特表 2022-519131 グルコシルセラミドシンターゼ（ＧＣＳ）阻害剤を使用した繊毛病の処置

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-03-18

(54)【発明の名称】グルコシルセラミドシンターゼ（ＧＣＳ）阻害剤を使用した繊毛病の処置

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/439 20060101AFI20220311BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20220311BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20220311BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20220311BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20220311BHJP

   C07D 453/02 20060101ALN20220311BHJP

【ＦＩ】

A61K31/439

A61P43/00 105

A61P27/02

A61P25/00

A61P13/12

C07D453/02

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021545384

(86)(22)【出願日】2020-02-04

(85)【翻訳文提出日】2021-09-28

(86)【国際出願番号】 US2020016588

(87)【国際公開番号】W WO2020163337

(87)【国際公開日】2020-08-13

(31)【優先権主張番号】62/800,993

(32)【優先日】2019-02-04

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/851,430

(32)【優先日】2019-05-22

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

(71)【出願人】

【識別番号】500034653

【氏名又は名称】ジェンザイム・コーポレーション

(74)【代理人】

【識別番号】100127926

【弁理士】

【氏名又は名称】結田 純次

(74)【代理人】

【識別番号】100140132

【弁理士】

【氏名又は名称】竹林 則幸

(72)【発明者】

【氏名】オクサナ・イブラギモフ－ベスクロフナヤ

(72)【発明者】

【氏名】ニコライ・オー・ブカノフ

(72)【発明者】

【氏名】エルヴェ・ユソン

(72)【発明者】

【氏名】サラ・イー・モレノ

【テーマコード（参考）】

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C086AA01

4C086AA02

4C086CB17

4C086MA52

4C086NA14

4C086ZA02

4C086ZA33

4C086ZA81

4C086ZB21

4C086ZC20

(57)【要約】

本開示は、対象における繊毛病を処置する方法であって、有効量のキヌクリジン化合物を対象に投与することを含む方法に関する。前記方法において使用するためのキヌクリジン化合物を含む医薬組成物も開示する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

（ａ）それを必要とする対象において繊毛病を処置するか、
（ｂ）繊毛病に罹患している対象における、肥満、肝臓疾患、網膜変性症、嗅覚機能障害、高脂血症、２型糖尿病、および代謝症候群から選択される疾患または障害を処置するか、または
（ｃ）それを必要とする対象、場合により繊毛病を有する対象において繊毛機能を保存または改善するための方法であって、
有効量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグを対象に投与することを含む方法

【化1】

（式中：
Ｒ^１は、水素、ハロゲン（例えば、フッ素）、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオ、アミノ、Ｃ_１～６－アルキル（例えば、メチルまたはエチル）、Ｃ_２～６－アルケニル、Ｃ_２～６－アルキニル、Ｃ_１～６－アルキルオキシ、Ｃ_２～６－アルケニルオキシ、およびＣ_２～６－アルキニルオキシから選択され、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、またはアルキニルオキシは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオまたはアミノから選択される１つまたはそれ以上（例えば、１、２または３つ）の基で場合により置換されており；
Ｒ^２およびＲ^３は、１つもしくはそれ以上（例えば１、２もしくは３つ）のハロゲンによって場合により置換されたＣ_１～３－アルキルから独立して選択されるか、またはＲ^２およびＲ^３は、１つもしくはそれ以上（例えば１もしくは２つの）のハロゲンによって場合により置換されたシクロプロピルもしくはシクロブチル基を一緒に形成し；
Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、水素、ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、チオ、アミノ、Ｃ_１～６－アルキル、およびＣ_１～６－アルキルオキシからそれぞれ独立して選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、およびＣ_１～６－アルキルオキシから選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されており；
Ａは、ハロゲン、ヒドロキシ、チオ、アミノ、ニトロ、Ｃ_１～６アルコキシおよびＣ_１～６アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換された５または６員アリールまたはヘテロアリール基である（例えば、フェニルまたはチアゾリル））。

【請求項2】

Ｒ^１は、水素、フッ素、メチルおよびエチルから選択され、前記メチルまたはエチルは、ハロゲン、ヒドロキシ、チオまたはアミノから選択される１または２つの基によって場合により置換されている、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

Ｒ^２およびＲ^３は、１つまたはそれ以上のフッ素で場合により置換されたメチルおよびエチル基からそれぞれ独立して選択される、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

Ｒ^４は、ハロゲン（例えば、フッ素）、Ｃ_１～３－アルキル（例えば、メチル）およびＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）から選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲンおよびＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）から選択される１つまたはそれ以上（例えば、１、２または３つ）の基によって場合により置換されている、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項5】

Ｒ^５およびＲ^６はそれぞれ水素である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項6】

Ｒ^４は、フッ素または２－メトキシエトキシであり、Ｒ^５およびＲ^６は水素である、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項7】

Ｒ^４は、それが結合しているフェニル環の４位に（すなわち、Ａ置換基に対してパラで）位置する、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

Ａは、ハロゲン、ヒドロキシ、チオ、アミノ、ニトロ、Ｃ_１～６アルコキシおよびＣ_１～６アルキル（例えば、メチル）から独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換されたフェニルである、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

Ａ置換基に結合している２つの基は、互いに１，３または１，４の関係で（すなわち、メタまたはパラで）位置する、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

Ａは、ＮおよびＳから選択される１または２つのヘテロ原子を含む５員ヘテロアリール基である、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項11】

Ａ置換基に結合している２つの基は、互いに１，３の関係で（すなわち、メタで）位置する、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

前記化合物は、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。

【化2】

【請求項13】

前記化合物は、式（Ｖ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。

【化3】

【請求項14】

前記化合物は、式（ＶＩ）、（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。

【化4】

【請求項15】

前記化合物は、式（ＩＸ）または（ＸＩ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。

【化5】

【請求項16】

Ｒ^４はフッ素である、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

前記化合物は、キヌクリジン－３－イル（２－（４’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－３－イル）プロパン－２－イル）カルバメート；（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート；（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート；ならびにこれらの薬学的に許容される塩およびプロドラッグから選択される、請求項１に記載の方法。

【請求項18】

繊毛病は、ジュベール症候群、メッケルグルーバー症候群、シニアローケン症候群、口顔面指症候群Ｉ型、レーバー先天性黒内障、バルデービードル症候群（ＢＢＳ）、アムストレーム症候群、ジューン窒息性胸部ジストロフィー、エリスファンクレフェルト症候群、センセンブレナー症候群および原発性繊毛ジスキネジアから選択される、請求項１に記載の方法。

【請求項19】

繊毛病はＢＢＳである、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

繊毛病はジュベール症候群である、請求項１８に記載の方法。

【請求項21】

繊毛病はメッケルグルーバー症候群である、請求項１８に記載の方法。

【請求項22】

繊毛病はシニアローケン症候群である、請求項１８に記載の方法。

【請求項23】

繊毛病は口顔面指症候群Ｉ型である、請求項１８に記載の方法。

【請求項24】

繊毛病はレーバー先天性黒内障である、請求項１８に記載の方法。

【請求項25】

繊毛病はアムストレーム症候群である、請求項１８に記載の方法。

【請求項26】

繊毛病はジューン窒息性胸部ジストロフィーである、請求項１８に記載の方法。

【請求項27】

繊毛病はエリスファンクレフェルト症候群である、請求項１８に記載の方法。

【請求項28】

繊毛病はセンセンブレナー症候群である、請求項１８に記載の方法。

【請求項29】

繊毛病は原発性繊毛ジスキネジアである、請求項１８に記載の方法。

【請求項30】

前記対象は、哺乳動物、例えばヒトである、請求項１～２９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、全身投与によって、例えば、非経口ではない経路を介して投与される、請求項１～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

前記化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは経口投与される、請求項３１に記載の方法。

【請求項33】

対象における繊毛病を処置する方法において使用するための、請求項１～１７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグ。

【請求項34】

繊毛病を処置する前記方法は、請求項１８～３２のいずれか１項に記載のものである、請求項３３に記載の使用のための化合物。

【請求項35】

対象における繊毛病を処置する方法において使用するための医薬の製造における、請求項１～１７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの使用。

【請求項36】

繊毛病を処置する前記方法は、請求項１８～３２のいずれか１項に記載のものである、請求項３５に記載の使用。

【請求項37】

タンパク質症を有すると診断されたかまたはタンパク質症を発症するリスクがあると診断された対象の組織において、タンパク質凝集体の蓄積を減少させるか、逆転させるかまたは阻止する方法であって、前記タンパク質凝集体はタウタンパク質および／またはα－シヌクレインを含み、有効量の請求項１～１７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグを前記対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項38】

（ｉ）請求項１～１７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグ；（ｉｉ）繊毛病を処置または阻止することができる更なる薬剤；および（ｉｉｉ）薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年２月４日に出願された米国特許仮出願第６２／８００，９９３号、および２０１９年５月２２日に出願された米国特許仮出願第６２／８５１，４３０号の優先権および利点を主張する国際出願であり、これらの内容はそれぞれ、その全体が参照によって本明細書によって組み入れられるものとする。

【0002】

本発明は、式（Ｉ）のキヌクリジン化合物を使用した、繊毛病、例えば、バルデービードル症候群（ＢＢＳ）およびジュベール症候群を処置するための方法に関する。

【背景技術】

【0003】

繊毛病は、欠陥タンパク質をコードする遺伝的突然変異と関連する疾患／障害のグループであり、繊毛の異常な形成および機能をもたらす。繊毛は、身体内の細胞の大部分の種類の構成要素である。したがって、繊毛の形成および機能における異常は、これらに限定されないが、網膜変性症、腎臓疾患および脳の異常を含む特徴の集合をもたらす場合がある。疾患／障害のうちのいくつかは、ジュベール症候群、メッケルグルーバー症候群、シニアローケン症候群、口顔面指症候群Ｉ型、レーバー先天性黒内障、バルデービードル症候群（ＢＢＳ）、アムストレーム症候群、ジューン窒息性胸部ジストロフィー、エリスファンクレフェルト症候群、センセンブレナー症候群、原発性繊毛ジスキネジア（カルタゲナー症候群としても知られる）およびさまざまな他の疾患および障害を含むこれらの繊毛病に起因する。

【0004】

例えば、繊毛病の中でもＢＢＳは臨床的な要求を全く満たされておらず、ＢＢＳ患者のための承認された治療の選択肢は現在のところ存在しない。ＢＢＳは、稀な常染色体劣性多系統性遺伝的疾患であり、米国および北ヨーロッパにおける有病率は１：１６０，０００である。ＢＢＳは、少なくとも２１個の異なる遺伝子における突然変異に起因する場合があるが、ＢＢＳ１、ＢＢＳ２、およびＢＢＳ１０における突然変異がおよそ５０％の症例を占めている。ＢＢＳにおいて影響を受けた遺伝子は、ＢＢＳｏｍｅのアセンブリに必須であり、このＢＢＳｏｍｅのアセンブリは基底小体の構成要素であり、一次繊毛の形成、維持、および機能に関与している。同時に一次繊毛およびその固定構造、基底小体は、多くの鍵となる生物学的シグナル伝達経路の適切な機能に必須である。適切に形成されたＢＢＳｏｍｅが損失されると、繊毛が広範囲に損失され、それが複数の臨床的特徴として現れる。８つのＢＢＳタンパク質（ＢＢＳ１、ＢＢＳ２、ＢＢＳ４、ＢＢＳ５、ＢＢＳ７、ＢＢＳ８、ＢＢＳ９、およびＢＢＳ１８）が集合してＢＢＳｏｍｅ複合体を形成している。これらのＢＢＳタンパク質の機能は、部分的に重複しており、これは個別のＢＢＳ遺伝子における突然変異で観察される表現型の類似性と一致する。研究によって、個別のＢＢＳタンパク質機能が損失すると同じ表現型の欠乏が生じる場合があり、同時に１つを超えるＢＢＳ遺伝子またはタンパク質を標的として同じ治療効果を達成できることが示されている。例えば、分化中の前脂肪細胞におけるＢＢＳ４、ＢＢＳ１０およびＢＢＳ１２がｉｎ ｖｉｔｒｏで抑制されると、脂肪生成および脂肪蓄積が促進される（非特許文献１；非特許文献２）。ＢＢＳ１およびＢＢＳ４が失われると、特定のタンパク質の局在に欠陥が生じ、嗅覚上皮が繊毛を完全に発達させることができなくなる（非特許文献３）。更に、ＢＢＳ８が失われると、嗅覚知覚ニューロンにおいて繊毛が損失し、繊毛関連タンパク質の誤局在化が生じると同時に、嗅覚刺激の応答に低下が生じる（非特許文献４）。最後に、ＢＢＳ２が欠失すると、主な嗅覚上皮においてアデニル酸シクラーゼＩＩＩ活性が低下し、同じことがＢＢ１、ＢＢＳ４およびＢＢＳ８ ｎｕｌｌマウスにおいて観察されるということが認められている。この効果はグルコシルセラミドシンターゼ（ＧＣＳ）阻害剤での処置によって改善される。

【0005】

ＢＢＳの主な特徴は、夜盲症より始まり小児期発症の失明を伴う錐体桿体ジストロフィー、軸後多指症、乳児期の間に確立され成人期にわたって維持される体幹肥満、腎臓異常および学習困難、ならびに無嗅覚症および肝障害（hepatic involvement）を含む多くの二次的特徴である。繊毛の機能障害は、適切な細胞機能に必須の重要なシグナル伝達経路の損失につながり、この患者集団における視覚の損失、脂肪生成の増加、および過食症と直接関連していることが示されている。現在にいたるまで、明らかな遺伝子型－表現型の相関関係は同定されていない（非特許文献５を参照のこと）。ＢＢＳに関する現在の標準治療は、臨床症状の管理および患者と介護者の両方のためのサポートケアである。

【0006】

遺伝子療法およびオリゴヌクレオチド療法のような治療モダリティを通してＢＢＳを標的とすることは、ＢＢＳにおいて多くの異なる遺伝子が突然変異している場合があるという事実のため困難であった。ＢＢＳの嗅覚および網膜の欠陥を標的とする遺伝子療法の取り組みは、ささやかな成功を収めてきたにすぎない。ＯＲＰＫマウスモデルにおいて、ＩＦＴ８８のアデノウィルス介在性発現は、嗅覚上皮における繊毛を回復させ、嗅覚応答を改善する（非特許文献６）。ＢＢＳ１突然変異体マウスにおける同様の研究によって、野生型ＢＢＳ１のＡＡＶ－介在性送達を行うと、嗅覚知覚ニューロンにおける繊毛が回復し、嗅覚応答が回復したことが示された。しかし、これらの知覚ニューロンの６０から９０日のターンオーバーにより、ＡＡＶ遺伝子療法ベクターの複数の投与を行うことはできないことと相まって、このアプローチの適用は制限されている。更に、そのような鼻腔内送達は、細胞嗅覚上皮の先端面に露出している細胞のみに到達し、より深い未成熟ニューロンには到達しない（非特許文献７）。

【0007】

ＢＢＳの遺伝的不均質性は各個々の遺伝的欠陥を修正することを必要とし、その結果、投薬量および毒性を各個々の遺伝子特異的治療薬に関して確立させなくてはならないことになる。逆に、遺伝的病変部に関係なくＢＢＳの根底にある繊毛欠陥を標的とすることは、ＢＢＳの複数の所見を改善することができる処置モダリティを表す。

【0008】

スフィンゴ脂質およびスフィンゴ糖脂質は、分化、増殖、老化、および細胞間相互作用を含む重要な細胞プロセスの調節に不可欠な鍵となる生体反応性分子である。それらは、繊毛構造の中心的な構成要素でもあり、繊毛のシグナル伝達に寄与する。ガングリオシドＧＭ１およびＧＭ３は、上皮細胞の頂端膜内の異なる脂質マイクロドメインを特徴付け、セラミドは中心体／中心体周囲（periocentriolar）細胞コンパートメントにおいて豊富であることが既知である。セラミドは一次繊毛の形成も制御し、近年の研究では、繊毛の長さは、繊毛基部のサイズまたはセラミド含有量、および繊毛へのその脂質流動によって制御される場合があることが示唆されている（非特許文献８）。

【0009】

本明細書において記載するキヌクリジン化合物は、酵素グルコシルセラミドシンターゼ（ＧＣＳ）阻害剤としての活性を有する。そのような化合物は、リソソーム蓄積性疾患、例えば、ゴーシェ病（例えば特許文献１）、タンパク質症、例えば、アルツハイマー病（例えば特許文献２）、および嚢胞性疾患、例えば多発性嚢胞腎疾患（例えば特許文献３）を含む状態の処置において有用性を有する。キヌクリジン化合物は、例えば、ゴーシェ病の場合は糖脂質レベルを低下させることによって、または例えば、アルツハイマー病の場合はタンパク質凝集を減少させることによって、または例えば、多発性嚢胞腎疾患の場合はアポトーシスによってこれらの処置において作用できることが示唆されている。繊毛に対する、例えば、繊毛病と関連する異常繊毛に対するこれらのキヌクリジン化合物の効果はこれまでのところ報告されていない。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0010】

【特許文献1】ＷＯ２０１２／１２９０８４

【特許文献2】ＷＯ２０１６／１４５０４６

【特許文献3】ＷＯ２０１４／１５２２１５

【非特許文献】

【0011】

【非特許文献1】Ｍａｒｉｏｎ，Ｖ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０６（６）：１８２０－２６（２００９）

【非特許文献2】Ａｋｓａｎｏｖ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ．Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．，７１（１７）：３３８１－９２（２０１４）

【非特許文献3】Ｋｕｌａｇａ ＨＭ，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，３６（９）：９４４－４８（２００４）

【非特許文献4】Ｔａｄｅｎｅｖ ＡＬ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０８（２５）：１０３２０－２５（２０１１）

【非特許文献5】Ｈａｗｓ Ｒ．ｅｔ ａｌ，Ｎｅｗ Ｈｏｒｉｚｏｎｓ ｉｎ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１５，２：１０２－１０９

【非特許文献6】ＭｃＩｎｔｙｒｅ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．，１８（９）：１４２３－２８（２０１２）

【非特許文献7】Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＣＬ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，２５（４）：９０４－９１６（２０１７）

【非特許文献8】Ｊａｎｉｃｈ Ｐ．ｅｔ ａｌ．，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，５８１（－）：１７８３－１７８７（２００７）

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0012】

繊毛病、特にＢＢＳおよびジュベール症候群などの繊毛病と関連する症状の軽減または管理において有効な治療法を開発することが当技術分野において真に必要とされている。繊毛病の基本的な病態生理の処置において有効な治療法を開発することも特に必要とされている。

【課題を解決するための手段】

【0013】

本発明は、式（Ｉ）によるキヌクリジン化合物（化合物１）またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグに関する

【化1】

（式中：
Ｒ^１は、水素、ハロゲン（例えば、フッ素）、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオ、アミノ、Ｃ_１～６－アルキル（例えば、メチルまたはエチル）、Ｃ_２～６－アルケニル、Ｃ_２～６－アルキニル、Ｃ_１～６－アルキルオキシ、Ｃ_２～６－アルケニルオキシ、およびＣ_２～６－アルキニルオキシから選択され、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、またはアルキニルオキシは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオまたはアミノから選択される１つまたはそれ以上（例えば、１、２または３つ）の基で場合により置換されており；
Ｒ^２およびＲ^３は、１つもしくはそれ以上（例えば１、２もしくは３つ）のハロゲンによって場合により置換されたＣ_１～３－アルキルから独立して選択されるか、またはＲ^２およびＲ^３は、１つもしくはそれ以上（例えば１もしくは２つの）のハロゲンによって場合により置換されたシクロプロピルもしくはシクロブチル基を一緒に形成しており；
Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、水素、ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、チオ、アミノ、Ｃ_１～６－アルキル、およびＣ_１－６－アルキルオキシからそれぞれ独立して選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、およびＣ_１～６－アルキルオキシから選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されており；
Ａは、ハロゲン、ヒドロキシ、チオ、アミノ、ニトロ、Ｃ_１～６アルコキシまたはＣ_１～６アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換された５または６員アリールまたはヘテロアリール基である）。

【0014】

第１の態様において、本出願は、それを必要とする対象において繊毛病を処置するための方法であって、有効量の本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式Ｉによる化合物を対象に投与することを含む方法を提供する。第２の態様において、本出願は、繊毛病に罹患している対象における、肥満、肝臓疾患、網膜変性症、嗅覚機能障害、高脂血症、２型糖尿病、および代謝症候群から選択される疾患または障害を処置するための方法であって、有効量の本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式Ｉによる化合物を対象に投与することを含む方法を提供する。第３の態様において、本出願は、それを必要とする対象、場合により繊毛病を有する対象において繊毛機能を保存または改善するための方法であって、有効量の本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式Ｉによる化合物を対象に投与することを含む方法を提供する。

【0015】

本明細書において開示する化合物、組成物および方法の追加の特徴および利点は、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1A】ＷｔおよびＢｂｓ２^－／－不死化腎臓上皮細胞における繊毛の長さの定量化を示す図である。

【図1B】ＷｔおよびＢｂｓ２^－／－不死化腎臓上皮細胞におけるＧＳＬ局在化の免疫蛍光法分析を示す図である。

【図1C】ＷｔおよびＢｂｓ２^－／－不死化腎臓上皮細胞における繊毛の長さおよびＧＭ３繊毛のレベルに対する化合物１を用いた処置の効果を示す図である。

【図2】Ｗｔ、および化合物１を用いて処置された場合のＢｂｓ２^－／－マウスモデルにおける複数の異なる組織におけるグルコシルセラミド（ＧｌｃＣｅｒまたはＧＬ１）レベルに対する効果を示す図である。

【図3A】１カ月から６カ月の月齢のＷｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウス、および化合物１を用いて処置されたＢｂｓ２^－／－マウスにおいて測定された、餌消費量、体重、体脂肪百分率および血清レプチンを含む代謝パラメータにおける変化を示す図である。

【図3B】１カ月から６カ月の月齢のＷｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウス、および化合物１を用いて処置されたＢｂｓ２^－／－マウスからの代表的なＨ＆Ｅ染色された白色脂肪組織（上）および脂肪細胞体積の定量化（下）を示す図である。

【図3C】１カ月から６カ月の月齢のＷｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウス、および化合物１を用いて処置されたＢｂｓ２^－／－マウスからの白色脂肪組織における脂質生成促進（pro-adipogenic）遺伝子のｍＲＮＡ分析を示す図である。

【図4A】確立された代謝疾患を呈するＢｂｓ２^－／－マウス（４カ月から６カ月の月齢のマウス）において測定された体重、体脂肪百分率および血清レプチンを含む代謝パラメータに対する化合物１を用いた短期間処置の効果を示す図である。

【図4B】Ｗｔマウス、確立された代謝疾患を呈するＢｂｓ２^－／－マウス（４カ月から６カ月の月齢のマウス）、および化合物１を用いて短期間処置で処置された確立された代謝疾患を呈するＢｂｓ２^－／－マウス（４カ月から６カ月）からの代表的なＨ＆Ｅ染色された白色脂肪組織および脂肪細胞体積の定量化を示す図である。

【図5】Ｗｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウス、および食餌中の化合物１で処置されたＢｂｓ２^－／－マウスの視床下部における繊毛の分析を示す図である。

【図6】１カ月から６カ月の月齢のＷｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウス、および化合物１を用いて処置されたＢｂｓ２^－／－マウスにおいて測定された肝臓重量、血清ＡＬＴおよび血清トリグリセリドを含む肝臓パラメータにおける変化を示す図である。

【図7A】ＷｔマウスおよびＢｂｓ２^－／－マウスにおける光干渉断層法による外顆粒層（ＯＮＬ）の厚さの分析を示す図である。

【図7B】１カ月から６カ月の月齢のＷｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウス、および化合物１を用いて処置されたＢｂｓ２^－／－マウスの外顆粒層（ＯＮＬ）／内顆粒層（ＩＮＬ）の比率に対する分析を示す図である。

【図7C】１カ月から６カ月の月齢のＷｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウス、および化合物１を用いて処置されたＢｂｓ２^－／－マウスの眼切片におけるロドプシン（上）およびコーンアレスチン（cone arrestin）（下）－杆体および錐体にそれぞれ特異的である－の発現の分析を示す図である。

【図8A】１カ月から６カ月の月齢のＷｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウス、および化合物１を用いて処置されたＢｂｓ２^－／－マウスにおける隠された報酬（treat）の蓋を外すまでの待ち時間を測定するために利用されるｉｎ ｖｉｖｏ埋込報酬試験（buried treat test）の結果を示す図である。

【図8B】１カ月から６カ月の月齢のＷｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウス、および化合物１を用いて処置されたＢｂｓ２^－／－マウスの鼻腔切片における繊毛のマーカーであるアセチル化チューブリンの分析を示す図である。

【図8C】１カ月から６カ月の月齢のＷｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウス、および化合物１を用いて処置されたＢｂｓ２^－／－マウスの鼻腔切片における臭気物質シグナル伝達のマーカーであるアデニル酸シクラーゼＩＩＩの分析を示す図である。

【図9】１カ月から６カ月の月齢のＷｔマウス、Ｂｂｓ２^－／－マウスおよび化合物１を用いて処置されたＢｂｓ２^－／－マウスの鼻腔切片における主な嗅覚上皮（ＭＯＥ）の細胞層のマーカー－すなわち、水平基底細胞（ＣＫ１４、サイトケラチン１４）、球状基底細胞および支持細胞（Ｓｏｘ２、ＳＲＹ－Ｂｏｘ２）、未成熟ニューロン（Ｄｃｘ、ダブルコルチン）および成熟ニューロン（ＯＭＰ、嗅覚のマーカータンパク質）－の分析を示す図である。

【図10A】ｓｉＲＮＡを用いてＢＢＳ１、ＢＢＳ２、およびＢＢＳ１０遺伝子をノックダウンした場合の成熟脂肪細胞における脂質（球状）の蓄積を示すヒト脂肪細胞分化のｉｎ ｖｉｔｒｏでアッセイを示す図である。

【図10B】脂肪細胞馴化培地におけるレプチン濃度は、ＢＢＳ遺伝子のノックダウンした後よりも高いことを示すヒト脂肪細胞分化のｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイを示す図である。

【図10C】化合物１（１．２５～１０μＭ）を用いた処置によって脂質（球状）の蓄積に対する用量依存的な効果を示すヒト脂肪細胞分化のｉｎ ｖｉｔｒｏでアッセイを示す図である。

【図10D】化合物１（１．２５～１０μＭ）を用いた処置によってレプチン分泌に対する用量依存的効果を示すヒト脂肪細胞分化のｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイを示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0017】

ここで本開示の具体的な実施形態を調製物およびスキームを参照しながら記載することになるが、そのような実施形態はほんの一例であり、例示の本開示の原理の適用を表すことができる多くの可能な具体的な実施形態のうちの少数にすぎないことを理解するべきである。さまざまな変更および修正が本開示の利点を考慮すると当業者であれば自明であり、添付の特許請求の範囲において更に定義される本開示の趣旨および範囲の範囲内であるとみなされる。

【0018】

定義
別段の定義がない限り、本明細書において使用される全ての技術および科学用語は、本開示が属する技術の当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有する。本明細書において記載するものと同様のまたは同等の任意の方法および材料を本発明の実施または試験に使用してもよいが、例示的な方法、デバイス、および材料をここで記載する。本明細書において引用する全ての技術および特許刊行物は、その全体を参照によって本明細書に組み入れるものとする。本明細書におけるいかなるものも、本発明が先行する発明を理由にそのような開示に先行する権利はないことを認めるものと解釈するべきではない。

【0019】

本開示の実施は、別段指示がない限り、組織培養、免疫学、分子生物学、微生物学、細胞生物学および組換えＤＮＡの従来技術を用いることになり、これらは当技術分野の範囲内である。

【0020】

範囲を含む全ての数値表示、例えば、ｐＨ、温度、時間、濃度、分子量は、必要に応じて０．１または１．０の増分で（＋）または（－）に変化する近似値である。必ずしも明確に規定されているとは限らないが、全ての数値表示には「約」という用語が先行することを理解されたい。必ずしも明確に規定されているとは限らないが、本明細書において記載する試薬は例示にすぎず、そのような等価物は当技術分野において既知であることも理解されたい。

【0021】

本明細書において使用する場合、「場合により置換された」という用語は、「置換されていないかまたは～によって置換された」という句と同等であることを意味する。

【0022】

本明細書において使用する場合、「処置または阻止する方法において」という句（例えば、「疼痛を処置または阻止する方法において」という句）は、「～の処置または阻止において」という句（例えば、「疼痛の処置または阻止において」という句）と同等であることを意味する。

【0023】

明細書および特許請求の範囲において使用する場合、単数形の「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈上明らかに別段の指示がない限り、複数形の言及を含む。例えば、「細胞（ａ ｃｅｌｌ）」という用語は、これらの混合物を含む複数の細胞（ｃｅｌｌｓ）を含む。特に述べられるかまたは文脈から自明ではない限り、本明細書において使用する場合、「または」という用語は包含的であると理解される。「～としては、～がある（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語は、「～としては、これらに限定されないが、～がある」という句を意味するために本明細書において使用され、区別せずに使用される。

【0024】

本明細書において使用する場合、「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」または「含む（は、を含む）」という用語は、組成物および方法が列挙された要素を含むが、他を除外するものではないことを意味することを意図する。「から実質的になる」は、組成物および方法を定義する場合、記載した目的のために組合せにとって任意の本質的に重要な他の要素を除外することを意味するものとする。したがって、本明細書において定義される要素から実質的になる組成物は、単離および精製方法からの微量混入物質、ならびに薬学的に許容される担体、例えばリン酸緩衝生理食塩水、防腐剤などは除外しないことになる。「からなる」は、他の成分の微量元素だけではなく、本発明の組成物を投与するための実質的な方法工程または組成物を生成するかもしくは意図する結果を達成するための方法工程を除外することを意味するものとする。これらの各転換用語によって定義される実施形態は本発明の範囲内である。本明細書において「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語の使用は、「から実質的になる」および「からなる」を包含することを意図する。

【0025】

「繊毛病」という用語は、繊毛機能障害によって特徴付けられる疾患を指す。「繊毛機能障害」は、繊毛位置の異常を含む繊毛の異常な形成および／または機能を意味する。繊毛機能障害は繊毛の細胞外および／または細胞内部分に影響を与える場合があり、それは構造的および／または機能的不規則性によって特徴付けてもよい。

【0026】

「対象」、「個体」または「患者」は本明細書において区別せずに使用され、脊椎動物、例えば哺乳動物を指す。哺乳動物としては、これらに限定されるものではないが、ネズミ、ラット、ウサギ、サル、ウシ、ヒツジ、ブタ、イヌ、ネコ、家畜、スポーツ動物、ペット、ウマ、霊長類、およびヒトがある。１つの実施形態において、哺乳動物としては、馬、犬、および猫がある。１つの実施形態において、哺乳動物はヒトである。

【0027】

「投与すること」は、薬剤が対象の身体内部に存在することをもたらす様式で、薬剤または薬剤を含む組成物を対象に提供する手段として本明細書において定義する。そのような投与は、限定するものではないが、経口、経皮（例えば膣、直腸、経口粘膜）を含む任意の経路によるもの、注射（例えば皮下、静脈内、非経口、腹腔内、ＣＮＳ内）によるもの、または吸入（例えば、経口または経鼻）によるものであってもよい。医薬調製物は無論、各投与経路に好適な形態によって与えられる。

【0028】

疾患を「処置すること」またはその「処置」は、（１）疾患を阻害すること、すなわち、疾患またはその臨床症状の発症を停止または減少させること；および／または（２）疾患を軽減すること、すなわち、疾患またはその臨床症状の退行をもたらすことを含む。

【0029】

疾患を「阻止すること」またはその「阻止」は、疾患に罹りやすい場合があるが、疾患の症状をまだ経験していないかまたは示していない患者において疾患の臨床症状を発症させないことを含む。

【0030】

「罹患している」という用語は、「処置」という用語に関連する場合、疾患と診断された患者または個体を指す。「罹患している」という用語は、「阻止」という用語に関連する場合、疾患に罹りやすい患者または個体を指す。患者は、その家系における病歴のためまたは疾患と関連する遺伝的突然変異の存在のため疾患に「罹患するリスクがある」ものを指す場合もある。疾患のリスクがある患者は、疾患の特徴的な病状のうちの全てまたは一部をまだ発症していない。

