▶ シーストーン・ファーマスーティカルズ・（スージョウ）・カンパニー・リミテッドの特許一覧 ▶ シーストーン・ファーマスーティカルズ・（シャンハイ）・カンパニー・リミテッドの特許一覧 ▶ シーストーン・ファーマスーティカルズの特許一覧
特表2022-527910Ａ２Ａ受容体アンタゴニストの塩形態、結晶形態及びその製造方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-06-07
(54)【発明の名称】Ａ２Ａ受容体アンタゴニストの塩形態、結晶形態及びその製造方法
(51)【国際特許分類】
C07D 519/00 20060101AFI20220531BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20220531BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220531BHJP
A61K 31/4985 20060101ALI20220531BHJP
【ＦＩ】
C07D519/00 311
C07D519/00 CSP
A61P35/00
A61P43/00 111
A61K31/4985
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021557448
(86)(22)【出願日】2020-03-27
(85)【翻訳文提出日】2021-10-28
(86)【国際出願番号】 CN2020081704
(87)【国際公開番号】W WO2020192762
(87)【国際公開日】2020-10-01
(31)【優先権主張番号】201910244468.8
(32)【優先日】2019-03-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】519250338
【氏名又は名称】シーストーン・ファーマスーティカルズ・（スージョウ）・カンパニー・リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＣＳＴＯＮＥ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ （ＳＵＺＨＯＵ） ＣＯ．， ＬＴＤ．
【住所又は居所原語表記】ＢＵＩＬＤＩＮＧ Ａ１ Ｅ１６８， ２１８ ＸＩＮＧＨＵ ＳＴ．， ＳＵＺＨＯＵ ＩＮＤＵＳＴＲＩＡＬ ＰＡＲＫ， ＳＵＺＨＯＵ， ＪＩＡＮＧＳＵ ２１５１２３， ＣＨＩＮＡ
(71)【出願人】
【識別番号】519250349
【氏名又は名称】シーストーン・ファーマスーティカルズ・（シャンハイ）・カンパニー・リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＣＳＴＯＮＥ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ （ＳＨＡＮＧＨＡＩ） ＣＯ．， ＬＴＤ．
【住所又は居所原語表記】ＲＯＯＭ ２１１‐２０， ２Ｆ， ＢＵＩＬＤＩＮＧ １， ３８ ＤＥＢＡＯ ＲＯＡＤ， ＳＨＡＮＧＨＡＩ ＰＩＬＯＴ ＦＲＥＥ ＴＲＡＤＥ ＺＯＮＥ， ＳＨＡＮＧＨＡＩ ２０００００， ＣＨＩＮＡ
(71)【出願人】
【識別番号】519250350
【氏名又は名称】シーストーン・ファーマスーティカルズ
【氏名又は名称原語表記】ＣＳＴＯＮＥ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ
【住所又は居所原語表記】Ｐ．Ｏ． ＢＯＸ ３１１１９， ＧＲＡＮＤ ＰＡＶＩＬＩＯＮ， ＨＩＢＩＳＣＵＳ ＷＡＹ， ８０２ ＷＥＳＴ ＢＡＹ ＲＯＡＤ， ＧＲＡＮＤ ＣＡＹＭＡＮ ＫＹ １‐１２０５， ＣＡＹＭＡＮ ＩＳＬＡＮＤＳ， ＵＮＩＴＥＤ ＫＩＮＧＤＯＭ
(74)【代理人】
【識別番号】110001818
【氏名又は名称】特許業務法人Ｒ＆Ｃ
(72)【発明者】
【氏名】▲陳▼ 新▲海▼
(72)【発明者】
【氏名】周 ▲凱▼
(72)【発明者】
【氏名】于 衍新
(72)【発明者】
【氏名】胡 伯羽
(72)【発明者】
【氏名】▲張▼ ▲リ▼
(72)【発明者】
【氏名】▲陳▼ 兆国
【テーマコード（参考）】
4C072
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C072MM02
4C072UU01
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086CB09
4C086GA15
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZC37
4C086ZC41
(57)【要約】
アデノシンＡ２Ａ受容体アンタゴニストの塩形態、結晶形態及びその製造方法を提供し、更に、Ａ２Ａ受容体に関連する疾患の医薬の製造における前記塩形態又は結晶形態の使用を含み、前記塩形態におけるマレイン酸は式（Ｉ）で表わされる構造を有する。
【化１】
【化１】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）で表される化合物。【化1】
【請求項2】
粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：７．１６±０．２°、９．６６±０．２°、１９．６６±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項3】
粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：７．１６±０．２°、９．６６±０．２°、１３．５９±０．２°、１４．３０±０．２°、１５．８７±０．２°、１７．７３±０．２°、１９．６６±０．２°、２０．８８±０．２°において特徴的な回折ピークを有する、請求項２に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項4】
粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：７．１６±０．２°、９．６６±０．２°、１３．５９±０．２°，１４．３０±０．２°、１５．８７±０．２°、１７．７３±０．２°、１９．６６±０．２°、２０．８８±０．２°、２６．０１±０．２°、２６．７６±０．２°、２７．２１±０．２°において特徴的な回折ピークを有する、請求項３に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項5】
ＸＲＰＤスペクトルは図１に示された通りである、請求項４に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項6】
示差走査熱量曲線は２０５．６７±３℃において吸熱ピークの開始点を有することを特徴とする、請求項２～５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項7】
ＤＳＣスペクトルは図２に示された通りであることを特徴とする、請求項６に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項8】
熱重量分析曲線は１２０．００℃±３℃の際に重量が０．１８４６％減少する、請求項２～５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項9】
ＴＧＡスペクトルは図３に示された通りである、請求項８に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項10】
Ａ２Ａ受容体に関連する疾患を治療する医薬の製造における請求項１に記載の式（Ｉ）で表される化合物、及び請求項２～９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形の使用。
【請求項11】
粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：１２．８４±０．２°、１５．８４±０．２°、２３．５５±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。【化2】
【請求項12】
粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：６．４３±０．２°、１１．２２±０．２°、１２．８４±０．２°、１５．８４±０．２°、１９．７８±０．２°、２１．６１±０．２°、２３．５５±０．２°、２７．０２±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、請求項１１に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。
【請求項13】
粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：６．４３±０．２°、１１．２２±０．２°、１２．４１±０．２°、１２．８４±０．２°、１５．８４±０．２°、１６．３６±０．２°、１９．２７±０．２°、１９．７８±０．２°、２１．６１±０．２°、２３．５５±０．２°、２７．０２±０．２°、２８．６２±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、請求項１２に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。
【請求項14】
ＸＲＰＤスペクトルは図４に示された通りである、請求項１３に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。
【請求項15】
示差走査熱量曲線は２５６．３７±３℃において吸熱ピークの開始点を有する、請求項１１～１４のいずれか１項に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。
【請求項16】
ＤＳＣスペクトルは図５に示された通りである、請求項１５に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。
【請求項17】
熱重量分析曲線は１５９．５３℃±３℃の際に重量が０．８８６０％減少する、請求項１１～１４のいずれか１項に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。
【請求項18】
ＴＧＡスペクトルは図６に示された通りである、請求項１７に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。
【請求項19】
粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：８．８９±０．２°、１４．１０±０．２°、１５．５６±０．２°、１５．９９±０．２°、１６．４８±０．２°、１７．４９±０．２°、２０．２３±０．２°、２１．６３±０．２°、２３．４７±０．２°、２４．５１±０．２°、２６．３３±０．２°、２８．１８±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形。【化3】
【請求項20】
ＸＲＰＤスペクトルは図７に示された通りである、請求項１９に記載の式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形。
【請求項21】
粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：４．４３３±０．２°、１２．３８±０．２°、１３．３１±０．２°、１６．６６±０．２°、１７．０８±０．２°、１７．７５±０．２°、１８．６５±０．２°、２２．５８±０．２°、２３．６３±０．２°、２４．９５±０．２°、２５．４０±０．２°、２６．８０±０．２°、２７．６５±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形。【化4】
【請求項22】
ＸＲＰＤスペクトルは図１０に示された通りである、請求項２１に記載の式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形。
【請求項23】
Ａ２Ａ受容体に関連する疾患を治療する医薬の製造における、請求項１１～１８のいずれか１項に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形、請求項１９～２０のいずれか１項に記載の式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形、及び請求項２１～２２のいずれか１項に記載の式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本出願は以下の優先権を主張する。
ＣＮ２０１９１０２４４４６８．８、出願日は２０１９年０３月２８日である。
ＣＮ２０１９１０２４４４６８．８、出願日は２０１９年０３月２８日である。
