特表 2022-529990 １，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトールとの併用治療レジメン

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-06-27

(54)【発明の名称】１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトールとの併用治療レジメン

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/047 20060101AFI20220620BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20220620BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20220620BHJP

   A61K 31/4188 20060101ALI20220620BHJP

   A61K 31/69 20060101ALI20220620BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20220620BHJP

   A61K 51/00 20060101ALI20220620BHJP

【ＦＩ】

A61K31/047

A61P35/00

A61P43/00 121

A61K31/4188

A61K31/69

A61K31/506

A61K51/00

A61P43/00 111

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021562308

(86)(22)【出願日】2020-04-22

(85)【翻訳文提出日】2021-12-13

(86)【国際出願番号】 US2020029350

(87)【国際公開番号】W WO2020219566

(87)【国際公開日】2020-10-29

(31)【優先権主張番号】62/837,761

(32)【優先日】2019-04-24

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522158317

【氏名又は名称】エレイソン ファーマシューティカルズ，エルエルシー

【氏名又は名称原語表記】ＥＬＥＩＳＯＮ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ， ＬＬＣ

【住所又は居所原語表記】１００ Ｏｖｅｒｌｏｏｋ Ｃｅｎｔｅｒ， ２ｎｄ Ｆｌｏｏｒ， Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ， ＮＪ ０８５４０， ＵＳＡ

(74)【代理人】

【識別番号】100189131

【弁理士】

【氏名又は名称】佐伯 拓郎

(74)【代理人】

【識別番号】100182486

【弁理士】

【氏名又は名称】中村 正展

(74)【代理人】

【識別番号】100147289

【弁理士】

【氏名又は名称】佐伯 裕子

(72)【発明者】

【氏名】マグワイヤ，パトリック

(72)【発明者】

【氏名】ジョンストン，ロバート

(72)【発明者】

【氏名】レーダーマン，セス

【テーマコード（参考）】

4C085

4C086

4C206

【Ｆターム（参考）】

4C085LL18

4C086AA01

4C086AA02

4C086BC50

4C086CB05

4C086DA43

4C086GA07

4C086GA08

4C086GA12

4C086MA02

4C086MA04

4C086NA05

4C086ZB26

4C086ZC20

4C086ZC75

4C206AA01

4C206AA02

4C206CA05

4C206MA01

4C206MA02

4C206MA04

4C206NA05

4C206ZB26

4C206ZC75

(57)【要約】

脳腫瘍に罹患している対象を治療する方法が本明細書に記載され、前記方法は、治療有効量の１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトール（ＤＢＤ）の結晶性多形を投与することを含み、相乗的な第２の癌治療との併用療法を含む。結晶性ＤＢＤ多形に感受性のある対象をスクリーニングし、感受性を示す対象を治療する方法も開示される。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

癌に罹患している対象を治療する方法であって、治療有効量の１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトール（ＤＢＤ）の結晶性多形を投与することを含む方法。

【請求項2】

前記癌が、腺癌、肉腫、皮膚癌、黒色腫、膀胱癌、脳癌、乳癌、子宮癌、卵巣癌、前立腺癌、または肺癌から選択される、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記脳癌が、星状細胞腫、髄膜腫、乏突起神経膠腫、混合神経膠腫および上衣腫から選択される、請求項２に記載の方法。

【請求項4】

前記脳腫瘍が多形性膠芽腫である、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記対象がヒトである、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項6】

テモゾロミド、放射線、ＡＢＴ－８８８、ボルテゾミブ、イマチニブ、パノビノスタット、またはＢＩＢＲ－１５３２から選択される第２の癌治療を投与することをさらに含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記放射線療法が、ガントリベースのシステム、ロボット放射線外科システム、皮下インプラント、または放射性同位体を含む放射線送達システムによって提供される、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

