知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
▶ ボイジャー セラピューティクス インコーポレイテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-04-21
(54)【発明の名称】ＡＡＶ粒子を生成するための方法及びシステム
(51)【国際特許分類】
C12N 7/01 20060101AFI20220414BHJP
C12N 15/864 20060101ALI20220414BHJP
C12N 7/02 20060101ALI20220414BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20220414BHJP
A61K 35/761 20150101ALI20220414BHJP
A61P 31/12 20060101ALI20220414BHJP
A61P 31/00 20060101ALI20220414BHJP
A61P 25/14 20060101ALI20220414BHJP
【ＦＩ】
C12N7/01 ZNA
C12N15/864 100Z
C12N7/02
A61K48/00
A61K35/761
A61P31/12
A61P31/00
A61P25/14
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021541505
(86)(22)【出願日】2020-01-17
(85)【翻訳文提出日】2021-09-14
(86)【国際出願番号】 US2020014000
(87)【国際公開番号】W WO2020150556
(87)【国際公開日】2020-07-23
(31)【優先権主張番号】62/794,199
(32)【優先日】2019-01-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/794,204
(32)【優先日】2019-01-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/794,208
(32)【優先日】2019-01-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/794,216
(32)【優先日】2019-01-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/931,848
(32)【優先日】2019-11-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＲＩＴＯＮ
２．ＢＲＩＪ
(71)【出願人】
【識別番号】517157204
【氏名又は名称】ボイジャー セラピューティクス インコーポレイテッド
【氏名又は名称原語表記】ＶＯＹＡＧＥＲ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，ＩＮＣ．
(74)【代理人】
【識別番号】100105957
【弁理士】
【氏名又は名称】恩田 誠
(74)【代理人】
【識別番号】100068755
【弁理士】
【氏名又は名称】恩田 博宣
(74)【代理人】
【識別番号】100142907
【弁理士】
【氏名又は名称】本田 淳
(74)【代理人】
【識別番号】100152489
【弁理士】
【氏名又は名称】中村 美樹
(72)【発明者】
【氏名】マランガ、ルイス
(72)【発明者】
【氏名】モリソン、クリストファー ジェイ．
(72)【発明者】
【氏名】マートゥル、クリシャヌ
(72)【発明者】
【氏名】ルーサー、マシュー
(72)【発明者】
【氏名】ハーウィット、ダニエル エス．
(72)【発明者】
【氏名】カーディナル、ジェイコブ ジェイ．
(72)【発明者】
【氏名】カーペス、ロリ ビー．
(72)【発明者】
【氏名】アンソンダリア、アディティア
(72)【発明者】
【氏名】フォースター、ジェームズ
(72)【発明者】
【氏名】ディスミューク、デイビッド
(72)【発明者】
【氏名】シュタイニンガー、ロバート
【テーマコード（参考）】
4B065
4C084
4C087
【Ｆターム（参考）】
4B065AA95X
4B065AB01
4B065AC14
4B065AC20
4B065BA02
4B065BD01
4B065BD14
4B065BD18
4B065CA46
4C084AA13
4C084NA14
4C084ZA021
4C084ZA022
4C084ZB321
4C084ZB322
4C084ZB331
4C084ZB332
4C087AA01
4C087AA03
4C087BB21
4C087BB64
4C087BC83
4C087NA14
4C087ZA02
4C087ZB32
4C087ZB33
(57)【要約】
本開示は、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子の生成において使用するための方法及びシステムを記載している。所定の実施形態では、生成プロセス及びシステムは、Ｓｆ９昆虫細胞をウイルス生成細胞として使用する。所定の実施形態では、生成プロセス及びシステムは、ＡＡＶ粒子の生成においてバキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）及びバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を使用する。
【選択図】図１
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を生成するための方法であって、（ａ）少なくとも１つのウイルス生成細胞（ＶＰＣ）をバイオリアクターに導入し、前記バイオリアクター内のＶＰＣの数を標的ＶＰＣ細胞密度まで増殖させることと、
（ｂ）ＡＡＶウイルス発現コンストラクトを含む少なくとも１つの発現バキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）及びＡＡＶペイロードコンストラクトを含む少なくとも１つのペイロードＢＩＩＣを前記バイオリアクターに導入することと、
（ｃ）前記ＶＰＣの１つ以上の中で１つ以上のｒＡＡＶの前記生成をもたらす条件下で前記バイオリアクター内でＶＰＣ、発現ＢＩＩＣ及びペイロードＢＩＩＣの混合物をインキュベーションすることと、
（ｄ）前記バイオリアクターからウイルス生成プールを収穫することであって、前記ウイルス生成プールは、液体媒体及び前記１つ以上のｒＡＡＶを含有する前記１つ以上のＶＰＣを含む、前記収穫することと、
（ｅ）化学的溶解条件下で化学的溶解溶液を使用して前記ウイルス生成プール内の前記１つ以上のＶＰＣを化学的溶解に曝露することであって、前記化学的溶解は、前記１つ以上のｒＡＡＶを前記ＶＰＣから前記ウイルス生成プールの前記液体媒体に放出する、前記曝露することと、
（ｆ）前記ウイルス生成プールが１つ以上の清澄化濾過システムを介して処理される１つ以上の清澄化濾過工程を介して前記ウイルス生成プールを処理することと、
（ｇ）前記ウイルス生成プールが１つ以上のアフィニティークロマトグラフィーシステムを介して処理される１つ以上のアフィニティークロマトグラフィー工程を介して前記ウイルス生成プールを処理することと、
（ｈ）前記ウイルス生成プールが１つ以上のイオン交換クロマトグラフィーシステムを介して処理される１つ以上のイオン交換クロマトグラフィー工程を介して前記ウイルス生成プールを処理することと、
（ｉ）前記ウイルス生成プールが１つ以上のタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）システムを介して処理される１つ以上のタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）工程を介して前記ウイルス生成プールを処理することと、
（ｊ）前記ウイルス生成プールが１つ以上のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）システムを介して処理される１つ以上のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）工程を介して前記ウイルス生成プールを処理することと、
を含む、前記方法。
【請求項2】
前記ＶＰＣは、Ｓｆ９昆虫細胞を含み、前記ｒＡＡＶは、バキュロウイルス生成系を使用して生成される、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記バイオリアクターの容積は、少なくとも５Ｌ、１０Ｌ、２０Ｌ、５０Ｌ、１００Ｌ、または２００Ｌである、請求項１～２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項4】
ＢＩＩＣ導入時の前記標的ＶＰＣ細胞密度は、２．０～４．０×１０６細胞／ｍＬ、２．５～３．５×１０６細胞／ｍＬ、または約３．０×１０６細胞／ｍＬである、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項5】
前記バイオリアクターに導入される発現ＢＩＩＣの数に対するＢＩＩＣ導入時のＶＰＣ細胞の比は、１：２．０×１０５～１：４．０×１０５ｖ／ｖの間、１：２．５×１０５～１：３．５×１０５ｖ／ｖの間、約１：２．５×１０５ｖ／ｖ、約１：３．０×１０５ｖ／ｖ、約１：３．５×１０５ｖ／ｖ、または約１：４．０×１０５ｖ／ｖである、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項6】
前記バイオリアクターに導入されるペイロードＢＩＩＣの数に対するＢＩＩＣ導入時のＶＰＣ細胞の比は、１：５．０×１０４～２．０×１０５ｖ／ｖの間、１：８．０×１０４～１：１．５×１０５ｖ／ｖの間、約１：８．０×１０４ｖ／ｖ、約１：１．０×１０５ｖ／ｖ、または約１：１．５×１０５ｖ／ｖである、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項7】
前記バイオリアクターに導入されるペイロードＢＩＩＣに対する前記バイオリアクターに導入される発現ＢＩＩＣの比は、１：１～５：１の間、２：１～４：１の間、２．５：１～３．５：１の間、または約３：１である、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項8】
前記１つ以上の清澄化濾過工程は、深層濾過システム、０．２μｍ精密濾過システム、またはそれらの組み合わせを介して前記ウイルス生成プールを処理することを含む、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項9】
前記１つ以上の清澄化濾過工程は、深層濾過システム、及び次いで０．２μｍ精密濾過システムを介して前記ウイルス生成プールを処理することを含む、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項10】
前記１つ以上の清澄化濾過工程は、第１の深層濾過システム、次いで第２の深層濾過システム、及び次いで０．２μｍ精密濾過システムを介して前記ウイルス生成プールを処理することを含む、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項11】
前記１つ以上のアフィニティークロマトグラフィー工程は、１つ以上のイムノアフィニティークロマトグラフィーシステムを介して結合－溶出モードで前記ウイルス生成プールを処理することを含み、前記イムノアフィニティークロマトグラフィーシステムは、１つ以上のＡＡＶカプシドバリアントに結合することが可能な１つ以上の組換え一本鎖抗体を含む、請求項１～１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項12】
前記アフィニティークロマトグラフィーシステムは、ＡＶＢカラム樹脂、ＡＡＶ９カラム樹脂またはＡＡＶＸカラム樹脂を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項13】
前記１つ以上のイオン交換クロマトグラフィー工程は、１つ以上の陰イオン交換クロマトグラフィーシステムを介してフロースルーモードで前記ウイルス生成プールを処理することを含み、前記陰イオン交換クロマトグラフィーシステムは、非ウイルス性不純物、非ＡＡＶウイルス粒子、またはそれらの組み合わせを結合させる固定相を含み、前記陰イオン交換クロマトグラフィーシステムの前記固定相は、前記ウイルス生成プールにおける前記１つ以上のｒＡＡＶに結合しない、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項14】
前記陰イオン交換クロマトグラフィーシステムの前記固定相は、第４級アミン官能基またはトリメチルアンモニウムエチル（ＴＭＡＥ）官能基を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項15】
前記１つ以上のＴＦＦ工程の前に、前記ウイルス生成プールに５０％スクロース混合物が９～１３％ｖ／ｖの間の濃度で添加される、請求項１～１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項16】
前記１つ以上のＴＦＦ工程は、前記ウイルス生成プールの前記液体媒体の少なくとも一部が低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液に置き換えられる第１のダイアフィルトレーション工程を含み、前記低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液は、４～６％ｗ／ｖの間の糖または糖代用品及び１５０～２５０ｍＭの間の塩化アルカリ塩、好ましくは４．５～５．５％ｗ／ｖの間のスクロース及び２１０～２３０ｍＭの間の塩化ナトリウム、より好ましくは５％ｗ／ｖのスクロース及び２２０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項１～１５に記載のいずれか１項に記載の方法。
【請求項17】
前記１つ以上のＴＦＦ工程は、限外濾過濃縮工程を含み、前記ウイルス生成プールにおける前記ＡＡＶ粒子は、１．０×１０１２～５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの間、１．０～５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの間、２．０～３．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの間、または約２．７×１０１３ｖｇ／ｍＬに濃縮される、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項18】
前記１つ以上のＴＦＦ工程は、前記ウイルス生成プールの前記液体媒体の少なくとも一部が高スクロース製剤化緩衝液に置き換えられる製剤化ダイアフィルトレーション工程を含み、前記高スクロース製剤化緩衝液は、６～８％ｗ／ｖの間の糖または糖代用品及び９０～１００ｍＭの間の塩化アルカリ塩、好ましくは７％ｗ／ｖのスクロース及び９０～１００ｍＭの間の塩化ナトリウム、より好ましくは７％ｗ／ｖのスクロース、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、９５～１００ｍＭの間の塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含む、請求項１～１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項19】
前記ＶＲＦシステムは、３５ｎｍ以上である粒子を保持するフィルター媒体、または２０ｎｍ以上である粒子を保持するフィルター媒体を含む、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項20】
薬学的製剤を生成する方法であって、（ｉ）請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法によって生成された１つ以上のｒＡＡＶを提供することと、（ｉｉ）前記１つ以上のｒＡＡＶを１つ以上の１つの薬学的賦形剤と組み合わせることと、を含む、前記方法。
【請求項21】
請求項２０に記載の方法によって生成された薬学的製剤。
【請求項22】
遺伝子療法製品を生成する方法であって、（ｉ）請求項２１に記載の薬学的製剤を提供することと、（ｉｉ）前記薬学的製剤を製剤容器に好適に分配することと、を含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、ＭＥＴＨＯＤＳ ＡＮＤ ＳＹＳＴＥＭＳ ＦＯＲ ＰＲＯＤＵＣＩＮＧ ＡＡＶ ＰＡＲＴＩＣＬＥＳというタイトルの２０１９年１月１８日に出願された米国仮特許出願番号６２／７９４，１９９；ＭＥＴＨＯＤＳ ＡＮＤ ＳＹＳＴＥＭＳ ＦＯＲ ＰＲＯＤＵＣＩＮＧ ＡＡＶ ＰＡＲＴＩＣＬＥＳというタイトルの２０１９年１月１８日に出願された米国仮特許出願番号６２／７９４，２０４；ＭＥＴＨＯＤＳ ＡＮＤ ＳＹＳＴＥＭＳ ＦＯＲ ＰＲＯＤＵＣＩＮＧ ＡＡＶ ＰＡＲＴＩＣＬＥＳというタイトルの２０１９年１月１８日に出願された米国仮特許出願番号６２／７９４，２０８；ＢＩＩＣ ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳ ＦＯＲ ＰＲＯＤＵＣＩＮＧ ＡＡＶ ＰＡＲＴＩＣＬＥＳというタイトルの２０１９年１月１８日に出願された米国仮特許出願番号６２／７９４，２１６；ＭＥＴＨＯＤＳ ＡＮＤ ＳＹＳＴＥＭＳ ＦＯＲ ＰＲＯＤＵＣＩＮＧ ＡＡＶ ＰＡＲＴＩＣＬＥＳというタイトルの２０１９年１１月０７日に出願された米国仮特許出願番号６２／９３１，８４８（これらの内容はそれぞれ、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）の利益を主張する。
本出願は、ＭＥＴＨＯＤＳ ＡＮＤ ＳＹＳＴＥＭＳ ＦＯＲ ＰＲＯＤＵＣＩＮＧ ＡＡＶ ＰＡＲＴＩＣＬＥＳというタイトルの２０１９年１月１８日に出願された米国仮特許出願番号６２／７９４，１９９；ＭＥＴＨＯＤＳ ＡＮＤ ＳＹＳＴＥＭＳ ＦＯＲ ＰＲＯＤＵＣＩＮＧ ＡＡＶ ＰＡＲＴＩＣＬＥＳというタイトルの２０１９年１月１８日に出願された米国仮特許出願番号６２／７９４，２０４；ＭＥＴＨＯＤＳ ＡＮＤ ＳＹＳＴＥＭＳ ＦＯＲ ＰＲＯＤＵＣＩＮＧ ＡＡＶ ＰＡＲＴＩＣＬＥＳというタイトルの２０１９年１月１８日に出願された米国仮特許出願番号６２／７９４，２０８；ＢＩＩＣ ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳ ＦＯＲ ＰＲＯＤＵＣＩＮＧ ＡＡＶ ＰＡＲＴＩＣＬＥＳというタイトルの２０１９年１月１８日に出願された米国仮特許出願番号６２／７９４，２１６；ＭＥＴＨＯＤＳ ＡＮＤ ＳＹＳＴＥＭＳ ＦＯＲ ＰＲＯＤＵＣＩＮＧ ＡＡＶ ＰＡＲＴＩＣＬＥＳというタイトルの２０１９年１１月０７日に出願された米国仮特許出願番号６２／９３１，８４８（これらの内容はそれぞれ、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）の利益を主張する。
【0002】
配列票の参照
本出願は、電子フォーマットの配列表とともに出願されている。配列表は、２０２０年１月１７日に作成されたサイズが６，４７８，２９５バイトの２０５７１５２６ＰＣＴＳＬ．ｔｘｔというタイトルのファイルとして提供される。配列表の電子フォーマットの情報は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、電子フォーマットの配列表とともに出願されている。配列表は、２０２０年１月１７日に作成されたサイズが６，４７８，２９５バイトの２０５７１５２６ＰＣＴＳＬ．ｔｘｔというタイトルのファイルとして提供される。配列表の電子フォーマットの情報は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0003】
本開示は、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子、組成物及び製剤の生成において使用するための方法及びシステムを記載している。所定の実施形態では、本開示は、ｒＡＡＶ及びｒＡＡＶ製剤を設計、生成、清澄化、精製、製剤化、濾過及び処理するための方法及びシステムを提供する。所定の実施形態では、生成プロセス及びシステムは、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ昆虫細胞（Ｓｆ９またはＳｆ２１など）をウイルス生成細胞として使用する。所定の実施形態では、生成プロセス及びシステムは、ｒＡＡＶの生成においてバキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）及び／またはバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を使用する。
【背景技術】
【0004】
ＡＡＶは、哺乳動物細胞への遺伝子移行のために最も広く研究及び利用されているウイルスベクターの１つとして現れてきた。例えば、非特許文献１及び非特許文献２（その内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい。アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターは、治療遺伝子送達のための有望な候補であり、臨床試験において安全で有効であることが証明されている。この目的のための改善されたＡＡＶ粒子の設計及び生成は、活発な研究分野である。
【0005】
ＡＡＶカプシドタンパク質、ＡＡＶカプシド、及び対応するＡＡＶベクター（ＡＡＶ粒子など）を生成するための改善されたシステム及び方法の必要性が依然として存在する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0006】
【非特許文献1】Ｔｒａｔｓｃｈｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．，５（１１）：３２５１－３２６０（１９８５）
【非特許文献2】Ｇｒｉｍｍ ｅｔ ａｌ．，Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．，１０（１５）：２４４５－２４５０（１９９９）
【発明の概要】
【0007】
本開示は、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を生成するための方法及びシステムを提供する。
所定の実施形態では、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を生成するための方法は、以下の工程のうちの１つ以上を含む：（ａ）少なくとも１つのウイルス生成細胞（ＶＰＣ）をバイオリアクターに導入し、バイオリアクター内のＶＰＣの数を標的ＶＰＣ細胞密度まで増殖させること、（ｂ）ＡＡＶウイルス発現コンストラクトを含む少なくとも１つの発現バキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）及びＡＡＶペイロードコンストラクトを含む少なくとも１つのペイロードＢＩＩＣをバイオリアクターに導入すること、（ｃ）ＶＰＣの１つ以上の中で１つ以上のｒＡＡＶの生成をもたらす条件下でバイオリアクター内でＶＰＣ、発現ＢＩＩＣ及びペイロードＢＩＩＣの混合物をインキュベーションすること、（ｄ）バイオリアクターからウイルス生成プールを収穫することであって、ウイルス生成プールは、液体媒体及び１つ以上のｒＡＡＶを含有する１つ以上のＶＰＣを含む、収穫すること、（ｅ）化学的溶解条件下で化学的溶解溶液を使用してウイルス生成プール内の１つ以上のＶＰＣを化学的溶解に曝露することであって、化学的溶解は、１つ以上のｒＡＡＶをＶＰＣからウイルス生成プールの液体媒体に放出する、曝露すること、（ｆ）ウイルス生成プールが１つ以上の清澄化濾過システムを介して処理される１つ以上の清澄化濾過工程を介してウイルス生成プールを処理すること、（ｇ）ウイルス生成プールが１つ以上のアフィニティークロマトグラフィーシステムを介して処理される１つ以上のアフィニティークロマトグラフィー工程を介してウイルス生成プールを処理すること、（ｈ）ウイルス生成プールが１つ以上のイオン交換クロマトグラフィーシステムを介して処理される１つ以上のイオン交換クロマトグラフィー工程を介してウイルス生成プールを処理すること、（ｉ）ウイルス生成プールが１つ以上のタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）システムを介して処理される１つ以上のタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）工程を介してウイルス生成プールを処理すること、及び（ｊ）ウイルス生成プールが１つ以上のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）システムを介して処理される１つ以上のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）工程を介してウイルス生成プールを処理すること。
所定の実施形態では、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を生成するための方法は、以下の工程のうちの１つ以上を含む：（ａ）少なくとも１つのウイルス生成細胞（ＶＰＣ）をバイオリアクターに導入し、バイオリアクター内のＶＰＣの数を標的ＶＰＣ細胞密度まで増殖させること、（ｂ）ＡＡＶウイルス発現コンストラクトを含む少なくとも１つの発現バキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）及びＡＡＶペイロードコンストラクトを含む少なくとも１つのペイロードＢＩＩＣをバイオリアクターに導入すること、（ｃ）ＶＰＣの１つ以上の中で１つ以上のｒＡＡＶの生成をもたらす条件下でバイオリアクター内でＶＰＣ、発現ＢＩＩＣ及びペイロードＢＩＩＣの混合物をインキュベーションすること、（ｄ）バイオリアクターからウイルス生成プールを収穫することであって、ウイルス生成プールは、液体媒体及び１つ以上のｒＡＡＶを含有する１つ以上のＶＰＣを含む、収穫すること、（ｅ）化学的溶解条件下で化学的溶解溶液を使用してウイルス生成プール内の１つ以上のＶＰＣを化学的溶解に曝露することであって、化学的溶解は、１つ以上のｒＡＡＶをＶＰＣからウイルス生成プールの液体媒体に放出する、曝露すること、（ｆ）ウイルス生成プールが１つ以上の清澄化濾過システムを介して処理される１つ以上の清澄化濾過工程を介してウイルス生成プールを処理すること、（ｇ）ウイルス生成プールが１つ以上のアフィニティークロマトグラフィーシステムを介して処理される１つ以上のアフィニティークロマトグラフィー工程を介してウイルス生成プールを処理すること、（ｈ）ウイルス生成プールが１つ以上のイオン交換クロマトグラフィーシステムを介して処理される１つ以上のイオン交換クロマトグラフィー工程を介してウイルス生成プールを処理すること、（ｉ）ウイルス生成プールが１つ以上のタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）システムを介して処理される１つ以上のタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）工程を介してウイルス生成プールを処理すること、及び（ｊ）ウイルス生成プールが１つ以上のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）システムを介して処理される１つ以上のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）工程を介してウイルス生成プールを処理すること。
【0008】
所定の実施形態では、ｒＡＡＶは、バイオリアクター内でウイルス生成細胞（ＶＰＣ）において生成される。所定の実施形態では、バイオリアクターの容積は、少なくとも５Ｌ、１０Ｌ、２０Ｌ、５０Ｌ、１００Ｌ、または２００Ｌである。所定の実施形態では、ＶＰＣは、昆虫細胞を含む。所定の実施形態では、ＶＰＣは、Ｓｆ９昆虫細胞を含む。所定の実施形態では、ｒＡＡＶは、バキュロウイルス生成システムを使用して生成される。
【0009】
所定の実施形態では、ＢＩＩＣ導入時の標的ＶＰＣ細胞密度は、２．０～４．０×１０６細胞／ｍＬ、２．５～３．５×１０６細胞／ｍＬ、または約３．０×１０６細胞／ｍＬである。所定の実施形態では、バイオリアクターに導入される発現ＢＩＩＣの数に対するＢＩＩＣ導入時のＶＰＣ細胞の比は、１：２．０×１０５～１：４．０×１０５ｖ／ｖの間、１：２．５×１０５～１：３．５×１０５ｖ／ｖの間、約１：２．５×１０５ｖ／ｖ、約１：３．０×１０５ｖ／ｖ、約１：３．５×１０５ｖ／ｖ、または約１：４．０×１０５ｖ／ｖである。所定の実施形態では、バイオリアクターに導入されるペイロードＢＩＩＣの数に対するＢＩＩＣ導入時のＶＰＣ細胞の比は、１：５．０×１０４～２．０×１０５ｖ／ｖの間、１：８．０×１０４～１：１．５×１０５ｖ／ｖの間、約１：８．０×１０４ｖ／ｖ、約１：１．０×１０５ｖ／ｖ、または約１：１．５×１０５ｖ／ｖである。所定の実施形態では、バイオリアクターに導入されるペイロードＢＩＩＣに対するバイオリアクターに導入される発現ＢＩＩＣの比は、１：１～５：１の間、２：１～４：１の間、２．５：１～３．５：１の間、または約３：１である。
【0010】
所定の実施形態では、方法は、ウイルス生成プールが化学的溶解に曝露される１つ以上の化学的溶解工程を含む。所定の実施形態では、方法は、バイオリアクターからウイルス生成プールを収穫することであって、ウイルス生成プールは、液体媒体及び１つ以上のｒＡＡＶを含有する１つ以上のＶＰＣを含む、収穫することと、化学的溶解条件下で化学的溶解溶液を使用してウイルス生成プール内の１つ以上のＶＰＣを化学的溶解に曝露することであって、化学的溶解は、１つ以上のｒＡＡＶをＶＰＣからウイルス生成プールの液体媒体に放出する、曝露することと、を含む。所定の実施形態では、化学的溶解溶液は、アルギニン及びその塩から選択される安定化添加剤を含む。
【0011】
所定の実施形態では、方法は、ウイルス生成プールが１つ以上の清澄化濾過システムを介して処理される１つ以上の清澄化濾過工程を含む。所定の実施形態では、１つ以上の清澄化濾過工程は、深層濾過システム、０．２μｍ精密濾過システム、またはそれらの組み合わせを介してウイルス生成プールを処理することを含む。所定の実施形態では、１つ以上の清澄化濾過工程は、深層濾過システム及び次いで０．２μｍ精密濾過システムを介してウイルス生成プールを処理することを含む。所定の実施形態では、１つ以上の清澄化濾過工程は、ウイルス生成プールを第１の深層濾過システム、次いで第２の深層濾過システム、及び次いで０．２μｍ精密濾過システムを介して処理することを含む。
【0012】
所定の実施形態では、方法は、ウイルス生成プールが１つ以上のアフィニティークロマトグラフィーシステムを介して処理される１つ以上のアフィニティークロマトグラフィー工程を含む。所定の実施形態では、方法は、１つ以上のイムノアフィニティークロマトグラフィーシステムを介して結合－溶出モードでウイルス生成プールを処理することを含む。所定の実施形態では、イムノアフィニティークロマトグラフィーシステムは、１つ以上のＡＡＶカプシドバリアントに結合することが可能な１つ以上の組換え一本鎖抗体を含む。所定の実施形態では、アフィニティークロマトグラフィーシステムは、ＡＶＢカラム樹脂、ＡＡＶ９カラム樹脂またはＡＡＶＸカラム樹脂を含む。
【0013】
所定の実施形態では、方法は、ウイルス生成プールが１つ以上のイオン交換クロマトグラフィーシステムを介して処理される１つ以上のイオン交換クロマトグラフィー工程を含む。所定の実施形態では、方法は、１つ以上の陰イオン交換クロマトグラフィーシステムを介してフロースルーモードでウイルス生成プールを処理することを含む。所定の実施形態では、陰イオン交換クロマトグラフィーシステムは、非ウイルス不純物、非ＡＡＶウイルス粒子、またはそれらの組み合わせを結合させる固定相を含む。所定の実施形態では、陰イオン交換クロマトグラフィーシステムは、ウイルス生成プールにおける１つ以上のｒＡＡＶと結合しない固定相を含む。所定の実施形態では、陰イオン交換クロマトグラフィーシステムの固定相は、第４級アミン官能基を含む。所定の実施形態では、陰イオン交換クロマトグラフィーシステムは、トリメチルアンモニウムエチル（ＴＭＡＥ）官能基を含む。
【0014】
所定の実施形態では、方法は、ウイルス生成プールが１つ以上のＴＦＦシステムを介して処理される１つ以上のタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）工程を含む。所定の実施形態では、１つ以上のＴＦＦ工程の前にウイルス生成プールに５０％スクロース混合物が添加される。所定の実施形態では、１つ以上のＴＦＦ工程の前にウイルス生成プールに５０％スクロース混合物が９～１３％ｖ／ｖの間の濃度で添加される。所定の実施形態では、１つ以上のＴＦＦ工程の前にウイルス生成プールに５０％スクロース混合物が１０～１２％ｖ／ｖの間の濃度で添加される。所定の実施形態では、１つ以上のＴＦＦ工程の前にウイルス生成プールに５０％スクロース混合物が１１％ｖ／ｖの濃度で添加される。
【0015】
所定の実施形態では、１つ以上のＴＦＦ工程は、ウイルス生成プールの液体媒体の少なくとも一部が低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液に置き換えられる第１のダイアフィルトレーション工程を含む。所定の実施形態では、低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液は、４～６％ｗ／ｖの間の糖または糖代用品及び１５０～２５０ｍＭの間の塩化アルカリ塩を含む。所定の実施形態では、低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液は、４．５～５．５％ｗ／ｖの間のスクロース及び２１０～２３０ｍＭの間の塩化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、低スクロースダイアフィルトレーション緩衝液は、５％ｗ／ｖのスクロース及び２２０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。
【0016】
所定の実施形態では、１つ以上のＴＦＦ工程は、ウイルス生成プールにおけるＡＡＶ粒子が標的粒子濃度に濃縮される限外濾過濃縮工程を含む。所定の実施形態では、ウイルス生成プールにおけるＡＡＶ粒子は、１．０×１０１２～５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの間に濃縮される。所定の実施形態では、ウイルス生成プールにおけるＡＡＶ粒子は、２．０×１０１２～５．０×１０１２ｖｇ／ｍＬの間に濃縮される。所定の実施形態では、ウイルス生成プールにおけるＡＡＶ粒子は、１．０×１０１３～５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの間に濃縮される。所定の実施形態では、ウイルス生成プールにおけるＡＡＶ粒子は、２．０×１０１３～３．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの間に濃縮される。所定の実施形態では、ウイルス生成プールにおけるＡＡＶ粒子は、２．７×１０１３ｖｇ／ｍＬに濃縮される。
【0017】
所定の実施形態では、１つ以上のＴＦＦ工程は、ウイルス生成プールの液体媒体の少なくとも一部が高スクロース製剤化緩衝液に置き換えられる製剤化ダイアフィルトレーション工程を含む。所定の実施形態では、高スクロース製剤化緩衝液は、６～８％ｗ／ｖの間の糖または糖代用品及び９０～１００ｍＭの間の塩化アルカリ塩を含む。所定の実施形態では、高スクロース製剤化緩衝液は、７％ｗ／ｖのスクロース及び９０～１００ｍＭの間の塩化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、高スクロース製剤化緩衝液は、７％ｗ／ｖのスクロース、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、９５～１００ｍＭの間の塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含む。所定の実施形態では、製剤化ダイアフィルトレーション工程は、１つ以上のＴＦＦ工程における最終ダイアフィルトレーション工程である。所定の実施形態では、製剤化ダイアフィルトレーション工程は、１つ以上のＴＦＦ工程における唯一のダイアフィルトレーション工程である。
【0018】
所定の実施形態では、方法は、ウイルス生成プールが１つ以上のＶＲＦシステムを介して処理される１つ以上のウイルス保持濾過（ＶＲＦ）工程を含む。所定の実施形態では、ＶＲＦシステムは、５０ｎｍ以上である粒子を保持するフィルター媒体を含む。所定の実施形態では、ＶＲＦシステムは、３５ｎｍ以上である粒子を保持するフィルター媒体を含む。所定の実施形態では、ＶＲＦシステムは、２０ｎｍ以上である粒子を保持するフィルター媒体を含む。
【0019】
本開示は、（ｉ）本開示の方法またはシステムによって生成された１つ以上のｒＡＡＶを提供することと、（ｉｉ）１つ以上のｒＡＡＶを１つ以上の１つの薬学的賦形剤と組み合わせることとによって薬学的製剤を生成するための方法及びシステムを提供する。本開示は、本開示の方法またはシステムによって生成された薬学的製剤を提供する。
【0020】
本開示は、（ｉ）本開示のｒＡＡＶを含む薬学的製剤を提供することであって、薬学的製剤及び／またはｒＡＡＶは、本開示の方法またはシステムによって生成される、提供することと、（ｉｉ）薬学的製剤を製剤容器に好適に分配することとによって遺伝子療法製品を生成するための方法及びシステムを提供する。
【0021】
本開示は、遺伝子療法様式に有用な薬学的製剤を提供する。所定の実施形態では、薬学的製剤は、本開示のｒＡＡＶを含む。所定の実施形態では、薬学的製剤は、ｒＡＡＶを５×１０１３ｖｇ／ｍｌ未満の濃度で含む。所定の実施形態では、薬学的製剤は、ｒＡＡＶを１．０×１０１２～５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの間の濃度で含む。所定の実施形態では、薬学的製剤は、ｒＡＡＶを１．０×１０１２～５．０×１０１２ｖｇ／ｍＬの間の濃度で含む。所定の実施形態では、薬学的製剤は、ｒＡＡＶを１．０×１０１３～５．０×１０１３ｖｇ／ｍＬの間の濃度で含む。所定の実施形態では、薬学的製剤は、ｒＡＡＶを２．７×１０１３ｖｇ／ｍＬの濃度で含む。
【0022】
前述及び他の目的、特徴及び利点は、添付の図に示されているように、本開示の特定の実施形態の以下の説明から明らかになる。図は、必ずしも縮尺どおりでも包括的でもなく、代わりに本開示の様々な実施形態の原理を説明することに重点を置いている。
【図面の簡単な説明】
【0023】
【図1】ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）及びプラスミドコンストラクトを使用してバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を生成するための、システムの一実施形態のための概略図、及びプロセスの一実施形態のためのフロー図を示している。
【図2】ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）及びバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を使用してＡＡＶ粒子を生成するための、システムの一実施形態のための概略図、及びプロセスの一実施形態のためのフロー図を示している。
【図3】ＡＡＶ粒子及びウイルス生成細胞のバルク収穫物を処理、清澄化及び精製することによって薬物物質を生成するための、システムの一実施形態のための概略図、及びプロセスの一実施形態のためのフロー図を示している。
【図4】ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）のＢＩＩＣトランスフェクションにおけるＢＩＩＣＲｅｐ／Ｃａｐ細胞数（ｙ軸）対ＢＩＩＣＲｅｐ／Ｃａｐ対ＢＩＩＣペイロードｖ／ｖ比（ｘ軸）についてのコンピュータモデリングの結果を示している。Ａは、ｄｄＰＣＲを使用したＡＡＶ力価（ｖｇ／ｍＬ）を示しており、Ｂは、カプシド完全％を示している。
【図5】ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）のＢＩＩＣトランスフェクションにおけるＢＩＩＣＲｅｐ／Ｃａｐ細胞数（ｙ軸）対ＶＰＣ細胞／ｍＬ（ｘ軸、×１０６）についてのコンピュータモデリングの結果を示している。Ａは、ｄｄＰＣＲを使用したＡＡＶ力価（ｖｇ／ｍＬ）を示しており、Ｂは、カプシド完全％を示している。
【図6】ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）のＢＩＩＣトランスフェクションにおけるＢＩＩＣＲｅｐ／Ｃａｐ対ＢＩＩＣペイロードｖ／ｖ比（ｙ軸）対ＶＰＣ細胞／ｍＬ（ｘ軸、×１０６）についてのコンピュータモデリングの結果を示している。Ａは、ｄｄＰＣＲを使用したＡＡＶ力価（ｖｇ／ｍＬ）を示しており、Ｂは、カプシド完全％を示している。
【発明を実施するための形態】
【0024】
Ｉ．アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）
概要
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、一本鎖ＤＮＡウイルスゲノムを特徴とするＰａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅファミリーの小型非エンベロープ型２０面体カプシドウイルスである。Ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅファミリーウイルスは、２つのサブファミリー：脊椎動物に感染するＰａｒｖｏｖｉｒｉｎａｅ及び無脊椎動物に感染するＤｅｎｓｏｖｉｒｉｎａｅからなる。Ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅファミリーは、ヒト、霊長類、ウシ、イヌ、ウマ、及びヒツジ種を含むがこれらに限定されない脊椎動物宿主における複製が可能なＡＡＶを含むＤｅｐｅｎｄｏｖｉｒｕｓ属を含む。
概要
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、一本鎖ＤＮＡウイルスゲノムを特徴とするＰａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅファミリーの小型非エンベロープ型２０面体カプシドウイルスである。Ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅファミリーウイルスは、２つのサブファミリー：脊椎動物に感染するＰａｒｖｏｖｉｒｉｎａｅ及び無脊椎動物に感染するＤｅｎｓｏｖｉｒｉｎａｅからなる。Ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅファミリーは、ヒト、霊長類、ウシ、イヌ、ウマ、及びヒツジ種を含むがこれらに限定されない脊椎動物宿主における複製が可能なＡＡＶを含むＤｅｐｅｎｄｏｖｉｒｕｓ属を含む。
【0025】
パルボウイルス及びＰａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅファミリーの他のメンバーは一般に、Ｋｅｎｎｅｔｈ Ｉ．Ｂｅｒｎｓ，“Ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅ：Ｔｈｅ Ｖｉｒｕｓｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ，” Ｃｈａｐｔｅｒ ６９ ｉｎ Ｆｉｅｌｄｓ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（３ｄ Ｅｄ．１９９６）（その内容は、本開示と矛盾しない限り、パルボウイルスに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【0026】
ＡＡＶは、それらの比較的単純な構造、宿主ゲノムへのインテグレーションを伴わずに及び複製を伴わずに広い範囲の細胞（静止及び分裂細胞を含む）に感染するそれらの能力、及びそれらの比較的無害な免疫原性プロファイルのため、生物学的ツールとして有用であることが証明されている。そのウイルスのゲノムは、特定の組織を標的とし、所望のペイロードを発現または送達するようにロードまたは修飾された機能的組換えウイルス、またはウイルス粒子の集合のための最小の成分を含有するように操作され得る。
【0027】
ＡＡＶウイルスゲノム
野生型ＡＡＶウイルスゲノムは、長さがおよそ５，０００ヌクレオチド（ｎｔ）の線状一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）分子である。末端逆位反復（ＩＴＲ）は、５’及び３’末端の両方でウイルスゲノムを従来的にキャップし、ウイルスゲノムのための複製の起点を提供する。理論に縛られることを望むものではないが、ＡＡＶウイルスゲノムは典型的には、２つのＩＴＲ配列を含む。これらのＩＴＲは、エネルギー的に安定な二本鎖領域を形成するｓｓＤＮＡの５’及び３’末端で自己相補性領域（野生型ＡＡＶにおいて１４５ｎｔ）によって定義される特徴的なＴ型ヘアピン構造を有する。二本鎖ヘアピン構造は、限定されないが、宿主ウイルス複製細胞の内因性ＤＮＡポリメラーゼ複合体のためのプライマーとして機能することによってＤＮＡ複製のための起点として作用することを含む複数の機能を含む。
野生型ＡＡＶウイルスゲノムは、長さがおよそ５，０００ヌクレオチド（ｎｔ）の線状一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）分子である。末端逆位反復（ＩＴＲ）は、５’及び３’末端の両方でウイルスゲノムを従来的にキャップし、ウイルスゲノムのための複製の起点を提供する。理論に縛られることを望むものではないが、ＡＡＶウイルスゲノムは典型的には、２つのＩＴＲ配列を含む。これらのＩＴＲは、エネルギー的に安定な二本鎖領域を形成するｓｓＤＮＡの５’及び３’末端で自己相補性領域（野生型ＡＡＶにおいて１４５ｎｔ）によって定義される特徴的なＴ型ヘアピン構造を有する。二本鎖ヘアピン構造は、限定されないが、宿主ウイルス複製細胞の内因性ＤＮＡポリメラーゼ複合体のためのプライマーとして機能することによってＤＮＡ複製のための起点として作用することを含む複数の機能を含む。
【0028】
野生型ＡＡＶウイルスゲノムは、２つのオープンリーディングフレーム（１つは４つの非構造Ｒｅｐタンパク質（Ｒｅｐ遺伝子によってコードされるＲｅｐ７８、Ｒｅｐ６８、Ｒｅｐ５２、Ｒｅｐ４０）のためのものであり、１つは３つのカプシド、または構造タンパク質（カプシド遺伝子またはＣａｐ遺伝子によってコードされるＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３）のためのものである）のためのヌクレオチド配列をさらに含む。Ｒｅｐタンパク質は、複製及びパッケージングに重要であるのに対し、カプシドタンパク質は、集合してＡＡＶのタンパク質シェル、またはＡＡＶカプシドを生成する。選択的スプライシングならびに選択的開始コドン及びプロモーターは、単一のオープンリーディングフレームからの４つの異なるＲｅｐタンパク質の産生及び単一のオープンリーディングフレームからの３つのカプシドタンパク質の産生をもたらす。それはＡＡＶ血清型によって変わるが、非限定的な例として、ＡＡＶ９／ｈｕ．１４（ＵＳ７，９０６，１１１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶ９／ｈｕ．１４に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）の配列番号１２３）の場合、ＶＰ１は、アミノ酸１～７３６を指し、ＶＰ２は、アミノ酸１３８～７３６を指し、ＶＰ３は、アミノ酸２０３～７３６を指す。すなわち、ＶＰ１は、全長カプシド配列であるのに対し、ＶＰ２及びＶＰ３は、全体のより短い成分である。結果として、ＶＰ３領域における配列の変化は、ＶＰ１及びＶＰ２に対する変化でもあり、しかしながら、親配列と比較した相違率は、ＶＰ３について最も高くなるが、その理由はそれが３つのうち最も短い配列であるからである。ここではアミノ酸配列に関して記載されているが、これらのタンパク質をコードする核酸配列が同様に記載され得る。３つのカプシドタンパク質は一緒に集合してＡＡＶカプシドタンパク質を生成する。理論に縛られることを望むものではないが、ＡＡＶカプシドタンパク質は典型的には、１：１：１０のＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３のモル比を含む。本明細書で使用される場合、「ＡＡＶ血清型」は、主にＡＡＶカプシドによって定義される。いくつかの例では、ＩＴＲはまた、ＡＡＶ血清型（例えば、ＡＡＶ２／９）によって具体的に表される。
【0029】
生物学的ツールとして使用するため、野生型ＡＡＶウイルスゲノムは、ｒｅｐ／ｃａｐ配列を、少なくとも１つのＩＴＲ領域を有するペイロード領域を含む核酸配列に置き換えるように改変され得る。典型的には、組換えＡＡＶウイルスゲノムにおいて２つのＩＴＲ領域が存在する。ｒｅｐ／ｃａｐ配列は、ＡＡＶ粒子を産生するための生成中にトランスで提供され得る。
【0030】
コードされる異種ペイロードに加えて、ＡＡＶベクターは、任意の天然に存在する及び／または組換えＡＡＶ血清型のヌクレオチド配列またはバリアントのウイルスゲノムを全体としてまたは部分的に含み得る。ＡＡＶバリアントは、通常、物理的及び機能的な同等物であり、類似するメカニズムによって複製し、類似するメカニズムによって集合するコンストラクトを生成するために、核酸（ゲノムまたはカプシド）及びアミノ酸レベル（カプシド）で大幅に相同する配列を有し得る。Ｃｈｉｏｒｉｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒ．７１：６８２３－３３（１９９７）；Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒ．４５：５５５－６４（１９８３）；Ｃｈｉｏｒｉｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒ．７３：１３０９－１３１９（１９９９）；Ｒｕｔｌｅｄｇｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒ．７２：３０９－３１９（１９９８）；及びＷｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒ．７４：８６３５－４７（２０００）（これらの各々の内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶバリアント及び同等物に関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【0031】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子、ウイルスゲノム及び／またはペイロード、及びそれらの使用方法は、ＷＯ２０１７１８９９６３（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶ粒子、ウイルスゲノム及び／またはペイロードに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているとおりであり得る。
【0032】
本開示のＡＡＶ粒子は、当業者に明らかなそのような製剤の任意のバリエーションを含む本開示の遺伝子療法製剤のいずれかで製剤化され得る。本出願における「ＡＡＶ粒子」、「ＡＡＶ粒子製剤」及び「製剤化されたＡＡＶ粒子」に対する言及は、製剤化され得るＡＡＶ粒子及びいずれも制限することなく製剤化されたものを指す。
【0033】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、複製欠損性であり、それらのウイルスゲノム内の機能的Ｒｅｐ及びＣａｐタンパク質をコードする配列を欠く組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）ウイルス粒子である。これらの欠損性ＡＡＶ粒子は、ほとんどまたはすべての親コーディング配列を欠き、１つまたは２つのＡＡＶ ＩＴＲ配列及び細胞、組織、器官または生物への送達のための対象となる核酸（すなわち、ペイロード）のみを本質的に保有し得る。
【0034】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、それにコードされるコーディング配列の複製、転写及び翻訳を提供する少なくとも１つの制御要素を含む。コーディング配列が適切な宿主細胞において複製、転写及び／または翻訳されることが可能である限り、制御要素のすべてが常に存在する必要があるわけではない。発現制御要素の非限定的な例は、転写開始及び／または終結のための配列、プロモーター及び／またはエンハンサー配列、効率的なＲＮＡ処理シグナル、例えば、スプライシング及びポリアデニル化シグナル、細胞質性ｍＲＮＡを安定化する配列、翻訳有効性を向上させる配列（例えば、コザックコンセンサス配列）、タンパク質安定性を向上させる配列、及び／またはタンパク質処理及び／または分泌を向上させる配列を含む。
【0035】
本開示によれば、治療剤及び／または診断剤において使用するためのＡＡＶ粒子は、対象となる核酸ペイロードまたは搭載物の形質導入に必要な最小成分に抽出または減少されたウイルスを含む。この手法では、ＡＡＶ粒子は、野生型ウイルスに見られる有害な複製及び／またはインテグレーションの特徴を欠如させつつ、特異的送達のためのビヒクルとして修飾される。
【0036】
本開示のＡＡＶ粒子は、組換え的に生成され得、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づき得る。本明細書で使用される場合、「ベクター」は、本明細書に記載の核酸などの異種分子を輸送し、形質導入し、またはそうでなければその担体として作用する任意の分子または部位である。
【0037】
一本鎖ＡＡＶウイルスゲノム（例えば、ｓｓＡＡＶ）に加えて、本開示はまた、自己相補性ＡＡＶ（ｓｃＡＡＶ）ウイルスゲノムを提供する。ｓｃＡＡＶベクターゲノムは、二本鎖ＤＮＡを形成するために一緒にアニーリングするＤＮＡ鎖を含有する。第２の鎖合成をスキップすることによって、ｓｃＡＡＶは、細胞における急速発現を可能にする。
【0038】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶウイルスゲノムは、ｓｃＡＡＶである。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶウイルスゲノムは、ｓｓＡＡＶである。
偽型ＡＡＶ粒子などのＡＡＶ粒子を生成及び／または改変するための方法は、当該技術分野で開示されておいる（ＰＣＴ特許公開番号ＷＯ２０００２８００４；ＷＯ２００１２３００１；ＷＯ２００４１１２７２７；ＷＯ２００５００５６１０及びＷＯ２００５０７２３６４（これらの各々の内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶ粒子の生成及び／または改変に関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる））。
偽型ＡＡＶ粒子などのＡＡＶ粒子を生成及び／または改変するための方法は、当該技術分野で開示されておいる（ＰＣＴ特許公開番号ＷＯ２０００２８００４；ＷＯ２００１２３００１；ＷＯ２００４１１２７２７；ＷＯ２００５００５６１０及びＷＯ２００５０７２３６４（これらの各々の内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶ粒子の生成及び／または改変に関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる））。
【0039】
ＡＡＶ粒子は、送達の効率を向上させるために改変され得る。そのような改変されたＡＡＶ粒子は、効率的にパッケージングされ得、高頻度で最小の毒性で標的細胞を成功裏に感染させるために使用され得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のカプシドは、米国公開番号ＵＳ２０１３０１９５８０１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、送達の効率を向上させるためにＡＡＶ粒子を改変することに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の方法に従って修飾される。
【0040】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、本開示のポリペプチドまたはタンパク質をコードするペイロード領域を含み、哺乳動物細胞に導入され得る。
末端逆位反復（ＩＴＲ）
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのＩＴＲ領域及びペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、２つのＩＴＲを有する。これらの２つのＩＴＲは、５’及び３’末端でペイロード領域を挟んでいる。ＩＴＲは、複製のための認識部位を含む複製の起点として機能する。ＩＴＲは、相補的であり、対称的に配置され得る配列領域を含む。本開示のウイルスゲノムに組み込まれるＩＴＲは、天然に存在するポリヌクレオチド配列または組換え的に誘導されたポリヌクレオチド配列を含み得る。
末端逆位反復（ＩＴＲ）
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのＩＴＲ領域及びペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、２つのＩＴＲを有する。これらの２つのＩＴＲは、５’及び３’末端でペイロード領域を挟んでいる。ＩＴＲは、複製のための認識部位を含む複製の起点として機能する。ＩＴＲは、相補的であり、対称的に配置され得る配列領域を含む。本開示のウイルスゲノムに組み込まれるＩＴＲは、天然に存在するポリヌクレオチド配列または組換え的に誘導されたポリヌクレオチド配列を含み得る。
【0041】
ＩＴＲは、カプシドと同じ血清型、またはその誘導体に由来し得る。ＩＴＲは、カプシドとは異なる血清型のものであり得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、複数のＩＴＲを有する。非限定的な例では、ＡＡＶ粒子は、２つのＩＴＲを含むウイルスゲノムを有する。所定の実施形態では、ＩＴＲは、互いに同じ血清型のものである。別の実施形態では、ＩＴＲは、異なる血清型のものである。非限定的な例は、カプシドと同じ血清型を有するＩＴＲが非存在であるか、その一方または両方を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムの両方のＩＴＲは、ＡＡＶ２のＩＴＲである。
【0042】
独立して、各ＩＴＲは、長さが約１００～約１５０ヌクレオチドであり得る。ＩＴＲは、長さが約１００～１０５ヌクレオチド、長さが１０６～１１０ヌクレオチド、長さが１１１～１１５ヌクレオチド、長さが１１６～１２０ヌクレオチド、長さが１２１～１２５ヌクレオチド、長さが１２６～１３０ヌクレオチド、長さが１３１～１３５ヌクレオチド、長さが１３６～１４０ヌクレオチド、長さが１４１～１４５ヌクレオチドまたは長さが１４６～１５０ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、ＩＴＲは、長さが１４０～１４２ヌクレオチドである。ＩＴＲの長さの非限定的な例は、長さが１０２、１３０、１４０、１４１、１４２、１４５ヌクレオチド、及びそれらと少なくとも９５％の同一性を有するものである。
【0043】
所定の実施形態では、各ＩＴＲは、長さが１４１ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、各ＩＴＲは、長さが１３０ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、各ＩＴＲは、長さが１１９ヌクレオチドであり得る。
【0044】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は２つのＩＴＲを含み、一方のＩＴＲは長さが１４１ヌクレオチドであり、他方のＩＴＲは長さが１３０ヌクレオチドである。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は２つのＩＴＲを含み、両方のＩＴＲは長さが１４１ヌクレオチドである。
【0045】
独立して、各ＩＴＲは、長さが約７５～約１７５ヌクレオチドであり得る。ＩＴＲは、独立して、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、及び１７５ヌクレオチドなどであるがこれらに限定されない長さを有し得る。ウイルスゲノムについてのＩＴＲの長さは、７５～８０、７５～８５、７５～１００、８０～８５、８０～９０、８０～１０５、８５～９０、８５～９５、８５～１１０、９０～９５、９０～１００、９０～１１５、９５～１００、９５～１０５、９５～１２０、１００～１０５、１００～１１０、１００～１２５、１０５～１１０、１０５～１１５、１０５～１３０、１１０～１１５、１１０～１２０、１１０～１３５、１１５～１２０、１１５～１２５、１１５～１４０、１２０～１２５、１２０～１３０、１２０～１４５、１２５～１３０、１２５～１３５、１２５～１５０、１３０～１３５、１３０～１４０、１３０～１５５、１３５～１４０、１３５～１４５、１３５～１６０、１４０～１４５、１４０～１５０、１４０～１６５、１４５～１５０、１４５～１５５、１４５～１７０、１５０～１５５、１５０～１６０、１５０～１７５、１５５～１６０、１５５～１６５、１６０～１６５、１６０～１７０、１６５～１７０、１６５～１７５、及び１７０～１７５ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１０５ヌクレオチドであるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１４１ヌクレオチドであるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１３０ヌクレオチドであるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１０５ヌクレオチドであるＩＴＲ及び長さが約１４１ヌクレオチドであるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１０５ヌクレオチドであるＩＴＲ及び長さが約１３０ヌクレオチドであるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１３０ヌクレオチドであるＩＴＲ及び長さが約１４１ヌクレオチドであるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、２つのＩＴＲを含み得、その各々は、長さが約１４１ヌクレオチドである。
【0046】
プロモーター
所定の実施形態では、ウイルスゲノムのペイロード領域は、導入遺伝子の標的特異性及び発現を向上させる少なくとも１つの要素を含む（例えば、Ｐｏｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．Ｖｉｒａｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｃａｓｓｅｔｔｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｔｏ Ｅｎｈａｎｃｅ Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ Ｔａｒｇｅｔ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ，２０１５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ペイロード／導入遺伝子エンハンサー要素に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。導入遺伝子の標的特異性及び発現を向上させる要素の非限定的な例は、プロモーター、内因性ｍｉＲＮＡ、転写後制御因子（ＰＲＥ）、ポリアデニル化（ポリＡ）シグナル配列及び上流エンハンサー（ＵＳＥ）、ＣＭＶエンハンサー及びイントロンを含む。
所定の実施形態では、ウイルスゲノムのペイロード領域は、導入遺伝子の標的特異性及び発現を向上させる少なくとも１つの要素を含む（例えば、Ｐｏｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．Ｖｉｒａｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｃａｓｓｅｔｔｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｔｏ Ｅｎｈａｎｃｅ Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ Ｔａｒｇｅｔ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ，２０１５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ペイロード／導入遺伝子エンハンサー要素に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。導入遺伝子の標的特異性及び発現を向上させる要素の非限定的な例は、プロモーター、内因性ｍｉＲＮＡ、転写後制御因子（ＰＲＥ）、ポリアデニル化（ポリＡ）シグナル配列及び上流エンハンサー（ＵＳＥ）、ＣＭＶエンハンサー及びイントロンを含む。
【0047】
当業者は、標的細胞における本開示のポリペプチドの発現が、種特異的、誘導的、組織特異的、または細胞周期特異的であるプロモーターを含むがこれらに限定されない特異的プロモーターを必要とし得ることを認識し得る（Ｐａｒｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．３：１１４５－９（１９９７）（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ポリペプチド発現プロモーターに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。
【0048】
所定の実施形態では、プロモーターは、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムのペイロード領域にコードされるポリペプチド（複数可）の発現を作動させる場合に効率的であると考えられる。所定の実施形態では、プロモーターは、標的とされている細胞における発現を作動させる場合に効率的であると考えられる。所定の実施形態では、プロモーターは、標的とされている細胞に対するトロピズムを有する。所定の実施形態では、プロモーターは、ウイルス生成細胞に対するトロピズムを有する。
【0049】
所定の実施形態では、プロモーターは、標的細胞または組織において所定期間、ペイロードの発現を作動させる。プロモーターによって作動される発現は、１～３１日（またはその中の任意の値もしくは範囲）、１～２３ヶ月（またはその中の任意の値もしくは範囲）、２～１０年（またはその中の任意の値もしくは範囲）、または１０年超の期間であり得る。発現は、１～５時間、１～１２時間、１～２日間、１～５日間、１～２週間、１～３週間、１～４週間、１～２ヶ月間、１～４ヶ月間、１～６ヶ月間、２～６ヶ月間、３～６ヶ月間、３～９ヶ月間、４～８ヶ月間、６～１２ヶ月間、１～２年間、１～５年間、２～５年間、３～６年間、３～８年間、４～８年間または５～１０年間であり得る。非限定的な例として、プロモーターは、神経（例えば、ＣＮＳ）細胞または組織におけるペイロードの持続した発現のための弱いプロモーターであり得る。
【0050】
所定の実施形態では、プロモーターは、少なくとも１～１１ヶ月（またはその中の任意の個々の値）、２～６５年（またはその中の任意の個々の値）、または６５年超の間、本開示のポリペプチドの発現を作動させる。
【0051】
プロモーターは、天然に存在するまたは天然に存在しないものであり得る。プロモーターの非限定的な例は、ウイルスプロモーター、植物プロモーター及び哺乳動物プロモーターを含む。所定の実施形態では、プロモーターは、ヒトプロモーターであり得る。所定の実施形態では、プロモーターは、切断型または変異型であり得る。
【0052】
ほとんどの組織において発現を作動または促進するプロモーターは、ヒト延長因子１α－サブユニット（ＥＦ１α）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）最初期エンハンサー及び／またはプロモーター、ニワトリβ－アクチン（ＣＢＡ）及びその誘導体ＣＡＧ、βグルクロニダーゼ（ＧＵＳＢ）、またはユビキチンＣ（ＵＢＣ）を含むがこれらに限定されない。組織特異的発現要素、例えば、限定されないが、筋肉特異的プロモーター、Ｂ細胞プロモーター、単球プロモーター、白血球プロモーター、マクロファージプロモーター、膵腺房細胞プロモーター、内皮細胞プロモーター、肺組織プロモーター、星状細胞プロモーター、または発現をニューロンもしくはニューロンのサブタイプ、星状細胞、もしくはオリゴデンドロサイトに制限するために使用され得る神経系プロモーターが、発現を所定の細胞タイプに制限するために使用され得る。
【0053】
筋肉特異的プロモーターの非限定的な例は、哺乳動物筋肉クレアチンキナーゼ（ＭＣＫ）プロモーター、哺乳動物デスミン（ＤＥＳ）プロモーター、哺乳動物トロポニンＩ（ＴＮＮＩ２）プロモーター、及び哺乳動物骨格アルファ－アクチン（ＡＳＫＡ）プロモーターを含む（例えば、米国特許公開ＵＳ２０１１０２１２５２９（その内容は、本開示と矛盾しない限り、筋肉特異的プロモーターに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。
【0054】
ニューロンのための組織特異的発現要素の非限定的な例は、ニューロン特異的エノラーゼ（ＮＳＥ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、血小板由来成長因子Ｂ鎖（ＰＤＧＦ－β）、シナプシン（Ｓｙｎ）、メチル－ＣｐＧ結合タンパク質２（ＭｅＣＰ２）、Ｃａ２＋／カルモジュリン依存性タンパク質キナーゼＩＩ（ＣａＭＫＩＩ）、代謝型グルタミン酸受容体２（ｍＧｌｕＲ２）、ニューロフィラメント軽鎖（ＮＦＬ）またはニューロフィラメント重鎖（ＮＦＨ）、β－グロビンミニ遺伝子ｎβ２、プレプロエンケファリン（ＰＰＥ）、エンケファリン（Ｅｎｋ）及び興奮性アミノ酸トランスポーター２（ＥＡＡＴ２）プロモーターを含む。星状細胞のための組織特異的発現要素の非限定的な例は、グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）及びＥＡＡＴ２プロモーターを含む。オリゴデンドロサイトのための組織特異的発現要素の非限定的な例は、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）プロモーターを含む。
【0055】
所定の実施形態では、プロモーターは、１ｋｂ未満であり得る。プロモーターは、２００～８００ヌクレオチド（またはその中の任意の値もしくは範囲）、または８００ヌクレオチド超の長さを有し得る。プロモーターは、２００～３００、２００～４００、２００～５００、２００～６００、２００～７００、２００～８００、３００～４００、３００～５００、３００～６００、３００～７００、３００～８００、４００～５００、４００～６００、４００～７００、４００～８００、５００～６００、５００～７００、５００～８００、６００～７００、６００～８００または７００～８００の間の長さを有し得る。
【0056】
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのプロモーター領域を有するウイルスゲノムを含む。プロモーター領域（複数可）は、独立して、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、５００、５０１、５０２、５０３、５０４、５０５、５０６、５０７、５０８、５０９、５１０、５１１、５１２、５１３、５１４、５１５、５１６、５１７、５１８、５１９、５２０、５２１、５２２、５２３、５２４、５２５、５２６、５２７、５２８、５２９、５３０、５３１、５３２、５３３、５３４、５３５、５３６、５３７、５３８、５３９、５４０、５４１、５４２、５４３、５４４、５４５、５４６、５４７、５４８、５４９、５５０、５５１、５５２、５５３、５５４、５５５、５５６、５５７、５５８、５５９、５６０、５６１、５６２、５６３、５６４、５６５、５６６、５６７、５６８、５６９、５７０、５７１、５７２、５７３、５７４、５７５、５７６、５７７、５７８、５７９、５８０、５８１、５８２、５８３、５８４、５８５、５８６、５８７、５８８、５８９、５９０、５９１、５９２、５９３、５９４、５９５、５９６、５９７、５９８、５９９、及び６００ヌクレオチドなどであるがこれらに限定されない長さを有し得る。ウイルスゲノムについてのプロモーター領域の長さは、４～１０、１０～２０、１０～５０、２０～３０、３０～４０、４０～５０、５０～６０、５０～１００、６０～７０、７０～８０、８０～９０、９０～１００、１００～１１０、１００～１５０、１１０～１２０、１２０～１３０、１３０～１４０、１４０～１５０、１５０～１６０、１５０～２００、１６０～１７０、１７０～１８０、１８０～１９０、１９０～２００、２００～２１０、２００～２５０、２１０～２２０、２２０～２３０、２３０～２４０、２４０～２５０、２５０～２６０、２５０～３００、２６０～２７０、２７０～２８０、２８０～２９０、２９０～３００、３００～３１０、３００～３５０、３１０～３２０、３２０～３３０、３３０～３４０、３４０～３５０、３５０～３６０、３５０～４００、３６０～３７０、３７０～３８０、３８０～３９０、３９０～４００、４００～４１０、４００～４５０、４１０～４２０、４２０～４３０、４３０～４４０、４４０～４５０、４５０～４６０、４５０～５００、４６０～４７０、４７０～４８０、４８０～４９０、４９０～５００、５００～５１０、５００～５５０、５１０～５２０、５２０～５３０、５３０～５４０、５４０～５５０、５５０～５６０、５５０～６００、５６０～５７０、５７０～５８０、５８０～５９０、及び５９０～６００ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約４ヌクレオチドであるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１７ヌクレオチドであるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約２０４ヌクレオチドであるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約２１９ヌクレオチドであるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約２６０ヌクレオチドであるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３０３ヌクレオチドであるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３８２ヌクレオチドであるプロモーター領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約５８８ヌクレオチドであるプロモーター領域を含む。
【0057】
所定の実施形態では、プロモーターは、同じまたは異なる開始または親プロモーター、例えば、限定されないが、ＣＭＶ及びＣＢＡの２つ以上の成分の組み合わせであり得る。各成分は、２００～８００ヌクレオチド（またはその中の任意の値もしくは範囲）、または８００ヌクレオチド超の長さを有し得る。各成分は、２００～３００、２００～４００、２００～５００、２００～６００、２００～７００、２００～８００、３００～４００、３００～５００、３００～６００、３００～７００、３００～８００、４００～５００、４００～６００、４００～７００、４００～８００、５００～６００、５００～７００、５００～８００、６００～７００、６００～８００または７００～８００の間の長さを有し得る。所定の実施形態では、プロモーターは、３８２ヌクレオチドのＣＭＶ－エンハンサー配列及び２６０ヌクレオチドのＣＢＡ－プロモーター配列の組み合わせである。
【0058】
所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、普遍的なプロモーターを含む。普遍的なプロモーターの非限定的な例は、ＣＭＶ、ＣＢＡ（誘導体ＣＡＧ、ＣＢｈなどを含む）、ＥＦ－１α、ＰＧＫ、ＵＢＣ、ＧＵＳＢ（ｈＧＢｐ）、及びＵＣＯＥ（ＨＮＲＰＡ２Ｂ１－ＣＢＸ３のプロモーター）を含む。所定の実施形態では、プロモーター領域は、ＣＢＡプロモーター配列に由来する。非限定的な例として、プロモーターは、長さが２６０ヌクレオチドである。
【0059】
Ｙｕら（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐａｉｎ ２０１１，７：６３（その内容は、本開示と矛盾しない限り、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）は、レンチウイルスベクターを使用してラットＤＲＧ細胞及び初代ＤＲＧ細胞におけるＣＡＧ、ＥＦＩα、ＰＧＫ及びＵＢＣプロモーター下でのｅＧＦＰの発現を評価し、他の３つのプロモーターよりも弱い発現を示し、すべてのプロモーターについて１０～１２％のグリアの発現しか認められなかったことが見出された。Ｓｏｄｅｒｂｌｏｍら（Ｅ．Ｎｅｕｒｏ ２０１５（これらの内容はそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）は、運動皮質における注射後のＣＭＶ及びＵＢＣプロモーターを有するＡＡＶ８及びＣＭＶプロモーターを有するＡＡＶ２におけるｅＧＦＰの発現を評価した。ＵＢＣまたはＥＦＩαプロモーターを含有するプラスミドの鼻腔内投与は、ＣＭＶプロモーターでの発現よりも高い持続した気道発現を示した（例えば、Ｇｉｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ２００１，Ｖｏｌ．８，１５３９－１５４６（その内容は、本開示と矛盾しない限り、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。Ｈｕｓａｉｎ ｅｔ ａｌ．（Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ２００９（その内容は、本開示と矛盾しない限り、その全体が参照により本明細書に組み込まれる））は、ｈＧＵＳＢプロモーター、ＨＳＶ－１ＬＡＴプロモーター及びＮＳＥプロモーターを有するＨβＨコンストラクトを評価し、ＨβＨコンストラクトがマウス脳においてＮＳＥよりも弱い発現を示したことが見出された。Ｐａｓｓｉｎｉ及びＷｏｌｆｅ（Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．２００１，１２３８２－１２３９２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、その全体が参照により本明細書に組み込まれる））は、新生マウスにおいて心室内（脳室内）注射の後のＨβＨベクターの長期効果を評価し、少なくとも１年間の持続した発現があったことを見出した。すべての脳領域における低発現は、ＣＭＶ－ｌａｃＺ、ＣＭＶ－ｌｕｃ、ＥＦ、ＧＦＡＰ、ｈＥＮＫ、ｎＡＣｈＲ、ＰＰＥ、ＰＰＥ＋ｗｐｒｅ、ＮＳＥ（０．３ｋｂ）、ＮＳＥ（１．８ｋｂ）及びＮＳＥ（１．８ｋｂ＋ｗｐｒｅ）と比較してＮＦＬ及びＮＦＨプロモーターが使用された場合にＸｕら（Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ２００１，８，１３２３－１３３２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、その全体が参照により本明細書に組み込まれる））によって見出された。Ｘｕらは、降順のプロモーター活性が、ＮＳＥ（１．８ｋｂ）、ＥＦ、ＮＳＥ（０．３ｋｂ）、ＧＦＡＰ、ＣＭＶ、ｈＥＮＫ、ＰＰＥ、ＮＦＬ及びＮＦＨであることを見出した。ＮＦＬプロモーターは、６５０ヌクレオチドのプロモーターであり、ＮＦＨプロモーターは、９２０ヌクレオチドのプロモーターであり、これらはいずれも、肝臓では非存在であるが、ＮＦＨプロモーターは、感覚固有受容性ニューロン、脳及び脊髄に多く存在し、ＮＦＨプロモーターは、心臓に存在する。ＳＣＮ８Ａプロモーターは、海馬ニューロン及び小脳プルキンエ細胞、皮質、視床及び視床下部に見られる特に高い発現を伴ってＤＲＧ、脊髄及び脳の全体を通して発現する４７０ヌクレオチドのプロモーターである（例えば、Ｄｒｅｗｓ ｅｔ ａｌ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ，ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ ｇｅｎｅ ＳＣＮ８Ａ，Ｍａｍｍ Ｇｅｎｏｍｅ（２００７）１８：７２３－７３１；及びＲａｙｍｏｎｄ ｅｔ ａｌ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｌｙ Ｓｐｌｉｃｅｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ｃｈａｎｎｅｌ α－ｓｕｂｕｎｉｔ ｇｅｎｅｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（２００４）２７９（４４）４６２３４－４６２４１（これらの各々の内容は、本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。
【0060】
前述したＹｕ、Ｓｏｄｅｒｂｌｏｍ、Ｇｉｌｌ、Ｈｕｓａｉｎ、Ｐａｓｓｉｎｉ、Ｘｕ、ＤｒｅｗｓまたはＲａｙｍｏｎｄによって教示されたプロモーターのいずれかが本開示において使用され得る。
【0061】
所定の実施形態では、プロモーターは、細胞特異的ではない。
所定の実施形態では、プロモーターは、ユビキチンｃ（ＵＢＣ）プロモーターである。ＵＢＣプロモーターは、３００～３５０ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＵＢＣプロモーターは、３３２ヌクレオチドである。所定の実施形態では、プロモーターは、β－グルクロニダーゼ（ＧＵＳＢ）プロモーターである。ＧＵＳＢプロモーターは、３５０～４００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＧＵＳＢプロモーターは、３７８ヌクレオチドである。所定の実施形態では、プロモーターは、ニューロフィラメント軽鎖（ＮＦＬ）プロモーターである。ＮＦＬプロモーターは、６００～７００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＮＦＬプロモーターは、６５０ヌクレオチドである。所定の実施形態では、プロモーターは、ニューロフィラメント重鎖（ＮＦＨ）プロモーターである。ＮＦＨプロモーターは、９００～９５０ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＮＦＨプロモーターは、９２０ヌクレオチドである。所定の実施形態では、プロモーターは、ＳＣＮ８Ａプロモーターである。ＳＣＮ８Ａプロモーターは、４５０～５００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＳＣＮ８Ａプロモーターは、４７０ヌクレオチドである。
所定の実施形態では、プロモーターは、ユビキチンｃ（ＵＢＣ）プロモーターである。ＵＢＣプロモーターは、３００～３５０ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＵＢＣプロモーターは、３３２ヌクレオチドである。所定の実施形態では、プロモーターは、β－グルクロニダーゼ（ＧＵＳＢ）プロモーターである。ＧＵＳＢプロモーターは、３５０～４００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＧＵＳＢプロモーターは、３７８ヌクレオチドである。所定の実施形態では、プロモーターは、ニューロフィラメント軽鎖（ＮＦＬ）プロモーターである。ＮＦＬプロモーターは、６００～７００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＮＦＬプロモーターは、６５０ヌクレオチドである。所定の実施形態では、プロモーターは、ニューロフィラメント重鎖（ＮＦＨ）プロモーターである。ＮＦＨプロモーターは、９００～９５０ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＮＦＨプロモーターは、９２０ヌクレオチドである。所定の実施形態では、プロモーターは、ＳＣＮ８Ａプロモーターである。ＳＣＮ８Ａプロモーターは、４５０～５００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＳＣＮ８Ａプロモーターは、４７０ヌクレオチドである。
【0062】
所定の実施形態では、プロモーターは、フラタキシン（ＦＸＮ）プロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、ホスホグリセリン酸キナーゼ１（ＰＧＫ）プロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、ニワトリβ－アクチン（ＣＢＡ）プロモーター、またはそのバリアントである。所定の実施形態では、プロモーターは、ＣＢ６プロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、最小ＣＢプロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、Ｈ１プロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、ＣＡＧプロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、ＧＦＡＰプロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、シナプシンプロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、修飾されたプロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、肝臓または骨格筋プロモーターである。肝臓プロモーターの非限定的な例は、ヒトα－１－アンチトリプシン（ｈＡＡＴ）及びサイロキシン結合グロブリン（ＴＢＧ）を含む。骨格筋プロモーターの非限定的な例は、デスミン、ＭＣＫまたは合成Ｃ５－１２を含む。所定の実施形態では、プロモーターは、ＲＮＡ ｐｏｌ ＩＩＩプロモーターである。非限定的な例として、ＲＮＡ ｐｏｌ ＩＩＩプロモーターは、Ｕ６である。非限定的な例として、ＲＮＡ ｐｏｌ ＩＩＩプロモーターは、Ｈ１である。所定の実施形態では、プロモーターは、心筋細胞特異的プロモーターである。心筋細胞特異的プロモーターの非限定的な例は、αＭＨＣ、ｃＴｎＴ、及びＣＭＶ－ＭＬＣ２ｋを含む。所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、２つのプロモーターを含む。非限定的な例として、プロモーターは、ＥＦ１αプロモーター及びＣＭＶプロモーターである。
【0063】
所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、エンハンサー要素、プロモーター及び／または５’ＵＴＲイントロンを含む。エンハンサー要素はまた、本明細書では「エンハンサー」とも称され、限定されないが、ＣＭＶエンハンサーであり得、プロモーターは、限定されないが、ＣＭＶ、ＣＢＡ、ＵＢＣ、ＧＵＳＢ、ＮＳＥ、シナプシン、ＭｅＣＰ２、及びＧＦＡＰプロモーターであり得、５’ＵＴＲ／イントロンは、限定されないが、ＳＶ４０、及びＣＢＡ－ＭＶＭであり得る。非限定的な例として、組み合わせて使用されるエンハンサー、プロモーター及び／またはイントロンは、（１）ＣＭＶエンハンサー、ＣＭＶプロモーター、ＳＶ４０ ５’ＵＴＲイントロン；（２）ＣＭＶエンハンサー、ＣＢＡプロモーター、ＳＶ－４０ ５’ＵＴＲイントロン；（３）ＣＭＶエンハンサー、ＣＢＡプロモーター、ＣＢＡ－ＭＶＭ ５’ＵＴＲイントロン；（４）ＵＢＣプロモーター；（５）ＧＵＳＢプロモーター；（６）ＮＳＥプロモーター；（７）シナプシンプロモーター；（８）ＭｅＣＰ２プロモーター及び（９）ＧＦＡＰプロモーターであり得る。
【0064】
所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、修飾されたプロモーターを含む。
別の実施形態では、ウイルスゲノムは、天然に発現するタンパク質に由来するプロモーターを含む。
別の実施形態では、ウイルスゲノムは、天然に発現するタンパク質に由来するプロモーターを含む。
【0065】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのエンハンサー領域を有するウイルスゲノムを含む。エンハンサー領域（複数可）は、独立して、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、及び４００ヌクレオチドなどであるがこれらに限定されない長さを有し得る。ウイルスゲノムについてのエンハンサー領域の長さは、３００～３１０、３００～３２５、３０５～３１５、３１０～３２０、３１５～３２５、３２０～３３０、３２５～３３５、３２５～３５０、３３０～３４０、３３５～３４５、３４０～３５０、３４５～３５５、３５０～３６０、３５０～３７５、３５５～３６５、３６０～３７０、３６５～３７５、３７０～３８０、３７５～３８５、３７５～４００、３８０～３９０、３８５～３９５、及び３９０～４００ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３０３ヌクレオチドであるエンハンサー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３８２ヌクレオチドであるエンハンサー領域を含む。
【0066】
所定の実施形態では、エンハンサー領域は、ＣＭＶエンハンサー配列に由来する。非限定的な例として、ＣＭＶエンハンサーは、長さが３８２ヌクレオチドである。
非翻訳領域（ＵＴＲ）
定義によれば、遺伝子の野生型非翻訳領域（ＵＴＲ）は、転写されるが、翻訳されない。通常、５’ＵＴＲは、転写開始部位で開始し、開始コドンで終了し、３’ＵＴＲは、終止コドンの直後に開始し、転写のための終結シグナルまで続く。
非翻訳領域（ＵＴＲ）
定義によれば、遺伝子の野生型非翻訳領域（ＵＴＲ）は、転写されるが、翻訳されない。通常、５’ＵＴＲは、転写開始部位で開始し、開始コドンで終了し、３’ＵＴＲは、終止コドンの直後に開始し、転写のための終結シグナルまで続く。
【0067】
特定の標的器官の豊富に発現する遺伝子に典型的に見られる特徴は、安定性及びタンパク質生成を向上させるためにＵＴＲに修飾され得る。非限定的な例として、肝臓において通常発現するｍＲＮＡ（例えば、アルブミン、血清アミロイドＡ、アポリポタンパク質Ａ／Ｂ／Ｅ、トランスフェリン、アルファフェトプロテイン、エリスロポエチン、または第ＶＩＩＩ因子）からの５’ＵＴＲは、肝臓細胞株または肝臓における発現を向上させるために本開示のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムにおいて使用され得る。
【0068】
理論に縛られることを望むものではないが、野生型５’非翻訳領域（ＵＴＲ）は、翻訳開始において役割を果たす特徴を含む。リボソームが多くの遺伝子の翻訳を開始するプロセスに関与することが一般的に知られているコザック配列は通常、５’ＵＴＲに含まれる。コザック配列は、コンセンサスＣＣＲ（Ａ／Ｇ）ＣＣＡＵＧＧ（Ｒは、開始コドン（ＡＴＧ）と、それに続く別の「Ｇ」の３塩基上流のプリン（アデニンまたはグアニンである）を有する。所定の実施形態では、ウイルスゲノムにおける５’ＵＴＲは、コザック配列を含む。所定の実施形態では、ウイルスゲノムにおける５’ＵＴＲは、コザック配列を含まない。
【0069】
理論に縛られることを望むものではないが、野生型３’ＵＴＲは、それに埋め込まれたアデノシン及びウリジンの伸長部を有することが知られている。これらのＡＵリッチシグネチャーは特に、高率のターンオーバーを有する遺伝子において広く見られる。それらの配列特徴及び機能的特性に基づいて、ＡＵリッチエレメント（ＡＲＥ）は、３つのクラスに分けられ得る（Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ，１９９５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＵリッチエレメントに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる））：クラスＩのＡＲＥ、例えば、限定されないが、ｃ－Ｍｙｃ及びＭｙｏＤは、Ｕリッチ領域内のＡＵＵＵＡモチーフのいくつかの分散したコピーを含有する。クラスＩＩのＡＲＥ、例えば、限定されないが、ＧＭ－ＣＳＦ及びＴＮＦ－ａは、２つ以上の重複ＵＵＡＵＵＵＡ（Ｕ／Ａ）（Ｕ／Ａ）九量体を保有する。クラスＩＩＩのＡＲＥ、例えば、限定されないが、ｃ－Ｊｕｎ及びミオゲニンは、あまりよく定義されていない。これらのＵリッチ領域は、ＡＵＵＵＡモチーフを含有しない。ＡＲＥに結合するほとんどのタンパク質は、メッセンジャーを脱安定化することが知られている一方で、ＥＬＡＶファミリーのメンバー、最も特にＨｕＲは、ｍＲＮＡの安定性を増加させることが文書に記載されている。ＨｕＲは、３つのクラスすべてのＡＲＥに結合する。核酸分子の３’ＵＴＲへのＨｕＲ特異的結合部位の修飾は、ＨｕＲ結合、及びこれによるｉｎ ｖｉｖｏでのメッセージの安定化をもたらす。
【0070】
３’ＵＴＲのＡＵリッチエレメント（ＡＲＥ）の導入、除去または改変は、ポリヌクレオチドの安定性を調節するために使用され得る。特定のポリヌクレオチド、（例えば、ウイルスゲノムのペイロード領域）を修飾する場合、安定性がより低いポリヌクレオチドを作製するためにＡＲＥの１つ以上のコピーが導入され得、それにより翻訳を抑制し、得られるタンパク質の生成を減少させる。同様に、ＡＲＥは、細胞内安定性を増加させるために特定され、除去または変異され得、これにより、得られるタンパク質の翻訳及び生成を増加させる。
【0071】
所定の実施形態では、ウイルスゲノムの３’ＵＴＲは、ポリＡテールのテンプレート化付加のためのオリゴ（ｄＴ）配列を含み得る。
所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのｍｉＲＮＡシード、結合部位または全配列を含み得る。マイクロＲＮＡ（またはｍｉＲＮＡもしくはｍｉＲ）は、核酸標的の部位に結合し、かつ核酸分子安定性を減少させることによってまたは翻訳を阻害することによってのいずれかで遺伝子発現を下方制御する１９～２５ヌクレオチドのノンコーディングＲＮＡである。マイクロＲＮＡ配列は、「シード」領域、すなわち、成熟マイクロＲＮＡの位置２～８の領域における配列を含み、その配列は、核酸のｍｉＲＮＡ標的配列と完全なワトソン・クリック相補性を有する。
所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのｍｉＲＮＡシード、結合部位または全配列を含み得る。マイクロＲＮＡ（またはｍｉＲＮＡもしくはｍｉＲ）は、核酸標的の部位に結合し、かつ核酸分子安定性を減少させることによってまたは翻訳を阻害することによってのいずれかで遺伝子発現を下方制御する１９～２５ヌクレオチドのノンコーディングＲＮＡである。マイクロＲＮＡ配列は、「シード」領域、すなわち、成熟マイクロＲＮＡの位置２～８の領域における配列を含み、その配列は、核酸のｍｉＲＮＡ標的配列と完全なワトソン・クリック相補性を有する。
【0072】
所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのｍｉＲＮＡ結合部位、配列またはシード領域を含む、変化させるまたは除去するように修飾され得る。
当該技術分野で知られている任意の遺伝子からの任意のＵＴＲは、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムに組み込まれ得る。これらのＵＴＲ、またはその一部は、それらが選択された遺伝子におけるものと同じ向きで配置され得るか、またはそれらは、向き及び位置において変化され得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムにおいて使用されるＵＴＲは、反転され、短くされ、長くされ、当該技術分野で知られている１つ以上の他の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲを用いて作製され得る。本明細書で使用される場合、用語「変化した」は、ＵＴＲに関する場合、ＵＴＲが参照配列に対して何らかの方法で変更されていることを意味する。例えば、３’または５’ＵＴＲは、上記で教示されているように向きまたは位置の変化によって野生型またはネイティブＵＴＲに対して変化され得、または追加のヌクレオチドの包含、ヌクレオチドの欠失、ヌクレオチドのスワッピングまたは転位によって変化され得る。
当該技術分野で知られている任意の遺伝子からの任意のＵＴＲは、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムに組み込まれ得る。これらのＵＴＲ、またはその一部は、それらが選択された遺伝子におけるものと同じ向きで配置され得るか、またはそれらは、向き及び位置において変化され得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムにおいて使用されるＵＴＲは、反転され、短くされ、長くされ、当該技術分野で知られている１つ以上の他の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲを用いて作製され得る。本明細書で使用される場合、用語「変化した」は、ＵＴＲに関する場合、ＵＴＲが参照配列に対して何らかの方法で変更されていることを意味する。例えば、３’または５’ＵＴＲは、上記で教示されているように向きまたは位置の変化によって野生型またはネイティブＵＴＲに対して変化され得、または追加のヌクレオチドの包含、ヌクレオチドの欠失、ヌクレオチドのスワッピングまたは転位によって変化され得る。
【0073】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、野生型ＵＴＲのバリアントではない少なくとも１つの人工ＵＴＲを含む。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、タンパク質が一般的な機能、構造、特徴または特性を共有する転写産物のファミリーから選択されたＵＴＲを含む。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、タンパク質が一般的な機能、構造、特徴または特性を共有する転写産物のファミリーから選択されたＵＴＲを含む。
【0074】
ポリアデニル化配列
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、少なくとも１つのポリアデニル化配列を含む。ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、ペイロードコーディング配列の３’末端と３’ＩＴＲの５’末端との間にポリアデニル化配列を含み得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、少なくとも１つのポリアデニル化配列を含む。ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、ペイロードコーディング配列の３’末端と３’ＩＴＲの５’末端との間にポリアデニル化配列を含み得る。
【0075】
所定の実施形態では、ポリアデニル化配列または「ポリＡ配列」は、非存在～長さが約５００ヌクレオチドの範囲であり得る。ポリアデニル化配列は、限定されないが、長さが１～５００ヌクレオチド（またはその中の任意の値または範囲）であり得る。
【0076】
所定の実施形態では、ポリアデニル化配列は、長さが１２７ヌクレオチドである。所定の実施形態では、ポリアデニル化配列は、長さが４７７ヌクレオチドである。所定の実施形態では、ポリアデニル化配列は、長さが５５２ヌクレオチドである。
【0077】
リンカー
本開示のウイルスゲノムは、コーディングまたはノンコーディング領域を分離するために１つ以上のスペーサーまたはリンカー領域で修飾され得る。
本開示のウイルスゲノムは、コーディングまたはノンコーディング領域を分離するために１つ以上のスペーサーまたはリンカー領域で修飾され得る。
【0078】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は任意に、１つ以上のリンカー配列をコードし得る。いくつかの場合では、リンカーは、ペイロード領域によってコードされるポリペプチドを接続するために使用され得るペプチドリンカーであり得る。いくつかのペプチドリンカーは、ポリペプチドドメインを分離して、成熟タンパク質断片の集合を可能にするために発現後に切断され得る。リンカーの切断は、酵素的であり得る。いくつかの場合では、リンカーは、細胞内または細胞外切断を容易化するための酵素的切断部位を含む。いくつかのペイロード領域は、ｍＲＮＡ転写産物からのリンカー配列の翻訳中にポリペプチド合成を妨げるリンカーをコードする。そのようなリンカーは、単一の転写産物からの別個のタンパク質ドメイン（例えば、重鎖及び軽鎖抗体ドメイン）の翻訳を容易化し得る。いくつかの場合では、２つ以上のリンカーは、ウイルスゲノムのペイロード領域によってコードされる。
【0079】
所定の実施形態では、ペイロード領域は、フーリン切断部位を含むリンカーをコードする。フーリンは、塩基性アミノ酸標的配列（Ａｒｇ－Ｘ－（Ａｒｇ／Ｌｙｓ）－Ａｒｇ）のすぐ下流のタンパク質を切断するカルシウム依存性セリンエンドプロテアーゼである（Ｔｈｏｍａｓ，Ｇ．，２００２．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ３（１０）：７５３－６６（その内容は、本開示と矛盾しない限り、リンカー分子または配列に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる））。フーリンは、トランスゴルジネットワークに豊富に存在し、ここで細胞性前駆体タンパク質の処理に関与する。フーリンはまた、多数の病原体の活性化において役割を果たす。この活性は、本開示のポリペプチドの発現のために活用され得る。
【0080】
所定の実施形態では、ペイロード領域は、２Ａペプチドを含むリンカーをコードする。２Ａペプチドは、ウイルス、例えば、口蹄疫ウイルス（Ｆ２Ａ）、ブタテシオウイルス－１（Ｐ２Ａ）、Ｔｈｏｓｅａａｓｉｇｎａウイルス（Ｔ２Ａ）、またはウマ鼻炎ウイルス（Ｅ２Ａ）に由来する小さな「自己切断」ペプチド（１８～２２アミノ酸）である。２Ａ称号は、２ＡペプチドのＣ末端においてグリシル－プロリル結合でリボソームスキップをもたらすピコルナウイルスポリタンパク質の領域を具体的に指す（Ｋｉｍ，Ｊ．Ｈ．ｅｔ ａｌ．，２０１１．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ６（４）：ｅ１８５５６（その内容は、本開示と矛盾しない限り、２Ａペプチドリンカーに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる））。このスキップは、２Ａペプチドとそのすぐ下流のペプチドとの間の切断をもたらす。ＩＲＥＳリンカーとは対照的に、２Ａペプチドは、２Ａペプチドを挟むタンパク質の化学量論的発現を生成し、それらのより短い長さは、ウイルス発現ベクターの生成において有利であり得る。
【0081】
所定の実施形態では、ペイロード領域は、ＩＲＥＳを含むリンカーをコードする。内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）は、ｍＲＮＡ配列の中で翻訳の開始を可能にするヌクレオチド配列（＞５００ヌクレオチド）である（Ｋｉｍ，Ｊ．Ｈ．ｅｔ ａｌ．，２０１１．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ６（４）：ｅ１８５５６（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＩＲＥＳ領域及びリンカーに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる））。ＩＲＥＳ配列の使用は、ＩＲＥＳの前及び後の遺伝子の共発現を確保するが、ＩＲＥＳに続く配列は、ＩＲＥＳ配列に先行する配列よりも低いレベルで転写及び翻訳され得る。
【0082】
所定の実施形態では、ペイロード領域は、カテプシン、マトリックスメタロプロテイナーゼまたはレグマイン切断部位を含む１つ以上のリンカーをコードし得る。そのようなリンカーは、国際公開番号ＷＯ２００８０５２３２２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、リンカー分子及び配列に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）においてＣｉｚｅａｕ及びＭａｃｄｏｎａｌｄによって記載されている。カテプシンは、特定のタンパク質を切断するための独自のメカニズムを有するプロテアーゼのファミリーである。カテプシンＢは、システインプロテアーゼであり、カテプシンＤは、アスパルチルプロテアーゼである。マトリックスメタロプロテイナーゼは、カルシウム依存性の亜鉛含有エンドペプチダーゼのファミリーである。レグマインは、タンパク質及び小分子基質の（－Ａｓｎ－Ｘａａ－）結合の加水分解を触媒する酵素である。
【0083】
所定の実施形態では、ペイロード領域は、切断されないリンカーをコードし得る。そのようなリンカーは、単純なアミノ酸配列、例えば、グリシンリッチ配列を含み得る。いくつかの場合では、リンカーは、グリシン及びセリン残基を含むフレキシブルペプチドリンカーを含み得る。これらのフレキシブルリンカーは、小さく、側鎖を有さないので、それらは、抗体セグメント間のフレキシブルリンカーを提供しつつ、二次タンパク質構造に影響を及ぼさない傾向がある（Ｇｅｏｒｇｅ，Ｒ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，２００２．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ １５（１１）：８７１－９；Ｈｕｓｔｏｎ，Ｊ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．，１９８８．ＰＮＡＳ ８５：５８７９－８３；及びＳｈａｎ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．，１９９９．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１６２（１１）：６５８９～９５（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、リンカー分子及び配列に関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）。さらに、セリン残基の極性は、溶解性を改善し、凝集問題を防止する。
【0084】
所定の実施形態では、本開示のペイロード領域は、小さな非分岐セリンリッチペプチドリンカー、例えば、米国特許番号ＵＳ５５２５４９１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、リンカー分子及び配列に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）においてＨｕｓｔｏｎらによって記載されているものをコードし得る。セリンリッチリンカーによって連結される本開示のペイロード領域によってコードされるポリペプチドは、増加した溶解性を有する。
【0085】
所定の実施形態では、本開示のペイロード領域は、人工リンカー、例えば、米国特許番号ＵＳ５８５６４５６においてＷｈｉｔｌｏｗ及びＦｉｌｐｕｌａならびに米国特許番号ＵＳ４９４６７７８においてＬａｄｎｅｒら（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、リンカー分子及び配列に関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）によって記載されているものをコードし得る。
【0086】
所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが１～５０、１～１００、５０～１００、５０～１５０、１００～１５０、１００～２００、１５０～２００、１５０～２５０、２００～２５０、２００～３００、２５０～３００、２５０～３５０、３００～３５０、３００～４００、３５０～４００、３５０～４５０、４００～４５０、４００～５００、４５０～５００、４５０～５５０、５００～５５０、５００～６００、５５０～６００、５５０～６５０、または６００～６５０ヌクレオチドであり得る。リンカー領域は、１～６５０ヌクレオチド（またはその中の任意の値もしくは範囲）、または６５０超の長さを有し得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが１２ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが１８ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが４５ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが５４ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが６６ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが７５ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが７８ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが８７ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが１０８ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが１５３ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが１９８ヌクレオチドであり得る。所定の実施形態では、リンカー領域は、長さが６２３ヌクレオチドであり得る。
【0087】
イントロン及びエクソン
所定の実施形態では、ベクターゲノムは、導入遺伝子の標的特異性及び発現を向上させる少なくとも１つの要素（例えば、Ｐｏｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．Ｖｉｒａｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｃａｓｓｅｔｔｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｔｏ Ｅｎｈａｎｃｅ Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ Ｔａｒｇｅｔ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ，２０１５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、導入遺伝子標的化エンハンサーに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）、例えば、イントロンを含む。イントロンの非限定的な例は、ＭＶＭ（６７～９７ｂｐｓ）、Ｆ．ＩＸ切断型イントロン１（３００ｂｐｓ）、β－グロビンＳＤ／イムノグロブリン重鎖スプライスアクセプター（２５０ｂｐｓ）、アデノウイルススプライスドナー／イムノグロビンスプライスアクセプター（５００ｂｐｓ）、ＳＶ４０レイトスプライスドナー／スプライスアクセプター（１９Ｓ／１６Ｓ）（１８０ｂｐｓ）及びハイブリッドアデノウイルススプライスドナー／ＩｇＧスプライスアクセプター（２３０ｂｐｓ）を含む。
所定の実施形態では、ベクターゲノムは、導入遺伝子の標的特異性及び発現を向上させる少なくとも１つの要素（例えば、Ｐｏｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．Ｖｉｒａｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｃａｓｓｅｔｔｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｔｏ Ｅｎｈａｎｃｅ Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ Ｔａｒｇｅｔ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ，２０１５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、導入遺伝子標的化エンハンサーに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）、例えば、イントロンを含む。イントロンの非限定的な例は、ＭＶＭ（６７～９７ｂｐｓ）、Ｆ．ＩＸ切断型イントロン１（３００ｂｐｓ）、β－グロビンＳＤ／イムノグロブリン重鎖スプライスアクセプター（２５０ｂｐｓ）、アデノウイルススプライスドナー／イムノグロビンスプライスアクセプター（５００ｂｐｓ）、ＳＶ４０レイトスプライスドナー／スプライスアクセプター（１９Ｓ／１６Ｓ）（１８０ｂｐｓ）及びハイブリッドアデノウイルススプライスドナー／ＩｇＧスプライスアクセプター（２３０ｂｐｓ）を含む。
【0088】
所定の実施形態では、イントロンまたはイントロン部分は、長さが１００～５００ヌクレオチドであり得る。イントロンは、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０または５００の長さを有し得る。イントロンは、８０～１００、８０～１２０、８０～１４０、８０～１６０、８０～１８０、８０～２００、８０～２５０、８０～３００、８０～３５０、８０～４００、８０～４５０、８０～５００、２００～３００、２００～４００、２００～５００、３００～４００、３００～５００、または４００～５００の間の長さを有し得る。
【0089】
所定の実施形態では、イントロン領域（複数可）は、独立して、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、及び３５０ヌクレオチドなどであるがこれらに限定されない長さを有し得る。ウイルスゲノムについてのイントロン領域の長さは、２５～３５、２５～５０、３５～４５、４５～５５、５０～７５、５５～６５、６５～７５、７５～８５、７５～１００、８５～９５、９５～１０５、１００～１２５、１０５～１１５、１１５～１２５、１２５～１３５、１２５～１５０、１３５～１４５、１４５～１５５、１５０～１７５、１５５～１６５、１６５～１７５、１７５～１８５、１７５～２００、１８５～１９５、１９５～２０５、２００～２２５、２０５～２１５、２１５～２２５、２２５～２３５、２２５～２５０、２３５～２４５、２４５～２５５、２５０～２７５、２５５～２６５、２６５～２７５、２７５～２８５、２７５～３００、２８５～２９５、２９５～３０５、３００～３２５、３０５～３１５、３１５～３２５、３２５～３３５、３２５～３５０、及び３３５～３４５ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３２ヌクレオチドであるイントロン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１７２ヌクレオチドであるイントロン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約２０１ヌクレオチドであるイントロン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３４７ヌクレオチドであるイントロン領域を含む。
【0090】
所定の実施形態では、イントロン領域は、ＳＶ４０イントロン配列に由来する。非限定的な例として、イントロンは、長さが１７２ヌクレオチドである。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのエクソン領域を有するウイルスゲノムを含み得る。エクソン領域（複数可）は、独立して、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０ヌクレオチドなどであるがこれらに限定されない長さを有し得る。ウイルスゲノムについてのエクソン領域の長さは、２～１０、５～１０、５～１５、１０～２０、１０～３０、１０～４０、１５～２０、１５～２５、２０～３０、２０～４０、２０～５０、２５～３０、２５～３５、３０～４０、３０～５０、３０～６０、３５～４０、３５～４５、４０～５０、４０～６０、４０～７０、４５～５０、４５～５５、５０～６０、５０～７０、５０～８０、５５～６０、５５～６５、６０～７０、６０～８０、６０～９０、６５～７０、６５～７５、７０～８０、７０～９０、７０～１００、７５～８０、７５～８５、８０～９０、８０～１００、８０～１１０、８５～９０、８５～９５、９０～１００、９０～１１０、９０～１２０、９５～１００、９５～１０５、１００～１１０、１００～１２０、１００～１３０、１０５～１１０、１０５～１１５、１１０～１２０、１１０～１３０、１１０～１４０、１１５～１２０、１１５～１２５、１２０～１３０、１２０～１４０、１２０～１５０、１２５～１３０、１２５～１３５、１３０～１４０、１３０～１５０、１３５～１４０、１３５～１４５、１４０～１５０、及び１４５～１５０ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約５３ヌクレオチドであるエクソン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１３４ヌクレオチドであるエクソン領域を含む。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのエクソン領域を有するウイルスゲノムを含み得る。エクソン領域（複数可）は、独立して、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０ヌクレオチドなどであるがこれらに限定されない長さを有し得る。ウイルスゲノムについてのエクソン領域の長さは、２～１０、５～１０、５～１５、１０～２０、１０～３０、１０～４０、１５～２０、１５～２５、２０～３０、２０～４０、２０～５０、２５～３０、２５～３５、３０～４０、３０～５０、３０～６０、３５～４０、３５～４５、４０～５０、４０～６０、４０～７０、４５～５０、４５～５５、５０～６０、５０～７０、５０～８０、５５～６０、５５～６５、６０～７０、６０～８０、６０～９０、６５～７０、６５～７５、７０～８０、７０～９０、７０～１００、７５～８０、７５～８５、８０～９０、８０～１００、８０～１１０、８５～９０、８５～９５、９０～１００、９０～１１０、９０～１２０、９５～１００、９５～１０５、１００～１１０、１００～１２０、１００～１３０、１０５～１１０、１０５～１１５、１１０～１２０、１１０～１３０、１１０～１４０、１１５～１２０、１１５～１２５、１２０～１３０、１２０～１４０、１２０～１５０、１２５～１３０、１２５～１３５、１３０～１４０、１３０～１５０、１３５～１４０、１３５～１４５、１４０～１５０、及び１４５～１５０ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約５３ヌクレオチドであるエクソン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１３４ヌクレオチドであるエクソン領域を含む。
【0091】
スタッファー配列
所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、パッケージング効率及び発現を改善するための少なくとも１つの要素、例えば、スタッファーまたはフィラー配列を含む。スタッファー配列の非限定的な例は、アルブミン及び／またはアルファ－１アンチトリプシンを含む。任意の既知のウイルス、哺乳動物、または植物配列は、スタッファー配列として使用するために操作され得る。
所定の実施形態では、ウイルスゲノムは、パッケージング効率及び発現を改善するための少なくとも１つの要素、例えば、スタッファーまたはフィラー配列を含む。スタッファー配列の非限定的な例は、アルブミン及び／またはアルファ－１アンチトリプシンを含む。任意の既知のウイルス、哺乳動物、または植物配列は、スタッファー配列として使用するために操作され得る。
【0092】
所定の実施形態では、スタッファーまたはフィラー配列は、長さが約１００～３５００ヌクレオチドであり得る。スタッファー配列は、約１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２１００、２２００、２３００、２４００、２５００、２６００、２７００、２８００、２９００または３０００の長さを有し得る。
【0093】
所定の実施形態では、スタッファー／フィラー領域（複数可）は、独立して、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、５００、５０１、５０２、５０３、５０４、５０５、５０６、５０７、５０８、５０９、５１０、５１１、５１２、５１３、５１４、５１５、５１６、５１７、５１８、５１９、５２０、５２１、５２２、５２３、５２４、５２５、５２６、５２７、５２８、５２９、５３０、５３１、５３２、５３３、５３４、５３５、５３６、５３７、５３８、５３９、５４０、５４１、５４２、５４３、５４４、５４５、５４６、５４７、５４８、５４９、５５０、５５１、５５２、５５３、５５４、５５５、５５６、５５７、５５８、５５９、５６０、５６１、５６２、５６３、５６４、５６５、５６６、５６７、５６８、５６９、５７０、５７１、５７２、５７３、５７４、５７５、５７６、５７７、５７８、５７９、５８０、５８１、５８２、５８３、５８４、５８５、５８６、５８７、５８８、５８９、５９０、５９１、５９２、５９３、５９４、５９５、５９６、５９７、５９８、５９９、６００、６０１、６０２、６０３、６０４、６０５、６０６、６０７、６０８、６０９、６１０、６１１、６１２、６１３、６１４、６１５、６１６、６１７、６１８、６１９、６２０、６２１、６２２、６２３、６２４、６２５、６２６、６２７、６２８、６２９、６３０、６３１、６３２、６３３、６３４、６３５、６３６、６３７、６３８、６３９、６４０、６４１、６４２、６４３、６４４、６４５、６４６、６４７、６４８、６４９、６５０、６５１、６５２、６５３、６５４、６５５、６５６、６５７、６５８、６５９、６６０、６６１、６６２、６６３、６６４、６６５、６６６、６６７、６６８、６６９、６７０、６７１、６７２、６７３、６７４、６７５、６７６、６７７、６７８、６７９、６８０、６８１、６８２、６８３、６８４、６８５、６８６、６８７、６８８、６８９、６９０、６９１、６９２、６９３、６９４、６９５、６９６、６９７、６９８、６９９、７００、７０１、７０２、７０３、７０４、７０５、７０６、７０７、７０８、７０９、７１０、７１１、７１２、７１３、７１４、７１５、７１６、７１７、７１８、７１９、７２０、７２１、７２２、７２３、７２４、７２５、７２６、７２７、７２８、７２９、７３０、７３１、７３２、７３３、７３４、７３５、７３６、７３７、７３８、７３９、７４０、７４１、７４２、７４３、７４４、７４５、７４６、７４７、７４８、７４９、７５０、７５１、７５２、７５３、７５４、７５５、７５６、７５７、７５８、７５９、７６０、７６１、７６２、７６３、７６４、７６５、７６６、７６７、７６８、７６９、７７０、７７１、７７２、７７３、７７４、７７５、７７６、７７７、７７８、７７９、７８０、７８１、７８２、７８３、７８４、７８５、７８６、７８７、７８８、７８９、７９０、７９１、７９２、７９３、７９４、７９５、７９６、７９７、７９８、７９９、８００、８０１、８０２、８０３、８０４、８０５、８０６、８０７、８０８、８０９、８１０、８１１、８１２、８１３、８１４、８１５、８１６、８１７、８１８、８１９、８２０、８２１、８２２、８２３、８２４、８２５、８２６、８２７、８２８、８２９、８３０、８３１、８３２、８３３、８３４、８３５、８３６、８３７、８３８、８３９、８４０、８４１、８４２、８４３、８４４、８４５、８４６、８４７、８４８、８４９、８５０、８５１、８５２、８５３、８５４、８５５、８５６、８５７、８５８、８５９、８６０、８６１、８６２、８６３、８６４、８６５、８６６、８６７、８６８、８６９、８７０、８７１、８７２、８７３、８７４、８７５、８７６、８７７、８７８、８７９、８８０、８８１、８８２、８８３、８８４、８８５、８８６、８８７、８８８、８８９、８９０、８９１、８９２、８９３、８９４、８９５、８９６、８９７、８９８、８９９、９００、９０１、９０２、９０３、９０４、９０５、９０６、９０７、９０８、９０９、９１０、９１１、９１２、９１３、９１４、９１５、９１６、９１７、９１８、９１９、９２０、９２１、９２２、９２３、９２４、９２５、９２６、９２７、９２８、９２９、９３０、９３１、９３２、９３３、９３４、９３５、９３６、９３７、９３８、９３９、９４０、９４１、９４２、９４３、９４４、９４５、９４６、９４７、９４８、９４９、９５０、９５１、９５２、９５３、９５４、９５５、９５６、９５７、９５８、９５９、９６０、９６１、９６２、９６３、９６４、９６５、９６６、９６７、９６８、９６９、９７０、９７１、９７２、９７３、９７４、９７５、９７６、９７７、９７８、９７９、９８０、９８１、９８２、９８３、９８４、９８５、９８６、９８７、９８８、９８９、９９０、９９１、９９２、９９３、９９４、９９５、９９６、９９７、９９８、９９９、１０００、１００１、１００２、１００３、１００４、１００５、１００６、１００７、１００８、１００９、１０１０、１０１１、１０１２、１０１３、１０１４、１０１５、１０１６、１０１７、１０１８、１０１９、１０２０、１０２１、１０２２、１０２３、１０２４、１０２５、１０２６、１０２７、１０２８、１０２９、１０３０、１０３１、１０３２、１０３３、１０３４、１０３５、１０３６、１０３７、１０３８、１０３９、１０４０、１０４１、１０４２、１０４３、１０４４、１０４５、１０４６、１０４７、１０４８、１０４９、１０５０、１０５１、１０５２、１０５３、１０５４、１０５５、１０５６、１０５７、１０５８、１０５９、１０６０、１０６１、１０６２、１０６３、１０６４、１０６５、１０６６、１０６７、１０６８、１０６９、１０７０、１０７１、１０７２、１０７３、１０７４、１０７５、１０７６、１０７７、１０７８、１０７９、１０８０、１０８１、１０８２、１０８３、１０８４、１０８５、１０８６、１０８７、１０８８、１０８９、１０９０、１０９１、１０９２、１０９３、１０９４、１０９５、１０９６、１０９７、１０９８、１０９９、１１００、１１０１、１１０２、１１０３、１１０４、１１０５、１１０６、１１０７、１１０８、１１０９、１１１０、１１１１、１１１２、１１１３、１１１４、１１１５、１１１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、１１２３、１１２４、１１２５、１１２６、１１２７、１１２８、１１２９、１１３０、１１３１、１１３２、１１３３、１１３４、１１３５、１１３６、１１３７、１１３８、１１３９、１１４０、１１４１、１１４２、１１４３、１１４４、１１４５、１１４６、１１４７、１１４８、１１４９、１１５０、１１５１、１１５２、１１５３、１１５４、１１５５、１１５６、１１５７、１１５８、１１５９、１１６０、１１６１、１１６２、１１６３、１１６４、１１６５、１１６６、１１６７、１１６８、１１６９、１１７０、１１７１、１１７２、１１７３、１１７４、１１７５、１１７６、１１７７、１１７８、１１７９、１１８０、１１８１、１１８２、１１８３、１１８４、１１８５、１１８６、１１８７、１１８８、１１８９、１１９０、１１９１、１１９２、１１９３、１１９４、１１９５、１１９６、１１９７、１１９８、１１９９、１２００、１２０１、１２０２、１２０３、１２０４、１２０５、１２０６、１２０７、１２０８、１２０９、１２１０、１２１１、１２１２、１２１３、１２１４、１２１５、１２１６、１２１７、１２１８、１２１９、１２２０、１２２１、１２２２、１２２３、１２２４、１２２５、１２２６、１２２７、１２２８、１２２９、１２３０、１２３１、１２３２、１２３３、１２３４、１２３５、１２３６、１２３７、１２３８、１２３９、１２４０、１２４１、１２４２、１２４３、１２４４、１２４５、１２４６、１２４７、１２４８、１２４９、１２５０、１２５１、１２５２、１２５３、１２５４、１２５５、１２５６、１２５７、１２５８、１２５９、１２６０、１２６１、１２６２、１２６３、１２６４、１２６５、１２６６、
１２６７、１２６８、１２６９、１２７０、１２７１、１２７２、１２７３、１２７４、１２７５、１２７６、１２７７、１２７８、１２７９、１２８０、１２８１、１２８２、１２８３、１２８４、１２８５、１２８６、１２８７、１２８８、１２８９、１２９０、１２９１、１２９２、１２９３、１２９４、１２９５、１２９６、１２９７、１２９８、１２９９、１３００、１３０１、１３０２、１３０３、１３０４、１３０５、１３０６、１３０７、１３０８、１３０９、１３１０、１３１１、１３１２、１３１３、１３１４、１３１５、１３１６、１３１７、１３１８、１３１９、１３２０、１３２１、１３２２、１３２３、１３２４、１３２５、１３２６、１３２７、１３２８、１３２９、１３３０、１３３１、１３３２、１３３３、１３３４、１３３５、１３３６、１３３７、１３３８、１３３９、１３４０、１３４１、１３４２、１３４３、１３４４、１３４５、１３４６、１３４７、１３４８、１３４９、１３５０、１３５１、１３５２、１３５３、１３５４、１３５５、１３５６、１３５７、１３５８、１３５９、１３６０、１３６１、１３６２、１３６３、１３６４、１３６５、１３６６、１３６７、１３６８、１３６９、１３７０、１３７１、１３７２、１３７３、１３７４、１３７５、１３７６、１３７７、１３７８、１３７９、１３８０、１３８１、１３８２、１３８３、１３８４、１３８５、１３８６、１３８７、１３８８、１３８９、１３９０、１３９１、１３９２、１３９３、１３９４、１３９５、１３９６、１３９７、１３９８、１３９９、１４００、１４０１、１４０２、１４０３、１４０４、１４０５、１４０６、１４０７、１４０８、１４０９、１４１０、１４１１、１４１２、１４１３、１４１４、１４１５、１４１６、１４１７、１４１８、１４１９、１４２０、１４２１、１４２２、１４２３、１４２４、１４２５、１４２６、１４２７、１４２８、１４２９、１４３０、１４３１、１４３２、１４３３、１４３４、１４３５、１４３６、１４３７、１４３８、１４３９、１４４０、１４４１、１４４２、１４４３、１４４４、１４４５、１４４６、１４４７、１４４８、１４４９、１４５０、１４５１、１４５２、１４５３、１４５４、１４５５、１４５６、１４５７、１４５８、１４５９、１４６０、１４６１、１４６２、１４６３、１４６４、１４６５、１４６６、１４６７、１４６８、１４６９、１４７０、１４７１、１４７２、１４７３、１４７４、１４７５、１４７６、１４７７、１４７８、１４７９、１４８０、１４８１、１４８２、１４８３、１４８４、１４８５、１４８６、１４８７、１４８８、１４８９、１４９０、１４９１、１４９２、１４９３、１４９４、１４９５、１４９６、１４９７、１４９８、１４９９、１５００、１５０１、１５０２、１５０３、１５０４、１５０５、１５０６、１５０７、１５０８、１５０９、１５１０、１５１１、１５１２、１５１３、１５１４、１５１５、１５１６、１５１７、１５１８、１５１９、１５２０、１５２１、１５２２、１５２３、１５２４、１５２５、１５２６、１５２７、１５２８、１５２９、１５３０、１５３１、１５３２、１５３３、１５３４、１５３５、１５３６、１５３７、１５３８、１５３９、１５４０、１５４１、１５４２、１５４３、１５４４、１５４５、１５４６、１５４７、１５４８、１５４９、１５５０、１５５１、１５５２、１５５３、１５５４、１５５５、１５５６、１５５７、１５５８、１５５９、１５６０、１５６１、１５６２、１５６３、１５６４、１５６５、１５６６、１５６７、１５６８、１５６９、１５７０、１５７１、１５７２、１５７３、１５７４、１５７５、１５７６、１５７７、１５７８、１５７９、１５８０、１５８１、１５８２、１５８３、１５８４、１５８５、１５８６、１５８７、１５８８、１５８９、１５９０、１５９１、１５９２、１５９３、１５９４、１５９５、１５９６、１５９７、１５９８、１５９９、１６００、１６０１、１６０２、１６０３、１６０４、１６０５、１６０６、１６０７、１６０８、１６０９、１６１０、１６１１、１６１２、１６１３、１６１４、１６１５、１６１６、１６１７、１６１８、１６１９、１６２０、１６２１、１６２２、１６２３、１６２４、１６２５、１６２６、１６２７、１６２８、１６２９、１６３０、１６３１、１６３２、１６３３、１６３４、１６３５、１６３６、１６３７、１６３８、１６３９、１６４０、１６４１、１６４２、１６４３、１６４４、１６４５、１６４６、１６４７、１６４８、１６４９、１６５０、１６５１、１６５２、１６５３、１６５４、１６５５、１６５６、１６５７、１６５８、１６５９、１６６０、１６６１、１６６２、１６６３、１６６４、１６６５、１６６６、１６６７、１６６８、１６６９、１６７０、１６７１、１６７２、１６７３、１６７４、１６７５、１６７６、１６７７、１６７８、１６７９、１６８０、１６８１、１６８２、１６８３、１６８４、１６８５、１６８６、１６８７、１６８８、１６８９、１６９０、１６９１、１６９２、１６９３、１６９４、１６９５、１６９６、１６９７、１６９８、１６９９、１７００、１７０１、１７０２、１７０３、１７０４、１７０５、１７０６、１７０７、１７０８、１７０９、１７１０、１７１１、１７１２、１７１３、１７１４、１７１５、１７１６、１７１７、１７１８、１７１９、１７２０、１７２１、１７２２、１７２３、１７２４、１７２５、１７２６、１７２７、１７２８、１７２９、１７３０、１７３１、１７３２、１７３３、１７３４、１７３５、１７３６、１７３７、１７３８、１７３９、１７４０、１７４１、１７４２、１７４３、１７４４、１７４５、１７４６、１７４７、１７４８、１７４９、１７５０、１７５１、１７５２、１７５３、１７５４、１７５５、１７５６、１７５７、１７５８、１７５９、１７６０、１７６１、１７６２、１７６３、１７６４、１７６５、１７６６、１７６７、１７６８、１７６９、１７７０、１７７１、１７７２、１７７３、１７７４、１７７５、１７７６、１７７７、１７７８、１７７９、１７８０、１７８１、１７８２、１７８３、１７８４、１７８５、１７８６、１７８７、１７８８、１７８９、１７９０、１７９１、１７９２、１７９３、１７９４、１７９５、１７９６、１７９７、１７９８、１７９９、１８００、１８０１、１８０２、１８０３、１８０４、１８０５、１８０６、１８０７、１８０８、１８０９、１８１０、１８１１、１８１２、１８１３、１８１４、１８１５、１８１６、１８１７、１８１８、１８１９、１８２０、１８２１、１８２２、１８２３、１８２４、１８２５、１８２６、１８２７、１８２８、１８２９、１８３０、１８３１、１８３２、１８３３、１８３４、１８３５、１８３６、１８３７、１８３８、１８３９、１８４０、１８４１、１８４２、１８４３、１８４４、１８４５、１８４６、１８４７、１８４８、１８４９、１８５０、１８５１、１８５２、１８５３、１８５４、１８５５、１８５６、１８５７、１８５８、１８５９、１８６０、１８６１、１８６２、１８６３、１８６４、１８６５、１８６６、１８６７、１８６８、１８６９、１８７０、１８７１、１８７２、１８７３、１８７４、１８７５、１８７６、１８７７、１８７８、１８７９、１８８０、１８８１、１８８２、１８８３、１８８４、１８８５、１８８６、１８８７、１８８８、１８８９、１８９０、１８９１、１８９２、１８９３、１８９４、１８９５、１８９６、１８９７、１８９８、１８９９、１９００、１９０１、１９０２、１９０３、１９０４、１９０５、１９０６、１９０７、１９０８、１９０９、１９１０、１９１１、１９１２、１９１３、１９１４、１９１５、１９１６、１９１７、１９１８、１９１９、１９２０、１９２１、１９２２、１９２３、１９２４、１９２５、１９２６、１９２７、１９２８、１９２９、１９３０、１９３１、１９３２、１９３３、１９３４、１９３５、１９３６、１９３７、１９３８、１９３９、１９４０、１９４１、１９４２、１９４３、１９４４、１９４５、１９４６、１９４７、１９４８、１９４９、１９５０、１９５１、１９５２、１９５３、１９５４、１９５５、１９５６、１９５７、１９５８、１９５９、１９６０、１９６１、１９６２、１９６３、１９６４、１９６５、１９６６、１９６７、１９６８、１９６９、１９７０、１９７１、１９７２、１９７３、１９７４、１９７５、１９７６、１９７７、１９７８、１９７９、１９８０、１９８１、１９８２、１９８３、１９８４、１９８５、１９８６、１９８７、１９８８、１９８９、１９９０、１９９１、１９９２、１９９３、１９９４、１９９５、１９９６、１９９７、１９９８、１９９９、２０００、２００１、２００２、２００３、２００４、２００５、２００６、２００７、２００８、２００９、２０１０、２０１１、２０１２、２０１３、２０１４、２０１５、２０１６、２０１７、２０１８、２０１９、２０２０、２０２１、２０２２、２０２３、２０２４、２０２５、２０２６、２０２７、２０２８、２０２９、２０３０、２０３１、２０３２、２０３３、２０３４、２０３５、２０３６、２０３７、２０３８、２０３９、２０４０、２０４１、２０４２、２０４３、２０４４、２０４５、２０４６、２０４７、２０４８、２０４９、２０５０、２０５１、２０５２、２０５３、２０５４、２０５５、２０５６、２０５７、２０５８、２０５９、２０６０、２０６１、２０６２、２０６３、２０６４、２０６５、２０６６、２０６７、２０６８、２０６９、２０７０、２０７１、２０７２、２０７３、２０７４、２０７５、２０７６、２０７７、２０７８、２０７９、２０８０、２０８１、２０８２、２０８３、２０８４、２０８５、２０８６、２０８７、２０８８、２０８９、２０９０、２０９１、２０９２、２０９３、２０９４、２０９５、２０９６、２０９７、２０９８、２０９９、２１００、２１０１、２１０２、２１０３、２１０４、２１０５、２１０６、２１０７、２１０８、２１０９、２１１０、２１１１、２１１２、２１１３、２１１４、２１１５、２１１６、２１１７、２１１８、２１１９、２１２０、２１２１、２１２２、２１２３、２１２４、２１２５、２１２６、２１２７、２１２８、２１２９、２１３０、２１３１、２１３２、２１３３、２１３４、２１３５、２１３６、２１３７、２１３８、２１３９、２１４０、２１４１、２１４２、２１４３、２１４４、２１４５、２１４６、２１４７、２１４８、２１４９、２１５０、２１５１、２１５２、２１５３、２１５４、２１５５、２１５６、２１５７、２１５８、２１５９、２１６０、２１６１、２１６２、２１６３、２１６４、２１６５、２１６６、２１６７、２１６８、２１６９、２１７０、２１７１、２１７２、２１７３、２１７４、２１７５、２１７６、２１７７、２１７８、２１７９、２１８０、２１８１、２１８２、２１８３、２１８４、２１８５、２１８６、２１８７、２１８８、２１８９、２１９０、２１９１、２１９２、２１９３、２１９４、２１９５、２１９６、２１９７、２１９８、２１９９、２２００、２２０１、２２０２、２２０３、２２０４、２２０５、２２０６、２２０７、２２０８、２２０９、２２１０、２２１１、２２１２、２２１３、２２１４、２２１５、２２１６、２２１７、２２１８、２２１９、２２２０、２２２１、２２２２、２２２３、２２２４、２２２５、２２２６、２２２７、２２２８、２２２９、２２３０、２２３１、２２３２、２２３３、２２３４、２２３５、２２３６、２２３７、２２３８、２２３９、２２４０、２２４１、２２４２、２２４３、２２４４、２２４５、２２４６、２２４７、２２４８、２２４９、２２５０、２２５１、２２５２、２２５３、２２５４、２２５５、２２５６、２２５７、２２５８、２２５９、２２６０、２２６１、２２６２、２２６３、２２６４、２２６５、２２６６、２２６７、２２６８、２２６９、２２７０、２２７１、２２７２、２２７３、２２７４、２２７５、２２７６、２２７７、２２７８、２２７９、２２８０、２２８１、２２８２、２２８３、２２８４、２２８５、２２８６、２２８７、２２８８、２２８９、２２９０、２
２９１、２２９２、２２９３、２２９４、２２９５、２２９６、２２９７、２２９８、２２９９、２３００、２３０１、２３０２、２３０３、２３０４、２３０５、２３０６、２３０７、２３０８、２３０９、２３１０、２３１１、２３１２、２３１３、２３１４、２３１５、２３１６、２３１７、２３１８、２３１９、２３２０、２３２１、２３２２、２３２３、２３２４、２３２５、２３２６、２３２７、２３２８、２３２９、２３３０、２３３１、２３３２、２３３３、２３３４、２３３５、２３３６、２３３７、２３３８、２３３９、２３４０、２３４１、２３４２、２３４３、２３４４、２３４５、２３４６、２３４７、２３４８、２３４９、２３５０、２３５１、２３５２、２３５３、２３５４、２３５５、２３５６、２３５７、２３５８、２３５９、２３６０、２３６１、２３６２、２３６３、２３６４、２３６５、２３６６、２３６７、２３６８、２３６９、２３７０、２３７１、２３７２、２３７３、２３７４、２３７５、２３７６、２３７７、２３７８、２３７９、２３８０、２３８１、２３８２、２３８３、２３８４、２３８５、２３８６、２３８７、２３８８、２３８９、２３９０、２３９１、２３９２、２３９３、２３９４、２３９５、２３９６、２３９７、２３９８、２３９９、２４００、２４０１、２４０２、２４０３、２４０４、２４０５、２４０６、２４０７、２４０８、２４０９、２４１０、２４１１、２４１２、２４１３、２４１４、２４１５、２４１６、２４１７、２４１８、２４１９、２４２０、２４２１、２４２２、２４２３、２４２４、２４２５、２４２６、２４２７、２４２８、２４２９、２４３０、２４３１、２４３２、２４３３、２４３４、２４３５、２４３６、２４３７、２４３８、２４３９、２４４０、２４４１、２４４２、２４４３、２４４４、２４４５、２４４６、２４４７、２４４８、２４４９、２４５０、２４５１、２４５２、２４５３、２４５４、２４５５、２４５６、２４５７、２４５８、２４５９、２４６０、２４６１、２４６２、２４６３、２４６４、２４６５、２４６６、２４６７、２４６８、２４６９、２４７０、２４７１、２４７２、２４７３、２４７４、２４７５、２４７６、２４７７、２４７８、２４７９、２４８０、２４８１、２４８２、２４８３、２４８４、２４８５、２４８６、２４８７、２４８８、２４８９、２４９０、２４９１、２４９２、２４９３、２４９４、２４９５、２４９６、２４９７、２４９８、２４９９、２５００、２５０１、２５０２、２５０３、２５０４、２５０５、２５０６、２５０７、２５０８、２５０９、２５１０、２５１１、２５１２、２５１３、２５１４、２５１５、２５１６、２５１７、２５１８、２５１９、２５２０、２５２１、２５２２、２５２３、２５２４、２５２５、２５２６、２５２７、２５２８、２５２９、２５３０、２５３１、２５３２、２５３３、２５３４、２５３５、２５３６、２５３７、２５３８、２５３９、２５４０、２５４１、２５４２、２５４３、２５４４、２５４５、２５４６、２５４７、２５４８、２５４９、２５５０、２５５１、２５５２、２５５３、２５５４、２５５５、２５５６、２５５７、２５５８、２５５９、２５６０、２５６１、２５６２、２５６３、２５６４、２５６５、２５６６、２５６７、２５６８、２５６９、２５７０、２５７１、２５７２、２５７３、２５７４、２５７５、２５７６、２５７７、２５７８、２５７９、２５８０、２５８１、２５８２、２５８３、２５８４、２５８５、２５８６、２５８７、２５８８、２５８９、２５９０、２５９１、２５９２、２５９３、２５９４、２５９５、２５９６、２５９７、２５９８、２５９９、２６００、２６０１、２６０２、２６０３、２６０４、２６０５、２６０６、２６０７、２６０８、２６０９、２６１０、２６１１、２６１２、２６１３、２６１４、２６１５、２６１６、２６１７、２６１８、２６１９、２６２０、２６２１、２６２２、２６２３、２６２４、２６２５、２６２６、２６２７、２６２８、２６２９、２６３０、２６３１、２６３２、２６３３、２６３４、２６３５、２６３６、２６３７、２６３８、２６３９、２６４０、２６４１、２６４２、２６４３、２６４４、２６４５、２６４６、２６４７、２６４８、２６４９、２６５０、２６５１、２６５２、２６５３、２６５４、２６５５、２６５６、２６５７、２６５８、２６５９、２６６０、２６６１、２６６２、２６６３、２６６４、２６６５、２６６６、２６６７、２６６８、２６６９、２６７０、２６７１、２６７２、２６７３、２６７４、２６７５、２６７６、２６７７、２６７８、２６７９、２６８０、２６８１、２６８２、２６８３、２６８４、２６８５、２６８６、２６８７、２６８８、２６８９、２６９０、２６９１、２６９２、２６９３、２６９４、２６９５、２６９６、２６９７、２６９８、２６９９、２７００、２７０１、２７０２、２７０３、２７０４、２７０５、２７０６、２７０７、２７０８、２７０９、２７１０、２７１１、２７１２、２７１３、２７１４、２７１５、２７１６、２７１７、２７１８、２７１９、２７２０、２７２１、２７２２、２７２３、２７２４、２７２５、２７２６、２７２７、２７２８、２７２９、２７３０、２７３１、２７３２、２７３３、２７３４、２７３５、２７３６、２７３７、２７３８、２７３９、２７４０、２７４１、２７４２、２７４３、２７４４、２７４５、２７４６、２７４７、２７４８、２７４９、２７５０、２７５１、２７５２、２７５３、２７５４、２７５５、２７５６、２７５７、２７５８、２７５９、２７６０、２７６１、２７６２、２７６３、２７６４、２７６５、２７６６、２７６７、２７６８、２７６９、２７７０、２７７１、２７７２、２７７３、２７７４、２７７５、２７７６、２７７７、２７７８、２７７９、２７８０、２７８１、２７８２、２７８３、２７８４、２７８５、２７８６、２７８７、２７８８、２７８９、２７９０、２７９１、２７９２、２７９３、２７９４、２７９５、２７９６、２７９７、２７９８、２７９９、２８００、２８０１、２８０２、２８０３、２８０４、２８０５、２８０６、２８０７、２８０８、２８０９、２８１０、２８１１、２８１２、２８１３、２８１４、２８１５、２８１６、２８１７、２８１８、２８１９、２８２０、２８２１、２８２２、２８２３、２８２４、２８２５、２８２６、２８２７、２８２８、２８２９、２８３０、２８３１、２８３２、２８３３、２８３４、２８３５、２８３６、２８３７、２８３８、２８３９、２８４０、２８４１、２８４２、２８４３、２８４４、２８４５、２８４６、２８４７、２８４８、２８４９、２８５０、２８５１、２８５２、２８５３、２８５４、２８５５、２８５６、２８５７、２８５８、２８５９、２８６０、２８６１、２８６２、２８６３、２８６４、２８６５、２８６６、２８６７、２８６８、２８６９、２８７０、２８７１、２８７２、２８７３、２８７４、２８７５、２８７６、２８７７、２８７８、２８７９、２８８０、２８８１、２８８２、２８８３、２８８４、２８８５、２８８６、２８８７、２８８８、２８８９、２８９０、２８９１、２８９２、２８９３、２８９４、２８９５、２８９６、２８９７、２８９８、２８９９、２９００、２９０１、２９０２、２９０３、２９０４、２９０５、２９０６、２９０７、２９０８、２９０９、２９１０、２９１１、２９１２、２９１３、２９１４、２９１５、２９１６、２９１７、２９１８、２９１９、２９２０、２９２１、２９２２、２９２３、２９２４、２９２５、２９２６、２９２７、２９２８、２９２９、２９３０、２９３１、２９３２、２９３３、２９３４、２９３５、２９３６、２９３７、２９３８、２９３９、２９４０、２９４１、２９４２、２９４３、２９４４、２９４５、２９４６、２９４７、２９４８、２９４９、２９５０、２９５１、２９５２、２９５３、２９５４、２９５５、２９５６、２９５７、２９５８、２９５９、２９６０、２９６１、２９６２、２９６３、２９６４、２９６５、２９６６、２９６７、２９６８、２９６９、２９７０、２９７１、２９７２、２９７３、２９７４、２９７５、２９７６、２９７７、２９７８、２９７９、２９８０、２９８１、２９８２、２９８３、２９８４、２９８５、２９８６、２９８７、２９８８、２９８９、２９９０、２９９１、２９９２、２９９３、２９９４、２９９５、２９９６、２９９７、２９９８、２９９９、３０００、３００１、３００２、３００３、３００４、３００５、３００６、３００７、３００８、３００９、３０１０、３０１１、３０１２、３０１３、３０１４、３０１５、３０１６、３０１７、３０１８、３０１９、３０２０、３０２１、３０２２、３０２３、３０２４、３０２５、３０２６、３０２７、３０２８、３０２９、３０３０、３０３１、３０３２、３０３３、３０３４、３０３５、３０３６、３０３７、３０３８、３０３９、３０４０、３０４１、３０４２、３０４３、３０４４、３０４５、３０４６、３０４７、３０４８、３０４９、３０５０、３０５１、３０５２、３０５３、３０５４、３０５５、３０５６、３０５７、３０５８、３０５９、３０６０、３０６１、３０６２、３０６３、３０６４、３０６５、３０６６、３０６７、３０６８、３０６９、３０７０、３０７１、３０７２、３０７３、３０７４、３０７５、３０７６、３０７７、３０７８、３０７９、３０８０、３０８１、３０８２、３０８３、３０８４、３０８５、３０８６、３０８７、３０８８、３０８９、３０９０、３０９１、３０９２、３０９３、３０９４、３０９５、３０９６、３０９７、３０９８、３０９９、３１００、３１０１、３１０２、３１０３、３１０４、３１０５、３１０６、３１０７、３１０８、３１０９、３１１０、３１１１、３１１２、３１１３、３１１４、３１１５、３１１６、３１１７、３１１８、３１１９、３１２０、３１２１、３１２２、３１２３、３１２４、３１２５、３１２６、３１２７、３１２８、３１２９、３１３０、３１３１、３１３２、３１３３、３１３４、３１３５、３１３６、３１３７、３１３８、３１３９、３１４０、３１４１、３１４２、３１４３、３１４４、３１４５、３１４６、３１４７、３１４８、３１４９、３１５０、３１５１、３１５２、３１５３、３１５４、３１５５、３１５６、３１５７、３１５８、３１５９、３１６０、３１６１、３１６２、３１６３、３１６４、３１６５、３１６６、３１６７、３１６８、３１６９、３１７０、３１７１、３１７２、３１７３、３１７４、３１７５、３１７６、３１７７、３１７８、３１７９、３１８０、３１８１、３１８２、３１８３、３１８４、３１８５、３１８６、３１８７、３１８８、３１８９、３１９０、３１９１、３１９２、３１９３、３１９４、３１９５、３１９６、３１９７、３１９８、３１９９、３２００、３２０１、３２０２、３２０３、３２０４、３２０５、３２０６、３２０７、３２０８、３２０９、３２１０、３２１１、３２１２、３２１３、３２１４、３２１５、３２１６、３２１７、３２１８、３２１９、３２２０、３２２１、３２２２、３２２３、３２２４、３２２５、３２２６、３２２７、３２２８、３２２９、３２３０、３２３１、３２３２、３２３３、３２３４、３２３５、３２３６、３２３７、３２３８、３２３９、３２４０、３２４１、３２４２、３２４３、３２４４、３２４５、３２４６、３２４７、３２４８、３２４９、及び３２５０ヌクレオチドなどであるがこれらに限定されない長さを有し得る。ウイルスゲノムについての任意のフィラー領域の長さは、５０～１００、１００～１５０、１５０～２００、２００～２５０、２５０～３００、３００～３５０、３５０～４００、４００～４５０、４５０～５００、５００～５５０、５５０～６００、６００～６５０、６５０～７００、７００～７５０、７５０～８００、８００～８５０、８５０～９００、９００～９５０、９５０～１０００、１０００～１０５０、１０５０～１１００、１１００～１１５０、１１５０～１２００、１２００～１２５０、１２５０～１３００、１３００～１３５０、１３５０～１４００、１４００～１４５０、１４５０～１５００、１５００～１５５０、１５５
０～１６００、１６００～１６５０、１６５０～１７００、１７００～１７５０、１７５０～１８００、１８００～１８５０、１８５０～１９００、１９００～１９５０、１９５０～２０００、２０００～２０５０、２０５０～２１００、２１００～２１５０、２１５０～２２００、２２００～２２５０、２２５０～２３００、２３００～２３５０、２３５０～２４００、２４００～２４５０、２４５０～２５００、２５００～２５５０、２５５０～２６００、２６００～２６５０、２６５０～２７００、２７００～２７５０、２７５０～２８００、２８００～２８５０、２８５０～２９００、２９００～２９５０、２９５０～３０００、３０００～３０５０、３０５０～３１００、３１００～３１５０、３１５０～３２００、及び３２００～３２５０ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約５５ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約５６ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約９７ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１０３ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１０５ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３５７ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３６３ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約７１２ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約７１４ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１２０３ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１２０９ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１５１２ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１５１９ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約２３９５ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約２４０３ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約２４０５ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３０１３ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３０２１ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。
１２６７、１２６８、１２６９、１２７０、１２７１、１２７２、１２７３、１２７４、１２７５、１２７６、１２７７、１２７８、１２７９、１２８０、１２８１、１２８２、１２８３、１２８４、１２８５、１２８６、１２８７、１２８８、１２８９、１２９０、１２９１、１２９２、１２９３、１２９４、１２９５、１２９６、１２９７、１２９８、１２９９、１３００、１３０１、１３０２、１３０３、１３０４、１３０５、１３０６、１３０７、１３０８、１３０９、１３１０、１３１１、１３１２、１３１３、１３１４、１３１５、１３１６、１３１７、１３１８、１３１９、１３２０、１３２１、１３２２、１３２３、１３２４、１３２５、１３２６、１３２７、１３２８、１３２９、１３３０、１３３１、１３３２、１３３３、１３３４、１３３５、１３３６、１３３７、１３３８、１３３９、１３４０、１３４１、１３４２、１３４３、１３４４、１３４５、１３４６、１３４７、１３４８、１３４９、１３５０、１３５１、１３５２、１３５３、１３５４、１３５５、１３５６、１３５７、１３５８、１３５９、１３６０、１３６１、１３６２、１３６３、１３６４、１３６５、１３６６、１３６７、１３６８、１３６９、１３７０、１３７１、１３７２、１３７３、１３７４、１３７５、１３７６、１３７７、１３７８、１３７９、１３８０、１３８１、１３８２、１３８３、１３８４、１３８５、１３８６、１３８７、１３８８、１３８９、１３９０、１３９１、１３９２、１３９３、１３９４、１３９５、１３９６、１３９７、１３９８、１３９９、１４００、１４０１、１４０２、１４０３、１４０４、１４０５、１４０６、１４０７、１４０８、１４０９、１４１０、１４１１、１４１２、１４１３、１４１４、１４１５、１４１６、１４１７、１４１８、１４１９、１４２０、１４２１、１４２２、１４２３、１４２４、１４２５、１４２６、１４２７、１４２８、１４２９、１４３０、１４３１、１４３２、１４３３、１４３４、１４３５、１４３６、１４３７、１４３８、１４３９、１４４０、１４４１、１４４２、１４４３、１４４４、１４４５、１４４６、１４４７、１４４８、１４４９、１４５０、１４５１、１４５２、１４５３、１４５４、１４５５、１４５６、１４５７、１４５８、１４５９、１４６０、１４６１、１４６２、１４６３、１４６４、１４６５、１４６６、１４６７、１４６８、１４６９、１４７０、１４７１、１４７２、１４７３、１４７４、１４７５、１４７６、１４７７、１４７８、１４７９、１４８０、１４８１、１４８２、１４８３、１４８４、１４８５、１４８６、１４８７、１４８８、１４８９、１４９０、１４９１、１４９２、１４９３、１４９４、１４９５、１４９６、１４９７、１４９８、１４９９、１５００、１５０１、１５０２、１５０３、１５０４、１５０５、１５０６、１５０７、１５０８、１５０９、１５１０、１５１１、１５１２、１５１３、１５１４、１５１５、１５１６、１５１７、１５１８、１５１９、１５２０、１５２１、１５２２、１５２３、１５２４、１５２５、１５２６、１５２７、１５２８、１５２９、１５３０、１５３１、１５３２、１５３３、１５３４、１５３５、１５３６、１５３７、１５３８、１５３９、１５４０、１５４１、１５４２、１５４３、１５４４、１５４５、１５４６、１５４７、１５４８、１５４９、１５５０、１５５１、１５５２、１５５３、１５５４、１５５５、１５５６、１５５７、１５５８、１５５９、１５６０、１５６１、１５６２、１５６３、１５６４、１５６５、１５６６、１５６７、１５６８、１５６９、１５７０、１５７１、１５７２、１５７３、１５７４、１５７５、１５７６、１５７７、１５７８、１５７９、１５８０、１５８１、１５８２、１５８３、１５８４、１５８５、１５８６、１５８７、１５８８、１５８９、１５９０、１５９１、１５９２、１５９３、１５９４、１５９５、１５９６、１５９７、１５９８、１５９９、１６００、１６０１、１６０２、１６０３、１６０４、１６０５、１６０６、１６０７、１６０８、１６０９、１６１０、１６１１、１６１２、１６１３、１６１４、１６１５、１６１６、１６１７、１６１８、１６１９、１６２０、１６２１、１６２２、１６２３、１６２４、１６２５、１６２６、１６２７、１６２８、１６２９、１６３０、１６３１、１６３２、１６３３、１６３４、１６３５、１６３６、１６３７、１６３８、１６３９、１６４０、１６４１、１６４２、１６４３、１６４４、１６４５、１６４６、１６４７、１６４８、１６４９、１６５０、１６５１、１６５２、１６５３、１６５４、１６５５、１６５６、１６５７、１６５８、１６５９、１６６０、１６６１、１６６２、１６６３、１６６４、１６６５、１６６６、１６６７、１６６８、１６６９、１６７０、１６７１、１６７２、１６７３、１６７４、１６７５、１６７６、１６７７、１６７８、１６７９、１６８０、１６８１、１６８２、１６８３、１６８４、１６８５、１６８６、１６８７、１６８８、１６８９、１６９０、１６９１、１６９２、１６９３、１６９４、１６９５、１６９６、１６９７、１６９８、１６９９、１７００、１７０１、１７０２、１７０３、１７０４、１７０５、１７０６、１７０７、１７０８、１７０９、１７１０、１７１１、１７１２、１７１３、１７１４、１７１５、１７１６、１７１７、１７１８、１７１９、１７２０、１７２１、１７２２、１７２３、１７２４、１７２５、１７２６、１７２７、１７２８、１７２９、１７３０、１７３１、１７３２、１７３３、１７３４、１７３５、１７３６、１７３７、１７３８、１７３９、１７４０、１７４１、１７４２、１７４３、１７４４、１７４５、１７４６、１７４７、１７４８、１７４９、１７５０、１７５１、１７５２、１７５３、１７５４、１７５５、１７５６、１７５７、１７５８、１７５９、１７６０、１７６１、１７６２、１７６３、１７６４、１７６５、１７６６、１７６７、１７６８、１７６９、１７７０、１７７１、１７７２、１７７３、１７７４、１７７５、１７７６、１７７７、１７７８、１７７９、１７８０、１７８１、１７８２、１７８３、１７８４、１７８５、１７８６、１７８７、１７８８、１７８９、１７９０、１７９１、１７９２、１７９３、１７９４、１７９５、１７９６、１７９７、１７９８、１７９９、１８００、１８０１、１８０２、１８０３、１８０４、１８０５、１８０６、１８０７、１８０８、１８０９、１８１０、１８１１、１８１２、１８１３、１８１４、１８１５、１８１６、１８１７、１８１８、１８１９、１８２０、１８２１、１８２２、１８２３、１８２４、１８２５、１８２６、１８２７、１８２８、１８２９、１８３０、１８３１、１８３２、１８３３、１８３４、１８３５、１８３６、１８３７、１８３８、１８３９、１８４０、１８４１、１８４２、１８４３、１８４４、１８４５、１８４６、１８４７、１８４８、１８４９、１８５０、１８５１、１８５２、１８５３、１８５４、１８５５、１８５６、１８５７、１８５８、１８５９、１８６０、１８６１、１８６２、１８６３、１８６４、１８６５、１８６６、１８６７、１８６８、１８６９、１８７０、１８７１、１８７２、１８７３、１８７４、１８７５、１８７６、１８７７、１８７８、１８７９、１８８０、１８８１、１８８２、１８８３、１８８４、１８８５、１８８６、１８８７、１８８８、１８８９、１８９０、１８９１、１８９２、１８９３、１８９４、１８９５、１８９６、１８９７、１８９８、１８９９、１９００、１９０１、１９０２、１９０３、１９０４、１９０５、１９０６、１９０７、１９０８、１９０９、１９１０、１９１１、１９１２、１９１３、１９１４、１９１５、１９１６、１９１７、１９１８、１９１９、１９２０、１９２１、１９２２、１９２３、１９２４、１９２５、１９２６、１９２７、１９２８、１９２９、１９３０、１９３１、１９３２、１９３３、１９３４、１９３５、１９３６、１９３７、１９３８、１９３９、１９４０、１９４１、１９４２、１９４３、１９４４、１９４５、１９４６、１９４７、１９４８、１９４９、１９５０、１９５１、１９５２、１９５３、１９５４、１９５５、１９５６、１９５７、１９５８、１９５９、１９６０、１９６１、１９６２、１９６３、１９６４、１９６５、１９６６、１９６７、１９６８、１９６９、１９７０、１９７１、１９７２、１９７３、１９７４、１９７５、１９７６、１９７７、１９７８、１９７９、１９８０、１９８１、１９８２、１９８３、１９８４、１９８５、１９８６、１９８７、１９８８、１９８９、１９９０、１９９１、１９９２、１９９３、１９９４、１９９５、１９９６、１９９７、１９９８、１９９９、２０００、２００１、２００２、２００３、２００４、２００５、２００６、２００７、２００８、２００９、２０１０、２０１１、２０１２、２０１３、２０１４、２０１５、２０１６、２０１７、２０１８、２０１９、２０２０、２０２１、２０２２、２０２３、２０２４、２０２５、２０２６、２０２７、２０２８、２０２９、２０３０、２０３１、２０３２、２０３３、２０３４、２０３５、２０３６、２０３７、２０３８、２０３９、２０４０、２０４１、２０４２、２０４３、２０４４、２０４５、２０４６、２０４７、２０４８、２０４９、２０５０、２０５１、２０５２、２０５３、２０５４、２０５５、２０５６、２０５７、２０５８、２０５９、２０６０、２０６１、２０６２、２０６３、２０６４、２０６５、２０６６、２０６７、２０６８、２０６９、２０７０、２０７１、２０７２、２０７３、２０７４、２０７５、２０７６、２０７７、２０７８、２０７９、２０８０、２０８１、２０８２、２０８３、２０８４、２０８５、２０８６、２０８７、２０８８、２０８９、２０９０、２０９１、２０９２、２０９３、２０９４、２０９５、２０９６、２０９７、２０９８、２０９９、２１００、２１０１、２１０２、２１０３、２１０４、２１０５、２１０６、２１０７、２１０８、２１０９、２１１０、２１１１、２１１２、２１１３、２１１４、２１１５、２１１６、２１１７、２１１８、２１１９、２１２０、２１２１、２１２２、２１２３、２１２４、２１２５、２１２６、２１２７、２１２８、２１２９、２１３０、２１３１、２１３２、２１３３、２１３４、２１３５、２１３６、２１３７、２１３８、２１３９、２１４０、２１４１、２１４２、２１４３、２１４４、２１４５、２１４６、２１４７、２１４８、２１４９、２１５０、２１５１、２１５２、２１５３、２１５４、２１５５、２１５６、２１５７、２１５８、２１５９、２１６０、２１６１、２１６２、２１６３、２１６４、２１６５、２１６６、２１６７、２１６８、２１６９、２１７０、２１７１、２１７２、２１７３、２１７４、２１７５、２１７６、２１７７、２１７８、２１７９、２１８０、２１８１、２１８２、２１８３、２１８４、２１８５、２１８６、２１８７、２１８８、２１８９、２１９０、２１９１、２１９２、２１９３、２１９４、２１９５、２１９６、２１９７、２１９８、２１９９、２２００、２２０１、２２０２、２２０３、２２０４、２２０５、２２０６、２２０７、２２０８、２２０９、２２１０、２２１１、２２１２、２２１３、２２１４、２２１５、２２１６、２２１７、２２１８、２２１９、２２２０、２２２１、２２２２、２２２３、２２２４、２２２５、２２２６、２２２７、２２２８、２２２９、２２３０、２２３１、２２３２、２２３３、２２３４、２２３５、２２３６、２２３７、２２３８、２２３９、２２４０、２２４１、２２４２、２２４３、２２４４、２２４５、２２４６、２２４７、２２４８、２２４９、２２５０、２２５１、２２５２、２２５３、２２５４、２２５５、２２５６、２２５７、２２５８、２２５９、２２６０、２２６１、２２６２、２２６３、２２６４、２２６５、２２６６、２２６７、２２６８、２２６９、２２７０、２２７１、２２７２、２２７３、２２７４、２２７５、２２７６、２２７７、２２７８、２２７９、２２８０、２２８１、２２８２、２２８３、２２８４、２２８５、２２８６、２２８７、２２８８、２２８９、２２９０、２
２９１、２２９２、２２９３、２２９４、２２９５、２２９６、２２９７、２２９８、２２９９、２３００、２３０１、２３０２、２３０３、２３０４、２３０５、２３０６、２３０７、２３０８、２３０９、２３１０、２３１１、２３１２、２３１３、２３１４、２３１５、２３１６、２３１７、２３１８、２３１９、２３２０、２３２１、２３２２、２３２３、２３２４、２３２５、２３２６、２３２７、２３２８、２３２９、２３３０、２３３１、２３３２、２３３３、２３３４、２３３５、２３３６、２３３７、２３３８、２３３９、２３４０、２３４１、２３４２、２３４３、２３４４、２３４５、２３４６、２３４７、２３４８、２３４９、２３５０、２３５１、２３５２、２３５３、２３５４、２３５５、２３５６、２３５７、２３５８、２３５９、２３６０、２３６１、２３６２、２３６３、２３６４、２３６５、２３６６、２３６７、２３６８、２３６９、２３７０、２３７１、２３７２、２３７３、２３７４、２３７５、２３７６、２３７７、２３７８、２３７９、２３８０、２３８１、２３８２、２３８３、２３８４、２３８５、２３８６、２３８７、２３８８、２３８９、２３９０、２３９１、２３９２、２３９３、２３９４、２３９５、２３９６、２３９７、２３９８、２３９９、２４００、２４０１、２４０２、２４０３、２４０４、２４０５、２４０６、２４０７、２４０８、２４０９、２４１０、２４１１、２４１２、２４１３、２４１４、２４１５、２４１６、２４１７、２４１８、２４１９、２４２０、２４２１、２４２２、２４２３、２４２４、２４２５、２４２６、２４２７、２４２８、２４２９、２４３０、２４３１、２４３２、２４３３、２４３４、２４３５、２４３６、２４３７、２４３８、２４３９、２４４０、２４４１、２４４２、２４４３、２４４４、２４４５、２４４６、２４４７、２４４８、２４４９、２４５０、２４５１、２４５２、２４５３、２４５４、２４５５、２４５６、２４５７、２４５８、２４５９、２４６０、２４６１、２４６２、２４６３、２４６４、２４６５、２４６６、２４６７、２４６８、２４６９、２４７０、２４７１、２４７２、２４７３、２４７４、２４７５、２４７６、２４７７、２４７８、２４７９、２４８０、２４８１、２４８２、２４８３、２４８４、２４８５、２４８６、２４８７、２４８８、２４８９、２４９０、２４９１、２４９２、２４９３、２４９４、２４９５、２４９６、２４９７、２４９８、２４９９、２５００、２５０１、２５０２、２５０３、２５０４、２５０５、２５０６、２５０７、２５０８、２５０９、２５１０、２５１１、２５１２、２５１３、２５１４、２５１５、２５１６、２５１７、２５１８、２５１９、２５２０、２５２１、２５２２、２５２３、２５２４、２５２５、２５２６、２５２７、２５２８、２５２９、２５３０、２５３１、２５３２、２５３３、２５３４、２５３５、２５３６、２５３７、２５３８、２５３９、２５４０、２５４１、２５４２、２５４３、２５４４、２５４５、２５４６、２５４７、２５４８、２５４９、２５５０、２５５１、２５５２、２５５３、２５５４、２５５５、２５５６、２５５７、２５５８、２５５９、２５６０、２５６１、２５６２、２５６３、２５６４、２５６５、２５６６、２５６７、２５６８、２５６９、２５７０、２５７１、２５７２、２５７３、２５７４、２５７５、２５７６、２５７７、２５７８、２５７９、２５８０、２５８１、２５８２、２５８３、２５８４、２５８５、２５８６、２５８７、２５８８、２５８９、２５９０、２５９１、２５９２、２５９３、２５９４、２５９５、２５９６、２５９７、２５９８、２５９９、２６００、２６０１、２６０２、２６０３、２６０４、２６０５、２６０６、２６０７、２６０８、２６０９、２６１０、２６１１、２６１２、２６１３、２６１４、２６１５、２６１６、２６１７、２６１８、２６１９、２６２０、２６２１、２６２２、２６２３、２６２４、２６２５、２６２６、２６２７、２６２８、２６２９、２６３０、２６３１、２６３２、２６３３、２６３４、２６３５、２６３６、２６３７、２６３８、２６３９、２６４０、２６４１、２６４２、２６４３、２６４４、２６４５、２６４６、２６４７、２６４８、２６４９、２６５０、２６５１、２６５２、２６５３、２６５４、２６５５、２６５６、２６５７、２６５８、２６５９、２６６０、２６６１、２６６２、２６６３、２６６４、２６６５、２６６６、２６６７、２６６８、２６６９、２６７０、２６７１、２６７２、２６７３、２６７４、２６７５、２６７６、２６７７、２６７８、２６７９、２６８０、２６８１、２６８２、２６８３、２６８４、２６８５、２６８６、２６８７、２６８８、２６８９、２６９０、２６９１、２６９２、２６９３、２６９４、２６９５、２６９６、２６９７、２６９８、２６９９、２７００、２７０１、２７０２、２７０３、２７０４、２７０５、２７０６、２７０７、２７０８、２７０９、２７１０、２７１１、２７１２、２７１３、２７１４、２７１５、２７１６、２７１７、２７１８、２７１９、２７２０、２７２１、２７２２、２７２３、２７２４、２７２５、２７２６、２７２７、２７２８、２７２９、２７３０、２７３１、２７３２、２７３３、２７３４、２７３５、２７３６、２７３７、２７３８、２７３９、２７４０、２７４１、２７４２、２７４３、２７４４、２７４５、２７４６、２７４７、２７４８、２７４９、２７５０、２７５１、２７５２、２７５３、２７５４、２７５５、２７５６、２７５７、２７５８、２７５９、２７６０、２７６１、２７６２、２７６３、２７６４、２７６５、２７６６、２７６７、２７６８、２７６９、２７７０、２７７１、２７７２、２７７３、２７７４、２７７５、２７７６、２７７７、２７７８、２７７９、２７８０、２７８１、２７８２、２７８３、２７８４、２７８５、２７８６、２７８７、２７８８、２７８９、２７９０、２７９１、２７９２、２７９３、２７９４、２７９５、２７９６、２７９７、２７９８、２７９９、２８００、２８０１、２８０２、２８０３、２８０４、２８０５、２８０６、２８０７、２８０８、２８０９、２８１０、２８１１、２８１２、２８１３、２８１４、２８１５、２８１６、２８１７、２８１８、２８１９、２８２０、２８２１、２８２２、２８２３、２８２４、２８２５、２８２６、２８２７、２８２８、２８２９、２８３０、２８３１、２８３２、２８３３、２８３４、２８３５、２８３６、２８３７、２８３８、２８３９、２８４０、２８４１、２８４２、２８４３、２８４４、２８４５、２８４６、２８４７、２８４８、２８４９、２８５０、２８５１、２８５２、２８５３、２８５４、２８５５、２８５６、２８５７、２８５８、２８５９、２８６０、２８６１、２８６２、２８６３、２８６４、２８６５、２８６６、２８６７、２８６８、２８６９、２８７０、２８７１、２８７２、２８７３、２８７４、２８７５、２８７６、２８７７、２８７８、２８７９、２８８０、２８８１、２８８２、２８８３、２８８４、２８８５、２８８６、２８８７、２８８８、２８８９、２８９０、２８９１、２８９２、２８９３、２８９４、２８９５、２８９６、２８９７、２８９８、２８９９、２９００、２９０１、２９０２、２９０３、２９０４、２９０５、２９０６、２９０７、２９０８、２９０９、２９１０、２９１１、２９１２、２９１３、２９１４、２９１５、２９１６、２９１７、２９１８、２９１９、２９２０、２９２１、２９２２、２９２３、２９２４、２９２５、２９２６、２９２７、２９２８、２９２９、２９３０、２９３１、２９３２、２９３３、２９３４、２９３５、２９３６、２９３７、２９３８、２９３９、２９４０、２９４１、２９４２、２９４３、２９４４、２９４５、２９４６、２９４７、２９４８、２９４９、２９５０、２９５１、２９５２、２９５３、２９５４、２９５５、２９５６、２９５７、２９５８、２９５９、２９６０、２９６１、２９６２、２９６３、２９６４、２９６５、２９６６、２９６７、２９６８、２９６９、２９７０、２９７１、２９７２、２９７３、２９７４、２９７５、２９７６、２９７７、２９７８、２９７９、２９８０、２９８１、２９８２、２９８３、２９８４、２９８５、２９８６、２９８７、２９８８、２９８９、２９９０、２９９１、２９９２、２９９３、２９９４、２９９５、２９９６、２９９７、２９９８、２９９９、３０００、３００１、３００２、３００３、３００４、３００５、３００６、３００７、３００８、３００９、３０１０、３０１１、３０１２、３０１３、３０１４、３０１５、３０１６、３０１７、３０１８、３０１９、３０２０、３０２１、３０２２、３０２３、３０２４、３０２５、３０２６、３０２７、３０２８、３０２９、３０３０、３０３１、３０３２、３０３３、３０３４、３０３５、３０３６、３０３７、３０３８、３０３９、３０４０、３０４１、３０４２、３０４３、３０４４、３０４５、３０４６、３０４７、３０４８、３０４９、３０５０、３０５１、３０５２、３０５３、３０５４、３０５５、３０５６、３０５７、３０５８、３０５９、３０６０、３０６１、３０６２、３０６３、３０６４、３０６５、３０６６、３０６７、３０６８、３０６９、３０７０、３０７１、３０７２、３０７３、３０７４、３０７５、３０７６、３０７７、３０７８、３０７９、３０８０、３０８１、３０８２、３０８３、３０８４、３０８５、３０８６、３０８７、３０８８、３０８９、３０９０、３０９１、３０９２、３０９３、３０９４、３０９５、３０９６、３０９７、３０９８、３０９９、３１００、３１０１、３１０２、３１０３、３１０４、３１０５、３１０６、３１０７、３１０８、３１０９、３１１０、３１１１、３１１２、３１１３、３１１４、３１１５、３１１６、３１１７、３１１８、３１１９、３１２０、３１２１、３１２２、３１２３、３１２４、３１２５、３１２６、３１２７、３１２８、３１２９、３１３０、３１３１、３１３２、３１３３、３１３４、３１３５、３１３６、３１３７、３１３８、３１３９、３１４０、３１４１、３１４２、３１４３、３１４４、３１４５、３１４６、３１４７、３１４８、３１４９、３１５０、３１５１、３１５２、３１５３、３１５４、３１５５、３１５６、３１５７、３１５８、３１５９、３１６０、３１６１、３１６２、３１６３、３１６４、３１６５、３１６６、３１６７、３１６８、３１６９、３１７０、３１７１、３１７２、３１７３、３１７４、３１７５、３１７６、３１７７、３１７８、３１７９、３１８０、３１８１、３１８２、３１８３、３１８４、３１８５、３１８６、３１８７、３１８８、３１８９、３１９０、３１９１、３１９２、３１９３、３１９４、３１９５、３１９６、３１９７、３１９８、３１９９、３２００、３２０１、３２０２、３２０３、３２０４、３２０５、３２０６、３２０７、３２０８、３２０９、３２１０、３２１１、３２１２、３２１３、３２１４、３２１５、３２１６、３２１７、３２１８、３２１９、３２２０、３２２１、３２２２、３２２３、３２２４、３２２５、３２２６、３２２７、３２２８、３２２９、３２３０、３２３１、３２３２、３２３３、３２３４、３２３５、３２３６、３２３７、３２３８、３２３９、３２４０、３２４１、３２４２、３２４３、３２４４、３２４５、３２４６、３２４７、３２４８、３２４９、及び３２５０ヌクレオチドなどであるがこれらに限定されない長さを有し得る。ウイルスゲノムについての任意のフィラー領域の長さは、５０～１００、１００～１５０、１５０～２００、２００～２５０、２５０～３００、３００～３５０、３５０～４００、４００～４５０、４５０～５００、５００～５５０、５５０～６００、６００～６５０、６５０～７００、７００～７５０、７５０～８００、８００～８５０、８５０～９００、９００～９５０、９５０～１０００、１０００～１０５０、１０５０～１１００、１１００～１１５０、１１５０～１２００、１２００～１２５０、１２５０～１３００、１３００～１３５０、１３５０～１４００、１４００～１４５０、１４５０～１５００、１５００～１５５０、１５５
