特表 2022-524294 デュオカルマイシン類似体

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-05-02

(54)【発明の名称】デュオカルマイシン類似体

(51)【国際特許分類】

   C07D 498/04 20060101AFI20220422BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20220422BHJP

   A61K 31/424 20060101ALI20220422BHJP

   A61K 47/68 20170101ALN20220422BHJP

   C07K 16/00 20060101ALN20220422BHJP

   C07K 5/06 20060101ALN20220422BHJP

【ＦＩ】

C07D498/04 103

C07D498/04 CSP

A61P35/00

A61K31/424

A61K47/68

C07K16/00

C07K5/06

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021544577

(86)(22)【出願日】2020-01-28

(85)【翻訳文提出日】2021-09-30

(86)【国際出願番号】 IB2020050665

(87)【国際公開番号】W WO2020157662

(87)【国際公開日】2020-08-06

(31)【優先権主張番号】750224

(32)【優先日】2019-01-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】NZ

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

(71)【出願人】

【識別番号】504448092

【氏名又は名称】オークランド ユニサービシズ リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＡＵＣＫＬＡＮＤ ＵＮＩＳＥＲＶＩＣＥＳ ＬＩＭＩＴＥＤ

(74)【代理人】

【識別番号】100118902

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 修

(74)【代理人】

【識別番号】100106208

【弁理士】

【氏名又は名称】宮前 徹

(74)【代理人】

【識別番号】100196508

【弁理士】

【氏名又は名称】松尾 淳一

(74)【代理人】

【識別番号】100106080

【弁理士】

【氏名又は名称】山口 晶子

(72)【発明者】

【氏名】リー，ホ・ファ

(72)【発明者】

【氏名】ターセル，モアナ

【テーマコード（参考）】

4C072

4C076

4C086

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C072AA07

4C072BB02

4C072BB06

4C072CC02

4C072CC11

4C072EE03

4C072FF03

4C072GG07

4C072HH07

4C072UU01

4C072UU08

4C076AA95

4C076CC27

4C076EE41

4C076EE59

4C076FF68

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086CB22

4C086GA16

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA13

4C086NA14

4C086ZB26

4H045AA10

4H045AA30

4H045BA10

4H045EA20

4H045FA10

(57)【要約】

本発明は、デュオカルマイシンのＤＮＡアルキル化サブユニットの類似体である式Ｉの２－メチルベンゾオキサゾール化合物に関する。

式Ｉの化合物は、ＤＮＡアルキル化剤および抗体－薬物コンジュゲートおよび関連化合物の合成において使用することができる。式Ｉの２－メチルベンゾオキサゾールユニットは、高い細胞毒性、低い親油性、および並外れた水性安定性を組み合わせる際に有利な特性を有し、これら全ては、有効な抗体－薬物コンジュゲートにおけるペイロードとしての適用に望ましい。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物

【化1】

（式中：
ＬＧは脱離基であり；
Ｘは、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、プロドラッグヒドロキシル、アミノ、および保護されたアミノから選択される基であり；ここで、アミノは、－ＮＨ_２、または－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；
ＹはＮ保護基である）。

【請求項2】

Ｙは、Ｂｏｃ、ＣＯＣＦ_３、Ｆｍｏｃ、Ａｌｌｏｃ、Ｃｂｚ、ＴｅｏｃおよびＴｒｏｃから選択されるＮ保護基である、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物

【化2】

（式中：
ＬＧは脱離基であり；
Ｘは、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、プロドラッグヒドロキシル、アミノ、および保護されたアミノから選択される基であり；ここで、アミノは、－ＮＨ_２、または－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；
ＤＢはＤＮＡ副溝結合ユニットである）。

【請求項4】

ＤＢは、直接またはアルケニル基を介して結合している、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリール基である、請求項３に記載の化合物。

【請求項5】

ＤＢは、置換されていてもよいインドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、イミダゾール、チオフェン、チアゾール、オキサゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジンまたはピリダジン基である、請求項４に記載の化合物。

【請求項6】

Ｘは、－ＯＨ、－ＯＢｎ、－ＯＴｆ、－ＯＭＯＭ、－ＯＭＥＭ、－ＯＢＯＭ、－ＯＴＢＤＭＳ、－ＯＰＭＢ、－ＯＳＥＭ、ピペラジン－１－カルボキシレートからなる群から選択され、ここで、４位のＮは、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^２）_２、－ＮＨ_２、－Ｎ＝Ｃ（Ｐｈ）_２、－ＮＨＺ、ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルおよび－Ｎ－Ｚ（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルで置換されており；
ここで、Ｒ^２は、ｔ－Ｂｕ、Ｂｎまたはアリルであり；Ｚは、Ｂｏｃ、ＣＯＣＦ_３、Ｆｍｏｃ、Ａｌｌｏｃ、Ｃｂｚ、ＴｅｏｃおよびＴｒｏｃから選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項7】

ＬＧは、塩化物、臭化物、ヨウ化物および－ＯＳＯ_２Ｒ^１からなる群から選択され；ここで、Ｒ^１は、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、（Ｃ_１～Ｃ_１０）ヘテロアルキル、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アリールまたは（Ｃ_１～Ｃ_１０）ヘテロアリールから選択される、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項8】

式ＩＩＩの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物

【化3】

（式中：
ＬＧは脱離基であり；
Ｘは、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、プロドラッグヒドロキシル、アミノ、および保護されたアミノから選択される基であり；ここで、アミノは、－ＮＨ_２、または－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；
Ｙは
（ａ）Ｎ保護基；
（ｂ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１
（ｃ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２
（ｄ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３；または
（ｅ）－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３
から選択され：
ここで、Ａｒ^１、Ａｒ^２およびＡｒ^３は、ヘテロアリールまたはアリール基からそれぞれ独立して選択され、ヘテロアリールまたはアリール基は、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルのうちの１つまたは複数で置換されていてもよく；
ここで、各場合において、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい）。

【請求項9】

Ｙは、Ｂｏｃ、ＣＯＣＦ_３、Ｆｍｏｃ、Ａｌｌｏｃ、Ｃｂｚ、ＴｅｏｃおよびＴｒｏｃから選択されるＮ保護基である、請求項８に記載の化合物。

【請求項10】

Ｙは、
（ｂ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１
（ｃ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２
（ｄ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３；および
（ｅ）－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３
からなる群から選択され、
ここで、Ａｒ^１、Ａｒ^２およびＡｒ^３は、

【化4】

からなる群から独立して選択され、
ここで、

【化5】

は結合点を表し、各アリールまたはヘテロアリール基は、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルから選択される最大３つの置換基で番号が付された位置において置換されていてもよく、ここで、各場合において、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい、請求項８に記載の化合物。

【請求項11】

Ａｒ^１はヘテロアリール基であり、好ましくはインドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基であり、これらは、ヘテロアリール基の２位においてＤＮＡアルキル化ユニットに結合している、請求項１０に記載の化合物。

【請求項12】

Ａｒ^２は、インドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、イミダゾール、チオフェン、チアゾール、オキサゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジンまたはピリダジンからなる群から選択され、好ましくはインドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピロールまたはイミダゾールからなる群から選択される、請求項１０または１１に記載の化合物。

【請求項13】

Ａｒ^３は、ベンゼン、ピリジン、ピリミジンおよびピリダジンから選択され、好ましくはベンゼンまたはピリジンであり、より好ましくはベンゼンである、請求項１０から１２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項14】

Ｙは－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２であり；
Ａｒ^１は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基であり、これらは、ヘテロアリール基の２位においてＤＮＡアルキル化ユニットに結合しており、Ａｒ^２は、インドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、イミダゾール、チオフェン、チアゾール、オキサゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジンまたはピリダジンからなる群から選択される、請求項１０に記載の化合物。

【請求項15】

Ｙは－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３であり；Ａｒ^１は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基であり、これらは、ヘテロアリール基の２位においてＤＮＡアルキル化ユニットに結合しており、Ａｒ^３は、ベンゼン、ピリジン、ピリミジンおよびピリダジンから選択される、請求項１０に記載の化合物。

【請求項16】

Ａｒ^１の結合点は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基の５位にある、請求項１４または１５に記載の化合物。

【請求項17】

Ｘは、－ＯＨ、－ＯＢｎ、－ＯＴｆ、－ＯＭＯＭ、－ＯＭＥＭ、－ＯＢＯＭ、－ＯＴＢＤＭＳ、－ＯＰＭＢ、－ＯＳＥＭ、ピペラジン－１－カルボキシレートからなる群から選択され、ここで、４位のＮは、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^２）_２、－ＮＨ_２、－Ｎ＝Ｃ（Ｐｈ）_２、－ＮＨＺ、ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルまたは－Ｎ－Ｚ（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルで置換されており；
ここで、Ｒ^２は、ｔ－Ｂｕ、Ｂｎまたはアリルであり；Ｚは、Ｂｏｃ、ＣＯＣＦ_３、Ｆｍｏｃ、Ａｌｌｏｃ、Ｃｂｚ、ＴｅｏｃおよびＴｒｏｃから選択される、請求項８から１６のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項18】

ＬＧは、塩化物、臭化物、ヨウ化物および－ＯＳＯ_２Ｒ^１からなる群から選択され；ここで、Ｒ^１は、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、（Ｃ_１～Ｃ_１０）ヘテロアルキル、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アリールまたは（Ｃ_１～Ｃ_１０）ヘテロアリールから選択される、請求項８から１７のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項19】

ＬＧはハロであり、好ましくは塩化物であり、ＬＧが結合しているキラル炭素における立体配置は（Ｓ）である、請求項８から１７のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項20】

【化6】

からなる群から選択される化合物。

【請求項21】

請求項１から２０のいずれか一項に記載の化合物および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、全般的に、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）および関連化合物の合成において使用することができる２－メチルベンゾオキサゾール化合物に関する。

【背景技術】

【0002】

デュオカルマイシンは、ＤＮＡの副溝において結合し、アデニンのＮ３位をアルキル化する非常に細胞毒性のある天然産物である。以下の２つの例、デュオカルマイシンＳＡおよびＣＣ－１０６５は典型的なデュオカルマイシン構造を例示しており、これらはＤＮＡアルキル化サブユニットと、ＤＮＡヘリックスの副溝内に非共有結合するＤＮＡ結合サブユニットとからなる。

【0003】

【化1】

【0004】

結合の作用機序は、アルキル化サブユニットのシクロプロピル環へのアデニン付加を伴い、このサブユニットに関する一般的な構造を使用して以下のスキーム１において示す。ＤＮＡとの反応は迅速で選択的であるが、水のような他の求核剤とは桁違いに遅く、その結果、ＤＮＡ非存在下では、アルキル化サブユニットは、長時間にわたる生理学的条件下で水性緩衝液中で存続する。

【0005】

【化2】

【0006】

シクロプロピル環は、スキーム１で示すように、クロロメチルまたは他の脱離基置換基を有するｓｅｃｏ（すなわち開環）前駆体から形成することができる。閉環反応は生理学的条件下で非常に容易に生じ、２つの形態（ｓｅｃｏおよびシクロプロピル）は実質的に同じ細胞毒性を示す。しかし、ｓｅｃｏアルキル化サブユニットのフェノールが環化を阻止する化学的形態である場合、細胞毒性は大幅に低下する。

【0007】

天然産物、例えばデュオカルマイシンＳＡは、示されるとおり単一のエナンチオマー形態で単離される。しかし、自然界には存在しないエナンチオマーは一般的に細胞毒性が低いものの、両方のエナンチオマーがＤＮＡをアルキル化することができる。

【0008】

デュオカルマイシンアルキル化サブユニットの多くの合成バージョンが報告されている。これらは、上記のスキーム１の構造における点線によって示される環縮合の性質の点で異なることが多い。これらの環縮合の性質は細胞毒性に対して非常に強力な影響を有する場合がある。

【0009】

例えば、ＣＢＩ（シクロプロパベンズインドール）アルキル化サブユニット（デュオカルマイシンＳＡにおいて認められるＴＭＩ（トリメトキシインドール）側鎖と組み合わせたｓｅｃｏ形態で以下に示される）は、天然産物のものと同様の細胞毒性効力のデュオカルマイシン類似体を生成する（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（１９９０）５５，５８２３）。

【0010】

【化3】

【0011】

対照的に、ＴＭＩと組み合わせた代替のＣＯＩ（クロプロパオキサゾロインドール）アルキル化サブユニットを含む化合物は、細胞毒性が数百分の１である（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２０１０）２０，１８５４）。

【0012】

他の合成バリエーションも報告されている。例えば、アミン基がフェノールのヒドロキシル基と交換されたアミノｓｅｃｏ－ＣＢＩは既知である。これらのバリアントは、それらのフェノール類似体と同じスピロ環化およびＤＮＡアルキル化反応を受け、同等の細胞毒性効力を有する（Ｃｈｅｍ Ｂｉｏ Ｃｈｅｍ（２０１４）１５，１９９８）。

【0013】

さらなるバリエーションは、ＤＮＡにおける２つのアデニンの鎖間の架橋を可能にする方法で２つのアルキル化サブユニットを一緒に連結することに関与する（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９８９）１１１，６４２８；Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．（２０１０）４９，７３３６））。これらの二量体は、対応するモノアルキル化剤よりもさらに細胞毒性を示す場合があるが、二量体の活性はその構成成分であるモノアルキル化ユニットの活性から必ずしも予測できるものではない。

【0014】

アミノｓｅｃｏ－デュオカルマイシンおよびアルキル化サブユニットの二量体を以下に示す。

【0015】

【化4】

【0016】

デュオカルマイシンのいくつかの類似体は、潜在的な小分子抗癌剤として調査されている。しかし、毒性によって、投与することができる量が非常に低用量に限られたため、臨床試験は成功しなかった。

【0017】

最近になって、デュオカルマイシン類似体は、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）のためのペイロードとしての適用が見出されている。ＡＤＣは、癌療法において最も頻繁に使用されており、この癌療法では、細胞毒性小分子（ペイロード）が、リンカーを介して腫瘍関連抗原を認識する抗体に結合している（Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．（２０１７）１６，３１５；Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．（２０１６）６８，３）。

【0018】

ＡＤＣは、ペイロードを好適なリンカーに化学的に結合させることによって構築され、そのリンカーはそれ自体が所望の抗体にコンジュゲートしている。ＡＤＣは、循環内で安定であるが、通常、受容体に結合し、標的細胞中に内在化した後に所定の標的位置においてペイロードを放出するように設計されている。このようにして、ペイロードの細胞毒性作用は、損傷が望ましい位置、すなわち腫瘍内に特に向けられる。いくつかのそのようなＡＤＣは抗癌処置として承認されている。

【0019】

ＡＤＣの概念は、ペイロードをその標的細胞に特に向ける賢明な手段であり、その結果、ｉｎ ｖｉｖｏで毒性化合物の従来の非特異的全身性送達と関連する不所望の影響を最小限にする。残念ながら、重要な技術的課題によって、ＡＤＣ概念の適用が成功することは限定されている。

【0020】

ＡＤＣの概念によって標的細胞に送達することができるペイロードの量は限定され、その結果、ＡＤＣが治療的効果を有するように、ペイロードは細胞毒性が非常に高くなければならない。

【0021】

その高い細胞毒性のために、デュオカルマイシン類似体は、モノアルキル化剤とＤＮＡに架橋することができる二量体の構成要素の両方としてのＡＤＣペイロードとして調査されている（例えば、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．（２０１５）１２，１８１３；国際公開第２０１１／１３３０３９号；Ｂｉｏｐｈａｒｍ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｐｏｓ．（２０１６）３７，９３；Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２０１６）７７：１５５－１６２；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１２）５５，７６６；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００５）４８，１３４４；ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．（１９９５）５５，４０７９；Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０００）８，２１７５；国際公開第２０１８／０３５３９１号；国際公開第２０１５／０３８４２６号；国際公開第２０１５／１５３４０１号；国際公開第２０１５／０２３３５５号；国際公開第２０１７／１９４９６０号；国際公開第２０１８／０７１４５５号を参照のこと）。

【0022】

これらの例の大部分において、以下に示すアルキル化サブユニットは、毒性の高いｓｅｃｏ－ＣＢＩである。

【0023】

【化5】

【0024】

このアルキル化サブユニットを使用すると、必要な細胞毒性を有するＡＤＣが生じるはずであるが、ｓｅｃｏ－ＣＢＩは高親油性であるという重大な欠点を有する。親油性ペイロードおよびその誘導体は、ペイロード－リンカー構成要素を抗体にコンジュゲートさせるために使用される水性緩衝液中では全く溶解せず、コンジュゲートステップを困難にする。得られたＡＤＣも凝集する傾向がある。ＡＤＣ凝集物は、ＡＤＣを使用し得る前に除去する必要があり、臨床的に有用なＡＤＣを生産するための複雑さおよびコストが追加される。

【0025】

親油性ペイロードは、血流からのＡＤＣのクリアランスが速いこととも関連し、それによって、その全体的な曝露は減少し、その結果、その抗腫瘍有効性が減少する（Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（２０１５）３３，７３３－７３５）。

【0026】

親油性ペイロード、特に凝集をもたらすものはまた、ｉｎ ｖｉｖｏで免疫応答を引き起こすＡＤＣを生成する場合があり、予想外の毒性または治療有効性の低下につながる。
しかし、親油性と関連する問題にもかかわらず、ｓｅｃｏ－ＣＢＩ化合物の高い細胞毒性によって、引き続き化合物は、不利益を減少させるために用いられるさまざまな戦略を伴って抗癌ＡＤＣのための魅力的なペイロードであり続けている。

【0027】

例えば、ｓｅｃｏ－ＣＢＩの高親油性を打ち消すために、一部の研究者は、他の構成成分部分を改変することに頼っており、その結果ＡＤＣ全体としての親油性が低くなる。一部の研究者は、改変されたリンカー（例えば、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．（２０１５）１２，１８１３；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００５）４８，１３４４の場合、ポリエチレングリコールスペーサー）を組み込んでいる。他の研究者は、より水溶性のプロドラッグ形態を構築している（例えば、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１２）５５，７６６、国際公開第２０１５／０２３３５５号）。

【0028】

しかし、ＡＤＣの他の構成要素を改変することによってペイロード親油性問題を解決することは、それ自体が不利益を有する場合がある。ペイロード－リンカー構成要素の合成をより複雑で時間のかかるものにするだけではなく、この技術はリンカーの選択も制限する場合がある。

【0029】

ペイロードに結合されるリンカー部分は、ｉｎ ｖｉｖｏでのＡＤＣの有効性および安全性プロファイルに著しい影響を有する（Ｂｉｏａｎａｌｙｓｉｓ（２０１５）７（１３），１５６１）。それは循環において適切な安定性のものであるが、必要に応じてｉｎ ｖｉｖｏで開裂しなければならない。ＡＤＣの設計にはペイロードが放出される生理学的条件の考慮が含まれ、その結果、適切なリンカーを使用することができる。例えば、ヒドラゾン部分を含むリンカーはｐＨ高感受性であり、低ｐＨ環境において、例えばエンドソームおよびリソソームにおいて開裂することになる。ジスルフィドリンカーは、還元環境において、例えば細胞内環境においてペイロードを放出する。

【0030】

アルキル化サブユニットの不所望の親油性特性を軽減するために行われたいくつかのリンカー改変は、それらが使用されるＡＤＣの有効性を低下させる場合があり、その結果得られたＡＤＣは、特定のペイロードおよび抗体から作製することができる最も有効な製品ではない場合がある。

【0031】

親油性の課題に対する他の解決策としては、ＡＤＣ Ｂｉｏの登録商標を有するＬｏｃｋ－Ｒｅｌｅａｓｅ技術（ｗｗｗ．ａｄｃｂｉｏ．ｃｏｍ）があり、これは抗体を固体支持体に固定化してからペイロード－リンカー構成成分にコンジュゲートさせている。凝集は、その製造中にＡＤＣ分子を互いに物理的に分離することによって阻止される。これは、広範囲のリンカーを使用することを可能にするが、コンジュゲートプロセスに追加のコストが加わり、最終的なＡＤＣ製品の親油性を実際に低下させることはない。

【0032】

その結果、高毒性のアルキル化サブユニットの親油性は、新規のＡＤＣの開発を妨げる問題である。
ＡＤＣペイロードとしての既知のデュオカルマイシン類似体のさらなる潜在的な欠点は、アルキル化サブユニットのシクロプロピル形態の安定性が高いことである。ＡＤＣから循環に放出される安定なペイロードは、不所望の全身性毒性をもたらすように十分長く持続される場合がある。残念ながら、安定性が高いことは所望の強力な細胞毒性を保持するというＣＢＩアルキル化サブユニットの事実上全ての合成類似体の特徴である。以前の研究では、水性安定性と細胞毒性との間に相関が示されており、その結果、大部分の細胞毒性類似体は中性ｐＨの水性緩衝液中で安定である（Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ（２００９）５２，５２７１）。

【0033】

したがって、さまざまなＡＤＣの効率的な合成を促進する代替のＤＮＡアルキル化サブユニットが必要とされており、同時に有効性に必要な細胞毒性および安定性特性が実証されている。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0034】

したがって、本発明の目的は、この必要性を満たす方向に向かう少なくともいくつかの方法に進むことであり；および／または少なくとも有用な選択を公衆に提供することである。本発明の他の目的は、ほんの一例として与えられる以下の説明から明らかになり得る。

【0035】

この明細書において、特許明細書および他の文献を含む外部情報源が参照されている場合、これは全般的に、本発明の特徴を議論するための文脈を提供することを目的としている。特に記載がない限り、そのような情報源への言及は、いかなる権限においても、そのような情報源が先行技術であるかまたは当技術分野において周知の一般的な知識の一部を形成することを認めるものとして解釈するべきではない。

【課題を解決するための手段】

【0036】

本発明は、広範囲のヘテロアリールおよびアリールＤＮＡ結合部分に結合して細胞毒性の高いデュオカルマイシン類似体を生成するのに好適な、新規なアルキル化サブユニット「２－メチルベンゾオキサゾール」ならびにこのサブユニットの保護されたプロドラッグ誘導体を提供する。

