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▶ スーヂョウ ゼルゲン バイオファーマシューティカルズ カンパニー， リミテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-06-07
(54)【発明の名称】ケノデオキシコール酸誘導体の調製方法
(51)【国際特許分類】
C07J 9/00 20060101AFI20220531BHJP
C07B 61/00 20060101ALN20220531BHJP
A61P 1/16 20060101ALN20220531BHJP
A61K 31/575 20060101ALN20220531BHJP
【ＦＩ】
C07J9/00
C07B61/00 300
A61P1/16
A61K31/575
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021559466
(86)(22)【出願日】2020-03-19
(85)【翻訳文提出日】2021-11-22
(86)【国際出願番号】 CN2020080244
(87)【国際公開番号】W WO2020187298
(87)【国際公開日】2020-09-24
(31)【優先権主張番号】201910210103.3
(32)【優先日】2019-03-19
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】521437839
【氏名又は名称】スーヂョウ ゼルゲン バイオファーマシューティカルズ カンパニー， リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＳＵＺＨＯＵ ＺＥＬＧＥＮ ＢＩＯＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＣＯ．， ＬＴＤ．
【住所又は居所原語表記】Ｎｏ． ２０９ Ｃｈｅｎｆｅｎｇ Ｒｏａｄ， Ｙｕｓｈａｎ Ｔｏｗｎ， Ｋｕｎｓｈａｎ， Ｓｕｚｈｏｕ， Ｊｉａｎｇｓｕ ２１５３００， Ｃｈｉｎａ
(74)【代理人】
【識別番号】100102842
【弁理士】
【氏名又は名称】葛和 清司
(72)【発明者】
【氏名】ロ，ビンフア
(72)【発明者】
【氏名】リー，チェンウェイ
(72)【発明者】
【氏名】グオ，チャオ
【テーマコード（参考）】
4C086
4C091
4H039
【Ｆターム（参考）】
4C086AA04
4C086DA11
4C086GA13
4C086GA15
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA20
4C086ZA75
4C091AA01
4C091BB01
4C091CC01
4C091DD01
4C091EE04
4C091FF04
4C091FF06
4C091GG02
4C091GG13
4C091HH01
4C091JJ03
4C091KK01
4C091LL01
4C091MM03
4C091NN01
4C091PA02
4C091PA05
4C091PB04
4C091QQ01
4C091RR06
4C091RR10
4C091SS01
4C091SS05
4H039CA65
4H039CB90
(57)【要約】
本発明は、ケノデオキシコール酸誘導体の調製方法に関する。具体的には、本発明は、式（VI）に示される化合物３α－ヒドロキシ－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－アルカナミドをワンポット法の還元により調製して式（V）に示される化合物３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コラン酸を得、塩形成および結晶化により高純度のオベチコール酸ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩およびカルシウム塩を得る方法を開示する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ａ）に示される化合物を調製する方法であって、【化1】
前記方法は、
（ａ）不活性溶媒において、式（VI）の化合物を「ワンポット法」により接触水素化し、金属水素化物還元剤で還元して、
【化2】
【化3】
ここで、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ、水素、ヒドロキシル基（ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｇｒｏｕｐ）、メチル基（ｍｅｔｈｙｌ ｇｒｏｕｐ）、エチル基（ｅｔｈｙｌ ｇｒｏｕｐ）、メトキシ基（ｍｅｔｈｏｘｙ ｇｒｏｕｐ）から選択されるか、またはＲ１およびＲ２は、これらに接続されるＮ原子とともに置換または非置換の５－７員複素環を形成し、ここで、前記複素環は、Ｎ、ＯまたはＳからなる群から選択される１～３個のヘテロ原子を含むことを特徴とする、前記方法。
【請求項2】
式（Ａ）に示される化合物は、【化4】
請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記段階（ａ）において、前記不活性溶媒は、Ｃ１－Ｃ４アルコール、水、またはそれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項4】
前記段階（ａ）において、前記アルコールは、メタノール（ｍｅｔｈａｎｏｌ）、エタノール（ｅｔｈａｎｏｌ）、イソプロパノール（ｉｓｏｐｒｏｐａｎｏｌ）、ｔｅｒｔ―ブタノール（ｔｅｒｔ－ｂｕｔａｎｏｌ）、またはそれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項5】
前記段階（ａ）において、前記不活性溶媒は、無水メタノール、またはメタノール：水（ｖ／ｖ）＝１：１００～１００：１の混合溶媒からなる群から選択され、好ましくは、メタノール：水（ｖ／ｖ）＝０．５：１～５：１であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項6】
前記方法は、以下の方法により式（VI）の化合物を調製する段階をさらに含み、ａ）式（VII）の化合物を使用して
【化5】
【化6】
ｂ）ルイス酸の存在下で、式（VIII）の化合物をアセトアルデヒドとアルドール（Ａｌｄｏｌ）縮合させて、式（VI）の化合物を得る段階、
【化7】
請求項１に記載の方法。
【請求項7】
前記段階ａ）における縮合剤は、Ｎ，Ｎ'－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、ＥＤＣｌ、ＤＩＣ、ＤＣＣ、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵおよびＰｙＢＯＰからなる群から選択され、好ましくは、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵおよびＰｙＢＯＰであり、特に好ましくは、ＰｙＢＯＰであることを特徴とする請求項６に記載の方法。
【請求項8】
前記方法は、以下の方法により前記式（VIII）の化合物を調製する段階をさらに含み、ｃ）式（IX）の化合物を使用して、化合物
【化8】
【化9】
【化10】
ここで、各基の定義は、請求項１に記載されるとおりであることを特徴とする
請求項６に記載の方法。
【請求項9】
前記塩形成および結晶化は、：（ｂ１）段階（ａ）で得られた３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（３α，７α－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ－６α－ｅｔｈｙｌ－５β－ｃｈｏｌａｎ－２４－ｏｉｃ ａｃｉｄ）を純水と混合し、水酸化ナトリウム水溶液を加え、ほぼ溶けて透明になるまで攪拌して、透明な溶液を得る段階と、
（ｂ２）Ｍｇ２＋またはＣａ２＋を含む水溶液を前記透明な溶液にゆっくりと滴下し、沈殿が生じるまで引き続き攪拌する段階と、および
（ｂ３）前記沈殿物をろ過し、洗浄し、真空乾燥して、式（Ａ）の化合物を得る段階とを含むことを特徴とする
請求項１に記載の方法。
【請求項10】
前記塩形成および結晶化は、（ｂ４）段階（ａ）で得られた３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸をメタノールに溶解させ、水酸化ナトリウムのメタノール溶液をゆっくりと滴下し、ほぼ溶けて透明になるまで攪拌して、透明な溶液を得る段階と、
（ｂ５）前記透明な溶液を乾燥するまで濃縮し、次に、アセトンを加えて濃縮乾固して、固体残留物を得る段階と、および
（ｂ６）前記残留物にアセトンを加えてスラリー化し、ろ過し、真空乾燥して、式（Ａ）の化合物を得る段階とを含むことを特徴とする
請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、医学の分野に関する。具体的には、本発明は、ケノデオキシコール酸塩の新規な調製および精製方法に関する。
【背景技術】
【0002】
ファルネソイドＸ受容体（ＦａｒｎｅｓｏｉｄｘＲｅｃｅｐｔｏｒ、ＦＸＲ）は、核内受容体（Ｎｕｃｌｅａｒ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ）ファミリーのメンバーであり、主に肝臓、小腸等の腸系で発現され、胆汁酸代謝およびコレステロール代謝等に関与する。胆汁酸は、様々な生理学的機構を有し、脂肪の吸収、輸送、分布およびコレステロールの動的バランス等のプロセスにおいて重要な役割を果たす。ファルネソイドＸ受容体は、ケノデオキシコール酸等の胆汁酸の受容体として、胆汁酸代謝に関与する遺伝子の発現を調節することにより、体内での胆汁酸のバランスを維持する。さらに、ファルネソイドＸ受容体は、体内のブドウ糖の動的バランスおよびインスリン抵抗等にも重要な機能を発揮する。従って、ファルネソイドＸ受容体アゴニストは、非アルコール性脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝疾患、胆石、原発性胆汁性肝硬変、肝硬変、肝線維症、糖尿病、高コレステロール血症、アテローム性動脈硬化症、肥満、高トリグリセリド血症等を治療する薬物として開発されることが期待される。ここで、化合物オベチコール酸（Ｏｂｅｔｉｃｈｏｌｉｃ ａｃｉｄ）は、選択的ファルネソイドＸ受容体アゴニストであり、化学名は、３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（３α，７α－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ－６α－ｅｔｈｙｌ－５β－ｃｈｏｌａｎ－２４－ｏｉｃ ａｃｉｄ）であり、原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および非アルコール性脂肪性肝関連疾患を治療する用途を有する。現在、オベチコール酸は、原発性胆汁性肝硬変の適応症として販売が承認されており、ＮＡＳＨの分野で第ＩＩＩ相臨床研究がおこなわれている。
【0003】
特許ＷＯ０２０７２５９８は、出発物質として３α－ジヒドロキシ－７－ケト－５β－コリン－２４－酸を用いて、６位のアルキル化等の段階を経て、ケノデオキシコール酸誘導体を合成する方法を開示しているが、当該特許の合成方法には、多くの欠点があり、例えば、すべての中間体および製品は、クロマトグラフィーカラムによって精製され、総反応収率が非常に低く（わずか３．５％）、反応段階で発がん性試薬が使用されるなどの欠点がある。
【0004】
さらに、特許ＷＯ２００６１２２９７７は、出発物質として３α－ジヒドロキシ－７－ケト－５β－コリン－２４－酸を用いて、アルドール（Ａｌｄｏｌ）縮合等の段階を経て、オベチコール酸を合成する方法を開示しているが、当該合成方法には、中間体が分離しにくく、反応段階が長く、配置変換段階の収率が低く、最終製品の不純物が除去しにくい等の欠点がある。
従って、当技術分野は、ケノデオキシコール酸塩を合成するためのより良い方法を開発する必要がある。
従って、当技術分野は、ケノデオキシコール酸塩を合成するためのより良い方法を開発する必要がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0005】
本発明の第１の態様は、式（Ａ）に示される化合物の合成方法を提供し、
ここで、ｎは、１または２であり、Ｍは、ＮＨ４
＋、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオンまたは遷移金属イオンであり、
前記方法は、
（ａ）不活性溶媒において、式（VI）の化合物を「ワンポット法」により接触水素化し、金属水素化物還元剤で還元して、
式（V）の化合物を得る段階と、
