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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-03-15
(54)【発明の名称】塞栓マイクロスフェア及び方法
(51)【国際特許分類】
A61K 9/16 20060101AFI20220308BHJP
A61K 31/765 20060101ALI20220308BHJP
A61P 3/04 20060101ALI20220308BHJP
A61K 9/06 20060101ALI20220308BHJP
A61K 47/32 20060101ALI20220308BHJP
【ＦＩ】
A61K9/16
A61K31/765
A61P3/04
A61K9/06
A61K47/32
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021544429
(86)(22)【出願日】2020-03-23
(85)【翻訳文提出日】2021-07-29
(86)【国際出願番号】 US2020024145
(87)【国際公開番号】W WO2020198108
(87)【国際公開日】2020-10-01
(31)【優先権主張番号】62/822,319
(32)【優先日】2019-03-22
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】303039785
【氏名又は名称】バイオコンパティブルズ ユーケー リミテッド
(71)【出願人】
【識別番号】398076227
【氏名又は名称】ザ・ジョンズ・ホプキンス・ユニバーシティー
(74)【代理人】
【識別番号】100105957
【弁理士】
【氏名又は名称】恩田 誠
(74)【代理人】
【識別番号】100068755
【弁理士】
【氏名又は名称】恩田 博宣
(74)【代理人】
【識別番号】100142907
【弁理士】
【氏名又は名称】本田 淳
(74)【代理人】
【識別番号】100152489
【弁理士】
【氏名又は名称】中村 美樹
(72)【発明者】
【氏名】ドレハー、マシュー アール．
(72)【発明者】
【氏名】ワイス、クリフォード
【テーマコード（参考）】
4C076
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA09
4C076AA31
4C076BB12
4C076CC21
4C076EE06A
4C086AA01
4C086AA02
4C086FA02
4C086MA01
4C086MA04
4C086MA65
4C086NA14
4C086ZA70
(57)【要約】
本発明は、治療塞栓術、特に肥満動脈塞栓術（ＢＡＥ）の方法に有用な組成物及び方法に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ポリマーからなるポリマーミクロスフェアの集団であって、１２０μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが１０％以下であり、かつ、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下である、固有のサイズ分布を有する、前記ポリマーミクロスフェアの集団からなる組成物。
【請求項2】
前記ミクロスフェアは、１０００ｋＰａを超える平均圧縮弾性率を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項3】
前記ミクロスフェアは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００の平均圧縮弾性率の少なくとも５倍の平均圧縮弾性率を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項4】
前記ミクロスフェアは、１００μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、かつ、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが５％以下である、固有のサイズ分布を有する、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項5】
前記ミクロスフェアは、１２０μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、かつ、１８５μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下であるような固有のサイズ分布を有する、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項6】
ブタ腎臓モデルにおいて、前記ミクロスフェアの１０％以下は、８０μｍ未満の浸透値を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項7】
前記ミクロスフェアの１０％以下は、３００μｍを超える浸透値を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項8】
前記ミクロスフェアの５％以下は、８０μｍ未満の浸透値を有し、かつ、前記ミクロスフェアの５％以下は、３００μｍを超える浸透値を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項9】
前記ミクロスフェアの５％以下が９０μｍ未満の浸透値を有し、かつ、前記ミクロスフェアの５％以下が２５０μｍを超える浸透値を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項10】
ポリマーからなるポリマーミクロスフェアの集団を含有する組成物であって、ブタ腎臓モデルでは、前記ミクロスフェアの１０％以下は、８０μｍ未満の浸透値を有する、組成物。
【請求項11】
前記ミクロスフェアの１０％以下は、３００μｍを超える浸透値を有する、請求項１０に記載の組成物。
【請求項12】
前記ミクロスフェアの５％以下は、８０μｍ未満の浸透値を有し、前記ミクロスフェアの５％以下は、３００μｍを超える浸透値を有する、請求項１０に記載の組成物。
【請求項13】
前記ミクロスフェアの５％以下は、９０μｍ未満の浸透値を有し、前記ミクロスフェアの５％以下は２５０μｍを超える浸透値を有する、請求項１０に記載の組成物。
【請求項14】
前記ミクロスフェアは、１２０μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが１０％以下であり、かつ、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下である、固有のサイズ分布を有する、請求項１０～１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項15】
前記ミクロスフェアは、１２０μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、かつ、１８５μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下であるような固有のサイズ分布を有する、請求項９～１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項16】
前記ミクロスフェアは、１０００ｋＰａを超える平均圧縮弾性率を有する、請求項９～１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項17】
前記ミクロスフェアは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００の平均圧縮弾性率の少なくとも１０倍の平均圧縮弾性率を有する、請求項９～１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項18】
前記ポリマーは、ヒドロゲルである、請求項１～１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項19】
前記ポリマーは、ポリビニルアルコールを含有する、請求項１～１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項20】
前記ポリマーは、画像化可能である、請求項１～１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項21】
前記ポリマーは、放射線不透過性である、請求項１～２０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項22】
前記ポリマーは、ポリマーに共有結合した沈降ミクロスフェア１ｍＬあたり７０～１５０ｍｇのヨウ素を含み、好適には沈降ミクロスフェアの８５～１２０ｍｇ／ｍＬ、特に好適には９０～１１０ｍｇ／ｍＬのヨウ素を含む、請求項１～２１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項23】
請求項１～２２のいずれか一項に記載のポリマーミクロスフェアの集団、及び薬学的に許容される希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項24】
体重の減少の誘発、又は体重の増加の遅延を必要とする患者に体重の減少を誘発させ、又は体重の増加を遅延させる方法であって、前記方法は、患者の胃底の毛細血管床に、有効量の請求項１～２２のいずれか一項に記載のミクロスフェアの集団、又は有効量の請求項２３に記載の医薬組成物を含有する組成物を送達する工程を含む、方法。
【請求項25】
体重の減少の誘発、又は体重の増加の遅延を必要とする患者に体重の減少を誘発、又は体重の増加を遅延させる方法であって、前記方法は、患者の胃底の毛細血管床に、有効量の請求項１～２２のいずれか一項に記載のミクロスフェアの集団、又は有効量の請求項２３に記載の医薬組成物を含有する組成物を送達する工程を含む、方法。
【請求項26】