【0037】

本発明は、ＤＮＡ副溝結合ユニットにコンジュゲートされた新規な２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットを含むデュオカルマイシン類似体も提供する。これらの化合物は、リンカー基を介して抗体に結合させる場合に、ＡＤＣを生成するために使用してもよい。

【0038】

したがって、第１の態様において、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する

【0039】

【化6】

【0040】

（式中：
ＬＧは脱離基であり；
Ｘは、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、プロドラッグヒドロキシル、アミン、および保護されたアミンから選択される基であり；アミンは、－ＮＨ_２、または－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；
ＹはＮ保護基である）。

【0041】

第２の態様において、本発明は、式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する

【0042】

【化7】

【0043】

（式中：
ＬＧは脱離基であり；
Ｘは、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、プロドラッグヒドロキシル、アミン、および保護されたアミンから選択される基であり；アミンは、－ＮＨ_２、または－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；
ＤＢはＤＮＡ副溝結合ユニットである）。

【0044】

１つの実施形態において、ＤＢは、直接またはアルケニル基を介して結合している、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリール基である。
１つの実施形態において、ＤＢは、置換されていてもよいインドール、アザインドール、ベンゾフラン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、イミダゾール、チオフェン、チアゾール、オキサゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジンまたはピリダジン基である。

【0045】

第３の態様において、本発明は、式ＩＩＩの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する

【0046】

【化8】

【0047】

（式中：
ＬＧは脱離基であり；
Ｘは、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、プロドラッグヒドロキシル、アミン、および保護されたアミンから選択される基であり；アミンは、－ＮＨ２、または－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；
Ｙは
（ａ）Ｎ保護基；
（ｂ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１
（ｃ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２
（ｄ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３；または
（ｅ）－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３
から選択され：
ここで、Ａｒ^１、Ａｒ^２およびＡｒ^３は、ヘテロアリールまたはアリール基からそれぞれ独立して選択され、ここで、各ヘテロアリールまたはアリール基は、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルのうちの１つまたは複数で置換されていてもよく；
ここで、各場合において、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい）。

【0048】

１つの実施形態において、Ａｒ^１、Ａｒ^２およびＡｒ^３は、

【0049】

【化9】

【0050】

からなる群から独立して選択される
（式中、

【0051】

【化10】

【0052】

は－Ｃ（Ｏ）またはＣ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－基への結合点を表し、各アリールまたはヘテロアリール基は、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルから選択される最大３つの置換基で番号が付された位置において置換されていてもよく；
ここで、各場合において、置換基－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい場合がある）。

【0053】

第４の態様において、本発明は、式ＩＶの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する

【0054】

【化11】

【0055】

（式中、Ｖは、ＹまたはＤＢであり、Ｘ、ＹおよびＤＢは、式Ｉ、ＩＩ、およびＩＩＩの化合物に関して定義されるものと同じ意味を有し、Ｘ’は、Ｈを失ったＸである）。
式ＩＶの化合物は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで転位させ、式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの対応するｓｅｃｏ－化合物からＨ－ＬＧを同時に消失させることを介して形成してもよい。式Ｉ、ＩＩもしくはＩＩＩの化合物、またはこれらの一部のいずれかに関する本明細書において記載する本発明の全ての実施形態も、文脈上特に指示がない限り、式ＩＶの化合物に関する本発明の態様の一部として特に検討される。

【0056】

以下の実施形態および好ましいものは、本明細書において記載する発明の態様のいずれかを単独でまたはいずれかのうちの任意の２つ以上の組合せで関連する場合がある。
１つの実施形態において、ＬＧは、塩化物、臭化物、ヨウ化物および－ＯＳＯ_２Ｒ^１からなる群から選択され；ここで、Ｒ^１は、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、（Ｃ_１～Ｃ_１０）ヘテロアルキル、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アリールまたは（Ｃ_１～Ｃ_１０）ヘテロアリールから選択される。

【0057】

１つの実施形態において、ＬＧはハロであり、好ましくは塩化物であり、ＬＧが結合しているキラル炭素における立体配置は（Ｓ）である。
１つの実施形態において、Ｘは、－ＯＨ、－ＯＢｎ、－ＯＴｆ、－ＯＭＯＭ、－ＯＭＥＭ、－ＯＢＯＭ、－ＯＴＢＤＭＳ、－ＯＰＭＢ、－ＯＳＥＭ、ピペラジン－１－カルボキシレートからなる群から選択され、ここで、４位のＮは、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^２）_２、－ＮＨ_２、－Ｎ＝Ｃ（Ｐｈ）_２、－ＮＨＺ、ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルおよび－Ｎ－Ｚ（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルで置換されており；
ここで、Ｒ^２は、ｔ－Ｂｕ、Ｂｎまたはアリルであり；Ｚは、Ｂｏｃ、ＣＯＣＦ_３、Ｆｍｏｃ、Ａｌｌｏｃ、Ｃｂｚ、ＴｅｏｃおよびＴｒｏｃから選択される。

【0058】

１つの実施形態において、Ｙは、Ｂｏｃ、ＣＯＣＦ_３、Ｆｍｏｃ、Ａｌｌｏｃ、Ｃｂｚ、ＴｅｏｃおよびＴｒｏｃから選択されるＮ保護基である。
本明細書において開示されるさまざまな数（例えば、１から１０）への言及は、範囲内の全ての有理数（例えば、１、１．１、２、３、３．９、４、５、６、６．５、７、８、９および１０）、またその範囲内の有理数の任意の範囲（例えば、２から８、１．５から５．５および３．１から４．７）への言及も組み込むことを意図し、したがって、本明細書において明示的に開示する全ての範囲の全ての部分範囲は、本明細書によって明示的に開示される。これらは特に意図するものの例にすぎず、列挙する最小値と最高値の間の数値の全ての可能な組合せは、同様の様式で本出願において明示的に記載するものと考えられる。

【0059】

本発明は、上記で定義されたとおり広範であるが、当業者であれば、本発明はそれに限定されるものではなく、本発明は以下の説明で例を与える実施形態も含むことは理解するであろう。

【0060】

本発明は以下の添付の図面を参照しながら記載することにする：

【図面の簡単な説明】

【0061】

【図1】中性水性緩衝液中のｓｅｃｏ－ＣＢＩ－ＴＭＩの安定性のＬＣＭＳ分析を示す図である。上のパネルはクロマトグラムの例を示す（２０分のインキュベート時間後）。下のパネルは、３００分を超える総インキュベート時間にわたる混合物の組成における変化を要約する。

【図2】中性水性緩衝液中の化合物２３の安定性のＬＣＭＳ分析を示す図である。上のパネルはクロマトグラムの例を示す（２００分のインキュベート時間後）。下のパネルは５００分の総インキュベート時間にわたる混合物の組成における変化を要約する。

【図3】中性水性緩衝液中の化合物５２の安定性のＨＰＬＣ分析を示す図である。実験は１時間ごとに合計８時間モニターした。

【図4】中性水性緩衝液中の化合物５９の安定性のＨＰＬＣ分析を示す図である。実験は１時間ごとに合計８時間モニターした。

【図5】中性水性緩衝液中の化合物６６の安定性のＨＰＬＣ分析を示す図である。実験は１時間ごとに合計８時間モニターした。

【発明を実施するための形態】

【0062】

５．１定義
この明細書および特許請求の範囲において使用する「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、「少なくとも一部は～からなる」を意味する。「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語を含むこの明細書および特許請求の範囲における各文章を説明する場合、それ以外の特徴またはその用語で始まるものも存在する場合がある。関連する用語、例えば「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は同じ様式で判断されたい。

【0063】

本明細書において使用する「および／または」という用語は、「および」もしくは「または」、またはその両方を意味する。
本明細書において使用する名詞に続く「（複数可）（（ｓ））」は、その名詞の複数形および／または単数形を意味する。

【0064】

不斉中心は、本明細書において記載する化合物において存在していてもよい。不斉中心は、キラル炭素原子の３次元空間における置換基の立体配置に応じて（Ｒ）または（Ｓ）として表してもよい。特定の立体化学または異性体が示されていない限り、構造の全てのキラル体、ジアステレオマー体およびラセミ体が意図される。ジアステレオマー体、エナンチオマー体、およびエピマー体を含む化合物の全ての立体化学異性体、ならびに立体化学異性体のエナンチオマー的に富化されたかつジアステレオマー的に富化された混合物を含むｄ－異性体およびｌ－異性体、およびこれらの混合物は本発明の範囲内である。

【0065】

個々のエナンチオマーは、市販されているエナンチオ純粋な出発材料から、またはエナンチオマー混合物を調製し、混合物を個々のエナンチオマーに分割することによって合成的に調製してもよい。分割方法としては、（ａ）キラル固定相クロマトグラフィーによってエナンチオマー混合物を分離するステップ、および（ｂ）エナンチオマー混合物をジアステレオマー混合物に変換し、ジアステレオマーを、例えば、再結晶またはクロマトグラフィー、および当技術分野において既知のその他の適切な方法によって分離するステップがある。定義される立体化学の出発材料は、市販のものであっても作製してもよく、必要であれば、当技術分野において周知の技術によって分割してもよい。キラル炭素（ｓｅｃｏ形態においてＣＨ_２－ＬＧ部分を有する炭素）において「天然」立体配置を有するエナンチオマーが好ましい。

【0066】

本明細書において記載する化合物は、シス、トランス、シン、アンチ、エントゲーゲン（Ｅ）、およびツザーメン（Ｚ）異性体を含む立体構造異性体または幾何異性体として存在していてもよい。全てのそのような異性体およびそれらの任意の混合物は発明の範囲内である。

【0067】

記載する化合物の任意の互変異性体またはこれらの混合物も本発明の範囲内である。当業者であれば理解するであろうように、さまざまな官能基および他の構造が互変異性を示す場合がある。例としては、これらに限定されるものではないが、ケト／エノール、イミン／エナミン、およびチオケトン／エンチオール互変異性がある。

【0068】

本明細書において記載する化合物は、化合物における１つまたは複数の原子が異なる同位体で交換されたアイソトポログおよびアイソトポマーとして存在してもよい。好適な同位体としては、例えば、^１Ｈ、^２Ｈ（Ｄ）、^３Ｈ（Ｔ）、^１２Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１６Ｏ、および^１８Ｏがある。そのような同位体を本明細書において記載する化合物に組み込むための手順は当業者であれば明らかであろう。本明細書において記載する化合物のアイソトポログおよびアイソトポマーも発明の範囲内である。

【0069】

薬学的に許容される塩を含む本明細書において記載する化合物の塩も本発明の範囲内である。そのような塩としては、酸付加塩、塩基付加塩、および塩基性窒素含有基の四級塩がある。酸付加塩は、化合物を遊離塩基形態で無機または有機酸と反応させることによって調製してもよい。無機酸の例としては、これらに限定されるものではないが、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、およびリン酸がある。有機酸の例としては、これらに限定されるものではないが、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、イセチオン酸、スルファニル酸、アジピン酸、酪酸、およびピバリン酸がある。塩基付加塩は、化合物を遊離酸性形態で無機または有機塩基と反応させることによって調製してもよい。無機塩基付加塩の例としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、および他の生理学的に許容される金属塩、例えば、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、または亜鉛の塩がある。有機塩基付加塩の例としては、アミン塩、例えば、トリメチルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、およびエチレンジアミンの塩がある。化合物における塩基性窒素含基の四級塩は、例えば、化合物をハロゲン化アルキルと、例えば、メチル、エチル、プロピル、およびブチルの塩化物、臭化物、およびヨウ化物と、硫酸ジアルキル、例えば、ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミルの硫酸化物などと反応させることによって調製してもよい。

【0070】

本明細書において記載する化合物は、さまざまな溶媒との溶媒和物として形成しても存在していてもよい。溶媒が水である場合、溶媒和物は、水和物、例えば、一水和物、二水和物、または三水和物と称してもよい。本明細書において記載する化合物の全ての溶媒和形態および非溶媒和形態は発明の範囲内である。

【0071】

本明細書において使用する一般的な化学用語はその通常の意味を有する。
化学基に関する標準的な略語は当技術分野において周知であり、その通常の意味を有し、例えば、Ｍｅ＝メチル、Ｅｔ＝エチル、Ｂｕ＝ブチル、ｔ－Ｂｕ＝ｔｅｒｔ－ブチル、Ｐｈ＝フェニル、Ｂｎ＝ベンジル、Ａｃ＝アセチル、Ｂｏｃ＝ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル、Ｆｍｏｃ＝９－フルオレニルメトキシカルボニル、Ｔｆ＝トリフレート、ＯＭＯＭ＝メトキシメチルエーテル、ＯＭＥＭ＝メトキシエトキシメチルエーテル、ＯＢＯＭ＝ベンジルオキシメチルエーテル、ＯＴＢＤＭＳ＝ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルエーテル、ＤＰＰＡ＝ジフェニルホスホリルアジド、ＮＢＳ＝Ｎ－ブロモスクシンイミド、ＮＩＳ＝Ｎ－ヨードスクシンイミド、ＯＰＭＢ＝４－メトキシベンジルエーテル、ＥＤＣＩ＝１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ＨＯＢｔ＝ヒドロキシベンゾトリアゾール、ＯＳＥＭ＝［２－（トリメチルシリル）エトキシ］メチルエーテル、Ａｌｌｏｃ＝アリルオキシカルボニル、Ｃｂｚ＝ベンジルオキシカルボニル、Ｔｅｏｃ＝（２－（トリメチルシリル）エトキシカルボニル、ＴＥＭＰＯ＝２，２，６，６－テトラメチル－１－ピペリジニルオキシ、Ｔｒｏｃ＝２，２，２－トリクロロエチルカルボニルなどである。

【0072】

特に記載がない限り、これらの略語は以下の例の全てに対して適用可能である。
本明細書において単独でまたは他の用語と組み合わせて使用する「アルキル」という用語は、特に指示がない限り、直鎖状または分岐状の飽和または不飽和非環式炭化水素基を指す。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１から１５、１から１３、１から１１、１から１０、１から８、１から６、１から５、１から４、１から３、１から２、２から１２、２から９、２から８、２から６、２から４、３から９、３から８、４から９、４から１５、６から１５、８から１５、１０から１５、または１、または２、または３個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は飽和である。そのようなアルキル基の例としては、これらに限定されるものではないが、－メチル、－エチル、－ｎ－プロピル、－ｎ－ブチル、－ｎ－ペンチル、－ｎ－ヘキシル、－ｎ－ヘプチル、－ｎ－オクチル、－ｎ－ノニル、－ｎ－デシル、ｎ－ウンデシル、ｎ－ドデシル、ｎ－トリデシル、ｎ－テトラデシル、ｎ－ペンタデシル、－イソプロピル、－ｓｅｃ－ブチル、－イソブチル、－ｔｅｒｔ－ブチル、－イソペンチル、－ネオペンチル、２－メチルブチル、－イソヘキシル、２－メチルペンチル、３－メチルペンチル、２，２－ジメチルブチル、２，３－ジメチルブチル、２，２－ジメチルペンチル、２，３－ジメチルペンチル、３，３－ジメチルペンチル、２，３，４－トリメチルペンチル、３－メチルヘキシル、２，２－ジメチルヘキシル、２，４－ジメチルヘキシル、２，５－ジメチルヘキシル、３，５－ジメチルヘキシル、２，４－ジメチルペンチル、２－メチルヘプチル、３－メチルヘプチル、ｎ－ヘプチル、イソヘプチル、イソオクチル、イソノニル、イソデシル、イソウンデシル、イソドデシル、イソトリデシル、イソテトラデシル、およびイソペンタデシルなどがある。いくつかの実施形態において、アルキル基は不飽和である。そのようなアルキル基の例としては、これらに限定されるものではないが、－ビニル、－アリル、－１－ブテニル、－２－ブテニル、－イソブチレニル、－１－ペンテニル、－２－ペンテニル、－３－メチル－１－ブテニル、－２－メチル－２－ブテニル、－２，３－ジメチル－２－ブテニル、１－ヘキシル、２－ヘキシル、３－ヘキシル，－アセチレニル、－プロピニル、－１－ブチニル、－２－ブチニル、－１－ペンチニル、－２－ペンチニル、－３－メチル－１－ブチニルなどがある。接頭辞「Ｃ_ｘ～Ｃ_ｙ」（ここで、ｘおよびｙはそれぞれ整数である）は、「アルキル」という用語と組み合わせて使用する場合、アルキル基における炭素原子の数を指す。いくつかの実施形態において、「アルキル」基は、本明細書において記載する１つまたは複数の任意選択の置換基で置換されていてもよい。

【0073】

本明細書において単独でまたは他の用語と組み合わせて使用する「アリール」という用語は、特に指示がない限り、環ヘテロ原子を一切含まない環式芳香族炭化水素基を指す。アリール基は、単環式、二環式および三環式環系を含む。アリール基の例としては、これらに限定されるものではないが、フェニル、アズレニル、ヘプタレニル、ビフェニル、フルオレニル、フェナントレニル、アントラセニル、インデニル、インダニル、ペンタレニル、およびナフチルがある。いくつかの実施形態において、アリール基は、環中に６から２０、６から１４、６から１２、または６から１０個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態において、アリール基は、フェニルまたはナフチルである。アリール基は芳香族－炭素環縮合環系を含む。例としては、これらに限定されるものではないが、インダニルおよびテトラヒドロナフチルがある。接頭辞「Ｃ_ｘ～Ｃ_ｙ」（ここで、ｘおよびｙはそれぞれ整数である）は、「アリール」という用語と組み合わせて使用する場合、アリール基における環炭素原子の数を指す。いくつかの実施形態において、「アリール」基は、本明細書において記載する１つまたは複数の任意選択の置換基で置換されていてもよい。

【0074】

本明細書において単独でまたは他の用語と組み合わせて使用する「ヘテロアリール」という用語は、特に指示がない限り、５個またはそれを超える環原子を含み、そのうちの１つまたは複数がヘテロ原子である芳香族環系を指す。いくつかの実施形態において、ヘテロ原子は窒素、酸素、または硫黄である。ヘテロアリール基は、芳香族電子構造を有するさまざまな複素環式基である。いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基は、５から２０、５から１６、５から１４、５から１２、５から１０、５から８、または５から６個の環原子を有する単環式－、二環式－および三環式環系を含む。ヘテロアリール基としては、これらに限定されるものではないが、ピロリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、チオフェニル、ベンゾチオフェニル、フラニル、ベンゾフラニル、インドリル、アザインドリル（ピロロピリジニル）、インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ピラゾロピリジニル、トリアゾロピリジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、イミダゾピリジニル、イミダジル、イソキサゾロピリジニルキサンチニル、グアニニル、キノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、キノキサリニル、およびキナゾリニルがある。ヘテロアリール基は、環の全てが芳香族である縮合環系、例えばインドリル、および環のうちの１つのみが芳香族である縮合環系、例えば２，３－ジヒドロインドリルを含む。接頭辞「ｘ～ｙ員」（ここで、ｘおよびｙはそれぞれ整数である）は、「ヘテロアリール」という用語と組み合わせて使用する場合、ヘテロアリール基における環原子の数を指す。いくつかの実施形態において「ヘテロアリール」基は、本明細書において記載する１つまたは複数の任意選択の置換基で置換されていてもよい。

【0075】

「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩを含むことを意図する。
「ヘテロ原子」という用語は、酸素、窒素、硫黄、セレン、またはリンを含むことを意図する。いくつかの実施形態において、ヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄からなる群から選択される。

【0076】

本明細書において使用する「置換された」という用語は、示された基における１つまたは複数の水素原子が、１つまたは複数の独立して選択された好適な置換基で交換されていることを意味し、ただし、置換基が結合している各原子の通常の原子価は超えず、置換によって安定な化合物が生じることを意図する。さまざまな実施形態において、本明細書において記載する化合物における好適な任意選択の置換基としては、これらに限定されるものではないが、ハロ、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、および－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨがある。この文脈における「安定」という用語は、特に指示がない限り、製造を可能にするのに十分な安定性を有し、本明細書において記載する目的に有用であるのに十分な時間にわたりその完全性を維持する化合物を指す。

【0077】

本明細書において使用する「抗体」という用語は、完全長免疫グロブリン分子または完全長免疫グロブリン分子の免疫学的活性部分、すなわち、目的の標的の抗原に免疫特異的に結合する抗原結合部位を含む分子またはその一部を指し、そのような標的としては、これらに限定されないが、癌細胞または自己免疫疾患と関連する自己免疫抗体を生成する細胞がある。「抗体」という用語は、これらが所望の生物学的活性を示す限りは、無傷モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、少なくとも２つの無傷抗体から形成された多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および抗体フラグメントを含む。構造的に、抗体は典型的には２つの重鎖および２つの軽鎖の４つのアミノ酸鎖からなるＹ字型タンパク質である。各抗体は、主に２つの領域：可変領域および定常領域を有する。Ｙのアーム部の末端に位置する可変領域は、標的抗原に結合し、それと相互に作用する。この可変領域は、特定の抗原の特定の結合部位を認識し、そこに結合する相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。Ｙの尾部に位置する定常領域は、免疫系によって認識され、それと相互に作用する（Ｊａｎｅｗａｙ，Ｃ．，Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｐ．，Ｗａｌｐｏｒｔ，Ｍ．，Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ（２００１）Ｉｍｍｕｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｙ，５^ｔｈ Ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）。標的抗原は、複数の抗体のＣＤＲによって認識される、エピトープとも称される多数の結合部位を一般的に有する。異なるエピトープに特異的に結合する各抗体は異なる構造を有する。したがって、１つの抗原は１つを超える対応する抗体を有する場合がある。

【0078】

本明細書において使用する「反応性部分」という用語は、比較的に穏やかな条件下で、事前の官能基化を必要とせずに第２の官能基と反応させることができる官能基を意味する。反応性部分と第２の官能基との間の反応は、熱、圧力、触媒、酸および／または塩基の適用のみを必要とする。反応性部分の例としては、ハロゲン化カルバモイル、ハロゲン化アシル、活性エステル、無水物、α－ハロアセチル、α－ハロアセトアミド、マレイミド、イソシアネート、イソチオシアネート、ジスルフィド、チオール、ヒドラジン、ヒドラジド、塩化スルホニル、アルデヒド、メチルケトン、ビニルスルホン、ハロメチルおよびメチルスルホネートがある。第２の官能基は、一般的に、リンカーまたはリガンドであることになる。

