特表 2022-530972 皮膚疾患の治療のためのマキベリー抽出物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-07-05

(54)【発明の名称】皮膚疾患の治療のためのマキベリー抽出物

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/185 20060101AFI20220628BHJP

   A61K 31/352 20060101ALI20220628BHJP

   A61K 31/353 20060101ALI20220628BHJP

   A61K 9/20 20060101ALI20220628BHJP

   A61K 9/28 20060101ALI20220628BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20220628BHJP

   A61K 9/48 20060101ALI20220628BHJP

   A61K 9/12 20060101ALI20220628BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20220628BHJP

   A61K 9/02 20060101ALI20220628BHJP

   A61K 9/107 20060101ALI20220628BHJP

   A61K 9/16 20060101ALI20220628BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20220628BHJP

   A61P 17/06 20060101ALI20220628BHJP

   A61P 17/04 20060101ALI20220628BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20220628BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20220628BHJP

   A61L 15/44 20060101ALI20220628BHJP

   A23L 33/105 20160101ALI20220628BHJP

   A23L 2/52 20060101ALI20220628BHJP

【ＦＩ】

A61K36/185

A61K31/352

A61K31/353

A61K9/20

A61K9/28

A61K9/14

A61K9/48

A61K9/12

A61K9/08

A61K9/02

A61K9/107

A61K9/16

A61P17/00

A61P17/06

A61P17/04

A61P29/00

A61P37/02

A61L15/44 100

A23L33/105

A23L2/00 F

A23L2/52 101

【審査請求】未請求

【予備審査請求】有

(21)【出願番号】P 2021564541

(86)(22)【出願日】2020-05-04

(85)【翻訳文提出日】2021-12-22

(86)【国際出願番号】 EP2020062300

(87)【国際公開番号】W WO2020225202

(87)【国際公開日】2020-11-12

(31)【優先権主張番号】19172658.7

(32)【優先日】2019-05-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】518367035

【氏名又は名称】アンクラム エクストラクト ゲーエムベーハー

【氏名又は名称原語表記】Ａｎｋｌａｍ Ｅｘｔｒａｋｔ ＧｍｂＨ

【住所又は居所原語表記】Ｊｏｈａｎｎ－Ｆｒｉｅｄｒｉｃｈ－Ｂｏｔｔｇｅｒ－Ｓｔｒ． ４ Ｄ－１７３８９ Ａｎｋｌａｍ Ｇｅｒｍａｎｙ

(74)【代理人】

【識別番号】110002310

【氏名又は名称】特許業務法人あい特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ボンレンダー，ベルント

