特表 2022-517554 分解性担体を収容する容器

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-03-09

(54)【発明の名称】分解性担体を収容する容器

(51)【国際特許分類】

   C12M 1/26 20060101AFI20220302BHJP

   C12N 15/115 20100101ALN20220302BHJP

   C12N 5/0775 20100101ALN20220302BHJP

   C12N 5/0783 20100101ALN20220302BHJP

   C12N 5/0786 20100101ALN20220302BHJP

【ＦＩ】

C12M1/26

C12N15/115 Z

C12N5/0775

C12N5/0783

C12N5/0786

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021538428

(86)(22)【出願日】2019-12-30

(85)【翻訳文提出日】2021-07-01

(86)【国際出願番号】 US2019068983

(87)【国際公開番号】W WO2020142453

(87)【国際公開日】2020-07-09

(31)【優先権主張番号】62/786,913

(32)【優先日】2018-12-31

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】500149223

【氏名又は名称】サン－ゴバン パフォーマンス プラスティックス コーポレイション

(74)【代理人】

【識別番号】110003281

【氏名又は名称】特許業務法人大塚国際特許事務所

(74)【代理人】

【識別番号】110000855

【氏名又は名称】特許業務法人浅村特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】キャンベル、ケイティー

(72)【発明者】

【氏名】ボゴーシアン、ナターシャ、アンナ

(72)【発明者】

【氏名】フェケーテ、ナタリー

(72)【発明者】

【氏名】ピテル、レイチェル、ゼット．

【テーマコード（参考）】

4B029

4B065

【Ｆターム（参考）】

4B029AA09

4B029BB11

4B029CC01

4B029HA05

4B065AA90X

4B065CA44

(57)【要約】

本開示は、フルオロポリマーを含み、生物学的薬剤捕捉部分を含む分解性担体を収容する容器（例えば、バッグの形態で）、そのような容器を備えた細胞単離システム、およびそのような容器を使用して生物学的薬剤を培養する方法に関する。一実施形態では、本開示は、外面および内面を有する容器を提供し、内面はフルオロポリマーを含み、容器内には分解性担体が収容されており、担体は、複数の生物学的薬剤捕捉部分を含む。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

外面および内面を有する容器（例えば、バッグの形態で）であって、前記内面がフルオロポリマーを含み、前記容器に分解性担体が収容されており、
前記担体が、複数の生物学的薬剤捕捉部分を含む、容器。

【請求項2】

前記分解性担体が、約０．５μｍ～約１０００μｍの範囲の平均直径を有する複数の分解性微小担体を含み、各微小担体が複数の生物学的薬剤捕捉部分を含む、請求項１に記載の容器。

【請求項3】

前記容器の前記内面が、複数の生物学的薬剤捕捉部分を含む、請求項２に記載の容器。

【請求項4】

前記分解性担体が、前記容器の前記内面の少なくとも大部分に隣接して配置された分解性コーティングを含む、請求項１に記載の容器。

【請求項5】

前記生物学的薬剤捕捉部分が１つまたは複数のアプタマーを含む、請求項１に記載の容器。

【請求項6】

前記生物学的薬剤が細胞である、請求項１に記載の容器。

【請求項7】

前記細胞が、血液細胞または免疫細胞、例えば、単球、幹細胞または前駆細胞（例えば、間葉系幹細胞）、Ｔ細胞（例えば、制御性Ｔ細胞）、内皮前駆細胞またはナチュラルキラー細胞である、請求項１に記載の容器。

【請求項8】

前記分解性担体が多糖（例えば、デンプンまたはポリガラクツロン酸）を含む、請求項１に記載の容器。

【請求項9】

前記分解性担体が、ポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、およびポリカプロラクトンから選択される１つまたは複数のポリマーを含む、請求項１に記載の容器。

【請求項10】

前記担体が、６未満のｐＨまたは８を超えるｐＨで水中で分解可能である、請求項１に記載の容器。

【請求項11】

前記担体が加水分解触媒（例えば、アミン触媒）と接触すると水中で分解可能である、請求項１に記載の容器。

【請求項12】

前記担体が、酵素、または酵素およびキレート剤と接触すると水中で分解可能である、請求項１に記載の容器。

【請求項13】

前記担体が、４０℃を超える温度にさらされると水中で分解可能である、請求項１に記載の容器。

【請求項14】

前記担体が、照射時（例えば、４５０ｎｍ未満、または４２０ｎｍ未満の波長を有する放射線を用いて）に水中で分解可能である、請求項１に記載の容器。

【請求項15】

前記フルオロポリマーが、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシ（ＰＦＡ）、エチレンテトラフルオロエチレン（ＥＴＦＥ）、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、ポリクロロトリフルオロエチレン（ＰＣＴＦＥ）、エチレンクロロトリフルオロエチレン（ＥＣＴＦＥ）、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、エチレンフッ素化エチレンプロピレン（ＥＦＥＰ）、パーフルオロポリエーテル（ＰＦＰＥ）、変性ポリテトラフルオロエチレン（ＴＦＭ）、ポリフッ化ビニル（ＰＶＦ）、またはそれらの任意の混合物である、請求項１に記載の容器。

【請求項16】

前記分解性担体が生物学的薬剤に結合しており、前記生物学的薬剤が前記生物学的薬剤捕捉部分を介して前記担体に結合している、請求項１に記載の容器。

【請求項17】

オフターゲット剤、例えば前記生物学的薬剤以外の細胞を含有し、２０％未満の前記オフターゲット剤が前記担体または前記容器の内面に接着している、請求項１に記載の容器。

【請求項18】

水性媒体を含む請求項１に記載の容器と、前記担体と前記水性媒体とを混合するように構成されたロッカ、前記担体を前記水性媒体から分離するように構成された遠心分離機、および前記容器の出口と流体連通し、前記担体を前記水性媒体から分離するように構成されたフィルタ、のうちの１つまたは複数と、を備えた細胞単離システム。

【請求項19】

生物学的薬剤を培養する方法であって、
請求項１に記載の容器を提供するステップであって、前記容器が前記生物学的薬剤を収容している、ステップと、
前記容器に収容された第１の水性媒体中で、前記生物学的薬剤と前記担体とを混合するステップと、
前記容器から前記第１の水性媒体を除去するステップと、
前記容器に第２の水性媒体を添加するステップと、
前記担体を分解させるステップと、
を含む方法。

【請求項20】

前記担体が複数の分解性微小担体を含み、前記第１の水性媒体を除去するステップが、遠心分離機で前記微小担体を沈降させるステップと、前記容器から前記第１の水性媒体をデカントするステップとを含む、または前記微小担体を保持するように構成されたフィルタを通して前記容器から前記第１の水性媒体を除去するステップを含む、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

前記担体が、前記容器の前記内面に隣接して配置された分解性コーティングを含み、前記第１の水性媒体を除去するステップが、前記容器から前記第１の水性媒体をデカントするステップを含む、請求項１９に記載の方法。