【0002】
（技術分野）
本発明はアデノシンＡ２Ａ受容体アンタゴニストの塩形態、結晶形態及びその製造方法に関し、更に、Ａ２Ａ受容体に関連する疾患の医薬の製造における前記塩形態及び結晶形態の使用を含む。
本発明はアデノシンＡ２Ａ受容体アンタゴニストの塩形態、結晶形態及びその製造方法に関し、更に、Ａ２Ａ受容体に関連する疾患の医薬の製造における前記塩形態及び結晶形態の使用を含む。
【背景技術】
【0003】
アデノシンＡ２Ａ受容体は、ヒトの組織に広く分布しており、脾臓、胸腺、白血球、血小板、ＧＡＢＡ型ニューロン及び嗅球等の組織と臓器の中で高い発現性がある。同時に、心臓、肺、血管及び脳などの他の部分でも発現される。アデノシンＡ２Ａ受容体は一般的にほかのＧＰＣＲと共存し、互いに結合してヘテロダイマーを形成し、例えば、Ａ２Ａ受容体はドーパミンＤ２、カンナビノイドＣＢ１、及びグルタミン酸ｍＧｌｕＲ５等とヘテロダイマーを形成することができる。アデノシンＡ２Ａ受容体は、血管拡張の調節、新しい血管の形成のサポート、及び炎症による損傷からの身体の組織の保護等、生体活動において重要な役に立ち、アデノシンＡ２Ａ受容体は、脳基底核の間接経路の活性程度にも影響する。
【0004】
固形腫瘍では、細胞組織の分解及び酸欠によって大量のＡＴＰが分解され、細胞外のアデノシンの濃縮をもたらし、その濃度は異常に高く、通常の１０～数百倍である。高濃度のアデノシンとＡ２Ａ受容体の結合は、アデノシンシグナル伝達経路を活性化する。当該のシグナル伝達経路は、生体組織が損傷した場合に、免疫抑制を通じて組織を保護する機序である。アデノシンシグナル伝達経路の活性化は、先天性免疫応答に対する長期的な阻害を引き起こし、この長期的な阻害は、免疫寛容をもたらし、更に悪性腫瘍の制御されない成長を引き起こし、白血球（例えば、リンパ球、Ｔリンパ球、ナチュラルキラー細胞、樹状細胞など）の中でのアデノシンとＡ２Ａ受容体を結合させ、これらの白血球の免疫システムに持つべきエフェクター機能を阻害する。アデノシンとＡ２Ａ受容体の結合は、ＣＤ３９、ＣＤ７３、及びＣＴＬＡ４（Ｔ細胞チェックポイント）の発現性を増加させ、より強い免疫抑制活性のあるＴｒｅｇ細胞の数を増やす。Ａ２Ａ受容体のアデノシンシグナル伝達経路を阻害すると、免疫システムへの抑制効果を低減させ、Ｔ細胞の免疫機能を強化させることができるため、腫瘍の成長を阻害することができる有望な負のフィードバック機序であると考えられる。
【0005】
モノクローナル抗体ＣＳ１００３はＰＤ－１に対する完全長、完全ヒト化免疫グロブリンＧ４（ＩｇＧ４）モノクローナル抗体である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
本発明はアデノシンＡ２Ａ受容体アンタゴニストの塩形態、結晶形態及びその製造方法、更に、Ａ２Ａ受容体に関連する疾患の医薬の製造における前記塩形態及び結晶形態の使用を提供する。
【課題を解決するための手段】
【0007】
本発明は式（Ｉ）で表される化合物を提供する。
【化1】
【0008】
本発明は、更に、粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：７．１６±０．２°、９．６６±０．２°、１９．６６±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形を提供する。
【0009】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ａ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：７．１６±０．２°、９．６６±０．２°、１３．５９±０．２°、１４．３０±０．２°、１５．８７±０．２°、１７．７３±０．２°、１９．６６±０．２°、２０．８８±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0010】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ａ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：７．１６±０．２°、９．６６±０．２°、１３．５９±０．２°，１４．３０±０．２°、１５．８７±０．２°、１７．７３±０．２°、１９．６６±０．２°、２０．８８±０．２°、２６．０１±０．２°、２６．７６±０．２°、２７．２１±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0011】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ａ結晶形のＸＲＰＤスペクトルは図１に示された通りである。
【0012】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ａ結晶形のＸＲＰＤスペクトル解析データは表１に示された通りである。
【0013】
【表1】
【0014】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ａ結晶形の示差走査熱量曲線は２０５．６７±３℃において吸熱ピークを有する。
【0015】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ａ結晶形のＤＳＣスペクトルは図２に示された通りである。
【0016】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ａ結晶形の熱重量分析曲線は１２０．００°Ｃ±３℃の際に重量が０．１８４６％減少する。
【0017】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ａ結晶形の熱重量分析曲線は１２０．００°Ｃ±３℃際に重量が０．１８４６％±０．２％減少する。
【0018】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ａ結晶形のＴＧＡスペクトルが図３に示された通りである。
【0019】
本発明は、更に、式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形の製造方法を提供し、それは以下の方法を含み、
（ａ）式（Ｉ）で表される化合物を溶媒の中に添加し、
（ｂ）３０～５０℃で４０～５５時間攪拌し、
（ｃ）遠心分離した固体は式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形であり、
ここで、前記溶媒はアルコール系、アセトニトリル、アセトン、酢酸エチル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、水、テトラヒドロフラン、アルコール系と水の混合溶媒及びアセトニトリルと水の混合溶媒である。
（ａ）式（Ｉ）で表される化合物を溶媒の中に添加し、
（ｂ）３０～５０℃で４０～５５時間攪拌し、
（ｃ）遠心分離した固体は式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形であり、
ここで、前記溶媒はアルコール系、アセトニトリル、アセトン、酢酸エチル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、水、テトラヒドロフラン、アルコール系と水の混合溶媒及びアセトニトリルと水の混合溶媒である。
【0020】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記アルコール系はメタノール、エタノール、イソプロパノール及びｎ－プロパノールであり、他の変数は、本発明で定義された通りである。
【0021】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記アルコール系と水の混合溶媒であり、アルコール系と水の体積比は１：１であり、他の変数は、本発明で定義された通りである。
本発明の幾つかの実施の態様において、前記アセトニトリルと水の混合溶媒であり、アセトニトリルと水の体積比は１：１であり、他の変数は、本発明で定義された通りである。
本発明は、更にＡ２Ａ受容体に関連する疾患を治療する医薬の製造における前記化合物又はＡ結晶形、或いは前記製造方法で得られたＡ結晶形の使用を提供する。
本発明の幾つかの実施の態様において、前記アセトニトリルと水の混合溶媒であり、アセトニトリルと水の体積比は１：１であり、他の変数は、本発明で定義された通りである。
本発明は、更にＡ２Ａ受容体に関連する疾患を治療する医薬の製造における前記化合物又はＡ結晶形、或いは前記製造方法で得られたＡ結晶形の使用を提供する。
【0022】
本発明は、更に、粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：１２．８４±０．２°、１５．８４±０．２°、２３．５５±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形を提供する。
ここで、ｎは０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９及び２．０から選択される。
【化2】
【0023】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記ｎは０．７及び１から選択され、好ましくは１である。
【0024】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｂ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：６．４３±０．２°、１１．２２±０．２°、１２．８４±０．２°、１５．８４±０．２°、１９．７８±０．２°、２１．６１±０．２°、２３．５５±０．２°、２７．０２±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0025】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｂ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：６．４３±０．２°、１１．２２±０．２°、１２．４１±０．２°、１２．８４±０．２°、１５．８４±０．２°、１６．３６±０．２°、１９．２７±０．２°、１９．７８±０．２°、２１．６１±０．２°、２３．５５±０．２°、２７．０２±０．２°、２８．６２±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0026】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｂ結晶形のＸＲＰＤスペクトルは図４に示された通りである。
【0027】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｂ結晶形のＸＲＰＤスペクトルの解析データは表２に示された通りである。
【0028】
【表2】
【0029】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｂ結晶形の示差走査熱量曲線は２５６．３７±３℃において吸熱ピークの開始点を有する。
【0030】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｂ結晶形のＤＳＣスペクトルは図５に示された通りである。
【0031】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｂ結晶形の熱重量分析曲線は１５９．５３°Ｃ±３℃の際に重量が０．８８６０％減少する。
【0032】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｂ結晶形のＴＧＡスペクトルは図６に示された通りである。
【0033】
本発明は、更に、粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：１５．５６±０．２°、２０．２３±０．２°、２４．５１±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形を提供する。
【化3】