０～１６００、１６００～１６５０、１６５０～１７００、１７００～１７５０、１７５０～１８００、１８００～１８５０、１８５０～１９００、１９００～１９５０、１９５０～２０００、２０００～２０５０、２０５０～２１００、２１００～２１５０、２１５０～２２００、２２００～２２５０、２２５０～２３００、２３００～２３５０、２３５０～２４００、２４００～２４５０、２４５０～２５００、２５００～２５５０、２５５０～２６００、２６００～２６５０、２６５０～２７００、２７００～２７５０、２７５０～２８００、２８００～２８５０、２８５０～２９００、２９００～２９５０、２９５０～３０００、３０００～３０５０、３０５０～３１００、３１００～３１５０、３１５０～３２００、及び３２００～３２５０ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約５５ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約５６ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約９７ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１０３ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１０５ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３５７ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３６３ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約７１２ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約７１４ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１２０３ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１２０９ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１５１２ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１５１９ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約２３９５ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約２４０３ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約２４０５ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３０１３ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約３０２１ヌクレオチドであるフィラー領域を含む。
【0094】
所定の実施形態では、フィラー領域は、長さが７１４ヌクレオチドである。
マルチクローニングサイト（ＭＣＳ）領域
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのマルチクローニングサイト（ＭＣＳ）領域を有するウイルスゲノムを含む。ＭＣＳ領域（複数可）は、独立して、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０ヌクレオチドなどであるがこれらに限定されない長さを有し得る。ウイルスゲノムについてのＭＣＳ領域の長さは、２～１０、５～１０、５～１５、１０～２０、１０～３０、１０～４０、１５～２０、１５～２５、２０～３０、２０～４０、２０～５０、２５～３０、２５～３５、３０～４０、３０～５０、３０～６０、３５～４０、３５～４５、４０～５０、４０～６０、４０～７０、４５～５０、４５～５５、５０～６０、５０～７０、５０～８０、５５～６０、５５～６５、６０～７０、６０～８０、６０～９０、６５～７０、６５～７５、７０～８０、７０～９０、７０～１００、７５～８０、７５～８５、８０～９０、８０～１００、８０～１１０、８５～９０、８５～９５、９０～１００、９０～１１０、９０～１２０、９５～１００、９５～１０５、１００～１１０、１００～１２０、１００～１３０、１０５～１１０、１０５～１１５、１１０～１２０、１１０～１３０、１１０～１４０、１１５～１２０、１１５～１２５、１２０～１３０、１２０～１４０、１２０～１５０、１２５～１３０、１２５～１３５、１３０～１４０、１３０～１５０、１３５～１４０、１３５～１４５、１４０～１５０、及び１４５～１５０ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約５ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１０ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１４ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１８ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約７３ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１２１ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。
マルチクローニングサイト（ＭＣＳ）領域
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのマルチクローニングサイト（ＭＣＳ）領域を有するウイルスゲノムを含む。ＭＣＳ領域（複数可）は、独立して、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、及び１５０ヌクレオチドなどであるがこれらに限定されない長さを有し得る。ウイルスゲノムについてのＭＣＳ領域の長さは、２～１０、５～１０、５～１５、１０～２０、１０～３０、１０～４０、１５～２０、１５～２５、２０～３０、２０～４０、２０～５０、２５～３０、２５～３５、３０～４０、３０～５０、３０～６０、３５～４０、３５～４５、４０～５０、４０～６０、４０～７０、４５～５０、４５～５５、５０～６０、５０～７０、５０～８０、５５～６０、５５～６５、６０～７０、６０～８０、６０～９０、６５～７０、６５～７５、７０～８０、７０～９０、７０～１００、７５～８０、７５～８５、８０～９０、８０～１００、８０～１１０、８５～９０、８５～９５、９０～１００、９０～１１０、９０～１２０、９５～１００、９５～１０５、１００～１１０、１００～１２０、１００～１３０、１０５～１１０、１０５～１１５、１１０～１２０、１１０～１３０、１１０～１４０、１１５～１２０、１１５～１２５、１２０～１３０、１２０～１４０、１２０～１５０、１２５～１３０、１２５～１３５、１３０～１４０、１３０～１５０、１３５～１４０、１３５～１４５、１４０～１５０、及び１４５～１５０ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約５ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１０ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１４ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１８ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約７３ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、長さが約１２１ヌクレオチドであるＭＣＳ領域を含む。
【0095】
所定の実施形態では、ＭＣＳ領域は、長さが５ヌクレオチドである。
所定の実施形態では、ＭＣＳ領域は、長さが１０ヌクレオチドである。
ゲノムサイズ
所定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むＡＡＶ粒子は、一本鎖または二本鎖ベクターゲノムであり得る。ベクターゲノムのサイズは、小型、中型、大型または最大型のサイズであり得る。また、ベクターゲノムは、プロモーター及びポリＡテールを含み得る。
所定の実施形態では、ＭＣＳ領域は、長さが１０ヌクレオチドである。
ゲノムサイズ
所定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むＡＡＶ粒子は、一本鎖または二本鎖ベクターゲノムであり得る。ベクターゲノムのサイズは、小型、中型、大型または最大型のサイズであり得る。また、ベクターゲノムは、プロモーター及びポリＡテールを含み得る。
【0096】
所定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むベクターゲノムは、小型一本鎖ベクターゲノムであり得る。小型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが２．１～３．５、例えば、サイズが約２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、及び３．５ｋｂであり得る。非限定的な例として、小型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが３．２ｋｂであり得る。別の非限定的な例として、小型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが２．２ｋｂであり得る。また、ベクターゲノムは、プロモーター及びポリＡテールを含み得る。
【0097】
所定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むベクターゲノムは、小型二本鎖ベクターゲノムであり得る。小型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが１．３～１．７ｋｂ、例えば、サイズが約１．３、１．４、１．５、１．６、及び１．７ｋｂであり得る。非限定的な例として、小型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが１．６ｋｂであり得る。また、ベクターゲノムは、プロモーター及びポリＡテールを含み得る。
【0098】
所定の実施形態では、本明細書に記載のペイロード、例えば、ポリヌクレオチド、ｓｉＲＮＡまたはｄｓＲＮＡを含むベクターゲノムは、中型一本鎖ベクターゲノムであり得る。中型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが３．６～４．３ｋｂ、例えば、サイズが約３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２及び４．３ｋｂであり得る。非限定的な例として、中型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが４．０ｋｂであり得る。また、ベクターゲノムは、プロモーター及びポリＡテールを含み得る。
【0099】
所定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むベクターゲノムは、中型二本鎖ベクターゲノムであり得る。中型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが１．８～２．１ｋｂ、例えば、サイズが約１．８、１．９、２．０、及び２．１ｋｂであり得る。非限定的な例として、中型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが２．０ｋｂであり得る。また、ベクターゲノムは、プロモーター及びポリＡテールを含み得る。
【0100】
所定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むベクターゲノムは、大型一本鎖ベクターゲノムであり得る。大型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが４．４～６．０ｋｂ、例えば、サイズが約４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９及び６．０ｋｂであり得る。非限定的な例として、大型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが４．７ｋｂであり得る。別の非限定的な例として、大型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが４．８ｋｂであり得る。さらに別の非限定的な例として、大型一本鎖ベクターゲノムは、サイズが６．０ｋｂであり得る。また、ベクターゲノムは、プロモーター及びポリＡテールを含み得る。
【0101】
所定の実施形態では、本明細書に記載のペイロードを含むベクターゲノムは、大型二本鎖ベクターゲノムであり得る。大型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが２．２～３．０ｋｂ、例えば、サイズが約２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９及び３．０ｋｂであり得る。非限定的な例として、大型二本鎖ベクターゲノムは、サイズが２．４ｋｂであり得る。また、ベクターゲノムは、プロモーター及びポリＡテールを含み得る。
【0102】
ＡＡＶ血清型
本開示のＡＡＶ粒子は、任意の天然または組換えＡＡＶ血清型を含み得るか、またはそれから誘導され得る。本開示によれば、ＡＡＶ粒子は、血清型を利用し得るまたは血清型に基づき得るか、または以下のいずれかから選択されるペプチドを含み得る：ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９ Ｋ４４９Ｒ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、ＡＡＶＧ２Ｂ－２６、ＡＡＶＧ２Ｂ－１３、ＡＡＶＴＨ１．１－３２、ＡＡＶＴＨ１．１－３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２（ＰＨＰ．Ｂ２）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３（ＰＨＰ．Ｂ３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３（Ｇ２Ａ３）、ＡＡＶＧ２Ｂ４（Ｇ２Ｂ４）、ＡＡＶＧ２Ｂ５（Ｇ２Ｂ５）、ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３－３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４－４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２－１ｂ、ＡＡＶ４２－２、ＡＡＶ４２－３ａ、ＡＡＶ４２－３ｂ、ＡＡＶ４２－４、ＡＡＶ４２－５ａ、ＡＡＶ４２－５ｂ、ＡＡＶ４２－６ｂ、ＡＡＶ４２－８、ＡＡＶ４２－１０、ＡＡＶ４２－１１、ＡＡＶ４２－１２、ＡＡＶ４２－１３、ＡＡＶ４２－１５、ＡＡＶ４２－ａａ、ＡＡＶ４３－１、ＡＡＶ４３－１２、ＡＡＶ４３－２０、ＡＡＶ４３－２１、ＡＡＶ４３－２３、ＡＡＶ４３－２５、ＡＡＶ４３－５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ、ＡＡＶ－ＬＫ０１、ＡＡＶ－ＬＫ０２、ＡＡＶ－ＬＫ０３、ＡＡＶ－ＬＫ０４、ＡＡＶ－ＬＫ０５、ＡＡＶ－ＬＫ０６、ＡＡＶ－ＬＫ０７、ＡＡＶ－ＬＫ０８、ＡＡＶ－ＬＫ０９、ＡＡＶ－ＬＫ１０、ＡＡＶ－ＬＫ１１、ＡＡＶ－ＬＫ１２、ＡＡＶ－ＬＫ１３、ＡＡＶ－ＬＫ１４、ＡＡＶ－ＬＫ１５、ＡＡＶ－ＬＫ１６、ＡＡＶ－ＬＫ１７、ＡＡＶ－ＬＫ１８、ＡＡＶ－ＬＫ１９、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１、ＡＡＶ－８ｈ、ＡＡＶ－８ｂ、ＡＡＶ－ｈ、ＡＡＶ－ｂ、ＡＡＶ ＳＭ １０－２、ＡＡＶシャッフル １００－１、ＡＡＶシャッフル １００－３、ＡＡＶシャッフル １００－７、ＡＡＶシャッフル １０－２、ＡＡＶシャッフル １０－６、ＡＡＶシャッフル １０－８、ＡＡＶシャッフル １００－２、ＡＡＶ ＳＭ １０－１、ＡＡＶ ＳＭ １０－８、ＡＡＶ ＳＭ １００－３、ＡＡＶ ＳＭ １００－１０、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、真型ＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ ＡＡＶ １０、日本型ＡＡＶ １０血清型、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－１、ＡＡＶ ＣＨｔ－２、ＡＡＶ ＣＨｔ－３、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９、ＡＡＶ ＣＫｄ－１、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０、ＡＡＶ ＣＫｄ－２、ＡＡＶ ＣＫｄ－３、ＡＡＶ ＣＫｄ－４、ＡＡＶ ＣＫｄ－６、ＡＡＶ ＣＫｄ－７、ＡＡＶ ＣＫｄ－８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－１、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９、ＡＡＶ ＣＬｖ－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－４、ＡＡＶ ＣＬｖ－６、ＡＡＶ ＣＬｖ－８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－
Ｄ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９、ＡＡＶ ＣＳｐ－１、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１、ＡＡＶ ＣＳｐ－２、ＡＡＶ ＣＳｐ－３、ＡＡＶ ＣＳｐ－４、ＡＡＶ ＣＳｐ－６、ＡＡＶ ＣＳｐ－７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９、ＡＡＶ ＣＳｐ－９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、及び／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、及びそれらのバリアントまたはハイブリッド／キメラ／組み合わせ。
本開示のＡＡＶ粒子は、任意の天然または組換えＡＡＶ血清型を含み得るか、またはそれから誘導され得る。本開示によれば、ＡＡＶ粒子は、血清型を利用し得るまたは血清型に基づき得るか、または以下のいずれかから選択されるペプチドを含み得る：ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９ Ｋ４４９Ｒ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、ＡＡＶＧ２Ｂ－２６、ＡＡＶＧ２Ｂ－１３、ＡＡＶＴＨ１．１－３２、ＡＡＶＴＨ１．１－３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２（ＰＨＰ．Ｂ２）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３（ＰＨＰ．Ｂ３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＴＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＧＧＴ－Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ－ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３（Ｇ２Ａ３）、ＡＡＶＧ２Ｂ４（Ｇ２Ｂ４）、ＡＡＶＧ２Ｂ５（Ｇ２Ｂ５）、ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３－３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４－４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２－１ｂ、ＡＡＶ４２－２、ＡＡＶ４２－３ａ、ＡＡＶ４２－３ｂ、ＡＡＶ４２－４、ＡＡＶ４２－５ａ、ＡＡＶ４２－５ｂ、ＡＡＶ４２－６ｂ、ＡＡＶ４２－８、ＡＡＶ４２－１０、ＡＡＶ４２－１１、ＡＡＶ４２－１２、ＡＡＶ４２－１３、ＡＡＶ４２－１５、ＡＡＶ４２－ａａ、ＡＡＶ４３－１、ＡＡＶ４３－１２、ＡＡＶ４３－２０、ＡＡＶ４３－２１、ＡＡＶ４３－２３、ＡＡＶ４３－２５、ＡＡＶ４３－５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ、ＡＡＶ－ＬＫ０１、ＡＡＶ－ＬＫ０２、ＡＡＶ－ＬＫ０３、ＡＡＶ－ＬＫ０４、ＡＡＶ－ＬＫ０５、ＡＡＶ－ＬＫ０６、ＡＡＶ－ＬＫ０７、ＡＡＶ－ＬＫ０８、ＡＡＶ－ＬＫ０９、ＡＡＶ－ＬＫ１０、ＡＡＶ－ＬＫ１１、ＡＡＶ－ＬＫ１２、ＡＡＶ－ＬＫ１３、ＡＡＶ－ＬＫ１４、ＡＡＶ－ＬＫ１５、ＡＡＶ－ＬＫ１６、ＡＡＶ－ＬＫ１７、ＡＡＶ－ＬＫ１８、ＡＡＶ－ＬＫ１９、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１、ＡＡＶ－８ｈ、ＡＡＶ－８ｂ、ＡＡＶ－ｈ、ＡＡＶ－ｂ、ＡＡＶ ＳＭ １０－２、ＡＡＶシャッフル １００－１、ＡＡＶシャッフル １００－３、ＡＡＶシャッフル １００－７、ＡＡＶシャッフル １０－２、ＡＡＶシャッフル １０－６、ＡＡＶシャッフル １０－８、ＡＡＶシャッフル １００－２、ＡＡＶ ＳＭ １０－１、ＡＡＶ ＳＭ １０－８、ＡＡＶ ＳＭ １００－３、ＡＡＶ ＳＭ １００－１０、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、真型ＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ ＡＡＶ １０、日本型ＡＡＶ １０血清型、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－１、ＡＡＶ ＣＨｔ－２、ＡＡＶ ＣＨｔ－３、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９、ＡＡＶ ＣＫｄ－１、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０、ＡＡＶ ＣＫｄ－２、ＡＡＶ ＣＫｄ－３、ＡＡＶ ＣＫｄ－４、ＡＡＶ ＣＫｄ－６、ＡＡＶ ＣＫｄ－７、ＡＡＶ ＣＫｄ－８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－１、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９、ＡＡＶ ＣＬｖ－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－４、ＡＡＶ ＣＬｖ－６、ＡＡＶ ＣＬｖ－８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－
Ｄ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９、ＡＡＶ ＣＳｐ－１、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１、ＡＡＶ ＣＳｐ－２、ＡＡＶ ＣＳｐ－３、ＡＡＶ ＣＳｐ－４、ＡＡＶ ＣＳｐ－６、ＡＡＶ ＣＳｐ－７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９、ＡＡＶ ＣＳｐ－９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、及び／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、及びそれらのバリアントまたはハイブリッド／キメラ／組み合わせ。
【0103】
所定の実施形態では、本明細書に開示される組成物において使用されるＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開番号ＵＳ２００３０１３８７７２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号６及び６４）、ＡＡＶ２（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号７及び７０）、ＡＡＶ３（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号８及び７１）、ＡＡＶ４（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号６３）、ＡＡＶ５（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１１４）、ＡＡＶ６（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号６５）、ＡＡＶ７（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１～３）、ＡＡＶ８（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４及び９５）、ＡＡＶ９（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５及び１００）、ＡＡＶ１０（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１１７）、ＡＡＶ１１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１１８）、ＡＡＶ１２（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１１９）、ＡＡＶｒｈ１０（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号８１のアミノ酸１～７３８）、ＡＡＶ１６．３（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１０）、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１１）、ＡＡＶ２９．４（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１２）、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１３）、ＡＡＶ１．３（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１４）、ＡＡＶ１３．３（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１５）、ＡＡＶ２４．１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１６）、ＡＡＶ２７．３（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１７）、ＡＡＶ７．２（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１８）、ＡＡＶＣ１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号１９）、ＡＡＶＣ３（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号２０）、ＡＡＶＣ５（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号２１）、ＡＡＶＦ１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号２２）、ＡＡＶＦ３（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号２３）、ＡＡＶＦ５（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号２４）、ＡＡＶＨ６（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号２５）、ＡＡＶＨ２（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号２６）、ＡＡＶ４２－８（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号２７）、ＡＡＶ４２－１５（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号２８）、ＡＡＶ４２－５ｂ（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号２９）、ＡＡＶ４２－１ｂ（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号３０）、ＡＡＶ４２－１３（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号３１）、ＡＡＶ４２－３ａ（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号３２）、ＡＡＶ４２－４（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号３３）、ＡＡＶ４２－５ａ（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号３４）、ＡＡＶ４２－１０（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号３５）、ＡＡＶ４２－３ｂ（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号３６）、ＡＡＶ４２－１１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号３７）、ＡＡＶ４２－６ｂ（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号３８）、ＡＡＶ４３－１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号３９）、ＡＡＶ４３－５（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４０）、ＡＡＶ４３－１２（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４１）、ＡＡＶ４３－２０（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４２）、ＡＡＶ４３－２１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４３）、ＡＡＶ４３－２３（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４４）、ＡＡＶ４３－２５（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４５）、ＡＡＶ４４．１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４６）、ＡＡＶ４４．５（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４７）、ＡＡＶ２２３．１（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４８）、ＡＡＶ２２３．２（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号４９）、ＡＡＶ２２３．４（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５０）、ＡＡＶ２２３．５（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５１）、ＡＡＶ２２３．６（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５２）、ＡＡＶ２２３．７（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５３）、ＡＡＶＡ３．４（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５４）、ＡＡＶＡ３．５（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５５）、ＡＡＶＡ３．７（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５６）、ＡＡＶＡ３．３（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５７）、ＡＡＶ４２．１２（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５８）、ＡＡＶ４４．２（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号５９）、ＡＡＶ４２－２（ＵＳ２００３０１３８７７２の配列番号９）、またはそれらのバリアントもしくはハイブリッド／キメラ／組み合わせであり得るか、またはそれを含み得る。
【0104】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開番号ＵＳ２０１５０１５９１７３（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ２（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号７及び２３）、ｒｈ２０（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１）、ｒｈ３２／３３（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号２）、ｒｈ３９（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号３、２０及び３６）、ｒｈ４６（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４及び２２）、ｒｈ７３（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号５）、ｒｈ７４（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号６）、ＡＡＶ６．１（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号２９）、ｒｈ．８（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４１）、ｒｈ．４８．１（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４４）、ｈｕ．４４（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４５）、ｈｕ．２９（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４２）、ｈｕ．４８（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号３８）、ｒｈ５４（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４９）、ＡＡＶ２（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号７）、ｃｙ．５（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号８及び２４）、ｒｈ．１０（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号９及び２５）、ｒｈ．１３（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１０及び２６）、ＡＡＶ１（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１１及び２７）、ＡＡＶ３（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１２及び２８）、ＡＡＶ６（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１３及び２９）、ＡＡＶ７（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１４及び３０）、ＡＡＶ８（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１５及び３１）、ｈｕ．１３（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１６及び３２）、ｈｕ．２６（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１７及び３３）、ｈｕ．３７（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１８及び３４）、ｈｕ．５３（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号１９及び３５）、ｒｈ．４３（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号２１及び３７）、ｒｈ２（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号３９）、ｒｈ．３７（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４０）、ｒｈ．６４（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４３）、ｒｈ．４８（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４４）、ｃｈ．５（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４６）、ｒｈ．６７（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４７）、ｒｈ．５８（ＵＳ２０１５０１５９１７３の配列番号４８）、または、限定されないが、Ｃｙ５Ｒ１、Ｃｙ５Ｒ２、Ｃｙ５Ｒ３、Ｃｙ５Ｒ４、ｒｈ．１３Ｒ、ｒｈ．３７Ｒ２、ｒｈ．２Ｒ、ｒｈ．８Ｒ、ｒｈ．４８．１、ｒｈ．４８．２、ｒｈ．４８．１．２、ｈｕ．４４Ｒ１、ｈｕ．４４Ｒ２、ｈｕ．４４Ｒ３、ｈｕ．２９Ｒ、ｃｈ．５Ｒ１、ｒｈ６４Ｒ１、ｒｈ６４Ｒ２、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．１２、ｈｕ．４８Ｒ１、ｈｕ．４８Ｒ２、もしくはｈｕ．４８Ｒ３を含むそれらのバリアント、またはそれらのバリアントもしくはハイブリッド／キメラ／組み合わせであり得るか、またはそれを含み得る。
【0105】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ７１９８９５１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ９（ＵＳ７１９８９５１の配列番号１～３）、ＡＡＶ２（ＵＳ７１９８９５１の配列番号４）、ＡＡＶ１（ＵＳ７１９８９５１の配列番号５）、ＡＡＶ３（ＵＳ７１９８９５１の配列番号６）、またはＡＡＶ８（ＵＳ７１９８９５１の配列番号７）、またはそれらのバリアントもしくはハイブリッド／キメラもしくは組み合わせであり得るか、またはそれを含み得る。
【0106】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、Ｎ Ｐｕｌｉｃｈｅｒｌａ ｅｔ ａｌ．（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ １９（６）：１０７０－１０７８（２０１１）（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）によって記載されるＡＡＶ９配列であり得るか、またはそのバリアント、例えば、限定されないが、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、またはＡＡＶ９．８４であり得る。
【0107】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ６１５６３０３（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ３Ｂ（ＵＳ６１５６３０３の配列番号１及び１０）、ＡＡＶ６（ＵＳ６１５６３０３の配列番号２、７及び１１）、ＡＡＶ２（ＵＳ６１５６３０３の配列番号３及び８）、ＡＡＶ３Ａ（ＵＳ６１５６３０３の配列番号４及び９）、またはそれらの誘導体もしくはバリアントもしくはハイブリッド／キメラもしくは組み合わせであり得るか、またはそれを含み得る。
【0108】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開番号ＵＳ２０１４０３５９７９９（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ８（ＵＳ２０１４０３５９７９９の配列番号１）、ＡＡＶＤＪ（ＵＳ２０１４０３５９７９９の配列番号２及び３）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。
【0109】
所定の実施形態では、血清型は、ＡＡＶＤＪまたはそのバリアント、例えば、Ｇｒｉｍｍ ｅｔ ａｌ．（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ８２（１２）：５８８７－５９１１（２００８）（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる））によって記載されるＡＡＶＤＪ８（またはＡＡＶ－ＤＪ８）であり得る。ＡＡＶＤＪ８のアミノ酸配列は、ヘパリン結合ドメイン（ＨＢＤ）を除去するために有効な２つ以上の変異を含み得る。非限定的な例として、米国特許番号７，５８８，７７２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）における配列番号１として記載されるＡＡＶ－ＤＪ配列は、２つの変異：（１）Ｒ５８７Ｑ（アミノ酸５８７におけるアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ；Ｇｌｎ）に変化している）及び（２）Ｒ５９０Ｔ（アミノ酸５９０におけるアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がトレオニン（Ｔ；Ｔｈｒ）に変化している）を含み得る。別の非限定的な例として、米国特許番号７，５８８，７７２におけるＡＡＶ－ＤＪ配列は、３つの変異：（１）Ｋ４０６Ｒ（アミノ酸４０６におけるリシン（Ｋ；Ｌｙｓ）がアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）に変化している）（２）Ｒ５８７Ｑ（アミノ酸５８７におけるアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ；Ｇｌｎ）に変化している）及び（３）Ｒ５９０Ｔ（アミノ酸５９０におけるアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がトレオニン（Ｔ；Ｔｈｒ）に変化している）を含み得る。
【0110】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際公開番号ＷＯ１９９８０１１２４４（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるＡＡＶ４の配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ４（ＷＯ１９９８０１１２４４の配列番号１～２０）であり得るか、またはそれを含み得る。
【0111】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際公開番号ＷＯ２０１４１４４２２９（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるＡＡＶ２Ｇ９を生成するためのＡＡＶ２配列における変異であり得るか、またはそれを含み得る。
【0112】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際公開番号ＷＯ２００５０３３３２１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ３－３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２１７）、ＡＡＶ１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２１９及び２０２）、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０）、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１１）、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号６及び８）、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号８１）、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号７８）、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１７６及び１７７）、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５６（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１６８及び１９２）、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１５３及び５７）、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１５６及び５６）、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１７０）、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１７４）、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号３２）、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０３及び２５）、ＡＡＶ２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２１１及び２２１）、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号３３及び１１４）、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２１）、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２３及び１０８）、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０４及び２２）、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号５及び８４）、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１５５及び５８）、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１８６及び１７６）、ＡＡＶ３－３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２００）、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号４）、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号５０）、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号５１）、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号９６及び１８）、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１１７）、ＡＡＶ４－４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２０１及び２１８）、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１１６）、ＡＡＶ５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１９９及び２１６）、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号６３）、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１３３）、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２７）、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０５）、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２６）、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号４９）、ＡＡＶ６（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２０３及び２２０）、ＡＡＶ７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２２２及び２１３）、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号５５）、ＡＡＶ８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２２３及び２１４）、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号４６）、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号４４）、ＡＡＶｈｕ．１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４４）、ＡＡＶｈｕ．１０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１５６）、ＡＡＶｈｕ．１１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１５３）、ＡＡＶｈｕ．１２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号５９）、ＡＡＶｈｕ．１３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１２９）、ＡＡＶｈｕ．１４／ＡＡＶ９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１２３及び３）、ＡＡＶｈｕ．１５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４７）、ＡＡＶｈｕ．１６（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４８）、ＡＡＶｈｕ．１７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号８３）、ＡＡＶｈｕ．１８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４９）、ＡＡＶｈｕ．１９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１３３）、ＡＡＶｈｕ．２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４３）、ＡＡＶｈｕ．２０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１３４）、ＡＡＶｈｕ．２１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１３５）、ＡＡＶｈｕ．２２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１３８）、ＡＡＶｈｕ．２３．２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１３７）、ＡＡＶｈｕ．２４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１３６）、ＡＡＶｈｕ．２５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４６）、ＡＡＶｈｕ．２７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４０）、ＡＡＶｈｕ．２９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１３２）、ＡＡＶｈｕ．３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４５）、ＡＡＶｈｕ．３１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１２１）、ＡＡＶｈｕ．３２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１２２）、ＡＡＶｈｕ．３４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１２５）、ＡＡＶｈｕ．３５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１６４）、ＡＡＶｈｕ．３７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号８８）、ＡＡＶｈｕ．３９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０２）、ＡＡＶｈｕ．４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４１）、ＡＡＶｈｕ．４０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号８７）、ＡＡＶｈｕ．４１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号９１）、ＡＡＶｈｕ．４２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号８５）、ＡＡＶｈｕ．４３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１６０）、ＡＡＶｈｕ．４４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４４）、ＡＡＶｈｕ．４５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１２７）、ＡＡＶｈｕ．４６（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１５９）、ＡＡＶｈｕ．４７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１２８）、ＡＡＶｈｕ．４８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１５７）、ＡＡＶｈｕ．４９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１８９）、ＡＡＶｈｕ．５１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１９０）、ＡＡＶｈｕ．５２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１９１）、ＡＡＶｈｕ．５３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１８６）、ＡＡＶｈｕ．５４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１８８）、ＡＡＶｈｕ．５５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１８７）、ＡＡＶｈｕ．５６（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１９２）、ＡＡＶｈｕ．５７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１９３）、ＡＡＶｈｕ．５８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１９４）、ＡＡＶｈｕ．６（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号８４）、ＡＡＶｈｕ．６０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１８４）、ＡＡＶｈｕ．６１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１８５）、ＡＡＶｈｕ．６３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１９５）、ＡＡＶｈｕ．６４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１９６）、ＡＡＶｈｕ．６６（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１９７）、ＡＡＶｈｕ．６７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１９８）、ＡＡＶｈｕ．７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１５０）、ＡＡＶｈｕ．８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１２）、ＡＡＶｈｕ．９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１５５）、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１４）、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号８６）、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号７）、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１６３）、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号４３）、ＡＡＶｐｉ．１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２８）、ＡＡＶｐｉ．２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号３０）、ＡＡＶｐｉ．３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２９）、ＡＡＶｒｈ．３８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号８６）、ＡＡＶｒｈ．４０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号９２）、ＡＡＶｒｈ．４３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１６３）、ＡＡＶｒｈ．４４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号３４）、ＡＡＶｒｈ．４５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号４１）、ＡＡＶｒｈ．４７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号３８）、ＡＡＶｒｈ．４８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１１５）、ＡＡＶｒｈ．４９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０３）、ＡＡＶｒｈ．５０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０８）、ＡＡＶｒｈ．５１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０４）、ＡＡＶｒｈ．５２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号９６）、ＡＡＶｒｈ．５３（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号９７）、ＡＡＶｒｈ．５５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号３７）、ＡＡＶｒｈ．５６（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１５２）、ＡＡＶｒｈ．５７（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０５）、ＡＡＶｒｈ．５８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０６）、ＡＡＶｒｈ．５９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号４２）、ＡＡＶｒｈ．６０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号３１）、ＡＡＶｒｈ．６１（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１０７）、ＡＡＶｒｈ．６２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１１４）、ＡＡＶｒｈ．６４（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号９９）、ＡＡＶｒｈ．６５（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号３５）、ＡＡＶｒｈ．６８（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号１６）、ＡＡＶｒｈ．６９（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号３９）、ＡＡＶｒｈ．７０（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号２０）、ＡＡＶｒｈ．７２（ＷＯ２００５０３３３２１の配列番号９）、または、限定されないが、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．２５／４２ １５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、またはＡＡＶｒｈ１４を含むそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。バリアントの非限定的な例は、ＷＯ２００５０３３３２１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）の配列番号１３、１５、１７、１９、２４、３６、４０、４５、４７、４８、５１、５２、５３、５４、６０、６１、６２、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７９、８０、８２、８９、９０、９３、９４、９５、９８、１００、１０１、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１８、１１９、１２０、１２４、１２６、１３１、１３９、１４２、１５１、１５４、１５８、１６１、１６２、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８
１、１８２、１８３、２０２、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１５、２１９、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５または２３６を含む。
１、１８２、１８３、２０２、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１５、２１９、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５または２３６を含む。
【0113】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際公開ＷＯ２０１５１６８６６６（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶｒｈ８Ｒ（ＷＯ２０１５１６８６６６の配列番号９）、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ変異体（ＷＯ２０１５１６８６６６の配列番号１０）、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ変異体（ＷＯ２０１５１６８６６６の配列番号１１）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。
【0114】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ９２３３１３１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶｈＥ１．１（ＵＳ９２３３１３１の配列番号４４）、ＡＡＶｈＥｒ１．５（ＵＳ９２３３１３１の配列番号４５）、ＡＡＶｈＥＲ１．１４（ＵＳ９２３３１３１の配列番号４６）、ＡＡＶｈＥｒ１．８（ＵＳ９２３３１３１の配列番号４７）、ＡＡＶｈＥｒ１．１６（ＵＳ９２３３１３１の配列番号４８）、ＡＡＶｈＥｒ１．１８（ＵＳ９２３３１３１の配列番号４９）、ＡＡＶｈＥｒ１．３５（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５０）、ＡＡＶｈＥｒ１．７（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５１）、ＡＡＶｈＥｒ１．３６（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５２）、ＡＡＶｈＥｒ２．２９（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５３）、ＡＡＶｈＥｒ２．４（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５４）、ＡＡＶｈＥｒ２．１６（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５５）、ＡＡＶｈＥｒ２．３０（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５６）、ＡＡＶｈＥｒ２．３１（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５８）、ＡＡＶｈＥｒ２．３６（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５７）、ＡＡＶｈＥＲ１．２３（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５３）、ＡＡＶｈＥｒ３．１（ＵＳ９２３３１３１の配列番号５９）、ＡＡＶ２．５Ｔ（ＵＳ９２３３１３１の配列番号４２）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。
【0115】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開番号ＵＳ２０１５０３７６６０７（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１）、ＡＡＶ－ＬＫ０１（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号２）、ＡＡＶ－ＬＫ０２（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号３）、ＡＡＶ－ＬＫ０３（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号４）、ＡＡＶ－ＬＫ０４（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号５）、ＡＡＶ－ＬＫ０５（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号６）、ＡＡＶ－ＬＫ０６（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号７）、ＡＡＶ－ＬＫ０７（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号８）、ＡＡＶ－ＬＫ０８（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号９）、ＡＡＶ－ＬＫ０９（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１０）、ＡＡＶ－ＬＫ１０（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１１）、ＡＡＶ－ＬＫ１１（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１２）、ＡＡＶ－ＬＫ１２（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１３）、ＡＡＶ－ＬＫ１３（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１４）、ＡＡＶ－ＬＫ１４（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１５）、ＡＡＶ－ＬＫ１５（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１６）、ＡＡＶ－ＬＫ１６（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１７）、ＡＡＶ－ＬＫ１７（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１８）、ＡＡＶ－ＬＫ１８（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号１９）、ＡＡＶ－ＬＫ１９（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号２０）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号２１）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号２２）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号２３）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号２４）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号２５）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号２６）、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２（ＵＳ２０１５０３７６６０７の配列番号２７）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。
【0116】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ９１６３２６１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１（ＵＳ９１６３２６１の配列番号１）、またはそのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。
【0117】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開番号ＵＳ２０１５０３７６２４０（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ－８ｈ（ＵＳ２０１５０３７６２４０の配列番号６）、ＡＡＶ－８ｂ（ＵＳ２０１５０３７６２４０の配列番号５）、ＡＡＶ－ｈ（ＵＳ２０１５０３７６２４０の配列番号２）、ＡＡＶ－ｂ（ＵＳ２０１５０３７６２４０の配列番号１）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを有し得る。
【0118】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開番号ＵＳ２０１６００１７２９５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ ＳＭ １０－２（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号２２）、ＡＡＶシャッフル １００－１（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号２３）、ＡＡＶシャッフル １００－３（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号２４）、ＡＡＶシャッフル １００－７（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号２５）、ＡＡＶシャッフル １０－２（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号３４）、ＡＡＶシャッフル １０－６（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号３５）、ＡＡＶシャッフル １０－８（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号３６）、ＡＡＶシャッフル １００－２（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号３７）、ＡＡＶ ＳＭ １０－１（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号３８）、ＡＡＶ ＳＭ １０－８（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号３９）、ＡＡＶ ＳＭ １００－３（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号４０）、ＡＡＶ ＳＭ １００－１０（ＵＳ２０１６００１７２９５の配列番号４１）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを有し得る。
【0119】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許公開番号ＵＳ２０１５０２３８５５０（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ（ＵＳ２０１５０２３８５５０の配列番号１）、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ（ＵＳ２０１５０２３８５５０の配列番号３）、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ（ＵＳ２０１５０２３８５５０の配列番号４）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。
【0120】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許公開番号ＵＳ２０１５０３１５６１２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶｒｈ．５０（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号１０８）、ＡＡＶｒｈ．４３（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号１６３）、ＡＡＶｒｈ．６２（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号１１４）、ＡＡＶｒｈ．４８（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号１１５）、ＡＡＶｈｕ．１９（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号１３３）、ＡＡＶｈｕ．１１（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号１５３）、ＡＡＶｈｕ．５３（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号１８６）、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号１５）、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号２４）、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号６０）、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号６７）、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号６６）、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号６５）、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号６４）、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号６８）、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号６９）、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３（ＵＳ２０１５０３１５６１２の配列番号８０）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。
【0121】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際公開番号ＷＯ２０１５１２１５０１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、真型ＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）（ＷＯ２０１５１２１５０１の配列番号２）、「ＵＰｅｎｎ ＡＡＶ１０」（ＷＯ２０１５１２１５０１の配列番号８）、「日本型ＡＡＶ１０」（ＷＯ２０１５１２１５０１の配列番号９）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。
【0122】
本開示によれば、ＡＡＶカプシド血清型の選択または使用は、多様な種からなされ得る。所定の実施形態では、ＡＡＶは、トリＡＡＶ（ＡＡＡＶ）であり得る。ＡＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ９２３８８００（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＡＶ（ＵＳ９２３８８００の配列番号１、２、４、６、８、１０、１２、または１４）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを有し得る。
【0123】
所定の実施形態では、ＡＡＶは、ウシＡＡＶ（ＢＡＡＶ）であり得る。ＢＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ９，１９３，７６９（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＢＡＡＶ（ＵＳ９１９３７６９の配列番号１及び６）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを有し得る。ＢＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ７４２７３９６（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＢＡＡＶ（ＵＳ７４２７３９６の配列番号５及び６）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを有し得る。
【0124】
所定の実施形態では、ＡＡＶは、ヤギＡＡＶであり得る。ヤギＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ７４２７３９６（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ヤギＡＡＶ（ＵＳ７４２７３９６の配列番号３）、またはそのバリアントであり得るか、またはそれを有し得る。
【0125】
所定の実施形態では、ＡＡＶは、２つ以上の親血清型からのハイブリッドＡＡＶとして修飾され得る。所定の実施形態では、ＡＡＶは、ＡＡＶ２及びＡＡＶ９からの配列を含むＡＡＶ２Ｇ９であり得る。ＡＡＶ２Ｇ９ ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開番号ＵＳ２０１６００１７００５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列であり得るか、またはそれを有し得る。
【0126】
所定の実施形態では、ＡＡＶは、Ｐｕｌｉｃｈｅｒｌａ ｅｔ ａｌ．（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ １９（６）：１０７０－１０７８（２０１１）（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるアミノ酸３９０～６２７（ＶＰ１ナンバリング）における変異を有するＡＡＶ９カプシドライブラリによって生成される血清型であり得る。血清型ならびに対応するヌクレオチド及びアミノ酸置換は、限定されないが、ＡＡＶ９．１（Ｇ１５９４Ｃ；Ｄ５３２Ｈ）、ＡＡＶ６．２（Ｔ１４１８Ａ及びＴ１４３６Ｘ；Ｖ４７３Ｄ及びＩ４７９Ｋ）、ＡＡＶ９．３（Ｔ１２３８Ａ；Ｆ４１３Ｙ）、ＡＡＶ９．４（Ｔ１２５０Ｃ及びＡ１６１７Ｔ；Ｆ４１７Ｓ）、ＡＡＶ９．５（Ａ１２３５Ｇ、Ａ１３１４Ｔ、Ａ１６４２Ｇ、Ｃ１７６０Ｔ；Ｑ４１２Ｒ、Ｔ５４８Ａ、Ａ５８７Ｖ）、ＡＡＶ９．６（Ｔ１２３１Ａ；Ｆ４１１Ｉ）、ＡＡＶ９．９（Ｇ１２０３Ａ、Ｇ１７８５Ｔ；Ｗ５９５Ｃ）、ＡＡＶ９．１０（Ａ１５００Ｇ、Ｔ１６７６Ｃ；Ｍ５５９Ｔ）、ＡＡＶ９．１１（Ａ１４２５Ｔ、Ａ１７０２Ｃ、Ａ１７６９Ｔ；Ｔ５６８Ｐ、Ｑ５９０Ｌ）、ＡＡＶ９．１３（Ａ１３６９Ｃ、Ａ１７２０Ｔ；Ｎ４５７Ｈ、Ｔ５７４Ｓ）、ＡＡＶ９．１４（Ｔ１３４０Ａ、Ｔ１３６２Ｃ、Ｔ１５６０Ｃ、Ｇ１７１３Ａ；Ｌ４４７Ｈ）、ＡＡＶ９．１６（Ａ１７７５Ｔ；Ｑ５９２Ｌ）、ＡＡＶ９．２４（Ｔ１５０７Ｃ、Ｔ１５２１Ｇ；Ｗ５０３Ｒ）、ＡＡＶ９．２６（Ａ１３３７Ｇ、Ａ１７６９Ｃ；Ｙ４４６Ｃ、Ｑ５９０Ｐ）、ＡＡＶ９．３３（Ａ１６６７Ｃ；Ｄ５５６Ａ）、ＡＡＶ９．３４（Ａ１５３４Ｇ、Ｃ１７９４Ｔ；Ｎ５１２Ｄ）、ＡＡＶ９．３５（Ａ１２８９Ｔ、Ｔ１４５０Ａ、Ｃ１４９４Ｔ、Ａ１５１５Ｔ、Ｃ１７９４Ａ、Ｇ１８１６Ａ；Ｑ４３０Ｌ、Ｙ４８４Ｎ、Ｎ９８Ｋ、Ｖ６０６Ｉ）、ＡＡＶ９．４０（Ａ１６９４Ｔ、Ｅ５６５Ｖ）、ＡＡＶ９．４１（Ａ１３４８Ｔ、Ｔ１３６２Ｃ；Ｔ４５０Ｓ）、ＡＡＶ９．４４（Ａ１６８４Ｃ、Ａ１７０１Ｔ、Ａ１７３７Ｇ；Ｎ５６２Ｈ、Ｋ５６７Ｎ）、ＡＡＶ９．４５（Ａ１４９２Ｔ、Ｃ１８０４Ｔ；Ｎ４９８Ｙ、Ｌ６０２Ｆ）、ＡＡＶ９．４６（Ｇ１４４１Ｃ、Ｔ１５２５Ｃ、Ｔ１５４９Ｇ；Ｇ４８１Ｒ、Ｗ５０９Ｒ、Ｌ５１７Ｖ）、９．４７（Ｇ１２４１Ａ、Ｇ１３５８Ａ、Ａ１６６９Ｇ、Ｃ１７４５Ｔ；Ｓ４１４Ｎ、Ｇ４５３Ｄ、Ｋ５５７Ｅ、Ｔ５８２Ｉ）、ＡＡＶ９．４８（Ｃ１４４５Ｔ、Ａ１７３６Ｔ；Ｐ４８２Ｌ、Ｑ５７９Ｌ）、ＡＡＶ９．５０（Ａ１６３８Ｔ、Ｃ１６８３Ｔ、Ｔ１８０５Ａ；Ｑ５４６Ｈ、Ｌ６０２Ｈ）、ＡＡＶ９．５３（Ｇ１３０１Ａ、Ａ１４０５Ｃ、Ｃ１６６４Ｔ、Ｇ１８１１Ｔ；Ｒ１３４Ｑ、Ｓ４６９Ｒ、Ａ５５５Ｖ、Ｇ６０４Ｖ）、ＡＡＶ９．５４（Ｃ１５３１Ａ、Ｔ１６０９Ａ；Ｌ５１１Ｉ、Ｌ５３７Ｍ）、ＡＡＶ９．５５（Ｔ１６０５Ａ；Ｆ５３５Ｌ）、ＡＡＶ９．５８（Ｃ１４７５Ｔ、Ｃ１５７９Ａ；Ｔ４９２Ｉ、Ｈ５２７Ｎ）、ＡＡＶ．５９（Ｔ１３３６Ｃ；Ｙ４４６Ｈ）、ＡＡＶ９．６１（Ａ１４９３Ｔ；Ｎ４９８Ｉ）、ＡＡＶ９．６４（Ｃ１５３１Ａ、Ａ１６１７Ｔ；Ｌ５１１Ｉ）、ＡＡＶ９．６５（Ｃ１３３５Ｔ、Ｔ１５３０Ｃ、Ｃ１５６８Ａ；Ａ５２３Ｄ）、ＡＡＶ９．６８（Ｃ１５１０Ａ；Ｐ５０４Ｔ）、ＡＡＶ９．８０（Ｇ１４４１Ａ，；Ｇ４８１Ｒ）、ＡＡＶ９．８３（Ｃ１４０２Ａ、Ａ１５００Ｔ；Ｐ４６８Ｔ、Ｅ５００Ｄ）、ＡＡＶ９．８７（Ｔ１４６４Ｃ、Ｔ１４６８Ｃ；Ｓ４９０Ｐ）、ＡＡＶ９．９０（Ａ１１９６Ｔ；Ｙ３９９Ｆ）、ＡＡＶ９．９１（Ｔ１３１６Ｇ、Ａ１５８３Ｔ、Ｃ１７８２Ｇ、Ｔ１８０６Ｃ；Ｌ４３９Ｒ、Ｋ５２８Ｉ）、ＡＡＶ９．９３（Ａ１２７３Ｇ、Ａ１４２１Ｇ、Ａ１６３８Ｃ、Ｃ１７１２Ｔ、Ｇ１７３２Ａ、Ａ１７４４Ｔ、Ａ１８３２Ｔ；Ｓ４２５Ｇ、Ｑ４７４Ｒ、Ｑ５４６Ｈ、Ｐ５７１Ｌ、Ｇ５７８Ｒ、Ｔ５８２Ｓ、Ｄ６１１Ｖ）、ＡＡＶ９．９４（Ａ１６７５Ｔ；Ｍ５５９Ｌ）、またはＡＡＶ９．９５（Ｔ１６０５Ａ；Ｆ５３５Ｌ）であり得る。
【0127】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際公開番号ＷＯ２０１６０４９２３０（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号２及び２０）、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号３及び２１）、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号５及び２２）、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号６及び２３）、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号１１及び２５）、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号７及び２４）、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号８及び２７）、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号９及び２８）、ＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号１０及び２９）、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号４及び２６）、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号１２及び３０）、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号１４及び３１）、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号１５及び３２）、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号１６及び３３）、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号１７及び３４）、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７（ＷＯ２０１６０４９２３０の配列番号１３及び３５）、またはそれらのバリアントもしくは誘導体であり得るか、またはそれを含み得る。
【0128】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ８７３４８０９（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１３及び８７）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１４及び８８）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１５及び８９）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１６及び９０）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１７及び９１）、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１８及び９２）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１９及び９３）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７（ＵＳ８７３４８０９の配列番号２０及び９４）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８（ＵＳ８７３４８０９の配列番号２１及び９５）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号２２及び９６）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号２３及び９７）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号２４及び９８）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４（ＵＳ８７３４８０９の配列番号２５及び９９）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５（ＵＳ８７３４８０９の配列番号２６及び１００）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６（ＵＳ８７３４８０９の配列番号２７及び１０１）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７（ＵＳ８７３４８０９の配列番号２８及び１０２）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ８（ＵＳ８７３４８０９の配列番号２９及び１０３）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１３及び８７）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３０及び１０４）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３１及び１０５）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３２及び１０６）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３３及び１０７）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３４及び１０８）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３５及び１０９）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３６及び１１０）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３７及び１１１）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３８及び１１２）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３９及び１１３）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４０及び１１４）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４１及び１１５）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４２及び１１６）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４３及び１１７）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４３及び１１７）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４４及び１１８）、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４３及び１１７）、ＡＡＶ ＣＳｐ－１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４５及び１１９）、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４６及び１２０）、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４７及び１２１）、ＡＡＶ ＣＳｐ－２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４８及び１２２）、ＡＡＶ ＣＳｐ－３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号４９及び１２３）、ＡＡＶ ＣＳｐ－４（ＵＳ８７３４８０９の配列番号５０及び１２４）、ＡＡＶ ＣＳｐ－６（ＵＳ８７３４８０９の配列番号５１及び１２５）、ＡＡＶ ＣＳｐ－７（ＵＳ８７３４８０９の配列番号５２及び１２６）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８（ＵＳ８７３４８０９の配列番号５３及び１２７）、ＡＡＶ ＣＳｐ－９（ＵＳ８７３４８０９の配列番号５４及び１２８）、ＡＡＶ ＣＨｔ－２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号５５及び１２９）、ＡＡＶ ＣＨｔ－３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号５６及び１３０）、ＡＡＶ ＣＫｄ－１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号５７及び１３１）、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０（ＵＳ８７３４８０９の配列番号５８及び１３２）、ＡＡＶ ＣＫｄ－２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号５９及び１３３）、ＡＡＶ ＣＫｄ－３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号６０及び１３４）、ＡＡＶ ＣＫｄ－４（ＵＳ８７３４８０９の配列番号６１及び１３５）、ＡＡＶ ＣＫｄ－６（ＵＳ８７３４８０９の配列番号６２及び１３６）、ＡＡＶ ＣＫｄ－７（ＵＳ８７３４８０９の配列番号６３及び１３７）、ＡＡＶ ＣＫｄ－８（ＵＳ８７３４８０９の配列番号６４及び１３８）、ＡＡＶ ＣＬｖ－１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号３５及び１３９）、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号６６及び１４０）、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号６７及び１４１）、ＡＡＶ ＣＬｖ－２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号６８及び１４２）、ＡＡＶ ＣＬｖ－３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号６９及び１４３）、ＡＡＶ ＣＬｖ－４（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７０及び１４４）、ＡＡＶ ＣＬｖ－６（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７１及び１４５）、ＡＡＶ ＣＬｖ－８（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７２及び１４６）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７３及び１４７）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７４及び１４８）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７５及び１４９）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７６及び１５０）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７７及び１５１）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７８及び１５２）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７９及び１５３）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８（ＵＳ８７３４８０９の配列番号８０及び１５４）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号８１及び１５５）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号８２及び１５６）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号８３及び１５７）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４（ＵＳ８７３４８０９の配列番号８４及び１５８）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５（ＵＳ８７３４８０９の配列番号８５及び１５９）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６（ＵＳ８７３４８０９の配列番号７７及び１５１）、ＡＡＶ ＣＨｔ－１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号８６及び１６０）、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１７１）、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１７２）、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１７３）、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１７４）、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１７５）、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１７６）、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１７７）、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１７８）、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１８１）、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３（ＵＳ８７３４８０９の配列番号１８３）、またはそれらのバリアントもしくは誘導体であり得るか、またはそれを含み得る。
【0129】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際公開番号ＷＯ２０１６０６５００１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１及び５１）、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２及び５２）、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３及び５３）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４及び５４）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号５及び５５）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号６及び５６）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号７及び５７）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号８及び５８）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号９及び５９）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１０及び６０）、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１１及び６１）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１２及び６２）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１３及び６３）、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１４及び６４）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１５及び６５）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１６及び６６）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１７及び６７）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１８及び６８）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号１９及び６９）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２０及び７０）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２１及び７１）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２２及び７２）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２３及び７３）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２４及び７４）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２５及び７５）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２６及び７６）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２７及び７７）、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２８及び７８）、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号２９及び７９）、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３０及び８０）、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３１及び８１）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３２及び８２）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３３及び８３）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３４及び８４）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３５及び８５）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３６及び８６）、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３７及び８７）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３８及び８８）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号３９及び８９）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４０及び９０）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４１及び９１）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４２及び９２）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４３及び９３）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４４及び９４）、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４５及び９５）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４６及び９６）、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４７及び９７）、ＡＡＶ３Ｂ（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４８及び９８）、ＡＡＶ４（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号４９及び９９）、ＡＡＶ５（ＷＯ２０１６０６５００１の配列番号５０及び１００）、またはそれらのバリアントもしくは誘導体であり得るか、またはそれを含み得る。
【0130】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、表１に見られるもののいずれかから選択される血清型であり得るか、またはそれを含み得る。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、表１における任意の配列の配列、断片、またはバリアントを含み得る。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、表１における任意の配列の配列、断片、またはバリアントを含み得る。
【0131】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、表１における任意の配列の配列、断片、またはバリアントによってコードされ得る。
本明細書で参照及び／または記載されるＤＮＡ及びＲＮＡ配列において、単一文字記号は、以下の記述を有する：アデニンについてはＡ；シトシンについてはＣ；グアニンについてはＧ；チミンについてはＴ；ウラシルについてはＵ；弱塩基、例えば、アデニンまたはチミンについてはＷ；強ヌクレオチド、例えば、シトシン及びグアニンについてはＳ；アミノヌクレオチド、例えば、アデニン及びシトシンについてはＭ；ケトヌクレオチド、例えば、グアニン及びチミンについてはＫ；プリンであるアデニン及びグアニンについてはＲ；ピリミジンであるシトシン及びチミンについてはＹ；Ａではない任意の塩基（例えば、シトシン、グアニン、及びチミン）についてはＢ；Ｃではない任意の塩基（例えば、アデニン、グアニン、及びチミン）についてはＤ；Ｇではない任意の塩基（例えば、アデニン、シトシン、及びチミン）についてはＨ；Ｔではない任意の塩基（例えば、アデニン、シトシン、及びグアニン）についてはＶ；任意のヌクレオチド（ギャップではない）についてはＮ；及びゼロについてはＺ。
本明細書で参照及び／または記載されるＤＮＡ及びＲＮＡ配列において、単一文字記号は、以下の記述を有する：アデニンについてはＡ；シトシンについてはＣ；グアニンについてはＧ；チミンについてはＴ；ウラシルについてはＵ；弱塩基、例えば、アデニンまたはチミンについてはＷ；強ヌクレオチド、例えば、シトシン及びグアニンについてはＳ；アミノヌクレオチド、例えば、アデニン及びシトシンについてはＭ；ケトヌクレオチド、例えば、グアニン及びチミンについてはＫ；プリンであるアデニン及びグアニンについてはＲ；ピリミジンであるシトシン及びチミンについてはＹ；Ａではない任意の塩基（例えば、シトシン、グアニン、及びチミン）についてはＢ；Ｃではない任意の塩基（例えば、アデニン、グアニン、及びチミン）についてはＤ；Ｇではない任意の塩基（例えば、アデニン、シトシン、及びチミン）についてはＨ；Ｔではない任意の塩基（例えば、アデニン、シトシン、及びグアニン）についてはＶ；任意のヌクレオチド（ギャップではない）についてはＮ；及びゼロについてはＺ。
【0132】
本明細書で参照及び／または記載されるアミノ酸配列のいずれかにおいて、単一文字記号は、以下の記述を有する：グリシンについてはＧ（Ｇｌｙ）；アラニンについては（Ａｌａ）；ロイシンについてはＬ（Ｌｅｕ）；メチオニンについてはＭ（Ｍｅｔ）；フェニルアラニンについてはＦ（Ｐｈｅ）；トリプトファンについてはＷ（Ｔｒｐ）；リシンについてはＫ（Ｌｙｓ）；グルタミンについてはＱ（Ｇｌｎ）；グルタミン酸についてはＥ（Ｇｌｕ）；セリンについてはＳ（Ｓｅｒ）；プロリンについてはＰ（Ｐｒｏ）；バリンについてはＶ（Ｖａｌ）；イソロイシンについてはＩ（Ｉｌｅ）；システインについてはＣ（Ｃｙｓ）；チロシンについてはＹ（Ｔｙｒ）；ヒスチジンについてはＨ（Ｈｉｓ）；アルギニンについてはＲ（Ａｒｇ）；アスパラギンについてはＮ（Ａｓｎ）；アスパラギン酸についてはＤ（Ａｓｐ）；トレオニンについてはＴ（Ｔｈｒ）；アスパラギン酸またはアスパラギンについてはＢ（Ａｓｘ）；ロイシンまたはイソロイシンについてはＪ（Ｘｌｅ）；ピロリシンについてはＯ（Ｐｙｌ）；セレノシステインについてはＵ（Ｓｅｃ）；任意のアミノ酸についてはＸ（Ｘａａ）；及びグルタミンまたはグルタミン酸についてはＺ（Ｇｌｘ）。
【0133】
【表1-1】
【0134】
【表1-2】
【0135】
【表1-3】
【0136】
【表1-4】
【0137】
【表1-5】
【0138】
【表1-6】
【0139】
【表1-7】
【0140】
【表1-8】
【0141】
【表1-9】
【0142】
【表1-10】
【0143】
【表1-11】
【0144】
【表1-12】
【0145】
【表1-13】
【0146】
【表1-14】
【0147】
【表1-15】
【0148】
【表1-16】
【0149】
【表1-17】
【0150】
【表1-18】
【0151】
【表1-19】
【0152】
【表1-20】
【0153】
【表1-21】
【0154】
【表1-22】
【0155】
【表1-23】
【0156】
【表1-24】
【0157】
【表1-25】
【0158】
【表1-26】
【0159】
【表1-27】
【0160】
【表1-28】
【0161】
【表1-29】
【0162】
【表1-30】
【0163】
【表1-31】
【0164】
【表1-32】
【0165】
【表1-33】
【0166】
【表1-34】
【0167】
表１に列挙される特許、出願、及び／または刊行物の各々の内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際特許公開ＷＯ２０１５０３８９５８（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ９（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２及び１１または本明細書の配列番号１３５及び１３６）、ＰＨＰ．Ｂ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号８及び９、本明細書の配列番号３及び４）、Ｇ２Ｂ－１３（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号１２、本明細書の配列番号５）、Ｇ２Ｂ－２６（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号１３、本明細書の配列番号３）、ＴＨ１．１－３２（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号１４、本明細書の配列番号６）、ＴＨ１．１－３５（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号１５、本明細書の配列番号７）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。さらに、ＷＯ２０１５０３８９５８に記載の「標的化ペプチド」または「アミノ酸インサート」（ＣＮＳ組織への送達を容易化するためにＡＡＶカプシド配列に挿入され得る配列を意味するために本明細書で互換的に使用される）のいずれかは、任意の親ＡＡＶ血清型、例えば、限定されないが、ＡＡＶ９（ＤＮＡ配列については配列番号１３５及びアミノ酸配列については配列番号１３６）に挿入され得る。所定の実施形態では、アミノ酸インサートは、親ＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ９）のアミノ酸５８６～５９２の間に挿入される。所定の実施形態では、アミノ酸インサートは、親ＡＡＶ配列のアミノ酸５８８～５８９の間に挿入される。アミノ酸インサートは、限定されないが、以下のアミノ酸配列のいずれかであり得る、ＴＬＡＶＰＦＫ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号１；本明細書の配列番号１２６０）、ＫＦＰＶＡＬＴ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３；本明細書の配列番号１２６１）、ＬＡＶＰＦＫ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３１；本明細書の配列番号１２６２）、ＡＶＰＦＫ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３２；本明細書の配列番号１２６３）、ＶＰＦＫ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３３；本明細書の配列番号１２６４）、ＴＬＡＶＰＦ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３４；本明細書の配列番号１２６５）、ＴＬＡＶＰ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３５；本明細書の配列番号１２６６）、ＴＬＡＶ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３６；本明細書の配列番号１２６７）、ＳＶＳＫＰＦＬ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２８；本明細書の配列番号１２６８）、ＦＴＬＴＴＰＫ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２９；本明細書の配列番号１２６９）、ＭＮＡＴＫＮＶ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３０；本明細書の配列番号１２７０）、ＱＳＳＱＴＰＲ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５４；本明細書の配列番号１２７１）、ＩＬＧＴＧＴＳ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５５；本明細書の配列番号１２７２）、ＴＲＴＮＰＥＡ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５６；本明細書の配列番号１２７３）、ＮＧＧＴＳＳＳ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５８；本明細書の配列番号１２７４）、またはＹＴＬＳＱＧＷ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号６０；本明細書の配列番号１２７５）。アミノ酸インサートをコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例は、限定されないが、以下を含む、ＡＡＧＴＴＴＣＣＴＧＴＧＧＣＧＴＴＧＡＣＴ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３；本明細書の配列番号１２７６について）、ＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２４及び４９；本明細書の配列番号１２７７）、ＡＧＴＧＴＧＡＧＴＡＡＧＣＣＴＴＴＴＴＴＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２５；本明細書の配列番号１２７８）、ＴＴＴＡＣＧＴＴＧＡＣＧＡＣＧＣＣＴＡＡＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２６；本明細書の配列番号１２７９）、ＡＴＧＡＡＴＧＣＴＡＣＧＡＡＧＡＡＴＧＴＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２７；本明細書の配列番号１２８０）、ＣＡＧＴＣＧＴＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＴＡＧＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号４８；本明細書の配列番号１２８１）、ＡＴＴＣＴＧＧＧＧＡＣＴＧＧＴＡＣＴＴＣＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５０及び５２；本明細書の配列番号１２８２）、ＡＣＧＣＧＧＡＣＴＡＡＴＣＣＴＧＡＧＧＣＴ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５１；本明細書の配列番号１２８３）、ＡＡＴＧＧＧＧＧＧＡＣＴＡＧＴＡＧＴＴＣＴ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５３；本明細書の配列番号１２８４）、またはＴＡＴＡＣＴＴＴＧＴＣＧＣＡＧＧＧＴＴＧＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５９；本明細書の配列番号１２８５）。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際特許公開ＷＯ２０１５０３８９５８（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ９（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２及び１１または本明細書の配列番号１３５及び１３６）、ＰＨＰ．Ｂ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号８及び９、本明細書の配列番号３及び４）、Ｇ２Ｂ－１３（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号１２、本明細書の配列番号５）、Ｇ２Ｂ－２６（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号１３、本明細書の配列番号３）、ＴＨ１．１－３２（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号１４、本明細書の配列番号６）、ＴＨ１．１－３５（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号１５、本明細書の配列番号７）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。さらに、ＷＯ２０１５０３８９５８に記載の「標的化ペプチド」または「アミノ酸インサート」（ＣＮＳ組織への送達を容易化するためにＡＡＶカプシド配列に挿入され得る配列を意味するために本明細書で互換的に使用される）のいずれかは、任意の親ＡＡＶ血清型、例えば、限定されないが、ＡＡＶ９（ＤＮＡ配列については配列番号１３５及びアミノ酸配列については配列番号１３６）に挿入され得る。所定の実施形態では、アミノ酸インサートは、親ＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ９）のアミノ酸５８６～５９２の間に挿入される。所定の実施形態では、アミノ酸インサートは、親ＡＡＶ配列のアミノ酸５８８～５８９の間に挿入される。アミノ酸インサートは、限定されないが、以下のアミノ酸配列のいずれかであり得る、ＴＬＡＶＰＦＫ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号１；本明細書の配列番号１２６０）、ＫＦＰＶＡＬＴ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３；本明細書の配列番号１２６１）、ＬＡＶＰＦＫ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３１；本明細書の配列番号１２６２）、ＡＶＰＦＫ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３２；本明細書の配列番号１２６３）、ＶＰＦＫ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３３；本明細書の配列番号１２６４）、ＴＬＡＶＰＦ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３４；本明細書の配列番号１２６５）、ＴＬＡＶＰ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３５；本明細書の配列番号１２６６）、ＴＬＡＶ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３６；本明細書の配列番号１２６７）、ＳＶＳＫＰＦＬ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２８；本明細書の配列番号１２６８）、ＦＴＬＴＴＰＫ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２９；本明細書の配列番号１２６９）、ＭＮＡＴＫＮＶ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３０；本明細書の配列番号１２７０）、ＱＳＳＱＴＰＲ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５４；本明細書の配列番号１２７１）、ＩＬＧＴＧＴＳ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５５；本明細書の配列番号１２７２）、ＴＲＴＮＰＥＡ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５６；本明細書の配列番号１２７３）、ＮＧＧＴＳＳＳ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５８；本明細書の配列番号１２７４）、またはＹＴＬＳＱＧＷ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号６０；本明細書の配列番号１２７５）。アミノ酸インサートをコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例は、限定されないが、以下を含む、ＡＡＧＴＴＴＣＣＴＧＴＧＧＣＧＴＴＧＡＣＴ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号３；本明細書の配列番号１２７６について）、ＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２４及び４９；本明細書の配列番号１２７７）、ＡＧＴＧＴＧＡＧＴＡＡＧＣＣＴＴＴＴＴＴＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２５；本明細書の配列番号１２７８）、ＴＴＴＡＣＧＴＴＧＡＣＧＡＣＧＣＣＴＡＡＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２６；本明細書の配列番号１２７９）、ＡＴＧＡＡＴＧＣＴＡＣＧＡＡＧＡＡＴＧＴＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号２７；本明細書の配列番号１２８０）、ＣＡＧＴＣＧＴＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＴＡＧＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号４８；本明細書の配列番号１２８１）、ＡＴＴＣＴＧＧＧＧＡＣＴＧＧＴＡＣＴＴＣＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５０及び５２；本明細書の配列番号１２８２）、ＡＣＧＣＧＧＡＣＴＡＡＴＣＣＴＧＡＧＧＣＴ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５１；本明細書の配列番号１２８３）、ＡＡＴＧＧＧＧＧＧＡＣＴＡＧＴＡＧＴＴＣＴ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５３；本明細書の配列番号１２８４）、またはＴＡＴＡＣＴＴＴＧＴＣＧＣＡＧＧＧＴＴＧＧ（ＷＯ２０１５０３８９５８の配列番号５９；本明細書の配列番号１２８５）。
【0168】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際特許公開ＷＯ２０１７１００６７１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ９ Ｋ４４９Ｒ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号４５、本明細書の配列番号９）、ＰＨＰ．Ｎ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号４６、本明細書の配列番号２）、ＰＨＰ．Ｓ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号４７、本明細書の配列番号８）、またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。さらに、ＷＯ２０１７１００６７１に記載の標的化ペプチドまたはアミノ酸インサートのいずれかは、任意の親ＡＡＶ血清型、例えば、限定されないが、ＡＡＶ９（配列番号９または配列番号１３６）に挿入され得る。所定の実施形態では、アミノ酸インサートは、親ＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ９）のアミノ酸５８６～５９２の間に挿入される。所定の実施形態では、アミノ酸インサートは、親ＡＡＶ配列のアミノ酸５８８～５８９の間に挿入される。アミノ酸インサートは、限定されないが、以下のアミノ酸配列のいずれかであり得る、ＡＱＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１；本明細書の配列番号１２８６）、ＡＱＳＶＳＫＰＦＬＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号２；本明細書の配列番号１２８７）、ＡＱＦＴＬＴＴＰＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列表における配列番号３；本明細書の配列番号１２８８）、ＤＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列表における配列番号４；本明細書の配列番号１２８９）、ＥＳＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５；本明細書の配列番号１２９０）、ＧＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号６；本明細書の配列番号１２９１）、ＡＱＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号７及び３３；本明細書の配列番号１２９２）、ＡＴＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８；本明細書の配列番号１２９３）、ＤＧＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号９；本明細書の配列番号１２９４）、ＧＧＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１０；本明細書の配列番号１２９５）、ＳＧＳＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１１；本明細書の配列番号１２９６）、ＡＱＴＬＡＱＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１２；本明細書の配列番号１２９７）、ＡＱＴＬＱＱＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１３；本明細書の配列番号１２９８）、ＡＱＴＬＳＮＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１４；本明細書の配列番号１２９９）、ＡＱＴＬＡＶＰＦＳＮＰ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１５；本明細書の配列番号１３００）、ＱＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１６；本明細書の配列番号１３０１）、ＮＱＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１７；本明細書の配列番号１３０２）、ＥＧＳＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１８；本明細書の配列番号１３０３）、ＳＧＮＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号１９；本明細書の配列番号１３０４）、ＥＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号２０；本明細書の配列番号１３０５）、ＤＳＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の表１における配列番号２１；本明細書の配列番号１３０６）、ＡＶＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号２２；本明細書の配列番号１３０７）、ＡＱＴＬＳＴＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号２３；本明細書の配列番号１３０８）、ＡＱＴＬＰＱＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号２４及び３２；本明細書の配列番号１３０９）、ＡＱＴＬＳＱＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号２５；本明細書の配列番号１３１０）、ＡＱＴＬＱＬＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号２６；本明細書の配列番号１３１１）、ＡＱＴＬＴＭＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号２７、及び３４及びＷＯ２０１７１００６７１の配列表における配列番号３５；本明細書の配列番号１３１２）、ＡＱＴＬＴＴＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号２８；本明細書の配列番号１３１３）、ＡＱＹＴＬＳＱＧＷＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号２９；本明細書の配列番号１３１４）、ＡＱＭＮＡＴＫＮＶＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号３０；本明細書の配列番号１３１５）、ＡＱＶＳＧＧＨＨＳＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号３１；本明細書の配列番号１３１６）、ＡＱＴＬＴＡＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の表１における配列番号３５；本明細書の配列番号１３１７）、ＡＱＴＬＳＫＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号３６；本明細書の配列番号１３１８）、ＱＡＶＲＴＳＬ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号３７；本明細書の配列番号１３１９）、ＹＴＬＳＱＧＷ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号３８；本明細書の配列番号１２７５）、ＬＡＫＥＲＬＳ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号３９；本明細書の配列番号１３２０）、ＴＬＡＶＰＦＫ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列表における配列番号４０；本明細書の配列番号１２６０）、ＳＶＳＫＰＦＬ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号４１；本明細書の配列番号１２６８）、ＦＴＬＴＴＰＫ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号４２；本明細書の配列番号１２６９）、ＭＮＳＴＫＮＶ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号４３；本明細書の配列番号１３２１）、ＶＳＧＧＨＨＳ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号４４；本明細書の配列番号１３２２）、ＳＡＱＴＬＡＶＰＦＫＡＱＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号４８；本明細書の配列番号１３２３）、ＳＸＸＸＬＡＶＰＦＫＡＱＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号４９（Ｘは任意のアミノ酸であり得る）；本明細書の配列番号１３２４）、ＳＡＱＸＸＸＶＰＦＫＡＱＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５０（Ｘは任意のアミノ酸であり得る）；本明細書の配列番号１３２５）、ＳＡＱＴＬＸＸＸＦＫＡＱＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５１（Ｘは任意のアミノ酸であり得る）；本明細書の配列番号１３２６）、ＳＡＱＴＬＡＶＸＸＸＡＱＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５２（Ｘは任意のアミノ酸であり得る）；本明細書の配列番号１３２７）、ＳＡＱＴＬＡＶＰＦＸＸＸＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５３（Ｘは任意のアミノ酸であり得る）；本明細書の配列番号１３２８）、ＴＮＨＱＳＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号６５；本明細書の配列番号１３２９）、ＡＱＡＱＴＧＷ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号６６；本明細書の配列番号１３３０）、ＤＧＴＬＡＴＰＦＫ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号６７；本明細書の配列番号１３３１）、ＤＧＴＬＡＴＰＦＫＸＸ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号６８（Ｘは任意のアミノ酸であり得る）；本明細書の配列番号１３３２）、ＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８０；本明細書の配列番号１３３３）、ＶＰＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８１；本明細書の配列番号１３３４）、ＦＫＡＱ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８２；本明細書の配列番号１３３５）、ＡＱＴＬＡＶ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８３；本明細書の配列番号１３３６）、ＡＱＴＬＡＶＰＦ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８４；本明細書の配列番号１３３７）、ＱＡＶＲ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８５；本明細書の配列番号１３３８）、ＡＶＲＴ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８６；本明細書の配列番号１３３９）、ＶＲＴＳ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８７；本明細書の配列番号１３４０）、ＲＴＳＬ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８８；本明細書の配列番号１３４１）、ＱＡＶＲＴ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号８９；本明細書の配列番号１３４２）、ＡＶＲＴＳ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号９０；本明細書の配列番号１３４３）、ＶＲＴＳＬ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号９１；本明細書の配列番号１３４４）、ＱＡＶＲＴＳ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号９２；本明細書の配列番号１３４５）、またはＡＶＲＴＳＬ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号９３；本明細書の配列番号１３４６）。
【0169】
アミノ酸インサートをコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例は、以下を含む、ＧＡＴＧＧＧＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧＧＣＡＣＡＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５４；本明細書の配列番号１３４７）、ＧＡＴＧＧＧＡＣＧＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧＧＣＡＣＡＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５５；本明細書の配列番号１３４８）、ＣＡＧＧＣＧＧＴＴＡＧＧＡＣＧＴＣＴＴＴＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５６；本明細書の配列番号１３４９）、ＣＡＧＧＴＣＴＴＣＡＣＧＧＡＣＴＣＡＧＡＣＴＡＴＣＡＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５７及び７８；本明細書の配列番号１３５０）、ＣＡＡＧＴＡＡＡＡＣＣＴＣＴＡＣＡＡＡＴＧＴＧＧＴＡＡＡＡＴＣＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５８；本明細書の配列番号１３５１）、ＡＣＴＣＡＴＣＧＡＣＣＡＡＴＡＣＴＴＧＴＡＣＴＡＴＣＴＣＴＣＴＡＧＡＡＣ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号５９；本明細書の配列番号１３５２）、ＧＧＡＡＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号６０；本明細書の配列番号１３５３）、ＧＧＴＣＧＣＧＧＴＴＣＴＴＧＴＴＴＧＴＧＧＡＴ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号６１；本明細書の配列番号１３５４）、ＣＧＡＣＣＴＴＧＡＡＧＣＧＣＡＴＧＡＡＣＴＣＣＴ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号６２；本明細書の配列番号１３５５）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＴＴＧＧＧＣＡＣＴＣＴＧＧＴＧＧＴＴＴＧＴＣ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号６３（Ｎは、Ａ、Ｃ、Ｔ、またはＧであり得る）；本明細書の配列番号１３５６）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＡＡＡＡＧＧＣＡＣＣＧＣＣＡＡＡＧＴＴＴＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号６９（Ｎは、Ａ、Ｃ、Ｔ、またはＧであり得る）；本明細書の配列番号１３５７）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＣＡＣＣＧＣＣＡＡＡＧＴＴＴＧＧＧＣＡＣＴ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号７０（Ｎは、Ａ、Ｃ、Ｔ、またはＧであり得る）；本明細書の配列番号１３５８）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＣＴＴＡＡＡＭＮＮＭＮＮＭＮＮＣＡＡＡＧＴＴＴＧＧＧＣＡＣＴＣＴＧＧＴＧＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号７１（Ｎは、Ａ、Ｃ、Ｔ、またはＧであり得る）；本明細書の配列番号１３５９）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＣＴＴＡＡＡＡＧＧＣＡＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＴＴＧＧＧＣＡＣＴＣＴＧＧＴＧＧＴＴＴＧＴＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号７２（Ｎは、Ａ、Ｃ、Ｔ、またはＧであり得る）；本明細書の配列番号１３６０）、ＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号７４；本明細書の配列番号１２７７）、ＡＧＴＧＴＧＡＧＴＡＡＧＣＣＴＴＴＴＴＴＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号７５；本明細書の配列番号１２７８）、ＴＴＴＡＣＧＴＴＧＡＣＧＡＣＧＣＣＴＡＡＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号７６；本明細書の配列番号１２７９）、ＴＡＴＡＣＴＴＴＧＴＣＧＣＡＧＧＧＴＴＧＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号７７；本明細書の配列番号１２８５）、またはＣＴＴＧＣＧＡＡＧＧＡＧＣＧＧＣＴＴＴＣＧ（ＷＯ２０１７１００６７１の配列番号７９；本明細書の配列番号１３６１）。
【0170】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ９６２４２７４（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ１（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１８１）、ＡＡＶ６（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１８２）、ＡＡＶ２（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１８３）、ＡＡＶ３ｂ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１８４）、ＡＡＶ７（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１８５）、ＡＡＶ８（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１８６）、ＡＡＶ１０（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１８７）、ＡＡＶ４（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１８８）、ＡＡＶ１１（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１８９）、ｂＡＡＶ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１９０）、ＡＡＶ５（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１９１）、ＧＰＶ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１９２；本明細書の配列番号９９２）、Ｂ１９（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１９３；本明細書の配列番号９９３）、ＭＶＭ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１９４；本明細書の配列番号９９４）、ＦＰＶ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１９５；本明細書の配列番号９９５）、ＣＰＶ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１９６；本明細書の配列番号９９６）またはそれらのバリアントであり得るか、またはそれを含み得る。さらに、米国特許番号ＵＳ９６２４２７４に記載の構造タンパク質インサートのいずれかは、限定されないが、任意の親ＡＡＶ血清型、例えば、限定されないが、ＡＡＶ２（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１８３）のＩ－４５３及びＩ－５８７に挿入され得る。アミノ酸インサートは、限定されないが、以下のアミノ酸配列のいずれかであり得る、ＶＮＬＴＷＳＲＡＳＧ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号５０；本明細書の配列番号１３６２）、ＥＦＣＩＮＨＲＧＹＷＶＣＧＤ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号５５；本明細書の配列番号１３６３）、ＥＤＧＱＶＭＤＶＤＬＳ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号８５；本明細書の配列番号１３６４）、ＥＫＱＲＮＧＴＬＴ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号８６；本明細書の配列番号１３６５）、ＴＹＱＣＲＶＴＨＰＨＬＰＲＡＬＭＲ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号８７；本明細書の配列番号１３６６）、ＲＨＳＴＴＱＰＲＫＴＫＧＳＧ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号８８；本明細書の配列番号１３６７）、ＤＳＮＰＲＧＶＳＡＹＬＳＲ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号８９；本明細書の配列番号１３６８）、ＴＩＴＣＬＷＤＬＡＰＳＫ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号９０；本明細書の配列番号１３６９）、ＫＴＫＧＳＧＦＦＶＦ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号９１；本明細書の配列番号１３７０）、ＴＨＰＨＬＰＲＡＬＭＲＳ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号９２；本明細書の配列番号１３７１）、ＧＥＴＹＱＣＲＶＴＨＰＨＬＰＲＡＬＭＲＳＴＴＫ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号９３；本明細書の配列番号１３７２）、ＬＰＲＡＬＭＲＳ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号９４；本明細書の配列番号１３７３）、ＩＮＨＲＧＹＷＶ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号９５；本明細書の配列番号１３７４）、ＣＤＡＧＳＶＲＴＮＡＰＤ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号６０；本明細書の配列番号１３７５）、ＡＫＡＶＳＮＬＴＥＳＲＳＥＳＬＱＳ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号９６；本明細書の配列番号１３７６）、ＳＬＴＧＤＥＦＫＫＶＬＥＴ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号９７；本明細書の配列番号１３７７）、ＲＥＡＶＡＹＲＦＥＥＤ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号９８；本明細書の配列番号１３７８）、ＩＮＰＥＩＩＴＬＤＧ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号９９；本明細書の配列番号１３７９）、ＤＩＳＶＴＧＡＰＶＩＴＡＴＹＬ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１００；本明細書の配列番号１３８０）、ＤＩＳＶＴＧＡＰＶＩＴＡ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１０１；本明細書の配列番号１３８１）、ＰＫＴＶＳＮＬＴＥＳＳＳＥＳＶＱＳ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１０２；本明細書の配列番号１３８２）、ＳＬＭＧＤＥＦＫＡＶＬＥＴ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１０３；本明細書の配列番号１３８３）、ＱＨＳＶＡＹＴＦＥＥＤ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１０４；本明細書の配列番号１３８４）、ＩＮＰＥＩＩＴＲＤＧ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１０５；本明細書の配列番号１３８５）、ＤＩＳＬＴＧＤＰＶＩＴＡＳＹＬ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１０６；本明細書の配列番号１３８６）、ＤＩＳＬＴＧＤＰＶＩＴＡ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１０７；本明細書の配列番号１３８７）、ＤＱＳＩＤＦＥＩＤＳＡ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１０８；本明細書の配列番号１３８８）、ＫＮＶＳＥＤＬＰＬＰＴＦＳＰＴＬＬＧＤＳ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１０９；本明細書の配列番号１３８９）、ＫＮＶＳＥＤＬＰＬＰＴ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１１０；本明細書の配列番号１３９０）、ＣＤＳＧＲＶＲＴＤＡＰＤ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１１１；本明細書の配列番号１３９１）、ＦＰＥＨＬＬＶＤＦＬＱＳＬＳ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１１２；本明細書の配列番号１３９２）、ＤＡＥＦＲＨＤＳＧ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号６５；本明細書の配列番号１３９３）、ＨＹＡＡＡＱＷＤＦＧＮＴＭＣＱＬ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１１３；本明細書の配列番号１３９４）、ＹＡＡＱＷＤＦＧＮＴＭＣＱ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１１４；本明細書の配列番号１３９５）、ＲＳＱＫＥＧＬＨＹＴ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１１５；本明細書の配列番号１３９６）、ＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＷＡＮＰＱＡＥ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１１６；本明細書の配列番号１３９７）、ＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＷＡＮＰ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１１７；本明細書の配列番号１３９８）、ＳＳＲＴＰＳＤＫＰ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１１８；本明細書の配列番号１３９９）、ＮＡＤＧＮＶＤＹＨＭＮＳＶＰ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１１９；本明細書の配列番号１４００）、ＤＧＮＶＤＹＨＭＮＳＶ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１２０；本明細書の配列番号１４０１）、ＲＳＦＫＥＦＬＱＳＳＬＲＡＬＲＱ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１２１；本明細書の配列番号１４０２）；ＦＫＥＦＬＱＳＳＬＲＡ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１２２；本明細書の配列番号１４０３）、またはＱＭＷＡＰＱＷＧＰＤ（ＵＳ９６２４２７４の配列番号１２３；本明細書の配列番号１４０４）。
【0171】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許番号ＵＳ９４７５８４５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ネイティブＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸位置５８５～５９０で１つ以上のアミノ酸の改変を含むＡＡＶカプシドタンパク質であり得るか、またはそれを有し得る。さらに、改変は、限定されないが、アミノ酸配列ＲＧＮＲＱＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号３；本明細書の配列番号１４０５）、ＳＳＳＴＤＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４；本明細書の配列番号１４０６）、ＳＳＮＴＡＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号５；本明細書の配列番号１４０７）、ＳＮＳＮＬＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６；本明細書の配列番号１４０８）、ＳＳＴＴＡＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７；本明細書の配列番号１４０９）、ＡＡＮＴＡＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８；本明細書の配列番号１４１０）、ＱＱＮＴＡＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９；本明細書の配列番号１４１１）、ＳＡＱＡＱＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１０；本明細書の配列番号１４１２）、ＱＡＮＴＧＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１１；本明細書の配列番号１４１３）、ＮＡＴＴＡＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１２；本明細書の配列番号１４１４）、ＳＳＴＡＧＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３及び２０；本明細書の配列番号１４１５）、ＱＱＮＴＡＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４；本明細書の配列番号１４１６）、ＰＳＴＡＧＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５；本明細書の配列番号１４１７）、ＮＱＮＴＡＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１６；本明細書の配列番号１４１８）、ＱＡＡＮＡＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１７；本明細書の配列番号１４１９）、ＳＩＶＧＬＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１８；本明細書の配列番号１４２０）、ＡＡＳＴＡＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１９、及び２７；本明細書の配列番号１４２１）、ＳＱＮＴＴＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号２１；本明細書の配列番号１４２２）、ＱＱＤＴＡＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号２２；本明細書の配列番号１４２３）、ＱＴＮＴＧＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号２３；本明細書の配列番号１４２４）、ＱＴＮＧＡＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号２４；本明細書の配列番号１４２５）、ＱＱＮＡＡＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号２５；本明細書の配列番号１４２６）、またはＡＡＮＴＱＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号２６；本明細書の配列番号１４２７）をもたらし得る。所定の実施形態では、アミノ酸改変は、ネイティブＡＡＶ２カプシドタンパク質におけるアミノ酸位置２６２から２６５または標的化配列を有する別のＡＡＶのカプシドタンパク質における対応する位置での置換である。標的化配列は、限定されないが、アミノ酸配列ＮＧＲＡＨＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号３８；本明細書の配列番号１４２８）、ＱＰＥＨＳＳＴ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号３９及び５０；本明細書の配列番号１４２９）、ＶＮＴＡＮＳＴ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４０；本明細書の配列番号１４３０）、ＨＧＰＭＱＫＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４１；本明細書の配列番号１４３１）、ＰＨＫＰＰＬＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４２；本明細書の配列番号１４３２）、ＩＫＮＮＥＭＷ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４３；本明細書の配列番号１４３３）、ＲＮＬＤＴＰＭ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４４；本明細書の配列番号１４３４）、ＶＤＳＨＲＱＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４５；本明細書の配列番号１４３５）、ＹＤＳＫＴＫＴ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４６；本明細書の配列番号１４３６）、ＳＱＬＰＨＱＫ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４７；本明細書の配列番号１４３７）、ＳＴＭＱＱＮＴ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４８；本明細書の配列番号１４３８）、ＴＥＲＹＭＴＱ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号４９；本明細書の配列番号１４３９）、ＤＡＳＬＳＴＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号５１；本明細書の配列番号１４４０）、ＤＬＰＮＫＫＴ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号５２；本明細書の配列番号１４４１）、ＤＬＴＡＡＲＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号５３；本明細書の配列番号１４４２）、ＥＰＨＱＦＮＹ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号５４；本明細書の配列番号１４４３）、ＥＰＱＳＮＨＴ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号５５；本明細書の配列番号１４４４）、ＭＳＳＷＰＳＱ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号５６；本明細書の配列番号１４４５）、ＮＰＫＨＮＡＴ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号５７；本明細書の配列番号１４４６）、ＰＤＧＭＲＴＴ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号５８；本明細書の配列番号１４４７）、ＰＮＮＮＫＴＴ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号５９；本明細書の配列番号１４４８）、ＱＳＴＴＨＤＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６０；本明細書の配列番号１４４９）、ＴＧＳＫＱＫＱ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６１；本明細書の配列番号１４５０）、ＳＬＫＨＱＡＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６２；本明細書の配列番号１４５１）、ＳＰＩＤＧＥＱ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６３；本明細書の配列番号１４５２）、ＷＩＦＰＷＩＱＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６４及び１１２；本明細書の配列番号１４５３）、ＣＤＣＲＧＤＣＦＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６５；本明細書の配列番号１４５４）、ＣＮＧＲＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６６；本明細書の配列番号１４５５）、ＣＰＲＥＣＥＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６７；本明細書の配列番号１４５６）、ＣＴＴＨＷＧＦＴＬＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６８及び１２３；本明細書の配列番号１４５７）、ＣＧＲＲＡＧＧＳＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号６９；本明細書の配列番号１４５８）、ＣＫＧＧＲＡＫＤＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７０；本明細書の配列番号１４５９）、ＣＶＰＥＬＧＨＥＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７１及び１１５；本明細書の配列番号１４６０）、ＣＲＲＥＴＡＷＡＫ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７２；本明細書の配列番号１４６１）、ＶＳＷＦＳＨＲＹＳＰＦＡＶＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７３；本明細書の配列番号１４６２）、ＧＹＲＤＧＹＡＧＰＩＬＹＮ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７４；本明細書の配列番号１４６３）、ＸＸＸＹＸＸＸ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７５；本明細書の配列番号１４６４）、ＹＸＮＷ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７６；本明細書の配列番号１４６５）、ＲＰＬＰＰＬＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７７；本明細書の配列番号１４６６）、ＡＰＰＬＰＰＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７８；本明細書の配列番号１４６７）、ＤＶＦＹＰＹＰＹＡＳＧＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号７９；本明細書の配列番号１４６８）、ＭＹＷＹＰＹ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８０；本明細書の配列番号１４６９）、ＤＩＴＷＤＱＬＷＤＬＭＫ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８１；本明細書の配列番号１４７０）、ＣＷＤＤＸＷＬＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８２；本明細書の配列番号１４７１）、ＥＷＣＥＹＬＧＧＹＬＲＣＹＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８３；本明細書の配列番号１４７２）、ＹＸＣＸＸＧＰＸＴＷＸＣＸＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８４；本明細書の配列番号１４７３）、ＩＥＧＰＴＬＲＱＷＬＡＡＲＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８５；本明細書の配列番号１４７４）、ＬＷＸＸＸ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８６；本明細書の配列番号１４７５）、ＸＦＸＸＹＬＷ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８７；本明細書の配列番号１４７６）、ＳＳＩＩＳＨＦＲＷＧＬＣＤ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８８；本明細書の配列番号１４７７）、ＭＳＲＰＡＣＰＰＮＤＫＹＥ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号８９；本明細書の配列番号１４７８）、ＣＬＲＳＧＲＧＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９０；本明細書の配列番号１４７９）、ＣＨＷＭＦＳＰＷＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９１；本明細書の配列番号１４８０）、ＷＸＸＦ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９２；本明細書の配列番号１４８１）、ＣＳＳＲＬＤＡＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９３；本明細書の配列番号１４８２）、ＣＬＰＶＡＳＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９４；本明細書の配列番号１４８３）、ＣＧＦＥＣＶＲＱＣＰＥＲＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９５；本明細書の配列番号１４８４）、ＣＶＡＬＣＲＥＡＣＧＥＧＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９６；本明細書の配列番号１４８５）、ＳＷＣＥＰＧＷＣＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９７；本明細書の配列番号１４８６）、ＹＳＧＫＷＧＷ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９８；本明細書の配列番号１４８７）、ＧＬＳＧＧＲＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号９９；本明細書の配列番号１４８８）、ＬＭＬＰＲＡＤ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１００；本明細書の配列番号１４８９）、ＣＳＣＦＲＤＶＣＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１０１；本明細書の配列番号１４９０）、ＣＲＤＶＶＳＶＩＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１０２；本明細書の配列番号１４９１）、ＭＡＲＳＧＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１０３；本明細書の配列番号１４９２）、ＭＡＲＡＫＥ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１０４；本明細書の配列番号１４９３）、ＭＳＲＴＭＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１０５；本明細書の配列番号１４９４）、ＫＣＣＹＳＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１０６；本明細書の配列番号１４９５）、ＭＹＷＧＤＳＨＷＬＱＹＷＹＥ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１０７；本明細書の配列番号１４９６）、ＭＱＬＰＬＡＴ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１０８；本明細書の配列番号１４９７）、ＥＷＬＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１０９；本明細書の配列番号１４９８）、ＳＮＥＷ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１１０；本明細書の配列番号１４９９）、ＴＮＹＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１１１；本明細書の配列番号１５００）、ＷＤＬＡＷＭＦＲＬＰＶＧ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１１３；本明細書の配列番号１５０１）、ＣＴＶＡＬＰＧＧＹＶＲＶＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１１４；本明細書の配列番号１５０２）、ＣＶＡＹＣＩＥＨＨＣＷＴＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１１６；本明細書の配列番号１５０３）、ＣＶＦＡＨＮＹＤＹＬＶＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１１７；本明細書の配列番号１５０４）、ＣＶＦＴＳＮＹＡＦＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１１８；本明細書の配列番号１５０５）、ＶＨＳＰＮＫＫ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１１９；本明細書の配列番号１５０６）、ＣＲＧＤＧＷＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１２０；本明細書の配列番号１５０７）、ＸＲＧＣＤＸ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１２１；本明細書の配列番号１５０８）、ＰＸＸＸ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１２２；本明細書の配列番号１５０９）、ＳＧＫＧＰＲＱＩＴＡＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１２４；本明細書の配列番号１５１０）、ＡＡＡＡＡＡＡＡＡＸＸＸＸＸ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１２５；本明細書の配列番号１５１１）、ＶＹＭＳＰＦ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１２６；本明細書の配列番号１５１２）、ＡＴＷＬＰＰＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１２７；本明細書の配列番号１５１３）、ＨＴＭＹＹＨＨＹＱＨＨＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１２８；本明細書の配列番号１５１４）、ＳＥＶＧＣＲＡＧＰＬＱＷＬＣＥＫＹＦＧ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１２９；本明細書の配列番号１５１５）、ＣＧＬＬＰＶＧＲＰＤＲＮＶＷＲＷＬＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３０；本明細書の配列番号１５１６）、ＣＫＧＱＣＤＲＦＫＧＬＰＷＥＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３１；本明細書の配列番号１５１７）、ＳＧＲＳＡ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３２；本明細書の配列番号１５１８）、ＷＧＦＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３３；本明細書の配列番号１５１９）、ＡＥＰＭＰＨＳＬＮＦＳＱＹＬＷＹＴ（
ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３４；本明細書の配列番号１５２０）、ＷＡＹＸＳＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３５；本明細書の配列番号１５２１）、ＩＥＬＬＱＡＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３６；本明細書の配列番号１５２２）、ＡＹＴＫＣＳＲＱＷＲＴＣＭＴＴＨ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３７；本明細書の配列番号１５２３）、ＰＱＮＳＫＩＰＧＰＴＦＬＤＰＨ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３８；本明細書の配列番号１５２４）、ＳＭＥＰＡＬＰＤＷＷＷＫＭＦＫ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３９；本明細書の配列番号１５２５）、ＡＮＴＰＣＧＰＹＴＨＤＣＰＶＫＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４０；本明細書の配列番号１５２６）、ＴＡＣＨＱＨＶＲＭＶＲＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４１；本明細書の配列番号１５２７）、ＶＰＷＭＥＰＡＹＱＲＦＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４２；本明細書の配列番号１５２８）、ＤＰＲＡＴＰＧＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４３；本明細書の配列番号１５２９）、ＦＲＰＮＲＡＱＤＹＮＴＮ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４４；本明細書の配列番号１５３０）、ＣＴＫＮＳＹＬＭＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４５；本明細書の配列番号１５３１）、ＣＸＸＴＸＸＸＧＸＧＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４６；本明細書の配列番号１５３２）、ＣＰＩＥＤＲＰＭＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４７；本明細書の配列番号１５３３）、ＨＥＷＳＹＬＡＰＹＰＷＦ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４８；本明細書の配列番号１５３４）、ＭＣＰＫＨＰＬＧＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４９；本明細書の配列番号１５３５）、ＲＭＷＰＳＳＴＶＮＬＳＡＧＲＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５０；本明細書の配列番号１５３６）、ＳＡＫＴＡＶＳＱＲＶＷＬＰＳＨＲＧＧＥＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５１；本明細書の配列番号１５３７）、ＫＳＲＥＨＶＮＮＳＡＣＰＳＫＲＩＴＡＡＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５２；本明細書の配列番号１５３８）、ＥＧＦＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５３；本明細書の配列番号１５３９）、ＡＧＬＧＶＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５４；本明細書の配列番号１５４０）、ＧＴＲＱＧＨＴＭＲＬＧＶＳＤＧ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５５；本明細書の配列番号１５４１）、ＩＡＧＬＡＴＰＧＷＳＨＷＬＡＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５６；本明細書の配列番号１５４２）、ＳＭＳＩＡＲＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５７；本明細書の配列番号１５４３）、ＨＴＦＥＰＧＶ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５８；本明細書の配列番号１５４４）、ＮＴＳＬＫＲＩＳＮＫＲＩＲＲＫ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５９；本明細書の配列番号１５４５）、ＬＲＩＫＲＫＲＲＫＲＫＫＴＲＫ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１６０；本明細書の配列番号１５４６）、ＧＧＧ、ＧＦＳ、ＬＷＳ、ＥＧＧ、ＬＬＶ、ＬＳＰ、ＬＢＳ、ＡＧＧ、ＧＲＲ、ＧＧＨ、またはＧＴＶのいずれかであり得る。
ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３４；本明細書の配列番号１５２０）、ＷＡＹＸＳＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３５；本明細書の配列番号１５２１）、ＩＥＬＬＱＡＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３６；本明細書の配列番号１５２２）、ＡＹＴＫＣＳＲＱＷＲＴＣＭＴＴＨ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３７；本明細書の配列番号１５２３）、ＰＱＮＳＫＩＰＧＰＴＦＬＤＰＨ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３８；本明細書の配列番号１５２４）、ＳＭＥＰＡＬＰＤＷＷＷＫＭＦＫ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１３９；本明細書の配列番号１５２５）、ＡＮＴＰＣＧＰＹＴＨＤＣＰＶＫＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４０；本明細書の配列番号１５２６）、ＴＡＣＨＱＨＶＲＭＶＲＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４１；本明細書の配列番号１５２７）、ＶＰＷＭＥＰＡＹＱＲＦＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４２；本明細書の配列番号１５２８）、ＤＰＲＡＴＰＧＳ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４３；本明細書の配列番号１５２９）、ＦＲＰＮＲＡＱＤＹＮＴＮ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４４；本明細書の配列番号１５３０）、ＣＴＫＮＳＹＬＭＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４５；本明細書の配列番号１５３１）、ＣＸＸＴＸＸＸＧＸＧＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４６；本明細書の配列番号１５３２）、ＣＰＩＥＤＲＰＭＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４７；本明細書の配列番号１５３３）、ＨＥＷＳＹＬＡＰＹＰＷＦ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４８；本明細書の配列番号１５３４）、ＭＣＰＫＨＰＬＧＣ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１４９；本明細書の配列番号１５３５）、ＲＭＷＰＳＳＴＶＮＬＳＡＧＲＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５０；本明細書の配列番号１５３６）、ＳＡＫＴＡＶＳＱＲＶＷＬＰＳＨＲＧＧＥＰ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５１；本明細書の配列番号１５３７）、ＫＳＲＥＨＶＮＮＳＡＣＰＳＫＲＩＴＡＡＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５２；本明細書の配列番号１５３８）、ＥＧＦＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５３；本明細書の配列番号１５３９）、ＡＧＬＧＶＲ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５４；本明細書の配列番号１５４０）、ＧＴＲＱＧＨＴＭＲＬＧＶＳＤＧ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５５；本明細書の配列番号１５４１）、ＩＡＧＬＡＴＰＧＷＳＨＷＬＡＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５６；本明細書の配列番号１５４２）、ＳＭＳＩＡＲＬ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５７；本明細書の配列番号１５４３）、ＨＴＦＥＰＧＶ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５８；本明細書の配列番号１５４４）、ＮＴＳＬＫＲＩＳＮＫＲＩＲＲＫ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１５９；本明細書の配列番号１５４５）、ＬＲＩＫＲＫＲＲＫＲＫＫＴＲＫ（ＵＳ９４７５８４５の配列番号１６０；本明細書の配列番号１５４６）、ＧＧＧ、ＧＦＳ、ＬＷＳ、ＥＧＧ、ＬＬＶ、ＬＳＰ、ＬＢＳ、ＡＧＧ、ＧＲＲ、ＧＧＨ、またはＧＴＶのいずれかであり得る。
【0172】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開番号ＵＳ２０１６０３６９２９８（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ２の部位特異的変異カプシドタンパク質（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９７；本明細書の配列番号１５４７）またはそれらのバリアントであって、特異的変異部位が、ＶＰ１またはその断片の部位Ｒ４４７、Ｇ４５３、Ｓ５７８、Ｎ５８７、Ｎ５８７＋１、Ｓ６６２から選択される少なくとも１つの部位であるものであり得るか、またはそれを有し得る。
【0173】
さらに、ＵＳ２０１６０３６９２９８に記載の変異配列のいずれかは、限定されないが、以下の配列のいずれかであり得るか、またはそれを有し得る：ＳＤＳＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１及び配列番号２３１；本明細書の配列番号１５４８）、ＳＰＳＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２；本明細書の配列番号１５４９）、ＳＨＳＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３；本明細書の配列番号１５５０）、ＳＲＳＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４；本明細書の配列番号１５５１）、ＳＫＳＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５；本明細書の配列番号１５５２）、ＳＮＳＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６；本明細書の配列番号１５５３）、ＳＧＳＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７；本明細書の配列番号１５５４）、ＳＡＳＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８、１７５、及び２２１；本明細書の配列番号１５５５）、ＳＥＳＧＴＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９；本明細書の配列番号１５５６）、ＳＴＴＧＧＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０；本明細書の配列番号１５５７）、ＳＳＡＧＳＴＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１１；本明細書の配列番号１５５８）、ＮＮＤＳＱＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１２；本明細書の配列番号１５５９）、ＮＮＲＮＱＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１３；本明細書の配列番号１５６０）、ＮＮＮＫＱＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１４；本明細書の配列番号１５６１）、ＮＡＫＲＱＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１５；本明細書の配列番号１５６２）、ＮＤＥＨＱＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１６；本明細書の配列番号１５６３）、ＮＴＳＱＫＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１７；本明細書の配列番号１５６４）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＤＴＱＳＲＬＶＦＳＱＡＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８；本明細書の配列番号１５６５）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＤＳＧＴＥＴＱＳＧＬＤＦＳＱＡＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１９；本明細書の配列番号１５６６）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＥＳＧＴＰＴＱＳＡＬＥＦＳＱＡＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０；本明細書の配列番号１５６７）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＨＳＧＴＨＴＱＳＰＬＨＦＳＱＡＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１；本明細書の配列番号１５６８）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＳＳＧＴＩＴＩＳＨＬＩＦＳＱＡＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２；本明細書の配列番号１５６９）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＲＳＧＩＭＴＫＳＳＬＭＦＳＱＡＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２３；本明細書の配列番号１５７０）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＫＳＧＲＫＴＬＳＮＬＳＦＳＱＡＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２４；本明細書の配列番号１５７１）、ＹＹＬＳＲＴＮＤＧＳＧＰＶＴＰＳＫＬＲＦＳＱＲＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５；本明細書の配列番号１５７２）、ＹＹＬＳＲＴＮＡＡＳＧＨＡＴＨＳＤＬＫＦＳＱＰＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６；本明細書の配列番号１５７３）、ＹＹＬＳＲＴＮＧＱＡＧＳＬＴＭＳＥＬＧＦＳＱＶＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２７；本明細書の配列番号１５７４）、ＹＹＬＳＲＴＮＳＴＧＧＮＱＴＴＳＱＬＬＦＳＱＬＳＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２８；本明細書の配列番号１５７５）、ＹＦＬＳＲＴＮＮＮＴＧＬＮＴＮＳＴＬＮＦＳＱＧＲＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２９；本明細書の配列番号１５７６）、ＳＫＴＧＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３０；本明細書の配列番号１５７７）、ＳＫＴＤＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３１；本明細書の配列番号１５７８）、ＳＫＴＥＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３２；本明細書の配列番号１５７９）、ＳＫＴＰＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３３；本明細書の配列番号１５８０）、ＳＫＴＨＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３４；本明細書の配列番号１５８１）、ＳＫＴＱＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３５；本明細書の配列番号１５８２）、ＳＫＴＩＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３６；本明細書の配列番号１５８３）、ＳＫＴＭＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３７；本明細書の配列番号１５８４）、ＳＫＴＲＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３８；本明細書の配列番号１５８５）、ＳＫＴＮＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号３９；本明細書の配列番号１５８６）、ＳＫＴＶＧＲＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４０；本明細書の配列番号１５８７）、ＳＫＴＡＤＲＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４１；本明細書の配列番号１５８８）、ＳＫＫＬＳＱＮＮＮＳＫＹＳＷＱＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４２；本明細書の配列番号１５８９）、ＳＫＰＴＴＧＮＮＮＳＤＹＳＷＰＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４３；本明細書の配列番号１５９０）、ＳＴＱＫＮＥＮＮＮＳＮＹＳＷＰＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４４；本明細書の配列番号１５９１）、ＨＫＤＤＥＧＫＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４５；本明細書の配列番号１５９２）、ＨＫＤＤＮＲＫＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４６；本明細書の配列番号１５９３）、ＨＫＤＤＴＮＫＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４７；本明細書の配列番号１５９４）、ＨＥＤＳＤＫＮＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４８；本明細書の配列番号１５９５）、ＨＲＤＧＡＤＳＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号４９；本明細書の配列番号１５９６）、ＨＧＤＮＫＳＲＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５０；本明細書の配列番号１５９７）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＦＥＥＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５１；本明細書の配列番号１５９８）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＳＥＥＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５２；本明細書の配列番号１５９９）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＶＥＥＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５３；本明細書の配列番号１６００）、ＫＱＧＳＤＫＴＮＶＤＤＡＧＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５４；本明細書の配列番号１６０１）、ＫＱＧＳＳＫＴＮＶＤＰＲＥＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５５；本明細書の配列番号１６０２）、ＫＱＧＳＲＫＴＮＶＤＨＫＱＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５６；本明細書の配列番号１６０３）、ＫＱＧＳＫＧＧＮＶＤＴＮＲＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５７；本明細書の配列番号１６０４）、ＫＱＧＳＧＥＡＮＶＤＮＧＤＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５８；本明細書の配列番号１６０５）、ＫＱＤＡＡＡＤＮＩＤＹＤＨＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号５９；本明細書の配列番号１６０６）、ＫＱＳＧＴＲＳＮＡＡＡＳＳＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６０；本明細書の配列番号１６０７）、ＫＥＮＴＮＴＮＤＴＥＬＴＮＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６１；本明細書の配列番号１６０８）、ＱＲＧＮＮＶＡＡＴＡＤＶＮＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６２；本明細書の配列番号１６０９）、ＱＲＧＮＮＥＡＡＴＡＤＶＮＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６３；本明細書の配列番号１６１０）、ＱＲＧＮＮＰＡＡＴＡＤＶＮＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６４；本明細書の配列番号１６１１）、ＱＲＧＮＮＨＡＡＴＡＤＶＮＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６５；本明細書の配列番号１６１２）、ＱＥＥＮＮＩＡＡＴＰＧＶＮＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６６；本明細書の配列番号１６１３）、ＱＰＰＮＮＭＡＡＴＨＥＶＮＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６７；本明細書の配列番号１６１４）、ＱＨＨＮＮＳＡＡＴＴＩＶＮＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６８；本明細書の配列番号１６１５）、ＱＴＴＮＮＲＡＡＦＮＭＶＥＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号６９；本明細書の配列番号１６１６）、ＱＫＫＮＮＮＡＡＳＫＫＶＡＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７０；本明細書の配列番号１６１７）、ＱＧＧＮＮＫＡＡＤＤＡＶＫＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７１；本明細書の配列番号１６１８）、ＱＡＡＫＧＧＡＡＤＤＡＶＫＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７２；本明細書の配列番号１６１９）、ＱＤＤＲＡＡＡＡＮＥＳＶＤＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７３；本明細書の配列番号１６２０）、ＱＱＱＨＤＤＡＡＹＱＲＶＨＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７４；本明細書の配列番号１６２１）、ＱＳＳＳＳＬＡＡＶＳＴＶＱＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７５；本明細書の配列番号１６２２）、ＱＮＮＱＴＴＡＡＩＲＮＶＴＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７６；本明細書の配列番号１６２３）、ＮＹＮＫＫＳＤＮＶＤＦＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７７；本明細書の配列番号１６２４）、ＮＹＮＫＫＳＥＮＶＤＦＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７８；本明細書の配列番号１６２５）、ＮＹＮＫＫＳＬＮＶＤＦＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号７９；本明細書の配列番号１６２６）、ＮＹＮＫＫＳＰＮＶＤＦＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８０；本明細書の配列番号１６２７）、ＮＹＳＫＫＳＨＣＶＤＦＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８１；本明細書の配列番号１６２８）、ＮＹＲＫＴＩＹＶＤＦＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８２；本明細書の配列番号１６２９）、ＮＹＫＥＫＫＤＶＨＦＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８３；本明細書の配列番号１６３０）、ＮＹＧＨＲＡＩＶＱＦＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８４；本明細書の配列番号１６３１）、ＮＹＡＮＨＱＦＶＶＣＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８５；本明細書の配列番号１６３２）、ＮＹＤＤＤＰＴＧＶＬＬＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８６；本明細書の配列番号１６３３）、ＮＹＤＤＰＴＧＶＬＬＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８７；本明細書の配列番号１６３４）、ＮＦＥＱＱＮＳＶＥＷＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８８；本明細書の配列番号１６３５）、ＳＱＳＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号８９及び配列番号２４１；本明細書の配列番号１６３６）、ＮＮＧＳＱＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９０；本明細書の配列番号１６３７）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＷＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９１；本明細書の配列番号１６３８）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９２；本明細書の配列番号１６３９）、ＨＫＤＤＥＥＫＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９３、２０９、２１４、２１９、２２４、２３４、２３９、及び２４４；本明細書の配列番号１６４０）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＥＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９４；本明細書の配列番号１６４１）、ＱＲＧＮＮＱＡＡＴＡＤＶＮＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９５；本明細書の配列番号１６４２）、ＮＹＮＫＫＳＶＮＶＤＦＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９６；本明細書の配列番号１６４３）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０６；本明細書の配列番号１６４４）、ＳＡＳＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０７；本
明細書の配列番号１６４５）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０８；本明細書の配列番号１６４６）、ＳＡＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０９；本明細書の配列番号１６４７）、ＳＱＳＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１１０；本明細書の配列番号１６４８）、ＳＡＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１１１；本明細書の配列番号１６４９）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１１２；本明細書の配列番号１６５０）、ＳＧＡＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１１３；本明細書の配列番号１６５１）、ＳＧＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１７６；本明細書の配列番号１６５２）、ＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１７７、１８５、１９３及び２０２；本明細書の配列番号１６５３）、ＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１７８；本明細書の配列番号１６５４）、ＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１７９；本明細書の配列番号１６５５）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８０；本明細書の配列番号１６５６）、ＳＱＳＧＡＳＮＹ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８１、１８７、及び１９８；本明細書の配列番号１６５７）、ＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８２、１８８、１９１、及び１９９；本明細書の配列番号１６５８）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８３；本明細書の配列番号１６５９）、ＳＡＳＧＡＳＮＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８４；本明細書の配列番号１６６０）、ＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８６、１８９、１９４、１９７、及び２０３；本明細書の配列番号１６６１）、ＳＡＳＧＡＳＮＹ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１９０及び配列番号１９５；本明細書の配列番号１６６２）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１９２；本明細書の配列番号１６６３）、ＮＴＰＳＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１９６；本明細書の配列番号１６６４）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２００；本明細書の配列番号１６６５）、ＳＧＡＧＡＳＮＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０１；本明細書の配列番号１６６６）、ＣＴＣＣＡＧＶＶＳＶＶＳＭＲＳＲＶＣＶＮＳＧＣＡＧＣＴＤＨＣＶＶＳＲＮＳＧＴＣＶＭＳＡＣＡＣＡＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０４；本明細書の配列番号１６６７）、ＣＴＣＣＡＧＡＧＡＧＧＣＡＡＣＡＧＡＣＡＡＧＣＡＧＣＴＡＣＣＧＣＡＧＡＴＧＴＣＡＡＣＡＣＡＣＡＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０５；本明細書の配列番号１６６８）、ＳＡＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０６；本明細書の配列番号１６６９）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＥＳＧＳＴＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０７；本明細書の配列番号１６７０）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０８、２２８、及び２５３；本明細書の配列番号１６７１）、ＫＱＧＳＥＫＴＤＶＤＩＤＫＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１０；本明細書の配列番号１６７２）、ＳＴＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１１；本明細書の配列番号１６７３）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＴＳＧＩＥＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１２及び配列番号２４７；本明細書の配列番号１６７４）、ＳＫＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１３及び配列番号２４８；本明細書の配列番号１６７５）、ＫＱＧＡＡＡＤＤＶＥＩＤＧＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１５及び配列番号２５０；本明細書の配列番号１６７６）、ＳＥＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１６；本明細書の配列番号１６７７）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１７、２３２及び２４２；本明細書の配列番号１６７８）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１８、２３３、２３８、及び２４３；本明細書の配列番号１６７９）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２０、２２５及び２４５；本明細書の配列番号１６８０）、ＹＦＬＳＲＴＮＤＡＳＧＳＤＴＫＳＴＬＬＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２２；本明細書の配列番号１６８１）、ＳＴＴＰＳＥＮＮＮＳＥＹＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２３；本明細書の配列番号１６８２）、ＳＡＡＧＡＴＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２６及び配列番号２５１；本明細書の配列番号１６８３）、ＹＦＬＳＲＴＮＧＥＡＧＳＡＴＬＳＥＬＲＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２７；本明細書の配列番号１６８４）、ＨＧＤＤＡＤＲＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２９及び配列番号２５４；本明細書の配列番号１６８５）、ＫＱＧＡＥＫＳＤＶＥＶＤＲＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２３０及び配列番号２５５；本明細書の配列番号１６８６）、ＫＱＤＳＧＧＤＮＩＤＩＤＱＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２３５；本明細書の配列番号１６８７）、ＳＤＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２３６；本明細書の配列番号１６８８）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＥＧＧＨＤＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２３７；本明細書の配列番号１６８９）、ＫＥＤＧＧＧＳＤＶＡＩＤＥＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２４０；本明細書の配列番号１６９０）、ＳＮＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２４６；本明細書の配列番号１６９１）、及びＹＦＬＳＲＴＮＧＥＡＧＳＡＴＬＳＥＬＲＦＳＱＰＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５２；本明細書の配列番号１６９２）。アミノ酸変異部位をコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例は、以下を含む、ＡＧＣＶＶＭＤＣＡＧＧＡＲＳＣＡＳＣＡＡＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９７；本明細書の配列番号１６９３）、ＡＡＣＲＡＣＲＲＳＭＲＳＭＡＧＧＣＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９８；本明細書の配列番号１６９４）、ＣＡＣＲＲＧＧＡＣＲＲＣＲＭＳＲＲＳＡＲＳＴＴＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９９；本明細書の配列番号１６９５）、ＴＡＴＴＴＣＴＴＧＡＧＣＡＧＡＡＣＡＡＡＣＲＶＣＶＶＳＲＳＣＧＧＡＭＮＣＶＨＳＡＣＧＭＨＳＴＣＡＶＶＳＣＴＴＶＤＳＴＴＴＴＣＴＣＡＧＳＢＣＲＧＳＧＣＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１００；本明細書の配列番号１６９６）、ＴＣＡＡＭＡＭＭＡＶＮＳＲＶＣＳＲＳＡＡＣＡＡＣＡＡＣＡＧＴＲＡＳＴＴＣＴＣＧＴＧＧＭＭＡＧＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０１；本明細書の配列番号１６９７）、ＡＡＧＳＡＡＲＲＣＲＳＣＲＶＳＲＶＡＲＶＣＲＡＴＲＹＣＧＭＳＮＨＣＲＶＭＶＲＳＧＴＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０２；本明細書の配列番号１６９８）、ＣＡＧＶＶＳＶＶＳＭＲＳＲＶＣＶＮＳＧＣＡＧＣＴＤＨＣＶＶＳＲＮＳＧＴＣＶＭＳＡＣＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０３；本明細書の配列番号１６９９）、ＡＡＣＴＷＣＲＶＳＶＡＳＭＶＳＶＨＳＤＤＴＧＴＧＳＷＳＴＫＳＡＣＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０４；本明細書の配列番号１７００）、ＴＴＧＴＴＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＡＣＧＴＧＡＣＧＣＡＣＧＴＴＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５６；本明細書の配列番号１７０１）、ＴＣＣＣＣＧＴＧＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＡＴＡＡＴＧＴＧＧＣＣＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５７；本明細書の配列番号１７０２）、ＴＴＣＣＡＣＡＣＴＣＣＧＴＴＴＴＧＧＡＴＡＡＴＧＴＴＧＡＡＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５８；本明細書の配列番号１７０３）、ＡＧＧＧＡＣＡＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＣＡＴＧＣＴＧＴＧＧＴＣＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５９；本明細書の配列番号１７０４）、ＡＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＴＣＣＧＡＣＴＣＧＣＣＣＴＡＡＴＣＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６０；本明細書の配列番号１７０５）、ＴＣＣＴＡＧＴＡＧＡＡＧＡＣＡＣＣＣＴＣＴＣＡＣＴＧＣＣＣＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６１；本明細書の配列番号１７０６）、ＡＧＴＡＣＣＡＴＧＴＡＣＡＣＣＣＡＣＴＣＴＣＣＣＡＧＴＧＣＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６２；本明細書の配列番号１７０７）、ＡＴＡＴＧＧＡＣＧＴＴＣＡＴＧＣＴＧＡＴＣＡＣＣＡＴＡＣＣＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６３；本明細書の配列番号１７０８）、ＡＧＣＡＧＧＡＧＣＴＣＣＴＴＧＧＣＣＴＣＡＧＣＧＴＧＣＧＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６４；本明細書の配列番号１７０９）、ＡＣＡＡＧＣＡＧＣＴＴＣＡＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＣＡＣＴＧＡＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６５；本明細書の配列番号１７１０）、ＣＡＧＣＣＴＡＧＧＡＡＣＴＧＧＣＴＴＣＣＴＧＧＡＣＣＣＴＧＴＴＡＣＣＧＣＣＡＧＣＡＧＡＧＡＧＴＣＴＣＡＡＭＡＭＭＡＶＮＳＲＶＣＳＲＳＡＡＣＡＡＣＡＡＣＡＧＴＲＡＳＴＴＣＴＣＣＴＧＧＭＭＡＧＧＡＧＣＴＡＣＣＡＡＧＴＡＣＣＡＣＣＴＣＡＡＴＧＧＣＡＧＡＧＡＣＴＣＴＣＴＧＧＴＧＡＡＴＣＣＣＧＧＡＣＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＡＡＧＣＣＡＣＲＲＧＧＡＣＲＲＣＲＭＳＲＲＳＡＲＳＴＴＴＴＴＴＣＣＴＣＡＧＡＧＣＧＧＧＧＴＴＣＴＣＡＴＣＴＴＴＧＧＧＡＡＧＳＡＡＲＲＣＲＳＣＲＶＳＲＶＡＲＶＣＲＡＴＲＹＣＧＭＳＮＨＣＲＶＭＶＲＳＧＴＣＡＴＧＡＴＴＡＣＡＧＡＣＧＡＡＧＡＧＧＡＧＡＴＣＴＧＧＡＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６６；本明細書の配列番号１７１１）、ＴＧＧＧＡＣＡＡＴＧＧＣＧＧＴＣＧＴＣＴＣＴＣＡＧＡＧＴＴＫＴＫＫＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６７；本明細書の配列番号１７１２）、ＡＧＡＧＧＡＣＣＫＫＴＣＣＴＣＧＡＴＧＧＴＴＣＡＴＧＧＴＧＧＡＧＴＴＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６８；本明細書の配列番号１７１３）、ＣＣＡＣＴＴＡＧＧＧＣＣＴＧＧＴＣＧＡＴＡＣＣＧＴＴＣＧＧＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６９；本明細書の配列番号１７１４）、またはＴＣＴＣＧＣＣＣＣＡＡＧＡＧＴＡＧＡＡＡＣＣＣＴＴＣＳＴＴＹＹＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２７０；本明細書の配列番号１７１５）。
明細書の配列番号１６４５）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０８；本明細書の配列番号１６４６）、ＳＡＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０９；本明細書の配列番号１６４７）、ＳＱＳＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１１０；本明細書の配列番号１６４８）、ＳＡＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１１１；本明細書の配列番号１６４９）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１１２；本明細書の配列番号１６５０）、ＳＧＡＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１１３；本明細書の配列番号１６５１）、ＳＧＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１７６；本明細書の配列番号１６５２）、ＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１７７、１８５、１９３及び２０２；本明細書の配列番号１６５３）、ＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１７８；本明細書の配列番号１６５４）、ＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１７９；本明細書の配列番号１６５５）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８０；本明細書の配列番号１６５６）、ＳＱＳＧＡＳＮＹ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８１、１８７、及び１９８；本明細書の配列番号１６５７）、ＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８２、１８８、１９１、及び１９９；本明細書の配列番号１６５８）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８３；本明細書の配列番号１６５９）、ＳＡＳＧＡＳＮＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８４；本明細書の配列番号１６６０）、ＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１８６、１８９、１９４、１９７、及び２０３；本明細書の配列番号１６６１）、ＳＡＳＧＡＳＮＹ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１９０及び配列番号１９５；本明細書の配列番号１６６２）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１９２；本明細書の配列番号１６６３）、ＮＴＰＳＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１９６；本明細書の配列番号１６６４）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２００；本明細書の配列番号１６６５）、ＳＧＡＧＡＳＮＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０１；本明細書の配列番号１６６６）、ＣＴＣＣＡＧＶＶＳＶＶＳＭＲＳＲＶＣＶＮＳＧＣＡＧＣＴＤＨＣＶＶＳＲＮＳＧＴＣＶＭＳＡＣＡＣＡＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０４；本明細書の配列番号１６６７）、ＣＴＣＣＡＧＡＧＡＧＧＣＡＡＣＡＧＡＣＡＡＧＣＡＧＣＴＡＣＣＧＣＡＧＡＴＧＴＣＡＡＣＡＣＡＣＡＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０５；本明細書の配列番号１６６８）、ＳＡＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０６；本明細書の配列番号１６６９）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＥＳＧＳＴＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０７；本明細書の配列番号１６７０）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２０８、２２８、及び２５３；本明細書の配列番号１６７１）、ＫＱＧＳＥＫＴＤＶＤＩＤＫＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１０；本明細書の配列番号１６７２）、ＳＴＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１１；本明細書の配列番号１６７３）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＴＳＧＩＥＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１２及び配列番号２４７；本明細書の配列番号１６７４）、ＳＫＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１３及び配列番号２４８；本明細書の配列番号１６７５）、ＫＱＧＡＡＡＤＤＶＥＩＤＧＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１５及び配列番号２５０；本明細書の配列番号１６７６）、ＳＥＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１６；本明細書の配列番号１６７７）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１７、２３２及び２４２；本明細書の配列番号１６７８）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２１８、２３３、２３８、及び２４３；本明細書の配列番号１６７９）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２０、２２５及び２４５；本明細書の配列番号１６８０）、ＹＦＬＳＲＴＮＤＡＳＧＳＤＴＫＳＴＬＬＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２２；本明細書の配列番号１６８１）、ＳＴＴＰＳＥＮＮＮＳＥＹＳ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２３；本明細書の配列番号１６８２）、ＳＡＡＧＡＴＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２６及び配列番号２５１；本明細書の配列番号１６８３）、ＹＦＬＳＲＴＮＧＥＡＧＳＡＴＬＳＥＬＲＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２７；本明細書の配列番号１６８４）、ＨＧＤＤＡＤＲＦ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２２９及び配列番号２５４；本明細書の配列番号１６８５）、ＫＱＧＡＥＫＳＤＶＥＶＤＲＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２３０及び配列番号２５５；本明細書の配列番号１６８６）、ＫＱＤＳＧＧＤＮＩＤＩＤＱＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２３５；本明細書の配列番号１６８７）、ＳＤＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２３６；本明細書の配列番号１６８８）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＥＧＧＨＤＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２３７；本明細書の配列番号１６８９）、ＫＥＤＧＧＧＳＤＶＡＩＤＥＶ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２４０；本明細書の配列番号１６９０）、ＳＮＡＧＡＳＮ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２４６；本明細書の配列番号１６９１）、及びＹＦＬＳＲＴＮＧＥＡＧＳＡＴＬＳＥＬＲＦＳＱＰＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５２；本明細書の配列番号１６９２）。アミノ酸変異部位をコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例は、以下を含む、ＡＧＣＶＶＭＤＣＡＧＧＡＲＳＣＡＳＣＡＡＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９７；本明細書の配列番号１６９３）、ＡＡＣＲＡＣＲＲＳＭＲＳＭＡＧＧＣＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９８；本明細書の配列番号１６９４）、ＣＡＣＲＲＧＧＡＣＲＲＣＲＭＳＲＲＳＡＲＳＴＴＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号９９；本明細書の配列番号１６９５）、ＴＡＴＴＴＣＴＴＧＡＧＣＡＧＡＡＣＡＡＡＣＲＶＣＶＶＳＲＳＣＧＧＡＭＮＣＶＨＳＡＣＧＭＨＳＴＣＡＶＶＳＣＴＴＶＤＳＴＴＴＴＣＴＣＡＧＳＢＣＲＧＳＧＣＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１００；本明細書の配列番号１６９６）、ＴＣＡＡＭＡＭＭＡＶＮＳＲＶＣＳＲＳＡＡＣＡＡＣＡＡＣＡＧＴＲＡＳＴＴＣＴＣＧＴＧＧＭＭＡＧＧＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０１；本明細書の配列番号１６９７）、ＡＡＧＳＡＡＲＲＣＲＳＣＲＶＳＲＶＡＲＶＣＲＡＴＲＹＣＧＭＳＮＨＣＲＶＭＶＲＳＧＴＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０２；本明細書の配列番号１６９８）、ＣＡＧＶＶＳＶＶＳＭＲＳＲＶＣＶＮＳＧＣＡＧＣＴＤＨＣＶＶＳＲＮＳＧＴＣＶＭＳＡＣＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０３；本明細書の配列番号１６９９）、ＡＡＣＴＷＣＲＶＳＶＡＳＭＶＳＶＨＳＤＤＴＧＴＧＳＷＳＴＫＳＡＣＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号１０４；本明細書の配列番号１７００）、ＴＴＧＴＴＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＡＣＧＴＧＡＣＧＣＡＣＧＴＴＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５６；本明細書の配列番号１７０１）、ＴＣＣＣＣＧＴＧＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＡＴＡＡＴＧＴＧＧＣＣＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５７；本明細書の配列番号１７０２）、ＴＴＣＣＡＣＡＣＴＣＣＧＴＴＴＴＧＧＡＴＡＡＴＧＴＴＧＡＡＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５８；本明細書の配列番号１７０３）、ＡＧＧＧＡＣＡＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＣＡＴＧＣＴＧＴＧＧＴＣＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２５９；本明細書の配列番号１７０４）、ＡＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＴＣＣＧＡＣＴＣＧＣＣＣＴＡＡＴＣＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６０；本明細書の配列番号１７０５）、ＴＣＣＴＡＧＴＡＧＡＡＧＡＣＡＣＣＣＴＣＴＣＡＣＴＧＣＣＣＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６１；本明細書の配列番号１７０６）、ＡＧＴＡＣＣＡＴＧＴＡＣＡＣＣＣＡＣＴＣＴＣＣＣＡＧＴＧＣＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６２；本明細書の配列番号１７０７）、ＡＴＡＴＧＧＡＣＧＴＴＣＡＴＧＣＴＧＡＴＣＡＣＣＡＴＡＣＣＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６３；本明細書の配列番号１７０８）、ＡＧＣＡＧＧＡＧＣＴＣＣＴＴＧＧＣＣＴＣＡＧＣＧＴＧＣＧＡＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６４；本明細書の配列番号１７０９）、ＡＣＡＡＧＣＡＧＣＴＴＣＡＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＣＡＣＴＧＡＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６５；本明細書の配列番号１７１０）、ＣＡＧＣＣＴＡＧＧＡＡＣＴＧＧＣＴＴＣＣＴＧＧＡＣＣＣＴＧＴＴＡＣＣＧＣＣＡＧＣＡＧＡＧＡＧＴＣＴＣＡＡＭＡＭＭＡＶＮＳＲＶＣＳＲＳＡＡＣＡＡＣＡＡＣＡＧＴＲＡＳＴＴＣＴＣＣＴＧＧＭＭＡＧＧＡＧＣＴＡＣＣＡＡＧＴＡＣＣＡＣＣＴＣＡＡＴＧＧＣＡＧＡＧＡＣＴＣＴＣＴＧＧＴＧＡＡＴＣＣＣＧＧＡＣＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＡＡＧＣＣＡＣＲＲＧＧＡＣＲＲＣＲＭＳＲＲＳＡＲＳＴＴＴＴＴＴＣＣＴＣＡＧＡＧＣＧＧＧＧＴＴＣＴＣＡＴＣＴＴＴＧＧＧＡＡＧＳＡＡＲＲＣＲＳＣＲＶＳＲＶＡＲＶＣＲＡＴＲＹＣＧＭＳＮＨＣＲＶＭＶＲＳＧＴＣＡＴＧＡＴＴＡＣＡＧＡＣＧＡＡＧＡＧＧＡＧＡＴＣＴＧＧＡＣ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６６；本明細書の配列番号１７１１）、ＴＧＧＧＡＣＡＡＴＧＧＣＧＧＴＣＧＴＣＴＣＴＣＡＧＡＧＴＴＫＴＫＫＴ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６７；本明細書の配列番号１７１２）、ＡＧＡＧＧＡＣＣＫＫＴＣＣＴＣＧＡＴＧＧＴＴＣＡＴＧＧＴＧＧＡＧＴＴＡ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６８；本明細書の配列番号１７１３）、ＣＣＡＣＴＴＡＧＧＧＣＣＴＧＧＴＣＧＡＴＡＣＣＧＴＴＣＧＧＴＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２６９；本明細書の配列番号１７１４）、またはＴＣＴＣＧＣＣＣＣＡＡＧＡＧＴＡＧＡＡＡＣＣＣＴＴＣＳＴＴＹＹＧ（ＵＳ２０１６０３６９２９８の配列番号２７０；本明細書の配列番号１７１５）。
【0174】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際特許公開ＷＯ２０１６１３４３７５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される眼球細胞標的化ペプチド、例えば、限定されないが、ＷＯ２０１６１３４３７５の配列番号９、または配列番号１０を含み得る。さらに、ＷＯ２０１６１３４３７５に記載の眼球細胞標的化ペプチドまたはアミノ酸のいずれかは、任意の親ＡＡＶ血清型、例えば、限定されないが、ＡＡＶ２（ＷＯ２０１６１３４３７５の配列番号８；本明細書の配列番号１７１６）、またはＡＡＶ９（ＷＯ２０１６１３４３７５の配列番号１１；本明細書の配列番号１７１７）に挿入され得る。所定の実施形態では、改変、例えば、挿入は、ＡＡＶ２タンパク質においてＰ３４～Ａ３５、Ｔ１３８～Ａ１３９、Ａ１３９～Ｐ１４０、Ｇ４５３～Ｔ４５４、Ｎ５８７～Ｒ５８８、及び／またはＲ５８８～Ｑ５８９でなされる。所定の実施形態では、挿入は、ＡＡＶ９のＤ３８４、Ｇ３８５、１５６０、Ｔ５６１、Ｎ５６２、Ｅ５６３、Ｅ５６４、Ｅ５６５、Ｎ７０４、及び／またはＹ７０５でなされる。眼球細胞標的化ペプチドは、限定されないが、以下のアミノ酸配列のいずれかであり得る、ＧＳＴＰＰＰＭ（ＷＯ２０１６１３４３７５の配列番号１；本明細書の配列番号１７１８）、またはＧＥＴＲＡＰＬ（ＷＯ２０１６１３４３７５の配列番号４；本明細書の配列番号１７１９）。
【0175】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開番号ＵＳ２０１７０１４５４０５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように改変され得る。ＡＡＶ血清型は、改変ＡＡＶ２（例えば、Ｙ４４４Ｆ、Ｙ５００Ｆ、Ｙ７３０Ｆ及び／またはＳ６６２Ｖでの改変）、改変ＡＡＶ３（例えば、Ｙ７０５Ｆ、Ｙ７３１Ｆ及び／またはＴ４９２Ｖでの改変）、及び改変ＡＡＶ６（例えば、Ｓ６６３Ｖ及び／またはＴ４９２Ｖでの改変）を含み得る。
【0176】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際公開番号ＷＯ２０１７０８３７２２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように改変され得る。ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶ１（Ｙ７０５＋７３１Ｆ＋Ｔ４９２Ｖ）、ＡＡＶ２（Ｙ４４４＋５００＋７３０Ｆ＋Ｔ４９１Ｖ）、ＡＡＶ３（Ｙ７０５＋７３１Ｆ）、ＡＡＶ５、ＡＡＶ５（Ｙ４３６＋６９３＋７１９Ｆ）、ＡＡＶ６（ＶＰ３バリアントＹ７０５Ｆ／Ｙ７３１Ｆ／Ｔ４９２Ｖ）、ＡＡＶ８（Ｙ７３３Ｆ）、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９（ＶＰ３バリアントＹ７３１Ｆ）、及びＡＡＶ１０（Ｙ７３３Ｆ）を含み得る。
【0177】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際特許公開番号ＷＯ２０１７０１５１０２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、アミノ酸ＳＰＡＫＦＡ（ＷＯ２０１７０１５１０２の配列番号２４；本明細書の配列番号１７２０）またはＮＫＤＫＬＮ（ＷＯ２０１７０１５１０２の配列番号２；本明細書の配列番号１７２１）を含む修飾されたエピトープを含み得る。エピトープは、ＡＡＶ８（ＷＯ２０１７０１５１０２の配列番号３）のＶＰ１カプシドのナンバリングに基づくアミノ酸６６５～６７０及び／またはＡＡＶ３Ｂ（配列番号３）の残基６６４～６６８の領域に挿入され得る。
【0178】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、国際特許公開番号ＷＯ２０１７０５８８９２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される配列、例えば、限定されないが、ＡＡＶ１のアミノ酸残基２６２～２６８、３７０～３７９、４５１～４５９、４７２～４７３、４９３～５００、５２８～５３４、５４７～５５２、５８８～５９７、７０９～７１０、もしくは７１６～７２２の任意の組み合わせ、またはＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶｒｈ３２．３３、ウシＡＡＶ、もしくはトリＡＡＶにおける同等のアミノ酸残基の１つ以上（例えば、２、３、４、５、６、または７つ）で置換を含み得るカプシドタンパク質を有するＡＡＶバリアントであり得るか、またはそれを有し得る。アミノ酸置換（複数可）は、ＷＯ２０１７０５８８９２に記載のアミノ酸配列のいずれかであり得るが、これらに限定されない。所定の実施形態では、ＡＡＶは、ＡＡＶ１（ＷＯ２０１７０５８８９２の配列番号１）の任意の組み合わせの２５６Ｌ、２５８Ｋ、２５９Ｑ、２６１Ｓ、２６３Ａ、２６４Ｓ、２６５Ｔ、２６６Ｇ、２７２Ｈ、３８５Ｓ、３８６Ｑ、Ｓ４７２Ｒ、Ｖ４７３Ｄ、Ｎ５００Ｅ ５４７Ｓ、７０９Ａ、７１０Ｎ、７１６Ｄ、７１７Ｎ、７１８Ｎ、７２０Ｌ、Ａ４５６Ｔ、Ｑ４５７Ｔ、Ｎ４５８Ｑ、Ｋ４５９Ｓ、Ｔ４９２Ｓ、Ｋ４９３Ａ、Ｓ５８６Ｒ、Ｓ５８７Ｇ、Ｓ５８８Ｎ、Ｔ５８９Ｒ及び／または７２２Ｔ、ＡＡＶ５（ＷＯ２０１７０５８８９２の配列番号５）の任意の組み合わせの２４４Ｎ、２４６Ｑ、２４８Ｒ、２４９Ｅ、２５０Ｉ、２５１Ｋ、２５２Ｓ、２５３Ｇ、２５４Ｓ、２５５Ｖ、２５６Ｄ、２６３Ｙ、３７７Ｅ、３７８Ｎ、４５３Ｌ、４５６Ｒ、５３２Ｑ、５３３Ｐ、５３５Ｎ、５３６Ｐ、５３７Ｇ、５３８Ｔ、５３９Ｔ、５４０Ａ、５４１Ｔ、５４２Ｙ、５４３Ｌ、５４６Ｎ、６５３Ｖ、６５４Ｐ、６５６Ｓ、６９７Ｑ、６９８Ｆ、７０４Ｄ、７０５Ｓ、７０６Ｔ、７０７Ｇ、７０８Ｅ、７０９Ｙ及び／または７１０Ｒ、ＡＡＶ５（ＷＯ２０１７０５８８９２の配列番号５）の任意の組み合わせの２４８Ｒ、３１６Ｖ、３１７Ｑ、３１８Ｄ、３１９Ｓ、４４３Ｎ、５３０Ｎ、５３１Ｓ、５３２Ｑ ５３３Ｐ、５３４Ａ、５３５Ｎ、５４０Ａ、５４１Ｔ、５４２Ｙ、５４３Ｌ、５４５Ｇ、５４６Ｎ、６９７Ｑ、７０４Ｄ、７０６Ｔ、７０８Ｅ、７０９Ｙ及び／または７１０Ｒ、ＡＡＶ６（ＷＯ２０１７０５８８９２の配列番号６）の任意の組み合わせの２６４Ｓ、２６６Ｇ、２６９Ｎ、２７２Ｈ、４５７Ｑ、５８８Ｓ及び／または５８９Ｉ、ＡＡＶ８（ＷＯ２０１７０５８８９２の配列番号８）の任意の組み合わせの４５７Ｔ、４５９Ｎ、４９６Ｇ、４９９Ｎ、５００Ｎ、５８９Ｑ、５９０Ｎ及び／または５９２Ａ、ＡＡＶ９（ＷＯ２０１７０５８８９２の配列番号９）の任意の組み合わせの４５１Ｉ、４５２Ｎ、４５３Ｇ、４５４Ｓ、４５５Ｇ、４５６Ｑ、４５７Ｎ及び／または４５８Ｑでのアミノ酸置換を含み得る。
【0179】
所定の実施形態では、ＡＡＶは、国際公開番号ＷＯ２０１７０６６７６４（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、ＶＰ１の位置１５５、１５６、及び１５７またはＶＰ２の位置１７、１８、１９、及び２０でアミノ酸の配列を含み得る。アミノ酸の配列は、限定されないが、Ｎ－Ｓ－Ｓ、Ｓ－Ｘ－Ｓ、Ｓ－Ｓ－Ｙ、Ｎ－Ｘ－Ｓ、Ｎ－Ｓ－Ｙ、Ｓ－Ｘ－Ｙ、またはＮ－Ｘ－Ｙ（Ｎ、Ｘ、及びＹは、限定されないが、独立して、非セリンまたは非トレオニンのアミノ酸であり、ＡＡＶは、限定されないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、またはＡＡＶ１２である）であり得る。所定の実施形態では、ＡＡＶは、ＶＰ１の位置（複数可）１５６、１５７、または１５８またはＶＰ２の位置１９、２０、または２１で少なくとも１つのアミノ酸の欠失を含み得、ＡＡＶは、限定されないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、またはＡＡＶ１２であり得る。
【0180】
所定の実施形態では、ＡＡＶは、Ｄｅｖｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，（Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ３４（２）：２０４－２０９（２０１６））、Ｃｈａｎ ｅｔ ａｌ．，（Ｎａｔｕｒｅ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ２０（８）：１１７２－１１７９（２０１７））、及び国際特許出願公開番号ＷＯ２０１５０３８９５８及びＷＯ２０１７１００６７１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるＣｒｅ組換え系ＡＡＶ標的進化（ＣＲＥＡＴＥ）によって生成される血清型であり得る。所定の実施形態では、この手法で生成されるＡＡＶ血清型は、この手法で生成されていないＡＡＶ血清型と比較して改善したＣＮＳ形質導入及び／またはニューロン及び星状細胞トロピズムを有する。非限定的な例として、ＡＡＶ血清型は、標的化ペプチド、例えば、限定されないが、ＰＨＰ．Ｂ、ＰＨＰ．Ｂ２、ＰＨＰ．Ｂ３、ＰＨＰ．Ａ、ＰＨＰ．Ｓ、ＰＨＰ．Ｎ、Ｇ２Ａ１２、Ｇ２Ａ１５、Ｇ２Ａ３、Ｇ２Ｂ４、またはＧ２Ｂ５を含み得る。所定の実施形態では、これらのＡＡＶ血清型は、アミノ酸５８８と５８９との間にアミノ酸インサートを有するＡＡＶ９（配列番号１３６）またはＡＡＶ９ Ｋ４４９Ｒ（配列番号９）の誘導体であり得る。これらのアミノ酸インサートの非限定的な例は、ＴＬＡＶＰＦＫ（ＰＨＰ．Ｂ；配列番号１２６０）、ＳＶＳＫＰＦＬ（ＰＨＰ．Ｂ２；配列番号１２６８）、ＦＴＬＴＴＰＫ（ＰＨＰ．Ｂ３；配列番号１２６９）、ＹＴＬＳＱＧＷ（ＰＨＰ．Ａ；配列番号１２７５）、ＱＡＶＲＴＳＬ（ＰＨＰ．Ｓ；配列番号１３１９）、ＬＡＫＥＲＬＳ（Ｇ２Ａ３；配列番号１３２０）、ＭＮＳＴＫＮＶ（Ｇ２Ｂ４；配列番号１３２１）、ＶＳＧＧＨＨＳ（Ｇ２Ｂ５；配列番号１３２２）、及び／またはＤＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（ＰＨＰ．Ｎ；配列番号１２８９）を含む。
【0181】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、Ｊａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ（Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ９：１５４（２０１６））（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているとおりであり得る。
【0182】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶ９（配列番号１３５または１３６）である。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ペプチドインサートを有するＡＡＶ９である。
【0183】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、Ｋ４４９Ｒ ＡＡＶ９バリアント（配列番号９）である。ＡＡＶ９ Ｋ４４９Ｒは、野生型ＡＡＶ９と同じ機能を有する。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ペプチドインサートを有するＡＡＶ９ Ｋ４４９Ｒである。
【0184】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｂ（例えば、ＷＯ２０１５０３８９５８に記載されている）である。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、より普遍的なプロモーター（すなわち、ＣＢＡまたはＣＭＶ）が使用される場合と比較して、ニューロン形質導入を向上させるためのシナプシンプロモーターと組み合わされる。
【0185】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｎ（例えば、ＷＯ２０１７１００６７１に記載されている）である。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ（ＰＨＰ．Ｎ）ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ（ＰＨＰ．Ｎ）ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
【0186】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
【0187】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｓペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｂ２ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｂ２ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
【0188】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｂ３ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、Ｇ２Ｂ４ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、Ｇ２Ｂ４ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
【0189】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、Ｇ２Ｂ５ペプチドを含む血清型またはそのバリアントである。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＶＯＹ１０１またはそのバリアントである。所定の実施形態では、ＶＯＹ１０１は、配列番号１のアミノ酸配列を含む。所定の実施形態では、カプシド配列は、配列番号１７２２の核酸配列を含む。
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＶＯＹ１０１またはそのバリアントである。所定の実施形態では、ＶＯＹ１０１は、配列番号１のアミノ酸配列を含む。所定の実施形態では、カプシド配列は、配列番号１７２２の核酸配列を含む。
【0190】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、ＶＯＹ２０１またはそのバリアントである。所定の実施形態では、ＶＯＹ２０１は、配列番号１７２４のアミノ酸配列を含む。所定の実施形態では、カプシド配列は、配列番号１７２３の核酸配列を含む。
【0191】
所定の実施形態では、ＡＡＶカプシドは、静脈内投与の後の血液脳関門通過を可能にする。そのようなＡＡＶカプシドの非限定的な例は、ペプチドインサート、例えば、限定されないが、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ（ＰＨＰ．Ｎ）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＰＨＰ．Ｓ、Ｇ２Ａ３、Ｇ２Ｂ４、Ｇ２Ｂ５、Ｇ２Ａ１２、Ｇ２Ａ１５、ＰＨＰ．Ｂ２、ＰＨＰ．Ｂ３、またはＡＡＶＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）を含むＡＡＶ９、ＡＡＶ９ Ｋ４４９Ｒ、ＶＯＹ１０１、ＶＯＹ２０１、またはＡＡＶカプシドを含む。
【0192】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、上述したもののいずれかと５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するカプシドアミノ酸配列を含み得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号１、２、３、９、１３６、または１７２４と少なくとも８０％同一のカプシドアミノ酸配列を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号１、２、３、９、１３６、または１７２４と少なくとも８５％同一のカプシドアミノ酸配列を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号１、２、３、９、１３６、または１７２４と少なくとも９０％同一のカプシドアミノ酸配列を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号１、２、３、９、１３６、または１７２４と少なくとも９５％同一のカプシドアミノ酸配列を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号１、２、３、９、１３６、または１７２４と少なくとも９９％同一のカプシドアミノ酸配列を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号１、２、３、９、１３６、または１７２４のカプシドアミノ酸を含む。
【0193】
所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、上述したもののいずれかと５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するカプシド核酸配列によってコードされ得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号４、１３５、１７２２、または１７２３と少なくとも８０％同一のカプシド核酸配列を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号４、１３５、１７２２、または１７２３と少なくとも８５％同一のカプシド核酸配列を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号４、１３５、１７２２、または１７２３と少なくとも９０％同一のカプシド核酸配列を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号４、１３５、１７２２、または１７２３と少なくとも９５％同一のカプシド核酸配列を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号４、１３５、１７２２、または１７２３と少なくとも９９％同一のカプシド核酸配列を含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ血清型は、配列番号４、１３５、１７２２、または１７２３のカプシド核酸配列を含む。
【0194】
所定の実施形態では、ＡＡＶのＶＰ１カプシドタンパク質の翻訳のための開始コドンは、米国特許番号ＵＳ８１６３５４３（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシド及び開始コドンに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるＣＴＧ、ＴＴＧ、またはＧＴＧであり得る。
【0195】
本開示は、カプシド（Ｃａｐ）遺伝子によってコードされる構造カプシドタンパク質（ＶＰ１、ＶＰ２、及びＶＰ３を含む）に言及する。これらのカプシドタンパク質は、ウイルスベクター、例えば、ＡＡＶの外側タンパク質構造シェル（すなわち、カプシド）を形成する。Ｃａｐポリヌクレオチドから合成されるＶＰカプシドタンパク質は通常、ペプチド配列における最初のアミノ酸としてメチオニン（Ｍｅｔ１）を含み、これは、対応するＣａｐヌクレオチド配列における開始コドン（ＡＵＧまたはＡＴＧ）に関連する。しかしながら、１番目のメチオニン（Ｍｅｔ１）残基または通常は任意の１番目のアミノ酸（ＡＡ１）は、タンパク質処理酵素、例えば、Ｍｅｔ－アミノペプチダーゼによるポリペプチド合成の後またはその間に切断されることが一般的である。この「Ｍｅｔ／ＡＡ切除」プロセスはしばしば、ポリペプチド配列における２番目のアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、セリン、トレオニンなど）の対応するアセチル化と相関する。Ｍｅｔ切除は一般的に、ＶＰ１及びＶＰ３カプシドタンパク質で生じるが、ＶＰ２カプシドタンパク質でも生じ得る。
【0196】
Ｍｅｔ／ＡＡ切除が不完全である場合、ウイルスカプシドを含む１つ以上（１、２、または３つ）のＶＰカプシドタンパク質の混合物が生成され得、その一部は、Ｍｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を含み得（Ｍｅｔ＋／ＡＡ＋）、その一部は、Ｍｅｔ／ＡＡ切除の結果としてのＭｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を欠き得る（Ｍｅｔ－／ＡＡ－）。カプシドタンパク質におけるＭｅｔ／ＡＡ切除に関するさらなる論述については、Ｊｉｎ，ｅｔ ａｌ．Ｄｉｒｅｃｔ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ／Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｏｒ Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ａｄｅｎｏ－Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｖｉｒｕｓ Ｃａｐｓｉｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０１７ Ｏｃｔ．２８（５）：２５５－２６７；Ｈｗａｎｇ，ｅｔ ａｌ．Ｎ－Ｔｅｒｍｉｎａｌ Ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ Ｃｒｅａｔｅｓ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ Ｓｉｇｎａｌｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．２０１０ Ｆｅｂｒｕａｒｙ １９．３２７（５９６８）：９７３－９７７（その内容は、本開示と矛盾しない限り、カプシドタンパク質におけるＭｅｔ／ＡＡ切除に関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【0197】
本開示によれば、カプシドタンパク質への言及は、切除された（Ｍｅｔ－／ＡＡ－）または切除されていない（Ｍｅｔ＋／ＡＡ＋）配列のいずれかに限定されず、文脈の中で、独立したカプシドタンパク質、カプシドタンパク質の混合物を含むウイルスカプシド、及び／または本開示のカプシドタンパク質をコードする、記載する、生成する、またはもたらすポリヌクレオチド配列（またはその断片）を指し得る。「カプシドタンパク質」または「カプシドポリペプチド」（例えば、ＶＰ１、ＶＰ２、またはＶＰ３）への直接的言及はまた、Ｍｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を含むＶＰカプシドタンパク質（Ｍｅｔ＋／ＡＡ＋）ならびにＭｅｔ／ＡＡ切除の結果としてＭｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を欠く対応するＶＰカプシドタンパク質（Ｍｅｔ－／ＡＡ－）を含み得る。
【0198】
さらに、本開示によれば、Ｍｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を含む１つ以上のカプシドタンパク質（Ｍｅｔ＋／ＡＡ＋）をそれぞれ含むまたはコードする特定の配列番号（タンパク質または核酸にかかわらない）への言及は、Ｍｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を欠くＶＰカプシドタンパク質を教示していることが理解されるべきであるが、それは、配列の確認時に、第１の列挙されたアミノ酸（メチオニンであるかどうかにかかわらない）を欠いているに過ぎない任意の配列であることが直ちに明らかであるからである。
【0199】
非限定的な例として、長さが７３６アミノ酸であり、かつＡＵＧ／ＡＴＧ開始コドンによってコードされる「Ｍｅｔ１」アミノ酸を含む（Ｍｅｔ＋）ＶＰ１ポリペプチド配列への言及はまた、長さが７３５アミノ酸であり、かつ７３６アミノ酸Ｍｅｔ＋配列の「Ｍｅｔ１」アミノ酸を含まない（Ｍｅｔ－）ＶＰ１ポリペプチド配列を教示することが理解され得る。第２の非限定的な例として、長さが７３６アミノ酸であり、かつ任意のＮＮＮ開始コドンによってコードされる「ＡＡ１」アミノ酸を含む（ＡＡ１＋）ＶＰ１ポリペプチド配列への言及はまた、長さが７３５アミノ酸であり、かつ７３６アミノ酸ＡＡ１＋配列の「ＡＡ１」アミノ酸を含まない（ＡＡ１－）ＶＰ１ポリペプチド配列を教示することが理解され得る。
【0200】
ＶＰカプシドタンパク質から形成されるウイルスカプシドへの言及（例えば、特定のＡＡＶカプシド血清型への言及）は、Ｍｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を含むＶＰカプシドタンパク質（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋）、Ｍｅｔ／ＡＡ１切除の結果としてＭｅｔ１／ＡＡ１アミノ酸を欠く対応するＶＰカプシドタンパク質（Ｍｅｔ－／ＡＡ１－）、またはそれらの組み合わせ（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋及びＭｅｔ－／ＡＡ１－）を包含し得る。
【0201】
非限定的な例として、ＡＡＶカプシド血清型は、ＶＰ１（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋）、ＶＰ１（Ｍｅｔ－／ＡＡ１－）、またはＶＰ１（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋）及びＶＰ１（Ｍｅｔ－／ＡＡ１－）の組み合わせを含み得る。ＡＡＶカプシド血清型はまた、ＶＰ３（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋）、ＶＰ３（Ｍｅｔ－／ＡＡ１－）、またはＶＰ３（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１＋）及びＶＰ３（Ｍｅｔ－／ＡＡ１－）の組み合わせを含み得、また、ＶＰ２（Ｍｅｔ＋／ＡＡ１）及びＶＰ２（Ｍｅｔ－／ＡＡ１－）の類似する任意の組み合わせを含み得る。
【0202】
ペイロード
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのペイロード領域を含む少なくとも１つのペイロードコンストラクトを含み得るか、またはそれを使用して生成され得る。所定の実施形態では、ペイロード領域は、ペイロードコンストラクトウイルスゲノムなどのウイルスゲノム内に位置し得る。ペイロード領域の５’及び／または３’末端では、少なくとも１つの末端逆位反復（ＩＴＲ）が存在し得る。ペイロード領域内では、プロモーター領域、イントロン領域及びコーディング領域が存在し得る。
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのペイロード領域を含む少なくとも１つのペイロードコンストラクトを含み得るか、またはそれを使用して生成され得る。所定の実施形態では、ペイロード領域は、ペイロードコンストラクトウイルスゲノムなどのウイルスゲノム内に位置し得る。ペイロード領域の５’及び／または３’末端では、少なくとも１つの末端逆位反復（ＩＴＲ）が存在し得る。ペイロード領域内では、プロモーター領域、イントロン領域及びコーディング領域が存在し得る。
【0203】
所定の実施形態では、本開示のペイロードコンストラクトは、バキュロウイルスプラスミドまたは組換えバキュロウイルスゲノムとしても知られているバクミドであり得る。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、対象となるポリペプチドまたはタンパク質をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、対象となるポリペプチドまたはタンパク質をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
【0204】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象となる複数のポリペプチドをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。所定の実施形態では、１つ以上のポリペプチドをコードするウイルスゲノムが複製され、ウイルス粒子にパッケージングされ得る。ベクターゲノムを含むウイルス粒子で形質導入された標的細胞は、単一の標的細胞において１つ以上のポリペプチドの各々を発現し得る。
【0205】
ＡＡＶ粒子のペイロード領域がポリペプチドをコードする場合、ポリペプチドは、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質であり得る。非限定的な例として、ペイロード領域は、対象となる少なくとも１つの治療用タンパク質をコードし得る。本明細書に記載のポリペプチドをコードするＡＡＶウイルスゲノムは、ヒト疾患、ウイルス、感染症、獣医学的用途ならびに多様なｉｎ ｖｉｖｏ及びｉｎ ｖｉｔｒｏ環境において有用であり得る。
【0206】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子（ウイルスゲノムを含む）の対象への投与は、対象におけるタンパク質の発現を増加させる。所定の実施形態では、タンパク質の発現の増加は、ペイロードによってコードされるポリペプチドに関連する疾患または疾病の作用及び／または症状を減少させる。
【0207】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象となるタンパク質（すなわち、ペイロードタンパク質、治療用タンパク質）をコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。
【0208】
所定の実施形態では、ペイロード領域は、限定されないが、抗体、芳香族Ｌ－アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）、ＡｐｏＥ２、フラタキシン、生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質、グルコセレブロシダーゼ、Ｎ－スルホグルコサミンスルホヒドロラーゼ、Ｎ－アセチル－アルファ－グルコサミニダーゼ、イズロン酸２－スルファターゼ、アルファ－Ｌ－イズロニダーゼ、パルミトイル－タンパク質チオエステラーゼ１、トリペプチジルペプチダーゼ１、バッテニン、ＣＬＮ５、ＣＬＮ６（リンクリン）、ＭＦＳＤ８、ＣＬＮ８、アスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）、プログラニュリン（ＧＲＮ）、ＭｅＣＰ２、ベータ－ガラクトシダーゼ（ＧＬＢ１）及び／またはギガキソニン（ＧＡＮ）を含むタンパク質をコードする核酸配列を含む。
【0209】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、以下の国際公開のいずれか１つに記載の疾患関連タンパク質（及びその断片またはバリアント）のいずれかをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む：ＷＯ２０１６０７３６９３、ＷＯ２０１７０２３７２４、ＷＯ２０１６０７７６８７、ＷＯ２０１６０７７６８９、ＷＯ２０１８２０４７８６、ＷＯ２０１７２０１２５８、ＷＯ２０１７２０１２４８、ＷＯ２０１８２０４８０３、ＷＯ２０１８２０４７９７、ＷＯ２０１７１８９９５９、ＷＯ２０１７１８９９６３、ＷＯ２０１７１８９９６４、ＷＯ２０１５１９１５０８、ＷＯ２０１６０９４７８３、ＷＯ２０１６０１３７９４９、ＷＯ２０１７０７５３３５（これらの内容はそれぞれ、それらが本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【0210】
本開示のウイルスゲノムのペイロード領域によってコードされるアミノ酸配列は、ポリペプチド全体、複数のポリペプチドまたはポリペプチドの断片として翻訳され得、これらは、独立して、１つ以上の核酸、核酸の断片または前述したもののいずれかのバリアントによってコードされ得る。本明細書で使用される場合、「ポリペプチド」は、ほとんどの場合ペプチド結合によって互いに連結されたアミノ酸残基（天然または非天然）のポリマーを意味する。その用語は、本明細書で使用される場合、任意のサイズ、構造、または機能のタンパク質、ポリペプチド、及びペプチドを指す。いくつかの例では、コードされるポリペプチドは、約５０アミノ酸よりも短く、そのときはポリペプチドはペプチドと称される。ポリペプチドがペプチドである場合、それは少なくとも約２つ、３つ、４つ、または少なくとも５つのアミノ酸残基長となる。よって、ポリペプチドは、遺伝子生成物、天然に存在するポリペプチド、合成ポリペプチド、ホモログ、オーソログ、パラログ、断片ならびに前述のものの他の同等物、バリアント、及びアナログを含む。ポリペプチドは、単一分子であり得、または複数分子複合体、例えば、二量体、三量体または四量体であり得る。それらはまた、一本鎖または多連鎖のポリペプチドを含み得、会合または連結されていてもよい。ポリペプチドという用語はまた、１つ以上のアミノ酸残基が、対応する天然に存在するアミノ酸の人工化学的アナログであるアミノ酸ポリマーにも適用され得る。
【0211】
所定の実施形態では、「ポリペプチドバリアント」が提供される。用語「ポリペプチドバリアント」は、ネイティブまたは参照配列に由来するそれらのアミノ酸配列とは異なる分子を指す。アミノ酸配列バリアントは、ネイティブまたは参照配列と比較して、アミノ酸配列内の所定の位置で置換、欠失、及び／または挿入を保有し得る。通常、バリアントは、ネイティブまたは参照配列と少なくとも約５０％の同一性（相同性）を保有し、所定の実施形態では、それらは、ネイティブまたは参照配列と少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％同一（相同）である。
【0212】
本開示は、ベクターゲノムが調節性ポリヌクレオチド、例えば、ＲＮＡまたはＤＮＡ分子を治療剤としてコードする製剤化されたＡＡＶ粒子の使用を含む。したがって、本開示は、対象となる遺伝子を標的とする低分子二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）分子（低分子干渉ＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、プレｍｉＲＮＡ）にプロセシングされるポリヌクレオチドをコードするベクターゲノムを提供する。本開示はまた、疾患、障害、及び／または病態を処置するための、対象となる遺伝子のアレルの遺伝子発現及びタンパク質生成を阻害するためのそれらの使用方法を提供する。
【0213】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、１つ以上の調節性ポリヌクレオチドをコードするまたは含む核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象となる調節性ポリヌクレオチドをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。本開示の所定の実施形態では、調節性ポリヌクレオチド、例えば、ＲＮＡまたはＤＮＡ分子は、治療剤として提供される。ＲＮＡ干渉媒介遺伝子サイレンシングは、標的遺伝子発現を特異的に阻害し得る。
【0214】
所定の実施形態では、ペイロード領域は、標的遺伝子発現及び／または標的タンパク質生成と干渉する調節性ポリヌクレオチドをコードする核酸配列を含む。所定の実施形態では、阻害／改変される遺伝子発現またはタンパク質生成は、限定されないが、スーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）、染色体９オープンリーディングフレーム７２（Ｃ９ＯＲＦ７２）、ＴＡＲ ＤＮＡ結合タンパク質（ＴＡＲＤＢＰ）、アタキシン－３（ＡＴＸＮ３）、ハンチンチン（ＨＴＴ）、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）、アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）、微小管関連タンパク質タウ（ＭＡＰＴ）、アルファ－シヌクレイン（ＳＮＣＡ）、電位依存性ナトリウムチャネルアルファサブユニット９（ＳＣＮ９Ａ）、及び／または電位依存性ナトリウムチャネルアルファサブユニット１０（ＳＣＮ１０Ａ）を含み得る。
【0215】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、以下の国際公開のいずれか１つに記載の調節性ポリヌクレオチド、ＲＮＡｉ分子、ｓｉＲＮＡ分子、ｄｓＲＮＡ分子、及び／またはＲＮＡ二本鎖のいずれかをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む：ＷＯ２０１６０７３６９３、ＷＯ２０１７０２３７２４、ＷＯ２０１６０７７６８７、ＷＯ２０１６０７７６８９、ＷＯ２０１８２０４７８６、ＷＯ２０１７２０１２５８、ＷＯ２０１７２０１２４８、ＷＯ２０１８２０４８０３、ＷＯ２０１８２０４７９７、ＷＯ２０１７１８９９５９、ＷＯ２０１７１８９９６３、ＷＯ２０１７１８９９６４、ＷＯ２０１５１９１５０８、ＷＯ２０１６０９４７８３、ＷＯ２０１６０１３７９４９、ＷＯ２０１７０７５３３５（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【0216】
所定の実施形態では、そのようなｓｉＲＮＡ分子、またはｓｉＲＮＡ分子の一本鎖をコードする核酸配列がアデノ随伴ウイルスベクターに挿入され、細胞、具体的には中枢神経系における細胞に導入される。
【0217】
ＡＡＶ粒子は、いくつかの独自の特徴のため、ｓｉＲＮＡ送達のために調査されてきた。特徴の非限定的な例は、（ｉ）分裂及び非分裂細胞の両方に感染する能力；（ｉｉ）ヒト細胞を含む、感染性に関する広い宿主範囲；（ｉｉｉ）野生型ＡＡＶは、いずれの疾患にも関連しておらず、感染した細胞において複製することは示されていないこと；（ｉｖ）ベクターに対する細胞媒介免疫反応の欠如及び（ｖ）宿主染色体における非組み込み特質による長期発現の潜在性の減少を含む。その上、ＡＡＶ粒子での感染は、細胞遺伝子発現のパターンの変化に対する最小の影響を有する（Ｓｔｉｌｗｅｌｌ ａｎｄ Ｓａｍｕｌｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，２００３，３４，１４８）。
【0218】
所定の実施形態では、本開示のコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、互いにハイブリダイズされて二本鎖構造を形成するアンチセンス鎖及びセンス鎖を含有し、アンチセンス鎖は、対象となる標的遺伝子の核酸配列に相補的であり、センス鎖は、対象となる標的遺伝子の核酸配列と相同である。他の態様では、各鎖の３’末端で０、１または２ヌクレオチドのオーバーハングが存在する。
【0219】
本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子のペイロードは、遺伝子発現のＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）誘導阻害に供される１つ以上の薬剤をコードし得る。本明細書では、対象となる遺伝子を標的とするコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖またはコードされるｄｓＲＮＡ（本明細書ではまとめて「ｓｉＲＮＡ分子」と称される）が提供される。そのようなｓｉＲＮＡ分子、例えば、コードされるｓｉＲＮＡ二本鎖、コードされるｄｓＲＮＡまたはコードされるｓｉＲＮＡまたはｄｓＲＮＡ前駆体は、細胞、例えば、星状細胞またはミクログリア、皮質、海馬、嗅内、視床、感覚または運動ニューロンにおける遺伝子発現を減少または沈静させ得る。
【0220】
ＲＮＡｉ（転写後遺伝子サイレンシング（ＰＴＧＳ）、クエリング、または共抑制としても知られている）は、ＲＮＡ分子が、配列特異的様式で、典型的には特定のｍＲＮＡ分子の破壊を引き起こすことによって、遺伝子発現を阻害する転写後遺伝子サイレンシングプロセスである。ＲＮＡｉの活性成分は、典型的には１５～３０ヌクレオチド（例えば、１９～２５、１９～２４または１９～２１ヌクレオチド）及び２ヌクレオチド３’オーバーハングを含有し、かつ標的遺伝子の核酸配列と合致する、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）と呼ばれる短鎖／低分子二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）である。これらの短鎖ＲＮＡ種は、より大きなｄｓＲＮＡのＤｉｃｅｒ媒介切断によってｉｎ ｖｉｖｏで自然に生成され得、それらは哺乳動物細胞において機能的である。
【0221】
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）として知られている天然に発現する低分子ＲＮＡ分子は、ｍＲＮＡの発現を調整することによって遺伝子サイレンシングを誘発する。ｍｉＲＮＡを含有するＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）は、シード領域と呼ばれるｍｉＲＮＡの５’領域におけるヌクレオチド２～７と完全な配列相補性、及びその３’領域との他の塩基対を提供するｍＲＮＡを標的とする。遺伝子発現のｍｉＲＮＡ媒介下方制御は、標的ｍＲＮＡの切断、標的ｍＲＮＡの翻訳阻害、またはｍＲＮＡ減衰によって引き起こされ得る。ｍｉＲＮＡ標的化配列は通常、標的ｍＲＮＡの３’ＵＴＲに位置する。単一のｍｉＲＮＡは、様々な遺伝子からの１００種を超える転写産物を標的とし得、１つのｍＲＮＡは、異なるｍｉＲＮＡによって標的とされ得る。
【0222】
特定のｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡ二本鎖またはｄｓＲＮＡは、ＡＡＶ粒子のペイロードとして設計され得、ＲＮＡｉプロセスを活性化するために細胞に導入される。Ｅｌｂａｓｈｉｒらは、２１ヌクレオチドｓｉＲＮＡ二本鎖（低分子干渉ＲＮＡと称される）が、哺乳動物細胞において免疫反応を誘導せずに強力で特異的な遺伝子ノックダウンを達成することが可能であることを実証した（Ｅｌｂａｓｈｉｒ ＳＭ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２００１，４１１，４９４－４９８）。この最初の報告以来、ｓｉＲＮＡによる転写後遺伝子サイレンシングは、哺乳動物細胞における遺伝子分析のための強力なツールとして直ちに出現し、新規治療剤を生成するための潜在性を有する。
【0223】
標的ｍＲＮＡと相同なセンス鎖及び標的ｍＲＮＡに相補的であるアンチセンス鎖を含むｓｉＲＮＡ二本鎖は、一本鎖（ｓｓ）－ｓｉＲＮＡ（例えば、アンチセンス鎖ＲＮＡまたはアンチセンスオリゴヌクレオチド）の使用と比較して、標的ＲＮＡ破壊のための効率の観点から多大な利点を提供する。多くの場合、それは、対応する二本鎖の有効な遺伝子サイレンシング効力を達成するためにより高い濃度のｓｓ－ｓｉＲＮＡを必要とする。
【0224】
所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、分子骨格も含む調節性ポリヌクレオチドにおいてコードされ得る。本明細書で使用される場合、「分子骨格」は、次の分子を設計または作製するための配列または構造的基礎を形成するフレームワークまたは開始分子である。
【0225】
所定の実施形態では、ペイロード（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたは本明細書に記載の他のＲＮＡｉ剤）を含む調節性ポリヌクレオチドは、任意の長さのものであり得、かつ野生型マイクロＲＮＡ配列に全体としてまたは部分的に由来し得るまたは完全に人工であり得るリーディング５’フランキング配列を含む分子骨格を含む。３’フランキング配列は、サイズ及び起源が５’フランキング配列を反映している場合がある。所定の実施形態では、５’及び３’フランキング配列の一方または両方は、非存在である。
【0226】
所定の実施形態では、分子骨格は、当該技術分野で知られている１つ以上のリンカーを含み得る。リンカーは、領域を分離し得、または一方の分子骨格を他方のものから分離し得る。非限定的な例として、分子骨格は、ポリシストロン性であり得る。
【0227】
所定の実施形態では、調節性ポリヌクレオチドは、以下の特性のうちの少なくとも１つを使用して設計される：ループバリアント、シードミスマッチ／バルジ／ゆらぎバリアント、ステムミスマッチ、ループバリアント及び基礎ステムミスマッチバリアント、シードミスマッチ及び基礎ステムミスマッチバリアント、ステムミスマッチ及び基礎ステムミスマッチバリアント、シードゆらぎ及び基礎ステムゆらぎバリアント、またはステム配列バリアント。
【0228】
ペイロード：ポリペプチド及びバリアント
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、対象となるポリペプチドまたはタンパク質をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子のペイロード領域は、対象となるポリペプチドまたはタンパク質をコードする１つ以上の核酸配列を含む。
【0229】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象となる複数のポリペプチドをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。所定の実施形態では、１つ以上のポリペプチドをコードするウイルスゲノムが複製され、ウイルス粒子にパッケージングされ得る。ベクターゲノムを含むウイルス粒子で形質導入された標的細胞は、単一の標的細胞において１つ以上のポリペプチドの各々を発現し得る。
【0230】
ＡＡＶ粒子ペイロード領域がポリペプチドをコードする場合、ポリペプチドは、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質であり得る。非限定的な例として、ペイロード領域は、対象となる少なくとも１つの治療用タンパク質をコードし得る。本明細書に記載のポリペプチドをコードするＡＡＶウイルスゲノムは、ヒト疾患、ウイルス、感染症、獣医学的用途ならびに多様なｉｎ ｖｉｖｏ及びｉｎ ｖｉｔｒｏ環境において有用であり得る。
【0231】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子（ウイルスゲノムを含む）の対象への投与は、対象におけるタンパク質の発現を増加させる。所定の実施形態では、タンパク質の発現の増加は、ペイロードによってコードされるポリペプチドに関連する疾患または疾病の作用及び／または症状を減少させる。
【0232】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子は、標準的な評価システム、例えば、限定されないが、総機能的能力（ＴＦＣ）スケールによって測定される日常生活の機能的能力及び活動の低下を減少させるために使用され得る。
【0233】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象となるタンパク質（すなわち、ペイロードタンパク質、治療用タンパク質）をコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。
【0234】
所定の実施形態では、ペイロード領域は、限定されないが、抗体、芳香族Ｌ－アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）、ＡｐｏＥ２、フラタキシン、生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質、グルコセレブロシダーゼ、Ｎ－スルホグルコサミンスルホヒドロラーゼ、Ｎ－アセチル－アルファ－グルコサミニダーゼ、イズロン酸２－スルファターゼ、アルファ－Ｌ－イズロニダーゼ、パルミトイル－タンパク質チオエステラーゼ１、トリペプチジルペプチダーゼ１、バッテニン、ＣＬＮ５、ＣＬＮ６（リンクリン）、ＭＦＳＤ８、ＣＬＮ８、アスパルトアシラーゼ（ＡＳＰＡ）、プログラニュリン（ＧＲＮ）、ＭｅＣＰ２、ベータ－ガラクトシダーゼ（ＧＬＢ１）及び／またはギガキソニン（ＧＡＮ）を含むタンパク質をコードする核酸配列を含む。
【0235】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＤＣをコードする核酸配列を含むペイロード領域またはパーキンソン病を処置するための当該技術分野で知られている任意の他のペイロードを有するウイルスゲノムを含む。非限定的な例として、ペイロードは、ＮＭ＿００１０８２９７１．１（ＧＩ：１３２８１４４４７）、ＮＭ＿０００７９０．３（ＧＩ：１３２８１４４５９）、ＮＭ＿００１２４２８８６．１（ＧＩ：３３８９６８９１３）、ＮＭ＿００１２４２８８７．１（ＧＩ：３３８９６８９１６）、ＮＭ＿００１２４２８８８．１（ＧＩ：３３８９６８９１８）、ＮＭ＿００１２４２８８９．１（ＧＩ：３３８９６８９２０）、ＮＭ＿００１２４２８９０．１（ＧＩ：３３８９６８９２２）ならびにそれらの断片またはバリアントなどの配列を含み得る。
【0236】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、フラタキシンをコードする核酸配列を含むペイロード領域またはフリードライヒ運動失調症を処置するための当該技術分野で知られている任意の他のペイロードを有するウイルスゲノムを含む。非限定的な例として、ペイロードは、ＮＭ＿０００１４４．４（ＧＩ：２３９７８７１６７）、ＮＭ＿１８１４２５．２（ＧＩ：２３９７８７１８５）、ＮＭ＿００１１６１７０６．１（ＧＩ：２３９７８７１９７）ならびにそれらの断片またはバリアントなどの配列を含み得る。
【0237】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＳＭＮをコードする核酸配列を含むペイロード領域または脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）を処置するための当該技術分野で知られている任意の他のペイロードを有するウイルスゲノムを含む。非限定的な例として、ペイロードは、ＮＭ＿００１２９７７１５．１（ＧＩ：６６３０７０９９３）、ＮＭ＿０００３４４．３（ＧＩ：１９６１１５０５５）、ＮＭ＿０２２８７４．２（ＧＩ：１９６１１５０４０）ならびにそれらの断片またはバリアントなどの配列を含み得る。
【0238】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、米国特許公開番号２０１８０２５８４２４（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の疾患関連タンパク質（及びその断片またはバリアント）のいずれかをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。
【0239】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、以下の国際公開のいずれか１つに記載の疾患関連タンパク質（及びその断片またはバリアント）のいずれかをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む：ＷＯ２０１６０７３６９３、ＷＯ２０１７０２３７２４、ＷＯ２０１６０７７６８７、ＷＯ２０１６０７７６８９、ＷＯ２０１８２０４７８６、ＷＯ２０１７２０１２５８、ＷＯ２０１７２０１２４８、ＷＯ２０１８２０４８０３、ＷＯ２０１８２０４７９７、ＷＯ２０１７１８９９５９、ＷＯ２０１７１８９９６３、ＷＯ２０１７１８９９６４、ＷＯ２０１５１９１５０８、ＷＯ２０１６０９４７８３、ＷＯ２０１６０１３７９４９、ＷＯ２０１７０７５３３５（これらの内容はそれぞれ、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【0240】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子は、神経変性障害／疾患の症状を測定するために使用される任意の評価に対する性能を改善するために使用され得る。そのような評価は、限定されないが、ＡＤＡＳ－ｃｏｇ（アルツハイマー病評価尺度－認知）、ＭＭＳＥ（ミニ精神状態検査）、ＧＤＳ（老年期うつ尺度）、ＦＡＱ（機能活性質問票）、ＡＤＬ（日常生活活動）、ＧＰＣＯＧ（一般開業医認知評価）、Ｍｉｎｉ－Ｃｏｇ、ＡＭＴＳ（簡易精神試験尺度）、時計描画試験、６－ＣＩＴ（６項目認知障害試験）、ＴＹＭ（自己記憶試験）、ＭｏＣａ（モントリオール認知評価）、ＡＣＥ－Ｒ（アデンブルックズ認知評価）、ＭＩＳ（記憶障害スクリーニング）、ＢＡＤＬＳ（ブリストル日常生活活動尺度）、バーセル指数、機能的自立度評価法、手段的日常生活活動、ＩＱＣＯＤＥ（高齢者における認知低下のインフォーマント質問票）、神経精神症状インベントリ、コーエン－マンスフィールド動揺インベントリ、ＢＥＨＡＶＥ－ＡＤ、ＥｕｒｏＱｏｌ、ショートフォーム－３６及び／またはＭＢＲ介護者負担指数、またはＳｈｅｅｈａｎ Ｂ Ｔｈｅｒ Ａｄｖ Ｎｅｕｒｏｌ Ｄｉｓｏｒｄ ５（６）：３４９－３５８（２０１２）（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される他の試験のいずれかを含む。
【0241】
所定の実施形態では、「バリアント模倣体」が提供される。本明細書で使用される場合、用語「バリアント模倣体」は、活性化配列を模倣するであろう１つ以上のアミノ酸を含有するものである。例えば、グルタミン酸は、ホスホロ－トレオニン及び／またはホスホロ－セリンの模倣体として機能し得る。代替的には、バリアント模倣体は、脱活性化または模倣体を含有する不活性化した生成物をもたらす。例えば、フェニルアラニンは、チロシンの不活性化置換として機能し得る；またはアラニンは、セリンの不活性化置換として機能し得る。
【0242】
所定の実施形態では、「アミノ酸配列バリアント」が提供される。用語「アミノ酸配列バリアント」は、ネイティブまたは開始配列と比較して、それらのアミノ酸配列におけるいくつかの相違を有する分子を指す。アミノ酸配列バリアントは、アミノ酸配列内の所定の位置で置換、欠失、及び／または挿入を保有し得る。「ネイティブ」または「開始」配列は、野生型配列と混同されるべきではない。本明細書で使用される場合、ネイティブまたは開始配列は、比較がなされ得るオリジナルの分子を指す相対的用語である。「ネイティブ」または「開始」配列または分子は、野生型（天然に見られるその配列）を表し得るが、野生型配列である必要はない。
【0243】
通常、バリアントは、ネイティブ配列と少なくとも約７０％の相同性を保有し、所定の実施形態では、それらは、ネイティブ配列と少なくとも約８０％または少なくとも約９０％相同である。「相同性」は、アミノ酸配列に適用される場合、配列をアライメントし、必要に応じてギャップを導入して、最大相同率を達成した後の第２の配列のアミノ酸配列における残基と同一である候補アミノ酸配列における残基の百分率として定義される。アライメントのための方法及びコンピュータプログラムは、当該技術分野でよく知られている。相同性は、同一率の計算に依存するが、計算に導入されるギャップ及びペナルティにより値が異なり得ることが理解される。
【0244】
「ホモログ」は、アミノ酸配列に適用される場合、第２の種の第２の配列と実質的な同一性を有する他の種の対応する配列を意味する。
「アナログ」は、親ポリペプチドの特性を依然として維持するアミノ酸残基の１つ以上のアミノ酸変化、例えば、置換、付加または欠失によって異なるポリペプチドバリアントを含むことを意味する。
「アナログ」は、親ポリペプチドの特性を依然として維持するアミノ酸残基の１つ以上のアミノ酸変化、例えば、置換、付加または欠失によって異なるポリペプチドバリアントを含むことを意味する。
【0245】
配列タグまたはアミノ酸、例えば、１つ以上のリシンが、本開示のペプチド配列に（例えば、Ｎ末端またはＣ末端の端部で）付加され得る。配列タグは、ペプチド精製または局在化のために使用され得る。リシンは、ペプチド溶解性を増加させるためまたはビオチン化を可能とするために使用され得る。代替的には、ペプチドまたはタンパク質のアミノ酸配列のカルボキシ及びアミノ末端領域に位置するアミノ酸残基は、任意に欠失され、切断型配列を提供し得る。所定のアミノ酸（例えば、Ｃ末端またはＮ末端残基）は代替的に、例えば、可溶性であるか、または固体支持体に連結されたより大きな配列の一部としての配列の発現として、配列の使用に応じて欠失され得る。
【0246】
所定の実施形態では、「置換型バリアント」が提供される。「置換型バリアント」は、タンパク質に言及する場合、ネイティブまたは開始配列における少なくとも１つのアミノ酸が除去され、同じ位置でその箇所に異なるアミノ酸が挿入されたものである。置換は、分子における１つのアミノ酸のみが置換された単独のものであり得、またはそれらは、同じ分子において２つ以上のアミノ酸が置換された複数のものであり得る。
【0247】
本明細書で使用される場合、用語「保存的アミノ酸置換」は、配列に通常存在するアミノ酸の、類似するサイズ、電荷、または極性の異なるアミノ酸での置換を指す。保存的置換の例は、非極性（疎水性）残基、例えば、イソロイシン、バリン及びロイシンでの別の非極性残基の置換を含む。同様に、保存的置換の例は、１つの極性（親水性）残基での別の極性残基の置換、例えば、アルギニンとリシンの間、グルタミンとアスパラギンの間、及びグリシンとセリンの間の置換を含む。また、塩基性残基、例えば、リシン、アルギニンまたはヒスチジンでの別の塩基性残基の置換、または１つの酸性残基、例えば、アスパラギン酸またはグルタミン酸での別の酸性残基の置換は、保存的置換の追加の例である。非保存的置換の例は、非極性（疎水性）アミノ酸残基、例えば、イソロイシン、バリン、ロイシン、アラニン、メチオニンでの極性（親水性）残基、例えば、システイン、グルタミン、グルタミン酸またはリシンの置換及び／または極性残基での非極性残基の置換を含む。
【0248】
所定の実施形態では、「挿入バリアント」が提供される。「挿入バリアント」は、タンパク質に言及する場合、ネイティブまたは開始配列における特定の位置でアミノ酸に直接隣接して挿入された１つ以上のアミノ酸を有するものである。アミノ酸に「直接隣接する」は、アミノ酸のアルファ－カルボキシまたはアルファ－アミノ官能基のいずれかに接続されていることを意味する。
【0249】
所定の実施形態では、「欠失バリアント」が提供される。「欠失バリアント」は、タンパク質に言及する場合、ネイティブまたは開始アミノ酸配列における１つ以上のアミノ酸が除去されたものである。通常、欠失バリアントは、分子の特定の領域において欠失した１つ以上のアミノ酸を有する。
【0250】
本明細書で使用される場合、用語「誘導体」は、用語「バリアント」と同義的に使用され、参照分子または開始分子に対して任意の方法で改変または変更された分子を指す。所定の実施形態では、誘導体は、有機タンパク質性または非タンパク質性誘導体化剤、及び翻訳後修飾で改変されたネイティブまたは開始タンパク質を含む。共有結合修飾は、タンパク質の標的アミノ酸残基を、選択された側鎖または末端残基と反応することが可能な有機誘導体化剤と反応させることによって、または選択された組換え宿主細胞において機能する翻訳後修飾のメカニズムを利用することによって従来的に導入される。得られる共有結合誘導体は、生物学的活性のため、イムノアッセイのため、または組換え糖タンパク質のイムノアフィニティー精製用の抗タンパク質抗体の調製のために重要な残基を同定する場合に仕向けられたプログラムにおいて有用である。そのような修飾は、当該技術分野における通常の技術の範囲内であり、過度の実験をせずに実施される。
【0251】
所定の翻訳後修飾は、発現したポリペプチドに対する組換え宿主細胞の作用の結果である。グルタミニル及びアスパラギニル残基は、対応するグルタミル及びアスパルチル残基に頻繁に翻訳後に脱アミド化される。代替的には、これらの残基は、弱酸性条件下で脱アミド化される。これらの残基のいずれかの形態は、本開示に従って使用されるタンパク質に存在し得る。
【0252】
他の翻訳後修飾は、プロリン及びリシンのヒドロキシル化、セリルまたはトレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リシン、アルギニン、及びヒスチジン側鎖のアルファ－アミノ基のメチル化を含む（Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ＆ Ｃｏ．，Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ｐｐ．７９－８６（１９８３））。
【0253】
「特徴」は、タンパク質に言及する場合、分子の区別可能なアミノ酸配列に基づく成分として定義される。本開示のタンパク質の特徴は、表面発現、局所コンフォメーション形状、折り畳み、ループ、ハーフループ、ドメイン、ハーフドメイン、部位、末端またはそれらの任意の組み合わせを含む。
【0254】
本明細書で使用される場合、タンパク質に言及する場合、用語「表面発現」は、最も外側の表面上に現れるタンパク質のポリペプチドに基づく成分を指す。
本明細書で使用される場合、タンパク質に言及する場合、用語「局所コンフォメーション形状」は、タンパク質の定義可能な空間内に位置するタンパク質のポリペプチドに基づく構造的発現を意味する。
本明細書で使用される場合、タンパク質に言及する場合、用語「局所コンフォメーション形状」は、タンパク質の定義可能な空間内に位置するタンパク質のポリペプチドに基づく構造的発現を意味する。
【0255】
本明細書で使用される場合、タンパク質に言及する場合、用語「折り畳み」は、エネルギー最小化時に得られるアミノ酸配列のコンフォメーションを意味する。折り畳みは、折り畳みプロセスの二次または三次レベルで生じ得る。二次レベルの折り畳みの例は、ベータシート及びアルファヘリックスを含む。三次折り畳みの例は、エネルギー力の凝集または分離により形成されるドメイン及び領域を含む。このように形成される領域は、疎水性及び親水性ポケットなどを含む。
【0256】
本明細書で使用される場合、用語「ターン」は、タンパク質コンフォメーションに関する場合、ペプチドまたはポリペプチドの骨格の方向を変化させ、かつ１、２、３つまたはそれ以上のアミノ酸残基を含み得る屈曲を意味する。
【0257】
本明細書で使用される場合、タンパク質に言及する場合、用語「ループ」は、ペプチドまたはポリペプチドの骨格の方向を逆転させ、かつ４つ以上のアミノ酸残基を含むペプチドまたはポリペプチド構造的特徴を指す。Ｏｌｉｖａらは、少なくとも５つのクラスのタンパク質ループを同定した（Ｊ．Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２６６（４）：８１４－８３０；１９９７）。
【0258】
本明細書で使用される場合、タンパク質に言及する場合、用語「ハーフループ」は、それが誘導されたループとしてのアミノ酸残基の数の少なくとも半分を有する同定されたループの一部を指す。ループは、必ずしも偶数のアミノ酸残基を含有するわけではない場合があることが理解される。そのため、ループが奇数のアミノ酸を含有するか、または含むことが同定されているそれらの場合、奇数のループのハーフループは、ループの整数部分または次の整数部分（ループのアミノ酸の数／２＋／－０．５アミノ酸）を含むことになる。例えば、７アミノ酸のループとして同定されたループは、３アミノ酸または４アミノ酸のハーフループを生成し得る（７／２＝３．５＋／－０．５は３または４である）。
【0259】
本明細書で使用される場合、タンパク質に言及する場合、用語「ドメイン」は、１つ以上の同定可能な構造的または機能的な特徴または特性（例えば、タンパク質－タンパク質相互作用のための部位として機能する結合能力）を有するポリペプチドのモチーフを指す。
【0260】
本明細書で使用される場合、タンパク質に言及する場合、用語「ハーフドメイン」は、それが誘導されたドメインとしてのアミノ酸残基の数の少なくとも半分を有する同定されたドメインの一部を意味する。ドメインは、必ずしも偶数のアミノ酸残基を含有するわけではない場合があることが理解される。そのため、ドメインが奇数のアミノ酸を含有するか、または含むことが同定されているそれらの場合、奇数のドメインのハーフドメインは、ドメインの整数部分または次の整数部分（ドメインのアミノ酸の数／２＋／－０．５アミノ酸）を含むことになる。例えば、７アミノ酸のドメインとして同定されたドメインは、３アミノ酸または４アミノ酸のハーフドメインを生成し得る（７／２＝３．５＋／－０．５は３または４である）。サブドメインは、ドメインまたはハーフドメイン内で同定され得、これらのサブドメインは、それらが誘導されたドメインまたはハーフドメインにおいて同定された構造的また機能的特性のすべてよりも少ないものを保有することも理解される。本明細書におけるドメインタイプのいずれかを含むアミノ酸は、ポリペプチドの骨格に沿って連続的である必要はない（すなわち、非隣接アミノ酸が構造的に折り畳まれてドメイン、ハーフドメインまたはサブドメインが生成され得る）ことも理解される。
【0261】
本明細書で使用される場合、タンパク質に言及する場合、用語「部位」は、アミノ酸に基づく実施形態に関する場合、「アミノ酸残基」及び「アミノ酸側鎖」と同義で使用される。部位は、本開示のポリペプチド系分子内で改変、操作、変化、誘導体化または変更され得るペプチドまたはポリペプチド内の位置を表す。
【0262】
本明細書で使用される場合、用語「末端（複数）または末端（単数）」は、タンパク質に言及する場合、ペプチドまたはポリペプチドの先端を指す。そのような先端は、ペプチドまたはポリペプチドの最初または最後の部位に限定されないが、末端領域における追加のアミノ酸を含み得る。本開示のポリペプチドに基づく分子は、Ｎ末端（遊離アミノ基（ＮＨ２）を有するアミノ酸によって終結される）及びＣ末端（遊離カルボキシル基（ＣＯＯＨ）を有するアミノ酸によって終結される）の両方を有するものとして特性化され得る。本開示のタンパク質は、所定の実施形態では、ジスルフィド結合によってまたは非共有結合性力によって一緒にもたらされる複数のポリペプチド鎖（多量体、オリゴマー）から構成される。これらの種類のタンパク質は、複数のＮ及びＣ末端を有することになる。代替的には、ポリペプチドの末端は、場合によって、非ポリペプチド系部位、例えば、有機コンジュゲートで開始または終了するように改変され得る。
【0263】
特徴のいずれかが本開示の分子の成分として同定または定義されると、これらの特徴のいくつかの操作及び／または改変のいずれかは、移動、交換、反転、欠失、ランダム化または複製によって実施され得る。さらに、特徴の操作は、本開示の分子に対する改変と同じアウトカムをもたらし得ることが理解される。例えば、ドメインを欠失させることを含む操作は、全長に満たない分子をコードするように核酸を改変する場合と同じように、分子の長さの変化をもたらすであろう。
【0264】
改変及び操作は、当該技術分野で知られている方法、例えば、部位特異的変異誘発によって達成され得る。生じた改変された分子は次いで、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏアッセイ、例えば、本明細書に記載のものまたは当該技術分野で知られている任意の他の好適なスクリーニングアッセイを使用して活性について試験され得る。
【0265】
ペイロード：対象となる遺伝子を標的とする調節性ポリヌクレオチド
概要
所定の実施形態では、本開示は、ベクターゲノムが調節性ポリヌクレオチド、例えば、ＲＮＡまたはＤＮＡ分子を治療剤としてコードする製剤化されたＡＡＶ粒子の使用を提供する。したがって、本開示は、対象となる遺伝子を標的とする低分子二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）分子（低分子干渉ＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、プレｍｉＲＮＡ）にプロセシングされるポリヌクレオチドをコードするベクターゲノムを提供する。本開示はまた、疾患、障害、及び／または病態を処置するための、対象となる遺伝子のアレルの遺伝子発現及びタンパク質生成を阻害するためのそれらの使用方法を提供する。
概要
所定の実施形態では、本開示は、ベクターゲノムが調節性ポリヌクレオチド、例えば、ＲＮＡまたはＤＮＡ分子を治療剤としてコードする製剤化されたＡＡＶ粒子の使用を提供する。したがって、本開示は、対象となる遺伝子を標的とする低分子二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）分子（低分子干渉ＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、プレｍｉＲＮＡ）にプロセシングされるポリヌクレオチドをコードするベクターゲノムを提供する。本開示はまた、疾患、障害、及び／または病態を処置するための、対象となる遺伝子のアレルの遺伝子発現及びタンパク質生成を阻害するためのそれらの使用方法を提供する。
【0266】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、１つ以上の調節性ポリヌクレオチドをコードするまたは含む核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象となる調節性ポリヌクレオチドをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。本開示の所定の実施形態では、調節性ポリヌクレオチド、例えば、ＲＮＡまたはＤＮＡ分子は、治療剤として提供される。ＲＮＡ干渉媒介遺伝子サイレンシングは、標的遺伝子発現を特異的に阻害し得る。
【0267】
所定の実施形態では、ペイロード領域は、標的遺伝子発現及び／または標的タンパク質生成と干渉する調節性ポリヌクレオチドをコードする核酸配列を含む。所定の実施形態では、阻害／改変される遺伝子発現またはタンパク質生成は、限定されないが、スーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）、染色体９オープンリーディングフレーム７２（Ｃ９ＯＲＦ７２）、ＴＡＲ ＤＮＡ結合タンパク質（ＴＡＲＤＢＰ）、アタキシン－３（ＡＴＸＮ３）、ハンチンチン（ＨＴＴ）、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）、アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）、微小管関連タンパク質タウ（ＭＡＰＴ）、アルファ－シヌクレイン（ＳＮＣＡ）、電位依存性ナトリウムチャネルアルファサブユニット９（ＳＣＮ９Ａ）、及び／または電位依存性ナトリウムチャネルアルファサブユニット１０（ＳＣＮ１０Ａ）を含み得る。
【0268】
本開示は、ＳＯＤ１のｍＲＮＡを標的としてＳＯＤ１の遺伝子発現及び／またはタンパク質生成と干渉する低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）二本鎖（及びそれらをコードする調節性ポリヌクレオチド）を提供する。本開示はまた、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）を処置するための、ＳＯＤ１のアレルの遺伝子発現及びタンパク質生成を阻害するためのそれらの使用方法を提供する。所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ二本鎖は、それぞれのヌクレオチド配列の任意のセグメントに沿ってＳＯＤ１を標的とし得る。所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ二本鎖は、ヌクレオチド配列内のＳＮＰまたはバリアントの位置でＳＯＤ１を標的とし得る。
【0269】
本開示は、ＨＴＴのｍＲＮＡを標的としてＨＴＴの遺伝子発現及び／またはタンパク質生成と干渉する低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）二本鎖（及びそれらをコードする調節性ポリヌクレオチド）を提供する。本開示はまた、ハンチントン病（ＨＤ）を処置するための、ＨＴＴのアレルの遺伝子発現及びタンパク質生成を阻害するためのそれらの使用方法を提供する。所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ二本鎖は、それぞれのヌクレオチド配列の任意のセグメントに沿ってＨＴＴを標的とし得る。所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ二本鎖は、ヌクレオチド配列内のＳＮＰまたはバリアントの位置でＨＴＴを標的とし得る。
【0270】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、以下の国際公開のいずれか１つに記載の調節性ポリヌクレオチド、ＲＮＡｉ分子、ｓｉＲＮＡ分子、ｄｓＲＮＡ分子、及び／またはＲＮＡ二本鎖のいずれかをコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む：ＷＯ２０１６０７３６９３、ＷＯ２０１７０２３７２４、ＷＯ２０１６０７７６８７、ＷＯ２０１６０７７６８９、ＷＯ２０１８２０４７８６、ＷＯ２０１７２０１２５８、ＷＯ２０１７２０１２４８、ＷＯ２０１８２０４８０３、ＷＯ２０１８２０４７９７、ＷＯ２０１７１８９９５９、ＷＯ２０１７１８９９６３、ＷＯ２０１７１８９９６４、ＷＯ２０１５１９１５０８、ＷＯ２０１６０９４７８３、ＷＯ２０１６０１３７９４９、ＷＯ２０１７０７５３３５（これらの内容はそれぞれ、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【0271】
所定の実施形態では、そのようなｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列、またはｓｉＲＮＡ分子の一本鎖は、アデノ随伴ウイルスベクターに挿入され、細胞、具体的には中枢神経系における細胞に導入される。
【0272】
ＡＡＶ粒子は、いくつかの独自の特徴のため、ｓｉＲＮＡ送達のために調査されてきた。特徴の非限定的な例は、（ｉ）分裂及び非分裂細胞の両方に感染する能力；（ｉｉ）ヒト細胞を含む、感染性に関する広い宿主範囲；（ｉｉｉ）野生型ＡＡＶは、いずれの疾患にも関連しておらず、感染した細胞において複製することは示されていないこと；（ｉｖ）ベクターに対する細胞媒介免疫反応の欠如及び（ｖ）宿主染色体における非組み込み特質による長期発現の潜在性の減少を含む。その上、ＡＡＶ粒子での感染は、細胞遺伝子発現のパターンの変化に対する最小の影響を有する（Ｓｔｉｌｗｅｌｌ ａｎｄ Ｓａｍｕｌｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，２００３，３４，１４８）。
【0273】
所定の実施形態では、本開示のコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、二本鎖構造を形成するために互いにハイブリダイズされたアンチセンス鎖及びセンス鎖を含有し、アンチセンス鎖は、対象となる標的遺伝子の核酸配列に相補的であり、センス鎖は、対象となる標的遺伝子の核酸配列と相同である。他の態様では、各鎖の３’末端で０、１または２つのヌクレオチドオーバーハングが存在する。
【0274】
本開示によれば、対象となる遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二本鎖の各鎖は、長さが約１９～２５、１９～２４または１９～２１ヌクレオチド、例えば、長さが約１９ヌクレオチド、２０ヌクレオチド、２１ヌクレオチド、２２ヌクレオチド、２３ヌクレオチド、２４ヌクレオチド、または２５ヌクレオチドであり得る。
【0275】
所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡまたはｄｓＲＮＡは、互いに相補的である少なくとも２つの配列を含む。ｄｓＲＮＡは、第１の配列を有するセンス鎖及び第２の配列を有するアンチセンス鎖を含む。アンチセンス鎖は、対象となる遺伝子をコードするｍＲＮＡの少なくとも一部に実質的に相補的であるヌクレオチド配列を含み、相補性の領域は、長さが３０ヌクレオチド以下、及び少なくとも１５ヌクレオチドである。通常、ｄｓＲＮＡは、長さが１９～２５、１９～２４または１９～２１ヌクレオチドである。所定の実施形態では、ｄｓＲＮＡは、長さが約１５～約２５ヌクレオチドであり、所定の実施形態では、ｄｓＲＮＡは、長さが約２５～約３０ヌクレオチドである。
【0276】
対象となる遺伝子によってコードされるタンパク質を発現する細胞との接触の際に発現ベクターにおいてコードされるｄｓＲＮＡは、当該技術分野で知られているまたは本明細書に記載される方法によってアッセイされた場合、対象となる遺伝子によってコードされるタンパク質の発現を少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、またはそれ以上阻害する。
【0277】
本開示によれば、対象となる遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二本鎖の核酸、ｓｉＲＮＡ二本鎖の一方の鎖またはｄｓＲＮＡを含む製剤化されたＡＡＶ粒子が生成され、ＡＡＶ粒子血清型は、ＰＨＰ．Ｂ、ＰＨＰ．Ａ、Ｇ２Ｂ－２６、Ｇ２Ｂ－１３、ＴＨ１．１－３２、ＴＨ１．１－３５、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３－３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４－４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２－１ｂ、ＡＡＶ４２－２、ＡＡＶ４２－３ａ、ＡＡＶ４２－３ｂ、ＡＡＶ４２－４、ＡＡＶ４２－５ａ、ＡＡＶ４２－５ｂ、ＡＡＶ４２－６ｂ、ＡＡＶ４２－８、ＡＡＶ４２－１０、ＡＡＶ４２－１１、ＡＡＶ４２－１２、ＡＡＶ４２－１３、ＡＡＶ４２－１５、ＡＡＶ４２－ａａ、ＡＡＶ４３－１、ＡＡＶ４３－１２、ＡＡＶ４３－２０、ＡＡＶ４３－２１、ＡＡＶ４３－２３、ＡＡＶ４３－２５、ＡＡＶ４３－５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１－７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１－８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２－１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２－３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２－４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２－５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３－９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３－１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４－９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４－１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５－３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５－２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ－１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ－５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ－１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ－４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１－８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ１９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ａ５８６Ｒ変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ Ｒ５３３Ａ変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ヒツジＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ、ＡＡＶ－ＬＫ０１、ＡＡＶ－ＬＫ０２、ＡＡＶ－ＬＫ０３、ＡＡＶ－ＬＫ０４、ＡＡＶ－ＬＫ０５、ＡＡＶ－ＬＫ０６、ＡＡＶ－ＬＫ０７、ＡＡＶ－ＬＫ０８、ＡＡＶ－ＬＫ０９、ＡＡＶ－ＬＫ１０、ＡＡＶ－ＬＫ１１、ＡＡＶ－ＬＫ１２、ＡＡＶ－ＬＫ１３、ＡＡＶ－ＬＫ１４、ＡＡＶ－ＬＫ１５、ＡＡＶ－ＬＫ１６、ＡＡＶ－ＬＫ１７、ＡＡＶ－ＬＫ１８、ＡＡＶ－ＬＫ１９、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ－ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ－２－ｐｒｅ－ｍｉＲＮＡ－１０１、ＡＡＶ－８ｈ、ＡＡＶ－８ｂ、ＡＡＶ－ｈ、ＡＡＶ－ｂ、ＡＡＶ ＳＭ １０－２、ＡＡＶシャッフル１００－１、ＡＡＶシャッフル１００－３、ＡＡＶシャッフル１００－７、ＡＡＶシャッフル１０－２、ＡＡＶシャッフル１０－６、ＡＡＶシャッフル１０－８、ＡＡＶシャッフル１００－２、ＡＡＶ ＳＭ １０－１、ＡＡＶ ＳＭ １０－８、ＡＡＶ ＳＭ １００－３、ＡＡＶ ＳＭ １００－１０、ＢＮＰ６１ ＡＡＶ、ＢＮＰ６２ ＡＡＶ、ＢＮＰ６３ ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４－８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ－９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、真型ＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ ＡＡＶ １０、日本型ＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．１０、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．２、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．５、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．７、ＡＡＶ ＣＢｒ－７．８、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｂ７．４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ２、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ３、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ４、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－ｅ５、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ６、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ７、ＡＡＶ ＣＢｒ－Ｅ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－１、ＡＡＶ ＣＨｔ－２、ＡＡＶ ＣＨｔ－３、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．１０、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．５、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．６、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．７、ＡＡＶ ＣＨｔ－６．８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ１、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ２、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ５、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ６、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ８、ＡＡＶ ＣＨｔ－Ｐ９、ＡＡＶ ＣＫｄ－１、ＡＡＶ ＣＫｄ－１０、ＡＡＶ ＣＫｄ－２、ＡＡＶ ＣＫｄ－３、ＡＡＶ ＣＫｄ－４、ＡＡＶ ＣＫｄ－６、ＡＡＶ ＣＫｄ－７、ＡＡＶ ＣＫｄ－８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ７、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｂ８、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ１、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ２、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ５、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｈ６、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ３、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ４、ＡＡＶ ＣＫｄ－Ｎ９、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ１、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ２、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ３、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ４、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ５、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ６、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ７、ＡＡＶ ＣＬｇ－Ｆ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－１、ＡＡＶ ＣＬｖ１－１、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－１０、ＡＡＶ ＣＬｖ１－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－１２、ＡＡＶ ＣＬｖ１－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－１３、ＡＡＶ ＣＬｖ１－４、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－７、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－８、ＡＡＶ Ｃｌｖ１－９、ＡＡＶ ＣＬｖ－２、ＡＡＶ ＣＬｖ－３、ＡＡＶ ＣＬｖ－４、ＡＡＶ ＣＬｖ－６、ＡＡＶ ＣＬｖ－８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｄ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｅ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｋ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｌ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ１１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｍ９、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ１、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ２、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ３、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ４、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ５、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ６、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ７、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ８、ＡＡＶ ＣＬｖ－Ｒ９、ＡＡＶ ＣＳｐ－１、ＡＡＶ ＣＳｐ－１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－１１、ＡＡＶ ＣＳｐ－２、ＡＡＶ ＣＳｐ－３、ＡＡＶ ＣＳｐ－４、ＡＡＶ ＣＳｐ－６、ＡＡＶ ＣＳｐ－７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．１０、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．２、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．４、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．５、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．６、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．７、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．８、ＡＡＶ ＣＳｐ－８．９、ＡＡＶ ＣＳｐ－９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ－３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／Ｈ
ＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、及び／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９ならびにそれらのバリアントであり得る。
ＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、及び／またはＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９ならびにそれらのバリアントであり得る。
【0278】
本開示によれば、ｓｉＲＮＡ分子は、培養細胞におけるｍＲＮＡレベルの減少におけるそれらの能力のために設計及び試験される。
所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、培養細胞における対象となる遺伝子のレべルの減少におけるそれらの能力のために設計及び試験される。
所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、培養細胞における対象となる遺伝子のレべルの減少におけるそれらの能力のために設計及び試験される。
【0279】
本開示はまた、対象となる遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二本鎖及び薬学的に許容可能な担体を含む薬学的組成物を提供する。いくつかの態様では、ｓｉＲＮＡ二本鎖は、ＡＡＶ粒子におけるベクターゲノムによってコードされる。
【0280】
所定の実施形態では、本開示は、細胞における遺伝子発現を阻害する／沈静させるための方法を提供する。いくつかの態様では、遺伝子発現の阻害は、少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％及び１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３５～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％の阻害を指す。したがって、標的遺伝子のタンパク質生成物は、少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％及び１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％阻害され得る。
【0281】
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、対象となる遺伝子によってコードされるタンパク質の発現を少なくとも約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％及び１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３５～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％減少させるために使用され得る。非限定的な例として、タンパク質の発現は、５０～９０％減少し得る。非限定的な例として、タンパク質の発現は、３０～７０％減少し得る。非限定的な例として、タンパク質の発現は、４０～７０％減少し得る。
【0282】
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、対象となる遺伝子から転写されるｍＲＮＡの発現を少なくとも約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％及び１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３５～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％減少させるために使用され得る。非限定的な例として、ｍＲＮＡ発現の発現は、５０～９０％減少し得る。
【0283】
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、ＣＮＳの少なくとも１つの領域における対象となる遺伝子によってコードされるタンパク質及び／または転写されるｍＲＮＡの発現を減少させるために使用され得る。タンパク質及び／またはｍＲＮＡの発現は、ＣＮＳの少なくとも１つの領域において少なくとも約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％及び１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３５～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％減少する。非限定的な例として、領域は、ニューロン（例えば、皮質ニューロン）である。
【0284】
所定の実施形態では、そのようなコードされるｓｉＲＮＡ分子を含む製剤化されたＡＡＶ粒子は、例えば、被殻への注入によって、対象の中枢神経系に直接的に導入され得る。
所定の実施形態では、そのようなコードされるｓｉＲＮＡ分子を含む製剤化されたＡＡＶ粒子は、例えば、対象の視床への注入によって、対象の中枢神経系に直接的に導入され得る。
所定の実施形態では、そのようなコードされるｓｉＲＮＡ分子を含む製剤化されたＡＡＶ粒子は、例えば、対象の視床への注入によって、対象の中枢神経系に直接的に導入され得る。
【0285】
所定の実施形態では、そのようなコードされるｓｉＲＮＡ分子を含む製剤化されたＡＡＶ粒子は、例えば、対象の白質への注入によって、対象の中枢神経系に直接的に導入され得る。
【0286】
所定の実施形態では、そのようなコードされるｓｉＲＮＡ分子を含む製剤化されたＡＡＶ粒子は、例えば、対象への静脈内投与によって、対象の中枢神経系に導入され得る。
所定の実施形態では、本開示の薬学的組成物は、単独療法として使用される。所定の実施形態では、本開示の薬学的組成物は、併用療法で使用される。併用療法は、１つ以上の神経保護剤、例えば、運動ニューロン変性に対するそれらの神経保護効果について試験された小分子化合物、成長因子及びホルモンとの組み合わせであり得る。
所定の実施形態では、本開示の薬学的組成物は、単独療法として使用される。所定の実施形態では、本開示の薬学的組成物は、併用療法で使用される。併用療法は、１つ以上の神経保護剤、例えば、運動ニューロン変性に対するそれらの神経保護効果について試験された小分子化合物、成長因子及びホルモンとの組み合わせであり得る。
【0287】
ｓｉＲＮＡ分子
本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子のペイロードは、遺伝子発現のＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）誘導阻害に供される１つ以上の薬剤をコードし得る。本明細書では、対象となる遺伝子を標的とするコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖またはコードされるｄｓＲＮＡ（本明細書ではまとめて「ｓｉＲＮＡ分子」と称される）が提供される。そのようなｓｉＲＮＡ分子、例えば、コードされるｓｉＲＮＡ二本鎖、コードされるｄｓＲＮＡまたはコードされるｓｉＲＮＡまたはｄｓＲＮＡ前駆体は、細胞、例えば、星状細胞またはミクログリア、皮質、海馬、嗅内、視床、感覚または運動ニューロンにおける遺伝子発現を減少または沈静させ得る。
本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子のペイロードは、遺伝子発現のＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）誘導阻害に供される１つ以上の薬剤をコードし得る。本明細書では、対象となる遺伝子を標的とするコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖またはコードされるｄｓＲＮＡ（本明細書ではまとめて「ｓｉＲＮＡ分子」と称される）が提供される。そのようなｓｉＲＮＡ分子、例えば、コードされるｓｉＲＮＡ二本鎖、コードされるｄｓＲＮＡまたはコードされるｓｉＲＮＡまたはｄｓＲＮＡ前駆体は、細胞、例えば、星状細胞またはミクログリア、皮質、海馬、嗅内、視床、感覚または運動ニューロンにおける遺伝子発現を減少または沈静させ得る。
【0288】
ＲＮＡｉ（転写後遺伝子サイレンシング（ＰＴＧＳ）、クエリング、または共抑制としても知られている）は、ＲＮＡ分子が、配列特異的様式で、典型的には特定のｍＲＮＡ分子の破壊を引き起こすことによって、遺伝子発現を阻害する転写後遺伝子サイレンシングプロセスである。ＲＮＡｉの活性成分は、典型的には１５～３０ヌクレオチド（例えば、１９～２５、１９～２４または１９～２１ヌクレオチド）及び２ヌクレオチド３’オーバーハングを含有し、かつ標的遺伝子の核酸配列と合致する、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）と呼ばれる短鎖／低分子二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）である。これらの短鎖ＲＮＡ種は、より大きなｄｓＲＮＡのＤｉｃｅｒ媒介切断によってｉｎ ｖｉｖｏで自然に生成され得、それらは哺乳動物細胞において機能的である。
【0289】
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）として知られている天然に発現する低分子ＲＮＡ分子は、ｍＲＮＡの発現を調整することによって遺伝子サイレンシングを誘発する。ｍｉＲＮＡを含有するＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）は、シード領域と呼ばれるｍｉＲＮＡの５’領域におけるヌクレオチド２～７と完全な配列相補性、及びその３’領域との他の塩基対を提供するｍＲＮＡを標的とする。遺伝子発現のｍｉＲＮＡ媒介下方制御は、標的ｍＲＮＡの切断、標的ｍＲＮＡの翻訳阻害、またはｍＲＮＡ減衰によって引き起こされ得る。ｍｉＲＮＡ標的化配列は通常、標的ｍＲＮＡの３’ＵＴＲに位置する。単一のｍｉＲＮＡは、様々な遺伝子からの１００種を超える転写産物を標的とし得、１つのｍＲＮＡは、異なるｍｉＲＮＡによって標的とされ得る。
【0290】
特定のｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡ二本鎖またはｄｓＲＮＡは、ＡＡＶ粒子のペイロードとして設計され得、ＲＮＡｉプロセスを活性化するために細胞に導入される。Ｅｌｂａｓｈｉｒらは、２１ヌクレオチドｓｉＲＮＡ二本鎖（低分子干渉ＲＮＡと称される）が、哺乳動物細胞において免疫反応を誘導せずに強力で特異的な遺伝子ノックダウンを達成することが可能であることを実証した（Ｅｌｂａｓｈｉｒ ＳＭ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２００１，４１１，４９４－４９８）。この最初の報告以来、ｓｉＲＮＡによる転写後遺伝子サイレンシングは、哺乳動物細胞における遺伝子分析のための強力なツールとして直ちに出現し、新規治療剤を生成するための潜在性を有する。
【0291】
標的ｍＲＮＡと相同なセンス鎖及び標的ｍＲＮＡに相補的であるアンチセンス鎖を含むｓｉＲＮＡ二本鎖は、一本鎖（ｓｓ）－ｓｉＲＮＡ（例えば、アンチセンス鎖ＲＮＡまたはアンチセンスオリゴヌクレオチド）の使用と比較して、標的ＲＮＡ破壊のための効率の観点から多大な利点を提供する。多くの場合、それは、対応する二本鎖の有効な遺伝子サイレンシング効力を達成するためにより高い濃度のｓｓ－ｓｉＲＮＡを必要とする。
【0292】
前述の分子のいずれかは、ＡＡＶ粒子またはベクターゲノムによってコードされ得る。
対象となる遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二本鎖の設計及び配列
ｓｉＲＮＡ（例えば、本明細書ではベクターゲノムにおけるペイロードとしてコードされる）を設計するためのいくつかのガイドラインが当該技術分野で提案されている。これらのガイドラインは通常、沈静される遺伝子における領域を標的とする１９ヌクレオチドの二本鎖領域、対称的な２～３ヌクレオチドの３’オーバーハング、５－リン酸基及び３－水酸基を生成することを推奨している。ｓｉＲＮＡ配列選好を既定し得る他のルールは、限定されないが、（ｉ）アンチセンス鎖の５’末端でのＡ／Ｕ；（ｉｉ）センス鎖の５’末端でのＧ／Ｃ；（ｉｉｉ）アンチセンス鎖の５’末端側の１／３における少なくとも５つのＡ／Ｕ残基；及び（ｉｖ）長さが９ヌクレオチドを超える任意のＧＣ伸長部の非存在を含む。そのような考慮事項に従って、標的遺伝子の特定の配列と共に、哺乳動物の標的遺伝子発現を抑制するのに必須の非常に有効なｓｉＲＮＡ分子が容易に設計され得る。
対象となる遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二本鎖の設計及び配列
ｓｉＲＮＡ（例えば、本明細書ではベクターゲノムにおけるペイロードとしてコードされる）を設計するためのいくつかのガイドラインが当該技術分野で提案されている。これらのガイドラインは通常、沈静される遺伝子における領域を標的とする１９ヌクレオチドの二本鎖領域、対称的な２～３ヌクレオチドの３’オーバーハング、５－リン酸基及び３－水酸基を生成することを推奨している。ｓｉＲＮＡ配列選好を既定し得る他のルールは、限定されないが、（ｉ）アンチセンス鎖の５’末端でのＡ／Ｕ；（ｉｉ）センス鎖の５’末端でのＧ／Ｃ；（ｉｉｉ）アンチセンス鎖の５’末端側の１／３における少なくとも５つのＡ／Ｕ残基；及び（ｉｖ）長さが９ヌクレオチドを超える任意のＧＣ伸長部の非存在を含む。そのような考慮事項に従って、標的遺伝子の特定の配列と共に、哺乳動物の標的遺伝子発現を抑制するのに必須の非常に有効なｓｉＲＮＡ分子が容易に設計され得る。