【0031】

「有効量」または「治療有効量」は、有益なまたは所望の結果をもたらすのに十分な量である。有効量は、１回またはそれ以上の回数の投与、適用または投薬で投与してもよい。そのような送達は、個々の投薬単位を使用する期間、治療剤のバイオアベイラビリティ、および投与経路を含む多くの変数に依存する。しかし、任意の特定の対象のための本発明の治療剤のその特定の用量レベルは、例えば、用いられる特定の化合物の活性、対象の年齢、体重、全般的な健康、性別、および食事、投与時期、排泄速度、薬物の組合せ、ならびに処置される特定の障害の重症度ならびに投与形態を含むさまざまな因子に依存することが理解される。処置投薬量は、一般的には、安全性および有効性を最適化するために漸増させてもよい。典型的には、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよび／またはｉｎ ｖｉｖｏ試験からの投薬量－効果の関係は、患者に投与するための適切な用量に関する有用なガイダンスを最初に提供することができる。一般的に、ｉｎ ｖｉｔｒｏで効果的であることが認められた濃度に見合った血清レベルに達成するために効果的な量の化合物を投与することが望まれることになる。これらのパラメータの判定は当技術分野の十分な範囲内である。これらの考察、ならびに効果的な製剤および投与手順は当技術分野において周知であり、標準的な教科書に記載されている。この定義を維持しながら、本明細書において使用する場合、「治療有効量」という用語は、ｅｘ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで、繊毛病と関連する１つまたはそれ以上の症状を処置する（例えば改善する）のに十分な量である。

【0032】

本明細書において使用する場合、「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、担体、例えば、リン酸緩衝生理食塩水溶液、水、およびエマルション、例えば油／水または水／油エマルション、ならびにさまざまな種類の湿潤剤を含む標準的な医薬賦形剤のいずれかを包含する。医薬組成物はまた、安定化剤および防腐剤を含む。例えば、担体、安定化剤およびアジュバントの例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（２０ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．２０００）を参照されたい。

【0033】

本明細書において使用する場合、「プロドラッグ」という用語は、生物内で自発的にまたは酵素的に生体内変換されて活性薬物を放出することを必要とする、親薬物分子の薬理学的誘導体を意味する。例えば、プロドラッグは、ある特定の代謝条件下で切断可能な基を有する、本明細書において記載するキヌクリジン化合物の変形形態または誘導体であり、これは開裂した場合、本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば式Ｉの化合物になる。次いで、そのようなプロドラッグは、これらが生理学的条件下で加溶媒分解を受けたかまたは酵素分解を受けた場合、ｉｎ ｖｉｖｏで薬学的に活性である。本明細書においてプロドラッグ化合物は、シングル、ダブル、トリプルなどと呼ばれる場合があり、生物内で活性薬物を放出するために必要な生体内変換工程の数、および前駆体型形態に存在する官能基の数に依存する。プロドラッグ形態は、哺乳動物生物において溶解性、組織適合性、または遅延放出の利点を提供することが多い。

【0034】

通常当技術分野において既知のプロドラッグとしては、例えば、酸化合物と好適なアルコールとの反応によって調製されたエステル、酸化合物と、アシル化塩基誘導体を形成するために反応させる塩基性基であるアミンとの反応によって調製されたアミドのような周知の酸誘導体がある。他のプロドラッグ誘導体は、バイオアベイラビリティを強化するために、本明細書において開示する他の特徴と組み合わせてもよい。したがって、当業者であれば、例えば、遊離アミノまたはヒドロキシ基を有するここで開示される化合物のうちのいくつかはプロドラッグに変換することができることを理解するであろう。プロドラッグとしては、アミノ酸残基、または２つ以上（例えば２つ、３つまたは４つ）のアミノ酸残基のポリペプチド鎖を有する化合物があり、これらの残基は、ここで開示される化合物の遊離アミノ、ヒドロキシまたはカルボン酸基にペプチド結合を介して共有結合している。アミノ酸残基としては、２０個の天然に存在するアミノ酸があり、３文字の記号によって通常示され、４－ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリシン、デスモシン、イソデスモシン、３－メチルヒスチジン、ノルバリン、ベータ－アラニン、ガンマ－アミノ酪酸、シトルリン、ホモシステイン、ホモセリン、オルニチンおよびメチオニンスルホンも含む。プロドラッグとしてはまた、本明細書において開示する上記の置換基のいずれかに共有結合した、カルボネート、カルバメート、アミドまたはアルキルエステル部分を有する化合物がある。

【0035】

本明細書において使用する場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、それが含まれていてもよい医薬組成物のその他の構成成分との結果として生じる任意の実質的に不所望の生物学的効果または結果として生じる任意の有害な相互作用なしで投与してもよい現在開示されている化合物の薬学的に許容される酸付加物塩または薬学的に許容される塩基付加塩を意味する。

【0036】

本明細書において使用する場合、「Ｃ_１～６－アルキル」という用語は、１から６個の炭素原子および対応する数の水素原子から実質的になる飽和直鎖状または分岐状フリーラジカルを意味する。例示的なＣ_１－６－アルキル基としては、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、およびイソブチルがある。他のＣ_１～６－アルキル基は、本開示の利点を考慮すれば当業者であれば容易に明らかであろう。「Ｃ_１～３－アルキル」、「Ｃ_１～４－アルキル」という用語などは、同等の意味を有し、すなわち、１から３個（または４個）の炭素原子および対応する数の水素原子から実質的になる飽和直鎖状または分岐状フリーラジカルの意味を有する。

【0037】

本明細書において使用する場合、「Ｃ_２～６－アルケニル」という用語は、２から６個の炭素原子および対応する数の水素原子から実質的になる不飽和直鎖状または分岐状のフリーラジカルであって、少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を含むフリーラジカルを意味する。例示的なＣ_２～６－アルケニル基としては、エテニル、プロパ－１－エニル、プロパ－２－エニル、イソプロペニル、ブタ－１－エニル、２－メチル－プロパ－１－エニル、および２－メチル－プロパ－２－エニルがある。他のＣ_２～６－アルケニル基は、本開示の利点を考慮すれば当業者であれば容易に明らかであろう。

【0038】

本明細書において使用する場合、「Ｃ_２～６－アルキニル」という用語は、２から６個の炭素原子および対応する数の水素原子から実質的になる不飽和直鎖状または分岐状のフリーラジカルであって、少なくとも１つの炭素－炭素三重結合を含むフリーラジカルを意味する。例示的なＣ_２～６－アルキニル基としては、エチニル、プロパ－１－イニル、プロパ－２－イニル、ブタ－１－イニル、および３－メチル－ブタ－１－イニルがある。他のＣ_２～６－アルキニル基は、本開示の利点を考慮すれば当業者であれば容易に明らかであろう。

【0039】

本明細書において使用する場合、「Ｃ_１～６－アルキルオキシ」という用語は、１から６個の炭素原子（および対応する数の水素原子）および酸素原子から実質的になる飽和直鎖状または分岐状フリーラジカルを意味する。Ｃ_１～６－アルキルオキシ基は、酸素原子を介して結合している。例示的なＣ_１～６－アルキルオキシ基としては、メチルオキシ、エチルオキシ、ｎ－プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、ｎ－ブチルオキシ、およびイソブチルオキシがある。他のＣ_１～６－アルキルオキシ基は、本開示の利点を考慮すれば当業者であれば容易に明らかであろう。「Ｃ_１～３－アルキルオキシ」、「Ｃ_１～４－アルキルオキシ」という用語などは、同等の意味を有し、すなわち、１から３個（または４個）の炭素原子（および対応する数の水素原子）および酸素原子から実質的になり、基が、酸素原子を介して結合している飽和直鎖状または分岐状フリーラジカルの意味を有する。

【0040】

本明細書において使用する場合、「Ｃ_２～６－アルケニルオキシ」という用語は、２から６個の炭素原子（および対応する数の水素原子）および酸素原子から実質的になる不飽和直鎖状または分岐状のフリーラジカルであって、少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を含むフリーラジカルを意味する。Ｃ_２～６－アルケニルオキシ基は、酸素原子を介して結合している。例示的なＣ_２～６－アルケニルオキシ基はエテニルオキシであり；他のものは、本開示の利点を考慮すれば当業者であれば容易に明らかであろう。

【0041】

本明細書において使用する場合、「Ｃ_２～６－アルキニルオキシ」という用語は、２から６個の炭素原子（および対応する数の水素原子）および酸素原子から実質的になる不飽和直鎖状または分岐状のフリーラジカルであって、少なくとも１つの炭素－炭素三重結合を含むフリーラジカルを意味する。Ｃ_２～６－アルケニルオキシ基は、酸素原子を介して結合している。例示的なＣ_２～６－アルケニルオキシ基はエチニルオキシであり；他のものは、本開示の利点を考慮すれば当業者であれば容易に明らかであろう。

【0042】

本明細書において使用する場合、「ヘテロアリール」という用語は、環を形成する５または６個の原子（すなわち、環原子）を有し、１から５個の環原子は炭素であり、残りの１から５個の環原子（すなわち、ヘテロ環原子）は、窒素、硫黄、および酸素からなる群から独立して選択される芳香族フリーラジカルを意味する。例示的な５員ヘテロアリール基としては、フリル、チエニル、チアゾリル（例えば、チアゾール－２－イル）、ピラゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピロリル、トリアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリルおよびチアジアゾリルがある。例示的な６員ヘテロアリール基としては、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、１，２，４－トリアジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、およびベンゾイミダゾリルがある。他のヘテロアリール基は、本開示の利点を考慮すれば当業者であれば容易に明らかであろう。一般的に、ヘテロアリール基は、炭素原子を介して主構造に典型的には結合している。しかし、当業者であれば、ある特定の他の原子、例えばヘテロ環原子を主構造に結合させることができることを理解するであろう。

【0043】

本明細書において使用する場合、「アリール」という用語は、環を形成する５または６個の原子（すなわち、環原子）を有し、環原子の全ては炭素である芳香族フリーラジカルを意味する。例示的なアリール基はフェニル基である。

【0044】

本明細書において使用する場合、「脂肪族」という用語は、炭素および水素原子を含む、例えば１から９個の炭素原子を含む非芳香族化合物を意味する。脂肪族化合物は、直鎖状であっても分岐状であってもよく、１つまたはそれ以上の環構造を含んでいてもよく、１つまたはそれ以上の炭素－炭素二重結合を含んでいてもよい（ただし、化合物は、芳香族特性を有する不飽和環構造を含んでいない）。脂肪族化合物の例としては、エタン、プロピレン、シクロブタン、およびシクロヘキサジエンがある。

【0045】

本明細書において使用する場合、「ハロ」および「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を意味する。これらの用語は区別せずに使用され、ハロゲンフリーラジカル基またはハロゲン原子自体を指していてもよい。当業者であれば、本開示においてこの用語が使用される文脈を考慮して同定を容易に確認することができるであろう。

【0046】

本明細書において使用する場合、「シアノ」という用語は、三重結合を介して窒素原子に連結している炭素原子を有するフリーラジカルを意味する。シアノラジカルは、その炭素原子を介して結合している。

【0047】

本明細書において使用する場合、「ニトロ」という用語は、その窒素原子を介して結合している－ＮＯ_２ラジカルを意味する。

【0048】

本明細書において使用する場合、「ヒドロキシ」および「ヒドロキシル」という用語は、その酸素原子を介して結合している－ＯＨラジカルを意味する。「チオ」という用語は、その硫黄原子を介して結合している－ＳＨラジカルを意味する。

【0049】

本明細書において使用する場合、「アミノ」という用語は、窒素原子および１または２つの水素原子を有するフリーラジカルを意味する。したがって、「アミノ」という用語は、第一級および第二級アミンを一般的に指す。その点で、本明細書において使用する場合、第三級アミンは、一般式ＲＲ’Ｎ－によって表される（式中、ＲおよびＲ’は同一であっても同一でなくてもよい炭素ラジカルである）。それにもかかわらず、「アミノ」という用語は、第一級、第二級、または第三級アミンを記載するために本明細書において全般的に使用する場合があり、当業者であれば、本開示においてこの用語が使用される文脈を考慮して同定を容易に確認することができるであろう。

【0050】

本明細書において使用する場合、「オキソ」という用語は、二重結合を介して連結している酸素ラジカルを意味する。この酸素に結合している原子が炭素原子である場合、結合は、炭素－酸素二重結合であり、これは－（Ｃ＝Ｏ）－と表記してもよく、ケトンと称してもよい。

【0051】

本明細書における可変基の任意の定義における化学基のリストの記載は、任意の単一の基としてのまたは挙げられた基の組合せとしての可変基の定義を含む。本明細書における可変基または態様に関する実施形態の記載は、その実施形態を、任意の単一の実施形態としてまたはその他の実施形態もしくはその一部と組み合わせて含む。

【0052】

本明細書において提供する任意の組成物または方法は、本明細書において提供する他の組成物および方法のいずれか１つまたはそれ以上と組み合わせてもよい。

【0053】

以下の略語を本明細書において使用する：
ｂｒ ブロードなシグナル
ＣＤＩ カルボニルジイミダゾール
ＣＮＳ 中枢神経系
ｄ ダブレット
ＤＡＰＩ ４’，６－ジアミジノ－２－フェニルインドール
ｄｄ ダブレットのダブレット
ＤＭＥ ジメトキシエタン
ＤＭＥＭ ダルベッコ改変イーグル培地
ＤＭＳＯ－ｄ６ ジメチルスルホキシド－ｄ６
ＤＭＦ ジメチルホルムアミド
ＤＮＡ デオキシリボ核酸
ＤＴＢＺ 炭素－１１ジヒドロテトラベナジン
ＥＤＴＡ エチレンジアミン四酢酸
ＥＬＩＳＡ 酸素結合免疫吸着アッセイ
Ｅｔ_２Ｏ ジエチルエーテル
ＥｔＭｇＢｒ 臭化エチルマグネシウム
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＧＬ１ グルコシルセラミド（ＧｌｃＣｅｒ）
ＧＭ１ モノシアロテトラヘキソシルガングリオシド
ＧＭ３ モノシアロジヘキソシルガングリオシド
ＧＳＬ スフィンゴ糖脂質
Ｈ＆Ｅ ヘマトキシリンおよびエオシン染色
ＨＰＬＣ 高圧／性能液体クロマトグラフィー
ＨＡＳ ヒト血清アルブミン
ＩＰＡ イソプロピルアルコール
Ｊ カップリング定数
ＬＣＭＳ 液体クロマトグラフィー質量分析
ｍ マルチプレット
ｐｐｍ １００万分の１
ｒＨＡ 組換えヒトアルブミン
ｓ シングレット
ＴＢＭＥ Ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
Ｔｒｉｓ トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
ＴＷＥＥＮ２０ ポリソルベート２０
ＴＷＥＥＮ８０ ポリソルベート８０
Ｗｔ 野生型
ＵＰＬＣＭＳ 超高性能液体クロマトグラフィー質量分析

【0054】

化合物
本発明は、繊毛病と関連する治療法において使用するためのキヌクリジン化合物に関する。そのさまざまな態様の全てにおいて、本発明は、式（Ｉ）によるキヌクリジン化合物（化合物１）またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグに関する

【化2】

（式中：
Ｒ^１は、水素、ハロゲン（例えば、フッ素）、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオ、アミノ、Ｃ_１～６－アルキル（例えば、メチルまたはエチル）、Ｃ_２～６－アルケニル、Ｃ_２～６－アルキニル、Ｃ_１～６－アルキルオキシ、Ｃ_２～６－アルケニルオキシ、およびＣ_２～６－アルキニルオキシから選択され、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、またはアルキニルオキシは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオまたはアミノから選択される１つまたはそれ以上（例えば、１、２または３つ）の基で場合により置換されており；
Ｒ^２およびＲ^３は、１つもしくはそれ以上（例えば１、２もしくは３つ）のハロゲンによって場合により置換されたＣ_１～３－アルキルから独立して選択されるか、またはＲ^２およびＲ^３は、１つもしくはそれ以上（例えば１もしくは２つの）のハロゲンによって場合により置換されたシクロプロピルもしくはシクロブチル基を一緒に形成し；
Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、水素、ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、チオ、アミノ、Ｃ_１～６－アルキル、およびＣ_１～６－アルキルオキシからそれぞれ独立して選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、およびＣ_１～６－アルキルオキシから選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されており；
Ａは、ハロゲン、ヒドロキシ、チオ、アミノ、ニトロ、Ｃ_１～６アルコキシおよびＣ_１～６アルキルから独立して選択される１、２または３つの基で場合により置換された５または６員アリールまたはヘテロアリール基（例えば、フェニルまたはチアゾリル）である）。

【0055】

本発明の任意の態様の更なる実施形態において、本開示は更に、以下のような化合物に関する：
１．１ 化合物１（式中、Ｒ^１は、水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオ、アミノ、Ｃ_１～６－アルキル、Ｃ_１～６－アルキルオキシから選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオまたはアミノから選択される１つまたはそれ以上（例えば、１、２または３つ）の基で場合により置換されている）；
１．２ 化合物１（式中、Ｒ^１は、水素、ハロゲン、Ｃ_１～６－アルキル、Ｃ_１～６－アルキルオキシから選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオまたはアミノから選択される１つまたはそれ以上（例えば、１、２または３つ）の基で場合により置換されている）；
１．３ 化合物１（式中、Ｒ^１は、水素、ハロゲン、Ｃ_１～４－アルキル、Ｃ_１～４－アルキルオキシから選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオまたはアミノから選択される１つまたはそれ以上（例えば、１、２または３つ）の基で場合により置換されている）；
１．４ 化合物１（式中、Ｒ^１は、水素、ハロゲン、Ｃ_１～４－アルキル、Ｃ_１～４－アルキルオキシから選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、チオまたはアミノから選択される１つまたはそれ以上（例えば、１、２もしくは３つ、または１もしくは２つ）の基で場合により置換されている）；
１．５ 化合物１（式中、Ｒ^１は、水素、ハロゲン、およびＣ_１～４－アルキルから選択され、ここで、前記アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、チオまたはアミノから選択される１つまたはそれ以上（例えば、１または２つ）の基で場合により置換されている）；
１．６ 化合物１（式中、Ｒ^１は、水素、フッ素、メチルおよびエチルから選択され、ここで、前記メチルまたはエチルは、ハロゲン、ヒドロキシ、チオまたはアミノから選択される１または２つの基で場合により置換されている）；
１．７ 化合物１（式中、Ｒ^１は、水素およびメチルから選択され、ここで、前記メチルは、１または２つのハロゲンで場合により置換されている）；
１．８ 化合物１（式中、Ｒ^１は水素である）；
１．９ 化合物１、または１．１～１．８のいずれか（式中、Ｒ^１は、キヌクリジン部分の窒素原子に結合していない）；
１．１０ 化合物１、または１．１～１．９のいずれか（式中、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立して、１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）のハロゲンによって場合により置換されたＣ_１～３－アルキルである）；
１．１１ 化合物１．１１（式中、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立して、１または２つのハロゲンによって場合により置換されたメチルまたはエチルである）；
１．１２ 化合物１．１１（式中、Ｒ^２およびＲ^３は、１つまたはそれ以上のフッ素、例えば、１、２または４つのフッ素によって場合により置換されたメチルおよびエチルからそれぞれ独立して選択される）；
１．１３ 化合物１．１１（式中、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立して、０、１、２または３つのフッ素で置換されたメチルである）；
１．１４ 化合物１．１１（式中、Ｒ^２およびＲ^３はそれぞれ、メチルまたはトリフルオロメチルである）；
１．１５ 化合物１．１１（Ｒ^２およびＲ^３はそれぞれメチルである）；
１．１６ 化合物１、または１．１～１．９のいずれか（式中、Ｒ^２およびＲ^３は、１つまたはそれ以上（例えば１または２つ）のハロゲンによって場合により置換されたシクロプロピルまたはシクロブチル基を一緒に形成している）；
１．１７ 化合物１．１６（式中、Ｒ^２およびＲ^３は、シクロプロピル基を一緒に形成している）；
１．１８ 化合物１または１．１～１．９のいずれか（式中、Ｒ^２およびＲ^３はそれぞれメチルであるか、またはＲ^２およびＲ^３は、シクロプロピル基を一緒に形成している）；
１．１９ 化合物１、または１．１～１．９のいずれか（式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、水素、ハロゲン、Ｃ_１～６－アルキル、およびＣ_１～６－アルキルオキシからそれぞれ独立して選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、およびＣ_１～６－アルキルオキシから選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されている）；
１．２０ 化合物１、または１．１～１．９のいずれか（式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、水素、ハロゲン、Ｃ_１～３－アルキル、およびＣ_１～３－アルキルオキシからそれぞれ独立して選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、およびＣ_１～３－アルキルオキシから選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されている）；
１．２１ 化合物１．１９（式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、水素、ハロゲン、Ｃ_１～３－アルキル、およびＣ_１～３－アルキルオキシからそれぞれ独立して選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲン、シアノ、およびＣ_１～３－アルキルオキシから選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されている）；
１．２２ 化合物１．１９（式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、水素、ハロゲン、Ｃ_１～３－アルキル、およびＣ_１～３－アルキルオキシからそれぞれ独立して選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲンおよびＣ_１～３－アルキルオキシから選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されている）；
１．２３ 化合物１．１９（式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、ハロゲン、Ｃ_１～３－アルキル、およびＣ_１～３－アルキルオキシからそれぞれ独立して選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲンおよびＣ_１～３－アルキルオキシから選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されている）
１．２４ 化合物１、または１．１９～１．２３のいずれか（Ｒ^４は、水素、ハロゲン、Ｃ_１～３－アルキル、およびＣ_１～３－アルキルオキシから選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲンおよびＣ_１～３－アルキルオキシから選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されている）；
１．２５ 化合物１．２４（Ｒ^４は、ハロゲン（例えば、フッ素）、Ｃ_１～３－アルキル（例えば、メチル）、およびＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）から選択され、ここで、前記アルキルまたはアルキルオキシは、ハロゲンおよびＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）から選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されている）；
１．２６ 化合物１．２６（Ｒ^４は、ハロゲン（例えば、フッ素）およびＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）から選択され、ここで、前記アルキルオキシは、ハロゲンおよびＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、メトキシまたはエトキシ）から選択される１つまたはそれ以上（例えば１、２または３つ）の基によって場合により置換されている）；
１．２７ 化合物１．２６（Ｒ^４は、フッ素、またはハロゲンおよびＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、メトキシ）から選択される１つもしくはそれ以上（例えば１、２もしくは３つ）の基によって場合により置換されたＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、エトキシ）である）；
１．２８ 化合物１．２６（式中、Ｒ^４は、フッ素、または１つもしくはそれ以上（例えば１、２もしくは３つ）のＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、メトキシ）によって場合により置換されたエトキシである）；
１．２９ 化合物１、または１．１９～１．２８のいずれか（式中、Ｒ^６は水素である）；
１．３０ 化合物１、または１．１９～１．２８のいずれか（式中、Ｒ^５およびＲ^６はそれぞれ水素である）；
１．３１ 化合物１、または１．１９～１．２８のいずれか（Ｒ^５およびＲ^６はそれぞれ、水素であり、Ｒ^４は、フッ素、またはハロゲンおよびＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、メトキシ）から選択される１つもしくはそれ以上（例えば１、２もしくは３つ）の基によって場合により置換されたＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、エトキシ）である）；
１．３２ 化合物１．３１（式中、Ｒ^５およびＲ^６はそれぞれ水素であり、Ｒ^４は、フッ素、または１つもしくはそれ以上（例えば１、２もしくは３つ）のＣ_１～３－アルキルオキシ（例えば、メトキシ）によって場合により置換されたエトキシである）；
１．３３ 化合物１．３２（式中、Ｒ^５およびＲ^６はそれぞれ水素であり、Ｒ^４は、フッ素、またはメトキシ（例えば、２－メトキシエトキシ）で置換されたエトキシである）；
１．３４ 化合物１．３２（式中、Ｒ^４は、フッ素または２－メトキシエトキシである）；
１．３５ 化合物１、または１．１から１．３４のいずれか（式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６のうち少なくとも１つは水素ではない）；
１．３６ 化合物１、または１．１～１．３５のいずれか（式中、Ｒ^６は水素であり、Ｒ^４およびＲ^５は、それらが結合しているフェニル環の２、４または６位に（すなわち、Ａ置換基に対してオルトまたはパラで）位置する）；
１．３７ 化合物１、または１．１～１．３５のいずれか（式中、Ｒ^６は水素であり、Ｒ^４およびＲ^５は、それらが結合しているフェニル環の、２および３位に（すなわち、隣接するオルトおよびメタで）、３および４位に（すなわち、隣接するメタおよびパラで）、または３および５位に（すなわち、メタで）独立して位置する（Ａ置換基に対して））；
１．３８ 化合物１、または１．１～１．３５のいずれか（式中、Ｒ^６は水素であり、Ｒ^４およびＲ^５は、それらが結合しているフェニル環の３および５位に（すなわち、メタで）位置する（Ａ置換基に対して））；
１．３９ 化合物１、または１．１～１．３５のいずれか（式中、Ｒ^５およびＲ^６は水素であり、Ｒ^４は、それが結合しているフェニル環の２、３または４位に（例えば、Ａ置換基に対してオルト、メタまたはパラで）位置する）；
１．４０ 化合物１、または１．１～１．３５のいずれか（式中、Ｒ^５およびＲ^６は水素であり、Ｒ^４は、それが結合しているフェニル環の２または４位に（例えば、Ａ置換基に対してオルトまたはパラで）位置する）；
１．４１ 化合物１、または１．１～１．３５のいずれか（式中、Ｒ^５およびＲ^６は水素であり、Ｒ^４は、それが結合しているフェニル環の４位に（例えば、Ａ置換基に対してパラで）位置する）；
１．４２ 化合物１、または１．１～１．３５のいずれか（式中、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６はいずれも水素ではなく、各Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、それらが結合しているフェニル環の２、４または６位に（すなわち、Ａ置換基に対してオルトまたはパラで）独立して位置する）；
１．４３ 化合物１、または１．１～１．４２のいずれか（式中、Ｒ^４は、それが結合しているフェニル環の４位に（すなわち、Ａ置換基に対してパラで）位置する）；
１．４４ 化合物１、または１．１～１．４３のいずれか（式中、Ａは、６員アリール基、５員ヘテロアリール基（例えば、Ｎ、ＯおよびＳから選択されるヘテロアリール環に１、２または３つのヘテロ原子を含む）、または６員ヘテロアリール基（例えば、ヘテロアリール環に１、２または３つの窒素原子を含む）である）；
１．４５ 化合物１．４４（式中、Ａは、６員アリール基または５員ヘテロアリール基（例えば、Ｎ、ＯおよびＳから選択されるヘテロアリール環に１、２または３つのヘテロ原子を含む）であり、場合により、５員ヘテロアリール基は、ＮおよびＳから選択される１または２つのヘテロ原子（例えば、１つのＮおよび／または１つのＳ）を含む）；
１．４６ 化合物１．４４または１．４５（式中、Ａは、フェニル、フリル、チエニル、チアゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピロリル、トリアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリルおよびチアジアゾリルからなる群から選択される）；
１．４７ 化合物１．４６（式中、Ａは、フェニル、チエニル、チアゾリル、ピロリル、およびイミダゾリルからなる群から選択される）；
１．４８ 化合物１．４６（式中、Ａは、フェニルおよびチアゾリル、例えば、２－チアゾール－４－イルまたは４－チアゾール－２－イルからなる群から選択される）；
１．４９ 化合物１、または１．１～１．４８のいずれか（式中、Ａは置換されていない）
１．５０ 化合物１、または１．１～１．４８のいずれか（式中、Ａは、ハロゲン、ヒドロキシ、チオ、アミノ、ニトロ、Ｃ_１～６アルコキシおよびＣ_１～６アルキル（例えば、メチル）から独立して選択される１つまたはそれ以上（例えば、１、２または３つ）の基で置換されている）；
１．５１ 化合物１．５０（式中、Ａは、１つのハロゲン（例えば、フッ素）、またはＣ_１～６アルキル（例えば、メチル）で置換されたチアゾリルである）；
１．５２ 化合物１．５０（式中、Ａは、ハロゲン（例えば、フッ素）およびＣ_１～６アルキル（例えば、メチル）から独立して選択される１、２または３つの基で置換されたフェニルである）；
１．５３ 化合物１．５２（式中、Ａは、１または２つのフッ素またはメチル基で置換されたフェニルである）；
１．５４ 化合物１、または１．１～１．５３のいずれか（式中、Ａ置換基に結合している２つの基（すなわち、フェニル環（－（Ｃ_６Ｈ_２Ｒ^４Ｒ^５Ｒ^６））および－Ｃ（Ｒ^２Ｒ^３）－基）は、互いに１，２、１，３または１，４の関係で（すなわち、オルト、メタ、またはパラで）位置する）；
１．５５ 化合物１．５４（式中、Ａ置換基に結合している２つの基は、互いに１，３の関係で（すなわち、メタで）位置する）；
１．５６ 化合物１．５４（式中、Ａ置換基に結合している２つの基は、互いに１，４の関係で（すなわち、パラで）位置する）；
１．５７ 化合物１．５４から１．５６のいずれか（式中、Ａ置換基は、５員ヘテロアリール基であり、Ａ置換基に結合している２つの基（すなわち、フェニル環（－（Ｃ_６Ｈ_２Ｒ^４Ｒ^５Ｒ^６））またはｔｈｅ－Ｃ（Ｒ^２Ｒ^３）－基）のうちの少なくとも１つは、ヘテロアリール環の炭素原子に結合しており、場合によりそのような基の両方は、ヘテロアリール環の炭素原子に結合している）；

【0056】

１．５８ 化合物１、または１．１～１．５７のいずれか（式中、式Ｉの化合物は、以下の構造のうちのいずれかまたはそれ以上によって表してもよい）：

【化3】

【化4】

【化5】

【0057】

１．５９ 化合物１、または１．１～１．５８のいずれか（式中、式Ｉの化合物、または式ＩＩからＸＩＩのいずれかは、（Ｓ）立体配置を有する）；
１．６０ 化合物１、または１．１～１．５８のいずれか（式中、式Ｉの化合物、または式ＩＩからＸＩＩのいずれかは、（Ｒ）立体配置を有する）；
１．６１ 化合物１、または１．１～１．６０のいずれか（式中、式Ｉの化合物、または式ＩＩからＸＩＩのいずれかは、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％または９９．９％のエナンチオマー過剰（例えば、（Ｓ）立体配置の）を有する）；
１．６２ 化合物１、または１．１～１．５８のいずれか（式中、式Ｉの化合物、または式ＩＩからＸＩＩのいずれかは、ラセミ体（すなわち、およそ５０：５０比率のエナンチオマー）であるか、またはいくつかの他の比率（例えば、５０：５０未満または５０：５０超）のエナンチオマー混合物である）；

【0058】

１．６３ 化合物１、または１．１～１．６２のいずれか（式中、式Ｉの化合物は、以下の表からなる群から選択される）：

【表1-1】

【表1-2】

【0059】

１．６４ 化合物１、または１．１～１．６３のいずれか（式中、化合物は、キヌクリジン－３－イル（２－（４’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－３－イル）プロパン－２－イル）カルバメート、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート、および（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートから選択される）；
１．６５ 化合物１、または１．１～１．６３のいずれか（式中、化合物はキヌクリジン－３－イル（２－（４’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－３－イル）プロパン－２－イル）カルバメートである）；
１．６６ 化合物１または１．１～１．６３のいずれか（式中、化合物は、キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートである）；
１．６７ 化合物１、または１．１～１．６６のいずれか（式中、式Ｉの化合物、またはＩＩからＸＩＩのいずれかは、遊離塩基の形態である）；
１．６８ 化合物１、または１．１～１．６６のいずれか（式中、式Ｉの化合物、またはＩＩからＸＩＩのいずれかは、薬学的に許容される塩の形態である）；
１．６９ 化合物１．６８（式中、前記塩の形態は酸付加塩の形態である）；
１．７０ 化合物１．６９（式中、前記酸付加塩の形態は、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、重酒石酸塩、コハク酸、ヒドロキシコハク酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、サッカリン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、およびパモ酸塩から選択される塩である）；
１．７１ 化合物１．７０（式中、酸付加塩の形態は、塩酸塩、ヒドロキシコハク酸塩（例えば、２－ヒドロキシコハク酸塩）、およびリンゴ酸塩から選択される）；
１．７２ 化合物１．６８（式中、前記塩の形態は、塩基付加塩の形態である）；
１．７３ 化合物１、または１．１～１．７２のいずれか（式中、化合物は、リンゴ酸塩の形態の（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートである）；
１．７４ 化合物１、または１．１～１．７３のいずれか（式中、式Ｉの化合物、またはＩＩからＸＩＩのいずれかは、本明細書において記載するプロドラッグの形態である）；
１．７５ 化合物１、または１．１～１．７４のいずれか（式中、式Ｉの化合物、またはＩＩからＸＩＩのいずれかは、水和物、溶媒和物および／または多形の形態である）。