【請求項22】

前記生物学的薬剤は細胞であり、
前記第１の水性媒体を除去した後の前記容器内の前記細胞の少なくとも８０％が前記生物学的薬剤である、
請求項１９に記載の方法。

【請求項23】

前記担体を分解するステップが、前記担体を６未満または約８未満のｐＨに供するステップと、前記担体を加水分解触媒（例えば、アミン触媒）と接触させるステップと、を含み、前記担体を分解するステップが、前記担体を酵素および場合によりキレート剤と接触させるステップと、前記担体を高温（例えば、３７℃を超える、または４０℃を超える温度）に曝露するステップと、または（例えば、４５０ｎｍ未満、または４２０ｎｍ未満の波長を有する放射線を用いて）前記担体を照射するステップと、を含む、請求項１９に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年１２月３１日に出願された米国仮特許出願第６２／７８６９１３号の優先権の利益を主張し、その全体を参照により本明細書に組み込む。

【0002】

本開示は、一般に、分解性担体を収容する容器（バッグなど）に関する。より詳細には、本開示は、フルオロポリマーを含み、生物学的薬剤捕捉部分を含む分解性担体を収容するバッグなどの容器、そのようなバッグを備えた細胞単離システム、およびそのようなバッグを使用して生物学的薬剤を培養する方法に関する。

【背景技術】

【0003】

細胞培養および細胞単離は、多くの用途において重要なプロセスである。例えば、治療用途（例えば、免疫療法、再生医療など）で使用するための特定の細胞は、典型的には、体外で単離され、培養される。例えば、前駆細胞および間葉系幹細胞などの細胞、ならびに単球および他の免疫細胞は、比較的低濃度で血液中に存在し、したがって、典型的には、血液から単離され、体外で培養される。同様に、神経細胞、心筋細胞、上皮細胞、および再生医療のための他の細胞（例えば、骨修復、皮膚修復、膵島再生などである）を体外で培養することができる。

【0004】

フルオロポリマーバッグは、細胞培養に一般的に使用される。そのようなバッグは、典型的には、安価で、使い捨て可能で、携帯可能であり、使いやすい。従来、細胞および供給培地は培養バッグ内で混合される。栄養素が消費され、細胞廃棄物が蓄積すると、供給培地を除去し、補充しなければならない。細胞はバッグ内に懸濁されたままであり得るので、所望の細胞を枯渇培地と共に除去することができる。

【0005】

１つの従来の細胞単離プロセスは、所望の細胞を固体支持体に選択的に固定することを含む。例えば、細胞媒介性免疫において中心的な役割を果たすＴ細胞は、細胞表面上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の存在によって他のリンパ球と区別することができる。Ｔ細胞受容体に結合することができる結合タンパク質を有する固体支持体は、細胞培養物内のＴ細胞を選択的に捕捉するが、望ましくない細胞は懸濁したままである。しかしながら、捕捉された細胞を放出することは、例えば、アンカータンパク質を切断することによって、単離された細胞を望ましくないように変化させる可能性がある。

【0006】

したがって、所望の細胞の保持の改善を促進する細胞培養および単離物品が依然として必要とされている。

【発明の概要】

【0007】

一態様では、本開示は、外面および内面を有する（例えば、バッグの形態の）容器であって、内面はフルオロポリマーを含み、容器には分解性担体が収容されており、担体は、複数の生物学的薬剤捕捉部分を含む、容器を提供する。

【0008】

別の態様では、本開示は、生物学的薬剤を培養するための方法であって、本明細書に記載の容器であって、生物学的薬剤を収容している容器を提供するステップと、容器に収容された第１の水性媒体中で、生物学的薬剤と担体とを混合するステップと、容器から第１の水性媒体を除去するステップと、容器に第２の水性媒体を添加するステップと、担体を分解させるステップと、を含む方法を提供する。

【0009】

本発明の他の態様は、本明細書の開示内容を考慮して、当業者には明らかになるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0010】

【図1】本開示の一実施形態に係るバッグの概略上面図（上）および概略断面図（下）である。

【0011】

【図2】本開示の特定の実施形態に係るバッグの概略上面図である。

【0012】

【図3】本開示の一実施形態に係るバッグの概略断面図である。

【0013】

【図4】本開示の一実施形態に係るバッグの概略断面図である。

【発明を実施するための形態】

【0014】

本開示は、フルオロポリマーを含む内面を有し、生物学的薬剤捕捉部分を含む分解性担体を収容する容器（例えば、バッグ）に関する。本開示は、所望の細胞を捕捉し、容器内の懸濁液から物理的に分離することができ、担体を分解することによって細胞機能に悪影響を及ぼすことなくさらに再懸濁することができることを実証する。

【0015】

本開示の容器は、いくつかの形態で提供することができる。１つの特に便利な形態は、例えば、本明細書に記載のフルオロポリマー材料の１つまたは複数のシートから形成されたバッグである。当業者は、細胞培養で使用されるものなどのバッグ構造に精通しており、本明細書の説明に基づいて本開示のバッグおよび方法で使用するために従来のバッグ構造を適合させることができる。当然のことながら、当業者は、本開示の容器を多数の他の形態、例えばフラスコ、チューブ、皿で提供できることを理解するであろう。

【0016】

したがって、本開示の一態様は、例えば外面および内面を有するバッグの形態の容器であり、内面はフルオロポリマーを含む。そのようなバッグの一実施形態が、図１の概略上面図（上）および概略断面図（下）に示されている。図１のバッグ１００は、外面１１２および内面１１４を有するバッグ壁１１０を含み、バッグにまたはバッグから媒体（例えば、それぞれ供給培地または廃棄培地）を追加または除去するためにバッグの両端に位置するポート１３０および１４０をさらに含む。ポートの数および位置は特に限定されず、したがって、例えば使用または製造の便宜のために配置することができることを当業者は理解するであろう。バッグ１００は、区画１２０を形成するためにそれらの縁部で（例えば、レーザ溶接、コロナ放電、放射、熱または溶融積層、エッチング、プラズマ処理、湿潤、接着剤、またはそれらの組み合わせによって）一緒に２つのフルオロポリマー含有シート（例えば、その内側表面にフッ素化エチレンプロピレンシートの層を有する２つのシート）を結合する製品とすることができる。ポート１３０および１４０は、密閉区画１２０を提供するために密閉可能であり得る。

【0017】

容器の壁は、その組成が均一であってもよく、あるいは２つまたはそれ以上の異なるドメイン（例えば、２つまたはそれ以上の層）を含んでもよい。例えば、２つのフルオロポリマーシートを互いに接合し、次いで接合されたシートをコーティングすることにより、内面１１４とは組成が異なる外面１１２を提供することができる。同様に、２つの多層シートを互いに接合することにより、内面１１４とは組成が異なる外面１１２を提供することができる。多層シートは、フルオロポリマー材料と非フッ素化ポリマー材料の両方から形成することができる。そのような場合、多層シートのうちの１つまたは複数の内面にフルオロポリマー層を設けることができる。容器の厚さ、区画の容積、ならびに容器および／または区画の形状は特に限定されず、使用または製造の便宜のために、および／または特定の用途に適するように選択することができる。例えば、容器の壁の厚さは、０．０００３インチ～０．２インチの範囲内とすることができ、区画の容積は、１００ｍＬ～１００Ｌの範囲内とすることができる。