【0079】

本明細書において使用する「リガンド」という用語は、受容体、抗原または所与の標的細胞母集団と関連する他の受容的な部分と結合するかまたは反応的に会合もしくは複合体形成するリガンドを意味する。リガンドは、分子間力、例えば、水素結合、イオン結合およびファンデルワールス力を介して一般的に結合することになる。リガンドは、一般的に特定の抗原を発現する細胞または細胞表面受容体に結合することによって、リガンドが結合する標的細胞母集団にペイロードを送達する。例えば、リガンドは、罹患した細胞、例えば癌細胞において過剰発現する細胞表面受容体または表面タンパク質に結合する場合がある。

【0080】

本発明に使用するためのリガンドの例としては、抗体（モノクローナル、二重特異性、キメラまたはヒト化抗体、またはこれらのいずれかの抗体フラグメントであってもよい）、成長因子、ホルモン、細胞／組織標的化ペプチド、アプタマーおよび小分子、例えば造影剤、補因子またはサイトカインがある。

【0081】

本明細書において使用する「薬学的に許容される塩」という用語は、特に指示がない限り、本明細書において記載する化合物の薬学的に許容される有機または無機塩を指す。例えば、本明細書において記載する化合物は、アミノ基を含んでいてもよく、したがって酸付加塩はこのアミノ基とともに形成することができる。塩の例としては、これらに限定されるものではないが、硫酸、クエン酸、酢酸、シュウ酸、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸、重硫酸、リン酸、酸性リン酸、イソニコチン酸、乳酸、サリチル酸、酸性クエン酸、酒石酸、オレイン酸、タンニン酸、パントテン酸、重酒石酸、アスコルビン酸、スクシン酸、マレイン酸、ゲンチシン酸、フマル酸、グルコン酸、グルクロン酸、サッカリン酸、ギ酸、安息香酸、グルタミン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、およびパモ酸（すなわち、１，１’－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエート））の塩がある。薬学的に許容される塩は、別の分子、例えばアセテートイオン、スクシネートイオンまたは他の対イオンの包含を伴う場合がある。対イオンは、親化合物の電荷を安定化させる任意の有機または無機部分であってもよい。さらに、薬学的に許容される塩は、その構造において１つを超える荷電原子を有していてもよい。複数の荷電原子が薬学的に許容される塩の一部である場合、複数の対イオンを有していてもよい。したがって、薬学的に許容される塩は、１つまたは複数の荷電原子および／または１つまたは複数の対イオンを有していてもよい。

【0082】

本明細書において使用する「薬学的に許容される溶媒和物」または「溶媒和物」という用語は、特に指示がない限り、１つまたは複数の溶媒分子および本明細書において記載する化合物の会合を指す。薬学的に許容される溶媒和物を形成する溶媒の例としては、これらに限定されるものではないが、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、およびエタノールアミンがある。
５．２本発明の化合物
本発明の化合物は、従来技術を使用した広範囲の非常に有効なＡＤＣの合成において利用することができる、非常に望ましい特性を有する新規のＤＮＡアルキル化ユニットを提供する。

【0083】

特に、本発明の化合物は以下を含む：
（ａ）Ｎ保護された２－メチルベンゾオキサゾールＤＮＡアルキル化ユニット（式中、ＹはＮ保護基である）および
（ｂ）ＤＮＡ副溝結合ユニットに結合している２－メチルベンゾオキサゾールＤＮＡアルキル化ユニット。

【0084】

本発明のＮ保護された２－メチルベンゾオキサゾールＤＮＡアルキル化ユニットは、ＤＮＡ副溝結合ユニットに容易に結合して、細胞毒性の高いデュオカルマイシン類似体を提供し得る。これはまた、他の化学的部分にコンジュゲートさせて、ＡＤＣを含む新規の生物学的な活性化合物を形成することができる。

【0085】

ＤＮＡアルキル化サブユニットがＤＮＡ副溝結合ユニットに結合している本発明の化合物は、リンカーを介して、抗体または他のリガンドを結合させることによってＡＤＣに変換することができる。リンカーは、ヒドロキシルもしくはアミン基Ｘを介してＤＮＡアルキル化サブユニットに直接結合させても、Ｙ位置においてＤＮＡ副溝結合ユニットを介して間接的に結合させてもよい。

【0086】

第１の態様において、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する

【0087】

【化12】

【0088】

（式中：
ＬＧは脱離基であり；
Ｘは、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、プロドラッグヒドロキシル、アミノ、および保護されたアミノから選択される基であり；ここで、アミノは、－ＮＨ_２、または－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；
ＹはＮ保護基である）。

【0089】

式Ｉの化合物は、式ＩＩおよびＩＩＩの化合物の合成において、ならびにＡＤＣおよびその前駆体において使用してもよい。
本発明はまた式Ｉａの化合物に関する

【0090】

【化13】

【0091】

（式中、ＬＧ、ＸおよびＹは、式Ｉに関して定義したとおりである）。
第２の態様において、本発明は、式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する

【0092】

【化14】

【0093】

（式中：
ＬＧは脱離基であり；
Ｘは、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、プロドラッグヒドロキシル、アミノ、および保護されたアミノから選択される基であり；ここで、アミノは、－ＮＨ_２、または－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；
ＤＢはＤＮＡ副溝結合ユニットである）。

【0094】

本発明はまた、式ＩＩａの化合物に関する

【0095】

【化15】

【0096】

（式中、ＬＧ、ＸおよびＤＢは、式ＩＩに関して定義したとおりである）。
１つの実施形態において、ＤＢは、直接またはアルケニル基を介して結合している、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリール基である。

【0097】

１つの実施形態において、ＤＢは、置換されていてもよいインドール、アザインドール、ベンゾフラン、ベンゼン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、イミダゾール、チオフェン、チアゾール、オキサゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジンまたはピリダジン基である。

【0098】

以下で記載するように、ＤＮＡ副溝結合ユニットの設計および合成、ならびにＤＮＡ結合のその様式および強度を確立するための方法に関する当技術分野において利用可能な広範な情報が存在する。したがって、当業者は、特定の化学物質がＤＮＡ副溝結合ユニットを構成するかどうかを容易に確立することができる。

【0099】

１つの実施形態において、ＤＢは、リンカー基の相補的反応部位またはリンカー基の構成成分に適合する反応性部分ＲＭを含み、前記リンカー基は、リガンド、例えば抗体に結合するかまたは結合に好適である。

【0100】

１つの実施形態において、ＲＭは、アジド、アルキン、ハロゲン化カルバモイル、ハロゲン化アシル、活性エステル、無水物、α－ハロアセチル、α－ハロアセトアミド、マレイミド、イソシアネート、イソチオシアネート、ジスルフィド、チオール、ヒドラジン、ヒドラジド、塩化スルホニル、アルデヒド、メチルケトン、ビニルスルホン、ハロメチルおよびメチルスルホネートからなる群から選択される反応性部分である。

【0101】

本発明のいくつかの実施形態、例えば式ＩＩの化合物において、２－メチルベンゾオキサゾールＤＮＡアルキル化サブユニットは、ＤＮＡ副溝結合ユニット（ＤＢ）に結合している。本発明において使用するための適切なＤＮＡ結合部分は、二本鎖ＤＮＡの副溝における結合に親和性を有する。例えば、Ｄｒｕｇ－Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｊ．Ｂ．Ｃｈａｉｒｅｓ ａｎｄ Ｍ．Ｊ．Ｗａｒｉｎｇ（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ ３４０，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，２００１）；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ＤＮＡ ｂｙ Ｓｍａｌｌ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００１）９，２２１５）；Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ－Ｂａｓｅｄ ＤＮＡ－Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｗｉｔｈ Ｓｍａｌｌ Ｍｏｌｅｃｕｌｅ Ｌｉｇａｎｄｓ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．（２０１３）３３，１１１９）；およびＡ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｏｒ Ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ Ａｓｓａｙ ｆｏｒ Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ ＤＮＡ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ Ａｆｆｉｎｉｔｙ（Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（２００４）３７，６１）において記載されているように、そのような分子の設計および合成、ならびにＤＮＡ結合のその様式および強度を確立するための方法に関する利用可能な広範な情報が存在する。

【0102】

ＤＮＡアルキル化ユニットに結合するためのＤＮＡ結合部分は、ヘテロアリールまたはアリール基であり、これらの基は他の官能基で置換されていてもよい。一般的に、平面アリールおよびヘテロ環系は、副溝内の結合に適切な物理化学的特性を有し、これは溝の壁および塩基のＤＮＡ構成要素とのＨ結合およびファンデルワールス相互作用の組合せによって通常促進される。これらの相互作用を強化するアリールおよびヘテロアリール環置換基は結合の強度を高める。

【0103】

結合は、２つ以上の環系と一緒に連結して、副溝とより長くより広範な相互作用を生成することによってさらに有利に働くが、それは全体的な構造が正確な屈曲およびねじれを保持して、それが結合する副溝のものと一致する場合に限る。これは、小分子リガンドまたはＤＮＡのいずれかの歪みが最小である場合；すなわち形状相補性が高度である場合、最も有利に達成される。環系に連結するためにアミド結合を使用することは、アミドがそれ自体がＤＮＡとのＨ結合相互作用に関与する場合があり、同時に所望のねじれおよび屈曲に適合するのに十分な可撓性も提供するため、有利なモチーフである。

【0104】

特に長さが延長されたＤＮＡ副溝バインダーに関して考慮するためのさらなる因子は、リガンドのＨ結合ドナーとＤＮＡのアクセプターとの間の正確なレジスター（register）または位置を維持することである。一部の場合において、これはアリールまたはヘテロアリール環の置換基の特質を変化させるかまたは位置をシフトさせることによって達成してもよい。ＤＮＡ副溝結合リガンドの広範なライブラリーは構築され、その結合親和性に関してアッセイされており（例えば、Ｔｏｔａｌ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｄｉｓｔａｍｙｃｉｎ Ａ ａｎｄ ２６４０ Ａｎａｌｏｇｕｅｓ：Ａ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ－Ｐｈａｓｅ Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ｔｈｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ Ｎｅｗ，Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ＤＮＡ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ Ｒａｐｉｄ，Ｈｉｇｈ－Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ Ｓｃｒｅｅｎ ｆｏｒ Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ Ｒｅｌａｔｉｖｅ ＤＮＡ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ａｆｆｉｎｉｔｙ ｏｒ ＤＮＡ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（２０００）１２２，６３８２）、そのようなライブラリーを適用してデュオカルマイシン類似体は調製されている（例えば、Ｐａｒａｌｌｅｌ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ １３２（＋）－１，２，９，９ａ－Ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａ［ｃ］ｂｅｎｚ［ｅ］ｉｎｄｏｌ－４－ｏｎｅ（ＣＢＩ）Ａｎａｌｏｇｕｅｓ ｏｆ ＣＣ－１０６５ ａｎｄ ｔｈｅ Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎｓ Ｄｅｆｉｎｉｎｇ ｔｈｅ Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＤＮＡ－Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｄｏｍａｉｎ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００１）６６，６６５４）。

【0105】

式ＩＩ、およびＩＩａの化合物の具体的な実施形態において、ＤＮＡ副溝結合ユニットは、アミド結合を介して第２のヘテロアリール基またはアリール基に連結していてもよいヘテロアリール基を含む。

【0106】

式ＩＩおよびＩＩａの化合物の他の実施形態において、ＤＮＡ副溝結合ユニットは、アルケニル基（－ＣＨ＝ＣＨ－）を介してＤＮＡアルキル化ユニットに連結した単一のアリールまたはヘテロアリール基を含む。

【0107】

第３の態様において、本発明は、式ＩＩＩの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する

【0108】

【化16】

【0109】

（式中：
ＬＧは脱離基であり；
Ｘは、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、プロドラッグヒドロキシル、アミノ、および保護されたアミノから選択される基であり；ここで、アミノは、－ＮＨ_２、または－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；
Ｙは
（ａ）Ｎ保護基；
（ｂ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１
（ｃ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２
（ｄ）－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３；または
（ｅ）－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３
から選択され：
ここで、Ａｒ^１、Ａｒ^２およびＡｒ^３は、ヘテロアリールまたはアリール基からそれぞれ独立して選択され、ここで、各ヘテロアリールまたはアリール基は、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルのうちの１つまたは複数で置換されていてもよく；
ここで、各場合において、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい）。

【0110】

本発明はまた、式ＩＩＩａの化合物に関する

【0111】

【化17】

【0112】

（式中、ＬＧ、ＸおよびＤＢは、式ＩＩＩに関して定義したとおりである）。
以下の実施形態は、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩおよびＩＩＩａの化合物に適用される。

【0113】

本明細書において使用する「脱離基」という用語は、置換反応において炭素中心から外れる基を意味する。通常そのような基は陰イオン形態で安定である。脱離基の例は当技術分野において周知であり、脱離基としては、これらに限定されるものではないが、ハロ基およびスルホネート基、例えば、置換されていてもよい（Ｃ_１～Ｃ_６）アルカンスルホネート（例えば、メタンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネートおよびトリフルオロエタンスルホネート）および置換されていてもよいベンゼンスルホネートがある。

【0114】

１つの実施形態において、ＬＧは、塩化物、臭化物、ヨウ化物および－ＯＳＯ_２Ｒ^１からなる群から選択され；ここで、Ｒ^１は、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、（Ｃ_１～Ｃ_１０）ヘテロアルキル、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アリールまたは（Ｃ_１～Ｃ_１０）ヘテロアリールから選択される。１つの実施形態において、ＬＧは、ハロゲン化物基であり、好ましくは塩化物である。以下のスキーム２では、異なる脱離基を含むＤＮＡアルキル化サブユニットの合成を示す。

【0115】

本発明の化合物において、基Ｘは、遊離ヒドロキシルまたは遊離アミノ基であっても、好適な保護基によって保護されたヒドロキシルまたはアミノ基（それぞれ保護されたヒドロキシルまたは保護されたアミノ基）であってもよい。Ｘはまた、ヒドロキシルのプロドラッグ形態（プロドラッグヒドロキシル）であってもよい。

【0116】

「プロドラッグヒドロキシル」という用語は、生化学物質、例えば酵素の作用によってｉｎ ｖｉｖｏで変換されて遊離ＯＨ基を提供する基を意味する。使用することができる好適なプロドラッグヒドロキシル基を選択し、調製するための従来の手順は、“Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ”，ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５において記載されている。例は当技術分野において周知であり、例としては、これらに限定されるものではないが、ホスフェート基、カルバメートおよびグリコシドがある。

【0117】

Ｘがプロドラッグヒドロキシルである本発明の化合物は、リンカーが、Ｘを介してではなく、ＤＮＡ副溝結合ユニットに結合することになるＡＤＣにおいて使用することができる。これは、ＡＤＣのプロドラッグ形態をもたらすことになる。本発明の化合物を組み込んだＡＤＣを設計する当業者であれば、抗体構成成分に繋ぐ適切な位置を選択し、ＡＤＣの意図する適用のための特定のプロドラッグ形態の望ましい状態を決定するであろう。

【0118】

本明細書において使用する「保護されたヒドロキシル」という用語は、合成手順中の不所望の反応に対して保護されているヒドロキシル基を指す。保護されたヒドロキシル基は、不用になった場合および／またはヒドロキシル基の反応を可能にするために、遊離ヒドロキシル基に容易に変換される。ヒドロキシル保護基は、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ｅｔ ａｌ．（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，１９９９）に記載されている。本明細書において使用する「保護されたヒドロキシル」という用語は、良好な脱離基を含み、ＯＨ基が代替の基で交換された誘導体の合成において有用であるＯＴｆなどの基も含む。本発明の化合物において有用であるヒドロキシル保護基の例としては、－ＯＢｎ、－ＯＴｆ、－ＯＭＯＭ、－ＯＭＥＭ、－ＯＢＯＭ、－ＯＴＢＤＭＳ、－ＯＰＭＢ、－ＯＳＥＭがある。

【0119】

本明細書において使用する「保護されたアミノ」という用語は、合成手順中の不所望の反応に対して保護されているアミノ基を指す。保護されたアミノ基は、不用になった場合および／またはアミノ基の反応を可能にするために、遊離アミノ基に容易に変換される。本発明の化合物において、Ｘ位におけるアミノ基は、－ＮＨ_２、および－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルから選択される。アミノ保護基はＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ｅｔ ａｌ．（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，１９９９）および’Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ－Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ’ ｂｙ Ｆｅｒｎａｎｄｏ Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ（ｗｉｔｈ Ａｌｂｅｒｔ Ｉｓｉｄｒｏ－Ｌｌｏｂｅｔ ａｎｄ Ｍｅｒｃｅｄｅｓ Ａｌｖａｒｅｚ）Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ２００９（１０９）２４５５－２５０４に記載されている。

【0120】

本発明の化合物において有用であるアミノ保護基の例としては、これらに限定されるものではないが、アシルおよびアシルオキシ基、例えば、アセチル、クロロアセチル、トリクロロアセチル、ｏ－ニトロフェニルアセチル、ｏ－ニトロフェノキシ－アセチル、トリフルオロアセチル、アセトアセチル、４－クロロブチリル、イソブチリル、ピコリノイル、アミノカプロイル、ベンゾイル、メトキシ－カルボニル、９－フルオレニルメトキシカルボニル、２，２，２－トリフルオロエトキシカルボニル、２－トリメチルシリルエトキシ－カルボニル、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、ｐ－ニトロベンジルオキシカルボニル、２，４－ジクロロ－ベンジルオキシカルボニルなどがある。さらなる例としては、Ｎｏｓｙｌ（ｏ－またはｐ－ニトロフェニルスルホニル）、Ｂｐｏｃ（２－（４－ビフェニル）イソプロポキシカルボニル）およびＤｄｅ（１－（４，４－ジメチル－２，６－ジオキソヘキシリデン）エチル）がある。

【0121】

１つの実施形態において、Ｘは、－ＯＨ、－ＯＢｎ、－ＯＴｆ、－ＯＭＯＭ、－ＯＭＥＭ、－ＯＢＯＭ、－ＯＴＢＤＭＳ、－ＯＰＭＢ、－ＯＳＥＭ、ピペラジン－１－カルボキシレートからなる群から選択され、ここで、４位のＮは、（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^２）_２、－ＮＨ_２、－Ｎ＝Ｃ（Ｐｈ）_２、－ＮＨＺ、ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルおよび－Ｎ－Ｚ（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルで置換されており；
ここで、Ｒ^２は、ｔ－Ｂｕ、Ｂｎまたはアリルであり；Ｚは、Ｂｏｃ、ＣＯＣＦ_３、Ｆｍｏｃ、Ａｌｌｏｃ、Ｃｂｚ、ＴｅｏｃおよびＴｒｏｃから選択される。

【0122】

１つの実施形態において、Ｘは、－ＯＨまたは－ＮＨ_２である。
１つの実施形態においてＸは、保護されたまたはプロドラッグ－ＯＨである。
１つの実施形態において、Ｘは、保護された－ＮＨ_２である。

【0123】

１つの実施形態において、Ｘは、－ＯＢｎ、－ＯＴｆ、－ＯＭＯＭおよび－ＯＭＥＭを含む群から選択される。
Ｘが、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシルまたはプロドラッグヒドロキシルである本発明の化合物を作製する方法は、以下のスキーム２に示す。Ｘが、アミノまたは保護されたアミノである本発明の化合物を作製する方法は、以下のスキーム３に示す。

【0124】

ＹがＮ保護基である本発明の化合物は、ＤＮＡ副溝結合ユニットに容易に結合して、２－メチルベンゾオキサゾールＤＮＡアルキル化ユニットを提供し、それが細胞毒性の高いデュオカルマイシン類似体を提供し得る。

【0125】

本明細書において使用する「Ｎ保護基」という用語は、容易に除去されて遊離Ｎを提供することができ、合成手順中の不所望の反応に対してＮ原子を保護する基を意味する。そのような保護基は、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ｅｔ ａｌ．（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，１９９９）ａｎｄ ’Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ－Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ’ ｂｙ Ｆｅｒｎａｎｄｏ Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ（ｗｉｔｈ Ａｌｂｅｒｔ Ｉｓｉｄｒｏ－Ｌｌｏｂｅｔ ａｎｄ Ｍｅｒｃｅｄｅｓ Ａｌｖａｒｅｚ）Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ２００９（１０９）２４５５－２５０４に記載されている。例としては、これらに限定されるものではないが、アシルおよびアシルオキシ基、例えば、アセチル、クロロアセチル、トリクロロアセチル、ｏ－ニトロフェニルアセチル、ｏ－ニトロフェノキシ－アセチル、トリフルオロアセチル、アセトアセチル、４－クロロブチリル、イソブチリル、ピコリノイル、アミノカプロイル、ベンゾイル、メトキシ－カルボニル、９－フルオレニルメトキシカルボニル、２，２，２－リフルオロエトキシカルボニル、２－トリメチルシリルエトキシ－カルボニル、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、ｐ－ニトロベンジルオキシカルボニル、２，４－ジクロロ－ベンジルオキシカルボニルなどがある。さらなる例としては、Ｎｏｓｙｌ（ｏ－またはｐ－ニトロフェニルスルホニル）、Ｂｐｏｃ（２－（４－ビフェニル）イソプロポキシカルボニル）およびＤｄｅ（１－（４，４－ジメチル－２，６－ジオキソヘキシリデン）エチル）がある。

【0126】

１つの実施形態において、Ｙは、Ｂｏｃ、ＣＯＣＦ_３、Ｆｍｏｃ、Ａｌｌｏｃ、Ｃｂｚ、ＴｅｏｃおよびＴｒｏｃから選択されるＮ保護基である。
当業者であれば、使用する特定の合成スキームおよび所望の最終製品に好適な保護基およびプロドラッグヒドロキシル部分を選択することができるであろう。

【0127】

式ＩＩＩの化合物において、ＤＮＡ副溝結合ユニットは、ヘテロアリールまたはアリール基を含み、これらは、第２のヘテロアリール基またはアリール基にアミド結合を介してまたは－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－を介して連結していてもよい。

