▶ エピタス バイオサイエンシズ（シャンハイ）カンパニー，リミティドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-07-11
(54)【発明の名称】ＴＤＧ活性を阻害する化合物
(51)【国際特許分類】
C07D 209/44 20060101AFI20220704BHJP
C07D 405/06 20060101ALI20220704BHJP
C07D 405/12 20060101ALI20220704BHJP
C07D 471/04 20060101ALI20220704BHJP
C07D 411/06 20060101ALI20220704BHJP
C07D 319/18 20060101ALI20220704BHJP
C07D 401/06 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/357 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/397 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/4025 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/4035 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/4155 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/416 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/427 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/437 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/4433 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/453 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/4725 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/506 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/538 20060101ALI20220704BHJP
A61K 31/55 20060101ALI20220704BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20220704BHJP
【ＦＩ】
C07D209/44
C07D405/06 CSP
C07D405/12
C07D471/04 106H
C07D411/06
C07D319/18
C07D401/06
A61K31/357
A61K31/397
A61K31/4025
A61K31/4035
A61K31/4155
A61K31/416
A61K31/427
A61K31/437
A61K31/4433
A61K31/453
A61K31/4725
A61K31/506
A61K31/538
A61K31/55
A61P35/00
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021565772
(86)(22)【出願日】2020-04-14
(85)【翻訳文提出日】2022-01-04
(86)【国際出願番号】 CN2020084755
(87)【国際公開番号】W WO2020224396
(87)【国際公開日】2020-11-12
(31)【優先権主張番号】201910385851.5
(32)【優先日】2019-05-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】521456449
【氏名又は名称】エピタス バイオサイエンシズ（シャンハイ）カンパニー，リミティド
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100141977
【弁理士】
【氏名又は名称】中島 勝
(74)【代理人】
【識別番号】100138210
【弁理士】
【氏名又は名称】池田 達則
(72)【発明者】
【氏名】チュー ウェイシン
(72)【発明者】
【氏名】ヤン ションリエン
(72)【発明者】
【氏名】シュイ クオリャン
【テーマコード（参考）】
4C063
4C065
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C063AA01
4C063BB04
4C063CC14
4C063CC79
4C063CC82
4C063CC87
4C063DD02
4C063DD03
4C063DD06
4C063DD07
4C063DD10
4C063DD12
4C063DD14
4C063DD15
4C063DD19
4C063DD22
4C063DD29
4C063DD54
4C063DD62
4C063EE01
4C065AA05
4C065BB05
4C065CC01
4C065DD03
4C065EE02
4C065HH01
4C065JJ01
4C065KK09
4C065LL01
4C065PP07
4C065QQ05
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086AA04
4C086BA15
4C086BC02
4C086BC07
4C086BC10
4C086BC17
4C086BC28
4C086BC30
4C086BC32
4C086BC36
4C086BC37
4C086BC42
4C086BC74
4C086BC82
4C086CB05
4C086GA02
4C086GA06
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZB26
4C086ZC20
(57)【要約】
本発明は、ＴＤＧ活性を阻害する化合物のクラスを提供する。具体的には、本発明は、式Ｉに示されるような新規構造を有する化合物を提供する。本発明の小分子阻害剤は、ＴＤＧに対して優れた阻害効果を有する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
Ｒ1およびＲ2は、ＯＨ、ＳＨ、置換もしくは非置換のＣ１－６アルコキシ、置換もしくは非置換のＣ１－６アルキルチオからなる群からそれぞれ独立に選択され；またはＲ1およびＲ2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、置換または非置換の５～７員環を形成し；および該５～７員環は、【化1】
Ｒ1およびＲ2において、「置換」という語は、基中の水素が、ハロゲン、Ｃ１－６アルキル、ハロゲン化Ｃ１－６アルキル、シアノからなる群から選択される一つまたは複数（好ましくは１～３）の置換基によって置換されていることを意味し；
Ｒ3は、Ｃ（Ｒｃ）2、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、ＣＲc（ＯＨ）、ＣＲc（ＳＨ）からなる群から選択され；
ｎは、０、１、２、３、または４であり；
Ｒ4は、置換または非置換のＣ２－Ｃ６アルケニレン、置換または非置換のＣ２－Ｃ６アルキニレン、ＮＲa、置換または非置換の環Ｇ基（ｒｉｎｇ Ｇ ｇｒｏｕｐ）からなる群から選択される二価基であり；ここで、該環Ｇ（ｒｉｎｇ Ｇ）は、４～１８員の複素環、５～１８員の芳香族複素環、Ｃ３－Ｃ１４芳香環、およびＣ３－Ｃ１８炭素環からなる群から選択され；
Ｒ4において、「置換」という語は、Ｒ4基の一つまたは複数の水素は、それぞれ独立にＲ’および／またはＲ’’で置換されていることを意味し；ただし、Ｒ4が環Ｇ基である場合、該環Ｇは、さらに任意選択でオキソおよび／またはチオを含んでもよく；
Ｒ5は、Ｈ、ニトロ、ハロゲン、シアノ、置換または非置換のＣ１－Ｃ１２アルキル、置換または非置換のＣ１－Ｃ１２アルコキシ、置換または非置換のＣ１－Ｃ１２アルキルカルボニル、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＯＣＯＲb、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＣＯＯＲb、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＮＲa－ＣＯＯＲb、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＮＲa－ＯＣＯＲb、Ｎ（Ｒa）2、置換または非置換の環Ｅ基（ｒｉｎｇ Ｅ ｇｒｏｕｐ）からなる群から選択され；ここで該環Ｅ基は、４～１８員の複素環基、５～１８員のヘテロアリール基、Ｃ６－Ｃ１４アリール、Ｃ３－Ｃ１８シクロアルキルからなる群から選択され；Ｒ5において、「置換」という語は、Ｒ5基の一つまたは複数の水素は、Ｒ’および／またはＲ’’で置換されていることを意味し；ただし、Ｒ5が環Ｅ基である場合、該環Ｅ基は、さらに任意選択でオキソおよび／またはチオを含んでもよく；
ｏ＝０、１、または２であり；
Ｒ’は、それぞれ独立にヒドロキシル、チオール、ニトロ、ハロゲン、シアノ、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルキル、Ｎ（Ｒa）2、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルコキシ、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルキルチオ、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルキルカルボニル、－ＣＯＯＲb、－ＯＣＯＲb、置換または非置換の４～１２員の複素環基、置換または非置換の５～１２員のヘテロアリール、置換または非置換のＣ６－Ｃ１４アリール、置換または非置換のＣ３－Ｃ１５炭素環基からなる群から選択され；
Ｒ’’は、それぞれ独立にＨ、ヒドロキシル、チオール、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
Ｒa、Ｒb、およびＲcは、それぞれ独立にＨ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
特に明記しない限り、「置換」という語は、基中の一つまたは複数の水素が、シアノ、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、およびＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択される置換基によって置換されていることを意味する、
式Ｉ
【化2】
【請求項2】
【化3】
【化4】
【化5】
【請求項3】
【化6】
【化7】
【請求項4】
前記環Ｅ基は、【化8】
【請求項5】
前記化合物は、式ＩＶ－Ａ、式ＩＶ－Ｂ、式ＩＶ－Ｃ、式ＩＶ－または式ＩＶ－Ｄ【化9】
【請求項6】
前記化合物は、【化10-1】
【化10-2】
【請求項7】
化合物を製造する方法であって、ここで該方法は、【化11】
ここでＺは脱離基であり；
ｎは、１、２、または３であり；
Ｒ5－ＮＲa’は、
【化12】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ5、およびＲcは請求項１で定義されている通りである、方法。
【請求項8】
（ｉ）請求項１に記載の化合物、および（ｉｉ）薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項9】
（ｉ）ＴＤＧ阻害剤の製造のための、または（ｉｉ）ＴＤＧの過剰発現に関係する疾患の治療および／または予防のための、請求項１に記載の化合物、またはその塩、またはその異性体、または請求項８に記載の医薬組成物の使用。
【請求項10】
前記ＴＤＧの過剰発現に関係する疾患は、腫瘍である、請求項９に記載の使用。
【請求項11】
前記腫瘍は、肺がん、結腸直腸がん、メラノーマ、乳がん、肝がん、神経膠腫、腎がん、膵がん、卵巣がん、胃がん、神経芽細胞腫、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１０に記載の使用。
【請求項12】
