特表 2022-530339 インテグリンα１０および侵攻性癌型

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-06-29

(54)【発明の名称】インテグリンα１０および侵攻性癌型

(51)【国際特許分類】

   C07K 16/28 20060101AFI20220622BHJP

   C07K 16/46 20060101ALI20220622BHJP

   C12N 5/09 20100101ALI20220622BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20220622BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20220622BHJP

   A61K 51/10 20060101ALI20220622BHJP

   A61K 49/00 20060101ALI20220622BHJP

   A61K 38/05 20060101ALI20220622BHJP

   A61K 31/704 20060101ALI20220622BHJP

   A61K 38/12 20060101ALI20220622BHJP

   A61K 38/02 20060101ALI20220622BHJP

   A61P 35/04 20060101ALI20220622BHJP

   A61K 31/537 20060101ALI20220622BHJP

   G01N 33/531 20060101ALI20220622BHJP

   G01N 33/574 20060101ALI20220622BHJP

   A61K 38/07 20060101ALI20220622BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20220622BHJP

   A61K 31/405 20060101ALI20220622BHJP

【ＦＩ】

C07K16/28 ZNA

C07K16/46

C12N5/09

C12N15/13

A61K39/395 Y

A61K51/10 200

A61K49/00

A61K38/05

A61K31/704

A61K38/12

A61K38/02

A61P35/04

A61K39/395 E

A61K39/395 T

A61K31/537

G01N33/531 A

G01N33/574 A

G01N33/574 D

A61K38/07

A61K47/68

A61K31/405

【審査請求】未請求

【予備審査請求】有

(21)【出願番号】P 2021560972

(86)(22)【出願日】2020-04-15

(85)【翻訳文提出日】2021-12-02

(86)【国際出願番号】 EP2020060582

(87)【国際公開番号】W WO2020212416

(87)【国際公開日】2020-10-22

(31)【優先権主張番号】19169233.4

(32)【優先日】2019-04-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

２．ＴＲＩＴＯＮ

(71)【出願人】

【識別番号】522021343

【氏名又は名称】タルギンタ エービー

(74)【代理人】

【識別番号】100114775

【弁理士】

【氏名又は名称】高岡 亮一

(74)【代理人】

【識別番号】100121511

【弁理士】

【氏名又は名称】小田 直

(74)【代理人】

【識別番号】100202751

【弁理士】

【氏名又は名称】岩堀 明代

(74)【代理人】

【識別番号】100208580

【弁理士】

【氏名又は名称】三好 玲奈

(74)【代理人】

【識別番号】100191086

【弁理士】

【氏名又は名称】高橋 香元

(72)【発明者】

【氏名】ルンドグレン アーケランド，エヴィー

(72)【発明者】

【氏名】ケミラスカ マソウミ，カタルジーナ

(72)【発明者】

【氏名】ファン，シャオリ

(72)【発明者】

【氏名】トーレン，マチルダ

【テーマコード（参考）】

4B065

4C076

4C084

4C085

4C086

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA93X

4B065AC20

4B065BB19

4B065BB40

4B065CA46

4C076AA95

4C076CC27

4C076CC41

4C076EE41

4C076EE59

4C076FF70

4C084AA02

4C084BA14

4C084BA17

4C084BA23

4C084BA41

4C084CA04

4C084DA32

4C084DA33

4C084NA13

4C084ZB26

4C085AA13

4C085AA14

4C085AA16

4C085AA26

4C085AA27

4C085BB11

4C085EE01

4C085HH03

4C085HH11

4C085KA03

4C085KA04

4C085KA05

4C085KA27

4C085KA29

4C085LL18

4C086AA01

4C086AA02

4C086BC13

4C086CB22

4C086EA10

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA13

4C086ZB26

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA72

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA28

4H045FA74

(57)【要約】

本発明は、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、ならびに転移癌を含む侵攻性癌型を治療するための組成物であって、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片を含む組成物に関する。本発明はまた、該侵攻性癌型を診断および治療する方法に関する。本発明はまた、該侵攻性癌型に罹患した個体の生存率を予測する方法に関する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体またはその抗原結合断片はインテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合し、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される侵攻性癌型の治療および／または予防に用いられる抗体またはその抗原結合断片。

【請求項2】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該侵攻性乳癌が、三重陰性乳癌および炎症性乳癌から成る群から選択される、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項3】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該三重陰性乳癌が、基底細胞様１型乳癌、基底細胞様２型乳癌、クローディン低乳癌、化生性乳癌（ＭＢＣ）、高インターフェロン型乳癌、免疫調節型乳癌、間葉型乳癌、間葉系幹細胞様乳癌、管腔アンドロゲン受容体型乳癌および不安定乳癌から成る群から選択される、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項4】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該侵攻性肺癌が、扁平上皮型肺癌、肺腺癌、大細胞肺癌および小細胞肺癌から成る群から選択される、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項5】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該侵攻性前立腺癌が小細胞神経内分泌癌（ＳＣＮＣ）である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項6】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該侵攻性膵癌が神経内分泌腫瘍である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項7】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該侵攻性膵癌および／または神経内分泌腫瘍がグレードＩ、グレードＩＩまたはグレードＩＩＩの膵癌である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項8】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該インテグリンα１０ポリペプチドが悪性細胞の表面および／または腫瘍関連細胞の表面で発現する、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項9】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体またはその断片である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項10】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体が非ヒト抗体、キメラ抗体、二重特異性抗体、ヒト化抗体またはヒト抗体である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項11】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体がマウスモノクローナル抗体である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項12】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体がヒトモノクローナル抗体である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項13】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体がＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＥおよびＩｇＭから成る群から選択されるアイソタイプである、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項14】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体が：
（ａ）アクセッション番号ＤＳＭ ＡＣＣ２５８３として、Ｄｅｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄ Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ ＧｍｂＨに寄託されているハイブリドーマ細胞株によって生成するモノクローナル抗体；
または
（ｂ）アクセッション番号ＤＳＭ ＡＣＣ２５８３として、Ｄｅｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄ Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ ＧｍｂＨに寄託されているハイブリドーマが産生するモノクローナル抗体が結合するエピトープと同一のエピトープに対する結合に関して競合する抗体；
または
（ｃ）インテグリンα１０ポリペプチド鎖の細胞外Ｉドメインに特異的に結合可能な（ａ）もしくは（ｂ）の断片
である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項15】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体または抗原結合断片が：
（ａ）配列番号４のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｈ１；
（ｂ）配列番号５のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｈ２；
および
（ｃ）配列番号６のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｈ３、
を含む重鎖可変領域；
および／または
（ｄ）配列番号７のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｌ１；
（ｅ）配列番号８のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｌ２；
および
（ｆ）配列番号９のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｌ３、
を含む軽鎖可変領域；
あるいは
配列番号４～９のいずれか１つの変異体（改変体）、
を含み、
ここで該変異体は、いずれか１つのアミノ酸が他のアミノ酸に置換されており、ただしそのような変更がたかだか３アミノ酸未満であることが前提であり、例えば、ここで２アミノ酸または１アミノ酸が置換されている、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項16】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体または抗原結合断片が配列番号１０のアミノ酸配列を含む、またはから成る重鎖可変領域を含む、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項17】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体または抗原結合断片が配列番号１１のアミノ酸配列を含む、またはから成る軽鎖可変領域を含む、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項18】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体またはその抗原結合断片が付加的な部分と複合体を形成している、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項19】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該付加的な部分が蛍光色素分子、酵素および放射性トレーサーまたは放射性同位体から成る群から選択される検出可能部分などの検出可能部分を含む、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項20】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該付加的な部分が細胞傷害性部分を含む、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項21】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該細胞傷害性部分が毒素、化学療法剤および放射性物質、またはそれらの組み合わせから成る群から選択される、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項22】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該細胞傷害性部分が毒素である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項23】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該毒素が微小管毒素類、ＤＮＡ毒素類および転写毒素類から選択される群から選択される、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項24】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該微小管毒素類がアウリスタチンを基礎とする毒素類、メイタンシノイドを基礎とする毒素類、ツブリシン類を基礎とする毒素類およびエリブリンから成る群から選択される、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項25】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該転写毒素がＲＮＡポリメラーゼＩＩ阻害物質である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項26】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該転写毒素がドキソルビシン、ドキソルビシン誘導体およびアマニチンから成る群から選択される、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項27】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該転写毒素が志賀毒素および志賀毒素様毒素；Ｉ型リボソーム不活性化蛋白質、ＩＩ型リボソーム不活性化蛋白質およびサポリン、またはそれらの組み合わせから成る群から選択される、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項28】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該Ｉ型リボソーム不活性化蛋白質がトリコサンチンおよび／またはルフィンである、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項29】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該ＩＩ型リボソーム不活性化蛋白質がリシン、凝集素および／またはアブリンである、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項30】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該インテグリンα１０ポリペプチドが、インテグリンα１０ポリペプチドの天然の変異体（改変体）またはインテグリンα１０ポリペプチドのイソ型である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項31】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体が、インテグリンα１０ポリペプチドを発現する細胞の細胞死を誘導することができる、および／または増殖を阻害することができる、および／または増生を阻害することができる、および／または遊走を阻害することができる、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項32】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該細胞が悪性細胞および／または腫瘍関連細胞である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項33】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該悪性細胞または腫瘍関連細胞が、癌関連線維芽細胞（ＣＡＦ）、間質細胞、幹細胞および／または幹細胞様細胞である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項34】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該インテグリンα１０ポリペプチドがインテグリンα１０β１ヘテロ二量体の一部である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項35】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該治療が予防的、改善的または治癒的である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項36】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該対象の腫瘍の侵攻性癌細胞にインテグリンα１０ポリペプチドが検出されることにより該治療が開始されるものである、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項37】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで癌の放射線療法および／または外科的除去と組み合わせて、該抗体またはその抗原結合断片をそれが必要な個体に投与する、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項38】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで癌の放射線療法および／または外科的除去に先だって該抗体またはその抗原結合断片をそれが必要な個体に投与する、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項39】

前記の請求項のいずれか１項に記載の用途の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで癌の放射線療法および／または外科的除去後に、該抗体またはその抗原結合断片をそれが必要な個体に投与する、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項40】

抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該抗体またはその抗原結合断片がインテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合し、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される侵攻性癌の診断に用いられる、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項41】

請求項４０に記載の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで同一種類の健常および／または良性組織に観察されるインテグリンα１０抗原のレベルと同一レベルであるか、またはより高いレベルを示す細胞を該癌が含む、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項42】

請求項４０の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで同一組織種の癌のタイプではあるが、診断される癌のタイプと比較して低侵攻性の癌のタイプに観察されるインテグリンα１０抗原のレベルと同一またはより高いレベルを示す細胞を該癌が含む、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項43】

侵攻性癌を治療する方法であって、ここで該侵攻性癌型が、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌から成る群から選択される、あるいは該侵攻性癌型が転移癌であり、該方法がインテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する薬学的有効量の抗体またはその抗原結合断片をそれが必要な対象に投与することを含む、方法。

【請求項44】

対象において侵攻性癌細胞を検出する方法であって、該方法が：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が該組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程；および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した該発現レベルを対照レベルと比較する工程、
を含み、
ここで該対照レベルが、単離した試料と同一組織種の健常および／または良性細胞に観察される抗原の発現レベルの平均値であり、
ここで対照レベルより高い抗原の発現レベルは、対象において侵攻性癌型が存在することの指標であり、ここで該侵攻性癌型が侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【請求項45】

対象において侵攻性癌細胞を検出する方法であって、該方法が：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）任意に、癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が該組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意に、インテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程、
を含み、
ここで癌形態を有する１個または複数個の細胞が存在することおよびインテグリンα１０抗原を発現することの組み合わせは、対象において侵攻性癌型が存在することの指標であり、ここで該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【請求項46】

対象において侵攻性癌型を診断する方法であって、該方法が：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が該組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程；および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが抗原発現レベルの平均値である、工程、
を含み、
ここで対照レベルよりも高い抗原発現レベルは、試料中に侵攻性癌型が存在することの指標であり、それによって対象の侵攻性癌型を診断するが、ここで該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択されるか、あるいは該侵攻性癌型のいずれかの転移癌である、方法。

【請求項47】

対象において侵攻性癌型を診断する方法であって、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）任意に、癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が試料中に存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意に、インテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程；
を含み、
ここで癌形態を有する１個または複数個の細胞が存在することおよびインテグリンα１０抗原を発現することの組み合わせは、試料中に侵攻性癌型が存在することの指標であり、それによって対象の侵攻性癌型を診断するが、ここで該侵攻性癌型が侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【請求項48】

対象の三重陰性乳癌腫瘍試料を分類する方法であって、該方法は：
（ａ）癌細胞を含むことが疑われる対象の乳房組織を提供する工程；
（ｂ）ＥＲ陰性、ＰＲ陰性かつＨＥＲ２陰性であると特徴づけられる乳癌細胞を単離する工程；
（ｃ）単離した細胞におけるインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原の発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性乳房組織に観察される抗原発現レベルの平均値である、工程；
を含み、
ここで対照レベルより高い乳癌細胞の抗原発現レベル、およびＥＲ陰性、ＰＲ陰性およびＨＥＲ２陰性である発現状態は、基底細胞様三重陰性乳癌または管腔型三重陰性乳癌の指標であり、それにより三重陰性乳癌腫瘍試料を基底細胞様三重陰性乳癌腫瘍または管腔型三重陰性乳癌腫瘍に属するものとして分類する、方法。

【請求項49】

対象において侵攻性癌型の予後を判定する方法であって、該方法が：
（ａ）対象の癌腫瘍組織を提供する工程；
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が試料中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程；
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが、試料と同一の組織種の健常および／または良性組織に観察される抗原発現レベルの平均値である、工程；
（ｅ）インテグリンα１０抗原の発現レベルが対照レベルよりも高いときに、侵攻性癌型の予後が不良であると判定する工程、
を含み、
ここで該侵攻性癌型が、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【請求項50】

対象において侵攻性癌型の予後を判定する方法であって、該方法が：
（ａ）対象の癌腫瘍組織を提供する工程；
（ｂ）任意に、癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が試料中に存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意に、インテグリンα１０抗原の発現レベルを判定し、判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが、試料と同一の組織種の健常および／または良性組織に観察される抗原発現レベルの平均値である工程；
（ｅ）癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在し、かつインテグリンα１０抗原が発現している、
および／または
インテグリンα１０抗原の発現レベルが対照レベルよりも高い場合に、該侵攻性癌型の予後が不良であると判定する工程、
を含むが、
ここで該侵攻性癌型が、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【請求項51】

請求項４９～５０のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該予後が総生存率または無再発生存率である、方法。

【請求項52】

請求項４４～５１のいずれか１項に記載の方法であって、ここでインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が試料中に存在するか否かを分析する該工程が組織および／または組織試料のイメージングを含む、方法。

【請求項53】

請求項４４～５２のいずれか１項に記載の方法であって、ここでインテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程が組織および／または組織試料のイメージングを含む、方法。

【請求項54】

侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌から成る群から選択される侵攻性原発癌の転移を予防する方法であって、該方法が治療有効量の抗体またはその抗原結合断片をそれが必要な患者に投与することを含み、ここで該抗体がインテグリンα１０ポリペプチドに特異的である、方法。

【請求項55】

請求項５４に記載の方法であって、ここで原発癌が検出された場合に該抗体または抗原結合断片が投与される、方法。

【請求項56】

少なくとも１個の癌細胞のインテグリンα１０媒介性シグナル伝達を阻害する方法であって、該方法が少なくとも１個の癌細胞をインテグリンα１０ポリペプチドに特異的な有効量の抗体またはその抗原結合断片に接触させることを含み、ここで該少なくとも１個の癌細胞は、侵攻性乳癌細胞、侵攻性肺癌細胞、侵攻性前立腺癌細胞、侵攻性膵癌細胞、および転移性腫瘍細胞から成る群から選択される、方法。

【請求項57】

少なくとも１個の癌細胞の細胞機能を阻害する方法であって、該方法が少なくとも１個の癌細胞をインテグリンα１０ポリペプチドに特異的な有効量の抗体または抗原結合断片に接触させることを含み、ここで該少なくとも１個の癌細胞は、侵攻性乳癌細胞、侵攻性肺癌細胞、侵攻性前立腺癌細胞、侵攻性膵癌細胞、および転移性腫瘍細胞から成る群から選択される、方法。

【請求項58】

請求項４４～５７のいずれか１項に記載の方法であって、ここでインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む該抗原が細胞表面上に発現する、方法。

【請求項59】

少なくとも１個の癌細胞の細胞機能を阻害する、請求項５７～５８のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該少なくとも１個の癌細胞が侵攻性および／または転移性腫瘍に存在し、阻害することが、
（ａ）少なくとも１個の癌細胞の増生を阻害すること；
（ｂ）少なくとも１個の癌細胞の自己複製を阻害すること；
（ｃ）少なくとも１個の癌細胞の足場非依存性増殖を阻害すること；
（ｄ）少なくとも１個の癌細胞の遊走を阻害すること；
（ｅ）少なくとも１個の癌細胞の浸潤を阻害すること；
（ｆ）少なくとも１個の癌細胞の生存を阻害すること；
（ｇ）少なくとも１個の癌細胞の接着を阻害すること；
および／または
それらの組み合わせ、
から成る群から選択される、方法。

【請求項60】

少なくとも１個の癌細胞の細胞機能を阻害する、請求項５７～５９のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該少なくとも１個の癌細胞が侵攻性および／または転移性腫瘍に存在し、少なくとも１個の癌細胞の細胞機能を阻害することが：
（ａ）侵攻性および／または転移性腫瘍の増殖を阻害すること；
（ｂ）侵攻性および／または転移性腫瘍の増生を阻害すること；
（ｃ）侵攻性および／または転移性腫瘍の移動を阻害すること；
（ｄ）侵攻性および／または転移性腫瘍の浸潤を阻害すること；
（ｅ）新しい侵攻性および／または転移性腫瘍の広がりを阻害すること；
（ｆ）新しい侵攻性および／または転移性腫瘍の発生を阻害すること；
（ｇ）新しい侵攻性および／または転移性腫瘍の浸潤を阻害すること；
および／または
それらの組み合わせ、
のうちの少なくとも１つである、方法。

【請求項61】

請求項５６～６０のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該少なくとも１個の癌細胞は、インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原の発現レベルが対照レベルよりも高いことによって特徴付けられ、
ここで該対照レベルが該癌細胞と同一組織種の健常および／または良性細胞に観察される該抗原の発現レベルの平均値である、方法。

【請求項62】

請求項４０～６１のいずれか１項に記載の方法または抗体であって、ここで該抗体またはその抗原結合断片が請求項１～３９のいずれか１項に記載されるものである、方法または抗体。

【請求項63】

請求項４３～６２のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法が請求項１～３９のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合断片を該対象に投与することをさらに含む、方法。

【請求項64】

請求項４４～６３のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法がインビトロ法であって、該組織が対象から取得する組織試料である、方法。

【請求項65】

請求項４０に記載の抗体またはその抗原結合断片であって、ここで該診断がインビトロ診断である、抗体またはその抗原結合断片。

【請求項66】

抗体またはその抗原結合断片の用途であって、ここで該抗体はインテグリンα１０ポリペプチドに特異的であり、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される侵攻性癌の治療および／または予防のための薬剤の製造に用いられる、抗体またはその抗原結合断片の用途。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、ならびに転移癌を含む侵攻性癌を治療するための組成物であって、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片を含む組成物に関する。本発明はまた、該侵攻性癌型を診断および治療する方法に関する。本発明はまた、該侵攻性癌型に罹患した個体の生存率を予測する方法に関する。

【背景技術】

【0002】

癌は複雑な疾患であり、動的に発達する細胞外マトリックス（ＥＣＭ）中で進行するが、腫瘍および腫瘍関連細胞はほぼあらゆる面でＥＣＭによって制御される。インテグリンはＥＣＭの構成成分に対する主要な細胞接着受容体であり、１８種のαインテグリン・サブユニットおよび８種のβインテグリン・サブユニットの組み合わせによって形成される２４種類の膜貫通型ヘテロ二量体から成るファミリーである。異なる種類の組織は典型的には、その細胞表面上に特定の組み合わせのインテグリンを発現する。インテグリンの異なる発現パターンが多様な種類の癌に関連付けられている（Ｍｏｓｃｈｏｓら、２００７）。インテグリンαβヘテロ二量体の種類の、利用に応じた切り替えから、インテグリンの異常発現、およびインテグリン・シグナル伝達の下流のエフェクターの構成的活性化ならびに他のシグナル伝達経路との相互作用にいたるまでインテグリン・シグナル伝達の変化は発癌のほぼ全プロセスに関与する。

【0003】

侵攻性癌型は増生速度が速く、および／または離れた部位および他の組織へ急速に転移する腫瘍であるため、浸潤性腫瘍でもあり得る。さらに、侵攻性癌型は通常、生命予後が不良である。

【0004】

組織学的分類にもとづく最も一般的な乳癌亜型分類によれば、最も一般的である組織学的乳癌亜型は浸潤性腺管癌であり浸潤性乳癌の８０％を占め、その次は浸潤性小葉癌であり浸潤性乳癌のおおよそ１０％を占める（Ｘｉａｏｆｅｎｇら、２０１５）。特異的蛋白質マーカーの発現（または発現の欠如）は乳癌の悪性度に関連する（特に、ホルモン受容体の状態［エストロゲン受容体（ＥＲ）およびプロゲステロン受容体（ＰＲ）の発現］ならびにヒト上皮成長因子受容体２（ＨＥＲ２）（Ａｒｐｉｎｏら、２０１５；Ｈａｒｉｒｉら、２０１９）。三重陰性乳癌（ＴＮＢＣ、ＥＲ－／ＰＲ－／ＨＥＲ２－）は侵攻性挙動を示す可能性が高いため、他の乳癌亜型と比較して予後不良となることが多い（Ｒａｋｈａら、２００７；Ｍａｌｏｒｎｉら、２０１２）。ＴＮＢＣが転移すれば、それは肺、肝臓および脳などの主要な内臓器官に至る可能性が高く、最終的には他の亜型に比べ中央値総生存期間が有意に短くなる（Ｂｉａｎｃｈｉｎｉら、２０１６）。ＴＮＢＣは６つの亜型に分類されている：すなわち、基底細胞様（ＢＬ１およびＢＬ２）、免疫調節型（ＩＭ）、間葉型（Ｍ）、間葉系幹細胞様（ＭＳＬ）、および管腔アンドロゲン受容体型（ＬＡＲ）亜型である（Ｍａら、２０１８）。したがって、早期ＴＮＢＣを治療するための最適治療方略を開発することは、ＴＮＢＣによる負担を軽減するために重要である。組織学的分類と分子論的分類の間には重複がある。例えば、浸潤性腺管癌は異なる分子発現プロフィールを有することもあり、三重陰性、ＨＥＲ２陽性、管腔Ａまたは管腔Ｂの可能性がある。三重陰性基底細胞様腫瘍は以下によってさらに特徴付けられる：５０％を超える頻度で変異ＴＰ５３を有すること、ＲＢ１の欠損により増生性が高いこと、ＢＲＣＡ－１変異を有していること、高度に異数性であること、およびサイトケラチン５、６または１７のいずれか１つについて特有の発現があること。ＴＮＢＣに加えて、ほかの侵攻性乳癌型も存在する。炎症性乳癌（ＩＢＣ）は稀であるが侵攻型の乳癌である。ＩＢＣは急速に増殖して広がる傾向があり、その症状は数日あるいはわずか数時間で悪化する。したがって、侵攻性タイプの乳癌の新規標的治療法を開発することが必要であり、その生命予後を改善するためには最も重要なことである。

