ホーム > 特許ランキング > アルヴォテック エイチエフ
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-05-17
(54)【発明の名称】ＴＮＦ－アルファ抗体の高濃度水性製剤
(51)【国際特許分類】
A61K 39/395 20060101AFI20220510BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20220510BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20220510BHJP
A61K 47/12 20060101ALI20220510BHJP
A61K 47/14 20060101ALI20220510BHJP
A61P 19/02 20060101ALI20220510BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20220510BHJP
A61P 1/04 20060101ALI20220510BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20220510BHJP
A61P 17/06 20060101ALI20220510BHJP
C07K 16/24 20060101ALI20220510BHJP
【ＦＩ】
A61K39/395 N
A61K39/395 D
A61K47/26
A61K9/08
A61K47/12
A61K47/14
A61P19/02
A61P29/00 101
A61P1/04
A61P25/00
A61P17/06
C07K16/24 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021556832
(86)(22)【出願日】2020-03-13
(85)【翻訳文提出日】2021-11-19
(86)【国際出願番号】 EP2020056908
(87)【国際公開番号】W WO2020187760
(87)【国際公開日】2020-09-24
(31)【優先権主張番号】62/819,823
(32)【優先日】2019-03-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】520097009
【氏名又は名称】アルヴォテック エイチエフ
(74)【代理人】
【識別番号】100094569
【弁理士】
【氏名又は名称】田中 伸一郎
(74)【代理人】
【識別番号】100103610
【弁理士】
【氏名又は名称】▲吉▼田 和彦
(74)【代理人】
【識別番号】100109070
【弁理士】
【氏名又は名称】須田 洋之
(74)【代理人】
【識別番号】100119013
【弁理士】
【氏名又は名称】山崎 一夫
(74)【代理人】
【識別番号】100123777
【弁理士】
【氏名又は名称】市川 さつき
(74)【代理人】
【識別番号】100111796
【弁理士】
【氏名又は名称】服部 博信
(74)【代理人】
【識別番号】100193493
【弁理士】
【氏名又は名称】藤原 健史
(72)【発明者】
【氏名】エドワルド エリン
(72)【発明者】
【氏名】ハーダーソン ホルドゥル ケイ
【テーマコード（参考）】
4C076
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076AA12
4C076DD41Z
4C076DD43Z
4C076DD67
4C076EE23
4C076FF36
4C076GG42
4C085AA13
4C085AA14
4C085BB17
4C085EE01
4C085EE07
4H045AA11
4H045AA30
4H045BA10
4H045DA76
4H045EA20
(57)【要約】
本発明はアダリムマブの安定な水性製剤、特に、高濃度（例えば約１００ｍｇ）のアダリムマブ、トレハロースまたはスクロース、非イオン性界面活性剤を含み、低濃度の緩衝剤を含むか全く含まず、イオン性等張化剤もアミノ酸安定剤も含まない安定な水性製剤に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
（ａ）約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌの抗ＴＮＦα抗体；（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤であって、
製剤がイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤がアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度が約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤が約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
【請求項2】
抗ＴＮＦα抗体がアダリムマブである、請求項１に記載の製剤。
【請求項3】
約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、約２５０ｍＭのトレハロース、および約０．１％のポリソルベート２０を含むか、または約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、約２５０ｍＭのスクロース、および約０．１％のポリソルベート２０を含む、請求項２に記載の製剤。
【請求項4】
約２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含むか、または約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤を含む、請求項１～３のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項5】
イオン性賦形剤を本質的に含まない、請求項１～４のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項6】
次の基準：（ａ）約２℃～約８℃で約３カ月である長期貯蔵下で安定；
（ｂ）約２℃～約８℃で約６カ月である長期貯蔵下で安定；
（ｃ）約２℃～約８℃で約１２カ月である長期貯蔵下で安定；および／または
（ｄ）約１４日である室温貯蔵下で安定
の１つ以上を満たす、請求項１～５のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項7】
安定性が次の基準：（ａ）約２℃～約８℃で少なくとも約１２カ月貯蔵したときの、凝集のほぼ同等以下の増加；
（ｂ）約２５℃で少なくとも１カ月貯蔵したときの、凝集のほぼ同等以下の増加；
（ｃ）約２℃～約８℃で少なくとも１２カ月貯蔵したときの、相対パーセント酸化学種のほぼ同等以下の増加；および／または
（ｄ）約２５℃で少なくとも１カ月貯蔵したときの、相対パーセント酸化学種のほぼ同等以下の増加
の１つ以上により決定され、
ここで、製剤がコントロールと比較されており；前記コントロールが製剤とほぼ同じ濃度でアダリムマブを含み、好ましくは製剤が約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブを含み、コントロールが約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、２３０ｍＭのマンニトール、０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０を含み、約５．２のｐＨを有する、請求項１～６のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項8】
安定性が次の基準：（ａ）アダリムマブに対するモノマーピークの相対割合が製剤を約２℃～約８℃で少なくとも６カ月貯蔵した後約９８％以上であり、ここでモノマーピークの前記相対割合はＳＥＣ－ＨＰＬＣにより決定される；
（ｂ）アダリムマブに対するモノマーピークの相対割合が製剤を約２５℃で少なくとも１カ月貯蔵した後約９８％以上であり、ここでモノマーピークの前記相対割合はＳＥＣ－ＨＰＬＣにより決定される；
（ｃ）アダリムマブに対する相対的酸性化学種ピークが製剤を約２℃～約８℃で少なくとも１２カ月貯蔵した後約２５％以下であり、ここで前記相対的酸性化学種ピークはＣＥＸ－ＨＰＬＣにより決定される；および／または
（ｄ）アダリムマブに対する相対的酸性化学種ピークが製剤を約２５℃で少なくとも３カ月貯蔵した後約２５％以下であり、ここで前記相対的酸性化学種ピークはＣＥＸ－ＨＰＬＣにより決定される
の１つ以上により決定される、請求項１～７のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項9】
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース、または約２５０ｎＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭの酢酸緩衝剤
を含む水性製剤であって、
イオン性等張化剤を本質的に含まず；アミノ酸安定剤を本質的に含まず；約ｐＨ５～約ｐＨ６である、水性製剤。
【請求項10】
本質的に（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース、または約２５０ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭの酢酸緩衝剤
からなる水性製剤であって、
約ｐＨ５～約ｐＨ６である、水性製剤。
【請求項11】
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロースまたは約２５０ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤であって、
イオン性賦形剤を本質的に含まず；約ｐＨ５～約ｐＨ６である、水性製剤。
【請求項12】
本質的に（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロースまたは約２５０ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
からなる水性製剤であって、
約ｐＨ５～約ｐＨ６である、水性製剤。
【請求項13】
次のストレス条件：（ａ）約２５℃で約３カ月；
（ｂ）約２～約８℃で約３カ月；および／または
（ｃ）約４０℃で約３カ月
の１つ以上への曝露の後安定であると決定されている、請求項１～５および９～１２のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項14】
安定性が所定のレベルの摂動、好ましくは所定のレベルの（ａ）ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより評価して約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積；
（ｂ）ＣＥＸ－ＨＰＬＣにより評価して約２５％以下のアダリムマブの相対的酸性化学種ピーク面積；
（ｃ）ＣＥ－ＳＤＳ（非還元）により評価して約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）；
（ｄ）ＣＤ－ＳＤＳ（還元）により評価して約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピーク；および／または
（ｅ）光遮蔽粒子計数法により評価して約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子および／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出される
の１つ以上の摂動を参照することにより決定される、請求項１３に記載の製剤。
【請求項15】
安定性がコントロールを参照することにより決定され、ここで前記コントロール製剤は約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、２３０ｍＭのマンニトール、０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０を含み、約５．２のｐＨを有しており；前記コントロールが製剤と同じ１つ以上のストレス条件に曝露され、好ましくは安定性がコントロールを参照することにより決定され、ここで前記コントロールは市販のＨｕｍｉｒａ（登録商標）製剤であり；前記コントロールが製剤と同じ１つ以上のストレス条件に曝露される、請求項１４に記載の製剤。
【請求項16】
製剤のｐＨが約ｐＨ５．５である、請求項１～１５のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項17】
請求項１～１６のいずれか１項に記載の製剤を製剤化する方法であって、（１）抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の第１の溶液を、
（ａ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｂ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む第２の溶液に交換するステップであって、
ここで第２の溶液はイオン性等張化剤を本質的に含まず；第２の溶液はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；第２の製剤は約５．０～約６．０のｐＨ、好ましくは約５．５のｐＨを有し、交換後の抗ＴＮＦα抗体の濃度は約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌである、ステップと；
（２）ステップ（１）の溶液を非イオン性界面活性剤で希釈して約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤の濃度を得るステップ
を含む方法。
【請求項18】
第２の溶液が：約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース
を含み、
第２の溶液がイオン性賦形剤を本質的に含まない、請求項１７に記載の方法。
【請求項19】
抗ＴＮＦα抗体がアダリムマブである、請求項１７または１８に記載の方法。
【請求項20】
請求項１７～１９のいずれか１項に記載の方法により得ることができる製剤。
【請求項21】
前記製剤が単一用量のプレフィルドインジェクションペン、単一用量の予め充填されたシリンジ、または単一用量の予め充填されたバイアルの形態であるか、または使い捨てのバッグの形態である、請求項１～１６および２０のいずれか１項に記載の製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本明細書は１６の図を含んでおり、そのうちのいくつかは多数の部分を含んでいる。図１～１５はカラーである。
本発明はアダリムマブの安定な水性製剤、特に、高濃度（例えば約１００ｍｇ）のアダリムマブ、トレハロースまたはスクロース、非イオン性界面活性剤を含み、低濃度の緩衝剤を含むか全く含まず、イオン性等張化剤を含まず、かつアミノ酸安定剤を含まない安定な水性製剤に関する。
本発明はアダリムマブの安定な水性製剤、特に、高濃度（例えば約１００ｍｇ）のアダリムマブ、トレハロースまたはスクロース、非イオン性界面活性剤を含み、低濃度の緩衝剤を含むか全く含まず、イオン性等張化剤を含まず、かつアミノ酸安定剤を含まない安定な水性製剤に関する。
【背景技術】
【0002】
本明細書を通じて従来技術のいかなる考察も、かかる従来技術が広く知られているかまたは当分野で共通の一般知識の一部を形成することを承認したものと考えてはならない。
市販品のＨｕｍｉｒａ（登録商標）はＤ２Ｅ７として知られている抗ＴＮＦα抗体を含む。Ｄ２Ｅ７はおよそ１４８キロダルトンの分子量を有する１３３０のアミノ酸からなるヒトＴＮＦαに特異的な組換えヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体である。Ｄ２Ｅ７の軽鎖可変領域のアミノ酸配列および重鎖可変領域のアミノ酸配列は米国特許第６，０９０，３８２号（その図１Ａ、１Ｂ、２Ａ、２Ｂ、ならびに配列番号１および２参照）に記載されており、その開示は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。Ｄ２Ｅ７は通常、例えば、チャイニーズハムスター卵巣細胞のような哺乳動物細胞発現系で組換えＤＮＡ技術により生産される。Ｄ２Ｅ７はＴＮＦαに特異的に結合し、そのｐ５５およびｐ７５細胞表面ＴＮＦ受容体との相互作用をブロックすることによってＴＮＦαの生物学的機能を中和する。
市販品のＨｕｍｉｒａ（登録商標）はＤ２Ｅ７として知られている抗ＴＮＦα抗体を含む。Ｄ２Ｅ７はおよそ１４８キロダルトンの分子量を有する１３３０のアミノ酸からなるヒトＴＮＦαに特異的な組換えヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体である。Ｄ２Ｅ７の軽鎖可変領域のアミノ酸配列および重鎖可変領域のアミノ酸配列は米国特許第６，０９０，３８２号（その図１Ａ、１Ｂ、２Ａ、２Ｂ、ならびに配列番号１および２参照）に記載されており、その開示は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。Ｄ２Ｅ７は通常、例えば、チャイニーズハムスター卵巣細胞のような哺乳動物細胞発現系で組換えＤＮＡ技術により生産される。Ｄ２Ｅ７はＴＮＦαに特異的に結合し、そのｐ５５およびｐ７５細胞表面ＴＮＦ受容体との相互作用をブロックすることによってＴＮＦαの生物学的機能を中和する。
【0003】
Ｄ２Ｅ７は関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、中等～重度の慢性乾癬、および若年性特発性関節炎を治療するのに使用される。
抗体、例えばＤ２Ｅ７またはそれとバイオシミラーな抗体の製剤は、投与前に最小の操作を要する形態で調製することができ、これは投与中の人為ミスを最小限にでき、および／または家庭での投与に適している。例えば、処置時に水の添加を含まない製剤、例えば単回投与用の水性製剤を含むガラスバイアル、単回投与用の水性製剤を含む予め充填されたシリンジ、水性製剤を含むプレフィルドインジェクションペン（ｐｒｅ－ｆｉｌｌｅｄ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｐｅｎ）、など。
治療レジメンの一部として投与される抗体（例えばＤ２Ｅ７またはそれとバイオシミラーな抗体）を含む製剤は１回より多く（例えば毎週、毎月２回、毎月）投与され、および／または高い抗体濃度（例えば、５０ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌ、１２５ｍｇ／ｍｌ）で投与される。
アダリムマブの安定な水性製剤に対するニーズが存在したままである。
従来技術の不利益の少なくとも１つを克服もしくは改善し、または有用な代替手段を提供することが本発明の１つの目的である。
抗体、例えばＤ２Ｅ７またはそれとバイオシミラーな抗体の製剤は、投与前に最小の操作を要する形態で調製することができ、これは投与中の人為ミスを最小限にでき、および／または家庭での投与に適している。例えば、処置時に水の添加を含まない製剤、例えば単回投与用の水性製剤を含むガラスバイアル、単回投与用の水性製剤を含む予め充填されたシリンジ、水性製剤を含むプレフィルドインジェクションペン（ｐｒｅ－ｆｉｌｌｅｄ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｐｅｎ）、など。
治療レジメンの一部として投与される抗体（例えばＤ２Ｅ７またはそれとバイオシミラーな抗体）を含む製剤は１回より多く（例えば毎週、毎月２回、毎月）投与され、および／または高い抗体濃度（例えば、５０ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌ、１２５ｍｇ／ｍｌ）で投与される。
アダリムマブの安定な水性製剤に対するニーズが存在したままである。
従来技術の不利益の少なくとも１つを克服もしくは改善し、または有用な代替手段を提供することが本発明の１つの目的である。
【発明の概要】
【0004】
驚くべきことに、高濃度のアダリムマブをトレハロースまたはスクロース、界面活性剤と共に含み、緩衝剤を少し含むかまたは全く含まない水性製剤が安定性を示すことが見出された。特に、本明細書に開示される製剤は長期貯蔵下で安定である。
第１の態様において、本発明は、
（ａ）約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．０５％～約０．１５％の非イオン性界面活性剤；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤を提供し、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。
第１の態様において、本発明は、
（ａ）約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．０５％～約０．１５％の非イオン性界面活性剤；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤を提供し、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。
【0005】
第２の態様において、本発明は、
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む水性製剤を提供し、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む水性製剤を提供し、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。
【0006】
第３の態様において、本発明は、
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む水性製剤を提供し、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む水性製剤を提供し、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。
【0007】
第４の態様において、本発明は、
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤を提供し、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤を提供し、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。
【0008】
第５の態様において、本発明は、
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤を提供し、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。
緩衝剤を低濃度で含むか全く含まないように調製され、さらにイオン性等張化剤を本質的に含まずアミノ酸安定剤を本質的に含まない水性製剤は長期貯蔵条件下（例えば約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月、約６カ月、約１２カ月、または約２４カ月）または室温貯蔵条件下（例えば約２０℃～約２５℃で少なくとも約１４日）で驚くほど安定である。
水性製剤は、対象（患者）への自己投与用に、または医療専門家により対象（患者）に投与するために製剤化することができる。好ましくは、水性製剤は、限定されないがプレフィルドインジェクションペン、予め充填されたシリンジ、および予め充填されたバイアル（例えば、予め充填されたガラスバイアル）を含めた単一用量の体裁で製剤化される。水性製剤はまた、単回使用バッグ（例えば、薬学的に許容されるプラスチックバッグ、およびバイオ医薬品グレードバッグなど）中にバルクで貯蔵することもできる。
水性製剤は対象（患者）への投与に適した水、例えば注射用の水（ＷＦＩ）または同様な薬学的に許容される水を含むと理解されたい。
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤を提供し、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。
緩衝剤を低濃度で含むか全く含まないように調製され、さらにイオン性等張化剤を本質的に含まずアミノ酸安定剤を本質的に含まない水性製剤は長期貯蔵条件下（例えば約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月、約６カ月、約１２カ月、または約２４カ月）または室温貯蔵条件下（例えば約２０℃～約２５℃で少なくとも約１４日）で驚くほど安定である。
水性製剤は、対象（患者）への自己投与用に、または医療専門家により対象（患者）に投与するために製剤化することができる。好ましくは、水性製剤は、限定されないがプレフィルドインジェクションペン、予め充填されたシリンジ、および予め充填されたバイアル（例えば、予め充填されたガラスバイアル）を含めた単一用量の体裁で製剤化される。水性製剤はまた、単回使用バッグ（例えば、薬学的に許容されるプラスチックバッグ、およびバイオ医薬品グレードバッグなど）中にバルクで貯蔵することもできる。
