特表 2022-530752 フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物、その調製方法、医薬組成物および使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-07-01

(54)【発明の名称】フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物、その調製方法、医薬組成物および使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 47/69 20170101AFI20220624BHJP

   A61K 31/12 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 31/05 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 31/12 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 39/06 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 5/00 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 9/12 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 3/06 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 9/10 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 19/10 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20220624BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 31/353 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 31/352 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 31/343 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 9/06 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 9/02 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 9/10 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 9/12 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 9/16 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 9/20 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 9/48 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 9/70 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 47/24 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 47/44 20170101ALI20220624BHJP

   A61K 47/14 20060101ALI20220624BHJP

   A61K 47/10 20060101ALI20220624BHJP

【ＦＩ】

A61K47/69

A61K31/12

A61K31/05

A61P31/04

A61P31/12

A61P29/00

A61P37/08

A61P37/02

A61P35/00

A61P39/06

A61P43/00 107

A61P5/00

A61P9/12

A61P3/06

A61P9/10 101

A61P25/28

A61P19/10

A61P1/16

A61P31/14

A61K31/353

A61K31/352

A61K31/343

A61K9/06

A61K9/02

A61K9/08

A61K9/10

A61K9/12

A61K9/14

A61K9/16

A61K9/20

A61K9/48

A61K9/70 401

A61K47/24

A61K47/44

A61K47/14

A61K47/10

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021560466

(86)(22)【出願日】2020-04-08

(85)【翻訳文提出日】2021-10-05

(86)【国際出願番号】 CN2020083837

(87)【国際公開番号】W WO2020207417

(87)【国際公開日】2020-10-15

(31)【優先権主張番号】201910278955.6

(32)【優先日】2019-04-09

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＲＩＴＯＮ

(71)【出願人】

【識別番号】521442176

【氏名又は名称】北京五和博澳薬業股▲フン▼有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＢＥＩＪＩＮＧ ＷＥＨＡＮＤ－ＢＩＯ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＣＯ．， ＬＴＤ

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ． ３０ Ｔｉａｎｆｕ Ｓｔｒｅｅｔ Ｄａｘｉｎｇ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｂａｓｅ， Ｚｈｏｎｇｇｕａｎｃｕｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐａｒｋ Ｂｅｉｊｉｎｇ １０２６００ Ｃｈｉｎａ

(71)【出願人】

【識別番号】521439268

【氏名又は名称】中国医学科学院薬物研究所

【氏名又は名称原語表記】ＩＮＳＴＩＴＵＴＥ ＯＦ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ， ＣＨＩＮＥＳＥ ＡＣＡＤＥＭＹ ＯＦ ＭＥＤＩＣＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥ ＆ ＰＥＫＩＮＧ ＵＮＩＯＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＣＯＬＬＥＧＥ

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ． １ Ｘｉａｎ Ｎｏｎｇ Ｔａｎ Ｓｔｒｅｅｔ， Ｘｉｃｈｅｎｇ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００５０ Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】110002664

【氏名又は名称】特許業務法人ナガトアンドパートナーズ

(72)【発明者】

【氏名】劉玉玲

(72)【発明者】

【氏名】廖恒鋒

(72)【発明者】

【氏名】高越

(72)【発明者】

【氏名】董武軍

(72)【発明者】

【氏名】劉志華

(72)【発明者】

【氏名】王邦源

(72)【発明者】

【氏名】張運

(72)【発明者】

【氏名】馮遇

(72)【発明者】

【氏名】周君卓

(72)【発明者】

【氏名】劉▲ロ▼

(72)【発明者】

【氏名】葉軍

(72)【発明者】

【氏名】楊艶芳

(72)【発明者】

【氏名】夏学軍

【テーマコード（参考）】

4C076

4C086

4C206

【Ｆターム（参考）】

4C076AA03

4C076AA06

4C076AA09

4C076AA11

4C076AA16

4C076AA24

4C076AA30

4C076AA31

4C076AA36

4C076AA53

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4C076BB01

4C076BB11

4C076BB21

4C076BB27

4C076BB29

4C076BB31

4C076CC01

4C076CC04

4C076CC07

4C076CC09

4C076CC11

4C076CC16

4C076CC27

4C076CC29

4C076CC31

4C076CC35

4C076DD08F

4C076DD09F

4C076DD37E

4C076DD38E

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4C076DD45F

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4C076GG41

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4C086MA16

4C086MA22

4C086MA23

4C086MA27

4C086MA28

4C086MA31

4C086MA32

4C086MA35

4C086MA37

4C086MA41

4C086MA52

4C086MA55

4C086MA63

4C086MA66

4C086NA11

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4C086ZA36

4C086ZA45

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4C086ZA97

4C086ZB07

4C086ZB11

4C086ZB13

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4C086ZB33

4C086ZB35

4C086ZC01

4C086ZC33

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4C206NA11

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4C206ZB07

4C206ZB11

4C206ZB13

4C206ZB26

4C206ZB33

4C206ZB35

4C206ZC01

4C206ZC33

4C206ZC41

(57)【要約】

フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を中間体とすることに基づくフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物であり、フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体、油相、乳化剤および乳化助剤を含み、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤は、バイカレイン、プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、およびレスベラトロールから選ばれる１種または複数種を含む。前記自己乳化組成物は、安定性が良く、薬剤負荷が高く、バイオアベイラビリティが高い等の有益な効果を有する。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体、油相、乳化剤および乳化助剤を含み、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤は、バイカレイン、プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、およびレスベラトロールから選ばれる１種または複数種を含み、
好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤は、バイカレイン、プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、およびレスベラトロール以外の他のフラボノイドポリフェノール系薬剤を含んでもよく、前記他のフラボノイドポリフェノール系薬剤は、ウォゴニン、フェルラ酸、カテキン、マグノロール、ホノキオール、アピゲニン、ヘスペレチン、ロテノン、イソババカルコン、オーロイシジン、デルフィニジン、ギンクゲチンから選ばれる１種または複数種であり、
好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤は、バイカレイン、プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、またはレスベラトロールであり、
好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の薬剤負荷は１０～１１０ｍｇ／ｇであり、１０～１００ｍｇ／ｇであることが好ましく、
好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の粒径は１０～１０００ｎｍである、ことを特徴とするフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項2】

前記フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体において、フラボノイドポリフェノール系薬剤とリン脂質との質量比は１：１～１：１５であり、１：１～１：８であることが好ましい、ことを特徴とする請求項１に記載のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項3】

前記リン脂質は、天然リン脂質、合成リン脂質材料から選ばれる１種または複数種であり、
好ましくは、前記天然リン脂質は、大豆リン脂質および卵黄リン脂質から選ばれる１種または複数種を含み、
好ましくは、前記合成リン脂質は、ホスホグリセリド、スフィンゴミエリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、グリセロリン脂質酸、ジステアロイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、ジミリストイルホスファチジルコリンから選ばれる１種または複数種を含み、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、グリセロリン脂質酸から選ばれる１種または複数種であることが好ましい、ことを特徴とする請求項１または２に記載のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項4】

前記油相は、植物油、植物油誘導体から選ばれる１種または複数種であり、
好ましくは、前記植物油は、大豆油、トウモロコシ油、オリーブ油、ヤシ油、落花生油、ツバキ油、ヒマシ油から選ばれる１種または複数種を含み、
好ましくは、前記植物油誘導体は、オレイン酸ソルビタン、オレイン酸グリセリル、リノール酸グリセリル、オレイン酸ポリエチレングリコールグリセリル、モノリノール酸グリセリル、オレイン酸エチル、リノール酸エチル、Ｃ８／Ｃ１０モノグリセリド、ヤシ油Ｃ８／Ｃ１０ジグリセリド、ヤシ油Ｃ８／Ｃ１０トリグリセリド、カプリル酸トリグリセリド、カプリル酸ジグリセリド、カプリル酸モノグリセリド、カプリン酸モノグリセリド、カプリン酸ジグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、カプリル酸／カプリン酸モノグリセリド、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、リノール酸ポリエチレングリコールグリセリル、ラウリン酸ポリエチレングリコールグリセリル、モノカプリル酸プロピレングリコールから選ばれる１種または複数種を含み、
好ましくは、前記油相は、大豆油、ヒマシ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリルから選ばれる１種または複数種である、ことを特徴とする請求項１～３のいずれか１項に記載のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項5】

前記乳化剤は、カプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリル、ポリエチレングリコール、ツイーン、スパン８０、オレイン酸ポリエチレングリコールグリセリル、リノール酸ポリエチレングリコールグリセリル、リン脂質、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルから選ばれる１種または複数種であり、
カプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリル、ツイーン８０、ツイーン８５、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル、オレイン酸ポリエチレングリコールグリセリルのうちの１種または複数種であることが好ましい、ことを特徴とする請求項１～４のいずれか１項に記載のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項6】

前記乳化助剤は、エタノール、プロピレングリコール、プロピレンカーボネート、エチレングリコールモノエチルエーテル、グリセロールフルフラール、ジメチルイソソルビド、モノカプリル酸プロピレングリコール、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ポリエチレングリコール、グリセリン、カプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリル、ベンジルアルコールから選ばれる１種または複数種であり、
ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ポリエチレングリコール４００、エタノール、モノカプリル酸プロピレングリコールのうちの１種または複数種であることが好ましい、ことを特徴とする請求項１～５のいずれか１項に記載のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項7】