前記ミクロスフェアは、経カテーテル経路によって送達される、請求項２４又は２５に記載の方法。
【請求項27】
体重の減少の誘発、又は体重の増加の遅延を必要とする患者に体重の減少を誘発、又は体重の増加を遅延させる方法で用いられる、請求項１～２３のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、治療塞栓術、特に肥満動脈塞栓術（ＢＡＥ）のための方法に有用な組成物及び方法に関する。
【背景技術】
【0002】
治療塞栓術は、血管を閉塞して血流を減速又は停止させて組織の虚血を引き起こすために、経カテーテル経路によって材料を血管の中に導入する低侵襲的な処置である。このアプローチは、肝細胞癌などの血管過多腫瘍の治療や、子宮筋腫などの良性腫瘍の治療に以前から使用されている。最近の前臨床観察では、胃底に供給する血管の塞栓術（肥満動脈塞栓術又はＢＡＥとして知られている）が体重増加の制御に有用である可能性があることが示唆されている。
【発明の概要】
【0003】
いくつかの態様では、本発明は、ポリマーからなるポリマーミクロスフェアの集団であって、１２０μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが１０％以下であり、及び、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下である固有のサイズ分布を有するポリマーミクロスフェアの集団からなる組成物を提供する。
【0004】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ミクロスフェアは、１０００ｋＰａを超える平均圧縮弾性率を有してよい。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ミクロスフェアは、ビーズブロック（Ｂｅａｄ Ｂｌｏｃｋ）（登録商標）３００－５００の平均圧縮弾性率の少なくとも５倍の平均圧縮弾性率を有する。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ミクロスフェアは、ビーズブロック（Ｂｅａｄ Ｂｌｏｃｋ）（登録商標）３００－５００の平均圧縮弾性率の少なくとも５倍の平均圧縮弾性率を有する。
【0005】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ミクロスフェアは、１００μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、及び、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが５％以下である固有のサイズ分布を有する。
【0006】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ミクロスフェアは、１２０μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、及び、１８５μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下である固有のサイズ分布を有する。
【0007】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ブタ腎臓モデルにおいて、８０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは１０％以下である。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、３００μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは１０％以下である。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、３００μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは１０％以下である。
【0008】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、８０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは５％以下であり、３００μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは５％以下である。
【0009】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、９０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは５％以下であり、２５０μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは５％以下である。
【0010】
本発明の別の態様は、ポリマーミクロスフェアの集団を含む組成物に関し、ポリマーミクロスフェアの集団は、ポリマーを含有し、ブタ腎臓モデルにおいて、８０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは１０％以下である。
【0011】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、３００μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは１０％以下である。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、８０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは５％以下であり、３００μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは５％以下である。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、８０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは５％以下であり、３００μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは５％以下である。
【0012】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、９０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは５％以下であり、２５０μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは５％以下である。
【0013】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ミクロスフェアは、１２０μｍ未満の直径を有するクロスフェアが１０％以下であり、及び２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０以下である固有のサイズ分布を有する。
【0014】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ミクロスフェアは、１２０μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、及び１８５μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下である固有のサイズ分布を有する。
【0015】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ミクロスフェアは、１０００ｋＰａを超える平均圧縮弾性率を有する。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ミクロスフェアは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００の平均圧縮弾性率の少なくとも１０倍の平均圧縮弾性率を有する。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ミクロスフェアは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００の平均圧縮弾性率の少なくとも１０倍の平均圧縮弾性率を有する。
【0016】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ポリマーはヒドロゲルである。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ポリマーは、ポリビニルアルコールを含有する。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ポリマーは、ポリビニルアルコールを含有する。
【0017】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ポリマーは画像化可能である。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ポリマーは放射線不透過性である。
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ポリマーは放射線不透過性である。
【0018】
上記態様と組み合わせて使用できるいくつかの実施形態では、ポリマーは、ポリマーに共有結合した沈降ミクロスフェアの１ｍＬあたり７０～１５０ｍｇのヨウ素を含み、好ましくは沈降したミクロスフェアの８５～１２０ｍｇ／ｍＬ、特に沈降したミクロスフェアの９０～１１０ｍｇ／ｍＬでヨウ素を含む。
【0019】
本発明の別の態様は、上記態様及び実施形態にかかるポリマーミクロスフェアの集団、及び薬学的に許容される希釈剤を含む医薬組成物に関する。
