特表 2022-528005 免疫応答を調節するためおよび疾患を処置するためのＢＴＬＡ結合（ＣＤ２７２）抗体

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-06-07

(54)【発明の名称】免疫応答を調節するためおよび疾患を処置するためのＢＴＬＡ結合（ＣＤ２７２）抗体

(51)【国際特許分類】

   C12N 15/13 20060101AFI20220531BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20220531BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20220531BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20220531BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20220531BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20220531BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20220531BHJP

   C12P 21/08 20060101ALI20220531BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20220531BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20220531BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20220531BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20220531BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20220531BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20220531BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20220531BHJP

【ＦＩ】

C12N15/13

C07K16/28 ZNA

C12N15/63 Z

C12N1/15

C12N1/19

C12N1/21

C12N5/10

C12P21/08

A61K39/395 N

A61P37/02

A61P43/00 111

A61P35/00

A61K45/00

A61P43/00 121

A61P25/00

A61P1/00

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021560478

(86)(22)【出願日】2020-03-31

(85)【翻訳文提出日】2021-11-29

(86)【国際出願番号】 US2020025936

(87)【国際公開番号】W WO2020205849

(87)【国際公開日】2020-10-08

(31)【優先権主張番号】62/827,744

(32)【優先日】2019-04-01

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

(71)【出願人】

【識別番号】521441238

【氏名又は名称】レイクファーマ・インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＬａｋｅＰｈａｒｍａ， Ｉｎｃ．

(71)【出願人】

【識別番号】518278007

【氏名又は名称】トリアニ・インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】Ｔｒｉａｎｎｉ， Ｉｎｃ．

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100106518

【弁理士】

【氏名又は名称】松谷 道子

(74)【代理人】

【識別番号】100138911

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻井 陽子

(72)【発明者】

【氏名】ゼベル，ブライアン エイ

(72)【発明者】

【氏名】リッピンコット，ジョン エイ

(72)【発明者】

【氏名】ジェン，ヤーユエ

(72)【発明者】

【氏名】ラオ，メガ バマン

(72)【発明者】

【氏名】タン，ミャオ

(72)【発明者】

【氏名】マイニンガー，デイビッド ピー

【テーマコード（参考）】

4B064

4B065

4C084

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B064AG27

4B064CA02

4B064CA05

4B064CA06

4B064CA08

4B064CA10

4B064CA19

4B064CC24

4B064DA01

4B064DA05

4B065AA01X

4B065AA01Y

4B065AA57X

4B065AA57Y

4B065AA72X

4B065AA72Y

4B065AA83X

4B065AA83Y

4B065AA90X

4B065AA90Y

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA25

4B065CA44

4C084AA19

4C084NA14

4C084ZA02

4C084ZA66

4C084ZB26

4C084ZC42

4C084ZC75

4C085AA14

4C085BB11

4C085DD62

4C085EE01

4H045AA10

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA72

4H045FA74

(57)【要約】

本発明は、新規の抗ＢＴＬＡ抗体、そのような抗体を含む医薬組成物、ならびにがんまたは自己免疫疾患などの疾患の処置のためにそのような抗体および医薬組成物を使用する治療方法を提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｃ）配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｄ）配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｅ）配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｆ）配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｇ）配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｈ）配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｉ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｊ）配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｋ）配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｌ）配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｍ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｎ）配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｏ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｐ）配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｑ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｒ）配列番号３７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
ｓ）配列番号３９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号４０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；または
ｔ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号４２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む抗体。

【請求項2】

ａ）配列番号４７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号４８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号４９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号５０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号５１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号５２を含むｖｌＣＤＲ３；
ｂ）配列番号５３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号５４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号５５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号５６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号５７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号５８を含むｖｌＣＤＲ３；
ｃ）配列番号５９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号６０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号６１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号６２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号６３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号６４を含むｖｌＣＤＲ３；
ｄ）配列番号６５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号６６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号６７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号６８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号６９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号７０を含むｖｌＣＤＲ３；
ｅ）配列番号７１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号７２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号７３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号７４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号７５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号７６を含むｖｌＣＤＲ３；
ｆ）配列番号７７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号７８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号７９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号８０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号８１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号８２を含むｖｌＣＤＲ３；
ｇ）配列番号８３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号８４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号８５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号８６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号８７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号８８を含むｖｌＣＤＲ３；
ｈ）配列番号８９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号９０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号９１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号９２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号９３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号９４を含むｖｌＣＤＲ３；
ｉ）配列番号９５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号９６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号９７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号９８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号９９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１００を含むｖｌＣＤＲ３；
ｊ）配列番号１０１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１０４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１０５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１０６を含むｖｌＣＤＲ３；
ｋ）配列番号１０７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１２を含むｖｌＣＤＲ３；
ｌ）配列番号１１３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１１４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１１５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１８を含むｖｌＣＤＲ３；
ｍ）配列番号１１９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１２４を含むｖｌＣＤＲ３；
ｎ）配列番号１３１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１３４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１３５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３６を含むｖｌＣＤＲ３；
ｏ）配列番号１３７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４２を含むｖｌＣＤＲ３；
ｐ）配列番号１４３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１４４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１４５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４８を含むｖｌＣＤＲ３；
ｑ）配列番号１４９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１５４を含むｖｌＣＤＲ３；
ｒ）配列番号１５５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１６０を含むｖｌＣＤＲ３；
ｓ）配列番号１６１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１６２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１６３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１６４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１６５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１６６を含むｖｌＣＤＲ３；または
ｔ）配列番号１６７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１６８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１６９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１７０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１７１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１７２を含むｖｌＣＤＲ３
を含む抗体。

【請求項3】

ヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに結合する、請求項１または２に記載の抗体。

【請求項4】

配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
配列番号１０７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１２を含むｖｌＣＤＲ３；
配列番号１３７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４２を含むｖｌＣＤＲ３；または
配列番号１４９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１５４を含むｖｌＣＤＲ３を含み、
ＢＴＬＡアンタゴニストとして働き、ＨＶＥＭに対するＢＴＬＡの結合およびＴ細胞機能のＨＶＥＭ媒介性抑制をブロックする、請求項１または２に記載の抗体。

【請求項5】

配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
配列番号１０１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１０４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１０５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１０６を含むｖｌＣＤＲ３；
配列番号１１９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１２４を含むｖｌＣＤＲ３；または
配列番号１３１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１３４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１３５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３６を含むｖｌＣＤＲ３を含み、
ＢＴＬＡアゴニストとして働き、炎症促進性のＴ細胞機能を抑制する、請求項１または２に記載の抗体。

【請求項6】

ヒトＩｇＧと少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する定常領域を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の抗体。

【請求項7】

ヒトＩｇＧはＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４からなる群から選択される、請求項６に記載の抗体。

【請求項8】

ＩｇＧはＩｇＧ２である、請求項７に記載の抗体。

【請求項9】

請求項１から８のいずれかに記載の抗体をコードする核酸組成物。

【請求項10】

ａ）配列番号１８５を含む第一の核酸および配列番号１８６を含む第二の核酸；
ｂ）配列番号１８７を含む第一の核酸および配列番号１８８を含む第二の核酸；
ｃ）配列番号１８９を含む第一の核酸および配列番号１９０を含む第二の核酸；
ｄ）配列番号１９１を含む第一の核酸および配列番号１９２を含む第二の核酸；
ｅ）配列番号１９３を含む第一の核酸および配列番号１９４を含む第二の核酸；
ｆ）配列番号１９５を含む第一の核酸および配列番号１９６を含む第二の核酸；
ｇ）配列番号１９７を含む第一の核酸および配列番号１９８を含む第二の核酸；
ｈ）配列番号１９９を含む第一の核酸および配列番号２００を含む第二の核酸；
ｉ）配列番号２０１を含む第一の核酸および配列番号２０２を含む第二の核酸；
ｊ）配列番号２０３を含む第一の核酸および配列番号２０４を含む第二の核酸；
ｋ）配列番号２０５を含む第一の核酸および配列番号２０６を含む第二の核酸；
ｌ）配列番号２０７を含む第一の核酸および配列番号２０８を含む第二の核酸；
ｍ）配列番号２０９を含む第一の核酸および配列番号２１０を含む第二の核酸；
ｎ）配列番号２１１を含む第一の核酸および配列番号２１２を含む第二の核酸；
ｏ）配列番号２１３を含む第一の核酸および配列番号２１４を含む第二の核酸；
ｐ）配列番号２１５を含む第一の核酸および配列番号２１６を含む第二の核酸；
ｑ）配列番号２１７を含む第一の核酸および配列番号２１８を含む第二の核酸；
ｒ）配列番号２１９を含む第一の核酸および配列番号２２０を含む第二の核酸；
ｓ）配列番号２２１を含む第一の核酸および配列番号２２２を含む第二の核酸；
ｔ）配列番号２２３を含む第一の核酸および配列番号２２４を含む第二の核酸；または
ｕ）配列番号２２５を含む第一の核酸および配列番号２２６を含む第二の核酸
を含む、請求項９に記載の核酸組成物。

【請求項11】

第一の核酸は第一の発現ベクターに含有され、第二の核酸は第二の発現ベクターに含有される、請求項１０に記載の核酸組成物を含む発現ベクター組成物。

【請求項12】

第一の核酸および第二の核酸は単一の発現ベクターに含有される、請求項１０に記載の核酸組成物を含む発現ベクター組成物。

【請求項13】

請求項１１または１２に記載の発現ベクター組成物を含む宿主細胞。

【請求項14】

抗体を作る方法であって、請求項１３に記載の前記宿主細胞を抗体が発現される条件下で培養すること、および抗体を回収することを含む方法。

【請求項15】

請求項１から８のいずれか一項に記載の抗体、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物。

【請求項16】

対象における免疫応答を調節する方法であって、対象に有効量の請求項１から８のいずれか一項に記載の抗体、または請求項１５に記載の組成物を投与することを含む方法。

【請求項17】

対象における免疫応答を刺激し、対象に有効量の請求項１から８のいずれか一項に記載の抗体、または請求項１５に記載の組成物を投与することを含み、抗体はＢＴＬＡアンタゴニストとして働く、請求項１６に記載の方法。

【請求項18】

抗体は、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１０７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１２を含むｖｌＣＤＲ３を含む、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

抗体は、配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１３７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４２を含むｖｌＣＤＲ３を含む、請求項１７に記載の方法。

【請求項20】

抗体は、配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１４９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１５４を含むｖｌＣＤＲ３を含む、請求項１７に記載の方法。

【請求項21】

対象における免疫応答を抑制し、対象に有効量の請求項１から８のいずれか一項に記載の抗体、または請求項１５に記載の組成物を投与することを含み、抗体はＢＴＬＡアゴニストとして働く、請求項１６に記載の方法。

【請求項22】

抗体は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１０１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１０４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１０５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１０６を含むｖｌＣＤＲ３を含む、請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１１９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１２４を含むｖｌＣＤＲ３を含む、請求項２１に記載の方法。

【請求項24】

抗体は、配列番号２９と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３０と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１３１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１３４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１３５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３６を含むｖｌＣＤＲ３を含む、請求項２１に記載の方法。

【請求項25】

対象におけるがんを処置する方法であって、対象に有効量の請求項１から８のいずれか一項に記載の抗体、または請求項１５に記載の組成物を投与することを含み、抗体はＢＴＬＡアンタゴニストとして働く、方法。

【請求項26】

がんはＨＶＥＭを上方制御する、請求項２５に記載の方法。

【請求項27】

対象はＴ細胞上に高レベルのＢＴＬＡを有する、請求項２５または２６に記載の方法。

【請求項28】

がんは胃がんである、請求項２５から２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項29】

抗体は、がんを処置する１つまたは複数の追加の治療剤と組み合わせられる、請求項２５から２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項30】

追加の治療剤は他の免疫チェックポイント阻害剤である、請求項２９に記載の方法。

【請求項31】

他の免疫チェックポイント阻害剤はイピリムマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、およびアテゾリズマブからなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。

【請求項32】

対象における自己免疫疾患を処置する方法であって、対象に有効量の請求項１から８のいずれか一項に記載の抗体、または請求項１５に記載の組成物を投与することを含み、抗体はＢＴＬＡアゴニストとして働く、方法。

【請求項33】

対象は自己免疫疾患が発生する部位に存在する自己反応性Ｔ細胞に低レベルのＨＶＥＭを発現する、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

自己免疫疾患は多発性硬化症である、請求項３２または３３に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、２０１９年４月１日に出願された米国仮特許出願第６２／８２７，７４４号に対する優先権を主張する。

【0002】

本開示は、新規の抗ＢＴＬＡ抗体、ならびに免疫応答の調節における使用およびがんまたは自己免疫疾患などの疾患の処置のためのそのような抗体を含む医薬組成物に関する。

【背景技術】

【0003】

免疫応答を誘導、増強、または抑制する疾患の処置は免疫療法と称される。免疫療法は、がんの処置において有効性を増加させることが実証されている。一般に、腫瘍微小環境は、がん細胞が、例えば、腫瘍細胞自身により発現される免疫阻害性タンパク質（例えば、ＰＤＬ１、ＨＶＥＭ）の上方制御により、免疫システムによる検出を逃れることを可能にする。白血球は、これらの阻害性タンパク質に対する特異的な受容体（例えば、ＰＤＬ１に対してＰＤ１、およびＨＶＥＭに対してＢＴＬＡ）（免疫チェックポイント受容体としても公知である）を発現し、腫瘍細胞は免疫チェックポイント受容体を拘束して自身に対する免疫応答を抑制することができる。

【0004】

がん処置における多くの免疫療法の成功は、免疫チェックポイントＣＴＬＡ－４およびＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１を標的にする免疫調節抗体の使用に基づいている。しかしながら、免疫チェックポイントペアをブロックする多くのＦＤＡが承認した抗体は、約２０％のがん患者においてのみ効果的である。その処置は、応答者に高度に効果的でありかつ耐久性がある。しかしながら、非応答者である残りの８０％のがん患者については、他の免疫チェックポイントを標的にする新しい免疫療法が必要である。

【0005】

ＢＴＬＡ（ＢおよびＴリンパ球アテニュエーター）は、膜貫通タンパク質であり、その発現はＴ細胞の活性化の間に誘導される。ＢＴＬＡは、Ｂ細胞および樹状細胞においても発現される。ＰＤ１およびＣＴＬＡ４と同様に、ＢＴＬＡはＢ７ホモログであるＢ７Ｈ４と相互作用する。しかしながら、ＰＤ－１およびＣＴＬＡ－４とは異なり、ＢＴＬＡは腫瘍壊死ファミリー受容体とも相互作用する。そのような受容体の１つは、腫瘍壊死因子（受容体）スーパーファミリーメンバー１４（ＴＮＦＲＳＦ１４）であり、ヘルペスウイルスエントリーメディエータ（ＨＶＥＭ）としても公知である。ＨＶＥＭはウイルス侵入に関与するＨＳＶ糖タンパク質Ｄに対する受容体であり、ＢおよびＴ細胞を含む造血細胞ならびに非造血細胞（実質細胞）に発現される。加えて、ＨＶＥＭは種々の血液および固形腫瘍に発現される。ＢＴＬＡ－ＨＶＥＭ相互作用は、Ｔ細胞応答、例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を下方制御する。ＢＴＬＡおよび／またはＨＶＥＭの上方制御は、免疫認識および破壊を回避する腫瘍細胞によって発揮される機構であることが見出されている。例えば、ＢＴＬＡおよびＨＶＥＭは、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病および胃がんにおいて高度に発現される；またＢＴＬＡ発現は、ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫および幾つかのＴ細胞非ホジキンリンパ腫、ならびに肝細胞癌を有する患者の末梢血中の細胞傷害性ＣＤ８＋Ｔ細胞において上方制御される。加えて、ＨＶＥＭ－ＢＴＬＡシグナル伝達の非存在は、制御不全の炎症および自己免疫疾患を導く過度の免疫応答をもたらす。したがって、ＢＴＬＡシグナル伝達の調節は、がんおよび自己免疫疾患の両方に対する標的となり得る。

【発明の概要】

【0006】

一態様では、本発明は、新規の抗ＢＴＬＡ抗体に関する。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号４０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号４１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号４２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域が含まれる。