（ｂ）式（V）の化合物を使用して溶媒中で塩形成および結晶化して、式（Ａ）の化合物を得る段階との段階を含み、
ここで、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ、水素、ヒドロキシル基（ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｇｒｏｕｐ）、メチル基（ｍｅｔｈｙｌ ｇｒｏｕｐ）、エチル基（ｅｔｈｙｌ ｇｒｏｕｐ）、メトキシ基（ｍｅｔｈｏｘｙ ｇｒｏｕｐ）から選択されるか、またはＲ１およびＲ２は、これらに接続されるＮ原子とともに置換または非置換の５－７員複素環を形成し、ここで、前記複素環は、Ｎ、ＯまたはＳからなる群から選択される１～３個のヘテロ原子を含む。別の好ましい例において、前記Ｒ１とＲ２とは、一緒になって、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－、および－ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２－からなる群から選択される構造を形成する。
【化1】
前記方法は、
（ａ）不活性溶媒において、式（VI）の化合物を「ワンポット法」により接触水素化し、金属水素化物還元剤で還元して、
【化2】
【化3】
ここで、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ、水素、ヒドロキシル基（ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｇｒｏｕｐ）、メチル基（ｍｅｔｈｙｌ ｇｒｏｕｐ）、エチル基（ｅｔｈｙｌ ｇｒｏｕｐ）、メトキシ基（ｍｅｔｈｏｘｙ ｇｒｏｕｐ）から選択されるか、またはＲ１およびＲ２は、これらに接続されるＮ原子とともに置換または非置換の５－７員複素環を形成し、ここで、前記複素環は、Ｎ、ＯまたはＳからなる群から選択される１～３個のヘテロ原子を含む。別の好ましい例において、前記Ｒ１とＲ２とは、一緒になって、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－、および－ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２－からなる群から選択される構造を形成する。
【0006】
別の好ましい例において、前記接触水素化および金属水素化物還元剤還元の「ワンポット法」プロセスでは、中間産物は、分離および精製されない。
【0007】
別の好ましい例において、段階（ａ）は、無水メタノールにおいて、式（VI）の化合物を使用して接触水素化反応し、次に、水および金属水素化物を加えて反応させて、式（V）の化合物を得る。
【0008】
別の好ましい例において、式（VI）に示される化合物は、以下の化合物である。
【化4】
【0009】
別の好ましい例において、式（VI）に示される化合物は、以下の化合物である。
【化5】
【0010】
別の好ましい例において、式（VI）に示される化合物は、以下の化合物である。
【化6】
【0011】
別の好ましい例において、式（Ａ）に示される化合物は、
から選択される。
【化7】
【0012】
別の好ましい例において、得られた式Ｉ～ＩＶの化合物は、高純度、好ましくは９９．０％を超える純度、さらに好ましくは９９．５％を超える純度、特に好ましくは９９．７％を超える純度を有する。
【0013】
別の好ましい例において、得られた式Ｉ～ＩＶの化合物に含まれる二量体関連物質の式（Ｂ）は、０．１％未満、特に好ましくは０．０５％未満である。
【化8】
【0014】
別の好ましい例において、得られた式Ｉ～ＩＶの化合物に含まれる異性体関連物質の式（Ｃ）は、０．１％未満であり、好ましくは０．０５％未満であり、特に好ましくは検出されない。
【化9】
【0015】
別の好ましい例において、前記段階（ａ）において、前記不活性溶媒は、Ｃ１－Ｃ４アルコール、水、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される。
別の好ましい例において、前記段階（ａ）において、前記アルコールは、メタノール（ｍｅｔｈａｎｏｌ）、エタノール（ｅｔｈａｎｏｌ）、イソプロパノール（ｉｓｏｐｒｏｐａｎｏｌ）、ｔｅｒｔ―ブタノール（ｔｅｒｔ－ｂｕｔａｎｏｌ）、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される。
別の好ましい例において、前記段階（ａ）において、前記アルコールは、メタノール（ｍｅｔｈａｎｏｌ）、エタノール（ｅｔｈａｎｏｌ）、イソプロパノール（ｉｓｏｐｒｏｐａｎｏｌ）、ｔｅｒｔ―ブタノール（ｔｅｒｔ－ｂｕｔａｎｏｌ）、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【0016】
別の好ましい例において、前記段階（ａ）において、前記不活性溶媒は、無水メタノール、またはメタノール：水（ｖ／ｖ）＝１：１００～１００：１の混合溶媒からなる群から選択され、好ましくは、メタノール：水（ｖ／ｖ）＝０．５：１～５：１である。
別の好ましい例において、段階（ａ）において、前記接触水素化は、パラジウム／炭素触媒の存在下で、水素ガスを通す条件下で行われる。
別の好ましい例において、段階（ａ）は、無水メタノールにおいて、式（VI）の化合物を使用して接触水素化反応させ、次に、水および金属水素化物を加えて反応させて、式（V）の化合物を得る段階を含む。
別の好ましい例において、段階（ａ）の反応温度は、５～１５０℃、好ましくは３０～１２０℃の範囲、特に好ましくは５０～１００℃である。
別の好ましい例において、段階（ａ）において、前記接触水素化は、パラジウム／炭素触媒の存在下で、水素ガスを通す条件下で行われる。
別の好ましい例において、段階（ａ）は、無水メタノールにおいて、式（VI）の化合物を使用して接触水素化反応させ、次に、水および金属水素化物を加えて反応させて、式（V）の化合物を得る段階を含む。
別の好ましい例において、段階（ａ）の反応温度は、５～１５０℃、好ましくは３０～１２０℃の範囲、特に好ましくは５０～１００℃である。
【0017】
別の好ましい例において、段階（ａ）における接触水素化の圧力は、１～２０ａｔｍ、好ましくは２～１０ａｔｍの範囲である。
別の好ましい例において、段階（ａ）において、前記金属水素化物還元剤は、水素化ホウ素、リチウムトリ―ｔｅｒｔ―ブトキシ水素化アルミニウムを含み、ここで、好ましくは水素化ホウ素であり、さらに好ましくは、水素化ホウ素ナトリウムおよび水素化ホウ素カリウムから選択され、特に好ましくは、水素化ホウ素ナトリウムである。
別の好ましい例において、段階（ａ）において、前記金属水素化物と式（VI）の化合物とのモル比は、５：１～１：１、さらに好ましくは３：１～１：１、特に好ましくは２：１である。
別の好ましい例において、段階（ａ）において、前記金属水素化物還元剤は、水素化ホウ素、リチウムトリ―ｔｅｒｔ―ブトキシ水素化アルミニウムを含み、ここで、好ましくは水素化ホウ素であり、さらに好ましくは、水素化ホウ素ナトリウムおよび水素化ホウ素カリウムから選択され、特に好ましくは、水素化ホウ素ナトリウムである。
別の好ましい例において、段階（ａ）において、前記金属水素化物と式（VI）の化合物とのモル比は、５：１～１：１、さらに好ましくは３：１～１：１、特に好ましくは２：１である。
【0018】
別の好ましい例において、段階（ａ）において、前記金属水素化物の還元は、塩基性条件下で行われる。好ましくは、前記塩基性条件は、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムの存在下である。
別の好ましい例において、前記水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムの添加量と式（VI）の化合物とのモル比は、５０：１～１：５、さらに好ましくは３０：１～１０：１である。
別の好ましい例において、前記水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムの添加量と式（VI）の化合物とのモル比は、５０：１～１：５、さらに好ましくは３０：１～１０：１である。
【0019】
別の好ましい例において、前記方法は、以下の方法により式（VI）の化合物を調製する段階をさらに含み、
ａ）式（VII）の化合物を使用して
またはその塩酸塩と縮合させて、式（VI）の化合物を得る段階、
または
ｂ）ルイス酸の存在下で、式（VIII）の化合物をアセトアルデヒドとアルドール（Ａｌｄｏｌ）縮合させて、式（VI）の化合物を得る段階、
ａ）式（VII）の化合物を使用して
【化10】
【化11】
ｂ）ルイス酸の存在下で、式（VIII）の化合物をアセトアルデヒドとアルドール（Ａｌｄｏｌ）縮合させて、式（VI）の化合物を得る段階、
【化12】
【0020】
ここで、各基の定義は、本発明の第１の態様に記載されるとおりである。
別の好ましい例において、前記化合物
またはその塩酸塩は、塩化アンモニウム、ヒドロキシルアミン塩酸塩、メチルアミン塩酸塩、Ｎ，Ｏ－ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくは、塩化アンモニウムである。
別の好ましい例において、段階ａ）において、前記化合物
の添加量と式（VII）の化合物とのモル比は、１０：１～１：１、さらに好ましくは５：１～１：１、特に好ましくは２：１～１：１である。
別の好ましい例において、前記化合物
【化13】
別の好ましい例において、段階ａ）において、前記化合物
【化14】
【0021】
別の好ましい例において、前記段階ａ）における縮合剤は、Ｎ，Ｎ'－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、ＥＤＣｌ、ＤＩＣ、ＤＣＣ、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵおよびＰｙＢＯＰからなる群から選択され、好ましくは、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵおよびＰｙＢＯＰからなる群から選択され、特に好ましくはＰｙＢＯＰである。
別の好ましい例において、段階ａ）において、前記縮合剤の添加量と式（VII）の化合物とのモル比は、１０：１～１：５、さらに好ましくは５：１～１：１、特に好ましくは２：１である。
別の好ましい例において、段階ａ）において、前記縮合剤の添加量と式（VII）の化合物とのモル比は、１０：１～１：５、さらに好ましくは５：１～１：１、特に好ましくは２：１である。
【0022】
別の好ましい例において、前記段階ａ）は、活性剤を加える段階をさらに含み、前記活性剤は、ＤＭＡＰ、ＨＯＢｔ、４－ＰＰＹ、ＤＩＰＥＡおよびＥｔ３Ｎからなる群から選択され、好ましくはＤＩＰＥＡである。
別の好ましい例において、前記段階ａ）は、非プロトン性溶媒中で行われ、好ましくは、前記非プロトン性溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドである。
別の好ましい例において、前記段階ｂ）は、溶媒中で行われ、前記溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくはジクロロメタンである。
別の好ましい例において、前記段階ａ）は、非プロトン性溶媒中で行われ、好ましくは、前記非プロトン性溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドである。
別の好ましい例において、前記段階ｂ）は、溶媒中で行われ、前記溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくはジクロロメタンである。
【0023】
別の好ましい例において、前記段階ｂ）におけるルイス酸は、塩酸、酢酸、ｐ－トルエンスルホン酸、三フッ化ホウ素エーテル溶液、三フッ化ホウ素アセトニトリル溶液、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくは三フッ化ホウ素エーテル溶液である。
別の好ましい例において、段階ｂ）において、前記ルイス酸の添加量と式（VIII）の化合物とのモル比は、１０：１～１：３、さらに好ましくは４：１～２：１である。
別の好ましい例において、段階ｂ）において、前記ルイス酸の添加量と式（VIII）の化合物とのモル比は、１０：１～１：３、さらに好ましくは４：１～２：１である。
【0024】
別の好ましい例において、前記方法は、以下の方法により前記式（VIII）の化合物を調製する段階をさらに含み、
ｃ）式（IX）の化合物を使用して、化合物
またはその塩酸塩と縮合反応させて、
式（X）の化合物を得る段階、