本発明の別の態様は、体重の減少、又は体重の増加の遅延を要する患者において、体重の減少を誘発、又は体重の増加を遅延させる方法に関し、方法は、有効量の上記態様及び実施形態にかかるミクロスフェアの集団、又は有効量の上記態様及び実施形態の任意の１つに係る薬学的組成物を患者の胃底の毛細血管床に送達する工程を含む。
本発明の別の態様は、体重の減少、又は体重の増加の遅延を要する患者において、体重の減少を誘発、又は体重の増加を遅延させる方法に関し、方法は、有効量の上記態様及び実施形態にかかるミクロスフェアの集団、又は有効量の上記態様及び実施形態の任意の１つに係る薬学的組成物を患者の胃底の毛細血管床に送達する工程を含む。
【0020】
本発明の別の態様は、肥満の治療を要する患者に肥満の治療をするための方法に関し、方法は、有効量の上記態様及び実施形態のいずれか１つにかかるミクロスフェアの集団、又は有効量の上記態様及び実施形態のうちのいずれか１つに係る薬学的組成物を患者の胃底の毛細血管床に送達する工程を含む。
【0021】
いくつかの実施形態において、ミクロスフェアは、経カテーテル経路によって患者に送達される。
本発明の他の態様は、体重の減少を誘発、又は体重の増加を遅延させる必要のある患者に、体重の減少を誘発、又は体重の増加を遅延させる方法で使用するための上記態様及び実施形態のいずれか１つにかかる組成物に関する。
本発明の他の態様は、体重の減少を誘発、又は体重の増加を遅延させる必要のある患者に、体重の減少を誘発、又は体重の増加を遅延させる方法で使用するための上記態様及び実施形態のいずれか１つにかかる組成物に関する。
【図面の簡単な説明】
【0022】
【図1】テストサンプルと比較して市販のミクロスフェア調製物の固有のサイズ分布を示すサイズ分布グラフ。
【図2】ブタ腎臓における、放射線不透過性１０２ミクロスフェア（ヨウ素１２９ｍｇ／ｍＬ）の浸透値を示すサイズ分布ヒストグラム。
【図3】ブタ腎臓における、放射線不透過性３０４ミクロスフェア（ヨウ素１１３ｍｇ／ｍＬ）の浸透値を示すサイズ分布ヒストグラム。
【図4】ブタ腎臓における、（放射線不透過性ではない）ビーズブロック（登録商標）３００－５００μｍ（公称サイズ範囲）ミクロスフェア（ヨウ素なし）の浸透値を示すサイズ分布ヒストグラム。
【図5】放射線不透過性の１０２ミクロスフェアを用いてＢＡＥで治療したブタにおける体重増加率を示すグラフ。
【図6】放射線不透過性の１０２ミクロスフェアの潰瘍スコアを、より小さいミクロスフェア（ディーシービーズルミ（ＤＣ Ｂｅａｄ ＬＵＭＩ）（登録商標）４０－９０μｍ（公称））、及びより大きいミクロスフェア（ディーシービーズルミ１００－３００μｍ（公称））と対比して示す散布図。４０～９０μｍのサイズ範囲のヨウ素含有量は１３１～１６９ｍｇ／ｍＬであり、１００～３００μｍのサイズ範囲のヨウ素含有量は１２２～１６２ｍｇ／ｍｌである。散布図は、各ミクロスフェアの集団の潰瘍スコアの平均と標準偏差を示す。潰瘍スコア：潰瘍なし＝０、小（＜＝２ｃｍ）＝１、大（＞２ｃｍ）＝２、全層潰瘍＝３。
【図8】個々のブタの体重増加を胃底被覆率に対してプロットして示すグラフであって、データは、例４（１０２ミクロスフェア）の個々の動物のコーンビームＣＴスキャンから得たものであり、胃底被覆率は、総胃底面積の割合として胃底内の放射線不透過性の範囲を示す、グラフ。
【発明を実施するための形態】
【0023】
上記のように、本発明は、治療塞栓術、特に肥満動脈塞栓術（ＢＡＥ）の方法に有用な組成物及び方法に関する。
治療塞栓術は、血管を閉塞して、血流を減速又は停止させて供給された組織の虚血を引き起こすために、経カテーテル経路によって材料を血管に導入する低侵襲的方法である。このアプローチは、肝細胞癌などの血管過多腫瘍の治療や、子宮筋腫などの良性腫瘍の治療に従前より使用されている。
治療塞栓術は、血管を閉塞して、血流を減速又は停止させて供給された組織の虚血を引き起こすために、経カテーテル経路によって材料を血管に導入する低侵襲的方法である。このアプローチは、肝細胞癌などの血管過多腫瘍の治療や、子宮筋腫などの良性腫瘍の治療に従前より使用されている。
【0024】
近年の前臨床観察では、胃底に供給する血管の塞栓術（肥満動脈塞栓術又はＢＡＥとして知られる）は、特に肥満、及び関連する扁平上皮の治療において、体重増加の制御に有用である可能性が示唆されている（Ａｒｅｐａｌｌｙ ｅｔ ａｌ ２００７、 Ｂａｗｕｄｕｎ ｅｔ ａｌ、２０１２、Ｐａｘｔｏｎ ｅｔ ａｌ ２０１３、Ｋｉｐｓｈｉｄｚｅ ｅｔ ａｌ ２０１３、Ｗｅｉｓｓ ｅｔ ａｌ ２０１４）。これらの研究は、ＢＡＥが、体重増加の減少、循環グレリンレベルの減少、及び胃底におけるグレリン分泌細胞の数の減少につながることを示唆している。例えば、米国特許第９５７２７００号明細書は３００～５００μｍのサイズ範囲のミクロスフェア（ビードブロック（登録商標）３００－５００バイオコンパチブルズＵＫ社（ＢｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｌｅｓＵＫ Ｌｔｄ））を使用したＢＡＥ処置を開示しており、サイズ範囲が小さい場合には、胃底の粘膜壊死、胃潰瘍、及びオフターゲットの塞栓形成、例えば食道、肝臓及び／又は脾臓などでの塞栓形成、を引き起こす可能性があることを示唆している。しかしながら、Ｆｕ ｅｔ ａｌ（２０１８）では、公称直径が３００～５００μｍのミクロスフェアを使用して、ブタで、体重増加の抑制又はグレリン発現細胞の減少を示すことができなかった。
【0025】
この方法は有望ではあるが、動物モデルで胃体及び胃炎など、粘膜表面の潰瘍などの有害事象の報告が続いている（Ｐａｘｔｏｎ ｅｔ ａｌ ２０１４、及びＷｅｉｓｓ ｅｔ ａｌ ２０１４）。したがって、ＢＡＥは、体重増加、肥満、及び関連する後遺症の調節に対して潜在的に有用なアプローチではあるが、胃底の効果的な塞栓形成を達成しつつ、安全性の面で改善された組成物及び方法を提供することが望ましい。
【0026】
本発明者は、粘膜の損傷の制御における重要な要因は、塞栓が生じる血管床内の深さと、胃底の外側の粘膜領域のオフターゲットの塞栓の存在であることを特定した。本発明者はさらに、粘膜損傷の１つの原因は、粘膜下組織内にミクロスフェアが存在することであり、塞栓形成がカテーテルのわずかにより近位に（すなわち粘膜から離間する方向に）のみに起こる場合は、虚血を引き起こすのに効果的であるが、一般に長期的又は重大な粘膜損傷を引き起こすことはないことを特定した。一方で塞栓形成が、近位すぎる場合、すなわち粘膜から離間しすぎている場合には、胃壁内の側副路の存在によって塞栓の効果が低下するため効力が低下すると考えられる。
【0027】
ミクロスフェアは、一般に、ミクロスフェアを調製するために使用される方法及び使用されるサイズを形成する技術に応じて一定の広がりのあるサイズを有する球の集団として形成されるが、ミクロスフェアの浸透性自体は、さまざまな要因によって支配される。これらには、サイズ分布だけでなく、球の圧縮率（圧縮弾性率）も含まれる。
【0028】
ミクロスフェアを体内で（ｉｎ ｓｉｔｕ）視覚化できることは特に有用である。何故なら、これにより、術者はミクロスフェアがどこに沈着しているかをリアルタイムで判断できるとともに、オフターゲットの塞栓を特定できるためである。しかしながら、ポリマーへの放射線不透過性成分の添加は、ミクロスフェアの圧縮性を変更することがあるため、ミクロスフェアの浸透性に影響を及ぼす可能性がある。
【0029】
第１の態様では、本発明は、したがって、１００μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが１０％以下であり、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下であるような固有のサイズ分布を有するポリマーミクロスフェアの集団を含有する組成物を提供する。
【0030】
固有のサイズは、注入前のミクロスフェアのサイズである。ヒドロゲルなどの水膨潤性ポリマーの場合、これは、通常の生理食塩水（１０ｍＭリン酸塩；５００ｍＭ ＮａＣｌ；ｐＨ７．４）で完全に水和したミクロスフェアのサイズである。
【0031】
好ましくは、ミクロスフェアは、１００μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、より好ましくは、及び、代替的には、１２０μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが５％以下であるような固有のサイズ分布を有する。
【0032】
好ましくは、ミクロスフェアは、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、より好ましくは、及び、代替的には、１８５μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下であるような固有のサイズ分布を有する。
【0033】
特に好ましい組み合わせでは、ミクロスフェアは、１００μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、及び、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、より好ましくは、ミクロスフェアは、１２０μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが５％以下であり、及び、１８５μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下であるような固有のサイズ分布を有する。
【0034】
上記の複数の好ましい固有のサイズ分布は、追加的ではなく代替的であるとして解釈されたい。
ミクロスフェアの圧縮率（圧縮弾性率）は、血管床の中への浸透の深さに影響を及ぼす。ミクロスフェアの圧縮性が高ければ高いいほど、所定のサイズで血管床内により深く浸透する。ミクロスフェアの圧縮弾性率の測定については、Ｃａｉｎｅ ｅｔ ａｌ（２０１７）、及びＤｕｒａｎ ｅｔ ａｌ（２０１６）に記載されている。本明細書に記載の測定方法が上記方法から逸脱する範囲については、本明細書に記載の方法に従うものとする。本明細書の例２を参照。