【0007】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号４７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号４８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号４９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号５０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号５１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号５２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号５３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号５４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号５５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号５６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号５７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号５８を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号５９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号６０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号６１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号６２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号６３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号６４を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号６５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号６６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号６７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号６８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号６９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号７０を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号７１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号７２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号７３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号７４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号７５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号７６を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号７７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号７８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号７９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号８０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号８１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号８２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号８３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号８４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号８５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号８６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号８７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号８８を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号８９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号９０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号９１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号９２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号９３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号９４を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号９５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号９６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号９７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号９８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号９９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１００を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１０１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１０４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１０５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１０６を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１０７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１１３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１１４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１１５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１８を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１１９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１２４を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１２５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３０を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１３１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１３４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１３５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３６を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１３７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１４３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１４４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１４５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４８を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１４９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１５４を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１５５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１６０を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１６１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１６２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１６３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１６４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１６５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１６６を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１６７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１６８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１６９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１７０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１７１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１７２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。

【0008】

幾つかの実施形態では、本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体は、ヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに結合する。

【0009】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体は、ＢＴＬＡアンタゴニストとして作用し、ＨＶＥＭに対するＢＴＬＡの結合ならびにＴ細胞機能のＨＶＥＭ媒介性抑制をブロックする。そのような抗体の例には、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；配列番号１０７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１２を含むｖｌＣＤＲ３；配列番号１３７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４２を含むｖｌＣＤＲ３；または配列番号１４９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１５４を含むｖｌＣＤＲ３を含有する抗体が含まれる。

【0010】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体は、ＢＴＬＡアゴニストとして作用し、炎症促進性の免疫細胞機能を抑制する。そのような抗体の例には、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；配列番号１０１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１０４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１０５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１０６を含むｖｌＣＤＲ３；配列番号１１９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１２４を含むｖｌＣＤＲ３；または配列番号１３１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１３４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１３５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３６を含むｖｌＣＤＲ３を含有する抗体が含まれる。

【0011】

幾つかの実施形態では、本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体は、ヒトＩｇＧと少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する定常領域を含む。幾つかの実施形態では、ＩｇＧは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４から選択される。幾つかの実施形態では、ＩｇＧは、ＩｇＧ２である。

【0012】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体のいずれか１つをコードする核酸組成物に関する。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号１８５を含む第一の核酸、および配列番号１８６を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号１８７を含む第一の核酸、および配列番号１８８を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号１８９を含む第一の核酸、および配列番号１９０を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号１９１を含む第一の核酸、および配列番号１９２を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号１９３を含む第一の核酸、および配列番号１９４を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号１９５を含む第一の核酸、および配列番号１９６を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号１９７を含む第一の核酸、および配列番号１９８を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号１９９を含む第一の核酸、および配列番号２００を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２０１を含む第一の核酸、および配列番号２０２を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２０３を含む第一の核酸、および配列番号２０４を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２０５を含む第一の核酸、および配列番号２０６を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２０７を含む第一の核酸、および配列番号２０８を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２０９を含む第一の核酸、および配列番号２１０を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２１１を含む第一の核酸、および配列番号２１２を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２１３を含む第一の核酸、および配列番号２１４を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２１５を含む第一の核酸、および配列番号２１６を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２１７を含む第一の核酸、および配列番号２１８を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２１９を含む第一の核酸、および配列番号２２０を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２２１を含む第一の核酸、および配列番号２２２を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２２３を含む第一の核酸、および配列番号２２４を含む第二の核酸が含まれる。幾つかの実施形態では、核酸組成物には、配列番号２２５を含む第一の核酸、および配列番号２２６を含む第二の核酸が含まれる。

【0013】

本発明の別の態様は、本明細書に記載されている核酸組成物のいずれか１つを含む発現ベクター組成物に関する。幾つかの実施形態では、第一の核酸は第一の発現ベクターに含有され、第二の核酸は第二の発現ベクターに含有される。幾つかの他の実施形態では、第一の核酸および第二の核酸は、単一の発現ベクターに含有される。

【0014】

本発明の別の態様は、本明細書に記載されている発現ベクターのいずれか１つを含む宿主細胞に関する。抗ＢＴＬＡ抗体を作る方法であって、宿主細胞を該抗体が発現される条件下で培養すること、および該抗体を回収することを含む方法も提示される。

【0015】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体のいずれか１つを含む組成物、および薬学的に許容される担体または希釈剤に関する。

【0016】

対象における免疫応答を調節する方法、および対象に有効量のいずれか１つの本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体、またはいずれか１つの本明細書に記載されている組成物を投与することを含む方法も記載される。幾つかの実施形態では、方法は対象における免疫応答を刺激し、方法は対象に有効量のＢＴＬＡアンタゴニストとして働く抗ＢＴＬＡ抗体、またはその医薬組成物を投与することを含む。幾つかの実施形態では、方法は対象における免疫応答を抑制し、方法は対象に有効量のＢＴＬＡアゴニストとして働く抗ＢＴＬＡ抗体、またはその医薬組成物を投与することを含む。

【0017】

幾つかの実施形態では、方法は対象における免疫応答を刺激し、方法は対象に有効量の抗ＢＴＬＡ抗体を投与することを含み、抗ＢＴＬＡ抗体は配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１０７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１２を含むｖｌＣＤＲ３を含む。

【0018】

幾つかの実施形態では、方法は対象における免疫応答を刺激し、方法は対象に有効量の抗ＢＴＬＡ抗体を投与することを含み、抗ＢＴＬＡ抗体は配列番号３１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１３７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４２を含むｖｌＣＤＲ３を含む。

【0019】

幾つかの実施形態では、方法は対象における免疫応答を刺激し、方法は対象に有効量の抗ＢＴＬＡ抗体を投与することを含み、抗ＢＴＬＡ抗体は配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１４９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１５４を含むｖｌＣＤＲ３を含む。

【0020】

幾つかの実施形態では、方法は対象における免疫応答を抑制し、方法は対象に有効量の抗ＢＴＬＡ抗体を投与することを含み、抗ＢＴＬＡ抗体は配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１０１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１０４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１０５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１０６を含むｖｌＣＤＲ３を含む。

【0021】

幾つかの実施形態では、方法は対象における免疫応答を抑制し、方法は対象に有効量の抗ＢＴＬＡ抗体を投与することを含み、抗ＢＴＬＡ抗体は配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１１９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１２４を含むｖｌＣＤＲ３を含む。

【0022】

幾つかの実施形態では、方法は対象における免疫応答を抑制し、方法は対象に有効量の抗ＢＴＬＡ抗体を投与することを含み、抗ＢＴＬＡ抗体は配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１３１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１３４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１３５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３６を含むｖｌＣＤＲ３を含む。

【0023】

別の態様では、本発明は、対象におけるがんを処置する方法であって、対象に有効量の本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体、またはその組成物を投与することを含み、抗ＢＴＬＡ抗体はＢＴＬＡアンタゴニストとして働く、方法に関する。幾つかの実施形態では、処置されるがんは、対応する非がん性組織と比較して、ＨＶＥＭを上方制御する。幾つかの実施形態では、処置される対象は、Ｔ細胞上に高レベルのＢＴＬＡを発現する。処置されるがんは、胃がんであってもよい。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体は、がんを処置する１つまたは複数の追加の治療剤と組み合せて使用される。幾つかの実施形態では、そのような抗がん治療剤は、他の免疫チェックポイント阻害剤、例えば、イピリムマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、およびアテゾリズマブである。

【0024】

別の態様では、本発明は、対象における自己免疫疾患を処置する方法であって、対象に本明細書に記載されている有効量の抗ＢＴＬＡ抗体、またはその組成物を投与することを含み、抗ＢＴＬＡ抗体はＢＴＬＡアゴニストとして働く、方法に関する。幾つかの実施形態では、処置される対象は、自己免疫疾患が発生する部位に存在する自己反応性Ｔ細胞に低レベルのＨＶＥＭを発現する。幾つかの実施形態では、自己免疫疾患は、多発性硬化症である。

【0025】

本発明は、添付の図面とあわせて読解される以下の詳細な説明から完全に理解され得る。以下の図が図面に含まれる：

【図面の簡単な説明】

【0026】

【図1】図１は、ＥＬＩＳＡによるヒトＢＴＬＡへの抗ＢＴＬＡ抗体１３－Ｆ７Ａの結合を示す。抗ＢＴＬＡ抗体４Ｃ７および８Ｄ５を対照として使用した。ヒトＩｇＧを陰性対照として使用した。相対光単位（ＲＬＵ）を計算した。

【図2A】図２Ａ～２Ｃは、ＦＡＣＳ分析によるＢＴＬＡへの抗ＢＴＬＡ抗体１３－Ｆ７Ａの結合を示すヒストグラムである。図２Ａは、ＨＥＫ－２９３細胞に発現したヒトＢＴＬＡへの１３－Ｆ７Ａの結合を示す。１０μｇ／ｍｌおよび１μｇ／ｍｌの抗体を、二次抗体のみの対照と一緒に試験した。

【図2B】図２Ａ～２Ｃは、ＦＡＣＳ分析によるＢＴＬＡへの抗ＢＴＬＡ抗体１３－Ｆ７Ａの結合を示すヒストグラムである。図２Ｂは、ＨＥＫ－２９３細胞に発現したカニクイザルＢＴＬＡへの１３－Ｆ７Ａの結合を示す。１０μｇ／ｍｌおよび１μｇ／ｍｌの抗体を、二次抗体のみの対照と一緒に試験した。

【図2C】図２Ａ～２Ｃは、ＦＡＣＳ分析によるＢＴＬＡへの抗ＢＴＬＡ抗体１３－Ｆ７Ａの結合を示すヒストグラムである。図２Ｃは、ＨＥＫ－２９３細胞への１３－Ｆ７Ａの結合を示す陰性対照である。１０μｇ／ｍｌおよび１μｇ／ｍｌの抗体を、二次抗体のみの対照と一緒に試験した。

【図3】図３は、抗ＢＴＬＡ抗体１３－Ｆ７Ａが、ＥＬＩＳＡによるヒトＢＴＬＡ／ＨＶＥＭ相互作用を阻害することを示す。抗ＢＴＬＡ抗体４Ｃ７および８Ｄ５ならびにヒトＩｇＧを対照として使用した。

【図4】図４は、Ｂｉｏ－Ｌａｙｅｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙにより測定されたヒトＢＴＬＡへの抗ＢＴＬＡ抗体１３－Ｆ７Ａの結合親和性を示す。１３－Ｆ７Ａをバイオセンサーチップに固定化し、１６６．７、５５．６、１８．５および６．１７ｎＭの組換えヒトＢＴＬＡを試験した。測定された解離定数Ｋ_Ｄは、５．４ｘ１０Ｅ－９Ｍである。

【図5A】図５Ａ～５Ｆは、抗ＢＴＬＡ抗体の存在下での初代Ｔ細胞によるＳＥＢ刺激ＩＬ－２分泌の用量反応曲線を示す。ヒトＩｇＧ２およびＩｇＧ４を対照として使用した。図５Ａ～５Ｃは、抗ＢＴＬＡ抗体１６－Ｉ２０Ａ、１５－Ｃ１９Ａ、および１６－Ｈ１６ＡならびにそれらのＴ細胞機能におけるアンタゴニスト効果を示す。

【図5B】図５Ａ～５Ｆは、抗ＢＴＬＡ抗体の存在下での初代Ｔ細胞によるＳＥＢ刺激ＩＬ－２分泌の用量反応曲線を示す。ヒトＩｇＧ２およびＩｇＧ４を対照として使用した。図５Ａ～５Ｃは、抗ＢＴＬＡ抗体１６－Ｉ２０Ａ、１５－Ｃ１９Ａ、および１６－Ｈ１６ＡならびにそれらのＴ細胞機能におけるアンタゴニスト効果を示す。

【図5C】図５Ａ～５Ｆは、抗ＢＴＬＡ抗体の存在下での初代Ｔ細胞によるＳＥＢ刺激ＩＬ－２分泌の用量反応曲線を示す。ヒトＩｇＧ２およびＩｇＧ４を対照として使用した。図５Ａ～５Ｃは、抗ＢＴＬＡ抗体１６－Ｉ２０Ａ、１５－Ｃ１９Ａ、および１６－Ｈ１６ＡならびにそれらのＴ細胞機能におけるアンタゴニスト効果を示す。

【図5D】図５Ａ～５Ｆは、抗ＢＴＬＡ抗体の存在下での初代Ｔ細胞によるＳＥＢ刺激ＩＬ－２分泌の用量反応曲線を示す。ヒトＩｇＧ２およびＩｇＧ４を対照として使用した。図５Ｄ～５Ｆは、抗ＢＴＬＡ抗体１２－Ｉ８Ａ、８－Ｍ２３Ａおよび１３－Ｆ７ＡならびにそれらのＴ細胞機能におけるアゴニスト効果を示す。

【図5E】図５Ａ～５Ｆは、抗ＢＴＬＡ抗体の存在下での初代Ｔ細胞によるＳＥＢ刺激ＩＬ－２分泌の用量反応曲線を示す。ヒトＩｇＧ２およびＩｇＧ４を対照として使用した。図５Ｄ～５Ｆは、抗ＢＴＬＡ抗体１２－Ｉ８Ａ、８－Ｍ２３Ａおよび１３－Ｆ７ＡならびにそれらのＴ細胞機能におけるアゴニスト効果を示す。

【図5F】図５Ａ～５Ｆは、抗ＢＴＬＡ抗体の存在下での初代Ｔ細胞によるＳＥＢ刺激ＩＬ－２分泌の用量反応曲線を示す。ヒトＩｇＧ２およびＩｇＧ４を対照として使用した。図５Ｄ～５Ｆは、抗ＢＴＬＡ抗体１２－Ｉ８Ａ、８－Ｍ２３Ａおよび１３－Ｆ７ＡならびにそれらのＴ細胞機能におけるアゴニスト効果を示す。

【発明を実施するための形態】

【0027】

本開示は、新規の抗ＢＴＬＡ抗体を提供する。本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体は、ヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに結合する。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体は、ヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに高親和性で結合する。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体は、機能的なＢＴＬＡアンタゴニストとして作用し、ＢＴＬＡとの結合に際して、それらはＢＴＬＡとＨＶＥＭの相互作用をブロックし、Ｔ細胞機能のＨＶＥＭ媒介性抑制をブロックする。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体は、機能的なＢＴＬＡアゴニストとして作用し、ＢＴＬＡとの結合に際して、それらはＴ細胞機能を抑制する。対象における免疫応答を調節する、例えば、がんまたは自己免疫疾患を処置する、抗体を使用する方法も本開示に提供される。加えて、これらの抗体をコードする核酸ならびにそのような核酸を含む宿主細胞が、本開示に記載される。

【0028】

本発明の理解を促進するために、幾つかの用語および語句が以下に定義される。

【0029】

本明細書で使用する、以下の用語の各々は、本セクションにおいてそれと関連する意味を有する。

【0030】

冠詞の「ａ」および「ａｎ」は、本明細書に使用されて、その冠詞の文法上の目的格の１つまたは複数（すなわち、少なくとも１つ）について言及する。例として、「エレメント（ａｎ ｅｌｅｍｅｎｔ）」は、１つのエレメントまたは複数のエレメントを意味する。

【0031】

例えば、量、時間的な持続時間等の測定可能な値を指す場合、本明細書で使用する「約」は、そのようなバリエーションが開示される方法を実施するため適切であるものとして、指定の値から±２０％または±１０％、より好ましくは±５％、なおより好ましくは±１％、および更により好ましくは±０．１％のバリエーションを包含することを意味する。

【0032】

本明細書で「アブレーション」は、活性の減少または除去を意味する。したがって、例えば、「ＦｃγＲ結合のアブレーション」は、Ｆｃ領域アミノ酸変異体が、特定の変異体を含有しないＦｃ領域と比較して、５０％開始結合未満を有することを意味し、活性の７０－８０－９０－９５－９８％喪失未満を有することが好ましく、一般には、活性がＢｉａｃｏｒｅアッセイにおける検出可能な結合のレベル未満であることを意味する。

【0033】

本明細書で使用する「ＡＤＣＣ」または「抗体依存性細胞介在性細胞傷害」は、ＦｃγＲを発現する非特異的な細胞傷害性細胞が、標的細胞において結合抗体を認識し、その後、標的細胞の溶解を引き起こす、細胞介在性反応を意味する。ＡＤＣＣはＦｃγＲＩＩＩａへの結合と相関し；ＦｃγＲＩＩＩａへの結合の増加は、ＡＤＣＣ活性の増加を導く。本明細書で論じるように、本発明の多くの実施形態は、ＡＤＣＣ活性を全体的にアブレーションする。

【0034】

本明細書で使用する「ＡＤＣＰ」または「抗体依存性細胞介在性食作用」は、ＦｃγＲを発現する非特異的な細胞傷害性細胞が、標的細胞において結合抗体を認識し、その後、標的細胞の食作用を引き起こす、細胞介在性反応を意味する。

