特表 2022-521649 生化学反応試験管及びその使用方法と、遺伝子増幅試薬キット

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-04-11

(54)【発明の名称】生化学反応試験管及びその使用方法と、遺伝子増幅試薬キット

(51)【国際特許分類】

   C12M 1/00 20060101AFI20220404BHJP

   C12M 1/24 20060101ALI20220404BHJP

【ＦＩ】

C12M1/00 A

C12M1/24

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021572696

(86)(22)【出願日】2020-02-25

(85)【翻訳文提出日】2021-08-23

(86)【国際出願番号】 CN2020076666

(87)【国際公開番号】W WO2020173445

(87)【国際公開日】2020-09-03

(31)【優先権主張番号】201920239379.X

(32)【優先日】2019-02-25

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(31)【優先権主張番号】202010110246.X

(32)【優先日】2020-02-23

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】521375221

【氏名又は名称】上海快▲リン▼生物科技有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＱＵＩＣＫＩＮＧ ＢＩＯＴＥＣＨ ＣＯ．，ＬＴＤ．

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．４８ Ｇｕｃｕｉ Ｒｏａｄ，Ｘｉｎｃｈａｎｇ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｐｕｄｏｎｇ Ｎｅｗ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１３１４，Ｃｈｉｎａ

(71)【出願人】

【識別番号】521375232

【氏名又は名称】上海快▲リン▼生物工程有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＱＵＩＣＫＩＮＧ ＢＩＯＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＣＯ．，ＬＴＤ．

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．４８ Ｇｕｃｕｉ Ｒｏａｄ，Ｘｉｎｃｈａｎｇ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｐｕｄｏｎｇ Ｎｅｗ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１３１４，Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】110000291

【氏名又は名称】特許業務法人コスモス国際特許商標事務所

(72)【発明者】

【氏名】許 向華

(72)【発明者】

【氏名】何 小明

(72)【発明者】

【氏名】周 中人

(72)【発明者】

【氏名】張 ▲レイ▼

【テーマコード（参考）】

4B029

【Ｆターム（参考）】

4B029AA27

4B029BB20

4B029CC01

4B029FA12

4B029GA02

(57)【要約】

本発明は生化学反応試験管及びその使用方法と遺伝子増幅試薬キットを公開し、生化学反応試験管は管部と蓋部とを含み、管部は第1のチャンバーと下部が上記の第１のチャンバーの下部から一定的に離れた第2のチャンバーとを含む管本体と、上記の管本体の外側に配置される制限ユニットとを備え、上記の蓋部は上記の管部を閉じると、上記の第１のチャンバーの上部が上記の第２のチャンバーの上部とつながる。有益効果は高さの異なる位置に設けられた第１のチャンバーと第２のチャンバーを設定することにより異なる反応組成と溶液を配置する。実際に使用するとき、第1のチャンバーと第2のチャンバーのうちの一つだけ単独に加熱され、他の一つは加熱されずに、生化学反応を完了する。試験管を180°反転させて振動操作を行う時に、第１のチャンバーと第２のチャンバー中の溶液を混合させ、更なる反応をする。よって、有害結果を排除できる。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

管部と蓋部を含む生化学反応試験管であり、上記の管部は、
第1のチャンバーと、下部が上記の第１のチャンバーの下部から一定的に離れた第2のチャンバーとを含む管本体と、
上記の管本体の外側に配置される制限ユニットと、
を備え、
上記の蓋部は上記の管部を閉じると、上記の第１のチャンバーの上部が上記の第２のチャンバーの上部とつながることを特徴とする生化学反応試験管。

【請求項2】

上記の第２のチャンバーの下部と上記の第１のチャンバーの下部の間の距離は少なくとも３mmであることを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項3】

上記の第２のチャンバーは上記の第１のチャンバーの外側に配置され、及び／または、上記の第２のチャンバーは上記の第１のチャンバーの内側に配置されることを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項4】

上記の第２のチャンバーの軸線は上記の第１のチャンバーとの共線、または平行であることを特徴とする請求項３に記載の生化学反応試験管。

【請求項5】

上記の第２のチャンバーの下部は上記の制限ユニットの上部と同じ水平面に位置され、または、上記の第２のチャンバーの下部は上記の制限ユニットの上部の上側にあることを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項6】

上記の制限ユニットの少なくとも一部分が上記の管本体の外側に周囲的に配置されることを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項7】

上記の制限ユニットは生化学反応装置によって接触伝導加熱される時、上記の第１のチャンバーまたは上記の第２のチャンバーは上記の生化学反応装置の熱源に接触することを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項8】

上記の管部は、さらに上記の管本体の内側壁の円周面に配置される第１の嵌合部材を含み、
上記の蓋部は、上記の蓋部の外側壁の円周面に配置される第２の嵌合部材を含み、
上記の第２の嵌合部材は上記の第１の嵌合部材と接続すると、上記の蓋部は上記の管部を閉じることを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項9】

上記の第１の嵌合部材は複数あり、複数の上記の第１の嵌合部材は上記の管部の軸方向に配置され、
上記の第２の嵌合部材は複数あり、複数の上記の第２の嵌合部材は上記の蓋部の軸方向に配置され、
少なくとも上記の蓋部の最下側にある上記の第２の嵌合部材が上記の管部の最上側にある上記の第１の嵌合部材と接続されることを特徴とする請求項８に記載の生化学反応試験管。

【請求項10】

一端が上記の管部と繋がり、他の一端が上記の蓋部と繋がる接続部材をさらに含むことを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項11】

上記の蓋部は、上記の蓋部の外側壁に配置される補助部材を含み、上記の蓋部は上記の管部を閉じる時に、上記の補助部材は上記の管部から突出するように配置されることを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項12】

上記の補助部材の厚さが上記の蓋部の上部の厚さより小さい、または、上記の補助部材の厚さは0．4mm以下であることを特徴とする請求項１１に記載の生化学反応試験管。

【請求項13】

上記の蓋部は、
上記の蓋部の内部を貫通して配置される中空部材と、
上記の中空部材を密封する密封部材と、
を備え、
上記の中空部材は、
上記の中空部材の上端に配置される第１の開口要素と、
上記の中空部材の下端に配置される第２の開口要素と、
を含み、
上記の密封部材は、
上記の第１の開口要素を密封する第１の密封要素と、
上記の第２の開口要素を密封する第２の密封要素と、
を含むことを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項14】

上記の密封部材は上記の中空部材を密封する場合に、上記の第１の密封要素は上記の第２の密封要素と接触しない；または、上記の第１の密封要素は上記の第２の密封要素を破壊することを特徴とする請求項１３に記載の生化学反応試験管。

【請求項15】

上記の中空部材は、
上記の中空部材の内側壁に周囲的に配置される第３の嵌合部材を含み、
上記の密封部材は、上記の第１の密封要素の外側壁に周囲的に配置され、上記の第１の密封要素が上記の第１の開口要素を密封するように、上記の第３の嵌合部材と接続する第４の嵌合部材を含むことを特徴とする請求項１３に記載の生化学反応試験管。