(72)【発明者】

【氏名】ラング，シュテファニー

【テーマコード（参考）】

4B018

4B117

4C076

4C081

4C086

4C088

【Ｆターム（参考）】

4B018MD08

4B018MD52

4B018ME14

4B018MF01

4B018MF14

4B117LC04

4B117LG01

4B117LP01

4C076AA06

4C076AA16

4C076AA24

4C076AA29

4C076AA31

4C076AA36

4C076AA43

4C076AA45

4C076AA53

4C076BB01

4C076CC18

4C076FF70

4C081AA02

4C081AA12

4C081CE02

4C081DA02

4C086AA01

4C086AA02

4C086BA08

4C086GA17

4C086MA01

4C086MA04

4C086MA13

4C086MA17

4C086MA22

4C086MA35

4C086MA37

4C086MA41

4C086MA43

4C086MA52

4C086NA14

4C086ZA89

4C086ZB07

4C086ZB11

4C088AB12

4C088AC05

4C088BA08

4C088CA08

4C088MA13

4C088MA17

4C088MA22

4C088MA35

4C088MA37

4C088MA41

4C088MA43

4C088MA52

4C088NA14

4C088ZA89

4C088ZB07

4C088ZB11

(57)【要約】

【課題】本発明は、一般に、皮膚疾患の治療または予防に使用するための、天然主要活性成分であってもよいマキベリーに関する。
【解決手段】本明細書に開示される特定の実施形態は、特に、皮膚疾患、特にヒトの皮膚炎、アトピー性皮膚炎（神経皮膚炎）、日光皮膚炎、湿疹、手湿疹、扁平苔癬、エリテマトーデス、乾癬、蕁麻疹、かゆみ、疥癬、しみ、雀卵斑および乾燥／アトピー性皮膚の予防および治療に用いられる。特に、本発明は、上述の皮膚疾患または皮膚欠損の治療または予防に使用するための医薬または栄養補給剤の製造におけるマキベリー抽出物の使用に関する。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

皮膚炎、アトピー性皮膚炎（神経皮膚炎）、日光皮膚炎、湿疹、手湿疹、扁平苔癬、エリテマトーデス、乾癬、疥癬、蕁麻疹の群から選択される炎症性皮膚状態の治療または予防に使用するための、マキベリー抽出物を含む医薬または栄養補給剤。

【請求項2】

かゆみの治療または予防に使用するための、マキベリー抽出物を含む医薬または栄養補給剤。

【請求項3】

前記マキベリー抽出物が主要活性成分である、請求項１または２に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項4】

前記マキベリー抽出物が、特に４０：６０（ｖ／ｖ）～６０：４０（ｖ／ｖ）、特に４１：５９（ｖ／ｖ）または５０：５０（ｖ／ｖ）の水／アルコール抽出剤によって得られる、請求項１～３のいずれか１項に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項5】

前記アルコール抽出剤が、エタノール、特に９６％エタノールである、請求項４に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項6】

前記マキベリー抽出物が、最小限２５％（ｗ／ｗ）のデルフィニジンと最小限３５％（ｗ／ｗ）のアントシアニンとを含む、請求項１～５のいずれか１項に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項7】

前記マキベリー抽出物が、最小限２５％（ｗ／ｗ）のデルフィニジンと最小限３５％（ｗ／ｗ）のアントシアニンとを含み、前記抽出物が、
ａ）植物材料の粗抽出物を得るステップと、
ｂ）前記粗抽出物を濾過するステップと、
ｃ）前記粗抽出物を吸着剤と接触させ、前記吸着剤、特に樹脂に前記アントシアニンを吸着させるステップと、
ｄ）前記吸着剤を洗浄するステップと、
ｅ）前記吸着剤から前記アントシアニンを溶出して、アントシアニンが富化された組成物を得るステップと、
によって得られる、請求項１～６のいずれか１項に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項8】

ステップｄ．）で水を使用し、ステップｅ．）でエタノールを使用する、請求項７に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項9】

ステップａ．）の植物材料が、果物および／またはベリーから選択される、請求項７に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項10】

ステップｃ．）からステップｄ．）までの前記吸着剤が、樹脂、特にポリマー樹脂またはポリスチレン樹脂である、請求項７に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項11】

適切な場合には、特に糖衣錠、錠剤、フィルムコーティング錠、粉末剤、カプセルまたは希釈液の形態での適切な担体物質、特に滴剤、ジュースまたはシロップ、軟膏、乳剤、粒状剤、粉末剤、点鼻スプレー、液体または固体の吸入製剤、圧迫包帯、創傷および歯肉の被覆、タンポナーデ、扁桃塗布液、うがい液、リンス液、注射剤、輸液、顆粒、腸溶錠、トローチ、懸濁液、湿布、点鼻薬、吸入剤、ローション、座剤、経腸栄養剤を含む製剤を含む、請求項１～１０のいずれか１項に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、一般に、皮膚疾患の治療または予防に使用するための、天然主要活性成分であってもよいマキベリーに関する。本明細書に開示される特定の実施形態は、特に、皮膚疾患、特にヒトの皮膚炎、アトピー性皮膚炎（神経皮膚炎）、日光皮膚炎、湿疹、手湿疹、扁平苔癬、エリテマトーデス、乾癬、蕁麻疹、かゆみ、疥癬、しみ、雀卵斑および乾燥／アトピー性皮膚の予防および治療に用いられる。特に、本発明は、上述の皮膚疾患または皮膚欠損の治療または予防に使用するための医薬または栄養補給剤の製造におけるマキベリー抽出物の使用に関する。