【0060】

塩
ここで開示される化合物、例えば、化合物１または１．１から１．７５のいずれかは本質的に塩基性であり、さまざまな無機および／または有機酸とさまざまな異なる塩を一般的に形成することができる。そのような塩は、動物およびヒトに投与するために一般的に薬学的に許容されるが、薬学的に許容されない塩として化合物を反応混合物から最初に単離し、次いで、アルカリ試薬で処置することによって後者を遊離塩基化合物に変換して単に戻し、その後、遊離塩基を薬学的に許容される酸付加物塩に変換することが実際に望ましいことが多い。塩基化合物の酸付加塩は、従来技術を使用して、例えば、塩基化合物と実質的に等量の選択された無機または有機酸とを、水性溶媒媒体中で、または例えば、メタノールもしくはエタノールのような好適な有機溶媒中で処置することによって容易に調製してもよい。溶媒を注意深く蒸発させた場合、所望の固体塩が得られる。ここで開示される化合物は正電荷であり、例えば第四級アンモニウムを含み、さまざまな無機および／または有機酸の陰イオン性構成成分とも塩を形成することができる。

【0061】

キヌクリジン化合物の薬学的に許容される塩を調製するために使用してもよい酸は、非毒性酸付加塩、例えば薬理学的に許容されるアニオンを含む塩、例えば、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩または重硫酸塩、リン酸塩または酸性リン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩または酸性クエン酸塩、酒石酸塩または重酒石酸塩、コハク酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、サッカリン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩およびパモ酸塩［すなわち、１，１’－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエート）］塩を形成することができるものである。

【0062】

本質的に酸性であるここで開示する化合物、例えば、チオール部分を含む化合物は、さまざまな無機および／または有機塩基とさまざまな異なる塩を一般的に形成することができる。そのような塩は、動物およびヒトに投与するために一般的に薬学的に許容されるが、化合物を反応混合物から薬学的に許容されない塩として最初に単離し、次いで酸性試薬で処置することによって後者を遊離酸化合物に変換して単に戻し、その後遊離酸を薬学的に許容される塩基付加塩に変換することが実際に望ましいことが多い。これらの塩基付加塩は、従来技術を使用して、例えば、対応する酸性化合物を、所望の薬理学的に許容されるカチオンを含む水溶液で処置し、次いで、得られた溶液を、例えば減圧下で乾燥するまで蒸発させることによって容易に調製してもよい。あるいは、これらは、酸性化合物の低級アルカノール溶液と、所望のアルカリ金属アルコキシドとを一緒に混合し、次いで前述と同じ様式で得られた溶液を蒸発乾固させることによっても調製してもよい。いずれの場合も、化学量論の量の試薬を、反応を完全に行い、所望の固体塩の生成物の収率を最大にすることを確実にするために用いてもよい。

【0063】

キヌクリジン化合物の薬学的に許容される塩基付加塩を調製するために使用してもよい塩基は、非毒性塩基付加塩、例えば、薬理学的に許容されるカチオン、例えば、アルカリ金属カチオン（例えばカリウムおよびナトリウム）、アルカリ土類金属カチオン（例えばカルシウムおよびマグネシウム）を含む塩、アンモニウムまたは他の水溶性アミン、例えば、Ｎ－メチルグルカミン（メグルミン）、低級アルカノールアンモニウム、および他の有機アミン塩基の付加塩を形成することができるものである。

【0064】

１つの実施形態において、薬学的に許容される塩はコハク酸塩である。別の実施形態において、薬学的に許容される塩は２－ヒドロキシコハク酸塩、例えば（Ｓ）－２－ヒドロキシコハク酸塩である。別の実施形態において、薬学的に許容される塩は塩酸塩（すなわち、ＨＣｌとの塩）である。別の実施形態において、薬学的に許容される塩はリンゴ酸塩である。

【0065】

プロドラッグ
本開示は、化合物１および１．１から１．７５のプロドラッグを更に包含する。本明細書において開示する薬学的に許容されるプロドラッグは、本明細書において記載するキヌクリジン化合物にｉｎ ｖｉｖｏで変換することができる、キヌクリジン化合物の誘導体である。プロドラッグは、それ自体がいくつかの活性を有する場合があり、例えば、生理学的条件下で加溶媒分解をまたは酵素分解を受けた場合に、ｉｎ ｖｉｖｏで薬学的に活性になる。本明細書において記載する化合物のプロドラッグを調製するための方法は、本開示に基づいて当業者であれば明らかであろう。

【0066】

１つの実施形態において、キヌクリジン化合物のカルバメート部分は改変されている。例えば、キヌクリジン化合物のカルバメート部分は、水および／または１つまたは２つの脂肪族アルコールを添加することによって改変してもよい。この場合、カルバメート部分の炭素－酸素二重結合は、ヘミアセタールまたはアセタール官能性と考えられ得るものを採用する。１つの実施形態において、キヌクリジン化合物のカルバメート部分は、脂肪族ジオール、例えば１，２－エタンジオールを添加することによって改変してもよい。

【0067】

１つの実施形態において、キヌクリジン化合物におけるヒドロキシ、チオまたはアミノ基のうちの１つまたはそれ以上は改変されている。例えば、キヌクリジン化合物におけるヒドロキシ、チオおよび／またはアミノ基のうちの１つまたはそれ以上は、酸誘導体、例えばエステル、チオエステル（またはチオールエステル）および／またはアミドを形成するために改変してもよい。酸誘導体は、例えば、１つまたはそれ以上のヒドロキシ、チオまたはアミノ基を含むキヌクリジン化合物とセチル化剤とを反応させることによって形成してもよい。アセチル化剤の例としては、無水物、例えば無水酢酸、酸塩化物、例えば塩化ベンジル、およびビカルボネート、例えばジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカルボネートがある。

【0068】

立体化学
本開示は、化合物１および１．１から１．７５の立体異性体および立体異性体の混合物を更に包含する。立体異性体（例えば、シスおよびトランス異性体）およびここで開示する化合物の全ての光学異性体（例えば、Ｒ－およびＳ－エナンチオマー）、ならびにそのような異性体のラセミ、ジアステレオマーおよび他の混合物は本開示の範囲内である。

【0069】

１つの実施形態において、本明細書において定義するキヌクリジン化合物のキヌクリジン－３－イル基はＲ－立体配置を有する。したがって、キヌクリジン化合物は、式（Ｉａ）から（ＸＩＩａ）の化合物、ならびにこれらの薬学的に許容される塩およびプロドラッグからなる群から選択してもよい：

【0070】

【化6】

【化7】

【化8】

【0071】

別の実施形態において、本明細書において定義するキヌクリジン化合物のキヌクリジン－３－イル基はＳ－立体配置を有する。したがって、キヌクリジン化合物は、式（Ｉｂ）から（ＸＩＩｂ）の化合物、ならびにこれらの薬学的に許容される塩およびプロドラッグからなる群から選択してもよい：

【0072】

【化9】

【化10】

【化11】

【0073】

１つの実施形態において、キヌクリジン化合物は、式（Ｘｂ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。別の実施形態において、キヌクリジン化合物は、式（ＸＩＩｂ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。

【0074】

１つの実施形態において、本明細書において定義するキヌクリジン化合物のキヌクリジン－３－イル基は、Ｒ－およびＳ－立体配置を有する異性体の混合物で存在する。例えば、キヌクリジン化合物は、式（Ｉａ）および（Ｉｂ）、（ＩＩａ）および（ＩＩｂ）、（ＩＩＩａ）および（ＩＩＩｂ）、（ＩＶａ）および（ＩＶｂ）、（Ｖａ）および（Ｖｂ）、（ＶＩａ）および（ＶＩｂ）、（ＶＩＩａ）および（ＶＩＩｂ）、（ＶＩＩＩａ）および（ＶＩＩＩｂ）、（ＩＸａ）および（ＩＸｂ）、（Ｘａ）および（Ｘｂ）、（ＸＩａ）および（ＸＩｂ）、ならびに（ＸＩＩａ）および（ＸＩＩｂ）の化合物、ならびにこれらの薬学的に許容される塩およびプロドラッグからなる群から選択される化合物の混合物であってもよい。１つの実施形態において、キヌクリジン化合物はラセミ混合物として存在し、例えば、キヌクリジン－３－イル基のＲ－およびＳ－異性体はほぼ等量で存在する。別の実施形態において、キヌクリジン化合物は、Ｒ－およびＳ－立体配置を有する異性体の混合物として存在し、Ｒ－およびＳ－異性体は異なる量で存在する。１つの実施形態において、Ｓ－異性体は、少なくとも約５％、１０％、２５％、４０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９８％または９９％、例えば、約１００％のエナンチオマー過剰で存在する。別の実施形態において、Ｒ－異性体は、少なくとも約５％、１０％、２５％、４０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９８％または９９％、例えば、約１００％のエナンチオマー過剰で存在する。

【0075】

エナンチオ富化および／またはエナンチオ純粋キヌクリジン化合物を調製するための方法は、本開示に基づいて当業者であれば明らかであろう。

【0076】

ここで開示する化合物は、エノールおよびイミン形態ならびにケトおよびエナミン形態を含むいくつかの互変異性体、ならびに幾何異性体、ならびにこれらの混合物で存在してもよい。互変異性体は、溶液中で互変異性体のセットの混合物として存在する。固体形態では、通常１つの互変異生体が優勢である。１つの互変異生体を記載する場合があるにしても、全ての互変異性体が本開示の範囲内である。

【0077】

アトロプ異性体も本開示の範囲内である。アトロプ異性体は、回転が制限された異性体に分解することができる化合物を指す。

【0078】

他の形態
本開示は、化合物１および１．１から１．７５の水和物、溶媒和物および多形を更に包含する。本明細書において記載するキヌクリジン化合物の薬学的に許容される水和物、溶媒和物、および多形は本開示の範囲内である。本明細書において記載するキヌクリジン化合物は、非結晶質形態および／または１つもしくはそれ以上の結晶形態であってもよい。

【0079】

同位体標識化合物も本開示の範囲内である。本明細書において使用する場合、「同位体標識化合物」は、本明細書においてそれぞれ記載する医薬塩およびそのプロドラッグを含むここで開示する化合物であって、１つまたはそれ以上の原子は、自然界で認められる原子質量または質量数と通常異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられている化合物を指す。ここで開示する化合物に組み込んでもよい同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素および塩素の同位体、例えばそれぞれ、^２Ｈ、^３Ｈ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１８Ｏ、^１７Ｏ、^３１Ｐ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、および^３６Ｃｌがある。

【0080】

医学的適応
本明細書において記載するキヌクリジン化合物、およびそれを含む医薬組成物は、治療法、特に、対象における繊毛病の治療的処置において有用である。本明細書において記載する方法に従って処置することになる対象としては、脊椎動物、例えば哺乳動物がある。特定の実施形態において、哺乳動物はヒト患者である。

【0081】

第１の態様において、本発明は、それを必要とする対象において繊毛病を処置するための方法（方法１）であって、本明細書において記載する有効量のキヌクリジン化合物、例えば、式Ｉによる化合物またはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１もしくは１．１から１．７５のいずれかを対象に投与することを含む方法を提供する。対象において繊毛病を処置する方法において使用するための、例えば、方法１または１．１～１．６２において使用するための、本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式ＩまたはＩＩ～ＸＩＩＩａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１もしくは１．１から１．７５のいずれかによる化合物も提供する。対象において繊毛病を処置する方法において使用するための医薬の製造における、例えば、方法１または１．１～１．６２のいずれかにおいて使用するための医薬の製造における、本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式ＩまたはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１または１．１から１．７５のいずれかによる化合物の使用を更に提供する。

【0082】

方法１の特定の更なる実施形態において、本開示は以下を提供する：
１．１ 有効量の式ＩまたはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１のいずれかまたは１．１から１．７５のいずれかによる化合物を対象に投与することを含む方法１；
１．２ 有効量の化合物１または化合物１．１から１．７５のうちのいずれか１つもしくはそれ以上を対象に投与することを含む、方法１；
１．３ 式ＩまたはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１のいずれかまたは１．１から１．７５のいずれかによる化合物を含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、方法１または１．１～１．２のいずれか；
１．４ 化合物１または化合物１．１から１．７５のうちのいずれか１つもしくはそれ以上を含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、方法１または１．１～１．２のいずれか；
１．５ 医薬組成物は、本明細書において記載する少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を更に含む、方法１．３または１．４；
１．６ 方法は、有効量の化合物または有効量の医薬組成物を含む医薬投薬形態を投与することを含む、方法１または１．１～１．５のいずれか；
１．７ 投薬形態は、経口投薬形態（例えば、丸剤、カプセル剤、カプレット剤、錠剤、糖衣錠剤、散剤、顆粒剤、フィルム剤、トローチ剤、または液剤）である、方法１．６；
１．８ 投薬形態はチュアブル錠剤である、方法１．７；
１．９ 投薬形態は非経口投薬（例えば、医薬組成物が注射用に製剤化された）形態である、方法１．６；
１．１０ 注射は、静脈内、筋肉内、髄腔内または皮下注射であり、場合により無菌注射である、方法１．９；
１．１１ 投薬形態は、局所または直腸投薬形態である、方法１．６；
１．１２ 投薬形態は、鼻腔内投薬形態（例えば、エアロゾル）である、方法１．６；
１．１３ それを必要とする患者において、本明細書において記載する第２の活性薬剤、例えば、繊毛病を処置または阻止することができる第２の化合物を同時に投与することを更に含む、方法１または１．１から１．１２のいずれか；
１．１４ 第２の活性薬剤は、キヌクリジン化合物と同じ医薬組成物または投薬形態で投与される、方法１．１３；
１．１５ 対象は哺乳動物である、方法１、または１．１～１．１４のいずれか；
１．１６ 対象は霊長類動物である、方法１．１５；
１．１７ 対象はヒトである、方法１．１６；
１．１８ 繊毛病は、ジュベール症候群、メッケルグルーバー症候群、シニアローケン症候群、口顔面指症候群Ｉ型、レーバー先天性黒内障、バルデービードル症候群（ＢＢＳ）、アムストレーム症候群、ジューン窒息性胸部ジストロフィー、エリスファンクレフェルト症候群、センセンブレナー症候群、および原発性繊毛ジスキネジア、またはこれらの組合せからなる群から選択される疾患である、方法１または１．１～１．１７のいずれか；
１．１９ 繊毛病はＢＢＳである、方法１または１．１～１．１８のいずれか；
１．２０ 繊毛病はメッケルグルーバー症候群である、方法１．１８または１．１９；
１．２１ 繊毛病はシニアローケン症候群である、方法１．１８～１．２０のいずれか；
１．２２ 繊毛病はジュベール症候群である、方法１．１８～１．２１のいずれか；
１．２３ 繊毛病はレーバー先天性黒内障である、方法１．１８～１．２２のいずれか；
１．２４ 繊毛病は口顔面指症候群Ｉ型である、方法１．１８～１．２３のいずれか；
１．２５ 繊毛病はアムストレーム症候群である、方法１．１８～１．２４のいずれか；
１．２６ 繊毛病はエリスファンクレフェルト症候群である、方法１．１８～１．２５のいずれか；
１．２７ 繊毛病はセンセンブレナー症候群である、方法１．１８～１．２６のいずれか；
１．２８ 繊毛病は原発性繊毛ジスキネジアである、方法１．１８～１．２７のいずれか；
１．２９ 対象は、遺伝子ＢＢＳ１（ＡＲＬ）、ＢＢＳ２、ＢＢＳ３、ＢＢＳ４、ＢＢＳ５、ＢＢＳ６（ＭＫＫＳ）、ＢＢＳ７、ＢＢＳ８（ＴＴＣ８）、ＢＢＳ９（Ｂ１）、ＢＢＳ１０、ＢＢＳ１１（ＴＲＩＭ３２）、ＢＢＳ１２、ＢＢＳ１３（ＭＫＳ１）、ＢＢＳ１４（ＣＥＰ２９０）、ＢＢＳ１５（Ｃ２ＯＲＦ８６／ＦＲＩＴＺ）、ＢＢＳ１６（ＳＤＣＣＡＧ８）、ＢＢＳ１７、ＢＢＳ１８、ＢＢＳ１９、ＢＢＳ２０、およびＢＢＳ２１のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．２８のいずれか；
１．３０ 対象は、遺伝子ＢＢＳ１、ＢＢＳ２、ＢＢＳ４、ＢＢＳ５、ＢＢＳ７、ＢＢＳ８、ＢＢＳ９、ＢＢＳ１０、およびＢＢＳ１８のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１．２９；
１．３１ 対象は、遺伝子ＢＢＳ１、ＢＢＳ２、およびＢＢＳ１０のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１．３０；
１．３２ 対象は、少なくとも遺伝子ＢＢＳ２における突然変異と診断されている、方法１．３１；
１．３３ 対象は、遺伝子ＭＫＳ１、ＭＫＳ３、ＣＥＰ２９０、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＣＣ２Ｄ２ＡおよびＴＭＥＭ２１６のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．３２のいずれか；
１．３４ 対象は、少なくとも遺伝子ＭＫＳ１における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．３２のいずれか；
１．３５ 対象は、遺伝子ＴＭＥＭ２１６、ＡＨＩ１、ＮＰＨＰ１、ＣＥＰ２９０、ＴＭＥＭ６７、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＡＲＬ１３Ｂ、ＣＣ２Ｄ２Ａ、ＯＦＤ１、ＴＴＣ２１Ｂ、ＫＩＦ７、ＴＣＴＮ１、ＴＭＥＭ２３７、ＣＥＰ４１、ＴＭＥＭ１３８、Ｃ５ＯＲＦ４２、ＴＣＴＮ３、ＺＮＦ４２３、ＴＭＥＭ２３１、ＣＳＰＰ１、ＡＲＭＣ９、ＩＮＰＰ５Ｅ、ＣＸＯＲＦ５、ＩＮＶＳ、ＮＰＨＰ３、ＮＰＨＰ４、ＮＰＨＰ５（ＩＱＣＢ１）、およびＳＤＣＣＡＧ８、のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．３４のいずれか；
１．３６ 対象は、遺伝子ＴＭＥＭ２１６、ＡＨＩ１、ＮＰＨＰ１、ＣＥＰ２９０、ＴＭＥＭ６７、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＡＲＬ１３Ｂ、ＣＣ２Ｄ２Ａ、ＯＦＤ１、ＴＴＣ２１Ｂ、ＫＩＦ７、ＴＣＴＮ１、ＴＭＥＭ２３７、ＣＥＰ４１、ＴＭＥＭ１３８、Ｃ５ＯＲＦ４２、ＴＣＴＮ３、ＺＮＦ４２３、ＴＭＥＭ２３１、ＣＳＰＰ１、ＡＲＭＣ９、ＩＮＰＰ５ＥおよびＣＸＯＲＦ５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．３４のいずれか；
１．３７ 対象は、遺伝子ＴＭＥＭ２１６、ＡＨＩ１、ＮＰＨＰ１、ＣＥＰ２９０、ＴＭＥＭ６７、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＡＲＬ１３Ｂ、ＣＣ２Ｄ２Ａ、ＩＮＰＰ５ＥおよびＣＸＯＲＦ５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．３４のいずれか；
１．３８ 対象は、遺伝子ＡＨＩ１、ＡＲＬ１３Ｂ、ＩＮＰＰ５ＥおよびＯＦＤ１のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．３７のいずれか
１．３９ 対象は、遺伝子ＣＥＰ２９０、ＮＰＨＰ１、ＩＮＶＳ、ＮＰＨＰ３、ＮＰＨＰ４およびＮＰＨＰ５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．３８のいずれか。
１．４０ 対象は、遺伝子ＯＦＤ１における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．３９のいずれか、；
１．４１ 対象は、遺伝子ＧＵＣＹ２Ｄ、ＲＰＥ６５、ＳＰＡＴＡ７、ＡＩＰＬ１、ＬＣＡ５、ＲＰＧＲＩＰＬ１、ＣＲＸ、ＣＲＢ１、ＩＭＰＤ１、ＲＤ３、ＣＥＰ２９０、ＮＰＨＰ５およびＲＤＨ１２のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．４０のいずれか；
１．４２ 対象は、遺伝子ＧＵＣＹ２Ｄ、ＲＰＥ６５、ＳＰＡＴＡ７、ＡＩＰＬ１、ＬＣＡ５、ＣＲＸ、ＣＲＢ１、ＩＭＰＤ１、ＲＤ３、およびＲＤＨ１２のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．４０のいずれか；
１．４３ 対象は、遺伝子ＡＬＭＳ１における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．４２のいずれか；
１．４４ 対象は、遺伝子ＩＦＴ８０における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．４３のいずれか；
１．４５ 対象は、遺伝子ＥＶＣ１、ＥＶＣ２、ＩＦＴ１２２、ＩＦＴ４３およびＷＤＲ３５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．４４のいずれか；
１．４６ 対象は、遺伝子ＩＦＴ１２２、ＩＦＴ４３およびＷＤＲ３５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１．４５；
１．４７ 対象は、遺伝子ＥＶＣ１およびＥＶＣ２のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１．３３；
１．４８ 対象は、遺伝子ＤＮＡＩ１、ＤＮＡＨ５、ＴＸＮＤＣ３、ＤＮＡＨ１１、ＤＮＡＩ２、ＫＴＵ、ＲＳＰＨ４Ａ、ＲＳＰＨ９およびＬＲＲＣ５０のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法１または１．１～１．４７のいずれか；
１．４９ 対象は、肥満、肝臓疾患、網膜変性症、嗅覚欠陥、高脂血症、２型糖尿病、および代謝症候群から選択される共存症を患っている、方法１、または１．１～１．４８のいずれか；
１．５０ 対象はまた、糖脂質貯蔵または蓄積の疾患または障害を患っている、方法１、または１．１～１．４９のいずれか；
１．５１ 糖脂質貯蔵または蓄積の疾患または障害は、多発性嚢胞腎疾患（ＰＫＤ）（例えば、常染色体優性ＰＫＤ［ＡＤＰＫＤ］）、ガングリオシドーシス（例えば、ＧＭ１ガングリオシドーシスまたはＧＭ２ガングリオシドーシスまたはＧＭ３ガングリオシドーシス）、ゴーシェ病（例えば、１型ゴーシェ、２型ゴーシェ、または３型ゴーシェ）、ファブリー病、およびパーキンソン病（例えば、デュシェンヌ型パーキンソン病）から選択される、方法１．５０；
１．５２ 対象はまた、酵素補充療法薬（ＥＲＴ）を用いて、例えば、グルコセレブロシダーゼ（例えば、アルグルセラーゼ、イミグルセラーゼ、ベラグルセラーゼ、またはタリグルセラーゼ）、アルファ－ガラクトシダーゼ（例えば、アガルシダーゼアルファまたはアガルシダーゼベータ）、またはベータ－ガラクトシダーゼを使用して処置されており、場合によりそのような酵素はそれぞれ組換え酵素である、方法１、または１．１～１．５０のいずれか；
１．５３ 対象に、約１ｍｇから約１５０ｍｇの、例えば、５から５０ｍｇ、もしくは１０から４０ｍｇ、もしくは１０から３０ｍｇ、もしくは１０から２０ｍｇ、もしくは２０から３０ｍｇ、もしくは３０から４０ｍｇ、もしくは４０から５０ｍｇ、もしくは５から２５ｍｇ、もしくは２０から５０ｍｇ、もしくは５から１５ｍｇ、もしくは１５から３０ｍｇ、もしくは約１５ｍｇの、または２、５、１５、２５、５０、１００、もしくは１５０ｍｇから選択される、１日用量の化合物を投与する、方法１、または１．１～１．５２のいずれか；
１．５４ 対象は、例えば、０から１８歳、例えば、１から１５歳、または１から５歳、または５から１０歳、または１０から１５歳の年齢のヒト小児患者である、方法１、または１．１～１．５３のいずれか；
１．５５ 方法は、肥満、肝臓疾患（例えば、血清肝臓酵素、例えば、ＡＬＴ、ＡＳＴ、アルカリホスファターゼ、ガンマグルタミルトランスペプチダーゼの上昇）、網膜変性症、高脂血症（例えば、血清合計コレステロール、ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、またはトリグリセリドの上昇）、２型糖尿病（例えば、血清グルコースの上昇）、および嗅覚機能障害から選択される１つまたはそれ以上の症状または兆候を処置するか、減少させるか、または回復させるのに効果的である、方法１、または１．１～１．５４のいずれか；
１．５６ 方法は、視床下部、網膜および／または嗅覚上皮における繊毛機能を保つかまたは改善させるのに、例えば、繊毛の機能（例えば運動性）を保つかもしくは改善させるのに、および／または機能している繊毛の量もしくは密度を保つかもしくは改善させるのに効果的である、方法１、または１．１．～１．５５のいずれか；
１．５７ 化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、全身投与によって、例えば、非経口経路または非経口ではない経路を介して投与される、方法１、または１．１～１．５６のいずれか；
１．５８ 投与経路は経口（経腸）である、方法１．５７；
１．５９ 投与経路は、例えば注射による、例えば静脈内注射による非経口である、方法１．５７；
１．６０ 化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、局在投与によって、例えば、局所投与によって投与される、方法１、または１．１～１．５６のいずれか；
１．６１ 化合物は、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートである、方法１、または１．１～１．６０のいずれか；
１．６２ 対象に、化合物、例えば、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートの５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、または２０ｍｇの単回１日用量を、場合によりリンゴ酸塩の酸付加塩の形態で投与する、方法１、または１．１～１．６１のいずれか。

【0083】

疾患および障害、例えば、繊毛病は、１つまたはそれ以上の遺伝的突然変異と関連することが多い。本開示のいくつかの実施形態において、対象、すなわち患者は、特定の疾患または障害を有すると診断されており、特定の遺伝的突然変異、例えば、問題の疾患または障害をもたらすことが既知であるものを有するとも診断されているが、特定の患者の疾患または障害は、その人が有すると診断された特定の突然変異によって引き起こされることを立証することはできないことが多い。このように使用する場合、「特定の遺伝的突然変異を有することが診断された」という用語は、対象、すなわち患者は、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡシークエンシング、タンパク質プロファイリング、または他の好適な手段によって試験されており、問題の突然変異を有することが認められていることを意味する。しかし、以下で更に説明するように、多くの遺伝的疾患および障害は、複数の遺伝的原因（例えば、突然変異）を有することがあり、患者は、いくつかの環境下で疾患または障害をそれぞれもたらすのに十分であり得る複数の突然変異を有する場合があり、特定の突然変異が特定の患者において特定の疾患または障害をもたらすことを裏付けるための対象とはならない。

【0084】

バルデービードル症候群およびメッケルグルーバー症候群
バルデービードル症候群（ＢＢＳ）は稀な常染色体劣性多系統性遺伝的疾患である（Ｗａｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．，２０１１，２６：１０３９－１０５６を参照のこと）。米国および北ヨーロッパにおけるＢＢＳの有病率は１：１６０，０００である。ＢＢＳの主な特徴としては、杆体－錐体ジストロフィー、多指症、肥満、学習能力障害、性腺機能低下症および腎臓異常がある。ＢＢＳは、少なくとも２１個の異なる遺伝子における突然変異に起因する場合があるが、ＢＢＳ１、ＢＢＳ２、およびＢＢＳ１０における突然変異がおよそ５０％の症例を占める。ＢＢＳにおいて影響を受けた遺伝子は、高分子複合体であるＢＢＳｏｍｅアセンブリに必須であり、このＢＢＳｏｍｅのアセンブリは基底小体の構成要素であり、一次繊毛の形成、維持、および機能に関与している。

【0085】

メッケルグルーバー症候群は、他の繊毛病と表現型的にオーバーラップする常染色体劣性致死性奇形である（Ｗａｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．、同上）。臨床的特徴としては、後頭脳ヘルニアおよび他の後側蓋窩欠陥、嚢胞性異形成腎臓、肝胆管増殖および多指症がある。メッケルグルーバー症候群は、ＭＫＳ１、ＭＫＳ３、ＣＥＰ２９０、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＣＣ２Ｄ２ＡおよびＴＭＥＭ２１６を含むいくつかの遺伝子における突然変異によって引き起こされる。ＭＫＳ１における突然変異もＢＢＳに関与している。

【0086】

したがって、実施形態において、繊毛病は、ＢＢＳおよびメッケルグルーバー症候群から選択される。１つの実施形態において、繊毛病はＢＢＳである。別の実施形態において、繊毛病はメッケルグルーバー症候群である。

【0087】

ジュベール症候群およびシニアローケン症候群
ジュベール症候群は、小脳に影響を与える稀な常染色体劣性遺伝的障害である。筋緊張低下、運動失調、心理運動遅延、不規則な呼吸パターンおよび動眼失行によって特徴付けられる。ジュベール症候群は、腎癆および進行性の眼疾患によって特徴付けられる稀な常染色体劣性障害であるシニアローケン症候群と表現型および遺伝子型のオーバーラップを共有している（Ｗａｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．、同上）。

【0088】

したがって、実施形態において、繊毛病は、ジュベール症候群およびシニアローケン症候群から選択される。１つの実施形態において、繊毛病はジュベール症候群である。別の実施形態において、繊毛病はシニアローケン症候群である。

【0089】

口顔面指症候群Ｉ型
口顔面指症候群１型はパピヨンリーグおよびプソーム症候群とも称され、稀なＸ連鎖性先天性障害である。ＯＦＤ１遺伝子における突然変異は、口顔面指症候群１型患者において記載している。ＯＦＤ１は、一次繊毛の起点における基底小体に局在する中心体タンパク質をコードし、ＯＦＤ１は、ヒト遺伝細胞構造内の中心体と基底小体の両方に局在する。毛様体形成の低下は、疾患関連突然変異とともに観察されている（Ｗａｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．、同上）。

【0090】

レーバー先天性黒内障
レーバー先天性黒内障は、重度の網膜ジストロフィーであり、生後１年以内に生じる。多くの場合、視覚の機能は不良であり、眼振、瞳孔応答の低下または消失寸前の（near-absent）瞳孔応答、羞明、遠視および円錐角膜を伴うことが多い（Ｗａｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．、同上）。

【0091】

アムストレーム症候群
アムストレーム症候群は、錐体桿体ジストロフィー、肥満、進行性の音感難聴および拡張型心筋症を含む多臓器機能障害によって特徴付けられる稀な常染色体劣性疾患である。アムストレーム症候群は、中心小体および基底小体の近位末端に特に局在しているタンパク質をコードする遺伝子ＡＬＭＳ１における突然変異によって引き起こされる（Ｗａｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．、同上）。ＡＬＭＳ１タンパク質は、繊毛機能、細胞周期制御および細胞内輸送に関与している。

【0092】

ジューン窒息性胸部ジストロフィー
ジューン窒息性胸部ジストロフィー（ジューン症候群）は、稀な常染色体劣性軟骨異形成症であり、子供の軟骨および骨の発達過程に影響を与える。ジューン症候群は、ＩＦＴ８０における突然変異によって引き起こされる場合があり、ＩＦＴ８０はネズミ軟骨細胞株における繊毛の基底小体に局在することが示されている（Ｗａｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．、同上）。

【0093】

エリスファンクレフェルト症候群およびセンセンブレナー症候群
エリスファンクレフェルト症候群は、軸後多指症、短い肋骨、口蓋裂、および手根骨の奇形を含む骨格異常によって特徴付けられる稀な軟骨外胚葉異形成症である。ＥＶＣ１またはＥＶＣ２における突然変異によって引き起こされる場合がある。ＥＶＣタンパク質は、軟骨細胞の一次繊毛の基部に局在することが示されている（Ｗａｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．、同上）。センセンブレナー症候群（頭蓋外胚葉異形成症としても知られる）は、エリスファンクレフェルト症候群と類似している常染色体劣性障害である。それは、ＩＦＴ１２２、ＩＦＴ４３またはＷＤＲ３５における突然変異によって引き起こされる場合があり、これら全ては繊毛タンパク質をコードしている（Ｗａｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．、同上）。

【0094】

原発性繊毛ジスキネジア
原発性繊毛ジスキネジア（カルタゲナー症候群としても知られる）は、気道（下部および上部、副鼻腔、エウスタキー管、中耳）、卵管、および精子細胞の鞭毛の内壁を覆う繊毛の作用において欠陥をもたらす稀な常染色体劣性障害である。