水性製剤は対象（患者）への投与に適した水、例えば注射用の水（ＷＦＩ）または同様な薬学的に許容される水を含むと理解されたい。
【0009】
定義
文脈上明らかに他に解すべき場合を除き、本明細書および特許請求の範囲を通じて、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などは排他的または網羅的な意味合いとは対照的に包括的な意味合いで；すなわち、「含むが、限定されない」という意味で解すべきである。本明細書に記載されている水性製剤に関連して、用語「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」または「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」およびその文法上の変化形は製剤のｐＨを目標のｐＨに調節するのに必要とされる水またはｐＨ調節剤の存在を除外しないと理解されたい。
文脈上明らかに他に解すべき場合を除き、本明細書および特許請求の範囲を通じて、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などは排他的または網羅的な意味合いとは対照的に包括的な意味合いで；すなわち、「含むが、限定されない」という意味で解すべきである。本明細書に記載されている水性製剤に関連して、用語「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」または「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」およびその文法上の変化形は製剤のｐＨを目標のｐＨに調節するのに必要とされる水またはｐＨ調節剤の存在を除外しないと理解されたい。
【0010】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用されているとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は文脈上明らかに他のものを指示する場合を除き複数の指示対象を含む。さらに、特許請求の範囲は任意選択の要素を除外して記載されている可能性があることに留意されたい。
【0011】
本明細書で使用されるとき用語「約」は当技術分野の習慣に従って１以上の標準偏差以内を意味することができる。あるいは、「約」は２０％まで、１０％まで、または５％までの範囲を意味することができる。一定の実施形態において、「約」は１０％までを意味することができる。例えば、本明細書に記載されている水性製剤に関連して、約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブを含む水性製剤は、９０ｍｇ／ｍｌ～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブを有する水性製剤を包含する。本明細書および特許請求の範囲に特定の値が記載されているとき、「約」の意味はその特定の値の許容される誤差範囲内であると仮定される。
【0012】
本明細書で使用されるとき用語「アダリムマブ」は米国特許第６，０９０，３８２号で定義されているＤ２Ｅ７という抗ＴＮＦα抗体およびＤ２Ｅ７とバイオシミラーな（例えば市販品Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）のＤ２Ｅ７とバイオシミラーな）抗ＴＮＦα抗体を包含する。Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）に含まれるＤ２Ｅ７抗体の配列は当技術分野で知られている。Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）のアダリムマブの軽鎖および重鎖の配列を報告しているｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｄｒｕｇｂａｎｋ．ｃａ／ｄｒｕｇｓ／ＤＢ０００５１参照。図１６参照。市販品のＨｕｍｉｒａ（登録商標）に含まれる抗体とバイオシミラーな抗ＴＮＦα抗体はアメリカ食品医薬品局の要件に従って「ａｄａｌｉｍｕｍａｂ－ｘｘｘｘ」と指定され、ここで「ｘｘｘｘ」はアダリムマブの起源を示すと理解される。バイオシミラーなアダリムマブは市販品（Ｈｕｍｉｒａ（登録商標））に含まれるアダリムマブとの生理化学的および機能的類似性により評価されると理解される。Liu et al., BioDrugs (2016) 30:321-338; Magnenat et al., MABS (2017) 9(1):127-139参照。Ｄ２Ｅ７とバイオシミラーな抗体には、限定されないが、Ｄ２Ｅ７のアミノ酸配列においてその抗体の生物学的機能（例えばＴＮＦα－結合性、ＦｃγＲＩＩＩａ、など）に有意に影響を及ぼすことがない１つまたは２つの変更（アミノ酸の欠失、付加、および／または置換）を有する抗体、および市販品Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）のＤ２Ｅ７と異なるグリコシル化プロファイルを有する抗体が含まれる。Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）の抗ＴＮＦα抗体Ｄ２Ｅ７は、各々がおよそ２４キロダルトン（ｋＤａ）の分子量を有する２つの軽鎖および各々がおよそ４９ｋＤａの分子量を有する２つのＩｇＧ１重鎖を有する組換えヒトＩｇＧ １モノクローナル抗体である。各々の軽鎖は２１４のアミノ酸残基からなり、各々の重鎖は４５１のアミノ酸残基からなる。したがって、Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）の抗ＴＮＦα抗体Ｄ２Ｅ７は１３３０のアミノ酸を有し、およそ１４８ｋＤａの合計分子量を有する。バイオシミラーな抗体はまたバイオベターな候補といってもよい。バイオシミラーな抗体またはバイオベターな候補は規制機関によるバイオシミラーな認可が求められている抗体であると当技術分野において理解されている。好ましくは、本明細書に記載されている水性製剤中のアダリムマブはＨｕｍｉｒａ（登録商標）のＤ２Ｅ７抗体と同じ１３３０のアミノ酸残基を有する抗体である。図１６参照。
【0013】
用語「ＴＮＦ－アルファ」（略してＴＮＦαと記載されることもある）は、本明細書で使用されるとき、１７ｋＤ分泌型として、および非共有結合した１７ｋＤ分子の三量体で構成される生物学的に活性な形態である２６ｋＤ膜結合型として存在するヒトサイトカインをいうことが意図されている。ＴＮＦ－アルファの構造はさらに、例えば、Pennica, D., et al. (1984) Nature 312:724-729; Davis, J. M., et al. (1987) Biochemistry 26:1322-1326;およびJones, E. Y., et al. (1989) Nature 338:225-228に記載されている。用語ＴＮＦ－アルファは、標準的な組換え発現法により調製されるかまたは商業的に購入することができる組換えヒトＴＮＦ－アルファ（ｒＴＮＦα）を含めて意味する。
【0014】
用語「抗体」は、本明細書で使用されるとき、ジスルフィド結合により相互に連結された４つのポリペプチド鎖、２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖で構成される免疫グロブリン分子をいう。各々の重鎖は重鎖可変領域（本明細書では略してＨＣＶＲまたはＶＨと記載される）および重鎖定常領域からなる。重鎖定常領域は３つのドメインＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３からなる。各々の軽鎖は軽鎖可変領域（本明細書では略してＬＣＶＲまたはＶＬと記載される）および軽鎖定常領域からなる。軽鎖定常領域は１つのドメインＣＬからなる。ＶＨおよびＶＬ領域はさらに相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域に細分され、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより良く保存された領域が点在する。各々のＶＨおよびＶＬはアミノ末端からカルボキシ末端に向かってＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順に配置された３つのＣＤＲおよび４つのＦＲからなる。
【0015】
５種類の脊椎動物重鎖：アルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、およびミューがある。各々の重鎖は１つの可変領域および３つの定常領域からなる。５つの重鎖の種類が脊椎動物抗体の５つのクラス（アイソタイプ）：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭを定める。各々のアイソタイプは、それぞれ、（ａ）２つのアルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、またはミュー重鎖、および（ｂ）２つのカッパまたは２つのラムダ軽鎖から構成されている。各々のクラスの重鎖は両方の種類の軽鎖と連携するが、所与の分子の２つの軽鎖は両方共カッパまたは両方共ラムダである。ＩｇＤ、ＩｇＥ、およびＩｇＧは一般に「遊離の」ヘテロ四量体糖タンパク質として存在する。ＩｇＡおよびＩｇＭは一般に「Ｊ」鎖ポリペプチドで結合した数個のＩｇＡまたは数個のＩｇＭヘテロ四量体を含む複合体に存在する。いくつかの脊椎動物アイソタイプは、定常領域配列の差により互いに区別されるサブクラスに分類される。例えば、４つのヒトＩｇＧサブクラスＩｇＧｌ、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４、ならびに２つのＩｇＡサブクラスＩｇＡｌおよびＩｇＡ２がある。これらおよび上に具体的に記載されていない他の５つ全てが本明細書で使用される用語「抗体」の意味に含まれる。
【0016】
本明細書で使用されるとき、用語「緩衝剤」は、例えば、溶液中でその溶液のｐＨを維持するための量の酸または塩基を中和することができる弱酸およびその塩、または弱塩基およびその塩をいう。代表的な緩衝剤には、限定されないが、酢酸緩衝剤（アセテート／酢酸）、コハク酸緩衝剤（スクシネート／コハク酸）、などがある。十分に理解されているように、緩衝剤は緩衝剤成分を強酸（例えばＨＣｌ）または強塩基（例えばＮａＯＨ）と混合して緩衝剤を標的のｐＨに調節することにより調製され、それにより緩衝剤は残留濃度の塩イオン、例えば塩化物イオン、ナトリウムイオンを含み得る。用語緩衝剤は、本明細書で使用されるとき、アダリムマブの自己緩衝能を含まない。本明細書で使用されるとき、緩衝剤の濃度とは、溶液中の緩衝剤の全成分（酸および共役塩基または、代わりに、塩基および共役酸）の合わせた濃度（例えば、「酢酸緩衝剤」の場合溶液中の酢酸塩および酢酸の合わせた濃度、「コハク酸緩衝剤」の場合溶液中のコハク酸塩およびコハク酸の合わせた濃度）をいう。
【0017】
本明細書で使用されるとき、用語「非イオン性界面活性剤」は親水性の頭部基および電荷をもたない疎水性の尾部を含む化合物をいう。代表的な非イオン性界面活性剤には、限定されないが、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレン水添ひまし油、ポリエチレングリコール脂肪酸エーテル、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステルなどがある。本明細書に記載されている水性製剤に含めるのに特に適した非イオン性界面活性剤には、約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート２０（ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート）、ポリソルベート８０（ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）、などがある。約０．１％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート２０は本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。
【0018】
本明細書で使用されるとき、「ｗ／ｖ」または「（ｗ／ｖ）」は溶液の容積（ｍｌ）当たりの溶質の質量（ｇ）を意味するために使用されている。「％（ｗ／ｖ）」は溶液の容積（ｍｌ）当たりの溶質の質量（ｇ）×１００を意味するために使用されている。
【0019】
本明細書に記載されている安定な水性製剤は「イオン性等張化剤を本質的に含まない」。イオン性等張化剤は当技術分野で公知であり、ナトリウム、カリウム、カルシウムなどの無機塩を含む。例えば、本明細書に記載されている安定な水性製剤は塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ2）、塩化カルシウム（ＣａＣｌ2）、メタ重亜硫酸ナトリウム（Ｎａ2Ｓ2Ｏ5）、などのようなイオン性等張化剤を本質的に含まないことができる。「イオン性等張化剤を本質的に含まない」安定な水性製剤は、例えば、前記安定な水性製剤中に含まれることになるアダリムマブの生産および／または精製中存在し得るイオン性等張化剤を除去するように製剤化される；イオン性等張化剤の添加なしに製剤化される；などである。イオン性等張化剤を除去する方法は特に限定されず、例えば、透析、脱塩カラム、透析ろ過、などのような公知の方法を含むと理解される。さらに、かかる方法は除去される目標の物質を一定の割合で残すことが知られていると理解される。本発明において、「イオン性等張化剤を本質的に含まない」安定な水性製剤は、イオン性等張化剤が特定の除去方法の限界まで除去されるイオン性等張化剤を除去する方法により調製された製剤を含む。一定の実施形態において、「イオン性等張化剤を本質的に含まない」とは、約０．１％（ｗ／ｖ）未満の１種以上のイオン性等張化剤の各々をいう。一定の実施形態において、「イオン性等張化剤を本質的に含まない」とは、約０．０１％（ｗ／ｖ）未満の１種以上のイオン性等張化剤の各々をいう。イオン性賦形剤を本質的に含まない安定な水性製剤は、緩衝剤（酢酸緩衝剤またはコハク酸緩衝剤）の存在下または緩衝剤の非存在下で目標のｐＨ、例えば約５．０～約６．０のｐＨを達成するためのｐＨ調節剤、例えば塩酸（ＨＣｌ）または水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）の添加を除外しないと理解される。
【0020】
本明細書に記載されている安定な水性製剤は「アミノ酸安定剤を本質的に含まない」。アミノ酸安定剤は当技術分野で公知であり、メチオニン、グリシン、アルギニン、などがある。用語「アミノ酸安定剤」は、製剤に添加される外因性のアミノ酸をいい、アダリムマブのアミノ酸残基または、例えば、製剤中のアダリムマブの分解から誘導されるアミノ酸残基を包含しない。「アミノ酸安定剤を本質的に含まない」安定な水性製剤は、例えば、前記安定な水性製剤中に含まれることになるアダリムマブの生産および／または精製中に存在し得るアミノ酸安定剤を除去するように製剤化される；アミノ酸安定剤の添加なしに製剤化される；などである。アミノ酸安定剤を除去する方法は特に限定されず、例えば、透析、脱塩カラム、透析ろ過、などのような公知の方法があることが分かる。本発明において、「アミノ酸安定剤を本質的に含まない」安定な水性製剤は、アミノ酸安定剤が特定の除去方法の限界まで除去されるアミノ酸安定剤を除去する方法により調製された製剤を含む。一定の実施形態において、「アミノ酸安定剤を本質的に含まない」とは、約０．１％（ｗ／ｖ）未満の１種以上のアミノ酸安定剤の各々をいう。一定の実施形態において、「アミノ酸安定剤を本質的に含まない」とは、約０．０１％（ｗ／ｖ）未満の１種以上のアミノ酸安定剤の各々をいう。
【0021】
本明細書に記載されている安定な水性製剤は「イオン性賦形剤を本質的に含まない」ことができる。イオン性賦形剤には、各々本明細書に定義されているイオン性等張化剤、アミノ酸安定剤、および緩衝剤が含まれる。「イオン性賦形剤を本質的に含まない」安定な水性製剤は、例えば、前記安定な水性製剤中に含まれることになるアダリムマブの生産および／または精製中に存在し得るようなイオン性賦形剤を除去するように製剤化される；アミノ酸安定剤の添加なしに製剤化される；などである。アダリムマブの緩衝能力はイオン性賦形剤を本質的に含まない安定な水性製剤において除外されないと理解される。緩衝剤を除去するように、または緩衝剤なしに製剤化されたイオン性等張化剤を本質的に含まず、アミノ酸安定剤を本質的に含まない安定な水性製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まない安定な水性製剤である。アダリムマブの緩衝能力はイオン性賦形剤を本質的に含まない安定な水性製剤において除外されないと理解される。イオン性賦形剤を除去する方法は特に限定されず、例えば、透析、脱塩カラム、透析ろ過、などのような公知の方法を含むと理解される。本発明において、「イオン性賦形剤を本質的に含まない」安定な水性製剤は、イオン性賦形剤が特定の除去方法の限度まで除去されるイオン性賦形剤を除去する方法により調製された製剤を含む。一定の実施形態において、「イオン性賦形剤を本質的に含まない」とは、約０．１％（ｗ／ｖ）未満の１種以上のイオン性賦形剤の各々をいう。一定の実施形態において、「イオン性賦形剤を本質的に含まない」とは、約０．０１％（ｗ／ｖ）未満の１種以上のイオン性賦形剤の各々をいう。イオン性賦形剤を本質的に含まない安定な水性製剤は緩衝剤（酢酸緩衝剤またはコハク酸緩衝剤）の存在下または緩衝剤の非存在下で目標のｐＨ、例えば約５．０～約６．０のｐＨを達成するためのｐＨ調節剤、例えば塩酸（ＨＣｌ）または水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）の添加を除外しないと理解される。
【0022】
本明細書で使用されるとき、用語「安定な」は、アダリムマブの低レベルの劣化（例えば物理的劣化、例えば凝集、断片化、脱アミド、酸化、グリコシル化の変化、など、および／または生物学的劣化、例えば活性の低下）を有するアダリムマブを含む水性製剤を記載する。製剤の安定性の決定は、製剤を１つ以上のストレス条件に曝露した後製剤が検出可能なレベルの摂動がないかまたは許容されるレベルの摂動を示すかどうかを決定することで評価できる。摂動は、１つ以上のストレス条件に曝露した後の水性製剤中の成分、特にアダリムマブの変化をいい、限定されないが、１つ以上の目に見えるまたは肉眼では見ることができない粒子の変化、製剤に含まれるアダリムマブの酸性化学種の変化（例えば脱アミド）、製剤に含まれるアダリムマブの塩基性化学種の変化、製剤に含まれるアダリムマブの酸化、製剤に含まれるアダリムマブのグリコシル化の変化、製剤に含まれるアダリムマブの凝集の変化、などを含む。摂動または摂動のレベルは、水性製剤中の抗体の劣化を評価するための当技術分野で公知の方法、例えば、限定されないがサイズ排除高性能液体クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）、カチオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）、キャピラリー電気泳動ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ－ＳＤＳ）（非還元および還元状態）、光遮蔽粒子計数法（ｐａｒｔｉｃｌｅ ｃｏｕｎｔ ｌｉｇｈｔ ｏｂｓｃｕｒａｔｉｏｎ）を含む方法によって決定することができる。一定の実施形態において、摂動または摂動のレベルは水性製剤に含まれるアダリムマブの生物学的な活性の変化を検出することをさらに含み得る。生物学的活性の変化は当技術分野で公知の方法、例えば、限定されないが、相対解離定数（ＫD）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）などにより決定することができる。
【0023】
本明細書で使用されるとき、用語「ストレス条件」は、限定されないが製剤のある温度での所与の時間、例えば約２℃～約８℃で少なくとも約１カ月、少なくとも約３カ月、少なくとも約６カ月、少なくとも約１２カ月、または少なくとも約２４カ月；約２５℃で少なくとも約１カ月、少なくとも約３カ月、少なくとも約６カ月、または少なくとも約１２カ月；約４０℃で少なくとも約１カ月、少なくとも約３カ月、少なくとも約６カ月、または少なくとも約１２カ月の貯蔵すること（貯蔵または維持）；または振盪、酸化、加熱、凍結、および／または混合のような条件への曝露を含む。
【0024】
一定の実施形態において、安定性はコントロールを参照して決定され得る。一定の実施形態において、コントロールは、ストレス条件に曝露する前に、摂動が分析されるストレス条件に曝露されていないストレスを受けていないコントロールであり得る。例えば、ストレスを受けていないコントロールは、ゼロの時点（例えば貯蔵の前、振盪の前、など）でストレスを受けていないコントロールの摂動が評価される安定性分析を受ける水性製剤と同じバッチに由来し得る。一定の実施形態において、コントロールは、１つ以上のストレス条件への曝露後に許容されるレベルの摂動を示すことが前もって決定されている水性製剤であり得る。一定の実施形態において、コントロールは当技術分野で日常的に行われるように市販の製剤、好ましくはＨｕｍｉｒａ（登録商標）であり得る。Liu et al., BioDrugs (2016) 30:321-338; Magnenat et al., MABS (2017) 9(1):127-139参照。また、実施例９の方法も参照。市販の製剤は、限定されないが、単一用量のプレフィルドインジェクションペン、予め充填されたシリンジまたはバイアルを含む体裁であり得る。
【0025】
一定の実施形態において、安定性は摂動の所定のレベルを参照して決定され得る。所定のレベルの摂動は凝集体の割合、酸性化学種の割合、肉眼では見ることができない粒子の割合を含み得る。例えば、製剤は本明細書で規定されたストレス条件への曝露後、ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより評価してアダリムマブの相対的なモノマーピーク面積が約９８％以上であるとき安定であると決定され得る。製剤は本明細書で規定されたストレス条件への曝露後ＣＥＸ－ＨＰＬＣにより評価してアダリムマブの相対的な酸性化学種のピーク面積が約２５％以下であるとき安定であると決定され得る。製剤は本明細書で規定されたストレス条件への曝露後、光遮蔽粒子計数法により評価して約１０μｍ以上のサイズの約６０００個以下の粒子が検出される場合および／または約２５μｍ以上のサイズの約６００個以下の粒子が検出される場合安定であると決定され得る。製剤は本明細書で規定されたストレス条件への曝露後ＣＥ－ＳＤＳ（非還元）により評価して相対的な「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）が約９０％以上であるとき安定であると決定され得る。製剤は本明細書で規定されたストレス条件への曝露後ＣＥ－ＳＤＳ（還元）により評価して相対的な重鎖（ＨＣ）ピークが約６０％～約７２％であるかおよび／または相対的な軽鎖（ＬＣ）ピークが約３０％～約３６％であるとき安定であると決定され得る。
【0026】
一定の実施形態において、水性製剤は、１つ以上のストレス条件への曝露がコントロールと比較してより少ない摂動を示すか、またはそれ以上の摂動を示さないとき安定であると考えられる。関連の実施形態において、水性製剤は、１つ以上のストレス条件への曝露が同じ１つ以上のストレス条件に曝露されたコントロールと比較してより少ない摂動を示すか、またはそれ以上の摂動を示さないとき安定であると考えられる。関連の実施形態において、水性製剤は、１つ以上のストレス条件への曝露がストレスを受けていないコントロールと比較してより少ない摂動を示すか、またはそれ以上の摂動を示さないとき安定であると考えられる。
【0027】
本明細書で使用されるとき、水性製剤中の摂動のレベルに関する用語「許容されるレベル」は、その水性製剤をその意図された薬学用途に適さなくすることがないレベルを含む。例えば、ある水性製剤に対する摂動のレベルに関して許容されるレベルとは、限定されないが、同じストレス条件に曝露された市販の製剤に存在するものを超えても下回ってもいない摂動またはいかなるストレス条件にも曝露されない市販の製剤に存在するものを超えても下回ってもいない摂動を含む。一定の実施形態において、摂動の許容されるレベルとして、ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより評価してアダリムマブの相対的なモノマーのピーク面積が約９８％以上である場合；ＣＥＸ－ＨＰＬＣにより評価してアダリムマブの相対的な酸性化学種のピーク面積が約２５％以下である場合；光遮蔽粒子計数法により評価して約１０μｍ以上のサイズの約６０００個以下の粒子が検出される、および／または約２５μｍ以上のサイズの約６００個以下の粒子が検出される場合；ＣＥ－ＳＤＳ（非還元）により評価して相対的な「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）が約９０％以上である場合；および／またはＣＥ－ＳＤＳ（還元）により評価して相対的な重鎖（ＨＣ）ピークが約６０％～約７２％および／または相対的な軽鎖（ＬＣ）ピークが約３０％～約３６％である場合がある。