ＴＤＧ活性を阻害する方法であって、有効量の請求項１に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、またはその薬学的に許容される塩、またはその水和物、またはその結晶形、またはその溶媒和物、または請求項８に記載の医薬組成物と対象を接触させることにより、ＴＤＧ活性を阻害することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、医薬品化学の分野、特にＴＤＧ活性を阻害する化合物およびその製造および使用に関する。
【背景技術】
【0002】
ヒトチミンＤＮＡグリコシラーゼ（ｈＴＤＧ）は、ウラシルＤＮＡグリコシラーゼ（ＵＤＧ）のスーパーファミリーに属する。このファミリーの酵素は、塩基フリップアウト（ｂａｓｅ－ｆｌｉｐｐｉｎｇ）機構を使用して、二本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）内の損傷した塩基を特定し、ＤＮＡ塩基除去修復（ＢＥＲ）経路を活性化して損傷した塩基を置換することにより、ＤＮＡ修復を仲介する。ｈＴＤＧは、Ｇ・ＵおよびＧ・Ｔのペアリングでミスマッチのピリミジンウラシルおよびチミンを認識し、次にグリコシル結合の切断を行ってＢＥＲ経路を活性化し、これらのミスマッチのＤＮＡを修復すると報告されている。ｈＴＤＧのもう一つの重要な機能は、５－メチルシトシン（５ｍＣ）のアクティブな脱メチル化を仲介することにより、エピジェネティックな調節経路に関与することである。真核生物では、シトシンのＣ５位置でのメチル化および脱メチル化が、転写調節およびゲノムの再プログラミングにおいて重要な役割を果たす。最近の研究は、哺乳類では、ＴＥＴジオキシゲナーゼファミリーのメンバーが５ｍＣを５－ヒドロキシメチルシトシン（５ｈｍＣ）に酸化し、さらに５－ホルミルシトシン（５ｆＣ）および５ｃａＣに酸化することができることを示している。ｈＴＤＧは、５ｃａＣおよび５ｆＣを認識した後、ＢＥＲ経路を活性化し、酸化シトシンを切除し、切除部位を非酸化シトシン（Ｃ）で修復し、最後に５ｍＣのアクティブな脱メチル化プロセスを完了する。ｈＴＤＧは、この新たに発見されたアクティブな脱メチル化プロセスを通じて、転写調節およびマウスの胚発生に関与している。さらに、ｈＴＤＧは、タンパク質間相互作用を介して一連の転写調節因子（たとえば、ＣＢＰ／ｐ３００、ＲＸＲａ、ＴＣＦ４、ＴＴＦ－１等）に結合し、細胞の転写調節に関与することもできる。
【0003】
マウスの胚発生に関与することに加えて、ＴＤＧ発現レベルは、様々なトランスジェニック発がんマウスモデルにおける乳腺腫瘍上皮組織、骨肉腫、およびリンパ球性がん腫（ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）において増加する。研究によると、ＴＤＧタンパク質の発現は、結腸直腸がんおよび胃がんの臨床病理学的な切片で上方制御されており、ＴＤＧ遺伝子のヌクレオシド多型は様々な腫瘍の感受性と密接に関連している。遺伝子干渉技術を使用してＴＤＧの発現を低下させると、肺がん、結腸直腸がん、メラノーマ、乳がん、肝がん、神経膠腫、腎がん、膵がん、卵巣がん、胃がん、神経芽細胞腫等の様々な腫瘍細胞株の生存および増殖を阻害することができる。
【0004】
しかしながら、ＴＤＧを標的とする高効率の小分子阻害剤はまだ不足している。
【0005】
要約すると、ＴＤＧを標的とする効率的な小分子阻害剤を開発することが当技術分野において急務である。
【発明の概要】
【0006】
本発明の目的は、ＴＤＧを標的とする効率的な小分子阻害剤を提供することである。
【0007】
本発明の第一の態様では、本発明の第１の態様では、式Ｉ
【0008】
【化1】
【0009】
で表される化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、またはその薬学的に許容される塩、またはその水和物、またはその結晶形、またはその溶媒和物が提供され、
ここで、 Ｒ1およびＲ2は、ＯＨ、ＳＨ、置換もしくは非置換のＣ１－６アルコキシ（－Ｏ－Ｃ１－６アルキル）、置換もしくは非置換のＣ１－６アルキルチオ（－Ｓ－Ｃ１－６アルキル）からなる群からそれぞれ独立に選択され；またはＲ1およびＲ2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、置換または非置換の５～７員環を形成し；および該５～７員環は、
ここで、 Ｒ1およびＲ2は、ＯＨ、ＳＨ、置換もしくは非置換のＣ１－６アルコキシ（－Ｏ－Ｃ１－６アルキル）、置換もしくは非置換のＣ１－６アルキルチオ（－Ｓ－Ｃ１－６アルキル）からなる群からそれぞれ独立に選択され；またはＲ1およびＲ2は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、置換または非置換の５～７員環を形成し；および該５～７員環は、
【0010】
【化2】
【0011】
からなる群から選択され；ここでＸおよびＹは、Ｃ（Ｒｃ）2（好ましくはＣＨ2）、Ｏ、Ｓ、ＮＲa、Ｃ（＝Ｏ）、Ｃ（＝Ｓ）からそれぞれ独立に選択され；
Ｒ1およびＲ2において、「置換」という語は、基中の水素が、ハロゲン、Ｃ１－６アルキル、ハロゲン化Ｃ１－６アルキル、シアノからなる群から選択される一つまたは複数（好ましくは１～３）の置換基によって置換されていることを意味し；
Ｒ3は、Ｃ（Ｒｃ）2、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、ＣＲc（ＯＨ）、ＣＲc（ＳＨ）からなる群から選択され；
ｎは、０、１、２、３、または４であり；
Ｒ4は、置換または非置換のＣ２－Ｃ６アルケニレン、置換または非置換のＣ２－Ｃ６アルキニレン、ＮＲa、置換または非置換の環Ｇ基（ｒｉｎｇ Ｇ ｇｒｏｕｐ）からなる群から選択される二価基であり；ここで、該環Ｇ（ｒｉｎｇ Ｇ）は、４～１８員の複素環（好ましくは、４員～１２員の複素環、より好ましくは、４員～６員の複素環）、５～１８員の芳香族複素環（好ましくは、５員～１２員の芳香族複素環）、Ｃ３－Ｃ１４芳香環（好ましくは、Ｃ６－Ｃ１０芳香環；より好ましくはベンゼン環）、およびＣ３－Ｃ１８炭素環からなる群から選択され；
Ｒ4において、「置換」という語は、Ｒ4基の一つまたは複数の水素は、それぞれ独立にＲ’および／またはＲ’’で置換されていることを意味し；ただし、Ｒ4が環Ｇ基である場合、該環Ｇは、さらに任意選択でオキソおよび／またはチオを含んでもよく； Ｒ5は、Ｈ、ニトロ、ハロゲン（好ましくは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ）、シアノ、置換または非置換のＣ１－Ｃ１２アルキル、置換または非置換のＣ１－Ｃ１２アルコキシ（Ｃ１－Ｃ１２アルキル－Ｏ－）（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ）、置換または非置換のＣ１－Ｃ１２アルキルカルボニル（Ｃ１－Ｃ１２アルキル－Ｃ（Ｏ）－）（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルキルカルボニル）、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＯＣＯＲb、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＣＯＯＲb、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＮＲa－ＣＯＯＲb、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＮＲa－ＯＣＯＲb、Ｎ（Ｒa）2、置換または非置換の環Ｅ基（ｒｉｎｇ Ｅ ｇｒｏｕｐ）からなる群から選択され；ここで該環Ｅ基は、４～１８員の複素環基（好ましくは、４員～１２員の複素環基）、５～１８員のヘテロアリール基（好ましくは、５～１２員のヘテロアリール）、Ｃ６－Ｃ１４アリール（好ましくは、Ｃ６－Ｃ１０アルール；より好ましくはフェニル）、Ｃ３－Ｃ１８シクロアルキルからなる群から選択され；Ｒ5において、「置換」という語は、Ｒ5基の一つまたは複数の水素は、Ｒ’および／またはＲ’’で置換されていることを意味し；ただし、Ｒ5が環Ｅ基である場合、該環Ｅ基は、さらに任意選択でオキソおよび／またはチオを含んでもよく；
ｏ＝０、１、または２であり；
Ｒ’は、それぞれ独立にヒドロキシル、チオール（－ＳＨ）、ニトロ、ハロゲン（好ましくは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ）、シアノ、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルキル（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルキル、より好ましくは、Ｃ１－Ｃ４アルキル）、Ｎ（Ｒa）2、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルコキシ（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、より好ましくは、Ｃ１－Ｃ４アルコキシ）、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルキルチオ（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルキルチオ、よりこのマしくは、Ｃ１－Ｃ４アルキルチオ）、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルキルカルボニル（好ましくはＣ１－Ｃ６アルキルカルボニル、より好ましくは、Ｃ１－Ｃ４アルキルカルボニル）、－ＣＯＯＲb、－ＯＣＯＲb、置換または非置換の４～１２員の複素環基、置換または非置換の５～１２員のヘテロアリール、置換または非置換のＣ６－Ｃ１４アリール、置換または非置換のＣ３－Ｃ１５炭素環基からなる群から選択され；
Ｒ’’は、それぞれ独立にＨ、ヒドロキシル、チオール、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
Ｒa、Ｒb、およびＲcは、それぞれ独立にＨ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
特に明記しない限り、「置換」という語は、基中の一つまたは複数の（好ましくは１～３個の）水素が、シアノ、ヒドロキシ、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１－Ｃ６アルキル、およびＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択される置換基によって置換されていることを意味する。
Ｒ1およびＲ2において、「置換」という語は、基中の水素が、ハロゲン、Ｃ１－６アルキル、ハロゲン化Ｃ１－６アルキル、シアノからなる群から選択される一つまたは複数（好ましくは１～３）の置換基によって置換されていることを意味し；
Ｒ3は、Ｃ（Ｒｃ）2、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、ＣＲc（ＯＨ）、ＣＲc（ＳＨ）からなる群から選択され；
ｎは、０、１、２、３、または４であり；
Ｒ4は、置換または非置換のＣ２－Ｃ６アルケニレン、置換または非置換のＣ２－Ｃ６アルキニレン、ＮＲa、置換または非置換の環Ｇ基（ｒｉｎｇ Ｇ ｇｒｏｕｐ）からなる群から選択される二価基であり；ここで、該環Ｇ（ｒｉｎｇ Ｇ）は、４～１８員の複素環（好ましくは、４員～１２員の複素環、より好ましくは、４員～６員の複素環）、５～１８員の芳香族複素環（好ましくは、５員～１２員の芳香族複素環）、Ｃ３－Ｃ１４芳香環（好ましくは、Ｃ６－Ｃ１０芳香環；より好ましくはベンゼン環）、およびＣ３－Ｃ１８炭素環からなる群から選択され；
