特表 2022-530732 ＮＥＴ関連合併症を処置及び予防するための化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-07-01

(54)【発明の名称】ＮＥＴ関連合併症を処置及び予防するための化合物

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/7024 20060101AFI20220624BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 31/12 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 31/10 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 33/00 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 1/18 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 9/10 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 3/00 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 11/08 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 7/04 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 7/02 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 1/04 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 19/06 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 25/14 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20220624BHJP

【ＦＩ】

A61K31/7024

A61P31/04

A61P31/12

A61P31/10

A61P33/00

A61P1/18

A61P13/12

A61P29/00

A61P9/10 101

A61P9/00

A61P3/00

A61P11/00

A61P11/08

A61P7/04

A61P7/02

A61P19/02

A61P1/04

A61P29/00 101

A61P25/28

A61P19/06

A61P3/10

A61P25/14

A61K45/00

A61P43/00 111

A61P43/00 105

【審査請求】有

【予備審査請求】有

(21)【出願番号】P 2021549884

(86)(22)【出願日】2019-02-25

(85)【翻訳文提出日】2021-08-25

(86)【国際出願番号】 AU2019050156

(87)【国際公開番号】W WO2020172698

(87)【国際公開日】2020-09-03

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】501004316

【氏名又は名称】ジ・オーストラリアン・ナショナル・ユニヴァーシティ

(71)【出願人】

【識別番号】520211948

【氏名又は名称】グリフィス・ユニヴァーシティ

(74)【代理人】

【識別番号】100099623

【弁理士】

【氏名又は名称】奥山 尚一

(74)【代理人】

【識別番号】100125380

【弁理士】

【氏名又は名称】中村 綾子

(74)【代理人】

【識別番号】100142996

【弁理士】

【氏名又は名称】森本 聡二

(74)【代理人】

【識別番号】100166268

【弁理士】

【氏名又は名称】田中 祐

(74)【代理人】

【識別番号】100180231

【弁理士】

【氏名又は名称】水島 亜希子

(74)【代理人】

【識別番号】100096769

【弁理士】

【氏名又は名称】有原 幸一

(72)【発明者】

【氏名】パリッシュ，クリストファー

(72)【発明者】

【氏名】オメーラ，コナー

(72)【発明者】

【氏名】クープランド，ルーシー

(72)【発明者】

【氏名】カー，ベンジャミン・ジュー・チャイ

(72)【発明者】

【氏名】コルドバッチェ，ファルザネ

(72)【発明者】

【氏名】ベゾス，アンナ

(72)【発明者】

【氏名】ブラウン，アンナ

(72)【発明者】

【氏名】スティーヴンス，ロス

(72)【発明者】

【氏名】トレドウェル，グレゴリー・デイヴィッド

(72)【発明者】

【氏名】フィリップ，リー・アンドリュー

(72)【発明者】

【氏名】ノックス，カレン

(72)【発明者】

【氏名】フォン・イツシュタイン，ローレンス・マーク

(72)【発明者】

【氏名】チャン，チー－ウェイ

(72)【発明者】

【氏名】ブリュストル，アン

(72)【発明者】

【氏名】デイヴィス，デイヴィッド・アナク・サイモン

【テーマコード（参考）】

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C084AA19

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4C086ZB08

4C086ZB11

4C086ZB21

4C086ZB32

4C086ZB33

4C086ZB35

4C086ZC21

4C086ZC35

4C086ZC75

(57)【要約】

本発明は、化学的安定性が高い化合物及び対象におけるＮＥＴの病理学的活性を阻害する方法に関する。具体的には、本発明は、化学的安定性が高い化合物、その使用並びにＮＥＴによって媒介される病気（例えば、敗血症、全身性免疫反応症候群（ＳＩＲＳ）及び虚血再灌流傷害（ＩＲＩ）等）を阻害するか又は寛解させる方法に関する。より具体的には、本発明は、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドの方法及び使用であって、この置換基の存在は、化学的安定性が高い分子を、ＮＥＴによって媒介される病気の治療で有効であるこの分子の能力に影響を及ぼすことなくもたらす、方法及び使用に関する。例えば、本発明は、対象におけるＮＥＴによって媒介される様々な病気の治療における、β－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェート（ｍＣＢＳ）又はその薬学的に許容される塩（例えば、ｍＣＢＳ．Ｎａ）の方法及び使用に関する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＮＥＴによって媒介される病気の処置又は予防に使用するための化合物であって、この化合物が、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩を含む、化合物。

【請求項2】

前記ＮＥＴによって媒介される病気が、これに限定されないが、（ａ）例えば、敗血症（例えば、細菌、ウイルス、真菌、寄生生物、プリオンによって誘発される敗血症を含む）等の感染又は手術、外傷、出血、熱傷、急性膵炎及び急性腎傷害を含む非感染性誘発因子に対する全身性炎症反応、（ｂ）例えば、粥状動脈硬化、血管の自然破裂、血管への外傷性損傷に起因する動脈の閉塞後の且つ心臓の及び移植に関連するＩＲＩを含む局所組織レベルでの低酸素症又は例えば溺死、ガス曝露若しくは心肺停止に起因する呼吸停止後の且つ例えば急性呼吸促迫症候群、慢性閉塞性肺疾患及び薬剤介在組織傷害等の病気を含む全身レベルでの低酸素症、（ｃ）止血又は血管閉塞、例えば循環器疾患又は慢性循環器疾患、例えば粥状動脈硬化、凝血及び血栓症（例えば、深部静脈血栓症）、（ｄ）自己免疫疾患状態及び炎症疾患状態、例えば多発性硬化症、過剰炎症疾患状態、全身性エリテマトーデス、脊椎関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、腸炎性関節炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、過敏性腸疾患、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、小血管の破壊及び炎症によって特徴付けられる抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連血管炎（ＡＡＶ）、例えば多発性血管炎を伴う肉芽腫症、多発性血管炎及び顕微鏡的多発血管炎を伴う好酸球性肉芽腫症）、家族性地中海熱、筋萎縮性側索硬化症、シェーグレン症候群、早期関節炎、ウイルス性関節炎、乾癬、加齢に伴う臓器線維症、特発性肺線維症、若年性糖尿病（Ｉ型）、糖尿病（２型）、抗リン脂質抗体症候群及び様々な中枢神経系疾患、例えばハンチントン病を含む群から選択される、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

前記ＮＥＴによって媒介される病気が、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患である、請求項１に記載の化合物。

【請求項4】

前記還元末端において小さい非荷電置換基で改変されている硫酸化セロビオシドが、

【化1】

（式中、Ｒ１は、小さい非荷電グリコシド結合置換基であり、及びＲ２～Ｒ８は、それぞれ小さい非荷電Ｏ結合置換基又はサルフェート基である）
の全体構造を有する、請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項5】

Ｒ１は、Ｏ又はＳ－（Ｃ_１～６）アルキルである、請求項４に記載の化合物。

【請求項6】

Ｒ１は、メトキシ基又はエトキシ基である、請求項５に記載の化合物。

【請求項7】

Ｒ２～Ｒ８は、それぞれＯ－サルフェート又はＮ－サルフェートから選択される、請求項４～６のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項8】

硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖である、請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項9】

ナトリウムβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートである、請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項10】

ＮＥＴによって媒介される病気を処置又は予防する方法であって、この方法が、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を対象に投与することを含む、方法。

【請求項11】

前記ＮＥＴによって媒介される病気が、これに限定されないが、（ａ）例えば、敗血症（細菌、ウイルス、真菌、寄生生物、プリオンによって誘発される敗血症を含む）等の感染又は手術、外傷、出血、熱傷、急性膵炎及び急性腎傷害を含む非感染性誘発因子に対する全身性炎症反応、（ｂ）例えば、粥状動脈硬化、血管の自然破裂、血管への外傷性損傷に起因する動脈の閉塞後の且つ心臓の及び移植に関連するＩＲＩを含む局所組織レベルでの低酸素症又は例えば溺死、ガス曝露若しくは心肺停止に起因する呼吸停止後の且つ例えば急性呼吸促迫症候群、慢性閉塞性肺疾患及び薬剤介在組織傷害等の病気を含む全身レベルでの低酸素症、（ｃ）止血又は血管閉塞、例えば循環器疾患又は慢性循環器疾患、例えば粥状動脈硬化、凝血及び血栓症（例えば、深部静脈血栓症）、（ｄ）自己免疫疾患状態及び炎症疾患状態、例えば多発性硬化症、過剰炎症疾患状態、全身性エリテマトーデス、脊椎関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、腸炎性関節炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、過敏性腸疾患、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、小血管の破壊及び炎症によって特徴付けられる抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連血管炎（ＡＡＶ）、例えば多発性血管炎を伴う肉芽腫症、多発性血管炎及び顕微鏡的多発血管炎を伴う好酸球性肉芽腫症）、家族性地中海熱、筋萎縮性側索硬化症、シェーグレン症候群、早期関節炎、ウイルス性関節炎、乾癬、加齢に伴う臓器線維症、特発性肺線維症、若年性糖尿病（Ｉ型）、糖尿病（２型）、抗リン脂質抗体症候群及び様々な中枢神経系疾患、例えばハンチントン病を含む群から選択される、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

対象における敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置又は予防する方法であって、この方法が、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項13】

前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患が、前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理によって引き起こされ、及び／又はそれによって媒介され、及び／又はそれを伴い、及び／又はそれと関連し、且つ前記方法が、前記対象における前記敗血症、ＳＩＲＳ又はＩＲＩの状態又は疾患を処置又は予防するのに十分である、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を前記対象に投与することを含む、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記医学的状態又は疾患が、前記対象におけるＮＥＴの放出によって引き起こされ、及び／又はそれによって媒介され、及び／又はそれを伴い、及び／又はそれと関連する、請求項１１～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

前記改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドの前記治療上有効な量が、前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、又は阻害するのに十分である、請求項１１～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項16】

前記治療上有効な量が、（ｉ）対象の内皮に対して細胞毒性である、又は（ｉｉ）対象の内皮機能障害の一因となる、又は（ｉｉｉ）対象の血小板を活性化させることによって凝血を開始させる、又は（ｉｖ）対象において赤血球脆弱性及びその結果としての貧血を誘発する、ＮＥＴを、減少させる、最小限に抑える又は阻害するのに十分である、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

単回用量において、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を投与することを含む、請求項１１～１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

複数回用量において、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を投与することを含む、請求項１１～１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項19】

前記処置される医学的状態又は疾患のための補助的処置として、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は別の形態の医学的介入からなる群から選択される第２の活性剤を同時に又は付随して前記対象に投与することをさらに含む、請求項１１～１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項20】

前記第２の活性剤が、１種又は複数の抗炎症剤を含む、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を有するか又は有する疑いがある対象において敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置することを含む、請求項１１～２０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項22】

敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を発症するリスクがある対象において敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を予防することを含む、請求項１１～２１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項23】

ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩を少なくとも含む、治療用組成物。

【請求項24】

ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体、添加剤及び／又は希釈剤とを少なくとも含む、医薬組成物。

【請求項25】

対象における敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患の処置又は予防のための薬物の製造のための、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量の使用。

【請求項26】

前記敗血症又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患が、前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理によって引き起こされ、及び／又はそれによって媒介され、及び／又はそれを伴い、及び／又はそれと関連する、請求項２５に記載の使用。

【請求項27】

前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は医学的状態若しくは疾患が、前記対象におけるＮＥＴの放出によって引き起こされ、及び／又はそれによって媒介され、及び／又はそれを伴い、及び／又はそれと関連する、請求項２５又は２６に記載の使用。

【請求項28】

前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は医学的状態若しくは疾患が、前記対象における炎症又は炎症反応後のＮＥＴの放出によって引き起こされ、及び／又はそれによって媒介され、及び／又はそれを伴い、及び／又はそれと関連する、請求項２７に記載の使用。

【請求項29】

前記ＮＥＴが、前記対象の内皮に対して細胞毒性であり、及び／又は前記対象の内皮機能障害の一因となる、請求項２５～２８のいずれか一項に記載の使用。

【請求項30】

前記薬物が、前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、又は阻害する、請求項２４～２８のいずれか一項に記載の使用。

【請求項31】

前記薬物が、前記対象における前記内皮に対する、ＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、又は阻害する、請求項３０に記載の使用。

【請求項32】

前記薬物が、前記対象への単回用量投与のために製剤化される、請求項２５～３０のいずれか一項に記載の使用。

【請求項33】

前記薬物が、前記対象への複数回用量投与のために製剤化される、請求項２５～３１のいずれか一項に記載の使用。

【請求項34】

前記薬物が、前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは疾患のための補助的処置としての、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は別の形態の医学的介入からなる群から選択される第２の活性剤の同時の又は付随する前記対象への投与のために製剤化される、請求項２５～３２のいずれか一項に記載の使用。

【請求項35】

前記第２の活性剤が、１種又は複数の抗炎症剤を含む、請求項３４に記載の方法。

【請求項36】

前記薬物が、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を有するか又は有する疑いがある対象において敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置するためのものである、請求項２５～３５のいずれか一項に記載の使用。

【請求項37】

前記薬物が、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を発症するリスクがある対象において敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置するためのものである、請求項２５～３５のいずれか一項に記載の使用。

【請求項38】

対象における敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患の処置又は予防のための、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量の使用。

【請求項39】

前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患が、前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理によって引き起こされ、及び／又はそれによって媒介され、及び／又はそれを伴い、及び／又はそれと関連する、請求項３９に記載の使用。

【請求項40】

前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は医学的状態若しくは疾患が、前記対象におけるＮＥＴの放出によって引き起こされ、及び／又はそれによって媒介され、及び／又はそれを伴い、及び／又はそれと関連する、請求項３８又は３９に記載の使用。

【請求項41】

前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は医学的状態若しくは疾患が、前記対象における炎症又は炎症反応後のＮＥＴの放出によって引き起こされ、及び／又はそれによって媒介され、及び／又はそれを伴い、及び／又はそれと関連する、請求項３９に記載の使用。

【請求項42】

前記ＮＥＴが、（ｉ）対象の内皮に対して細胞毒性であるか、又は（ｉｉ）対象の内皮機能障害の一因となるか、又は（ｉｉｉ）対象の血小板を活性化させることによって凝血を開始させるか、又は（ｉｖ）対象において赤血球脆弱性及びその結果としての貧血を誘発する、請求項３９～４１のいずれか一項に記載の使用。

【請求項43】

ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド若しくはその薬学的に許容される塩の治療上有効な量が、前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害するのに十分であり、及び／又は前記使用が、前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害する、請求項３８～４２のいずれか一項に記載の使用。

【請求項44】

前記治療上有効な量が、前記対象における前記内皮に対する、ＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害するのに十分であり、及び／又は前記使用が、前記対象における前記内皮に対する、ＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害する、請求項４３に記載の使用。

【請求項45】

前記対象における前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは疾患の処置又は予防のための、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量の単回用量の使用を含む、請求項３８～４４のいずれか一項に記載の使用。

【請求項46】

前記対象における前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは疾患の処置又は予防のための、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量の複数回用量の使用を含む、請求項３８～４４のいずれか一項に記載の使用。

【請求項47】

ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量と、前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは疾患のための補助的処置としての、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は別の形態の医学的介入からなる群から選択される第２の活性剤の量との使用を含む、請求項３８～４６のいずれか一項に記載の使用。

【請求項48】

前記第２の活性剤が、１種又は複数の抗炎症剤を含む、請求項４７に記載の方法。

【請求項49】

敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を有するか又は有する疑いがある患者において敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置することを含む、請求項３８～４８のいずれか一項に記載の使用。

【請求項50】

敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を発症するリスクがある患者において敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を予防することを含む、請求項３８～４８のいずれか一項に記載の使用。

【請求項51】

前記処置が、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは前記疾患を寛解させることを含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項１０～２１のいずれか一項に記載の方法、又は請求項２３に記載の治療用、又は請求項２４に記載の医薬組成物、又は請求項２５～５０のいずれか一項に記載の使用。

【請求項52】

前記処置が、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは前記疾患を阻害することを含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項１０～２２のいずれか一項に記載の方法、又は請求項２３に記載の治療用、又は請求項２５に記載の医薬組成物、又は請求項２５～５０のいずれか一項に記載の使用。

【請求項53】

前記敗血症、ＳＩＲＳ又はＩＲＩと関連する医学的状態又は疾患が、非敗血症性疾患状態、非ＳＩＲＳ疾患状態又は非ＩＲＩ疾患状態である、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項１０～２２のいずれか一項に記載の方法、又は請求項２３に記載の治療用、又は請求項２４に記載の医薬組成物、又は請求項２５～５０のいずれか一項に記載の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、対象における好中球細胞外トラップ（ＮＥＴ）の病理活性を阻害するための化合物及び方法に関する。特に、本発明は、ＮＥＴによって媒介される病気（例えば、敗血症、全身性免疫反応症候群（ＳＩＲＳ）及び虚血再灌流傷害（ＩＲＩ）等）を阻害するか又は寛解させるための化合物、使用及び方法に関する。より詳細には、本発明は、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドの方法及び使用に関する。好ましくは、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドは、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されており、この置換基の存在は、化学的安定性が高い分子を、ＮＥＴによって媒介される病気の治療で有効であるこの分子の能力に影響を及ぼすことなくもたらす。例えば、本発明は、対象におけるＮＥＴによって媒介される様々な病気の治療における、セロビオシドサルフェート（ＣＢＳ）、β－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェート（ｍＣＢＳ）又はそれらの薬学的に許容される塩の方法及び使用に関する。

【背景技術】

【0002】

好中球は、病原体クリアランス、免疫調節及び疾患病理における中心的な役割を有する、自然免疫顆粒球（最も豊富に存在する白血球）である。好中球は、食作用、活性酸素種（ＲＯＳ）の生成及び好中球顆粒に由来する抗微生物分子の放出（脱顆粒）等の機構によって、感染性因子を排除する。

【0003】

好中球はまた、顆粒由来の抗微生物ペプチドにより修飾されたクロマチン線維と好中球エラスターゼ（ＮＥ）、カテプシンＧ及びミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）等の酵素との網状構造を押し出す。これらの押し出された構造体は、好中球細胞外トラップ（ＮＥＴ）と呼ばれる。

【0004】

ＮＥＴの目的は、抗菌性構成成分のその高い局所濃度を使用して、病原体を無害にすることである。したがって、ＮＥＴは、侵襲生物を固定化して死滅させる重要な戦略を果たす。ＮＥＴ足場は、１５～１７ｎｍの直径を有する蜘蛛の巣様クロマチン線維からなり、ＤＮＡ及びヒストンは、主要なＮＥＴ構成物質となる。

【0005】

ＮＥＴは、その抗微生物特性に加え、病原及び潜在的に有害なタンパク質体の蔓延を予防する物理的障壁として働く。例えば、ＮＥＴへの顆粒タンパク質の吸収により、プロテアーゼのような潜在的に有害なタンパク質が炎症部位に隣接する組織において傷害を誘発する恐れのある傷害部から、これらの潜在的に有害なタンパク質が拡散しないようにすることができる。

【0006】

ＮＥＴ形成及び放出は、以下の２つの状況において発生すると考えられている：
ａ．脱凝縮したクロマチン及び顆粒含有物を細胞外空間に放出することを特徴とする、活性な細胞死の個別形態である、ＮＥＴオーシス。ＮＥＴオーシスの間に、核膜及び顆粒膜は溶解し、核含有物は、細胞質に脱凝縮する。この後に、顆粒タンパク質により修飾されたクロマチンの原形細胞質の破裂、及び細胞外空間への放出が続く。
ｂ．ミトコンドリアＤＮＡ放出が細胞死と明らかに関連しない、無傷好中球からのＤＮＡ／セリンプロテアーゼ押出機構。

【0007】

ＮＥＴオーシスは、炎症誘発性サイトカイン（ＴＮＦ－α、ＩＬ－８）、血小板、活性化された内皮細胞（ＥＣ）、一酸化窒素、尿酸一ナトリウムの結晶及び様々な自己抗体を含めた微生物キュー及び内因性危険シグナルに反応して主に誘発される。通常、この過程は、急性炎症又は慢性炎症、及び自己免疫疾患の間の、過度な組織傷害を予防するように厳密に調節される。

【0008】

ＮＥＴ形成は、疾患に対処するための有益な戦略をもたらす自然免疫応答に不可欠であるが、ＮＥＴはまた、低酸素症又は無菌性炎症等の、様々な感染性及び非感染性病理状態の中心において主に現れる。この点で、ＮＥＴは、その構築物及び性質のために、感受性の高い個体において、様々な感染症及び非感染症、炎症、組織傷害、並びに自己免疫を促進することができる免疫エフェクター及び炎症誘発性役割を有する分子の、推定される源である。ＮＥＴが過剰量で形成される場合、ＮＥＴは、内皮及び下層組織に有害となり得る。このような傷害は、多くの場合、内因性ヌクレアーゼと微生物由来ヌクレアーゼの両方によるＮＥＴ分解に起因する。ＮＥＴが分解すると、ＮＥＴは、微生物に対してだけではなく、宿主の上皮細胞及び内皮細胞に対しても細胞傷害性となるヒストンを放出する。

【0009】

ＮＥＴは、例えばの話であって単なる例示に過ぎないが、感染（細菌、ウイルス及び寄生虫を含む）に対する過剰炎症反応、敗血症の間、子癇前症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸を有する患者の結腸粘膜を含む又はこれらと関連する、並びに熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）（マラリア）に感染している子供におけるＩｇＧ抗核二本鎖ＤＮＡ抗体の生成；機能的な実質器官組織が線維化組織により置き換えられて、これによって器官の機能が著しく減退し得る線維症、輸血関連急性肺傷害、深部静脈血栓及びがんと関連する、様々な医学的状態に直接、関与している。

【0010】

近代の抗生物質の臨床的使用があるにも関わらず、ＮＥＴと関連する病気の無効な処置のために、罹患率及び致死率のレベルは高いままである。したがって、好中球の有益な効果を妨害することなく、ＮＥＴの過度なレベルの傷害作用を中和する薬物が差し迫って必要とされている。

【0011】

現在まで、ＮＥＴにより誘発される病気の処置を提供する化合物が不足している。本発明は、複数の疾患におけるＮＥＴの役割を背景とし、その認識の高まりを受けて開発された。

【発明の概要】

【0012】

本発明は、本明細書に記載されている、ある種の抗ＮＥＴポリアニオン性化合物が、動物の血循環中のＮＥＴと静電的に相互作用して、ＮＥＴの細胞変性特性を中和するという知見に基づいている。このようなポリアニオン性分子と生存動物の血液循環中のＮＥＴとの複合体形成により、ＮＥＴの細胞毒性活性を少なくとも寛解させる手段がもたらされる。

【0013】

特に、本発明者は、ある種の硫酸化二糖類がＮＥＴの病理作用の中和に有効であるということを特定した。例えば、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドは、ＮＥＴ関連合併症の非常に有効な処置を実現することが可能な、化学的に安定なポリアニオンをもたらす（例えば、患者における、敗血症、ＳＩＲＳ及びＩＲＩ、並びにそのような状態を少なくとも寛解させる）。

【0014】

その還元末端において小さな非荷電置換基で改変されている、結果として生じた化学的安定性を有する硫酸化セロビオシドの使用は、Ｎｅｔ関連合併症に罹患している患者を処置する、及び／又はリスクにある患者においてＮＥＴ関連合併症が起こるのを予防する分野において、新規な一般的施用原理を表すか、又は提供する。

【0015】

本発明の第１の態様では、対象における少なくともＮＥＴ関連合併症の処置又は予防に使用するための化合物であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩を含む化合物が提供される。

【0016】

好ましくは、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドが改変されている場合、それは、望ましくは、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドの還元末端において、小さい非荷電グリコシド結合置換基を有する。これにより、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善される。

【0017】

本発明の化合物は、治療上有効な量又は薬学的に有効な量で提供されると、ＮＥＴ関連合併症を寛解、処置又は予防するための手段を提供する。

【0018】

本発明の実施形態では、改変されたポリアニオン性硫酸化セロビオシドは、以下の一般構造：

【化1】

（式中、
Ｒ１は、サルフェート基、又は小さい非荷電グリコシド結合置換基、例えばＯ－又はＳ－（Ｃ_１～６）アルキルであり、
Ｒ２～Ｒ８は、（ｉ）小さい非荷電Ｏ結合置換基又は（ｉｉ）サルフェート基からそれぞれ選択される）を有する。

【0019】

好ましくは、Ｒ１は、Ｏ－又はＳ－（Ｃ_１～６）アルキルである。Ｒ１が、Ｏ－又はＳ－（Ｃ_１～６）アルキルである場合、この置換基により、Ｒ１にサルフェート基を有する同じポリアニオンに比べて、ポリアニオンの化学的安定性が好ましくは改善される。

【0020】

好ましくは、Ｒ２～Ｒ８は、それぞれ、（ａ）非改変ヒドロキシル基、又は（ｂ）サルフェート基から選択される。

【0021】

より好ましくは、Ｒ１は、メトキシ基又はエトキシ基であり、Ｒ２～Ｒ８は、それぞれサルフェート基である。

【0022】

望ましくは、このクラスの化合物は、高い正味の負電荷を有し、即ちポリアニオンである。

【0023】

この小さい非荷電グリコシド置換基（Ｒ１）のアノマー配置は、α位又はβ位のいずれかであり得る。好ましくは、この小さい非荷電置換基は、β配置である。

【0024】

本発明の非常に好ましい形態では、本化合物は、ＣＢＳ、ｍＣＢＳ又はそれらの薬学的に許容される塩であり、該化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、望ましくは、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖である。実例として、この化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、望ましくは、β－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちナトリウムβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェート（ｍＣＢＳ．Ｎａ）である。