【0005】

前立腺癌は男性において２番目に多い癌であり、世界全体で４番目に多い癌である。限局性癌または局所癌と診断された患者の５年生存率はほぼ１００％である。しかし、遠隔転移癌と診断された患者の５年生存率は２８％でしかない。健常な前立腺上皮は、管腔上皮細胞、基底細胞、および前立腺全体にわたって散在する小型の構成細胞である神経内分泌（ＮＥ）細胞を含む。大部分の前立腺癌は、基底細胞の欠如、および管腔分化の特徴（腺形成およびアンドロゲン受容体（ＡＲ）および前立腺特異抗原（ＰＳＡ）の発現を含む）を有する悪性腫瘍細胞の制御逸脱した増生によって特徴付けられる腺癌に分類される。興味深いのは、いずれの前立腺腺癌の症例においても小集団（通常～１％）のＮＥ腫瘍細胞を含むことである。腺癌のＮＥ細胞は、多くの重要な特徴が良性前立腺の特徴と共通している。例えば、非ＮＥ管腔型腫瘍細胞とは対照的に、良性前立腺および腺癌のＮＥ細胞はＡＲとＰＳＡを発現しない（Ｅｉｎｓｔｅｉｎら、２０１９）。前立腺上皮悪性腫瘍のうち少数のものは異型であり、導管型腺癌、粘液（膠様）癌、印環細胞癌、および小細胞（神経内分泌）癌（ＳＣＮＣ）などが挙げられる。良性前立腺および前立腺腺癌におけるＮＥ細胞と同様に、ＳＣＮＣの腫瘍細胞はＡＲおよびＰＳＡを発現しない；これは、腺癌とは異なり、このような腫瘍がアンドロゲン産生を止めることによってＡＲ機能を阻害するホルモン療法には反応しないという臨床所見を説明するものである。大部分の前立腺腫瘍とは対照的に、ＳＣＮＣは高度に侵攻性であり、一般的に局所進行性疾患または遠隔転移があり、そのため患者は通常、診断から数ヶ月以内に死亡する（Ｓａａｄら、２０１９）。

【0006】

男性においても女性においても、肺癌は世界の癌死の主要な原因である（ＧＬＯＢＯＣＡＮ、２０１８）。肺に限局性腫瘍を有する患者の５年生存率は５６％である。しかし、ほとんどの患者は後期になって診断されるので、遠隔腫瘍を有する患者の５年生存率は５％でしかない（ＳＥＥＲ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ Ｒｅｖｉｅｗ、２０１５）。組織学的には、肺癌を２つの主要なタイプに分類する：すなわち、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）および非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。これらの腫瘍の大部分はＮＳＣＬＣに分類され約８５％を占め、残り１５％の腫瘍がＳＣＬＣに分類される。ＮＳＣＬＣは不均一な腫瘍群を含み、さらに３つの主要な組織学的亜型に細分される；すなわち、腺癌、扁平上皮癌および大細胞癌である。腺癌および扁平上皮癌は、ＮＳＣＬＣの主要な亜型である。ＳＣＬＣに比して、ＮＳＣＬＣは化学療法および放射線療法に対し比較的非感受性である。近年では、分子亜群を標的とする特異性のより高い治療法によって、期待できる結果が得られている。しかし、バイオマーカーで識別したごく一部の患者のみが治療応答に対して相関を示した（Ｂｏｍｂａｒｄｅｌｌｉら、２０１６）。したがって、他の肺腫瘍と区別して、ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣを早期発見可能な新規バイオマーカー、ならびに新規治療標的が必要である。

【0007】

膵癌は主要な２つの群に分けられ得る：外分泌腫瘍および神経内分泌腫瘍である。外分泌腫瘍は全膵癌の９４％を占め、消化酵素を産生する外分泌細胞から発生する。この群は導管腺癌（全膵癌の９０％を占める最も多いタイプの膵癌）、腺房細胞癌、膵管内乳頭粘液性腫瘍などを含む。神経内分泌腫瘍は島細胞腫ともよばれ、膵癌の６％を占める。膵癌は一般に比較的無症候性に発生し、通常、診断時には進行している。診断されるのが遅く化学療法および放射線療法に対する応答性が不良であるため、膵癌患者の５年生存率は５％未満である（Ｍｉｌｅｎａら、２０１６）。したがって、この侵攻性疾患を診断および治療する新規の方法を開発する必要性は非常に高いのである。

【0008】

肉腫は、複数の組織系譜（脂肪、筋肉、線維、軟骨および骨）に分化し得る間葉由来の細胞から発生する広範な癌のファミリーである。肉腫は癌と診断された全癌および癌関連死の１％を占める。小児期および思春期で有病率が高く、これらの群において肉腫は癌関連死の１９％～２１％を占める。組織学的にも分子論的にも不均一性が高いため、この悪性腫瘍群は特に診断が困難である。癌と比較して、これらの腫瘍は大変稀で通常、限局的に増殖し隣接組織への浸潤が起こる。限局性で早期段階の腫瘍であれば、外科的摘出後の長期生存に関しては良好であるが、この腫瘍は１０年から１５年後でも再発する高リスクがある。軟組織肉腫に対する現在の治療方略としては、外科手術、放射線および化学療法が挙げられるが、毒性とあまり高くない応答性のために限定的である。今のところ５年までの生存率は６０％であり、これは年齢、腫瘍の種類、病期および組織学的悪性度（グレード）を反映するものであるが、転移腫瘍を有するハイリスク患者では生存率がかなり低下して１０％～１７％である。肉腫癌型分類については、軟組織および骨の腫瘍に関するＷＨＯ分類（ＷＨＯ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｒｓ ｏｆ ｓｏｆｔ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｂｏｎｅ、２０１３）に説明がある。

【0009】

したがって、本明細書中、前記したような侵攻性腫瘍の早期診断を可能にする新規手段、ならびに新規治療標的および治療法が必要であり、それによって予後および生存率の改善が可能である。

【発明の概要】

【0010】

意外なことではあったが、本発明者らは、最も高侵攻性の複数の癌型を細胞表面のインテグリンα１０高発現によって特徴付けられることを見いだした。これによって、本発明者らは、癌の罹患が疑われる組織の細胞におけるインテグリンα１０の発現レベルをもとに、個体において侵攻性癌型が存在するか否かを迅速検出することが可能であることを見いだした。したがって、現在の診断手段を用いる場合よりさらに早期において、より特異的な診断が可能であり、このことによって検査中の個体に対して早期介入および予後改善が可能となる。

【0011】

さらに、本発明者らは、インテグリンα１０を侵攻性癌型およびその転移型に対する新規治療標的とした。具体的には、本発明者らは、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片に、該細胞を接触させることによって、侵攻性癌型に属する腫瘍細胞の増殖と遊走を阻害し得ることを明らかにした。インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片を含む好適な抗体薬剤複合体に、腫瘍細胞を接触させることによって、細胞死を誘導することも可能である。さらに、本発明者らは、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片を投与し、該抗体またはその断片に該腫瘍細胞を接触させることによって、腫瘍増殖を低下させることが可能であることも明らかにした。

【0012】

したがって、本開示の一局面は、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される侵攻性癌型の治療および／または予防に用いる抗体またはその抗原結合断片に関するものであり、ここで該抗体またはその抗原結合断片はインテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する。

【0013】

本開示の他の一局面は、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される侵攻性癌の診断に用いられる抗体またはその抗原結合断片に関するものであり、ここで該抗体またはその抗原結合断片はインテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する。

【0014】

本開示のさらなる一局面は、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する薬学的有効量の抗体またはその抗原結合断片を、それを必要とする対象に投与することを含む、侵攻性癌の治療法に関するものであり、ここで該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌から成る群から選択される、あるいは該侵攻性癌型は転移癌である。

【0015】

また本開示のさらなる一局面は、対象において侵攻性癌細胞を検出する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が該組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した該発現レベルを対照レベルと比較する工程；
を含み、
ここで該対照レベルは、単離した試料と同一組織種の健常および／または良性細胞に観察した該抗原の発現レベルの平均値であり、対照レベルよりも高い抗原発現レベルは、対象において侵攻性癌型が存在することの指標であり、ここで該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0016】

本開示のさらなる一局面は、対象において侵攻性癌細胞を検出する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）組織中に癌形態を有する１個または複数個の細胞が存在するか否かを任意に分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が該組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意にインテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程；
を含み、
ここで癌形態を有する１個または複数個の細胞が存在することおよびインテグリンα１０抗原を発現することの組み合わせは、対象において侵攻性癌型が存在することの指標であり、ここで該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0017】

本開示の他の一局面は、対象において侵攻性癌型を診断する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が該組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程；および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが抗原発現レベルの平均値である、工程、
を含み、
ここで対照レベルよりも高い抗原発現レベルは、試料中に侵攻性癌型が存在することの指標であり、それによって対象の侵攻性癌型を診断するが、ここで該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択されるか、あるいは該侵攻性癌型のいずれかの転移癌である。

【0018】

本開示のさらなる一局面は、対象において侵攻性癌型を診断する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを任意に分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が試料中に存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意にインテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程；
を含み、
ここで癌形態を有する１個または複数個の細胞が存在することおよびインテグリンα１０抗原を発現することの組み合わせは、試料中に侵攻性癌型が存在することの指標であり、それによって対象の侵攻性癌型を診断するが、ここで該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0019】

本開示のさらなる一局面は、対象の三重陰性乳癌腫瘍試料を分類する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）癌細胞を含むことが疑われる対象の乳房組織を提供する工程；
（ｂ）ＥＲ陰性、ＰＲ陰性かつＨＥＲ２陰性であると特徴づけられる乳癌細胞を単離する工程；
（ｃ）単離した細胞におけるインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原の発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性乳房組織に観察される抗原発現レベルの平均値である、工程；
を含み、
ここで対照レベルより高い乳癌細胞の抗原発現レベル、およびＥＲ陰性、ＰＲ陰性およびＨＥＲ２陰性である発現状態は、基底細胞様三重陰性乳癌または管腔型三重陰性乳癌の指標であり、それにより三重陰性乳癌腫瘍試料を基底細胞様三重陰性乳癌腫瘍または管腔型三重陰性乳癌腫瘍に属するものとして分類する。

【0020】

一つの実施態様においては、該管腔型三重陰性乳癌は管腔アンドロゲン受容体型三重陰性乳癌である。

【0021】

本開示のさらなる一局面は、対象において侵攻性癌型の予後を判定する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象の癌腫瘍組織を提供する工程；
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が試料中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０抗原の発現レベルを判定する工程；
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが試料と同一組織種の健常および／または良性組織に観察される抗原発現レベルの平均値である、工程；
（ｅ）インテグリンα１０抗原の発現レベルが対照レベルよりも高いときに、侵攻性癌型の予後が不良であると判定する工程、
を含み、
ここで該侵攻性癌型は、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0022】

本開示の他の一局面は、対象において侵攻性癌型の予後を判定する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象の癌腫瘍組織を提供する工程；
（ｂ）癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを任意に分析する工程；
（ｃ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が試料中に存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意にインテグリンα１０抗原の発現レベルを判定し、判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが試料と同一組織種の健常および／または良性組織に観察される抗原発現レベルの平均値である、工程；
（ｅ）癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在し、かつインテグリンα１０抗原が発現している、
および／または
インテグリンα１０抗原の発現レベルが対照レベルよりも高い場合に、侵攻性癌型の予後が不良であると判定する工程；
を含むが、
ここで該侵攻性癌型は、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0023】

本開示のさらなる局面は、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌から成る群から選択される侵攻性原発癌の転移を予防する方法に関するものであり、該方法は治療有効量の抗体またはその抗原結合断片を、それを必要とする患者に投与することを含み、ここで該抗体はインテグリンα１０ポリペプチドに特異的な抗体である。

【0024】

本開示のさらなる一局面は、少なくとも１個の癌細胞のインテグリンα１０媒介性シグナル伝達を阻害する方法に関するものであり、該方法は少なくとも１個の癌細胞に、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的な抗体またはその抗原結合断片を有効量で接触させることを含むが、ここで該少なくとも１個の癌細胞は、侵攻性乳癌細胞、侵攻性肺癌細胞、侵攻性前立腺癌細胞、侵攻性膵癌細胞、および転移性腫瘍細胞から成る群から選択される。

【0025】

また本開示のさらなる一局面は、少なくとも１個の癌細胞の細胞機能を阻害する方法に関するものであり、該方法は少なくとも１個の癌細胞に、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的な抗体または抗原結合断片を有効量で接触させることを含むが、ここで該少なくとも１個の癌細胞は、侵攻性乳癌細胞、侵攻性肺癌細胞、侵攻性前立腺癌細胞、侵攻性膵癌細胞、および転移性腫瘍細胞から成る群から選択される。

【0026】

また本開示のさらなる一局面は、抗体またはその抗原結合断片の用途に関するものであり、ここで該抗体はインテグリンα１０ポリペプチドに特異的であり、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌および侵攻性膵癌、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される侵攻性癌の治療および／または予防のための薬剤の製造に用いられる。

【図面の簡単な説明】

【0027】

【図1】インテグリンα１０は乳癌組織の浸潤性腺管癌（ＩＤＣ）細胞に発現する。インテグリンα１０に対する抗体を用いた免疫組織学的分析。乳癌組織においてインテグリンα１０はＩＤＣ細胞（矢印）に特異的に高発現するが、間質（星印）ではわずかな細胞にしか発現しないことを示している（Ａ）。形態学的には正常な良性乳房組織ではインテグリンα１０の発現は微弱だった（Ｂ）。

【図2】インテグリンα１０は三重陰性乳癌腫瘍組織に発現する。インテグリンα１０に対する抗体を用いた免疫組織学的分析。インテグリンα１０は三重陰性乳癌細胞（矢印）に特異的に高発現することを示している。

【図3】インテグリンα１０は未分化多形肉腫組織の細胞に発現する。インテグリンα１０に対する抗体を用いた免疫組織学的分析。未分化多形肉腫組織ではインテグリンα１０が未分化多形肉腫細胞（矢印）に特異的に高発現することを示している。

【図4】インテグリンα１０は侵攻性癌細胞株に発現する。Ｔ４７Ｄ細胞およびＢＴ５４９細胞（侵攻性乳癌、単層培養）ならびにＰＣ－３細胞（侵攻性前立腺癌、球体培養）におけるインテグリンα１０の免疫蛍光染色。Ｔ４７Ｄ細胞（Ａ）、ＢＴ５４９細胞（Ｂ）およびＰＣ－３細胞（Ｃ）の共焦点イメージは、インテグリンα１０が細胞膜上に染まることを示している。

【図5】インテグリンα１０は単層培養の侵攻性癌細胞株、特に球体培養の同株に発現する。Ａ～Ｄ：単層乳癌細胞（ＡおよびＢ）および球体様構造の乳癌細胞（マンモスフェア）（ＣおよびＤ）におけるインテグリンα１０発現の分析。（Ａ）フローサイトメトリーの散布図で判定した場合には、低侵攻性癌細胞株１８４Ａ１、ＨＣＣ１４２８およびＭＤＡ－ＭＢ－２３１（インテグリンα１０陽性細胞の数が少ないことが示される）と比較して、侵攻性乳癌細胞株ＢＴ５４９およびＴ４７Ｄではインテグリンα１０陽性細胞の数が多い。（Ｂ）独立した５回の実験（ｎ＝５）によって得られた、各細胞株におけるインテグリンα１０陽性細胞の存在割合（％）に関する概要。（Ｃ）フローサイトメトリーの散布図は、マンモスフェアとして増殖させた三重陰性細胞株ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＢＴ５４９の細胞では、単層培養に比較してインテグリンα１０発現が高度に増強するが、１８４Ａ１、ＨＣＣ１４２８およびＴ４７Ｄでは、単層培養条件と比較してインテグリンα１０発現の増加が全く起こらないか、起こってもわずかであることを示している。（Ｄ）独立した５回の実験（ｎ＝５）によって得られた、各細胞株におけるインテグリンα１０陽性細胞の存在割合（％）に関する概要。Ｅ～Ｈ：単層前立腺癌細胞（ＥおよびＦ）および球体様構造の前立腺癌細胞（プロスタスフェア）（ＧおよびＨ）におけるインテグリンα１０発現の分析。最も高侵攻性の前立腺癌細胞株ＰＣ－３において、インテグリンα１０の発現が最大であることが示された。ＰＣ－３細胞では球体培養条件によってインテグリンα１０の発現が顕著に増加したが、低侵攻性細胞株２２Ｒｖ１またはＤＵ１４５ではそのような増加は起こらなかった。代表的なフローサイトメトリー散布図から、単層状（Ｅ）および球体状（Ｇ）に培養した各細胞株におけるインテグリンα１０陽性細胞の割合が分かる。前立腺癌細胞全株について単層（Ｆ）および球体（Ｈ）培養の、異なる培養実験の平均として求めたインテグリンα１０陽性細胞の存在割合（％）に関する概要。データを平均値±標準偏差で表す（ｎ≧３）。Ｉ～Ｊ：単層（Ｉ）および球体様構造（Ｊ）の膵臓細胞におけるインテグリンα１０発現に関する分析。最も高浸潤性の細胞株ＭｉａＰａＣａ－２細胞（グレードＩＩＩ）では、球体培養条件によってインテグリンα１０蛋白質の発現レベルが顕著に増加したが、低浸潤性細胞株ＢｘＰＣ－３およびＡｓＰＣ－１（グレードＩＩ）ではそのような増加は起こらなかった。Ｋ～Ｌ：単層（Ｋ）および球体様構造（Ｌ）の肺癌細胞におけるインテグリンα１０発現の分析。単層培養条件（Ｌ）と比較して、球体（Ｋ）として増殖させた侵攻性肺癌細胞株では、インテグリンα１０蛋白質の発現が大幅に増加した。Ｍ：単層および球体様構造（Ｍ）の肉腫細胞におけるインテグリンα１０発現の分析。未分化多形肉腫癌細胞では、球体培養条件によってインテグリンα１０発現が顕著に増加した。

【図6】インテグリンα１０（ＩＴＧＡ１０）は単層、および特に三次元（３Ｄ）培養（球体）の侵攻性癌細胞株に発現する（ｍＲＮＡ分析）。Ａ～Ｂ：マンモスフェア培養した乳癌細胞におけるインテグリンα１０の発現増加。特に癌細胞を球体として培養した場合に、最も高侵攻性の癌細胞株、例えば、三重陰性乳癌（ＢＴ５４９、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１）ではＩＴＧＡ１０発現が最大であり、最も低侵攻性の癌細胞株Ｔ４７Ｄでは発現が最低であった。Ｃ～Ｄ：プロスタスフェア培養した前立腺癌細胞におけるインテグリンα１０の発現増加。特に癌細胞を球体として培養した場合に、最も高侵攻性の癌細胞株ＰＣ－３ではＩＴＧＡ１０発現が最大であり、最も低侵攻性の癌細胞株２２ＲＶ１では発現が最低であった。Ｅ～Ｆ：浸潤性膵癌細胞株グレードＩＩＩにおけるインテグリンα１０の発現増加。最も高浸潤性の細胞株ＭｉａＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１（グレードＩＩＩ）では、球体培養条件によってインテグリンα１０のｍＲＮＡレベルが顕著に増加したが、低浸潤性細胞株ＢｘＰＣ－３およびＡｓＰＣ－１（グレードＩＩ）ではそのような増加は起こらなかった。データを平均値±標準偏差で表す（ｎ≧３）。

【図7】異なる侵攻性癌の徴候を有する患者において、ＩＴＧＡ１０の高発現は低い総生存率と関係する。異なる侵攻性癌を有する患者におけるＩＴＧＡ１０遺伝子発現と総生存率曲線。生存率分析およびログランク検定を行うために、中央値カットオフにもとづいて、患者をＩＴＧＡ１０高発現群（実線）と低発現群（点線）に分けた。Ｐ値は総生存率の差異のログランク検定に関するものである。記載の癌型全てについて、ＩＴＧＡ１０高発現患者群ではＩＴＧＡ１０低発現患者群に比較して生存率が低い。

【図8】インテグリンα１０モノクローナル抗体は侵攻性癌細胞のコラーゲンへの接着をブロックする。Ａ～Ｄ：三重陰性乳癌細胞。ＢＴ５４９を単層（ＡおよびＢ）およびマンモスフェア（ＣおよびＤ）として培養した。細胞を抗インテグリンα１０ブロッキング・モノクローナル抗体ｍＡｂα１０（５μｇ／ｍｌ）またはアイソタイプ対照抗体ＩｇＧ２ａ（５μｇ／ｍｌ）と共に３０分間、前保温した。次に、Ｉ型コラーゲン（ＡおよびＣ）、ＩＶ型コラーゲン（ＢおよびＤ）または対照としてのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）でコーティングした培養皿に、抗体の存在下または非存在下で細胞を接着させた。データは３回繰り返した測定の平均であり、各データ点において誤差棒は標準偏差を表す。細胞接着は、非処理細胞（ＮＴ）の接着を１００％として、相対的に表されている。Ｅ～Ｆ：侵攻性前立腺癌細胞。ＰＣ－３細胞は、機能阻害抗体である抗インテグリンα１０モノクローナル抗体ｍＡｂα１０（５μｇ／ｍｌ）と共に３０分間、前保温した。対照は非処理細胞である。次に、細胞を接着アッセイに供し、抗体の存在下または非存在下で、Ｉ型コラーゲン（Ｅ）およびＩＶ型コラーゲン（Ｆ）に接着させた。データは３回繰り返した測定の平均であり、誤差棒は標準偏差を表す。細胞接着は、非処理細胞（ＮＴ）の接着を１００％として、相対的に表されている。

【図9】インテグリンα１０をモノクローナル抗体でブロッキングした後の遊走低下。Ａ：乳癌細胞：乳癌細胞ＢＴ５４９を５μｇ／ｍｌの抗インテグリンα１０ブロッキング・モノクローナル抗体ｍＡｂα１０（マウス）またはＴｈ１０１（ヒト）、あるいは５μｇ／ｍｌの対照抗体ＩｇＧ２ａ（マウス）またはＴｈ３０１（ヒト）と共に３０分間、前保温した。次に、ＩＶ型コラーゲンでコーティングしたチャンバーから成るトランスウェルアッセイを用いて、細胞遊走をアッセイした。細胞遊走は、対照細胞の遊走（ＮＴ＝非処理）を１００％として、相対的に表されている。Ｂ：前立腺癌細胞：インテグリンα１０のブロッキングによる前立腺癌細胞の遊走低下。この図は、トランスウェルアッセイにおける抗インテグリンα１０抗体ｍＡｂα１０のＰＣ－３細胞遊走に対する効果を示している。Ｉ型コラーゲンでコーティングした２４穴プレートのトランスウェルチャンバーにＰＣ３細胞を播種し、抗インテグリンモノクローナル抗体ｍＡｂα１０（５μｇ／ｍｌ）と共にインキュベートした。細胞遊走（アッセイは、２４時間または４８時間）は、アイソトープ対照抗体ＩｇＧ２ａと共にインキュベートした細胞の遊走を１００％として、相対的に表されている。Ｃ：肺癌細胞：２４穴プレートに取り付けたトランスウェルチャンバーに肺癌細胞を播種し、抗インテグリンモノクローナル抗体ｍＡｂα１０と共にインキュベートした。細胞遊走は、アイソトープ対照抗体ＩｇＧ２ａと共にインキュベートした細胞の遊走を１００％として、相対的に表されている。

【図10】薬剤ＭＭＡＥと複合体化したインテグリンα１０抗体（抗α１０－ＭＭＡＥ）は乳癌細胞の生存率を低下させる。漸増濃度のＡＤＣ（抗α１０－ＭＭＡＥ）または陰性対照（対照抗体－ＭＭＡＥ）と共にＢＴ５４９細胞を４日間インキュベートした。細胞生存率はＷＳＴ－１比色アッセイで判定した。細胞生存率（％）は、陰性対照である対照抗体－ＭＭＡＥの場合を１００％とし、この陰性対照と比較して算出した。結果は、抗α１０－ＭＭＡＥがＢＴ５４９の細胞生存率を低下させることを示している。