【背景技術】

【0002】

ヒトの最大の器官として、皮膚は様々な生体機能を発揮する。たとえば皮膚は、寒さ、暑さ、放射線、化学物質の影響および病原体からの保護を提供する。皮膚がこのバリア機能を十分に発揮できなくなったとき、局所刺激や、さらには全身に影響を与える症状が生じる可能性がある。

【0003】

人体のバリア器官として、皮膚、主に表皮は、特に外部の影響にさらされる。このバリア機能は特に皮膚脂質によって維持される。スフィンゴ糖脂質、セラミド、ステロールおよびステロールエステル、脂肪酸、トリグリセリド、ｎ－アルカンまたは様々な極性脂質などのこれらの表皮脂質は、角化プロセス中に放出される。

【0004】

皮膚の最適状態では、皮膚脂質と皮膚水分との間でバランスがとれている。このバランスは、透過性、水和性、弾性、再生能力または、環境の影響および様々な毒物に対する抵抗性などの皮膚の主要な特性を決める上で役割を果たしている。このように、皮膚脂質、特に表面脂質は極めて重要である。

【0005】

皮膚の外部脂質膜は、様々な脂質と、尿素、脂肪酸、無機塩および水などの汗腺の分泌物との大変複雑な組成を有するエマルションによって形成されている。油相の成分は、主として特にスクアレン、コレステロールおよびコレステロールエステル、ワックスエステル、トリグリセリドならびに遊離脂肪酸を含む皮脂腺からの分泌物である。

【0006】

マキベリーは、チリワインベリー（アリストテリア・チレンシス（Ａｒｉｓｔｏｔｅｌｉａ ｃｈｉｌｅｎｓｉｓ））とも呼ばれ、チリおよびアルゼンチンに位置するパタゴニアの原生林にのみ生育する天然のベリーである。現在まで、産業栽培はほとんど行われておらず、このベリーの大部分は、依然として野生植物から採取されている。パタゴニア地域はアンデス山脈に近く、寒い夜、暑い昼および強烈な紫外線照射という極めて過酷な気候を示す。これらの条件は、マキベリーに特有のファイトケミカルプロファイルをもたらす。この果物は、その驚くべき健康促進効果と貴重な成分とで知られているため、深紫から黒のこの小さなベリーは、先住民のマプチェインディアンによって何世紀にもわたって摂取されてきた。今日では、マキベリーは、その優れた抗酸化作用によって、枸杞（クコ）およびアサイーに次いで「スーパーフルーツ」とみなされている。チリでは、このベリーはジャム、ジュース、アイスクリームおよびリキュールに用いられており、日常生活の一部である。

【0007】

果物や野菜に含まれるポリフェノールなどの天然化合物が広範囲の生物学的効果および薬理効果を有することを示唆する証拠が増えてきている。

【発明の概要】

【0008】

スキンケアの提供に加えて、皮膚疾患、特に、ヒトの皮膚炎、アトピー性皮膚炎（神経皮膚炎）、日光皮膚炎、湿疹、手湿疹、扁平苔癬、エリテマトーデス、乾癬、蕁麻疹、かゆみ、疥癬、しみ、雀卵斑および乾燥／アトピー性皮膚の治療に適した組成物、特に医薬または栄養補助食品を提供することが本発明の目的である。

【0009】

驚くべきことに、本発明者らは、本明細書に開示されたマキベリー抽出物が、皮膚の治癒および再生を促進し、皮膚炎、特に炎症性皮膚状態を防止することを見出した。

【0010】

したがって、対象者における炎症性皮膚状態の治療のための方法であって、それを必要とする対象者に、本明細書に記載のマキベリー抽出物の有効量を投与することを含む方法が本明細書に開示される。