【0293】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子は、センス鎖及び相補的アンチセンス鎖であって、両方の鎖が互いにハイブリダイズされて二本鎖構造を形成するものを含む。アンチセンス鎖は、標的特異的ＲＮＡｉを指示するのに十分なｍＲＮＡ配列に対する相補性を有する、すなわち、ｓｉＲＮＡ分子は、ＲＮＡｉ機構またはプロセスによって標的ｍＲＮＡの破壊を誘発するのに十分な配列を有する。
【0294】
所定の実施形態では、アンチセンス鎖及び標的ｍＲＮＡ配列は、１００％の相補性を有する。アンチセンス鎖は、標的ｍＲＮＡ配列の任意の部分に相補的であり得る。
所定の実施形態では、アンチセンス鎖及び標的ｍＲＮＡ配列は、少なくとも１つのミスマッチを含む。非限定的な例として、アンチセンス鎖及び標的ｍＲＮＡ配列は、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～９９％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～９９％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～９９％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～９９％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～９９％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～９９％、８０～９０％、８０～９５％、８０～９９％、９０～９５％、９０～９９％または９５～９９％の相補性を有する。
所定の実施形態では、アンチセンス鎖及び標的ｍＲＮＡ配列は、少なくとも１つのミスマッチを含む。非限定的な例として、アンチセンス鎖及び標的ｍＲＮＡ配列は、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～９９％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～９９％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～９９％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～９９％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～９９％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～９９％、８０～９０％、８０～９５％、８０～９９％、９０～９５％、９０～９９％または９５～９９％の相補性を有する。
【0295】
本開示によれば、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、約１０～５０またはそれ以上のヌクレオチドの長さを有し、すなわち、各鎖は、１０～５０ヌクレオチド（またはヌクレオチドアナログ）を含む。所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、各鎖が約１５～３０、例えば、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０ヌクレオチドの長さを有し、鎖の一方は、標的領域に十分に相補的である。所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、約１９～２５、１９～２４または１９～２１ヌクレオチドの長さを有する。
【0296】
所定の実施形態では、本開示のコードされるｓｉＲＮＡ分子は、対象となる遺伝子のヌクレオチド配列の領域またはそれをコードする領域（例えば、センスまたはパッセンジャー配列）を含み得る。非限定的な例として、本開示のｓｉＲＮＡ分子において使用されるセンス配列は、対象となる遺伝子のまたは対象となる遺伝子をコードするヌクレオチド配列の一部と少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～９９％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～９９％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～９９％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～９９％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～９９％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～９９％、８０～９０％、８０～９５％、８０～９９％、９０～９５％、９０～９９％または９５～９９％の同一性を有する。別の非限定的な例として、本開示のｓｉＲＮＡ分子において使用されるセンス配列は、対象となる遺伝子のまたは対象となる遺伝子をコードするヌクレオチド配列の少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１または２１超の連続ヌクレオチドを含む。
【0297】
所定の実施形態では、本開示のコードされるｓｉＲＮＡ分子は、対象となる遺伝子のまたは対象となる遺伝子をコードするヌクレオチド配列の領域（例えば、アンチセンスまたはガイド配列）、例えば、限定されないが、対象となる遺伝子のヌクレオチド配列またはその断片もしくはバリアントの逆相補体である少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１または２１超ヌクレオチドを含み得る。非限定的な例として、本開示のコードされるｓｉＲＮＡ分子において使用されるアンチセンス配列は、対象となる遺伝子のまたは対象となる遺伝子をコードするヌクレオチド配列の一部に対して少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～９９％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～９９％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～９９％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～９９％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～９９％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～９９％、８０～９０％、８０～９５％、８０～９９％、９０～９５％、９０～９９％または９５～９９％である逆相補体を有する。別の非限定的な例として、本開示のｓｉＲＮＡ分子において使用されるアンチセンス配列は、対象となる遺伝子のまたは対象となる遺伝子をコードするヌクレオチド配列の逆相補体である少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１または２１超の連続ヌクレオチドを含む。
【0298】
所定の実施形態では、本開示のコードされるｓｉＲＮＡ分子は、アンチセンス配列及びセンス配列、またはそれらの断片もしくはバリアントを含み得る。非限定的な例として、アンチセンス配列及びセンス配列は、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～９９％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～９９％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～９９％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～９９％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～９９％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～９９％、８０～９０％、８０～９５％、８０～９９％、９０～９５％、９０～９９％または９５～９９％の相補性を有する。
【0299】
一態様では、コードされるｓｉＲＮＡ二本鎖のセンス及びアンチセンス鎖は、短鎖ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）と称されるステムループ構造の発現をもたらす短いスペーサー配列によって連結されている。ヘアピンは、Ｄｉｃｅｒによって認識及び切断され、これにより成熟ｓｉＲＮＡ分子を生成する。
【0300】
所定の実施形態では、本開示のコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、標的ｍＲＮＡを抑制（または分解）する。したがって、コードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、細胞、例えば、ニューロンまたは星状細胞における遺伝子発現を実質的に阻害するために使用され得る。いくつかの態様では、遺伝子発現の阻害は、少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％及び１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％の阻害を指す。したがって、標的遺伝子のタンパク質生成物は、少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％及び１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％阻害され得る。
【0301】
本開示によれば、（ＡＡＶベクターゲノムにおいてコードされていない標準的な構造としての）ｓｉＲＮＡ分子は、培養細胞における標的ｍＲＮＡのレベルの減少におけるそれらの能力のために設計及び試験される。
【0302】
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、ガイド鎖のためのｍｉＲＮＡシードマッチを含む。別の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、パッセンジャー鎖のためのｍｉＲＮＡシードマッチを含む。さらに別の実施形態では、対象となる遺伝子を標的とするコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖またはコードされるｄｓＲＮＡは、ガイドまたはパッセンジャー鎖のためのシードマッチを含まない。
【0303】
所定の実施形態では、対象となる遺伝子を標的とするコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖またはコードされるｄｓＲＮＡは、ガイド鎖についての有意な完全長オフターゲットをほとんど有さない場合がある。別の実施形態では、対象となる遺伝子を標的とするコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、パッセンジャー鎖についての有意な完全長オフターゲットをほとんど有さない場合がある。対象となる遺伝子を標的とするコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％未満、１～５％、２～６％、３～７％、４～８％、５～９％、５～１０％、６～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、１０～２０％、１０～３０％、１０～４０％、１０～５０％、１５～３０％、１５～４０％、１５～４５％、２０～４０％、２０～５０％、２５～５０％、３０～４０％、３０～５０％、３５～５０％、４０～５０％、４５～５０％のパッセンジャー鎖についての完全長オフターゲットを有し得る。さらに別の実施形態では、対象となる遺伝子を標的とするコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、ガイド鎖またはパッセンジャー鎖についての有意な完全長オフターゲットをほとんど有さない場合がある。対象となる遺伝子を標的とするコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％未満、１～５％、２～６％、３～７％、４～８％、５～９％、５～１０％、６～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、１０～２０％、１０～３０％、１０～４０％、１０～５０％、１５～３０％、１５～４０％、１５～４５％、２０～４０％、２０～５０％、２５～５０％、３０～４０％、３０～５０％、３５～５０％、４０～５０％、４５～５０％のガイドまたはパッセンジャー鎖についての完全長オフターゲットを有し得る。
【0304】
所定の実施形態では、対象となる遺伝子を標的とするコードされるｓｉＲＮＡ二本鎖は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで高い活性を有し得る。別の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで低い活性を有し得る。さらに別の実施形態では、対象となる遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二本鎖またはｄｓＲＮＡは、ｉｎ ｖｉｔｒｏで高いガイド鎖活性及び低いパッセンジャー鎖活性を有し得る。
【0305】
所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで高いガイド鎖活性及び低いパッセンジャー鎖活性を有する。ガイド鎖による標的ノックダウン（ＫＤ）は、少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、９９．５％または１００％であり得る。ガイド鎖による標的ノックダウンは、６０～６５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６０～９９％、６０～９９．５％、６０～１００％、６５～７０％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、６５～９９％、６５～９９．５％、６５～１００％、７０～７５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７０～９９％、７０～９９．５％、７０～１００％、７５～８０％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、７５～９９％、７５～９９．５％、７５～１００％、８０～８５％、８０～９０％、８０～９５％、８０～９９％、８０～９９．５％、８０～１００％、８５～９０％、８５～９５％、８５～９９％、８５～９９．５％、８５～１００％、９０～９５％、９０～９９％、９０～９９．５％、９０～１００％、９５～９９％、９５～９９．５％、９５～１００％、９９～９９．５％、９９～１００％または９９．５～１００％であり得る。非限定的な例として、ガイド鎖による標的ノックダウン（ＫＤ）は、７０％を超える。
【0306】
所定の実施形態では、最も近いオフターゲットについてのパッセンジャー鎖のＩＣ５０は、標的についてのガイド鎖のＩＣ５０の１００倍よりも高い。非限定的な例として、最も近いオフターゲットについてのパッセンジャー鎖のＩＣ５０が、標的についてのガイド鎖のＩＣ５０の１００倍よりも高い場合、そのときは、ｓｉＲＮＡ分子は、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの高いガイド鎖活性及び低いパッセンジャー鎖活性を有すると称される。
【0307】
所定の実施形態では、ガイド鎖の５’プロセシングは、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％の確率で５’末端で正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは、正確であり、ｉｎ ｖｉｔｒｏで少なくとも９９％の確率で５’末端で正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは、正確であり、ｉｎ ｖｉｖｏで少なくとも９９％の確率で５’末端で正しい開始（ｎ）を有する。
【0308】
所定の実施形態では、発現するガイド対パッセンジャー（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス対センスとも称される）鎖比は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、１；１、２：１０、２：９、２：８、２：７、２：６、２：５、２：４、２：３、２：２、２：１、３：１０、３：９、３：８、３：７、３：６、３：５、３：４、３：３、３：２、３：１、４：１０、４：９、４：８、４：７、４：６、４：５、４：４、４：３、４：２、４：１、５：１０、５：９、５：８、５：７、５：６、５：５、５：４、５：３、５：２、５：１、６：１０、６：９、６：８、６：７、６：６、６：５、６：４、６：３、６：２、６：１、７：１０、７：９、７：８、７：７、７：６、７：５、７：４、７：３、７：２、７：１、８：１０、８：９、８：８、８：７、８：６、８：５、８：４、８：３、８：２、８：１、９：１０、９：９、９：８、９：７、９：６、９：５、９：４、９：３、９：２、９：１、１０：１０、１０：９、１０：８、１０：７、１０：６、１０：５、１０：４、１０：３、１０：２、１０：１、１：９９、５：９５、１０：９０、１５：８５、２０：８０、２５：７５、３０：７０、３５：６５、４０：６０、４５：５５、５０：５０、５５：４５、６０：４０、６５：３５、７０：３０、７５：２５、８０：２０、８５：１５、９０：１０、９５：５、または９９：１である。ガイド対パッセンジャー比は、ガイド鎖の切除の後のガイド鎖のパッセンジャー鎖に対する比を指す。例えば、８０：２０のガイド対パッセンジャー比は、２つのパッセンジャー鎖毎に８つのガイド鎖が前駆体から切除されるであろう。非限定的な例として、ガイド対パッセンジャー鎖比は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで８０：２０である。非限定的な例として、ガイド対パッセンジャー鎖比は、ｉｎ ｖｉｖｏで８０：２０である。非限定的な例として、ガイド対パッセンジャー鎖比は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで８：２である。非限定的な例として、ガイド対パッセンジャー鎖比は、ｉｎ ｖｉｖｏで８：２である。非限定的な例として、ガイド対パッセンジャー鎖比は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで９：１である。非限定的な例として、ガイド対パッセンジャー鎖比は、ｉｎ ｖｉｖｏで９：１である。
【0309】
所定の実施形態では、発現するパッセンジャー対ガイド（Ｐ：Ｇ）（センス対アンチセンスとも称される）鎖比は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、１；１、２：１０、２：９、２：８、２：７、２：６、２：５、２：４、２：３、２：２、２：１、３：１０、３：９、３：８、３：７、３：６、３：５、３：４、３：３、３：２、３：１、４：１０、４：９、４：８、４：７、４：６、４：５、４：４、４：３、４：２、４：１、５：１０、５：９、５：８、５：７、５：６、５：５、５：４、５：３、５：２、５：１、６：１０、６：９、６：８、６：７、６：６、６：５、６：４、６：３、６：２、６：１、７：１０、７：９、７：８、７：７、７：６、７：５、７：４、７：３、７：２、７：１、８：１０、８：９、８：８、８：７、８：６、８：５、８：４、８：３、８：２、８：１、９：１０、９：９、９：８、９：７、９：６、９：５、９：４、９：３、９：２、９：１、１０：１０、１０：９、１０：８、１０：７、１０：６、１０：５、１０：４、１０：３、１０：２、１０：１、１：９９、５：９５、１０：９０、１５：８５、２０：８０、２５：７５、３０：７０、３５：６５、４０：６０、４５：５５、５０：５０、５５：４５、６０：４０、６５：３５、７０：３０、７５：２５、８０：２０、８５：１５、９０：１０、９５：５、または９９：１である。パッセンジャー対ガイド比は、ガイド鎖の切除の後のパッセンジャー鎖のガイド鎖に対する比を指す。例えば、８０：２０のパッセンジャー対ガイド比は、２つのガイド鎖毎に８つのパッセンジャー鎖が前駆体から切除されるであろう。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで８０：２０である。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ ｖｉｖｏで８０：２０である。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで８：２である。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ ｖｉｖｏで８：２である。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで９：１である。非限定的な例として、パッセンジャー対ガイド鎖比は、ｉｎ ｖｉｖｏで９：１である。
【0310】
所定の実施形態では、ｄｓＲＮＡをコードするベクターゲノムの全体性は、コンストラクトの全長の少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超である。非限定的な例として、ベクターゲノムの全体性は、コンストラクトの全長の８０％である。
【0311】
所定の実施形態では、パッセンジャー及び／またはガイド鎖は、欧州特許公開番号ＥＰ１７５２５３６（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に概説される方法及び規則に基づいて設計される。非限定的な例として、配列の３’－末端塩基は、アデニン、チミンまたはウラシルである。非限定的な例として、配列の５’－末端塩基は、グアニンまたはシトシンである。非限定的な例として、３’－末端配列は、アデニン、チミン及びウラシルのうちの１つ以上の塩基に富む７つの塩基を含む。非限定的な例として、塩基数は、細胞毒性を発現せずにＲＮＡ干渉を引き起こすようなレベルである。
【0312】
分子骨格
所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、分子骨格も含む調節性ポリヌクレオチドにおいてコードされ得る。本明細書で使用される場合、「分子骨格」は、次の分子を設計または作製するための配列または構造的基礎を形成するフレームワークまたは開始分子である。
所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、分子骨格も含む調節性ポリヌクレオチドにおいてコードされ得る。本明細書で使用される場合、「分子骨格」は、次の分子を設計または作製するための配列または構造的基礎を形成するフレームワークまたは開始分子である。
【0313】
所定の実施形態では、ペイロード（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたは本明細書に記載の他のＲＮＡｉ剤）を含む調節性ポリヌクレオチドは、任意の長さのものであり得、かつ野生型マイクロＲＮＡ配列に全体としてまたは部分的に由来し得るまたは完全に人工であり得るリーディング５’フランキング配列を含む分子骨格を含む。３’フランキング配列は、サイズ及び起源が５’フランキング配列を反映している場合がある。所定の実施形態では、５’及び３’フランキング配列の一方または両方は、非存在である。
【0314】
所定の実施形態では、５’及び３’フランキング配列は、同じ長さである。
所定の実施形態では、５’フランキング配列は、長さが１～１０ヌクレオチド、長さが５～１５ヌクレオチド、長さが１０～３０ヌクレオチド、長さが２０～５０ヌクレオチド、長さが４０ヌクレオチド超、長さが５０ヌクレオチド超、長さが１００ヌクレオチド超または長さが２００ヌクレオチド超である。
所定の実施形態では、５’フランキング配列は、長さが１～１０ヌクレオチド、長さが５～１５ヌクレオチド、長さが１０～３０ヌクレオチド、長さが２０～５０ヌクレオチド、長さが４０ヌクレオチド超、長さが５０ヌクレオチド超、長さが１００ヌクレオチド超または長さが２００ヌクレオチド超である。
【0315】
所定の実施形態では、５’フランキング配列は、長さが１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、または５００ヌクレオチドであり得る。
【0316】
所定の実施形態では、３’フランキング配列は、長さが１～１０ヌクレオチド、長さが５～１５ヌクレオチド、長さが１０～３０ヌクレオチド、長さが２０～５０ヌクレオチド、長さが４０ヌクレオチド超、長さが５０ヌクレオチド超、長さが１００ヌクレオチド超または長さが２００ヌクレオチド超である。
【0317】
所定の実施形態では、３’フランキング配列は、長さが１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、または５００ヌクレオチドであり得る。
【0318】
所定の実施形態では、５’及び３’フランキング配列は、同じ配列である。所定の実施形態では、それらは、互いにアライメントされた場合、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％または３０％超異なる。
【0319】
３’フランキング配列は任意に、１つ以上のＣＮＮＣモチーフ（「Ｎ」は任意のヌクレオチドを表す）を含有し得る。
ステムループ構造のステムの形成は、少なくとも１つのペイロード配列の最小限のものである。所定の実施形態では、ペイロード配列は、標的配列に部分的に相補的であるか、またはハイブリダイズする少なくとも１つの核酸配列を含む。所定の実施形態では、ペイロードは、ｓｉＲＮＡ分子またはｓｉＲＮＡ分子の断片である。
ステムループ構造のステムの形成は、少なくとも１つのペイロード配列の最小限のものである。所定の実施形態では、ペイロード配列は、標的配列に部分的に相補的であるか、またはハイブリダイズする少なくとも１つの核酸配列を含む。所定の実施形態では、ペイロードは、ｓｉＲＮＡ分子またはｓｉＲＮＡ分子の断片である。
【0320】
所定の実施形態では、ステムループの５’アームは、センス配列を含む。
所定の実施形態では、ステムループの３’アームは、アンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、いくつかの例では、５’最末端で「Ｇ」ヌクレオチドを含む。
所定の実施形態では、ステムループの３’アームは、アンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、いくつかの例では、５’最末端で「Ｇ」ヌクレオチドを含む。
【0321】
所定の実施形態では、センス配列は、３’アームに存在し得るのに対し、アンチセンス配列は、ステムループ構造のステムの５’アームに存在する。
センス及びアンチセンス配列は、それらの長さの相当な部分にわたって完全に相補的であり得る。所定の実施形態では、センス配列及びアンチセンス配列は、独立して、鎖の長さの少なくとも５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、または９９％にわたって少なくとも７０、８０、９０、９５または９９％相補的であり得る。
センス及びアンチセンス配列は、それらの長さの相当な部分にわたって完全に相補的であり得る。所定の実施形態では、センス配列及びアンチセンス配列は、独立して、鎖の長さの少なくとも５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、または９９％にわたって少なくとも７０、８０、９０、９５または９９％相補的であり得る。
【0322】
センス配列の同一性もアンチセンス配列の相同性も、標的に対して１００％相補性である必要はない。
ステムループ構造のセンス及びアンチセンス配列の分離は、ループ（ループモチーフとしても知られている）である。ループは、任意の長さ、４～３０ヌクレオチドの間、４～２０ヌクレオチドの間、４～１５ヌクレオチドの間、５～１５ヌクレオチドの間、６～１２ヌクレオチドの間、６ヌクレオチド、７ヌクレオチド、８ヌクレオチド、９ヌクレオチド、１０ヌクレオチド、１１ヌクレオチド、及び／または１２ヌクレオチドのものであり得る。
ステムループ構造のセンス及びアンチセンス配列の分離は、ループ（ループモチーフとしても知られている）である。ループは、任意の長さ、４～３０ヌクレオチドの間、４～２０ヌクレオチドの間、４～１５ヌクレオチドの間、５～１５ヌクレオチドの間、６～１２ヌクレオチドの間、６ヌクレオチド、７ヌクレオチド、８ヌクレオチド、９ヌクレオチド、１０ヌクレオチド、１１ヌクレオチド、及び／または１２ヌクレオチドのものであり得る。
【0323】
所定の実施形態では、ループは、少なくとも１つのＵＧＵＧモチーフを含む。所定の実施形態では、ＵＧＵＧモチーフは、ループの５’末端に位置する。
スペーサー領域は、１つ以上のモジュールを互いに分離するために調節性ポリヌクレオチドに存在し得る。１つ以上のそのようなスペーサー領域が存在し得る。
スペーサー領域は、１つ以上のモジュールを互いに分離するために調節性ポリヌクレオチドに存在し得る。１つ以上のそのようなスペーサー領域が存在し得る。
【0324】
所定の実施形態では、８～２０の間、すなわち、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０ヌクレオチドのスペーサー領域が、センス配列とフランキング配列との間に存在し得る。
【0325】
所定の実施形態では、スペーサーは、１３ヌクレオチドであり、センス配列の５’末端とフランキング配列の間に位置する。所定の実施形態では、スペーサーは、配列のおよそ１つのヘリカルターンを形成するのに十分な長さのものである。
【0326】
所定の実施形態では、８～２０の間、すなわち、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０ヌクレオチドのスペーサー領域が、アンチセンス配列とフランキング配列との間に存在し得る。
【0327】
所定の実施形態では、スペーサー配列は、１０～１３の間、すなわち、１０、１１、１２または１３ヌクレオチドであり、アンチセンス配列の３’末端とフランキング配列の間に位置する。所定の実施形態では、スペーサーは、配列のおよそ１つのヘリカルターンを形成するのに十分な長さのものである。
【0328】
所定の実施形態では、調節性ポリヌクレオチドは、５’から３’方向で５’フランキング配列、５’アーム、ループモチーフ、３’アーム及び３’フランキング配列を含む。非限定的な例として、５’アームは、センス配列を含み得、３’アームは、アンチセンス配列を含む。別の非限定的な例では、５’アームは、アンチセンス配列を含み、３’アームは、センス配列を含む。
【0329】
所定の実施形態では、５’アーム、ペイロード（例えば、センス及び／またはアンチセンス配列）、ループモチーフ及び／または３’アーム配列は変化し得る（例えば、１つ以上のヌクレオチドの置換、ヌクレオチドの付加及び／またはヌクレオチドの欠失）。変化は、コンストラクトの機能に有益な変更を引き起こし得る（例えば、標的配列のノックダウンを増加させ、コンストラクトの分解を減少させ、オフターゲット効果を減少させ、ペイロードの効率を増加させ、ペイロードの分解を減少させ得る）。
【0330】
所定の実施形態では、ガイド鎖の切除の速度をパッセンジャー鎖の切除の速度よりも高くするために、調節性ポリヌクレオチドの分子骨格が配列される。ガイドまたはパッセンジャー鎖の切除の速度は、独立して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超であり得る。非限定的な例として、ガイド鎖の切除の速度は、少なくとも８０％である。別の非限定的な例として、ガイド鎖の切除の速度は、少なくとも９０％である。
【0331】
所定の実施形態では、ガイド鎖の切除の速度は、パッセンジャー鎖の切除の速度を超える。一態様では、ガイド鎖の切除の速度は、パッセンジャー鎖よりも少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超高い場合がある。
【0332】
所定の実施形態では、ガイド鎖の切除の効率は、少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超である。非限定的な例として、ガイド鎖の切除の効率は、８０％を超える。
【0333】
所定の実施形態では、ガイド鎖の切除の効率は、分子骨格からのパッセンジャー鎖の切除を超える。ガイド鎖の切除は、分子骨格からのパッセンジャー鎖の切除よりも２、３、４、５、６、７、８、９、１０倍または１０倍超効率的であり得る。
【0334】
所定の実施形態では、分子骨格は、二重機能標的化調節性ポリヌクレオチドを含む。本明細書で使用される場合、「二重機能標的化」調節性ポリヌクレオチドは、ガイド及びパッセンジャー鎖の両方が同じ標的をノックダウンするまたはガイド及びパッセンジャー鎖が異なる標的をノックダウンするポリヌクレオチドである。
【0335】
所定の実施形態では、本明細書に記載の調節性ポリヌクレオチドの分子骨格は、５’フランキング領域、ループ領域及び３’フランキング領域を含む。本明細書に記載の分子骨格において使用され得る５’フランキング領域、ループ領域及び３’フランキング領域のための配列の非限定的な例が表２～４において示されている。
【0336】
【表2】
【0337】
【表3】
【0338】
【表4】
【0339】
表２～４に記載の領域のいずれかは、本明細書に記載の分子骨格において使用され得る。
所定の実施形態では、分子骨格は、当該技術分野で知られている１つ以上のリンカーを含み得る。リンカーは、領域を分離し得、または一方の分子骨格を他方のものから分離し得る。非限定的な例として、分子骨格は、ポリシストロン性であり得る。
所定の実施形態では、分子骨格は、当該技術分野で知られている１つ以上のリンカーを含み得る。リンカーは、領域を分離し得、または一方の分子骨格を他方のものから分離し得る。非限定的な例として、分子骨格は、ポリシストロン性であり得る。
【0340】
所定の実施形態では、調節性ポリヌクレオチドは、以下の特性のうちの少なくとも１つを使用して設計される：ループバリアント、シードミスマッチ／バルジ／ゆらぎバリアント、ステムミスマッチ、ループバリアント及び基礎ステムミスマッチバリアント、シードミスマッチ及び基礎ステムミスマッチバリアント、ステムミスマッチ及び基礎ステムミスマッチバリアント、シードゆらぎ及び基礎ステムゆらぎバリアント、またはステム配列バリアント。
【0341】
細胞への導入
本開示のコードされるｓｉＲＮＡ分子（例えば、ｓｉＲＮＡ二本鎖）は、ＡＡＶ粒子のベクターゲノムによってコードされることによって細胞に導入され得る。これらのＡＡＶ粒子は、トランスフェクション／形質導入に対して容易に修正可能ではない細胞への侵入を容易化するように修飾及び最適化される。また、いくつかの合成ウイルスベクターは、ｓｈＲＮＡを細胞ゲノムに組み込み、それにより安定なｓｉＲＮＡ発現及び標的遺伝子の長期ノックダウンをもたらす能力を保有する。このように、ウイルスベクターは、野生型ウイルスに見られる有害な複製及び／または組み込みの特徴を欠如させつつ、特異的送達のためのビヒクルとして修飾される。
本開示のコードされるｓｉＲＮＡ分子（例えば、ｓｉＲＮＡ二本鎖）は、ＡＡＶ粒子のベクターゲノムによってコードされることによって細胞に導入され得る。これらのＡＡＶ粒子は、トランスフェクション／形質導入に対して容易に修正可能ではない細胞への侵入を容易化するように修飾及び最適化される。また、いくつかの合成ウイルスベクターは、ｓｈＲＮＡを細胞ゲノムに組み込み、それにより安定なｓｉＲＮＡ発現及び標的遺伝子の長期ノックダウンをもたらす能力を保有する。このように、ウイルスベクターは、野生型ウイルスに見られる有害な複製及び／または組み込みの特徴を欠如させつつ、特異的送達のためのビヒクルとして修飾される。
【0342】
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、細胞において転写された場合にｓｉＲＮＡ分子を生成することが可能な核酸配列を含むＡＡＶ粒子で細胞をトランスフェクション、感染または形質導入することによって細胞に導入される。所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞において転写された場合にｓｉＲＮＡ分子を生成することが可能な核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞または組織に注射することによって細胞に導入される。
【0343】
所定の実施形態では、トランスフェクション／形質導入の前に、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子が細胞にトランスフェクションされ得る。
本明細書に記載のｓｉＲＮＡ分子のための核酸配列を含むＡＡＶ粒子を導入するための他の方法は、米国特許公開番号２０１２０２６４８０７（その内容は、本開示と矛盾しない限り、光化学的内在化に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される光化学的内在化を含み得る。
本明細書に記載のｓｉＲＮＡ分子のための核酸配列を含むＡＡＶ粒子を導入するための他の方法は、米国特許公開番号２０１２０２６４８０７（その内容は、本開示と矛盾しない限り、光化学的内在化に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される光化学的内在化を含み得る。
【0344】
所定の実施形態では、本明細書に記載の製剤は、本明細書に記載のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含有し得る。所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、対象となる遺伝子を１つの標的部位で標的とし得る。別の実施形態では、製剤は、複数のＡＡＶ粒子を含み、各ＡＡＶ粒子は、対象となる遺伝子を異なる標的部位で標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。対象となる遺伝子は、２つ、３つ、４つ、５つまたは５つを超える部位で標的とされ得る。
【0345】
所定の実施形態では、任意の関連種、例えば、限定されないが、ヒト、ブタ、イヌ、マウス、ラットまたはサルからのＡＡＶ粒子が細胞に導入され得る。
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、処置される疾患に関連する細胞または組織に導入され得る。
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、処置される疾患に関連する細胞または組織に導入され得る。
【0346】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、標的配列の高レベルの内因性発現を有する細胞に導入され得る。
別の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、標的配列の低レベルの内因性発現を有する細胞に導入され得る。
別の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、標的配列の低レベルの内因性発現を有する細胞に導入され得る。
【0347】
所定の実施形態では、細胞は、高効率のＡＡＶ形質導入を有するものであり得る。
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化されたＡＡＶ粒子は、ｓｉＲＮＡ分子を中枢神経系に送達するために使用され得る（例えば、米国特許番号６，１８０，６１３（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ｓｉＲＮＡ分子及びＡＡＶ粒子の送達及び治療的使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる））。
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化されたＡＡＶ粒子は、ｓｉＲＮＡ分子を中枢神経系に送達するために使用され得る（例えば、米国特許番号６，１８０，６１３（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ｓｉＲＮＡ分子及びＡＡＶ粒子の送達及び治療的使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる））。
【0348】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化されたＡＡＶ粒子は、非ウイルス起源に由来するペプチドを含む改変されたカプシドをさらに含み得る。他の態様では、ＡＡＶ粒子は、コードされるｓｉＲＮＡ二本鎖の脳及び脊髄への送達を容易化するためのＣＮＳ特異的キメラカプシドを含有し得る。例えば、ＣＮＳトロピズムを示すＡＡＶバリアントからのｃａｐヌクレオチド配列のアライメントが、可変領域（ＶＲ）配列及び構造を同定するために構築され得る。
【0349】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化されたＡＡＶ粒子は、ポリシストロン性分子であるｓｉＲＮＡ分子をコードし得る。ｓｉＲＮＡ分子は追加的に、ｓｉＲＮＡ分子の領域間に１つ以上のリンカーを含み得る。
【0350】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、本明細書に記載のｓｉＲＮＡ配列または二本鎖の少なくとも１つをコードする調節性ポリヌクレオチドの少なくとも１つを含み得る。
【0351】
所定の実施形態では、発現ベクターは、ＩＴＲからＩＴＲまで列挙された５’から３’まで、ＩＴＲ、プロモーター、イントロン、調節性ポリヌクレオチド、ポリＡ配列及びＩＴＲを含み得る。
【0352】
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるプロモーター、例えば、限定されないが、ＣＭＶ、Ｕ６、Ｈ１、ＣＢＡまたはＳＶ４０イントロンを有するＣＢＡプロモーターの下流に位置し得る。さらに、コードされるｓｉＲＮＡ分子はまた、発現ベクターにおけるポリアデニル化配列の上流に位置し得る。非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるプロモーターの下流及び／またはポリアデニル化配列の上流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０または３０超ヌクレオチド以内に位置し得る。別の非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるプロモーターの下流及び／またはポリアデニル化配列の上流の１～５、１～１０、１～１５、１～２０、１～２５、１～３０、５～１０、５～１５、５～２０、５～２５、５～３０、１０～１５、１０～２０、１０～２５、１０～３０、１５～２０、１５～２５、１５～３０、２０～２５、２０～３０または２５～３０ヌクレオチド以内に位置し得る。非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるプロモーターの下流及び／またはポリアデニル化配列の上流のヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％または２５％超以内に位置し得る。別の非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるプロモーターの下流及び／またはポリアデニル化配列の上流の最初の１～５％、１～１０％、１～１５％、１～２０％、１～２５％、５～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、１０～１５％、１０～２０％、１０～２５％、１５～２０％、１５～２５％、または２０～２５％以内に位置し得る。
【0353】
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるポリアデニル化配列の上流に位置し得る。さらに、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるプロモーター、例えば、限定されないが、ＣＭＶ、Ｕ６、ＣＢＡまたはＳＶ４０イントロンを有するＣＢＡプロモーターの下流に位置し得る。非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるプロモーターの下流及び／またはポリアデニル化配列の上流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０または３０超ヌクレオチド以内に位置し得る。別の非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるプロモーターの下流及び／またはポリアデニル化配列の上流の１～５、１～１０、１～１５、１～２０、１～２５、１～３０、５～１０、５～１５、５～２０、５～２５、５～３０、１０～１５、１０～２０、１０～２５、１０～３０、１５～２０、１５～２５、１５～３０、２０～２５、２０～３０または２５～３０ヌクレオチド以内に位置し得る。非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるプロモーターの下流及び／またはポリアデニル化配列の上流のヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％または２５％超以内に位置し得る。別の非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるプロモーターの下流及び／またはポリアデニル化配列の上流の最初の１～５％、１～１０％、１～１５％、１～２０％、１～２５％、５～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、１０～１５％、１０～２０％、１０～２５％、１５～２０％、１５～２５％、または２０～２５％以内に位置し得る。
【0354】
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、ｓｃＡＡＶに位置し得る。
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、ｓｓＡＡＶに位置し得る。
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフリップＩＴＲの５’末端の近くに位置し得る。別の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフリップＩＴＲの３’末端の近くに位置し得る。さらに別の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフロップＩＴＲの５’末端の近くに位置し得る。さらに別の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフロップＩＴＲの３’末端の近くに位置し得る。所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフリップＩＴＲの５’末端とフロップＩＴＲの３’末端との間に位置し得る。所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフリップＩＴＲの３’末端とフリップＩＴＲの５’末端との間（例えば、フリップＩＴＲの５’末端とフロップＩＴＲの３’末端との間またはフロップＩＴＲの３’末端とフリップＩＴＲの５’末端との間の中途）に位置し得る。非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端から下流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０または３０超ヌクレオチド以内に位置し得る。非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端から上流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０または３０超ヌクレオチド以内に位置し得る。別の非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端の下流の１～５、１～１０、１～１５、１～２０、１～２５、１～３０、５～１０、５～１５、５～２０、５～２５、５～３０、１０～１５、１０～２０、１０～２５、１０～３０、１５～２０、１５～２５、１５～３０、２０～２５、２０～３０または２５～３０ヌクレオチド以内に位置し得る。別の非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端の上流の１～５、１～１０、１～１５、１～２０、１～２５、１～３０、５～１０、５～１５、５～２０、５～２５、５～３０、１０～１５、１０～２０、１０～２５、１０～３０、１５～２０、１５～２５、１５～３０、２０～２５、２０～３０または２５～３０以内に位置し得る。非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端の上流のヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％または２５％超以内に位置し得る。別の非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端の下流の最初の１～５％、１～１０％、１～１５％、１～２０％、１～２５％、５～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、１０～１５％、１０～２０％、１０～２５％、１５～２０％、１５～２５％、または２０～２５％以内に位置し得る。
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、ｓｓＡＡＶに位置し得る。
所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフリップＩＴＲの５’末端の近くに位置し得る。別の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフリップＩＴＲの３’末端の近くに位置し得る。さらに別の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフロップＩＴＲの５’末端の近くに位置し得る。さらに別の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフロップＩＴＲの３’末端の近くに位置し得る。所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフリップＩＴＲの５’末端とフロップＩＴＲの３’末端との間に位置し得る。所定の実施形態では、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるフリップＩＴＲの３’末端とフリップＩＴＲの５’末端との間（例えば、フリップＩＴＲの５’末端とフロップＩＴＲの３’末端との間またはフロップＩＴＲの３’末端とフリップＩＴＲの５’末端との間の中途）に位置し得る。非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端から下流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０または３０超ヌクレオチド以内に位置し得る。非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端から上流の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０または３０超ヌクレオチド以内に位置し得る。別の非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端の下流の１～５、１～１０、１～１５、１～２０、１～２５、１～３０、５～１０、５～１５、５～２０、５～２５、５～３０、１０～１５、１０～２０、１０～２５、１０～３０、１５～２０、１５～２５、１５～３０、２０～２５、２０～３０または２５～３０ヌクレオチド以内に位置し得る。別の非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端の上流の１～５、１～１０、１～１５、１～２０、１～２５、１～３０、５～１０、５～１５、５～２０、５～２５、５～３０、１０～１５、１０～２０、１０～２５、１０～３０、１５～２０、１５～２５、１５～３０、２０～２５、２０～３０または２５～３０以内に位置し得る。非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端の上流のヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％または２５％超以内に位置し得る。別の非限定的な例として、コードされるｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおけるＩＴＲ（例えば、フリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端の下流の最初の１～５％、１～１０％、１～１５％、１～２０％、１～２５％、５～１０％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、１０～１５％、１０～２０％、１０～２５％、１５～２０％、１５～２５％、または２０～２５％以内に位置し得る。
【0355】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子のための核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ＣＮＳ送達のために製剤化され得る。血液脳関門を通過する薬剤が使用され得る。例えば、ｓｉＲＮＡ分子を血液脳関門内皮に対して標的化し得るいくつかの細胞侵入ペプチドは、対象となる遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二本鎖を製剤化するために使用され得る。
【0356】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化されたＡＡＶ粒子は、ＣＮＳに直接的に投与され得る。非限定的な例として、ベクターは、対象となる遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。
【0357】
特定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む製剤化されたＡＡＶ粒子の組成物は、ベクターまたはｓｉＲＮＡ分子が中枢神経系に侵入し、運動ニューロン内に入り込むことを容易化する方法で投与され得る。
【0358】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、ｓｉＲＮＡ二本鎖またはｄｓＲＮＡが脊髄及び／または脳幹における運動ニューロン及び星状細胞を標的とするための治療的有効量で対象に（例えば、髄腔内投与を介して対象のＣＮＳに）投与され得る。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ二本鎖またはｄｓＲＮＡは、タンパク質またはｍＲＮＡの発現を減少させ得る。
【0359】
ＩＩ．ＡＡＶ生成
一般的ウイルス生成プロセス
ｒＡＡＶ粒子の生成のためのウイルス生成細胞は通常、哺乳動物細胞タイプを含む。しかしながら、哺乳動物細胞は、複製細胞当たりのウイルス粒子の全般的に低い収率及びウイルス生成細胞における他の哺乳動物の生物物質からの不要なコンタミネーションの高いリスクを含む、ｒＡＡＶ粒子の大規模生成に対するいくつかの複雑な要因を提供する。結果として、昆虫細胞は、ｒＡＡＶ粒子の大規模生成のための代替的媒体になっている。
一般的ウイルス生成プロセス
ｒＡＡＶ粒子の生成のためのウイルス生成細胞は通常、哺乳動物細胞タイプを含む。しかしながら、哺乳動物細胞は、複製細胞当たりのウイルス粒子の全般的に低い収率及びウイルス生成細胞における他の哺乳動物の生物物質からの不要なコンタミネーションの高いリスクを含む、ｒＡＡＶ粒子の大規模生成に対するいくつかの複雑な要因を提供する。結果として、昆虫細胞は、ｒＡＡＶ粒子の大規模生成のための代替的媒体になっている。
【0360】
昆虫細胞を使用するＡＡＶ生成システムも様々な複雑な要因を提供する。例えば、ｒＡＡＶ粒子の高収率生成はしばしば、Ｒｅｐ５２と比較してより低いＲｅｐ７８の発現を必要とする。よって、昆虫細胞におけるＲｅｐ７８及びＲｅｐ５２の相対的発現の制御は、Ｒｅｐオペロン内の慎重に設計された制御メカニズムを必要とする。これらの制御メカニズムは、個々に修飾された昆虫細胞プロモーター、例えば、Ｒｅｐ７８のためのΔＩＥ１プロモーター及びＲｅｐ５２のためのＰｏｌＨプロモーター、またはＲｅｐをコードするヌクレオチド配列を独立して修飾された配列またはコンストラクトに分割することを含み得る。しかしながら、これらの制御メカニズムの実行はしばしば、ｒＡＡＶ粒子収率の減少または構造的に不安定なビリオンにつながる。
【0361】
別の例では、ｒＡＡＶ粒子の生成は、ＡＡＶカプシドを形成するために集合するＶＰ１、ＶＰ２及びＶＰ３タンパク質を必要とする。ｒＡＡＶ粒子の高収率生成は、ＶＰ１、ＶＰ２及びＶＰ３の調整された比を必要とし、これは通常、それぞれ約１：１：１０であるべきであるが、１０コピーのＶＰ３に対して、ＶＰ１については１～２及び／またはＶＰ２については１～２で変化し得る。この比はカプシドの質にとって重量であるが、その理由は、過度に多いＶＰ１は、カプシドを脱安定化させ、過度に少ないＶＰ１は、ウイルスの感染性を低下させるからである。
【0362】
野生型ＡＡＶは、ＶＰ１発現を制御するための欠損性スプライシング方法；ＶＰ２を制御するための特別な周囲（「コザック」配列）を有する弱い開始コドン（ＡＣＧ）；及びＶＰ３発現のための標準的な開始コドン（ＡＴＧ）を使用する。しかしながら、いくつかのバキュロウイルスシステムでは、哺乳動物のスプライシング配列は、常に認識されるわけではなく、ＶＰ１、ＶＰ２及びＶＰ３の生成を適切に制御することができない。結果的に、隣接ヌクレオチド及びＶＰ２からのＡＣＧ開始配列が、カプシドタンパク質生成を作動させるために使用され得る。不運なことに、ＡＡＶ血清型のほとんどにとって、この方法は、ＶＰ２と比較してより低い比のＶＰ１（１０コピーのＶＰ３に対して＜１）を有するカプシドを生成する。ＶＰタンパク質の生成をより効果的に制御するために、非標準または開始コドン（ＴＴＧ、ＧＴＧまたはＣＴＧなど）が使用されてきた。しかしながら、これらの開始コドンは、野生型ＡＴＧまたはＡＣＧ開始コドンと比べて当業者によって準最適と考えられ得る（ＷＯ２００７０４６７０３及びＷＯ２００７１４８９７１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドタンパク質の生成に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。
【0363】
別の例では、バキュロウイルス／Ｓｆ９システムを使用するｒＡＡＶ粒子の生成は通常、大規模なＡＡＶ生成に最適化されていない広く使用されているバクミドベースのバキュロウイルス発現ベクターシステム（ＢＥＶ）を必要とする。バクミドベースのＢＥＶにおけるウイルスタンパク質の異常なタンパク質分解は、バキュロウイルス／Ｓｆ９システムを使用するＡＡＶカプシドタンパク質の信頼性のある大規模生成を不可能にする予想外の問題である。
【0364】
哺乳動物及び昆虫細胞におけるｒＡＡＶ粒子の有効かつ効率的な大規模（商業的）生成を可能にする方法及びシステムが継続して必要とされている。
本開示の１つ以上の実施形態の詳細は、以下の添付の明細書において示される。本開示の他の特徴、目的、及び利点は、明細書、図面、及び特許請求の範囲から明らかになる。明細書において、単数形はまた、文脈が別段明らかに示さない限り、複数を含む。別段定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語は、本開示が属する分野における当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。参照により組み込まれる開示と矛盾する場合は、本表現の説明が優先される。
本開示の１つ以上の実施形態の詳細は、以下の添付の明細書において示される。本開示の他の特徴、目的、及び利点は、明細書、図面、及び特許請求の範囲から明らかになる。明細書において、単数形はまた、文脈が別段明らかに示さない限り、複数を含む。別段定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語は、本開示が属する分野における当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。参照により組み込まれる開示と矛盾する場合は、本表現の説明が優先される。
【0365】
所定の実施形態では、本開示のコンストラクト、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、ベクター、血清型、カプシド製剤、または粒子は、以下の国際公開のうちの１つに記載の任意の配列、要素、コンストラクト、システム、標的またはプロセスであり得る、それを含み得る、それによって改変され得る、それによって使用され得る、そのために使用され得る、それを用いて使用され得る、またはそれを用いて生成され得る：ＷＯ２０１６０７３６９３、ＷＯ２０１７０２３７２４、ＷＯ２０１６０７７６８７、ＷＯ２０１６０７７６８９、ＷＯ２０１８２０４７８６、ＷＯ２０１７２０１２５８、ＷＯ２０１７２０１２４８、ＷＯ２０１８２０４８０３、ＷＯ２０１８２０４７９７、ＷＯ２０１７１８９９５９、ＷＯ２０１７１８９９６３、ＷＯ２０１７１８９９６４、ＷＯ２０１５１９１５０８、ＷＯ２０１６０９４７８３、ＷＯ２０１６０１３７９４９、ＷＯ２０１７０７５３３５（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【0366】
本開示のＡＡＶ生成は、標的細胞を接触させてペイロード分子をコードするヌクレオチドを含むペイロード、例えば、組換えウイルスコンストラクトを送達し得るＡＡＶ粒子及びウイルスベクターを生成するためのプロセス及び方法を含む。所定の実施形態では、ウイルスベクターは、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、例えば、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクターである。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子、例えば、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子である。
【0367】
本開示は、（ａ）ウイルス生成細胞を、少なくとも１つのＡＡＶカプシドタンパク質及び／または少なくとも１つのＡＡＶ複製タンパク質をコードする１つ以上のウイルス発現コンストラクト、及び１つ以上のペイロードコンストラクトベクターと接触させることであって、前記ペイロードコンストラクトベクターは、導入遺伝子、タンパク質をコードするポリヌクレオチド、及び調節性核酸からなる群から選択されるペイロード分子をコードするペイロードコンストラクトを含む、接触させることと、（ｂ）少なくとも１つのＡＡＶ粒子またはウイルスベクターが生成されるような条件下で前記ウイルス生成細胞を培養することと、（ｃ）前記少なくとも１つのＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを単離することとによってＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを生成する方法を提供する。
【0368】
これらの方法では、ウイルス発現コンストラクトは、少なくとも１つの構造タンパク質及び／または少なくとも１つの非構造タンパク質をコードし得る。構造タンパク質は、ネイティブまたは野生型カプシドタンパク質ＶＰ１、ＶＰ２及び／またはＶＰ３またはキメラタンパク質のいずれかを含み得る。非構造タンパク質は、ネイティブまたは野生型Ｒｅｐ７８、Ｒｅｐ６８、Ｒｅｐ５２及び／またはＲｅｐ４０タンパク質またはキメラタンパク質のいずれかを含み得る。
【0369】
所定の実施形態では、接触は、一過性トランスフェクション、ウイルス形質導入及び／またはエレクトロポレーションを介して行われる。
所定の実施形態では、ウイルス生成細胞は、哺乳動物細胞及び昆虫細胞からなる群から選択される。所定の実施形態では、昆虫細胞は、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ昆虫細胞を含む。所定の実施形態では、昆虫細胞は、Ｓｆ９昆虫細胞を含む。所定の実施形態では、昆虫細胞は、Ｓｆ２１昆虫細胞を含む。
所定の実施形態では、ウイルス生成細胞は、哺乳動物細胞及び昆虫細胞からなる群から選択される。所定の実施形態では、昆虫細胞は、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ昆虫細胞を含む。所定の実施形態では、昆虫細胞は、Ｓｆ９昆虫細胞を含む。所定の実施形態では、昆虫細胞は、Ｓｆ２１昆虫細胞を含む。
【0370】
本開示のペイロードコンストラクトベクターは、少なくとも１つの末端逆位反復（ＩＴＲ）を含み得、哺乳動物ＤＮＡを含み得る。
また、本明細書に記載の方法に従って生成されるＡＡＶ粒子及びウイルスベクターが提供される。
また、本明細書に記載の方法に従って生成されるＡＡＶ粒子及びウイルスベクターが提供される。
【0371】
本開示のＡＡＶ粒子は、１つ以上の許容可能な賦形剤を有する薬学的組成物として製剤化され得る。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子またはウイルスベクターは、本明細書に記載の方法によって生成され得る。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子またはウイルスベクターは、本明細書に記載の方法によって生成され得る。
【0372】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（例えば、昆虫細胞または哺乳動物細胞）を、少なくとも１つのカプシドタンパク質及び少なくとも１つのＡＡＶ複製タンパク質をコードする少なくとも１つのウイルス発現コンストラクト、及び少なくとも１つのペイロードコンストラクトベクターと接触させることによって生成され得る。ウイルス生成細胞は、一過性トランスフェクション、ウイルス形質導入及び／またはエレクトロポレーションによって接触され得る。ペイロードコンストラクトベクターは、ペイロード分子、例えば、限定されないが、導入遺伝子、タンパク質をコードするポリヌクレオチド、及び調節性核酸をコードするペイロードコンストラクトを含み得る。ウイルス生成細胞は、少なくとも１つのＡＡＶ粒子またはウイルスベクターが生成、単離（例えば、温度誘導溶解、機械的溶解及び／または化学的溶解を使用する）及び／または精製（例えば、濾過、クロマトグラフィー及び／またはイムノアフィニティー精製を使用する）されるような条件下で培養され得る。非限定的な例として、ペイロードコンストラクトベクターは、哺乳動物ＤＮＡを含み得る。
【0373】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、本明細書に記載の方法を使用して昆虫細胞（例えば、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ９）細胞）において生成される。非限定的な例として、昆虫細胞は、バキュロウイルス形質導入を含み得るウイルス形質導入を使用して接触される。
【0374】
別の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、本明細書に記載の方法を使用して哺乳動物細胞において生成される。非限定的な例として、哺乳動物細胞は、一過性トランスフェクションを使用して接触される。
【0375】
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、少なくとも１つの構造タンパク質及び少なくとも１つの非構造タンパク質をコードし得る。非限定的な例として、構造タンパク質は、ＶＰ１、ＶＰ２及び／またはＶＰ３を含む。別の非限定的な例として、非構造タンパク質は、Ｒｅｐ７８、Ｒｅｐ６８、Ｒｅｐ５２及び／またはＲｅｐ４０を含む。
【0376】
所定の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子生成方法は、ウイルス生成細胞において１０１個を超え、１０２個を超え、１０３個を超え、１０４個を超えまたは１０５個を超えるＡＡＶ粒子を生成する。
【0377】
所定の実施形態では、本開示のプロセスは、少なくとも１つのウイルス発現コンストラクト及び少なくとも１つのペイロードコンストラクトを含むウイルス生成システムを使用するウイルス生成細胞におけるウイルス粒子の生成を含む。少なくとも１つのウイルス発現コンストラクト及び少なくとも１つのペイロードコンストラクトは、ウイルス生成細胞にコトランスフェクション（例えば、二重トランスフェクション、三重トランスフェクション）され得る。トランスフェクションは、既知の標準的な分子生物学的技術を使用して完遂され、当業者によって慣用的に実施される。ウイルス生成細胞は、タンパク質の発現に必要な細胞機構ならびにペイロードコンストラクトを複製するＲｅｐタンパク質及び複製されたペイロードコンストラクトを封入するカプシドを形成するために集合するＣａｐタンパク質を含むＡＡＶ粒子を生成するのに必要な他の生物物質を提供する。生じたＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞から抽出され、投与のための薬学的調製物へと処理される。
【0378】
ＡＡＶ粒子は、投与されると、標的細胞と接触し、エンドソームにおいて細胞に侵入する。ＡＡＶ粒子は、エンドソームから放出し、その後、標的細胞の核と接触してペイロードコンストラクトを送達する。ペイロードコンストラクト、例えば、組換えウイルスコンストラクトは、標的細胞の核に送達され、そこでペイロードコンストラクトによってコードされるペイロード分子が発現し得る。
【0379】
所定の実施形態では、ウイルス粒子の生成のためのプロセスは、１つ以上のバキュロウイルス（例えば、ウイルス発現コンストラクト及びペイロードコンストラクトベクターでトランスフェクションされたバキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）またはバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ））を含むウイルス生成細胞のシード培養物を利用する。所定の実施形態では、シード培養物は、収穫され、アリコートに分割され、凍結され、生成細胞のナイーブ集団の感染を開始させるために後の時点で使用され得る。
【0380】
ＡＡＶ粒子の大規模生成は、バイオリアクターを利用し得る。バイオリアクターの使用により、ウイルス生成細胞の成長及び活性をサポートする可変要素、例えば、質量、温度、混合条件（インペラのＲＰＭまたは波振動）、ＣＯ２濃度、Ｏ２濃度、ガス散布速度及び体積、ガスオーバーレイ速度及び体積、ｐＨ、生存性細胞密度（ＶＣＤ）、細胞生存性、細胞直径、及び／または光学密度（ＯＤ）の正確な測定及び／または制御が可能になる。所定の実施形態では、バイオリアクターは、培養物全体が実験的に決定された時点で収穫され、ＡＡＶ粒子が精製されるバッチ生成のために使用される。別の実施形態では、バイオリアクターは、培養物の一部がＡＡＶ粒子の精製のために実験的に決定された時点で収穫され、バイオリアクター内の残りの培養物が追加の成長培地成分でリフレッシュされる連続的生成のために使用される。
【0381】
ＡＡＶウイルス粒子は、細胞溶解、清澄化、滅菌及び精製を含むプロセスにおいてウイルス生成細胞から抽出され得る。細胞溶解は、ウイルス生成細胞の構造を破壊し、それによりＡＡＶ粒子を放出する任意のプロセスを含む。所定の実施形態では、細胞溶解は、熱ショック、化学的、または機械的溶解方法を含み得る。清澄化は、溶解した細胞、培地成分、及びＡＡＶ粒子の混合物の粗雑な精製を含み得る。所定の実施形態では、清澄化は、限定されないが、深層部門、タンジェンシャルフロー、及び／または中空糸濾過を含む遠心分離及び／または濾過を含む。
【0382】
ウイルス生成の最終結果は、２つの成分：（１）ペイロードコンストラクト（例えば、組換えウイルスゲノムコンストラクト）及び（２）ウイルスカプシドを含むＡＡＶ粒子の精製された集合物である。
【0383】
所定の実施形態では、図１に提供される実施形態のように、本開示のウイルス生成システムまたはプロセスは、ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）及びプラスミドコンストラクトを使用してバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を生成するための工程を含む。細胞バンク（ＣＢ）からのウイルス生成細胞（ＶＰＣ）は、解凍され、増殖されて標的機能体積及びＶＰＣ濃度を提供する。生じたＶＰＣのプールは、Ｒｅｐ／Ｃａｐ ＶＰＣプール及びペイロードＶＰＣプールに分割される。１つ以上のＲｅｐ／Ｃａｐプラスミドコンストラクト（ウイルス発現コンストラクト）は、Ｒｅｐ／Ｃａｐバクミドポリヌクレオチドにプロセシングされ、Ｒｅｐ／Ｃａｐ ＶＰＣプールにトランスフェクションされる。１つ以上のペイロードプラスミドコンストラクト（ペイロードコンストラクト）は、ペイロードバクミドポリヌクレオチドにプロセシングされ、ペイロードＶＰＣプールにトランスフェクションされる。２つのＶＰＣプールは、Ｐ１ Ｒｅｐ／Ｃａｐバキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）及びＰ１ペイロードＢＥＶを生成するためにインキュベーションされる。２つのＢＥＶプールは、プラークの集合物に増殖されると共に、単一のプラークがクローン性プラーク（ＣＰ）精製（単一プラーク増殖とも称される）のために選択される。プロセスは、単一のＣＰ精製工程を含み得、または連続したまたは他の処理工程によって分離された複数のＣＰ精製工程を含み得る。１つ以上のＣＰ精製工程は、ＣＰ Ｒｅｐ／Ｃａｐ ＢＥＶプール及びＣＰペイロードＢＥＶプールを提供する。これらの２つのＢＥＶプールは次いで、将来の生成工程のために保存及び使用され得、またはそれらは次いで、ＶＰＣにトランスフェクションされてＲｅｐ／Ｃａｐ ＢＩＩＣプール及びペイロードＢＩＩＣプールが生成され得る。
【0384】
図２に提供される実施形態などの所定の実施形態では、本開示のウイルス生成システムまたはプロセスは、ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）及びバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を使用してＡＡＶ粒子を生成するための工程を含む。細胞バンク（ＣＢ）からのウイルス生成細胞（ＶＰＣ）は、解凍され、増殖されて標的機能体積及びＶＰＣ濃度を提供する。機能体積のウイルス生成細胞は、生成バイオリアクターに播種され、ＢＩＩＣ感染のための標的ＶＰＣ濃度を有する２００～２０００Ｌの機能体積までさらに増殖され得る。次いで生成バイオリアクター内の機能体積のＶＰＣは、Ｒｅｐ／Ｃａｐ ＢＩＩＣ及びペイロードＢＩＩＣで標的ＶＰＣ：ＢＩＩＣ比及び標的ＢＩＩＣ：ＢＩＩＣ比で共感染される。ＶＣＤ感染はまた、ＢＥＶを利用し得る。共感染したＶＰＣは、生成バイオリアクター内でインキュベーション及び増殖されてＡＡＶ粒子及びＶＰＣのバルク収穫物を生成する。
【0385】
図３に提供される実施形態などの所定の実施形態では、本開示のウイルス生成システムまたはプロセスは、ＡＡＶ粒子及びウイルス生成細胞のバルク収穫物を処理、清澄化及び精製することによって薬物物質を生成するための工程を含む。（生成バイオリアクター内の）ＡＡＶ粒子及びＶＰＣのバルク収穫物は、細胞破壊及び溶解（例えば、化学的溶解及び／または機械的溶解）、続いて溶解プールのヌクレアーゼ処置を介して処理され、それにより粗ライセートプールを生成する。粗ライセートプールは、深層濾過及び精密濾過を含む１つ以上の濾過及び清澄化工程を介して処理されて、清澄化されたライセートプールを提供する。清澄化されたライセートプールは、アフィニティークロマトグラフィー（ＡＦＣ）及びイオン交換クロマトグラフィー（ＡＥＸまたはＣＥＸ）を含む１つ以上のクロマトグラフィー及び精製工程を介して処理されて、精製された生成物プールを提供する。次いで精製された生成物プールは、ナノ濾過を介して、次いでタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）を介して任意に処理され得る。ＴＦＦプロセスは、１つ以上のダイアフィルトレーション（ＤＦ）工程及び１つ以上の限外濾過（ＵＦ）工程を連続してまたは交互にのいずれかで含む。生成物プールは、ウイルス保持濾過（ＶＲＦ）及び別の濾過工程を介してさらに処理されて薬物物質プールを提供する。薬物物質プールは、さらに濾過され、次いで保存及び処置のためのバイアルに分配され得る。
【0386】
ウイルス発現コンストラクト
本開示のウイルス生成システムは、ウイルス生成細胞にトランスフェクション／形質導入され得る１つ以上のウイルス発現コンストラクトを含む。所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトまたはペイロードコンストラクトは、バキュロウイルスプラスミドまたは組換えバキュロウイルスゲノムとしても知られているバクミドであり得る。所定の実施形態では、ウイルス発現は、タンパク質コーディングヌクレオチド配列及びウイルス生成細胞における発現のための少なくとも１つの発現制御配列を含む。所定の実施形態では、ウイルス発現は、ウイルス生成細胞における発現のための少なくとも１つの発現制御配列に機能可能に連結されたタンパク質コーディングヌクレオチド配列を含む。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、１つ以上のプロモーターの制御下のパルボウイルス遺伝子を含有する。パルボウイルス遺伝子は、非構造ＡＡＶ複製タンパク質をコードするヌクレオチド配列、例えば、Ｒｅｐ５２、Ｒｅｐ４０、Ｒｅｐ６８またはＲｅｐ７８タンパク質をコードするＲｅｐ遺伝子を含み得る。パルボウイルス遺伝子は、構造ＡＡＶタンパク質をコードするヌクレオチド配列、例えば、ＶＰ１、ＶＰ２及びＶＰ３タンパク質をコードするＣａｐ遺伝子を含み得る。
本開示のウイルス生成システムは、ウイルス生成細胞にトランスフェクション／形質導入され得る１つ以上のウイルス発現コンストラクトを含む。所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトまたはペイロードコンストラクトは、バキュロウイルスプラスミドまたは組換えバキュロウイルスゲノムとしても知られているバクミドであり得る。所定の実施形態では、ウイルス発現は、タンパク質コーディングヌクレオチド配列及びウイルス生成細胞における発現のための少なくとも１つの発現制御配列を含む。所定の実施形態では、ウイルス発現は、ウイルス生成細胞における発現のための少なくとも１つの発現制御配列に機能可能に連結されたタンパク質コーディングヌクレオチド配列を含む。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、１つ以上のプロモーターの制御下のパルボウイルス遺伝子を含有する。パルボウイルス遺伝子は、非構造ＡＡＶ複製タンパク質をコードするヌクレオチド配列、例えば、Ｒｅｐ５２、Ｒｅｐ４０、Ｒｅｐ６８またはＲｅｐ７８タンパク質をコードするＲｅｐ遺伝子を含み得る。パルボウイルス遺伝子は、構造ＡＡＶタンパク質をコードするヌクレオチド配列、例えば、ＶＰ１、ＶＰ２及びＶＰ３タンパク質をコードするＣａｐ遺伝子を含み得る。
【0387】
本開示のウイルス生成システムは、パルボウイルス機能をウイルス複製細胞に導入するために使用されるウイルス発現ベクターによって制限されない。ウイルス複製細胞におけるウイルス発現コンストラクトの存在は、永続的である必要はない。ウイルス発現コンストラクトは、既知の任意の手段、例えば、細胞の化学的処置、エレクトロポレーション、または感染によって導入され得る。
【0388】
本開示のウイルス発現コンストラクトは、核酸での細胞の形質転換、トランスフェクション、または形質導入を容易化する生物学的または化学的な任意の化合物または製剤を含み得る。例示的な生物学的ウイルス発現コンストラクトは、バキュロウイルスを含むプラスミド、線状核酸分子、及び組換えウイルスを含む。例示的な化学的ベクターは、脂質複合体を含む。ウイルス発現コンストラクトは、本開示に従ってウイルス複製細胞に核酸配列を導入するために使用される。（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ，Ｄａｖｉｄ Ｒ．，Ｌｏｉｓ Ｋ．Ｍｉｌｌｅｒ，ａｎｄ Ｖｅｒｎｅ Ａ．Ｌｕｃｋｏｗ．Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｖｅｃｔｏｒｓ：ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ．Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，１９９４．）；Ｍａｎｉａｔｉｓ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ．ＣＳＨ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＮＹ，Ｎ．Ｙ．（１９８２）；及び、Ｐｈｉｌｉｐｏｒｔ ａｎｄ Ｓｃｌｕｂｅｒ，ｅｄｓ．Ｌｉｐｏｓｏｅｓ ａｓ ｔｏｏｌｓ ｉｎ Ｂａｓｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ．ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ，Ｍｉｃｈ．（１９９５）（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、ウイルス発現コンストラクト及びその使用に関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【0389】
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、非構造ＡＡＶ複製タンパク質、構造ＡＡＶカプシドタンパク質、またはそれらの組み合わせをコードする１つ以上のヌクレオチド配列を含むＡＡＶ発現コンストラクトである。
【0390】
所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトは、プラスミドベクターであり得る。所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトは、バキュロウイルスコンストラクトであり得る。
【0391】
本開示は、ＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを生成するために用いられるウイルス発現コンストラクトの数によって制限される。所定の実施形態では、１、２、３、４、５、６、またはそれ以上のウイルス発現コンストラクトは、本開示に従ってウイルス生成細胞においてＡＡＶ粒子を生成するために用いられ得る。１つの非限定的な例では、５つの発現コンストラクトは、ペイロードポリヌクレオチド及び少なくとも１つのＡＡＶ ＩＴＲを含むペイロードコンストラクトを伴って、ＡＡＶ ＶＰ１、ＡＡＶ ＶＰ２、ＡＡＶ ＶＰ３、Ｒｅｐ５２、Ｒｅｐ７８を個々にコードし得る。別の実施形態では、発現コンストラクトは、例えば、Ｒｅｐ５２及びＲｅｐ４０、またはＲｅｐ７８及びＲｅｐ６８を発現するために用いられ得る。発現コンストラクトは、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、Ｒｅｐ５２／Ｒｅｐ４０、及びＲｅｐ７８／Ｒｅｐ６８をコードする配列の任意の組み合わせを含み得る。
【0392】
本開示の所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、昆虫細胞におけるＡＡＶ粒子の生成のために使用され得る。所定の実施形態では、ウイルス粒子の特質、例えば、増加した感染性または特異性を改善するために、または生成収率を向上させるために、カプシド及び／またはｒｅｐ遺伝子の野生型ＡＡＶ配列に対して改変がなされ得る。
【0393】
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、米国特許出願２０１１０１７１２６２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、パルボウイルスカプシドタンパク質に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、免疫浸潤配列として機能し得る、組み込まれたＧｌｙ－Ａｌａリピート領域を有するパルボウイルスカプシドの成分をコードし得る。
【0394】
本開示の所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、昆虫細胞におけるＡＡＶ粒子の生成のために使用され得る。所定の実施形態では、ウイルス粒子の特質、例えば、増加した感染性または特異性を改善するために、または昆虫細胞からの生成収率を向上させるために、カプシド及び／またはｒｅｐ遺伝子の野生型ＡＡＶ配列に対して改変がなされ得る。
【0395】
所定の実施形態では、ＶＰコーディング領域は、特定のＡＡＶ血清型の１つ以上のＡＡＶカプシドタンパク質をコードする。ＶＰコーディング領域のためのＡＡＶ血清型は、同じであり得るか、または異なり得る。所定の実施形態では、ＶＰコーディング領域は、最適化されたコドンであり得る。所定の実施形態では、ＶＰコーディング領域またはヌクレオチド配列は、哺乳動物細胞のために最適化されたコドンであり得る。所定の実施形態では、ＶＰコーディング領域またはヌクレオチド配列は、昆虫細胞のために最適化されたコドンであり得る。所定の実施形態では、ＶＰコーディング領域またはヌクレオチド配列は、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞のために最適化されたコドンであり得る。所定の実施形態では、ＶＰコーディング領域またはヌクレオチド配列は、Ｓｆ９またはＳｆ２１細胞株のために最適化されたコドンであり得る。
【0396】
所定の実施形態では、１つ以上のＶＰカプシドタンパク質をコードするヌクレオチド配列は、１００％未満の参照ヌクレオチド配列とのヌクレオチド相同性を有するように最適化されたコドンであり得る。所定の実施形態では、コドン最適化ＶＰヌクレオチド配列と参照ＶＰヌクレオチド配列との間のヌクレオチド相同性は、１００％未満、９９％未満、９８％未満、９７％未満、９６％未満、９５％未満、９４％未満、９３％未満、９２％未満、９１％未満、９０％未満、８９％未満、８８％未満、８７％未満、８６％未満、８５％未満、８４％未満、８３％未満、８２％未満、８１％未満、８０％未満、７８％未満、７６％未満、７４％未満、７２％未満、７０％未満、６８％未満、６６％未満、６４％未満、６２％未満、６０％未満、５５％未満、５０％未満、及び４０％未満である。
【0397】
ＶＰコーディング領域
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、ＶＰコーディング領域を含み得、ＶＰコーディング領域は、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、またはそれらの組み合わせをコードするＶＰヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、ＶＰ１コーディング領域を含み得、ＶＰ１コーディング領域は、ＶＰ１タンパク質をコードするＶＰ１ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、ＶＰ２コーディング領域を含み得、ＶＰ２コーディング領域は、ＶＰ２タンパク質をコードするＶＰ２ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、ＶＰ３コーディング領域を含み得、ＶＰ３コーディング領域は、ＶＰ３タンパク質をコードするＶＰ３ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、ＶＰコーディング領域を含み得、ＶＰコーディング領域は、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、またはそれらの組み合わせをコードするＶＰヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、ＶＰ１コーディング領域を含み得、ＶＰ１コーディング領域は、ＶＰ１タンパク質をコードするＶＰ１ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、ＶＰ２コーディング領域を含み得、ＶＰ２コーディング領域は、ＶＰ２タンパク質をコードするＶＰ２ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、ＶＰ３コーディング領域を含み得、ＶＰ３コーディング領域は、ＶＰ３タンパク質をコードするＶＰ３ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。
【0398】
ウイルス発現コンストラクトの構造ＶＰタンパク質であるＶＰ１、ＶＰ２、及びＶＰ３は、選択的スプライスアクセプター及び非標準的翻訳開始コドンの両方の利用によって調整される単一のオープンリーディングフレームにおいてコードされ得る。ＶＰ１、ＶＰ２及びＶＰ３は、転写され、インフレーム及び／またはアウトフレーム開始コドンの両方が、ヌクレオチド転写産物によって生成されるＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３比を制御するために修飾された単一の転写産物から翻訳され得る。所定の実施形態では、ＶＰ１は、ＶＰ１のみをコードする配列から生成され得る。本明細書で使用される場合、用語「ＶＰ１のためにのみ」または「ＶＰ１のみ」は、ＶＰ１カプシドタンパク質をコードし、かつ（ｉ）同じ配列からのＶＰ２及びＶＰ３の完全な転写または翻訳のためのＶＰ１配列内の必要な開始コドンを欠く（すなわち、欠失または変異している）；（ｉｉ）同じ配列からのＶＰ２及びＶＰ３の転写または翻訳を防止するＶＰ１配列内の追加のコドンを含む；または（ｉｉｉ）ＶＰ１のための開始コドン（例えば、ＡＴＧ）を含むことで、ＶＰ１が、ヌクレオチド転写産物によって生成される主要ＶＰタンパク質となるヌクレオチド配列または転写産物を指す。
【0399】
所定の実施形態では、ＶＰ２は、ＶＰ２のみをコードする配列から生成され得る。本明細書で使用される場合、用語「ＶＰ２のためにのみ」または「ＶＰ２のみ」は、ＶＰ２カプシドタンパク質をコードし、かつ（ｉ）ヌクレオチド転写産物が、ＶＰ２及びＶＰ３カプシドタンパク質のみをコードする完全なＶＰカプシド配列の切断型バリアントである；及び（ｉｉ）ＶＰ２のための開始コドン（例えば、ＡＴＧ）を含むことで、ＶＰ２が、ヌクレオチド転写産物によって生成される主要ＶＰタンパク質となるヌクレオチド配列または転写産物を指す。
【0400】
所定の実施形態では、ＶＰ１及びＶＰ２は、ＶＰ１及びＶＰ２のみをコードする配列から生成され得る。本明細書で使用される場合、用語「ＶＰ１及びＶＰ２のためにのみ」または「ＶＰ１及びＶＰ２のみ」は、ＶＰ１及びＶＰ２カプシドタンパク質をコードし、かつ（ｉ）同じ配列からのＶＰ３の完全な転写または翻訳のためのＶＰ配列内の必要な開始コドンを欠く（すなわち、欠失または変異している）；（ｉｉ）同じ配列からのＶＰ３の転写または翻訳を防止するＶＰ配列内の追加のコドンを含む；（ｉｉｉ）ＶＰ１（例えば、ＡＴＧ）及びＶＰ２（例えば、ＡＴＧ）のための開始コドンを含むことで、ＶＰ１及びＶＰ２が、ヌクレオチド転写産物によって生成される主要ＶＰタンパク質となる；または（ｉｖ）ＩＲＥＳ領域などのリンカーによって接続されたＶＰ１のみのヌクレオチド転写産物及びＶＰ２のみのヌクレオチド転写産物を含むヌクレオチド配列または転写産物を指す。
【0401】
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、開始コドン領域を含むヌクレオチド配列、例えば、１つ以上の開始コドン領域を含むＡＡＶカプシドタンパク質をコードする配列を含有し得る。所定の実施形態では、開始コドン領域は、発現制御配列内に存在し得る。開始コドンは、ＡＴＧまたは非ＡＴＧコドン（すなわち、準最適開始コドン（ＡＡＶのＶＰ１カプシドタンパク質の開始コドンは非ＡＴＧである））であり得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ生成のために使用されるウイルス発現コンストラクトは、ＡＡＶカプシドタンパク質をコードするヌクレオチド配列であって、ＡＡＶのＶＰ１カプシドタンパク質の開始コドンが、生成システムにおいてウイルスカプシドタンパク質の改変された比の発現を可能にする非ＡＴＧ、すなわち、準最適開始コドンであることで、宿主細胞の改善された感染性を提供する、ヌクレオチド配列を含有し得る。非限定的な例では、ウイルスコンストラクトベクターは、ＡＡＶのＶＰ１、ＶＰ２、及びＶＰ３カプシドタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸コンストラクトであって、ＡＡＶのＶＰ１カプシドタンパク質の翻訳のための開始コドンが、米国特許番号ＵＳ８，１６３，５４３（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶカプシドタンパク質及びその生成に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、ＣＴＧ、ＴＴＧ、またはＧＴＧである、核酸コンストラクトを含有し得る。
【0402】
Ｒｅｐコーディング領域
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、Ｒｅｐ５２コーディング領域を含み得、Ｒｅｐ５２コーディング領域は、Ｒｅｐ５２タンパク質をコードするＲｅｐ５２ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、Ｒｅｐ７８コーディング領域を含み得、Ｒｅｐ７８コーディング領域は、Ｒｅｐ７８タンパク質をコードするＲｅｐ７８ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、Ｒｅｐ４０コーディング領域を含み得、Ｒｅｐ４０コーディング領域は、Ｒｅｐ４０タンパク質をコードするＲｅｐ４０ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、Ｒｅｐ６８コーディング領域を含み得、Ｒｅｐ６８コーディング領域は、Ｒｅｐ６８タンパク質をコードするＲｅｐ６８ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、Ｒｅｐ５２コーディング領域を含み得、Ｒｅｐ５２コーディング領域は、Ｒｅｐ５２タンパク質をコードするＲｅｐ５２ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、Ｒｅｐ７８コーディング領域を含み得、Ｒｅｐ７８コーディング領域は、Ｒｅｐ７８タンパク質をコードするＲｅｐ７８ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、Ｒｅｐ４０コーディング領域を含み得、Ｒｅｐ４０コーディング領域は、Ｒｅｐ４０タンパク質をコードするＲｅｐ４０ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、Ｒｅｐ６８コーディング領域を含み得、Ｒｅｐ６８コーディング領域は、Ｒｅｐ６８タンパク質をコードするＲｅｐ６８ヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列である。
【0403】
ウイルス発現コンストラクトの非構造タンパク質であるＲｅｐ５２及びＲｅｐ７８は、選択的スプライスアクセプター及び非標準的翻訳開始コドンの両方の利用によって調整される単一のオープンリーディングフレームにおいてコードされ得る。
【0404】
Ｒｅｐ７８及びＲｅｐ５２の両方は、単一の転写産物から翻訳され得る：Ｒｅｐ７８の翻訳は、第１の開始コドン（ＡＵＧまたは非ＡＵＧ）で開始し、Ｒｅｐ５２の翻訳は、Ｒｅｐ７８配列内のＲｅｐ５２開始コドン（例えば、ＡＵＧ）から開始する。Ｒｅｐ７８及びＲｅｐ５２はまた、独立した開始コドンを有する別個の転写産物から翻訳され得る。Ｒｅｐ７８配列内のＲｅｐ５２開始コドンは、変異、改変または除去され得ることで、改変されたＲｅｐ７８配列のプロセシングは、Ｒｅｐ５２タンパク質を生成しないことになる。
【0405】
所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトは、昆虫細胞における発現のためのパルボウイルスｒｅｐタンパク質をコードするプラスミドベクターまたはバキュロウイルスコンストラクトであり得る。所定の実施形態では、単一のコーディング配列がＲｅｐ７８及びＲｅｐ５２タンパク質のために使用され、その場合、Ｒｅｐ７８タンパク質の翻訳のための開始コドンは、米国特許番号８，５１２，９８１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、高いベクター収率を促進するためのＲｅｐ５２と比較してより少ないＲｅｐ７８の発現の促進に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、昆虫細胞における発現時に部分的エクソンスキッピングに影響を及ぼすＡＣＧ、ＴＴＧ、ＣＴＧ及びＧＴＧからなる群から選択される準最適開始コドンである。
【0406】
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、米国特許番号８，６９７，４１７（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶ複製タンパク質及びその生成に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に教示されているように、例えば、Ｒｅｐタンパク質、例えば、Ｒｅｐ７８及びＲｅｐ５２の改善された比を達成し、それにより昆虫細胞におけるウイルス発現コンストラクト及び／またはペイロードコンストラクトベクターの大規模（商標的）生成を改善するために、区別的なコドンバイアスを有するリピートコドンを含有する、昆虫細胞における発現のためのプラスミドベクターまたはバキュロウイルスコンストラクトであり得る。
【0407】
所定の実施形態では、ｒｅｐタンパク質の改善された比は、米国特許番号８，６４２，３１４（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶ複製タンパク質及びその生成に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の方法及びコンストラクトを使用して達成され得る。
【0408】
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、それらの対応する野生型Ｒｅｐポリペプチドと比較して改善された１つ以上の特性、例えば、大規模生成のためのより高いウイルス力価の生成を有する変異型パルボウイルスＲｅｐポリペプチドをコードし得る。代替的には、それらは、より良好な質のウイルス粒子の生成を可能にし、またはウイルスのより安定な生成を持続させることが可能であり得る。非限定的な例では、ウイルス発現コンストラクトは、特許出願ＵＳ２０１３００２３０３４（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＡＡＶ複製タンパク質及びその生成に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、変異した核局在化配列またはジンクフィンガードメインを有する変異型Ｒｅｐポリペプチドをコードし得る。
【0409】
ＲＥＮアクセス点及びポリヌクレオチドインサート
所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトまたはペイロードコンストラクトは、バキュロウイルスプラスミドまたは組換えバキュロウイルスゲノムとしても知られているバクミドであり得る。所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトまたはペイロードコンストラクト（例えば、バクミド）は、当業者に知られており、実施される標準的な分子生物学技術によってバクミドに相同組換え（トランスポゾンドナー／アクセプターシステム）によって組み込まれたポリヌクレオチドを含み得る。
所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトまたはペイロードコンストラクトは、バキュロウイルスプラスミドまたは組換えバキュロウイルスゲノムとしても知られているバクミドであり得る。所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトまたはペイロードコンストラクト（例えば、バクミド）は、当業者に知られており、実施される標準的な分子生物学技術によってバクミドに相同組換え（トランスポゾンドナー／アクセプターシステム）によって組み込まれたポリヌクレオチドを含み得る。
【0410】
所定の実施形態では、バクミドに組み込まれたポリヌクレオチド（すなわち、ポリヌクレオチドインサート）は、タンパク質コーディングヌクレオチド配列に機能可能に連結された発現制御配列を含み得る。所定の実施形態では、バクミドに組み込まれたポリヌクレオチドは、ｐ１０またはｐｏｌＨなどのプロモーターを含み、かつ構造ＡＡＶカプシドタンパク質（例えば、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３またはそれらの組み合わせ）をコードするヌクレオチド配列に機能可能に連結されている発現制御配列を含み得る。所定の実施形態では、バクミドに組み込まれたポリヌクレオチドは、ｐ１０またはｐｏｌＨなどのプロモーターを含み、かつ非構造ＡＡＶカプシドタンパク質（例えば、Ｒｅｐ７８、Ｒｅｐ５２またはそれらの組み合わせ）をコードするヌクレオチド配列に機能可能に連結されている発現制御配列を含み得る。
【0411】
所定の実施形態では、ポリヌクレオチドインサートは、バキュロウイルス遺伝子の位置でバクミドに組み込まれ得る。所定の実施形態では、ポリヌクレオチドインサートは、非必須バキュロウイルス遺伝子の位置でバクミドに組み込まれ得る。所定の実施形態では、ポリヌクレオチドインサートは、バキュロウイルス遺伝子またはバキュロウイルス遺伝子の一部をポリヌクレオチドインサートに置き換えることによってバクミドに組み込まれ得る。所定の実施形態では、ポリヌクレオチドインサートは、バキュロウイルス遺伝子またはバキュロウイルス遺伝子の一部を、ポリヌクレオチドインサート及び置き換えられるバキュロウイルス遺伝子（またはその一部）を含む融合ポリヌクレオチドに置き換えることによってバクミドに組み込まれ得る。
【0412】
所定の実施形態では、ポリヌクレオチドインサートは、バキュロウイルス遺伝子をポリヌクレオチドインサートで分割することによってバクミドに組み込まれ得る（すなわち、ポリヌクレオチドインサートは、遺伝子の中に組み込まれ、バクミド遺伝子の３’部分から遺伝子の５’部分を分離する）。所定の実施形態では、ポリヌクレオチドインサートは、ポリヌクレオチドインサート及び分割されたバキュロウイルス遺伝子の一部を含む融合ポリヌクレオチドでバキュロウイルス遺伝子を分割することによってバクミドに組み込まれ得る。所定の実施形態では、融合ポリヌクレオチドの３’末端は、融合ポリヌクレオチドにおける遺伝子の５’部分及びバクミドに残る遺伝子の３’部分がバキュロウイルス遺伝子の全体または機能的部分を形成するように、分割された遺伝子の５’部分を含む。所定の実施形態では、融合ポリヌクレオチドの５’末端は、融合ポリヌクレオチドにおける遺伝子の３’部分及びバクミドに残る遺伝子の５’部分がバキュロウイルス遺伝子の全体または機能的部分を形成するように、分割された遺伝子の３’部分を含む。
【0413】
所定の実施形態では、ポリヌクレオチドは、バキュロウイルス遺伝子に関連する制限エンドヌクレアーゼ（ＲＥＮ）切断部位の位置（すなわち、ＲＥＮアクセス点）でバクミドに組み込まれ得る。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、ＦｓｅＩ（ｇｔａバキュロウイルス遺伝子と対応する）（ｇｇｃｃｇｇｃｃ）である。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、ＳｄａＩ（ＤＮＡポリメラーゼバキュロウイルス遺伝子と対応する）（ｃｃｔｇｃａｇｇ）である。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、ＭａｕＢＩ（ｌｅｆ－４バキュロウイルス遺伝子と対応する）（ｃｇｃｇｃｇｃｇ）である。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、ＳｂｆＩ（ｇｐ６４／ｇｐ６７バキュロウイルス遺伝子と対応する）（ｃｃｔｇｃａｇｇ）である。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、Ｉ－ＣｅｕＩ（ｖ－ｃａｔｈバキュロウイルス遺伝子と対応する）（配列番号１７５２）である。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、ＡｖｒＩＩ（ｅｇｔバキュロウイルス遺伝子と対応する）（ｃｃｔａｇｇ）である。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、ＮｈｅＩ（ｇｃｔａｇｃ）である。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、ＳｐｅＩ（ａｃｔａｇｔ）である。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、ＢｓｔＺ１７Ｉ（ｇｔａｔａｃ）である。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、ＮｃｏＩ（ｃｃａｔｇｇ）である。所定の実施形態では、バクミドにおけるＲＥＮアクセス点は、ＭｌｕＩ（ａｃｇｃｇｔ）である。
【0414】
バクミドが二本鎖コンストラクトである所定の実施形態では、ＲＥＮ切断部位は、一方の鎖における切断配列及び他方の鎖におけるその切断配列の逆相補体（これも切断配列として機能する）を含み得る。よって、ポリヌクレオチドインサート（またはその鎖）は、ＲＥＮ切断配列または逆相補体ＲＥＮ切断配列（これらは通常、機能的に互換可能である）を含み得る。非限定的な例として、ポリヌクレオチドインサートの鎖は、ＦｓｅＩ切断配列（ｇｇｃｃｇｇｃｃ）またはその逆相補体ＲＥＮ切断配列（ｃｃｇｇｃｃｇｇ）を含み得る。
【0415】
ポリヌクレオチドは、（ｉ）標的ＲＥＮ切断配列を含むように修飾されたポリヌクレオチドインサート（例えば、ポリヌクレオチドの両末端でＦｓｅＩ ＲＥＮ配列を含むように修飾されたポリヌクレオチドインサート）を提供すること、（ｉｉ）ポリヌクレオチド挿入のための標的ＲＥＮアクセス点を含むバクミド（例えば、ＦｓｅＩ切断部位を含むＡｃＭＮＰＶバクミドのバリアントｂＭＯＮ１４２７２）を提供すること、（ｉｉ）ＲＥＮ修飾ポリヌクレオチドを適切なＲＥＮ酵素で消化すること（例えば、ポリヌクレオチド－ＦｓｅＩインサートを生成するために両末端でＦｓｅＩ領域を含むＲＥＮ修飾ポリヌクレオチドを消化するためのＦｓｅＩ酵素を使用する）、（ｉｉｉ）ＲＥＮアクセス点でシングルカットバクミドを生成するために同じＲＥＮ酵素でバクミドを消化すること（例えば、ＦｓｅＩ位置でシングルカットバクミドを生成するためのＦｓｅＩ酵素を使用する）、及び（ｉｖ）適切なライゲーション酵素、例えば、Ｔ４リガーゼ酵素を使用してシングルカットバクミドにポリヌクレオチドインサートをライゲーションすることによってこれらのＲＥＮアクセス点に組み込まれ得る。結果物は、標的ＲＥＮアクセス点で修飾されたポリヌクレオチドインサートを含む修飾されたバクミドＤＮＡである。
【0416】
挿入プロセスは、異なるＲＥＮアクセス点で同じバクミドに他の修飾されたポリヌクレオチドインサートを組み込むために１回以上繰り返され得る（例えば、ｅｇｔにおけるＡｖｒＩＩ ＲＥＮアクセス点での第１の修飾されたポリヌクレオチドインサートの挿入と、それに続くｃａｔｈ遺伝子におけるＩ－ＣｅｕＩ ＲＥＮアクセス点での第２の修飾されたポリヌクレオチドインサートの挿入と、それに続くｇｔａ遺伝子におけるＦｓｅＩ ＲＥＮアクセス点での第３の修飾されたポリヌクレオチドインサートの挿入）。
【0417】
所定の実施形態では、制限エンドヌクレアーゼ（ＲＥＮ）切断は、バクミドから１つ以上の野生型遺伝子を除去するために使用され得る。所定の実施形態では、制限エンドヌクレアーゼ（ＲＥＮ）切断は、バクミドに既に挿入された１つ以上の修飾されたポリヌクレオチドインサートを除去するために使用され得る。所定の実施形態では、制限エンドヌクレアーゼ（ＲＥＮ）切断は、１つ以上の修飾されたポリヌクレオチドインサートを同じＲＥＮ切断配列を含む異なる修飾されたポリヌクレオチドインサートに置き換えるために使用され得る（例えば、ＦｓｅＩ ＲＥＮアクセス点における修飾されたポリヌクレオチドインサートは、ＦｓｅＩ ＲＥＮ切断配列を含む異なる修飾されたポリヌクレオチドインサートに置き換えられ得る）。
【0418】
発現制御
発現制御領域
本開示のウイルス発現コンストラクトは、発現制御配列によってコードされる１つ以上の発現制御領域を含み得る。所定の実施形態では、発現制御配列は、ウイルス生成細胞、例えば、昆虫細胞における発現のためのものである。所定の実施形態では、発現制御配列は、タンパク質コーディングヌクレオチド配列に機能可能に連結されている。所定の実施形態では、発現制御配列は、ＶＰコーディングヌクレオチド配列またはＲｅｐコーディングヌクレオチド配列に機能可能に連結されている。
発現制御領域
本開示のウイルス発現コンストラクトは、発現制御配列によってコードされる１つ以上の発現制御領域を含み得る。所定の実施形態では、発現制御配列は、ウイルス生成細胞、例えば、昆虫細胞における発現のためのものである。所定の実施形態では、発現制御配列は、タンパク質コーディングヌクレオチド配列に機能可能に連結されている。所定の実施形態では、発現制御配列は、ＶＰコーディングヌクレオチド配列またはＲｅｐコーディングヌクレオチド配列に機能可能に連結されている。
【0419】
本明細書において、用語「コーディングヌクレオチド配列」、「タンパク質をコードする遺伝子」または「タンパク質コーディングヌクレオチド配列」は、タンパク質生成物、例えば、ＶＰタンパク質またはＲｅｐタンパク質をコードするまたはそれに翻訳されるヌクレオチド配列を指す。「機能的に連結された」は、発現制御配列が、コードされる遺伝子生成物の発現を促進し得るようにコーディング配列に対して配置されていることを意味する。
【0420】
「発現制御配列」は、それが機能的に連結されたヌクレオチド配列の発現を調整する核酸配列を指す。発現制御配列は、発現制御配列がヌクレオチド配列の転写及び／または翻訳を制御及び調整する場合、ヌクレオチド配列に「機能的に連結されている」。よって、発現制御配列は、プロモーター、エンハンサー、非翻訳領域（ＵＴＲ）、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、転写ターミネーター、タンパク質をコードする遺伝子の前の開始コドン、イントロンのためのスプライシングシグナル、及び終止コドンを含み得る。用語「発現制御配列」は、存在が発現に影響を及ぼすように設計されており、また、追加の有利な成分を含み得る配列を最低限でも含むことが意図されている。例えば、リーダー配列及び融合パートナー配列は、発現制御配列である。その用語はまた、フレームの中または外における不要な潜在的開始コドンが配列から除去されるような核酸配列の設計を含み得る。それはまた、不要な潜在的スプライス部位が除去されるような核酸配列の設計を含み得る。それは、ポリＡテール、すなわち、ポリＡ配列と称される配列であるｍＲＮＡの３’末端におけるアデニン残基のストリングの付加を仕向ける配列またはポリアデニル化配列（ｐＡ）を含む。それはまた、ｍＲＮＡの安定性を向上させるために設計され得る。昆虫細胞において転写及び翻訳安定性に影響を及ぼす発現制御配列、例えば、プロモーター、ならびに翻訳に影響を及ぼす配列、例えば、コザック配列が知られている。発現制御配列は、より低い発現レベルまたはより高い発現レベルが達成されるように機能可能に連結されるヌクレオチド配列を調節するような特質のものであり得る。
【0421】
所定の実施形態では、発現制御配列は、１つ以上のプロモーターを含み得る。プロモーターは、限定されないが、バキュロウイルスメジャーレートプロモーター、昆虫ウイルスプロモーター、非昆虫ウイルスプロモーター、脊椎動物ウイルスプロモーター、核遺伝子プロモーター、ウイルス及び非ウイルス要素を含む１つ以上の種からのキメラプロモーター、及び／または合成プロモーターを含み得る。所定の実施形態では、プロモーターは、Ｃｔｘ、Ｏｐ－ＥＩ、ＥＩ、ΔＥＩ、ＥＩ－１、ｐＨ、ＰＩＯ、ｐｏｌＨ（ポリヘドロン）、ΔｐｏｌＨ、Ｄｍｈｓｐ７０、Ｈｒ１、Ｈｓｐ７０、４ｘＨｓｐ２７ ＥｃＲＥ＋最小Ｈｓｐ７０、ＩＥ、ＩＥ－１、ΔＩＥ－１、ΔＩＥ、ｐ１０、Δｐ１０（ｐ１０の改変されたバリエーションまたは誘導体）、ｐ５、ｐ１９、ｐ３５、ｐ４０、ｐ６．９、及びそれらのバリエーションまたは誘導体であり得る。所定の実施形態では、プロモーターは、Ｃｔｘプロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、ｐ１０プロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、ｐｏｌＨプロモーターである。所定の実施形態では、プロモーターは、組織特異的プロモーター、細胞タイプ特異的プロモーター、細胞周期特異的プロモーター、及びそれらのバリエーションまたは誘導体から選択され得る。所定の実施形態では、プロモーターは、ＣＭＶプロモーター、アルファ１－アンチトリプシン（α１－ＡＴ）プロモーター、甲状腺ホルモン結合グロブリンプロモーター、サイロキシン結合グロブリン（ＬＰＳ）プロモーター、ＨＣＲ－ＡｐｏＣＩＩハイブリッドプロモーター、ＨＣＲ－ｈＡＡＴハイブリッドプロモーター、アルブミンプロモーター、アポリポタンパク質Ｅプロモーター、α１－ＡＴ＋ＥａＩｂプロモーター、腫瘍選択的Ｅ２Ｆプロモーター、単核血液ＩＬ－２プロモーター、及びそれらのバリエーションまたは誘導体であり得る。所定の実施形態では、プロモーターは、低発現プロモーター配列である。所定の実施形態では、プロモーターは、向上発現プロモーター配列である。所定の実施形態では、プロモーターは、米国特許出願２０１１０１３６２２７（その内容は、本開示と矛盾しない限り、発現プロモーターに関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているようにＲｅｐまたはＣａｐプロモーターを含み得る。
【0422】
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、すべてのヌクレオチド配列において同じプロモーターを含み得る。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、２つ以上のヌクレオチド配列において同じプロモーターを含み得る。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、２つ以上のヌクレオチド配列において異なるプロモーターを含み得る。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、すべてのヌクレオチド配列において異なるプロモーターを含み得る。
【0423】
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、所定の細胞タイプにおいて発現を改善するための要素をコードする。さらなる実施形態では、発現コンストラクトは、哺乳動物または昆虫細胞における所望の遺伝子の発現のためのｐｏｌｈ及び／またはΔＩＥ－１昆虫転写プロモーター、ＣＭＶ哺乳動物転写プロモーター、及び／またはｐ１０昆虫特異的プロモーターを含み得る。
【0424】
複数の発現制御配列は、所与のヌクレオチド配列と機能可能に連結され得る。例えば、プロモーター配列、翻訳開始配列、及び終止コドンは、ヌクレオチド配列と機能可能に連結され得る。
【0425】
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、タンパク質コーディングヌクレオチド配列間に１つ以上の発現制御配列を含み得る。所定の実施形態では、発現制御領域は、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）をコードするＩＲＥＳヌクレオチド配列を含むＩＲＥＳ配列領域を含み得る。内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）は、口蹄疫ウイルスに由来するＦＭＤＶ－ＩＲＥＳ、脳心筋炎ウイルスに由来するＥＭＣＶ－ＩＲＥＳ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され得る。
【0426】
所定の実施形態では、発現制御領域は、ウイルス２Ａペプチドをコードする２Ａヌクレオチド配列を含む２Ａ配列領域を含み得る。その配列により、単一のオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）内の複数のポリペプチドの共翻訳が可能になる。ＯＲＦが翻訳されると、２Ａ配列を有するグリシン及びプロリン残基は、正常なペプチド結合の形成を防止し、ポリペプチド鎖内のリボソーム「スキッピング」及び「自己切断」をもたらす。ウイルス２Ａペプチドは、口蹄疫ウイルスに由来するＦ２Ａ、Ｔｈｏｓｅａ ａｓｉｇｎａウイルスに由来するＴ２Ａ、Ｅｑｕｉｎｅ ｒｈｉｎｉｔｉｓ Ａウイルスに由来するＥ２Ａ、ｐｏｒｃｉｎｅ ｔｅｓｃｈｏｖｉｒｕｓ－１に由来するＰ２Ａ、細胞質多角体病ウイルスに由来するＢｍＣＰＶ２Ａ、Ｂ．ｍｏｒｉ軟化病ウイルスに由来するＢｍＩＦＶ ２Ａ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され得る。
【0427】
所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、開始コドン領域を含むヌクレオチド配列、例えば、１つ以上の開始コドン領域を含むＡＡＶカプシドタンパク質をコードする配列を含有し得る。所定の実施形態では、開始コドン領域は、発現制御配列内に存在し得る。
【0428】
本開示の方法は、特定の発現制御配列の使用によって限定されない。しかしながら、所定の化学量論量のＶＰ生成物が達成される（ＶＰ１、ＶＰ２、及びＶＰ３についてそれぞれ１：１：１０に近い）場合、また、Ｒｅｐ５２またはＲｅｐ４０（ｐ１９Ｒｅｐとも称される）のレベルがＲｅｐ７８またはＲｅｐ６８（ｐ５Ｒｅｐとも称される）よりも有意に高い場合、生成細胞（昆虫細胞など）におけるＡＡＶの改善された収率が得られ得る。所定の実施形態では、ｐ５／ｐ１９比は、０．６未満、０．４未満、または０．３未満であるが、常に少なくとも０．０３である。これらの比は、タンパク質のレベルで測定され得、または特定のｍＲＮＡの相対的レベルから暗示され得る。
【0429】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（哺乳動物または昆虫細胞など）において生成され、その場合、３つすべてのＶＰタンパク質は、約１：１：１０または１：１：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）の化学量論的アプローチで発現される。
【0430】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（哺乳動物または昆虫細胞など）において生成され、その場合、３つすべてのＶＰタンパク質は、約２：２：１０または２：２：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）の化学量論的アプローチで発現される。
【0431】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（哺乳動物または昆虫細胞など）において生成され、その場合、３つすべてのＶＰタンパク質は、約２：０：１０または２：０：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）の化学量論的アプローチで発現される。
【0432】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（哺乳動物または昆虫細胞など）において生成され、その場合、３つすべてのＶＰタンパク質は、約１～２：０～２：１０または１～２：０～２：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）の化学量論的アプローチで発現される。
【0433】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（哺乳動物または昆虫細胞など）において生成され、その場合、３つすべてのＶＰタンパク質は、約１～２：１～２：１０または１～２：１～２：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）の化学量論的アプローチで発現される。
【0434】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（哺乳動物または昆虫細胞など）において生成され、その場合、３つすべてのＶＰタンパク質は、約２～３：０～３：１０または２～３：０～３：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）の化学量論的アプローチで発現される。
【0435】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（哺乳動物または昆虫細胞など）において生成され、その場合、３つすべてのＶＰタンパク質は、約２～３：２～３：１０または２～３：２～３：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）の化学量論的アプローチで発現される。
【0436】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（哺乳動物または昆虫細胞など）において生成され、その場合、３つすべてのＶＰタンパク質は、約３：３：１０または３：３：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）の化学量論的アプローチで発現される。
【0437】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（哺乳動物または昆虫細胞など）において生成され、その場合、３つすべてのＶＰタンパク質は、約３～５：０～５：１０または３～５：０～５：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）の化学量論的アプローチで発現される。
【0438】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（哺乳動物または昆虫細胞など）において生成され、その場合、３つすべてのＶＰタンパク質は、約３～５：３～５：１０または３～５：３～５：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）の化学量論的アプローチで発現される。
【0439】
所定の実施形態では、発現制御領域は、約または正確には１：０：１０；約または正確には１：１：１０；約または正確には２：１：１０；約または正確には２：１：１０；約または正確には２：２：１０；約または正確には３：０：１０；約または正確には３：１：１０；約または正確には３：２：１０；約または正確には３：３：１０；約または正確には４：０：１０；約または正確には４：１：１０；約または正確には４：２：１０；約または正確には４：３：１０；約または正確には４：４：１０；約または正確には５：５：１０；約または正確には１～２：０～２：１０；約または正確には１～２：１～２：１０；約または正確には１～３：０～３：１０；約または正確には１～３：１～３：１０；約または正確には１～４：０～４：１０；約または正確には１～４：１～４：１０；約または正確には１～５：１～５：１０；約または正確には２～３：０～３：１０；約または正確には２～３：２～３：１０；約または正確には２～４：２～４：１０；約または正確には２～５：２～５：１０；約または正確には３～４：３～４：１０；約または正確には３～５：３～５：１０；及び約または正確には４～５：４～５：１０からなる群から選択されるＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３比を生成するように修飾される。
【0440】
本開示の所定の実施形態では、Ｒｅｐ５２またはＲｅｐ７８は、バキュロウイルス由来多面体プロモーター（ｐｏｌｈ）から転写される。Ｒｅｐ５２またはＲｅｐ７８はまた、より弱いプロモーター、例えば、ＩＥ－１プロモーターの欠失変異体であるΔＩＥ－１プロモーターから転写され得、ΔＩＥ－１プロモーターは、そのＩＥ－１プロモーターの転写活性の約２０％を有する。ΔＩＥ－１プロモーターと実質的に相同なプロモーターが使用され得る。プロモーターに関して、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上の相同性が、実質的に相同なプロモーターとみなされる。
【0441】
修飾された非翻訳領域（ＵＴＲ）
本開示は、５’ＵＴＲとして機能する修飾されたＵＴＲポリヌクレオチドを含む修飾された非翻訳領域（ＵＴＲ）を提供する。非翻訳領域（ＵＴＲ）における特徴の修飾は、本開示のウイルス生成コンストラクトの安定性及びタンパク質生成能力を改善し得る。
本開示は、５’ＵＴＲとして機能する修飾されたＵＴＲポリヌクレオチドを含む修飾された非翻訳領域（ＵＴＲ）を提供する。非翻訳領域（ＵＴＲ）における特徴の修飾は、本開示のウイルス生成コンストラクトの安定性及びタンパク質生成能力を改善し得る。
【0442】
本開示は、本開示の修飾された非翻訳領域（ＵＴＲ）を含むウイルス発現コンストラクトを提供する。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、本開示の修飾された非翻訳領域（ＵＴＲ）を含む。所定の実施形態では、ウイルス発現コンストラクトは、本開示の修飾された５’ＵＴＲを含む。
【0443】
天然５’ＵＴＲは、翻訳開始において重要な役割を果たす特徴を含む。それらは、リボソームが多くの遺伝子の翻訳を開始するプロセスに関与することが知られているコザック配列などのシグネチャーを保有する。本開示は、少なくとも１つの５’ＵＴＲ機能を含む修飾されたポリヌクレオチド配列を提供する。そのような「修飾された５’ＵＴＲポリヌクレオチド」または「修飾された５’ＵＴＲ」はまた、発現が作動されているタンパク質、例えば、構造ＡＡＶカプシドタンパク質（ＶＰ１、ＶＰ２またはＶＰ３）または非構造ＡＡＶ複製タンパク質（Ｒｅｐ７８またはＲｅｐ５２）の開始コドンを含み得る。
【0444】
本開示によれば、修飾された５’ＵＴＲポリヌクレオチドは、独立して、長さが１５～１，０００ヌクレオチド（例えば、３０、４０、４５、５０、５５、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１８０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、６００、７００、８００、及び９００ヌクレオチドを超えまたは少なくとも３０、４０、４５、５０、５５、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１８０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、６００、７００、８００、９００、及び１，０００ヌクレオチド）の範囲であり得る。非ＵＴＲ配列が、修飾された５’ＵＴＲに組み込まれ得る。例えば、イントロンまたはイントロン配列の一部が、本開示のポリヌクレオチドに組み込まれ得る。イントロン配列の組み込みはまた、ＡＡＶ血清型ＡＡＶ血清型タンパク質（例えば、カプシド）生成を増加させ得る。
【0445】
リーダー配列は、修飾されたポリヌクレオチドに含まれ得る。そのようなリーダー配列は、本明細書で教示されているものから選択される任意のＡＡＶ血清型のすべてまたは一部に由来し得、またはそれと同一であり得る。
【0446】
本開示によれば、ポリヌクレオチドは、繰り返しの実験を介して発見されたコンセンサス配列を含み得る。本明細書で使用される場合、「コンセンサス」配列は、１つ以上の部位でばらつきを許容する配列の集合的集団を表す単一配列である。
【0447】
所定の実施形態では、本開示のポリヌクレオチドのバリアントが生成され得る。これらのバリアントは、参照ポリヌクレオチドと同じまたは類似する活性を有し得る。代替的には、バリアントは、参照ポリヌクレオチドに対して変化（例えば、増加または低下）した活性を有し得る。通常、本開示の特定のポリヌクレオチドのバリアントは、本明細書に記載されている及び当業者に知られている配列アライメントプログラム及びパラメータによって決定されるその特定の参照ポリヌクレオチドと少なくとも約４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％であるが１００％未満の配列同一性を有する。アライメントのためのそのようなツールは、ＢＬＡＳＴ ｓｕｉｔｅのものを含む（Ｓｔｅｐｈｅｎ Ｆ．Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｔｈｏｍａｓ Ｌ．Ｍａｄｄｅｎ，Ａｌｅｊａｎｄｒｏ Ａ．Ｓｃｈａｆｆｅｒ，Ｊｉｎｇｈｕｉ Ｚｈａｎｇ，Ｚｈｅｎｇ Ｚｈａｎｇ，Ｗｅｂｂ Ｍｉｌｌｅｒ，ａｎｄ Ｄａｖｉｄ Ｊ．Ｌｉｐｍａｎ（１９９７），“Ｇａｐｐｅｄ ＢＬＡＳＴ ａｎｄ ＰＳＩ－ＢＬＡＳＴ：ａ ｎｅｗ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ ｄａｔａｂａｓｅ ｓｅａｒｃｈ ｐｒｏｇｒａｍｓ”，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５：３３８９－３４０２）。他のツールは、本明細書、特に「同一性」の定義に記載されている。
【0448】
本開示の修飾されたポリヌクレオチドは、単独で、または他のポリヌクレオチド配列もしくは特徴、例えば、国際公開ＷＯ２００７０４６７０３及びＷＯ２００７１４８９７１（選択的開始コドン及び昆虫細胞で生成されるＡＡＶベクターを開示している）；ＷＯ２００９１０４９６４（昆虫細胞におけるＡＡＶタンパク質の発現の最適化及びプロモーター強度、エンハンサー要素、温度制御の変化の関与を開示している）；及びＷＯ２０１５１３７８０２（選択的開始コドン、開始コドンの除去及び昆虫細胞において生成される及びＡＡＶベクターを開示している）（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているものと組み合わせてベクターまたはプラスミドに組み込まれ得る。
【0449】
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、８０～１２０ヌクレオチドの間、９０～１１０ヌクレオチドの間、９５～１０５ヌクレオチドの間、９８～１００ヌクレオチドの間、または約９９ヌクレオチドを含むか、またはそれからなる。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、２４ヌクレオチドを含むか、またはそれからなる。
【0450】
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、ＡＡＶ２に由来する。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、ＡＡＶ２に由来する。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、ＡＡＶ９に由来する。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、ＡＡＶＲｈ１０に由来する。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂに由来する。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、表１に提供されるＡＡＶ血清型に由来する。
【0451】
５’ＵＴＲヘアピン構造
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、ヘアピン構造を含む。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲ領域は、ヘアピンの５’（上流）である「Ａ」領域（５’フランキング領域）、ステムループからの３’（下流）である「Ｂ領域」（開始コドン及び開始コドンの周囲のコザックヌクレオチドを含み得る３’フランキング領域）、ステム－ループ構造のステムを表す「Ｃ」領域、ならびにループ（４～１６ヌクレオチドの範囲であり得る）を含む５’ＵＴＲのプロモーター５’（上流）を含む。所定の実施形態では、ヘアピン構造は、コザック配列のすべてまたは一部、例えば、ＴＴＴを含み得る。プロモーター及び５’ＵＴＲは、ＣＡＰ遺伝子（構造カプシドタンパク質ＶＰ１、ＶＰ２及び／またはＶＰ３をコードする）またはＲＥＰ遺伝子（非構造複製タンパク質Ｒｅｐ７８及びＲｅｐ５２をコードする）のいずれかに関連し得る。
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、ヘアピン構造を含む。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲ領域は、ヘアピンの５’（上流）である「Ａ」領域（５’フランキング領域）、ステムループからの３’（下流）である「Ｂ領域」（開始コドン及び開始コドンの周囲のコザックヌクレオチドを含み得る３’フランキング領域）、ステム－ループ構造のステムを表す「Ｃ」領域、ならびにループ（４～１６ヌクレオチドの範囲であり得る）を含む５’ＵＴＲのプロモーター５’（上流）を含む。所定の実施形態では、ヘアピン構造は、コザック配列のすべてまたは一部、例えば、ＴＴＴを含み得る。プロモーター及び５’ＵＴＲは、ＣＡＰ遺伝子（構造カプシドタンパク質ＶＰ１、ＶＰ２及び／またはＶＰ３をコードする）またはＲＥＰ遺伝子（非構造複製タンパク質Ｒｅｐ７８及びＲｅｐ５２をコードする）のいずれかに関連し得る。
【0452】
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、ヘアピンヌクレオチド配列によってコードされるヘアピン構造を含む。所定の実施形態では、ヘアピンヌクレオチド配列は、リーダー配列を含む。所定の実施形態では、ヘアピンヌクレオチド配列は、リーダー配列及び開始コドン（例えば、ＡＴＧ）を含む。所定の実施形態では、ヘアピンヌクレオチド配列は、リーダー配列、及びコザック配列または改変されたコザック配列内の開始コドン（例えば、ＡＴＧ）を含む。
【0453】
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、５’フランキング配列によってコードされる５’フランキング領域（すなわち、上流領域）を有するヘアピン構造を含む。所定の実施形態では、５’フランキング配列は、任意の長さのものであり得、野生型ＡＡＶ配列に全体としてまたは部分的に由来し得るか、または完全に人工であり得る。
【0454】
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、３’フランキング配列によってコードされる３’フランキング領域（すなわち、下流領域）を有するヘアピン構造を含む。所定の実施形態では、３’フランキング配列は、任意の長さのものであり得、野生型ＡＡＶ配列に全体としてまたは部分的に由来し得るか、または完全に人工であり得る。
【0455】
５’フランキング配列及び３’フランキング配列は、同じサイズ及び起源、異なるサイズ、異なる起源、または異なるサイズ及び起源を有し得る。いずれかのフランキング配列は、非存在であり得る。５’フランキング配列は、２～５０、２～４０、２～３０、２～２０、または２～１５ヌクレオチドを含み得るか、またはそれからなり得る。３’フランキング配列は、２～５０、２～４０、２～３０、２～２０、または２～１５ヌクレオチドを含み得るか、またはそれからなり得る。３’フランキング配列は任意に、ＡＡＶタンパク質またはタンパク質の開始コドン及び他の配列、例えば、コザックまたは改変されたコザック配列を含有し得る。
【0456】
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、工程－ループ構造を含むヘアピン構造を含む。所定の実施形態では、ヘアピン構造は、ステム領域及びループ領域を含む。所定の実施形態では、ヘアピン構造は、ステム領域、ループ領域、及びステム相補性領域を含む。ステム－ループ構造は、ステム配列によってコードされるステム領域を含み得る。ステム－ループ構造は、ループ配列によってコードされるループ領域を含み得る。ステム－ループ構造は、ステム相補性配列によってコードされるステム相補性領域を含み得る。ヘアピンのステム－ループ構造のステムの形成は、２～５０対の間の対形成されたまたは実質的に対形成されたヌクレオ塩基である。ステムは、１つ以上のミスマッチ、バルジまたはループを含有し得る。所定の実施形態では、ステム配列及びステム相補的配列は、１００％相補性（すなわち、ゼロミスマッチ）である。所定の実施形態では、ステム配列及びステム相補的配列は、０、１、２、３、４、または５つのミスマッチを含む。
【0457】
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、表５に提供されるヘアピン構造、または表５に列挙される上流、ステム（上流）、ループ、ステム（下流）及び／または下流成分の組み合わせを含む。ヘアピンのループ部分の位置において、大文字の標準的ＡＴＧ開始コドンを有する配列で下線が引かれている。
【0458】
【表5-1】
【0459】
【表5-2】
【0460】
【表5-3】
【0461】
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、配列番号１７５３～１７６８から選択されるヘアピンヌクレオチド配列によってコードされるヘアピン構造、またはその成分を含む。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、配列番号１７５３～１７６８と少なくとも６０％の同一性、少なくとも６５％の同一性、少なくとも７０％の同一性、少なくとも７５％の同一性、少なくとも８０％の同一性、少なくとも８５％の同一性、少なくとも９０％の同一性または少なくとも９５％の同一性を有するヌクレオチド配列によってコードされるヘアピン構造、またはその成分を含む。
【0462】
Ｇ：Ｃ含有量
所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、リーダー配列などのヌクレオチド配列を含み得、これは変化したＧ：Ｃ含有量または割合を有する。所定の実施形態では、５’ＵＴＲの５’フランキング領域は、変化したＧ：Ｃ含有量を有する。所定の実施形態では、５’ＵＴＲのステムは、変化したＧ：Ｃ含有量を有する。所定の実施形態では、５’ＵＴＲの３’フランキング領域は、変化したＧ：Ｃ含有量を有する。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲのＧ：Ｃ含有量は、１０～８０％、２０～７０％、２５％～６５％、または３０％～６０％である。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲのＧ：Ｃ含有量は、約２５％、約３０％、３４％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、５８％、約６０％、６２％または約６５％である。
所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、リーダー配列などのヌクレオチド配列を含み得、これは変化したＧ：Ｃ含有量または割合を有する。所定の実施形態では、５’ＵＴＲの５’フランキング領域は、変化したＧ：Ｃ含有量を有する。所定の実施形態では、５’ＵＴＲのステムは、変化したＧ：Ｃ含有量を有する。所定の実施形態では、５’ＵＴＲの３’フランキング領域は、変化したＧ：Ｃ含有量を有する。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲのＧ：Ｃ含有量は、１０～８０％、２０～７０％、２５％～６５％、または３０％～６０％である。所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲのＧ：Ｃ含有量は、約２５％、約３０％、３４％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、５８％、約６０％、６２％または約６５％である。
【0463】
所定の実施形態では、修飾された５’ＵＴＲは、９８～１００の間のヌクレオチドを含むか、またはそれからなり、約２５％、約３０％、３４％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、５８％、約６０％、６２％または約６５％のＧ：Ｃ含有量を含む。
【0464】
改変されたコザック配列
真核ｍＲＮＡの翻訳開始部位は、Ｋｏｚａｋ，Ｍ Ｃｅｌｌ．１９８６ Ｊａｎ ３１；４４（２）：２８３－９２およびＫｏｚａｋ，Ｍ．Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１９８９ Ｆｅｂ；１０８（２）：２２９－４１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、コザック配列及びその使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるコザック配列と称されるヌクレオチド配列によって部分的に制御される。コザック形態の天然に存在する及び合成の（すなわち、改変または修飾された）翻訳開始部位はいずれとも、Ｋｏｚａｋ，Ｍ．Ｍａｍｍ Ｇｅｎｏｍｅ．１９９６ Ａｕｇ；７（８）：５６３－７４（その内容は、本開示と矛盾しない限り、コザック配列及びその使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、分子遺伝子的技術によってポリペプチドの生成において使用され得る。コザックコンセンサス配列は通常、ＧＣＣＲＣＣ（ＮＮＮ）ＧＣ（配列番号１７８８）（Ｒは、プリン（すなわち、ＡまたはＧ）であり、（ＮＮＮ）は、翻訳が始まる開始コドン、例えば、準最適開始コドンを表す）として定義される。所定の実施形態では、コザック配列は、ＶＰコーディング領域のリボソームスキャニング漏れを提供するように改変される。任意の対応するＶＰ１生成の増加は、ＶＰ１開始速度のわずかな変化が、ＶＰ１／ＶＰ３比の大きな変化を誘導し得るようにＶＰ３翻訳を逆に減少させる。本明細書で使用される場合、用語「改変されたコザック配列」または「修飾されたコザック配列」は、例えば、ヌクレオチド変異、付加、または欠失を含むコザック配列などの変化したコザック配列を表す。
真核ｍＲＮＡの翻訳開始部位は、Ｋｏｚａｋ，Ｍ Ｃｅｌｌ．１９８６ Ｊａｎ ３１；４４（２）：２８３－９２およびＫｏｚａｋ，Ｍ．Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１９８９ Ｆｅｂ；１０８（２）：２２９－４１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、コザック配列及びその使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるコザック配列と称されるヌクレオチド配列によって部分的に制御される。コザック形態の天然に存在する及び合成の（すなわち、改変または修飾された）翻訳開始部位はいずれとも、Ｋｏｚａｋ，Ｍ．Ｍａｍｍ Ｇｅｎｏｍｅ．１９９６ Ａｕｇ；７（８）：５６３－７４（その内容は、本開示と矛盾しない限り、コザック配列及びその使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、分子遺伝子的技術によってポリペプチドの生成において使用され得る。コザックコンセンサス配列は通常、ＧＣＣＲＣＣ（ＮＮＮ）ＧＣ（配列番号１７８８）（Ｒは、プリン（すなわち、ＡまたはＧ）であり、（ＮＮＮ）は、翻訳が始まる開始コドン、例えば、準最適開始コドンを表す）として定義される。所定の実施形態では、コザック配列は、ＶＰコーディング領域のリボソームスキャニング漏れを提供するように改変される。任意の対応するＶＰ１生成の増加は、ＶＰ１開始速度のわずかな変化が、ＶＰ１／ＶＰ３比の大きな変化を誘導し得るようにＶＰ３翻訳を逆に減少させる。本明細書で使用される場合、用語「改変されたコザック配列」または「修飾されたコザック配列」は、例えば、ヌクレオチド変異、付加、または欠失を含むコザック配列などの変化したコザック配列を表す。
【0465】
所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、改変されたコザック配列、例えば、改変された弱いコザック配列を含み得る。所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、ＶＰ開始コドン及び／またはＶＰ翻訳開始領域を含むか、またはそれに関連する改変されたコザック配列を含み得る。所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、ＶＰ１開始コドン及び／またはＶＰ１翻訳開始領域を含むか、またはそれに関連する改変されたコザック配列を含み得る。所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、ＶＰ２開始コドン及び／またはＶＰ２翻訳開始領域を含むか、またはそれに関連する改変されたコザック配列を含み得る。所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、ＶＰ３開始コドン及び／またはＶＰ３翻訳開始領域を含むか、またはそれに関連する改変されたコザック配列を含み得る。
【0466】
所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、表６から選択される改変されたコザック配列を含み得る。
【0467】
【表6】
【0468】
所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、配列番号１７８９～１７９１から選択される改変されたコザック配列を含み得る。所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、配列番号１７８９～１７９１から選択される改変されたコザック配列と少なくとも６０％の同一性、少なくとも６５％の同一性、少なくとも７０％の同一性、少なくとも７５％の同一性、少なくとも８０％の同一性、少なくとも８５％の同一性、少なくとも９０％の同一性または少なくとも９５％の同一性を有する改変されたコザック配列を含み得る。
【0469】
所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、配列番号１７８９の改変されたコザック配列を含み得る。所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、配列番号１７９０の改変されたコザック配列を含み得る。所定の実施形態では、本開示の修飾された５’ＵＴＲは、配列番号１７９１の改変されたコザック配列を含み得る。
【0470】
所定の実施形態では、改変されたコザック配列は、約または正確には１：１：１０；約または正確には２：２：１０；約または正確には３：３：１０；約または正確には４：４：１０；約または正確には５：５：１０；約または正確には１～２：１～２：１０；約または正確には１～３：１～３：１０；約または正確には１～４：１～４：１０；約または正確には１～５：１～５：１０；約または正確には２～３：２～３：１０；約または正確には２～４：２～４：１０；約または正確には２～５：２～５：１０；約または正確には３～４：３～４：１０；約または正確には３～５：３～５：１０；及び約または正確には４～５：４～５：１０から選択されるＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３比を生成するように修飾または選択される。
【0471】
所定の実施形態では、本開示は、ウイルス生成細胞、例えば、昆虫細胞においてｒＡＡＶ粒子を生成する方法を提供する。所定の実施形態では、方法は、（ｉ）ウイルス生成細胞（例えば、Ｓｆ９昆虫細胞）を、ペイロードコンストラクトならびに改変されたコザック配列をコードするヌクレオチド配列及びＶＰ１、ＶＰ２、及び／またはＶＰ３カプシドタンパク質をコードする配列を含むウイルス発現コンストラクトでトランスフェクションすることと、（ｉｉ）ｒＡＡＶ粒子を生成するのに好適な条件下で昆虫細胞を培養することと、を含む。
【0472】
ウイルス生成細胞及びベクター
哺乳動物細胞
本開示のウイルス生成は、標的細胞を接触させてペイロード分子をコードするヌクレオチドを含むペイロードコンストラクト、例えば、組換えＡＡＶ粒子またはウイルスコンストラクトを送達するＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを生成するためのプロセス及び方法を記載する。ウイルス生成細胞は、原核生物（例えば、細菌）細胞、ならびに昆虫細胞、酵母細胞及び哺乳動物細胞を含む真核細胞を含む任意の生物学的生物から選択され得る。
哺乳動物細胞
本開示のウイルス生成は、標的細胞を接触させてペイロード分子をコードするヌクレオチドを含むペイロードコンストラクト、例えば、組換えＡＡＶ粒子またはウイルスコンストラクトを送達するＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを生成するためのプロセス及び方法を記載する。ウイルス生成細胞は、原核生物（例えば、細菌）細胞、ならびに昆虫細胞、酵母細胞及び哺乳動物細胞を含む真核細胞を含む任意の生物学的生物から選択され得る。
【0473】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、哺乳動物細胞を含むウイルス生成細胞において生成され得る。ウイルス生成細胞は、哺乳動物細胞、例えば、Ａ５４９、ＷＥＨ１、３Ｔ３、１０Ｔ１／２、ＢＨＫ、ＭＤＣＫ、ＣＯＳ１、ＣＯＳ７、ＢＳＣ１、ＢＳＣ４０、ＢＭＴ１０、ＶＥＲＯ．Ｗ１３８、ＨｅＬａ、ＨＥＫ２９３、ＨＥＫ２９３Ｔ（２９３Ｔ）、Ｓａｏｓ、Ｃ２Ｃ１２、Ｌ細胞、ＨＴ１０８０、ＨｅｐＧ２ならびに哺乳動物に由来する初代線維芽細胞、肝細胞及び筋芽細胞を含み得る。ウイルス生成細胞は、ヒト、サル、マウス、ラット、ウサギ、及びハムスターを含むがこれらに限定されない哺乳動物種に由来する細胞または線維芽細胞、肝細胞、腫瘍細胞、細胞株形質転換細胞などを含むがこれらに限定されない細胞タイプを含み得る。
【0474】
組換えＡＡＶ粒子の生成のために一般的に使用されるＡＡＶウイルス生成細胞は、ＨＥＫ２９３細胞、ＣＯＳ細胞、Ｃ１２７、３Ｔ３、ＣＨＯ、ＨｅＬａ細胞、ＫＢ細胞、ＢＨＫ、ならびに米国特許番号６，１５６，３０３、５，３８７，４８４、５，７４１，６８３、５，６９１，１７６、６，４２８，９８８及び５，６８８，６７６；米国特許出願２００２／００８１７２１、及び国際特許公開番号ＷＯ００／４７７５７、ＷＯ００／２４９１６、及びＷＯ９６／１７９４７（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される他の哺乳動物細胞株を含むがこれらに限定されない。所定の実施形態では、ＡＡＶウイルス生成細胞は、複製欠損性ヘルパーウイルスから欠失した機能を提供するトランス補完性パッケージング細胞株、例えば、ＨＥＫ２９３細胞または他のＥａトランス補完性細胞である。
【0475】
所定の実施形態では、パッケージング細胞株２９３－１０－３（ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ－２３６１）が、米国特許番号ＵＳ６，２８１，０１０（その内容は、本開示と矛盾しない限り、２９３－１０－３包装細胞株及びその使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、ＡＡＶ粒子を生成するために使用され得る。
【0476】
本開示の所定の実施形態では、米国特許番号６３６５３９４（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＨｅＬＡ細胞株及びその使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、ホスホグリセリン酸キナーゼ（ＰＧＫ）プロモーターの制御下でアデノウイルスＥ１ａ及びアデノウイルスＥ１ｂをコードする、Ｅ１欠失アデノウイルスベクターをトランス補完するための細胞株、例えば、ＨｅＬＡ細胞株がＡＡＶ粒子生成のために使用され得る。
【0477】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、三重トランスフェクション方法を使用して哺乳動物細胞において生成され、その場合、ペイロードコンストラクト、パルボウイルスＲｅｐ及びパルボウイルスＣａｐ及びヘルパーコンストラクトが３つの異なるコンストラクト内に含まれる。ＡＡＶ粒子生成の３つの成分の三重トランスフェクション方法は、形質導入効率、標的組織（トロピズム）評価、及び安定性を含むアッセイのための少しのロットのウイルスを生成するために利用され得る。
【0478】
製剤化されるＡＡＶ粒子は、三重トランスフェクションまたはバキュロウイルス媒介ウイルス生成、または当該技術分野で知られている任意の他の方法によって生成され得る。当該技術分野で知られている任意の好適な許容またはパッケージング細胞が、ベクターを生成するために用いられ得る。所定の実施形態では、複製欠損性ヘルパーウイルスから欠失された機能を提供するトランス補完性パッケージング細胞株、例えば、２９３細胞または他のＥ１ａトランス相補性細胞が使用される。
【0479】
遺伝子カセットは、パルボウイルス（例えば、ＡＡＶ）のｃａｐ及びｒｅｐ遺伝子の一部またはすべてを含有し得る。所定の実施形態では、ｃａｐ及びｒｅｐ機能の一部またはすべては、カプシド及び／またはＲｅｐタンパク質をコードするパッケージングベクター（複数可）を細胞に導入することによってトランスで提供される。所定の実施形態では、遺伝子カセットは、カプシドまたはＲｅｐタンパク質をコードしない。代替的には、ｃａｐ及び／またはｒｅｐ遺伝子を発現するように安定的に形質転換されたパッケージング細胞株が使用される。
【0480】
組換えＡＡＶウイルス粒子は、所定の実施形態では、ＵＳ２０１６／００３２２５４（その内容は、本開示と矛盾しない限り、組換えＡＡＶウイルス粒子の生成及び処理に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される手順に従って培養上清から生成及び精製され得る。生成はまた、２９３Ｔ細胞を使用するもの、三重トランスフェクションまたは任意の好適な生成方法を含む、当該技術分野で知られている方法を含み得る。
【0481】
所定の実施形態では、哺乳動物ウイルス生成細胞（例えば、２９３Ｔ細胞）は、付着／接着状態（例えば、リン酸カルシウムを用いる）または浮遊状態（例えば、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）を用いる）であり得る。哺乳動物ウイルス生成細胞は、ＡＡＶの生成に必要とされるプラスミド（すなわち、ＡＡＶ ｒｅｐ／ｃａｐコンストラクト、アデノウイルスヘルパーコンストラクト、及び／またはＩＴＲ隣接ペイロードコンストラクト）でトランスフェクションされる。所定の実施形態では、トランスフェクションプロセスは、任意の培地交換（例えば、接着状態の細胞のための培地交換、浮遊形態の細胞のための培地交換なし、所望の場合は浮遊形態の細胞のための培地交換）を含み得る。所定の実施形態では、トランスフェクションプロセスは、トランスフェクション培地、例えば、ＤＭＥＭまたはＦ１７を含み得る。所定の実施形態では、トランスフェクション培地は、血清を含み得るか、または無血清であり得る（例えば、リン酸カルシウム及び血清を用いる接着状態の細胞、ＰＥＩを用い、血清を用いない浮遊状態の細胞）。
【0482】
細胞はその後、擦り落とし（接着形態）及び／またはペレット化（浮遊形態及び擦り落とされた接着形態）によって収集され、容器に移され得る。収集工程は、生成された細胞の完全な収集のために必要に応じて繰り返され得る。次に、細胞溶解は、連続的凍結－解凍サイクル（－８０Ｃから３７Ｃ）、化学的溶解（洗浄剤トライトン（登録商標）の添加など）、機械的溶解によって、または約０％の生存性に達した後に細胞培養物が分解することによって達成され得る。細胞デブリは、遠心分離及び／または深層濾過によって除去される。サンプルは、ＤＮＡ ｑＰＣＲによるＤＮａｓｅ耐性ゲノム力価測定によってＡＡＶ粒子について定量される。
【0483】
ＡＡＶ粒子力価は、ゲノムコピー数に従って測定される（ミリリットル当たりのゲノム粒子）。ゲノム粒子濃度は、先に報告されているようにベクターＤＮＡのＤＮＡ ｑＰＣＲに基づく（Ｃｌａｒｋ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．，１０：１０３１－１０３９；Ｖｅｌｄｗｉｊｋ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，６：２７２－２７８（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、粒子濃度の測定に関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【0484】
昆虫細胞
本開示のウイルス生成は、標的細胞を接触させてペイロード分子をコードするヌクレオチドを含むペイロードコンストラクト、例えば、組換えウイルスコンストラクトを送達するＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを生成するためのプロセス及び方法を含む。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子またはウイルスベクターは、昆虫細胞を含むウイルス生成細胞において生成され得る。
本開示のウイルス生成は、標的細胞を接触させてペイロード分子をコードするヌクレオチドを含むペイロードコンストラクト、例えば、組換えウイルスコンストラクトを送達するＡＡＶ粒子またはウイルスベクターを生成するためのプロセス及び方法を含む。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子またはウイルスベクターは、昆虫細胞を含むウイルス生成細胞において生成され得る。
【0485】
培養下の昆虫細胞のための成長条件、及び培養下の昆虫細胞における異種生成物の生成は、当該技術分野でよく知られている、米国特許番号６，２０４，０５９（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ウイルス生成における昆虫細胞の成長及び使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【0486】
パルボウイルスの複製を可能にし、かつ培養下で維持され得る任意の昆虫細胞が、本開示に従って使用され得る。組換えＡＡＶ粒子の生成のために一般的に使用されるＡＡＶウイルス生成細胞は、限定されないが、Ｓｆ９またはＳｆ２１細胞株を含むがこれに限定されないＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ細胞株、または蚊細胞株、例えば、Ａｅｄｅｓ ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ由来細胞株を含む。異種タンパク質の発現のための昆虫細胞の使用は、ベクター、例えば、昆虫細胞適合性ベクターなどの核酸をそのような細胞に導入する方法及びそのような細胞を培養下で維持する方法のように、十分に文書に記載されている。例えば、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｅｄ．Ｒｉｃｈａｒｄ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，ＮＪ（１９９５）；Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ ｅｔ ａｌ．，Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｖｅｃｔｏｒｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ（１９９４）；Ｓａｍｕｌｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒ．６３：３８２２－８（１９８９）；Ｋａｊｉｇａｙａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：４６４６－５０（１９９１）；Ｒｕｆｆｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒ．６６：６９２２－３０（１９９２）；Ｋｉｍｂａｕｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｖｉｒ．２１９：３７－４４（１９９６）；Ｚｈａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｖｉｒ．２７２：３８２－９３（２０００）；及びＳａｍｕｌｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，米国特許番号６，２０４，０５９（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、ウイルス生成における昆虫細胞の使用に関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【0487】
一実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＷＯ２０１５／１９１５０８（その内容は、本開示と矛盾しない限り、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の方法を使用して作製される。
【0488】
所定の実施形態では、バキュロウイルスシステムと組み合わされた昆虫宿主細胞システム（例えば、Ｌｕｃｋｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ６：４７（１９８８）によって記載されている）が使用され得る。所定の実施形態では、キメラペプチドを調製するための発現システムは、米国特許番号６６６０５２１（その内容は、本開示と矛盾しない限り、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、高レベルのタンパク質のために使用され得るＴｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ ｎｉ、Ｔｎ ５Ｂ１－４昆虫細胞／バキュロウイルスシステムである。
【0489】
昆虫細胞の増殖、培養、トランスフェクション、感染及び保存は、Ｈｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地、Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ＥＳＦ ＡＦ昆虫細胞培地、Ｂａｓａｌ ＩＰＬ－４１昆虫細胞培地、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｆ９００ＩＩ培地、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｆ９００ＩＩＩ培地、またはＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒグレース昆虫培地を含む、当該技術分野で知られている任意の細胞培地、細胞トランスフェクション培地または保存培地において行われ得る。本開示の昆虫細胞混合物はまた、（限定されないが）塩、酸、塩基、緩衝液、界面活性剤（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８／Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８など）、及び他の既知の培地要素を含む、本開示に記載の製剤添加剤または要素のいずれかを含み得る。製剤添加剤は、徐々にまたは「スパイク」（短時間での大量の組み込み）として組み込まれ得る。
【0490】
バキュロウイルス生成システム
所定の実施形態では、本開示のプロセスは、ウイルス発現コンストラクト及びペイロードコンストラクトベクターを使用するバキュロウイルスシステムにおけるＡＡＶ粒子またはウイルスベクターの生成を含み得る。所定の実施形態では、バキュロウイルスシステムは、バキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）及び／またはバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を含む。所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトまたはペイロードコンストラクトは、バキュロウイルスプラスミドまたは組換えバキュロウイルスゲノムとしても知られているバクミドであり得る。所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトまたはペイロードコンストラクトは、当業者に知られており、実施される標準的な分子生物学技術によってバクミドに相同組換え（トランスポゾンドナー／アクセプターシステム）によって組み込まれたポリヌクレオチドであり得る。別個のウイルス複製細胞集団のトランスフェクションは、２つ以上の群（例えば、２つ、３つ）のバキュロウイルス（ＢＥＶ）を生成し、１つ以上の群は、ウイルス発現コンストラクト（発現ＢＥＶ）を含み得、１つ以上の群は、ペイロードコンストラクト（ペイロードＢＥＶ）を含み得る。バキュロウイルスは、ＡＡＶ粒子またはウイルスベクターの生成のためのウイルス生成細胞を感染させるために使用され得る。
所定の実施形態では、本開示のプロセスは、ウイルス発現コンストラクト及びペイロードコンストラクトベクターを使用するバキュロウイルスシステムにおけるＡＡＶ粒子またはウイルスベクターの生成を含み得る。所定の実施形態では、バキュロウイルスシステムは、バキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）及び／またはバキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を含む。所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトまたはペイロードコンストラクトは、バキュロウイルスプラスミドまたは組換えバキュロウイルスゲノムとしても知られているバクミドであり得る。所定の実施形態では、本開示のウイルス発現コンストラクトまたはペイロードコンストラクトは、当業者に知られており、実施される標準的な分子生物学技術によってバクミドに相同組換え（トランスポゾンドナー／アクセプターシステム）によって組み込まれたポリヌクレオチドであり得る。別個のウイルス複製細胞集団のトランスフェクションは、２つ以上の群（例えば、２つ、３つ）のバキュロウイルス（ＢＥＶ）を生成し、１つ以上の群は、ウイルス発現コンストラクト（発現ＢＥＶ）を含み得、１つ以上の群は、ペイロードコンストラクト（ペイロードＢＥＶ）を含み得る。バキュロウイルスは、ＡＡＶ粒子またはウイルスベクターの生成のためのウイルス生成細胞を感染させるために使用され得る。
【0491】
所定の実施形態では、プロセスは、ウイルス発現コンストラクト及びペイロードコンストラクトの両方を含む単一バキュロウイルス（ＢＥＶ）群を生成するための単一ウイルス複製細胞集団のトランスフェクションを含む。これらのバキュロウイルスは、ＡＡＶ粒子またはウイルスベクターの生成のためのウイルス生成細胞を感染させるために使用され得る。
【0492】
所定の実施形態では、ＢＥＶは、バクミドトランスフェクション剤、例えば、Ｐｒｏｍｅｇａ ＦｕＧＥＮＥ ＨＤ、ＷＦＩ水、またはＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｃｅｌｌｆｅｃｔｉｎ ＩＩ試薬を使用して生成される。所定の実施形態では、ＢＥＶは、ウイルス生成細胞、例えば、昆虫細胞において生成及び増殖される。
【0493】
所定の実施形態では、方法は、バキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を含む、１つ以上のＢＥＶを含むウイルス生成細胞のシード培養物を利用する。シードＢＩＩＣは、ウイルス発現コンストラクトを含む発現ＢＥＶ、及びさらにペイロードコンストラクトを含むペイロードＢＥＶでトランスフェクション／形質導入／感染されている。所定の実施形態では、シード培養物は、収穫され、アリコートに分割され、凍結され、生成細胞のナイーブ集団のトランスフェクション／形質導入／感染を開始させるために後の時点で使用され得る。所定の実施形態では、シードＢＩＩＣのバンクは、－８０℃でまたはＬＮ２蒸気中で保存される。
【0494】
バキュロウイルスは、バキュロウイルスの機能及び複製に必須であるいくつかの必須タンパク質、例えば、複製タンパク質、エンベロープタンパク質及びカプシドタンパク質から作製される。よって、バキュロウイルスゲノムは、必須タンパク質をコードするいくつかの必須遺伝子ヌクレオチド配列を含む。非限定的な例として、ゲノムは、バキュロウイルスコンストラクトのための必須タンパク質をコードする必須遺伝子ヌクレオチド配列を含む必須遺伝子領域を含み得る。必須タンパク質は、ＧＰ６４バキュロウイルスエンベロープタンパク質、ＶＰ３９バキュロウイルスカプシドタンパク質、またはバキュロウイルスコンストラクトのための他の類似する必須タンパク質を含み得る。
【0495】
限定されないが、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ９）細胞を含む昆虫細胞においてＡＡＶ粒子を生成するためのバキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）は、高い力価のウイルスベクター生成物を提供する。ウイルス発現コンストラクト及びペイロードコンストラクトをコードする組換えバキュロウイルスは、ウイルスベクター複製細胞の生産的感染を開始させる。一次感染から放出された感染性バキュロウイルス粒子は、培養物中のさらなる細胞に二次感染し、初期感染多重度の関数である所定回数の感染サイクルで細胞培養物集団全体に指数関数的に感染する。Ｕｒａｂｅ，Ｍ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｖｉｒｏｌ．２００６ Ｆｅｂ；８０（４）：１８７４－８５（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＢＥＶ及びウイルス粒子の生成及び使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。
【0496】
昆虫細胞システムにおけるバキュロウイルスを用いたＡＡＶ粒子の生成は、既知のバキュロウイルスの遺伝子的及び物理的不安定性に対処し得る。
所定の実施形態では、本開示の生成システムは、タイターレス感染細胞保存及び規模拡大システムを利用することによって複数の継代にわたってバキュロウイルスの不安定性に対処する。ウイルス生成細胞の小規模シード培養物は、ＡＡＶ粒子の構造及び／または非構造成分をコードするウイルス発現コンストラクトでトランスフェクションされる。バキュロウイルスに感染したウイルス生成細胞は、液体窒素中で凍結保存され得るアリコートに収穫され；アリコートは、大規模ウイルス生成細胞培養の感染のための生存性及び感染性を保持するＷａｓｉｌｋｏ ＤＪ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒ Ｐｕｒｉｆ．２００９ Ｊｕｎ；６５（２）：１２２－３２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＢＥＶ及びウイルス粒子の生成及び使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
所定の実施形態では、本開示の生成システムは、タイターレス感染細胞保存及び規模拡大システムを利用することによって複数の継代にわたってバキュロウイルスの不安定性に対処する。ウイルス生成細胞の小規模シード培養物は、ＡＡＶ粒子の構造及び／または非構造成分をコードするウイルス発現コンストラクトでトランスフェクションされる。バキュロウイルスに感染したウイルス生成細胞は、液体窒素中で凍結保存され得るアリコートに収穫され；アリコートは、大規模ウイルス生成細胞培養の感染のための生存性及び感染性を保持するＷａｓｉｌｋｏ ＤＪ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒ Ｐｕｒｉｆ．２００９ Ｊｕｎ；６５（２）：１２２－３２（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ＢＥＶ及びウイルス粒子の生成及び使用に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【0497】
遺伝子的に安定なバキュロウイルスは、無脊椎動物細胞においてＡＡＶ粒子を生成するための成分の１つ以上のソースを生成するために使用され得る。所定の実施形態では、欠損性バキュロウイルス発現ベクターは、昆虫細胞においてエピソームとして維持され得る。そのような実施形態では、対応するバクミドベクターは、限定されないが、プロモーター、エンハンサー、及び／または細胞周期調整複製要素を含む複製制御要素で修飾されている。