ミクロスフェアの圧縮率（圧縮弾性率）は、血管床の中への浸透の深さに影響を及ぼす。ミクロスフェアの圧縮性が高ければ高いいほど、所定のサイズで血管床内により深く浸透する。ミクロスフェアの圧縮弾性率の測定については、Ｃａｉｎｅ ｅｔ ａｌ（２０１７）、及びＤｕｒａｎ ｅｔ ａｌ（２０１６）に記載されている。本明細書に記載の測定方法が上記方法から逸脱する範囲については、本明細書に記載の方法に従うものとする。本明細書の例２を参照。
【0035】
本明細書で説明するように、平均圧縮弾性率は、個々のミクロスフェアから得られた少なくとも５回の測定の平均であり、当業者であれば、読み取りが多く得られれば得られるほど平均はより正確になることが理解できるが、弾性率は、少なくとも２５回の測定の平均であることが好ましい。ミクロスフェアがヒドロゲルである場合、弾性率は、通常の生理食塩水で完全に水和したときに測定されなければならない。
【0036】
ミクロスフェアの好ましい弾性率は、少なくとも５００ｋＰａ～１０００ｋＰａ、好ましくは少なくとも２０００ｋＰａ、より好ましくは少なくとも４０００ｋＰａ、さらにより好ましくは少なくとも５０００ｋＰａである。好ましくは、弾性率は５０，０００ｋＰａを超えない。なぜなら、そのようなミクロスフェアは、送達がより困難になり、ミクロスフェアの剛性は、カテーテルの閉塞を引き起こす傾向を増加させるため、であるが、これはカテーテルのサイズにも多少依存する。弾性率は、好ましくは３００００ｋＰａを超えず、より好ましくは２５０００ｋＰａを超えない。
【0037】
好ましい弾性率の範囲は、２，０００ｋＰａ～３０，０００ｋＰａであり、より好ましくは５０００ｋＰａ～２５０００ｋＰａである。
したがって、好ましい態様では、組成物は、１００μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが１０％以下であり、かつ、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下であるような固有のサイズ分布を有するポリマーミクロスフェアの集団を含有し、ミクロスフェアは、少なくとも１０００ｋＰａの平均圧縮弾性率を有する。
したがって、好ましい態様では、組成物は、１００μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが１０％以下であり、かつ、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下であるような固有のサイズ分布を有するポリマーミクロスフェアの集団を含有し、ミクロスフェアは、少なくとも１０００ｋＰａの平均圧縮弾性率を有する。
【0038】
圧縮弾性率は、相対的な文言で表現することもできる。したがって、ミクロスフェアでは、好ましくは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００ミクロスフェアの圧縮弾性率の少なくとも５倍の圧縮弾性率を有する。ビーズブロック（登録商標）ミクロスフェアは、国際公開第２００４／０７１４９５号明細書の実施例１の低ＡＭＰＳの場合に従って調製し、３００～５００のサイズ範囲にふるいにかけられてもよい。
【0039】
好ましくは、ミクロスフェアは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００の弾性率の少なくとも１０倍、より好ましくは少なくとも１５倍、さらにより好ましくは少なくとも２０倍、より好ましくは少なくとも２５倍の弾性率を有する。
【0040】
好ましくは、ミクロスフェアは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００の圧縮弾性率の２００倍を超える圧縮弾性率を有さず、好ましくは１５０倍未満であり、より好ましくは１２５倍未満であり、より好ましくは１１０倍未満であり、さらにより好ましくは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００の圧縮弾性率の１００倍未満である。
【0041】
好ましくは、ミクロスフェアは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００の圧縮弾性率の１０～２００倍の圧縮弾性率を有する。より好ましくは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００の圧縮弾性率の１５～１５０倍、より好ましくはさらに２０～１１０倍、さらにより好ましくは２５～１１０倍又は２５～１００倍の圧縮弾性率を有する。
【0042】
したがって、さらに好ましい態様では、組成物は、１００μｍ未満の直径を有するミクロスフェアが１０％以下であり、及び、２００μｍを超える直径を有するミクロスフェアが１０％以下であるような固有のサイズ分布を有するポリマーミクロスフェアの集団を含有し、ミクロスフェアは、ビーズブロック（登録商標）３００－５００の平均圧縮弾性率の少なくとも５倍の平均圧縮弾性率を有する。
【0043】
ミクロスフェアが浸透する血管床内の深さは、ミクロスフェアの固有のサイズ及びミクロスフェアの圧縮性（圧縮弾性率）を含む多くの要因によって支配される。本明細書で使用する場合、ミクロスフェアの「浸透値」は、血管を遮断する時、１個のミクロスフェアが留まる部位における血管の最小の直径である。これは、ミクロスフェアの集団が腎動脈に送達されて腎臓血管系の塞栓形成を引き起こしたブタ腎臓モデルで決定される（例えばＣａｉｎｅ ｅｔ ａｌ ２０１７参照）。浸透値は、剖検後に顕微鏡で決定される。塞栓された腎臓は切断されて染色され、１個のミクロスフェアによって塞栓された血管の最小の直径が測定される（多くの血管は楕円を示す角度で切断され、血管の最小の直径は楕円の最小直径である）。これがミクロスフェアの浸透値である（例３も参照）。
【0044】
上記ミクロスフェア集団は、第２の態様により、以下に記載する浸透特性を有し得る。
第２の態様では、本発明は、ブタ腎臓モデルにおいて、８０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアが１０％以下である、ポリマーミクロスフェアの集団を含有する組成物も提供する。
第２の態様では、本発明は、ブタ腎臓モデルにおいて、８０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアが１０％以下である、ポリマーミクロスフェアの集団を含有する組成物も提供する。
【0045】
好ましくは、８０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは５％以下であり、代替的、及びより好ましくは、９０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは５％以下である。好ましくは、３００μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは１０％以下であり、より好ましくは、３００μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは５％以下である。あるいは、さらにより好ましくは、２５０μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは５％以下である。好ましくは、ブタ腎臓モデルでは、ミクロスフェアの集団において、８０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは１０％以下であり、及び、３００μｍを超える浸透値を有すミクロスフェアは１０％以下である。より好ましくは、８０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアは５％以下であり、及び、３００μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアの５％以下である。あるいは、さらにより好ましくは、９０μｍ未満の浸透値を有するミクロスフェアの５％以下であり、かつ、２５０μｍを超える浸透値を有するミクロスフェアは５％以下である。
【0046】
上記上限及び下限の浸透分布の好ましい値は、追加的ではなく代替的であるものとして解釈されたい。
そのような集団は、第１の態様に関して上記したように、固有のサイズ分布及び圧縮性特性を有する。
そのような集団は、第１の態様に関して上記したように、固有のサイズ分布及び圧縮性特性を有する。
【0047】
好ましくは、ポリマーは親水性ポリマーであり、これは、そのようなポリマーが、一般により生体適合性が高いためである。
親水性ポリマーは、アクリルポリマー、アクリルアミド、アセタール、アリル、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリエステル、ポリエーテル、ポリイミド、ポリオレフィン、ポリホスフェート、ポリウレタン、スチレン系、ビニル、多糖類、又はそれらの組み合わせ、及び／又はコポリマーからなる群から選択されてもよい。好ましくは、ポリマーは、ビニルアルコール、エチレン又はプロピレングリコール、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド又はメタクリルアミドから選択されるモノマーを含有する。
親水性ポリマーは、アクリルポリマー、アクリルアミド、アセタール、アリル、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリエステル、ポリエーテル、ポリイミド、ポリオレフィン、ポリホスフェート、ポリウレタン、スチレン系、ビニル、多糖類、又はそれらの組み合わせ、及び／又はコポリマーからなる群から選択されてもよい。好ましくは、ポリマーは、ビニルアルコール、エチレン又はプロピレングリコール、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド又はメタクリルアミドから選択されるモノマーを含有する。
【0048】