油相と乳化剤と乳化助剤との３者の総質量比を１００％として計算すると、油相は１０％～５０％（好ましくは、２０％～４０％）であり、乳化剤は３０％～６０％（好ましくは、４０％～６０％）であり、乳化助剤は２０％～６０％（好ましくは、３０％～５０％）である、ことを特徴とする請求項１～６のいずれか１項に記載のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項8】

（１）フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体の調製：フラボノイドポリフェノール系薬剤およびリン脂質を有機溶剤に溶解させ、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥して取得することであって、
好ましくは、前記有機溶剤は、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、メタノール、アセトン、エタノール、無水エタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、イソブタノール、ｔ－ブタノール、エチルエーテル、メチルエチルエーテル、ジオキサン、ブタノン、石油エーテル、ヘキサン、シクロヘキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、ＤＭＳＯ、ＤＭＦから選ばれる１種または複数種であり、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、シクロヘキサン、ＤＭＳＯ、ＤＭＦのうちの１種または複数種であることが好ましいステップと、
（２）フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の調製：ステップ（１）で得られたフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体と、油相、乳化剤および乳化助剤とを任意の順序で十分に混合させることであって、
好ましくは、ステップ（１）で得られたフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体と、油相、乳化剤および乳化助剤とを直接十分に混合させ、
または、まず、油相、乳化剤および乳化助剤を均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を調製し、その後、ステップ（１）で得られたフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を調製されたブランクの自己乳化濃縮液に加え、十分に混合させ、
または、ステップ（１）で得られたフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を、油相、乳化剤、または乳化助剤のうちのいずれかに溶解してから、別の２種の成分を加えて十分に混合させるステップと、
を含む、ことを特徴とする請求項１～７のいずれか１項に記載のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の調製方法。

【請求項9】

請求項１～７のいずれか１項に記載のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物と、任意に医薬的に許容される補助材料とを含み、
好ましくは、医薬組成物の剤形は、経口製剤、注射製剤、経皮投与製剤、粘膜投与製剤、経肺吸入投与製剤、または腸管投与製剤を含み、
好ましくは、医薬組成物の剤形は、点滴剤、オーラル液体、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、練薬、フィルム剤、ゲル剤、散剤、乳剤、滴下ピル、坐剤、エアゾール剤、スプレー剤、粉末エアゾール剤、貼付剤、接着プラスター、液剤、軟膏剤、またはクリーム剤を含む、ことを特徴とする医薬組成物。

【請求項10】

請求項１～７のいずれか１項に記載のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物または請求項９に記載の医薬組成物の、抗菌、抗ウイルス、抗炎症、アレルギー反応の抑制、免疫調節、抗腫瘍、酸化防止、抗老化、紫外線照射防止、ホルモン欠乏の治療、抗高血圧、血中脂質の低減、抗アテローム性動脈硬化症、抗老人性認知症、手足口病の治療、抗骨粗鬆症、または肝臓保護用の薬剤の調製における使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物、その調製方法、医薬組成物および使用に関し、医薬分野に属する。

【背景技術】

【0002】

フラボノイドポリフェノール系化合物は、現在、一般的に以下の３種類に分けられる。（１）小分子のフェノール酸類物質であって、例えば、サリチル酸、桂皮酸、パラヒドロキシ桂皮酸コーヒー酸、フェルラ酸、クロロゲン酸等である。（２）タンニンであって、ポリフェノールのポリマーであり、縮合タンニンおよび加水分解タンニンに分けられ、前者は、フラバノール類物質がＣ４～Ｃ６またはＣ４～Ｃ８結合により連結された異なる重合度のポリフェノールであり、プロアントシアニジンとも呼ばれ、後者は、没食子酸またはエラグ酸とグルコース等の糖類におけるヒドロキシ基とがエステル化して形成される。（３）ポリヒドロキシフラボン類であって、１種は、植物色素の１つのアントシアニン（アントシアンの配糖体である）であり、他種は、狭義のフラボンおよびその配糖体であり、アグリコンは、フラボン、フラボノール、フラバノン、フラバノノール、イソフラボン、イソフラバノン、カルコン、オーロン、フラバン、アントシアン、ビフラボン、フラボノイドを含む（非特許文献１参照）。

【0003】

研究により、フラボノイドポリフェノール系薬剤は、多方面の薬理作用を持ち、例えば、抗腫瘍、血液凝固抑制、抗菌、ホルモン調節、酸化防止、抗老化、抗アテローム性動脈硬化症、抗感染、抗骨粗鬆症、抗ウイルス、抗微生物、血中脂質調節および血糖降下等の多方面で良好な効果を持つことが分かった。

【0004】

理化学的性質の制限により、フラボノイドポリフェノール系薬剤の経口製剤はバイオアベイラビリティが悪く、経口治療の効果が良くない。そのため、製剤学的技術により経口投与の血中濃度（Ｃｍａｘ）および血中暴露量（ＡＵＣ）を高めることは、重要な臨床的な意義を有する。

【0005】

自己乳化型ドラッグデリバリーシステム（ＳＥＤＤＳ）は、油相、乳化剤および乳化助剤で形成された均一な混合物であり、薬剤の担持およびデリバリーツールとして使用でき、経口投与後に、胃腸管の蠕動および胃腸液の水性媒体環境で、迅速に自己乳化して水中油型乳化滴を形成することができる。

【0006】

王至秦らは、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリルを油相とし、ポリオキシエチレン４０ヒマシ油を乳化剤とし、１，２－プロピレングリコールを乳化助剤とし、プロアントシアニジン原料薬が担持された自己マイクロエマルジョンを調製し、３者の質量比が１：３：１である場合、乳化が速く、薬剤負荷（ｄｒｕｇ ｌｏａｄｉｎｇ）が１０％であり、配合比でポリオキシエチレン４０ヒマシ油、１，２－プロピレングリコールおよびトリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリルを秤量し、３７℃にて水浴で撹拌して均一に混合し、更に処方量のプロアントシアニジンを加えて混合して溶解させ、３７℃にて１ｈのバランスを取ってプロアントシアニジンの自己マイクロエマルジョンを取得し、水で１００倍に希釈した後、平均粒径が（６３．６±０．７）ｎｍであることを報告した（非特許文献２参照）。

【0007】

張偉玲らは、オレイン酸ポリエチレングリコールグリセリルを油相とし、ポリオキシエチレン３５ヒマシ油を乳化剤とし、ジエチレングリコールモノエチルエーテルを乳化助剤とし、３者の割合が２７．０：５５．６：１７．４（ｗ：ｗ：ｗ）であり、過剰のケルセチン原料薬と油相、乳化剤および乳化助剤とを６０℃の恒温水浴に置いて磁気攪拌し、ケルセチンの過飽和溶液を調製し、室温で２４ｈ振とうしてバランスを取った後、４０００ｒ／ｍｉｎで１０ｍｉｎ遠心し、上清を取ると、ケルセチン原料薬が担持された自己マイクロエマルジョンを取得し、最大薬量が６７．８７ｍｇ／ｇであり、水で５０倍に希釈した後、平均粒径が２５．２６ｎｍであることを報告した（非特許文献３参照）。

【0008】

李沢民らは、中鎖脂肪酸（ＭＣＴ）を油相とし、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ４０）を乳化剤とし、ポリエチレングリコール－４００（ＰＥＧ－４００）を乳化助剤とし、３者の割合がＭＣＴ：ＰＥＧ－４００：Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ４０＝２：２：６（ｗ／ｗ）であり、過剰のクルクミン原料薬と油相、乳化剤および乳化助剤とを均一に混合し、５ｍｉｎ旋回させた後、３７℃にて遮光下で４８ｈ揺らし、サンプルを取り出して１２０００ｒ／ｍｉｎで１０ｍｉｎ遠心し、上清を精密に取ると、クルクミン原料薬が担持された自己マイクロエマルジョンを調製し、その溶解度を著しく向上させ、最大薬剤負荷が５５．３０ｍｇ／ｇであり、水で１００倍に希釈した後、平均粒径が１１．８ｎｍであることを報告した（非特許文献４参照）。

【0009】

曹▲ロ▼らは、トリアセチンを油相とし、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬおよびＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ４０を乳化剤とし、イソプロパノールを乳化助剤とし、割合がトリアセチン：Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ：Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ４０：イソプロパノール＝２２：２７：１３．５：３７．８（ｗ／ｗ）であり、３７℃の水浴条件で、磁気攪拌して均一に混合させ、ブランクの自己マイクロエマルジョンを取得し、適量のレスベラトロールをブランクの自己マイクロエマルジョンに入れ、超音波で溶解させると、レスベラトロール自己マイクロエマルジョンを取得することができ、薬剤負荷が４５ｍｇ／ｇであり、水で１００倍に希釈した後、平均粒径が１５ｎｍであることを報告した（非特許文献５参照）。

【0010】

文献２～５に記載の方法でプロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、およびレスベラトロールの自己マイクロエマルジョンをそれぞれ調製し、それらを４℃および室温でそれぞれ５日間、1ヶ月および２ヶ月放置し、外観性状の変化を観察し、それらの物理安定性を考察した結果、文献２～５の処方で調製されたフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己マイクロエマルジョン混合物には、いずれも顕著な安定性欠陥が存在し、４℃で放置した後、半固体を形成したり析出したりしやすく、室温でしばらく放置すると薬剤析出が発生することが分かった。

