特表 2022-519425 骨髄増殖性障害を治療する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-03-24

(54)【発明の名称】骨髄増殖性障害を治療する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/55 20060101AFI20220316BHJP

   A61K 31/519 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 7/00 20060101ALI20220316BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 7/04 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 7/06 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 3/02 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 25/04 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 1/08 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 25/20 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 17/04 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 19/08 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 29/02 20060101ALI20220316BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20220316BHJP

【ＦＩ】

A61K31/55

A61K31/519

A61P7/00

A61K45/00

A61P7/04

A61P7/06

A61P1/16

A61P1/00

A61P11/00

A61P3/02

A61P25/04

A61P1/08

A61P25/20

A61P17/04

A61P19/08

A61P29/02

A61P43/00 121

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021530108

(86)(22)【出願日】2018-11-27

(85)【翻訳文提出日】2021-07-08

(86)【国際出願番号】 US2018062534

(87)【国際公開番号】W WO2020112086

(87)【国際公開日】2020-06-04

(81)【指定国・地域】

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り （１）発行者名／コンステレーション・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 刊行物名／ＰｈａｓｅＩＩ Ｓｔｕｄｙ Ｄｏｃｕｍｅｎｔ 発行年月日／平成３０（２０１８）年２月２０日 （２）発行者名／コンステレーション・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 刊行物名／ＦｏｒｍＳ１ Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ Ｓｔａｔｅｍｅｎｔ 発行年月日／平成３０（２０１８）年６月２２日 （３）発行者名／Ｆｒｏｎｔｌｉｎｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ Ｉｎｃ． 刊行物名／ＭＤｅｄｇｅ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ 発行年月日／平成３０（２０１８）年１１月６日 （４）刊行物名／Ｂｌｏｏｄ Ｊｏｕｒｎａｌ 発行年月日／平成３０（２０１８）年１１月２１日

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り （１）発行者名／コンステレーション・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 刊行物名／Ｐｈａｓｅ ＩＩ Ｓｔｕｄｙ Ｄｏｃｕｍｅｎｔ 発行年月日／平成３０（２０１８）年２月２０日 （２）発行者名／コンステレーション・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 刊行物名／Ｆｏｒｍ Ｓ１ Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ Ｓｔａｔｅｍｅｎｔ 発行年月日／平成３０（２０１８）年６月２２日 （３）発行者名／Ｆｒｏｎｔｌｉｎｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ Ｉｎｃ． 刊行物名／ＭＤｅｄｇｅ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ 発行年月日／平成３０（２０１８）年１１月６日 （４）刊行物名／Ｂｌｏｏｄ Ｊｏｕｒｎａｌ 発行年月日／平成３０（２０１８）年１１月２１日

(71)【出願人】

【識別番号】513137422

【氏名又は名称】コンステレーション・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＣＯＮＳＴＥＬＬＡＴＩＯＮ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ，ＩＮＣ．

(74)【代理人】

【識別番号】100118902

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 修

(74)【代理人】

【識別番号】100106208

【弁理士】

【氏名又は名称】宮前 徹

(74)【代理人】

【識別番号】100196508

【弁理士】

【氏名又は名称】松尾 淳一

(72)【発明者】

【氏名】センデロビッチ，エイドリアン

(72)【発明者】

【氏名】クーパー，マイケル

【テーマコード（参考）】

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C084AA19

4C084NA14

4C084ZA051

4C084ZA081

4C084ZA141

4C084ZA511

4C084ZA531

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4C084ZA591

4C084ZA661

4C084ZA751

4C084ZA891

4C084ZA961

4C084ZC202

4C084ZC751

4C086AA01

4C086AA02

4C086CB05

4C086CB11

4C086GA16

4C086MA01

4C086MA02

4C086MA04

4C086NA05

4C086NA14

4C086ZA05

4C086ZA08

4C086ZA14

4C086ZA51

4C086ZA53

4C086ZA55

4C086ZA59

4C086ZA66

4C086ZA75

4C086ZA89

4C086ZA96

4C086ZC20

(57)【要約】

本開示は、骨髄線維症を治療するための２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、およびその薬学的に許容される塩の使用に関する。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象における骨髄線維症を治療する方法であって、治療有効量の２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項2】

前記対象が、以前に、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤による治療を受けたことがある、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記対象が、ＪＡＫ阻害剤に対して進行／再発している、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

前記対象が、ＪＡＫ阻害剤に対して難治性／抵抗性である、請求項１または２に記載の方法。

【請求項5】

前記対象が、以前に、ルキソリチニブによる治療を受けたことがある、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項6】

対象における骨髄線維症を治療する方法であって、治療有効量の２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミドおよび治療有効量のヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項7】

前記ＪＡＫ阻害剤が、ルキソリチニブである、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

前記対象が血球減少症である、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項9】

前記対象が貧血である、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

前記対象が、１０ｇ／ｄＬ未満のヘモグロビン数を有する、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項11】

前記対象が血小板減少症である、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記対象の血小板数が、１２０，０００個の血小板／μＬより少ない、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

前記対象が血小板血症である、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

前記対象の血小板数が、５００，０００個の血小板／μＬより多い、請求項１～１０および１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

前記対象が好中球減少性である、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項16】

前記対象の絶対好中球数が、１０００個の好中球／血液μＬ数より少ない、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項17】

前記対象が、肥大した脾臓または肝臓を有する、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

前記対象が、腹部不快感、労作時呼吸困難、早期満腹感、疲労感、頭痛、夜間発汗、めまい、不眠症、掻痒症、または骨痛に罹患している、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項19】

前記対象が輸血依存性である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項20】

前記対象が、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を１００ｍｇ／日～３００ｍｇ／日投与される、請求項１～５および８～１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項21】

前記対象が、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を１５０ｍｇ／日～２５０ｍｇ／日投与される、請求項１～５および８～２０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項22】

前記対象が、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を１００ｍｇ／日～３００ｍｇ／日投与される、請求項６～１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項23】

前記対象が、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を１００ｍｇ／日～２００ｍｇ／日投与される、請求項６～１９および２２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項24】

前記対象が、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を１日１回投与される、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【背景技術】

