特表 2022-525125 ブレイアコニチンＡのＥ結晶形及びその製造方法と応用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-05-11

(54)【発明の名称】ブレイアコニチンＡのＥ結晶形及びその製造方法と応用

(51)【国際特許分類】

   C07D 221/22 20060101AFI20220428BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20220428BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20220428BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20220428BHJP

   A61K 31/439 20060101ALI20220428BHJP

【ＦＩ】

C07D221/22 CSP

A61P29/00 101

A61P19/02

A61P21/00

A61P29/00

A61K31/439

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021555041

(86)(22)【出願日】2020-02-21

(85)【翻訳文提出日】2021-09-10

(86)【国際出願番号】 CN2020076156

(87)【国際公開番号】W WO2020186962

(87)【国際公開日】2020-09-24

(31)【優先権主張番号】201910197746.9

(32)【優先日】2019-03-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】521209731

【氏名又は名称】ユンナン ハオピィ ファーマシューティカルズ エルティーディー

【氏名又は名称原語表記】ＹＵＮＮＡＮ ＨＡＯＰＹ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＬＴＤ

(74)【代理人】

【識別番号】110000084

【氏名又は名称】特許業務法人アルガ特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ウー，チョンフェン

(72)【発明者】

【氏名】リ，ビアオ

【テーマコード（参考）】

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C086AA01

4C086AA03

4C086AA04

4C086BC27

4C086CB14

4C086GA15

4C086GA17

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA03

4C086ZA08

4C086ZA94

4C086ZA96

4C086ZB15

(57)【要約】

ブレイアコニチンＡのＥ結晶形及びブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法を提供する。Ｃｕ－Ｋα線で測定した前記結晶形のＸ線粉末回折パターンは、図１に示される。前記ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の調製は、アルコールと水の混合溶液をブレイアコニチンＡに加え、撹拌して懸濁固体を得、遠心分離して固体を収集し、前記アルコールがメタノール、エタノール、またはｎ－ブタノールである。その製造プロセスが簡単であり、かつ、得られた結晶形は、高純度であり、ＸＲＤ、ＤＳＣ、ＴＧＡ、¹ＨＮＭＲにより特徴づけしてＥ結晶形であると同定される。得られたブレイアコニチンＡの結晶が無水結晶形である。安定性試験の結果は、結晶が光、湿気、熱に対して良好な安定性を有することを示している。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

Ｘ線粉末回折パターンは、２θ値が７．８±０．２、９．４±０．２、１１．５±０．２、１２．４±０．２、１３．２±０．２、１３．８±０．２、１４．８±０．２、１６．６±０．２、１８．８±０．２、１９．３±０．２、２２．１±０．２、３３．６±０．２に明らかな特徴的な吸収ピークを有する、ことを特徴とするブレイアコニチンＡのＥ結晶形。

【請求項2】

熱重量分析曲線は、１５０℃まで加熱すると、重量が０．３％減少する、ことを特徴とする請求項１に記載の結晶形。

【請求項3】

示差走査熱量曲線は、１６０－１６４℃に吸熱ピークを有する、ことを特徴とする請求項１に記載の結晶形。

【請求項4】

核磁気共鳴スペクトルが図３に示される、ことを特徴とする請求項１に記載の結晶形。

【請求項5】

アルコールと水の混合溶液をブレイアコニチンＡに加え、撹拌して懸濁固体を得、遠心分離して固体を収集するブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法において、
前記アルコールがメタノール、エタノール、またはｎ－ブタノールである、ことを特徴とする請求項１に記載のブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法。

【請求項6】

前記アルコールと水の混合溶液におけるアルコールと水との体積比が１０：１～１：１０である、ことを特徴とする請求項５に記載のブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法。

【請求項7】

前記アルコールと水の混合溶液に対する前記ブレイアコニチンＡの質量体積比は、ｍｇ／ｍｌとして３：１～１０００：１である、ことを特徴とする請求項５に記載のブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法。