【0011】

対象者は、皮膚欠損または皮膚疾患を患っていてもよく、またこのような欠損または疾患を受けやすいか、またはその素因を有していてもよい。以下の用語は、本発明による上述の疾患を規定する：
皮膚炎は、湿疹としても知られ、皮膚の炎症を引き起こす疾患群である。これらの疾患は、かゆみ、発赤および発疹を特徴とする。

【0012】

特にアトピー性皮膚炎（神経皮膚炎）は、遺伝的感受性と環境要因との間の相互作用によって生じる多因子性炎症性皮膚疾患である。

【0013】

日光皮膚炎はＵＶ照射によって引き起こされ、局所炎症および一次性痛覚過敏を引き起こす。

【0014】

皮膚炎という用語は、アレルギー性接触皮膚炎、刺激性接触皮膚炎およびうっ滞性皮膚炎も意味する。

【0015】

扁平苔癬は、皮膚および粘膜を含む扁平上皮細胞層に影響を与える慢性炎症性疾患である。

【0016】

エリテマトーデスは、膠原病グループに由来する全身性自己免疫疾患である。ＳＬＥ（全身性エリテマトーデス）の特別な特徴は、いわゆる蝶形紅斑である。いずれにせよ炎症が関与している。

【0017】

乾癬は、自然免疫細胞および獲得免疫細胞によって放出される炎症性メディエーターの過剰産生によってもたらされる疾患プロセスである。

【0018】

疥癬は、小児における感染に起因する３つの最も一般的な炎症性皮膚障害のうちの１つである。

【0019】

蕁麻疹は、６週間以上続く再発性のかゆみを伴う膨疹および／または血管浮腫の発症を特徴とする疾患と定義される。

【0020】

言及したすべての疾患および欠損は、Ｐｓｃｈｙｒｅｍｂｅｌ（たとえばｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｐｓｃｈｙｒｅｍｂｅｌ．ｄｅ／）で詳細に説明されている。

【0021】

マキベリー抽出物によって、疾患の治癒の割合または程度を高めてもよい。本抽出物または組成物によって、皮膚の治癒または再生を促進させてもよい。

【0022】

欠損または疾患は急性または慢性であってもよい。当業者は、治癒（損傷を受けたかまたは別様に欠損もしくは炎症を起こした皮膚の再建または皮膚の再生）が望ましいかまたは有益である、本明細書に開示された実施形態が関係する欠損および疾患の範囲を容易に認識するであろう。好ましい実施形態において、上述の欠損および疾患は、好ましくは、ヒトの皮膚炎、アトピー性皮膚炎（神経皮膚炎）、日光皮膚炎、湿疹、手湿疹、扁平苔癬、エリテマトーデス、乾癬、蕁麻疹、かゆみ、疥癬、しみ、雀卵斑および乾燥／アトピー性皮膚の群から選択される。

【0023】

したがって、特に、マキベリー抽出物の抗酸化的および抗炎症防御に関するアプローチは、皮膚の一次予防に重要であるが、一方でこのアプローチによってリスクを低下させ、欠損または疾患の治癒手順を改善させてもよい。さらに、マキベリー抽出物は、本実施例に示されるように、特にＩＬ－８の媒介による特定の抗炎症作用を示すことが有利である。

【0024】

マキベリー抽出物は、原料（果物およびベリー）から得られるそれぞれの画分に基づいて、水／アルコールおよび他の溶媒によって得ることができる。このような方法は、最新技術において周知である。