【0028】
本明細書で使用される用語「長期貯蔵」とは、限定されないが、約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月、少なくとも約６カ月、少なくとも約１２カ月、および／または少なくとも約２４カ月を含む。
【0029】
本明細書で使用されるとき、用語「室温貯蔵」とは、限定されないが、約２０℃～約２５℃で約１４日を含む。
【0030】
以下、ほんの一例として次の通りの添付の図面を参照して本発明の実施形態を記載する。
【図面の簡単な説明】
【0031】
【図1-1】Ａ及びＢは、様々な濃度および無機塩の化学種の存在下でのアダリムマブの融解温度。実施例１参照。Ａ：主ピークに対して決定された全ての融解温度の棒グラフ。各々の値は４つの決定された融解温度の平均であり、エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された標準偏差である。左から右へ：５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＭｇＣｌ2、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＮａ2Ｓ2Ｏ5、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＣａＣｌ2、塩なし（ＷＦＩ）。Ｂ～Ｆ：試験した各々の塩化学種に対する融解曲線：ＭｇＣｌ2（Ｂ）、ＮａＣｌ（Ｃ）、ＫＣｌ（Ｄ）、Ｎａ2Ｓ2Ｏ5（Ｅ）、ＣａＣｌ2（Ｆ）。場合によっては、第２の集団またはショルダーがより低い温度で融解曲線に現れる。これら２つのピークは高Ｔｍ（主ピーク）および低Ｔｍ（ショルダーまたは第２の集団）といわれる。いずれも、各々のサンプルに対して表１に記載される。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの融解曲線の平均曲線である。
【図1-2】Ｃ及びＤは、様々な濃度および無機塩の化学種の存在下でのアダリムマブの融解温度。実施例１参照。Ａ：主ピークに対して決定された全ての融解温度の棒グラフ。各々の値は４つの決定された融解温度の平均であり、エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された標準偏差である。左から右へ：５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＭｇＣｌ2、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＮａ2Ｓ2Ｏ5、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＣａＣｌ2、塩なし（ＷＦＩ）。Ｂ～Ｆ：試験した各々の塩化学種に対する融解曲線：ＭｇＣｌ2（Ｂ）、ＮａＣｌ（Ｃ）、ＫＣｌ（Ｄ）、Ｎａ2Ｓ2Ｏ5（Ｅ）、ＣａＣｌ2（Ｆ）。場合によっては、第２の集団またはショルダーがより低い温度で融解曲線に現れる。これら２つのピークは高Ｔｍ（主ピーク）および低Ｔｍ（ショルダーまたは第２の集団）といわれる。いずれも、各々のサンプルに対して表１に記載される。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの融解曲線の平均曲線である。
【図1-3】Ｅ及びＦは、様々な濃度および無機塩の化学種の存在下でのアダリムマブの融解温度。実施例１参照。Ａ：主ピークに対して決定された全ての融解温度の棒グラフ。各々の値は４つの決定された融解温度の平均であり、エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された標準偏差である。左から右へ：５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＭｇＣｌ2、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＮａ2Ｓ2Ｏ5、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのＣａＣｌ2、塩なし（ＷＦＩ）。Ｂ～Ｆ：試験した各々の塩化学種に対する融解曲線：ＭｇＣｌ2（Ｂ）、ＮａＣｌ（Ｃ）、ＫＣｌ（Ｄ）、Ｎａ2Ｓ2Ｏ5（Ｅ）、ＣａＣｌ2（Ｆ）。場合によっては、第２の集団またはショルダーがより低い温度で融解曲線に現れる。これら２つのピークは高Ｔｍ（主ピーク）および低Ｔｍ（ショルダーまたは第２の集団）といわれる。いずれも、各々のサンプルに対して表１に記載される。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの融解曲線の平均曲線である。
【図2-1】Ａ及びＢは、様々な濃度および糖類／ポリオール化学種の存在下でのアダリムマブの融解温度。実施例２参照。Ａ：主ピーク（Ｔｍ）に対して決定された全ての融解温度の棒グラフ。各々の値は４つの決定された融解温度の平均であり、エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された標準偏差である。左から右へ：５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのマンニトール、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのソルビトール、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのスクロース、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのトレハロース、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのグリセロール、糖類／ポリオールなし。Ｂ～Ｆ：試験した各々の糖類／ポリオール化学種に対する融解曲線：マンニトール（Ｂ）、ソルビトール（Ｃ）、スクロース（Ｄ）、トレハロース（Ｅ）、グリセロール（Ｆ）。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの融解曲線の平均曲線である。これらの場合、第２の集団またはショルダーはより低い温度で融解曲線に現れない。全ての融解温度は表２に記載される。
【図2-2】Ｃ及びＤは、様々な濃度および糖類／ポリオール化学種の存在下でのアダリムマブの融解温度。実施例２参照。Ａ：主ピーク（Ｔｍ）に対して決定された全ての融解温度の棒グラフ。各々の値は４つの決定された融解温度の平均であり、エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された標準偏差である。左から右へ：５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのマンニトール、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのソルビトール、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのスクロース、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのトレハロース、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのグリセロール、糖類／ポリオールなし。Ｂ～Ｆ：試験した各々の糖類／ポリオール化学種に対する融解曲線：マンニトール（Ｂ）、ソルビトール（Ｃ）、スクロース（Ｄ）、トレハロース（Ｅ）、グリセロール（Ｆ）。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの融解曲線の平均曲線である。これらの場合、第２の集団またはショルダーはより低い温度で融解曲線に現れない。全ての融解温度は表２に記載される。
【図2-3】Ｅ及びＦは、様々な濃度および糖類／ポリオール化学種の存在下でのアダリムマブの融解温度。実施例２参照。Ａ：主ピーク（Ｔｍ）に対して決定された全ての融解温度の棒グラフ。各々の値は４つの決定された融解温度の平均であり、エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された標準偏差である。左から右へ：５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのマンニトール、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのソルビトール、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのスクロース、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのトレハロース、５ｍＭ、２５ｍＭ、１２５ｍＭのグリセロール、糖類／ポリオールなし。Ｂ～Ｆ：試験した各々の糖類／ポリオール化学種に対する融解曲線：マンニトール（Ｂ）、ソルビトール（Ｃ）、スクロース（Ｄ）、トレハロース（Ｅ）、グリセロール（Ｆ）。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの融解曲線の平均曲線である。これらの場合、第２の集団またはショルダーはより低い温度で融解曲線に現れない。全ての融解温度は表２に記載される。
【図3-1】Ａ及びＢは、様々なｐＨ値における様々な緩衝剤の存在下でのアダリムマブの融解温度。実施例３参照。Ａ：試験したｐＨの関数としての融解温度のグラフ：クエン酸（Ｂ）、酢酸（Ｃ）、リン酸－クエン酸（Ｄ）、トリス（Ｅ）、コハク酸（Ｆ）。融解温度は各々のサンプルの主ピークに対して決定された４つの値の平均である。エラーバーはｘ軸上で±０．１ｐＨ単位に固定され、ｙ軸上ではマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された４つの値の標準偏差である。近似曲線は４因子多項式であり、視覚的ガイドを意図したものに過ぎない。Ｂ～Ｆ：試験した各々のｐＨおよび緩衝剤条件の融解曲線である。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの曲線の平均である。場合によっては（より低いｐＨ値で）、第２の集団またはショルダーがより低い温度で融解曲線に現れる。各々の曲線についてたった１つの融解温度が決定された。これは、主ピーク（Ｔｍ）を決定することが、実験のこの部分の目的であったアダリムマブの熱安定性の明白なｐＨ依存性を明らかにするのに充分であったからである。決定されたＴｍ値を表３に記載する。
【図3-2】Ｃ及びＤは、様々なｐＨ値における様々な緩衝剤の存在下でのアダリムマブの融解温度。実施例３参照。Ａ：試験したｐＨの関数としての融解温度のグラフ：クエン酸（Ｂ）、酢酸（Ｃ）、リン酸－クエン酸（Ｄ）、トリス（Ｅ）、コハク酸（Ｆ）。融解温度は各々のサンプルの主ピークに対して決定された４つの値の平均である。エラーバーはｘ軸上で±０．１ｐＨ単位に固定され、ｙ軸上ではマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された４つの値の標準偏差である。近似曲線は４因子多項式であり、視覚的ガイドを意図したものに過ぎない。Ｂ～Ｆ：試験した各々のｐＨおよび緩衝剤条件の融解曲線である。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの曲線の平均である。場合によっては（より低いｐＨ値で）、第２の集団またはショルダーがより低い温度で融解曲線に現れる。各々の曲線についてたった１つの融解温度が決定された。これは、主ピーク（Ｔｍ）を決定することが、実験のこの部分の目的であったアダリムマブの熱安定性の明白なｐＨ依存性を明らかにするのに充分であったからである。決定されたＴｍ値を表３に記載する。
【図3-3】Ｅ及びＦは、様々なｐＨ値における様々な緩衝剤の存在下でのアダリムマブの融解温度。実施例３参照。Ａ：試験したｐＨの関数としての融解温度のグラフ：クエン酸（Ｂ）、酢酸（Ｃ）、リン酸－クエン酸（Ｄ）、トリス（Ｅ）、コハク酸（Ｆ）。融解温度は各々のサンプルの主ピークに対して決定された４つの値の平均である。エラーバーはｘ軸上で±０．１ｐＨ単位に固定され、ｙ軸上ではマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された４つの値の標準偏差である。近似曲線は４因子多項式であり、視覚的ガイドを意図したものに過ぎない。Ｂ～Ｆ：試験した各々のｐＨおよび緩衝剤条件の融解曲線である。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの曲線の平均である。場合によっては（より低いｐＨ値で）、第２の集団またはショルダーがより低い温度で融解曲線に現れる。各々の曲線についてたった１つの融解温度が決定された。これは、主ピーク（Ｔｍ）を決定することが、実験のこの部分の目的であったアダリムマブの熱安定性の明白なｐＨ依存性を明らかにするのに充分であったからである。決定されたＴｍ値を表３に記載する。
【図4】可変のｐＨおよび緩衝剤条件下３００ｒｐｍで４日振盪後の濁度（３２０ｎｍでの吸光度）測定。実施例４参照。各々の値は３つの測定の平均である。エラーバーはｘ軸上がマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された標準偏差、およびｘ軸上が０．１ｐＨ単位である。緩衝剤なしの条件（ＷＦＩ）はここにはプロットされていないがこの場合０．４のＯ．Ｄ．を生じた。近似曲線は直線状であり、視覚的ガイドを意図したものに過ぎない。
【図5-1】Ａは、５．２の固定されたｐＨにおける４種の緩衝剤の存在下でのアダリムマブ融解温度の緩衝剤濃度依存性。実施例５参照。Ａ：可変の濃度の４種の緩衝剤中のアダリムマブの融解温度の棒グラフ。各々の値は４つの融点決定の平均である。先の緩衝剤実験（図４）に関して、主ピークのみが決定された。エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された標準偏差である。Ｂ～Ｅ：試験した各々のｐＨおよび緩衝剤条件の融解曲線：酢酸（Ｂ）、コハク酸（Ｃ）、クエン酸（Ｄ）、リン酸－クエン酸（Ｅ）。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの曲線の平均である。決定されたＴｍを表４に記載する。
【図5-2】Ｂ及びＣは、５．２の固定されたｐＨにおける４種の緩衝剤の存在下でのアダリムマブ融解温度の緩衝剤濃度依存性。実施例５参照。Ａ：可変の濃度の４種の緩衝剤中のアダリムマブの融解温度の棒グラフ。各々の値は４つの融点決定の平均である。先の緩衝剤実験（図４）に関して、主ピークのみが決定された。エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された標準偏差である。Ｂ～Ｅ：試験した各々のｐＨおよび緩衝剤条件の融解曲線：酢酸（Ｂ）、コハク酸（Ｃ）、クエン酸（Ｄ）、リン酸－クエン酸（Ｅ）。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの曲線の平均である。決定されたＴｍを表４に記載する。
【図5-3】Ｄ及びＥは、５．２の固定されたｐＨにおける４種の緩衝剤の存在下でのアダリムマブ融解温度の緩衝剤濃度依存性。実施例５参照。Ａ：可変の濃度の４種の緩衝剤中のアダリムマブの融解温度の棒グラフ。各々の値は４つの融点決定の平均である。先の緩衝剤実験（図４）に関して、主ピークのみが決定された。エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓ関数により決定された標準偏差である。Ｂ～Ｅ：試験した各々のｐＨおよび緩衝剤条件の融解曲線：酢酸（Ｂ）、コハク酸（Ｃ）、クエン酸（Ｄ）、リン酸－クエン酸（Ｅ）。各々の曲線は各々のサンプルに対して集めた４つの曲線の平均である。決定されたＴｍを表４に記載する。
【図6】アダリムマブの撹拌安定性に対するポリソルベートの効果。実施例６参照。棒グラフは０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０およびポリソルベート８０の存在下または非存在下での３００ｒｐｍの振盪４日後の濁度（３２０ｎｍ吸光度）測定を示す。ポリソルベート条件は３回実行し測定した。エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓにより決定された標準偏差を示す。
【図7】Ａ及びＢは、アダリムマブの安定性に対するＬ－アルギニンの効果。実施例７参照。Ａ：５０または２００ｍＭのＬ－アルギニンの存在下でのアダリムマブの融解曲線。各々の融解曲線は４つの曲線の平均である。Ｂ：４日振盪実験後の濁度（３２０ｎｍ吸光度）測定を示す。２００ｍＭのＬ－アルギニン条件は３回実行し測定した。エラーバーはマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓにより決定された標準偏差を示す。
【図8】Ａ及びＢは、ＨＣｌ（オレンジ色の線－約ｐＨ７～約ｐＨ４、負のμｌ値として示す）およびＮａＯＨ（青色の線－約ｐＨ７～約ｐＨ９）を含む水中のアダリムマブの滴定。実施例８参照。Ａ：１０８ｍｇ／ｍｌのアダリムマブで行った滴定。Ｂ：１ｍｇ／ｍｌのアダリムマブで行った滴定。各々の出発容積は５ｍｌであり、示されている０．２または０．００２Ｍ濃度のＨＣｌおよびＮａＯＨを一度に５０μｌ加えた。
【図9-1】Ａ及びＢは、ＳＥＣ－ＨＰＬＣ凝集体決定。Ａ：０、１、３、６および１２カ月に測定された２℃～８℃に対する相対的なモノマーピーク。Ｂ：０、１、３、および６カ月に測定された２５℃に対する相対的なモノマーピーク。Ｃ：０、１、および３カ月に測定された４０℃に対する相対的なモノマーピーク。実施例９参照。
【図9-2】Ｃは、ＳＥＣ－ＨＰＬＣ凝集体決定。Ａ：０、１、３、６および１２カ月に測定された２℃～８℃に対する相対的なモノマーピーク。Ｂ：０、１、３、および６カ月に測定された２５℃に対する相対的なモノマーピーク。Ｃ：０、１、および３カ月に測定された４０℃に対する相対的なモノマーピーク。実施例９参照。
【図10-1】Ａ及びＢは、ＭＦＩ肉眼では見ることができない粒子決定。Ａ：０、３、６、および１２カ月で測定された２℃～８℃の全粒子濃度（粒子／ｍｌ）。Ｂ：０、３、および６カ月で測定された２５℃の全粒子濃度（粒子／ｍｌ）。Ｃ：０および３カ月で測定された４０℃の全粒子濃度（粒子／ｍｌ）。実施例９参照。
【図10-2】Ｃは、ＭＦＩ肉眼では見ることができない粒子決定。Ａ：０、３、６、および１２カ月で測定された２℃～８℃の全粒子濃度（粒子／ｍｌ）。Ｂ：０、３、および６カ月で測定された２５℃の全粒子濃度（粒子／ｍｌ）。Ｃ：０および３カ月で測定された４０℃の全粒子濃度（粒子／ｍｌ）。実施例９参照。
【図11-1】Ａ及びＢは、ＣＥＸ－ＨＰＬＣによる荷電化学種決定。Ａ：０、１、３、６および１２カ月で測定された２℃～８℃の相対的主ピーク面積。Ｂ：０、１、３および６カ月で測定された２５℃の相対的主ピーク面積。Ｃ：０、１、３、６および１２カ月で測定された２℃～８℃の相対的酸性化学種ピーク。Ｄ：０、１、３および６カ月で測定された２５℃の相対的酸性化学種ピーク面積。Ｅ：０、１、３、６および１２カ月で測定された２℃～８℃の相対的塩基性化学種ピーク。Ｆ：０、１、３および６カ月で測定された２５℃の相対的塩基性化学種ピーク面積。実施例９参照。
【図11-2】Ｃ及びＤは、ＣＥＸ－ＨＰＬＣによる荷電化学種決定。Ａ：０、１、３、６および１２カ月で測定された２℃～８℃の相対的主ピーク面積。Ｂ：０、１、３および６カ月で測定された２５℃の相対的主ピーク面積。Ｃ：０、１、３、６および１２カ月で測定された２℃～８℃の相対的酸性化学種ピーク。Ｄ：０、１、３および６カ月で測定された２５℃の相対的酸性化学種ピーク面積。Ｅ：０、１、３、６および１２カ月で測定された２℃～８℃の相対的塩基性化学種ピーク。Ｆ：０、１、３および６カ月で測定された２５℃の相対的塩基性化学種ピーク面積。実施例９参照。
【図11-3】Ｅ及びＦは、ＣＥＸ－ＨＰＬＣによる荷電化学種決定。Ａ：０、１、３、６および１２カ月で測定された２℃～８℃の相対的主ピーク面積。Ｂ：０、１、３および６カ月で測定された２５℃の相対的主ピーク面積。Ｃ：０、１、３、６および１２カ月で測定された２℃～８℃の相対的酸性化学種ピーク。Ｄ：０、１、３および６カ月で測定された２５℃の相対的酸性化学種ピーク面積。Ｅ：０、１、３、６および１２カ月で測定された２℃～８℃の相対的塩基性化学種ピーク。Ｆ：０、１、３および６カ月で測定された２５℃の相対的塩基性化学種ピーク面積。実施例９参照。
【図12-1】Ａ及びＢは、ＣＥ－ＳＤＳ（非還元）およびＣＥ－ＳＤＳ（還元）によるサイズ変異体決定。Ａ：０、１、３、６、および１２カ月で測定された非還元ＣＥ－ＳＤＳによる２℃～８℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｂ：０、１、３、および６カ月で測定された非還元ＣＥ－ＳＤＳによる２５℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｃ：０、１、および３カ月で測定された非還元ＣＥ－ＳＤＳによる４０℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｄ：０、１、３、６、および１２カ月で測定された還元ＣＥ－ＳＤＳによる２℃～８℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｅ：０、１、３、および６カ月で測定された還元ＣＥ－ＳＤＳによる２５℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｆ：０、１、および３カ月で測定された還元ＣＥ－ＳＤＳによる４０℃の相対的ＩｇＧピーク面積。
【図12-2】Ｃ及びＤは、ＣＥ－ＳＤＳ（非還元）およびＣＥ－ＳＤＳ（還元）によるサイズ変異体決定。Ａ：０、１、３、６、および１２カ月で測定された非還元ＣＥ－ＳＤＳによる２℃～８℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｂ：０、１、３、および６カ月で測定された非還元ＣＥ－ＳＤＳによる２５℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｃ：０、１、および３カ月で測定された非還元ＣＥ－ＳＤＳによる４０℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｄ：０、１、３、６、および１２カ月で測定された還元ＣＥ－ＳＤＳによる２℃～８℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｅ：０、１、３、および６カ月で測定された還元ＣＥ－ＳＤＳによる２５℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｆ：０、１、および３カ月で測定された還元ＣＥ－ＳＤＳによる４０℃の相対的ＩｇＧピーク面積。
【図12-3】Ｅ及びＦは、ＣＥ－ＳＤＳ（非還元）およびＣＥ－ＳＤＳ（還元）によるサイズ変異体決定。Ａ：０、１、３、６、および１２カ月で測定された非還元ＣＥ－ＳＤＳによる２℃～８℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｂ：０、１、３、および６カ月で測定された非還元ＣＥ－ＳＤＳによる２５℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｃ：０、１、および３カ月で測定された非還元ＣＥ－ＳＤＳによる４０℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｄ：０、１、３、６、および１２カ月で測定された還元ＣＥ－ＳＤＳによる２℃～８℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｅ：０、１、３、および６カ月で測定された還元ＣＥ－ＳＤＳによる２５℃の相対的ＩｇＧピーク面積。Ｆ：０、１、および３カ月で測定された還元ＣＥ－ＳＤＳによる４０℃の相対的ＩｇＧピーク面積。
【図13】０、６カ月（２℃～８℃）および６カ月（２５℃）の時点で測定された製剤のオスモル濃度（ｍＯｓｍ／ｋｇ）。図中３つのバーの各々の組で、時点は左から右へ０、６カ月（２℃～８℃）および６カ月（２５℃）である。実施例９参照。
【図14】０、１、３、６および１２カ月で測定された２℃～８℃のＴＮＦ－アルファＳＰＲによる相対的平均ＫＤ。実施例９参照。
【図15】０、４、および１２週で測定された２℃～８℃のＦｃγＲＩＩＩａ ＳＰＲによる相対的平均ＫＤ。実施例９参照。
【図16】https://www.drugbank.ca/drugs/DB00051に記載されている市販品Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）に含まれるアダリムマブの軽鎖および重鎖のアミノ酸配列。
【発明を実施するための形態】
【0032】
好ましい実施形態の詳細な説明
抗体のプレフォーミュレーション研究は、ストレス、例えば熱ストレス、撹拌ストレスに対して抗体製剤を安定化するかまたは、代わりに不安定化する所与の成分の能力に関する情報を提供し得る。しかしながら、かかるプレフォーミュレーション研究は所与の成分の、安定化または不安定化をもたらす影響を完全に決定するわけではないし、個別のプレフォーミュレーション研究が、成分の組合せの、安定化または不安定化をもたらす影響を捉えるわけでもない。矛盾する情報がプレフォーミュレーション研究で生じることもある。