【図11】インテグリンα１０抗体は球体状の乳癌細胞、前立腺癌細胞、膵癌細胞および肺癌細胞の細胞増殖を低下させる。（Ａ）乳癌細胞（ＢＴ５４９）、（Ｂ）前立腺癌細胞（ＰＣ－３）および（ＣおよびＤ）膵癌細胞（ＭｉａＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１）は、球体培養条件の細胞播種と同時に５μｇ／ｍｌのインテグリンα１０抗体ｍＡｂα１０または対照抗体（ＩｇＧ２ａ）で処理した。該抗体を１４日間、２日毎にさらに添加した。次に、球体にＢｒｄＵを加えて２４時間インキュベートし、増殖を判定するためにフローサイトメトリー分析を行った。データを平均蛍光強度であらわす。（Ｅ）同様に、乳癌細胞を抗インテグリンα１０モノクローナル抗体ｍＡｂα１０またはＴｈ１０１、あるいは陰性対照抗体（Ｔｈ３０１、ＩｇＧ２ａ）と共にインキュベートした。ＢｒｄＵの取り込みで判定した増殖は、抗体非存在下（ＮＴ＝非処理）でインキュベートした細胞を１００％として、相対的に表されている。（Ｆ）肺癌では、対照抗体（ＩｇＧ２ａ）による処理と比較して、インテグリンα１０抗体（ｍＡｂα１０）処理が細胞増殖を阻害するが、これは細胞周期をＧ０／Ｇ１期で停止させることによる。肺癌細胞（Ａ５４９）を球体として播種し、５μｇ／ｍｌのインテグリンα１０抗体（ｍＡｂ １０）または対照抗体（ＩｇＧ２ａ）で処理した。該抗体を１４日間、２日毎にさらに添加した。細胞をＢｒｄＵおよび７－ＡＡＤで染色し、細胞周期をフローサイトメトリーで分析した。データは細胞集団全体の割合（％）で表す。

【図12】インテグリンα１０抗体による処理は乳癌腫瘍の増殖を抑制する。陰性対照抗体（ＩｇＧ２ａおよびＴｈ３０１）で処理したマウスと比較して、インテグリンα１０抗体ｍＡｂα１０またはＴｈ１０１で処理したマウスでは、総フラックス読み取り値（腫瘍サイズに相当する）が減少した。（Ａ）異なる実験群（アイソタイプ対照抗体ＩｇＧ２ａ対ｍＡｂα１０、および陰性対照抗体Ｔｈ３０１対Ｔｈ１０１）における９回の抗体処理（９Ｘ）後の総フラックス読み取り値（＝腫瘍サイズ）に基づく腫瘍増殖の進行を示すボックスプロット。侵攻性乳癌ＢＴ５４９細胞をルシフェラーゼおよびＧＦＰ発現レンチウイルスに感染させた（ＢＴ５４９ Ｌｕｃ／ＧＦＰ）。マウスの右脇腹に２ｘ１０^６個のＢＴ５４９ Ｌｕｃ／ＧＦＰ細胞を注入した。ＩＶＩＳ－ＣＴスペクトラムを用いた生物発光イメージングにより腫瘍増殖を毎週、測定した。各マウスについての光子フラックス（光子数／ｓ）およびそれらの平均を、腫瘍細胞注入後９週（９Ｘ）の期間にわたって示す。総光子フラックス（秒当たりの光子数）の平均±標準誤差をデータとして示す。（Ｂ）マウスの体重は、実験期間を通じて毎週記録した。処置実施前では、病的徴候も増殖速度の低下も認められなかった。

【図13】モノクローナル抗体ｍＡｂα１０およびＴｈ１０１はインテグリンα１０の異なるエピトープに結合する。抗体ｍＡｂα１０およびＴｈ１０１の結合競合アッセイは、インテグリンα１０過剰発現Ｃ２Ｃ１２細胞株であるＣ２Ｃ１２α１０（Ａ）および三重陰性乳癌細胞株ＢＴ５４９（Ｂ）によって実施し、フローサイトメトリー分析を行った。細胞は表記の濃度（μｇ／ｍｌ）の抗体と共に３０分間、インキュベートし、次に２次抗体と共にさらに３０分間、インキュベートした。データを１００，０００細胞の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として表す。灰色のバー：抗体ＴＨ１０１（ヒト抗インテグリンα１０）の結合強度を判定するロバ抗ヒトＡｌｅｘａ ４８８の蛍光強度；黒色のバー：抗体ｍＡｂα１０（マウス抗インテグリンα１０）の結合強度を判定するロバ抗マウスＡｌｅｘａ ６４７の蛍光強度。図の左部分：反応ウェルに添加する抗体Ｔｈ１０１の濃度を増加（０～９μｇ／ｍｌ）させても（灰色のバー）、抗体ｍＡｂα１０を表すシグナルは（３μｇ／ｍｌの一定濃度で）変わらなかった（黒色のバー）。図の右部分：反応ウェルに添加する抗体ｍＡｂα１０の濃度を増加（０～９μｇ／ｍｌ）させても（黒色のバー）、抗体Ｔｈ１０１を表すシグナルは（３μｇ／ｍｌの一定濃度で）変わらなかった（灰色のバー）。

【0028】

定義
本明細書中において、「インテグリンα１０」または「インテグリンα１０サブユニット」または「インテグリンα１０ポリペプチド」は、ヘテロ二量体蛋白質インテグリンα１０β１のα１０サブユニットを意味する。この表記はα１０サブユニットに結合してインテグリンα１０β１ヘテロ二量体を形成するβ１サブユニットの存在を除外するものではない。「アルファ」と「α」、ならびに「アルファ１０」と「α１０」はそれぞれ同義語である。

【0029】

本明細書中において、「インテグリンα１０」は、ヘテロ二量体蛋白質インテグリンα１０β１のα１０サブユニット、ならびにヘテロ二量体蛋白質インテグリンα１０β１のα１０サブユニットをコードする転写物ポリヌクレオチド、およびそれらの断片を指すことがある。

【0030】

本明細書中において、「抗インテグリンα１０抗体」または「インテグリンα１０抗体」または「抗インテグリンα１０サブユニット抗体」とは、ヘテロ二量体蛋白質インテグリンα１０β１の少なくともα１０インテグリンを認識し、これに結合することのできる抗体を意味する。これら抗体はヘテロ二量体蛋白質インテグリンα１０β１のエピトープを認識する抗体であってもよく、ここで該エピトープは、α１０およびβ１インテグリン両方のポリペプチドのアミノ酸残基を含む。モノクローナル抗体に関して、「ｍＡｂａ１０」および「ｍＡｂα１０」は同義語である。

【0031】

本明細書中において、単数表現の「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈において特に明示しない限り、複数形のものをも包含するものである。したがって、例えば、「一抗体」という表現はそのような抗体を複数含む。

【0032】

本明細書中において、「対象」はげっ歯類、ネコ、イヌ、ウマおよび霊長類などの哺乳動物を意味する。好ましくは、本発明の対象はヒトである。

【0033】

本明細書中において、「試料」は任意の対象および対象から得られる多様な試料の種類を含む。本開示の方法に有用な試料の例としては、対象、液体組織試料（血液など）、または固体組織試料（生検材料または組織培養またはそれに由来する細胞およびその子孫細胞など）が挙げられるが、これらのみに限定されるものではない。例えば、生体試料は対象から採取される組織試料より得られる細胞を含む。したがって、試料としては、臨床試料、培養細胞、細胞上清、細胞溶解物、および組織試料（例えば、乳房組織、肺組織、前立腺組織、膵臓組織、卵巣組織、骨組織、軟骨組織、脂肪組織、筋肉組織および結合組織由来の組織試料）が挙げられる。

【0034】

本明細書中において、「侵攻性癌型」とは増生速度が速く、および／または離れた部位および他の組織へ急速に移動する腫瘍を意味する。侵攻性癌型は、浸潤性腫瘍および／または転移しやすい腫瘍および／または高悪性度（高グレード）腫瘍および／または高増生性腫瘍であってもよい。侵攻性癌型は通常、生命予後が不良である。侵攻性癌型の例としては、三重陰性乳癌、炎症性乳癌、扁平上皮型肺癌、肺腺癌、小細胞肺癌、前立腺癌、膵癌、卵巣癌および肉腫が挙げられる。癌のタイプが異なれば、侵攻性の度合いも異なり得る。

【0035】

本明細書中において、「癌」は悪性および／または浸潤性増殖または異常な細胞増殖によって起こる腫瘍を意味する。本明細書中において、「癌」は腫瘍を形成する細胞の種類にもとづいて命名された腫瘍を意味する。癌または腫瘍は腫瘍細胞または癌細胞から成る。癌または腫瘍の一部は間質細胞、例えば、線維芽細胞などの結合組織細胞であり得る。固形腫瘍の例としては、肉腫および癌腫が挙げられるが、これらのみに限定されるものではない。用語「癌」としては、身体の特定の部位から発生する原発癌、最初に発生した部位から身体の他の部分へ広がる転移癌、寛解の後に元々の原発癌が再発したもの、および以前癌に罹患した病歴を有するヒトにおいて以前の癌とは異なる種類の、新規に発生する原発癌である二次原発癌が挙げられるが、これらのみに限定されるものではない。

【0036】

本明細書中において、「検出」、「検出する」、「検出すること」は、対照を参照する、または対照を参照しない定性的および／または定量的検出（値を測定する）を含み、特定標的、具体的にはインテグリンα１０サブユニットの標的の存在を、非存在を、または量を特定することをさらに意味する。

【0037】

本明細書中において、「阻害」は、本発明の抗体の存在が受容体へのリガンド結合および／またはリガンド結合によって生じ得る受容体シグナル無効化を、完全にもしくは部分的に阻害することを意味する。その例としては、細胞挙動および細胞プロセスに影響を与える下流のシグナル伝達が挙げられる。本明細書中において、「阻害」および「ブロッキング」は同義語として用いられる。

【0038】

本明細書中において、「ＡＤＣＣ活性」または「抗体依存性細胞毒性活性」は、キラー細胞、ナチュラルキラー細胞、活性化マクロファージなどのエフェクター細胞の表面に存在するＦｃ受容体に抗体のＦｃ領域が結合することによってエフェクター細胞が活性化し、それによって標的細胞（例えば、腫瘍細胞）を傷害する活性を意味する。本発明の抗体の活性はＡＤＣＣ活性を含む。ＡＤＣＣ活性測定および抗腫瘍実験は、当該技術分野で公知のいずれのアッセイを用いて実施してもよい。

【発明を実施するための形態】

【0039】

意外なことではあったが、本発明者らは、ＩＴＧＡ１０遺伝子のコードするインテグリンα１０ポリペプチド（Ｕｎｉｐｒｏｔ：Ｏ７５５７８）が侵攻性腫瘍の生検から得られた組織、特に三重陰性乳癌、炎症性乳癌、扁平上皮型肺癌、肺腺癌、小細胞肺癌、前立腺癌、膵癌、卵巣癌および肉腫から得られた組織において過剰発現することを明らかにした。さらに、本発明者らは、ＩＴＧＡ１０遺伝子のコードするインテグリンα１０ポリペプチド（Ｕｎｉｐｒｏｔ：Ｏ７５５７８）が上記の癌に由来する転移癌に過剰発現することを明らかにした。

【0040】

本所見にもとづいて、本発明者らは癌型を検出する、および／または診断する、および／または治療する、および／または予防する方法および手段を開発したが、ここで該癌型は乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫、または上記癌型の転移癌である該癌型のいずれかである。

【0041】

一つの実施態様においては、該癌型は侵攻性癌型である。

【0042】

インテグリンα１０ポリペプチド
インテグリンは、αおよびβポリペプチドから成るヘテロ二量体である。インテグリンα１０β１ヘテロ二量体は、抗インテグリンα１０特異抗体ならびにインテグリンα１０結合ペプチドおよび蛋白質によって検出され得る。

【0043】

本開示の一つの実施態様においては、該インテグリンα１０ポリペプチドはインテグリンα１０β１ヘテロ二量体の一部である。

【0044】

本開示の一つの実施態様においては、該インテグリンα１０ポリペプチドは細胞表面に発現する。

【0045】

インテグリンα１０β１は、１９９８年に軟骨細胞上のＩＩ型コラーゲン結合受容体として同定された（Ｃａｍｐｅｒら、１９９８）。発生中の組織および成体の組織の免疫組織学的分析によって、該マーカーの局在は軟骨含有組織に限定されることがわかっている（Ｃａｍｐｅｒら、１９９８；Ｃａｍｐｅｒら、２００１）。該マーカーを欠失するノックアウトマウスでは、成長板が無秩序で、マトリックス中のコラーゲンは減少しており、また長管骨が短く、このことは該マーカーが細胞構造にとって重要であることをさらに支持する（Ｂｅｎｇｔｓｓｏｎら、２００５）。そのアミノ酸配列、変異体、イソ型および配列アノテーションについては、Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｏ７５５７８（ＩＴＡ１０＿ＨＵＭＡＮ）によって調べることができる。

【0046】

インテグリンα１０β１は、軟骨組織に存在する最も豊富なコラーゲン結合性インテグリンであり、その発現パターンは他のコラーゲン結合性インテグリンの発現パターンと異なる。インビトロおよびインビボ研究により、インテグリンα１０β１が、軟骨細胞分化に特有の表現型マーカーであり、また適切な軟骨分化に必要な細胞－マトリックス相互作用にとって重要なメディエータであることが分かっている（Ｌｕｎｄｇｒｅｎ ＡｋｅｒｌｕｎｄおよびＡｓｚｏｄｉ、２０１４）。

【0047】

さらに、インテグリンα１０β１は間葉系幹細胞（ＭＳＣ）に存在し、培養間葉系幹細胞を線維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ－２）で処理するとインテグリンα１０β１の発現が増加し、凝集培養においてインビトロ軟骨形成を改善する。したがって、インテグリンα１０β１は間葉系幹細胞の細胞表面上バイオマーカーであって、軟骨形成能を有するバイオマーカーである（Ｖａｒａｓら、２００７）。

【0048】

全脳を含むマウス脳の複数の異なる構造物におけるインテグリンα１０発現については以前に分析がなされており、健常な脳組織のいずれにおいてもインテグリンα１０の発現は低いか全く発現しないことが分かっている（ＷＯ９９／５１６３９）。しかし最近になって、中枢神経系の悪性新生物から得られた組織、ならびに脳室下帯（ＳＶＺ）、脳の幹細胞ニッチにおいてインテグリンα１０β１蛋白質が発現することが明らかにされた（ＷＯ２０１６／１３３４４９）。

【0049】

インテグリンα１０の健常組織における分布が限局的であるため、インテグリンα１０は疾病に関して優れたバイオマーカーとなる。したがって、本開示は抗原としてのインテグリンα１０ポリペプチドの検出、例えば、配列番号１（インテグリンα１０）、配列番号２（インテグリンα１０の細胞外ドメイン）または配列番号３（インテグリンα１０の細胞外Ｉドメイン）に対して特異的な抗体を利用した検出に関する。

【0050】

本開示の一つの実施態様においては、インテグリンα１０はインテグリンα１０ポリペプチドの天然の変異体、インテグリンα１０ポリペプチドのイソ型またはインテグリンα１０ポリペプチドのスプライス変異体である。

【0051】

一つの実施態様においては、インテグリンα１０抗原の該変異体は、配列番号１、２または３に対して少なくとも７０％同一であり、例えば、配列番号１、２または３に対して少なくとも７５％同一である変異体であり、これは配列番号１、２または３に対して少なくとも８０％同一である変異体などであり、例えば、配列番号１、２または３に対して少なくとも８５％同一である変異体であり、これは配列番号１、２または３に対して少なくとも９０％同一である変異体などであり、例えば、配列番号１、２または３に対して少なくとも９５％同一である変異体であり、これは配列番号１、２または３に対して少なくとも９６％同一である変異体などであり、例えば、配列番号１、２または３に対して少なくとも９７％同一である変異体であり、例えば、配列番号１、２または３に対して少なくとも９８％同一である変異体であり、例えば、配列番号１、２または３に対して少なくとも９９％同一である変異体であり、これは配列番号１、２または３に対して少なくとも９９．５％同一である変異体などである。

【0052】

一つの実施態様においては、インテグリンα１０の断片は、配列番号１の連続する少なくとも１００アミノ酸、好ましくは配列番号１の連続する少なくとも２００アミノ酸、好ましくは配列番号１の連続する少なくとも３００アミノ酸、好ましくは配列番号１の連続する少なくとも４００アミノ酸、好ましくは配列番号１の連続する少なくとも５００アミノ酸、好ましくは配列番号１の連続する少なくとも６００アミノ酸、好ましくは配列番号１の連続する少なくとも７００アミノ酸、好ましくは配列番号１の連続する少なくとも８００アミノ酸、好ましくは配列番号１の連続する少なくとも９００アミノ酸、好ましくは配列番号１の連続する少なくとも１０００アミノ酸を含む。

【0053】

インテグリンα１０はヌクレオチドレベルでも検出することが可能であるが、このような検出は、例えば、本明細書中の上記にあるように、翻訳によってインテグリンα１０抗原を生成するｍＲＮＡ転写物が存在するか否かについて試料を分析することによってなされる。

【0054】

医薬組成物およびその投与
一つの実施態様においては、本開示は医薬組成物などの組成物に関するものであり、該組成物は：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片、
または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド、
を含み、
ここで該組成物は本明細書中に定義されるような癌型の診断および／または治療に用いられるものである。

【0055】

本開示の一つの実施態様においては、本明細書中に定義されるような侵攻性癌型の診断および／または治療に用いる該組成物は、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する薬学的有効量の抗体またはその断片を含む。

【0056】

本開示の一つの実施態様においては、本明細書中に定義されるような侵攻性癌型の診断および／または治療に用いる該組成物は、インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合する薬学的有効量のポリヌクレオチドを含む。

【0057】

本明細書中において、薬学的有効量は典型的には、抗インテグリンα１０抗体の量またはインテグリンα１０ポリペプチドをコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチドの量であって、該医薬組成物を受容した個体において所望の応答を誘導する量である。

【0058】

インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片、ならびにインテグリンα１０ポリペプチドをコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチドおよびその断片ならびに変異体（改変体）については、本明細書中で詳細に説明される。

【0059】

本開示の一つの実施態様においては、本明細書中に定義されるような癌型の診断および／または治療に用いる該組成物は、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する薬学的有効量の抗体またはその断片を含むが、ここで該抗体またはその断片は付加的な部分と複合体を形成している。

【0060】

本開示の一つの実施態様においては、明細書中に定義されるような侵攻性癌型の診断および／または治療に用いる該組成物は、インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合する薬学的有効量のポリヌクレオチドを含むが、ここで該ポリヌクレオチドまたはその断片あるいはその変異体（改変体）は付加的な部分と複合体を形成している。

【0061】

例えば、該付加的な部分は検出可能部分であってもよい。インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片に特異的に結合する抗体であって、検出可能部分と複合体を形成した抗体は、細胞上のインテグリンα１０発現の検出に有用であり、該細胞が悪性細胞および／または腫瘍関連細胞であるか否かの判定に有用であり得る。例えば、該付加的な部分は細胞傷害性部分であってもよい。インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片に特異的に結合する抗体であって、細胞傷害性部分と複合体を形成した抗体（インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片に特異的に結合する抗体を含む抗体薬剤複合体（ＡＤＣ）など）は、インテグリンα１０を発現する細胞であって、それが悪性細胞および／または腫瘍関連細胞である細胞に、特定の細胞傷害性部分および／または薬剤を特異的に誘導するために有用であり得る。

【0062】

例えば、該付加的な部分は生物反応修飾物質を含んでもよい。生物反応修飾物質は、免疫応答を促進する、あるいは抑制することのいずれかによって免疫応答を修飾する物質である。生物反応修飾物質は、内因性（通常、身体内で自然に産生される部分など）であっても、外因性であってもよい。

【0063】

一つの実施態様においては、該付加的な部分は生物反応修飾物質（サイトカイン、リンホカイン、インターフェロン、またはそれらの組み合わせなど）を含んでもよい。

【0064】

検出可能部分
本開示の用途の組成物は、検出可能部分を含んでもよく、例えば、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片および／またはインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチドは検出可能部分に共有結合していてもよい。

【0065】

一つの実施態様においては、該検出可能部分は、蛍光色素分子、酵素または放射性トレーサーまたは放射性同位体から成る群から選択される。一つの実施態様においては、該検出可能部分は、陽電子放射体およびガンマ放出体から選択される放射性トレーサーである。一つの実施態様においては、該放射性同位体は、９９ｍＴｃ、^１１１Ｉｎ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^７２Ａｓ、^８９Ｚｒ、^１２３Ｉおよび^２０１Ｔｌから成る群から選択される。

【0066】

一つの実施態様においては、該抗体は、^８６Ｙ／^９０Ｙまたは^１２４Ｉ／^２１１Ａｔなどの検出可能放射性核種および細胞傷害性放射性核種の対を含む。

【0067】

一つの実施態様においては、該放射性同位体は、検出可能部分として、および細胞傷害性部分としても複合的に同時作用が可能である。

【0068】

一つの実施態様においては、該検出可能部分は、^１５７Ｇｄ、^５５Ｍｎ、^１６２Ｄｙ、^５２Ｃｒおよび^５６Ｆｅから成る群から選択されるような常磁性同位体を含む、またはその常磁性同位体から成る。一つの実施態様においては、該検出可能部分は、ＳＰＥＣＴ、ＰＥＴ、ＭＲＩ、光学的画像診断または超音波画像診断などのイメージング技術で検出することができる。

【0069】

一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分および／または検出可能部分は、連結部分を介して間接的に抗体またはその抗原結合断片に連結される。

【0070】

細胞傷害性部分
本開示の用途の組成物は、細胞傷害性部分を含んでもよく、例えば、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片および／またはインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチドは細胞傷害性部分に共有結合していてもよい。

【0071】

一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分は、毒素、化学療法剤および放射性物質、またはその組み合わせから成る群から選択される。

【0072】

一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分は毒素である。例えば、一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分は、微小管毒素類、ＤＮＡ毒素類および転写毒素類から選択される群から選択される毒素である。

【0073】

一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分は、アウリスタチンを基礎とする毒素類、メイタンシノイドを基礎とする毒素類、ツブリシン類を基礎とする毒素類およびエリブリンから成る群から選択される微小管毒素である。

【0074】

一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分はＤＮＡの副溝に結合する物質、ＤＮＡの副溝に結合するアルキル化薬、ＤＮＡアルキル化薬およびＤＮＡ開裂剤から成る群から選択されるＤＮＡ毒素である。例えば、一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分は、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）、デュオカルマイシン、デュオカルマイシン類似体、インドリノ－ベンゾジアゼピン、カリケアマイシン類、イリノテカンおよびエキサテカン誘導体から成る群から選択されるＤＮＡ毒素である。

【0075】

一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分は、リボソーム不活性化蛋白質（ＲＮＡポリメラーゼＩＩ阻害物質など）などの転写毒素である。

【0076】

一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分はドキソルビシン、ドキソルビシン誘導体およびアマニチンから成る群から選択される転写毒素である。

【0077】

一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分は、志賀毒素および志賀毒素様毒素；Ｉ型リボソーム不活性化蛋白質、ＩＩ型リボソーム不活性化蛋白質およびサポリン、またはそれらの組み合わせから成る群から選択される転写毒素である。例えば、該Ｉ型リボソーム不活性化蛋白質はトリコサンチンおよび／またはルフィンであってもよい。例えば、該ＩＩ型リボソーム不活性化蛋白質はリシン、凝集素および／またはアブリンであってもよい。

【0078】

一つの実施態様においては、該細胞傷害性部分は化学療法剤である。例えば、一つの実施態様においては、該化学療法剤はアルキル化薬、代謝拮抗物質、微小管阻害薬、トポイソメラーゼ阻害剤または細胞傷害性抗生物質であってもよい。例えば、一つの実施態様においては、該化学療法剤はアントラサイクリン類、タキサン類および白金薬剤から成る群から選択されてもよい。例えば、一つの実施態様においては、該化学療法剤は、シスプラチン、パクリタキセル、アルブミン結合パクリタキセル、ドセタキセル、シクロホスファミド、エリブリン、エピルビシン、ドキソルビシン、カルボプラチン、ゲムシタビン、ブレオマイシン、フルオロウラシル、シクロホスファミド、ビノレルビン、カペシタビン、イキサベピロンおよびイキサベピロン、またはそれらの組み合わせから成る群から選択されてもよい。