【0025】

水／アルコール抽出剤は、４０：６０（ｖ／ｖ）～６０：４０（ｖ／ｖ）、特に４１：５９（ｖ／ｖ）、または５０：５０（ｖ／ｖ）の比率で用いられる。

【0026】

アルコールとして、特にエタノール、特に９６％エタノール（ｖ／ｖ）が用いられる。

【0027】

好ましい実施形態において、マキベリー抽出物は、有効成分としてアントシアニン（糖を含む）、特にデルフィニジン配糖体（いわゆるデルフィニジン）で富化されている。特に、マキベリー抽出物は、デルフィニジン‐３‐サンブビオシド‐５‐グルコシド、デルフィニジン‐３，５‐ジグルコシド、デルフィニジン‐３‐サンブビオシドまたはデルフィニジン‐３‐グルコシドで富化されている。さらに、デルフィニジン‐３‐Ｏ‐ガラクトシド、デルフィニジン３‐Ｏ‐グルコシド、シアニジン‐３‐Ｏ‐ガラクトシド、デルフィニジン‐３‐Ｏ‐アラビノシド、シアニジン‐３‐Ｏ‐グルコシド、ペツニジン‐３‐Ｏ‐ガラクトシド、ペツニジン‐３‐Ｏ‐グルコシド、シアニジン‐３‐Ｏ‐アラビノシド、ペオニジン‐３‐Ｏ‐ガラクトシド、ペツニジン‐３‐Ｏ‐アラビノシド、マルビジン‐３‐Ｏ‐ガラクトシド、ペオニジン‐３‐Ｏ‐グルコシド、マルビジン‐３‐Ｏ‐グルコシド、ペオニジン‐３‐Ｏ‐アラビノース、マルビジン‐３‐Ｏ‐アラビノースは、マキベリー抽出物の好ましい化合物である。

【0028】

【化1】

【0029】

【表1】

【0030】

化学式１および表１は、いくつかのアントシアニジン（糖を含まない）を示している。

【0031】

好ましい実施形態において、マキベリー抽出物は、
ａ）植物材料の粗抽出物を得るステップと、
ｂ）前記粗抽出物を濾過するステップと、
ｃ）前記粗抽出物をポリスチレン樹脂に接触させ、前記樹脂に前記アントシアニンを吸着させるステップと、
ｄ）前記樹脂を洗浄するステップと、
ｅ）前記ポリスチレン樹脂から前記アントシアニンを溶出して、アントシアニンが富化された組成物を得るステップと、
によって得ることができる。

【0032】

したがって、本発明は、最小限２５％（ｗ／ｗ）のデルフィニジンと最小限３５％（ｗ／ｗ）の総アントシアニンとを含むように規格化されたマキベリー抽出物を指す。

【0033】

好ましい実施形態において、マキベリー抽出物は主要活性成分である。

【0034】

「主要活性成分」は、他の活性成分に加えて、本発明による組成物中に活性成分であるマキベリー抽出物が主要量で存在することを意味する。

【0035】

本明細書で使用される場合、用語「治療する」および「治療」または「予防する」および「予防」は、状態または症状を治療し、状態または疾患の形成を予防し、または別様に状態もしくは疾患または他のいかなる望ましくない症状の進展も予防し、妨ぎ、遅らせ、または回復させるためのありとあらゆる使用を意味する。したがって、用語「治療する」および「治療」または「予防する」および「予防」は、それらの最も広い意味とみなされる。たとえば、治療は、必ずしも対象者が完全回復まで治療されることを意味しない。