【0018】

図２は、本開示のバッグおよび方法での使用に適した培養バッグの構成のいくつかの例示的な実施形態を示す図である。バッグ２００ａは、単一のポート２３０ａのみを有し、区画２２０ａへのアクセスを提供する。バッグ２００ｂは、システムを通るより長い経路長を提供することができる、いわゆる「蛇行」構成にある。ポート２３０ｂおよび２４０ｂは、バッグを形成するシートの適切な溶接によって形成された蛇行形状区画２２０ｂによって形成された蛇行経路によって接続されている。また、バッグ２００ｃは非矩形形状を有し、ポート２２０ｃとポート２３０ｃとの間に対応する非矩形区画２４０ｃを有する。

【0019】

容器の壁の１つまたは複数は多孔質であってもよく、例えば、細胞培養物中で生成および消費されるガス（例えば、Ｏ_２、ＣＯ_２）に対して透過性であるが、液体（例えば、水）に対して不透過性であってもよい。これは、バッグ内の細胞の呼吸を可能にするために、容器壁を横切るガスの大気との受動的交換を可能にすることができる。

【0020】

本開示の容器は、望ましくは、容器内の流体の汚染が実質的にないように形成される。したがって、容器の内面は、有機物を流体に浸出させない材料から形成されることが望ましい。例えば、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器の壁の内面は、０．１ｍｇ／ｃｍ^２未満（例えば、０．０５ｍｇ／ｃｍ^２未満、または０．０５ｍｇ／ｃｍ^２未満）の水中全有機体炭素（ＴＯＣ）を有するポリマー（例えば、フッ素化エチレンプロピレンなどのフルオロポリマー）から形成される。そのような容器は、例えば、米国特許出願公開第２０１６／０１７８４９０号および第２０１６／０１７８４９１号に記載されており、これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。当業者は、本明細書の記載に基づいて、本開示の容器および方法で使用するためにそのような容器を適合させることができる。特に、本開示の容器は、その内面に反応性官能基を有する必要はないが、場合によっては、例えば分解性担体が分解性コーティングである場合、以下に記載されるように、反応性官能基を使用して分解性担体を容器の内面に共有結合させることができる。

【0021】

容器は分解性担体を含有し、担体は複数の生物学的薬剤捕捉部分を含む。本明細書で使用される場合、生物学的薬剤捕捉部分は、生物学的薬剤が選択的に結合することができる材料である。生物学的薬剤とそれぞれの捕捉部分との間の会合は、（例えば、遠心分離または濾過の間中）生物学的薬剤を担体上に保持するのに十分であり、共有結合性であっても非共有結合性であってもよい。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、１つまたは複数のアプタマーを含む。特定のこのような実施形態では、１つまたは複数のアプタマーは、ペプチド、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、およびポリヌクレオチド（すなわち、ＤＮＡおよびＲＮＡ）から選択される。例えば、本明細書に別途記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、ランダムな合成的に生成された配列プールから選択されるオリゴヌクレオチドアプタマーを含む。

【0022】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、生物学的薬剤が選択的に会合することができる少なくとも２つの部位を有するＤＮＡアプタマーを含む。例えば、特定のこのような実施形態では、生物学的薬剤に選択的なヌクレオチド部分配列の少なくとも５個、または少なくとも１０個、または少なくとも２５個、または少なくとも５０個、または少なくとも７５個、または少なくとも１００個の実例がＤＮＡアプタマー配列中に存在する。

【0023】

本明細書で他の様式で記載される一定の実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、ポリペプチドに結合した複数のアプタマー（例えば、オリゴヌクレオチドアプタマー）を含む。例えば、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、アビジンタンパク質に結合した複数のビオチン化アプタマーを含む。一定のこのような実施形態では、ビオチン化アプタマーがオリゴヌクレオチドまたはポリペプチドを含む。特定のこのような実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、少なくとも１０個、または少なくとも２５個、または少なくとも５０個、または少なくとも７５個、または少なくとも１００個、または少なくとも２００個、または少なくとも３００個、または少なくとも４００個、または少なくとも５００個、または少なくとも６００個、または少なくとも７００個、または少なくとも８００個、または少なくとも９００個、または少なくとも１０００個のアプタマー（例えば、アビジンタンパク質に結合したビオチン化アプタマー）を含む。特定のこのような実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、１０～１０００、または１０～９００、または１０～８００、または１０～７００、または１０～６００、または１０～５００、または１０～４００、または１０～３００、または１０～２００、または２５～１０００、または５０～１０００、または１００～１０００、または２００～１０００、または３００～１０００、または４００～１０００、または５００～１０００、または６００～１０００、または７００～１０００、または８００～１０００、または１０～４００、または１００～５００、または２００～６００、または３００～７００、または４００～８００、または５００～９００、または６００～１０００の範囲内のいくつかのアプタマー（例えば、アビジンタンパク質に結合したビオチン化アプタマー）を含む。

【0024】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤は、無機種および有機小分子から選択される。例えば、特定のそのような実施形態では、生物学的薬剤は金属イオンである。他のこのような実施形態では、生物学的薬剤は、ビタミン、ホルモン、またはペプチドである。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤は、例えば、タンパク質、酵素、または核酸（すなわち、ＤＮＡまたはＲＮＡ）などの高分子である。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤は、例えば、細胞小器官（例えば、核、リボソーム、ミトコンドリア、液胞、粗面小胞体、平滑小胞体、ゴルジ体、リソソーム、中心体、小胞、膜）または細胞断片などの複雑な生物系である。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤は細菌または細胞群である。

【0025】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤は細胞（例えば、正常細胞または疾患細胞）である。例えば、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、細胞は、血球、幹細胞、または免疫細胞である。特定のこのような実施形態では、細胞は白血球である。特定のこのような実施形態では、細胞は単球である。特定のこのような実施形態では、細胞は、例えば、間葉系幹細胞または前駆細胞などの幹細胞である。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、細胞は、Ｔ細胞（例えば、制御性Ｔ細胞）、内皮前駆細胞またはナチュラルキラー細胞である。当業者は、生物学的薬剤が、特定の実施形態では、細胞培養物（すなわち、ポジティブ選択）中での保持のために捕捉可能な望ましい生物学的薬剤であり得、あるいは、他の実施形態では、細胞培養物（すなわち、ネガティブ選択）からの除去のために捕捉可能な望ましくない生物学的薬剤であり得ることを理解するであろう。

【0026】

例えば、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、内皮前駆細胞のＣＤ３１マーカーと選択的に会合することができる１つまたは複数のアプタマーを含む。別の例では、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、制御性Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４、ＣＤ２５、ＣＤ２７）の１つまたは複数のマーカーと選択的に会合することができる１つまたは複数のアプタマーを含む。さらに別の例では、本明細書に別途記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、間葉系幹細胞（例えば、ＣＤ７３、ＣＤ９０、ＣＤ１０５）の１つまたは複数のマーカーと選択的に会合することができる１つまたは複数のアプタマーを含む。一定のこのような実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、ポリペプチドに結合した複数のアプタマー（例えば、オリゴヌクレオチドアプタマー）を含む。