【0001】

骨髄増殖性障害は、骨髄および血液の疾患である。骨髄線維症は、例えば、巨核球における不自然な異常を特徴とする、クローン性骨髄増殖性疾患である。異常な巨核球は、主にＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路の異常調節に起因するが、いくつかの他の経路にも異常調節が存在する。影響を受ける複数の経路および数々の下流の効果に起因して、骨髄線維症は、多くの相互に関連する特徴を有する複雑な異質性疾患である。異常な巨核球は、両方とも炎症促進性および線維化促進性（トランスフォーミング増殖因子ベータ［ＴＧＦ－β］）である過剰な血小板およびサイトカインを骨髄に放出する。炎症促進性サイトカインは、身体を衰弱させる全身症状を引き起こし、線維化促進性経路によってシグナル伝達されるコラーゲンの沈着を悪化させる。骨髄の線維形成は、骨髄線維症の特徴であるが、診断は必ずしもそれに依存しない。骨髄の線維形成は、この疾患に関連する罹患率および死亡率を引き起こす主要な特徴である。骨髄線維症の骨髄の線維形成および炎症状態は、多くの場合、血球減少症、髄外造血（ＥＭＨ）、脾腫大および肝腫大などの臓器肥大、ならびに多数の全身症状を引き起こす。

【0002】

骨髄線維症は、生命を脅かし、生存に影響を及ぼす前に患者の生活の質を大幅に低下させるという点で、深刻な疾患である。２つの最も一般的な死亡原因は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）への転換および疾患の進行である。治療パラダイムは、存在する危険因子の数によって左右され、次いで、様々な生存率と相関する。同種異系造血幹細胞移植（ＨＣＴ）は、治癒的なものであってもよいが、その自身の罹患率および死亡率と関連しており、その使用を、移植を進める危険性よりも予後の方が悪い（５年未満）適格な患者に限定する。残りの治療は、その作用機序（例えば、骨髄線維症に関連することが多い貧血に特に焦点を当てた治療）に起因して、または治療が誘発することができる限定的な効果（例えば、標準治療であるルキソリチニブ）に起因して、本質的により緩和的である。

【0003】

ＪＡＫ１／２阻害剤であるルキソリチニブは、骨髄線維症の治療に適応される唯一の承認された療法である。ＪＡＫは、造血、免疫制御、成長および胚発生における主要な制御因子である（Ｓｔａｈｌ Ｍ，Ｚｅｉｄａｎ ＡＭ（２０１７）．Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｙｅｌｏｆｉｂｒｏｓｉｓ：ＪＡＫ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｂｅｙｏｎｄ．Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｈｅｍａｔｏｌ；１７（５）：４５９－４７７）。ＪＡＫシグナル伝達の異常調節によって、トロンボポエチンシグナル伝達の増加を引き起こす場合があり、これは骨髄線維症における巨核球産生および血小板の増加の原因の１つであると考えられる。さらに、ＪＡＫシグナル伝達は、全身症状および脾腫大を引き起こす炎症促進性サイトカインおよび成長因子の放出に関与している。ＪＡＫ－１は、骨髄線維症における全身症状の原因である炎症促進性サイトカイン（例えば、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α）のシグナル伝達において役割を果たし、ＪＡＫ－２は、骨髄線維症において脾腫大を促進すると考えられる成長因子および他のサイトカイン（例えば、ＩＬ－３、ＩＬ－５）に影響を及ぼす。この作用機序を通じて、ルキソリチニブは、骨髄線維症患者の脾臓の体積および症状を減少させ、それによって、患者の生活の質を改善する能力を示している。しかし、残念ながら、ルキソリチニブの現在の使用にはいくつかの制限が存在する。

【0004】

ルキソリチニブは、疾患修飾効果がないため、緩和治療とみなされる。突然変異対立遺伝子の負荷または骨髄の線維形成には影響を与えない（Ｎｏｖｅｌ Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｆｏｒ Ｍｙｅｌｏｆｉｂｒｏｓｉｓ，２０１７，Ｃｕｒｒ Ｈｅｍａｔｏｌ Ｍａｌｉｇ Ｒｅｐ；１２（６）：６１１－６２４）。加えて、全身症状は、ルキソリチニブ治療を止めて１週間後には元に戻る（Ｔｅｆｆｅｒｉ Ａ（２０１７）；Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｒｉｍａｒｙ Ｍｙｅｌｏｆｉｂｒｏｓｉｓ；ＵｐＴｏＤａｔｅ；１－２３を参照）。次に、貧血は、患者の生活の質に悪影響を与え、生存期間の短縮を予測する最大の力を有し、最適な標準治療へのアクセスを制限する。ルキソリチニブは、赤血球細胞産生およびヘモグロビンレベルを低下させることが知られているため、ルキソリチニブは、一部の貧血患者にとって実行可能な治療オプションではない。貧血患者は、例えば、低用量のルキソリチニブが不十分な応答を引き起こすことを考慮して、ルキソリチニブで全く治療されないか、または完全な用量のルキソリチニブを与え、典型的には、赤血球細胞（ＲＢＣ）輸血の必要性が生じる。例えば、Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ．２０１６ Ｄｅｃ；１０１（１２）：ｅ４８２－ｅ４８４を参照されたい。ＲＢＣ輸血に依存性になった患者は、生活の質および予後のさらなる悪化に苦しむ。別の満たされていない医学的需要は、骨髄線維症を治療する代替療法がないことである。このことは、ｉ）ルキソリチニブに対する十分な応答を達成しない者、ｉｉ）ルキソリチニブに対して不耐容である者、およびｉｉｉ）ルキソリチニブによる治療にもかかわらず、進行する者が、代替治療のオプションをほとんど有さないか、または全く有さず、また、初期応答にもかかわらず時間経過に伴って進行する者（患者のおよそ７５％が、進行または毒性に起因してルキソリチニブを中止している）を意味する。

【発明の概要】

【0005】

ここで、ブロモドメインおよびエクストラターミナル（ＢＥＴ）ファミリーの阻害剤である２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミドが、骨髄線維症の治療に有効であり、現在の標準治療（すなわち、ルキソリチニブ）を上回る多数の利点を有することが見出された。

【0006】

ルキソリチニブとは異なり、骨髄線維症の対象を２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミドで治療すると、ヘモグロビンレベルが増加した。このことは、貧血でもある対象にとっては、特に重要である。例えば、以下の実施例の章において、患者２４７および２４８は、約８ｇ／ｄＬから約１１．５ｇ／ｄＬの正常付近までのヘモグロビンレベルの増加を経験した。例えば、図５を参照。加えて、血小板数は、約８ｇ／ｄＬから約１０．９ｇ／ｄＬまで正常化された。例えば、図５を参照。

【0007】

他の結果は、化合物１による治療後に、ＪＡＫ阻害剤ルキソリチニブを含む全ての標準治療に対して難治性であった対象において、制御されていない血小板増加症を軽減させることができた（すなわち、血小板が正常化された）ことを示した。例えば、図６および以下の実施例の章を参照。頭痛の改善もみられた。