好ましい親水性ポリマーには、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）などのビニルアルコールポリマー；ポリアクリル酸及び塩などのアクリルポリマー、ポリ（メチルアクリレート）などのポリ（アルキルアクリレート）、ポリメチルメタクリレート及びポリエチルメタクリレートなどのポリアルキル（アルキルアクリレート）；ポリヒドロキシエチルメタクリレートなどのポリヒドロキシアルキル（アルキルアクリレート）；ポリアクリルアミドなどのアクリルアミドポリマー、ポリ（アルキルアクリルアミド）、トリス－（ヒドロキシメチル）メチルアクリルアミドなどのポリメタクリルアミド（ヒドロキシアルキル）アクリルアミドなどの；ポリビニルピロリドン、ポリエチレングルコール（ＰＥＧ）ポリマー、例えばＰＥＧ、ＰＥＧ－アクリルアミド及びジアクリルアミド、ＰＥＧ－アクリレート及びジアクリレート、ＰＥＧ－メタシレート及びジメタクリレートなど；及び、ＰＥＧ－メタクリルアミド及びジメタクリルアミド；カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースなどのセルロース；キトサン、アルギン酸塩、ゼラチン、デンプン、又は上記の少なくとも１つを含む組み合わせ又はコポリマーを含む。ポリマーは架橋されてもよい。
【0049】
特定の実施形態では、ポリマーは、ポリヒドロキシル化ポリマー、すなわち、１つ以上のペンダントヒドロキシルを有する繰り返し単位を含むポリマーを含有するか、又はそのようなポリマーである。好ましいポリヒドロキシル化ポリマーには、ポリ（ヒドロキシアルキルアクリレート）及びポリ（ヒドロキシアルキル（アルキルアクリレート）、特に、ポリヒドロキシエチル（メタクリレート）などのアクリレート及びアルキルアクリレート（例えばメタシレート）のポリオールエステル；ポリ（ヒドロキシアルキルアクリルアミド）及びポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、例えば、トリス（ヒドロキシメチル）メタクリルアミド；ポリ（ビニルアルコール）又は（エチレン－ビニルアルコール）コポリマーなどのビニルアルコールを含有するポリマー；及びデンプン、キトサン、グリコーゲンなどの多糖類、メチルセルロースなどのセルロース、アルギン酸塩、及びカラゲナン、ガー、キサンタン、ジェラン、ローカスビーンガム、ガムアラビアックなどの多糖類ガムを含有するポリマーが含まれる。
【0050】
さらなる実施形態では、親水性ポリマーは、ポリカルボキシル化ポリマー、すなわち、１つ以上のペンダントカルボキシル基を有する繰り返し単位を含むポリマーであってよい。これらのポリマーには、例えばポリアクリル酸、ポリアルキルアクリル酸、ポリメタクリル酸など、及びそれらのコポリマー、特にＰＶＡを有するものが含まれる。そのようなポリマーは、ナトリウム塩又はカリウム塩などのそれらの塩の形態であってよい。
【0051】
特に好ましいのは、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）のホモポリマー及びコポリマーなどのＰＶＡ、ＰＥＧポリマー、ＰＥＧ－アクリルアミド及びジアクリルアミド、ＰＥＧ－アクリレート及びジアクリレート、ＰＥＧ－メタシレート及びジメタクリレートなど；及びＰＥＧ－メタクリルアミド及びジメタクリルアミド；及びポリメタクリル酸などのポリアルキルアクリル酸を含有するポリマーである。最も好ましいのは、ポリビニルアルコールのホモポリマー及びコポリマーなどの、ＰＶＡを含有するポリマーである。
【0052】
ポリマーは、好ましくは架橋ポリマーである。架橋は、共有結合又は非共有結合であってよい。非共有結合には、例えば、ポリマー鎖の絡み合い、又は結晶領域の存在による物理的な架橋が含まれる。イオン性架橋は、ポリマー上の荷電基が逆の電荷を帯びた多価基によって架橋される場合に生じる。いくつかの場合には、これは、アルギン酸塩ポリマーの場合のように、カルシウム、マグネシウム又はバリウムなどの二価以上の金属イオンを介することができる。共有結合架橋は、異なる鎖上の官能基を共有結合させるための確立された方法のいずれかによって達成される。重合段階で達成される場合、これは、二官能性モノマーの組み込みによって達成され得る。後重合の場合、アミン基、ヒドロキシル基、又はカルボキシル基、又はエチレン性不飽和基などのポリマー上の官能基と反応することができる二官能性種によって達成され得る。ポリマーはまた、そのような架橋可能な基をそれ自体が有するペンダント基を含んでもよい。例えば、エチレン性不飽和基を含んでもよい。
【0053】
好ましい実施形態では、ポリマーは、ｐＨ７．４で帯電した官能基によって置換されてもよい。このような官能基は、正又は負の電荷を帯びており、生理学的ｐＨ（ｐＨ７．４）で逆の電荷を帯びた化合物に可逆的に結合できる。スルホナート（ｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ）基、リン酸基、アンモニウム基、ホスホニウム基、及びカルボキシラート基を含む様々な荷電基を使用することができ、カルボキシラート基、及びスルホナート基が好ましい。架橋ポリマーの一実施形態では、荷電基は、架橋部分上にあってもよい。
【0054】
特に好ましくは、ポリマーは、ヒドロゲルであり、つまり、ポリマーは、水膨潤性であるが水不溶性である。それは、５０重量％を超える水、好ましくは最大９８重量％までの水を含有し、好ましくは６５～８５％、より好ましくは７５～８５％の水を含有する。ポリヒドロキシル化ポリマー又はポリカルボキシル化ポリマー、及び、好ましくは架橋ポリヒドロキシポリマーは、そのようなヒドロゲルを形成する傾向があるため、この点において好ましい。
【0055】
特に好ましい実施形態では、ポリマーは、ヒドロゲルの形態の架橋ポリビニルアルコールポリマー又はコポリマーである。一実施形態では、そのようなポリマーは、物理的又は共有結合的に架橋されてもよい。ポリマーは、ポリマーが架橋される架橋可能な官能基を有するペンダント基（－ＯＨ基以外）、例えば、エチレン性不飽和基などを含み、または、ポリマーは、アルデヒド、又は酸などの、ＰＶＡ骨格のヒドロキシル基と反応する複数の官能基を有する架橋剤を介して架橋されてもよい。
【0056】
特に好ましいのは、上記のような荷電基を有するポリマーであり、特にポリマーがスルホナート基、又はカルボキシラート基を含む場合である（例えば、国際公開第２００４／０７１４９５号明細書及び国際公開第２０１７／０３７２７６号明細書参照）。
【0057】
好ましいタイプのポリマーは、ポリビニルアルコールマクロマーであり、ＰＶＡ分子ごとに２つ以上のエチレン性不飽和ペンダント基を有し、ＰＶＡとエチレン性不飽和モノマーとの反応によって形成される。ＰＶＡマクロマーは、例えば、ペンダントビニル基、又はアクリル基を有するＰＶＡポリマーを設けることによって形成されてもよい。ペンダントアクリル基は、例えば、アクリル酸又はメタクリル酸をＰＶＡと反応させて、いくつかのヒドロキシル基を介してエステル結合を形成することによって設けられてもよい。ポリビニルアルコールに結合することができるビニル基を含有する化合物は、例えば、米国特許第４，９７８，７１３号明細書、好ましくは、米国特許第５，５０８，３１７号明細書、及び米国特許第５，５８３，１６３号明細書に記載されている。したがって、好ましいマクロマーは、（アルク）アクリルアミノアルキル部分（（ａｌｋ）ａｃｒｙｌａｍｉｎｏａｌｋｙｌ ｍｏｉｅｔｙ）に結合されたポリビニルアルコールの骨格を含む。そのようなポリマーの例は、ネルフィルコン－Ｂ（Ｎｅｌｆｉｌｃｏｎ－Ｂ）、又はアクリルアミド－ＰＶＡとして知られる、ＰＶＡ－Ｎ－アクリロイルアミノアセトアルデヒド（ＮＡＡＡＤＡ）マクロマーを含有する。
【0058】
好ましい実施形態において、このマクロマーは、任意選択で正又は負の電荷を有するエチレン性不飽和モノマー、例えば、２－アクリルアミド－２－メチルプロパンスルホン酸（ＡＭＰＳ）と反応させてもよい。そのようなポリマー及びそれらを製造する方法は、国際公開第２００４／０７１４９５号明細書、国際公開第２０１２／１０１４５５号明細書及び国際公開第２０１７／０３７２７６号明細書に記載されている。ディーシービーズ（ＤＣ Ｂｅａｄ（登録商標））は、そのようなポリマーミクロスフェアの１つである。
【0059】
特に好ましくは、ミクロスフェアは画像化可能である。これは、処置中又は処置後の視覚化に役立つ。画像化可能性には、超音波、Ｘ線、磁気共鳴画像法、超常磁性共鳴画像法（ｓｕｐｅｒｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｉｍａｇｉｎｇ）、陽電子放射型画像法（ＰＥＴなど）又は光子放射型画像法（ＳＰＥＣＴなど）が含まれる。画像化可能性は、画像化可能な構成要素を組み込むことによって達成され、好ましくは、それは、ミクロスフェア全体に組み込まれる。そのような薬剤は、ミクロスフェアのポリマーに共有結合されていることが特に好ましい。
【0060】
好ましい実施形態では、ミクロスフェアは、Ｘ線によって画像化可能である。これは、放射線不透過性成分を共有結合又は非共有結合のいずれかでポリマーミクロスフェアに組み込むことによって達成可能である。非共有的に組み込まれた放射線不透過性成分の例には、例えば、バリウム塩（例えば、硫酸バリウム）などの粒子状物質（例えば、Ｔｈａｎｏｏ ｅｔ ａｌ １９９１参照）、金、鉄又はタンタルなどの金属、又はリピオドール（Ｌｉｐｉｄｏｌ（登録商標））などのヨウ素化油が含まれる。しかしながら、より好ましいアプローチでは、ポリマーは、好ましくはミクロスフェア全体に結合されたヨウ素（例えば、国際公開第２０１５／０３３０９２号明細書）、又はビスマス（例えば、国際公開第２０１８／０９３５６６号明細書）などの共有結合された放射線不透過性成分を含有してもよい。
【0061】