【0034】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｃ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：８．８９±０．２°、１５．５６±０．２°、１５．９９±０．２°、２０．２３±０．２°、２１．６３±０．２°、２３．４７±０．２°、２４．５１±０．２°、２８．１８±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0035】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｃ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：８．８９±０．２°、１４．１０±０．２°、１５．５６±０．２°、１５．９９±０．２°、１６．４８±０．２°、１７．４９±０．２°、２０．２３±０．２°、２１．６３±０．２°、２３．４７±０．２°、２４．５１±０．２°、２６．３３±０．２°、２８．１８±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0036】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｃ結晶形のＸＲＰＤスペクトルは図７に示された通りである。
【0037】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｃ結晶形のＸＲＰＤスペクトルの解析データは表３に示された通りである。
【表3】
【0038】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｃ結晶形の示差走査熱量曲線は２６９．７２±３℃において吸熱ピークの開始点を有する。
【0039】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｃ結晶形のＤＳＣスペクトルは図８に示された通りである。
【0040】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｃ結晶形の熱重量分析曲線は１４４．３３℃±３℃の際に重量が０．３０１７％減少し、２００．０８℃±３℃の際に重量が０．６２６６％減少する。
【0041】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｃ結晶形のＴＧＡスペクトルは図９に示された通りである。
【0042】
本発明は、更に、粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：１７．０８±０．２°、１７．７５±０．２°、２６．８０±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形を提供する。
【化4】
【0043】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｄ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：１３．３１±０．２°、１６．６６±０．２°、１７．０８±０．２°、１７．７５±０．２°、２２．５８±０．２°、２３．６３±０．２°、２４．９５±０．２°、２６．８０±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0044】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｄ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：１２．３８±０．２°、１３．３１±０．２°、１６．６６±０．２°、１７．０８±０．２°、１７．７５±０．２°、１８．６５±０．２°、２２．５８±０．２°、２３．６３±０．２°、２４．９５±０．２°、２５．４０±０．２°、２６．８０±０．２°、２７．６５±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0045】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｄ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：４．４３３±０．２°、１２．３８±０．２°、１３．３１±０．２°、１６．６６±０．２°、１７．０８±０．２°、１７．７５±０．２°、１８．６５±０．２°、２２．５８±０．２°、２３．６３±０．２°、２４．９５±０．２°、２５．４０±０．２°、２６．８０±０．２°、２７．６５±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0046】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｄ結晶形のＸＲＰＤスペクトルは図１０に示された通りである。
【0047】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｄ結晶形のスペクトルの解析データは表４に示された通りである。
【0048】
【表4】
【0049】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｄ結晶形の示差走査熱量曲線は２３８．９６±３℃において吸熱ピークの開始点を有する。
【0050】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｄ結晶形のＤＳＣスペクトルは図１１で示された通りである。
【0051】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｄ結晶形の熱重量分析曲線は１０９．８７℃±３℃の際に重量が０．０７６０７％減少し、２２３．１４℃±３℃の際に重量が０．５９１５７％減少する。
【0052】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｄ結晶形のＴＧＡスペクトルは図１２に示された通りである。
【0053】
本発明は、更に、Ａ２Ａ受容体に関連する疾患を治療する医薬の製造における、式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形、式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形、及び式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形の使用を提供する。
【0054】
本発明は、更に、粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：１５．７４±０．２°、１６．８２±０．２°、２４．６７±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（Ｖ）で表される化合物のＥ結晶形を提供する。
【化5】
【0055】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｅ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：１２．２５±０．２°、１３．７６±０．２°、１５．７４±０．２°、１６．８２±０．２°、２０．１５±０．２°、２２．０３±０．２°、２４．６７±０．２°、２５．５２±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0056】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｅ結晶形の粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：１２．２５±０．２°、１３．７６±０．２°、１５．７４±０．２°、１６．２５±０．２°、１６．８２±０．２°、１８．２８±０．２°、２０．１５±０．２°、２２．０３±０．２°、２４．６７±０．２°、２５．５２±０．２°、２６．１９±０．２°、２９．９４±０．２°において特徴的な回折ピークを有する。
【0057】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｅ結晶形のＸＲＰＤスペクトルは図１３に示される通りである。
【0058】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｅ結晶形のＸＲＰＤスペクトルの解析データは表５に示された通りである。
【0059】
【表5】
【0060】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｅ結晶形の示差走査熱量曲線は２５７．９６±３℃において吸熱ピークを有する。
【0061】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｅ結晶形のＤＳＣスペクトルは図１４に示された通りである。
【0062】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｅ結晶形の熱重量分析曲線は６３．７５℃±３℃の際に重量が０．７０６１％減少し、１５５．２３℃±３℃の際に重量が１．２６３２％減少する。
【0063】
本発明の幾つかの実施の態様において、前記Ｅ結晶形のＴＧＡスペクトルは図１５に示された通りである。
【0064】
本発明は、更に、Ａ２Ａ受容体に関連する疾患を治療する医薬の製造における、式（Ｖ）で表される化合物のＥ結晶形を提供する。
【0065】
（発明的効果）
本発明は、式（Ｉ）で表される化合物を合成して、新規のアデノシンＡ２Ａアンタゴニストを得、単独投与又は抗体と併用投与して腫瘍免疫療法に使用される。本発明の化合物は、良好な溶解性を有し、同時に、薬物動態特性を有意に改善した。
本発明は、式（Ｉ）で表される化合物を合成して、新規のアデノシンＡ２Ａアンタゴニストを得、単独投与又は抗体と併用投与して腫瘍免疫療法に使用される。本発明の化合物は、良好な溶解性を有し、同時に、薬物動態特性を有意に改善した。
【0066】
本発明の化合物とＣＳ１００３の併用投与は良好な抗腫瘍効果を達成し、本発明の化合物とＣＳ１００３との併用は相乗効果を有する。
【0067】
本発明の化合物は、血漿及び腫瘍組織において十分な曝露量を有する。
【0068】
本発明の化合物の結晶形は、高温及び高湿度条件下で良好な安定性を有する。
【0069】
（定義と説明）
別途に説明しない限り、本明細書で用いられる以下の用語及び連語は以下の意味を含む。一つの特定の連語又は用語は、特別に定義されない場合、不確定又は不明瞭ではなく、普通の定義として理解されるべきである。本明細書で商品名が出た場合、相応の商品又はその活性成分を指す。
別途に説明しない限り、本明細書で用いられる以下の用語及び連語は以下の意味を含む。一つの特定の連語又は用語は、特別に定義されない場合、不確定又は不明瞭ではなく、普通の定義として理解されるべきである。本明細書で商品名が出た場合、相応の商品又はその活性成分を指す。
【0070】
本発明の中間体化合物は当業者に熟知の様々な合成方法によって製造することができ、以下に挙げられた具体的な実施形態、他の化学合成方法と合わせた実施形態及び当業者に熟知の同等の代替方法を含み、好適な実施形態は本発明の実施例を含むが、これらに限定されない。
【0071】
本発明の具体的な実施形態の化学反応は適切な溶媒で完成され、前記の溶媒は本発明の化学変化及びそれに必要な試薬と材料に適するべきである。本発明の化合物を得るため、当業者が既存の実施形態に基づいて合成工程又は反応スキームを変更又は選択することが必要であることもある。
【0072】
本発明の化合物は、以下に列挙された特定の具体的な実施形態、それらを他の化学合成方法と組み合わせることによって形成される実施形態、及び当業者によく知られている同等の代替方法を含む方法で製造でき、好ましい実施形態は、本発明の実施例を含むが、これらに限定されない。本発明の化合物の構造は、当業者に周知の従来の方法によって確認することができ、本発明が化合物の絶対配置に関連する場合、当該絶対配置は、当業者の従来の技術的手段によって確認することができる。例えば、単結晶Ｘ線回折法（ＳＸＲＤ）では、培養した単結晶をＢｒｕｋｅｒ Ｄ８ ｖｅｎｔｕｒｅ回折計で回折強度データを収集し、光源はＣｕＫα線であり、走査方法は：φ／走査であり、関連するデータを収集した後、更に、直接法（Ｓｈｅｌｘｓ９７）を使用して結晶形の構造を分析して絶対配置を確認できる。
【0073】
本発明に使用されたすべての溶媒は市販品で、更に精製せずにそのままで使用してもよい。
【0074】
本発明は下記略語を使用する：ｒ．ｔ．は室温を表し；ＴＨＦはテトラヒドロフランを表し；ＮＭＰはＮ－メチルピロリドンを表し；ＭｅＳＯ３Ｈはメタンスルホン酸を表し；ＤＭＥは１，２－ジメトキシエタンを表し；ＤＣＭはジクロロメタンを表し；Ｘｐｈｏｓは２－ジシクロヘキシルホスフィノ－２´，４´，６´－トリイソプロピルビフェニルを表し；ＥｔＯＡｃは酢酸エチルを表し；ＭｅＯＨはメタノールを表し；２－Ｍｅ－ＴＨＦは２－メチルテトラヒドロフランを表し；ＩＰＡはイソプロパノールを表し；Ｐｄ（ｄｐｐｆ）２Ｃｌ２は［１，１´－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロリド ジクロロメタン付加物を表し；ＲＨは湿度を表し；ＢＩＤは１日２回を表す。
【0075】