前記ＤＢＤの結晶性多形が、前記第２の癌治療と相乗的に作用する、請求項６に記載の方法。

【請求項9】

ａ．前記対象から神経膠腫細胞を入手すること、または入手されたこと、
ｂ．前記ＤＢＤの結晶性多形に対する感受性についてインビトロで前記神経膠腫細胞を試験すること、または試験されたこと、および
ｃ．工程（ｂ）で感受性を示した前記対象に前記ＤＢＤ結晶性多形を投与することをさらに含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

治療有効量の前記ＤＢＤの結晶性多形を投与することを含む、癌を有する患者を治療するために使用される組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

結晶性の１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトール（ジブロモズルシトールまたはＤＢＤ）多形を含むＤＢＤを特定の抗癌成分（ｍｏｉｅｔｙ）と組み合わせて投与することによる癌の治療方法は、安全性および有効性が向上したことが示されている。

【背景技術】

【0002】

米国において癌は、心臓病に次いで２番目に多い死因である。癌の診断および治療における最近の進歩にもかかわらず、癌が早期に発見されれば手術および放射線療法で治癒し得るが、転移性疾患のための現在の薬物療法のほとんどが緩和的であり、長期の治癒をもたらすことはほとんどない。新しい化学療法が市場に参入しているにもかかわらず、耐性腫瘍の治療における一次療法として、二次および三次療法として、単独療法または既存の薬剤との組み合わせで有効な新しい薬物の必要性が引き続き求められている。

【0003】

癌を治療するために使用される可能性のある化学療法剤の一例は、１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトール（ジブロモズルシトールまたはＤＢＤ）である。ＤＢＤの結晶構造は、ＳｉｍｏｎおよびＳａｓｖａｒｉによって、Ａｃｔａ．Ｃｒｙｓｔ．（１９７１）Ｂ２７，８０６－８１５において初めて公開された。Ｋｅｌｌｎｅｒ ｅｔ ａｌ．は、ＤＢＤが選択的に強力な抗腫瘍効果を有することを報告した。Ｋｅｌｌｎｅｒ ｅｔ ａｌ．、「１，６－Ｄｉｂｒｏｍｏ－１，６－Ｄｉｄｅｏｘｙ－Ｄｕｌｃｉｔｏｌ：Ａ Ｎｅｗ Ａｎｔｉｔｕｍｏｒａｌ Ａｇｅｎｔ、」Ｎａｔｕｒｅ（１９６７）２８；２１３（５０７４）：４０２－３。しかしながら、これらの研究では、ＤＢＤは、ズルシトールを気体臭化水素で飽和した水性臭化水素酸で、０℃未満の温度で処理することによって調製された。このプロセスは、ＤＢＤを製造する安全な方法とはもはや考えられていない。さらに、ＤＢＤは難溶性であることが文献に報告されている。

【0004】

本発明は、より安全かつ有効なプロファイルを有する新規の癌治療を改善および開発するため、この継続的な必要性を対処するものである。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0005】

【非特許文献1】Ｓｉｍｏｎ ａｎｄ Ｓａｓｖａｒｉ、Ａｃｔａ．Ｃｒｙｓｔ．（１９７１）Ｂ２７，８０６－８１５

【非特許文献2】Ｋｅｌｌｎｅｒ ｅｔ ａｌ．、「１，６－Ｄｉｂｒｏｍｏ－１，６－Ｄｉｄｅｏｘｙ－Ｄｕｌｃｉｔｏｌ：Ａ Ｎｅｗ Ａｎｔｉｔｕｍｏｒａｌ Ａｇｅｎｔ、」Ｎａｔｕｒｅ（１９６７）２８；２１３（５０７４）：４０２－３

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0006】

この概要では、さらに詳細な説明で後述される概念の選択を、簡略化して紹介する。この概要では、特許請求される主題の重要な特徴または本質的な特徴を特定することを意図しておらず、特許請求される主題の範囲を決定する際の補助として使用されることも意図していない。