【0036】

本明細書で使用される場合、用語「対象者」は、ヒトおよび動物を含む。通常は、対象者はヒトまたは患者である。

【0037】

好ましくは、マキベリー抽出物は、１以上の薬学的に許容される担体または希釈剤をさらに含む医薬組成物として製剤化される。

【0038】

本発明のマキベリー抽出物を用いて製造される医療用医薬品は、好ましくは、非経口、局所、筋肉内、関節周囲、関節内、静脈内、腹腔内、皮下、または直腸投与に加えて、経口投与することができる。本発明は、本発明のマキベリー抽出物に、薬学的に適切で生理学的に許容される媒体と、任意選択でさらなる適切な有効成分、添加剤または補助物質とを加えて投与用薬剤の適切な剤形をもたらす機能を特徴とする医療用医薬品の製造プロセスに関する。適切な固体または液体のガレヌス剤形の調製品または製剤には、たとえば、粒状剤、粉末剤、糖衣錠、錠剤、（マイクロ）カプセル、座剤、シロップ、ジュース、懸濁液、乳剤、滴剤また注射液だけでなく、従来の補助物質の調製に用いられ、有効成分を遅延放出する調製物（たとえば賦形物質）、調製品の崩壊をもたらす薬剤、結合剤、コーティング剤、膨張剤、滑り促進剤または滑沢剤、風味改良剤、甘味料および可溶化剤などがある。補助物質として、炭酸マグネシウム、二酸化チタン、ラクトース、マンニトールおよび他の糖、滑石粉、乳タンパク質、ゼラチン、デンプン、セルロースおよびその誘導体、動物および植物油、たとえばタラ肝油、ひまわり油、落花生油またはゴマ油、ポリエチレングリコール、ならびに溶媒、たとえば滅菌水および１価または多価アルコール、たとえばグリセリンなど、を挙げてもよい。

【0039】

マキベリー抽出物を医薬品の調製品に用いるとき、たとえば注射剤（乳化性、懸濁性、非水性など）または、使用前に乳化または懸濁させる固形注射剤、輸液、粉末剤、顆粒、錠剤、カプセル、腸溶錠、トローチ、内用液剤、懸濁液、乳剤、シロップ、外用液剤、湿布、点鼻薬、吸入剤、軟膏、ローション、座剤、経腸栄養剤などの、経口または非経口投与に有利に用いられる任意の剤形で投与してもよい。これは、病状に応じて、単独または組み合わせのいずれかで使用してもよい。これらは、製造用の薬理学的および薬学的に許容されるアジュバントを主要薬物に添加する従来の方法に従って調製してもよい。

【0040】

医療用医薬品は、好ましくは、各単位が、活性成分として規定量の本発明のマキベリー抽出物を含む投与単位で製造され投与される。錠剤、カプセル、糖衣錠または座剤などの固体の投与単位の場合は、この用量は１～１０００ｍｇ、好ましくは５０～３００ｍｇにすることができ、アンプル剤形の注射液の場合は、この用量は、０．３～３００ｍｇ、好ましくは１０～１００ｍｇにすることができる。

【0041】

体重５０～１００ｋｇ、たとえば７０ｋｇの成人患者の治療には、１日量の有効成分２０～１０００ｍｇ、好ましくは有効成分１００～５００ｍｇが必要とされる。しかしながら、特定の条件下では、より高いまたはより低い１日量を投与することもできる。１日量の投与は、個々の投与単位剤形またはいくつかのより小さな投与単位剤形での一度だけの投与で、または規定の間隔での細分化した量の複数回の投与で行うことができる。

【0042】

以下に、実施例を用いて本発明をより詳細に説明する。しかしながら、これらの実施例は、本発明の保護の範囲を何ら限定するものではない。

【0043】

これらの実施例は、いくつかの図面も参照する。それらの凡例は下記に示す。
実施例
Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）（ｍａｑｕｉｓｕｐｒｅｍｅ（登録商標）という商標名もある）は、Ａｎｋｌａｍ Ｅｘｔｒａｋｔ社（ドイツ）によってＧＭＰ条件下で製造される、マキベリーの高水溶性粉末状抽出物である。Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、最小限２５％のデルフィニジンと最小限３５％の総アントシアニンとを含むように規格化されている。
実施例１：
細胞のグルコース利用に対するＤｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）の効果。