【0095】

本発明の方法は、繊毛病と診断されているが、病態と関連する典型的な症状をまだ経験していない対象にとって有益な場合がある。本発明の方法は、例えば、繊毛病をもたらすことが既知の対象または対象の家系における突然変異のために繊毛病を発症するリスクがある対象にとっても有益な場合がある。本明細書において記載する方法の１つの実施形態において、対象は、前記繊毛病を発症するリスクがあると診断されており、方法は、対象における繊毛病の発病および／または発症を阻止するかまたは遅延させる。実施形態において、対象は、本明細書において記載する遺伝子における突然変異を有するという理由で、前記繊毛病を発症するリスクがあると診断されている。

【0096】

第２の態様において、本発明は、繊毛病に罹患している対象における、肥満、肝臓疾患、網膜変性症、嗅覚機能障害、高脂血症、２型糖尿病、および代謝症候群から選択される疾患または障害を処置するための方法（方法２）であって、有効量の本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式ＩまたはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１または１．１から１．７５のいずれかによる化合物を対象に投与することを含む方法を提供する。繊毛病に罹患している対象における肥満、肝臓疾患、網膜変性症、嗅覚機能障害、高脂血症、２型糖尿病、およびメタボリック症候群から選択される疾患または障害を処置するための方法において使用するための、例えば、方法２または２．１～２．６１のいずれかにおいて使用するための、本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式Ｉによる化合物またはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１または１．１から１．７５のいずれかも提供する。繊毛病に罹患している対象における肥満、肝臓疾患、網膜変性症、嗅覚機能障害、高脂血症、２型糖尿病、およびメタボリック症候群から選択される疾患または障害を処置するための方法において使用するための医薬の製造における、例えば、方法２または２．１～２．６１のいずれかにおいて使用するための医薬の製造における、本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式Ｉによる化合物またはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１または１．１から１．７５のいずれかの使用を更に提供する。

【0097】

方法２の特定の更なる実施形態において、本開示は以下を提供する：
２．１ 有効量の式ＩまたはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１のいずれかまたは１．１から１．７５のいずれかによる化合物を対象に投与することを含む、方法２；
２．２ 有効量の化合物１または化合物１．１から１．７５のうちのいずれか１つもしくはそれ以上を対象に投与することを含む、方法２、；
２．３ 式ＩまたはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１のいずれかまたは１．１から１．７５のいずれかによる化合物を含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、方法２または２．１～２．２のいずれか；
２．４ 化合物１または化合物１．１から１．７５のうちのいずれか１つもしくはそれ以上を含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、方法２または２．１～２．２のいずれか；
２．５ 医薬組成物は、本明細書において記載する少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を更に含む、方法２．３または２．４；
２．６ 方法は、有効量の化合物または有効量の医薬組成物を含む医薬投薬形態を投与することを含む、方法２または２．１～２．５のいずれか；
２．７ 投薬形態は、経口投薬形態（例えば、丸剤、カプセル剤、カプレット剤、錠剤、糖衣錠剤、散剤、顆粒剤、フィルム剤、トローチ剤、または液剤）である、方法２．６；
２．８ 投薬形態はチュアブル錠剤である、方法２．７；
２．９ 投薬形態は非経口投薬（例えば、医薬組成物が注射用に製剤化された）形態である、方法２．６；
２．１０ 注射は、静脈内、筋肉内、髄腔内または皮下注射であり、場合により無菌注射である、方法２．９；
２．１１ 投薬形態は、局所または直腸投薬形態である、方法２．６；
２．１２ 投薬形態は、鼻腔内投薬形態（例えば、エアロゾル）である、方法２．６；
２．１３ それを必要とする患者において、本明細書において記載する第２の活性薬剤、例えば、繊毛病を処置または阻止することができる第２の化合物を同時に投与することを更に含む、方法２または２．１から２．１２のいずれか；
２．１４ 第２の活性薬剤は、キヌクリジン化合物と同じ医薬組成物または投薬形態で投与される、方法２．１３；
２．１５ 対象は哺乳動物である、方法２、または２．１～２．１４のいずれか；
２．１６ 対象は霊長類動物である、方法２．１５；
２．１７ 対象はヒトである、方法２．１６；
２．１８ 繊毛病は、ジュベール症候群、メッケルグルーバー症候群、シニアローケン症候群、口顔面指症候群Ｉ型、レーバー先天性黒内障、バルデービードル症候群（ＢＢＳ）、アムストレーム症候群、ジューン窒息性胸部ジストロフィー、エリスファンクレフェルト症候群、センセンブレナー症候群、および原発性繊毛ジスキネジア、またはこれらの組合せからなる群から選択される疾患である、方法２または２．１～２．１７のいずれか；
２．１９ 繊毛病はＢＢＳである、方法２または２．１～２．１８のいずれか；
２．２０ 繊毛病はメッケルグルーバー症候群である、方法２．１８または２．１９；
２．２１ 繊毛病はシニアローケン症候群である、方法２．１８～２．２０のいずれか；
２．２２ 繊毛病はジュベール症候群である、方法２．１８～２．２１のいずれか；
２．２３ 繊毛病はレーバー先天性黒内障である、方法２．１８～２．２２のいずれか；
２．２４ 繊毛病は口顔面指症候群Ｉ型である、方法２．１８～２．２３のいずれか；
２．２５ 繊毛病はアムストレーム症候群である、方法２．１８～２．２４のいずれか；
２．２６ 繊毛病はエリスファンクレフェルト症候群である、方法２．１８～２．２５のいずれか；
２．２７ 繊毛病はセンセンブレナー症候群である、方法２．１８～２．２６のいずれか；
２．２８ 繊毛病は原発性繊毛ジスキネジアである、方法２．１８～２．２７のいずれか；
２．２９ 対象は、遺伝子ＢＢＳ１（ＡＲＬ）、ＢＢＳ２、ＢＢＳ３、ＢＢＳ４、ＢＢＳ５、ＢＢＳ６（ＭＫＫＳ）、ＢＢＳ７、ＢＢＳ８（ＴＴＣ８）、ＢＢＳ９（Ｂ１）、ＢＢＳ１０、ＢＢＳ１１（ＴＲＩＭ３２）、ＢＢＳ１２、ＢＢＳ１３（ＭＫＳ１）、ＢＢＳ１４（ＣＥＰ２９０）、ＢＢＳ１５（Ｃ２ＯＲＦ８６／ＦＲＩＴＺ）、ＢＢＳ１６（ＳＤＣＣＡＧ８）、ＢＢＳ１７、ＢＢＳ１８、ＢＢＳ１９、ＢＢＳ２０、およびＢＢＳ２１のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．２８のいずれか；
２．３０ 対象は、遺伝子ＢＢＳ１、ＢＢＳ２、ＢＢＳ４、ＢＢＳ５、ＢＢＳ７、ＢＢＳ８、ＢＢＳ９、ＢＢＳ１０、およびＢＢＳ１８のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２．２９；
２．３１ 対象は、遺伝子ＢＢＳ１、ＢＢＳ２、およびＢＢＳ１０のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２．３０；
２．３２ 対象は、少なくとも遺伝子ＢＢＳ２における突然変異と診断されている、方法２．３１；
２．３３ 対象は、遺伝子ＭＫＳ１、ＭＫＳ３、ＣＥＰ２９０、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＣＣ２Ｄ２ＡおよびＴＭＥＭ２１６のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．３２のいずれか；
２．３４ 対象は、少なくとも遺伝子ＭＫＳ１における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．３２のいずれか；
２．３５ 対象は、遺伝子ＴＭＥＭ２１６、ＡＨＩ１、ＮＰＨＰ１、ＣＥＰ２９０、ＴＭＥＭ６７、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＡＲＬ１３Ｂ、ＣＣ２Ｄ２Ａ、ＯＦＤ１、ＴＴＣ２１Ｂ、ＫＩＦ７、ＴＣＴＮ１、ＴＭＥＭ２３７、ＣＥＰ４１、ＴＭＥＭ１３８、Ｃ５ＯＲＦ４２、ＴＣＴＮ３、ＺＮＦ４２３、ＴＭＥＭ２３１、ＣＳＰＰ１、ＡＲＭＣ９、ＩＮＰＰ５Ｅ、ＣＸＯＲＦ５、ＩＮＶＳ、ＮＰＨＰ３、ＮＰＨＰ４、ＮＰＨＰ５（ＩＱＣＢ１）、およびＳＤＣＣＡＧ８、のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．３４のいずれか；
２．３６ 対象は、遺伝子ＴＭＥＭ２１６、ＡＨＩ１、ＮＰＨＰ１、ＣＥＰ２９０、ＴＭＥＭ６７、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＡＲＬ１３Ｂ、ＣＣ２Ｄ２Ａ、ＯＦＤ１、ＴＴＣ２１Ｂ、ＫＩＦ７、ＴＣＴＮ１、ＴＭＥＭ２３７、ＣＥＰ４１、ＴＭＥＭ１３８、Ｃ５ＯＲＦ４２、ＴＣＴＮ３、ＺＮＦ４２３、ＴＭＥＭ２３１、ＣＳＰＰ１、ＡＲＭＣ９、ＩＮＰＰ５ＥおよびＣＸＯＲＦ５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．３４のいずれか；
２．３７ 対象は、遺伝子ＴＭＥＭ２１６、ＡＨＩ１、ＮＰＨＰ１、ＣＥＰ２９０、ＴＭＥＭ６７、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＡＲＬ１３Ｂ、ＣＣ２Ｄ２Ａ、ＩＮＰＰ５ＥおよびＣＸＯＲＦ５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．３４のいずれか；
２．３８ 対象は、遺伝子ＡＨＩ１、ＡＲＬ１３Ｂ、ＩＮＰＰ５ＥおよびＯＦＤ１のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．３７のいずれか
２．３９ 対象は、遺伝子ＣＥＰ２９０、ＮＰＨＰ１、ＩＮＶＳ、ＮＰＨＰ３、ＮＰＨＰ４およびＮＰＨＰ５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．３８のいずれか。
２．４０ 対象は、遺伝子ＯＦＤ１における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．３９のいずれか；
２．４１ 対象は、遺伝子ＧＵＣＹ２Ｄ、ＲＰＥ６５、ＳＰＡＴＡ７、ＡＩＰＬ１、ＬＣＡ５、ＲＰＧＲＩＰＬ１、ＣＲＸ、ＣＲＢ１、ＩＭＰＤ１、ＲＤ３、ＣＥＰ２９０、ＮＰＨＰ５およびＲＤＨ１２のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．４０のいずれか；
２．４２ 対象は、遺伝子ＧＵＣＹ２Ｄ、ＲＰＥ６５、ＳＰＡＴＡ７、ＡＩＰＬ１、ＬＣＡ５、ＣＲＸ、ＣＲＢ１、ＩＭＰＤ１、ＲＤ３、およびＲＤＨ１２のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．４０のいずれか；
２．４３ 対象は、遺伝子ＡＬＭＳ１における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．４２のいずれか；
２．４４ 対象は、遺伝子ＩＦＴ８０における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．４３のいずれか；
２．４５ 対象は、遺伝子ＥＶＣ１、ＥＶＣ２、ＩＦＴ１２２、ＩＦＴ４３およびＷＤＲ３５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．４４のいずれか；
２．４６ 対象は、遺伝子ＩＦＴ１２２、ＩＦＴ４３およびＷＤＲ３５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２．４５；
２．４７ 対象は、遺伝子ＥＶＣ１およびＥＶＣ２のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２．３３；
２．４８ 対象は、遺伝子ＤＮＡＩ１、ＤＮＡＨ５、ＴＸＮＤＣ３、ＤＮＡＨ１１、ＤＮＡＩ２、ＫＴＵ、ＲＳＰＨ４Ａ、ＲＳＰＨ９およびＬＲＲＣ５０のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法２または２．１～２．４７のいずれか；
２．４９ 対象はまた、糖脂質貯蔵または蓄積の疾患または障害を患っている、方法２、または２．１～２．４８のいずれか；
２．５０ 糖脂質貯蔵または蓄積の疾患または障害は、多発性嚢胞腎疾患（ＰＫＤ）（例えば、常染色体優性ＰＫＤ［ＡＤＰＫＤ］）、ガングリオシドーシス（例えば、ＧＭ１ガングリオシドーシスまたはＧＭ２ガングリオシドーシスまたはＧＭ３ガングリオシドーシス）、ゴーシェ病（例えば、１型ゴーシェ、２型ゴーシェ、または３型ゴーシェ）、ファブリー病、およびパーキンソン病（例えば、デュシェンヌ型パーキンソン病）から選択される、方法２．４９；
２．５１ 対象はまた、酵素補充療法薬（ＥＲＴ）を用いて、例えば、グルコセレブロシダーゼ（例えば、アルグルセラーゼ、イミグルセラーゼ、ベラグルセラーゼ、またはタリグルセラーゼ）、アルファ－ガラクトシダーゼ（例えば、アガルシダーゼアルファまたはアガルシダーゼベータ）、またはベータ－ガラクトシダーゼを使用して処置されており、場合によりそのような酵素はそれぞれ組換え酵素である、方法２、または２．１～２．４９のいずれか；
２．５２ 対象に、約１ｍｇから約１５０ｍｇの、例えば、５から５０ｍｇ、もしくは１０から４０ｍｇ、もしくは１０から３０ｍｇ、もしくは１０から２０ｍｇ、もしくは２０から３０ｍｇ、もしくは３０から４０ｍｇ、もしくは４０から５０ｍｇ、もしくは５から２５ｍｇ、もしくは２０から５０ｍｇ、もしくは５から１５ｍｇ、もしくは１５から３０ｍｇ、もしくは約１５ｍｇの、または２、５、１５、２５、５０、１００、もしくは１５０ｍｇから選択される、１日用量の化合物を投与する、方法２、または２．１～２．５１のいずれか；
２．５３ 対象は、例えば、０から１８歳、例えば、１から１５歳、または１から５歳、または５から１０歳、または１０から１５歳の年齢のヒト小児患者である、方法２、または２．１～２．５２のいずれか；
２．５４ 方法は、肥満、肝臓疾患（例えば、血清肝臓酵素、例えば、ＡＬＴ、ＡＳＴ、アルカリホスファターゼ、ガンマグルタミルトランスペプチダーゼの上昇）、網膜変性症、高脂血症（例えば、血清合計コレステロール、ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、またはトリグリセリドの上昇）、２型糖尿病（例えば、血清グルコースの上昇）、および嗅覚機能障害から選択される１つまたはそれ以上の症状または兆候を処置するか、減少させるか、または回復させるのに効果的である、方法２、または２．１～２．５３のいずれか；
２．５５ 方法は、視床下部、網膜および／または嗅覚上皮における繊毛機能を保つかまたは改善させるのに、例えば、繊毛の機能（例えば運動性）を保つかもしくは改善させるのに、および／または機能している繊毛の量もしくは密度を保つかもしくは改善させるのに効果的である、方法２、または２．１～２．５４のいずれか；
２．５６ 化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、全身投与によって、例えば、非経口経路または非経口ではない経路を介して投与される、方法２、または２．１～２．５５のいずれか；
２．５７ 投与経路は経口（経腸）である、方法２．５６；
２．５８ 投与経路は、例えば注射による、例えば静脈内注射による非経口である、方法２．５６；
２．５９ 化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、局在投与によって、例えば、局所投与によって投与される、方法２、または２．１～２．５５のいずれか；
２．６０ 化合物は、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートである、方法２、または２．１～２．５９のいずれか；
２．６１ 対象に、化合物、例えば、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートの５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、または２０ｍｇの単回１日用量を、場合によりリンゴ酸塩の酸付加塩の形態で投与する、方法２、または２．１～２．６０のいずれか。

【0098】

第３の態様において、本発明は、それを必要とする対象、場合により繊毛病を有する対象において繊毛機能を保存または改善するための方法（方法３）であって、有効量の本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式ＩまたはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１または１．１から１．７５のいずれかによる化合物を対象に投与することを含む方法を提供する。それを必要とする対象において繊毛機能を保存または改善するための方法において使用するための、例えば、方法３または３．１～３．６２のいずれかにおいて使用するための、本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式Ｉによる化合物またはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１または１．１から１．７５のいずれかも提供する。それを必要とする対象において繊毛機能を保存することまたは改善するための方法において使用するための医薬の製造における、例えば、方法３または３．１～３．６２のいずれかにおいて使用するための医薬の製造における、本明細書において記載するキヌクリジン化合物、例えば、式Ｉによる化合物またはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１または１．１から１．７５のいずれかの使用を更に提供する。

【0099】

方法３の特定の更なる実施形態において、本開示は以下を提供する：
３．１ 有効量の式ＩまたはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１のいずれかまたは１．１から１．７５のいずれかによる化合物を対象に投与することを含む、方法３；
３．２ 有効量の化合物１または化合物１．１から１．７５のうちのいずれか１つもしくはそれ以上を対象に投与することを含む、方法３；
３．３ 式ＩまたはＩＩ～ＸＩＩ、Ｉａ～ＸＩＩａもしくはＩｂ～ＸＩＩｂのいずれか、または化合物１のいずれかまたは１．１から１．７５のいずれかによる化合物を含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、方法３または３．１～３．２のいずれか；
３．４ 化合物１または化合物１．１から１．７５のうちのいずれか１つもしくはそれ以上を含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、方法３または３．１～３．２のいずれか；
３．５ 医薬組成物は、本明細書において記載する少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を更に含む、方法３．３または３．４；
３．６ 有効量の化合物または有効量の医薬組成物を含む医薬投薬形態を投与することを含む、方法３または３．１～３．５のいずれか；
３．７ 投薬形態は、経口投薬形態（例えば、丸剤、カプセル剤、カプレット剤、錠剤、糖衣錠剤、散剤、顆粒剤、フィルム剤、トローチ剤、または液剤）である、方法３．６；
３．８ 投薬形態はチュアブル錠剤である、方法３．７；
３．９ 投薬形態は非経口投薬（例えば、医薬組成物が注射用に製剤化された）形態である、方法３．６；
３．１０ 注射は、静脈内、筋肉内、髄腔内または皮下注射であり、場合により無菌注射である、方法３．９；
３．１１ 投薬形態は局所または直腸投薬形態である、方法３．６；
３．１２ 投薬形態は鼻腔内投薬形態（例えば、エアロゾル）である、方法３．６；
３．１３ それを必要とする患者において、本明細書において記載する第２の活性薬剤、例えば、繊毛病を処置または阻止することができる第２の化合物を同時に投与することを更に含む、方法３または３．１から３．１２のいずれか；
３．１４ 第２の活性薬剤は、キヌクリジン化合物と同じ医薬組成物または投薬形態で投与される、方法３．１３；
３．１５ 対象は哺乳動物である、方法３、または３．１～３．１４のいずれか；
３．１６ 対象は霊長類動物である、方法３．１５；
３．１７ 対象はヒトである、方法３．１６；
３．１８ 対象は、繊毛病、例えば、ジュベール症候群、メッケルグルーバー症候群、シニアローケン症候群、口顔面指症候群Ｉ型、レーバー先天性黒内障、バルデービードル症候群（ＢＢＳ）、アムストレーム症候群、ジューン窒息性胸部ジストロフィー、エリスファンクレフェルト症候群、センセンブレナー症候群、および原発性繊毛ジスキネジア、またはこれらの組合せからなる群から選択される疾患を患っている、方法３または３．１～３．１７のいずれか；
３．１９ 繊毛病はＢＢＳである、方法３．１８；
３．２０ 繊毛病はメッケルグルーバー症候群である、方法３．１８または３．１９；
３．２１ 繊毛病はシニアローケン症候群である、方法３．１８～３．２０のいずれか；
３．２２ 繊毛病はジュベール症候群である、方法３．１８～３．２１のいずれか；
３．２３ 繊毛病はレーバー先天性黒内障である、方法３．１８～３．２２のいずれか；
３．２４ 繊毛病は口顔面指症候群Ｉ型である、方法３．１８～３．２３のいずれか；
３．２５ 繊毛病はアムストレーム症候群である、方法３．１８～３．２４のいずれか；
３．２６ 繊毛病はエリスファンクレフェルト症候群である、方法３．１８～３．２５のいずれか；
３．２７ 繊毛病はセンセンブレナー症候群である、方法３．１８～３．２６のいずれか；
３．２８ 繊毛病は原発性繊毛ジスキネジアである、方法３．１８～３．２７のいずれか；
３．２９ 対象は、遺伝子ＢＢＳ１（ＡＲＬ）、ＢＢＳ２、ＢＢＳ３、ＢＢＳ４、ＢＢＳ５、ＢＢＳ６（ＭＫＫＳ）、ＢＢＳ７、ＢＢＳ８（ＴＴＣ８）、ＢＢＳ９（Ｂ１）、ＢＢＳ１０、ＢＢＳ１１（ＴＲＩＭ３２）、ＢＢＳ１２、ＢＢＳ１３（ＭＫＳ１）、ＢＢＳ１４（ＣＥＰ２９０）、ＢＢＳ１５（Ｃ２ＯＲＦ８６／ＦＲＩＴＺ）、ＢＢＳ１６（ＳＤＣＣＡＧ８）、ＢＢＳ１７、ＢＢＳ１８、ＢＢＳ１９、ＢＢＳ２０、およびＢＢＳ２１のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．２８のいずれか；
３．３０ 対象は、遺伝子ＢＢＳ１、ＢＢＳ２、ＢＢＳ４、ＢＢＳ５、ＢＢＳ７、ＢＢＳ８、ＢＢＳ９、ＢＢＳ１０、およびＢＢＳ１８のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３．２９；
３．３１ 対象は、遺伝子ＢＢＳ１、ＢＢＳ２、およびＢＢＳ１０のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３．３０；
３．３２ 対象は、少なくとも遺伝子ＢＢＳ２における突然変異と診断されている、方法３．３１；
３．３３ 対象は、遺伝子ＭＫＳ１、ＭＫＳ３、ＣＥＰ２９０、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＣＣ２Ｄ２ＡおよびＴＭＥＭ２１６のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．３２のいずれか；
３．３４ 対象は、少なくとも遺伝子ＭＫＳ１における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．３２のいずれか；
３．３５ 対象は、遺伝子ＴＭＥＭ２１６、ＡＨＩ１、ＮＰＨＰ１、ＣＥＰ２９０、ＴＭＥＭ６７、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＡＲＬ１３Ｂ、ＣＣ２Ｄ２Ａ、ＯＦＤ１、ＴＴＣ２１Ｂ、ＫＩＦ７、ＴＣＴＮ１、ＴＭＥＭ２３７、ＣＥＰ４１、ＴＭＥＭ１３８、Ｃ５ＯＲＦ４２、ＴＣＴＮ３、ＺＮＦ４２３、ＴＭＥＭ２３１、ＣＳＰＰ１、ＡＲＭＣ９、ＩＮＰＰ５Ｅ、ＣＸＯＲＦ５、ＩＮＶＳ、ＮＰＨＰ３、ＮＰＨＰ４、ＮＰＨＰ５（ＩＱＣＢ１）、およびＳＤＣＣＡＧ８のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．３４のいずれか；
３．３６ 対象は、遺伝子ＴＭＥＭ２１６、ＡＨＩ１、ＮＰＨＰ１、ＣＥＰ２９０、ＴＭＥＭ６７、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＡＲＬ１３Ｂ、ＣＣ２Ｄ２Ａ、ＯＦＤ１、ＴＴＣ２１Ｂ、ＫＩＦ７、ＴＣＴＮ１、ＴＭＥＭ２３７、ＣＥＰ４１、ＴＭＥＭ１３８、Ｃ５ＯＲＦ４２、ＴＣＴＮ３、ＺＮＦ４２３、ＴＭＥＭ２３１、ＣＳＰＰ１、ＡＲＭＣ９、ＩＮＰＰ５ＥおよびＣＸＯＲＦ５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．３４のいずれか；
３．３７ 対象は、遺伝子ＴＭＥＭ２１６、ＡＨＩ１、ＮＰＨＰ１、ＣＥＰ２９０、ＴＭＥＭ６７、ＲＰＧＲＩＰ１Ｌ、ＡＲＬ１３Ｂ、ＣＣ２Ｄ２Ａ、ＩＮＰＰ５ＥおよびＣＸＯＲＦ５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．３４のいずれか；
３．３８ 対象は、遺伝子ＡＨＩ１、ＡＲＬ１３Ｂ、ＩＮＰＰ５ＥおよびＯＦＤ１のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．３７のいずれか
３．３９ 対象は、遺伝子ＣＥＰ２９０、ＮＰＨＰ１、ＩＮＶＳ、ＮＰＨＰ３、ＮＰＨＰ４およびＮＰＨＰ５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．３８のいずれか。
３．４０ 対象は、遺伝子ＯＦＤ１における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．３９のいずれか；
３．４１ 対象は、遺伝子ＧＵＣＹ２Ｄ、ＲＰＥ６５、ＳＰＡＴＡ７、ＡＩＰＬ１、ＬＣＡ５、ＲＰＧＲＩＰＬ１、ＣＲＸ、ＣＲＢ１、ＩＭＰＤ１、ＲＤ３、ＣＥＰ２９０、ＮＰＨＰ５およびＲＤＨ１２のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．４０のいずれか；
３．４２ 対象は、遺伝子ＧＵＣＹ２Ｄ、ＲＰＥ６５、ＳＰＡＴＡ７、ＡＩＰＬ１、ＬＣＡ５、ＣＲＸ、ＣＲＢ１、ＩＭＰＤ１、ＲＤ３、およびＲＤＨ１２のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．４０のいずれか；
３．４３ 対象は、遺伝子ＡＬＭＳ１における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．４２のいずれか；
３．４４ 対象は、遺伝子ＩＦＴ８０における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．４３のいずれか；
３．４５ 対象は、遺伝子ＥＶＣ１、ＥＶＣ２、ＩＦＴ１２２、ＩＦＴ４３およびＷＤＲ３５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．４４のいずれか；
３．４６ 対象は、遺伝子ＩＦＴ１２２、ＩＦＴ４３およびＷＤＲ３５のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３．４５；
３．４７ 対象は、遺伝子ＥＶＣ１およびＥＶＣ２のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３．３３；
３．４８ 対象は、遺伝子ＤＮＡＩ１、ＤＮＡＨ５、ＴＸＮＤＣ３、ＤＮＡＨ１１、ＤＮＡＩ２、ＫＴＵ、ＲＳＰＨ４Ａ、ＲＳＰＨ９およびＬＲＲＣ５０のうちの１つまたはそれ以上における突然変異と診断されている、方法３または３．１～３．４７のいずれか；
３．４９ 対象はまた、糖脂質貯蔵または蓄積の疾患または障害を患っている、方法３、または３．１～３．４８のいずれか；
３．５０ 糖脂質貯蔵または蓄積の疾患または障害は、多発性嚢胞腎疾患（ＰＫＤ）（例えば、常染色体優性ＰＫＤ［ＡＤＰＫＤ］）、ガングリオシドーシス（例えば、ＧＭ１ガングリオシドーシスまたはＧＭ２ガングリオシドーシスまたはＧＭ３ガングリオシドーシス）、ゴーシェ病（例えば、１型ゴーシェ、２型ゴーシェ、または３型ゴーシェ）、ファブリー病、およびパーキンソン病（例えば、デュシェンヌ型パーキンソン病）から選択される、方法３．４９；
３．５１ 対象はまた、酵素補充療法薬（ＥＲＴ）を用いて、例えば、グルコセレブロシダーゼ（例えば、アルグルセラーゼ、イミグルセラーゼ、ベラグルセラーゼ、またはタリグルセラーゼ）、アルファ－ガラクトシダーゼ（例えば、アガルシダーゼアルファまたはアガルシダーゼベータ）、またはベータ－ガラクトシダーゼを使用して処置されており、場合によりそのような酵素はそれぞれ組換え酵素である、方法３、または３．１～３．４９のいずれか；
３．５２ 対象に、約１ｍｇから約１５０ｍｇの、例えば、５から５０ｍｇ、もしくは１０から４０ｍｇ、もしくは１０から３０ｍｇ、もしくは１０から２０ｍｇ、もしくは２０から３０ｍｇ、もしくは３０から４０ｍｇ、もしくは４０から５０ｍｇ、もしくは５から２５ｍｇ、もしくは２０から５０ｍｇ、もしくは５から１５ｍｇ、もしくは１５から３０ｍｇ、もしくは約１５ｍｇの、または２、５、１５、２５、５０、１００、もしくは１５０ｍｇから選択される、１日用量の化合物を投与する、方法３、または３．１～３．５１のいずれか；
３．５３ 対象は、例えば、０から１８歳、例えば、１から１５歳、または１から５歳、または５から１０歳、または１０から１５歳の年齢のヒト小児患者である、方法３、または３．１～３．５２のいずれか；
３．５４ 対象は、肥満、肝臓疾患、網膜変性症、嗅覚の欠陥、高脂血症、２型糖尿病、および代謝症候群から選択される共存症を患っている、方法３、または３．１～３．５３のいずれか；
３．５５ 方法は、肥満、肝臓疾患（例えば、血清肝臓酵素、例えば、ＡＬＴ、ＡＳＴ、アルカリホスファターゼ、ガンマグルタミルトランスペプチダーゼの上昇）、網膜変性症、高脂血症（例えば、血清合計コレステロール、ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、またはトリグリセリドの上昇）、２型糖尿病（例えば、血清グルコースの上昇）、および嗅覚機能障害から選択される１つまたはそれ以上の症状または兆候を処置するか、減少させるか、または回復させるのに効果的である、方法３、または３．１～３．５４のいずれか；
３．５６ 方法は、視床下部、網膜および／または嗅覚上皮における繊毛機能を保つかまたは改善させるのに、例えば、繊毛の機能（例えば運動性）を保つかもしくは改善させるのに、および／または機能している繊毛の量もしくは密度を保つかもしくは改善させるのに効果的である、方法３、または３．１～３．５５のいずれか；
３．５７ 化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、全身投与によって、例えば、非経口経路または非経口ではない経路を介して投与される、方法３、または３．１～３．５６のいずれか；
３．５８ 投与経路は経口（経腸）である、方法３．５７；
３．５９ 投与経路は、例えば注射による、例えば静脈内注射による非経口である、方法３．５７；
３．６０ 化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、局在投与によって、例えば、局所投与によって投与される、方法３、または３．１～３．５６のいずれか；
３．６１ 化合物は、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートである、方法３、または３．１～３．６０のいずれか；
３．６２ 対象に、化合物、例えば、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートの５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、または２０ｍｇの単回１日用量を、場合によりリンゴ酸塩の酸付加塩の形態で投与する、方法３、または３．１～３．６１のいずれか。

【0100】

医薬組成物
本開示はまた、例えば、本明細書において開示する方法による使用のための、本明細書において記載する少なくとも１つのキヌクリジン化合物および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。薬学的に許容される賦形剤は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ ｅｄｉｔ．１９８５）に記載されているものを含む当技術分野において既知の任意の賦形剤であってもよい。ここで開示する化合物の医薬組成物は、当技術分野において既知の従来の手段、例えば、少なくとも１つのここで開示する化合物と薬学的に許容される賦形剤とを混合することによって調製してもよい。

【0101】

したがって、１つの態様において、本発明は、本明細書において記載するキヌクリジン化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬投薬形態であって、投薬形態は、投与する場合に（例えば、経口投与する場合に）、繊毛病を処置するのに十分な量の前記化合物を提供するように製剤化されている医薬投薬形態を提供する。

【0102】

本発明の医薬組成物または投薬形態は、薬剤および別の担体、例えば、不活性なまたは活性を有する化合物または組成物、例えば、検出可能な薬剤、標識、アジュバント、希釈剤、結合剤、安定化剤、緩衝液、塩、親油性溶媒、保存剤、アジュバントなどを含んでいてもよい。担体としては、医薬賦形剤および添加剤、例えば、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、脂質、および炭水化物（例えば、単糖、二糖、三糖、四糖、およびオリゴ糖を含む糖；誘導体化糖、例えばアルジトール、アルドン酸、エステル化糖など；および多糖または糖ポリマー）もあり、これらは、単独または１から９９．９９重量または体積％の組合せを含む、単独でまたは組合せで存在していてもよい。例示的なタンパク質賦形剤としては、血清アルブミン、例えば、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、組換えヒトアルブミン（ｒＨＡ）、ゼラチン、カゼインなどがある。緩衝能力においても機能することができる代表的なアミノ酸／抗体構成成分としては、アラニン、グリシン、アルギニン、ベタイン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、システイン、リシン、ロイシン、イソロイシン、バリン、メチオニン、フェニルアラニン、アスパルテームなどがある。炭水化物賦形剤も本発明の範囲内で対象とし、その例としては、これらに限定されるものではないが、単糖類、例えば、フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、Ｄ－マンノース、ソルボースなど；二糖類、例えば、ラクトース、スクロース、トレハロース、セロビオースなど；多糖、例えば、ラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキストラン、デンプンなど；およびアルジトール、例えば、マンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトール、ソルビトール（グルシトール）およびミオイノシトールがある。