Ｒ4において、「置換」という語は、Ｒ4基の一つまたは複数の水素は、それぞれ独立にＲ’および／またはＲ’’で置換されていることを意味し；ただし、Ｒ4が環Ｇ基である場合、該環Ｇは、さらに任意選択でオキソおよび／またはチオを含んでもよく； Ｒ5は、Ｈ、ニトロ、ハロゲン（好ましくは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ）、シアノ、置換または非置換のＣ１－Ｃ１２アルキル、置換または非置換のＣ１－Ｃ１２アルコキシ（Ｃ１－Ｃ１２アルキル－Ｏ－）（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ）、置換または非置換のＣ１－Ｃ１２アルキルカルボニル（Ｃ１－Ｃ１２アルキル－Ｃ（Ｏ）－）（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルキルカルボニル）、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＯＣＯＲb、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＣＯＯＲb、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＮＲa－ＣＯＯＲb、－（Ｃ（Ｒc）2）o－ＮＲa－ＯＣＯＲb、Ｎ（Ｒa）2、置換または非置換の環Ｅ基（ｒｉｎｇ Ｅ ｇｒｏｕｐ）からなる群から選択され；ここで該環Ｅ基は、４～１８員の複素環基（好ましくは、４員～１２員の複素環基）、５～１８員のヘテロアリール基（好ましくは、５～１２員のヘテロアリール）、Ｃ６－Ｃ１４アリール（好ましくは、Ｃ６－Ｃ１０アルール；より好ましくはフェニル）、Ｃ３－Ｃ１８シクロアルキルからなる群から選択され；Ｒ5において、「置換」という語は、Ｒ5基の一つまたは複数の水素は、Ｒ’および／またはＲ’’で置換されていることを意味し；ただし、Ｒ5が環Ｅ基である場合、該環Ｅ基は、さらに任意選択でオキソおよび／またはチオを含んでもよく；
ｏ＝０、１、または２であり；
Ｒ’は、それぞれ独立にヒドロキシル、チオール（－ＳＨ）、ニトロ、ハロゲン（好ましくは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ）、シアノ、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルキル（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルキル、より好ましくは、Ｃ１－Ｃ４アルキル）、Ｎ（Ｒa）2、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルコキシ（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、より好ましくは、Ｃ１－Ｃ４アルコキシ）、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルキルチオ（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルキルチオ、よりこのマしくは、Ｃ１－Ｃ４アルキルチオ）、置換または非置換のＣ１－Ｃ１０アルキルカルボニル（好ましくはＣ１－Ｃ６アルキルカルボニル、より好ましくは、Ｃ１－Ｃ４アルキルカルボニル）、－ＣＯＯＲb、－ＯＣＯＲb、置換または非置換の４～１２員の複素環基、置換または非置換の５～１２員のヘテロアリール、置換または非置換のＣ６－Ｃ１４アリール、置換または非置換のＣ３－Ｃ１５炭素環基からなる群から選択され；
Ｒ’’は、それぞれ独立にＨ、ヒドロキシル、チオール、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
Ｒa、Ｒb、およびＲcは、それぞれ独立にＨ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
特に明記しない限り、「置換」という語は、基中の一つまたは複数の（好ましくは１～３個の）水素が、シアノ、ヒドロキシ、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１－Ｃ６アルキル、およびＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択される置換基によって置換されていることを意味する。
【0012】
別の好ましい実施形態では、Ｒ’は、それぞれ独立にニトロ、ハロゲン（好ましくは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ）、シアノ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｎ（Ｒa）2（好ましくは、ＮＨ2）、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、ハロゲン化Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキルチオ、ハロゲン化Ｃ１－Ｃ６アルキルチオ、Ｃ１－Ｃ６アルキルカルボニル、ハロゲン化Ｃ１－Ｃ６アルキルカルボニルからなる群から選択される。
【0013】
別の好ましい実施形態では、Ｒ’は、それぞれ独立にニトロ、ＮＨ2、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｃ１－Ｃ４アルコキシ、Ｃ１－Ｃ４アルキル、Ｃ１－Ｃ４ハロアルキル、シアノからなる群から選択される。
【0014】
別の好ましい実施形態では、Ｒ4は、Ｃ２－Ｃ６アルケニレン、ＮＲa、置換または非置換の環Ｇからなる群から選択される。
【0015】
別の好ましい実施形態では、環Ｇは、少なくとも一つのＮヘテロ原子を含む複素環または芳香族複素環である；好ましくは、環ＧのＮヘテロ原子は、
【0016】
【化3】
【0017】
と結合している。
【0018】
別の好ましい実施形態では、
【0019】
【化4】
【0020】
は、Ｒ5－ＮＲa－、
【0021】
【化5】
【0022】
であり、ここで
【0023】
【化6】
【0024】
は、置換または非置換の環Ｇ基を表す。
【0025】
別の好ましい実施形態では、環Ｇ基は、
【0026】
【化7】
【0027】
からなる群から選択される。
【0028】
別の好ましい実施形態では、
【0029】
【化8】
【0030】
は、非置換であるか、または１～３個のＲ’および／またはＲ’’で置換されているＲ5－ＮＲa－、
【0031】
【化9】
【0032】
からなる群から選択される基である。
【0033】
別の好ましい実施形態では、Ｒ5は、Ｈ、ニトロ、ハロゲン（好ましくは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ）、シアノ、Ｃ１－Ｃ１２アルキルオキシ（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルキルオキシ）、Ｃ１－Ｃ１２アルキルカルボニル（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルキルカルボニル）、Ｃ１－Ｃ１２アルキルエステル基（好ましくは、Ｃ１－Ｃ６アルキルエステル基）、－（Ｃ（Ｒc）２）o－ＮＲa－ＣＯＯＲb、ＮＲa、非置換のもしくは１～３個のＲ’で置換された環Ｅ基からなる群から選択される。
【0034】
別の好ましい実施形態では、環Ｅ基は、Ｃ６－Ｃ１４アリール（好ましくは、フェニル）、５員～１０員のヘテロアリール（好ましくは、１～３個の窒素ヘテロ原子を含む５～１０員の芳香族複素環）から選択される。
【0035】
別の好ましい実施形態では、環Ｅ基は、
【0036】
【化10】
【0037】
から選択される。
【0038】
別の好ましい実施形態では、環Ｅ基は、
【0039】
【化11】
【0040】
から選択される。
【0041】
別の好ましい実施形態では、Ｒ3は存在しないか、またはＣ＝Ｏである。
【0042】
別の好ましい実施形態では、５～７員環は、
【0043】
【化12】
【0044】
である。
【0045】
別の好ましい実施形態では、ＸおよびＹの少なくとも一つは、ＯまたはＳである。
【0046】
別の好ましい実施形態では、ＸはＯであり、ＹはＯ、Ｃ＝Ｏから選択される。
【0047】
別の好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩ
【0048】
【化13】
【0049】
で表され、
ここでＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ5、Ｒc、環Ｇ、およびｎは、上記に定義した通りである。
ここでＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ5、Ｒc、環Ｇ、およびｎは、上記に定義した通りである。
【0050】
別の好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩＩ
【0051】
【化14】
【0052】
で表され、
ここでＲ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒc、Ｙ、Ｘ、およびｎは、上記に定義した通りである。
ここでＲ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒc、Ｙ、Ｘ、およびｎは、上記に定義した通りである。
【0053】
別の好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＶ
【0054】
【化15】
【0055】
で表され、
ここでｎ１＝０、１、または２であり；環Ｇ、Ｒ5、Ｙ、およびＸは、上記に定義した通りである。
ここでｎ１＝０、１、または２であり；環Ｇ、Ｒ5、Ｙ、およびＸは、上記に定義した通りである。
【0056】
別の好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＶ－Ａ、式ＩＶ－Ｂ、式ＩＶ－Ｃ、または式ＩＶ－Ｄ
【0057】
【化16】
【0058】
で表され、
ここでｐ＝０、１、または２であり；ｎ１＝０、１、またはであり；
Ｒ５、Ｒ’、Ｒ’’、Ｙ、およびＸは、請求項１で定義されているとおりである。
ここでｐ＝０、１、または２であり；ｎ１＝０、１、またはであり；
Ｒ５、Ｒ’、Ｒ’’、Ｙ、およびＸは、請求項１で定義されているとおりである。
【0059】
別の好ましい実施形態では、化合物は、式Ｖ－Ａまたは式Ｖ－Ｂ
【0060】
【化17】
【0061】
で表され、
ここでｎ１、Ｒ’、Ｒ’’、Ｙ、およびＸは、上記に定義した通りである。
ここでｎ１、Ｒ’、Ｒ’’、Ｙ、およびＸは、上記に定義した通りである。
【0062】
別の好ましい実施形態では、化合物は、表Ａの化合物１～５４から選択される。
【0063】
本発明の第二の態様は、第一の態様による化合物を調製する方法を提供し、該方法は、
【0064】
【化18】
ここでＺは脱離基であり；
ｎは、１、２、または３であり；
Ｒ5－ＮＲa’は、
【0065】
【化19】
【0066】
Ｒ5－Ｎ（Ｒa）Ｈからなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ5、およびＲcは第一の態様で定義されている通りである。
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ5、およびＲcは第一の態様で定義されている通りである。
【0067】
別の好ましい実施形態では、Ｚは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉからなる群から選択される。
【0068】
本発明の第三の態様は、（ｉ）第一の態様に記載の化合物、および（ｉｉ）薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物を提供する。
【0069】
本発明の第四の態様は、（ｉ）ＴＤＧ阻害剤の製造のための、または（ｉｉ）ＴＤＧの過剰発現に関係する疾患の治療および／または予防のための、第一の態様に記載の化合物、またはその塩、またはその異性体、または第三の態様に記載の医薬組成物の使用を提供する。
【0070】
別の好ましい実施形態では、ＴＤＧの過剰発現に関係する疾患は、腫瘍である。
【0071】
別の好ましい実施形態では、腫瘍は、肺がん、結腸直腸がん、メラノーマ、乳がん、肝がん、神経膠腫、腎がん、膵がん、卵巣がん、胃がん、神経芽細胞腫、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【0072】
本発明の第五の態様は、ＴＤＧ活性を阻害する方法であって、有効量の第一の態様に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、またはその薬学的に許容される塩、またはその水和物、またはその結晶形、またはその溶媒和物、または第三の態様に記載の医薬組成物と対象を接触させることにより、ＴＤＧ活性を阻害することを含む方法を提供する。
【0073】
別の好ましい実施形態では、方法は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで非治療的および非診断的である。
【0074】
本発明の第六の態様は、ＴＤＧの過剰発現に関係する疾患の治療および／または予防のための方法を提供し、該方法は、有効量の第一の態様に記載の化合物、またはその塩、またはその異性体、または第三の態様に記載の医薬組成物を対象に投与することを含む。
【0075】
別の好ましい実施形態では、対象は、哺乳類；好ましくは、ヒトである。