【請求項16】

上記の第１のチャンバーの下部は円筒構造または円錐構造を呈することを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項17】

上記の円筒構造または円錐構造の上部の内径が1.5～8mmであることを特徴とする請求項１６に記載の生化学反応試験管。

【請求項18】

上記の第２のチャンバーの上部の内径が5～15mmであることを特徴とする請求項１に記載の生化学反応試験管。

【請求項19】

上記の生化学反応試験管にある生化学反応溶液を接触式加熱伝導させる金属浴装置を含むことを特徴とする請求項７に記載の生化学反応試験管。

【請求項20】

上記の生化学反応試験管が接触式加熱伝導された時に、上記の生化学反応試験管にある生化学反応溶液の光学的信号を収集する生化学反応光学的検出装置を含むことを特徴とする請求項７または１９に記載の生化学反応試験管。

【請求項21】

請求項１～２０のいずれかの記載の生化学反応試験管と、
核酸増幅試薬と、
機能性反応試薬と、
を含み、
上記の核酸増幅試薬と上記の機能性反応試薬のうちの一つが上記の第１のチャンバーの内部に配置され、上記の核酸増幅試薬と上記の機能性反応試薬のうちの他の一つが上記の第２のチャンバーの内部に配置され；
上記の蓋部が上記の管部を閉じる場合には、
その中に、上記の蓋部は上記の管部を閉じ、生化学反応を行う時、上記の核酸増幅試薬は熱源を接触し、上記の機能性反応試薬は熱源を接触しない、
上記の核酸増幅試薬を加熱して増幅反応を完了した後、上記の生化学反応試験管を垂直に180°反転して、上記の機能性反応試薬を増幅反応が完了した増幅産物と混合させることを特徴とする遺伝子増幅試薬キット。

【請求項22】

上記の核酸増幅試薬はｄＵＴＰを含み、上記の機能性反応試薬はUNG酵素を含む溶液であり、または、
上記の核酸増幅試薬はエンドヌクレアーゼと対応する切断配列を含む核酸増幅産物を含み、上記の機能性反応試薬はエンドヌクレアーゼを含む溶液であり、または、
上記の核酸増幅試薬は核酸増幅プライマーを含み、上記の機能性反応試薬はヌクレアーゼを含む溶液であることを特徴とする請求項２１に記載の遺伝子増幅試薬キット。

【請求項23】

核酸増幅試薬と機能性反応試薬のうちの一つを上記の第１のチャンバー内に配置し、核酸増幅試薬と機能性反応試薬のうちの他の一つを上記の第２のチャンバー内に配置し、
上記の生化学反応試験管を増幅装置に挿入して、上記の核酸増幅試薬が配置されている上記の第１のチャンバーまたは第２のチャンバーのみ接触式加熱伝導させ、
核酸増幅反応が終了した後、上記の機能性反応試薬を増幅反応済の増幅産物と混合させることを特徴とする請求項１～２０のいずれかに記載の生化学反応試験管の使用方法。

【請求項24】

上記の機能性試薬はリアーぜであり、上記の機能性反応試薬は増幅反応が終了した増幅産物と混合して上記の増幅産物を切断することを特徴とする請求項２３に記載の生化学反応試験管の使用方法。

【請求項25】

上記の増幅装置はPCR装置、蛍光検出装置を含むことを特徴とする請求項２３に記載の生化学反応試験管の使用方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は生物工学分野に関し、特に、生化学反応試験管及びその使用方法と、遺伝子増幅試薬キットに関する。

【背景技術】

【0002】

従来の小規模の生化学反応で、一般的には単なる試験管の中に一つのキャビティ及び一種類の溶液が収納され、複数の溶液が反応に必要な場合には、異なる試験管から溶液を吸収して他の反応試験管に加入することである。薬汚染などの特別な原因がある場合は、バッフルを試験管に設置して試験管を2つの部分に分割し、2つの溶液A / Bを同じ試験管の異なるキャビティに配置することができる。そうすると、蓋を開けずに、A/ B溶液を混合して反応させ、試薬の漏れや汚染を防ぐようにできる。

【0003】

PCR反応などの核酸増幅は、大きな増幅能力と高感度という最大の特徴を有するが、汚染されやすい。実験室のサンプルと増幅ターゲットが同じ条件を多数持つことが多い場合には、核酸エアロゾル汚染は実験区域に蓄積し続け、汚染のリスクが高まり、誤検知の頻度が高まることにつながる。PCRによる高増幅能力により生成された核酸エアロゾル汚染は偽陽性の結果を引き起こす。誤検知は、実験の信頼性が低く、実験室に直接的に経済的損失をもたらすことを意味する。さらに深刻なのは、エアロゾル汚染が形成されると、PCRラボ全体の汚染を引き起こしたり、ラボを閉鎖したりする可能性がある。

【0004】

PCR増幅産物のコンタミネーションが最も一般的な汚染である。非常に少量のPCR産物のコンタミネーションは、誤検出を引き起こす可能性がある。PCR産物のコンタミネーションの最も可能性の高い形態は、エアロゾル汚染である。核酸エアロゾル、またはDNA / RNAエアロゾルは、ガス状媒体に分散および懸濁された核酸エアロゾルは、ガス媒体に懸濁された一般に0.001μmから1000μmの粒子サイズの小さな固体および液体粒子から形成されたゾルの分散系である。核酸エアロゾル、即ちDNA / RNAエアロゾルは、ガス状媒体に分散および懸濁された核酸ポリマーであり、実験室のデスクトップ、機器、消耗品、および空気に広く存在している。計算によると、一つのエアロゾル粒子には48,000コピーが含まれる。核酸エアロゾルはPCRプロセスを伴い、操作中において、液面が空気に触れるとか、遠心分離機にて遠心分離するとか、反応管を激しく振るとか、反応管を開くとか、サンプルを吸引するとか、ピペットを繰り返し吸引するとか、およびコンタミネーション物質の漏出とか、上記の工程の中から、いずれも核酸エアゾロルを生成する可能性がある。

【0005】

PCR増幅法に加えて、現在の核酸定温増幅法が徐々に実験室に入ってきた。現在、主に次のものが含まれている：ループ仲介等温増幅（loop－mediated isothermal amplification, LAMP）、NEMA（nicking enzyme mediated amplification）、SDA（strand displacement amplification）、ローリング サークル増幅（RCA、rolling circle amplification）、HAD（helicase-dependent isothermal DNA amplification） 、TAS（transcription － based amplification system）、３SR（self－sustained sequence replication）とも言うNASBA（Nucleic acid sequence-based amplification）、Q－beta replicase －amplified assayなどである。等温増幅はサーマルサイクリングを行う必要がないため、その応用範囲が大幅に拡大していて、それに、現在使用されている等温増幅法は感度や特異性に優れ、核酸検査での応用範囲は非常に広い。しかし、高感度は増幅産物のコンタミネーションによる偽陽性などの問題をもたらし、反応結果の判断が不正確になるという問題となる。