【0007】

本明細書には、結晶性ＤＢＤ多形を含む、１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトールの、癌を治療するために特定の抗癌成分と組み合わせた使用が記載される。ＤＢＤは、３０７．９８ｇ／ｍｏｌの分子量、分子式Ｃ_６Ｈ_１２Ｂｒ_２Ｏ_４、および以下の構造を有する：

【化1】

。

【0008】

具体的には、好ましい実施形態は、癌腫瘍に罹患している対象を治療する方法を含み、前記方法は、治療有効量の１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトール（ＤＢＤ）の結晶性多形を投与することを含む。本明細書に記載されるように治療され得るそのような癌の例には、腺癌、肉腫、皮膚癌、黒色腫、膀胱癌、脳癌、乳癌、子宮癌、卵巣癌、前立腺癌、または肺癌が含まれるが、これらに限定されない。

【0009】

好ましい実施形態では、脳癌は、星状細胞腫、髄膜腫、乏突起神経膠腫、混合神経膠腫および上衣腫から選択される。さらに好ましい実施形態では、脳腫瘍は多形性膠芽腫である。

【0010】

さらに好ましい実施形態では、対象はヒトである。

【0011】

さらに好ましい実施形態では、方法は、テモゾロミド、放射線、ＡＢＴ－８８８、ボルテゾミブ、イマチニブ、パノビノスタット、またはＢＩＢＲ－１５３２から選択される第２の癌治療を投与することをさらに含む。そのような実施形態では、ＤＢＤの結晶性多形は、第２の癌治療と相乗的に作用する。さらなる実施形態では、請求項６に記載の方法は、放射線療法が、ガントリベースのシステム、ロボット放射線外科システム、皮下インプラント、または放射性同位体を含む放射線送達システムによって提供される。

【0012】

他の好ましい実施形態では、方法は、（Ａ）対象から神経膠腫細胞を入手すること、または入手したこと、（ｂ）ＤＢＤの結晶性多形に対する感受性についてインビトロで神経膠腫細胞を試験すること、または試験したこと、および（ｃ）工程（ｂ）で感受性を示した対象にＤＢＤの結晶性多形を投与することをさらに含む。この方法を実施することにより、低減できる可能性のある用量で活性が向上し有効性が増強し結果として安全性の改善および副作用の軽減につながる、ＤＢＤの結晶性多形と組み合わせる薬剤を特定し得る。

【0013】

実施形態は、添付の図面の図に例として（限定ではなく）示し、図中、同様の参照符号は同様の要素を示す。

【図面の簡単な説明】

【0014】

【図1】図１はＴ９８細胞培養物からのヒストグラムであって、結晶性ＤＢＤ多形処理の５日後および８日後の、１００％生存率とみなす非処理細胞と比較した生細胞の百分率を示している。

【図2】図２はＵ３７３細胞培養物からのヒストグラムであって、結晶性ＤＢＤ多形処理の５日後および８日後の、１００％生存率とみなす非処理細胞と比較した生細胞の百分率を示している。

【発明を実施するための形態】

【0015】

本発明のある特定の実施形態を本明細書に示し説明しているが、そのような実施形態が例としてのみ提供されることは、当業者には自明のことである。本発明から逸脱することなく、多数の変形、変更、および置換が当業者により想到される。本明細書に記載の実施形態に対する様々な代替形態が、状況によって、本発明の実施において使用されることを理解すべきである。以下の特許請求の範囲が本発明の範囲を定義し、これらの特許請求の範囲内の方法および構造、ならびにそれらの均等物がそれによって包含されることが意図される。

【0016】

本明細書で使用されるセクションの見出しは、構成上の目的のためだけであり、記載された主題を限定するものと解釈されるべきではない。これらに限定されないが、特許、特許出願、説明書、書籍、マニュアル、および論文を含む、本出願で引用されたすべての文書または文書の一部は、任意の目的のためにその全体が参照により本明細書に明示的に組み込まれる。