【0128】

他の実施形態において、ＤＮＡ副溝結合ユニットは、単一のアリールまたはヘテロアリール基を含む。
１つの実施形態において、Ａｒ^１、Ａｒ^２およびＡｒ^３は、

【0129】

【化18】

【0130】

からなる群から独立して選択される
（式中、

【0131】

【化19】

【0132】

は、－Ｃ（Ｏ）またはＣ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－基への結合点を表し、各アリールまたはヘテロアリール基は、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルから選択される最大３つの置換基で番号が付された位置において置換されていてもよい）。

【0133】

当業者に理解されるであろうように、５－アザインドール、６－アザインドール、７－アザインドール、イミダゾール、チアゾール、オキサゾールおよびピラゾール基は、最大２つの基およびトリアゾールと、１つだけ置換することができる。

【0134】

Ａｒ^１がＡｒ^２にＮＨ－Ｃ（Ｏ）を介して結合する場合、またはＡｒ^１がＡｒ^３に－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨを介して結合する場合、Ａｒ^１の結合点は、番号が付された位置のうちのいずれか１つであってもよい。当業者に理解されるであろうように、そのような結合は、Ａｒ^１の可能な置換基を１つ減少させることになる。

【0135】

各場合において、置換基－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい場合がある。

【0136】

１つの実施形態において、Ａｒ^１はヘテロアリール基である。１つの実施形態において、ヘテロアリール基は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基であり、これらは、ヘテロアリール基の２位において－Ｃ（Ｏ）またはＣ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－を介してＤＮＡアルキル化ユニットに結合している。

【0137】

１つの実施形態において、Ａｒ^１はＡｒ^２にＮＨ－Ｃ（Ｏ）を介して結合するかまたはＡｒ^１は－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨを介してＡｒ^３に結合する。１つの実施形態において、Ａｒ^１の結合点は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基の５位にある。

【0138】

１つの実施形態において、Ａｒ^２は、インドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、イミダゾール、チオフェン、チアゾール、オキサゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジンまたはピリダジンからなる群から選択される。

【0139】

１つの実施形態において、Ａｒ^２は、インドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピロールまたはイミダゾールからなる群から選択される。
１つの実施形態において、Ａｒ^３は、ベンゼン、ピリジン、ピリミジンおよびピリダジンから選択される。１つの実施形態においてＡｒ^３は、ベンゼンまたはピリジンであり、好ましくはベンゼンである。

【0140】

１つの実施形態において、Ｙは－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１であり、ここで、Ａｒ^１は、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルまたは－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルのうちの１つまたは複数で置換されていてもよいヘテロアリールまたはアリール基であり、
ここで、各場合において、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい。

【0141】

１つの実施形態において、Ａｒ^１は、ヘテロアリールまたはアリール環の１位において置換されている。
１つの実施形態において、Ａｒ^１はヘテロアリール基である。

【0142】

１つの実施形態においてヘテロアリール基は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基であり、これらは、ヘテロアリール基の２位において－Ｃ（Ｏ）またはＣ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－を介してＤＮＡアルキル化ユニットに結合している。

【0143】

１つの実施形態において、Ａｒ^１は

【0144】

【化20】

【0145】

である
（式中、Ａは、ＮＨ、ＯまたはＳであり、
Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２は、Ｈ、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルから独立して選択され、
ここで、各場合において、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、および－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい）。

【0146】

１つの実施形態において、ＡはＮＨである。
１つの実施形態において、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２はＯＭｅである。
１つの実施形態において、Ｒ^１０は、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で置換されていてもよい－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；Ｒ^１１およびＲ^１２は両方ともＨである。

【0147】

１つの実施形態において、Ｒ^１０は、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で置換されていてもよい－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり；Ｒ^１１およびＲ^１２は両方ともＨである。

【0148】

１つの実施形態において、Ｒ^１０は－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２であり、ここでＡｒ^２は、置換されていてもよいインドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピロールまたはイミダゾール基であり；Ｒ^１１およびＲ^１２は両方ともＨである。

【0149】

１つの実施形態において、Ｒ^１０は－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２であり、ここで、Ａｒ^２は、置換されていてもよいインドール基であり；Ｒ^１１およびＲ^１２は両方ともＨである。１つの実施形態において、インドール基は、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で置換されていてもよい－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルで置換されている。

【0150】

１つの実施形態において、Ｒ^１０は－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２であり、ここで、Ａｒ^２は置換されていてもよいベンゼン基であり；Ｒ^１１およびＲ^１２は両方ともＨである。１つの実施形態において、ベンゼン基は、－ＯＨ、－ＮＨ_２、または－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルで置換されており、ここで、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２で置換されていてもよい。

【0151】

１つの実施形態において、Ｒ^１０は－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３であり、ここで、Ａｒ^３は、置換されていてもよいベンゼン、ピリミジン基またはピロール基であり；Ｒ^１１およびＲ^１２は両方ともＨである。１つの実施形態において、ベンゼン、ピリミジン基またはピロール基は、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、または－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルで置換されており、ここで、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルはモルホリンで置換されていてもよい。

【0152】

１つの実施形態において、Ａｒ^１は、

【0153】

【化21】

【0154】

からなる群から選択される
（式中、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２（存在する場合）は、Ｈ、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルから独立して選択され、
ここで、各場合において、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい）。

【0155】

１つの実施形態において、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２はＯＭｅである。
１つの実施形態において、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２のうちの１つは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で置換されていてもよい－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルである。

【0156】

１つの実施形態において、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２のうちの１つは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で置換されていてもよい－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルである。

【0157】

１つの実施形態において、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２のうちの１つは－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２であり、ここで、Ａｒ^２は、置換されていてもよいインドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピロールまたはイミダゾール基である。

【0158】

１つの実施形態において、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２のうちの１つは－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２であり、ここで、Ａｒ^２は、置換されていてもよいインドール基である。１つの実施形態において、インドール基は、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で置換されていてもよい－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルで置換されている。

【0159】

１つの実施形態において、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２のうちの１つは－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２であり、ここで、Ａｒ^２は置換されていてもよいベンゼン基である。１つの実施形態において、ベンゼン基は、－ＯＨ、－ＮＨ_２、または－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルで置換されており、ここで、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２で置換されていてもよい。

【0160】

１つの実施形態において、Ｒ^１０、Ｒ^１１およびＲ^１２のうちの１つは－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３であり、ここで、Ａｒ^３は、置換されていてもよいベンゼン、ピリミジン基またはピロール基である。１つの実施形態において、ベンゼン、ピリミジン基またはピロール基は、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、または－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルで置換されており、ここで、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、モルホリンで置換されていてもよい。

【0161】

１つの実施形態において、Ｙは－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^２であり、ここで、Ａｒ^１およびＡｒ^２は、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルまたは－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルのうちの１つまたは複数で置換されていてもよいヘテロアリールまたはアリール基であり、
ここで、各場合において、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい。

【0162】

１つの実施形態において、Ａｒ^１はヘテロアリール基であり、Ａｒ^２は、ヘテロアリールまたはアリール基である。
１つの実施形態において、Ａｒ^１は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基であり、これらは、ヘテロアリール基の２位においてＤＮＡアルキル化ユニットに結合している。

【0163】

１つの実施形態において、Ａｒ^２は、インドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、イミダゾール、チオフェン、チアゾール、オキサゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジンまたはピリダジンからなる群から選択される。

【0164】

１つの実施形態において、Ａｒ^２は、インドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピロールまたはイミダゾール基からなる群から選択される。
１つの実施形態において、Ａｒ^１は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基であり、これらは、ヘテロアリール基の２位においてＤＮＡアルキル化ユニットに結合しており、Ａｒ^２は、インドール、アザインドール、ベンゼン、ベンゾフラン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、イミダゾール、チオフェン、チアゾール、オキサゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジンまたはピリダジンからなる群から選択される。

【0165】

１つの実施形態において、Ａｒ^１の結合点は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基の５位にある。
１つの実施形態において、Ｙは－Ｃ（Ｏ）－Ａｒ^１－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３であり、ここで、Ａｒ^２およびＡｒ^３は、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルまたは－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルのうちの１つまたは複数で置換されていてもよいヘテロアリールまたはアリール基であり、
ここで、各場合において、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい。

【0166】

１つの実施形態において、Ａｒ^１はヘテロアリール基であり、Ａｒ^３は、ヘテロアリールまたはアリール基である。
１つの実施形態において、Ａｒ^１は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基であり、これらは、ヘテロアリール基の２位においてＤＮＡアルキル化ユニットに結合している。

【0167】

１つの実施形態において、Ａｒ^３は、ベンゼン、ピリジン、ピリミジンおよびピリダジンから選択される。１つの実施形態において、Ａｒ^３は、ベンゼンまたはピリジンであり、好ましくはベンゼンである。

【0168】

１つの実施形態において、Ａｒ^１は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基であり、これらは、ヘテロアリール基の２位においてＤＮＡアルキル化ユニットに結合しており、Ａｒ^３は、ベンゼン、ピリジン、ピリミジンおよびピリダジンから選択される。

【0169】

１つの実施形態において、Ａｒ１の結合点は、インドール、アザインドール、ベンゾフランまたはベンゾチオフェン基の５位にある。
１つの実施形態において、Ｙは－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３であり、ここで、Ａｒ^３は、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルまたは－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルのうちの１つまたは複数で置換されていてもよいヘテロアリールまたはアリール基であり、
ここで、各場合において、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＣＯＮ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルおよび－ＮＨＣ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルは、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で独立して置換されていてもよい。

【0170】

１つの実施形態において、Ａｒ^３は、ベンゼン、ピリジン、ピリミジンおよびピリダジンから選択される。１つの実施形態において、Ａｒ^３は、ベンゼンまたはピリジンであり、好ましくはベンゼンである。

【0171】

１つの実施形態において、Ａｒ^３は、－ＮＭｅ_２、－ＮＨＭｅ、－ＮＨ_２、－ＯＨ、モルホリンおよび－ＳＨのうちの１つまたは複数で置換されていてもよい－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルで置換されていてもよいベンゼン基である。

【0172】

式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの化合物は、式ＩＶの化合物に対するｓｅｃｏ前駆体であり、これはｉｎ ｖｉｖｏでの活性薬剤と考えらている。
第４の態様において、本発明は、式ＩＶの化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物を提供する

【0173】

【化22】

【0174】

（式中、Ｖは、ＹまたはＤＢであり、Ｘ、ＹおよびＤＢは、式Ｉ、ＩＩ、およびＩＩＩの化合物に関して定義されるものと同じ意味を有し、Ｘ’は、Ｈを失ったＸである）。
式ＩＶの化合物は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで転位させ、式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの対応するｓｅｃｏ－化合物からＨ－ＬＧを同時に消失させることを介して形成してもよい。式Ｉ、ＩＩもしくはＩＩＩの化合物、またはこれらの一部のいずれかに関する本明細書において記載する本発明の全ての実施形態も、文脈上特に指示がない限り、式ＩＶの化合物に関する本発明の態様の一部として特に検討される。

【0175】

式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの化合物は、脱離基（ＬＧ）を含み、ＬＧは生理学的条件下でシクロプロピル環形成を促進して式ＩＶの化合物を形成する。
１つの態様において、本発明は、化合物４９、１８、５０、５１、２３、５２、５３、５７、５８、５９、６３、６４、６５、６６、７０、７４、７９、８０、８１、８２、８３、２４、２６、８５、８７、８８、８９、９０、９１および９３のうちのいずれか１つからなる群から選択される化合物を提供する。

【0176】

１つの実施形態において、本発明は、化合物４９、１８、５０、５１、２３、５２、５７、５３、５８、５９、６３、６４、６５、６６、７０、７４、７９、８０、８１、８２、８３、２４、８５、８８および９０のうちのいずれか１つからなる群から選択される化合物を提供する。

【0177】

１つの実施形態において、本発明は、

【0178】

【化23】

【0179】

からなる群から選択される化合物を提供する。
１つの実施形態において、本発明は、

【0180】

【化24】

【0181】

からなる群から選択される化合物を提供する。
１つの実施形態において、本発明は、

【0182】

【化25】

【0183】

からなる群から選択される化合物を提供する。
５．３本発明の化合物の合成
本発明の化合物は、本明細書において記載する方法および手順またはそれに類似した方法および手順を使用して調製してもよい。本発明の化合物を調製するための他の好適な方法は、当業者であれば明らかであろう。

【0184】

典型的なまたは好ましいプロセス条件（例えば、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧力など）が示される場合、特に記載がない限り、他のプロセス条件も使用してもよいことは理解されるであろう。最適な反応条件は、使用する特定の反応物に伴って変化する場合がある。

【0185】

方法および反応において有用である出発材料は、市販されているか、または既知の手順もしくはその改変物、例えば、標準的な参照テキスト、例えばＦｉｅｓｅｒ ａｎｄ Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ Ｒｅａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌｕｍｅｓ １－１５（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９９１），Ｏｒｇａｎｉｃ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｖｏｌｕｍｅｓ １－４０（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９９１）、Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ）、およびＬａｒｏｃｋ’ｓ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ（ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ Ｉｎｃ．，１９８９）に記載されているものによって調製してもよい。

【0186】

さまざまな出発材料、中間体、および化合物は、適切な従来技術、例えば、沈殿、濾過、結晶化、蒸発、蒸留、およびクロマトグラフィーを使用して単離し精製してもよい。化合物の特性評価は、従来の方法を使用して、例えば、融点、マススペクトル、核磁気共鳴、およびさまざまな他の分光学的分析によって行ってもよい。

【0187】

従来の保護基は、ある特定の官能基が不所望の反応を受けることから阻止するために必要な場合がある。保護および脱保護の必要性、ならびに適切な保護基の選択は当業者であれば容易に判定することができる。さまざまな官能基に好適な保護基ならびに特定の官能基を保護および脱保護するための好適な条件は当技術分野において周知である（例えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９９を参照のこと）。

【0188】

２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットを含むペイロードの個々のエナンチオマーは、好適な中間体、例えば、化合物４９または１８のキラルＨＰＬＣ分割を使用して調製してもよい。好適なカラムとしては、関連するアルキル化サブユニットを分割するために使用されるもの、例えば、ＣＢＩ（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９９４）１１６，７９９６）、ＣＴＩ（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２００９）１９，６９６２）、ｉｓｏ－ＤＳＡ（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（２００９）１３１，１１８７）、ＣＩｍＩ（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１６）２４，４７７９）がある。分割した中間体は、ラセミ体に関して記載するものと類似の方法によってペイロードおよび薬物－リンカーコンジュゲートに変換することができる。

【0189】

Ｘ＝保護されたＯＨである２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットを作製するための一般的な方法をスキーム２に示す。このスキームにおける化合物５および７は、Ｘ＝遊離ＯＨおよびＸ＝プロドラッグＯＨである２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットに容易に変換される。

【0190】

【化26】

【0191】

このスキームにおいて、３，４－ジヒドロキシ－５－ニトロ安息香酸エステル１は出発材料として機能する。これらは、例えば、３，４－ジヒドロキシ－５－ニトロベンズアルデヒドを対応する酸に酸化し、続いてアルコールＲＯＨを用いてエステル化することによって調製してもよい。あるいは、１は、４－ヒドロキシ－３－メトキシ安息香酸をニトロ化し、続いて試薬、例えば、ＨＢｒまたはＢＢｒ_３を使用してメトキシ基を脱アルキル化し、続いてアルコールＲＯＨを用いてエステル化することによって調製してもよい。

【0192】

１のニトロ基は、好適な条件（例えばＰｄまたはＰｔ触媒での水素添加、または酸性条件下でのＦｅ（ＩＩＩ）塩への曝露）に曝露することによって対応するアミンに還元され、生成物は、酸性条件下でトリアルキルオルトアセテート、例えばトリメチルオルトアセテートで処置して、置換された２－メチルベンゾオキサゾール２への環化を誘導する。

【0193】

合成のこの時点において、さまざまなＸ＝保護された－ＯＨを導入してもよい。例えば、ベンジル保護基は、２とベンジル臭化物またはベンジル塩化物との塩基性条件下での反応によって導入して、Ｘ＝ＯＢｎである３を得てもよい。同様に、ＭＯＭ保護基は、ＭＯＭＣｌとの反応によって導入してもよく；ＭＥＭ保護基は、ＭＥＭＣｌとの反応によって導入してもよく；ＢＯＭ保護基は、ＢＯＭＣｌとの反応によって導入してもよく；ＴＢＤＭＳ保護基は、ＴＢＤＭＳＣｌとの反応によって導入してもよく；ＰＭＢ保護基は、ＰＭＢＣｌとの反応によって導入してもよく；ＳＥＭ保護基は、ＳＥＭＣｌとの反応によって導入してもよい。異なる保護基に関しては、異なる反応条件（例えば、塩基、溶媒、温度、塩化物または臭化物試薬、添加物、例えばヨウ化物塩）を必要に応じて選択して３の収率を最適化してもよい。

【0194】

次いで、３のエステルを標準的な条件下で加水分解して、対応する酸を得、これを４のＮＨＹ基に変換する。Ｙがカルバメート保護基を表す場合、第２のこれらのステップは、有機塩基、例えばトリメチルアミンおよび好適なアルコールと組み合わせてジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）試薬を使用して単一のポット中で好都合には行ってもよい。例えば、ＤＰＰＡおよびｔ－ＢｕＯＨでＹ＝Ｂｏｃである４が得られることになる。同様にベンジルアルコールを使用するとＹ＝Ｃｂｚのものが得られることになり、２－（トリメチルシリル）エタノールを使用するとＹ＝Ｔｅｏｃのものが得られることになり、２，２，２－（トリクロロ）エタノールを使用するとＹ＝Ｔｒｏｃのものが得られることになる。あるいは、中間体イソシアネートを、アルコールの代わりに水と反応させて対応する非保護アミンを生成してもよい。次いで、これを標準的な条件下で保護された形態に変換してもよく、例えばトリフルオロ酢酸無水物との反応でＹ＝ＣＯＣＦ_３のものが得られることになり、同時にクロロギ酸ベンジルとの反応でＹ＝Ｃｂｚのものが得られることになる。

【0195】

化合物４を、好適な試薬との反応によって４位において選択的にハロゲン化してもよく、例えばＮＢＳは４位に臭化物を導入し、同時にＮＩＳは４位にヨウ化物を導入する。これらの反応は、４および６位におけるジハロゲン化を最小限にするために１当量のハロゲン化剤で行うのが最良である。脱離基が塩化物である、すなわち５のアルキル化サブユニットを作成するために、次いで、ハロゲン化中間体を１，３－ジクロロプロペンと好適な塩基、例えばＮａＨまたはＫ_２ＣＯ_３の存在下で反応させ、これらが、ＮＨＹ基を脱プロトン化し、この位置を直接クロロアリル化するための働きをする。次いで、この中間体を好適な試薬、例えばトリブチルスズヒドリドまたはトリス（トリメチルシリル）シランで処置して、ハロゲン原子を除去し、ペンダントクロロアリル基のラジカル介在性環化を開始し、これにより製品５が生成する。

【0196】

脱離基がハロゲン化物またはスルホネートであるアルキル化サブユニットは、中間体６を介して作製することができる。化合物６は、上述のステップを改変することによって４から調製してもよい。臭化アリルを１，３－ジクロロプロペンの代わりに使用し、ラジカル介在性環化をスピントラップＴＥＭＰＯ（２，２，６，６－テトラメチル－１－ピペリジニルオキシ）の存在下で行う。これにより、Ｎ－Ｏ結合を含む製品が生成し、この結合は、Ｚｎおよび酸、例えば酢酸に曝露することによって開裂して６が生成する。６の第一級アルコールを、標準的な試薬を使用することによってＬＧ＝ハロゲン化物またはスルホネートのものに変換し、例えば、臭素およびトリフェニルホスフィンを使用して、ＬＧ＝Ｂｒのものを作製することができ、同時に塩化メタンスルホニルおよびトリエチルアミンを使用してＬＧ＝ＯＳＯ_２Ｍｅのものを作製することができる。

【0197】

ＸおよびＹの保護基を、化合物５および７の段階において選択的に除去し、交換してもよい。化合物４の後の合成ステップにおいて使用する条件に対して不安定な場合があるいくつかのＹ保護基に関しては、その導入のための好ましい方法である可能性が高い。例えば、Ｙ＝ＣＯＣＦ_３は、アリル化反応において使用する塩基性条件に対して不安定な場合があるが、５または７（ここで、例えばＹ＝Ｂｏｃ）を脱保護し、続いてトリフルオロ酢酸無水物と反応させることによって導入してもよい。同様に、Ｙ＝Ｆｍｏｃも同じ塩基性条件で不安定な場合があり、同時にＹ＝Ａｌｌｏｃはラジカル介在性環化に干渉する場合がある。それにもかかわらず、これらの代替の保護基は、異なる反応条件に対する安定性が必要な５および７のその後の反応において非常に有用な場合がある。これは、例として、Ｘ＝保護されたＮＨ_２であるアルキル化サブユニットの合成において以下に示す。

【0198】

５および７に関しては、基Ｘ＝保護されたＯＨも、遊離ＯＨ（すなわち以下の化合物８）に変換してもよく、したがってプロドラッグＯＨに変換してもよい。後者の変換は、十分確立された合成方法を介して進行する。例えば、８と４－アルキルピペラジンカルボニル塩化物との反応によって、５および７が得られる（ここで、Ｘ＝ピペラジン－１－カルボキシレートであり、４位におけるＮがアルキル基で置換されている）。別の例において、８の遊離ＯＨを一般的な構造Ｒ_２ＮＰ（ＯＲ^２）_２のホスホルアミダイト試薬と反応させる（ここでＲは低級アルキル、例えばエチルまたはイソプロピルであり、Ｒ^４はｔ－Ｂｕ、Ｂｎまたはアリルである）。次いで、中間体生成物を好適な試薬、例えば過酸化水素または有機過酸を用いて酸化させて、５および７（ここで、Ｘ＝ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^２）_２）が得られる。