【0006】

核酸生成物を試薬組成と区別して、核酸反応試薬組成という点からコンタミネーション問題を克服するのは多くの試薬メーカーが取り組んでいる方向で、その中で、酵素UNG（Uracil‐N‐Glycosila）によるコンタミ予防効果はますます評価され、肯定されてきた。PCR産物またはプライマーにおいて、dTの代わりにdUを用いる。UDGは、ウラシル塩基と糖－リン酸骨格の間のN-グリコシド結合を切断でき、dUを除去してTaq-DNAポリメラーゼの伸長を防ぐことができるため、上記のdU化したPCR産物は、UDGとインキュベーションすると再増幅の能力を失う。UNGはdUを含まない鋳型には影響を与えない。UNGは一本鎖DNAからも、二本鎖DNAからもウラシルを除去できるが、RNA中のウラシルおよび一本鎖ウラシル分子には影響を与えない。増幅反応では、dTTPの代わりにｄＵＴＰを使用するため、生成物に大量のdUが取り込まれる。次のPCR増幅を行う前に、PCR混合物をUNGで処理すると、PCR産物のキャリーオーバコンタミネーションを除去することができる。ただし、酸素反応の効率が高くなく、消化時間が通常5分しかないため、上記の技法ではUNGにてPCR混合物中の軽度のPCR産物コンタミしか処理できず、問題を解決することができない。

【0007】

プライマーを合成する際に、dTの代わりにdUを使用すれば、PCR産物に5’末端のみdUを含む。UNGにて処理後、プライマーは結合部位を失い、増幅できない。長いフラグメント（1～2KB以上）の増幅において、ｄＵＴＰ法による効率はdTTP法による効率より低いが、dU法にて欠点を克服することができる。dUプライマーはdUを3’末端または’端近くに設計するのが好ましいが、当該方法はプライマー以外の試薬しか使用できない。

【0008】

現在のUNG酸素によるコンタミ予防法は、核酸増幅反応前の増幅産物に対する酵素加水分解にのみ注意を払い、核酸増幅反応後の増幅産物の直接酵素加水分解を考慮していない。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0009】

本発明の目的は既存技術の欠陥を考慮して、生化学反応試験管およびその使用方法と、遺伝子増幅試薬キットを提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0010】

本発明の第一の実施形態では、生化学反応試験管を提供し、管部と蓋部を含み、上記の管部は、
第1のチャンバーと、下部が上記の第１のチャンバーの下部から一定的に離れた第2のチャンバーとを含む管本体と、
上記の管本体の外側に配置される制限ユニットと、
を備え、
ここで、上記の蓋部は上記の管部を閉じると、上記の第１のチャンバーの上部が上記の第２のチャンバーの上部とつながる。

【0011】

好ましくは、上記の第２のチャンバーの下部と上記の第１のチャンバーの下部の間の距離は少なくとも３mmである。

【0012】

好ましくは、上記の第２のチャンバーは上記の第１のチャンバーの外側に配置され、及び／または、上記の第２のチャンバーは上記の第１のチャンバーの内側に配置される。

【0013】

好ましくは、上記の第２のチャンバーの軸線は上記の第１のチャンバーのと共線、または平行である。

【0014】

好ましくは、上記の第２のチャンバーの下部は上記の制限ユニットの上部と同じ水平面に位置され、または、上記の第２のチャンバーの下部は上記の制限ユニットの上部の上側にある。

【0015】

好ましくは、少なくとも上記の制限ユニットの一部分が上記の管本体の外側に周囲的に配置される。

【0016】

好ましくは、上記の制限ユニットは生化学反応装置によって接触伝導加熱される時、上記の第１のチャンバーまたは上記の第２のチャンバーは上記の生化学反応装置の熱源に接触する。

【0017】

好ましくは、上記の管部は、さらに上記の管本体の内側壁の円周面に配置される第１の嵌合部材を含み、
上記の蓋部は、上記の蓋部の外側壁の円周面に配置される第２の嵌合部材を含み、
上記の第２の嵌合部材は上記の第１の嵌合部材と接続すると、上記の蓋部は上記の管部を閉じる。

【0018】

好ましくは、上記の第１の嵌合部材は複数あり、複数の上記の第１の嵌合部材は上記の管部の軸方向に配置され、
上記の第２の嵌合部材は複数あり、複数の上記の第２の嵌合部材は上記の蓋部の軸方向に配置され、
ここで、少なくとも上記の蓋部の最下側にある上記の第２の嵌合部材が上記の管部の最上側にある上記の第１の嵌合部材と接続される。

【0019】

好ましくは、さらに、一端が上記の管部と繋がり、他の一端が上記の蓋部と繋がる接続部材を含む。

【0020】

好ましくは、上記の蓋部は、上記の蓋部の外側壁に配置される補助部材を含み、ここで、上記の補助部材は、上記の蓋部は上記の管部を閉じる時に、上記の管部から突出するように配置される。

【0021】

好ましくは、上記の補助部材の厚さが上記の蓋部の上部の厚さより小さい、または、上記の補助部材の厚さは0．4mm以下である。

【0022】

好ましくは、上記の蓋部は、
上記の蓋部の内部を貫通して配置される中空部材と、
上記の中空部材を密封する密封部材と、
を備え、
上記の中空部材は、
上記の中空部材の上端に配置される第１の開口要素と、
上記の中空部材の下端に配置される第２の開口要素と、
を含み、
上記の密封部材は、
上記の第１の開口要素を密封する第１の密封要素と、
上記の第２の開口要素を密封する第２の密封要素と、
を含む。

【0023】

好ましくは、上記の密封部材は上記の中空部材を密封する場合に、上記の第１の密封要素は上記の第２の密封要素と接触しない；または、上記の第１の密封要素は上記の第２の密封要素を破壊する。

【0024】

好ましくは、上記の中空部材は、
上記の中空部材の内側壁に周囲的に配置される第３の嵌合部材を含み、
上記の密封部材は、上記の第１の密封要素の外側壁に周囲的に配置され、上記の第１の密封要素が上記の第１の開口要素を密封するように、上記の第３の嵌合部材と接続する第４の嵌合部材を含む。

【0025】

好ましくは、上記の第１のチャンバーの下部は円筒構造または円錐構造を呈する。

【0026】

好ましくは、上記の円筒構造または円錐構造の上部の内径が1.5～8mmである。

【0027】

好ましくは、上記の第２のチャンバーの上部の内径が5～15mmである。

【0028】

好ましくは、さらに、上記の生化学反応試験管にある生化学反応溶液を接触式加熱伝導させる金属浴装置を含む。

【0029】

好ましくは、好ましくは、上記の生化学反応試験管が接触式加熱伝導された時に、上記の生化学反応試験管にある生化学反応溶液の光学的信号を収集する生化学反応光学的検出装置をさらに含む。