【0035】

本明細書で「抗原結合ドメイン」または「ＡＢＤ」は、ポリペプチド配列の一部として存在する場合、本明細書で論じるように特異的に標的抗原に結合する、６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）のセットを意味する。したがって、「抗原結合ドメイン」は、本明細書に概略されている標的抗原に結合する。当技術分野において公知であるように、これらのＣＤＲは、第一のセットの可変重鎖ＣＤＲ（ｖｈＣＤＲまたはＶＨＣＤＲまたはＣＤＲ－ＨＣ）および第二のセットの可変軽鎖ＣＤＲ（ｖｌＣＤＲまたはＶＬＣＤＲまたはＣＤＲ－ＬＣ）として一般に存在し、各々が３つのＣＤＲ、重鎖に関してｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２、ｖｈＣＤＲ３および軽鎖に関してｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２およびｖｌＣＤＲ３を含む。ＣＤＲは、それぞれ、可変重鎖および可変軽鎖ドメインに存在し、一緒にＦｖ領域を形成する。したがって、幾つかの場合、抗原結合ドメインの６つのＣＤＲには、可変重鎖および可変軽鎖が寄与する。「Ｆａｂ」フォーマットでは、６つのＣＤＲのセットには、２つの異なるポリペプチド配列、可変重鎖ドメイン（ｖｈまたはＶＨ；ｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２およびｖｈＣＤＲ３を含有）および可変軽鎖ドメイン（ｖｌまたはＶＬ；ｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２およびｖｌＣＤＲ３を含有）が寄与し、ｖｈドメインのＣ末端は重鎖のＣＨ１ドメインのＮ末端に結合し、ｖｌドメインのＣ末端は定常軽鎖ドメインのＮ末端に結合する（したがって、軽鎖を形成する）。ｓｃＦｖフォーマットでは、ＶＨおよびＶＬドメインは、一般に本明細書に概略されているリンカーの使用により単一ポリペプチド配列に共有結合し、これは（Ｎ末端から開始して）ｖｈ－リンカー－ｖｌまたはｖｌ－リンカー－ｖｈのいずれであってもよく、前者が一般に好ましい（使用されるフォーマットに応じて、任意選択で各側にドメインリンカーを含む）。当技術分野において理解されるように、ＣＤＲは、各々可変重鎖および可変軽鎖ドメインにおいてフレームワーク領域によって分離され：軽鎖可変領域に関して、これらはＦＲ１－ｖｌＣＤＲ１－ＦＲ２－ｖｌＣＤＲ２－ＦＲ３－ｖｌＣＤＲ３－ＦＲ４であり、重鎖可変領域に関して、これらはＦＲ１－ｖｈＣＤＲ１－ＦＲ２－ｖｈＣＤＲ２－ＦＲ３－ｖｈＣＤＲ３－ＦＲ４であり、フレームワーク領域は高い同一性をヒト生殖系列配列に対して示す。本発明の抗原結合ドメインには、Ｆａｂ、ＦｖおよびｓｃＦｖが含まれる。

【0036】

本明細書で「リンカー」は、ｓｃＦｖおよび／または他の抗体構造に使用されるリンカーを意味する。一般に、使用することができる幾つかの適切なｓｃＦｖリンカーが存在し、組換え技術によって生成される、伝統的なペプチド結合が含まれる。リンカーペプチドには、以下のアミノ酸残基：Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、またはＴｈｒが主に含まれ得る。リンカーペプチドは、２つの分子を、それらが互いに対して正確なコンホメーションを想定し、それらが所望の活性を保持するように、連結するのに適切な長さを有するべきである。一実施形態では、リンカーは、約１から５０アミノ酸長、好ましくは約１から３０アミノ酸長である。一実施形態では、１から２０アミノ酸長のリンカーが使用されてもよく、約５から約１０アミノ酸が幾つかの実施形態における使用を見出す。有用なリンカーには、例えば（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ、（ＧＧＧＧＳ）ｎ、および（ＧＧＧＳ）ｎを含むグリシン－セリンポリマー［式中のｎは、少なくとも１つ（一般に３から４）の整数である］、グリシン－アラニンポリマー、アラニン－セリンポリマー、ならびに他の可動性リンカーが含まれる。あるいは、リンカーとしての使用を見出し得る、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、ポリオキシアルキレン、またはポリエチレングリコールとポリプロピレングリコールのコポリマーを含むが、これらに限定されない、種々の非タンパク質性ポリマーは、リンカーとしての使用を見出し得る。他のリンカー配列には、任意の配列の任意の長さのＣＬ／ＣＨ１ドメイン（しかし、ＣＬ／ＣＨ１ドメインの全ての残基ではない）；例えば、ＣＬ／ＣＨ１ドメインの最初の５－１２アミノ酸残基が含まれ得る。リンカーは、免疫グロブリン軽鎖、例えば、ＣκまたはＣλに由来し得る。リンカーは、例えばＣγ１、Ｃγ２、Ｃγ３、Ｃγ４、Ｃα１、Ｃα２、Ｃδ、Ｃε、およびＣμを含む、免疫グロブリン重鎖の任意のアイソタイプに由来し得る。リンカー配列はまた、他のタンパク質、例えばＩｇ様タンパク質（例えば、ＴＣＲ、ＦｃＲ、ＫＩＲ）、ヒンジ領域由来配列、および他のタンパク質の他の天然配列に由来し得る。幾つかの実施形態では、リンカーは、本明細書に一緒に概略されている任意の２つのドメインを連結するために使用される「ドメインリンカー」である。任意の適切なリンカーを使用することができるが、多くの実施形態は、例えば（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ、（ＧＧＧＧＳ）ｎ、および（ＧＧＧＳ）ｎを含むグリシン－セリンポリマー［式中のｎは、少なくとも１つ（一般に３から４から５）の整数である］ならびに十分な長さと可動性を有し、各ドメインがその生物学的機能を保持することを可能し、２つのドメインの組換え結合を可能にする、任意のペプチド配列を利用する。

【0037】

用語「抗体」は、最も広い意味で使用され、例えば、インタクトな免疫グロブリンまたは抗原結合部分を含む。抗原結合部分は、組換えＤＮＡ技術またはインタクトな抗体の酵素もしくは化学的な切断によって生産され得る。したがって、抗体の用語には、２つの重鎖および２つの軽鎖の伝統的な四量体の抗体ならびに抗原結合断片、例えばＦｖ、ＦａｂおよびｓｃＦｖが含まれる。幾つかの場合、本発明は、本明細書に概略されている少なくとも１つの抗原結合ドメインを含む二重特異性抗体を提供する。

【0038】

本明細書で「修飾」は、ポリペプチド配列中のアミノ酸置換、挿入、および／または欠失またはタンパク質に化学的に連結された部分に対する変更を意味する。例えば、修飾は、タンパク質に結合させた変更させた炭水化物またはＰＥＧ構造であってもよい。本明細書で「アミノ酸修飾」は、ポリペプチド配列中のアミノ酸置換、挿入、および／または欠失を意味する。明確にするために、他に注記しない限り、アミノ酸修飾はＤＮＡにコードされるかＤＮＡによってコードされるアミノ酸（例えば、ＤＮＡおよびＲＮＡ中にコドンを有する２０アミノ酸）に常に対する。

【0039】

本明細書で「アミノ酸置換」または「置換」は、親ポリペプチド配列中の特定の位置での異なるアミノ酸でのアミノ酸の置き換えを意味する。特に、幾つかの実施形態では、置換は、生物内または任意の生物中のいずれかで天然ではない、特定の位置で天然ではないアミノ酸に対する。例えば、置換Ｍ２５２Ｙは、この場合、２５２位のメチオニンがチロシンで置き換えられたＦｃ変異体である、変異体ポリペプチドを指す。明確にするために、核酸コード配列を変化させるが、開始アミノ酸を変化させないよう操作されている（例えばＣＧＧ（アルギニンをコード）をＣＧＡ（依然としてアルギニンをコード）交換して宿主生物の発現レベルを増加させる）タンパク質は「アミノ酸置換」ではない；換言すれば、タンパク質が開始される特定の位置で同じアミノ酸を有する場合に、同じタンパク質をコードする新しい遺伝子を創出するが、これはアミノ酸置換ではない。

【0040】

本明細書で使用する「変異体タンパク質」または「タンパク質変異体」または「変異体」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾の効力によって親タンパク質のものと異なるタンパク質を意味する。タンパク質変異体は、タンパク質自身、タンパク質を含む組成物、またはそれをコードするアミノ配列を指してもよい。好ましくは、タンパク質変異体は、親タンパク質と比較して、少なくとも１つのアミノ酸修飾、例えば親と比較して、約１から約７０アミノ酸修飾、好ましくは約１から約５アミノ酸修飾を有する。以下に記載されるように、幾つかの実施形態では、親ポリペプチド、例えばＦｃ親ポリペプチドは、ヒト野生型配列、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４からのＦｃ領域である。本明細書のタンパク質変異体配列は、好ましくは、親タンパク質配列と少なくとも約８０％同一性を有する、最も好ましくは少なくとも約９０％同一性、より好ましくは少なくとも約９５％－９８％－９９％同一性を有する。変異体タンパク質は、変異体タンパク質自身、タンパク質変異体を含む組成物、またはそれをコードするＤＮＡ配列を指してもよい。

【0041】

したがって、本明細書で使用する「抗体変異体」または「変異体抗体」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾の効力によって親抗体と異なる抗体を意味し、本明細書で使用する「ＩｇＧ変異体」または「変異体ＩｇＧ」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾の効力によって親ＩｇＧ（再び、多くの場合、ヒトＩｇＧ配列）と異なる抗体を意味し、および本明細書で使用する「免疫グロブリン変異体」または「変異体免疫グロブリン」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾の効力によって親免疫グロブリン配列のものと異なる免疫グロブリン配列を意味する。本明細書で使用する「Ｆｃ変異体」または「変異体Ｆｃ」は、Ｆｃドメイン中にアミノ酸修飾を含むタンパク質を意味する。本発明のＦｃ変異体は、それらを構成するアミノ酸修飾に従って定義される。したがって、例えば、Ｍ２５２Ｙまたは２５２Ｙは、親Ｆｃポリペプチドに対して２５２位に置換チロシンを有するＦｃ変異体である（ここで、ナンバリングは、ＥＵインデックスに従う）。同様に、Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅは、親Ｆｃポリペプチドに対して置換Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４ＴおよびＴ２５６Ｅを有するＦｃ変異体を定義する。野生型アミノ酸が何であるかは、特定されていなくてもよく、この場合、前述の変異体は２５２Ｙ／２５４Ｔ／２５６Ｅと称される。置換が提供される順序が任意であること、すなわち、例えば、２５２Ｙ／２５４Ｔ／２５６Ｅが２５４Ｔ／２５２Ｙ／２５６Ｅなどと同じＦｃ変異体であることが注記される。抗体に関して本発明で論じる全ての位置に関して、他に注記しない限り、アミノ酸位置ナンバリングは、可変領域ナンバリングに関してはＫａｂａｔに従い、Ｆｃ領域を含む定常領域に関してはＥＵインデックスに従う。ＥＵインデックスまたはＫａｂａｔもしくはＥＵナンバリングスキームにおけるようなＥＵインデックスは、ＥＵ抗体のナンバリングを指す（Edelman et al., 1969, Proc Natl Acad Sci USA 63:78-85、参照により全体的に本明細書に組み込まれる）。修飾は、付加、欠失、または置換であってもよい。置換は、天然アミノ酸、幾つかの場合、合成アミノ酸を含み得る。

【0042】

本明細書で使用する、「タンパク質」は、少なくとも２つの共有結合したアミノ酸を本明細書で意味し、タンパク質、ポリペプチド、オリゴペプチドおよびペプチドが含まれる。ペプチジル基は、天然アミノ酸およびペプチド結合を含み得る。

【0043】

本明細書で使用する「Ｆａｂ」または「Ｆａｂ領域」は、ＶＨ、ＣＨ１、ＶＬ、およびＣＬ免疫グロブリンドメインを含むポリペプチドを意味する。Ｆａｂは、単離物中のこの領域、または完全長抗体、抗体断片もしくはＦａｂ融合タンパク質との関連における、この領域を指してもよい。
本明細書で使用する「Ｆｖ」または「Ｆｖ断片」または「Ｆｖ領域」は、単一の抗原結合ドメイン（ＡＢＤ）のＶＬおよびＶＨドメインを含むポリペプチドを意味する。当業者によって理解されるように、これらは、一般に２つの鎖で構成される、または組み合わされて（一般に本明細書で論じるようにリンカーと）ｓｃＦｖを形成することができる。

【0044】

本明細書で使用する「アミノ酸」および「アミノ酸同一性」は、ＤＮＡおよびＲＮＡにコードされるかＤＮＡおよびＲＮＡによってコードされる２０天然アミノ酸の１つを意味する。

【0045】

本明細書で使用する「エフェクター機能」は、抗体Ｆｃ領域とＦｃ受容体またはリガンドの相互作用からもたらされる生化学的なイベントを意味する。エフェクター機能には、限定されないが、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、およびＣＤＣが含まれる。

【0046】

本明細書で使用する「Ｆｃガンマ受容体」、「ＦｃγＲ」または「ＦｃガンマＲ」は、ＩｇＧ抗体Ｆｃ領域に結合する、タンパク質のファミリーの任意のメンバーを意味し、ＦｃγＲ遺伝子によってコードされる。ヒトでは、このファミリーには、限定されないが、アイソフォームＦｃγＲＩａ、ＦｃγＲＩｂ、およびＦｃγＲＩｃを含むＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、；アイソフォームＦｃγＲＩＩａ（アロタイプＨ１３１およびＲ１３１）、ＦｃγＲＩＩｂ（ＦｃγＲＩＩｂ－１およびＦｃγＲＩＩｂ－２）、およびＦｃγＲＩＩｃを含むＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）、；およびアイソフォームＦｃγＲＩＩＩａ（アロタイプＶ１５８およびＦ１５８）およびＦｃγＲＩＩＩｂ（アロタイプＦｃγＲＩＩｂ－ＮＡ１およびＦｃγＲＩＩｂ－ＮＡ２）を含むＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）、（Jefferis et al., 2002, Immunol Lett 82:57-65、参照により全体的に組み込まれる）、ならびに任意の発見されていないヒトＦｃγＲまたはＦｃγＲアイソフォームまたはアロタイプが含まれる。幾つかの場合、本明細書に概略されているように、１つまたは複数のＦｃγＲ受容体に対する結合は、減少またはアブレーションされる。例えば、ＦｃγＲＩＩＩａに対する結合の減少はＡＤＣＣを減少させ、幾つかの場合、ＦｃγＲＩＩＩａおよびＦｃγＲＩＩｂに対する結合の減少が所望される。

【0047】

本明細書で使用する「ＦｃＲｎ」または「新生児Ｆｃ受容体」は、ＩｇＧ抗体Ｆｃ領域に結合し、ＦｃＲｎ遺伝子によって少なくとも部分的にコードされるタンパク質を意味する。ＦｃＲｎは、限定されないが、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、およびサルを含む、任意の生物に由来し得る。当技術分野において公知であるように、機能的なＦｃＲｎタンパク質は、多くの場合、重鎖および軽鎖と称される、２つのポリペプチドを含む。軽鎖はベータ－２－ミクログロブリンであり、重鎖はＦｃＲｎ遺伝子によってコードされる。本明細書で他に注記しない限り、ＦｃＲｎまたはＦｃＲｎタンパク質は、ＦｃＲｎ重鎖とベータ－２－ミクログロブリンの複合体を指す。

【0048】

本明細書で使用する「親ポリペプチド」は、その後、修飾されて変異体が生成される開始ポリペプチドを意味する。親ポリペプチドは、天然ポリペプチド、または変異体または天然ポリペプチドの操作されたバージョンであってもよい。親ポリペプチドは、ポリペプチド自身、親ポリペプチドを含む組成物、またはそれをコードするアミノ酸配列を指してもよい。したがって、本明細書で使用する「親免疫グロブリン」は、修飾されて変異体が生成される未修飾免疫グロブリンポリペプチドを意味し、本明細書で使用する「親抗体」は、修飾されて変異体抗体が生成される未修飾抗体を意味する。「親抗体」には、以下に概略されているように、公知の市販の組換え的に生産された抗体が含まれることに留意すべきである。

【0049】

本明細書で「重鎖定常領域」は、一般にヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４由来の抗体のＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３部分を意味する。

【0050】

本明細書で使用する「標的抗原」は、所与の抗体の可変領域によって特異的に結合される分子を意味する。本発明の場合（ｐｒｅｓｅｎｔ ｃａｓｅ）、標的抗原は、ＢＴＬＡタンパク質である。