【0025】

ｍＣＢＳは、ＣＢＳと比べて非常に安定しており、高濃度で良好に耐容性があるので、好ましい。

【0026】

本発明の第２の態様では、対象における、ＮＥＴを伴う、医学的状態、病気又は疾患を処置（治療的又は予防的のどちらか一方）する方法であって、対象にポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療的又は薬学的に有効な量を投与するステップを含む方法が提供される。

【0027】

本発明の第３の態様では、対象における、ＮＥＴ蓄積を寛解させる方法であって、対象にポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療的又は薬学的に有効な量を投与するステップを含む方法が提供される。

【0028】

本発明の第２又は第３の態様の実施形態では、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0029】

例えば、本発明の第２又は第３の態様の実施形態では、本方法は、例えば、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ等のＮＥＴ関連合併症と関連する状態又は病気を処置又は予防するために使用される。

【0030】

本発明の第２又は第３の態様に係る特定の例示的実施形態では、この特定された方法は、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤及び／又は対象が患っているか若しくは患うリスクがある１種若しくは複数の状態を処置する任意の他の形態の医薬組成物の１つ又は複数から選択される第２の活性剤、化合物又は組成物の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を、この改変されている硫酸化セロビオシドと一緒に又はこの硫酸化セロビオシドに付随（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔｌｙ）して対象に投与するステップをさらに含み得る。

【0031】

この実施形態によれば、第２の活性剤、化合物又は組成物は、ＮＥＴに関連する合併症（例えば、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ）及び／又はそのような合併症と関連する医学的状態若しくは疾患を対象とする処置に対して補助的処置を提供する。好ましくは、第２の活性剤、化合物又は組成物は、１種又は複数の抗炎症剤を含む。

【0032】

好ましくは、第２の活性剤は、本発明の化合物によって処置される医学的病気に関連するか又はこの医学的病気と異なる、患者が患っている疾患の医学的介入の手段を提示し、前記第２の活性剤は、この患者に補助的処置を提供する。

【0033】

本発明の第４の態様では、対象における、ＮＥＴ細胞毒性と関連する医学的状態若しくは疾患を処置又は予防する方法であって、対象にポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療的又は薬学的に有効な量を投与するステップを含む方法が提供される。

【0034】

本発明の第４の態様の実施形態では、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0035】

本発明の第４の態様の１つの好ましい例では、本方法は、（ｉ）対象における内皮に対して細胞傷害性となる、且つ／又は（ｉｉ）対象における内皮機能障害の一因となるＮＥＴを中和するために使用される。

【0036】

加えて又は代わりに、本方法を使用して、対象における感染、炎症若しくは低酸素症又はあらゆる感染、炎症若しくは低酸素症の反応後の対象におけるＮＥＴの放出であるか、それによって引き起こされるか、又はそれによって媒介される敗血症性状態若しくはＳＩＲＳ状態、又はＩＲＩ、又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する疾患を処置する。

【0037】

本発明の第５の態様では、ＮＥＴ関連合併症の処置での使用のための治療用組成物又は医薬組成物であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩を少なくとも含む治療用組成物又は医薬組成物が提供される。

【0038】

本発明の第５の態様の実施形態では、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0039】

好ましくは、この化合物は、治療用組成物又は医薬組成物中に治療上有効な量又は薬学的に有効な量で存在する。この組成物は、治療上許容されるか又は薬学的に許容される担体、添加剤及び／又は希釈剤も含み得る。この治療又は医薬での化合物は、中性遊離塩基形態又は塩形態のいずれかである。好ましくは、このポリアニオン性硫酸化セロビオシド化合物は、ｍＣＢＳであるか、又はより具体的にはβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩である。

【0040】

本発明の第５の態様に係る特定の例示的実施形態では、この特定された組成物は、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤及び／又は対象が患っている１種若しくは複数の状態を処置する任意の他の形態の治療用化合物若しくは医薬化合物の１つ又は複数から選択される第２の活性剤、化合物又は組成物も含み得る。

【0041】

この実施形態によれば、第２の活性剤、化合物又は組成物は、望ましくは、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩの補助的治療又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患のための補助的治療を提供する。好ましくは、第２の活性剤、化合物又は組成物は、１種又は複数の抗炎症剤を含む。

【0042】

本発明の第６の態様では、ＮＥＴを伴う医学的状態、病気又は疾患を処置するための薬物の製造における、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療用有効な量又は薬学的に有効な量の使用が提供される。

【0043】

本発明の第６の態様の実施形態では、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0044】

例えば、本発明の第６の態様のある実施形態では、対象における敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患の処置又は予防のための薬物の製造における、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量の使用が提供される。好ましくは、この改変されている硫酸化セロビオシドは、ｍＣＢＳであるか、又はより具体的にはｍＣＢＳの薬学的に許容される塩（例えば、ｍＣＢＳ．Ｎａ）である。

【0045】

そのような使用の一実施形態では、この薬物は、対象における敗血症若しくはＳＩＲＳ又は敗血症若しくはＳＩＲＳと関連する医学的状態若しくは疾患を処置するためのものであり、前記処置により、前記敗血症若しくはＳＩＲＳ又は前記敗血症若しくはＳＩＲＳと関連する前記状態若しくは疾患が寛解されるか又は阻害される。

【0046】

そのような使用の別の実施形態では、この薬物は、対象におけるＩＲＩ又はＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置するためのものであり、前記処置により、前記ＩＲＩ又は前記傷害と関連する前記状態若しくは疾患が寛解されるか又は阻害される。

【0047】

そのような使用のさらに別の実施形態では、この薬物を使用して、（ｉ）対象の内皮に対して細胞毒性であるか、又は（ｉｉ）対象の内皮機能障害の一因となるか、又は（ｉｉｉ）対象の血小板を活性化させることによって凝血を開始させるか、又は（ｉｖ）対象において赤血球脆弱性及びその結果としての貧血を誘発するＮＥＴを中和する。

【0048】

さらに別の実施形態では、製造された薬物は、第２の活性剤、化合物又は組成物の治療上有効な量又は薬学的に有効な量も含み得る。この実施形態によれば、第２の活性剤、化合物又は組成物は、ＮＥＴを伴う医学的状態、病気又は疾患を処置するための補助的治療を提供する。望ましくは、第２の活性剤、化合物又は組成物は、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩの処置のための補助的治療又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患のための補助的治療を提供する。好ましくは、第２の活性剤は、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤及び／又は対象が患っている１種若しくは複数の状態を処置する任意の他の形態の治療用化合物若しくは医薬化合物の１つ又は複数から選択される。より好ましくは、第２の活性剤、化合物又は組成物は、１種又は複数の抗炎症剤を含む。

【0049】

本発明の方法のいずれかにおいて、改変されている硫酸化セロビオシド化合物を使用する場合、この化合物を、製剤の単回用量において、それを必要とする対象に投与し得るか、又はこの投与のために製剤化し得る。特定の代替実施形態では、この改変されている硫酸化セロビオシド化合物を、複数回用量製剤として、それを必要とする対象に投与するか、又はこの投与のために製剤化する。

【0050】

追加の目的、利点及び新規の特徴は、下記の説明に記載されるか、又は図面及び下記に続くいくつかの非限定的な実施形態の詳細な説明の考察により当業者に明らかになるであろう。

【0051】

本開示は、下記の図面を参照して、好ましい実施形態の下記の説明で詳細を提供する。

【図面の簡単な説明】

【0052】

【図1】選択された化合物の化学構造である。

【図2】ヒストンにより媒介される病理を阻害する際に、ヘパリンと同程度に強力となるためのポリアニオンの最小限の構造上の要件である。ａ、硫酸化二糖、ｍＣＢＳ及び硫酸化三糖、ＭＴＳは、ＨＭＥＣ－１に対するヒストンにより媒介される細胞毒性を阻害する際にヘパリンと同程度に有効である一方、硫酸化単糖、グルコースペル－Ｏ－サルフェート及びメチルβ－グルコシドペル－Ｏ－サルフェートは、阻害活性をほとんど又はまったく示さないことを示す阻害曲線である。ｂ、ヒストンにより誘発される赤血球の脆弱性の阻害を検討すると得られた類似結果。データは、平均±ｓ．ｅ．ｍである。（ｎ＝３、生物学的反復）

【図3】ヒストンは、ＳＰＡにより完全に阻害される過程である、赤血球凝集を促進して赤血球変形能を低下させる。ヒト赤血球（ＲＢＣ）を、ｍＣＢＳ（２００μｇｍｌ^－１）と共に又はこれを使用しないで、単独（「生理食塩水」コントロール）で、又はヒストン（４００μｇｍｌ^－１）の存在下で、３７℃で１時間、インキュベートした。ａ、凝集化ＲＢＣと正常な（非凝集化）ＲＢＣとを区別するため、前方（ＦＳＣ）散乱パラメータ及び側方（ＳＳＣ）散乱パラメータ及び適切なゲート戦略に基づいたフローサイトメトリーにより測定されたＲＢＣ凝集の割合。ｂ、（ａ）において図示された３種の処置後の、低倍率及び高倍率でのＲＢＣ凝集レベルを図示する、走査電子顕微鏡写真。ｃ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳによる、ヒストンにより媒介されるＲＢＣ凝集の濃度依存的阻害であり、この場合、ＲＢＣ凝集は、ヒストンの非存在下でのＲＢＣと比較したＲＢＣ自家蛍光の増加倍率として、フローサイトメトリーによって計算される。この増加倍率の値はまた、各凝集物におけるＲＢＣの数の推定値をもたらす。ｄ、ＲＢＣ変形能を測定する人工脾臓におけるＲＢＣの保持。ＲＢＣを、１時間、ヒストンの濃度を向上させてインキュベートし、人工脾臓に通過させる前に、使用される最も高い濃度（４００μｇｍｌ^－１）で、ｍＣＢＳ又はＭＴＳ（１００及び２００μｇｍｌ^－１）のどちらか一方と共にやはりインキュベートした。データは、平均±ｓ．ｅ．ｍである。（ｎ＝３、生物学的反復）^＊＊＊Ｐ＜０．００１、^＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１（Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較検定による一元配置分散分析）。

【図4】ＳＰＡは、ヒストンにより誘発される血小板凝集及び脱顆粒を阻害する。ａ、分離した血小板のヒストンにより誘発される凝集。ｂ、ヒストン（ＨＩＳ）（１５０μｇ／ｍＬ）により誘発される血小板凝集のＳＰＡによる阻害。ｃ、ＡＴＰ放出によって測定される、全血中の血小板のヒストンにより誘発される脱顆粒。点線は、トロンビンにより活性化された血小板からのＡＴＰ放出である。ｄ、ヒストンにより誘発される血小板脱顆粒のＳＰＡによる阻害。（ａ、ｂ）におけるデータは、平均±ｓ．ｅ．ｍ（ｎ＝３、生物学的反復）。（ｃ、ｄ）におけるデータは、３つの実験の１つの代表例である。

【図5】ヒストンは、ＳＰＡによりブロックされるプロセスである、脂質二重層を破壊して細胞内Ｃａ^２＋流動を誘発する。ａ、ヒストン（ＨＩＳ）（１μｍ）に単独（ｎ＝４７）で、又はＳＰＡであるＣＢＳ（ｎ＝５２）若しくはＭＴＳ（ｎ＝４０）（１０μＭ）の存在下で曝露した人工脂質二重層の寿命。コントロール二重層（ｎ＝１２５）は、ＲγＲ１イオンチャネルタンパク質を含んだ（ｎ＝生物学的反復）。データは、平均±ｓ．ｅ．ｍである。ノンパラメトリックＫｒｕｓｋａｌ－Ｗａｌｌｉｓ検定を使用してＰ値を算出した。ｂ．ヒストンを添加（１００μｇｍｌ^－１）して１分後のＣａ^２＋流動ＨＭＥＣ－１を示す、Ｃａ^２＋感受性色素Ｉｎｄｏ－１を使用する代表的なフローサイトメトリープロット。ｃ．ＨＭＥＣ－１による、ヒストンによって誘発されるＣａ^２＋流動に及ぼすＣＢＳ及びＭＴＳ（１００μｇｍｌ^－１）の効果の時間経過。２回の個別の実験の１つ及び２回の生物学的反復の平均値からの（ｃ）におけるデータ。

【図6】ＳＰＡは、インビボで、ヒストンにより誘発される組織傷害、血小板減少症、貧血及びＤＶＴを阻害する。ａ、ヒストン（５０ｍｇｋｇ^－１）のＩ．Ｖ．注射の１０分間前に、ＳＰＡ用量（表示されている）をｉ．ｐ．注射したマウス（ｎ＝５～２８／群）の肝臓（アラニンアミノトランスフェラーゼ、ＡＬＴ）、腎臓（クレアチニン、Ｃｒｅａ）及び一般組織（乳酸デヒドロゲナーゼ、ＬＤＨ）傷害を評価するために、ヒストンの４時間後にマウスの血液を採取した。データは、ｎ＝５～２８匹のマウス／処置で、１０回の個別の実験からプールしたデータ。ｂ、上記のとおり処置されたが、１回のＳＰＡ投与量（１００ｍｇｋｇ^－１）を受けたマウス（ｎ＝５／群）の循環血小板及びＲＢＣ及び脾臓ヘモグロビン（Ｈｂ）を評価するため、ヒストンの１０分後に、マウスの血液及び脾臓を採取した。ｃ、ヒストンにより誘発されたＤＶＴのマウスモデル（ｎ＝７～１０マウス／群）に及ぼすＣＢＳ及びＭＴＳの影響。データは、平均±ｓ．ｅ．ｍ。^＊Ｐ≦０．０５、^＊＊Ｐ＜０．０１、^＊＊＊Ｐ＜０．００１、^＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１（Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較検定による一元配置分散分析）。

【図7】ＳＰＡは、細胞外ヒストンに伴う様々な病理を阻害する。ａ、盲腸のライゲーション及び穿刺（ＣＬＰ）が施され、生理食塩水（コントロール）、ＣＢＳ又はＭＴＳの投与受けたラット（ｎ＝８／群）の生存率。ログランク（Ｍａｎｔｅｌ－Ｃｏｘ）検定を使用してＰ値を得た。ｂ、ＡＬＴ及びクレアチニンの血中レベルにより測定される、ＣＬＰラットにおける腎臓及び肝臓の傷害。ｃ、左心室（ＬＶ）における虚血区域（ＩＺ）を有するラットにおける、心臓ＩＲＩに及ぼすＣＢＳ及びＭＴＳ（ｎ＝６～１２／群）の作用であり、微小血管閉塞（ＭＶＯ）及び梗塞領域が測定される。ｄ、マウス（ｎ＝３～５／群）におけるＩＲＩの皮膚弁モデルに及ぼすｍＣＢＳ及びＭＴＳの作用であり、代表的な写真が示されている。図６と同様の（ｂ～ｄ）の統計分析。

【図8】ＨＭＥＣ－１増殖は、ヒストン細胞毒性の決定及びこの細胞毒性の阻害剤の両方の検出のための、非常に感度の高いアッセイである。ａ、サブコンフェルトＨＭＥＣ－１単層を３時間、濃度を向上したヒストンに曝露させて、次に、^３Ｈ－チミジンを加え、次の２４時間にわたり、ＨＭＥＣ－１増殖を^３Ｈ－チミジン取込みによって測定し、ＨＭＥＣ－１増殖が、高度に濃度依存的に、ヒストンによって阻害された。ｂ、ＳＰＡであるｍＣＢＳ及びＭＴＳ（１００μｇｍｌ^－１）は、ＨＭＥＣ－１単層に及ぼすヒストン（４００μｇｍｌ^－１）の抗増殖作用を完全に中和した。データは、平均±ｓ．ｅ．ｍである。（ｎ＝３、生物学的反復）^＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１（Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較検定による一元配置分散分析）。

【図9】敗血症の患者に由来する血清は、内皮細胞に対して毒性であり、作用は、ＤＮアーゼＩ、抗ヒストン抗体及びＳＰＡにより中和される。ａ、ＡＰＡＣＨＥ ＩＩスコアとＨＭＥＣ－１に及ぼす敗血症患者（ｎ＝２０の患者）の血清の抗増殖作用との相関関係（スピアマンのｒ値）。ｂ、ＡＰＡＣＨＥ ＩＩスコアと敗血症患者の血清の細胞外ＤＮＡ含有物との相関関係。ｃ、敗血症患者５に由来する血清の抗増殖作用に及ぼす、ヒストン３（αＨ３）及びヒストン４（αＨ４）（ｎ＝４、生物学的反復／処置）に対するＤＮアーゼＩ又はｐＡｂの効果（赤丸、パネルａ）。ｄ、ＳＰＡであるｍＣＢＳ及びＭＴＳが敗血症患者の血清（ＳＳ）（ｎ＝１０患者）の抗増殖性影響を中和する能力。図６と同様の統計分析。

【発明を実施するための形態】

【0053】

本発明は、対象におけるＮＥＴによって媒介される病気（例えば、敗血症、ＳＩＲＳ又はＩＲＩ）の処置又は予防における、化学的安定性が高い、改変されている硫酸化セロビオシド化合物の使用を対象とする。そのような化合物により、対象におけるＮＥＴの細胞毒性効果を寛解させ得るか、又は阻害し得るか、又は予防し得る。

【0054】

便宜のために、下記のセクションは、本明細書で使用される用語の様々な意味を全体的に概説する。この議論後、本発明を例示する一般的な例示的実施形態を開示し、続いて本発明の様々な例示的実施形態の特性のより具体的な例示を提供する具体例を開示する。

【0055】

概要
本明細書で説明されている本発明は、本明細書で説明されている本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく、具体的に説明されているもの以外に変形及び改変される余地があることを当業者は認識するであろう。本発明は、全てのそのような変形形態及び改変形態を含む。本発明はまた、個々に又はまとめて、本明細書で言及されるか又は示される全てのステップ、特徴、組成物及び構成要素と、前記ステップ又は特徴の任意の及び全ての組み合わせ又は任意の２つ以上とを含む。機能的に均等な製品、物質の組成及び方法は、明らかに、本明細書で説明されている本発明の範囲内である。

【0056】

上記参照又は下記参照のいずれかで本明細書で引用されている全ての刊行物、参考文献、文献、特許及び特許出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれ、これは、これらの刊行物、参考文献、文献、特許及び特許出願が本文の一部として読まれるべきであり且つ見なされるべきであることを意味する。本文で引用されている任意の刊行物、参考文献、文献、特許及び特許出願を本文中で繰り返さないのは、単に簡潔さのためである。しかしながら、本明細書で言及されている刊行物、参考文献、文献、特許及び特許出願は、これらの刊行物で報告されており且つ本発明に関連して使用される可能性があるプロトコル、試薬及び生成物を説明及び開示するために引用されている。本明細書のいかなるものも、先行発明により又はあらゆる他の理由により、本発明がそのような開示に先行する権利がないことを認めるものと解釈すべきではない。これらの文献の日付に関する全ての記載又は内容に関する表示は、本出願人らが入手可能な情報に基づくものであり、これらの文献の日付又は内容の正確さに関していかなる承認も構成しない。

【0057】

本明細書で言及されているか又は参照により本明細書に組み込まれる任意の文献で言及されている任意の製品のあらゆる製造業者の指示書、説明書、製品仕様書及び製品シートは、参照により本明細書に組み込まれ、且つ本発明の実施で用いられ得る。

【0058】

本明細書で使用される選択された用語の定義は、本発明の要約及び本発明の詳細な説明内に見出され得、且つ全体を通して適用される。別途定義しない限り、本明細書で使用される全ての他の科学用語及び技術用語は、本発明が属する技術分野における当業者に一般に理解されるのと同じ意味を有する。当該技術分野における用語の使用法と、本明細書に記載されているこの用語の定義との間に明らかな矛盾が存在する場合、本明細書内に記載されている定義が優先されるものとする。

【0059】

定義
作業実施例又は別途指示されている場合を除いて、本明細書で使用されている成分又は反応条件の量を表す全ての数字は、全ての場合において用語「約」により修飾されていると理解すべきである。例えば、用語「約」は、百分率と関連して使用される場合、±１０％を意味し得る。

【0060】

別途文脈が必要としない限り又は本明細書が明確に反対のことを述べない限り、単数の整数、ステップ又は要素として本明細書で列挙されている本発明の整数、ステップ又は要素は、列挙された整数、ステップ又は要素の単数形及び複数形の両方を明確に包含する。本明細書全体を通して、別途述べない限り又は別途文脈が必要としない限り、単一のステップ、組成物若しくは物質、ステップの群又は物質の組成物の群への言及は、１つ及び複数（即ち１つ以上）の又はこれらのステップ、組成物若しくは物質、ステップの群又は物質の組成物の群を包含すると見なすものとする。従って、本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その」は、別途文脈が明確に指示しない限り、複数の言及を含む。そのため、例えば、「硫酸化セロビオシドであって、その還元末端で小さい非荷電置換基で改変されている硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩」への言及は、複数のそのような改変されている硫酸化セロビオシド化合物又は複数のその塩及び同類のものを含む。

【0061】

本明細書及び特許請求の範囲の全体を通して、別途文脈が必要としない限り、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」又は「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」若しくは「含んでいる」等のバリエーションは、述べられているステップ、若しくは要素、若しくは整数又はステップ、若しくは要素、若しくは整数の群の包含を暗示するが、あらゆる他のステップ、若しくは要素、若しくは整数又はステップ、若しくは要素、若しくは整数の群の排除を暗示しないと理解されるであろう。

【0062】

本明細書で使用される場合、用語「包含している」並びに「包含する」及び「包含される」等のバリエーションも限定的ではないと理解されるであろう。

【0063】

本出願では、「又は」の使用は、別途述べない限り「及び／又は」を意味する。

【0064】

本明細書で説明されている本発明は、１つ又は複数の範囲の値（例えば、サイズ、変位及び電界強度等）を含み得る。値の範囲は、この範囲を定義する値等のこの範囲内の全ての値と、この範囲の境界を定義する値に直接隣接する値と同一の又は実質的に同一の結果を導く、この範囲に隣接する値とを含むと理解されるであろう。例えば、関連分野の当業者は、範囲の上限又は下限の１０％変動が完全に適切であり得、且つ本発明に包含されることを理解するであろう。より具体的には、範囲の上限又は下限の変動は、５％であるか、又は当該技術分野で一般的に認識されているようにいずれかがより大きい。

【0065】

本明細書で使用する場合、用語「ＮＥＴ」とは、ヌクレオソームとタンパク質、例えば、抗微生物活性を有するタンパク質との細胞外複合体を指す。ヌクレオソームは、好中球、肥満細胞、好酸球、単球又は白血球に由来し得る。

【0066】

本明細書で使用する場合、言い回し「ＮＥＴ関連合併症」は、特に限定なしに、ＮＥＴが関連する
ａ．感染（細菌、ウイルス、真菌、寄生性感染を含む）、敗血症（細菌、ウイルス、真菌、寄生生物、プリオンによって誘発される敗血症を含む）；又は非感染性全身性炎症反応症候群、手術、外傷、出血、熱傷、急性膵炎、子癇前症及び急性腎傷害を含めた非感染性誘発因子に対する全身性炎症反応
ｂ．例えば、粥状動脈硬化、血管の自然破裂、血管への外傷性傷害に起因する動脈の閉塞後の且つ心臓の及び移植と関連するＩＲＩを含む局所組織レベルでの低酸素症；又は例えば溺死、ガス曝露若しくは心肺停止に起因する呼吸停止後の、且つ例えば急性呼吸促迫症候群、人工呼吸器関連肺傷害、慢性閉塞性肺疾患及び薬剤介在組織傷害等の病気を含む全身レベルでの低酸素症
ｃ．粥状動脈硬化、凝血及び血栓症（例えば、深部静脈血栓症）等の、例えば循環器疾患又は慢性循環器疾患等の止血（ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ）又は血管閉塞；輸血関連急性肺傷害（ＴＲＡＬＩ）
ｄ．機能的な実質器官組織が線維化組織によって置き換えられて、これによって、肺線維症、特発性肺線維症等の器官の機能が著しく減退する恐れのある線維症
ｅ．自己免疫疾患状態及び炎症疾患状態（例えば、多発性硬化症、腫瘍関連炎症、過剰炎症疾患状態、全身性エリテマトーデス、脊椎関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、腸炎性関節炎、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、嚢胞性線維症（ＣＦ）、喘息、糸球体腎炎、慢性肺疾患、クローン病、過敏性腸疾患、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、小血管の破壊及び炎症によって特徴付けられる抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連血管炎（ＡＡＶ）（多発性血管炎を伴う肉芽腫症、多発性血管炎及び顕微鏡的多発血管炎を伴う好酸球性肉芽腫症等）、家族性地中海熱、筋萎縮性側索硬化症、がん、シェーグレン症候群、早期関節炎、ウイルス性関節炎、乾癬、加齢に伴う臓器線維症、特発性肺線維症、若年性糖尿病（Ｉ型）、糖尿病（２型）、抗リン脂質抗体症候群等）
ｆ．ハンチントン病等の様々な中枢神経系疾患
ｇ．痛風等のサイトカイン及びケモカインにより誘発された分解
を意味する。