化合物は、本技術分野の従来の命名則、又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）ソフトウェアを使用して命名され、市販の化合物は、サプライヤーのカタログ名を使用して命名される。
【0076】
本発明の粉末Ｘ線回折（Ｘ－ｒａｙ ｐｏｗｄｅｒ ｄｉｆｆｒａｃｔｏｍｅｔｅｒ、ＸＲＰＤ）方法
計器モデル：ブルカーＤ８ ａｄｖａｎｃｅ Ｘ－線回折計
測定方法：約１０～２０ｍｇの試料をＸＲＰＤの検出に用いる。
計器モデル：ブルカーＤ８ ａｄｖａｎｃｅ Ｘ－線回折計
測定方法：約１０～２０ｍｇの試料をＸＲＰＤの検出に用いる。
【0077】
詳細なＸＲＰＤパラメータは以下通りである。
Ｘ線管：Ｃｕ、ｋα、（λ＝１．５４０５６Å）。
管電圧：４０ｋＶ、管電流：４０ｍＡ
発散スリット：０．６０ｍｍ
センサスリット：１０．５０ｍｍ
散乱防止スリット：７．１０ｍｍ
走査範囲：４～４０ｄｅｇ
ステップ角：０．０２ｄｅｇ
ステップ幅：０．１２秒
サンプルパン回転数：１５ｒｐｍ
Ｘ線管：Ｃｕ、ｋα、（λ＝１．５４０５６Å）。
管電圧：４０ｋＶ、管電流：４０ｍＡ
発散スリット：０．６０ｍｍ
センサスリット：１０．５０ｍｍ
散乱防止スリット：７．１０ｍｍ
走査範囲：４～４０ｄｅｇ
ステップ角：０．０２ｄｅｇ
ステップ幅：０．１２秒
サンプルパン回転数：１５ｒｐｍ
【0078】
本発明の示差熱分析（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ Ｓｃａｎｎｉｎｇ Ｃａｌｏｒｉｍｅｔｅｒ、ＤＳＣ）方法
計器モデル：ＴＡ Ｑ２０００示差走査熱量計
測定方法：試料（～１ｍｇ）をＤＳＣアルミニウム製坩堝に取って測定を行い、５０ｍＬ／分 Ｎ２条件で、１０℃／分の昇温速度で、試料を３０℃（室温）から３００℃（又は３５０℃）まで加熱する。
計器モデル：ＴＡ Ｑ２０００示差走査熱量計
測定方法：試料（～１ｍｇ）をＤＳＣアルミニウム製坩堝に取って測定を行い、５０ｍＬ／分 Ｎ２条件で、１０℃／分の昇温速度で、試料を３０℃（室温）から３００℃（又は３５０℃）まで加熱する。
【0079】
本発明の熱重量分析（Ｔｈｅｒｍａｌ Ｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃ Ａｎａｌｙｚｅｒ、ＴＧＡ）方法
計器モデル：ＴＡ Ｑ５０００ＩＲ熱重量分析計
測定方法：試料（２～５ｍｇ）をＴＧＡ白金坩堝に取って測定を行い、２５ｍＬ／分 Ｎ２条件で、１０℃／分の昇温速度で、試料を室温から３５０℃まで、又は重量が２０％減少するまで加熱する。
計器モデル：ＴＡ Ｑ５０００ＩＲ熱重量分析計
測定方法：試料（２～５ｍｇ）をＴＧＡ白金坩堝に取って測定を行い、２５ｍＬ／分 Ｎ２条件で、１０℃／分の昇温速度で、試料を室温から３５０℃まで、又は重量が２０％減少するまで加熱する。
【0080】
本発明の高速液体クロマトグラフィー分析法（ＨＰＬＣ）は表６に示された通りである。
【0081】
【表6】
【図面の簡単な説明】
【0082】
【図1】式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形のＣｕ－Ｋα線のＸＲＰＤスペクトルである。
【図2】式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形のＤＳＣスペクトルである。
【図3】式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形のＴＧＡスペクトルである。
【図4】式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形のＣｕ－Ｋα線のＸＲＰＤスペクトルである。
【図5】式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形のＤＳＣスペクトルである。
【図6】式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形のＴＧＡスペクトルである。
【図7】式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形のＣｕ－Ｋα線のＸＲＰＤスペクトルである。
【図8】式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形のＤＳＣスペクトルである。
【図9】式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形のＴＧＡスペクトルである。
【図10】式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形のＣｕ－Ｋα線のＸＲＰＤスペクトルである。
【図11】式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形のＤＳＣスペクトルである。
【図12】式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形のＴＧＡスペクトルである。
【図13】式（Ｖ）で表される化合物のＥ結晶形のＣｕ－Ｋα線のＸＲＰＤスペクトルである。
【図14】式（Ｖ）で表される化合物のＥ結晶形のＤＳＣスペクトルである。
【図15】式（Ｖ）で表される化合物のＥ結晶形のＴＧＡスペクトルである。
【発明を実施するための形態】
【0083】
本発明の内容がよりよく分かるように、以下に具体的な実施の形態を参照しながら更に説明するが、具体的な実施の態様は本発明の内容を制限するものではない。
【0084】
実施例１：化合物Ｄの製造
【化6】
【0085】
工程１：
２０Ｌのイソプロパノールを５０ＬのケトルＲ１に添加した後、原材料Ａ（１０Ｋｇ、１．０ｅｑ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（８．５３Ｋｇ、１．２ｅｑ）を添加し、反応溶液を７０～８０℃に昇温させ、３時間攪拌し、サンプリングして検出し、原材料Ａは消失した。反応溶液を７０℃に冷却させた後、バッチで塩酸ヒドロキシルアミン（４．８Ｋｇ、１．２ｅｑ）を添加し、内部温度を８０℃未満に制御し、添加完了後、内部温度を７０～８０℃に維持させながら１時間攪拌し、サンプリングして検出し、反応を完成させた。加熱を停止させ、反応溶液を室温に冷却させ、濾過し、ケーキを２Ｌのイソプロパノールで洗浄し、固体を収集し、減圧して真空乾燥させ、化合物Ｂを得た。
２０Ｌのイソプロパノールを５０ＬのケトルＲ１に添加した後、原材料Ａ（１０Ｋｇ、１．０ｅｑ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（８．５３Ｋｇ、１．２ｅｑ）を添加し、反応溶液を７０～８０℃に昇温させ、３時間攪拌し、サンプリングして検出し、原材料Ａは消失した。反応溶液を７０℃に冷却させた後、バッチで塩酸ヒドロキシルアミン（４．８Ｋｇ、１．２ｅｑ）を添加し、内部温度を８０℃未満に制御し、添加完了後、内部温度を７０～８０℃に維持させながら１時間攪拌し、サンプリングして検出し、反応を完成させた。加熱を停止させ、反応溶液を室温に冷却させ、濾過し、ケーキを２Ｌのイソプロパノールで洗浄し、固体を収集し、減圧して真空乾燥させ、化合物Ｂを得た。
【0086】
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ：２１７．７［Ｍ＋１］＋；
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＤ－ｄ４）：δ ８．２４（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．９０（ｓ、２Ｈ）、７．７６（ｄｄ、Ｊ＝８．８、２．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８９（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＤ－ｄ４）：δ ８．２４（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．９０（ｓ、２Ｈ）、７．７６（ｄｄ、Ｊ＝８．８、２．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８９（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）。
【0087】
工程２：
２２．４Ｌの酢酸イソプロピルを５０ＬのケトルＲ１に添加した後、化合物Ｂ（４．４８Ｋｇ、１．０ｅｑ）を添加し、反応系を０～１０℃に制御した。ケトルに無水トリフルオロ酢酸（６．２Ｋｇ、１．５ｅｑ）を滴下し、内部温度を０～１０℃に制御し、滴下完了後、冷凍を停止させ、反応溶液をゆっくりと室温まで昇温させ、１６時間撹拌し、サンプリングして検出し、反応を完了させた。２．４４ｋｇの水酸化ナトリウムを秤量し、３０Ｌの氷と均一に混合し、反応溶液をバッチで前記混合溶液に注ぎ、０．２時間攪拌し、濾過し、固体を１Ｌの酢酸イソプロピルで洗浄した。濾液を分離し、水層を毎回５Ｌの酢酸イソプロピルで２回抽出した。有機層を合わせ、１０Ｌの水で洗浄した。液体を分離し、有機層を濃縮して粗生成物を得、粗生成物と前記濾過して得られた固体と合わせた。合わせた固体を１６～２２℃で２時間スラリー化させ、濾過し、ケーキを２Ｌの前記混合溶媒で洗浄し、固体を収集し、減圧して真空乾燥させ、化合物Ｃを得た。
２２．４Ｌの酢酸イソプロピルを５０ＬのケトルＲ１に添加した後、化合物Ｂ（４．４８Ｋｇ、１．０ｅｑ）を添加し、反応系を０～１０℃に制御した。ケトルに無水トリフルオロ酢酸（６．２Ｋｇ、１．５ｅｑ）を滴下し、内部温度を０～１０℃に制御し、滴下完了後、冷凍を停止させ、反応溶液をゆっくりと室温まで昇温させ、１６時間撹拌し、サンプリングして検出し、反応を完了させた。２．４４ｋｇの水酸化ナトリウムを秤量し、３０Ｌの氷と均一に混合し、反応溶液をバッチで前記混合溶液に注ぎ、０．２時間攪拌し、濾過し、固体を１Ｌの酢酸イソプロピルで洗浄した。濾液を分離し、水層を毎回５Ｌの酢酸イソプロピルで２回抽出した。有機層を合わせ、１０Ｌの水で洗浄した。液体を分離し、有機層を濃縮して粗生成物を得、粗生成物と前記濾過して得られた固体と合わせた。合わせた固体を１６～２２℃で２時間スラリー化させ、濾過し、ケーキを２Ｌの前記混合溶媒で洗浄し、固体を収集し、減圧して真空乾燥させ、化合物Ｃを得た。
【0088】
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ：１９９．７［Ｍ＋１］＋；
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、重水素化クロロホルム）：δ ８．７７（ｓ、１Ｈ）、８．３４（ｓ、１Ｈ）、７．７０－７．６０（ｍ、２Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、重水素化クロロホルム）：δ ８．７７（ｓ、１Ｈ）、８．３４（ｓ、１Ｈ）、７．７０－７．６０（ｍ、２Ｈ）。
【0089】
工程３：
３０Ｌのジオキサンを５０ＬのケトルＲ１に添加した後、化合物Ｃ（３．０Ｋｇ、１．０ｅｑ）を添加し、その後、ビスピナコラートジボロン（３．８５Ｋｇ、１．０ｅｑ）を添加し、Ｒ１に酢酸カリウム（２．３Ｋｇ、１．５ｅｑ）を添加し、Ｒ１にＰｄ（ｄｐｐｆ）２Ｃｌ２（５３７ｇ、０．０５ｅｑ）を添加し、窒素ガスでＲ１ケトルを４回置換し、窒素雰囲気を維持させ、温度を８５～１０５℃に制御し、１８時間攪拌した。サンプリングして検出し、反応溶液を室温に冷却させ、珪藻土濾過し、ケーキをジオキサンで洗浄し、合わせた有機層をスピン乾燥させて残留物を得、Ｒ１に２．５Ｌの酢酸イソプロピルを添加し、残留物をケトルＲ１に移し、珪藻土を添加した後、ｎ－ヘプタンを添加し、混合物を１００℃に加熱し、１６時間撹拌した。混合物を室温に冷却させ、珪藻土で濾過し、ケーキをｎ－ヘプタンで洗浄し、有機層合わせてスピン乾燥させ、粗生成物を得た。粗生成物をｎ－ヘプタンで１６時間スラリー化させ、濾過し、ケーキをｎ－ヘプタンで洗浄した後、ケーキを収集し、ケーキを乾燥させて化合物Ｄを得た。
３０Ｌのジオキサンを５０ＬのケトルＲ１に添加した後、化合物Ｃ（３．０Ｋｇ、１．０ｅｑ）を添加し、その後、ビスピナコラートジボロン（３．８５Ｋｇ、１．０ｅｑ）を添加し、Ｒ１に酢酸カリウム（２．３Ｋｇ、１．５ｅｑ）を添加し、Ｒ１にＰｄ（ｄｐｐｆ）２Ｃｌ２（５３７ｇ、０．０５ｅｑ）を添加し、窒素ガスでＲ１ケトルを４回置換し、窒素雰囲気を維持させ、温度を８５～１０５℃に制御し、１８時間攪拌した。サンプリングして検出し、反応溶液を室温に冷却させ、珪藻土濾過し、ケーキをジオキサンで洗浄し、合わせた有機層をスピン乾燥させて残留物を得、Ｒ１に２．５Ｌの酢酸イソプロピルを添加し、残留物をケトルＲ１に移し、珪藻土を添加した後、ｎ－ヘプタンを添加し、混合物を１００℃に加熱し、１６時間撹拌した。混合物を室温に冷却させ、珪藻土で濾過し、ケーキをｎ－ヘプタンで洗浄し、有機層合わせてスピン乾燥させ、粗生成物を得た。粗生成物をｎ－ヘプタンで１６時間スラリー化させ、濾過し、ケーキをｎ－ヘプタンで洗浄した後、ケーキを収集し、ケーキを乾燥させて化合物Ｄを得た。