【0044】

培養ケラチノサイト（ＨａＣａＴ細胞；成人ヒト皮膚由来の異数性不死ケラチノサイト細胞株）を２－ＮＢＤＧ（２－［Ｎ－（７－ニトロベンゾ－２－オキサ－ｌ，３－ジアゾール－４－イル）アミノ］－２－デオキシ－Ｄ－グルコースで標識し、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）または陽性対照（ロシグリタゾン）で２４時間処理した。蛍光を測定し、緑色物体の全積分強度によってデータを解析した。ロシグリタゾンの蛍光を１００％のグルコース取り込みとみなし、グルコース取り込みを、（％グルコース取り込み）＝１００（Ｔ－Ｂ）／（Ｐ－Ｂ）（式中、Ｔ（処理）はＤｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）処理細胞の蛍光であり、Ｂ（基礎）は２－ＮＢＤＧ細胞の蛍光であり、Ｐ（陽性対照）は、ロシグリタゾンで処理した細胞の蛍光である）として算出する。その結果、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、試験した最高濃度でケラチノサイトのグルコース取り込みを誘発した。したがって、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）の摂取は、皮膚関連の細胞のグルコース取り込みを増加させ、それによって細胞に栄養を与え、細胞の生存能力を高め、さらに健康な皮膚の維持をもたらす（図１）。
実施例２：
Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、強力なＴＲＰＶ１アンタゴニスト作用を示す。

【0045】

培養２９３Ｔ－ＶＲ１をＤｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）とともにインキュベートし、次いでアゴニストカプサイシンで３時間刺激した。ＴＲＰＶ－１拮抗作用の陽性対照としてカプサゼピンを用いた。刺激の３時間後に生細胞イメージングによって細胞生存能力を測定した。その結果、より高い濃度でのＤｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）処理による、ＴＲＰＶ１受容体に対する強力なアゴニスト活性を反映する、カプサイシン処理細胞への高い生存能力が明らかとなった。ＴＲＰＶ１受容体（カプサイシン受容体）は熱感および疼痛感（侵害受容）を高めることが公知であり、また体温を感知し、制御することができる。ＴＲＰＶ１受容体の遮断は、皮膚の治療のための興味深いアプローチである。したがって、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、敏感皮膚に対して抗かゆみ効果だけでなく抗疼痛効果を示す可能性がある（図２）。
実施例３：
Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は抗炎症作用を示す。

【0046】

Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）の存在下、初代正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）をＩＬ－１β（細胞刺激）とともに２４時間インキュベートした。細胞刺激の２４時間後、炎症性サイトカインＩＬ－６およびＩＬ－８についてＥＬＩＳＡ法によって細胞培養上清を検査した。Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、１０μｇ／ｍｌおよび１００μｇ／ｍｌ処理で、ＮＦＩＤＦにおけるＩＬ－ｌβ誘発ＩＬ－６放出に対して阻害作用を示した。さらに、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、ＮＦＩＤＦにおいて、用量依存的にＩＬ－８放出の強い抑制を示した（図３）。
実施例４：
Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、コラーゲン分解酵素ＭＭＰ－１に対して阻害作用を示す
ＨａＣａＴケラチノサイトを培養し、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）の存在下、ＰｏｌｙＩＣで２４時間刺激した。２４時間後、細胞刺激上清を除去し、ＥＬＩＳＡによってＭＭＰ－１濃度を調べた。Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで、ＭＭＰ－１酵素に対して強力かつ用量依存的な阻害作用を示した。したがって、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、皮膚の弾力性の維持に関して潜在的に有益な効果を示す可能性がある（図４）。
実施例５：
Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、チロシナーゼ活性に影響を及ぼし、ｉｎ ｖｉｔｒｏでメラニン産生を低下させる
Ｂ１６黒色腫細胞におけるチロシナーゼ活性を測定するために、細胞をＤｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）またはコウジ酸（陽性対照として）で７２時間処理した。細胞の溶解後、上清をＬ－ドーパ（メラニン前駆体）とともに２時間インキュベートし、測光法を用いて４８５ｎｍでチロシナーゼ活性を測定した。メラニン生成を調べるために、Ｂ１６細胞をＤｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）で３日間処理し、次いで処理終了時にリン酸緩衝生理食塩水で洗浄し、ＮａＯＨ含有１０％ＤＭＳＯに６０℃で１時間溶解した。４０５ｎｍでの光度測定によってメラニンを測定した。その結果、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、用量依存的にチプロシナーゼ活性を阻害し、メラニン産生の減少を裏付けることができた。したがって、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）は、しみまたは雀卵斑の治療に有用な可能性がある（図５）。