【0008】

さらなる結果は、化合物１による治療後に、輸血依存性を好転させることができたことを示した。例えば、ＪＡＫ阻害剤ルキソリチニブを摂取している間に輸血依存性であった対象は、化合物１による治療後に輸血非依存性になり、２４週間より長く、輸血非依存性のままであった。例えば、図５を参照。ルキソリチニブと２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド両方の組み合わせを使用して、同様の結果がみられた。例えば、以下の実施例の章における患者２４５および２４６を参照。例えば、図６を参照。

【0009】

さらなる利点として、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミドは、ルキソリチニブに対して抵抗性であった対象であっても、脾臓の大きさを有意に減少させた。例えば、化合物１の投与前に、以下に記載する患者２４５は、ルキソリチニブに対して抵抗性になっており、彼女の脾臓は、大きさが２５％増加していた（脾臓の体積は、触診によって１２ｃｍであった）。しかしながら、化合物１とルキソリチニブによる４週間の治療の後、彼女の脾臓の大きさは、５ｃｍまで減少した。

【0010】

したがって、骨髄線維症を治療するために、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を、単独で、またはルキソリチニブなどのＪＡＫ阻害剤と組み合わせて使用する方法が本明細書で提供される。

【0011】

特定の態様では、貧血を有する対象において骨髄線維症を治療するために、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を、単独で、またはルキソリチニブなどのＪＡＫ阻害剤と組み合わせて使用する方法も本明細書で提供される。

【図面の簡単な説明】

【0012】

【図1】ＩＬ６およびＩＬ１０ｍＲＮＡ転写物レベルに対する化合物１の効果を示す。

【図2】巨核球分化に対する化合物１の効果のヒストグラムを図示する。

【図3】健康なドナー２に由来する幹細胞由来の巨核球培養物において、化合物１とルキソリチニブによる１０日間の治療の後、成熟巨核球マーカーＣＤ４２ｂに対する効果のヒストグラムおよび定量を表し、ここで、灰色のヒストグラムは、ＤＭＳＯ処理された試料であり、青色のヒストグラムは、化合物１で処理された試料であり、ＣＤ４２ｂ高の計算は、化合物１で処理された試料を指す。

【図4】投与から２時間後の循環血液中のＢＥＴ標的遺伝子ＩＬ８およびＣＣＲ１の抑制を、化合物１の血漿濃度の関数として示す。

【図5】化合物１とルキソリチニブの併用アームにおけるヘモグロビンレベルおよび輸血必要性の変化を示す。

【図6】単剤療法アームの患者２４７における血小板およびヘモグロビンレベルの変化を示す。

【発明を実施するための形態】

【0013】

２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミドは、米国特許第８，７９６，２６１号において化合物１４４として例示されており、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミドは、本明細書において化合物１と互換的に使用され、以下の構造式によって表される：

【化1】

化合物１の結晶形態は、米国特許第９，９６９，７４７号に開示されており、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0014】

化合物１は、ＢＥＴタンパク質の機能を選択的に阻害することによって、抗腫瘍活性を促進するように設計された、強力かつ選択的な小分子である。例えば、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１６；Ｆｅｂ．２５；５９（４）：１３３０－９を参照。化合物１は、進行性リンパ腫を含む血液悪性腫瘍を治療する際のその顕著な効果について調査されている。例えば、Ｕ．Ｓ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓ ＮＣＴ０２１５７６３６およびＮＣＴ０１９４９８８３を参照。しかしながら、ここで、化合物１が、骨髄線維症の治療にも有効であることが見出された。この目的のために、例えば、化合物１は、ヘモグロビンレベルを増加させ、血小板数を正常化し、脾臓の大きさを減少させた。以前に輸血依存性であった対象は、治療後に輸血非依存性になった。

【0015】

したがって、第１の実施形態において、対象における骨髄線維症を治療する方法であって、治療有効量の２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む、方法が本明細書で提供される。対象における骨髄線維症を治療するための医薬の製造における、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩の使用も本明細書で提供される。対象における骨髄線維症を治療するための２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩がさらに提供される。

【0016】

「対象」および「患者」という用語は、互換的に使用されてもよく、治療を必要とする哺乳動物、例えば、コンパニオンアニマル（例えば、イヌ、ネコなど）、家畜（例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギなど）、および実験動物（例えば、ラット、マウス、モルモットなど）を意味する。典型的には、対象は、治療を必要とするヒトである。

【0017】

「治療」、「治療する」、および「治療すること」という用語は、本明細書に記載されるように、骨髄線維症、またはその１つ以上の症状の発生を好転させ、軽減し、その可能性を減らすこと、またはその進行を抑制することを指す。いくつかの実施形態において、治療は、１つ以上の症状が発生した後に行われてもよい（すなわち、治療的治療）。他の実施形態において、治療は、症状が存在しない状態で行われてもよい。例えば、治療は、症状の発症前に（例えば、症状の既往に照らして、および／または遺伝的もしくは他の感受性因子に照らして）、感受性のある個体に行われてもよい（すなわち、予防的治療）。症状が解消した後、例えば、その再発を予防するか、または遅らせるために、治療を継続することもできる。骨髄線維症に特異的な症状としては、限定されないが、腹部不快感、労作時呼吸困難、早期満腹感、疲労感、頭痛、夜間発汗、めまい、熱、寒気、不眠症、掻痒症、または骨痛が挙げられる。

【0018】

以下の実施例の章で詳述されるように、化合物１は、ルキソリチニブなどのＪＡＫ阻害剤による骨髄線維症の治療を受けたことがある対象に有効であった。したがって、第２の実施形態において、対象における骨髄線維症を治療する方法であって、治療有効量の２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを含み、対象が、以前に、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤（例えば、ルキソリチニブ）による治療を受けたことがある、方法が本明細書で提供される。以前に、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤（例えば、ルキソリチニブ）による治療を受けたことがある対象における骨髄線維症を治療するための医薬の製造における、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩の使用も提供される。以前に、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤（例えば、ルキソリチニブ）による治療を受けたことがある対象における骨髄線維症を治療するための２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩がさらに提供される。

【0019】

第３の実施形態において、第１および第２の実施形態に記載される対象は、ＪＡＫ阻害剤に対して進行／再発しているものとして特徴付けられる。第４の実施形態において、第１および第２の実施形態に記載される対象は、ＪＡＫ阻害剤に対して難治性／抵抗性であると特徴付けられる。