【0199】

２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニット（ここで、Ｘ＝ＮＨ_２、保護されたＮＨ_２、ＮＨＲ^１、または保護されたＮＨＲ^１、ここで、Ｒ^１は（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルである）を作製するための一般的な方法をスキーム３に示す。

【0200】

【化27】

【0201】

遊離ＯＨ基を含む化合物８をトリフルオロメタンスルホン酸無水物および好適な塩基、例えばトリエチルアミンと反応させて、化合物９を得る。この化合物を、好適な触媒、例えばＰｄ（ＯＡｃ）_２およびリガンド、例えばＢＩＮＡＰを使用してベンゾフェノンイミンと反応させて、アミノ化を行い、化合物１０を生成する。ベンゾフェノンイミンを、酸性条件下で開裂させて、化合物１１を生成する。必要な酸性条件は、いくつかの保護基Ｙが他のものよりも好適であることを意味する。例えば、Ｙ＝ＣＯＣＦ_３はＹ＝Ｂｏｃよりも好適であり、その結果１つの好都合な経路は、化合物７の段階においてＹ＝ＢｏｃからＹ＝ＣＯＣＦ_３への交換を伴う。保護基の他の組合せも可能であり、特定の標的化合物に応じてさまざまな合成の利点を提供することができる。

【0202】

化合物１１は、Ｘ位においてＮＨＲ^１（ここで、Ｒ^１は（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルである）置換基を有するアルキル化サブユニット１２にさらに変換してもよい。例えば、１１は酢酸ギ酸無水物と反応させて、ホルミル化中間体を生成してもよく、これを、ボランを使用して還元して、１２（ここで、Ｒ^１＝Ｍｅ）を得る。あるいは、１１をアルデヒドＲ^１ＣＨＯ（ここで、Ｒ^１は（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルである）と縮合させて、イミンを得てもよく、これを試薬、例えば水素化ホウ素ナトリウムまたはシアノホウ素化ナトリウムを用いて還元して、１２（ここで、Ｒ^１＝（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルである）を得る。化合物１１および１２は、上記で示したような標準的な条件を使用して保護された類似体１３および１４に変換することができ、例えば、トリフルオロ酢酸無水物との反応で、Ｘ＝ＮＨＺおよびＮＺＲ^１（ここで、Ｚ＝ＣＯＣＦ_３であり、Ｒ^１は（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルである）を生成することになり、同時にフルオレニルメチルオキシカルボニル塩化物との反応はＸ＝ＮＨＺおよびＮＺＲ^１（ここで、Ｚ＝Ｆｍｏｃ、Ｒ^１は（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルである）を生成することになる。

【0203】

２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットおよびＤＮＡ副溝結合部分（ＤＢ）を組み込んだＤＮＡアルキル化剤を作製するための一般的な方法をスキーム４に示す。

【0204】

【化28】

【0205】

１５がＸ＝ＯＨを含む場合、保護基Ｙは、適切な方法によって（例えば、Ｙ＝Ｂｏｃに関してはＨＣｌとの処置によって）除去し、得られた中間体を、ＤＮＡ副溝結合ユニットＡｒ^１ＣＯ_２ＨまたはＡｒ^３ＣＨ＝ＣＨＣＯ_２Ｈと、好適なアミドカップリング剤、例えばＥＤＣＩまたはＨＯＢｔの存在下で反応させる。ＤＮＡ副溝結合ユニットの他の活性化形態、例えば酸塩化物も使用してもよい。このアプローチは、１７（ここで、Ｘ＝ＯＨである）を直接生成する。

【0206】

１５が、Ｘ＝保護されたＯＨまたは保護されたＮＨ_２または保護されたＮＨＲ^１を含む場合、合成は、２ステップで中間体１６を介して進行する。ＸおよびＹにおける保護基の適切な選択は、Ｘにおいて使用する保護基の存在下でＹの脱保護を可能にするために行うべきであることは当業者であれば明らかであろう。例えば、ＹはＢｏｃである場合、ＸはＮＨＢｏｃもしくはＮＲＢｏｃ、または酸に対して高感受性であるその他の保護基、例えばＮＨＴｅｏｃまたはＮＲＴｅｏｃであるべきではない。直交性保護基の好適な組合せは、上記で示す一般的なスキームに従うことによって容易に利用可能である。化合物１６（ここで、Ｙ＝－Ｃ（Ｏ）Ａｒ^１または－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－Ａｒ^３）を形成するためのアミドカップリングを上述と同じ一般的な方法で行い、１６を、Ｘにおける保護基を除去することによって１７に変換する。化合物１７がＸ＝ＮＨ_２を含む場合、ベンゾフェノンイミンは好適な保護された前駆体、すなわち１５（ここで、Ｘ＝Ｎ＝Ｃ（Ｐｈ）_２）として機能する場合がある。

【0207】

同じアプローチを使用して、適切な側鎖酸を置換することによって、すなわち、Ａｒ^２Ｃ（Ｏ）ＮＨＡｒ^１ＣＯ_２ＨまたはＡｒ^３ＣＨ＝ＣＨＣ（Ｏ）ＮＨＡｒ^１ＣＯ_２Ｈを使用することによって、側鎖が２つの連結した芳香環を含むペイロードを作製することができる。

【0208】

スキーム５は、ＸがＮＨ_２である本発明の化合物の合成の予測的な例を示す。

【0209】

【化29】

【0210】

スキーム５において提案する合成では、遊離アミノ基を含む２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニット（一般的な構造２２）を、ｓｅｃｏ－ＣＢＩ化合物に関して報告済みの方法に類似した方法によって調製してもよい（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１６）２４，６０７５）。特に、化合物１８は、トリフルオロメタンスルホン酸無水物およびトリエチルアミンを使用してトリフレート１９に変換する。化合物１９は、ベンゾフェノンイミンおよびＰｄ（ＯＡｃ）_２触媒およびＢＩＮＡＰリガンドを使用してアミノ化して２０を得る。Ｂｏｃ保護基が、メタノール中のＨＣｌまたはジクロロメタン中のＴＦＡを使用して選択的に開裂し、得られた中間体は、カップリング剤としてＥＤＣＩを使用して好適な側鎖酸と反応させてアミド２１を得る。ベンゾフェノン保護基を、水性酢酸を使用して除去して所望の製品２２を得る。この方法は、１８のＲおよびＳエナンチオマーにも適用して、２２の対応するＲおよびＳエナンチオマーを得てもよい。

【0211】

好適な置換基を有する多くのＤＮＡ副溝結合ユニット酸Ａｒ^１ＣＯ_２ＨまたはＡｒ^３ＣＨ＝ＣＨＣＯ_２Ｈは市販されている化合物であるか、または単純な官能基の変更によって市販されている化合物から容易に作成することができ、例えば、エステルおよびニトリルをカルボン酸に加水分解することができ、ニトロ置換基をアミノ置換基に還元することができ、これをさらにアルキル化またはアシル化することができ、ハロゲン化物置換基はさまざまな金属－介在性反応および／または変位反応を受けて、さまざまな所望の置換基にアクセスすることができる。さらに、好適なＤＮＡ副溝結合ユニット酸を調製するのに有用である多数の他のアリールおよびヘテロアリール化合物は既知の化合物であるか、または既知の合成方法を改変することによって作製することができる。多くのこれらの方法は、“Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＩＩＩ”，ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ａ．Ｒ．Ｋａｔｒｉｔｚｋｙ，Ｃ．Ａ．Ｒａｍｓｄｅｎ，Ｅ．Ｆ．Ｖ．Ｓｃｒｉｖｅｎ ａｎｄ Ｒ．Ｊ．Ｋ．Ｔａｙｌｏｒ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，２００８に記載されている。例えば、インドールの合成は、第３．０３項（３巻、２６９～３５１頁）においてレビューされており、アザインドールの合成は第１０．０６項（１０巻、２６３～３３８頁）においてレビューされており、ベンゾフランの合成は第３．０７項（３巻、４９７～５６９頁）においてレビューされており、ベンゾチオフェンの合成は第３．１１項（３巻、８３４～９３０頁）においてレビューされており、これら全ては参照により本明細書に組み込まれるものとする。置換されたヘテロアリール化合物の合成に対する多くのレビューが存在し、例えば、インドールの合成は以下の出版物においてレビューされている：Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（２００６）１０６，２８７５；Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（２００５）１０５，２８７３；Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ １（２０００），１０４５。

【0212】

より具体的には、ＤＮＡ副溝結合ユニット酸としての適用に関しては、所望の２位においてカルボキシレート置換基を有するヘテロアリール化合物を生成する方法が既知である。これらの多くは前述のレビューに含まれているが、特定の例もここに示す：インドール－２－カルボキシレートに関しては、Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．（２０１６）１８，３５８６；Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．（２００４）６，２９５３；アザインドール－２－カルボキシレートに関しては、国際公開第２００９／０３０７２５号；ベンゾフラン－２－カルボキシレートに関しては、Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．（２０１３）１５，３８７６；Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ．２（１９９８）１０６３；ベンゾチオフェン－２－カルボキシレートに関しては、Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．（２０１３）１５，３８７６；Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．（２０１２）１４，５３３４。

【0213】

多くのこれらの方法は、デュオカルマイシン類似体の調製に使用するための特定のＤＮＡ副溝結合ユニット酸の合成において採用されている。例えば、７２個の異なる置換されたインドール－２－カルボキシレートの合成およびそのｓｅｃｏ－ＣＢＩアルキル化サブユニットへのカップリングは、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００３）１１，３８１５に記載されている。デュオカルマイシン類似体を調製するために使用するさまざまな置換されたインドール－２－カルボキシレートの他の例は、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２０１７）６０，５８３４；ＣｈｅｍＭｅｄＣｈｅｍ（２０１４）９，２１９３；Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００６）２３１４；およびＪ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９９７）１１９，４９７７に記載されており；同時にさまざまな置換されたケイ皮酸の同様の使用は、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（１９９７）４０，９７２に記載されている。Ａｒ^１がアリールまたはヘテロアリール基Ａｒ^３に結合しているタイプのＤＮＡ副溝結合ユニット酸の合成も報告されている、例えば、国際公開第２０１１／１３３０３９号；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００３）４６，６３４；およびＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００１）６６，６６５４において記載されている（これらは、他の環系の中でも、インドール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ピロール、チオフェン、イミダゾール、およびチアゾールを組み合わせた１３２個の側鎖の合成を記載している）。

【0214】

当業者であれば、Ａｒ^１がＡｒ^２またはＡｒ^３に結合している多くの側鎖を、標準的な方法およびカップリング剤を使用して、特定の例に関与する他の置換基に応じて適切な保護基を使用して、アミノ置換基を含むＡｒ^１ユニットとカルボン酸置換基を含むＡｒ^２またはＡｒ^３ユニットとの間のアミド結合を形成することによって調製してもよいことを認識するであろう。したがって、本発明の化合物の合成において、ＤＮＡアルキル化ユニットと反応させる酸Ａｒ^１ＣＯ_２ＨまたはＡｒ^３ＣＨ＝ＣＨＣＯ_２ＨまたはＡｒ^２ＣＯＮＨＡｒ^１ＣＯ_２ＨまたはＡｒ^３ＣＨ＝ＣＨＣＯＮＨＡｒ^１ＣＯ_２Ｈを調製する一般的で特定の方法を記載している大量の情報および前例が存在する。

【0215】

２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットおよび副溝結合側鎖が組み込まれたＤＮＡアルキル化剤をＡＤＣのペイロードとして使用することができる。この目的のために、リンカーを使用してペイロードを抗体に結合させる必要がある。リンカーは、いくつかの異なる方法でペイロードに結合させてもよい。例えば、リンカーはＸ位において結合させてもよく、これは、カルバメート（－ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲもしくは－ＯＣ（Ｏ）ＮＲ_２または－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲまたは－ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ’）を介していても、エーテル（－ＯＲ）官能基を介していてもよい。これらのタイプのリンカーは、「トレースレス」リンカーとして既知の結合タイプのものであり、ＡＤＣが代謝された後にフラグメント化してＸ＝ＯＨまたはＮＨ_２またはＮＨＲを放出することを必要とする。好適なリンカータイプのいくつかの例は既知であり、自壊性スペーサー、例えばパラ－アミノベンジルエーテルまたはパラ－アミノベンジルカルバメートが組み込まれていることが多く、これらのフラグメンテーション速度に影響を与える方法でさらに置換されていても、または追加の開裂可能なスペーサー、例えばＮ，Ｎ－ジアルキル－１，２－ジアミノエタンに結合させてもよい。

【0216】

Ｘ位置にトレースレスリンカーを含む代表的な薬物－リンカー化合物の合成の例示的な例を以下に示す。
スキーム６は、リンカーがフェノールカルバメートを介して結合している本発明の化合物の調製を概説する。

【0217】

【化30】

【0218】

このスキームにおいて、化合物２３を４－ニトロフェニルクロロホルメートと反応させ、次いで、生成物をモノＢｏｃ－保護されたＮ，Ｎ’－ジメチル－１，２－ジアミノエタンと反応させて２４を得る。２４のＢｏｃ基を、ＴＦＡを使用して脱保護して、対応するＴＦＡ塩を得る。活性化マレイミド－バリン－シトルリン－ＰＡＢＡ化合物２５を記載されているように調製する（Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．（２０１５）１２、１８１３）。ＴＦＡ塩および２５を弱塩基性条件下で反応させ、薬物－リンカー２６を得る。

【0219】

スキーム７は、リンカーがフェノールエーテルを介して結合している本発明の化合物の調製を概説する。

【0220】

【化31】

【0221】

このスキームにおいて、フェノール１８を、好適な塩基、例えばＭｅＬｉを使用して脱プロトン化し、次いで、既知のバリン－アラニン－ＰＡＢ－臭化物化合物２７と反応させて（国際公開第２０１８／０３５３９１号）、化合物２８を得る。両方のＢｏｃ保護基をＴＦＡで処置することによって除去し、続いて、脂肪族アミンのＢｏｃ保護基を、ＤＩＰＥＡの存在下で（Ｂｏｃ）_２Ｏで処置することによって置き換えて化合物２９を得る。この化合物を、カップリング剤としてＥＤＣＩを使用して５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボン酸と反応させて、３０を生成する。Ｂｏｃ保護基をＴＦＡで除去し、アミンを市販されているＮＨＳエステル３１と反応させ、ペイロード－リンカー化合物３２を得る。

【0222】

スキーム８は、リンカーがアミノカルバメートを介して結合している本発明の化合物の調製を概説する。

【0223】

【化32】

【0224】

化合物３３を、塩基としてのピリジンの存在下で既知のジスルフィドクロロホルメート試薬３４（ＡＣＳ Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２０１６）７，９８８））と反応させ、本発明の化合物３５を得る。

【0225】

これらの例は、リンカーがｉｎ ｖｉｖｏでの選択的な代謝または反応のための特定の官能基を含むべきであることを例示するのにも役立つ。例としては、リソソーム酵素によって認識されるジペプチド（例えば、カテプシンに対して認識される開裂部位であるバリン－シトルリンまたはバリン－アラニンジペプチド）または高レベルの細胞内還元剤、例えばグルタチオンに曝露された場合に開裂するジスルフィド結合がある。リンカーは、抗体への結合を可能にする官能基、例えば、チオール、例えば、抗体鎖内ジスルフィド結合の還元によって生成されたもの、または位置選択的に改変された抗体において遺伝子操作されたシステイン残基上のものと選択的に反応するマレイミドも含んでいるべきである。

【0226】

ペイロードをリンカーに結合させるための代替の位置は、側鎖Ｙ内の官能基にある。このアプローチは、Ｘ＝ＯＨまたはＸ＝プロドラッグＯＨである場合に使用することができる。後者の場合において、プロドラッグは、以下のスキーム９において示すように、通常、アルキル化サブユニットに導入されてから側鎖が結合される。

【0227】

【化33】

【0228】

スキーム９は、リンカーを、カルバメートを介して側鎖に結合させる本発明の化合物の調製を概説する。このスキームにおいて、アルキル化サブユニットのフェノールはカルバメートプロドラッグとして保護される。化合物１８をＤＭＡＰの存在下で４－メチルピペラジンカルボニル塩化物と反応させ、化合物３６を得る。Ｂｏｃ保護基を、ＨＣｌを使用して除去し、中間体を、カップリング試薬としてＥＤＣＩを使用して５－（２－（メチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボン酸と反応させて、化合物３７を得る。上述の活性化リンカー２５との反応によって薬物－リンカー３８を得る。

【0229】

プロドラッグがホスフェートＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）_２である場合、合成は、リン酸エステル脱保護の最終的なステップまでホスフェートエステル中間体ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^４）_２を使用して好ましくは進行する。側鎖Ｙへの結合において、リンカーを側鎖に結合させる方法に関しては多くの融通性が存在する。結合は、上記のスキームで示したようにトレースレスであってもよく、好適な側鎖官能基としては、アルコール（カルバメート結合に関して）、第一級および第二級アミン（カルバメート結合に関して）、第三級アミン（第四級塩結合に関して）およびチオール（ジスルフィド結合に関して）がある。これらの官能基は、同定された置換基位置のいずれかにおいて側鎖に結合させてもよい。結合はまた、トレースレスではないものであってもよく、すなわちＡＤＣから開裂した後、ペイロードはリンカーのフラグメントが含まれたままである。このアプローチは、リンカーフラグメントが構造のものであり、ペイロードによってＤＮＡのアルキル化が干渉されない、すなわち放出される種の細胞毒性に有害な影響を与えない位置にある場合、好適である。この限定の範囲内で、非トレースレスリンカーを、すでに定義されている任意のタイプの側鎖反応性部分ＲＭに結合させてもよい。
５．４ 本発明の化合物の使用
本発明の化合物は、ＡＤＣおよび他の生物学的な活性化合物の調製に使用するための、細胞毒性の高いペイロードまたはペイロード構成要素を含む。

【0230】

２－メチルベンゾオキサゾールサブユニットがＤＮＡ副溝結合ユニットに結合している本発明の化合物は、リンカーを介して、抗体または他のリガンド結合基を結合させることによってＡＤＣに変換することができる。リンカーは、ヒドロキシルまたはアミノ基Ｘを介してＤＮＡアルキル化サブユニットに直接結合させても、ＤＮＡ副溝結合ユニットを介して間接的に結合させてもよい。

【0231】

結合リガンド（例えば、抗体）および適切なリンカーは、ＡＤＣが意図する特定の臨床適用のために選択してもよい。リンカーの性質は、コンジュゲートの薬物動態特性に影響を与える場合があるため、使用することになる結合リガンドとの適合性、およびコンジュゲート全体の薬理学的要件に関して選択するべきである。リンカーは、ストレッチャーユニット、スペーサーユニットおよび溶解性を高めるための部分を含んでいてもよい。

【0232】

そのようなリンカー基、ストレッチャーユニット、およびスペーサーユニットの例としては、これらに限定されるものではないが、米国特許第７，９６４，５６６Ｂ２号および同第２０１７／０２３２１０８Ａ１号に記載されているものがあり、これらはその全体が参照により本明細書に組み込まれるものとする。

【0233】

１つの態様において、本発明は、ＡＤＣの調製における式Ｉ、Ｉａ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩまたはＩＩＩａの化合物の使用を提供する。
別の態様において、本発明は、ＡＤＣまたはＡＤＣ構成成分を作製する方法であって、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩまたはＩＩＩａの化合物をリンカーまたはリンカー－抗体部分と反応させることを含む方法を提供する。

【0234】

新規の２－メチルベンゾオキサゾールＤＮＡアルキル化ユニットは、例６および２４において実証されたように、多くのデュオカルマイシン類似体に存在し広範囲に使用されているＣＢＩアルキル化ユニットよりも親油性がはるかに低い。

【0235】

これにより、ペイロード構成成分が抗体－リンカー構成成分をコンジュゲートさせるために使用する水性溶媒中により溶解性となるために、対応するＡＤＣの製造は容易になるであろう。ペイロードの親油性が低くなると、ＡＤＣの凝集も低下することになり、製造がさらに単純化することになる。凝集が低下すると、ｉｎ ｖｉｖｏでの免疫応答のリスクが低下することになり、ＡＤＣの親油性が低下すると、血流からのクリアランスが長くなり、したがって全体的な曝露は大きくなることになる。要約すると、２－メチルベンゾオキサゾール系のペイロードによって、より作製が簡単で安全で有効なＡＤＣを生成することになる。

【0236】

デュオカルマイシンの２－メチルベンゾオキサゾール類似体をベースとするＤＮＡアルキル化剤は細胞毒性の高い化合物である。これは、本発明の化合物とｓｅｃｏ－ＣＢＩ－ＴＭＩとを比較する細胞毒性試験を記載する例７および２５において実証される。後者は、ＡＤＣペイロードとしての適用に関して十分な細胞毒性効力を有するとして広範囲に認識されている。ｓｅｃｏ－ＣＢＩ－ＴＭＩと本発明の化合物との間の最も近い比較を化合物２３で行った。化合物２３は同じ副溝結合側鎖（すなわちＴＭＩ）を共有するため、これらの２つの化合物を直接突き合わせて比較することができ、同等の細胞毒性効力が実証される。本発明の化合物の細胞毒性が高いことは非常に驚くべきものである。２－メチルベンゾオキサゾール類似体の構造は、既知のＣＯＩデュオカルマイシン類似体と密接に関連する（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２０１０）２０，１８５４）。ｓｅｃｏ－ＣＯＩ－ＴＭＩで示されるように、これらの構造の唯一の違いは、オキサゾール環縮合の配向、および２－置換基の特質（Ｍｅ対ＣＯ_２Ｍｅ）である。それにもかかわらず、ＣＯＩデュオカルマイシン類似体は、ＣＢＩ類似体よりも細胞毒性が数百倍低いため、ＣＯＩ類似体はＡＤＣペイロードとしての使用に不適切となる。

【0237】

【化34】

【0238】

本発明の２－メトキシベンゾオキサゾールデュオカルマイシン類似体の別の利点は、例８および２６において実証されるように、それが生理学的条件下、水性緩衝液中で急速に加水分解を受けて、不活性生成物を形成することである。