ｄ）塩基の存在下で、式（X）の化合物を使用してトリメチルクロロシラン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｃｈｌｏｒｏｓｉｌａｎｅ）と反応させて、式（VIII）の化合物を得る段階、
ここで、各基の定義は、本発明の第１の態様に記載されるとおりである。
ｃ）式（IX）の化合物を使用して、化合物
【化15】
【化16】
【化17】
ここで、各基の定義は、本発明の第１の態様に記載されるとおりである。
【0025】
別の好ましい例において、前記段階ｃ）において、前記縮合剤は、Ｎ，Ｎ'－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、ＥＤＣｌ、ＤＩＣ、ＤＣＣ、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵ、ＰｙＢＯＰ、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくはＨＡＴＵ、ＨＢＴＵ、ＰｙＢＯＰ、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、より好ましくはＰｙＢＯＰである。
【0026】
別の好ましい例において、段階ｃ）において、前記化合物
の添加量と式（IX）の化合物とのモル比は、１０：１～１：１、さらに好ましくは５：１～１：１、特に好ましくは２：１～１：１である。
別の好ましい例において、段階ｃ）において、前記縮合剤の添加量と式（IX）の化合物とのモル比は、１０：１～１：５、さらに好ましくは５：１～１：１、特に好ましくは２：１である。
【化18】
別の好ましい例において、段階ｃ）において、前記縮合剤の添加量と式（IX）の化合物とのモル比は、１０：１～１：５、さらに好ましくは５：１～１：１、特に好ましくは２：１である。
【0027】
別の好ましい例において、前記段階ｃ）は、活性剤を加える段階をさらに含み、前記活性剤は、ＤＭＡＰ、ＨＯＢｔ、４－ＰＰＹ、ＤＩＰＥＡおよびＥｔ３Ｎからなる群から選択され、好ましくはＤＩＰＥＡである。
別の好ましい例において、前記段階ｃ）は、非プロトン性溶媒中で行われ、好ましくは、前記非プロトン性溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドである。
別の好ましい例において、前記段階ｃ）は、非プロトン性溶媒中で行われ、好ましくは、前記非プロトン性溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドである。
【0028】
別の好ましい例において、前記段階ｄ）における塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ―ブトキシド、水素化ナトリウム、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、好ましくはリチウムジイソプロピルアミドである。
別の好ましい例において、段階ｄ）において、前記トリメチルクロロシランの添加量と式（X）の化合物とのモル比は、２０：１～１：１、さらに好ましくは１５：１～１：１、特に好ましくは１０：１である。
別の好ましい例において、段階ｄ）において、前記トリメチルクロロシランの添加量と式（X）の化合物とのモル比は、２０：１～１：１、さらに好ましくは１５：１～１：１、特に好ましくは１０：１である。
【0029】
別の好ましい例において、段階ｄ）において、前記塩基の添加量と式（X）の化合物とのモル比は、２０：１～１：１、さらに好ましくは１５：１～１：１、特に好ましくは１０：１である。
別の好ましい例において、前記段階ｄ）は、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、エーテル、トルエン、１，４－ジオキサン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドまたはその混合溶媒からなる群から選択される溶媒中で行われ、より好ましくはテトラヒドロフランである溶媒中で行われる。
別の好ましい例において、前記段階ｄ）は、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、エーテル、トルエン、１，４－ジオキサン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドまたはその混合溶媒からなる群から選択される溶媒中で行われ、より好ましくはテトラヒドロフランである溶媒中で行われる。
【0030】
別の好ましい例において、前記塩形成および結晶化は、
（ｂ１）段階（ａ）で得られた３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（３α，７α－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ－６α－ｅｔｈｙｌ－５β－ｃｈｏｌａｎ－２４－ｏｉｃ ａｃｉｄ）を純水と混合し、水酸化ナトリウム水溶液を加え、ほぼ溶けて透明になるまで攪拌して、透明な溶液を得る段階と、
（ｂ２）Ｍｇ２＋またはＣａ２＋を含む水溶液を前記透明な溶液にゆっくりと滴下し、沈殿が生じるまで引き続き攪拌する段階と、および
（ｂ３）前記沈殿物をろ過し、洗浄し、真空乾燥して、式（Ａ）の化合物を得る段階とを含む。
別の好ましい例において、前記３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸と純水との重量比は、４０：１～１：５、さらに好ましくは１０：１～１：３、特に好ましくは５：１である。
（ｂ１）段階（ａ）で得られた３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（３α，７α－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ－６α－ｅｔｈｙｌ－５β－ｃｈｏｌａｎ－２４－ｏｉｃ ａｃｉｄ）を純水と混合し、水酸化ナトリウム水溶液を加え、ほぼ溶けて透明になるまで攪拌して、透明な溶液を得る段階と、
（ｂ２）Ｍｇ２＋またはＣａ２＋を含む水溶液を前記透明な溶液にゆっくりと滴下し、沈殿が生じるまで引き続き攪拌する段階と、および
（ｂ３）前記沈殿物をろ過し、洗浄し、真空乾燥して、式（Ａ）の化合物を得る段階とを含む。
別の好ましい例において、前記３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸と純水との重量比は、４０：１～１：５、さらに好ましくは１０：１～１：３、特に好ましくは５：１である。
【0031】
別の好ましい例において、前記３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸と水酸化ナトリウム水溶液との重量比は、１０：１～１：１０、さらに好ましくは３：１～１：５、特に好ましくは１：０．９７～１：３である。
別の好ましい例において、前記水酸化ナトリウム水溶液の濃度は、０．５～５ｍｏｌ．Ｌ－１、さらに好ましくは２～３ｍｏｌ．Ｌ－１、特に好ましくは２．５２ｍｏｌ．Ｌ－１である。
別の好ましい例において、前記水酸化ナトリウム水溶液の濃度は、０．５～５ｍｏｌ．Ｌ－１、さらに好ましくは２～３ｍｏｌ．Ｌ－１、特に好ましくは２．５２ｍｏｌ．Ｌ－１である。
【0032】
別の好ましい例において、前記金属イオンＭｇ２＋を含む水溶液の濃度は、０．１～１０、さらに好ましくは０．３～５、特に好ましくは０．５～２ｍｏｌ．Ｌ－１である。
別の好ましい例において、前記金属イオンＣａ２＋を含む水溶液の濃度は、０．１～２０、さらに好ましくは０．５～１０、特に好ましくは２～５ｍｏｌ．Ｌ－１である。
別の好ましい例において、前記塩形成および結晶化は、
（ｂ４）段階（ａ）で得られた３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸をメタノールに溶解させ、水酸化ナトリウムのメタノール溶液をゆっくりと滴下し、ほぼ溶けて透明になるまで攪拌して、透明な溶液を得る段階と、
（ｂ５）前記透明な溶液を乾燥するまで濃縮し、次に、アセトンを加えて濃縮乾固して、固体残留物を得る段階と、および
（ｂ６）前記残留物にアセトンを加えてスラリー化し、ろ過し、真空乾燥して、式（Ａ）の化合物を得る段階とを含む。
別の好ましい例において、前記金属イオンＣａ２＋を含む水溶液の濃度は、０．１～２０、さらに好ましくは０．５～１０、特に好ましくは２～５ｍｏｌ．Ｌ－１である。
別の好ましい例において、前記塩形成および結晶化は、
（ｂ４）段階（ａ）で得られた３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸をメタノールに溶解させ、水酸化ナトリウムのメタノール溶液をゆっくりと滴下し、ほぼ溶けて透明になるまで攪拌して、透明な溶液を得る段階と、
（ｂ５）前記透明な溶液を乾燥するまで濃縮し、次に、アセトンを加えて濃縮乾固して、固体残留物を得る段階と、および
（ｂ６）前記残留物にアセトンを加えてスラリー化し、ろ過し、真空乾燥して、式（Ａ）の化合物を得る段階とを含む。
【発明の効果】
【0033】
本発明の範囲内で、本発明の上記の各技術的特徴と以下（例えば、実施例）に具体的に説明される各技術的特徴との間を、互いに組み合わせることにより、新しいまたは好ましい技術的解決策を構成することができることに理解されたい。スペースに限りがあるため、ここでは繰り返さない。
【発明を実施するための形態】
【0034】
本発明者らは、長期にわたる詳細な研究の結果、３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸またはその塩の調製方法を得た。前記方法は、合成経路が短く、中間体が精製しやすく、反応条件が穏やかである特徴があり、得られた対応するコール酸またはコール酸塩の純度が高く、製品の品質が高く、薬物の製造に適している。上記の発見に基づいて、本発明者らは、本発明を完成させた。
【0035】
３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸塩の調製
本発明の式（Ａ）構造の化合物は、以下の一般的な経路１および経路２によって調製されることができる。
本発明の式（Ａ）構造の化合物は、以下の一般的な経路１および経路２によって調製されることができる。
【化19】
【0036】
合成経路１
合成経路１に示されるように、
（１）式（VII）の化合物と化合物
またはその塩酸塩とを縮合反応させる。
合成経路１に示されるように、
（１）式（VII）の化合物と化合物
【化20】
【0037】
反応は、縮合剤および／または活性剤の存在下で、非プロトン溶媒中で、－２０～６０℃の温度下で行われる。前記縮合剤は、Ｎ，Ｎ'－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、ＥＤＣｌ、ＤＩＣ、ＤＣＣ、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵおよびＰｙＢＯＰから選択され、より好ましくはＰｙＢＯＰである。前記活性剤は、ＤＭＡＰ、ＨＯＢｔ、４－ＰＰＹ、ＤＩＰＥＡおよびＥｔ３Ｎから選択され、より好ましくはＤＩＰＥＡであり、前記非プロトン溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、またはその混合溶媒、より好ましくはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドであり、前記反応温度は、好ましくは－５～５０℃、より好ましくは０～３０℃である。
【0038】
（２）式（VI）の化合物を「ワンポット法」で水素化し、金属水素化物還元剤で還元して、式（V）の化合物を得る。
当該段階の反応は、プロトン溶媒、塩基性水溶液および５～１５０℃の温度下で行われる。前記水素化反応は、パラジウム／炭素を触媒として使用して、１～２０気圧の水素ガス下で行われ、前記金属水素化物還元剤は、水素化ホウ素ナトリウムまたは水素化ホウ素カリウム、より好ましくは水素化ホウ素ナトリウムであり得、前記プロトン溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ―ブタノール、水またはその混合溶媒から選択され、好ましくはメタノールと水との混合溶媒であり、前記塩基性水溶液は、水酸化ナトリウム水溶液および水酸化カリウム水溶液から選択される。前記反応温度は、５～１５０℃、より好ましくは５０～１００℃である。
当該段階の反応は、プロトン溶媒、塩基性水溶液および５～１５０℃の温度下で行われる。前記水素化反応は、パラジウム／炭素を触媒として使用して、１～２０気圧の水素ガス下で行われ、前記金属水素化物還元剤は、水素化ホウ素ナトリウムまたは水素化ホウ素カリウム、より好ましくは水素化ホウ素ナトリウムであり得、前記プロトン溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ―ブタノール、水またはその混合溶媒から選択され、好ましくはメタノールと水との混合溶媒であり、前記塩基性水溶液は、水酸化ナトリウム水溶液および水酸化カリウム水溶液から選択される。前記反応温度は、５～１５０℃、より好ましくは５０～１００℃である。