【0027】

本明細書で使用される場合、分解性担体は、分解されていない状態で、生物学的薬剤捕捉部分が（例えば、共有結合性リンカーを介して）付着され得る表面を有する材料である。担体は、例えば、水性媒体の存在下で、生物学的薬剤を培養または単離するのに十分な少なくとも一定期間、または無期限にさえ、未分解状態のままであり得る。担体は、断片に分解され得るか、または部分的もしくは完全に溶解され得、分解された状態で生物学的薬剤から分離され得る。

【0028】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、分解性担体の表面の官能基に共有結合している。例えば、分解性担体の表面は、カルボキシル基、ヒドロキシル基、アルデヒド基、カルボニル基、アミン基、イミン基、アミド基、エステル基、無水物基、チオール基、ジスルフィド、フェノール、グアニジン、チオエーテル、インドール、イミダゾールまたはジアゾニウム基で官能化されていてもよい。当業者は、これらの「官能基」が、生物学的薬剤捕捉部分が共有結合している基として特定されることを理解するであろう。例えば、「アミン」官能基をカルボキシを有する生物学的薬剤捕捉部分に結合させて、生物学的薬剤捕捉部分にカルボキサミド結合を形成することができる。

【0029】

特定のこのような実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、タンパク質に結合した複数のアプタマー（例えば、オリゴヌクレオチドアプタマー）を含み、タンパク質は、分解性担体の表面のカルボキシル基にペプチド結合を介して結合している。他のこのような実施形態では、生物学的薬剤捕捉部分は、分解性担体の表面のアルデヒド基にイミン結合を介して結合したアミン末端アプタマー（例えば、ＤＮＡアプタマー）を含む。

【0030】

分解性担体表面の単位当たりの生物学的薬剤捕捉部分の数（すなわち、捕捉部分密度）は特に限定されないが、当業者は、捕捉部分密度が、典型的には、分解性担体表面の単位当たりに捕捉され得る生物学的薬剤（例えば、細胞）の数（すなわち、捕捉された薬剤密度）よりも大きくなり得ることを理解するであろう。したがって、特定の実施形態では、分解性担体の捕捉部分密度は、分解性担体の捕捉剤密度よりも大きい。

【0031】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、分解性担体は、複数の分解性微小担体（例えば、ポリマー微小担体）を含み、微小担体は、生物学的薬剤捕捉部分が付着され得る表面を有する。例えば、図３のバッグ３００は、区画３２０を取り囲むバッグ壁３１０（外面３１２および内面３１４を有する）と、複数の分解性微小担体３５０を収容する区画３２０とを含む。特定の実施形態では、微小担体の平均サイズは、０．５μｍ～１０００μｍ、または０．５μｍ～９００μｍ、または０．５μｍ～８００μｍ、または０．５μｍ～７００μｍ、または０．５μｍ～６００μｍ、または０．５μｍ～５００μｍ、または０．５μｍ～４００μｍ、または０．５μｍ～３００μｍ、または０．５μｍ～２５０μｍ、または１μｍ～１０００μｍ、または５μｍ～１０００μｍ、または１０μｍ～１０００μｍ、または２５μｍ～１０００μｍ、または５０μｍ～１０００μｍ、または１００μｍ～１０００μｍ、２００μｍ～１０００μｍ、または３００μｍ～１０００μｍ、または４００μｍ～１０００μｍ、または５００μｍ～１０００μｍ、または１０μｍ～７５０μｍ、または１０μｍ～５００μｍ、または２０μｍ～４００μｍ、または５０μｍ～３００μｍの範囲内である。

【0032】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、分解性担体は、容器の内面の少なくとも一部（例えば、少なくとも大部分、またはさらには全て）に隣接して配置された分解性コーティング（例えば、ポリマーコーティング）を含む。特定のこのような実施形態では、分解性コーティングは、容器の内面に共有結合している。例えば、図４のバッグ４００は、密閉区画４２０を取り囲むバッグ壁４１０（外面４１２および内面４１４を有する）と、内面４１４に隣接して（例えば、共有結合している）配置された分解性コーティング４６０を含む密閉区画４２０とを含む。特定のこのような実施形態では、分解性コーティングは、１０ｎｍ（例えば、約単層）～１０ｍｍ、または１０ｎｍ～１ｍｍ、または１０ｎｍ～５００μｍ、または１０ｎｍ～１００μｍ、または１０ｎｍ １μｍ、または１μｍ～１０ｍｍ、または１００μｍ～１０ｍｍ、または５００μｍ～１０ｍｍ、または１ｍｍ～１０ｍｍの範囲内の厚さを有する。特定のこのような実施形態では、分解性コーティングは、容器の内面の官能基（例えば、内面を含むフルオロポリマーの官能基）に共有結合している。ある特定の実施形態において、官能基は、カルボキシル基、ヒドロキシル基、アルデヒド基、カルボニル基、アミン基、イミン基、アミド基、エステル基、無水物基、チオール基、ジスルフィド、フェノール、グアニジン、チオエーテル、インドール、イミダゾールまたはジアゾニウム基である。

【0033】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、分解性担体は切断性ポリマーを含む。例えば、特定のそのような実施形態では、分解性担体は、例えば多糖などの酵素切断性ポリマーを含む。特定のこのような実施形態では、多糖はデンプン（例えば、α－アミラーゼによって切断可能である）である。他のこのような実施形態では、多糖はポリガラクツロン酸（例えば、ペクチナーゼによって切断可能である）である。別の例では、特定のそのような実施形態では、分解性担体は、例えば、ポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、またはポリカプロラクトンなどの加水分解性ポリマーを含む。特定のこのような実施形態では、ポリマー加水分解は、６未満のｐＨまたは８を超えるｐＨで加速される。特定のこのような実施形態では、ポリマー加水分解は、例えばアミンなどの加水分解触媒の存在下で加速される。

【0034】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、分解性担体は、例えば、水性媒体中で分解されないままであり得る担体を提供するのに十分な数の架橋を有する架橋ポリマーを含む。特定のこのような実施形態では、分解性担体は、臨界レベル未満の酵素を有する水性媒体中で分解されないままであり得る担体を提供するのに十分な数の架橋（例えば、グリセロールジエーテル架橋）を有する酵素切断性ポリマー（例えば、多糖）を含む。他のこのような実施形態では、分解性担体は、臨界レベル未満の加水分解触媒を有する水性媒体中、または臨界範囲外のｐＨを有する水性媒体中で未分解のままであり得る担体を提供するのに十分な数の架橋を有する加水分解性ポリマー（例えば、ＰＬＧＡ、ＰＬＡ、またはポリカプロラクトン）を含む。別の例では、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、分解性担体は、他の様式で可溶性のポリマーの不溶性架橋ネットワークを含む。例えば、特定のこのような実施形態では、チオエーテル架橋ポリマーネットワーク（例えば、ヒドロゲル）を含む分解性担体は、臨界レベル未満のグルタチオンを有する水性媒体中で分解されないままであり得る。