【0020】

進行／再発しているものとして特徴付けられる対象は、ＪＡＫ阻害剤（例えば、ルキソリチニブ）による治療に一度は応答したが、もはや応答しない対象である。難治性／抵抗性であるとして特徴付けられる対象は、ＪＡＫ阻害剤（例えば、ルキソリチニブ）による治療の間に、非応答性であるか、または疾患の悪化を示す対象である。

【0021】

化合物１は、ＪＡＫ阻害剤ルキソリチニブによる併用治療として有効であることも示された。したがって、第５の実施形態において、対象における骨髄線維症を治療する方法であって、治療有効量の２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミドおよび治療有効量のヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤（例えば、ルキソリチニブ）、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を対象に投与することを含む、方法が本明細書で提供される。対象における骨髄線維症を治療するための医薬の製造における、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミドおよびヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤（例えば、ルキソリチニブ）、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩の使用も提供される。対象における骨髄線維症を治療するための２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミドおよびヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤（例えば、ルキソリチニブ）、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩がさらに提供される。

【0022】

本明細書で使用される場合、ルキソリチニブは、以下の式を有するＪＡＫ阻害剤（Ｒ）－３－（４－（７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－３－シクロペンチルプロパンニトリルホスフェートを指す。

【化2】

【0023】

「有効量」または「治療有効量」という用語は、互換的に使用され、骨髄線維症を有する対象において所望の医学的応答を誘発する、例えば、疾患の症状を減少させ、および／または疾患の進行を遅らせる、本明細書に記載の化合物の量を含む。

【0024】

第６の実施形態において、本明細書に記載の方法によって治療される（例えば、第１～第５の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象は、血球減少症である。血球減少症とは、１つ以上の血液細胞型の産生が停止するか、または大幅に減少した対象を指す。細胞減少症の種類としては、例えば、貧血（赤血球細胞の欠乏）、白血球減少症または好中球減少症（白血球細胞の欠乏）、血小板減少症（血小板における欠乏）、および汎血球減少症（赤血球細胞、白血球細胞、および血小板数の３つ全てにおける欠乏）が挙げられる。

【0025】

第７の実施形態において、本明細書に記載の方法によって治療される（例えば、第１～第６の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象は、貧血である。本開示の対象（例えば、第１～第６の実施形態のいずれか１つにおけるように）は、男性対象についてそのヘモグロビン値が１３．５ｇ／血液のｄＬ数より低い場合、または女性対象について１２．０ｇ／血液のｄＬ数より低い場合、貧血であるといわれる。いくつかの態様において、対象（例えば、第１～第６の実施形態のいずれか１つにおけるように）は、そのヘモグロビン値が１０．０ｇ／ｄＬより低い場合に、本明細書では貧血であると定義される。したがって、本方法によって治療可能な（例えば、第１～第６の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象としては、男性対象について１３．０ｇ／ｄＬ未満、１２．５ｇ／ｄＬ未満、１２．０ｇ／ｄＬ未満、１１．５ｇ／ｄＬ未満、１１．０ｇ／ｄＬ未満、１０．５ｇ／ｄＬ未満、１０．０ｇ／ｄＬ未満、９．５ｇ／ｄＬ未満、９．０ｇ／ｄＬ未満、または８．５ｇ／ｄＬ未満、女性対象について１１．５ｇ／ｄＬ未満、１１．０ｇ／ｄＬ未満、１０．５ｇ／ｄＬ未満、１０．０ｇ／ｄＬ未満、９．５ｇ／ｄＬ未満、９．０ｇ／ｄＬ未満、または８．５ｇ／ｄＬ未満のヘモグロビン値を有する対象が挙げられる。他の態様において、対象（例えば、第１～第６の実施形態のいずれか１つにおけるように）は、そのヘモグロビン値が、男性対象について７．５ｇ／血液のｄＬ数～１３．５ｇ／血液のｄＬ数の範囲である場合、または女性対象について７．５ｇ／血液のｄＬ数～１２．０ｇ／血液のｄＬ数の範囲である場合、本明細書では貧血であると定義される。他の態様において、対象（例えば、第１～第６の実施形態のいずれか１つにおけるように）は、そのヘモグロビン値が、男性対象について７．５ｇ／血液のｄＬ数～１０．５ｇ／血液のｄＬ数の範囲である場合、または女性対象について７．５ｇ／血液のｄＬ数～１０．５ｇ／血液のｄＬ数の範囲である場合、本明細書では貧血であると定義される。他の態様において、対象（例えば、第１～第６の実施形態のいずれか１つにおけるように）は、そのヘモグロビン値が、男性対象について７．５ｇ／血液のｄＬ数～１０．０ｇ／血液のｄＬ数の範囲である場合、または女性対象について７．５ｇ／血液のｄＬ数～１０．０ｇ／血液のｄＬ数の範囲である場合、本明細書では貧血であると定義される。他の態様において、対象（例えば、第１～第６の実施形態のいずれか１つにおけるように）は、そのヘモグロビン値が、男性対象について７．７ｇ／血液のｄＬ数～１０．７ｇ／血液のｄＬ数の範囲である場合、または女性対象について７．７ｇ／血液のｄＬ数～１０．５ｇ／血液のｄＬ数の範囲である場合、本明細書では貧血であると定義される。他の態様において、対象（例えば、第１～第６の実施形態のいずれか１つにおけるように）は、そのヘモグロビン値が、男性対象について７．７ｇ／血液のｄＬ数～１０．０ｇ／血液のｄＬ数の範囲である場合、または女性対象について７．７ｇ／血液のｄＬ数～１０．０ｇ／血液のｄＬ数の範囲である場合、本明細書では貧血であると定義される。

【0026】

第８の実施形態において、本明細書に記載の方法によって治療される（例えば、第１～第７の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象は、血小板減少症である。本開示の対象（例えば、第１～第７の実施形態のいずれか１つにおけるように）は、その血小板数が１５０，０００個の血小板／血液のμＬ数より低い場合、血小板減少症であるといわれる。したがって、本方法によって治療可能な（例えば、第１～第７の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象としては、１４０，０００個の血小板／μＬ未満、１３０，０００個の血小板／μＬ未満、１２０，０００個の血小板／μＬ未満、１１０，０００個の血小板／μＬ未満、１００，０００個の血小板／μＬ未満、９０，０００個の血小板／μＬ未満、８０，０００個の血小板／μＬ未満、７０，０００個の血小板／μＬ未満、６０，０００個の血小板／μＬ未満、または５０，０００個の血小板／μＬ未満の血小板レベルを単独で、または上に記載したヘモグロビン値の１つ以上と組み合わせて有する対象が挙げられる。