【0090】
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ：４６．２［Ｍ＋１］＋；
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、重水素化クロロホルム）：δ ８．９０（ｓ、１Ｈ）、８．２９（ｓ、１Ｈ）、７．７６－７．６６（ｍ、２Ｈ）、１．３０（ｓ、１２Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、重水素化クロロホルム）：δ ８．９０（ｓ、１Ｈ）、８．２９（ｓ、１Ｈ）、７．７６－７．６６（ｍ、２Ｈ）、１．３０（ｓ、１２Ｈ）。
【0091】
実施例２：式（Ｉ）で表される化合物の製造
【化7】
【0092】
工程１：
２４ＬのＤＭＦを５０Ｌのケトルに添加した後、ケトルに化合物Ｅ（５．０Ｋｇ、１．０ｅｑ）、化合物Ｆ（４３０４．１４ｇ、１．０ｅｑ）、ヨウ化第一銅（６６．８８ｇ、０．０１ｅｑ）、トリエチルアミン（５３３０．００ｇ、１．５ｅｑ）を添加し、０．９５ｋｇのＤＭＦでケトル口を洗い流し、ケトルに窒素ガスを置換せずにＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１２３．２４ｇ、０．００５ｅｑ）を添加し、内部温度を５０℃未満に維持させ、１６時間攪拌し、サンプリングして検出し、反応溶液を直接濾過し、１／５濾液当たりを２５Ｌの水にゆっくりと添加し、０．５時間攪拌し続け、５回繰り返してすべての濾液を処理し、混合溶液を濾過して９．８２ｋｇの粗生成物を得た。粗生成物を１４Ｌのエタノールで室温でスラリー化させ、スラリー化した液体を濾過し、ケーキを真空乾燥オーブンで減圧乾燥させて、化合物Ｇを得た。
２４ＬのＤＭＦを５０Ｌのケトルに添加した後、ケトルに化合物Ｅ（５．０Ｋｇ、１．０ｅｑ）、化合物Ｆ（４３０４．１４ｇ、１．０ｅｑ）、ヨウ化第一銅（６６．８８ｇ、０．０１ｅｑ）、トリエチルアミン（５３３０．００ｇ、１．５ｅｑ）を添加し、０．９５ｋｇのＤＭＦでケトル口を洗い流し、ケトルに窒素ガスを置換せずにＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（１２３．２４ｇ、０．００５ｅｑ）を添加し、内部温度を５０℃未満に維持させ、１６時間攪拌し、サンプリングして検出し、反応溶液を直接濾過し、１／５濾液当たりを２５Ｌの水にゆっくりと添加し、０．５時間攪拌し続け、５回繰り返してすべての濾液を処理し、混合溶液を濾過して９．８２ｋｇの粗生成物を得た。粗生成物を１４Ｌのエタノールで室温でスラリー化させ、スラリー化した液体を濾過し、ケーキを真空乾燥オーブンで減圧乾燥させて、化合物Ｇを得た。
【0093】
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ：２２３．６［Ｍ＋１］＋；
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、重水素化クロロホルム）：δ ８．７６（ｄ、Ｊ＝１．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．６０（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．７３－７．６５（ｍ、２Ｈ）、７．１３（ｔ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、重水素化クロロホルム）：δ ８．７６（ｄ、Ｊ＝１．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．６０（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．７３－７．６５（ｍ、２Ｈ）、７．１３（ｔ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）。
【0094】
工程２：
２３ＬのＤＭＦを５０Ｌのケトルに添加した後、ケトルに化合物Ｇ（７７００．００ｇ、１．０ｅｑ）、酢酸アンモニウム（４９４５．４５ｇ、２．０ｅｑ）、トリフルオロメタンスルホナート銅（２３２．０７ｇ、０．０２ｅｑ）を添加し、１ＬのＤＭＦでケトル口を洗い流し、加熱を開始させ、内部温度を１００℃に維持させ、１６時間攪拌した。サンプリングして検出し、反応溶液を直接に濾過し、収集した固体は粗生成物であり、組成生物は６．９８ｋｇであった。組成生物を１４Ｌの水で室温でスラリー化させ、スラリー化した液体を濾過し、粗生成物を１４Ｌのエタノールで還流させながらスラリー化させ、スラリー化した液体を濾過し、ケーキを真空乾燥オーブンで減圧乾燥させて、化合物Ｈを得た。
２３ＬのＤＭＦを５０Ｌのケトルに添加した後、ケトルに化合物Ｇ（７７００．００ｇ、１．０ｅｑ）、酢酸アンモニウム（４９４５．４５ｇ、２．０ｅｑ）、トリフルオロメタンスルホナート銅（２３２．０７ｇ、０．０２ｅｑ）を添加し、１ＬのＤＭＦでケトル口を洗い流し、加熱を開始させ、内部温度を１００℃に維持させ、１６時間攪拌した。サンプリングして検出し、反応溶液を直接に濾過し、収集した固体は粗生成物であり、組成生物は６．９８ｋｇであった。組成生物を１４Ｌの水で室温でスラリー化させ、スラリー化した液体を濾過し、粗生成物を１４Ｌのエタノールで還流させながらスラリー化させ、スラリー化した液体を濾過し、ケーキを真空乾燥オーブンで減圧乾燥させて、化合物Ｈを得た。
【0095】
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ：２４１．０［Ｍ＋１］＋；
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ ９．４４（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、９．１９（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．７３（ｄｄ、Ｊ＝８．８、３．２ ｚ、２Ｈ）、８．０６（ｓ、１Ｈ）、７．７１（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．２９（ｂｒ、２Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ ９．４４（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、９．１９（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．７３（ｄｄ、Ｊ＝８．８、３．２ ｚ、２Ｈ）、８．０６（ｓ、１Ｈ）、７．７１（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．２９（ｂｒ、２Ｈ）。
【0096】
工程３：
１０．６ＬのＤＭＦを５０Ｌのケトルに添加し、攪拌を開始させ、ケトルに化合物Ｈ（５．３０ｋｇ、１．０ｅｑ）を添加し、バッチでケトルにＮ－ブロモスクシンイミド（４．６６ｋｇ、１．２ｅｑ）を添加し、添加する時、内部温度を５０℃未満に維持させ、加熱を開始させ、内部温度を５０℃に維持させ、２時間攪拌し、サンプリングして検出し、反応溶液にゆっくりと２０ＬのＥｔＯＡｃを注ぎ、内部温度を５０℃に維持させ、０．５時間攪拌した。反応溶液を室温に冷却させ、反応溶液を濾過し、組成生物を１６ＬのＴＨＦで還流させながらスラリー化させ、スラリー化した液体を濾過し、ケーキを真空乾燥オーブンで減圧乾燥させて、化合物Ｊを得た。
１０．６ＬのＤＭＦを５０Ｌのケトルに添加し、攪拌を開始させ、ケトルに化合物Ｈ（５．３０ｋｇ、１．０ｅｑ）を添加し、バッチでケトルにＮ－ブロモスクシンイミド（４．６６ｋｇ、１．２ｅｑ）を添加し、添加する時、内部温度を５０℃未満に維持させ、加熱を開始させ、内部温度を５０℃に維持させ、２時間攪拌し、サンプリングして検出し、反応溶液にゆっくりと２０ＬのＥｔＯＡｃを注ぎ、内部温度を５０℃に維持させ、０．５時間攪拌した。反応溶液を室温に冷却させ、反応溶液を濾過し、組成生物を１６ＬのＴＨＦで還流させながらスラリー化させ、スラリー化した液体を濾過し、ケーキを真空乾燥オーブンで減圧乾燥させて、化合物Ｊを得た。
【0097】
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ：３２０．９［Ｍ＋１］＋；
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ ９．１６（ｄ、Ｊ＝１．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．８９（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．７２（ｄｄ、Ｊ＝８．８、６．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．６４（ｂｒ、２Ｈ），７．３２（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ ９．１６（ｄ、Ｊ＝１．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．８９（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．７２（ｄｄ、Ｊ＝８．８、６．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．６４（ｂｒ、２Ｈ），７．３２（ｔ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）。
【0098】
工程４：
２２ＬのＴＨＦを５０Ｌのケトルに添加した後、ケトルに化合物Ｊ（４．４ｋｇ、１．０ｅｑ）、Ｐ３ＫＯ４（７９９１．９７ｇ、３．０ｅｑ）、化合物Ｄ（６．１５ｋｇ、１．３８ｅｑ）、Ｐｄ（ｄｔｂｐｆ）２Ｃｌ２（４０８．９７ｇ、０．０５ｅｑ）を添加し、４．４ＬのＨ２Ｏを５０ＬのケトルＡに添加し、攪拌を開始させ、窒素ガスで３回置換し、温度を７０℃に制御して１６時間攪拌した。サンプリングして検出し、反応溶液を減圧濃縮し、ケトルに３３ＬのＤＣＭ及び１０ＬのＥｔＯＨを添加し、３０℃で０．５時間攪拌し、濃縮物を４．４ＬのＥｔＯＡｃに添加し、温度を６０℃に制御して１時間攪拌し、室温に冷却させ、濾過した。ケーキを８．８Ｌの水で希釈し、２５℃で１時間攪拌し、濾過し、ケーキを４．４ＬのＤＭＦで希釈し、温度を５０℃に制御して０．５時間攪拌し、２２Ｌの酢酸エチルを添加し、温度を５０℃に制御して１時間攪拌した。室温に冷却させ、濾過し、ケーキを３６．７ＬのＤＣＭと９．７ＬのＥｔＯＨで希釈し、４０℃に昇温させ、１，３，５－トリアジン－２，４，６－トリチオール三ナトリウム（０．８８ｋｇ）を添加し、温度を４０℃に制御して１５時間攪拌し、濾過した。前記の工程を３回繰り返した。濾過し、濾液をスピン乾燥させて化合物Ｌを得た。
２２ＬのＴＨＦを５０Ｌのケトルに添加した後、ケトルに化合物Ｊ（４．４ｋｇ、１．０ｅｑ）、Ｐ３ＫＯ４（７９９１．９７ｇ、３．０ｅｑ）、化合物Ｄ（６．１５ｋｇ、１．３８ｅｑ）、Ｐｄ（ｄｔｂｐｆ）２Ｃｌ２（４０８．９７ｇ、０．０５ｅｑ）を添加し、４．４ＬのＨ２Ｏを５０ＬのケトルＡに添加し、攪拌を開始させ、窒素ガスで３回置換し、温度を７０℃に制御して１６時間攪拌した。サンプリングして検出し、反応溶液を減圧濃縮し、ケトルに３３ＬのＤＣＭ及び１０ＬのＥｔＯＨを添加し、３０℃で０．５時間攪拌し、濃縮物を４．４ＬのＥｔＯＡｃに添加し、温度を６０℃に制御して１時間攪拌し、室温に冷却させ、濾過した。ケーキを８．８Ｌの水で希釈し、２５℃で１時間攪拌し、濾過し、ケーキを４．４ＬのＤＭＦで希釈し、温度を５０℃に制御して０．５時間攪拌し、２２Ｌの酢酸エチルを添加し、温度を５０℃に制御して１時間攪拌した。室温に冷却させ、濾過し、ケーキを３６．７ＬのＤＣＭと９．７ＬのＥｔＯＨで希釈し、４０℃に昇温させ、１，３，５－トリアジン－２，４，６－トリチオール三ナトリウム（０．８８ｋｇ）を添加し、温度を４０℃に制御して１５時間攪拌し、濾過した。前記の工程を３回繰り返した。濾過し、濾液をスピン乾燥させて化合物Ｌを得た。
【0099】
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ：３５８．１［Ｍ＋１］＋。
【0100】
工程５：
２４．２ＬのＴＨＦを５０ＬのケトルＡに添加した後、ケトルＣにＬ（４９０ｇ、１．０ｅｑ）を添加し、温度を５０℃に制御して１時間攪拌し、濾過し、濾液を再び５０ＬのケトルＡに添加し、マレイン酸（１６５．９８ｇ、１．０５ｅｑ）を２９ＬのＴＨＦに溶解させた後Ｃに添加し、温度を５０℃に制御して１４時間攪拌し、室温２０～２５℃に冷却させ、反応溶液を直接に濾過し、ケーキを１．３２Ｌのエタノールで室温で１６時間スラリー化させ、スラリー化した液体を濾過した。ケーキを真空乾燥オーブンで減圧乾燥させて式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形を得た。