【0030】

本発明の第２の実施形態では、遺伝子増幅試薬キットを提供し、その遺伝子増幅試薬キットは、
上記に生化学反応試験管と、
核酸増幅試薬と、
機能性反応試薬と、
を含み、
ここで、上記の核酸増幅試薬と上記の酵素溶液のうちの一つが上記の第１のチャンバーの内部に配置され、上記の核酸増幅試薬と上記の機能性反応試薬のうちの他の一つが上記の第２のチャンバーの内部に配置され；
上記の蓋部が上記の管部を閉じる場合には、
その中に、上記の蓋部は上記の管部を閉じる時、
上記の核酸増幅試薬は熱源を接触して増幅反応を完了した後、上記の機能性反応試薬の反応活性が良好なままであり、
上記の生化学反応試験管を垂直に180°反転した後、上記の機能性反応試薬を増幅反応が完了した増幅産物と混合させる。

【0031】

好ましくは、上記の核酸増幅試薬はｄＵＴＰを含み、上記の機能性反応試薬はUNG酵素を含む溶液であり、または、
上記の核酸増幅試薬はエンドヌクレアーゼと対応する切断配列を含む核酸増幅産物を含み、上記の機能性反応試薬はエンドヌクレアーゼを含む溶液であり、または、
上記の核酸増幅試薬は核酸増幅プライマーを含み、上記の機能性反応試薬はヌクレアーゼを含む溶液である。

【0032】

本発明の第３の実施形態では、生化学反応試験管の使用方法を提供し、
核酸増幅試薬と機能性反応試薬のうちの一つを上記の第１のチャンバー内に配置し、核酸増幅試薬と機能性反応試薬のうちの他の一つを上記の第２のチャンバー内に配置し、
上記の生化学反応試験管を増幅装置に挿入して、上記の核酸増幅試薬が配置された上記の第１のチャンバーまたは第２のチャンバーのみ接触式加熱伝導させ、温度をコントロールし、
核酸増幅反応が終了した後、上記の機能性反応試薬を増幅反応済の増幅産物と混合させる。

【0033】

好ましくは、核酸増幅反応が終了した後、上記の生化学反応試験管を上記の増幅装置から取り外し、上記の生化学反応試験管を垂直に180°反転させて、上記の生化学反応試験管が倒置した状態で、上記の機能性反応試薬を増幅反応を完了した増幅産物と混合させる。

【0034】

好ましくは、上記の機能性試薬はリアーぜであり、上記の機能性反応試薬は増幅反応が終了した増幅産物と混合して上記の増幅産物を切断する。

【0035】

好ましくは、上記の増幅装置はPCR装置、蛍光検出装置を含む。

【発明の効果】

【0036】

本発明は、以上の技術案を採用し、既存技術と比べて、以下の技術効果がある。
本発明による生化学反応試験管で、高さの異なる位置に設られた第１のチャンバーと第２のチャンバーを設定することにより異なる反応組成と溶液を配置する。実際の使用では、第1のチャンバーと第2のチャンバーのうちの一つだけ単独に加熱され、他の一つは加熱されずに、生化学反応を完了し、装置によって蛍光信号など関連する生化学反応信号を収集することができる。試験管を180°反転させて振動操作を行う時に、第１のチャンバーと第２のチャンバー中の溶液を混合させ、更なる反応をする。よって、有害結果を排除できる。例えば、異なるチャンバー中の核酸分解酵素溶液を核酸増幅産物溶液と混合すると、増幅産物を分解でき、増幅産物溶液の漏れにより操作環境を汚染することを防ぐ。

【図面の簡単な説明】

【0037】

【図1】図１は本発明に係る一つの例示的実施例による蓋部が管部を閉じていない生化学反応試験管を示す断面図である。

【図2】図２は本発明に係る一つの例示的実施例による蓋部は管部を閉じてた生化学反応試験管を示す断面図である。

【図3】図３は本発明に係る一つの例示的実施例による生化学反応試験管の管部を示す断面図である。

【図4】図４は本発明に係る一つの例示的実施例による生化学反応試験管の蓋部を示す断面図である。

【図5】図５は本発明に係る一つの具体的実施例による蓋部は管部を閉じていない生化学反応試験管を示す断面図である。

【図6】図６は本発明に係る一つの具体的実施例による生化学反応試験管を示す平面図である。

【図7】図７は本発明に係る一つの具体的実施例による蓋部は管部を閉じていない生化学反応試験管を示す断面図である。

【図8】図８は本発明に係る一つの具体的実施例による生化学反応試験管を示す平面図である。

【図9】図９は本発明に係る一つの具体的実施例による蓋部は管部を閉じていない生化学反応試験管を示す断面図である

【図10】図１０は本発明に係る一つの具体的実施例による蓋部は管部を閉じた生化学反応試験管を示す断面図である。

【図11】図１１は本発明に係る一つの具体的実施例による蓋部は管部を閉じた生化学反応試験管を示す断面図である。

【図12】図１２は本発明に係る一つの具体的実施例による生化学反応試験管の中空部材を示す断面図である。

【図13】図１３は本発明に係る一つの具体的実施例による生化学反応試験管の第１の密封要素を示す断面図である。

【図14】図１４は本発明に係る一つの具体的実施例による金属浴装置付きの生化学反応試験管を示す図である。

【図15】図１５は本発明に係る一つの具体的実施例による生化学反応光学的検出装置付きの生化学反応試験管を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0038】

以下は図面を参考して本発明の実施例を説明するが、本発明の限定とするものではない。明らかに、記載された実施例はただ本発明の一部にすぎず、すべての実施例ではない。本発明の実施例に基づいて、当業者によって創造的な努力なしに得られた他のすべての実施例は本発明の保護範囲に含まれるものである。

【0039】

注意すべきなのは、本発明中の各実施例の特徴は組み合わせることができる。

【実施例1】

【0040】

図１～２に示すように、本発明による一つの例示的実施例の生化学反応試験管は、管部１０と蓋部２０とを含み、管部１０は管本体１１と管本体１１の外側壁に配置される制限ユニット１２とを含み、管本体１１は第１のチャンバー１３と第２のチャンバー１４とを含み、蓋部２０は管部１０を閉じてる場合には、第１のチャンバー１３の上部は第２のチャンバー１４の上部と繋がる。

【0041】

ここで、第１のチャンバー１３の中に核酸増幅試薬を配置し、第２のチャンバー１４の中には、第１のチャンバー１３の中に配置されている増幅産物を分解する機能性反応試薬を配置する。あるいは、第２のチャンバー１４の中に核酸増幅試薬を配置し、第１のチャンバー１３の中に、第２のチャンバー１４の中に配置されている増幅産物を分解する機能性反応試薬を配置する。核酸増幅反応が終了した後、生化学反応試験管を垂直に１８０°反転すると、機能性反応試薬が増幅産物と混合して、増幅産物を分解することができるようになる。