【0039】
好ましい実施形態において、式（Ａ）の化合物は、以下の方法によって調製される。
【化21】
【0040】
合成経路２
合成経路２に示されるように、
（１）式（IX）の化合物と化合物
またはその塩酸塩とを縮合反応させる。
縮合剤および／または活性剤の存在下で、非プロトン溶媒中で、－２０～６０℃の温度下で行われる。前記縮合剤は、Ｎ，Ｎ'－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、ＥＤＣｌ、ＤＩＣ、ＤＣＣ、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵおよびＰｙＢＯＰ、より好ましくはＰｙＢＯＰであり、前記活性剤は、ＤＭＡＰ、ＨＯＢｔ、４－ＰＰＹ、ＤＩＰＥＡおよびＥｔ３Ｎ、より好ましくはＤＩＰＥＡであり、前記非プロトン溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、またはその混合溶媒、より好ましくはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドである。前記反応温度は、好ましくは－５～４０℃、より好ましくは０～３０℃である。
合成経路２に示されるように、
（１）式（IX）の化合物と化合物
【化22】
縮合剤および／または活性剤の存在下で、非プロトン溶媒中で、－２０～６０℃の温度下で行われる。前記縮合剤は、Ｎ，Ｎ'－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、ＥＤＣｌ、ＤＩＣ、ＤＣＣ、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵおよびＰｙＢＯＰ、より好ましくはＰｙＢＯＰであり、前記活性剤は、ＤＭＡＰ、ＨＯＢｔ、４－ＰＰＹ、ＤＩＰＥＡおよびＥｔ３Ｎ、より好ましくはＤＩＰＥＡであり、前記非プロトン溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、またはその混合溶媒、より好ましくはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドである。前記反応温度は、好ましくは－５～４０℃、より好ましくは０～３０℃である。
【0041】
（２）式（X）の化合物と塩基およびトリメチルクロロシランとを反応させて、式（VIII）の化合物を得る。
当該反応は、非プロトン溶媒中で行われることができ、前記塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ―ブトキシド、水素化ナトリウムまたはリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）から選択され、より好ましくはリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）であり、前記非プロトン溶媒は、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、エーテル、トルエン、１，４－ジオキサン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドまたはその混合溶媒から選択され、より好ましくはテトラヒドロフランである。前記反応温度は、好ましくは－１００～４０℃、より好ましくは－７０～３０℃である。式（VIII）の化合物は、さらに精製することなく、次の反応に直接使用されることができる。
当該反応は、非プロトン溶媒中で行われることができ、前記塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ―ブトキシド、水素化ナトリウムまたはリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）から選択され、より好ましくはリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）であり、前記非プロトン溶媒は、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、エーテル、トルエン、１，４－ジオキサン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドまたはその混合溶媒から選択され、より好ましくはテトラヒドロフランである。前記反応温度は、好ましくは－１００～４０℃、より好ましくは－７０～３０℃である。式（VIII）の化合物は、さらに精製することなく、次の反応に直接使用されることができる。
【0042】
（３）ルイス酸の条件下で、式（VIII）の化合物とアセトアルデヒドとを反応させて、式（VI）の化合物を得る。
当該段階の反応において、前記ルイス酸は、好ましくは三フッ化ホウ素エーテレート であり、前記溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、またはその混合溶媒から選択され、より好ましくはジクロロメタンである。前記反応温度は、好ましくは－１００～７０℃、より好ましくは－７０～４０℃である。
当該段階の反応において、前記ルイス酸は、好ましくは三フッ化ホウ素エーテレート であり、前記溶媒は、ジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、またはその混合溶媒から選択され、より好ましくはジクロロメタンである。前記反応温度は、好ましくは－１００～７０℃、より好ましくは－７０～４０℃である。
【0043】
（４）式（VI）の化合物を「ワンポット法」で水素化し、金属水素化物還元剤で還元して、式（V）の化合物を得る。
当該段階の反応は、プロトン溶媒、塩基性水溶液および０～１５０℃の温度下で行われる。前記水素化反応は、パラジウム／炭素を触媒として使用して、１～２０気圧の水素ガス下で行われ、前記水素化ホウ素は、水素化ホウ素ナトリウムまたは水素化ホウ素カリウム、より好ましくは水素化ホウ素ナトリウムである。前記プロトン溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ―ブタノール、水、またはその混合溶媒からなる群から選択され、好ましくはメタノールと水との混合溶媒である。前記塩基性水溶液は、水酸化ナトリウム水溶液および水酸化カリウム水溶液から選択される。前記反応温度は、５～１５０℃、より好ましくは５０～１００℃である。
当該段階の反応は、プロトン溶媒、塩基性水溶液および０～１５０℃の温度下で行われる。前記水素化反応は、パラジウム／炭素を触媒として使用して、１～２０気圧の水素ガス下で行われ、前記水素化ホウ素は、水素化ホウ素ナトリウムまたは水素化ホウ素カリウム、より好ましくは水素化ホウ素ナトリウムである。前記プロトン溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ―ブタノール、水、またはその混合溶媒からなる群から選択され、好ましくはメタノールと水との混合溶媒である。前記塩基性水溶液は、水酸化ナトリウム水溶液および水酸化カリウム水溶液から選択される。前記反応温度は、５～１５０℃、より好ましくは５０～１００℃である。
【化23】
【0044】
従来の技術と比較して、本発明の調製方法は、一連の利点を有する。その主な利点は、次のとおりである。
（１）本発明のアミド縮合によって得られる中間体は、すべて固体形態であり、精製、包装および貯蔵が容易である。
（２）公開された調製技術と比較して、本発明の経路は短い。
（３）公開された調製技術と比較して、本発明は、生産継続性が高く、大規模生産により適した「ワンポット法」方式を採用する。
（４）公開された調製技術と比較して、本発明によって得られた対応するコール酸塩は、純度が高く、製品の品質が高く、特に、本発明の方法によって調製されたオベチコール酸のマグネシウム塩、カルシウム塩、ナトリウム塩およびカリウム塩は、不純物が少なく、薬物の製造に適している。
（１）本発明のアミド縮合によって得られる中間体は、すべて固体形態であり、精製、包装および貯蔵が容易である。
（２）公開された調製技術と比較して、本発明の経路は短い。
（３）公開された調製技術と比較して、本発明は、生産継続性が高く、大規模生産により適した「ワンポット法」方式を採用する。
（４）公開された調製技術と比較して、本発明によって得られた対応するコール酸塩は、純度が高く、製品の品質が高く、特に、本発明の方法によって調製されたオベチコール酸のマグネシウム塩、カルシウム塩、ナトリウム塩およびカリウム塩は、不純物が少なく、薬物の製造に適している。
【0045】
以下、本発明は、具体的実施例と併せてさらに説明される。これらの実施例は、本発明を説明するためにのみ使用され、本発明の範囲を限定するものではないことを理解されたい。以下の実施例において、具体的条件を示さない実験方法は、通常従来の条件または製造業者によって提案された条件に従う。特に明記されない限り、パーセンテージと部数とは、重量で計算される。
【0046】
実施例１．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１、式（V）の化合物）の調製
【化24】
【0047】
１．３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－アミド（化合物２）の調製
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－酸（式（VII）、６０．０ｇ、０．１４４ｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（９０．０ｇ、０．１７３ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４００ｍｌ）を順次に加え、氷浴下で攪拌し、温度を０℃に下げ、ＤＩＰＥＡ（７４．４ｇ、０．５７６ｍｏｌ）を加え、温度を０℃に制御し、３０分間攪拌し続ける。窒素ガスの保護下で、塩化アンモニウム（１２．３ｇ、０．２３０ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）を加える。室温まで昇温させ、一晩攪拌する。攪拌しながら、反応混合液を４Ｌの５％重炭酸ナトリウム水溶液にゆっくりと注ぎ、固体が析出するように2時間撹拌し、ろ過し、純水（５００ｍｌ）で洗浄し、真空乾燥して粗生成物を得る。粗生成物に酢酸エチル（３６０ｍｌ）を加え、１時間還流およびスラリー化および攪拌し、約４０℃にゆっくりと冷却し、ろ過し、フィルターケーキを酢酸エチル（５０ｍｌ）で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（５４．８ｇ、収率９１％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９８．４％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：７．２３（ｓ，１Ｈ），６．６６（ｓ，１Ｈ），５．９８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５５（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４７－３．４４（ｍ，１Ｈ），２．６１－２．５７（ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１３．２Ｈｚ，１Ｈ），２．３２－２．１７（ｍ，２Ｈ），２．１１－２．０４（ｍ，１Ｈ），１．９８－１．７９（ｍ，５Ｈ），１．７０－１．５７（ｍ，５Ｈ），１．４４－１．０５（ｍ，１３Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．９０（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．６０（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ－ＭＳ：４１６（Ｍ＋Ｈ）＋。