２４．２ＬのＴＨＦを５０ＬのケトルＡに添加した後、ケトルＣにＬ（４９０ｇ、１．０ｅｑ）を添加し、温度を５０℃に制御して１時間攪拌し、濾過し、濾液を再び５０ＬのケトルＡに添加し、マレイン酸（１６５．９８ｇ、１．０５ｅｑ）を２９ＬのＴＨＦに溶解させた後Ｃに添加し、温度を５０℃に制御して１４時間攪拌し、室温２０～２５℃に冷却させ、反応溶液を直接に濾過し、ケーキを１．３２Ｌのエタノールで室温で１６時間スラリー化させ、スラリー化した液体を濾過した。ケーキを真空乾燥オーブンで減圧乾燥させて式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形を得た。
【0101】
ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ：３５８．１［Ｍ＋１］＋；
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ ９．０２（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．８８（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．７９（ｄ、Ｊ＝１．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．４８（ｓ、１Ｈ）、７．７７（ｄ、Ｊ＝０．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．７５（ｂｒ、２Ｈ）、７．４７－７．４３（ｍ、３Ｈ）、７．１４（ｔ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、２Ｈ）、６．２７（ｔ、Ｊ＝１０．８Ｈｚ、２Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ ９．０２（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．８８（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．７９（ｄ、Ｊ＝１．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．４８（ｓ、１Ｈ）、７．７７（ｄ、Ｊ＝０．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．７５（ｂｒ、２Ｈ）、７．４７－７．４３（ｍ、３Ｈ）、７．１４（ｔ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、２Ｈ）、６．２７（ｔ、Ｊ＝１０．８Ｈｚ、２Ｈ）。
【0102】
実施例３
表７に従って、式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形をぞれぞれ液相バイアルに秤量し、それぞれ表７の溶媒又は混合溶媒を添加して懸濁液に製造した。次に、前記懸濁液サンプルを４０℃の恒温ミキサーに置き、７００ｒｐｍの回転速度で２日間振とうした。その後、遠心分離（８０００ｒｐｍの遠心分離機で、３分間遠心分離した）して固体を分離し、３０℃の真空乾燥オーブン内で一晩乾燥させて、式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形を得た。
表７に従って、式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形をぞれぞれ液相バイアルに秤量し、それぞれ表７の溶媒又は混合溶媒を添加して懸濁液に製造した。次に、前記懸濁液サンプルを４０℃の恒温ミキサーに置き、７００ｒｐｍの回転速度で２日間振とうした。その後、遠心分離（８０００ｒｐｍの遠心分離機で、３分間遠心分離した）して固体を分離し、３０℃の真空乾燥オーブン内で一晩乾燥させて、式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形を得た。
【表7】
【0103】
実施例４：式（ＩＩ－１）で表される化合物の製造
【化8】
【0104】
２５℃で反応バイアルにアセトニトリル２００ｍＬ、水２００ｍＬを添加した後、化合物Ｌ（６ｇ）を添加し、その後、１Ｍの希塩酸を添加してｐＨ値を３～５に調節した。反応溶液を２５℃で続いて０．５時間攪拌した。式（ＩＩ－１）で表される化合物を得た。
【0105】
生成物ＬＣＭＳｍ／ｚ：３５８．２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ＝９．２４（ｔ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、１Ｈ）、９．１２（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．８７（ｓ、１Ｈ）、８．５９（ｔ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．８４（ｔ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８-７．５５（ｍ、２Ｈ）、７．５０（ｄ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．２７（ｔ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、２Ｈ）
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ＝９．２４（ｔ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、１Ｈ）、９．１２（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．８７（ｓ、１Ｈ）、８．５９（ｔ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．８４（ｔ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８-７．５５（ｍ、２Ｈ）、７．５０（ｄ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．２７（ｔ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、２Ｈ）
【0106】
実施例５：式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形の製造
常温で約１００ｍｇの化合物Ｌを秤量して４０ｍＬのバイアルに添加し、３０ｍＬのアセトンを添加してそれを溶解させた後、ゆっくりと２４．１７μＬのＨＣｌ（化合物Ｌ：塩酸のモル比は１：１．０５）を添加した。サンプルをマグネチックスターラー（４０℃）に置いて１日攪拌した。式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形を得た。
常温で約１００ｍｇの化合物Ｌを秤量して４０ｍＬのバイアルに添加し、３０ｍＬのアセトンを添加してそれを溶解させた後、ゆっくりと２４．１７μＬのＨＣｌ（化合物Ｌ：塩酸のモル比は１：１．０５）を添加した。サンプルをマグネチックスターラー（４０℃）に置いて１日攪拌した。式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形を得た。
【0107】
実施例６：式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形の製造
【化9】
【0108】
常温で約１００ｍｇの化合物Ｌを秤量して４０ｍＬのバイアルに添加し、３０ｍＬのアセトンを添加してそれを溶解させた後、ゆっくりと１９．０８μＬのメタンスルホン酸（化合物Ｌ：メタンスルホン酸のモル比は１：１．０５）を添加した。サンプルをマグネチックスターラー（４０℃）に置いて１日攪拌した。式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形を得た。
【0109】
実施例７：式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形の製造
【化10】
【0110】
常温で約１００ｍｇの化合物Ｌを秤量して４０ｍＬのバイアルに添加し、３０ｍＬのアセトンを添加してそれを溶解させた後、ゆっくりと２００．５７μＬのｐ－トルエンスルホン酸（化合物Ｌ：ｐ－トルエンスルホン酸のモル比は１：１．０５）を添加した。サンプルをマグネチックスターラー（４０℃）に置いて１日攪拌した。式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形を得た。
【0111】
実施例８：式（Ｖ）で表される化合物のＥ結晶形の製造
【化11】
【0112】
常温で約１００ｍｇの化合物Ｌを秤量して４０ｍＬのバイアルに添加し、３０ｍＬのアセトンを添加してそれを溶解させた後、ゆっくりと１５．９９μＬの硫酸（化合物Ｌ：硫酸のモル比は１：１．０５）を添加した。サンプルをマグネチックスターラー（４０℃）に置いて１日攪拌した。式（Ｖ）で表される化合物のＥ結晶形を得た。
【0113】
実施例９：結晶形の安定性実験
所定量（約１０ｍｇ）の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形、式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形、及び式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形を並行して各２部を秤量し、４０ｍＬのサンプルバイアルに添加し、６０℃／７５％湿度の恒温恒湿ボックスに入れ、１週間放置した。又、それぞれ一部（約１０ｍｇ）の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形、式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形、及び式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形を取って、－２０℃の冷蔵庫に入れ、対照サンプルとした。調査時点で、安定ボックスから対応する試験サンプルを取り出し、６０℃／７５％ＲＨのサンプルバイアルのアルミホイルを取り、蓋で覆いた。０日目のサンプルを冷蔵庫から取り出し、サンプルが室温に戻った後で分析した。実験結果は表８に示した通りである。
所定量（約１０ｍｇ）の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形、式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形、及び式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形を並行して各２部を秤量し、４０ｍＬのサンプルバイアルに添加し、６０℃／７５％湿度の恒温恒湿ボックスに入れ、１週間放置した。又、それぞれ一部（約１０ｍｇ）の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形、式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形、及び式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形を取って、－２０℃の冷蔵庫に入れ、対照サンプルとした。調査時点で、安定ボックスから対応する試験サンプルを取り出し、６０℃／７５％ＲＨのサンプルバイアルのアルミホイルを取り、蓋で覆いた。０日目のサンプルを冷蔵庫から取り出し、サンプルが室温に戻った後で分析した。実験結果は表８に示した通りである。
【0114】
【表8】
【0115】
結論：
式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形、式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形及び式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形は高温、高湿の条件下で良好な安定性を有した。
式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形、式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形及び式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形は高温、高湿の条件下で良好な安定性を有した。