【0076】
本発明の範囲内で、本発明の上記の技術的特徴および以下に具体的に記載される技術的特徴（実施例等）を互いに組み合わせて、スペースの制限のために本明細書で繰り返し説明されない、新規のまたは好ましい技術的解決策を形成することができることを理解されたい。
【発明を実施するための形態】
【0077】
実施形態の詳細な説明
本発明者らは、広範かつ詳細な研究を経てきた。式Ｉに示されるような新規構造を有する化合物、特に式Ｉに示される一連のベンゾジオキサン化合物は、ＴＤＧに対して優れた阻害活性を有することを見出した。これにより、本発明が完成した。
本発明者らは、広範かつ詳細な研究を経てきた。式Ｉに示されるような新規構造を有する化合物、特に式Ｉに示される一連のベンゾジオキサン化合物は、ＴＤＧに対して優れた阻害活性を有することを見出した。これにより、本発明が完成した。
【0078】
定義
本明細書で使用される場合、「環Ｇ基」という用語は、環Ｇが環上で２つの水素を失うことによって形成される（二価）基を指す。同様に、「環Ｅ基」は、環Ｅが環上で１つの水素を失うことによって形成される基を指す。
本明細書で使用される場合、「環Ｇ基」という用語は、環Ｇが環上で２つの水素を失うことによって形成される（二価）基を指す。同様に、「環Ｅ基」は、環Ｅが環上で１つの水素を失うことによって形成される基を指す。
【0079】
特に明記しない限り、「アルキル」という用語は、それ自体で、または別の置換基の一部として、指定された数の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖炭化水素基を指す（すなわち、Ｃ１－Ｃ８は１～８個の炭素を表す）。好ましい例において、アルキルは、一般に、Ｃ１－Ｃ６アルキル、好ましくは、Ｃ１－Ｃ４アルキルを指す。アルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｔ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｎ－ペンチル、ｎ－ヘキシル、ｎ－ヘプチル、ｎ－オクチル等を含むが、これらに限定されない。
【0080】
特に明記しない限り、「アルケニル」または「アルケニレン」という用語は、一つまたは複数の二重結合を有する不飽和アルキルまたはアルキレン基を指す。同様に、「アルキニル」または「アルキニレン」という用語は、一つまたは複数の三重結合を有する不飽和アルキルまたはアルキレン基を指す。そのような不飽和アルキル基の例は、ビニル、２－プロペニル、クロチル、２－イソペンテニル、２－（ブタジエニル）、２，４－ペンタジエニル、３－（１，４－ペンタジエニル）、エチニル、１－および３－プロピニル、３－ブチニル以上の同族体および高級同族体（ｈｉｇｈｅｒ ｈｏｍｏｌｏｇ）および異性体を含む。
【0081】
特に明記しない限り、「シクロアルキル」または「炭素環」という用語は、指定された数の環原子（たとえば、Ｃ３－Ｃ１８シクロアルキルまたはＣ３－Ｃ１８炭素環）を有し、完全に飽和されているまたは不飽和（たとえば、環頂点（ring vertex）間に一つだけの二重結合がある）である。たとえば、シクロプロピル（アルキル）、シクロブチル（アルキル）、シクロペンチル（アルキル）等である。「シクロアルキル」または「炭素環式環」は、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、ビシクロ［２．２．２］オクタン等の二環式および多環式炭化水素環も含む。
【0082】
特に明記しない限り、「ヘテロシクリル」または「複素環」という用語は、窒素および硫黄原子が任意選択で酸化され、窒素原子が任意選択で四級化される、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される１～５個のヘテロ原子を含む飽和または不飽和シクロアルキル基を指す。複素環基は、単環式、二環式または多環式環系であってもよい。複素環基の非限定的な例は、ピロリジン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、ブチロラクタム、バレロラクタム、イミダゾリジノン、ヒダントイン、ジオキソラン、フタルイミド、ピペリジン、１，４－ジオキサン、モルホリン、チオモルホリン、チオモルホリン－Ｓ－オキシド、チオモルホリン－Ｓ，Ｓ－オキシド、ピペラジン、ピラン、ピリドン、３－ピロリン、チオピラン、ピロン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、キヌクリジン等を含む。ヘテロシクロアルキル基は、環炭素またはヘテロ原子を介して分子の残りの部分に結合することができる。シクロアルキルおよびヘテロシクリルアルキル等の用語については、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルが、アルキルまたはアルキレンリンカーを介して分子の残りの部分に結合していることを意味する。
【0083】
特に明記しない限り、「アルキレン」という用語は、それ自体で、または別の置換基の一部として、－ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2－等のアルカンに由来する二価基を指す。アルキル基（またはアルキレン基）は、一般に１～２４個の炭素原子を有し、本発明では１０個以下の炭素原子を有するものが好ましい。「低級アルキル」または「低級アルキレン」は、通常４個以下の炭素原子を有する、より短い鎖のアルキルまたはアルキレン基である。同様に、「アルケニレン」または「アルキニレン」は、それぞれ二重結合または三重結合を有する「アルキレン」の不飽和形態を指す。
【0084】
同様に、特に明記しない限り、「ヘテロアルケニル」および「ヘテロアルキニル」という用語は、それ自体で、または別の用語と組み合わせて、それぞれ、指定された数の炭素およびそれぞれＯ、Ｎ、Ｓｉ、およびＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含むアルケニルまたはアルキニルを指す。ここで、窒素原子および硫黄原子は任意選択で酸化され、窒素ヘテロ原子は任意選択で四級化されていてもよい。ヘテロ原子Ｏ、Ｎ、およびＳは、ヘテロアルキル基の任意の内部位置に配置することができる。
【0085】
特に明記しない限り、「アルコキシ」または「アルキルオキシ」、「アルカミノ」または「アルキルアミノ」および「アルクチオ」または「アルキルチオ」（またはチオアルコキシ）という用語は、それらの従来の意味で使用され、それぞれ、酸素原子、アミノ基、または硫黄原子を介して分子の残りの部分に結合したアルキル基を指す。さらに、ジアルキルアミノ基の場合、アルキル基は同じでも異なっていてもよく、それぞれのアルキル基に結合した窒素原子と結合して３～７員環を形成することもできる。したがって、－ＮＲaＲbで表される基は、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、アゼチジニル等を含む。
【0086】
特に明記しない限り、「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、それ自体で、または別の置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を指す。さらに、「ハロアルキル」等の用語は、モノハロアルキルまたはポリハロアルキルを含むことを意味する。たとえば、「Ｃ1-4ハロアルキル」という用語は、トリフルオロメチル、２，２，２－トリフルオロエチル、４－クロロブチル、３－ブロモプロピル等を含むことを意味する。
【0087】
特に明記しない限り、「アリール」または「芳香族環」という用語は、多価不飽和（通常は芳香族）炭化水素基を指し、単一の環または複数の環（最大３つの環）が融合または共有結合していてもよい。「ヘテロアリール」または「芳香族複素環」という用語は、窒素および硫黄原子が任意選択で酸化され、窒素原子が任意選択で四級化される、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される１～５個のヘテロ原子を含むアリール基（または環）を指す。ヘテロアリール基は、ヘテロ原子を介して分子の残りの部分に結合することができる。アリール基の非限定的な例は、フェニル、ナフチル、およびビフェニルを含み、ヘテロアリール基の非限定的な例は、ピリジル、ピリダジニル、ピラジニル、ピリミジニル、トリアジニル、キノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリン、フタラジニル、ベンゾトリアジニル、プリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイソキサゾリル、イソベンゾフリル、イソインドリル、インドリジニル、ベンゾトリアジニル、チエノピリジル、チエノピリミジニル、ピラゾロピリミジニル、イミダゾピリジン、ベンゾチアゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、イソチアゾリル、ピラゾリル、インダゾリル、プテリジニル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアジアゾリル、ピロリル、チアゾリル、フリル、チエニル等を含む。上記のアリールおよびヘテロアリール環系のそれぞれの置換基は、以下に記載される許容される置換基の群から選択される。
【0088】
簡潔にするために、「アリール」という用語が他の用語と組み合わせて使用される場合（たとえば、アリールオキシ、アリールチオ、アラルキル）、それは、上記で定義されたアリールおよびヘテロアリール環を含む。したがって、「アラルキル」という用語は、アリール基が分子の残りの部分に結合したアルキル基に結合している基（たとえば、ベンジル、フェネチル、ピリジルメチル等）を含むことを意味する。
【0089】
一部の実施形態では、前述の用語（「アルキル」、「アリール」および「ヘテロアリール」等）は、特定の基の置換形態および非置換形態の両方を含む。各タイプの基に好ましい置換基を以下に示す。簡潔にするために、アリールおよびヘテロアリールという用語は、以下に提供される置換または非置換形態を指し、一方、「アルキル」および関連する脂肪族基という用語は、置換されていると示されない限り、非置換形態を指す。
【0090】
アルキル基の置換基（一般にアルキレン、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルと呼ばれるものを含む）は、以下の基から選択される様々な基であってもよい：－ハロゲン、－ＯＲ’、ＮＲ’Ｒ’’、ＳＲ’、－ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、－Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＣＯ2Ｒ’，－ＣＯＮＲ’Ｒ’’、－ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＮＲ’－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）2Ｒ’、－ＮＨ－Ｃ（ＮＨ2）＝ＮＨ、－ＮＲ’Ｃ（ＮＨ2）＝ＮＨ、－ＮＨ－Ｃ（ＮＨ2）＝ＮＲ’、－Ｓ（Ｏ）Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）2Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）2ＮＲ’Ｒ’’、ＮＲ’Ｓ（Ｏ）2Ｒ”、－ＣＮ、および－ＮＯ2。ゼロから（２ｍ’＋１）までの範囲の数値であり、ここで、ｍ’は、この基の炭素原子の総数である。Ｒ’、Ｒ’’およびＲ’’’はそれぞれ独立して水素、非置換Ｃ1-8アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換アリール、１～３個のハロゲンで置換されたアリール、非置換Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8アルコキシまたはＣ1-8チオアルコキシ、または非置換のアリール－Ｃ1-4アルキルを表す。Ｒ’およびＲ’’が同じ窒素原子に結合している場合、それらは窒素原子と結合して３、４、５、６、または７員環を形成することができる。たとえば、－ＮＲ’Ｒ’’１－ピロリジニルおよび４－モルホリニルを含む。単独でまたは別の基の一部として使用される「アシル」という用語は、基の結合点に最も近い炭素上の２つの置換基が置換基＝Ｏ（たとえば、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ3、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ2ＣＨ2ＯＲ’等）で置換されているものを指す。