【0067】

上で引用した状態は、ＮＥＴオーシスの向上と関連し、したがって、ＮＥＴは、これらの障害の処置を標的とすることができる。

【0068】

本明細書で使用する場合、用語「病気」、「状態」又は「疾患」（互換的に使用される）は、ＮＥＴの放出と関連する医学的合併症を意味する。

【0069】

本明細書で使用される場合、用語「敗血症」は、その意味において、標準的な医学参考文献で特徴付けられており、及び／又は当業者に既知である敗血症の疾患又は状態の全てのステージを含む。例えば、敗血症は、重度の敗血症、急性及び慢性の敗血症並びに敗血症性ショックを含む。用語「敗血症」は、本明細書で使用される場合、感染と関連するエピソードも含む。本明細書で使用される用語「ＳＩＲＳ」（全身性免疫反応症候群）は、感染と関連しないエピソード（例えば、外傷、熱傷、膵炎、臓器移植、手術、癌の治療レジーム後の腫瘍溶解、周産期合併症及び同種移植片の免疫抑制予防）を含む。

【0070】

本明細書で使用される場合、用語「敗血症若しくはＳＩＲＳと関連する医学的状態」又は「敗血症若しくはＳＩＲＳと関連する疾患」は、それらの意味において、標準的な医学参考文献で特徴付けられており、及び／又は当業者に既知である敗血症又はＳＩＲＳの疾患又は状態の任意の又は全てのステージと直接的に又は間接的に関連するか、それに由来するか、それによって引き起こされるか又はそれを伴う全ての徴候及び症状を含む。例えば、敗血症又はＳＩＲＳと関連する医学的状態又は疾患として、感染の有無にかかわらず対象において現れる場合がある対象における敗血症又はＳＩＲＳの疾患又は状態の任意の又は全てのステージと関連するか、それに由来するか、それによって引き起こされるか又はそれを伴う下記の徴候又は症状の１つ又は複数が挙げられる：動脈性低血圧、代謝性アシドーシス、全身性血管抵抗減少、心拍数増加（頻脈）、呼吸速度増加（頻呼吸）、全体炎症若しくは全身性炎症、白血球数上昇若しくは白血球減少（白血球増加症又は白血球減少症）、血液中のＮＥＴの増加、臓器機能不全、例えば急性臓器機能不全、循環系の機能不全、多臓器不全症候群、播種性血管内凝固（ＤＩＣ）、１種若しくは複数の臓器の微小血管系中でのフィブリンの沈着、発熱、錯乱、肺炎、肺炎を伴う咳、腎感染、腎感染を伴う排尿時痛及び／又は敗血症性ショック。

【0071】

本明細書で使用される場合、用語「低減する」、「低減した」、「低減」、「減少する」又は「阻害する」は、全て統計的に有意な量の減少を意味するために概して使用される。しかしながら、疑念を回避するために、「低減した」、「低減」若しくは「減少する」又は「阻害する」は、例えば、薬剤の非存在下で基準レベルと比較して少なくとも１０％の減少を意味し、例えば少なくとも約２０％、又は少なくとも約３０％、又は少なくとも４０％、又は少なくとも５０％、又は少なくとも約６０％、又は少なくとも約７０％、又は少なくとも約８０％の減少を意味する。

【0072】

本明細書で使用される場合、用語「改善する」、「増加した」、「増加する」若しくは「増強する」又は「活性化する」は、全て統計的に有意な量の増加を概して意味するように使用され、あらゆる疑念を回避するために、用語「改善する」、「増加した」、「増加する」若しくは「増強する」又は「活性化する」は、例えば、薬剤の非存在下で基準レベルと比較して少なくとも１０％の増加を意味し、例えば少なくとも約２０％、若しくは少なくとも約３０％、若しくは少なくとも約４０％、若しくは少なくとも約５０％）、若しくは少なくとも約６０％、若しくは少なくとも約７０％、若しくは少なくとも約８０％の増加又は少なくとも約２倍、若しくは少なくとも約３倍、若しくは少なくとも約４倍、若しくは少なくとも約５倍、若しくは少なくとも約１０倍の増加又は基準レベルと比較して２倍～１０倍以上の任意の増加を意味する。

【0073】

本明細書で使用される場合、用語「投与する」、「投与した」及び「投与すること」は、所望の効果が生じるように、所望の部位での組成物の少なくとも部分的な局在化をもたらす方法又は経路による、この組成物の対象への配置を指す。本明細書で説明されている化合物又は組成物を、当該技術分野で既知の任意の適切な経路により投与し得、この経路として経口経路又は非経口経路が挙げられるが、これらに限定されず、例えば静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、経皮投与、気道（エアロゾル）投与、肺投与、経鼻投与、直腸投与並びに局所（例えば、頬側及び舌下）投与が挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態では、本化合物は、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩である。好ましくは、このポリアニオン性硫酸化セロビオシドの還元末端に存在する小さい非荷電グリコシド結合置換基は、還元末端で硫酸化されている同一のポリアニオンと比べてポリアニオンの化学的安定性を改善する。上記化合物が治療用組成物又は治療用組成物等の組成物中に存在する場合、この化合物は、非経口投与のために調製されるか、又は標的部位への送達を可能にする別の他の方法のために調製される。いくつかの例示的な投与形態として、注射、注入、点滴、吸入又は経口摂取が挙げられるが、これらに限定されない。

【0074】

本明細書で使用される場合、用語「注射」は、下記を含むが、これらに限定されない：静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、脳室内、関節内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節腔内、嚢下、くも膜下、脊髄内、脳脊髄内及び胸骨内の注射及び注入。好ましい実施形態では、本組成物を静脈内注入又は静脈内注射により投与する。

【0075】

本明細書で使用される場合、本明細書で列挙されている状態又は疾患のいずれかに関する限り、本発明に関連して、用語「処置する」、「処置」、「処置すること」及び同類のものは、そのような状態又は疾患と関連する少なくとも１種の症状又は合併症の進行、悪化（ａｇｇｒａｖａｔｉｏ）、悪化（ｄｅｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎ）、進行、予想される進行又は重症度を軽減するか、緩和するか、寛解させるか、阻害するか、減速させるか、反転させるか又は停止させることを意味する。ある実施形態では、状態又は疾患の症状は、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％又は少なくとも５０％緩和される。

【0076】

本明細書で使用される場合、語句「有効量」、「治療上有効な量」又は「有効用量」（本明細書では互換的に使用される）は、これらの意味において、本発明の化合物又は組成物の、所望の効果が生じるのに十分であるが、非毒性である量を含む。必要とされる化合物又は組成物の正確な量は、所望の効果、処置する種、対象の年齢及び全身状態、処置する状態の重症度、投与する薬剤、投与様式及び同類のもの等の因子に応じて対象毎に異なるであろう。そのため、正確な「有効量」を指定することは、不可能である。しかしながら、任意の所与の場合に関して、適切な有効量（用量）を、日常的な実験のみを使用して当業者により決定し得る。一般に、治療上有効な量は、対象の病歴、年齢、状態、性別及び対象の医学的状態の重症度及び種類並びに他の薬学的に活性な薬剤の投与により変化し得る。

【0077】

本明細書で使用される場合、治療用途又は医薬用途での化合物及び組成物の使用への言及は、ヒト用途及び非ヒト（例えば、獣医）用途にも同様に適用可能であることが理解されるであろう。従って、別途指示されている場合を除いて、「患者」、「対象」又は「個体」（本明細書では互換的に使用される）への言及は、ヒト又は非ヒト（例えば、社会的に重要な、経済的に又は研究上重要なあらゆる種の個体）を意味することが理解され、この個体として下記が挙げられるが、これらに限定されない：哺乳類、鳥類、ウサギ類、ヒツジ、ウシ、ウマ、ブタ、ネコ、イヌ、霊長類及び齧歯類の種。より好ましくは、患者、対象又は個体は、哺乳類の種に属する動物である。この哺乳類の種は、望ましくは、ヒト若しくは非ヒトの霊長類であるか、又はコンパニオン動物（例えば、家畜化されたイヌ、ネコ、ウマ、サル、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ、ヤギ、ウシ若しくはブタ）である。特に好ましい一例では、患者、対象又は個体は、ヒトである。

【0078】

本明細書で使用される選択された用語の定義は、本発明の詳細な説明中に見出され得、且つ全体を通して適用される。別途定義しない限り、本明細書で使用される全ての他の科学用語及び技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般に理解するのと同じ意味を有する。

【0079】

本発明の例示的実施形態
下記の本発明の詳細な説明は、本発明を例示する目的のためにのみ含まれており、上記に記載されているような本発明の広範な説明への限定として決して理解されるべきではない。

【0080】

１．本発明の化合物
本発明の第１の態様では、ＮＥＴによって媒介される合併症の処置での使用のための化合物であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩を含む化合物が提供される。この置換基は、同一のポリアニオンであるが、還元末端で硫酸化されているポリアニオンと比べて、分子に高い化学的安定性を付与する。好ましくは、このクラスの化合物は、高い正味の負電荷を有するはずである。

【0081】

本発明の化合物は、ＮＥＴによって媒介される合併症（例えば、敗血症又は虚血再灌流傷害）を、予防的（即ち医療処置に対する予防的前処置として）又はこの状態若しくは疾患が発生した後の処置中の治療的の両方で寛解させ得る。

【0082】

本発明の実施形態では、改変されたポリアニオン性硫酸化セロビオシドは、以下の一般構造：

【化2】

（式中、
Ｒ１は、サルフェート基、又は小さい非荷電グリコシド結合置換基、例えばＯ－又はＳ－（Ｃ_１～６）アルキルであり、
Ｒ２～Ｒ８は、（ｉ）小さい非荷電Ｏ結合置換基又は（ｉｉ）サルフェート基からそれぞれ選択される）を有する。

【0083】

好ましくは、Ｒ１は、Ｏ－又はＳ－（Ｃ_１～６）アルキルである。Ｒ１が、Ｏ－又はＳ－（Ｃ_１～６）アルキルである場合、選択された置換基により、Ｒ１にサルフェート基を有する同じポリアニオンに比べて、ポリアニオンの化学的安定性が好ましくは改善される。

【0084】

好ましくは、Ｒ２～Ｒ８は、それぞれ（ａ）非改変ヒドロキシル基、又は（ｂ）サルフェート基から選択される。

【0085】

より好ましくは、Ｒ１は、メトキシ基又はエトキシ基であり、及びＲ２～Ｒ８は、それぞれサルフェート基である。

【0086】

望ましくは、この化合物のクラスは、高い正味の負電荷を有し、即ちポリアニオンである。

【0087】

この小さい非荷電グリコシド置換基（Ｒ１）のアノマー配置は、α位又はβ位のいずれかであり得る。好ましくは、この小さい非荷電置換基は、β配置である。

【0088】

本発明の非常に好ましい形態では、本化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖であるβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェート又はその薬学的に許容される塩である。実例として、この化合物は、β－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩である。

【0089】

ｍＣＢＳは、ＣＢＳと比べて非常に安定しており、高用量で良好に耐容性である。

【0090】

ポリアニオン性硫酸化セロビオシドの還元末端に存在する小さい非荷電グリコシド結合置換基は、還元末端で硫酸化されている同一のポリアニオンと比べてポリアニオンの化学的安定性を改善する。

【0091】

化学的安定性は、本明細書で使用される場合、本発明の化合物の、変化（具体的には自然環境中での分解又は空気、熱、光、圧力若しくは他の自然条件に曝露された際の分解又は内部反応に起因する分解）に抵抗する傾向を表す。

【0092】

本発明の化合物は、予想される使用条件又は通常の環境条件下での少なくとも１ヶ月の貯蔵後、還元末端で硫酸化されている同一のポリアニオンと比べて有意に分解していない場合に「安定」である。

【0093】

本発明の化合物は、予想される使用条件又は通常の環境条件下での少なくとも１ヶ月の貯蔵後に３個以上のサルフェート基が失われている場合、有意に分解されているであろう。好ましくは、本発明の化合物は、予想される使用条件又は通常の環境条件下での少なくとも１ヶ月の貯蔵後に２個のサルフェート基が失われている場合、有意に分解されているであろう。最も好ましくは、本発明の化合物は、予想される使用条件又は通常の環境条件下での少なくとも１ヶ月の貯蔵後に１個のサルフェート基が失われている場合、有意に分解されているであろう。

【0094】

好ましくは、本発明の化合物は、ｐＨ７．５に緩衝化されたリン酸塩製剤中に保存され且つ２～８℃で保存された場合、少なくとも２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１２ヶ月、１３ヶ月、１４ヶ月、１５ヶ月、１６ヶ月、１７ヶ月、１８ヶ月、１９ヶ月、２０ヶ月、２１ヶ月、２２ヶ月、２３ヶ月又は２４ヶ月にわたり化学的に安定である。より好ましくは、ｐＨ７．５に緩衝化されたリン酸塩製剤中で保存され且つ約２～８℃で保存されている化合物では、６ヶ月～２年の期間にわたり安定性が測定される。

【0095】

本明細書で使用される場合、語句「薬学的に許容される塩」は、健全な医学的判断の範囲内において、過度の毒性、刺激、アレルギー反応及び同類のものを伴うことなくヒト及び下級動物の組織との接触での使用に適しており、且つ合理的な利益／リスク比に見合う塩を含む。

【0096】

薬学的に許容される塩は、当該技術分野で公知である。この塩として、例えば、無機酸（例えば、塩酸若しくはリン酸）又は有機酸（例えば、クエン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸、マンデル酸及び同類のもの）に由来する酸付加塩（タンパク質の遊離アミノ基で形成されている）が挙げられる。同様に、タンパク質の遊離カルボキシル基で形成された塩も、無機塩基（例えば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム若しくは第二鉄の水酸化物）又は有機塩基（例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ヒスチジン、プロカイン及び同類のもの）に由来し得る。

【0097】

本発明の好ましい形態では、本発明の改変されている硫酸化セロビオシドは、薬学的に許容される塩として存在する。実例として、この化合物は、β－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩であり、即ちナトリウムβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェート（ｍＣＢＳ．Ｎａ）である。

【0098】

本発明の方法又は組成物で使用される、改変されている硫酸化セロビオシド化合物又はその薬学的に許容される塩は、当業者に既知の方法により調製され得る。例えば、硫酸化化合物であって、その還元末端において非荷電置換基で改変されている硫酸化化合物を調製する方法は、全体が参照により本明細書に組み込まれるＫａｔｒｉｎ Ｃ Ｐｒｏｂｓｔ ａｎｄ Ｈａｎｓ Ｐｅｔｅｒ Ｗｅｓｓｅｌ，２００１，Ｊ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０（７＆８）：５４９－５６０で概して説明されている。

【0099】

２．処置方法
本発明の化合物、及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、ＮＥＴの病理的な活性を寛解又は予防することができるので、本発明は、本発明の第２の態様として、ＮＥＴ関連合併症を処置又は予防する方法であって、対象にポリアニオン性硫酸化セロビオシド若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療的又は薬学的に有効な量を投与するステップを含む方法を提供する。

【0100】

更に、本発明の第３の態様では、対象における、ＮＥＴ蓄積を寛解させる方法であって、対象にポリアニオン性硫酸化セロビオシド若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療的又は薬学的に有効な量を投与するステップを含む方法が提供される。

【0101】

本発明の第２及び第３の態様の実施形態では、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0102】

本発明の第２及び第３の態様により記載される本発明は、ＮＥＴの形成及びこれに由来する生じた毒性によって引き起こされる、様々な異なるＮＥＴの病気を処置すること、寛解させること又は予防することを企図する。本発明のこれらの態様によれば、個々の方法は、対象における、ＮＥＴ関連合併症の処置又は予防に使用することができる。

【0103】

通常、ＮＥＴ関連状態は、ＮＥＴオーシスの増大に起因することができ、したがって、ＮＥＴは、対象におけるその正常な病態生理学的レベルに一致する基底濃度又は基底量までＮＥＴのレベル又は活性を改変する（好ましくは、低下させる）ことによって、これらの障害の処置を標的とすることができる。

【0104】

ＮＥＴ活性化因子の最大の群は、病原性グラム陽性菌及びグラム陰性菌のリポタイコ酸及びＬＰＳ、並びに原核生物タンパク質の分解生成物である。ＮＥＴを誘発する細菌の一部の例は、例示として、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、マンヘミア・ヘモリチカ（Ｍａｎｎｈｅｉｍｉａ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃａ）、アグリゲイティバクター・アクチノミセテムコミタンス（Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ）、淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｈｏｅａｅ）、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、エルシニア・エンテロコリチカ（Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ）、コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ）、レプトスピラ属種（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ ｓｐｅｃｉｅｓ）、インフルエンザ菌（Ｈ．Ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、肺炎桿菌（Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、Ｌ．モノサイトゲネス（Ｌ．Ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）及びフレキシネル赤痢菌（Ｓ．ｆｌｅｘｎｅｒｉ）を含む。ＮＥＴ活性化はまた、真菌感染（例は、例示として、Ａ．ニデュランス（Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓ）、Ａ．フミガツス（Ａ．ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）等のアスペルギルス属種（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．）、及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）等のカンジダ属種（Ｃａｎｄｉｄａ ｓｐｐ．）を含む）；原生動物の寄生虫感染（例は、例示として、（Ｌ．アマゾネンシス（Ｌ．ａｍａｚｏｎｅｎｓｉｓ）又はその表面リポホスホグリカン、糞線虫（Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ）、アイメリア・ボビス（Ｅｉｍｅｒｉａ ｂｏｖｉｓ）、リーシュマニア属種（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）、トキソプラズマ・ゴンディ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ）、熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）を含む）；又はウイルス感染（例は、例示として、ＨＩＶ／ＳＩＶ、ハンターンウイルス呼吸系発疹ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルスを含む）から起こり得る。これらの病因活性化因子は、例にとして提示されているに過ぎず、ＮＥＴ活性化因子となる生物の規定リストを構成（ｃｏｎｓｉｓｔｕｔｅ）するものではない。当業者は、生物のＮＥＴ活性化能を認識している。

【0105】

上に列挙したもの等の生物による感染により引き起こされる反応は、一般に、炎症経路の活性化を引き起こす炎症反応であるが、自己免疫応答、肺疾患、血栓症又は他の微生物活性等の他の反応もまた、ＮＥＴ活性化の結果として現れ得る。Ｎｅｔ活性化はまた、非感染性全身性炎症反応症候群、手術、外傷、出血、熱傷及び腎臓傷害を含めた非感染性誘発因子；局所組織レベル又は全身性レベルでの低酸素症；止血又は血管閉塞；機能的な実質器官組織が線維化組織により置き換えられた線維症；自己免疫疾患状態及び炎症疾患、様々な中枢神経系疾患、並びにサイトカイン及びケモカイン誘発性分解から生じる。

【0106】

本発明の第２又は第３の態様のある実施形態では、それぞれの方法は、本発明の化合物と同時に又はこの化合物に付随して、対象が罹患しているか又は罹患する可能性がある医学的状態のための補助的処置を提供する、本発明の化合物と異なる第２の治療薬（例えば、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は他の形態の医学的介入）を対象に投与することをさらに含み得る。

【0107】

好ましくは、本発明のこれらの態様の一例として、それぞれの方法は、対象における敗血症若しくはＳＩＲＳ又は敗血症若しくはＳＩＲＳと関連する医学的状態若しくは疾患を処置又は予防する手段を提供する。

【0108】

本発明のこれらの態様の別の例として、それぞれの方法は、対象におけるＩＲＩ又はＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置又は予防する手段を提供する。

【0109】

好ましくは、この方法は、二次的な状態を処置するために医師が他の薬物を投与することを可能にするためにこの状態又は疾患状態を十分に寛解させる。そのため、本発明は、患者におけるＮＥＴ関連の合併症を寛解させる目的で、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を対象に投与することも含む。

【0110】

本発明の第２又は第３の態様に係る特定の例示的実施形態では、この特定された方法は、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤及び／又は対象が患っているか若しくは患うリスクがある１種若しくは複数の状態を処置する任意の他の形態の医薬組成物の１つ又は複数から選択される第２の活性剤、化合物又は組成物の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を、この改変されている硫酸化セロビオシドと一緒に又はこの硫酸化セロビオシドに付随して対象に投与するステップをさらに含み得る。

【0111】

この実施形態によれば、第２の活性剤、化合物又は組成物は、ＮＥＴ関連の合併症（例えば、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ）及び／又はそのような合併症と関連する医学的状態若しくは疾患を対象とする処置に対して補助的処置を提供する。好ましくは、第２の活性剤、化合物又は組成物は、１種又は複数の抗炎症剤を含む。

【0112】

好ましくは、第２の活性剤は、本発明の化合物によって処置される医学的病気に関連するか又はこの医学的病気と異なる、患者が患っている疾患の医学的介入の手段を提示し、前記第２の活性剤は、この患者に補助的処置を提供する。

【0113】

本明細書で開示されている本発明の治療用及組成物及び／又は医薬組成物を治療的又は予防的に投与し得る。治療用途では、化合物及び組成物を、ＮＥＴ関連の合併症又はヒストン関連の合併症と関連する病気を既に罹患している患者に、この症状を治癒するか又は少なくとも部分的に停止させるのに十分な量で投与する。この化合物又は組成物を、単回用量において又は処置レジーム（例えば、複数回用量処置レジーム）の一部として、この患者を効果的に処置するのに十分な量の活性化合物で提供すべきである。予防的用途では、本発明の化合物及び組成物を、ＮＥＴ関連の合併症と関連する病気を発症するリスクがある対象に、この病気の症状及び／又は合併症を少なくとも部分的に停止させるのに十分な量で投与する。

【0114】

本発明の第４の態様では、対象におけるＮＥＴによって媒介される病理と関連する医学的状態、病気又は疾患を処置又は予防する方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0115】

本発明の第４の態様の実施形態では、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0116】

好ましい一例では、この方法を使用して、（ｉ）対象の内皮に対して細胞毒性であるか、又は（ｉｉ）対象の内皮機能障害の一因となるか、又は（ｉｉｉ）対象の血小板を活性化させることによって凝血を開始させるか、又は（ｉｖ）対象において赤血球脆弱性及びその結果としての貧血を誘発するＮＥＴを処置する。

【0117】

上記の同定された生物のうちの１つ又は複数によって引き起こされる感染のタイプに罹患している患者は、その血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している。

【0118】

本発明の第２、第３又は第４の態様の実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することによる、対象における、ＮＥＴと関連する敗血症を処置（治療的又は予防的のどちらか一方）する方法であって、対象にその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療的又は薬学的に有効な量を投与するステップを含む方法が提供される。好ましくは、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドの還元末端に存在する小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。より好ましくは、改変されている硫酸化セロビオシドは、ｍＣＢＳであるか、又はより詳細には、ｍＣＢＳ．Ｎａなどのその薬学的に許容される塩である。

【0119】

本明細書において実証されるとおり、本発明の化合物、特にｍＣＢＳは、ＮＥＴの毒性作用をブロックし、それにより敗血症の処置として有用である。

【0120】

したがって、本発明の化合物、及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、前処置（医療処置の場合における）と敗血症が起こった後の処置の両方を含めた、敗血症におけるＮＥＴタンパク質の細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0121】

本明細書で説明されているあらゆる態様、実施形態又は例に係る本発明の非常に好ましい例示的形態では、本発明の化合物を使用して、後に論じる病気又は状態の１つ又は複数を処置又は予防する。

【0122】

Ａ．敗血症
敗血症（敗血症性ショックを含む）とは、動脈性低血圧、代謝性アシドーシス、全身性血管抵抗減少、頻呼吸及び臓器機能不全を特徴とする、感染に対する全身反応のことである。敗血症（敗血症性ショックを含む）は、サイトカインネットワーク、白血球並びに補体及び凝固線維素溶解系を含む多くの宿主防御機構の活性化と関連し且つこの活性化によって媒介される、感染に対する全身炎症反応でもある。様々な臓器の微小血管系中に線維素が広範に沈着した播種性血管内凝固（ＤＩＣ）は、敗血症の初期症状の場合がある。ＤＩＣは、多臓器不全症候群の発症において重要なメディエータであり、敗血症性ショックの患者の予後不良の一因となる。

【0123】

敗血症を引き起こす免疫学的反応は、炎症及び凝固経路の広範な活性化を引き起こす全身性炎症反応である。これは、循環器系の機能障害に進行する場合があり、たとえ最適な処置を受けても多臓器不全症候群を引き起こし、最終的に死に至る場合がある。

【0124】

敗血症の症状は、基礎となる感染プロセスに関連することが多く、未処置まま放置すると、重度の敗血症（急性臓器機能不全を伴う敗血症）又は敗血症性ショック（難治性の動脈性低血圧を伴う敗血症）として現れる可能性がある。全身性炎症反応症候群の基準（例えば、全身の炎症、発熱、白血球数の上昇（白血球増多症）並びに心拍数の上昇（頻脈）及び呼吸速度の上昇（頻呼））の２つ以上が感染の証拠なく満たされる場合、患者は、全身に影響を及ぼす敗血症性炎症状態である「ＳＩＲＳ」と単に診断される場合がある。

【0125】

敗血症の多くの患者は、２４～４８時間にわたる急速な衰弱を示す。敗血症の効果的な処置のために迅速な処置が不可欠である。残念ながら、感染のタイプの診断には、数日を要する場合がある病原体を同定するための微生物学的分析が必要である。従って、病原体を除去するための治療（例えば、抗生物質治療）は、病原体のタイプ及び種を知ることなく且つ感染の程度を知る手段がない状態で開始されなければならない。本発明は、そのような方法を提供する。

【0126】

敗血症に罹患している患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している。ＮＥＴは、敗血症の病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0127】

本発明の第２、第３又は第４の態様の実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することによる、対象における、ＮＥＴと関連する敗血症を処置（治療的又は予防的のどちらか一方）する方法であって、対象にポリアニオン性硫酸化セロビオシド若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療的又は薬学的に有効な量を投与するステップを含む方法が提供される。

【0128】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0129】

本明細書で実証されているように、本発明の化合物（特にｍＣＢＳ）は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし、それにより敗血症の処置として有用である。