【0051】

本明細書で使用する「標的細胞」は、標的抗原を発現する細胞を意味する。

【0052】

本明細書で使用する「可変領域」は、それぞれ、カッパ、ラムダ、および重鎖免疫グロブリン遺伝子座を構成する、任意のＶ．カッパ、Ｖ．ラムダ、および／またはＶＨ遺伝子によって実質的にコードされる１つまたは複数のＩｇドメインを含む免疫グロブリンの領域を意味する。

【0053】

本明細書で「野生型またはＷＴ」は、対立遺伝子バリエーションを含む、自然に見出されるアミノ酸配列またはヌクレオチド配列を意味する。ＷＴタンパク質は、意図的に修飾されていないアミノ酸配列またはヌクレオチド配列を有する。

【0054】

本明細書で使用する「位置」は、タンパク質の配列中の位置を意味する。位置は、連続的に、または抗体ナンバリングに関するＥＵインデックスなどの確立されたフォーマットに従って番号付けされ得る。

【0055】

本明細書で使用する「残基」は、タンパク質中の位置およびその関連するアミノ酸同一性を意味する。例えば、アスパラギン２９７（Ａｓｎ２９７またはＮ２９７と称される）は、ヒト抗体ＩｇＧ１中の２９７位での残基である。

【0056】

本発明の抗体は、一般に組換えである。「組換え」は、抗体が、外来性の宿主細胞において組換え核酸技術を使用して生成されることを意味する。

【0057】

タンパク質配列に関して「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」は、必要に応じて、最大パーセント配列同一性を達成させるために、配列を整列させ、ギャップを導入した後、配列同一性の一部として、任意の保存的置換を考慮しないで、特定の（親）配列におけるアミノ酸残基と同一である、候補配列中のアミノ酸残基のパーセンテージとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定することを目的としたアライメントは、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどの公衆に利用可能なコンピュータソフトウェアを用いて、当業者の範囲内にある様々な方式において達成することができる。当業者は、比較される配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するのに必要なあらゆるアルゴリズムを含む、アライメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。１つの特定のプログラムは、参照により本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２０１６０２４４５２５号の段落［０２７９］から［０２８０］で概略されているＡＬＩＧＮ－２プログラムである。核酸配列に関する別の近似アライメントは、Smith and Waterman,Advances in Applied Mathematics,2:482-489 (1981)のローカルホモロジーアルゴリズムによって提供される。このアルゴリズムは、Dayhoff, Atlas of Protein Sequences and Structure, M.O. Dayhoff ed., 5 suppl. 3:353-358, National Biomedical Research Foundation, Washington, D.C., USAによって開発されGribskov, Nucl. Acids Res. 14(6):6745-6763 (1986)によって標準化されたスコアリングマトリックスを使用することによりアミノ酸配列に適用することができる。

【0058】

配列のパーセント同一性を決定するための、このアルゴリズムの例示的な実施は、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ （Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）によって「ＢｅｓｔＦｉｔ」ユーティリティーアプリケーションにおいて示される。この方法に関するデフォルトパラメーターは、Wisconsin Sequence Analysis Package Program Manual, Version 8 (1995)（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩから利用可能）に記載される。本発明の関連においてパーセント同一性を確立する別の方法は、Ｊｏｈｎ Ｆ． Ｃｏｌｌｉｎｓ ａｎｄ Ｓｈａｎｅ Ｓ． Ｓｔｕｒｒｏｋによって開発され、ＩｎｔｅｌｌｉＧｅｎｅｔｉｃｓ、Ｉｎｃ．（Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、ＣＡ）によって頒布され、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈが著作権を取得したプログラムのＭＰＳＲＣＨパッケージを使用することである。このパッケージ一式から、Ｓｍｉｔｈ－Ｗａｔｅｒｍａｎアルゴリズムを採用してもよく、デフォルトパラメーターがスコアリングテーブルに対して使用される（例えば、ギャップオープンペナルティー１２、ギャップ伸長ペナルティー１、およびギャップ６）。生成されたデータから、「マッチ」値は「配列同一性」を反映する。配列間のパーセント同一性または類似度を計算するのに適した他のプログラムは当技術分野で一般に公知であり、例えば別のアライメントプログラムはＢＬＡＳＴであり、デフォルトパラメーターで使用される。例えば、ＢＬＡＳＴＮおよびＢＬＡＳＴＰは、以下のデフォルトパラメーターの使用時に使用されてもよい：遺伝子コード＝標準；フィルター＝なし；鎖＝両方；カットオフ＝６０；期待値＝１０；マトリックス＝ＢＬＯＳＵＭ６２；説明＝５０配列；選別＝ハイスコア；データベース＝非冗長、ＧｅｎＢａｎｋ＋ＥＭＢＬ＋ＤＤＢＪ＋ＰＤＢ＋ＧｅｎＢａｎｋ ＣＤＳ翻訳＋Ｓｗｉｓｓ ｐｒｏｔｅｉｎ＋Ｓｐｕｐｄａｔｅ＋ＰＩＲ。これらのプログラムの詳細は、ｈｔｔｐ：／／ ｉｎ ｆｒｏｎｔ ｏｆ ｂｌａｓｔ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／Ｂｌａｓｔ．ｃｇｉ．を打込むことによって配置されるインターネットアドレスに見出すことができる。

【0059】

本発明のアミノ酸配列（「発明配列」）と親アミノ酸配列との間の同一性の程度は、完全マッチを、どちらが最短であっても、「発明配列」の長さまたは親配列の長さで割った、２つの配列のアライメント中の完全マッチの数として計算される。結果は、パーセント同一性で表される。

【0060】

幾つかの実施形態では、２つまたはそれ以上のアミノ酸配列は、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％同一である。幾つかの実施形態では、２つまたはそれ以上のアミノ酸配列は、少なくとも９５％、９７％、９８％、９９％、またはさらに１００％同一である。

【0061】

「特異的な結合」または特定の抗原もしくはエピトープに「特異的に結合」または「特異的」は、非特異的な相互作用とは測定できる程度に異なる結合を意味する。特異的な結合は、例えば、一般に結合活性を有していない類似する構造の分子である対照分子の結合と比較して、分子の結合を決定することによって測定することができる。例えば、特異的な結合は、標的に類似する対照分子との競合によって決定することができる。

【0062】

本明細書で使用する用語「Ｋａｓｓｏｃ」または「Ｋａ」は、特定の抗体－抗原相互作用の会合速度を指すことを意図し、一方、本明細書で使用する用語「Ｋｄｉｓ」または「Ｋｄ」は、特定の抗体－抗原相互作用の解離速度を指すことを意図する。本明細書で使用する用語「Ｋ_Ｄ」は、解離定数を指すことを意図し、これはＫｄとＫａの比（すなわち、Ｋｄ／Ｋａ）から得られ、モル濃度（Ｍ）として表される。抗体に関するＫ_Ｄ値は、当技術分野において十分確立された方法を使用して決定することができる。幾つかの実施形態では、抗体のＫ_Ｄを決定するための方法は、表面プラズモン共鳴を使用すること、例えば、バイオセンサーシステム、例えばＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）システムを使用することによる。幾つかの実施形態では、抗体のＫ_Ｄは、Ｂｉｏ－Ｌａｙｅｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙによって決定される。幾つかの実施形態では、Ｋ_Ｄ値は、固定化されて測定される。他の実施形態では、Ｋ_Ｄ値は、固定化された抗体（例えば、親マウス抗体、キメラ抗体、またはヒト化抗体変異体）で測定される。ある特定の実施形態では、Ｋ_Ｄ値は、二価結合モード（ｂｉｖａｌｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｍｏｄｅ）で測定される。他の実施形態では、Ｋ_Ｄ値は、一価結合モード（ｍｏｎｏｖａｌｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｍｏｄｅ）で測定される。

【0063】

「疾患」は、動物がホメオスタシスを維持できず、疾患が寛解されない場合、動物の健康が悪化し続ける、ヒトを含む動物の健康の状態を含む。

【0064】

対照的に、ヒトを含む動物における「障害」は、動物がホメオスタシスを維持することができるが、動物の健康の状態が障害の非存在下よりも好ましくない健康の状態を含む。未処置のままでも、障害は、必ずしも動物の健康の状態の更なる低減を引き起こすとは限らない。

【0065】

「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、「処置する（ｔｒｅａｔ）」等の用語は、所望の薬理的および／または生理的効果を得ることを指す。効果は、疾患またはその症状を完全または部分的に防止するまたは疾患またはその症状の可能性を減少させることに関して予防的であり得るおよび／または疾患および／または疾患に起因しうる副作用の部分的または完全な治癒に関して治療的であり得る。本明細書で使用する「処置」は、哺乳動物、特にヒトにおける疾患の任意の処置を網羅しており：（ａ）疾患が生じることを、疾患の素因があり得るが、それを有するとまだ診断されていない、対象において防止すること；（ｂ）疾患を阻害すること、すなわち、その発生または進行を停止すること；および（ｃ）疾患を軽減すること、すなわち、疾患の退行を生じさせることおよび／または１つまたは複数の疾患症状を軽減することを含む。「処置」はまた、疾患または状態の非存在下でさえも、薬理的効果を提供するために薬剤のデリバリーを包含することを意味する。例えば、「処置」は、疾患状態の非存在下で、免疫応答を誘発することができるまたは免疫を与えることができる組成物（例えば、ワクチンの場合）のデリバリーを包含する。

【0066】

本明細書で使用する、用語「哺乳動物」は、限定されないが、げっ歯目の哺乳動物、例えば、マウスおよびハムスター、およびウサギ目（Ｌｏｇｏｍｏｒｐｈａ）の哺乳動物、例えば、ウサギを含む、任意の哺乳動物を指す。幾つかの実施形態では、哺乳動物は、ネコ（猫）およびイヌ（犬）を含む、食肉目からである。幾つかの実施形態では、哺乳動物は、ウシ（牛）およびブタ（豚）を含む偶蹄目またはウマ（馬）を含む奇蹄目（Ｐｅｒｓｓｏｄａｃｔｙｌａ）からである。哺乳動物は、霊長目（Ｐｒｉｍａｔｅｓ）、セボイド目（Ｃｅｂｏｉｄｓ）、もしくはシモイド目（Ｓｉｍｏｉｄｓ）（サル）のものまたは真猿目（Ａｎｔｈｒｏｐｏｉｄｓ）（ヒトおよび類人猿）のものであることが最も好ましい。幾つかの実施形態では、哺乳動物はヒトである。幾つかの実施形態では、哺乳動物はカニクイザルである。

【0067】

本明細書で使用する、用語「退行」ならびにそれから派生（ｓｔｅｍｍｉｎｇ）する言葉は、必ずしも１００％または完全な退行を意味するとは限らない。むしろ、当業者が、潜在的な利益または治療効果を有すると認識する、種々の程度の退行が存在する。この点、開示される方法は、哺乳動物におけるがんの退行の任意のレベルの任意の量を提供することができる。さらに、本発明の方法によって提供される退行は、疾患、例えば、がんの１つまたは複数の状態または症状の退行を含み得る。また、本明細書の目的に関して、「退行」は、疾患の発症を遅延させること、症状の発症を遅延させること、および／またはその状態の発症を遅延させることを包含し得る。進行性の疾患および障害に関して、「退行」は、疾患または障害の進行の緩徐化、疾患または障害の症状の進行の緩徐化、および／またはその状態の進行の緩徐化を包含し得る。

【0068】

組成物の「有効量」または「治療的な有効量」には、組成物が投与される対象に対して有益な効果を提供するのに十分な組成物の量が含まれる。デリバリー媒体の「有効量」には、組成物と効果的に結合するまたは組成物をデリバリーするのに十分な量が含まれる。

【0069】

「個体」または「宿主」または「対象」または「患者」は、診断、処置、または治療が所望される任意の哺乳動物の対象、特にヒトを意味する。他の対象には、カニクイザル、ウシ、イヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、マウス、ウマ、などが含まれ得る。

【0070】

本明細書で使用する用語「と組み合わせて」は、例えば、第一の治療は、第二の治療の投与の全過程の間に投与される；第一の治療が第二の治療の投与とオーバーラップする期間にわたって投与される、例えば、第一の治療の投与が第二の治療の投与の前に始まる、および第一の治療の投与が第二の治療の投与が終わる前に終わる；第二の治療の投与が第一の治療の投与の前に始まる、および第二の治療の投与が第一の治療の投与が終わる前に終わる；第一の治療の投与が第二の治療の投与が始まる前に始まる、および第二の治療の投与が第一の治療の投与が終わる前に終わる；第二の治療の投与が第一の治療の投与が始まる前に始まる、および第一の治療の投与が第二の治療の投与が終わる前に終わる、使用を指す。したがって、「組合せで」はまた、２つまたはそれ以上の治療の投与が関与するレジメンを指し得る。本明細書で使用する「と組み合わせて」はまた、同じまたは異なる製剤中で、同じまたは異なる経路によって、および同じまたは異なる剤形タイプ中に投与され得る、２つまたはそれ以上の治療の投与を指す。

【0071】

「コードする」には、ヌクレオチド（すなわち、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡおよびｍＲＮＡ）の定義された配列またはアミノ酸の定義された配列のいずれかを有する、生物学的プロセスにおける他のポリマーおよび高分子の合成のためのテンプレートとして働く、ポリヌクレオチド、例えば遺伝子、ｃＤＮＡ、またはｍＲＮＡにおけるヌクレオチドの特異的な配列の固有の特性およびそれからもたらされる生物学的な特性が含まれる。したがって、例えば、遺伝子に対応するｍＲＮＡの転写および翻訳が細胞または他の生物系でタンパク質を生産する場合、その遺伝子はそのタンパク質をコードする。そのヌクレオチド配列がｍＲＮＡ配列と同一であり、通常配列表に提供されているコード鎖と、遺伝子またはｃＤＮＡの転写のためのテンプレートとして使用される非コード鎖とは両方とも、タンパク質またはその遺伝子もしくはｃＤＮＡの他の生成物をコードすると称することができる。

【0072】

用語「核酸」には、一本鎖、二本鎖、オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドを含む任意の形態で複数のヌクレオチドを有するＲＮＡまたはＤＮＡ分子が含まれる。用語「ヌクレオチド配列」には、一本鎖形態の核酸におけるオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドにおけるヌクレオチドの順序付けが含まれる。

【0073】

「核酸コンストラクト」は、構築されて自然には一緒に見出されない１つまたは複数の機能的な単位を含む核酸配列を意味する。例には、非天然核酸配列を含む環状、直鎖状、二本鎖状の、染色体外ＤＮＡ分子（プラスミド）、コスミド（ラムダファージ由来のＣＯＳ配列を含有するプラスミド）、ウイルスゲノム等が含まれる。

【0074】

本明細書で使用する用語「作動可能に連結」は、２つのポリヌクレオチドの少なくとも１つが、他方において、それが特性評価される生理的な効果を発揮できる様式で、核酸部分内に配置される２つのポリヌクレオチドを含む、第二のポリヌクレオチド、例えば、一本鎖または二本鎖核酸部分との機能的な関係にあるポリヌクレオチドを含む。例として、ある遺伝子のコード領域に作動可能に連結されたプロモーターは、コード領域の転写を促進できる。作動可能な連結を示す場合に、特定された順序は重要ではない。例えば、語句「プロモーターがヌクレオチド配列に作動可能に連結」および「ヌクレオチド配列がプロモーターに作動可能に連結」は、本明細書で互換的に使用され、等価であると考えられる。幾つかの場合、所望のタンパク質をコードする核酸はプロモーター／制御配列をさらに含み、プロモーター／制御配列は、所望のタンパク質コード配列の５’端に位置付けられ、その結果、それが細胞において所望のタンパク質の発現を駆動する。

【0075】

本明細書で互換的に使用する、用語「オリゴヌクレオチド」、「ポリヌクレオチド」および「核酸分子」は、リボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドのいずれかの任意の長さのヌクレオチドのポリマー形態を指す。したがって、この用語には、限定されないが、一本鎖、二本鎖または複数鎖のＤＮＡもしくはＲＮＡ、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ＤＮＡ－ＲＮＡハイブリッド、またはプリンおよびピリミジン塩基を含むポリマー、または他の天然の、化学的にもしくは生化学的に修飾された、非天然の、または誘導体化されたヌクレオチド塩基が含まれる。ポリヌクレオチドの骨格は、糖およびリン酸基（典型的には、ＲＮＡまたはＤＮＡに見出すことができるような）、または修飾もしくは置換型糖またはリン酸基を含んでもよい。

【0076】

ポリヌクレオチドに適用される用語「組換え」は、ポリヌクレオチドが、様々な組合せのクローニング、制限またはライゲーションステップ、ならびに自然に見出されるポリヌクレオチドとは別個のおよび／または異なるコンストラクトをもたらす他の手順の生成物であることを意味する。用語は、オリジナルのポリヌクレオチドコンストラクトおよびオリジナルのウイルスコンストラクトの子孫の複製物をそれぞれ含む。