【0011】

また、柯学らは、Ｍｉｇｌｙ－ｃｏｌ８１２／Ｍａｉｓｉｎｅ３５－１（１：１）を油相とし、ＣｒｅｍｐｈｏｒＥＬ３５／Ｌａｂｒａｓｏｌ（２：１）を乳化剤とし、Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ Ｐを乳化助剤とし、処方でブランクのＳＭＥＤＤＳを調製し、過剰のバイカレインを加え、３７℃の水浴で撹拌して溶解させ、２４ｈ後に取り出し、１２０００ｒ・ｍｉｎ^－１で１５ｍｉｎ高速遠心し、上清を吸い出すと、バイカレイン原料薬が担持された自己マイクロエマルジョンを調製し、最大薬剤負荷が（１８．１±１．１１）ｍｇ／ｇであり、それを精製水で１００倍に希釈した後、３ｍｉｎ以内で安定して均一なマイクロエマルションを形成し、形成されたマイクロエマルションの粒径が２７．２±０．５６ｎｍであり、バイカレイン原料薬（強制経口投与）と比べ、バイカレインの自己マイクロエマルジョンをラットに経口投与したＣｍａｘが３．１倍に上昇し、相対的なバイオアベイラビリティ（ＡＵＣ）が３．７７倍に増加することを報告した（非特許文献６参照）。

【0012】

Ｗｅｎｌｉ Ｌｉｕらは、Ｃａｐｒｙｌｉｃ ｃａｐｒｉｃ ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ（ＯＤＯ、２５％）を油相とし、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ４０（５３．５７％）を乳化剤とし、Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ Ｐ（２１．４３％）を乳化助剤とし、過剰のバイカレイン原料薬と油相、乳化剤および乳化助剤とを３７℃の条件で４８ｈ撹拌し、更に混合物を１２０００ｒｐｍで２０ｍｉｎ遠心し、上清を取り、最終的にバイカレイン原料薬が担持された自己マイクロエマルジョンを調製し、最大薬剤負荷が（３２．０２）ｍｇ／ｇであり、被水後の乳化粒径が２７．５４ｎｍであり、バイカレイン原料薬の懸濁液（０．５％のカルボキシメチルセルロースナトリウム溶液に分散されている）と比べ、バイカレインの自己マイクロエマルジョンをラットに経口投与したＣｍａｘが１．６倍に上昇し、相対的なバイオアベイラビリティ（ＡＵＣ）が２．０１倍に増加することを報告した（非特許文献７参照）。

【0013】

非特許文献６および非特許文献７で調製された自己マイクロエマルジョンは、いずれもバイカレインの経口バイオアベイラビリティを著しく向上させるが、検証実験により、依然として以下のような欠陥が存在することが分かった。

【0014】

（１）調製されたバイカレインの自己マイクロエマルジョン混合物は、４℃で放置した後、半固体を形成したり析出したりしやすく、室温で１ヶ月放置すると薬剤析出が発生する。

【0015】

（２）所定の油相、乳化剤、乳化助剤の条件で、バイカレインの薬剤負荷は更に向上しにくく、臨床治療投与量の薬剤負荷に対する要求を満たすことができない。

【0016】

（３）バイカレイン原料薬と比べ、ＣｍａｘおよびＡＵＣの増加幅が限られている。

【0017】

また、劉昌順らは、バイカリン（ＢＧ）、バイカリンリン脂質複合体（ＢＧＰＣ）、バイカリンが直接担持された自己マイクロエマルジョン投与システム（ＢＧ－ＳＭＥＤＤＳ）、バイカリン－リン脂質複合体を中間体とする自己マイクロエマルジョン投与システム（ＢＧＰＣ－ＳＭＥＤＤＳ）の、ラット体内での薬物動態学を比較した結果、ＢＧと比べ、ＢＧＰＣ、ＢＧ－ＳＭＥＤＤＳ、ＢＧＰＣ－ＳＭＥＤＤＳの血漿濃度がいずれも増加し、ＣｍａｘがそれぞれＢＧの３．８９、１１．０１および６．７０倍であり、ＡＵＣ_{０→２４ｈ}がそれぞれＢＧの２．４６倍、２．８６倍および２．３８倍であり、即ち、Ｃｍａｘは、バイカリンの自己マイクロエマルジョン＞バイカリン－リン脂質複合体の自己マイクロエマルジョン＞バイカリン－リン脂質複合体であり、ＡＵＣ_{０→２４ｈ}は、バイカリンの自己マイクロエマルジョン＞バイカリン－リン脂質複合体＞バイカリン－リン脂質複合体の自己マイクロエマルジョンであることが分かった。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0018】

【非特許文献1】ポリフェノール系化学成分の腸管でのバイオトランスフォーメーションについての研究の進展［Ｃ］．中華漢方医薬学会の漢方薬化学部の第８回の学術年会、２０１３

【非特許文献2】漢方薬、２０１３、３５（１２）：２７４９～２７５２

【非特許文献3】山東大学学報、２０１６、５４（３）：４１～４９

【非特許文献4】成都医学院学報、２０１７、１２（２）：１５５～５９

【非特許文献5】曹▲ロ▼．レスベラトロールの研究調製［Ｄ］．河北：河北医科大学、２０１４

【非特許文献6】中国新薬雑誌、２０１０、１９（５）：３７１～３９５

【非特許文献7】Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ、２０１２、８３：１５３２～１５３９

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0019】

理想的な薬剤積載自己乳化組成物は、以下の条件を満たさなければならない。（１）冷蔵または室温の条件で長期間貯蔵されても、外観が均一な清澄な透明液体であり、分層が発生してはならない。（２）冷蔵または室温の条件で長期間貯蔵されても、外観が均一な清澄な透明液体であり、凝固または沈殿が発生してはならず、使用前の「薬剤混合物を加熱して融解する」という処理を回避し、薬剤の分解を減少する。（３）自己乳化の効率が高く、胃腸環境を模擬して一定量の水を加えて希釈すると、迅速に自己乳化してナノスケールの乳化滴を形成することができる。（４）自己乳化混合物を直接経口投与した後、胃腸で自発的に乳化して形成された乳化滴は、ナノスケール（１～１０００ｎｍ）でなければならず、ミクロンスケール（＞１μｍ）であってはならない。

【0020】

薬剤積載ＳＥＤＤＳに対し、異なる薬剤によって、理化学的性質が異なることから、薬剤負荷および安定性も異なる。且つ、油相、乳化剤、乳化助剤、および割合の変化によって、いずれも薬剤負荷および自己乳化の効率に影響を及ぼし、更にその粘膜浸透性およびバイオアベイラビリティに影響を及ぼすが、このような影響は、一定の規律がないことが多い。

【0021】

本発明者は、フラボノイドポリフェノール系の薬剤製剤を鋭意検討した結果、リン脂質と、バイカレイン、プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、およびレスベラトロールから選ばれたフラボノイドポリフェノール系薬剤とでフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を調製し、これを中間体として調製された自己乳化システムは、安定性が良く、薬剤負荷が高く、バイオアベイラビリティが高い等の有益な効果を持つことを発見した。

【課題を解決するための手段】

【0022】

これに鑑み、態様１において、本発明は、
フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体、油相、乳化剤および乳化助剤を含み、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤は、バイカレイン、プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、およびレスベラトロールから選ばれる１種または複数種を含み、
好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤は、バイカレイン、プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、およびレスベラトロール以外の他のフラボノイドポリフェノール系薬剤を含んでもよく、前記他のフラボノイドポリフェノール系薬剤は、ウォゴニン、フェルラ酸、カテキン、マグノロール、ホノキオール、アピゲニン、ヘスペレチン、ロテノン、イソババカルコン、オーロイシジン、デルフィニジン、ギンクゲチンから選ばれる１種または複数種であり、
好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤は、バイカレイン、プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、またはレスベラトロールであり、
好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の薬剤負荷は１０～１１０ｍｇ／ｇであり、１０～１００ｍｇ／ｇであることが好ましく、
好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の粒径は１０～１０００ｎｍであることを特徴とするフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物を提供する。

【0023】

好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体において、フラボノイドポリフェノール系薬剤とリン脂質との質量比（ｗ／ｗ）は１：１～１：１５であり、１：１～１：８であることが好ましい。

【0024】

前記フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体は、フラボノイドポリフェノール系薬剤とリン脂質材料とで複合され、好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体の薬剤複合率は８０％以上である。

【0025】

好ましくは、前記フラボノイドポリフェノール系薬剤は、漢方薬から抽出されたフラボノイドポリフェノール系薬剤抽出物および／または化学的に合成されたフラボノイドポリフェノール系薬剤である。

【0026】

好ましくは、前記バイカレインは、人工的に合成されたバイカレインであってもよいし、植物から抽出されたバイカレイン含有量が５０％以上の有効成分であってもよいし、植物から抽出されて変換または再結晶により調製された生成物であってもよい。

【0027】

好ましくは、前記リン脂質は、天然リン脂質、合成リン脂質材料から選ばれる１種または複数種であり、
好ましくは、前記天然リン脂質は、大豆リン脂質および卵黄リン脂質から選ばれる１種または複数種を含み、
好ましくは、前記合成リン脂質は、ホスホグリセリド、スフィンゴミエリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、グリセロリン脂質酸、ジステアロイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、ジミリストイルホスファチジルコリンから選ばれる１種または複数種を含み、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、グリセロリン脂質酸から選ばれる１種または複数種であることが好ましい。