【0130】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、（医療処置の場合における）前処置と敗血症が発症した後の処置との両方を含む、敗血症におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0131】

Ｂ．非感染性ＳＩＲＳ
非感染性の全身炎症性反応症候群（ＳＩＲＳ）は、全身に影響を及ぼす炎症状態である。非感染性ＳＩＲＳは、非感染性の侵襲に対する身体の反応である。ＳＩＲＳの定義は、非感染性ＳＩＲＳを「炎症性」の反応と称するが、非感染性ＳＩＲＳは、実際には炎症誘発性成分及び抗炎症性成分を有する。

【0132】

ＳＩＲＳは、全身の炎症、臓器機能障害及び臓器不全に関連する重篤な状態である。ＳＩＲＳは、サイトカインストームのサブセットであり、様々なサイトカインの異常な調節が存在する。ＳＩＲＳは、敗血症とも密接に関係しており、この敗血症では、患者は、ＳＩＲＳの基準を満たしており、且つ感染が疑われるか又は感染が証明されている。非感染性ＳＩＲＳの原因として、例えば外傷、手術、外傷性出血、熱傷及び急性膵炎が実例として挙げられる。

【0133】

本発明の第２、第３又は第４の態様のある実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することにより、対象におけるＮＥＴ関連の非感染性ＳＩＲＳを（予防的又は治療的に）処置する方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0134】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0135】

本明細書で実証されているように、本発明の化合物（特にｍＣＢＳ）は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし、それにより非感染性ＳＩＲＳの処置として有用である。

【0136】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、（医療処置の場合における）前処置と非感染性ＳＩＲＳが発症した後の処置との両方を含む、非感染性ＳＩＲＳにおけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0137】

Ｂ．１ 外傷
身体外傷とは、重篤で身体が変わる身体的損傷（例えば、四肢の粉砕又は切断）のことである。

【0138】

鈍力外傷は、鈍器から又は鈍器により加えられる衝撃又は他の力によって引き起こされる身体外傷の一種であり、貫通性外傷は、物体が皮膚又は組織を貫く身体外傷の一種である。外傷は、事故等の無計画なもの又は手術の場合の計画的なものの両方としても説明され得る。両方とも軽度～重度の組織損傷、出血及び／又はショックを特徴とし得、両方ともＳＩＲＳを引き起こす可能性があるが、その後の感染及び敗血症のリスクも著しく高める。

【0139】

ＮＥＴは、感染の非存在下において、外傷又は重度の細胞ストレス後に放出される。外傷を受けている患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している可能性がある。ＮＥＴは、外傷の病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0140】

本発明の第２、第３又は第４の態様のある実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することにより、対象におけるＮＥＴ関連の外傷を（予防的又は治療的に）処置する方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0141】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0142】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし得、そのため外傷患者での処置として有用である。

【0143】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、（医療処置の場合における）前処置と外傷性傷害が生じた後の処置との両方を含む、外傷におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0144】

Ｂ．２．手術
手術は、身体の機能若しくは外観の改善に役立つために又はときにいくつかの他の理由のために、疾患又は傷害等の病的状態を調査及び／又は処置するために患者に手術的な手技又は機器技術を使用する。本発明は、下記でさらに定義されるように、手術に起因する外傷に対処し得る。

【0145】

本発明の第２、第３又は第４の態様のある実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することにより、対象におけるＮＥＴ関連の外科的外傷を（予防的又は治療的に）処置する方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0146】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0147】

概して、処置は、患者の組織の切除又は以前から持続する傷の縫合を伴う場合に手術と見なされる。必ずしもこの範疇に該当しない他の処置（例えば、血管形成術又は内視鏡検査）も、一般的な外科的処置又は外科的設定（例えば、無菌環境、麻酔、無菌条件、典型的な手術器具及び縫合又はステープリングの使用）を伴う場合に手術と見なされる場合がある。手術の全ての形態は、侵襲的処置と見なされるが、いわゆる非侵襲的手術は、通常、対象となる構造を貫通しない切除（例えば、角膜のレーザー焼灼術）又は放射線外科的処置（例えば、腫瘍の照射）を指す。

【0148】

本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、ＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させ得ることから、本発明は、（医療処置の場合における）前処置と外科的傷害が生じた後の処置との両方を含む、外科的外傷での使用のための処置を提供する。

【0149】

Ｂ．３．外傷性出血
外傷性出血は、傷害の広範にわたる国際的影響の大半を占めており、死亡の大部分の原因となり、負傷者に大きい罹患率をもたらす。病院前救護の差異にもかかわらず、外傷性出血の急性期管理は、世界中で類似しており、十分に受け入れられる公表されたガイドラインに従う。重傷の患者のケアは、蘇生段階、手術段階及び救命治療段階の４つの多くの場合に重複するセグメントとして起こる。出血の診断及びコントロールは、外傷ケアの全ての段階で高い優先度であるべきであり、出血性ショックの状態である患者で特に重要である。出血コントロールの初期の試みは、直接圧迫、圧迫包帯又は止血帯による、目に見える重度の出血源の直接コントロール；長骨及び骨盤の骨折の安定化；並びに患者の保温を含む。蘇生段階では、温めた静脈内輸液、出血の外科的コントロール前の低血圧蘇生並びに血液及び血液製剤の適切な注入が行われる。手術段階では、出血及び任意の他の傷害の外科的コントロール並びに追加の輸血が行われる。最後に、救命治療段階では、術後のサポート及び組織潅流が提供される）。

【0150】

本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、ＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させ得ることから、本発明は、（医療処置の場合における）前処置と外傷性出血が生じた後の処置との両方を含む、外傷性出血での使用のための処置を提供する。

【0151】

Ｂ．４．熱傷
熱傷は、熱、寒さ、電気、化学物質、摩擦又は放射線によって引き起こされる傷害であり得る。第１度熱傷は、通常、発赤（紅斑）、白斑及び受傷部位での軽度の痛みに限定される。この熱傷は、通常、表皮中にのみ広がる。第２度熱傷は、透明な液体でさらに満たされ、皮膚の表面に水膨れができ、且つ神経関与のレベルに応じて多少の痛みを伴う可能性がある。第２度熱傷は、表皮（真皮乳頭層）に及ぶが、深い真皮層（真皮網状層）にも及ぶ場合がある。第３度熱傷は、皮膚の炭化をさらに有し、硬くて革のような焼痂が生じる。焼痂とは、身体の影響を受けていない部分から分離している痂皮のことである。多くの場合、紫色の液体も存在する。このタイプの熱傷は、火傷した領域中では神経末端が破壊されていることから痛みを伴わないことが多い。深刻な熱傷（特に身体の広範な領域を覆う場合）は、死をもたらす可能性があり、（例えば、煙の吸入による）肺への熱傷のあらゆる兆候は、医療的緊急事態である。

【0152】

皮膚の下にある組織（例えば、筋肉又は骨）を傷つける熱傷は、第４度熱傷に分類されることがある。この熱傷は、下記のさらなる３段階に分けられる：皮膚が取り返しのつかないほど失われる第４度熱傷、筋肉が取り返しのつかないほど失われる第５度熱傷及び骨が炭化している第６度熱傷。

【0153】

様々な熱傷がＮＥＴレベルの上昇につながり、その結果、毒性と関連している。このＮＥＴ毒性が存在する限り、本発明は、本発明の医薬組成物を使用してこの毒性を低減し、それにより患者側の不快感を低減又は緩和し、さらにより高用量の治療を可能にしようとする。

【0154】

熱傷に罹患している患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している可能性がある。ＮＥＴは、熱傷の病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0155】

本発明の第２又は第３の態様のある実施形態では、対象への熱傷によって引き起こされるヒストンによって誘発される細胞毒性を寛解させる方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0156】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0157】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし得、そのため熱傷患者での処置として有用である。

【0158】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、対象の熱傷におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0159】

Ｂ．５．急性膵炎
急性膵炎は、無菌性炎症及び腺房細胞死（例えば壊死及びアポトーシス）による膵臓の急速に発症する炎症を特徴とする。

【0160】

急性膵炎は、その重症度に応じて、重度の合併症を有する可能性があり、処置にもかかわらず高い死亡率を有する可能性がある。軽症例では、保存的処置又は腹腔鏡検査による処置が成功することが多いが、重症例では、疾患プロセスを抑制するために侵襲的手術（多くの場合に複数の介入）が必要である。

【0161】

急性膵炎に罹患している患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している可能性がある。ＮＥＴは、急性膵炎の病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0162】

本発明の第２、第３又は第４の態様のある実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することにより、対象におけるＮＥＴ関連の急性膵炎を（予防的又は治療的に）処置する方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0163】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0164】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし得、そのため急性膵炎患者での処置として有用である。

【0165】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、（医療処置の場合における）前処置と急性膵炎が発症した後の処置との両方を含む、急性膵炎におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0166】

Ｃ．虚血再灌流傷害
虚血再灌流傷害（例えば、移植関連の虚血再灌流傷害）及び薬剤介在組織傷害は、微生物の非存在下で起こるプロセスである無菌性炎症を生じる。

【0167】

虚血とは、組織への血液供給が制限され、細胞の代謝に必要な酸素が欠乏することである。長期にわたる虚血（６０分以上）では、ＡＴＰ代謝の分解産物としてヒポキサンチンが形成される。酵素キサンチンデヒドロゲナーゼは、酸素のより高い利用可能性の結果として、キサンチンオキシダーゼに変換される。この酸化により、分子酸素が、反応性がより高いスーパーオキシド及びヒドロキシルラジカルに変換される。キサンチンオキシダーゼは、尿酸も産生し、この尿酸は、酸化促進剤と、ペルオキシニトライト等の反応種の捕捉剤との両方として作用する場合がある。再灌流中に生成された過剰な一酸化窒素は、スーパーオキシドと反応して強力な反応種ペルオキシナイトライトを生成する。そのようなラジカル及び活性酸素種は、細胞膜脂質、タンパク質及びグリコサミノグリカンを攻撃し、さらなる損傷を与える。このラジカル及び活性酸素種は、酸化還元シグナル伝達により特定の生物学的プロセスを開始する場合もある。

【0168】

再灌流傷害は、損傷した組織の炎症反応に部分的に起因する損傷を指す。新たに戻る血液により、この領域に運ばれた白血球は、インターロイキン等の炎症性因子のホストを放出し、組織損傷に反応してフリーラジカルも放出する。血流の回復により細胞内に酸素が再導入され、細胞のタンパク質、ＤＮＡ及び原形質膜が損傷を受ける。その結果、細胞膜への損傷がさらなるフリーラジカルの放出を引き起こす可能性がある。そのような反応種は、酸化還元シグナル伝達で間接的に作用してアポトーシスを活性化する。白血球も小さい毛細血管中に蓄積し、この毛細血管を閉塞させ、より多くの虚血を引き起こす。

【0169】

再灌流傷害は、脳卒中及び脳外傷に関与する脳の虚血性カスケードにも関与する。虚血及び再灌流傷害の発作の繰り返しも、褥瘡及び糖尿病性足部潰瘍等の慢性創傷の形成及び治癒不全につながる要因であると考えられている。連続的な圧力は、血液供給を制限して虚血を引き起こし、再灌流中に炎症が生じる。このプロセスが繰り返されるうちに、最終的に創傷が生じるのに十分な損傷を組織が受ける。

【0170】

ＮＥＴレベルは、肝臓、腎臓、肺及び脳の傷害を伴う動物の虚血再灌流モデルにおいて上昇しており、これは、無菌性炎症の調節におけるＮＥＴの重要な役割を示唆する。

【0171】

ＮＥＴは、肝臓だけでなく、直接的毒性又は炎症促進効果を介して急性腎傷害又は虚血性脳卒中も媒介する。ＮＥＴの形成および活性の阻害は、組織損傷の治療戦略を提示する。

【0172】

虚血再灌流傷害（例えば、移植関連の虚血再灌流傷害）及び薬剤介在組織傷害に罹患している患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している。ＮＥＴは、虚血／再灌流及び薬剤介在組織傷害の病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0173】

本発明の第２、第３又は第４の態様のある実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することにより、対象におけるＮＥＴ関連のＩＲＩ及び／又は薬剤介在組織傷害を（予防的又は治療的に）処置する方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0174】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0175】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし得、そのため虚血／再灌流及び薬剤介在組織傷害の患者での処置として有用である。

【0176】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、（医療処置の場合における）前処置と虚血／再灌流及び薬剤介在組織傷害が発症した後の処置との両方を含む、虚血／再灌流及び薬剤介在組織傷害におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0177】

Ｄ．凝血及び血栓症
凝血は、血液が血餅を形成する生物学的プロセスである。正確な調節機構により、出血（ｂｌｅｅｄｉｎｇ）（出血（ｈａｅｍｏｒｒｈａｇｅ））又は閉塞性凝固（血栓症）のリスクの増加をもたらす異常な凝血が防止される。

【0178】

凝血及び又は血栓症に罹患している患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している。ＮＥＴは、凝血及び又は血栓症の病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0179】

本発明の第２又は第３の態様のある実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することにより、対象における凝血及び血栓症を処置する方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0180】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0181】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし得、そのため凝血及び又は血栓症の患者での処置として有用である。

【0182】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、（医療処置の場合における）前処置と凝血又は血栓症が発症した後の処置との両方を含む、凝血及び又は血栓症におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0183】

Ｅ．自己免疫／炎症性疾患
本発明は、多発性硬化症、脊椎関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、腸炎性関節炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、過敏性腸疾患、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、家族性地中海熱、筋萎縮性側索硬化症、シェーグレン症候群、早期関節炎、ウイルス性関節炎又は乾癬等の様々な自己免疫及び／又は炎症性疾患状態の処置を企図する。これらの疾患の診断及び処置は、文献に十分に記述されている。

【0184】

自己免疫及び／又は炎症性疾患に罹患している患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している。ＮＥＴは、自己免疫及び／又は炎症性疾患の病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0185】

本発明の第２又は第３の態様のある実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することにより、対象における自己免疫及び／又は炎症性疾患を処置する方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0186】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0187】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし得、そのため自己免疫及び／又は炎症性疾患の患者での処置として有用である。

【0188】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、（医療処置の場合における）前処置と自己免疫及び／又は炎症性疾患が発症した後の処置との両方を含む、自己免疫及び／又は炎症性疾患におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0189】

Ｆ．急性呼吸促迫症候群
呼吸促迫症候群（ＲＤＳ）又は成人呼吸促迫症候群（ＩＲＤＳとは対照的）としても既知である急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）とは、肺への様々な形態の傷害に対する重篤な反応のことである。これは、透過性肺水腫の増加をもたらす最も重要な障害である。

【0190】

ＡＲＤＳは、様々な直接的侵襲及び間接的侵襲によって引き起こされる。ＡＲＤＳは、炎症、低酸素血症を引き起こし且つ多臓器不全を引き起こすことが多い炎症性メディエータの全身放出を伴うガス交換の障害につながる肺実質の炎症を特徴とする。この状態は、生命を脅かし、多くの場合に致死的であり、通常、人工呼吸器及び集中治療室への入院を必要とする。重症度が低い形態は、輸血関連急性肺傷害（ＴＲＡＬＩ）等の急性肺傷害（ＡＬＩ）と呼ばれている。

【0191】

ＡＲＤＳは、傷害又は急性疾病の発作の２４～４８時間以内に発症する可能性がある。そのような場合、患者は、通常、息切れ、頻呼吸及び根本的原因（即ちショック）に関連する症状を呈する。マラリア等の長期にわたる疾病がＡＲＤＳの引き金になる可能性もある。次いで、ＡＲＤＳは、特に急性感染の発症後しばらくしてから発症する場合がある。

【0192】

ＡＲＤＳに罹患している患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している可能性がある。ＮＥＴは、ＡＲＤＳの病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0193】

本発明の第２、第３又は第４の態様のある実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することにより、対象におけるＮＥＴ関連の急性呼吸促迫症候群を（予防的又は治療的に）処置する方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0194】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0195】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし得、そのためＡＲＤＳの患者での処置として有用である。

【0196】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、（医療処置の場合における）前処置とＡＲＤＳが発症した後の処置との両方を含む、ＡＲＤＳにおけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0197】

Ｇ．心血管疾患
心血管疾患は、心臓又は血管（動脈及び静脈）に関与する疾患のクラスを指す。この用語は、技術的には、心血管系に影響を及ぼすあらゆる疾患を指すが、通常、粥状動脈硬化（動脈疾患）に関連するものを指すために使用される。これらの状態は、原因、機序及び処置が類似している。

【0198】

心血管疾患の処置は、各患者における疾患の特定の形態に依存するが、効果的な処置は、上記で論じた予防的な生活様式の変化を常に含む。血圧を下げる薬物、アスピリン及びスタチン系コレステロール降下薬等の薬物が有用な場合がある。状況によっては、手術又は血管形成術により、損傷した血管を再開するか、修復するか又は置き換えることが正当化される場合がある。

【0199】

心血管疾患の様々な形態として、下記が挙げられる：動脈瘤、狭心症、不整脈、粥状動脈硬化、心筋症、脳血管疾患、先天性心疾患、うっ血性心不全、心筋炎、弁疾患、冠動脈疾患、拡張型心筋症、拡張機能障害、心内膜炎、高血圧（ｈｉｇｈ ｂｌｏｏｄ ｐｒｅｓｓｕｒｅ）（高血圧（ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ））、肥大型心筋症、僧帽弁逸脱、心筋梗塞及び静脈血栓塞栓。

【0200】

ＮＥＴ関連の心血管疾患に罹患している患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇しており、これはＮＥＴ関連の心血管疾患の病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0201】

本発明の第２、第３又は第４の態様のある実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することにより、対象におけるＮＥＴ関連の心血管疾患を（予防的又は治療的に）処置する方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0202】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0203】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性作用をブロックすることができ、それにより、ＮＥＴ関連の循環器疾患の患者における処置として有用である。

【0204】

したがって、本発明の化合物、及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、前処置（医療処置の場合における）とＮＥＴと関連する循環器疾患が起こった後の処置の両方を含めた、ＮＥＴ関連の循環器疾患におけるＮＥＴタンパク質の細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0205】

Ｈ．線維症
線維症に罹患している患者は、その血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している。ＮＥＴは、線維症病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0206】

本発明の第２又は第３の態様の実施形態では、対象における、ＮＥＴによって誘発される細胞毒性が引き起こす線維症を寛解させる方法であって、対象にポリアニオン性硫酸化セロビオシド若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療的又は薬学的に有効な量を投与するステップを含む方法が提供される。

【0207】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0208】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性作用をブロックすることができ、それにより、線維症の患者における処置として有用である。

【0209】

したがって、本発明の化合物、及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、前処置（医療処置の場合における）と線維症が起こった後の処置の両方を含めた、対象における線維症のＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0210】

Ｉ．糖尿病
糖尿病に罹患している患者は、その血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇し得る。ＮＥＴは、糖尿病病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0211】

本発明は、糖尿病におけるＮＥＴ関連の合併症（例えば、炎症及び創傷治癒の遅延）を処置する方法を提供する。この方法は、１型糖尿病、１．５型糖尿病又は２型糖尿病と診断を受けた対象に、本発明の少なくとも１種の化合物の治療上有効な量を投与することを含む。

【0212】

本発明の第２又は第３の態様の実施形態では、対象における糖尿病を寛解させる方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療的又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0213】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0214】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし得、そのため糖尿病患者での処置として有用である。

【0215】

特定の実施形態では、ＮＥＴが関与している糖尿病の症状は、炎症である。炎症の減少を理学的検査及び炎症マーカーの存在の減少によりモニタリングし得る。

【0216】

特定の実施形態では、糖尿病を処置する方法であって、糖尿病を処置するために使用される薬剤と、本発明の少なくとも１種の化合物との治療上有効な量の投与を含む方法が提供される。糖尿病を処置するために使用される薬剤は、インスリンであり得るか、又は下記から選択される別の薬剤であり得る：ビグアナイド、メトホルミン（Ｇｌｕｃｏｐｈａｇｅ）、液状メトホルミン（Ｒｉｏｍｅｔ）、徐放メトホルミン（Ｇｌｕｃｏｐｈａｇｅ ＸＲ、Ｆｏｒｔａｍｅｔ、Ｇｌｕｍｅｔｚａ）、スルホニル尿素、グリメピリド（Ａｍａｒｙｌ）、グリブリド（Ｄｉａｂｅｔａ、Ｍｉｃｒｏｎａｓｅ）、グリピジド（Ｇｌｕｃｏｔｒｏｌ、Ｇｌｕｃｏｔｒｏｌ ＸＬ）、微粒子化グリブリド（Ｇｌｙｎａｓｅ）、メグリチニド（Ｍｅｇｌｉｔｉｎｉｄｅｓ）、レパグリニド（Ｐｒａｎｄｉｎ）、Ｄ－フェニルアラニン誘導体、ナテグリニド（Ｓｔａｒｌｉｘ）、チアゾリジンジオン、ピオグリタゾン（ＴＺＤｓ）、ピオグリタゾン、（Ａｃｔｏｓ）、ＤＰＰ－４阻害剤、シタグリプチン（Ｊａｎｕｖｉａ）、サキサグリプチン（Ｏｎｇｌｙｚａ）、リナグリプチン（Ｔｒａｄｊｅｎｔａ）、アルファ－グルコシダーゼ、アカルボース（Ｐｒｅｃｏｓｅ）、ミグリトール（Ｇｌｙｓｅｔ）、胆汁酸捕捉剤、コレセベラム（Ｗｅｌｃｈｏｌ）、ピオグリタゾン及びメトホルミン（Ａｃｔｏｐｌｕｓ Ｍｅｔ）、グリブリド及びメトホルミン（Ｇｌｕｃｏｖａｎｃｅ）、グリピジド及びメトホルミン（Ｍｅｔａｇｌｉｐ）、シタグリプチン及びメトホルミン（Ｊａｎｕｍｅｔ）、サキサグリプチン及びメトホルミン（ｋｏｍｂｉｇｌｙｚｅ）、レパグリニド及びメトホルミン（Ｐｒａｎｄｉｍｅｔ）並びにピオグリタゾン及びグリメピリド（Ｄｕｅｔａｃｔ）。

【0217】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、対象の糖尿病におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。従って、本発明は、（医療処置の場合における）前処置と糖尿病が発症した後の処置との両方を含む、対象における糖尿病の処置を提供する。

【0218】

Ｊ．化学療法、放射線療法及びサイトカイン療法の毒性
様々な形態の癌治療（例えば、化学療法、放射線及びサイトカイン）は、癌患者において毒性を伴い、ときに重篤である。この毒性がヒストンの細胞外作用により少なくとも部分的に引き起こされる限り、本発明は、本発明の医薬組成物を使用してこの毒性を低減し、それにより患者側の不快感を低減又は緩和し、さらにより高用量の治療を可能にしようとする。

【0219】

様々な形態の癌治療（例えば、化学療法、放射線及びサイトカイン療法）の副作用を罹患している患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している可能性がある。ＮＥＴは、この副作用の重要なメディエータとして示唆されている。

【0220】

本発明の第２又は第３の態様のある実施形態では、ＮＥＴの細胞毒性活性を阻害することにより、対象における様々な形態の癌治療（例えば、化学療法、放射線及びサイトカイン療法）の副作用を寛解させる方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0221】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0222】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし得、そのため様々な形態の癌治療（例えば、化学療法、放射線及びサイトカイン療法）の副作用の処置として有用である。

【0223】

本発明の非常に好ましい形態では、様々な形態の癌治療（例えば、化学療法、放射線及びサイトカイン療法）を受けている患者における、そのような治療の副作用の処置で使用される化合物は、化合物β－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェート又はその薬学的に許容される塩である。例えば、この方法で使用される化合物は、ナトリウムβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートである。

【0224】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、（医療処置の場合における）前処置と、様々な形態の癌治療（例えば、化学療法、放射線及びサイトカイン療法）を行った後の処置との両方を含む、これらの治療の副作用におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0225】

Ｋ．創傷治癒
同様に提供されるのは、創傷治癒での使用のための方法である。本明細書で使用される場合、「創傷治癒」は、皮膚（又は別の臓器－組織）が傷害後に自己を修復する複雑なプロセスを指す。創傷治癒の古典的なモデルは、下記の３つ又は４つの連続した（さらに重複している）時期に分けられる：（１）血餅が止血した場合の止血、（２）炎症、（３）増殖、及び（４）再構築。皮膚が傷害を受けると、損傷を修復するために、一連の複雑な生化学的事象が、密接に組織化されたカスケードで起こる。炎症期中、白血球により、細菌及び細胞残屑が貪食されて創傷から除去される。血小板由来の成長因子（血小板のアルファ顆粒中に貯蔵されている）が創傷中に放出され、増殖期中に細胞の遊走及び分裂を引き起こす。増殖期は、血管新生、コラーゲン沈着、肉芽組織形成、上皮化及び創傷収縮を特徴とする。新たな血管が形成され、線維芽細胞が成長し、コラーゲン及びフィブロネクチンが排泄されることにより新たな仮の細胞外マトリックス（ＥＣＭ）が形成される。同時に、表皮の再上皮化が起こり、上皮細胞が増殖して創傷床の上を「這い」、新たな組織のカバーを生成する。

【0226】

創傷治癒の困難さに悩まされている患者は、血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇している可能性がある。ＮＥＴは、創傷治癒の病理の重要なメディエータとして示唆されている。

【0227】

本発明の第２又は第３の態様のある実施形態では、対象の創傷治癒中に生じるヒストン誘発細胞毒性を寛解させる方法であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法が提供される。