【0042】

ここで、機能性試薬は分解酵素、細胞溶解液、プローブ、緩衝液、希釈剤など、または、増幅反応が完了した後の後続の反応のための試薬が含まれるが、これらに限定されない。

【0043】

第２のチャンバー１４の下部は第１のチャンバー１３の下部から一定の距離があり、即ち、第２のチャンバー１４の下部と水平面との間の距離は第１のチャンバー１３の下部と水平面との間の距離より大きい。

【0044】

第２のチャンバー１４の下部と第１のチャンバー１３の下部との間の距離は少なくとも３mmである。

【0045】

第２のチャンバー１４は第１のチャンバー１３の外側に位置し、第２のチャンバー１４は管本体１１の内側壁と第１のチャンバー１３の外側壁との間に位置し、それに第２のチャンバー１４は環状なチャンバーであり、即ち、第２のチャンバー１４は第１のチャンバー１３の外側壁に周囲的に配置される。この場合には、第２のチャンバー１４の軸線は第１のチャンバー１３の軸線と同じである。

【0046】

一方で、第２のチャンバー１４は第１のチャンバー１３の内側壁にも配置されてもよいし、さらに第２のチャンバー１４は環状なチャンバーであり、即ち、第２のチャンバー１４は第１のチャンバー１３の内側壁に周囲的に配置される。この場合にも、第２のチャンバー１４の軸線は第１のチャンバー１３の軸線と同じである。

【0047】

本実施例の他の実施方式において、第２のチャンバー１４は第１のチャンバー１３の外側に位置し、第２のチャンバー１４は管本体１１の内側壁と第１のチャンバー１３の外側壁との間に位置し、さらに第２のチャンバー１４は円形なチャンバーであり、即ち、第２のチャンバー１４の外側壁の円周面は第１のチャンバー１３の外側壁の円周面に対して接線をなす。この場合には、第２のチャンバー１４の軸線は第１のチャンバー１３の軸線と平行する。ここで、第２のチャンバー１４は複数あってもよく、複数の第２のチャンバー１４は第１のチャンバー１３を中心として第１のチャンバー１３の外側壁の円周面に周囲的に配置されうる。

【0048】

一方で、第２のチャンバー１４は第１のチャンバー１３の内側に配置されてもよいし、それに第２のチャンバー１４は円形なチャンバーであり、第２のチャンバー１４の外側壁の円周面は第１のチャンバー１３の内側壁の円周面に対して接線をなす。この場合には、第２のチャンバー１４の軸線は第１のチャンバー１３の軸線と平行する。ここで、第２のチャンバー１４は複数あってもよく、複数の第２のチャンバー１４は第１のチャンバー１３を中心として第１のチャンバー１３の内側壁の円周面に周囲的に配置されうる。

【0049】

上記の構造において、第２のチャンバー１４および第１のチャンバー１３は、一体的に配置されてもよいし、別々に配置されてもよい。第２のチャンバー１４および第１のチャンバー１３が別々に配置される場合に、第２のチャンバー１４は、第１のチャンバー１３の外側に取り外し可能に配置され、取り外し可能な方法は、スナップ接続を含むが、これに限定されない。

【0050】

制限ユニット１２は少なくとも一部が管本体１１の周囲に配置され、即ち、制限ユニット１２は管本体１１との接続は円弧形となし、当該の円弧形の中心角は少なくとも鋭角である。具体的には、制限ユニット１２は、フルスカート、ハーフスカート、またはクォータースカートであり得る。

【0051】

制限ユニット１２の上部と第２のチャンバー１４の下部との間の距離は０、即ち制限ユニット１２の上部と第２のチャンバー１４の下部は同じ水平面にあってもよいし、制限ユニット１２の上部と第２のチャンバー１４の下部との間の距離は０より大きい、即ち、制限ユニット１２は垂直方向に第２のチャンバー１４の下側に位置してもよい。

【0052】

制限ユニット１２は対称的な柱体や錐体であり、任意の角度で生化学反応装置に挿入することができ、例えば、任意の角度でＰＣＲ増幅装置の加熱ベースに挿入して固定し、それに、第１のチャンバー１３の下面または下面に近い側面から、第１のチャンバー１３内の溶液の生化学反応の結果に対して、光学的信号を収集および検出することができる。

【0053】

または、限界ユニット１２は非対称柱体であり、単一の角度からしか生化学反応装置に挿入することができず、それに単一の角度からしか第１のチャンバー１３内の溶液の生化学反応結果に対して光学的信号を収集および検出することができない。

【0054】

限界ユニット１２が生化学反応装置によって接触伝導加熱により加熱されると、第１のチャンバー１３の下部溶液（核酸増幅試薬を含む）が接触伝導加熱を行い、第２のチャンバー１４の下部溶液（機能性反応試薬を含む）は接触伝導加熱を行わない。または、第２のチャンバー１４の下部溶液（核酸増幅試薬を含む）は接触伝導加熱を行うが、第１のチャンバー１３の下部溶液（機能性反応試薬を含む）は接触伝導加熱を行わない。

【0055】

図１～３に示すように、第１のチャンバー１３の下部は、円筒構造または円錐構造を呈し、生化学反応装置の加熱ベースの内穴と一致することができる。

【0056】

第１のチャンバー１３の円筒構造または円錐構造の上部の内径は１．５～８mmであり、第２のチャンバー１４の上部の内径は５～１５mmである。

【0057】

管部１０と蓋部２０との密封効果を向上させるために、管部１０と蓋部２０には、それぞれ第１の嵌合部材１５と第２の嵌合部材２１が設けられている。

【0058】

図３に示すように、第１の嵌合部材１５は、管本体１１の内側壁の円周面に配置され、且つ第１の嵌合部材１５が少なくとも一つある。

【0059】

図４に示すように、第２の嵌合部材２１は蓋部２０の外側壁の円周面に配置され、且つ、第２の嵌合部材２１が少なくとも１つある。

【0060】

蓋部２０が管部１０を閉じる時に、第２の嵌合部材２１が第１の嵌合部材１５に接続され、蓋部２０と管部１０が互いに協働して、蓋部２０が管部１０を密封する効果を向上させる。

【0061】

第１の嵌合部材１５は溝（または密封溝）であり、第２の嵌合部材２１は突起（または突起密封環）であり、または、第１の嵌合部材１５は突起（または突起密封環）であり、第２の嵌合部材２１は溝（または密封溝）である。