【図面の簡単な説明】

【0047】

【図1】図１は、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）がケラチノサイトにおいてグルコース取り込みを促進することを示すグラフである。

【図2】図２は、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）が敏感皮膚状態に有益な効果を示すグラフである。

【図3】図３は、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）が線維芽細胞の免疫刺激に対して抗炎症作用を示すグラフである。

【図4】図４は、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）がケラチノサイトにおいてコラーゲン繊維分解酵素ＭＭＰ－１を強力に抑制することを示すグラフである。

【図5】図５は、Ｄｅｌｐｈｉｎｏｌ（登録商標）が用量依存的にチロシナーゼ活性を阻害し、ｉｎ ｖｉｔｒｏでメラニン産生を低下させることを示すグラフである。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【手続補正書】

【提出日】2021-06-22

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

湿疹、手湿疹、扁平苔癬、エリテマトーデス、乾癬、疥癬、蕁麻疹の群から選択される炎症性皮膚状態の治療または予防に使用するための医薬または栄養補給剤であって、
マキベリー抽出物を含み、
前記マキベリー抽出物が、最小限２５％（ｗ／ｗ）のデルフィニジンと最小限３５％（ｗ／ｗ）のアントシアニンとを含み、
前記抽出物が、
ａ）植物材料の粗抽出物を得るステップと、
ｂ）前記粗抽出物を濾過するステップと、
ｃ）前記粗抽出物を吸着剤と接触させ、前記吸着剤、特に樹脂に前記アントシアニンを吸着させるステップと、
ｄ）前記吸着剤を洗浄するステップと、
ｅ）前記吸着剤から前記アントシアニンを溶出して、アントシアニンが富化された組成物を得るステップとによって得られる、医薬または栄養補給剤。

【請求項2】

皮膚疾患の治療または予防に使用するための医薬または栄養補給剤であって、前記皮膚疾患がかゆみである、マキベリー抽出物を含む医薬または栄養補給剤。

【請求項3】

前記マキベリー抽出物が、特に４０：６０（ｖ／ｖ）～６０：４０（ｖ／ｖ）、特に４１：５９（ｖ／ｖ）または５０：５０（ｖ／ｖ）の水／アルコール抽出剤によって得られる、請求項１または２に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項4】

前記アルコール抽出剤が、エタノール、特に９６％エタノールである、請求項３に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項5】

ステップｄ）で水を使用し、ステップｅ）でエタノールを使用する、請求項１に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項6】

ステップａ）の植物材料が、果物および／またはベリーから選択される、請求項１に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項7】

ステップｃ）からステップｄ）までの前記吸着剤が、樹脂、特にポリマー樹脂またはポリスチレン樹脂である、請求項１に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【請求項8】

適切な場合には、特に糖衣錠、錠剤、フィルムコーティング錠、粉末剤、カプセルまたは希釈液の形態での適切な担体物質、特に滴剤、ジュースまたはシロップ、軟膏、乳剤、粒状剤、粉末剤、点鼻スプレー、液体または固体の吸入製剤、圧迫包帯、創傷および歯肉の被覆、タンポナーデ、扁桃塗布液、うがい液、リンス液、注射剤、輸液、顆粒、腸溶錠、トローチ、懸濁液、湿布、点鼻薬、吸入剤、ローション、座剤、経腸栄養剤を含む製剤を含む、請求項１～７のいずれか１項に記載の使用のための医薬または栄養補給剤。

【国際調査報告】