【0228】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0229】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性作用をブロックすることができ、それにより、創傷治癒の困難さに悩まされる患者における処置として有用である。

【0230】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、対象の創傷の処置におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0231】

Ｌ．中枢神経系疾患
中枢神経系疾患に罹患している患者は、その血液中に存在するＮＥＴのレベルが上昇し得る。ＮＥＴは、中枢神経系疾患の病理の重要なメディエータとして示唆されている。例えば、ハンチントン病は、ポリグルタミンの反復伸長によって引き起こされる常染色体優性の神経変性障害であり、ハンチントンタンパク質中のポリグルタミントラック（ｐｏｌｙｇｌｕｔａｍｉｎｅ ｔｒａｃｋ）が伸長される。

【0232】

本発明の第２又は第３の態様の実施形態では、対象における、ＮＥＴにより誘発される中枢神経系疾患を寛解させる方法であって、対象にポリアニオン性硫酸化セロビオシド若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療的又は薬学的に有効な量を投与するステップを含む方法が提供される。

【0233】

この実施形態によれば、選択された化合物は、好ましくは、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0234】

ｍＣＢＳ等の化合物は、ＮＥＴの毒性効果をブロックし得、そのため中枢神経系疾患での処置として有用である。

【0235】

そのため、本発明の化合物及び前記化合物を含む治療用組成物又は医薬組成物は、（医療処置の場合における）前処置と中枢神経系疾患が発症した後の処置との両方を含む、対象の中枢神経系疾患におけるＮＥＴの細胞毒性活性を寛解させる手段を提供する。

【0236】

３．治療形態及び医薬形態
本発明の第５の態様では、ＮＥＴ関連の合併症の処置での使用のための治療用組成物又は医薬組成物であって、ポリアニオン性硫酸化セロビオシドであって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその治療上許容されるか若しくは薬学的に許容される塩を少なくとも含む治療用組成物又は医薬組成物が提供される。好ましくは、この組成物は、治療上許容されるか又は薬学的に許容される担体、添加剤及び／又は希釈剤を含む。この治療又は医薬での化合物は、中性遊離塩基形態であり得るか又は塩形態であり得る。好ましくは、この化合物は、β－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩である。

【0237】

本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される」又は「治療上許容される」は、合理的な利益／リスク比に見合っており、過度の毒性、刺激、アレルギー反応又は他の問題若しくは合併症を伴わず、健全な医学的判断の範囲内でヒト及び動物の組織との接触での使用に適している化合物、物質、組成物及び／又は剤形を指す。

【0238】

投与可能な組成物を調製する方法は、当業者に明らかであり、例えば、全体が参照により本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１５ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．でより詳細に説明されている。

【0239】

本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される担体」、又は「薬学的に許容される添加剤」、又は「薬学的に許容される希釈剤」、「治療上許容される担体」、又は「治療上許容される添加剤」、又は「治療上許容される希釈剤」は、ある臓器又は身体の部分から別の臓器又は身体の部分への対象化合物の担持又は輸送に関与する物質、組成物又はビヒクル（例えば、液体又は固体の充填剤、希釈剤、添加剤、製造補助剤（例えば、潤滑剤、タルクマグネシウム、カルシウム、若しくはステアリン酸亜鉛、若しくはステアリン酸）又は溶媒カプセル化物質）を意味する。各担体、希釈剤及び添加剤は、製剤の他の成分と適合し且つ患者に有害ではないという意味で「許容される」ものでなければならない。これは、生物学的に又は他の方法で望ましくないものではない物質であり、即ち、この物質は、許容されない生物学的効果を引き起こすことなく又はこれが含まれる組成物の成分の任意の１つ又は複数と有害な方法で相互作用することなく、活性剤と共に個体に提供され得る。薬学的に許容される担体、希釈剤及び添加剤として機能し得る物質のいくつかの例として下記が挙げられるが、これらに限定されない：（１）糖類、例えばラクトース、グルコース及びスクロース；（２）デンプン類、例えばトウモロコシデンプン及びジャガイモデンプン；（３）セルロース及びその誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、エチルセルロース、微結晶セルロース及び酢酸セルロース；（４）トラガント末；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム及びタルク；（８）添加剤、例えばココアバター及び座薬ワックス；（９）油、例えばピーナッツ油、綿実油、紅花油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油及び大豆油；（１０）グリコール類、例えばプロピレングリコール；（１１）ポリオール類、例えばグリセリン、ソルビトール、マンニトール及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）；（１２）エステル類、例えばオレイン酸エチル及びラウリン酸エチル；（１３）寒天；（１４）緩衝剤、例えば水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム；（１５）アルギン酸；（１６）パイロジェンフリー水；（１７）等張生理食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）ｐＨ緩衝溶液；（２１）ポリエステル類、ポリカーボネート類及び／又はポリ無水物；（２２）増量剤、例えばポリペプチド及びアミノ酸；（２３）血清成分、例えば血清アルブミン、ＨＤＬ及びＬＤＬ；（２２）Ｃ_２～Ｃ_１２アルコール、例えばエタノール；並びに（２３）医薬製剤で用いられる他の非毒性の適合性物質。製剤中に湿潤剤、結合剤、充填剤、潤滑剤、着色剤、崩壊剤、放出剤、コーティング剤、甘味料、着香料、芳香剤、保存料、水、塩溶液、アルコール、抗酸化剤、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン及び同類のものも存在し得る。「添加剤」、「担体」、「希釈剤」及び「薬学的に許容される単体」又は同類のもの等の用語は、本明細書では互換的に使用される。

【0240】

治療上許容されるか又は薬学的に許容される担体、添加剤又は希釈剤の例は、下記である：脱塩水又は蒸留水；生理食塩水；植物ベースの油、例えばピーナッツ油、紅花油、オリーブ油、綿実油、トウモロコシ油、ゴマ油、例えばピーナッツ油、紅花油、オリーブ油、綿実油、トウモロコシ油、ゴマ油、落花生油又はヤシ油；シリコーン油、例えばポリシロキサン類、例えばメチルポリシロキサン、フェニルポリシロキサン及びメチルフェニルポリシロキサン；揮発性シリコーン；鉱油、例えば流動パラフィン、軟パラフィン又はスクアラン；セルロース誘導体、例えばメチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム又はヒドロキシプロピルメチルセルロース；低級アルカノール類、例えばエタノール又はイソプロパノール；低級アラルカノール類（ｌｏｗｅｒ ａｒａｌｋａｎｏｌｓ）；低級ポリアルキレングリコール類又は低級アルキレングリコール類、例えばポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール又はグリセリン；脂肪酸エステル類、例えばパルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル又はオレイン酸エチル；ポリビニルピロリドン；寒天；カラギーナン；トラガントガム又はアカシアゴム並びにワセリン。典型的には、担体は、組成物の１０重量％～９９．９重量％を形成するであろう。

【0241】

本明細書で説明されている組成物は、医薬組成物中に従来見出される他の補助成分を、この補助成分の技術的に確立された使用レベルでさらに含み得る。そのため、例えば、この組成物は、追加の適合性の薬学的に活性な物質（例えば、鎮痒薬、収斂薬、局所麻酔薬又は抗炎症剤）を含み得る。しかしながら、そのような物質は、添加された場合、本明細書で説明されている組成物の成分の生物学的活性を過度に妨げるべきではない。

【0242】

下記で詳細に説明するように、本明細書で説明されている治療上許容されるか又は薬学的に許容される組成物は、固体又は液体の形態での投与のために特に製剤化され得、下記に適合したものが挙げられる：（１）経口投与、例えば水薬（水性若しくは非水性の溶液若しくは懸濁液）、ロゼンジ、糖衣錠、カプセル、丸薬、錠剤（例えば、頬側吸収、舌下吸収及び全身吸収を目標とするもの）、ボーラス、粉末、顆粒、舌への塗布のためのペースト；（２）例えば、滅菌溶液若しくは滅菌懸濁液又は徐放性製剤として、例えば皮下注射、筋肉内注射、静脈内注射又は硬膜外による非経口投与；（３）例えば、（脳中の）実質内投与、髄腔内投与、心室内投与若しくは肝内投与による、処置を必要とする臓器への直接注射；（４）例えば、皮膚に適用されるクリーム、ローション、ジェル、軟膏又は放出制御されたパッチ若しくはスプレーとしての局所適用；（５）吸入（例えば経鼻吸入若しくは経口吸入）による投与に適したエアロゾル形態；（６）例えば、ペッサリー、クリーム、座薬若しくは泡沫剤としての膣内用又は直腸内用；（７）舌下；（８）点眼薬としての眼用；（９）経皮用；（１０）経粘膜用；又は（１１）経鼻用。

【0243】

一実施形態では、本発明の組成物を非経口注射（例えば、皮下注射、筋肉内注射若しくは静脈内注射）等の注射により投与するか、又は例えば（脳中の）実質内投与、髄腔内投与、心室内投与若しくは肝内投与により組織及び臓器に局所投与する。

【0244】

注射に適した医薬組成物として、滅菌の水溶液（水溶性）又は分散液及び滅菌注射用溶液又は滅菌注射用分散液の即時調製のための滅菌粉末が挙げられる。理想的には、この組成物は、製造及び貯蔵の条件下で安定であり、微生物（例えば細菌及び真菌）の夾雑作用に対してこの組成物を安定化させるための保存料を含み得る。

【0245】

上記で列挙した成分の１つ又は組み合わせと共に、適切な溶媒に必要な量の本発明の医薬組成物を組み込み、必要に応じて続いて滅菌ろ過することにより、滅菌注射用溶液を調製し得る。実例として、単回用量を等張ＮａＣｌ溶液１ｍｌに溶解させ、液体１０００ｍｌに添加し得るか、又は提案されている注入部位で注射し得る（例えば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”１５ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐａｇｅｓ １０３５－１０３８及び１５７０－１５８０を参照されたい）。

【0246】

注射溶液の場合、担体は、下記を含む溶媒又は分散媒体であり得る：例えば、水、リンゲル液、等張生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール（例えば１，２プロピレングリコール）及び液体ポリエチレングリコール並びに同類のもの）、これらの適切な混合物並びに植物油。

【0247】

例えば、レシチン等のコーティングを使用して、分散系の場合には必要な粒径の維持により且つ界面活性を使用して、適切な流動性を維持し得る。微生物の作用の予防を、様々な抗菌剤及び又は抗真菌剤を含むことにより達成し得る。適切な薬剤は、当業者に公知であり、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ベンジルアルコール、アスコルビン酸、チオメロサール（ｔｈｉｏｍｅｒｏｓａｌ）及び同類のものが挙げられる。多くの場合、本組成物が等張剤を含むことが好ましい場合があり、例えば糖類、多価アルコール類、例えばマンニトール、ソルビトール、塩化ナトリウムを含むことが好ましい場合がある。注射用組成物の持続的吸収を、吸収を遅延させる薬剤（例えばモノステアリン酸アルミニウム及びゼラチン）をこの組成物に含めることによりもたらし得る。

【0248】

第２の実施形態では、本発明の組成物を例えば不活性希釈剤又は吸収可能な食用担体と共に経口投与する。経口治療的投与のために、この医薬組成物を添加剤と組み合わせ、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウエハース及び同類なものの形態で使用し得る。

【0249】

経口使用に適した担体、希釈剤、添加剤、アジュバントの一部の例として、ピーナッツ油、液体パラフィン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、アカシアガム、トラガカントゴム、ブドウ糖、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、ゼラチン及びレシチンが挙げられる。加えて、これらの経口製剤は、適切な着香料及び着色料を含み得る。

【0250】

カプセル形態で使用する場合、このカプセルは、崩壊を遅延させる化合物（例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリル）でコーティングされ得る。同様に、錠剤、トローチ、丸剤、カプセル及び同類のものは、下記を含み得る：結合剤、例えばトラガカントゴム、アカシア、コーンスターチ若しくはゼラチン；添加剤、例えばリン酸二カルシウム；追加の崩壊剤、例えばコーンスターチ、ジャガイモデンプン、アルギン酸及び同類のもの；潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム；並びに甘味料、例えばショ糖、ラクトース若しくはサッカリン又は着香料、例えばペパーミント、冬緑油若しくはサクランボ香料（ｃｈｅｒｒｙ ｆｌａｖｏｕｒｉｎｇ）。

【0251】

投与単位形態がカプセルである場合、このカプセルは、上記のタイプの物質に加えて、液体担体を含み得る。様々な他の物質は、コーティングとして存在し得るか、又は他の方法でこの投与単位の物理的形状を修飾するために存在し得る。例えば、錠剤、丸剤又はカプセルをシェラック、糖又は両方でコーティングし得る。

【0252】

経口投与のための液体形態（例えばシロップ又はエリキシル）は、上記の薬剤に加えて、液体担体、甘味料（例えばショ糖）、保存料（例えばメチルパラベン及びプロピルパラベン）、色素並びに香料（例えば、サクランボフレーバー又はオレンジフレーバー）を含み得る。適切な液体担体として下記が挙げられる：水、油、例えば、オリーブ油、ピーナッツ油、ゴマ油、ヒマワリ油、紅花油、落花生油、ヤシ油、液体パラフィン、エチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、グリセロール、脂肪アルコール類、トリグリセリド類又はこれらの混合物。

【0253】

経口投与のための懸濁液は、分散剤及び／又は懸濁剤をさらに含み得る。適切な懸濁剤として、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル－セルロース、ポリ－ビニル－ピロリドン、アルギン酸ナトリウム又はアセチルアルコールが挙げられる。適切な分散剤として下記が挙げられる：レシチン、ステアリン酸等の脂肪酸のポリオキシエチレンエステル、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート若しくはジオレエート、ステアレート又はラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート若しくはジオレエート、ステアレート又はラルレート及び同類のもの。経口投与のための乳濁液は、１種又は複数の乳化剤をさらに含み得る。適切な乳化剤として、上記で例示したような分散剤又は天然ガム、例えばグアーガム、アカシアガム若しくはトラガカントゴムが挙げられる。

【0254】

第３の例示的な実施形態では、本発明の組成物をエアロゾルの形態において又は吸入投与により対象の気道に直接投与する。エアロゾルとしての使用のために、本発明の薬学的に許容される組成物の溶液又は懸濁液を適切な噴霧剤（例えば、プロパン、ブタン又はイソブタンのような炭化水素噴霧剤）及び従来のアジュバントと一緒に加圧エアロゾル容器に充填し得る。そのような組成物を（例えば、ネブライザ又はアトマイザ中での）非加圧形態でも投与し得る。

【0255】

気道への送達のためのエアロゾルは、当該技術分野で既知である：例えば、Ａｄｊｅｉ，Ａ．ａｎｄ Ｇａｒｒｅｎ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，１：５６５－５６９（１９９０）；Ｚａｎｅｎ，Ｐ．ａｎｄ Ｌａｍｍ，Ｊ－Ｗ．Ｊ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，１１４：１１１－１１５（１９９５）；Ｇｏｎｄａ，Ｉ．“Ａｅｒｏｓｏｌｓ ｆｏｒ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｎ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ ｔｏ ｔｈｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｔｒａｃｔ，”ｉｎ Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ，６：２７３－３１３（１９９０）；Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．，１４０：１３１７－１３２４（１９８９））を参照されたい。

【0256】

第４の例示的な実施形態では、本組成物をリポソームの形態で投与し得る。リポソームは、一般に、リン脂質又は他の脂質物質に由来し、水性媒体中に分散している単層状又は多層状の水和液晶で形成されている。リポソームを形成し得る、非毒性で生理的に許容されて代謝可能なあらゆる脂質を使用し得る。リポソーム形態の組成物は、安定剤、保存料、添加剤及び同類のものを含み得る。好ましい脂質は、リン脂質及びホスファチジルコリン（レシチン）であり、両方とも天然及び合成である。リポソームを形成するための方法は、当該技術分野で既知であり、これに関して、Ｐｒｅｓｃｏｔｔ，Ｅｄ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｕｍｅ ＸＩＶ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９７６），ｐ．３３ ｅｔ ｓｅｑ．（この内容は、参照により本明細書に組み込まれる）が具体的に参照される。

【0257】

加えて、本明細書で説明されている任意の態様、実施形態又は例に係る本発明の治療的又は薬学的に許容される組成物を徐放性調製物及び徐放性製剤に組込み得る。そのような治療用組成物又は医薬組成物は、酸の加水分解を最小限に抑えるために、適切な緩衝剤をさらに含み得る。適切な緩衝剤は、当業者に公知であり、リン酸塩、クエン酸塩、炭酸塩及びこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。

【0258】

本発明の化合物を「プロドラッグ」の形態で投与し得る。プロドラッグとは、インビボで活性型に変換される不活性型の化合物のことである。適切なプロドラッグとして、活性型の化合物のエステル類、ホスホン酸エステル類等が挙げられる。

【0259】

加えて、本発明の組成物を患者に移植し得るか、又は薬物送達システムを使用して注射し得る。コーティングされた送達デバイスも有用であり得る。例えば、Ｕｒｑｕｈａｒｔ，ｅｔ ａｌ．（１９８４），Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．２４：１９９－２３６；Ｌｅｗｉｓ，ｅｄ．“Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ”（Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８１）；米国特許第３，７７３，９１９号明細書；同第６，７４７，０１４号明細書；及び同第３５３，２７０，９６０号明細書を参照されたい。

【0260】

特定の実施形態では、例えば創傷の処置のプロセスで使用されるデバイス又は包帯を使用して、本組成物を送達する。

【0261】

任意の特定の対象のための、本明細書で開示されている医薬組成物の治療上有効な量は、様々な因子に依存し、この因子として下記が挙げられる：この医薬組成物の毒性及び治療効果；病気の重症度；患者の年齢、体重、全体的な健康、性別及び食事；投与時間；投与経路；この組成物の捕捉率；処置の持続期間；医学で公知の他の関連因子と一緒に、処置と組み合わせて又は同時に使用される薬物。

【0262】

毒性及び治療上の有効性を、例えばＬＤ_５０（母集団の５０％に対する致死量）及びＥＤ_５０（母集団の５０％において治療上有効な用量）を決定するための、細胞培養又は実験動物における標準的な薬学的手順により決定し得る。毒性と治療効果との間の用量比は、治療指数であり、比ＬＤ_５０／ＥＤ_５０で表され得る。大きい治療指数を示す組成物が好ましい。

【0263】

本明細書で説明されている細胞培養アッセイ及び動物モデルから得られたデータを、ヒトでの使用のための治療上有効な投与量の範囲の策定で使用し得る。そのような化合物の投与量は、好ましくは、ほとんど又は全く毒性がないＥＤ_５０を含む循環濃度の範囲内である。この投与量は、用いられる投与形態及び利用される投与経路に応じて、この範囲内で変動し得る。

【0264】

剤形を生成するために担体物質と組み合わされ得る、本明細書で説明されている本発明の化合物の量は、概して、治療効果を生じるこの化合物の量であるであろう。一般に、１００％の内、この量は、約０．１％～９９％の化合物の範囲であり、好ましくは約５％～約７０％の範囲であり、最も好ましくは１０％～約３０％の範囲であるであろう。

【0265】

投与量は、医師により決定され得、且つ必要に応じて処置の観察された効果に適合するように調整され得る。実例のみとして、組成物を、薬学的に許容される組成物が下記の用量で投与されるように投与し得る：１μｇ／ｋｇ～１５０ｍｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ。ここで示された範囲は、全ての中間範囲を含むことを理解すべきであり、例えば範囲１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇは、１ｍｇ／ｋｇ～２ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～４ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～６ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～７ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～９ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ等を含む。上記で示されたものの中間の範囲（例えば、範囲１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇでは、２ｍｇ／ｋｇ～８ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ～７ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ～６ｍｇ／ｋｇ等の用量範囲）も、本明細書で説明されている方法及び組成物の範囲内であることをさらに理解すべきである。

【0266】

本発明の化合物がｍＣＢＳ又はｍＣＢＳ．Ｎａである場合、投与量は、１０～８００μｇ／ｍｌであり得る。好ましくは、この投与量は、５０～５００μｇ／ｍｌの範囲である。より好ましくは、この投与量は、ヒト対象に投与される場合、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０又は８００μｇ／ｍｌである。

【0267】

本発明の特定の例では、改変されている硫酸化セロビオシド化合物の有効量を単回用量で投与する。特定の例では、この用量を繰り返し投与する。即ち、処置レジメンは、疾患の重症度及びタイプ、患者の全体的な健康状態及び年齢並びに処置する医師が考慮すべき様々な他の条件に応じて変わるであろう。処置の持続時間及び頻度に関して、熟練した臨床医は、典型的には、対象をモニタリングして、処置が治療上の有益性をいつ提供するかを決定し、且つ投与量を増減させるかどうか、投与頻度を増減させるかどうか、処置を中断するかどうか、処置を再開するかどうか又は処置レジメンに他の変更を行うかどうかを決定する。

【0268】

本明細書で説明されている任意の態様、実施形態又は例に係る本発明の治療用組成物又は薬学的に許容される組成物は、単回のボーラス投与で投与され得るか又は複数回の用量若しくは処置で投与され得、且つ少量の治療用組成物が長期間にわたり持続的に投与される「持続的」治療により適用され得る。

【0269】

複数回投与が処置（持続的治療を含む）で使用される場合、治療用組成物又は医薬組成物を、いくつかの臨床的因子（例えば、この治療用組成物又は医薬組成物で使用される改変されている硫酸化セロビオシド化合物に対する対象の感受性）に応じて１週間に１回～毎日で変化し得る投与スケジュールにより投与するであろう。そのようなレジームで投与する所望の用量を一度に単回用量として送達し得るか、又は部分用量（例えば、２～４回の部分用量）に分割して、ある期間にわたり（例えば、１日中を通して適切な間隔又は他の適切なスケジュールで）投与し得る。そのような部分用量を単位剤形として投与し得る。

【0270】

いくつかの実施形態では、投与は、慢性的であり、例えば数週間又は数ヶ月の期間にわたり１日１回又は複数回の用量である。投与スケジュールに例は、１週間、２週間、３週間、４週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月若しくは６ヶ月又はより長い期間にわたり１日１回、１日２回、１日３回又は１日４回以上の投与である。

【0271】

所望の用量を、連続的注入を使用するか又は放出制御製剤による送達を使用して投与し得る。この場合、各部分用量に含まれる医薬組成物は、１日当たりの総投与量を達成するために相応に少なくなければならない。

【0272】

また、投与量単位を、例えば数日の期間にわたる医薬組成物の持続放出をもたらす従来の徐放性製剤を使用して、数日にわたる送達のためにも配合し得る。徐放性製剤は、当該技術分野で公知であり、例えば本明細書で説明されている薬剤により使用され得る、ある部位への薬剤の送達に特に有用である。この実施形態では、この投与量単位は、１日当たりの用量の対応する倍数を含む。

【0273】

４．併用レジーム
本発明の第５の態様に係る特定の例示的な実施形態では、特定された組成物は、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤及び／又は対象が患っている１種若しくは複数の状態を処置する任意の他の形態の治療用化合物若しくは医薬化合物の１つ又は複数から選択される第２の活性剤、化合物又は組成物を含む場合がある。この実施形態によれば、第２の活性剤、化合物又は組成物は、望ましくは、敗血症、ＳＩＲＳ及びＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ及びＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患のための補助的治療を提供する。好ましくは、第２の活性剤、化合物又は組成物は、１種又は複数の抗炎症剤を含む。

【0274】

治療上の利点を併用レジメンにより実現できる場合がある。本発明の特定の実施形態では、説明されている方法は、予防的に送達される際、患者が有しているか、又は罹患しているか、又は有する若しくは罹患するリスクがある敗血症、ＳＩＲＳ及びＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ及びＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患のための補助的処置である第２の活性剤を本発明の処置と同時に又は付随して対象に投与するステップをさらに含み得る。

【0275】

第２の活性剤として、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は本発明の化合物と異なる他の形態の医学的介入が挙げられ得るが、これらに限定されない。

【0276】

実例として、本方法又は本処置が、対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を伴う敗血症性疾患状態又は非敗血症性疾患状態を処置するか又は寛解させることに向けられている場合、この方法は、ＮＥＴによって媒介される病理を伴う医学的状態のための補助処置を提供する第２の抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は本発明の化合物と異なる他の形態の医学的介入を同時に又は付随して対象に投与することも含み得る。

【0277】

一例では、第２の活性剤は、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患（例えば、対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を伴う敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患）のための補助的処置又は補助的予防を提供する。

【0278】

別の例では、第２の活性剤は、ＮＥＴ細胞毒性を伴う医学的状態のための補助的処置又は補助的予防を提供する。

【0279】

実例として、本処置方法が、対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を伴う敗血症、ＳＩＲＳ又はＩＲＩを関連する敗血症性疾患状態又は非敗血症性疾患状態を処置するか又は寛解させることに向けられている場合、この方法は、ＮＥＴによって媒介される病理を伴う医学的状態のための補助処置を提供する第２の抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は本発明の化合物と異なる他の形態の医学的介入を同時に又は付随して対象に投与することも含み得る。