【0017】

定義
別段の定義がなされていない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、ペプチド化学、細胞培養、化学および生化学の分野などの当業者によって通常理解される同じ意味を有する。標準的な技術が、分子生物学、遺伝学および生化学の方法に使用され（Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ ｅｄ．，２００１，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９９）４ｔｈ ｅｄ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．を参照のこと）、これらは参照により本明細書に組み込まれる。

【0018】

本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈上他に明確に指示されない限り、複数の指示対象を含む。例えば、「化学療法剤（単数）」への言及は、２つ以上のそのような化学療法剤または複数のそのような化学療法剤の混合物を含む。

【0019】

本明細書で使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という用語、または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」もしくは「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などのその変形は、任意の列挙された整数（例えば、特徴、要素、特性、性質、方法／プロセス工程または制限）または整数群（例えば、複数の特徴、要素、特性、性質、方法／プロセス工程または制限）を含むが、他の任意の整数または整数群を除外しないことを示すと解釈されるべきである。したがって、本明細書で使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は包括的であり、追加の列挙されていない整数または方法／プロセス工程を排除しない。

【0020】

本明細書で提供される組成物および方法のいずれかの実施形態では、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」または「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」で置き換えられ得る。「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という語句は、本明細書では、特定の整数（もしくは複数の整数）または複数の工程、ならびに特許請求される発明の特徴または機能に実質的に影響を及ぼさないものを要求するために使用される。本明細書で使用される場合、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）」という用語は、列挙された整数（例えば、特徴、要素、特性、性質、方法／プロセス工程または制限）または整数群（例えば、複数の特徴、要素、特性、性質、方法／プロセス工程または制限）のみの存在を示すために使用される。

【0021】

本明細書で使用される場合、「ＤＢＤ」は、Ａｃｔａ．Ｃｒｙｓｔ．（１９７１）Ｂ２７，８０６－８１５の文献に報告されている結晶構造を有する１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトールを指す。

【0022】

「結晶性ＤＢＤ多形」または「結晶性多形」または「ＤＢＤの結晶性多形」という用語は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０１６／２０５２９９号および米国特許第２０１８／０３６２４２７号に記載されている、１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトールの結晶形態を指す。

【0023】

「対象」という用語は、癌に罹患している個体に関して本明細書で使用される場合、哺乳動物および非哺乳動物を包含する。好ましい実施形態では、対象はヒトである。

【0024】

本明細書で使用される「有効量」、「治療有効量」または「薬学的有効量」という用語は、投与されている少なくとも１つの薬剤または化合物の、癌を治療するのに十分な量を指す。その結果は、そのような疾患の徴候、症状、もしくは原因の軽減および／もしくは緩和、または生物系における任意の他の所望の変化である。例えば、治療的使用のための「有効量」は、疾患の臨床的に有意な軽減をもたらすために必要な、本明細書に開示される化合物を含む組成物の量である。任意の個別のケースにおける適切な「有効」量は、用量漸増研究などの技術を使用して決定される。さらに、「有効量」、「治療有効量」または「薬学的有効量」は、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症なしに、合理的なベネフィット／リスク比に見合って、対象（例えば、ヒト）の組織に接触させて使用するのに、健全な医学的判断の範囲内で適した化合物、材料、組成物、および／または剤形を意味する。各担体、賦形剤などはまた、製剤の他の成分と適合するという意味で「許容可能」でなければならない。

【0025】

本発明では、「腫瘍」または「癌」は、悪性癌細胞の異常な増殖に起因して、対象において集合的に組織の塊を形成する不均一な細胞の集団として定義される。したがって、「腫瘍」は、正常細胞または「非癌性」細胞および「癌」細胞または「癌性」細胞の両方を含む。

【0026】

本明細書で使用される場合、「および／または」は、他のものの有無にかかわらず、２つの指定された特徴または構成要素のそれぞれの具体的な開示として解釈されるべきである。例えば、「Ａおよび／またはＢ」は、それぞれが個別に記載されているかのように、各（ｉ）Ａ、（ｉｉ）Ｂ、ならびに（ｉｉｉ）ＡおよびＢの具体的な開示として解釈されるべきである。