【0079】

製剤
本開示の用途の組成物は、非経口投与に好適な医薬組成物であってもよい。そのような組成物は好ましくは、湿潤剤または乳化試薬、抗酸化剤、ｐＨ緩衝剤、静菌化合物、および製剤を、個体の体液、好ましくは血液と等張にする溶質を含んでいてもよい水性および非水性滅菌注射溶液；および懸濁化剤または増粘剤を含んでいてもよい水性および非水性滅菌懸濁液を含む。該医薬組成物は単位用量または複数用量の容器（例えば、密封アンプルおよびバイアル）に入った形態でもよく、使用直前に唯一条件として、滅菌液性媒体の添加を必要とする凍結乾燥状態で保存することができる。

【0080】

一つの実施態様においては、本開示の用途の組成物は、少なくとも１種類の薬学的に許容可能な希釈剤、担体または賦形剤をさらに含む。

【0081】

好ましくは、本発明の組成物は、非滅菌または滅菌状態であり得る１種類または複数種類の好適な薬学的賦形剤を含み、ここで該薬学的賦形剤は細胞、組織または生体に用いる薬学的賦形剤（個体への投与に好適な薬学的賦形剤など）である。このような賦形剤としては、生理食塩水、緩衝生理食塩水、ブドウ糖、水、グリセロール、エタノールおよびこれらの賦形剤を様々な量で含む組み合わせを挙げることができるが、これらのみに限定されるものではない。該製剤は投与方法に適合させるべきである。

【0082】

好ましくは、本発明の医薬組成物は注射可能な形態、液体溶液または懸濁液のいずれかとして調製される；さらに、注射前の、溶液または懸濁液のための液体に好適である固形形態もまた本発明の範囲に含まれる。該調製物はまた、乳化されていても、あるいはリポソームに封入されていてもよい。

【0083】

該抗インテグリンα１０ポリペプチド抗体または該インテグリンα１０ポリペプチドをコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチドは、単独でまたは他の化合物と組み合わせて、同時にあるいは任意の順序で逐次的に投与してもよい。

【0084】

投与は例えば、注射または点滴による非経口投与でもよい。非経口投与は、例えば、脳室内、髄腔内、腫瘍内、静脈内、筋肉内、皮内または皮下注射でもよい。好ましくは、該投与は注射または点滴による非経口投与である。

【0085】

病態
本開示の一つの実施態様においては、治療する、および／または予防する、および／または検出する、および／または診断する、および／または分類する、および／または予後を判定する、および／または転移を予防する該癌型は、乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌、卵巣癌および肉腫から成る群から選択される。

【0086】

本開示の別の一つの実施態様においては、治療する、および／または予防する、および／または検出する、および／または診断する、および／または分類する、および／または予後を判定する、および／または転移を予防する該癌型は、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌、卵巣癌および侵攻性肉腫から成る群から選択される侵攻性癌型である。

【0087】

本明細書中において、「侵攻性癌型」とは増生速度が速く、および／または離れた部位および他の組織へ急速に移動する腫瘍を意味する。侵攻性癌型は、浸潤性腫瘍および／または転移しやすい腫瘍および／または高悪性度（高グレード）腫瘍および／または高増生性腫瘍であってもよい。侵攻性癌型は通常、生命予後が不良である。侵攻性癌型の例としては、三重陰性乳癌、炎症性乳癌、扁平上皮型肺癌、肺腺癌、小細胞肺癌、前立腺癌、膵癌、卵巣癌および肉腫が挙げられる。癌のタイプが異なれば、侵攻性の度合いも異なり得る。

【0088】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性乳癌が三重陰性乳癌および炎症性乳癌から成る群から選択される。

【0089】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型が三重陰性乳癌型であり、該三重陰性乳癌が基底細胞様１型乳癌、基底細胞様２型乳癌、クローディン低乳癌、化生性乳癌（ＭＢＣ）、高インターフェロン型乳癌、免疫調節型乳癌、間葉型乳癌、間葉系幹細胞様乳癌、管腔アンドロゲン受容体型乳癌および不安定乳癌から成る群から選択される。

【0090】

侵攻性乳癌の特徴は当業者に公知である（例えば、Ａｒｐｉｎｏら、２０１５；Ｄａｉら、２０１６；およびＭａら、２０１８を参照のこと）。

【0091】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性乳癌型は三重陰性乳癌型であり、浸潤性腺管癌の形態学的特徴を有する。

【0092】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性乳癌型は三重陰性乳癌型であり、基底細胞様三重陰性乳癌の形態学的特徴を有する。

【0093】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性乳癌型は基底細胞様乳癌型であり、浸潤性腺管癌の形態学的特徴を有する。

【0094】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は前立腺癌であり、該前立腺癌は小細胞（神経内分泌）癌（ＳＣＮＣ）である。

【0095】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は肺癌であり、該肺癌は扁平上皮型肺癌、肺腺癌、小細胞肺癌または大細胞肺癌である。

【0096】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は肺癌であり、該肺癌は扁平上皮型肺癌である。

【0097】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は膵癌であり、該侵攻性膵癌は神経内分泌腫瘍である。

【0098】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は膵癌であり、該侵攻性膵癌はグレードＩ、グレードＩＩまたはグレードＩＩＩの膵癌である。

【0099】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性肉腫が未分化多形肉腫、粘液線維肉腫、脱分化脂肪肉腫、異型脂肪腫様腫瘍、粘液炎症性線維芽細胞肉腫、低悪性度（低グレード）線維粘液性肉腫、硬化性類上皮線維肉腫、偽筋原性血管内皮腫および間葉性軟骨肉腫から成る群から選択される。

【0100】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は転移癌であり、例えば、該侵攻性癌型は、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌、卵巣癌および侵攻性肉腫のいずれかの転移癌であってもよい。

【0101】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は転移癌であり、例えば、三重陰性乳癌および炎症性乳癌のいずれかの転移癌である。

【0102】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は転移癌であり、例えば、三重陰性乳癌の転移癌である（基底細胞様１型乳癌、基底細胞様２型乳癌、クローディン低乳癌、化生性乳癌（ＭＢＣ）、高インターフェロン型乳癌、免疫調節型乳癌、間葉型乳癌、間葉系幹細胞様乳癌、管腔アンドロゲン受容体型乳癌および不安定乳癌から成る群から選択される三重陰性乳癌など）。

【0103】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は転移癌であり、例えば、侵攻性肺癌の転移癌である。本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は転移癌であり、例えば、扁平上皮型肺癌、肺腺癌、小細胞肺癌または大細胞肺癌の転移癌である。

【0104】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は転移癌であり、例えば、侵攻性膵癌の転移癌である。

【0105】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は転移癌であり、例えば、侵攻性前立腺癌の転移癌である。

【0106】

本開示の一つの実施態様においては、該侵攻性癌型は転移癌であり、例えば、侵攻性肉腫の転移癌である。

【0107】

侵攻性癌型の治療
一局面においては、本発明は組成物の用途に関するものであり、ここで該組成物は：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片に特異的に結合する抗体；
または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド
を含み、該組成物は侵攻性癌型治療のための薬剤の製造に用いられるものであり、ここで該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌および侵攻性肉腫から成る群から選択される、あるいは該侵攻性癌型は転移癌である。

【0108】

本開示の一局面は、侵攻性癌型を治療する方法に関するものであり、ここで該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌および侵攻性肉腫から成る群から選択される、またはここで該侵攻性癌型は転移癌であり、該方法は薬学的有効量の組成物をそれが必要な対象に投与することを含み、該組成物は：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片、
または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド、
を含む。

【0109】

本開示の一局面は、少なくとも１個の癌細胞のインテグリンα１０媒介性シグナル伝達を阻害する方法に関するものであり、該方法は該少なくとも１個の癌細胞を組成物に接触させることを含み、該組成物は有効量の：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的な抗体または抗原結合断片；
および／または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
を含み、
ここで該少なくとも１個の癌細胞は、侵攻性乳癌細胞、侵攻性肺癌細胞、侵攻性前立腺癌細胞、侵攻性膵癌細胞、侵攻性肉腫細胞および転移性腫瘍細胞から成る群から選択される。

【0110】

当業者であれば、細胞のシグナル伝達は細胞が外部刺激を検出して反応する分子機序を含むことを理解する。細胞のシグナル伝達は、シグナル伝達機序ならびに転写および翻訳の制御および機序をも含む。

【0111】

本開示の一局面は、少なくとも１個の癌細胞の細胞機能を阻害する方法に関するものであり、該方法は該少なくとも１個の癌細胞を組成物に接触させることを含み、該組成物は有効量の：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
を含み、
ここで該少なくとも１個の癌細胞は、侵攻性乳癌細胞、侵攻性肺癌細胞、侵攻性前立腺癌細胞、侵攻性膵癌細胞、侵攻性肉腫細胞および転移性腫瘍細胞から成る群から選択されるものである。

【0112】

一つの実施態様においては、本発明は、インテグリンα１０発現細胞の増殖および／または増生を阻害する方法に関するものであり、該方法は組成物を投与することを含み、該組成物は有効量の：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片、
または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド、
を含む。

【0113】

本開示の一つの実施態様においては、少なくとも１個の癌細胞を阻害することは：
（ａ）少なくとも１個の癌細胞の増生を阻害すること；
（ｂ）少なくとも１個の癌細胞の自己複製を阻害すること；
（ｃ）少なくとも１個の癌細胞の足場非依存性増殖を阻害すること；
（ｄ）少なくとも１個の癌細胞の遊走を阻害すること；
（ｅ）少なくとも１個の癌細胞の浸潤を阻害すること；
（ｆ）少なくとも１個の癌細胞の接着を阻害すること；
および／または
それらの組み合わせ；
から成る群から選択される。

【0114】

別の一つの実施態様においては、（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体または（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチドを用いて少なくとも１個の癌細胞を阻害することによって、該少なくとも１個の癌細胞の足場依存性増殖を阻害する。

【0115】

一つの実施態様においては、本開示は、少なくとも１個の癌細胞を阻害する方法に関するものであり、ここで該癌細胞は侵攻性および／または転移性腫瘍中に存在し、該阻害は：
（ａ）侵攻性および／または転移性腫瘍の増殖の阻害；
（ｂ）侵攻性および／または転移性腫瘍の増生の阻害；
（ｃ）侵攻性および／または転移性腫瘍の移動の阻害；
（ｄ）侵攻性および／または転移性腫瘍の浸潤の阻害；
（ｅ）新規の侵攻性および／または転移性腫瘍の発生の阻害；
（ｆ）新規の侵攻性および／または転移性腫瘍の浸潤の阻害；
および
それらの組み合わせ；
のうちの少なくとも１つである。

【0116】

該細胞は、本明細書中において定義するようなマーカーをさらに１種類または複数種類、発現してもよい。一つの実施態様においては、該細胞は悪性細胞および／または腫瘍関連細胞である。別の一つの実施態様においては、該細胞は、癌関連線維芽細胞（ＣＡＦ）、間質細胞、幹細胞および／または幹細胞様細胞である。該方法はインビトロまたはインビボで実施してもよい。

【0117】

本開示の一つの実施態様においては、該組成物は有効量の：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片、
または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド、
を含む該組成物は、インテグリンα１０発現細胞の細胞死を誘導する、および／または増殖を阻害する、および／または増生を阻害する、および／または遊走を阻害することができる。

【0118】

本開示の一つの実施態様においては、該対象の腫瘍の癌細胞にインテグリンα１０ポリペプチドおよび／または転写物ポリヌクレオチドが検出された場合に該治療を開始する。

【0119】

本開示の一つの実施態様においては、癌の放射線療法および／または外科的除去と組み合わせて、侵攻性癌型の治療のための本開示の該組成物をそれが必要な個体に投与する。例えば、一つの実施態様においては、癌の放射線療法および／または外科的除去に先だって、侵攻性癌型の治療のための本開示の該組成物をそれが必要な個体に投与する。それとは別に、またはそれに加えて、一つの実施態様においては、癌の放射線療法および／または外科的除去後に、侵攻性癌型の治療のための本開示の該組成物をそれが必要な個体に投与する。

【0120】

本開示の一つの実施態様においては、該治療は予防的、改善的または治癒的である。

【0121】

本開示の一つの実施態様においては、本開示の該方法は細胞表面に発現するインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原を標的とする。

【0122】

当業者であれば、侵攻性癌に由来する転移を予防する可能性について理解するであろう。

【0123】

本開示の一局面は、乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫から成る群から選択される癌型である原発癌の転移を予防する方法に関するものであり、ここで該方法は治療有効量の：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的な抗体またはその抗原結合断片；および／または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
をそれが必要な患者に投与することを含む。

【0124】

当業者であれば、原発癌が検出された場合に原発癌の転移を予防する方法を実施可能であることを理解するであろう。

【0125】

侵攻性癌型の検出および診断
本開示の一局面は、インテグリンα１０ポリペプチドに対して特異性を有する抗体またはその断片を含む、あるいはそれから成る物質であって、哺乳動物の侵攻性癌型に関連する細胞を検出するために用いる物質に関するものであり、ここで該細胞はインテグリンα１０ポリペプチドを発現し、該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌および侵攻性肉腫、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0126】

本開示の一局面は、組成物に関するものであって、該組成物は：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片、
または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド、
を含み、
乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌、および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される癌型の診断に用いるための組成物である。

【0127】

疾患の生物学的マーカー（例えば、本発明におけるようなインテグリンα１０）を検出するプロセス、または疾患を診断するプロセス（例えば、本発明におけるようにインテグリンα１０の発現を分析することによる）は、分析組織を健常組織、非悪性組織または非罹患組織と比較することを含み得ることは、当業者であれば理解するであろう。例えば、乳癌試料を同一組織試料の非罹患部または健常乳房組織の試料と比較することができる。肺癌試料を同一組織試料の非罹患部または健常肺組織の試料と比較することができる。前立腺癌試料を同一組織試料の非罹患部または健常前立腺組織の試料と比較することができる。膵癌試料を同一組織試料の非罹患部または健常膵臓組織の試料と比較することができる。肉腫試料を同一組織試料の非罹患部または健常結合組織の試料と比較することができる。

【0128】

癌診断のプロセスでは、癌細胞におけるインテグリンα１０ポリペプチドまたはポリヌクレオチドのレベルを対照細胞と比較することが有用であり得ることを、当業者なら理解するであろう。

【0129】

一つの実施態様においては、同一種類の健常組織および／または良性組織に観察される（ｉ）インテグリンα１０抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドのレベルと同一であるか、またはより高いレベルを示す細胞を、該診断される癌が含む。

【0130】

別の一つの実施態様においては、同一組織種の癌のタイプではあるが、診断される癌のタイプと比較して低侵攻性の癌のタイプに観察される（ｉ）インテグリンα１０抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドのレベルと同一であるか、またはより高いレベルを示す細胞を、該診断される癌が含む。

【0131】

別の一つの実施態様においては、（ｉ）インテグリンα１０抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルが対照細胞株のレベルと同一であるか、またはより高いレベルを示す細胞を、該診断される癌が含む。

【0132】

これらの細胞株が初代細胞と比較して遺伝子型および表現型において安定性を有しているので、標準化診断方法においてはこれらを対照細胞株として用い得ることは、当業者であれば理解するであろう。対照細胞株は健常組織から、あるいは癌組織からも確立され得るが、ここで該癌は増殖傾向および転移傾向に応じて高侵攻性または低侵攻性の癌のタイプであり得る。確立した細胞株は、細胞培養で継代可能に不死化する必要がある。本明細書中において、非悪性細胞株とは、悪性の徴候を示さず、表現型において健常組織細胞に類似する確立細胞株であると理解される。

【0133】

対照細胞株は、例えば、表１に示される細胞株であり得る。

【0134】

【表1】

【0135】

一つの実施態様においては、診断に用いる該対照細胞株は、健常組織に由来する（健常乳房組織に由来する対照細胞株、健常前立腺組織に由来する対照細胞株、健常肺組織に由来する対照細胞株、健常膵臓組織に由来する対照細胞株および健常結合組織に由来する対照細胞株から成る群から選択される対照細胞株など）。

【0136】

一つの実施態様においては、乳癌診断に用いる該対照細胞株は、健常組織に由来する（健常乳癌組織に由来する対照細胞株１８４Ａ１など）。

【0137】

他の一つの実施態様においては、診断に用いる該対照細胞株は、同一組織種の癌のタイプではあるが、診断される癌のタイプに比較して低侵攻性の癌のタイプに由来する（低侵攻性乳癌に由来する対照細胞株、低侵攻性前立腺癌に由来する対照細胞株、低侵攻性肺癌に由来する対照細胞株、低侵攻性膵癌に由来する対照細胞株、および低侵攻性肉腫に由来する対照細胞株から成る群から選択される対照細胞株など）。

【0138】

一つの実施態様においては、侵攻性癌の診断に用いる該対照細胞株は、低侵攻性乳癌に由来する細胞株ＨＣＣ１４２８、低侵攻性乳癌に由来する細胞株Ｔ４７Ｄ、低侵攻性前立腺癌に由来する細胞株２２Ｒｖ１、低侵攻性前立腺癌に由来する細胞株ＤＵ１４５、低侵攻性膵癌に由来する細胞株ＢｘＰＣ－３および低侵攻性膵癌に由来する細胞株ＡｓＰＣ－１から成る群から選択される。

【0139】

本開示の一局面は、対象において侵攻性癌細胞を検出する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）該組織において：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した該発現レベルを対照レベルと比較する工程；
を含み、
ここで該対照レベルは、単離した試料と同一組織種の健常および／または良性細胞に観察される平均レベルであり、
ここで対照レベルよりも高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは、対象において侵攻性癌型が存在することの指標であり、ここで該侵攻性癌型は、侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌および侵攻性肉腫、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0140】

本開示の他の一局面は、対象において癌型を診断する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）該組織において：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが同一組織種の健常および／または良性組織に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程；
を含み、
ここで対照レベルよりも高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは、試料中に癌型が存在することの指標であり、それによって対象における癌型を診断するが、ここで該癌型は乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0141】

本開示のさらに他の一局面は、対象において癌型を診断する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）試料中に：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
任意に（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程、
を含み、
ここで（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）インテグリンα１０転写物ポリヌクレオチドの発現と組み合わせて、癌形態を有する１個または複数個の細胞が存在することは、試料中に癌型が存在することの指標であり、それによって対象における癌型を診断するが、ここで該癌型は乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0142】

本開示の一つの実施態様においては、工程（ｂ）においてインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原が存在するか否かを分析することは、侵攻性癌細胞を含むことが疑われる組織を本開示の組成物と接触させることを含む。例えば、本開示の一つの実施態様においては、癌細胞を含むことが疑われる該組織を、インテグリンα１０ポリペプチドに対して特異性を有する抗体を含む、またはそれから成る組成物に接触させてもよい。

【0143】

試料中にインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片；および／またはインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドを含む抗原が存在するか否かを分析すること、および対照レベルよりも高いインテグリンα１０発現レベルであるか否かを判定することに加えて、対象における侵攻性癌型を診断する該方法および／または対象において侵攻性癌細胞を検出する該方法は侵攻性癌型に属する癌細胞を含む試料を形態学的に特徴付ける工程をさらに含んでいてもよく、ここで該侵攻性癌型は侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌および侵攻性肉腫、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0144】

癌組織、または癌性であることが疑われる組織の形態学的特徴付けは、当業者に公知であり、現在、癌細胞を検出するため、および癌が存在するか否かを診断するために利用されている。しかし、形態学的特徴付けは、それ単独では癌細胞を同一組織種の健常および／または良性細胞と区別することにおいてのみ有用ではあり得るが、癌細胞が侵攻性癌型に属するか否かを判定するため（対象において侵攻性癌型が存在するか否かを診断するためなど）には充分とはいえない。

【0145】

したがって、一局面において、本開示は対象において侵攻性癌細胞を検出する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）該組織において：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意に（ｉ）インテグリンα１０抗原の発現レベルおよび／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程、
を含み、
ここで（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）インテグリンα１０転写物ポリヌクレオチドの発現と組み合わせて、癌形態を有する１個または複数個の細胞が存在することは、対象において侵攻性癌型が存在することの指標であり、ここで該侵攻性癌型が侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌および侵攻性肉腫、または侵攻性癌型のいずれかの該転移癌から成る群から選択される。

【0146】

一つの実施態様においては、本開示は対象において乳癌細胞の存在を検出する、または対象の乳癌を診断する方法に関するものであり、ここで該乳癌は三重陰性乳癌および炎症性乳癌から成る群から選択される侵攻性乳癌型であり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる乳房組織を提供する工程；
（ｂ）該組織において：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程、
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性乳房組織に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程；
を含み、
ここで対照レベルよりも高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは、乳癌が存在することの指標であり、それにより対象において乳癌細胞の存在を検出するおよび／または乳癌を診断する。

【0147】

一つの実施態様においては、本開示は、対象において肺癌の存在を検出する、または対象において肺癌を診断する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる肺組織を提供する工程；
（ｂ）該組織において：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性肺組織に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程、
を含み、
ここで対照レベルよりも高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは、肺癌が存在することの指標であり、それにより対象において扁平上皮肺癌を検出する、および／または診断する。

【0148】

一つの実施態様においては、本開示は、対象において扁平上皮肺細胞癌の存在を検出する、または対象の扁平上皮肺細胞癌を診断する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる肺組織を提供する工程；
（ｂ）該組織において：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性肺組織に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程、
を含み、
ここで対照レベルよりも高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは、扁平上皮肺細胞癌が存在することの指標であり、それにより対象において扁平上皮肺細胞癌を検出する、および／または診断する。

【0149】

一つの実施態様においては、本開示は、対象において肺腺癌の存在を検出する、または対象において肺腺癌を診断する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる肺組織を提供する工程；
（ｂ）該組織において：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性肺組織に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程、
を含み、
ここで対照レベルよりも高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは、肺腺癌が存在することの指標であり、それにより対象において肺腺癌を検出する、および／または診断する。

【0150】

一つの実施態様においては、本開示は、対象において前立腺癌細胞の存在を検出する、または対象の前立腺癌を診断する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる前立腺組織を提供する工程；
（ｂ）試料中に：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド；
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性前立腺組織に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程、
を含み、
ここで対照レベルよりも高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは、前立腺癌が存在することの指標であり、それにより対象において前立腺癌を検出する、および／または診断する。

【0151】

一つの実施態様においては、本開示は、対象において膵癌細胞の存在を検出する、または対象の膵癌を診断する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌を含むことが疑われる膵臓組織を提供する工程；
（ｂ）試料中に：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド；
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性膵臓組織に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程；
を含み、
ここで対照レベルよりも高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは、膵癌が存在することの指標であり、それにより対象において膵癌を検出する、および／または診断する。

【0152】

一つの実施態様においては、本開示は、対象において肉腫細胞の存在を検出する、または対象の肉腫を診断する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象において癌を含むことが疑われる結合組織を提供する工程；
（ｂ）試料中に：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド；
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性結合組織に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程、
を含み、
ここで対照レベルよりも高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは、肉腫が存在することの指標であり、それにより対象において肉腫を検出する、および／または診断する。

【0153】

本発明者らは、インテグリンα１０の発現レベルが侵攻性乳癌の亜型間（三重陰性乳癌の亜型間など）の識別に有用であることを明らかにしている。

【0154】

したがって、本開示の一局面は、対象の三重陰性乳癌腫瘍試料を分類する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象の乳房組織試料を提供する工程；
（ｂ）ＥＲ陰性、ＰＲ陰性かつＨＥＲ２陰性であると特徴づけられる乳癌細胞を単離する工程；
（ｃ）単離した細胞における：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
の発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性乳房組織に観察されるインテグリンα１０ポリペプチドを含む抗原の発現レベルの平均値である、工程、
を含み、
ここで対照レベルより高い乳癌細胞における（ｉ）抗原発現レベルおよび／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチド発現レベル、およびＥＲ陰性、ＰＲ陰性およびＨＥＲ２陰性である発現状態は、基底細胞様三重陰性乳癌または管腔型三重陰性乳癌の指標であり、それにより三重陰性乳癌腫瘍試料を基底細胞様三重陰性乳癌腫瘍または管腔型三重陰性乳癌腫瘍に属するものとして分類する。