【0116】
実験例１：本発明の化合物の生体外活性測定実験
【0117】
ヒトアデノシンＡ２Ａ受容体のカルシウム流量検出実験
【0118】
細胞の由来：
Ａ２Ａ安定細胞株はＳｈａｎｇｈａｉ ＷｕＸｉ Ａｐｐによって構築され、宿主細胞はＣＨＯである。
Ａ２Ａ安定細胞株はＳｈａｎｇｈａｉ ＷｕＸｉ Ａｐｐによって構築され、宿主細胞はＣＨＯである。
【0119】
検出キット：
Ｆｌｕｏ－４ Ｄｉｒｅｃｔ試薬キット、（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号：Ｆ１０４７１）。キット内の蛍光検出試薬（カルシウムイオンに特異的に結合し、蛍光シグナルの増加を引き起こす）と細胞を適切な時間培養した後、化合物を添加し細胞を刺激して、細胞内カルシウム流量を変化させ、それによって蛍光シグナルの変化が引き起こし、化合物のアゴニスト又は阻害活性の強さを示すことができる。
Ｆｌｕｏ－４ Ｄｉｒｅｃｔ試薬キット、（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号：Ｆ１０４７１）。キット内の蛍光検出試薬（カルシウムイオンに特異的に結合し、蛍光シグナルの増加を引き起こす）と細胞を適切な時間培養した後、化合物を添加し細胞を刺激して、細胞内カルシウム流量を変化させ、それによって蛍光シグナルの変化が引き起こし、化合物のアゴニスト又は阻害活性の強さを示すことができる。
【0120】
細胞培地：
Ｆ１２＋１０％のウシ胎児血清＋ジェネティシン３００ｕｇ／ｍＬ＋ブラストサイジン２μｇ／ｍＬ
Ｆ１２＋１０％のウシ胎児血清＋ジェネティシン３００ｕｇ／ｍＬ＋ブラストサイジン２μｇ／ｍＬ
【0121】
化合物希釈の緩衝液：
Ｈａｎｋｓ平衡塩緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）＋２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、毎回使用する前に製造した。
Ｈａｎｋｓ平衡塩緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）＋２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、毎回使用する前に製造した。
【0122】
アゴニスト：
ＮＥＣＡ（Ｓｉｇｍａ－Ｅ２３８７）
ＮＥＣＡ（Ｓｉｇｍａ－Ｅ２３８７）
【0123】
参照化合物（アンタゴニスト）：
ＣＧＳ－１５９４３（Ｓｉｇｍａ－Ｃ１９９）
ＣＧＳ－１５９４３（Ｓｉｇｍａ－Ｃ１９９）
【0124】
化合物の希釈：
試験化合物をＤＭＳＯで溶解させて１０ｍＭの母液に製造した。試験化合物をＤＭＳＯで０．２ｍＭに希釈し、参照化合物ＣＧＳ－１５９４３をＤＭＳＯで０．０１５ｍＭに希釈した。次に、ＥＣＨＯを使用して１０ポイントに３倍段階希釈し、９００ｎＬを化合物プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ－７８１２８０）に移し、３０μＬの化合物を添加して緩衝液を希釈した。試験化合物の最終の初期濃度は１μＭであり、ＣＧＳ－１５９４３は０．０７５μＭであった。
試験化合物をＤＭＳＯで溶解させて１０ｍＭの母液に製造した。試験化合物をＤＭＳＯで０．２ｍＭに希釈し、参照化合物ＣＧＳ－１５９４３をＤＭＳＯで０．０１５ｍＭに希釈した。次に、ＥＣＨＯを使用して１０ポイントに３倍段階希釈し、９００ｎＬを化合物プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ－７８１２８０）に移し、３０μＬの化合物を添加して緩衝液を希釈した。試験化合物の最終の初期濃度は１μＭであり、ＣＧＳ－１５９４３は０．０７５μＭであった。
【0125】
検出方法：
【0126】
細胞の準備：
凍結したＡ２Ａ細胞を取り、蘇生後、培地で１×１０６個細胞／ｍＬに再懸濁し、３８４ウェルポリリジンコーティング細胞プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ－７８１９４６）に２０μＬ／ウェルを植え、５％のＣＯ２、３７℃のインキュベーターで培養した。
凍結したＡ２Ａ細胞を取り、蘇生後、培地で１×１０６個細胞／ｍＬに再懸濁し、３８４ウェルポリリジンコーティング細胞プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ－７８１９４６）に２０μＬ／ウェルを植え、５％のＣＯ２、３７℃のインキュベーターで培養した。
【0127】
前日に調製した細胞プレートをインキュベーターから取り出し、各ウェルに２０μＬの２×Ｆｌｕｏ－４ ＤｉｒｅｃｔＴＭ緩衝液を添加し、５％のＣＯ２、３７℃のインキュベーターで５０分間培養し、室温で１０分間放置した。
【0128】
アゴニストＮＥＣＡのＥＣ８０の検出：
アゴニストＮＥＣＡの希釈：初期濃度が０．１５ｍＭであるＮＥＣＡをＥｃｈｏで１０ポイントに３倍段階希釈し、次に、９００ｎＬを対応する化合物プレートに移し、３０μＬの化合物希釈緩衝液を対応する化合物プレートに添加した。最終の開始濃度は７５０ｎＭであった。
アゴニストＮＥＣＡの希釈：初期濃度が０．１５ｍＭであるＮＥＣＡをＥｃｈｏで１０ポイントに３倍段階希釈し、次に、９００ｎＬを対応する化合物プレートに移し、３０μＬの化合物希釈緩衝液を対応する化合物プレートに添加した。最終の開始濃度は７５０ｎＭであった。
【0129】
ＦＬＩＰＲ計器ソフトウェアを実行し、設定したプログラムに従って１０μＬの化合物希釈緩衝液を細胞プレートに添加し、蛍光シグナルを読み取った。次に、所定の濃度のアゴニストである参照化合物１０μＬを細胞プレートに添加し、蛍光シグナルを読み取った。読み取った後、ソフトウェアの「Ｍａｘ－Ｍｉｎ」、「Ｒｅａｄ ９０ ｔｏ Ｍａｘｉｍｕｍ Ａｌｌｏｗｅｄ」方法を使用してデータをエクスポートし、Ａ２Ａ細胞株のＥＣ８０を計算し、６×ＥＣ８０濃度のアゴニストを製造した。緩衝塩溶液で対応する細胞の６×ＥＣ８０濃度の参照化合物アゴニストを製造し、使用のために対応する化合物プレートに３０μＬ／ウェルを添加した。
【0130】
試験化合物のＩＣ５０検出：
ＦＬＩＰＲ計器ソフトウェアを実行し、設定したプログラムに従って、既に規定された濃度の１０μＬの実験化合物と参照化合物を細胞プレートに添加し、蛍光シグナルを読み取った。次に、１０μＬの６×ＥＣ８０濃度の参照化合物アゴニストを細胞プレートに添加し、蛍光シグナルを読み取った。化合物のアゴニストの検出は、ソフトウェアの「Ｍａｘ－Ｍｉｎ」、「Ｒｅａｄ ９０ ｔｏ Ｍａｘｉｍｕｍ Ａｌｌｏｗｅｄ」方法を使用してデータをエクスポートした。化合物のアンタゴニストの検出は、ソフトウェアの「Ｍａｘ－Ｍｉｎ」、「Ｒｅａｄ ９０ ｔｏ Ｍａｘｉｍｕｍ Ａｌｌｏｗｅｄ」方法を使用してデータをエクスポートした。データはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ５．０を使用して分析し、試験化合物のＩＣ５０値を計算した。試験結果は表９に示された通りである。
ＦＬＩＰＲ計器ソフトウェアを実行し、設定したプログラムに従って、既に規定された濃度の１０μＬの実験化合物と参照化合物を細胞プレートに添加し、蛍光シグナルを読み取った。次に、１０μＬの６×ＥＣ８０濃度の参照化合物アゴニストを細胞プレートに添加し、蛍光シグナルを読み取った。化合物のアゴニストの検出は、ソフトウェアの「Ｍａｘ－Ｍｉｎ」、「Ｒｅａｄ ９０ ｔｏ Ｍａｘｉｍｕｍ Ａｌｌｏｗｅｄ」方法を使用してデータをエクスポートした。化合物のアンタゴニストの検出は、ソフトウェアの「Ｍａｘ－Ｍｉｎ」、「Ｒｅａｄ ９０ ｔｏ Ｍａｘｉｍｕｍ Ａｌｌｏｗｅｄ」方法を使用してデータをエクスポートした。データはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ５．０を使用して分析し、試験化合物のＩＣ５０値を計算した。試験結果は表９に示された通りである。
【0131】
【表9】
【0132】
結論：
本発明の化合物は、優れたアデノシンＡ２Ａ受容体拮抗活性を示した。
本発明の化合物は、優れたアデノシンＡ２Ａ受容体拮抗活性を示した。
【0133】
実験例２：本発明の化合物の薬物動態実験
【0134】
実験材料：
Ｂａｌｂ／ｃマウス（メス、１５～３０ｇ、７～９週齢、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｌｉｎｇｃｈａｎｇ）を使用した。
Ｂａｌｂ／ｃマウス（メス、１５～３０ｇ、７～９週齢、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｌｉｎｇｃｈａｎｇ）を使用した。
【0135】
実験方法：
試験化合物を静脈内注射及び経口投与した後の齧歯類動物の薬物動態特性を標準プロトコルで試験し、実験では、候補化合物を透明な溶液に製造し、マウスに１回静脈内注射及び１回経口投与した。静脈（ＩＶ）溶媒は、５％のＤＭＳＯ／５％のポリエチレングリコールヒドロキシステアレート／９０％の水の混合溶媒であり、経口（ＰＯ）溶媒は、１％のｔｗｅｅｎ８０、９％のＰＥＧ４００、９０％のＨ２Ｏ（ｐＨ＝３）の混合溶媒であった。４８時間以内の全血サンプルを収集し、４℃で３０００ｇで１５分間遠心分離し、上清を分離して血漿サンプルを得、内部標準を含む２０倍体積のアセトニトリル溶液を添加してタンパク質を沈殿させ、遠心分離して上清を得、同じ体積の水に添加し、再び、遠心分離して上清を取ってサンプリングし、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析方法で血中薬物濃度を定量的に分析し、ピークに達する濃度、ピークに達する時間、クリアランス、半減期、薬物－時間曲線下の面積、バイオアベイラビリティなどの薬物動態パラメータを計算した。試験結果は表１０に示された通りである。
試験化合物を静脈内注射及び経口投与した後の齧歯類動物の薬物動態特性を標準プロトコルで試験し、実験では、候補化合物を透明な溶液に製造し、マウスに１回静脈内注射及び１回経口投与した。静脈（ＩＶ）溶媒は、５％のＤＭＳＯ／５％のポリエチレングリコールヒドロキシステアレート／９０％の水の混合溶媒であり、経口（ＰＯ）溶媒は、１％のｔｗｅｅｎ８０、９％のＰＥＧ４００、９０％のＨ２Ｏ（ｐＨ＝３）の混合溶媒であった。４８時間以内の全血サンプルを収集し、４℃で３０００ｇで１５分間遠心分離し、上清を分離して血漿サンプルを得、内部標準を含む２０倍体積のアセトニトリル溶液を添加してタンパク質を沈殿させ、遠心分離して上清を得、同じ体積の水に添加し、再び、遠心分離して上清を取ってサンプリングし、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析方法で血中薬物濃度を定量的に分析し、ピークに達する濃度、ピークに達する時間、クリアランス、半減期、薬物－時間曲線下の面積、バイオアベイラビリティなどの薬物動態パラメータを計算した。試験結果は表１０に示された通りである。
【表10】
【0136】
結論：
本発明の化合物は、マウスの薬物動態指数を有意に改善できた。
本発明の化合物は、マウスの薬物動態指数を有意に改善できた。
【0137】
実験例３：本発明の化合物の生体内有効性実験
【0138】
実験材料：
ＢＡＬＢ／ｃマウス（メス）；マウス結腸がんＣＴ２６細胞（中国科学院典型的な培養物保存委員会細胞バンク）、生体外単層培養し、培養条件は、１０％のウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ－１６４０培地で、３７℃で５％ＣＯ２のインキュベーターで培養した。トリプシン－ＥＤＴＡを使用して通常の消化処理をし、継代培養した。細胞数が指数増殖期にあり、飽和度が８０％～９０％である場合、細胞を収集してカウントした。
ＢＡＬＢ／ｃマウス（メス）；マウス結腸がんＣＴ２６細胞（中国科学院典型的な培養物保存委員会細胞バンク）、生体外単層培養し、培養条件は、１０％のウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ－１６４０培地で、３７℃で５％ＣＯ２のインキュベーターで培養した。トリプシン－ＥＤＴＡを使用して通常の消化処理をし、継代培養した。細胞数が指数増殖期にあり、飽和度が８０％～９０％である場合、細胞を収集してカウントした。
【0139】
化合物の準備：
式（ＩＩ－１）で表される化合物を秤量し、溶媒（１０％のＰＥＧ４００＋９０％の（１０％のＣｒｅｍｏｐｈｏｒ水溶液））に添加して、それぞれ２．５ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬのサンプルに製造した。７２μＬのＣＳ１００３（ＰＤ－１抗体）溶液（２５ｍｇ／ｍＬ）に１．７２８ｍＬのダルベッコのリン酸緩衝液（ＤＰＢＳ）を添加して１ｍｇ／ｍＬの溶液に製造し、更に、１６．２ｍｌのＤＰＢＳを添加して０．１ｍｇ／ｍＬの澄清溶液に製造した。