【0027】

本明細書で使用される場合、「約」という用語は、記載された量におおよそ、ほとんど、大体またはほぼ等しい量、または等しい量、例えば、状態量プラス／マイナス約５％、約４％、約３％、約２％または約１％を指すために使用される。

【0028】

本出願は、文脈上別段の要求がない限り、上記の態様および実施形態のいずれかの互いの組み合わせをすべて開示していることを理解されたい。同様に、本出願は、文脈上別段の要求がない限り、好ましい特徴および／または任意選択の特徴のすべての組み合わせを単独で、または他の態様のいずれかと共に開示する。

【実施例】

【0029】

本発明を、以下の実施例を参照してさらに説明する。以下は単なる例示にすぎず、本発明の範囲内で、細部の変更が行われ得ることが理解されよう。

【0030】

以下の実施例では、以下の略語を使用する。
定義および略語
・Ａ２，５ ＡＢＴ－８８８濃度２，５μＭ
・Ａ１０ ＡＢＴ－８８８濃度１０μＭ
・Ｂ１ ボルテゾミブ濃度１ｎＭ
・Ｂ２，５ ボルテゾミブ濃度２，５ｎＭ
・Ｂ５ ＢＩＢＲ１５３２濃度５μＭ
・Ｂ１０ ＢＩＢＲ１５３２濃度１０μＭ
・ＣＴＧ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（生存率アッセイ）
・ＤＢＤ ジブロモズルシトール
・ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド（薬物用溶媒、対照として使用）
・ＧＢＭ 多形性膠芽腫
・ＧＢＭ（ｒｅｃ） 再発性多形性膠芽腫
・ＧＳＣ’ｓ 神経膠腫無血清幹様細胞培養物
・ＩＣ５０ 最大半量阻害濃度
・Ｉ４ イマチニブ濃度４μＭ
・Ｉ１５ イマチニブ濃度１５μＭ
・ＭＧＭＴ Ｏ６－メチルグアニン－メチルトランスフェラーゼ
・ＮＴ 非処理対照細胞培養物
・Ｐ５ パノビノスタット濃度５ｎＭ
・Ｐ２０ パノビノスタット濃度２０ｎＭ
・ＲＬＵ 相対発光量
・ＲＴＸ 放射線療法
・ＴＭＺ テモゾロミド
・Ｔ５０ ＴＭＺ濃度５０μＭ
・Ｔ１００ ＴＭＺ濃度１００μＭ
・１／２ ＩＣ５０ ＩＣ５０の半分濃度
・３Ｇｙ ３グレイ放射線
・６Ｇｙ ６グレイ放射線

【0031】

概要
結晶性ＤＢＤ多形を、細胞生存率を低減させるＤＢＤの能力を特定し、他の化合物との相乗効果を特定する試みで、２つのヒト神経膠腫細胞株を使用したインビトロシステムにて研究した。以下の研究実施例１～３を実施した。以下の結果を提示する。
ａ．他の細胞研究に使用することができる多形のＤＢＤ薬物の適切なインビトロ濃度範囲の実証（実施例１）；
ｂ．２０種を超える患者由来無細胞培養物の５日目および８日目のＩＣ５０（最大半量阻害濃度）値の決定（実施例２）；および
ｃ．２０種の初代無血清細胞培養物のパネルにおいて、ＤＢＤ（ＩＣ５０用量の１／２、およびＩＣ５０用量）の効果が、ＴＭＸ（テモゾロミド）、放射線療法、または他の標的療法との組み合わせによって増強されるかどうかの決定（実施例３）。