【0498】
所定の実施形態では、バキュロウイルスは、キチナーゼ／カテプシン遺伝子座への組換えのためのマーカーで修飾され得る。ｃｈｉａ／ｖ－ｃａｔｈ遺伝子座は、組織培養においてバキュロウイルスを増殖させるために必須ではなく、Ｖ－ｃａｔｈ（ＥＣ ３．４．２２．５０）は、Ａｒｇ－Ａｒｇジペプチド含有基質に対して最も活性なシステインエンドプロテアーゼである。Ａｒｇ－Ａｒｇジペプチドは、デンソウイルス及びパルボウイルスのカプシド構造タンパク質に存在するが、ディペンドウイルスのＶＰ１において稀に生じる。
【0499】
所定の実施形態では、バキュロウイルス感染が可能な安定なウイルス生成細胞は、限定されないが、ＡＡＶゲノム全体、Ｒｅｐ及びＣａｐ遺伝子、Ｒｅｐ遺伝子、Ｃａｐ遺伝子、分離転写カセットとしての各Ｒｅｐタンパク質、分離転写カセットとしての各ＶＰタンパク質、ＡＡＰ（集合活性化タンパク質）、またはネイティブもしくは非ネイティブプロモーターを有するバキュロウイルスヘルパー遺伝子の少なくとも１つを含有する、ＡＡＶ複製及びベクター生成に必要な要素のいずれかの少なくとも１つの安定な組み込まれたコピーで修飾される。
【0500】
所定の実施形態では、バキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）は、ＡｃＭＮＰＶバキュロウイルスまたはＢｍＮＰＶバキュロウイルスＢｍＮＰＶに基づく。所定の実施形態では、本開示のバクミドは、ＡｃＭＮＰＶバクミド（すなわち、その修飾されたバリアント）、例えば、ｂｍｏｎ１４２７２、ｖＡｃｅ２５ｋｏまたはｖＡｃｌｅｆ１１ＫＯに基づく。
【0501】
所定の実施形態では、バキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）は、バキュロウイルスｖ－ｃａｔｈ遺伝子が、部分的または完全に欠失（「ｖ－ｃａｔｈ欠失ＢＥＶ」）または変異したＢＥＶである。所定の実施形態では、ＢＥＶは、ｖ－ｃａｔｈ遺伝子を欠き、またはｖ－ｃａｔｈ遺伝子の変異的に不活性化した型を含む。所定の実施形態では、ＢＥＶは、ｖ－ｃａｔｈ遺伝子を欠く。所定の実施形態では、ＢＥＶは、ｖ－ｃａｔｈ遺伝子の変異的に不活性化した型を含む。
【0502】
本開示のウイルス生成バクミドは、所定のバキュロウイルス遺伝子または遺伝子座の欠失を含み得る。
バキュロウイルス／Ｓｆ９システムは、ｒＡＡＶ生成のために確立されたｃＧＭＰ適合性の拡大可能な製造プラットフォームである。バキュロウイルス接種材料は、この製造プロセスのための重要な原料であり、プロセス収率及び生成物品質に対する有意な影響を有し得る。しかしながら、任意の他の生物学に基づく生成プロセスと同様に、バキュロウイルス接種材料の生成においてバッチ毎のばらつきの大きな潜在性が存在する。バキュロウイルス接種材料の各バンクは、ｒＡＡＶ生成において最適に使用するために広範な分析特性化及び最適化されたバイオリアクター生成パラメータを必要とする（これは大規模製造のための時間及び費用を増やす）。そのため、バキュロウイルス接種材料の大きなバンクを生成することが有利であるが、その理由は、これらの大きなバンクは、同じバキュロウイルス接種材料バンクからの複数の製造過程にわたって大規模バイオリアクターにおけるｒＡＡＶの一定かつ繰り返し可能な生成を可能とするからである。
バキュロウイルス／Ｓｆ９システムは、ｒＡＡＶ生成のために確立されたｃＧＭＰ適合性の拡大可能な製造プラットフォームである。バキュロウイルス接種材料は、この製造プロセスのための重要な原料であり、プロセス収率及び生成物品質に対する有意な影響を有し得る。しかしながら、任意の他の生物学に基づく生成プロセスと同様に、バキュロウイルス接種材料の生成においてバッチ毎のばらつきの大きな潜在性が存在する。バキュロウイルス接種材料の各バンクは、ｒＡＡＶ生成において最適に使用するために広範な分析特性化及び最適化されたバイオリアクター生成パラメータを必要とする（これは大規模製造のための時間及び費用を増やす）。そのため、バキュロウイルス接種材料の大きなバンクを生成することが有利であるが、その理由は、これらの大きなバンクは、同じバキュロウイルス接種材料バンクからの複数の製造過程にわたって大規模バイオリアクターにおけるｒＡＡＶの一定かつ繰り返し可能な生成を可能とするからである。
【0503】
所定の実施形態では、バキュロウイルス接種材料バンクは、小規模振盪フラスコ、例えば、３Ｌまたは５Ｌ振盪フラスコを使用して生成され得る。しかしながら、このプロセスは、生成され得るＢＩＩＣ細胞の最大細胞密度が通常は制限され、よって、生じた細胞を機能可能な濃度に濃縮するための遠心分離を必要とする。これは対応して、この方法を使用して生成及び保存され得るバキュロウイルス接種材料バンクの体積（すなわち、量）（約６００ｍＬ）を制限する。このプロセスはまた、開放的オペレーションのために無菌状態の懸案を提供する。
【0504】
所定の実施形態では、バキュロウイルス接種材料バンクは、バイオリアクター、例えば、２０～５０Ｌのバイオリアクターを使用して生成され得る。しかしながら、このプロセスも通常、生成され得るＢＩＩＣ細胞の最大細胞密度が制限され、よって、生じた細胞を機能可能な濃度に濃縮するためのタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）及び／または遠心分離を介する重要な処理を必要とする（３Ｌの培養物質は、約６００ｍＬの濃縮したＢＩＩＣ製剤を生成することが必要とされ、これは１５～２５％の収率に相当する）。これは対応して、この方法を使用して生成及び保存され得るバキュロウイルス接種材料バンクの体積（すなわち、量）（約３０００ｍＬ）を制限する。このプロセスはまた、開放的オペレーションのために無菌状態の懸案を提供する。
【0505】
所定の実施形態では、灌流技術が、バキュロウイルス接種材料バンクの生成において使用され得る。灌流システムは、ポンプ、フィルター及びスクリーンの組み合わせを使用してバイオリアクター内の細胞を保持する一方で、細胞消費生成物を継続的に除去し、細胞代謝によって栄養素が枯渇した培地を置き換える流体循環システムである。所定の実施形態では、灌流システムは、交互タンジェンシャルフロー（ＡＴＦ）灌流システムである。所定の実施形態では、灌流システムは、バキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）の生成中にバイオリアクター内で細胞培地を管理及び循環させるためにバイオリアクターと連携して使用され得る。所定の実施形態では、灌流システムは、大規模で予期しないほど高い細胞密度を有する高品質のＢＩＩＣバンクの生成をサポートするために使用され得る。所定の実施形態では、灌流システムは、７０％超（例えば、７５～８０％、８０～８５％、８５～９０％、９０～９５％または９５～１００％）の感染細胞対生成物細胞収率を提供するために使用され得る。所定の実施形態では、灌流システムは、バイオリアクター内での培地交換、例えば、ＢＩＩＣ細胞を凍結及び保存することを可能にする凍結保存培地での細胞培地の置き換えを実施するために使用され得る。
【0506】
本開示は、バキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を生成するための方法を提供する。所定の実施形態では、本開示は、以下の工程を含む、バキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を生成するための方法を提供する：（ａ）所定体積の細胞培地をバイオリアクターに導入すること；（ｂ）少なくとも１つのウイルス生成細胞（ＶＰＣ）をバイオリアクターに導入し、バイオリアクター内のＶＰＣの数を標的ＶＰＣ細胞密度まで増殖させること；（ｃ）少なくとも１つのバキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）をバイオリアクターに導入することであって、ＢＥＶは、ＡＡＶウイルス発現コンストラクトまたはＡＡＶペイロードコンストラクトを含む、導入すること；（ｄ）少なくとも１つのＢＥＶを少なくとも１つのＶＰＣに感染させることを可能にする条件下でバイオリアクター内でＶＰＣ及びＢＥＶの混合物をインキュベーションして、バキュロウイルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を生成すること；（ｅ）バイオリアクター内のＢＩＩＣの数を標的ＢＩＩＣ細胞密度に到達させることを可能にする条件下でバイオリアクターをインキュベーションすること；及び（ｆ）バイオリアクターからＢＩＩＣを収穫すること。所定の実施形態では、バイオリアクターは、少なくとも５Ｌ、１０Ｌ、２０Ｌ、５０Ｌ、１００Ｌ、または２００Ｌの体積を有する。所定の実施形態では、バイオリアクター内の細胞培地の体積（すなわち、機能体積）は、少なくとも５Ｌ、１０Ｌ、２０Ｌ、５０Ｌ、１００Ｌ、または２００Ｌである。
【0507】
所定の実施形態では、ＢＥＶ導入時のＶＰＣ密度は、１．０×１０５～２．５×１０５、２．５×１０５～５．０×１０５、５．０×１０５～７．５×１０５、７．５×１０５～１．０×１０６、１．０×１０６～５．０×１０６、１．０×１０６～２．０×１０６、１．５×１０６～２．５×１０６、２．０×１０６～３．０×１０６、２．５×１０６～３．５×１０６、３．０×１０６～４．０×１０６、３．５×１０６～４．５×１０６、４．０×１０６～５．０×１０６、４．５×１０６～５．５×１０６、５．０×１０６～１．０×１０７、５．０×１０６～６．０×１０６、５．５×１０６～６．５×１０６、６．０×１０６～７．０×１０６、６．５×１０６～７．５×１０６、７．０×１０６～８．０×１０６、７．５×１０６～８．５×１０６、８．０×１０６～９．０×１０６、８．５×１０６～９．５×１０６、９．０×１０６～１．０×１０７、９．５×１０６～１．５×１０７、１．０×１０７～５．０×１０７、または５．０×１０７～１．０×１０８細胞／ｍＬである。所定の実施形態では、ＢＥＶ導入時のＶＰＣ密度は、５．０×１０５、６．０×１０５、７．０×１０５、８．０×１０５、９．０×１０５、１．０×１０６、１．５×１０６、２．０×１０６、２．５×１０６、３．０×１０６、３．５×１０６、４．０×１０６、４．５×１０６、５．０×１０６、５．５×１０６、６．０×１０６、６．５×１０６、７．０×１０６、７．５×１０６、８．０×１０６、８．５×１０６、９．０×１０６、９．５×１０６、１．０×１０７、１．５×１０７、２．０×１０７、２．５×１０７、３．０×１０７、４．０×１０７、５．０×１０７、６．０×１０７、７．０×１０７、８．０×１０７、または９．０×１０７細胞／ｍＬである。
【0508】
所定の実施形態では、ＢＥＶ導入時の標的ＶＰＣ細胞密度は、１．５～４．０×１０６細胞／ｍＬである。所定の実施形態では、ＢＥＶ導入時の標的ＶＰＣ細胞密度は、２．０～３．５×１０６細胞／ｍＬである。
【0509】
所定の実施形態では、ＢＥＶは、ＶＰＣに対するＢＥＶの標的感染多重度（ＭＯＩ）でバイオリアクターに導入される。所定の実施形態では、ＢＥＶのＭＯＩは、０．０００５～０．００３、またはより具体的には０．００１～０．００２である。
【0510】
所定の実施形態では、バイオリアクターは、バイオリアクター内の細胞培地を管理するための灌流システムを含み得る。所定の実施形態では、灌流システムは、交互タンジェンシャルフロー（ＡＴＦ）灌流システムである。所定の実施形態では、灌流システムは、バイオリアクター内のＶＰＣ及びＢＩＩＣＳの少なくとも９０％を保持しつつ、バイオリアクターにおける培地の少なくとも一部を置き換える。所定の実施形態では、灌流システムは、バイオリアクター内の細胞培地から細胞消費生成物を除去する。所定の実施形態では、灌流システムは、細胞代謝によって栄養素が枯渇した細胞培地を置き換える。所定の実施形態では、灌流システムは、培地を、ＢＩＩＣ細胞の凍結及び貯蔵を可能にする凍結保存媒体に置き換える。所定の実施形態では、灌流システムは、細胞培地を、成長または生成強化因子で補充された細胞培地に置き換えて、ＡＡＶ生成物の質及び量を増大させる。
【0511】
所定の実施形態では、ＢＩＩＣは、特定のＢＩＩＣ細胞密度でバイオリアクターから収穫される。所定の実施形態では、バイオリアクターから収穫されたＢＩＩＣは、特定のＢＩＩＣ細胞密度を有する。所定の実施形態では、収穫時のＢＩＩＣ細胞密度は、６．０～１８．０×１０６細胞／ｍＬ、８．０～１６．５×１０６細胞／ｍＬ、１０．０～１６．５×１０６細胞／ｍＬである。
【0512】
その他
所定の実施形態では、発現宿主は、限定されないが、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、またはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ属内の細菌種を含む。
所定の実施形態では、発現宿主は、限定されないが、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、またはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ属内の細菌種を含む。
【0513】
所定の実施形態では、細胞の染色体内に安定的に組み込まれたＡＡＶのｒｅｐ及びｃａｐ遺伝子を含む宿主細胞は、ＡＡＶ粒子生成のために使用され得る。非限定的な例では、ＡＡＶのｒｅｐ遺伝子及びＡＡＶのｃａｐ遺伝子の少なくとも２つのコピーをその染色体に安定的に組み込まれた宿主細胞は、米国特許番号７２３８５２６（その内容は、本開示と矛盾しない限り、ウイルス粒子の生成に関してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の方法及びコンストラクトに従ってＡＡＶ粒子を生成するために使用され得る。
【0514】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＵＳ２００３００９２１６１及びＥＰ１１８３３８０（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、ウイルス粒子の生成に関してそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、宿主細胞における稀な制限酵素の発現の調整を可能にする核酸配列を含む分子で安定的に形質転換された宿主細胞において生成され得る。
【0515】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子を生成するための生成方法及び細胞株は、限定されないが、ＰＣＴ／ＵＳ１９９６／０１０２４５、ＰＣＴ／ＵＳ１９９７／０１５７１６、ＰＣＴ／ＵＳ１９９７／０１５６９１、ＰＣＴ／ＵＳ１９９８／０１９４７９、ＰＣＴ／ＵＳ１９９８／０１９４６３、ＰＣＴ／ＵＳ２０００／０００４１５、ＰＣＴ／ＵＳ２０００／０４０８７２、ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１６６１４、ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０１００５５、ＰＣＴ／ＵＳ１９９９／００５８７０、ＰＣＴ／ＵＳ２０００／００４７５５、米国特許出願番号ＵＳ０８／５４９４８９、ＵＳ０８／４６２０１４、ＵＳ０９／６５９２０３、ＵＳ１０／２４６４４７、ＵＳ１０／４６５３０２、米国特許番号ＵＳ６２８１０１０、ＵＳ６２７０９９６、ＵＳ６２６１５５１、ＵＳ５７５６２８３（ＮＩＨに譲渡された）、ＵＳ６４２８９８８、ＵＳ６２７４３５４、ＵＳ６９４３０１９、ＵＳ６４８２６３４、（ＮＩＨに譲渡された：ＵＳ７２３８５２６、ＵＳ６４７５７６９）、ＵＳ６３６５３９４（ＮＩＨに譲渡された）、ＵＳ７４９１５０８、ＵＳ７２９１４９８、ＵＳ７０２２５１９、ＵＳ６４８５９６６、ＵＳ６９５３６９０、ＵＳ６２５８５９５、ＥＰ２０１８４２１、ＥＰ１０６４３９３、ＥＰ１１６３３５４、ＥＰ８３５３２１、ＥＰ９３１１５８、ＥＰ９５０１１１、ＥＰ１０１５６１９、ＥＰ１１８３３８０、ＥＰ２０１８４２１、ＥＰ１２２６２６４、ＥＰ１６３６３７０、ＥＰ１１６３３５４、ＥＰ１０６４３９３、ＵＳ２００３００３２６１３、ＵＳ２００２０１０２７１４、ＵＳ２００３００７３２３２、ＵＳ２００３００４０１０１（ＮＩＨに譲渡された）、ＵＳ２００６０００３４５１、ＵＳ２００２００９０７１７、ＵＳ２００３００９２１６１、ＵＳ２００７０２３１３０３、ＵＳ２００６０２１１１１５、ＵＳ２００９０２７５１０７、ＵＳ２００７００４０４２、ＵＳ２００３０１１９１９１、ＵＳ２００２００１９０５０（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に教示されているものを含み得る。
【0516】
ウイルス生成システム
大規模生成
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子生成は、生成の規模を増加させるために改変され得る。本開示に従う大規模ウイルス生成方法は、米国特許番号５，７５６，２８３、６，２５８，５９５、６，２６１，５５１、６，２７０，９９６、６，２８１，０１０、６，３６５，３９４、６，４７５，７６９、６，４８２，６３４、６，４８５，９６６、６，９４３，０１９、６，９５３，６９０、７，０２２，５１９、７，２３８，５２６、７，２９１，４９８及び７，４９１，５０８または国際公開番号ＷＯ１９９６０３９５３０、ＷＯ１９９８０１００８８、ＷＯ１９９９０１４３５４、ＷＯ１９９９０１５６８５、ＷＯ１９９９０４７６９１、ＷＯ２００００５５３４２、ＷＯ２００００７５３５３及びＷＯ２００１０２３５９７（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により参照により本明細書に組み込まれる）に教示されているプロセスまたは処理工程のいずれかを含み得る。
大規模生成
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子生成は、生成の規模を増加させるために改変され得る。本開示に従う大規模ウイルス生成方法は、米国特許番号５，７５６，２８３、６，２５８，５９５、６，２６１，５５１、６，２７０，９９６、６，２８１，０１０、６，３６５，３９４、６，４７５，７６９、６，４８２，６３４、６，４８５，９６６、６，９４３，０１９、６，９５３，６９０、７，０２２，５１９、７，２３８，５２６、７，２９１，４９８及び７，４９１，５０８または国際公開番号ＷＯ１９９６０３９５３０、ＷＯ１９９８０１００８８、ＷＯ１９９９０１４３５４、ＷＯ１９９９０１５６８５、ＷＯ１９９９０４７６９１、ＷＯ２００００５５３４２、ＷＯ２００００７５３５３及びＷＯ２００１０２３５９７（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により参照により本明細書に組み込まれる）に教示されているプロセスまたは処理工程のいずれかを含み得る。
【0517】
ＡＡＶ粒子生成規模を増加させる方法は典型的には、ウイルス生成細胞の数を増加させることを含む。所定の実施形態では、ウイルス生成細胞は、接着細胞を含む。接着ウイルス生成細胞によってＡＡＶ粒子生成の規模を増加させるために、より大きな細胞培養表面が必要とされる。所定の実施形態では、大規模生成方法は、細胞培養表面を増加させるためのローラーボトルの使用を含む。増加した表面積を有する他の細胞培養基材は、当該技術分野で知られている。増加した表面積を有する追加の接着細胞培養生成物の例は、限定されないが、ｉＣＥＬＬｉｓ（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐ，Ｐｏｒｔ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＮＹ）、ＣｅｌｌＳＴＡＣＫ（登録商標）、ＣｅｌｌＣｕｂｅ（登録商標）（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｒｐ．，Ｃｏｒｎｉｎｇ，ＮＹ）及びＮｕｎｃ（商標）Ｃｅｌｌ Ｆａｃｔｏｒｙ（商標）（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を含む。所定の実施形態では、大規模接着細胞表面は、約１，０００ｃｍ２～約１００，０００ｃｍ２を含み得る。
【0518】
所定の実施形態では、本開示の大規模ウイルス生成方法は、浮遊細胞培養物の使用を含み得る。浮遊細胞培養は、細胞の数の有意な増加を可能にし得る。典型的には、約１０～５０ｃｍ２の表面積上で成長し得る接着細胞の数は、浮遊状態で約１ｃｍ３の体積で成長し得る。
【0519】
所定の実施形態では、大規模細胞培養物は、約１０７～約１０９細胞、約１０８～約１０１０細胞、約１０９～約１０１２細胞または少なくとも１０１２細胞を含み得る。所定の実施形態では、大規模培養物は、約１０９～約１０１２、約１０１０～約１０１３、約１０１１～約１０１４、約１０１２～約１０１５または少なくとも１０１５個のＡＡＶ粒子を生成し得る。
【0520】
大規模培養形式での複製細胞のトランスフェクションは、当該技術分野で知られている任意の方法に従って行われ得る。大規模接着細胞培養物のため、トランスフェクション方法は、限定されないが、無機化合物（例えば、リン酸カルシウム）、有機化合物（例えば、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ））の使用または非化学的方法（例えば、エレクトロポレーション）の使用を含み得る。浮遊状態で成長する細胞を用いる場合、トランスフェクション方法は、限定されないが、無機化合物（例えば、リン酸カルシウム）、有機化合物（例えば、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ））の使用または非化学的方法（例えば、エレクトロポレーション）の使用を含み得る。所定の実施形態では、大規模浮遊培養物のトランスフェクションは、Ｆｅｎｇ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．，２００８．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ａｐｐｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．５０：１２１－３２（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の「Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ」というタイトルのセクションに従って行われ得る。そのような実施形態によれば、ＰＥＩ－ＤＮＡ複合体が、トランスフェクションされるプラスミドの導入のために形成され得る。所定の実施形態では、ＰＥＩ－ＤＮＡ複合体を用いてトランスフェクションされている細胞は、トランスフェクションの前に「ショック」を受け得る。これは、細胞培養温度を約１時間の期間４℃に低下させることを含む。所定の実施形態では、細胞培養物は、約１０分～約５時間の期間ショックを受け得る。所定の実施形態では、細胞培養物は、約０℃～約２０℃の温度でショックを受け得る。
【0521】
所定の実施形態では、トランスフェクションは、１つ以上のペイロードコンストラクトからの核酸の発現を減少させるためのＲＮＡエフェクター分子の発現のための１つ以上のベクターを含み得る。そのような方法は、発現するペイロードコンストラクトに消費される細胞リソースを減少させることによってＡＡＶ粒子の生成を向上させ得る。所定の実施形態では、そのような方法は、米国公開番号ＵＳ２０１４／００９９６６６（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）で教示されているものに従って行われ得る。
【0522】
バイオリアクター
所定の実施形態では、細胞培養バイオリアクターが、ＡＡＶ粒子の大規模生成のために使用され得る。所定の実施形態では、バイオリアクターは、撹拌タンクリアクターを含む。そのようなリアクターは通常、撹拌機（例えば、インペラ）を有する典型的には形状が円筒の容器を含む。所定の実施形態では、そのようなバイオリアクター容器は、容器温度を制御するために及び／または周囲温度変化からの影響を最小化するためにウォータージャケット内に配置され得る。
所定の実施形態では、細胞培養バイオリアクターが、ＡＡＶ粒子の大規模生成のために使用され得る。所定の実施形態では、バイオリアクターは、撹拌タンクリアクターを含む。そのようなリアクターは通常、撹拌機（例えば、インペラ）を有する典型的には形状が円筒の容器を含む。所定の実施形態では、そのようなバイオリアクター容器は、容器温度を制御するために及び／または周囲温度変化からの影響を最小化するためにウォータージャケット内に配置され得る。
【0523】
バイオリアクター容器の容積は、約５００ｍｌ～約２Ｌ、約１Ｌ～約５Ｌ、約２．５Ｌ～約２０Ｌ、約１０Ｌ～約５０Ｌ、約２５Ｌ～約１００Ｌ、約７５Ｌ～約５００Ｌ、約２５０Ｌ～約２，０００Ｌ、約１，０００Ｌ～約１０，０００Ｌ、約５，０００Ｌ～約５０，０００Ｌまたは少なくとも５０，０００Ｌのサイズの範囲であり得る。容器の底は、丸型または平坦であり得る。所定の実施形態では、動物細胞培養物は、丸型の容器の底を有するバイオリアクター内で維持され得る。
【0524】
所定の実施形態では、バイオリアクター容器は、サーモサーキュレーターの使用により温められ得る。サーモサーキュレーターは、ウォータージャケットの周りの加熱された水を圧送する。所定の実施形態では、加熱された水は、バイオリアクター容器内に存在するパイプ（例えば、コイルパイプ）を介して圧送され得る。所定の実施形態では、暖かい空気が、限定されないが、培地の直上の空気スペースを含む、バイオリアクターの周りで循環され得る。また、ｐＨ及びＣＯ２レベルは、細胞生存性を最適化するために維持され得る。
【0525】
所定の実施形態では、バイオリアクターは、中空糸リアクターを含み得る。中空糸バイオリアクターは、足場依存性細胞及び足場非依存性細胞の両方の培養をサポートし得る。さらにバイオリアクターは、限定されないが、充填床または固定床バイオリアクターを含み得る。そのようなバイオリアクターは、接着細胞付着のためのガラスビーズを有する容器を含み得る。さらに充填床リアクターは、セラミックビーズを含み得る。
【0526】
所定の実施形態では、ウイルス粒子は、使い捨て可能なバイオリアクターの使用を介して生成される。所定の実施形態では、バイオリアクターは、ＧＥ ＷＡＶＥバイオリアクター、ＧＥ Ｘｃｅｌｌｅｒａｘバイオリアクター、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｂｉｏｓｔａｔバイオリアクター、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｈｙｃｌｏｎｅバイオリアクター、またはＰａｌｌ Ａｌｌｅｇｒｏバイオリアクターを含み得る。
【0527】
所定の実施形態では、細胞バイオリアクター培養におけるＡＡＶ粒子生成は、米国特許番号５，０６４７６４、６，１９４，１９１、６，５６６，１１８、８，１３７，９４８または米国特許出願番号ＵＳ２０１１／０２２９９７１（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）で教示されている方法またはシステムに従って行われ得る。
【0528】
所定の実施形態では、灌流技術が、ウイルス粒子の生成において使用され得る。灌流システムは、フィルター及びスクリーンを使用してバイオリアクター内の細胞を保持する一方で、細胞消費生成物及び細胞代謝によって栄養素が枯渇した培地を継続的に除去する流体循環システムである。所定の実施形態では、灌流システムは、交互タンジェンシャルフロー（ＡＴＦ）灌流システムである。所定の実施形態では、灌流システムは、ウイルス粒子、例えば、ＡＡＶウイルス粒子の生成の生成中にバイオリアクター内で細胞培地を管理及び循環させるためにバイオリアクターと連携して使用され得る。所定の実施形態では、灌流システムは、大規模で予期しないほど高い細胞密度を有する高品質のＡＡＶウイルス粒子の生成をサポートするために使用され得る。所定の実施形態では、灌流システムは、バイオリアクター内での培地交換、例えば、ＡＡＶ生成物の質及び量を増加させるために成長または生成強化因子が補充された培地での細胞培地の置き換えを実施するために使用され得る。
【0529】
治療物質の大きなバッチは、臨床研究一貫性を保証し、複数のより小さな製造過程に起因する治療的及び統計的ばらつきを最小限にするので、遺伝子療法臨床開発活動のための単一生成過程においてＡＡＶ粒子の大きなバッチを生成することが有利である。治療物質の大きなバッチは、複数のより小さな製造過程に起因するばらつきならびに小バッチ生成に関連する品質制御及び生成物分析における対応する複雑な要因を最小限にするので、商業的製品開発活動のための単一生成過程においてＡＡＶ粒子の大きなバッチを生成することが有利である。
【0530】
ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）混合物の増殖
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子またはウイルスベクターは、ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）、例えば、昆虫細胞において生成され得る。生成細胞は、細胞バンク（ＣＢ）から調達され得、しばしば凍結細胞バンクにおいて保存される。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子またはウイルスベクターは、ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）、例えば、昆虫細胞において生成され得る。生成細胞は、細胞バンク（ＣＢ）から調達され得、しばしば凍結細胞バンクにおいて保存される。
【0531】
所定の実施形態では、細胞バンクからのウイルス生成細胞は、凍結形態で提供される。凍結細胞のバイアルは、典型的には氷結晶が消散するまで解凍される。所定の実施形態では、凍結細胞は、１０～５０℃、１５～４０℃、２０～３０℃、２５～５０℃、３０～４５℃、３５～４０℃、または３７～３９℃の間の温度で解凍される。所定の実施形態では、凍結ウイルス生成細胞は、加熱水浴を使用して解凍される。
【0532】
所定の実施形態では、解凍されたＣＢ細胞混合物は、１．０×１０４～１．０×１０９細胞／ｍＬの細胞密度を有する。所定の実施形態では、解凍されたＣＢ細胞混合物は、１．０×１０４～２．５×１０４細胞／ｍＬ、２．５×１０４～５．０×１０４細胞／ｍＬ、５．０×１０４～７．５×１０４細胞／ｍＬ、７．５×１０４～１．０×１０５細胞／ｍＬ、１．０×１０５～２．５×１０５細胞／ｍＬ、２．５×１０５～５．０×１０５細胞／ｍＬ、５．０×１０５～７．５×１０５細胞／ｍＬ、７．５×１０５～１．０×１０６細胞／ｍＬ、１．０×１０６～２．５×１０６細胞／ｍＬ、２．５×１０６～５．０×１０６細胞／ｍＬ、５．０×１０６～７．５×１０６細胞／ｍＬ、７．５×１０６～１．０×１０７細胞／ｍＬ、１．０×１０７～２．５×１０７細胞／ｍＬ、２．５×１０７～５．０×１０７細胞／ｍＬ、５．０×１０７～７．５×１０７細胞／ｍＬ、７．５×１０７～１．０×１０８細胞／ｍＬ、１．０×１０８～２．５×１０８細胞／ｍＬ、２．５×１０８～５．０×１０８細胞／ｍＬ、５．０×１０８～７．５×１０８細胞／ｍＬ、または７．５×１０８～１．０×１０９細胞／ｍＬの細胞密度を有する。
【0533】
所定の実施形態では、ＣＢ細胞混合物の体積が増大される。このプロセスは一般的に、シードトレイン、シード増殖、またはＣＢ細胞増殖と称される。細胞／シード増殖は、逐次より多くなる機能体積を使用する複数の増殖工程を介して細胞混合物を播種し、増殖させる逐次工程を含み得る。所定の実施形態では、細胞増殖は、１、２、３、４、５、６、７つまたは７つを超える増殖工程を含み得る。所定の実施形態では、細胞増殖における機能体積は、以下の機能体積または機能体積範囲のうちの１つ以上を含み得る：５ｍＬ、１０ｍＬ、２０ｍＬ、５～２０ｍＬ、２５ｍＬ、３０ｍＬ、４０ｍＬ、５０ｍＬ、２０～５０ｍＬ、７５ｍＬ、１００ｍＬ、１２５ｍＬ、１５０ｍＬ、１７５ｍＬ、２００ｍＬ、５０～２００ｍＬ、２５０ｍＬ、３００ｍＬ、４００ｍＬ、５００ｍＬ、７５０ｍＬ、１０００ｍＬ、２５０～１０００ｍＬ、１２５０ｍＬ、１５００ｍＬ、１７５０ｍＬ、２０００ｍＬ、１０００～２０００ｍＬ、２２５０ｍＬ、２５００ｍＬ、２７５０ｍＬ、３０００ｍＬ、２０００～３０００ｍＬ、３５００ｍＬ、４０００ｍＬ、４５００ｍＬ、５０００ｍＬ、３０００～５０００ｍＬ、５．５Ｌ、６．０Ｌ、７．０Ｌ、８．０Ｌ、９．０Ｌ、１０．０Ｌ、及び５．０～１０．０Ｌ。
【0534】
所定の実施形態では、第１の増殖した細胞混合物からの所定体積の細胞は、第２の別個のシードトレイン／シード増殖を（解凍されたＣＢ細胞混合物を使用する代わりに）播種するために使用され得る。このプロセスは一般的に、回転式（ｒｏｌｌｉｎｇ）接種と称される。所定の実施形態では、ローリング接種は、一連の２つ以上の（例えば、２つ、３つ、４つまたは５つの）分離したシードトレイン／シード増殖において使用される。
【0535】
所定の実施形態では、大体積細胞増殖は、バイオリアクター、例えば、ＧＥ ＷＡＶＥバイオリアクター、ＧＥ Ｘｃｅｌｌｅｒａｘバイオリアクター、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｂｉｏｓｔａｔバイオリアクター、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｈｙｃｌｏｎｅバイオリアクター、またはＰａｌｌ Ａｌｌｅｇｒｏバイオリアクターの使用を含み得る。
【0536】
所定の実施形態では、機能体積内の細胞密度は、標的アウトプット細胞密度まで増殖される。所定の実施形態では、増殖工程のアウトプット細胞密度は、１．０×１０５～５．０×１０５、５．０×１０５～１．０×１０６、１．０×１０６～５．０×１０６、５．０×１０６～１．０×１０７、１．０×１０７～５．０×１０７、５．０×１０７～１．０×１０８、５．０×１０５、６．０×１０５、７．０×１０５、８．０×１０５、９．０×１０５、１．０×１０６、２．０×１０６、３．０×１０６、４．０×１０６、５．０×１０６、６．０×１０６、７．０×１０６、８．０×１０６、９．０×１０６、１．０×１０７、２．０×１０７、３．０×１０７、４．０×１０７、５．０×１０７、６．０×１０７、７．０×１０７、８．０×１０７、または９．０×１０７細胞／ｍＬである。
【0537】
所定の実施形態では、機能体積のアウトプット細胞密度は、より多い逐次機能体積のための播種細胞密度を提供する。所定の実施形態では、増殖工程の播種細胞密度は、１．０×１０５～５．０×１０５、５．０×１０５～１．０×１０６、１．０×１０６～５．０×１０６、５．０×１０６～１．０×１０７、１．０×１０７～５．０×１０７、５．０×１０７～１．０×１０８、５．０×１０５、６．０×１０５、７．０×１０５、８．０×１０５、９．０×１０５、１．０×１０６、２．０×１０６、３．０×１０６、４．０×１０６、５．０×１０６、６．０×１０６、７．０×１０６、８．０×１０６、９．０×１０６、１．０×１０７、２．０×１０７、３．０×１０７、４．０×１０７、５．０×１０７、６．０×１０７、７．０×１０７、８．０×１０７、または９．０×１０７細胞／ｍＬである。
【0538】
所定の実施形態では、細胞増殖は、１～５０日間持続し得る。各細胞増殖工程または総細胞増殖は、１～１０日、１～５日、１～３日、２～３日、２～４日、２～５日、２～６日、３～４日、３～５日、３～６日、３～８日、４～５日、４～６日、４～８日、５～６日、または５～８日の間持続し得る。所定の実施形態では、各細胞増殖工程または総細胞増殖は、１～１００世代、１～１０００世代、１００～１０００世代、１００世代以上、または１０００世代以上の間持続し得る。
【0539】
所定の実施形態では、感染またはトランスフェクションされた生成細胞は、本開示に示されているように、ＣＢ細胞混合物と同じ様式で増殖され得る。
ウイルス生成細胞の感染
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）、例えば、昆虫細胞において、ＡＡＶ発現コンストラクトを含むウイルスベクター及び／またはＡＡＶペイロードコンストラクトを含むウイルスベクターでＶＰＣを感染させることによって生成される。所定の実施形態では、ＶＰＣは、ＡＡＶ発現コンストラクトを含む発現ＢＥＶ及びＡＡＶペイロードコンストラクトを含むペイロードＢＥＶで感染される。
ウイルス生成細胞の感染
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、ウイルス生成細胞（ＶＰＣ）、例えば、昆虫細胞において、ＡＡＶ発現コンストラクトを含むウイルスベクター及び／またはＡＡＶペイロードコンストラクトを含むウイルスベクターでＶＰＣを感染させることによって生成される。所定の実施形態では、ＶＰＣは、ＡＡＶ発現コンストラクトを含む発現ＢＥＶ及びＡＡＶペイロードコンストラクトを含むペイロードＢＥＶで感染される。
【0540】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ発現コンストラクト及びＡＡＶペイロードコンストラクトの両方を含むウイルスベクターでＶＰＣを感染させることによって生成される。所定の実施形態では、ＶＰＣは、ＡＡＶ発現コンストラクト及びＡＡＶペイロードコンストラクトの両方を含む単一のＢＥＶで感染される。
【0541】
所定の実施形態では、ＶＰＣ（昆虫細胞など）は、以下の工程を含む感染プロセスにおいて感染ＢＩＩＣを使用して感染される：（ｉ）ＶＰＣの集合物が生成バイオリアクターに播種される；（ｉｉ）播種されたＶＰＣは任意に標的機能体積及び細胞密度まで増殖され得る；（ｉｉｉ）発現ＢＥＶを含む感染ＢＩＩＣ及びペイロードＢＥＶを含む感染ＢＩＩＣが生成バイオリアクターに注入され、感染したウイルス生成細胞がもたらされる；及び（ｉｖ）感染したウイルス生成細胞をインキュベーションしてウイルス生成細胞内のＡＡＶ粒子を生成する。
【0542】
所定の実施形態では、感染時のＶＰＣ密度は、１．０×１０５～２．５×１０５、２．５×１０５～５．０×１０５、５．０×１０５～７．５×１０５、７．５×１０５～１．０×１０６、１．０×１０６～５．０×１０６、１．０×１０６～２．０×１０６、１．５×１０６～２．５×１０６、２．０×１０６～３．０×１０６、２．５×１０６～３．５×１０６、３．０×１０６～３．４×１０６、３．０×１０６～４．０×１０６、３．５×１０６～４．５×１０６、４．０×１０６～５．０×１０６、４．５×１０６～５．５×１０６、５．０×１０６～１．０×１０７、５．０×１０６～６．０×１０６、５．５×１０６～６．５×１０６、６．０×１０６～７．０×１０６、６．５×１０６～７．５×１０６、７．０×１０６～８．０×１０６、７．５×１０６～８．５×１０６、８．０×１０６～９．０×１０６、８．５×１０６～９．５×１０６、９．０×１０６～１．０×１０７、９．５×１０６～１．５×１０７、１．０×１０７～５．０×１０７、または５．０×１０７～１．０×１０８細胞／ｍＬである。所定の実施形態では、感染時のＶＰＣ密度は、５．０×１０５、６．０×１０５、７．０×１０５、８．０×１０５、９．０×１０５、１．０×１０６、１．５×１０６、２．０×１０６、２．５×１０６、３．０×１０６、３．１×１０６、３．２×１０６、３．３×１０６、３．４×１０６、３．５×１０６、４．０×１０６、４．５×１０６、５．０×１０６、５．５×１０６、６．０×１０６、６．５×１０６、７．０×１０６、７．５×１０６、８．０×１０６、８．５×１０６、９．０×１０６、９．５×１０６、１．０×１０７、１．５×１０７、２．０×１０７、２．５×１０７、３．０×１０７、４．０×１０７、５．０×１０７、６．０×１０７、７．０×１０７、８．０×１０７、または９．０×１０７細胞／ｍＬである。所定の実施形態では、感染時のＶＰＣ密度は、２．０～３．５×１０６細胞／ｍＬである。所定の実施形態では、感染時のＶＰＣ密度は、３．５～５．０×１０６細胞／ｍＬである。所定の実施形態では、感染時のＶＰＣ密度は、５．０～７．５×１０６細胞／ｍＬである。所定の実施形態では、感染時のＶＰＣ密度は、５．０～１０．０×１０６細胞／ｍＬである。
【0543】
図５Ａ、図５Ｂ、図６Ａ及び図６Ｂは、約１：３００Ｋｖ／ｖのＶＰＣ対ＢＩＩＣＲｅｐ／Ｃａｐ比で組み合わされた３．０～３．４×１０６細胞／ｍＬの間、特に３．２×１０６細胞／ｍＬのトランスフェクション／感染時のＶＰＣ密度が、有益なＡＡＶ力価（ｖｇ／ｍＬ）及びカプシド完全％を提供することを示している。
【0544】
所定の実施形態では、感染ＢＩＩＣは、ＶＰＣ対ＢＩＩＣの標的比でＶＰＣと組み合わされる。所定の実施形態では、ＶＰＣ対ＢＩＩＣ感染比（体積対体積）は、１．０×１０３～５．０×１０３、５．０×１０３～１．０×１０４、１．０×１０４～５．０×１０４、５．０×１０４～１．０×１０５、１．０×１０５～５．０×１０５、５．０×１０５～１．０×１０６、１．０×１０３、２．０×１０３、３．０×１０３、４．０×１０３、５．０×１０３、６．０×１０３、７．０×１０３、８．０×１０３、９．０×１０３、１．０×１０４、２．０×１０４、３．０×１０４、４．０×１０４、５．０×１０４、６．０×１０４、７．０×１０４、８．０×１０４、または９．０×１０４、１．０×１０５、２．０×１０５、３．０×１０５、４．０×１０５、５．０×１０５、６．０×１０５、７．０×１０５、８．０×１０５、または９．０×１０５ＢＩＩＣ／ＶＰＣである。所定の実施形態では、ＶＰＣ対ＢＩＩＣ感染比（細胞対細胞）は、１．０×１０３～５．０×１０３、５．０×１０３～１．０×１０４、１．０×１０４～５．０×１０４、５．０×１０４～１．０×１０５、１．０×１０５～５．０×１０５、５．０×１０５～１．０×１０６、１．０×１０３、２．０×１０３、３．０×１０３、４．０×１０３、５．０×１０３、６．０×１０３、７．０×１０３、８．０×１０３、９．０×１０３、１．０×１０４、２．０×１０４、３．０×１０４、４．０×１０４、５．０×１０４、６．０×１０４、７．０×１０４、８．０×１０４、または９．０×１０４、１．０×１０５、２．０×１０５、３．０×１０５、４．０×１０５、５．０×１０５、６．０×１０５、７．０×１０５、８．０×１０５、または９．０×１０５ＢＩＩＣ／ＶＰＣである。
【0545】
所定の実施形態では、発現ＢＥＶを含む感染ＢＩＩＣは、ＶＰＣ対ＢＩＩＣの標的比でＶＰＣと組み合わされる。所定の実施形態では、ＶＰＣ対ＢＩＩＣ感染比（体積対体積）は、１．０×１０３～５．０×１０３、５．０×１０３～１．０×１０４、１．０×１０４～５．０×１０４、５．０×１０４～１．０×１０５、１．０×１０５～５．０×１０５、５．０×１０５～１．０×１０６、１．０×１０３、２．０×１０３、３．０×１０３、４．０×１０３、５．０×１０３、６．０×１０３、７．０×１０３、８．０×１０３、９．０×１０３、１．０×１０４、２．０×１０４、３．０×１０４、４．０×１０４、５．０×１０４、６．０×１０４、７．０×１０４、８．０×１０４、または９．０×１０４、１．０×１０５、２．０×１０５、３．０×１０５、４．０×１０５、５．０×１０５、６．０×１０５、７．０×１０５、８．０×１０５、または９．０×１０５ＢＩＩＣ／ＶＰＣである。所定の実施形態では、ＶＰＣ対ＢＩＩＣ感染比（細胞対細胞）は、１．０×１０３～５．０×１０３、５．０×１０３～１．０×１０４、１．０×１０４～５．０×１０４、５．０×１０４～１．０×１０５、１．０×１０５～５．０×１０５、５．０×１０５～１．０×１０６、１．０×１０３、２．０×１０３、３．０×１０３、４．０×１０３、５．０×１０３、６．０×１０３、７．０×１０３、８．０×１０３、９．０×１０３、１．０×１０４、２．０×１０４、３．０×１０４、４．０×１０４、５．０×１０４、６．０×１０４、７．０×１０４、８．０×１０４、または９．０×１０４、１．０×１０５、２．０×１０５、３．０×１０５、４．０×１０５、５．０×１０５、６．０×１０５、７．０×１０５、８．０×１０５、または９．０×１０５ＢＩＩＣ／ＶＰＣである。
【0546】
所定の実施形態では、ペイロードＢＥＶを含む感染ＢＩＩＣは、ＶＰＣ対ＢＩＩＣの標的比でＶＰＣと組み合わされる。所定の実施形態では、ＶＰＣ対ＢＩＩＣ感染比（体積対体積）は、１．０×１０３～５．０×１０３、５．０×１０３～１．０×１０４、１．０×１０４～５．０×１０４、５．０×１０４～１．０×１０５、１．０×１０５～５．０×１０５、５．０×１０５～１．０×１０６、１．０×１０３、２．０×１０３、３．０×１０３、４．０×１０３、５．０×１０３、６．０×１０３、７．０×１０３、８．０×１０３、９．０×１０３、１．０×１０４、２．０×１０４、３．０×１０４、４．０×１０４、５．０×１０４、６．０×１０４、７．０×１０４、８．０×１０４、または９．０×１０４、１．０×１０５、２．０×１０５、３．０×１０５、４．０×１０５、５．０×１０５、６．０×１０５、７．０×１０５、８．０×１０５、または９．０×１０５ＢＩＩＣ／ＶＰＣである。所定の実施形態では、ＶＰＣ対ＢＩＩＣ感染比（細胞対細胞）は、１．０×１０３～５．０×１０３、５．０×１０３～１．０×１０４、１．０×１０４～５．０×１０４、５．０×１０４～１．０×１０５、１．０×１０５～５．０×１０５、５．０×１０５～１．０×１０６、１．０×１０３、２．０×１０３、３．０×１０３、４．０×１０３、５．０×１０３、６．０×１０３、７．０×１０３、８．０×１０３、９．０×１０３、１．０×１０４、２．０×１０４、３．０×１０４、４．０×１０４、５．０×１０４、６．０×１０４、７．０×１０４、８．０×１０４、または９．０×１０４、１．０×１０５、２．０×１０５、３．０×１０５、４．０×１０５、５．０×１０５、６．０×１０５、７．０×１０５、８．０×１０５、または９．０×１０５ＢＩＩＣ／ＶＰＣである。
【0547】
所定の実施形態では、発現ＢＥＶを含む感染ＢＩＩＣ及びペイロードＢＥＶを含む感染ＢＩＩＣは、標的ＢＩＩＣ対ＢＩＩＣ比でＶＰＣと組み合わされる。所定の実施形態では、ペイロードＢＩＩＣに対する発現（Ｒｅｐ／Ｃａｐ）ＢＩＩＣの比は、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４．５：１、４：１、３．５：１、３：１、２．５：１、２：１、１．５：１、１：１、１：１．５、１：２、１：２．５、１：３、１：３．５、１：４、１：４．５、１：５、１：５．５、１：６、１：６．５、１：７、１：７．５、１：８、１：９、１：１０、３．５～４．５：１、３～４：１、２．５～３．５：１、２～３：１、１．５～２．５：１、１～２：１、１～１．５：１、１：１～１．５、１：１～２、１：１．５～２．５、１：２～３、１：２．５～３．５、１：３～４、１：３．５～４．５、１：４～５、１：４．５～５．５、１：５～６、１：５．５～６．５、１：６～７、または１：６．５～７．５である。
【0548】
図４Ａ、図４Ｂ、図６Ａ及び図６Ｂは、約１：３００Ｋｖ／ｖのＶＰＣ対ＢＩＩＣＲｅｐ／Ｃａｐ比及び約１：１００Ｋｖ／ｖのＶＰＣ対ＢＩＩＣペイロード比（３：１のＢＩＩＣ対ＢＩＩＣ比）で組み合わされた３．０～３．４×１０６細胞／ｍＬの間、特に３．２×１０６細胞／ｍＬのトランスフェクション／感染時のＶＰＣ密度が、有益なＡＡＶ力価（ｖｇ／ｍＬ）及びカプシド完全％を提供することを示している。
【0549】
所定の実施形態では、感染したウイルス生成細胞は、所定の溶解酸素（ＤＯ）含有量（ＤＯ％）下でインキュベーションされる。所定の実施形態では、感染したウイルス生成細胞は、１０％～５０％、２０％～４０％、１０％～２０％、１５％～２５％、２０％～３０％、２５％～３５％、３０％～４０％、３５％～４５％、４０％～５０％、１０％～１５％、１５％～２０％、２０％～２５％、２５％～３０％、３０％～３５％、３５％～４０％、４０％～４５％、または４５％～５０％の間のＤＯ％下でインキュベーションされる。所定の実施形態では、感染したウイルス生成細胞は、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％のＤＯ％下でインキュベーションされる。所定の実施形態では、感染したウイルス生成細胞は、２０％～３０％の間または約２５％のＤＯ％下でインキュベーションされる。所定の実施形態では、感染したウイルス生成細胞は、２５％～３５％の間または約３０％のＤＯ％下でインキュベーションされる。所定の実施形態では、感染したウイルス生成細胞は、３０％～４０％の間または約３５％のＤＯ％下でインキュベーションされる。所定の実施形態では、感染したウイルス生成細胞は、３５％～４５％の間または約４０％のＤＯ％下でインキュベーションされる。
【0550】
細胞溶解
限定されないが、ウイルス生成細胞を含む本開示の細胞は、当該技術分野で知られている任意の方法に従って細胞溶解に供され得る。細胞溶解は、本開示の任意の細胞内に存在する１つ以上の薬剤（例えば、ウイルス粒子）を得るために行われ得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子及びウイルス生成細胞のバルク収穫物は、本開示による細胞溶解に供される。
限定されないが、ウイルス生成細胞を含む本開示の細胞は、当該技術分野で知られている任意の方法に従って細胞溶解に供され得る。細胞溶解は、本開示の任意の細胞内に存在する１つ以上の薬剤（例えば、ウイルス粒子）を得るために行われ得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子及びウイルス生成細胞のバルク収穫物は、本開示による細胞溶解に供される。
【0551】
所定の実施形態では、細胞溶解は、米国特許番号７，３２６，５５５、７，５７９，１８１、７，０４８，９２０、６，４１０，３００、６，４３６，３９４、７，７３２，１２９、７，５１０，８７５、７，４４５，９３０、６，７２６，９０７、６，１９４，１９１、７，１２５，７０６、６，９９５，００６、６，６７６，９３５、７，９６８，３３３、５，７５６，２８３、６，２５８，５９５、６，２６１，５５１、６，２７０，９９６、６，２８１，０１０、６，３６５，３９４、６，４７５，７６９、６，４８２，６３４、６，４８５，９６６、６，９４３，０１９、６，９５３，６９０、７，０２２，５１９、７，２３８，５２６、７，２９１，４９８及び７，４９１，５０８または国際公開番号ＷＯ１９９６０３９５３０、ＷＯ１９９８０１００８８、ＷＯ１９９９０１４３５４、ＷＯ１９９９０１５６８５、ＷＯ１９９９０４７６９１、ＷＯ２００００５５３４２、ＷＯ２００００７５３５３及びＷＯ２００１０２３５９７（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）で提供される方法またはシステムのいずれかに従って行われ得る。
【0552】
細胞溶解方法及びシステムは、化学的または機械的であり得る。化学的細胞溶解は典型的には、化学的溶解条件下で１つ以上の細胞を１つ以上の化学的溶解剤と接触させることを含む。機械的溶解は典型的には、１つ以上の細胞を、機械力によって行われる細胞溶解に供することを含む。溶解はまた、約０％の生存性に到達した後に細胞を分解することによって完了し得る。
【0553】
所定の実施形態では、化学的溶解は、細胞を溶解するために使用され得る。本明細書で使用される場合、用語「化学的溶解剤」は、細胞の破壊を補助し得る任意の薬剤を指す。所定の実施形態では、溶解剤は、溶解溶液または溶解緩衝液と称される溶液に導入される。本明細書で使用される場合、用語「化学的溶解溶液」は、１つ以上の溶解剤を含む溶液（典型的には水性）を指す。溶解剤に加えて、溶解溶液は、１つ以上の緩衝剤、可溶化剤、界面活性剤、防腐剤、抗凍結剤、酵素、酵素阻害剤及び／またはキレート剤を含み得る。溶解緩衝液は、１つ以上の緩衝剤を含む溶解溶液である。溶解溶液の追加の成分は、１つ以上の可溶化剤を含み得る。本明細書で使用される場合、用語「可溶化剤」は、溶液の１つ以上の成分の溶解性及び／または溶液が適用される１つ以上の実体の溶解性を向上させる化合物を指す。所定の実施形態では、可溶化剤は、タンパク質溶解性を向上させる。所定の実施形態では、可溶化剤は、タンパク質のコンフォメーション及び／または活性を維持しつつ、タンパク質溶解性を向上させるそれらの能力に基づいて選択される。
【0554】
例示的な溶解剤は、米国特許番号８，６８５，７３４、７，９０１，９２１、７，７３２，１２９、７，２２３，５８５、７，１２５，７０６、８，２３６，４９５、８，１１０，３５１、７，４１９，９５６、７，３００，７９７、６，６９９，７０６及び６，１４３，５６７（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているもののいずれかを含み得る。所定の実施形態では、溶解剤は、溶解塩、両性剤、陽イオン性剤、イオン性洗浄剤及び非イオン性洗浄剤から選択され得る。溶解塩は、限定されないが、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）及び塩化カリウム（ＫＣｌ）を含み得る。さらに溶解塩は、米国特許番号８，６１４，１０１、７，３２６，５５５、７，５７９，１８１、７，０４８，９２０、６，４１０，３００、６，４３６，３９４、７，７３２，１２９、７，５１０，８７５、７，４４５，９３０、６，７２６，９０７、６，１９４，１９１、７，１２５，７０６、６，９９５，００６、６，６７６，９３５及び７，９６８，３３３（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているもののいずれかを含み得る。
【0555】
所定の実施形態では、細胞ライセート溶液は、安定化添加剤を含む。所定の実施形態では、安定化添加剤は、トレハロース、グリシンベタイン、マンニトール、クエン酸カリウム、ＣｕＣｌ２、プロリン、キシリトール、ＮＤＳＢ２０１、ＣＴＡＢ及びＫ２ＰＯ４を含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、アルギニンなどのアミノ酸、またはアルギニンＨＣｌなどの酸性化アミノ酸混合物を含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、０．１ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、０．２ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、０．２５ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、０．３ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、０．４ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、０．５ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、０．６ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、０．７ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、０．８ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、０．９ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。所定の実施形態では、安定化添加剤は、１．０ＭアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを含み得る。
【0556】
塩の濃度は、細胞膜の破壊のための有効濃度を得るために増加または低下され得る。本明細書で称される両性剤は、酸または塩基として反応することが可能な化合物である。両性剤は、限定されないが、リソホスファチジルコリン、３－（（３－コラミドプロピル）ジメチルアンモニウム）－１－プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）、ＺＷＩＴＴＥＲＧＥＮＴ（登録商標）などを含み得る。陽イオン性剤は、限定されないが、セチルトリメチルアンモニウム臭化物（Ｃ（１６）ＴＡＢ）及び塩化ベンザルコニウムを含み得る。洗浄剤を含む溶解剤は、イオン性洗浄剤または非イオン性洗浄剤を含み得る。
【0557】
洗浄剤は、限定されないが、細胞膜、細胞壁、脂質、炭水化物、リポタンパク質及び糖タンパク質を含む細胞構造を分裂または溶解する働きをし得る。例示的なイオン性洗浄剤は、米国特許番号７，６２５，５７０及び６，５９３，１２３または米国公開番号ＵＳ２０１４／００８７３６１（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）で教示されているもののいずれかを含む。所定の実施形態では、溶解溶液は、１つ以上のイオン性洗浄剤を含む。溶解溶液において使用するためのイオン性洗浄剤の例は、限定されないが、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、コール酸塩及びデオキシコール酸塩を含む。所定の実施形態では、イオン性洗浄剤は、可溶化剤として溶解溶液に含まれ得る。所定の実施形態では、溶解溶液は、１つ以上の非イオン性洗浄剤を含む。溶解溶液において使用するための非イオン性洗浄剤は、限定されないが、オクチルグルコシド、ジギトニン、ルブロール、Ｃ１２Ｅ８、ＴＷＥＥＮ（登録商標）－２０、ＴＷＥＥＮ（登録商標）－８０、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１１４、Ｂｒｉｊ－３５、Ｂｒｉｊ－５８、及びＮｏｎｉｏｄｅｔ Ｐ－４０を含み得る。非イオン性洗浄剤は、典型的には、より弱い溶解剤であるが、細胞性及び／またはウイルス性タンパク質を可溶化するための可溶化剤として含まれ得る。所定の実施形態では、溶解溶液は、１つ以上の双性イオン性洗浄剤を含む。溶解溶液において使用するための双性イオン性洗浄剤は、限定されないが、ラウリルジメチルアミンＮ－オキシド（ＬＤＡＯ）；Ｎ，Ｎ－ジメチル－Ｎ－ドデシルグリシンベタイン（Ｅｍｐｉｇｅｎ（登録商標）ＢＢ）；３－（Ｎ，Ｎ－ジメチルミリスチルアンモニオ）プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ（登録商標）３－１０）；ｎ－ドデシル－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－アンモニオ－１－プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ（登録商標）３－１２）；ｎ－テトラデシル－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－アンモニオ－１－プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ（登録商標）３－１４）；３－（Ｎ，Ｎ－ジメチルパルミチルアンモニオ）プロパンスルホネート（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ（登録商標）３－１６）；３－（（３－コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ）－１－プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）；及び３－（［３－コラミドプロピル］ジメチルアンモニオ）－２－ヒドロキシ－１－プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳＯ）を含み得る。
【0558】
所定の実施形態では、溶解溶液は、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、例えば、０．５％ｗ／ｖのＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００を含む。所定の実施形態では、溶解溶液は、ラウリルジメチルアミンＮ－オキシド（ＬＤＡＯ）、例えば、０．１８４％ｗ／ｖ（４×ＣＭＣ）のＬＤＡＯを含む。所定の実施形態では、溶解溶液は、種油界面活性剤、例えば、Ｅｃｏｓｕｒｆ（商標）ＳＡ－９を含む。所定の実施形態では、溶解溶液は、Ｎ，Ｎ－ジメチル－Ｎ－ドデシルグリシンベタイン（Ｅｍｐｉｇｅｎ（登録商標）ＢＢ）を含む。所定の実施形態では、溶解溶液は、Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ（登録商標）洗浄剤、例えば、Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ（登録商標）３－１２（ｎ－ドデシル－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－アンモニオ－１－プロパンスルホネート）、Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ（登録商標）３－１４（ｎ－テトラデシル－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－アンモニオ－１－プロパンスルホネート）、またはＺｗｉｔｔｅｒｇｅｎｔ（登録商標）３－１６（３－（Ｎ，Ｎ－ジメチルパルミチルアンモニオ）プロパンスルホネート）を含む。
【0559】
さらに溶解剤は、酵素及び尿素を含み得る。所定の実施形態では、１つ以上の溶解剤は、細胞溶解及びタンパク質溶解性の１つ以上を向上させるために、溶解溶液中で組み合わされ得る。所定の実施形態では、酵素阻害剤は、細胞膜破壊によって誘発され得るタンパク質分解を防止するために溶解溶液に含まれ得る。
【0560】
所定の実施形態では、溶解溶液は、０．１～１．０％ｗ／ｖの間、０．２～０．８％ｗ／ｖの間、０．３～０．７％ｗ／ｖの間、０．４～０．６％ｗ／ｖの間、または約０．５％ｗ／ｖの細胞溶解剤（例えば、洗浄剤）を含む。所定の実施形態では、溶解溶液は、０．３～０．３５％ｗ／ｖの間、０．３５～０．４％ｗ／ｖの間、０．４～０．４５％ｗ／ｖの間、０．４５～０．５％ｗ／ｖの間、０．５～０．５５％ｗ／ｖの間、０．５５～０．６％ｗ／ｖの間、０．６～０．６５％ｗ／ｖの間、または０．６５～０．７％ｗ／ｖの間の細胞溶解剤（例えば、洗浄剤）を含む。
【0561】
所定の実施形態では、接着細胞培養物から生成される細胞ライセートは、１つ以上のヌクレアーゼ、例えば、ベンゾナーゼヌクレアーゼ（グレードＩ、９９％純粋）またはｃ－ＬＥｃｔａ Ｄｅｎａｒａｓｅヌクレアーゼ（正式にはＳａｒｔｏｒｉｕｓ Ｄｅｎａｒａｓｅ）で処置され得る。所定の実施形態では、ヌクレアーゼは、遊離したＤＮＡによって引き起こされるライセートの粘性を低下させるために添加される。
【0562】
所定の実施形態では、化学的溶解は、単一の化学的溶解混合物を使用する。所定の実施形態では、化学的溶解は、最終化学的溶解混合物を提供するために連続して添加されるいくつかの溶解剤を使用する。
【0563】
所定の実施形態では、化学的溶解混合物は、酸性化アミノ酸混合物（アルギニンＨＣｌなど）、非イオン性洗浄剤（Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００など）、及びヌクレアーゼ（ベンゾナーゼヌクレアーゼなど）を含む。所定の実施形態では、化学的溶解混合物は、標的溶解ｐＨを提供するために酸または塩基を含み得る。
【0564】
所定の実施形態では、化学的溶解は、化学的溶解条件下で行われる。本明細書で使用される場合、用語「化学的溶解条件」は、標的細胞が化学的溶解剤によって溶解され得る環境条件（例えば、温度、圧力、ｐＨなど）の任意の組み合わせを指す。
【0565】
所定の実施形態では、溶解ｐＨは、３．０～３．５、３．５～４．０、４．０～４．５、４．５～５．０、５．０～５．５、５．５～６．０、６．０～６．５、６．５～７．０、７．０～７．５、または７．５～８．０の間である。所定の実施形態では、溶解ｐＨは、６．０～７．０、６．５～７．０、６．５～７．５、または７．０～７．５の間である。
【0566】
所定の実施形態では、溶解温度は、１５～３５℃の間、２０～３０℃の間、２５～３９℃の間、２０～２１℃の間、２０～２２℃の間、２１～２２℃の間、２１～２３℃の間、２２～２３℃の間、２２～２４℃の間、２３～２４℃の間、２３～２５℃の間、２４～２５℃の間、２４～２６℃の間、２５～２６℃の間、２５～２７℃の間、２６～２７℃の間、２６～２８℃の間、２７～２８℃の間、２７～２９℃の間、２８～２９℃の間、２８～３０℃の間、２９～３０℃の間、２９～３１℃の間、３０～３１℃の間、３０～３２℃の間、３１～３２℃の間、または３１～３３℃の間である。
【0567】
所定の実施形態では、機械的細胞溶解が行われる。機械的細胞溶解方法は、１つ以上の溶解条件及び／または１つ以上の溶解力の使用を含み得る。本明細書で使用される場合、用語「溶解条件」は、細胞破壊を促進する状態または状況を指す。溶解条件は、所定の温度、圧力、浸透圧純度、塩分濃度などを含み得る。所定の実施形態では、溶解条件は、上昇または低下した温度を含む。所定の実施形態によれば、溶解条件は、細胞破壊を促進するための温度の変化を含む。そのような実施形態に従って行われる細胞溶解は、凍結－解凍溶解を含み得る。本明細書で使用される場合、用語「凍結－解凍溶解」は、細胞溶液が１つ以上の凍結－解凍サイクルに供される細胞溶解を指す。凍結－解凍溶解方法によれば、溶液中の細胞が凍結されて、氷結晶の形成及び膨張によって引き起こされる細胞膜の機械的破壊が誘導される。凍結－解凍溶解方法に従って使用される細胞溶液は、１つ以上の溶解剤、可溶化剤、緩衝剤、抗凍結剤、界面活性剤、防腐剤、酵素、酵素阻害剤及び／またはキレート剤をさらに含み得る。凍結に供された細胞溶液が解凍されると、そのような成分は、所望の細胞生成物の回収を向上させ得る。所定の実施形態では、１つ以上の抗凍結剤は、凍結－解凍溶解を受ける細胞溶液に含まれる。本明細書で使用される場合、用語「抗凍結剤」は、凍結による損傷から１つ以上の物質を保護するために使用される薬剤を指す。抗凍結剤は、米国公開番号ＵＳ２０１３／０３２３３０２または米国特許番号６，５０３，８８８、６，１８０，６１３、７，８８８，０９６、７，０９１，０３０（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）で教示されているもののいずれかを含み得る。所定の実施形態では、抗凍結剤は、限定されないが、ジメチルスルホキシド、１，２－プロパンジオール、２，３－ブタンジオール、ホルムアミド、グリセロール、エチレングリコール、１，３－プロパンジオール及びｎ－ジメチルホルムアミド、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシエチルデンプン、アガロース、デキストラン、イノシトール、グルコース、ヒドロキシエチルデンプン、ラクトース、ソルビトール、メチルグルコース、スクロース及び尿素を含み得る。所定の実施形態では、凍結－解凍溶解は、米国特許番号７，７０４，７２１（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の方法のいずれかに従って行われ得る。
【0568】
本明細書で使用される場合、用語「溶解力」は、細胞を破壊するために使用される物理的活性を指す。溶解力は、限定されないが、機械力、超音波力、重力、光学力、電気力などを含み得る。機械力によって行われる細胞溶解は、本明細書では「機械的溶解」と称される。機械的溶解に従って使用され得る機械力は、高剪断流体力を含み得る。機械的溶解のそのような方法に従って、マイクロフルイダイザーが使用され得る。マイクロフルイダイザーは典型的には、細胞溶液が適用され得る注入リザーバを含む。次いで細胞溶液は、ポンプ（例えば、高圧ポンプ）を介して高速及び／または高圧で相互作用チャンバに圧送されて剪断流体力が生じ得る。次いで生じたライセートは、１つ以上のアウトプットリザーバに収集され得る。ポンプ速度及び／または圧力は、細胞溶解を調節し、生成物（例えば、ウイルス粒子）の回収を向上させるために調整され得る。他の機械的溶解方法は、擦り落としによる細胞の物理的破壊を含み得る。
【0569】
細胞溶解方法は、溶解される細胞の細胞培養形式に基づいて選択され得る。例えば、接着細胞培養物では、いくつかの化学的及び機械的溶解方法が使用され得る。そのような機械的溶解方法は、凍結－解凍溶解または擦り落としを含み得る。別の例では、接着細胞培養物の化学的溶解は、界面活性剤、例えば、Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ－１００を含む溶解溶液を用いたインキュベーションを介して行われ得る。
【0570】
所定の実施形態では、溶解をせずにＡＡＶ粒子を収穫するための方法は、効率的で拡大可能なＡＡＶ粒子生成のために使用され得る。非限定的な例では、ＡＡＶ粒子は、米国特許出願２００９０２７５１０７（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているように、ヘパリン結合部位を欠くＡＡＶ粒子を培養し、それによりＡＡＶ粒子が細胞培養物中で上清に移行することを可能にし、培養物から上清を収集すること；及び上清からＡＡＶ粒子を単離することによって生成され得る。
【0571】
清澄化及び精製：概要
ウイルス粒子を含む細胞ライセートは、清澄化及び精製に供され得る。清澄化は通常、細胞ライセートからのウイルス粒子の精製に取り入れられる初期工程を指し、バルク溶解収穫物からより大きな不溶性デブリを除去することによってさらなる精製のためにライセートを準備する機能をする。ウイルス生成は、ウイルス生成プロセスにおける任意の時点で清澄化工程を含み得る。清澄化工程は、限定されないが、遠心分離及び濾過を含み得る。清澄化の間、遠心分離は、より大きなデブリのみを除去するために低速度で行われ得る。同様に、濾過は、より大きなデブリが除去されるように、より大きな孔サイズを有するフィルターを使用して行われ得る。
ウイルス粒子を含む細胞ライセートは、清澄化及び精製に供され得る。清澄化は通常、細胞ライセートからのウイルス粒子の精製に取り入れられる初期工程を指し、バルク溶解収穫物からより大きな不溶性デブリを除去することによってさらなる精製のためにライセートを準備する機能をする。ウイルス生成は、ウイルス生成プロセスにおける任意の時点で清澄化工程を含み得る。清澄化工程は、限定されないが、遠心分離及び濾過を含み得る。清澄化の間、遠心分離は、より大きなデブリのみを除去するために低速度で行われ得る。同様に、濾過は、より大きなデブリが除去されるように、より大きな孔サイズを有するフィルターを使用して行われ得る。
【0572】
精製は通常、最終のプールされた薬物物質の調製において清澄化された溶解収穫物からより小さなデブリを除去することによって細胞ライセートからのウイルス粒子の精製及び濃縮において採用される最終工程を指す。ウイルス生成は、ウイルス生成プロセスにおける任意の時点で精製工程を含み得る。精製工程は、限定されないが、濾過及びクロマトグラフィーを含み得る。濾過は、生成物からより小さなデブリを除去するためのより小さな孔サイズ又生成物からより大きなデブリを保持するためのより大きな孔サイズを有するフィルターを使用して行われ得る。濾過は、ウイルス生成プールまたはストリームの濃度及び／または含有量を変化させるために使用され得る。クロマトグラフィーは、不純物のプールから標的粒子を選択的に分離するために行われ得る。
【0573】
高濃度ＡＡＶ製剤の大規模生成は、高濃度のＡＡＶ粒子が凝集するまたは塊になる傾向によって複雑化される。小規模清澄化及び濃縮システム、例えば、透析カセットまたは回転遠心分離は通常、大規模生成のために十分に拡大可能ではない。本開示は、大量の高濃度ＡＡＶ生成製剤を処理するための清澄化、精製及び濃縮システムの実施形態を提供する。所定の実施形態では、大量清澄化システムは、以下の処理工程のうちの１つ以上を含む：深層濾過、精密濾過（例えば、０．２μｍ濾過）、アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、例えば、陰イオン交換クロマトグラフィー（ＡＥＸ）または陽イオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）、タンジェンシャルフロー濾過システム（ＴＦＦ）、ナノ濾過（例えば、ウイルス保持濾過（ＶＲＦ））、最終濾過（ＦＦ）、及び充填濾過。
【0574】
ウイルス清澄化及び精製の目的は、細胞ライセートのハイスループット処理及び最終的ウイルス回収を最適化することを含む。本開示の清澄化及び精製工程を含める利点は、より大量のライセートの処理のための拡大可能性を含む。所定の実施形態では、清澄化及び精製は、米国特許番号８，５２４，４４６、５，７５６，２８３、６，２５８，５９５、６，２６１，５５１、６，２７０，９９６、６，２８１，０１０、６，３６５，３９４、６，４７５，７６９、６，４８２，６３４、６，４８５，９６６、６，９４３，０１９、６，９５３，６９０、７，０２２，５１９、７，２３８，５２６、７，２９１，４９８、７，４９１，５０８、米国公開番号ＵＳ２０１３／００４５１８６、ＵＳ２０１１／０２６３０２７、ＵＳ２０１１／０１５１４３４、ＵＳ２００３／０１３８７７２、及び国際公開番号ＷＯ２００２０１２４５５、ＷＯ１９９６０３９５３０、ＷＯ１９９８０１００８８、ＷＯ１９９９０１４３５４、ＷＯ１９９９０１５６８５、ＷＯ１９９９０４７６９１、ＷＯ２００００５５３４２、ＷＯ２００００７５３５３及びＷＯ２００１０２３５９７（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）で提供されている方法またはシステムのいずれかに従って行われ得る。
【0575】
所定の実施形態では、少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含む組成物は、米国特許番号ＵＳ６１４６８７４、ＵＳ６６６０５１４、ＵＳ８２８３１５１またはＵＳ８５２４４４６（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の方法またはシステムを使用して単離または精製され得る。
【0576】
清澄化及び精製：遠心分離
所定の実施形態によれば、細胞ライセートは、１つ以上の遠心分離工程によって清澄化され得る。遠心分離は、ライセート中の不溶性粒子をペレット化するために使用され得る。清澄化の間、遠心分離強度（標準重力の倍数を表す重力単位（ｇ）の観点から表され得る）は、後の精製工程よりも低い場合がある。所定の実施形態では、遠心分離は、約２００ｇ～約８００ｇ、約５００ｇ～約１５００ｇ、約１０００ｇ～約５０００ｇ、約１２００ｇ～約１００００ｇまたは約８０００ｇ～約１５０００ｇの重力で細胞ライセートに対して行われ得る。所定の実施形態では、細胞ライセートの遠心分離は、８０００ｇで１５分間行われる。所定の実施形態では、沈降速度によって細胞ライセートにおける粒子状物を区分化するために、密度勾配遠心分離が行われ得る。本開示の方法またはシステムに従って使用される勾配は、限定されないが、塩化セシウム勾配及びイオジキサノール工程勾配を含み得る。所定の実施形態では、遠心分離は、デカンタ遠心分離システムを使用する。所定の実施形態では、遠心分離は、ディスクスタック遠心分離システムを使用する。所定の実施形態では、遠心分離は、超遠心分離、例えば、２サイクルＣｓＣｌ勾配超遠心分離またはイオジキサノール非連続的密度勾配超遠心分離を含む。
所定の実施形態によれば、細胞ライセートは、１つ以上の遠心分離工程によって清澄化され得る。遠心分離は、ライセート中の不溶性粒子をペレット化するために使用され得る。清澄化の間、遠心分離強度（標準重力の倍数を表す重力単位（ｇ）の観点から表され得る）は、後の精製工程よりも低い場合がある。所定の実施形態では、遠心分離は、約２００ｇ～約８００ｇ、約５００ｇ～約１５００ｇ、約１０００ｇ～約５０００ｇ、約１２００ｇ～約１００００ｇまたは約８０００ｇ～約１５０００ｇの重力で細胞ライセートに対して行われ得る。所定の実施形態では、細胞ライセートの遠心分離は、８０００ｇで１５分間行われる。所定の実施形態では、沈降速度によって細胞ライセートにおける粒子状物を区分化するために、密度勾配遠心分離が行われ得る。本開示の方法またはシステムに従って使用される勾配は、限定されないが、塩化セシウム勾配及びイオジキサノール工程勾配を含み得る。所定の実施形態では、遠心分離は、デカンタ遠心分離システムを使用する。所定の実施形態では、遠心分離は、ディスクスタック遠心分離システムを使用する。所定の実施形態では、遠心分離は、超遠心分離、例えば、２サイクルＣｓＣｌ勾配超遠心分離またはイオジキサノール非連続的密度勾配超遠心分離を含む。
【0577】
清澄化及び精製：濾過
所定の実施形態では、１つ以上の精密濾過、ナノ濾過及び／または限外濾過工程が、清澄化、精製及び／または滅菌の間に使用され得る。１つ以上の精密濾過、ナノ濾過または限外濾過工程は、濾過システム、例えば、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣ ＸＬ１０ ０．５／０．２μｍフィルター、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣＸＬ６０００ ０．５／０．２μｍフィルター、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣＸＬ１５０フィルター、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｍｉｌｌｉｐａｋ Ｇａｍｍａ Ｇｏｌｄ ０．２２μｍフィルター（二重インライン滅菌グレードフィルター）、Ｐａｌｌ Ｓｕｐｏｒ ＥＫＶ、０．２μｍ滅菌グレードフィルター、Ａｓａｈｉ Ｐｌａｎｏｖａ ３５Ｎ、Ａｓａｈｉ Ｐｌａｎｏｖａ ２０Ｎ、Ａｓａｈｉ Ｐｌａｎｏｖａ ７５Ｎ、Ａｓａｈｉ Ｐｌａｎｏｖａ ＢｉｏＥｘ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｖｉｒｅｓｏｌｖｅ ＮＦＲまたはＳａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓａｒｔｏｐｏｒｅ ２ＸＬＧ、０．８／０．２μｍの使用を含み得る。
所定の実施形態では、１つ以上の精密濾過、ナノ濾過及び／または限外濾過工程が、清澄化、精製及び／または滅菌の間に使用され得る。１つ以上の精密濾過、ナノ濾過または限外濾過工程は、濾過システム、例えば、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣ ＸＬ１０ ０．５／０．２μｍフィルター、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣＸＬ６０００ ０．５／０．２μｍフィルター、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣＸＬ１５０フィルター、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｍｉｌｌｉｐａｋ Ｇａｍｍａ Ｇｏｌｄ ０．２２μｍフィルター（二重インライン滅菌グレードフィルター）、Ｐａｌｌ Ｓｕｐｏｒ ＥＫＶ、０．２μｍ滅菌グレードフィルター、Ａｓａｈｉ Ｐｌａｎｏｖａ ３５Ｎ、Ａｓａｈｉ Ｐｌａｎｏｖａ ２０Ｎ、Ａｓａｈｉ Ｐｌａｎｏｖａ ７５Ｎ、Ａｓａｈｉ Ｐｌａｎｏｖａ ＢｉｏＥｘ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｖｉｒｅｓｏｌｖｅ ＮＦＲまたはＳａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓａｒｔｏｐｏｒｅ ２ＸＬＧ、０．８／０．２μｍの使用を含み得る。
【0578】
所定の実施形態では、１つ以上の精密濾過工程が、清澄化、精製及び／または滅菌の間に使用され得る。精密濾過は、典型的には０．１μｍ～１０μｍの間の孔サイズを有する精密濾過膜を利用する。精密濾過は通常、微粒子の一般的な清澄化、滅菌、及び除去のために使用される。所定の実施形態では、精密濾過は、ウイルス粒子の凝集塊を除去するために使用される。所定の実施形態では、本開示の生成プロセスまたはシステムは、少なくとも１つの精密濾過工程を含む。１つ以上の精密濾過工程は、深層濾過システム、例えば、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｍｉｌｌｉｓｔａｋ＋ ＰＯＤフィルター（Ｄ０ＨＣ媒体シリーズ）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ ＭＣ０ＳＰ２３ＣＬ３フィルター（Ｃ０ＳＰ媒体シリーズ）、またはＳａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓａｒｔｏｐｏｒｅフィルターシリーズを用いた深層濾過工程を含み得る。本開示の精密濾過システムは、本開示のＡＡＶ薬学的、処理及び保存製剤を含む、当業者に知られている製剤で事前すすぎ、装填、平衡化、フラッシュ、処理、溶出、洗浄または清澄化され得る。
【0579】
所定の実施形態では、１つ以上の限外濾過工程が、清澄化及び精製の間に使用され得る。限外濾過工程は、本開示の処理及び／または製剤化溶液のいずれかを濃縮、製剤化、脱塩または脱水するために使用され得る。限外濾過は、典型的には０．００１～０．１μｍの間の孔サイズを有する限外濾過膜を利用する。限外濾過膜はまた、それらの分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）によって定義され得、１ｋＤ～５００ｋＤの範囲を有し得る。限外濾過は通常、溶解した生物分子、例えば、タンパク質、ペプチド、プラスミド、ウイルス粒子、核酸、及び炭水化物を濃縮及び製剤化するために使用される。本開示の限外濾過システムは、本開示のＡＡＶ薬学的、処理及び保存製剤を含む、当業者に知られている製剤で事前すすぎ、装填、平衡化、フラッシュ、処理、溶出、洗浄または清澄化され得る。
【0580】
所定の実施形態では、１つ以上のナノ濾過工程が、清澄化及び精製の間に使用され得る。ナノ濾過は、典型的には１００ｎｍ未満の孔サイズを有するナノ濾過膜を利用する。ナノ濾過は通常、不要な内因性ウイルス不純物（例えば、バキュロウイルス）の除去のために使用される。所定の実施形態では、ナノ濾過は、ウイルス除去濾過（ＶＲＦ）を含み得る。ＶＲＦフィルターは、典型的には１５ｎｍ～１００ｎｍの間の濾過サイズを有し得る。ＶＲＦフィルターの例は、（限定されないが）、Ｐｌａｎｏｖａ １５Ｎ、Ｐｌａｎｏｖａ ２０Ｎ、及びＰｌａｎｏｖａ ３５Ｎ（Ａｓａｈｉ－Ｋａｓｅｉ Ｃｏｒｐ，Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ）；ならびにＶｉｒｅｓｏｌｖｅ ＮＦＰ及びＶｉｒｅｓｏｌｖｅ ＮＦＲ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｃｏｒｐ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ，ＵＳＡ）を含む。本開示のナノ濾過システムは、本開示のＡＡＶ薬学的、処理及び保存製剤を含む、当業者に知られている製剤で事前すすぎ、装填、平衡化、フラッシュ、処理、溶出、洗浄または清澄化され得る。所定の実施形態では、ナノ濾過は、ウイルス粒子の凝集塊を除去するために使用される。
【0581】
所定の実施形態では、１つ以上のタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）（クロスフロー濾過としても知られている）工程が、清澄化及び精製の間に使用され得る。タンジェンシャルフロー濾過は、供給ストリーム（清澄化及び濃縮される標的薬剤／粒子を含む）が供給タンクから濾過モジュールまたはカートリッジに流れる膜濾過の形態である。ＴＦＦ濾過モジュール内で、供給ストリームは、ストリームの一部が膜を通過する（透過液／濾液）一方で、ストリームの残り（保持液）は、濾過システムを介して戻されて供給タンクに再循環されるように、膜表面に対して並行に通過する。
【0582】
所定の実施形態では、ＴＦＦ濾過モジュールは、フラットプレートモジュール（積層された平坦なカセット）、渦巻き形モジュール（渦巻き形膜層）、または中空糸モジュール（膜チューブの束）であり得る。本開示において使用するためのＴＦＦシステムの例は、限定されないが、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｍＰＥＳ中空糸ＴＦＦシステム（０．５ｍｍの糸ＩＤ、１００ｋＤＡのＭＷＣＯ）またはＰｅｌｌｉｃｏｎ－３カセットを有するＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｕｌｔｒａｃｅｌ ＰＬＣＴＫシステム（０．５７ｍ２、３０ｋＤＡのＭＷＣＯ）を含む。
【0583】
新たな緩衝液物質は、供給ストリームがＴＦＦ濾過システムを介して循環されるときにＴＦＦ供給タンクに添加され得る。所定の実施形態では、緩衝液物質は、フローストリームがＴＦＦ濾過システムを介して循環するときに十分に補充され得る。この実施形態では、緩衝液物質は、透過液において失われた緩衝液物質に等しい量でストリームに添加され、一定濃度をもたらす。所定の実施形態では、緩衝液物質は、フローストリームが濾過システムを介して循環するときに減少され得る。この実施形態では、透過液において失われた緩衝液物質と比べて減少した量の緩衝液物質がストリームに添加され、増加した濃度をもたらす。所定の実施形態では、緩衝液物質は、フローストリームが濾過システムを介して循環するときに置き換えられ得る。この実施形態では、ストリームに添加される緩衝液は、透過液において失われた緩衝液物質とは異なり、ストリームにおける緩衝液物質の最終的な置き換えがもたらされる。本開示のＴＦＦシステムは、本開示のＡＡＶ薬学的、処理及び保存製剤を含む、当業者に知られている製剤で事前すすぎ、装填、平衡化、フラッシュ、処理、溶出、洗浄または清澄化され得る。
【0584】
所定の実施形態では、ＴＦＦロードプールには、濾過の前に賦形剤または希釈剤がスパイクされ得る。所定の実施形態では、ＴＦＦロードプールには、濾過の前に高塩混合物（塩化ナトリウムまたは塩化カリウムなど）がスパイクされ得る。所定の実施形態では、ＴＦＦロードプールには、濾過の前に高糖混合物（５０％ｗ／ｖのスクロースなど）がスパイクされ得る。
【0585】
ＴＦＦ処理の有効性は、（限定されないが）フロー設計からの剪断ストレス、クロスフロー速度、濾液フロー制御、膜貫通圧力（ＴＭＰ）、膜コンディショニング、膜組成（例えば、中空糸コンストラクトション）及び設計（例えば、表面積）、システムフロー設計、リザーバ設計、及び混合方策を含むいくつかの要素に依存し得る。所定の実施形態では、濾過膜は、プレＴＦＦ膜コンディショニングに曝露され得る。
【0586】
所定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、１つ以上の精密濾過段階を含み得る。所定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、１つ以上の限外濾過段階を含み得る。所定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、１つ以上のナノ濾過段階を含み得る。
【0587】
所定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、１つ以上の濃縮段階、例えば、限外濾過（ＵＦ）または精密濾過（ＭＦ）濃縮段階を含み得る。濃縮段階では、（透過液として失われた緩衝液物質の量に対して）減少した量の緩衝液物質が、ストリームが濾過システムを介して循環するときに置き換えられる。透過液において失われた緩衝液物質のすべてを完全に置き換えない場合、濾過ストリーム内でウイルス粒子の増加した濃度をもたらす。所定の実施形態では、増加した量の緩衝液物質が、ストリームが濾過システムを介して循環するときに置き換えられる。透過液において失われた緩衝液物質の量に対する過剰の緩衝液物質の組み込みは、濾過ストリーム内のウイルス粒子の低下した濃度をもたらす。
【0588】
所定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、１つ以上のダイアフィルトレーション（ＤＦ）段階を含み得る。ダイアフィルトレーション段階は、第１の緩衝液物質（高塩物質など）を第２の緩衝液物質（低塩または無塩物質など）に置き換えることを含む。この実施形態では、透過液において失われた第１の緩衝液物質とは異なる第２の緩衝液がフローストリームに添加され、ストリームにおける緩衝液物質の最終的な置き換えがもたらされる。
【0589】
所定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、複数の段階を連続して含み得る。所定の実施形態では、ＴＦＦ処理プロセスは、限外濾過（ＵＦ）濃縮段階と、それに続くダイアフィルトレーション段階（ＤＦ）を含み得る。所定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、ダイアフィルトレーション段階と、それに続く限外濾過濃縮段階を含み得る。所定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、第１のダイアフィルトレーション段階と、それに続く限外濾過濃縮段階と、それに続く第２のダイアフィルトレーション段階を含み得る。所定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、高塩低糖緩衝液物質をフローストリームに組み込む第１のダイアフィルトレーション段階、続いてフローストリームにおいて高濃度のウイルス物質をもたらす限外濾過／濃縮段階、続いて低塩高糖または無塩高糖緩衝液物質をフローストリームに組み込む第２のダイアフィルトレーション段階を含み得る。所定の実施形態では、塩は、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、またはそれらの組み合わせであり得る。所定の実施形態では、糖は、スクロース、例えば、５％ｗ／ｖのスクロース混合物または７％ｗ／ｖのスクロース混合物であり得る。
【0590】
所定の実施形態では、１つ以上のＴＦＦ工程は、ウイルス生成プールの液体媒体の少なくとも一部が高スクロース製剤化緩衝液に置き換えられる製剤化ダイアフィルトレーション工程を含み得る。所定の実施形態では、高スクロース製剤化緩衝液は、６～８％ｗ／ｖの間の糖または糖代用品及び９０～１００ｍＭの間の塩化アルカリ塩を含む。所定の実施形態では、高スクロース製剤化緩衝液は、７％ｗ／ｖのスクロース及び９０～１００ｍＭの間の塩化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、高スクロース製剤化緩衝液は、７％ｗ／ｖのスクロース、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、９５～１００ｍＭの間の塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含む。所定の実施形態では、製剤化ダイアフィルトレーション工程は、１つ以上のＴＦＦ工程における最終ダイアフィルトレーション工程である。所定の実施形態では、製剤化ダイアフィルトレーション工程は、１つ以上のＴＦＦ工程における唯一のダイアフィルトレーション工程である。
【0591】
所定の実施形態では、ＴＦＦ処理は、同時に行われる複数の段階を含み得る。非限定的な例として、ＴＦＦ清澄化プロセスは、濃縮段階と同時に行われる限外濾過段階を含み得る。
【0592】
濾過による細胞ライセート清澄化及び精製の方法は、当該技術分野でよく理解されており、限定されないが、受動濾過及びフロー濾過を含む多様な利用可能な方法に従って行われ得る。使用されるフィルターは、多様な物質及び孔サイズを含み得る。例えば、細胞ライセートフィルターは、約１μＭ～約５μＭ、約０．５μＭ～約２μＭ、約０．１μＭ～約１μＭ、約０．０５μＭ～約０．０５μＭ及び約０．００１μＭ～約０．１μＭの孔サイズを含み得る。細胞ライセートフィルターのための例示的な孔サイズは、限定されないが、２．０、１．９、１．８、１．７、１．６、１．５、１．４、１．３、１．２、１．１、１、０．９、０．８、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、０．２、０．１、０．９５、０．９、０．８５、０．８、０．７５、０．７、０．６５、０．６、０．５５、０．５、０．４５、０．４、０．３５、０．３、０．２５、０．２、０．１５、０．１、０．０５、０．２２、０．２１、０．２０、０．１９、０．１８、０．１７、０．１６、０．１５、０．１４、０．１３、０．１２、０．１１、０．１、０．０９、０．０８、０．０７、０．０６、０．０５、０．０４、０．０３、０．０２、０．０１、０．０２、０．０１９、０．０１８、０．０１７、０．０１６、０．０１５、０．０１４、０．０１３、０．０１２、０．０１１、０．０１、０．００９、０．００８、０．００７、０．００６、０．００５、０．００４、０．００３、０．００２、０．００１及び０．００１μＭを含み得る。所定の実施形態では、清澄化は、大きなデブリを除去するための２．０μＭの孔サイズを有するフィルターを介する濾過と、それに続くインタクト細胞を除去するための０．４５μＭの孔サイズを有するフィルターを介する通過を含み得る。
【0593】
フィルター物質は、多様な物質から構成され得る。そのような物質は、限定されないが、ポリマー物質及び金属物質（例えば、焼結金属及び有孔アルミニウム）を含み得る。例示的な物質は、限定されないが、ナイロン、セルロース物質（例えば、セルロースアセテート）、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、ポリエーテルスルホン、ポリアミド、ポリスルホン、ポリプロピレン、及びポリエチレンテレフタレートを含み得る。所定の実施形態では、細胞ライセートの清澄化に有用なフィルターは、限定されないが、ＵＬＴＩＰＬＥＡＴ ＰＲＯＦＩＬＥ（商標）フィルター（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｐｏｒｔ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＮＹ）、ＳＵＰＯＲ（商標）膜フィルター（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｐｏｒｔ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＮＹ）を含み得る。
【0594】
所定の実施形態では、フロー濾過は、濾過速度及び／または有効性を増加させるために行われ得る。所定の実施形態では、フロー濾過は、真空濾過を含み得る。そのような方法によれば、真空は、濾過される細胞ライセートの側とは反対のフィルターの側に形成される。所定の実施形態では、細胞ライセートは、遠心力によってフィルターに通過され得る。所定の実施形態では、ポンプは、細胞ライセートを清澄化フィルターを介して押し入れるために使用される。１つ以上のフィルターを介する細胞ライセートの流速は、チャネルサイズ及び／または流体圧のうちの１つ以上を調整することによって調節され得る。
【0595】
清澄化及び精製：クロマトグラフィー
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子は、クロマトグラフィーの１つ以上の異なる方法を使用して１つ以上のクロマトグラフィー工程を介して細胞ライセートから清澄化及び精製され得る。クロマトグラフィーは、混合物から１つ以上の要素を選択的に分離除外するための当該技術分野で知られている多数の方法を指す。そのような方法は、限定されないが、イオン交換クロマトグラフィー（例えば、陽イオン交換クロマトグラフィー及び陰イオン交換クロマトグラフィー）、アフィニティークロマトグラフィー（例えば、イムノアフィニティークロマトグラフィー、金属アフィニティークロマトグラフィー、シュードアフィニティークロマトグラフィー、例えば、Ｂｌｕｅ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ樹脂）、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）、サイズ排除クロマトグラフィー、及びマルチモードクロマトグラフィー（ＭＭＣ）（固定相と分析物との間の複数の形態の相互作用を利用するクロマトグラフィー方法）を含み得る。所定の実施形態では、ウイルスクロマトグラフィーの方法またはシステムは、米国特許番号５，７５６，２８３、６，２５８，５９５、６，２６１，５５１、６，２７０，９９６、６，２８１，０１０、６，３６５，３９４、６，４７５，７６９、６，４８２，６３４、６，４８５，９６６、６，９４３，０１９、６，９５３，６９０、７，０２２，５１９、７，２３８，５２６、７，２９１，４９８及び７，４９１，５０８または国際公開番号ＷＯ１９９６０３９５３０、ＷＯ１９９８０１００８８、ＷＯ１９９９０１４３５４、ＷＯ１９９９０１５６８５、ＷＯ１９９９０４７６９１、ＷＯ２００００５５３４２、ＷＯ２００００７５３５３及びＷＯ２００１０２３５９７（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）で教示されているもののいずれかを含み得る。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子は、クロマトグラフィーの１つ以上の異なる方法を使用して１つ以上のクロマトグラフィー工程を介して細胞ライセートから清澄化及び精製され得る。クロマトグラフィーは、混合物から１つ以上の要素を選択的に分離除外するための当該技術分野で知られている多数の方法を指す。そのような方法は、限定されないが、イオン交換クロマトグラフィー（例えば、陽イオン交換クロマトグラフィー及び陰イオン交換クロマトグラフィー）、アフィニティークロマトグラフィー（例えば、イムノアフィニティークロマトグラフィー、金属アフィニティークロマトグラフィー、シュードアフィニティークロマトグラフィー、例えば、Ｂｌｕｅ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ樹脂）、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）、サイズ排除クロマトグラフィー、及びマルチモードクロマトグラフィー（ＭＭＣ）（固定相と分析物との間の複数の形態の相互作用を利用するクロマトグラフィー方法）を含み得る。所定の実施形態では、ウイルスクロマトグラフィーの方法またはシステムは、米国特許番号５，７５６，２８３、６，２５８，５９５、６，２６１，５５１、６，２７０，９９６、６，２８１，０１０、６，３６５，３９４、６，４７５，７６９、６，４８２，６３４、６，４８５，９６６、６，９４３，０１９、６，９５３，６９０、７，０２２，５１９、７，２３８，５２６、７，２９１，４９８及び７，４９１，５０８または国際公開番号ＷＯ１９９６０３９５３０、ＷＯ１９９８０１００８８、ＷＯ１９９９０１４３５４、ＷＯ１９９９０１５６８５、ＷＯ１９９９０４７６９１、ＷＯ２００００５５３４２、ＷＯ２００００７５３５３及びＷＯ２００１０２３５９７（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）で教示されているもののいずれかを含み得る。
【0596】
本開示のクロマトグラフィーシステムは、本開示のＡＡＶ薬学的、処理及び保存製剤を含む、当業者に知られている製剤で事前すすぎ、装填、平衡化、フラッシュ、処理、溶出、洗浄または清澄化され得る。
【0597】
所定の実施形態では、１つ以上のイオン交換（ＩＥＸ）クロマトグラフィー工程は、ウイルス粒子を単離するために使用され得る。イオン交換工程は、陰イオン交換（ＡＥＸ）クロマトグラフィー、陽イオン交換（ＣＥＸ）クロマトグラフィー、またはそれらの組み合わせを含み得る。所定の実施形態では、イオン交換クロマトグラフィーは、結合／溶出モードで使用される。結合／溶出ＩＥＸは、ウイルス粒子のカプシドタンパク質（または他の帯電した成分）と固定相上に存在する帯電した部位との間の電荷－電荷相互作用に基づいて固定相にウイルス粒子を結合させることによって使用され得るこのプロセスは、ウイルス調製物（例えば、清澄化したライセート）を通過させるカラムの使用を含み得る。ウイルス調製物を帯電した固定相（例えば、カラム）に適用した後、結合したウイルス粒子は次いで、溶出溶液を適用して電荷－電荷相互作用を破壊することによって固定相から溶出され得る。溶出溶液は、結合したウイルス粒子の回収を向上させるために塩濃度及び／またはｐＨを調整することによって最適化され得る。所定の実施形態では、溶出溶液は、ヌクレアーゼ、例えば、ベンゾナーゼヌクレアーゼを含み得る。単離されているウイルスカプシドの電荷に応じて、陽イオンまたは陰イオン交換クロマトグラフィー法が選択され得る。所定の実施形態では、イオン交換クロマトグラフィーは、フロースルーモードで使用される。フロースルーＩＥＸは、非ウイルス性不純物または不要なウイルス粒子を固定相に（電荷－電荷相互作用に基づいて）結合させ、ウイルス調製物中の標的ウイルス粒子が、ＩＥＸシステムを「介して流れて（フロースルーして）」収集プールに入ることを可能にすることによって使用され得る。
【0598】
イオン交換クロマトグラフィーの方法またはシステムは、限定されないが、米国特許番号７，４１９，８１７、６，１４３，５４８、７，０９４，６０４、６，５９３，１２３、７，０１５，０２６及び８，１３７，９４８（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に教示されているもののいずれかを含み得る。
【0599】
所定の実施形態では、ＩＥＸプロセスは、ＡＥＸクロマトグラフィーシステム、例えば、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓａｒｔｏｂｉｎｄ Ｑ膜、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓａｒｔｏｂｉｎｄ ＳＴＩＣ膜、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｆｒａｃｔｏｇｅｌ ＴＭＡＥ ＨｉＣａｐ（ｍ）Ｆｌｏｗ－Ｔｈｒｏｕｇｈ膜、ＧＥ Ｑ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＨＰ膜、Ｐｏｒｏｓ ＸＱまたはＰｏｒｏｓ ＨＱを使用する。所定の実施形態では、ＩＥＸプロセスは、ＣＥＸシステム、例えば、Ｐｏｒｏｓ ＸＳ膜を使用する。所定の実施形態では、ＡＥＸシステムは、トリメチルアンモニウムエチル（ＴＭＡＥ）官能基を含む固定相を含む。所定の実施形態では、ＩＥＸプロセスは、マルチモードクロマトグラフィー（ＭＭＣ）システム、例えば、Ｎｕｖｉａ ａＰｒｉｍｅ ４Ａ膜を使用する。
【0600】
所定の実施形態では、１つ以上のアフィニティークロマトグラフィー工程、例えば、イムノアフィニティークロマトグラフィーが、ウイルス粒子を単離するために使用され得る。イムノアフィニティークロマトグラフィーは、１つ以上の免疫化合物（例えば、抗体または抗体関連構造）を利用してウイルス粒子を保持するクロマトグラフィーの形態である。免疫化合物は、限定されないが、１つ以上のウイルス被覆タンパク質を含む、ウイルス粒子表面上の１つ以上の構造に特異的に結合し得る。所定の実施形態では、免疫化合物は、特定のウイルスバリアントについて特異的であり得る。所定の実施形態では、免疫化合物は、複数のウイルスバリアントに結合し得る。所定の実施形態では、免疫化合物は、組換え一本鎖抗体を含み得る。そのような組換え一本鎖抗体は、Ｓｍｉｔｈ，Ｒ．Ｈ．ｅｔ ａｌ．，２００９．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１７（１１）：１８８８－９６（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているものを含み得る。そのような免疫化合物は、限定されないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ６及びＡＡＶ８または本明細書に教示されているもののいずれかを含むいくつかのＡＡＶカプシドバリアントに結合することが可能である。所定の実施形態では、ＡＦＣプロセスは、ＧＥ ＡＶＢ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＨＰカラム樹脂、Ｐｏｒｏｓ ＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ ＡＡＶ８樹脂（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）、Ｐｏｒｏｓ ＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ ＡＡＶ９樹脂（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）及びＰｏｒｏｓ ＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ ＡＡＶＸ樹脂（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を使用する。
【0601】
所定の実施形態では、１つ以上のサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）工程が、ウイルス粒子を単離するために使用され得る。ＳＥＣは、サイズに応じて粒子を分離するためのゲルの使用を含み得る。ウイルス粒子精製において、ＳＥＣ濾過は、時に「最終精製（ｐｏｌｉｓｈｉｎｇ）」と称される。所定の実施形態では、ＳＥＣは、ほぼ均質である最終生成物を生成するために行われ得る。そのような最終生成物は、所定の実施形態では、前臨床研究及び／または臨床研究で使用され得る（Ｋｏｔｉｎ，Ｒ．Ｍ．２０１１．Ｈｕｍａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ．２０（１）：Ｒ２－Ｒ６（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる））。所定の実施形態では、ＳＥＣは、米国特許番号６，１４３，５４８、７，０１５，０２６、８，４７６，４１８、６，４１０，３００、８，４７６，４１８、７，４１９，８１７、７，０９４，６０４、６，５９３，１２３、及び８，１３７，９４８（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）で教示されている方法のいずれかに従って行われ得る。
【0602】
ＩＩＩ．組成物及び製剤
概要
遺伝子療法薬物生成物（ｒＡＡＶ粒子など）は、液体状態でのそれらの限られた安定性及び低濃度で大規模凝集する高い傾向のため、組成物及び製剤に組み込むことが困難である。遺伝子療法薬物生成物はしばしば、処置領域（ＣＮＳ組織を含む）に直接的に送達される；これは、賦形剤及び製剤パラメータが、組織機能、微小環境、及び体積制限と適合することを必要とする。
概要
遺伝子療法薬物生成物（ｒＡＡＶ粒子など）は、液体状態でのそれらの限られた安定性及び低濃度で大規模凝集する高い傾向のため、組成物及び製剤に組み込むことが困難である。遺伝子療法薬物生成物はしばしば、処置領域（ＣＮＳ組織を含む）に直接的に送達される；これは、賦形剤及び製剤パラメータが、組織機能、微小環境、及び体積制限と適合することを必要とする。
【0603】
本開示によれば、ＡＡＶ粒子は、薬学的組成物として調製され得、または薬学的組成物に含まれ得る。そのような組成物は必然的に、１つ以上の活性成分及び、最も多くの場合、１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤を含むことが理解される。
【0604】
本開示に従う薬学的組成物における活性成分（例えば、ＡＡＶ粒子）、薬学的に許容可能な賦形剤、及び／または任意の追加の成分の相対量は、処置されている対象の同一性、サイズ、及び／または状態に応じて及びさらに組成物が投与される経路に応じて変化し得る。例えば、組成物は、０．１％～９９％（ｗ／ｗ）の間の活性成分を含み得る。例として、組成物は、０．１％～１００％の間、例えば、．５～５０％の間、１～３０％の間、５～８０％の間、または少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。
【0605】
所定の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子の薬学的組成物は、本開示の少なくとも１つのペイロードを含み得る。非限定的な例として、薬学的組成物は、１、２、３、４または５つのペイロードを有するＡＡＶ粒子を含有し得る。
【0606】
本明細書で提供される薬学的組成物の説明は、ヒトへの投与に好適である薬学的組成物を原理的に対象としているが、そのような組成物は通常、任意の他の動物、例えば、非ヒト動物、例えば、非ヒト哺乳動物への投与に好適であることが当業者によって理解される。組成物を様々な動物への投与に好適なものとするためのヒトへの投与に好適な薬学的組成物の改変はよく理解されており、通常の知識を有する獣医薬理学者は、もし行う場合は、単なる普通の実験を用いてそのような改変を設計及び／または実施し得る。薬学的組成物の投与が企図される対象は、限定されないが、ヒト及び／または他の霊長類；商業的に関連する哺乳動物、例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、イヌ、マウス、ラット、商業的に関連するトリ、例えば、家禽、ニワトリ、アヒル、ガチョウ、及び／またはシチメンチョウを含むトリを含む哺乳動物を含む。
【0607】
所定の実施形態では、組成物は、ヒト、ヒト患者または対象に投与される。
本開示の製剤は、限定されないが、生理食塩水、リポソーム、脂質ナノ粒子、ポリマー、ペプチド、タンパク質、ＡＡＶ粒子でトランスフェクションされた細胞（例えば、対象への移行または移植のため）及びそれらの組み合わせを含み得る。
本開示の製剤は、限定されないが、生理食塩水、リポソーム、脂質ナノ粒子、ポリマー、ペプチド、タンパク質、ＡＡＶ粒子でトランスフェクションされた細胞（例えば、対象への移行または移植のため）及びそれらの組み合わせを含み得る。
【0608】
本明細書に記載の薬学的組成物の製剤は、薬理学の分野において知られているまたは後に開発される任意の方法によって調製され得る。本明細書で使用される場合、用語「薬学的組成物」は、少なくとも１つの活性成分及び任意に１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤を含む組成物を指す。
【0609】
通常、そのような調製方法は、活性成分を賦形剤及び／または１つ以上の他の付属成分と会合させる工程を含む。本明細書で使用される場合、語句「活性成分」は通常、本開示のポリヌクレオチドまたはポリペプチドをコードするペイロード領域を保有するＡＡＶ粒子または本明細書に記載されるＡＡＶ粒子のウイルスゲノムによってコードされる最終生成物のいずれかを指す。
【0610】
所定の実施形態では、製剤は、少なくとも１つの不活性成分を含み得る。本明細書で使用される場合、用語「不活性成分」は、製剤に含まれる１つ以上の不活性剤を指す。所定の実施形態では、本開示の製剤において使用され得る不活性成分のすべてが、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認されている場合があり、そのいずれもが承認されていない場合があり、またはその一部が承認されている場合がある。
【0611】
本明細書に記載のＡＡＶ粒子及び薬学的組成物の製剤は、薬理学の分野において知られているまたは後に開発される任意の方法によって調製され得る。通常、そのような調製方法は、活性成分を賦形剤及び／または１つ以上の他の付属成分と会合させ、次いで、必要な及び／または所望の場合、生成物を所望の単回または複数用量単位に分割、成形及び／または包装する工程を含む。
【0612】
本開示に従う薬学的組成物は、バルクで、単回単位用量として、及び／または複数の単回単位用量として調製、包装、及び／または販売され得る。本明細書で使用される場合、「単位用量」は、既定の量の活性成分を含む薬学的組成物の別個の量を指す。活性成分の量は通常、対象に投与されるであろう活性成分の投薬量及び／またはそのような投薬量の好都合な分数、例えば、そのような投薬量の２分の１または３分の１などに等しい。
【0613】
所定の実施形態では、本開示の製剤は、水性製剤（すなわち、水を含む製剤）である。所定の実施形態では、本開示の製剤は、水、消毒された水、または注射用水（ＷＦＩ）を含む。
【0614】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、約７．０のｐＨで０．００１％～０．１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を有するＰＢＳ中で製剤化され得る。
【0615】
所定の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ製剤は、少なくとも１つの発現する機能的ペイロードの発現に十分なＡＡＶ粒子を含有し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、１、２、３、４または５つの機能的ペイロードをコードするウイルスゲノムを含有し得る。
【0616】
本開示によれば、ＡＡＶ粒子は、ＣＮＳ送達のために製剤化され得る。血液脳関門を通過する薬剤が使用され得る。例えば、血液脳関門内皮に分子を標的化し得るいくつかの細胞侵入ペプチドが製剤化のために使用され得る（例えば、Ｍａｔｈｕｐａｌａ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｔｈｅｒ Ｐａｔ．，２００９，１９，１３７－１４０（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる））。
【0617】
所定の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ製剤は、リン酸塩、トリス、及び／またはヒスチジンを含む緩衝系を含み得る。リン酸塩、トリス、及び／またはヒスチジンの緩衝剤は、独立して、２～１２ｍＭの範囲で製剤において使用され得る。
【0618】
本開示の製剤は、本開示のＡＡＶ粒子及びウイルスベクターを生成、処理、調製、保存、増殖、または投与する任意の工程において使用され得る。所定の実施形態では、薬学的製剤及び成分は、本開示のＡＡＶ生成、ＡＡＶ処理、ＡＡＶ清澄化、ＡＡＶ精製、及びＡＡＶ仕上げシステムにおいて使用され得、これらのすべては、本開示のＡＡＶ薬学的、処理及び保存製剤を含む、当該技術分野で知られている製剤で事前すすぎ、包装、平衡化、フラッシュ、処理、溶出、洗浄または清澄化され得る。
【0619】
賦形剤及び希釈剤
本開示のＡＡＶ粒子は、（１）安定性を増加させる；（２）細胞トランスフェクションまたは形質導入を増加させる；（３）ペイロードの持続または遅延放出を可能にする；（４）生物分布を変化させる（例えば、ウイルス粒子を特定の組織または細胞タイプに標的化する）；（５）コードされるタンパク質の翻訳を増加させる；（６）コードされるタンパク質の放出プロファイルを変化させる及び／または（７）本開示のペイロードの調整可能な発現を可能にするために１つ以上の賦形剤または希釈剤を含む薬学的組成物に製剤化され得る。
本開示のＡＡＶ粒子は、（１）安定性を増加させる；（２）細胞トランスフェクションまたは形質導入を増加させる；（３）ペイロードの持続または遅延放出を可能にする；（４）生物分布を変化させる（例えば、ウイルス粒子を特定の組織または細胞タイプに標的化する）；（５）コードされるタンパク質の翻訳を増加させる；（６）コードされるタンパク質の放出プロファイルを変化させる及び／または（７）本開示のペイロードの調整可能な発現を可能にするために１つ以上の賦形剤または希釈剤を含む薬学的組成物に製剤化され得る。
【0620】
本開示に従う薬学的組成物における活性成分（例えば、ＡＡＶ粒子）、薬学的に許容可能な賦形剤、及び／または任意の追加の成分の相対量は、処置されている対象の同一性、サイズ、及び／または状態に応じて及びさらに組成物が投与される経路に応じて変化し得る。所定の実施形態では、組成物は、０．００１％～９９％（ｗ／ｗ）の間の活性成分を含み得る。例として、組成物は、０．００１％～１００％の間、例えば、０．５～５０％の間、１～３０％の間、５～８０％の間、または少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。所定の実施形態では、組成物は、０．００１％～９９％（ｗ／ｗ）の間の賦形剤及び希釈剤を含み得る。例として、組成物は、０．００１％～１００％の間、例えば、０．５～５０％の間、１～３０％の間、５～８０％の間、または少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の賦形剤及び希釈剤を含み得る。
【0621】
所定の実施形態では、薬学的に許容可能な賦形剤は、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％純粋であり得る。所定の実施形態では、賦形剤は、ヒトのための使用及び獣医学的使用のために承認されている。所定の実施形態では、賦形剤は、米国食品医薬品局によって承認されていてもよい。所定の実施形態では、賦形剤は、薬学的グレードのものであり得る。所定の実施形態では、賦形剤は、米国薬局方（ＵＳＰ）、欧州薬局方（ＥＰ）、英国薬局方、及び／または国際薬局方の基準を満たし得る。
【0622】
賦形剤は、本明細書で使用される場合、限定されないが、所望の特定の投薬形態に好適であるような任意の及びすべての溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散または懸濁助剤、表面活性剤、等張剤、増粘または乳化剤、防腐剤などを含む。薬学的組成物を製剤化するための様々な賦形剤及び組成物を調製するための技術は、当該技術分野で知られている（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ，２００６（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。任意の従来の賦形媒体、例えば、任意の不要な生物学的効果を生み出すことによってまたはそうでなければ薬学的組成物の任意の他の成分（複数可）と有害な様式で相互作用することによって物質またはその誘導体と不適合であり得る場合を除き、従来の賦形媒体の使用が本開示の範囲内で企図され得る。
【0623】
本開示の製剤に含まれ得る例示的な賦形剤及び希釈剤は、限定されないが、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウムラクトース、スクロース、セルロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、コーンデンプン、粉末糖など、及び／またはそれらの組み合わせを含む。
【0624】
本開示の製剤に含まれ得る例示的な賦形剤及び希釈剤は、限定されないが、１，２，６－ヘキサントリオール；１，２－ジミリストイル－Ｓｎ－グリセロ－３－（ホスホ－Ｓ－（１－グリセロール））；１，２－ジミリストイル－Ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン；１，２－ジオレオイル－Ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン；１，２－ジパルミトイル－Ｓｎ－グリセロ－３－（ホスホ－Ｒａｃ－（１－グリセロール））；１，２－ジステアロイル－Ｓｎ－グリセロ－３－（ホスホ－Ｒａｃ－（１－グリセロール））；１，２－ジステアロイル－Ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン；１－Ｏ－トリルビグアニド；２－エチル－１，６－ヘキサンジオール；酢酸；氷酢酸；無水酢酸；アセトン；アセトン重亜硫酸ナトリウム；アセチル化ラノリンアルコール；アセチル化モノグリセリド；アセチルシステイン；アセチルトリプトファン，ＤＬ－；アクリレートコポリマー；アクリル酸－アクリル酸イソオクチルコポリマー；アクリル接着剤７８８；活性炭；Ａｄｃｏｔｅ７２Ａ１０３；接着テープ；アジピン酸；Ａｅｒｏｔｅｘ樹脂３７３０；アラニン；凝集アルブミン；コロイドアルブミン；ヒトアルブミン；アルコール；無水アルコール；変性アルコール；希釈アルコール；アルファデクス；アルギン酸；アルキルアンモニウムスルホン酸ベタイン；アルキルアリールスルホン酸ナトリウム；アラントイン；アリル．アルファ．－イオノン；アーモンド油；アルファテルピネオール；アルファ－トコフェロール；アルファ－トコフェロールアセテート，Ｄｌ－；アルファ－トコフェロール，Ｄｌ－；酢酸アルミニウム；アルミニウムクロルヒドロキシアラントイネート；水酸化アルミニウム；水和水酸化アルミニウム－スクロース；水酸化アルミニウムゲル；水酸化アルミニウムゲルＦ５００；水酸化アルミニウムゲルＦ５０００；モノステアリン酸アルミニウム；酸化アルミニウム；アルミニウムポリエステル；ケイ酸アルミニウム；オクテニルコハク酸デンプンアルミニウム；ステアリン酸アルミニウム；塩基性酢酸アルミニウム；無水硫酸アルミニウム；アメルコールＣ；アメルコール－Ｃａｂ；アミノメチルプロパノール；アンモニア；アンモニア溶液；濃アンモニア溶液；酢酸アンモニウム；水酸化アンモニウム；ラウリル硫酸アンモニウム；アンモニウムノノキシノール－４スルフェート；Ｃ－１２－Ｃ－１５直鎖第一級アルコールエトキシレートのアンモニウム塩；硫酸アンモニウム；アンモニックス；アンホテリック－２；アンホテリック－９；アネトール；無水クエン酸；無水デキストロース；無水ラクトース；無水クエン酸三ナトリウム；アニス油；アノキシドＳｂｎ；消泡剤；アンチピリン；アパフルラン；杏仁油Ｐｅｇ－６エステル；アクアホール；アルギニン；アルラセル；アスコルビン酸；アスコルビン酸パルミテート；アスパラギン酸；ペルーバルサム；硫酸バリウム；みつろう；合成みつろう；ベヘネス－１０；ベントナイト；塩化ベンザルコニウム；ベンゼンスルホン酸；塩化ベンゼトニウム；臭化ベンゾドデシニウム；安息香酸；ベンジルアルコール；安息香酸ベンジル；塩化ベンジル；ベータデクス；ビバプシチド；次没食子酸ビスマス；ホウ酸；ブロクリナト；ブタン；ブチルアルコール；ビニルメチルエーテルのブチルエステル／無水マレイン酸コポリマー（１２５０００Ｍｗ）；ステアリン酸ブチル；ブチル化ヒドロキシアニソール；ブチル化ヒドロキシトルエン；ブチレングリコール；ブチルパラベン；酪酸；Ｃ２０－４０パレス－２４；カフェイン；カルシウム；炭酸カルシウム；塩化カルシウム；グルセプト酸カルシウム；水酸化カルシウム；乳酸カルシウム；カルコブトロール；カルジアミドナトリウム；カロキセト酸三ナトリウム；カルテリドールカルシウム；カナダバルサム；カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド；カプリル酸／カプリン酸／ステアリン酸トリグリセリド；カプタン；カプチゾール；カラメル；カルボマー１３４２；カルボマー１３８２；カルボマー９３４；カルボマー９３４ｐ；カルボマー９４０；カルボマー９４１；カルボマー９８０；カルボマー９８１；カルボマーホモポリマーＢ型（アリルペンタエリトリトール架橋）；カルボマーホモポリマーＣ型（アリルペンタエリトリトール架橋）；二酸化炭素；カルボキシビニルコポリマー；カルボキシメチルセルロース；カルボキシメチルセルロースナトリウム；カルボキシポリメチレン；カラギナン；カラギナン塩；ヒマシ油；ニオイヒバ油；セルロース；微晶質セルロース；Ｃｅｒａｓｙｎｔ－Ｓｅ；セレシン；セテアレス－１２；セテアレス－１５；セテアレス－３０；セテアリルアルコール／セテアレス－２０；エチルヘキサン酸セテアリル；セテス－１０；セテス－２；セテス－２０；セテス－２３；セトステアリルアルコール；塩化セトリモニウム；セチルアルコール；セチルエステルワックス；パルミチン酸セチル；塩化セチルピリジウム；クロロブタノール；クロロブタノール半水和物；無水クロロブタノール；クロロクレゾール；クロロキシレノール；コレステロール；コレス；コレス－２４；クエン酸塩；クエン酸；クエン酸一水和物；含水クエン酸；コカミドエーテルスルフェート；コカミンオキシド；ココベタイン；ココジエタノールアミド；ココモノエタノールアミド；カカオ脂；ココ－グリセリド；ヤシ油；水素化ヤシ油；水素化ヤシ油／パーム核油グリセリド；ココイルカプリロカプラート；コラノキ種子抽出物；コラーゲン；着色料懸濁剤；トウモロコシ油；綿実油；クリーム基材；クレアチン；クレアチニン；クレゾール；クロスカルメロースナトリウム；クロスポビドン；硫酸銅；無水硫酸銅；シクロメチコーン；シクロメチコーン／ジメチコーンコポリオール；システイン；塩酸システイン；無水塩酸システイン；システイン，Ｄｌ－；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．２８；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．３３；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．３６；Ｄ＆ＣレッドＮｏ．３９；Ｄ＆ＣイエローＮｏ．１０；ダルファムプリジン；Ｄａｕｂｅｒｔ１－５ Ｐｅｓｔｒ（Ｍａｔｔｅ）１６４ｚ；デシルメチルスルホキシド；ＤｅｈｙｄａｇワックスＳｘ；デヒドロ酢酸；Ｄｅｈｙｍｕｌｓ Ｅ；安息香酸デナトニウム；デオキシコール酸；デキストラン；デキストラン４０；デキストリン；デキストロース；デキストロース一水和物；デキストロース溶液；ジアトリゾ酸；ジアゾリジニル尿素；ジクロロベンジルアルコール；ジクロロジフルオロメタン；ジクロロテトラフルオロエタン；ジエタノールアミン；ピロ炭酸ジエチル；セバシン酸ジエチル；ジエチレングリコールモノエチルエーテル；ジエチルヘキシルフタレート；ジヒドキシアルミニウムアミノアセテート；ジイソプロパノールアミン；ジイソプロピルアジペート；ジイソプロピルジリノレエート；ジメチコン３５０；ジメチコンコポリオ－ル；ジメチコンＭｄｘ４－４２１０；ジメチコン医療用流体３６０；ジメチルイソソルビド；ジメチルスルホキシド；ジメチルアミノエチルメタクリレート－ブチルメタクリレート－メチルメタクリレートコポリマー；ジメチルジオクタデシルアンモニウムベントナイト；ジメチルシロキサン／ジメチルビニルシロキシコポリマー；ジノセブアンモニウム塩；ジパルミトイルホスファチジルグリセロール，Ｄｌ－；ジプロピレングリコール；ジナトリウムココアンホジアセテート；ジナトリウムラウレススルホスクシネート；ジナトリウムラウリルスルホスクシネート；ジナトリウムスルホサリチネート；ジソフェニン；ジビニルベンゼンスチレンコポリマー；Ｄｍｄｍヒダントイン；ドコサノール；ドクセートナトリウム；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ２８０－２５１６；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ３８７－２５１６；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８０－１１９６；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２０７０；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２１９４；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２２８７；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２２９６；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２８８８；Ｄｕｒｏ－Ｔａｋ８７－２９７９；エデト酸カルシウム二ナトリウム；エデト酸二ナトリウム；無水エデト酸二ナトリウム；エデト酸ナトリウム；エデト酸；卵リン脂質；エンツホン；エンツホンナトリウム；エピラクトース；エピテトラサイクリン塩酸塩；エッセンスブーケット９２００；エタノールアミン塩酸塩；酢酸エチル；オレイン酸エチル；エチルセルロース；エチレングリコール；エチレン酢酸ビニルコポリマー；エチレンジアミン；エチレンジアミン二塩酸塩；エチレン－プロピレンコポリマー；エチレン－酢酸ビニルコポリマー（２８％酢酸ビニル）；エチレン－酢酸ビニルコポリマー（９％酢酸ビニル）；ヒドロキシステアリン酸エチルヘキシル；エチルパラベン；オイカリプトール；エキサメタジム；食用脂肪；固形脂肪；脂肪酸エステル；脂肪酸ペンタエリスリオールエステル；脂肪酸；クエン酸脂肪アルコール；脂肪アルコール；Ｆｄ＆ＣブルーＮｏ．１；Ｆｄ＆ＣグリーンＮｏ．３；Ｆｄ＆ＣレッドＮｏ．４；Ｆｄ＆ＣレッドＮｏ．４０；Ｆｄ＆ＣイエローＮｏ．１０（脱リスト済）；Ｆｄ＆ＣイエローＮｏ．５；Ｆｄ＆ＣイエローＮｏ．６；塩化第二鉄；酸化第二鉄；香味料８９－１８６；香味料８９－２５９；香味料Ｄｆ－１１９；香味料Ｄｆ－１５３０；香味増強剤；香味料イチジク８２７１１８；香味料ラズベリーＰｆｃ－８４０７；医薬用香味料ロディアＮｏ．Ｒｆ４５１；フルオロクロロ炭化水素；ホルムアルデヒド；ホルムアルデヒド溶液；分留ヤシ油；芳香剤３９４９－５；芳香剤５２０ａ；芳香剤６．００７；芳香剤９１－１２２；芳香剤９１２８－Ｙ；芳香剤９３４９８ｇ；芳香剤マツバルサムＮｏ．５１２４；芳香剤Ｂｏｕｑｕｅｔ１０３２８；芳香剤Ｃｈｅｍｏｄｅｒｍ６４０１－Ｂ；芳香剤Ｃｈｅｍｏｄｅｒｍ６４１１；芳香剤Ｃｒｅａｍ Ｎｏ．７３４５７；芳香剤Ｃｓ－２８１９７；芳香剤Ｆｅｌｔｏｎ０６６ｍ；芳香剤Ｆｉｒｍｅｎｉｃｈ４７３７３；芳香剤Ｇｉｖａｕｄａｎ Ｅｓｓ９０９０／１ｃ；芳香剤Ｈ－６５４０；芳香剤Ｈｅｒｂａｌ１０３９６；芳香剤Ｎｊ－１０８５；芳香剤Ｐ Ｏ Ｆｌ－１４７；芳香剤Ｐａ５２８０５；芳香剤Ｐｅｒａ Ｄｅｒｍ Ｄ；芳香剤Ｒｂｄ－９８１９；芳香剤Ｓｈａｗ Ｍｕｄｇｅ Ｕ－７７７６；芳香剤Ｔｆ０４４０７８；芳香剤Ｕｎｇｅｒｅｒ Ｈｏｎｅｙｓｕｃｋｌｅ Ｋ２７７１；芳香剤Ｕｎｇｅｒｅｒ Ｎ５１９５；フルクトース；ガドリニウム酸化物；ガラクトース；ガンマシクロデキストリン；ゼラチン；架橋ゼラチン；ゲルフォームスポンジ；ジェランガム（低アシル）；Ｇｅｌｖａ７３７；ゲンチシン酸；ゲンチシン酸エタノールアミド；グルセプト酸ナトリウム；グルセプト酸ナトリウム二水和物；グルコノラクトン；グルクロン酸；グルタミン酸，Ｄｌ－；グルタチオン；グリセリン；水素化ロジンのグリセロールエステル；クエン酸グリセリル；イソステアリン酸グリセリル；ラウリン酸グリセリル；モノステアリン酸グリセリル；オレイン酸グリセリル；オレイン酸グリセリル／プロピレングリコール；パルミチン酸グリセリル；リシノール酸グリセリル；ステアリン酸グリセリル；ステアリン酸グリセリル－ラウレス－２３；ステアリン酸グリセリル／Ｐｅｇステアレート；ステアリン酸グリセリル／Ｐｅｇ－１００ステアレート；ステアリン酸グリセリル／Ｐｅｇ－４０ステアレート；ステアリン酸グリセリル－ステアルアミドエチルジエチルアミン；トリオレイン酸グリセリル；グリシン；グリシン塩酸塩；ジステアリン酸グリコール；ステアリン酸グリコール；グアニジン塩酸塩；グアーガム；ヘアコンディショナー（１８ｎ１９５－１ｍ）；ヘプタン；ヘタスターチ；ヘキシレングリコール；高密度ポリエチレン；ヒスチジン；ヒトアルブミンマイクロスフェア；ヒアルロン酸ナトリウム；炭化水素；可塑化炭化水素ゲル；塩酸；希塩酸；ヒドロコルチゾン；ヒドロゲルポリマー；過酸化水素；水素化ヒマシ油；水素化パーム油；水素化パーム／パーム核油Ｐｅｇ－６エステル；水素化ポリブテン６３５－６９０；水酸化イオン；ヒドロキシエチルセルロース；ヒドロキシエチルピペラジンエタンスルホン酸；ヒドロキシメチルセルロース；ヒドロキシオクタコサニルヒドロキシステアレート；ヒドロキシプロピルセルロース；ヒドロキシプロピルメチルセルロース
２９０６；ヒドロキシプロピル－ベータ－シクロデキストリン；ヒプロメロース２２０８（１５０００Ｍｐａ．Ｓ）；ヒプロメロース２９１０（１５０００Ｍｐａ．Ｓ）；ヒプロメロース；イミド尿素；ヨウ素；ヨードキサム酸；イオフェタミン塩酸塩；アイリッシュモス抽出物；イソブタン；イソセテス－２０；イソロイシン；アクリル酸イソオクチル；イソプロピルアルコール；イソステアリン酸イソプロピル；ミリスチン酸イソプロピル；ミリスチン酸イソプロピル－ミリスチルアルコール；パルミチン酸イソプロピル；ステアリン酸イソプロピル；イソステアリン酸；イソステアリルアルコール；等張食塩溶液；ジェレン；カオリン；カトンＣｇ；カトンＣｇＩＩ；ラクテート；乳酸；乳酸，Ｄｌ－；乳酸，Ｌ－；ラクトビオン酸；ラクトース；ラクトース一水和物；含水ラクトース；ラネス；ラノリン；ラノリンアルコール－鉱油；ラノリンアルコール；無水ラノリン；ラノリンコレステロール；ラノリン非イオン性誘導体；エトキシル化ラノリン；水素化ラノリン；塩化ラウラルコニウム；酸化ラウラミン；ラウルジモニウム加水分解動物コラーゲン；硫酸ラウレス；ラウレス－２；ラウレス－２３；ラウレス－４；ラウリン酸ジエタノールアミド；ラウリン酸ミリスチン酸ジエタノールアミド；ラウロイルサルコシン；乳酸ラウリル；硫酸ラウリル；Ｌａｖａｎｄｕｌａ Ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ花頂部；レシチン；無漂白レシチン；卵レシチン；水素化レシチン；水素化大豆レシチン；大豆レシチン；レモン油；ロイシン；レブリン酸；リドフェニン；軽油；軽油（８５Ｓｓｕ）；リモネン，（＋／－）－；リポコールＳｃ－１５；リジン；酢酸リジン；リジン一水和物；ケイ酸アルミニウムマグネシウム；ケイ酸アルミニウムマグネシウム水和物；塩化マグネシウム；硝酸マグネシウム；ステアリン酸マグネシウム；マレイン酸；マンニトール；マプロフィックス；メブロフェニン；医療用接着剤改変型Ｓ－１５；医療用消泡剤Ａ－Ｆエマルション；メドロン酸二ナトリウム；メドロン酸；メグルミン；メントール；メタクレゾール；メタリン酸；メタンスルホン酸；メチオニン；メチルアルコール；メチルグルセス－１０；メチルグルセス－２０；セスキステアリン酸メチルグルセス－２０；セスキステアリン酸メチルグルコース；ラウリン酸メチル；メチルピロリドン；サリチル酸メチル；ステアリン酸メチル；メチルボロン酸；メチルセルロース（４０００Ｍｐａ．Ｓ）；メチルセルロース；メチルクロロイソチアゾリノン；メチレンブルー；メチルイソチアゾリノン；メチルパラベン；微結晶性ワックス；鉱油；モノ及びジグリセリド；クエン酸モノステアリル；モノチオグリセロール；マルチステロール抽出物；ミリスチルアルコール；乳酸ミリスチル；ミリスチル－．ガンマ．－ピコリニウムクロリド；Ｎ－（カルバモイル－メトキシＰｅｇ－４０）－１，２－ジステアロイル－セファリンナトリウム；Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド；ナイアシンアミド；ニオキシム；硝酸；窒素；ノノキシノールヨード；ノノキシノール－１５；ノノキシノール－９；ノルフルラン；オートミール；オクタデセン－１／マレイン酸コポリマー；オクタン酸；オクチサレート；オクトキシノール－１；オクトキシノール－４０；オクトキシノール－９；オクチルドデカノール；オクチルフェノールポリメチレン；オレイン酸；オレス－１０／オレス－５；オレス－２；オレス－２０；オレイルアルコール；オレイン酸オレイル；オリーブ油；オキシドロン酸二ナトリウム；オキシキノリン；パーム核油；パルミタミンオキシド；パラベン；パラフィン；白色軟質パラフィン；香料クレーム４５／３；ピーナッツ油；精製ピーナッツ油；ペクチン；Ｐｅｇ６－３２ステアレート／ステアリン酸グリコール；Ｐｅｇ植物油；Ｐｅｇ－１００ステアレート；Ｐｅｇ－１２ラウリン酸グリセリル；Ｐｅｇ－１２０ステアリン酸グリセリル；Ｐｅｇ－１２０ジオレイン酸メチルグルコース；Ｐｅｇ－１５コカミン；Ｐｅｇ－１５０ジステアレート；Ｐｅｇ－２ステアレート；Ｐｅｇ－２０ソルビタンイソステアレート；Ｐｅｇ－２２メチルエーテル／ドデシルグリコールコポリマー；Ｐｅｇ－２５プロピレングリコールステアレート；Ｐｅｇ－４ジラウレート；Ｐｅｇ－４ラウレート；Ｐｅｇ－４０ヒマシ油；Ｐｅｇ－４０ソルビタンジイソステアレート；Ｐｅｇ－４５／ドデシルグリコールコポリマー；Ｐｅｇ－５オレエート；Ｐｅｇ－５０ステアレート；Ｐｅｇ－５４水素化ヒマシ油；Ｐｅｇ－６イソステアレート；Ｐｅｇ－６０ヒマシ油；Ｐｅｇ－６０水素化ヒマシ油；Ｐｅｇ－７メチルエーテル；Ｐｅｇ－７５ラノリン；Ｐｅｇ－８ラウレート；Ｐｅｇ－８ステアレート；ペゴキソール７ステアレート；ペンタデカラクトン；ペンタエリトリトールココエート；ペンテト酸五ナトリウム；ペンテト酸カルシウム三ナトリウム；ペンテト酸；ハッカ油；ペルフルトレン；香料２５６７７；香料Ｂｏｕｑｕｅｔ；香料Ｅ－１９９１；香料Ｇｄ５６０４；香料Ｔａｎａ９０／４２Ｓｃｂａ；香料Ｗ－１９５２－１；ワセリン；白色ワセリン；石油蒸留物；フェノール；液化フェノール；フェノニップ；フェノキシエタノール；フェニルアラニン；フェニルエチルアルコール；酢酸フェニル水銀；硝酸フェニル水銀；卵ホスファチジルグリセロール；リン脂質；卵リン脂質；ホスホリポン９０ｇ；リン酸；松葉油（Ｐｉｎｕｓ Ｓｙｌｖｅｓｔｒｉｓ）；ピペラジン六水和物；プラスチベース－５０ｗ；ポラクリリン；塩化ポリドロニウム；ポロキサマー１２４；ポロキサマー１８１；ポロキサマー１８２；ポロキサマー１８８；ポロキサマー２３７；ポロキサマー４０７；ポリ（ビス（Ｐ－カルボキシフェノキシ）プロパン無水物）：セバシン酸；末端ブロック化ポリ（ジメチルシロキサン／メチルビニルシロキサン／メチルヒドロゲンシロキサン）ジメチルビニルまたはジメチルヒドロキシまたはトリメチル；ポリ（Ｄｌ－乳酸－コ－グリコール酸）、（５０：５０；ポリ（Ｄｌ－乳酸－コ－グリコール酸）、エチルエステル終端、（５０：５０；ポリアクリル酸（２５００００Ｍｗ））；ポリブテン（１４００Ｍｗ）；ポリカルボフィル；ポリエステル；ポリエステルポリアミンコポリマー；ポリエステルレーヨン；ポリエチレングリコール１０００；ポリエチレングリコール１４５０；ポリエチレングリコール１５００；ポリエチレングリコール１５４０；ポリエチレングリコール２００；ポリエチレングリコール３００；ポリエチレングリコール３００－１６００；ポリエチレングリコール３３５０；ポリエチレングリコール４００；ポリエチレングリコール４０００；ポリエチレングリコール５４０；ポリエチレングリコール６００；ポリエチレングリコール６０００；ポリエチレングリコール８０００；ポリエチレングリコール９００；酸化第二鉄ブラック含有（＜１％）高密度ポリエチレン；硫酸バリウム含有（２０～２４％）低密度ポリエチレン；ポリエチレンＴ；ポリエチレンテレフタレート；ポリグラクチン；ポリグルセリル－３オレエート；ポリグルセリル－４オレエート；ポリヒドロキシエチルメタクリレート；ポリイソブチレン；ポリイソブチレン（１１０００００Ｍｗ）；ポリイソブチレン（３５０００Ｍｗ）；ポリイソブチレン１７８－２３６；ポリイソブチレン２４１－２９４；ポリイソブチレン３５－３９；低分子量ポリイソブチレン；中分子量ポリイソブチレン；ポリイソブチレン／ポリブテン接着剤；ポリラクチド；ポリオール；ポリオキシエチレン－ポリオキシプロピレン１８００；ポリオキシエチレンアルコール；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレンプロピレン；ポリオキシル２０セトステアリルエーテル；ポリオキシル３５ヒマシ油；ポリオキシル４０水素化ヒマシ油；ステアリン酸ポリオキシル４０；ステアリン酸ポリオキシル４００；パルミトステアリン酸ポリオキシル６及びポリオキシル３２；ジステアリン酸ポリオキシル；ポリオキシルグリセリルステアレート；ポリオキシルラノリン；パルミチン酸ポリオキシル；ステアリン酸ポリオキシル；ポリプロピレン；ポリプロピレングリコール；ポリクオタニウム－１０；ポリクオタニウム－７（７０／３０アクリルアミド／ダドマック；ポリシロキサン；ポリソルベート２０；ポリソルベート４０；ポリソルベート６０；ポリソルベート６５；ポリソルベート８０；ポリウレタン；ポリ酢酸ビニル；ポリビニルアルコール；ポリ塩化ビニル；ポリ塩化ビニル－ポリ酢酸ビニルコポリマー；ポリビニルピリジン；ケシ油；炭酸カリウム；酢酸カリウム；カリウムミョウバン；炭酸水素カリウム；亜硫酸水素カリウム；塩化カリウム；クエン酸カリウム；水酸化カリウム；メタ重亜硫酸カリウム；二塩基性リン酸カリウム；一塩基性リン酸カリウム；カリウム石鹸；ソルビン酸カリウム；ポビドンアクリレートコポリマー；ポビドンヒドロゲル；ポビドンＫ１７；ポビドンＫ２５；ポビドンＫ２９／３２；ポビドンＫ３０；ポビドンＫ９０；ポビドンＫ９０ｆ；ポビドン／エイコサエンコポリマー；ポビドン；Ｐｐｇ－１２／Ｓｍｄｉコポリマー；Ｐｐｇ－１５ステアリルエーテル；Ｐｐｇ－２０メチルグルコースエーテルジステアレート；Ｐｐｇ－２６オレエート；プロダクトワット（Ｐｒｏｄｕｃｔ Ｗａｔ）；プロリン；プロムルゲンＤ；プロムルゲンＧ；プロパン；噴霧剤Ａ－４６；没食子酸プロピル；炭酸プロピレン；プロピレングリコール；プロピレングリコールジアセテート；プロピレングリコールジカプリレート；プロピレングリコールモノラウレート；プロピレングリコールモノパルミトステアレート；プロピレングリコールパルミトステアレート；プロピレングリコールリシノレレート；プロピレングリコール／ジアゾリジニル；尿素／メチルパラベン／プロピルパルベン；プロピルパラベン；硫酸プロタミン；タンパク質加水分解物；Ｐｖｍ／Ｍａコポリマー；クアテルニウム－１５；クアテルニウム－１５シス型；クアテルニウム－５２；Ｒａ－２３９７；Ｒａ－３０１１；サッカリン；サッカリンナトリウム；無水サッカリンナトリウム；サフラワー油；Ｓｄアルコール３ａ；Ｓｄアルコール４０；Ｓｄアルコール４０－２；Ｓｄアルコール４０ｂ；セピネオＰ６００；セリン；ゴマ油；シアバター；シラスティックブランドの医療用管材料；シラスティック医療用接着剤、シリコーンＡ型；歯科用シリカ；ケイ素；二酸化ケイ素；コロイド状二酸化ケイ素；シリコーン；シリコーン接着剤４１０２；シリコーン接着剤４５０２；シリコーン接着剤Ｂｉｏ－Ｐｓａ Ｑ７－４２０１；シリコーン接着剤Ｂｉｏ－Ｐｓａ Ｑ７－４３０１；シリコーンエマルション；シリコーン／ポリエステルフィルムストリップ；シメチコン；シメチコンエマルジョン；Ｓｉｐｏｎ Ｌｓ ２０ｎｐ；ソーダ灰；酢酸ナトリウム；無水酢酸ナトリウム；アルキル硫酸ナトリウム；アスコルビン酸ナトリウム；安息香酸ナトリウム；重炭酸ナトリウム；重硫酸ナトリウム；亜硫酸水素ナトリウム；ホウ酸ナトリウム；ホウ酸ナトリウム十水和物；炭酸ナトリウム；炭酸ナトリウム十水和物；炭酸ナトリウム一水和物；セトステアリル硫酸ナトリウム；塩素酸ナトリウム；塩化ナトリウム；塩化ナトリウム注射剤；静菌性塩化ナトリウム注射剤；ナトリウムコレステリルスルフェート；クエン酸ナトリウム；ナトリウムココイルサルコシネート；デソキシコール酸ナトリウム；亜ジチオン酸ナトリウム；ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム；ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム；グルコン酸ナトリウム；水酸化ナトリウム；次亜塩素酸ナトリウム；ヨウ化ナトリウム；乳酸ナトリウム；乳酸ナトリウム，Ｌ－；ナトリウムラウレス－２スルフェート；ナトリウムラウレス－３スルフェート；ナトリウムラウレス－５スルフェート；ナトリウムラウロイルサルコシネート；ラウリル硫酸ナトリウム；ラウリルスルホ酢酸ナトリウム；メタ重亜硫酸ナトリウム；硝酸ナトリウム；リン酸ナトリウム；リン酸ナトリウム二水和物；二塩基性リン酸ナトリウム；無水二塩基性リン酸ナトリウム；二塩基性リン酸ナトリウム二水和物；二塩基性リン酸ナトリウム十二水和物；二塩基性リン酸ナトリウム七水和物；一塩基性リン酸ナトリウ
ム；無水一塩基性リン酸ナトリウム；一塩基性リン酸ナトリウム二水和物；一塩基性リン酸ナトリウム一水和物；ポリアクリル酸ナトリウム（２５０００００Ｍｗ）；ピロリン酸ナトリウム；ピロリドンカルボン酸ナトリウム；デンプングリコール酸ナトリウム；コハク酸ナトリウム六水和物；硫酸ナトリウム；無水硫酸ナトリウム；硫酸ナトリウム十水和物；亜硫酸ナトリウム；ナトリウムスルホスクシネート化ウンデシレンモノアルキロールアミド；酒石酸ナトリウム；チオグリコール酸ナトリウム；チオマリン酸ナトリウム；チオ硫酸ナトリウム；無水チオ硫酸ナトリウム；トリメタリン酸ナトリウム；キシレンスルホン酸ナトリウム；Ｓｏｍａｙ４４；ソルビン酸；ソルビタン；イソステアリン酸ソルビタン；モノラウリン酸ソルビタン；モノオレイン酸ソルビタン；モノパルミチン酸ソルビタン；モノステアリン酸ソルビタン；セスキオレイン酸ソルビタン；トリオレイン酸ソルビタン；トリステアリン酸ソルビタン；ソルビトール；ソルビトール溶液；大豆粉；大豆油；スペアミント油；鯨ろう；スクアラン；安定化オキシクロロ錯体；２－エチルヘキサン酸第一スズ；塩化第一スズ；無水塩化第一スズ；フッ化第一スズ；酒石酸第一スズ；デンプン；アルファ化デンプン１５００；トウモロコシデンプン；塩化ステアラルコニウム；ステアラルコニウムヘクトライト／炭酸プロピレン；ステアルアミドエチルジエチルアミン；ステアレス－１０；ステアレス－１００；ステアレス－２；ステアレス－２０；ステアレス－２１；ステアレス－４０；ステアリン酸；ステアリン酸ジエタノールアミド；ステアロキシトリメチルシラン；ステアルトリモニウム加水分解動物コラーゲン；ステアリルアルコール；吸入用滅菌水；スチレン／イソプレン／スチレンブロックコポリマー；サクシマー；コハク酸；スクラロース；スクロース；ジステアリン酸スクロース；スクロースポリエステル；スルファセタミドナトリウム；スルホブチルエーテル．ベータ．－シクロデキストリン；二酸化硫黄；硫酸；亜硫酸；スルファクトールＱｓ；タガトース，Ｄ－；タルク；トール油；獣脂グリセリド；酒石酸；酒石酸，Ｄｌ－；テノックス；テノックス－２；Ｔｅｒｔ－ブチルアルコール；Ｔｅｒｔ－ブチルヒドロペルオキシド；Ｔｅｒｔ－ブチルヒドロキノン；テトラキス（２－メトキシイソブチルイソシアニド）銅（Ｉ）テトラフルオロボレート；オルトケイ酸テトラプロピル；テトロホスミン；テオフィリン；チメロサール；トレオニン；チモール；スズ；二酸化チタン；トコフェロール；トコフェルソラン；完全非経口栄養剤、脂質エマルション；トリアセチン；トリカプリリン；トリクロロモノフルオロメタン；トリデセス－１０；ラウリル硫酸トリエタノールアミン；トリフルオロ酢酸；中鎖トリグリセリド；トリヒドロキシステアリン；トリラネス－４リン酸；トリラウレス－４リン酸；クエン酸三ナトリウム二水和物；トリナトリウムヘドタ；Ｔｒｉｔｏｎ７２０；Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－２００；トロラミン；トロマンタジン；トロメタミン（ＴＲＩＳ）；トリプトファン；チロキサポール；チロシン；ウンデシレン酸；ユニオン７６Ａｍｓｃｏ－Ｒｅｓ６０３８；尿素；バリン；植物油；水素化植物油グリセリド；水素化植物油；ベルセタミド；ビスカリン；ビスコース／コットン；ビタミンＥ；乳化ワックス；ウェコビーＦｓ；白色セレシンワックス；白ろう；キサンタンガム；亜鉛；酢酸亜鉛；炭酸亜鉛；塩化亜鉛；ならびに酸化亜鉛を含む。
２９０６；ヒドロキシプロピル－ベータ－シクロデキストリン；ヒプロメロース２２０８（１５０００Ｍｐａ．Ｓ）；ヒプロメロース２９１０（１５０００Ｍｐａ．Ｓ）；ヒプロメロース；イミド尿素；ヨウ素；ヨードキサム酸；イオフェタミン塩酸塩；アイリッシュモス抽出物；イソブタン；イソセテス－２０；イソロイシン；アクリル酸イソオクチル；イソプロピルアルコール；イソステアリン酸イソプロピル；ミリスチン酸イソプロピル；ミリスチン酸イソプロピル－ミリスチルアルコール；パルミチン酸イソプロピル；ステアリン酸イソプロピル；イソステアリン酸；イソステアリルアルコール；等張食塩溶液；ジェレン；カオリン；カトンＣｇ；カトンＣｇＩＩ；ラクテート；乳酸；乳酸，Ｄｌ－；乳酸，Ｌ－；ラクトビオン酸；ラクトース；ラクトース一水和物；含水ラクトース；ラネス；ラノリン；ラノリンアルコール－鉱油；ラノリンアルコール；無水ラノリン；ラノリンコレステロール；ラノリン非イオン性誘導体；エトキシル化ラノリン；水素化ラノリン；塩化ラウラルコニウム；酸化ラウラミン；ラウルジモニウム加水分解動物コラーゲン；硫酸ラウレス；ラウレス－２；ラウレス－２３；ラウレス－４；ラウリン酸ジエタノールアミド；ラウリン酸ミリスチン酸ジエタノールアミド；ラウロイルサルコシン；乳酸ラウリル；硫酸ラウリル；Ｌａｖａｎｄｕｌａ Ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ花頂部；レシチン；無漂白レシチン；卵レシチン；水素化レシチン；水素化大豆レシチン；大豆レシチン；レモン油；ロイシン；レブリン酸；リドフェニン；軽油；軽油（８５Ｓｓｕ）；リモネン，（＋／－）－；リポコールＳｃ－１５；リジン；酢酸リジン；リジン一水和物；ケイ酸アルミニウムマグネシウム；ケイ酸アルミニウムマグネシウム水和物；塩化マグネシウム；硝酸マグネシウム；ステアリン酸マグネシウム；マレイン酸；マンニトール；マプロフィックス；メブロフェニン；医療用接着剤改変型Ｓ－１５；医療用消泡剤Ａ－Ｆエマルション；メドロン酸二ナトリウム；メドロン酸；メグルミン；メントール；メタクレゾール；メタリン酸；メタンスルホン酸；メチオニン；メチルアルコール；メチルグルセス－１０；メチルグルセス－２０；セスキステアリン酸メチルグルセス－２０；セスキステアリン酸メチルグルコース；ラウリン酸メチル；メチルピロリドン；サリチル酸メチル；ステアリン酸メチル；メチルボロン酸；メチルセルロース（４０００Ｍｐａ．Ｓ）；メチルセルロース；メチルクロロイソチアゾリノン；メチレンブルー；メチルイソチアゾリノン；メチルパラベン；微結晶性ワックス；鉱油；モノ及びジグリセリド；クエン酸モノステアリル；モノチオグリセロール；マルチステロール抽出物；ミリスチルアルコール；乳酸ミリスチル；ミリスチル－．ガンマ．－ピコリニウムクロリド；Ｎ－（カルバモイル－メトキシＰｅｇ－４０）－１，２－ジステアロイル－セファリンナトリウム；Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド；ナイアシンアミド；ニオキシム；硝酸；窒素；ノノキシノールヨード；ノノキシノール－１５；ノノキシノール－９；ノルフルラン；オートミール；オクタデセン－１／マレイン酸コポリマー；オクタン酸；オクチサレート；オクトキシノール－１；オクトキシノール－４０；オクトキシノール－９；オクチルドデカノール；オクチルフェノールポリメチレン；オレイン酸；オレス－１０／オレス－５；オレス－２；オレス－２０；オレイルアルコール；オレイン酸オレイル；オリーブ油；オキシドロン酸二ナトリウム；オキシキノリン；パーム核油；パルミタミンオキシド；パラベン；パラフィン；白色軟質パラフィン；香料クレーム４５／３；ピーナッツ油；精製ピーナッツ油；ペクチン；Ｐｅｇ６－３２ステアレート／ステアリン酸グリコール；Ｐｅｇ植物油；Ｐｅｇ－１００ステアレート；Ｐｅｇ－１２ラウリン酸グリセリル；Ｐｅｇ－１２０ステアリン酸グリセリル；Ｐｅｇ－１２０ジオレイン酸メチルグルコース；Ｐｅｇ－１５コカミン；Ｐｅｇ－１５０ジステアレート；Ｐｅｇ－２ステアレート；Ｐｅｇ－２０ソルビタンイソステアレート；Ｐｅｇ－２２メチルエーテル／ドデシルグリコールコポリマー；Ｐｅｇ－２５プロピレングリコールステアレート；Ｐｅｇ－４ジラウレート；Ｐｅｇ－４ラウレート；Ｐｅｇ－４０ヒマシ油；Ｐｅｇ－４０ソルビタンジイソステアレート；Ｐｅｇ－４５／ドデシルグリコールコポリマー；Ｐｅｇ－５オレエート；Ｐｅｇ－５０ステアレート；Ｐｅｇ－５４水素化ヒマシ油；Ｐｅｇ－６イソステアレート；Ｐｅｇ－６０ヒマシ油；Ｐｅｇ－６０水素化ヒマシ油；Ｐｅｇ－７メチルエーテル；Ｐｅｇ－７５ラノリン；Ｐｅｇ－８ラウレート；Ｐｅｇ－８ステアレート；ペゴキソール７ステアレート；ペンタデカラクトン；ペンタエリトリトールココエート；ペンテト酸五ナトリウム；ペンテト酸カルシウム三ナトリウム；ペンテト酸；ハッカ油；ペルフルトレン；香料２５６７７；香料Ｂｏｕｑｕｅｔ；香料Ｅ－１９９１；香料Ｇｄ５６０４；香料Ｔａｎａ９０／４２Ｓｃｂａ；香料Ｗ－１９５２－１；ワセリン；白色ワセリン；石油蒸留物；フェノール；液化フェノール；フェノニップ；フェノキシエタノール；フェニルアラニン；フェニルエチルアルコール；酢酸フェニル水銀；硝酸フェニル水銀；卵ホスファチジルグリセロール；リン脂質；卵リン脂質；ホスホリポン９０ｇ；リン酸；松葉油（Ｐｉｎｕｓ Ｓｙｌｖｅｓｔｒｉｓ）；ピペラジン六水和物；プラスチベース－５０ｗ；ポラクリリン；塩化ポリドロニウム；ポロキサマー１２４；ポロキサマー１８１；ポロキサマー１８２；ポロキサマー１８８；ポロキサマー２３７；ポロキサマー４０７；ポリ（ビス（Ｐ－カルボキシフェノキシ）プロパン無水物）：セバシン酸；末端ブロック化ポリ（ジメチルシロキサン／メチルビニルシロキサン／メチルヒドロゲンシロキサン）ジメチルビニルまたはジメチルヒドロキシまたはトリメチル；ポリ（Ｄｌ－乳酸－コ－グリコール酸）、（５０：５０；ポリ（Ｄｌ－乳酸－コ－グリコール酸）、エチルエステル終端、（５０：５０；ポリアクリル酸（２５００００Ｍｗ））；ポリブテン（１４００Ｍｗ）；ポリカルボフィル；ポリエステル；ポリエステルポリアミンコポリマー；ポリエステルレーヨン；ポリエチレングリコール１０００；ポリエチレングリコール１４５０；ポリエチレングリコール１５００；ポリエチレングリコール１５４０；ポリエチレングリコール２００；ポリエチレングリコール３００；ポリエチレングリコール３００－１６００；ポリエチレングリコール３３５０；ポリエチレングリコール４００；ポリエチレングリコール４０００；ポリエチレングリコール５４０；ポリエチレングリコール６００；ポリエチレングリコール６０００；ポリエチレングリコール８０００；ポリエチレングリコール９００；酸化第二鉄ブラック含有（＜１％）高密度ポリエチレン；硫酸バリウム含有（２０～２４％）低密度ポリエチレン；ポリエチレンＴ；ポリエチレンテレフタレート；ポリグラクチン；ポリグルセリル－３オレエート；ポリグルセリル－４オレエート；ポリヒドロキシエチルメタクリレート；ポリイソブチレン；ポリイソブチレン（１１０００００Ｍｗ）；ポリイソブチレン（３５０００Ｍｗ）；ポリイソブチレン１７８－２３６；ポリイソブチレン２４１－２９４；ポリイソブチレン３５－３９；低分子量ポリイソブチレン；中分子量ポリイソブチレン；ポリイソブチレン／ポリブテン接着剤；ポリラクチド；ポリオール；ポリオキシエチレン－ポリオキシプロピレン１８００；ポリオキシエチレンアルコール；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレンプロピレン；ポリオキシル２０セトステアリルエーテル；ポリオキシル３５ヒマシ油；ポリオキシル４０水素化ヒマシ油；ステアリン酸ポリオキシル４０；ステアリン酸ポリオキシル４００；パルミトステアリン酸ポリオキシル６及びポリオキシル３２；ジステアリン酸ポリオキシル；ポリオキシルグリセリルステアレート；ポリオキシルラノリン；パルミチン酸ポリオキシル；ステアリン酸ポリオキシル；ポリプロピレン；ポリプロピレングリコール；ポリクオタニウム－１０；ポリクオタニウム－７（７０／３０アクリルアミド／ダドマック；ポリシロキサン；ポリソルベート２０；ポリソルベート４０；ポリソルベート６０；ポリソルベート６５；ポリソルベート８０；ポリウレタン；ポリ酢酸ビニル；ポリビニルアルコール；ポリ塩化ビニル；ポリ塩化ビニル－ポリ酢酸ビニルコポリマー；ポリビニルピリジン；ケシ油；炭酸カリウム；酢酸カリウム；カリウムミョウバン；炭酸水素カリウム；亜硫酸水素カリウム；塩化カリウム；クエン酸カリウム；水酸化カリウム；メタ重亜硫酸カリウム；二塩基性リン酸カリウム；一塩基性リン酸カリウム；カリウム石鹸；ソルビン酸カリウム；ポビドンアクリレートコポリマー；ポビドンヒドロゲル；ポビドンＫ１７；ポビドンＫ２５；ポビドンＫ２９／３２；ポビドンＫ３０；ポビドンＫ９０；ポビドンＫ９０ｆ；ポビドン／エイコサエンコポリマー；ポビドン；Ｐｐｇ－１２／Ｓｍｄｉコポリマー；Ｐｐｇ－１５ステアリルエーテル；Ｐｐｇ－２０メチルグルコースエーテルジステアレート；Ｐｐｇ－２６オレエート；プロダクトワット（Ｐｒｏｄｕｃｔ Ｗａｔ）；プロリン；プロムルゲンＤ；プロムルゲンＧ；プロパン；噴霧剤Ａ－４６；没食子酸プロピル；炭酸プロピレン；プロピレングリコール；プロピレングリコールジアセテート；プロピレングリコールジカプリレート；プロピレングリコールモノラウレート；プロピレングリコールモノパルミトステアレート；プロピレングリコールパルミトステアレート；プロピレングリコールリシノレレート；プロピレングリコール／ジアゾリジニル；尿素／メチルパラベン／プロピルパルベン；プロピルパラベン；硫酸プロタミン；タンパク質加水分解物；Ｐｖｍ／Ｍａコポリマー；クアテルニウム－１５；クアテルニウム－１５シス型；クアテルニウム－５２；Ｒａ－２３９７；Ｒａ－３０１１；サッカリン；サッカリンナトリウム；無水サッカリンナトリウム；サフラワー油；Ｓｄアルコール３ａ；Ｓｄアルコール４０；Ｓｄアルコール４０－２；Ｓｄアルコール４０ｂ；セピネオＰ６００；セリン；ゴマ油；シアバター；シラスティックブランドの医療用管材料；シラスティック医療用接着剤、シリコーンＡ型；歯科用シリカ；ケイ素；二酸化ケイ素；コロイド状二酸化ケイ素；シリコーン；シリコーン接着剤４１０２；シリコーン接着剤４５０２；シリコーン接着剤Ｂｉｏ－Ｐｓａ Ｑ７－４２０１；シリコーン接着剤Ｂｉｏ－Ｐｓａ Ｑ７－４３０１；シリコーンエマルション；シリコーン／ポリエステルフィルムストリップ；シメチコン；シメチコンエマルジョン；Ｓｉｐｏｎ Ｌｓ ２０ｎｐ；ソーダ灰；酢酸ナトリウム；無水酢酸ナトリウム；アルキル硫酸ナトリウム；アスコルビン酸ナトリウム；安息香酸ナトリウム；重炭酸ナトリウム；重硫酸ナトリウム；亜硫酸水素ナトリウム；ホウ酸ナトリウム；ホウ酸ナトリウム十水和物；炭酸ナトリウム；炭酸ナトリウム十水和物；炭酸ナトリウム一水和物；セトステアリル硫酸ナトリウム；塩素酸ナトリウム；塩化ナトリウム；塩化ナトリウム注射剤；静菌性塩化ナトリウム注射剤；ナトリウムコレステリルスルフェート；クエン酸ナトリウム；ナトリウムココイルサルコシネート；デソキシコール酸ナトリウム；亜ジチオン酸ナトリウム；ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム；ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム；グルコン酸ナトリウム；水酸化ナトリウム；次亜塩素酸ナトリウム；ヨウ化ナトリウム；乳酸ナトリウム；乳酸ナトリウム，Ｌ－；ナトリウムラウレス－２スルフェート；ナトリウムラウレス－３スルフェート；ナトリウムラウレス－５スルフェート；ナトリウムラウロイルサルコシネート；ラウリル硫酸ナトリウム；ラウリルスルホ酢酸ナトリウム；メタ重亜硫酸ナトリウム；硝酸ナトリウム；リン酸ナトリウム；リン酸ナトリウム二水和物；二塩基性リン酸ナトリウム；無水二塩基性リン酸ナトリウム；二塩基性リン酸ナトリウム二水和物；二塩基性リン酸ナトリウム十二水和物；二塩基性リン酸ナトリウム七水和物；一塩基性リン酸ナトリウ
ム；無水一塩基性リン酸ナトリウム；一塩基性リン酸ナトリウム二水和物；一塩基性リン酸ナトリウム一水和物；ポリアクリル酸ナトリウム（２５０００００Ｍｗ）；ピロリン酸ナトリウム；ピロリドンカルボン酸ナトリウム；デンプングリコール酸ナトリウム；コハク酸ナトリウム六水和物；硫酸ナトリウム；無水硫酸ナトリウム；硫酸ナトリウム十水和物；亜硫酸ナトリウム；ナトリウムスルホスクシネート化ウンデシレンモノアルキロールアミド；酒石酸ナトリウム；チオグリコール酸ナトリウム；チオマリン酸ナトリウム；チオ硫酸ナトリウム；無水チオ硫酸ナトリウム；トリメタリン酸ナトリウム；キシレンスルホン酸ナトリウム；Ｓｏｍａｙ４４；ソルビン酸；ソルビタン；イソステアリン酸ソルビタン；モノラウリン酸ソルビタン；モノオレイン酸ソルビタン；モノパルミチン酸ソルビタン；モノステアリン酸ソルビタン；セスキオレイン酸ソルビタン；トリオレイン酸ソルビタン；トリステアリン酸ソルビタン；ソルビトール；ソルビトール溶液；大豆粉；大豆油；スペアミント油；鯨ろう；スクアラン；安定化オキシクロロ錯体；２－エチルヘキサン酸第一スズ；塩化第一スズ；無水塩化第一スズ；フッ化第一スズ；酒石酸第一スズ；デンプン；アルファ化デンプン１５００；トウモロコシデンプン；塩化ステアラルコニウム；ステアラルコニウムヘクトライト／炭酸プロピレン；ステアルアミドエチルジエチルアミン；ステアレス－１０；ステアレス－１００；ステアレス－２；ステアレス－２０；ステアレス－２１；ステアレス－４０；ステアリン酸；ステアリン酸ジエタノールアミド；ステアロキシトリメチルシラン；ステアルトリモニウム加水分解動物コラーゲン；ステアリルアルコール；吸入用滅菌水；スチレン／イソプレン／スチレンブロックコポリマー；サクシマー；コハク酸；スクラロース；スクロース；ジステアリン酸スクロース；スクロースポリエステル；スルファセタミドナトリウム；スルホブチルエーテル．ベータ．－シクロデキストリン；二酸化硫黄；硫酸；亜硫酸；スルファクトールＱｓ；タガトース，Ｄ－；タルク；トール油；獣脂グリセリド；酒石酸；酒石酸，Ｄｌ－；テノックス；テノックス－２；Ｔｅｒｔ－ブチルアルコール；Ｔｅｒｔ－ブチルヒドロペルオキシド；Ｔｅｒｔ－ブチルヒドロキノン；テトラキス（２－メトキシイソブチルイソシアニド）銅（Ｉ）テトラフルオロボレート；オルトケイ酸テトラプロピル；テトロホスミン；テオフィリン；チメロサール；トレオニン；チモール；スズ；二酸化チタン；トコフェロール；トコフェルソラン；完全非経口栄養剤、脂質エマルション；トリアセチン；トリカプリリン；トリクロロモノフルオロメタン；トリデセス－１０；ラウリル硫酸トリエタノールアミン；トリフルオロ酢酸；中鎖トリグリセリド；トリヒドロキシステアリン；トリラネス－４リン酸；トリラウレス－４リン酸；クエン酸三ナトリウム二水和物；トリナトリウムヘドタ；Ｔｒｉｔｏｎ７２０；Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－２００；トロラミン；トロマンタジン；トロメタミン（ＴＲＩＳ）；トリプトファン；チロキサポール；チロシン；ウンデシレン酸；ユニオン７６Ａｍｓｃｏ－Ｒｅｓ６０３８；尿素；バリン；植物油；水素化植物油グリセリド；水素化植物油；ベルセタミド；ビスカリン；ビスコース／コットン；ビタミンＥ；乳化ワックス；ウェコビーＦｓ；白色セレシンワックス；白ろう；キサンタンガム；亜鉛；酢酸亜鉛；炭酸亜鉛；塩化亜鉛；ならびに酸化亜鉛を含む。
【0625】
本明細書に開示されるＡＡＶ粒子の薬学的製剤は、陽イオンまたは陰イオンを含み得る。所定の実施形態では、製剤は、金属陽イオン、例えば、限定されないが、Ｚｎ２＋、Ｃａ２＋、Ｃｕ２＋、Ｍｎ２＋、Ｍｇ＋及びそれらの組み合わせを含む。非限定的な例として、製剤は、ポリマー及び金属陽イオンとの複合体を含み得る（例えば、米国特許番号６，２６５，３８９及び６，５５５，５２５（これらの各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。
【0626】
本開示の製剤はまた、１つ以上の薬学的に許容可能な塩を含み得る。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容可能な塩」は、開示される化合物の誘導体であって、親化合物が、既存の酸または塩基部位をその塩形態に変換することによって（例えば、遊離塩基基を好適な有機酸と反応させることによって）改変されたものを指す。
【0627】
所定の実施形態では、薬学的組成物の製剤化において使用され得る追加の賦形剤は、塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ２）、アルギニン、ソルビトール、及び／またはトレハロースを含み得る。
【0628】
本開示の製剤は、ＡＡＶ粒子に加えて少なくとも１つの賦形剤及び／または希釈剤を含み得る。製剤は、ＡＡＶ粒子に加えて１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０種、または１０種を超える賦形剤及び／または希釈剤を含み得る。
【0629】
所定の実施形態では、製剤は、限定されないが、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含み得る。非限定的な例として、ＰＢＳは、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二ナトリウム、リン酸一カリウム、及び蒸留水を含み得る。いくつかの例では、ＰＢＳは、カリウムまたはマグネシウムを含有しない。他の例では、ＰＢＳは、カルシウム及びマグネシウムを含有する。
【0630】
リン酸ナトリウム
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、リン酸ナトリウムである。製剤は、一塩基性、二塩基性または一塩基性及び二塩基性の両方の組み合わせのリン酸ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、リン酸ナトリウムである。製剤は、一塩基性、二塩基性または一塩基性及び二塩基性の両方の組み合わせのリン酸ナトリウムを含み得る。
【0631】
所定の実施形態では、製剤におけるリン酸ナトリウムの濃度は、限定されないが、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭまたは１５ｍＭであり得る。
【0632】
製剤は、０～０．５ｍＭ、０．１～０．６ｍＭ、０．２～０．７ｍＭ、０．３～０．８ｍＭ、０．４～０．９ｍＭ、０．５～１ｍＭ、０．６～１．１ｍＭ、０．７～１．２ｍＭ、０．８～１．３ｍＭ、０．９～１．４ｍＭ、１～１．５ｍＭ、１．１～１．６ｍＭ、１．２～１．７ｍＭ、１．３～１．８ｍＭ、１．４～１．９ｍＭ、１．５～２ｍＭ、１．６～２．１ｍＭ、１．７～２．２ｍＭ、１．８～２．３ｍＭ、１．９～２．４ｍＭ、２～２．５ｍＭ、２．１～２．６ｍＭ、２．２～２．７ｍＭ、２．３～２．８ｍＭ、２．４～２．９ｍＭ、２．５～３ｍＭ、２．６～３．１ｍＭ、２．７～３．２ｍＭ、２．８～３．３ｍＭ、２．９～３．４ｍＭ、３～３．５ｍＭ、３．１～３．６ｍＭ、３．２～３．７ｍＭ、３．３～３．８ｍＭ、３．４～３．９ｍＭ、３．５～４ｍＭ、３．６～４．１ｍＭ、３．７～４．２ｍＭ、３．８～４．３ｍＭ、３．９～４．４ｍＭ、４～４．５ｍＭ、４．１～４．６ｍＭ、４．２～４．７ｍＭ、４．３～４．８ｍＭ、４．４～４．９ｍＭ、４．５～５ｍＭ、４．６～５．１ｍＭ、４．７～５．２ｍＭ、４．８～５．３ｍＭ、４．９～５．４ｍＭ、５～５．５ｍＭ、５．１～５．６ｍＭ、５．２～５．７ｍＭ、５．３～５．８ｍＭ、５．４～５．９ｍＭ、５．５～６ｍＭ、５．６～６．１ｍＭ、５．７～６．２ｍＭ、５．８～６．３ｍＭ、５．９～６．４ｍＭ、６～６．５ｍＭ、６．１～６．６ｍＭ、６．２～６．７ｍＭ、６．３～６．８ｍＭ、６．４～６．９ｍＭ、６．５～７ｍＭ、６．６～７．１ｍＭ、６．７～７．２ｍＭ、６．８～７．３ｍＭ、６．９～７．４ｍＭ、７～７．５ｍＭ、７．１～７．６ｍＭ、７．２～７．７ｍＭ、７．３～７．８ｍＭ、７．４～７．９ｍＭ、７．５～８ｍＭ、７．６～８．１ｍＭ、７．７～８．２ｍＭ、７．８～８．３ｍＭ、７．９～８．４ｍＭ、８～８．５ｍＭ、８．１～８．６ｍＭ、８．２～８．７ｍＭ、８．３～８．８ｍＭ、８．４～８．９ｍＭ、８．５～９ｍＭ、８．６～９．１ｍＭ、８．７～９．２ｍＭ、８．８～９．３ｍＭ、８．９～９．４ｍＭ、９～９．５ｍＭ、９．１～９．６ｍＭ、９．２～９．７ｍＭ、９．３～９．８ｍＭ、９．４～９．９ｍＭ、９．５～１０ｍＭ、９．６～１０．１ｍＭ、９．７～１０．２ｍＭ、９．８～１０．３ｍＭ、９．９～１０．４ｍＭ、１０～１０．５ｍＭ、１０．１～１０．６ｍＭ、１０．２～１０．７ｍＭ、１０．３～１０．８ｍＭ、１０．４～１０．９ｍＭ、１０．５～１１ｍＭ、１０．６～１１．１ｍＭ、１０．７～１１．２ｍＭ、１０．８～１１．３ｍＭ、１０．９～１１．４ｍＭ、１１～１１．５ｍＭ、１１．１～１１．６ｍＭ、１１．２～１１．７ｍＭ、１１．３～１１．８ｍＭ、１１．４～１１．９ｍＭ、１１．５～１２ｍＭ、１１．６～１２．１ｍＭ、１１．７～１２．２ｍＭ、１１．８～１２．３ｍＭ、１１．９～１２．４ｍＭ、１２～１２．５ｍＭ、１２．１～１２．６ｍＭ、１２．２～１２．７ｍＭ、１２．３～１２．８ｍＭ、１２．４～１２．９ｍＭ、１２．５～１３ｍＭ、１２．６～１３．１ｍＭ、１２．７～１３．２ｍＭ、１２．８～１３．３ｍＭ、１２．９～１３．４ｍＭ、１３～１３．５ｍＭ、１３．１～１３．６ｍＭ、１３．２～１３．７ｍＭ、１３．３～１３．８ｍＭ、１３．４～１３．９ｍＭ、１３．５～１４ｍＭ、１３．６～１４．１ｍＭ、１３．７～１４．２ｍＭ、１３．８～１４．３ｍＭ、１３．９～１４．４ｍＭ、１４～１４．５ｍＭ、１４．１～１４．６ｍＭ、１４．２～１４．７ｍＭ、１４．３～１４．８ｍＭ、１４．４～１４．９ｍＭ、１４．５～１５ｍＭ、０～１ｍＭ、１～２ｍＭ、２～３ｍＭ、３～４ｍＭ、４～５ｍＭ、５～６ｍＭ、６～７ｍＭ、７～８ｍＭ、８～９ｍＭ、９～１０ｍＭ、１０～１１ｍＭ、１１～１２ｍＭ、１２～１３ｍＭ、１３～１４ｍＭ、１４～１５ｍＭ、１５～１６ｍＭ、０～２ｍＭ、１～３ｍＭ、２～４ｍＭ、３～５ｍＭ、４～６ｍＭ、５～７ｍＭ、６～８ｍＭ、７～９ｍＭ、８～１０ｍＭ、９～１１ｍＭ、１０～１２ｍＭ、１１～１３ｍＭ、１２～１４ｍＭ、１３～１５ｍＭ、０～３ｍＭ、１～４ｍＭ、２～５ｍＭ、３～６ｍＭ、４～７ｍＭ、５～８ｍＭ、６～９ｍＭ、７～１０ｍＭ、８～１１ｍＭ、９～１２ｍＭ、１０～１３ｍＭ、１１～１４ｍＭ、１２～１５ｍＭ、０～４ｍＭ、１～５ｍＭ、２～６ｍＭ、３～７ｍＭ、４～８ｍＭ、５～９ｍＭ、６～１０ｍＭ、７～１１ｍＭ、８～１２ｍＭ、９～１３ｍＭ、１０～１４ｍＭ、１１～１５ｍＭ、０～５ｍＭ、１～６ｍＭ、２～７ｍＭ、３～８ｍＭ、４～９ｍＭ、５～１０ｍＭ、６～１１ｍＭ、７～１２ｍＭ、８～１３ｍＭ、９～１４ｍＭ、１０～１５ｍＭ、０～６ｍＭ、１～７ｍＭ、２～８ｍＭ、３～９ｍＭ、４～１０ｍＭ、５～１１ｍＭ、６～１２ｍＭ、７～１３ｍＭ、８～１４ｍＭ、９～１５ｍＭ、０～７ｍＭ、１～８ｍＭ、２～９ｍＭ、３～１０ｍＭ、４～１１ｍＭ、５～１２ｍＭ、６～１３ｍＭ、７～１４ｍＭ、８～１５ｍＭ、０～８ｍＭ、１～９ｍＭ、２～１０ｍＭ、３～１１ｍＭ、４～１２ｍＭ、５～１３ｍＭ、６～１４ｍＭ、７～１５ｍＭ、０～９ｍＭ、１～１０ｍＭ、２～１１ｍＭ、３～１２ｍＭ、４～１３ｍＭ、５～１４ｍＭ、６～１５ｍＭ、０～１０ｍＭ、１～１１ｍＭ、２～１２ｍＭ、３～１３ｍＭ、４～１４ｍＭ、５～１５ｍＭ、０～１１ｍＭ、１～１２ｍＭ、２～１３ｍＭ、３～１４ｍＭ、４～１５ｍＭ、０～１２ｍＭ、１～１３ｍＭ、２～１４ｍＭ、３～１５ｍＭ、０～１３ｍＭ、１～１４ｍＭ、２～１５ｍＭ、０～１４ｍＭ、１～１５ｍＭ、または０～１５ｍＭの範囲のリン酸ナトリウムを含み得る。
【0633】
所定の実施形態では、製剤は、０～１０ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２～１２ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２～３ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２～１２ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２～３ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
【0634】
所定の実施形態では、製剤は、９～１０ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０～１１ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２．７ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０～１１ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２．７ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
【0635】
所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。
リン酸カリウム
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、リン酸カリウムである。製剤は、一塩基性、二塩基性または一塩基性及び二塩基性の両方の組み合わせのリン酸カリウムを含み得る。
リン酸カリウム
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、リン酸カリウムである。製剤は、一塩基性、二塩基性または一塩基性及び二塩基性の両方の組み合わせのリン酸カリウムを含み得る。
【0636】
所定の実施形態では、製剤におけるリン酸カリウムの濃度は、限定されないが、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭまたは１５ｍＭであり得る。
【0637】
製剤は、０～０．５ｍＭ、０．１～０．６ｍＭ、０．２～０．７ｍＭ、０．３～０．８ｍＭ、０．４～０．９ｍＭ、０．５～１ｍＭ、０．６～１．１ｍＭ、０．７～１．２ｍＭ、０．８～１．３ｍＭ、０．９～１．４ｍＭ、１～１．５ｍＭ、１．１～１．６ｍＭ、１．２～１．７ｍＭ、１．３～１．８ｍＭ、１．４～１．９ｍＭ、１．５～２ｍＭ、１．６～２．１ｍＭ、１．７～２．２ｍＭ、１．８～２．３ｍＭ、１．９～２．４ｍＭ、２～２．５ｍＭ、２．１～２．６ｍＭ、２．２～２．７ｍＭ、２．３～２．８ｍＭ、２．４～２．９ｍＭ、２．５～３ｍＭ、２．６～３．１ｍＭ、２．７～３．２ｍＭ、２．８～３．３ｍＭ、２．９～３．４ｍＭ、３～３．５ｍＭ、３．１～３．６ｍＭ、３．２～３．７ｍＭ、３．３～３．８ｍＭ、３．４～３．９ｍＭ、３．５～４ｍＭ、３．６～４．１ｍＭ、３．７～４．２ｍＭ、３．８～４．３ｍＭ、３．９～４．４ｍＭ、４～４．５ｍＭ、４．１～４．６ｍＭ、４．２～４．７ｍＭ、４．３～４．８ｍＭ、４．４～４．９ｍＭ、４．５～５ｍＭ、４．６～５．１ｍＭ、４．７～５．２ｍＭ、４．８～５．３ｍＭ、４．９～５．４ｍＭ、５～５．５ｍＭ、５．１～５．６ｍＭ、５．２～５．７ｍＭ、５．３～５．８ｍＭ、５．４～５．９ｍＭ、５．５～６ｍＭ、５．６～６．１ｍＭ、５．７～６．２ｍＭ、５．８～６．３ｍＭ、５．９～６．４ｍＭ、６～６．５ｍＭ、６．１～６．６ｍＭ、６．２～６．７ｍＭ、６．３～６．８ｍＭ、６．４～６．９ｍＭ、６．５～７ｍＭ、６．６～７．１ｍＭ、６．７～７．２ｍＭ、６．８～７．３ｍＭ、６．９～７．４ｍＭ、７～７．５ｍＭ、７．１～７．６ｍＭ、７．２～７．７ｍＭ、７．３～７．８ｍＭ、７．４～７．９ｍＭ、７．５～８ｍＭ、７．６～８．１ｍＭ、７．７～８．２ｍＭ、７．８～８．３ｍＭ、７．９～８．４ｍＭ、８～８．５ｍＭ、８．１～８．６ｍＭ、８．２～８．７ｍＭ、８．３～８．８ｍＭ、８．４～８．９ｍＭ、８．５～９ｍＭ、８．６～９．１ｍＭ、８．７～９．２ｍＭ、８．８～９．３ｍＭ、８．９～９．４ｍＭ、９～９．５ｍＭ、９．１～９．６ｍＭ、９．２～９．７ｍＭ、９．３～９．８ｍＭ、９．４～９．９ｍＭ、９．５～１０ｍＭ、９．６～１０．１ｍＭ、９．７～１０．２ｍＭ、９．８～１０．３ｍＭ、９．９～１０．４ｍＭ、１０～１０．５ｍＭ、１０．１～１０．６ｍＭ、１０．２～１０．７ｍＭ、１０．３～１０．８ｍＭ、１０．４～１０．９ｍＭ、１０．５～１１ｍＭ、１０．６～１１．１ｍＭ、１０．７～１１．２ｍＭ、１０．８～１１．３ｍＭ、１０．９～１１．４ｍＭ、１１～１１．５ｍＭ、１１．１～１１．６ｍＭ、１１．２～１１．７ｍＭ、１１．３～１１．８ｍＭ、１１．４～１１．９ｍＭ、１１．５～１２ｍＭ、１１．６～１２．１ｍＭ、１１．７～１２．２ｍＭ、１１．８～１２．３ｍＭ、１１．９～１２．４ｍＭ、１２～１２．５ｍＭ、１２．１～１２．６ｍＭ、１２．２～１２．７ｍＭ、１２．３～１２．８ｍＭ、１２．４～１２．９ｍＭ、１２．５～１３ｍＭ、１２．６～１３．１ｍＭ、１２．７～１３．２ｍＭ、１２．８～１３．３ｍＭ、１２．９～１３．４ｍＭ、１３～１３．５ｍＭ、１３．１～１３．６ｍＭ、１３．２～１３．７ｍＭ、１３．３～１３．８ｍＭ、１３．４～１３．９ｍＭ、１３．５～１４ｍＭ、１３．６～１４．１ｍＭ、１３．７～１４．２ｍＭ、１３．８～１４．３ｍＭ、１３．９～１４．４ｍＭ、１４～１４．５ｍＭ、１４．１～１４．６ｍＭ、１４．２～１４．７ｍＭ、１４．３～１４．８ｍＭ、１４．４～１４．９ｍＭ、１４．５～１５ｍＭ、０～１ｍＭ、１～２ｍＭ、２～３ｍＭ、３～４ｍＭ、４～５ｍＭ、５～６ｍＭ、６～７ｍＭ、７～８ｍＭ、８～９ｍＭ、９～１０ｍＭ、１０～１１ｍＭ、１１～１２ｍＭ、１２～１３ｍＭ、１３～１４ｍＭ、１４～１５ｍＭ、１５～１６ｍＭ、０～２ｍＭ、１～３ｍＭ、２～４ｍＭ、３～５ｍＭ、４～６ｍＭ、５～７ｍＭ、６～８ｍＭ、７～９ｍＭ、８～１０ｍＭ、９～１１ｍＭ、１０～１２ｍＭ、１１～１３ｍＭ、１２～１４ｍＭ、１３～１５ｍＭ、０～３ｍＭ、１～４ｍＭ、２～５ｍＭ、３～６ｍＭ、４～７ｍＭ、５～８ｍＭ、６～９ｍＭ、７～１０ｍＭ、８～１１ｍＭ、９～１２ｍＭ、１０～１３ｍＭ、１１～１４ｍＭ、１２～１５ｍＭ、０～４ｍＭ、１～５ｍＭ、２～６ｍＭ、３～７ｍＭ、４～８ｍＭ、５～９ｍＭ、６～１０ｍＭ、７～１１ｍＭ、８～１２ｍＭ、９～１３ｍＭ、１０～１４ｍＭ、１１～１５ｍＭ、０～５ｍＭ、１～６ｍＭ、２～７ｍＭ、３～８ｍＭ、４～９ｍＭ、５～１０ｍＭ、６～１１ｍＭ、７～１２ｍＭ、８～１３ｍＭ、９～１４ｍＭ、１０～１５ｍＭ、０～６ｍＭ、１～７ｍＭ、２～８ｍＭ、３～９ｍＭ、４～１０ｍＭ、５～１１ｍＭ、６～１２ｍＭ、７～１３ｍＭ、８～１４ｍＭ、９～１５ｍＭ、０～７ｍＭ、１～８ｍＭ、２～９ｍＭ、３～１０ｍＭ、４～１１ｍＭ、５～１２ｍＭ、６～１３ｍＭ、７～１４ｍＭ、８～１５ｍＭ、０～８ｍＭ、１～９ｍＭ、２～１０ｍＭ、３～１１ｍＭ、４～１２ｍＭ、５～１３ｍＭ、６～１４ｍＭ、７～１５ｍＭ、０～９ｍＭ、１～１０ｍＭ、２～１１ｍＭ、３～１２ｍＭ、４～１３ｍＭ、５～１４ｍＭ、６～１５ｍＭ、０～１０ｍＭ、１～１１ｍＭ、２～１２ｍＭ、３～１３ｍＭ、４～１４ｍＭ、５～１５ｍＭ、０～１１ｍＭ、１～１２ｍＭ、２～１３ｍＭ、３～１４ｍＭ、４～１５ｍＭ、０～１２ｍＭ、１～１３ｍＭ、２～１４ｍＭ、３～１５ｍＭ、０～１３ｍＭ、１～１４ｍＭ、２～１５ｍＭ、０～１４ｍＭ、１～１５ｍＭ、または０～１５ｍＭの範囲のリン酸カリウムを含み得る。