【0239】

これは、循環において非常に長く存続する可能性が低く、したがって、ＡＤＣからの全身性の放出が生じた場合、これらは関連する機序以外の毒性をもたらす可能性が低いことを意味する。デュオカルマイシン類似体の細胞毒性と水性安定性とは相関するということが見い出されているために、この安定性特性も非常に驚くべきものである。言い換えれば、以前に報告されている大部分の細胞毒性類似体（ＣＢＩを含む）の全てもほぼ安定しており、その結果、以前に報告されている類似体の全てが、全身循環に放出された場合、不所望の副作用をもたらす潜在力を有する。

【0240】

本発明の化合物は、ＡＤＣに組み込まれることになるペイロードとして主に有用であるが、いくつかの実施形態において、これらは療法薬としてそれ自体だけで使用してもよい。その結果、本発明はさらに、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩまたはＩＩＩａの化合物、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物に関する。

【0241】

「薬学的に許容される担体」という用語は、式Ｉ、Ｉａ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩまたはＩＩＩａの化合物とともに対象に投与してもよい担体（例えばアジュバントまたはビヒクル）を指し、これは一般的に安全であり、非毒性であり、生物学的に不所望のものでもその他の不所望のものでもなく、獣医用ならびにヒト医薬用途に好適な担体を含む。

【0242】

組成物において使用してもよい薬学的に許容される担体としては、これらに限定されるものではないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、自己乳化薬物送達システム（ＳＥＤＤＳ）、例えばｄ－ａ－トコフェロールポリエチレングリコール１０００スクシネート、医薬剤形において使用される界面活性剤、例えばＴｗｅｅｎまたは他の同様の高分子送達マトリックス、血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えば、リン酸、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の一部のグリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素ジナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン－ポリオキシプロピレン－ブロックポリマー、ポリエチレングリコール、および羊毛脂がある。シクロデキストリン、例えば、α－、β－、およびγ－シクロデキストリン、または化学的に改変された誘導体、例えば、２－および３－ヒドロキシプロピル－３－シクロデキストリンを含むヒドロキシアルキルシクロデキストリン、または他の可溶化された誘導体も、送達を強化するために有利には使用してもよい。油性溶液または懸濁液も、長鎖アルコール希釈剤もしくは分散剤、またはカルボキシメチルセルロースまたは同様の分散剤を含んでいてもよく、これらは、薬学的に許容される剤形、例えばエマルションおよびまたは懸濁液の製剤において通常使用される。

【0243】

本発明の医薬組成物は、単回用量としてまたは複数回用量スケジュールで、単独の治療剤、または１つもしくは複数の追加の治療剤と組み合わせて同時に、連続的に、もしくは個別に投与してもよい。１つまたは複数の追加の治療剤は、処置されることになる疾患もしくは状態、または他の所望の治療的利点に依存することになる。当業者であれば既知であろうように、１つまたは複数の追加の治療剤は、特定の薬剤に関して表示されているかまたは承認された治療量で使用することができる。

【0244】

医薬組成物は、これらに限定されないが、経口または非経口（局在、皮下、筋肉内および静脈内を含む）投与を含む任意の選択された経路によって対象に投与するのが可能になるように製剤化される。いくつかの実施形態において、組成物は、経口、静脈内、皮下、筋肉内、経皮、腹腔内、または他の薬理学的に許容される経路で投与するために製剤化される。例えば、組成物は、意図する投与経路および標準的な製薬慣行に関して選択された適切な薬学的に許容される担体（賦形剤、希釈剤、助剤、およびこれらの組合せを含む）とともに製剤化してもよい。例えば、組成物は、散剤、液剤、錠剤もしくはカプセル剤として経口で、または軟膏剤、クリーム剤もしくはローション剤として局在的に投与してもよい。好適な製剤は、必要に応じて、乳化剤、抗酸化剤、香味料または着色剤を含む追加の薬剤を含んでいてもよく、即時－、遅延性－、改変－、持続性－、パルス－または制御放出に適応してもよい。

【0245】

組成物は、非経口経路を介して投与してもよい。非経口剤形の例としては、活性薬剤の水溶液、等張生理食塩水または５％グルコース、または他の周知の薬学的に許容される賦形剤がある。例えば、シクロデキストリン、または当業者に周知の他の可溶化剤を、治療剤を送達するための医薬賦形剤として利用してもよい。

【0246】

経口投与に好適な剤形の例としては、これらに限定されるものではないが、組成物の治療有効量を提供することができる、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、もしくは類似の形態、または任意の液体形態、例えば、シロップ剤、水性溶液剤、エマルション剤などがある。カプセル剤は、任意の標準的な薬学的に許容される材料、例えば、ゼラチンまたはセルロースを含んでいてもよい。錠剤は、活性成分の混合物と固体担体および滑沢剤とを圧縮することによって従来の手順に従って製剤化してもよい。固体担体の例としては、デンプンおよび糖ベントナイトがある。活性成分はまた、結合剤、例えば、ラクトースまたはマンニトール、従来のフィラー、および打錠剤を含む、ハードシェル錠剤またはカプセル剤の形態で投与してもよい。

【0247】

剤形に好適な経皮投与の例としては、これらに限定されるものではないが、経皮皮膚パッチ、経皮絆創膏などがある。
組成物の局在投与に好適な剤形の例としては、皮膚に直接適用するか、パッド、パッチなどの手段を介して適用するかにかかわらず、任意のローション剤、スティック剤、噴霧剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ゲル剤などがある。

【0248】

組成物の坐剤投与に好適な剤形の例には、身体の開口部へ挿入する任意の固体剤形、特に、経直腸で、経膣でおよび尿道で挿入するものが含まれる。
組成物の注射に好適な剤形の例には、ボーラスを介した送達、例えば、静脈内注射、皮下、真皮下、および筋肉内投与または経口投与による単回または複数回の投与が含まれる。

【0249】

組成物のデポー投与に好適な剤形の例としては、活性物質が、生分解性ポリマー、マイクロエマルション、リポソームのマトリックス中に封入されているか、またはマイクロカプセル化されているペレットもしくは固体形態がある。

【0250】

組成物のための注入デバイスの例としては、所望の回数の投薬または定常状態投与を提供するための注入ポンプがあり、埋め込み型薬物ポンプがある。組成物のための埋め込み型注入デバイスの例としては、活性物質が、生分解性ポリマーまたは合成ポリマー、例えば、シリコーン、シリコーンゴム、シラスティックもしくは同様のポリマー内にカプセル化されているかまたは全体にわたって分散されている任意の固体形態がある。

【0251】

組成物の経粘膜送達に好適な剤形の例としては、浣腸用溶液（depositories solutions for enemas）、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、噴霧溶液、粉末および同様の製剤があり、活性成分に加えて、適切であることが当技術分野において既知の担体を含む。そのような剤形には、薬学的に許容される水性もしくは有機溶媒中の溶液および／もしくは懸濁液、またはこれらの混合物、および／または粉末を含む組成物を含む、組成物の吸入または吹入に好適な形態が含まれる。組成物の経粘膜投与には任意の粘膜を利用してもよいが、鼻、頬、膣および直腸組織が通常利用される。組成物の経鼻投与に好適な製剤は、液体形態、例えば、鼻腔用スプレー、点鼻で、またはポリマー粒子の水性または油性溶液を含むネブライザーによるエアロゾル投与によって投与してもよい。製剤は、例えば、ベンジルアルコールまたは他の好適な防腐剤、バイオアベイラビリティを強化するための吸収促進剤、フルオロカーボン、および／または当技術分野において既知の他の可溶化剤もしくは分散剤を用いた溶液である生理食塩水中の水溶液として調製してもよい。

【0252】

組成物の経頬または舌下投与に好適な剤形の例としては、トローチ剤、錠剤などがある。組成物の眼投与に好適な剤形の例としては、薬学的に許容される水性または有機溶媒中の溶液および／または懸濁液を含む挿入物および／または組成物がある。

【0253】

組成物の製剤の例は、例えば、Ｓｗｅｅｔｍａｎ，Ｓ．Ｃ．（Ｅｄ．）．Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ．Ｔｈｅ Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｄｒｕｇ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，３３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｈｉｃａｇｏ，２００２，２４８３ ｐｐ．；Ａｕｌｔｏｎ，Ｍ．Ｅ．（Ｅｄ．）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ．Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ｏｆ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍ Ｄｅｓｉｇｎ．Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ，Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ，２０００，７３４ ｐｐ．；およびＡｎｓｅｌ，Ｈ．Ｃ，Ａｌｌｅｎ，Ｌ．Ｖ．ａｎｄ Ｐｏｐｏｖｉｃｈ，Ｎ．Ｇ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ １９９９，６７６ ｐｐで見出すことができる。薬物送達システムの製造において用いられる賦形剤は、当業者であれば既知であるさまざまな出版物に記載されており、例えば、Ｋｉｂｂｅ，Ｅ．Ｈ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，３ｒｄ Ｅｄ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，２０００，６６５ ｐｐ．がある。ＵＳＰは、錠剤またはカプセル剤として製剤化されたものを含む、放出調節経口剤形の例も提供する。例えば、米国薬局方２３／Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ １８，Ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ ＭＤ，１９９５（以下「ＵＳＰ」）を参照されたく、これも、徐放性および遅延放出錠剤およびカプセル剤の薬物を放出する能力を決定するための特定の試験を記載している。徐放性および遅延放出物品のための薬物放出に関するＵＳＰ試験は、経過試験時間に対する投薬単位からの薬物溶解に基づいている。さまざまな試験装置および手順の説明は、ＵＳＰで見出すことができる。持続放出剤形の分析に関するさらなるガイダンスは、Ｆ．Ｄ．Ａ．によって提供されている（産業向けガイダンス、Ｅｘｔｅｎｄｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｒａｌ ｄｏｓａｇｅ ｆｏｒｍｓ：ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ，ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ／ｉｎ ｖｉｖｏ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ． Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ：Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，１９９７を参照のこと）。

【0254】

本明細書において記載する剤形は、処置されることになる対象のための単回投薬としての使用に好適な物理的に個別単位の形態であってもよく、各単位は、所望の治療効果を生成するように計算された所定の量の活性材料を含む。

【0255】

医薬組成物における活性成分の投薬量レベルは、患者に対する毒性を示すことなく、特定の患者、組成物、および投与様式に関して所望の治療効果を達成するのに効果的な量（有効量）の活性成分が提供されるように多様であってもよい。

【0256】

選択される投薬量レベルは、用いられる特定の組成物の活性、投与経路、投与時間、用いられる特定の本発明の化合物の排出速度、用いられる特定の組成物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物および／または材料、処置される患者の年齢、性別、体重、状態、一般的な健康および過去の既往歴、ならびに医学分野において周知の同様の因子を含むさまざまな薬物動態学的因子に依存することになる。一般的に、１日の量またはレジメンは、体重１キログラム（ｋｇ）あたり本発明の化合物約０．０１ｍｇから約２０００ｍｇの範囲であるべきである。

【実施例】

【0257】

６．実施例
一般的方法および材料
全ての試薬は試薬グレードとして購入し、さらに精製することなく使用した。反応のための溶媒は、標準的な手順に従って使用前に蒸留した。石油エーテルは、ｂｐ４０～６０℃を有する画分を指す。溶媒は標準的な手順に従って、すなわち無水Ｎａ_２ＳＯ_４またはＭｇＳＯ_４で乾燥させた。カラムクロマトグラフィーはシリカゲル（Ｍｅｒｃｋ ２３０～４００メッシュ）上で行った。

【0258】

ＮＭＲスペクトルは、^１ＨについてＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ４００ＭＨｚ装置で、^１３Ｃスペクトルについて１００ＭＨｚで記録した。化学シフトは、百万分率（ｐｐｍ）で報告し、^１Ｈスペクトルでは内部標準としてのテトラメチルシラン（０ｐｐｍ）に対して、^１３Ｃスペクトルでは残留溶媒に対して較正される。多重度は以下のように報告する：ｂｒ＝幅広、ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線、ｄｄ＝二重線の二重線、ｄｔ＝三重線の二重線、ｄｄｄ＝二重線の二重線の二重線。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）は、Ｂｒｕｋｅｒ ｍｉｃｒｏＴＯＦ－Ｑ ＩＩまたはＡｇｉｌｅｎｔ ６５３０Ｂ Ａｃｃｕｒａｔｅ Ｍａｓｓ Ｑ－ＴＯＦ質量分析計を使用して取得した。ＬＲＭＳは、Ｓｕｒｖｅｙｏｒ ＭＳＱ質量分析計を用いて実施した。

【0259】

代替的な一般的方法および材料が示されない限り、上記の一般的材料および方法は、下記の実施例の全てに適用可能である。
実施例１
ｔｅｒｔ－ブチル６－メチル－４－オキソ－８，８ａ－ジヒドロ－１Ｈ－シクロプロパ［ｃ］オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－２（４Ｈ）－カルボキシレート（５０）

【0260】

【化35】

【0261】

Ｈ_２Ｏ（１０ｍＬ）中のＮａＨ_２ＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ（４．２９ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）の溶液を、ＤＭＳＯ（２５ｍＬ）中の３，４－ジヒドロキシ－５－ニトロベンズアルデヒド ３９（５．０３ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。撹拌混合物に、内部温度を４５℃未満に保ちながらＨ_２Ｏ（２５ｍＬ）中のＮａＣｌＯ_２（８０％、４．３５ｇ、３８．５ｍｍｏｌ）の溶液を５０分間かけて滴下添加した。暗赤褐色混合物を室温で１６時間撹拌し、次いでＮａＨＣＯ_３水溶液（５％、８０ｍＬ）に注ぎ入れた。混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（×２）で洗浄し、水相をｃ．ＨＣｌで酸性化してｐＨ約１にした。混合物をＥｔＯＡｃ（×３）で抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させて、３，４－ジヒドロキシ－５－ニトロ安息香酸（４０）を黄褐色固体（５．１２ｇ、９４％）として得た；

【0262】

【数1】

【0263】

ＭｅＯＨ（６０ｍＬ）およびｃ．Ｈ_２ＳＯ_４（１．５ｍＬ）中の４０（３．９９ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）の混合物を、１９時間還流撹拌し、次いで冷却し、蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した（×２）。ＥｔＯＡｃ抽出物を乾燥させ、蒸発させ、得られた固体をＨ_２Ｏから再結晶して、メチル３，４－ジヒドロキシ－５－ニトロベンゾエート（４１）を橙褐色結晶性固体（３．３０ｇ、７７％）として得た；ｍｐ１３７～１３９℃；

【0264】

【数2】

【0265】

ジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、２．９４ｍＬ、１１．８ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、０．２５ｇ）を、ＥｔＯＨ（３５ｍＬ）中の４１（２．５１ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を窒素で脱気し、水素でフラッシュし、次いで還元が完了するまで（約８時間）水素バルーン下で撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅに通して濾過し、ＥｔＯＨで洗浄し、濾液を蒸発させて、メチル３－アミノ－４，５－ジヒドロキシベンゾエート塩酸塩（４２）を淡黄色固体（３．０ｇ）として得、これを次のステップで直接使用した。［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_８Ｈ_１０ＮＯ_４）計算値１８４．１；実測値１８４．１。

【0266】

オルト酢酸トリメチル（１３．６ｍＬ、１０７ｍｍｏｌ）を、上記のように調製した４２の一部（２．７１ｇ）に添加した。懸濁液を１時間還流撹拌し、次いで冷却し、石油エーテルで希釈した。沈殿物を濾別し、乾燥させて、メチル７－ヒドロキシ－２－メチルベンゾ［ｄ］オキサゾール－５－カルボキシレート（４３）を薄黄褐色固体（４１から２．０２ｇ、９１％）として得た；

【0267】

【数3】

【0268】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１０Ｈ_９ＮＯ_４）計算値２０８．０６０４３；実測値２０８．０６０６１。
臭化ベンジル（９８％、１．２４ｍＬ、１０．２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（１．４８ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の４３（２．０２ｇ、９．７５ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物をＨ_２Ｏで希釈し、固体を濾別し、乾燥させて、メチル７－（ベンジルオキシ）－２－メチルベンゾ［ｄ］オキサゾール－５－カルボキシレート（４４）（２．８１ｇ、９７％）を薄黄褐色固体として得た；

【0269】

【数4】

【0270】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１７Ｈ_１５ＮＯ_４）計算値２９８．１０７３８；実測値２９８．１０８３４。
Ｈ_２Ｏ（１５ｍＬ）中のＫＯＨ（１．６２ｇ、２９．１ｍｍｏｌ）の溶液を、ＭｅＯＨ（６０ｍＬ）中の４４（２．７９ｇ、９．３８ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物を７０℃で４０分間撹拌した。ＭｅＯＨを蒸発させ、水性残留物を０℃にてＨＣｌ水溶液（２Ｎ、１２ｍＬ）で酸性化した。沈殿した固体を濾別し、乾燥させて、７－（ベンジルオキシ）－２－メチルベンゾ［ｄ］オキサゾール－５－カルボン酸（４５）をオフホワイトの固体（２．６２ｇ、９８％）として得た；

【0271】

【数5】

【0272】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１６Ｈ_１３ＮＯ_４）計算値２８４．０９１７３；実測値２８４．０９１６４。
Ｅｔ_３Ｎ（１．５４ｍＬ、１１．１ｍｍｏｌ）およびＤＰＰＡ（９７％、２．２５ｍＬ、１０．１ｍｍｏｌ）を、乾燥ｔｅｒｔ－ＢｕＯＨ（８０ｍＬ）中の４５（２．６１ｇ、９．２１ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物を３時間還流撹拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ ９：１、次いで４：１）により精製して、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（ベンジルオキシ）－２－メチルベンゾ［ｄ］オキサゾール－５－イル）カルバメート（４６）をクリーム色固体（２．４４ｇ、７５％）として得た；

【0273】

【数6】

【0274】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２０Ｈ_２２Ｎ_２Ｏ_４）計算値３５５．１６５２；実測値３５５．１６６８。試料をＥｔＯＡｃ／石油エーテルから再結晶して、白色針状物、ｍｐ１５０～１５２℃を得た。

【0275】

ＮＢＳ（１．１６ｇ、６．５２ｍｍｏｌ）を、０℃のＣＨ_３ＣＮ（１００ｍＬ）中の４６（２．３１ｇ、６．５２ｍｍｏｌ）の溶液に１０分間かけて少量ずつ添加した。混合物を室温で３時間撹拌し、次いで溶媒を蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、溶液をＨ_２Ｏ（×２）で、次いでブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。得られたクリーム色固体をＥｔＯＡｃ／石油エーテルから再結晶して、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（ベンジルオキシ）－４－ブロモ－２－メチルベンゾ［ｄ］オキサゾール－５－イル）カルバメート（４７）を白色固体（２．１５ｇ、７６％）として得た；ｍｐ１５４～１５６℃；

【0276】

【数7】

【0277】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２０Ｈ_２１ ^７９ＢｒＮ_２Ｏ_４）計算値４３３．０７５７；実測値４３３．０７６２；［Ｍ＋Ｈ］^＋の（Ｃ_２０Ｈ_２１ ^８１ＢｒＮ_２Ｏ_４）計算値４３５．０７４０；実測値４３５．０７４５。母液を蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ ４：１）により精製して、さらなる４７（０．６０ｇ、２１％）を得た。

【0278】

１，３－ジクロロプロペン（混合異性体、９０％、１．９２ｍＬ、１８．６ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（４．３ｇ、３１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１２ｍＬ）中の４７（２．６９ｇ、６．２１ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を８０℃で７時間撹拌した。ＤＭＦを蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃとＨ_２Ｏとの間で分配した。水層をＥｔＯＡｃ（×２）で再度抽出し、合わせたＥｔＯＡｃ層をブライン（×３）で洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させて、粗製のｔｅｒｔ－ブチル（７－（ベンジルオキシ）－４－ブロモ－２－メチルベンゾ［ｄ］オキサゾール－５－イル）（３－クロロアリル）カルバメート（４８）を薄褐色ガム状物（３．２１ｇ、１００％）として得た；

【0279】

【数8】

【0280】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２３Ｈ_２４ ^７９ＢｒＣｌＮ_２Ｏ_４）計算値５０７．０６８０７；実測値５０７．０６９０９。
Ｂｕ_３ＳｎＨ（９７％、１．０９ｍＬ、３．９２ｍｍｏｌ）およびＡＩＢＮ（６４ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を、窒素下、乾燥トルエン（１５ｍＬ）中の４８（９９５ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を還流撹拌した。さらなる分量のＢｕ_３ＳｎＨ（９７％、０．５４ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）およびＡＩＢＮ（３２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を１．５および３時間後に添加した。４時間後、トルエンを蒸発させ、残留物をＣＨ_３ＣＮと石油エーテルとの間で分配した。石油エーテル層をＣＨ_３ＣＮ（×２）で再度抽出し、合わせた抽出物を石油エーテル（×２）で洗浄し、次いで蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ ９：１、次いで６：１）により精製して、粗生成物を白色泡状物として得た。これを石油エーテル（８ｍＬ）とともに撹拌して、ｔｅｒｔ－ブチル４－（ベンジルオキシ）－８－（クロロメチル）－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－カルボキシレート（４９）を白色固体（６６８ｍｇ、８０％）として得た；ｍｐ１４２～１４３℃；

【0281】

【数9】

【0282】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２３Ｈ_２５ＣｌＮ_２Ｏ_４）計算値４２９．１５７５６；実測値４２９．１５７３５。
ＮＨ_４ＨＣＯ_２の水溶液（２５％、３．９ｍＬ、１５．４ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、５３％Ｈ_２Ｏで湿潤させた、０．１３ｇ）を、０℃の窒素下、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の４８（６６０ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物をこの温度で激しく撹拌した。さらなる分量のＮＨ_４ＨＣＯ_２水溶液（２５％、３．９ｍＬ、１５．４ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、５３％Ｈ_２Ｏで湿潤させた、０．１３ｇ）を３時間後に添加した。７時間後、混合物をＣｅｌｉｔｅに通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液からのＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃ／石油エーテルから再結晶して、ｔｅｒｔ－ブチル８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－カルボキシレート（１８）を白色固体（４４４ｍｇ、８５％）として得た；ｍｐ２３４～２３８℃；