【0077】

本明細書で使用する用語「プロモーター」は、所望の分子をコードする核酸配列などの転写される核酸配列に作動可能に連結されたＤＮＡ配列を含む。プロモーターは、一般に、転写される核酸配列の上流に位置付けられ、ＲＮＡポリメラーゼおよび他の転写因子による特異的な結合のための部位を提供する。

【0078】

「ベクター」は、遺伝子配列を標的細胞に移すことが可能である。典型的に、「ベクターコンストラクト」、「発現ベクター」および「遺伝子導入ベクター」は、目的の遺伝子の発現を方向付ける能力のある任意の核酸コンストラクトを意味し、これは遺伝子配列を標的細胞に移すことができ、これはベクターの全てまたは一部のゲノム統合または染色体外エレメントとしてのベクターの一過性のまたは遺伝的な維持によって達成され得る。したがって、この用語は、クローニングおよび発現媒体、ならびに組込みベクターを含む。

【0079】

本明細書で使用する用語「制御エレメント」は、核酸配列の発現の幾つかの側面を制御する、ヌクレオチド配列を含む。制御エレメントの例には、エンハンサー、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、イントロン、複製起点、ポリアデニル化シグナル（ｐＡ）、プロモーター、エンハンサー、転写終結配列、および上流制御ドメインが例証的に含まれ、これは核酸配列の複製、転写、および／または転写後プロセシングに寄与する。この場合、制御エレメントには、シス制御ＤＮＡエレメントならびに転移エレメント（ＴＥ）も含まれ得る。当業者は、日常的な実験法を用いて、これらおよび他の制御エレメントを選択し、発現コンストラクトに使用することが可能である。発現コンストラクトは、遺伝的な組換えアプローチを使用してまたは周知の方法論を使用して合成的に生成することができる。

【0080】

「コントロールエレメント」または「コントロール配列」は、ポリヌクレオチドの複製（ｒｅｐｌｉｋａｔｉｏｎ）、複製（ｄｕｐｌｉｃａｔｉｏｎ）、転写、スプライシング、翻訳、または分解を含むポリヌクレオチドの機能制御に寄与する分子の相互作用に関与するヌクレオチド配列である。制御は、プロセスの頻度、速度、または特異性に影響してもよく、性質において増強させるまたは阻害的なものであってもよい。当技術分野において公知のコントロールエレメントには、例えば、転写制御配列、例えばプロモーターおよびエンハンサーが含まれる。プロモーターは、特定の条件下で、ＲＮＡポリメラーゼに結合し、プロモーターから下流（３’方向）に通常配置されるコード領域の転写を開始することが可能であるＤＮＡ領域である。

【0081】

アミノ酸残基が本明細書で使用する「リン酸化され」との記述は、リン酸基がアミノ酸残基の側鎖にエステル連結されることを意味する。リン酸化され得る典型的なアミノ酸残基には、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、およびチロシン（Ｔｙｒ）が含まれる。

【0082】

本明細書で使用する、用語「医薬組成物」は、インビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）またはエクスビボ（ｅｘ ｖｉｖｏ）での診断上または治療上の使用のために特に適切な組成物を作る、活性剤と担体（不活性または活性）の組合せを指す。

【0083】

本明細書で使用する、用語「薬学的に許容される担体」は、リン酸緩衝生理食塩液、水、エマルジョン（例えば、油／水型または水／油型エマルジョン）、および様々なタイプの湿潤剤などの任意の標準的な薬学的担体を指す。組成物はまた、安定化剤および保存剤を含み得る。担体、安定化剤およびアジュバントの例に関して、例えば、Martin, Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th Ed., Mack Publ. Co., Easton, PA [1975]を参照されたい。

【0084】

記載を通して、組成物が特定の成分を「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」として記載されるか、またはプロセスおよび方法が特定のステップを「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」として記載される場合、さらに、参照成分から本質的になるまたは参照成分からなる本発明の組成物の存在、および参照プロセシングステップから本質的になるまたは参照プロセシングステップからなる本発明に従うプロセスおよび方法の存在を意図している。

【0085】

一般的な事項として、パーセンテージを特定する組成物は、特記しない限り、重量による。さらに、変数が定義を伴わない場合、変数の前の定義が優先される。

【0086】

本発明の様々な態様が、以下のセクションに記載される；しかしながら、１つの特定のセクションに記載される本発明の態様は、いずれの特定のセクションにも限定されるものではない。

【0087】

Ｉ．抗体
本開示は、新規の抗ＢＴＬＡ抗体を提供する。このような抗体は、ヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに結合することができる。表１は、表１に表記される組合せで、ヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに結合することができる、重鎖可変領域および軽鎖可変領域のペプチド配列を列挙する。幾つかの実施形態では、重鎖可変領域および軽鎖可変領域は、Ｆａｂフォーマットに配置される。幾つかの実施形態では、重鎖可変領域および軽鎖可変領域は、一緒に融合されてｓｃＦｖを形成（ｆｒｏｍ）する。

【0088】

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【表1-4】

【表1-5】

【表1-6】

【表1-7】

【表1-8】

【0089】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0090】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号４７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号４８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号４９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号５０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号５１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号５２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0091】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号４と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0092】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号５３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号５４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号５５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号５６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号５７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号５８を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0093】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号５と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号６と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0094】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号５９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号６０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号６１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号６２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号６３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号６４を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0095】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号７と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号８と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0096】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号６５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号６６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号６７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号６８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号６９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号７０を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0097】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号９と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号１０と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0098】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号７１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号７２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号７３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号７４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号７５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号７６を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0099】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１１と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号１２と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0100】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号７７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号７８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号７９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号８０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号８１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号８２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0101】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１３と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号１４と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0102】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号８３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号８４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号８５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号８６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号８７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号８８を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0103】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１５と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号１６と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0104】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号８９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号９０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号９１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号９２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号９３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号９４を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0105】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１７と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号１８と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0106】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号９５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号９６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号９７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号９８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号９９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１００を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0107】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１９と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２０と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0108】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１０１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１０４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１０５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１０６を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0109】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２１と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２２と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0110】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１０７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0111】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２３と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２４と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0112】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１１３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１１４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１１５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１８を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0113】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２５と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２６と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0114】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１１９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１２４を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0115】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２７と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号２８と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0116】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１２５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３０を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0117】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２９と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号３０と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0118】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１３１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１３４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１３５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３６を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0119】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３１と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号３２と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0120】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１３７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0121】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３３と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号３４と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0122】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１４３を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１４４を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１４５を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４６を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４７を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４８を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0123】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３５と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号３６と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0124】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１４９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１５４を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0125】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３７と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号３８と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0126】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１５５を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５６を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５７を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５８を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５９を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１６０を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0127】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３９と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号４０と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0128】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１６１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１６２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１６３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１６４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１６５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１６６を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0129】

幾つかの実施形態では、本開示において抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号４１と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号４２と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。

【0130】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１６７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１６８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１６９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１７０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１７１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１７２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれる。幾つかの実施形態では、１つまたは複数の、そのような６つのＣＤＲは、１、２、３、４または５アミノ酸修飾を有する。さらなる実施形態では、単一ＣＤＲは、１または２アミノ酸置換を含有し、修飾された抗ＢＴＬＡ抗体はヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに対する結合を保持する。

【0131】

重鎖および軽鎖可変領域および／またはＣＤＲにおいて本明細書に記載されている配列変異体に加えて、重鎖および／または軽鎖可変領域のフレームワーク領域に変化を作ることができる。幾つかの実施形態では、フレームワーク領域の変異体（例えば、ＣＤＲを排除）は、生殖系列配列と少なくとも約８０、８５、９０または９５％同一性を保持する。表２は、本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体をコードする生殖系列遺伝子対立遺伝子を列挙する。変異体は、軽鎖Ｖ遺伝子、軽鎖Ｊ遺伝子、重鎖Ｖ遺伝子、重鎖Ｊ遺伝子、および重鎖Ｄ遺伝子の対立遺伝子のいずれか１つと少なくとも約８０、８５、９０または９５％同一性を保持するように作ることができる。

【0132】

【表2-1】

【表2-2】

【0133】

幾つかの実施形態では、バリエーションはフレームワーク領域に作られ、これは表２に記載されている生殖系列遺伝子配列と少なくとも８０、８５、９０または９５％同一性を保持し、６つのＣＤＲは不変に保たれる。

【0134】

幾つかの実施形態では、バリエーションは、フレームワーク領域（これは表２に記載されている生殖系列遺伝子配列と少なくとも８０、８５、９０または９５％同一性を保持する）と６つのＣＤＲの両方に作られる。ＣＤＲは、アミノ酸修飾を有してもよい（例えば、ＣＤＲのセットに１、２、３、４または５アミノ酸修飾）、（すなわち、ＣＤＲは、６つのＣＤＲのセットにおける変化の総数が６アミノ酸修飾未満である限り、修飾されてもよく、ＣＤＲの任意の組合せが変化する；例えば、１つの変化がｖｌＣＤＲ１に、２つの変化がｖｈＣＤＲ２に、変化なしがｖｈＣＤＲ３に存在し得る、等々）。

【0135】

重鎖および軽鎖のＣＤＲおよび／または可変領域のアミノ酸配列を、本明細書に記載されているものから選択することおよび必要に応じてそれらを抗体の重鎖および軽鎖のフレームワーク領域および／または定常領域のアミノ酸配列と組み合わせることにより、当業者は本発明に従って抗ＢＴＬＡ抗体をデザインできる。本発明に記載されている抗体フレームワーク領域および／または定常領域（Ｆｃドメイン）は、任意の種、例えば、ヒト、ウサギ、イヌ、ネコ、マウス、ウマまたはサルに由来し得る。

【0136】

幾つかの実施形態では、定常領域は、ヒトに由来し、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、およびＩｇＤサブタイプまたはその変異体のものに由来する重鎖定常領域、およびカッパまたはラムダサブタイプまたはその変異体に由来する軽鎖定常領域を含む。幾つかの実施形態では、重鎖定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４を含む、ヒトＩｇＧに由来する。幾つかの実施形態では、重鎖定常領域のアミノ酸配列は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４定常領域と少なくとも８０％、８５％、９０％、または９５％同一である。幾つかの他の実施形態では、定常領域のアミノ酸配列は、別の哺乳動物、例えば、ウサギ、イヌ、ネコ、マウス、ウマまたはサルからの抗体定常領域と少なくとも８０％、８５％、９０％、または９５％同一である。幾つかの実施形態では、抗体定常領域には、ヒンジ、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメインおよび適宜ＣＨ１ドメインが含まれる。

【0137】

幾つかの実施形態では、本明細書に記載されている抗体は、異なる種からの混合物（例えば、キメラ抗体および／またはヒト化抗体を形成する）に由来し得る。一般に、「キメラ抗体」および「ヒト化抗体」の両方は、複数の種からの領域を組み合わせる抗体を指す。例えば、「キメラ抗体」は、マウス（または、幾つかの場合では、ラット）からの可変領域およびヒトからの定常領域を伝統的に含む。「ヒト化抗体」は、ヒト抗体に見出される配列とスワップされた可変ドメインフレームワーク領域を有していた非ヒト抗体を一般に指す。一般に、ヒト化抗体では、抗体全体（ＣＤＲを除く）は、ヒト起源のポリヌクレオチドによってコードされるかまたはそのＣＤＲ内を除いて、そのような抗体と同一である。ＣＤＲ（その幾つかまたは全てが、非ヒト生物に起源を持つ核酸によってコードされる）がヒト抗体可変領域のベータシートフレームワークに移植されて抗体を作出し、その特異性は移植されたＣＤＲによって決定される。そのような抗体の作出は、例えば、参照により全てが全体的に組み込まれる、ＷＯ９２／１１０１８、Jones, 1986, Nature 321:522-525、Verhoeyen et al., 1988, Science 239:1534-1536に記載されている。対応するドナー残基に対して選択されたアクセプターフレームワーク残基の「復帰突然変異」が、しばしば必要とされて、初期の移植されたコンストラクトにおいて喪失される親和性が回復する（ＵＳ５５３０１０１；ＵＳ５５８５０８９；ＵＳ５６９３７６１；ＵＳ５６９３７６２；ＵＳ６１８０３７０；ＵＳ５８５９２０５；ＵＳ５８２１３３７；ＵＳ６０５４２９７；ＵＳ６４０７２１３、参照により全てが全体的に組み込まれる）。ヒト化抗体はまた、少なくとも一部の免疫グロブリン定常領域（典型的にはヒト免疫グロブリンのもの）を至適に含み、したがって、ヒトＦｃ領域を典型的に含む。ヒト化抗体はまた、例えば、参照により全体的に組み込まれる、Roque et al., 2004, Biotechnol. Prog. 20:639-654に記載されるように、遺伝的に操作された免疫システムを有するマウスを使用して生成することができる。非ヒト抗体をヒト化および再構築（ｒｅｓｈａｐｉｎｇ）するための種々の技術および方法は、当技術分野において周知である（参照により全てが全体的に組み込まれる、Tsurushita & Vasquez, 2004, Humanization of Monoclonal Antibodies, Molecular Biology of B Cells, 533-545, Elsevier Science (USA)、およびその中で引用されている参照文献を参照されたい）。ヒト化方法には、限定されないが、参照により全てが全体的に組み込まれる、Jones et al., 1986, Nature 321:522-525; Riechmann et al.,1988; Nature 332:323-329; Verhoeyen et al., 1988, Science, 239:1534-1536; Queen et al., 1989, Proc Natl Acad Sci, USA 86:10029-33; He et al., 1998, J. Immunol. 160: 1029-1035; Carter et al., 1992, Proc Natl Acad Sci, USA 89:4285-9, Presta et al., 1997, Cancer Res. 57(20):4593-9; Gorman et al., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:4181-4185; O'Connor et al., 1998, Protein Eng 11:321-8に記載されている方法が含まれる。ヒト化または非ヒト抗体可変領域の免疫原性を減少させる他の方法には、例えば、参照により全体的に組み込まれる、Roguska et al., 1994, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:969-973に記載されるように、リサーフェイシング法が含まれ得る。他のヒト化方法には、限定されないが、参照により全てが全体的に組み込まれる、Tan et al., 2002, J. Immunol. 169:1119-1125; De Pascalis et al., 2002, J. Immunol. 169:3076-3084に記載されている方法を含む、ＣＤＲの一部のみの移植術が関与してもよい。

【0138】

幾つかの実施形態では、本発明の抗体は、特定のヒト生殖系列重鎖免疫グロブリン遺伝子に由来する重鎖可変領域および／または特定のヒト生殖系列軽鎖免疫グロブリン遺伝子に由来する軽鎖可変領を含む。そのような抗体は、例えば、天然の体細胞突然変異または部位特異的突然変異の意図的な導入により、ヒト生殖系列配列と比較して、アミノ酸の差を含有し得る。しかしながら、ヒト化抗体は、典型的には、ヒト生殖系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列に対してアミノ酸配列が少なくとも８０％同一であり、他の種（例えば、マウス生殖系列配列）の生殖系列免疫グロブリンアミノ酸配列と比較した場合に、ヒト配列に由来する抗体を識別するアミノ酸残基を含有する。ある特定の場合、ヒト化抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列に対してアミノ酸配列が少なくとも９５、９６、９７、９８もしくは９９％、またはさらに少なくとも９６％、９７％、９８％、もしくは９９％同一であり得る。典型的には、特定のヒト生殖系列配列に由来するヒト化抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列から１０－２０アミノ酸以下の差を提示する。ある特定の場合、ヒト化抗体は、生殖系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列から５以下、またはさらに４、３、２、もしくは１アミノ酸以下の差を提示し得る。

【0139】

幾つかの実施形態では、本開示の抗体は、当技術分野において公知であるように、ヒト化および親和性成熟される。構造に基づく方法を、例えば、米国特許第７，６５７，３８０号に記載されているように、ヒト化および親和性成熟について用いてもよい。選択に基づく方法は、抗体可変領域をヒト化および／または親和性成熟するのに用いてもよく、限定されないが、参照により全てが全体的に組み込まれる、Wu et al., 1999, J. Mol. Biol. 294:151-162; Baca et al., 1997, J. Biol. Chem. 272(16):10678-10684; Rosok et al., 1996, J. Biol. Chem. 271(37): 22611-22618; Rader et al., 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 8910-8915; Krauss et al., 2003, Protein Engineering 16(10):753-759に記載されている方法を含む。