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－酸（式（VII）、６０．０ｇ、０．１４４ｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（９０．０ｇ、０．１７３ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４００ｍｌ）を順次に加え、氷浴下で攪拌し、温度を０℃に下げ、ＤＩＰＥＡ（７４．４ｇ、０．５７６ｍｏｌ）を加え、温度を０℃に制御し、３０分間攪拌し続ける。窒素ガスの保護下で、塩化アンモニウム（１２．３ｇ、０．２３０ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）を加える。室温まで昇温させ、一晩攪拌する。攪拌しながら、反応混合液を４Ｌの５％重炭酸ナトリウム水溶液にゆっくりと注ぎ、固体が析出するように2時間撹拌し、ろ過し、純水（５００ｍｌ）で洗浄し、真空乾燥して粗生成物を得る。粗生成物に酢酸エチル（３６０ｍｌ）を加え、１時間還流およびスラリー化および攪拌し、約４０℃にゆっくりと冷却し、ろ過し、フィルターケーキを酢酸エチル（５０ｍｌ）で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（５４．８ｇ、収率９１％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９８．４％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：７．２３（ｓ，１Ｈ），６．６６（ｓ，１Ｈ），５．９８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５５（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４７－３．４４（ｍ，１Ｈ），２．６１－２．５７（ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１３．２Ｈｚ，１Ｈ），２．３２－２．１７（ｍ，２Ｈ），２．１１－２．０４（ｍ，１Ｈ），１．９８－１．７９（ｍ，５Ｈ），１．７０－１．５７（ｍ，５Ｈ），１．４４－１．０５（ｍ，１３Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．９０（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．６０（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ－ＭＳ：４１６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【0048】
２．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１）の調製
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－アミド（化合物２、２４．０ｇ、５７．７ｍｍｏｌ）および無水メタノール（１３０ｍｌ）を加え、攪拌しながら１０％パラジウム炭素触媒（２．５ｇ）を加え、水素ガスで十分に置換し、水素バルーンを加圧し、５０℃で１６時間反応させる。反応液を別のフラスコに移し、攪拌しながら精製水（３００ｍｌ）および水酸化ナトリウム（５８ｇ）を加え、１００℃で約２時間攪拌し、ろ過し、母液を別の反応フラスコに移し、水素化ホウ素ナトリウム（５．５ｇ）をゆっくりとバッチで加え、加えた後混合物を１００℃の油浴で約４時間攪拌し、減圧下で濃縮して有機溶媒を完全に除去する。氷浴で冷却し、攪拌しながら６Ｎ塩酸をゆっくりと滴下してｐＨを約３に調節し、酢酸エチル（４５０ｍｌ×２）で抽出し、有機相をそれぞれ水（６００ｍｌ）および飽和食塩水（６００ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、濃縮して、固体粗生成物を得る。酢酸ブチル／ｎ―ヘプタン（７５ｍｌ：３０ｍｌ）の混合溶媒によって再結晶して、表題化合物（２１．１ｇ、収率８５％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９９．５％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１１．９７（ｂｒｓ，１Ｈ），４．３１（ｓ，１Ｈ），４．０６（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．５０（ｓ，１Ｈ），３．１７－３．０６（ｍ，１Ｈ），２．２８－２．２０（ｍ，１Ｈ），２．１５－２．０７（ｍ，１Ｈ），１．９３－１．９０（ｍ，１Ｈ），１．８３－１．６７（ｍ，６Ｈ），１．５４－１．０（ｍ，１８Ｈ），０．９０－０．８２（ｍ，９Ｈ），０．６１（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ－ＭＳ：４１９（Ｍ－Ｈ）－，８３９（２Ｍ－Ｈ）－。
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－アミド（化合物２、２４．０ｇ、５７．７ｍｍｏｌ）および無水メタノール（１３０ｍｌ）を加え、攪拌しながら１０％パラジウム炭素触媒（２．５ｇ）を加え、水素ガスで十分に置換し、水素バルーンを加圧し、５０℃で１６時間反応させる。反応液を別のフラスコに移し、攪拌しながら精製水（３００ｍｌ）および水酸化ナトリウム（５８ｇ）を加え、１００℃で約２時間攪拌し、ろ過し、母液を別の反応フラスコに移し、水素化ホウ素ナトリウム（５．５ｇ）をゆっくりとバッチで加え、加えた後混合物を１００℃の油浴で約４時間攪拌し、減圧下で濃縮して有機溶媒を完全に除去する。氷浴で冷却し、攪拌しながら６Ｎ塩酸をゆっくりと滴下してｐＨを約３に調節し、酢酸エチル（４５０ｍｌ×２）で抽出し、有機相をそれぞれ水（６００ｍｌ）および飽和食塩水（６００ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、濃縮して、固体粗生成物を得る。酢酸ブチル／ｎ―ヘプタン（７５ｍｌ：３０ｍｌ）の混合溶媒によって再結晶して、表題化合物（２１．１ｇ、収率８５％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９９．５％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１１．９７（ｂｒｓ，１Ｈ），４．３１（ｓ，１Ｈ），４．０６（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．５０（ｓ，１Ｈ），３．１７－３．０６（ｍ，１Ｈ），２．２８－２．２０（ｍ，１Ｈ），２．１５－２．０７（ｍ，１Ｈ），１．９３－１．９０（ｍ，１Ｈ），１．８３－１．６７（ｍ，６Ｈ），１．５４－１．０（ｍ，１８Ｈ），０．９０－０．８２（ｍ，９Ｈ），０．６１（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ－ＭＳ：４１９（Ｍ－Ｈ）－，８３９（２Ｍ－Ｈ）－。
【0049】
実施例２．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１）の調製
１．３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－（Ｎ－メチル－Ｎ－メトキシ）アミド（化合物３）の調製
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－酸（式（VII）、６０．０ｇ、０．１４４ｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（９０．０ｇ、０．１７３ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４００ｍｌ）を中順次に加え、氷浴下で攪拌し、温度を０℃に下げ、ＤＩＰＥＡ（７４．４ｇ、０．５７６ｍｏｌ）を加え、温度を０℃に制御し、３０分間攪拌し続ける。窒素ガスの保護下で、Ｎ，Ｏ－ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１２８．４ｇ、０．２８８ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）を加える。室温まで昇温させ、一晩攪拌する。攪拌しながら、反応混合液を水（４Ｌ）にゆっくりと注ぎ、酢酸エチル（１Ｌ×３）で抽出し、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液（２Ｌ×３）、水（２Ｌ）および食塩水（２Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して、スラリー状の粗生成物を得る。粗生成物に酢酸エチル／石油エーテル（２２０ｍｌ：７００ｍｌ）を加えて再結晶し、還流し、約０℃にゆっくりと冷却し、ろ過し、フィルターケーキを酢酸エチル／石油エーテル（５０ｍｌ×３，ＥＡ／ＰＥ＝１：４）で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（５１．３ｇ、収率７８％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９８％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：５．９８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），３．４８－３．４３（ｍ，１Ｈ），３．０８（ｓ，３Ｈ），２．６１－２．５７（ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．４２－２．１７（ｍ，４Ｈ），１．９８－１．７９（ｍ，４Ｈ），１．６７－１．０７（ｍ，１８Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．９１（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．６１（ｓ，３Ｈ）；ＬＣ－ＭＳ：４６０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【化25】
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－酸（式（VII）、６０．０ｇ、０．１４４ｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（９０．０ｇ、０．１７３ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４００ｍｌ）を中順次に加え、氷浴下で攪拌し、温度を０℃に下げ、ＤＩＰＥＡ（７４．４ｇ、０．５７６ｍｏｌ）を加え、温度を０℃に制御し、３０分間攪拌し続ける。窒素ガスの保護下で、Ｎ，Ｏ－ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１２８．４ｇ、０．２８８ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）を加える。室温まで昇温させ、一晩攪拌する。攪拌しながら、反応混合液を水（４Ｌ）にゆっくりと注ぎ、酢酸エチル（１Ｌ×３）で抽出し、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液（２Ｌ×３）、水（２Ｌ）および食塩水（２Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して、スラリー状の粗生成物を得る。粗生成物に酢酸エチル／石油エーテル（２２０ｍｌ：７００ｍｌ）を加えて再結晶し、還流し、約０℃にゆっくりと冷却し、ろ過し、フィルターケーキを酢酸エチル／石油エーテル（５０ｍｌ×３，ＥＡ／ＰＥ＝１：４）で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（５１．３ｇ、収率７８％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９８％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：５．９８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），３．４８－３．４３（ｍ，１Ｈ），３．０８（ｓ，３Ｈ），２．６１－２．５７（ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．４２－２．１７（ｍ，４Ｈ），１．９８－１．７９（ｍ，４Ｈ），１．６７－１．０７（ｍ，１８Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．９１（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．６１（ｓ，３Ｈ）；ＬＣ－ＭＳ：４６０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【0050】
２．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１）の調製