抗体のプレフォーミュレーション研究は、ストレス、例えば熱ストレス、撹拌ストレスに対して抗体製剤を安定化するかまたは、代わりに不安定化する所与の成分の能力に関する情報を提供し得る。しかしながら、かかるプレフォーミュレーション研究は所与の成分の、安定化または不安定化をもたらす影響を完全に決定するわけではないし、個別のプレフォーミュレーション研究が、成分の組合せの、安定化または不安定化をもたらす影響を捉えるわけでもない。矛盾する情報がプレフォーミュレーション研究で生じることもある。
【0033】
熱安定性に焦点を当てたプレフォーミュレーション研究は、無機塩および緩衝剤のようなイオン性化学種がアダリムマブの安定性を不安定化する可能性を示唆した。実施例１、４および５ならびに図１、３、および５参照。しかし、撹拌ストレス（振盪）に焦点を当てたプレフォーミュレーション研究は、Ｌ－アルギニンが安定化をもたらす効果を有することを示した。実施例７および図７参照。
【0034】
プレフォーミュレーション研究は、トレハロースおよびスクロースのような糖類に対するアダリムマブ製剤の適合性を示唆し、トレハロース製剤による増大した安定性の可能性を示した。実施例２および図２参照。
【0035】
熱融解に焦点を当てたプレフォーミュレーション研究は、アダリムマブがｐＨに対して感受性であり、ｐＨが増大すると、特に約ｐＨ６以上で安定性が増大する傾向があることを示唆した。実施例３および図３参照。
撹拌ストレス（振盪）に焦点を当てたプレフォーミュレーション研究は低いｐＨの、安定化をもたらす可能性を示した。実施例４、図４参照。この観察はより高いｐＨが安定化をもたらした実施例３、図３で観察されたのと反対であった。
撹拌ストレス（振盪）に焦点を当てたプレフォーミュレーション研究は低いｐＨの、安定化をもたらす可能性を示した。実施例４、図４参照。この観察はより高いｐＨが安定化をもたらした実施例３、図３で観察されたのと反対であった。
【0036】
撹拌ストレス（振盪）に焦点を当てたプレフォーミュレーション研究はポリソルベート８０およびポリソルベート２０が安定化をもたらす可能性を示し、ポリソルベート２０を含む製剤の安定性が高められる傾向を示した。実施例６および図６参照。
一般的な傾向はプレフォーミュレーション試験で観察することができるが、かかる研究は矛盾する傾向を提供することがある。したがって、プレフォーミュレーション研究単独では、一般に、長期貯蔵下の製剤（例えば約２℃～約８℃で約３カ月、約６カ月、約１２カ月、約２４カ月、またはそれ以上貯蔵した製剤）の安定性に関する確固たる結論が可能にならない。同様に、例えば単一の種類の賦形剤の、安定化／不安定化をもたらす傾向を調べたプレフォーミュレーション研究では、一般に、多数の種類の賦形剤を含む長期貯蔵下の製剤の安定性に関する確固たる結論が可能にならない。
一般的な傾向はプレフォーミュレーション試験で観察することができるが、かかる研究は矛盾する傾向を提供することがある。したがって、プレフォーミュレーション研究単独では、一般に、長期貯蔵下の製剤（例えば約２℃～約８℃で約３カ月、約６カ月、約１２カ月、約２４カ月、またはそれ以上貯蔵した製剤）の安定性に関する確固たる結論が可能にならない。同様に、例えば単一の種類の賦形剤の、安定化／不安定化をもたらす傾向を調べたプレフォーミュレーション研究では、一般に、多数の種類の賦形剤を含む長期貯蔵下の製剤の安定性に関する確固たる結論が可能にならない。
【0037】
最終的に製剤の安定性はより長い継続時間の研究後の研究された製剤の分析、例えば少なくとも３カ月、６カ月、またはそれ以上後の分析で明らかとなろう。
【0038】
驚くべきことに、アダリムマブが賦形剤の非存在下で高い安定性を示すことが見出された。ほとんどの賦形剤の添加は一般に不安定化をもたらし、安定性に対して正の影響がほとんどないか、または不安定化をもたらすかのいずれかであることが見出された。いくつかの賦形剤、例えばトレハロース、スクロースは十分に容認され、かかる賦形剤の使用が許容されることが発見された。驚くべきことに、トレハロースまたはスクロース中に高濃度（例えば少なくとも約１００ｍｇ／ｍｌ）のアダリムマブを含むアダリムマブの水性製剤は、製剤が約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０を含み、ｐＨ約５～約６の緩衝剤を少し含むか全く含まず、他のイオン性賦形剤が製剤に加えられていない（具体的にはイオン性等張化剤もアミノ酸安定剤もない）とき安定であることが見出された。
【0039】
１つの実施形態において、
（ａ）約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨは本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤を含む。さらなる関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭの酢酸緩衝剤および約２５０ｍＭのトレハロースを含む。さらなる関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭの酢酸緩衝剤および約２５０ｍＭのスクロースを含む。代替の関連する実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤を含む。さらなる関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤および約２５０ｍＭのトレハロースを含む。さらなる関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤および約２５０ｍＭのスクロースを含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、摂動の所定のレベルは約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、摂動の所定のレベルは約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、摂動の所定のレベルは、約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、摂動の所定のレベルは約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、摂動の所定のレベルは約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
（ａ）約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨは本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤を含む。さらなる関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭの酢酸緩衝剤および約２５０ｍＭのトレハロースを含む。さらなる関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭの酢酸緩衝剤および約２５０ｍＭのスクロースを含む。代替の関連する実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤を含む。さらなる関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤および約２５０ｍＭのトレハロースを含む。さらなる関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤および約２５０ｍＭのスクロースを含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、摂動の所定のレベルは約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、摂動の所定のレベルは約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、摂動の所定のレベルは、約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、摂動の所定のレベルは約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、摂動の所定のレベルは約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
【0040】
１つの実施形態において、
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨが本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５０ｍＭのトレハロースおよび約２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む。代替の関連する実施形態において、安定な水性製剤は約２５０ｍＭのスクロースおよび約２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨが本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５０ｍＭのトレハロースおよび約２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む。代替の関連する実施形態において、安定な水性製剤は約２５０ｍＭのスクロースおよび約２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
【0041】
１つの実施形態において、
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨが本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５０ｍＭのトレハロースおよび約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤を含む。代替の関連する実施形態において、安定な水性製剤は約２５０ｍＭのスクロースおよび約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤を含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨが本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５０ｍＭのトレハロースおよび約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤を含む。代替の関連する実施形態において、安定な水性製剤は約２５０ｍＭのスクロースおよび約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤を含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
【0042】
１つの実施形態において、
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨが本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２℃～約８℃で少なくとも６カ月の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５℃で少なくとも約１４日の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は２５０ｍＭのトレハロースおよび２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨが本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２℃～約８℃で少なくとも６カ月の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５℃で少なくとも約１４日の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は２５０ｍＭのトレハロースおよび２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
【0043】
１つの実施形態において、
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨが本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２℃～約８℃で少なくとも６カ月の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５℃で少なくとも約１４日の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は２５０ｍＭのスクロースおよび２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨが本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２℃～約８℃で少なくとも６カ月の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５℃で少なくとも約１４日の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は２５０ｍＭのスクロースおよび２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
【0044】
１つの実施形態において、
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨは本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２℃～約８℃で少なくとも６カ月の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５℃で少なくとも約１４日の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は２５０ｍＭのトレハロースを含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨは本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２℃～約８℃で少なくとも６カ月の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５℃で少なくとも約１４日の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は２５０ｍＭのトレハロースを含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
【0045】
１つの実施形態において、
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨが本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２℃～約８℃で少なくとも６カ月の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５℃で少なくとも約１４日の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は２５０ｍＭのスクロースを含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む安定な水性製剤が提供され、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である。約５．５のｐＨが本明細書に記載されている水性製剤に特に適している。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２℃～約８℃で少なくとも６カ月の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は約２５℃で少なくとも約１４日の貯蔵条件下で安定である。関連の実施形態において、安定な水性製剤は２５０ｍＭのスクロースを含む。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２℃～約８℃で少なくとも約３カ月貯蔵した後に決定され得る。関連の実施形態において、水性製剤の安定性は製剤を約２５℃で少なくとも約１カ月貯蔵した後に決定され得る。一定の実施形態において、安定性はＳＥＣ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積である。一定の実施形態において、安定性はＣＥＸ－ＨＰＬＣによる製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約２５％以下の相対的酸性化学種ピーク面積である。一定の実施形態において安定性は光遮蔽粒子計数法による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子が検出されることおよび／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出されることである。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（非還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）である。一定の実施形態において、安定性はＣＥ－ＳＤＳ（還元）による製剤の分析および所定のレベルの摂動によって決定される。一定の実施形態において、所定のレベルの摂動は約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピークである。
【0046】
製剤のオスモル濃度
本明細書に記載されている製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり得る。一定の実施形態において、本明細書に記載されている製剤のオスモル濃度は約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ～４００ｍＯｓｍ／ｋｇである。
オスモル濃度を決定する方法は必ずしも限定されることがなく、当技術分野で公知の任意の方法を含むことができる。オスモル濃度を測定する代表的な方法は凝固点降下である。
本明細書に記載されている製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり得る。一定の実施形態において、本明細書に記載されている製剤のオスモル濃度は約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ～４００ｍＯｓｍ／ｋｇである。
オスモル濃度を決定する方法は必ずしも限定されることがなく、当技術分野で公知の任意の方法を含むことができる。オスモル濃度を測定する代表的な方法は凝固点降下である。
【0047】
製剤のｐＨ
本明細書に記載されている水性製剤のｐＨは約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０であり得る。本明細書に記載されている水性製剤に特に適したｐＨは約５．２～約５．８のｐＨである。一定の実施形態において、水性製剤のｐＨは約ｐＨ５．５である。
安定な水性製剤を調製する方法
アダリムマブ製剤は水性の抗体製剤を製造する公知の方法により調製することができる。
本明細書に記載されている水性製剤のｐＨは約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０であり得る。本明細書に記載されている水性製剤に特に適したｐＨは約５．２～約５．８のｐＨである。一定の実施形態において、水性製剤のｐＨは約ｐＨ５．５である。
安定な水性製剤を調製する方法
アダリムマブ製剤は水性の抗体製剤を製造する公知の方法により調製することができる。
【0048】
例えば、安定性研究のために小規模で製剤を調製する一般的な方法は次の通りである：アダリムマブを精製し、水中に約１３０ｍｇ／ｍｌの濃度で限外ろ過／透析ろ過する（ＵＦ／ＤＦ）。ストック溶液、例えば２Ｍ酢酸、１．３７５Ｍトレハロース、１．７５スクロース、２０％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０を調製する。加えて、ストック１Ｍ（または代わりに）０．５ＭのＮａＯＨおよび１Ｍ（または代わりに０．５Ｍ）ＨＣｌ溶液をｐＨ調節用に調製する。次いで小規模製剤の各々のストック成分を秤量してビーカーに入れ、成分を穏やかに撹拌しながら最終の希釈前に必要に応じてｐＨ調節して意図した容積にする。
本明細書に記載されている水性製剤を調製する一般的な方法は、
（１）抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の第１の溶液を、
（ａ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｂ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む第２の溶液に交換するステップであって、
ここで、第２の溶液はイオン性等張化剤を本質的に含まず；第２の溶液はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；第２の製剤は約５～約６のｐＨを有し；交換後の抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の濃度は約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌである、ステップと；
（２）ステップ（１）の溶液を非イオン性界面活性剤で希釈して約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤の濃度を得る
ステップと
を含む。関連の方法において、ステップ（２）の前の抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の濃度は約１００ｍｇ／ｍｌである。
本明細書に記載されている水性製剤を調製する一般的な方法は、
（１）抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の第１の溶液を、
（ａ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｂ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む第２の溶液に交換するステップであって、
ここで、第２の溶液はイオン性等張化剤を本質的に含まず；第２の溶液はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；第２の製剤は約５～約６のｐＨを有し；交換後の抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の濃度は約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌである、ステップと；
（２）ステップ（１）の溶液を非イオン性界面活性剤で希釈して約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤の濃度を得る
ステップと
を含む。関連の方法において、ステップ（２）の前の抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の濃度は約１００ｍｇ／ｍｌである。
【0049】
本明細書に記載されている水性製剤を調製する一般的な方法は、
（１）抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の第１の溶液を、
（ａ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｂ）約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤
を含む第２の溶液に交換するステップであって、
ここで、交換後の抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の濃度は約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌであり、第２の溶液はイオン性賦形剤を本質的に含まない、ステップと、
（２）ステップ（１）の溶液を非イオン性界面活性剤で希釈して約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤の濃度を得るステップと
を含む。関連の方法において、ステップ（２）の前の抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の濃度は約１００ｍｇ／ｍｌである。
（１）抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の第１の溶液を、