【0035】

特定の実施形態では、分解性担体の架橋ポリマーは、ポリマーの酵素切断を防止する架橋剤（例えば、多糖）を含む。例えば、特定のこのような実施形態では、Ｃａ^２＋架橋多糖（例えば、ポリガラクツロン酸）を含む分解性担体は、臨界レベル未満のＣａ^２＋キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）を有する水性媒体中で、すなわち、媒体が臨界レベルを超える切断酵素（例えば、ペクチナーゼ）を含む場合でも、分解されないままであり得る。

【0036】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、分解性担体は、（例えば、４５０ｎｍ未満、または４２０ｎｍ未満の波長を有する放射線を用いた）照射時に分解性であるか、または分解性担体の分解が加速される。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、分解性担体は、高温（例えば、３７℃超、または４０℃超）に曝露されると分解性であるか、または分解性担体の分解が加速される。

【0037】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器の内面は、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシ（ＰＦＡ）、エチレンテトラフルオロエチレン（ＥＴＦＥ）、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、ポリクロロトリフルオロエチレン（ＰＣＴＦＥ）、エチレンクロロトリフルオロエチレン（ＥＣＴＦＥ）、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、エチレンフッ素化エチレンプロピレン（ＥＦＥＰ）、パーフルオロポリエーテル（ＰＦＰＥ）、変性ポリテトラフルオロエチレン（ＴＦＭ）、ポリフッ化ビニル（ＰＶＦ）、またはそれらの任意の混合物から選択されるフルオロポリマーを含む。例えば、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器の内面はフッ素化エチレンプロピレンを含む。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器の内面は、フルオロポリマー（例えば、フッ素化エチレンプロピレン）から本質的になるか、またはフルオロポリマーである。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、バッグの内面を含む材料は、少なくとも０．０００３インチ、少なくとも０．０００４インチ、少なくとも０．０００５インチ、少なくとも０．０００６インチ、少なくとも０．００１インチ、または少なくとも０．１０インチの厚さを有する。例えば、特定のそのような実施形態では、容器の内面の材料は、０．０００３インチ～０．２インチ、または０．０００３インチ～０．１インチ、または０．０００５インチ～０．０８インチ、または０．００１インチ～０．０７インチ、または０．００１インチ～０．０５インチ、または０．００１インチ～０．０３インチ、または０．００１インチ～０．０１８インチ、または０．００１インチ～０．０１６インチ、または０．００１インチ～０．０１４インチ、または０．００１インチ～０．０１２インチの範囲内の厚さを有する。

【0038】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器の壁を構成する材料は、その内面にフルオロポリマーの層を有し、その外面に別のポリマー材料（フルオロポリマーまたは他の様式で）の層を有する多層材料である。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器の外面の材料は、少なくとも０．０００５インチ、または少なくとも０．００１インチ、または少なくとも０．００５インチ、または少なくとも０．００７５インチ、または少なくとも０．０１インチ、または少なくとも０．０２インチ、または少なくとも０．０３インチ、または少なくとも０．０４インチ、または少なくとも０．０５インチ、または少なくとも０．０６インチ、または少なくとも０．０７インチ、または少なくとも０．０８インチ、または少なくとも０．０９インチ、または少なくとも０．１インチ、または少なくとも０．１１インチの厚さを有する。例えば、特定のそのような実施形態では、容器の外面の材料は、０．０００５インチ～０．２インチ、または０．００５インチ～０．１８インチ、または０．０１インチ～０．１６インチ、または０．０１インチ～０．１４インチ、または０．０１インチ～０．１２インチ、または０．０６インチ～０．１３インチ、または０．０９インチ～０．１２６インチの範囲内の厚さを有する。

【0039】

特定の実施形態では、分解性担体は、複数の微小担体を含み、容器の内面は、本明細書に記載の複数の生物学的薬剤捕捉部分をさらに含む。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器の内面に結合した生物学的薬剤捕捉部分は、分解性担体の生物学的薬剤捕捉部分と同じである。他の実施形態では、容器の内面に結合した生物学的薬剤捕捉部分は、分解性担体の生物学的薬剤捕捉部分が選択的である薬剤以外の生物学的薬剤に対して選択的である。有利には、本発明者らは、そのような容器が生物学的薬剤の捕捉効率を改善することができ、または２つの異なる生物学的薬剤の単離および分離を容易にすることができることを特定した。

【0040】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器の外面は、フルオロポリマー以外の材料を含む。例えば、特定のそのような実施形態では、容器の外面の材料は、熱可塑性ポリマー、熱可塑性エラストマー、シリコン、ゴム、またはそれらの任意の組み合わせを含む。あるいは、容器の外面は、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、例えば内面のフルオロポリマーなどのフルオロポリマーを含むことができる。特定のこのような実施形態では、内面および外面の材料（すなわち、容器壁）は、フルオロポリマー（例えば、フッ素化エチレンプロピレン）から本質的になるか、またはフルオロポリマーである。

【0041】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器は生物学的薬剤を含む。特定のこのような実施形態では、生物学的薬剤は、生物学的薬剤捕捉部分を介して担体に結合される。例えば、特定のそのような実施形態では、生物学的薬剤は、分解性微小担体または分解性コーティングの表面に結合したアプタマーを介して担体と会合した細胞である。特定の実施形態では、容器の内面は、複数の生物学的薬剤捕捉部分を含み、その少なくとも一部は生物学的薬剤に結合している。例えば、特定のそのような実施形態では、生物学的薬剤は細胞であり、分解性微小担体の表面に結合したアプタマー、または容器の内面に結合したアプタマーと会合することができる。特定のこのような実施形態では、分解性微小担体の生物学的薬剤捕捉部分は、容器の内面の生物学的薬剤捕捉部分と同じである。

【0042】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器は、水性媒体をさらに含む。水性媒体は、例えば、生物学的薬剤および１つまたは複数のオフターゲット剤を含む細胞培養培地であり得る。本明細書で使用される場合、オフターゲット剤は、例えば、生物学的薬剤以外の細胞、細胞断片、タンパク質、ビタミン、ホルモン、ペプチド、および金属イオンを含む、生物学的薬剤以外の材料（すなわち、生物学的薬剤捕捉部分によって捕捉可能である）である。

【0043】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器はオフターゲット剤（例えば、生物学的薬剤以外の細胞）を含み、オフターゲット剤の２０％以下が分解性担体または容器の内面に接着している。例えば、特定のこのような実施形態では、１７．５％未満、または１５％未満、または１２．５％未満、または１０％未満、または７．５％未満、または５％未満、または４％未満、または３％未満、または２％未満、または１％未満のオフターゲット剤が、分解性担体または容器の内面に接着している。