【0155】

別の一つの実施態様においては、該管腔型三重陰性乳癌は管腔アンドロゲン受容体型三重陰性乳癌である。

【0156】

一つの実施態様においては、三重陰性乳癌腫瘍試料を分類する本開示の方法は、該試料におけるクローディンの発現レベルを分析することをさらに含み、ここで対照レベルよりも高い、乳癌細胞における（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベル、およびＥＲ陰性、ＰＲ陰性、ＨＥＲ２陰性の発現状態、ならびにクローディンのレベルが低いことは、基底細胞様三重陰性乳癌の指標であり、それにより三重陰性乳癌腫瘍試料を基底細胞様三重陰性乳癌腫瘍に属するものとして分類する。

【0157】

クローディン低乳房腫瘍は、三重陰性乳房腫瘍の亜型の一つである。この腫瘍では、クローディン３、クローディン４、およびクローディン７を含むクローディン遺伝子の多くが低発現である。クローディン低腫瘍のその他の重要な特徴としては、ほぼ常に強度の免疫細胞浸潤を受けていること、および幹細胞の特徴および上皮間葉転換（ＥＭＴ）の特徴を有することが挙げられる。

【0158】

一つの実施態様においては、
（ｉ）該インテグリンα１０抗原の発現レベル、
および／または
（ｉｉ）該転写物ポリヌクレオチドの発現レベル
が対照レベルよりも高い場合に、
三重陰性乳癌腫瘍試料を分類する本開示の該方法は、三重陰性乳癌腫瘍試料を基底細胞様２型三重陰性乳癌腫瘍に属するものとして分類することをさらに含む。

【0159】

一つの実施態様においては、三重陰性乳癌腫瘍試料を分類する本開示の方法は、サイトケラチン７、サイトケラチン８、サイトケラチン１８およびサイトケラチン１９から成る群から選択される１種類または複数種類のポリペプチドの発現の有無を判定することをさらに含み、ここでインテグリンα１０の発現およびサイトケラチン７、サイトケラチン８、サイトケラチン１８およびサイトケラチン１９から成る群から選択される１種類または複数種類のポリペプチドの発現は管腔型三重陰性乳癌の指標である。

【0160】

一つの実施態様においては、三重陰性乳癌腫瘍試料を分類する本開示の方法は、サイトケラチン５／６、サイトケラチン１４、サイトケラチン１７、ｐ６３、ＥＧＦＲおよびｃ－ｋｉｔ／ＣＤ１１７から成る群から選択される１種類または複数種類のポリペプチドの発現の有無を判定することをさらに含み、ここでインテグリンα１０の発現およびサイトケラチン５／６、サイトケラチン１４、サイトケラチン１７、ｐ６３、ＥＧＦＲ、３４ＢＥ１２およびｃ－ｋｉｔ／ＣＤ１１７から成る群から選択される１種類または複数種類のポリペプチドの発現は基底細胞様三重陰性乳癌の指標である。

【0161】

意外なことではあったが、本発明者らは、本明細書中に定義するような侵攻性癌型に属する細胞におけるインテグリンα１０の高発現レベルは、不良な予後に直接相関し、またその指標であることを発見した。

【0162】

したがって、本開示の一局面は、対象において侵攻性癌型の予後を判定する方法に関するものであり、ここで該侵攻性癌型が侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌および侵攻性肉腫、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択され、該方法は：
（ａ）対象の癌腫瘍組織を提供する工程；
（ｂ）試料中に：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド；
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）インテグリンα１０抗原の発現レベルおよび／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが試料と同一組織種の健常および／または良性組織に観察される（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）インテグリンα１０転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程；
（ｅ）（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルが対照レベルよりも高い場合に、該侵攻性癌型が予後不良であることを判定する工程、
を含む。

【0163】

本開示の他の一局面は、対象において侵攻性癌型の予後を判定する方法に関するものであり、該方法は：
（ａ）対象の癌腫瘍組織を提供する工程；
（ｂ）癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）試料中に
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意に（ｉ）インテグリンα１０抗原の発現レベルおよび／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
（ｅ）（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）インテグリンα１０転写物ポリヌクレオチドが発現し、かつ癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在する場合に、該侵攻性癌型が予後不良であることを判定する工程、
を含むが、
ここで該侵攻性癌型が侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌および侵攻性肉腫、または該侵攻性癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される。

【0164】

対象において侵攻性癌型の予後を判定する該方法は、本明細書中に記載の侵攻性癌型のいずれにも用いることができる（例えば、「病態」の節を参照のこと）。

【0165】

一つの実施態様においては、本開示は対象において侵攻性癌型の予後を判定する方法に関するものであるが、ここで該予後は総生存率または無再発生存率である。

【0166】

本開示の一つの実施態様においては、本開示の該方法は細胞表面に発現するインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原を標的とする。

【0167】

本開示の該方法はインビボで実施してもよく、またはインビトロで実施してもよい。

【0168】

一つの実施態様においては、本明細書中に開示されるような、対象において侵攻性癌細胞を検出する方法はインビボで実施される。一つの実施態様においては、本明細書中に開示されるような、対象において侵攻性癌型を診断する方法はインビトロで実施され、該組織は対象から取得した組織試料である。

【0169】

一つの実施態様においては、本明細書中に開示されるような、対象における侵攻性癌型を診断する方法はインビボで実施される。一つの実施態様においては、本明細書中に開示されるような、対象における侵攻性癌型を診断する方法はインビトロで実施され、該組織は対象から取得した組織試料である。

【0170】

一つの実施態様においては、本明細書中に開示されるような、対象における侵攻性癌の予後を判定する方法はインビボで実施される。一つの実施態様においては、本明細書中に開示されるような、対象における侵攻性癌の予後を判定する方法はインビトロで実施され、該組織は対象から取得した組織試料である。

【0171】

本開示の一つの実施態様においては、試料中に：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する該工程は、組織および／または組織試料のイメージングを含む。

【0172】

本開示の一つの実施態様においては、（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程は、組織および／または組織試料のイメージングを含む。

【0173】

イメージングは、例えば、インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原に結合可能な標識部分を対象および／または組織試料に投与することによって実施してもよい。例えば、イメージングは本明細書中に定義されるような標識抗インテグリンα１０抗体を対象および／または組織試料に投与することによって実施してもよい。

【0174】

インテグリンα１０ポリペプチドに対する抗体
一つの実施態様においては、侵攻性癌型の診断および／または治療および／または予防に用いる本開示の組成物は抗インテグリンα１０特異抗体を含み、ここで該抗体は免疫反応においてインテグリンα１０ポリペプチドに結合する。好ましくは、該抗体はインテグリンα１０ポリペプチドの細胞外ドメインに結合するが、特定の実施態様においては、該抗インテグリンα１０抗体は、ヘテロ二量体のインテグリンα１０β１複合体そのものに対して重複性の特異性を有する。このことは、例えば、本発明の抗体はα１０ポリペプチドおよびβ１ポリペプチドの両方にわたるエピトープに結合することを意味し得る。

【0175】

該抗体およびその機能的同等物は、当業者に公知の好適な方法によって作成することができる。

【0176】

一つの実施態様においては、本発明の抗体はハイブリドーマ細胞株（例えば、アクセッション番号ＤＳＭ ＡＣＣ２５８３として、Ｄｅｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄ Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ ＧｍｂＨに寄託されているハイブリドーマ細胞株ｍＡｂ ３６５）によって産生されるので、これにより細胞外インテグリンα１０ドメインに結合する抗体を作成する。該ハイブリドーマの作成には、インテグリンα１０β１の遺伝子ノックアウトマウスを用いてもよい。該ノックアウトマウスについては、ＷＯ０３／１０１４９７に説明されており、参照として本明細書に組み入れられる。

【0177】

一つの実施態様においては、本発明の抗体は：
（ａ）アクセッション番号ＤＳＭ ＡＣＣ２５８３として、Ｄｅｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄ Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ ＧｍｂＨに寄託されているハイブリドーマ細胞株が産生するモノクローナル抗体；
または
（ｂ）アクセッション番号ＤＳＭ ＡＣＣ２５８３として、Ｄｅｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄ Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ ＧｍｂＨに寄託されているハイブリドーマが産生するモノクローナル抗体が結合するエピトープと同一のエピトープに対する結合に関して競合する抗体；
または
（ｃ）インテグリンα１０ポリペプチド鎖の細胞外Ｉドメインに特異的に結合可能な（ａ）もしくは（ｂ）の断片
である。

【0178】

別の一つの実施態様においては、本発明の抗インテグリンα１０抗体は抗体パニング法によって同定されている。

【0179】

配列番号４～１１のアミノ酸配列で識別される本発明の抗体は、本明細書中でＴｈ１０１と表記される。抗体Ｔｈ１０１の６つのＣＤＲ（相補性決定領域）（配列番号４～９）、重鎖可変領域（配列番号１０）および軽鎖可変領域（配列番号１１）を本明細書中に開示する。実施例で用いられるような、抗体Ｔｈ１０１の同定および作成については、ＷＯ０８／０７５０３８に記載されており、参照として本明細書に組み入れられる。

【0180】

一つの実施態様においては、本発明の該抗インテグリンα１０抗体は：
（ａ）配列番号４のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｈ１；
（ｂ）配列番号５のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｈ２；および
（ｃ）配列番号６のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｈ３、
を含む重鎖可変領域；
および／または
（ｄ）配列番号７のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｌ１；
（ｅ）配列番号８のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｌ２；および
（ｆ）配列番号９のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｌ３、
を含む軽鎖可変領域；
あるいは
配列番号４～９のいずれか１つの変異体（改変体）、
を含み、
ここで該変異体は、いずれか１つのアミノ酸が他のアミノ酸に置換されており、ただしそのような変更がたかだか３アミノ酸未満であることが前提であり、例えば、ここで２アミノ酸または１アミノ酸が置換されている。

【0181】

別の一つの実施態様においては、本発明の抗インテグリンα１０抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む、またはから成る重鎖可変領域を含む。

【0182】

別の一つの実施態様においては、本発明の抗インテグリンα１０抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む、またはから成る軽鎖可変領域を含む。

【0183】

該インテグリンα１０抗体は、該哺乳動物に２回以上（２回など、例えば、３回、３回～５回など、例えば、５回～１０回、１０回～２０回など、例えば、２０回～５０回、５０回を超える回数など）投与してもよい。同一の哺乳動物に異なる複数のインテグリンα１０抗原を同時に、あるいは任意の順序で逐次的に投与することも可能である。

【0184】

通常、インテグリンα１０抗体は投与前に水性溶液または懸濁液にする。さらに、該インテグリンα１０抗原は、１種類または複数種類の他の化合物と混合してもよい。例えば、該インテグリンα１０抗原は、１種類または複数種類の好適なアジュバントおよび／または１種類または複数種類の担体と混合してもよい。

【0185】

アジュバントは、投与抗原との混合物が該抗原に対する免疫応答を増強するまたは修飾する物質である。好適なアジュバントは当業者に周知である。

【0186】

担体は骨格構造である（例えば、抗原が結合することのできるポリペプチドまたは多糖）。担体はアジュバントとは独立に存在してもよい。好適な担体は当業者に周知である。

【0187】

モノクローナル抗体、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体の混合物を調製する方法は、当該技術分野で公知であり、例えば、抗体：実験室マニュアル（Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｂｙ Ｅｄ Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｄａｖｉｄ Ｌａｎｅ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、１９８８）に記載されている。

【0188】

一つの実施態様においては、本発明の該抗インテグリンα１０抗体は、インテグリンα１０ポリペプチドの生物学的活性および機能的活性を阻害可能な抗体である。

【0189】

他の一つの実施態様においては、該抗インテグリンα１０抗体を抗体薬剤複合体（ＡＤＣ）の一部として投与する。抗体薬剤複合体では、該抗体は部分（例えば、疾患を修飾する薬剤または毒素）に連結されている。インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合すると、該ＡＤＣは細胞内部に移行して、細胞内に該部分が送達される。

【0190】

一つの実施態様においては、侵攻性癌型の診断および／または治療に用いる本開示の組成物に含まれる該抗体は、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＥおよびＩｇＭから成る群から選択されるアイソタイプである。さらなる実施態様においては、該抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２（例えば、ＩｇＧ２ａ）、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４から成る群から選択されるＩｇＧアイソタイプなどのＩｇＧアイソタイプである。

【0191】

一つの実施態様においては、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する本開示の該抗体は一本鎖抗体である。

【0192】

本開示は、インテグリンα１０ポリペプチドに結合可能なモノクローナル抗体およびポリクローナル抗体の両方を意図し、さらにその断片、抗原結合断片ならびにその組換え蛋白質をも意図する。

【0193】

一つの実施態様においては、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する本開示の該抗体であって、診断および／または治療に用いる抗体は、ポリクローナル抗体である。

【0194】

一つの実施態様においては、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する本開示の該抗体は、ヒト化抗体またはヒト抗体である。

【0195】

一つの実施態様においては、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する本開示の該抗体は、マウス抗体である。

【0196】

一つの実施態様においては、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する本開示の該抗体は、モノクローナル抗体である。

【0197】

一つの実施態様においては、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する本開示の該抗体は、ポリクローナル抗体である。

【0198】

一つの実施態様においては、侵攻性癌型の診断および／または治療に用いる本開示の組成物に含まれる該抗体は、抗体断片である。抗体の抗原結合断片は、抗原に特異的に結合する能力を保持している抗体断片である。本発明の抗体断片の例としては、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）_２断片およびＦｖ断片（一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）など）および単一ドメイン抗体から成る群から選択される抗体断片が挙げられる。

【0199】

侵攻性癌型の診断および／または治療に用いる本開示の組成物に含まれる該抗体は、キメラ抗体（すなわち、異なる種に由来する領域を含む抗体）であってもよい。該キメラ抗体は、例えば、ある動物種に由来する可変領域とそれとは別の動物種に由来する定常領域を含んでいてもよい。例えば、キメラ抗体は、マウスモノクローナル抗体に由来する可変領域とヒトの定常領域を有する抗体であってもよい。このような抗体はヒト化抗体とよばれることもある。例えば、キメラヒト化抗体は完全ヒト型であってもよい。

【0200】

一つの実施態様においては、侵攻性癌型の診断および／または治療に用いる本開示の組成物に含まれる該抗体は、ヘテロ特異抗体（蛋白質またはポリペプチドであり、異なる特異性を有する２カ所の異なる抗原結合部位を含む二重特異性抗体など）である。例えば、該二重特異性抗体は、インテグリンα１０上の（ａ）ある一つのエピトープおよびインテグリンα１０上の（ｂ）別の一つのエピトープを認識して結合するものでもよい。したがって、該抗体は、同一抗原内の２つの異なるエピトープを認識して結合し得る。用語「ヘテロ特異抗体」は、異なる特異性を有する３つ以上の抗原結合部位をもつ蛋白質またはポリペプチドを含むものであることが意図される。したがって、本発明は、インテグリンα１０ポリペプチドに対する二重特異抗体、三重特異抗体、四重特異抗体、およびその他の多重特異抗体を含むが、これらのみに限定されるものではない。

【0201】

いくつかの実施態様においては、インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する本開示の該抗体またはその断片は、付加的な部分などの部分と複合体化してもよい。該複合体化によって、侵攻性癌型の治療および診断の両方が改善および向上し得る。

【0202】

一つの実施態様においては、該抗体は検出可能部分（蛍光色素分子、酵素、放射性トレーサーまたは放射性同位体から成る群から選択される検出可能部分など）に共有結合している。インテグリンα１０ポリペプチド以外の他のペプチド、蛋白質またはポリペプチドを検出することによって、インテグリンα１０抗原を検出してもよいが、ここで該他のペプチド、蛋白質またはポリペプチドはインテグリンα１０抗原に特異的に結合可能なものである。一つの実施態様においては、該ペプチド、蛋白質またはポリペプチドは、酵素、蛍光色素分子または放射性トレーサーに連結されている。放射性トレーサーは、例えば、陽電子放射体またはガンマ放射体から選択されてもよい。抗体の検出可能部分との複合体化は、該抗体の検出を向上あるいは改善し、それによって試料中のインテグリンα１０発現細胞の検出を促進することができ、またそれによって侵攻性癌型の診断も向上し得る。

【0203】

当業者であれば、試料の状況および物理的な状態に応じて、抗インテグリンα１０抗体を検出するための標準的な実験設備を選択することができる。

【0204】

一つの実施態様においては、当業者であれば蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）などのフローサイトメトリーを用いて検出工程を実施するであろう。

【0205】

当該技術分野で周知の通常の免疫学的方法としては、ウエスタンブロット法、酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）、放射免疫測定（ＲＩＡ）、免疫組織化学（ＩＨＣ）、免疫蛍光アッセイ（ＩＦ）、蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）が挙げられるが、これらのみに限定されるものではない。

【0206】

インテグリンα１０の検出は、当該技術分野で周知の検出法および臨床イメージングなどのイメージング法（通常の蛍光顕微鏡、共焦点顕微鏡、二光子顕微鏡、誘導放出抑制顕微鏡（ＳＴＥＤ）など）を用いて実施できる。

【0207】

一つの実施態様においては、該抗インテグリンα１０抗体は、インテグリンα１０発現細胞の遊走および／または増殖を阻害および／またはブロックすることの可能な抗体などの機能阻害抗体である。

【0208】

インテグリンα１０検出のための分子プローブ
インテグリンα１０抗原またはインテグリンα１０をコードするポリヌクレオチドの存在に関する生体試料の分析は、生体試料中の発現を検出するためのインテグリンα１０ ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡまたは蛋白質に結合可能またはハイブリダイズ可能な分子プローブ（蛋白質またはポリヌクレオチド）を利用することによって、あるいはＰＣＲ、好ましくはＱ－ＰＣＲを用いることによって、実施することもできる。

【0209】

一つの実施態様においては、該インテグリンα１０特異的ポリヌクレオチドプローブは検出可能部分に連結されるが、該検出可能部分は任意に光子放出可能である。本実施態様を用いる場合には、該検出可能部分（例えば、蛍光色素分子）を励起することが可能な光源を用いて、診断するまたは調べる対象に光照射してもよい。光子を検出する方法としては、ＰＥＴスキャンおよびＳＰＥＣＴスキャンが挙げられるが、これらのみに限定されるものではない。

【0210】

特定の実施態様においては、該検出可能部分は、蛍光色素分子、酵素または放射性トレーサーから成る群から選択される。

【0211】

転写物ポリヌクレオチドは、ＰＣＲ、好ましくはＱ－ＰＣＲを用いて検出してもよい。

【0212】

さらなる実施態様においては、生体試料中にインテグリンα１０が存在するか否かを、ハイブリダイゼーション反応によってインテグリンα１０ＲＮＡまたはｃＤＮＡに結合するインテグリンα１０核酸プローブを用いて検出する。

【0213】

インテグリンα１０を特異的標的とする核酸構成成分の例としては、ＤＮＡプローブ、アンチセンスＲＮＡまたはＲＮＡｉ（マイクロＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）および低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）など）が挙げられる。

【0214】

当該技術分野で周知の典型的な核酸検出法としては、ノーザンブロット法、サザンブロット法、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、マイクロアレイ、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーションなどが挙げられるが、これらのみに限定されるものではない。

【0215】

さらなる実施態様においては、生体試料中にインテグリンα１０が存在するか否かを、インテグリンα１０結合ペプチドまたは蛋白質を用いて検出する。このようなペプチドまたは蛋白質は、組換え体として作成することができ、化学合成することもでき、または天然源から精製することもできる。

【0216】

さらなる実施態様においては、生体試料中のインテグリンα１０の存在は、インテグリンα１０特異抗体、あるいはインテグリンα１０結合ペプチドまたは蛋白質、あるいはハイブリダイゼーション反応においてインテグリンα１０ＲＮＡまたはｃＤＮＡに結合するインテグリンα１０核酸プローブを用いることによってインビボで検出される。

【0217】

細胞表面抗原およびポリヌクレオチドの典型的なインビボ検出法については、当該技術分野で周知であり、陽電子放出断層撮影法、Ｘ線コンピュータ断層映像法（ＣＴ）、核磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）および磁気共鳴機能画像法（ｆＭＲＩ）、超音波検査法および単一光子放出型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）が挙げられるが、これらのみに限定されるものではない。特に、細胞表面抗原は、抗体またはその他の特異的に結合する蛋白質に連結させた放射性トレーサーによる免疫標識を用いてインビボでイメージ化することができる。

【0218】

好ましくは、インビボイメージングに用いる抗体は、抗体断片（Ｆａｂ断片など）、および一本鎖抗体であり、その理由はこれらのサイズが小型であることとエフェクター機能を欠いていることである。

【0219】

項目
項目１：組成物であって、
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片；
または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド、
を含み、
乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される癌型の治療および／または予防に用いる組成物。

【0220】

項目２：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該乳癌が三重陰性乳癌および炎症性乳癌から成る群から選択される、組成物。

【0221】

項目３：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該三重陰性乳癌が基底細胞様１型乳癌、基底細胞様２型乳癌、クローディン低乳癌、化生性乳癌（ＭＢＣ）、高インターフェロン型乳癌、免疫調節型乳癌、間葉型乳癌、間葉系幹細胞様乳癌、管腔アンドロゲン受容体型乳癌および不安定乳癌から成る群から選択される、組成物。

【0222】

項目４：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該肺癌が扁平上皮型肺癌、肺腺癌、大細胞肺癌および小細胞肺癌から成る群から選択される、組成物。

【0223】

項目５：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該前立腺癌が小細胞神経内分泌癌（ＳＣＮＣ）である、組成物。

【0224】

項目６：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該膵癌が神経内分泌腫瘍である、組成物。

【0225】

項目７：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該膵癌および／または神経内分泌腫瘍がグレードＩ、グレードＩＩまたはグレードＩＩＩの膵癌である、組成物。

【0226】

項目８：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該肉腫が未分化多形肉腫、粘液線維肉腫、脱分化脂肪肉腫、異型脂肪腫様腫瘍、粘液炎症性線維芽細胞肉腫、低悪性度線維粘液性肉腫、硬化性類上皮線維肉腫、偽筋原性血管内皮腫および間葉性軟骨肉腫から成る群から選択される、組成物。

【0227】

項目９：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該インテグリンα１０ポリペプチドが悪性細胞および／または腫瘍関連細胞の表面に発現する、組成物。

【0228】

項目１０：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該抗体がモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体またはそれらの断片である、組成物。

【0229】

項目１１：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該抗体が非ヒト抗体、キメラ抗体、二重特異性抗体、ヒト化抗体またはヒト抗体である、組成物。

【0230】

項目１２：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該抗体がマウスモノクローナル抗体である、組成物。

【0231】

項目１３：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該抗体がヒトモノクローナル抗体である、組成物。

【0232】

項目１４：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該抗体がＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＥおよびＩｇＭから成る群から選択されるアイソタイプである、組成物。

【0233】

項目１５：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該抗体が：
（ａ）アクセッション番号ＤＳＭ ＡＣＣ２５８３として、Ｄｅｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄ Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ ＧｍｂＨに寄託されているハイブリドーマ細胞株が産生するモノクローナル抗体；
または
（ｂ）アクセッション番号ＤＳＭ ＡＣＣ２５８３として、Ｄｅｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄ Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ ＧｍｂＨに寄託されているハイブリドーマが産生するモノクローナル抗体が結合するエピトープと同一のエピトープに対する結合に関して競合する抗体；
または
（ｃ）インテグリンα１０ポリペプチド鎖の細胞外Ｉドメインに特異的に結合可能な（ａ）もしくは（ｂ）の断片
である、
組成物。

【0234】

項目１６：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該抗体またはその抗原結合断片は：
（ａ）配列番号４のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｈ１；
（ｂ）配列番号５のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｈ２；および
（ｃ）配列番号６のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｈ３、
を含む重鎖可変領域；
および／または
（ｄ）配列番号７のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｌ１；
（ｅ）配列番号８のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｌ２；および
（ｆ）配列番号９のアミノ酸配列を含む、またはから成るＣＤＲ－Ｌ３、
を含む軽鎖可変領域；
あるいは
配列番号４～９のいずれか１つの変異体（改変体）、
を含み、
ここで該変異体は、いずれか１つのアミノ酸が他のアミノ酸に置換されており、ただしそのような変更がたかだか３アミノ酸未満であることが前提であり、例えば、ここで２アミノ酸または１アミノ酸が置換されている、組成物。