【0283】

【数10】

【0284】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１６Ｈ_１９ＣｌＮ_２Ｏ_４）計算値３３９．１１０６１；実測値３３９．１１１４９。
Ｋ_２ＣＯ_３（４１ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の１８（６７ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を室温で３．５時間撹拌し、次いでＥｔＯＡｃおよびＨ_２Ｏで希釈した。ＥｔＯＡｃ層をブライン（×３）で洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ ２：３、次いで１：４）により精製して、５０を無色油状物（２２ｍｇ、３７％）として得た；

【0285】

【数11】

【0286】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１６Ｈ_１８Ｎ_２Ｏ_４）計算値３０３．１３３９３；実測値３０３．１３４５８。
実施例２
（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－イル）（５，６，７－トリメトキシ－１Ｈ－インドール－２－イル）メタノン（２３）

【0287】

【化36】

【0288】

４９（５１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ）の混合物を、室温で３時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．５ｍＬ）中に懸濁させ、５，６，７－トリメトキシ－１Ｈ－インドール－２－カルボン酸（３１．４ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ．ＨＣｌ（４６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、次いで希ＮａＨＣＯ_３水溶液を添加した。沈殿した固体を濾別し、Ｈ_２Ｏで洗浄し、乾燥させた。粗生成物をＥｔＯＡｃから再結晶して、（４－（ベンジルオキシ）－８－（クロロメチル）－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－イル）（５，６，７－トリメトキシ－１Ｈ－インドール－２－イル）メタノン（５１）をオフホワイトの固体（３４ｍｇ、５１％）として得た；ｍｐ２２５～２２７℃；

【0289】

【数12】

【0290】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_３０Ｈ_２８ＣｌＮ_３Ｏ_６）計算値５６２．１７３９４；実測値５６２．１７３１１。
ＮＨ_４ＨＣＯ_２の水溶液（２５％、０．１４ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、５３％Ｈ_２Ｏで湿潤させた、３４ｍｇ）を、０℃の窒素下、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の５１（３１ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物をこの温度で激しく撹拌した。さらなるＮＨ_４ＨＣＯ_２水溶液（２５％、０．２８ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、５３％Ｈ_２Ｏで湿潤させた、３５ｍｇ）を１時間後に添加した。２時間後、混合物をＣｅｌｉｔｅに通して濾過し、ＴＨＦで洗浄し、濾液を３０℃で蒸発乾固させた。残留物をＨ_２Ｏで摩砕し、固体を濾別し、乾燥させた。ＥｔＯＡｃでさらに摩砕して、２３を白色固体（２１ｍｇ、８１％）として得た；ｍｐ２８５℃（ｄｅｃ）；

【0291】

【数13】

【0292】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２３Ｈ_２２ＣｌＮ_３Ｏ_６）計算値４７２．１２６９９；実測値４７２．１２６９４。
実施例３
（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－イル）（５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－イル）メタノン（５２）

【0293】

【化37】

【0294】

１８（３３ｍｇ、０．０９７ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ）の混合物を、室温で４時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．０ｍＬ）中に懸濁させ、５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボン酸塩酸塩（３４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（６５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、および無水トルエンスルホン酸（３．３ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１．５時間撹拌し、次いで氷浴中で冷却した。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（１０ｍＬ）を添加し、ｐＨを、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液を使用して８～９に調整した。ＥｔＯＡｃ層を分離し、水で洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ １０：１）により精製して、５２（３４ｍｇ、７５％）を得た；ｍｐ２０６～２１０℃（ｄｅｃ）；

【0295】

【数14】

【0296】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２４Ｈ_２５ＣｌＮ_４Ｏ_４）計算値４６９．１６３７；実測値４６９．１６４２。
実施例４
Ｎ－（２－（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－カルボニル）－１Ｈ－インドール－５－イル）－５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボキサミド（５３）

【0297】

【化38】

【0298】

１８（３３ｍｇ、０．０９７ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ）の混合物を、室温で４時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．０ｍＬ）中に懸濁させ、５－（５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボキサミド）－１Ｈ－インドール－２－カルボン酸塩酸塩（４３ｍｇ、０．０９７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（６５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、および無水トルエンスルホン酸（３．３ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１．５時間撹拌し、次いで氷浴中で冷却した。ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（５０ｍＬ）を添加し、ｐＨを、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液を使用して８～９に調整した。ＥｔＯＡｃ層を分離し、水で洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ １０：１、次いで５：１）により精製して、５３（４６ｍｇ、７５％）を得た；ｍｐ２３１℃（ｄｅｃ）；

【0299】

【数15】

【0300】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_３３Ｈ_３１ＣｌＮ_６Ｏ_５）計算値６２７．２１１７；実測値６２７．２１１９。
実施例５
Ｎ－（２－（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－カルボニル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－６－イル）－４－ヒドロキシベンズアミド（５７）

【0301】

【化39】

【0302】

ＤＭＡ（１ｍＬ）中のエチル６－アミノイミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－２－カルボキシレート（５４）（５０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）、４－ヒドロキシ安息香酸（６８ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（１６３ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、および無水トルエンスルホン酸（８．７ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で２時間撹拌した。混合物をＨ_２Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ層を乾燥させ、蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃのみ、次いでＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ １０：１）により精製して、エチル６－（４－ヒドロキシベンズアミド）イミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－２－カルボキシレート（５５）を緑色がかった琥珀色固体（４１ｍｇ、５２％）として得た；ｍｐ２６３～２６６℃；

【0303】

【数16】

【0304】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１７Ｈ_１５Ｎ_３Ｏ_４）計算値３２６．１１３５；実測値３２６．１１２５。
固体ＫＯＨ（１７１ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（６ｍＬ）、ＭｅＯＨ（６ｍＬ）、およびＨ_２Ｏ（３ｍＬ）中の５５（１９８ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を室温で１時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ＨＣｌ水溶液（５Ｍ）でｐＨ＜１に酸性化した。固体を濾別し、Ｈ_２Ｏで洗浄し、乾燥させて、６－（４－ヒドロキシベンズアミド）イミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－２－カルボン酸（５６）を黄色固体（１４３ｍｇ、７９％）、ｍｐ２６８～２７１℃として得た；

【0305】

【数17】

【0306】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１５Ｈ_１１Ｎ_３Ｏ_４）計算値２９８．０８２２；実測値２９８．０８１８。
１８（３８ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ）の混合物を、室温で３時間１５分撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．０ｍＬ）中に懸濁させ、５６（２８ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（６３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、および無水トルエンスルホン酸（３．３ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１．５時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（５０ｍＬ）を添加し、ＥｔＯＡｃ層を分離し、Ｈ_２Ｏ（×２）で洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物をＭｅＯＨで摩砕して、５７（３０ｍｇ、６３％）を得た；ｍｐ２３２～２３５℃；

【0307】

【数18】

【0308】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２６Ｈ_２０ＣｌＮ_５Ｏ_５）計算値５１８．１２２６；実測値５１８．１２２３。
実施例６
本発明の化合物の親油性
親油性は、ＣｈｅｍＤｒａｗ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ｖ．１７．０．０ソフトウェアパッケージ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｉｎｃ）を使用して、本発明の代表的な化合物について計算した。結果を表１に示す。

【0309】

【化40】

【0310】

本発明の化合物は、さまざまなＤＮＡ副溝結合側鎖を有する：側鎖Ａは、デュオカルマイシン天然産物に見出される５，６，７－トリメトキシインドール構造であり；側鎖Ｂは、ＡＤＣ ＢＭＳ－９３６５６１のペイロードで使用されており（Ｂｉｏｐｈａｒｍ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｐ．（２０１６）３７、９３）；側鎖Ｃは、ＡＤＣ ＳＹＤ９８５におけるペイロードｓｅｃｏ－ＤＵＢＡで使用されている（Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．（２０１５）１２、１８１３）。

【0311】

全ての場合において、２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットを含有する化合物は、ｓｅｃｏ－ＣＢＩアルキル化サブユニットを組み込むものよりも実質的に低いｌｏｇＰ計算値を有し（１．５単位程度）、これは、アルキル化サブユニットがフェノール（Ｘ＝ＯＨ）の形態であるか、アミン（Ｘ＝ＮＨ_２）の形態であるかに関わらずあてはまる。

【0312】

ペイロード親油性のこれらの実質的な低下は、２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットを組み込む薬物リンカーおよびＡＤＣについての好ましい特性につながる可能性が高い。

【0313】

【表1】

【0314】

実施例７
細胞毒性
本発明のペイロードの細胞毒性を、２種のヒト腫瘍細胞株、子宮頸癌ＳｉＨａ、および卵巣癌ＳＫＯＶ３の増殖の阻害を測定することにより決定した。対数期の単層を９６ウェルプレート中で５日間、ペイロードに連続的に曝露させ、続いてスルホローダミンＢ染色を行った。ＩＣ_５０は、細胞密度を同じプレート上の未処置対照の細胞密度の５０％まで阻害するために必要とされる薬物濃度として、補間により決定した。全てのプレートは、内部対照として参照化合物ｓｅｃｏ－ＣＢＩ－ＴＭＩを含んでいた。

【0315】

表２に示したデータは、２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットを含有するＤＮＡアルキル化剤が、ｎＭまたはサブｎＭ範囲の、すなわちＡＤＣ用途に適していると考えられる範囲内のＩＣ_５０を有する、細胞毒性の高い化合物であることを示す。

【0316】

重要なことに、化合物２３およびｓｅｃｏ－ＣＢＩ－ＴＭＩは、同じＴＭＩ副溝結合側鎖を有しており、これによって、細胞毒性に対するアルキル化サブユニットの効果の直接比較が可能となる。この比較において、２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットはｓｅｃｏ－ＣＢＩと同じ細胞毒性を生じるが、このことは、後者がデュオカルマイシン型アルキル化サブユニットの全ての既知のバリアントの中で最も強力なものの１つであるため、注目に値する（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００９）５２、５７７１）。

【0317】

２３の顕著な細胞毒性は驚くべきことであり、なぜなら密接に関連する化合物であるｓｅｃｏ－ＣＯＩ－ＴＭＩ（これはオキサゾール環縮合の配向および２－置換基の性質のみが異なる）が、関連する参照化合物と比較した場合に予想されるものの数百分の１の細胞毒性であったからである（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２０１０）２０、１８５４）。

【0318】

【表2】

【0319】

実施例８
安定性
２３および参照化合物ｓｅｃｏ－ＣＢＩ－ＴＭＩの水性安定性をＬＣ－ＭＳ分析により調査した。３７℃の１０％ＤＭＦを含有するトリス緩衝液（ｐＨ７．４）中４μＭの濃度でペイロードを含有する試料を、３００～５００分にわたって一定間隔でモニターした。

【0320】

図１に示すように、ｓｅｃｏ－ＣＢＩ－ＴＭＩは、シクロプロピル形態（ＣＢＩ－ＴＭＩ）にクリーンに変換され、これはこれらの条件下で安定であった。これらの観察は、報告されている挙動と一致する（ＣｈｅｍＢｉｏＣｈｅｍ（２０１４）１５、１９９８；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９９４）１１６、７９９６）。

【0321】

対照的に、図２に示すように、２３もまた、対応するシクロプロピル形態（特徴的なＵＶ－Ｖｉｓ吸収スペクトルおよび質量スペクトルにより同定される）に変換されたが、この化合物はこれらの条件下で安定ではなく、さまざまな生成物に迅速に変換された。主生成物は、水の添加によるシクロプロパンの加水分解、すなわち開環と一致するＵＶ－Ｖｉｓ吸収スペクトルおよび質量スペクトルを有する。そのような生成物は、ＤＮＡをアルキル化できず、非毒性と考えることができる。２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットから誘導されるシクロプロピル中間体の不安定性は非常に驚くべきことであり、なぜなら加溶媒分解安定性と細胞毒性効力との間には十分に確立された相関があり、ＣＢＩと同じ細胞毒性である全ての他の既知のアルキル化サブユニットは中性ｐＨでの加水分解に対して安定であると報告されているからである（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００９）５２、５７７１）。２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットを含有するペイロードの不安定性は、任意の全身的に放出されるペイロードのための無毒化機序として働くことにより、ＡＤＣ用途において利点となり得る。

【0322】

実施例９
（Ｅ）－１－（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－イル）－３－（４－メトキシフェニル）プロパ－２－エン－１－オン（５８）

【0323】

【化41】

【0324】

１８（３１．３ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ）の混合物を、室温で４時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．５ｍＬ）中に懸濁させ、４－メトキシケイ皮酸（１８ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ．ＨＣｌ（５３ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１９時間撹拌した。水をゆっくりと添加し、沈殿した固体を濾別し、乾燥させて、５８を薄褐色固体（１０ｍｇ、２７％）として得た；

【0325】

【数19】

【0326】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２１Ｈ_１９ＣｌＮ_２Ｏ_４）計算値３９９．１１０６；実測値３９９．１１０８。
実施例１０
（Ｅ）－１－（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－イル）－３－（３－ヒドロキシ－４－メトキシフェニル）プロパ－２－エン－１－オン（５９）

【0327】

【化42】

【0328】

１８（３０．１ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ）の混合物を、室温で４時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．０ｍＬ）中に懸濁させ、３－ヒドロキシ－４－メトキシケイ皮酸（１９ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ．ＨＣｌ（５１ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌し、次いで水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（×２）で抽出した。合わせた抽出物を水（×３）およびブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物を少量のＥｔＯＡｃ（約１ｍＬ）で摩砕して、５９を非常に淡い緑色固体（７．７ｍｇ、２１％）として得た；

【0329】

【数20】

【0330】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２１Ｈ_１９ＣｌＮ_２Ｏ_５）計算値４１５．１０５５；実測値４１５．１０６０。
実施例１１
（Ｅ）－Ｎ－（２－（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－カルボニル）－１Ｈ－インドール－５－イル）－３－（４－メトキシフェニル）アクリルアミド（６３）

【0331】

【化43】

【0332】

ＤＭＡ（４ｍＬ）中のエチル５－アミノインドール－２－カルボキシレート（６０）（３５４ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）、４－メトキシケイ皮酸（３０９ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．６７ｇ、３．４６ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１８時間撹拌した。水を添加し、沈殿した固体を濾別し、水で洗浄し、乾燥させた。粗生成物を熱ＥｔＯＨ（４０ｍＬ）とともに撹拌し、懸濁液を冷却した。固体を濾別し、乾燥させて、エチル（Ｅ）－５－（３－（４－メトキシフェニル）アクリルアミド）－１Ｈ－インドール－２－カルボキシレート（６１）をクリーム色固体（５０６ｍｇ、８０％）として得た；ｍｐ２４４～２４７℃；

【0333】

【数21】

【0334】

分析（Ｃ_２１Ｈ_２０Ｎ_２Ｏ_４・１／４Ｈ_２Ｏ）計算値Ｃ、６８．３７；Ｈ、５．６０；Ｎ、７．５９％；実測値Ｃ、６８．５６；Ｈ、５．５３；Ｎ、７．６６％。
水（６ｍＬ）中のＫＯＨ（０．４０ｇ、７．１ｍｍｏｌ）の溶液を、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の６１（４８０ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物を５分間加熱還流した。溶液を室温に冷却し、ＨＣｌ水溶液（２Ｎ、５ｍＬ）で酸性化した。得られた懸濁液を水で希釈し、固体を濾別し、水で洗浄し、乾燥させて、（Ｅ）－５－（３－（４－メトキシフェニル）アクリルアミド）－１Ｈ－インドール－２－カルボン酸（６２）を薄黄褐色固体（４１４ｍｇ、９３％）として得た；ｍｐ２７６～２７９℃；

【0335】

【数22】

【0336】

分析（Ｃ_１９Ｈ_１６Ｎ_２Ｏ_４）計算値Ｃ、６７．８５；Ｈ、４．７９；Ｎ、８．３３％；実測値Ｃ、６８．０９；Ｈ、４．７７；Ｎ、８．３９％。
１８（３０．０ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ）の混合物を、室温で４時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．０ｍＬ）中に懸濁させ、６２（３３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ．ＨＣｌ（５１ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。水をゆっくりと添加し、沈殿した固体を濾別し、乾燥させた。粗生成物をＥｔＯＡｃで摩砕して、６３を薄黄褐色固体（２４ｍｇ、４９％）として得た；

【0337】

【数23】

【0338】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_３０Ｈ_２５ＣｌＮ_４Ｏ_５）計算値５５７．１５８６；実測値５５７．１５９３。
実施例１２
（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－イル）（５－メトキシベンゾフラン－２－イル）メタノン（６４）

【0339】

【化44】

【0340】

化合物６４は、実施例３および４に記載したものと同じ一般的方法により、１８から調製し、灰色固体として単離した；

【0341】

【数24】

【0342】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２１Ｈ_１７ＣｌＮ_２Ｏ_５）計算値４１３．０８９９；実測値４１３．０８９９。
実施例１３
（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－イル）（５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）メタノン（６５）

【0343】

【化45】

【0344】

１８（４０．０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、２ｍＬ）の混合物を、室温で１．５時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．５ｍＬ）中に懸濁させ、５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸（２５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（６８ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）およびトルエンスルホン酸（４ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。水をゆっくりと添加し、沈殿した固体を濾別し、乾燥させた。粗生成物をＥｔＯＡｃで摩砕して、６５をクリーム色固体（３５ｍｇ、６９％）として得た；

【0345】

【数25】

【0346】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２１Ｈ_１７ＣｌＮ_２Ｏ_４Ｓ）計算値４２９．０６７０；実測値４２９．０６７７。
実施例１４
（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－イル）（５－（２－メトキシエトキシ）－１Ｈ－インドール－２－イル）メタノン（６６）

【0347】

【化46】

【0348】

１８（３６ｍｇ、０．１０６ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ）の混合物を、室温で４時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．０ｍＬ）中に懸濁させ、５－（２－メトキシエトキシ）インドール－２－カルボン酸（２７．５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（６１ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびトルエンスルホン酸（３．７ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。水をゆっくりと添加し、沈殿した固体を濾別し、水で洗浄し、乾燥させた。粗生成物をＥｔＯＡｃで摩砕して、６６を灰色固体（２８ｍｇ、５８％）として得た；

【0349】

【数26】

【0350】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２３Ｈ_２２ＣｌＮ_３Ｏ_５）計算値４５６．１３２１；実測値４５６．１３２３。
実施例１５
Ｎ－（２－（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－カルボニル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－５－イル）アセトアミド（７０）

【0351】

【化47】

【0352】

塩化アセチル（０．１２ｍＬ、１．７ｍｍｏｌ）を、０℃のＣＨ_２Ｃｌ_２（８ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）中のメチル５－アミノ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－カルボキシレート（６７）（１６５ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（０．３６ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。氷浴を取り外し、混合物を１時間撹拌し、次いで水で希釈した。有機溶媒を蒸発させると、水性懸濁液が残った。固体を濾別し、乾燥させて、メチル５－アセトアミド－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－カルボキシレート（６８）を白色固体（１７８ｍｇ、８９％）として得た；

【0353】

【数27】

【0354】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１１Ｈ_１１Ｎ_３Ｏ_３）計算値２３４．０８７３；実測値２３４．０８６８。
水（３ｍＬ）中のＫＯＨ（２０５ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）の溶液を、ＭｅＯＨ（６ｍＬ）中の６８（１６７ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物を２分間加熱還流し、次いで室温に冷却した。ＨＣｌ水溶液（２Ｎ、１．６ｍＬ）を添加し、沈殿した固体を濾別し、乾燥させて、５－アセトアミド－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸（６９）をクリーム色固体（１３４ｍｇ、８５％）として得た；

【0355】

【数28】

【0356】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１０Ｈ_９Ｎ_３Ｏ_３）計算値２２０．０７１７；実測値２２０．０７１２。
１８（３９ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、２ｍＬ）の混合物を、室温で１．５時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．０ｍＬ）中に懸濁させ、６９（２５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（６６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）およびトルエンスルホン酸（１５ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。水をゆっくりと添加し、沈殿した固体を濾別し、水で洗浄し、乾燥させた。粗生成物をＥｔＯＡｃで摩砕して、７０を褐色固体（３１ｍｇ、６１％）として得た；

【0357】

【数29】

【0358】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２１Ｈ_１８ＣｌＮ_５Ｏ_４）計算値４４０．１１２０；実測値４４０．１１２３。
実施例１６
Ｎ－（２－（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－カルボニル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－６－イル）アセトアミド（７４）

【0359】

【化48】

【0360】

塩化アセチル（０．１１ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を、室温のＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）中のエチル６－アミノイミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－２－カルボキシレート（７１）（１６１ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（０．３３ｍＬ、２．３ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。５分間撹拌した後、混合物を水で希釈し、有機溶媒を蒸発させると、水性懸濁液が残った。固体を濾別し、乾燥させ、次いでＥｔＯＡｃで摩砕して、エチル６－アセトアミドイミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－２－カルボキシレート（７２）を薄緑色固体（９９ｍｇ、５１％）として得た；

【0361】

【数30】

【0362】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１２Ｈ_１３Ｎ_３Ｏ_３）計算値２４８．１０３０；実測値２４８．１０２１。
水（３ｍＬ）中のＫＯＨ（１２２ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）の溶液を、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の７２（９６ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物を室温で４時間撹拌した。ＭｅＯＨを蒸発させ、水性残留物をＨＣｌ（２Ｎ、１．０ｍＬ）で酸性化した。沈殿した固体を濾別し、乾燥させて、６－アセトアミドイミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－２－カルボン酸（７３）を薄褐色固体（７１ｍｇ、８３％）として得た；

【0363】

【数31】

【0364】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１０Ｈ_９Ｎ_３Ｏ_３）計算値２２０．０７１７；実測値２２０．０７０９。
１８（４３ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ）の混合物を、室温で３．５時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．０ｍＬ）中に懸濁させ、７３（２７．８ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（７３ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）およびトルエンスルホン酸（４．４ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。水をゆっくりと添加して、エマルジョンを得た。ＮａＨＣＯ_３水溶液を添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（×４）で抽出した。合わせた抽出物を水およびブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃで摩砕して、７４をオフホワイトの固体（２５．５ｍｇ、４６％）として得た；