【0028】

好ましくは、前記油相は、植物油、植物油誘導体から選ばれる１種または複数種であり、
好ましくは、前記植物油は、大豆油、トウモロコシ油、オリーブ油、ヤシ油、落花生油、ツバキ油、ヒマシ油から選ばれる１種または複数種を含み、
好ましくは、前記植物油誘導体は、オレイン酸ソルビタン、オレイン酸グリセリル、リノール酸グリセリル、オレイン酸ポリエチレングリコールグリセリル（ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）１９４４ｃｓ）、モノリノール酸グリセリル（Ｍａｉｓｉｎｅ３５－１）、オレイン酸エチル、リノール酸エチル、Ｃ８／Ｃ１０モノグリセリド、ヤシ油Ｃ８／Ｃ１０ジグリセリド、ヤシ油Ｃ８／Ｃ１０トリグリセリド、カプリル酸トリグリセリド、カプリル酸ジグリセリド、カプリル酸モノグリセリド、カプリン酸モノグリセリド、カプリン酸ジグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、カプリル酸／カプリン酸モノグリセリド、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、リノール酸ポリエチレングリコールグリセリル（Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）Ｍ２１２５ＣＳ）、ラウリン酸ポリエチレングリコールグリセリル（Ｇｅｌｕｃｉｒｅ）、モノカプリル酸プロピレングリコール（Ｃａｐｒｙｏｌ ９０）から選ばれる１種または複数種を含み、
好ましくは、前記油相は、大豆油、ヒマシ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリルから選ばれる１種または複数種である。

【0029】

好ましくは、前記乳化剤は、カプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリル（ｌａｂｒａｓｏｌまたはｌａｂｒａｏｓｏｌ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ－２００、ＰＥＧ－４００、ＰＥＧ－６００、ＰＥＧ－８００（ＰＥＧの後の数字は、平均分子量を表す）を含む）、ツイーン（ツイーン２０、ツイーン２１、ツイーン４０、ツイーン６０、ツイーン６１、ツイーン８０、ツイーン８１、ツイーン８５を含み、ツイーン８０、ツイーン６０、ツイーン２０であることが好ましい）、スパン８０（ｓｐａｎ ８０）、オレイン酸ポリエチレングリコールグリセリル（ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）１９４４ｃｓ）、リノール酸ポリエチレングリコールグリセリル（Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）Ｍ２１２５ＣＳ）、リン脂質、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル（Ｘ－１００）から選ばれる１種または複数種であり、カプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリル（ｌａｂｒａｓｏｌまたはｌａｂｒａｏｓｏｌ）、ツイーン８０、ツイーン８５、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）１９４４ｃｓのうちの１種または複数種であることが好ましい。

【0030】

好ましくは、前記乳化助剤は、エタノール、プロピレングリコール、プロピレンカーボネート、エチレングリコールモノエチルエーテル、グリセロールフルフラール、ジメチルイソソルビド、モノカプリル酸プロピレングリコール（Ｃａｐｒｙｏｌ ９０）、ジエチレングリコールモノエチルエーテル（ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰまたはｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ Ｐ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ－２００、ＰＥＧ－４００、ＰＥＧ－６００、ＰＥＧ－８００（ＰＥＧの後の数字は、平均分子量を表す）を含む）、グリセリン、カプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリル（ｌａｂｒａｏｓｏｌ）、ベンジルアルコールから選ばれる１種または複数種であり、ジエチレングリコールモノエチルエーテル（ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰまたはｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ Ｐ）、ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ－４００）、エタノール、モノカプリル酸プロピレングリコール（Ｃａｐｒｙｏｌ ９０）のうちの１種または複数種であることが好ましい。

【0031】

好ましくは、油相と乳化剤と乳化助剤との３者の総質量比を１００％として計算すると、油相は１０％～５０％（好ましくは、２０％～４０％）であり、乳化剤は３０％～６０％（好ましくは、４０％～６０％）であり、乳化助剤は２０％～６０％（好ましくは、３０％～５０％）である。

【0032】

態様２において、
（１）フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体の調製：フラボノイドポリフェノール系薬剤およびリン脂質材料を有機溶剤に溶解させ、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥して取得することであって、
好ましくは、前記有機溶剤は、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、メタノール、アセトン、エタノール、無水エタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、イソブタノール、ｔ－ブタノール、エチルエーテル、メチルエチルエーテル、ジオキサン、ブタノン、石油エーテル、ヘキサン、シクロヘキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、ＤＭＳＯ、ＤＭＦから選ばれる少なくとも１種または複数種であり、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、シクロヘキサン、ＤＭＳＯ、ＤＭＦのうちの１種または複数種であることが好ましいステップと、
（２）フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の調製：ステップ（１）で得られたフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体と、油相、乳化剤および乳化助剤とを任意の順序で十分に混合させることであって、
例えば、ステップ（１）で得られたフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体と、油相、乳化剤および乳化助剤とを直接十分に混合させてもよいし、
または、まず、油相、乳化剤および乳化助剤を均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を調製し、その後、ステップ（１）で得られたフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を調製されたブランクの自己乳化濃縮液に加え、十分に混合させてもよいし、
または、ステップ（１）で得られたフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を、油相、乳化剤、または乳化助剤のうちのいずれかに溶解してから、別の２種の成分を加えて十分に混合させてもよいステップと、
を含むことを特徴とする上記フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の調製方法を提供する。

【0033】

態様３において、上記フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物および任意に医薬的に許容される補助材料を含み、
好ましくは、医薬組成物の剤形は、経口製剤、注射製剤、経皮投与製剤、粘膜投与製剤、経肺吸入投与製剤、または腸管投与製剤を含み、
好ましくは、医薬組成物の剤形は、点滴剤（ｄｒｏｐ）、オーラル液体（ｏｒａｌ ｌｉｑｕｉｄ）、錠剤、カプセル剤（軟カプセル剤、硬カプセル剤を含む）、顆粒剤、練薬（ｅｌｅｃｔｕａｒｙ）、フィルム剤、ゲル剤、散剤、乳剤、滴下ピル（ｄｒｉｐｐｉｎｇ ｐｉｌｌ）、坐剤、エアゾール剤、スプレー剤、粉末エアゾール剤、貼付剤、接着プラスター（ａｄｈｅｓｉｖｅ ｐｌａｓｔｅｒｓ）、液剤、軟膏剤、またはクリーム剤を含むことを特徴とする医薬組成物を提供する。

【0034】

医薬的に許容される補助材料は、医薬製剤分野における任意の通常の補助材料であってもよい。特定の補助材料の選択は、特定の患者を治療するための投与方式または疾患のタイプおよび状態に依存する。例えば、医薬的に許容される補助材料として薬学分野における通常の希釈剤、担体、充填剤、粘着剤、湿潤剤、崩壊剤、吸収促進剤、界面活性剤、吸着担体および潤滑剤を含んでもよい。必要な場合、医薬組成物に香料、防腐剤および甘味料を加えてもよい。

【0035】

態様４において、本発明は、上記フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物または上記医薬組成物の、抗菌、抗ウイルス、抗炎症、アレルギー反応の抑制、免疫調節、抗腫瘍、酸化防止、抗老化、紫外線照射防止、ホルモン欠乏の治療、抗高血圧、血中脂質の低減、抗アテローム性動脈硬化症、抗老人性認知症、手足口病の治療、抗骨粗鬆症、または肝臓保護用の薬剤の調製における使用を提供する。

【発明の効果】

【0036】

本発明のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物は、安定性が良く、薬剤負荷が高く、バイオアベイラビリティが高いという有益な効果を持つ。

【0037】

本発明のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物は、外観性状が均一な液体であり、薬剤負荷が１００ｍｇ／ｇ以上（Ｗフラボノイドポリフェノール系薬剤／Ｗ組成物）に達することができる。

【0038】

本発明のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物は、良好な自己乳化能力を有し、１０～１０００倍の水を加えて希釈した後、迅速に乳化して粒径１０～１０００ｎｍの乳化滴を形成することができる。

【図面の簡単な説明】

【0039】

【図1】試験例２における被験グループＡ、Ｂ、Ｃのラットの血漿中のバイカリン濃度－時間曲線図である。

【図2】試験例２における被験グループＡ、Ｂ、Ｃのラットの血漿中のバイカレイン濃度－時間曲線図である。

【発明を実施するための形態】

【0040】

以下、本発明の具体的な実施形態について詳細に説明する。ここで説明する具体的な実施形態は、本発明を例示的に説明するためのものに過ぎず、本発明を限定するものではないことが理解されるべきである。

【0041】

以下の実施例１～５において、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ法）を採用してフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体におけるフラボノイドポリフェノール系薬剤とリン脂質との複合率を測定する。

【0042】

ＨＰＬＣクロマトグラフィー条件：
カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ Ｃ１８カラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ）、
移動相：０．０５％のリン酸－メタノール（３５：６５、ｖ／ｖ）、
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ、
カラム温度：２５℃（常温）、
インジェクション量:１０μＬ
検出波長：２７５ｎｍ。

【0043】

測定方法：２４ｍｇのフラボノイドポリフェノール系薬剤の参照物質を精密に秤量し、１０ｍｌのメスフラスコに入れ、無水エタノールを加えて溶解させて定容し、１ｍｌを精密に移し取って１００ｍｌのメスフラスコに入れ、無水エタノールを加えて濃度２４μｇ／ｍｌの溶液に希釈し、参照物質溶液とする。１３５ｍｇのフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を精密に秤量し、５０ｍｌのメスフラスコに入れ、無水エタノールで溶解させて目盛りまで希釈し、振り混ぜる。１ｍｌを精密に秤量し、２５ｍｌのメスフラスコに入れ、無水エタノールを加えて溶解させて目盛りまで希釈し、振り混ぜて供試液Ａとする。１３５ｍｇのフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を精密に秤量し、５０ｍｌのメスフラスコに入れ、ｎ－ヘキサンを加えて溶解させて定容し、振り混ぜ、０．４５ｕｍの有機膜で濾過する。１ｍｌの後続の濾液（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ｆｉｌｔｒａｔｅ）を精密に移し取って２５ｍｌのメスフラスコに入れ、窒素パージにより溶剤を除去し、無水エタノールを加えて溶解させて目盛りまで希釈し、振り混ぜて供試液Ｂとする。参照液、供試液Ａおよび供試液Ｂをそれぞれ１０μｌ精密に秤量し、上記ＨＰＬＣ方法に従って測定し、クロマトグラムを記録し、ピーク面積に基づいて外部標準法でフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体の含有量を計算し、それぞれＷ_総およびＷ_複合と記す。