【0638】
所定の実施形態では、製剤は、０～１０ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１～３ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１～２ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１～３ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１～２ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
【0639】
所定の実施形態では、製剤は、２～３ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２～１２ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１．５ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。非限定的な例として、製剤は、１．５４ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２～１２ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１．５ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。非限定的な例として、製剤は、１．５４ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
【0640】
所定の実施形態では、製剤は、２ｍＭのリン酸カリウムを含み得る。
塩化ナトリウム
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、塩化ナトリウムである。
塩化ナトリウム
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、塩化ナトリウムである。
【0641】
所定の実施形態では、製剤における塩化ナトリウムの濃度は、限定されないが、７５ｍＭ、７６ｍＭ、７７ｍＭ、７８ｍＭ、７９ｍＭ、８０ｍＭ、８１ｍＭ、８２ｍＭ、８３ｍＭ、８４ｍＭ、８５ｍＭ、８６ｍＭ、８７ｍＭ、８８ｍＭ、８９ｍＭ、９０ｍＭ、９１ｍＭ、９２ｍＭ、９３ｍＭ、９４ｍＭ、９５ｍＭ、９６ｍＭ、９７ｍＭ、９８ｍＭ、９９ｍＭ、１００ｍＭ、１０１ｍＭ、１０２ｍＭ、１０３ｍＭ、１０４ｍＭ、１０５ｍＭ、１０６ｍＭ、１０７ｍＭ、１０８ｍＭ、１０９ｍＭ、１１０ｍＭ、１１１ｍＭ、１１２ｍＭ、１１３ｍＭ、１１４ｍＭ、１１５ｍＭ、１１６ｍＭ、１１７ｍＭ、１１８ｍＭ、１１９ｍＭ、１２０ｍＭ、１２１ｍＭ、１２２ｍＭ、１２３ｍＭ、１２４ｍＭ、１２５ｍＭ、１２６ｍＭ、１２７ｍＭ、１２８ｍＭ、１２９ｍＭ、１３０ｍＭ、１３１ｍＭ、１３２ｍＭ、１３３ｍＭ、１３４ｍＭ、１３５ｍＭ、１３６ｍＭ、１３７ｍＭ、１３８ｍＭ、１３９ｍＭ、１４０ｍＭ、１４１ｍＭ、１４２ｍＭ、１４３ｍＭ、１４４ｍＭ、１４５ｍＭ、１４６ｍＭ、１４７ｍＭ、１４８ｍＭ、１４９ｍＭ、１５０ｍＭ、１５１ｍＭ、１５２ｍＭ、１５３ｍＭ、１５４ｍＭ、１５５ｍＭ、１５６ｍＭ、１５７ｍＭ、１５８ｍＭ、１５９ｍＭ、１６０ｍＭ、１６１ｍＭ、１６２ｍＭ、１６３ｍＭ、１６４ｍＭ、１６５ｍＭ、１６６ｍＭ、１６７ｍＭ、１６８ｍＭ、１６９ｍＭ、１７０ｍＭ、１７１ｍＭ、１７２ｍＭ、１７３ｍＭ、１７４ｍＭ、１７５ｍＭ、１７６ｍＭ、１７７ｍＭ、１７８ｍＭ、１７９ｍＭ、１８０ｍＭ、１８１ｍＭ、１８２ｍＭ、１８３ｍＭ、１８４ｍＭ、１８５ｍＭ、１８６ｍＭ、１８７ｍＭ、１８８ｍＭ、１８９ｍＭ、１９０ｍＭ、１９１ｍＭ、１９２ｍＭ、１９３ｍＭ、１９４ｍＭ、１９５ｍＭ、１９６ｍＭ、１９７ｍＭ、１９８ｍＭ、１９９ｍＭ、２００ｍＭ、２０１ｍＭ、２０２ｍＭ、２０３ｍＭ、２０４ｍＭ、２０５ｍＭ、２０６ｍＭ、２０７ｍＭ、２０８ｍＭ、２０９ｍＭ、２１０ｍＭ、２１１ｍＭ、２１２ｍＭ、２１３ｍＭ、２１４ｍＭ、２１５ｍＭ、２１６ｍＭ、２１７ｍＭ、２１８ｍＭ、２１９ｍＭ、または２２０ｍＭであり得る。
【0642】
製剤は、７５～８５ｍＭ、８０～９０ｍＭ、８５～９５ｍＭ、９０～１００ｍＭ、９５～１０５ｍＭ、１００～１１０ｍＭ、１０５～１１５ｍＭ、１１０～１２０ｍＭ、１１５～１２５ｍＭ、１２０～１３０ｍＭ、１２５～１３５ｍＭ、１３０～１４０ｍＭ、１３５～１４５ｍＭ、１４０～１５０ｍＭ、１４５～１５５ｍＭ、１５０～１６０ｍＭ、１５５～１６５ｍＭ、１６０～１７０ｍＭ、１６５～１７５ｍＭ、１７０～１８０ｍＭ、１７５～１８５ｍＭ、１８０～１９０ｍＭ、１８５～１９５ｍＭ、１９０～２００ｍＭ、７５～９５ｍＭ、８０～１００ｍＭ、８５～１０５ｍＭ、９０～１１０ｍＭ、９５～１１５ｍＭ、１００～１２０ｍＭ、１０５～１２５ｍＭ、１１０～１３０ｍＭ、１１５～１３５ｍＭ、１２０～１４０ｍＭ、１２５～１４５ｍＭ、１３０～１５０ｍＭ、１３５～１５５ｍＭ、１４０～１６０ｍＭ、１４５～１６５ｍＭ、１５０～１７０ｍＭ、１５５～１７５ｍＭ、１６０～１８０ｍＭ、１６５～１８５ｍＭ、１７０～１９０ｍＭ、１７５～１９５ｍＭ、１８０～２００ｍＭ、７５～１００ｍＭ、８０～１０５ｍＭ、８５～１１０ｍＭ、９０～１１５ｍＭ、９５～１２０ｍＭ、１００～１２５ｍＭ、１０５～１３０ｍＭ、１１０～１３５ｍＭ、１１５～１４０ｍＭ、１２０～１４５ｍＭ、１２５～１５０ｍＭ、１３０～１５５ｍＭ、１３５～１６０ｍＭ、１４０～１６５ｍＭ、１４５～１７０ｍＭ、１５０～１７５ｍＭ、１５５～１８０ｍＭ、１６０～１８５ｍＭ、１６５～１９０ｍＭ、１７０～１９５ｍＭ、１７５～２００ｍＭ、７５～１０５ｍＭ、８０～１１０ｍＭ、８５～１１５ｍＭ、９０～１２０ｍＭ、９５～１２５ｍＭ、１００～１３０ｍＭ、１０５～１３５ｍＭ、１１０～１４０ｍＭ、１１５～１４５ｍＭ、１２０～１５０ｍＭ、１２５～１５５ｍＭ、１３０～１６０ｍＭ、１３５～１６５ｍＭ、１４０～１７０ｍＭ、１４５～１７５ｍＭ、１５０～１８０ｍＭ、１５５～１８５ｍＭ、１６０～１９０ｍＭ、１６５～１９５ｍＭ、１７０～２００ｍＭ、７５～１１５ｍＭ、８０～１２０ｍＭ、８５～１２５ｍＭ、９０～１３０ｍＭ、９５～１３５ｍＭ、１００～１４０ｍＭ、１０５～１４５ｍＭ、１１０～１５０ｍＭ、１１５～１５５ｍＭ、１２０～１６０ｍＭ、１２５～１６５ｍＭ、１３０～１７０ｍＭ、１３５～１７５ｍＭ、１４０～１８０ｍＭ、１４５～１８５ｍＭ、１５０～１９０ｍＭ、１５５～１９５ｍＭ、１６０～２００ｍＭ、７５～１２０ｍＭ、８０～１２５ｍＭ、８５～１３０ｍＭ、９０～１３５ｍＭ、９５～１４０ｍＭ、１００～１４５ｍＭ、１０５～１５０ｍＭ、１１０～１５５ｍＭ、１１５～１６０ｍＭ、１２０～１６５ｍＭ、１２５～１７０ｍＭ、１３０～１７５ｍＭ、１３５～１８０ｍＭ、１４０～１８５ｍＭ、１４５～１９０ｍＭ、１５０～１９５ｍＭ、１５５～２００ｍＭ、７５～１２５ｍＭ、８０～１３０ｍＭ、８５～１３５ｍＭ、９０～１４０ｍＭ、９５～１４５ｍＭ、１００～１５０ｍＭ、１０５～１５５ｍＭ、１１０～１６０ｍＭ、１１５～１６５ｍＭ、１２０～１７０ｍＭ、１２５～１７５ｍＭ、１３０～１８０ｍＭ、１３５～１８５ｍＭ、１４０～１９０ｍＭ、１４５～１９５ｍＭ、１５０～２００ｍＭ、７５～１２５ｍＭ、８０～１３０ｍＭ、８５～１３５ｍＭ、９０～１４０ｍＭ、９５～１４５ｍＭ、１００～１５０ｍＭ、１０５～１５５ｍＭ、１１０～１６０ｍＭ、１１５～１６５ｍＭ、１２０～１７０ｍＭ、１２５～１７５ｍＭ、１３０～１８０ｍＭ、１３５～１８５ｍＭ、１４０～１９０ｍＭ、１４５～１９５ｍＭ、１５０～２００ｍＭ、７５～１３５ｍＭ、８０～１４０ｍＭ、８５～１４５ｍＭ、９０～１５０ｍＭ、９５～１５５ｍＭ、１００～１６０ｍＭ、１０５～１６５ｍＭ、１１０～１７０ｍＭ、１１５～１７５ｍＭ、１２０～１８０ｍＭ、１２５～１８５ｍＭ、１３０～１９０ｍＭ、１３５～１９５ｍＭ、１４０～２００ｍＭ、７５～１４５ｍＭ、８０～１５０ｍＭ、８５～１５５ｍＭ、９０～１６０ｍＭ、９５～１６５ｍＭ、１００～１７０ｍＭ、１０５～１７５ｍＭ、１１０～１８０ｍＭ、１１５～１８５ｍＭ、１２０～１９０ｍＭ、１２５～１９５ｍＭ、１３０～２００ｍＭ、７５～１５５ｍＭ、８０～１６０ｍＭ、８５～１６５ｍＭ、９０～１７０ｍＭ、９５～１７５ｍＭ、１００～１８０ｍＭ、１０５～１８５ｍＭ、１１０～１９０ｍＭ、１１５～１９５ｍＭ、１２０～２００ｍＭ、７５～１６５ｍＭ、８０～１７０ｍＭ、８５～１７５ｍＭ、９０～１８０ｍＭ、９５～１８５ｍＭ、１００～１９０ｍＭ、１０５～１９５ｍＭ、１１０～２００ｍＭ、７５～１７５ｍＭ、８０～１８０ｍＭ、８５～１８５ｍＭ、９０～１９０ｍＭ、９５～１９５ｍＭ、１００～２００ｍＭ、８０～２２０ｍＭ、９０～２２０ｍＭ、１００～２２０ｍＭ、１１０～２２０ｍＭ、１２０～２２０ｍＭ、１３０～２２０ｍＭ、１４０～２２０ｍＭ、１５０～２２０ｍＭ、１６０～２２０ｍＭ、１７０～２２０ｍＭ、１８０～２２０ｍＭ、１９０～２２０ｍＭ、２００～２２０ｍＭ、または２１０～２２０ｍＭの範囲の塩化ナトリウムを含み得る。
【0643】
所定の実施形態では、製剤は、８０～２２０ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８０～１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７５ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８０～１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７５ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
【0644】
所定の実施形態では、製剤は、８３ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、９２ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、９５ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、９２ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、９５ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
【0645】
所定の実施形態では、製剤は、９８ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１００ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０７ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１００ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０７ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
【0646】
所定の実施形態では、製剤は、１０９ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１１８ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１２５ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１１８ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１２５ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
【0647】
所定の実施形態では、製剤は、１２７ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１３３ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１４２ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１３３ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１４２ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
【0648】
所定の実施形態では、製剤は、１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１５５ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１８０ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１５５ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１８０ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
【0649】
所定の実施形態では、製剤は、１９２ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２１０ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
塩化カリウム
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、塩化カリウムである。
所定の実施形態では、製剤は、２１０ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。
塩化カリウム
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、塩化カリウムである。
【0650】
所定の実施形態では、製剤における塩化カリウムの濃度は、限定されないが、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭまたは１５ｍＭであり得る。
【0651】
製剤は、０～０．５ｍＭ、０．１～０．６ｍＭ、０．２～０．７ｍＭ、０．３～０．８ｍＭ、０．４～０．９ｍＭ、０．５～１ｍＭ、０．６～１．１ｍＭ、０．７～１．２ｍＭ、０．８～１．３ｍＭ、０．９～１．４ｍＭ、１～１．５ｍＭ、１．１～１．６ｍＭ、１．２～１．７ｍＭ、１．３～１．８ｍＭ、１．４～１．９ｍＭ、１．５～２ｍＭ、１．６～２．１ｍＭ、１．７～２．２ｍＭ、１．８～２．３ｍＭ、１．９～２．４ｍＭ、２～２．５ｍＭ、２．１～２．６ｍＭ、２．２～２．７ｍＭ、２．３～２．８ｍＭ、２．４～２．９ｍＭ、２．５～３ｍＭ、２．６～３．１ｍＭ、２．７～３．２ｍＭ、２．８～３．３ｍＭ、２．９～３．４ｍＭ、３～３．５ｍＭ、３．１～３．６ｍＭ、３．２～３．７ｍＭ、３．３～３．８ｍＭ、３．４～３．９ｍＭ、３．５～４ｍＭ、３．６～４．１ｍＭ、３．７～４．２ｍＭ、３．８～４．３ｍＭ、３．９～４．４ｍＭ、４～４．５ｍＭ、４．１～４．６ｍＭ、４．２～４．７ｍＭ、４．３～４．８ｍＭ、４．４～４．９ｍＭ、４．５～５ｍＭ、４．６～５．１ｍＭ、４．７～５．２ｍＭ、４．８～５．３ｍＭ、４．９～５．４ｍＭ、５～５．５ｍＭ、５．１～５．６ｍＭ、５．２～５．７ｍＭ、５．３～５．８ｍＭ、５．４～５．９ｍＭ、５．５～６ｍＭ、５．６～６．１ｍＭ、５．７～６．２ｍＭ、５．８～６．３ｍＭ、５．９～６．４ｍＭ、６～６．５ｍＭ、６．１～６．６ｍＭ、６．２～６．７ｍＭ、６．３～６．８ｍＭ、６．４～６．９ｍＭ、６．５～７ｍＭ、６．６～７．１ｍＭ、６．７～７．２ｍＭ、６．８～７．３ｍＭ、６．９～７．４ｍＭ、７～７．５ｍＭ、７．１～７．６ｍＭ、７．２～７．７ｍＭ、７．３～７．８ｍＭ、７．４～７．９ｍＭ、７．５～８ｍＭ、７．６～８．１ｍＭ、７．７～８．２ｍＭ、７．８～８．３ｍＭ、７．９～８．４ｍＭ、８～８．５ｍＭ、８．１～８．６ｍＭ、８．２～８．７ｍＭ、８．３～８．８ｍＭ、８．４～８．９ｍＭ、８．５～９ｍＭ、８．６～９．１ｍＭ、８．７～９．２ｍＭ、８．８～９．３ｍＭ、８．９～９．４ｍＭ、９～９．５ｍＭ、９．１～９．６ｍＭ、９．２～９．７ｍＭ、９．３～９．８ｍＭ、９．４～９．９ｍＭ、９．５～１０ｍＭ、９．６～１０．１ｍＭ、９．７～１０．２ｍＭ、９．８～１０．３ｍＭ、９．９～１０．４ｍＭ、１０～１０．５ｍＭ、１０．１～１０．６ｍＭ、１０．２～１０．７ｍＭ、１０．３～１０．８ｍＭ、１０．４～１０．９ｍＭ、１０．５～１１ｍＭ、１０．６～１１．１ｍＭ、１０．７～１１．２ｍＭ、１０．８～１１．３ｍＭ、１０．９～１１．４ｍＭ、１１～１１．５ｍＭ、１１．１～１１．６ｍＭ、１１．２～１１．７ｍＭ、１１．３～１１．８ｍＭ、１１．４～１１．９ｍＭ、１１．５～１２ｍＭ、１１．６～１２．１ｍＭ、１１．７～１２．２ｍＭ、１１．８～１２．３ｍＭ、１１．９～１２．４ｍＭ、１２～１２．５ｍＭ、１２．１～１２．６ｍＭ、１２．２～１２．７ｍＭ、１２．３～１２．８ｍＭ、１２．４～１２．９ｍＭ、１２．５～１３ｍＭ、１２．６～１３．１ｍＭ、１２．７～１３．２ｍＭ、１２．８～１３．３ｍＭ、１２．９～１３．４ｍＭ、１３～１３．５ｍＭ、１３．１～１３．６ｍＭ、１３．２～１３．７ｍＭ、１３．３～１３．８ｍＭ、１３．４～１３．９ｍＭ、１３．５～１４ｍＭ、１３．６～１４．１ｍＭ、１３．７～１４．２ｍＭ、１３．８～１４．３ｍＭ、１３．９～１４．４ｍＭ、１４～１４．５ｍＭ、１４．１～１４．６ｍＭ、１４．２～１４．７ｍＭ、１４．３～１４．８ｍＭ、１４．４～１４．９ｍＭ、１４．５～１５ｍＭ、０～１ｍＭ、１～２ｍＭ、２～３ｍＭ、３～４ｍＭ、４～５ｍＭ、５～６ｍＭ、６～７ｍＭ、７～８ｍＭ、８～９ｍＭ、９～１０ｍＭ、１０～１１ｍＭ、１１～１２ｍＭ、１２～１３ｍＭ、１３～１４ｍＭ、１４～１５ｍＭ、１５～１６ｍＭ、０～２ｍＭ、１～３ｍＭ、２～４ｍＭ、３～５ｍＭ、４～６ｍＭ、５～７ｍＭ、６～８ｍＭ、７～９ｍＭ、８～１０ｍＭ、９～１１ｍＭ、１０～１２ｍＭ、１１～１３ｍＭ、１２～１４ｍＭ、１３～１５ｍＭ、０～３ｍＭ、１～４ｍＭ、２～５ｍＭ、３～６ｍＭ、４～７ｍＭ、５～８ｍＭ、６～９ｍＭ、７～１０ｍＭ、８～１１ｍＭ、９～１２ｍＭ、１０～１３ｍＭ、１１～１４ｍＭ、１２～１５ｍＭ、０～４ｍＭ、１～５ｍＭ、２～６ｍＭ、３～７ｍＭ、４～８ｍＭ、５～９ｍＭ、６～１０ｍＭ、７～１１ｍＭ、８～１２ｍＭ、９～１３ｍＭ、１０～１４ｍＭ、１１～１５ｍＭ、０～５ｍＭ、１～６ｍＭ、２～７ｍＭ、３～８ｍＭ、４～９ｍＭ、５～１０ｍＭ、６～１１ｍＭ、７～１２ｍＭ、８～１３ｍＭ、９～１４ｍＭ、１０～１５ｍＭ、０～６ｍＭ、１～７ｍＭ、２～８ｍＭ、３～９ｍＭ、４～１０ｍＭ、５～１１ｍＭ、６～１２ｍＭ、７～１３ｍＭ、８～１４ｍＭ、９～１５ｍＭ、０～７ｍＭ、１～８ｍＭ、２～９ｍＭ、３～１０ｍＭ、４～１１ｍＭ、５～１２ｍＭ、６～１３ｍＭ、７～１４ｍＭ、８～１５ｍＭ、０～８ｍＭ、１～９ｍＭ、２～１０ｍＭ、３～１１ｍＭ、４～１２ｍＭ、５～１３ｍＭ、６～１４ｍＭ、７～１５ｍＭ、０～９ｍＭ、１～１０ｍＭ、２～１１ｍＭ、３～１２ｍＭ、４～１３ｍＭ、５～１４ｍＭ、６～１５ｍＭ、０～１０ｍＭ、１～１１ｍＭ、２～１２ｍＭ、３～１３ｍＭ、４～１４ｍＭ、５～１５ｍＭ、０～１１ｍＭ、１～１２ｍＭ、２～１３ｍＭ、３～１４ｍＭ、４～１５ｍＭ、０～１２ｍＭ、１～１３ｍＭ、２～１４ｍＭ、３～１５ｍＭ、０～１３ｍＭ、１～１４ｍＭ、２～１５ｍＭ、０～１４ｍＭ、１～１５ｍＭ、または０～１５ｍＭの範囲の塩化カリウムを含み得る。
【0652】
所定の実施形態では、製剤は、０～１０ｍＭの塩化カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１～３ｍＭの塩化カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１～２ｍＭの塩化カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１～３ｍＭの塩化カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１～２ｍＭの塩化カリウムを含み得る。
【0653】
所定の実施形態では、製剤は、２～３ｍＭの塩化カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１．５ｍＭの塩化カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２．７ｍＭの塩化カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１．５ｍＭの塩化カリウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２．７ｍＭの塩化カリウムを含み得る。
【0654】
塩化マグネシウム
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、塩化マグネシウムである。
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、塩化マグネシウムである。
【0655】
所定の実施形態では、塩化マグネシウムの濃度は、限定されないが、１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、２０ｍＭ、２１ｍＭ、２２ｍＭ、２３ｍＭ、２４ｍＭ、２５ｍＭ、２６ｍＭ、２７ｍＭ、２８ｍＭ、２９ｍＭ、３０ｍＭ、３１ｍＭ、３２ｍＭ、３３ｍＭ、３４ｍＭ、３５ｍＭ、３６ｍＭ、３７ｍＭ、３８ｍＭ、３９ｍＭ、４０ｍＭ、４１ｍＭ、４２ｍＭ、４３ｍＭ、４４ｍＭ、４５ｍＭ、４６ｍＭ、４７ｍＭ、４８ｍＭ、４９ｍＭ、５０ｍＭ、５１ｍＭ、５２ｍＭ、５３ｍＭ、５４ｍＭ、５５ｍＭ、５６ｍＭ、５７ｍＭ、５８ｍＭ、５９ｍＭ、６０ｍＭ、６１ｍＭ、６２ｍＭ、６３ｍＭ、６４ｍＭ、６５ｍＭ、６６ｍＭ、６７ｍＭ、６８ｍＭ、６９ｍＭ、７０ｍＭ、７１ｍＭ、７２ｍＭ、７３ｍＭ、７４ｍＭ、７５ｍＭ、７６ｍＭ、７７ｍＭ、７８ｍＭ、７９ｍＭ、８０ｍＭ、８１ｍＭ、８２ｍＭ、８３ｍＭ、８４ｍＭ、８５ｍＭ、８６ｍＭ、８７ｍＭ、８８ｍＭ、８９ｍＭ、９０ｍＭ、９１ｍＭ、９２ｍＭ、９３ｍＭ、９４ｍＭ、９５ｍＭ、９６ｍＭ、９７ｍＭ、９８ｍＭ、９９ｍＭ、または１００ｍＭであり得る。
【0656】
製剤は、０～５ｍＭ、１～５ｍＭ、２～５ｍＭ、３～５ｍＭ、４～５ｍＭ、０～１０ｍＭ、１～１０ｍＭ、２～１０ｍＭ、３～１０ｍＭ、４～１０ｍＭ、５～１０ｍＭ、６～１０ｍＭ、７～１０ｍＭ、８～１０ｍＭ、９～１０ｍＭ、０～２５ｍＭ、１～２５ｍＭ、２～２５ｍＭ、３～２５ｍＭ、４～２５ｍＭ、５～２５ｍＭ、６～２５ｍＭ、７～２５ｍＭ、８～２５ｍＭ、９～２５ｍＭ、１０～２５ｍＭ、１１～２５ｍＭ、１２～２５ｍＭ、１３～２５ｍＭ、１４～２５ｍＭ、１５～２５ｍＭ、１６～２５ｍＭ、１７～２５ｍＭ、１８～２５ｍＭ、１９～２５ｍＭ、２０～２５ｍＭ、２１～２５ｍＭ、２２～２５ｍＭ、２３～２５ｍＭ、２４～２５ｍＭ、０～５０ｍＭ、１～５０ｍＭ、２～５０ｍＭ、３～５０ｍＭ、４～５０ｍＭ、５～５０ｍＭ、６～５０ｍＭ、７～５０ｍＭ、８～５０ｍＭ、９～５０ｍＭ、１０～５０ｍＭ、１１～５０ｍＭ、１２～５０ｍＭ、１３～５０ｍＭ、１４～５０ｍＭ、１５～５０ｍＭ、１６～５０ｍＭ、１７～５０ｍＭ、１８～５０ｍＭ、１９～５０ｍＭ、２０～５０ｍＭ、２１～５０ｍＭ、２２～５０ｍＭ、２３～５０ｍＭ、２４～５０ｍＭ、２５～５０ｍＭ、２６～５０ｍＭ、２７～５０ｍＭ、２８～５０ｍＭ、２９～５０ｍＭ、３０～５０ｍＭ、３１～５０ｍＭ、３２～５０ｍＭ、３３～５０ｍＭ、３４～５０ｍＭ、３５～５０ｍＭ、３６～５０ｍＭ、３７～５０ｍＭ、３８～５０ｍＭ、３９～５０ｍＭ、４０～５０ｍＭ、４１～５０ｍＭ、４２～５０ｍＭ、４３～５０ｍＭ、４４～５０ｍＭ、４５～５０ｍＭ、４６～５０ｍＭ、４７～５０ｍＭ、４８～５０ｍＭ、４９～５０ｍＭ、０～７５ｍＭ、１～７５ｍＭ、２～７５ｍＭ、３～７５ｍＭ、４～７５ｍＭ、５～７５ｍＭ、６～７５ｍＭ、７～７５ｍＭ、８～７５ｍＭ、９～７５ｍＭ、１０～７５ｍＭ、１１～７５ｍＭ、１２～７５ｍＭ、１３～７５ｍＭ、１４～７５ｍＭ、１５～７５ｍＭ、１６～７５ｍＭ、１７～７５ｍＭ、１８～７５ｍＭ、１９～７５ｍＭ、２０～７５ｍＭ、２１～７５ｍＭ、２２～７５ｍＭ、２３～７５ｍＭ、２４～７５ｍＭ、２５～７５ｍＭ、２６～７５ｍＭ、２７～７５ｍＭ、２８～７５ｍＭ、２９～７５ｍＭ、３０～７５ｍＭ、３１～７５ｍＭ、３２～７５ｍＭ、３３～７５ｍＭ、３４～７５ｍＭ、３５～７５ｍＭ、３６～７５ｍＭ、３７～７５ｍＭ、３８～７５ｍＭ、３９～７５ｍＭ、４０～７５ｍＭ、４１～７５ｍＭ、４２～７５ｍＭ、４３～７５ｍＭ、４４～７５ｍＭ、４５～７５ｍＭ、４６～７５ｍＭ、４７～７５ｍＭ、４８～７５ｍＭ、４９～７５ｍＭ、５０～７５ｍＭ、５１～７５ｍＭ、５２～７５ｍＭ、５３～７５ｍＭ、５４～７５ｍＭ、５５～７５ｍＭ、５６～７５ｍＭ、５７～７５ｍＭ、５８～７５ｍＭ、５９～７５ｍＭ、６０～７５ｍＭ、６１～７５ｍＭ、６２～７５ｍＭ、６３～７５ｍＭ、６４～７５ｍＭ、６５～７５ｍＭ、６６～７５ｍＭ、６７～７５ｍＭ、６８～７５ｍＭ、６９～７５ｍＭ、７０～７５ｍＭ、７１～７５ｍＭ、７２～７５ｍＭ、７３～７５ｍＭ、７４～７５ｍＭ、５０～１００ｍＭ、６０～１００ｍＭ、７５～１００ｍＭ、８０～１００ｍＭ、または９０～１００ｍＭの範囲の塩化マグネシウムを含み得る。
【0657】
所定の実施形態では、製剤は、０～７５ｍＭの塩化マグネシウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～５ｍＭの塩化マグネシウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５０～１００ｍＭの塩化マグネシウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～５ｍＭの塩化マグネシウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５０～１００ｍＭの塩化マグネシウムを含み得る。
【0658】
所定の実施形態では、製剤は、２ｍＭの塩化マグネシウムを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７５ｍＭの塩化マグネシウムを含み得る。
トリス
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、トリス（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、トロメタミンまたはＴＨＡＭとも呼ばれる）。
所定の実施形態では、製剤は、７５ｍＭの塩化マグネシウムを含み得る。
トリス
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、トリス（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、トロメタミンまたはＴＨＡＭとも呼ばれる）。
【0659】
所定の実施形態では、製剤におけるトリスの濃度は、限定されないが、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭまたは１５ｍＭであり得る。
【0660】
製剤は、０～０．５ｍＭ、０．１～０．６ｍＭ、０．２～０．７ｍＭ、０．３～０．８ｍＭ、０．４～０．９ｍＭ、０．５～１ｍＭ、０．６～１．１ｍＭ、０．７～１．２ｍＭ、０．８～１．３ｍＭ、０．９～１．４ｍＭ、１～１．５ｍＭ、１．１～１．６ｍＭ、１．２～１．７ｍＭ、１．３～１．８ｍＭ、１．４～１．９ｍＭ、１．５～２ｍＭ、１．６～２．１ｍＭ、１．７～２．２ｍＭ、１．８～２．３ｍＭ、１．９～２．４ｍＭ、２～２．５ｍＭ、２．１～２．６ｍＭ、２．２～２．７ｍＭ、２．３～２．８ｍＭ、２．４～２．９ｍＭ、２．５～３ｍＭ、２．６～３．１ｍＭ、２．７～３．２ｍＭ、２．８～３．３ｍＭ、２．９～３．４ｍＭ、３～３．５ｍＭ、３．１～３．６ｍＭ、３．２～３．７ｍＭ、３．３～３．８ｍＭ、３．４～３．９ｍＭ、３．５～４ｍＭ、３．６～４．１ｍＭ、３．７～４．２ｍＭ、３．８～４．３ｍＭ、３．９～４．４ｍＭ、４～４．５ｍＭ、４．１～４．６ｍＭ、４．２～４．７ｍＭ、４．３～４．８ｍＭ、４．４～４．９ｍＭ、４．５～５ｍＭ、４．６～５．１ｍＭ、４．７～５．２ｍＭ、４．８～５．３ｍＭ、４．９～５．４ｍＭ、５～５．５ｍＭ、５．１～５．６ｍＭ、５．２～５．７ｍＭ、５．３～５．８ｍＭ、５．４～５．９ｍＭ、５．５～６ｍＭ、５．６～６．１ｍＭ、５．７～６．２ｍＭ、５．８～６．３ｍＭ、５．９～６．４ｍＭ、６～６．５ｍＭ、６．１～６．６ｍＭ、６．２～６．７ｍＭ、６．３～６．８ｍＭ、６．４～６．９ｍＭ、６．５～７ｍＭ、６．６～７．１ｍＭ、６．７～７．２ｍＭ、６．８～７．３ｍＭ、６．９～７．４ｍＭ、７～７．５ｍＭ、７．１～７．６ｍＭ、７．２～７．７ｍＭ、７．３～７．８ｍＭ、７．４～７．９ｍＭ、７．５～８ｍＭ、７．６～８．１ｍＭ、７．７～８．２ｍＭ、７．８～８．３ｍＭ、７．９～８．４ｍＭ、８～８．５ｍＭ、８．１～８．６ｍＭ、８．２～８．７ｍＭ、８．３～８．８ｍＭ、８．４～８．９ｍＭ、８．５～９ｍＭ、８．６～９．１ｍＭ、８．７～９．２ｍＭ、８．８～９．３ｍＭ、８．９～９．４ｍＭ、９～９．５ｍＭ、９．１～９．６ｍＭ、９．２～９．７ｍＭ、９．３～９．８ｍＭ、９．４～９．９ｍＭ、９．５～１０ｍＭ、９．６～１０．１ｍＭ、９．７～１０．２ｍＭ、９．８～１０．３ｍＭ、９．９～１０．４ｍＭ、１０～１０．５ｍＭ、１０．１～１０．６ｍＭ、１０．２～１０．７ｍＭ、１０．３～１０．８ｍＭ、１０．４～１０．９ｍＭ、１０．５～１１ｍＭ、１０．６～１１．１ｍＭ、１０．７～１１．２ｍＭ、１０．８～１１．３ｍＭ、１０．９～１１．４ｍＭ、１１～１１．５ｍＭ、１１．１～１１．６ｍＭ、１１．２～１１．７ｍＭ、１１．３～１１．８ｍＭ、１１．４～１１．９ｍＭ、１１．５～１２ｍＭ、１１．６～１２．１ｍＭ、１１．７～１２．２ｍＭ、１１．８～１２．３ｍＭ、１１．９～１２．４ｍＭ、１２～１２．５ｍＭ、１２．１～１２．６ｍＭ、１２．２～１２．７ｍＭ、１２．３～１２．８ｍＭ、１２．４～１２．９ｍＭ、１２．５～１３ｍＭ、１２．６～１３．１ｍＭ、１２．７～１３．２ｍＭ、１２．８～１３．３ｍＭ、１２．９～１３．４ｍＭ、１３～１３．５ｍＭ、１３．１～１３．６ｍＭ、１３．２～１３．７ｍＭ、１３．３～１３．８ｍＭ、１３．４～１３．９ｍＭ、１３．５～１４ｍＭ、１３．６～１４．１ｍＭ、１３．７～１４．２ｍＭ、１３．８～１４．３ｍＭ、１３．９～１４．４ｍＭ、１４～１４．５ｍＭ、１４．１～１４．６ｍＭ、１４．２～１４．７ｍＭ、１４．３～１４．８ｍＭ、１４．４～１４．９ｍＭ、１４．５～１５ｍＭ、０～１ｍＭ、１～２ｍＭ、２～３ｍＭ、３～４ｍＭ、４～５ｍＭ、５～６ｍＭ、６～７ｍＭ、７～８ｍＭ、８～９ｍＭ、９～１０ｍＭ、１０～１１ｍＭ、１１～１２ｍＭ、１２～１３ｍＭ、１３～１４ｍＭ、１４～１５ｍＭ、１５～１６ｍＭ、０～２ｍＭ、１～３ｍＭ、２～４ｍＭ、３～５ｍＭ、４～６ｍＭ、５～７ｍＭ、６～８ｍＭ、７～９ｍＭ、８～１０ｍＭ、９～１１ｍＭ、１０～１２ｍＭ、１１～１３ｍＭ、１２～１４ｍＭ、１３～１５ｍＭ、０～３ｍＭ、１～４ｍＭ、２～５ｍＭ、３～６ｍＭ、４～７ｍＭ、５～８ｍＭ、６～９ｍＭ、７～１０ｍＭ、８～１１ｍＭ、９～１２ｍＭ、１０～１３ｍＭ、１１～１４ｍＭ、１２～１５ｍＭ、０～４ｍＭ、１～５ｍＭ、２～６ｍＭ、３～７ｍＭ、４～８ｍＭ、５～９ｍＭ、６～１０ｍＭ、７～１１ｍＭ、８～１２ｍＭ、９～１３ｍＭ、１０～１４ｍＭ、１１～１５ｍＭ、０～５ｍＭ、１～６ｍＭ、２～７ｍＭ、３～８ｍＭ、４～９ｍＭ、５～１０ｍＭ、６～１１ｍＭ、７～１２ｍＭ、８～１３ｍＭ、９～１４ｍＭ、１０～１５ｍＭ、０～６ｍＭ、１～７ｍＭ、２～８ｍＭ、３～９ｍＭ、４～１０ｍＭ、５～１１ｍＭ、６～１２ｍＭ、７～１３ｍＭ、８～１４ｍＭ、９～１５ｍＭ、０～７ｍＭ、１～８ｍＭ、２～９ｍＭ、３～１０ｍＭ、４～１１ｍＭ、５～１２ｍＭ、６～１３ｍＭ、７～１４ｍＭ、８～１５ｍＭ、０～８ｍＭ、１～９ｍＭ、２～１０ｍＭ、３～１１ｍＭ、４～１２ｍＭ、５～１３ｍＭ、６～１４ｍＭ、７～１５ｍＭ、０～９ｍＭ、１～１０ｍＭ、２～１１ｍＭ、３～１２ｍＭ、４～１３ｍＭ、５～１４ｍＭ、６～１５ｍＭ、０～１０ｍＭ、１～１１ｍＭ、２～１２ｍＭ、３～１３ｍＭ、４～１４ｍＭ、５～１５ｍＭ、０～１１ｍＭ、１～１２ｍＭ、２～１３ｍＭ、３～１４ｍＭ、４～１５ｍＭ、０～１２ｍＭ、１～１３ｍＭ、２～１４ｍＭ、３～１５ｍＭ、０～１３ｍＭ、１～１４ｍＭ、２～１５ｍＭ、０～１４ｍＭ、１～１５ｍＭ、または０～１５ｍＭの範囲のトリスを含み得る。
【0661】
所定の実施形態では、製剤は、０～１０ｍＭのトリスを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２～１２ｍＭのトリスを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのトリスを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２～１２ｍＭのトリスを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのトリスを含み得る。
【0662】
ヒスチジン
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、ヒスチジンである。
所定の実施形態では、製剤におけるヒスチジンの濃度は、限定されないが、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭまたは１５ｍＭであり得る。
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、ヒスチジンである。
所定の実施形態では、製剤におけるヒスチジンの濃度は、限定されないが、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭまたは１５ｍＭであり得る。
【0663】
製剤は、０～０．５ｍＭ、０．１～０．６ｍＭ、０．２～０．７ｍＭ、０．３～０．８ｍＭ、０．４～０．９ｍＭ、０．５～１ｍＭ、０．６～１．１ｍＭ、０．７～１．２ｍＭ、０．８～１．３ｍＭ、０．９～１．４ｍＭ、１～１．５ｍＭ、１．１～１．６ｍＭ、１．２～１．７ｍＭ、１．３～１．８ｍＭ、１．４～１．９ｍＭ、１．５～２ｍＭ、１．６～２．１ｍＭ、１．７～２．２ｍＭ、１．８～２．３ｍＭ、１．９～２．４ｍＭ、２～２．５ｍＭ、２．１～２．６ｍＭ、２．２～２．７ｍＭ、２．３～２．８ｍＭ、２．４～２．９ｍＭ、２．５～３ｍＭ、２．６～３．１ｍＭ、２．７～３．２ｍＭ、２．８～３．３ｍＭ、２．９～３．４ｍＭ、３～３．５ｍＭ、３．１～３．６ｍＭ、３．２～３．７ｍＭ、３．３～３．８ｍＭ、３．４～３．９ｍＭ、３．５～４ｍＭ、３．６～４．１ｍＭ、３．７～４．２ｍＭ、３．８～４．３ｍＭ、３．９～４．４ｍＭ、４～４．５ｍＭ、４．１～４．６ｍＭ、４．２～４．７ｍＭ、４．３～４．８ｍＭ、４．４～４．９ｍＭ、４．５～５ｍＭ、４．６～５．１ｍＭ、４．７～５．２ｍＭ、４．８～５．３ｍＭ、４．９～５．４ｍＭ、５～５．５ｍＭ、５．１～５．６ｍＭ、５．２～５．７ｍＭ、５．３～５．８ｍＭ、５．４～５．９ｍＭ、５．５～６ｍＭ、５．６～６．１ｍＭ、５．７～６．２ｍＭ、５．８～６．３ｍＭ、５．９～６．４ｍＭ、６～６．５ｍＭ、６．１～６．６ｍＭ、６．２～６．７ｍＭ、６．３～６．８ｍＭ、６．４～６．９ｍＭ、６．５～７ｍＭ、６．６～７．１ｍＭ、６．７～７．２ｍＭ、６．８～７．３ｍＭ、６．９～７．４ｍＭ、７～７．５ｍＭ、７．１～７．６ｍＭ、７．２～７．７ｍＭ、７．３～７．８ｍＭ、７．４～７．９ｍＭ、７．５～８ｍＭ、７．６～８．１ｍＭ、７．７～８．２ｍＭ、７．８～８．３ｍＭ、７．９～８．４ｍＭ、８～８．５ｍＭ、８．１～８．６ｍＭ、８．２～８．７ｍＭ、８．３～８．８ｍＭ、８．４～８．９ｍＭ、８．５～９ｍＭ、８．６～９．１ｍＭ、８．７～９．２ｍＭ、８．８～９．３ｍＭ、８．９～９．４ｍＭ、９～９．５ｍＭ、９．１～９．６ｍＭ、９．２～９．７ｍＭ、９．３～９．８ｍＭ、９．４～９．９ｍＭ、９．５～１０ｍＭ、９．６～１０．１ｍＭ、９．７～１０．２ｍＭ、９．８～１０．３ｍＭ、９．９～１０．４ｍＭ、１０～１０．５ｍＭ、１０．１～１０．６ｍＭ、１０．２～１０．７ｍＭ、１０．３～１０．８ｍＭ、１０．４～１０．９ｍＭ、１０．５～１１ｍＭ、１０．６～１１．１ｍＭ、１０．７～１１．２ｍＭ、１０．８～１１．３ｍＭ、１０．９～１１．４ｍＭ、１１～１１．５ｍＭ、１１．１～１１．６ｍＭ、１１．２～１１．７ｍＭ、１１．３～１１．８ｍＭ、１１．４～１１．９ｍＭ、１１．５～１２ｍＭ、１１．６～１２．１ｍＭ、１１．７～１２．２ｍＭ、１１．８～１２．３ｍＭ、１１．９～１２．４ｍＭ、１２～１２．５ｍＭ、１２．１～１２．６ｍＭ、１２．２～１２．７ｍＭ、１２．３～１２．８ｍＭ、１２．４～１２．９ｍＭ、１２．５～１３ｍＭ、１２．６～１３．１ｍＭ、１２．７～１３．２ｍＭ、１２．８～１３．３ｍＭ、１２．９～１３．４ｍＭ、１３～１３．５ｍＭ、１３．１～１３．６ｍＭ、１３．２～１３．７ｍＭ、１３．３～１３．８ｍＭ、１３．４～１３．９ｍＭ、１３．５～１４ｍＭ、１３．６～１４．１ｍＭ、１３．７～１４．２ｍＭ、１３．８～１４．３ｍＭ、１３．９～１４．４ｍＭ、１４～１４．５ｍＭ、１４．１～１４．６ｍＭ、１４．２～１４．７ｍＭ、１４．３～１４．８ｍＭ、１４．４～１４．９ｍＭ、１４．５～１５ｍＭ、０～１ｍＭ、１～２ｍＭ、２～３ｍＭ、３～４ｍＭ、４～５ｍＭ、５～６ｍＭ、６～７ｍＭ、７～８ｍＭ、８～９ｍＭ、９～１０ｍＭ、１０～１１ｍＭ、１１～１２ｍＭ、１２～１３ｍＭ、１３～１４ｍＭ、１４～１５ｍＭ、１５～１６ｍＭ、０～２ｍＭ、１～３ｍＭ、２～４ｍＭ、３～５ｍＭ、４～６ｍＭ、５～７ｍＭ、６～８ｍＭ、７～９ｍＭ、８～１０ｍＭ、９～１１ｍＭ、１０～１２ｍＭ、１１～１３ｍＭ、１２～１４ｍＭ、１３～１５ｍＭ、０～３ｍＭ、１～４ｍＭ、２～５ｍＭ、３～６ｍＭ、４～７ｍＭ、５～８ｍＭ、６～９ｍＭ、７～１０ｍＭ、８～１１ｍＭ、９～１２ｍＭ、１０～１３ｍＭ、１１～１４ｍＭ、１２～１５ｍＭ、０～４ｍＭ、１～５ｍＭ、２～６ｍＭ、３～７ｍＭ、４～８ｍＭ、５～９ｍＭ、６～１０ｍＭ、７～１１ｍＭ、８～１２ｍＭ、９～１３ｍＭ、１０～１４ｍＭ、１１～１５ｍＭ、０～５ｍＭ、１～６ｍＭ、２～７ｍＭ、３～８ｍＭ、４～９ｍＭ、５～１０ｍＭ、６～１１ｍＭ、７～１２ｍＭ、８～１３ｍＭ、９～１４ｍＭ、１０～１５ｍＭ、０～６ｍＭ、１～７ｍＭ、２～８ｍＭ、３～９ｍＭ、４～１０ｍＭ、５～１１ｍＭ、６～１２ｍＭ、７～１３ｍＭ、８～１４ｍＭ、９～１５ｍＭ、０～７ｍＭ、１～８ｍＭ、２～９ｍＭ、３～１０ｍＭ、４～１１ｍＭ、５～１２ｍＭ、６～１３ｍＭ、７～１４ｍＭ、８～１５ｍＭ、０～８ｍＭ、１～９ｍＭ、２～１０ｍＭ、３～１１ｍＭ、４～１２ｍＭ、５～１３ｍＭ、６～１４ｍＭ、７～１５ｍＭ、０～９ｍＭ、１～１０ｍＭ、２～１１ｍＭ、３～１２ｍＭ、４～１３ｍＭ、５～１４ｍＭ、６～１５ｍＭ、０～１０ｍＭ、１～１１ｍＭ、２～１２ｍＭ、３～１３ｍＭ、４～１４ｍＭ、５～１５ｍＭ、０～１１ｍＭ、１～１２ｍＭ、２～１３ｍＭ、３～１４ｍＭ、４～１５ｍＭ、０～１２ｍＭ、１～１３ｍＭ、２～１４ｍＭ、３～１５ｍＭ、０～１３ｍＭ、１～１４ｍＭ、２～１５ｍＭ、０～１４ｍＭ、１～１５ｍＭ、または０～１５ｍＭの範囲のヒスチジンを含み得る。
【0664】
所定の実施形態では、製剤は、０～１０ｍＭのヒスチジンを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２～１２ｍＭのヒスチジンを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのヒスチジンを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２～１２ｍＭのヒスチジンを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのヒスチジンを含み得る。
【0665】
アルギニン
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、アルギニンである。
所定の実施形態では、アルギニンの濃度は、限定されないが、１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、２０ｍＭ、２１ｍＭ、２２ｍＭ、２３ｍＭ、２４ｍＭ、２５ｍＭ、２６ｍＭ、２７ｍＭ、２８ｍＭ、２９ｍＭ、３０ｍＭ、３１ｍＭ、３２ｍＭ、３３ｍＭ、３４ｍＭ、３５ｍＭ、３６ｍＭ、３７ｍＭ、３８ｍＭ、３９ｍＭ、４０ｍＭ、４１ｍＭ、４２ｍＭ、４３ｍＭ、４４ｍＭ、４５ｍＭ、４６ｍＭ、４７ｍＭ、４８ｍＭ、４９ｍＭ、５０ｍＭ、５１ｍＭ、５２ｍＭ、５３ｍＭ、５４ｍＭ、５５ｍＭ、５６ｍＭ、５７ｍＭ、５８ｍＭ、５９ｍＭ、６０ｍＭ、６１ｍＭ、６２ｍＭ、６３ｍＭ、６４ｍＭ、６５ｍＭ、６６ｍＭ、６７ｍＭ、６８ｍＭ、６９ｍＭ、７０ｍＭ、７１ｍＭ、７２ｍＭ、７３ｍＭ、７４ｍＭ、７５ｍＭ、７６ｍＭ、７７ｍＭ、７８ｍＭ、７９ｍＭ、８０ｍＭ、８１ｍＭ、８２ｍＭ、８３ｍＭ、８４ｍＭ、８５ｍＭ、８６ｍＭ、８７ｍＭ、８８ｍＭ、８９ｍＭ、９０ｍＭ、９１ｍＭ、９２ｍＭ、９３ｍＭ、９４ｍＭ、９５ｍＭ、９６ｍＭ、９７ｍＭ、９８ｍＭ、９９ｍＭ、または１００ｍＭであり得る。
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、アルギニンである。
所定の実施形態では、アルギニンの濃度は、限定されないが、１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、２０ｍＭ、２１ｍＭ、２２ｍＭ、２３ｍＭ、２４ｍＭ、２５ｍＭ、２６ｍＭ、２７ｍＭ、２８ｍＭ、２９ｍＭ、３０ｍＭ、３１ｍＭ、３２ｍＭ、３３ｍＭ、３４ｍＭ、３５ｍＭ、３６ｍＭ、３７ｍＭ、３８ｍＭ、３９ｍＭ、４０ｍＭ、４１ｍＭ、４２ｍＭ、４３ｍＭ、４４ｍＭ、４５ｍＭ、４６ｍＭ、４７ｍＭ、４８ｍＭ、４９ｍＭ、５０ｍＭ、５１ｍＭ、５２ｍＭ、５３ｍＭ、５４ｍＭ、５５ｍＭ、５６ｍＭ、５７ｍＭ、５８ｍＭ、５９ｍＭ、６０ｍＭ、６１ｍＭ、６２ｍＭ、６３ｍＭ、６４ｍＭ、６５ｍＭ、６６ｍＭ、６７ｍＭ、６８ｍＭ、６９ｍＭ、７０ｍＭ、７１ｍＭ、７２ｍＭ、７３ｍＭ、７４ｍＭ、７５ｍＭ、７６ｍＭ、７７ｍＭ、７８ｍＭ、７９ｍＭ、８０ｍＭ、８１ｍＭ、８２ｍＭ、８３ｍＭ、８４ｍＭ、８５ｍＭ、８６ｍＭ、８７ｍＭ、８８ｍＭ、８９ｍＭ、９０ｍＭ、９１ｍＭ、９２ｍＭ、９３ｍＭ、９４ｍＭ、９５ｍＭ、９６ｍＭ、９７ｍＭ、９８ｍＭ、９９ｍＭ、または１００ｍＭであり得る。
【0666】
製剤は、０～５ｍＭ、１～５ｍＭ、２～５ｍＭ、３～５ｍＭ、４～５ｍＭ、０～１０ｍＭ、１～１０ｍＭ、２～１０ｍＭ、３～１０ｍＭ、４～１０ｍＭ、５～１０ｍＭ、６～１０ｍＭ、７～１０ｍＭ、８～１０ｍＭ、９～１０ｍＭ、０～２５ｍＭ、１～２５ｍＭ、２～２５ｍＭ、３～２５ｍＭ、４～２５ｍＭ、５～２５ｍＭ、６～２５ｍＭ、７～２５ｍＭ、８～２５ｍＭ、９～２５ｍＭ、１０～２５ｍＭ、１１～２５ｍＭ、１２～２５ｍＭ、１３～２５ｍＭ、１４～２５ｍＭ、１５～２５ｍＭ、１６～２５ｍＭ、１７～２５ｍＭ、１８～２５ｍＭ、１９～２５ｍＭ、２０～２５ｍＭ、２１～２５ｍＭ、２２～２５ｍＭ、２３～２５ｍＭ、２４～２５ｍＭ、０～５０ｍＭ、１～５０ｍＭ、２～５０ｍＭ、３～５０ｍＭ、４～５０ｍＭ、５～５０ｍＭ、６～５０ｍＭ、７～５０ｍＭ、８～５０ｍＭ、９～５０ｍＭ、１０～５０ｍＭ、１１～５０ｍＭ、１２～５０ｍＭ、１３～５０ｍＭ、１４～５０ｍＭ、１５～５０ｍＭ、１６～５０ｍＭ、１７～５０ｍＭ、１８～５０ｍＭ、１９～５０ｍＭ、２０～５０ｍＭ、２１～５０ｍＭ、２２～５０ｍＭ、２３～５０ｍＭ、２４～５０ｍＭ、２５～５０ｍＭ、２６～５０ｍＭ、２７～５０ｍＭ、２８～５０ｍＭ、２９～５０ｍＭ、３０～５０ｍＭ、３１～５０ｍＭ、３２～５０ｍＭ、３３～５０ｍＭ、３４～５０ｍＭ、３５～５０ｍＭ、３６～５０ｍＭ、３７～５０ｍＭ、３８～５０ｍＭ、３９～５０ｍＭ、４０～５０ｍＭ、４１～５０ｍＭ、４２～５０ｍＭ、４３～５０ｍＭ、４４～５０ｍＭ、４５～５０ｍＭ、４６～５０ｍＭ、４７～５０ｍＭ、４８～５０ｍＭ、４９～５０ｍＭ、０～７５ｍＭ、１～７５ｍＭ、２～７５ｍＭ、３～７５ｍＭ、４～７５ｍＭ、５～７５ｍＭ、６～７５ｍＭ、７～７５ｍＭ、８～７５ｍＭ、９～７５ｍＭ、１０～７５ｍＭ、１１～７５ｍＭ、１２～７５ｍＭ、１３～７５ｍＭ、１４～７５ｍＭ、１５～７５ｍＭ、１６～７５ｍＭ、１７～７５ｍＭ、１８～７５ｍＭ、１９～７５ｍＭ、２０～７５ｍＭ、２１～７５ｍＭ、２２～７５ｍＭ、２３～７５ｍＭ、２４～７５ｍＭ、２５～７５ｍＭ、２６～７５ｍＭ、２７～７５ｍＭ、２８～７５ｍＭ、２９～７５ｍＭ、３０～７５ｍＭ、３１～７５ｍＭ、３２～７５ｍＭ、３３～７５ｍＭ、３４～７５ｍＭ、３５～７５ｍＭ、３６～７５ｍＭ、３７～７５ｍＭ、３８～７５ｍＭ、３９～７５ｍＭ、４０～７５ｍＭ、４１～７５ｍＭ、４２～７５ｍＭ、４３～７５ｍＭ、４４～７５ｍＭ、４５～７５ｍＭ、４６～７５ｍＭ、４７～７５ｍＭ、４８～７５ｍＭ、４９～７５ｍＭ、５０～７５ｍＭ、５１～７５ｍＭ、５２～７５ｍＭ、５３～７５ｍＭ、５４～７５ｍＭ、５５～７５ｍＭ、５６～７５ｍＭ、５７～７５ｍＭ、５８～７５ｍＭ、５９～７５ｍＭ、６０～７５ｍＭ、６１～７５ｍＭ、６２～７５ｍＭ、６３～７５ｍＭ、６４～７５ｍＭ、６５～７５ｍＭ、６６～７５ｍＭ、６７～７５ｍＭ、６８～７５ｍＭ、６９～７５ｍＭ、７０～７５ｍＭ、７１～７５ｍＭ、７２～７５ｍＭ、７３～７５ｍＭ、７４～７５ｍＭ、５０～１００ｍＭ、６０～１００ｍＭ、７５～１００ｍＭ、８０～１００ｍＭ、または９０～１００ｍＭの範囲のアルギニンを含み得る。
【0667】
所定の実施形態では、製剤は、０～７５ｍＭのアルギニンを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５０～１００ｍＭのアルギニンを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７５ｍＭのアルギニンを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５０～１００ｍＭのアルギニンを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７５ｍＭのアルギニンを含み得る。
【0668】
塩酸
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、塩酸である。
所定の実施形態では、製剤における塩酸の濃度は、限定されないが、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭまたは１５ｍＭであり得る。
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、塩酸である。
所定の実施形態では、製剤における塩酸の濃度は、限定されないが、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、１．１ｍＭ、１．２ｍＭ、１．３ｍＭ、１．４ｍＭ、１．５ｍＭ、１．６ｍＭ、１．７ｍＭ、１．８ｍＭ、１．９ｍＭ、２ｍＭ、２．１ｍＭ、２．２ｍＭ、２．３ｍＭ、２．４ｍＭ、２．５ｍＭ、２．６ｍＭ、２．７ｍＭ、２．８ｍＭ、２．９ｍＭ、３ｍＭ、３．１ｍＭ、３．２ｍＭ、３．３ｍＭ、３．４ｍＭ、３．５ｍＭ、３．６ｍＭ、３．７ｍＭ、３．８ｍＭ、３．９ｍＭ、４ｍＭ、４．１ｍＭ、４．２ｍＭ、４．３ｍＭ、４．４ｍＭ、４．５ｍＭ、４．６ｍＭ、４．７ｍＭ、４．８ｍＭ、４．９ｍＭ、５ｍＭ、５．１ｍＭ、５．２ｍＭ、５．３ｍＭ、５．４ｍＭ、５．５ｍＭ、５．６ｍＭ、５．７ｍＭ、５．８ｍＭ、５．９ｍＭ、６ｍＭ、６．１ｍＭ、６．２ｍＭ、６．３ｍＭ、６．４ｍＭ、６．５ｍＭ、６．６ｍＭ、６．７ｍＭ、６．８ｍＭ、６．９ｍＭ、７ｍＭ、７．１ｍＭ、７．２ｍＭ、７．３ｍＭ、７．４ｍＭ、７．５ｍＭ、７．６ｍＭ、７．７ｍＭ、７．８ｍＭ、７．９ｍＭ、８ｍＭ、８．１ｍＭ、８．２ｍＭ、８．３ｍＭ、８．４ｍＭ、８．５ｍＭ、８．６ｍＭ、８．７ｍＭ、８．８ｍＭ、８．９ｍＭ、９ｍＭ、９．１ｍＭ、９．２ｍＭ、９．３ｍＭ、９．４ｍＭ、９．５ｍＭ、９．６ｍＭ、９．７ｍＭ、９．８ｍＭ、９．９ｍＭ、１０ｍＭ、１０．１ｍＭ、１０．２ｍＭ、１０．３ｍＭ、１０．４ｍＭ、１０．５ｍＭ、１０．６ｍＭ、１０．７ｍＭ、１０．８ｍＭ、１０．９ｍＭ、１１ｍＭ、１１．１ｍＭ、１１．２ｍＭ、１１．３ｍＭ、１１．４ｍＭ、１１．５ｍＭ、１１．６ｍＭ、１１．７ｍＭ、１１．８ｍＭ、１１．９ｍＭ、１２ｍＭ、１２．１ｍＭ、１２．２ｍＭ、１２．３ｍＭ、１２．４ｍＭ、１２．５ｍＭ、１２．６ｍＭ、１２．７ｍＭ、１２．８ｍＭ、１２．９ｍＭ、１３ｍＭ、１３．１ｍＭ、１３．２ｍＭ、１３．３ｍＭ、１３．４ｍＭ、１３．５ｍＭ、１３．６ｍＭ、１３．７ｍＭ、１３．８ｍＭ、１３．９ｍＭ、１４ｍＭ、１４．１ｍＭ、１４．２ｍＭ、１４．３ｍＭ、１４．４ｍＭ、１４．５ｍＭ、１４．６ｍＭ、１４．７ｍＭ、１４．８ｍＭ、１４．９ｍＭまたは１５ｍＭであり得る。
【0669】
製剤は、０～０．５ｍＭ、０．１～０．６ｍＭ、０．２～０．７ｍＭ、０．３～０．８ｍＭ、０．４～０．９ｍＭ、０．５～１ｍＭ、０．６～１．１ｍＭ、０．７～１．２ｍＭ、０．８～１．３ｍＭ、０．９～１．４ｍＭ、１～１．５ｍＭ、１．１～１．６ｍＭ、１．２～１．７ｍＭ、１．３～１．８ｍＭ、１．４～１．９ｍＭ、１．５～２ｍＭ、１．６～２．１ｍＭ、１．７～２．２ｍＭ、１．８～２．３ｍＭ、１．９～２．４ｍＭ、２～２．５ｍＭ、２．１～２．６ｍＭ、２．２～２．７ｍＭ、２．３～２．８ｍＭ、２．４～２．９ｍＭ、２．５～３ｍＭ、２．６～３．１ｍＭ、２．７～３．２ｍＭ、２．８～３．３ｍＭ、２．９～３．４ｍＭ、３～３．５ｍＭ、３．１～３．６ｍＭ、３．２～３．７ｍＭ、３．３～３．８ｍＭ、３．４～３．９ｍＭ、３．５～４ｍＭ、３．６～４．１ｍＭ、３．７～４．２ｍＭ、３．８～４．３ｍＭ、３．９～４．４ｍＭ、４～４．５ｍＭ、４．１～４．６ｍＭ、４．２～４．７ｍＭ、４．３～４．８ｍＭ、４．４～４．９ｍＭ、４．５～５ｍＭ、４．６～５．１ｍＭ、４．７～５．２ｍＭ、４．８～５．３ｍＭ、４．９～５．４ｍＭ、５～５．５ｍＭ、５．１～５．６ｍＭ、５．２～５．７ｍＭ、５．３～５．８ｍＭ、５．４～５．９ｍＭ、５．５～６ｍＭ、５．６～６．１ｍＭ、５．７～６．２ｍＭ、５．８～６．３ｍＭ、５．９～６．４ｍＭ、６～６．５ｍＭ、６．１～６．６ｍＭ、６．２～６．７ｍＭ、６．３～６．８ｍＭ、６．４～６．９ｍＭ、６．５～７ｍＭ、６．６～７．１ｍＭ、６．７～７．２ｍＭ、６．８～７．３ｍＭ、６．９～７．４ｍＭ、７～７．５ｍＭ、７．１～７．６ｍＭ、７．２～７．７ｍＭ、７．３～７．８ｍＭ、７．４～７．９ｍＭ、７．５～８ｍＭ、７．６～８．１ｍＭ、７．７～８．２ｍＭ、７．８～８．３ｍＭ、７．９～８．４ｍＭ、８～８．５ｍＭ、８．１～８．６ｍＭ、８．２～８．７ｍＭ、８．３～８．８ｍＭ、８．４～８．９ｍＭ、８．５～９ｍＭ、８．６～９．１ｍＭ、８．７～９．２ｍＭ、８．８～９．３ｍＭ、８．９～９．４ｍＭ、９～９．５ｍＭ、９．１～９．６ｍＭ、９．２～９．７ｍＭ、９．３～９．８ｍＭ、９．４～９．９ｍＭ、９．５～１０ｍＭ、９．６～１０．１ｍＭ、９．７～１０．２ｍＭ、９．８～１０．３ｍＭ、９．９～１０．４ｍＭ、１０～１０．５ｍＭ、１０．１～１０．６ｍＭ、１０．２～１０．７ｍＭ、１０．３～１０．８ｍＭ、１０．４～１０．９ｍＭ、１０．５～１１ｍＭ、１０．６～１１．１ｍＭ、１０．７～１１．２ｍＭ、１０．８～１１．３ｍＭ、１０．９～１１．４ｍＭ、１１～１１．５ｍＭ、１１．１～１１．６ｍＭ、１１．２～１１．７ｍＭ、１１．３～１１．８ｍＭ、１１．４～１１．９ｍＭ、１１．５～１２ｍＭ、１１．６～１２．１ｍＭ、１１．７～１２．２ｍＭ、１１．８～１２．３ｍＭ、１１．９～１２．４ｍＭ、１２～１２．５ｍＭ、１２．１～１２．６ｍＭ、１２．２～１２．７ｍＭ、１２．３～１２．８ｍＭ、１２．４～１２．９ｍＭ、１２．５～１３ｍＭ、１２．６～１３．１ｍＭ、１２．７～１３．２ｍＭ、１２．８～１３．３ｍＭ、１２．９～１３．４ｍＭ、１３～１３．５ｍＭ、１３．１～１３．６ｍＭ、１３．２～１３．７ｍＭ、１３．３～１３．８ｍＭ、１３．４～１３．９ｍＭ、１３．５～１４ｍＭ、１３．６～１４．１ｍＭ、１３．７～１４．２ｍＭ、１３．８～１４．３ｍＭ、１３．９～１４．４ｍＭ、１４～１４．５ｍＭ、１４．１～１４．６ｍＭ、１４．２～１４．７ｍＭ、１４．３～１４．８ｍＭ、１４．４～１４．９ｍＭ、１４．５～１５ｍＭ、０～１ｍＭ、１～２ｍＭ、２～３ｍＭ、３～４ｍＭ、４～５ｍＭ、５～６ｍＭ、６～７ｍＭ、７～８ｍＭ、８～９ｍＭ、９～１０ｍＭ、１０～１１ｍＭ、１１～１２ｍＭ、１２～１３ｍＭ、１３～１４ｍＭ、１４～１５ｍＭ、１５～１６ｍＭ、０～２ｍＭ、１～３ｍＭ、２～４ｍＭ、３～５ｍＭ、４～６ｍＭ、５～７ｍＭ、６～８ｍＭ、７～９ｍＭ、８～１０ｍＭ、９～１１ｍＭ、１０～１２ｍＭ、１１～１３ｍＭ、１２～１４ｍＭ、１３～１５ｍＭ、０～３ｍＭ、１～４ｍＭ、２～５ｍＭ、３～６ｍＭ、４～７ｍＭ、５～８ｍＭ、６～９ｍＭ、７～１０ｍＭ、８～１１ｍＭ、９～１２ｍＭ、１０～１３ｍＭ、１１～１４ｍＭ、１２～１５ｍＭ、０～４ｍＭ、１～５ｍＭ、２～６ｍＭ、３～７ｍＭ、４～８ｍＭ、５～９ｍＭ、６～１０ｍＭ、７～１１ｍＭ、８～１２ｍＭ、９～１３ｍＭ、１０～１４ｍＭ、１１～１５ｍＭ、０～５ｍＭ、１～６ｍＭ、２～７ｍＭ、３～８ｍＭ、４～９ｍＭ、５～１０ｍＭ、６～１１ｍＭ、７～１２ｍＭ、８～１３ｍＭ、９～１４ｍＭ、１０～１５ｍＭ、０～６ｍＭ、１～７ｍＭ、２～８ｍＭ、３～９ｍＭ、４～１０ｍＭ、５～１１ｍＭ、６～１２ｍＭ、７～１３ｍＭ、８～１４ｍＭ、９～１５ｍＭ、０～７ｍＭ、１～８ｍＭ、２～９ｍＭ、３～１０ｍＭ、４～１１ｍＭ、５～１２ｍＭ、６～１３ｍＭ、７～１４ｍＭ、８～１５ｍＭ、０～８ｍＭ、１～９ｍＭ、２～１０ｍＭ、３～１１ｍＭ、４～１２ｍＭ、５～１３ｍＭ、６～１４ｍＭ、７～１５ｍＭ、０～９ｍＭ、１～１０ｍＭ、２～１１ｍＭ、３～１２ｍＭ、４～１３ｍＭ、５～１４ｍＭ、６～１５ｍＭ、０～１０ｍＭ、１～１１ｍＭ、２～１２ｍＭ、３～１３ｍＭ、４～１４ｍＭ、５～１５ｍＭ、０～１１ｍＭ、１～１２ｍＭ、２～１３ｍＭ、３～１４ｍＭ、４～１５ｍＭ、０～１２ｍＭ、１～１３ｍＭ、２～１４ｍＭ、３～１５ｍＭ、０～１３ｍＭ、１～１４ｍＭ、２～１５ｍＭ、０～１４ｍＭ、１～１５ｍＭ、または０～１５ｍＭの範囲の塩酸を含み得る。
【0670】
所定の実施形態では、製剤は、０～１０ｍＭの塩酸を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、６．２～６．３ｍＭの塩酸を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８．９～９ｍＭの塩酸を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、６．２～６．３ｍＭの塩酸を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８．９～９ｍＭの塩酸を含み得る。
【0671】
所定の実施形態では、製剤は、６．２ｍＭの塩酸を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、６．３ｍＭの塩酸を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８．９ｍＭの塩酸を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、６．３ｍＭの塩酸を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８．９ｍＭの塩酸を含み得る。
【0672】
所定の実施形態では、製剤は、９ｍＭの塩酸を含み得る。
糖
所定の実施形態では、製剤は、少なくとも１つの糖及び／または糖代用品を含み得る。
糖
所定の実施形態では、製剤は、少なくとも１つの糖及び／または糖代用品を含み得る。
【0673】
所定の実施形態では、製剤は、製剤の安定性を増加させるための少なくとも１つの糖及び／または糖代用品を含み得る。この安定性の増加は、インプロセスのプールのためのより長い保持時間を提供し、より長い「保存可能期間」を提供し、溶液中のＡＡＶ粒子の濃度を増加させ（例えば、製剤は、ｒＡＡＶが溶液から欠乏することなく、より高い濃度のＡＡＶ粒子を有することが可能である）及び／または製剤における凝集の生成または形成を減少させ得る。
【0674】
所定の実施形態では、製剤における少なくとも１つの糖及び／または糖代用品の包含は、糖及び／または糖代用品を有さない同じ製剤と比較して、製剤の安定性を１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、１～５％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加させ得る。
【0675】
所定の実施形態では、糖及び／または糖代用品は、安定性の増加のためにリン酸緩衝液と組み合わせて使用される。糖及び／または糖代用品とリン酸緩衝液との組み合わせは、糖及び／または糖代用品を有さない同じ製剤と比較して、安定性を１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、１～５％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加させ得る。非限定的な例として、糖は、スクロースである。別の非限定的な例として、糖は、トレハロースである。別の非限定的な例として、糖代用品は、ソルビトールである。
【0676】
所定の実施形態では、製剤の保持時間は、糖及び／または糖代用品を有さない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、１～５％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加し得る。
【0677】
所定の実施形態では、製剤の保存可能期間は、糖及び／または糖代用品を有さない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、１～５％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加し得る。保存可能期間は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４時間、または１、２、３、４週、または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４ヶ月、または１、２、３、４、５、６、７年もしくは７年超であり得る。
【0678】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、糖及び／または糖代用品を有さない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、１～５％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％増加し得る。
【0679】
所定の実施形態では、糖及び／または糖代用品の添加の結果として、製剤における凝集物の形成または生成は、糖及び／または糖代用品を有さない同じ製剤と比較して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、１～５％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％減少し得る。
【0680】
所定の実施形態では、糖及び／または糖代用品の添加の結果として、凝集物の形成または生成は、糖及び／または糖代用品を有さない同じ製剤と比較して、当該技術分野で知られている方法によって（例えば、ＤＬＳ測定によって）決定して、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、１～５％、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％であり得る。非限定的な例として、製剤の凝集は、少なくとも１つの糖及び／または糖代用品の製剤への添加によって２％未満となり得る。さらなる凝集物は、当該技術分野で知られている方法によって除去され得る。
【0681】
所定の実施形態では、製剤は、糖及び／または糖代用品を０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、２％、２．１％、２．２％、２．３％、２．４％、２．５％、２．６％、２．７％、２．８％、２．９％、３％、３．１％、３．２％、３．３％、３．４％、３．５％、３．６％、３．７％、３．８％、３．９％、４％、４．１％、４．２％、４．３％、４．４％、４．５％、４．６％、４．７％、４．８％、４．９％、５％、５．１％、５．２％、５．３％、５．４％、５．５％、５．６％、５．７％、５．８％、５．９％、６％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、８．９％、９％、９．１％、９．２％、９．３％、９．４％、９．５％、９．６％、９．７％、９．８％、９．９％、または１０％ｗ／ｖで含み得る。
【0682】
所定の実施形態では、製剤は、０～１％、０．１～１％、０．２～１％、０．３～１％、０．４～１％、０．５～１％、０．６～１％、０．７～１％、０．８～１％、０．９～１％、０～１．５％、０．１～１．５％、０．２～１．５％、０．３～１．５％、０．４～１．５％、０．５～１．５％、０．６～１．５％、０．７～１．５％、０．８～１．５％、０．９～１．５％、１～１．５％、１．１～１．５％、１．２～１．５％、１．３～１．５％、１．４～１．５％、０～２％、０．１～２％、０．２～２％、０．３～２％、０．４～２％、０．５～２％、０．６～２％、０．７～２％、０．８～２％、０．９～２％、１～２％、１．１～２％、１．２～２％、１．３～２％、１．４～２％、１．５～２％、１．６～２％、１．７～２％、１．８～２％、１．９～２％、０～２．５％、０．１～２．５％、０．２～２．５％、０．３～２．５％、０．４～２．５％、０．５～２．５％、０．６～２．５％、０．７～２．５％、０．８～２．５％、０．９～２．５％、１～２．５％、１．１～２．５％、１．２～２．５％、１．３～２．５％、１．４～２．５％、１．５～２．５％、１．６～２．５％、１．７～２．５％、１．８～２．５％、１．９～２．５％、２～２．５％、２．１～２．５％、２．２～２．５％、２．３～２．５％、２．４～２．５％、０～３％、０．１～３％、０．２～３％、０．３～３％、０．４～３％、０．５～３％、０．６～３％、０．７～３％、０．８～３％、０．９～３％、１～３％、１．１～３％、１．２～３％、１．３～３％、１．４～３％、１．５～３％、１．６～３％、１．７～３％、１．８～３％、１．９～３％、２～３％、２．１～３％、２．２～３％、２．３～３％、２．４～３％、２．５～３％、２．６～３％、２．７～３％、２．８～３％、２．９～３％、０～３．５％、０．１～３．５％、０．２～３．５％、０．３～３．５％、０．４～３．５％、０．５～３．５％、０．６～３．５％、０．７～３．５％、０．８～３．５％、０．９～３．５％、１～３．５％、１．１～３．５％、１．２～３．５％、１．３～３．５％、１．４～３．５％、１．５～３．５％、１．６～３．５％、１．７～３．５％、１．８～３．５％、１．９～３．５％、２～３．５％、２．１～３．５％、２．２～３．５％、２．３～３．５％、２．４～３．５％、２．５～３．５％、２．６～３．５％、２．７～３．５％、２．８～３．５％、２．９～３．５％、３～３．５％、３．１～３．５％、３．２～３．５％、３．３～３．５％、３．４～３．５％、０～４％、０．１～４％、０．２～４％、０．３～４％、０．４～４％、０．５～４％、０．６～４％、０．７～４％、０．８～４％、０．９～４％、１～４％、１．１～４％、１．２～４％、１．３～４％、１．４～４％、１．５～４％、１．６～４％、１．７～４％、１．８～４％、１．９～４％、２～４％、２．１～４％、２．２～４％、２．３～４％、２．４～４％、２．５～４％、２．６～４％、２．７～４％、２．８～４％、２．９～４％、３～４％、３．１～４％、３．２～４％、３．３～４％、３．４～４％、３．５～４％、３．６～４％、３．７～４％、３．８～４％、３．９～４％、０～４．５％、０．１～４．５％、０．２～４．５％、０．３～４．５％、０．４～４．５％、０．５～４．５％、０．６～４．５％、０．７～４．５％、０．８～４．５％、０．９～４．５％、１～４．５％、１．１～４．５％、１．２～４．５％、１．３～４．５％、１．４～４．５％、１．５～４．５％、１．６～４．５％、１．７～４．５％、１．８～４．５％、１．９～４．５％、２～４．５％、２．１～４．５％、２．２～４．５％、２．３～４．５％、２．４～４．５％、２．５～４．５％、２．６～４．５％、２．７～４．５％、２．８～４．５％、２．９～４．５％、３～４．５％、３．１～４．５％、３．２～４．５％、３．３～４．５％、３．４～４．５％、３．５～４．５％、３．６～４．５％、３．７～４．５％、３．８～４．５％、３．９～４．５％、４～４．５％、４．１～４．５％、４．２～４．５％、４．３～４．５％、４．４～４．５％、０～５％、０．１～５％、０．２～５％、０．３～５％、０．４～５％、０．５～５％、０．６～５％、０．７～５％、０．８～５％、０．９～５％、１～５％、１．１～５％、１．２～５％、１．３～５％、１．４～５％、１．５～５％、１．６～５％、１．７～５％、１．８～５％、１．９～５％、２～５％、２．１～５％、２．２～５％、２．３～５％、２．４～５％、２．５～５％、２．６～５％、２．７～５％、２．８～５％、２．９～５％、３～５％、３．１～５％、３．２～５％、３．３～５％、３．４～５％、３．５～５％、３．６～５％、３．７～５％、３．８～５％、３．９～５％、４～５％、４．１～５％、４．２～５％、４．３～５％、４．４～５％、４．５～５％、４．６～５％、４．７～５％、４．８～５％、４．９～５％、０～５．５％、０．１～５．５％、０．２～５．５％、０．３～５．５％、０．４～５．５％、０．５～５．５％、０．６～５．５％、０．７～５．５％、０．８～５．５％、０．９～５．５％、１～５．５％、１．１～５．５％、１．２～５．５％、１．３～５．５％、１．４～５．５％、１．５～５．５％、１．６～５．５％、１．７～５．５％、１．８～５．５％、１．９～５．５％、２～５．５％、２．１～５．５％、２．２～５．５％、２．３～５．５％、２．４～５．５％、２．５～５．５％、２．６～５．５％、２．７～５．５％、２．８～５．５％、２．９～５．５％、３～５．５％、３．１～５．５％、３．２～５．５％、３．３～５．５％、３．４～５．５％、３．５～５．５％、３．６～５．５％、３．７～５．５％、３．８～５．５％、３．９～５．５％、４～５．５％、４．１～５．５％、４．２～５．５％、４．３～５．５％、４．４～５．５％、４．５～５．５％、４．６～５．５％、４．７～５．５％、４．８～５．５％、４．９～５．５％、５～５．５％、５．１～５．５％、５．２～５．５％、５．３～５．５％、５．４～５．５％、０～６％、０．１～６％、０．２～６％、０．３～６％、０．４～６％、０．５～６％、０．６～６％、０．７～６％、０．８～６％、０．９～６％、１～６％、１．１～６％、１．２～６％、１．３～６％、１．４～６％、１．５～６％、１．６～６％、１．７～６％、１．８～６％、１．９～６％、２～６％、２．１～６％、２．２～６％、２．３～６％、２．４～６％、２．５～６％、２．６～６％、２．７～６％、２．８～６％、２．９～６％、３～６％、３．１～６％、３．２～６％、３．３～６％、３．４～６％、３．５～６％、３．６～６％、３．７～６％、３．８～６％、３．９～６％、４～６％、４．１～６％、４．２～６％、４．３～６％、４．４～６％、４．５～６％、４．６～６％、４．７～６％、４．８～６％、４．９～６％、５～６％、５．１～６％、５．２～６％、５．３～６％、５．４～６％、５．５～６％、５．６～６％、５．７～６％、５．８～６％、５．９～６％、０～６．５％、０．１～６．５％、０．２～６．５％、０．３～６．５％、０．４～６．５％、０．５～６．５％、０．６～６．５％、０．７～６．５％、０．８～６．５％、０．９～６．５％、１～６．５％、１．１～６．５％、１．２～６．５％、１．３～６．５％、１．４～６．５％、１．５～６．５％、１．６～６．５％、１．７～６．５％、１．８～６．５％、１．９～６．５％、２～６．５％、２．１～６．５％、２．２～６．５％、２．３～６．５％、２．４～６．５％、２．５～６．５％、２．６～６．５％、２．７～６．５％、２．８～６．５％、２．９～６．５％、３～６．５％、３．１～６．５％、３．２～６．５％、３．３～６．５％、３．４～６．５％、３．５～６．５％、３．６～６．５％、３．７～６．５％、３．８～６．５％、３．９～６．５％、４～６．５％、４．１～６．５％、４．２～６．５％、４．３～６．５％、４．４～６．５％、４．５～６．５％、４．６～６．５％、４．７～６．５％、４．８～６．５％、４．９～６．５％、５～６．５％、５．１～６．５％、５．２～６．５％、５．３～６．５％、５．４～６．５％、５．５～６．５％、５．６～６．５％、５．７～６．５％、５．８～６．５％、５．９～６．５％、６～６．５％、６．１～６．５％、６．２～６．５％、６．３～６．５％、６．４～６．５％、０～７％、０．１～７％、０．２～７％、０．３～７％、０．４～７％、０．５～７％、０．６～７％、０．７～７％、０．８～７％、０．９～７％、１～７％、１．１～７％、１．２～７％、１．３～７％、１．４～７％、１．５～７％、１．６～７％、１．７～７％、１．８～７％、１．９～７％、２～７％、２．１～７％、２．２～７％、２．３～７％、２．４～７％、２．５～７％、２．６～７％、２．７～７％、２．８～７％、２．９～７％、３～７％、３．１～７％、３．２～７％、３．３～７％、３．４～７％、３．５～７％、３．６～７％、３．７～７％、３．８～７％、３．９～７％、４～７％、４．１～７％、４．２～７％、４．３～７％、４．４～７％、４．５～７％、４．６～７％、４．７～７％、４．８～７％、４．９～７％、５～７％、５．１～７％、５．２～７％、５．３～７％、５．４～７％、５．５～７％、５．６～７％、５．７～７％、５．８～７％、５．９～７％、６～７％、６．１～７％、６．２～７％、６．３～７％、６．４～７％、６．５～７％、６．６～７％、６．７～７％、６．８～７％、６．９～７％、０～７．５％、０．１～７．５％、０．２～７．５％、０．３～７．５％、０．４～７．５％、０．５～７．５％、０．６～７．５％、０．７～７．５％、０．８～７．５％、０．９～７．５％、１～７．５％、１．１～７．５％、１．２～７．５％、１．３～７．５％、１．４～７．５％、１．５～７．５％、１．６～７．５％、１．７～７．５％、１．８～７．５％、１．９～７．５％、２～７．５％、２．１～７．５％、２．２～７．５％、２．３～７．５％、２．４～７．５％、２．５～７．５％、２．６～７．５％、２．７～７．５％、２．８～７．５％、２．９～７．５％、３～７．５％、３．１～７．５％、３．２～７．５％、３．３～７．５％、３．４～７．５％、３．５～７．５％、３．６～７．５％、３．７～７．５％、３．８～７．５％、３．９～７．５％、４～７．５％、４．１～７．５％、４．２～７．５％、４．３～７．５％、４．４～７．５％、４．５～７．５％、４．６～７．５％、４．７～７．５％、４．８～７．５％、４．９～７．５％、５～７．５％、５．１～７．５％、５．２～７．５％、５．３～７．５％、５．４～７．５％、５．５～７．５％、５．６～７．５％、５．７～７．５％、５．８～７．５％、５．９～７．５％、６～７．５％、６．１～７．５％、６．２～７．５％、６．３～７．５％、６．４～７．５％、６．５～７．５％、６．６～７．５％、６．７～７．５％、６．８～７．５％、６．９～７．５％、７～７．５％、７．１～７．５％、７．２～７．５％、７．３～７．５％、７．４～７．５％、０～８％、０．１～８％、０．２～８％、０．３～８％、０．４～８％、０．５～８％、０．６～８％、０．７～８％、０．８～８％、０．９～８％、１～８％、１．１～８％、１．２～８％、１．３～８％、１．４～８％、１．５～８％、１．６～８％、１．７～８％、１．８～８％、１．９～８％、２～８％、２．１～８％、２．２～８％、２．３～８％、２．４～８％、２．５～８％、２．６～８％、２．７～８％、２．８～８％、２．９～８％、３～８％、３．１～８％、３．２～８％、３．３～８％、３．４～８％、３．５～８％、３．６～８％、３．７～８％、３．８～８％、３．９～８％、４～８％、４．１～８％、４．２～８％、４．３～８％、４．４～８％、４．５～８％、４．６～８％、４．７～８％、４．８～８％、４．９～８％、５～８％、５．１～８％、５．２～８％、５．３～８％、５．４～８％、５．５～８％、５．６～８％、５．７～８％、５．８～８％、５．９～８％、６～８％、６．１～８％、６．２～８％、６．３～８％、６．４
～８％、６．５～８％、６．６～８％、６．７～８％、６．８～８％、６．９～８％、７～８％、７．１～８％、７．２～８％、７．３～８％、７．４～８％、７．５～８％、７．６～８％、７．７～８％、７．８～８％、７．９～８％、０～８．５％、０．１～８．５％、０．２～８．５％、０．３～８．５％、０．４～８．５％、０．５～８．５％、０．６～８．５％、０．７～８．５％、０．８～８．５％、０．９～８．５％、１～８．５％、１．１～８．５％、１．２～８．５％、１．３～８．５％、１．４～８．５％、１．５～８．５％、１．６～８．５％、１．７～８．５％、１．８～８．５％、１．９～８．５％、２～８．５％、２．１～８．５％、２．２～８．５％、２．３～８．５％、２．４～８．５％、２．５～８．５％、２．６～８．５％、２．７～８．５％、２．８～８．５％、２．９～８．５％、３～８．５％、３．１～８．５％、３．２～８．５％、３．３～８．５％、３．４～８．５％、３．５～８．５％、３．６～８．５％、３．７～８．５％、３．８～８．５％、３．９～８．５％、４～８．５％、４．１～８．５％、４．２～８．５％、４．３～８．５％、４．４～８．５％、４．５～８．５％、４．６～８．５％、４．７～８．５％、４．８～８．５％、４．９～８．５％、５～８．５％、５．１～８．５％、５．２～８．５％、５．３～８．５％、５．４～８．５％、５．５～８．５％、５．６～８．５％、５．７～８．５％、５．８～８．５％、５．９～８．５％、６～８．５％、６．１～８．５％、６．２～８．５％、６．３～８．５％、６．４～８．５％、６．５～８．５％、６．６～８．５％、６．７～８．５％、６．８～８．５％、６．９～８．５％、７～８．５％、７．１～８．５％、７．２～８．５％、７．３～８．５％、７．４～８．５％、７．５～８．５％、７．６～８．５％、７．７～８．５％、７．８～８．５％、７．９～８．５％、８～８．５％、８．１～８．５％、８．２～８．５％、８．３～８．５％、８．４～８．５％、０～９％、０．１～９％、０．２～９％、０．３～９％、０．４～９％、０．５～９％、０．６～９％、０．７～９％、０．８～９％、０．９～９％、１～９％、１．１～９％、１．２～９％、１．３～９％、１．４～９％、１．５～９％、１．６～９％、１．７～９％、１．８～９％、１．９～９％、２～９％、２．１～９％、２．２～９％、２．３～９％、２．４～９％、２．５～９％、２．６～９％、２．７～９％、２．８～９％、２．９～９％、３～９％、３．１～９％、３．２～９％、３．３～９％、３．４～９％、３．５～９％、３．６～９％、３．７～９％、３．８～９％、３．９～９％、４～９％、４．１～９％、４．２～９％、４．３～９％、４．４～９％、４．５～９％、４．６～９％、４．７～９％、４．８～９％、４．９～９％、５～９％、５．１～９％、５．２～９％、５．３～９％、５．４～９％、５．５～９％、５．６～９％、５．７～９％、５．８～９％、５．９～９％、６～９％、６．１～９％、６．２～９％、６．３～９％、６．４～９％、６．５～９％、６．６～９％、６．７～９％、６．８～９％、６．９～９％、７～９％、７．１～９％、７．２～９％、７．３～９％、７．４～９％、７．５～９％、７．６～９％、７．７～９％、７．８～９％、７．９～９％、８～９％、８．１～９％、８．２～９％、８．３～９％、８．４～９％、８．５～９％、８．６～９％、８．７～９％、８．８～９％、８．９～９％、０～９．５％、０．１～９．５％、０．２～９．５％、０．３～９．５％、０．４～９．５％、０．５～９．５％、０．６～９．５％、０．７～９．５％、０．８～９．５％、０．９～９．５％、１～９．５％、１．１～９．５％、１．２～９．５％、１．３～９．５％、１．４～９．５％、１．５～９．５％、１．６～９．５％、１．７～９．５％、１．８～９．５％、１．９～９．５％、２～９．５％、２．１～９．５％、２．２～９．５％、２．３～９．５％、２．４～９．５％、２．５～９．５％、２．６～９．５％、２．７～９．５％、２．８～９．５％、２．９～９．５％、３～９．５％、３．１～９．５％、３．２～９．５％、３．３～９．５％、３．４～９．５％、３．５～９．５％、３．６～９．５％、３．７～９．５％、３．８～９．５％、３．９～９．５％、４～９．５％、４．１～９．５％、４．２～９．５％、４．３～９．５％、４．４～９．５％、４．５～９．５％、４．６～９．５％、４．７～９．５％、４．８～９．５％、４．９～９．５％、５～９．５％、５．１～９．５％、５．２～９．５％、５．３～９．５％、５．４～９．５％、５．５～９．５％、５．６～９．５％、５．７～９．５％、５．８～９．５％、５．９～９．５％、６～９．５％、６．１～９．５％、６．２～９．５％、６．３～９．５％、６．４～９．５％、６．５～９．５％、６．６～９．５％、６．７～９．５％、６．８～９．５％、６．９～９．５％、７～９．５％、７．１～９．５％、７．２～９．５％、７．３～９．５％、７．４～９．５％、７．５～９．５％、７．６～９．５％、７．７～９．５％、７．８～９．５％、７．９～９．５％、８～９．５％、８．１～９．５％、８．２～９．５％、８．３～９．５％、８．４～９．５％、８．５～９．５％、８．６～９．５％、８．７～９．５％、８．８～９．５％、８．９～９．５％、９～９．５％、９．１～９．５％、９．２～９．５％、９．３～９．５％、９．４～９．５％、０～１０％、０．１～１０％、０．２～１０％、０．３～１０％、０．４～１０％、０．５～１０％、０．６～１０％、０．７～１０％、０．８～１０％、０．９～１０％、１～１０％、１．１～１０％、１．２～１０％、１．３～１０％、１．４～１０％、１．５～１０％、１．６～１０％、１．７～１０％、１．８～１０％、１．９～１０％、２～１０％、２．１～１０％、２．２～１０％、２．３～１０％、２．４～１０％、２．５～１０％、２．６～１０％、２．７～１０％、２．８～１０％、２．９～１０％、３～１０％、３．１～１０％、３．２～１０％、３．３～１０％、３．４～１０％、３．５～１０％、３．６～１０％、３．７～１０％、３．８～１０％、３．９～１０％、４～１０％、４．１～１０％、４．２～１０％、４．３～１０％、４．４～１０％、４．５～１０％、４．６～１０％、４．７～１０％、４．８～１０％、４．９～１０％、５～１０％、５．１～１０％、５．２～１０％、５．３～１０％、５．４～１０％、５．５～１０％、５．６～１０％、５．７～１０％、５．８～１０％、５．９～１０％、６～１０％、６．１～１０％、６．２～１０％、６．３～１０％、６．４～１０％、６．５～１０％、６．６～１０％、６．７～１０％、６．８～１０％、６．９～１０％、７～１０％、７．１～１０％、７．２～１０％、７．３～１０％、７．４～１０％、７．５～１０％、７．６～１０％、７．７～１０％、７．８～１０％、７．９～１０％、８～１０％、８．１～１０％、８．２～１０％、８．３～１０％、８．４～１０％、８．５～１０％、８．６～１０％、８．７～１０％、８．８～１０％、８．９～１０％、９～１０％、９．１～１０％、９．２～１０％、９．３～１０％、９．４～１０％、９．５～１０％、９．６～１０％、９．７～１０％、９．８～１０％、または９．９～１０％ｗ／ｖの範囲の糖及び／または糖代用品を含み得る。
～８％、６．５～８％、６．６～８％、６．７～８％、６．８～８％、６．９～８％、７～８％、７．１～８％、７．２～８％、７．３～８％、７．４～８％、７．５～８％、７．６～８％、７．７～８％、７．８～８％、７．９～８％、０～８．５％、０．１～８．５％、０．２～８．５％、０．３～８．５％、０．４～８．５％、０．５～８．５％、０．６～８．５％、０．７～８．５％、０．８～８．５％、０．９～８．５％、１～８．５％、１．１～８．５％、１．２～８．５％、１．３～８．５％、１．４～８．５％、１．５～８．５％、１．６～８．５％、１．７～８．５％、１．８～８．５％、１．９～８．５％、２～８．５％、２．１～８．５％、２．２～８．５％、２．３～８．５％、２．４～８．５％、２．５～８．５％、２．６～８．５％、２．７～８．５％、２．８～８．５％、２．９～８．５％、３～８．５％、３．１～８．５％、３．２～８．５％、３．３～８．５％、３．４～８．５％、３．５～８．５％、３．６～８．５％、３．７～８．５％、３．８～８．５％、３．９～８．５％、４～８．５％、４．１～８．５％、４．２～８．５％、４．３～８．５％、４．４～８．５％、４．５～８．５％、４．６～８．５％、４．７～８．５％、４．８～８．５％、４．９～８．５％、５～８．５％、５．１～８．５％、５．２～８．５％、５．３～８．５％、５．４～８．５％、５．５～８．５％、５．６～８．５％、５．７～８．５％、５．８～８．５％、５．９～８．５％、６～８．５％、６．１～８．５％、６．２～８．５％、６．３～８．５％、６．４～８．５％、６．５～８．５％、６．６～８．５％、６．７～８．５％、６．８～８．５％、６．９～８．５％、７～８．５％、７．１～８．５％、７．２～８．５％、７．３～８．５％、７．４～８．５％、７．５～８．５％、７．６～８．５％、７．７～８．５％、７．８～８．５％、７．９～８．５％、８～８．５％、８．１～８．５％、８．２～８．５％、８．３～８．５％、８．４～８．５％、０～９％、０．１～９％、０．２～９％、０．３～９％、０．４～９％、０．５～９％、０．６～９％、０．７～９％、０．８～９％、０．９～９％、１～９％、１．１～９％、１．２～９％、１．３～９％、１．４～９％、１．５～９％、１．６～９％、１．７～９％、１．８～９％、１．９～９％、２～９％、２．１～９％、２．２～９％、２．３～９％、２．４～９％、２．５～９％、２．６～９％、２．７～９％、２．８～９％、２．９～９％、３～９％、３．１～９％、３．２～９％、３．３～９％、３．４～９％、３．５～９％、３．６～９％、３．７～９％、３．８～９％、３．９～９％、４～９％、４．１～９％、４．２～９％、４．３～９％、４．４～９％、４．５～９％、４．６～９％、４．７～９％、４．８～９％、４．９～９％、５～９％、５．１～９％、５．２～９％、５．３～９％、５．４～９％、５．５～９％、５．６～９％、５．７～９％、５．８～９％、５．９～９％、６～９％、６．１～９％、６．２～９％、６．３～９％、６．４～９％、６．５～９％、６．６～９％、６．７～９％、６．８～９％、６．９～９％、７～９％、７．１～９％、７．２～９％、７．３～９％、７．４～９％、７．５～９％、７．６～９％、７．７～９％、７．８～９％、７．９～９％、８～９％、８．１～９％、８．２～９％、８．３～９％、８．４～９％、８．５～９％、８．６～９％、８．７～９％、８．８～９％、８．９～９％、０～９．５％、０．１～９．５％、０．２～９．５％、０．３～９．５％、０．４～９．５％、０．５～９．５％、０．６～９．５％、０．７～９．５％、０．８～９．５％、０．９～９．５％、１～９．５％、１．１～９．５％、１．２～９．５％、１．３～９．５％、１．４～９．５％、１．５～９．５％、１．６～９．５％、１．７～９．５％、１．８～９．５％、１．９～９．５％、２～９．５％、２．１～９．５％、２．２～９．５％、２．３～９．５％、２．４～９．５％、２．５～９．５％、２．６～９．５％、２．７～９．５％、２．８～９．５％、２．９～９．５％、３～９．５％、３．１～９．５％、３．２～９．５％、３．３～９．５％、３．４～９．５％、３．５～９．５％、３．６～９．５％、３．７～９．５％、３．８～９．５％、３．９～９．５％、４～９．５％、４．１～９．５％、４．２～９．５％、４．３～９．５％、４．４～９．５％、４．５～９．５％、４．６～９．５％、４．７～９．５％、４．８～９．５％、４．９～９．５％、５～９．５％、５．１～９．５％、５．２～９．５％、５．３～９．５％、５．４～９．５％、５．５～９．５％、５．６～９．５％、５．７～９．５％、５．８～９．５％、５．９～９．５％、６～９．５％、６．１～９．５％、６．２～９．５％、６．３～９．５％、６．４～９．５％、６．５～９．５％、６．６～９．５％、６．７～９．５％、６．８～９．５％、６．９～９．５％、７～９．５％、７．１～９．５％、７．２～９．５％、７．３～９．５％、７．４～９．５％、７．５～９．５％、７．６～９．５％、７．７～９．５％、７．８～９．５％、７．９～９．５％、８～９．５％、８．１～９．５％、８．２～９．５％、８．３～９．５％、８．４～９．５％、８．５～９．５％、８．６～９．５％、８．７～９．５％、８．８～９．５％、８．９～９．５％、９～９．５％、９．１～９．５％、９．２～９．５％、９．３～９．５％、９．４～９．５％、０～１０％、０．１～１０％、０．２～１０％、０．３～１０％、０．４～１０％、０．５～１０％、０．６～１０％、０．７～１０％、０．８～１０％、０．９～１０％、１～１０％、１．１～１０％、１．２～１０％、１．３～１０％、１．４～１０％、１．５～１０％、１．６～１０％、１．７～１０％、１．８～１０％、１．９～１０％、２～１０％、２．１～１０％、２．２～１０％、２．３～１０％、２．４～１０％、２．５～１０％、２．６～１０％、２．７～１０％、２．８～１０％、２．９～１０％、３～１０％、３．１～１０％、３．２～１０％、３．３～１０％、３．４～１０％、３．５～１０％、３．６～１０％、３．７～１０％、３．８～１０％、３．９～１０％、４～１０％、４．１～１０％、４．２～１０％、４．３～１０％、４．４～１０％、４．５～１０％、４．６～１０％、４．７～１０％、４．８～１０％、４．９～１０％、５～１０％、５．１～１０％、５．２～１０％、５．３～１０％、５．４～１０％、５．５～１０％、５．６～１０％、５．７～１０％、５．８～１０％、５．９～１０％、６～１０％、６．１～１０％、６．２～１０％、６．３～１０％、６．４～１０％、６．５～１０％、６．６～１０％、６．７～１０％、６．８～１０％、６．９～１０％、７～１０％、７．１～１０％、７．２～１０％、７．３～１０％、７．４～１０％、７．５～１０％、７．６～１０％、７．７～１０％、７．８～１０％、７．９～１０％、８～１０％、８．１～１０％、８．２～１０％、８．３～１０％、８．４～１０％、８．５～１０％、８．６～１０％、８．７～１０％、８．８～１０％、８．９～１０％、９～１０％、９．１～１０％、９．２～１０％、９．３～１０％、９．４～１０％、９．５～１０％、９．６～１０％、９．７～１０％、９．８～１０％、または９．９～１０％ｗ／ｖの範囲の糖及び／または糖代用品を含み得る。
【0683】
所定の実施形態では、製剤は、０～１０％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～９％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～９％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
【0684】
所定の実施形態では、製剤は、１％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、３％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、３％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
【0685】
所定の実施形態では、製剤は、４％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、６％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、６％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
【0686】
所定の実施形態では、製剤は、７％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、９％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、９％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
【0687】
所定の実施形態では、製剤は、１０％ｗ／ｖの糖及び／または糖代用品を含み得る。
所定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的組成物の製剤は、二糖を含み得る。本明細書に記載の製剤において使用され得る好適な二糖は、スクロース、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース、キトビオース、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、β，β－トレハロース、α，β－トレハロース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロース、及びキシロビオースを含み得る。製剤において使用される二糖（ｗ／ｖ）の濃度は、１％～１５％の間、例えば、１％～５％の間、３％～６％の間、５％～８％の間、７％～１０％の間、または１０％～１５％の間であり得る。
所定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的組成物の製剤は、二糖を含み得る。本明細書に記載の製剤において使用され得る好適な二糖は、スクロース、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース、キトビオース、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、β，β－トレハロース、α，β－トレハロース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロース、及びキシロビオースを含み得る。製剤において使用される二糖（ｗ／ｖ）の濃度は、１％～１５％の間、例えば、１％～５％の間、３％～６％の間、５％～８％の間、７％～１０％の間、または１０％～１５％の間であり得る。
【0688】
所定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的組成物の製剤は、糖アルコールを含み得る。非限定的な例として、本明細書に記載の製剤において使用され得る糖アルコールは、ソルビトールを含み得る。製剤において使用される糖アルコールの濃度（ｗ／ｖ）は、１％～１５％、例えば、１％～５％の間、３％～６％の間、５％～８％の間、７％～１０％の間、または１０％～１５％の間であり得る。
【0689】
スクロース
所定の実施形態では、製剤は、二糖、例えば、限定されないが、スクロースである少なくとも１つの糖を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、二糖、例えば、限定されないが、スクロースである少なくとも１つの糖を含み得る。
【0690】
所定の実施形態では、製剤は、スクロースを０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、２％、２．１％、２．２％、２．３％、２．４％、２．５％、２．６％、２．７％、２．８％、２．９％、３％、３．１％、３．２％、３．３％、３．４％、３．５％、３．６％、３．７％、３．８％、３．９％、４％、４．１％、４．２％、４．３％、４．４％、４．５％、４．６％、４．７％、４．８％、４．９％、５％、５．１％、５．２％、５．３％、５．４％、５．５％、５．６％、５．７％、５．８％、５．９％、６％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、８．９％、９％、９．１％、９．２％、９．３％、９．４％、９．５％、９．６％、９．７％、９．８％、９．９％、または１０％ｗ／ｖで含み得る。
【0691】
所定の実施形態では、製剤は、０～１％、０．１～１％、０．２～１％、０．３～１％、０．４～１％、０．５～１％、０．６～１％、０．７～１％、０．８～１％、０．９～１％、０～１．５％、０．１～１．５％、０．２～１．５％、０．３～１．５％、０．４～１．５％、０．５～１．５％、０．６～１．５％、０．７～１．５％、０．８～１．５％、０．９～１．５％、１～１．５％、１．１～１．５％、１．２～１．５％、１．３～１．５％、１．４～１．５％、０～２％、０．１～２％、０．２～２％、０．３～２％、０．４～２％、０．５～２％、０．６～２％、０．７～２％、０．８～２％、０．９～２％、１～２％、１．１～２％、１．２～２％、１．３～２％、１．４～２％、１．５～２％、１．６～２％、１．７～２％、１．８～２％、１．９～２％、０～２．５％、０．１～２．５％、０．２～２．５％、０．３～２．５％、０．４～２．５％、０．５～２．５％、０．６～２．５％、０．７～２．５％、０．８～２．５％、０．９～２．５％、１～２．５％、１．１～２．５％、１．２～２．５％、１．３～２．５％、１．４～２．５％、１．５～２．５％、１．６～２．５％、１．７～２．５％、１．８～２．５％、１．９～２．５％、２～２．５％、２．１～２．５％、２．２～２．５％、２．３～２．５％、２．４～２．５％、０～３％、０．１～３％、０．２～３％、０．３～３％、０．４～３％、０．５～３％、０．６～３％、０．７～３％、０．８～３％、０．９～３％、１～３％、１．１～３％、１．２～３％、１．３～３％、１．４～３％、１．５～３％、１．６～３％、１．７～３％、１．８～３％、１．９～３％、２～３％、２．１～３％、２．２～３％、２．３～３％、２．４～３％、２．５～３％、２．６～３％、２．７～３％、２．８～３％、２．９～３％、０～３．５％、０．１～３．５％、０．２～３．５％、０．３～３．５％、０．４～３．５％、０．５～３．５％、０．６～３．５％、０．７～３．５％、０．８～３．５％、０．９～３．５％、１～３．５％、１．１～３．５％、１．２～３．５％、１．３～３．５％、１．４～３．５％、１．５～３．５％、１．６～３．５％、１．７～３．５％、１．８～３．５％、１．９～３．５％、２～３．５％、２．１～３．５％、２．２～３．５％、２．３～３．５％、２．４～３．５％、２．５～３．５％、２．６～３．５％、２．７～３．５％、２．８～３．５％、２．９～３．５％、３～３．５％、３．１～３．５％、３．２～３．５％、３．３～３．５％、３．４～３．５％、０～４％、０．１～４％、０．２～４％、０．３～４％、０．４～４％、０．５～４％、０．６～４％、０．７～４％、０．８～４％、０．９～４％、１～４％、１．１～４％、１．２～４％、１．３～４％、１．４～４％、１．５～４％、１．６～４％、１．７～４％、１．８～４％、１．９～４％、２～４％、２．１～４％、２．２～４％、２．３～４％、２．４～４％、２．５～４％、２．６～４％、２．７～４％、２．８～４％、２．９～４％、３～４％、３．１～４％、３．２～４％、３．３～４％、３．４～４％、３．５～４％、３．６～４％、３．７～４％、３．８～４％、３．９～４％、０～４．５％、０．１～４．５％、０．２～４．５％、０．３～４．５％、０．４～４．５％、０．５～４．５％、０．６～４．５％、０．７～４．５％、０．８～４．５％、０．９～４．５％、１～４．５％、１．１～４．５％、１．２～４．５％、１．３～４．５％、１．４～４．５％、１．５～４．５％、１．６～４．５％、１．７～４．５％、１．８～４．５％、１．９～４．５％、２～４．５％、２．１～４．５％、２．２～４．５％、２．３～４．５％、２．４～４．５％、２．５～４．５％、２．６～４．５％、２．７～４．５％、２．８～４．５％、２．９～４．５％、３～４．５％、３．１～４．５％、３．２～４．５％、３．３～４．５％、３．４～４．５％、３．５～４．５％、３．６～４．５％、３．７～４．５％、３．８～４．５％、３．９～４．５％、４～４．５％、４．１～４．５％、４．２～４．５％、４．３～４．５％、４．４～４．５％、０～５％、０．１～５％、０．２～５％、０．３～５％、０．４～５％、０．５～５％、０．６～５％、０．７～５％、０．８～５％、０．９～５％、１～５％、１．１～５％、１．２～５％、１．３～５％、１．４～５％、１．５～５％、１．６～５％、１．７～５％、１．８～５％、１．９～５％、２～５％、２．１～５％、２．２～５％、２．３～５％、２．４～５％、２．５～５％、２．６～５％、２．７～５％、２．８～５％、２．９～５％、３～５％、３．１～５％、３．２～５％、３．３～５％、３．４～５％、３．５～５％、３．６～５％、３．７～５％、３．８～５％、３．９～５％、４～５％、４．１～５％、４．２～５％、４．３～５％、４．４～５％、４．５～５％、４．６～５％、４．７～５％、４．８～５％、４．９～５％、０～５．５％、０．１～５．５％、０．２～５．５％、０．３～５．５％、０．４～５．５％、０．５～５．５％、０．６～５．５％、０．７～５．５％、０．８～５．５％、０．９～５．５％、１～５．５％、１．１～５．５％、１．２～５．５％、１．３～５．５％、１．４～５．５％、１．５～５．５％、１．６～５．５％、１．７～５．５％、１．８～５．５％、１．９～５．５％、２～５．５％、２．１～５．５％、２．２～５．５％、２．３～５．５％、２．４～５．５％、２．５～５．５％、２．６～５．５％、２．７～５．５％、２．８～５．５％、２．９～５．５％、３～５．５％、３．１～５．５％、３．２～５．５％、３．３～５．５％、３．４～５．５％、３．５～５．５％、３．６～５．５％、３．７～５．５％、３．８～５．５％、３．９～５．５％、４～５．５％、４．１～５．５％、４．２～５．５％、４．３～５．５％、４．４～５．５％、４．５～５．５％、４．６～５．５％、４．７～５．５％、４．８～５．５％、４．９～５．５％、５～５．５％、５．１～５．５％、５．２～５．５％、５．３～５．５％、５．４～５．５％、０～６％、０．１～６％、０．２～６％、０．３～６％、０．４～６％、０．５～６％、０．６～６％、０．７～６％、０．８～６％、０．９～６％、１～６％、１．１～６％、１．２～６％、１．３～６％、１．４～６％、１．５～６％、１．６～６％、１．７～６％、１．８～６％、１．９～６％、２～６％、２．１～６％、２．２～６％、２．３～６％、２．４～６％、２．５～６％、２．６～６％、２．７～６％、２．８～６％、２．９～６％、３～６％、３．１～６％、３．２～６％、３．３～６％、３．４～６％、３．５～６％、３．６～６％、３．７～６％、３．８～６％、３．９～６％、４～６％、４．１～６％、４．２～６％、４．３～６％、４．４～６％、４．５～６％、４．６～６％、４．７～６％、４．８～６％、４．９～６％、５～６％、５．１～６％、５．２～６％、５．３～６％、５．４～６％、５．５～６％、５．６～６％、５．７～６％、５．８～６％、５．９～６％、０～６．５％、０．１～６．５％、０．２～６．５％、０．３～６．５％、０．４～６．５％、０．５～６．５％、０．６～６．５％、０．７～６．５％、０．８～６．５％、０．９～６．５％、１～６．５％、１．１～６．５％、１．２～６．５％、１．３～６．５％、１．４～６．５％、１．５～６．５％、１．６～６．５％、１．７～６．５％、１．８～６．５％、１．９～６．５％、２～６．５％、２．１～６．５％、２．２～６．５％、２．３～６．５％、２．４～６．５％、２．５～６．５％、２．６～６．５％、２．７～６．５％、２．８～６．５％、２．９～６．５％、３～６．５％、３．１～６．５％、３．２～６．５％、３．３～６．５％、３．４～６．５％、３．５～６．５％、３．６～６．５％、３．７～６．５％、３．８～６．５％、３．９～６．５％、４～６．５％、４．１～６．５％、４．２～６．５％、４．３～６．５％、４．４～６．５％、４．５～６．５％、４．６～６．５％、４．７～６．５％、４．８～６．５％、４．９～６．５％、５～６．５％、５．１～６．５％、５．２～６．５％、５．３～６．５％、５．４～６．５％、５．５～６．５％、５．６～６．５％、５．７～６．５％、５．８～６．５％、５．９～６．５％、６～６．５％、６．１～６．５％、６．２～６．５％、６．３～６．５％、６．４～６．５％、０～７％、０．１～７％、０．２～７％、０．３～７％、０．４～７％、０．５～７％、０．６～７％、０．７～７％、０．８～７％、０．９～７％、１～７％、１．１～７％、１．２～７％、１．３～７％、１．４～７％、１．５～７％、１．６～７％、１．７～７％、１．８～７％、１．９～７％、２～７％、２．１～７％、２．２～７％、２．３～７％、２．４～７％、２．５～７％、２．６～７％、２．７～７％、２．８～７％、２．９～７％、３～７％、３．１～７％、３．２～７％、３．３～７％、３．４～７％、３．５～７％、３．６～７％、３．７～７％、３．８～７％、３．９～７％、４～７％、４．１～７％、４．２～７％、４．３～７％、４．４～７％、４．５～７％、４．６～７％、４．７～７％、４．８～７％、４．９～７％、５～７％、５．１～７％、５．２～７％、５．３～７％、５．４～７％、５．５～７％、５．６～７％、５．７～７％、５．８～７％、５．９～７％、６～７％、６．１～７％、６．２～７％、６．３～７％、６．４～７％、６．５～７％、６．６～７％、６．７～７％、６．８～７％、６．９～７％、０～７．５％、０．１～７．５％、０．２～７．５％、０．３～７．５％、０．４～７．５％、０．５～７．５％、０．６～７．５％、０．７～７．５％、０．８～７．５％、０．９～７．５％、１～７．５％、１．１～７．５％、１．２～７．５％、１．３～７．５％、１．４～７．５％、１．５～７．５％、１．６～７．５％、１．７～７．５％、１．８～７．５％、１．９～７．５％、２～７．５％、２．１～７．５％、２．２～７．５％、２．３～７．５％、２．４～７．５％、２．５～７．５％、２．６～７．５％、２．７～７．５％、２．８～７．５％、２．９～７．５％、３～７．５％、３．１～７．５％、３．２～７．５％、３．３～７．５％、３．４～７．５％、３．５～７．５％、３．６～７．５％、３．７～７．５％、３．８～７．５％、３．９～７．５％、４～７．５％、４．１～７．５％、４．２～７．５％、４．３～７．５％、４．４～７．５％、４．５～７．５％、４．６～７．５％、４．７～７．５％、４．８～７．５％、４．９～７．５％、５～７．５％、５．１～７．５％、５．２～７．５％、５．３～７．５％、５．４～７．５％、５．５～７．５％、５．６～７．５％、５．７～７．５％、５．８～７．５％、５．９～７．５％、６～７．５％、６．１～７．５％、６．２～７．５％、６．３～７．５％、６．４～７．５％、６．５～７．５％、６．６～７．５％、６．７～７．５％、６．８～７．５％、６．９～７．５％、７～７．５％、７．１～７．５％、７．２～７．５％、７．３～７．５％、７．４～７．５％、０～８％、０．１～８％、０．２～８％、０．３～８％、０．４～８％、０．５～８％、０．６～８％、０．７～８％、０．８～８％、０．９～８％、１～８％、１．１～８％、１．２～８％、１．３～８％、１．４～８％、１．５～８％、１．６～８％、１．７～８％、１．８～８％、１．９～８％、２～８％、２．１～８％、２．２～８％、２．３～８％、２．４～８％、２．５～８％、２．６～８％、２．７～８％、２．８～８％、２．９～８％、３～８％、３．１～８％、３．２～８％、３．３～８％、３．４～８％、３．５～８％、３．６～８％、３．７～８％、３．８～８％、３．９～８％、４～８％、４．１～８％、４．２～８％、４．３～８％、４．４～８％、４．５～８％、４．６～８％、４．７～８％、４．８～８％、４．９～８％、５～８％、５．１～８％、５．２～８％、５．３～８％、５．４～８％、５．５～８％、５．６～８％、５．７～８％、５．８～８％、５．９～８％、６～８％、６．１～８％、６．２～８％、６．３～８％、６．４
～８％、６．５～８％、６．６～８％、６．７～８％、６．８～８％、６．９～８％、７～８％、７．１～８％、７．２～８％、７．３～８％、７．４～８％、７．５～８％、７．６～８％、７．７～８％、７．８～８％、７．９～８％、０～８．５％、０．１～８．５％、０．２～８．５％、０．３～８．５％、０．４～８．５％、０．５～８．５％、０．６～８．５％、０．７～８．５％、０．８～８．５％、０．９～８．５％、１～８．５％、１．１～８．５％、１．２～８．５％、１．３～８．５％、１．４～８．５％、１．５～８．５％、１．６～８．５％、１．７～８．５％、１．８～８．５％、１．９～８．５％、２～８．５％、２．１～８．５％、２．２～８．５％、２．３～８．５％、２．４～８．５％、２．５～８．５％、２．６～８．５％、２．７～８．５％、２．８～８．５％、２．９～８．５％、３～８．５％、３．１～８．５％、３．２～８．５％、３．３～８．５％、３．４～８．５％、３．５～８．５％、３．６～８．５％、３．７～８．５％、３．８～８．５％、３．９～８．５％、４～８．５％、４．１～８．５％、４．２～８．５％、４．３～８．５％、４．４～８．５％、４．５～８．５％、４．６～８．５％、４．７～８．５％、４．８～８．５％、４．９～８．５％、５～８．５％、５．１～８．５％、５．２～８．５％、５．３～８．５％、５．４～８．５％、５．５～８．５％、５．６～８．５％、５．７～８．５％、５．８～８．５％、５．９～８．５％、６～８．５％、６．１～８．５％、６．２～８．５％、６．３～８．５％、６．４～８．５％、６．５～８．５％、６．６～８．５％、６．７～８．５％、６．８～８．５％、６．９～８．５％、７～８．５％、７．１～８．５％、７．２～８．５％、７．３～８．５％、７．４～８．５％、７．５～８．５％、７．６～８．５％、７．７～８．５％、７．８～８．５％、７．９～８．５％、８～８．５％、８．１～８．５％、８．２～８．５％、８．３～８．５％、８．４～８．５％、０～９％、０．１～９％、０．２～９％、０．３～９％、０．４～９％、０．５～９％、０．６～９％、０．７～９％、０．８～９％、０．９～９％、１～９％、１．１～９％、１．２～９％、１．３～９％、１．４～９％、１．５～９％、１．６～９％、１．７～９％、１．８～９％、１．９～９％、２～９％、２．１～９％、２．２～９％、２．３～９％、２．４～９％、２．５～９％、２．６～９％、２．７～９％、２．８～９％、２．９～９％、３～９％、３．１～９％、３．２～９％、３．３～９％、３．４～９％、３．５～９％、３．６～９％、３．７～９％、３．８～９％、３．９～９％、４～９％、４．１～９％、４．２～９％、４．３～９％、４．４～９％、４．５～９％、４．６～９％、４．７～９％、４．８～９％、４．９～９％、５～９％、５．１～９％、５．２～９％、５．３～９％、５．４～９％、５．５～９％、５．６～９％、５．７～９％、５．８～９％、５．９～９％、６～９％、６．１～９％、６．２～９％、６．３～９％、６．４～９％、６．５～９％、６．６～９％、６．７～９％、６．８～９％、６．９～９％、７～９％、７．１～９％、７．２～９％、７．３～９％、７．４～９％、７．５～９％、７．６～９％、７．７～９％、７．８～９％、７．９～９％、８～９％、８．１～９％、８．２～９％、８．３～９％、８．４～９％、８．５～９％、８．６～９％、８．７～９％、８．８～９％、８．９～９％、０～９．５％、０．１～９．５％、０．２～９．５％、０．３～９．５％、０．４～９．５％、０．５～９．５％、０．６～９．５％、０．７～９．５％、０．８～９．５％、０．９～９．５％、１～９．５％、１．１～９．５％、１．２～９．５％、１．３～９．５％、１．４～９．５％、１．５～９．５％、１．６～９．５％、１．７～９．５％、１．８～９．５％、１．９～９．５％、２～９．５％、２．１～９．５％、２．２～９．５％、２．３～９．５％、２．４～９．５％、２．５～９．５％、２．６～９．５％、２．７～９．５％、２．８～９．５％、２．９～９．５％、３～９．５％、３．１～９．５％、３．２～９．５％、３．３～９．５％、３．４～９．５％、３．５～９．５％、３．６～９．５％、３．７～９．５％、３．８～９．５％、３．９～９．５％、４～９．５％、４．１～９．５％、４．２～９．５％、４．３～９．５％、４．４～９．５％、４．５～９．５％、４．６～９．５％、４．７～９．５％、４．８～９．５％、４．９～９．５％、５～９．５％、５．１～９．５％、５．２～９．５％、５．３～９．５％、５．４～９．５％、５．５～９．５％、５．６～９．５％、５．７～９．５％、５．８～９．５％、５．９～９．５％、６～９．５％、６．１～９．５％、６．２～９．５％、６．３～９．５％、６．４～９．５％、６．５～９．５％、６．６～９．５％、６．７～９．５％、６．８～９．５％、６．９～９．５％、７～９．５％、７．１～９．５％、７．２～９．５％、７．３～９．５％、７．４～９．５％、７．５～９．５％、７．６～９．５％、７．７～９．５％、７．８～９．５％、７．９～９．５％、８～９．５％、８．１～９．５％、８．２～９．５％、８．３～９．５％、８．４～９．５％、８．５～９．５％、８．６～９．５％、８．７～９．５％、８．８～９．５％、８．９～９．５％、９～９．５％、９．１～９．５％、９．２～９．５％、９．３～９．５％、９．４～９．５％、０～１０％、０．１～１０％、０．２～１０％、０．３～１０％、０．４～１０％、０．５～１０％、０．６～１０％、０．７～１０％、０．８～１０％、０．９～１０％、１～１０％、１．１～１０％、１．２～１０％、１．３～１０％、１．４～１０％、１．５～１０％、１．６～１０％、１．７～１０％、１．８～１０％、１．９～１０％、２～１０％、２．１～１０％、２．２～１０％、２．３～１０％、２．４～１０％、２．５～１０％、２．６～１０％、２．７～１０％、２．８～１０％、２．９～１０％、３～１０％、３．１～１０％、３．２～１０％、３．３～１０％、３．４～１０％、３．５～１０％、３．６～１０％、３．７～１０％、３．８～１０％、３．９～１０％、４～１０％、４．１～１０％、４．２～１０％、４．３～１０％、４．４～１０％、４．５～１０％、４．６～１０％、４．７～１０％、４．８～１０％、４．９～１０％、５～１０％、５．１～１０％、５．２～１０％、５．３～１０％、５．４～１０％、５．５～１０％、５．６～１０％、５．７～１０％、５．８～１０％、５．９～１０％、６～１０％、６．１～１０％、６．２～１０％、６．３～１０％、６．４～１０％、６．５～１０％、６．６～１０％、６．７～１０％、６．８～１０％、６．９～１０％、７～１０％、７．１～１０％、７．２～１０％、７．３～１０％、７．４～１０％、７．５～１０％、７．６～１０％、７．７～１０％、７．８～１０％、７．９～１０％、８～１０％、８．１～１０％、８．２～１０％、８．３～１０％、８．４～１０％、８．５～１０％、８．６～１０％、８．７～１０％、８．８～１０％、８．９～１０％、９～１０％、９．１～１０％、９．２～１０％、９．３～１０％、９．４～１０％、９．５～１０％、９．６～１０％、９．７～１０％、９．８～１０％、または９．９～１０％ｗ／ｖの範囲のスクロースを含み得る。
～８％、６．５～８％、６．６～８％、６．７～８％、６．８～８％、６．９～８％、７～８％、７．１～８％、７．２～８％、７．３～８％、７．４～８％、７．５～８％、７．６～８％、７．７～８％、７．８～８％、７．９～８％、０～８．５％、０．１～８．５％、０．２～８．５％、０．３～８．５％、０．４～８．５％、０．５～８．５％、０．６～８．５％、０．７～８．５％、０．８～８．５％、０．９～８．５％、１～８．５％、１．１～８．５％、１．２～８．５％、１．３～８．５％、１．４～８．５％、１．５～８．５％、１．６～８．５％、１．７～８．５％、１．８～８．５％、１．９～８．５％、２～８．５％、２．１～８．５％、２．２～８．５％、２．３～８．５％、２．４～８．５％、２．５～８．５％、２．６～８．５％、２．７～８．５％、２．８～８．５％、２．９～８．５％、３～８．５％、３．１～８．５％、３．２～８．５％、３．３～８．５％、３．４～８．５％、３．５～８．５％、３．６～８．５％、３．７～８．５％、３．８～８．５％、３．９～８．５％、４～８．５％、４．１～８．５％、４．２～８．５％、４．３～８．５％、４．４～８．５％、４．５～８．５％、４．６～８．５％、４．７～８．５％、４．８～８．５％、４．９～８．５％、５～８．５％、５．１～８．５％、５．２～８．５％、５．３～８．５％、５．４～８．５％、５．５～８．５％、５．６～８．５％、５．７～８．５％、５．８～８．５％、５．９～８．５％、６～８．５％、６．１～８．５％、６．２～８．５％、６．３～８．５％、６．４～８．５％、６．５～８．５％、６．６～８．５％、６．７～８．５％、６．８～８．５％、６．９～８．５％、７～８．５％、７．１～８．５％、７．２～８．５％、７．３～８．５％、７．４～８．５％、７．５～８．５％、７．６～８．５％、７．７～８．５％、７．８～８．５％、７．９～８．５％、８～８．５％、８．１～８．５％、８．２～８．５％、８．３～８．５％、８．４～８．５％、０～９％、０．１～９％、０．２～９％、０．３～９％、０．４～９％、０．５～９％、０．６～９％、０．７～９％、０．８～９％、０．９～９％、１～９％、１．１～９％、１．２～９％、１．３～９％、１．４～９％、１．５～９％、１．６～９％、１．７～９％、１．８～９％、１．９～９％、２～９％、２．１～９％、２．２～９％、２．３～９％、２．４～９％、２．５～９％、２．６～９％、２．７～９％、２．８～９％、２．９～９％、３～９％、３．１～９％、３．２～９％、３．３～９％、３．４～９％、３．５～９％、３．６～９％、３．７～９％、３．８～９％、３．９～９％、４～９％、４．１～９％、４．２～９％、４．３～９％、４．４～９％、４．５～９％、４．６～９％、４．７～９％、４．８～９％、４．９～９％、５～９％、５．１～９％、５．２～９％、５．３～９％、５．４～９％、５．５～９％、５．６～９％、５．７～９％、５．８～９％、５．９～９％、６～９％、６．１～９％、６．２～９％、６．３～９％、６．４～９％、６．５～９％、６．６～９％、６．７～９％、６．８～９％、６．９～９％、７～９％、７．１～９％、７．２～９％、７．３～９％、７．４～９％、７．５～９％、７．６～９％、７．７～９％、７．８～９％、７．９～９％、８～９％、８．１～９％、８．２～９％、８．３～９％、８．４～９％、８．５～９％、８．６～９％、８．７～９％、８．８～９％、８．９～９％、０～９．５％、０．１～９．５％、０．２～９．５％、０．３～９．５％、０．４～９．５％、０．５～９．５％、０．６～９．５％、０．７～９．５％、０．８～９．５％、０．９～９．５％、１～９．５％、１．１～９．５％、１．２～９．５％、１．３～９．５％、１．４～９．５％、１．５～９．５％、１．６～９．５％、１．７～９．５％、１．８～９．５％、１．９～９．５％、２～９．５％、２．１～９．５％、２．２～９．５％、２．３～９．５％、２．４～９．５％、２．５～９．５％、２．６～９．５％、２．７～９．５％、２．８～９．５％、２．９～９．５％、３～９．５％、３．１～９．５％、３．２～９．５％、３．３～９．５％、３．４～９．５％、３．５～９．５％、３．６～９．５％、３．７～９．５％、３．８～９．５％、３．９～９．５％、４～９．５％、４．１～９．５％、４．２～９．５％、４．３～９．５％、４．４～９．５％、４．５～９．５％、４．６～９．５％、４．７～９．５％、４．８～９．５％、４．９～９．５％、５～９．５％、５．１～９．５％、５．２～９．５％、５．３～９．５％、５．４～９．５％、５．５～９．５％、５．６～９．５％、５．７～９．５％、５．８～９．５％、５．９～９．５％、６～９．５％、６．１～９．５％、６．２～９．５％、６．３～９．５％、６．４～９．５％、６．５～９．５％、６．６～９．５％、６．７～９．５％、６．８～９．５％、６．９～９．５％、７～９．５％、７．１～９．５％、７．２～９．５％、７．３～９．５％、７．４～９．５％、７．５～９．５％、７．６～９．５％、７．７～９．５％、７．８～９．５％、７．９～９．５％、８～９．５％、８．１～９．５％、８．２～９．５％、８．３～９．５％、８．４～９．５％、８．５～９．５％、８．６～９．５％、８．７～９．５％、８．８～９．５％、８．９～９．５％、９～９．５％、９．１～９．５％、９．２～９．５％、９．３～９．５％、９．４～９．５％、０～１０％、０．１～１０％、０．２～１０％、０．３～１０％、０．４～１０％、０．５～１０％、０．６～１０％、０．７～１０％、０．８～１０％、０．９～１０％、１～１０％、１．１～１０％、１．２～１０％、１．３～１０％、１．４～１０％、１．５～１０％、１．６～１０％、１．７～１０％、１．８～１０％、１．９～１０％、２～１０％、２．１～１０％、２．２～１０％、２．３～１０％、２．４～１０％、２．５～１０％、２．６～１０％、２．７～１０％、２．８～１０％、２．９～１０％、３～１０％、３．１～１０％、３．２～１０％、３．３～１０％、３．４～１０％、３．５～１０％、３．６～１０％、３．７～１０％、３．８～１０％、３．９～１０％、４～１０％、４．１～１０％、４．２～１０％、４．３～１０％、４．４～１０％、４．５～１０％、４．６～１０％、４．７～１０％、４．８～１０％、４．９～１０％、５～１０％、５．１～１０％、５．２～１０％、５．３～１０％、５．４～１０％、５．５～１０％、５．６～１０％、５．７～１０％、５．８～１０％、５．９～１０％、６～１０％、６．１～１０％、６．２～１０％、６．３～１０％、６．４～１０％、６．５～１０％、６．６～１０％、６．７～１０％、６．８～１０％、６．９～１０％、７～１０％、７．１～１０％、７．２～１０％、７．３～１０％、７．４～１０％、７．５～１０％、７．６～１０％、７．７～１０％、７．８～１０％、７．９～１０％、８～１０％、８．１～１０％、８．２～１０％、８．３～１０％、８．４～１０％、８．５～１０％、８．６～１０％、８．７～１０％、８．８～１０％、８．９～１０％、９～１０％、９．１～１０％、９．２～１０％、９．３～１０％、９．４～１０％、９．５～１０％、９．６～１０％、９．７～１０％、９．８～１０％、または９．９～１０％ｗ／ｖの範囲のスクロースを含み得る。
【0692】
所定の実施形態では、製剤は、０～１０％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～９％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～８％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～９％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～８％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
【0693】
所定の実施形態では、製剤は、０～７％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～６％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～５％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～６％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～５％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
【0694】
所定の実施形態では、製剤は、０～４％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～３％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～２％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～３％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～２％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
【0695】
所定の実施形態では、製剤は、０～１％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
【0696】
所定の実施形態では、製剤は、３％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、４％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、４％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
【0697】
所定の実施形態では、製剤は、６％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
【0698】
所定の実施形態では、製剤は、９％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
トレハロース
所定の実施形態では、製剤は、二糖、例えば、限定されないが、トレハロースである少なくとも１つの糖を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０％ｗ／ｖのスクロースを含み得る。
トレハロース
所定の実施形態では、製剤は、二糖、例えば、限定されないが、トレハロースである少なくとも１つの糖を含み得る。
【0699】
所定の実施形態では、製剤は、トレハロースを０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、２％、２．１％、２．２％、２．３％、２．４％、２．５％、２．６％、２．７％、２．８％、２．９％、３％、３．１％、３．２％、３．３％、３．４％、３．５％、３．６％、３．７％、３．８％、３．９％、４％、４．１％、４．２％、４．３％、４．４％、４．５％、４．６％、４．７％、４．８％、４．９％、５％、５．１％、５．２％、５．３％、５．４％、５．５％、５．６％、５．７％、５．８％、５．９％、６％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、８．９％、９％、９．１％、９．２％、９．３％、９．４％、９．５％、９．６％、９．７％、９．８％、９．９％、または１０％ｗ／ｖで含み得る。
【0700】
所定の実施形態では、製剤は、０～１％、０．１～１％、０．２～１％、０．３～１％、０．４～１％、０．５～１％、０．６～１％、０．７～１％、０．８～１％、０．９～１％、０～１．５％、０．１～１．５％、０．２～１．５％、０．３～１．５％、０．４～１．５％、０．５～１．５％、０．６～１．５％、０．７～１．５％、０．８～１．５％、０．９～１．５％、１～１．５％、１．１～１．５％、１．２～１．５％、１．３～１．５％、１．４～１．５％、０～２％、０．１～２％、０．２～２％、０．３～２％、０．４～２％、０．５～２％、０．６～２％、０．７～２％、０．８～２％、０．９～２％、１～２％、１．１～２％、１．２～２％、１．３～２％、１．４～２％、１．５～２％、１．６～２％、１．７～２％、１．８～２％、１．９～２％、０～２．５％、０．１～２．５％、０．２～２．５％、０．３～２．５％、０．４～２．５％、０．５～２．５％、０．６～２．５％、０．７～２．５％、０．８～２．５％、０．９～２．５％、１～２．５％、１．１～２．５％、１．２～２．５％、１．３～２．５％、１．４～２．５％、１．５～２．５％、１．６～２．５％、１．７～２．５％、１．８～２．５％、１．９～２．５％、２～２．５％、２．１～２．５％、２．２～２．５％、２．３～２．５％、２．４～２．５％、０～３％、０．１～３％、０．２～３％、０．３～３％、０．４～３％、０．５～３％、０．６～３％、０．７～３％、０．８～３％、０．９～３％、１～３％、１．１～３％、１．２～３％、１．３～３％、１．４～３％、１．５～３％、１．６～３％、１．７～３％、１．８～３％、１．９～３％、２～３％、２．１～３％、２．２～３％、２．３～３％、２．４～３％、２．５～３％、２．６～３％、２．７～３％、２．８～３％、２．９～３％、０～３．５％、０．１～３．５％、０．２～３．５％、０．３～３．５％、０．４～３．５％、０．５～３．５％、０．６～３．５％、０．７～３．５％、０．８～３．５％、０．９～３．５％、１～３．５％、１．１～３．５％、１．２～３．５％、１．３～３．５％、１．４～３．５％、１．５～３．５％、１．６～３．５％、１．７～３．５％、１．８～３．５％、１．９～３．５％、２～３．５％、２．１～３．５％、２．２～３．５％、２．３～３．５％、２．４～３．５％、２．５～３．５％、２．６～３．５％、２．７～３．５％、２．８～３．５％、２．９～３．５％、３～３．５％、３．１～３．５％、３．２～３．５％、３．３～３．５％、３．４～３．５％、０～４％、０．１～４％、０．２～４％、０．３～４％、０．４～４％、０．５～４％、０．６～４％、０．７～４％、０．８～４％、０．９～４％、１～４％、１．１～４％、１．２～４％、１．３～４％、１．４～４％、１．５～４％、１．６～４％、１．７～４％、１．８～４％、１．９～４％、２～４％、２．１～４％、２．２～４％、２．３～４％、２．４～４％、２．５～４％、２．６～４％、２．７～４％、２．８～４％、２．９～４％、３～４％、３．１～４％、３．２～４％、３．３～４％、３．４～４％、３．５～４％、３．６～４％、３．７～４％、３．８～４％、３．９～４％、０～４．５％、０．１～４．５％、０．２～４．５％、０．３～４．５％、０．４～４．５％、０．５～４．５％、０．６～４．５％、０．７～４．５％、０．８～４．５％、０．９～４．５％、１～４．５％、１．１～４．５％、１．２～４．５％、１．３～４．５％、１．４～４．５％、１．５～４．５％、１．６～４．５％、１．７～４．５％、１．８～４．５％、１．９～４．５％、２～４．５％、２．１～４．５％、２．２～４．５％、２．３～４．５％、２．４～４．５％、２．５～４．５％、２．６～４．５％、２．７～４．５％、２．８～４．５％、２．９～４．５％、３～４．５％、３．１～４．５％、３．２～４．５％、３．３～４．５％、３．４～４．５％、３．５～４．５％、３．６～４．５％、３．７～４．５％、３．８～４．５％、３．９～４．５％、４～４．５％、４．１～４．５％、４．２～４．５％、４．３～４．５％、４．４～４．５％、０～５％、０．１～５％、０．２～５％、０．３～５％、０．４～５％、０．５～５％、０．６～５％、０．７～５％、０．８～５％、０．９～５％、１～５％、１．１～５％、１．２～５％、１．３～５％、１．４～５％、１．５～５％、１．６～５％、１．７～５％、１．８～５％、１．９～５％、２～５％、２．１～５％、２．２～５％、２．３～５％、２．４～５％、２．５～５％、２．６～５％、２．７～５％、２．８～５％、２．９～５％、３～５％、３．１～５％、３．２～５％、３．３～５％、３．４～５％、３．５～５％、３．６～５％、３．７～５％、３．８～５％、３．９～５％、４～５％、４．１～５％、４．２～５％、４．３～５％、４．４～５％、４．５～５％、４．６～５％、４．７～５％、４．８～５％、４．９～５％、０～５．５％、０．１～５．５％、０．２～５．５％、０．３～５．５％、０．４～５．５％、０．５～５．５％、０．６～５．５％、０．７～５．５％、０．８～５．５％、０．９～５．５％、１～５．５％、１．１～５．５％、１．２～５．５％、１．３～５．５％、１．４～５．５％、１．５～５．５％、１．６～５．５％、１．７～５．５％、１．８～５．５％、１．９～５．５％、２～５．５％、２．１～５．５％、２．２～５．５％、２．３～５．５％、２．４～５．５％、２．５～５．５％、２．６～５．５％、２．７～５．５％、２．８～５．５％、２．９～５．５％、３～５．５％、３．１～５．５％、３．２～５．５％、３．３～５．５％、３．４～５．５％、３．５～５．５％、３．６～５．５％、３．７～５．５％、３．８～５．５％、３．９～５．５％、４～５．５％、４．１～５．５％、４．２～５．５％、４．３～５．５％、４．４～５．５％、４．５～５．５％、４．６～５．５％、４．７～５．５％、４．８～５．５％、４．９～５．５％、５～５．５％、５．１～５．５％、５．２～５．５％、５．３～５．５％、５．４～５．５％、０～６％、０．１～６％、０．２～６％、０．３～６％、０．４～６％、０．５～６％、０．６～６％、０．７～６％、０．８～６％、０．９～６％、１～６％、１．１～６％、１．２～６％、１．３～６％、１．４～６％、１．５～６％、１．６～６％、１．７～６％、１．８～６％、１．９～６％、２～６％、２．１～６％、２．２～６％、２．３～６％、２．４～６％、２．５～６％、２．６～６％、２．７～６％、２．８～６％、２．９～６％、３～６％、３．１～６％、３．２～６％、３．３～６％、３．４～６％、３．５～６％、３．６～６％、３．７～６％、３．８～６％、３．９～６％、４～６％、４．１～６％、４．２～６％、４．３～６％、４．４～６％、４．５～６％、４．６～６％、４．７～６％、４．８～６％、４．９～６％、５～６％、５．１～６％、５．２～６％、５．３～６％、５．４～６％、５．５～６％、５．６～６％、５．７～６％、５．８～６％、５．９～６％、０～６．５％、０．１～６．５％、０．２～６．５％、０．３～６．５％、０．４～６．５％、０．５～６．５％、０．６～６．５％、０．７～６．５％、０．８～６．５％、０．９～６．５％、１～６．５％、１．１～６．５％、１．２～６．５％、１．３～６．５％、１．４～６．５％、１．５～６．５％、１．６～６．５％、１．７～６．５％、１．８～６．５％、１．９～６．５％、２～６．５％、２．１～６．５％、２．２～６．５％、２．３～６．５％、２．４～６．５％、２．５～６．５％、２．６～６．５％、２．７～６．５％、２．８～６．５％、２．９～６．５％、３～６．５％、３．１～６．５％、３．２～６．５％、３．３～６．５％、３．４～６．５％、３．５～６．５％、３．６～６．５％、３．７～６．５％、３．８～６．５％、３．９～６．５％、４～６．５％、４．１～６．５％、４．２～６．５％、４．３～６．５％、４．４～６．５％、４．５～６．５％、４．６～６．５％、４．７～６．５％、４．８～６．５％、４．９～６．５％、５～６．５％、５．１～６．５％、５．２～６．５％、５．３～６．５％、５．４～６．５％、５．５～６．５％、５．６～６．５％、５．７～６．５％、５．８～６．５％、５．９～６．５％、６～６．５％、６．１～６．５％、６．２～６．５％、６．３～６．５％、６．４～６．５％、０～７％、０．１～７％、０．２～７％、０．３～７％、０．４～７％、０．５～７％、０．６～７％、０．７～７％、０．８～７％、０．９～７％、１～７％、１．１～７％、１．２～７％、１．３～７％、１．４～７％、１．５～７％、１．６～７％、１．７～７％、１．８～７％、１．９～７％、２～７％、２．１～７％、２．２～７％、２．３～７％、２．４～７％、２．５～７％、２．６～７％、２．７～７％、２．８～７％、２．９～７％、３～７％、３．１～７％、３．２～７％、３．３～７％、３．４～７％、３．５～７％、３．６～７％、３．７～７％、３．８～７％、３．９～７％、４～７％、４．１～７％、４．２～７％、４．３～７％、４．４～７％、４．５～７％、４．６～７％、４．７～７％、４．８～７％、４．９～７％、５～７％、５．１～７％、５．２～７％、５．３～７％、５．４～７％、５．５～７％、５．６～７％、５．７～７％、５．８～７％、５．９～７％、６～７％、６．１～７％、６．２～７％、６．３～７％、６．４～７％、６．５～７％、６．６～７％、６．７～７％、６．８～７％、６．９～７％、０～７．５％、０．１～７．５％、０．２～７．５％、０．３～７．５％、０．４～７．５％、０．５～７．５％、０．６～７．５％、０．７～７．５％、０．８～７．５％、０．９～７．５％、１～７．５％、１．１～７．５％、１．２～７．５％、１．３～７．５％、１．４～７．５％、１．５～７．５％、１．６～７．５％、１．７～７．５％、１．８～７．５％、１．９～７．５％、２～７．５％、２．１～７．５％、２．２～７．５％、２．３～７．５％、２．４～７．５％、２．５～７．５％、２．６～７．５％、２．７～７．５％、２．８～７．５％、２．９～７．５％、３～７．５％、３．１～７．５％、３．２～７．５％、３．３～７．５％、３．４～７．５％、３．５～７．５％、３．６～７．５％、３．７～７．５％、３．８～７．５％、３．９～７．５％、４～７．５％、４．１～７．５％、４．２～７．５％、４．３～７．５％、４．４～７．５％、４．５～７．５％、４．６～７．５％、４．７～７．５％、４．８～７．５％、４．９～７．５％、５～７．５％、５．１～７．５％、５．２～７．５％、５．３～７．５％、５．４～７．５％、５．５～７．５％、５．６～７．５％、５．７～７．５％、５．８～７．５％、５．９～７．５％、６～７．５％、６．１～７．５％、６．２～７．５％、６．３～７．５％、６．４～７．５％、６．５～７．５％、６．６～７．５％、６．７～７．５％、６．８～７．５％、６．９～７．５％、７～７．５％、７．１～７．５％、７．２～７．５％、７．３～７．５％、７．４～７．５％、０～８％、０．１～８％、０．２～８％、０．３～８％、０．４～８％、０．５～８％、０．６～８％、０．７～８％、０．８～８％、０．９～８％、１～８％、１．１～８％、１．２～８％、１．３～８％、１．４～８％、１．５～８％、１．６～８％、１．７～８％、１．８～８％、１．９～８％、２～８％、２．１～８％、２．２～８％、２．３～８％、２．４～８％、２．５～８％、２．６～８％、２．７～８％、２．８～８％、２．９～８％、３～８％、３．１～８％、３．２～８％、３．３～８％、３．４～８％、３．５～８％、３．６～８％、３．７～８％、３．８～８％、３．９～８％、４～８％、４．１～８％、４．２～８％、４．３～８％、４．４～８％、４．５～８％、４．６～８％、４．７～８％、４．８～８％、４．９～８％、５～８％、５．１～８％、５．２～８％、５．３～８％、５．４～８％、５．５～８％、５．６～８％、５．７～８％、５．８～８％、５．９～８％、６～８％、６．１～８％、６．２～８％、６．３～８％、６．４
～８％、６．５～８％、６．６～８％、６．７～８％、６．８～８％、６．９～８％、７～８％、７．１～８％、７．２～８％、７．３～８％、７．４～８％、７．５～８％、７．６～８％、７．７～８％、７．８～８％、７．９～８％、０～８．５％、０．１～８．５％、０．２～８．５％、０．３～８．５％、０．４～８．５％、０．５～８．５％、０．６～８．５％、０．７～８．５％、０．８～８．５％、０．９～８．５％、１～８．５％、１．１～８．５％、１．２～８．５％、１．３～８．５％、１．４～８．５％、１．５～８．５％、１．６～８．５％、１．７～８．５％、１．８～８．５％、１．９～８．５％、２～８．５％、２．１～８．５％、２．２～８．５％、２．３～８．５％、２．４～８．５％、２．５～８．５％、２．６～８．５％、２．７～８．５％、２．８～８．５％、２．９～８．５％、３～８．５％、３．１～８．５％、３．２～８．５％、３．３～８．５％、３．４～８．５％、３．５～８．５％、３．６～８．５％、３．７～８．５％、３．８～８．５％、３．９～８．５％、４～８．５％、４．１～８．５％、４．２～８．５％、４．３～８．５％、４．４～８．５％、４．５～８．５％、４．６～８．５％、４．７～８．５％、４．８～８．５％、４．９～８．５％、５～８．５％、５．１～８．５％、５．２～８．５％、５．３～８．５％、５．４～８．５％、５．５～８．５％、５．６～８．５％、５．７～８．５％、５．８～８．５％、５．９～８．５％、６～８．５％、６．１～８．５％、６．２～８．５％、６．３～８．５％、６．４～８．５％、６．５～８．５％、６．６～８．５％、６．７～８．５％、６．８～８．５％、６．９～８．５％、７～８．５％、７．１～８．５％、７．２～８．５％、７．３～８．５％、７．４～８．５％、７．５～８．５％、７．６～８．５％、７．７～８．５％、７．８～８．５％、７．９～８．５％、８～８．５％、８．１～８．５％、８．２～８．５％、８．３～８．５％、８．４～８．５％、０～９％、０．１～９％、０．２～９％、０．３～９％、０．４～９％、０．５～９％、０．６～９％、０．７～９％、０．８～９％、０．９～９％、１～９％、１．１～９％、１．２～９％、１．３～９％、１．４～９％、１．５～９％、１．６～９％、１．７～９％、１．８～９％、１．９～９％、２～９％、２．１～９％、２．２～９％、２．３～９％、２．４～９％、２．５～９％、２．６～９％、２．７～９％、２．８～９％、２．９～９％、３～９％、３．１～９％、３．２～９％、３．３～９％、３．４～９％、３．５～９％、３．６～９％、３．７～９％、３．８～９％、３．９～９％、４～９％、４．１～９％、４．２～９％、４．３～９％、４．４～９％、４．５～９％、４．６～９％、４．７～９％、４．８～９％、４．９～９％、５～９％、５．１～９％、５．２～９％、５．３～９％、５．４～９％、５．５～９％、５．６～９％、５．７～９％、５．８～９％、５．９～９％、６～９％、６．１～９％、６．２～９％、６．３～９％、６．４～９％、６．５～９％、６．６～９％、６．７～９％、６．８～９％、６．９～９％、７～９％、７．１～９％、７．２～９％、７．３～９％、７．４～９％、７．５～９％、７．６～９％、７．７～９％、７．８～９％、７．９～９％、８～９％、８．１～９％、８．２～９％、８．３～９％、８．４～９％、８．５～９％、８．６～９％、８．７～９％、８．８～９％、８．９～９％、０～９．５％、０．１～９．５％、０．２～９．５％、０．３～９．５％、０．４～９．５％、０．５～９．５％、０．６～９．５％、０．７～９．５％、０．８～９．５％、０．９～９．５％、１～９．５％、１．１～９．５％、１．２～９．５％、１．３～９．５％、１．４～９．５％、１．５～９．５％、１．６～９．５％、１．７～９．５％、１．８～９．５％、１．９～９．５％、２～９．５％、２．１～９．５％、２．２～９．５％、２．３～９．５％、２．４～９．５％、２．５～９．５％、２．６～９．５％、２．７～９．５％、２．８～９．５％、２．９～９．５％、３～９．５％、３．１～９．５％、３．２～９．５％、３．３～９．５％、３．４～９．５％、３．５～９．５％、３．６～９．５％、３．７～９．５％、３．８～９．５％、３．９～９．５％、４～９．５％、４．１～９．５％、４．２～９．５％、４．３～９．５％、４．４～９．５％、４．５～９．５％、４．６～９．５％、４．７～９．５％、４．８～９．５％、４．９～９．５％、５～９．５％、５．１～９．５％、５．２～９．５％、５．３～９．５％、５．４～９．５％、５．５～９．５％、５．６～９．５％、５．７～９．５％、５．８～９．５％、５．９～９．５％、６～９．５％、６．１～９．５％、６．２～９．５％、６．３～９．５％、６．４～９．５％、６．５～９．５％、６．６～９．５％、６．７～９．５％、６．８～９．５％、６．９～９．５％、７～９．５％、７．１～９．５％、７．２～９．５％、７．３～９．５％、７．４～９．５％、７．５～９．５％、７．６～９．５％、７．７～９．５％、７．８～９．５％、７．９～９．５％、８～９．５％、８．１～９．５％、８．２～９．５％、８．３～９．５％、８．４～９．５％、８．５～９．５％、８．６～９．５％、８．７～９．５％、８．８～９．５％、８．９～９．５％、９～９．５％、９．１～９．５％、９．２～９．５％、９．３～９．５％、９．４～９．５％、０～１０％、０．１～１０％、０．２～１０％、０．３～１０％、０．４～１０％、０．５～１０％、０．６～１０％、０．７～１０％、０．８～１０％、０．９～１０％、１～１０％、１．１～１０％、１．２～１０％、１．３～１０％、１．４～１０％、１．５～１０％、１．６～１０％、１．７～１０％、１．８～１０％、１．９～１０％、２～１０％、２．１～１０％、２．２～１０％、２．３～１０％、２．４～１０％、２．５～１０％、２．６～１０％、２．７～１０％、２．８～１０％、２．９～１０％、３～１０％、３．１～１０％、３．２～１０％、３．３～１０％、３．４～１０％、３．５～１０％、３．６～１０％、３．７～１０％、３．８～１０％、３．９～１０％、４～１０％、４．１～１０％、４．２～１０％、４．３～１０％、４．４～１０％、４．５～１０％、４．６～１０％、４．７～１０％、４．８～１０％、４．９～１０％、５～１０％、５．１～１０％、５．２～１０％、５．３～１０％、５．４～１０％、５．５～１０％、５．６～１０％、５．７～１０％、５．８～１０％、５．９～１０％、６～１０％、６．１～１０％、６．２～１０％、６．３～１０％、６．４～１０％、６．５～１０％、６．６～１０％、６．７～１０％、６．８～１０％、６．９～１０％、７～１０％、７．１～１０％、７．２～１０％、７．３～１０％、７．４～１０％、７．５～１０％、７．６～１０％、７．７～１０％、７．８～１０％、７．９～１０％、８～１０％、８．１～１０％、８．２～１０％、８．３～１０％、８．４～１０％、８．５～１０％、８．６～１０％、８．７～１０％、８．８～１０％、８．９～１０％、９～１０％、９．１～１０％、９．２～１０％、９．３～１０％、９．４～１０％、９．５～１０％、９．６～１０％、９．７～１０％、９．８～１０％、または９．９～１０％ｗ／ｖの範囲のトレハロースを含み得る。
～８％、６．５～８％、６．６～８％、６．７～８％、６．８～８％、６．９～８％、７～８％、７．１～８％、７．２～８％、７．３～８％、７．４～８％、７．５～８％、７．６～８％、７．７～８％、７．８～８％、７．９～８％、０～８．５％、０．１～８．５％、０．２～８．５％、０．３～８．５％、０．４～８．５％、０．５～８．５％、０．６～８．５％、０．７～８．５％、０．８～８．５％、０．９～８．５％、１～８．５％、１．１～８．５％、１．２～８．５％、１．３～８．５％、１．４～８．５％、１．５～８．５％、１．６～８．５％、１．７～８．５％、１．８～８．５％、１．９～８．５％、２～８．５％、２．１～８．５％、２．２～８．５％、２．３～８．５％、２．４～８．５％、２．５～８．５％、２．６～８．５％、２．７～８．５％、２．８～８．５％、２．９～８．５％、３～８．５％、３．１～８．５％、３．２～８．５％、３．３～８．５％、３．４～８．５％、３．５～８．５％、３．６～８．５％、３．７～８．５％、３．８～８．５％、３．９～８．５％、４～８．５％、４．１～８．５％、４．２～８．５％、４．３～８．５％、４．４～８．５％、４．５～８．５％、４．６～８．５％、４．７～８．５％、４．８～８．５％、４．９～８．５％、５～８．５％、５．１～８．５％、５．２～８．５％、５．３～８．５％、５．４～８．５％、５．５～８．５％、５．６～８．５％、５．７～８．５％、５．８～８．５％、５．９～８．５％、６～８．５％、６．１～８．５％、６．２～８．５％、６．３～８．５％、６．４～８．５％、６．５～８．５％、６．６～８．５％、６．７～８．５％、６．８～８．５％、６．９～８．５％、７～８．５％、７．１～８．５％、７．２～８．５％、７．３～８．５％、７．４～８．５％、７．５～８．５％、７．６～８．５％、７．７～８．５％、７．８～８．５％、７．９～８．５％、８～８．５％、８．１～８．５％、８．２～８．５％、８．３～８．５％、８．４～８．５％、０～９％、０．１～９％、０．２～９％、０．３～９％、０．４～９％、０．５～９％、０．６～９％、０．７～９％、０．８～９％、０．９～９％、１～９％、１．１～９％、１．２～９％、１．３～９％、１．４～９％、１．５～９％、１．６～９％、１．７～９％、１．８～９％、１．９～９％、２～９％、２．１～９％、２．２～９％、２．３～９％、２．４～９％、２．５～９％、２．６～９％、２．７～９％、２．８～９％、２．９～９％、３～９％、３．１～９％、３．２～９％、３．３～９％、３．４～９％、３．５～９％、３．６～９％、３．７～９％、３．８～９％、３．９～９％、４～９％、４．１～９％、４．２～９％、４．３～９％、４．４～９％、４．５～９％、４．６～９％、４．７～９％、４．８～９％、４．９～９％、５～９％、５．１～９％、５．２～９％、５．３～９％、５．４～９％、５．５～９％、５．６～９％、５．７～９％、５．８～９％、５．９～９％、６～９％、６．１～９％、６．２～９％、６．３～９％、６．４～９％、６．５～９％、６．６～９％、６．７～９％、６．８～９％、６．９～９％、７～９％、７．１～９％、７．２～９％、７．３～９％、７．４～９％、７．５～９％、７．６～９％、７．７～９％、７．８～９％、７．９～９％、８～９％、８．１～９％、８．２～９％、８．３～９％、８．４～９％、８．５～９％、８．６～９％、８．７～９％、８．８～９％、８．９～９％、０～９．５％、０．１～９．５％、０．２～９．５％、０．３～９．５％、０．４～９．５％、０．５～９．５％、０．６～９．５％、０．７～９．５％、０．８～９．５％、０．９～９．５％、１～９．５％、１．１～９．５％、１．２～９．５％、１．３～９．５％、１．４～９．５％、１．５～９．５％、１．６～９．５％、１．７～９．５％、１．８～９．５％、１．９～９．５％、２～９．５％、２．１～９．５％、２．２～９．５％、２．３～９．５％、２．４～９．５％、２．５～９．５％、２．６～９．５％、２．７～９．５％、２．８～９．５％、２．９～９．５％、３～９．５％、３．１～９．５％、３．２～９．５％、３．３～９．５％、３．４～９．５％、３．５～９．５％、３．６～９．５％、３．７～９．５％、３．８～９．５％、３．９～９．５％、４～９．５％、４．１～９．５％、４．２～９．５％、４．３～９．５％、４．４～９．５％、４．５～９．５％、４．６～９．５％、４．７～９．５％、４．８～９．５％、４．９～９．５％、５～９．５％、５．１～９．５％、５．２～９．５％、５．３～９．５％、５．４～９．５％、５．５～９．５％、５．６～９．５％、５．７～９．５％、５．８～９．５％、５．９～９．５％、６～９．５％、６．１～９．５％、６．２～９．５％、６．３～９．５％、６．４～９．５％、６．５～９．５％、６．６～９．５％、６．７～９．５％、６．８～９．５％、６．９～９．５％、７～９．５％、７．１～９．５％、７．２～９．５％、７．３～９．５％、７．４～９．５％、７．５～９．５％、７．６～９．５％、７．７～９．５％、７．８～９．５％、７．９～９．５％、８～９．５％、８．１～９．５％、８．２～９．５％、８．３～９．５％、８．４～９．５％、８．５～９．５％、８．６～９．５％、８．７～９．５％、８．８～９．５％、８．９～９．５％、９～９．５％、９．１～９．５％、９．２～９．５％、９．３～９．５％、９．４～９．５％、０～１０％、０．１～１０％、０．２～１０％、０．３～１０％、０．４～１０％、０．５～１０％、０．６～１０％、０．７～１０％、０．８～１０％、０．９～１０％、１～１０％、１．１～１０％、１．２～１０％、１．３～１０％、１．４～１０％、１．５～１０％、１．６～１０％、１．７～１０％、１．８～１０％、１．９～１０％、２～１０％、２．１～１０％、２．２～１０％、２．３～１０％、２．４～１０％、２．５～１０％、２．６～１０％、２．７～１０％、２．８～１０％、２．９～１０％、３～１０％、３．１～１０％、３．２～１０％、３．３～１０％、３．４～１０％、３．５～１０％、３．６～１０％、３．７～１０％、３．８～１０％、３．９～１０％、４～１０％、４．１～１０％、４．２～１０％、４．３～１０％、４．４～１０％、４．５～１０％、４．６～１０％、４．７～１０％、４．８～１０％、４．９～１０％、５～１０％、５．１～１０％、５．２～１０％、５．３～１０％、５．４～１０％、５．５～１０％、５．６～１０％、５．７～１０％、５．８～１０％、５．９～１０％、６～１０％、６．１～１０％、６．２～１０％、６．３～１０％、６．４～１０％、６．５～１０％、６．６～１０％、６．７～１０％、６．８～１０％、６．９～１０％、７～１０％、７．１～１０％、７．２～１０％、７．３～１０％、７．４～１０％、７．５～１０％、７．６～１０％、７．７～１０％、７．８～１０％、７．９～１０％、８～１０％、８．１～１０％、８．２～１０％、８．３～１０％、８．４～１０％、８．５～１０％、８．６～１０％、８．７～１０％、８．８～１０％、８．９～１０％、９～１０％、９．１～１０％、９．２～１０％、９．３～１０％、９．４～１０％、９．５～１０％、９．６～１０％、９．７～１０％、９．８～１０％、または９．９～１０％ｗ／ｖの範囲のトレハロースを含み得る。
【0701】
所定の実施形態では、製剤は、０～１０％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～９％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～８％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～９％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～８％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
【0702】
所定の実施形態では、製剤は、０～７％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～６％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～５％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～６％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～５％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
【0703】
所定の実施形態では、製剤は、０～４％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～３％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～２％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～３％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～２％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
【0704】
所定の実施形態では、製剤は、０～１％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
【0705】
所定の実施形態では、製剤は、３％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、４％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、４％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
【0706】
所定の実施形態では、製剤は、６％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
【0707】
所定の実施形態では、製剤は、９％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
ソルビトール
所定の実施形態では、製剤は、ソルビトールである少なくとも１つの糖代用品（例えば、糖アルコール）を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０％ｗ／ｖのトレハロースを含み得る。
ソルビトール
所定の実施形態では、製剤は、ソルビトールである少なくとも１つの糖代用品（例えば、糖アルコール）を含み得る。
【0708】
所定の実施形態では、製剤は、０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％、２％、２．１％、２．２％、２．３％、２．４％、２．５％、２．６％、２．７％、２．８％、２．９％、３％、３．１％、３．２％、３．３％、３．４％、３．５％、３．６％、３．７％、３．８％、３．９％、４％、４．１％、４．２％、４．３％、４．４％、４．５％、４．６％、４．７％、４．８％、４．９％、５％、５．１％、５．２％、５．３％、５．４％、５．５％、５．６％、５．７％、５．８％、５．９％、６％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、８．９％、９％、９．１％、９．２％、９．３％、９．４％、９．５％、９．６％、９．７％、９．８％、９．９％、または１０％ｗ／ｖでソルビトールを含み得る。
【0709】
所定の実施形態では、製剤は、０～１％、０．１～１％、０．２～１％、０．３～１％、０．４～１％、０．５～１％、０．６～１％、０．７～１％、０．８～１％、０．９～１％、０～１．５％、０．１～１．５％、０．２～１．５％、０．３～１．５％、０．４～１．５％、０．５～１．５％、０．６～１．５％、０．７～１．５％、０．８～１．５％、０．９～１．５％、１～１．５％、１．１～１．５％、１．２～１．５％、１．３～１．５％、１．４～１．５％、０～２％、０．１～２％、０．２～２％、０．３～２％、０．４～２％、０．５～２％、０．６～２％、０．７～２％、０．８～２％、０．９～２％、１～２％、１．１～２％、１．２～２％、１．３～２％、１．４～２％、１．５～２％、１．６～２％、１．７～２％、１．８～２％、１．９～２％、０～２．５％、０．１～２．５％、０．２～２．５％、０．３～２．５％、０．４～２．５％、０．５～２．５％、０．６～２．５％、０．７～２．５％、０．８～２．５％、０．９～２．５％、１～２．５％、１．１～２．５％、１．２～２．５％、１．３～２．５％、１．４～２．５％、１．５～２．５％、１．６～２．５％、１．７～２．５％、１．８～２．５％、１．９～２．５％、２～２．５％、２．１～２．５％、２．２～２．５％、２．３～２．５％、２．４～２．５％、０～３％、０．１～３％、０．２～３％、０．３～３％、０．４～３％、０．５～３％、０．６～３％、０．７～３％、０．８～３％、０．９～３％、１～３％、１．１～３％、１．２～３％、１．３～３％、１．４～３％、１．５～３％、１．６～３％、１．７～３％、１．８～３％、１．９～３％、２～３％、２．１～３％、２．２～３％、２．３～３％、２．４～３％、２．５～３％、２．６～３％、２．７～３％、２．８～３％、２．９～３％、０～３．５％、０．１～３．５％、０．２～３．５％、０．３～３．５％、０．４～３．５％、０．５～３．５％、０．６～３．５％、０．７～３．５％、０．８～３．５％、０．９～３．５％、１～３．５％、１．１～３．５％、１．２～３．５％、１．３～３．５％、１．４～３．５％、１．５～３．５％、１．６～３．５％、１．７～３．５％、１．８～３．５％、１．９～３．５％、２～３．５％、２．１～３．５％、２．２～３．５％、２．３～３．５％、２．４～３．５％、２．５～３．５％、２．６～３．５％、２．７～３．５％、２．８～３．５％、２．９～３．５％、３～３．５％、３．１～３．５％、３．２～３．５％、３．３～３．５％、３．４～３．５％、０～４％、０．１～４％、０．２～４％、０．３～４％、０．４～４％、０．５～４％、０．６～４％、０．７～４％、０．８～４％、０．９～４％、１～４％、１．１～４％、１．２～４％、１．３～４％、１．４～４％、１．５～４％、１．６～４％、１．７～４％、１．８～４％、１．９～４％、２～４％、２．１～４％、２．２～４％、２．３～４％、２．４～４％、２．５～４％、２．６～４％、２．７～４％、２．８～４％、２．９～４％、３～４％、３．１～４％、３．２～４％、３．３～４％、３．４～４％、３．５～４％、３．６～４％、３．７～４％、３．８～４％、３．９～４％、０～４．５％、０．１～４．５％、０．２～４．５％、０．３～４．５％、０．４～４．５％、０．５～４．５％、０．６～４．５％、０．７～４．５％、０．８～４．５％、０．９～４．５％、１～４．５％、１．１～４．５％、１．２～４．５％、１．３～４．５％、１．４～４．５％、１．５～４．５％、１．６～４．５％、１．７～４．５％、１．８～４．５％、１．９～４．５％、２～４．５％、２．１～４．５％、２．２～４．５％、２．３～４．５％、２．４～４．５％、２．５～４．５％、２．６～４．５％、２．７～４．５％、２．８～４．５％、２．９～４．５％、３～４．５％、３．１～４．５％、３．２～４．５％、３．３～４．５％、３．４～４．５％、３．５～４．５％、３．６～４．５％、３．７～４．５％、３．８～４．５％、３．９～４．５％、４～４．５％、４．１～４．５％、４．２～４．５％、４．３～４．５％、４．４～４．５％、０～５％、０．１～５％、０．２～５％、０．３～５％、０．４～５％、０．５～５％、０．６～５％、０．７～５％、０．８～５％、０．９～５％、１～５％、１．１～５％、１．２～５％、１．３～５％、１．４～５％、１．５～５％、１．６～５％、１．７～５％、１．８～５％、１．９～５％、２～５％、２．１～５％、２．２～５％、２．３～５％、２．４～５％、２．５～５％、２．６～５％、２．７～５％、２．８～５％、２．９～５％、３～５％、３．１～５％、３．２～５％、３．３～５％、３．４～５％、３．５～５％、３．６～５％、３．７～５％、３．８～５％、３．９～５％、４～５％、４．１～５％、４．２～５％、４．３～５％、４．４～５％、４．５～５％、４．６～５％、４．７～５％、４．８～５％、４．９～５％、０～５．５％、０．１～５．５％、０．２～５．５％、０．３～５．５％、０．４～５．５％、０．５～５．５％、０．６～５．５％、０．７～５．５％、０．８～５．５％、０．９～５．５％、１～５．５％、１．１～５．５％、１．２～５．５％、１．３～５．５％、１．４～５．５％、１．５～５．５％、１．６～５．５％、１．７～５．５％、１．８～５．５％、１．９～５．５％、２～５．５％、２．１～５．５％、２．２～５．５％、２．３～５．５％、２．４～５．５％、２．５～５．５％、２．６～５．５％、２．７～５．５％、２．８～５．５％、２．９～５．５％、３～５．５％、３．１～５．５％、３．２～５．５％、３．３～５．５％、３．４～５．５％、３．５～５．５％、３．６～５．５％、３．７～５．５％、３．８～５．５％、３．９～５．５％、４～５．５％、４．１～５．５％、４．２～５．５％、４．３～５．５％、４．４～５．５％、４．５～５．５％、４．６～５．５％、４．７～５．５％、４．８～５．５％、４．９～５．５％、５～５．５％、５．１～５．５％、５．２～５．５％、５．３～５．５％、５．４～５．５％、０～６％、０．１～６％、０．２～６％、０．３～６％、０．４～６％、０．５～６％、０．６～６％、０．７～６％、０．８～６％、０．９～６％、１～６％、１．１～６％、１．２～６％、１．３～６％、１．４～６％、１．５～６％、１．６～６％、１．７～６％、１．８～６％、１．９～６％、２～６％、２．１～６％、２．２～６％、２．３～６％、２．４～６％、２．５～６％、２．６～６％、２．７～６％、２．８～６％、２．９～６％、３～６％、３．１～６％、３．２～６％、３．３～６％、３．４～６％、３．５～６％、３．６～６％、３．７～６％、３．８～６％、３．９～６％、４～６％、４．１～６％、４．２～６％、４．３～６％、４．４～６％、４．５～６％、４．６～６％、４．７～６％、４．８～６％、４．９～６％、５～６％、５．１～６％、５．２～６％、５．３～６％、５．４～６％、５．５～６％、５．６～６％、５．７～６％、５．８～６％、５．９～６％、０～６．５％、０．１～６．５％、０．２～６．５％、０．３～６．５％、０．４～６．５％、０．５～６．５％、０．６～６．５％、０．７～６．５％、０．８～６．５％、０．９～６．５％、１～６．５％、１．１～６．５％、１．２～６．５％、１．３～６．５％、１．４～６．５％、１．５～６．５％、１．６～６．５％、１．７～６．５％、１．８～６．５％、１．９～６．５％、２～６．５％、２．１～６．５％、２．２～６．５％、２．３～６．５％、２．４～６．５％、２．５～６．５％、２．６～６．５％、２．７～６．５％、２．８～６．５％、２．９～６．５％、３～６．５％、３．１～６．５％、３．２～６．５％、３．３～６．５％、３．４～６．５％、３．５～６．５％、３．６～６．５％、３．７～６．５％、３．８～６．５％、３．９～６．５％、４～６．５％、４．１～６．５％、４．２～６．５％、４．３～６．５％、４．４～６．５％、４．５～６．５％、４．６～６．５％、４．７～６．５％、４．８～６．５％、４．９～６．５％、５～６．５％、５．１～６．５％、５．２～６．５％、５．３～６．５％、５．４～６．５％、５．５～６．５％、５．６～６．５％、５．７～６．５％、５．８～６．５％、５．９～６．５％、６～６．５％、６．１～６．５％、６．２～６．５％、６．３～６．５％、６．４～６．５％、０～７％、０．１～７％、０．２～７％、０．３～７％、０．４～７％、０．５～７％、０．６～７％、０．７～７％、０．８～７％、０．９～７％、１～７％、１．１～７％、１．２～７％、１．３～７％、１．４～７％、１．５～７％、１．６～７％、１．７～７％、１．８～７％、１．９～７％、２～７％、２．１～７％、２．２～７％、２．３～７％、２．４～７％、２．５～７％、２．６～７％、２．７～７％、２．８～７％、２．９～７％、３～７％、３．１～７％、３．２～７％、３．３～７％、３．４～７％、３．５～７％、３．６～７％、３．７～７％、３．８～７％、３．９～７％、４～７％、４．１～７％、４．２～７％、４．３～７％、４．４～７％、４．５～７％、４．６～７％、４．７～７％、４．８～７％、４．９～７％、５～７％、５．１～７％、５．２～７％、５．３～７％、５．４～７％、５．５～７％、５．６～７％、５．７～７％、５．８～７％、５．９～７％、６～７％、６．１～７％、６．２～７％、６．３～７％、６．４～７％、６．５～７％、６．６～７％、６．７～７％、６．８～７％、６．９～７％、０～７．５％、０．１～７．５％、０．２～７．５％、０．３～７．５％、０．４～７．５％、０．５～７．５％、０．６～７．５％、０．７～７．５％、０．８～７．５％、０．９～７．５％、１～７．５％、１．１～７．５％、１．２～７．５％、１．３～７．５％、１．４～７．５％、１．５～７．５％、１．６～７．５％、１．７～７．５％、１．８～７．５％、１．９～７．５％、２～７．５％、２．１～７．５％、２．２～７．５％、２．３～７．５％、２．４～７．５％、２．５～７．５％、２．６～７．５％、２．７～７．５％、２．８～７．５％、２．９～７．５％、３～７．５％、３．１～７．５％、３．２～７．５％、３．３～７．５％、３．４～７．５％、３．５～７．５％、３．６～７．５％、３．７～７．５％、３．８～７．５％、３．９～７．５％、４～７．５％、４．１～７．５％、４．２～７．５％、４．３～７．５％、４．４～７．５％、４．５～７．５％、４．６～７．５％、４．７～７．５％、４．８～７．５％、４．９～７．５％、５～７．５％、５．１～７．５％、５．２～７．５％、５．３～７．５％、５．４～７．５％、５．５～７．５％、５．６～７．５％、５．７～７．５％、５．８～７．５％、５．９～７．５％、６～７．５％、６．１～７．５％、６．２～７．５％、６．３～７．５％、６．４～７．５％、６．５～７．５％、６．６～７．５％、６．７～７．５％、６．８～７．５％、６．９～７．５％、７～７．５％、７．１～７．５％、７．２～７．５％、７．３～７．５％、７．４～７．５％、０～８％、０．１～８％、０．２～８％、０．３～８％、０．４～８％、０．５～８％、０．６～８％、０．７～８％、０．８～８％、０．９～８％、１～８％、１．１～８％、１．２～８％、１．３～８％、１．４～８％、１．５～８％、１．６～８％、１．７～８％、１．８～８％、１．９～８％、２～８％、２．１～８％、２．２～８％、２．３～８％、２．４～８％、２．５～８％、２．６～８％、２．７～８％、２．８～８％、２．９～８％、３～８％、３．１～８％、３．２～８％、３．３～８％、３．４～８％、３．５～８％、３．６～８％、３．７～８％、３．８～８％、３．９～８％、４～８％、４．１～８％、４．２～８％、４．３～８％、４．４～８％、４．５～８％、４．６～８％、４．７～８％、４．８～８％、４．９～８％、５～８％、５．１～８％、５．２～８％、５．３～８％、５．４～８％、５．５～８％、５．６～８％、５．７～８％、５．８～８％、５．９～８％、６～８％、６．１～８％、６．２～８％、６．３～８％、６．４
～８％、６．５～８％、６．６～８％、６．７～８％、６．８～８％、６．９～８％、７～８％、７．１～８％、７．２～８％、７．３～８％、７．４～８％、７．５～８％、７．６～８％、７．７～８％、７．８～８％、７．９～８％、０～８．５％、０．１～８．５％、０．２～８．５％、０．３～８．５％、０．４～８．５％、０．５～８．５％、０．６～８．５％、０．７～８．５％、０．８～８．５％、０．９～８．５％、１～８．５％、１．１～８．５％、１．２～８．５％、１．３～８．５％、１．４～８．５％、１．５～８．５％、１．６～８．５％、１．７～８．５％、１．８～８．５％、１．９～８．５％、２～８．５％、２．１～８．５％、２．２～８．５％、２．３～８．５％、２．４～８．５％、２．５～８．５％、２．６～８．５％、２．７～８．５％、２．８～８．５％、２．９～８．５％、３～８．５％、３．１～８．５％、３．２～８．５％、３．３～８．５％、３．４～８．５％、３．５～８．５％、３．６～８．５％、３．７～８．５％、３．８～８．５％、３．９～８．５％、４～８．５％、４．１～８．５％、４．２～８．５％、４．３～８．５％、４．４～８．５％、４．５～８．５％、４．６～８．５％、４．７～８．５％、４．８～８．５％、４．９～８．５％、５～８．５％、５．１～８．５％、５．２～８．５％、５．３～８．５％、５．４～８．５％、５．５～８．５％、５．６～８．５％、５．７～８．５％、５．８～８．５％、５．９～８．５％、６～８．５％、６．１～８．５％、６．２～８．５％、６．３～８．５％、６．４～８．５％、６．５～８．５％、６．６～８．５％、６．７～８．５％、６．８～８．５％、６．９～８．５％、７～８．５％、７．１～８．５％、７．２～８．５％、７．３～８．５％、７．４～８．５％、７．５～８．５％、７．６～８．５％、７．７～８．５％、７．８～８．５％、７．９～８．５％、８～８．５％、８．１～８．５％、８．２～８．５％、８．３～８．５％、８．４～８．５％、０～９％、０．１～９％、０．２～９％、０．３～９％、０．４～９％、０．５～９％、０．６～９％、０．７～９％、０．８～９％、０．９～９％、１～９％、１．１～９％、１．２～９％、１．３～９％、１．４～９％、１．５～９％、１．６～９％、１．７～９％、１．８～９％、１．９～９％、２～９％、２．１～９％、２．２～９％、２．３～９％、２．４～９％、２．５～９％、２．６～９％、２．７～９％、２．８～９％、２．９～９％、３～９％、３．１～９％、３．２～９％、３．３～９％、３．４～９％、３．５～９％、３．６～９％、３．７～９％、３．８～９％、３．９～９％、４～９％、４．１～９％、４．２～９％、４．３～９％、４．４～９％、４．５～９％、４．６～９％、４．７～９％、４．８～９％、４．９～９％、５～９％、５．１～９％、５．２～９％、５．３～９％、５．４～９％、５．５～９％、５．６～９％、５．７～９％、５．８～９％、５．９～９％、６～９％、６．１～９％、６．２～９％、６．３～９％、６．４～９％、６．５～９％、６．６～９％、６．７～９％、６．８～９％、６．９～９％、７～９％、７．１～９％、７．２～９％、７．３～９％、７．４～９％、７．５～９％、７．６～９％、７．７～９％、７．８～９％、７．９～９％、８～９％、８．１～９％、８．２～９％、８．３～９％、８．４～９％、８．５～９％、８．６～９％、８．７～９％、８．８～９％、８．９～９％、０～９．５％、０．１～９．５％、０．２～９．５％、０．３～９．５％、０．４～９．５％、０．５～９．５％、０．６～９．５％、０．７～９．５％、０．８～９．５％、０．９～９．５％、１～９．５％、１．１～９．５％、１．２～９．５％、１．３～９．５％、１．４～９．５％、１．５～９．５％、１．６～９．５％、１．７～９．５％、１．８～９．５％、１．９～９．５％、２～９．５％、２．１～９．５％、２．２～９．５％、２．３～９．５％、２．４～９．５％、２．５～９．５％、２．６～９．５％、２．７～９．５％、２．８～９．５％、２．９～９．５％、３～９．５％、３．１～９．５％、３．２～９．５％、３．３～９．５％、３．４～９．５％、３．５～９．５％、３．６～９．５％、３．７～９．５％、３．８～９．５％、３．９～９．５％、４～９．５％、４．１～９．５％、４．２～９．５％、４．３～９．５％、４．４～９．５％、４．５～９．５％、４．６～９．５％、４．７～９．５％、４．８～９．５％、４．９～９．５％、５～９．５％、５．１～９．５％、５．２～９．５％、５．３～９．５％、５．４～９．５％、５．５～９．５％、５．６～９．５％、５．７～９．５％、５．８～９．５％、５．９～９．５％、６～９．５％、６．１～９．５％、６．２～９．５％、６．３～９．５％、６．４～９．５％、６．５～９．５％、６．６～９．５％、６．７～９．５％、６．８～９．５％、６．９～９．５％、７～９．５％、７．１～９．５％、７．２～９．５％、７．３～９．５％、７．４～９．５％、７．５～９．５％、７．６～９．５％、７．７～９．５％、７．８～９．５％、７．９～９．５％、８～９．５％、８．１～９．５％、８．２～９．５％、８．３～９．５％、８．４～９．５％、８．５～９．５％、８．６～９．５％、８．７～９．５％、８．８～９．５％、８．９～９．５％、９～９．５％、９．１～９．５％、９．２～９．５％、９．３～９．５％、９．４～９．５％、０～１０％、０．１～１０％、０．２～１０％、０．３～１０％、０．４～１０％、０．５～１０％、０．６～１０％、０．７～１０％、０．８～１０％、０．９～１０％、１～１０％、１．１～１０％、１．２～１０％、１．３～１０％、１．４～１０％、１．５～１０％、１．６～１０％、１．７～１０％、１．８～１０％、１．９～１０％、２～１０％、２．１～１０％、２．２～１０％、２．３～１０％、２．４～１０％、２．５～１０％、２．６～１０％、２．７～１０％、２．８～１０％、２．９～１０％、３～１０％、３．１～１０％、３．２～１０％、３．３～１０％、３．４～１０％、３．５～１０％、３．６～１０％、３．７～１０％、３．８～１０％、３．９～１０％、４～１０％、４．１～１０％、４．２～１０％、４．３～１０％、４．４～１０％、４．５～１０％、４．６～１０％、４．７～１０％、４．８～１０％、４．９～１０％、５～１０％、５．１～１０％、５．２～１０％、５．３～１０％、５．４～１０％、５．５～１０％、５．６～１０％、５．７～１０％、５．８～１０％、５．９～１０％、６～１０％、６．１～１０％、６．２～１０％、６．３～１０％、６．４～１０％、６．５～１０％、６．６～１０％、６．７～１０％、６．８～１０％、６．９～１０％、７～１０％、７．１～１０％、７．２～１０％、７．３～１０％、７．４～１０％、７．５～１０％、７．６～１０％、７．７～１０％、７．８～１０％、７．９～１０％、８～１０％、８．１～１０％、８．２～１０％、８．３～１０％、８．４～１０％、８．５～１０％、８．６～１０％、８．７～１０％、８．８～１０％、８．９～１０％、９～１０％、９．１～１０％、９．２～１０％、９．３～１０％、９．４～１０％、９．５～１０％、９．６～１０％、９．７～１０％、９．８～１０％、または９．９～１０％ｗ／ｖの範囲でソルビトールを含み得る。
～８％、６．５～８％、６．６～８％、６．７～８％、６．８～８％、６．９～８％、７～８％、７．１～８％、７．２～８％、７．３～８％、７．４～８％、７．５～８％、７．６～８％、７．７～８％、７．８～８％、７．９～８％、０～８．５％、０．１～８．５％、０．２～８．５％、０．３～８．５％、０．４～８．５％、０．５～８．５％、０．６～８．５％、０．７～８．５％、０．８～８．５％、０．９～８．５％、１～８．５％、１．１～８．５％、１．２～８．５％、１．３～８．５％、１．４～８．５％、１．５～８．５％、１．６～８．５％、１．７～８．５％、１．８～８．５％、１．９～８．５％、２～８．５％、２．１～８．５％、２．２～８．５％、２．３～８．５％、２．４～８．５％、２．５～８．５％、２．６～８．５％、２．７～８．５％、２．８～８．５％、２．９～８．５％、３～８．５％、３．１～８．５％、３．２～８．５％、３．３～８．５％、３．４～８．５％、３．５～８．５％、３．６～８．５％、３．７～８．５％、３．８～８．５％、３．９～８．５％、４～８．５％、４．１～８．５％、４．２～８．５％、４．３～８．５％、４．４～８．５％、４．５～８．５％、４．６～８．５％、４．７～８．５％、４．８～８．５％、４．９～８．５％、５～８．５％、５．１～８．５％、５．２～８．５％、５．３～８．５％、５．４～８．５％、５．５～８．５％、５．６～８．５％、５．７～８．５％、５．８～８．５％、５．９～８．５％、６～８．５％、６．１～８．５％、６．２～８．５％、６．３～８．５％、６．４～８．５％、６．５～８．５％、６．６～８．５％、６．７～８．５％、６．８～８．５％、６．９～８．５％、７～８．５％、７．１～８．５％、７．２～８．５％、７．３～８．５％、７．４～８．５％、７．５～８．５％、７．６～８．５％、７．７～８．５％、７．８～８．５％、７．９～８．５％、８～８．５％、８．１～８．５％、８．２～８．５％、８．３～８．５％、８．４～８．５％、０～９％、０．１～９％、０．２～９％、０．３～９％、０．４～９％、０．５～９％、０．６～９％、０．７～９％、０．８～９％、０．９～９％、１～９％、１．１～９％、１．２～９％、１．３～９％、１．４～９％、１．５～９％、１．６～９％、１．７～９％、１．８～９％、１．９～９％、２～９％、２．１～９％、２．２～９％、２．３～９％、２．４～９％、２．５～９％、２．６～９％、２．７～９％、２．８～９％、２．９～９％、３～９％、３．１～９％、３．２～９％、３．３～９％、３．４～９％、３．５～９％、３．６～９％、３．７～９％、３．８～９％、３．９～９％、４～９％、４．１～９％、４．２～９％、４．３～９％、４．４～９％、４．５～９％、４．６～９％、４．７～９％、４．８～９％、４．９～９％、５～９％、５．１～９％、５．２～９％、５．３～９％、５．４～９％、５．５～９％、５．６～９％、５．７～９％、５．８～９％、５．９～９％、６～９％、６．１～９％、６．２～９％、６．３～９％、６．４～９％、６．５～９％、６．６～９％、６．７～９％、６．８～９％、６．９～９％、７～９％、７．１～９％、７．２～９％、７．３～９％、７．４～９％、７．５～９％、７．６～９％、７．７～９％、７．８～９％、７．９～９％、８～９％、８．１～９％、８．２～９％、８．３～９％、８．４～９％、８．５～９％、８．６～９％、８．７～９％、８．８～９％、８．９～９％、０～９．５％、０．１～９．５％、０．２～９．５％、０．３～９．５％、０．４～９．５％、０．５～９．５％、０．６～９．５％、０．７～９．５％、０．８～９．５％、０．９～９．５％、１～９．５％、１．１～９．５％、１．２～９．５％、１．３～９．５％、１．４～９．５％、１．５～９．５％、１．６～９．５％、１．７～９．５％、１．８～９．５％、１．９～９．５％、２～９．５％、２．１～９．５％、２．２～９．５％、２．３～９．５％、２．４～９．５％、２．５～９．５％、２．６～９．５％、２．７～９．５％、２．８～９．５％、２．９～９．５％、３～９．５％、３．１～９．５％、３．２～９．５％、３．３～９．５％、３．４～９．５％、３．５～９．５％、３．６～９．５％、３．７～９．５％、３．８～９．５％、３．９～９．５％、４～９．５％、４．１～９．５％、４．２～９．５％、４．３～９．５％、４．４～９．５％、４．５～９．５％、４．６～９．５％、４．７～９．５％、４．８～９．５％、４．９～９．５％、５～９．５％、５．１～９．５％、５．２～９．５％、５．３～９．５％、５．４～９．５％、５．５～９．５％、５．６～９．５％、５．７～９．５％、５．８～９．５％、５．９～９．５％、６～９．５％、６．１～９．５％、６．２～９．５％、６．３～９．５％、６．４～９．５％、６．５～９．５％、６．６～９．５％、６．７～９．５％、６．８～９．５％、６．９～９．５％、７～９．５％、７．１～９．５％、７．２～９．５％、７．３～９．５％、７．４～９．５％、７．５～９．５％、７．６～９．５％、７．７～９．５％、７．８～９．５％、７．９～９．５％、８～９．５％、８．１～９．５％、８．２～９．５％、８．３～９．５％、８．４～９．５％、８．５～９．５％、８．６～９．５％、８．７～９．５％、８．８～９．５％、８．９～９．５％、９～９．５％、９．１～９．５％、９．２～９．５％、９．３～９．５％、９．４～９．５％、０～１０％、０．１～１０％、０．２～１０％、０．３～１０％、０．４～１０％、０．５～１０％、０．６～１０％、０．７～１０％、０．８～１０％、０．９～１０％、１～１０％、１．１～１０％、１．２～１０％、１．３～１０％、１．４～１０％、１．５～１０％、１．６～１０％、１．７～１０％、１．８～１０％、１．９～１０％、２～１０％、２．１～１０％、２．２～１０％、２．３～１０％、２．４～１０％、２．５～１０％、２．６～１０％、２．７～１０％、２．８～１０％、２．９～１０％、３～１０％、３．１～１０％、３．２～１０％、３．３～１０％、３．４～１０％、３．５～１０％、３．６～１０％、３．７～１０％、３．８～１０％、３．９～１０％、４～１０％、４．１～１０％、４．２～１０％、４．３～１０％、４．４～１０％、４．５～１０％、４．６～１０％、４．７～１０％、４．８～１０％、４．９～１０％、５～１０％、５．１～１０％、５．２～１０％、５．３～１０％、５．４～１０％、５．５～１０％、５．６～１０％、５．７～１０％、５．８～１０％、５．９～１０％、６～１０％、６．１～１０％、６．２～１０％、６．３～１０％、６．４～１０％、６．５～１０％、６．６～１０％、６．７～１０％、６．８～１０％、６．９～１０％、７～１０％、７．１～１０％、７．２～１０％、７．３～１０％、７．４～１０％、７．５～１０％、７．６～１０％、７．７～１０％、７．８～１０％、７．９～１０％、８～１０％、８．１～１０％、８．２～１０％、８．３～１０％、８．４～１０％、８．５～１０％、８．６～１０％、８．７～１０％、８．８～１０％、８．９～１０％、９～１０％、９．１～１０％、９．２～１０％、９．３～１０％、９．４～１０％、９．５～１０％、９．６～１０％、９．７～１０％、９．８～１０％、または９．９～１０％ｗ／ｖの範囲でソルビトールを含み得る。