【請求項8】

前記撹拌の時間が少なくても０．５時間である、ことを特徴とする請求項５に記載のブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法。

【請求項9】

前記撹拌の温度が０℃～５０℃である、ことを特徴とする請求項５に記載のブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法。

【請求項10】

関節リウマチ（ＲＡ）、変形性関節症、筋線維膜炎、首・肩の痛み、腰痛・下肢痛、又は癌性疼痛を予防及び／又は治療するための医薬品の製造における、請求項１に記載のブレイアコニチンＡのＥ結晶形の使用。

【発明の詳細な説明】

【相互参照】

【0001】

本願は、２０１９年３月１５日に、中国特許庁に出願された出願番号が２０１９１０１９７７４６．９、発明名称が「ブレイアコニチンＡのＥ結晶形及びその製造方法」である中国特許出願に基づく優先権を主張し、その全内容は援用により本願に組み込まれる。

【技術分野】

【0002】

本発明は、医薬品化学分野に関し、具体的には、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形及びその製造方法と応用に関する。

【背景技術】

【0003】

ブレイアコニチンＡは、化学名が（１α,６α,１４α,１６β）テトラヒドロ－８,１３,１４－トリオール－２０－エチル－１,６,１６－トリメトキシ－４－メトキシメチル－８－アセトキシ－１４－（４’－ｐ－メトキシベンジル）－アコニチンであり、キンポウゲ科のトリカブト属の植物であるトリカブト（Ａｃｏｎｉｔｕｍ ｇｅｏｒｇｅｉ Ｃｏｍｂｅｒ）の根塊茎から抽出・単離されたジテルペンジエステルアルカロイドであり、クラッシカウリンＡ（Ｃｒａｓｓｉｃａｕｌｉｎｅ Ａ）と名付けられ、その後、ブレイアコニチンＡ（Ｂｕｌｌｅｙａｃｏｎｉｔｉｎｅ Ａ、Ｔ２）と改名され、植物種の既知の天然化合物であり、その構造式は次のとおりである。

【0004】

【化1】

【0005】

現在、ブレイアコニチンＡの製剤は、関節リウマチ（ＲＡ）、変形性関節症、筋線維膜炎、首・肩の痛み、腰痛・下肢痛、癌性疼痛、及びさまざまな理由による慢性疼痛の治療に臨床的に広く用いられている。

【0006】

医薬品の結晶多形は、創薬開発における一般的な現象であり、薬剤の品質に影響を及ぼす重要な要因である。結晶形の異なる同一の医薬品は、外観、溶解度、融点、溶解度、バイオアベイラビリティなどの面で違いがあり、ひいては大きな違いがある場合もあり、そのため、医薬品の安定性、生体的利用能や治療効果などに影響を及ぼすことがある。さらに、医薬品の結晶形は、医薬品の薬用製剤の品質、人体における吸収挙動にも影響を及ぼし、そして最終的には人体における該製剤の治療効果と副作用との利益率に影響を及ぼす。ブレイアコニチンＡの研究の進みとともに、ブレイアコニチンＡの結晶形、物理化学的特性などに関する研究が、ブレイアコニチンＡの薬効、品質、安全性の評価にとって重要な意味がある。出願番号２０１７１０４２３００５．９の中国特許には、ブレイアコニチンＡをＣ１－４の有機溶剤で溶解して得られたブレイアコニチンＡの溶液を、水に撹拌しながら滴下し、滴下終了後、吸引ろ過し、フィルターケーキを乾燥することにより製造されるアモルファスブレイアコニチンＡ、が開示されている。現在、結晶性ブレイアコニチンＡに関する報告はまだない。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