【0044】

複合率の計算式は、以下のとおりである。

【数1】

【0045】

実施例１：異なる薬剤脂質比（バイカレイン原料薬と大豆リン脂質との質量比）でバイカレイン－リン脂質複合体を調製した

【0046】

表１の薬剤脂質比でバイカレイン原料薬および大豆リン脂質を精密に秤量し、１０００ｍｌの回転蒸発瓶に入れ、適量のテトラヒドロフランを加えて混合させて振り混ぜ、バイカレイン原料薬とリン脂質とが完全に溶解して複合溶液が清澄になってから、１５～３０ｍｉｎ放置し、ロータリーエバポレーターに置き、４０℃で溶剤を揮散した。回転蒸発瓶内の物体が発泡してハニカム状になった後、１～２ｈ回転蒸発し続け、調製が終了した後、乾燥ボックスに入れて３ｄ乾燥してから、バイカレイン－リン脂質複合体固体を軽く掻き取り、乾燥ボックス内に入れて保存して使用に備えた。

【0047】

【表1】

【0048】

実施例２：異なる有機溶剤でバイカレイン－リン脂質複合体を調製した

【0049】

実施例１と同じ方法を採用し、違いは以下のとおりであった。バイカレイン原料薬と大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、それぞれ酢酸エチル、メタノール、アセトン、エタノール、無水エタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、イソブタノール、ｔ－ブタノール、エチルエーテル、メチルエチルエーテル、ジオキサン、ブタノン、石油エーテル、ヘキサン、シクロヘキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、ＤＭＳＯ、ＤＭＦを反応溶剤として用い、バイカレイン－リン脂質複合体を調製し、複合率を考察した。

【0050】

その結果、上記有機溶剤を反応溶剤として用いた場合、得られた全てのバイカレイン－リン脂質複合体の複合率がいずれも８０％より大きいことが分かった。

【0051】

実施例３：異なるリン脂質でバイカレイン－リン脂質複合体を調製した

【0052】

実施例１と同じ方法を採用し、違いは以下のとおりであった。バイカレイン原料薬とリン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、それぞれ卵黄リン脂質、または大豆リン脂質等のような天然リン脂質、またはホスホグリセリド、スフィンゴミエリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、グリセロリン脂質酸、ジステアロイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、またはジミリストイルホスファチジルコリンのような合成リン脂質を脂質材料として用い、バイカレイン－リン脂質複合体を調製し、複合率をそれぞれ考察した。

【0053】

その結果、上記リン脂質で調製された全てのバイカレイン－リン脂質複合体の複合率がいずれも８０％以上であることが分かった。

【0054】

実施例４：異なる源のバイカレイン原料薬でバイカレイン－リン脂質複合体を調製した

【0055】

実施例１と同じ方法を採用し、違いは以下のとおりであった。バイカレイン原料薬と大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、前記バイカレイン原料薬として、化学的に合成されたバイカレイン、または漢方薬から抽出されたバイカレイン抽出物（バイカレイン含有量≧５０％）をそれぞれ用いて一連のバイカレイン－リン脂質複合体を調製した。複合率を考察した。

【0056】

該実施例で使用された合成バイカレインは、南京沢郎バイオテクノロジー有限公司から購入された。

【0057】

該実施例で使用されたバイカレイン抽出物は、以下の方法で調製された。オウゴン粉末を２０メッシュの篩にかけ、５倍量の水を加え、３８℃で２４ｈ酵素分解し、恒量になるまで乾燥してオウゴン酵素分解粉末を取得し、更に１０倍量の異なる濃度のエタノール（１０％、３０％、５０％、７０％、１００％）をそれぞれ加え、超音波出力７０％で３回抽出し、毎回２０ｍｉｎとし、濾過した。濾液を減圧蒸留して恒量になるまで乾燥し、異なる含有量のバイカレイン抽出物を取得した。

【0058】

その結果、全てのバイカレイン／リン脂質の複合率はいずれも８０％以上であった。

【0059】

実施例５：異なるフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を調製した

【0060】

実施例１と同じ方法を採用し、違いは以下のとおりであった。プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、レスベラトロールのそれぞれと大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、一連のフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を調製した。その結果、薬剤複合率がいずれも９０％以上であることが分かり、表２に示すとおりであった。

【0061】

【表2】

【0062】

以下の実施例、比較例および試験例において、
１、得られたフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の乳化粒径は、以下のような方法で測定される。
ピペットマンで２００μｌのフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物を移し取り、２０ｍｌの蒸留水（３７℃の水浴、ゆっくりと撹拌する）にゆっくりと入れ、フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の乳化時間を記録し、乳化後の溶液を取ってレーザー粒度計でその粒径を直接測定する。
２、得られたフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の薬剤負荷は、以下のような方法で測定される。
０．５ｇのフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物を精密に秤量して１０ｍｌのメスフラスコに入れ、無水エタノールで溶解させて目盛りまで希釈し、振り混ぜる。１ｍｌを精密に秤量し、５０ｍｌのメスフラスコに入れ、９５％のエタノール（０．０２％のＶＣを含む）を加えて溶解させて目盛りまで希釈し、振り混ぜて供試品溶液とする。また、３０ｍｇのフラボノイドポリフェノール系薬剤原料薬を精密に秤量し、２５ｍｌのメスフラスコに入れ、無水エタノールを加えて溶解させて定容し、１ｍｌを精密に移し取って５０ｍｌのメスフラスコに入れ、９５％のエタノール（０．０２％のＶＣを含む）を加えて濃度２４μｇ／ｍｌの溶液に希釈し、参照物質溶液とする。供試品溶液および参照物質溶液をそれぞれ１０μｌ精密に秤量して液体クロマトグラフに注入して分離分析を行い、カラムがＡｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ Ｃ１８カラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ）であり、移動相が０．０５％のリン酸－メタノール（３５：６５、ｖ／ｖ）であり、流速が１．０ｍＬ／ｍｉｎであり、カラム温度が２５℃であり、検出波長が２７５ｎｍであった。クロマトグラムを記録し、ピーク面積に基づいて外部標準法でフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の薬剤負荷を計算する。

【0063】

実施例６：フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物に使用される油相、乳化剤、乳化助剤及び３者の割合の選別

【0064】

ａ、バイカレインの自己乳化組成物の予備的な調製
（１）バイカレインと大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、テトラヒドロフランを反応溶剤とし、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥してバイカレイン－リン脂質複合体を取得した。
（２）オレイン酸エチルを油相とし、カプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリル（ｌａｂｒａｏｓｏｌ）を乳化剤とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とした。２：５：３の割合で、油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させ、ブランクの自己乳化濃縮液を取得した。
（３）適量（ブランクの自己乳化濃縮液の重量の３０％）のステップ（１）のバイカレイン－リン脂質複合体を秤量し、ステップ（２）のブランクの自己乳化濃縮液に入れ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとした。バイカレイン－リン脂質複合体が完全に溶解した後、バイカレインの自己乳化組成物を取得した。

【0065】

その結果、調製されたバイカレインの自己乳化組成物が均一な溶液であり、２ｍｉｎ以内で完全に乳化でき、且つ、粒径が１０～１０００ｎｍの範囲内にあることが分かった。

【0066】

ｂ、異なる乳化剤でバイカレインの自己乳化組成物を調製した
上記ａ、と同じ方法でバイカレインの自己乳化組成物を調製し、違いは以下のとおりであった。ｌａｂｒａｓｏｌの代わりに、ＰＥＧ－４００、ツイーン８０、ツイーン６０、ツイーン２０、ツイーン８５、Ｓｐａｎ ８０、オレイン酸ポリエチレングリコールグリセリル（ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）１９４４ｃｓ）、リノール酸ポリエチレングリコールグリセリル（Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）Ｍ２１２５ＣＳ）、リン脂質、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル（Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００）のうちの１種、またはカプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリルとツイーン８０との組み合わせ、またはカプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリルとＰＥＧ－４００との組み合わせ、またはカプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリルとポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルとの組み合わせ、またはカプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリルとリン脂質との組み合わせ、またはツイーン８０とＰＥＧ－４００との組み合わせ、またはツイーン８０とポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルとの組み合わせ、またはツイーン８０とリン脂質との組み合わせを乳化剤とし、バイカレインの自己乳化組成物を調製した。