【0091】
本明細書で使用される場合、「ヘテロ原子」という用語は、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、およびケイ素（Ｓｉ）を含むことを意図している。
【0092】
本明細書で提供される化合物の場合、置換基（通常はＲ基）から環の中心（たとえば、環Ｇ、環Ｅ等）への結合は、利用可能な環頂点（または環から派生した基）での接続を提供する結合を意味すると理解される。
【0093】
特に明記しない限り、本発明において、出現するすべての化合物は、単一のキラル化合物、または様々な異なるキラル化合物（すなわち、ラセミ体）の混合物等のすべての可能な光学異性体を含むことを意図している。本発明のすべての化合物において、各キラル炭素原子は、任意選択で、Ｒ配置もしくはＳ配置、またはＲ配置およびＳ配置の混合物であってもよい。
【0094】
本発明の特定の化合物は、不斉炭素原子（光学中心）または二重結合を有する；ラセミ体、ジアステレオマー、幾何異性体、位置異性体、および個々の異性体（たとえば、分離されたエナンチオマー）は、本発明の範囲に含まれるべきである。本明細書で提供される化合物が定義された立体化学を有する場合（ＲまたはＳで表されるか、または破線またはくさび形の結合で示される）、当業者は、それらの化合物が他の異性体を実質的に含まない（たとえば、少なくとも８０％、９０％、９５％、９８％、９９％、および最大１００％他の異性体を含まない）ことを理解するであろう。
【0095】
本明細書において、特に明記しない限り、「置換された」という用語は、基上の一つまたは複数水素原子が、以下の基から選択される置換基によって置換されることを意味する：シアノ、ヒドロキシル、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６ハロアルキル。
【0096】
本明細書で使用される場合、「１から３」または「１～３」は、１、２、または３を指す。
【0097】
本明細書で使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、様々な成分を本発明の混合物または組成物において一緒に使用することができることを意味する。したがって、「実質的に構成される」および「からなる」という用語は、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語に含まれる。
【0098】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される」成分という用語は、過度の有害な副作用（毒性、刺激、およびアレルギー反応等）なしに、ヒトおよび／または動物での使用に適した物質、すなわち、合理的な利益／リスク比を有する物質を指す。
【0099】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」または「有効量」という用語は、単独でまたは別の治療薬と組み合わせて使用される場合、疾患の退縮を促進することができる、以下に記載される任意の量の薬物を指す。退縮は、疾患症状の重症度の低下、無症候性期間の頻度および期間の増加、または疾患によって引き起こされる障害（ｄｉｓｏｒｄｅｒ）または障害（ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ）の予防として顕在化する。本発明の薬物または薬剤の「治療有効量」または「有効量」は、「予防的有効量」も含む。「予防的有効量」とは、以下に記載する任意の量の薬剤であり、この量の薬剤を単独で、または他の治療薬と組み合わせて投与する場合、疾患を発症するリスクまたは疾患に罹患するリスクのある対象に投与する場合、疾患の再発、疾患の発症または再発を抑えることができる。
【0100】
本発明の化合物
本発明は、ＴＤＧを効果的に阻害する化合物を提供する。
本発明は、ＴＤＧを効果的に阻害する化合物を提供する。
【0101】
本明細書で使用される場合、「本発明の化合物」または「活性化合物」という用語は、式Ｉ
【0102】
【化20】
【0103】
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩、またはそのプロドラッグ、またはその光学異性体、またはそのラセミ体、またはその溶媒和物、またはその多量体を指し、
ここで、各基は第一の態様に記載したように定義されている。
ここで、各基は第一の態様に記載したように定義されている。
【0104】
特定の実施形態では、本発明の化合物は、表１の化合物（すなわち、化合物１～化合物５４）である。
【0105】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、本発明の化合物と、医薬品としての使用に適した酸または塩基とによって形成される塩を指す。薬学的に許容される塩は、無機塩および有機塩を含む。好ましいクラスの塩は、本発明の化合物と酸とによって形成される塩である。塩形成に適した酸は、以下を含むが、これらに限定されない： 塩酸、臭化水素酸、フッ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸；ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、ピクリン酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、およびベンゼンスルホン酸等の有機酸；アスパラギン酸およびグルタミン酸などの酸性アミノ酸。
【0106】
塩形態に加えて、本発明はまた、プロドラッグの形態の化合物を提供する。本明細書に記載の化合物のプロドラッグは、生理学的条件下で化学変化を容易に受けて本発明の化合物を提供する化合物である。さらに、プロドラッグは、ｅｘ ｖｉｖｏ環境において化学的または生化学的方法によって本発明の化合物に変換することができる。たとえば、適切な酵素または化学試薬を含む経皮パッチリザーバーに入れると、プロドラッグをゆっくりと本発明の化合物に変換することができる。
【0107】
本発明の特定の化合物は、溶媒和されていない形態および、水和形態を含む、溶媒和形態で存在することができる。溶媒和形態は、一般に、溶媒和されていない形態と同等であり、本発明の範囲に含まれるべきである。本発明の特定の化合物は、多形または非晶形の形態で存在し得る。一般に、本発明で検討される用途に関する限り、すべての物理的形態は同等であり、本発明の範囲に含まれるべきである。
【0108】
本発明の化合物はまた、化合物を構成する一つまたは複数の同位体原子に不自然な割合の原子同位体を含み得る。特定の同位体の不自然な割合は、関係する原子の自然に見つかった量からその原子の１００％までと定義することができる。たとえば、化合物は、トリチウム（3Ｈ）、ヨウ素－１２５（125Ｉ）、または炭素－１４（14Ｃ）等の放射性同位体、または重水素（2Ｈ）、または炭素－１３（13Ｃ）等の非放射性同位体と組み込まれ得る。本出願に記載されるそれらの使用に加えて、そのような同位体変異体は、追加の使用を提供し得る。たとえば、本発明の化合物の同位体変異体は、診断および／または画像化試薬として、または細胞毒性／放射線毒性治療薬としてを含むがこれらに限定されない、追加の用途を有し得る。さらに、本発明の化合物の同位体変異体は、薬物動態学的および薬力学的特性を変化させ、それにより、治療中の安全性、忍容性または有効性を高めるのに役立つ可能性がある。それが放射性であるかどうかに関係なく、本発明の化合物のすべての同位体変異体は、本発明の範囲内に含まれるべきである。
【0109】
本発明の「医薬組成物」は、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、トローチ、坐剤、経口液剤または無菌非経口懸濁剤等の液体製剤形態、ならびに大量または少量の注射等の注射可能な形態、凍結乾燥粉末等に作製することができる。上記の投薬形態の薬物または薬剤は、薬学の分野における従来法に従って調製することができる。
【0110】
本発明に記載の「薬学的に許容される担体」は、製薬分野における従来の希釈剤、充填剤、結合剤、湿潤剤、吸収促進剤、界面活性剤、吸着担体、滑沢剤等を含む。
【0111】
当業者には明らかであるように、有効なｉｎ ｖｉｖｏ投与量および特定の投与様式は、治療される哺乳動物の種類、体重および年齢、使用される特定の化合物、およびこれらの化合物の使用の特定の目的に応じて変化する。当業者は、従来の薬理学的方法に従って、有効用量レベル（すなわち、所望の効果を達成するために必要な用量レベル）を決定することができる。一般に、製品のヒトの臨床応用は、より低い投与量レベルから始まり、その後、所望の効果が達成されるまで、投与量レベルが継続的に増加される。あるいは、本方法によって同定された組成物の有用な用量および投与経路は、許容されるｉｎ ｖｉｔｒｏ研究を使用する既存の薬理学的方法によって確立することができる。
【0112】
本発明の化合物、その異性体、その薬学的に許容される塩、または化合物を含む医薬組成物の投与様式は、特に限定されない。代表的な投与方法は、経口、腫瘍内、直腸、非経口（静脈内、筋肉内、または皮下）等を含む（ただしこれらに限定されない）。本発明の化合物は、単独で、または他の薬学的に許容される化合物と組み合わせて投与することができる。本発明の化合物は、他の小分子阻害剤の投与または投与方法を指してもよい。たとえば、任意の投与方法は、経口、経皮、静脈内、筋肉内、局所等を含む（ただしこれらに限定されない）。
【0113】
調製の方法
本発明の化合物は、当技術分野における一般的な方法によって、および／または特定の実施例における方法を参照することによって調製することができる。
本発明の化合物は、当技術分野における一般的な方法によって、および／または特定の実施例における方法を参照することによって調製することができる。
【0114】
特定の実施形態では、本発明は、
【0115】
【化21】
【0116】
式Ａの化合物を式Ｂの化合物と反応させて、式Ｉの化合物を得る工程を含む、式Ｉの化合物を調製するための方法を提供し；
ここでＺは脱離基であり、Ｒ４’は、求核置換反応を起こすことができるアミン基を含み、ｎは１、２、または３であり、式の他の基は上記で定義されたとおりである。
ここでＺは脱離基であり、Ｒ４’は、求核置換反応を起こすことができるアミン基を含み、ｎは１、２、または３であり、式の他の基は上記で定義されたとおりである。
【0117】
好ましくは、Ｒ5－Ｒ4’は、
【0118】
【化22】
【0119】
Ｒ5－Ｎ（Ｒa）Ｈからなる群から選択される；
【0120】
好ましくは、Ｚは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉを含む。
【0121】
医薬組成物および投与方法
本発明の化合物は優れたＴＤＧ阻害活性を有するため、本発明の化合物およびその様々な結晶形態、薬学的に許容される無機または有機塩、水和物、溶媒和物、ポリマー、および主な有効成分として本発明の化合物を含む医薬組成物は、変異型ＴＤＧによって媒介される疾患を治療、予防および緩和するために使用することができる。
本発明の化合物は優れたＴＤＧ阻害活性を有するため、本発明の化合物およびその様々な結晶形態、薬学的に許容される無機または有機塩、水和物、溶媒和物、ポリマー、および主な有効成分として本発明の化合物を含む医薬組成物は、変異型ＴＤＧによって媒介される疾患を治療、予防および緩和するために使用することができる。
【0122】
好ましくは、本発明の化合物は、腫瘍細胞株に関連する疾患を治療するために使用することができる。腫瘍細胞株に関連する代表的な疾患は、肺がん、結腸直腸がん、メラノーマ、乳がん、肝がん、神経膠腫、腎がん、膵がん、卵巣がん、胃がん、神経芽細胞腫、またはそれらの組み合わせを含む（ただしこれらに限定されない）。
【0123】
本発明の医薬組成物は、安全かつ有効な量の本発明の化合物またはその薬理学的に許容される塩、ならびに薬理学的に許容される賦形剤または担体を含む。「安全で有効な量」とは、化合物の量が、深刻な副作用を引き起こすことなく状態を大幅に改善するのに十分であることを指す。一般に、医薬組成物は、用量あたり１～２０００ｍｇの本発明の化合物を含み、より好ましくは、用量あたり１０～５００ｍｇの本発明の化合物を含む。 好ましくは、「１回量」は１つのカプセル剤または錠剤である。
【0124】