【0140】

ＩＩ．抗体の特徴
幾つかの実施形態では、本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体は、ヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに結合する。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体のヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡへの結合は、ＥＬＩＳＡ、例えば、実施例１に記載されている例示的なアッセイによって測定される。そのような実施形態では、本明細書に記載されている抗体は、そのようなアッセイによって測定される０．１－２０ｎＭ範囲となり得るＥＣ５０を提示する。幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体のヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡへの結合は、ＦＡＣＳ、例えば、実施例２に記載されている例示的なアッセイによって測定される。そのような実施形態では、本明細書に記載されている抗体は、ＦＡＣＳによって測定される０．１－２０ｎＭ範囲となるＥＣ５０を提示する。さらなる実施形態では、本明細書に記載されている抗体のＥＣ５０は、ＥＬＩＳＡまたはＦＡＣＳのいずれかによって測定される約０．１－３０、１－２８、２－２６、３－２４、４－２２、５－２０、６－１８、７－１６、８－１４、または９－１２ｎＭ範囲となる。

【0141】

幾つかの実施形態では、本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体は、ヒトおよび／またはカニクイザルＢＴＬＡに高親和性で結合する。Ｋ_Ｄ値は、固定化された抗原または固定化された抗体で測定することができる。Ｋ_Ｄ値はまた、一価または二価結合モードで測定することができる。例えば、Ｂｉｏ－Ｌａｙｅｒ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙによって測定される場合、抗体とヒトＢＴＬＡとの間のＫ_Ｄ値は、１×１０^－６Ｍ以下、５×１０^－７Ｍ以下、２．５×１０^－７Ｍ以下、１×１０^－７Ｍ以下、５×１０^－８Ｍ以下、１×１０^－８Ｍ以下、１×１０^－９Ｍ以下、または１×１０^－１０Ｍ以下であり得る。抗体とカニクイザルＢＴＬＡとの間のＫ_Ｄ値は、１×１０^－６Ｍ以下、５×１０^－７Ｍ以下、２．５×１０^－７Ｍ以下、１×１０^－７Ｍ以下、５×１０^－８Ｍ以下、２．５×１０^－８Ｍ以下、１×１０^－８Ｍ以下、５×１０^－９Ｍ以下、１×１０^－９Ｍ以下、５×１０^－１０Ｍ以下、または１×１０^－１０Ｍ以下であり得る。幾つかの実施形態では、抗体とヒトＢＴＬＡとの間のＫ_Ｄ値は、０．１ｎＭ－１μＭ、０．２５ｎＭ－５００ｎＭ、０．５ｎＭ－２５０ｎＭ、１ｎＭ－１００ｎＭ、または２ｎＭ－５０ｎＭ範囲となる。幾つかの実施形態では、抗体とカニクイザルＢＴＬＡとの間のＫ_Ｄ値は、０．１ｎＭ－１μＭ、０．２５ｎＭ－５００ｎＭ、０．５ｎＭ－２５０ｎＭ、１ｎＭ－１００ｎＭ、または２ｎＭ－５０ｎＭ範囲となる。

【0142】

本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体の結合親和性は、米国特許第８，５６３，６９４号に記載されているＢＴＬＡモノクローナル抗体４Ｃ７と比較される。幾つかの実施形態では、本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体は、ヒトＢＴＬＡに対して４Ｃ７よりも高い結合親和性を有する。幾つかの実施形態では、本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体は、カニクイザルＢＴＬＡに対して４Ｃ７よりも高い結合親和性を有する。表７は、抗体クローンの幾つかならびに４Ｃ７の例示的なＫ_Ｄを列挙する。４Ｃ７よりも高い結合親和性を有することの１つの利点は、本明細書に記載されている抗体が、免疫応答の調節および／または抗腫瘍免疫応答への参加により効果的であり得ることである。カニクイザルＢＴＬＡに対して４Ｃ７よりも高い結合親和性を有する別の利点は、これらの抗体に由来する前臨床のサルの研究（例えば、薬物動態、薬力学、安全性、毒性研究）が、４Ｃ７を使用する研究よりも優れた予測力を有し得ることである。

【0143】

幾つかの実施形態では、抗ＢＴＬＡ抗体は、ヒト対象に投与される場合に低い免疫原性を提示する。これらの抗体は、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２またはヒトＩｇＧ３に由来するＦｃドメインを含有し得る。幾つかの実施形態では、これらの抗体は、ヒト免疫グロブリンに由来するフレームワーク領域を使用してヒト化される。

【0144】

Ｔ細胞機能における抗ＢＴＬＡ抗体の効果は、例えば、実施例５に記載されている方法などを含む、当技術分野において公知であり本明細書に記載されている種々の方法を使用してアッセイされ得る。したがって、抗ＢＴＬＡ抗体は、ＢＴＬＡアンタゴニストまたはＢＴＬＡアゴニストとして働き得る。

【0145】

幾つかの実施形態では、記載されている抗ＢＴＬＡ抗体は、ＢＴＬＡアンタゴニストとして作用し、ＢＴＬＡとＨＶＥＭの相互作用ならびにＴ細胞機能のＨＶＥＭ媒介性抑制をブロックする。結果として、そのような抗ＢＴＬＡ抗体は、免疫応答を刺激する。そのような抗ＢＴＬＡ抗体の例には、配列番号２１と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号２２と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１０７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１２を含むｖｌＣＤＲ３を含有する抗体が含まれる。あるいは、アンタゴニストとして作用する、そのような抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３１と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号３２と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１３７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４２を含むｖｌＣＤＲ３が含まれ得る。あるいは、アンタゴニストとして作用する、そのような抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号３５と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号３６と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１４９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１５４を含むｖｌＣＤＲ３が含まれ得る。

【0146】

幾つかの他の実施形態では、本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体は、ＢＴＬＡアゴニストとして作用し、炎症促進性のＴ細胞機能を含む、免疫細胞機能を抑制する。結果として、そのような抗ＢＴＬＡ抗体は、免疫応答を抑制する。例えば、そのような抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号１９と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号２０と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１０１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１０４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１０５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１０６を含むｖｌＣＤＲ３が含まれ得る。あるいは、そのような抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２５と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号２６と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１１９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１２４を含むｖｌＣＤＲ３が含まれ得る。あるいは、アゴニストとして作用する、そのような抗ＢＴＬＡ抗体には、配列番号２９と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号３０と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１３１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１３４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１３５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３６を含むｖｌＣＤＲ３が含まれ得る。

【0147】

ＩＩＩ．本発明の核酸
本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体をコードする核酸、ならびにそのような核酸を含有する発現ベクターおよびそのような核酸および／または発現ベクターで形質転換された宿主細胞も提供される。当業者によって理解されるように、本明細書に示されるタンパク質配列は、遺伝子コードの縮重により可能な任意の数の核酸配列によってコードされ得る。表３は、本明細書に記載されている抗体の重鎖可変領域および軽鎖可変領域をコードする例示的な核酸を提供する。

【0148】

【表3-1】

【表3-2】

【表3-3】

【表3-4】

【表3-5】

【表3-6】

【表3-7】

【表3-8】

【表3-9】

【表3-10】

【表3-11】

【0149】

抗ＢＴＬＡ抗体および／またはＢＴＬＡ結合ドメインをコードする核酸組成物も提供される。当業者によって理解されるように、抗原結合ドメインの場合、核酸組成物は、重鎖可変領域をコードする第一の核酸および軽鎖可変領域をコードする第二の核酸を一般に含む。ｓｃＦｖの場合、本明細書に記載されているリンカーによって分離された、重鎖可変領域および軽鎖可変領域をコードする単一核酸を作ることができる。伝統的な抗体の場合、核酸組成物は、重鎖をコードする第一の核酸および軽鎖をコードする第二の核酸を一般に含み、これが、細胞中で発現に際して、２つの重鎖および２つの軽鎖の「伝統的な」四量体フォーマットに自発的に組み立てられる。

【0150】

当技術分野において公知であるように、本発明の成分をコードする核酸は、発現ベクターに組み込まれ、宿主細胞に応じて、本発明の抗体を産生するために使用され得る。これらの２つの核酸は、単一の発現ベクターまたは２つの異なる発現ベクターに組み込まれ得る。一般に、核酸は、発現ベクター中の任意の数の制御エレメント（プロモーター、複製起点、選択可能マーカー、リボソーム結合部位、誘導因子、等々）に作動可能に連結され得る。発現ベクターは、染色体外または組込みベクターであってもよい。

【0151】

本発明の核酸および／または発現ベクターは、哺乳動物、細菌、酵母、昆虫および真菌細胞を含む、当技術分野において周知である、任意のタイプの宿主細胞に導入され得る。トランスフェクション後、単一細胞クローンは、例えば、限界希釈、ＥＬＩＳＡ、ＦＡＣＳ、顕微鏡、またはＣｌｏｎｅｐｉｘなどの、当技術分野において公知の方法を使用して、細胞バンク生成のために単離され得る。クローンは、バイオリアクターでのスケールアップおよび抗体の発現の維持に適切な条件下で培養され得る。抗体は、遠心分離、深層ろ過、細胞溶解、均質化、凍結融解、親和性精製、ゲル濾過、イオン交換クロマトグラフィー、疎水的相互作用交換クロマトグラフィー、および混合モードクロマトグラフィーを含む、当技術分野において公知の方法を使用して単離され、精製され得る。

【0152】

ＩＶ．治療適用
本開示は、対象における免疫応答を調節する方法であって、対象に有効量の本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体、または抗ＢＴＬＡ抗体を含有する医薬組成物を投与することを含む、方法を提供する。

【0153】

幾つかの実施形態では、本開示に包含される免疫応答を調節する方法は、対象における免疫応答を刺激することを含み、さらなる実施形態では、そのような方法は、対象に有効量のＢＴＬＡアンタゴニストとして作用する抗ＢＴＬＡ抗体を投与することを含む、またはアンタゴニスト性の抗ＢＴＬＡ抗体を含有する医薬組成物を投与することによる。

【0154】

幾つかの実施形態では、本開示に包含される方法は、例えば、配列番号２１と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号２２と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１０７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１１０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１１１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１２を含むｖｌＣＤＲ３を含む抗ＢＴＬＡ抗体を投与することによって、対象における免疫応答を刺激する方法を含む。

【0155】

幾つかの実施形態では、本明細書に記載されている方法は、例えば、配列番号３１と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号３２と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１３７を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３８を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３９を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１４０を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１４１を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１４２を含むｖｌＣＤＲ３を含む抗ＢＴＬＡ抗体を投与することによって、対象における免疫応答を刺激する。

【0156】

幾つかの実施形態では、本明細書に記載されている方法は、例えば、配列番号３５と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号３６と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１４９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１５０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１５１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１５２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１５３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１５４を含むｖｌＣＤＲ３を含む抗ＢＴＬＡ抗体を投与することによって、対象における免疫応答を刺激する。

【0157】

幾つかの実施形態では、本開示は、例えば、対象に有効量のＢＴＬＡアゴニストとして作用する抗ＢＴＬＡ抗体を投与することによって、または対象にそのようなアゴニスト性の抗ＢＴＬＡ抗体を含有する医薬組成物を投与することによって、対象における免疫応答を抑制するための方法を提供する。

【0158】

幾つかの他の実施形態では、本明細書に記載されている方法は、例えば、配列番号１９と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号２０と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１０１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１０２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１０３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１０４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１０５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１０６を含むｖｌＣＤＲ３を含む抗ＢＴＬＡ抗体を投与することによって、対象における免疫応答を抑制する。

【0159】

幾つかの他の実施形態では、本明細書に記載されている方法は、例えば、配列番号２５と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号２６と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１１９を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１２０を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１２１を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１２２を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１２３を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１２４を含むｖｌＣＤＲ３を含む抗ＢＴＬＡ抗体を投与することによって、対象における免疫応答を抑制する。

【0160】

幾つかの他の実施形態では、本明細書に記載されている方法は、例えば、配列番号２９と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号３０と少なくとも８０％（例えば、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；ならびに／または配列番号１３１を含むｖｈＣＤＲ１、配列番号１３２を含むｖｈＣＤＲ２、配列番号１３３を含むｖｈＣＤＲ３、配列番号１３４を含むｖｌＣＤＲ１、配列番号１３５を含むｖｌＣＤＲ２、および配列番号１３６を含むｖｌＣＤＲ３を含む抗ＢＴＬＡ抗体を投与することによって、対象における免疫応答を抑制する。

【0161】

本開示はまた、対象におけるがんを処置する方法を提供し、そのような方法は、対象に有効量のＢＴＬＡアンタゴニストとして作用する抗ＢＴＬＡ抗体、またはそのような抗ＢＴＬＡ抗体を含有する医薬組成物を投与することを含む。幾つかの実施形態では、処置されるがんは、がん細胞表面にＨＶＥＭおよび／またはＢＴＬＡを発現する。幾つかの実施形態では、処置されるがんは、対応する非がん性組織と比較して、ＨＶＥＭおよび／またはＢＴＬＡを上方制御する。幾つかの実施形態では、処置される対象は、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋および／またはＣＤ４＋Ｔ細胞にＨＶＥＭおよび／またはＢＴＬＡを発現する。幾つかの実施形態では、処置される対象は、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、および樹状細胞を含む、１つまたは複数のタイプの免疫細胞に高レベルのＨＶＥＭおよび／またはＢＴＬＡを発現する。幾つかの実施形態では、処置されるがんは、Ｔ細胞応答を下方制御するおよび／または免疫認識および破壊から回避するのにＢＴＬＡ－ＨＶＥＭ経路を使用する。幾つかの実施形態では、処置されるがんは、他の免疫チェックポイント、例えば、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１を標的にする現存の免疫調節抗体に非応答性である。

【0162】

幾つかの実施形態では、がんは、胃がん、結腸直腸がん、肝細胞癌、黒色腫、または食道扁平上皮細胞癌などの固形腫瘍である。幾つかの実施形態では、がんは、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病、ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫またはＴ細胞非ホジキンリンパ腫である。

【0163】

幾つかの他の実施形態では、がんは、脳がん、膀胱がん（ｂｌａｄｄｅｒ ｃａｎｃｅｒ）、乳がん、頚部がん、子宮内膜がん、食道がん、白血病、肺がん、肝臓がん、黒色腫、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、腎臓がん、精巣がん、または子宮がんである。さらに他の実施形態では、がんは、血管新生化腫瘍（ｖａｓｃｕｌａｒｉｚｅｄ ｔｕｍｏｒ）、扁平上皮細胞癌、腺癌、小細胞癌、神経芽細胞腫、肉腫（例えば、血管肉腫または軟骨肉腫）、喉頭がん、耳下腺がん、胆道がん、甲状腺がん、末端黒子型黒色腫、光線角化症、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、腺様嚢胞癌、腺腫、腺肉腫、腺扁平上皮癌、肛門管がん、肛門がん、肛門直腸がん（ａｎｏｒｅｃｔｕｍ ｃａｎｃｅｒ）、星状細胞腫瘍、バルトリン腺癌、基底細胞癌、胆道がん、骨がん、骨髄がん、気管支がん、気管支腺癌、カルチノイド、胆管癌、コンド肉腫（ｃｈｏｎｄｏｓａｒｃｏｍａ）、脈絡叢乳頭腫／癌、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、明細胞癌、結合組織がん、嚢腺腫、消化器系がん、十二指腸がん、内分泌系がん、内胚葉洞腫瘍、子宮内膜過形成、子宮内膜間質部肉腫、類子宮内膜腺癌（ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｉｄ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）、内皮細胞がん、上衣がん、上皮細胞がん、ユーイング肉腫、眼および眼窩がん、女性器がん、限局性結節性過形成、胆嚢がん、胃洞がん（ｇａｓｔｒｉｃ ａｎｔｒｕｍ ｃａｎｃｅｒ）、胃底部がん、ガストリノーマ、グリア芽腫、グルカゴノーマ、心臓がん、血管芽腫（ｈｅｍａｎｇｉｂｌａｓｔｏｍａｓ）、血管内皮腫（ｈｅｍａｎｇｉｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｍａ）、血管腫、肝細胞腺腫、肝腺腫症（ｈｅｐａｔｉｃ ａｄｅｎｏｍａｔｏｓｉｓ）、肝胆道がん、肝細胞癌、ホジキン病、回腸がん、インスリノーマ、上皮内新形成、上皮間性扁平上皮細胞新形成（ｉｎｔｅｒｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｎｅｏｐｌａｓｉａ）、肝内胆管がん、浸潤性扁平上皮癌、空腸がん、関節がん、カポジ肉腫、骨盤がん、大細胞癌、大腸がん、平滑筋肉腫、悪性黒子型黒色腫、リンパ腫、男性器がん、悪性黒色腫、悪性中皮腫、髄芽腫、髄上皮腫、髄膜がん、中皮がん、転移性癌、口腔がん（ｍｏｕｔｈ ｃａｎｃｅｒ）、粘表皮癌（ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、多発性骨髄腫、筋肉がん、鼻道がん、神経系がん、神経上皮腺癌 結節型黒色腫、非上皮性皮膚がん、燕麦細胞癌、乏突起膠細胞がん、口腔がん（ｏｒａｌ ｃａｖｉｔｙ ｃａｎｃｅｒ）、骨肉腫、乳頭漿液性腺癌（ｐａｐｉｌｌａｒｙ ｓｅｒｏｕｓ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）、陰茎がん、咽頭がん、下垂体部腫瘍、プラスマ細胞腫、偽肉腫、肺芽細胞腫、直腸がん、腎細胞癌、呼吸器系がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、肉腫、漿液性癌（ｓｅｒｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、洞がん（ｓｉｎｕｓ ｃａｎｃｅｒ）、皮膚がん、小細胞癌、小腸がん、平滑筋がん、軟部組織がん（ｓｏｆｔ ｔｉｓｓｕｅ ｃａｎｃｅｒ）、ソマトスタチン分泌腫瘍、脊椎がん（ｓｐｉｎｅ ｃａｎｃｅｒ）、扁平上皮癌、横紋筋がん、中皮下がん（ｓｕｂｍｅｓｏｔｈｅｌｉａｌ ｃａｎｃｅｒ）、表在拡大型黒色腫、Ｔ細胞白血病、舌がん、未分化癌、尿管がん、尿道がん、膀胱がん（ｕｒｉｎａｒｙ ｂｌａｄｄｅｒ ｃａｎｃｅｒ）、尿路系がん、子宮頚部がん、子宮体部がん、ブドウ膜黒色腫、腟がん、疣状癌、ビポーマ、外陰がん（ｖｕｌｖａ ｃａｎｃｅｒ）、高分化癌（ｗｅｌｌ－ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、またはウィルムス腫瘍である。