【0103】

使用してもよい担体としては、緩衝液またはｐＨ調整剤があり；典型的には、緩衝液は有機酸または塩基から調製された塩である。代表的な緩衝液としては、有機酸塩、例えば、クエン酸、アスコルビン酸、グルコン酸、炭酸、酒石酸、コハク酸、酢酸、またはフタル酸の塩；トリス、塩酸トロメタミン、またはリン酸緩衝液がある。追加の担体としては、ポリマー賦形剤／添加剤、例えば、ポリビニルピロリドン、フィコール（ポリマー糖）、デキストレート（例えば、シクロデキストリン、例えば２－ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン）、ポリエチレングリコール、香味剤、抗菌剤、甘味料、抗酸化剤、帯電防止剤、界面活性剤（例えば、ポリソルベート、例えば、「ＴＷＥＥＮ２０」および「ＴＷＥＥＮ８０」）、脂質（例えば、リン脂質、脂肪酸）、ステロイド（例えばコレステロール）、およびキレート化剤（例えばＥＤＴＡ）がある。

【0104】

本開示はまた、本明細書において記載する少なくとも１つのキヌクリジン化合物および少なくとも１つの更なる薬学的活性薬剤を含む、医薬組成物および前記組成物を含むキットを提供する。これらの医薬組成物およびキットは、キヌクリジン化合物および更なる活性薬剤を、同時に、続けておよび／または個別に投与することを可能にするように適合させてもよい。例えば、キヌクリジン化合物および更なる活性薬剤は、個別の剤型に、例えば、個別の錠剤、カプセル剤、凍結乾燥剤または液剤に製剤化しても、同じ投薬形態に、例えば、同じ錠剤、カプセル剤、凍結乾燥剤または液剤に製剤化してもよい。キヌクリジン化合物および更なる活性薬剤が同じ投薬形態に製剤化された場合、キヌクリジン化合物および更なる活性薬剤は、添加混合物中に、例えば、錠剤のコア内に実質的に存在していても、投薬形態の個別の領域中に、例えば、同じ錠剤の個別の層中に実質的に存在していてもよい。１つの実施形態において、医薬投薬形態は、繊毛病、例えば、本明細書において記載する繊毛病を処置または阻止することができる更なる薬剤を含む。

【0105】

更なる態様において、本発明は、（ｉ）本明細書において記載するキヌクリジン化合物；（ｉｉ）更なる活性薬剤；および（ｉｉｉ）薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。１つの実施形態において、更なる活性薬剤は、繊毛病、例えば、本明細書において記載する繊毛病を処置または阻止することができる薬剤である。１つの実施形態において、更なる活性薬剤は、対象に経口投与する場合に繊毛病を処置または阻止することができる。

【0106】

タンパク質症、例えばパーキンソン病を処置することができる更なる薬剤の例としては、例えば、ドーパミン前駆体（例えばＬ－ドパ）、ドーパミンアゴニスト（例えば、ブロモクリプチン、カベルゴリン、ペルゴリド、プラミペキソールおよびアポモルヒネ）、ＭＡＯ－Ｂ阻害剤（例えばラサギリンおよびセレギリン）、抗コリン薬（例えばオルフェナドリン、プロシクリジン、およびトリヘキシフェニジル）、β－グルコセレブロシダーゼ活性賦活薬（例えばアンブロキソールおよびアフェゴスタット）およびアマンタジンがある。アルツハイマーを処置することができる薬剤の例としては、例えば、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、例えばタクリン、リバスチグミン、ガランタミン、ドネペジル、およびメマンチンがある。

【0107】

本明細書において記載する方法と組み合わせてもよいタンパク質症のための更なる治療法としては、心理社会的介入、行動的介入、レミニセンス療法、バリデーション療法、支持的精神療法、感覚統合、認知再訓練、リハビリテーション、言語療法などがある。他の介入としては、外科手術、リハビリテーション、および食事管理がある。

【0108】

ここで開示されるキヌクリジン化合物および医薬組成物は、動物またはヒトにおいて使用してもよい。したがって、ここで開示する化合物は、経口、頬側、非経口（例えば、静脈内、筋肉内または皮下）、局所、直腸もしくは鼻腔内投与用の医薬組成物として、または吸入もしくは吹入による投与に好適な形態で製剤化してもよい。特定の実施形態において、キヌクリジン化合物または医薬組成物は、例えば、非経口ではない経路を介して全身投与用に製剤化される。１つの実施形態において、キヌクリジン化合物または医薬組成物は、例えば、固体形態で経口投与用に製剤化される。適切な医薬組成物を調製するためのそのような投与様式および方法は、例えば、Ｇｉｂａｌｄｉ’ｓ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃａｒｅ （１ｓｔ ｅｄ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ－Ｓｙｓｔｅｍ Ｐｈａｒｍａｃｉｓｔｓ ２００７）に記載されている。

【0109】

医薬組成物は、例えば、所望の放出プロファイルを提供するためのさまざまな比率のヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／またはマイクロスフェアを使用して、その中の活性成分の放出を遅延させるか、延長させるか、または制御するように製剤化してもよい。医薬組成物は、乳白剤も場合により含んでいてもよく、場合により、例えば、腸溶性コーティングを使用することによって遅延様式で胃腸管のある特定の部分において活性成分のみを放出するかまたは優先的に放出する組成物であってもよい。埋込組成物の例としては、ポリマー物質およびワックスがある。活性成分はまた、適切な場合、当技術分野において周知の１つまたはそれ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤、または希釈剤（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓを参照のこと）とともにマイクロカプセル化された形態であってもよい。ここで開示する化合物は、当業者に周知の方法に従って持続送達用に製剤化してもよい。そのような製剤の例は、米国特許第３，１１９，７４２号；同第３，４９２，３９７号；同第３，５３８，２１４；４，０６０，５９８号；および同第４，１７３，６２６号で見出すことができる。

【0110】

経口投与用の固体投薬形態（例えば、カプセル剤、錠剤、丸剤、糖衣錠剤、散剤、顆粒剤など）では、活性成分は、１つまたはそれ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤、または希釈剤、例えば、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム、および／または以下のいずれか：（１）フィラーまたは増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、微結晶性セルロース、リン酸カルシウムおよび／またはケイ酸；（２）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、スクロースおよび／またはアカシア；（３）保湿剤、例えばグリセロール；（４）崩壊剤、例えば、アガー－アガー、炭酸カルシウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定のシリケート、および炭酸ナトリウム；（５）溶解遅延剤、例えばパラフィン；（６）吸収促進剤、例えば第四級アンモニウム化合物；（７）湿潤剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、アセチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール；（８）吸収剤、例えば、カオリンおよびベントナイト粘土；（９）滑沢剤、例えば、タルク、シリカ、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびこれらの混合物；ならびに（１０）着色剤と混合されている。カプセル剤、錠剤、および丸剤の場合、医薬組成物は緩衝剤も含んでいてもよい。類似のタイプの固体組成物はまた、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中にフィラー、ならびに賦形剤、例えば、ラクトースまたは乳糖、ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどを使用して調製してもよい。

【0111】

錠剤は、場合により１つまたはそれ以上の補助成分とともに、圧縮または成形することによって作製してもよい。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、表面活性化剤、および／または分散剤を使用して調製してもよい。成形錠剤は、不活性な液体希釈剤で湿らせた粉末化活性成分の混合物を好適な機械で成形することによって作製してもよい。錠剤および他の固体投薬形態、例えば、糖衣錠剤、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤は、場合により、刻み目を入れてもよいし、またはコーティングおよびシェル、例えば、当技術分野において周知の腸溶性コーティングおよび他のコーティングを用いて調製してもよい。

【0112】

実施形態において、医薬組成物は、液体形態で経口投与される。活性成分の経口投与用の液体投薬形態としては、薬学的に許容されるエマルション剤、マイクロエマルション剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤がある。経口投与用の液体調製物は、使用前に水または他の好適なビヒクルを用いて構成するための乾燥製品として存在していてもよい。活性成分に加えて、液体投薬形態は、当技術分野において通常使用される不活性希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、油（例えば綿実油、落花生油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物を含んでいてもよい。不活性希釈剤に加えて、液体医薬組成物は、アジュバント、例えば湿潤剤、乳化および懸濁化剤、甘味料、香味料、着色剤、香料および保存剤などを含んでいてもよい。活性成分に加えて、懸濁剤は、懸濁化剤、例えば、これらに限定されないが、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド（aluminum metahydroxide）、ベントナイト、アガー－アガーならびにトラガカント、ならびにこれらの混合物を含んでいてもよい。好適な液体調製物は、薬学的に許容される添加物、例えば、懸濁化剤（例えば、ソルビトールシロップ、メチルセルロースまたは水素化食用脂肪）；乳化剤（例えば、レシチンまたはアカシア）；非水性ビヒクル（例えば、アーモンド油、油性エステルまたはエチルアルコール）；および／または保存剤（例えばメチルまたはプロピルｐ－ヒドロキシ安息香酸またはソルビン酸）を用いて従来の手段によって調製してもよい。活性成分はまた、ボーラス剤、舐剤、またはペースト剤として投与してもよい。

【0113】

頬側投与に関しては、組成物は、従来の様式で製剤化された錠剤またはトローチ剤の形態をとっていてもよい。

【0114】

実施形態において、医薬組成物は、非経口手段によって、例えば、局所適用、経皮適用、注射などによって投与される。関連する実施形態において、医薬組成物は、注射、注入、または埋込（例えば、静脈内、筋肉内、動脈内、皮下など）によって非経口で投与される。

【0115】

ここで開示する化合物は、従来のカテーテル技術または注入を使用することを含む注射によって非経口投与用に製剤化してもよい。注射用製剤は、保存剤が添加された単位投薬形態で、例えば、アンプルでまたは複数回用量容器で存在していてもよい。組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁剤、溶液剤またはエマルション剤のような形態をとっていてもよく、当業者によって認識されている製剤化剤、例えば、懸濁化剤、安定化剤および／または分散剤を含んでいてもよい。あるいは、活性成分は、使用前に好適なビヒクル、例えば無菌発熱因子不含水を用いて復元するための粉末形態であってもよい。

【0116】

医薬組成物は、中枢神経系に直接投与してもよい。したがって、ある特定の実施形態において、組成物は中枢神経系に直接投与され、その結果、血液脳関門を回避する。いくつかの実施形態において、組成物は、直接脊髄注射を介して投与してもよい。実施形態において、組成物は髄腔内注射によって投与される。いくつかの実施形態において、組成物は、脳室内注射を介して投与される。実施形態において、組成物は、側脳室に投与される。実施形態において、組成物は、両方の側脳室に投与される。追加の実施形態において、組成物は、海馬内注射を介して投与される。組成物は、１回の注射または複数回の注射で投与してもよい。他の実施形態において、組成物は、１か所を超える位置に（例えば、中枢神経系において２か所の位置に）投与される。

【0117】

医薬組成物は、無菌注射の形態であってもよい。医薬組成物は、例えば、細菌保持フィルターに通してろ過することによって、または使用直前に水、もしくはいくつかの他の無菌注射可能媒体中に溶解することができる無菌固体組成物の形態の無菌化剤を組み込むことによって無菌としてもよい。そのような組成物を調製するために、活性成分は、非経口で許容される液体ビヒクル中に溶解または懸濁される。例示的なビヒクルおよび溶媒としては、これらに限定されるものではないが、水、適切な量の塩酸、水酸化ナトリウムまたは好適な緩衝液を添加することによって好適なｐＨに調整される水、１，３－ブタンジオール、リンゲル溶液および等張塩化ナトリウム溶液がある。医薬組成物は、１つまたはそれ以上の防腐剤、例えば、メチル、エチルまたはｎ－プロピルｐ－ヒドロキシベンゾエートも含んでいてもよい。溶解性を改善させるために、溶解促進剤または可溶化剤を添加してもよく、または溶媒は１０～６０％ｗ／ｗのプロピレングリコールまたは類似のものを含んでいてもよい。

【0118】

医薬組成物は、１つまたはそれ以上の薬学的に許容される無菌等張水性または非水溶液剤、分散剤、懸濁剤もしくはエマルション剤、または使用直前に無菌注射用溶液または分散体に復元することができる無菌粉末剤を含んでいてもよい。そのような医薬組成物は、抗酸化剤；緩衝液；静菌剤；製剤を対象とされるレシピエントの血液と等張にする溶質；懸濁化剤；増粘剤；防腐剤；などを含んでいてもよい。

【0119】

本発明の医薬組成物において用いてもよい好適な水性および非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、およびこれらの好適な混合物、植物油、例えばオリーブ油、ならびに注射可能な有機エステル、例えばオレイン酸エチルがある。適切な流動性は、例えば、コーティング材料、例えばレシチンを使用することによって、分散体の場合は必要な粒子サイズを維持することによって、かつ界面活性剤を使用することによって維持してもよい。いくつかの実施形態において、活性成分の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射からの化合物の吸収を遅延させることが望ましい。これは、難水溶性の結晶質または非結晶質材料の液体懸濁液を使用することによって達成してもよい。そして、活性成分の吸収速度はその溶解速度に依存し、溶解速度は、結晶サイズおよび結晶形態に依存する場合がある。あるいは、非経口投与される活性成分の遅延性の吸収は、油ビヒクル中に化合物を溶解または懸濁することによって達成される。更に、注射可能な医薬形態の持続吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを含むことによって行ってもよい。

【0120】

制御放出非経口組成物は、水性懸濁剤、マイクロスフェア剤、マイクロカプセル剤、磁性マイクロスフェア剤、油溶液剤、油性懸濁剤、エマルション剤の形態であってもよく、または活性成分は、生体適合性担体、リポソーム、ナノ粒子、埋め込み体または注入デバイス中に組み込んでもよい。マイクロスフェアおよび／またはマイクロカプセルの調製において使用するための材料としては、これらに限定されるものではないが、生分解性／生体内分解性ポリマー、例えばポリグラクチン、ポリ－（イソブチルシアノアクリレート）、ポリ（２－ヒドロキシエチル－Ｌ－グルタミン）およびポリ（乳酸）がある。制御放出非経口製剤を製剤化する場合に使用してもよい生体適合性担体としては、炭水化物、例えば、デキストラン、タンパク質、例えば、アルブミン、リポタンパク質または抗体がある。埋め込み体において使用するための材料は、非生分解性、例えば、ポリジメチルシロキサン、または生分解性、例えば、ポリ（カプロラクトン）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）またはポリ（オルトエステル）であってもよい。

【0121】

局所投与に関しては、ここで開示する化合物は、軟膏剤またはクリーム剤として製剤化してもよい。ここで開示する化合物はまた、直腸組成物、例えば、例えば、従来の坐剤基剤、例えばココアバターまたは他のグリセリドを含む坐剤または停留浣腸に製剤化してもよい。

【0122】

鼻腔内投与または吸入による投与に関しては、ここで開示する化合物は、患者によって押されるかまたはポンプで送られるポンプ噴霧剤容器からの溶液もしくは懸濁液の形態で、または好適な噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、もしくは他の好適なガスを使用した加圧型容器またはネブライザーから提示されるエアロゾル噴霧剤として都合よく送達してもよい。加圧型エアロゾルの場合、投薬単位は、定量を送達するためのバルブを提供することによって判定してもよい。加圧型容器またはネブライザーは、ここで開示する化合物の溶液または懸濁液を含んでいてもよい。カプセルおよびカートリッジ（例えば、ゼラチンから作製される）において使用するための吸入器または吹送器は、ここで開示する化合物および好適な粉末ベース、例えばラクトースまたはデンプンの粉末ミックスを含むように製剤化してもよい。

【0123】

一般的に、本明細書において記載する試薬および組成物は、対象において繊毛病を処置または阻止するのに十分な有効量または量で投与される。典型的には、用量は、例えば、年齢、身体状態、体重、性別、食事、投与時間、および他の臨床的因子に基づいてこの範囲内で調整してもよい。有効量の判定は、当業者の能力の十分範囲内である。

【0124】

繊毛病を処置するために平均的な成人へ経口、非経口または頬側投与するための本明細書において記載するキヌクリジン化合物の提案する用量は約０．１ｍｇから約２０００ｍｇである。ある特定の実施形態において、提案する用量は、１単位用量あたり活性成分約０．２ｍｇから約１０００ｍｇである。提案された用量の量に関係なく、化合物の投与は、例えば、１日１から４回で起こる場合がある。１つの実施形態において、経口投与のための用量は、約０．５から約２０００ｍｇ、例えば、約１から約７５０ｍｇである。１つの実施形態において、中枢神経系に直接投与するための用量は約１μｇから約１ｍｇ、例えば、約５μｇから約０．５ｍｇ、または約１０μｇから約０．１ｍｇである。平均的な成人における上記の状態を処置または阻止するためのエアロゾル製剤は、エアロゾルの各定量用量または「パフ」が約１ｍｇから約１０ｇ、例えば約２ｍｇから約１ｇのここで開示する化合物を含むことができるように準備してもよい。投与は、１日数回、例えば、２、３、４または８回であってもよく、例えば、毎回１、２または３回の用量を与える。いくつかの実施形態において、投与は、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇまたは２０ｍｇの単回１日用量によるものであってもよい。いくつかの実施形態において、投与は、２、５、１５、２５、５０、１００、または１５０ｍｇの単回１日用量によるものであってもよい。

【0125】

他の態様では、本発明は、治療法において使用するための、例えば、本明細書において定義する方法において使用するための本明細書において記載する投薬形態または医薬組成物を提供する。

【0126】

本明細書において全般的に記載してきたが、本発明を更に例示するために、以下の非限定的な例を提供する。

【実施例】

【0127】

化学的合成のための一般手順
一般手順Ａ：トリホスゲンを用いたカルバメート形成
室温のＴＨＦ（濃度約０．２Ｍ）中のアミン塩酸塩（１当量）およびトリエチルアミン（３～４当量）の懸濁液に、トリホスゲン（０．３５当量）を添加した。反応混合物を１０分間撹拌し、少量のエーテル（１～２ｍＬ）を添加した。トリエチルアンモニウム塩をろ過除去して、ＴＨＦ／エーテル中のイソシアネートの透明溶液を得た。

【0128】

室温のＴＨＦ（濃度約０．２Ｍ）中のアルコール（１．５当量）の溶液へ、ＮａＨ［６０％、油］（１．５当量）を添加した。反応混合物を１５分間撹拌し、上記溶液（ＴＨＦ／エーテル中のイソシアネート）を滴加した。標準的な後処理では、反応物を食塩水でクエンチした。溶液をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗製材料をコンビフラッシュ（ＳｉＯ_２カートリッジ、ＭｅＯＨ中のＣＨＣｌ_３および２Ｎ ＮＨ_３）で精製して、対応するカルバメートを得た。

【0129】

一般手順Ｂ：有機セリウムを用いたアルキル化
ＴＨＦ（濃度約０．２Ｍ）中のＣｅＣｌ_３（４当量）の懸濁液を、室温で１時間撹拌した。懸濁液を－７８℃に冷却し、ＭｅＬｉ／エーテル［１．６Ｍ］（４当量）を滴加した。有機セリウム錯体を１時間形成させ、ＴＨＦ（濃度２．０Ｍ）中のニトリル（１当量）の溶液を滴加した。反応混合物を室温に加温し、１８時間撹拌した。溶液を０℃に冷却し、水（約１ｍＬ）でクエンチし、続いて、水酸化アンモニウム５０％水溶液（約３ｍＬ）を、沈殿が形成され、フラスコの底に沈むまで添加した。混合物を、セライトパッドに通してろ過し、濃縮した。粗製材料をＨＣｌ／ジオキサン［４．０Ｍ］溶液で処置した。中間体アリールプロパン－２－アミン塩酸塩をエーテル中で破砕し、次の工程にそのまま使用した。あるいは、粗製遊離塩基アミンをコンビフラッシュ（ＳｉＯ_２カートリッジ、ＭｅＯＨ中のＣＨＣｌ_３および２Ｎ ＮＨ_３）で精製して、対応するアリールプロピルアミンを得た。

【0130】

一般手順Ｃ：鈴木カップリング
ＤＭＥ／水［４：１］の混合物（濃度約０．２Ｍ）中のアリールハロゲン化物（１当量）の溶液へ、ボロン酸（２当量）、パラジウム触媒（０．１～０．２５当量）および炭酸ナトリウム（２当量）を添加した。反応混合物を、１５０°Ｃで２５分マイクロ波処理した。セライトプラグに通してろ過し、濃縮した後、粗製製品をコンビフラッシュ（ＳｉＯ_２カートリッジ、ＭｅＯＨ中のＣＨＣｌ_３および２Ｎ ＮＨ_３）で精製して、対応するカップリング付加物を得た。

【0131】

代替法：トルエン／水［２０：１］の混合物（濃度約０．２Ｍ）中の、アリールハロゲン化物（１当量）の溶液へ、ボロン酸（１．３～２．５当量）、パラジウム触媒（０．０５～０．１５当量）、トリシクロヘキシルホスフィン（０．１５～０．４５当量）およびリン酸カリウム（５当量）を添加した。反応混合物を、１５０℃で２５分マイクロ波処理した。セライトプラグに通してろ過し、濃縮した後、粗製製品をコンビフラッシュ（ＳｉＯ_２カートリッジ、ＭｅＯＨ中のＣＨＣｌ_３および２Ｎ ＮＨ_３）で精製して、対応するカップリング付加物を得た。

【0132】

一般手順Ｄ：シクロプロパン化
－７０℃で撹拌したアリールニトリル（１当量）およびＴｉ（Ｏｉ－Ｐｒ）_４（１．７当量）の混合物に、ＥｔＭｇＢｒ［３．０Ｍ、エーテル中］（１．１当量）を滴加した。反応混合物を２５℃に加温し、１時間撹拌した。上記混合物にＢＦ_３・Ｅｔ_２Ｏ（３当量）を２５℃で滴加した。添加後、混合物を更に２時間撹拌し、次いで水性ＨＣＩ［２Ｍ］でクエンチした。次いで得られた溶液を、ＮａＯＨ水溶液［２Ｍ］を添加することによって塩基性化した。有機材料をエチルエーテルで抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗製材料をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ：１０／１から１／１で溶出）によって精製して、対応する１－アリール－シクロプロパンアミンを得た。

【0133】

一般手順Ｅ：鈴木条件を使用したビアリールカップリング
５：１（ｖ／ｖ）のジオキサン／水（約０．１５Ｍ）または５：１（ｖ／ｖ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（約０．１５Ｍ）中のアリールハロゲン化物構成成分（１当量）の撹拌溶液に、アリールボロネートまたはアリールボロン酸構成成分（１～１．５当量）、炭酸ナトリウム（２～３当量）および［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（０．０５当量）を添加した。混合物を一晩加熱し（９０℃）、次いでセライトプラグに通してろ過した。セライトを酢酸エチルですすぎ、合わせたろ液を食塩水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。残渣をシリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。

【0134】

一般手順Ｆ：混合無水物／クルチウス転位経路を介して生成されたイソシアネートを使用したカルバメート形成
テトラヒドロフラン（約０．１Ｍ）中のカルボン酸構成成分（１当量）の撹拌溶液に、トリエチルアミン（２当量）を添加した。反応物を冷却し（０℃）、クロロギ酸イソブチル（１．５当量）で処置した。０℃で１時間後、水（約１Ｍ）中のアジ化ナトリウム（２当量）の溶液を添加し、反応物を室温に加温した。一晩撹拌後、反応物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた抽出物を、重炭酸ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。粗製アシルアジドを、トルエンとの共蒸発を介して更に乾燥し、次いでトルエン（約０．１Ｍ）に入れた。撹拌溶液を２～２．５時間還流し、冷却し、アルコール構成成分（１．２５～２当量）で処置した。反応物を一晩加熱還流し、次いで濃縮した。残渣を酢酸エチルまたはクロロホルムのいずれかに入れ、炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。粗製製品を、クロロホルム／メタノール（極性の低いカルバメート）またはクロロホルム／メタノール／アンモニア（極性の高いカルバメート）溶媒勾配を使用した、シリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。

【実施例1】

【0135】

キヌクリジン化合物の合成
１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル［２－（４’－フルオロビフェニル－３－イル）プロパン－２－イル］カルバメート（化合物１）
一般手順Ｃを使用して、１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル［２－（３－ブロモフェニル）プロパン－２－イル］カルバメート（６００ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）、４－フルオロフェニルボロン酸（４５７ｍｇ、３．２７ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（ＩＩ）により、表題化合物を白色固形物（３７３ｍｇ；６０％）として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.56 (s, 1H), 7.52 (dd, J = 5.4, 8.4 Hz, 2H), 7.42-7.38 (m, 3H), 7.12 (m, 2H), 5.18 (5, 1H), 4.62 (s, 1H), 2.66 (m, 6H), 1.72 (s, 6H), 2.01-0.83 (m, 5H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 125.0, 124.0, 123.8, 116.0, 116.0, 71.3, 55.9, 55.5, 47.6, 46.7, 29.6, 25.6, 24.8, 19.8 ppm. Purity: 98.0% UPLCMS (210 nm); retention time 0.95 min; (M+1) 382.9. Anal. Calcd. for C₂₃H₂₇FN₂O₂・0.37(CHCl₃): C, 65.86; H, 6.47; N, 6.57. Found: C, 65.85; H, 6.69; N, 6.49.

【0136】

（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イルカルバメート（化合物２）
エタノール（７０ｍＬ）中の４－フルオロチオベンズアミド（８．９４ｇ、５７．６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、エチル４－クロロアセテート（７．８ｍＬ、５８ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を４時間加熱還流し、エチル４－クロロアセトアセテートのアリコート（１．０ｍＬ、７．４ｍｍｏｌ）を添加して処置し、更に３．５時間還流した。次いで、反応物を濃縮し、残渣を、酢酸エチル（２００ｍＬ）と水性ＮａＨＣＯ_３（２００ｍＬ）との間で分割した。有機層を、水性層（酢酸エチル、１×７５ｍＬ）の逆抽出物と合わせ、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。得られた琥珀色油状物を、ヘキサン／酢酸エチル勾配を使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、エチル２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）アセテートを、低融点のほぼ無色の固形物（１３．５８ｇ、８９％）として得た。

【0137】

ＤＭＦ（５０ｍＬ）中のエチル２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）アセテート（６．２８ｇ、２３．７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水素化ナトリウム［鉱油中の６０％分散体］（２．８４ｇ、７１．０ｍｍｏｌ）を添加した。泡状混合物を１５分間撹拌してから、氷浴中で冷却し、ヨードメタン（４．４ｍＬ、７１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を一晩撹拌し、冷却浴槽を室温にゆっくりと加温した。次いで、混合物を濃縮し、残渣を、酢酸エチル（８０ｍＬ）と水（２００ｍＬ）との間で分割した。有機層を第２の一部の水（１×２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。得られた琥珀色油状物を、ヘキサン／酢酸エチル勾配を使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、エチル２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパノエートを無色油状物（４．５７ｇ、６６％）として得た。

【0138】

１：１：１のＴＨＦ／エタノール／水（４５ｍＬ）中のエチル２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパノエート（４．５６ｇ、１５．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水酸化リチウム一水和物（２．９３ｇ、６９．８ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を一晩撹拌し、濃縮し、水（１７５ｍＬ）中に再溶解した。溶液をエーテル（１×１００ｍＬ）で洗浄し、１．０Ｎ ＨＣｌ（８０ｍＬ）を添加することによって酸性化し、酢酸エチル（２×７０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパン酸を白色固形物（４．０４ｇ、９８％）として得た。この材料を精製せずに次の工程で使用した。

【0139】

ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパン酸（４．０２ｇ、１５．２ｍｍｏｌ）の撹拌し、冷却した（０℃）溶液に、トリメチルアミン（４．２ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）、続いてクロロギ酸イソブチル（３．０ｍＬ、２３ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を更に１時間冷却撹拌してから、水（２０ｍＬ）中のアジ化ナトリウム（１．９８ｇ、３０．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物を一晩撹拌し、冷却浴槽を室温にゆっくりと加温した。次いで、混合物を水で希釈し（１００ｍＬ）、酢酸エチル（２×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を水性ＮａＨＣＯ_３（１×１５０ｍＬ）および食塩水（１×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。トルエン（２×５０ｍＬ）と共蒸発させた後、得られた白色固形物をトルエン（１００ｍＬ）に入れ、４時間還流した。次いで、（Ｓ）－３－キヌクリジノール（３．８７ｇ、３０．４ｍｍｏｌ）を添加し、還流を一晩継続した。反応物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）と水性ＮａＨＣＯ_３（１５０ｍＬ）との間で分割した。有機層を水（１×１５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。得られたオフホワイト色固形物を、クロロホルム／メタノール／アンモニア勾配を使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を白色固形物（４．３４ｇ、７３％）として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.96-7.88 (m, 2H), 7.16-7.04 (m, 3H), 5.55 (br s, 1H), 4.69-4.62 (m, 1H), 3.24-3.11 (m, 1H), 3.00-2.50 (m, 5H), 2.01-1.26 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 166.4, 165.1, 163.8 (d, J=250.3 Hz), 162.9, 155.0, 130.1 (d, J=3.3 Hz), 128.4 (d, J= 8.5 Hz), 115.9 (d, J= 22.3 Hz), 112.5, 71.2, 55.7, 54.2, 47.5, 46.5, 28.0, 25.5, 24.7, 19.6 ppm. Purity: 100 % UPLCMS (210 nm & 254 nm); retention time 0.83 min; (M+1) 390.

【0140】

（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物３）
一般手順Ｅを使用し、反応にエチル２－（４－ブロモフェニル）－２－メチルプロパノエートおよび４－（２－メトキシエトキシ）フェニルボロン酸を用い（input）、エチル２－（４’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－メチルプロパノエートを、オフホワイト色固形物として調製した。１：１：１（ｖ／ｖ／ｖ）のテトラヒドロフラン／エタノール／水（４５ｍＬ）中のこの化合物（３．０１ｇ、８．７８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水酸化リチウム一水和物（１．４７ｇ、６１．４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を一晩加熱還流し、次いで濃縮した。残渣を水中に溶解し、１Ｎ塩酸（６５ｍＬ）で処置し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、２－（４’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－メチルプロパン酸を白色固形物（２．７５ｇ、１００％）として得た。この中間体および（Ｓ）－キヌクリジン－３－オールを一般手順Ｆに従って反応させて、表題化合物を無色のガラス状固形物として生成した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.62-7.29 (m, 7H), 7.01 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 4.47-4.37 (m, 1H), 4.17-4.08 (m, 2H), 3.72-3.62 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 3.09-2.25 (m, 6H), 2.05-1.18 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d₆) δ 157.9, 154.5, 146.7, 137.4, 132.5, 127.5, 125.7, 125.2, 114.8, 70.4, 70.0, 66.9, 58.2, 55.4, 54.2, 46.9, 45.9, 29.4, 25.3, 24.2, 19.2 ppm. Purity: 100%, 100% (210 & 254 nm) UPLCMS; retention time: 0.87 min; (M+H⁺) 439.5.

【0141】

１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル［２－（ビフェニル－３－イル）プロパン－２－イル］カルバメート（化合物４）
一般手順Ｃを使用して、１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル［２－（３－ブロモフェニル）プロパン－２－イル］カルバメート（６００ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（３９８ｍｇ、３．２７ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（ＩＩ）により、表題化合物を白色固形物（３７９ｍｇ、６４％）として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.61 (s, 1H), 7.56 (d, J= 7.4 Hz, 2H), 7.50-7.38 (m, 4H), 7.34 (m, 2H), 5.16 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 3.39-2.09 (m, 6H), 1.72 (s, 6H), 2.02-0.73 (m, 5H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 154.8, 147.8, 141.6, 129.0, 129.0, 128.6, 127.5, 125.8, 125.0, 124.0, 71.6, 71.3, 55.9, 55.5, 47.6, 46.8, 31.5, 30.2, 30.0, 29.5, 25.6, 24.8, 19.8 ppm. Purity: 99% UPLCMS (210 nm); retention time 0.84 min; (M+1) 365.0. Anal. Calcd. for C₂₃H₂₈N₂O₂・0.29(CHCl₃): C, 70.02; H, 7.14; N, 7.01. Found: C, 70.02; H, 7.37; N, 6.84.