【0032】

実施例１：２つの神経膠腫細胞株を使用した、結晶性ＤＢＤ多形のＤＢＤの適切な濃度範囲の決定
患者由来の無血清神経膠腫細胞培養物において効果を実証する結晶性ＤＢＤ多形の濃度範囲はまだ知られていないため、２つの神経膠腫細胞株について広範囲の濃度で試験した。これらの株を、５００細胞／ウェルの希釈度で、９６ウェルプレートに三連で播種した。ＡＴＰベースのＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）（ＣＴＧ）アッセイを５日目および８日目に実施して、細胞増殖、および細胞生存率の低下をもたらすＤＢＤの効率を監視した。図１および２は、使用された２つの神経膠腫細胞株、Ｔ９８およびＵ３７３のヒストグラム結果を示す。

【0033】

具体的には、ヒストグラムを百分率で正規化し、この場合非処理細胞は１００％の生存率を有する。０．１μＭおよび０．３μＭの２つの最低濃度は、効果がなかった。さらに、３００μＭのＤＢＤ用量で処理したほとんどすべての細胞は、生存不可能である。しかしながら、１～１００μＭの濃度範囲を選択し、次に患者由来の２０種の無血清細胞培養物で試験した。

【0034】

実施例２：患者由来の２０種の初代無血清細胞培養物のパネルにおける結晶性ＤＢＤ多形のＤＢＤのＩＣ５０値の決定
患者由来ＧＳＣ（神経膠腫無血清幹細胞様培養物）の増殖に対する結晶性ＤＢＤ多形の効果を評価するために、２０種の培養物に対して用量反応アッセイを実施した。

【0035】

結晶性ＤＢＤ多形のＩＣ５０を決定するために、１μＭ～１００μＭの濃度を適用した。用量依存的な生存率の低下が見出され、線形回帰分析を使用してＩＣ５０値を計算することができた。５日目および８日目の両方の分析からの、２０種の細胞培養物に対するＤＢＤのすべてのＩＣ５０値（μＭ）の概要を表１に示す。具体的には、表１を見ると、患者由来ＧＳＣのこのパネルでは、大きく変動した様々なＩＣ５０値が見られる。さらに、ＭＧＭＴプロモーターメチル化状態とＩＣ５０値の量との間に相関は見られない。（ＭＧＭＴメチル化状態は予後診断であり得、いくつかの研究では、放射線療法およびテモゾロミドを併用投与された、切除不能多形性膠芽腫患者の生存率を有意に改善した。）

【0036】

しかしながら、時間の経過と共に、５～８日の間に、細胞の薬物に対する感受性が高くなり、より低いＩＣ５０値が観察される。例えば、５日目のＩＣ５０は４１．７７であるが、８日目のＩＣ５０が１１．９４に低下した、ＧＳ１０２ｐｅｒｉを参照されたい。特定の化学療法剤に対する腫瘍細胞の応答性の低下の既知の機構は、（１）薬剤の細胞への取り込みの減少または細胞からの排出の増加、（２）細胞内での薬剤の不活性化の増加、（３）アルキル化剤によって生じるＤＮＡ損傷の修復の強化、および（４）ＤＮＡ損傷に応答して細胞毒性をもたらす細胞機構の不存在、を含むので、これは驚くべきことである。したがって、記載された化学療法剤の１つを組み合わせたＤＢＤ多形の治療に対して、細胞殺滅に対する癌細胞の感受性の増加を観察することは驚くべきことである。

【表1】

【0037】

実施例２：２０種の初代無血清細胞培養物のパネルにおける、ＤＢＤ多形（ＩＣ５０用量の１／２およびＩＣ５０用量）の効果が、ＴＭＺ（テモゾロミド、神経膠腫に対する治療に使用される化学療法アルキル化剤）、ＲＴＸ（放射線療法）または他の任意の化合物と組み合わせて増強されるかどうかの決定
結晶性ＤＢＤ多形治療を化学療法、放射線療法および標的阻害剤と組み合わせて、結晶性ＤＢＤ多形形態が、従来の治療法の有効性を増強することができるか、より新しい「標的」療法と組み合わせた場合に有効性を増強することができるか、またはこの処理に対する培養物（のサブセット）の感受性を高めるかどうかを決定した。