【0164】

幾つかの他の実施形態では、処置されるがんは、非ホジキンリンパ腫、例えば、Ｂ細胞リンパ腫またはＴ細胞リンパ腫である。ある特定の実施形態では、非ホジキンリンパ腫は、Ｂ細胞リンパ腫、例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、小リンパ球性リンパ種、外套細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾臓辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、ヘアリー細胞白血病、または原発性中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫である。ある特定の他の実施形態では、非ホジキンリンパ腫は、Ｔ細胞リンパ腫、例えば、前駆体Ｔ－リンパ芽球性リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、血管免疫芽細胞性Ｔ細胞リンパ腫、節外性ナチュラルキラー／Ｔ細胞リンパ腫、腸症型Ｔ細胞リンパ腫、皮下脂肪組織炎様Ｔ細胞リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、または末梢性Ｔ細胞リンパ腫である。

【0165】

本開示はまた、対象における自己免疫性または炎症性障害を処置する方法であって、対象に有効量のＢＴＬＡアゴニストとして作用する抗ＢＴＬＡ抗体、またはそのような抗ＢＴＬＡ抗体を含有する医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。幾つかの実施形態では、ＨＶＥＭおよび／またはＢＴＬＡは、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、樹状細胞、内皮細胞、およびマクロファージを含む、処置される対象における１つまたは複数のタイプの免疫細胞において低レベルで発現される。幾つかの実施形態では、ＨＶＥＭおよび／またはＢＴＬＡは、自己免疫疾患が発生する部位、例えば、多発性硬化症に罹患している対象におけるリンパ節および中枢神経系、関節リウマチに罹患している対象における関節、およびセリアック病に罹患している対象における胃腸管で自己反応性免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、樹状細胞、内皮細胞、およびマクロファージ）に低レベルで対象に発現される。ＢＴＬＡアゴニストとして作用する抗ＢＴＬＡ抗体を投与することは、炎症促進性のＴ細胞応答を含む、炎症促進性の免疫応答を抑制し、自己免疫性または炎症性障害に罹患している対象における免疫応答を調節することができる。

【0166】

幾つかの実施形態では、処置する自己免疫性または炎症性障害は、多発性硬化症、アジソン病、筋萎縮性側索硬化症、クローン病、クッシング症候群、真性糖尿病タイプ１、移植片対宿主病、グレーブズ病、ギラン－バレー症候群、エリテマトーデス、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、全身性エリテマトーデス、移植拒絶、または血管炎である。

【0167】

幾つかの他の実施形態では、処置される自己免疫性障害には、限定されないが、急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、無ガンマグロブリン血症、円形脱毛症、強直性脊椎炎、抗リン脂質症候群、抗シンセターゼ症候群、アトピー性アレルギー、アトピー性皮膚炎、自己免疫性再生不良性貧血、自己免疫性心筋症、自己免疫性腸症、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、自己免疫性リンパ増殖性症候群、自己免疫性膵炎、自己免疫性末梢神経障害、自己免疫性多内分泌症候群、自己免疫性プロゲステロン皮膚炎、自己免疫性血小板減少性紫斑病、自己免疫性じんま疹、自己免疫性ブドウ膜炎、バロー病／バロー同心円性硬化症、ベーチェット病、バージャー病、ビッカースタッフ型脳幹脳炎、ブラウ症候群、水疱性類天疱瘡、がん、キャッスルマン病、セリアック病、シャーガス病、慢性炎症性脱髄性多発神経障害、慢性炎症性脱髄性多発神経障害、慢性閉塞性肺疾患、慢性再発性多巣性骨髄炎、チャーグ－ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡、コーガン症候群、寒冷凝集素症、補体成分２欠乏症、接触性皮膚炎、頭蓋動脈炎、クレスト症候群、皮膚白血球破砕性血管炎、ドゴー病、ダーカム病、ヘルペス状皮膚炎、皮膚筋炎、びまん性皮膚全身性硬化症、円板状エリテマトーデス、ドレスラー症候群、薬物誘発性ループス、湿疹、子宮内膜症、好酸球性筋膜炎、好酸球性胃腸炎、好酸球性肺炎、後天性表皮水疱症、結節性紅斑、胎児赤芽球症、本態性混合型クリオグロブリン血症、エヴァンズ症候群、進行性骨化性線維形成異常症、線維化肺胞炎（または特発性肺線維症）、胃炎、胃腸疱瘡、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、橋本脳症、橋本甲状腺炎、へノッホ－シェーンライン紫斑病、妊娠性疱疹 別名 妊娠性類天疱瘡、化膿性汗腺炎、ヒューズ－ストーヴィン症候群、低ガンマグロブリン血症（Ｈｙｐｏｇａｍｍａｇｌｏｂｕｌｉｎｅｍｉ）、特発性炎症性脱髄疾患、特発性肺線維症、特発性血小板減少性紫斑病、ＩｇＡ腎症、封入体筋炎、間質性膀胱炎、若年性特発性関節炎 別名 若年性関節リウマチ、川崎病、ランバート－イートン筋無力症候群、白血球破砕性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、線状ＩｇＡ病、ルポイド肝炎 別名 自己免疫性肝炎、マジード症候群、顕微鏡的大腸炎、顕微鏡的多発血管炎、ミラー－フィッシャー症候群、混合性結合組織病、斑状強皮症、ムッハ－ハーベルマン病 別名 急性痘瘡状苔癬状粃糠疹、多発性硬化症、重症筋無力症、筋炎、メニエール病、ナルコレプシー、視神経脊髄炎、神経性筋強直症、眼部瘢痕性類天疱瘡、オプソクローヌスミオクローヌス症候群、オード甲状腺炎、回帰性リウマチ、ＰＡＮＤＡＳ（小児自己免疫性溶連菌感染関連性精神神経障害）、傍腫瘍性小脳変性症、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）、パリーロンバーグ症候群、扁平部炎、パーソネージ－ターナー症候群、尋常性天疱瘡、静脈周囲脳脊髄炎、悪性貧血、ＰＯＥＭＳ症候群、結節性多発性動脈炎、リウマチ性多発筋痛、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、進行性炎症性神経障害、赤芽球癆、壊疽性膿皮症、ラスムッセン脳炎、レイノー現象、ライター症候群、再発性多発軟骨炎、下肢静止不能症候群、後腹膜線維症、リウマチ熱、統合失調症、シュミット症候群、シュニッツラー症候群、強膜炎、血清病、シェーグレン症候群、脊椎関節症、スティッフパーソン症候群、スティル病、亜急性細菌性心内膜炎（ＳＢＥ）、スザック症候群、スウィート症候群、シデナム舞踏病、交感性眼炎、高安動脈炎、側頭動脈炎、血小板減少症、トロサ－ハント症候群、横断性脊髄炎、潰瘍性大腸炎、未分化脊椎関節症、じんま疹様血管炎、白斑、ウェゲナー肉芽腫症が含まれる。

【0168】

Ｖ．併用療法
本明細書に記載されている抗ＢＴＬＡ抗体は、がんまたは自己免疫性障害を処置する、追加の治療剤と組み合わせて使用され得る。

【0169】

がんを処置する併用療法の一部として使用され得る例示的な治療剤には、例えば、放射線、マイトマイシン、トレチノイン、リボムスチン、ゲムシタビン、ビンクリスチン、エトポシド、クラドリビン、ミトブロニトール、メトトレキセート、ドキソルビシン、カルボコン、ペントスタチン、ニトラクリン、ジノスタチン、セトロレリクス、レトロゾール、ラルチトレキセド（ｒａｌｔｉｔｒｅｘｅｄ）、ダウノルビシン、ファドロゾール、ホテムスチン、サイマルファシン、ソブゾキサン、ネダプラチン、シタラビン、ビカルタミド、ビノレルビン、ベスナリノン、アミノグルテチミド、アムサクリン、プログルミド、エリプチニウム酢酸塩、ケタンセリン、ドキシフルリジン、エトレチナート、イソトレチノイン、ストレプトゾシン、ニムスチン、ビンデシン、フルタミド、ドロゲニル（ｄｒｏｇｅｎｉｌ）、ブトシン（ｂｕｔｏｃｉｎ）、カルモフール、ラゾキサン、シゾフィラン、カルボプラチン、ミトラクトール、テガフール、イホスファミド、プレドニムスチン、ピシバニール、レバミゾール、テニポシド、インプロスルファン、エノシタビン、リスリド、オキシメトロン、タモキシフェン、プロゲステロン、メピチオスタン、エピチオスタノール、ホルメスタン、インターフェロン－アルファ、インターフェロン－２ アルファ、インターフェロン－ベータ、インターフェロン－ガンマ、コロニー刺激因子－１、コロニー刺激因子－２、デニロイキンジフチトクス、インターロイキン－２、黄体形成ホルモン放出因子およびその同族受容体に異なる結合および増加または減少した血清半減期を呈し得る前述の薬剤のバリエーションが含まれる。

【0170】

がんを処置する併用療法の一部として使用され得る追加クラスの薬剤は、免疫チェックポイント阻害剤である。例示的な免疫チェックポイント阻害剤には、１つまたは複数の（ｉ）細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４（ＣＴＬＡ４）、（ｉｉ）プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ１）、（ｉｉｉ）ＰＤＬ１、（ｉｖ）ＬＡＧ３、（ｖ）Ｂ７－Ｈ３、（ｖｉ）Ｂ７－Ｈ４、および（ｖｉｉ）ＴＩＭ３を阻害する薬剤、例えば、イピリムマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、およびアテゾリズマブが含まれる。

【0171】

がんを処置する併用療法の一部として使用され得るさらに他の薬剤は、非チェックポイント標的を標的にするモノクローナル抗体（例えば、ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ）および非細胞傷害性薬剤（例えば、チロシンキナーゼ阻害剤）である。

【0172】

抗がん剤のさらに他のカテゴリーには、例えば：（ｉ）ＡＬＫ阻害剤、ＡＴＲ阻害剤、Ａ２Ａアンタゴニスト、塩基除去修復阻害剤、Ｂｃｒ－Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤、ブルトンチロシンキナーゼ阻害剤、ＣＤＣ７阻害剤、ＣＨＫ１阻害剤、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤、ＤＮＡ－ＰＫ阻害剤、ＤＮＡ－ＰＫおよびｍＴＯＲ両方の阻害剤、ＤＮＭＴ１阻害剤、ＤＮＭＴ１阻害剤プラス２－クロロ－デオキシアデノシン、ＨＤＡＣ阻害剤、ヘッジホッグシグナル伝達経路阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ＪＡＫ阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＭＥＬＫ阻害剤、ＭＴＨ１阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤、ホスホイノシチド３－キナーゼ阻害剤、ＰＡＲＰ１およびＤＨＯＤＨ両方の阻害剤、プロテアソーム阻害剤、トポイソメラーゼ－ＩＩ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、およびＷＥＥ１阻害剤から選択される阻害剤；（ｉｉ）ＯＸ４０、ＣＤ１３７、ＣＤ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＴＮＦＲＳＦ２５、またはＩＣＯＳのアゴニスト；および（ｉｉｉ）ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＧＭ－ＣＳＦ、およびＧ－ＣＳＦから選択されるサイトカインが含まれる。

【0173】

本発明の抗体はまた、原発病巣からのがんの外科的な除去の補助として使用され得る。

【0174】

自己免疫性または炎症性障害を処置する、自己免疫性または炎症性障害の進行を遅延させる、自己免疫性または炎症性障害の再発を防止する、または自己免疫性または炎症性障害の症状を緩和するための、本明細書で開示される抗ＢＴＬＡ抗体との併用療法の一部として使用され得る例示的な治療剤には、当技術分野において公知のおよび本明細書に記載されている任意の抗炎症性および／または免疫抑制療法が含まれる。幾つかの実施形態では、抗炎症性および／または免疫抑制療法には、限定されないが、メトトレキセート、シクロスポリンＡ（例えば、シクロスポリンマイクロエマルジョンを含む）、タクロリムス、コルチコステロイド、スタチン、インターフェロンベータ、非ステロイド性抗炎症剤、および６－ＭＰ（メルカプトプリン、６－メルカプトプリン、またはＰｕｒｉｎｅｔｈｏｌとも呼ばれる）が含まれる。

【0175】

幾つかの実施形態では、本明細書で開示される抗ＢＴＬＡ抗体との組合せのための、抗炎症性および／または免疫抑制療法には、限定されないが、ＴＯＰＫ阻害剤（例えば、ＯＴＳ９６４（（Ｒ）－９－（４－（１－（ジメチルアミノ）プロパン－２－イル）フェニル）－８－ヒドロキシ－６－メチルチエノ［２，３－ｃ］キノリン－４（５Ｈ）－オン）（Ｏｎｃｏｔｈｅｒａｐｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ））、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、アキシチニブ、ダサチニブ、イコチニブ（ｉｃｏｔｉｎｉｂ））、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、トポテカン）、スフィンゴシン－１－リン酸受容体アゴニスト（例えば、フィンゴリモド、ＫＲＰ－２０３）、抗Ｔ細胞免疫グロブリン（例えば、ＡｔＧａｍ）、抗ＩＬ－２受容体抗体（例えば、ダクリズマブ）、アミド（ＣＴＸ）、イホスファミド（ＩＦＯ）、アドリアマイシン（ＡＤＭ）、ダウノルビシン（ＤＮＲ）、ビンクリスチン（ＶＣＲ）、ビンブラスチン（ＶＢＬ）、エトポシド（ＶＰ１６）、フェルメール（Ｖｕｍｏｎ）、カルボプラチン（ＣＢＰ）、タクロリムス、シロリムス、エベロリムス、アザチオプリン、ブレキナール、レフルノミド、ＬＥＡ－２９Ｙ、抗ＣＤ３抗体（例えば、ＯＫＴ３）、アスピリン、Ｂ７－ＣＤ２８ブロッキング分子（例えば、ベラタセプト、アバタセプト）、ＣＤ４０－ＣＤ１５４ブロッキング分子（抗ＣＤ４０抗体）、アセトアミノフェン、イブプロフェン、ナプロキセン、ピロキシカム、および抗炎症ステロイド（例えば、プレドニゾロンまたはデキサメサゾン）が含まれる。

【0176】

幾つかの実施形態では、本明細書で開示される抗ＢＴＬＡ抗体との組合せのための、抗炎症性および／または免疫抑制療法には、例えば、ＴＮＦ－アルファ、ＣＦＡ、インターロイキン－１（ＩＬ－１）、プロテアソーム阻害剤、ＮＦκＢ阻害剤、抗炎症薬物、組織プラスミノゲンアクチベーター（ＴＰＡ）、リポ多糖、紫外光、およびＴＮＦアルファシグナル伝達経路の細胞内メディエータの投与による、自己免疫細胞のアブレーションが含まれる。そのような薬剤は、ＴＮＦアルファ受容体シグナル伝達の下流の経路を中断することまたはＴＮＦアルファ受容体結合の下流で作用することによって自己反応性リンパ球のアポトーシスを誘導する（Baldwin et al., Ann. Rev. Immunol.(1996) 12:141; Baltimore, Cell (1996) 87:13）。