１つのアプローチでは、ポリマーミクロスフェアは、放射線不透過性成分を含むペンダント基などの共有結合基を含む。好ましくは、共有結合されたペンダント基は、ヨウ素化芳香族基、特にフェニル基などのヨウ素化された基である。当業者であれば、ポリマー中のヨウ素の量は、ヨウ素化された基のポリマーへのカップリングの程度を制御することによって、例えば、ＰＶＡでは、ポリマー中のペンダント基の数、又は、例えばペンダント基上のヨウ素の数を制御することによって調節し得ることが理解できる。ヨウ素のレベルは、ミクロスフェア１ｍｌあたりのヨウ素の量（ｍｇ）として簡便に表し得る。ミクロスフェアが水膨潤性である場合、たとえば架橋されたＰＶＡなどのヒドロゲルでは、これは、充填体積として通常の生理食塩水中の完全に水和したビーズ１ｍｌあたりのヨウ素の量を指す（たとえば、メスシリンダーで定量化される）。本発明では、ミクロスフェアは、適切な放射線不透過性（又は放射線密度）を形成するように選択されたヨウ素のレベルを有する一方で、ミクロスフェアの圧縮度が、必要とされるレベルの取り扱い及び浸透を可能にし、かつ、カテーテル送達の容易性や懸濁特性が過度に妥協されないことを保証する。
【0062】
本明細書に記載のミクロスフェア集団は、沈降ミクロスフェアの７０～１５０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは８０～１４０ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは８５～１２０ｍｇ／ｍｌ、特に９０～１１０ｍｇ／ｍｌの範囲のポリマー中のヨウ素レベルを有してもよい。これらのレベルは、特に、ポリマーが本明細書に記載されるように架橋されたＰＶＡポリマー又はコポリマーであるミクロスフェアに対して、良好な特性を付与することが見出されている。
【0063】
このような官能基は、ポリマー上の官能基の利用可能性に応じて、さまざまな化学作用を介してポリマー主鎖に結合させてもよい。例えば、ポリヒドロキシル化ポリマーの場合、ペンダント基は、エーテル結合、エステル結合、又は環状アセタール結合を介して結合させてもよい。ヨウ素化芳香族基は、リンカーを介して、又はカップリング基を介して直接ポリマーに結合させてもよい。鎖が、Ｎ，Ｓ，Ｏから選択された１つの原子のみ含むように形成される場合には、適切なリンカーは、芳香族基とカップリング基との間に、Ｃ、Ｎ、Ｓ及びＯから選択される１～６個の原子の鎖を有するリンカーを含む。ここで、Ｃは、任意選択で、＝Ｏ、－ＣＨ３、及び（－ＣＨ３）２から選択される基、特には、＝Ｏで置換され、Ｎは、Ｒ１で置換され、Ｒ１は、Ｈ及びＣ１-４アルキル、特にＨ及びメチルから選択され、Ｓは、－ＳＯ２－基である。このリンカー内では、Ｓはあまり好ましくない。適切なリンカーには、式－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－（ＣＨ２）ｑ－と、ここで、ｐ及びｑは、ｐ及びｑが両方とも０であってはならないという条件で、０、１、又は２であり、式－（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（Ｏ）－と、ここで、ｎは、１又は２であり、式Ｃ１－６アルキレンの基とが含まれる。好ましいリンカーは、メチレンエチレン及びプロピレン基、メトキシレン、エトキシレン、オキシメチレン、及びオキシエチレン基、－（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（Ｏ）－、ここで、ｎは、１又は２であり、メチレン、エチレン、及びプロピレン基から選択される。
【0064】
ポリマーがＰＶＡ（ＰＶＡポリマー及びコポリマー）である場合、又はそれを含む場合、放射線不透過性成分を含むペンダント基（好ましくはヨウ素化フェニル基）は、国際公開第２０１５／０３３０９２号明細書及び国際公開第２０１５／０３３０９号明細書に記載されているように、環状アセタール基を介してポリマーに共有結合できる。したがって、特に好ましい実施形態では、ミクロスフェアは、上記のヒドロゲルの形態の架橋されたポリビニルアルコールポリマー又はコポリマーを含み、ＰＶＡ骨格は、例えば環状アセタール結合、好ましくは環状アセタールを介して直接結合を介してＰＶＡ骨格に結合されたヨウ素化フェニル基をさらに含む。
【0065】
適切なヨウ素化フェニル基を以下に示す。
【0066】
【化1】
【0067】
そのようなペンダント基を有するＰＶＡポリマー及びコポリマーを調製するための工程は、国際公開第２０１５／０３３０９２号明細書及び国際公開第２０１５／０３３０９号明細書に記載されている。
【0068】
特に好ましいアプローチでは、ポリマーは、本明細書に記載のように、架橋されたＰＶＡポリマー又はコポリマーの形態のヒドロゲルであり、ポリマー全体にわたって共有結合したヨウ素化基を含み、その結果、ポリマーは、７０～１５０ｍｇ／ｍｌのヨウ素を含有する。
【0069】
１つのアプローチでは、有効量の１つ以上の医薬活性剤を組成物に含めることができる。ミクロスフェアから活性剤を送達することが望ましい場合があるため、ミクロスフェアは、例えばイオン相互作用によってポリマーに結合、又は組み込まれ得るそのような活性剤を含有してもよい。
【0070】
有利な実施形態では、本発明のミクロスフェアは、例えば、イオン交換機構によって帯電した医薬活性物質がミクロスフェアに搭載され得る正味の電荷を有する。その結果、治療薬は、ヒドロゲル内に静電的に保持され、生理食塩水又は生体内などの電解媒体内でヒドロゲルから溶出して、血液又は組織内で、数時間、数日、さらには数週間にわたって薬物の持続的な放出を行う。この実施形態では、本発明のミクロスフェアは、正に帯電した薬物が生体内でヒドロゲルからの持続的に溶出されるために、制御可能かつ再現可能にミクロスフェアに搭載されてその内部に静電的に保持されるように、生理学的条件（ｐＨ７．４）を含むｐＨの一定の範囲にわたって正味の負電荷を有する場合に、特に有用である。このような電荷は、ポリマーマトリックスに結合したカルボキシル基、又はスルホナート（ｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ）基などのイオン交換基に由来し得る。生理学的ｐＨで電荷のない薬物であっても、本発明のミクロスフェアに装薬することができ、これは、例えば塞栓形成直後に、迅速な溶出、又は「バースト効果」が望まれる場合に特に有利であり、又は生理学的条件下の薬物の低溶出性がイオン相互作用よりもむしろ薬物の放出プロファイルを決定する場合に特に有用である。
【0071】
そのような化合物の例には、血漿グレリンレベルを抑制するものが含まれ、例えばソマトスタチン及びソマトスタチン類似体など、例えばオクトレオチド（通常は酢酸塩として）、Ｌ－システインなどのアミノ酸（ＭｃＧａｖｉｎ ｅｔ ａｌ ２０１５）、又はインスリン（Ｓａａｄ ｅｔ ａｌ ２００２）やＧＬＰ－１などのホルモンなどが含まれる。
【0072】
本明細書に記載のミクロスフェアの集団は、通常、少なくとも１０００個のミクロスフェアを含み、より一般には、少なくとも２５又は５０μＬの沈降体積、好ましくは少なくとも１００μＬ、より好ましくは少なくとも２５０μＬの沈降体積のミクロスフェアの単位で付与される。
【0073】
本発明の第３の態様は、本明細書に記載のミクロスフェアの集団と、治療薬がミクロスフェアマトリックスに吸収され得る薬学的に活性な薬剤とを含む医薬組成物を提供する。そのような活性物質は、集団内に薬理学的に有効な量、すなわち、ミクロスフェアの集団から所望の効果を得るために必要な活性剤又はミクロスフェアの量で存在してよい。そのような組成物は、一般には、本明細書に記載のミクロスフェア及び薬学的に許容可能な希釈剤又は担体、一般には水性希釈剤又は担体を含有する。水性希釈剤又は担体は好ましくは無菌であり、例えば注射用滅菌水又は生理食塩水であり、好ましくは適切なｐＨ、例えばｐＨ７～８の間、例えばｐＨ７．４±０．２で緩衝されている。注射用の水又は通常の生理食塩水が一般的である。希釈剤又は担体は、通常、注射又は注入に適しており、したがって、例えば、通常、発熱物質を含まない。
【0074】
医薬組成物は、造影剤（イオン性又は非イオン性のいずれか及び／又ヨード化ケシの実油（リピオドール（登録商標）などの油性造影剤））などの追加の成分も含んでもよい。適切な非イオン性造影剤には、イオパミドール、イオジキサノール、イオヘキソール、イオプロミド、イオブチリドール、イオメプロール、イオペントール、イオパミロン、イオキシラン、イオトロラン、イオトロール及びイオバーソルが含まれる。イオン性造影剤を使用してもよいが、特にポリマーがイオン性電荷を帯びる場合、薬物を搭載したミクロスフェアと組み合わせて使用することは好ましくない。なぜなら、高イオン濃度は、マトリックスからのイオン性薬物の解離に有利に働くためである。イオン性造影剤には、ジアトリゾエート、メトリゾエート、及びイオキサグレートが含まれる。
【0075】
代替的には、本発明の放射線不透過性ヒドロゲルミクロスフェアは、乾燥形態で提供されてもよい。ミクロスフェア又は別の放射線不透過性ポリマー製品が乾燥して提供される場合、乾燥する前に、薬学的に許容される水溶性ポリオールをポリマーに組み込むことが有利である。これは、水の不在下でヒドロゲルマトリックスを保護するため、ヒドロゲルにとって特に有利である。有用なポリオールは、グルコース、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトールなどの自由に水に溶け得る糖（単糖又は二糖）である。
【0076】
ミクロスフェアは、当技術分野で認められている任意の工程によって乾燥させることができるが、凍結乾燥（凍結乾燥）などによる真空下での乾燥は、ミクロスフェアを乾燥して減圧下で保存できるため有利である。このアプローチは、国際公開第２００７／１４７９０２号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているように、改善された再水和性をもたらす。通常、乾燥したミクロスフェアが保存される圧力は１ｍＢａｒ（ゲージ）未満である。
【0077】
ミクロスフェアの本発明に係る組成物の胃底への送達は、患者の体重の減少を誘発し、又は体重の増加率を低下させる。送達は通常、経カテーテル経路で実施される。適切な患者には、哺乳動物患者、特にヒト患者が含まれるが、このアプローチは、他の哺乳動物種でも使用することができ、愛玩哺乳動物など、例えば、ネコ、イヌ、ウマなどで体重の減少を誘発させたり、又は体重の増加率を低下させたりするためにも使用できる。
【0078】