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－（Ｎ－メチル－Ｎ－メトキシ）アミド（化合物３、５ｇ、１０．８８ｍｍｏｌ）および無水メタノール（５０ｍｌ）を加え、攪拌しながら１０％パラジウム炭素触媒（０．５ｇ）を加え、水素ガスで十分に置換し、水素バルーンを加圧し、５０℃で１６時間反応させる。ろ過し、母液を別のフラスコに移し、攪拌しながら精製水（６０ｍｌ）および水酸化ナトリウム（１３．１ｇ）を加え、混合物が透明になるまで１００℃で攪拌する。水素化ホウ素ナトリウム（１．２ｇ）をゆっくりとバッチで加え、加えた後混合物を１００℃の油浴で約４時間攪拌し、減圧下で濃縮して有機溶媒を完全に除去する。氷浴で冷却し、攪拌しながら６Ｎ塩酸をゆっくりと滴下してｐＨを約３に調節し、酢酸エチル（１００ｍｌ×２）で抽出し、有機相をそれぞれ水（１５０ｍｌ）および飽和食塩水（１５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、濃縮して、固体粗生成物を得る。酢酸ブチル（１３ｍｌ）によって結晶して、表題化合物（２．６ｇ、収率５６％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９９．０％を超える。
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－（Ｎ－メチル－Ｎ－メトキシ）アミド（化合物３、５ｇ、１０．８８ｍｍｏｌ）および無水メタノール（５０ｍｌ）を加え、攪拌しながら１０％パラジウム炭素触媒（０．５ｇ）を加え、水素ガスで十分に置換し、水素バルーンを加圧し、５０℃で１６時間反応させる。ろ過し、母液を別のフラスコに移し、攪拌しながら精製水（６０ｍｌ）および水酸化ナトリウム（１３．１ｇ）を加え、混合物が透明になるまで１００℃で攪拌する。水素化ホウ素ナトリウム（１．２ｇ）をゆっくりとバッチで加え、加えた後混合物を１００℃の油浴で約４時間攪拌し、減圧下で濃縮して有機溶媒を完全に除去する。氷浴で冷却し、攪拌しながら６Ｎ塩酸をゆっくりと滴下してｐＨを約３に調節し、酢酸エチル（１００ｍｌ×２）で抽出し、有機相をそれぞれ水（１５０ｍｌ）および飽和食塩水（１５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、濃縮して、固体粗生成物を得る。酢酸ブチル（１３ｍｌ）によって結晶して、表題化合物（２．６ｇ、収率５６％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９９．０％を超える。
【0051】
実施例３．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１）の調製
１．３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－ヒドロキシアミド（化合物４）の調製
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－酸（式（VII）、３００ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（４５２ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（６ｍｌ）を順次に加え、氷浴下で攪拌し、温度を０℃に下げ、ＤＩＰＥＡ（３７２ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）を加え、温度を０℃に制御し、３０分間攪拌し続ける。窒素ガスの保護下で、ヒドロキシルアミン塩酸塩（７７ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）を加える。室温まで昇温させ、３時間攪拌する。攪拌しながら、反応混合液を水（６０ｍｌ）にゆっくりと注ぎ、３０分間攪拌し、ろ過し、フィルターケーキを水（１０ｍｌ×４）で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（２７５ｍｇ、収率９５％）を得る。ＨＰＬＣ純度は、９８．５％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１０．３３（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），８．６６（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），５．９８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４８－３．４２（ｍ，１Ｈ），２．５９（ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．３２－２．１８（ｍ，２Ｈ），２．０－１．７９（ｍ，６Ｈ），１．６７－１．５７（ｍ，５Ｈ），１．４３－１．３１（ｍ，５Ｈ），１．２３－１．０４（ｍ，８Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．９０（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．６０（ｓ，３Ｈ）；ＬＣ－ＭＳ：４３２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【化26】
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－酸（式（VII）、３００ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（４５２ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（６ｍｌ）を順次に加え、氷浴下で攪拌し、温度を０℃に下げ、ＤＩＰＥＡ（３７２ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）を加え、温度を０℃に制御し、３０分間攪拌し続ける。窒素ガスの保護下で、ヒドロキシルアミン塩酸塩（７７ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）を加える。室温まで昇温させ、３時間攪拌する。攪拌しながら、反応混合液を水（６０ｍｌ）にゆっくりと注ぎ、３０分間攪拌し、ろ過し、フィルターケーキを水（１０ｍｌ×４）で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（２７５ｍｇ、収率９５％）を得る。ＨＰＬＣ純度は、９８．５％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１０．３３（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），８．６６（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），５．９８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４８－３．４２（ｍ，１Ｈ），２．５９（ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．３２－２．１８（ｍ，２Ｈ），２．０－１．７９（ｍ，６Ｈ），１．６７－１．５７（ｍ，５Ｈ），１．４３－１．３１（ｍ，５Ｈ），１．２３－１．０４（ｍ，８Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．９０（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．６０（ｓ，３Ｈ）；ＬＣ－ＭＳ：４３２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【0052】
２．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１）の調製
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－ヒドロキシアミド（化合物４、０．２ｇ、０．４６ｍｍｏｌ）および無水メタノール（１０ｍｌ）を加え、攪拌しながら１０％パラジウム炭素触媒（２０ｍｇ）を加え、水素ガスで十分に置換し、水素バルーンを加圧し、５０℃で１６時間反応させる。ろ過し、母液を別のフラスコに移し、攪拌しながら精製水（１０ｍｌ）および水酸化ナトリウム（０．５５ｇ）を加え、混合物が透明になるまで１００℃で攪拌する。水素化ホウ素ナトリウム（０．０７ｇ）をゆっくりとバッチで加え、加えた後混合物を１００℃の油浴で約４時間攪拌し、減圧下で濃縮して有機溶媒を完全に除去する。氷浴で冷却し、攪拌しながら６Ｎ塩酸をゆっくりと滴下してｐＨを約３に調節し、酢酸エチル（１５ｍｌ×３）で抽出し、有機相をそれぞれ水（３０ｍｌ）および飽和食塩水（３０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、濃縮して、固体粗生成物を得る。酢酸ブチル（５ｍｌ）によって結晶して、表題化合物（０．１７ｇ、収率８７％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９９．５％を超える。
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－ヒドロキシアミド（化合物４、０．２ｇ、０．４６ｍｍｏｌ）および無水メタノール（１０ｍｌ）を加え、攪拌しながら１０％パラジウム炭素触媒（２０ｍｇ）を加え、水素ガスで十分に置換し、水素バルーンを加圧し、５０℃で１６時間反応させる。ろ過し、母液を別のフラスコに移し、攪拌しながら精製水（１０ｍｌ）および水酸化ナトリウム（０．５５ｇ）を加え、混合物が透明になるまで１００℃で攪拌する。水素化ホウ素ナトリウム（０．０７ｇ）をゆっくりとバッチで加え、加えた後混合物を１００℃の油浴で約４時間攪拌し、減圧下で濃縮して有機溶媒を完全に除去する。氷浴で冷却し、攪拌しながら６Ｎ塩酸をゆっくりと滴下してｐＨを約３に調節し、酢酸エチル（１５ｍｌ×３）で抽出し、有機相をそれぞれ水（３０ｍｌ）および飽和食塩水（３０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、濃縮して、固体粗生成物を得る。酢酸ブチル（５ｍｌ）によって結晶して、表題化合物（０．１７ｇ、収率８７％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９９．５％を超える。
【0053】
実施例４．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１）の調製
【化27】
【0054】
１．３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－カルボキサミド（化合物５）の調製
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－酸（式（VII）、６．０ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（９．０ｇ、１７．３ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）を順次に加え、氷浴下で攪拌し、温度を０℃に下げ、ＤＩＰＥＡ（７．５ｇ、５７．６ｍｏｌ）を加え、温度を０℃に制御し、３０分間攪拌し続ける。窒素ガスの保護下で、メチルアミン塩酸塩（１．６ｇ、２３．０ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）を加える。室温まで昇温させ、３時間攪拌する。攪拌しながら、反応混合液を５％重炭酸ナトリウム水（４００ｍｌ）にゆっくりと注ぎ、攪拌し、ろ過し、フィルターケーキを水（５０ｍｌ×４）で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（５．８ｇ、収率９３％）を得る。ＨＰＬＣ純度は、９８．４％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：７．８１（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４７－３．４２（ｍ，１Ｈ），２．６０－２．５６（ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１３．２Ｈｚ，１Ｈ），２．５４（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，３Ｈ），２．２９－１．７８（ｍ，８Ｈ），１．６６－１．０４（ｍ，１８Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．８９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．６０（ｓ，３Ｈ）；ＬＣ－ＭＳ：４３０（Ｍ＋Ｈ）＋。