【0044】

本開示の別の態様は、本明細書に別途記載されるような容器を含む細胞単離システムである。例えば、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、細胞単離システムは、水性媒体を含有する本明細書で他の様式で記載される容器と、水性媒体と担体とを混合するように構成されたロッカとを含む。別の例では、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、細胞単離システムは、水性媒体を含有する本明細書で他の様式で記載される容器と、水性媒体から担体（例えば、複数の分解性微小担体を含む）を分離するように構成された遠心分離機とを含む。さらに別の例では、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、細胞単離システムは、水性媒体を含有する本明細書で他の様式で記載される容器と、水性媒体から担体（例えば、複数の分解性微小担体を含む）を分離するように構成された容器の出口と流体連通するフィルタとを含む。特定の実施形態では、細胞単離システムの容器内の水性媒体は、例えば生物学的薬剤以外の細胞などのオフターゲット剤を含む。

【0045】

有利には、本発明者らは、本明細書に記載の担体の分解が、細胞機能に有害な影響を及ぼすことなく、捕捉された（例えば、および単離された）生物学的薬剤を水性媒体（例えば、保存またはさらに培養されるべきである）に放出することができることを特定した。望ましくは、内面のフルオロポリマーは、生物学的薬剤以外の材料（すなわち、オフターゲット剤）の付着を防止し、容器内に単離された生物学的薬剤の純度を高めることができる。

【0046】

したがって、本開示の別の態様は、生物学的薬剤を培養するための方法であって、生物学的薬剤を含有する本明細書に別途記載されるような容器を提供するステップと、容器に収容される第１の水性媒体中で生物学的薬剤と担体とを混合するステップとを含む方法である。方法は、容器から第１の水性媒体を除去するステップと、容器に第２の水性媒体を添加するステップと、担体を分解するステップとをさらに含む。

【0047】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、容器は、生物学的薬剤を含む血液試料（例えば、全血サンプル）を含む。例えば、特定のそのような実施形態では、容器は血液試料を含み、生物学的薬剤は単球である。特定の実施形態では、容器は、１つまたは複数のオフターゲット剤をさらに含む。例えば、特定のそのような実施形態では、容器は、生物学的薬剤（例えば、単球、幹細胞、Ｔ細胞、内皮前駆細胞またはナチュラルキラー細胞）および１つまたは複数のオフターゲット剤（例えば、生物学的薬剤以外の細胞）を含む試料（例えば、全血サンプル）を含む。

【0048】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、第１の水性媒体は細胞培養培地である。特定のこのような実施形態では、生物学的薬剤は細胞であり、生物学的薬剤は容器内で培養される（すなわち、薬剤は、第１の水性媒体中で成長または膨張する）。もちろん、水性媒体（例えば、容器に収容された全血サンプルに含まれる）を含む１つまたは複数のオフターゲット剤もまた、第１の水性媒体中で膨張し得る。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤および担体は、ロッカ上で混合される。混合は、生物学的薬剤捕捉部分と生物学的薬剤とを会合させるのに十分な期間行われる。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤は細胞であり、混合は、生物学的薬剤を増殖させるのに十分な時間および温度で行われる。特定の実施形態では、混合はロッカで行われる。

【0049】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、担体は複数の分解性微小担体を含み、第１の水性媒体を除去するステップは、担体を沈降させ、容器から第１の水性媒体をデカントするステップを含む。例えば、特定のそのような実施形態では、第１の水性媒体を除去するステップは、微小担体を遠心分離機で沈降させるステップと、容器から第１の水性媒体をデカントするステップとを含む。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、第１の水性媒体は、微小担体を保持するように構成されたフィルタを通して容器から除去される。例えば、特定のそのような実施形態では、第１の水性媒体は、分解されていない状態の分解性微小担体よりも小さい孔径を有するフィルタを通して容器から除去される。

【0050】

他の実施形態では、担体は、容器の内面に隣接して配置された分解性コーティングを含み、第１の水性媒体を除去することは、容器から第１の水性媒体をデカントすること（すなわち、沈降または濾過なし）を含む。

【0051】

もちろん、当業者は、少量の第１の水性媒体を容器内に保持することができることを理解するであろう。

【0052】

第１の水性媒体の除去後、本明細書で他の様式で記載される容器は、例えば生物学的薬剤および場合により１つまたは複数のオフターゲット剤を含む細胞を含有することができる。望ましくは、容器内に残っている細胞の大部分は、分解性担体に、および場合により生物学的薬剤捕捉部分を介して容器の内面に付着した生物学的薬剤を含むことができる。例えば、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、生物学的薬剤は細胞であり、第１の水性媒体を除去した後の容器内の細胞の少なくとも８０％、または少なくとも８２．５％、または少なくとも８５％、または少なくとも８７．５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９２．５％、または少なくとも９５％、または少なくとも９７．５％、または少なくとも９８％、または約９８．５％、または少なくとも９９％が生物学的薬剤である。

【0053】

本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、担体を分解するステップは、担体を第１の水性媒体のｐＨとは異なるｐＨに供するステップを含む。例えば、本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、担体を分解するステップは、担体を６未満または８超のｐＨに供するステップを含む。特定のこのような実施形態では、容器に添加される第２の水性媒体は、６未満または８超のｐＨを有する。他のこのような実施形態では、第２の水性媒体のｐＨは、第２の水性媒体を容器に添加した後に調整される。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、担体を分解するステップは、担体を加水分解触媒（例えば、アミン触媒）と接触させるステップを含む。特定のこのような実施形態では、容器に添加される第２の水性媒体は、加水分解触媒を含有する。他のこのような実施形態では、加水分解触媒は、第２の水性媒体を添加した後に容器に添加される。特定の実施形態では、第２の水性媒体のｐＨは、加水分解触媒によって触媒される加水分解反応を可能にするか、または加速さえする。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、担体を分解するステップは、担体を酵素、または酵素およびキレート剤と接触させるステップを含む。特定のこのような実施形態では、容器に添加される第２の水性媒体は酵素を含有する。他のこのような実施形態では、酵素は、第２の水性媒体を添加した後に容器に添加される。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、担体を分解するステップは、担体を高温（例えば、３７℃を超える、または４０℃を超える温度）に供するステップを含む。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、担体を分解するステップは、（例えば、４５０ｎｍ未満、または４２０ｎｍ未満の波長を有する放射線を用いて）担体を照射するステップを含む。

【0054】

有利には、本発明者らは、担体を分解する（例えば、断片化するステップ、部分的に溶解するステップ、または溶解するステップ）ことにより、生物学的薬剤に有害な影響を及ぼすことなく、捕捉された生物学的薬剤を担体から分離することができることを特定した。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、本方法は、生物学的薬剤を第２の水性媒体（すなわち、劣化した担体を含む）中で培養するステップをさらに含む。特定のそのような実施形態では、第２の水性媒体は細胞培養培地である。本明細書で他の様式で記載される特定の実施形態では、本方法は、例えば生物学的薬剤を沈降させ、第２の水性媒体を除去し、第３の水性媒体を容器に添加することによって、分解された担体を除去するステップとをさらに含む。特定のそのような実施形態では、第３の水性媒体は、細胞培養培地または細胞保存培地である。