【0027】

第９の実施形態において、本明細書に記載の方法によって治療される（例えば、第１～第７の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象は、血小板血症である。本開示の対象本明細書に記載の方法によって治療される（例えば、第１～第７の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象は、その血小板数が４５０，０００個の血小板／血液のμＬ数を超える場合、血小板血症であるといわれる。したがって、本方法によって治療可能な（例えば、第１～第７の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象としては、４５０，０００個の血小板／μＬを超え、５００，０００個の血小板／μＬを超え、５５０，０００個の血小板／μＬを超え、または６００，０００個の血小板／μＬを超える血小板レベルを単独で、または上に記載したヘモグロビン値の１つ以上と組み合わせて有する対象が挙げられる。

【0028】

第１０の実施形態において、本明細書に記載の方法によって治療される（例えば、第１～第９の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象は、白血球減少性である。対象（例えば、第１～第９の実施形態のいずれか１つにおけるように）は、その白血球細胞（ＷＢＣ）数が、４，０００個のＷＢＣ／血液のμＬ数より低い場合、白血球減少性であるといわれる。特定の態様において、本方法によって治療可能な（例えば、第１～第９の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象としては、３，５００個のＷＢＣ／μＬより低い、３，２００個のＷＢＣ／μＬより低い、３，０００個のＷＢＣ／μＬより低い、または２，５００個のＷＢＣ／μＬより低いＷＢＣ数を単独で、または上に記載したヘモグロビン値および／もしくは血小板値の１つ以上と組み合わせて有する対象が挙げられる。

【0029】

第１１の実施形態において、本明細書に記載の方法によって治療される（例えば、第１～第１０の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象は、好中球減少性である。一態様において、本開示の対象（例えば、第１～第１０の実施形態のいずれか１つにおけるように）は、その好中球数が、１５００個の好中球／血液のμＬ数より低い場合、好中球減少性であるといわれる。特定の態様において、本方法によって治療可能な（例えば、第１～第１０の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象としては、１２５０個の好中球／μＬより低い、１０００個の好中球／μＬより低い、７５０個の好中球／μＬより低い、または５００個の好中球／μＬより低い好中球数を単独で、または上に記載したヘモグロビン、血小板および／もしくはＷＢＣ値の１つ以上と組み合わせて有する対象が挙げられる。

【0030】

骨髄線維症は、多くの場合、脾臓の肥大と関連する。脾臓の肥大は、満腹感、消化不良、および食欲不振を引き起こす可能性がある。第１２の実施形態において、本方法によって治療可能な（例えば、第１～第１１の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象としては、肥大した脾臓または肝臓を有する対象が挙げられる。

【0031】

第１３の実施形態において、本方法によって治療可能な（例えば、第１～第１２の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象は、１つ以上のさらなる症状も経験していてもよい。これらの症状としては、限定されないが、腹部不快感、労作時呼吸困難、早期満腹感、疲労感、頭痛、夜間発汗、めまい、不眠症、掻痒症、または骨痛が挙げられる。

【0032】

第１４の実施形態において、本方法によって治療される（例えば、第１～第１３の実施形態のいずれか１つにおけるように）対象は、化合物１による治療の前に、輸血依存性である。いくつかの態様において、「輸血依存性」とは、対象が、許容レベルのヘモグロビンを維持するために、赤血球細胞（ＲＢＣ）の輸血を必要とすることを意味する。ヘモグロビンの許容レベルは、当業者によって決定され、例えば、男性について１３．５～１７．５ｇ／血液のｄＬ数、女性において１２．０～１５．５ｇ／血液のｄＬ数の範囲であってもよい。ｒｕｘによる治療を受ける対象が、上に記載したよりも低いヘモグロビンレベルを有していてもよく、治療を継続するために依然として「許容」レベルであるとみなされてもよいことが理解されるであろう。

【0033】

本明細書に記載の方法の化合物は、薬学的組成物として製剤化することができ、ヒトなどの対象に、選択された投与経路に適合した様々な形態で投与することができる。このような薬学的組成物を投与する典型的な経路としては、限定されないが、経口、局所、口腔、経皮、吸入、非経口、舌下、直腸、膣、および鼻内が挙げられる。本明細書で使用される非経口という用語は、皮下注射、静脈内、筋肉内、髄腔内、胸骨内注射または輸注技術を含む。薬学的組成物を製剤化する方法は、例えば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，”Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ｅｄ．，２１ｓｔ ｅｄｉｔｉｏｎ，２００５，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡに開示されるように、当該技術分野で周知である。

【0034】

本発明の薬学的組成物は、本明細書に記載される方法の化合物と、適切な薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とを組み合わせることによって調製することができ、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、溶液、座薬、注射、吸入剤、ゲル、微粒子、およびエアロゾルなどの固体、半固体、液体、または気体形態の調製物に製剤化され得る。したがって、本明細書に記載の方法の本発明の化合物は、不活性希釈剤または吸収可能な食用担体などの薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて、全身（例えば、経口）投与されてもよい。本発明の化合物は、硬質もしくは軟質シェルゼラチンカプセルに封入されてもよく、錠剤へと圧縮されてもよく、または患者の食事の食品と共に直接的に取り込まれてもよい。経口治療投与のために、活性化合物が１つ以上の賦形剤と組み合わされ、摂取可能な錠剤、口腔錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウエハースなどの形態で使用されてもよい。

【0035】

任意の特定の患者に対する特定の投薬量および治療レジメンは、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、全体的な健康、性別、食事、投与時間、排泄速度、薬物の組み合わせ、および治療する医師の判断、ならびに治療される特定の疾患の重症度を含む、様々な因子に依存するであろう。組成物中の本明細書に記載の化合物の量は、組成物中の特定の化合物にも依存する。しかしながら、一態様において、単剤療法として（すなわち、ルキソリチニブなどのＪＡＫ阻害剤なしで）使用される場合、化合物１、またはその薬学的に許容される塩は、例えば、１日に１回、２回、または３回投与するために、５０ｍｇ～５００ｍｇの用量で製剤化され得る。例えば、単剤療法では、化合物１は、１００ｍｇ～３００ｍｇ／日、１５０ｍｇ～２５０ｍｇ／日、または１５０ｍｇ／日、１７５ｍｇ／日、２００ｍｇ／日、２２５ｍｇ／日、もしくは２５０ｍｇ／日の投薬量で投与され得る。他の態様において、ルキソリチニブなどのＪＡＫ阻害剤と組み合わせて使用される場合、化合物１、またはその薬学的に許容される塩は、例えば、１日に１回、２回、または３回投与するために、５０ｍｇ～５００ｍｇの用量で製剤化され得る。例えば、併用療法では、化合物１は、１００ｍｇ～３００ｍｇ／日、１００ｍｇ～２００ｍｇ／日、または１００ｍｇ／日、１２５ｍｇ／日、１５０ｍｇ／日、１７５ｍｇ／日、もしくは２００ｍｇ／日の投薬量で投与され得る。