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－酸（式（VII）、６．０ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（９．０ｇ、１７．３ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）を順次に加え、氷浴下で攪拌し、温度を０℃に下げ、ＤＩＰＥＡ（７．５ｇ、５７．６ｍｏｌ）を加え、温度を０℃に制御し、３０分間攪拌し続ける。窒素ガスの保護下で、メチルアミン塩酸塩（１．６ｇ、２３．０ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）を加える。室温まで昇温させ、３時間攪拌する。攪拌しながら、反応混合液を５％重炭酸ナトリウム水（４００ｍｌ）にゆっくりと注ぎ、攪拌し、ろ過し、フィルターケーキを水（５０ｍｌ×４）で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（５．８ｇ、収率９３％）を得る。ＨＰＬＣ純度は、９８．４％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：７．８１（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４７－３．４２（ｍ，１Ｈ），２．６０－２．５６（ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１３．２Ｈｚ，１Ｈ），２．５４（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，３Ｈ），２．２９－１．７８（ｍ，８Ｈ），１．６６－１．０４（ｍ，１８Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．８９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．６０（ｓ，３Ｈ）；ＬＣ－ＭＳ：４３０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【0055】
２．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１）の調製
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－カルボキサミド（化合物５、１．０ｇ、２．３２ｍｍｏｌ）および無水メタノール（１０ｍｌ）を加え、攪拌しながら１０％パラジウム炭素触媒（１００ｍｇ）を加え、水素ガスで十分に置換し、水素バルーンを加圧し、５０℃で１６時間反応させる。ろ過し、母液を別のフラスコに移し、攪拌しながら精製水（１２０ｍｌ）および水酸化ナトリウム（２．８ｇ）を加え、混合物が透明になるまで１００℃で攪拌する。水素化ホウ素ナトリウム（０．２７ｇ）をゆっくりとバッチで加え、加えた後混合物を１００℃の油浴で約４時間攪拌し、減圧下で濃縮して有機溶媒を完全に除去する。氷浴で冷却し、攪拌しながら６Ｎ塩酸をゆっくりと滴下してｐＨを約３に調節し、酢酸エチル（３０ｍｌ×３）で抽出し、有機相をそれぞれ水（４０ｍｌ）および飽和食塩水（４０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、濃縮して、固体粗生成物を得る。酢酸ブチル（１０ｍｌ）によって結晶して、表題化合物（０．７８ｇ、収率８０％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９９．０％を超える。
フラスコに３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－カルボキサミド（化合物５、１．０ｇ、２．３２ｍｍｏｌ）および無水メタノール（１０ｍｌ）を加え、攪拌しながら１０％パラジウム炭素触媒（１００ｍｇ）を加え、水素ガスで十分に置換し、水素バルーンを加圧し、５０℃で１６時間反応させる。ろ過し、母液を別のフラスコに移し、攪拌しながら精製水（１２０ｍｌ）および水酸化ナトリウム（２．８ｇ）を加え、混合物が透明になるまで１００℃で攪拌する。水素化ホウ素ナトリウム（０．２７ｇ）をゆっくりとバッチで加え、加えた後混合物を１００℃の油浴で約４時間攪拌し、減圧下で濃縮して有機溶媒を完全に除去する。氷浴で冷却し、攪拌しながら６Ｎ塩酸をゆっくりと滴下してｐＨを約３に調節し、酢酸エチル（３０ｍｌ×３）で抽出し、有機相をそれぞれ水（４０ｍｌ）および飽和食塩水（４０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、濃縮して、固体粗生成物を得る。酢酸ブチル（１０ｍｌ）によって結晶して、表題化合物（０．７８ｇ、収率８０％）を得、ＨＰＬＣ純度は、９９．０％を超える。
【0056】
実施例５．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１）の調製
１．３α－ヒドロキシ－７－ケト－５β－コリン－２４－アミド（化合物６）の調製
反応フラスコに３α－ヒドロキシ－７－ケト－５β－コリン－２４－アルカン酸（式（ＩＸ）、１００．０ｇ、０．２６ｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（１６０．０ｇ、０．３１ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（７００ｍｌ）を順次に加え、氷浴で約０℃まで攪拌し、ＤＩＰＥＡ（１１６ｇ、０．９１ｍｏｌ）を加え、温度を約０℃に制御しながら３０分間攪拌し続ける。窒素ガスの保護下で、塩化アンモニウム（２７．４ｇ、０．５２ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）を加え、混合液を室温に昇温させて１６時間攪拌する。混合物を１００℃下で１６時間攪拌する。攪拌しながら、反応混合液を５％重炭酸ナトリウム水溶液（５Ｌ）にゆっくりと注ぎ、固体を析出し、１時間均一に攪拌し、ろ過し、純水（５００ｍｌ×８）で洗浄し、真空乾燥して粗生成物を得る。粗生成物をフラスコに移し、テトラヒドロフラン（４００ｍｌ）を加え、還流およびスラリー化し、温度を下げて冷却し、ろ過し、フィルターケーキをテトラヒドロフラン（５０ｍｌ×３）で洗浄し、真空乾燥して、標的化合物（８３．５ｇ、８６％）を得る。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：７．２３（ｓ，１Ｈ），６．６６（ｓ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．３６－３．３４（ｍ，１Ｈ），２．９４－２．８９（ｍ，１Ｈ），２．４５（ｔ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），２．１１－２．０４（ｍ，２Ｈ），１．９８－１．９２（ｍ，２Ｈ），１．８５－１．６６（ｍ，６Ｈ），１．５１－０．９２（ｍ，１７Ｈ），０．８９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．６２（ｓ，３Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）：３９０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【化28】
反応フラスコに３α－ヒドロキシ－７－ケト－５β－コリン－２４－アルカン酸（式（ＩＸ）、１００．０ｇ、０．２６ｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（１６０．０ｇ、０．３１ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（７００ｍｌ）を順次に加え、氷浴で約０℃まで攪拌し、ＤＩＰＥＡ（１１６ｇ、０．９１ｍｏｌ）を加え、温度を約０℃に制御しながら３０分間攪拌し続ける。窒素ガスの保護下で、塩化アンモニウム（２７．４ｇ、０．５２ｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）を加え、混合液を室温に昇温させて１６時間攪拌する。混合物を１００℃下で１６時間攪拌する。攪拌しながら、反応混合液を５％重炭酸ナトリウム水溶液（５Ｌ）にゆっくりと注ぎ、固体を析出し、１時間均一に攪拌し、ろ過し、純水（５００ｍｌ×８）で洗浄し、真空乾燥して粗生成物を得る。粗生成物をフラスコに移し、テトラヒドロフラン（４００ｍｌ）を加え、還流およびスラリー化し、温度を下げて冷却し、ろ過し、フィルターケーキをテトラヒドロフラン（５０ｍｌ×３）で洗浄し、真空乾燥して、標的化合物（８３．５ｇ、８６％）を得る。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：７．２３（ｓ，１Ｈ），６．６６（ｓ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．３６－３．３４（ｍ，１Ｈ），２．９４－２．８９（ｍ，１Ｈ），２．４５（ｔ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），２．１１－２．０４（ｍ，２Ｈ），１．９８－１．９２（ｍ，２Ｈ），１．８５－１．６６（ｍ，６Ｈ），１．５１－０．９２（ｍ，１７Ｈ），０．８９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ），０．６２（ｓ，３Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）：３９０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【0057】
２．３α，７－ビス（トリメチルシロキシ）－５β－コリン－６－エン－２４－アミド（化合物７）の調製
フラスコに乾燥テトラヒドロフラン（２００ｍｌ）およびリチウムジイソプロピルアミド（１９３ｍｌ、２Ｍのヘプタン／テトラヒドロフラン／エチルベンゼン溶液）を順次に加え、窒素ガス下で温度を－７０℃に下げ、２０分間攪拌し、トリメチルクロロシラン（４２ｇ、０．３８５ｍｏｌ）をゆっくりと滴下し、温度を－７０℃に制御しながら３０分間攪拌し続ける。混合液に３α－ヒドロキシ－７－ケト－５β－コリン－２４－アミド（化合物６）のテトラヒドロフラン懸濁液（１５．０ｇの固体は、５０ｍｌの乾燥テトラヒドロフランに均一に分散され）を滴下し、約１０分間滴下完了し、温度を約－７０℃に制御しながら１時間攪拌し続ける。氷浴で冷却し、反応混合液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液にゆっくりと加えてクエンチし、酢酸エチル（１５０ｍｌｘ２）で抽出し、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液（２００ｍｌｘ３）で数回洗浄し、最後に食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、粗生成物を得、精製することなく、次の反応に直接使用される。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：４．７５（ｑ，Ｊ＝１．６，４．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６５－３．５８（ｍ，１Ｈ），２．３２－２．２５（ｍ，１Ｈ），２．１８－２．０９（ｍ，２Ｈ），１．９９－１．７３（ｍ，７Ｈ），１．６６－１．４３（ｍ，５Ｈ），１．３７－１．０９（ｍ，９Ｈ），１．０１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８８（ｓ，３Ｈ），０．７５（ｓ，３Ｈ），０．１８（ｓ，９Ｈ），０．１３（ｓ，９Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）：５３４（Ｍ＋Ｈ）＋。