式（ＩＩ－１）で表される化合物を秤量し、溶媒（１０％のＰＥＧ４００＋９０％の（１０％のＣｒｅｍｏｐｈｏｒ水溶液））に添加して、それぞれ２．５ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬのサンプルに製造した。７２μＬのＣＳ１００３（ＰＤ－１抗体）溶液（２５ｍｇ／ｍＬ）に１．７２８ｍＬのダルベッコのリン酸緩衝液（ＤＰＢＳ）を添加して１ｍｇ／ｍＬの溶液に製造し、更に、１６．２ｍｌのＤＰＢＳを添加して０．１ｍｇ／ｍＬの澄清溶液に製造した。
【0140】
実験操作：
細胞をダルベッコのリン酸緩衝液に再懸濁させ、密度は３×１０６個細胞／ｍＬであった。０．１ｍＬのＤＰＢＳ（３×１０５個のＣＴ２６細胞を含む）を各マウスの右背部に皮下接種し、接種当日、マウスの体重に応じて無作為に群を分け、群当たり９匹であって、投与を開始し、２０日間続けた。実験全期間で、毎日動物の体重を測定し、健康状態を観察し、特別な状況がある場合は、関連するプロジェクトリーダーに通知し、対応する記録をした。腫瘍の直径は、週に２回ノギスで測定した。投与方法は表１１に示された通りである。腫瘍体積の計算式は：Ｖ＝０．５×ａ×ｂ２であり、ａとｂはそれぞれ腫瘍の長径と短径を表す。
細胞をダルベッコのリン酸緩衝液に再懸濁させ、密度は３×１０６個細胞／ｍＬであった。０．１ｍＬのＤＰＢＳ（３×１０５個のＣＴ２６細胞を含む）を各マウスの右背部に皮下接種し、接種当日、マウスの体重に応じて無作為に群を分け、群当たり９匹であって、投与を開始し、２０日間続けた。実験全期間で、毎日動物の体重を測定し、健康状態を観察し、特別な状況がある場合は、関連するプロジェクトリーダーに通知し、対応する記録をした。腫瘍の直径は、週に２回ノギスで測定した。投与方法は表１１に示された通りである。腫瘍体積の計算式は：Ｖ＝０．５×ａ×ｂ２であり、ａとｂはそれぞれ腫瘍の長径と短径を表す。
【0141】
【表11】
【0142】
化合物の抗腫瘍効果は、ＧＩ（％）又は相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）で評価された。相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）＝Ｖｔ／Ｖｃ×１００％（Ｖｔ：治療群の平均腫瘍体積；Ｖｃ：陰性対照群の平均腫瘍体積）。ＶｔとＶｃは同じ日のデータを取得した。
【0143】
ＧＩ（％）は、腫瘍抑制率である。ＧＩ（％）＝１－Ｖｔ／Ｖｃ×１００％。
【0144】
統計分析は、ＳＰＳＳソフトウェアを使用して実験終了時の相対的な腫瘍体積と腫瘍重量に基づいて分析した。２つの群間の比較はｔ検定によって分析され、３つ以上の群間の比較は一元配置分散分析で分析し、分散が均一である場合（Ｆ値に有意差がない場合）、Ｔｕｋｅｙ’ｓ方法を使用して分析し、分散が均一でない場合（Ｆ値に有意差がある場合）、Ｇａｍｅｓ－Ｈｏｗｅｌｌ法を使用して検定した。Ｐ＜０．０５は有意差があると見なされた。
【0145】
投与を開始してから２０日目、溶媒群の腫瘍体積は８４７．０９±７９．６５ｍｍ３に達し、ＣＳ１００３（１ｍｇ／ｋｇ）群の腫瘍体積は４８７．３４±１０９．０７ｍｍ３であり、その阻害率は４２．４７％（溶媒対照群と有意差がない）であった。溶媒対照群と比較して、併用投与群は、いずれも生体内に移植された腫瘍の成長を有意に阻害することができ、式（ＩＩ－１）で表わされる化合物とＣＳ１００３の併用は、投与量と投与頻度に正の相関関係があった。２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ及び１００ｍｇ／ｋｇの式（ＩＩ－１）で表わされる化合物と１ｍｇ／ｋｇのＣＳ１００３の併用は実験終了時の腫瘍体積はそれぞれ、３１２．０６±８０．１７ｍｍ３、２４６．４８±６２．５７ｍｍ３及び２３３．１０±５９．５５ｍｍ３であり、阻害率はそれぞれ６３．１６％、７０．９０％及び７２．４８％（Ｐ＜０．００１）であった。一方、式（ＩＩ－１）で表わされる化合物（５０ｍｇ／ｋｇ）を１日２回ＣＳ１００３と併用して投与する場合、より強い抗腫瘍効果を示し、実験終了時の当該群の平均腫瘍体積は１４２．１７±４０．３０ｍｍ３であり、阻害率は８３．２２％（Ｐ＜０．００１）であった。これから分かるように、式（ＩＩ－１）で表わされる化合物をＣＳ１００３と併用して予防投与する場合、マウス結腸癌細胞ＣＴ２６の生体内の同種移植腫瘍の増殖を有意に阻害できた。
【0146】
結論：
本発明の化合物とＣＳ１００３の併用は良好な抗腫瘍効果を達成しており、本発明の化合物とＣＳ１００３の併用は相乗効果を有した。式（ＩＩ－１）で表わされる化合物とＣＳ１００３の併用は、抗腫瘍効果を増強することができた。ここで、式（ＩＩ－１）で表わされる化合物を２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で１日１回ＣＳ１００３と併用投与した群の腫瘍抑制率はそれぞれ６３％、７１％及び７２％であり、式（ＩＩ－１）で表わされる化合物を５０ｍｇ／ｋｇの投与量で１日２回ＣＳ１００３と併用投与した群の腫瘍抑制率は８３％（Ｐ＜０．００１）であり、式（ＩＩ－１）で表わされる化合物（５０ｍｇ／ｋｇ、ＢＩＤ）又はＣＳ１００３を単独投与する場合と比較して有意差が（Ｐ値はそれぞれ０．００２、０．０１４である）あった。
本発明の化合物とＣＳ１００３の併用は良好な抗腫瘍効果を達成しており、本発明の化合物とＣＳ１００３の併用は相乗効果を有した。式（ＩＩ－１）で表わされる化合物とＣＳ１００３の併用は、抗腫瘍効果を増強することができた。ここで、式（ＩＩ－１）で表わされる化合物を２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で１日１回ＣＳ１００３と併用投与した群の腫瘍抑制率はそれぞれ６３％、７１％及び７２％であり、式（ＩＩ－１）で表わされる化合物を５０ｍｇ／ｋｇの投与量で１日２回ＣＳ１００３と併用投与した群の腫瘍抑制率は８３％（Ｐ＜０．００１）であり、式（ＩＩ－１）で表わされる化合物（５０ｍｇ／ｋｇ、ＢＩＤ）又はＣＳ１００３を単独投与する場合と比較して有意差が（Ｐ値はそれぞれ０．００２、０．０１４である）あった。
【0147】
実験例４：本発明の化合物の生体内薬物効果ＰＫ実験
実験では、実験例３の投与２０日目の異なる時点（０時、０．２５時、０．５時、１時、２時、４時、８時及び２４時）で、実験の各群から血液及び組織を採取した。各実験群の薬物動態パラメータは表１２に示された通りであり、実験で検出した各実験群の腫瘍組織薬物濃度と、対応する採血点の腫瘍組織薬物濃度及び血漿薬物濃度の生物学的比率は表１３に示された通りである。
実験では、実験例３の投与２０日目の異なる時点（０時、０．２５時、０．５時、１時、２時、４時、８時及び２４時）で、実験の各群から血液及び組織を採取した。各実験群の薬物動態パラメータは表１２に示された通りであり、実験で検出した各実験群の腫瘍組織薬物濃度と、対応する採血点の腫瘍組織薬物濃度及び血漿薬物濃度の生物学的比率は表１３に示された通りである。
【表12】
【0148】
【表13】
【0149】
結論：
本発明の化合物は、血漿及び腫瘍組織において十分な曝露を有した。
本発明の化合物は、血漿及び腫瘍組織において十分な曝露を有した。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【手続補正書】
【提出日】2022-03-24
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）で表される化合物。【化1】
【請求項2】
粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：７．１６±０．２°、９．６６±０．２°、１９．６６±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。【化2】
【請求項3】
粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：７．１６±０．２°、９．６６±０．２°、１３．５９±０．２°、１４．３０±０．２°、１５．８７±０．２°、１７．７３±０．２°、１９．６６±０．２°、２０．８８±０．２°において特徴的な回折ピークを有する、または、
示差走査熱量曲線は２０５．６７±３℃において吸熱ピークの開始点を有する、または、
熱重量分析曲線は１２０．００℃±３℃の際に重量が０．１８４６％減少する、請求項２に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項4】
粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：７．１６±０．２°、９．６６±０．２°、１３．５９±０．２°，１４．３０±０．２°、１５．８７±０．２°、１７．７３±０．２°、１９．６６±０．２°、２０．８８±０．２°、２６．０１±０．２°、２６．７６±０．２°、２７．２１±０．２°において特徴的な回折ピークを有する、請求項３に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項5】
ＸＲＰＤスペクトルは図１に示された通りである、または、
ＤＳＣスペクトルは図２に示された通りである、または、
ＴＧＡスペクトルは図３に示された通りである、請求項４に記載の式（Ｉ）で表される化合物のＡ結晶形。
【請求項6】
請求項１に記載の化合物、または、請求項２～５のいずれか１項に記載のＡ結晶形を含む医薬組成物。
【請求項7】
粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：１２．８４±０．２°、１５．８４±０．２°、２３．５５±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。【化3】
【請求項8】
粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：６．４３±０．２°、１１．２２±０．２°、１２．８４±０．２°、１５．８４±０．２°、１９．７８±０．２°、２１．６１±０．２°、２３．５５±０．２°、２７．０２±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とする、請求項７に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。
【請求項9】
粉末Ｘ線回折スペクトルは以下の２θ角：６．４３±０．２°、１１．２２±０．２°、１２．４１±０．２°、１２．８４±０．２°、１５．８４±０．２°、１６．３６±０．２°、１９．２７±０．２°、１９．７８±０．２°、２１．６１±０．２°、２３．５５±０．２°、２７．０２±０．２°、２８．６２±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とし、任意に、ＸＲＰＤスペクトルは図４に示された通りである、または、
示差走査熱量曲線は２５６．３７±３℃において吸熱ピークの開始点を有し、任意に、ＤＳＣスペクトルは図５に示された通りである、または、
熱重量分析曲線は１５９．５３℃±３℃の際に重量が０．８８６０％減少し、任意に、ＴＧＡスペクトルは図６に示された通りである、請求項８に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形。
【請求項10】
粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：８．８９±０．２°、１４．１０±０．２°、１５．５６±０．２°、１５．９９±０．２°、１６．４８±０．２°、１７．４９±０．２°、２０．２３±０．２°、２１．６３±０．２°、２３．４７±０．２°、２４．５１±０．２°、２６．３３±０．２°、２８．１８±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とし、任意に、ＸＲＰＤスペクトルは図７に示された通りである、式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形。【化4】
【請求項11】
粉末Ｘ線回折スペクトルが以下の２θ角：４．４３３±０．２°、１２．３８±０．２°、１３．３１±０．２°、１６．６６±０．２°、１７．０８±０．２°、１７．７５±０．２°、１８．６５±０．２°、２２．５８±０．２°、２３．６３±０．２°、２４．９５±０．２°、２５．４０±０．２°、２６．８０±０．２°、２７．６５±０．２°において特徴的な回折ピークを有することを特徴とし、任意に、ＸＲＰＤスペクトルは図１０に示された通りである、式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形。【化5】
【請求項12】
請求項７～９のいずれか１項に記載の式（ＩＩ）で表される化合物のＢ結晶形、請求項１０に記載の式（ＩＩＩ）で表される化合物のＣ結晶形、及び請求項１１に記載の式（ＩＶ）で表される化合物のＤ結晶形を含む医薬組成物。
【国際調査報告】