【実施例】

【0036】

化合物１は、米国特許第８，７９６，２６１号およびＷＯ２０１５／１９５８６２号に記載される手順に従って得ることができ、これらの両方は参照により本明細書に組み込まれる。

【0037】

インビトロでのサイトカイン放出に対する阻害効果
化合物１は、２つの実験において、ＮＦ－κＢ標的遺伝子の発現を抑制する能力について評価された。１つの実験では、ＴＨＰ－１急性白血病細胞株をリポ多糖治療に曝露し、次いで化合物１に１６時間曝露した。ＴＨＰ－１急性白血病細胞からのＩＬ６放出を、０．０６９μＭのＩＣ_５０で阻害した。他の実験では、化合物１がＴＭＤ８ ＡＢＣ－ＤＬＢＣＬ細胞におけるＩＬ６およびＩＬ１０の両方の発現を抑制する能力を調べた（社内資料）。ＴＭＤ８細胞を、ＤＭＳＯまたは１．６μＭの化合物１と共に６時間または２４時間インキュベートした。次いで、ＲＮＡを細胞から抽出し、ｑＲＴ－ＰＣＲを使用して定量した。図１に示すように、化合物１は、６時間および２４時間の治療後にＩＬ６およびＩＬ１０の両方のｍＲＮＡ転写を大幅に抑制した。

【0038】

巨核球分化に対する単剤としての化合物１の効果
健康なドナー骨髄から単離されたＣＤ３４＋細胞を使用して、巨核球分化および増殖に対する化合物１の効果を評価した（社内資料）。ＣＤ３４＋細胞を、巨核球誘発サイトカインカクテルを含む巨核球分化無血清幹細胞分化基本培地中、ＤＭＳＯまたは３ｎＭ～５００ｎＭの範囲の濃度の化合物１と共に１４日間成長させた。次に、細胞をＣＤ３４（前駆体マーカー）、ＣＤ４５（白血球マーカー）およびＣＤ４１ａ（成熟巨核球マーカー）について染色し、生存率およびマーカー発現についてＦＡＣＳによって評価した。ＣＤ４１ａ発現および細胞の大きさを巨核球分化のマーカーとして使用した。化合物１は、濃度依存性の様式で高ＣＤ４１ａ発現を伴う細胞の数を減少させた。高ＣＤ４１ａ発現から低ＣＤ４１ａ発現へのシフトは、図２に示すように、約５０ｎＭで開始し、２００～５００ｎＭで顕著な効果が観察された。ＣＤ４１ａ高発現細胞の消失は、巨核球分化障害および成熟巨核球の消失を示唆している。

【0039】

巨核球分化および増殖に対する、単独で、またルキソリチニブと組み合わせた化合物１の効果
同様の実験において、２人の健康なドナーの骨髄から単離されたＣＤ３４＋細胞を、ＤＭＳＯ、３０～５００ｎＭの濃度の化合物１単独、８～１０００ｎＭの濃度のルキソリチニブ単独、またはそれらが単独で試験されたのと同じ濃度でのルキソリチニブと組み合わせた化合物１と共に、巨核球分化培地中、１０日間インキュベートした（社内資料）。次に、細胞を生／死染色を用いたＦＡＣＳ分析のために採取し、ＣＤ３４（前駆体マーカー）ならびにＣＤ４１ａおよびＣＤ４２ｂ（成熟巨核球マーカー）でゲーティングした。化合物１は、全体的な生存率（生／死染色による生存細胞の割合）に対する限定的な効果を示したが、それは、全細胞増殖（全生存数）および巨核球分化（ＣＤ４１ａおよびＣＤ４２ｂに対して二重陽性の細胞の割合）に対して強力な効果を示し、それにより生存成熟巨核球の全体的な消失を引き起こした（平均ＥＣ_５０が２８ｎＭ、表１）。

【0040】

化合物１とは対照的に、ルキソリチニブは、前駆細胞を死滅させた同様の濃度で巨核球分化に対して影響を及ぼし（平均ＥＣ_５０値はそれぞれ５２６および６４４ｎＭ、表１）、このことは、巨核球に対するルキソリチニブの阻害効果が、その細胞毒性に基づくことを示唆している。化合物１の段階希釈液をルキソリチニブの段階希釈液と組み合わせると、巨核球分化に対する相加阻害効果が観察された（図３）。２５０ｎＭのルキソリチニブ存在下で試験された最小用量を下回る、化合物１についての平均ＥＣ_５０が３８ｎＭから１７ｎＭまで減少した（外挿した）ときに全細胞増殖に対して同様の相加効果がみられ、このことは、巨核球分化および増殖についてそのＩＣ_５０値に近い濃度の化合物１およびルキソリチニブが、同じ効果を誘発するのに必要な他の薬剤の量を減らすのに有効であることを示している。

【表1】

【0041】

末梢血中のサイトカインレベルの減少
化合物１の全身暴露とＢＥＴ阻害剤感受性遺伝子の抑制との間の関係を決定するために、選択されたＢＥＴ標的遺伝子（ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＩＬ８、ＦＮ１、ＣＳＦ１ＲおよびＴＨＢＳ１）のパネルを、化合物１の第１相臨床試験に参加する患者由来の末梢血試料において評価した。遺伝子発現分析は、時間に対する化合物１の血漿濃度のデータと共に、時間依存性および濃度依存性の関係があることを示す。非臨床データと一致して、化合物１によって誘導される発現の変化は、治療から２時間後のＩＬ８およびＣＣＲ１について最も一貫して観察され、このことは、転写に対するＢＥＴ阻害の迅速な効果を示している。ＣＣＲ１およびＩＬ８の曝露－応答関係の例を図４に示す。示されるデータは、Ｓｔｕｄｙ０６１０－０１において、化合物１で治療されたリンパ腫患者から採取した試料を含む。遺伝子発現値を、単一時間点の前治療で測定したもの（１００％）に対して正規化した。このデータは、主要な炎症促進性遺伝子に対するＢＥＴ阻害の迅速なオンターゲット効果を示し、この臨床バイオマーカーアッセイの使用を裏付ける。