【0067】

その結果、調製されたバイカレインの自己乳化組成物が均一な溶液であり、２ｍｉｎ以内で完全に乳化でき、且つ、粒径が１０～１０００ｎｍの範囲内にあることが分かった。

【0068】

ｃ、異なる乳化助剤でバイカレインの自己乳化組成物を調製した
上記ａ、と同じ方法でバイカレインの自己乳化組成物を調製し、違いは以下のとおりであった。ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰの代わりに、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、プロピレンカーボネート、エチレングリコールモノエチルエーテル、グリセロールフルフラール、ジメチルイソソルビド、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ Ｐ、ＰＥＧ４００、グリセリン、ｌａｂｒａｏｓｏｌ、ベンジルアルコールのうちの１種、またはｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰとエタノールとの組み合わせ、またはｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰとプロピレングリコールとの組み合わせ、またはｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰとＰＥＧ４００との組み合わせ、またはｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰとグリセリンとの組み合わせ、またはｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰとエチレングリコールモノエチルエーテルとの組み合わせ、またはｌａｂｒａｏｓｏｌとエタノールとの組み合わせ、またはｌａｂｒａｏｓｏｌとプロピレングリコールとの組み合わせ、またはｌａｂｒａｏｓｏｌとＰＥＧ４００との組み合わせ、またはｌａｂｒａｏｓｏｌとグリセリンとの組み合わせを乳化助剤とし、ツイーン８０を乳化剤とし、バイカレインの自己乳化組成物を調製した。

【0069】

その結果、調製されたバイカレインの自己乳化組成物が均一な溶液であり、２ｍｉｎ以内で完全に乳化でき、且つ、粒径が１０～１０００ｎｍの範囲内にあることが分かった。

【0070】

ｄ、異なる油相でバイカレインの自己乳化組成物を調製した
上記と同じ方法でバイカレインの自己乳化組成物を調製し、違いは以下のとおりであった。オレイン酸エチルの代わりに、大豆油、トウモロコシ油、オリーブ油、ヤシ油、落花生油、ツバキ油、ヒマシ油、オレイン酸ソルビタン、オレイン酸グリセリル、リノール酸グリセリル、オレイン酸ポリエチレングリコールグリセリル（ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）１９４４ｃｓ）、Ｍａｉｓｉｎｅ３５－１、リノール酸エチル、Ｃ８／Ｃ１０モノグリセリド、ヤシ油Ｃ８／Ｃ１０ジグリセリド、ヤシ油Ｃ８／Ｃ１０トリグリセリド、カプリル酸トリグリセリド、カプリル酸ジグリセリド、カプリル酸モノグリセリド、カプリン酸モノグリセリド、カプリン酸ジグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、カプリル酸／カプリン酸モノグリセリド、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、リノール酸ポリエチレングリコールグリセリル（Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）Ｍ２１２５ＣＳ）、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ、Ｃａｐｒｙｏｌ ９０のうちの１種、またはオレイン酸エチルとトリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリルとの組み合わせ、またはオレイン酸エチルとミリスチン酸イソプロピルとの組み合わせ、またはオレイン酸エチルと大豆油との組み合わせ、またはリノール酸ポリエチレングリコールグリセリルとリノール酸エチルとの組み合わせ、またはリノール酸ポリエチレングリコールグリセリルとオリーブ油との組み合わせ、またはリノール酸ポリエチレングリコールグリセリルとカプリル酸モノグリセリドとの組み合わせを油相とし、ツイーン８０を乳化剤とし、バイカレインの自己乳化組成物を調製した。

【0071】

その結果、調製されたバイカレインの自己乳化組成物が均一な溶液であり、２ｍｉｎ以内で完全に乳化でき、且つ、粒径が１０～１０００ｎｍの範囲内にあることが分かった。

【0072】

ｅ、油相、乳化剤、乳化助剤の異なる割合でバイカレインの自己乳化組成物を調製した
（１）バイカレインと大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、テトラヒドロフランを反応溶剤とし、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥してバイカレイン－リン脂質複合体を取得した。

【0073】

（２）オレイン酸エチルを油相とし、ツイーン８０を乳化剤とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とした。３者の組成質量比の総和を１００％として計算すると、油相：乳化剤：乳化助剤＝１０％：６０％：３０％、または２０％：５０％：３０％、または２０％：４０％：４０％の割合で、油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得した。

【0074】

（３）適量（ブランクの自己乳化濃縮液重量の３０％）のステップ（１）のバイカレイン－リン脂質複合体を秤量してステップ（２）のブランクの自己乳化濃縮液に入れ、且つ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとした。バイカレイン－リン脂質複合体が完全に溶解した後、バイカレインの自己乳化組成物を取得した。

【0075】

その結果、調製されたバイカレインの自己乳化組成物が均一な溶液であり、２ｍｉｎ以内で完全に乳化でき、且つ、粒径が１０～１０００ｎｍの範囲内にあることが分かった。

【0076】

実施例７：フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の薬剤負荷についての考察

【0077】

（１）フラボノイドポリフェノール系薬剤（バイカレイン、プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、レスベラトロール）と大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、テトラヒドロフランを反応溶剤とし、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥してバイカレイン－リン脂質複合体、プロアントシアニジン－リン脂質複合体、ケルセチン－リン脂質複合体、クルクミン－リン脂質複合体、レスベラトロール－リン脂質複合体をそれぞれ調製した。

【0078】

（２）オレイン酸エチルを油相とし、ｌａｂｒａｏｓｏｌを乳化剤とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とした。２：５：３の割合で油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得した。

【0079】

（３）適量のステップ（１）のバイカレイン－リン脂質複合体、プロアントシアニジン－リン脂質複合体、ケルセチン－リン脂質複合体、クルクミン－リン脂質複合体、レスベラトロール－リン脂質複合体を秤量し、それぞれ５ｇの油相（オレイン酸エチル）またはステップ（２）で得られたブランクの自己乳化濃縮液に入れ、３７℃に加熱し、撹拌または剪断し、各リン脂質複合体をそれぞれ十分に混合させて溶解させ、室温で２４ｈ放置し、薬剤が析出したか否かを観察し、薬剤の析出がなかった場合、適量の各リン脂質複合体をそれぞれ加え、薬剤が析出したまで同様に操作し、上清を１２０００ｒ／ｍｉｎで２０ｍｉｎ遠心した。その後、上清を取り、前記ＨＰＬＣ法で上記各フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体の油相およびブランクの自己乳化濃縮液における飽和溶解度を測定した。

【0080】

試験の結果により、バイカレイン－リン脂質複合体は、バイカレインの油中の飽和溶解度を０．３ｍｇ／ｇから６０ｍｇ／ｇ以上に増加させ、バイカレインのブランクの自己乳化濃縮液中の飽和溶解度（即ち、バイカレインの自己乳化組成物の薬剤負荷）を２０ｍｇ／ｇから１００ｍｇ／ｇ以上に増加させることができることが分かった。

【0081】

プロアントシアニジン、ケルセチン、クルクミン、レスベラトロールのリン脂質複合体は、それぞれの原料薬の油中の飽和溶解度が６０ｍｇ／ｇ以上に達し、ブランクの自己乳化濃縮液中の飽和溶解度が１００ｍｇ／ｇ以上に達することが分かった。

【0082】

以上の試験により、本発明のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の薬剤負荷が高いことが分かった。

【0083】

実施例８：バイカレイン－リン脂質複合体を中間体として異なる油相でバイカレインの自己乳化組成物を調製した

【0084】

（１）バイカレインと大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、テトラヒドロフランを反応溶剤とし、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥してバイカレイン－リン脂質複合体を取得した。

【0085】

（２）ｌａｂｒｏｓｏｌを乳化剤とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とし、以下の表３に示す異なる油相を用い、２：５：３の割合で油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得した。

【0086】

（３）適量のステップ（１）のバイカレイン－リン脂質複合体（薬剤負荷５０ｍｇ／ｇで配合した）を秤量してステップ（２）のブランクの自己乳化濃縮液に入れ、且つ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとした。バイカレイン－リン脂質複合体が完全に溶解した後、バイカレインの自己乳化組成物を取得するとともに、その薬剤負荷および乳化粒径を測定し、結果を表３に示した。

【0087】

【表3】

【0088】

実施例９：バイカレイン－リン脂質複合体を中間体として異なる乳化剤でバイカレインの自己乳化組成物を調製した

【0089】

（１）バイカレインと大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、テトラヒドロフランを反応溶剤とし、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥してバイカレイン－リン脂質複合体を取得した。

【0090】

（２）オレイン酸エチルを油相とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とし、以下の表４に示す異なる乳化剤を用い、２：５：３の割合で油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得した。

【0091】

（３）適量（薬剤負荷５０ｍｇ／ｇで配合した）のステップ（１）のバイカレイン－リン脂質複合体を秤量してステップ（２）のブランクの自己乳化濃縮液に入れ、且つ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとした。バイカレイン－リン脂質複合体が完全に溶解した後、バイカレインの自己乳化組成物を取得するとともに、その薬剤負荷および乳化粒径を測定し、結果を表４に示した。

【0092】

【表4】

【0093】

実施例１０：バイカレイン－リン脂質複合体を中間体として異なる乳化助剤でバイカレインの自己乳化組成物を調製した

【0094】

（１）バイカレインと大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、テトラヒドロフランを反応溶剤とし、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥してバイカレイン－リン脂質複合体を取得した。

【0095】

（２）オレイン酸エチルを油相とし、ｌａｂｒｏｓｏｌを乳化剤とし、以下の表５に示す異なる乳化助剤を用い、２：５：３の割合で油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得した。

【0096】

（３）適量（薬剤負荷５０ｍｇ／ｇで配合した）のステップ（１）のバイカレイン－リン脂質複合体を秤量してステップ（２）のブランクの自己乳化濃縮液に入れ、且つ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとした。バイカレイン－リン脂質複合体が完全に溶解した後、バイカレインの自己乳化組成物を取得するとともに、その薬剤負荷および乳化粒径を測定し、結果を表５に示した。