「薬学的に許容される担体」は、ヒトでの使用に適しており、十分な純度および十分に低い毒性を持たなければならない、一つまたは複数の適合性のある固体または液体の充填剤またはゲル物質を指す。ここでの「適合性」とは、組成物中の成分が、化合物の効力を著しく低下させることなく、本発明の化合物と、および互いに混合できることを意味する。薬学的に許容される担体の例は、セルロースおよびその誘導体（カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースナトリウム、酢酸セルロース等）、ゼラチン、タルク、固体滑沢剤（ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム等）、硫酸カルシウム、植物油（大豆油、ゴマ油、ピーナッツ油、オリーブ油等）、ポリオール（プロピレングリコール、グリセリン、マンニトール、ソルビトール等）、乳化剤（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）等）、湿潤剤（ラウリル硫酸ナトリウム等）、着色剤、香料、安定剤、抗酸化剤、防腐剤、パイロジェンフリー水等を含む。
【0125】
本発明の化合物または医薬組成物の投与方法は特に限定されず、代表的な投与方法は、経口、腫瘍内、直腸、非経口（静脈内、筋肉内、または皮下）、および局所投与を含む（ただしこれらに限定されない）。
【0126】
経口投与用の固形剤形は、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、および顆粒剤を含む。これらの固形剤形では、活性化合物は、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム等の少なくとも一つの従来の不活性賦形剤（または担体）と混合されるか、または以下の成分と混合される： （ａ）充填剤または相溶化剤、たとえばデンプン、乳糖、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸；（ｂ）結合剤、たとえばヒドロキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、およびアラビアゴム；（ｃ）保湿剤、たとえばグリセリン；（ｄ）崩壊剤、たとえばアガー、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプンまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定の複合ケイ酸塩、および炭酸ナトリウム；（ｅ）徐放剤、たとえばパラフィン；（ｆ）吸収促進剤、たとえば第四級アミン化合物；（ｇ）湿潤剤、たとえばセチルアルコール、およびモノステアリン酸グリセリル；（ｈ）吸着剤、たとえばカオリン；および（ｉ）滑沢剤、たとえばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、またはそれらの混合物。カプセル剤、錠剤、および丸剤において、剤形はまた、緩衝剤を含んでもよい。
【0127】
錠剤、糖衣剤（ｓｕｇａｒ ｐｉｌｌ）、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤等の固体剤形は、コーティングおよび腸溶コーティングおよび当技術分野で知られている他の材料等のシェル材料を用いて調製することができる。それらは乳白剤を含んでもよく、そして組成物中の活性化合物または化合物は、消化管の特定の部分において遅延的に放出されてもよい。使用できる埋め込みコンポーネントの例は、高分子物質およびワックスである。必要に応じて、活性化合物は、上記の賦形剤の一つまたは複数を用いてマイクロカプセル剤に形成することもできる。
【0128】
経口投与用の液体剤形は、薬学的に許容される乳剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、またはチンキを含む。活性化合物に加えて、液体剤形は、当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤、たとえば水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、たとえば、エタノール、イソプロパノール、炭酸エチル、酢酸エチル、プロピレングリコール、１，３－ブタンジオール、ジメチルホルムアミド、および油、特に綿実油、ピーナッツ油、トウモロコシ胚芽油、オリーブオイル、ヒマシ油、およびゴマ油、またはこれらの物質の混合物を含んでもよい。
【0129】
これらの不活性希釈剤に加えて、組成物はまた、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、甘味剤、香味剤、および香料等のアジュバントを含んでもよい。
【0130】
活性化合物に加えて、懸濁剤は、懸濁化剤、たとえば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール、およびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメトキシド、およびアガー、またはこれらの物質の混合物等を含んでもよい。
【0131】
非経口注射用の組成物は、生理学的に許容される滅菌水溶液または非水溶液、分散液、懸濁液または乳濁液、および滅菌注射可能溶液または分散液に再構成するための滅菌粉末を含んでもよい。適切な水性および非水性担体、希釈剤、溶媒、または賦形剤は、水、エタノール、ポリオール、およびそれらの適切な混合物を含む。
【0132】
局所投与のための本発明の化合物の剤形は、軟膏、散剤、パッチ、スプレー剤、および吸入剤を含む。有効成分は、無菌条件下で、生理学的に許容される担体、および必要に応じて必要となる可能性のある防腐剤、緩衝剤、または推進剤と混合される。
【0133】
本発明の化合物は、単独で、または他の薬学的に許容される化合物と組み合わせて投与することができる。
【0134】
医薬組成物を使用する場合、安全かつ有効な量の本発明の化合物が、治療を必要とする哺乳動物（ヒト等）に投与される。投与量は、薬学的に考慮された有効量である。体重が６０ｋｇのヒトの場合、日用量は通常１～２０００ｍｇ、好ましくは２０～５００ｍｇである。もちろん、特定の投与量は、投与経路、患者の健康状態等、熟練した医師の範囲内にある要因も考慮する必要がある。
【0135】
本発明の主な利点は、以下を含む：
（ａ）本発明の化合物は、ＴＤＧに対して優れた阻害効果を有する；
（ｂ）本発明の化合物は、腫瘍および／またはがん細胞を効果的に阻害することができる。
（ａ）本発明の化合物は、ＴＤＧに対して優れた阻害効果を有する；
（ｂ）本発明の化合物は、腫瘍および／またはがん細胞を効果的に阻害することができる。
【0136】
本発明は、特定の例と併せて以下でさらに説明される。これらの実施例は、本発明を説明するためにのみ使用され、本発明の範囲を限定するものではないことを理解されたい。以下の例に特定の条件が示されていない実験方法は、通常、従来の条件または製造業者が推奨する条件に従う。特に明記しない限り、パーセンテージおよびパーツは重量パーセントおよび重量部（ｐａｒｔｓ ｂｙ ｗｅｉｇｈｔ）である。
【0137】
本明細書において、特に明記しない限り、略語は、当業者に知られている従来の意味を指す。たとえば、ＴＨＦはテトラヒドロフランを指す；ＤＭＦはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを指す；ＤＣＭはジクロロメタンを指す；ＮＢＳはＮ－ブロモスクシンイミドを指す；ＡＩＢＮはアゾビスイソブチロニトリルを指す；ＥＡは酢酸エチルを指す；ＰＥは石油エーテルを指す；ＤＭＡＰは４－ジメチルアミノピリジンを指す；Ｅｔ3Ｎはトリエチルアミンを指す；ＣＡＮはアセトニトリルを指す；ＨＡＴＵは、２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチル尿素ヘキサフルオロホスフェートを指す。
【実施例】
【0138】
実施例１
【0139】
【化23】
【0140】
化合物１～８の一般的な調製方法。
１．１．１ ３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オン（１ｉ）の合成
２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン ２ｇ（１４．７ｍｍｏｌ）および５ｍｌのＤＣＭを５０ｍｌのバイアル中で混合した。混合物を１０℃に冷却した。３．１５ｇ（１８．４ｍｍｏｌ）の３－ブロモプロピルクロリドを添加した。次に、３．１５ｇのＡｌＣｌ３をバッチで添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。氷浴で１０℃に冷却した後、反応を停止させた。４ミリリットルの塩酸をゆっくりと滴下した。次に、２０ｍｌの冷水を反応混合物に添加し、それを１０分間撹拌し、有機物を収集し、そして水層をＤＣＭ ２０ｍｌ×２で抽出した。複合有機物（ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｏｒｇａｎｉｃ）を飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×３、ブライン１０ｍｌで洗浄し、そして真空中で濃縮して、粗生成物１ｉを得た。
１．１．１ ３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オン（１ｉ）の合成
２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン ２ｇ（１４．７ｍｍｏｌ）および５ｍｌのＤＣＭを５０ｍｌのバイアル中で混合した。混合物を１０℃に冷却した。３．１５ｇ（１８．４ｍｍｏｌ）の３－ブロモプロピルクロリドを添加した。次に、３．１５ｇのＡｌＣｌ３をバッチで添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。氷浴で１０℃に冷却した後、反応を停止させた。４ミリリットルの塩酸をゆっくりと滴下した。次に、２０ｍｌの冷水を反応混合物に添加し、それを１０分間撹拌し、有機物を収集し、そして水層をＤＣＭ ２０ｍｌ×２で抽出した。複合有機物（ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｏｒｇａｎｉｃ）を飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×３、ブライン１０ｍｌで洗浄し、そして真空中で濃縮して、粗生成物１ｉを得た。
【0141】
１．１．２ １，２－ビスブロモメチルベンゼン（１ｂ）の合成
１，２－ジメチルベンゼン（１４ｍｍｏｌ）の溶液に、１５ｍｌのＣＣｌ4中のＮＢＳ（３５ｍｍｏｌ） ＡＩＢＮ（３．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を７０℃で２時間撹拌した。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（０～１０％）を伴う８０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して１ｂを得た。
１，２－ジメチルベンゼン（１４ｍｍｏｌ）の溶液に、１５ｍｌのＣＣｌ4中のＮＢＳ（３５ｍｍｏｌ） ＡＩＢＮ（３．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を７０℃で２時間撹拌した。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（０～１０％）を伴う８０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して１ｂを得た。
【0142】
１．１．３． ２－（トルエン－４－スルホニル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール（１ｃ）の合成
１５ｍｌのＤＭＦ中のＮａＨ（０．５ｇ、２０．１ｍｍｏｌ）の溶液に、２．５ｍｌのＤＭＦ中のＴｏｓ－ＮＨ2（１．１ｇ、６．７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で３０分間撹拌した。３０分後、２．５ｍｌのＤＭＦ中の１ｂ（６．７ｍｍｏｌ）を混合反応に滴下して添加した。その後、６０℃で１時間撹拌した。１０ｍｌの氷水を氷浴に添加した。混合物を静置して層に分離した後、水層をＥＡ ２０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を合わせ、１０ｍｌ×２のＮａＨＣＯ3飽和溶液および１０ｍｌのブラインで洗浄した。溶媒を真空で除去して粗生成物１ｃを得、これを、ＥＡ／ＰＥ（８０～１００％）の勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。