【0042】

骨髄線維症患者における活性の臨床徴候
Ｓｔｕｄｙ０６１０－０２に登録された最初の４名の骨髄線維症患者は、２０１８年７月時点で少なくとも６ヶ月延長された臨床的利益を示している。登録する最初の２名の骨髄線維症患者（患者２４５および２４６）は、ルキソリチニブと組み合わせて化合物１を摂取し、この記載の時点で１８治療サイクル（１１ヶ月の治療）を受けている。登録する次の２名の患者（患者２４７および２４８）は、これまでに単剤療法として１０サイクルの化合物１（６ヶ月の治療）を受けている。４名の患者全員が治療中であり、全身症状の減少、脾臓体積の減少、およびヘモグロビンの増加を経験している。試験参加時に輸血依存性であった１名の患者は、輸血非依存性になった（赤血球細胞（ＲＢＣ）輸血を必要とせずに１２週間より長いと定義される）（２０１８年７月時点で、最後の輸血から７ヶ月が経過している）。直近のヘモグロビン測定は１０．９ｇ／ｄＬであった。この所見と一致して、４名全ての患者が、化合物１による複数の治療サイクルでヘモグロビンレベルの増加を経験している。加えて、制御されていない血小板増加症（ベースライン血小板は８９５×１０^９／Ｌである）を有する試験に参加した１名の患者は、維持された化合物１による単剤療法治療の最初の１ヶ月以内に血小板数の正常化を経験した（直近の血小板測定は１３２×１０^９／Ｌであった）。血小板の回復は、頭痛の顕著な改善と関連付けられた。少なくとも６ヶ月間治療された４名全ての患者の簡潔な説明を以下に提示する。

【0043】

併用療法アーム
６６歳の女性である患者２４５は、２０１４年５月に骨髄線維症と診断され、１日２回（ＢＩＤ）のルキソリチニブ１５ｍｇによる治療を開始した２０１６年１月まで、治療未経験のままであった。２０１６年２月にパノビノスタットが追加され、貧血の発生により、２０１７年３月に中止された。２０１７年３月から、ルキソリチニブ単独では、患者はルキソリチニブに対して抵抗性になり、彼女の脾臓は、大きさが２５％増加した。

【0044】

２０１７年７月のＳｔｕｄｙ０６１０－０２への参加時、ＭＲＩによる患者２４５の脾臓体積は、１４０４ｃｃであり、触診によって１２ｃｍであった。この患者は、試験開始時に、早期満腹感、夜間発汗、および呼吸困難を呈していた。化合物１の１２５ｍｇのＱＤおよびルキソリチニブ１５ｍｇのＢＩＤによる治療の４ヶ月以内に、この患者は、早期満腹感が解消し、彼女の脾臓は、触診によって５ｃｍであり、彼女の肝臓は、もはや触診することができなかった。ＭＲＩによる最小脾臓体積は、６ヵ月時点でのＭＲＩで１１４４ｃｃであり、１９％の減少であった。ルキソリチニブの用量は、減少する血小板数に対処するために、サイクル１０では７．５ｍｇのＢＩＤまで減少した。このルキソリチニブの用量減少の後、彼女の血小板数は、徐々に改善されているが、化合物１の用量増加を可能にするために、２つの治療サイクルについてプロトコル指定基準である１００×１０^９／Ｌを依然として下回っている。患者は、それ以外は良好であり、症状に実質的な変化はない。

【0045】

患者２４６は、２００９年に骨髄線維症と診断された５３歳の女性である。２００２年から２００６年の間、この患者は、エポエチンアルファ、レナリドミドおよびサリドマイドをサイクル投薬され、次いで、２０１３年までレナリドミドを７年間摂取した。彼女は、２０１３年の間にＲＢＣ輸血を必要とし、２０１４年にインターフェロンを開始し、輸血非依存性にすることができた。インターフェロンは、ほぼ１年後に、疲労感のために中止された。この患者は、輸血非依存性を維持し、２０１６年後半に再び輸血依存性になるまで、さらなる治療は行われなかった。ルキソリチニブ５ｍｇのＢＩＤが２０１７年１月に開始された。ルキソリチニブを、２０１７年４月に１０ｍｇのＢＩＤまで増やしたが、この患者は、輸血依存性のままであり、症状が残った。彼女は、脾臓の大きさの増加のため、ルキソリチニブ抵抗性とみなされ、ルキソリチニブ療法中に、症状が悪化した（極度の疲労感、息切れ、労作時の苦痛、時折起こる嘔吐および夜間発汗）。

【0046】

患者２４６が、２０１７年７月に化合物１の１２５ｍｇのＱＤおよびルキソリチニブ１０ｍｇのＢＩＤによる併用治療を開始したとき、彼女の脾臓の体積はＭＲＩによって６０７ｃｃであり、触診によって２ｃｍであり、定期的な輸血を必要とした（３～４週間ごとに２単位のＲＢＣ）。化合物１の用量を、５回の治療サイクル後、併用療法の７ヶ月以内に、１７５ｍｇのＱＤまで増量し、患者は、輸血非依存性になり（輸血せずに１２週間を超え、ヘモグロビンが８ｇ／ｄＬを超えると定義される、図５を参照）、これが３０週間を超えて維持されている（直近のヘモグロビン測定は、１０．９ｇ／ｄＬであった）。彼女は、関連する全身症状（疲労感および呼吸困難）における臨床的に意味のある改善も経験し、脾臓体積が漸進的に減少し、サイクル１２までに脾臓体積の３７％減少（３８０ｃｃ）を達成した。

【0047】

単剤療法アーム
患者２４７は、２０１４年４月に骨髄線維症と診断された４６歳の女性である。２００９年に、この患者は、本態性血小板増加症（ＥＴ）を患っているという疑いがあり、そのため、２００９年４月から２０１７年１２月までヒドロキシ尿素治療を受けた。この患者はまた、２０１５年に１ヶ月間のエポエチンアルファ、２０１６年に３ヶ月間のイメテルスタット、２０１７年に４ヶ月間のペムブロリズマブを摂取した。ルキソリチニブは、２０１５年１０月から２０１６年５月まで投与された。ルキソリチニブは、症候性脾腫大、貧血、白血球増加症、および血小板増加症の悪化に起因して、中止された。