上記事情に鑑みて、本発明は、ブレイアコニチンＡの新たな結晶形及びその製造方法を提供することを目的とする。

【0008】

また、本発明は、結晶学的手法によって、ブレイアコニチンＡの結晶形態のＥ結晶形を研究し、発見し、提供することを一つの目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明は、国際的に認められたＸ線粉末回折法（ＸＲＰＤ）を使用し、ブレイアコニチンＡの結晶形態の研究及び特徴づけを行う。測定条件及び方法は、Ｃｕ／Ｋ－ａｌｐｈａ１（ターゲット）、４５ＫＶ～４０ｍＡ（動作電圧及び電流）、２θ＝３～４０（スキャン範囲）、ステップあたりのスキャンタイム（ｓ）：１７．８～４６．７、スキャンステップサイズ（２θ）：０．０１６７～０．０２６３、λ＝１．５４Ａである。

【0010】

本発明で提供される実質的に純粋なＥ結晶形は、そのＸ線粉末回折パターンが図１に示され、そのＸ線粉末回折パターンは、２θ値が７．８±０．２、９．４±０．２、１１．５±０．２、１２．４±０．２、１３．２±０．２、１３．８±０．２、１４．８±０．２、１６．６±０．２、１８．８±０．２、１９．３±０．２、２２．１±０．２、３３．６±０．２に明らかな特徴的な吸収ピークを有する。

【0011】

さらに、本発明は、熱重量分析法を使用してブレイアコニチンＡのＥ結晶形の研究及び特徴付ける。検出条件は、室温から、昇温勾配：１０℃／分の速度で４００℃まで加熱し、保護ガスが窒素である。

【0012】

本発明で提供される実質的に純粋なブレイアコニチンＡのＥ結晶形は、その熱重量分析曲線が図２に示され、１５０℃まで昇温すると、サンプルの重量が０．３％減少するという特徴を有する。

【0013】

本発明は、示差走査熱量測定を使用してブレイアコニチンＡのＥ結晶形の研究及び特徴付けを行う。検出方法は、２５℃から始まり、昇温勾配：１０℃／ｍｉｎの速度で２８０℃まで加熱し、保護ガスが窒素である。

【0014】

本発明で提供される実質的に純粋なブレイアコニチンＡのＥ結晶形は、その示差走査熱量曲線が図２に示され、１６０～１６４℃に吸熱ピークを有するという特徴を有する。

【0015】

なお、上記の結晶形のＸ線粉末回折パターンは、一つのマシンと別のマシンの間、及び、一つのサンプルと別のサンプルの間にある、Ｘ線粉末回折パターンの特徴的なピークが若干変化する可能性があり、その値が約１単位、約０．８単位、約０．５単位、約０．３単位、または約０．１単位異なる場合があるため、示される値が絶対値とは見なされない。同様に、上記の結晶形の示差走査熱量分析曲線に示される値は絶対的なものと見なすこともできない。

【0016】

結晶形は、当技術分野で周知な他の分析手段で特徴付けることもできる。例えば、核磁気共鳴スペクトル（¹ＨＮＭＲ）、偏光顕微鏡法（ＰＬＭ）、動的水分吸着（ＤＶＳ）が挙げられる。

【0017】

本発明で提供される実質的に純粋なブレイアコニチンＡのＥ結晶形は、その核磁気共鳴スペクトルが図３に示され、その偏光顕微鏡分析画面が図４に示され、その動的水分吸着グラフが図５に示される。

【0018】

さらに、本発明は、高純度で残留溶媒を含まないブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法を提供する。

【0019】

本発明で提供される前記ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法は、アルコールと水の混合溶液をブレイアコニチンＡに加え、撹拌して懸濁固体を得、遠心分離して固体を収集する。ここで、前記アルコールがメタノール、エタノール、またはｎ－ブタノールである。

【0020】

好ましくは、本発明に係るブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法においては、前記アルコールと水の混合溶液におけるアルコールと水との体積比が１０：１～１：１０である。

【0021】

好ましくは、本発明においては、アルコールと水の混合溶液に対するブレイアコニチンＡの比がｍｇ／ｍｌとして３：１～１０００：１である。

【0022】

好ましくは、本発明に係るブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法においては、前記撹拌時間が少なくても０．５時間である。

【0023】

好ましくは、本発明に係るブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法においては、前記撹拌温度が０℃～５０℃である。