【0710】
所定の実施形態では、製剤は、０～１０％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～９％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～８％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～９％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～８％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
【0711】
所定の実施形態では、製剤は、０～７％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～６％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～５％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～６％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～５％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
【0712】
所定の実施形態では、製剤は、０～４％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～３％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～２％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～３％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、０～２％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
【0713】
所定の実施形態では、製剤は、０～１％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、２％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
【0714】
所定の実施形態では、製剤は、３％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、４％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、４％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、５％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
【0715】
所定の実施形態では、製剤は、６％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、７％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、８％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
【0716】
所定の実施形態では、製剤は、９％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
界面活性剤
所定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的組成物の製剤は、界面活性剤を含み得る。界面活性剤は、浮遊培養物における剪断力の制御を補助し得る。本明細書で使用される界面活性剤は、陰イオン性、双性イオン性、または非イオン性であり得、薬学的製剤において使用するのに好適である当該技術分野で知られているものを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、１０％ｗ／ｖのソルビトールを含み得る。
界面活性剤
所定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的組成物の製剤は、界面活性剤を含み得る。界面活性剤は、浮遊培養物における剪断力の制御を補助し得る。本明細書で使用される界面活性剤は、陰イオン性、双性イオン性、または非イオン性であり得、薬学的製剤において使用するのに好適である当該技術分野で知られているものを含み得る。
【0717】
陰イオン性界面活性剤の例は、限定されないが、スルフェート、スルホネート、ホスフェートエステル、及びカルボキシレートを含む。
非イオン性界面活性剤の例は、限定されないが、エトキシレート、脂肪アルコールエトキシレート、アルキルフェノールエトキシレート（例えば、ノノキシノール、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００）、脂肪酸エトキシレート、エトキシル化アミン及び／または脂肪酸アミド（例えば、ポリエトキシル化獣脂アミン、コカミドモノエタノールアミン、コカミドジエタノールアミン）、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマー（例えば、ポロキサマー、例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８またはＦ－１２７）、脂肪酸及び多価アルコールのエステル、脂肪酸アルカノールアミド、エトキシル化脂肪族酸、エトキシル化脂肪族アルコール、エトキシル化ソルビトール脂肪酸エステル、エトキシル化グリセリド、ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）を有するエトキシル化ブロックコポリマー、エトキシル化環状エーテルアダクト、エトキシル化アミド及びイミダゾリンアダクト、エトキシル化アミンアダクト、エトキシル化メルカプタンアダクト、アルキルフェノールを有するエトキシル化縮合物、エトキシル化窒素系疎水性物質、エトキシル化ポリオキシプロピレン、シリコーンポリマー、フッ素化界面活性剤、及び重合性界面活性剤を含む。
非イオン性界面活性剤の例は、限定されないが、エトキシレート、脂肪アルコールエトキシレート、アルキルフェノールエトキシレート（例えば、ノノキシノール、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００）、脂肪酸エトキシレート、エトキシル化アミン及び／または脂肪酸アミド（例えば、ポリエトキシル化獣脂アミン、コカミドモノエタノールアミン、コカミドジエタノールアミン）、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマー（例えば、ポロキサマー、例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８またはＦ－１２７）、脂肪酸及び多価アルコールのエステル、脂肪酸アルカノールアミド、エトキシル化脂肪族酸、エトキシル化脂肪族アルコール、エトキシル化ソルビトール脂肪酸エステル、エトキシル化グリセリド、ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）を有するエトキシル化ブロックコポリマー、エトキシル化環状エーテルアダクト、エトキシル化アミド及びイミダゾリンアダクト、エトキシル化アミンアダクト、エトキシル化メルカプタンアダクト、アルキルフェノールを有するエトキシル化縮合物、エトキシル化窒素系疎水性物質、エトキシル化ポリオキシプロピレン、シリコーンポリマー、フッ素化界面活性剤、及び重合性界面活性剤を含む。
【0718】
双性イオン性界面活性剤の例は、限定されないが、アルキルアミドベタイン及びそのアミンオキシド、アルキルベタイン及びそのアミンオキシド、スルホベタイン、ヒドロキシスルホベタイン、アンフォグリシネート、アンフォプロピオネート、バランス型アンフォポリカルボキシグリシネート、及びアルキルポリアミノグリシネートを含む。タンパク質は、ｐＨに応じて帯電するまたは帯電しない能力を有し、よって、適切なｐＨでは、好ましくは約８～９のｐＩを有するタンパク質、例えば、改変ウシ血清アルブミンまたはキモトリプシノーゲンは、双性イオン性界面活性剤として機能し得る。界面活性剤の様々な混合物が所望の場合に使用され得る。
【0719】
コポリマー
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、コポリマーである。
所定の実施形態では、製剤は、少なくとも１つのコポリマーを０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１％ｗ／ｖの濃度で含み得る。
所定の実施形態では、製剤における成分の少なくとも１つは、コポリマーである。
所定の実施形態では、製剤は、少なくとも１つのコポリマーを０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１％ｗ／ｖの濃度で含み得る。
【0720】
所定の実施形態では、製剤は、０．００００１％～０．０００１％、０．００００１％～０．００１％、０．００００１％～０．０１％、０．００００１％～０．１％、０．００００１％～１％、０．０００１％～０．００１％、０．０００１％～０．０１％、０．０００１％～０．１％、０．０００１％～１％、０．００１％～０．０１％、０．００１％～０．１％、０．００１％～１％、０．０１％～０．１％、０．０１％～１％、または０．１～１％ｗ／ｖの範囲の少なくとも１つのコポリマーを含み得る。
【0721】
所定の実施形態では、製剤は、０．００１％ｗ／ｖのコポリマーを含み得る。
所定の実施形態では、コポリマーは、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーである。
所定の実施形態では、コポリマーは、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーである。
【0722】
所定の実施形態では、製剤は、少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１％ｗ／ｖの濃度で含み得る。
【0723】
所定の実施形態では、製剤は、０．００００１％～０．０００１％、０．００００１％～０．００１％、０．００００１％～０．０１％、０．００００１％～０．１％、０．００００１％～１％、０．０００１％～０．００１％、０．０００１％～０．０１％、０．０００１％～０．１％、０．０００１％～１％、０．００１％～０．０１％、０．００１％～０．１％、０．００１％～１％、０．０１％～０．１％、０．０１％～１％、または０．１～１％ｗ／ｖの範囲の少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含み得る。
【0724】
所定の実施形態では、製剤は、０．００１％ｗ／ｖのエチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、ポロキサマー（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）である少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンコポリマーを含み得る。所定の実施形態では、製剤は、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒを０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１％ｗ／ｖの濃度で含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、ポロキサマー（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）である少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンコポリマーを含み得る。所定の実施形態では、製剤は、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒを０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１％ｗ／ｖの濃度で含み得る。
【0725】
所定の実施形態では、製剤は、０．００００１％～０．０００１％、０．００００１％～０．００１％、０．００００１％～０．０１％、０．００００１％～０．１％、０．００００１％～１％、０．０００１％～０．００１％、０．０００１％～０．０１％、０．０００１％～０．１％、０．０００１％～１％、０．００１％～０．０１％、０．００１％～０．１％、０．００１％～１％、０．０１％～０．１％、０．０１％～１％、または０．１～１％ｗ／ｖの範囲のＰｏｌｏｘａｍｅｒを含み得る。
【0726】
所定の実施形態では、製剤は、０．００１％ｗ／ｖのＰｏｌｏｘａｍｅｒを含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８である少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンコポリマーを含み得る。所定の実施形態では、製剤は、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１％ｗ／ｖの濃度で含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８である少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンコポリマーを含み得る。所定の実施形態では、製剤は、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１％ｗ／ｖの濃度で含み得る。
【0727】
所定の実施形態では、製剤は、０．００００１％～０．０００１％、０．００００１％～０．００１％、０．００００１％～０．０１％、０．００００１％～０．１％、０．００００１％～１％、０．０００１％～０．００１％、０．０００１％～０．０１％、０．０００１％～０．１％、０．０００１％～１％、０．００１％～０．０１％、０．００１％～０．１％、０．００１％～１％、０．０１％～０．１％、０．０１％～１％、または０．１～１％ｗ／ｖの範囲のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含み得る。
【0728】
所定の実施形態では、製剤は、０．００１％～０．１ｗ／ｖのＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８である少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンコポリマーを含み得る。所定の実施形態では、製剤は、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８を０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１％ｗ／ｖの濃度で含み得る。
所定の実施形態では、製剤は、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８である少なくとも１つのエチレンオキシド／プロピレンコポリマーを含み得る。所定の実施形態では、製剤は、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８を０．００００１％、０．０００１％、０．００１％、０．０１％、０．１％、または１％ｗ／ｖの濃度で含み得る。
【0729】
所定の実施形態では、製剤は、０．００００１％～０．０００１％、０．００００１％～０．００１％、０．００００１％～０．０１％、０．００００１％～０．１％、０．００００１％～１％、０．０００１％～０．００１％、０．０００１％～０．０１％、０．０００１％～０．１％、０．０００１％～１％、０．００１％～０．０１％、０．００１％～０．１％、０．００１％～１％、０．０１％～０．１％、０．０１％～１％、または０．１～１％ｗ／ｖの範囲のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８を含み得る。
【0730】
所定の実施形態では、製剤は、０．００１％～０．１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８を含み得る。
【0731】
製剤特性
所定の実施形態では、製剤は、特定のｐＨ、オスモル濃度、濃度、ＡＡＶ粒子の濃度、及び／またはＡＡＶ粒子の総用量を有するように最適化されている。
所定の実施形態では、製剤は、特定のｐＨ、オスモル濃度、濃度、ＡＡＶ粒子の濃度、及び／またはＡＡＶ粒子の総用量を有するように最適化されている。
【0732】
ｐＨ
所定の実施形態では、製剤は、特定のｐＨのために最適化され得る。所定の実施形態では、製剤は、弱酸または弱塩基であるｐＨ緩衝剤（本明細書では「緩衝剤」とも称される）であって、製剤において使用される場合、別の酸または塩基が製剤に添加された後であっても選択された値に近い製剤のｐＨを維持するものを含み得る。製剤のｐＨは、限定されないが、０、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、９、９．１、９．２、９．３、９．４、９．５、９．６、９．７、９．８、９．９、１０、１０．１、１０．２、１０．３、１０．４、１０．５、１０．６、１０．７、１０．８、１０．９、１１、１１．１、１１．２、１１．３、１１．４、１１．５、１１．６、１１．７、１１．８、１１．９、１２、１２．１、１２．２、１２．３、１２．４、１２．５、１２．６、１２．７、１２．８、１２．９、１３、１３．１、１３．２、１３．３、１３．４、１３．５、１３．６、１３．７、１３．８、１３．９、及び１４であり得る。
所定の実施形態では、製剤は、特定のｐＨのために最適化され得る。所定の実施形態では、製剤は、弱酸または弱塩基であるｐＨ緩衝剤（本明細書では「緩衝剤」とも称される）であって、製剤において使用される場合、別の酸または塩基が製剤に添加された後であっても選択された値に近い製剤のｐＨを維持するものを含み得る。製剤のｐＨは、限定されないが、０、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、９、９．１、９．２、９．３、９．４、９．５、９．６、９．７、９．８、９．９、１０、１０．１、１０．２、１０．３、１０．４、１０．５、１０．６、１０．７、１０．８、１０．９、１１、１１．１、１１．２、１１．３、１１．４、１１．５、１１．６、１１．７、１１．８、１１．９、１２、１２．１、１２．２、１２．３、１２．４、１２．５、１２．６、１２．７、１２．８、１２．９、１３、１３．１、１３．２、１３．３、１３．４、１３．５、１３．６、１３．７、１３．８、１３．９、及び１４であり得る。
【0733】
所定の実施形態では、製剤は、特定のｐＨ範囲のために最適化され得る。ｐＨ範囲は、限定されないが、０～４、１～５、２～６、３～７、４～８、５～９、６～１０、７～１１、８～１２、９～１３、１０～１４、０～１．５、１～２．５、２～３．５、３～４．５、４～５．５、５～６．５、６～７．５、７～８．５、８～９．５、９～１０．５、１０～１１．５、１１～１２．５、１２～１３．５、０～１、１～２、２～３、３～４、４～５、５～６、６～７、７～８、８～９、９～１０、１０～１１、１１～１２、１２～１３、１３～１４、０～０．５、０．５～１、１～１．５、１．５～２、２～２．５、２．５～３、３～３．５、３．５～４、４～４．５、４．５～５、５～５．５、５．５～６、６～６．５、６．５～７、７～７．５、７．２～８．２、７．２～７．６、７．３～７．７、７．５～８、７．８～８．２、８～８．５、８．５～９、９～９．５、９．５～１０、１０～１０．５、１０．５～１１、１１～１１．５、１１．５～１２、１２～１２．５、１２．５～１３、１３～１３．５、または１３．５～１４であり得る。
【0734】
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、６～８．５の間である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７～８．５の間である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７～７．６の間である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７～８．５の間である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７～７．６の間である。
【0735】
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．１である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．２である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．１である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．２である。
【0736】
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．３である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．４である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．５である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．４である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．５である。
【0737】
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．６である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．７である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．８である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．７である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．８である。
【0738】
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、７．９である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、８である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．１である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、８である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．１である。
【0739】
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．２である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．３である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．４である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．３である。
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．４である。
【0740】
所定の実施形態では、製剤のｐＨは、８．５である。
所定の実施形態では、ｐＨは、製剤が５℃である場合に決定される。
所定の実施形態では、ｐＨは、製剤が２５℃である場合に決定される。
所定の実施形態では、ｐＨは、製剤が５℃である場合に決定される。
所定の実施形態では、ｐＨは、製剤が２５℃である場合に決定される。
【0741】
好適な緩衝剤は、限定されないが、トリスＨＣｌ、トリス塩基、リン酸ナトリウム（リン酸一ナトリウム及び／またはリン酸二ナトリウム）、リン酸カリウム（リン酸一カリウム及び／またはリン酸二カリウム）、ヒスチジン、ホウ酸、クエン酸、グリシン、ＨＥＰＥＳ（４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸）、及びＭＯＰＳ（３－（Ｎ－モルホリノ）プロパンスルホン酸）を含み得る。
【0742】
製剤における緩衝剤の濃度は、１～５０ｍＭの間、１～２５ｍＭの間、５～３０ｍＭの間、５～２０ｍＭの間、５～１５ｍＭの間、１０～４０ｍＭの間、または１５～３０ｍＭの間であり得る。製剤における緩衝剤の濃度は、約１ｍＭ、５ｍＭ、７．５ｍＭ、１０ｍＭ、１２．５ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭ、３５ｍＭ、４０ｍＭ、または５０ｍＭであり得る。
【0743】
所定の実施形態では、製剤は、限定されないが、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含み得る。非限定的な例として、ＰＢＳは、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二ナトリウム、リン酸一カリウム、及び蒸留水を含み得る。いくつかの例では、ＰＢＳは、カリウムまたはマグネシウムを含有しない。他の例では、ＰＢＳは、カルシウム及びマグネシウムを含有する。
【0744】
所定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的組成物の製剤において使用される緩衝剤は、リン酸ナトリウム（リン酸一ナトリウム及び／またはリン酸二ナトリウム）を含み得る。非限定的な例として、リン酸ナトリウムは、７．４±０．２の範囲内のｐＨ（５℃で）に調整され得る。所定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的組成物の製剤において使用される緩衝剤は、トリス塩基を含み得る。トリス塩基は、７．１～９．１の範囲内の任意のｐＨに塩酸で調整され得る。非限定的な例として、本明細書に記載の製剤において使用されるトリス塩基は、８．０±０．２に調整され得る。非限定的な例として、本明細書に記載の製剤において使用されるトリス塩基は、７．５±０．２に調整され得る。
【0745】
オスモル濃度
所定の実施形態では、製剤は、特定のオスモル濃度のために最適化され得る。製剤のオスモル濃度は、限定されないが、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、または５００ｍＯｓｍ／ｋｇ（ミリオスモル／ｋｇ）であり得る。
所定の実施形態では、製剤は、特定のオスモル濃度のために最適化され得る。製剤のオスモル濃度は、限定されないが、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、または５００ｍＯｓｍ／ｋｇ（ミリオスモル／ｋｇ）であり得る。
【0746】
所定の実施形態では、製剤は、特定のオスモル濃度の範囲のために最適化され得る。範囲は、限定されないが、３５０～３６０、３６０～３７０、３７０～３８０、３８０～３９０、３９０～４００、４００～４１０、４１０～４２０、４２０～４３０、４３０～４４０、４４０～４５０、４５０～４６０、４６０～４７０、４７０～４８０、４８０～４９０、４９０～５００、３５０～３７０、３６０～３８０、３７０～３９０、３８０～４００、３９０～４１０、４００～４２０、４１０～４３０、４２０～４４０、４３０～４５０、４４０～４６０、４５０～４７０、４６０～４８０、４７０～４９０、４８０～５００、３５０～３７５、３７５～４００、４００～４２５、４２５～４５０、４５０～４７５、４７５～５００、３５０～３８０、３６０～３９０、３７０～４００、３８０～４１０、３９０～４２０、４００～４３０、４１０～４４０、４２０～４５０、４３０～４６０、４４０～４７０、４５０～４８０、４６０～４９０、４７０～５００、３５０～３９０、３６０～４００、３７０～４１０、３８０～４２０、３９０～４３０、４００～４４０、４１０～４５０、４２０～４６０、４３０～４７０、４４０～４８０、４５０～４９０、４６０～５００、３５０～４００、３６０～４１０、３７０～４２０、３８０～４３０、３９０～４４０、４００～４５０、４１０～４６０、４２０～４７０、４３０～４８０、４４０～４９０、４５０～５００、３５０～４１０、３６０～４２０、３７０～４３０、３８０～４４０、３９０～４５０、４００～４６０、４１０～４７０、４２０～４８０、４３０～４９０、４４０～５００、３５０～４２０、３６０～４３０、３７０～４４０、３８０～４５０、３９０～４６０、４００～４７０、４１０～４８０、４２０～４９０、４３０～５００、３５０～４３０、３６０～４４０、３７０～４５０、３８０～４６０、３９０～４７０、４００～４８０、４１０～４９０、４２０～５００、３５０～４４０、３６０～４５０、３７０～４６０、３８０～４７０、３９０～４８０、４００～４９０、４１０～５００、３５０～４５０、３６０～４６０、３７０～４７０、３８０～４８０、３９０～４９０、４００～５００、３５０～４６０、３６０～４７０、３７０～４８０、３８０～４９０、３９０～５００、３５０～４７０、３６０～４８０、３７０～４９０、３８０～５００、３５０～４８０、３６０～４９０、３７０～５００、３５０～４９０、３６０～５００、または３５０～５００ｍＯｓｍ／ｋｇであり得る。
【0747】
所定の実施形態では、製剤のオスモル濃度は、３５０～５００ｍＯｓｍ／ｋｇの間である。
所定の実施形態では、製剤のオスモル濃度は、４００～５００ｍＯｓｍ／ｋｇの間である。
所定の実施形態では、製剤のオスモル濃度は、４００～５００ｍＯｓｍ／ｋｇの間である。
【0748】
所定の実施形態では、製剤のオスモル濃度は、４００～４８０ｍＯｓｍ／ｋｇの間である。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、３９５ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、３９５ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【0749】
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４１３ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４２０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４３２ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４２０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４３２ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【0750】
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４４７ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４５０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４５２ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４５０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４５２ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【0751】
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４５９ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４７２ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４９０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４７２ｍＯｓｍ／ｋｇである。
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４９０ｍＯｓｍ／ｋｇである。
【0752】
所定の実施形態では、オスモル濃度は、４９６ｍＯｓｍ／ｋｇである。
ＡＡＶ粒子の濃度
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、約１×１０６ＶＧ／ｍｌ～約１×１０１６ＶＧ／ｍｌの間であり得る。本明細書で使用される場合、「ＶＧ／ｍｌ」は、ミリリットル（ｍｌ）当たりのベクターゲノム（ＶＧ）を表す。ＶＧ／ｍｌはまた、１ミリリットル当たりのゲノムコピーまたは１ミリリットル当たりのＤＮａｓｅ耐性粒子を表し得る。
ＡＡＶ粒子の濃度
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、約１×１０６ＶＧ／ｍｌ～約１×１０１６ＶＧ／ｍｌの間であり得る。本明細書で使用される場合、「ＶＧ／ｍｌ」は、ミリリットル（ｍｌ）当たりのベクターゲノム（ＶＧ）を表す。ＶＧ／ｍｌはまた、１ミリリットル当たりのゲノムコピーまたは１ミリリットル当たりのＤＮａｓｅ耐性粒子を表し得る。
【0753】
所定の実施形態では、製剤は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、２．１×１０１１、２．２×１０１１、２．３×１０１１、２．４×１０１１、２．５×１０１１、２．６×１０１１、２．７×１０１１、２．８×１０１１、２．９×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、７．１×１０１１、７．２×１０１１、７．３×１０１１、７．４×１０１１、７．５×１０１１、７．６×１０１１、７．７×１０１１、７．８×１０１１、７．９×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、７．１×１０１２、７．２×１０１２、７．３×１０１２、７．４×１０１２、７．５×１０１２、７．６×１０１２、７．７×１０１２、７．８×１０１２、７．９×１０１２、８×１０１２、８．１×１０１２、８．２×１０１２、８．３×１０１２、８．４×１０１２、８．５×１０１２、８．６×１０１２、８．７×１０１２、８．８×１０１２、８．９×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、１．１×１０１３、１．２×１０１３、１．３×１０１３、１．４×１０１３、１．５×１０１３、１．６×１０１３、１．７×１０１３、１．８×１０１３、１．９×１０１３、２×１０１３、２．１×１０１３、２．２×１０１３、２．３×１０１３、２．４×１０１３、２．５×１０１３、２．６×１０１３、２．７×１０１３、２．８×１０１３、２．９×１０１３、３×１０１３、３．１×１０１３、３．２×１０１３、３．３×１０１３、３．４×１０１３、３．５×１０１３、３．６×１０１３、３．７×１０１３、３．８×１０１３、３．９×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｍｌのＡＡＶ粒子濃度を含み得る。
【0754】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、１×１０１１～５×１０１３の間、１×１０１２～５×１０１２の間、２×１０１２～１×１０１３の間、５×１０１２～１×１０１３の間、１×１０１３～２×１０１３の間、２×１０１３～３×１０１３の間、２×１０１３～２．５×１０１３の間、２．５×１０１３～３×１０１３の間、または５×１０１３ＶＧ／ｍｌ以下である。
【0755】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１１ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、９×１０１１ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、９×１０１１ＶＧ／ｍｌである。
【0756】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、１．２×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
【0757】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、４×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、６×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、６×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
【0758】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、７．９×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、８×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、８×１０１２ＶＧ／ｍｌである。
【0759】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、１×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、１．８×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、１．８×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
【0760】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、２．２×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、２．７×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
【0761】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、３．５×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、２．７～３．５×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、２．７～３．５×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
【0762】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、７．０×１０１３ＶＧ／ｍｌである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬである。
【0763】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の濃度は、約１×１０６総カプシド／ｍＬ～約１×１０１６総カプシド／ｍｌの間であり得る。所定の実施形態では、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、３．１×１０１２、３．２×１０１２、３．３×１０１２、３．４×１０１２、３．５×１０１２、３．６×１０１２、３．７×１０１２、３．８×１０１２、３．９×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、２．１×１０１３、２．２×１０１３、２．３×１０１３、２．４×１０１３、２．５×１０１３、２．６×１０１３、２．７×１０１３、２．８×１０１３、２．９×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６総カプシド／ｍｌの組成物濃度を含み得る。
【0764】
ＡＡＶ粒子の総用量
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、約１×１０６ＶＧ～約１×１０１６ＶＧの間であり得る。所定の実施形態では、製剤は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、２．１×１０１１、２．２×１０１１、２．３×１０１１、２．４×１０１１、２．５×１０１１、２．６×１０１１、２．７×１０１１、２．８×１０１１、２．９×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、７．１×１０１１、７．２×１０１１、７．３×１０１１、７．４×１０１１、７．５×１０１１、７．６×１０１１、７．７×１０１１、７．８×１０１１、７．９×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、７．１×１０１２、７．２×１０１２、７．３×１０１２、７．４×１０１２、７．５×１０１２、７．６×１０１２、７．７×１０１２、７．８×１０１２、７．９×１０１２、８×１０１２、８．１×１０１２、８．２×１０１２、８．３×１０１２、８．４×１０１２、８．５×１０１２、８．６×１０１２、８．７×１０１２、８．８×１０１２、８．９×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、１．１×１０１３、１．２×１０１３、１．３×１０１３、１．４×１０１３、１．５×１０１３、１．６×１０１３、１．７×１０１３、１．８×１０１３、１．９×１０１３、２×１０１３、２．１×１０１３、２．２×１０１３、２．３×１０１３、２．４×１０１３、２．５×１０１３、２．６×１０１３、２．７×１０１３、２．８×１０１３、２．９×１０１３、３×１０１３、３．１×１０１３、３．２×１０１３、３．３×１０１３、３．４×１０１３、３．５×１０１３、３．６×１０１３、３．７×１０１３、３．８×１０１３、３．９×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧのＡＡＶ粒子の総用量を含み得る。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、約１×１０６ＶＧ～約１×１０１６ＶＧの間であり得る。所定の実施形態では、製剤は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、２．１×１０１１、２．２×１０１１、２．３×１０１１、２．４×１０１１、２．５×１０１１、２．６×１０１１、２．７×１０１１、２．８×１０１１、２．９×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、７．１×１０１１、７．２×１０１１、７．３×１０１１、７．４×１０１１、７．５×１０１１、７．６×１０１１、７．７×１０１１、７．８×１０１１、７．９×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、７．１×１０１２、７．２×１０１２、７．３×１０１２、７．４×１０１２、７．５×１０１２、７．６×１０１２、７．７×１０１２、７．８×１０１２、７．９×１０１２、８×１０１２、８．１×１０１２、８．２×１０１２、８．３×１０１２、８．４×１０１２、８．５×１０１２、８．６×１０１２、８．７×１０１２、８．８×１０１２、８．９×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、１．１×１０１３、１．２×１０１３、１．３×１０１３、１．４×１０１３、１．５×１０１３、１．６×１０１３、１．７×１０１３、１．８×１０１３、１．９×１０１３、２×１０１３、２．１×１０１３、２．２×１０１３、２．３×１０１３、２．４×１０１３、２．５×１０１３、２．６×１０１３、２．７×１０１３、２．８×１０１３、２．９×１０１３、３×１０１３、３．１×１０１３、３．２×１０１３、３．３×１０１３、３．４×１０１３、３．５×１０１３、３．６×１０１３、３．７×１０１３、３．８×１０１３、３．９×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧのＡＡＶ粒子の総用量を含み得る。
【0765】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、１×１０１１～５×１０１３ＶＧの間であり得る。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、１×１０１１～２×１０１４ＶＧの間であり得る。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、１×１０１１～２×１０１４ＶＧの間であり得る。
【0766】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、１．４×１０１１ＶＧである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、４．５×１０１１ＶＧである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、４．５×１０１１ＶＧである。
【0767】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、６．８×１０１１ＶＧである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、１．４×１０１２ＶＧである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、１．４×１０１２ＶＧである。
【0768】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、２．２×１０１２ＶＧである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、４．６×１０１１ＶＧである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、４．６×１０１１ＶＧである。
【0769】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、９．２×１０１２ＶＧである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、１．０×１０１３ＶＧである。
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、１．０×１０１３ＶＧである。
【0770】
所定の実施形態では、製剤におけるＡＡＶ粒子の総用量は、２．３×１０１３ＶＧである。
例示的な製剤
本開示の例示的で非限定的な製剤を以下に記載する。製剤は、ＡＡＶ粒子製剤を含み得る。表７は、本開示の所定の例示的な製剤の成分及び特性の概要を提供する。各製剤は任意に、０．００１％～０．１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（登録商標））を含み得る。
例示的な製剤
本開示の例示的で非限定的な製剤を以下に記載する。製剤は、ＡＡＶ粒子製剤を含み得る。表７は、本開示の所定の例示的な製剤の成分及び特性の概要を提供する。各製剤は任意に、０．００１％～０．１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（登録商標））を含み得る。
【0771】
【表7-1】
【0772】
【表7-2】
【0773】
所定の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、スクロース、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１．５ｍＭのリン酸カリウム、１００ｍＭの塩化ナトリウム、５％ｗ／ｖのスクロース、及び任意にＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ７．５の緩衝液）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１．５ｍＭのリン酸カリウム、２２０ｍＭの塩化ナトリウム、５％ｗ／ｖのスクロース、及び任意にＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ７．５の緩衝液）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１．５ｍＭのリン酸カリウム、１００ｍＭの塩化ナトリウム、７％ｗ／ｖのスクロース、及び任意にＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ７．５の緩衝液）を含み得る。
【0774】
所定の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、スクロースまたはトレハロース、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0775】
所定の実施形態では、製剤は、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、ヒスチジン、糖、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えばＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0776】
所定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、スクロース、トリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0777】
所定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、スクロース、トリス、塩酸、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0778】
所定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、スクロース、トリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0779】
所定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、スクロース、トリス、塩化マグネシウム、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0780】
所定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、スクロース、トリス、アルギニン及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0781】
所定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、ソルビトール、トリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0782】
所定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、スクロース、ヒスチジン及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0783】
所定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、スクロース、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、１０５ｍＭの塩化ナトリウム、５％（ｗ／ｖ）のスクロース、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、９５ｍＭの塩化ナトリウム、５％（ｗ／ｖ）のスクロース、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、２２０ｍＭの塩化ナトリウム、５％（ｗ／ｖ）のスクロース、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含み得る。
【0784】
所定の実施形態では、製剤は、リン酸カリウム、スクロース、トリス及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0785】
所定の実施形態では、製剤は、塩化カリウム、スクロース、トリス及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えばＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。
【0786】
所定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、トリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えばＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、１００ｍＭの塩化ナトリウム、２０ｍＭのトリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ８．０の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、２２０ｍＭの塩化ナトリウム、２０ｍＭのトリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ７．０～８．０の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、２９０ｍＭの塩化ナトリウム、２０ｍＭのトリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ８．０の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、３０５ｍＭの塩化ナトリウム、２０ｍＭのトリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ８．０の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、２Ｍの塩化ナトリウム、２０ｍＭのトリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ８．０の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、１７０ｍＭの塩化ナトリウム、４０ｍＭのトリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ８．５の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、２Ｍの塩化ナトリウム、１Ｍのトリス、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ７．５の混合物）を含み得る。
【0787】
所定の実施形態では、製剤は、塩化ナトリウム、トリス－ビスプロパン、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えばＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、２００ｍＭの塩化ナトリウム、５０ｍＭのトリス－ビスプロパン、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ９．０の混合物）を含み得る。
【0788】
所定の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、塩化ナトリウム及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１８０ｍＭの塩化ナトリウム及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ７．３の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１８０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ７．３の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ７．４の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、５０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ７．４の混合物）を含み得る。
【0789】
所定の実施形態では、製剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化カリウム、塩化ナトリウム、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、２ｍＭのリン酸カリウム、２．７ｍＭの塩化カリウム、１９２ｍＭの塩化ナトリウム、及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ７．５の混合物）を含み得る。
【0790】
所定の実施形態では、製剤は、クエン酸ナトリウム、塩化ナトリウム及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、１Ｍの塩化ナトリウム及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ６．０の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、１０ｍＭのクエン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ６．０の混合物）を含み得る。所定の実施形態では、製剤は、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び任意にコポリマー、例えば、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（ｐＨ３．０の混合物）を含み得る。
【0791】
所定の実施形態では、製剤は、ＰＢＳを含み得る。所定の実施形態では、製剤は、ＰＢＳ及び糖及び／または糖代用品を含み得る。製剤は、製剤の安定性を増加させるために３～５％（ｗ／ｖ）の糖及び／または糖代用品を含み得る。非限定的な例として、製剤は、ＰＢＳ及び３％（ｗ／ｖ）スクロースである（ＶＹＦＯＲＭ３０）。別の非限定的な例として、製剤は、ＰＢＳ及び５％（ｗ／ｖ）スクロースである（ＶＹＦＯＲＭ３１）。別の非限定的な例として、製剤は、ＰＢＳ及び７％（ｗ／ｖ）スクロースである。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマー（プルロニック（登録商標）またはポロキサマーとしても知られている）と組み合わせて、ＰＢＳ中で製剤化され得る。
【0792】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、３％（ｗ／ｖ）のスクロース及び０．００１％～０．１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を有するＰＢＳ中で製剤化され得る。
【0793】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、５％（ｗ／ｖ）のスクロース及び０．００１％～０．１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を有するＰＢＳ中で製剤化され得る。
【0794】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、約７．０のｐＨで０．００１％～０．１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を有するＰＢＳ中で製剤化され得る。
【0795】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、約７．３のｐＨで０．００１％～０．１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を有するＰＢＳ中で製剤化され得る。
【0796】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、約７．４のｐＨで０．００１％～０．１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を有するＰＢＳ中で製剤化され得る。
【0797】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム及びエチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーを含む溶液中で製剤化され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、９５ｍＭの塩化ナトリウム、５ｍＭの二塩基性リン酸ナトリウム、５ｍＭの一塩基性リン酸ナトリウム、１．５ｍＭのリン酸カリウム、７％ｗ／ｖのスクロース、及び．００１％のｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含む溶液中で製剤化され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、９５ｍＭの塩化ナトリウム、５ｍＭの二塩基性リン酸ナトリウム、５ｍＭの一塩基性リン酸ナトリウム、１．５ｍＭのリン酸カリウム、７％ｗ／ｖのスクロース、及び．００１％のｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）を含む溶液中で製剤化され得る。
【0798】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、約７．３のｐＨで約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約１０ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．００１％のｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含む溶液中で製剤化され得る。最終溶液における塩化ナトリウムの濃度は、１５０ｍＭ～２００ｍＭであり得る。非限定的な例として、最終溶液における塩化ナトリウムの濃度は、１５０ｍＭ、１６０ｍＭ、１７０ｍＭ、１８０ｍＭ、１９０ｍＭまたは２００ｍＭであり得る。最終溶液におけるリン酸ナトリウムの濃度は、１ｍＭ～５０ｍＭであり得る。非限定的な例として、最終溶液におけるリン酸ナトリウムの濃度は、１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭ、４０ｍＭ、または５０ｍＭであり得る。ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）の濃度は、０．０００１％～１％（ｗ／ｖ）であり得る。非限定的な例として、ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）の濃度は、０．０００１％、０．０００５％、０．００１％、０．００５％、０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、または１％（ｗ／ｖ）であり得る。最終溶液は、６．８～７．７のｐＨを有し得る。最終溶液のｐＨについての非限定的な例は、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、または７．７のｐＨを含む。
【0799】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、約７．４のｐＨで、約１．０５％（ｗ／ｖ）の塩化ナトリウム、約０．２１２％（ｗ／ｖ）の二塩基性リン酸ナトリウム七水和物、約０．０２５％（ｗ／ｖ）の一塩基性リン酸ナトリウム一水和物、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含む溶液中で製剤化され得る。非限定的な例として、この製剤化溶液におけるＡＡＶ粒子の濃度は、約０．００１％（ｗ／ｖ）であり得る。最終溶液における塩化ナトリウムの濃度は、０．１～２．０％（ｗ／ｖ）であり得、非限定的な例は、０．１％、０．２５％、０．５％、０．７５％、０．９５％、０．９６％、０．９７％、０．９８％、０．９９％、１．００％、１．０１％、１．０２％、１．０３％、１．０４％、１．０５％、１．０６％、１．０７％、１．０８％、１．０９％、１．１０％、１．２５％、１．５％、１．７５％、または２％（ｗ／ｖ）である。最終溶液における二塩基性リン酸ナトリウムの濃度は、０．１００～０．３００％（ｗ／ｖ）であり得、非限定的な例は、０．１００％、０．１２５％、０．１５０％、０．１７５％、０．２００％、０．２１０％、０．２１１％、０．２１２％、０．２１３％、０．２１４％、０．２１５％、０．２２５％、０．２５０％、０．２７５％、０．３００％（ｗ／ｖ）を含む。最終溶液における一塩基性リン酸ナトリウムの濃度は、０．０１０～０．０５０％（ｗ／ｖ）であり得、非限定的な例は、０．０１０％、０．０１５％、０．０２０％、０．０２１％、０．０２２％、０．０２３％、０．０２４％、０．０２５％、０．０２６％、０．０２７％、０．０２８％、０．０２９％、０．０３０％、０．０３５％、０．０４０％、０．０４５％、または０．０５０％（ｗ／ｖ）である。ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８）の濃度は、０．０００１％～１％（ｗ／ｖ）であり得る。非限定的な例として、ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８））の濃度は、０．０００１％、０．０００５％、０．００１％、０．００５％、０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、または１％（ｗ／ｖ）であり得る。最終溶液は、６．８～７．７のｐＨを有し得る。最終溶液のｐＨについての非限定的な例は、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、または７．７のｐＨを含む。
【0800】
所定の実施形態では、製剤は、以下のＣＡＳ（Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ）登録番号、７６４７－１４－１５（塩化ナトリウム）、７７８２－８５－６（二塩基性リン酸ナトリウム七水和物）、１００４９－２１－５（一塩基性リン酸ナトリウム一水和物）、及び９００３－１１－６（ｐｏｌｏｘａｍｅｒ １８８）を有する成分を含む。
【0801】
注射用製剤
注射用調製物、例えば、滅菌注射用水性または油性懸濁液は、好適な分散剤、湿潤剤、及び／または懸濁剤を使用して既知の技術に従って製剤化され得る。滅菌注射用調製物は、非毒性の非経口で許容可能な希釈剤及び／または溶媒中の滅菌注射用溶液、懸濁液、及び／またはエマルション、例えば、１，３－ブタンジオール中の溶液であり得る。用いられ得る許容可能なビヒクル及び溶媒の一部は、水、リンゲル溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．、及び等張性塩化ナトリウム溶液である。滅菌固定油は、溶媒または懸濁媒体として従来から用いられている。この目的のため、合成モノまたはジグリセリドを含む任意の無菌固定油が用いられ得る。脂肪酸、例えば、オレイン酸は、注射剤の調製において使用され得る。
注射用調製物、例えば、滅菌注射用水性または油性懸濁液は、好適な分散剤、湿潤剤、及び／または懸濁剤を使用して既知の技術に従って製剤化され得る。滅菌注射用調製物は、非毒性の非経口で許容可能な希釈剤及び／または溶媒中の滅菌注射用溶液、懸濁液、及び／またはエマルション、例えば、１，３－ブタンジオール中の溶液であり得る。用いられ得る許容可能なビヒクル及び溶媒の一部は、水、リンゲル溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．、及び等張性塩化ナトリウム溶液である。滅菌固定油は、溶媒または懸濁媒体として従来から用いられている。この目的のため、合成モノまたはジグリセリドを含む任意の無菌固定油が用いられ得る。脂肪酸、例えば、オレイン酸は、注射剤の調製において使用され得る。
【0802】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターを介する濾過によって、及び／または使用前に滅菌水または他の滅菌注射用媒体に溶解または分散され得る滅菌固体組成物の形態の滅菌剤を組み込むことによって滅菌され得る。
【0803】
活性成分の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射剤からの活性成分の吸収を遅延させることがしばしば望ましい。これは、不十分な水溶解性を有する結晶性または非晶質性物質の液体懸濁液の使用によって達成され得る。活性成分の吸収の速度は、溶解の速度に依存し、これは今度は、結晶サイズ及び結晶形態に依存し得る。代替的には、非経口で投与される薬物形態の吸収の遅延は、油ビヒクルに薬物を溶解または懸濁させることによって達成され得る。注射用デポ形態は、生分解性ポリマー、例えば、ポリラクチド－ポリグリコリドにおいて薬物のマイクロカプセル化されたマトリックスを形成することによって作製される。薬物のポリマーに対する比及び用いられる特定のポリマーの特質に応じて、薬物放出の速度が制御され得る。他の生分解性ポリマーの例は、ポリ（オルトエステル）及びポリ（無水物）を含む。デポ注射用製剤は、身体組織と適合性のあるリポソームまたはマイクロエマルションに薬物を捕捉させることによって調製される。
【0804】
デポ製剤
本開示の所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、延長放出のためのデポ剤で製剤化される。通常、特定の器官または組織（「標的組織」）が投与のために標的とされる。
本開示の所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、延長放出のためのデポ剤で製剤化される。通常、特定の器官または組織（「標的組織」）が投与のために標的とされる。
【0805】
本開示の所定の実施形態では、本開示の薬学的組成物であるＡＡＶ粒子製剤は、標的組織の中でまたはそれに近接して空間的に保持される。薬学的組成物であるＡＡＶ粒子製剤を哺乳動物対象の標的組織に提供する方法であって、それらが標的組織において実質的に保持される（組成物の少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、９９．９、９９．９９または９９．９９％超が標的組織において保持されることを意味する）ような条件下で、標的組織（１つ以上の標的細胞を含む）を薬学的組成物であるＡＡＶ粒子製剤と接触させることによって提供する方法が提供される。有利には、保持は、１つ以上の標的細胞に侵入する薬学的組成物であるＡＡＶ粒子製剤の量を測定することによって決定される。例えば、対象に投与される薬学的組成物であるＡＡＶ粒子製剤の少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．９％、９９．９９％または９９．９９％超が、投与後の所定期間で細胞内に存在する。
【0806】
本開示の所定の態様は、本開示の薬学的組成物であるＡＡＶ粒子製剤を哺乳動物対象の標的組織に提供する方法であって、それらがそのような標的組織において実質的に保持されるような条件下で標的組織（１つ以上の標的細胞を含む）を薬学的組成物であるＡＡＶ粒子製剤と接触させることによって提供する方法を対象とする。薬学的組成物であるＡＡＶ粒子は、対象となる効果が少なくとも１つの標的細胞において生み出されるように十分に活性な成分を含む。
【0807】
ＩＶ．投与
投与
本開示は、本開示に従うＡＡＶ粒子を、それを必要とする対象に投与する方法を提供する。所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、様々な疾患、障害及び／または病態の処置のために対象に投与され得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象の疾患の症状を減少させるための治療的有効量（例えば、既知の評価方法を使用して決定される）で対象に投与され得る。
投与
本開示は、本開示に従うＡＡＶ粒子を、それを必要とする対象に投与する方法を提供する。所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、様々な疾患、障害及び／または病態の処置のために対象に投与され得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象の疾患の症状を減少させるための治療的有効量（例えば、既知の評価方法を使用して決定される）で対象に投与され得る。
【0808】
本開示は、本開示のＡＡＶ粒子を細胞または組織に送達する方法であって、細胞もしくは組織を前記ＡＡＶ粒子と接触させることまたは細胞もしくは組織を前記ＡＡＶ粒子を含む製剤と接触させること、または細胞もしくは組織を薬学的組成物を含む記載される組成物のいずれかと接触させることを含む、方法を提供する。ＡＡＶ粒子を細胞または組織に送達する方法は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｖｉｖｏで達成され得る。
【0809】
本開示は、哺乳動物対象を含む対象に本開示のＡＡＶ粒子を送達する方法であって、前記ＡＡＶ粒子を対象に投与すること、または前記ＡＡＶ粒子を含む製剤を対象に投与すること、または薬学的組成物を含む記載される組成物のいずれかを対象に投与することを含む、方法を提供する。
【0810】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子及び製剤は、治療的に有効なアウトカムをもたらす任意の送達経路によって投与され得る。これらは、限定されないが、腸内（腸の中）、胃腸内、硬膜上（硬膜の中）、経口（口を介して）、経皮、大脳内（大脳の中）、脳室内（脳室の中）、軟膜下（軟膜とＣＮＳ実質との間）、頸動脈内（頸動脈の中）、経皮（皮膚への塗布）、皮内（皮膚自体の中）、皮下（皮膚の下）、鼻腔投与（鼻を通じて）、静脈内（静脈の中）、静脈内ボーラス、静脈内点滴、動脈内（動脈の中）、全身性、筋肉内（筋肉の中）、心臓内（心臓の中）、骨内注入（骨髄の中）、髄腔内（脊柱管の中）、実質内（組織または器官、例えば、脳、脊髄などの本体部）、腹腔内（腹膜への注入または注射）、膀胱内注入、硝子体内（眼を通じて）、海綿体内注射（病的腔の中）、腔内（陰茎の基部の中）、腟内投与、子宮内、羊膜外投与、経皮（全身分布のためのインタクトな皮膚を通じた拡散）、経粘膜（粘膜を通じた拡散）、経腟、送気（鼻から吸い込む）、舌下、唇下、浣腸、点眼薬（結膜上）、または点耳薬で、耳介（耳内または耳を介して）、頬側（頬の方に向けて）、結膜、皮膚、歯（１本または複数の歯に対して）、電気浸透、子宮頚管内、副鼻腔内、気管内、体外、血液透析、浸潤、間質内、腹部内、羊膜内、関節内、胆管内、気管支内、嚢内、軟骨内（軟骨の内部）、尾内（ウマ尾の内部）、嚢内（大槽小脳延髄槽の内部）、角膜内（角膜の範囲内）、歯冠内、冠内（冠動脈の内部）、海綿体内（陰茎の海綿体の可膨張性空間の範囲内）、椎間板内（椎間板の内部）、管内（腺管の内部）、十二指腸内（十二指腸の内部）、硬膜内（硬膜の内部または真下）、表皮内（表皮に対して）、食道内（食道に対して）、胃内（胃の内部）、歯肉内（歯肉の内部）、回腸内（小腸の遠位部分の内部）、病巣内（局所病変の内部、またはそこに直接導入される）、管腔内（管の内腔の内部）、リンパ内（リンパの内部）、髄内（骨の髄腔の内部）、髄膜内（髄膜の内部）、心筋内（心筋の内部）、眼内（眼の内部）、卵巣内（卵巣の内部）、心膜内（心膜の内部）、胸膜内（胸膜の内部）、前立腺内（前立腺の内部）、肺内（肺、またはその気管支の内部）、洞内（鼻洞または眼窩周囲洞の内部）、脊髄内（脊柱の内部）、滑液嚢内（関節の滑膜腔の内部）、腱内（腱の内部）、精巣内（精巣の内部）、髄腔内（脳脊髄軸の任意のレベルでの脳脊髄液の内部）、胸腔内（胸郭の内部）、細管内（臓器の細管の内部）、腫瘍内（腫瘍の内部）、鼓室内（中耳の内部）、血管内（１つまたは複数の血管の内部）、脳室内（脳室の内部）、イオントフォレシス（可溶性塩のイオンが体の組織に移動する電流を用いるもの）、潅注（開放創または体腔を浸すまたはフラッシュする）、喉頭（喉頭に対して直接）、経鼻胃（鼻を通じて胃の中に）、密封包帯技術（局所経路投与の後に区域を閉塞する包帯で覆われる）、眼（外眼部に対して）、口腔咽頭（口及び咽頭に対して直接）、非経口、経皮、関節周囲、硬膜外、神経周囲、歯周、直腸、呼吸器（局所または全身作用のため経口的または鼻腔的に吸入することにより気道の内部に）、球後（橋の後ろまたは眼球の後ろ）、軟部組織、くも膜下、結膜下、粘膜下、局所、経胎盤（胎盤を通じてまたは越えて）、経気管（気管の壁を通じて）、経鼓室（鼓室を越えてまたは通じて）、尿管（尿管に対して）、尿道（尿道に対して）、腟、仙骨ブロック、診断的、神経ブロック、胆管灌流、心灌流、フォトフェレーシス及び脊髄を含む。
【0811】
所定の実施形態では、組成物は、それが血液脳関門、血管障壁、または他の上皮障壁を通過することを可能にする手法で投与され得る。本開示のＡＡＶ粒子は、液体溶液または懸濁液として、液体溶液中の液体溶解または懸濁に好適な固体形態としてのいずれかで、任意の好適な形態で投与され得る。ＡＡＶ粒子は、任意の適切な及び薬学的に許容可能な賦形剤を用いて製剤化され得る。所定の実施形態では、本開示の組成物は、必要とする対象に静脈内に、筋肉内に、皮下に、腹腔内に、実質内に、髄腔内に及び／または脳室内に投与され、製剤化されたＡＡＶ粒子が血液脳関門及び血液脊髄関門の一方または両方を通過することを可能にする。
【0812】
本開示は、本開示に従うＡＡＶ粒子を、それを必要とする対象のＣＮＳに投与する方法を提供する。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、既知の評価方法を使用して決定される、対象の神経疾患の症状を減少させるための治療的有効量で対象のＣＮＳに投与され得る。
【0813】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子を含む組成物は、全身性投与を介して対象の中枢神経系に投与される。所定の実施形態では、全身性投与は、静脈内注射である。
【0814】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射を介して対象の中枢神経系に投与される。実質内注射の非限定的な例は、視床内、線条体内（例えば、被殻内）、海馬内または嗅内皮質を標的とすることを含む。
【0815】
所定の実施形態では、ＣＮＳへの投与は、複数の投与、例えば、１つを超える経路及び／または箇所を介する。そのような投与は、逐次または同時であり得る。所定の実施形態では、投与は、複数の経路、例えば、実質内注射及び髄腔内注射を介する対象の中枢神経系内へのものである。
【0816】
所定の実施形態では、投与は、複数の投与、例えば、１つを超える経路及び／または箇所を介する。そのような投与は、逐次または同時であり得る。
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子は、限定されないが、海馬、皮質、運動または嗅内ニューロン；オリゴデンドロサイト、星状細胞及びミクログリアを含むグリア細胞；及び／またはニューロンを包囲する他の細胞、例えば、Ｔ細胞を含む特定のタイプの標的細胞に送達され得る。
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子は、限定されないが、海馬、皮質、運動または嗅内ニューロン；オリゴデンドロサイト、星状細胞及びミクログリアを含むグリア細胞；及び／またはニューロンを包囲する他の細胞、例えば、Ｔ細胞を含む特定のタイプの標的細胞に送達され得る。
【0817】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、米国特許番号８，９９９，９４８、または国際公開番号ＷＯ２０１４１７８８６３（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の疾患の処置のための方法を使用して投与または送達され得る。
【0818】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、米国出願番号２０１５０１２６５９０（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるアルツハイマー病または他の神経変性状態における遺伝子療法を送達するための方法を使用して投与または送達され得る。
【0819】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、米国特許番号６，４３６，７０８、及び８，９４６，１５２、及び国際公開番号ＷＯ２０１５１６８６６６（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるＣＮＳ遺伝子療法の送達のための方法を使用して投与または送達され得る。
【0820】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、欧州特許出願番号ＥＰ２６７８４３３（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のＡＡＶ粒子を使用してタンパク質を送達するための方法を使用して投与または送達され得る。
【0821】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、米国特許番号ＵＳ６，２１１，１６３（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のＤＮＡを血流に送達するための方法を使用して投与または送達され得る。
【0822】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、米国特許番号ＵＳ７，５８８，７５７（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のペイロードを中枢神経系に送達するための方法を使用して投与または送達され得る。
【0823】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、米国特許番号ＵＳ８，２８３，１５１（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のペイロードを送達するための方法を使用して投与または送達され得る。
【0824】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、国際特許公開番号ＷＯ２００１０８９５８３（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のグルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）送達ベクターを使用してペイロードを送達するための方法を使用して投与または送達され得る。
【0825】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、国際特許公開番号ＷＯ２０１２０５７３６３（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のペイロードを神経細胞に送達するための方法を使用して投与または送達され得る。
【0826】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０４２３９１（その内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のペイロードを神経細胞に送達するための方法を使用して投与または送達され得る。
【0827】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子または薬学的組成物は、米国特許番号６，５０６，３７９（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の筋肉内送達経路によってペイロードを送達するための方法を使用して投与または送達され得る。筋肉内投与の非限定的な例は、静脈内注射または皮下注射を含む。
【0828】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、経口投与によって送達され得る。経口投与の非限定的な例は、消化管投与及びバッカル投与を含む。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、眼内送達経路によって送達され得る。眼内投与の非限定的な例は、硝子体内注射を含む。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、眼内送達経路によって送達され得る。眼内投与の非限定的な例は、硝子体内注射を含む。
【0829】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、末梢注射によって対象に投与され得る。末梢注射の非限定的な例は、腹腔内、筋肉内、静脈内、結膜または関節注射を含む。ＡＡＶ粒子の末梢投与は、中枢神経系、例えば、運動ニューロンに輸送され得ることが当該技術分野で開示されている（例えば、米国特許公開番号２０１００２４０７３９；及び２０１００１３０５９４（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【0830】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子製剤は、ＣＳＦ経路への注射によって送達され得る。ＣＳＦ経路への送達の非限定的な例は、髄腔内及び脳室内投与を含む。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子製剤は、全身性送達によって送達され得る。非限定的な例として、全身性送達は、血管内投与によるものであり得る。
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子製剤は、全身性送達によって送達され得る。非限定的な例として、全身性送達は、血管内投与によるものであり得る。
【0831】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、頭蓋内送達によって対象に投与され得る（例えば、米国特許番号８，１１９，６１１（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）。
【0832】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、注射によって投与され得る。非限定的な例として、本開示のＡＡＶ粒子は、注射によって対象に投与され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、筋肉注射によって投与され得る。非限定的な例として、本開示のＡＡＶ粒子は、筋肉投与によって対象に投与され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、筋肉注射によって投与され得る。非限定的な例として、本開示のＡＡＶ粒子は、筋肉投与によって対象に投与され得る。
【0833】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、筋肉内投与によって投与され得る。非限定的な例として、本開示のＡＡＶ粒子は、筋肉内投与によって対象に投与され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、対象に投与され、対象の筋肉を形質導入する。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、対象に投与され、対象の筋肉を形質導入する。
【0834】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、実質内注射を介して投与され得る。非限定的な例として、本開示のＡＡＶ粒子は、実質内投与によって対象に投与され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、静脈内投与によって投与され得る。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、単回用量静脈内送達を介して投与され得る。非限定的な例として、単回用量静脈内送達は、１回の処置であり得る。遺伝子療法の文脈において、単回用量静脈内送達は、対象のための継続的な緩和を生み出し得る。緩和は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９分または５９分超などであるがこれらに限定されない分；１、２、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８時間、または４８時間超などであるがこれらに限定されない時間；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１日、または３１日超などであるがこれらに限定されない日；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６週、または１６週超などであるがこれらに限定されない週；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４ヶ月、または２４ヶ月超などであるがこれらに限定されない月；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５年、または１５年超などであるがこれらに限定されない年の間持続し得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、静脈内投与によって投与され得る。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、単回用量静脈内送達を介して投与され得る。非限定的な例として、単回用量静脈内送達は、１回の処置であり得る。遺伝子療法の文脈において、単回用量静脈内送達は、対象のための継続的な緩和を生み出し得る。緩和は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９分または５９分超などであるがこれらに限定されない分；１、２、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８時間、または４８時間超などであるがこれらに限定されない時間；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１日、または３１日超などであるがこれらに限定されない日；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６週、または１６週超などであるがこれらに限定されない週；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４ヶ月、または２４ヶ月超などであるがこれらに限定されない月；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５年、または１５年超などであるがこれらに限定されない年の間持続し得る。
【0835】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、静脈内送達を介してＤＲＧ侵害ニューロンに投与され得る。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、単回用量静脈内送達を介してＤＲＧ侵害ニューロンに投与され得る。非限定的な例として、単回用量静脈内送達は、１回の処置であり得る。緩和は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９分または５９分超などであるがこれらに限定されない分；１、２、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８時間、または４８時間超などであるがこれらに限定されない時間；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１日、または３１日超などであるがこれらに限定されない日；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６週、または１６週超などであるがこれらに限定されない週；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４ヶ月、または２４ヶ月超などであるがこれらに限定されない月；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５年、または１５年超などであるがこれらに限定されない年の間持続し得る。
【0836】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、髄腔内に、例えば、髄腔内注射によって投与され得る。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子製剤は、脊髄運動ニューロン及び／または星状細胞を形質導入するために大槽に治療的有効量で投与され得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子製剤は、髄腔内に投与され得る。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、単回用量髄腔内注射を介して投与され得る。非限定的な例として、単回用量髄腔内注射は、１回の処置であり得、単回用量髄腔内注射は、対象のための継続的な緩和を生み出し得る。緩和は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９分または５９分超などであるがこれらに限定されない分；１、２、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８時間、または４８時間超などであるがこれらに限定されない時間；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１日、または３１日超などであるがこれらに限定されない日；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６週、または１６週超などであるがこれらに限定されない週；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４ヶ月、または２４ヶ月超などであるがこれらに限定されない月；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５年、または１５年超などであるがこれらに限定されない年の間持続し得る。
【0837】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、髄腔内注射を介してＤＲＧ侵害ニューロンに投与され得る。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、単回用量髄腔内注射を介してＤＲＧ侵害ニューロンに投与され得る。非限定的な例として、単回用量髄腔内注射は、１回の処置であり得る。遺伝子療法の文脈において、単回用量髄腔内注射は、対象のための継続的な緩和を生み出し得る。緩和は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９分または５９分超などであるがこれらに限定されない分；１、２、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８時間、または４８時間超などであるがこれらに限定されない時間；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１日、または３１日超などであるがこれらに限定されない日；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６週、または１６週超などであるがこれらに限定されない週；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４ヶ月、または２４ヶ月超などであるがこれらに限定されない月；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５年、または１５年超などであるがこれらに限定されない年の間持続し得る。
【0838】
所定の実施形態では、本明細書に記載の製剤化されたＡＡＶ粒子は、髄腔内（ＩＴ）注入を介してＣ１で投与される。注入は、１、２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５時間または１５時間超であり得る。
【0839】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、実質内注射によって投与され得る。所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、脊髄運動ニューロン及び／または星状細胞を形質導入するために実質内注射を介して大槽に治療的有効量で投与され得る。
【0840】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、実質内注射及び髄腔内注射によって投与され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、皮下注射によって投与され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、皮下注射によって投与され得る。
【0841】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子製剤は、脳への直接的注射によって送達され得る。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、１つ以上の被殻への注射を含む線条体内注射を介して投与され得る。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、線条体内注射及び本明細書に記載の別の投与経路を介して投与され得る。
【0842】
所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子製剤は、複数の投与経路によって送達され得る。組み合わせ投与の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、髄腔内及び脳室内投与によって、または静脈内及び実質内投与によって送達され得る。
【0843】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、対象のための機能及び／または生存を改善するための治療的有効量でＣＮＳに投与され得る。非限定的な例として、ベクターは、線条体への直接的注入によって投与され得る。
【0844】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子は、「治療的有効」量、すなわち、疾患に関連する少なくとも１つの症状を軽減及び／または予防するのにまたは対象の状態の改善を提供するのに十分な量で投与され得る。
【0845】
所定の実施形態では、多部位送達のために脊椎における複数の部位でカテーテルが配置され得る。製剤化されたＡＡＶ粒子は、連続及び／またはボーラス注入で送達され得る。送達の各部位は、異なる投薬レジメンであり得、または同じ投薬レジメンが、送達の各部位のために使用され得る。非限定的な例として、送達の部位は、頸部及び腰部領域であり得る。別の非限定的な例として、送達の部位は、頸部領域であり得る。別の非限定的な例として、送達の部位は、腰部領域であり得る。
【0846】
所定の実施形態では、対象は、本明細書に記載のＡＡＶ粒子の送達前に脊椎構造及び病理について分析され得る。非限定的な例として、脊柱側彎症を有する対象は、脊柱側彎症を有さない対象と比較して、異なる投薬レジメン及び／またはカテーテル位置を有し得る。
【0847】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子の送達中の対象の脊椎の向きは、地面に対して垂直であり得る。
別の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子の送達中の対象の脊椎の向きは、地面に対して水平であり得る。
別の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子の送達中の対象の脊椎の向きは、地面に対して水平であり得る。
【0848】
所定の実施形態では、対象の脊椎は、ＡＡＶ粒子製剤の送達中に地面と比較した所定角度であり得る。地面と比較した対象の脊椎の角度は、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０または１８０度であり得る。
【0849】
所定の実施形態では、送達方法及び継続期間は、脊髄における広い形質導入を提供するように選択される。非限定的な例として、髄腔内送達は、脊髄の前後軸の長さに沿って広い形質導入を提供するように使用される。別の非限定的な例として、多部位注入は、脊髄の前後軸の長さに沿ってより均一な形質導入を提供する。さらに別の非限定的な例として、長期注入は、脊髄の前後軸の長さに沿ってより均一な形質導入を提供する。
【0850】
投薬量及びレジメン
本開示の薬学的、診断用、または予防用ＡＡＶ粒子、製剤及び組成物は、疾患、障害及び／または病態を予防、処置、管理、または診断するのに有効な任意の量及び任意の投与経路を使用して対象に投与され得る。必要とされる正確な量は、対象の種、年齢、及び全般的状態、疾患の重症度、特定の組成物、その投与様式、その活性様式などに応じて対象毎に変化し得る。対象は、ヒト、哺乳動物、または動物であり得る。本開示に従う組成物は典型的には、投与の容易性及び投薬量の均一性のために単位投薬形態で製剤化される。しかしながら、本開示の組成物の総１日用法は、合理的な医学的判断の範囲内で担当医によって決定され得ることが理解される。任意の特定の個体のための特定の治療的に有効な、予防的に有効な、または適切な診断用量レベルは、処置されている障害及び障害の重症度；用いられる特定のペイロードの活性；用いられる特定の組成物；患者の年齢、体重、全般的健康状態、性別及び食餌；投与の時間、投与の経路、及び用いられる特定のＡＡＶ粒子の排泄速度；処置の継続期間；用いられる特定のＡＡＶ粒子と組み合わせて使用されるまたは同時に存在する薬物；及び医学分野でよく知られている同様の要因を含む多様な要因に依存する。所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子の送達は、製剤化されたＡＡＶ粒子の送達の結果として最小の重大有害事象（ＳＡＥ）をもたらす。
本開示の薬学的、診断用、または予防用ＡＡＶ粒子、製剤及び組成物は、疾患、障害及び／または病態を予防、処置、管理、または診断するのに有効な任意の量及び任意の投与経路を使用して対象に投与され得る。必要とされる正確な量は、対象の種、年齢、及び全般的状態、疾患の重症度、特定の組成物、その投与様式、その活性様式などに応じて対象毎に変化し得る。対象は、ヒト、哺乳動物、または動物であり得る。本開示に従う組成物は典型的には、投与の容易性及び投薬量の均一性のために単位投薬形態で製剤化される。しかしながら、本開示の組成物の総１日用法は、合理的な医学的判断の範囲内で担当医によって決定され得ることが理解される。任意の特定の個体のための特定の治療的に有効な、予防的に有効な、または適切な診断用量レベルは、処置されている障害及び障害の重症度；用いられる特定のペイロードの活性；用いられる特定の組成物；患者の年齢、体重、全般的健康状態、性別及び食餌；投与の時間、投与の経路、及び用いられる特定のＡＡＶ粒子の排泄速度；処置の継続期間；用いられる特定のＡＡＶ粒子と組み合わせて使用されるまたは同時に存在する薬物；及び医学分野でよく知られている同様の要因を含む多様な要因に依存する。所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子の送達は、製剤化されたＡＡＶ粒子の送達の結果として最小の重大有害事象（ＳＡＥ）をもたらす。
【0851】
従来的には、標準的な治療剤の十分に多い量（長く持続する治療効果を確保する）を達成するために、多くの療法は、反復または延長投与によって、例えば、複数回の注射または長期注入によって送達される。しかしながら、これらの延長投薬レジメンは、所定のＡＡＶ遺伝子療法様式、例えば、単回用量パラダイムによって作動されるものにとって十分に好適ではない。延長ＡＡＶ投薬レジメンは、製剤流体のための限られた体積空間、賦形剤の量及び効力に対する厳格な制限、ＣＮＳ微小環境に対するイオン性粒子の影響、ならびに延長ＣＮＳ処置に関連する外科的及び臨床的合併症のため、ＣＮＳ疾患の処置において特に問題となり得る。製剤内の治療剤の十分に高い濃度を達成するために遺伝子療法様式の新規製剤が必要である。
【0852】
所定の実施形態では、本開示に従う製剤化されたＡＡＶ粒子の薬学的組成物は、所望の治療的、診断的、または予防的効果を得るために、１日当たり約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約２５ｍｇ／ｋｇ対象体重を送達するのに十分な投薬量レベルで、１日１回以上投与され得る。上記投薬濃度は、当業者によって１ｋｇ当たりのｖｇまたはウイルスゲノムまたは投与される総ウイルスゲノムに変換され得ることが理解される。
【0853】
所定の実施形態では、本開示に従う製剤化されたＡＡＶ粒子の薬学的組成物は、約１０～約６００μｌ／部位、５０～約５００μｌ／部位、１００～約４００μｌ／部位、１２０～約３００μｌ／部位、１４０～約２００μｌ／部位、約１６０μｌ／部位で投与され得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、５０μｌ／部位及び／または１５０μｌ／部位で投与され得る。
【0854】
所定の実施形態では、本開示に従う組成物の細胞への送達は、［ＶＧ／時間＝ｍＬ／時間＊ＶＧ／ｍＬ］（式中、ＶＧは、ウイルスゲノムであり、ＶＧ／ｍＬは、組成物濃度であり、ｍＬ／時間は、長期送達の速度である）によって定義される送達の速度を含む。
【0855】
所定の実施形態では、本開示に従う組成物の細胞への送達は、約１×１０６ＶＧ～約１×１０１６ＶＧの間の対象当たりの総濃度を含み得る。所定の実施形態では、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、２．１×１０１１、２．２×１０１１、２．３×１０１１、２．４×１０１１、２．５×１０１１、２．６×１０１１、２．７×１０１１、２．８×１０１１、２．９×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、７．１×１０１１、７．２×１０１１、７．３×１０１１、７．４×１０１１、７．５×１０１１、７．６×１０１１、７．７×１０１１、７．８×１０１１、７．９×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、８．１×１０１２、８．２×１０１２、８．３×１０１２、８．４×１０１２、８．５×１０１２、８．６×１０１２、８．７×１０１２、８．８×１０１２、８．９×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／対象またはＶＧ／用量の組成物濃度を含み得る。
【0856】
所定の実施形態では、本開示に従う組成物の細胞への送達は、約１×１０６ＶＧ／ｋｇ～約１×１０１６ＶＧ／ｋｇの間の対象当たりの総濃度を含み得る。所定の実施形態では、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、２．１×１０１１、２．２×１０１１、２．３×１０１１、２．４×１０１１、２．５×１０１１、２．６×１０１１、２．７×１０１１、２．８×１０１１、２．９×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、７．１×１０１１、７．２×１０１１、７．３×１０１１、７．４×１０１１、７．５×１０１１、７．６×１０１１、７．７×１０１１、７．８×１０１１、７．９×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、８．１×１０１２、８．２×１０１２、８．３×１０１２、８．４×１０１２、８．５×１０１２、８．６×１０１２、８．７×１０１２、８．８×１０１２、８．９×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含み得る。
【0857】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子の中枢神経系（例えば、実質）の細胞への送達は、約１×１０６ＶＧ～約１×１０１６ＶＧの間の総用量を含み得る。所定の実施形態では、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、１．９×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、３．７３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、２．５×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧの総用量を含み得る。非限定的な例として、総用量は、１×１０１３ＶＧである。別の非限定的な例として、総用量は、２．１×１０１２ＶＧである。
【0858】
所定の実施形態では、用量当たり約１０５～１０６ウイルスゲノム（単位）が投与され得る。
所定の実施形態では、本開示に従う組成物の細胞への送達は、約１×１０６ＶＧ／ｍＬ～約１×１０１６ＶＧ／ｍＬの間の総濃度を含み得る。所定の実施形態では、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、３．１×１０１２、３．２×１０１２、３．３×１０１２、３．４×１０１２、３．５×１０１２、３．６×１０１２、３．７×１０１２、３．８×１０１２、３．９×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含み得る。本明細書で使用される場合、「ＶＧ／ｍＬ」は、１ミリリットル（ｍＬ）当たりのベクターゲノム（ＶＧ）を表す。ＶＧ／ｍＬはまた、１ミリリットル当たりのゲノムコピーまたは１ミリリットル当たりのＤＮａｓｅ耐性粒子を表し得る。
所定の実施形態では、本開示に従う組成物の細胞への送達は、約１×１０６ＶＧ／ｍＬ～約１×１０１６ＶＧ／ｍＬの間の総濃度を含み得る。所定の実施形態では、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、３．１×１０１２、３．２×１０１２、３．３×１０１２、３．４×１０１２、３．５×１０１２、３．６×１０１２、３．７×１０１２、３．８×１０１２、３．９×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含み得る。本明細書で使用される場合、「ＶＧ／ｍＬ」は、１ミリリットル（ｍＬ）当たりのベクターゲノム（ＶＧ）を表す。ＶＧ／ｍＬはまた、１ミリリットル当たりのゲノムコピーまたは１ミリリットル当たりのＤＮａｓｅ耐性粒子を表し得る。
【0859】
所定の実施形態では、本開示に従う組成物の細胞への送達は、約１×１０６総カプシド／ｍＬ～約１×１０１６総カプシド／ｍＬの間の総濃度を含み得る。所定の実施形態では、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、３．１×１０１２、３．２×１０１２、３．３×１０１２、３．４×１０１２、３．５×１０１２、３．６×１０１２、３．７×１０１２、３．８×１０１２、３．９×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６総カプシド／ｍＬの組成物濃度を含み得る。
【0860】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子の中枢神経系（例えば、実質）の細胞への送達は、約１×１０６ＶＧ／ｍＬ～約１×１０１６ＶＧ／ｍＬの間の組成物濃度を含み得る。所定の実施形態では、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含み得る。所定の実施形態では、送達は、１×１０１３ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含む。所定の実施形態では、送達は、２．１×１０１２ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含む。
【0861】
本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子の所望の投薬量は、単一の投与プロトコルで１回のみ、１日３回、１日２回、１日１回または１回超で送達され得る。所定の実施形態では、所望の投薬量は、複数回の投与（例えば、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、１２回、１３回、１４回、またはそれ以上の投与）を使用して送達され得る。複数回の投与が用いられる場合、分割投薬レジメン、例えば、本明細書に記載されるものが使用され得る。本明細書で使用される場合、「分割用量」は、「単回単位用量」または総１日用量の２回以上の用量への分割、例えば、「単回単位用量」の２回以上の投与である。本明細書で使用される場合、「単回単位用量」は、１つの用量／１回で／単一経路／単一接触点、すなわち、単一投与事象で投与される任意の治療剤の用量である。
【0862】
本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子の所望の投薬量は、「パルス用量」としてまたは「連続流」として投与され得る。本明細書で使用される場合、「パルス用量」は、所定期間にわたって規定の頻度で投与される任意の治療剤の一連の単回単位用量である。本明細書で使用される場合、「連続流」は、単一経路／単一接触点で所定期間で連続的に投与される治療剤の用量、すなわち、連続投与事象である。２４時間の期間で与えられるまたは処方される量である総１日用量は、これらの方法のいずれかによって、またはこれらの方法の組み合わせとして、または薬学的投与に好適な任意の他の方法によって投与され得る。
【0863】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子の対象への送達は、対象における対象となる遺伝子の活性を調整することを提供する。活性を調整することは、対象における対象となる遺伝子の生成の増加または対象における対象となる遺伝子の生成の減少であり得る。活性を調整することは、少なくとも１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１年、１３ヶ月、１４ヶ月、１５ヶ月、１６ヶ月、１７ヶ月、１８ヶ月、１９ヶ月、２０ヶ月、２０ヶ月、２１ヶ月、２２ヶ月、２３ヶ月、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年または１０年超の間であり得る。
【0864】
所定の実施形態では、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子は、単回用量、１回の処置を使用して対象に投与され得る。１回の処置の用量は、当該技術分野で知られている及び／または本明細書に記載されている任意の方法によって投与され得る。本明細書で使用される場合、「１回の処置」は、１回のみ投与される組成物を指す。必要な場合、適切な効力に到達することを確保するためにブースター用量が対象に投与され得る。ブースターは、１回の処置の後、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１２ヶ月、１年、１３ヶ月、１４ヶ月、１５ヶ月、１６ヶ月、１７ヶ月、１８ヶ月、１９ヶ月、２０ヶ月、２１ヶ月、２２ヶ月、２３ヶ月、２４ヶ月、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年、または１０年超投与され得る。
【0865】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、単一の投与経路を介して対象に送達され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、多部位の投与経路を介して対象に送達され得る。対象は、２つ、３つ、４つ、５つまたは５つを超える部位で投与され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、多部位の投与経路を介して対象に送達され得る。対象は、２つ、３つ、４つ、５つまたは５つを超える部位で投与され得る。
【0866】
所定の実施形態では、対象には、ボーラス注入を使用して本開示のＡＡＶ粒子製剤が投与され得る。
所定の実施形態では、対象には、数分、数時間または数日の期間にわたって持続送達を使用して本開示のＡＡＶ粒子製剤が投与され得る。注入速度は、対象、分布、製剤または別の送達パラメータに応じて変更され得る。
所定の実施形態では、対象には、数分、数時間または数日の期間にわたって持続送達を使用して本開示のＡＡＶ粒子製剤が投与され得る。注入速度は、対象、分布、製剤または別の送達パラメータに応じて変更され得る。
【0867】
所定の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子は、被殻及び尾状（ｃａｕｄａｔｅ）注入を介して投与される。非限定的な例として、二重注入は、広い線条体分布ならびに前頭及び側頭皮質分布を提供する。
【0868】
所定の実施形態では、本明細書に記載のＡＡＶ粒子の投与のための対象の選択及び／または用量、投与経路及び／または投与体積の有効性は、ウィルヒョウ・ロビン腔としても知られている血管周囲腔（ＰＶＳ）の画像化を使用して評価され得る。ＰＶＳは、脳実質を穿孔しており、脳脊髄液（ＣＳＦ）／間質液で満たされているとともに、細動脈及び小静脈を囲んでいる。ＰＶＳは、中脳、基底核、及び半卵円中心において一般的である。理論に縛られることを望むものではないが、ＰＶＳは、代謝産物の正常なクリアランスにおいて役割を果たし得、より悪い認知力及びパーキンソン病を含むいくつかの疾患状態に関連している。ＰＶＳは通常、サイズは正常であるが、それらは、多数の疾患状態においてサイズが増加し得る。Ｐｏｔｔｅｒ ｅｔ ａｌ．（Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ Ｄｉｓ．２０１５ Ｊａｎ；３９（４）：２２４－２３１（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）は、等級付け方法を開発し、その方法において、彼らは完全な範囲のＰＶＳを研究し、基底核、半卵円中心及び中脳のＰＶＳを格付けした。彼らは、Ｍａｃ ａｎｄ Ｌｕｌｌｉｃｈ ｅｔ ａｌ．（Ｊ Ｎｅｕｒｏｌ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．２００４ Ｎｏｖ；７５（１１）：１５１９－２３（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる））によって使用されたＰＶＳの頻度及び範囲を使用し、Ｐｏｔｔｅｒらは、基底核及び半卵円中心のＰＶＳに対する５つの格付け：０（なし）、１（１～１０）、２（１１～２０）、３（２１～４０）及び４（＞４０）及び中脳のＰＶＳに対する２つの格付け：０（不可視）または１（可視）を提供した。Ｐｏｔｔｅｒらによる格付けシステムのためのユーザガイドは、ｗｗｗ．ｓｂｉｒｃ．ｅｄ．ａｃ．ｕｋ／ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／ｅｐｖｓ－ｒａｔｉｎｇ－ｓｃａｌｅ－ｕｓｅｒ－ｇｕｉｄｅ．ｐｄｆで見ることができる。
【0869】
組み合わせ
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、１つ以上の他の治療、予防、研究または診断剤と組み合わせて使用され得る。「と組み合わせて」は、薬剤が同じ時間に投与されなければならない及び／または一緒に送達するために製剤化されなければならないことを意味することは意図されていないが、これらの送達方法は本開示の範囲内である。組成物は、１つ以上の他の所望の治療剤または医学的処置と同時に、その前にまたは後に投与され得る。通常、各薬剤は、その薬剤のために決定された用量で及び／または時間スケジュールで投与される。所定の実施形態では、本開示は、薬学的、予防、研究、または診断組成物の送達であって、それらのバイオアベイラビリティを改善し、それらの代謝を減少及び／または改変し、それらの排泄を阻害し、及び／または体内のそれらの分布を改変し得る薬剤と組み合わせた送達を包含する。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子製剤は、１つ以上の他の治療、予防、研究または診断剤と組み合わせて使用され得る。「と組み合わせて」は、薬剤が同じ時間に投与されなければならない及び／または一緒に送達するために製剤化されなければならないことを意味することは意図されていないが、これらの送達方法は本開示の範囲内である。組成物は、１つ以上の他の所望の治療剤または医学的処置と同時に、その前にまたは後に投与され得る。通常、各薬剤は、その薬剤のために決定された用量で及び／または時間スケジュールで投与される。所定の実施形態では、本開示は、薬学的、予防、研究、または診断組成物の送達であって、それらのバイオアベイラビリティを改善し、それらの代謝を減少及び／または改変し、それらの排泄を阻害し、及び／または体内のそれらの分布を改変し得る薬剤と組み合わせた送達を包含する。
【0870】
本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子と組み合わせて使用され得る治療剤は、抗酸化剤、抗炎症剤、抗アポトーシス剤、カルシウム調整剤、抗グルタミン酸剤、構造タンパク質阻害剤、筋肉機能に関与する化合物、及び金属イオン調整に関与する化合物である小分子化合物であり得る。
【0871】
所定の実施形態では、本明細書に記載の製剤化されたＡＡＶ粒子と組み合わせて使用され得る疾患を処置するために試験される化合物は、限定されないが、コリンエステラーゼ阻害剤（ドネペジル、リバスチグミン、ガランタミン）、メマンチンなどのＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト、抗精神病剤、抗うつ剤、抗痙攣剤（例えば、ミオクローヌスに対するバルプロ酸ナトリウム及びレベチラセタム）、セクレターゼ阻害剤、アミロイド凝集阻害剤、銅または亜鉛調節剤、ＢＡＣＥ阻害剤、例えば、メチレンブルー、フェノチアジン、アントラキノン、ｎ－フェニルアミンまたはローダミン、微小管安定化剤、例えば、ＮＡＰ、タキソールまたはパクリタキセル、キナーゼまたはホスファターゼ阻害剤、例えば、ＧＳＫ３βを標的とするもの（リチウム）またはＰＰ２Ａを標的とするもの、Ａβペプチドによる免疫化またはドーパミン枯渇剤（例えば、舞踏病に対するテトラベナジン）、ベンゾジアゼピン（例えば、ミオクローヌス、舞踏病、ジストニア、こわばり、及び／または痙縮に対するクロナゼパム）、ドーパミンのアミノ酸前駆体（例えば、こわばりに対するレボドパ）、骨格筋弛緩剤（例えば、こわばり及び／または痙縮に対するバクロフェン、チザニジン）、筋肉まひを引き起こす神経筋接合部でのアセチコリン放出の阻害剤（例えば、歯ぎしり及び／またはジストニアに対するボツリヌス毒素）、非典型神経遮断剤（例えば、精神病及び／または被刺激性に対するオランザピン及びクエチアピン、精神病、舞踏病及び／または被刺激性に対するリスペリドン、スルピリド及びハロペリドール、処置抵抗性精神病に対するクロザピン、顕著な陰性症状を有する精神病に対するアリピプラゾール）、選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）（例えば、うつ、不安、妄想強迫行動及び／または被刺激性に対するシタロプラム、フルオキセチン、パロキセチン、セルトラリン、ミルタザピン、ベンラファキシン）、催眠剤（例えば、睡眠－覚醒サイクルの変化に対するキソピクロン及び／またはゾルピデム）、抗痙攣剤（例えば、躁病または軽躁病に対するバルプロ酸ナトリウム及びカルバマゼピン）及び気分安定剤（例えば、躁病または軽躁病に対するリチウム）を含む。
【0872】
所定の実施形態では、神経栄養因子が、本開示の製剤化されたＡＡＶ粒子との併用療法において使用され得る。通常、神経栄養因子は、ニューロンの生存、成長、分化、増殖及び／または成熟を促進する、またはニューロンの活性の増加を刺激する物質として定義される。所定の実施形態では、本方法は、処置を必要とする対象への１つ以上の栄養因子の送達をさらに含む。栄養因子は、限定されないが、ＩＧＦ－Ｉ、ＧＤＮＦ、ＢＤＮＦ、ＣＴＮＦ、ＶＥＧＦ、コリベリン、キサリプロデン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン及びＡＤＮＦ、ならびにそれらのバリアントを含み得る。
【0873】
一態様では、本明細書に記載の製剤化されたＡＡＶ粒子は、神経栄養因子、例えば、ＡＡＶ－ＩＧＦ－Ｉ（例えば、Ｖｉｎｃｅｎｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２００４，６，７９－８５（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）及びＡＡＶ－ＧＤＮＦ（例えば、Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００２，２２，６９２０－６９２８（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）を発現するＡＡＶ粒子（製剤化されているかどうかにかかわらない）と共投与され得る。
【0874】
測定及び分析
ペイロードの発現またはウイルスゲノムからのそのようなペイロードの下方制御効果は、当該技術分野で知られている様々な方法、例えば、限定されないが、免疫化学（例えば、ＩＨＣ）、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、親和性ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＳＰＯＴ、フローサイトメトリー、免疫細胞学、表面プラズモン共鳴分析、結合平衡除外アッセイ、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣＭＳ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、ＢＣＡアッセイ、免疫電気泳動、ウェスタンブロット、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、タンパク質免疫沈降、及び／またはＰＣＲを使用して決定され得る。
ペイロードの発現またはウイルスゲノムからのそのようなペイロードの下方制御効果は、当該技術分野で知られている様々な方法、例えば、限定されないが、免疫化学（例えば、ＩＨＣ）、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、親和性ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＳＰＯＴ、フローサイトメトリー、免疫細胞学、表面プラズモン共鳴分析、結合平衡除外アッセイ、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣＭＳ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、ＢＣＡアッセイ、免疫電気泳動、ウェスタンブロット、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、タンパク質免疫沈降、及び／またはＰＣＲを使用して決定され得る。
【0875】
バイオアベイラビリティ
所定の実施形態では、本明細書に記載される送達剤と共に組成物中に製剤化されるＡＡＶ粒子は、本明細書に記載される送達剤を欠く組成物と比較して、バイオアベイラビリティの増加を示し得る。本明細書で使用される場合、用語「バイオアベイラビリティ」は、哺乳動物に投与されるＡＡＶ粒子または発現されるペイロードの所与の量の全身的利用可能性を指す。バイオアベイラビリティは、後の組成物の曲線下面積（ＡＵＣ）または最大血清もしくは血漿濃度（Ｃｍａｘ）を測定することによって評価され得る。ＡＵＣは、横座標（Ｘ軸）に沿った時間に対する縦座標（Ｙ軸）に沿った化合物（例えば、ＡＡＶ粒子または発現したペイロード）の血清または血漿濃度をプロットした曲線下面積の決定である。通常、特定の化合物についてのＡＵＣは、当業者に知られている及びＧ．Ｓ．Ｂａｎｋｅｒ，Ｍｏｄｅｒｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，Ｄｒｕｇｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｖ．７２，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｉｎｃ．，１９９６（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される方法を使用して計算され得る。
所定の実施形態では、本明細書に記載される送達剤と共に組成物中に製剤化されるＡＡＶ粒子は、本明細書に記載される送達剤を欠く組成物と比較して、バイオアベイラビリティの増加を示し得る。本明細書で使用される場合、用語「バイオアベイラビリティ」は、哺乳動物に投与されるＡＡＶ粒子または発現されるペイロードの所与の量の全身的利用可能性を指す。バイオアベイラビリティは、後の組成物の曲線下面積（ＡＵＣ）または最大血清もしくは血漿濃度（Ｃｍａｘ）を測定することによって評価され得る。ＡＵＣは、横座標（Ｘ軸）に沿った時間に対する縦座標（Ｙ軸）に沿った化合物（例えば、ＡＡＶ粒子または発現したペイロード）の血清または血漿濃度をプロットした曲線下面積の決定である。通常、特定の化合物についてのＡＵＣは、当業者に知られている及びＧ．Ｓ．Ｂａｎｋｅｒ，Ｍｏｄｅｒｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，Ｄｒｕｇｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｖ．７２，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｉｎｃ．，１９９６（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される方法を使用して計算され得る。
【0876】
Ｃｍａｘ値は、哺乳動物へのＡＡＶ粒子の投与の後に哺乳動物の血清または血漿において達成されるＡＡＶ粒子または発現したペイロードの最大濃度である。Ｃｍａｘ値は、当業者に知られている方法を使用して測定され得る。語句「バイオアベイラビリティを増加させること」または「薬物動態を改善すること」は、本明細書で使用される場合、哺乳動物においてＡＵＣ、Ｃｍａｘ、またはＣｍｉｎとして測定される第１のＡＡＶ粒子または発現したペイロードの全身的利用可能性が、本明細書に記載される送達剤と共に共投与された場合、そのような共投与が行われない場合よりも高いことを意味する。所定の実施形態では、バイオアベイラビリティは、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または約１００％増加し得る。
【0877】
治療ウインドウ
本明細書で使用される場合、「治療ウインドウ」は、治療効果を引き起こす高い可能性を伴う、血漿濃度の範囲、または作用の部位での治療的活性物質のレベルの範囲を指す。所定の実施形態では、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子製剤の治療ウインドウは、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または約１００％増加し得る。
本明細書で使用される場合、「治療ウインドウ」は、治療効果を引き起こす高い可能性を伴う、血漿濃度の範囲、または作用の部位での治療的活性物質のレベルの範囲を指す。所定の実施形態では、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子製剤の治療ウインドウは、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または約１００％増加し得る。
【0878】
分布容積
本明細書で使用される場合、用語「分布容積」は、血液または血漿中と同じ濃度で体内の薬物の総量を含有することが必要とされるであろう流体容積を指す：Ｖｄｉｓｔは、体内の薬物の量／血液または血漿中の薬物の濃度に等しい。例えば、１０ｍｇの用量及び１０ｍｇ／Ｌの血漿濃度の場合、分布容積は１リットルになるであろう。分布容積は、薬物が血管外組織に存在する程度を反映する。大きな分布容積は、血漿タンパク質結合と比較した組織成分に結合する化合物の傾向を反映する。臨床的状況では、Ｖｄｉｓｔは、定常状態濃度を達成するための負荷用量を決定するために使用され得る。所定の実施形態では、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子製剤の分布容積は、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％低下し得る。
本明細書で使用される場合、用語「分布容積」は、血液または血漿中と同じ濃度で体内の薬物の総量を含有することが必要とされるであろう流体容積を指す：Ｖｄｉｓｔは、体内の薬物の量／血液または血漿中の薬物の濃度に等しい。例えば、１０ｍｇの用量及び１０ｍｇ／Ｌの血漿濃度の場合、分布容積は１リットルになるであろう。分布容積は、薬物が血管外組織に存在する程度を反映する。大きな分布容積は、血漿タンパク質結合と比較した組織成分に結合する化合物の傾向を反映する。臨床的状況では、Ｖｄｉｓｔは、定常状態濃度を達成するための負荷用量を決定するために使用され得る。所定の実施形態では、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子製剤の分布容積は、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％低下し得る。
【0879】
生物学的効果
所定の実施形態では、動物に送達されるＡＡＶ粒子製剤の生物学的効果は、動物におけるペイロード発現を分析することによって分類され得る。ペイロード発現は、本開示のＡＡＶ粒子製剤が投与された哺乳動物から収集された生物学的サンプルを分析することから決定され得る。例えば、哺乳動物に送達されるＡＡＶ粒子によってコードされるタンパク質についての５０～２００ｐｇ／ｍｌのタンパク質発現は、哺乳動物におけるタンパク質の治療的有効量として認められ得る。
所定の実施形態では、動物に送達されるＡＡＶ粒子製剤の生物学的効果は、動物におけるペイロード発現を分析することによって分類され得る。ペイロード発現は、本開示のＡＡＶ粒子製剤が投与された哺乳動物から収集された生物学的サンプルを分析することから決定され得る。例えば、哺乳動物に送達されるＡＡＶ粒子によってコードされるタンパク質についての５０～２００ｐｇ／ｍｌのタンパク質発現は、哺乳動物におけるタンパク質の治療的有効量として認められ得る。
【0880】
Ｖ．処置
概要
本開示は、ヒト対象を含む哺乳動物対象における疾患、障害及び／または病態を処置するための方法であって、本明細書に記載のウイルス粒子または製剤のいずれかを対象に投与することまたは本明細書に記載の薬学的組成物または製剤を含む記載される組成物のいずれかを対象に投与することを含む、方法を提供する。
概要
本開示は、ヒト対象を含む哺乳動物対象における疾患、障害及び／または病態を処置するための方法であって、本明細書に記載のウイルス粒子または製剤のいずれかを対象に投与することまたは本明細書に記載の薬学的組成物または製剤を含む記載される組成物のいずれかを対象に投与することを含む、方法を提供する。
【0881】
所定の実施形態では、製剤化されたＡＡＶ粒子の対象への投与は、基礎疾患の過程を変化させないが、対象における症状を好転させる。
所定の実施形態では、本開示のウイルス粒子は、対象に予防的に投与される。
所定の実施形態では、本開示のウイルス粒子は、対象に予防的に投与される。
【0882】
所定の実施形態では、本開示のウイルス粒子は、本明細書に記載の疾患の少なくとも１つを有する対象に投与される。
所定の実施形態では、本開示のウイルス粒子は、本明細書に記載の疾患または障害を処置するために対象に投与される。対象は、疾患または障害を有し得るか、または疾患または障害を発症するリスクがあり得る。
所定の実施形態では、本開示のウイルス粒子は、本明細書に記載の疾患または障害を処置するために対象に投与される。対象は、疾患または障害を有し得るか、または疾患または障害を発症するリスクがあり得る。
【0883】
本開示は、疾患進行を遅延、停止または逆行させるために治療的有効量の本開示のＡＡＶ粒子を、ヒト対象を含む、それを必要とする対象に投与するための方法を提供する。非限定的な例として、疾患進行は、当業者に知られている試験または診断ツール（複数可）によって測定され得る。別の非限定的な例として、疾患進行は、対象の脳、ＣＳＦまたは他の組織の病理学的特徴の変化によって測定され得る。
【0884】
所定の実施形態では、神経疾患を含む様々な非感染性疾患が、本開示の薬学的組成物で処置され得る。ＡＡＶ粒子、特に血液脳関門を通過する本開示のＡＡＶ粒子は、様々な神経疾患の処置において特に有用である。非限定的な例として、神経疾患は、透明中隔欠損、酸性リパーゼ病、酸性マルターゼ欠損症、後天性てんかん様失語症、急性散在性脳脊髄炎、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、アディー瞳孔、アディー症候群、副腎白質ジストロフィー、脳梁欠損症、失認症、エカルディ症候群、エカルディ・グティエール症候群障害、ＡＩＤＳ神経合併症、アレキサンダー病、アルパース病、交代性片まひ、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、無脳症、動脈瘤、アンジェルマン症候群、血管腫症、無酸素症、抗リン脂質症候群、失語症、失行症、くも膜嚢胞、くも膜炎、アーノルド・キアリ奇形、動静脈奇形、アスペルガー症候群、運動失調、毛細血管拡張性運動失調症、運動失調及び小脳または脊髄小脳変性症、心房細動及び脳卒中、注意欠陥多動性障害、自閉スペクトラム障害、自律神経機能障害、背痛、バース症候群、バッテン病、ベッカーミオトニー、ベーチェット病、ベルまひ、良性特発性眼瞼けいれん、良性限局性筋萎縮症、良性頭蓋内圧亢進症、ベルナール・ロス症候群、ビンスワンガー病、眼瞼けいれん、ブロッホ・サルツバーガー症候群、腕神経叢分娩損傷、腕神経叢損傷、ブラッドベリ・エグルストン症候群、脳及び脊髄腫瘍、脳動脈瘤、脳損傷、ブラウン・セカール症候群、延髄脊髄性筋萎縮症、皮質下梗塞及び白質脳症を伴う常染色体優性脳動脈症（ＣＡＤＡＳＩＬ）、カナバン病、手根管症候群、灼熱痛、海綿腫、海綿状血管腫、海綿状奇形、中心性頸髄症候群、中心性脊髄症候群、中心性疼痛症候群、橋中央ミエリン溶解、頭部障害、セラミダーゼ欠損症、小脳変性症、小脳形成不全、脳動脈瘤、脳動脈硬化症、脳萎縮症、脳性脚気、脳海綿状奇形、脳性巨人症、脳低酸素症、脳性まひ、脳－眼－顔－骨格症候群（ＣＯＦＳ）、シャルコー・マリー・トゥース病、キアリ奇形、コレステロールエステル保存疾患、舞踏病、有棘赤血球舞踏病、慢性炎症性脱髄性多発性神経炎（ＣＩＤＰ）、慢性起立不耐症、慢性疼痛、コケイン症候群ＩＩ型、コフィンローリー症候群、側脳室後角拡大症、昏睡、複合性局所疼痛症候群、先天性顔面両まひ、先天性筋無力症、先天性ミオパシー、先天性血管海綿状奇形、大脳皮質基底核変性症、頭部動脈炎、頭蓋骨癒合症、クリー脳炎、クロイツフェルト・ヤコブ病、蓄積外傷障害、クッシング症候群、巨大細胞性封入体症、サイトメガロウイルス感染症、ダンシングアイズ－ダンシングフィート症候群症候群、ダンディ・ウォーカー症候群、ドーソン病、ドモルシア症候群、デジェリン－クルンプケまひ、認知症、多発梗塞性認知症、意味性認知症、皮質下認知症、レビー小体を伴う認知症、歯状小脳性運動失調、歯状核赤核萎縮症、皮膚筋炎、発達性統合運動障害、デビック症候群、糖尿病性ニューロパシー、びまん性硬化症、ドラベ症候群、自律神経障害、書字障害、失読症、嚥下障害、ディスプラキシア、ミオクローヌス性小脳性共同運動障害、進行性小脳性共同運動障害、ジストニア、早期乳児てんかん性脳症、エンプティセラ症候群、脳炎、嗜眠性脳炎、脳ヘルニア、脳障害、脳障害（家族性乳児）、脳三叉神経領域血管腫症、てんかん、てんかん性片まひ、エルブまひ、エルブ・デュシェンヌ及びデジェリン・クルンプケまひ、本態性振戦、橋外髄鞘崩壊症、ファブリー病、ファール症候群、失神、家族性自律神経失調症、家族性血管腫、家族性特発性基底核石灰化症、家族性周期性まひ、家族性けいれん性まひ、ファーバー病、熱性けいれん、線維筋性形成異常症、フィッシャー症候群、フロッピーインファント症候群、下垂足、フリードライヒ運動失調症、前頭側頭型認知症、ゴーシェ病、全身性ガングリオシドーシス、ゲルストマン症候群、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病、巨大軸索性ニューロパシー、巨細胞動脈炎、巨細胞封入病、球様細胞白質ジストロフィー、舌咽神経痛、グリコーゲン蓄積症、ギラン・バレー症候群、ハレルフォルデン・スパッツ病、頭部損傷、頭痛、持続性片頭痛、片側顔面けいれん、交代性片まひ、遺伝性ニューロパシー、遺伝性痙性対まひ、遺伝性多発神経炎性失調、帯状疱疹、耳帯状疱疹、平山症候群、ホームズ・アディー症候群、全前脳症、ＨＴＬＶ－１関連ミエロパシー、ヒューズ症候群、ハンチントン病、水無脳症、水頭症、正常圧水頭症、水脊髄症、副腎皮質機能亢進症、過眠症、筋緊張亢進症、低血圧症、低酸素症、免疫媒介脳脊髄炎、封入体筋炎、色素失調症、乳児低血圧症、乳児神経軸索性ジストロフィー、乳児フィタン酸蓄積症、乳児レフサム病、乳児けいれん、炎症性ミオパシー、後頭孔脳脱出症、腸性リポジストロフィー、頭蓋内嚢胞、頭蓋内高血圧症、アイザックス症候群、ジュベール症候群、キーンズ・セイアー症候群、ケネディ病、キンスボーン症候群、クライネ・レヴィン症候群、クリペル・ファイル症候群、クリッペル・トレノネイ症候群（ＫＴＳ）、クリューバー・ビューシー症候群、コルサコフ記憶喪失症候群、クラッベ病、クーゲルバーグ・ウェランダー病、クールー、ランバート・イートン筋無力症候群、ランドウ・クレフナー症候群、外側大腿皮神経絞扼、外側髄症候群、学習障害、リー病、レノックス・ガストー症候群、レッシュ・ナイハン症候群、白質ジストロフィー、レビン・クリッチリー症候群、レビー小体認知症、脂質蓄積症、リポイドタンパク症、脳回欠損、閉じ込め症候群、ルー・ゲーリック病、ループス－神経学的後遺症、ライム病－神経学的合併症、マチャド・ジョセフ病、巨大脳症、巨大脳髄症、メルカーソン・ローゼンタール症候群、髄膜炎、髄膜炎及び脳炎、メンケス病、知覚異常性大腿神経痛、異染性白質ジストロフィー、小頭症、片頭痛、ミラーフィッシャー症候群、軽度脳卒中、ミトコンドリアミオパシー、メビウス症候群、単肢筋萎縮症、運動ニューロン疾患、モヤモヤ病、ムコリピドーシス、ムコ多糖症、多発梗塞性認知症、多巣性運動ニューロパシー、多発性硬化症、多系統萎縮症、起立性低血圧症を伴う多系統萎縮症、筋ジストロフィー、先天性筋無力症、重症筋無力症、ミエリン分解性びまん性硬化症、乳児のミオクロニー脳症、ミオクローヌス、ミオパシー、先天性ミオパシー、甲状腺中毒性ミオパシー、ミオトニー、先天性ミオトニー、ナルコレプシー、神経有棘赤血球症、脳鉄蓄積を伴う神経変性症、神経線維腫症、神経弛緩性悪性症候群、ＡＩＤＳの神経学的合併症、ライム病の神経学的合併症、サイトメガロウイルス感染症の神経学的帰結、ポンぺ病の神経学的兆候、ループスの神経学的後遺症、視神経脊髄炎、ニューロミオトニア、ニューロンセロイドリポフスチン症、ニューロン移動障害、遺伝性ニューロパシー、ニューロサルコイドーシス、神経梅毒、神経毒性、海綿状母斑、ニーマン・ピック病、オサリバン・マクラウド症候群、後頭部神経痛、大田原症候群、オリーブ橋小脳萎縮症、オプソクローヌスミオクローヌス、起立性低血圧症、使い過ぎ症候群、慢性疼痛、パントテン酸キナーゼ関連神経変性症、腫瘍随伴症候群、錯感覚、パーキンソン病、発作性舞踏アテトーゼ、発作性片頭痛、パリー・ロンベルグ、ペリツェウス・メルツバッハー病、ペナ・ショッカーＩＩ症候群、神経周囲嚢胞、周期性まひ、末梢神経障害、脳室周囲白質軟化症、遷延性植物状態、広汎性発達障害、フィタン酸蓄積症、ピック病、神経圧迫、梨状筋症候群、下垂体腫瘍、多発性筋炎、ポンぺ病、孔脳症、ポリオ後症候群、ヘルペス後神経痛、感染後脳脊髄炎、体位性低血圧、体位性起立性頻脈症候群、体位性頻脈症候群、原発性歯状核萎縮症、原発性側索硬化症、原発性進行性失語症、プリオン病、進行性片側顔面萎縮症、進行性歩行運動失調症、進行性多巣性白質脳症、進行性硬化性ポリオジストロフィー、進行性核上まひ、相貌失認、偽トーチ症候群、偽トキソプラズマ症候群、偽脳腫瘍、心因性運動、ラムゼイハント症候群Ｉ、ラムゼイハント症候群ＩＩ、ラスムッセン脳炎、反射性交感神経性ジストロフィー症候群、レフサム病、乳児レフサム病、反復運動障害、反復ストレス損傷、レストレスレッグス症候群、レトロウイルス関連ミエロパシー、レット症候群、ライ症候群、リウマチ性脳炎、リレイ・デイ症候群、仙髄神経根嚢胞、舞踏病、唾液腺疾患、サンドホフ病、シルダー病、裂脳症、ザイテルベルガー病、発作障害、意味性認知症、中隔視神経形成異常症、乳児重症ミオクロニーてんかん（ＳＭＥＩ）、揺さぶられっ子症候群、帯状疱疹、シャイ・ドレーガー症候群、シェーグレン症候群、睡眠時無呼吸、睡眠病、ソトス症候群、痙縮、二分脊椎、脊髄梗塞、脊髄損傷、脊髄腫瘍、脊髄性筋萎縮症、脊髄小脳萎縮症、脊髄小脳変性症、スティール・リチャードソン・オルゼウスキー症候群、スティッフ・パーソン症候群、線条体黒質変性症、脳卒中、スタージ・ウェーバー症候群、亜急性硬化性全脳炎、皮質下動脈硬化性脳症、短時間型片側性神経痛様（ＳＵＮＣＴ）頭痛、嚥下障害、シデナム舞踏病、気絶、梅毒性脊髄硬化症、水脊髄空洞症、脊髄空洞症、全身性エリテマトーデス、脊髄癆、遅発性ジスキネジー、ターロフ嚢胞、テイ・サックス病、側頭動脈炎、脊髄係留症候群、トムセンミオトニー、胸郭出口症候群、甲状腺中毒性ミオパシー、疼痛性チック、トッドまひ、トゥレット症候群、一過性脳虚血発作、伝達性海綿状脳症、横断性脊髄炎、外傷性脳損傷、振戦、三叉神経痛、熱帯性痙性不全対まひ、トロイヤー症候群、結節性硬化症、血管隆起腫瘍、中枢及び末梢神経系の血管炎症候群、フォンエコノモ病、フォンヒッペル・リンドウ病（ＶＨＬ）、フォンレックリングハウゼン病、ワレンベルグ症候群、ウェルドニッヒ・ホフマン病、ウェルニッケ・コルサコフ症候群、ウェスト症候群、むち打ち、ウィップル病、ウィリアムズ症候群、ウィルソン病、ウォルマン病、Ｘ連鎖性脊髄及び延髄性筋萎縮症であり得る。
【0885】
本開示は追加的に、ヒト対象を含む哺乳動物対象における神経障害を処置するための方法であって、本開示のＡＡＶ粒子または薬学的組成物のいずれかを対象に投与することを含む、方法を提供する。所定の実施形態では、ＡＡＶ粒子は、血液脳関門通過粒子である。所定の実施形態では、本明細書に記載の方法に従って処置される神経障害は、限定されないが、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病（ＨＤ）、パーキンソン病（ＰＤ）、及び／またはフリードライヒ運動失調症（ＦＡ）を含む。
【0886】
キット及びデバイス
キット
いくつかの実施形態では、本開示は、本開示の方法を好都合に及び／または効率的に行うための多様なキットを提供する。典型的には、キットは、使用者が対象（複数可）の複数の処置を実施すること及び／または複数の実験を実施することを可能にするための十分な量及び／または数の成分を含む。
キット
いくつかの実施形態では、本開示は、本開示の方法を好都合に及び／または効率的に行うための多様なキットを提供する。典型的には、キットは、使用者が対象（複数可）の複数の処置を実施すること及び／または複数の実験を実施することを可能にするための十分な量及び／または数の成分を含む。
【0887】
本開示のＡＡＶ粒子のいずれかは、キットに含まれ得る。いくつかの実施形態では、キットは、本開示の化合物及び／または組成物を生成及び／または合成するための試薬及び／または指示書をさらに含み得る。いくつかの実施形態では、キットはまた、１つ以上の緩衝液を含み得る。いくつかの実施形態では、本開示のキットは、タンパク質または核酸アレイまたはライブラリを作製するための成分を含み得、よって、例えば、固体支持体を含み得る。
【0888】
いくつかの実施形態では、キットの成分は、水性媒体中にまたは凍結乾燥形態のいずれかで包装され得る。キットの容器手段は通常、成分が配置され得る、好ましくは好適に分配され得る少なくとも１つのバイアル、試験管、フラスコ、ボトル、シリンジまたは他の容器手段を含む。複数のキット成分が存在する場合、（標識試薬及び標識は一緒に包装され得る）、キットはまた通常、追加の成分が別々に配置され得る第２、第３または他の追加の容器を含有し得る。いくつかの実施形態では、キットはまた、滅菌の薬学的に許容可能な緩衝液及び／または他の希釈剤を含有するための第２の容器手段を含み得る。いくつかの実施形態では、成分の様々な組み合わせが１つ以上のバイアルに含まれ得る。本開示のキットはまた、典型的には、本開示の化合物及び／または組成物、例えば、タンパク質、核酸を含有させるための手段、及び商業的販売のために閉じ込められた任意の他の試薬容器を含み得る。そのような容器は、所望のバイアルが保持される射出またはブロー成型されたプラスチック容器を含み得る。
【0889】
いくつかの実施形態では、キット成分は、１つ及び／またはそれ以上の液体溶液で提供される。いくつかの実施形態では、液体溶液は、水溶液であり、滅菌水溶液が特に好ましい。いくつかの実施形態では、キット成分は、乾燥粉末（複数可）として提供され得る。試薬及び／または成分が乾燥粉末として提供される場合、そのような粉末は、好適な体積の溶媒の添加によって再構成され得る。いくつかの実施形態では、溶媒はまた、別の容器手段で提供され得ることが想定される。いくつかの実施形態では、標識色素が、乾燥粉末として提供される。いくつかの実施形態では、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００マイクログラムまたは少なくとももしくは多くともそれらの量の乾燥色素が、本開示のキットにおいて提供されることが企図される。そのような実施形態では、色素は次いで、任意の好適な溶媒、例えば、ＤＭＳＯ中で再懸濁され得る。
【0890】
いくつかの実施形態では、キットは、キット成分を用いるための、及びキットに含まれない任意の他の試薬の使用のための指示書を含み得る。指示書は、実行され得る類型を含み得る。
【0891】
デバイス
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ粒子を送達するためのデバイスび頭部固定アセンブリを使用して対象に送達され得る。頭部固定アセンブリは、限定されないが、ＭＲＩ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓによって販売されている頭部固定アセンブリのいずれかであり得る。非限定的な例として、頭部固定アセンブリは、米国特許番号８，０９９，１５０、８，５４８，５６９及び９，０３１，６３６ならびに国際特許公開番号ＷＯ２０１１０８４９５及びＷＯ２０１４０１４５８５（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により組み込まれる）に記載のアセンブリのいずれかであり得る。頭部固定アセンブリは、ＭＲＩ適合性ドリル、例えば、限定されないが、国際特許公開番号ＷＯ２０１３１８１００８及び米国特許公開番号ＵＳ２０１３０３２５０１２（これらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のＭＲＩ適合性ドリルと組み合わせて使用され得る。
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ粒子を送達するためのデバイスび頭部固定アセンブリを使用して対象に送達され得る。頭部固定アセンブリは、限定されないが、ＭＲＩ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓによって販売されている頭部固定アセンブリのいずれかであり得る。非限定的な例として、頭部固定アセンブリは、米国特許番号８，０９９，１５０、８，５４８，５６９及び９，０３１，６３６ならびに国際特許公開番号ＷＯ２０１１０８４９５及びＷＯ２０１４０１４５８５（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により組み込まれる）に記載のアセンブリのいずれかであり得る。頭部固定アセンブリは、ＭＲＩ適合性ドリル、例えば、限定されないが、国際特許公開番号ＷＯ２０１３１８１００８及び米国特許公開番号ＵＳ２０１３０３２５０１２（これらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のＭＲＩ適合性ドリルと組み合わせて使用され得る。
【0892】
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対象の標的ポイントに装置を配置してＡＡＶ粒子を送達するための方法、システム及び／またはコンピュータプログラムを使用して送達され得る。非限定的な例として、方法、システム及び／またはコンピュータプログラムは、米国特許番号８，３４０，７４３（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の方法、システム及び／またはコンピュータプログラムであり得る。その方法は、身体における標的点及び参照点を決定することであって、標的点及び参照点は、各々を介して伸長する計画された軌道ライン（ＰＴＬ）を画定する、決定することと、可視化平面を決定することであって、ＰＴＬは、観測点で可視化平面と交差する、決定することと、ＰＴＬについて移動するように身体に対して案内デバイスを搭載することであって、案内デバイスは、可視化平面と交差しない、搭載することと、案内軸と可視化平面との間の交差点（ＧＰＰ）を決定することと、ＧＰＰを可視化平面における観測点とアライメントすることと、を含み得る。
【0893】
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、対流向上送達デバイスを使用して対象に送達され得る。対流を使用する薬物の標的化送達の非限定的な例は、米国特許公開番号ＵＳ２０１００２１７２２８、ＵＳ２０１３００３５５７４及びＵＳ２０１３００３５６６０ならびに国際特許公開番号ＷＯ２０１３０１９８３０及びＷＯ２００８１４４５８５（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【0894】
いくつかの実施形態では、対象は、ＡＡＶ粒子の送達の前、間及び／または後に画像化され得る。画像化方法は、当該技術分野で知られている及び／または本明細書に記載されている方法、例えば、限定されないが、磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）であり得る。非限定的な例として、画像化は、治療効果を評価するために使用され得る。別の非限定的な例として、画像化は、ＡＡＶ粒子の送達の支援のために使用され得る。
【0895】
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩガイドデバイスを使用して送達され得る。ＭＲＩガイドデバイスの非限定的な例は、米国特許番号９，０５５，８８４、９，０４２，９５８、８，８８６，２８８、８，７６８，４３３、８，３９６，５３２、８，３６９，９３０、８，３７４，６７７及び８，１７５，６７７及び米国特許出願番号ＵＳ２０１４００２４９２７（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。非限定的な例として、ＭＲＩガイドデバイスは、米国特許番号８，８８６，２８８及び８，７６８，４３３（これらの各々の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるを提供する）に記載されているものなどのリアルタイムのデータを提供することが可能であり得る。別の非限定的な例として、ＭＲＩガイドデバイスまたはシステムは、米国特許番号８，１７５，６７７及び８，３７４，６７７（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のシステムなどの標的化カニューレを用いて使用され得る。さらなる別の非限定的な例では、ＭＲＩガイドデバイスは、例えば、米国特許番号９，０５５，８８４及び米国特許出願番号ＵＳ２０１４００２４９２７（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される介入装置をガイドするための軌道ガイドフレームを含む。
【0896】
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合性チップアセンブリを使用して送達され得る。ＭＲＩ適合性チップアセンブリの非限定的な例は、米国特許公開番号ＵＳ２０１４０２７５９８０（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【0897】
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合性であるカニューレを使用して送達され得る。ＭＲＩ適合性カニューレの非限定的な例は、国際特許公開番号ＷＯ２０１１１３０１０７（その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）で教示されているものを含む。いくつかの実施形態では、カニューレもしくはその一部またはカニューレに付属するチューブが、手術部位／領域を包囲する組織に付着され、搭載され、接着され、固定され、またはそうでなければと可逆的に接触される。そのような接触は、手順のすべてまたは一部の間に１つの位置で局在化及び／または安定化され得る。
【0898】
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合性であるカテーテルを使用して送達され得る。ＭＲＩ適合性カテーテルの非限定的な例は、国際特許公開番号ＷＯ２０１２１１６２６５、米国特許公開番号８，８２５，１３３及び米国特許公開番号ＵＳ２０１４００２４９０９（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に教示されているものを含む。
【0899】
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、米国特許公開番号ＵＳ２０１４０２７６５８２及びＵＳ２０１４０２７６６１４（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される伸長管状体及び隔壁を有するデバイスを使用して送達され得る。
【0900】
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、ＭＲＩ適合性局在化及び／または案内システム、例えば、限定されないが、米国特許公開番号ＵＳ２０１５０２２３９０５及びＵＳ２０１５０２３０８７１（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているものを使用して送達され得る。非限定的な例として、ＭＲＩ適合性局在化及び／または案内システムは、患者への固定のために適合されたマウント、少なくとも３次元で制御可能に転換することができるように取り付けるよう構成された内腔を有する標的化カニューレ、及び標的化カニューレの内腔におけるスライド及び後退を介してぴったりと前進するように構成された細長いプローブを含み得、細長いプローブは、刺激または導出電極のうちの少なくとも１つを含む。
【0901】
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、米国特許公開番号ＵＳ２０１５００３１９８２及びＵＳ２０１４００６６７５０ならびに国際特許公開番号ＷＯ２０１５０５７８０７及びＷＯ２０１４０３９４８１（これらの各々の内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される軌道フレームを使用して対象に送達され得る。
【0902】
いくつかの実施形態では、ＡＡＶ粒子は、遺伝子銃を使用して対象に送達され得る。
タンパク質ペイロードをコードするＡＡＶ粒子の使用
本開示では、本開示の方法及びシステムに従って製造されたＡＡＶ粒子を細胞に導入するための方法であって、方法は、ベクターのいずれかを、標的ｍＲＮＡ及びタンパク質の生成の増加が生じるのに十分な量で前記細胞に導入することを含む、方法が提供される。いくつかの態様では、細胞は、筋肉細胞、幹細胞、ニューロン、例えば、限定されないが、運動、海馬、嗅内、視床または皮質ニューロン、及びグリア細胞、例えば、星状細胞またはミクログリアであり得る。
タンパク質ペイロードをコードするＡＡＶ粒子の使用
本開示では、本開示の方法及びシステムに従って製造されたＡＡＶ粒子を細胞に導入するための方法であって、方法は、ベクターのいずれかを、標的ｍＲＮＡ及びタンパク質の生成の増加が生じるのに十分な量で前記細胞に導入することを含む、方法が提供される。いくつかの態様では、細胞は、筋肉細胞、幹細胞、ニューロン、例えば、限定されないが、運動、海馬、嗅内、視床または皮質ニューロン、及びグリア細胞、例えば、星状細胞またはミクログリアであり得る。
【0903】
本開示では、処置を必要とする対象における標的タンパク質の不十分な機能／存在と関連する神経疾患を処置するための方法が開示される。方法は任意に、本開示のＡＡＶ粒子を含む治療的有効量の組成物を対象に投与することを含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的遺伝子発現を増加させ、標的タンパク質生成を増加させ、これにより対象が治療的に処置されるように対象における神経疾患の１つ以上の症状を減少させ得る。
【0904】
所定の実施形態では、タンパク質ペイロードをコードする核酸を含む本開示のＡＡＶ粒子は、静脈内投与の後に血液脳関門への通過を可能にするＡＡＶカプシドを含む。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、全身性投与を介して対象の中枢神経系に投与される。所定の実施形態では、全身性投与は、静脈内注射である。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、全身性投与を介して対象の中枢神経系に投与される。所定の実施形態では、全身性投与は、静脈内注射である。
【0905】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の中枢神経系に投与される。所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の組織（例えば、対象の脳）に投与される。
【0906】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射を介して対象の中枢神経系に投与される。実質内注射の非限定的な例は、視床内、線条体内、海馬内または嗅内皮質を標的とすることを含む。
【0907】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射及び髄腔内注射を介して対象の中枢神経系に投与される。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、限定されないが、海馬、皮質、運動または嗅内ニューロン；オリゴデンドロサイト、星状細胞及びミクログリアを含むグリア細胞；及び／またはニューロンを包囲する他の細胞、例えば、Ｔ細胞を含む特定のタイプの標的細胞に送達され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、限定されないが、海馬、皮質、運動または嗅内ニューロン；オリゴデンドロサイト、星状細胞及びミクログリアを含むグリア細胞；及び／またはニューロンを包囲する他の細胞、例えば、Ｔ細胞を含む特定のタイプの標的細胞に送達され得る。
【0908】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、線条体（例えば、被殻）及び／または皮質におけるニューロンに送達され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、神経疾患のための療法として使用され得る。
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、神経疾患のための療法として使用され得る。
【0909】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、標的タンパク質を増加させ、対象における神経疾患の症状を減少させるために使用され得る。標的タンパク質の増加及び／または神経疾患の症状の減少は、独立して、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％変化（標的タンパク質の生成について増加及び神経疾患の症状について減少）し得る。
【0910】
ＲＮＡｉポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子の使用
本開示では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞に導入するための方法であって、方法は、ベクターのいずれかを標的ｍＲＮＡの分解が生じるのに十分な量で前記細胞に導入し、それにより細胞における標的特異的ＲＮＡｉを活性化することを含む、方法が提供される。いくつかの態様では、細胞は、筋肉細胞、幹細胞、ニューロン、例えば、限定されないが、運動、海馬、嗅内、視床または皮質ニューロン、及びグリア細胞、例えば、星状細胞またはミクログリアであり得る。
本開示では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞に導入するための方法であって、方法は、ベクターのいずれかを標的ｍＲＮＡの分解が生じるのに十分な量で前記細胞に導入し、それにより細胞における標的特異的ＲＮＡｉを活性化することを含む、方法が提供される。いくつかの態様では、細胞は、筋肉細胞、幹細胞、ニューロン、例えば、限定されないが、運動、海馬、嗅内、視床または皮質ニューロン、及びグリア細胞、例えば、星状細胞またはミクログリアであり得る。
【0911】
本開示では、処置を必要とする対象における標的タンパク質の機能不全に関連する神経疾患を処置するための方法が開示される。方法は任意に、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む治療的有効量の組成物を対象に投与することを含む。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子は、対象が治療的に処置されるように、標的遺伝子発現を沈静させ、標的タンパク質生成を阻害し、対象における神経疾患の１つ以上の症状を減少させ得る。
【0912】
所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む本開示のＡＡＶ粒子を含む組成物は、静脈内投与の後に血液脳関門の通過を可能にするＡＡＶカプシドを含む。
【0913】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の中枢神経系に投与される。所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の組織（例えば、対象の脳）に投与される。
【0914】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、全身性投与を介して対象の中枢神経系に投与される。所定の実施形態では、全身性投与は、静脈内注射である。
【0915】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射を介して対象の中枢神経系に投与される。実質内注射の非限定的な例は、視床内、線条体内、海馬内または嗅内皮質を標的とすることを含む。
【0916】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射及び髄腔内注射を介して対象の中枢神経系に投与される。
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、限定されないが、海馬、皮質、運動または嗅内ニューロン；オリゴデンドロサイト、星状細胞及びミクログリアを含むグリア細胞；及び／またはニューロンを包囲する他の細胞、例えば、Ｔ細胞を含む特定のタイプの標的細胞に送達され得る。
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、限定されないが、海馬、皮質、運動または嗅内ニューロン；オリゴデンドロサイト、星状細胞及びミクログリアを含むグリア細胞；及び／またはニューロンを包囲する他の細胞、例えば、Ｔ細胞を含む特定のタイプの標的細胞に送達され得る。
【0917】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、線条体及び／または皮質におけるニューロンに送達され得る。
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、神経疾患のための療法として使用され得る。
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、神経疾患のための療法として使用され得る。
【0918】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、筋萎縮性側索硬化症のための療法として使用され得る。
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ハンチントン病のための療法として使用され得る。
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ハンチントン病のための療法として使用され得る。
【0919】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、パーキンソン病のための療法として使用され得る。
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、フリードライヒ運動失調症のための療法として使用され得る。
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、フリードライヒ運動失調症のための療法として使用され得る。
【0920】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、神経疾患を処置するために標的を抑制するために使用され得る。星状細胞における標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％によって抑制され得る。星状細胞における標的タンパク質は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５～１５％、５～２０％、５～２５％、５～３０％、５～３５％、５～４０％、５～４５％、５～５０％、５～５５％、５～６０％、５～６５％、５～７０％、５～７５％、５～８０％、５～８５％、５～９０％、５～９５％、１０～２０％、１０～２５％、１０～３０％、１０～３５％、１０～４０％、１０～４５％、１０～５０％、１０～５５％、１０～６０％、１０～６５％、１０～７０％、１０～７５％、１０～８０％、１０～８５％、１０～９０％、１０～９５％、１５～２５％、１５～３０％、１５～３５％、１５～４０％、１５～４５％、１５～５０％、１５～５５％、１５～６０％、１５～６５％、１５～７０％、１５～７５％、１５～８０％、１５～８５％、１５～９０％、１５～９５％、２０～３０％、２０～３５％、２０～４０％、２０～４５％、２０～５０％、２０～５５％、２０～６０％、２０～６５％、２０～７０％、２０～７５％、２０～８０％、２０～８５％、２０～９０％、２０～９５％、２５～３５％、２５～４０％、２５～４５％、２５～５０％、２５～５５％、２５～６０％、２５～６５％、２５～７０％、２５～７５％、２５～８０％、２５～８５％、２５～９０％、２５～９５％、３０～４０％、３０～４５％、３０～５０％、３０～５５％、３０～６０％、３０～６５％、３０～７０％、３０～７５％、３０～８０％、３０～８５％、３０～９０％、３０～９５％、３５～４５％、３５～５０％、３５～５５％、３５～６０％、３５～６５％、３５～７０％、３５～７５％、３５～８０％、３５～８５％、３５～９０％、３５～９５％、４０～５０％、４０～５５％、４０～６０％、４０～６５％、４０～７０％、４０～７５％、４０～８０％、４０～８５％、４０～９０％、４０～９５％、４５～５５％、４５～６０％、４５～６５％、４５～７０％、４５～７５％、４５～８０％、４５～８５％、４５～９０％、４５～９５％、５０～６０％、５０～６５％、５０～７０％、５０～７５％、５０～８０％、５０～８５％、５０～９０％、５０～９５％、５５～６５％、５５～７０％、５５～７５％、５５～８０％、５５～８５％、５５～９０％、５５～９５％、６０～７０％、６０～７５％、６０～８０％、６０～８５％、６０～９０％、６０～９５％、６５～７５％、６５～８０％、６５～８５％、６５～９０％、６５～９５％、７０～８０％、７０～８５％、７０～９０％、７０～９５％、７５～８５％、７５～９０％、７５～９５％、８０～９０％、８０～９５％、または９０～９５％減少し得る。