（ａ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｂ）約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤
を含む第２の溶液に交換するステップであって、
ここで、交換後の抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の濃度は約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌであり、第２の溶液はイオン性賦形剤を本質的に含まない、ステップと、
（２）ステップ（１）の溶液を非イオン性界面活性剤で希釈して約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤の濃度を得るステップと
を含む。関連の方法において、ステップ（２）の前の抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の濃度は約１００ｍｇ／ｍｌである。
【0050】
安定性を決定する方法
貯蔵された（または貯蔵中の）製剤は貯蔵前またはストレス条件への曝露前適切な容器内に含まれることが理解される。適切な容器には、注射による水性製剤の投与に適した容器、例えばガラスバイアル、予め充填されたシリンジ、およびプレフィルドインジェクションペンがある。代替の実施形態において、水性製剤はバルク貯蔵に適した容器、例えば使い捨てのバッグ、使い捨てのプラスチックバッグなどを始めとする、最終の製品（例えばプレフィルドインジェクションペン）を生成し得る容器内に貯蔵され得る。容器、例えば使い捨てのバッグ、などは薬剤規格を満たし、またはその他薬学的に許容されるもしくはバイオ医薬品グレードであることが分かる。
貯蔵された（または貯蔵中の）製剤は貯蔵前またはストレス条件への曝露前適切な容器内に含まれることが理解される。適切な容器には、注射による水性製剤の投与に適した容器、例えばガラスバイアル、予め充填されたシリンジ、およびプレフィルドインジェクションペンがある。代替の実施形態において、水性製剤はバルク貯蔵に適した容器、例えば使い捨てのバッグ、使い捨てのプラスチックバッグなどを始めとする、最終の製品（例えばプレフィルドインジェクションペン）を生成し得る容器内に貯蔵され得る。容器、例えば使い捨てのバッグ、などは薬剤規格を満たし、またはその他薬学的に許容されるもしくはバイオ医薬品グレードであることが分かる。
【0051】
製剤中のアダリムマブは劣化し得、例えば限定されないが脱アミド、酸化、変性、断片化、凝集、および／または脱グリコシル化を起こし得る。製剤の安定性は当技術分野で公知の１つ以上の技術により評価し得る。例えば、Liu et al., BioDrugs (2016) 30:321-338 Magnenat et al., MABS (2017) 9(1):127-139参照。これらの各々はアダリムマブの劣化を評価するための公知の技術を記載している。実施例９に記載されている方法も参照。
１つの実施形態において、製剤は１つ以上の以下の技術、凝集体分析のためのサイズ排除高性能液体クロマトグラフィー（ＳＥ－ＨＰＬＣ）；劣化したタンパク質サイズ変異体を分析するための還元または非還元条件下のキャピラリー電気泳動－ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ－ＳＤＳ）；光遮蔽；目に見える粒子を評価するための目視検査；および／または荷電化学種の変化を評価するためのカチオン交換－高性能液体クロマトグラフィー（ＣＥＸ－ＨＰＬＣ）により分析される。かかる分析は当技術分野で公知である。例えばLiu et al., BioDrugs (2016) 30:321-338 Magnenat et al., MABS (2017) 9(1):127-139参照。
１つの実施形態において、製剤は１つ以上の以下の技術、凝集体分析のためのサイズ排除高性能液体クロマトグラフィー（ＳＥ－ＨＰＬＣ）；劣化したタンパク質サイズ変異体を分析するための還元または非還元条件下のキャピラリー電気泳動－ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ－ＳＤＳ）；光遮蔽；目に見える粒子を評価するための目視検査；および／または荷電化学種の変化を評価するためのカチオン交換－高性能液体クロマトグラフィー（ＣＥＸ－ＨＰＬＣ）により分析される。かかる分析は当技術分野で公知である。例えばLiu et al., BioDrugs (2016) 30:321-338 Magnenat et al., MABS (2017) 9(1):127-139参照。
【0052】
本明細書中で引用した全ての参考文献、例えば特許、特許出願、刊行物、およびデータベースは、具体的に組み込まれるか否か前もって述べられていてもいなくても、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0053】
本発明は以下の実施形態に関する：
１．（ａ）約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌの抗ＴＮＦα抗体；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２．（ａ）約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４００ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
３．約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブおよび／または約２５０ｍＭのトレハロースを含む、実施形態１または実施形態２の製剤。
４．約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブおよび／または約２５０ｍＭのスクロースを含む、実施形態１または実施形態２の製剤。
５．約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０を含む、実施形態１～４のいずれか１つの製剤。
６．約２０ｍＭの酢酸緩衝剤または約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤を含む、実施形態１～５のいずれか１つの製剤。
７．約２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む、実施形態１～５のいずれか１つの製剤。
８．約１０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む、実施形態１～５のいずれか１つの製剤。
９．イオン性賦形剤を本質的に含まない、実施形態１～５のいずれか１つの製剤。
１０．約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、約２５０ｍＭのトレハロース、および約０．１％のポリソルベート２０を含む、実施形態１または実施形態２の製剤。
１１．約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、約２５０ｍＭのスクロース、および約０．１％のポリソルベート２０を含む、実施形態１または実施形態２の製剤。
１２．以下の基準の１つ以上を満たす、実施形態１～１１のいずれか１つの製剤：
（ａ）約２℃～約８℃で約３カ月である長期貯蔵下で安定である；
（ｂ）約２℃～約８℃で約６カ月である長期貯蔵下で安定である；
（ｃ）約２℃～約８℃で約１２カ月である長期貯蔵下で安定である；および／または
（ｄ）約１４日である室温貯蔵下で安定である。
１３．安定性が以下の基準の１つ以上により決定される、実施形態１～１２のいずれか１つの製剤：
（ａ）約２℃～約８℃で少なくとも約１２カ月貯蔵したときの、凝集のほぼ同等以下の増大；
（ｂ）約２５℃で少なくとも１カ月貯蔵したときの、凝集のほぼ同等以下の増大；
（ｃ）約２℃～約８℃で少なくとも１２カ月貯蔵したときの、相対パーセント酸化学種のほぼ同等以下の増加；および／または
（ｄ）約２５℃で少なくとも１カ月貯蔵したときの、相対パーセント酸化学種のほぼ同等以下の増加；
ここで、製剤はコントロールに対して比較されており；前記コントロールはアダリムマブを製剤とほぼ同一濃度で含む。
１４．製剤が約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブを含み、コントロールが約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、２３０ｍＭのマンニトール、０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０からなり、コントロールが約５．２のｐＨを有する、実施形態１３の製剤。
１５．凝集がＳＥＣ－ＨＰＬＣにより決定され、および／または相対的酸化学種がＣＥＸ－ＨＰＬＣにより決定される、実施形態１３または実施形態１４の製剤。
１６．安定性が以下の基準の１つ以上により決定される、実施形態１～１５のいずれか１つの製剤：
（ａ）アダリムマブに対するモノマーピークの相対割合が製剤を約２℃～約８℃で少なくとも６カ月貯蔵した後約９８％以上であり、ここで前記モノマーピークの相対割合はＳＥＣ－ＨＰＬＣにより決定される；
（ｂ）アダリムマブに対するモノマーピークの相対割合が製剤を約２５℃で少なくとも１カ月貯蔵した後約９８％以上であり、ここで前記モノマーピークの相対割合はＳＥＣ－ＨＰＬＣにより決定される；
（ｃ）アダリムマブに対する相対的酸性化学種ピークが製剤を約２℃～約８℃で少なくとも１２カ月貯蔵した後約２５％以下であり；ここで前記相対的酸性化学種ピークはＣＥＸ－ＨＰＬＣにより決定される；および／または
（ｄ）アダリムマブに対する相対的酸性化学種ピークが製剤を約２５℃で少なくとも３カ月貯蔵した後約２５％以下であり；ここで前記相対的酸性化学種ピークはＣＥＸ－ＨＰＬＣにより決定される。
１７．（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
１８．２５０ｍＭのトレハロースおよび２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む、実施形態１７の製剤。
１９．本質的に
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
からなる水性製剤であって、
ここで、製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２０．トレハロース濃度が約２５０ｍＭであり、酢酸緩衝剤濃度が約２０ｍＭである、実施形態１９の製剤。
２１．（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２２．約２５０ｍＭのスクロースおよび約２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む、実施形態２１の製剤。
２３．本質的に
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
からなる水性製剤であって、
ここで、製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２４．スクロース濃度が約２５０ｍＭであり、酢酸緩衝剤濃度が約２０ｍＭである、実施形態２３の製剤。
２５．（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２６．２５０ｍＭのトレハロースを含む、実施形態２５の製剤。
２７．本質的に
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
からなる水性製剤であって、
ここで、製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２８．トレハロース濃度が約２５０ｍＭである、実施形態２７の製剤。
２９．（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
３０．約２５０ｍＭのスクロースを含む、実施形態２９の製剤。
３１．本質的に
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
からなる水性製剤であって、
ここで、製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
３２．スクロース濃度が約２５０ｍＭである、実施形態３１の製剤。
３３．次のストレス条件：
（ａ）約２５℃約３カ月；
（ｂ）約２℃～約８℃約３カ月；
（ｃ）約２℃～約８℃約６カ月；および／または
（ｄ）約４０℃約３カ月
の１つ以上への曝露後安定であると決定された、実施形態１～１１および１７～３２のいずれか１つの製剤。
３４．安定性が摂動の所定のレベルを参照することにより決定される、実施形態３３の製剤。
３５．摂動の所定のレベルが
（ａ）ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより評価して約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積；
（ｂ）ＣＥＸ－ＨＰＬＣにより評価して約２５％以下のアダリムマブの相対的酸性化学種ピーク面積；
（ｃ）ＣＥ－ＳＤＳ（非還元）により評価して約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）；
（ｄ）ＣＤ－ＳＤＳ（還元）により評価して約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピーク；および／または
（ｅ）光遮蔽粒子計数法により評価して約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子および／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出される
の１つ以上である、実施形態３４の製剤。
３６．安定性がコントロールを参照することにより決定され、前記コントロールが約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、２３０ｍＭのマンニトール、０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０を含み、約５．２のｐＨを有し；前記コントロールが製剤と同じ１つ以上のストレス条件に曝露される、実施形態３３の製剤。
３７．安定性がコントロールを参照して決定され、前記コントロールが市販されているＨｕｍｉｒａ（登録商標）であり；前記コントロールが製剤と同じ１つ以上のストレス条件に曝露される、実施形態３３の製剤。
３８．室温貯蔵安定性を示す、実施形態１～３７のいずれか１つの製剤。
３９．長期貯蔵安定性を示す、実施形態１～３７のいずれか１つの製剤。
４０．長期貯蔵安定性が約２℃～約８℃で少なくとも３カ月である、実施形態３９の製剤。
４１．長期貯蔵安定性が約２℃～約８℃で少なくとも６カ月である、実施形態３９の製剤。
４２．約ｐＨ５．５である、実施形態１～４１のいずれか１つの製剤。
４３．実施形態１～４１のいずれか１つの製剤を製剤化する方法であって、
（１）抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の第１の溶液を
（ａ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｂ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む第２の溶液に交換するステップであって、
ここで、第２の溶液はイオン性等張化剤を本質的に含まず；第２の溶液はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；第２の製剤は約５．０～約６．０のｐＨを有し、交換後の抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の濃度は約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌである、ステップと；
（２）ステップ（１）の溶液を非イオン性界面活性剤で希釈して約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤の濃度を得るステップと
を含む方法。
４４．第２の溶液が約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロースを含み；第２の溶液がイオン性賦形剤を本質的に含まない、実施形態４３の方法。
４５．抗ＴＮＦα抗体がアダリムマブである、実施形態４３または実施形態４４の方法。
４６．第２の溶液のｐＨが約５．５である、実施形態４３～４５のいずれか１つの方法。
４７．実施形態４３～４６のいずれか１つの方法によって得られた製剤。
４８．単一用量のプレフィルドインジェクションペン、単一用量の予め充填されたシリンジ、または単一用量の予め充填されたバイアルの形態である、実施形態１～４２および４７のいずれか１つの製剤。
４９．単一用量のプレフィルドインジェクションペンの形態である、実施形態１～４２および４７のいずれか１つの製剤。
５０．使い捨てのバッグの形態である、実施形態１～４２および４７のいずれか１つの製剤。
５１．（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭの酢酸緩衝剤
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５２．本質的に
（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭの酢酸緩衝剤
からなる水性製剤であって、
製剤が約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５３．（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭの酢酸緩衝剤
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５４．本質的に
（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭの酢酸緩衝剤
からなる水性製剤であって、
製剤が約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５５．（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５６．本質的に
（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
からなる水性製剤であって、
製剤が約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５７．（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５８．本質的に
（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
からなる水性製剤であって、
製剤が約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５９．製剤が次のストレス条件：
（ａ）約２５℃約３カ月；
（ｂ）約２℃～約８℃約３カ月；
（ｃ）約２℃～約８℃約６カ月；および／または
（ｄ）約４０℃約３カ月
の１つ以上への曝露後安定であると決定された、実施形態５１～５８のいずれか１つの製剤。
６０．安定性が摂動の所定のレベルを参照することによって決定される、実施形態５９の製剤。
６１．摂動の所定のレベルが
（ａ）ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより評価して約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積；
（ｂ）ＣＥＸ－ＨＰＬＣにより評価して約２５％以下のアダリムマブの相対的酸性化学種ピーク面積；
（ｃ）ＣＥ－ＳＤＳ（非還元）により評価して約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）；
（ｄ）ＣＤ－ＳＤＳ（還元）により評価して約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピーク；および／または
（ｅ）光遮蔽粒子計数法により評価して約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子および／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出される
の１つ以上である、実施形態６０の製剤。
６２．安定性がコントロールを参照することによって決定され、前記コントロールが約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、２３０ｍＭのマンニトール、０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０を含み、約５．２のｐＨを有し；前記コントロールが製剤と同じ１つ以上のストレス条件に曝露される、実施形態５９の製剤。
６３．安定性がコントロールを参照して決定され、前記コントロールが市販のＨｕｍｉｒａ（登録商標）である、実施形態５９の製剤。
６４．室温貯蔵安定性を示す、実施形態５２～５８のいずれか１つの製剤。
６５．長期貯蔵安定性を示す、実施形態５２～５８のいずれか１つの製剤。
６６．長期貯蔵安定性が約２℃～約８℃で少なくとも３カ月である、実施形態６５の製剤。
６７．長期貯蔵安定性が約２℃～約８℃で少なくとも６カ月である、実施形態６５の製剤。
１．（ａ）約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌの抗ＴＮＦα抗体；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２．（ａ）約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｄ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む安定な水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤のオスモル濃度は約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ～約４００ｍＯｓｍ／ｋｇであり；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
３．約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブおよび／または約２５０ｍＭのトレハロースを含む、実施形態１または実施形態２の製剤。
４．約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブおよび／または約２５０ｍＭのスクロースを含む、実施形態１または実施形態２の製剤。
５．約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０を含む、実施形態１～４のいずれか１つの製剤。
６．約２０ｍＭの酢酸緩衝剤または約２０ｍＭのコハク酸緩衝剤を含む、実施形態１～５のいずれか１つの製剤。
７．約２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む、実施形態１～５のいずれか１つの製剤。
８．約１０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む、実施形態１～５のいずれか１つの製剤。
９．イオン性賦形剤を本質的に含まない、実施形態１～５のいずれか１つの製剤。
１０．約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、約２５０ｍＭのトレハロース、および約０．１％のポリソルベート２０を含む、実施形態１または実施形態２の製剤。
１１．約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、約２５０ｍＭのスクロース、および約０．１％のポリソルベート２０を含む、実施形態１または実施形態２の製剤。
１２．以下の基準の１つ以上を満たす、実施形態１～１１のいずれか１つの製剤：
（ａ）約２℃～約８℃で約３カ月である長期貯蔵下で安定である；
（ｂ）約２℃～約８℃で約６カ月である長期貯蔵下で安定である；
（ｃ）約２℃～約８℃で約１２カ月である長期貯蔵下で安定である；および／または
（ｄ）約１４日である室温貯蔵下で安定である。
１３．安定性が以下の基準の１つ以上により決定される、実施形態１～１２のいずれか１つの製剤：
（ａ）約２℃～約８℃で少なくとも約１２カ月貯蔵したときの、凝集のほぼ同等以下の増大；
（ｂ）約２５℃で少なくとも１カ月貯蔵したときの、凝集のほぼ同等以下の増大；
（ｃ）約２℃～約８℃で少なくとも１２カ月貯蔵したときの、相対パーセント酸化学種のほぼ同等以下の増加；および／または
（ｄ）約２５℃で少なくとも１カ月貯蔵したときの、相対パーセント酸化学種のほぼ同等以下の増加；
ここで、製剤はコントロールに対して比較されており；前記コントロールはアダリムマブを製剤とほぼ同一濃度で含む。