【0024】

本発明に係るブレイアコニチンＡのＥ結晶形製造方法により得られた結晶形含有量が９９％を超え、高純度であり、Ｘ線粉末回折パターンの特性とＤＳＣ特性パターンが合致し、安定な特性、光、湿気、熱に対する良好な安定性を有する。

【0025】

さらに、本発明は、関節リウマチ（ＲＡ）、変形性関節症、筋線維膜炎、首・肩の痛み、腰痛・下肢痛、又は癌性疼痛を予防及び／又は治療するための医薬品の製造における、前記ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の使用を提供する。

【発明の効果】

【0026】

上記の技術説明から分かるように、本発明は、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形及びブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造方法を開示する。Ｃｕ－Ｋα線で測定した本発明に係る結晶形のＸ線粉末回折パターンは、図１に示される。前記ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造は、アルコールと水の混合溶液をブレイアコニチンＡに加え、撹拌して懸濁固体を得、遠心分離して固体を収集し、前記アルコールがメタノール、エタノール、またはｎ－ブタノールである。その製造プロセスが簡単であり、かつ、得られた結晶形は、高純度であり、ＸＲＤ、ＤＳＣ、ＴＧＡ、¹ＨＮＭＲにより特徴づけしてＥ結晶形であると同定される。得られたブレイアコニチンＡのＥ結晶形が無水結晶形である。安定性試験の結果は、この結晶が光、湿気、熱に対して良好な安定性を有することを示している。

【図面の簡単な説明】

【0027】

以下、本発明の実施形態または先行技術における技術説明をより明確に説明するために、実施例又は先行技術の説明において使用される必要がある図面を簡単に紹介する。

【図1】図１は結晶形ＥのＸＲＰＤパターンである。

【図2】図２は結晶形ＥのＴＧＡ／ＤＳＣ曲線である。

【図3】図３は結晶形Ｅの¹ＨＮＭＲスペクトルである。

【図4】図４は結晶形ＥのＰＬＭ画像である。

【図5】図５は結晶形ＥのＤＶＳグラフである。

【図6】図６は結晶形ＥのＤＶＳ測定前後のＸＲＰＤ比較図である。

【図7】図７は結晶形Ｅの安定性の評価前後のＸＲＰＤ比較図である。

【発明を実施するための形態】

【0028】

以下、本発明の技術説明を、本発明の実施例を合わせてより明確かつ全面に説明するが、記載された実施形態は、すべての実施形態ではなく、本発明の実施形態の一部にすぎないことは明らかである。当業者が本発明における実施形態に基づき、創造的な労働なしに得た他のすべての実施形態は、本発明の保護範囲に含まれるものとする。

【0029】

以下、本発明をさらに理解するために、具体的な実施例を合わせて本発明を詳細に論述する。以下実施例では、特に断りがない限り、試験法が、一般的に、通常の条件または製造者に推奨する条件に従って実行される。

【0030】

測定パラメータ
ＸＲＰＤパターンは、ＰＡＮａｌｙｔａｃａｌ Ｅｍｐｙｒｅａｎ及びＸ’Ｐｅｒｔ３粉末Ｘ線回折分析装置で収集し、スキャンパラメータを表１に示す。

【0031】

【表1】

【0032】

熱重量分析（ＴＧＡ）及び示差走査熱量測定（ＤＳＣ）

【0033】

ＴＧＡ及びＤＳＣ図は、それぞれＴＡ Ｑ５０００ ＴＧＡ／ＴＡ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＴＧＡ５５００熱重量分析計及びＴＡ Ｑ２０００ ＤＳＣ／ＴＡ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＤＳＣ２５００示差走査熱量計で収集し、測定パラメータを表２に示す。