【0038】

したがって、培養物を以下で処理した。
ａ．ＩＣ５０および１／２ ＩＣ５０用量（５日目に決定）での結晶性ＤＢＤ多形；および
ｂ．２つの異なる濃度での、テモゾロミド、放射線療法、ＡＢＴ－８８８（ＰＡＲＰ（ポリＡＤＰ－リボースポリメラーゼ）阻害剤）、ボルテゾミブ（プロテアソーム阻害剤）、イマチニブ（Ｂｃｒ－Ａｂｌ、ＰＤＧＦおよびｃ－ＫＩＴ受容体チロシンキナーゼ阻害剤）、パノビノスタット（汎ＨＤＡＣ（ヒストンデアセチラーゼ阻害剤）またはＢＩＢＲ１５３２（テロメラーゼ阻害剤）のいずれか。

【0039】

表２（５日目）および表３（８日目）は、すべての治療の組み合わせについて、使用した２０種すべての細胞培養物の増強係数（最も有効な単独療法の生存率を、テモゾロミドまたは放射線療法と組み合わせた生存率で割ったもの）を示す。いくつかのケースにおいて、単独療法テモゾロミド、放射線、ＡＢＴ－８８８、ボルテゾミブ、イマチニブ、パノビノスタットまたはＢＩＢＲ１５３２と比較して、結晶性ＤＢＤ多形処理の効果（細胞生存率の低下）が見られた。

【0040】

「ヒートマップ」（ヒートマップ＝データ値が様々な色として表示される表形態によるデータの表示）は、表のセル内の「より濃い灰色」が、より大きい整数値を表し、データの視覚化をより容易にする。データセルが「濃い」ほど、両方の療法の併用が、最も効果的な単独療法と比較してより効果的である。表２および表３に示されるように、イマチニブおよびパノビノスタットの両方が、全体として最も高い増強係数を有する。

【表2】

【表3】

【0041】

要約および結論
治療薬を含む化学成分（ｍｏｉｅｔｙ）は、異なる結晶構造を得るために合成し得る。多くの場合、これらの異なる「多形」は、その結晶構造によって、異なる物理化学的特性を有し得る。

【0042】

物理化学的特性の変化により、多形はまた異なる治療プロファイルを有し得、ヒトでの治療的使用の際に送達される化合物の安全性および有効性を変更し得る。これは、他のアジュバントまたは併用薬および療法との多形の使用に影響を及ぼすかもしれない。これは、腫瘍学的状態のための併用療法において特に重要である。

【0043】

提示された方法および結果は、患者由来神経膠腫細胞培養物におけるインビトロ治療用量範囲を特定し、国際公開第２０１６／２０５２９９号および米国特許第２０１８／０３６２４２７号に記載されているように、結晶性ＤＢＤ多形で処置した場合、これらの効果がＭＧＭＴ状態によって影響されないことを実証した。

【0044】

さらに、他の併用療法に関して、ＤＢＤ多形による治療は、別のアルキル化剤であるテモゾロミド（５０％）および放射線治療（３０％）と組み合わせた場合に細胞毒性効果を増強した。

【0045】

より新しい標的療法（後述）と組み合わせた場合、ＤＢＤ多形とより新しい標的療法との併用は、インビトロでの患者由来細胞研究において増強した有効性が示された。具体的には、標的薬物の選択をＤＢＤと組み合わせて、２０種の患者由来細胞培養物のパネルにおいて試験した。この選択は、悪性ヒト神経膠芽腫の初発および継続的な成長における最も重要な経路、例えば、以下を網羅した。
ａ．ｂｃｒ／ａｂｌ、ｃ－ｋｉｔおよびｐｄｇｆＲチロシンキナーゼ
ｂ．ＨＤＡＣ
ｃ．テロメラーゼ阻害
ｄ．プロテアソーム阻害
ｅ．ＤＮＡ修復（ＰＡＲＰ）阻害