フラスコに乾燥テトラヒドロフラン（２００ｍｌ）およびリチウムジイソプロピルアミド（１９３ｍｌ、２Ｍのヘプタン／テトラヒドロフラン／エチルベンゼン溶液）を順次に加え、窒素ガス下で温度を－７０℃に下げ、２０分間攪拌し、トリメチルクロロシラン（４２ｇ、０．３８５ｍｏｌ）をゆっくりと滴下し、温度を－７０℃に制御しながら３０分間攪拌し続ける。混合液に３α－ヒドロキシ－７－ケト－５β－コリン－２４－アミド（化合物６）のテトラヒドロフラン懸濁液（１５．０ｇの固体は、５０ｍｌの乾燥テトラヒドロフランに均一に分散され）を滴下し、約１０分間滴下完了し、温度を約－７０℃に制御しながら１時間攪拌し続ける。氷浴で冷却し、反応混合液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液にゆっくりと加えてクエンチし、酢酸エチル（１５０ｍｌｘ２）で抽出し、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液（２００ｍｌｘ３）で数回洗浄し、最後に食塩水で洗浄し、乾燥し、濃縮して、粗生成物を得、精製することなく、次の反応に直接使用される。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：４．７５（ｑ，Ｊ＝１．６，４．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６５－３．５８（ｍ，１Ｈ），２．３２－２．２５（ｍ，１Ｈ），２．１８－２．０９（ｍ，２Ｈ），１．９９－１．７３（ｍ，７Ｈ），１．６６－１．４３（ｍ，５Ｈ），１．３７－１．０９（ｍ，９Ｈ），１．０１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），０．８８（ｓ，３Ｈ），０．７５（ｓ，３Ｈ），０．１８（ｓ，９Ｈ），０．１３（ｓ，９Ｈ）；ＥＳＩ－ＭＳ（ｍ／ｚ）：５３４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【0058】
３．３α－ヒドロキシ－６－エチリデン－７－ケト－５β－コリン－２４－アミド（化合物２）の調製
フラスコに３α，７－ビス（トリメチルシロキシ）－５β－コリン－６－エン－２４－アミド（化合物７、１．０ｇ、１．９ｍｍｏｌ）、乾燥ジクロロメタン（１０ｍｌ）を順次に加え、窒素ガス下で－６０℃に冷却し、１０分間攪拌する。混合液にアセトアルデヒド（２３０ｕｌ、３．８ｍｍｏｌ）すばやく加え、温度を約－６０℃に制御しながら１５分間攪拌し続ける。混合液に三フッ化ホウ素エーテルのジクロロメタン溶液（１．０ｍｌの４８％三フッ化ホウ素エーテルを５ｍｌの乾燥ジクロロメタンに溶解する）に滴下し、温度を－５０℃に制御しながら２０分間攪拌し続け、５０℃に昇温して１時間攪拌する。氷浴で冷却し、攪拌しながら反応混合液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液にゆっくりと注いでクエンチし、ジクロロメタン（２０ｍｌｘ２）で抽出し、有機相を合併し、水および食塩水で洗浄し、乾燥する。濃縮して、粗生成物を得る。酢酸エチルおよびエタノール混合系によって結晶して、標的生成物（４２０ｍｇ、収率５４％）を得る。
フラスコに３α，７－ビス（トリメチルシロキシ）－５β－コリン－６－エン－２４－アミド（化合物７、１．０ｇ、１．９ｍｍｏｌ）、乾燥ジクロロメタン（１０ｍｌ）を順次に加え、窒素ガス下で－６０℃に冷却し、１０分間攪拌する。混合液にアセトアルデヒド（２３０ｕｌ、３．８ｍｍｏｌ）すばやく加え、温度を約－６０℃に制御しながら１５分間攪拌し続ける。混合液に三フッ化ホウ素エーテルのジクロロメタン溶液（１．０ｍｌの４８％三フッ化ホウ素エーテルを５ｍｌの乾燥ジクロロメタンに溶解する）に滴下し、温度を－５０℃に制御しながら２０分間攪拌し続け、５０℃に昇温して１時間攪拌する。氷浴で冷却し、攪拌しながら反応混合液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液にゆっくりと注いでクエンチし、ジクロロメタン（２０ｍｌｘ２）で抽出し、有機相を合併し、水および食塩水で洗浄し、乾燥する。濃縮して、粗生成物を得る。酢酸エチルおよびエタノール混合系によって結晶して、標的生成物（４２０ｍｇ、収率５４％）を得る。
【0059】
４．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１）の調製
実施例１の化合物１の調製段階２と同様に、表題化合物１を得、収率は、８２％であり、ＨＰＬＣ純度は、９９．６％である。
実施例１の化合物１の調製段階２と同様に、表題化合物１を得、収率は、８２％であり、ＨＰＬＣ純度は、９９．６％である。
【0060】
実施例７．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸性マグネシウム塩（化合物８）の調製
【化29】
【0061】
１０Ｌの反応器に３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸（化合物１、４５０ｇ）および純水（２．２５ｋｇ）を加え、攪拌しながら水酸化ナトリウム水溶液（４２．３ｇの水酸化ナトリウムを４２０ｇの水に溶解する）を加え、ほぼ溶けて透明になるまで約３５℃で攪拌し、ろ過し、少量の水で洗浄し、母液を反応器に移し、塩化マグネシウム水溶液（１３０．５ｇの塩化マグネシウム六水和物を９６９ｇの水に溶解する）をゆっくりと滴下し、２０４ｇの純水で洗浄して一緒に移し、１．５時間攪拌し続ける。ろ過し、中性になるまで純水で洗浄し、６５℃で真空乾燥して、表題化合物（４６０ｇ、収率９９％）を得、純度は、９９．８％であり、式（Ｂ）の不純物は、０．０２％であり、式（Ｃ）の不純物は、検出されない。
【化30】
【0062】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：４．３２（ｓ，１Ｈ），４．０３（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），３．５０（ｓ，１Ｈ），３．１３（ｓ，１Ｈ），１．９３－０．８１（ｍ，３６Ｈ），０．６１（ｓ，３Ｈ）．
赤外線スペクトル（ＩＲ）特性吸収ピーク：３４０１±５ｃｍ－１、２９３５±５ｃｍ－１、２８７１±５ｃｍ－１、１５５５±５ｃｍ－１、１４４９±５ｃｍ－１、１４１４±５ｃｍ－１、１３７７±５ｃｍ－１、１１５９±５ｃｍ－１、１０６４±５ｃｍ－１および６０３±５ｃｍ－１。
原子吸光（Ｍｇ２＋）：２．８２％（理論値：２．８１％）。
赤外線スペクトル（ＩＲ）特性吸収ピーク：３４０１±５ｃｍ－１、２９３５±５ｃｍ－１、２８７１±５ｃｍ－１、１５５５±５ｃｍ－１、１４４９±５ｃｍ－１、１４１４±５ｃｍ－１、１３７７±５ｃｍ－１、１１５９±５ｃｍ－１、１０６４±５ｃｍ－１および６０３±５ｃｍ－１。
原子吸光（Ｍｇ２＋）：２．８２％（理論値：２．８１％）。
【0063】
実施例８．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸性ナトリウム塩（化合物９）の調製
【化31】
【0064】
５．０ｇの化合物１に１０ｍｌの無水メタノールを加え、溶解されて透明になるまで攪拌した後、水酸化ナトリウムのメタノール溶液（１．０ｅｑＮａＯＨを２．０ｍｌのメタノールに溶解する）にゆっくりと滴下し、室温下で２時間攪拌する。４０℃の水浴で濃縮し、アセトン（１５ｍｌｘ３）を加えて濃縮乾固し，最後に残留物に３０ｍｌのアセトンを加えて２時間スラリー化し、ろ過し、室温下で８時間真空乾燥して、４．６ｇの表題化合物を得、収率は、８７％であり、純度は、９９．７％であり、式（Ｂ）の不純物は、０．０３％であり、式（Ｃ）の不純物は、検出されない。
【0065】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：４．３８（ｓ，１Ｈ），４．０８（ｓ，１Ｈ），３．５０（ｓ，１Ｈ），３．１７－３．１３（ｍ，１Ｈ），１．９３－０．８１（ｍ，３６Ｈ），０．６１（ｓ，３Ｈ）。
赤外線スペクトル（ＩＲ）特性吸収ピーク：３４２３±５ｃｍ－１、２９５８±５ｃｍ－１、２９３５±５ｃｍ－１、２８７１±５ｃｍ－１、２１２２±５ｃｍ－１、１６４０±５ｃｍ－１、１５５９±５ｃｍ－１、１４５１±５ｃｍ－１、１４０６±５ｃｍ－１、１３７８±５ｃｍ－１、１１６０±５ｃｍ－１、１０６５±５ｃｍ－１および６０３±５ｃｍ－１。
イオンクロマトグラフィーＩＣ（Ｎａ＋）：５．１９％（理論値：５．１９％）。
赤外線スペクトル（ＩＲ）特性吸収ピーク：３４２３±５ｃｍ－１、２９５８±５ｃｍ－１、２９３５±５ｃｍ－１、２８７１±５ｃｍ－１、２１２２±５ｃｍ－１、１６４０±５ｃｍ－１、１５５９±５ｃｍ－１、１４５１±５ｃｍ－１、１４０６±５ｃｍ－１、１３７８±５ｃｍ－１、１１６０±５ｃｍ－１、１０６５±５ｃｍ－１および６０３±５ｃｍ－１。
イオンクロマトグラフィーＩＣ（Ｎａ＋）：５．１９％（理論値：５．１９％）。
【0066】
実施例９．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸性カリウム塩（化合物１０）の調製
５．０ｇの化合物１に１０ｍｌのメタノールを加え、溶解されて透明になるまで攪拌した後、水酸化カリウムメタノール溶液（０．６５ｇのＫＯＨを２．０ｍｌのメタノールに溶解する）にゆっくりと滴下し、室温下で２時間攪拌し、４０℃の水浴で濃縮し、アセトン（１０ｍｌｘ３）を加えて濃縮乾固し，残留物に３０ｍｌのアセトンを加えて１．５時間スラリー化し、ろ過し、室温下で８時間真空乾燥して、表題化合物１０をえ、重量は、４．９ｇであり、収率は、９０％であり、純度は、９９．８％であり、式（Ｂ）の不純物は、０．０３％であり、式（Ｃ）の不純物は、検出されない。
【化32】
【0067】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：４．５１（ｓ，１Ｈ），４．１８（ｓ，１Ｈ），３．５０（ｓ，１Ｈ），３．１５－３．１０（ｍ，１Ｈ），１．９３－０．８１（ｍ，３６Ｈ），０．６０（ｓ，３Ｈ）。
赤外線スペクトル（ＩＲ）特性吸収ピーク：３４０９±５ｃｍ－１、２９３５±５ｃｍ－１、２８７１±５ｃｍ－１、１６４３±５ｃｍ－１、１５５５±５ｃｍ－１、１４６５±５ｃｍ－１、１４５１±５ｃｍ－１、１４０４±５ｃｍ－１、１３７８±５ｃｍ－１、１３３８±５ｃｍ－１、１１５９±５ｃｍ－１、１０６５±５ｃｍ－１および６０３±５ｃｍ－１。
イオンクロマトグラフィーＩＣ（Ｋ＋）：８．５０％（理論値：８．５２％）。
赤外線スペクトル（ＩＲ）特性吸収ピーク：３４０９±５ｃｍ－１、２９３５±５ｃｍ－１、２８７１±５ｃｍ－１、１６４３±５ｃｍ－１、１５５５±５ｃｍ－１、１４６５±５ｃｍ－１、１４５１±５ｃｍ－１、１４０４±５ｃｍ－１、１３７８±５ｃｍ－１、１３３８±５ｃｍ－１、１１５９±５ｃｍ－１、１０６５±５ｃｍ－１および６０３±５ｃｍ－１。
イオンクロマトグラフィーＩＣ（Ｋ＋）：８．５０％（理論値：８．５２％）。
【0068】
実施例１０．３α，７α－ジヒドロキシ－６α－エチル－５β－コリン－２４－酸性カルシウム塩（化合物１１）の調製
【化33】
【0069】
８４０ｍｇの化合物１を取り、３．０ｍｌの水および水酸化ナトリウム水溶液（８５ｍｇの固体を２．０ｍｌの水に溶解する）を加え、溶解された透明になるまで攪拌し、塩かカルシウム水溶液（８８８ｍｇの塩かカルシウム固体を２．５ｍｌの水に溶解する）を滴下し、室温下で１６時間攪拌し、ろ過し、純水で洗浄して排水し、室温下で８時間真空乾燥して、７３５ｍｇの表題化合物を得、収率は、８４％であり、純度は、９９．９％であり、式（Ｂ）の不純物は、０．０１％であり、式（Ｃ）の不純物は、検出されない。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：４．３２（ｓ，１Ｈ），４．０２（ｓ，１Ｈ），３．５０（ｓ，１Ｈ），３．１４（ｍ，１Ｈ），２．０９－０．８１（ｍ，３６Ｈ），０．６１（ｓ，３Ｈ）．
赤外線スペクトル（ＩＲ）特性吸収ピーク：３４０７±５ｃｍ－１、２９３５±５ｃｍ－１、２８７１±５ｃｍ－１、１５５３±５ｃｍ－１、１４４７±５ｃｍ－１、１４１７±５ｃｍ－１、１３７７±５ｃｍ－１、１１５９±５ｃｍ－１、１０６４±５ｃｍ－１および６０３±５ｃｍ－１。
原子吸光（Ｃａ２＋）：４．５８％（理論値：４．５６％）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：４．３２（ｓ，１Ｈ），４．０２（ｓ，１Ｈ），３．５０（ｓ，１Ｈ），３．１４（ｍ，１Ｈ），２．０９－０．８１（ｍ，３６Ｈ），０．６１（ｓ，３Ｈ）．
赤外線スペクトル（ＩＲ）特性吸収ピーク：３４０７±５ｃｍ－１、２９３５±５ｃｍ－１、２８７１±５ｃｍ－１、１５５３±５ｃｍ－１、１４４７±５ｃｍ－１、１４１７±５ｃｍ－１、１３７７±５ｃｍ－１、１１５９±５ｃｍ－１、１０６４±５ｃｍ－１および６０３±５ｃｍ－１。
原子吸光（Ｃａ２＋）：４．５８％（理論値：４．５６％）。
【0070】
本発明で言及されたすべての文書は、あたかも各文書が個別に参照として引用されたかのように、本出願における参照として引用される。さらに、本発明の上記の教示内容を読んだ後、当業者は本発明に様々な変更または修正を加えることができ、これらの同等の形態も、本出願の添付の請求範囲によって定義される範囲に含まれる。
【国際調査報告】