【0142】

（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル２－（ビフェニル－４－イル）プロパン－２－イルカルバメート（化合物５）
一般手順Ｂを使用して、ブロモベンゾニトリル（２．００ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）を、対応する２－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－アミン（１．２０ｇ、５１％）へ茶色油状物として変換した。

【0143】

一般手順Ａを使用して、２－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－アミン（１．０ｇ、４．７ｍｍｏｌ）および（Ｓ）－キヌクリジン－３－オールにより、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル２－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－イルカルバメート（１．０ｇ、５８％）を茶色油状物として得た。

【0144】

一般手順Ｃを使用して、上記臭化物（２００ｍｇ、０．５４０ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（１３３ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）および［ＰｄＣｌ_２（ｐｄｄｆ）］ＣＨ_２Ｃｌ_２により、表題化合物を白色固形物（７０ｍｇ、３５％）として得た。¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.60-7.53 (m, 4H), 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.33 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.26 (br s, 1H), 4.64 (m, 1H), 3.33-3.15 (m, 1H), 3.10-2.45 (m, 5H), 2.40-1.80 (m, 2H), 1.78-1.58 (m, 7H), 1.55-1.33 (m, 2H) ppm. ¹³C NMR (125 MHz, CDCl₃) δ154.5, 146.1, 140.8, 139.5, 128.7, 127.2, 127.1, 127.1, 125.2, 70.9, 55.5, 55.1, 47.4, 46.4, 31.1, 29.5, 25.3, 24.5, 19.5 ppm. Purity: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); retention time 1.56 min; (M+1) 365.

【0145】

キヌクリジン－３－イル１－（ビフェニル－４－イル）シクロプロピルカルバメート（化合物６）
一般手順Ｄを使用して、ブロモベンゾニトリル（３．００ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）を、対応する１－（４－ブロモフェニル）シクロプロパンアミン（１．８０ｇ、５１％）へ黄色固形物として変換した。

【0146】

一般手順Ａを使用して、１－（４－ブロモフェニル）シクロプロパンアミン（１．０ｇ、４．７ｍｍｏｌ）およびキヌクリジン－３－オールにより、キヌクリジン－３－イル１－（４－ブロモフェニル）シクロプロピル－カルバメート（１．３ｇ、７５％）を白色半固形物として得た。

【0147】

一般手順Ｃを使用して、上記カルバメート（４００ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（２６７ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）および［ＰｄＣｌ_２（ｐｄｄｆ）］ＣＨ_２Ｃｌ_２により、表題化合物を粘性油状物として得た（１００ｍｇ、２５％）。¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.47 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 7.43 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.33 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 7.26-7.15 (m, 3H), 5.93 (br s, 0.6H), 5.89 (br s, 0.4H), 4.67 (m, 1H), 3.20-3.06 (m, 1H), 2.88-2.42 (m, 5H), 1.98-1.08 (m, 9H) ppm. ¹³C NMR (125 MHz, CDCl₃) δ 155.0, 141.0, 139.7, 138.2, 127.7, 126.1, 126.0, 124.8, 124.1, 70.0, 54.5, 46.3, 45.4, 34.1, 24.3, 23.2, 18.3, 17.0 ppm. Purity: 100 % LCMC (214 nm & 254 nm); retention time 1.52 min; (M+1) 363.

【0148】

（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピルカルバメート（化合物７）
一般手順Ｃを使用して、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル１－（４－ブロモフェニル）シクロプロピルカルバメート、４－Ｆ－フェニルボロン酸および［ＰｄＣｌ_２（ｐｄｄｆ）］ＣＨ_２Ｃｌ_２により、表題化合物を白色固形物（４５％）として得た。¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8.06-7.83 (d, 1H), 7.69-7.66 (m, 2H), 7.59-7.55 (m, 2H), 7.29-7.22 (m, 4H), 4.56-4.54 (m, 1H), 3.13-2.32 (m, 6H), 1.91-1.19 (m, 9H) ppm. ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆) δ 163.2, 161.2, 156.4, 143.7, 136.9, 128.9, 128.8, 126.8, 125.6, 116.2, 116.0, 70.7, 55.8, 47.4, 46.4, 34.8, 25.7, 24.6, 19.6, 18.7, 18.6 ppm. Purity: > 97 % LCMS (214 nm & 254 nm); retention time 1.96 min; (M+1) 381.2.

【0149】

（Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル［１－（２’，４’－ジフルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］カルバメート（化合物８）
一般手順Ｃを使用して、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル１－（４－ブロモフェニル）シクロプロピルカルバメート（０．４４６ｇ、１．２２ｍｍｏｌ）、２，４－ジフルオロフェニルボロン酸（０．３８６ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）_２（０．０１５ｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）により、表題化合物を黄褐色固形物（０．１１１ｇ、２３％）として得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 7.43 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 2H), 7.40-7.33 (m, 1H), 7.31 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 6.99-6.81 (m, 2H), 5.54 (d, J = 48.0 Hz, 1H), 4.82-4.65 (m, 1H), 3.30-3.07 (m, 1H), 2.98-2.44 (m, 5H), 1.97 (d, J = 32.7 Hz, 1H), 1.83 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 1.64 (s, 1H), 1.52 (s, 1H), 1.39 (s, 1H), 1.31 (d, J = 6.8 Hz, 4H) ppm. ¹³C NMR major rotomer (CDCl₃) δ 162.2 (dd, J = 12.8, 249.1 Hz), 159.8 (dd, J = 11.8, 251.0 Hz), 156.9, 156.0, 142.6, 133.1, 131.3 (m), 128.9, 125.6, 124.9, 111.5 (dd, J = 3.9, 21.2 Hz) 104.4 (dd, J = 25.2, 29.4 Hz), 72.1, 71.6, 55.7, 47.4, 46.5, 35.7, 35.3, 25.5, 24.6, 24.4, 19.5, 18.1 ppm. Purity: LCMS > 99.3 % (214 nm & 254 nm); retention time 0.90 min; (M+1) 399.0.

【0150】

１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル［１－（４’－メトキシビフェニル－４－イル）シクロプロピル］カルバメート（化合物９）
一般手順Ｃを使用して、キヌクリジン－３－イル１－（４－ブロモフェニル）シクロプロピルカルバメート（０．４８５ｇ、１．３３ｍｍｏｌ）、４－メトキシフェニルボロン酸（０．４０４ｇ、２．６６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）_２（０．０１６ｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）により、表題化合物を灰色固形物（０．３３７ｍｇ、６５％）として得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 7.48 (dd, J = 8.6, 5.5 Hz, 4H), 7.29 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.96 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.58 (d, J = 48.7 Hz, 1H), 4.83-4.63 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.20 (dd, J = 24.0, 15.5 Hz, 1H), 2.97-2.42 (m, 5H), 1.97 (d, J = 30.9 Hz, 1H), 1.81 (s, 1H), 1.75-1.33 (m, 3H), 1.28 (d, J = 6.8 Hz, 4H) ppm. ¹³C NMR major rotomer (CDCl₃) δ 159.1, 156.0, 141.4, 139.0, 133.4, 128.0, 126.7, 125.9, 114.2, 71.5, 55.7, 55.3, 47.4, 46.5, 35.3, 25.5, 24.6, 19.6, 17.8 ppm. Purity: LCMS >97.1 % (214 nm & 254 nm); retention time 0.88 min; (M+1) 393.4.

【0151】

キヌクリジン－３－イル２－（５－（４－フルオロフェニル）チオフェン－３－イル）プロパン－２－イルカルバメート（化合物１０）
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中のエチル５－ブロモチオフェン－３－カルボキシレート（１３．３０ｇ、５６．５７ｍｍｏｌ）の撹拌し、冷却した（０℃）溶液に、ジエチルエーテル［３．０Ｍ］（５５．０ｍＬ、１６５ｍｍｏｌ）中の臭化メチルマグネシウムの溶液を２０分にわたって滴加した。２時間後、反応溶液を濃縮した。残渣を水性ＮＨ_４Ｃｌ（２００ｍＬ）に入れ、酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。得られた琥珀色油状物を、ヘキサン／酢酸エチル勾配を使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２－（５－ブロモチオフェン－３－イル）プロパン－２－オールを淡琥珀色油状物（８．０５ｇ、６４％）として得た。

【0152】

塩化メチレン（８０ｍＬ）中の２－（５－ブロモチオフェン－３－イル）プロパン－２－オール（８．０３ｇ、３６．３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、アジ化ナトリウム（７．０８ｇ、１０９ｍｍｏｌ）、続いてトリフルオロ酢酸（８．０ｍＬ；５～６分にわたって滴下する）を添加した。増粘懸濁液を１．５時間撹拌してから、水（３５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を水性ＮａＨＣＯ_３（１×２５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、粗製アジド生成物を得た。ＴＨＦ（１６０ｍＬ）中のこの材料の撹拌溶液に、水（１１ｍＬ）、続いてトリフェニルホスフィン（２３．８ｇ、９０．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を２日間撹拌してから濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に溶解し、１Ｎ ＨＣｌ水溶液（４×７５ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を濃ＮＨ_４ＯＨで塩基性化し、酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。これらの抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。得られた琥珀色油状物を、塩化メチレン／メタノール／アンモニア勾配を使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２－（５－ブロモチオフェン－３－イル）プロパン－２－アミンおよびトリフェニルホスフィン酸化物（約７０／３０比率）の混合物を粘性琥珀色油状物（１．３２ｇ、１７％）として得た。

【0153】

ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の３－キヌクリジノール（３．００ｇ、２３．６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、４－ニトロフェニルクロロホルメート（５．９４ｇ、２９．５）を添加した。４時間撹拌した後、沈殿物をろ過除去し、ＴＨＦですすぎ、ハウス真空下フリット上で風乾した。ろ過物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）中に溶解し、ＮａＨＣＯ_３水溶液（１×１５０ｍＬ）、水（２×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、粗製４－ニトロフェニルキヌクリジン－３－イルカルボネート生成物を得、これを精製せずに次の工程で使用した。

【0154】

ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の２－（５－ブロモチオフェン－３－イル）プロパン－２－アミン（０．３６６ｇ、１．６６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、４－ニトロフェニルキヌクリジン－３－イルカルボネート（０．５７１ｇ、１．９５ｍｍｏｌ）および少量の顆粒の４－（ジメチルアミノ）ピリジンを添加した。混合物を一晩還流し、濃縮し、酢酸エチル（５０ｍＬ）とＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）との間で分割した。有機層をＮａＨＣＯ_３水溶液（１×５０ｍＬ）で再び洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。得られたくすんだ黄色ゴム状物を、クロロホルム／メタノール／アンモニア勾配を使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、キヌクリジン－３－イル（１－（５－ブロモチオフェン－３－イル）シクロプロピル）カルバメートをオフホワイト色固形物（０．３０５ｇ、４９％）として得た。

【0155】

一般手順Ｃを使用して、キヌクリジン－３－イル（１－（５－ブロモチオフェン－３－イル）シクロプロピル）カルバメート（０．２２７ｇ、０．７４２ｍｍｏｌ）、４－フルオロフェニルボロン酸（０．２０８ｇ、１．４９ｍｍｏｌ）、トリシクロヘキシルホスフィン（０．０２１ｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（０．８６６、４．０８ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（８．０ｍｇ、３６μｍｏｌ）により、表題化合物を灰色固形物（０．１４２ｇ、４９％）として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.60-7.45 (m, 2H), 7.24-7.19 (m, 1H), 7.10-6.97 (m, 3H), 5.23 (br s, 1H), 4.72-4.61 (m, 1H), 3.30-3.04 (m, 1H), 3.03-2.25 (m, 5H), 2.09-1.02 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 162.3 (d, J = 247.1 Hz), 154.5, 149.8, 143.6, 130.7, 127.4 (d, J = 8.1 Hz), 121.8, 118.9, 115.8 (d, J = 21.6 Hz), 70.8, 55.5, 53.4, 47.3, 46.4, 29.0, 25.4, 24.4, 19.4 ppm. Purity: 95.8 % UPLCMS (210 nm & 254 nm); retention time 0.90 min; (M+1) 389.

【0156】

（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル２－（３－（４－フルオロフェニル）イソチアゾール－５－イル）プロパン－２－イルカルバメート（化合物１１）
トルエン中の２－（３－（４－フルオロフェニル）イソチアゾール－５－イル）プロパン－２－アミン（１．２１ｇ、５．１２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トルエン［約１．９Ｍ］（１０．８ｍＬ、２０．５ｍｍｏｌ）中のホスゲン溶液を添加した。反応物を２時間加熱還流し、次いで濃縮した。残渣をトルエン（２×１５ｍＬ）と共蒸発させて、粗製イソシアネート中間体を金色油状物として得た。この材料をトルエン（１０ｍＬ）に入れ、（Ｓ）－３－キヌクリジノール（０．７４９ｇ、５．８９ｍｍｏｌ）で処置した。反応物を一晩加熱還流し、濃縮した。残渣を、クロロホルム／メタノール／アンモニア勾配を使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を白色固形物（０．９７１ｇ、４９％）として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.09-8.00 (m, 2H), 7.87 (br s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.35-7.25 (m, 2H), 4.54-4.45 (m, 1H), 3.14-2.92 (m, 1H), 2.87-2.17 (m, 5H), 1.98-0.98 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 180.1, 165.6, 162.6 (d, J = 246.4 Hz), 154.7, 131.2 (d, J = 3.0 Hz), 128.7 (d, J = 8.4 Hz), 118.2, 115.7 (d, J = 21.8 Hz), 70.6, 55.3, 52.8, 46.9, 45.9, 29.9, 25.2, 24.2, 19.2 ppm. Purity: 100 % UPLCMS (210 nm & 254 nm); retention time 0.82 min; (M+1) 390.

【0157】

（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル２－（４－（４－フルオロフェニル）チアゾール－２－イル）プロパン－２－イルカルバメート（化合物１２）
エタノール（１２０ｍＬ）中のエチル３－アミノ－３－チオキソプロパノエート（２０．００ｇ、１３５．９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、２－ブロモ－４’－フルオロアセトフェノン（２９．４９ｇ、１３５．９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１時間還流し、濃縮し、酢酸エチル（３００ｍＬ）とＮａＨＣＯ_３水溶液（４００ｍＬ）との間で分割した。有機層を水性層（酢酸エチル、１×１００ｍＬ）の逆抽出物と合わせ、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。得られた薄茶色固形物を、ヘキサン／酢酸エチル勾配を使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、エチル２－（４－（４－フルオロフェニル）チアゾール－２－イル）アセテートをオフホワイト色固形物（２９．９２ｇ、８３％）として得た。

【0158】

ＴＨＦ（２５０ｍＬ）中のエチル２－（４－（４－フルオロフェニル）チアゾール－２－イル）アセテート（１０．００ｇ、３７．６９ｍｍｏｌ）の撹拌し、冷却した（－７８°Ｃ）溶液を、ＴＨＦ［１．０Ｍ］（１３６ｍＬ、１３６ｍｍｏｌ）中のカリウムｔ－ブトキシドの溶液、続いて１８－クラウン－６（１．６ｍＬ、７．５ｍｍｏｌ）に１５分にわたって滴加した。－７８℃で更に３０分後、ヨードメタン（８．５ｍＬ）を５分にわたって滴加した。反応物を更に２時間冷却撹拌してから、水（４５０ｍＬ）に注ぎ入れ、酢酸エチル（２×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を食塩水で洗浄し（１×２００ｍＬ）、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。得られた茶色油状物を、ヘキサン／酢酸エチル勾配を使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、エチル２－（４－（４－フルオロフェニル）チアゾール－２－イル）－２－メチルプロパノエートを淡琥珀色油状物（８．６４ｇ、７８％）として得た。

【0159】

１：１：１のＴＨＦ／エタノール／水（１５ｍＬ）中のエチル２－（４－（４－フルオロフェニル）チアゾール－２－イル）－２－メチルプロパノエート（０．９００ｇ、３．０７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水酸化リチウム一水和物（０．４５１ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）を添加した。一晩撹拌後、反応物を濃縮し、水（８０ｍＬ）中に再溶解した。溶液をエーテル（１×５０ｍＬ）で洗浄し、１Ｎ ＨＣｌ（１５ｍＬ）を添加して酸性化し、酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、２－（４－（４－フルオロフェニル）チアゾール－２－イル）－２－メチルプロパン酸を淡金色固形物（０．８０８ｇ、９９％）として得た。

【0160】

ＴＨＦ（２５ｍＬ）中の２－（４－（４－フルオロフェニル）チアゾール－２－イル）－２－メチルプロパン酸（０．７８４ｇ、２．９６ｍｍｏｌ）の撹拌し、冷却した（０℃）溶液に、トリエチルアミン（０．８２ｍＬ、５．９ｍｍｏｌ）、続いてクロロギ酸イソブチル（０．５８ｍＬ、４．４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を更に１時間冷却撹拌してから、水（７ｍＬ）中のアジ化ナトリウム（０．３８５ｇ、５．９２ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物を一晩撹拌し、冷却浴槽を室温にゆっくりと加温した。次いで、混合物を水で希釈し（１００ｍＬ）、酢酸エチル（２×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物をＮａＨＣＯ_３水溶液（１×１５０ｍＬ）および食塩水（１×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。トルエン（２×３０ｍＬ）と共蒸発させた後、得られたオフホワイト色固形物をトルエン（２５ｍＬ）に入れ、４時間還流した。次いで、（Ｓ）－３－キヌクリジノール（０．７５３ｇ、５．９２ｍｍｏｌ）を添加し、還流を３時間継続した。反応物を濃縮し、残渣を、クロロホルム／メタノール／アンモニア勾配を使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を白色固形物（０．７９３ｇ、６９％）として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.90-7.81 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.14-7.05 (m, 2H), 5.76 (br s, 1H), 4.72-4.65 (m, 1H), 3.26-3.10 (m, 1H), 3.03-2.37 (m, 5H), 2.05-1.23 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 177.6, 162.6 (d, J = 248.4 Hz), 154.8, 153.6, 130.8 (d, J = 3.2 Hz), 128.1 (d, J = 8.1 Hz), 115.9 (d, J = 21.7 Hz), 112.2, 71.6, 55.7, 47.4, 46.5, 29.1, 25.4, 24.7, 19.6 ppm. Purity: 100 % UPLCMS (210 nm & 254 nm); retention time 0.82 min; (M+1) 390.

【0161】

キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物１３）
一般手順Ｆを使用し、反応に２－（４’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－メチルプロパン酸（実施例３に記載するとおりに調製した）およびキヌクリジン－３－オールを用い、表題化合物を無色ガラス状固形物（２３％）として生成した。ＮＭＲデータは、例３のものと一致した。純度：１００％、９９．１％（２１０および２５４ｎｍ）ＵＰＬＣＭＳ；保持時間：０．８７分；（Ｍ＋Ｈ^＋）４３９．０。

【0162】

（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（３’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物１４）
４－（２－メトキシエトキシ）フェニルボロン酸を３－（２－メトキシエトキシ）フェニルボロン酸に交換し、例３で概説する反応順序を使用して、２－（３’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－メチルプロパン酸を調製した。この中間体およびキヌクリジン－３－オールを一般手順Ｆに従って反応させて、表題化合物をガラス状無色固形物として生成した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.63-7.31 (m, 6H), 7.24-7.10 (m, 2H), 6.92 (dd, J = 8.2, 1.9 Hz, 1H), 4.51-4.34 (m, 1H), 4.21-4.08 (m, 2H), 3.72-3.64 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 3.09-2.26 (m, 5H), 2.04-1.22 (m, 9H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d₆) δ 158.9, 154.6, 147.6, 141.5, 137.6, 129.9, 126.3, 125.2, 118.9, 113.2, 112.5, 70.4, 70.0, 66.9, 58.2, 55.4, 54.2, 46.9, 45.9, 29.4, 25.3, 24.2, 19.2 ppm. Purity: 100%, 100% (210 & 254 nm) UPLCMS; retention time: 0.91 min; 15 (M+H⁺) 439.4.

【0163】

キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－３－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物１５）
エチル２－（４－ブロモフェニル）－２－メチルプロパノエートをエチル２－（３－ブロモフェニル）－２－メチルプロパノエートに交換し、例３で概説する反応順序を使用して、２－（４’－（２－メトキシエトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－３－イル）－２－メチルプロパン酸を調製した。この中間体およびキヌクリジン－３－オールを一般手順Ｆに従って反応させて、表題化合物を黄色固形物として生成した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.62-7.20 (m, 7H), 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 4.48-4.35 (m, 2H), 4.18-4.08 (m, 2H), 3.72-3.62 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 3.10-2.19 (m, 6H), 2.10-1.10 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d₆) δ 158.0, 154.6, 148.8, 139.5, 133.1, 128.5, 127.7, 123.8, 123.2, 122.7, 114.8, 70.4, 69.9, 67.0, 58.2, 55.3, 54.5, 47.0, 45.9, 29.4, 25.3, 24.2, 19.2 ppm. Purity: 97.4%, 94.6% (210 & 254 nm) UPLCMS; retention time: 0.88 min; (M+H⁺) 439.3.

【0164】

キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（３－メトキシプロポキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物１６）
アセトニトリル（１００ｍＬ）中の４－ヨードフェノール（１０．０５ｇ、４５．６８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、炭酸カリウム（６．９５ｇ、５０．２ｍｍｏｌ）および１－クロロ－３－メトキシプロパン（６．４ｍＬ、５７．１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を一晩加熱還流し、次いで濃縮した。残渣を水に入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた抽出物を重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。粗製材料を、ヘキサン／酢酸エチル溶出液を使用したシリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１－ヨード－４－（３－メトキシプロポキシ）ベンゼンを無色油状物として（４．３９ｇ、３３％）得た。この中間体およびエチル２－メチル－２－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェニル）プロパノエートを一般手順Ｅに従って反応させて、エチル２－（４’－（３－メトキシプロポキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－メチルプロパノエートを生成した。１：１：１（ｖ／ｖ／ｖ）のテトラヒドロフラン／エタノール／水（１０ｍＬ）中のこの化合物（０．６９３ｇ、１．９４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水酸化リチウム一水和物（０．３２６ｇ、７．７７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を一晩加熱還流し、次いで濃縮した。残渣を水中に溶解し、１Ｎ塩酸（１０ｍＬ）で処置し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、２－（４’－（３－メトキシプロポキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－メチルプロパン酸をワックス状オフホワイト色固形物（０．６３０ｇ、９９％）として得た。この中間体およびキヌクリジン－３－オールを一般手順Ｆに従って反応させて、表題化合物をガラス状無色固形物（６２％）として生成した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.61-7.29 (m, 7H), 7.00 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 4.47-4.36 (m, 1H), 4.05 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.48 (t, J=6.3 Hz, 2H), 3.26 (s, 3H), 3.10-2.25 (m, 6H), 2.04-1.74 (m, 4H), 1.65-1.23 (m, 9H) ppm.¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 158.0, 154.5, 146.7, 137.4, 132.4, 127.5, 125.7, 125.2, 114.8, 69.9, 68.5, 64.6, 57.9, 55.4, 54.2, 46.9, 46.0, 29.4, 29.0, 25.2, 24.1, 19.2 ppm. Purity: 97.7%, 98.2% (210 & 254 nm) UPLCMS; retention time: 0.96 min; (M+H⁺) 453.5.

【0165】

キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（ヒドロキシメチル）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物１７）
一般手順Ｅを使用し、反応にエチル２－（４－ブロモフェニル）－２－メチルプロパノエートおよび４－ホルミルフェニルボロン酸を用い、エチル２－（４’－ホルミル－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－メチルプロパノエートを淡琥珀色固形物として調製した。この中間体およびキヌクリジン－３－オールを一般手順Ｆに従って反応させて、キヌクリジン－３－イル（２－（４’－ホルミル－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートを泡沫状黄色固形物として生成した。２：１（ｖ／ｖ）のテトラヒドロフラン／エタノール（１５ｍＬ）中のこの材料（０．７５５ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（０．０７３ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を添加した。４５分後、反応物を水で希釈し、クロロホルムで抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、シリカ上で濃縮した。クロロホルム／メタノール／アンモニア溶出液を使用したシリカフラッシュクロマトグラフィーによって、表題化合物を白色固形物（０．３２３ｇ、４３％）として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.66-7.29 (m, 9H), 5.18 (t, J= 5.7 Hz, 1H), 4.53 (d, J= 5.7 Hz, 2H), 4.46-4.37 (m, 1H), 3.11-2.19 (m, 6H), 2.11-1.10 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d₆) δ 154.7, 147.3, 141.5, 138.4, 137.7, 127.0, 126.2, 126.1, 125.3, 70.0, 62.6, 55.4, 54.2, 46.9, 45.9, 29.4, 25.3, 24.2, 19.2 ppm. Purity: 97.5%, 99.1 % (210 & 254 nm) UPLCMS; retention time: 0.73 min; (M+H⁺) 395.

【0166】

キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（２－ヒドロキシエチル）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物１８）
一般手順Ｅを使用し、反応に１－（２－（ベンジルオキシ）エチル）－４－ブロモベンゼンおよびエチル２－メチル－２－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェニル）プロパノエートを用い、エチル２－（４’－（２－（ベンジルオキシ）エチル）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－メチルプロパノエートを無色ゴム状物として調製した。１：１：１（ｖ／ｖ／ｖ）のテトラヒドロフラン／エタノール／水（１８ｍＬ）中のこの化合物（１．３４ｇ、３．３３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水酸化リチウム一水和物（０．６９８ｇ、１６．６ｍｍｏｌ）を添加した。一晩加熱還流後、反応物を濃縮し、水とジエチルエーテルとの間で分割した。得られたエマルションを０．２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（５×５０ｍＬ）で繰り返し抽出した。水性層の透明部分を毎回除去した。次いで、合わせた水性層を１．０Ｎ塩酸（８０ｍＬ）で処置し、得られた白色固形物の懸濁液を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、２－（４’－（２－（ベンジルオキシ）エチル）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－メチルプロパン酸を白色固形物（１．２０ｇ、９６％）として得た。この化合物およびキヌクリジン－３－オールを一般手順Ｆに従って反応させて、キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（２－ベンジルオキシエチル）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートを生成した。メタノール中のこの材料（０．４３５ｇ、０．８０６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１．０Ｎ塩酸（１ｍＬ）および１０％炭素上パラジウム（５０％水；０．０８７ｇ）を添加した。混合物を真空と窒素パージとの間で数回循環させ、最後に排気した後に水素を再充填した。１．２５時間後、反応物をセライトろ過し、濃縮した。残渣を炭酸ナトリウム水溶液に入れ、４：１（ｖ／ｖ）のクロロホルム／イソプロパノールで抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、シリカ上で濃縮した。クロロホルム／メタノール／アンモニア勾配を使用したシリカフラッシュクロマトグラフィーによって、精製した表題化合物を無色固形物として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.85-7.63 (m, 1H), 7.63-7.19 (m, 8H), 4.78-4.62 (m, 2H), 3.71-2.78 (m, 8H), 2.76 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.26-1.96 (m, 2H), 1.96-1.40 (m, 9H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d₆) δ 153.8, 146.8, 138.7, 137.9, 137.6, 129.4, 126.3, 126.1, 125.3, 66.2, 62.1, 54.4, 52.8, 45.4, 44.5, 38.6, 29.5, 29.2, 24.0, 19.9, 16.6 ppm. Purity: 100%, 100% (210 & 254 nm) UPLCMS; retention time: 0.75 min; (M+H⁺) 409.

【0167】

キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－（３－メトキシプロポキシ）フェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物１９）
エタノール（７５ｍＬ）中の４－メトキシチオベンズアミド（９．９９ｇ、５９．７ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、４－クロロアセト酢酸エチル（８．１ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を４時間加熱還流してから、冷却し、追加のエチル４－クロロアセト酢酸エチル（０．８１ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を追加し、還流に戻した。更に４時間加熱した後、反応物を濃縮し、酢酸エチルと重炭酸ナトリウム水溶液との間で分割した。有機層を追加の酢酸エチル抽出物と合わせ、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。粗製生成物を、ヘキサン／酢酸エチル勾配を使用したシリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、エチル２－（２－（４－メトキシフェニル）チアゾール－４－イル）アセテートを淡琥珀色油状物（１４．５１ｇ、８７％）として得た。Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１２５ｍＬ）中のこの化合物（１４．４８ｇ、５２．２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水素化ナトリウム（鉱油中の６０％分散体；６．２７ｇ、１５７ｍｍｏｌ）を１５分にわたって少しずつ添加した。得られた赤色懸濁液を冷却し（０℃）、ヨードメタン（９．８０ｍＬ、１５７ｍｍｏｌ）を１０分にわたって滴下処置した。冷却浴槽を除去し、反応物を４時間撹拌してから濃縮し、残渣を酢酸エチルと水との間で分割した。有機層を水で更に２回洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル勾配を使用したシリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、エチル２－（２－（４－メトキシフェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパノエートを淡琥珀色油状物（１４．１２ｇ、８９％）として得た。塩化メチレン（２５０ｍＬ）中のこの中間体（１４．１２ｇ、４６．２４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、三臭化ホウ素（１１．０ｍＬ、１１６ｍｍｏｌ）を５分にわたって滴加した。一晩撹拌後、反応物を、メタノール（約２０ｍＬ）をゆっくり添加することによりクエンチし、次いで濃縮した。残渣を、メタノール（２５０ｍＬ）および濃硫酸（７．０ｍＬ）に入れた。撹拌溶液を２時間加熱還流し、濃縮し、酢酸エチルと重炭酸ナトリウム水溶液との間で分割した。有機層を水性層の第２の酢酸エチル抽出物と合わせ、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、メチル２－（２－（４－ヒドロキシフェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパノエートを白色固形物（１２．５６ｇ、９８％）として得た。アセトン（３０ｍＬ）中の１－ブロモ－３－メトキシプロパン（１．６６ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、フェノール中間体（２．００ｇ、７．２１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１．２５ｇ、９．０４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を一晩加熱還流し、ろ過し、濃縮した。残渣を、ヘキサン／酢酸エチル勾配を使用したシリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、メチル２－（２－（４－（３－メトキシプロポキシ）フェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパノエートをかすかに琥珀色のゴム状物（２．４７ｇ、９８％）として得た。１：１：１（ｖ／ｖ／ｖ）のテトラヒドロフラン／エタノール／水（４５ｍＬ）中のこの化合物（２．４５ｇ、７．０１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水酸化リチウム一水和物（１．４７ｇ、３５．０ｍｍｏｌ）を添加した。一晩撹拌後、反応物を濃縮し、水とジエチルエーテルとの間で分割した。水性層を１．０Ｎ塩酸（４０ｍＬ）で処置し、酢酸エチルで抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、２－（２－（４－（３－メトキシプロポキシ）フェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパン酸を白色固形物（２．１９ｇ、４０９３％）として得た。この化合物およびキヌクリジン－３－オールを一般手順Ｆに従って反応させて、表題化合物を軟らかくかすかに琥珀色の固形物として生成した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.82 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.36 (br s, 1H), 7.24 (br s, 1H), 7.03 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 4.49-4.41 (m, 1H), 4.07 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.48 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.26 (s, 3H), 3.09-2.26 (m, 6H), 2.02-1.91 (m, 2H), 1.91-1.03 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ165.8, 162.4, 160.0, 154.6, 127.5, 126.1, 114.9, 112.1, 70.1, 68.4, 64.8, 57.9, 55.4, 53.5, 46.9, 45.9, 28.9, 28.3, 25.2, 24.2, 19.2 ppm. Purity: 100%, 100% (210 & 254 nm) UPLCMS; retention time: 0.87 min; (M+H⁺) 460.

【0168】

キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－（２－メトキシエトキシ）フェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物２０）
アセトン中の２－ブロモエチルメチルエーテル（１．８８ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、メチル２－（２－（４－ヒドロキシフェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパノエート（実施例１９に記載するとおりに調製した、２．００ｇ、７．２１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１．５６ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）を添加した。一晩加熱還流後、混合物を、追加の２－ブロモエチルメチルエーテル（１．８８ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１．５６ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）で処置した。反応物を２晩加熱還流し、ろ過し、濃縮した。残渣を、ヘキサン／酢酸エチル勾配を使用したシリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、メチル２－（２－（４－（２－メトキシエトキシ）フェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパノエートを白色固形物（２．７１ｇ、９０％）として得た。１：１：１（ｖ／ｖ／ｖ）のテトラヒドロフラン／エタノール／水（５０ｍＬ）中のこの化合物（２．７１ｇ、８．０８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水酸化リチウム一水和物（１．７０ｇ、４０．５ｍｍｏｌ）を添加した。一晩撹拌後、反応物を濃縮し、水とジエチルエーテルとの間で分割した。水性層を１．０Ｎ塩酸（４１ｍＬ）で処置し、酢酸エチルで抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、２－（２－（４－（２－メトキシエトキシ）フェニル）チアゾール－４－イル）－２－メチルプロパン酸を白色固形物（２．５７ｇ、９９％）として得た。この化合物およびキヌクリジン－３－オールを一般手順Ｆに従って反応させて、表題化合物を淡琥珀色固形物として生成した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.36 (br s, 1H), 7.24 (br s, 1H), 7.04 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.49-4.41 (m, 1H), 4.19-4.12 (m, 2H), 3.71-3.65 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 3.11-2.87 (m, 1H), 2.86-2.19 (m, 5H), 1.92-1.16 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d₆) δ 165.7, 162.9, 159.9, 154.6, 127.5, 126.2, 114.9, 112.2, 70.3, 70.1, 67.1, 58.2, 55.4, 53.5, 46.9, 45.9, 28.3, 25.2, 24.3, 19.2 ppm. Purity: 100%, 100% (210 & 254 nm) UPLCMS; retention time: 0.85 min; (M+H⁺) 446.