【0280】

いくつかの例では、投与される追加の薬剤は、抗炎症剤であり、例えばステロイド、副腎皮質ステロイド、ＣＯＸ－２阻害剤、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、アスピリン又はこれらの任意の組み合わせである。より具体的には、投与される追加の薬剤は、下記からなる群から選択される抗炎症剤であり得る：アルクロフェナク；プロピオン酸アルクロメタゾン；アルゲストンアセトニド（Ａｌｇｅｓｔｏｎｅ Ａｃｅｔｏｎｉｄｅ）；アルファアミラーゼ；アムシナファル（Ａｍｃｉｎａｆａｌ）；アムシナフィド（Ａｍｃｉｎａｆｉｄｅ）；アンフェナクナトリウム；塩酸アミプリロース；アナキンラ；アニロラク；アニトラザフェン；アパゾン；バルサラジド二ナトリウム；ベンダザック；ベノキサプロフェン；塩酸ベンジダミン；ブロメライン；ブロペラモール；ブデソニド；カプロフェン；シクロプロフェン；ジンタゾン；クリプロフェン；プロピオン酸クロベタゾール；酪酸クロベタゾン；クロピラク；プロピオン酸クロチカソン（Ｃｌｏｔｉｃａｓｏｎｅ Ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）；酢酸コルメタソン；コルトドキソン；デフラザコート；デソニド；デスオキシメタゾン；ジプロピオン酸デキサメタゾン；ジクロフェナクカリウム；ジクロフェナクナトリウム；酢酸ジフロラゾン；ジフルミドンナトリウム；ジフルニサル；ジフルプレドナート；ジフタロン、ジメチルスルホキシド；ドロシノニド；エンドリソン；エンリモマブ；エノリカムナトリウム；エピリゾール；エトドラク；エトフェナメート；フェルビナク；フェナモル（Ｆｅｎａｍｏｌｅ）；フェンブフェン；フェンクロフェナク；フェンクロラク；フェンドサル；フェンピパロン；フェンチアザク；フラザロン；フルアザコート；フルフェナム酸；フルミゾール；酢酸フルニソリド；フルニキシン；フルニキシンメグルミン；フルコルチンブチル；酢酸フルオロメトロン；フルクアゾン（Ｆｌｕｑｕａｚｏｎｅ）；フルルビプロフェン；フルレトフェン；プロピオン酸フルチカソン；フラプロフェン；フロブフェン；ハルシノニド；プロピオン酸ハロベタゾール；酢酸ハロプレドン；イブフェナク；イブプロフェン；イブプロフェンアルミニウム；イブプロフェンピコノール；イロニダップ；インドメタシン；インドメタシンナトリウム；インドプロフェン；インドキソール（Ｉｎｄｏｘｏｌｅ）；イントラゾル（Ｉｎｔｒａｚｏｌｅ）；酢酸イソフルプレドン；イソキセパック；イソキシカム；ケトプロフェン；塩酸ロフェミゾール；ロモキシカム（Ｌｏｍｏｘｉｃａｍ）；エタボン酸ロテプレドノール；メクロフェナム酸ナトリウム；メクロフェナム酸；二酪酸メクロリゾン（Ｍｅｃｌｏｒｉｓｏｎｅ Ｄｉｂｕｔｙｒａｔｅ）；メフェナム酸；メサラミン；メセクラゾン；メチルプレドニゾロンスレプタネート；モルニフルメート；ナブメトン；ナプロキセン；ナプロキセンナトリウム；ナプロキソル（Ｎａｐｒｏｘｏｌ）；ニマゾン；オルサラジンナトリウム；オルゴテイン；オルパノキシン；オキサプロジン；オキシフェンブタゾン；塩酸パラニリン；ペントサンポリスルフェートナトリウム；フェンブタゾンナトリウムグリセレート；ピルフェニドン；ピロキシカム；桂皮酸ピロキシカム；ピロキシカムオラミン；ピプロフェン；プレドナゼート（Ｐｒｅｄｎａｚａｔｅ）；プリフェロン；プロドリック酸；プロクアゾン；プロキサゾール；クエン酸プロキサゾール；リメキソロン；ロマザリト；サルコレックス（Ｓａｌｃｏｌｅｘ）；サルナセジン；サルサラート；サルシレート（Ｓａｌｙｃｉｌａｔｅ）；塩化サンギナリウム；セクラゾン；セルメタシン；スドキシカム；スリンダク；スプロフェン；タルメタシン；タルニフルメート；タロサレート；テブフェロン；テニダップ；テニダップナトリウム；テノキシカム；テシカム；テシミド；テトリダミン；チオピナク；チキソコルトールピバレート；トルメチン；トルメチンナトリウム；トリクロニド；トリフルミデート（Ｔｒｉｆｌｕｍｉｄａｔｅ）；ジドメタシン；グルココルチコイド；ゾメピラックナトリウム；及びこれらの組み合わせ。

【0281】

いくつかの例では、投与される追加の薬剤は、抗生物質製剤であり、例えばカナマイシン、アクチノマイシンＤ、ドキソルビシン、ブレオマイシン、ミトラマイシン、アミノグリコシド、アンサマイシン、カルバセフェム、カルバペネム、セファロスポリン、糖ペプチド、リンコサミド、マクロライド、モノバクタム、ペニシリン、ポリペプチド、キノロン、スルホンアミド及び／又はテトラサイクリンである。

【0282】

いくつかの例では、投与される追加の薬剤は、抗ウイルス剤であり、例えば非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤、ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤（例えば、ヌクレオシド類似体）、プロテアーゼ阻害剤及び／又はヌクレオチド類似体逆転写酵素阻害剤である。

【0283】

いくつかの例では、投与される追加の薬剤は、抗真菌剤であり、例えばイミダゾール、トリアゾール、チアゾール、アリルアミン及び／又はエキノキャンディン化合物である。

【0284】

いくつかの例では、投与される追加の薬物は、糖尿病を処置するための薬剤である。そのような薬剤として、糖尿病の処置のための及び又は抗高血糖活性を有するための、当該技術分野で既知の薬物が挙げられ、例えば下記が挙げられる：ジペプチジルペプチダーゼ４（ＤＰＰ－４）の阻害剤（例えば、アログリプチン、リナグリプチン、サキサグリプチン、シタグリプチン、ビルダグリプチン及びベルベリン）、ビグアナイド（例えば、メトホルミン、ブホルミン及びフェンホルミン）、ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体（ＰＰＡＲ）モジュレータ、例えばチアゾリジンジオン（ＴＺＤ）（例えば、ピオグリタゾン、リボグリタゾン、ロシグリタゾン及びトログリタゾン）、デュアルＰＰＡＲアゴニスト（例えば、アレグリタザル、ムラグリタザル及びテサグリタザル）、スルホニル尿素（例えば、アセトヘキサミド、カルブタミド、クロルプロパミド、グリクラジド、トルブタミド、トラザミド、グリベンクラミド（グリブリド）、グリピジド、グリキドン、グリクロピラミド及びグリメピリド）、メグリチニド（「グリニド」）（例えば、ナテグリニド、レパグリニド及びミチグリニド）、グルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）及び類似体（例えば、エキセンジン－４、エキセナチド、リラグルチド、アルビグルチド）、インスリン及びインスリン類似体（例えば、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングルリジン、インスリングラルギン、インスリンデテミル、エクスベラ及びＮＰＨインスリン）、アルファ－グルコシダーゼ阻害剤（例えば、アカルボース、ミグリトール及びボグリボース）、アミリン類似体（例えばプラムリンチド）、ナトリウム依存性グルコース共輸送体Ｔ２（ＳＧＬＴ Ｔ２）阻害剤（例えば、ダパグリフロジン、レモグリフロジン及びセルウグリフロジン）並びに他のもの（例えば、ベンフルオレックス及びトルレスタット）。

【0285】

説明されている任意の態様、実施形態又は例に係る組成物は、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する疾患若しくは状態の処置のための併用治療アプローチの一部として投与され得ることを当業者は認識するであろう。併用治療では、各薬剤を同時に投与し得るか又は任意の順序で逐次投与し得る。逐次投与する場合、各成分を同一経路で投与することが好ましい場合がある。

【0286】

２種の薬剤が別々に適用されるいくつかの例では、両方の薬剤が、有利に組み合わされた効果を依然として発揮し得るように、各送達の時間の間に有意な期間が失効しなかったことが概して保証されるであろう。そのような例では、両方の治療法が互いに約１２～２４時間以内、より好ましくは互いに約６～１２時間以内に概して投与されることが企図され、約１２時間のみの遅延時間が最も好ましいが、いくつかの状況では処置のための時間を大いに延ばすことが望ましい場合があり、それぞれの投与間に数日（２、３、４、５、６又は７）～数週間（１、２、３、４、５、６、７又は８）経過する。また、薬剤の複数回の投与が望ましいであろうことも考えられる。

【0287】

本発明の組成物と第２の活性剤とを別々の組成物で投与する場合、投与経路は、異なり得る。例えば、本発明の組成物を、当該技術分野で既知の任意の適切な経路（例えば、限定されないが、経口経路又は非経口経路、例えば、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、経皮投与、気道（エアロゾル）投与、肺投与、経鼻投与、直腸投与並びに局所（例えば、頬側及び舌下）投与）で投与し、第２の薬学的に活性な薬剤を別の経路（例えば、前記薬学的に活性な薬剤の投与のために当該技術分野で一般に使用される経路）で投与する。非限定的な例では、本発明の組成物を注射により投与し得、第２の活性剤を経口投与し得る。

【0288】

５．薬物の製造
本発明の第６の態様では、ＮＥＴを伴う医学的状態、病気又は疾患を処置するための薬物の製造における、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量の使用が提供される。

【0289】

好ましくは、本発明のこの態様では、選択された化合物は、還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドである。より好ましくは、小さい非荷電グリコシド結合置換基により、その還元末端において硫酸化されている同じポリアニオンに比べると、ポリアニオンの化学的安定性が改善されている。特に、本化合物がｍＣＢＳである場合、この化合物は、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖、又はβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートのナトリウム塩、即ちｍＣＢＳ．Ｎａである。

【0290】

例えば、本発明の第６の態様のある実施形態では、対象における敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患の処置又は予防のための薬物の製造における、ポリアニオン性硫酸化セロビオシド、若しくはその還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量又は薬学的に有効な量の使用が提供される。好ましくは、この改変されている硫酸化セロビオシドは、ｍＣＢＳであるか、又はより具体的にはｍＣＢＳの薬学的に許容される塩（例えば、ｍＣＢＳ．Ｎａ）である。

【0291】

そのような使用の一実施形態では、この薬物は、対象における敗血症若しくはＳＩＲＳを処置するためのものであるか、又は対象における敗血症若しくはＳＩＲＳと関連する医学的状態若しくは疾患を処置するためのものであり、前記処置は、前記敗血症若しくはＳＩＲＳ又は前記敗血症若しくはＳＩＲＳと関連する前記状態若しくは疾患を寛解させるか又は阻害する。

【0292】

そのような使用の別の実施形態では、この薬物は、対象におけるＩＲＩを処置するためのものであるか、又は対象におけるＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置するためのものであり、前記処置は、前記ＩＲＩ又は前記傷害と関連する前記状態若しくは疾患を寛解させるか又は阻害する。

【0293】

そのような使用のさらに別の実施形態では、この薬物を使用して、（ｉ）対象の内皮に対して細胞毒性であるか、又は（ｉｉ）対象の内皮機能障害の一因となるか、又は（ｉｉｉ）対象の血小板を活性化させることによって凝血を開始させるか、又は（ｉｖ）対象において赤血球脆弱性及びその結果としての貧血を誘発するＮＥＴを中和する。

【0294】

さらに別の実施形態では、製造された薬物は、第２の活性剤、化合物又は組成物の治療上有効な量又は薬学的に有効な量も含み得る。この実施形態によれば、第２の活性剤、化合物又は組成物は、ＮＥＴを伴う医学的状態、病気又は疾患を処置するための補助的治療を提供する。望ましくは、第２の活性剤、化合物又は組成物は、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患の処置のための補助的治療を提供する。好ましくは、第２の活性剤は、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤及び／又は対象が患っている１種若しくは複数の状態を処置する任意の他の形態の治療用化合物若しくは医薬化合物の１つ又は複数から選択される。より好ましくは、第２の活性剤、化合物又は組成物は、１種又は複数の抗炎症剤を含む。

【0295】

本発明の方法のいずれかで、改変されている硫酸化セロビオシド化合物を使用する場合、この化合物を、単回用量の製剤において、それを必要とする対象に投与し得るか、又はそれを必要とする対象への投与のために製剤化し得る。特定の代替実施形態では、この改変されている硫酸化セロビオシド化合物を、複数回用量の製剤として、それを必要とする対象に投与するか、又はそれを必要とする対象への投与のために製剤化する。

【0296】

好ましくは、対象への投与ために、本治療用組成物又は医薬組成物は、薬学的に許容される組成物として提供される。この形態の場合、（１）この組成物は、１種又は複数の薬学的に許容される担体（添加剤（ａｄｄｉｔｉｖｅ））、及び／又は希釈剤、及び／又は添加剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）と一緒に薬学的に製剤化され、（２）この組成物中の改変されている硫酸化セロビオシド化合物は、中性又は塩の形態で製剤化され得る。

【実施例】

【0297】

本発明を下記の非限定的な実施例でさらに説明し、この実施例は、例証のみを目的として提供され、本明細書全体を通して本明細書の開示の一般性を制限すると解釈すべきではない。

【0298】

［実施例１：ｍＣＢＳ・Ｎａの調製方法］
β－Ｏ－メチルセロビオシドを、Ｊｏｎ Ｋ Ｆａｉｒｗｅａｔｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，５７：１９７－２０５により説明されているように調製する。

【0299】

β－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェート（ｍＣＢＳ）化合物及びナトリウムβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェート（ｍＣＢＳ．Ｎａ）化合物を、Ｋａｔｒｉｎ Ｃ Ｐｒｏｂｓｔ ａｎｄ Ｈａｎｓ Ｐｅｔｅｒ Ｗｅｓｓｅｌ，２００１，Ｊ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０（７＆８）：５４９－５６０（この開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）により説明されているように調製した。

【0300】

β－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェート（ｍＣＢＳ）を下記の概要に従って調製した。

【化3】

【0301】

工程１：α－Ｄ－セロビオース１（１１６ｇ、３３８ｍｍｏｌ）及び氷酢酸（１．６Ｌ）の混合物に、室温で臭化アセチル（３００ｍＬ、５００．０ｇ、４０６５ｍｍｏｌ、１２．０当量）を添加した。得られたクリーム状の混合物を、この反応混合物が、反応の完了を示す透明な溶液に変わるまで、４５～５５分にわたり６０℃で加熱した。

【0302】

この熱い溶液を、割れた氷（４ｋｇ）が入っているビーカ（１０Ｌ）に慎重に注ぐ。この混合物を、白色固体が沈殿するまで撹拌する（約１０分）。冷水の別の一部（１Ｌ）を添加し、１０分にわたり撹拌し続ける。

【0303】

焼結漏斗でろ別し、固体を冷水で洗浄した（７００ｍＬ×３回）。得られた漏斗中の固体をＤＣＭ（１Ｌ）に溶解させ、この漏斗をＤＣＭで洗浄した（３００ｍＬ×２回）。まとめたＤＣＭ層をブライン（１．５Ｌ）で洗浄し、ＤＣＭ（０．５Ｌ）で逆抽出した。最終ＤＣＭ層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ろ過し、２時間以内に＜３５℃において減圧下で濃縮して、次のグリコシル化に直接使用する目的の臭化物２（１７２．５ｇ、７４．３％収率）を得た。

【0304】

工程２：ｐｅｒ－Ｏ－アセチル化セロビオシルブロミド２（１７１ｇ、２５０ｍｍｏｌ）、無水ＤＣＭ（８００ｍＬ）、無水ＭｅＯＨ（８００ｍＬ）、活性化３Ａモレキュラーシーブ（７０ｇ）の混合物に炭酸銀（Ａｇ_２ＣＯ_３、７５ｇ、２７５ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。得られた混合物を１６時間にわたり光の非存在下で撹拌した。この混合物をシリカのプラグに通して精製し、ＥｔＯＡｃで溶出した。集めた画分を濃縮して褐色固体として粗生成物を得、この粗生成物を次の工程に直接使用した。化合物３のＲ_ｆ＝０．２８（ＥｔＯＡｃ－ヘキサン、１：１）。

【0305】

工程３：工程２で得られた粗生成物及び無水ＭｅＯＨ（１Ｌ）の混合物に室温でＮａの小片（１．７２ｇ、０．３当量、７５ｍｍｏｌ）を添加した。その後まもなく、溶液から白色固体が沈殿し始めた。得られた混合物を一晩撹拌して、脱アセチル化を確実に完了させた。最終懸濁液をろ別し、ＭｅＯＨで洗浄した（３００ｍＬ×２回）。白色固体を集め、一晩にわたり真空下で乾燥させて、最終セロビオシド４（７２．５ｇ、２段階で８１．４％）を得た。

【化4】

工程４の合成及び精製の手順：

【0306】

工程４ 化合物４（８４．０ｇ、２３６ｍｍｏｌ）、ＳＯ_３．ＴＭＡ（３６７．４ｇ、２．６４ｍｏｌ、１１．２当量）、無水ＤＭＦ（３１４０ｍＬ）及び無水ＤＣＥ（７６７ｍＬ）の混合物をＡｒ下で３回脱気し、２時間にわたり８０～９０℃で加熱した。（反応のモニタリング：１０分にわたる加熱後、クリーム状の混合物が透明な溶液に変化した。３０分後、この溶液は再び濁った。５０分後、フラスコの表面上に、凝集した固体を観察した）。冷却後、得られた混合物を低温室（－５℃）に移し、一晩沈降させて溶媒から固体を完全に凝集させた。化合物４から５への完全な変換を１Ｈ－ＮＭＲで確認した。この溶液を排水管にデカントする。粗固体をろ別し、ＤＣＭで２～３回洗浄した。得られた固体を脱イオン水に溶解させ、イオン交換カラム［ＤＯＷＥＸ ５０Ｗ×８のＮａ形態：樹脂（Ｈ^＋形態）３ｋｇをガラス製重力カラムに予め充填し、１ＭのＮａＯＨ（－６Ｌ）の溶出により再生し、脱イオン水（－１２Ｌ）で中和した］に直接かけた。集めた画分を濃縮し、ガラス状固体として最終的な硫酸化セロビオシド６（２３２．１ｇ、９２．０％）を得た。

【0307】

［実施例２～６：ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳの比較］
以下の検討では、本発明者は、３種のＳＰＡ、即ちセロビオースペル－Ｏ－サルフェート（ＣＢＳ）、メチルβ－セロビオシドペル－Ｏ－サルフェート（ｍＣＢＳ）及びマルトトリオースペル－Ｏ－サルフェート（ＭＴＳ）（図１中の構造）を試験した。実施例２～６に使用した方法を以下に説明する。

【0308】

以下の実施例（２～６）に関する方法及び物質
ヘパリン（ブタ粘膜－ＰＭ）は、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈから購入した。

【0309】

ヒト対象。すべてのヒトと関連する研究は、ＡＣＴ Ｈｅａｌｔｈ Ｈｕｍａｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅにより承認を得た。インビトロでの研究のための赤血球及び血小板の供給源として、健康な成人ドナーを使用した。ＡＰＡＣＨＥ ＩＩ致死スコア≧１２（Ｋｎａｕｓ，Ｗ．Ａ．，Ｄｒａｐｅｒ，Ｅ．Ａ．，Ｗａｇｎｅｒ，Ｄ．Ｐ．＆ Ｚｉｍｍｅｒｍａｎ，Ｊ．Ｅ．ＡＰＡＣＨＥ ＩＩ：ａ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｏｆ ｄｉｓｅａｓｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ．Ｃｒｉｔ ｃａｒｅ ｍｅｄ １３， ８１８－８２９（１９８５））を有する承諾患者を、Ｃａｎｂｅｒｒａ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ Ｕｎｉｔに到着時にＩＣＵに入院させて、敗血症の診断を本発明者らの検討に含めた。

【0310】

敗血症は以下の診断基準に基づき診断した（Ｍａｙｒ，Ｆ．Ｂ．，Ｙｅｎｄｅ，Ｓ．＆ Ａｎｇｕｓ，Ｄ．Ｃ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｓｅｖｅｒｅ ｓｅｐｓｉｓ．Ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ ５，４－１１ （２０１４）；及びＢｏｎｅ，Ｒ．Ｃ．ｅｔ ａｌ．Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｓｅｐｓｉｓ ａｎｄ ｏｒｇａｎ ｆａｉｌｕｒｅ ａｎｄ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｉｎ ｓｅｐｓｉｓ．Ｔｈｅ ＡＣＣＰ／ＳＣＣＭ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｓｔ Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ／Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｃａｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｃｈｅｓｔ １０１，１６４４－１６５５（１９９２））：
ａ．以下のうちの少なくとも２つ：
ｉ．多呼吸＞２４ｂｐｍ又は血液ガスＰＣＯ２＜３２ｍｍＨｇ
ｉｉ．白血球数（ＷＣＣ）は、＜４，０００細胞／ｍｍ３又は＞１２，０００細胞／ｍｍ３のどちらか一方
ｉｉｉ．心拍数（ＨＲ）＞１００ｂｐｍ
ｉｖ．温度（発熱）＞３８．０℃又は（低体温）＜３６．０℃。
ｂ．特定された全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）に別の理由がない。
ｃ．血液培養陽性、胸部ｘ線又は他のイメージングに肺炎の兆候を含めた敗血症の証拠
ｄ．末端臓器機能障害の証拠：腎不全、肝機能障害、グラスゴーコーマスコア（他の原因に起因しない）又は血清乳酸の変化。
ｅ．強心剤支持を必要とする難治性低血圧

【0311】

動物。動物実験はすべて、Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｎｉｍａｌ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅにより承認を受けた。病原体を含まない雄及び雌のＣ５７ＢＬ／６マウス（６～８週齢）、雄のＢＡＬＢ／ｃマウス（５～６週齢）及び雄のＷｉｓｔａｒラット（体重は２５０～３５０ｇの間）を、Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｐｈｅｎｏｍｉｃｓ Ｆａｃｉｌｉｔｙ ａｔ ｔｈｅ Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙから得た。

【0312】

細胞株及び細胞培養物条件。Ｏ型血液の群を有し、したがって、ヒト血清中に抗血液群抗体との反応性のないヒト毛細血管内皮細胞－１（ＨＭＥＣ－１）は、ＡＴＣＣにより供給され、１０％の熱－不活性化ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、２ｍＭのＬ－グルタミン、１００ＩＵｍｌ^－１のペニシリン、１００μｇｍｌ^－１ストレプトマイシン、１０ｎｇｍｌ^－１のＥＧＦ及び１μｇｍｌ^－１のヒドロコルチゾンを補給したＭＣＤＢ１３１培地中で培養した。細胞を５％ＣＯ_２及び周囲Ｏ_２中、３７℃でインキュベートし、ＭｙｃｏＡｌｅｒｔアッセイキット（Ｌｏｎｚａ）を使用してマイコプラズマを繰り返し検査した。

【0313】

ヒストンにより媒介された細胞毒性アッセイ。仔ウシ胸腺ヒストン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）の細胞毒性を決定するため、様々な濃度（１００～８００μｇｍｌ^－１）のヒストンを、９６ウェルプレート中のＨＭＥＣ－１又はＨＵＶＥＣ（１×１０^６ｍｌ^－１）の懸濁液に加え、３７℃で１時間、インキュベートした。次に、死滅細胞を検出するためヨウ化プロピジウム（ＰＩ；２．５μｇｍｌ^－１）（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）と共に、及び生存細胞を検出するためカルセイン－ＡＭ（０．０４μＭ）（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）と共に、細胞を３７℃で５分間、インキュベートし、ゲーティング戦略を使用するフローサイトメトリーにより、死滅細胞及び生存細胞の割合を決定した。阻害アッセイでは、ＨＭＥＣ－１を、様々な濃度の化合物（１２．５～４００μｇｍｌ^－１）の存在下、３７℃で１時間、ヒストン（４００μｇｍｌ^－１）と共にインキュベートした後、ＰＩ及びカルセイン－ＡＭを添加した。次いで、各化合物濃度におけるＨＭＥＣ－１細胞毒性を、式：

【数1】

に基づいて決定し、次いで、各ポリアニオンのＩＣ５０値を、Ｐｒｉｓｍソフトウェア（Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用する最良適合線（非線形回帰解析）に基づいて決定した。すべてのアッセイにおいて、実験変動を相殺するための標準品としてＭＴＳ（ＩＣ５０ ３０μｇｍｌ^－１）を含ませ、データを、各アッセイにおいて、３０μｇｍｌ^－１であるＩＣ５０を有するＭＴＳに適応させた。

【0314】

脂質二重層アッセイ。既に説明されているように（Ｒｅｂｂｅｃｋ，Ｒ．Ｔ．ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｂｅｔａ（１ａ）ｓｕｂｕｎｉｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｋｅｌｅｔａｌ ＤＨＰＲ ｂｉｎｄｓ ｔｏ ｓｋｅｌｅｔａｌ ＲｙＲ１ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ｔｈｅ ｃｈａｎｎｅｌ ｖｉａ ｉｔｓ ３５－ｒｅｓｉｄｕｅ Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ ｔａｉｌ．Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｊ １００，９２２－９３０，（２０１１）．）調製し、１５０ｍＭ又は２５０ｍＭのＫＣｌ（ｐＨ約５．５）溶液に対称的に分離した人工脂質二重層である。二重層にヒストン（１μＭ、１５．２μｇｍｌ^－１）を単独で添加したか、又は約２０℃での１０μＭのＣＢＳ（３．５μｇｍｌ^－１）又は１０μＭのＭＴＳ（５．１μｇｍｌ^－１）と一緒の０．５～３時間のインキュベーション後に添加した。ヒストンの添加後、この二重層が破れるか又は実験が終了するまで、電流を連続的に記録した。