【0055】

本開示のさらなる態様は、技術的または論理的に矛盾しない任意の数および任意の方法で組み合わせることができる、以下に列挙される実施形態によって提供される。
［実施形態１］
外面および内面を有する容器（例えば、バッグの形態で）であって、内面がフルオロポリマーを含み、容器に分解性担体が収容されており、
担体が、複数の生物学的薬剤捕捉部分を含む、容器。
［実施形態２］
分解性担体が複数の分解性微小担体を含み、各微小担体が複数の生物学的薬剤捕捉部分を含む、実施形態１に記載の容器。
［実施形態３］
微小担体の平均直径が約０．５μｍ～約１０００μｍ（例えば、約５μｍ～約７５０μｍ、または約１０μｍ～約５００μｍ、または約２５μｍ～約３００μｍ）の範囲内である、実施形態２に記載の容器。
［実施形態４］
容器の内面が、複数の生物学的薬剤捕捉部分を含む、実施形態２または３に記載の容器。
［実施形態５］
分解性担体が、容器の内面の少なくとも一部（例えば、少なくとも大多数）に隣接して配置された分解性コーティングを含む、実施形態１に記載の容器。
［実施形態６］
生物学的薬剤捕捉部分が１つまたは複数のアプタマーを含む、実施形態１～５のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態７］
生物学的薬剤が細胞である、実施形態１～６のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態８］
細胞が、血球または免疫細胞である、実施形態７に記載の容器。
［実施形態９］
細胞が、単球、幹細胞もしくは前駆細胞（例えば、間葉系幹細胞）、Ｔ細胞（例えば、制御性Ｔ細胞）、内皮前駆細胞またはナチュラルキラー細胞である、実施形態７に記載の容器。
［実施形態１０］
分解性担体がポリマーを含む、実施形態１～９のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態１１］
分解性担体が多糖（例えば、デンプンまたはポリガラクツロン酸）を含む、実施形態１０に記載の容器。
［実施形態１２］
分解性担体が、ポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＡ）およびポリカプロラクトンから選択される１つまたは複数のポリマーを含む、実施形態１０に記載の容器。
［実施形態１３］
ポリマーが架橋（例えば、チオエーテル架橋、Ｃａ^２＋架橋、またはグリセロールジエーテル架橋）されている、実施形態１０～１２のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態１４］
担体が、６未満のｐＨまたは８を超えるｐＨで水中で分解可能である、実施形態１～１３のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態１５］
担体が加水分解触媒（例えば、アミン触媒）と接触すると水中で分解可能である、実施形態１～１３のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態１６］
担体が、酵素、または酵素およびキレート剤と接触すると水中で分解可能である、実施形態１～１３のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態１７］
酵素がアミラーゼまたはペクチナーゼである、実施形態１６に記載の容器。
［実施形態１８］
担体が、高温（例えば、３７℃を超える、または４０℃を超える温度）に曝露されると水中で分解可能である、実施形態１～１３のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態１９］
担体が、（例えば、４５０ｎｍ未満、または４２０ｎｍ未満の波長を有する放射線を用いた）照射時に水中で分解可能である、実施形態１～１３のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態２０］
フルオロポリマーが、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシ（ＰＦＡ）、エチレンテトラフルオロエチレン（ＥＴＦＥ）、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、ポリクロロトリフルオロエチレン（ＰＣＴＦＥ）、エチレンクロロトリフルオロエチレン（ＥＣＴＦＥ）、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、エチレンフッ素化エチレンプロピレン（ＥＦＥＰ）、パーフルオロポリエーテル（ＰＦＰＥ）、変性ポリテトラフルオロエチレン（ＴＦＭ）、ポリフッ化ビニル（ＰＶＦ）、またはそれらの任意の混合物である、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態２１］
フルオロポリマーがフッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）である、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態２２］
分解性担体が生物学的薬剤に結合しており、生物学的薬剤が生物学的薬剤捕捉部分を介して担体に結合している、実施形態１～２１のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態２３］
水性媒体を含有する、実施形態１～２２のいずれか１つに記載の容器。
［実施形態２４］
オフターゲット剤を含有する実施形態２３に記載の容器。
［実施形態２５］
オフターゲット剤が生物学的薬剤以外の細胞である、実施形態２４に記載の容器。
［実施形態２６］
オフターゲット剤の２０％未満（例えば、１５％未満、１０％未満、５％未満、または１％未満）が担体または容器の内面に付着している、実施形態２４または２５に記載の容器。
［実施形態２７］
実施形態２３～２５のいずれか１つに記載の容器と、担体と水性媒体とを混合するように構成されたロッカとを備えた細胞単離システム。
［実施形態２８］
実施形態２３～２５のいずれか１つに記載の容器と、水性媒体から担体を分離するように構成された遠心分離機とを備えた細胞単離システム。
［実施形態２９］
実施形態２３～２５のいずれか１つに記載の容器と、容器の出口と流体連通するフィルタとを備え、フィルタが、水性媒体から担体を分離するように構成されている、細胞単離システム。
［実施形態３０］
生物学的薬剤を培養する方法であって、
実施形態１～２１のいずれか１つに記載の容器であって、生物学的薬剤を収容している容器を提供するステップと、
容器に収容された第１の水性媒体中で、生物学的薬剤と担体とを混合するステップと、
容器から第１の水性媒体を除去するステップと、
容器に第２の水性媒体を添加するステップと、
担体を分解させるステップと、
を含む方法。
［実施形態３１］
担体が複数の分解性微小担体を含み、第１の水性媒体を除去するステップが、微小担体を遠心分離機で沈降させるステップと、容器から第１の水性媒体をデカントするステップとを含む、実施形態３０に記載の方法。
［実施形態３２］
担体が複数の分解性微小担体を含み、第１の水性媒体が、微小担体を保持するように構成されたフィルタを通して容器から除去される、実施形態３０の方法。
［実施形態３３］
担体が、容器の内面に隣接して配置された分解性コーティングを含み、第１の水性媒体を除去するステップが、容器から第１の水性媒体をデカントするステップを含む、実施形態３０に記載の方法。
［実施形態３４］
生物学的薬剤は細胞であり、
第１の水性媒体を除去した後の容器内の細胞の少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％、または少なくとも９８％、または少なくとも９９％）が生物学的薬剤である、
実施形態３０～３４のいずれか１つに記載の方法。
［実施形態３５］
担体を分解させるステップが、担体を６未満または約８未満のｐＨに供するステップを含む、実施形態３０～３４のいずれか１つに記載の方法。
［実施形態３６］
担体を分解させるステップが、担体を加水分解触媒（例えば、アミン触媒）と接触させるステップを含む、実施形態３０～３４のいずれか１つに記載の方法。
［実施形態３７］
担体を分解するステップが、担体を酵素および場合によりキレート剤と接触させるステップを含む、実施形態３０～３４のいずれか１つに記載の方法。
［実施形態３８］
担体を分解させるステップが、担体を高温（例えば、３７℃を超える、または４０℃を超える温度）に曝露するステップを含む、実施形態３０～３４のいずれか１つに記載の方法。
［実施形態３９］
担体を分解させるステップが、（例えば、４５０ｎｍ未満、または４２０ｎｍ未満の波長を有する放射線を用いて）担体を照射することを含む、実施形態３０～３４のいずれか１つに記載の方法。
［実施形態４０］
劣化した担体を容器から除去するステップをさらに含む、実施形態３０～３９のいずれか１つに記載の方法。
［実施形態４１］
容器がバッグの形態である、請求項１～４０のいずれか１つに記載の容器または方法。