１５ｍｌのＤＭＦ中のＮａＨ（０．５ｇ、２０．１ｍｍｏｌ）の溶液に、２．５ｍｌのＤＭＦ中のＴｏｓ－ＮＨ2（１．１ｇ、６．７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で３０分間撹拌した。３０分後、２．５ｍｌのＤＭＦ中の１ｂ（６．７ｍｍｏｌ）を混合反応に滴下して添加した。その後、６０℃で１時間撹拌した。１０ｍｌの氷水を氷浴に添加した。混合物を静置して層に分離した後、水層をＥＡ ２０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を合わせ、１０ｍｌ×２のＮａＨＣＯ3飽和溶液および１０ｍｌのブラインで洗浄した。溶媒を真空で除去して粗生成物１ｃを得、これを、ＥＡ／ＰＥ（８０～１００％）の勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。
【0143】
１．１．４． ５－置換－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール（１ｉｉ）の合成
１２ｍｌのＨＢｒ／ＴＨＦ中の１ｃ（２．６０ｍｍｏｌ）の混合物を室温で撹拌するか、または一晩加熱した。溶媒を真空下で濃縮して、粗生成物１ｉｉを得た。
１２ｍｌのＨＢｒ／ＴＨＦ中の１ｃ（２．６０ｍｍｏｌ）の混合物を室温で撹拌するか、または一晩加熱した。溶媒を真空下で濃縮して、粗生成物１ｉｉを得た。
【0144】
１．１． ３－（５－置換－１，３－ジヒドロ－イソインドール－２－イル）－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロパン－１－オン（１）の合成
１ｉｉ（２．６ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（７８８ｍｇ、７．８ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（６１ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を２０ｍｌのＴＨＦの溶液に添加し、１ｉ（５８９ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に１０ｍｌの水を加え、１０分間撹拌し、静置して層状に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を合わせ、５ｍｌ×２のＮａＨＣＯ3および５ｍｌのブラインで洗浄した。溶媒を真空で除去して、粗生成物を得た。ＥＡ／ＰＥ（８０～１００％）の勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製を使用して、４００ｍｇの白色固体（５０％収率）を得た。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２９分；純度９７．３％；ESI m/z [M+1]+ =311.14. 1HNMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.79-7.68 (m, 1H), 7.50-7.45 (m, 1H) ,7.27-7.21 (m, 4H), 7.14-7.03(m, 1H), 4.50-4.43 (m, 2H), 4.15-4.10 (m, 4H), 3.33 (t, J = 4.5Hz, 4H), 3.19-3,14 (m, 2H).
１ｉｉ（２．６ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（７８８ｍｇ、７．８ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（６１ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を２０ｍｌのＴＨＦの溶液に添加し、１ｉ（５８９ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に１０ｍｌの水を加え、１０分間撹拌し、静置して層状に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を合わせ、５ｍｌ×２のＮａＨＣＯ3および５ｍｌのブラインで洗浄した。溶媒を真空で除去して、粗生成物を得た。ＥＡ／ＰＥ（８０～１００％）の勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製を使用して、４００ｍｇの白色固体（５０％収率）を得た。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２９分；純度９７．３％；ESI m/z [M+1]+ =311.14. 1HNMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.79-7.68 (m, 1H), 7.50-7.45 (m, 1H) ,7.27-7.21 (m, 4H), 7.14-7.03(m, 1H), 4.50-4.43 (m, 2H), 4.15-4.10 (m, 4H), 3.33 (t, J = 4.5Hz, 4H), 3.19-3,14 (m, 2H).
【0145】
１．２． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］ ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（５－ニトロイソインドール－２－イル）プロパン－１－オン（２）の合成
１５０ｍｇ（０．９１ｍｍｏｌ）の５－ニトロイソインドリン、２７６ｍｇ（２．７３ｍｍｏｌ）のＥｔ3Ｎ、２２ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰ、および１０ｍＬのテトラヒドロフランを２０ｍＬのボトルで混合し、１５分間撹拌した。２４７ｍｇ（０．９１ｍｍｏｌ）の３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オンを添加し、混合物を室温で４時間撹拌した。反応物を２０ｍｌのＥＡで希釈し、水（２×１０ｍｌ）で洗浄し、次にブラインで洗浄し、そして硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾液を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ（酢酸エチル）／ＰＥ（石油）（０－８０％）勾配溶出を伴う８０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーに供して、２０ｍｇの褐色固体（６．１％の収率）を得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１９分；純度９２．０％；ESI m/z [M+1]+= 355.40.
１５０ｍｇ（０．９１ｍｍｏｌ）の５－ニトロイソインドリン、２７６ｍｇ（２．７３ｍｍｏｌ）のＥｔ3Ｎ、２２ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰ、および１０ｍＬのテトラヒドロフランを２０ｍＬのボトルで混合し、１５分間撹拌した。２４７ｍｇ（０．９１ｍｍｏｌ）の３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オンを添加し、混合物を室温で４時間撹拌した。反応物を２０ｍｌのＥＡで希釈し、水（２×１０ｍｌ）で洗浄し、次にブラインで洗浄し、そして硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾液を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ（酢酸エチル）／ＰＥ（石油）（０－８０％）勾配溶出を伴う８０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーに供して、２０ｍｇの褐色固体（６．１％の収率）を得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１９分；純度９２．０％；ESI m/z [M+1]+= 355.40.
【0146】
１．３． １－（３，４－ジメトキシフェニル）－３－（イソインドリン－２－イル）プロパン－１－オン（３）の合成
１５ｍｌのＴＨＦ中の５－ブロモ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール（１００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（１５０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１２ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の溶液に３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロ-ベンゾ［１，４］ジフェニル）－プロピル－１－オン（１１４ ｍｇ、０．５ ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物に１０ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌し、静置して層状に分離した後、水層を１０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ（５０～８０％）の勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製を使用して、精製した。最終的に、８５ｍｇのパーム油が得られた。収率４９．７％；ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．３１分；純度９５．１％；ESI m/z [M+H]+ = 388 FA mobile system. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.54-7.52 (m, 2H), 7.33(d, J = 8.0 Hz,2H), 7.07(d, J = 8.0 Hz,1H), 6.92(d, J = 9.0 Hz,1H),4.34-4.28 (m, 4H), 4.00(d, J = 17.0 Hz, 2H), 3.23 (t, J = 3.5 Hz, 1H).
１５ｍｌのＴＨＦ中の５－ブロモ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール（１００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（１５０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１２ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の溶液に３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロ-ベンゾ［１，４］ジフェニル）－プロピル－１－オン（１１４ ｍｇ、０．５ ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物に１０ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌し、静置して層状に分離した後、水層を１０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ（５０～８０％）の勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製を使用して、精製した。最終的に、８５ｍｇのパーム油が得られた。収率４９．７％；ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．３１分；純度９５．１％；ESI m/z [M+H]+ = 388 FA mobile system. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.54-7.52 (m, 2H), 7.33(d, J = 8.0 Hz,2H), 7.07(d, J = 8.0 Hz,1H), 6.92(d, J = 9.0 Hz,1H),4.34-4.28 (m, 4H), 4.00(d, J = 17.0 Hz, 2H), 3.23 (t, J = 3.5 Hz, 1H).