１４．製剤が約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブを含み、コントロールが約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、２３０ｍＭのマンニトール、０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０からなり、コントロールが約５．２のｐＨを有する、実施形態１３の製剤。
１５．凝集がＳＥＣ－ＨＰＬＣにより決定され、および／または相対的酸化学種がＣＥＸ－ＨＰＬＣにより決定される、実施形態１３または実施形態１４の製剤。
１６．安定性が以下の基準の１つ以上により決定される、実施形態１～１５のいずれか１つの製剤：
（ａ）アダリムマブに対するモノマーピークの相対割合が製剤を約２℃～約８℃で少なくとも６カ月貯蔵した後約９８％以上であり、ここで前記モノマーピークの相対割合はＳＥＣ－ＨＰＬＣにより決定される；
（ｂ）アダリムマブに対するモノマーピークの相対割合が製剤を約２５℃で少なくとも１カ月貯蔵した後約９８％以上であり、ここで前記モノマーピークの相対割合はＳＥＣ－ＨＰＬＣにより決定される；
（ｃ）アダリムマブに対する相対的酸性化学種ピークが製剤を約２℃～約８℃で少なくとも１２カ月貯蔵した後約２５％以下であり；ここで前記相対的酸性化学種ピークはＣＥＸ－ＨＰＬＣにより決定される；および／または
（ｄ）アダリムマブに対する相対的酸性化学種ピークが製剤を約２５℃で少なくとも３カ月貯蔵した後約２５％以下であり；ここで前記相対的酸性化学種ピークはＣＥＸ－ＨＰＬＣにより決定される。
１７．（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
１８．２５０ｍＭのトレハロースおよび２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む、実施形態１７の製剤。
１９．本質的に
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
からなる水性製剤であって、
ここで、製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２０．トレハロース濃度が約２５０ｍＭであり、酢酸緩衝剤濃度が約２０ｍＭである、実施形態１９の製剤。
２１．（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２２．約２５０ｍＭのスクロースおよび約２０ｍＭの酢酸緩衝剤を含む、実施形態２１の製剤。
２３．本質的に
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭ以下の酢酸緩衝剤
からなる水性製剤であって、
ここで、製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２４．スクロース濃度が約２５０ｍＭであり、酢酸緩衝剤濃度が約２０ｍＭである、実施形態２３の製剤。
２５．（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２６．２５０ｍＭのトレハロースを含む、実施形態２５の製剤。
２７．本質的に
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
からなる水性製剤であって、
ここで、製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
２８．トレハロース濃度が約２５０ｍＭである、実施形態２７の製剤。
２９．（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
３０．約２５０ｍＭのスクロースを含む、実施形態２９の製剤。
３１．本質的に
（ａ）約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
からなる水性製剤であって、
ここで、製剤は約ｐＨ５．０～約ｐＨ６．０である、製剤。
３２．スクロース濃度が約２５０ｍＭである、実施形態３１の製剤。
３３．次のストレス条件：
（ａ）約２５℃約３カ月；
（ｂ）約２℃～約８℃約３カ月；
（ｃ）約２℃～約８℃約６カ月；および／または
（ｄ）約４０℃約３カ月
の１つ以上への曝露後安定であると決定された、実施形態１～１１および１７～３２のいずれか１つの製剤。
３４．安定性が摂動の所定のレベルを参照することにより決定される、実施形態３３の製剤。
３５．摂動の所定のレベルが
（ａ）ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより評価して約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積；
（ｂ）ＣＥＸ－ＨＰＬＣにより評価して約２５％以下のアダリムマブの相対的酸性化学種ピーク面積；
（ｃ）ＣＥ－ＳＤＳ（非還元）により評価して約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）；
（ｄ）ＣＤ－ＳＤＳ（還元）により評価して約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピーク；および／または
（ｅ）光遮蔽粒子計数法により評価して約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子および／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出される
の１つ以上である、実施形態３４の製剤。
３６．安定性がコントロールを参照することにより決定され、前記コントロールが約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、２３０ｍＭのマンニトール、０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０を含み、約５．２のｐＨを有し；前記コントロールが製剤と同じ１つ以上のストレス条件に曝露される、実施形態３３の製剤。
３７．安定性がコントロールを参照して決定され、前記コントロールが市販されているＨｕｍｉｒａ（登録商標）であり；前記コントロールが製剤と同じ１つ以上のストレス条件に曝露される、実施形態３３の製剤。
３８．室温貯蔵安定性を示す、実施形態１～３７のいずれか１つの製剤。
３９．長期貯蔵安定性を示す、実施形態１～３７のいずれか１つの製剤。
４０．長期貯蔵安定性が約２℃～約８℃で少なくとも３カ月である、実施形態３９の製剤。
４１．長期貯蔵安定性が約２℃～約８℃で少なくとも６カ月である、実施形態３９の製剤。
４２．約ｐＨ５．５である、実施形態１～４１のいずれか１つの製剤。
４３．実施形態１～４１のいずれか１つの製剤を製剤化する方法であって、
（１）抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の第１の溶液を
（ａ）約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロース；および
（ｂ）約２５ｍＭ以下の酢酸緩衝剤または約２５ｍＭ以下のコハク酸緩衝剤
を含む第２の溶液に交換するステップであって、
ここで、第２の溶液はイオン性等張化剤を本質的に含まず；第２の溶液はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；第２の製剤は約５．０～約６．０のｐＨを有し、交換後の抗ＴＮＦα抗体（好ましくはアダリムマブ）の濃度は約９０ｍｇ／ｍｌ～約１２５ｍｇ／ｍｌである、ステップと；
（２）ステップ（１）の溶液を非イオン性界面活性剤で希釈して約０．０５％（ｗ／ｖ）～約０．１５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤の濃度を得るステップと
を含む方法。
４４．第２の溶液が約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのトレハロースまたは約２００ｍＭ～約２７５ｍＭのスクロースを含み；第２の溶液がイオン性賦形剤を本質的に含まない、実施形態４３の方法。
４５．抗ＴＮＦα抗体がアダリムマブである、実施形態４３または実施形態４４の方法。
４６．第２の溶液のｐＨが約５．５である、実施形態４３～４５のいずれか１つの方法。
４７．実施形態４３～４６のいずれか１つの方法によって得られた製剤。
４８．単一用量のプレフィルドインジェクションペン、単一用量の予め充填されたシリンジ、または単一用量の予め充填されたバイアルの形態である、実施形態１～４２および４７のいずれか１つの製剤。
４９．単一用量のプレフィルドインジェクションペンの形態である、実施形態１～４２および４７のいずれか１つの製剤。
５０．使い捨てのバッグの形態である、実施形態１～４２および４７のいずれか１つの製剤。
５１．（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭの酢酸緩衝剤
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５２．本質的に
（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭの酢酸緩衝剤
からなる水性製剤であって、
製剤が約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５３．（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭの酢酸緩衝剤
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性等張化剤を本質的に含まず；製剤はアミノ酸安定剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５４．本質的に
（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０；および
（ｄ）約２０ｍＭの酢酸緩衝剤
からなる水性製剤であって、
製剤が約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５５．（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５６．本質的に
（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのトレハロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
からなる水性製剤であって、
製剤が約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５７．（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
を含む水性製剤であって、
ここで、製剤はイオン性賦形剤を本質的に含まず；製剤は約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５８．本質的に
（ａ）９０～１１０ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ；
（ｂ）約２５０ｍＭのスクロース；および
（ｃ）約０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０
からなる水性製剤であって、
製剤が約ｐＨ５．５である、水性製剤。
５９．製剤が次のストレス条件：
（ａ）約２５℃約３カ月；
（ｂ）約２℃～約８℃約３カ月；
（ｃ）約２℃～約８℃約６カ月；および／または
（ｄ）約４０℃約３カ月
の１つ以上への曝露後安定であると決定された、実施形態５１～５８のいずれか１つの製剤。
６０．安定性が摂動の所定のレベルを参照することによって決定される、実施形態５９の製剤。
６１．摂動の所定のレベルが
（ａ）ＳＥＣ－ＨＰＬＣにより評価して約９８％以上のアダリムマブの相対的モノマーピーク面積；
（ｂ）ＣＥＸ－ＨＰＬＣにより評価して約２５％以下のアダリムマブの相対的酸性化学種ピーク面積；
（ｃ）ＣＥ－ＳＤＳ（非還元）により評価して約９０％以上の相対的「ＩｇＧ」ピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有する完全なままのアダリムマブ）；
（ｄ）ＣＤ－ＳＤＳ（還元）により評価して約６０％～約７２％の相対的重鎖（ＨＣ）ピークおよび／または約３０％～約３６％の相対的軽鎖（ＬＣ）ピーク；および／または
（ｅ）光遮蔽粒子計数法により評価して約６０００個以下の約１０μｍ以上のサイズの粒子および／または約６００個以下の約２５μｍ以上のサイズの粒子が検出される
の１つ以上である、実施形態６０の製剤。
６２．安定性がコントロールを参照することによって決定され、前記コントロールが約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブ、２３０ｍＭのマンニトール、０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０を含み、約５．２のｐＨを有し；前記コントロールが製剤と同じ１つ以上のストレス条件に曝露される、実施形態５９の製剤。
６３．安定性がコントロールを参照して決定され、前記コントロールが市販のＨｕｍｉｒａ（登録商標）である、実施形態５９の製剤。
６４．室温貯蔵安定性を示す、実施形態５２～５８のいずれか１つの製剤。
６５．長期貯蔵安定性を示す、実施形態５２～５８のいずれか１つの製剤。
６６．長期貯蔵安定性が約２℃～約８℃で少なくとも３カ月である、実施形態６５の製剤。
６７．長期貯蔵安定性が約２℃～約８℃で少なくとも６カ月である、実施形態６５の製剤。
【0054】
（実施例１～９）
実施例１～９で使用したアダリムマブは市販のＨｕｍｉｒａ（登録商標）に含まれているものに対応するアミノ酸配列をもつＩｇＧ１抗体である。実施例１～９で使用したアダリムマブは図１６に示されている軽鎖配列および重鎖配列を含むことが確認されている。
実施例１～９で使用したアダリムマブは市販のＨｕｍｉｒａ（登録商標）に含まれているものに対応するアミノ酸配列をもつＩｇＧ１抗体である。実施例１～９で使用したアダリムマブは図１６に示されている軽鎖配列および重鎖配列を含むことが確認されている。
【0055】
（実施例１）
プレフォーミュレーション研究（無機塩－イオン性等張化剤）
無機塩の熱安定性に対する効果を試験した。無機塩は等張化剤として有用であり得るので試験した。
アダリムマブの熱安定性に対する無機塩の効果を試験した。アダリムマブのサンプルを最終濃度０．２ｍｇ／ｍｌ、１×濃度のＳＹＰＲＯオレンジ色ゲル染色（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）および５、２５または１２５ｍＭの、塩の５つの化学種：塩化マグネシウム、塩化ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、塩化カリウム、および塩化カルシウムで調製した。各々のサンプルを９６－ウエルプレートの４つのウエルに分配した（各々５０μｌのサンプル）。遅い段階的ヒートランプ（機械設定４％）を用いてＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓの７５００ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ ＰＣＲサーモサイクラーシステムでタンパク質を加熱した。蛍光を５０～９５℃の温度範囲にわたって記録した。タンパク質が加熱され変性するにつれて、色素がタンパク質の新たに曝露される疎水性の部分に結合し、その際、蛍光が増大する。この増大する蛍光により融解曲線が生ずる（例えば図１Ｂ参照）。
各々の曲線の融解温度（Ｔｍ）はＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓの特化されたＰｒｏｔｅｉｎ Ｔｈｅｒｍａｌ Ｓｈｉｆｔ（商標） Ｓｏｆｔｗａｒｅ １．ｘ．を用いて決定した。融解曲線に基づいてＴｍを決定するのに２つの方法が利用可能である。第１の方法は曲線の屈曲をＢｏｌｔｚｍａｎｎ分布に適合させる。第２のものは融解曲線の導関数を決定し、微分曲線のピークを決定する。水中のアダリムマブの測定において、２つの方法はほぼ同等な結果を生じた。導関数方法はモデルを適合させるその独立性のために好ましい。
導関数方法はまた、単一の測定で１つより多くのＴｍを決定することも可能にする。無機塩実験の結果を図１Ａおよび表１に示す。
プレフォーミュレーション研究（無機塩－イオン性等張化剤）
無機塩の熱安定性に対する効果を試験した。無機塩は等張化剤として有用であり得るので試験した。
アダリムマブの熱安定性に対する無機塩の効果を試験した。アダリムマブのサンプルを最終濃度０．２ｍｇ／ｍｌ、１×濃度のＳＹＰＲＯオレンジ色ゲル染色（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）および５、２５または１２５ｍＭの、塩の５つの化学種：塩化マグネシウム、塩化ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、塩化カリウム、および塩化カルシウムで調製した。各々のサンプルを９６－ウエルプレートの４つのウエルに分配した（各々５０μｌのサンプル）。遅い段階的ヒートランプ（機械設定４％）を用いてＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓの７５００ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ ＰＣＲサーモサイクラーシステムでタンパク質を加熱した。蛍光を５０～９５℃の温度範囲にわたって記録した。タンパク質が加熱され変性するにつれて、色素がタンパク質の新たに曝露される疎水性の部分に結合し、その際、蛍光が増大する。この増大する蛍光により融解曲線が生ずる（例えば図１Ｂ参照）。
各々の曲線の融解温度（Ｔｍ）はＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓの特化されたＰｒｏｔｅｉｎ Ｔｈｅｒｍａｌ Ｓｈｉｆｔ（商標） Ｓｏｆｔｗａｒｅ １．ｘ．を用いて決定した。融解曲線に基づいてＴｍを決定するのに２つの方法が利用可能である。第１の方法は曲線の屈曲をＢｏｌｔｚｍａｎｎ分布に適合させる。第２のものは融解曲線の導関数を決定し、微分曲線のピークを決定する。水中のアダリムマブの測定において、２つの方法はほぼ同等な結果を生じた。導関数方法はモデルを適合させるその独立性のために好ましい。
導関数方法はまた、単一の測定で１つより多くのＴｍを決定することも可能にする。無機塩実験の結果を図１Ａおよび表１に示す。
【0056】
表1
【表1】
【0057】
表１－可変濃度の５つの無機塩化学種の存在下で決定されたアダリムマブ融解温度。各々の値は４つの融解温度の平均である。誤差はマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓにより決定された標準偏差である。
【0058】
表１は第２の集団（または主ピーク上のショルダー）がより高い無機塩濃度で存在することを明らかにした（図１Ａ～１Ｆ）。測定された全ての融解曲線がＰｒｏｔｅｉｎ Ｔｈｅｒｍａｌ Ｓｈｉｆｔ（商標）ソフトウエアで２つの融点を生じた条件に対して２つのＴｍ値が表１に与えられた。２つの融点（高Ｔｍおよび低Ｔｍ）を生じたサンプルで、低Ｔｍは通例高Ｔｍよりずっと低かったが、高ＴｍはＷＦＩ条件のＴｍより少し低いだけだった（例えば１２５ｍＭのＭｇＣｌ2条件に対して、高Ｔｍは７２．３℃と測定されるＷＦＩ条件のＴｍと比較して６９．９℃である。一方、低Ｔｍは６１．７℃である）。
この結果は、２つの違った集団が高塩条件で存在し得ることを示唆する。高Ｔｍで表わされるものはタンパク質全体に対する全体的な効果によって不安定化され、それにより、無機塩が増加するとＴｍの連続的な低下が起こり得（例えば周囲の増大する誘電定数に起因する水素結合の強度の低下）、一方、低Ｔｍで表わされるものはおそらく何らかの控えめな状態の変化（例えば単一の、安定化をもたらす塩橋の崩壊）を受けている。２つの集団が４つの異なる無機塩条件（ＭｇＣｌ2、ＫＣｌ、ＮａＣｌ、およびＣａＣｌ2）で現れるという事実は、その効果が、無機塩イオンの１つへの結合のような特異的な何かの結果というより、一般的な特性（例えば同一の前から存在する、安定化をもたらす結合の崩壊）であり得るということを示唆する。
非経口タンパク質医薬の製剤に塩を含める１つの目的は注射可能な溶液の張度を等張（約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ）に調節することである。これらの知見は、試験した全ての無機塩が今回のアッセイにおいて通例使用される濃度（１００ｍＭのオーダー）で不安定化をもたらす効果を有するので、研究した無機塩のいずれも製剤の張度の主要な調節剤であるには適切でないことを示す。
この結果は、２つの違った集団が高塩条件で存在し得ることを示唆する。高Ｔｍで表わされるものはタンパク質全体に対する全体的な効果によって不安定化され、それにより、無機塩が増加するとＴｍの連続的な低下が起こり得（例えば周囲の増大する誘電定数に起因する水素結合の強度の低下）、一方、低Ｔｍで表わされるものはおそらく何らかの控えめな状態の変化（例えば単一の、安定化をもたらす塩橋の崩壊）を受けている。２つの集団が４つの異なる無機塩条件（ＭｇＣｌ2、ＫＣｌ、ＮａＣｌ、およびＣａＣｌ2）で現れるという事実は、その効果が、無機塩イオンの１つへの結合のような特異的な何かの結果というより、一般的な特性（例えば同一の前から存在する、安定化をもたらす結合の崩壊）であり得るということを示唆する。
非経口タンパク質医薬の製剤に塩を含める１つの目的は注射可能な溶液の張度を等張（約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ）に調節することである。これらの知見は、試験した全ての無機塩が今回のアッセイにおいて通例使用される濃度（１００ｍＭのオーダー）で不安定化をもたらす効果を有するので、研究した無機塩のいずれも製剤の張度の主要な調節剤であるには適切でないことを示す。
【0059】
（実施例２）
プレフォーミュレーション研究（ポリオール／糖類）
アダリムマブのサンプルを実施例１に無機塩について記載したのと同様にｑＰＣＲ測定用に調製した。マンニトール、ソルビトール、スクロース、トレハロース、およびグリセロールを５、２５、および１２５ｍＭの濃度で含めた。
これらのサンプルの融解温度を図２に示し、表２に記載する。Ｔｍのいくらかのささいな変動が観察された。最も高い濃度のマンニトールは糖類／ポリオールを含まないコントロールサンプルより０．３４℃低い最も低い測定Ｔｍを示す。トレハロースは最も高い濃度でより高いＴｍの傾向を示す（０ｍＭトレハロースの場合より０．２５℃高い）が、その差は測定の単一の標準偏差よりわずかに高いのみである。全体として、このグループの賦形剤のアダリムマブ安定性に対する効果はニュートラルである。
プレフォーミュレーション研究（ポリオール／糖類）
アダリムマブのサンプルを実施例１に無機塩について記載したのと同様にｑＰＣＲ測定用に調製した。マンニトール、ソルビトール、スクロース、トレハロース、およびグリセロールを５、２５、および１２５ｍＭの濃度で含めた。
これらのサンプルの融解温度を図２に示し、表２に記載する。Ｔｍのいくらかのささいな変動が観察された。最も高い濃度のマンニトールは糖類／ポリオールを含まないコントロールサンプルより０．３４℃低い最も低い測定Ｔｍを示す。トレハロースは最も高い濃度でより高いＴｍの傾向を示す（０ｍＭトレハロースの場合より０．２５℃高い）が、その差は測定の単一の標準偏差よりわずかに高いのみである。全体として、このグループの賦形剤のアダリムマブ安定性に対する効果はニュートラルである。
【0060】
表2
【表2】
【0061】
表２－可変の濃度の糖類／ポリオールの５つの化学種の存在下で決定されたアダリムマブの融解温度。各々の値は４つの融解温度の平均である。誤差はマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓにより決定された標準偏差である。
特に、糖類／ポリオールの存在下でのアダリムマブの全ての融解曲線は単一の曲線であり、最も高い濃度でもショルダーを示さない。これはさらにこれらの賦形剤がアダリムマブを不安定化しないことを示唆する。
他の安定化をもたらす利益も観察されているが、等張性の変更は非経口のタンパク質製剤に糖類／ポリオールを含める重大な理由である（例えばキレート性金属イオン、したがって酸化防止剤として役立つ）。実施例１に示されるように、無機塩（イオン性等張化剤）はアダリムマブを不安定化する傾向がある。トレハロース条件およびスクロース条件でのＴｍの極めてわずかな増大のために、これらの糖類がさらなる研究のための基本の等張性調整剤として提案された。
特に、糖類／ポリオールの存在下でのアダリムマブの全ての融解曲線は単一の曲線であり、最も高い濃度でもショルダーを示さない。これはさらにこれらの賦形剤がアダリムマブを不安定化しないことを示唆する。
他の安定化をもたらす利益も観察されているが、等張性の変更は非経口のタンパク質製剤に糖類／ポリオールを含める重大な理由である（例えばキレート性金属イオン、したがって酸化防止剤として役立つ）。実施例１に示されるように、無機塩（イオン性等張化剤）はアダリムマブを不安定化する傾向がある。トレハロース条件およびスクロース条件でのＴｍの極めてわずかな増大のために、これらの糖類がさらなる研究のための基本の等張性調整剤として提案された。