【0169】

キヌクリジン－３－イル２－（５－（４－（２－メトキシエトキシ）フェニル）ピリジン－２－イル）プロパン－２－イルカルバメート（化合物２１）
一般手順Ｅを使用し、反応に５－ブロモピコリノニトリルおよび２－（４－（２－メトキシエトキシ）フェニル）－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランを用い、５－（４－（２－メトキシエトキシ）フェニル）ピコリノニトリルを調製した。三塩化セリウム（８．０５ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）をフラスコに入れ、真空下で３時間加熱することによって（１７０℃）乾燥させた。固形物をテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に入れ、３０分間激しく撹拌した。懸濁液を－７８℃に冷却し、ジエチルエーテル（７．２ｍＬ、２１．６ｍｍｏｌ）中のメチルリチウムの３．０Ｍ溶液で滴下処置した。添加後、反応物を－７８℃で１時間撹拌してから、テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の上記アリールボレート（１．８３ｇ、７．２０ｍｍｏｌ）溶液を添加した。混合物を－７８℃で２時間維持し、次いで室温に加温した。この時点で、反応物を、水酸化アンモニウム水溶液（１０ｍＬ）を添加することによってクエンチし、セライトプラグに通してろ過した。ろ液を酢酸エチルで抽出し、合わせた抽出物を食塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。残渣を、酢酸エチル溶出液を使用したシリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２－（５－（４－（２－メトキシエトキシ）フェニル）ピリジン－２－イル）プロパン－２－アミンを黄色固形物（０．８００ｇ、３９％）として得た。水（１０ｍＬ）および濃塩酸（０．４４ｍＬ）中のこの中間体（０．５００ｇ、１．７５ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、トルエン（１０ｍＬ）を添加した。混合物を冷却し（０℃）、同時にトルエン（１０ｍＬ）中のトリホスゲン（０．７７６ｇ、２．６２ｍｍｏｌ）および水（２０ｍＬ）中の重炭酸ナトリウム（２．２ｇ、２６ｍｍｏｌ）の溶液で１時間にわたって処置した。添加後、反応物を更に３０分間撹拌してから、上部のトルエン層を除去し、乾燥させた（Ｎａ_２ＳＯ_４）。同時に、テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中のキヌクリジン－３－オール（０．４４５ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液を、水素化ナトリウム（鉱油中の６０％分散体；０．１５４ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）で処置した。この混合物を５分間撹拌し、次いでトルエン中の粗製イソシアネート溶液に添加した。反応物を１０分間撹拌し、食塩水（５ｍＬ）を添加してクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。残渣を逆相シリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を淡黄色固形物（０．１００ｇ、１３％）として得た。¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 8.70-8.70 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83-7.81 (m, 1H), 7.49-7.47 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.45-7.43 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.03-7.01 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.63 (br s, 1H), 4.68-4.66 (m, 1H), 4.16 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.77 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.45 (s, 3H), 3.19-2.70 (m, 6H), 2.15-1.89 (m, 2H), 1.76 (s, 6H), 1.73-1.36 (m, 3H) ppm. ¹³C NMR (125 MHz, CDCl₃) δ 162.7, 158.9, 154.9, 145.9, 134.8, 134.3, 130.1, 128.1, 119.2, 115.2, 71.0, 70.8, 67.4, 59.2, 55.9, 55.7, 47.4, 46.5, 46.4, 27.9, 25.4, 24.6, 19.5 ppm. Purity: >99% (214 & 254 nm) LCMS; retention time: 1.32 min; (M+H⁺) 440.2.

【0170】

キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（３－シアノプロポキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物２２）
アセトニトリル（１５０ｍＬ）中の４－ブロモフェノール（１７．１ｇ、９８．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１－ブロモブチルニトリル（１２．３ｍＬ、１２４ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１５．０ｇ、１０９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を一晩加熱還流し、冷却し、濃縮した。残渣を水に入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮し、粗製材料を、ヘキサン／酢酸エチル溶出液を使用したシリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４－（４－ブロモフェノキシ）ブタンニトリルを白色固形物（２０．８ｇ、８８％）として得た。Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中のこの生成物の撹拌溶液に、ビス（ピナコラト）ジボロン（４．６０ｇ、１８．１ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（７．４１ｇ、７５．５ｍｍｏｌ）および［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］－ジクロロパラジウム（ＩＩ）とジクロロメタンとの錯体（０．６１６ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を一晩加熱還流し、次いで濃縮した。残渣を酢酸エチルに入れ、水および食塩水で洗浄した。有機層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮し、粗製生成物を、ヘキサン／酢酸エチル溶出液を使用したシリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノキシ）ブタンニトリルを白色固形物（３．４３ｇ、７９％）として得た。この生成物およびキヌクリジン－３－イル（２－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－イル）カルバメート（一般手順Ｆを使用してキヌクリジン－３－オールおよび２－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－アミンを反応させることによって調製した）を一般手順Ｅに従って反応させて、表題化合物を白色固形物として生成した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.67-7.26 (m, 7H), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.50-4.33 (m, 1H), 4.08 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.14-2.18 (m, 8H), 2.04 (quin, J = 6.7 Hz, 2H), 1.94-1.70 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d₆) δ 157.7, 154.5, 146.8, 137.4, 132.7, 127.6, 125.7, 125.2, 120.2, 114.9, 70.0, 65.8, 55.4, 54.2, 46.9, 45.9, 29.4, 25.3, 24.7, 24.2, 19.2, 13.4 ppm. Purity: 100%, 98.9% (210 & 254 nm) UPLCMS; retention time: 0.88 min; (M+H⁺) 448.6.

【0171】

キヌクリジン－３－イル（２－（４’－（シアノメトキシ）－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（化合物２３）
一般手順Ｅを使用し、反応にキヌクリジン－３－イル（２－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－イル）カルバメート（一般手順Ｆを使用してキヌクリジン－３－オールおよび２－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－アミンを反応させることによって調製した）および４－（シアノメトキシ）フェニルボロン酸を用い、表題化合物を淡琥珀色固形物として調製した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.65 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 7.60-7.31 (m, 5H), 7.15 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 5.21 (s, 2H), 4.53-4.30 (m, 1H), 3.18-2.19 (m, 6H), 2.05-1.18 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d₆) δ155.8, 154.6, 147.2, 137.2, 134.4, 127.8, 126.0, 125.3, 116.7, 115.3, 70.0, 55.4, 54.2, 53.5, 46.9, 45.9, 29.4, 25.2, 24.2, 19.2 ppm. Purity: 100%, 100% (210 & 254 nm) UPLCMS; retention time: 0.85 min; (M+H⁺) 420.3.

【実施例2】

【0172】

（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート遊離塩基の調製
工程１：ヨウ化メチルを用いたジメチル化

【化12】

３Ｎ ＲＢフラスコは、サーモメーター、添加漏斗および窒素入口を備えていた。フラスコに窒素を流し、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（ＭＷ１１２．２１、７５．４ｍｍｏｌ、８．４６ｇ、４．０当量、白色粉末）を秤量し、粉末漏斗を介してフラスコに添加し、続いてＴＨＦ（６０ｍＬ）を添加した。大部分のカリウムｔｅｒｔ－ブトキシドが溶解すると、濁った溶液が得られた。この混合物を氷水浴槽中で０～２℃（内部温度）に冷却した。別のフラスコ中で、出発エステル（ＭＷ２６５．３、１８．８５ｍｍｏｌ、５．０ｇ、１．０当量）をＴＨＦ（１８ｍＬ＋すすぎとして２ｍＬ）中に溶解し、添加漏斗に移した。この溶液を冷却した混合物に２５～３０分にわたって滴加し、添加中は内部温度を５℃未満に維持した。反応混合物を冷却し、０～２℃に戻した。別のフラスコ中に、ＴＨＦ（６ｍＬ）中のヨウ化メチル（ＭＷ１４１．９４、４７．１３ｍｍｏｌ、６．７ｇ、２．５当量）の溶液を調製し、添加漏斗に移した。次いで、ヨウ化メチル溶液を含むフラスコをＴＨＦ（１．５ｍＬ）ですすぎ、次いで、ＴＨＦ中のヨウ化メチルの透明無色溶液をすでに含む添加漏斗に移した。この溶液を暗褐色の反応混合物に３０～４０分にわたって慎重に滴加し、添加中は常に内部温度を１０℃未満に維持した。添加が完了した後、わずかに濁った混合物を更に１時間撹拌し、その間に内部温度は０～５℃に低下した。０～５℃で１時間撹拌後、反応混合物を、５．０Ｍ ＨＣｌ水溶液（８ｍＬ）をゆっくりと滴加しながら５～７分にわたってクエンチした。この添加の間、内部温度を２０℃未満に維持した。添加後、水（１４ｍＬ）を添加し、混合物を２～３分間撹拌した。撹拌を停止し、２つの層を分離した。次いで、２つの層を２５０ｍＬの１Ｎ ＲＢフラスコに移し、ＴＨＦを可能な限り真空中で蒸発させて、ＴＨＦ／生成物および水の二相性層を得た。２つの層を分離した。工程１の生成物のＴＨＦ溶液を次の反応において使用した。

【0173】

工程２：ＬｉＯＨ一水和物を用いたエチルエステルの加水分解

【化13】

ＴＨＦ中の粗製エステルを反応フラスコに添加した。個別に、ＬｉＯＨ．Ｈ_２Ｏ（ＭＷ４１．９６、７５．０ｍｍｏｌ、３．１５グラム、２．２当量）を、撹拌子が添加された１００ｍＬのビーカー中に秤量した。水（４０ｍＬ）を添加し、混合物を、全ての固形物が溶解するまで撹拌して、透明無色溶液を得た。次いで、この水溶液を、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中のエステル溶液を含む２５０ｍＬのＲＢフラスコに添加した。コンデンサーをフラスコの首に取り付け、窒素入口をコンデンサーの上部に取り付けた。混合物を１６時間加熱還流した。１６時間後、加熱を中止し、混合物を室温に冷却した。ＴＨＦを真空中で蒸発させて、茶色溶液を得た。茶色水溶液のアリコートをＨＰＬＣおよびＬＣ／ＭＳによって分析して、エチルエステルの加水分解を完了させた。水（１５ｍＬ）を添加し、この水性塩基性溶液をＴＢＭＥ（２×４０ｍＬ）で抽出して、ｔ－ブチルエステルを除去した。水性塩基性層を、氷水浴槽中で０～１０℃に冷却し、濃ＨＣｌを滴加し、撹拌しながら酸性化してｐＨを約１とした。水性酸性溶液中のこの粘着性の固形物にＴＢＭＥ（６０ｍＬ）を添加し、混合物を振とうし、次いで激しく撹拌して、全ての酸をＴＢＭＥ層に溶解させた。２つの層を分液漏斗に移し、ＴＢＭＥ層を分離した。淡黄色水性酸性溶液をＴＢＭＥ（４０ｍＬ）で再抽出し、ＴＢＭＥ層を分離し、前述のＴＢＭＥ層と合わせた。水性酸性層を廃棄した。合わせたＴＢＭＥ層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ろ過し、真空中で蒸発させて、ＴＢＭＥを除去し、粗製酸をオレンジ／暗黄色油状物として得、これを高真空下で固形化して、くすんだ黄色固形物とした。粗製酸を秤量し、ヘプタン／ＴＢＭＥ（３：１、５ｍＬ／ｇ粗製物）中でそれを加熱することによって結晶化して、酸を黄色固形物として得た。

【0174】

工程３：ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌを用いたヒドロキサム酸の形成

【化14】

カルボン酸（ＭＷ２６５．３、１８．８５ｍｍｏｌ、５．０ｇ、１．０当量）を秤量し、２５ｍＬの１Ｎ ＲＢフラスコに窒素下で移した。ＴＨＦ（５．０ｍＬ）を添加すると酸は容易に溶解して、透明暗黄色から茶色の溶液を得た。溶液を、氷浴槽中で０～２℃（浴槽温度）に冷却し、Ｎ、Ｎ’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ；ＭＷ１６２．１５、２０．７４ｍｍｏｌ、３．３６ｇ、１．１当量）を、１０～１５分にわたって少量ずつゆっくりと添加した。氷浴槽を除去し、溶液を室温で１時間撹拌した。１時間撹拌した後、溶液を氷水浴槽中で０～２℃（浴槽温度）に再び冷却した。ヒドロキシルアミン塩酸塩（ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ；ＭＷ６９．４９、３７．７ｍｍｏｌ、２．６２ｇ、２．０当量）を、この添加が発熱性であったため、少量ずつ３～５分にわたって固形物のままゆっくりと添加した。添加が完了した後、水（１．０ｍＬ）を不均質な混合物へ２分にわたって滴加し、反応混合物を氷水浴槽中、０～１０℃で５分間撹拌した。冷却浴槽を除去し、反応混合物を窒素下、室温で一晩２０～２２時間撹拌した。全てのＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌが溶解するにつれて、溶液は透明になった。２０～２２時間後、反応混合物のアリコートを、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって分析した。次いで、ＴＨＦを真空中で蒸発させ、残渣をジクロロメタン（１２０ｍＬ）および水（６０ｍＬ）に入れた。混合物を分液漏斗に移し、それを振とうし、２つの層に分離させた。水層を廃棄し、ジクロロメタン層を１Ｎ塩酸塩（ＨＣｌ；６０ｍＬ）で洗浄した。酸層を廃棄した。ジクロロメタン層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、溶媒を真空中で蒸発させて、粗製ヒドロキサム酸を淡黄色固形物として得、それを高真空下で一晩乾燥させた。

【0175】

工程３の続き：ヒドロキサム酸の環式中間体への変換（単離なし）

【化15】

粗製ヒドロキサム酸（ＭＷ２８０．３２、５．１ｇ）を、窒素入口を備えた２５０ｍＬの１Ｎ ＲＢフラスコに移した。撹拌子を添加し、続いてアセトニトリル（５０ｍＬ）を添加した。固形物はアセトニトリル中で不溶性であった。黄色の不均質な混合物を、窒素下で２～３分間撹拌し、ＣＤＩ（ＭＷ１６２．１５、２０．７４ｍｍｏｌ、３．３６ｇ、１．１当量）を、室温で一度に添加した。発熱は観察されなかった。固形物をただちに溶解し、透明黄色溶液を室温で２～２．５時間撹拌した。２～２．５時間後、アリコートをＨＰＬＣおよびＬＣ／ＭＳによって分析し、それによってヒドロキサム酸の所望の環式中間体への変換が示された。

【0176】

次いで、アセトニトリルを真空中で蒸発させて、粗製環式中間体を赤みがかった濃厚な油状物として得た。油状物をトルエン（６０ｍＬ）に入れ、赤みがかった混合物を２時間加熱還流すると、その間に環式中間体がＣＯ_２を放出し、イソシアネートに転位した（以下を参照のこと）。

【化16】

【0177】

工程３の続き：イソシアネートの遊離塩基への変換

【化17】

反応混合物を５０～６０°Ｃに冷却し、（Ｓ）－（＋）－キヌクリジノール（ＭＷ１２７．１８、２８．２８ｍｍｏｌ、３．６ｇ、１．５当量）を、混合物へ固形物のまま一度に添加した。混合物を１８時間再び加熱還流した。１８時間後、アリコートをＨＰＬＣおよびＬＣ／ＭＳによって分析し、それによって、イソシアネートの所望の生成物への変換が完了したことが示された。反応混合物を分液漏斗に移し、トルエン（２５ｍＬ）を添加した。混合物を水（２×４０ｍＬ）で洗浄し、水層を分離した。合わせた水層をトルエン（３０ｍＬ）で再抽出し、水層を廃棄した。合わせたトルエン層を１Ｎ ＨＣｌ（２×６０ｍＬ）で抽出し、トルエン層（Ｏ－アシル不純物を含む）を廃棄した。合わせたＨＣｌ層を、撹拌子を備えた５００ｍＬの三角フラスコに移した。この撹拌されている透明な黄色／赤みがかったオレンジ色溶液を、５０％ｗ／ｗ ＮａＯＨ水溶液を滴加することによってｐＨ１０～１２に塩基性化した。所望の遊離塩基が、くすんだ黄色粘着性固形物として溶液から析出し、これは撹拌子で捕捉することができた。この混合物に酢酸イソプロピル（１００ｍＬ）を添加し、粘着性固形物が酢酸イソプロピルに移行した場合、混合物を５分間激しく撹拌した。撹拌を停止し、２つの層を分離した。黄色の酢酸イソプロピル層を分離し、塩基性水性層を酢酸イソプロピル（３０ｍＬ）で再抽出した。塩基性水性層を廃棄し、合わせた酢酸イソプロピル層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、あらかじめ秤量されたＲＢフラスコ中にろ過し、溶媒を真空中で蒸発させて、粗製遊離塩基をベージュ色から黄褐色固形物として得、それを高真空下で一晩乾燥させた。

【0178】

工程３の続き：粗製遊離塩基の再結晶
ベージュ色から黄褐色の粗製遊離塩基を秤量し、ヘプタン／酢酸イソプロピル（３：１、溶媒９．０ｍＬ／粗製遊離塩基１ｇ）から再結晶化した。適切な量のヘプタン／酢酸イソプロピルを、粗製遊離塩基および撹拌子へ添加し、混合物を１０分間加熱還流した（遊離塩基は最初に部分的に溶解したが、加熱還流した場合、溶解し、透明な赤みがかったオレンジ色溶液が得られた）。白色沈殿物が形成された場合、熱源を除去し、混合物を撹拌しながら室温に冷却した。室温で３～４時間撹拌した後、沈殿物を、真空ホースでブフナー漏斗を使用してろ過除去し、ヘプタン（２０ｍＬ）で洗浄し、ブフナー漏斗上、真空ホースで一晩乾燥させた。沈殿物を結晶皿に移し、真空オーブン中、５５℃で一晩乾燥させた。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.04 - 7.83 (m, 2H), 7.20 - 6.99 (m, 3H), 5.53 (s, 1H), 4.73 - 4.55 (m, 1H), 3.18 (dd, J = 14.5, 8.4 Hz, 1H), 3.05 - 2.19 (m, 5H), 2.0 - 1.76 (m, 11H) ppm. ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 166.38, 165.02, 162.54, 162.8-155.0 (d, C-F), 130.06, 128.43, 128.34, 116.01, 115.79, 112.46, 71.18, 55.70, 54.13, 47.42, 46.52, 27.94, 25.41, 24.67, 19.58 ppm.

【実施例3】

【0179】

（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート塩の結晶形態の調製
（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートの結晶質の塩は、実施例２３に記載するとおりに調製した遊離塩基から形成してもよい。

【0180】

例えば、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル（２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメートの遊離塩基（約５０ｍｍｏｌ）を、ＩＰＡ（１４０ｍｌ）中に室温で溶解し、ろ過する。ろ液を、オーバーヘッド撹拌機および窒素入口／出口を備えた１Ｌのｒ．ｂ．フラスコに添加する。Ｌ－リンゴ酸（約５０ｍｍｏｌ）をＩＰＡ（１００＋３０ｍｌ）中に室温で溶解し、ろ過する。ろ液を、上記１リットルのフラスコに添加する。得られた溶液を、窒素下、室温で４から２４時間撹拌する（播種の有無にかかわらず）。この時間内に結晶が形成される。生成物をろ過収集し、少量のＩＰＡ（３０ｍｌ）で洗浄する。結晶質の固形物を真空オーブン中、５５℃で７２時間乾燥させて、所望のリンゴ酸塩を得る。

【0181】

他の塩の結晶形態、例えばコハク酸またはＨＣｌとの酸付加塩は、同様の様式で調製してもよい。

【実施例4】

【0182】

繊毛構造およびシグナル伝達に対する化合物１の効果
マウスモデル
ＡＢｂｓ２^－／－マウスモデルは、Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ ＤＹ ｅｔ ａｌ．（Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ，１０１：１６５８８－１６５９３（２００４））によって記載されており、Ｂｂｓ２のエクソン５～１４がネオマイシンカセットで置き換えられている。マウスを１２９／ＳｖＪバックグラウンドに戻し交配した。処置したＢｂｓ２^－／－マウスには、１カ月から６カ月の月齢まで食餌に組み込まれた０．０３３％ｗ／ｗの化合物１を自由に与えた。Ｂｂｓ２^－／－およびＷｔ対照動物には、通常の５０５３固形飼料（ＬａｂＤｉｅｔ）を与えた。代謝疾患を確立するために、Ｂｂｓ２^－／－マウスを４カ月の月齢まで未処置のままにし、次いで５および６カ月目は食事に組み込まれた化合物１を用いて処置した。

【0183】

細胞培養および一次繊毛染色
野生型およびＢｂｓ２^－／－腎臓上皮細胞株を確立し、すでに記載されているように維持した（Ｎａｔｏｌｉ Ｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｍｅｄ，１６：７８８－７９２（２０１０）；およびＨｕｍｅｓ ＨＤ．ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓ，３９：１０７８－１０８７（２００２）を参照のこと）。細胞を、１％ペニシリン／ストレプトマイシン、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ中、コラーゲンＩで被覆されたガラススライド上で培養した。化合物の繊毛および脂質局在化に対する効果を判定するために、細胞を血清不含培地中で２４時間培養し、続いて化合物１を６～２４時間添加した。次いで、細胞を４％パラホルムアルデヒドで固定し、続いて、抗ＧＭ３（Ｃｒｅａｔｉｖｅ Ｂｉｏｌａｂｓ）、抗セラミド（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）、抗ＧＭ１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、および抗アセチル化チューブリン（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）抗体を用いて免疫蛍光法を行った。繊毛の長さを、Ｍｅｔａｍｏｒｐｈソフトウェアを使用して定量化した。

【0184】

考察および結果
本明細書において記載するキヌクリジン化合物の繊毛構造およびシグナル伝達に対する作用の機序を調べるために、ＷｔおよびＢｂｓ２^－／－マウスからの不死化腎臓上皮細胞を使用した。最初に、突然変異の繊毛の長さに対する効果を分析し、Ｂｂｓ２^－／－細胞はＷＴ細胞と比較して繊毛が短いことが認められた（図１Ａ）。次に、ＷｔおよびＢｂｓ２^－／－細胞におけるスフィンゴ糖脂質（ＧＳＬ）、ＧＭ３、ＧＭ１、およびセラミドの特定のレベルを調べた。免疫蛍光分析によって、ＧＭ３およびセラミドは一次繊毛に局在していたことが示された（図１Ｂ）。ＧＭ３は、Ｗｔと比較してＢｂｓ２^－／－細胞の一次繊毛において豊富であった。Ｗｔマウスと比較して、細胞質Ｂｂｓ２^－／－細胞におけるセラミドレベルの上昇も認められた。ＧＭ１は繊毛に局在していなかったが、細胞内のビヒクルコンパートメントに局在していた（図１Ｂ）。

【0185】

最後に、ＷｔおよびＢｂｓ２^－／－細胞におけるＧＳＬ分布に対する化合物１を用いた処置の効果を研究した。この化合物１を用いた処置はＧＭ３の分布に最も大きな効果を与えた。処置によって繊毛が伸長し、ＧＭ３局在化が、ＷＴ細胞において観察されたものと同様まで回復する（図１Ｃ）。まとめると、このデータは、Ｂｂｓ２^－／－細胞は、野生型細胞と比較してＧＳＬが誤って局在している短い繊毛よって特徴付けられ、キヌクリジン化合物、例えば化合物１で処置すると、繊毛の長さおよびＧＭ３局在化が野生型細胞において観察されたものと同様まで回復する場合があることを実証した。

【実施例5】

【0186】

化合物１の前臨床ｉｎ ｖｉｖｏ有効性研究
ＧＬ１レベルの評価
ＧＬ１分析
グリコシルセラミドの定量分析を液体クロマトグラフィーおよびタンデムマススペクトロメトリ（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）によって行った。簡潔には、組織１００ｍｇを水１ｍｌ中でＭｉｎｉ Ｂｅａｄｂｅａｔｅｒ（ＢｉｏＳｐｅｃ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｉｎｃ．、Ｂａｒｔｌｅｓｖｉｌｌｅ、ＯＫ）を用いてホモジネートした。ホモジネート１０μｌを、両方とも５ｍＭ酢酸アンモニウムを含む、９０％の９６：２：１：１のアセトニトリル／メタノール／酢酸／水（ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）（移動相Ａ）および１０％の９８：１：１のメタノール／酢酸／水（ｖ／ｖ／ｖ）（移動相Ｂ）１ｍｌで抽出した。試料をＶＸ－２５００チューブボルテックス（ＶＷＲ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、ＬＬＣ、ＭＡ）に５分間乗せ、次いで、８，４００ｒｐｍで４分間遠心分離した（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ、Ｉｎｃ．、ＩＮ）。得られた上澄みをＨＰＬＣバイアルに移して分析を行った。グリコシルセラミドを、ＡＢ Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ ５０００トリプル四重極質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ、ＣＡ）に接続したＡｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐ．、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ）を使用して収集した。グルコシルセラミド（ＧＬ１）およびガラクトシルセラミドを２．１ｍｍ×１５０ｍｍ Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ＨＩＬＩＣシリカカラムを使用した順相ＬＣによって分離した。ＧＬ１標準（グルコセレブロシド、ゴーシェ脾臓；Ｍａｔｒｅｙａ、ＬＬＣ、Ｐｌｅａｓａｎｔ Ｇａｐ、ＰＡ）を使用して定量を行った。

【0187】

考察および結果
前臨床ｉｎ ｖｉｖｏ有効性研究を、ＢＢＳのＢｂｓ２^－／－マウスモデルにおいて化合物１を用いて行った。ＢＢＳのＢｂｓ２^－／－マウスモデルは、肥満、網膜変性症、神経学的および骨格異常、肝臓所見、および無嗅覚症を含むヒトＢＢＳの主要な臨床的特徴を再現している。ＢＢＳの処置における本明細書において記載するキヌクリジン化合物の治療的利点を判定するために、Ｂｂｓ２^－／－マウスを、１から６カ月の月齢まで食餌中の０．０３３％ｗ／ｗの化合物１で処置した。この処置によって、脳、腎臓、肝臓および血清におけるＧＬ１のレベルが減少し、標的への十分な関与が示唆された（図２）（＊ｐ＜０．０５）。

【実施例6】

【0188】

代謝パラメータに対する化合物１の効果
身体組成
身体組成を、ＥｃｈｏＭＲＩ（商標）を使用して分析した。脂肪量および除脂肪量の測定値を記録し、体脂肪パーセントを計算した。身体組成を以下の式を使用して計算した：脂肪量／（脂肪量＋除脂肪量）。

【0189】

食餌消費量
食餌の重量をフードホッパーおよび床敷から記録した。１日あたりの動物１匹あたりの平均餌消費量を以下の式を使用して評価した：［（期間開始時の餌の重量－（期間終了時のホッパー中の餌の重量－期間終了時の床敷中の餌の重量）］／＃ケージ中の動物／＃観察日数。

【0190】

血清レプチン
剖検中に血液を収集し、室温で１５分間インキュベートして、血餅を形成させた。血餅を遠心分離によって１５，０００ｒｐｍで５分間除去して、血清を収集した。レプチンＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して、製造業者の取扱説明書に従ってレプチン濃度を測定した。

【0191】

リアルタイム定量的ＰＣＲ
合計ＲＮＡを、月齢６カ月のマウスから切断し、ホモジネートした脂肪組織から、ＴＲｉｚｏｌおよびクロロホルム抽出、続いてＲＮＡｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ精製（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して単離し、ＮａｎｏＤｒｏｐ ２３００システムを使用して定量化し、Ｈｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙ ｃＤＮＡ Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して逆転写した。ＦａｓおよびＳｒｅｂｆ１のプライマーはＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓから購入した。定量的ＰＣＲを、製造業者の取扱説明書に従ってＴａｑｍａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）を使用して、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ＲＴ－ＰＣＲ機器で各サンプルに関して２回繰り返して行った。ｍＲＮＡの相対量を、比較ＣＴ法を使用して判定して定量化し、ＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡレベルに対して正規化した。

【0192】

細胞体積の計算
自動デジタル画像分析を、Ｖｉｓｉｏｐｈａｒｍ Ｉｍａｇｅ Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェア（ＤＫ－２９７０ Ｈｏｅｒｓｈｏｌｍ、デンマーク、バージョン６．９．１）を使用して、脂肪組織全体で行った。２つの特注アプリケーションを作製し、各デジタル画像に関して連続して実行した。最初のアプリケーションによって、閾値分類を使用して脂肪組織を検出し、領域を関心領域（ＲＯＩ）として輪郭を描いた。第２のアプリケーションによって、閾値を使用してＲＯＩ内の組織を３つのカテゴリー：細胞質（細胞質膜）、脂肪（脂肪細胞）、および他の（望ましくないアーチファクト、大きな血管、他の組織）に分類した。後処理工程には、脂肪を細胞質で囲み、適切な脂肪細胞を選択して、形成因子が０．５未満の任意の脂肪を除去することによって計数することが含まれていた。

【0193】

免疫蛍光法
ＷｔおよびＢｂｓ２^－／－マウスからの脳組織のパラフィン包埋試料を切り取り、４マイクロメートルの切片を圧力鍋中、抗原回復溶液（ＤＡＫＯ）中で煮沸して、抗原マスクを解除した。切片を、３％ＢＳＡを用いて１時間ブロックし、続いてアデニル酸シクラーゼＩＩＩ（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）に対する一次抗体とともにインキュベートして、３％ＢＳＡで４℃で一晩希釈した。Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８二次抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を１：１０００の希釈で使用した。画像は、Ｌｅｉｃａ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ Ｓｕｉｔｅ Ａｄｖａｎｃｅ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅソフトウェア（Ｌｅｉｃａ Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用した４０倍および６０倍の対物レンズを取り付けたＬｅｉｃａ ＤＭ５５００Ｂ顕微鏡で得た。

【0194】

考察および結果
本明細書において記載するキヌクリジン化合物のＢｂｓ２^－／－マウスにおける代謝パラメータに対する効果を評価した。ＢＢＳ患者における代謝異常は、病的状態の主な原因のうちの１つであり、疾患の多くの二次的特徴の一因となることが既知である。この例は、化合物１を用いた処置によって、食餌消費量、体重、および体脂肪において有意な減少が生じたことを示す（図３Ａ）（＊ｐ＜０．０５）。

【0195】

脂肪組織によって抽出されたホルモンである血清レプチンは、野生型動物と比較してＢｂｓ２^－／－マウスにおいて上昇する。化合物１を用いて処置した場合、血清レプチンは野生型レベルに減少する（図３Ａ）。

【0196】

ＢＢＳにおける肥満は、２つの構成要素である、末梢構成要素およびＣＮＳ関連構成要素と関連することが示唆されている（Ｍａｒｉｏｎ Ｖ．ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ Ｍｅｔ．，１６：３６３－３７７（２０１２）を参照のこと）。ＢＢＳ関連肥満における末梢系構成要素の役割を分析するために、Ｂｂｓ２^－／－マウスにおける脂肪生成に対する処置の効果を調べた。Ｂｂｓ２^－／－マウスからの白色脂肪組織を分析すると、脂肪細胞サイズにおいて、野生型対照と比較して有意な増加を伴う脂肪細胞の不均質な母集団が得られた。化合物１を用いて処置することによって、脂肪細胞サイズは減少した（図３Ｂ）（＊ｐ＜０．０５）。Ｂｂｓ２^－／－マウスにおける脂肪細胞サイズの増加は、脂質生成促進の遺伝子Ｓｒｅｂｆ１の発現の増加と相関しており、これは処置した場合にＷｔ対照において観察されたレベルにまで訂正される（図３Ｃ）（＊ｐ＜０．０５）。