【0235】

項目１７：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該抗体またはその抗原結合断片が配列番号１０のアミノ酸配列を含む、またはから成る重鎖可変領域を含む、組成物。

【0236】

項目１８：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該抗体またはその抗原結合断片が配列番号１１のアミノ酸配列を含む、またはから成る軽鎖可変領域を含む、組成物。

【0237】

項目１９：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該抗体またはその抗原結合断片および／または該ポリヌクレオチドまたはその断片またはその変異体（改変体）が付加的な部分と複合体を形成している、組成物。

【0238】

項目２０：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該付加的な部分が蛍光色素分子、酵素および放射性トレーサーまたは放射性同位体から成る群から選択される検出可能部分などの検出可能部分を含む、組成物。

【0239】

項目２１：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該付加的な部分が細胞傷害性部分を含む、組成物。

【0240】

項目２２：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該細胞傷害性部分が毒素、化学療法剤および放射性物質、またはそれらの組み合わせから成る群から選択される、組成物。

【0241】

項目２３：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該細胞傷害性部分が毒素である、組成物。

【0242】

項目２４：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該毒素が微小管毒素類、ＤＮＡ毒素類および転写毒素類から選択される群から選択される、組成物。

【0243】

項目２５：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該微小管毒素類がアウリスタチンを基礎とする毒素類、メイタンシノイドを基礎とする毒素類、ツブリシン類を基礎とする毒素類およびエリブリンから成る群から選択される、組成物。

【0244】

項目２６：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該ＤＮＡ毒素類がＤＮＡの主溝に結合する物質、ＤＮＡの副溝に結合するアルキル化薬、ＤＮＡアルキル化薬およびＤＮＡ開裂剤から成る群から選択される、組成物。

【0245】

項目２７：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該ＤＮＡ毒素類がピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）、デュオカルマイシン、デュオカルマイシン類似体、インドリノ－ベンゾジアゼピン、カリケアマイシン類、イリノテカンおよびエキサテカン誘導体から成る群から選択される、組成物。

【0246】

項目２８：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該転写毒素がＲＮＡポリメラーゼＩＩ阻害物質である、組成物。

【0247】

項目２９：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該転写毒素がドキソルビシン、ドキソルビシン誘導体およびアマニチンから成る群から選択される、組成物。

【0248】

項目３０：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、該転写毒素が、志賀毒素および志賀毒素様毒素；Ｉ型リボソーム不活性化蛋白質、ＩＩ型リボソーム不活性化蛋白質およびサポリン、またはそれらの組み合わせから成る群から選択される、組成物。

【0249】

項目３１：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該Ｉ型リボソーム不活性化蛋白質がトリコサンチンおよび／またはルフィンである、組成物。

【0250】

項目３２：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該ＩＩ型リボソーム不活性化蛋白質がリシン、凝集素および／またはアブリンである、組成物。

【0251】

項目３３：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該付加的な部分が生物反応修飾物質を含む、組成物。

【0252】

項目３４：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該生物反応修飾物質はサイトカイン、リンホカイン、インターフェロンまたはそれらの組み合わせである、組成物。

【0253】

項目３５：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該化学療法剤がアルキル化薬、代謝拮抗物質、微小管阻害薬、トポイソメラーゼ阻害剤または細胞傷害性抗生物質である、組成物。

【0254】

項目３６：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該化学療法剤はアントラサイクリン類、タキサン類および白金薬剤から成る群から選択される、組成物。

【0255】

項目３７：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該化学療法剤は、シスプラチン、パクリタキセル、アルブミン結合パクリタキセル、ドセタキセル、シクロホスファミド、エリブリン、エピルビシン、ドキソルビシン、カルボプラチン、ゲムシタビン、ブレオマイシン、フルオロウラシル、シクロホスファミド、ビノレルビン、カペシタビン、イキサベピロンおよびイキサベピロン、またはそれらの組み合わせから成る群から選択される、組成物。

【0256】

項目３８：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該組成物が少なくとも１種類の薬学的に許容可能な希釈剤、担体または賦形剤をさらに含む、組成物。

【0257】

項目３９：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該インテグリンα１０ポリペプチドがインテグリンα１０ポリペプチドの天然の変異体、インテグリンα１０ポリペプチドのイソ型またはインテグリンα１０ポリペプチドのスプライス変異体である、組成物。

【0258】

項目４０：上記項目のいずれかに記載の用途の組成物であって、ここで該抗体および／またはポリヌクレオチドが、インテグリンα１０ポリペプチドおよび／または転写物ポリヌクレオチドを発現する細胞の細胞死を誘導可能である、および／または増殖を阻害可能である、および／または増生を阻害可能である、および／または遊走を阻害可能である、組成物。

【0259】

項目４１：上記項目のいずれかに記載の用途の組成物であって、ここで該細胞が悪性細胞および／または腫瘍関連細胞である、組成物。

【0260】

項目４２：上記項目のいずれかに記載の用途の組成物であって、ここで該悪性細胞または腫瘍関連細胞が癌関連線維芽細胞（ＣＡＦ）、間質細胞、幹細胞および／または幹細胞様細胞である、組成物。

【0261】

項目４３：上記項目のいずれか１項に記載の用途の組成物であって、ここで該インテグリンα１０ポリペプチドがインテグリンα１０β１ヘテロ二量体の一部である、組成物。

【0262】

項目４４：上記項目のいずれかに記載の用途の組成物であって、ここで該治療は予防的、改善的または治癒的である、組成物。

【0263】

項目４５：上記項目のいずれかに記載の用途の組成物であって、ここで該対象の腫瘍の癌細胞においてインテグリンα１０ポリペプチドおよび／または転写物ポリヌクレオチドが検出されることにより該治療が開始されるものである、組成物。

【0264】

項目４６：上記項目のいずれかに記載の用途の組成物であって、ここで癌の放射線療法および／または外科的除去と組み合わせて、該組成物をそれが必要な個体に投与する、組成物。

【0265】

項目４７：上記項目のいずれかに記載の用途の組成物であって、ここで癌の放射線療法および／または外科的除去に先だって該組成物をそれが必要な個体に投与する、組成物。

【0266】

項目４８：上記項目のいずれかに記載の用途の組成物であって、ここで癌の放射線療法および／または外科的除去後に、該組成物をそれが必要な個体に投与する、組成物。

【0267】

項目４９：組成物であって、ここで該組成物が：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片；
または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド、
を含み、
乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌、および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される癌型の診断に用いる、組成物。

【0268】

項目５０：項目４９に記載の組成物であって、ここで同一種類の健常および／または良性組織に観察される（ｉ）インテグリンα１０抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドのレベルと同一またはより高いレベルを示す細胞を該癌が含む、組成物。

【0269】

項目５１：項目４９に記載の組成物であって、ここで同一組織種の癌のタイプではあるが、診断される癌のタイプと比較して低侵攻性の癌のタイプに観察される（ｉ）インテグリンα１０抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドのレベルと同一またはより高いレベルを示す細胞を該癌が含む、組成物。

【0270】

項目５２：項目４９に記載の組成物であって、ここで対照細胞株における（ｉ）インテグリンα１０抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルと同一またはそれよりも高いレベルを示す細胞を該癌が含む、組成物。

【0271】

項目５３：項目５２に記載の組成物であって、ここで該対照細胞株が健常組織に由来する、組成物。

【0272】

項目５４：項目５２～５３のいずれか１項に記載の組成物であって、ここで該対照細胞株が、健常乳房組織に由来する対照細胞株、健常前立腺組織に由来する対照細胞株、健常肺組織に由来する対照細胞株、健常膵臓組織に由来する対照細胞株および健常結合組織に由来する対照細胞株から成る群から選択される、組成物。

【0273】

項目５５：項目５２～５４のいずれか１項に記載の組成物であって、ここで該対照細胞株が健常乳癌組織に由来する細胞株１８４Ａ１である、組成物。

【0274】

項目５６：項目５２に記載の組成物であって、ここで該対照細胞株が、同一組織種の癌のタイプではあるが、診断される癌のタイプと比較して低侵攻性の癌のタイプに由来する、組成物。

【0275】

項目５７：項目５６に記載の組成物であって、ここで該対照細胞株が、低侵攻性乳癌に由来する対照細胞株、低侵攻性前立腺癌に由来する対照細胞株、低侵攻性肺癌に由来する対照細胞株、低侵攻性膵癌に由来する対照細胞株、および低侵攻性肉腫に由来する対照細胞株から成る群から選択される、組成物。

【0276】

項目５８：項目５６～５７のいずれか１項に記載の組成物であって、ここで該対照細胞株が、低侵攻性乳癌に由来する細胞株ＨＣＣ１４２８、低侵攻性乳癌に由来する細胞株Ｔ４７Ｄ、低侵攻性前立腺癌に由来する細胞株２２Ｒｖ１、低侵攻性前立腺癌に由来する細胞株ＤＵ１４５、低侵攻性膵癌に由来する細胞株ＢｘＰＣ－３および低侵攻性膵癌に由来する細胞株ＡｓＰＣ－１から成る群から選択される、組成物。

【0277】

項目５９：癌型を治療する方法であって、ここで該癌型が乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫から成る群から選択され、あるいは該癌型が転移癌であり、該方法が：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその断片、
または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド、
を含む薬学的有効量の組成物を、それが必要な対象に投与することを含む、方法。

【0278】

項目６０：対象において癌細胞を検出する方法であって、該方法が：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）該組織において：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した該発現レベルを対照レベルと比較する工程、
を含み、
ここで該対照レベルが、単離した試料と同一組織種の健常および／または良性細胞に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値であり、
ここで対照レベルより高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは対象において癌型が存在することの指標であり、ここで該癌型が乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【0279】

項目６１：対象において癌細胞を検出する方法であって、該方法は：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）該組織において：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意に（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
を含み、
ここで（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）インテグリンα１０転写物ポリヌクレオチドの発現と組み合わせて、癌形態を有する１個または複数個の細胞が存在することは、対象において癌型が存在することの指標であり、ここで該癌型は乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【0280】

項目６２：対象において癌型を診断する方法であって、該方法が：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）該組織において：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが同一組織種の健常および／または良性組織に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程、
を含み、
ここで対照レベルより高い（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルは、試料において癌型が存在することの指標であり、それによって対象における癌型を診断するが、ここで該癌型が乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【0281】

項目６３：対象において癌型を診断する方法であって、該方法が：
（ａ）対象において癌細胞を含むことが疑われる組織を提供する工程；
（ｂ）癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）試料中に：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド；
が存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意に（ｉ）インテグリンα１０抗原の発現レベルおよび／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程、
を含み、
ここで（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）インテグリンα１０転写物ポリヌクレオチドの発現と組み合わせて、癌形態を有する１個または複数個の細胞が存在することは、試料中に癌型が存在することの指標であり、それによって対象における癌型を診断するが、ここで該癌型が乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【0282】

項目６４：項目６０～６３のいずれか１項に記載の方法であって、ここで工程（ｂ）が項目１～５８のいずれか１項に記載の組成物またはその断片を該対象に投与することをさらに含む、方法。

【0283】

項目６５：項目６０～６４のいずれか１項に記載の方法であって、癌型に属する癌細胞を含むものとして試料を形態学的に特徴付けることをさらに含み、ここで該癌型が乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌、および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【0284】

項目６６：項目６０～６５のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法が対象において乳癌の存在を検出する方法または対象において乳癌を診断する方法であって、ここで該乳癌が乳癌型三重陰性乳癌および炎症性乳癌から成る群から選択され、ここで該方法が工程（ｂ）において判定したインテグリンα１０ポリペプチドの発現レベルを対照レベルと比較することを含み、ここで該対照レベルが健常および／または良性乳房組織細胞に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値であり、インテグリンα１０ポリペプチドを含む抗原のレベルが対照レベルよりも高いことが、対象において乳癌が存在することの指標である、方法。

【0285】

項目６７：項目６０～６５のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法が対象において肺癌の存在を検出する方法または対象において肺癌を診断する方法であって、ここで該方法が工程（ｂ）において判定したインテグリンα１０ポリペプチドの発現レベルを対照レベルと比較することを含み、ここで該対照レベルが非癌性肺細胞に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値であり、インテグリンα１０ポリペプチドを含む抗原のレベルが対照レベルよりも高いことが、対象において肺癌が存在することの指標である、方法。

【0286】

項目６８：項目６０～６５のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法が対象において扁平上皮肺細胞癌の存在を検出する方法または対象において扁平上皮肺細胞癌を診断する方法であって、ここで該方法が工程（ｂ）において判定したインテグリンα１０ポリペプチドの発現レベルを対照レベルと比較することを含み、ここで該対照レベルが非癌性肺細胞に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値であり、インテグリンα１０ポリペプチドを含む抗原のレベルが対照レベルよりも高いことが、対象において扁平上皮肺細胞癌が存在することの指標である、方法。

【0287】

項目６９：項目６０～６５のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法が対象において肺腺癌の存在を検出する方法または対象において肺腺癌を診断する方法であって、ここで該方法が工程（ｂ）において判定したインテグリンα１０ポリペプチドの発現レベルを対照レベルと比較することを含み、ここで該対照レベルが非癌性肺細胞に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値であり、インテグリンα１０ポリペプチドを含む抗原のレベルが対照レベルよりも高いことが、対象において肺腺癌が存在することの指標である、方法。

【0288】

項目７０：項目６０～６５のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法が対象において前立腺癌細胞の存在を検出する方法または対象において前立腺癌を診断する方法であって、ここで該方法が工程（ｂ）において判定したインテグリンα１０ポリペプチドの発現レベルを対照レベルと比較することを含み、ここで該対照レベルが非癌性前立腺細胞に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値であり、インテグリンα１０ポリペプチドを含む抗原のレベルが対照レベルよりも高いことが、対象において前立腺癌の癌型が存在することの指標である、方法。

【0289】

項目７１：項目６０～６５のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法が対象において膵癌細胞の存在を検出する方法または対象において膵癌を診断する方法であって、ここで該方法が工程（ｂ）において判定したインテグリンα１０ポリペプチドの発現レベルを対照レベルと比較することを含み、ここで該対照レベルが非癌性膵臓細胞に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値であり、インテグリンα１０ポリペプチドの発現レベルが対照レベルよりも高いことが、対象において膵癌の癌型が存在することの指標である、方法。

【0290】

項目７２：項目６０～６５のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法が対象において肉腫の存在を検出する方法または対象において肉腫を診断する方法であって、ここで該方法が工程（ｂ）において判定したインテグリンα１０ポリペプチドの発現レベルを対照レベルと比較することを含み、ここで該対照レベルが非癌性肉腫細胞に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値であり、インテグリンα１０ポリペプチドを含む抗原のレベルが対照レベルよりも高いことが、対象において肉腫が存在することの指標である、方法。

【0291】

項目７３：対象の三重陰性乳癌腫瘍試料を分類する方法であって、該方法は：
（ａ）癌細胞を含むことが疑われる対象の乳房組織を提供する工程；
（ｂ）ＥＲ陰性、ＰＲ陰性かつＨＥＲ２陰性であると特徴づけられる乳癌細胞を単離する工程；
（ｃ）単離した細胞における：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
の発現レベルを判定する工程；
および
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが健常および／または良性乳房組織に観察される（ｉ）抗原または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程；
を含み、
ここで対照レベルより高い乳癌細胞における（ｉ）抗原発現レベルおよび／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチド発現レベル、およびＥＲ陰性、ＰＲ陰性およびＨＥＲ２陰性である発現状態は、基底細胞様三重陰性乳癌または管腔型三重陰性乳癌の指標であり、それにより三重陰性乳癌腫瘍試料を基底細胞様三重陰性乳癌腫瘍または管腔型三重陰性乳癌腫瘍に属するものとして分類する、方法。

【0292】

項目７４：項目７３に記載の方法であって、ここでインテグリンα１０の発現ならびにサイトケラチン７、サイトケラチン８、サイトケラチン１８およびサイトケラチン１９から成る群から選択される１種類または複数種類のポリペプチドの発現が管腔型三重陰性乳癌の指標である、方法。

【0293】

項目７５：項目７３に記載の方法であって、ここでインテグリンα１０の発現ならびにサイトケラチン５／６、サイトケラチン１４、サイトケラチン１７、ｐ６３、ＥＧＦＲ、３４ＢＥ１２およびｃ－ｋｉｔ／ＣＤ１１７から成る群から選択される１種類または複数種類のポリペプチドの発現が基底細胞様三重陰性乳癌の指標である、方法。

【0294】

項目７６：対象における癌型の予後を判定する方法であって、該方法が：
（ａ）対象の癌腫瘍組織を提供する工程；
（ｂ）試料中に：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド；
が存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する工程；
（ｄ）工程（ｃ）で判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが試料と同一組織種の健常および／または良性組織に観察される（ｉ）抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、工程；
（ｅ）（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）インテグリンα１０転写物ポリヌクレオチドの発現レベルが対照レベルよりも高い場合に、該癌型の予後が不良であると判定する工程、
を含むが、
ここで該癌型が乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【0295】

項目７７：対象における癌型の予後を判定する方法であって、該方法が：
（ａ）対象の癌腫瘍組織を提供する工程；
（ｂ）任意に癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在するか否かを分析する工程；
（ｃ）試料中に：
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド；
が存在するか否かを分析する工程；
（ｄ）任意に（ｉ）インテグリンα１０抗原の発現レベルおよび／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定し、判定した発現レベルを対照レベルと比較する工程であって、ここで該対照レベルが試料と同一の組織種の健常および／または良性組織に観察される（ｉ）抗原の発現レベルおよび／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である工程；
（ｅ）癌形態を有する１個または複数個の細胞が組織中に存在し、かつ（ｉ）インテグリンα１０の抗原および／または（ｉｉ）インテグリンα１０の転写物ポリヌクレオチドが発現している、
および／または
（ｉ）インテグリンα１０抗原の発現レベルおよび／または（ｉｉ）インテグリンα１０転写物ポリヌクレオチドの発現レベルが対照レベルよりも高い場合に、
該癌型の予後が不良であると判定する工程、
を含むが、
ここで該癌型が乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される、方法。

【0296】

項目７８：項目７６～７７のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該予後が総生存率または無再発生存率である、方法。

【0297】

項目７９：項目６０～７８のいずれか１項に記載の方法であって、ここで試料中に
（ｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｉｉ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド；
が存在するか否かを分析する該工程が組織および／または組織試料のイメージングを含む、方法。

【0298】

項目８０：項目６０～７９のいずれか１項に記載の方法であって、ここで（ｉ）インテグリンα１０抗原および／または（ｉｉ）転写物ポリヌクレオチドの発現レベルを判定する該工程が、組織および／または組織試料のイメージングを含む、方法。

【0299】

項目８１：乳癌、肺癌、前立腺癌、膵癌および肉腫から成る群から選択される癌型である原発癌の転移を予防する方法であって、ここで該方法は：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的な抗体またはその抗原結合断片；
および／または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
をそれが必要な患者に治療有効量で投与することを含む、方法。

【0300】

項目８２：項目８１に記載の方法であって、ここで原発癌が検出された場合に、（ａ）抗体または抗原結合断片および／または（ｂ）転写物ポリヌクレオチドが投与される、方法。

【0301】

項目８３：少なくとも１個の癌細胞のインテグリンα１０媒介性シグナル伝達を阻害する方法であって、該方法が少なくとも１個の癌細胞を、有効量の：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的な抗体または抗原結合断片；
および／または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
を含む組成物に接触させることを含み、
ここで該少なくとも１個の癌細胞が乳癌細胞、肺癌細胞、前立腺癌細胞、膵癌細胞、肉腫細胞および転移性腫瘍細胞から成る群から選択される、方法。

【0302】

項目８４：少なくとも１個の癌細胞の細胞機能を阻害する方法であって、ここで有効量の：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドに特異的な抗体または抗原結合断片；
および／または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
を含む組成物に少なくとも１個の癌細胞を接触させることを該方法が含み、
ここで該少なくとも１個の癌細胞が乳癌細胞、肺癌細胞、前立腺癌細胞、膵癌細胞、肉腫細胞および転移性腫瘍細胞から成る群から選択される、方法。

【0303】

項目８５：項目６０～８４のいずれか１項に記載の方法であって、ここでインテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む該抗原が細胞表面上に発現する、方法。

【0304】

項目８６：少なくとも１個の癌細胞の細胞機能を阻害する、項目８４～８５のいずれか１項に記載される方法であって、ここで該少なくとも１個の癌細胞が腫瘍および／または転移性腫瘍中に存在し、阻害することが：
（ａ）少なくとも１個の癌細胞の増殖を阻害すること；
（ｂ）少なくとも１個の癌細胞の自己複製を阻害すること；
（ｃ）少なくとも１個の癌細胞の足場非依存性増殖を阻害すること；
（ｄ）少なくとも１個の癌細胞の遊走を阻害すること；
（ｅ）少なくとも１個の癌細胞の浸潤を阻害すること；
（ｆ）少なくとも１個の癌細胞の生存を阻害すること；
（ｇ）少なくとも１個の癌細胞の接着を阻害すること；
および／または
それらの組み合わせ、
から成る群から選択される、方法。

【0305】

項目８７：少なくとも１個の癌細胞の細胞機能を阻害する、項目８４～８６のいずれか１項に記載される方法であって、ここで該少なくとも１個の癌細胞が腫瘍および／または転移性腫瘍中に存在し、該少なくとも１個の癌細胞の細胞機能を阻害することが：
（ａ）腫瘍および／または転移性腫瘍の増殖を阻害すること；
（ｂ）腫瘍および／または転移性腫瘍の増生を阻害すること；
（ｃ）腫瘍および／または転移性腫瘍の移動を阻害すること；
（ｄ）腫瘍および／または転移性腫瘍の浸潤を阻害すること；
（ｅ）新規の腫瘍および／または転移性腫瘍の広がりを阻害すること；
（ｆ）新規の腫瘍および／または転移性腫瘍の発生を阻害すること；
（ｇ）新規の腫瘍および／または転移性腫瘍の浸潤を阻害すること；
および／または
それらの組み合わせ、
のうちの少なくとも１つである、方法。

【0306】

項目８８：項目８３～８７のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該少なくとも１個の癌細胞は：
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片を含む抗原；
および／または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチド、
の発現レベルが対照レベルよりも高いことによって特徴付けられ、
ここで該対照レベルが癌細胞と同一組織種の健常および／または良性細胞に観察される（ａ）抗原および／または（ｂ）ポリヌクレオチドの発現レベルの平均値である、方法。

【0307】

項目８９：項目４９～８８のいずれか１項に記載の方法および／または組成物であって、ここで該組成物が項目１～４８のいずれか１項に記載の組成物である、方法および／または組成物。

【0308】

項目９０：項目５９～８９のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法が項目１～４８のいずれか１項に記載の組成物、またはその断片を該対象に投与することをさらに含む、方法。

【0309】

項目９１：項目６０～９０のいずれか１項に記載の方法であって、ここで該方法がインビトロ法であり、該組織が対象から取得される組織試料である、方法。

【0310】

項目９２：請求項４９の組成物であって、ここで該診断がインビトロ診断である、組成物。

【0311】

項目９３：組成物の用途であって、ここで該組成物が、
（ａ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片に特異的に結合する抗体、
または
（ｂ）インテグリンα１０ポリペプチドまたはその断片またはその変異体（改変体）をコードする転写物ポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド
を含み、該組成物が、乳癌、肺癌、前立腺癌および膵癌、または該癌型のいずれかの転移癌から成る群から選択される癌型の治療および／または予防のための薬剤の製造に用いられる、用途。

【0312】

項目９４：項目１～９３のいずれか１項に記載の組成物、用途または方法であって、ここで該癌型が侵攻性乳癌、侵攻性肺癌、侵攻性前立腺癌、侵攻性膵癌および侵攻性肉腫から成る群から選択される侵攻性癌型である、組成物、用途または方法。