【0315】

内皮細胞におけるカルシウム流動研究。ＲＰＭＩ－１６４０培地中のＨＭＥＣ－１（２×１０^７ｍｌ^－１）を６０分にわたり３７℃でＩｎｄｏ－１ ＡＭ（５μＭ）（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）と共にインキュベートした。（Ｔｅｌｌａｍ，Ｒ．Ｌ．＆Ｐａｒｉｓｈ，Ｃ．Ｒ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｕｌｆａｔｅｄ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｆｒｅｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｌｃｉｕｍ ｉｏｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ９３０，５５－６４（１９８７）、及びＷｅｓｔｏｎ，Ｓ．Ａ．，Ｔｅｌｌａｍ，Ｒ．Ｌ．＆Ｐａｒｉｓｈ，Ｃ．Ｒ．Ｄｅｘｔｒａｎ ｓｕｌｆａｔｅ ｉｎｄｕｃｅｓ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｆｒｅｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｌｃｉｕｍ ｉｏｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｔｈｙｍｏｃｙｔｅｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ６９，３６９－３７６，（１９９１））。５％のＦＣＳが補充されたＲＰＭＩ－１６４０培地による３回の洗浄後、細胞を、１０ｍＭのＨＥＰＥＳが補充された氷冷ＨＥＰＥＳ緩衝生理食塩水（ＮａＣｌ ８ｇｌ^－１、ＫＣｌ ０．４ｇｌ^－１、ＣａＣｌ_２ ０．２ｇｌ^－１、ＭｇＣｌ_２．６Ｈ_２Ｏ ０．２ｇｌ^－１、Ｄ－グルコース １．８ｇｌ^－１、ｐＨ７．４）に４×１０^６ｍｌ^－１で再懸濁させた。この細胞懸濁液を氷上で保持し、３時間以内に使用した。フローサイトメトリーを使用して、細胞内Ｃａ^２＋流動をモニタリングした。細胞を予め平衡化し、加熱水浴に接続された外部シース（ｅｘｔｅｒｎａｌ ｓｈｅａｔｈ）を使用して、分析中に３７℃で維持した。（ＦＳＣ／ＳＳＣ光散乱に基づく）細胞残屑及び塊状の細胞の排除後、新規の化合物の存在下／非存在下でのヒストン添加前２分にわたり、基底Ｃａ^２＋レベルをモニタリングした。一定の流速（約３００事象／秒）でヒストン添加の１、４及び１０分後にＣａ^２＋レベルを測定した。Ｃａ^２＋流動をＣａ^２＋非結合Ｉｎｄｏ－１に対するＣａ^２＋結合Ｉｎｄｏ－１の幾何平均蛍光強度（ＧＭＦＩ）の比率の増加として決定した。

【0316】

インビトロでの赤血球の顕微鏡観察、凝集、脆弱性及び変形能のアッセイ。ヒト赤血球のヒストンによって媒介される凝集及び様々な化合物によるこの凝集の阻害を、本発明者らにより既に報告されているように（Ｋｏｒｄｂａｃｈｅｈ，Ｆ．，Ｏ’Ｍｅａｒａ，Ｃ．Ｈ．，Ｃｏｕｐｌａｎｄ，Ｌ．Ａ．，Ｌｅｌｌｉｏｔｔ，Ｐ．Ｍ．＆Ｐａｒｉｓｈ，Ｃ．Ｒ．Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｈｉｓｔｏｎｅｓ ｉｎｄｕｃｅ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｆｒａｇｉｌｉｔｙ ａｎｄ ａｎｅｍｉａ．Ｂｌｏｏｄ １３０，２８８４－２８８８，（２０１７））、前方及び側方散乱パラメータ又は赤血球自己蛍光のいずれかに基づくフローサイトメトリーと、以前に説明されているような（Ｙａｂａｓ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｍｉｃｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｉｎ ｔｈｅ ｐｕｔａｔｉｖｅ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ ｆｌｉｐｐａｓｅ ＡＴＰ１１Ｃ ｅｘｈｉｂｉｔ ａｌｔｅｒｅｄ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｓｈａｐｅ，ａｎｅｍｉａ，ａｎｄ ｒｅｄｕｃｅｄ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｌｉｆｅ ｓｐａｎ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８９，１９５３１－１９５３７，ｄｏｉ：１０．１０７４／ｊｂｃ．Ｃ１１４．５７０２６７（２０１４））走査型電子顕微鏡とにより検出した。同様に、阻害剤の存在下又は非存在下でヒストンによって誘発される赤血球の脆弱性を、彼らが最近開発した（Ｋｏｒｄｂａｃｈｅｈ，Ｆ．，Ｏ’Ｍｅａｒａ，Ｃ．Ｈ．，Ｃｏｕｐｌａｎｄ，Ｌ．Ａ．，Ｌｅｌｌｉｏｔｔ，Ｐ．Ｍ．＆Ｐａｒｉｓｈ，Ｃ．Ｒ．Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｈｉｓｔｏｎｅｓ ｉｎｄｕｃｅ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｆｒａｇｉｌｉｔｙ ａｎｄ ａｎｅｍｉａ．Ｂｌｏｏｄ １３０，２８８４－２８８８，（２０１７））せん断ストレスアッセイを使用して定量した。最後に、ヒストンの存在下での赤血球の変形能の低下及びこのプロセスへの阻害剤の効果を、人工ヒト脾臓を通る赤血球の通過を測定することにより評価した（Ｋｏｒｄｂａｃｈｅｈ， Ｆ．，Ｏ’Ｍｅａｒａ，Ｃ．Ｈ．，Ｃｏｕｐｌａｎｄ，Ｌ．Ａ．，Ｌｅｌｌｉｏｔｔ，Ｐ． Ｍ.＆Ｐａｒｉｓｈ，Ｃ．Ｒ．Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｈｉｓｔｏｎｅｓ ｉｎｄｕｃｅ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｆｒａｇｉｌｉｔｙ ａｎｄ ａｎｅｍｉａ．Ｂｌｏｏｄ １３０，２８８４－２８８８，（２０１７）；およびＤｅｐｌａｉｎｅ，Ｇ．ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｎｇ ｏｆ ｐｏｏｒｌｙ ｄｅｆｏｒｍａｂｌｅ ｒｅｄ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｓｐｌｅｅｎ ｃａｎ ｂｅ ｍｉｍｉｃｋｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｂｌｏｏｄ １１７，ｅ８８－９５，（２０１１））。

【0317】

インビトロでの血小板の凝集及び脱顆粒のアッセイ。凝集研究のために、室温での２段階遠心分離（２０分にわたる２００×ｇ、次いで１５分にわたる血小板リッチの血漿８００×ｇ）により、クエン酸Ｎａバキュテナ中に採取したヒト全血から血小板を単離し、血小板ペレットを、カルシウム及びマグネシウムを含むハンクス平衡塩類溶液に再懸濁させ、ヒストンを添加し、示したそれぞれの濃度において化合物の存在下／非存在下でインキュベートした。血小板の特徴的なｌｏｇ ＦＳＣ対ｌｏｇ ＳＳＣ識別を使用するフローサイトメトリーにより、ヒストンへの１５分間の曝露後の血小板凝集の程度に関してサンプルを評価し、ｌｏｇ ＦＳＣの幾何平均の増加は血小板凝集を示す。

【0318】

血小板活性化アッセイのために、クエン酸Ｎａバキュテナ中に採取した全血を、Ｃｈｒｏｎｏ－Ｌｕｍｅ試薬（Ｃｈｒｏｎｏ－Ｌｏｇ Ｃｏｒｐ）を用いたＣｈｒｏｎｏ－Ｌｏｇ Ｍｏｄｅｌ ７００の発光モードを使用して、血小板の脱顆粒をモニタリングした。インサイチュでスターラーバーにより、予め温めた血液（４２０μｌ）に生理食塩水（３００μｌ）を添加した。次いで、Ｃｈｒｏｍｏ－Ｌｕｍｅ試薬（１００μｌ）を添加し、２分にわたりインキュベートした後、水で希釈したヒストン±化合物を、示した濃度において１８０μｌの総量で添加した。結果を、ヒストン＋生理食塩水コントロールの割合として算出したＡＴＰ放出として表した。

【0319】

インビボでのヒストン毒性アッセイ。ＢＡＬＢ／ｃ雌マウス（５～６週齢）（Ｃ５７ＢＬ／６マウスと比べて、この若い年齢で、ヒストンによって誘発される貧血を起こし易く且つＩＶ注射し易い）に、示した濃度での試験化合物のｉ．ｐ．注射の１０分後にリン酸緩衝生理食塩水中のヒストン（５０ｍｇｋｇ^－１）をｉ．ｖ．注射した。ヒストン注射の１０分後に眼窩後出血（ｒｅｔｒｏ－ｏｒｂｉｔａｌ ｂｌｅｅｄ）をガラスパスツールピペットで実施し、採取した血液を酸性クエン酸デキストロース（ＡＣＤ）に添加し、この１０分血液サンプルを、ＡＤＶＩＡ ２１２０ｉ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ Ａｎａｌｙｚｅｒを使用して血小板及び赤血球の含有量に関する血液分析にかけた。ヒストン注射の１０分後に脾臓も摘出し、ヘモグロビンアッセイキット（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して脾臓ヘモグロビン含有量を定量した。４時間血液サンプルの場合、雄Ｃ５７／ＢＬ／６マウス（６～８週齢）に、上記のように試験化合物及びヒストンを注射し、その後の生化学的試験のために血漿を単離して凍結保存し、肝臓損傷のマーカー（アラニンアミノトランスフェラーゼ、ＡＬＴ）、腎臓損傷のマーカー（クレアチニン、Ｃｒｅａ）及び一般組織損傷のマーカー（乳酸デヒドロゲナーゼ、ＬＤＨ）を、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｔｈｅ Ｃａｎｂｅｒｒａ Ｈｏｓｐｉｔａｌにより測定した。

【0320】

マウス深部静脈血栓症（ＤＶＴ）モデル。使用する手順は大部分が既に説明されている通りである（Ｂｒｉｌｌ，Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｔｒａｐｓ ｐｒｏｍｏｔｅ ｄｅｅｐ ｖｅｉｎ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｊ Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ １０，１３６－１４４，（２０１２））。簡潔に説明すると、８週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスに麻酔して開腹切開を行い、腸を体外から出し、次いで腹部大動脈からの緩やかな分離後、腎静脈直下の下大静脈（ＩＶＣ）を約１０％の開存性まで結紮し、全ての関連するＩＶＣ支流を結紮した。腹膜及び皮膚を閉じ、その後、全てのマウスに尾静脈を介してヒストン（１０ｍｇｋｇ^－１）又は等量の生理食塩水をｉ．ｖ．注射し、続いて５分後に試験化合物（５０ｍｇｋｇ^－１）又は生理食塩水をｉ．ｖ．注射した。マウスを４８時間にわたりモニタリングし、その後、再び麻酔して再び開き、ＩＶＣ狭窄の遠位で発症していた任意の血栓を、分析のために取り出した。偽手術するコントロール動物を開腹手術し、ＩＶＣを９０％結紮したが、この結紮をＩＶＣの閉塞直後に除去した。

【0321】

敗血症に関するラット盲腸結紮及び穿刺（ＣＬＰ）アッセイ。ＣＬＰアッセイを、既に説明されているように（Ｈｕｂｂａｒｄ，Ｗ．Ｊ．ｅｔ ａｌ．Ｃｅｃａｌ ｌｉｇａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｎｃｔｕｒｅ．Ｓｈｏｃｋ ２４ Ｓｕｐｐｌ １，５２－５７（２００５））雄のＷｉｓｔａｒラットで実施した。生理食塩水に溶解させた試験化合物（５０ｍｇｋｇ^－１）又は等量の生理食塩水のみ（コントロールコホート）を、ＣＬＰの５分前且つ２０時間での実験停止まで術後５、１０及び１５時間にｉ．ｐ．投与した。偽ＣＬＰラットに同一の手順を行ったが、盲腸を結紮していないか又は穿刺しておらず、このラットに、上記と同じ時間に生理食塩水を投与した。実験期間の終了時（２０時間）又は病的状態が倫理上安楽死を必要とした場合、ラットを麻酔し、後のＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｔｈｅ Ｃａｎｂｅｒｒａ Ｈｏｓｐｉｔａｌによる肝臓（ＡＬＴ）及び腎臓（クレアチニン）の機能の分析のために、心臓穿刺によりＥＤＴＡ中に採血した。生理食塩水で処理したコントロールＣＬＰ動物の血液サンプル内では（ＥＤＴＡの存在にもかかわらず）血餅が形成される傾向があるため、全ての動物からの血漿サンプルの分析は成功しなかった。

【0322】

ラット心臓虚血再灌流傷害モデル。使用する方法は、既に公開されている手順の組み合わせに基づく（Ｔａｋａｄａ，Ｙ．，Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ，Ｍ．，Ｋａｓａｈａｒａ，Ｊ．，Ａｉｈａｒａ，Ｋ．＆Ｆｕｋｕｎａｇａ，Ｋ．Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｏｒｔｈｏｖａｎａｄａｔｅ ｏｎ ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ ｈｅａｒｔ ｉｎｖｏｌｖｅｓ Ａｋｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｄｒｉｎ ｂｒｅａｋｄｏｗｎ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ ３１１，１２４９－１２５５，（２００４）、及びＨａｌｅ，Ｓ．Ｌ．，Ｄａｅ，Ｍ．Ｗ．＆Ｋｌｏｎｅｒ，Ｒ．Ａ．Ｈｙｐｏｔｈｅｒｍｉａ ｄｕｒｉｎｇ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｌｉｍｉｔｓ ’ｎｏ－ｒｅｆｌｏｗ’ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ａ ｒａｂｂｉｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｒｅｓ ５９，７１５－７２２（２００３））。雄のＷｉｓｔａｒラットをイソフルレンで麻酔し、気管切開術により挿管し、１ｍｌ １５０ｇ^－１の一回換気量及び６５回の呼吸 分^－１の呼吸数で人工呼吸した。酸素補給を約３０％のＦｉＯ_２で供給した。左心室を可視化し得るように、左半開胸術を実施した。左冠動脈叢（ＬＣＡ）を、３０分にわたる再灌流前に３０分にわたり非侵襲的スネアを使用して閉塞させた。虚血を心筋充血により確認した。試験化合物（３０ｍｇｋｇ^－１）又は等量（２００μｌ）の生理食塩水を、再潅流フェーズのためのスネアの開放の５分前に、左心室の内腔（吸引で確認）に注射した。

【0323】

再潅流（３０分）の終了時、左心室の内腔にチオフラビンＳ（体重の１ｍｌ ２００ｇ^－１）を緩やかに注射して、虚血ゾーン（ＩＺ）内の微小血管閉塞（ＭＶＯ）の領域を定義した。このＩＺ領域を、非侵襲的スネアの再閉塞と、ＣＤ－６８００（Ｕｎｉｓｏｎｉｃｓ）超音波処理器を使用する超音波処理による、溶液内に分散された左心室への青色微粒子（Ｕｎｉｓｐｅｒｓｅ Ｂｌｕｅ，ＢＡＳＦ）の注入とにより決定した。次いで、心臓を胸部から切除し、等張生理食塩水ですすぎ、心室間線に対して直角において非侵襲的スネアの遠位で２ｍｍ切片を切り取った。この方法は、秤量し且つ紫外線（ＭＶＯの領域）下及び明るい光（ＩＺ領域）下で撮影した（Ｓｏｎｙ Ｈａｎｄｙｃａｍ（登録商標），Ｚｅｉｓｓ ６０倍光学ズーム）４枚の心筋切片を作製した後、塩化テトラゾリウム（ＴＴＣ）中でインキュベートして、壊死心筋の領域を決定した。Ｐｌａｎｉｍｅｔｒｙ（Ｉｍａｇｅ Ｊ，Ｆｒｅｅｗａｒｅ）を使用して、ＩＺ、ＭＶＯ及び壊死の領域を定量した。

【0324】

ラット虚血再灌流組織弁モデル。用いる手順は大部分が既に説明されている方法に基づく（Ｂｏｎｅ，Ｒ．Ｃ．ｅｔ ａｌ．Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｓｅｐｓｉｓ ａｎｄ ｏｒｇａｎ ｆａｉｌｕｒｅ ａｎｄ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｉｎ ｓｅｐｓｉｓ．Ｔｈｅ ＡＣＣＰ／ＳＣＣＭ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｓｔ Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ／Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｃａｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｃｈｅｓｔ ０，１６４４－１６５５（１９９２））。簡潔に説明すると、雄のＷｉｓｔａｒラットに麻酔し、局所的に脱毛し、３ｃｍ×６ｃｍの筋膜弁を、血管茎を無傷のままにして摘出した。下腹壁動脈をクランプし、下の組織からの酸素拡散を防ぐために、この弁の下に細かいゴムシートを置き、この弁を所定の位置に再縫合した。この弁に血流が戻ることを可能にするために、適用の１０時間後にクランプを除去した。試験化合物（５０ｍｇｋｇ^－１）又は生理食塩水を、クランプ適用の５分前及びこのクランプの除去の５分後にｉ．ｐ．投与した。ラットを、術後２４時間及び４８時間でこのラットに追加の化合物又は生理食塩水をｉ．ｐ．投与している７２時間の合計実験期間にわたりモニタリングした。「コントロールクランプなし」ラットは、摘出して再縫合前にゴムを下に置いた組織弁を有したが、血管はクランプされておらず、他のラットと同じ時点で生理食塩水を投与した。実験期間の終了時、この弁の生存率を黒色の壊死領域又は発赤領域対ピンク色の生存領域の割合で決定した。エリザベスカラーの適用及び沈降剤としての鎮痛の使用にもかかわらず、少数のラットを、その弁の自己共食いを繰り返す際に早期に安楽死させなければならなかった。

【0325】

患者の血清中のＤＮＡの定量。ＩＣＵ到着時にＡＰＡＣＨＥ ＩＩスコア＞１２を有する同意をした患者からの血液を静脈アクセスラインから血清分離管に採取し、この管を２３００×ｇで１０分間、遠心分離し、血清を採取して、－８０℃で保管した。ＤＮＡ含有量を定量するため、敗血症患者に由来する血清（５μｌ）を、９６ウェルフラットボトム培養プレート中で９５μｌの５μＭ Ｓｙｔｏｘ Ｇｒｅｅｎと共に３７℃で１０分間、インキュベートした。次に、蛍光強度を５０４ｎｍで設定した励起及び５２３ｎｍでの発光で、蛍光プレートリーダー（Ｔｅｃａｎ Ｉｎｆｉｎｉｔｅ Ｍ２００ Ｐｒｏ）で測定した。

【0326】

内皮細胞に関する敗血症患者の血清の細胞毒性の検出及び分析。インビトロでの内皮細胞の場合の敗血症患者の細胞毒性活性を測定するため、ＨＭＥＣ－１を培地中、２．５×１０^４ウェル^－１において９６ウェルプレートに播種し、３７℃、５％ ＣＯ_２中、４８時間、３７℃で成長させた後に、ＤＮアーゼＩ（１０μｇｍｌ^－１）、抗ヒトヒストン３及びヒストン４ウサギｐＡｂ（２００μｇｍｌ^－１）（ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ）又は試験化合物（２００μｇｍｌ^－１）の存在下／非存在下で、５０μｌの患者血清を添加し、３時間、インキュベートした。次に、２０μｌのＨＭＥＣ－１培地中、各培養物のウェルに^３Ｈ－チミジン（０．５μＣｉ、ＭＰ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ）を加え、更に２４時間、インキュベートした。インキュベート期間の終わりに、プレートに３回の凍結／解凍サイクル（－７０℃で３０分間、次に、３７±０．５℃で３０分間）を施した後、採取して^３Ｈ－チミジン取込みを測定した。フィルターメイト１９６ハーベスター（Ｐａｃｋａｒｄ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を使用して、細胞培養物をガラス繊維フィルター（ＥａｓｙＴａｂ（商標）－Ｃ Ｓｅｌｆ Ａｌｉｇｎｉｎｇ Ｆｉｌｔｅｒｓ；Ｐａｃｋａｒｄ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）に採取した。フィルターを８０℃で乾燥し、Ｏｍｎｉｆｉｌｔｅｒプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に置き、次に、２０μｌのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ－Ｏシンチレーション流体（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を各ウェルに加え、このプレートをＴｏｐＳｅａｌ－Ａ粘着フィルム（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で密封した。^３Ｈ－チミジン取込みをＴｏｐＣｏｕｎｔ ＮＸＴ（商標）マイクロプレートシンチレーション及び発光量カウンター（Ｐａｃｋａｒｄ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を使用して測定した。結果を患者の血清に曝露していないＨＭＥＣ－１の増殖の割合として表した。

【0327】

統計解析。Ｐｒｉｓｍソフトウェア（Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して、統計学的試験を行い、グラフを生成し、使用した試験の詳細は図の説明文に含まれている。

【0328】

ｍＣＢＳの生物学的作用のインビトロでの証拠
以下の実施例２～６は、遊離ヒストン及びＮＥＴの中和に、ｍＣＢＳの生物学的効果のインビトロでの証拠を提示している。

【0329】

［実施例２：ｍＣＢＳはヒストン毒性から内皮細胞を、及びヒストンにより誘発される脆弱性及び凝集から赤血球を保護する］

【0330】

ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳ（まとめて、小さなポリアニオン又はＳＰＡと呼ぶ）の各々は、内皮細胞（図２ａ）に対するヒストン細胞毒性又は赤血球（ＲＢＣ）脆弱性（図２ｂ）の誘発を測定した場合、かなり活性が低い硫酸化単糖とは異なり、ヘパリンに類似したヒストン阻害活性を有する。

【0331】

この実施例は、ｍＣＢＳ及びＭＴＳが赤血球凝集を促進し、赤血球変形能を低下させるかどうかを検討するものである。フローサイトメトリーＦＳＣ及びＳＳＣに基づくと、ヒストンは、かなり効率的に赤血球を凝集させ、この効果は、ｍＣＢＳによって完全に阻害され（図３ａ）、結果は、ＥＭを走査することによって確認した（図３ｂ）。本発明者らはまた、赤血球の自家蛍光を使用して、ヒストンにより誘発された凝集物に存在する赤血球の数を定量した。高いヒストン濃度（４００μｇｍｌ^－１）では、約３５個の赤血球／凝集物が存在したが、ｍＣＢＳ及びＭＴＳは、濃度依存的に凝集を防止し、ＭＴＳは、ｍＣＢＳよりも約２倍有効であった（図３ｃ）。最後に、赤血球凝集（＜５０μｇｍｌ^－１）を誘発しないヒストン濃度に曝露させた赤血球（図３ｄ）は、人工脾臓への通過をかなり低下させることを示し、このアッセイは、赤血球変形能／剛性を測定するものである（Ｄｅｐｌａｉｎｅ，Ｇ．ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｎｇ ｏｆ ｐｏｏｒｌｙ ｄｅｆｏｒｍａｂｌｅ ｒｅｄ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｓｐｌｅｅｎ ｃａｎ ｂｅ ｍｉｍｉｃｋｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｂｌｏｏｄ １１７，ｅ８８－９５（２０１１））。しかし、ｍＣＢＳ及びＭＴＳの添加により、赤血球が人工脾臓を通過する能力が完全に回復され（図３ｄ）、ＳＰＡ、及びヒストンにより媒介される凝集及び漸弱性からの赤血球の保護は、ヒストンにより誘発される剛性を防止することを示している。

【0332】

［実施例３：ＳＰＡは、ヒストンによって血小板の活性化を阻害する］
ヒストンは血小板の活性化を誘発することが知られており、したがってＳＰＡがこの過程を阻害する能力を検討し、単離して洗浄したヒト血小板をヒストンと共にインキュベートし、血小板凝集をフローサイトメトリーにより測定した。更に、ＡＴＰ放出は、血小板の脱顆粒により、全血のヒストンへの曝露後に測定した。血小板凝集と脱顆粒との両方が、ヒストン濃度に依存しており（図４ａ、ｃ）、２つのアッセイ間での血小板のヒストン感受性の差異は、ヒストンにやはり結合するＡＴＰ放出アッセイにおける血漿タンパク質及び赤血球の存在に起因した。ヒストンにより誘発される血小板凝集は、ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳにより完全に阻害され、ＭＴＳが、最も活性であった（図４ｂ）。陰性コントロールとして含まれる非硫酸化ＣＢは、非阻害性であった（図４ｂ）。同様の結果が、ヒストンに誘発されるＡＴＰ放出の場合に得られた（図４ｄ）。したがって、ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳは、ヒストンの血小板活性特性の阻害に有効である。