したがって、第４の態様では、本発明は、患者の胃底の毛細血管床に、本明細書に記載の有効量のミクロスフェアの集団を送達する工程を含む、患者の体重減少を誘発、又は体重増加を遅延させる方法を提供する。そのような組成物は、本明細書に記載された医薬組成物の形態で送達されてもよい。
【0079】
ミクロスフェアの有効量は、治療する適応症に測定可能な改善をもたらすために必要な量である。この体積は、治療される患者に依存するが、ヒトなどのより大きな哺乳動物の場合、通常、充填ミクロスフェア体積として測定して、５０～１０００μＬ～１６００μＬ、好ましくは１００～８００μＬ、より好ましくは１５０～７５０μＬの範囲である。
【0080】
体重の減少、又は体重増加率の低下を必要とする患者の症状の治療、例えば肥満なども、その状態の併存症の軽減、又はそのような状態のリスクの低下をもたらすことが期待される。このような状態には、インスリン抵抗性、２型糖尿病、高血圧、脂質異常症、心血管疾患、睡眠時無呼吸、胆嚢疾患、高尿酸血症、痛風、変形性関節症などの慢性状態、及び脳卒中などの急性状態が含まれる。したがって、別の態様では、本発明は、これらの併存する疾患の治療のための方法も提供する。ＢＡＥは、グレリンレベルの低下、胃底におけるグレリン分泌細胞の数の減少、及び空腹の低下をもたらすことが知られているため、本発明は、別の態様において、血中のグレリンレベルを低下させる方法、患者の胃底におけるグレリン分泌細胞の数を減少させるための方法、及び患者の空腹を低下させるための方法も提供する。
【0081】
第５の態様では、本明細書に記載の任意の状態の治療又は予防のための薬剤の製造に本明細書の態様のいずれか１つにかかるミクロスフェアの集団を含有する組成物の使用が提供される。さらなる態様では、本明細書に記載の治療方法のいずれかで使用するために、本明細書の態様の任意の１つにかかるミクロスフェアの集団を含有する組成物が提供される。いずれの場合も、この方法は、本明細書に記載の組成物を対象物の胃底の毛細血管床に送達する工程を含む。
【0082】
次に、図面を参照して、以下の非限定的な例によって、本発明をさらに説明する。これらは、例示のみを目的として提供されており、特許請求の範囲内に入る別例は、これらに照らして当業者であれば理解できる。本明細書で引用されているすべての参考文献は、参照により援用される。
【0083】
実験例
（実施例１）ミクロスフェアの調製
架橋したヒドロゲルミクロスフェアは、国際公開第２００４／０７１４９５号明細書の実施例１（高ＡＭＰＳの場合）に従って調製した。工程は、生成物を真空乾燥して残留溶媒を除去したあと、ミクロスフェアをふるいにかけて適切なサイズ範囲を形成した後に終了させた。５００μｍ、４２５μｍ、３５５μｍ、３２３μｍ、２５０μｍ、２１２μｍ及び１６０μｍのふるいを順次使用し、ふるいからミクロスフェアを回収して、使用するサンプル、つまり３５５～４２５μｍ（「３０４」）、２５０～３２３μｍ（「２０３」）、及び１６０～２１２μｍ（「１０２」）を形成した。ビーズは、乾燥状態で保存し、必要に応じて、国際公開第２０１５／０３３０９３号明細書に記載の方法に従って、２，３，５－トリヨードベンズアルデヒドでアセタール化して、放射線不透過性のヨウ素化ミクロスフェアを形成した。
（実施例１）ミクロスフェアの調製
架橋したヒドロゲルミクロスフェアは、国際公開第２００４／０７１４９５号明細書の実施例１（高ＡＭＰＳの場合）に従って調製した。工程は、生成物を真空乾燥して残留溶媒を除去したあと、ミクロスフェアをふるいにかけて適切なサイズ範囲を形成した後に終了させた。５００μｍ、４２５μｍ、３５５μｍ、３２３μｍ、２５０μｍ、２１２μｍ及び１６０μｍのふるいを順次使用し、ふるいからミクロスフェアを回収して、使用するサンプル、つまり３５５～４２５μｍ（「３０４」）、２５０～３２３μｍ（「２０３」）、及び１６０～２１２μｍ（「１０２」）を形成した。ビーズは、乾燥状態で保存し、必要に応じて、国際公開第２０１５／０３３０９３号明細書に記載の方法に従って、２，３，５－トリヨードベンズアルデヒドでアセタール化して、放射線不透過性のヨウ素化ミクロスフェアを形成した。
【0084】
簡潔に説明すると、１ｇの乾燥ミクロスフェアと適切な量のアルデヒド（以下の表1を参照）とを、窒素でパージした容器に入れた。３０ｍＬの無水ＤＭＳＯを窒素雰囲気（ｂｌａｎｋｅｔ）の下に加え、ビーズを懸濁状態に保つために撹拌した。懸濁液を５０℃に温めて、２．２ｍＬのメタンスルホン酸をゆっくりと加えた。アルデヒドの消費をＨＰＬＣでモニターしながら、反応スラリーを５０℃で２２時間撹拌した。次に、反応スラリーを沈降させて、反応混合物を吸引により除去し、ミクロスフェアを３０ｍｌのＤＭＳＯ／０．５％ＮａＣｌで５回洗浄した後、続いて５０ｍｌの０．９％ＮａＣｌで５回洗浄した。洗浄は５０℃で行った。次に、得られたミクロスフェアのうちの１．５ｍＬのサンプルを５ｍＬのリン酸緩衝生理食塩水に保存した。
【0085】
【表1】
【0086】
（実施例２）ミクロスフェアの弾性圧縮率（ＥＣＭ）の測定
ミクロスフェアの弾性圧縮弾性率（ＥＣＭ）は、Ｃａｉｎ ｅｔ ａｌ（２０１８）、及びＤｕｒａｎ ｅｔ ａｌ（２０１６）に概説されたプロトコルに従って測定してもよい。Ｃａｉｎｅ ｅｔ ａｌ（２０１８）は、さまざまな市販のミクロスフェアの圧縮弾性率の値の表も開示している。簡潔に説明すると、ＥＣＭは、独自のインデンテーションソフトウェアによって操作されるＵＮＨＴバイオインデンターシステム（ＵＮＨＴ Ｂｉｏｉｎｄｅｎｔｏｒ ｓｙｓｔｅｍ）（アントンパール社（Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ）、スイス）を使用して、０．０１～２０ｍＮの力範囲と、１ｎｍ～１００μｍの変位範囲で決定した。ミクロスフェアのサンプルは、皿に分散させて、通常の生理食塩水に沈めた。機器の光学顕微鏡を用いて個々のミクロスフェアを選択し、それらの直径を最も近い１μｍまで測定した（５倍の倍率で）。個々のミクロスフェアを５０μｍ／ｍｉｎで圧縮し、５秒間休止した後、サンプルを５０μｍ／ｍｉｎで脱負荷（ｕｎｌｏａｄｅｄ）させた。取得（Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ）は２０Ｈｚに設定した。各ビーズの弾性率は、２つの平坦な表面間で圧縮された球の場合に線形弾性ヘルツ接触力学（Ｈｅｒｔｚｉａｎ ｃｏｎｔａｃｔ ｍｅｃｈａｎｉｃｓ）を適用することによって、荷重曲線から計算し、１０～１５％の個々のビーズ直径圧縮範囲でｎ＝５の反復の算術平均として得た。
ミクロスフェアの弾性圧縮弾性率（ＥＣＭ）は、Ｃａｉｎ ｅｔ ａｌ（２０１８）、及びＤｕｒａｎ ｅｔ ａｌ（２０１６）に概説されたプロトコルに従って測定してもよい。Ｃａｉｎｅ ｅｔ ａｌ（２０１８）は、さまざまな市販のミクロスフェアの圧縮弾性率の値の表も開示している。簡潔に説明すると、ＥＣＭは、独自のインデンテーションソフトウェアによって操作されるＵＮＨＴバイオインデンターシステム（ＵＮＨＴ Ｂｉｏｉｎｄｅｎｔｏｒ ｓｙｓｔｅｍ）（アントンパール社（Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ）、スイス）を使用して、０．０１～２０ｍＮの力範囲と、１ｎｍ～１００μｍの変位範囲で決定した。ミクロスフェアのサンプルは、皿に分散させて、通常の生理食塩水に沈めた。機器の光学顕微鏡を用いて個々のミクロスフェアを選択し、それらの直径を最も近い１μｍまで測定した（５倍の倍率で）。個々のミクロスフェアを５０μｍ／ｍｉｎで圧縮し、５秒間休止した後、サンプルを５０μｍ／ｍｉｎで脱負荷（ｕｎｌｏａｄｅｄ）させた。取得（Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ）は２０Ｈｚに設定した。各ビーズの弾性率は、２つの平坦な表面間で圧縮された球の場合に線形弾性ヘルツ接触力学（Ｈｅｒｔｚｉａｎ ｃｏｎｔａｃｔ ｍｅｃｈａｎｉｃｓ）を適用することによって、荷重曲線から計算し、１０～１５％の個々のビーズ直径圧縮範囲でｎ＝５の反復の算術平均として得た。
【0087】
実験用及び市販のミクロスフェアのサンプルで得られた結果を表２に示す。
【0088】
【表2】
【0089】
（実施例３）生体内腎塞栓術
以下の手順に従って、体重約３０ｋｇの雌ヨークシャーブタの腎動脈に塞栓を形成した。
以下の手順に従って、体重約３０ｋｇの雌ヨークシャーブタの腎動脈に塞栓を形成した。
【0090】
超音波ガイド下セルディンガー（Ｓｅｌｄｉｎｇｅｒ）法を用いて大腿動脈にカニューレを挿入した。微小穿刺セットの針の中を通して腹部大動脈の中にワイヤーを前進させた。次に、針を除去して、５～６フレンチ（１．７～２．３ｍｍ）の血管鞘を大腿動脈に配置した。第ＩＶヘパリンを５，０００ＩＵで投与してもよいし、必要に応じて数時間後にこれを繰り返してもよい。Ｘ線透視下で、ワイヤー上に沿って大動脈の中にガイドカテーテルを前進させた。腎動脈のヨウ素化造影剤を用いた血管造影評価を行って、塞栓を形成するために透視ガイダンスの下で動脈を選択した。選択的な動脈カテーテルの挿入中の血管痙攣を防止するために、ニトロプルシド（１００ｍｇ）を動脈内に注射してもよい。
【0091】
次に、２．８フレンチレネゲードハイフロー（Ｒｅｎｅｇａｄｅ（登録商標）Ｈｉ－Ｆｌｏ）マイクロカテーテル（ボストンサイエンティフィック社）を使用して、塞栓ミクロスフェアを選択した血管に注入した。その際、次の液滴を投与する前に、血流がビーズを腎臓に送達できるように少量の液滴を断続的に送達した。次に、動物を、飽和させた過剰量のバルビツール酸塩をベースとする安楽死によって人道的に安楽死させて、腎臓を取り出した。
【0092】
腎臓の集合管、髄質、及び皮質を含む上極、下極、及び側極から理想的な切片面で腎臓の連続切片を採取して、ヘマトキシリン及びエオシンで染色した。次に、切片をデジタルスキャンして、ミクロスフェアの最遠の浸透を評価した。
【0093】
１個のミクロスフェアが血管を閉塞していることが示されている場合には、閉塞した血管の直径は、その部位における血管内腔の内径（横血管断面の場合）、又は斜めの断面では楕円の最小軸として測定した。縦断面の場合には、血管の直径は最も大きいミクロスフェアのレベルで測定した。腎臓あたり少なくとも１４０個の血管径を分析した。