【0313】

実施例
実施例１：非罹患組織領域における発現と比較した、乳房腫瘍、肺腫瘍、膵臓腫瘍および肉腫を含む侵攻性腫瘍の組織における、免疫組織化学的に可視化したインテグリンα１０の蛋白質発現
材料と方法
乳房組織、肺組織、膵臓組織および肉腫組織検体から成るヒト材料を用いた。免疫組織化学の標準プロトコル（Ｒｅｎｓｈａｗ ２００７、ＩＳＢＮ１０：１ ９０４８４２ ０３８、Ｓｃｉｏｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｌｔｄ、ＵＫを参照のこと）はＨＲＰポリマー共役２次抗体（ＤＡＫＯ Ｅｎｖｉｓｉｏｎ 抗ウサギ、ＤＫ）を用いて最適化し（下記を参照のこと）、次にジアミノベンジジンおよび過酸化水素による反応を行った。

【0314】

乳房組織および膵臓組織について：パラフィン切片（４または８μｍ）を用いた。
標準プロトコルにしたがい、スライドをキシレンに浸漬することによって切片を脱パラフィンし、エタノールと水の系列溶液を用いて再水和した。標識プロトコル最適化のために実施した処置としては、抗原回復のためのパラフィン切片処理が挙げられ、この処理では、酸性緩衝溶液（クエン酸緩衝液：１０ｍＭクエン酸ナトリウム、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、ｐＨ６．０）にスライドを浸漬した後、熱処理（９２～９５°Ｃ）を行った。

【0315】

肺組織および肉腫組織について：
凍結切片（８μｍ）および上記と同一のプロトコルを用いた。標識プロトコル最適化のために実施した処置としては、アセトン（１００％）による凍結切片の後固定（－２０℃）および０．３％過酸化水素によるクエンチングが挙げられるが、これらはブロッキング（１％ＢＳＡおよび０．０５％Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００を含むＰＢＳ）の前に実施した。前処理とインキュベーション工程の間で、ＰＢＳによる３分間のすすぎを３回実施した。

【0316】

Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００（０．０５％）を１次抗体希釈緩衝液に添加した。前処理とインキュベーション工程の間で、ＰＢＳによる３分間のすすぎを３回実施した。マイヤーヘマトキシリン溶液を用いて切片を対比染色することにより、核を可視化した。

【0317】

用いた１次抗体は、３μｇ／ｍｌ濃度のウサギ抗インテグリンα１０ポリクローナル抗体である。

【0318】

結果
インテグリンα１０は浸潤性腺管癌を含む複数の侵攻性癌型（図１Ａ）および三重陰性乳癌組織（図２）において特異的に高発現するが、形態学的には正常である乳房組織（図１Ｂ）ではインテグリンα１０発現は無視できる程度である。予想通り、インテグリンα１０は細胞膜（矢印）に局在した。

【0319】

さらに、扁平上皮型肺癌細胞（データ非提示）および膵癌細胞ならびに膵管腺癌組織中の増殖膵島細胞（データ非提示）においてインテグリンα１０が顕著に発現していたが、周囲の形態学的に健常な組織ではそのような発現は認められなかった。未分化多形肉腫細胞（図３）においてインテグリンα１０が顕著に発現していた。

【0320】

結論
最も高侵攻性であると見なされる複数の異なる癌型において得られた患者組織に、インテグリンα１０が顕著に発現することを、この結果は示している。

【0321】

実施例２：乳癌および前立腺癌細胞株において、免疫蛍光によって可視化したインテグリンα１０の発現
材料と方法
三重陰性乳癌細胞株ＢＴ５４９および管腔Ａ乳癌細胞株Ｔ４７Ｄの細胞（もともとは、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ－ＡＴＣＣから取得したものである）を単層で増殖させ、一方、前立腺癌細胞株ＰＣ－３の細胞はＩｂｉｄｉマイクロスライド８ウェル顕微鏡スライド（Ｉｂｉｄｉ Ｌａｂｗａｒｅ、Ｇｅｒｍａｎｙ）上で球体に増殖させた。ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０７０８３８の実施例２に記載の免疫蛍光プロトコルにしたがって実施した。用いた１次抗体は、インテグリンα１０に対するマウスモノクローナル代替抗体であり、１．７μｇ／ｍｌで用いた。２次抗体は、蛍光色素分子共役抗体（抗マウスＡＦ４８８またはＡＦ６４７共役および／または抗ウサギＡＦ４８８またはＲｏｄＲＸ、いずれもロバで作成したものであり、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、ＵＳＡから入手した）であった。２次抗体はいずれも１％ＢＳＡを含むＰＢＳで１：２００に希釈し、インキュベーションは３０分間実施した。

【0322】

結果
免疫蛍光を共焦点顕微鏡法によって観察したところ、インテグリンα１０は異なる２種類の乳癌細胞株（図４Ａ～Ｂ）および前立腺癌細胞株（図４Ｃ）のそれぞれにおいて細胞膜に特異的に高発現することが明らかになった。

【0323】

結論
この結果は、インテグリンα１０が異なる侵攻性癌由来の細胞株において顕著に発現することを実証している。

【0324】

実施例３：ヒト非悪性および癌細胞株の単層培養およびインテグリンα１０蛋白質発現のフローサイトメトリー分析
材料と方法
以下の癌細胞株は、もともとはＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から取得したものである：乳癌細胞株１８４Ａ１、ＨＣＣ１４２８、Ｔ４７Ｄ、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＢＴ５４９；肺癌細胞株Ａ５４９（腺癌）およびＵ－１７５２（扁平上皮型肺癌）；前立腺癌細胞株：２２Ｒｖ１、Ｄｕ１４５およびＰＣ－３；膵癌細胞株ＢｘＰＣ－３、ＡｓＰＣ－１、ＰＡＮＣ－１およびＭｉａＰａＣａ－２。

【0325】

細胞株１８４Ａ１は、乳房縮小術で得られた健常乳房組織から確立した。該組織に由来する細胞をベンゾ（ａ）ピレンに曝露して形質転換株を確立した。この細胞株では、細胞は不死化状態であるが悪性ではないと思われる。その他の細胞株はいずれも、悪性腫瘍に由来する悪性細胞である（下の表を参照のこと）。

【0326】

暗所４℃で３０分間、細胞を１．０μｇ／ｍｌ濃度のマウス抗インテグリン１０モノクローナル代替抗体（Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７複合体）と共にインキュベートすることによって、細胞を免疫染色した。１次抗体と共に３０分間インキュベートした後、細胞を１％ＦＢＳおよび０．１％アジ化ナトリウムを含むＤＰＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ、ＳＨ３００２８０２）で２回洗浄してから、ＢＤ Ａｃｃｕｒｉ Ｃ６フローサイトメーターを用いたフローサイトメトリーにより分析した。

【0327】

【表2】

【0328】

結果
乳癌の結果から、単層培養したＴ４７Ｄではインテグリンα１０が中程度に発現し、三重陰性細胞株ＢＴ５４９ではインテグリンα１０が高度に発現する（図５Ａおよび５Ｂ）ことが分かる。単層培養では、侵攻性前立腺癌細胞ＰＣ－３のインテグリンα１０発現が最も高かった（図５Ｅおよび５Ｆ）。さらに、最も高浸潤性の高悪性度膵癌細胞株（グレードＩＩＩ）であるＭｉａＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１もまた、インテグリンα１０発現が最も高かった（図５Ｉ）。対照的に、低侵攻性膵癌細胞株であるＢｘＰＣ－３およびＡｓＰＣ－１では、インテグリンα１０が発現していないか、していてもより低いレベルであり、このことは特に球体培養で明らかである（実施例４、図５Ｊを参照のこと）。単層培養肺癌細胞では発現がかなり低かった（図５Ｋ）が、同細胞を球体培養した場合には発現が上昇した（図５Ｌおよび実験４）。

【0329】

結論
この結果は、最も高侵攻性の癌のタイプでインテグリンα１０の発現が最大であることを示している。このことは、異なる癌の悪性度とインテグリンα１０との間に相関があることを示唆し、したがって多分、細胞遊走や侵襲性とも相関するであろうと考えられる。このような所見は、単培養系において容易に認められ得、三次元（３Ｄ）培養系（実施例４を参照のこと）ではさらに明らかである。三次元細胞培養モデルは細胞間相互作用、細胞－ＥＣＭ相互作用、および細胞集団、ならびにインビボ構築に類似した構造に関しても改善されているため、従来型の二次元単層培養よりも良いモデルである。

【0330】

実施例４：球体形成アッセイにおけるインテグリンα１０蛋白質の検出と分析
材料と方法
乳房細胞株１８４Ａ１、ＨＣＣ１４２８、Ｔ４７Ｄ、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＢＴ５４９の細胞、または肺癌細胞株Ａ５４９およびＵ－１７５２、または前立腺癌細胞株２２Ｒｖ１、ＤＵ１４５およびＰＣ－３細胞、または膵癌細胞株ＢｘＰＣ－３、ＡｓＰＣ－１、ＰＡＮＣ－１およびＭｉａＰＡＣａ－２、または肉腫細胞株ＭＦＨ１５２は、自己複製能を有する非接着性球体（乳癌ではマンモスフェアと称し、前立腺癌ではプロスタスフェアと称する）を形成させるため、超低接着表面プレート（ｕｌｔｒａ－ｌｏｗ ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ ｐｌａｔｅｓ、ＣＬＳ３４７１、Ｃｏｒｎｉｎｇ）中の血清不含培地に播種した。非足場型培養物は一般的にスフェロイドまたは球体として知られる細胞凝集体によって形成される。球体形成のためのプレーティング培地は、Ｂ２７（１２５８７－０１０、Ｇｉｂｃｏ）、２０ｎｇ／ｍｌヒト塩基性線維芽細胞増殖因子（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）、２０ｎｇ／ｍｌヒト上皮成長因子（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）および１００Ｕ／ｍｌペニシリン、１００Ｕ／ｍｌストレプトマイシンを添加したＤＭＥＭ／Ｆ１２（１：１）ｗ／Ｇｌｕｔａｍａｘ（３１３３１－０８、Ｇｉｂｃｏ）培地から成るものであった。細胞は恒温装置中で約１０日間、恒温静置したが、特に最初の５日間は静置状態を保った。免疫染色およびフローサイトメトリー分析は、マウス抗インテグリンα１０モノクローナル代替抗体を用いて実施例３に記載のように実施した。三次元培養系は優れたインビトロモデルを提供するので、インビボ環境に類似した状況での細胞応答研究が可能になる。

【0331】

結果
腫瘍増殖をインビトロで模倣する三次元（球体）条件下で侵攻性三重陰性乳癌細胞ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＢＴ５４９を培養した場合には、インテグリンα１０の発現が有意に増加する（図５Ｃ～Ｄ）ことが、乳癌の実験結果により実証された。非悪性または低侵攻性乳房細胞株１８４Ａ１およびＨＣＣ１４２８では、いずれも球体培養によってインテグリンα１０が増加することはなかった。前立腺癌由来の侵攻性癌細胞株ＰＣ－３においてもまた、（単層培養（図５Ｅ～Ｆ）と比較して）細胞を球体に増殖させた（図５Ｇ～Ｈ）場合には、いずれもインテグリンα１０の蛋白質の発現が上方制御された。同様に、侵攻性膵癌細胞ＰＡＮＣ－１およびＭｉａＰａＣａ－２も容易に球体を形成し、単層培養と比較してインテグリンα１０の蛋白質の発現は有意に増加した（図５Ｉ～Ｊ）。対照的に、細胞株ＢｘＰＣ－３およびＡｓＰＣ－１ではインテグリンα１０の発現増加は認められず、さらに、ＡｓＰＣ－１の培養では球体が形成されなかった。球体に増殖した肺癌細胞Ａ５４９およびＵ－１７５２では、インテグリンα１０蛋白質のレベルが顕著に増加した（図５Ｋ～Ｌ）。同様に、侵攻性肉腫細胞株ＭＦＨ１５２も容易に球体を形成し、単層培養と比較してインテグリンα１０の発現が蛋白質のレベルで顕著に増加した（図５Ｍ）。

【0332】

結論
本結果は、最も高侵攻性の癌のタイプにおいてインテグリンα１０発現が最大であることを実証する。インビボ腫瘍増殖を模倣する優れた方法である球体培養（三次元細胞培養）では、侵攻性癌細胞のインテグリンα１０発現がさらに増加する。このことは、インテグリンα１０と侵攻性癌との間の相関をさらに支持する。

【0333】

実施例５：単層または球体に培養したヒト乳癌、前立腺癌、および膵癌細胞株におけるインテグリンα１０ ｍＲＮＡ（ＩＴＧＡ１０）発現の検出と分析
材料と方法
単層で、あるいは腫瘍増殖を模倣する球体のいずれかで培養した異なる細胞株について、ＲＮＡ抽出および定量ＰＣＲを行った。ＲＮｅａｓｙ Ｐｌｕｓミニキット（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて細胞から全ＲＮＡを抽出し、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ ｃＤＮＡ合成キット（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いた逆転写によってｃＤＮＡに変換した。定量ＰＣＲには、ＴａｑＭａｎ遺伝子発現マスターミックス（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）およびＴａｑＭａｎプローブ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いた：ＧＡＰＤＨ（Ｍｍ９９９９９９１５＿ｇ１）およびＩＴＧＡ１０（Ｍｍ０１２６５７６７＿ｍ１）。ΔＣｔを得るためにハウスキーピング遺伝子ＧＡＰＤＨの幾何平均に対して標的遺伝子の閾値到達サイクル数を正規化した。最終分析において、２の－ΔＣｔ乗（２^－ΔＣｔ）を算出した。

【0334】

結果
それぞれの図に示されるように、低浸潤性かつ低侵攻性である細胞株、すなわち非悪性乳房細胞１８４Ａ１、ならびに乳癌細胞ＨＣＣ１４２８およびＴ４７Ｄ、前立腺癌細胞２２ＲＶ１およびＤＵ１４５、ならびに膵癌細胞ＢｘＰＣ－３およびＡｓＰＣ－１と比較して、高浸潤性かつ高侵攻性である癌細胞、すなわち三重陰性乳癌細胞ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＢＴ５４９（図６Ａ～Ｂ）、前立腺癌細胞ＰＣ－３（図６Ｃ～Ｄ）、ならびに膵癌細胞ＰＡＮＣ－１およびＭｉａＰａＣａ－２（図６Ｅ～Ｆ）では、インテグリンα１０ ｍＲＮＡ（ＩＴＧＡ１０）のレベルがより高かった。さらに、単層条件に比較して、細胞を球体条件で培養した場合には、インテグリンα１０ ｍＲＮＡ（ＩＴＧＡ１０）のレベルが有意に増加した（図６Ａ対６Ｂ、図６Ｃ対６Ｄ、および図６Ｅ対６Ｆを参照のこと）。

【0335】

結論
本結果は、最も高侵攻性の癌のタイプにおいてインテグリンα１０ ｍＲＮＡの発現が最も高いことを実証している。インビボ腫瘍増殖を模倣する優れた方法である球体培養（三次元細胞培養）では、侵攻性癌細胞におけるインテグリンα１０発現がさらに増加する。このことは、インテグリンα１０と侵攻性癌との間の相関をさらに支持する。

【0336】

実施例６：症状の異なる癌における総生存率曲線とＩＴＧＡ１０遺伝子発現
材料と方法
三重陰性乳癌患者２５５名（Ｇｙｏｒｆｆｙ Ｂら、２０１０）について、その総生存率曲線とＩＴＧＡ１０遺伝子発現（Ａ）を分析した。中央値カットオフにもとづいて、患者をＩＴＧＡ１０低発現およびＩＴＧＡ１０高発現コホートに分けた。カプラン・マイヤーのプロットを作成し、無再発生存率間の差異を判定するためにログランク検定を用いた。分析に用いたカットオフ値は２２４であった。

【0337】

扁平上皮型肺癌（データベースＧＳＥ４５７３、８８試料）、前立腺腺癌（データベースＴＣＧＡ－前立腺腺癌、４１３試料）、限局性の膵管腺癌（データベースＧＳＥ２１１５０１、１０２試料）、および肉腫（データベースＴＣＧＡ－肉腫、２３４試料）に関する総生存率曲線を、中央値で分けたＩＴＧＡ１０高発現群およびＩＴＧＡ１０低発現群についてＰＲＯＧｇｅｎｅＶ２ツールを用いて分析した。本分析により、対応するマイクロアレイ・データセットにおいて、ＩＴＧＡ１０の遺伝子発現が予後にどのように相関するのかを調べることができる（Ｇｏｓｗａｍｉ ＣＰら、２０１３）。

【0338】

結果
生存率曲線は、高ＩＴＧＡ１０発現（実線）と低ＩＴＧＡ１０発現（点線）の患者間における総生存率の差異を示している（図７）。生存率分析およびログランク検定を行うために、中央値カットオフにもとづいて患者を高ＩＴＧＡ１０発現群と低ＩＴＧＡ１０発現群に分けた。Ｐ値は総生存率の差異のログランク検定に関するものである。記載の癌型すべてについて、ＩＴＧＡ１０高発現の患者群ではＩＴＧＡ１０低発現患者群に比較して生存率が低い。

【0339】

結論
記載の癌のタイプにおいて、ＩＴＧＡ１０の高発現は低総生存率と相関する。

【0340】

実施例７：抗体によるインテグリンα１０ブロッキング後の細胞接着阻害
材料と方法
接着アッセイの前日に、４８穴プレートをＩ型コラーゲン（Ｓｉｇｍａ、Ｃ７６６１－５ＭＧ）、ＩＶ型コラーゲン（Ｓｉｇｍａ、Ｃ５５３３－５ＭＧ）またはウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）でコーティングした。実験の当日に、非特異的結合をブロックするためにプレートを３７℃で３０分間、０．２５％ＢＳＡと共にインキュベートした。同時に、癌細胞（乳癌細胞ＢＴ５４９および前立腺癌細胞ＰＣ－３）を回収し、ＨＢＳＳに懸濁して単一の細胞懸濁液とした。インテグリンα１０ポリペプチドに対する、１０μｇ／ｍｌ濃度のマウスモノクローナル抗体ｍＡｂαの存在下または非存在下で、細胞を３０分間、予備定温静置した。アイソトープマウス対照モノクローナル抗体ＩｇＧ２ａを陰性対照として用いた。次に、細胞を６０分間、接着させ、ＨＢＳＳで洗浄することによって非接着細胞を除去した。９６％エタノールで接着細胞を固定し、０．１％クリスタルバイオレットで染色した。プレート読み取り装置により、５９０ｎｍの波長で吸光度を測定した。

【0341】

結果
インテグリンα１０ポリペプチドに対する機能ブロッキング・モノクローナル抗体を用いた乳房細胞ＢＴ５４９の処理によって、ＢＴ５４９細胞のＩ型コラーゲンおよびＩＶ型コラーゲンに対する細胞接着が有意に増加した（図８）。単層培養（図８Ａ～Ｂ）およびマンモスフェア培養（図８Ｃ～Ｄ）した細胞を、非処理またはＩｇＧ２ａ処理細胞と比較した場合のいずれにおいても、この効果が認められた。同様に、機能ブロッキング・インテグリンα１０モノクローナル抗体を用いた処理によって、球体培養したＰＣ－３細胞のＩ型コラーゲンおよびＩＶ型コラーゲンに対する細胞接着は、対照としての非処理細胞と比較して有意に減少した（図８Ｅ～Ｆ）。ＢＳＡでコーティングしたウェルを陰性対照として用いたが、その理由はインテグリン受容体が細胞外マトリックス（ＥＣＭ）への細胞接着を媒介するので、ＢＳＡでコーティングしたウェルには細胞が接着しないからである。

【0342】

結論
本結果は、インテグリンα１０機能阻害抗体は接着をブロックすることが可能であり、それによって腫瘍細胞の主要な機能（増生、遊走および増殖など）に影響を与える可能性があることを明らかにした。

【0343】

実施例８：モノクローナル抗体でインテグリンα１０をブロッキングした後の細胞遊走低下
材料と方法
乳癌細胞ＢＴ５４９、肺癌細胞Ａ５４９および前立腺癌ＰＣ－３の癌細胞に対して、孔径８μｍのポリカーボネート・フィルターを有するボイデンチャンバー（Ｃｏｒｎｉｎｇ）を用いて細胞遊走アッセイを実施した。乳癌細胞ＢＴ５４９についてはフィルターをＩＶ型コラーゲン（Ｓｉｇｍａ、Ｃ５５３３－５ＭＧ）のコラーゲンでコーティングし、前立腺癌細胞ＰＣ－３についてはＩ型コラーゲン（Ｓｉｇｍａ、Ｃ７６６１－５ＭＧ）のコラーゲンでコーティングしたが、肺癌細胞Ａ５４９に関しては無コーティングとした。細胞遊走アッセイのコラーゲン希釈標準溶液（０．０１ｍｇ／ｍｌ）は、原液（１ｍｇ／ｍｌ）からＰＢＳを用いて調製した。下槽を化学誘引物質としての１０％ＦＢＳ含有培地で満たし、インテグリンα１０に対するモノクローナル抗体も添加した。ボイデンチャンバーの上槽に細胞を加える前に、癌細胞を５μｇ／ｍｌの抗体と共に３０分間インキュベートした。２４時間後または４８時間後に下槽の細胞を固定して、クリスタルバイオレットで染色した。プレート読み取り装置（ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ ＡＢＳ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）で、ＯＤ５９０ｎｍの測定を行った。

【0344】

乳癌細胞の細胞遊走アッセイ：インテグリンα１０の異なるエピトープに結合する、マウス抗インテグリンα１０モノクローナル抗体（ｍＡｂα１０）またはヒト抗インテグリンα１０抗体であるＴｈ１０１のいずれかと共に細胞をインキュベートした（実施例１２を参照のこと）。陰性対照として、陰性対照抗体Ｔｈ３０１（ヒトＩｇＧ１ ＶＨ／ラムダ）または陰性／アイソトープ対照抗体ＩｇＧ２ａ（マウスモノクローナルＩｇＧ２ａ、κ）と共に細胞をインキュベートした、あるいは抗体処理を完全に省略した（ＮＴ＝非処理）。

【0345】

前立腺癌細胞の細胞遊走アッセイ：細胞をマウス抗インテグリンα１０モノクローナル抗体（ｍＡｂα１０）と共にインキュベートし、２４時間または４８時間、遊走させた。陰性対照として、細胞をアイソトープ対照抗体ＩｇＧ２ａと共にインキュベートした。

【0346】

肺癌の細胞遊走アッセイ：細胞をマウス抗インテグリンα１０モノクローナル抗体（ｍＡｂα１０）と共に２４時間または４８時間インキュベートした。陰性対照として、細胞をアイソトープ対照抗体ＩｇＧ２ａと共にインキュベートした。

【0347】

結果
乳癌細胞：抗インテグリンα１０モノクローナル抗体ｍＡｂα１０とのインキュベーションまたはＴｈ１０１とのインキュベーションのいずれにおいても、非処理細胞または対照抗体と共にインキュベートした細胞と比較して細胞遊走が低下した（図９Ａ）。両方の抗インテグリンα１０抗体が類似の効果を発揮した。

【0348】

前立腺癌細胞：抗インテグリンα１０抗体ｍＡｂα１０とのインキュベーションでは、対照抗体と共にインキュベートした細胞と比較して細胞遊走が低下した（図９Ｂ）。２４時間に比較して細胞を４８時間アッセイした場合には、この効果が増強した。

【0349】

肺癌細胞：同様に、抗インテグリンα１０モノクローナル抗体ｍＡｂα１０とのインキュベーションでは、対照抗体と共にインキュベートした細胞と比較して細胞遊走が低下した（図９Ｃ）。

【0350】

結論
インテグリンα１０モノクローナル抗体はインテグリンα１０をブロック可能であり、乳癌細胞および前立腺癌細胞の遊走（それぞれ、図９Ａおよび図９Ｂ）ならびに肺癌細胞の遊走（図９Ｃ）を阻害することが、本結果によって実証される。