【0333】

［実施例４：ＳＰＡは、脂質二重層の破壊を防止する］
次に、本発明者らは、どのようにしてヒストンがその細胞毒性を媒介し、その結果として、ＳＰＡがどのようにして、ヒストンによって媒介される傷害から細胞を保護するかを調べた。ヒストンは、脂質二重層と相互作用し、これを傷害（Ｋｌｅｉｎｅ，Ｔ．Ｊ．，Ｌｅｗｉｓ，Ｐ．Ｎ．＆Ｌｅｗｉｓ，Ｓ．Ａ．Ｈｉｓｔｏｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｄａｍａｇｅ ｏｆ ａ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ： ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ ２７３，Ｃ１９２５－１９３６（１９９７））し、細胞透過性タンパク質として作用する（Ｒｏｓｅｎｂｌｕｈ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｉｓｔｏｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｃｒｏｓｓ ｌｉｐｉｄ ｂｉｌａｙｅｒｓ ａｎｄ Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｍｅｍｂｒａｎｅｓ．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ３４５， ３８７－４００ （２００５））。したがって、本発明者らは、ヒストンが、脂質二重層を直接、破壊することによってその細胞毒性を媒介するかどうかを検討した。この可能性を検討するため、人工脂質二重層を調製し、この二重層を横切る電流の変化により、ヒストン破断に対するこの人工脂質二重層の感受性を検出した。脂質二重層は寿命が有限であり、通常、３０～１２０分である（Ｒｅｂｂｅｃｋ，Ｒ．Ｔ．ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｂｅｔａ（１ａ） ｓｕｂｕｎｉｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｋｅｌｅｔａｌ ＤＨＰＲ ｂｉｎｄｓ ｔｏ ｓｋｅｌｅｔａｌ ＲｙＲ１ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ｔｈｅ ｃｈａｎｎｅｌ ｖｉａ ｉｔｓ ３５－ｒｅｓｉｄｕｅ Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ ｔａｉｌ．Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｊ １００， ９２２－９３０ （２０１１））。本発明者らの実験では、リアノジン受容体１（ＲｙＲ１）イオンチャネルタンパク質を含むコントロール脂質二重層は、平均寿命が４６±４分を有し、ヒストン（１μＭ）の添加により、この寿命が５．７±１．２分まで顕著に縮まった（図３ａ）。実際には、４７個の二重層の１３個（２８％）がヒストン添加の０．３～０．５分以内に壊れたのに対して、１２５個のコントロール二重層の２個のみ（１．６％）が同じ期間で破裂し、より高いヒストン濃度（≧５０μＭ）により、ほとんどの二重層が急速に破裂した（図示しない）。二重層は、ＣＢＳ又はＭＴＳが存在する場合にはヒストンにより破裂し難く、二重層の平均寿命は、ＣＢＳ及びＭＴＳの場合にはそれぞれ、１８±４分及び３６±５分まで有意に向上した（図５ａ）。更に、ＭＴＳによる二重層の寿命は、コントロール寿命とは有意に違いがなかった。同様に、ヒストン単独の場合と比べると（２８％）、速やかな二重層の破裂の出現率は、ＣＢＳの場合、５２個の二重層の３個（５．８％）までに、及びＭＴＳの場合、４０個の二重層の１個（２．５％）までに低下した。

【0334】

以前の研究により、ヒストンが、細胞中で非選択的なＣａ^２＋チャネル及び形質膜の脱分極を誘発することができることが実証された。これらの知見は、ヒストンが細胞表面のリン脂質と直接相互作用して、膜の完全性を乱すという概念を更に支持する。ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳが、ヒストンによって誘発されるＣａ^２＋流動から細胞を保護するかどうかを調べるために、ＨＭＥＣ－１にＣａ^２＋感受性色素Ｉｎｄｏ－１を負荷し、ＣＢＳ又はＭＴＳの存在下又は非存在下においてヒストンをチャレンジし、フローサイトメトリーによりＣａ^２＋取込みを測定した（図５ｂ）。ヒストンは、高い細胞内Ｃａ^２＋レベルを示す細胞の集団において約８倍を超える向上を誘発し、この反応は、ヒストン添加の１～３分後に定常に達する。ＭＴＳの存在により、Ｃａ^２＋反応が完全になくなり、ＣＢＳはこの反応を実質的に阻害した（図５ｃ）。まとめると、本発明者らの知見は、ヒストンが細胞の脂質二重層を直接破壊することにより細胞膜に傷害を与え、ＳＰＡであるＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳは、ヒストンのこの望ましくない性質を中和することを示す。

【0335】

［実施例５：インビボでのヒストンと関連する病理に及ぼすＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳの効果］
本発明者は、次に、ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳが、ヒストンが媒介する病理をインビボで阻害する能力を評価した。ヒストンをマウスに静脈内注射すると、血液循環するＡＬＴ、ＬＤＨ及びクレアチニンレベルによって測定すると、肝臓障害、全身性組織傷害及び腎不全を伴う敗血症様症候群をもたらす。ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳの投与により、動物は、これらの組織特異的病理の各々から濃度依存的に保護され、ＭＴＳが最も強力であり、ＣＢＳ及びｍＣＢＳは、等しく活性であり、硫酸化されていないＣＢは、不活性である（図６ａ）。全身性ヒストンはまた、ｍＣＢＳ及びＭＴＳ処置によって予防される血小板減少症及び貧血を誘発する（図６ｂ）。ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳがヒストンの局所的な血管作用に影響を及ぼすかどうかを検討するため、ヒストンにより媒介されるＤＶＴのモデル（Ｂｒｉｌｌ，Ａ．ｅｔ ａｌ．ｖｏｎ Ｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ ｆａｃｔｏｒ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｉｓ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｄｅｅｐ ｖｅｉｎ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌｓ．Ｂｌｏｏｄ １１７，１４００－１４０７（２０１１））を確立し、これは、ＣＢＳ及びＭＴＳの両方によってほとんど完全に阻害されることが明らかになり（図６ｃ）、遊離ヒストンにより媒介される全身性病理と局所病理の両方が、ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳによる阻害に適していることと一致した。

【0336】

本発明者らは、次に、敗血症のラット盲腸結紮穿刺（ＣＬＰ）モデルにおいて、ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳの有効性を検討した。ＣＢＳ処置群では致死はなく、ＰＢＳコントロールと比べると、効果は非常に顕著であり、ＭＴＳ群においてわずか１匹の死亡しか起こらず、これは、有意性に近かった（図７ａ）。重要なことに、広範囲にわたる肝臓及び腎臓の損傷を示す、未処置群において検出された高いＡＬＴ及びクレアチニンレベルは、ＣＢＳ処置動物には観察されなかったが、ＭＴＳ処置群では、部分的にしか低下しなかった（図７ｂ）。この知見は、インビトロ及びインビボでのＭＴＳは、一貫して、ｍＣＢＳ／ＣＢＳよりもＤＮＡ不含細胞外ヒストンの強力な中和因子であったので、いくらか矛盾している。

【0337】

この矛盾を更に検討するため、ラット虚血再灌流傷害（ＩＲＩ）モデルにおいて、ＣＢＳ及びＭＴＳの有効性を試験し、これまでの検討は、心臓のＩＲＩは、非常にＮＥＴ依存的であることを実証している（Ｓａｖｃｈｅｎｋｏ，Ａ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．ＶＷＦ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｄｅｃｏｎｄｅｎｓａｔｉｏｎ ｂｙ ＰＡＤ４ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｂｌｏｏｄ １２３， １４１－１４８，（２０１４）；及びＧｅ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｔｒａｐｓ ｉｎ ｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｎｏ－ｒｅｆｌｏｗ： ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ＤＮａｓｅ－ｂａｓｅｄ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｓｔｒａｔｅｇｙ．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｈｅａｒｔ Ｃｉｒｃ Ｐｈｙｓｉｏｌ ３０８，Ｈ５００－５０９，（２０１５））。留意すべきことに、このモデルでは、ＭＴＳは完全に無効であった一方、ＣＢＳ処置により、毛細血管閉塞の領域及び虚血領域の心筋壊死が５０％とかなり低下した（図７ｃ）。この予期しない知見は、ｍＣＢＳが一貫して且つ顕著に皮膚弁の生存可能領域を増大させるラット皮膚弁ＩＲＩモデルでは大いに確認されたが、ＭＴＳ処置による結果は、かなりばらつきがあった（図７ｄ）。

【0338】

［実施例６：敗血症患者の血清における、ＣＢＳ、ｍＣＢＳ及びＭＴＳがＮＥＴを阻害する能力の比較］
上で議論したインビボ効力のデータに基づいて、本発明者らは、ｍＣＢＳ／ＣＢＳは、ＤＮＡ不含ヒストン及びＮＥＴ関連ヒストンの両方によって媒介される病理を阻害する一方、ＭＴＳは、ＤＮＡ不含ヒストンの傷害効果を優先的に阻害するという仮説を立てた。この解釈に対する支持は、ＡＰＡＣＨＥ ＩＩスコアと高度に相関するレベルにおいて、^３Ｈ－チミジン取込み（図８ａ、ｂ）によって測定されるＨＭＥＣ－１増殖を阻害することを本発明者らが発見した敗血症患者に由来する血清を使用して得られた（図９ａ）。この相関関係は、ＡＰＡＣＨＥ ＩＩスコアと血液循環ＤＮＡレベルとの間に観察されたものよりも強力であった（図９ｂ）。患者５に由来する阻害性の高い血清の更なる分析により、この細胞毒性活性は、ＤＮアーゼＩに感度が高く、やはりまたヒストン３及び４に特異的なポリクローナル抗体によって完全に阻害されることが明らかになった（図９ｃ）。このようなデータは、ＮＥＴが敗血症患者の血清の抗増殖作用を媒介することと一致する。最後に、本発明者らは、ＣＢＳが、１０名のほとんど阻害性の敗血症患者の血清の抗増殖活性をかなり無効化する一方、ＭＴＳは無効化しないことを見出した（図９ｄ）。したがって、これらの結果は、ＭＴＳが遊離ヒストン阻害剤となること、及びｍＣＢＳ／ＣＢＳは、ＤＮＡ不含ヒストン及びＮＥＴ関連ヒストンの両方により媒介される病理を阻害することと完全に一致する。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【手続補正書】

【提出日】2021-08-26

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＮＥＴによって媒介される病気の処置又は予防における化合物の使用であって、前記化合物が、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩を含む、使用。

【請求項2】

前記ＮＥＴによって媒介される病気が、以下に限定されないが、（ａ）例えば、敗血症（細菌、ウイルス、真菌、寄生生物、プリオンによって誘発される敗血症を含む）等の感染、又は手術、外傷、出血、熱傷、急性膵炎及び急性腎傷害を含む非感染性誘発因子に対する全身性炎症反応、
（ｂ）例えば、粥状動脈硬化、血管の自然破裂、血管への外傷性傷害に起因する動脈の閉塞後の且つ心臓の及び移植と関連するＩＲＩを含む局所組織レベルでの低酸素症、又は例えば溺死、ガス曝露若しくは心肺停止に起因する呼吸停止後の、且つ例えば急性呼吸促迫症候群、慢性閉塞性肺疾患及び薬剤介在組織傷害等の病気を含む全身レベルでの低酸素症、
（ｃ）粥状動脈硬化、凝血及び血栓症（例えば、深部静脈血栓症）等の、例えば循環器疾患又は慢性循環器疾患等の止血又は血管閉塞、
（ｄ）自己免疫疾患状態及び炎症疾患状態、例えば多発性硬化症、過剰炎症疾患状態、全身性エリテマトーデス、脊椎関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、腸炎性関節炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、過敏性腸疾患、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、小血管の破壊及び炎症によって特徴付けられる、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連血管炎（ＡＡＶ）（多発性血管炎を伴う肉芽腫症、多発性血管炎及び顕微鏡的多発血管炎を伴う好酸球性肉芽腫症など）、家族性地中海熱、筋萎縮性側索硬化症、シェーグレン症候群、早期関節炎、ウイルス性関節炎、乾癬、加齢に伴う臓器線維症、特発性肺線維症、若年性糖尿病（Ｉ型）、糖尿病（２型）、抗リン脂質抗体症候群及び様々な中枢神経系疾患（ハンチントン病など）を含む群から選択されるか、又は前記ＮＥＴによって媒介される病気が、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態又は疾患である、請求項１に記載の使用。

【請求項3】

前記その還元末端において小さな非荷電置換基で改変されている硫酸化セロビオシドが、

【化1】

（式中、
Ｒ１は、小さい非荷電グリコシド結合置換基であり、又はＲ１は、Ｏ－又はＳ－（Ｃ_１～６）アルキルであり、又はＲ１は、メトキシ基又はエトキシ基であり、
Ｒ２～Ｒ８は、小さい非荷電Ｏ結合置換基又はサルフェート基からそれぞれ独立して選択されるか、又はＲ２～Ｒ８は、それぞれ、サルフェート基である）
である一般構造を有するか、又は
前記化合物が、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖であるか、又は
前記化合物が、ナトリウムβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートである、請求項１又は２に記載の使用。

【請求項4】

ＮＥＴによって媒介される病気を処置若しくは予防する、あるいは敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態又は疾患を処置又は予防する方法であって、対象に、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を投与することを含む方法。

【請求項5】

前記ＮＥＴによって媒介される病気が、以下に限定されないが、（ａ）例えば、敗血症（細菌、ウイルス、真菌、寄生生物、プリオンによって誘発される敗血症を含む）等の感染、又は手術、外傷、出血、熱傷、急性膵炎及び急性腎傷害を含む非感染性誘発因子に対する全身性炎症反応、（ｂ）例えば、粥状動脈硬化、血管の自然破裂、血管への外傷性傷害に起因する動脈の閉塞後の且つ心臓の及び移植と関連するＩＲＩを含む局所組織レベルでの低酸素症、又は例えば溺死、ガス曝露若しくは心肺停止に起因する呼吸停止後の、且つ例えば急性呼吸促迫症候群、慢性閉塞性肺疾患及び薬剤介在組織傷害等の病気を含む全身レベルでの低酸素症、（ｃ）粥状動脈硬化、凝血及び血栓症（例えば、深部静脈血栓症）等の、例えば循環器疾患又は慢性循環器疾患等の止血又は血管閉塞、（ｄ）自己免疫疾患状態及び炎症疾患状態、例えば多発性硬化症、過剰炎症疾患状態、全身性エリテマトーデス、脊椎関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、腸炎性関節炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、過敏性腸疾患、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、小血管の破壊及び炎症によって特徴付けられる、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連血管炎（ＡＡＶ）（多発性血管炎を伴う肉芽腫症、多発性血管炎及び顕微鏡的多発血管炎を伴う好酸球性肉芽腫症など）、家族性地中海熱、筋萎縮性側索硬化症、シェーグレン症候群、早期関節炎、ウイルス性関節炎、乾癬、加齢に伴う臓器線維症、特発性肺線維症、若年性糖尿病（Ｉ型）、糖尿病（２型）、抗リン脂質抗体症候群及び様々な中枢神経系疾患（ハンチントン病など）を含む群から選択されるか、又は前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患が、対象におけるＮＥＴによって媒介される病理によって引き起こされ、及び／又はそれによって媒介され、及び／又はそれを伴い、及び／又はそれと関連し、且つ前記方法が、対象における前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩの状態又は疾患を処置又は予防するのに十分である、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量を対象に投与することを含む、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

ａ）前記医学的状態又は疾患が、対象におけるＮＥＴの放出によって引き起こされる、及び／又はそれによって媒介される、及び／又はそれを伴い、及び／又はそれと関連する、及び／又は
ｂ）前記改変されたポリアニオン性硫酸化セロビオシドの前記治療上有効な量が、対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害するのに十分である、及び／又は
ｃ）前記治療上有効な量が、（ｉ）対象の内皮に対して細胞毒性である、又は（ｉｉ）対象における内皮機能障害の一因となる、又は（ｉｉｉ）対象における血小板を活性化させることによって凝血を開始させる、又は（ｉｖ）対象において赤血球脆弱性及びその結果としての貧血を誘発するＮＥＴを減少させるか、最小限に抑えるか又は阻害するのに十分である、請求項４又は５に記載の方法。

【請求項7】

ａ）単回用量において、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又は前記その薬学的に許容される塩の前記治療上有効な量を投与すること、又は
ｂ）多回用量において、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又は前記その薬学的に許容される塩の前記治療上有効な量を投与すること、又は
ｃ）前記処置される医学的状態又は疾患のための補助的処置として、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は別の形態の医学的介入からなる群から選択される第２の活性剤を同時に又は共時的に前記対象に投与すること
を含み、及び／又は
前記第２の活性剤が、１種又は複数の抗炎症剤を含む、請求項４～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を有する、又はそれらを有することが疑われる、又はそれらを発症するリスクにある対象における、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置又は予防することを含む、請求項４～７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

ＮＥＴによって媒介される病気の処置又は予防のための、
ａ）その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩を少なくとも含む治療用組成物、又は
ｂ）その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩、並びに薬学的に許容される担体、添加剤及び／又は希釈剤を少なくとも含む医薬組成物
の使用。

【請求項10】

対象における敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置又は予防するための薬物の製造のための、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量の使用。

【請求項11】

前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患が、
ａ）前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理、及び／又は
ｂ）前記対象におけるＮＥＴの放出、及び／又は
ｃ）前記対象における炎症又は炎症反応後のＮＥＴの放出
によって引き起こされる、及び／又はそれらによって媒介される、及び／又はそれらを伴う、及び／又はそれらと関連する、請求項１０に記載の使用。

【請求項12】

ａ）前記ＮＥＴが、前記対象における内皮に対して細胞傷害性となる、且つ／又は前記対象における内皮機能障害の一因となる、及び／又は
ｂ）前記薬物が、前記対象における、ＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害する、及び／又は
ｃ）前記薬物が、前記対象における前記内皮に対してＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害する、請求項１０又は１１に記載の使用。

【請求項13】

前記薬物が、
ａ） 前記対象への単回用量投与のために製剤化されている、又は
ｂ） 前記対象への多回用量投与のために製剤化されている、又は
ｃ） 前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは疾患のための補助的処置としての、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は別の形態の医学的介入からなる群から選択されるか、又は１種若しくは複数の抗炎症剤を含む、第２の活性剤の同時の又は付随する前記対象への投与のために製剤化されている、請求項１０～１２のいずれか１項に記載の使用。

【請求項14】

前記薬物が、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を有するか又は有する疑いがある対象において、又はそれらを発症するリスクにある対象において、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置又は予防するためのものである、請求項１０～１３のいずれか１項に記載の使用。

【請求項15】

対象における敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患の処置又は予防のための、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又はその薬学的に許容される塩の治療上有効な量の使用。

【請求項16】

前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患が、
ａ）前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理、及び／又は
ｂ）前記対象におけるＮＥＴの放出、及び／又は
ｃ）前記対象における炎症又は炎症反応後のＮＥＴの放出
によって引き起こされる、及び／又はそれらによって媒介される、及び／又はそれらを伴う、及び／又はそれらと関連し、
場合により更に、前記ＮＥＴが、（ｉ）対象における内皮に対して細胞毒性である、又は（ｉｉ）対象における内皮機能障害の一因となる、又は（ｉｉｉ）対象における血小板を活性化させることによって凝血を開始させる、又は（ｉｖ）対象において赤血球脆弱性及びその結果としての貧血を誘発する、請求項１５に記載の使用。

【請求項17】

その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド若しくは前記その薬学的に許容される塩の前記治療上有効な量が、前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害するのに十分であり、且つ／又は前記使用が、前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害する、及び／又は前記使用が、前記対象における内皮に対してＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害する、請求項１５又は１６に記載の使用。

【請求項18】

前記使用が、
ａ）前記対象における前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは疾患の前記処置又は予防における、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又は前記その薬学的に許容される塩の前記治療上有効な量の単回用量の使用、又は
ｂ）前記対象における前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは疾患の前記処置又は予防における、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又は前記その薬学的に許容される塩の前記治療上有効な量の多回用量の使用、又は
ｃ）その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド又は前記その薬学的に許容される塩の前記治療上有効な量、及び前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは疾患のための補助的処置としての、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は別の形態の医学的介入からなる群から選択されるか、又は１種若しくは複数の抗炎症剤を含む、第２の活性剤の量の使用を含む、請求項１５～１７のいずれか１項に記載の使用。

【請求項19】

敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を有する、又はそれらを有することが疑われる、又はそれらを発症するリスクにある対象における、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置又は予防することを含む、請求項１５～１８のいずれか１項に記載の使用。

【請求項20】

前記処置が、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を寛解させるか、又は阻害することを含む、又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する前記医学的状態若しくは疾患が、非敗血症状態、ＳＩＲＳ疾患状態又はＩＲＩ疾患状態である、請求項１～３、９～１９のいずれか１項に記載の使用、又は請求項４～８のいずれか１項に記載の方法。

【手続補正書】

【提出日】2022-02-24

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＮＥＴによって媒介される病気の処置又は予防のための医薬組成物であって、その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシド、又はその薬学的に許容される塩を含む、医薬組成物。

【請求項2】

前記ＮＥＴによって媒介される病気が、（ａ）敗血症（細菌、ウイルス、真菌、寄生生物、プリオンによって誘発される敗血症を含む）を含む感染、又は手術、外傷、出血、熱傷、急性膵炎及び急性腎傷害を含む非感染性誘発因子に対する全身性炎症反応、
（ｂ）粥状動脈硬化、血管の自然破裂、血管への外傷性傷害に起因する動脈の閉塞後の且つ心臓の及び移植と関連するＩＲＩを含む局所組織レベルでの低酸素症、又は溺死、ガス曝露若しくは心肺停止に起因する呼吸停止後の、且つ急性呼吸促迫症候群、慢性閉塞性肺疾患及び薬剤介在組織傷害を含む全身レベルでの低酸素症、
（ｃ）粥状動脈硬化、凝血及び血栓症（深部静脈血栓症を含む）を含む、循環器疾患又は慢性循環器疾患等の止血又は血管閉塞、
（ｄ）自己免疫疾患状態及び炎症疾患状態、多発性硬化症、過剰炎症疾患状態、全身性エリテマトーデス、脊椎関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、腸炎性関節炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、過敏性腸疾患、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、小血管の破壊及び炎症によって特徴付けられる、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連血管炎（ＡＡＶ）（多発性血管炎を伴う肉芽腫症、多発性血管炎及び顕微鏡的多発血管炎を伴う好酸球性肉芽腫症を含む）、家族性地中海熱、筋萎縮性側索硬化症、シェーグレン症候群、早期関節炎、ウイルス性関節炎、乾癬、加齢に伴う臓器線維症、特発性肺線維症、若年性糖尿病（Ｉ型）、糖尿病（２型）、抗リン脂質抗体症候群及び様々な中枢神経系疾患（ハンチントン病を含む）を含む群から選択されるか、又は
前記ＮＥＴによって媒介される病気が、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患、又は非敗血症性疾患状態、非ＳＩＲＳ疾患状態若しくは非ＩＲＩ疾患状態である、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

前記その還元末端において小さな非荷電置換基で改変されている硫酸化セロビオシドが、

【化1】

（式中、
Ｒ１は、小さい非荷電グリコシド結合置換基であり、又はＲ１は、Ｏ－（Ｃ _１～６ ）アルキル又はＳ－（Ｃ_１～６）アルキルであり、
Ｒ２～Ｒ８は、小さい非荷電Ｏ結合置換基又はサルフェート基からそれぞれ独立して選択されるか、又はＲ２～Ｒ８は、それぞれ、サルフェート基である）
である一般構造を有する、請求項１又は２に記載の医薬組成物。

【請求項4】

Ｒ１は、メトキシ基又はエトキシ基である、請求項３に記載の医薬組成物。

【請求項5】

前記その還元末端において小さな非荷電置換基で改変されている硫酸化セロビオシドが、硫酸化β－Ｏ－メチルセロビオシド二糖であるか、又はナトリウムβ－Ｏ－メチルセロビオシドサルフェートである、請求項１～４のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項6】

ａ）対象におけるＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害する効果がある、及び／又は
ｂ）（ｉ）対象の内皮に対して細胞毒性である、又は（ｉｉ）対象における内皮機能障害の一因となる、又は（ｉｉｉ）対象における血小板を活性化させることによって凝血を開始させる、又は（ｉｖ）対象において赤血球脆弱性及びその結果としての貧血を誘発するＮＥＴを減少させるか、最小限に抑えるか又は阻害する効果がある、請求項１～５のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項7】

ａ）対象への単回投与用に製剤化されているか、又は
ｂ）対象への多回投与用に製剤化されているか、又は
ｃ）前記処置される医学的状態又は疾患のための補助的処置として、抗炎症剤、抗生物質製剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤又は別の形態の医学的介入からなる群から選択される第２の活性剤を同時に又は共時的に対象に投与するために製剤化されており、及び／又は前記第２の活性剤が、１種又は複数の抗炎症剤を含む、請求項１～６のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項8】

敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を有する、又はそれらを有することが疑われる、又はそれらを発症するリスクにある対象における、敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患を処置又は予防するための、請求項１～７のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項9】

前記敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩ又は敗血症、ＳＩＲＳ若しくはＩＲＩと関連する医学的状態若しくは疾患が、
ａ）前記対象におけるＮＥＴによって媒介される病理、及び／又は
ｂ）前記対象におけるＮＥＴの放出、及び／又は
ｃ）前記対象における炎症又は炎症反応後のＮＥＴの放出
によって引き起こされる、及び／又はそれらによって媒介される、及び／又はそれらを伴う、及び／又はそれらと関連する、請求項８に記載の医薬組成物。

【請求項10】

ａ）前記ＮＥＴが、前記対象における内皮に対して細胞傷害性となる、且つ／又は前記対象における内皮機能障害の一因となる、及び／又は
ｂ）前記薬物が、前記対象における、ＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害する、及び／又は
ｃ）前記薬物が、前記対象における前記内皮に対してＮＥＴによって媒介される病理を減少させるか、最小限に抑えるか、若しくは阻害する、請求項８又は９に記載の医薬組成物。

【請求項11】

前記ＮＥＴが、（ｉ）対象における内皮に対して細胞毒性である、又は（ｉｉ）対象における内皮機能障害の一因となる、又は（ｉｉｉ）対象における血小板を活性化させることによって凝血を開始させる、又は（ｉｖ）対象において赤血球脆弱性及びその結果としての貧血を誘発する、請求項１～１０のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項12】

前記その還元末端において小さい非荷電グリコシド結合置換基で改変されているポリアニオン性硫酸化セロビオシドの水性溶液を含む、請求項１～１１のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項13】

緩衝系を含む、請求項１～１２のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項14】

リン酸緩衝系を含む、請求項１～１３のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項15】

初期ｐＨ７．５を呈する量の緩衝系で製剤化されている、請求項１～１４のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【国際調査報告】