【0062】

第１の嵌合部材１５は複数あり、管部１０の軸方向に配置され、同様に、第２の嵌合部材２１は複数あり、蓋部２０の軸方向にそって配置されている。

【0063】

第１の嵌合部材１５と第２の嵌合部材２１は一対一に接続されてもよい。具体的には、蓋部２０が管部１０を閉じている場合、管部１０の最下部に位置する第１の嵌合部材１５は、蓋部２０の再下部に位置する第２の嵌合部材２１に接続され、管部１０の最上部に位置する第１の嵌合部材１５は、蓋部２０の最上部に位置する第２の嵌合部材２１に接続される。この場合、蓋部２０を外して管部１０の内部空間を露出させるために、大きな外力を加える必要がある。

【0064】

第１の嵌合部材１５と第２の嵌合部材２１は一対一に接続されなくてもよい。具体的には、蓋部２０が管部１０を閉じている場合、管部１０の最上部に位置する第１の嵌合部材１５は、蓋部２０の最下部に位置する第２の嵌合部材２１に接続される。この場合、蓋部２０を容易に取り外して管部１０の内部空間を露出させうる。

【0065】

以上のことから、蓋部２０は管部10を密封するよう、管部１０の最上部に位置する第１の嵌合部材１５は、少なくとも蓋部２０の最下部に位置する第２の嵌合部材２１と接続する。

【0066】

管部１０と蓋部２０は一対一対応を確保するために、管部１０と蓋部２０とを接続する接続部材３０も設られている。具体的に、接続部材３０の１端は管部１０の上部の外側壁に接続され、他の一端は蓋部２０の上部の外側壁に接続されている。

【0067】

接続部材３０は撚り線接続具である。

【0068】

図２に示すように、蓋部２０は管部１０を閉じている場合に、折り畳まれた接続部３０を除いて、蓋部２０の上部の外縁は管部１０の上部の外縁を超える部分は一切ない。

【実施例2】

【0069】

本実施例は本発明による一つの具体的な実施例であり、蓋部２０の取り外しを容易にすることができる実施例１の改善された実施例である。

【0070】

図５～６に示すように、上記の生化学反応試験管は管部１０、蓋部２０、接続部分３０と補助部分４０とを含む。ここで、管部１０、蓋部２０と接続部分３０の構造と接続関係は実施例１とほぼ同じなので、これらに関する説明を省略する。

【0071】

補助部材４０は蓋部２０の外側壁に配置され、蓋部２０は管部１０を閉じた時、補助部分４０は管部１０から突起して配置され、言い換えれば、補助部材４０は、管部１０の上部の外縁から蓋部２０の上部の外縁に沿って一定の長さまで延びる突起である。

【0072】

補助部材４０は接続部材３０と蓋部２０に対して対称に配置される。

【0073】

補助部材４０の厚さは蓋部２０の上部の厚さより小さい。

【0074】

補助部材４０の厚さは０．０４mm以下である。

【実施例3】

【0075】

本実施例は本発明による一つの具体的な実施例であり、第２のチャンバー１４への溶液の添加を容易にすることができる実施例１の改善された実施例である。

【0076】

図７～８に示すように、生化学反応試験管は、管部１０と、蓋部２０と接続部材３０とを含む。蓋部２０と接続部材３０の構造と接続関係は、基本的に第１の実施例と同じであり、ここでは説明を省略する。

【0077】

図７～８に示すように、管部１０において、第１のチャンバー１３の下部は、生化学反応装置の内穴と一致する円筒構造または円錐構造である。第２のチャンバー１４は管本１１の外側壁と制限ユニット１２の内側壁との間に位置し、かつ、第２のチャンバー１４の軸線は第１のチャンバー１３の軸線と平行し、即ち、第１のチャンバー１３は第２のチャンバー１４の下面から偏心して配置されている。

【0078】

具体的に、第１のチャンバー１３の外側壁の一方の側は相対する制限ユニット１２の内側壁から遠く離れ、第１のチャンバー１３の外側壁の他方の側は、相対する制限ユニット１２の内側壁に近い。その結果、第２のチャンバー１４の径方向へのサイズが大きくなり、ピペットの先端が第２のチャンバー１４により深く挿入でき、溶液が第２のチャンバー１４にスムーズに入ることができ、操作者による不適切な操作による第１のチャンバー１３への溶液の侵入を防ぐ。

【実施例4】

【0079】

本実施例は本発明による一つの具体的実施例であり、生化学反応試験管の汚染の可能性をさらに低減することができる実施例１の改善された実施例である。

【0080】

図９～１０に示すように、生化学反応試験管は、管部１０と、蓋部２０と接続部材３０とを含む。ここで、管部１０と接続部材３０の構造と接続関係は、基本的に第１の実施例と同じであり、ここでは説明を省略する。

【0081】

図９～図１０に示すように、実施例１に基づいて、蓋部２０は、中空部材５０と密封部材と６０をさらに含む。中空部材５０は、蓋部２０の内部を貫通して配置され、密封部材６０は中空部材５０を閉じている。

【0082】

中空部材５０は、中空部材５０の上端に配置される第１の開口要素５１を含み、溶液は蓋部２０の外側から第１の開口要素５１を通って中空部材５０の内部に入る。

【0083】

対応的に、密封部材６０は第１の開口要素５１を閉じる第１の密封要素６１を含む。

【0084】

具体的に、第１の密封要素６１はシールフィルムであり、または、ステッカー付きシールフィルムである。実際に使用する時、第1の密封要素６１を外して、中空部材５０の内部に生化学反応溶液を入ってから、第1の密封要素６１で第1の開口要素５１を閉じる。

【0085】

上記の構造に基づいて、更なる操作効率を高めるために、中空部材５０は中空部材５０の下端に配置する第２の開口要素５２を含み、密封部材６１は第２の開口要素６２を閉じる第２の密封要素６２を含む。

【0086】

具体的に、第２の密封要素６２はシールフィルム、またはシール接続剤を有するアルミホイルや他のフィルム材料など容易に壊れやすい密封要素である。初めに操作する時、第１の密封要素６１を外し、生化学反応溶液を中空部材５０内に加えてから、第１の密封要素６１で第１の開口要素５１を閉じる。次回操作する時、第１の密封要素６１を外して、操作者はツールを使用して、中空部材５１の内部にある生化学反応溶液を管本体１１の内部に入るように、第１の開口要素５１と第２の開口要素５２を順次に通して第２の密封要素６２を破壊し、最後に、第１の密封要素６１で第１の開口要素５１を閉じる。

【実施例5】

【0087】

本実施例は本発明による一つの具体的実施例であり、生化学反応試験管の汚染の可能性をさらに低減することができる実施例１の改善された実施例である。

【0088】

図１１に示すように、生化学反応試験管は、管部１０と、蓋部２０と接続部材３０とを含む。ここで、管部１０と接続部材３０の構造と接続関係は、基本的に第１の実施例と同じであり、ここでは説明を省略する。

【0089】

図１１に示すように、実施例１に基づいて、蓋部２０は、中空部材５０と密封部材と６０をさらに含む。中空部材５０は、蓋部２０の内部を貫通して配置され、密封部材６０は中空部材５０を閉じている。