【0097】

【表5】

【0098】

実施例１１：バイカレイン－リン脂質複合体を中間体として油相：乳化剤：乳化助剤の異なる割合でバイカレインの自己乳化組成物を調製した

【0099】

（１）バイカレインと大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、テトラヒドロフランを反応溶剤とし、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥してバイカレイン－リン脂質複合体を取得した。

【0100】

（２）オレイン酸エチルを油相とし、ｌａｂｒｏｓｏｌを乳化剤とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とし、以下の表６に示す油相：乳化剤：乳化助剤の異なる割合で、油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得した。

【0101】

（３）適量（薬剤負荷５０ｍｇ／ｇで配合した）のステップ（１）のバイカレイン－リン脂質複合体を秤量してステップ（２）のブランクの自己乳化濃縮液に入れ、且つ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとした。バイカレイン－リン脂質複合体が完全に溶解した後、バイカレインの自己乳化組成物を取得するとともに、その薬剤負荷および乳化粒径を測定し、結果を表６に示した。

【0102】

【表6】

【0103】

実施例１２：バイカレイン－リン脂質複合体を中間体として異なる薬剤負荷のバイカレインの自己乳化組成物を調製した

【0104】

（１）バイカレインと大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、テトラヒドロフランを反応溶剤とし、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥してバイカレイン－リン脂質複合体を取得した。

【0105】

（２）オレイン酸エチルを油相とし、ｌａｂｒｏｓｏｌを乳化剤とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とし、２：５：３の割合で、油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得した。

【0106】

（３）異なる質量のステップ（１）のバイカレイン－リン脂質複合体を秤量してステップ（２）のブランクの自己乳化濃縮液に入れ、且つ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとした。バイカレイン－リン脂質複合体が完全に溶解した後、異なる薬剤負荷のバイカレインの自己乳化組成物を取得するとともに、その薬剤負荷および乳化粒径を測定し、結果を表７に示した。

【0107】

【表7】

【0108】

実施例１３：異なる薬剤脂質比のバイカレイン－リン脂質複合体を中間体としてバイカレインの自己乳化組成物を調製した

【0109】

（１）オレイン酸エチルを油相とし、ｌａｂｒｏｓｏｌを乳化剤とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とし、２：５：３の割合で、油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得した。

【0110】

（２）実施例１で得られた一連のバイカレイン－リン脂質複合体（薬剤負荷１００ｍｇ／ｇで配合した）を秤量してステップ（１）のブランクの自己乳化濃縮液に入れ、且つ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとした。バイカレイン－リン脂質複合体が完全に溶解した後、バイカレインの自己乳化組成物を取得するとともに、その薬剤負荷および乳化粒径を測定し、結果を表８に示した。

【0111】

【表8】

【0112】

実施例１４：異なるフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物を調製した

【0113】

（１）オレイン酸エチルを油相とし、ｌａｂｒｏｓｏｌを乳化剤とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とし、２：５：３の割合で、油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得した。

【0114】

（２）表２における一連のフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体（組成物ＳＥＤＤＳ－３１、ＳＥＤＤＳ－３２、ＳＥＤＤＳ－３３、ＳＥＤＤＳ－３４を調製し、リン脂質複合体を薬剤負荷２０ｍｇ／ｇで配合し、組成物ＳＥＤＤＳ－３５、ＳＥＤＤＳ－３６、ＳＥＤＤＳ－３７、ＳＥＤＤＳ－３８を調製し、リン脂質複合体を薬剤負荷１００ｍｇ／ｇで配合した）を秤量してステップ（１）のブランクの自己乳化濃縮液に入れ、且つ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとした。フラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体が完全に溶解した後、フラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物を取得するとともに、その薬剤負荷および乳化粒径を測定し、異なる薬剤負荷および異なる粒径のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物を取得し、結果を表９に示した。

【0115】

【表9】

【0116】

実施例６～実施例１４の結果から分かるように、本発明のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物はいずれも迅速に乳化してナノスケールの乳化滴を形成することができる。実施例７～実施例１２では、異なる薬剤負荷のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物を調製し、必要に応じて、本発明のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の薬剤負荷は１００ｍｇ／ｇ以上に達する。

【0117】

試験例１：本発明のバイカレインの自己乳化組成物、文献２～７のフラボノイドポリフェノール系自己マイクロエマルジョン、および比較例１の自己乳化組成物の物理安定性についての考察

【0118】

（１）比較例１：バイカレイン原料薬が担持されたバイカレインの自己乳化組成物の調製

【0119】

オレイン酸エチルを油相とし、ツイーン８０を乳化剤とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とした。２：５：３の割合で、油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得し、更にバイカレイン原料薬を秤量してブランクの自己乳化濃縮液に入れ、且つ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとし、２４ｈ振とうし、１２０００ｒｐｍで１５ｍｉｎ遠心し、上清を取ると、前記バイカレイン原料薬が担持されたバイカレインの自己乳化組成物を調製した。

【0120】

（２）比較例２：シリマリンリン脂質複合体の自己乳化組成物の調製

【0121】

文献『劉琳▲ショウ▼．シリマリンおよびそのリン脂質複合体の自己マイクロエマルジョン化カプセルの研究．［Ｄ］．瀋陽、瀋陽薬科大学、２００７』の方法に従い、アセトンを反応溶剤とし、シリマリンと大豆リン脂質との質量比が１：１であり、５５℃にて加熱還流し、減圧下で液体体積に濃縮した後、迅速にｎ－ヘキサンに入れ、黄色の沈殿物を取得し、上層の液体が黄白色のエマルジョンであり、減圧下で濾過し、ｎ－ヘキサンで沈殿を洗浄し、真空乾燥ボックスに置いて室温で乾燥し、黄白色の固体生成物であるシリマリンリン脂質複合体を取得した。７０ｇのシリマリンリン脂質複合体を秤量し、２５０ｇのオレイン酸エチルとＭＣＴとの混合物（１：１）を加え、旋回混合させて溶解させ、２００ｇのＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬおよび５０ｇのＴｒａｎｓｃｕｔｏｌを加え、３７℃の水浴で緩撹拌すると取得できた。

【0122】

（３）文献２～７に記載の処方および調製方法（本願の背景技術に記載されているように）に従い、プロアントシアニジン自己マイクロエマルジョンＹＺ－１、ケルセチン自己マイクロエマルジョンＹＺ－２、クルクミン自己マイクロエマルジョンＹＺ－３、レスベラトロール自己マイクロエマルジョンＹＺ－４、バイカレイン自己マイクロエマルジョンＹＺ－５、およびバイカレイン自己マイクロエマルジョンＹＺ－６をそれぞれ調製した。

【0123】

（４）ＹＺ－１、ＹＺ－２、ＹＺ－３、ＹＺ－４、ＹＺ－５、ＹＺ－６、比較例１の自己乳化組成物、比較例２のシリマリン自己乳化組成物、本発明に係る実施例で調製されたバイカレインの自己乳化組成物、プロアントシアニジン自己乳化組成物、ケルセチン自己乳化組成物、クルクミン自己乳化組成物、およびレスベラトロール自己乳化組成物を、４℃および室温でそれぞれ５日、１ヶ月および２ヶ月放置し、外観性状の変化を観察し、物理安定性を考察し、関連結果を表１０に示した。

【0124】

【表10】

【0125】

その結果、文献２～７、比較例１および比較例２で調製された一連のフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物は、４℃で放置した後、半固体を形成したり析出したりしやすく、室温で１～２ヶ月放置すると、薬剤析出が発生し、安定性が悪いことが分かった。

【0126】

本発明のフラボノイドポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を担体とするフラボノイドポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物は、４℃および室温で２ヶ月放置した後、外観性状が依然として清澄で透明であり、安定性が高かった。

【0127】

試験例２：血漿薬物動態学の研究

【0128】

（１）バイカレイン－リン脂質複合体を中間体とするバイカレインの自己乳化組成物を調製した

【0129】

１）バイカレインと大豆リン脂質との質量比（ｗ／ｗ）１：３．５で配合し、テトラヒドロフランを反応溶剤とし、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥してバイカレイン－リン脂質複合体を取得した。２）オレイン酸エチルを油相とし、ツイーン８０を乳化剤とし、ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ ＨＰを乳化助剤とし、２：５：３の割合で、油相、乳化剤および乳化助剤を精密に秤量して適当な容器内に入れ、均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を取得した。３）適量のステップ１）のバイカレイン－リン脂質複合体を秤量してステップ２）のブランクの自己乳化濃縮液に入れ、且つ、空気浴振動器に置き、温度を２５℃とし、回転数を２１０ｒｐｍとした。バイカレイン－リン脂質複合体が完全に溶解した後、バイカレインの自己乳化組成物を取得した。該組成物を１００倍の水で希釈した後、１ｍｉｎ以内で完全に乳化し、その粒径が１０ｎｍであり、薬剤負荷が２０ｍｇ／ｇであると測定した。

【0130】

（２）試験のグループ分け

【0131】

被験グループＡ：上記（１）で調製された本発明のバイカレイン－リン脂質複合体を中間体とするバイカレインの自己乳化組成物（以下、ＢＡＰＣ－ＳＭＥＤＤＳと記す）を投与した

【0132】

被験グループＢ：比較例１におけるバイカレイン原料薬が担持されたバイカレインの自己乳化組成物（以下、ＯＢＡ－ＳＭＥＤＤＳと記す）を投与した

【0133】

被験グループＣ：バイカレイン原料薬（以下、ＢＡと記す）を投与した

【0134】

（３）試験動物
Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラット、オス、２００ｇ。試験前に、ラットを１週間飼育し、試験前の夜に絶食させ、断水せず、実験中に自由飲水させた。