【0062】
（実施例３）
プレフォーミュレーション研究（緩衝剤およびｐＨ）
５種類の緩衝剤をスクリーニングのために選んだ：クエン酸塩、トリス、コハク酸塩、酢酸塩およびリン酸塩－クエン酸塩。緩衝範囲を理論的なｐＫａ値から評価し、各々の緩衝剤に適当な３つのｐＨ値をその範囲の低い部分、中央部分および高い部分から選んだ。したがって、全部で１５の個々の緩衝剤を調製した。
緩衝剤を以下のように調製した。トリス（ｐＨ７．１、８．１、および９．１）、コハク酸塩（ｐＨ３．５、５、６．５）および酢酸塩（４、４．８、５．６）緩衝剤サンプルは、各々トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、コハク酸、および氷酢酸を所望の濃度に溶かし、必要に応じてＨＣｌまたはＮａＯＨストック溶液でｐＨを調節することにより調製した。クエン酸塩緩衝剤（ｐＨ３、５、７）は、クエン酸一水和物およびクエン酸三ナトリウム二水和物を所望の濃度に溶かし、所望のｐＨに混合することにより（およその比３：７）作製した。クエン酸塩－リン酸塩緩衝剤は、リン酸水素二ナトリウム．２Ｈ2Ｏを所望の濃度に溶かし、同じ濃度のクエン酸ストックに対して滴定する（およその比２．３：１のリン酸塩：クエン酸塩）ことにより作製した。必要とされる最終の緩衝剤濃度は振盪実験用が２５ｍＭ、ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒ（融解温度）実験用が１０、２５および４０ｍＭであった。
アダリムマブの安定性は図３および表３に明瞭に示されているようにｐＨに大いに依存することが見出された。図３Ａは融解温度がおよそ４または５～９のｐＨ範囲においてあらゆる条件で一定のままであることを示している。
アダリムマブのｐＨ依存性は図３Ｂ～３Ｆの融解曲線に明らかな集団を検査すると明瞭に裏付けられる。高いｐＨ（ｐＨ５または６より上）で測定された各々の曲線の場合、水と本質的に重なる単一の集団が明らかである（例えばトリスシリーズ融解曲線）。他の場合、ｐＨ４．２６のクエン酸塩のように第２の集団が明らかとなり、ｐＨ２．８１のクエン酸塩のような最も低いｐＨで、より高い温度に集団がない単一の低温融解曲線が明らかである。
興味深いことに、無機塩シリーズ（実施例１）とは違って、不安定化をもたらすｐＨの効果は、高Ｔｍを低下させ、同じ測定で第２の集団を生じさせるのではないようである。むしろ、効果には２つのモードがあるようであり、Ｔｍは水の条件または低Ｔｍと同じである（例えばリン酸塩－クエン酸塩シリーズ、図３）。
この知見の意味合いはｐＨによるアダリムマブの不安定化が無機塩に関するセクション（実施例１）で述べた控えめな状態を通して起こり得、全体的な不安定化ではないということであろう。例えば、より低いｐＨは塩橋にとって重大なアミノ酸をプロトン化することができ、したがって塩橋を壊し、タンパク質を不安定化することができる（不安定化のメカニズムは異なり得るが、おそらく塩と同じ部位においても）。
プレフォーミュレーション研究（緩衝剤およびｐＨ）
５種類の緩衝剤をスクリーニングのために選んだ：クエン酸塩、トリス、コハク酸塩、酢酸塩およびリン酸塩－クエン酸塩。緩衝範囲を理論的なｐＫａ値から評価し、各々の緩衝剤に適当な３つのｐＨ値をその範囲の低い部分、中央部分および高い部分から選んだ。したがって、全部で１５の個々の緩衝剤を調製した。
緩衝剤を以下のように調製した。トリス（ｐＨ７．１、８．１、および９．１）、コハク酸塩（ｐＨ３．５、５、６．５）および酢酸塩（４、４．８、５．６）緩衝剤サンプルは、各々トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、コハク酸、および氷酢酸を所望の濃度に溶かし、必要に応じてＨＣｌまたはＮａＯＨストック溶液でｐＨを調節することにより調製した。クエン酸塩緩衝剤（ｐＨ３、５、７）は、クエン酸一水和物およびクエン酸三ナトリウム二水和物を所望の濃度に溶かし、所望のｐＨに混合することにより（およその比３：７）作製した。クエン酸塩－リン酸塩緩衝剤は、リン酸水素二ナトリウム．２Ｈ2Ｏを所望の濃度に溶かし、同じ濃度のクエン酸ストックに対して滴定する（およその比２．３：１のリン酸塩：クエン酸塩）ことにより作製した。必要とされる最終の緩衝剤濃度は振盪実験用が２５ｍＭ、ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒ（融解温度）実験用が１０、２５および４０ｍＭであった。
アダリムマブの安定性は図３および表３に明瞭に示されているようにｐＨに大いに依存することが見出された。図３Ａは融解温度がおよそ４または５～９のｐＨ範囲においてあらゆる条件で一定のままであることを示している。
アダリムマブのｐＨ依存性は図３Ｂ～３Ｆの融解曲線に明らかな集団を検査すると明瞭に裏付けられる。高いｐＨ（ｐＨ５または６より上）で測定された各々の曲線の場合、水と本質的に重なる単一の集団が明らかである（例えばトリスシリーズ融解曲線）。他の場合、ｐＨ４．２６のクエン酸塩のように第２の集団が明らかとなり、ｐＨ２．８１のクエン酸塩のような最も低いｐＨで、より高い温度に集団がない単一の低温融解曲線が明らかである。
興味深いことに、無機塩シリーズ（実施例１）とは違って、不安定化をもたらすｐＨの効果は、高Ｔｍを低下させ、同じ測定で第２の集団を生じさせるのではないようである。むしろ、効果には２つのモードがあるようであり、Ｔｍは水の条件または低Ｔｍと同じである（例えばリン酸塩－クエン酸塩シリーズ、図３）。
この知見の意味合いはｐＨによるアダリムマブの不安定化が無機塩に関するセクション（実施例１）で述べた控えめな状態を通して起こり得、全体的な不安定化ではないということであろう。例えば、より低いｐＨは塩橋にとって重大なアミノ酸をプロトン化することができ、したがって塩橋を壊し、タンパク質を不安定化することができる（不安定化のメカニズムは異なり得るが、おそらく塩と同じ部位においても）。
【0063】
表3
【表3】
【0064】
表３－様々なｐＨ値で決定されたアダリムマブの融解温度。各々の値は４つの融解温度の平均である。誤差はマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓにより決定された標準偏差である。
【0065】
（実施例４）
プレフォーミュレーション研究（撹拌安定性およびｐＨ）
ｐＨは実施例３に示されているようにタンパク質安定性に対して特に重要な寄与をすると広く考えられるので、可変のｐＨ条件を撹拌（振盪）ストレッサーに対しても試験した。簡潔に言うと、１Ｍ緩衝剤ストックおよびアダリムマブを可変のｐＨ値において９９ｍｇ／ｍｌのアダリムマブおよび２５ｍＭの緩衝剤の濃度に混合した。２ミリリットルの各溶液を６Ｒバイアルに入れ、ストッパーおよびオーバーシールで密封した。次いでバイアルを４日間３００ｒｐｍで振盪し、またはネガティブコントロールとして振盪することなく冷蔵庫に貯蔵した。各々の実験は追加のコントロールとして振盪ありおよび振盪なしの水中（緩衝剤なし）タンパク質のサンプルも含んでいた。タンパク質濃度は１０８ｍｇ／ｍｌに限定されていたので、所望の緩衝剤濃度に到達するのに１Ｍストックの緩衝剤が必要であった。コハク酸塩およびリン酸塩－クエン酸塩緩衝剤の溶解度が限定的であるために、これらを振盪アッセイに含めることはできなかった。にもかかわらず、３～９の所望のｐＨ範囲全体が実験で示された。次いでサンプルを濁度測定により分析した。（１ｍｌの経路長のキュベット中３２０ｎｍでの分光光度計吸光度測定。）
振盪アッセイの知見を図４に示す。エラーバーは３つの測定値の標準偏差であり、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイよりずっと大きい。全体の傾向は明らかであるが、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイ（実施例３）の知見と反対のように見える。すなわち、ｐＨが低いほど、アダリムマブは振盪ストレスに対してより回復力があるように見える。したがって、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒの結果（実施例３）は５より高いｐＨが、安定化をもたらす条件であることを示しているが、これらの結果はタンパク質が熱安定性のｐＨ範囲の下端で製剤化するべきであることを示唆している。約５．５の名目のｐＨが提案される。これは実施例３およびこの実施例から結論されるようにアダリムマブの最適な安定性を可能にするが、依然として安定なｐＨ範囲内である生産における許容範囲（例えば±０．５ｐＨ）を可能にする。
プレフォーミュレーション研究（撹拌安定性およびｐＨ）
ｐＨは実施例３に示されているようにタンパク質安定性に対して特に重要な寄与をすると広く考えられるので、可変のｐＨ条件を撹拌（振盪）ストレッサーに対しても試験した。簡潔に言うと、１Ｍ緩衝剤ストックおよびアダリムマブを可変のｐＨ値において９９ｍｇ／ｍｌのアダリムマブおよび２５ｍＭの緩衝剤の濃度に混合した。２ミリリットルの各溶液を６Ｒバイアルに入れ、ストッパーおよびオーバーシールで密封した。次いでバイアルを４日間３００ｒｐｍで振盪し、またはネガティブコントロールとして振盪することなく冷蔵庫に貯蔵した。各々の実験は追加のコントロールとして振盪ありおよび振盪なしの水中（緩衝剤なし）タンパク質のサンプルも含んでいた。タンパク質濃度は１０８ｍｇ／ｍｌに限定されていたので、所望の緩衝剤濃度に到達するのに１Ｍストックの緩衝剤が必要であった。コハク酸塩およびリン酸塩－クエン酸塩緩衝剤の溶解度が限定的であるために、これらを振盪アッセイに含めることはできなかった。にもかかわらず、３～９の所望のｐＨ範囲全体が実験で示された。次いでサンプルを濁度測定により分析した。（１ｍｌの経路長のキュベット中３２０ｎｍでの分光光度計吸光度測定。）
振盪アッセイの知見を図４に示す。エラーバーは３つの測定値の標準偏差であり、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイよりずっと大きい。全体の傾向は明らかであるが、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイ（実施例３）の知見と反対のように見える。すなわち、ｐＨが低いほど、アダリムマブは振盪ストレスに対してより回復力があるように見える。したがって、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒの結果（実施例３）は５より高いｐＨが、安定化をもたらす条件であることを示しているが、これらの結果はタンパク質が熱安定性のｐＨ範囲の下端で製剤化するべきであることを示唆している。約５．５の名目のｐＨが提案される。これは実施例３およびこの実施例から結論されるようにアダリムマブの最適な安定性を可能にするが、依然として安定なｐＨ範囲内である生産における許容範囲（例えば±０．５ｐＨ）を可能にする。
【0066】
（実施例５）
プレフォーミュレーション研究（緩衝剤）
実施例４はアダリムマブの最適なｐＨ範囲を示しているが、ｐＨ５付近の緩衝を達成するには多数の方法がある。試験した緩衝剤の４種はｐＨ５付近で有効であり、それに加えてアダリムマブ自体が自己緩衝性であり、より高い濃度（例えば約１００ｍｇ／ｍｌ以上）で緩衝系を厳密には必要としない（実施例７参照）。例えば、Gokarn et al., J Pharm Sci (2008) 97(8): 3051-3066参照。したがって、今回の実験は、適切な緩衝剤のいずれが、他のものよりまたは緩衝剤を含まない組成物より良好な選択肢となる安定化効果を付与するかどうかを発見することを意図していた。
この実験では、様々な濃度のコハク酸塩、クエン酸塩、リン酸塩－クエン酸塩、および酢酸緩衝剤を５．２の同じｐＨに調節し、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイにより評価した。緩衝剤の濃度は１０、２５および４０ｍＭであった。実施例１と同様に、アダリムマブの最終濃度は０．２ｍｇ／ｍｌ、ＳＹＰＲＯオレンジは１×であった。
結果は、試験した緩衝剤のいずれも、アダリムマブのＴｍに対して、安定化をもたらすまたは測定できるほど明らかに正の効果を有してはいなかったことを示している（表４、図５）。むしろ、全ての緩衝剤系がＴｍにおいて濃度依存性の低下を示す傾向があった。クエン酸塩は最も不安定化をもたらし、酢酸塩で不安定化は最も弱いようであった。
プレフォーミュレーション研究（緩衝剤）
実施例４はアダリムマブの最適なｐＨ範囲を示しているが、ｐＨ５付近の緩衝を達成するには多数の方法がある。試験した緩衝剤の４種はｐＨ５付近で有効であり、それに加えてアダリムマブ自体が自己緩衝性であり、より高い濃度（例えば約１００ｍｇ／ｍｌ以上）で緩衝系を厳密には必要としない（実施例７参照）。例えば、Gokarn et al., J Pharm Sci (2008) 97(8): 3051-3066参照。したがって、今回の実験は、適切な緩衝剤のいずれが、他のものよりまたは緩衝剤を含まない組成物より良好な選択肢となる安定化効果を付与するかどうかを発見することを意図していた。
この実験では、様々な濃度のコハク酸塩、クエン酸塩、リン酸塩－クエン酸塩、および酢酸緩衝剤を５．２の同じｐＨに調節し、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイにより評価した。緩衝剤の濃度は１０、２５および４０ｍＭであった。実施例１と同様に、アダリムマブの最終濃度は０．２ｍｇ／ｍｌ、ＳＹＰＲＯオレンジは１×であった。
結果は、試験した緩衝剤のいずれも、アダリムマブのＴｍに対して、安定化をもたらすまたは測定できるほど明らかに正の効果を有してはいなかったことを示している（表４、図５）。むしろ、全ての緩衝剤系がＴｍにおいて濃度依存性の低下を示す傾向があった。クエン酸塩は最も不安定化をもたらし、酢酸塩で不安定化は最も弱いようであった。
【0067】
表4
【表4】
【0068】
表４：様々な濃度の緩衝剤で決定されたアダリムマブの融解温度。各々の値は４つの融解温度の平均である。誤差はマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓにより決定された標準偏差である。
【0069】
（実施例６）
プレフォーミュレーション研究（非イオン性界面活性剤）
タンパク質非経口製剤中での非イオン性界面活性剤（例えばポリソルベート）の基本的役割は撹拌ストレスに対して保護することである。今回の実験では、振盪アッセイをポリソルベート２０およびポリソルベート８０の存在下で行った。ポリソルベートはＴｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイと適合性でなく、したがって補足の熱安定性データを集めることはできなかった。
９９ｍｇ／ｍｌのアダリムマブおよび０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０または８０からなる２ミリリットルのサンプルを６Ｒバイアルに入れ、密封し、３００ｒｐｍ、周囲温度で４日間撹拌した後サンプルの濁度を分析した。ポリソルベートを含まないコントロールサンプルも試験した。
結果（図６に示す）はいずれのポリソルベートも撹拌ストレスに対して保護するのに極めて有効であることを示している。いずれのポリソルベートの存在下でも、測定された濁度のレベルは研究において振盪しなかったコントロールサンプルとほとんど同じである。しかしながら、ポリソルベート２０および８０を比較すると、ポリソルベート２０はタンパク質を保護するのに測定できるほど明らかにより有効であるようである（３つのサンプルの標準偏差であるエラーバーを上回る）。
プレフォーミュレーション研究（非イオン性界面活性剤）
タンパク質非経口製剤中での非イオン性界面活性剤（例えばポリソルベート）の基本的役割は撹拌ストレスに対して保護することである。今回の実験では、振盪アッセイをポリソルベート２０およびポリソルベート８０の存在下で行った。ポリソルベートはＴｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイと適合性でなく、したがって補足の熱安定性データを集めることはできなかった。
９９ｍｇ／ｍｌのアダリムマブおよび０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０または８０からなる２ミリリットルのサンプルを６Ｒバイアルに入れ、密封し、３００ｒｐｍ、周囲温度で４日間撹拌した後サンプルの濁度を分析した。ポリソルベートを含まないコントロールサンプルも試験した。
結果（図６に示す）はいずれのポリソルベートも撹拌ストレスに対して保護するのに極めて有効であることを示している。いずれのポリソルベートの存在下でも、測定された濁度のレベルは研究において振盪しなかったコントロールサンプルとほとんど同じである。しかしながら、ポリソルベート２０および８０を比較すると、ポリソルベート２０はタンパク質を保護するのに測定できるほど明らかにより有効であるようである（３つのサンプルの標準偏差であるエラーバーを上回る）。
【0070】
（実施例７）
プレフォーミュレーション研究（アミノ酸安定剤）
Ｌ－アルギニンは最近その凝集に対する安定化をもたらす能力のためにタンパク質製剤に次第に導入されるようになっている。熱ストレスよりもむしろ撹拌ストレスに対する安定化をもたらすことが観察されているが、今回の実験では、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒおよび振盪アッセイの両方を行った。振盪実験は２００ｍＭのＬ－アルギニンの存在下で実施例４と同様に行った。Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイは、濃度依存性の効果を判断するために５０および２００ｍＭのＬ－アルギニンの存在下で実施例１と同様にして行った。表５に示されているように、Ｔｍの低下から、Ｌ－アルギニンの添加はアダリムマブを不安定化する傾向があった。図７も参照。
プレフォーミュレーション研究（アミノ酸安定剤）
Ｌ－アルギニンは最近その凝集に対する安定化をもたらす能力のためにタンパク質製剤に次第に導入されるようになっている。熱ストレスよりもむしろ撹拌ストレスに対する安定化をもたらすことが観察されているが、今回の実験では、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒおよび振盪アッセイの両方を行った。振盪実験は２００ｍＭのＬ－アルギニンの存在下で実施例４と同様に行った。Ｔｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイは、濃度依存性の効果を判断するために５０および２００ｍＭのＬ－アルギニンの存在下で実施例１と同様にして行った。表５に示されているように、Ｔｍの低下から、Ｌ－アルギニンの添加はアダリムマブを不安定化する傾向があった。図７も参照。
【0071】
表5
【表5】
【0072】
表５－可変濃度のアミノ酸安定剤Ｌ－アルギニンで決定されたアダリムマブの融解温度。各々の値は４つの融解温度の平均である。誤差はマイクロソフトエクセルでＳＴＤＥＶ．Ｓにより決定された標準偏差である。
【0073】
（実施例８）
アダリムマブによる自己緩衝
次の実験を行って、アダリムマブの自己緩衝性挙動の程度、およびそれがｐＨ範囲にわたってどのように変化するのか評価した。
実験は、５ｍｌのタンパク質（１０８ｍｇ／ｍｌ）を容器に分配し、約９のｐＨに到達するまで撹拌しながら５０μｌの０．２Ｍ ＮａＯＨを一度に滴定することによって行った。酸性滴定は、新鮮な５ｍｌの一定分量のタンパク質から出発し、約４のｐＨに到達するまで５０μｌの０．２Ｍ ＨＣｌを一度に加えて同じようにして行った（図８Ａ）。
結果（図８に示されている）は、アダリムマブがｐＨの広い範囲にわたって実質的な緩衝能力を有することを示している。関係性はｐＨ５～７の範囲を除いて実質的に直線状である。さらに、図８Ａの曲線は製剤の製造中必要ならばｐＨを調節するのに必要とされる酸または塩基の量を示す。例えば、塩基性曲線の傾きは５ｍｌの出発容積に対して０．００５３ｐＨ単位／μｌであり、より大きい容積のアダリムマブのｐＨ調節に必要とされる酸または塩基の容積を推定するために使用することができる。しかしながら、他の賦形剤（例えばスクロースおよびグリセロール）がいくつかの緩衝剤系の緩衝能力に影響を及ぼすことができるので、このアプローチは最終の製剤に対して完全に予測するものではない。
第２の組の滴定を１ｍｇ／ｍｌのアダリムマブならびに０．００２ＭのＨＣｌおよびＮａＯＨで行った（図８Ｂ）。注目すべきことに、この滴定は１０８ｍｇ／ｍｌのアダリムマブで行ったものと極めて類似している。これは、約１００ｍｇ／ｍｌのより高い濃度に到達するまでは自己緩衝性製剤が例えば製剤化中ｐＨ変動を相殺するのに実際的でないとしても、異なる濃度のｍＡｂタンパク質での相対的な緩衝能力が同等であることを示唆している。
アダリムマブによる自己緩衝
次の実験を行って、アダリムマブの自己緩衝性挙動の程度、およびそれがｐＨ範囲にわたってどのように変化するのか評価した。
実験は、５ｍｌのタンパク質（１０８ｍｇ／ｍｌ）を容器に分配し、約９のｐＨに到達するまで撹拌しながら５０μｌの０．２Ｍ ＮａＯＨを一度に滴定することによって行った。酸性滴定は、新鮮な５ｍｌの一定分量のタンパク質から出発し、約４のｐＨに到達するまで５０μｌの０．２Ｍ ＨＣｌを一度に加えて同じようにして行った（図８Ａ）。
結果（図８に示されている）は、アダリムマブがｐＨの広い範囲にわたって実質的な緩衝能力を有することを示している。関係性はｐＨ５～７の範囲を除いて実質的に直線状である。さらに、図８Ａの曲線は製剤の製造中必要ならばｐＨを調節するのに必要とされる酸または塩基の量を示す。例えば、塩基性曲線の傾きは５ｍｌの出発容積に対して０．００５３ｐＨ単位／μｌであり、より大きい容積のアダリムマブのｐＨ調節に必要とされる酸または塩基の容積を推定するために使用することができる。しかしながら、他の賦形剤（例えばスクロースおよびグリセロール）がいくつかの緩衝剤系の緩衝能力に影響を及ぼすことができるので、このアプローチは最終の製剤に対して完全に予測するものではない。
第２の組の滴定を１ｍｇ／ｍｌのアダリムマブならびに０．００２ＭのＨＣｌおよびＮａＯＨで行った（図８Ｂ）。注目すべきことに、この滴定は１０８ｍｇ／ｍｌのアダリムマブで行ったものと極めて類似している。これは、約１００ｍｇ／ｍｌのより高い濃度に到達するまでは自己緩衝性製剤が例えば製剤化中ｐＨ変動を相殺するのに実際的でないとしても、異なる濃度のｍＡｂタンパク質での相対的な緩衝能力が同等であることを示唆している。
【0074】
結論：プレフォーミュレーション研究
この研究の全体的な目的はある範囲の個々の賦形剤の、安定化または不安定化をもたらす効果を決定すること、タンパク質に対する最大の安定性のｐＨを決定すること、および安定化製剤を仮定することであった。
必要に応じて振盪アッセイおよび／またはＴｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイを用いてある範囲の塩、糖類／ポリオール、ｐＨ値、緩衝系、および安定剤を試験した。アダリムマブを無機塩および緩衝剤のようなイオン性賦形剤の存在により濃度依存的に断定的に不安定化したが、低い濃度の各々は十分に容認された。また、アダリムマブは５より低いｐＨ値により熱不安定化されたが、５より高い試験した全てのｐＨ値で極めて熱安定性であった。しかしながら、振盪安定性傾向は、撹拌安定性が低下するｐＨと共に増大することを示唆した。糖類のアダリムマブに対する効果は本質的にニュートラルであった。トレハロースは張度変更に対して最も有益な糖類であると思われた。試験した両方のポリソルベートは撹拌ストレスに対してアダリムマブを安定化するのに非常に有効であったが、ポリソルベート２０は明らかにそれ以上であった。最後に、Ｌ－アルギニンはアダリムマブの撹拌安定性を増大したが、増大は控えめであり、熱安定性は低下し、この賦形剤は考慮から除外した。
したがって、実施例１～７のプレフォーミュレーション研究で示唆された最上の製剤化候補は、約０．１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０を含み、等張性調節のためのトレハロースを含み、約ｐＨ５．５に自己緩衝された約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブである。代替の製剤化候補は、約０．１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０を含み、等張性調節のためのスクロースを含み、約ｐＨ５．５に自己緩衝された約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブを含む。
低濃度の緩衝剤、特定のクエン酸塩およびコハク酸塩は容認されたので、製造プロセスは（自己緩衝ではなく）低濃度の緩衝剤を含み得る。したがって、試験する第２の製剤は最良に容認された緩衝系である酢酸緩衝剤を２０ｍＭの低い濃度で含む。最後に、トレハロースの代わりにスクロースを含む同じ製剤もさらなる研究のために提案される。
この研究の全体的な目的はある範囲の個々の賦形剤の、安定化または不安定化をもたらす効果を決定すること、タンパク質に対する最大の安定性のｐＨを決定すること、および安定化製剤を仮定することであった。