【0090】

中空部材５０は、中空部材５０の上端に配置される第１の開口要素５１と、中空部材５０の下端に配置される第１の開口要素５２とを含む。

【0091】

対応的に、密封部材６０は第１の開口要素を閉じる第１の密封要素６１と、第２の開口要素を閉じる第２の密封要素６２とを含み、第１の密封要素６１は第１の開口要素５１を完全に閉じる時、第１のシーリング要素６１は、第２のシーリング要素を破壊する。

【0092】

第１の密封要素６１は制限ユニット６１１と破壊部品６１２とを含み、破壊部品６１２は制限ユニット６１１の下端に配置される。制限ユニット６１１の内径は中空部材５０の内径より大きい、破壊部品６１２の内径は中空部材５０の内径以下である。第１の密封要素６１は完全に第１の開口要素５１を閉じる時、破壊部品６１２の下端は第２の密封要素６２を破壊する。

【0093】

具体的に、制限ユニット６１１は蓋板であり、破壊部品６１２は中空管である。

【0094】

制限ユニット６１１と破壊部品６１２は移動可能に接続されている、すなわち、制限ユニット６１１に対して特定の操作（開けるなど）を実行することにより、生化学反応組成や溶液を破壊部品６１２に加えることができる。

【0095】

具体的には、制限ユニット６１１と破壊部品６１２は、入れ子接続、ねじ接続、スナップ接続などの接続となる。例えば、制限ユニット６１１と破壊部品６１２との接続は、蓋部20と管部10との間の接続方式と同じである。

【0096】

具体的には、第２の密封要素６２は、シールフィルム、またはシール接続剤を有するアルミホイルや他のフィルム材料など容易に壊れやすい密封要素である。

【0097】

中空部材５０と密封部材６０の密封効果を向上させるために、中空部材５０と密封部材６０には、それぞれ第３の嵌合部材５３と第４の嵌合部材６３が設けられている。

【0098】

図１２に示すように、第３の嵌合部材５３が中空部材５０の内側壁の円周面には設けられており、かつ、第３の嵌合部材５３が少なくとも１つある。

【0099】

図１３に示すように、第４の嵌合部材６３は、第１の密封要素６１の外側壁の円周面に配置されており、かつ、第４の嵌合部材６３が少なくとも１つある。

【0100】

第１の密封要素６１が第１の開口要素５１を閉じる時、第４の嵌合部材６３と第３の嵌合部材５３が接続され、第１の密封要素６１と中空部材５０が互いに協働し、第１の密封要素が第１の開口要素５１を密封する効果を向上させる。

【0101】

第３の嵌合部材５３は溝（または密封溝）であり、第４の嵌合部分６３は突起（または突起密封環）であり、または、第３の嵌合部分５３は突起（または突起密封環）であり、第４の嵌合部材６３は溝（密封溝）である。

【0102】

第３の嵌合部品５３が複数あり、かつ第３の嵌合部品５３は、中空部品５０の軸方向に沿って配置されている。同様に、第４の嵌合部品６３が複数あり、かつ、第４の嵌合部品６３は、第１の密封要素６１の軸方向に沿って配置されている。

【0103】

第３の嵌合部材５３と第４の嵌合部材６３は一対一に接続されてもよい。具体的には、
中空部材５０の最下部に位置する第３の嵌合部材５３は第１の密封要素６１の最下部に位置する第５の接続部６３に接続され、中空部材５０の最上部に位置する第３の嵌合部材５３は、第１の密封要素６１の最上部に位置する第４の嵌合部材６３に接続される。この場合、第１の密封要素６１は第２の密封要素６２を破壊する。

【0104】

第３の嵌合部材５３と第４の嵌合部材６３は一対一に接続されなくてもよい。具体的には、中空部材５０の最上部に位置する第３の嵌合部材５３は、第１の密封要素６１の最下部に位置する第４の嵌合部材２１に接続される。この場合、第１の密封要素６１は第２の密封要素６２を破壊しない。

【0105】

本実施例の生化学反応試験管を使用するとき、第１の密封要素６１の制限ユニット６１１を開き、特定の生化学反応組成や溶液を破壊部品６１２の内部に加えて、第１の密封要素６１に第１の開口要素５１から中空部分５０を挿入して第２の密封要素６２を破壊すると、破壊部品６１２内の生化学反応組成や溶液は、管本体１１内の溶液と混合し、さらなる生化学反応をすることができる。例えば、生化学反応試験管内に核酸分解酵素を加え、生化学反応試験管の内部にある核酸増幅産物を分解する。

【実施例6】

【0106】

本実施例は本発明による一つの具体的実施例であり、実施例１～５から拡張された実施例である。

【0107】

図１４に示すように、生化学反応試験管には、生化学反応試験管内にある溶液を接触式温度伝導制御を行う金属浴装置７０を含み、それは特定の温度を設定して、設定された条件に応じて一定の値を維持して、または複数の温度値の間で周期的に変化することができる。

【0108】

図１５に示すように、生化学反応試験管はまた、生化学反応試験管内の溶液に対して接触型温度伝導制御を行う生化学反応光学的検出装置８０を含み、当該の生化学反応光学的検出装置８０は、生化学反応試験管の内部にある溶液に対して温度を伝導するとき、生化学反応試験管の内部にある生化学反応溶液の光学的信号を収集する。

【実施例7】

【0109】

本実施例は実施例１～５の生化学反応試験管の適用である。

【0110】

少なくとも生化学反応試験管と、核酸増幅試薬と機能性反応試薬とを含む遺伝子増幅試薬キットである。ここで、核酸増幅試薬は、管本体１１の第１のチャンバー１３内に配置され、かつ機能性反応試薬は、管本体１１の第２のチャンバー１４内に配置され、または、核酸増幅試薬は管本体１１の第２のチャンバー１４内に配置され、かつ機能性反応試薬は、管本体１１の第１のチャンバー１３内に配置されている。

【0111】

ここで、機能性反応試薬の熱感受性は、核酸増幅試薬の熱感受性とは異なる。

【0112】

具体的には、機能性試薬は、分解酵素、細胞溶解液、プローブ、緩衝液、希釈剤など、または増幅反応が完了した後の後続の反応のための試薬を含むが、これらに限定されない。

【0113】

本実施例の第１の具体的実施方式において、核酸増幅試薬はｄＵＴＰを含む核酸増幅試薬であり、機能性反応試薬はＵＮＧ酵素を含む溶液である。本実施方式において、ｄＵＴＰを含む核酸増幅試薬を使用することにより、特定の温度条件下で核酸増幅反応を完了させて、増幅産物に特定の量のｄＵを混合することができる。具体的には、第１のチャンバー１３（または第２のチャンバー１４）内の核酸増幅試薬を加熱して増幅反応を完了した後、第２のチャンバー１４（または第１のチャンバー１３）内のＵＮＧ酵素の反応活性は良好なままの状態で、生化学反応試験管を垂直に１８０°反転すると、第2のチャンバー14（または第1のチャンバー13）内に事前に添加されたUNG酵素溶液、または事前に添加された第2のチャンバー14（または第1のチャンバー）で溶解および固化したUNG酵素溶液は、第1のチャンバー13（または第2のチャンバー14）内の増幅産物溶液と混合し、dUが混合した核酸産物を酵素分解する。