【0351】

実施例９：インテグリンα１０抗体薬剤複合体で処理した乳癌細胞の生存率低下
材料と方法
乳癌細胞ＢＴ５４９を９６穴プレートで単層培養し、抗インテグリンα１０－ＭＭＡＥ ＡＤＣ（抗体薬剤複合体または抗対照－ＭＭＡＥ ＡＤＣ）で処理した。ＡＤＣはインテグリンα１０マウスモノクローナル代替抗体（ＩｇＧ１（ｋａｐｐａ））またはアイソタイプ対照抗体ＩｇＧ１（ａｎｔｉ－ｃｔｒｌ）に微小管阻害剤であるモノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）を結合した複合体である。細胞を２３ｎＭ、６９ｎＭまたは２０７ｎＭのＡＤＣと共に、３７℃で４日間インキュベートした。細胞生存率の判定は、ＷＳＴ－１アッセイ（Ｒｏｃｈｅ、Ｍａｎｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて製造元の推奨にしたがって実施した。

【0352】

結果
強力な細胞毒素であるＭＭＡＥ（抗α１０－ＭＭＡＥ）と複合体化したインテグリンα１０抗体から成る抗体薬剤複合体（ＡＤＣ）は、乳癌細胞に細胞死を誘導した（図１０）。対照的に、ＭＭＡＥを複合体化したアイソタイプ対照抗体ＩｇＧ１（対照抗体－ＭＭＡＥ）で細胞を処理した場合には、細胞死は観察されなかった。抗体薬剤複合体の濃度が高くなるにしたがい、乳癌細胞の生存率は低下した。

【0353】

結論
本結果は、インテグリンα１０抗体複合体による特異的細胞傷害性効果を実証している。

【0354】

実施例１０：抗α１０モノクローナル抗体処理は侵攻性乳癌細胞、侵攻性膵癌細胞、および侵攻性肺癌細胞のインビトロ細胞増殖を抑制する
材料と方法
球体アッセイ（図１１Ａ～ＤおよびＦ）：乳癌細胞（ＢＴ５４９）、前立腺癌細胞（ＰＣ－３）、膵癌細胞（ＭｉａＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１）および肺癌細胞（Ａ５４９）は、非接着球体を形成させるために超低接着表面６穴プレート（ＣＬＳ３４７１、Ｃｏｒｎｉｎｇ）中の血清不含培地に播種した。播種と同時に、細胞を１０μｇ／ｍｌの抗インテグリンα１０モノクローナル抗体ｍＡｂα１０または対照抗体（ＩｇＧ２ａ）のいずれかで処理した。該抗体を１４日間、２日毎にさらに添加した。１４日間の処理後に、球体にＢｒｄＵ（最終濃度１０μＭ）を添加して細胞を２４時間インキュベートした。次に、ＢｒｄＵ分析を実施するために、フローサイトメトリーを用いて、ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｇｅｎ ＡＰＣ ＢｒｄＵフローキット（カタログ番号：５５２５９８）の説明書にしたがい細胞を回収した。ＢｒｄＵ染色の平均蛍光強度を算出した。肺癌細胞（Ａ５４９）に関しては、ＢｒｄＵ染色に加え、全ＤＮＡを染色するために７－アミノアクチノマイシンＤ（７－ＡＡＤ）を添加した。ＢｒｄＵ染色および７－ＡＡＤ染色の両方にもとづいて、細胞周期分析を実施した。

【0355】

単層アッセイ（図１１Ｅ）：接着性乳癌細胞ＢＴ５４９を、ＩＶ型コラーゲンでコーティングした９６穴プレートに播種し、細胞播種直後に最終濃度が５μｇ／ｍｌになるように抗インテグリンα１０モノクローナル抗体（ｍＡｂα１０またはＴｈ１０１）で処理した。２４時間の抗体処理後に、ＢｒｄＵを添加して２．５時間経過してから、Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ＥＬＩＳＡ ＢｒｄＵキット（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ）を用い製造元の説明書にしたがって増殖を判定した。

【0356】

細胞周期分析（図１１Ｆ）：取り込まれたブロモデオキシウリジン（ＢｒｄＵ）の免疫蛍光染色およびフローサイトメトリー分析によって、ＤＮＡを合成した個々の細胞の割合と性質を判定した。本方法では、細胞周期のＳ（ＤＮＡ合成）期に入りその期を進行している細胞が新規に合成したＤＮＡにＢｒｄＵ（ＤＮＡ前駆体チミジンの類似体）が取り込まれる。特異的な抗ＢｒｄＵ蛍光抗体を用いて、取り込まれたＢｒｄＵを染色する。次に、細胞のＢｒｄＵレベルをフローサイトメトリーで測定する。全ＤＮＡに結合する色素（７－アミノアクチノマイシンＤ（７－ＡＡＤ）など）を用いた染色を免疫蛍光ＢｒｄＵ染色と組み合わせることも多い。この組み合わせを利用すれば、二重染色フローサイトメトリー分析によって、活発にＤＮＡ合成（ＢｒｄＵの取り込み）を行っている細胞の計数と細胞周期上の位置（すなわち、７－ＡＡＤ染色強度で特定されるＧ０／Ｇ１期、Ｓ期、またはＧ２＋Ｍ期）に関する特徴付けを行うことができる。

【0357】

結果
球体アッセイ：機能ブロッキングα１０モノクローナル抗体が、侵攻性乳癌（図１１Ａ）、侵攻性前立腺癌（図１１Ｂ）および侵攻性膵癌細胞（図１１Ｃ～Ｄ）の増殖を低下することが、本結果によって実証される。これを対照抗体ＩｇＧ２ａによる処理後の増殖と比較した。対照的に対照抗体では増殖の低下は全く認められなかった。肺癌細胞株Ａ５４９では、対照抗体ＩｇＧ２ａによる処理と比較して、α１０モノクローナル抗体処理が細胞をＧ０／Ｇ１期で停止させ、それによって細胞増殖を阻害する（図１１Ｆ）ことが、細胞周期分析によって分かった。

【0358】

単層アッセイ：対照抗体の存在下または抗体非存在下でのインキュベーションと比較して、抗インテグリンα１０抗体（ｍＡｂα１０およびＴｈ１０１）は単層培養乳癌細胞の細胞増殖をブロックしたことが、図１１Ｅから分かる。

【0359】

結論
本結果によって、インテグリンα１０が細胞増殖プロセスに関与することが確認され、このことは抗インテグリンα１０抗体が癌増殖抑制治療薬としての能力を有することを示す。

【0360】

実施例１１：インテグリンα１０抗体による処理は乳房腫瘍のインビボ増殖の進行を抑制する
材料と方法
インビボ実験はいずれも、Ｊａｎｖｉｅｒ Ｌａｂｓ（Ｆｒａｎｃｅ）から購入した６～８週齢の雌ＮＭＲＩ－ｎｕ免疫不全マウス（群当たりｎ＝５）を用いて実施した。動物福祉および実験手順は、国際的な基準に基づいて実施し、動物は特定病原体感染防止条件（ＳＰＦ）の下で維持した。全実験方法はマルメ（Ｍａｌｍｏ）およびルンド（Ｌｕｎｄ）動物倫理委員会（スエーデン）の承認を受けたものである。腫瘍の誘導に関しては、２ｘ１０^６個の侵攻性乳癌ＢＴ５４９細胞を含むマトリゲルをマウスの右脇腹領域に皮下注射で接種した。注射後２～３週間後に、ＩＶＩＳ－ＣＴスペクトラム（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＭＡ、ＵＳＡ）を用いた非侵襲性の二次元生物発光（ＢＬＩ）イメージングによって、腫瘍増殖を追跡した。腫瘍増殖の徴候を示したマウスを、平均の総フラックス値（光子数／ｓ）と共に特定される目的領域（ＲＯＩ）に記録されたＢＬＩシグナル強度の平均値に基づいて無作為に２群（対照および治療）に分けた。本実験ではインテグリンα１０に対する複数の異なる抗体を用いた：すなわち、マウスモノクローナル抗体ｍＡｂ α１０およびヒトモノクローナル抗体Ｔｈ１０１である。マウスに注射する各抗体の濃度を算出して５ｍｇ／ｋｇとし、腹腔内注射により抗体をエンドポイントまで動物に投与した。腫瘍増殖は生物発光２Ｄおよび３ＤマイクロＣＴイメージングを用いて追跡した。簡単に説明すると、イメージング前にマウスを３％イソフルレンガスで麻酔し、ＰＢＳに溶かしたＤ－ルシフェリンを１５０ｍｇ／体重ｋｇで腹腔内に注射した。異なる露光セグメント間で５間隔を逐次的に撮像することによって２Ｄイメージを得た（発光：ｏｐｅｎ ｆｉｌｔｅｒ、ｆ／ｓｔｏｐ：１、ｂｉｎｄｉｎｇ：８）。目的領域（ＲＯＩ）の測定から生体イメージ分析ソフトウエア（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＭＡ、ＵＳＡ）を用いて平均の背景シグナル（Ｂｋｇ）を推定した後、ＢＬＩシグナル強度を総フラックス（光子数／ｓ）として定量した。マウスの体重は毎週、抗体処置の前に記録した。病的徴候および増殖速度の低下は全く認められなかった。

【0361】

結果
インテグリンα１０抗体ｍＡｂα１０またはＴｈ１０１で処置したマウスでは、陰性対照抗体（ＩｇＧ２ａおよびＴｈ３０１）で処置したマウスと比較して総フラックス読み取り値が減少した（図１２Ａ）ことが、本結果から分かる。このことは腫瘍増殖が低減したことを示している。動物の体重は処置の開始から追跡したが、各抗体で処置した動物においては病的徴候も体重減少も認められなかった（図１２Ｂ）。

【0362】

結論
インテグリンα１０に対する異なる抗体（ここではｍＡｂα１０（＝Ａｂ３６５）またはＴｈ１０１）がインビボ腫瘍増殖を低減し、抗インテグリンα１０抗体の癌増殖抑制治療薬としての有用性を示唆し得ることが、本結果によって示される。

【0363】

実施例１２：モノクローナル抗体ｍＡｂα１０およびＴｈ１０１はインテグリンα１０の異なるエピトープに結合する
材料と方法
インテグリンα１０を過剰発現するＣ２Ｃ１２α１０細胞および三重陰性乳癌ＢＴ５４９細胞におけるマウスモノクローナル抗体ｍＡｂα１０およびヒトモノクローナル抗体Ｔｈ１０１の結合競合アッセイを行った。細胞を表記の濃度（μｇ／ｍｌ）の単一の抗体または混合抗体と共に３０分間インキュベートした後、２回洗浄し、次に２次抗体で３０分間染色した。ヒトモノクローナル抗体Ｔｈ１０１に対する２次抗体としては、ロバ抗ヒトＡｌｅｘａ ４８８を用いた。マウスモノクローナル抗体ｍＡｂａ１０に対する２次抗体としては、ロバ抗マウスＡｌｅｘａ ６４７を用いた。抗体結合をフローサイトメトリーで分析し、２次抗体の蛍光シグナルを検出した。

【0364】

データを１００，０００個の細胞の平均蛍光強度として表す。

【0365】

結果
フローサイトメトリーのデータは、Ｔｈ１０１抗体の濃度を増加させても抗体ｍＡｂα１０の結合強度は有意には変化しない（図１３Ａ～Ｂ）ことを示している。反応ウェルに添加した抗体Ｔｈ１０１の濃度が増加（０～９μｇ／ｍｌ）しても（灰色のバー）、抗体ｍＡｂα１０（３μｇ／ｍｌの一定濃度で）に対応するシグナルは安定したままであった（黒色のバー）（各図の左部分）。

【0366】

逆も同様に、Ｔｈ１０１の結合強度は、ｍＡｂα１０の濃度の増加に影響されなかった（図１３Ａ～Ｂ）。反応ウェルに添加した抗体ｍＡｂα１０の濃度が増加（０～９μｇ／ｍｌ）しても（黒色のバー）、抗体Ｔｈ１０１（３μｇ／ｍｌの一定濃度）に対応するシグナルは安定したままであった（灰色のバー）（各図の右部分）。

【0367】

Ｃ２Ｃ１２α１０細胞株（図１３Ａ）およびＢＴ５４９細胞株（図１３Ｂ）のそれぞれについても同様の結果が得られた。

【0368】

結論
もし抗体が同一のエピトープに結合するのであれば、同一の結合部位への競合により一方の抗体の濃度を増加させると他方の抗体の結合が低下するはずである。これは除外されるので、本結果は、２種のインテグリンα１０モノクローナル抗体ｍＡｂα１０およびＴｈ１０１がインテグリンα１０抗原の異なるエピトープに結合することを示唆している。

【0369】

実施例１３：配列
ヒトインテグリンα１０ポリペプチドの配列情報
配列番号１
ヒトインテグリンα１０の完全長ポリペプチド
配列リストを参照のこと。
配列番号２
ヒトインテグリンα１０の細胞外ドメイン
配列リストを参照のこと。
配列番号３
ヒトインテグリンα１０のＩドメイン
配列リストを参照のこと。

【0370】

抗インテグリンα１０抗体Ｔｈ１０１の配列情報
配列番号４：
重鎖可変領域の相補性決定領域１（ＣＤＲ－Ｈ１）
ＦＴＦＳＤＹＧＭＮ
配列番号５：
重鎖可変領域の相補性決定領域２（ＣＤＲ－Ｈ２）
ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ
配列番号６：
重鎖可変領域の相補性決定領域３（ＣＤＲ－Ｈ３）
ＧＧＮＷＧＶＦＤＹ
配列番号７：
軽鎖可変領域の相補性決定領域４（ＣＤＲ－Ｌ１）
ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＰＶＨ
配列番号８：
軽鎖可変領域の相補性決定領域５（ＣＤＲ－Ｌ２）
ＥＮＮＫＲＰＳ
配列番号９：
軽鎖可変領域の相補性決定領域６（ＣＤＲ－Ｌ３）
ＡＡＷＤＤＳＬＳＧＱＧＶ
配列番号１０：
重鎖可変領域
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＧＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＮＷＧＶＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号１１：
軽鎖可変領域
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＰＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＥＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＳＧＱＧＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ

【0371】

参考文献
Ａｒｐｉｎｏ Ｇ， Ｍｉｌａｎｏ Ｍ， Ｄｅ Ｐｌａｃｉｄｏ Ｓ． Ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ａｇｇｒｅｓｓｉｖｅ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ， Ｔｈｅ Ｂｒｅａｓｔ． ２０１５；２４（５）： ５９４－６００．
Ｂｅｎｇｔｓｓｏｎ Ｔ， Ａｓｚｏｄｉ Ａ， Ｎｉｃｏｌａｅ Ｃ， Ｈｕｎｚｉｋｅｒ ＥＢ， Ｌｕｎｄｇｒｅｎ－Ａｋｅｒｌｕｎｄ Ｅ， Ｆａｓｓｌｅｒ Ｒ． Ｌｏｓｓ ｏｆ ａｌｐｈａ１０ｂｅｔａ１ ｉｎｔｅｇｒｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅａｄｓ ｔｏ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒｏｗｔｈ ｐｌａｔｅ ｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅｓ， Ｊ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ． ２００５；１１８（Ｐｔ ５）：９２９－３６．
Ｂｉａｎｃｈｉｎｉ Ｇ， Ｂａｌｋｏ ＪＭ， Ｍａｙｅｒ ＩＡ， ｅｔ ａｌ． Ｔｒｉｐｌｅ－ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ： ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ ａｎｄ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ ｏｆ ａ ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｏｕｓ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２０１６；１３：６７４－９０．
Ｂｏｍｂａｒｄｅｌｌｉ Ｌ ａｎｄ Ｂｅｒｎｓ Ａ． Ｔｈｅ ｓｔｅａｄｙ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ， ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ａｄｖａｎｃｅｓ ｆｏｒ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ， Ｅｃａｎｃｅｒｍｅｄｉｃａｌｓｃｉｅｎｃｅ ２０１６；１０：６３８．
Ｃａｍｐｅｒ Ｌ， Ｈｅｌｌｍａｎ Ｕ， Ｌｕｎｄｇｒｅｎ－Ａｋｅｒｌｕｎｄ． Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ， Ｃｌｏｎｉｎｇ， ａｎｄ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｉｎｔｅｇｒｉｎ Ｓｕｂｕｎｉｔ α１０， ａ β１－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｃｏｌｌａｇｅｎ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｉｎｔｅｇｒｉｎ， Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｏｎ Ｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅｓ， Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９９８； ２７３（３２）：２０３８３－９．
Ｃａｍｐｅｒ Ｌ， Ｈｏｌｍｖａｌｌ Ｋ， Ｗａｎｇｎｅｒｕｄ Ｃ， Ａｓｚｏｄｉ Ａ， Ｌｕｎｄｇｒｅｎ－Ａｋｅｒｌｕｎｄ Ｅ． Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｌｌａｇｅｎ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｉｎｔｅｇｒｉｎ ａｌｐｈａ１０ｂｅｔａ１ ｄｕｒｉｎｇ ｍｏｕｓｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ， Ｃｅｌｌ Ｔｉｓｓｕｅ Ｒｅｓ． ２００１；３０６（１）：１０７－１６．
Ｄａｉ Ｘ， Ｌｉ Ｔ， Ｂａｉ Ｚ， Ｙａｎｇ Ｙ， Ｌｉｕ Ｘ， Ｚｈａｎ Ｊ， Ｓｈｉ Ｂ． Ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｓｕｂｔｙｐｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ， ｃｌｉｎｉｃａｌ ｕｓｅ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ ｔｒｅｎｄｓ， Ａｍ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ２０１５；５（１０）：２９２９－２９４３．
Ｄａｉ Ｘ， Ｘｉａｎｇ Ｌ， Ｌｉ Ｔ， Ｂａｉ Ｚ． Ｃａｎｃｅｒ Ｈａｌｌｍａｒｋｓ， Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ ａｎｄ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｕｂｔｙｐｅｓ， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ． ２０１６；７（１０）：１２８１－９４．
Ｅｉｎｓｔｅｉｎ ＤＪ， Ａｒａｉ Ｓ， Ｂａｌｋ ＳＰ． Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｄ ｏｖｅｒｃｏｍｉｎｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ， Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｏｎｃｏｌ． ２０１９； ３１（３）：１７５－１８．
Ｇｏｓｗａｍｉ ＣＰ ａｎｄ Ｎａｋｓｈａｔｒｉ Ｈ． ＰＲＯＧｇｅｎｅ： ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂａｓｅｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｗｅｂ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃａｎｃｅｒｓ． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａ． ２０１３ Ｏｃｔ ２８；３（１）：２２．
Ｇｙｏｒｆｆｙ Ｂ， Ｌａｎｃｚｋｙ Ａ， Ｅｋｌｕｎｄ ＡＣ， Ｄｅｎｋｅｒｔ Ｃ， Ｂｕｄｃｚｉｅｓ Ｊ， Ｌｉ Ｑ， Ｓｚａｌｌａｓｉ Ｚ． Ａｎ ｏｎｌｉｎｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔｏｏｌ ｔｏ ｒａｐｉｄｌｙ ａｓｓｅｓｓ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ２２，２７７ ｇｅｎｅｓ ｏｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｕｓｉｎｇ ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ ｄａｔａ ｏｆ １８０９ ｐａｔｉｅｎｔｓ， Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ， ２０１０ Ｏｃｔ；１２３（３）：７２５－３１．
Ｈａｒｉｒｉ Ｎ， Ｈａｓｔｅｈ Ｆ， Ｗａｌａｖａｌｋａｒ Ｖ， Ｒｏｍａ ＡＡ， ａｎｄ Ｆａｄａｒｅ， Ｏ． Ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ， ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ， ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－２ ｔｅｓｔｉｎｇ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ： ａｓｓｅｓｓｉｎｇ ｔｈｅ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｒｅｐｅａｔｅｄ ｃｅｎｔｒａｌｉｚｅｄ ｔｅｓｔｉｎｇ ｉｎ ｅｘｃｉｓｉｏｎ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ， Ａｐｐｌ Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ Ｍｏｒｐｈｏｌ． ２０１９； ２７（１）：１－７．
Ｉｌｉｃ Ｍ， Ｉｌｉｃ Ｉ． Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ． Ｗｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２０１６； ４４：９６９４－９７０５．
Ｌｕｎｄｇｒｅｎ－Ａｋｅｒｌｕｎｄ Ｅ， Ａｓｚｏｄｉ Ａ． α１０β１： ａ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｉｎ ｓｋｅｌｅｔａｌ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ， Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ． ２０１４； ８１９：６１－７１．
Ｍａ Ｌ， Ｌｉａｎｇ Ｚ， Ｚｈｏｕ Ｈ， Ｑｕ Ｌ． Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＲＮＡ Ｉｎｄｅｘｅｓ ｆｏｒ Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ｉｎ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ， Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ． ２０１８；１６（２）：１０８－１１９．
Ｍａｌｏｒｎｉ Ｌ， Ｓｈｅｔｔｙ ＰＢ， Ｄｅ Ａｎｇｅｌｉｓ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｔｒｉｐｌｅ－ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒｓ ｉｎ ａ ｌａｒｇｅ ｃｏｈｏｒｔ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｆｏｌｌｏｗ－ｕｐ． Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ Ｔｒｅａｔ ２０１２；１３６：７９５－８０４．
Ｍｏｓｃｈｏｓ ＳＪ， Ｄｒｏｇｏｗｓｋｉ ＬＭ， Ｒｅｐｐｅｒｔ ＳＬ， Ｋｉｒｋｗｏｏｄ ＪＭ． Ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ， Ｏｎｃｏｌｏｇｙ． ２００７ Ａｕｇ；２１（９ Ｓｕｐｐｌ ３）：１３－２０．
Ｒａｋｈａ ＥＡ， Ｅｌ－Ｓａｙｅｄ ＭＥ， Ｇｒｅｅｎ ＡＲ， Ｌｅｅ ＡＨ， Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ ＪＦ， Ｅｌｌｉｓ ＩＯ Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｍａｒｋｅｒｓ ｉｎ ｔｒｉｐｌｅ－ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ． Ｃａｎｃｅｒ． ２００７ １； １０９（１）：２５－３２
Ｓａａｄ Ｆ， Ｓｈｏｒｅ Ｎ， Ｚｈａｎｇ Ｔ， Ｓｈａｒｍａ Ｓ， Ｃｈｏ ＨＫ， Ｊａｃｏｂｓ ＩＡ． Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｄｖａｎｃｅｄ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ． Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔ Ｒｅｖ． ２０１９；１９；７６：１－９．
Ｕ．Ｓ． Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ， Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ． ＳＥＥＲ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ Ｒｅｖｉｅｗ， １９７５－２０１５．
Ｖａｒａｓ Ｌ， Ｏｈｌｓｓｏｎ ＬＢ， Ｈｏｎｅｔｈ Ｇ， Ｏｌｓｓｏｎ Ａ， Ｂｅｎｇｔｓｓｏｎ Ｔ， Ｗｉｂｅｒｇ Ｃ， Ｂｏｃｋｅｒｍａｎｎ Ｒ， Ｊａｒｎｕｍ Ｓ， Ｒｉｃｈｔｅｒ Ｊ， Ｐｅｎｎｉｎｇｔｏｎ Ｄ， Ｊｏｈｎｓｔｏｎｅ Ｂ， Ｌｕｎｄｇｒｅｎ－Ａｋｅｒｌｕｎｄ Ｅ， Ｋｊｅｌｌｍａｎ Ｃ． Ａｌｐｈａ１０ ｉｎｔｅｇｒｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｓ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｏｎ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－２－ｔｒｅａｔｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｃｈｏｎｄｒｏｇｅｎｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ， Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ Ｄｅｖ． ２００７；１６（６）：９６５－７８．
ＷＨＯ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｒｓ ｏｆ ｓｏｆｔ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｂｏｎｅ （２０１３）．

【図1A】

【図1B】

【図2】

【図3】

【図4-1】

【図4-2】

【図5-1】

【図5-2】

【図5-3】

【図5-4】

【図5-5】

【図5-6】

【図6-1】

【図6-2】

【図7-1】

【図7-2】

【図7-3】

【図8-1】

【図8-2】

【図9】

【図10】

【図11-1】

【図11-2】

【図12】

【図13-1】

【図13-2】

【国際調査報告】