【0365】

【数32】

【0366】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２１Ｈ_１８ＣｌＮ_５Ｏ_４）計算値４４０．１１２０；実測値４４０．１１３９。
実施例１７
４－アセトアミド－Ｎ－（２－（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－カルボニル）－１Ｈ－インドール－５－イル）－１－メチル－１Ｈ－イミダゾール－２－カルボキサミド（７９）

【0367】

【化49】

【0368】

Ｐｄ／Ｃ（１０％、９０ｍｇ）を、ＥｔＯＨ（２５ｍＬ）中のエチル１－メチル－４－ニトロ－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレート（７５）（２５４ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を３４４．７４ｋＰａ（５０ｐｓｉ）で２時間水素化した。混合物をＣｅｌｉｔｅに通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、濾液を蒸発させた。残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２（６ｍＬ）に溶解し、溶液を氷浴中で冷却した。Ｅｔ_３Ｎ（０．５４ｍＬ、３．８ｍｍｏｌ）および塩化アセチル（０．１８ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴を取り外した。混合物を１０分間撹拌し、次いで水で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（×２）で抽出した。抽出物を希ＨＣｌ水溶液および水で洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物をＥｔＯＨから再結晶して、エチル４－アセトアミド－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレート（７６）を淡黄色固体（６５ｍｇ、２４％）として得た；ｍｐ１６５～１６８℃。液－液抽出からの水相をＮａＨＣＯ_３水溶液で塩基性化し、ＥｔＯＡｃ（×４）で抽出した。抽出物を乾燥させ、再結晶からの母液と合わせ、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル １：１、次いで４：１、次いでＥｔＯＡｃのみ）により精製して、さらなる７６（１３９ｍｇ、５２％）を得た；

【0369】

【数33】

【0370】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_９Ｈ_１３Ｎ_３Ｏ_３）計算値２１２．１０３０；実測値２１２．１０２６。
水（２ｍＬ）中のＫＯＨ（２１８ｍｇ、３．９ｍｍｏｌ）の溶液を、ＭｅＯＨ（４ｍＬ）中の７６（１８５ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。ＭｅＯＨを蒸発させ、水層をＨＣｌ水溶液（２Ｎ、１．３ｍＬ）で中和し、次いで蒸発乾固させた。アミノインドール ６０（１７９ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．５０ｇ、２．６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で２９時間撹拌した。混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（×２）で抽出した。抽出物を水（×３）で洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃで摩砕して、エチル５－（４－アセトアミド－１－メチル－１Ｈ－イミダゾール－２－カルボキサミド）－１Ｈ－インドール－２－カルボキシレート（７７）をクリーム色固体（２ステップにわたって５９ｍｇ、１８％）として得た；

【0371】

【数34】

【0372】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１８Ｈ_１９Ｎ_５Ｏ_４）計算値３７０．１５１０；実測値２７０．１５０５。
水（１ｍＬ）中のＫＯＨ（８９ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）の溶液を、ＭｅＯＨ（８ｍＬ）中の７７（５４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物を５０℃で３時間、次いで還流で１．５時間撹拌した。混合物を冷却し、ＭｅＯＨを蒸発させ、水性残留物をＨＣｌ水溶液（２Ｎ、０．８ｍＬ）で酸性化した。沈殿した固体を濾別し、乾燥させて、５－（４－アセトアミド－１－メチル－１Ｈ－イミダゾール－２－カルボキサミド）－１Ｈ－インドール－２－カルボン酸（７８）を灰色固体（４６ｍｇ、９２％）として得た；

【0373】

【数35】

【0374】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_１６Ｈ_１５Ｎ_５Ｏ_４）計算値３４２．１１９７；実測値３４２．１２０４。
１８（３９．４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびジオキサン中ＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ）の混合物を、室温で３．５時間撹拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＡ（１．０ｍＬ）中に懸濁させ、７８（３９．７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（６７ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）およびトルエンスルホン酸（４ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で５時間撹拌した。水をゆっくりと添加し、沈殿した固体を濾別し、水で洗浄し、乾燥させた。粗生成物をＥｔＯＡｃで摩砕して、７９をオフホワイトの固体（３６ｍｇ、５５％）として得た；

【0375】

【数36】

【0376】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２７Ｈ_２４ＣｌＮ_７Ｏ_５）計算値５６２．１６００；実測値５６２．１５７９。
実施例１８
（Ｓ）－（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－イル）（５，６，７－トリメトキシ－１Ｈ－インドール－２－イル）メタノン（８２）および（Ｒ）－（８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－イル）（５，６，７－トリメトキシ－１Ｈ－インドール－２－イル）メタノン（８３）

【0377】

【化50】

【0378】

化合物１８（３３４ｍｇ）を分取キラルＨＰＬＣ（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＡ ２５０×２１ｍｍカラム、ＥｔＯＨ：ヘキサン １５：８５溶離液、６ｍＬ／分の流速、α１．４３）により分割して、２つのエナンチオマーのベースライン分離を得た。より早く溶出するエナンチオマー（Ｒ_Ｔ９．４分）を含有する画分を合わせ、蒸発させて、ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－カルボキシレート（８０）を白色固体（１３１ｍｇ、３９％）として得た；［α］_Ｄ＝－３１°（ｃ０．５８４、ＣＨ_２Ｃｌ_２）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）は１８について記載したものと同一であった。より遅く溶出するエナンチオマー（Ｒ_Ｔ１３．４分）を含有する画分を合わせ、蒸発させて、ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－８－（クロロメチル）－４－ヒドロキシ－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－６－カルボキシレート（８１）を白色固体（１３０ｍｇ、３９％）として得た；［α］_Ｄ＝＋２４°（ｃ０．５８６、ＣＨ_２Ｃｌ_２）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）は１８について記載したものと同一であった。分析カラム（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＡ １５０×４．６ｍｍカラム）上での再分析により、各エナンチオマーについて１００％ｅｅを確認した。

【0379】

記載の一般的方法により、化合物８０を８２に変換して、白色固体を得た。［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２３Ｈ_２２ＣｌＮ_３Ｏ_６）計算値４７２．１２６９９；実測値４７２．１２７２１。記載の一般的方法により、化合物８１を８３に変換して、白色固体を得た；^１Ｈ ＮＭＲ（ｄ_６－ＤＭＳＯ）は２３について記載したものと同一であった。［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_２３Ｈ_２２ＣｌＮ_３Ｏ_６）計算値４７２．１２６９９；実測値４７２．１２７１９。

【0380】

実施例１９
８－（クロロメチル）－２－メチル－６－（５，６，７－トリメトキシ－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－４－イル（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）エタン－１，２－ジイルビス（メチルカルバメート）（２６）

【0381】

【化51】

【0382】

ｐ－ニトロフェニルクロロホルメート（９７％、２０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（３４μＬ、０．２５ｍｍｏｌ）を、０℃の乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）およびＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の２３（２３ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。１．５時間後、さらなるｐ－ニトロフェニルクロロホルメート（９７％、１０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（１７μＬ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加し、さらに５０分後、ｔｅｒｔ－ブチルメチル（２－（メチルアミノ）エチル）カルバメート（９５％、４０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加した。氷浴を取り外し、混合物をさらに２０時間撹拌し、次いで蒸発乾固させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル １：４、次いで１：３、１：１、３：１）により精製して、ｔｅｒｔ－ブチル（８－（クロロメチル）－２－メチル－６－（５，６，７－トリメトキシ－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－４－イル）エタン－１，２－ジイルビス（メチルカルバメート）（２４）を無色油状物（３１ｍｇ、９４％）として得た；

【0383】

【数37】

【0384】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_３３Ｈ_４０ＣｌＮ_５Ｏ_９）計算値６８６．２５８７；実測値６８６．２５７３。
ＴＦＡ（０．７ｍＬ、９．１ｍｍｏｌ）を、０℃のＣＨ_２Ｃｌ_２（０．７ｍＬ）中の２４（３１ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。３０分後、混合物を室温で蒸発乾固させ、残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解し、再度蒸発させた。残留物をＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解し、溶液を氷浴中で冷却した。４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４－ニトロフェニル）カーボネート（２５）（３６．７ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（３２μＬ、０．２３ｍｍｏｌ）を添加した。氷浴を取り外し、混合物を１８時間撹拌し、次いで室温で蒸発乾固させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２のみ、次いでＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ １００：１、次いで５０：１、３０：１、１５：１）により精製して、回収された２３（６ｍｇ、２８％）および粗生成物を得た。後者をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ ９：１）により精製して、２６を淡黄色ガラス状物（２２ｍｇ、４１％）として得た；

【0385】

【数38】

【0386】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_５７Ｈ_７０ＣｌＮ_１１Ｏ_１５）計算値１１８４．４８１４；実測値１１８４．４８４０。
実施例２０
８－（クロロメチル）－２－メチル－６－（５，６，７－トリメトキシ－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－４－イル（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメート（８７）

【0387】

【化52】

【0388】

ｐ－ニトロフェニルクロロホルメート（９７％、３９ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（６４μＬ、０．４６ｍｍｏｌ）を、０℃のＤＭＦ（４ｍＬ）中の２３（４３．５ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。さらなる分量のｐ－ニトロフェニルクロロホルメート（９７％、１９ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を４５分および２時間後に添加し、さらなるＥｔ_３Ｎ（３２μＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を７０分後に添加した。２．５時間後、ＤＭＦ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２－（（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバメート（８４）（７３ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、氷浴を取り外した。混合物を１８時間撹拌し、次いで蒸発乾固させた。残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２で摩砕し、固体を濾別し、乾燥させて、回収された２３（２３ｍｇ、５３％）を得た。濾液を蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル １：１、次いで３：１、次いでＥｔＯＡｃのみ、次いでＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ ２０：１）により精製して、８－（クロロメチル）－２－メチル－６－（５，６，７－トリメトキシ－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－４－イル（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメート（８５）を無色油状物（２０ｍｇ、２９％）として得た；

【0389】

【数39】

【0390】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_３６Ｈ_４６ＣｌＮ_５Ｏ_１１）計算値７６０．２９５５；実測値７６０．２９４０。
化合物８５（３１ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を、０℃で１５分間、ＣＨ_２Ｃｌ_２（０．７ｍＬ）およびＴＦＡ（０．７ｍＬ、９．１ｍｍｏｌ）の混合物で処理した。混合物を室温で蒸発乾固させ、残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解し、再度蒸発させた。残留物をＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解し、溶液を氷浴中で冷却した。ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－３－メチル－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－１－オキソブタン－２－イル）カルバメート（８６）（２３ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（２８μＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴を取り外した。２．５時間後、混合物を蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル ２：３、次いで３：２、次いでＥｔＯＡｃのみ、次いでＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ ２０：１）により精製して、回収された２３（４．３ｍｇ、２２％）および８７を無色ガラス状物（２４．８ｍｇ、５６％）として得た；

【0391】

【数40】

【0392】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_５２Ｈ_６７ＣｌＮ_８Ｏ_１５）計算値１０７９．４４８７；実測値１０７９．４４８９。
実施例２１
８－（クロロメチル）－６－（５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－４－イル（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメート（８９）

【0393】

【化53】

【0394】

ｐ－ニトロフェニルクロロホルメート（９７％、３４．５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（８８μＬ、０．６３ｍｍｏｌ）を、０℃のＴＨＦ（６ｍＬ）およびＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の５２（５９．３ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。３０分後、さらなるｐ－ニトロフェニルクロロホルメート（９７％、３４．５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を添加し、２．５時間後、ＴＨＦ（１ｍＬ）中の８４（６６ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。氷浴を取り外し、混合物を１８時間撹拌し、次いで蒸発乾固させた。残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２で摩砕し、固体を濾別し、乾燥させて、回収された５２を塩酸塩（２１ｍｇ、３２％）として得た。濾液を蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃのみ、次いでＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ １０：１、次いで５：１、次いで３：２）により精製して、８－（クロロメチル）－６－（５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－４－イル（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメート（８８）を無色油状物（３０ｍｇ、３１％）として得た；

【0395】

【数41】

【0396】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_３７Ｈ_４９ＣｌＮ_６Ｏ_９）計算値７５７．３３２２；実測値７５７．３３３２。
化合物８８（３０ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）を、０℃で１５分間、ＣＨ_２Ｃｌ_２（０．７ｍＬ）およびＴＦＡ（０．７ｍＬ、９．１ｍｍｏｌ）の混合物で処理した。混合物を室温で蒸発乾固させ、残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解し、再度蒸発させた。残留物をＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解し、溶液を氷浴中で冷却した。化合物８６（２２ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（３３μＬ、０．２４ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴を取り外した。２時間撹拌した後、混合物を蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ ５０：１、次いで２０：１、１０：１、８：１；続いて第２のカラムはＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ １０：１、次いで５：１、３：１、３：２で溶出）により精製して、８９を無色ガラス状物（７．８ｍｇ、１８％）として得た；

【0397】

【数42】

【0398】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_５３Ｈ_７０ＣｌＮ_９Ｏ_１３）計算値１０７６．４８５４；実測値１０７６．４８５７。
実施例２２
８－（クロロメチル）－６－（５－（２－メトキシエトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－４－イル（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメート（９１）

【0399】

【化54】

【0400】

ｐ－ニトロフェニルクロロホルメート（９６％、１６０ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（０．３７ｍＬ、２．７ｍｍｏｌ）を、０℃のＴＨＦ（８ｍＬ）中の６６（２４２ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。７５分後、ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中の８４（２７９ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。氷浴を取り外し、混合物を５．５時間撹拌し、次いで蒸発乾固させた。残留黄褐色泡状物を最少量のＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解し、溶液を４℃で終夜静置した。固体を濾別し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄し、濾液を蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル １：１、次いで３：１、次いでＥｔＯＡｃのみ、次いでＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ ２０：１）により精製して、８－（クロロメチル）－６－（５－（２－メトキシエトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－４－イル（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメート（９０）を無色油状物（９０ｍｇ、２３％）として得た；

【0401】

【数43】

【0402】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_３６Ｈ_４６ＣｌＮ_５Ｏ_１０）計算値７４４．３００６；実測値７４４．３０１４。
ＣＨ_２Ｃｌ_２に不溶性の固体を、カラムクロマトグラフィーからの対応する画分と合わせて、回収された６６（１４２ｍｇ、５９％）を得た。

【0403】

ＴＦＡ（０．７ｍＬ、９．１ｍｍｏｌ）を、０℃のＣＨ_２Ｃｌ_２（２．０ｍＬ）中の９０（９０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物をこの温度で４０分間撹拌した。混合物を室温で蒸発乾固させ、残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解し、再度蒸発させた。残留物をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、溶液を氷浴中で冷却した。化合物８６（６７．５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（８４μＬ、０．６ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴を取り外した。３時間後、混合物を蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル ２：３、次いで１：１、３：１、次いでＥｔＯＡｃのみ、次いでＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ ５０：１、次いで２５：１、１５：１）により精製して、回収された６６を白色固体（１１ｍｇ、２０％）として、９１を白色ガラス状物（５８ｍｇ、４５％）として得た；

【0404】

【数44】

【0405】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_５２Ｈ_６７ＣｌＮ_８Ｏ_１４）計算値１０６３．４５３８；実測値１０６３．４５４６。
純度の低い９１のさらなる画分も、カラムから白色ガラス状物（１４ｍｇ、粗収率１１％）として得た。

【0406】

実施例２３
８－（クロロメチル）－６－（５－（２－メトキシエトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－２－メチル－７，８－ジヒドロ－６Ｈ－オキサゾロ［４，５－ｅ］インドール－４－イル（２－（（（（４－（（２Ｓ，５Ｓ）－１３－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－５－イソプロピル－２－メチル－４，７－ジオキソ－８，１１－ジオキサ－３，６－ジアザトリデカンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメート（９３）

【0407】

【化55】

【0408】

ＴＦＡ（０．２ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ）を、０℃のＣＨ_２Ｃｌ_２（１．０ｍＬ）中の９１（１４ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、溶液をこの温度で３時間保った。混合物を室温で蒸発乾固させ、残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解し、再度蒸発させた。残留物をＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解し、溶液を氷浴中で冷却した。２－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）エチル（４－ニトロフェニル）カーボネート（９２）（４．６ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（９μＬ、０．０６５ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴を取り外した。１９時間後、混合物を蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃのみ、次いでＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ ２０：１）により精製して、９３を無色油状物（８．３ｍｇ、５４％）として得た；

【0409】

【数45】

【0410】

［Ｍ＋Ｈ］^＋の分析（Ｃ_５６Ｈ_６８ＣｌＮ_９Ｏ_１７）計算値１１７４．４４９４；実測値１１７４．４５１６。
実施例２４
追加の親油性データ
小分子化合物の親油性は、多くの異なる方法で計算することができる（例えば、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．（２００９）９８，８６１でレビューされている）。例６において提供するデータを補足するために、本発明のいくつかの化合物の計算された親油性を、４つの異なるソフトウェアパッケージ、すなわち、例６におけるもののようなＣｈｅｍＤｒａｗ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｉｎｃ）、ＡＣＤ／ｌｏｇＰ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）、ＸＬＯＧＰ３（Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、およびＭＬＯＧＰ（Ｔａｌｅｔｅ ＳＲＬ，Ｍｉｌａｎｏ，Ｉｔａｌｙ）を使用して、最後の３つはＳｗｉｓｓＡＤＭＥ（ｈｔｔｐ：／／ｓｗｉｓｓａｄｍｅ．ｃｈ／，Ｓｗｉｓｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ）を介してアクセスし、同じ副溝結合側鎖を有するｓｅｃｏ－ＣＢＩ類似体のものと比較した。化合物の構造を示し（ＤＮＡ結合ユニットＡ、Ｄ、ＥおよびＦは、２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットに結合している場合、化合物２３、５９、６６および７４をそれぞれ表す）、計算値ｌｏｇＰ値を表３に集約する。

【0411】

【化56】

【0412】

絶対ｌｏｇＰ値は使用する計算プログラムによって変化するが、２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットをｓｅｃｏ－ＣＢＩアルキル化サブユニットに対して比較した場合、いずれの場合においてもｌｏｇＰは一貫して実質的に減少する（ΔｌｏｇＰは０．９８～１．４８の範囲に入る）ことは表３から明らかである。これは、計算プログラムが、プロパティ（例えばＭＬＯＧＰ）またはサブ構造（フラグメントベース、例えばＡＣＤ、または原子ベース、例えばＸＬＯＧ３のいずれか）に基づいているかどうかにかかわらず適用される。

【0413】

すでに記載したように、ペイロード親油性におけるこれらの実質的な減少は、２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットが組み込まれた薬物－リンカーおよびＡＤＣの良好な特性につながる可能性が非常に高い。

【0414】

【表3】

【0415】

実施例２５
追加の細胞毒性データ
本発明のペイロードの細胞毒性を、例７において記載した一般手順に従って、２つのヒト腫瘍細胞株、頸部癌腫ＳｉＨａ、および卵巣癌腫ＳＫＯＶ３の増殖の阻害を測定することによって判定した。新規の判定では、ＤＭＳＯ中のペイロードの原液を連続希釈してから、９６－ウェルプレートの細胞含有ウェルに添加した。細胞毒性の判定を数回繰り返し（ｎ＝３～７、化合物および細胞株に応じて）、結果を表４に集約する。

【0416】

新規のデータは、２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットを含むＤＮＡアルキル化剤は細胞毒性の高い化合物である場合があり、ＩＣ_５０は、ｎＭまたはサブｎＭ範囲、すなわちＡＤＣの適用に好適と考えられる範囲内にあるということを示す点で、表２で示される情報を強化する。これらはまた、副溝結合側鎖の適切な選択は、ペイロードの細胞毒性をモジュレートするために使用することができ、表４の例では、調査した２つの細胞株においてＩＣ_５０の範囲は１００倍超に及ぶことを示す。表４のデータによって、２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットの２つのエナンチオマー形態間での比較がさらに可能になる。化合物８２および８３は、ＳｉＨａにおいて９３倍およびＳＫＯＶ３において１１０倍の異なる細胞毒性効力を示す。これらの所見は、両方のエナンチオマーはアルキル化ＤＮＡの結果として細胞毒性を示すが、天然エナンチオマーは一般的に細胞毒性が高いという点において、デュオカルマイシンの他の類似体の挙動と一致する。

【0417】

重要なことには、同じ副溝結合側鎖を共有する化合物２３およびｓｅｃｏ－ＣＢＩ－ＴＭＩは、ＩＣ_５０測定の誤差の範囲内で同じ細胞毒性効力を有することが再び認められた。これは、２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットは、密接に関連するｓｅｃｏ－ＣＯＩアルキル化サブユニットとは驚くことに異なり、デュオカルマイシン型アルキル化サブユニットの全ての既知のバリアントの最も強力なもののうちの１つと考えることができることを意味する。

【0418】

【表4】

【0419】

実施例２６
追加の安定性データ
化合物５２、５９および６６の水性安定性を、ＨＰＬＣ分析によって調査した。条件は例８に記載されているものと同じであり、すなわち試料は、３７℃で１０％ＤＭＦを含むトリス緩衝液（ｐＨ７．４）中に４μＭの濃度でペイロードを含んでいた。この実験では、溶液を１時間間隔で８時間にわたってモニターした。

【0420】

図３～５で示すように、３つのペイロード化合物全てが中間体に変換され、これはＵＶ－Ｖｉｓ吸収スペクトルにおいて特徴的なシフトに基づいて、対応するシクロプロピル形態として同定された。３つのケース全てにおいて、シクロプロピル中間体は水性緩衝液中でのさらなる反応に対して不安定であり、さまざまな生成物を生成し、２つの主要な加水分解生成物が優勢であった。この挙動は、例８の化合物２３で観察された安定性および生成物の分布と厳密に一致するが（図２を参照のこと）、参照化合物ｓｅｃｏ－ＣＢＩ－ＴＭＩの長期の安定性と著しく対照的である（図１を参照のこと）。その結果、並外れた不安定性は２－メチルベンゾオキサゾールアルキル化サブユニットの一般的な特性であると思われる。それはＤＮＡ副溝結合側鎖の特質に大きく依存することはない。言い換えれば、任意の全身的に放出されたペイロードのための解毒機序としての加水分解の潜在的な利点は、本発明の新規の化合物全てに一般的な特性であることを合理的に想定することができる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【国際調査報告】