必要に応じて振盪アッセイおよび／またはＴｈｅｒｍｏｆｌｕｏｒアッセイを用いてある範囲の塩、糖類／ポリオール、ｐＨ値、緩衝系、および安定剤を試験した。アダリムマブを無機塩および緩衝剤のようなイオン性賦形剤の存在により濃度依存的に断定的に不安定化したが、低い濃度の各々は十分に容認された。また、アダリムマブは５より低いｐＨ値により熱不安定化されたが、５より高い試験した全てのｐＨ値で極めて熱安定性であった。しかしながら、振盪安定性傾向は、撹拌安定性が低下するｐＨと共に増大することを示唆した。糖類のアダリムマブに対する効果は本質的にニュートラルであった。トレハロースは張度変更に対して最も有益な糖類であると思われた。試験した両方のポリソルベートは撹拌ストレスに対してアダリムマブを安定化するのに非常に有効であったが、ポリソルベート２０は明らかにそれ以上であった。最後に、Ｌ－アルギニンはアダリムマブの撹拌安定性を増大したが、増大は控えめであり、熱安定性は低下し、この賦形剤は考慮から除外した。
したがって、実施例１～７のプレフォーミュレーション研究で示唆された最上の製剤化候補は、約０．１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０を含み、等張性調節のためのトレハロースを含み、約ｐＨ５．５に自己緩衝された約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブである。代替の製剤化候補は、約０．１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０を含み、等張性調節のためのスクロースを含み、約ｐＨ５．５に自己緩衝された約１００ｍｇ／ｍｌのアダリムマブを含む。
低濃度の緩衝剤、特定のクエン酸塩およびコハク酸塩は容認されたので、製造プロセスは（自己緩衝ではなく）低濃度の緩衝剤を含み得る。したがって、試験する第２の製剤は最良に容認された緩衝系である酢酸緩衝剤を２０ｍＭの低い濃度で含む。最後に、トレハロースの代わりにスクロースを含む同じ製剤もさらなる研究のために提案される。
【0075】
（実施例９）
アダリムマブの製剤（安定性分析）
安定性分析（表６に示す）のために４つの製剤を調製した：
アダリムマブの製剤（安定性分析）
安定性分析（表６に示す）のために４つの製剤を調製した：
【0076】
表6
【表6】
【0077】
製剤は以下の一般的な方法に基づいて調製した：精製し、水中に約１３０ｍｇ／ｍｌの濃度に限外ろ過／透析ろ過する（ＵＦ／ＤＦ）。２Ｍ酢酸塩、１．３７５Ｍトレハロース、１．７５ スクロース、２０％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０のようなストック溶液を調製する。加えて、ｐＨ調節のためにストック１Ｍ ＮａＣｌおよび１Ｍ ＨＣｌ溶液を調製する。次いで各々のストック成分を秤量して成分を穏やかに撹拌しながらビーカーに入れ（添加の順序はタンパク質、糖類、酢酸塩、ポリソルベート、ｐＨ調節、水でよい）、必要に応じてｐＨ調節の後意図した容積に最終希釈する。
全ての研究にコントロールを用いた。コントロールのアダリムマブは以下の一般的な方法に基づいて調製した。アダリムマブ（Ａｄａｌｉｍｕｍｂ）を精製し、２３０ｍＭマンニトール溶液および１２７．５ｍｇ／ｍｌの濃度に限外ろ過／透析ろ過する（ＵＦ／ＤＦ）。２０％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０および４６０ｍＭマンニトールのストック溶液を調製する。加えて、ストック１Ｍ ＮａＣｌおよび１Ｍ ＨＣｌ溶液をｐＨ調節のために調製する。次いで各々のストック成分を秤量して成分を穏やかに撹拌しながらビーカーに入れ（添加の順序はタンパク質、糖類、ポリソルベート、ｐＨ調節、水でよい）必要に応じてｐＨ調節した後意図した容積に最終希釈した。最終のコントロールは５．２のｐＨで濃度１００ｍｇ／ｍｌアダリムマブ、２３０ｍＭマンニトール、０．１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０を有する。
各々の製剤のサンプルを１ｍｌの長さのステーキドニードルプレフィル用シリンジに充填し（１ｍｌの充填容積）、プランジャーストッパーで栓をする。表６の各々の製剤の１３２のサンプルならびにコントロールを安定性に供した。
サンプルを２℃～８℃、２５℃、および４０℃で貯蔵した。安定性を貯蔵０、１カ月、３カ月、６カ月および１２カ月後の時点で決定した。１２月での決定は２℃～８℃での貯蔵の場合のみ決定した。
製剤Ａ～Ｄの凝集体決定
凝集体をサイズ排除高性能液体クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）により決定した。
サイズ排除方法はバイナリーポンプ、オートサンプラーおよびダイオードアレイ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ １２６０機器を用いて行う。分離はアイソクラチック条件下Ｔｏｓｈｏ ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅのＴＳＫゲルＳｕｐｅｒＳＷ ｍＡｂ ＨＲ、４μｍ ３００ｍｍ×７．８ｍｍ、２５０Ａカラムで０．１Ｍリン酸ナトリウム／０．１Ｍ塩化ナトリウム、ｐＨ６．２移動相を用いて達成する。試験サンプルはｍＡｂ溶液を移動相で５ｍｇ／ｍＬに希釈することにより調製する。機器制御、データ収集および報告はＥｍｐｏｗｅｒ ３ソフトウエア（Ｗａｔｅｒｓ）を用いて行う。
分析の結果を表７に示す。図９Ａ～９Ｃは表７に報告されている各々の貯蔵条件に対する相対的モノマーピーク面積を示す。
全ての研究にコントロールを用いた。コントロールのアダリムマブは以下の一般的な方法に基づいて調製した。アダリムマブ（Ａｄａｌｉｍｕｍｂ）を精製し、２３０ｍＭマンニトール溶液および１２７．５ｍｇ／ｍｌの濃度に限外ろ過／透析ろ過する（ＵＦ／ＤＦ）。２０％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０および４６０ｍＭマンニトールのストック溶液を調製する。加えて、ストック１Ｍ ＮａＣｌおよび１Ｍ ＨＣｌ溶液をｐＨ調節のために調製する。次いで各々のストック成分を秤量して成分を穏やかに撹拌しながらビーカーに入れ（添加の順序はタンパク質、糖類、ポリソルベート、ｐＨ調節、水でよい）必要に応じてｐＨ調節した後意図した容積に最終希釈した。最終のコントロールは５．２のｐＨで濃度１００ｍｇ／ｍｌアダリムマブ、２３０ｍＭマンニトール、０．１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０を有する。
各々の製剤のサンプルを１ｍｌの長さのステーキドニードルプレフィル用シリンジに充填し（１ｍｌの充填容積）、プランジャーストッパーで栓をする。表６の各々の製剤の１３２のサンプルならびにコントロールを安定性に供した。
サンプルを２℃～８℃、２５℃、および４０℃で貯蔵した。安定性を貯蔵０、１カ月、３カ月、６カ月および１２カ月後の時点で決定した。１２月での決定は２℃～８℃での貯蔵の場合のみ決定した。
製剤Ａ～Ｄの凝集体決定
凝集体をサイズ排除高性能液体クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）により決定した。
サイズ排除方法はバイナリーポンプ、オートサンプラーおよびダイオードアレイ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ １２６０機器を用いて行う。分離はアイソクラチック条件下Ｔｏｓｈｏ ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅのＴＳＫゲルＳｕｐｅｒＳＷ ｍＡｂ ＨＲ、４μｍ ３００ｍｍ×７．８ｍｍ、２５０Ａカラムで０．１Ｍリン酸ナトリウム／０．１Ｍ塩化ナトリウム、ｐＨ６．２移動相を用いて達成する。試験サンプルはｍＡｂ溶液を移動相で５ｍｇ／ｍＬに希釈することにより調製する。機器制御、データ収集および報告はＥｍｐｏｗｅｒ ３ソフトウエア（Ｗａｔｅｒｓ）を用いて行う。
分析の結果を表７に示す。図９Ａ～９Ｃは表７に報告されている各々の貯蔵条件に対する相対的モノマーピーク面積を示す。
【0078】
【表7-1】
【表7-2】
【表7-3】
【0079】
製剤Ａ～Ｄの肉眼では見ることができない粒子濃度決定
肉眼では見ることができない粒子濃度をマイクロフローイメージング（ＭＦＩ）で決定した。
マイクロフローイメージングを用いる肉眼では見ることができない粒子測定はＢｏｔ１オートサンプラーを備えたＭＦＩ ５２００機器（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ）を用いて行う。サンプルは希釈しないで（４×０．９ｍＬ）測定し、サンプルをＬＡＦ条件下でサンプルバイアルに移すことにより気泡または粒子汚染物質を導入しないように特別な注意を払う。機器制御、データ収集および報告はＰｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ ＭＦＩソフトウエアＭＶＳＳおよびＭＶＡＳを用いて行う。
分析の結果を表８に示す。図１０Ａ～１０Ｃは各々の貯蔵条件に対する全粒子濃度を示す。
肉眼では見ることができない粒子濃度をマイクロフローイメージング（ＭＦＩ）で決定した。
マイクロフローイメージングを用いる肉眼では見ることができない粒子測定はＢｏｔ１オートサンプラーを備えたＭＦＩ ５２００機器（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ）を用いて行う。サンプルは希釈しないで（４×０．９ｍＬ）測定し、サンプルをＬＡＦ条件下でサンプルバイアルに移すことにより気泡または粒子汚染物質を導入しないように特別な注意を払う。機器制御、データ収集および報告はＰｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ ＭＦＩソフトウエアＭＶＳＳおよびＭＶＡＳを用いて行う。
分析の結果を表８に示す。図１０Ａ～１０Ｃは各々の貯蔵条件に対する全粒子濃度を示す。
【0080】
【表8-1】
【表8-2】
【0081】
製剤Ａ～Ｄの荷電化学種決定
カチオン交換－高性能液体クロマトグラフィー（ＣＥＸ－ＨＰＬＣ）により決定した相対的主ピーク、酸化学種ピーク、および塩基性ピーク。
カチオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）はクオータナリポンプ、オートサンプラーおよびダイオードアレイ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＩＩ １２６０生体不活性機器を用いて行う。分離はＴｈｅｒｍｏ ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃのＭａｂＰａｃ ＳＣＸ－１０、１０μｍ、２５０ｍｍ×４．０ｍｍカラムで、塩勾配を１０ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ７．０の移動相Ａおよび１０ｍＭリン酸ナトリウム／１００ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ７．０の移動相Ｂと共に用いて達成する。試験サンプルは０．１％ポリソルベート８０を含む移動相ＡでｍＡｂ溶液を０．５ｍｇ／ｍＬに希釈することにより調製する。機器制御、データ収集および報告はＥｍｐｏｗｅｒ ３ソフトウエア（Ｗａｔｅｒｓ）を用いて行う。
分析の結果を表９に示す。図１１Ａ～１１Ｆは２℃～８℃および２５℃の貯蔵条件に対する相対的な主ピーク、相対的な酸性化学種、および相対的な塩基性化学種を示す。
カチオン交換－高性能液体クロマトグラフィー（ＣＥＸ－ＨＰＬＣ）により決定した相対的主ピーク、酸化学種ピーク、および塩基性ピーク。
カチオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）はクオータナリポンプ、オートサンプラーおよびダイオードアレイ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＩＩ １２６０生体不活性機器を用いて行う。分離はＴｈｅｒｍｏ ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃのＭａｂＰａｃ ＳＣＸ－１０、１０μｍ、２５０ｍｍ×４．０ｍｍカラムで、塩勾配を１０ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ７．０の移動相Ａおよび１０ｍＭリン酸ナトリウム／１００ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ７．０の移動相Ｂと共に用いて達成する。試験サンプルは０．１％ポリソルベート８０を含む移動相ＡでｍＡｂ溶液を０．５ｍｇ／ｍＬに希釈することにより調製する。機器制御、データ収集および報告はＥｍｐｏｗｅｒ ３ソフトウエア（Ｗａｔｅｒｓ）を用いて行う。
分析の結果を表９に示す。図１１Ａ～１１Ｆは２℃～８℃および２５℃の貯蔵条件に対する相対的な主ピーク、相対的な酸性化学種、および相対的な塩基性化学種を示す。
【0082】
【表9-1】
【表9-2】
相対的なＩｇＧピーク（２つの重鎖および２つの軽鎖を有するアダリムマブ）または相対的な軽鎖および重鎖はそれぞれ還元または非還元条件下でキャピラリー電気泳動－ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ－ＳＤＳ）により決定される。
ＣＥ－ＳＤＳ方法はＰｒｏｔｅｉｎ ＳｉｍｐｌｅのＭａｕｒｉｃｅ ＣＥ機器を用いて行われる。分離はＰｒｏｔｅｉｎ ＳｉｍｐｌｅのＭａｕｒｉｃｅ ＣＥ－ＳＤＳカートリッジの毛細管で達成される。試験サンプルを調製するために、最初に１％ＳＤＳを含む５０ｍＭリン酸塩緩衝剤ｐＨ６．０でｍＡｂ溶液を１０ｍｇ／ｍＬに希釈する。非還元条件の場合ＮＥＭを含有する分離ミックスで１０ｍｇ／ｍＬサンプルを処理し、還元条件の場合β－メルカプトエタノールを含有する分離ミックスで１０ｍｇ／ｍＬサンプルを処理する。機器制御およびデータ収集はＩＣＥソフトウエアのためのＣｏｍｐａｓｓ（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ）を用いて行われ、データ取扱いおよび報告はＥｍｐｏｗｅｒ ３ソフトウエア（Ｗａｔｅｒｓ）を用いて行われる。分析の結果を表１０（非還元ＣＥ－ＳＤＳ）および表１１（還元ＣＥ－ＳＤＳ）に示す。表１０で、「ＩｇＧ」は２つの重鎖および２つの軽鎖を有するアダリムマブであり、「ＨＨＬ」は２つの重鎖および１つの軽鎖をもつ変異体である。表１１で、「ＨＣ」は重鎖であり、「ＬＣ」は軽鎖であり、「ＤＨＣ」は脱グリコシル化した重鎖である。図１２Ａ～１２Ｆは、非還元条件（ＮＲ ＣＥ－ＳＤＳ）および還元条件（Ｒ ＣＥ－ＳＤＳ）下、０、１、３、６、および１２カ月で測定された２℃～８℃の貯蔵条件、０、１、３、および６カ月で測定された２５℃の貯蔵条件、および０、１、および３カ月で測定された４０℃の貯蔵条件に対する相対的なＩｇＧピーク面積を示す。
【0083】
【表10-1】
【表10-2】
【表10-3】
【表11-1】
【表11-2】
【表11-3】
サンプルを目で見える粒子について検査した（表１２）。
焦点に集めた光線の前でサンプルを回転させて目に見える粒子の反射を最大にするＳｅｉｄｅｎａｄｅｒ Ｖ９０－Ｔ目視検査機を用いてサンプルを検査した。
【0084】
【表12】
いずれのサンプルも「外来」とは示されなかった。
製剤Ａ～Ｄのオスモル濃度およびｐＨ
オスモル濃度（ｍＯｓｍ／ｋｇ）を測定した。
オスモル濃度測定は凝固点浸透圧計であるＯｓｍｏｍａｔ ３０００（Ｇｏｎｏｔｅｃｈ）を用いて行われる。５０μＬのサンプルを希釈しないで測定する。
ｐＨも決定した。
オスモル濃度およびｐＨを表１３に示し、オスモル濃度を図１３に示す。
【0085】
表13
生物学的活性（ＴＮＦαへの結合）
貯蔵条件下の製剤に対するアダリムマブの生物学的活性（ＴＮＦαへの結合）を決定した。
【表13】
生物学的活性（ＴＮＦαへの結合）
貯蔵条件下の製剤に対するアダリムマブの生物学的活性（ＴＮＦαへの結合）を決定した。
【0086】
アダリムマブのＴＮＦ－αへの結合は表面プラズモン共鳴技術を用いる４つの分離したフローセルからなる金コートしたマイクロ流体流量センサーチップで検出される（Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）。アダリムマブはセンサーチップのあらゆるフローセル２－４の金層表面のプロテインＡを介して捕捉される。第１のフローセルはブランクのまま残し、基準フローセルとして使用する。５つの濃度のリガンドＴＮＦ－αをセンサー表面の４つのフローセル全てに並行して注入する。注入は基準注入、すなわちリガンドを含有しない緩衝剤により調和させる。緩衝剤注入および基準フローセルの両方のシグナルを現実のシグナルから差し引く（二重参照）。チップ表面上に捕捉されたアダリムマブは特異的にＴＮＦ－αに結合する。結合および解離を検出し、金層上の屈折率の変化により生じた表面－プラズモン共鳴シグナルの変化によって定量する。表面上で検出されたシグナルの強度は注入したリガンドの濃度に依存する。ＴＮＦ－αの結合および解離により生じたシグナル変化の時間経過をセンサーグラムとして記録し、これを用いて動態パラメーターｋａ、ｋｄおよびＫＤを決定する。相対的な結合の評価のためにサンプルのＫＤ値を基準バッチのＫＤ値で正規化する。
【0087】
表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）により測定されたＴＮＦ－アルファによる相対的平均ＫＤを表１４および図１４に示す。
生物学的活性（ＦｃγＲＩＩＩａ結合）
貯蔵条件下の製剤に対してアダリムマブの生物学的活性（ＦｃγＲＩＩＩａへの結合）を決定した。
アダリムマブのＦｃγＲＩＩＩａへの結合は表面プラズモン共鳴技術を用いる４つの分離したフローセルからなる金コートしたマイクロ流体流量センサーチップで検出される（Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）。リガンドＦｃγＲＩＩＩａはアミンカップリング化学反応によりセンサーチップのフローセル２－４の官能化された金層表面上に共有結合で固定化される。一方、フローセル１はエタノールアミンにより固定化されたブランクであり、基準フローセルとして使用する。アダリムマブをセンサー表面の４つのフローセル全てに連続して注入する。注入は基準注入、すなわちアダリムマブを含有しない緩衝剤により調和させる。緩衝剤注入および基準フローセルの両方のシグナルを現実のシグナルから差し引く（二重参照）。アダリムマブのＦｃ領域はチップ表面上の固定化されたＦｃγＲＩＩＩａにグリコシル化特異的に結合する。アダリムマブの結合および解離を検出し、金層上の屈折率の変化により生じた表面－プラズモン共鳴シグナルの変化によって定量する。表面上で検出されたシグナルの強度は注入した抗体の濃度に依存する。アダリムマブの結合および解離により生じたシグナル変化をセンサーグラムとして記録し、これを使用して定常状態親和性パラメーターＫＤを決定する。相対的な結合の評価のためにサンプルのＫＤ値は基準バッチのＫＤ値で正規化される。
表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）により測定されたＦｃγＲＩＩＩａによる相対的平均ＫＤを表１５および図１５に示す。
【表14-1】
【表14-2】
貯蔵条件下の製剤に対してアダリムマブの生物学的活性（ＦｃγＲＩＩＩａへの結合）を決定した。
アダリムマブのＦｃγＲＩＩＩａへの結合は表面プラズモン共鳴技術を用いる４つの分離したフローセルからなる金コートしたマイクロ流体流量センサーチップで検出される（Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）。リガンドＦｃγＲＩＩＩａはアミンカップリング化学反応によりセンサーチップのフローセル２－４の官能化された金層表面上に共有結合で固定化される。一方、フローセル１はエタノールアミンにより固定化されたブランクであり、基準フローセルとして使用する。アダリムマブをセンサー表面の４つのフローセル全てに連続して注入する。注入は基準注入、すなわちアダリムマブを含有しない緩衝剤により調和させる。緩衝剤注入および基準フローセルの両方のシグナルを現実のシグナルから差し引く（二重参照）。アダリムマブのＦｃ領域はチップ表面上の固定化されたＦｃγＲＩＩＩａにグリコシル化特異的に結合する。アダリムマブの結合および解離を検出し、金層上の屈折率の変化により生じた表面－プラズモン共鳴シグナルの変化によって定量する。表面上で検出されたシグナルの強度は注入した抗体の濃度に依存する。アダリムマブの結合および解離により生じたシグナル変化をセンサーグラムとして記録し、これを使用して定常状態親和性パラメーターＫＤを決定する。相対的な結合の評価のためにサンプルのＫＤ値は基準バッチのＫＤ値で正規化される。
表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）により測定されたＦｃγＲＩＩＩａによる相対的平均ＫＤを表１５および図１５に示す。
【0088】
【表15-1】
【表15-2】
【0089】
酸化／脱アミド
貯蔵条件下の製剤に対してアダリムマブの酸化／脱アミドを決定した（表１６および１７）。
酸化および脱アミド試験はエレクトロスプレー（ＥＳＩ）イオン化による正モードのＤｉｏｎｅｘ Ｕｌｔｉｍａｔｅ３０００ＲＳＬＣナノ液体クロマトグラフィーシステムと組み合わせたＢｒｕｋｅｒ ｍｉｃｒＯＴＯＦ質量分析計を用いるＬＣ－ＭＳにより行った。スペクトルは１Ｈｚのスペクトル率の２００～２５００ｍ／ｚの質量範囲で記録した。分析のためにペプチドまたはタンパク質のＥＳＩ－ＭＳのための標準的な方法を適用した。ペプチド分離は１％移動相（ＭＰ）Ｂで１０分のアイソクラチック溶出の後の１％～３５％ＭＰ Ｂの１４５分にわたる直線勾配を用いて（カラムで）達成した。ＭＰ Ａは水中０．１％のギ酸（ＦＡ）であり、ＭＰ Ｂは９０％水性アセトニトリル（ＡＣＮ）中０．１％ＦＡであった。流量は８μＬ／ｍｉｎであり、０．８μｇの消化したタンパク質を注入した。サンプル調製ステップは、１）６ＭグアニジンＨＣｌおよび１００ｍＭトリス、ｐＨ７．８中、還元剤としてのジチオスレイトール（ＤＴＴ）および酸化防止剤としてのメチオニンによる変性および還元、２）ヨードアセトアミドによるシステインアルキル化、３）透析による１００ｍＭトリス、０．８Ｍ尿素、ｐＨ７．０への緩衝剤交換（Ｓｃｉｅｎｏｖａ； Ｘｐｒｅｓｓ Ｍｉｃｒｏ Ｄｉａｌｙｓｅｒ、１２～１４ｋＤａ）、４）トリプシン活性を高めるＣａＣｌ2および酸化防止剤としてのメチオニンの存在下でのトリプシンによる消化、ならびに５）水性のＦＡによる０．２ｍｇ／ｍＬタンパク質および２％（ｖ／ｖ）ＦＡ濃度への希釈であった。全てのデータをソフトウエアパッケージデータ解析（バージョン４．４、Ｂｒｕｋｅｒ Ｄａｌｔｏｎｉｋ）で処理した。
貯蔵条件下の製剤に対してアダリムマブの酸化／脱アミドを決定した（表１６および１７）。
酸化および脱アミド試験はエレクトロスプレー（ＥＳＩ）イオン化による正モードのＤｉｏｎｅｘ Ｕｌｔｉｍａｔｅ３０００ＲＳＬＣナノ液体クロマトグラフィーシステムと組み合わせたＢｒｕｋｅｒ ｍｉｃｒＯＴＯＦ質量分析計を用いるＬＣ－ＭＳにより行った。スペクトルは１Ｈｚのスペクトル率の２００～２５００ｍ／ｚの質量範囲で記録した。分析のためにペプチドまたはタンパク質のＥＳＩ－ＭＳのための標準的な方法を適用した。ペプチド分離は１％移動相（ＭＰ）Ｂで１０分のアイソクラチック溶出の後の１％～３５％ＭＰ Ｂの１４５分にわたる直線勾配を用いて（カラムで）達成した。ＭＰ Ａは水中０．１％のギ酸（ＦＡ）であり、ＭＰ Ｂは９０％水性アセトニトリル（ＡＣＮ）中０．１％ＦＡであった。流量は８μＬ／ｍｉｎであり、０．８μｇの消化したタンパク質を注入した。サンプル調製ステップは、１）６ＭグアニジンＨＣｌおよび１００ｍＭトリス、ｐＨ７．８中、還元剤としてのジチオスレイトール（ＤＴＴ）および酸化防止剤としてのメチオニンによる変性および還元、２）ヨードアセトアミドによるシステインアルキル化、３）透析による１００ｍＭトリス、０．８Ｍ尿素、ｐＨ７．０への緩衝剤交換（Ｓｃｉｅｎｏｖａ； Ｘｐｒｅｓｓ Ｍｉｃｒｏ Ｄｉａｌｙｓｅｒ、１２～１４ｋＤａ）、４）トリプシン活性を高めるＣａＣｌ2および酸化防止剤としてのメチオニンの存在下でのトリプシンによる消化、ならびに５）水性のＦＡによる０．２ｍｇ／ｍＬタンパク質および２％（ｖ／ｖ）ＦＡ濃度への希釈であった。全てのデータをソフトウエアパッケージデータ解析（バージョン４．４、Ｂｒｕｋｅｒ Ｄａｌｔｏｎｉｋ）で処理した。
【0090】
表16
【表16】
【0091】
表17
【表17】
【0092】
消化ペプチドの配列は表１８に示すとおりである。
表18
表18
【表18】
【図1-1】
【図1-2】
【図1-3】
【図2-1】
【図2-2】
【図2-3】
【図3-1】
【図3-2】
【図3-3】
【図4】
【図5-1】
【図5-2】
【図5-3】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9-1】
【図9-2】
【図10-1】
【図10-2】
【図11-1】
【図11-2】
【図11-3】
【図12-1】
【図12-2】
【図12-3】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【配列表】
【国際調査報告】