【0056】

本明細書に示す詳細は、例示として、かつ本発明の好ましい実施形態を考察する目的でのみ示されており、本発明の様々な実施形態の原理および概念的な態様について、最も有用で容易に理解されると考えられる説明を提供するために提示される。この点に関して、本発明の構造的な詳細を、本発明の基本的な理解に対して必要以上に詳細に示そうとはせず、図面および／または例を用いる説明によって、本発明のいくつかの形式がどのように実施され得るかを当業者に明らかにする。したがって、開示されたプロセスおよびデバイスを説明する前に、本明細書に記載された態様は、特定の実施形態、装置、または構成に限定されるものではなく、そのようなものとして、もちろん、変化し得ることを理解されたい。また、本明細書で使用される用語は、特定の態様を説明することを目的としておらず、本明細書で特に定義されない限り、限定することを意図したものではないことを理解されたい。

【0057】

本発明を説明する文脈（特に以下の特許請求の範囲の文脈において）で使用される用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」および同様の指示対象は、本明細書で別段の指示がない限り、または文脈によって明らかに矛盾しない限り、単数形と複数形の両方を対象とするように解釈されるべきである。本明細書で値の範囲を記載することは、単にその範囲内にある各個別の値を個別に参照するための略記法として機能することを意図する。本明細書で特に示さない限り、各個別の値は、本明細書に個別に記載されるかのように本明細書に組み込まれる。本明細書では、ある特定の値の「約」から、および／または別の特定の値の「約」までの範囲を表すことができる。このような範囲を表す場合、別の態様としては、ある特定の値から、および／または他の特定の値までを含む。同様に、値が近似値として表現される場合、先行詞の「約」を使用することで、特定の値が別の態様を形成することが理解されよう。さらに、範囲の各々の終点は、他の終点および独立して他の終点と関連してどちらとも重要であることが理解されよう。

【0058】

本明細書に記載される全ての方法は、本明細書に別段の記載がない限り、または文脈上明らかに矛盾しない限り、あらゆる好適なステップの順序で実行することができる。本明細書で提供されるありとあらゆる実施例、または例示的な言語（例えば、「など」）の使用は、単に本発明をより容易に理解することを意図し、別の形で特許請求される本発明の範囲に制限を課すものではない。本明細書中のいかなる言語も、本発明の実施に不可欠な非特許請求要素を示すものとして解釈されるべきではない。

【0059】

文脈が明らかに他の方法が必要とされない限り、本明細書および特許請求の範囲を通じて、「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」、「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」などの語は、排他的または網羅的な意味ではなく、包括的な意味で解釈されるべきであり、すなわち、「～を含むが、～に限定されない」という意味で解釈されるべきである。また、単数形や複数形を使用する語には、それぞれ複数形や単数形も含まれる。さらに、本出願で使用される「本明細書」、「超」、「未満」という語および同様の意味を持つ語は、本出願の任意の特定の部分ではなく、本出願全体を指すものとする。

【0060】

当業者であれば理解することができるように、本明細書で開示される各実施形態は、その特定の記載された要素、ステップ、成分、または構成要素を含み、本質的にこれらから成るか、またはこれらから成り得る。本明細書で使用される場合、移行語「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」または「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」は、主要な量であっても、不特定の要素、ステップ、成分、または構成要素を含むことを意味するが、これらに限定されない。「から成る」という移行句は、指定されないあらゆる要素、ステップ、成分、または構成要素を除外する。「から本質的に成る」という移行語は、実施形態の範囲を、指定された要素、ステップ、成分または構成要素と、実施形態に重要な影響を与えないものに限定する。

【0061】

特に明記しない限り、本明細書および特許請求の範囲で使用される、成分の量、分子量などの特性、反応条件などを表す全ての数字は、全ての場合において「約」という言葉で修飾されていると理解されよう。したがって、反対の指示がない限り、明細書および添付の特許請求の範囲に記載される数値パラメータは、本発明によって得ようとする所望の特性に応じて変化する可能性がある近似値である。少なくとも、特許請求の範囲の範囲への均等論の適用を制限するものではないが、各数値パラメータは少なくとも、報告された有効数字を考慮し、かつ通常の丸め技術を適用して解釈されるべきである。さらに明確にする必要がある場合、「約」という用語は、記載された数値または範囲と関連して使用されたときに、当業者によって合理的に与えられる意味を持つ、すなわち、当業者の通常の精度の範囲内で、記載された数値または範囲よりも幾分多いまたは幾分少ないことを示す。

【0062】

本発明の広い範囲を示す数値範囲やパラメータは近似値であるにもかかわらず、具体的例で示された数値は可能な限り正確に報告される。しかしながら、いずれの数値にも、それらのそれぞれの試験測定値内に見られる標準偏差に必然的に起因する一定の誤差が含まれる。

【0063】

本明細書に開示される本発明の代替要素または実施形態のグループ化は、制限として解釈されるものではない。各グループの構成要素は、個別に、またはグループの他の構成要素または本明細書に記載される他の要素との任意の組み合わせで参照され、特許請求され得る。利便性および／または特許性のために、グループの１つまたは複数の構成要素をグループに含め、またはグループから削除することが予想される。任意のこのような包含または削除が行われた場合、本明細書には修正されたグループが含まれるとみなされ、添付の特許請求の範囲で使用される全てのマーカッシュ群の記述が行われる。

【0064】

本発明のいくつかの実施形態は、本発明を実施するために本発明者らに知られている最良の態様を含めて、本明細書に記載される。もちろん、これらの説明された実施形態の変形は、前述の説明を読むことで、当業者に明らかになるであろう。本発明者は、当業者が適宜そのような変形を採用することを期待しており、本発明者らは、本明細書に具体的に記載されない方法で本発明が実施されることを意図する。したがって、本発明には、適用法で認められる限り、添付の特許請求の範囲に記載された主題の全ての変更および同等物が含まれる。さらに、その全ての可能な変形における上述した要素のいずれの組み合わせも、本明細書に別段の記載がない限り、あるいは文脈上明らかに矛盾しない限り、本発明に包含される。

【0065】

本明細書を通じて、特許や出版物を数多く参照している。引用された文献および印刷された出版物の各々は、個々にそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0066】

さらに、本明細書に開示された本発明の実施形態は、本発明の原理を例示するものであることを理解されたい。用いられ得る他の変更は、本発明の範囲内である。したがって、限定ではなく例として、本発明の代替構成を、本明細書の教示に従って利用することができる。したがって、本発明は正確に示され、説明されたものに限定されるものではない。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【国際調査報告】