【0046】

これらの結果（ほとんどの場合、高い増強係数）は、チロシンキナーゼ阻害剤イマチニブを使用して、ＨＤＡＣ阻害（パノビノスタット）と、Ｒａｓ／ＭａｐＫ経路、Ｓｒｃ／Ｐａｘ／Ｆａｋ／Ｒａｃ経路、ＰＩ／ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ＢＣＬ－２経路およびＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路の阻害とを組み合わせて（Ｂｃｒ－Ａｂｌ経路の下流効果）達成された。

【0047】

実施例３：国際公開第２０１６／２０５２９９号（米国特許第２０１８０３６２３２７号）開示の組み込み
国際公開第２０１６／２０５２９９号（米国特許第２０１８０３６２３２７号）のパラグラフ［００７－０１０］に記載されているように、ＤＢＤ多形は、３０７．９８ｇ／ｍｏｌの分子量および分子式Ｃ_６Ｈ_１２Ｂｒ_２Ｏ_４を有する。

【0048】

一態様では、本明細書に記載される１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトールの結晶性多形は、２θ±０．１°における１９．５９°（１００，００）および２４．３８０°（７９，５２）および３１．２６０°（８，３２）および３４．５００°（２５，５６）および３４．８１０°（２２，８３）および３９．２６０°（２３，６３）のピークを特徴とする。さらなる実施形態では、そのような結晶性多形は、２θ±０．１°において、１９．５９°（１００，００）および２４．３８０°（７９，５２）および３１．２６０°（８，３２）および３４．５００°（２５，５６）および３４．８１０°（２２，８３）および３９．２６０°（２３，６３）から選択される、少なくとも２つのピークをさらに特徴とする。さらなる実施形態では、そのような結晶性多形は、２θ±０．１°において、１９．５９°（１００，００）および２４．３８０°（７９，５２）および３１．２６０°（８，３２）および３４．５００°（２５，５６）および３４．８１０°（２２，８３）および３９．２６０（２３，６３）から選択される、少なくとも３つのピークをさらに特徴とする。さらなる実施形態では、そのような結晶性多形は、２θ±０．１°において、１９．５９°（１００，００）および２４．３８０°（７９，５２）および３１．２６０°（８，３２）および３４．５００°（２５，５６）および３４．８１０°（２２，８３）および３９．２６０°（２３，６３）から選択される、少なくとも４つのピークをさらに特徴とする。さらなる実施形態では、そのような結晶性多形は、２θ±０．１°において、１９．５９°（１００，００）および２４．３８０°（７９，５２）および３１．２６０°（８，３２）および３４．５００°（２５，５６）および３４．８１０°（２２，８３）および３９．２６０°（２３，６３）から選択される、少なくとも５つのピークをさらに特徴とする。

【0049】

またさらなる実施形態では、結晶性多形は、国際公開第２０１６／２０５２９９号（米国特許第２０１８０３６２３２７号）の図１に示されるＸ線粉末回折パターンと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。さらなる実施形態では、結晶性多形は、国際公開第２０１６／２０５２９９号（米国特許第２０１８０３６２３２７号）の図２に示されるＸ線粉末回折パターンと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。またさらなる実施形態では、結晶性多形は、国際公開第２０１６／２０５２９９号（米国特許第２０１８０３６２３２７号）の表１に記載されるＸ線粉末回折パターンと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。またさらなる実施形態では、結晶性多形は、文献に報告されている９８°のベータ角と比較して９６°のベータ角を示す。

【0050】

ある関連する態様では、本明細書に記載される１，６－ジブロモ－１，６－ジデオキシ－ズルシトールの結晶性多形は、示差走査熱量測定によって決定される場合、吸熱開始点が約１８４．４^ｏＣ、ピークが約１９１^ｏＣであることを特徴とする。さらなる実施形態では、結晶性多形は、国際公開第２０１６／２０５２９９号（米国特許第２０１８０３６２３２７号）の図３および／または図４に示される示差走査熱量測定パターンと実質的に同じ示差走査熱量測定パターンを特徴とする。

参考文献
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【図1】

【図2】

【国際調査報告】