【0034】

【表2】

【0035】

動的水分吸着（ＤＶＳ）
動的水分吸着（ＤＶＳ）の曲線は、ＳＭＳ（Ｓｕｒｆａｃｅ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ Ｓｙｓｔｅｍｓ）のＤＶＳ Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃで収集した。２５℃における相対湿度がＬｉＣｌ、Ｍｇ（ＮＯ₃）₂及びＫＣｌの潮解点によって校正した。ＤＶＳ測定のパラメータを表３に示す。

【0036】

【表3】

【0037】

液体核磁気共鳴
液体核磁気共鳴スペクトルは、ＤＭＳＯ－ｄ６を溶媒としてＢｒｕｋｅｒ ４００Ｍ核磁気共鳴装置で収集した。

【実施例】

【0038】

実施例１：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造及び同定
３ｍｌのバイアルに１５ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、ｎ－ブタノール－水（１：１）０．５ｍｌを加え、５℃で２時間撹拌し、遠心分離して固形物を得、固体はＸＲＰＤ、ＴＧＡ／ＤＳＣ及び¹ＨＮＭＲで測定した。

【0039】

ＸＲＰＤ結果は、７．６±０．２、９．４±０．２、１１．３±０．２、１２．４±０．２、１３．４±０．２、１３．９±０．２、１４．８±０．２、１６．８±０．２、１８．８±０．２、１９．４±０．２、２２．２±０．２、３３．１±０．２の回折角（２θ角）に明らかな特徴的な吸収ピークがあることを示した。ＴＧＡ／ＤＳＣ結果は、温度が１５０℃に上がると、重量が０．３％減少することを示し、ＤＳＣ曲線は、１６０．９℃（開始温度）で鋭い吸熱ピークが現れることを示し、溶融に起因したものだろうと推定される。ＴＧＡの重量減少を合わせて考えると、ＤＳＣ曲線での２００℃以上の熱シグナルがサンプルの分解に起因したものだろうと推定される。¹ＨＮＭＲの結果は、サンプルに明らかな溶媒の残留物がないことを示した。ＰＬＭの結果は、小さな粒子の不規則な組成を示した。
結晶形Ｅ、無水結晶であると同定された。

【0040】

このサンプルのＸＲＰＤパターンを図１に示し、ＴＧＡ／ＤＳＣ特徴付け結果図を図２に示し、¹ＨＮＭＲスペクトルを図３に示す。ＰＬＭ結果図を図４に示す。

【0041】

実施例２：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
３ｍｌのバイアルに１５ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、ｎ－ブタノール－水（１：１０）０．５ｍｌを加え、２５℃で０．５時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６３．９℃に現われたことを示している。

【0042】

実施例３：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
３ｍｌのバイアルに１５ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、ｎ－ブタノール－水（１：１）０．３ｍｌを加え、５０℃で３時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６０℃に現われたことを示している。

【0043】

実施例４：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
３ｍｌのバイアルに１５ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、ｎ－ブタノール－水（１：１０）０．３ｍｌを加え、２５℃で１時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６４℃に現われたことを示している。

【0044】

実施例５：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
ビーカーに１５００ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、ｎ－ブタノール－水（５：１）１５ｍｌを加え、１５℃で５時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６２．９℃に現われたことを示している。

【0045】

実施例６：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
ビーカーに１００ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、ｎ－ブタノール－水（１：８）１ｍｌを加え、５℃で１０時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６１．５℃に現われたことを示している。

【0046】

実施例７：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
ビーカーに１０００ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、ｎ－ブタノール－水（１０：１）１ｍｌを加え、０℃で２４時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６３．１℃に現われたことを示している。

【0047】

実施例８：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
３ｍｌのバイアルに１５ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、メタノール－水（１：１０）０．５ｍｌを加え、２５℃で０．５時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６１．７℃に現われたことを示している。

【0048】

実施例９：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
３ｍｌのバイアルに１５ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、メタノール－水（１：１）０．３ｍｌを加え、５０℃で３時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６２．６℃に現われたことを示している。

【0049】

実施例１０：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
３ｍｌのバイアルに１５ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、メタノール－水（１：１０）０．３ｍｌを加え、２５℃で１時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６１．８℃に現われたことを示している。