【0177】

幾つかの実施形態では、本明細書で開示される抗ＢＴＬＡ抗体は、自己免疫疾患を処置するまたはそうでなければ緩和する外科的な方法とあわせて使用される。

【0178】

例えば、多発性硬化症（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｅｌｅｒｏｓｉｓ）の症状を処置する、多発性硬化症の進行を遅延させる、多発性硬化症の再発を防止する、多発性硬化症の症状を緩和するために、ＢＴＬＡアゴニストとして作用する抗ＢＴＬＡ抗体を、多発性硬化症のための任意の現存の治療、例えば、コルチコステロイド（例えば、経口のプレドニゾンおよび静脈内のメチルプレドニゾロン）、血漿分離交換法、オクレリズマブ、ベータインターフェロン、グラチラマーアセテート、ジメチルフマル酸塩、フィンゴリモド、フェリフルノミド（Ｆｅｒｉｆｌｕｎｏｍｉｄｅ）、ナタリズマブ、アレムツズマブおよび／またはミトキサントロンと組み合わせてもよい。

【0179】

抗体および追加の治療剤の量ならびに投与の相対的なタイミングは、所望の組み合わせ治療効果を達成するために、選択され得る。例えば、併用療法を、そのような投与を必要とする患者に投与する場合、組合せ中の治療剤、または治療剤を含む医薬組成物または組成物は、例えば、連続的に、同時に、一緒に、同時期に等の任意の順序で投与され得る。さらに、例えば、多重特異的結合タンパク質は、追加の治療剤が、その予防的または治療効果を発揮する時間の間に投与されてもよく、逆もまた同様である。

【0180】

ＶＩ．医薬組成物および投与
本開示はまた、本明細書に記載されている治療的な有効量の抗ＢＴＬＡ抗体を含有する医薬組成物／製剤を特徴とする。組成物は、種々の薬物デリバリーシステムにおける使用のために製剤化され得る。１つまたは複数の生理的に許容される賦形剤または担体も、適切な製剤のための組成物に含まれ得る。本開示における使用のための適切な製剤は、Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Philadelphia, Pa., 17th ed., 1985に見出される。薬物デリバリーのための方法の簡潔な総説に関して、例えば、Langer (Science 249:1527-1533, 1990)を参照されたい。

【0181】

本開示の抗体は、凍結乾燥された製剤または水性液体（ｌｉｑｕｉｄ ａｑｕｅｏｕｓ）の医薬製剤に存在し得る。本明細書で目的の水性担体は、薬学的に許容され（ヒトへの投与に関して安全かつ毒性ではない）、液体製剤の調製に有用なものである。例示的な担体には、注射用滅菌水（ＳＷＦＩ）、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、ｐＨ緩衝液（例えば、リン酸緩衝生理食塩水）、滅菌生理食塩液、リンゲル液またはデキストロース液が含まれる。

【0182】

本開示の抗体は、タンパク質およびリオプロテクタントを含む、凍結乾燥された製剤に存在し得る。リオプロテクタントは、糖、例えば、二糖類であってもよい。ある特定の実施形態では、リオプロテクタントは、スクロースまたはマルトースである。凍結乾燥された製剤には、１つまたは複数の緩衝剤、界面活性剤、充填剤、および／または保存剤も含まれ得る。

【0183】

本発明の医薬組成物中の有効成分の実際の用量レベルは、患者に対して毒性ではなく、特定の患者、組成物、および投与モードについて所望の治療応答を達成するのに効果的である有効成分の量が得られるように変動し得る。成人に対して投与ごとに０．１ｍｇから１ｇの範囲および好ましくは０．５ｍｇから５００ｍｇの範囲の活性抗体の範囲で投与されてもよい。あるいは、患者の用量は、患者のおおよその体重または表面領域に対して調整されてもよい。適切な用量を決定する他の因子には、処置または防止される疾患または状態、疾患の重症度、投与の経路、および患者の年齢、性別および医学的な状態が含まれ得る。処置に対する適切な用量を決定するのに必要な計算のさらなる改良は、特に、本明細書で開示される用量情報およびアッセイに鑑み、当業者によって日常的になされている。用量はまた、適切な用量反応データとあわせて使用して用量を決定する公知のアッセイを使用することを通して決定され得る。個々の患者の用量は、疾患の進行をモニタリングしながら、調整されてもよい。患者において標的可能なコンストラクトまたは複合体の血液レベルは、用量が、有効濃度に達するまたは維持するよう調整される必要があるかどうかを確かめるために測定されてもよい。薬理ゲノミクスを使用して、どの標的可能なコンストラクトおよび／または複合体、およびその用量が、所与の個体にとって効果的である可能性が最も高いかを決定してもよい（Schmitz et al., Clinica Chimica Acta 308: 43-53, 2001; Steimer et al., Clinica Chimica Acta 308: 33-41, 2001）。

【0184】

用量は、１または複数の回数を毎日、毎週、毎月もしくは毎年、またはさらに２から２０年ごとに１回与えてもよい。当業者は、体液または組織中の標的可能なコンストラクトまたは複合体の滞留時間および濃度の測定に基づいて投薬の反復率を容易に推定することができる。本発明の投与は、カテーテルを通した灌流によるまたは直接的な病巣内注射による、静脈内、動脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、胸膜内、クモ膜下腔内、腔内であり得る。これは、１または複数の回数を毎日、１または複数の回数を毎週、１または複数の回数を毎月、および１または複数の回数を毎年投与され得る。

【実施例】

【0185】

本発明をここで一般に記載したが、本発明のある特定の態様および実施形態の例示の目的のためのみに含まれ、本発明を限定することが意図されていない、以下の実施例への参照によってより明確に理解されることになる。
［実施例１］

【0186】

抗ＢＴＬＡ抗体は組換えＢＴＬＡに結合する
抗ＢＴＬＡ抗体のヒトまたはカニクイザルＢＴＬＡへの結合を、ＥＬＩＳＡによってアッセイした。プレート（３８４ウェル）を、２０μｌ ＢＴＬＡ（ＥＣＤ）－ＨＩＳ（１μｇ／ｍｌ）で一晩４℃でコーティングした。ウェルを、次にＰＢＳで洗浄し、次に５５μｌブロッキング緩衝液で１ｈ、室温でブロッキングした。ウェルを、次にＰＢＳで洗浄し、本発明の抗ＢＴＬＡ抗体ならびに抗ＢＴＬＡ抗体４Ｃ７および８Ｄ５（米国特許第８，５６３，６９４号に記載）、およびヒトＩｇＧ対照を、様々な濃度（６７、２２、７．４、２．５、０．８、０．３、０．０９、０．０３、０．０１、０．００４、０．００１ｎＭ）でウェルに加え、１ｈ、室温でインキュベートした。ウェルを次にＰＢＳで洗浄し、２０μｌの希釈したＨＲＰコンジュゲート二次抗ヒトＩｇＧ抗体を次にウェルに加え、室温で４５分間インキュベートした。過剰なＨＲＰコンジュゲート二次抗体を除去した後、基質溶液をウェルに加えて化学発光シグナルを発生させた。光子放出をＯｍｅｇａｓｔａｒプレートリーダーを使用して決定し、相対光単位（ＲＬＵ）を計算した。図１は、ヒトＢＴＬＡに対する抗ＢＴＬＡ抗体１３－Ｆ７Ａの例示的な結合プロファイルを、４Ｃ７および８Ｄ５抗体と比較して示す。ヒトＩｇＧを陰性対照として使用した。表４は、ＥＬＩＳＡによって測定された様々な抗ＢＴＬＡ抗体のヒトおよびカニクイザルＢＴＬＡへの結合ＥＣ５０を要約する。

【0187】

【表4】

［実施例２］

【0188】

抗ＢＴＬＡ抗体は細胞に発現されるＢＴＬＡに結合する
ヒトまたはカニクイザルＢＴＬＡを発現するＨＥＫ２９３細胞を使用して、抗ＢＴＬＡ抗体のＢＴＬＡへの結合を評価した。様々な濃度の抗ＢＴＬＡ抗体（６７、２２、７．４、２．５、０．８、０．３、０．０９、０．０３、０．０１、０．００４、および０．００１ｎＭ）を、細胞と１時間、室温でインキュベートした。フルオロフォアコンジュゲート抗ヒトＩｇＧ二次抗体を次に加え、細胞をフローサイトメトリーによって分析した。図２Ａ－２Ｂは、ヒトまたはカニクイザルＢＴＬＡを発現するＨＥＫ２９３細胞に対する抗ＢＴＬＡ抗体１３－Ｆ７Ａの例示的な結合プロファイルを示す。対照ＨＥＫ２９３細胞（図２Ｃ）と比較して、１３－Ｆ７ＡはヒトＢＴＬＡおよびカニクイザルＢＴＬＡの両方に結合する。表５は、ＦＡＣＳによって測定された様々な抗ＢＴＬＡ抗体のヒトおよびカニクイザルＢＴＬＡへの結合ＥＣ５０を要約する。

【0189】

【表5】

［実施例３］

【0190】

抗ＢＴＬＡ抗体はＢＴＬＡ／ＨＶＥＭ相互作用を阻害する
ＥＬＩＳＡに基づく生体機能アッセイを使用して、ＢＴＬＡ／ＨＶＥＭ相互作用における抗ＢＴＬＡ抗体の効果をアッセイした。３８４ウェルＥＬＩＳＡプレートの各ウェルを、２０μｌの５μｌ／ｍｌヒトＨＶＥＭ－ラットＩｇＧ２ａで３７℃で１ｈｒ（または一晩、４℃）コーティングした。コーティング後、プレートをＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ａｑｕａｍａｘ２０００プレート洗浄機で洗浄溶液（０．０５％ Ｔｗｅｅｎ－２０を含有するＰＢＳ）で２回洗浄し、次にブロッキング溶液（３％ ＢＳＡを含有するＰＢＳ）で１ｈｒ、室温（ＲＴ）でブロッキングした。ブロッキングステップの間、１μｇ／ｍｌヒトＢＴＬＡ－ヒトＦｃまたは０．５μｇ／ｍｌカニクイザルＢＴＬＡ－ヒトＦｃを、抗ＢＴＬＡ抗体、４Ｃ７、８Ｄ５またはヒトＩｇＧ２対照と様々な濃度（６７、２２、７．４、２．５、０．８、０．３、０．０９、０．０３、０．０１、０．００４、０．００１ｎＭ）で混合した。ブロッキングステップの完了後、プレートをプレート洗浄機で２回洗浄した。２０μｌタンパク質／抗体混合物を次にプレートに加え、１ｈｒ、ＲＴでインキュベートした。結合していない物質を廃棄し、プレートをプレート洗浄機で４回洗浄した。２０μｌ二次抗体（抗ヒトＦｃ－ＨＲＰ）を次に各ウェルに加え、４５分間、ＲＴでインキュベートした。結合していない物質を廃棄し、プレートをプレート洗浄機で８回洗浄した。２０μｌ化学発光基質（ｃｈｅｍｉｌｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）を次に各ウェルに加え、ルミネセンスをゲイン３６００で読み取り、相対光単位（ＲＬＵ）を計算した。図３は、抗ＢＴＬＡ抗体１３－Ｆ７Ａの例示的なプロファイルを示す。１３－Ｆ７Ａは、４Ｃ７と類似の程度までヒトＨＶＥＭとのヒトＢＴＬＡ相互作用を阻害した。しかしながら、８Ｄ５およびヒトＩｇＧ対照は、ヒトＢＴＬＡとＨＶＥＭとの間の相互作用にわずかな効果を有する。表６は、ヒトＢＴＬＡとＨＶＥＭとの間の相互作用ならびにカニクイザルＢＴＬＡとＨＶＥＭとの間の相互作用を阻害する異なる抗ＢＴＬＡ抗体に関するＩＣ５０の概要を示す。

【0191】

【表6】

［実施例４］

【0192】

抗ＢＴＬＡ抗体はＢＴＬＡに高親和性で結合する
ヒトおよびカニクイザルＢＴＬＡに対する抗ＢＴＬＡ抗体の結合親和性を、Ｂｉｏ－Ｌａｙｅｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ（ＦｏｒｔｅＢＩＯからのＯｃｔｅｔ（登録商標）システム）によって測定した。１０μｇ／ｍｌの各抗ＢＴＬＡ抗体を、抗ヒト－Ｆｃ（ＡＨＣ）捕捉を介してバイオセンサーチップ表面に固定化した。ヒトまたはカニクイザルＢＴＬＡを、ＰＢＳに希釈し、１６６．７ｎＭから６．１７ｎＭの濃度で３倍連続希釈に負荷した。結合曲線を、Ｏｃｔｅｔ（登録商標）システムによって提供される分析ソフトウェアを使用して１：１ 相互作用モデルに当てはめた。図４は、抗ＢＴＬＡ抗体１３－Ｆ７Ａと異なる濃度（１６６．７ｎＭ、５５．６ｎＭ、１８．５ｎＭおよび６．１７ｎＭ）のヒトＢＴＬＡとの間での例示的な会合および解離曲線を示す。表７は、Ｂｉｏ－Ｌａｙｅｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙによって測定したヒトおよびカニクイザルＢＴＬＡに対する異なる抗ＢＴＬＡ抗体に関する結合解離定数（Ｋ_Ｄ）の概要を示す。

【0193】

【表7】

［実施例５］

【0194】

抗ＢＴＬＡ抗体はＴ細胞機能を調節する
Ｔ細胞機能における抗ＢＴＬＡ抗体の効果をアッセイした。末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を、ヒトドナーのヘパリン処理した全血から密度勾配遠心分離により単離した。ＰＢＭＣを完全ＲＰＭＩ１６４０（ＲＰＭＩ１６４０、１０％ ＦＣＳ、ｌ－グルタミン、ペニシリン、およびストレプトマイシン）中に１×１０^６個／ｍｌで再懸濁し、１００μｌの細胞を９６ウェル細胞培養クラスタープレートにウェルごとに播種した。１ｎｇ／ｍｌブドウ球菌エンテロトキシンＢ（ＳＥＢ）を、各々の抗ＢＴＬＡ抗体と一緒に、ウェルに加えた。細胞を３７℃、５％ ＣＯ_２下で４８時間でインキュベートし、上清を収集した。上清中のＩＬ－２の濃度を、抗ＩＬ２捕捉抗体（Ｒ＆ＤシステムＭＡＢ６０２）を使用するＥＬＩＳＡにより測定した。

【0195】

図５Ａ－５Ｆは、異なる抗ＢＴＬＡ抗体およびＳＥＢの存在下での初代Ｔ細胞からの放出ＩＬ－２の用量反応曲線を示す。ヒトＩｇＧ２およびＩｇＧ４をアッセイに対する対照として使用した、その理由は、この実施例では、抗ＢＴＬＡ抗体がヒトＩｇＧ２からのＦｃドメインを含み、８Ｄ５および４Ｃ７が各々ヒトＩｇＧ４からのＦｃドメインを含むからである。抗ＢＴＬＡ抗体１６－Ｉ２０Ａ、１５－Ｃ１９Ａおよび１６－Ｈ１６Ａは、Ｔ細胞によるＳＥＢ誘導性ＩＬ－２分泌を増大させ、したがって、ＢＴＬＡアンタゴニストとして働いた。加えて、それらは、４Ｃ７抗体と比較して、より高い最大のアンタゴニスト活性を提示した。試験した各抗体のＥＣ５０を計算し、１６－Ｉ２０Ａが類似のＥＣ５０、すなわち、４Ｃ７抗体と比較して、Ｔ細胞機能のアンタゴナイズに効力を提示した。抗ＢＴＬＡ抗体１２－Ｉ８Ａ、８－Ｍ２３Ａおよび１３－Ｆ７Ａは、Ｔ細胞によるＳＥＢ誘導性ＩＬ－２分泌を抑制し、したがって、ＢＴＬＡアゴニストとして働いた。

【0196】

参照による組み込み
本明細書に参照される特許文書および科学論文の各々の全開示は、全ての目的のために参照により組み込まれる。

【0197】

等価物
本発明は、その精神または不可欠な特徴から逸脱しない限り、他の特殊な形態でも具現化することができる。したがって、前述の実施形態は、本明細書に記載されている本発明を限定せず、全ての点で例示的であると考えられる。したがって、本発明の範囲は、前述の記載ではなく、添付の特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲の等価の意味および範囲内に入る全ての変化は、本発明に包合されることが意図される。

【図1】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図3】

【図4】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図5D】

【図5E】

【図5F】

【配列表】

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【国際調査報告】