【0197】

本明細書において記載するキヌクリジン化合物を用いた処置が、確立された疾患を呈する動物における代謝パラメータに対して効果があるかどうかを判定するために、Ｂｂｓ２^－／－マウスを、４カ月の月齢から開始し２カ月間０．０３３％ｗ／ｗの化合物１を含む食餌で処置した。図４Ａで示すように、この処置によって、１カ月処置した後、未処置対照動物と比較して体重、体脂肪および血清レプチンは減少した。２カ月処置した後の最終時点における脂肪組織の分析でも、脂肪細胞サイズの減少が得られた（図４Ｂ）（＊ｐ＜０．０５）。これらのデータは、処置は、確立された疾患を呈する、例えば、肥満患者の患者集団における効果を有し得ることを示唆する。

【0198】

肥満のＣＮＳ構成要素は、視床下部における繊毛の損失と関連しており、レプチンシグナル伝達における減少および食餌消費量の増加をもたらすことが示唆されている（Ｇｕｏ，ｅｔ ａｌ．，ＰＬＯＳ．，ＤＯＩ：１０．１３７１（２０１６）を参照のこと）。この点を考慮して、視床下部における繊毛も分析した。野生型と比較してＢｂｓ２^－／－マウスにおける繊毛の損失が認められた。この発見は、このマウスモデルにおいて観察された食餌消費量の増加と一致した（上記を参照のこと）。更に、化合物１を用いて処置すると、Ｂｂｓ２^－／－マウスにおいて視床下部の繊毛を保つことが認められた（図５）。総合すると、これらのデータは、処置は、ＢＢＳと関連する肥満の末梢構成要素とＣＮＳ構成要素の両方に対する効果を有し得ることを示唆する。

【実施例7】

【0199】

Ｂｂｓ２^－／－マウス脂肪組織における遺伝子発現に対する化合物１の効果
ＲＮＡ抽出、次世代シークエンシングライブラリーの構築およびデータ分析
全てのＲＮＡを、ＴＲＩｚｏｌ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）およびクロロホルム抽出を使用して、以前に６カ月の月齢の４匹の、Ｗｔ（Ｗｔ＃１～４）、Ｂｂｓ２^－／－（Ｂｂｓ＃１～４）、または１から６カ月の月齢まで食餌中の０．０３３％ｗ／ｗ化合物１（Ｂｂｓ＋Ｃｍｐｄ１＃１～４）で処置したＢｂｓ２^－／－から切断し、急速冷凍した脂肪組織から単離した。ＲＮＡ試料をＲＮＡｅａｓｙＭｉｎｉ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）で更に精製して、ゲノムＤＮＡを除去した。ＲＮＡの濃度および純度をＮａｎｏＤｒｏｐ ８０００ 顕微分光光度計（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて評価した。次いで、４２００ ＴａｐｅＳｔａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いてＲＮＡ完全性を評価した。

【0200】

シークエンシングライブラリーを、製造業者の推奨事項（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）に従って、ＴｒｕＳｅｑ Ｓｔｒａｎｄｅｄ ｍＲＮＡ Ｌｉｂｒａｒｙ Ｐｒｅｐ Ｋｉｔを使用して生成した。シークエンシングを、Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＮｅｘｔＳｅｑ ５００プラットフォーム（２×７５ｂｐのペアエンドリード）でＨｉｇｈ Ｏｕｔｐｕｔ ＮｅｘｔＳｅｑ ５００／５５０ ｖ２．５キットを使用して行った。

【0201】

データ分析を、Ａｒｒａｙ Ｓｔｕｄｉｏ Ｖ１０．１（Ｏｍｉｃｓｏｆｔ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｑｉａｇｅｎ ｃｏｍｐａｎｙ）を用いて行い、Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍ Ｍｏｕｓｅ Ｂｕｉｌｄ ３８にマッピングした。ヒートマップは、ソフトウェア開発者（Ｏｍｉｃｓｏｆｔ）に従って、正規化されたＬｏｇ２発現値の中央値に対してＣｅｎｔｅｒ Ｓｃａｌｅ正規化アルゴリズムを使用して生成する。

【0202】

考察および結果
肥満は、ＢＢＳのような繊毛病の主要な臨床的特徴である（Ｂｅａｌｅｓ，Ｐ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｇｅｎｅｔ．Ｄｅｖ．，１５：３１５－３２３（２００５））。化合物１の脂肪生成に対する役割をより理解するために、ＲＮＡシークエンシング分析を、Ｗｔ、Ｂｂｓ２^－／－および^－化合物１を用いて処置したＢｂｓ２^－／マウスからの脂肪組織に対して行った。Ｗｔ、Ｂｂｓ２^－／－およびＢｂｓ２^－／－＋化合物１の群からの脂肪組織において差次的に発現したｍＲＮＡのヒートマップ分析によって、脂肪生成経路における８１個の差次的に発現した遺伝子が示された。

【0203】

同様の分析を、スフィンゴ糖脂質経路に関与する遺伝子、ならびに本明細書において毛様体形成とも称される一次繊毛の形成およびホメオスタシスに関与する遺伝子に関して行った。ヒートマップによって、スフィンゴ糖脂質および繊毛の経路におけるそれぞれ３３個および５２個の差次的に発現した遺伝子が示された。

【0204】

これらのデータによって、化合物１を用いて処置すると、脂肪生成、毛様体形成に関与する無調節経路における遺伝子およびＢＢＳと関連する脂肪組織において無調節であるスフィンゴ脂質のホメオスタシスに関与する遺伝子の発現が正常化されることを示唆する。

【実施例8】

【0205】

肝臓異常に対するＧＣＳ阻害の効果
ＡＬＴおよびトリグリセリドレベルの測定
トリグリセリドおよびＡＬＴレベルを、ＶｅｔＡＣＥＴＭアナライザー（Ａｌｆａ Ｗａｓｓｅｒｍａｎ、Ｗｅｓｔ Ｃｏｌｄｗｅｌｌ、ＮＪ）を使用して測定した。

【0206】

考察および結果
Ｂｂｓ２^－／－マウスにおける肝臓異常に対する化合物１を用いた処置の効果も調査した。ＢＢＳ患者は、肥満と強く関連する肝臓表現型を発症することが示されている（Ｄａｙ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｇｅｎｅｔ．，８９：５０７－５０９（２０１５）を参照のこと）。これらの患者と同様、Ｂｂｓ２^－／－マウスは、肝臓重量、血清ＡＬＴおよびトリグリセリドにおける上昇を含むいくつかの肝臓異常を有することが特徴付けられ、これらは化合物１を用いて処置した場合に正常化された（図６）。これらのデータは、本明細書において記載するキヌクリジン化合物を用いた処置の効果は、肥満と関連する肝臓表現型も改善させ得ることを示唆する。

【実施例9】

【0207】

網膜変性症に対する化合物１の効果
網膜変性症
Ｂｉｏｐｔｉｇｅｎ Ｅｎｖｉｓｕ Ｒ２２００機器を使用した非侵襲的メージング技術である光干渉断層法（ＯＣＴ）を使用して、２ミクロンの解像度を有する網膜の断面画像を生成して、網膜細胞層の厚さをｉｎ ｖｉｖｏで測定した。

【0208】

免疫蛍光法
ＷｔおよびＢｂｓ２^－／－マウスからの眼のパラフィン包埋試料を調製し、上記のように分析した。使用した一次抗体はロドプシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）およびコーンアレスチン（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）であった。

【0209】

考察および結果
ＢＢＳのいくつかのマウスモデルは、生後間もなく失明につながる進行性の網膜変性症を示している（Ｔｏｂｉｎ ＪＬ ｅｔ ａｌ．，Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．，７：９２６－９３６（２００７）およびＮｉｓｈｉｍｕｒａ ＤＹ ｅｔ ａｌ．、同上を参照のこと）。Ｎｉｓｈｉｍｕｒａによって記載されたＢｂｓ２^－／－マウスモデルも、外顆粒層（ＯＮＬ）の大きな変性、杆体および錐体の数における減少、および網膜におけるアポトーシスレベルの増加によって特徴付けられることが認められた。これらの変化は進行性であることが認められ、Ｂｂｓ２^－／－動物の初期段階において観察された（図７Ａ）。月齢１カ月から５カ月の間化合物１を用いて処置することによって、ＯＮＬの厚さがおよそ２倍増加した（図７Ｂ）（＊ｐ＜０．０５）。杆体－錐体特異的染色の部分的な回復／保存によって明白である網膜の細胞構造の改善（図７Ｃ）も化合物１を用いた処置で観察された。

【実施例10】

【0210】

化合物１の主な嗅覚上皮（ＭＯＥ）に対する効果
嗅覚
動物嗅覚を、Ｙａｎｇ Ｍ． ｅｔ ａｌ．（Ｃｕｒｒ Ｐｒｏｔｏｃ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ， ＤＯＩ：１０．１００２／０４７１１４２３０１．ｎｓ０８２４ｓ４８（２００９））に採用されたプロトコールを使用して試験した。試験前、動物を３日間馴化させ、次いで、Ａｌｐｈａ Ｄｒｉ床敷ケージ内で１８時間絶食させた。報酬（Ｂｉｏｓｅｒｖ Ｓｕｐｒｅｍｅ Ｍｉｎｉ－Ｔｒｅａｔｓ、チョコレートフレーバー）を、３ｃｍの深さの床敷を備えた清潔なケージ内に１ｃｍの深さで埋めた。動物をケージに入れ、報酬を発見し、食べ始めたときの時間を記録した。対象が１０分経過しても埋められた餌を発見できなかった場合、試験を中止し、待ち時間スコアを１０分として記録した。

【0211】

免疫蛍光法
ＷｔおよびＢｂｓ２^－／－マウスからの鼻腔のパラフィン包埋試料を調製し、上記のように分析した。使用した一次抗体は、アセチル化チューブリン（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、サイトケラチン１４（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈ）、ＳＲＹ－Ｂｏｘ ２（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、ダブルコルチン（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、および嗅覚マーカータンパク質（Ｗａｋｏ）であった。

【0212】

考察および結果
本明細書において記載するキヌクリジン化合物を用いた処置は、主な嗅覚上皮（ＭＯＥ）において繊毛を保ったことが認められた。嗅覚における改善を、埋められた報酬を発見するまでの時間の判定に基づいた嗅覚機能試験を用いてｉｎ ｖｉｖｏで評価した。Ｂｂｓ２^－／－マウスは、Ｗｔ動物と比較して嗅覚欠陥を有し、それは化合物１を用いた処置によって回復した（図８Ａ）（＊ｐ＜０．０５）。

【0213】

組織学的検査および免疫蛍光法分析の場合、Ｗｔ対照と比較してＢｂｓ２^－／－マウスのＭＯＥにおける繊毛の特異的染色（ａｃ Ｔｕｂｕｌｉｎ）の有意な減少が観察された（図８Ｂ）。Ｂｂｓ２^－／－マウスにおいて認められた呼吸器官上皮において明らかな異常はなかった（データは示していない）。

【0214】

化合物１を用いて処置することによって、ＭＯＥにおける繊毛の保存／回復と相関する嗅覚が改善した（図８Ｂ）。ｉｎ ｖｉｖｏデータと一致して、Ｂｂｓ２^－／－マウスのＭＯＥは、臭気物質シグナル伝達カスケードを開始する酵素であるアデニル酸シクラーゼＩＩＩ（ＡＣＩＩＩ）の量の減少によって特徴付けられた。処置によって、ＡＣＩＩＩが増加し、臭気物質シグナル伝達カスケードが活性化されたことが示唆された（図８Ｃ）。これらの同じ方針に沿った更なる調査も、ＭＯＥにおける細胞分化に対する本明細書において記載するキヌクリジン化合物を用いた処置の効果を提供した。主な嗅覚上皮は、４つの異なる細胞層：基底細胞（幹細胞）、支持細胞、未成熟ニューロン、および成熟ニューロンから構成される多細胞層であり、これらは幹細胞の成熟ニューロンへの分化を介して再生することができる（ＭｃＩｎｔｙｒｅ Ｊ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｍｅｄ，１８：１４２３－１４２８（２０１２））。この分化プロセスは、未成熟ニューロンの蓄積および成熟ニューロンの減少によって実証されるようにＢｂｓ２^－／－マウスにおいて損なわれている。化合物１を用いた処置によって、野生型動物のものと類似するようにこの表現型が修正された（図９）。これらのデータによって、本明細書において記載するキヌクリジン化合物の作用の機序は分化の調節を介するものであることが示唆された。

【0215】

上記例で示された結果によって、本明細書において記載するキヌクリジン化合物の繊毛病へのｉｎ ｖｉｖｏでの効果を提供し、本明細書において記載するキヌクリジン化合物を投与して繊毛病処置する治療的潜在力を実証することに成功した。

【実施例11】

【0216】

化合物１の脂肪細胞分化に対する効果
Ｉｎ ｖｉｔｒｏでの脂肪細胞分化アッセイ
化合物１の他の突然変異への効果を検討するために、ヒト前脂肪細胞におけるｉｎ ｖｉｔｒｏ分化アッセイを開発した。ＢＢＳ遺伝子ＢＢＳ１、ＢＢＳ２、またはＢＢＳ１０を、ｓｉＲＮＡを使用して細胞においてノックダウンした。このために、ヒト前脂肪細胞ＳＱ細胞（Ｌｏｎｚａ）をＰＧＭ－２前脂肪細胞成長培地－２ＢｕｌｌｅｔＫｉｔ、（Ｌｏｎｚａ）に３０，０００細胞／ｃｍ^２密度でプレートし、３７℃で一晩成長させた。翌日、細胞に、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の存在下、ＯｐｔｉＭｅｍ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中でＢＢＳ１、ＢＢＳ２またはＢＢＳ１０特異的ｓｉＲＮＡをトランスフェクトし、１．２５、１．５、５．０および１０μＭの濃度の化合物１を含んでいるかまたは含んでいないＲＤＭ－２媒体（Ｌｏｎｚａ）中で１０日間分化させた（化合物１の原液は１００％エタノール中で調製し、ＲＤＭ－２培地で希釈して最終濃度にしてから細胞に添加した）。非特異的ｓｉＲＮＡの混合物（スクランブルしたもの）を陰性対照として使用した。培地を採取して、脂肪細胞分化の０、５、７および１０日目にＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ ＥＬＩＳＡキット（ＲｎＤ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｉｎｃ．）を用いてレプチン分析を行った。顕微鏡写真（ＬＡＳｖ４．２、Ｌｅｉｃａを備えたＡｘｉｏｖｅｒｔ ２５、Ｚｅｉｓｓ）を使用して、細胞における脂質液胞のサイズおよび量によって明白である脂質蓄積を定量化した。

【0217】

考察および結果
本明細書において記載するキヌクリジン化合物の脂肪細胞分化に対する効果を、脂質蓄積およびレプチン分泌によって測定したとおりに評価した。ＢＢＳ遺伝子ノックダウンの脂肪細胞分化に対する影響は、細胞における脂質蓄積の増加（図１０Ａ）およびレプチンの培地への分泌の増加（図１０Ｂ）によって明白である。脂肪生成は、化合物１を用いた処置によって抑制され、脂質蓄積（図１０Ｃ）およびレプチン分泌（図１０Ｄ）の減少を用量依存的な様式でもたらすことが示される。

【実施例12】

【0218】

Ｉｎ－ｖｉｔｒｏでのＧＣＳ阻害（化合物１および類似体）
グルコシルセラミドシンターゼ活性の阻害は、１つまたはそれ以上のアッセイを用いて測定してもよい。第１のアッセイは、ミクロソームアッセイであり、これは、ＨＰＬＣによってセラミドからグルコシルセラミドへの変換を直接測定する。ミクロソームは、ミクロソームアッセイにおけるグルコシルセラミドシンターゼ活性の原料である。第２のアッセイは細胞ベースの表現型アッセイであり、これは抗体介在性免疫蛍光法によって下流の脂質ＧＭ３の細胞表面発現をモニターする。特定のプロトコールを以下に提供する。

【0219】

グルコシルセラミドシンターゼ活性のミクロソームアッセイ：
グルコシルセラミドシンターゼ活性の原料としてミクロソームを使用した酵素アッセイ。蛍光セラミド基質は、アルブミンとの複合体として膜結合酵素に送達される。反応後、セラミドおよびグルコシルセラミドは、蛍光検出を備えた逆相ＨＰＬＣによって分離し、定量化される。酵素活性は、蛍光標識された基質とグルコシルセラミドシンターゼの原料としてのミクロソームとを使用して評価する。Ｃ_６－ＮＢＤ－セラミドは、アルブミンと複合体を形成して、以下に記載する手順に従って単離したミクロソームに送達される。原液中のＣ_６－ＮＢＤ－セラミドの最終濃度は０．５ｍＭであり；ＢＳＡの最終濃度は０．５ｍＭである。基質および生成物（グルコシルセラミド）の分離および定量は、蛍光検出を備えた逆相ＨＰＬＣによって達成される。

【0220】

Ａ３７５ヒト黒色腫細胞からのミクロソームの調製；
ミクロソームをＡ３７５ヒト黒色腫細胞から単離する。８００から１０００万個の細胞をトリプシン処理によって採取し、氷冷ＰＢＳで洗浄する。細胞を、プロテアーゼ阻害剤を含む氷冷溶解緩衝液中に再懸濁する。細胞溶解物を、プローブソニケーターを使用して氷上で超音波処理する。超音波処理後、細胞溶解物を、遠心分離によって１０，０００ｇ、４℃で１０分間破片から分離する。上澄みを除去し、追加の遠心分離によって１００，０００ｇ、４℃で１時間清浄化する。次いで、ペレットを溶解緩衝液中に再懸濁し、分割し、－８０℃で貯蔵してから使用する。

【0221】

グルコシルセラミドシンターゼアッセイ
グルコシルセラミドシンターゼ阻害を判定するために、そのＫｍの２倍の基質（蛍光セラミドおよびＵＤＰ－グルコース、それぞれ３μΜおよび４μΜ）とミクロソーム（１：５０希釈）とを１：１で合わせ、暗室中、プレートシェーカーで、室温で１時間インキュベートする。反応を、５０％イソプロパノール水溶液中の１００μΜ Ｃ_８－セラミド１５０μＬを添加することによって停止させ；最終ミックス１０μＬをＨＰＬＣ（蛍光検出器を備えた）で分析する。移動相は、１％ギ酸を８１％メタノール／１９％水に添加したものであり、流速は０．５ｍＬ／分である。蛍光は、λ_ｅｘ＝４７０ｎｍおよびλ_ｅｍ＝５３０ｎｍで検出する。これらの条件下、ＮＢＤ－Ｃ_６－ＧｌｕＣｅｒの保持時間は約１．７分であり、ＮＢＤ－Ｃ_６－Ｃｅｒは、約２．１分後にカラムから溶出する。両方のピークが、互いにかつベースラインから分離し、ＨＰＬＣソフトウェアによって自動的に積分された。基質から生成物への変換率を阻害剤試験に関する読み取り値として使用する。

【0222】

ＧＭ３蛍光性連結免疫吸着アッセイ（ＦＬＩＳＡ）：
これは、被検化合物で処置した後のＢ１６マウス黒色腫またはＣ３２ヒト黒色腫細胞におけるＧＭ３発現を測定する表現型アッセイである。細胞表面のＧＭ３発現は、抗体が介在する蛍光によって判定される。

【0223】

化合物を媒体で希釈し、３８４ウェルプレートのＤＭＳＯ中にプレーティングする。Ｂ１６およびＣ３２細胞をそれぞれ、１ウェルあたり２０，０００細胞／ｍｌおよび６２，５００細胞／ｍｌの密度でアッセイする。各滴定曲線は１０点を含み、これらは各試験ランにおいて２回繰り返してアッセイされている。プレートを、５％ＣＯ２、３７℃で４８時間インキュベートし、次いでＴＢＳで１回洗浄する。抗ＧＭ３抗体を各ウェルに添加し、次いで、プレートを室温で更に１時間インキュベートする。その後、プレートを２回洗浄し、標識された二次抗体とともに更に１時間インキュベートする。最後のインキュベート後、プレートを２回洗浄し、λ_ｅｘ＝Ｄ６４０／２０ｎｍおよびλ_ｅｍ＝６５７ｎｍにおける蛍光を、蛍光リーダーで検出する。

【0224】

アッセイ結果
これらのアッセイにおけるある特定の例示された化合物の個々のアッセイ結果を以下の表に示す。ミクロソームアッセイの結果を「ＧＣＳ ＩＣ_５０」として示し、これは、グルコシルセラミドシンターゼ活性の５０％阻害をもたらす化合物の濃度を表す。細胞ベースアッセイの結果はそれぞれ、Ｂ１６アッセイおよびＣ３２アッセイに関して「ＧＭ３Ｂ１６ＩＣ_５０」または「ＧＭ３Ｃ３２ＩＣ_５０」として示す。これらの値は、細胞表面においてＧＭ３発現の５０％阻害をもたらす化合物の濃度を表す。

【0225】

【表2】

【0226】

これらの比較結果は、本開示による化合物がＧＣＳ阻害剤と同等のｉｎ－ｖｉｔｒｏ活性を有することを実証し、結果的に同様のｉｎ－ｖｉｖｏ利点を実証することが予想される。

【実施例13】

【0227】

健常ヒトボランティアにおける化合物２の薬物動態
２パート第１相臨床研究を行って、食事の存在下および非存在下での健常ヒトボランティアにおける化合物２の薬物動態、薬力学、安全性および耐容性を評価した。化合物２はベングルスタットとしても知られる。

【0228】

研究１
研究１は、健常成人男性ボランティアにおける２パート単一施設トライアルであった。パート１は、安全性、耐容性、およびＰＫに関する化合物２の二重盲検無作為化プラセボ対照漸増単回用量研究であった。パート２は、高脂肪食を伴うＰＫおよび伴わないＰＫに関する化合物２の非盲検単一コホート無作為化２順序２期２処置クロスオーバー研究であった。

【0229】

研究のパート１では、５５名の健常男性（プラセボ、ｎ＝１４；２、５、１５、２５、５０、および１００ｍｇ用量、各ｎ＝６；１５０ｍｇ用量、ｎ＝５）が登録され、無作為化された。８名の健常男性がパート２に参加した。

【0230】

パート１において、対象は、少なくとも１０時間の絶食後の初日の朝に、２、５、１５、２５、５０、１００、または１５０ｍｇの化合物２（Ｌ－リンゴ酸塩の形態）または匹敵するプラセボが与えられるように無作為化された。パート２において、対象は、５ｍｇの単回経口用量の化合物２が、空腹時（投与してから少なくとも１０時間前および４時間後）にまたは規格化された高脂肪朝食（約８１５ｋｃａｌ）から３０分後に同時に与えられるように無作為化された。７日間のウォッシュアウト期間後、参加者は他の条件にクロスオーバーされた。

【0231】

研究１、パート１において、血液を、被験薬物投与時（０時間）および投薬から０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１６、２４、４８、７２、および９６時間後における化合物２の血漿濃度のためにサンプリングした。尿試料を収集して、被験薬物を投与する２時間前から始まり４８時間後までの化合物２の濃度を分析した。

【0232】

研究１、パート２において、血液を、投薬から０、０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１６、２４、および４８時間後における化合物２の血漿濃度のためにサンプリングした。

【0233】

パート１から、化合物２の２から１５０ｍｇの用量の単回経口投薬後、最大血漿濃度（Ｃ_ｍａｘ）は、血漿濃度が指数関数的に低下し始める前の３～５．５時間の時間の中央値において発生し、幾何平均ｔ_１／２は２８．９時間であることが認められた。曝露は、用量範囲全体にわたってほぼ用量比例的に増加し：７５倍の用量増加によって、幾何平均Ｃ_ｍａｘ、ＡＵＣ_ｌａｓｔ、およびＡＵＣ_ｉｎｆ値においてそれぞれ９７．３、８９．２、および８５．９倍増加した。ＰＫの結果を以下の表に示す（ＡＵＣ＝測定可能な濃度が持続するかまたは無限大に外挿された時間濃度曲線下面積；ｔ_１／２＝終末半減期；ＣＬ／Ｆ＝血漿からの見かけの総クリアランス；ＣＶ＝変動係数；ＳＤ＝標準偏差；ｔ_ｍａｘ＝Ｃ_ｍａｘまでの時間；Ｖｓｓ／Ｆ＝定常状態における見かけの分布体積）：

【0234】

【表3】

【0235】

パート２から、高脂肪食とともに５ｍｇの用量を投与すると、絶食条件と比較して化合物２への曝露に対する影響はないことが認められた。中央値ｔ_ｍａｘは、摂食したか空腹かどうかにかかわらず６．００時間であった。摂食／絶食の幾何平均比はＣ_ｍａｘおよびＡＵＣ_ｌａｓｔに関してそれぞれ０．９２および０．９１であった。対象内変動（すなわち、摂食対絶食）は、対象変動全体の半分未満を占めていた。

【0236】

研究２
研究２は、健常成人男性および女性ボランティアにおける化合物２の安全性、耐容性、ＰＫ、および薬力学の単一施設二重盲検無作為化プラセボ対照漸増反復用量研究であった。

【0237】

研究では、３６名の健常成人（１９名男性および１７名女性）（ｎ＝９各群）が登録され、無作為化された。対象は、少なくとも１０時間の絶食後、１日１回投薬する化合物２を５、１０、または２０ｍｇ（Ｌ－リンゴ酸塩の５－ｍｇカプセル剤の形態として提供された）でまたはプラセボで１４日間与えられるように無作為化された。

【0238】

血液を、以下のとおり化合物２の血漿濃度のためにサンプリングした：１日目、投薬から０、０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、および１６時間後；２～５、８、１１、および１３日目、０時間目；１４日目、投薬から０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２時間後；１５～１７日目、１４日目の投薬からそれぞれ２４、４８、および７２時間目。尿試料を収集して、化合物２の濃度を、１日目（投薬から０時間後）および１４日目に連続的に投薬から０～２４時間後に分析した。薬力学的エンドポイント（血漿ＧＬ－１、ＧＬ－３、およびＧＭ３濃度）を、１～５、８、１１、１３、および１４日目の投薬から０時間後；および１５日目の１４日目の投薬から２４時間後に評価した。

【0239】

５、１０、または２０ｍｇの化合物２を１日１回１４日間受けた対象において、血漿Ｃ_ｍａｘは、１日目および１４日目の投薬から２～５時間後の時間の中央値において発生したことが認められた。Ｃ_{ｔｒｏｕｇｈ}値は、５日後にプラトーに達した。化合物２の曝露は、５～２０ｍｇの用量範囲にわたってほぼ用量比例的に増加し：この４倍の用量増加によって、１４日目に幾何平均Ｃ_ｍａｘおよびＡＵＣ_０－２４値においてそれぞれ３．７６および３．６９倍の増加が生じた。研究２からのＰＫの結果を以下の表に要約する：

【0240】

【表4】

【0241】

化合物２を１日１回投薬してから１４日後、その２４時間未変化体尿中排泄割合（平均ｆｅ_０－２４）は、２６．３％から３３．１％の間の範囲であり、明らかな用量関連性は一切なかった。平均ＣＬ_{Ｒ（０－２４）}は、１．４９Ｌ／時間から２．０７Ｌ／時間の間の範囲であり、観察された血漿ＣＬ／Ｆよりもおよそ３．１８～３．８６倍低かった。

【0242】

プラセボレシピエントにおける血漿ＧＬ－１、ＧＬ－３、およびＧＭ３は、ベースライン全体にわたって依然として同様のままであり、一方、３つの化合物２の用量群全体では、血漿ＧＬ－１およびＧＭ３レベルは、以下の表で示すようにベースラインから時間および用量依存的に減少した（反復漸増用量研究の１５日目においてグルコシルセラミド（ＧＬ－１）、グロボトリアオシルセラミド（ＧＬ－３）、およびＧＭ３ガングリオシド（ＧＭ３）に関する処置比率の点推定）：

【0243】

【表5】

【0244】

ＧＬ－１に関する最大持続効果は、５および１０ｍｇの群において１１日目に、２０ｍｇの群において８日目までに発生した。１５日目におけるベースラインからのＧＬ－１減少の平均計算値は、５、１０および２０ｍｇの群においてそれぞれ４１．９％、６９．６％、および７４．６％であった。ＧＬ－１値は、１名の５ｍｇの化合物２レシピエントにおいてベースラインで、３名、５名、および９名の対象においてそれぞれ５、１０、および２０ｍｇの群において１５日目に下限値定量化（ＬＬＯＱ）を下回っていた。

【0245】

最大の持続的なＧＭ３の減少は、化合物２の全ての用量群にわたって発生し、１３日目から始まった。１５日目の平均血漿ＧＭ３レベルは、５、１０、および２０ｍｇの用量群に関してそれぞれベースラインの４２．７％、４９．４％、および５７．８％であった。ＧＭ３は、１名および２名の対象においてそれぞれ１０および２０ｍｇの用量群で１５日目にＬＬＯＱを下回った。

【0246】

血漿ＧＬ－３も化合物２の全ての用量群において経時的に減少したが、ＬＬＯＱと比較してベースラインＧＬ－３値は変動し、低く、計算されたＧＬ－３の減少平均値は制限された。プラセボ、５、１０、および２０ｍｇの用量群において、ＧＬ－３値は、ベースラインにおいてそれぞれ１名、３名、１名、および６名の対象が、１５日目においてそれぞれ４名、９名、７名、および９名の対象がＬＬＯＱを下回った。

【0247】

５、１０、および２０ｍｇの用量群における化合物２のＣ_{ｔｒｏｕｇｈ}に起因するベースラインからの平均推定血漿ＧＬ－１の減少（それぞれ１９．０、４７．５、および６９．９ｎｇ／ｍＬ）（９０％ＣＩ）は、それぞれ６７．０％（５４．４～７９．７％）、７４．４％（６３．７～８５．２％）、および７６．３％（６４．８～８７．８％）であった。

【0248】

結論
これらの研究において、健常対象における化合物２への曝露（Ｃ_ｍａｘおよびＡＵＣ）は、単回用量として２～１５０ｍｇの範囲でまたは１日１回反復用量として５～２０ｍｇの範囲で１４日間投与した場合、ほぼ用量に比例していた。空腹時と比較して、高脂肪食は、単回５ｍｇの用量を受けた対象における曝露に対する影響は有さなかった。５～２０ｍｇの１日１回の反復用量では、定常状態は、５日以内に達し；年齢も性別も蓄積に影響を与えなかった。薬力学的に、１日１回の反復用量の化合物２は、ＧＬ－１およびＧＭ３の血漿濃度が時間および用量依存的様式で減少し、化合物２介在性ＧＣＳ阻害と一致したが、ＧＬ－３のベースラインレベルはあまりにも低すぎて薬力学的バイオマーカーとしては有用ではなかった。用量依存的なＧＬ－１の減少は、化合物２の作用の意図する機序：ＧＣＳによるセラミドからのＧＬ－１形成の阻害を裏付けた。

【0249】

全ての研究において、重篤な有害事象［ＳＡＥ］）、ＥＣＧモニタリング、臨床検査値、および身体検査を含む安全性プロファイルを、研究医薬の最後の投薬後１０日にわたって処置創発有害事象（ＴＥＡＥ）モニタリングによって評価した。いずれの研究においても、死亡、ＳＡＥ、重度のＴＥＡＥ、または研究中断につながるＴＥＡＥはなかった。

【0250】

臨床的に適切な血液または生化学的異常はいずれの研究においても報告されなかった。バイタルサインは、いずれの研究においてもベースラインからの関連する変化を示さなかった。ＥＣＧパラメータは、漸増単回用量および食品の影響の研究において関連する変化を示さず；複数の漸増用量研究では、ＥＣＧパラメータは、いずれの用量においても化合物２のレシピエントにおいて平均ベースライン対プラセボから統計的に有意に変化しなかった。

【0251】

本発明は上記実施形態と併記してきたが、前述の説明および例は例示を意図し、発明の範囲を限定するものではないことは理解されるべきである。発明の範囲内の他の態様、利点および変更は、本発明が関連する当業者であれば明らかであろう。

【0252】

更に、本発明の特徴または態様がマルクーシュグループによって記載する場合、当業者であれば、本発明がマルクーシュグループの任意の個々のメンバーまたはメンバーのサブグループに関しても記載していることを認識するであろう。

【0253】

本明細書において記載する全ての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、それぞれが参照によって個々に組み入れたのと同程度にその全体が参照によって明示的に組み入れるものとする。矛盾がある場合、定義を含む本明細書が優先されることになる。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図2】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図4A】

【図4B】

【図5】

【図6】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図8A】

【図8B】

【図8C】

【図9】

【図10A】

【図10B】

【図10C】

【図10D】

【国際調査報告】