【0921】
所定の実施形態では、本開示のｓｉＲＮＡをコードするＡＡＶ粒子の対象への投与は、対象における標的タンパク質レベルを低下させ得る。標的タンパク質レベルは、対象、例えば、限定されないが、ＣＮＳ、ＣＮＳの領域、または対象のＣＮＳの特定の細胞において約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％及び１００％、または少なくとも２０～３０％、２０～４０％、２０～５０％、２０～６０％、２０～７０％、２０～８０％、２０～９０％、２０～９５％、２０～１００％、３０～４０％、３０～５０％、３０～６０％、３０～７０％、３０～８０％、３０～９０％、３０～９５％、３０～１００％、４０～５０％、４０～６０％、４０～７０％、４０～８０％、４０～９０％、４０～９５％、４０～１００％、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、５０～９５％、５０～１００％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～９５％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～９５％、７０～１００％、８０～９０％、８０～９５％、８０～１００％、９０～９５％、９０～１００％または９５～１００％低下し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを少なくとも５０％低下させ得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、標的タンパク質のタンパク質レベルを少なくとも４０％低下させ得る。
【0922】
治療適応症
パーキンソン病
パーキンソン病（ＰＤ）は、特に脳の黒質に影響を及ぼす神経系の進行性障害である。ＰＤ発症は、ドーパミン生成脳細胞の喪失の結果である。ＰＤの典型的な早期症状は、四肢、例えば、手、腕、脚、足及び顔の振動または振戦を含む。さらなる特徴的症状は、四肢及び胴部の硬直、運動遅延または運動不能、バランス及び協調不全、認知変化、及び精神病態、例えば、鬱病及び視覚的幻覚である。ＰＤは、家族性及び特発性の両方の形態を有し、遺伝的及び環境的原因を伴うことが示唆される。ＰＤは、世界で４百万人を超える人々に影響を及ぼしている。米国では、およそ６０，０００件の症例が毎年同定されている。通常、ＰＤは、５０歳以上の年齢で開始する。病態の早期発症形態は、５０歳よりも若い年齢で開始し、若年性発症ＰＤは、２０歳より前に開始する。
パーキンソン病
パーキンソン病（ＰＤ）は、特に脳の黒質に影響を及ぼす神経系の進行性障害である。ＰＤ発症は、ドーパミン生成脳細胞の喪失の結果である。ＰＤの典型的な早期症状は、四肢、例えば、手、腕、脚、足及び顔の振動または振戦を含む。さらなる特徴的症状は、四肢及び胴部の硬直、運動遅延または運動不能、バランス及び協調不全、認知変化、及び精神病態、例えば、鬱病及び視覚的幻覚である。ＰＤは、家族性及び特発性の両方の形態を有し、遺伝的及び環境的原因を伴うことが示唆される。ＰＤは、世界で４百万人を超える人々に影響を及ぼしている。米国では、およそ６０，０００件の症例が毎年同定されている。通常、ＰＤは、５０歳以上の年齢で開始する。病態の早期発症形態は、５０歳よりも若い年齢で開始し、若年性発症ＰＤは、２０歳より前に開始する。
【0923】
ＰＤに関連するドーパミン生成脳細胞の死は、アルファ－シヌクレインタンパク質の凝集、沈着及び機能不全に関連している（例えば、Ｍａｒｑｕｅｓ ａｎｄ Ｏｕｔｅｉｒｏ，２０１２，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｓ．３：ｅ３５０，Ｊｅｎｎｅｒ，１９８９，Ｊ Ｎｅｕｒｏｌ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．Ｓｐｅｃｉａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ，２２－２８、及びその参考文献参照）。研究は、シナプス前シグナル伝達、膜トラフィッキングならびにドーパミン放出及び輸送の調整において役割を有することを示唆している。アルファ－シヌクレインは、例えば、オリゴマーの形態で凝集し、ニューロンの機能不全及び死の原因となる種であることが示唆されている。アルファ－シヌクレイン遺伝子（ＳＮＣＡ）の変異は、家族性形態のＰＤにおいて同定されているが、環境的要因、例えば、神経毒もアルファ－シヌクレイン凝集に影響を及ぼす。ＰＤにおける脳細胞死の他の示唆される原因は、プロテアソーム及びリソソーム系の機能不全、ミトコンドリア活性の減少である。
【0924】
ＰＤは、「シヌクレイノパチー」と称されるアルファ－シヌクレイン凝集に関連する他の疾患に関連する。そのような疾患は、限定されないが、パーキンソン病認知症（ＰＤＤ）、多系統萎縮症（ＭＳＡ）、レビー小体型認知症、若年発症全身性神経軸索ジストロフィー（ハラーフォルデン・シュパッツ病）、純粋自律神経不全症（ＰＡＦ）、脳鉄蓄積を伴う神経変性症１型（ＮＢＩＡ－１）及びアルツハイマー病とパーキンソン病の組み合わせを含む。
【0925】
今日現在で、ＰＤのための治癒または予防療法は特定されていない。利用可能な多様な薬物療法は、症状に対する緩和を提供する。医学的対症療法の非限定的な例は、硬直及び遅延運動を減少させるカルビドパ及びレボドパの組み合わせ、ならびに振戦及び硬直を減少させるための抗コリン剤を含む。他の任意の療法は、例えば、深部脳刺激及び手術を含む。根底にある病態生理に影響を及ぼす療法が依然として必要とされている。例えば、アルファ－シヌクレインタンパク質、またはＰＤにおける脳細胞死に関連する他のタンパク質を標的とする抗体が、ＰＤを予防及び／または処置するために使用され得る。
【0926】
所定の実施形態では、本開示の方法は、ＰＤ及び他のシヌクレイノパチーに罹患している対象を処置するために使用され得る。所定の実施形態では、本開示の方法は、ＰＤ及び他のシヌクレイノパチーを発症していることが疑われる対象を処置するために使用され得る。
【0927】
本開示に記載されるＡＡＶ粒子、薬学的製剤及びウイルス粒子を使用する方法は、ＰＤを予防、管理及び／または処置するために使用され得る。
脊髄性筋萎縮症
脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）は、幼児及び小児の腕及び脚における随意筋の遺伝性疾患を原因とする虚弱及び衰弱である。ＳＭＡは、生存運動ニューロン遺伝子１（ＳＭＮ１）のタンパク質生成における異常に関連している。そのタンパク質の欠如は、下位運動ニューロンの変性及び死に影響を及ぼす。典型的な症状は、柔軟な四肢及び胴体、腕及び脚の衰弱運動、嚥下及び摂食困難、ならびに呼吸不全を含む。ＳＭＡは、２歳未満の小児の死亡につながる最も一般的な遺伝的障害である。ＳＭＡは、６，０００～１０，０００人に１人に影響を及ぼす。
脊髄性筋萎縮症
脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）は、幼児及び小児の腕及び脚における随意筋の遺伝性疾患を原因とする虚弱及び衰弱である。ＳＭＡは、生存運動ニューロン遺伝子１（ＳＭＮ１）のタンパク質生成における異常に関連している。そのタンパク質の欠如は、下位運動ニューロンの変性及び死に影響を及ぼす。典型的な症状は、柔軟な四肢及び胴体、腕及び脚の衰弱運動、嚥下及び摂食困難、ならびに呼吸不全を含む。ＳＭＡは、２歳未満の小児の死亡につながる最も一般的な遺伝的障害である。ＳＭＡは、６，０００～１０，０００人に１人に影響を及ぼす。
【0928】
今日現在で、ＳＭＡの治癒法はない。利用可能な療法は、症状の管理及びさらなる合併症の予防を目的としている。そのような療法は、例えば、心臓病学、運動管理、呼吸ケア及び精神保健に関連している。ＳＭＡならびに関連する疾患及び病気の根底にある病態生理に影響を及ぼす療法が依然として必要とされている。
【0929】
所定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子及び方法は、ＳＭＡならびに関連する疾患及び病気に罹患している対象を処置するために使用され得る。所定の実施形態では、本開示の方法は、ＳＭＡならびに関連する疾患及び病気を発症していることが疑われる対象を処置するために使用され得る。
【0930】
本開示に記載されるＡＡＶ粒子、薬学的製剤及びウイルス粒子を使用する方法は、ＳＭＡならびに関連する疾患及び病気を予防、管理及び／または処置するために使用され得る。
【0931】
アルツハイマー病
アルツハイマー病（ＡＤ）は、衰弱性神経変性疾患であり、記憶、思考及び挙動に影響を及ぼす最も一般的な形態の認知症である。典型的な早期症状は、新たに学んだ情報を思い出すことの困難性である。疾患が進行するにつれて、症状は、失見当識、睡眠の変化、気分及び挙動の変化、混乱、根拠のない疑念ならびに最終的には発話、嚥下及び歩行の困難性を含む。ＡＤは現在、世界で３，５００万人超が罹患しており、その数は今後数十年で倍増すると予想されている。
アルツハイマー病（ＡＤ）は、衰弱性神経変性疾患であり、記憶、思考及び挙動に影響を及ぼす最も一般的な形態の認知症である。典型的な早期症状は、新たに学んだ情報を思い出すことの困難性である。疾患が進行するにつれて、症状は、失見当識、睡眠の変化、気分及び挙動の変化、混乱、根拠のない疑念ならびに最終的には発話、嚥下及び歩行の困難性を含む。ＡＤは現在、世界で３，５００万人超が罹患しており、その数は今後数十年で倍増すると予想されている。
【0932】
今日現在で、ＡＤのための治癒または予防療法は特定されていない。記憶喪失、行動変化及び睡眠変化を処置するための、及びＡＤの進行を遅らせるための薬物療法が利用可能である。しかしながら、これらの対症処置は、根底にある病態生理を対処するものではない。
【0933】
所定の実施形態では、本開示の方法は、ＡＤならびに関連する疾患及び病気に罹患している対象を処置するために使用され得る。所定の実施形態では、本開示の方法は、ＡＤならびに関連する疾患及び病気を発症していることが疑われる対象を処置するための療法として使用され得る。
【0934】
本開示に記載されるＡＡＶ粒子、薬学的製剤及びウイルス粒子を使用する方法は、ＡＤならびに関連する疾患及び病気を予防、管理及び／または処置するために使用され得る。
筋萎縮性側索硬化症
ルーゲーリッグ病または古典的運動ニューロン疾患としても知られている筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）は、急速進行性の致命的な神経疾患である。ＡＬＳは、筋肉運動の使用可能性をもたらす上位及び下位運動ニューロンの細胞変性及び死、自発性筋肉運動にわたる制御の減退、衰弱及び喪失に関連している。早期症状は、手、脚及び嚥下筋肉の筋力低下を含み、最終的に横隔膜不全による呼吸不能に進行する。疾病管理予防センター（ＣＤＣ）によれば、ＡＬＳは、米国において推定１２，０００～１５，０００人に影響を及ぼしている。約５～１０％の症例は家族性である。
筋萎縮性側索硬化症
ルーゲーリッグ病または古典的運動ニューロン疾患としても知られている筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）は、急速進行性の致命的な神経疾患である。ＡＬＳは、筋肉運動の使用可能性をもたらす上位及び下位運動ニューロンの細胞変性及び死、自発性筋肉運動にわたる制御の減退、衰弱及び喪失に関連している。早期症状は、手、脚及び嚥下筋肉の筋力低下を含み、最終的に横隔膜不全による呼吸不能に進行する。疾病管理予防センター（ＣＤＣ）によれば、ＡＬＳは、米国において推定１２，０００～１５，０００人に影響を及ぼしている。約５～１０％の症例は家族性である。
【0935】
ＡＬＳは、他の非感染性神経変性疾患のように、ミスフォールドタンパク質の存在によって特性化されている。家族性ＡＬＳは、ＴＡＲ ＤＮＡ結合タンパク質４３（ＴＤＰ－４３）及びＲＮＡ結合タンパク質ＦＵＳ／ＴＬＳの変異に関連している。いくつかのタンパク質、例えば、限定されないが、成長因子、例えば、インスリン様成長因子１（ＩＧＦ－１）、グリア細胞株由来成長因子、脳由来成長因子、血管内皮成長因子及び毛様体神経栄養因子、または筋肉成長を促進する成長因子、例えば、ミオスタチンがＡＬＳの進行を遅らせることが特定されている。
【0936】
今日現在で、ＡＬＳの予防または治癒法はない。ＦＤＡが承認した薬物であるリルゾールは、寿命を延ばすために承認されているが、症状に対して効果を有さない。また、薬物及び医学的デバイスが、ＡＬＳに関連する疼痛及び発作に耐容するために利用可能である。根底にある病態生理に影響を及ぼす療法が依然として必要とされている。
【0937】
所定の実施形態では、本開示の方法は、ＡＬＳならびに関連する疾患及び病気に罹患している対象を処置するために使用され得る。所定の実施形態では、本開示の方法は、ＡＬＳならびに関連する疾患及び病気を発症していることが疑われる対象を処置するために使用され得る。
【0938】
本開示に記載されるＡＡＶ粒子、薬学的製剤及びウイルス粒子を使用する方法は、ＡＬＳならびに関連する疾患及び病気を予防、管理及び／または処置するために使用され得る。
【0939】
ハンチントン病
ハンチントン病（ＨＤ）は、脳の運動制御領域、ならびに他の領域におけるニューロンの変性を引き起こす稀な遺伝性障害である。疾患の典型的な症状は、制御不能な動作（舞踏病）、異常な姿勢、協調不全、不明瞭な発語ならびに挙動、判断及び認知の変化に付随する摂取及び嚥下の困難性を含む。ＨＤは、ハンチンチン（ＨＴＴ）タンパク質に関連する遺伝子における変異によって引き起こされる。変異は、ＤＮＡの（ＣＡＧ）ブロックが異常に多くの回数繰り返すことを引き起こす。ＨＤは、米国でおよそ３０，０００人に影響を及ぼしている。
ハンチントン病（ＨＤ）は、脳の運動制御領域、ならびに他の領域におけるニューロンの変性を引き起こす稀な遺伝性障害である。疾患の典型的な症状は、制御不能な動作（舞踏病）、異常な姿勢、協調不全、不明瞭な発語ならびに挙動、判断及び認知の変化に付随する摂取及び嚥下の困難性を含む。ＨＤは、ハンチンチン（ＨＴＴ）タンパク質に関連する遺伝子における変異によって引き起こされる。変異は、ＤＮＡの（ＣＡＧ）ブロックが異常に多くの回数繰り返すことを引き起こす。ＨＤは、米国でおよそ３０，０００人に影響を及ぼしている。
【0940】
ＨＤは、ポリグルタミン鎖の異常な拡大、例えば、ＣＡＧリピートによってコードされるグルタミン残基の長さの拡大を有するハンチンチン（ＨＴＴ）タンパク質の変異を特徴とする。疾患の発生についての拡大閾値は、およそ３５～４０残基であると考えられる。ＨＤはまた、ＨＴＴのＮ末端領域によって形成される線条体ニューロンにおけるベータシートリッチ凝集物に関連している。ＨＤが進行するにつれて、膨張物及凝集物はニューロンのゆるやかな喪失をもたらす。また、ＨＤにおける細胞死は、アポトーシスを誘導することが知られている死受容体６（ＤＲ６）に関連している。
【0941】
今日現在で、その疾患の進行を治癒、または予防する療法はない。利用可能な薬物療法は、症状の管理を目的としている。例えば、ＦＤＡは、舞踏病の予防のために処方されるテトラベネジンを承認した。また、例えば、抗精神病薬は、妄想、幻覚及び暴力的突発を制御することを補助し得る。根底にある病態生理、例えば、ＨＴＴタンパク質、ＤＲ６タンパク質、及び／または他のＨＤ関連タンパク質を標的とする抗体療法に影響を及ぼす療法が依然として必要とされている。
【0942】
所定の実施形態では、本開示の方法は、ＨＤならびに関連する疾患及び病気に罹患している対象を処置するために使用され得る。所定の実施形態では、本開示の方法は、ＨＤならびに関連する疾患及び病気を発症していることが疑われる対象を処置するために使用され得る。
【0943】
本開示に記載されるＡＡＶ粒子、薬学的製剤及びウイルス粒子を使用する方法は、ＨＤならびに関連する疾患及び病気を予防、管理及び／または処置するために使用され得る。
ＶＩ．定義
本開示における様々な箇所で、本開示の化合物の置換基または特性は、群または範囲で開示される。本開示は、そのような群及び範囲のメンバーの各々及びすべての個体または副次的組み合わせを含むことが特に意図されている。
ＶＩ．定義
本開示における様々な箇所で、本開示の化合物の置換基または特性は、群または範囲で開示される。本開示は、そのような群及び範囲のメンバーの各々及びすべての個体または副次的組み合わせを含むことが特に意図されている。
【0944】
別段記述されない限り、以下の用語及び語句は、以下に記載される意味を有する。定義は、事実上限定することを意味しておらず、本開示の所定の態様のより明確な理解を提供する働きをする。
【0945】
アデノ随伴ウイルス：用語「アデノ随伴ウイルス」または「ＡＡＶ」は、本明細書で使用される場合、それに由来する任意の粒子、配列、遺伝子、タンパク質、または成分を含むディペンドウイルス属のメンバーを指す。
【0946】
ＡＡＶ粒子：本明細書で使用される場合、「ＡＡＶ粒子」は、カプシドならびに少なくとも１つのペイロード領域及び少なくとも１つのＩＴＲ領域を有するウイルスゲノムを含むウイルスである。本開示のＡＡＶ粒子は、組換え的に生成され得、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づき得る。ＡＡＶ粒子は、血清型の組み合わせ（すなわち、「偽型」ＡＡＶ）を含む、本明細書に記載されるまたは当該技術分野で知られている任意の血清型または様々なゲノム（例えば、一本鎖または自己相補性）に由来し得る。また、ＡＡＶ粒子は、複製欠損性であり得、及び／または標的化され得る。
【0947】
活性：本明細書で使用される場合、用語「活性」は、物事が起こっているまたは行われている状態を指す。本開示の組成物は、活性を有し得、この活性は、１つ以上の生物学的事象を含み得る。
【0948】
投与すること：本明細書で使用される場合、用語「投与すること」は、薬学的薬剤または組成物を対象に提供することを指す。
組み合わせて投与される：本明細書で使用される場合、用語「組み合わせて投与される」または「組み合わされた投与」は、２つ以上の薬剤が、同時に、または各薬剤の患者に対する効果の重複が存在し得るような間隔内で対象に投与されることを意味する。所定の実施形態では、それらは、互いに約６０、３０、１５、１０、５、または１分以内に投与される。所定の実施形態では、薬剤の投与は、組み合わせの（例えば、相乗的な）効果が達成されるように、互いに十分に近接して間隔が空けられる。
組み合わせて投与される：本明細書で使用される場合、用語「組み合わせて投与される」または「組み合わされた投与」は、２つ以上の薬剤が、同時に、または各薬剤の患者に対する効果の重複が存在し得るような間隔内で対象に投与されることを意味する。所定の実施形態では、それらは、互いに約６０、３０、１５、１０、５、または１分以内に投与される。所定の実施形態では、薬剤の投与は、組み合わせの（例えば、相乗的な）効果が達成されるように、互いに十分に近接して間隔が空けられる。
【0949】
好転：本明細書で使用される場合、用語「好転」または「好転すること」は、病態または疾患の少なくとも１つの指標の重症度の減少を指す。例えば、神経変性障害に関して、好転は、ニューロン損失の減少を含む。
【0950】
動物：本明細書で使用される場合、用語「動物」は、動物界の任意のメンバーを指す。所定の実施形態では、「動物」は、任意の発達段階のヒトを指す。所定の実施形態では、「動物」は、任意の発達段階の非ヒト動物を指す。所定の実施形態では、非ヒト動物は、哺乳動物（例えば、げっ歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類、またはブタ）である。所定の実施形態では、動物は、限定されないが、哺乳動物、鳥類、爬虫類、両生類、魚類、及びワームを含む。所定の実施形態では、動物は、トランスジェニック動物、遺伝子修飾動物、またはクローンである。
【0951】
アンチセンス鎖：本明細書で使用される場合、ｓｉＲＮＡ分子の「アンチセンス鎖」または「第１の鎖」または「ガイド鎖」という用語は、サイレンシングについて標的とされた遺伝子のｍＲＮＡの約１０～５０ヌクレオチド、例えば、約１５～３０、１６～２５、１８～２３または１９～２２ヌクレオチドのセクションに実質的に相補的である鎖を指す。アンチセンス鎖または第１の鎖は、標的特異的サイレンシングを指示するための所望の標的ｍＲＮＡ配列に十分に相補的な配列、例えば、ＲＮＡｉ機構またはプロセスによって所望の標的ｍＲＮＡの破壊を誘発するのに十分な相補性を有する。
【0952】
およそ：本明細書で使用される場合、用語「およそ」または「約」は、対象となる１つ以上の値に適用される場合、記述された参照値に類似する値を指す。本明細書で使用される場合、用語「約」は、記述された値の＋／－１０％を指す。所定の実施形態では、用語「およそ」は、別段記述されない限り、または別段文脈から明らか出ない限り、記述された参照値のいずれかの方向（超または未満）の２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、またはそれ未満の範囲内に入る値の範囲を指す（そのような数が、可能な値の１００％を超えるであろう場合を除く）。
【0953】
と会合した：本明細書で使用される場合、用語「と会合した」、「コンジュゲートされた」、「連結された」、「付着された」、及び「つながれた」は、２つ以上の部位に関して使用される場合、部位が直接的にまたは連結剤として機能する１つ以上の追加の部位を介してのいずれかで互いに物理的に会合または接続されて、構造が使用される条件、例えば、生理的条件下で部位が物理的に会合したままであるように十分に安定な構造を形成することを意味する。「会合」は、直接的な共有結合性化学的結合を介した厳密なものである必要はない。それはまた、「会合した」実体が物理的に会合したままであるように十分に安定なイオン性もしくは水素結合またはハイブリダイゼーションに基づく接続性を示唆し得る。
【0954】
バキュロウイルス発現ベクター（ＢＥＶ）：本明細書で使用される場合、ＢＥＶは、バキュロウイルス発現ベクター、すなわち、バキュロウイルス起源のポリヌクレオチドベクターである。ＢＥＶを使用するシステムは、バキュロウイルス発現ベクターシステム（ＢＥＶＳ）として知られている。
【0955】
ｍＢＥＶまたは改変されたＢＥＶ：本明細書で使用される場合、改変されたＢＥＶは、１つ以上の遺伝子；遺伝子断片；切断部位；制限部位；配列領域；対象となるペイロードまたは遺伝子をコードする配列（複数可）；または前述のものの組み合わせの付加及び／または欠失及び／または複製及び／または逆位によって開始ＢＥＶ（野生型であるか人工であるかにかかわらない）から変化したバキュロウイルス起源の発現ベクターである。
【0956】
二機能性：本明細書で使用される場合、用語「二機能性」は、少なくとも２つの機能を可能とするまたはそれを維持する任意の物質、分子または部位を指す。機能は、同じアウトカムまたは異なるアウトカムに影響を及ぼし得る。機能を生成する構造は、同じであり得るか、または異なり得る。
【0957】
ＢＩＩＣ：本明細書で使用される場合、ＢＩＩＣは、バキュロウイルスに感染した昆虫細胞である。
生体適合性：本明細書で使用される場合、用語「生体適合性」は、免疫系による傷害、毒性または拒絶のリスクをほとんどまたは全く引き起こさずに生存細胞、組織、器官またはシステムと適合することを意味する。
生体適合性：本明細書で使用される場合、用語「生体適合性」は、免疫系による傷害、毒性または拒絶のリスクをほとんどまたは全く引き起こさずに生存細胞、組織、器官またはシステムと適合することを意味する。
【0958】
生分解性：本明細書で使用される場合、用語「生分解性」は、生存物の作用によって無害の生成物への分解が可能であることを意味する。
生物学的に活性：本明細書で使用される場合、語句「生物学的に活性」は、生物学的システム及び／または生物において活性を有する任意の物質の特徴を指す。例えば、生物に投与された場合にその生物に対して生物学的作用を有する物質は、生物学的に活性と考えられる。特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、コードされるペイロードの一部が生物学的に活性であるか、または生物学的に関連すると考えられる活性を模倣する場合であっても、生物学的に活性であると考えられ得る。
生物学的に活性：本明細書で使用される場合、語句「生物学的に活性」は、生物学的システム及び／または生物において活性を有する任意の物質の特徴を指す。例えば、生物に投与された場合にその生物に対して生物学的作用を有する物質は、生物学的に活性と考えられる。特定の実施形態では、本開示のＡＡＶ粒子は、コードされるペイロードの一部が生物学的に活性であるか、または生物学的に関連すると考えられる活性を模倣する場合であっても、生物学的に活性であると考えられ得る。
【0959】
カプシド：本明細書で使用される場合、用語「カプシド」は、ウイルス粒子のタンパク質シェルを指す。
コドン最適化された：本明細書で使用される場合、用語「コドン最適化された」または「コドン最適化」は、親／参照配列と同じアミノ酸配列をコードするが、改変された核酸配列のコドンが、特定の系（特定の種または種の群など）における発現のための最適化または改善されるように変化した、改変された核酸配列を指す。非限定的な例として、ＡＡＶカプシドタンパク質を含む核酸配列は、昆虫細胞またはＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞などの特定の昆虫細胞における発現のためにコドン最適化され得る。コドン最適化は、当業者に知られている方法及びデータベースを使用して完成され得る。
コドン最適化された：本明細書で使用される場合、用語「コドン最適化された」または「コドン最適化」は、親／参照配列と同じアミノ酸配列をコードするが、改変された核酸配列のコドンが、特定の系（特定の種または種の群など）における発現のための最適化または改善されるように変化した、改変された核酸配列を指す。非限定的な例として、ＡＡＶカプシドタンパク質を含む核酸配列は、昆虫細胞またはＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞などの特定の昆虫細胞における発現のためにコドン最適化され得る。コドン最適化は、当業者に知られている方法及びデータベースを使用して完成され得る。
【0960】
相補的及び実質的に相補的：本明細書で使用される場合、用語「相補的」は、ポリヌクレオチドが互いに塩基対を形成する能力を指す。塩基対は典型的には、逆平行ポリヌクレオチド鎖におけるヌクレオチド単位間の水素結合によって形成される。相補的ポリヌクレオチド鎖は、ワトソン・クリック様式（例えば、ＡとＴ、ＡとＵ、ＣとＧ）、または二本鎖の形成を可能とする任意の他の様式で塩基対を形成し得る。当業者が知っているように、ＤＮＡとは対照的にＲＮＡを使用する場合、チミンではなくウラシルがアデノシンに相補的と考えられる塩基である。しかしながら、Ｕが本開示の文脈において示される場合、別段記述されない限り、Ｔを置換する能力が黙示されている。完全相補性または１００％相補性は、あるポリヌクレオチド鎖の各ヌクレオチド単位が、第２のポリヌクレオチド鎖のヌクレオチド単位と水素結合を形成し得る状況を指す。完全未満の相補性は、２つの鎖のすべてではないが一部のヌクレオチド単位が、互いに水素結合を形成し得る状況を指す。例えば、２つの２０量体の場合、各鎖の２つの塩基対のみが互いに水素結合を形成し得る場合、ポリヌクレオチド鎖は１０％相補性を示す。同じ例において、各鎖の１８塩基対が互いに水素結合を形成し得る場合、ポリヌクレオチド鎖は９０％相補性を示す。本明細書で使用される場合、用語「実質的に相補的」は、ｓｉＲＮＡが、所望の標的ｍＲＮＡを結合させ、標的ｍＲＮＡのＲＮＡサイレンシングを誘発するのに十分な（例えば、アンチセンス鎖における）配列を有することを意味する。
【0961】
化合物：本開示の化合物は、中間体または最終化合物で生じる原子の同位体のすべてを含む。「同位体」は、同じ原子番号を有するが、原子核における中性子の異なる数に起因する異なる質量数を有する原子を指す。例えば、水素の同位体は、トリチウム及び重水素を含む。
【0962】
本開示の化合物及び塩は、慣用の方法によって溶媒和物及び水和物を形成するための溶媒または水分子と組み合わせて調製され得る。
条件的に活性：本明細書で使用される場合、用語「条件的に活性」は、野生型ポリペプチドの変異体またはバリアントであって、その変異体またはバリアントが、親ポリペプチドと比べて生理的条件で多かれ少なかれ活性であるものを指す。さらに、条件的に活性なポリペプチドは、親ポリペプチドと比較して異常な条件で増加または低下した活性を有し得る。条件的に活性なポリペプチドは、正常な生理的条件または異常な条件で可逆的または不可逆的に不活性化され得る。
条件的に活性：本明細書で使用される場合、用語「条件的に活性」は、野生型ポリペプチドの変異体またはバリアントであって、その変異体またはバリアントが、親ポリペプチドと比べて生理的条件で多かれ少なかれ活性であるものを指す。さらに、条件的に活性なポリペプチドは、親ポリペプチドと比較して異常な条件で増加または低下した活性を有し得る。条件的に活性なポリペプチドは、正常な生理的条件または異常な条件で可逆的または不可逆的に不活性化され得る。
【0963】
保存された：本明細書で使用される場合、用語「保存された」は、それぞれポリヌクレオチド配列またはポリペプチド配列のヌクレオチドまたはアミノ酸残基であって、比較されている２つ以上の配列の同じ位置において変化が生じていないものを指す。相対的に保存されているヌクレオチドまたはアミノ酸は、配列における他の個所に現れるヌクレオチドまたはアミノ酸よりも関連した配列の中で保存されているものである。
【0964】
所定の実施形態では、２つ以上の配列は、それらが互いに１００％同一である場合、「完全に保存されている」と称される。所定の実施形態では、２つ以上の配列は、それらが互いに少なくとも７０％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一である場合、「高度に保存されている」と称される。所定の実施形態では、２つ以上の配列は、それらが互いに約７０％同一、約８０％同一、約９０％同一、約９５％、約９８％、または約９９％同一である場合、「高度に保存されている」と称される。所定の実施形態では、２つ以上の配列は、それらが互いに少なくとも３０％同一、少なくとも４０％同一、少なくとも５０％同一、少なくとも６０％同一、少なくとも７０％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一である場合、「保存されている」と称される。所定の実施形態では、２つ以上の配列は、それらが互いに約３０％同一、約４０％同一、約５０％同一、約６０％同一、約７０％同一、約８０％同一、約９０％同一、約９５％同一、約９８％同一、または約９９％同一である場合、「保存されている」と称される。配列の保存は、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの全長に適用され得、またはその部分、領域もしくは特徴に適用され得る。
【0965】
制御要素：本明細書で使用される場合、「制御要素」、「調整性制御要素」または「調整性配列」は、レシピエント細胞におけるコーディング配列の複製、転写及び翻訳を提供するプロモーター領域、ポリアデニル化シグナル、転写終結配列、上流調整性ドメイン、複製の起点、内部リボソーム進入部位（「ＩＲＥＳ」）、エンハンサーなどを指す。選択されたコーディング配列が適切な宿主細胞において複製、転写及び／または翻訳されることが可能である限り、これらの制御要素のすべてが常に存在する必要があるわけではない。
【0966】
制御放出：本明細書で使用される場合、用語「制御放出」は、治療アウトカムに影響を及ぼすための放出の特定のパターンに従う薬学的組成物または化合物の放出プロファイルを指す。
【0967】
細胞増殖抑制性：本明細書で使用される場合、「細胞増殖抑制性」は、細胞（例えば、哺乳動物細胞（例えば、ヒト細胞））、細菌、ウイルス、真菌、原生動物、寄生生物、プリオン、またはそれらの組み合わせの成長、分裂、または増殖を阻害、減少、抑制することを指す。
【0968】
細胞毒性：本明細書で使用される場合、「細胞毒性」は、細胞（例えば、哺乳動物細胞（例えば、ヒト細胞））、細菌、ウイルス、真菌、原生動物、寄生生物、プリオン、またはそれらの組み合わせを殺傷すること、またはそれに対して有害、毒性、または致命的な作用を引き起こすことを指す。
【0969】
送達：本明細書で使用される場合、「送達」は、ＡＡＶ粒子、化合物、物質、実体、部位、搭載物またはペイロードを送達する作用または様式を指す。
送達剤：本明細書で使用される場合、「送達剤」は、ＡＡＶ粒子の標的細胞へのｉｎ ｖｉｖｏ送達を少なくとも部分的に容易化する任意の物質を指す。
送達剤：本明細書で使用される場合、「送達剤」は、ＡＡＶ粒子の標的細胞へのｉｎ ｖｉｖｏ送達を少なくとも部分的に容易化する任意の物質を指す。
【0970】
脱安定化した：本明細書で使用される場合、用語「脱安定化する」または「脱安定化領域」は、同じ領域または分子の開始、野生型またはネイティブ形態よりも安定性が低い領域または分子を意味する。
【0971】
検出可能な標識：本明細書で使用される場合、「検出可能な標識」は、ラジオグラフィー、蛍光、化学発光、酵素活性、吸光度などを含む当該技術分野で知られている方法によって容易に検出される別の実体に付着された、組み込まれた、または関連する１つ以上のマーカー、シグナル、または部位を指す。検出可能な標識は、放射性同位体、フルオロフォア、発色団、酵素、色素、金属イオン、リガンド、例えば、ビオチン、アビジン、ストレプトアビジン及びハプテン、量子ドットなどを含む。検出可能な標識は、本明細書に開示されるペプチドまたはタンパク質において任意の位置に位置し得る。それらは、アミノ酸、ペプチド、またはタンパク質内に存在し得るか、またはＮもしくはＣ末端に位置し得る。
【0972】
消化する：本明細書で使用される場合、用語「消化する」は、より小さな部分または成分に分裂することを意味する。ポリペプチドまたはタンパク質に言及する場合、消化は、ペプチドの生成をもたらす。
【0973】
遠位：本明細書で使用される場合、用語「遠位」は、中心から離れてまたは対象となる点または領域から離れて位置することを意味する。
投薬レジメン：本明細書で使用される場合、「投薬レジメン」は、処置、予防、または緩和ケアの投与または医師が決定したレジメンのスケジュールである。
投薬レジメン：本明細書で使用される場合、「投薬レジメン」は、処置、予防、または緩和ケアの投与または医師が決定したレジメンのスケジュールである。
【0974】
封入する：本明細書で使用される場合、用語「封入する」は、囲むこと、包囲することまたは包むことを意味する。
修飾された：本明細書で使用される場合、本開示の実施形態は、それらが構造的または化学的にかかわらず、開始点、野生型またはネイティブ分子から変化する特徴または特性を有するように設計されている場合、「修飾されている」。
修飾された：本明細書で使用される場合、本開示の実施形態は、それらが構造的または化学的にかかわらず、開始点、野生型またはネイティブ分子から変化する特徴または特性を有するように設計されている場合、「修飾されている」。
【0975】
有効量：本明細書で使用される場合、薬剤の「有効量」という用語は、有益なまたは所望の結果、例えば、臨床的結果を達成するのに十分な量であり、このように、「有効量」は、それが適用される文脈に依存する。例えば、がんを処置する薬剤を投与することの文脈では、薬剤の有効量は、例えば、薬剤の投与をせずに得られる反応と比較して、がんの本明細書で定義される処置を達成するのに十分な量である。
【0976】
発現：本明細書で使用される場合、核酸配列の「発現」は、以下の事象のうちの１つ以上を指す：（１）ＤＮＡ配列からのＲＮＡテンプレートの生成（例えば、転写による）；（２）ＲＮＡ転写産物のプロセシング（例えば、スプライシング、編集、５’キャップ形成、及び／または３’末端プロセシングによる）；（３）ＲＮＡのポリペプチドまたはタンパク質への翻訳；及び（４）ポリペプチドまたはタンパク質の翻訳後修飾。
【0977】
特徴：本明細書で使用される場合、「特徴」は、特質、特性、または区別可能な要素を指す。
製剤：本明細書で使用される場合、「製剤」は、少なくとも１つのＡＡＶ粒子及び送達剤または賦形剤を含む。
製剤：本明細書で使用される場合、「製剤」は、少なくとも１つのＡＡＶ粒子及び送達剤または賦形剤を含む。
【0978】
断片：「断片」は、本明細書で使用される場合、部分を指す。例えば、タンパク質の断片は、培養細胞から単離された全長タンパク質を消化することによって得られたポリペプチドを含み得る。
【0979】
機能的：本明細書で使用される場合、「機能的」生物学的分子は、それが特徴となる特性及び／または活性を示す形態の生物学的分子である。
遺伝子発現：用語「遺伝子発現」は、核酸配列が、成功裏の転写及びほとんどの例ではタンパク質またはペプチドを生成するための翻訳を受けるプロセスを指す。明確性のため、「遺伝子発現」の測定に言及される場合、これは、測定が、転写の核酸生成物、例えば、ＲＮＡもしくはｍＲＮＡまたは翻訳のアミノ酸生成物、例えば、ポリペプチドまたはペプチドのものであり得ることを意味することが理解されるべきである。ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ポリペプチド及びペプチドの量またはレベルを測定する方法は、当該技術分野でよく知られている。
遺伝子発現：用語「遺伝子発現」は、核酸配列が、成功裏の転写及びほとんどの例ではタンパク質またはペプチドを生成するための翻訳を受けるプロセスを指す。明確性のため、「遺伝子発現」の測定に言及される場合、これは、測定が、転写の核酸生成物、例えば、ＲＮＡもしくはｍＲＮＡまたは翻訳のアミノ酸生成物、例えば、ポリペプチドまたはペプチドのものであり得ることを意味することが理解されるべきである。ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ポリペプチド及びペプチドの量またはレベルを測定する方法は、当該技術分野でよく知られている。
【0980】
相同性：本明細書で使用される場合、用語「相同性」は、ポリマー分子間、例えば、ポリヌクレオチド分子（例えば、ＤＮＡ分子及び／またはＲＮＡ分子）間及び／またはポリペプチド分子間の全体的関連性を指す。所定の実施形態では、ポリマー分子は、それらの配列が少なくとも２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％同一または類似する場合、互いに「相同」であるとみなされる。用語「相同」は必然的に、少なくとも２つの配列（ポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列）の間の比較を指す。本開示によれば、２つのポリヌクレオチド配列は、それらがコードするポリペプチドが少なくとも約２０アミノ酸の少なくとも１つの伸長部について少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはさらに９９％である場合、相同であるとみなされる。所定の実施形態では、相同ポリヌクレオチド配列は、少なくとも４～５個の独自に特定されたアミノ酸の伸長部をコードする能力を特徴とする。長さが６０ヌクレオチド未満のポリヌクレオチド配列の場合、相同性は、少なくとも４～５個の独自に特定されたアミノ酸の伸長部をコードする能力によって決定される。本開示によれば、２つのタンパク質配列は、タンパク質が少なくとも約２０アミノ酸の少なくとも１つの伸長部について少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％同一である場合、相同であるとみなされる。
【0981】
異種領域：本明細書で使用される場合、用語「異種領域」は、相同領域とはみなされないであろう領域を指す。
相同領域：本明細書で使用される場合、用語「相同領域」は、位置、構造、進化起源、性質、形態または機能が類似する領域を指す。
相同領域：本明細書で使用される場合、用語「相同領域」は、位置、構造、進化起源、性質、形態または機能が類似する領域を指す。
【0982】
同一性：本明細書で使用される場合、用語「同一性」は、ポリマー分子間、例えば、ポリヌクレオチド分子（例えば、ＤＮＡ分子及び／またはＲＮＡ分子）間及び／またはポリペプチド分子間の全体的関連性を指す。２つのポリヌクレオチド配列の同一率の計算は、例えば、最適な比較目的のための２つの配列をアライメントすることによって実施され得る（例えば、最適なアライメントのために第１及び第２の核酸配列の一方または両方にギャップが導入され得、非同一配列は比較目的のために無視され得る）。所定の実施形態では、比較目的のためにアライメントされる配列の長さは、参照配列の長さの少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％である。次いで対応するヌクレオチド位置におけるヌクレオチドが比較される。第１の配列における位置が第２の配列における対応する位置と同じヌクレオチドによって占有されている場合、そのときは分子はその位置で同一である。２つの配列間の同一率は、２つの配列の最適なアライメントのために導入する必要があるギャップの数、及び各ギャップの長さを考慮に入れて、配列によって共有される同一位置の数に依存する。２つの配列間の配列の比較及び同一率の決定は、数学的アルゴリズムを使用して達成され得る。例えば、２つのヌクレオチド配列間の同一率は、Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．，ｅｄ．，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８８；Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅ Ｐｒｏｊｅｃｔｓ，Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｗ．，ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９３；Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｎ Ｈｅｉｎｊｅ，Ｇ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８７；Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｄａｔａ，Ｐａｒｔ Ｉ，Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ａ．Ｍ．，ａｎｄ Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ｈ．Ｇ．，ｅｄｓ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ，１９９４；及びＳｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐｒｉｍｅｒ，Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，Ｍ．ａｎｄ Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．，ｅｄｓ．，Ｍ Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９１；これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているものなどの方法を使用して決定され得る。例えば、２つのヌクレオチド配列間の同一率は、ＰＡＭ１２０重み付け残基表、１２のギャップレングスペナルティ及び４のギャップペナルティを使用してＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれた、Ｍｅｙｅｒｓ ａｎｄ Ｍｉｌｌｅｒ（ＣＡＢＩＯＳ，１９８９，４：１１－１７）のアルゴリズムを使用して決定され得る。２つのヌクレオチド配列間の同一率は、代替的に、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックスを使用してＧＣＧソフトウエアパッケージにおけるＧＡＰプログラムを使用して決定され得る。配列間の同一率を決定するために一般的に用いられる方法は、限定されないが、Ｃａｒｉｌｌｏ，Ｈ．，ａｎｄ Ｌｉｐｍａｎ，Ｄ．，ＳＩＡＭ Ｊ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍａｔｈ．，４８：１０７３（１９８８）（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているものを含む。同一性を決定するために技術は、公共に利用可能なコンピュータプログラムにおいて体系化されている。２つの配列間の相同性を決定するための例示的なコンピュータソフトウエアは、限定されないが、ＧＣＧプログラムパッケージ、Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１２（１），３８７（１９８４））、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮ、及びＦＡＳＴＡ Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．，２１５，４０３（１９９０））を含む。
【0983】
遺伝子の発現を阻害する：本明細書で使用される場合、語句「遺伝子の発現を阻害する」は、遺伝子の発現生成物の量の減少を引き起こすことを意味する。発現生成物は、遺伝子から転写されるＲＮＡ（例えば、ｍＲＮＡ）または遺伝子から転写されるｍＲＮＡから翻訳されるポリペプチドであり得る。典型的には、ｍＲＮＡのレベルの減少は、それから翻訳されるポリペプチドのレベルの減少をもたらす。発現のレベルは、ｍＲＮＡまたはタンパク質を測定するための標準的な技術を使用して決定され得る。
【0984】
Ｉｎ ｖｉｔｒｏ：本明細書で使用される場合、用語「ｉｎ ｖｉｔｒｏ」は、生物（例えば、動物、植物、または微生物）内ではなく、人工環境、例えば、試験管または反応容器、細胞培養、ペトリ皿などにおいて生じる事象を指す。
【0985】
Ｉｎ ｖｉｖｏ：本明細書で使用される場合、用語「ｉｎ ｖｉｖｏ」は、生物（例えば、動物、植物、もしくは微生物またはそれらの細胞もしくは組織）内で生じる事象を指す。
【0986】
単離された：本明細書で使用される場合、用語「単離された」は、物質または実体であって、それが関連していた成分の少なくとも一部から分離されたもの（自然におけるものであるかまたは実験的状況におけるものであるかにかかわらない）を指す。単離された物質は、それらが関連していた物質に関する純度の様々なレベルを有し得る。単離された物質及び／または実体は、それらが最初に関連していた他の成分の少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、またはそれ以上から分離され得る。所定の実施形態では、単離された薬剤は、約８０％超、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約９９％超純粋である。本明細書で使用される場合、物質は、それが他の成分を実質的に含まない場合、「純粋」である。本明細書で使用される場合、用語「実質的に単離された」は、物質が、形成または検出された環境から実質的に分離されていることを意味する。部分的分離は、例えば、本開示の物質またはＡＡＶ粒子が豊富に存在する組成物を含み得る。実質的分離は、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９重量％の本開示の化合物、またはその塩を含有する組成物を含み得る。化合物及びそれらの塩を単離するための方法は、当該技術分野で慣用である。
【0987】
リンカー：本明細書で使用される場合、「リンカー」は、２つの分子を接続する分子または分子の群を指す。リンカーは、２つの異なるポリペプチドをコードする２つの核酸分子を接続する核酸配列であり得る。リンカーは、翻訳されてもされなくてもよい。リンカーは、切断可能なリンカーであり得る。
【0988】
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）結合部位：本明細書で使用される場合、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）結合部位は、少なくともｍｉＲＮＡの「シード」領域が結合する核酸転写産物のヌクレオチド位置または領域を表す。
【0989】
改変された：本明細書で使用される場合、「改変された」は、本開示の分子の変化した状態または構造を指す。分子は、化学的、構造的、及び機能的を含む多くの方法で改変され得る。本明細書で使用される場合、本開示の実施形態は、それらが構造的または化学的にかかわらず、開始点、野生型またはネイティブ分子から変化する特徴または特性を有するまたは保有する場合、「改変されている」。
【0990】
変異：本明細書で使用される場合、用語「変異」は、後の世代に伝えられ得るバリアント（「変異体」とも呼ばれる）形態をもたらす遺伝子の構造の任意の変化を指す。遺伝子における変異は、ＤＮＡにおける単一塩基の変化、または遺伝子もしくは染色体のより大きなセクションの欠失、挿入もしくは再配列によって引き起こされ得る。
【0991】
天然に存在する：本明細書で使用される場合、「天然に存在する」または「野生型」は、人工的補助、または人間の手の関与を伴わずに天然に存在することを意味する。
非ヒト脊椎動物：本明細書で使用される場合、「非ヒト脊椎動物」は、野生及び家畜種を含む、Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓを除くすべての脊椎動物を含む。非ヒト脊椎動物の例は、限定されないが、哺乳動物、例えば、アルパカ、バンテン、バイソン、ラクダ、ネコ、ウシ、シカ、イヌ、ロバ、ガヤル、ヤギ、モルモット、ウマ、リャマ、ラバ、ブタ、ウサギ、トナカイ、ヒツジスイギュウ、及びヤクを含む。
非ヒト脊椎動物：本明細書で使用される場合、「非ヒト脊椎動物」は、野生及び家畜種を含む、Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓを除くすべての脊椎動物を含む。非ヒト脊椎動物の例は、限定されないが、哺乳動物、例えば、アルパカ、バンテン、バイソン、ラクダ、ネコ、ウシ、シカ、イヌ、ロバ、ガヤル、ヤギ、モルモット、ウマ、リャマ、ラバ、ブタ、ウサギ、トナカイ、ヒツジスイギュウ、及びヤクを含む。
【0992】
核酸：本明細書で使用される場合、用語「核酸」、「ポリヌクレオチド」及び「オリゴヌクレオチド」は、ポリデオキシリボヌクレオチド（２－デオキシ－Ｄ－リボースを含有する）、またはポリリボヌクレオチド（Ｄ－リボースを含有する）、またはプリンもしくはピリミジン塩基、または改変されたプリンもしくはピリミジン塩基のＮグリコシドである任意の他のタイプのポリヌクレオチドのいずれかから構成される任意の核酸ポリマーを指す。用語「核酸」、「ポリヌクレオチド」及び「オリゴヌクレオチド」の間の長さの区別は意図されておらず、これらの用語は互換的に使用される。これらの用語は、分子の一次構造のみを指す。よって、これらの用語は、二本鎖及び一本鎖ＤＮＡ、ならびに二本鎖及び一本鎖ＲＮＡを含む。
【0993】
オフターゲット：本明細書で使用される場合、「オフターゲット」は、任意の１つ以上の標的、遺伝子、または細胞転写産物に対する任意の意図的ではない効果を指す。
オープンリーディングフレーム：本明細書で使用される場合、「オープンリーディングフレーム」または「ＯＲＦ」は、所与のリーディングフレーム内で、リーディングフレームの端部以外で終止コドンを含有しない配列を指す。
オープンリーディングフレーム：本明細書で使用される場合、「オープンリーディングフレーム」または「ＯＲＦ」は、所与のリーディングフレーム内で、リーディングフレームの端部以外で終止コドンを含有しない配列を指す。
【0994】
機能可能に連結された：本明細書で使用される場合、語句「機能可能に連結された」は、２つ以上の分子、コンストラクト、転写産物、実体、部位などの間の機能的接続を指す。非限定的な例として、プロモーターは、プロモーター配列がヌクレオチド配列の転写を制御及び／または調整する場合、ヌクレオチド配列に「機能可能に連結されている」。
【0995】
患者：本明細書で使用される場合、「患者」は、処置を求め得るまたは必要とし得る、処置を必要とする、処置を受けている、処置を受ける予定がある対象、または特定の疾患もしくは病態のために熟練した専門家によるケア下にある対象を指す。
【0996】
ペイロード：本明細書で使用される場合、「ペイロード」または「ペイロード領域」は、ウイルスゲノムによってコードされるもしくはウイルスゲノム内の１つ以上のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド領域、またはそのようなポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド領域の発現生成物、例えば、導入遺伝子、ポリペプチドもしくはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、または調節性核酸もしくは調整性核酸を指す。
【0997】
ペイロードコンストラクト：本明細書で使用される場合、「ペイロードコンストラクト」は、末端逆位反復（ＩＴＲ）配列と一方または両方の側で隣接したペイロードをコードするまたは含むポリヌクレオチド領域を含む１つ以上のベクターコンストラクトである。ペイロードコンストラクトは、治療用ウイルスゲノムを生成するためにウイルス生成細胞において複製されるテンプレートを提供する。
【0998】
ペイロードコンストラクトベクター：本明細書で使用される場合、「ペイロードコンストラクトベクター」は、ペイロードコンストラクト、及び細菌細胞におけるペイロードコンストラクトの複製及び発現のための調整性領域をコードするまたは含むベクターである。
【0999】
ペイロードコンストラクト発現ベクター：本明細書で使用される場合、「ペイロードコンストラクト発現ベクター」は、ペイロードコンストラクトをコードするまたは含むベクターであって、ウイルス複製細胞におけるウイルス発現のための成分をコードするまたは含む１つ以上のポリヌクレオチド領域をさらに含むベクターである。
【1000】
ペプチド：本明細書で使用される場合、「ペプチド」は、５０アミノ酸長未満またはそれに等しく、例えば、約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０アミノ酸長である。
【1001】
薬学的に許容可能な：語句「薬学的に許容可能な」は、合理的な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずに、妥当な利益／リスク比に見合った、ヒト及び動物の組織と接触して使用するのに好適なそれらの化合物、物質、組成物、及び投薬形態を指すために本明細書で用いられる。
【1002】
薬学的に許容可能な賦形剤：語句「薬学的に許容可能な賦形剤」は、本明細書で使用される場合、本明細書に記載の化合物以外の任意の成分（例えば、活性化合物を懸濁または溶解することが可能なビヒクル）であって、患者において実質的に非毒性及び非炎症性である特性を有するものを指す。賦形剤は、例えば、抗付着剤、抗酸化剤、結合剤、コーティング剤、圧縮補助剤、崩壊剤、色素（着色剤）、皮膚軟化剤、乳化剤、充填剤（希釈剤）、フィルム形成剤またはコーティング剤、香味剤、芳香剤、流動促進剤（流動性向上剤）、滑沢剤、防腐剤、印刷インク、吸着剤、懸濁または分散剤、甘味剤、及び水和水を含み得る。例示的な賦形剤は、限定されないが、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム（二塩基性）、ステアリン酸カルシウム、クロスカルメロース、架橋ポリビニルピロリドン、クエン酸、クロスポビドン、システイン、エチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、マルチトール、マンニトール、メチオニン、メチルセルロース、メチルパラベン、微結晶性セルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポビドン、アルファ化デンプン、プロピルパラベン、パルミチン酸レチニル、シェラック、二酸化ケイ素、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クエン酸ナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ソルビトール、デンプン（コーン）、ステアリン酸、スクロース、タルク、二酸化チタン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＣ、及びキシリトールを含む。
【1003】
薬学的に許容可能な塩：本開示はまた、本明細書に記載の化合物の薬学的に許容可能な塩を含む。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容可能な塩」は、開示される化合物の誘導体であって、親化合物が、既存の酸または塩基部位をその塩形態に変換することによって（例えば、遊離塩基基を好適な有機酸と反応させることによって）改変されたものを指す。薬学的に許容可能な塩の例は、限定されないが、塩基性残基、例えば、アミンの鉱酸または有機酸塩；酸性残基、例えば、カルボン酸のアルカリまたは有機塩などを含む。代表的な酸付加塩は、酢酸塩、酢酸、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプトン酸塩、ヘキサン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などを含む。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩は、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなど、ならびに非毒性アンモニウム、第４級アンモニウム、及び限定されないが、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンを含むアミンカチオンなどを含む。本開示の薬学的に許容可能な塩は、例えば、非毒性無機または有機酸から形成された親化合物の従来の非毒性塩を含む。本開示の薬学的に許容可能な塩は、従来の化学的方法によって塩基性または酸性部位を含有する親化合物から合成され得る。通常、そのような塩は、水もしくは有機溶媒、またはその２つの混合物中でこれらの化合物の遊離酸または塩基形態を化学量論量の適切な塩基または酸と反応させることによって調製され得る；通常、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルのような非水性媒体が使用され得る。好適な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８５，ｐ．１４１８，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ，Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（ｅｄｓ．），Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ，２００８、及びＢｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，１－１９（１９７７）（これらの内容はそれぞれ、本開示と矛盾しない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）で見られる。
【1004】
薬学的に許容可能な溶媒和物：用語「薬学的に許容可能な溶媒和物」は、本明細書で使用される場合、本開示の化合物であって、好適な溶媒の分子が結晶格子に組み込まれているものを指す。好適な溶媒は、投与される投薬量で生理的に耐容可能である。例えば、溶媒和物は、有機溶媒、水、またはそれらの混合物を含む溶液からの結晶化、再結晶化、または析出によって調製され得る。好適な溶媒の例は、エタノール、水（例えば、一、二、及び三水和物）、Ｎ－メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ’－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ’－ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン（ＤＭＥＵ）、１，３－ジメチル－３，４，５，６－テトラヒドロ－２－（１Ｈ）－ピリミジノン（ＤＭＰＵ）、アセトニトリル（ＡＣＮ）、プロピレングリコール、酢酸エチル、ベンジルアルコール、２－ピロリドン、安息香酸ベンジルなどである。水が溶媒である場合、溶媒和物は、「水和物」と称される。
【1005】
薬物動態：本明細書で使用される場合、「薬物動態」は、生存生物に投与される物質の結末の決定に関する場合、分子または化合物の任意の１つ以上の特性を指す。薬物動態は、吸収、分布、代謝及び排泄の程度及び速度を含むいくつかの領域に分けられる。これは一般的に、ＡＤＭＥと称される：（Ａ）吸収は、血液循環に入る物質のプロセスである；（Ｄ）分布は、身体の流体及び組織全体にわたる物質の分散または行きわたりである；（Ｍ）代謝（または生体内変化）は、親化合物から娘代謝物への不可逆的変換である；及び（Ｅ）排泄（または排除）は、身体から物質の排除を指す。稀な場合では、いくつかの薬物は、身体組織において不可逆的に蓄積する。
【1006】
物理化学的：本明細書で使用される場合、「物理化学的」は、物理的及び／または化学的特性を意味し、またはそれに関する。
予防すること：本明細書で使用される場合、用語「予防すること」または「予防」は、感染症、疾患、障害及び／または病態の発症を部分的または完全に遅延させること；特定の感染症、疾患、障害、及び／または病態の１つ以上の症状、特徴、または臨床的徴候の発症を部分的または完全に遅延させること；特定の感染症、疾患、障害、及び／または病態の１つ以上の症状、特徴、または兆候の発症を部分的または完全に遅延させること；感染症、特定の疾患、障害及び／または病態からの進行を部分的または完全に遅延させること；及び／または感染症、疾患、障害、及び／または病態に関連する病状を発症するリスクを低下させることを指す。
予防すること：本明細書で使用される場合、用語「予防すること」または「予防」は、感染症、疾患、障害及び／または病態の発症を部分的または完全に遅延させること；特定の感染症、疾患、障害、及び／または病態の１つ以上の症状、特徴、または臨床的徴候の発症を部分的または完全に遅延させること；特定の感染症、疾患、障害、及び／または病態の１つ以上の症状、特徴、または兆候の発症を部分的または完全に遅延させること；感染症、特定の疾患、障害及び／または病態からの進行を部分的または完全に遅延させること；及び／または感染症、疾患、障害、及び／または病態に関連する病状を発症するリスクを低下させることを指す。
【1007】
増殖する：本明細書で使用される場合、用語「増殖する」は、成長する、増えるもしくは増加するまたは急速に成長する、増える、もしくは増加することを引き起こすことを意味する。「増殖性」は、増殖する能力を有することを意味する。「抗増殖性」は、増殖特性に対して逆のまたは不適切な特性を有することを意味する。
【1008】
予防的：本明細書で使用される場合、「予防的」は、疾患の広がりを防止するために使用される治療剤または作用過程を指す。
予防：本明細書で使用される場合、「予防」は、健康を維持するために及び疾患の広がりを防止するために取られる手段を指す。
予防：本明細書で使用される場合、「予防」は、健康を維持するために及び疾患の広がりを防止するために取られる手段を指す。
【1009】
対象となるタンパク質：本明細書で使用される場合、用語「対象となるタンパク質」または「所望のタンパク質」は、本明細書で提供されるものならびにその断片、変異体、バリアント、及び変化体を含む。
【1010】
近接する：本明細書で使用される場合、用語「近接する」は、中心に対してまたは対象となる点もしくは領域に対してより近く配置されていることを意味する。
精製された：本明細書で使用される場合、「精製する」、「精製された」、「精製」は、不要な成分、物質汚染、混和または欠陥から実質的に純粋または清澄にすることを意味する。「精製された」は、純粋である状態を指す。「精製」は、純粋にするプロセスを指す。
精製された：本明細書で使用される場合、「精製する」、「精製された」、「精製」は、不要な成分、物質汚染、混和または欠陥から実質的に純粋または清澄にすることを意味する。「精製された」は、純粋である状態を指す。「精製」は、純粋にするプロセスを指す。
【1011】
領域：本明細書で使用される場合、用語「領域」は、区域または一般的場所を指す。所定の実施形態では、タンパク質またはタンパク質モジュールに言及する場合、領域は、タンパク質またはタンパク質モジュールに沿うアミノ酸の線状配列を含み得、または三次元領域、エピトープ及び／またはエピトープのクラスターを含み得る。所定の実施形態では、領域は、末端領域を含む。本明細書で使用される場合、用語「末端領域」は、所与の薬剤の端部または末端に位置する領域を指す。タンパク質に言及する場合、末端領域は、Ｎ及び／またはＣ末端を含み得る。Ｎ末端は、遊離アミノ基を有するアミノ酸を含むタンパク質の端部を指す。Ｃ末端は、遊離カルボキシル基を有するアミノ酸を含むタンパク質の端部を指す。Ｎ及び／またはＣ末端領域は、そのため、Ｎ及び／またはＣ末端ならびに周囲のアミノ酸を含み得る。所定の実施形態では、Ｎ及び／またはＣ末端領域は、約３アミノ酸～約３０アミノ酸、約５アミノ酸～約４０アミノ酸、約１０アミノ酸～約５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１００アミノ酸及び／または少なくとも１００アミノ酸を含む。所定の実施形態では、Ｎ末端領域は、Ｎ末端を含むが、Ｃ末端を含まない任意の長さのアミノ酸を含み得る。所定の実施形態では、Ｃ末端領域は、Ｃ末端を含むが、Ｎ末端を含まない任意の長さのアミノ酸を含み得る。
【1012】
所定の実施形態では、ポリヌクレオチドに言及する場合、領域は、ポリヌクレオチドに沿って核酸の線状配列を含み得、または三次元領域、二次構造、または三次構造を含み得る。所定の実施形態では、領域は、末端領域を含む。本明細書で使用される場合、用語「末端領域」は、所与の薬剤の端部または末端に位置する領域を指す。ポリヌクレオチドに言及する場合、末端領域は、５’及び３’末端を含み得る。５’末端は、遊離リン酸基を有する核酸を含むポリヌクレオチドの端部を指す。３’末端は、遊離ヒドロキシル基を有する核酸を含むポリヌクレオチドの端部を指す。５’及び３’領域は、そのため、５’及び３’末端及び周囲の核酸を含み得る。所定の実施形態では、５’及び３’末端領域は、約９核酸～約９０核酸、約１５核酸～約１２０核酸、約３０核酸～約１５０核酸、約６０核酸～約３００核酸及び／または少なくとも３００核酸を含む。所定の実施形態では、５’領域は、５’末端を含むが、３’末端を含まない任意の長さの核酸を含み得る。所定の実施形態では、３’領域は、３’末端を含むが、５’末端を含まない任意の長さの核酸を含み得る。
【1013】
ＲＮＡまたはＲＮＡ分子：本明細書で使用される場合、用語「ＲＮＡ」または「ＲＮＡ分子」または「リボ核酸分子」は、リボヌクレオチドのポリマーを指し、用語「ＤＮＡ」または「ＤＮＡ分子」または「デオキシリボ核酸分子」は、デオキシリボヌクレオチドのポリマーを指す。ＤＮＡ及びＲＮＡは、例えば、それぞれ、ＤＮＡ複製及びＤＮＡの転写によって天然に合成され得るか、または化学的に合成され得る。ＤＮＡ及びＲＮＡは、一本鎖（すなわち、それぞれ、ｓｓＲＮＡまたはｓｓＤＮＡ）または多重鎖（例えば、二本鎖、すなわち、それぞれ、ｄｓＲＮＡ及びｄｓＤＮＡ）であり得る。用語「ｍＲＮＡ」または「メッセンジャーＲＮＡ」は、本明細書で使用される場合、１つ以上のポリペプチド鎖のアミノ酸配列をコードする一本鎖ＲＮＡを指す。
【1014】
ＲＮＡ干渉またはＲＮＡｉ：本明細書で使用される場合、用語「ＲＮＡ干渉」または「ＲＮＡｉ」は、対応するタンパク質をコードする遺伝子の発現の阻害または干渉または「サイレンシング」をもたらすＲＮＡ分子によって媒介される配列特異的調整性メカニズムを指す。ＲＮＡｉは、植物、動物及び真菌を含む多くのタイプの生物において観察されている。ＲＮＡｉは、外来ＲＮＡ（例えば、ウイルスＲＮＡ）を除去するために細胞において自然に生じる。自然のＲＮＡｉは、分解メカニズムを他の類似するＲＮＡ配列に指示する、遊離ｄｓＲＮＡから切断された断片を介して進行する。ＲＮＡｉは、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）によって制御され、細胞質において短鎖／低分子ｄｓＲＮＡ分子によって開始され、そこでそれらは、触媒的ＲＩＳＣ成分アルゴノートと相互作用する。ｄｓＲＮＡ分子は、外因的に細胞に導入され得る。外因性ｄｓＲＮＡは、リボヌクレアーゼタンパク質であるＤｉｃｅｒを活性化することによってＲＮＡｉを開始させ、ＤｉｃｅｒはｄｓＲＮＡと結合し、それを切断して、各末端に数個の不対オーバーハング塩基を有する２１～２５塩基対の二重鎖断片を生成する。これらの短鎖二本鎖断片は、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）と呼ばれる。
【1015】
サンプル：本明細書で使用される場合、用語「サンプル」または「生物学的サンプル」は、その組織、細胞または成分部分（例えば、限定されないが、血液、粘液、リンパ液、滑液、脳脊髄液、唾液、羊水、羊膜帯血液、尿、膣液及び精液を含む体液）のサブセットを指す。サンプルはさらに、限定されないが、例えば、血漿、血清、髄液、リンパ液、皮膚の外部切片、気道、腸管、及び尿生殖路、涙、唾液、母乳、血液細胞、腫瘍、器官を含む、生物全体またはその組織、細胞もしくは成分部分のサブセット、またはその画分もしくは部分から調製されたホモジネート、ライセートまたは抽出物を含み得る。サンプルはさらに、タンパク質または核酸分子などの細胞成分を含有し得る栄養素ブロスまたはゲルなどの媒体を指す。
【1016】
自己相補性ウイルス粒子：本明細書で使用される場合、「自己相補性ウイルス粒子」は、少なくとも２つの成分、すなわち、タンパク質カプシド及びカプシド内に封入された自己相補性ゲノムをコードするポリヌクレオチド配列を含む粒子である。
【1017】
センス鎖：本明細書で使用される場合、ｓｉＲＮＡ分子の「センス鎖」または「第２の鎖」または「パッセンジャー鎖」という用語は、アンチセンス鎖または第１の鎖に相補的である鎖を指す。ｓｉＲＮＡ分子のアンチセンス及びセンス鎖は、二本鎖構造を形成するためにハイブリダイズされる。本明細書で使用される場合、「ｓｉＲＮＡ二本鎖」は、サイレンシングについて標的とされた遺伝子のｍＲＮＡの約１０～５０ヌクレオチドのセクションに対して十分な相補性を有するｓｉＲＮＡ鎖及び他方のｓｉＲＮＡ鎖と二本鎖を形成するのに十分な相補性を有するｓｉＲＮＡ鎖を含む。
【1018】
短鎖干渉ＲＮＡまたはｓｉＲＮＡ：本明細書で使用される場合、用語「短鎖干渉ＲＮＡ」、「低分子干渉ＲＮＡ」または「ｓｉＲＮＡ」は、ＲＮＡｉを指向または媒介することが可能な約５～６０の間のヌクレオチド（またはヌクレオチドアナログ）を含むＲＮＡ分子（またはＲＮＡアナログ）を指す。所定の実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子は、約１５～３０個の間のヌクレオチドまたはヌクレオチドアナログ、例えば、約１６～２５個の間のヌクレオチド（またはヌクレオチドアナログ）、約１８～２３個の間のヌクレオチド（またはヌクレオチドアナログ）、約１９～２２個の間のヌクレオチド（またはヌクレオチドアナログ）（例えば、１９、２０、２１または２２ヌクレオチドまたはヌクレオチドアナログ）、約１９～２５個の間のヌクレオチド（またはヌクレオチドアナログ）、及び約１９～２４個の間のヌクレオチド（またはヌクレオチドアナログ）を含む。用語「短鎖」ｓｉＲＮＡは、５～２３ヌクレオチド、例えば、２１ヌクレオチド（またはヌクレオチドアナログ）、例えば、１９、２０、２１または２２ヌクレオチドを含むｓｉＲＮＡを指す。用語「長鎖」ｓｉＲＮＡは、２４～６０ヌクレオチド、例えば、約２４～２５ヌクレオチド、例えば、２３、２４、２５または２６ヌクレオチドを含むｓｉＲＮＡを指す。短鎖ｓｉＲＮＡは、いくつかの例では、より短鎖のｓｉＲＮＡがＲＮＡｉを媒介する能力を保持する限り、１９未満のヌクレオチド、例えば、１６、１７または１８ヌクレオチド、またはわずか５ヌクレオチドを含み得る。同様に、長鎖ｓｉＲＮＡは、いくつかの例では、２６超のヌクレオチド、例えば、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、またはさらに６０ヌクレオチドであって、但し、より長鎖のｓｉＲＮＡが、ＲＮＡｉを媒介する能力または短鎖ｓｉＲＮＡへのさらなるプロセシング、例えば、酵素的プロセシングを欠く翻訳抑制を保持する、ヌクレオチドを含み得る。ｓｉＲＮＡは、一本鎖ＲＮＡ分子（ｓｓ－ｓｉＲＮＡ）またはｓｉＲＮＡ二本鎖と呼ばれる二本鎖構造を形成するためにハイブリダイズされたセンス鎖及びアンチセンス鎖を含む二本鎖ＲＮＡ分子（ｄｓ－ｓｉＲＮＡ）であり得る。
【1019】
シグナル配列：本明細書で使用される場合、語句「シグナル配列」は、タンパク質の輸送または局在化を指示し得る配列を指す。
単回単位用量：本明細書で使用される場合、「単回単位用量」は、１つの用量／１回で／単一経路／単一接触点、すなわち、単一投与事象で投与される任意の治療剤の用量である。所定の実施形態では、単回単位用量は、別個の投薬形態（例えば、錠剤、カプセル、パッチ、装填されたシリンジ、バイアルなど）として提供される。
単回単位用量：本明細書で使用される場合、「単回単位用量」は、１つの用量／１回で／単一経路／単一接触点、すなわち、単一投与事象で投与される任意の治療剤の用量である。所定の実施形態では、単回単位用量は、別個の投薬形態（例えば、錠剤、カプセル、パッチ、装填されたシリンジ、バイアルなど）として提供される。
【1020】
類似性：本明細書で使用される場合、用語「類似性」は、ポリマー分子間、例えば、ポリヌクレオチド分子（例えば、ＤＮＡ分子及び／またはＲＮＡ分子）間及び／またはポリペプチド分子間の全体的関連性を指す。ポリマー分子の互いの類似率の計算は、類似率の計算が当該技術分野で理解されるように保存的置換を考慮に入れることを除き、同一率の計算と同じ手法で実施され得る。
【1021】
分割用量：本明細書で使用される場合、「分割用量」は、単回単位用量または総１日用量の２つ以上の用量への分割である。
安定な：本明細書で使用される場合、「安定な」は、反応混合物から有用な程度の純度への単離を乗り切るのに十分に頑強であり、所定の実施形態では、有効な治療剤への製剤化が可能である化合物を指す。
安定な：本明細書で使用される場合、「安定な」は、反応混合物から有用な程度の純度への単離を乗り切るのに十分に頑強であり、所定の実施形態では、有効な治療剤への製剤化が可能である化合物を指す。
【1022】
安定化された：本明細書で使用される場合、用語「安定化する」、「安定化された」、「安定化された領域」は、安定にするまたは安定になることを意味する。
対象：本明細書で使用される場合、用語「対象」または「患者」は、本開示に従う組成物が、例えば、実験、診断、予防、及び／または治療の目的のために投与され得る任意の生物を指す。典型的な対象は、動物（例えば、哺乳動物、例えば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、及びヒト）及び／または植物を含む。対象または患者は、処置を求め得るまたは必要とし得る、処置を必要とする、処置を受けている、処置を受ける予定がある、または特定の疾患もしくは病態のために熟練した専門家によるケア下にある。
対象：本明細書で使用される場合、用語「対象」または「患者」は、本開示に従う組成物が、例えば、実験、診断、予防、及び／または治療の目的のために投与され得る任意の生物を指す。典型的な対象は、動物（例えば、哺乳動物、例えば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、及びヒト）及び／または植物を含む。対象または患者は、処置を求め得るまたは必要とし得る、処置を必要とする、処置を受けている、処置を受ける予定がある、または特定の疾患もしくは病態のために熟練した専門家によるケア下にある。
【1023】
実質的に：本明細書で使用される場合、用語「実質的に」は、対象となる特徴または特性の全体または全体に近い程度または度合いの定量的状態を指す。当業者は、生物学的及び化学的現象が、完成に進むこと及び／または完了まで進行することまたは絶対的結果を達成もしくは回避することは、仮にあるとしても、ほとんどないことを理解する。そのため、用語「実質的に」は、多くの生物学的及び化学的現象において固有の完全性の潜在的欠如を捉えるために本明細書で使用される。
【1024】
実質的に等しい：本明細書で使用される場合、用量間の時間差に関する場合、その用語はプラス／マイナス２％を意味する。
実質的に同時に：本明細書で使用される場合及びそれが複数の用量に関する場合、その用語は、２秒以内を意味する。
実質的に同時に：本明細書で使用される場合及びそれが複数の用量に関する場合、その用語は、２秒以内を意味する。
【1025】
に罹患している：疾患、障害、及び／または病態「に罹患している」個体は、疾患、障害、及び／または病態の１つ以上の症状を有すると診断されているまたはそれを示す。
にかかりやすい：疾患、障害、及び／または病態に「かかりやすい」個体は、疾患、障害、及び／または病態の症状を有すると診断されていない及び／またはそれを示さない場合があるが、疾患またはその症状を発症する傾向を保有する。所定の実施形態では、疾患、障害、及び／または病態（例えば、がん）にかかりやすい個体は、以下の１つ以上によって特性化され得る：（１）疾患、障害、及び／または病態の発症に関連する遺伝子変異；（２）疾患、障害、及び／または病態の発症に関連する遺伝子多型；（３）疾患、障害、及び／または病態に関連するタンパク質及び／または核酸の発現及び／または活性の増加及び／または低下；（４）疾患、障害、及び／または病態の発症に関連する習慣及び／または生活様式；（５）疾患、障害、及び／または病態の家族歴；及び（６）疾患、障害、及び／または病態の発症に関連する微生物への曝露及び／または感染。所定の実施形態では、疾患、障害、及び／または病態にかかりやすい個体は、疾患、障害、及び／または病態を発症する。所定の実施形態では、疾患、障害、及び／または病態にかかりやすい個体は、疾患、障害、及び／または病態を発症しない。
にかかりやすい：疾患、障害、及び／または病態に「かかりやすい」個体は、疾患、障害、及び／または病態の症状を有すると診断されていない及び／またはそれを示さない場合があるが、疾患またはその症状を発症する傾向を保有する。所定の実施形態では、疾患、障害、及び／または病態（例えば、がん）にかかりやすい個体は、以下の１つ以上によって特性化され得る：（１）疾患、障害、及び／または病態の発症に関連する遺伝子変異；（２）疾患、障害、及び／または病態の発症に関連する遺伝子多型；（３）疾患、障害、及び／または病態に関連するタンパク質及び／または核酸の発現及び／または活性の増加及び／または低下；（４）疾患、障害、及び／または病態の発症に関連する習慣及び／または生活様式；（５）疾患、障害、及び／または病態の家族歴；及び（６）疾患、障害、及び／または病態の発症に関連する微生物への曝露及び／または感染。所定の実施形態では、疾患、障害、及び／または病態にかかりやすい個体は、疾患、障害、及び／または病態を発症する。所定の実施形態では、疾患、障害、及び／または病態にかかりやすい個体は、疾患、障害、及び／または病態を発症しない。
【1026】
持続放出：本明細書で使用される場合、用語「持続放出」は、特定の期間にわたって放出速度が一致する薬学的組成物または化合物放出プロファイルを指す。
合成：用語「合成」は、人間の手によって生成される、調製される、及び／または製造されることを意味する。本開示のポリヌクレオチドもしくはポリペプチドまたは他の分子の合成は、化学的または酵素的であり得る。
合成：用語「合成」は、人間の手によって生成される、調製される、及び／または製造されることを意味する。本開示のポリヌクレオチドもしくはポリペプチドまたは他の分子の合成は、化学的または酵素的であり得る。
【1027】
標的とする：本明細書で使用される場合、「標的とする」は、標的核酸にハイブリダイズし、所望の効果を誘導する核酸配列の設計及び選択のプロセスを意味する。
標的細胞：本明細書で使用される場合、「標的細胞」は、対象となる任意の１つ以上の細胞を指す。細胞は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｓｉｔｕでまたは生物の組織もしくは器官において見られ得る。生物は、動物、例えば、哺乳動物、ヒト、またはヒト患者であり得る。
標的細胞：本明細書で使用される場合、「標的細胞」は、対象となる任意の１つ以上の細胞を指す。細胞は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｓｉｔｕでまたは生物の組織もしくは器官において見られ得る。生物は、動物、例えば、哺乳動物、ヒト、またはヒト患者であり得る。
【1028】
末端領域：本明細書で使用される場合、用語「末端領域」は、連結されたヌクレオシドまたはアミノ酸（それぞれ、ポリヌクレオチドまたはポリペプチド）の領域の５’または３’端部上の領域を指す。
【1029】
末端最適化されている：用語「末端最適化されている」は、核酸に言及する場合、核酸の末端領域が、ネイティブまたは野生型末端領域にわたって何らかの方法で改善されている、例えば、コドン最適化されていることを意味する。
【1030】
治療剤：用語「治療剤」は、対象に投与された場合、治療的、診断的、及び／または予防的効果を有する及び／または所望の生物学的及び／または薬理学的効果を引き起こす任意の薬剤を指す。
【1031】
治療的有効量：本明細書で使用される場合、用語「治療的有効量」は、感染症、疾患、障害、及び／または病態に罹患しているまたはかかりやすい対象に投与される場合、感染症、疾患、障害、及び／または病態を処置する、その症状を改善する、その発症を診断する、予防する、及び／または遅延させるのに十分な、送達される薬剤（例えば、核酸、薬物、治療剤、診断剤、予防剤など）の量を意味する。所定の実施形態では、治療的有効量は、単回用量で提供される。所定の実施形態では、治療的有効量は、複数の用量を含む投薬レジメンで投与される。当業者は、所定の実施形態では、単位投薬形態が、そのような投薬レジメンの一部として投与される場合に有効な量を含む場合、特定の薬剤または実体の治療的有効量を含むとみなされ得ることを理解する。
【1032】
治療的に有効なアウトカム：本明細書で使用される場合、用語「治療的に有効アウトカム」は、感染症、疾患、障害、及び／または病態を処置する、その症状を改善する、診断する、予防する、及び／またはその発症を遅延させるために、感染症、疾患、障害、及び／または病態に罹患しているまたはかかりやすい対象において十分なアウトカムを意味する。
【1033】
総１日用量：本明細書で使用される場合、「総１日用量」は、２４時間の期間で与えれるまたは処方される量である。それは、単回単位用量として投与され得る。
トランスフェクション：本明細書で使用される場合、用語「トランスフェクション」は、外因性核酸を細胞に導入するための方法を指す。トランスフェクションの方法は、限定されないが、化学的方法、物理的処置及び陽イオン性脂質または混合物を含む。
トランスフェクション：本明細書で使用される場合、用語「トランスフェクション」は、外因性核酸を細胞に導入するための方法を指す。トランスフェクションの方法は、限定されないが、化学的方法、物理的処置及び陽イオン性脂質または混合物を含む。
【1034】
処置すること：本明細書で使用される場合、用語「処置すること」は、特定の感染症、疾患、障害、及び／または病態の１つ以上の症状または特徴を部分的または完全に軽減する、好転させる、改善する、緩和する、その発症を遅延させる、その進行を阻害する、その重症度を減少させる、及び／またはその発生率を減少させることを指す。例えば、がんを「処置すること」は、腫瘍の生存、成長、及び／または広がりを阻害することを指し得る。処置は、疾患、障害、及び／または病態に関連する病状を発症するリスクを減少させる目的のため、疾患、障害、及び／または病態の兆候を示さない対象及び／または疾患、障害、及び／または病態の早期徴候のみを示す対象に投与され得る。
【1035】
改変されていない：本明細書で使用される場合、「改変されていない」は、任意の方法で変更される前の任意の物質、化合物または分子を指す。改変されていないは、常にではないが、生物分子の野生型またはネイティブ形態を指し得る。分子は、一連の改変を受け得ることにより、各々の改変された分子が、後の改変のための「改変されていない」開始分子として機能し得る。
【1036】
ベクター：本明細書で使用される場合、「ベクター」は、異種分子を輸送し、形質導入し、またはそうでなければその担体として作用する任意の分子または部位である。本開示のベクターは、組換え的に生成され得、及び／またはアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づき得、及び／またはそれを含み得る。そのような親または参照ＡＡＶ配列は、ベクターを修飾するためのオリジナルの、２番目の、３番目のまたはその後の配列として機能し得る。非限定的な例では、そのような親または参照ＡＡＶ配列は、以下の配列のうちの任意の１つ以上を含み得る：ポリペプチドまたはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列であって、その配列が、野生型であり得、または野生型から改変され得、かつその配列が、タンパク質、タンパク質ドメイン、またはタンパク質の１つ以上のサブユニットの全長または部分配列をコードし得るもの；野生型であり得、または野生型から改変され得る調節性または調整性核酸を含むポリヌクレオチド；及び野生型配列から改変されていてもいなくてもよい導入遺伝子。これらのＡＡＶ配列は、１つ以上のコドン（核酸レベルで）もしくはアミノ酸（ポリペプチドレベルで）の「ドナー」配列または１つ以上のコドン（核酸レベルで）もしくはアミノ酸（ポリペプチドレベルで）の「アクセプター」配列のいずれかとして機能し得る。
【1037】
ウイルスゲノム：本明細書で使用される場合、「ウイルスゲノム」または「ベクターゲノム」は、ＡＡＶ粒子に封入された核酸配列（複数可）を指す。
ＶＩＩ．均等物及び範囲
当業者は、本明細書に記載の本開示に従う特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、または慣用の実験を超えないものを使用して確認することができる。本開示の範囲は、上記の説明に限定されることは意図されておらず、むしろ添付の特許請求の範囲に示されるとおりである。
ＶＩＩ．均等物及び範囲
当業者は、本明細書に記載の本開示に従う特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、または慣用の実験を超えないものを使用して確認することができる。本開示の範囲は、上記の説明に限定されることは意図されておらず、むしろ添付の特許請求の範囲に示されるとおりである。
【1038】
特許請求の範囲において、「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」などの冠詞は、逆に示されない限り、または別段文脈から明らかでない限り、１つまたは複数を意味し得る。群の１つ以上のメンバーの間に「または」を含む請求項または記載は、逆に示されない限りまたは別段文脈から明らかでない限り、群のメンバーの１つ、複数、またはすべてが所与の生成物またはプロセスに存在し、用いられ、またはそうでなければ関連する場合に満たされるとみなされる。本開示は、群の正確に１つのメンバーが、所与の生成物またはプロセスに存在する、用いられる、またはそうでなければ関連する実施形態を含む。本開示は、複数の群メンバー、またはその全体が、所与の生成物またはプロセスに存在する、用いられる、またはそうでなければ関連する実施形態を含む。
【1039】
それはまた、用語「含む」が、オープンであり、追加の要素または工程の包含を許可するが必要としないことが留意される。よって、用語「含む」が本明細書で使用される場合、用語「からなる」も包含及び開示される。
【1040】
範囲が与えられる場合、端点が含まれる。さらに、別段示されない限りまたは別段文脈及び当業者の理解から明らかでない限り、範囲として表される値は、文脈が別段明らかに示さない限り、本開示の異なる実施形態における記述された範囲内の任意の特定の値または副次的範囲を、範囲の下限の単位の１０分の１まで想定し得ることを理解されたい。
【1041】
また、先行技術に入る本開示の任意の特定の実施形態は、特許請求の範囲の任意の１つ以上から明示的に除外され得ることを理解されたい。そのような実施形態は、当業者に知られているとみなされるので、それらは、除外が本明細書で明示的に示されていない場合でも除外され得る。本開示の組成物の任意の特定の実施形態（例えば、任意の抗生物質、治療または活性成分；任意の生成方法；任意の使用方法など）は、先行技術の存在に関連するかどうかにかかわらず、任意の理由で、任意の１つ以上の請求項から除外され得る。
【1042】
使用されている言葉は、限定ではなく説明の言葉であること、及び本開示のその広い態様における真の範囲及び趣旨から逸脱することなく、添付の特許請求の範囲の範囲内で変更がなされ得ることを理解されたい。
【1043】
本開示は、記載されているいくつかの実施形態に関してある程度の長さ及びある程度の特殊性をもって記載されているが、それは任意のそのような詳細もしくは実施形態または任意の特定の実施形態に限定されるべきではないことが意図されているが、先行技術に鑑みてそのような請求項の最も広い可能性のある解釈を提供し、これにより本開示の意図された範囲を効果的に包含するように添付の請求項を参照して解釈されるべきである。
【1044】
本明細書で挙げられたすべての刊行物、特許出願、特許、及び他の参考文献は、それらの全体が参照により組み込まれる。矛盾する場合、定義を含む本明細書が優先する。また、セクションの見出し、物質、方法、及び例は、例示にすぎず、限定することは意図されていない。
【実施例】
【1045】
ＶＩＩＩ．実施例
実施例１．ソースＲｅｐ／Ｃａｐ ＢＩＩＣの生成（Ａ）
ＣＰ ＢＥＶプール
Ｓｆ９ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで１９～２０ｍＬの機能体積のＨｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地に希釈した。振盪フラスコを、Ｓｆ９細胞混合物の細胞密度が４．０×１０６細胞／ｍＬに増殖するまで最初の増殖（Ｐ０、３～４日）で２７℃でインキュベーションした（１３５ｒｐｍの振盪、０％ｖ／ｖのＣＯ２）。
実施例１．ソースＲｅｐ／Ｃａｐ ＢＩＩＣの生成（Ａ）
ＣＰ ＢＥＶプール
Ｓｆ９ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで１９～２０ｍＬの機能体積のＨｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地に希釈した。振盪フラスコを、Ｓｆ９細胞混合物の細胞密度が４．０×１０６細胞／ｍＬに増殖するまで最初の増殖（Ｐ０、３～４日）で２７℃でインキュベーションした（１３５ｒｐｍの振盪、０％ｖ／ｖのＣＯ２）。
【1046】
細胞混合物を、複数の追加の増殖工程を介してより大きな振盪フラスコを使用して、後の増殖工程において０．５～１．５×１０６細胞／ｍＬの一定播種密度を可能とするために各増殖工程について４．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度で播種し、増殖させた。増殖を、１３５ｒｐｍの振盪（≦２Ｌの機能体積）または９０ｒｐｍの振盪（＞２Ｌの機能体積）で２７℃で３～５日間（０％ｖ／ｖのＣＯ２）で完了させた。以下の追加の増殖を完了させた：（ｉ）１．０Ｌのフラスコ内で２００ｍＬの機能体積までの増殖；及び（ｉｉ）３Ｌのフラスコ内で１０００ｍＬの機能体積までの増殖。
【1047】
５μｇのＲｅｐ／Ｃａｐバクミド物質を３７５μＬのＷＦＩ水と組み合わせることによってＲｅｐ／Ｃａｐトランスフェクション混合物を調製した。希釈したバクミド混合物を３０μＬのＰｒｏｍｅｇａ ＦｕＧＥＮＥ ＨＤ（トランスフェクション剤）及び追加の３４５μＬのＷＦＩ水と組み合わせ、次いで２７℃で１５分間インキュベーションしてトランスフェクションカクテルを提供した。
【1048】
２５ｍＬの増殖したＳｆ９細胞混合物を１２５ｍＬのフラスコに播種し（１．０×１０６細胞／ｍＬの播種濃度）、２．５～４．０×１０６細胞／ｍＬの標的感染密度まで増殖させた。トランスフェクションカクテルを１２５ｍＬのフラスコに添加し、２７℃で５～７日間（０％ｖ／ｖのＣＯ２、１３５ｒｐｍの撹拌）インキュベーションした。生じた混合物を５０ｍＬの円錐チューブ内で５分間遠心分離し、Ｐ１ ＢＥＶを含有する上清を収集し、他のＰ１ ＢＥＶ上清と共にプールした。Ｐ１ ＢＥＶプールを５℃で保存した。
【1049】
増殖したＳｆ９細胞混合物を、細胞を均一に分布させるために穏やかに揺動しながらＣｅｌｌｓｔａｒ６ウェル細胞ポリスチレン培養プレートに播種し（ウェル当たり２ｍＬ、０．５～１．０×１０６細胞／ｍＬの播種濃度）、続いて２７℃で９０分間インキュベーションした（０％ｖ／ｖのＣＯ２、０ｒｐｍの撹拌）。Ｐ１ ＢＥＶを１．０×１０７ＢＥＶ／ｍＬの標的希釈物までＨｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地で段階希釈し、次いで１ｍＬの希釈したＰ１ ＢＥＶ混合物を、Ｐ１ ＢＥＶを均一に分布させるために穏やかに揺動しながら各ウェルに添加した。感染混合物を２７℃で９０分間インキュベーションした（０％ｖ／ｖのＣＯ２、０ｒｐｍの撹拌）。
【1050】
４％ｗ／ｖのアガロースをＬｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｓｆ－９００培地オーバーレイと１：３で組み合わせることによってアガロースゲルを調製した（組み合わせのためにアガロースを７０℃で溶融、３７℃に冷却）。次いで２ｍＬのアガロースオーバーレイを各ウェルに添加し、アガロースゲルを硬化させるためにプレートを室温で１５～２０分間維持した。次いでオーバーレイされたプレートを、プラーク形成が観察されるまで２７℃で５～１４日間インキュベーションした（０％ｖ／ｖのＣＯ２、０ｒｐｍの撹拌）。各ウェルにおけるプラークを試験及びプラーク採取を介して処理して、クローン性プラーク精製（すなわち、単一プラーク増殖）のための単一のプラークを提供した。単一のプラークをＳｆ９細胞混合物を使用して増殖させ、２７℃で３～５日間インキュベーションした（０％ｖ／ｖのＣＯ２、０ｒｐｍの撹拌）。生じたＣＰ１ ＢＥＶを、５０ｍＬの円錐チューブ内での５分間の遠心分離及びＣＰ１ ＢＥＶを含有する上清のＣＰ１ ＢＥＶプールへの収集を使用して収穫した。
【1051】
ＢＥＶ感染／ＢＩＩＣ生成
Ｓｆ９細胞混合物を、複数の増殖工程を介してより大きな振盪フラスコを使用して、後の増殖工程において０．５～１．０×１０６細胞／ｍＬの一定播種密度を可能とするために各増殖工程について４．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度で播種し、増殖させた。増殖を、１３５ｒｐｍの振盪（≦２Ｌの機能体積）または９０ｒｐｍの振盪（＞２Ｌの機能体積）で２７℃で３～５日間（０％ｖ／ｖのＣＯ２）で完了させた。以下の増殖を完了させた：（ｉ）１．０Ｌのフラスコ内で２００ｍＬの機能体積まで増殖；（ｉｉ）３Ｌのフラスコ内で１０００ｍＬの機能体積まで増殖；及び（ｉｉｉ）２．０×１０６細胞／ｍＬの最終アウトプット密度で、５Ｌのフラスコ内で２５００ｍＬの機能体積まで増殖。
Ｓｆ９細胞混合物を、複数の増殖工程を介してより大きな振盪フラスコを使用して、後の増殖工程において０．５～１．０×１０６細胞／ｍＬの一定播種密度を可能とするために各増殖工程について４．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度で播種し、増殖させた。増殖を、１３５ｒｐｍの振盪（≦２Ｌの機能体積）または９０ｒｐｍの振盪（＞２Ｌの機能体積）で２７℃で３～５日間（０％ｖ／ｖのＣＯ２）で完了させた。以下の増殖を完了させた：（ｉ）１．０Ｌのフラスコ内で２００ｍＬの機能体積まで増殖；（ｉｉ）３Ｌのフラスコ内で１０００ｍＬの機能体積まで増殖；及び（ｉｉｉ）２．０×１０６細胞／ｍＬの最終アウトプット密度で、５Ｌのフラスコ内で２５００ｍＬの機能体積まで増殖。
【1052】
２００ｍＬの増殖したＳｆ９細胞混合物を１．０Ｌのフラスコに播種し（１．０×１０６細胞／ｍＬの播種密度）、≧２．０×１０６細胞／ｍＬの生存性細胞密度まで増殖させ、次いで０．０１ＭＯＩのＣＰ１ ＢＥＶで感染させた。次いで感染した細胞を、細胞が≧２．０×１０６細胞／ｍＬ（ＶＣＤ）、≧１６．５μｍの細胞直径及び≧７５％の細胞生存性に達するまで２７℃で４８～８０時間（０％ｖ／ｖのＣＯ２、１３５ｒｐｍ）インキュベーションし、増殖させた。感染した細胞を、遠沈し（ポリプロピレン遠心分離チューブ、５分）、細胞ペレットを４．０×１０７細胞／ｍＬでＨｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地に再懸濁することによって収穫し、続いて３００ｍＭのトレハロース、１４％ｖ／ｖのＤＭＳＯ、及び追加のＳＦＸ培地を添加して２．０×１０６細胞／ｍＬの標的ＶＣＤを提供した。Ｒｅｐ／ＣａｐソースＢＩＩＣを２ｍＬまたは５ｍＬのクライオバイアルに分配し、制御速度冷凍庫を使用して≦－６５℃まで凍結し、次いで－８０℃でまたはＬＮ２蒸気中で保存した。
【1053】
実施例２．ソース導入遺伝子ＢＩＩＣの生成（Ａ）
導入遺伝子ソースＢＩＩＣを、実施例１に従って、Ｒｅｐ／Ｃａｐバクミド物質の代わりにＰ１ ＢＥＶ生成のために使用される導入遺伝子バクミド物質を用いて生成した。
導入遺伝子ソースＢＩＩＣを、実施例１に従って、Ｒｅｐ／Ｃａｐバクミド物質の代わりにＰ１ ＢＥＶ生成のために使用される導入遺伝子バクミド物質を用いて生成した。
【1054】
実施例３．ソースＲｅｐ／Ｃａｐ ＢＩＩＣの生成（Ｂ）
ＣＰ ＢＥＶプール
Ｓｆ９ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで４０ｍＬの機能体積のＨｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地に希釈した。振盪フラスコを、Ｓｆ９細胞混合物の細胞密度が４．０×１０６細胞／ｍＬに増殖するまで最初の増殖（Ｐ０、３～４日）のためにインキュベーションした。
ＣＰ ＢＥＶプール
Ｓｆ９ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで４０ｍＬの機能体積のＨｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地に希釈した。振盪フラスコを、Ｓｆ９細胞混合物の細胞密度が４．０×１０６細胞／ｍＬに増殖するまで最初の増殖（Ｐ０、３～４日）のためにインキュベーションした。
【1055】
次いで培養物を、複数の追加の増殖工程を介してより大きな振盪フラスコを使用して、後の増殖工程において０．５～１．０×１０６細胞／ｍＬの一定播種密度を可能とするために各増殖工程について４．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度で播種し、増殖させた。増殖は、２７℃で３～５日間で完了させ、（ｉ）１．０Ｌのフラスコ内で２００ｍＬの機能体積までの増殖（Ｐ１）；及び（ｉｉ）３Ｌのフラスコ内で１０００ｍＬの機能体積までの増殖（Ｐ２）を含んでいた。
【1056】
３０μｇのＲｅｐ／Ｃａｐバクミド物質を０．６ｍＬのＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒグレース昆虫培地（トランスフェクション培地）と組み合わせることによってＲｅｐ／Ｃａｐトランスフェクション混合物を調製した。希釈したバクミド混合物を、３０μＬのＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｃｅｌｌｆｅｃｔｉｎ ＩＩ試薬（トランスフェクション剤）及び追加の０．６ｍＬのトランスフェクション培地と組み合わせ、続いて１８～２５℃で２５～３５分間インキュベーションし、次いでさらに４．８ｍＬのトランスフェクション培地で希釈してトランスフェクションカクテルを提供した。
【1057】
６０ｍＬの増殖したＳｆ９細胞混合物を１２５ｍＬのフラスコに播種し、１．０×１０６細胞／ｍＬの播種濃度まで増殖させた。次いでＳｆ９細胞混合物を６ウェル細胞培養プレートに播種した（ウェル当たり２ｍＬ、１．０×１０６細胞／ｍＬの播種濃度）。１ｍＬのトランスフェクションカクテルを各ウェルに添加し、プレートを２７℃で４～５時間インキュベーションした。２ｍＬのＨｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地を各ウェルに添加し、次いでプレートを２７℃で３～４日間インキュベーションした。生じた混合物を５０ｍＬの円錐チューブ内で５分間遠心分離し、Ｐ１ ＢＥＶを含有する上清を収集し、他のＰ１ ＢＥＶ上清と共にプールした。Ｐ１ ＢＥＶプールを４～８℃で保存した。
【1058】
増殖したＳｆ９細胞混合物を、細胞を均一に分布させるために穏やかに揺動しながら６ウェル細胞培養プレートに播種し（ウェル当たり２ｍＬ、０．５～１．０細胞／ｍＬの播種濃度）、続いて２７℃で９０分間インキュベーションした。Ｐ１ ＢＥＶを１．０～５．０×１０７ＢＥＶの標的希釈物までＨｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地で段階希釈し、次いで１ｍＬの希釈したＰ１ ＢＥＶ混合物を、Ｐ１ ＢＥＶを均一に分布させるために穏やかに揺動しながら各ウェルに添加した。感染混合物を２７℃で９０分間インキュベーションした。
【1059】
４％ｗ／ｖのアガロースをＬｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｓｆ－９００培地オーバーレイと１：３で組み合わせることによってアガロースゲルを調製した。アガロースオーバーレイを各ウェルに添加し、アガロースゲルを硬化させるためにプレートを室温で１５～２０分間維持した。次いでオーバーレイされたプレートを、プラーク形成が観察されるまで２７℃で１０日間インキュベーションした。各ウェルにおけるプラークを試験及びプラーク採取を介して処理して、クローン性プラーク精製（すなわち、単一プラーク増殖）のための単一のプラークを提供した。単一のプラークを、２７℃で４日間のインキュベーションで、５００ｍＬのフラスコ内で１２０ｍＬのプールのＳｆ９細胞の混合物を使用して増殖させた。生じたＣＰ２ ＢＥＶを、５０ｍＬの円錐チューブ内での５分間の遠心分離及びＣＰ２ ＢＥＶを含有する上清のＣＰ２ ＢＥＶプールへの収集を使用して収穫した。
【1060】
ＢＥＶ感染／ＢＩＩＣ生成
Ｓｆ９細胞混合物を、１．０×１０６細胞／ｍＬの最終感染密度で、５Ｌのフラスコ内で３０００ｍＬの機能体積まで複数の増殖工程を介して播種し、増殖させた。次いで増殖したＳｆ９細胞混合物を０．０１ＭＯＩのＣＰ２ ＢＥＶで感染させた。感染した細胞をインキュベーションし、２７℃で４８～３６時間増殖させ、次いで遠沈し（ポリプロピレン遠心分離チューブ、５分）、細胞ペレットを２．０×１０７細胞／ｍＬでＨｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地に再懸濁することによって収穫し、続いて３００ｍＭのトレハロース、１４％ｖ／ｖのＤＭＳＯ、及び追加のＳＦＸ培地を添加して２．０×１０６細胞／ｍＬの標的ＶＣＤを提供した。Ｒｅｐ／ＣａｐソースＢＩＩＣを２ｍＬまたは５ｍＬのクライオバイアルに分配し、制御速度冷凍庫を使用して≦－６５℃まで凍結し、次いで－８０℃でまたはＬＮ２蒸気中で保存した。
Ｓｆ９細胞混合物を、１．０×１０６細胞／ｍＬの最終感染密度で、５Ｌのフラスコ内で３０００ｍＬの機能体積まで複数の増殖工程を介して播種し、増殖させた。次いで増殖したＳｆ９細胞混合物を０．０１ＭＯＩのＣＰ２ ＢＥＶで感染させた。感染した細胞をインキュベーションし、２７℃で４８～３６時間増殖させ、次いで遠沈し（ポリプロピレン遠心分離チューブ、５分）、細胞ペレットを２．０×１０７細胞／ｍＬでＨｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地に再懸濁することによって収穫し、続いて３００ｍＭのトレハロース、１４％ｖ／ｖのＤＭＳＯ、及び追加のＳＦＸ培地を添加して２．０×１０６細胞／ｍＬの標的ＶＣＤを提供した。Ｒｅｐ／ＣａｐソースＢＩＩＣを２ｍＬまたは５ｍＬのクライオバイアルに分配し、制御速度冷凍庫を使用して≦－６５℃まで凍結し、次いで－８０℃でまたはＬＮ２蒸気中で保存した。
【1061】
実施例４．ソース導入遺伝子ＢＩＩＣの生成（Ｂ）
導入遺伝子ソースＢＩＩＣを、実施例３に従って、Ｒｅｐ／Ｃａｐバクミド物質の代わりにＰ１ ＢＥＶ生成のために使用される導入遺伝子バクミド物質を用いて生成した。
導入遺伝子ソースＢＩＩＣを、実施例３に従って、Ｒｅｐ／Ｃａｐバクミド物質の代わりにＰ１ ＢＥＶ生成のために使用される導入遺伝子バクミド物質を用いて生成した。
【1062】
実施例５．ソースＢＩＩＣからの感染ＢＩＩＣの生成
Ｓｆ９ ９ｆ４ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで２０ｍＬの機能体積のＥＳＦ－ＡＦ培地に希釈した。振盪フラスコを、細胞密度が５．０～８．０×１０６細胞／ｍＬの間に増殖するまで最初の増殖で非加湿の周囲空気の温度調整されたインキュベーター内で２７℃でインキュベーションした（１００ｒｐｍの振盪、２インチの軌道直径）。
Ｓｆ９ ９ｆ４ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで２０ｍＬの機能体積のＥＳＦ－ＡＦ培地に希釈した。振盪フラスコを、細胞密度が５．０～８．０×１０６細胞／ｍＬの間に増殖するまで最初の増殖で非加湿の周囲空気の温度調整されたインキュベーター内で２７℃でインキュベーションした（１００ｒｐｍの振盪、２インチの軌道直径）。
【1063】
次いで培養物を、複数の追加の増殖工程を介してより大きな振盪フラスコを使用して、後の増殖工程において１．０～１．５×１０６細胞／ｍＬの一定播種密度を可能とするために各増殖工程について５．０～８．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度で播種し、増殖させた。増殖を１００ｒｐｍの振盪（≦２Ｌの機能体積）または８０ｒｐｍの振盪（＞２Ｌの機能体積）で２７℃で３～５日間で完了させた。
【1064】
以下の追加の増殖を完了させた：（ｉ）５００ｍＬのフラスコ内で１００ｍＬの機能体積までの増殖；（ｉｉ）１．０Ｌのフラスコ内で４００ｍＬの機能体積までの増殖；（ｉｉｉ）３Ｌのフラスコ内で１５００ｍＬの機能体積までの増殖；及び（ｉｖ）２つの５Ｌの生成フラスコ（Ｒｅｐ／Ｃａｐ生成フラスコ及び導入遺伝子生成フラスコ）の各々において２５００ｍＬの機能体積までの増殖。
【1065】
Ｒｅｐ／Ｃａｐ生成フラスコを、細胞濃度が１．８～２．５×１０６細胞／ｍＬに増殖するまでインキュベーションし、次いでＲｅｐ／ＣａｐソースＢＩＩＣで感染させた（１．０×１０４の細胞対細胞（ｃ／ｃ）のＳｆ９：ＢＩＩＣ感染比、１．０×１０５ｖ／ｖの感染比と同等）。感染した細胞を７２時間インキュベーションし（≧１９．０μｍの標的細胞直径、≧３．０×１０６細胞／ｍＬの細胞培養密度標的）、次いで遠沈し（ポリプロピレン遠心分離チューブ、４．０℃で５分）、細胞ペレットを５０％の２×凍結培地（８５８ｍＬ／ＬのＥＳＦ－ＡＦ培地、１４０ｍＬ／Ｌのジメチルスルホキシド、１１３ｍＬ／Ｌのトレハロース二水和物）及び５０％のＥＳＦ－ＡＦ培地に２．０×１０７細胞／ｍＬで再懸濁することによって収穫した。Ｒｅｐ／Ｃａｐ感染ＢＩＩＣの再懸濁した培養物を２ｍＬまたは５ｍＬのクライオバイアルに分配し、ＬＮ２蒸気中で保存した。
【1066】
導入遺伝子生成フラスコを、細胞濃度が１．８～２．５×１０６細胞／ｍＬに増殖するまでインキュベーションし、次いで導入遺伝子ソースＢＩＩＣで感染させた（１．０×１０４の細胞対細胞（ｃ／ｃ）のＳｆ９：ＢＩＩＣ感染比、１．０×１０５ｖ／ｖの感染比と同等）。感染した細胞を９６～１００時間インキュベーションし（≧１９．０μｍの標的細胞直径、≧３．０×１０６細胞／ｍＬの細胞培養密度標的）、次いで遠沈し（ポリプロピレン遠心分離チューブ、４．０℃で５分）、細胞ペレットを５０％の２×凍結培地（８５８ｍＬ／ＬのＥＳＦ－ＡＦ培地、１４０ｍＬ／Ｌのジメチルスルホキシド、１１３ｍＬ／Ｌのトレハロース二水和物）及び５０％のＥＳＦ－ＡＦ培地に２．０×１０７細胞／ｍＬで再懸濁することによって収穫した。導入遺伝子感染ＢＩＩＣの再懸濁した培養物を２ｍＬまたは５ｍＬのクライオバイアルに分配し、ＬＮ２蒸気中で保存した。
【1067】
実施例６．上流－バルク粒子プールの生成（Ａ）
Ｓｆ９ ９ｆ４ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで２０ｍＬの機能体積のＥＳＦ－ＡＦ培地に希釈した。振盪フラスコを、細胞密度が５．０～８．０×１０６細胞／ｍＬの間に増殖するまで最初の増殖で非加湿の周囲空気の温度調整されたインキュベーター内で２７℃で（１３０～１５０ｒｐｍの振盪、２５ｍｍの軌道直径）４８時間インキュベーションした。
Ｓｆ９ ９ｆ４ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで２０ｍＬの機能体積のＥＳＦ－ＡＦ培地に希釈した。振盪フラスコを、細胞密度が５．０～８．０×１０６細胞／ｍＬの間に増殖するまで最初の増殖で非加湿の周囲空気の温度調整されたインキュベーター内で２７℃で（１３０～１５０ｒｐｍの振盪、２５ｍｍの軌道直径）４８時間インキュベーションした。
【1068】
次いで培養物を、複数の追加の増殖工程を介してより大きな振盪フラスコを使用して、後の増殖工程において１．０～１．５×１０６細胞／ｍＬの一定標的播種密度を可能とするために各増殖工程について５．０×１０６～１．０×１０７細胞／ｍＬの標的アウトプット密度で播種し、増殖させた。増殖を１３０～１５０ｒｐｍの振盪（≦４００ｍＬの機能体積）または１００～１２０ｒｐｍの振盪（＞４００ｍＬの機能体積）で２７℃で３～５日間で完了させた。
【1069】
以下の追加の増殖を完了させた：（ｉ）２５０または５００ｍＬのフラスコ内で１００ｍＬの機能体積までの増殖；（ｉｉ）１．０Ｌのフラスコ内で４００ｍＬの機能体積までの増殖；（ｉｉｉ）３Ｌのフラスコ内で１５００ｍＬの機能体積までの増殖；及び（ｉｖ）２つの５Ｌのフラスコの各々における２５００ｍＬの機能体積までの増殖（５０００ｍＬの総機能体積）。
【1070】
増殖した培養混合物を、５．０～８．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度を有する２５Ｌの機能体積までの追加の増殖（２７℃で３～５日）のために５０ＬのＧＥ ＷＡＶＥバイオリアクターに移した（０．２５ｍＬ／分の固定空気散布、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じた酸素、２０ｒｐｍの揺動、９ｏの揺動角度、２５０ｍＬ／分の空気注入）。次いで培地を撹拌タンクＧＥ Ｘｃｅｌｌｅｒａｘバイオリアクター（６８ｒｐｍの撹拌、０．５ｍＬ／分の固定空気散布、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、０．５ｍＬ／分のヘッドスペース流速）に播種し、１．５～２．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度を有する１２５Ｌの機能体積まで増殖させた（Ｎ－１バイオリアクター工程、２７℃で２～３日）。
【1071】
培養混合物を０．８～１．５×１０６細胞／ｍＬの播種密度及び２００Ｌの機能体積で単回使用生成バイオリアクターに播種した。培地をバイオリアクター内で（６Ｗ／ｍ３のインペラ、０．８ｍＬ／分の固定空気散布、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、０．８ｍＬ／分のヘッドスペース流速）２００Ｌの機能体積で３．０～３．２×１０６細胞／ｍＬまでさらに増殖させた。
【1072】
次いでバイオリアクター内の細胞をＲｅｐ／Ｃａｐ感染ＢＩＩＣ（１：２５０ｋ ｖ／ｖ）及び導入遺伝子感染ＢＩＩＣ（１：８０ｋ ｖ／ｖ）で共感染させた。感染した細胞を１４４時間（６日間）インキュベーションし、バルク収穫物を下流処理を介した溶解及び処理のために収集した。
【1073】
サンプルを増殖及び生物反応工程の各々を介して取得して上流プロセス全体にわたる細胞密度及び生存性をモニタリングした。
１つの代替法では、増殖バイオリアクターは、３５ｒｐｍの撹拌、１．３ｍＬ／分の固定空気散布、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、及び０．８ｍＬ／分のヘッドスペース流速として維持されるＰａｌｌ ２００Ｌ Ａｌｌｅｇｒｏバイオリアクターであった。
１つの代替法では、増殖バイオリアクターは、３５ｒｐｍの撹拌、１．３ｍＬ／分の固定空気散布、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、及び０．８ｍＬ／分のヘッドスペース流速として維持されるＰａｌｌ ２００Ｌ Ａｌｌｅｇｒｏバイオリアクターであった。
【1074】
１つの代替法では、生成バイオリアクターのための処理パラメータは、２００Ｌの機能体積における３．２～３．４×１０６細胞／ｍＬまでの標的増殖で、４１撹拌ｒｐｍ（感染前）、５１撹拌ｒｐｍ（感染後）、２．５ｍＬ／分の固定空気散布、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、及び１．２ｍＬ／分のヘッドスペース流速であった。
【1075】
１つの代替法では、増殖した培養混合物を、５．０×１０６～１．０×１０７細胞／ｍＬの標的アウトプット密度を有する１０Ｌの機能体積までの追加の増殖のためのＰａｌｌ Ａｌｌｅｇｒｏ ＸＲＳ ２５Ｌバイオリアクターに移した（２５ｃｐｍの撹拌、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、０．３ｍＬ／分の固定空気散布、０．５ｍＬ／分のヘッドスペース流速、２７℃で３～５日）。
【1076】
１つの代替法では、Ｎ－１バイオリアクターは、５．０×１０６～１．０×１０７細胞／ｍＬの標的アウトプット密度でのＰａｌｌ １２５Ｌ Ａｌｌｅｇｒｏバイオリアクター（４５ｒｐｍの撹拌、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、０．８Ｌ／分の空気オーバーレイ、２７℃の容器温度、１．５Ｌ／分のＯ２流速）であった。
【1077】
１つの代替法では、Ｎ生成バイオリアクターは、ＰＤ ２００Ｌ Ａｌｌｅｇｒｏバイオリアクター（６０ｒｐｍの撹拌、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、１．２Ｌ／分の空気オーバーレイ、２７±１℃の容器温度、２．５Ｌ／分のＯ２流速）であった。培養混合物を約１．０×１０６細胞／ｍＬの標的播種密度及び２００Ｌの機能体積で生成バイオリアクターに播種した。培地をバイオリアクター内で２００Ｌの機能体積中で約３．２×１０６細胞／ｍＬまでさらに増殖させた。次いでバイオリアクター内の細胞をＲｅｐ／Ｃａｐ感染ＢＩＩＣ（１：３００ｋ ｖ／ｖ）及び導入遺伝子感染ＢＩＩＣ（１：１００ｋ ｖ／ｖ）で共感染させた。感染した細胞を１６８時間（７日）インキュベーションした。感染後、バイオリアクター条件を以下のように調整した：７０ｒｐｍの撹拌、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、１．２Ｌ／分の空気オーバーレイ、２７℃の容器温度、３．０Ｌ／分のＯ２流速。バルク収穫物を下流処理を介した溶解及び処理のために収集した。
【1078】
実施例７．上流－バルク粒子プールの生成（Ｂ）
Ｓｆ９ ９ｆ４ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで２０ｍＬの機能体積のＥＳＦ－ＡＦ培地に希釈した。振盪フラスコを、細胞密度が５．０～８．０×１０６細胞／ｍＬの間に増殖するまで最初の増殖で非加湿の周囲空気の温度調整されたインキュベーター内で２７℃でインキュベーションした（１００ｒｐｍの振盪、２インチの軌道直径）。
Ｓｆ９ ９ｆ４ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで２０ｍＬの機能体積のＥＳＦ－ＡＦ培地に希釈した。振盪フラスコを、細胞密度が５．０～８．０×１０６細胞／ｍＬの間に増殖するまで最初の増殖で非加湿の周囲空気の温度調整されたインキュベーター内で２７℃でインキュベーションした（１００ｒｐｍの振盪、２インチの軌道直径）。
【1079】
次いで培養物を、複数の追加の増殖工程を介してより大きな振盪フラスコを使用して、後の増殖工程において０．５×１０６細胞／ｍＬの一定播種密度を可能とするために各増殖工程について４．０～５．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度で播種し、増殖させた。増殖を１００ｒｐｍの振盪（≦２Ｌの機能体積）または８０ｒｐｍの振盪（＞２Ｌの機能体積）で２７℃で３～５日間で完了させた。
【1080】
以下の追加の増殖を完了させた：（ｉ）１Ｌのフラスコ内で２００ｍＬの機能体積まで増殖；（ｉｉ）３Ｌのフラスコ内で１０００ｍＬの機能体積まで増殖；及び（ｉｉｉ）５Ｌのフラスコ内で３０００ｍＬの機能体積まで増殖。
【1081】
５Ｌの増殖した培養混合物に１０％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（２．０４５ｖ／ｖのスパイク）をスパイクし、これを次いで３．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度を有する２５Ｌの機能体積までの追加の増殖（２７℃で３～５日）のために５０ＬのＧＥ ＷＡＶＥバイオリアクター（０．２５ｍＬ／分の固定空気散布、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じた酸素、９ｏの角度までの２０ｒｐｍの揺動）に移した。
【1082】
培地に１０％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（２．０４５ｖ／ｖのスパイク）を再度スパイクし、次いで０．８×１０６細胞／ｍＬの播種密度及び１２５Ｌの機能体積（Ｈｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地）でＧＥ ２５０ Ｌ Ｘｃｅｌｌｅｒａｘバイオリアクターに播種した。培地を、２００Ｌの機能体積で３．０×１０６細胞／ｍＬまでバイオリアクター内で２～４日間増殖させた（最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、１Ｌ／分の空気オーバーレイ、２７℃の容器温度、６０℃の通気ヒーター温度、８０ｒｐｍの下方ミキサー方向）。
【1083】
次いでバイオリアクター内の細胞をＲｅｐ／Ｃａｐ感染ＢＩＩＣ及び導入遺伝子感染ＢＩＩＣ（１：１のＢＩＩＣ比、５．０×１０３のＳＦ９：ＢＩＩＣ比）で共感染させた。感染した細胞を５～７日間インキュベーションし、バルク収穫物を下流処理を介した溶解及び処理のために収集した。
【1084】
サンプルを増殖及び生物反応工程の各々を介して取得して上流プロセス全体にわたる細胞密度及び生存性をモニタリングした。
実施例８．上流－バルク粒子プールの生成（Ｃ）
Ｓｆ９ ９ｆ４ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで２０ｍＬの機能体積のＥＳＦ－ＡＦ培地に希釈した。振盪フラスコを、細胞密度が５．０～８．０×１０６細胞／ｍＬの間に増殖するまで最初の増殖で非加湿の周囲空気の温度調整されたインキュベーター内で２７℃でインキュベーションした（１００ｒｐｍの振盪、２インチの軌道直径）。
実施例８．上流－バルク粒子プールの生成（Ｃ）
Ｓｆ９ ９ｆ４ ＣＢの１つのバイアルを１２５ｍＬの振盪フラスコ内で解凍し（水浴を使用して３７℃、氷結晶が消散するまで１～５分）、次いで２０ｍＬの機能体積のＥＳＦ－ＡＦ培地に希釈した。振盪フラスコを、細胞密度が５．０～８．０×１０６細胞／ｍＬの間に増殖するまで最初の増殖で非加湿の周囲空気の温度調整されたインキュベーター内で２７℃でインキュベーションした（１００ｒｐｍの振盪、２インチの軌道直径）。
【1085】
次いで培養物を、複数の追加の増殖工程を介してより大きな振盪フラスコを使用して、後の増殖工程において０．５×１０６細胞／ｍＬの一定播種密度を可能とするために各増殖工程について４．０～５．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度で播種し、増殖させた。増殖を１００ｒｐｍの振盪（≦２Ｌの機能体積）または８０ｒｐｍの振盪（＞２Ｌの機能体積）で２７℃で３～５日間で完了させた。
【1086】
以下の追加の増殖を完了させた：（ｉ）１Ｌのフラスコ内で２００ｍＬの機能体積まで増殖；（ｉｉ）３Ｌのフラスコ内で１０００ｍＬの機能体積まで増殖；及び（ｉｉｉ）５Ｌのフラスコ内で３０００ｍＬの機能体積まで増殖。
【1087】
５Ｌの増殖した培養混合物に１０％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（２．０４５ｖ／ｖのスパイク）をスパイクし、これを次いで３．０×１０６細胞／ｍＬの標的アウトプット密度を有する２５Ｌの機能体積までの追加の増殖（２７℃で３～５日）のために５０ＬのＧＥ ＷＡＶＥバイオリアクター（０．２５ｍＬ／分の固定空気散布、最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じた酸素、９ｏの角度までの２０ｒｐｍの揺動）に移した。
【1088】
培地に１０％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（２．５ｖ／ｖのスパイク）を再度スパイクし、次いで１．０～２．０×１０６細胞／ｍＬの播種密度及び１２５Ｌの機能体積（Ｈｙｃｌｏｎｅ ＳＦＸ昆虫細胞培地）でＴｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ ２５０Ｌ ＨｙＰｅｒｆｏｒｍａバイオリアクターに播種した。培地を、２００Ｌの機能体積中で２．５～２．７５×１０６細胞／ｍＬまでバイオリアクター内で２～３日増殖させた（最大で４０％の溶解Ｏ２の要求に応じたカスケード式酸素、０．２５Ｌ／分の空気散布、７Ｌ／分の空気オーバーレイ、２７℃の容器温度、６５℃の通気ヒーター温度、６０ｒｐｍのミキサー）。
【1089】
次いでバイオリアクター内の細胞をＲｅｐ／Ｃａｐ感染ＢＩＩＣ（１：２５０ｋ ｖ／ｖ）及び導入遺伝子感染ＢＩＩＣ（１：５０ｋ ｖ／ｖ）で共感染させた。感染した細胞を１～２日間インキュベーションし、バルク収穫物を下流処理を介した溶解及び処理のために収集した。
【1090】
サンプルを増殖及び生物反応工程の各々を介して取得して上流プロセス全体にわたる細胞密度及び生存性をモニタリングした。
実施例９．下流－細胞溶解
生成バイオリアクター内のバルク収穫物について０．２ＭのアルギニンＨＣｌ（ｐＨ７．５、１１．４３％ｖ／ｖ）を添加し、続いて１０％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００界面活性剤（２．８６％ｖ／ｖ、最終溶解混合物中で０．２５％ｗ／ｖのＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００のため）を添加し、続いてベンゾナーゼヌクレアーゼ（グレードＩ、９９％純粋、１０Ｕ／ｍＬ）を添加し、最後に２Ｍのトリス塩基を添加して６．９～７．１の溶解ｐＨを提供することによって化学的溶解を開始させた。溶解混合物を、粗ライセートプールが生成されるまで６Ｗ／ｍ３の撹拌で３７℃で４．０～６．０時間保持した。粗ライセートプールを室温にし、さらなる処理の前に無菌的にサンプリングした。
実施例９．下流－細胞溶解
生成バイオリアクター内のバルク収穫物について０．２ＭのアルギニンＨＣｌ（ｐＨ７．５、１１．４３％ｖ／ｖ）を添加し、続いて１０％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００界面活性剤（２．８６％ｖ／ｖ、最終溶解混合物中で０．２５％ｗ／ｖのＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００のため）を添加し、続いてベンゾナーゼヌクレアーゼ（グレードＩ、９９％純粋、１０Ｕ／ｍＬ）を添加し、最後に２Ｍのトリス塩基を添加して６．９～７．１の溶解ｐＨを提供することによって化学的溶解を開始させた。溶解混合物を、粗ライセートプールが生成されるまで６Ｗ／ｍ３の撹拌で３７℃で４．０～６．０時間保持した。粗ライセートプールを室温にし、さらなる処理の前に無菌的にサンプリングした。
【1091】
１つの代替法では、生成バイオリアクター内の２００Ｌのバルク収穫物について０．２ＭのアルギニンＨＣｌ（ｐＨ７．５、１１．４３％ｖ／ｖ）を添加し、続いて１０％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００界面活性剤（５．３％ｖ／ｖ、最終溶解混合物中で０．５％ｗ／ｖのＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００のため）を添加して６．８～７．５の溶解ｐＨを提供することによって化学的溶解を開始させた。溶解混合物を、粗ライセートプールが生成されるまで６Ｗ／ｍ３の撹拌で２７℃で４．０～６．０時間保持した。
【1092】
１つの代替法では、生成バイオリアクター内のバルク収穫物（２２５Ｌの機能体積）について６．９～７．１の溶解ｐＨを提供するために２Ｍのトリス塩基を添加し、続いて０．２ＭのアルギニンＨＣｌ（ｐＨ７．５、１．１８ｋｇ／Ｌの３０ｋｇ）、次いでＳａｒｔｏｒｉｕｓ Ｄｅｎａｒａｓｅヌクレアーゼ（５Ｕ／ｍＬ）、最後にＰＢＳバックグラウンド中の２０％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００界面活性剤（１．００ｋｇ／Ｌの３．２５％ｋｇ）を添加することによって化学的溶解を開始させた。溶解混合物を、粗ライセートプールが生成されるまで６０ｒｐｍの撹拌で３７℃で３～４時間保持した。
【1093】
１つの代替法では、生成バイオリアクター内のバルク収穫物について１０％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００界面活性剤（２．５７％ｖ／ｖのスパイク）を添加し、続いてベンゾナーゼヌクレアーゼ（グレードＩ、９９％純粋、１０Ｕ／ｍＬ）を添加することによって化学的溶解を開始させた。溶解混合物を、粗ライセートプールが生成されるまで撹拌しながら３７℃で６～１２時間保持した。
【1094】
１つの代替法では、０．５ＭのアルギニンまたはアルギニンＨＣｌを０．２ＭのアルギニンＨＣｌの代わりに使用する。
実施例１０．下流－深層濾過
化学的溶解からの粗ライセートプールを、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｍｉｌｌｉｓｔａｋ＋ＰＯＤフィルター（Ｄ０ＨＣ媒体シリーズ）（≦２５０Ｌ／ｍ２のロード負荷、１５０～２００ＬＭＨのロード流束）を使用して３０ｐｓｉｄ未満の差圧及び５０ｐｓｉｇ未満の注入圧力で深層濾過を介して処理した。２０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ７．４の混合物）を使用したフィルター回収フラッシュを深層フィルターに通過させると共に、フラッシュされた回収物を深層濾過されたプールに添加した。
実施例１０．下流－深層濾過
化学的溶解からの粗ライセートプールを、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｍｉｌｌｉｓｔａｋ＋ＰＯＤフィルター（Ｄ０ＨＣ媒体シリーズ）（≦２５０Ｌ／ｍ２のロード負荷、１５０～２００ＬＭＨのロード流束）を使用して３０ｐｓｉｄ未満の差圧及び５０ｐｓｉｇ未満の注入圧力で深層濾過を介して処理した。２０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ７．４の混合物）を使用したフィルター回収フラッシュを深層フィルターに通過させると共に、フラッシュされた回収物を深層濾過されたプールに添加した。
【1095】
１つの代替法では、化学的溶解からの粗ライセートプールをＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｍｉｌｌｉｓｔａｋ＋ ＰＯＤフィルター（Ｃ０ＳＰ媒体シリーズ）（≦２５０Ｌ／ｍ２のロード負荷）を使用して深層濾過を介して処理した。
【1096】
１つの代替法では、回収フラッシュ（１０～２０Ｌ／ｍ２のロード負荷、１５０～２００ＬＭＨのロード流束）は、５０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ７．４の混合物）を使用した。１つの代替法では、回収フラッシュ（９～１２Ｌ／ｍ２のロード負荷）は、ＰＢＳを使用した。
【1097】
実施例１１．下流－０．２μｍ濾過
深層濾過からの深層濾過されたプールを、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣ ＸＬ１０ ０．５／０．２μｍフィルター（≦２５０Ｌ／ｍ２のロード負荷、３００ＬＭＨのロード流束）を使用して７２．５ｐｓｉｄ未満の差圧、８０ｐｓｉｇ未満の注入圧力及び２９ｐｓｉｇ未満の背圧で０．２μｍ濾過を介して処理した。２０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ７．４の混合物）を使用したフィルター回収フラッシュを０．２μｍフィルターに通過させると共に、フラッシュされた回収物を０．２μｍ濾過されたプールに添加した。生じた０．２μｍ濾過されたプールに５ＭのＮａＣｌ（７．０～７．５％ｖ／ｖ）をスパイクし、１～２日間保持して清澄化されたライセートプールを形成した。清澄化されたライセートプールを２～８℃で保存した。
深層濾過からの深層濾過されたプールを、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣ ＸＬ１０ ０．５／０．２μｍフィルター（≦２５０Ｌ／ｍ２のロード負荷、３００ＬＭＨのロード流束）を使用して７２．５ｐｓｉｄ未満の差圧、８０ｐｓｉｇ未満の注入圧力及び２９ｐｓｉｇ未満の背圧で０．２μｍ濾過を介して処理した。２０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ７．４の混合物）を使用したフィルター回収フラッシュを０．２μｍフィルターに通過させると共に、フラッシュされた回収物を０．２μｍ濾過されたプールに添加した。生じた０．２μｍ濾過されたプールに５ＭのＮａＣｌ（７．０～７．５％ｖ／ｖ）をスパイクし、１～２日間保持して清澄化されたライセートプールを形成した。清澄化されたライセートプールを２～８℃で保存した。
【1098】
１つの代替法では、０．２μｍ濾過は、３００Ｌ／ｍ２のロード負荷でＳａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓａｒｔｏｐｏｒｅ ２ＸＬＧ，０．８／０．２μｍフィルターを使用した。別の代替法では、０．２μｍ濾過は、５０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ７．４の混合物）を使用する回収フラッシュを含んでいた。
【1099】
実施例１２．下流－アフィニティークロマトグラフィー
深層濾過及び０．２μｍ濾過からの清澄化されたライセートプールを、ＧＥ ＡＶＢ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＨＰカラム樹脂（３．０～３．５Ｌのカラム容積）を使用してアフィニティークロマトグラフィー（ＡＦＣ）を介して処理した。カラム樹脂を２０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ７．４の混合物）で平衡化した（３～７カラム体積（ＣＶ）、１５０ｃｍ／ｈｒ）。次いでカラム樹脂に、清澄化されたライセートプール（≦５．０×１０１３ＶＧ／ｍＬ－ｒのロード負荷）を１８～２５℃でロードし、次いで２０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ７．４の混合物）でフラッシュした（１～３ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）。これに続いて、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、１Ｍの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ６．０の混合物）でのカラム樹脂の第１の洗浄（５ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）、及び１０ｍＭのクエン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ６．０の混合物）でのカラム樹脂の第２の洗浄（５ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）を行った。次いで濾過された生成物を、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ３．０の混合物）の混合物を使用して、２．５～３．０ＣＶの標的溶出プールでカラム樹脂から溶出させた（２～３ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）。
深層濾過及び０．２μｍ濾過からの清澄化されたライセートプールを、ＧＥ ＡＶＢ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＨＰカラム樹脂（３．０～３．５Ｌのカラム容積）を使用してアフィニティークロマトグラフィー（ＡＦＣ）を介して処理した。カラム樹脂を２０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ７．４の混合物）で平衡化した（３～７カラム体積（ＣＶ）、１５０ｃｍ／ｈｒ）。次いでカラム樹脂に、清澄化されたライセートプール（≦５．０×１０１３ＶＧ／ｍＬ－ｒのロード負荷）を１８～２５℃でロードし、次いで２０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ７．４の混合物）でフラッシュした（１～３ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）。これに続いて、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、１Ｍの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ６．０の混合物）でのカラム樹脂の第１の洗浄（５ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）、及び１０ｍＭのクエン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ６．０の混合物）でのカラム樹脂の第２の洗浄（５ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）を行った。次いで濾過された生成物を、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ３．０の混合物）の混合物を使用して、２．５～３．０ＣＶの標的溶出プールでカラム樹脂から溶出させた（２～３ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）。
【1100】
生じた溶出プールを０．５Ｍのトリス塩基及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（８～１２％ｖ／ｖ、８．０の標的最終ｐＨ）で中和した。次いで中和した溶出プールを、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣ ＸＬ６０００ ０．５／０．２μｍフィルターを使用して０．２μｍ濾過を介して処理し（≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、≦３０ｐｓｉ、≦４００Ｌ／ｍ２／ｈｒの流速）、８．５～９．０Ｌの機能プール体積を有するＡＦＣプール（ＡＶＢプールとも称される）をもたらした。
【1101】
１つの代替法では、清澄化されたライセートプールに５ＭのＮａＣｌ（７．５３％ｖ／ｖ）をスパイクしてから、アフィニティークロマトグラフィーを介して処理した。
１つの代替法では、カラム樹脂を５０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ７．４の混合物）で平衡化し（５～７ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）、フラッシュした（２ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）。
１つの代替法では、カラム樹脂を５０ｍＭのリン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ７．４の混合物）で平衡化し（５～７ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）、フラッシュした（２ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）。
【1102】
１つの代替法では、第１及び第２の洗浄工程の前にカラム樹脂をフラッシュしなかった。
１つの代替法では、生じた溶出プールを２Ｍのトリス塩基及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（３．０％ｖ／ｖのスパイク、８．０～８．５の標的最終ｐＨ）で中和した。
１つの代替法では、生じた溶出プールを２Ｍのトリス塩基及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（３．０％ｖ／ｖのスパイク、８．０～８．５の標的最終ｐＨ）で中和した。
【1103】
１つの代替法では、清澄化されたライセートプールを、クエン酸塩の代わりに溶出のために使用されるグリシンを用いて、Ｐｏｒｏｓ ＡＡＶＸまたはＰｏｒｏｓ ＡＡＶ９樹脂を使用してＡＦＣを介して処理した。１つの代替法では、洗浄溶液は、３５０ｍＭの塩化ナトリウムの代わりに１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいた。１つの代替法では、洗浄溶液は、３５０ｍＭの塩化ナトリウムの代わりに０ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいた。
【1104】
１つの代替法では、清澄化されたライセートプールを、上記で開示されている第１の洗浄ならびに５０ｍＭのクエン酸ナトリウム、３５０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ５．５の混合物）を含む第２の洗浄、続いて２００ｍＭのグリシンを含む溶出混合物（ｐＨ２）を用いてＰｏｒｏｓ ＡＡＶ９樹脂を使用してＡＦＣを介して処理した（≦５．０×１０１３ＶＧ／ｍＬ－ｒのロード負荷、４分の滞留）。
【1105】
１つの代替法では、クエン酸塩の代わりにグリシンを溶出のために使用した。１つの代替法では、洗浄溶液は、３５０ｍＭの塩化ナトリウムの代わりに１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいた。１つの代替法では、洗浄溶液は、３５０ｍＭの塩化ナトリウムの代わりに０ｍＭの塩化ナトリウムを含んでいた。
【1106】
１つの代替法では、清澄化されたライセートプールを以下の条件下で疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）を介して処理した：２Ｍの硫酸アンモニウム、０．００１％のＦ６８、ｐＨ７中の５％のバルクＡＡＶ薬物生成物の標的実行ロード；約２．５～１０．０×１０１２ｖｇ／ｍＬ－ｒの標的ロード負荷；２Ｍの硫酸アンモニウム、５０ｍＭのトリス、．００１％のＦ６８、ｐＨ７．７５での平衡化；及び２５０ｍＭの硫酸アンモニウム、５０ｍＭのトリス、．００１％のＦ６８、ｐＨ７．７５での溶出。１つの代替法では、清澄化されたライセートプールを以下の条件下で疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）を介して処理した：１Ｍの硫酸アンモニウム、０．００１％のＦ６８、ｐＨ７中の５％のバルクＡＡＶ薬物生成物の標的実行ロード；約２．５～１０．０×１０１２ｖｇ／ｍＬ－ｒの標的ロード負荷；１Ｍの硫酸アンモニウム、５０ｍＭのトリス、．００１％のＦ６８、ｐＨ７．７５での平衡化；及び２５０ｍＭの硫酸アンモニウム、５０ｍＭのトリス、．００１％のＦ６８、ｐＨ７．７５での溶出。使用したＨＩＣ樹脂は、Ｔｏｓｏｈ ＰＰＧ ６００Ｍ、Ｔｏｓｏｈ Ｐｈｅｎｙｌ ６５０Ｍ、Ｔｏｓｏｈ Ｂｕｔｙｌ ６５０Ｍ、またはＰｏｒｏｓ Ｂｅｎｚｙｌ ＨＩＣであった。
【1107】
実施例１３．下流－イオン交換クロマトグラフィー
中和したＡＦＣ／ＡＶＢプールを、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓａｒｔｏｂｉｎｄ Ｑ Ｍｅｍｂｒａｎｅ（１５０ｍＬの膜体積、結合及び溶出モード）を使用して陰イオン交換クロマトグラフィー（ＡＥＸ）を介して処理した。ＡＥＸ膜を、２０ｍＭのトリス、２Ｍの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の第１の混合物（ｐＨ８．０の混合物）、次いで２０ｍＭのトリス、１００ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の第２の混合物（ｐＨ８．０の混合物）で平衡化した（２０膜体積（ＭＶ）、５～７ＭＶ／分）。ＡＦＣプールを、１０ｍＳ／ｃｍの標的プール導電率及び８．０の標的プールｐＨで、３００～３２０％ｖ／ｖの２０ｍＭのトリス及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ８．０の混合物）での１：４希釈によってロード調整した。次いでＡＥＸ膜システムに、希釈したＡＦＣプールを１８～２５℃及び５ＭＶ／分でロードした（４．０×１０１３ＶＧ／ｍＬ－ｒのロード負荷）。システムを２０ｍＭのトリス、１００ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ８．０の混合物）でフラッシュした（２０ＭＶ、５ＭＶ／分）。次いで生成物を、２０ｍＭのトリス、２２０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ８．０の混合物）でＡＥＸ膜システムから溶出させ（２０ＭＶ、５ＭＶ／分）、溶出物全体を収集した。次いでＡＥＸ溶出プールを、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣＸＬ１５０フィルターを使用して０．２μｍ濾過を介して処理し（≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、≦３０ｐｓｉ）、１．５～２．０Ｌの機能プール体積を有するＡＥＸプールをもたらした。
中和したＡＦＣ／ＡＶＢプールを、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓａｒｔｏｂｉｎｄ Ｑ Ｍｅｍｂｒａｎｅ（１５０ｍＬの膜体積、結合及び溶出モード）を使用して陰イオン交換クロマトグラフィー（ＡＥＸ）を介して処理した。ＡＥＸ膜を、２０ｍＭのトリス、２Ｍの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の第１の混合物（ｐＨ８．０の混合物）、次いで２０ｍＭのトリス、１００ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の第２の混合物（ｐＨ８．０の混合物）で平衡化した（２０膜体積（ＭＶ）、５～７ＭＶ／分）。ＡＦＣプールを、１０ｍＳ／ｃｍの標的プール導電率及び８．０の標的プールｐＨで、３００～３２０％ｖ／ｖの２０ｍＭのトリス及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ８．０の混合物）での１：４希釈によってロード調整した。次いでＡＥＸ膜システムに、希釈したＡＦＣプールを１８～２５℃及び５ＭＶ／分でロードした（４．０×１０１３ＶＧ／ｍＬ－ｒのロード負荷）。システムを２０ｍＭのトリス、１００ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ８．０の混合物）でフラッシュした（２０ＭＶ、５ＭＶ／分）。次いで生成物を、２０ｍＭのトリス、２２０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ８．０の混合物）でＡＥＸ膜システムから溶出させ（２０ＭＶ、５ＭＶ／分）、溶出物全体を収集した。次いでＡＥＸ溶出プールを、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣＸＬ１５０フィルターを使用して０．２μｍ濾過を介して処理し（≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、≦３０ｐｓｉ）、１．５～２．０Ｌの機能プール体積を有するＡＥＸプールをもたらした。
【1108】
１つの代替法では、中和したＡＦＣ／ＡＶＢプールを、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｆｒａｃｔｏｇｅｌ ＴＭＡＥ ＨｉＣａｐ（ｍ）フロースルー膜樹脂を使用してＡＥＸを介して処理した。ＡＥＸ膜に、２０ｍＭのトリス、２Ｍの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の第１の混合物（ｐＨ８．０の混合物）、次いで４０ｍＭのトリス、１７０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の第２の混合物（ｐＨ８．５の混合物）をチャージし、平衡化した（５ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）。ＡＦＣプールを、１７ｍＳ／ｃｍの標的プール導電率（５ＭのＮａＣｌで調整した）及び８．５の標的プールｐＨ（２Ｍのトリス塩基で調整した）で、１０ｍＭのトリス及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ８．０～８．５の混合物）の１００～１１０％ｖ／ｖのスパイクによってロード調整した。次いでＡＥＸ膜システムに、調整されたＡＦＣプールを１８～２５℃でロードした（１．０～５．０×１０１３ＶＧ／ｍＬ－ｒのロード負荷）。システムを、４０ｍＭのトリス、１７０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ８．５の混合物）でフラッシュし、溶出させ（２ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）、溶出物全体を収集した。次いでＡＥＸ溶出プールを、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣＸＬ１５０フィルターを使用して０．２μｍ濾過を介して処理し（≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、≦３０ｐｓｉ）、ＡＥＸプールをもたらした。
【1109】
１つの代替法では、中和したＡＦＣ／ＡＶＢプールをＧＥ Ｑ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＨＰ膜樹脂を使用してＡＥＸを介して処理した。ＡＥＸ膜を５０ｍＭのビス－トリスプロパン、２００ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ９．０の混合物）で平衡化した（５～２０ＭＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）。ＡＦＣプールを０．５ｍＭのビス－トリスプロパン及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８で９．０のｐＨまでロード調整し、続いて１００ｍＭのビス－トリスプロパン、２０ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ９．０の混合物）で１：１で希釈した。次いでＡＥＸ膜システムに、希釈したＡＦＣプールを１８～２５℃及び１５０ｃｍ／ｈｒでロードした（≦１．０×１０１４ＶＧ／ｍＬｒのロード負荷）。システムを、５０ｍＭのビス－トリスプロパン、２００ｍＭの塩化ナトリウム及び０．００１％ｗ／ｖのＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ９．０の混合物）でフラッシュし、溶出させた（３ＣＶ、１５０ｃｍ／ｈｒ）。ＡＥＸ溶出プールを１Ｍのトリス、２ＭのＮａＣｌ、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ７．５の混合物ｐＨ）の１０％ｖ／ｖのスパイクで中和した。次いでＡＥＸ溶出プールを、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨ ＣＸＬ１５０フィルターを使用して０．２μｍ濾過を介して処理し（≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、≦３０ｐｓｉ）、ＡＥＸプールをもたらした。
【1110】
１つの代替法では、中和したＡＦＣ／ＡＶＢプールを、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓａｒｔｏｂｉｎｄ ＳＴＩＣ Ｍｅｎｂｒａｎｅを使用してＡＥＸを介して処理した（２５０Ｌのバッチ当たり＜２．５Ｌの膜体積、結合及び溶出モード、≦１．０×１０１４ＶＧ／ｍＬｒのロード負荷）。システムを、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、５０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ６．８の混合物）でフラッシュし、溶出させた。１つの代替法では、深層濾過（実施例１０）及び０．２μｍ濾過（実施例１１）からの清澄化されたライセートプールをＡＥＸを介して処理してから、アフィニティークロマトグラフィー（ＡＦＣ）（実施例１２）を介して処理する。
【1111】
１つの代替法では、中和したＡＦＣ／ＡＶＢプールをＰｏｒｏｓ ＸＳ膜樹脂を使用して陽イオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）を介して処理した。ＣＥＸ膜に１ＭのＮａＣｌをチャージし（６～１０ＣＶ、５００ｃｍ／ｈｒ）、次いで２０ｍＭのトリス、１００ｍＭのＮａＣｌ、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ８．５の混合物ｐＨ）で平衡化した。ＡＦＣプールを２Ｍのトリス塩基で８．５のｐＨまでロード調整し、続いてＷＦＩ水で１５ｍＳ／ｃｍの標的プール導電率まで希釈し、次いで０．００１％ｗ／ｖの１％のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８を添加した。次いでＣＥＸ膜システムに、希釈したＡＦＣプールをロードした（≦１．０×１０１４ＶＧ／ｍＬ－ｒのロード負荷、３．３分の滞留）。システムを２０ｍＭのトリス及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ８．５の混合物）で洗浄し（６ＣＶ、３．３分の滞留）；続いて２０ｍＭのトリス、２９０ｍＭのＮａＣｌ、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ８．５の混合物ｐＨ）での第１の溶出（１０ＣＶ、≦５００ｃｍ／ｈｒ）；次いで２０ｍＭのトリス、３０５ｍＭのＮａＣｌ、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８（ｐＨ８．５の混合物ｐＨ）での第２の溶出（１０ＣＶ、≦５００ｃｍ／ｈｒ）を行った。ＣＥＸ溶出プールを１Ｍの酢酸で中和してｐＨ７．０の混合物とした。次いでＡＥＸ溶出プールをＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣ ＸＬ１５０フィルター（５０ Ｌ／ｍ２のロード負荷）を使用して０．２μｍ濾過を介して処理し、ＡＥＸプール同等物としてＣＥＸプールをもたらした。
【1112】
１つの代替法では、中和したＡＦＣ／ＡＶＢプールを、ｐＨ７．８～８．２で１６～２０ｍＳ／ｃｍの標的プール導電率で、Ｐｏｒｏｓ ＨＱ膜樹脂（３．４ｍＬのＣＶ）を使用してＡＥＸを介して処理した。１つの代替法では、中和したＡＦＣ／ＡＶＢプールを以下のパラメータを使用してＡＥＸを介して処理した：約１×１０１３ｖｇｓ／ｍｌ－ｒの標的ロード負荷、＜５～６ｍＳ／ｃｍの標的ロード導電率、８～１０のロードｐＨ、塩化ナトリウム及び酢酸ナトリウム塩での８～１０の溶出ｐＨ。１つの代替法では、中和したＡＦＣ／ＡＶＢプールを以下のパラメータを使用してＮｕｖｉａ ａＰｒｉｍｅ ４Ａ膜を使用してマルチモードクロマトグラフィー（ＭＭＣ）を介して処理した：約１×１０１３ｖｇｓ／ｍｌ－ｒの標的ロード負荷、＜５～６ｍＳ／ｃｍの標的ロード導電率、８～１０のロードｐＨ、塩化ナトリウム及び酢酸ナトリウム塩での８～１０の溶出ｐＨ。１つの代替法では、中和したＡＦＣ／ＡＶＢプールを９．５以上のｐＨを使用してＡＥＸまたはＭＭＣを介して処理した。
【1113】
実施例１４．下流－ＴＦＦ濾過
中和したＡＥＸプールを、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｍＰＥＳ中空糸ＴＦＦシステムを使用してタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）を介して処理した（０．５ｍｍの糸ＩＤ、１００ｋＤＡのＭＷＣＯ、２０～３０Ｌ／ｍ２のロード負荷、４～５ｐｓｉのＴＭＰ、２０００秒－１の剪断）。ＴＦＦシステムを最初にＷＦＩ水ですすぎ（２０Ｌ／ｍ２）、次いで０．１ＭのＮａＯＨで消毒し（２０Ｌ／ｍ２、４５分保持）、次いで２０ｍＭのトリス、２２０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８を含むＡＥＸ溶出緩衝液（ｐＨ８．０）で平衡化し（２０Ｌ／ｍ２）、透過液及び保持液流出物の両方がｐＨ８．０になるまで平衡化を継続した。ＡＥＸプールを、一定圧力での単一ロード連続フロープロセスとしてＡｓａｈｉ Ｋａｓｅｉ Ｐｌａｎｏｖａ ３５Ｎフィルターを使用してプレＴＦＦナノ濾過を介して処理し（１２．５Ｌ／ｍ２のロード負荷、１０ｐｓｉ）、ＴＦＦロードプールを生成した。ＴＦＦロードプールに５０％スクロース混合物をスパイクし（１１％ｖ／ｖ）、次いで１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１．５ｍＭのリン酸カリウム、２２０ｍＭの塩化ナトリウム、５％ｗ／ｖのスクロース、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含む第１のダイアフィルトレーション緩衝液（高塩、低スクロース）（ｐＨ７．５の緩衝液）を使用して第１のダイアフィルトレーション（ＤＦ）工程（５～６ダイアフィルトレーション体積（ＤＶ）、低剪断）を介して処理した。生成物プールのダイアフィルトレーションに続いて、７．０×１０１３ＶＧ／ｍＬ（ｄｄＰＣＲによって確認した）の標的濃度まで限外濾過を介して濃縮し、及び次いで１０ｍＭのリン酸ナトリウム（二塩基性）、１．５ｍＭのリン酸カリウム（一塩基性）、１００ｍＭの塩化ナトリウム、７％ｗ／ｖのスクロース、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含む最終製剤化緩衝液（低塩、高スクロース）（ｐＨ７．５の緩衝液）を使用する第２のダイアフィルトレーション工程（７～８ＤＶ、低剪断）を行った。生成物及び最終製剤化緩衝液を含む保持液を最終ＴＦＦプールに収集した。最終ＴＦＦプールのウイルス力価をｄｄＰＣＲを使用して一晩分析した。
中和したＡＥＸプールを、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｍＰＥＳ中空糸ＴＦＦシステムを使用してタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）を介して処理した（０．５ｍｍの糸ＩＤ、１００ｋＤＡのＭＷＣＯ、２０～３０Ｌ／ｍ２のロード負荷、４～５ｐｓｉのＴＭＰ、２０００秒－１の剪断）。ＴＦＦシステムを最初にＷＦＩ水ですすぎ（２０Ｌ／ｍ２）、次いで０．１ＭのＮａＯＨで消毒し（２０Ｌ／ｍ２、４５分保持）、次いで２０ｍＭのトリス、２２０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８を含むＡＥＸ溶出緩衝液（ｐＨ８．０）で平衡化し（２０Ｌ／ｍ２）、透過液及び保持液流出物の両方がｐＨ８．０になるまで平衡化を継続した。ＡＥＸプールを、一定圧力での単一ロード連続フロープロセスとしてＡｓａｈｉ Ｋａｓｅｉ Ｐｌａｎｏｖａ ３５Ｎフィルターを使用してプレＴＦＦナノ濾過を介して処理し（１２．５Ｌ／ｍ２のロード負荷、１０ｐｓｉ）、ＴＦＦロードプールを生成した。ＴＦＦロードプールに５０％スクロース混合物をスパイクし（１１％ｖ／ｖ）、次いで１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１．５ｍＭのリン酸カリウム、２２０ｍＭの塩化ナトリウム、５％ｗ／ｖのスクロース、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含む第１のダイアフィルトレーション緩衝液（高塩、低スクロース）（ｐＨ７．５の緩衝液）を使用して第１のダイアフィルトレーション（ＤＦ）工程（５～６ダイアフィルトレーション体積（ＤＶ）、低剪断）を介して処理した。生成物プールのダイアフィルトレーションに続いて、７．０×１０１３ＶＧ／ｍＬ（ｄｄＰＣＲによって確認した）の標的濃度まで限外濾過を介して濃縮し、及び次いで１０ｍＭのリン酸ナトリウム（二塩基性）、１．５ｍＭのリン酸カリウム（一塩基性）、１００ｍＭの塩化ナトリウム、７％ｗ／ｖのスクロース、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含む最終製剤化緩衝液（低塩、高スクロース）（ｐＨ７．５の緩衝液）を使用する第２のダイアフィルトレーション工程（７～８ＤＶ、低剪断）を行った。生成物及び最終製剤化緩衝液を含む保持液を最終ＴＦＦプールに収集した。最終ＴＦＦプールのウイルス力価をｄｄＰＣＲを使用して一晩分析した。
【1114】
ＴＦＦシステムを、１０ｍＭのリン酸ナトリウム（二塩基性）、１．５ｍＭのリン酸カリウム（一塩基性）、１００ｍＭの塩化ナトリウム、７％ｗ／ｖのスクロース、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８を含む最終製剤化緩衝液（低塩、高スクロース）（ｐＨ７．５の緩衝液）を使用する回収フラッシュ（１１０％ｖ／ｖのシステムホールドアップ、１０分の再循環）に供した。最終ＴＦＦ回収フラッシュを最終ＴＦＦプールから分離して収集する。最終ＴＦＦ回収フラッシュのウイルス力価をｄｄＰＣＲを使用して一晩分析した。最終ＴＦＦ回収フラッシュを最終ＴＦＦプールに添加して、３．５×１０１３ＶＧ／ｍＬのウイルス濃度を有するＶＲＦロードプールを提供した。追加の最終製剤化緩衝液（低塩、高スクロース）を必要に応じて添加して、ＶＲＦロードプールのための標的ウイルス濃度を達成した。
【1115】
１つの代替法では、中和したＡＥＸプールをＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｐｅｌｌｉｃｏｎ－３ Ｕｌｔｒａｃｅｌ ＰＬＣＴＫシステムを使用してＴＦＦを介して処理した（３０ｋＤＡのＭＷＣＯ、２～３Ｌ／ｍ２のロード負荷）。ＴＦＦシステムを、２０ｍＭのトリス、２９０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８で平衡化し（２０Ｌ／ｍ２、５分の接触）、透過液及び保持液流出物の両方がｐＨ７．０になるまで平衡化を継続した。ＴＦＦロードプールを２０ｍＭのトリス、２９０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８で希釈して２．０～３．０×１０１２ＶＧ／ｍＬのウイルス濃度とした。ＴＦＦロードプールをプレＴＦＦナノ濾過を介して処理したのではなく、代わりに１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１８０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８を含むダイアフィルトレーション緩衝液（ｐＨ７．３の混合物）を使用してダイアフィルトレーション工程に直接的に処理した（６ＤＶ、５～１０ｐｓｉのＴＭＰ、１０～２０ｐｓｉの注入、８０ＬＭＨ）。次いでプールを限外濾過（１０～２０ｐｓｉの注入、８０ＬＭＨ）を介して濃縮して５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬの標的濃度とした。生成物及び製剤化緩衝液を含む保持液を最終ＴＦＦプールに収集した。プロセスは、第２のダイアフィルトレーション工程も回収フラッシュも含まなかった。
【1116】
１つの代替法では、中和したＡＥＸプールを、Ｐｅｌｌｉｃｏｎ－３カセットを有するＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｕｌｔｒａｃｅｌ ＰＬＣＴＫシステムを使用してＴＦＦを介して処理した（０．５７ｍ２、３０ｋＤＡのＭＷＣＯ、２～３Ｌ／ｍ２のロード負荷、６ｐｓｉのＴＭＰ、５～１０ｐｓｉの注入供給）。ＴＦＦシステムを最初にＷＦＩ水ですすぎ（２５Ｌ／ｍ２）、次いで０．２５ＭのＮａＯＨで消毒し（２５Ｌ／ｍ２、４５分保持）、次いで４０ｍＭのトリス、１７０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８を含む平衡化緩衝液（ｐＨ８．５）で平衡化し（２５Ｌ／ｍ２）、透過液及び保持液流出物の両方がｐＨ８．５になるまで平衡化を継続した。ＴＦＦロードプールをプレＴＦＦナノ濾過または第１のダイアフィルトレーション工程を介して処理したのではなく、代わりに５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬの標的濃度（ｄｄＰＣＲによって確認した）までの限外濾過（２．６Ｌ／分）、及び次いで１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１８０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８を含むダイアフィルトレーション緩衝液（ｐＨ７．３の混合物）を使用するダイアフィルトレーション工程（８ＤＶ、２．６Ｌ／分）を介して濃縮した。ＴＦＦシステムを、同じダイアフィルトレーション緩衝液を使用する回収フラッシュ（１１０％ｖ／ｖのシステムホールドアップ、５～１０分の再循環）に供した。最終ＴＦＦ回収フラッシュを最終ＴＦＦプールから分離して収集し、各プールをＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣＸＬ１５０フィルターを使用して０．２μｍ濾過を介して分離して処理した（≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、≦４００Ｌ／ｍ２／ｈｒの流速、≦３０ｐｓｉ）。濾過したＴＦＦ回収フラッシュを濾過したＴＦＦプールに添加し、次いで必要に応じてダイアフィルトレーション緩衝液で希釈して、２．０～６．０×１０１２ＶＧ／ｍＬのウイルス濃度を有するＶＲＦロードプールを提供した。
【1117】
１つの代替法では、システムは、Ｐｅｌｌｉｃｏｎ－３カセットを有するＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｕｌｔｒａｃｅｌ ＰＬＣＴＫシステムを使用した（０．５７ｍ２、３０ｋＤＡのＭＷＣＯ、２～３Ｌ／ｍ２のロード負荷、供給ＴＭＰで２５ｐｓｉｇ、３５０ＬＭＨ、７ダイアフィルトレーション体積、＜６．０×１０１６ＶＧ／ｍ２のロード）。
【1118】
１つの代替法では、ＴＦＦシステムを、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、２ｍＭのリン酸カリウム、２．７ｍＭの塩化カリウム、１９２ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８の混合物（ｐＨ７．５の混合物）で平衡化した（１０～１５Ｌ／ｍ２）。ＴＦＦロードプールをプレＴＦＦナノ濾過または第１のダイアフィルトレーション工程を介して処理したのではなく、代わりに５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬ（ｑＰＣＲによって確認した）の標的濃度までの限外濾過（０．５ｍｍの糸ＩＤ、１００ｋＤＡのＭＷＣＯ、６０Ｌ／ｍ２のロード負荷、４～５ｐｓｉのＴＭＰ、４０００秒－１の剪断）、及び次いで１０ｍＭのリン酸ナトリウム、２ｍＭのリン酸カリウム、２．７ｍＭの塩化カリウム、１９２ｍＭの塩化ナトリウム、０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８を含むダイアフィルトレーション緩衝液（ｐＨ７．５の混合物）を使用するダイアフィルトレーション工程（５ＤＶ、４～５ｐｓｉのＴＭＰ、４０００秒－１の剪断）を介して濃縮した。ＴＦＦシステムを、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、２ｍＭのリン酸カリウム、２．７ｍＭの塩化カリウム、１９２ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８を含む緩衝液を使用する回収フラッシュ（１１０％ｖ／ｖのシステムホールドアップ、５分の再循環）に供した。最終ＴＦＦ回収フラッシュを最終ＴＦＦプールに添加して、３．０～５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬのウイルス濃度を有するＶＲＦロードプールを提供した。
【1119】
実施例１５．下流－ウイルス保持濾過
ＶＲＦロードプールを、１０ｍＭのリン酸ナトリウム（二塩基性）、１．５ｍＭのリン酸カリウム（一塩基性）、１００ｍＭの塩化ナトリウム、７％ｗ／ｖのスクロース、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８の製剤化緩衝液（ｐＨ７．５の緩衝液）での使用前フラッシュ（１０．０Ｌ／ｍ２のロード負荷、１０ｐｓｉ）を介して処理されたＡｓａｈｉ Ｋａｓｅｉ Ｐｌａｎｏｖａ ３５Ｎフィルター（５０．０～１００．０Ｌ／ｍ２のロード負荷、１０ｐｓｉ）を使用してウイルス保持濾過（ＶＲＦ）を介して処理した。ＶＲＦ濾過に続いてＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣＸＬ１５０フィルターを使用して０．２μｍ濾過を介して処理し（≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、≦３０ｐｓｉ）、３．５～５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬの機能ウイルス濃度を有するＶＲＦプールをもたらした。
ＶＲＦロードプールを、１０ｍＭのリン酸ナトリウム（二塩基性）、１．５ｍＭのリン酸カリウム（一塩基性）、１００ｍＭの塩化ナトリウム、７％ｗ／ｖのスクロース、及び０．００１％（ｗ／ｖ）のＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８の製剤化緩衝液（ｐＨ７．５の緩衝液）での使用前フラッシュ（１０．０Ｌ／ｍ２のロード負荷、１０ｐｓｉ）を介して処理されたＡｓａｈｉ Ｋａｓｅｉ Ｐｌａｎｏｖａ ３５Ｎフィルター（５０．０～１００．０Ｌ／ｍ２のロード負荷、１０ｐｓｉ）を使用してウイルス保持濾過（ＶＲＦ）を介して処理した。ＶＲＦ濾過に続いてＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＳＨＣＸＬ１５０フィルターを使用して０．２μｍ濾過を介して処理し（≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、≦３０ｐｓｉ）、３．５～５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬの機能ウイルス濃度を有するＶＲＦプールをもたらした。
【1120】
次いでＶＲＦプールを、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｔｅｒｉｌｅ Ｍｉｌｌｉｐａｋ ０．２２μｍを使用してミリポア最終濾過（ＦＦ）を介して処理し（製剤化緩衝液での使用前フラッシュ、≧１０．０Ｌ／ｍ２のロード負荷；≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、２００ＬＭＨのロード流束、≦６０ｐｓｉの差圧、≦７５ｐｓｉの注入圧力でのＦＦプロセス）、３．５～５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬの機能ウイルス濃度を有する薬物物質プールを提供した。薬物物質プールの一部を大気に対して密閉された無菌バイオプロセスバッグ内で２～８℃で≦１ヶ月の間保存した。薬物物質プールの一部を大気に対して密閉された無菌ポリプロピレン容器内で≦－６０℃で≧１ヶ月の間保存した。
【1121】
１つの代替法では、ＶＲＦフィルター及びＦＦフィルターをＷＦＩ水で使用前フラッシュし（１０Ｌ／ｍ２、２４０～３００ＬＭＨ、１４ｐｓｉ）、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１８０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ６８（ｐＨ７．３の混合物）で２回目の使用前フラッシュをする。
【1122】
１つの代替法では、ＶＲＦフィルターを、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、２ｍＭのリン酸カリウム、２．７ｍＭの塩化カリウム、１９２ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ６８の混合物（ｐＨ７．５の混合物）で使用前フラッシュする（１０～２０Ｌ／ｍ２）。
【1123】
１つの代替法では、ＶＲＦフィルターは、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ ＮＦＲフィルターである。
実施例１６．下流－充填及び仕上げ
プールされた薬物物質をバイオセーフティキャビネット（ＢＳＣ）に移し、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｍｉｌｌｉｐａｋ Ｇａｍｍａ Ｇｏｌｄ ０．２２μｍフィルターを介して濾過した（二重インライン無菌グレードフィルター、≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、２００ＬＭＨのロード流束、≦６０ｐｓｉの差圧、≦７５ｐｓｉの注入圧力）。濾過した薬物物質プールは、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１８０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ６８（ｐＨ７．３の混合物）を含んでおり、３．０～５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬの標的ＡＡＶ濃度を有していた。次いで濾過した薬物物質プールを、ＢＳＣ内のプログラム可能な蠕動分注ポンプを利用して２ｍｌのクライオバイアルに無菌的に充填した（１．８ｍｌの充填体積、１．６ｍｌ抽出可能）。生成物バイアルを栓で塞ぎ、シールでキャップし、１００％視覚的に検査し、ラベルを付け（２５℃で）、次いで≦－６５℃で保存した。
実施例１６．下流－充填及び仕上げ
プールされた薬物物質をバイオセーフティキャビネット（ＢＳＣ）に移し、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｍｉｌｌｉｐａｋ Ｇａｍｍａ Ｇｏｌｄ ０．２２μｍフィルターを介して濾過した（二重インライン無菌グレードフィルター、≦１０００Ｌ／ｍ２のロード負荷、２００ＬＭＨのロード流束、≦６０ｐｓｉの差圧、≦７５ｐｓｉの注入圧力）。濾過した薬物物質プールは、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１８０ｍＭの塩化ナトリウム、及び０．００１％のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ６８（ｐＨ７．３の混合物）を含んでおり、３．０～５．０×１０１２ＶＧ／ｍＬの標的ＡＡＶ濃度を有していた。次いで濾過した薬物物質プールを、ＢＳＣ内のプログラム可能な蠕動分注ポンプを利用して２ｍｌのクライオバイアルに無菌的に充填した（１．８ｍｌの充填体積、１．６ｍｌ抽出可能）。生成物バイアルを栓で塞ぎ、シールでキャップし、１００％視覚的に検査し、ラベルを付け（２５℃で）、次いで≦－６５℃で保存した。
【1124】
１つの代替法では、プールされた薬物物質をＰａｌｌ Ｓｕｐｏｒ ＥＫＶ、０．２μｍ滅菌グレードフィルターを介して濾過した。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【配列表】
【国際調査報告】