【0050】

実施例１１：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
ビーカーに１５００ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、メタノール－水（５：１）１５ｍｌを加え、１５℃で５時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６３．９８℃に現われたことを示している。

【0051】

実施例１２：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
ビーカーに１００ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、メタノール－水（１：８）１ｍｌを加え、５℃で１０時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６１．９℃に現われたことを示している。

【0052】

実施例１３：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
ビーカーに１０００ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、メタノール－水（１０：１）１ｍｌを加え、０℃で２４時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６０．２℃に現われたことを示している。

【0053】

実施例１４：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
３ｍｌのバイアルに１５ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、エタノール－水（１：１０）０．５ｍｌを加え、２５℃で０．５時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６０．８℃に現われたことを示している。

【0054】

実施例１５：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
３ｍｌのバイアルに１５ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、エタノール－水（１：１）０．３ｍｌを加え、５０℃で３時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６３℃に現われたことを示している。

【0055】

実施例１６：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
３ｍｌのバイアルに１５ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、エタノール－水（１：１０）０．３ｍｌを加え、２５℃で１時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６２℃に現われたことを示している。

【0056】

実施例１７：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
ビーカーに１５００ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、エタノール－水（５：１）１５ｍｌを加え、１５℃で５時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６３．５℃に現われたことを示している。

【0057】

実施例１８：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
ビーカーに１００ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、エタノール－水（１：８）１ｍｌを加え、５℃で１０時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致し、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６２．４℃に現われたことを示している。

【0058】

実施例１９：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の製造
ビーカーに１０００ｍｇのブレイアコニチンＡを量り、エタノール－水（１０：１）１ｍｌを加え、０℃で２４時間撹拌し、遠心分離して固形物を得た。固形物は、ＸＲＰＤで測定した結果が図１と一致しており、ブレイアコニチンＡのＥ結晶形であると同定された。ＤＳＣ曲線は、吸熱ピークが１６１．６℃に現われたことを示している。

【0059】

実施例２０：ブレイアコニチンＡのＥ結晶形の安定性の試験
１）結晶形ＥのＤＶＳの特徴付け
無水結晶形Ｅの吸湿性及びさまざまな湿度条件下での安定性を評価するため、２５℃の定温条件下で結晶形ＥのサンプルについてＤＶＳ及びＸＲＰＤ測定を行った。

【0060】

結晶形Ｅは、湿度が上がるにつれてゆっくりと水分を連続的に吸着していた。湿度が８０％ＲＨに達すると、０．１２％の水が吸着され、該サンプルの吸湿性がないことを示した。ＤＶＳ測定前後の結晶形ＥのサンプルのＸＲＰＤ特徴付け結果は、結晶形が変化しておらず、ＸＲＰＤの比較結果より、ＤＶＳ測定後のサンプルの結晶形が変化しなかったことが分かった。

【0061】

結晶形ＥのＤＶＳグラフを図５に示す。結晶形ＥのＤＶＳ測定前後のＸＲＰＤ比較図を図６に示す。

【0062】

２）結晶形Ｅの固形安定性の評価
結晶形Ｅの固形安定性を評価するために、適量のサンプルをそれぞれ取り、２５℃／６０％ＲＨ及び４０℃／７５％ＲＨ条件下で、開放された状態で１週間及び１ヶ月放置し、また８０℃の条件下で密閉された状態で２４時間放置した。放置後のサンプルをＸＲＰＤ及びＨＰＬＣ特徴付けし、結晶形の変化及び化学的純度を検出した。

【0063】

ＨＰＬＣ結果を表６に示す。その結果は、選ばれた測定条件でサンプルの化学的純度が変化しなかったことを示している。ＸＲＰＤの結果は、選ばれた測定条件でサンプルの結晶形が変化しなかったことを示している。

【0064】

【表4】

【0065】

結論：結晶形Ｅは良好な物理的及び化学的安定性を有する。

【0066】

安定性の評価前後の結晶形ＥのＸＲＰＤ比較図を図７に示す。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【国際調査報告】