【0094】
図２～４は、１０２（１２９ｍｇ／ｍＬ ヨウ素）、３０４（１１３ｍｇ／ｍＬ ヨウ素）のサンプルミクロスフェア調製物の浸透度のデータ、及び市販の調製物であるビーズブロック（登録商標）３００－５００μｍ（バイオコンパチブルズＵＫ社）の浸透度のデータを示す。
【0095】
（実施例４）ブタ胃底塞栓術
放射線不透過性の１０２ミクロスフェア（９５ｍｇ／ｍＬ ヨウ素）を、健康で発育中のブタ（～３２ｋｇ）の左胃大網動脈と、右胃動脈とに注入した。これらの２つの動脈は胃底に供給する。ミクロスフェアは、非イオン性造影剤で１：１０に希釈して送達した。３匹の比較ブタに生理食塩水を注入して偽の処置を行った。
放射線不透過性の１０２ミクロスフェア（９５ｍｇ／ｍＬ ヨウ素）を、健康で発育中のブタ（～３２ｋｇ）の左胃大網動脈と、右胃動脈とに注入した。これらの２つの動脈は胃底に供給する。ミクロスフェアは、非イオン性造影剤で１：１０に希釈して送達した。３匹の比較ブタに生理食塩水を注入して偽の処置を行った。
【0096】
すべてのブタに、以前の試験で投与したように、潰瘍を防ぐための胃保護剤として、ＢＡＥの３日前～ＢＡＥの後２８日目まで、毎日４０ｍｇの経口オメプラゾールを投与するか、又は偽の処置を行った。
【0097】
２５ｋｇあたり１ｍＬでケタミン（１００ｍｇ／ｍＬ）、キシラジン、及びテラゾールを筋肉注射して、絶食させたブタを鎮静させて、静脈内注射で作用させるために、プロポフォール（～４ｍｇ／ｋｇ）で誘導した。全身麻酔は、１～２％のイソフルラン（バクスターヘルスケア社（Ｂａｘｔｅｒ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｃｏｒｐ.）、イリノイ州ディアフィールド）で維持した。ブタを挿管して機械的に換気させた。
【0098】
大腿動脈へのアクセスは、超音波ガイド（ゾナールメディカルシステムズ社（Ｚｏｎａｒｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｉｎｃ．）、カリフォルニア州マウンテンビュー）下で経皮的に行い、続いてイントロデューサーシース（５フレンチ）を配置した。Ｘ線透視ガイダンス（アキシオム アルティス ジー（Ａｘｉｏｍ Ａｒｔｉｓ Ｚｅｅ）、フォルヒハイム、ドイツ）下で、腹腔軸を選択する為に、５フレンチの血管造影ガイドカテーテル（フレクション アキシス（Ｆｌｅｘｉｏｎ Ａｘｉｓ）、シュアファイアメディカル社（Ｓｕｒｅｆｉｒｅ Ｍｅｄｉｃａｌ）、コロラド州ウェストミンスター）を、０．０３５インチ（約０．０８９ｃｍ）のベントソン（Ｂｅｎｔｓｏｎ）ガイドワイヤー（クックメディカル社（Ｃｏｏｋ Ｍｅｄｉｃａｌ）、インディアナ州ブルーミントン）上に沿って腹部大動脈の中に前進させた。次に、４ｍL／秒で５秒間のイオヘキソール注射をして塞栓前の腹腔のデジタル差分血管造影図（ＤＳＡ）を取得して、胃底に栄養を与える血管をマッピングした。次に、マイクロカテーテル（レネゲード（Ｒｅｎｅｇａｄｅ）（登録商標））を、０．０１６インチ（約０．０４ｃｍ）のファソム（Ｆａｔｈｏｍ）（登録商標）ガイドワイヤー（ボストンサイエンティフィック社、マサチューセッツ州マールボロ）上に沿って胃動脈の胃底枝に進めた。選択した血管のＤＳＡを、５０％のイオヘキソールの穏やかなハンドパフで取得して、標的動脈のサブ選択を確認した。次に、１００マイクログラムのニトロプルシドを筋弛緩薬としてその血管に送達して、マイクロカテーテルの展開中におけるけいれんを防止した。次に、動脈をミクロスフェアで塞栓して、５拍のうっ血が達成された後、ハンドパフＤＳＡを使用して２番目の動脈を選択して、５拍の状態に塞栓した。塞栓ビーズの位置を記録するために中間のシングルショットを取得した。次に、標的動脈の塞栓形成を確認するためにハンドパフＤＳＡを取得した。５拍のうっ血を超える残留流が観察された場合は、さらに塞栓を投与した。塞栓形成の成功を確認するために、塞栓形成後のＣＢＣＴを取得した。次の動脈枝の塞栓形成の前に、マイクロカテーテルを取り外して、生理食塩水で洗い流し、再度配置した。
【0099】
体重は、基準時及び塞栓形成後１～８週目に測定した。腹腔のデジタル差分血管造影（ＤＳＡ）は、塞栓術の前と直後、及び塞栓術の８週間後に取得した。胃のコーンビームＣＴ（ＣＢＣＴ）画像は、塞栓形成直後と、処分する８週間前に取得した。胃の内視鏡検査は、塞栓形成の約１週間後に行われ、標準的な成人胃鏡（ペンタックス社（Ｐｅｎｔａｘ）、コロラド州デンバー）を使用して胃粘膜に対するミクロスフェアの影響を評価した。
【0100】
放射線不透過性のミクロスフェアは、塞栓形成後８週間までＣＢＣＴ画像で視覚化した。第１週の内視鏡評価では、すべての肥満動脈塞栓動物は、胃底又は胃体に小さな表在性の粘膜潰瘍を発症し、第８週までに治癒したが、比較動物には潰瘍は生じなかった。肥満動脈塞栓動物では、比較動物と対比して、体重増加のパーセンテージに有意な減少が認められた（肥満動脈塞栓動物対比較動物：４２．３％±５．７対５１．６％±２．９、ｐ＜０．００１）。体重の進行を図５に示す。これは、１００～２００μｍのミクロスフェアが、ブタモデルにおいて体重の増加を抑制するのに効果的であることを示す。図８は、胃底の被覆率と体重増加の関係を示す。データは、個々の動物のコーンビームＣＴスキャンから得た。胃底被覆率は、胃底内の放射線不透過性の範囲を総胃底面積の割合として示す。胃底被覆率は、胃底領域内の塞栓の程度を表す。
【0101】
表３は、１週間での動物の潰瘍の発生率を示す。
【0102】
【表3】
【0103】
（実施例５）代替サイズのミクロスフェアによるＢＡＥ
市販の放射線不透過性ミクロスフェア（ディーシービーズルミ（登録商標）公称サイズ４０－９０μｍ及び公称サイズ１００－３００μｍ－バイオコンパチブルズＵＫ社）を使用して実施例４を行った。これらの製品のそれぞれでは、１００μｍ未満のミクロスフェアは１０％以上であった。
市販の放射線不透過性ミクロスフェア（ディーシービーズルミ（登録商標）公称サイズ４０－９０μｍ及び公称サイズ１００－３００μｍ－バイオコンパチブルズＵＫ社）を使用して実施例４を行った。これらの製品のそれぞれでは、１００μｍ未満のミクロスフェアは１０％以上であった。
【0104】
以下の表４は、動物の潰瘍の発生率を示す。
【0105】
【表4】
【0106】
Ｓ１動物は、１本の胃動脈に送達することにより、ディーシービーズルミ（登録商標）４０－９０μｍミクロスフェアで処置した。Ｓ２動物は、ディーシービーズルミ（登録商標）ミクロスフェア４０－９０μｍを２本の胃動脈に送達することによって処置した。Ｌ２動物は、ディーシービーズルミ（登録商標）１００－３００μｍミクロスフェアを２つの胃動脈に送達することによって処置した。図６，７は、３種類のミクロスフェアを使用したＢＡＥ後に見られた潰瘍のレベルを示す。
（参照文献）
Arepally et al（2007）Radiology、244：138 -143
Bawudun et al（2012）Cardiovasc. Intervent. Radiol. 35：1460-1466。
（参照文献）
Arepally et al（2007）Radiology、244：138 -143
Bawudun et al（2012）Cardiovasc. Intervent. Radiol. 35：1460-1466。
【0107】
Caine et al（2017）Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials 78： 46-55。
Duran et al（2016）Theranostics 6（1）： 28-39
Fu et al（2018）Radiology 289（1）：83-89。
Duran et al（2016）Theranostics 6（1）： 28-39
Fu et al（2018）Radiology 289（1）：83-89。
【0108】
Kipshidze et al（2013） Presented at the 62nd Annual Scientific Meeting of the American College of Cardiology; San Francisco, CA. 2013年3月10日。
McGavin et al（2015）International Journal of Obesity volume 39、pages 447-455。
McGavin et al（2015）International Journal of Obesity volume 39、pages 447-455。
【0109】
Paxton et al（2013）Radiology 266： 471-479。
Paxton et al（2014）. Vasc. Interv. Radiol. 25： 455-461。
Saad et al（2002）JJ. Clin. Endocrinol. Metab.87： 3997-4000。
Paxton et al（2014）. Vasc. Interv. Radiol. 25： 455-461。
Saad et al（2002）JJ. Clin. Endocrinol. Metab.87： 3997-4000。
【0110】
Thanoo et al（1991）J. App. Biomaterials, 2： 67-72。
Weiss et al（2014）Presented at the 30th Annual Scientific Meeting of the European Society of Interventional Radiology; Glasgow, UK. 9月13-17日。
Weiss et al（2014）Presented at the 30th Annual Scientific Meeting of the European Society of Interventional Radiology; Glasgow, UK. 9月13-17日。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【国際調査報告】