【0114】

本実施例の第２の具体的実施方式において、核酸増幅試薬はエンドヌクレアーゼと対応する切断配列を含む核酸増幅プライマー及びその増幅試薬であり、機能性反応試薬はエンドヌクレアーゼを含む溶液である。本実施方式において、エンドヌクレアーゼと対応する切断配列を含む核酸増幅プライマー及びその増幅試薬を使用することにより、特定の温度条件下でエンドヌクレアーゼと対応する切断配列を混合した核酸産物の増幅を完了することができる。具体的には、第１のチャンバー１３（または第２のチャンバー１４）内の核酸増幅試薬を加熱して増幅反応を完了させた後、生化学反応管を垂直方向に１８０°反転させて振動操作を行い、第２のチャンバー１４（または第１のチャンバー１３）内に事前に添加されたエンドヌクレアーゼ溶液、または事前に添加された第２のチャンバー１４（または第１のチャンバー１３）内で溶解及び固化したエンドヌクレアーゼ溶液を、第１のチャンバー１３（または第２のチャンバー１４）にある増幅産物溶液と混合させ、核酸産物を酵素分解する。

【0115】

本実施例の第３の具体的実施方式において、核酸増幅試薬は核酸増幅プライマー及びその増幅試薬であり、機能性反応試薬はヌクレアーゼを含む溶液である。本実施方式において、核酸増幅プライマー及びその増幅試薬を使用することにより、特定の温度条件下で産物の増幅を完了することができる。具体的には、第１のチャンバー１３（または第２のチャンバー１４）内の核酸増幅試薬を加熱して増幅反応を完了させた後、生化学反応管を垂直方向に１８０°反転させて振動操作を行い、第２のチャンバー１４（または第１のチャンバー１３）内に事前に添加されたヌクレアーゼ溶液、または事前に添加された第２のチャンバー１４（または第１のチャンバー１３）内で溶解及び固化したヌクレアーゼ溶液を、第１のチャンバー１３（または第２のチャンバー１４）にある増幅産物溶液と混合させ、核酸産物を酵素分解する。

【実施例8】

【0116】

本実施例は実施例１～５の生化学反応試験管の使用方法である。

【0117】

上記の生化学反応試験管の使用方法は以下を含み、
核酸増幅試薬と機能性反応試薬のうちの一つを第１のチャンバー１３内に配置し、核酸増幅試薬と機能性反応試薬のうちの他の一つを上記の第２のチャンバー１４内に配置し、
生化学反応試験管を増幅装置に挿入して、核酸増幅試薬が配置されている第１のチャンバー１３または第２のチャンバー１４のみ接触式加熱伝導させ、
核酸増幅反応が終了した後、機能性反応試薬を増幅反応済の増幅産物と混合させる。

【0118】

具体的には、核酸増幅反応が終了した後、生化学反応試験管を増幅装置から取り外し、生化学反応試験管を垂直に180°反転させて、上記の生化学反応試験管が倒置した状態で、機能性反応試薬を増幅反応が完了した増幅産物と混合させる。

【0119】

本実施例の第１の具体的実施方式は以下を含み、
PCR増幅試薬を第１のチャンバー１３内に入れて、PCR増幅産物を切断するヌクレアーゼ溶液を第２のチャンバー１４内に入れ、
生化学反応試験管を核酸を増幅するPCR装置に挿入して温度制御を行い、この場合、第１のチャンバー１３内の溶液だけが温度伝導を受け、第２のチャンバー１４はPCR装置の熱伝導部品と接触しない、
核酸増幅反応が終了した後、生化学反応試験をを取り外し、生化学反応試験管を倒置して、第１のチャンバー１３と第２のチャンバー１４内の溶液を混合させ、
生化学反応試験管を酵素が産物を分解する温度に適した環境中に倒置したまま、増幅産物が分解されるまで保管する。

【0120】

本実施例の第２の具体的実施方式は以下を含み、
核酸増幅試薬を第２のチャンバー１４内に入れて、核酸増幅産物を分解するヌクレアーゼ溶液を第１のチャンバー１３内に入れ、
生化学反応試験管を核酸を増幅する増幅装置に挿入して温度制御を行い、この場合、第２のチャンバー１４内の溶液だけが温度伝導を受け、第１のチャンバー１３内の溶液は増幅装置の加熱部品により熱伝導されない、
核酸増幅反応が終了した後、生化学反応試験をを取り外し、生化学反応試験管を倒置して、第１のチャンバー１３と第２のチャンバー１４内の溶液を混合させ、
生化学反応試験管を酵素が産物を分解する温度に適した環境中に倒置したまま、増幅産物が分解されるまで保管する。

【0121】

本実施例の第３の具体的実施方式は以下を含み、
核酸増幅試薬を第１のチャンバー１３内に入れて、核酸増幅産物を分解するヌクレアーゼ溶液を第２のチャンバー１４内に入れ、
生化学反応試験管を核酸を増幅する蛍光検出装置に挿入して温度制御を行い、この場合、第１のチャンバー１３内の溶液だけが温度伝導を受け増幅反応をし、
核酸増幅反応が終了した後、生化学反応試験をを取り外し、生化学反応試験管を倒置して、第１のチャンバー１３と第２のチャンバー１４内の溶液を混合させ、
生化学反応試験管を酵素が産物を分解する温度に適した環境中に倒置したまま、増幅産物が分解されるまで保管する。

【0122】

前述の説明は、本発明の好ましい実施例にすぎず、本発明の実施方式および保護範囲を限定するものではない。当業者にとって、本発明の明細書及び図面を使って作られた均等の置換や明らかな変更により得られた方案はすべて本発明の保護範囲内に含まれることが意識すべきである。

【符号の説明】

【0123】

１０ 管部
１１ 管本体
１２ 制限ユニット
１３ 第１のチャンバー
１４ 第２のチャンバー
１５ 第１の嵌合部材
２０ 蓋部
２１ 第２の嵌合部材
３０ 接続部材
４０ 補助部材
５０ 中空部材
５１ 第１の開口要素
５２ 第２の開口要素
５３ 第３の嵌合部材
６０ 密封部材
６１ 第１の密封要素
６２ 第２の密封要素
６３ 第４の嵌合部材
６１１ ストッパー
６１２ 破壊部品
７０ 金属浴装置
８０ 生化学反応光学的検出装置

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【国際調査報告】