【0048】

２０１７年１２月にＳｔｕｄｙ０６１０－０２に参加した際に、患者２４７は、ＭＲＩによって脾臓体積が８５８ｃｃであり、触診によって５ｃｍであり、腹部不快感、労作時呼吸困難、早期満腹感、疲労感、頭痛、夜間発汗、めまい、不眠症、掻痒症、および骨痛を含む多くの全身症状を有していた。この患者は、試験参加時に、ヒドロキシ尿素にもかかわらず、制御されない血小板増加症も呈していた（ベースラインでの血小板数が８９５×１０^９／Ｌ）。加えて、この患者は、疼痛制御のために複数回の入院を必要とする、持続的で身体を衰弱させる頭痛を経験していた。血小板は、化合物１の単剤療法を最初の２週間受けた後に正常化し（１８３×１０^９／Ｌ）、試験に参加していた残りの期間にわたって、正常範囲内に留まっていた（図６を参照）。化合物１単剤療法の２ヶ月以内に、この患者の重度の頭痛は回復し、夜間発汗は、頻度が少なくなり、症状の３７％の減少が、Ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ Ｎｅｏｐｌａｓｍ Ｓｙｍｐｔｏｍ（ＭＮＳ）スコアによって評価された。ＣＰＩ－０６１０による２回の治療サイクルの後、ＥＣＯＧパフォーマンススコアは、２から１に減少し、直近の測定である８回の治療サイクルの後に、脾臓体積の２５％減少（６４０ｃｃ）がＭＲＩによって評価された。

【0049】

２０１１年９月に骨髄線維症と診断された７６歳の男性である患者２４８は、フレソレムニブ（ｆｒｅｓｏｌｅｍｕｎｉｂ）（２０１１年１２月から２０１２年１０月まで）およびイタシチニブ（２０１２年１２月から２０１４年７月まで）により治療された。ルキソリチニブ５ｍｇのＢＩＤは、２０１５年１月に開始され、２０１５年１２月に１５ｍｇのＢＩＤまで増やした。ルキソリチニブは、この患者が、一般的に疲労感、貧血および血小板減少症の悪化を経験していたため、２０１６年９月に中止された。ルキソリチニブ治療の後、この患者は、２０１６年６月から２０１７年３月までイメテルスタットを摂取し、その後、２０１７年６月から１０月までペムブロリズマブを摂取した。

【0050】

２０１７年１２月に、患者２４８は、Ｓｔｕｄｙ０６１０－０２において、ＣＰＩ－０６１０単剤療法を開始した。当時、この患者は、脾臓体積がＭＲＩによって１１４８ｃｃ、触診によって５ｃｍであった。試験参加時の全身症状には、疲労感、早期満腹感、および集中力低下が含まれていた。この患者は、開始用量の２２５ｍｇのＱＤのＣＰＩ－０６１０に忍容性ではなく（嘔吐、下痢、不快感およびめまいを経験した）、サイクル１の最初の５回の用量の後に、投与中断を必要とした。この患者は、サイクル２の開始時に、化合物１の用量を１７５ｍｇに減らして再開始し、この試験での残りの期間（６ヶ月を超える）にわたって、忍容性であった。この患者の脾臓は、触診によって最小限の変化を示しているが、ＣＰＩ－０６１０による治療の３ヶ月後に、脾臓体積の１１％減少（１０２３ｃｃ）がＭＲＩによって測定された。そのＭＮＳスコアは、１７５ｍｇのＱＤ用量で２ヶ月後に１９％改善し、化合物１治療の６ヶ月後、骨髄の線維形成グレードが、局所病理学者の評価に基づいて、ベースライン時のＭＦ－２からＭＦ－１に減少した。

【0051】

本開示のいくつかの実施形態を説明してきたが、本開示の化合物および方法を利用する他の実施形態を提供するために、本願発明者らの基本的な実施例が変更され得ることは明らかである。したがって、本開示の範囲は、例によって表された特定の実施形態によってではなく、添付の特許請求の範囲によって定義されることを理解されたい。

【0052】

本出願全体で引用される全ての参考文献（参考文献、発行された特許、公開特許出願、および同時係属中の特許出願を含む）の内容は、それらの全体が参照により本明細書に明示的に組み込まれる。別段定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語には、当業者に一般的に知られる意味が付与される。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【手続補正書】

【提出日】2021-11-15

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象における骨髄線維症を治療するための医薬組成物であって、治療有効量の２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を含む、前記医薬組成物。

【請求項2】

前記対象が、以前に、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤による治療を受けたことがある、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

前記対象が、ＪＡＫ阻害剤に対して進行／再発している、請求項１または２に記載の医薬組成物。

【請求項4】

前記対象が、ＪＡＫ阻害剤に対して難治性／抵抗性である、請求項１または２に記載の医薬組成物。

【請求項5】

前記対象が、以前に、ルキソリチニブによる治療を受けたことがある、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項6】

対象における骨髄線維症を治療するための医薬組成物であって、治療有効量の２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミドおよび治療有効量のヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、前記医薬組成物。

【請求項7】

対象における骨髄線維症を治療するための医薬組成物であって、治療有効量の２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を含む、治療有効量のヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤とともに用いるものである、前記医薬組成物。

【請求項8】

前記ＪＡＫ阻害剤が、ルキソリチニブである、請求項６または７に記載の医薬組成物。

【請求項9】

前記対象が血球減少症である、請求項１～８のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項10】

前記対象が貧血である、請求項１～９のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項11】

前記対象が、１０ｇ／ｄＬ未満のヘモグロビン数を有する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項12】

前記対象が血小板減少症である、請求項１～１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項13】

前記対象の血小板数が、１２０，０００個の血小板／μＬより少ない、請求項１～１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項14】

前記対象が血小板血症である、請求項１～１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項15】

前記対象の血小板数が、５００，０００個の血小板／μＬより多い、請求項１～１１および１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項16】

前記対象が好中球減少性である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項17】

前記対象の絶対好中球数が、１０００個の好中球／血液μＬ数より少ない、請求項１～１６のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項18】

前記対象が、肥大した脾臓または肝臓を有する、請求項１～１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項19】

前記対象が、腹部不快感、労作時呼吸困難、早期満腹感、疲労感、頭痛、夜間発汗、めまい、不眠症、掻痒症、または骨痛に罹患している、請求項１～１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項20】

前記対象が輸血依存性である、請求項１～１９のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項21】

前記対象が、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を１００ｍｇ／日～３００ｍｇ／日投与される、請求項１～５および９～２０のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項22】

前記対象が、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を１５０ｍｇ／日～２５０ｍｇ／日投与される、請求項１～５および９～２１のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項23】

前記対象が、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を１００ｍｇ／日～３００ｍｇ／日投与される、請求項６～２０のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項24】

前記対象が、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を１００ｍｇ／日～２００ｍｇ／日投与される、請求項６～２０および２３のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項25】

前記対象が、２－（（４Ｓ）－６－（４－クロロフェニル）－１－メチル－４Ｈ－ベンゾ［ｃ］イソオキサゾロ［４，５－ｅ］アゼピン－４－イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容される塩を１日１回投与される、請求項１～２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【国際調査報告】