【0135】

（４）投与形態および投与量
１５匹のラットを、ランダムに３グループ（それぞれ被験グループＡ、被験グループＢ、被験グループＣ）に分け、グループ毎に５匹とした。４０ｍｇ／ｋｇの投与量で強制経口投与（２～３ｍｌ）し、それぞれ投与してからの５、１５、３０、４５、６０、７５ｍｉｎおよび３、６、８、１０、１２、２４ｈ後に眼窩後静脈叢から０．３ｍＬ採血し、予めヘパリンされた１．５ｍＬのコニカル遠心チューブに入れ、４０００ｒ／ｍｉｎで１５ｍｉｎ遠心し、上層の血漿を吸い取り、－８０℃の冷蔵庫に置いて保存し、測定前に常温で放置して解凍した。

【0136】

（５）血中濃度の測定
血漿サンプルの処理：１００μＬの血漿を取り、１．５ｍＬのコニカル遠心チューブに入れ、１０μＬのアスコルビン酸（２００ｍｇ／ｍＬ）、２０μＬの内部標準溶液（５００ｎｇ／ｍｌ）を加え、また、３００μＬのメタノールを加え、６０ｓ旋回混合させ、１２０００ｒ／ｍｉｎで１０ｍｉｎ遠心した後、上清を吸い出し、遠心管に入れ、遠心して濃縮し、溶剤を揮散し（４０℃）、また、２００μＬのメタノール：水（８０：２０）を加えて溶解させ、３０ｓ旋回した後、１２０００ｒ／ｍｉｎで５ｍｉｎ遠心し、２０μＬの上清を取ってインジェクションし、所定の下記クロマトグラフィー条件で血中濃度（液相クロマトグラフィー－質量分析）を測定した。

【0137】

ＨＰＬＣクロマトグラフィー条件は以下のとおりであった。
カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ Ｃ１８カラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ）
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
インジェクションボリューム：２０μＬ
カラム温度：２５℃
移動相（グラジエント溶出は表１１を参照する）：溶出剤がアセトニトリル－０．１％のギ酸であった。

【0138】

【表11】

【0139】

質量分析条件は以下のとおりであった。
イオン源：エレクトロスプレイイオン源（ＥＳＩ）であり、正イオン方式で検出し、多イオン反応モニタリングモード（ＭＲＭ）であった。
他のパラメータ：ネブライザキットの圧力が４０ｐｓｉであり、乾燥ガスの流速が９Ｌ／ｍｉｎであり、乾燥ガスの温度が３５０℃であり、キャピラリ電圧が４０００Ｖであり、分流比が１：２であった。
定量用のＭＲＭ検出イオン対：
バイカリン［Ｍ＋Ｈ］＋４４７．０→２７１．１
バイカレイン［Ｍ＋Ｈ］＋２７１．１→１２２．８
６－ヒドロキシ黄銅［Ｍ＋Ｈ］＋２３９．０→１３７．０

【0140】

（６）試験結果
６．１バイカレインを体内に経口投与した後、腸管上皮細胞および肝臓組織で速やかにバイカリンに代謝され、血漿中のバイカリン濃度－時間曲線および関連する薬物動態パラメータは、図１および表１２に示すとおりであった。

【0141】

その結果、本発明のバイカレイン－リン脂質複合体を中間体とするバイカレインの自己乳化組成物のＣｍａｘは、バイカレイン原料薬およびバイカレイン原料薬が担持されたバイカレインの自己乳化組成物と比べ、それぞれ７．７倍および１．９倍上昇し、ＡＵＣ（０－ｔ）は、それぞれ４．５倍および１．３倍上昇したことが分かった。血漿中のバイカリン濃度で計算されたＢＡＰＣ－ＳＭＥＤＤＳおよびＯＢＡ－ＳＭＥＤＤＳ（バイカレイン原料薬に対して）の相対的なバイオアベイラビリティは、それぞれ４４８．７％および３４２．５％であった。

【0142】

【表12】

【0143】

６．２血漿中のバイカレイン濃度－時間曲線および関連する薬物動態パラメータは、図２および表１３に示すように、本発明のバイカレイン－リン脂質複合体を中間体とするバイカレインの自己乳化組成物のＣｍａｘは、バイカレイン原料薬およびバイカレイン原料薬が担持されたバイカレインの自己乳化組成物と比べ、それぞれ４．６倍および１．９倍上昇し、ＡＵＣ（０－ｔ）は、それぞれ３．７倍および１．２倍上昇した。血漿中のバイカレイン濃度で計算されたＢＡＰＣ－ＳＭＥＤＤＳおよびＯＢＡ－ＳＭＥＤＤＳ（バイカレイン原料薬に対して）の相対的なバイオアベイラビリティは、それぞれ３７４．４％および３０２．３％であった。

【0144】

【表13】

【図1】

【図2】

【手続補正書】

【提出日】2022-06-23

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体、油相、乳化剤および乳化助剤を含み、前記ポリフェノール系薬剤は、バイカレインであり、
前記ポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体において、ポリフェノール系薬剤とリン脂質との質量比は１：１～１：８であり、
前記油相は、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、（カプリル酸／カプリン酸）グリセリルから選ばれる１種または複数種であり、
前記乳化剤は、カプリル酸カプリン酸ポリエチレングリコールグリセリル、ツイーン８０、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルから選ばれる１種または複数種であり、
前記乳化助剤は、モノカプリル酸プロピレングリコールおよび/またはジエチレングリコールモノエチルエーテルから選ばれ、
油相と乳化剤と乳化助剤との３者の総質量比を１００％として計算すると、油相は２０％～４０％であり、乳化剤は４０％～６０％であり、乳化助剤は３０％～５０％である、ことを特徴とするポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項2】

前記油相は、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリルから選ばれる１種または複数種である、ことを特徴とする請求項１に記載のポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項3】

前記ポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の薬剤負荷は１０～１１０ｍｇ／ｇである、ことを特徴とする請求項１または２に記載のポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項4】

前記ポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の薬剤負荷は１０～１００ｍｇ／ｇである、ことを特徴とする請求項３に記載のポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項5】

前記ポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の粒径は１０～１０００ｎｍである、ことを特徴とする請求項１または２に記載のポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項6】

前記リン脂質は、天然リン脂質、合成リン脂質材料から選ばれる１種または複数種であり、
前記天然リン脂質は、大豆リン脂質および卵黄リン脂質から選ばれる１種または複数種を含み、
前記合成リン脂質は、ホスホグリセリド、スフィンゴミエリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、グリセロリン脂質酸、ジステアロイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、ジミリストイルホスファチジルコリンから選ばれる１種または複数種を含む、ことを特徴とする請求項１または２に記載のポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項7】

前記合成リン脂質は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、グリセロリン脂質酸から選ばれる１種または複数種である、ことを特徴とする請求項６に記載のポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物。

【請求項8】

（１）ポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体の調製：ポリフェノール系薬剤およびリン脂質を有機溶剤に溶解させ、複合反応を経た後、有機溶剤を除去し、乾燥して取得するステップと、
（２）ポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の調製：ステップ（１）で得られたポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体と、油相、乳化剤および乳化助剤とを任意の順序で十分に混合させるステップと、
を含む、ことを特徴とする請求項１～７のいずれか１項に記載のポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物の調製方法。

【請求項9】

ステップ（１）において、前記有機溶剤は、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、メタノール、アセトン、エタノール、無水エタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、イソブタノール、ｔ－ブタノール、エチルエーテル、メチルエチルエーテル、ジオキサン、ブタノン、石油エーテル、ヘキサン、シクロヘキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、ＤＭＳＯ、ＤＭＦから選ばれる１種または複数種である、ことを特徴とする請求項８に記載の調製方法。

【請求項10】

ステップ（１）において、前記有機溶剤は、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、シクロヘキサン、ＤＭＳＯ、ＤＭＦのうちの１種または複数種である、ことを特徴とする請求項９に記載の調製方法。

【請求項11】

ステップ（２）において、ステップ（１）で得られたポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体と、油相、乳化剤および乳化助剤とを直接十分に混合させる、ことを特徴とする請求項８に記載の調製方法。

【請求項12】

まず、油相、乳化剤および乳化助剤を均一に混合させてブランクの自己乳化濃縮液を調製し、その後、ステップ（１）で得られたポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を調製されたブランクの自己乳化濃縮液に加え、十分に混合させる、ことを特徴とする請求項８に記載の調製方法。

【請求項13】

ステップ（１）で得られたポリフェノール系薬剤－リン脂質複合体を、油相、乳化剤、または乳化助剤のうちのいずれかに溶解してから、別の２種の成分を加えて十分に混合させる、ことを特徴とする請求項８に記載の調製方法。

【請求項14】

請求項１～７のいずれか１項に記載のポリフェノール系薬剤の自己乳化組成物と、任意に医薬的に許容される補助材料とを含む、ことを特徴とする医薬組成物。

【請求項15】

前記医薬組成物の剤形は、経口製剤、注射製剤、経皮投与製剤、粘膜投与製剤、経肺吸入投与製剤、または腸管投与製剤を含む、ことを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。

【請求項16】

前記医薬組成物の剤形は、点滴剤、オーラル液体、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、練薬、フィルム剤、ゲル剤、散剤、乳剤、滴下ピル、坐剤、エアゾール剤、スプレー剤、粉末エアゾール剤、貼付剤、接着プラスター、液剤、軟膏剤、またはクリーム剤を含む、ことを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。

【国際調査報告】