【0147】
１．４． ３－（５－クロロ－１，３－ジヒドロ－イソインドール－２－イル）－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロパン－１－オン（４）の合成
２０ｍｌのＴＨＦ中の５－クロロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール（４００ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（７８８ｍｇ、７．８ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（６１ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）に、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（５８９ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に１０ｍｌの水を添加し、混合物を１０分間撹拌し、静置して層状に分離した後、水層を１０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄した。 有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（８０～１００％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、１２０ｍｇのパーム油が得られた。 分析結果：収率４９．７％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２５分；純度９５．１％、ESI m/z [M+H]+ = 344 FA mobile system. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.55-7.53 (m, 2H), 7.19-7.14 (m, 2H), 7.08 (d, J = 6.0 Hz,1H), 6.93-6.92 (m, 1H), 4.34-4.28 (m, 4H),4.12 (d, J = 7.0 Hz,4H), 3.26 (t, J = 4.5 Hz, 1H).
２０ｍｌのＴＨＦ中の５－クロロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール（４００ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（７８８ｍｇ、７．８ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（６１ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）に、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（５８９ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に１０ｍｌの水を添加し、混合物を１０分間撹拌し、静置して層状に分離した後、水層を１０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄した。 有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（８０～１００％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、１２０ｍｇのパーム油が得られた。 分析結果：収率４９．７％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２５分；純度９５．１％、ESI m/z [M+H]+ = 344 FA mobile system. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.55-7.53 (m, 2H), 7.19-7.14 (m, 2H), 7.08 (d, J = 6.0 Hz,1H), 6.93-6.92 (m, 1H), 4.34-4.28 (m, 4H),4.12 (d, J = 7.0 Hz,4H), 3.26 (t, J = 4.5 Hz, 1H).
【0148】
１．５． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（５－メトキシイソインドール－２－イル）プロパン－１－オン（５）の合成
１００ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）の５－メトキシイソインドリン、２０３ｍｇ（２．０１ｍｍｏｌ）のＥｔ3Ｎ、１６ｍｇ（０．１３４ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰ、および２ｍｌのＴＨＦを２０ｍｌのバイアル中で混合し、混合物を１５分間撹拌した。３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］キシレン－６－アシル）－プロピル－１－オン１５２ ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。反応を停止し、真空下で濃縮して、粗生成物を得た。ＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～５％）勾配溶出を伴う２５ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用して、６０ｍｇのバターを得た。分析結果：収率２６．４％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２２分；純度９９．０％；ESI m/z [M+1]+= 340.26.
１００ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）の５－メトキシイソインドリン、２０３ｍｇ（２．０１ｍｍｏｌ）のＥｔ3Ｎ、１６ｍｇ（０．１３４ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰ、および２ｍｌのＴＨＦを２０ｍｌのバイアル中で混合し、混合物を１５分間撹拌した。３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］キシレン－６－アシル）－プロピル－１－オン１５２ ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。反応を停止し、真空下で濃縮して、粗生成物を得た。ＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～５％）勾配溶出を伴う２５ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用して、６０ｍｇのバターを得た。分析結果：収率２６．４％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２２分；純度９９．０％；ESI m/z [M+1]+= 340.26.
【0149】
１．６． ３－（５－フルオロ－１，３－ジヒドロ－イソインドール－２－イル）－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ジオックス－６－イル）－プロパン－１－オン（６）の合成
２０ｍｌのＴＨＦ中の５－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール（５４０ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（１２００ｍｇ、１２．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（９６ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）の溶液に、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（８９１ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、混合物を１０分間撹拌し、静置して層に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＤＣＭ／ＭｅＯＨを用いた勾配溶出（０～１０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、３５０ｍｇのパーム油が得られた。分析結果：収率２７．２％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２１分；＞９５％の純度 ESI m/z [M+H]+ = 328 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ． 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.55-7.53 (m, 2H), 7.16-7.14 (m, 1H), 6.93-6.91 (m, 3H), 4.34-4.28 (m, 4H), 4.10(d, J = 13.0 Hz,4H), 3.31 (t, J = 4.5 Hz,4H).
２０ｍｌのＴＨＦ中の５－フルオロ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール（５４０ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（１２００ｍｇ、１２．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（９６ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）の溶液に、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（８９１ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、混合物を１０分間撹拌し、静置して層に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＤＣＭ／ＭｅＯＨを用いた勾配溶出（０～１０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、３５０ｍｇのパーム油が得られた。分析結果：収率２７．２％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２１分；＞９５％の純度 ESI m/z [M+H]+ = 328 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ． 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.55-7.53 (m, 2H), 7.16-7.14 (m, 1H), 6.93-6.91 (m, 3H), 4.34-4.28 (m, 4H), 4.10(d, J = 13.0 Hz,4H), 3.31 (t, J = 4.5 Hz,4H).
【0150】
１．７． ３－（５－アセチルイソインドリン－２－イル）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキサン－６－イル）プロパン－１－オン（７）の合成
２－イソインドリン－５－イル２－オキソエチル－１－イル ５０ｍｇ（０．３２ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ ９８ｍｇ（０．９６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ ８ｍｇ（０．０６６ｍｍｏｌ）および１０ｍｌのテトラヒドロフランを２０ｍｌのボトルで混合し、３０分間撹拌した。３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オン ８６ｍｇ（０．３２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３時間撹拌した。反応を停止し、真空下で濃縮して粗生成物を得、メタノール／ジクロロメタン（０～５％）勾配溶出を伴う８０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用して、２０ｍｇのバターを得た。分析結果：収率１８．４％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１７分；純度９９．０％；ESI m/z [M+1]+= 352.22.
２－イソインドリン－５－イル２－オキソエチル－１－イル ５０ｍｇ（０．３２ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ ９８ｍｇ（０．９６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ ８ｍｇ（０．０６６ｍｍｏｌ）および１０ｍｌのテトラヒドロフランを２０ｍｌのボトルで混合し、３０分間撹拌した。３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オン ８６ｍｇ（０．３２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３時間撹拌した。反応を停止し、真空下で濃縮して粗生成物を得、メタノール／ジクロロメタン（０～５％）勾配溶出を伴う８０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用して、２０ｍｇのバターを得た。分析結果：収率１８．４％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１７分；純度９９．０％；ESI m/z [M+1]+= 352.22.
【0151】
１．８． ２－（３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－オキソプロピル）イソロイシン－５－カルボニトリル（８）の合成
イソインドール－５－カルボニトリル（３２０ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（６７３ｍｇ、６．６６ｍｍｏｌ）、溶媒としてのＤＭＡＰ（５４ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（５０３ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）を１５ｍｌのＴＨＦに添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、混合物を１０分間撹拌し、静置して層に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＤＣＭ／ＭｅＯＨ勾配溶出（０～１０％）を用いた４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、２３０ｍｇのバターが得られた。分析結果：収率３１．４％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１５分；＞９５％の純度； ESI m/z [M+H]+ = 335 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ． 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.70 (s, 1H), 7.66 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.34-4.28 (m, 4H), 3.92 (d, J = 15.5 Hz, 4H), 3.18 (t, J = 14.5 Hz,2H), 3.02 (t, J = 7.0 Hz, 2H).
イソインドール－５－カルボニトリル（３２０ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（６７３ｍｇ、６．６６ｍｍｏｌ）、溶媒としてのＤＭＡＰ（５４ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（５０３ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）を１５ｍｌのＴＨＦに添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、混合物を１０分間撹拌し、静置して層に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＤＣＭ／ＭｅＯＨ勾配溶出（０～１０％）を用いた４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、２３０ｍｇのバターが得られた。分析結果：収率３１．４％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１５分；＞９５％の純度； ESI m/z [M+H]+ = 335 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ． 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.70 (s, 1H), 7.66 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.34-4.28 (m, 4H), 3.92 (d, J = 15.5 Hz, 4H), 3.18 (t, J = 14.5 Hz,2H), 3.02 (t, J = 7.0 Hz, 2H).
【0152】
実施例２
２． ３－（５－アミノイソインドリン－２－イル）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オン（９）の合成
２． ３－（５－アミノイソインドリン－２－イル）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オン（９）の合成
【0153】
【化24】
【0154】
１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（５－ニトロイソインドリン－２－イル）プロパン－１－オン １．８ｇ（５．１ｍｍｏｌ）および２０ｍｌのメタノールを１００ｍｌのボトルで混合し、５分間撹拌した。１．６ｇ（３０．６ｍｍｏｌ）のＮＨ4Ｃｌおよび０．８５ｇ（１５．２ｍｍｏｌ）の鉄を添加し、混合物を４時間加熱還流し、反応溶液を室温に冷却し、メタノールで洗浄し、濾液を減圧下で蒸発させた、粗生成物を得た。粗生成物を、ＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ勾配溶出（５～６０％）を伴うＣ１８カラムフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、１５ｍｇの黄色固体を得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１８分；純度９１．０％；ESI m/z [M+1]+= 325.29.
【0155】
実施例３
３． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（イソインドリン－２－イル）プロパン－１－オール（１０）の合成
３． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（イソインドリン－２－イル）プロパン－１－オール（１０）の合成
【0156】
【化25】
【0157】
１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－３－（イソインドリン－２－アシル）プロパン－１（１） ５０ｍｇ（０．１６２ｍｍｏｌ）および５ｍｌ ＭｅＯＨを２０ｍｌのバイアル中で混合し、５分間撹拌し、１２ｍｇ（０．３２４ｍｍｏｌ）のＮａＢＨ4を添加し、混合物を室温で４時間撹拌し、反応を停止し、真空中での濃縮により粗生成物を得た。粗生成物を、メタノール／ジクロロメタン（０～５％）勾配溶出を伴う２５ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２０ｍｇの褐色固体を得た。分析結果：収率３９．８％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１２分；純度９９．０％；ESI m/z [M+1]+= 312.21.
【0158】
実施例４
４． 化合物１１～２８の一般的な調製方法
４． 化合物１１～２８の一般的な調製方法
【0159】
【化26】
【0160】
４．１． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（インドリン－１－イル）プロパン－１－オン（１１）
１０ｍｌのＴＨＦ中の１１ｉｉ（１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、１ｉ（１ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に５ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌した。混合物を静置して層に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄した。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（８０～１００％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。
１０ｍｌのＴＨＦ中の１１ｉｉ（１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、１ｉ（１ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に５ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌した。混合物を静置して層に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄した。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（８０～１００％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。
【0161】
４．２． ２－（３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－オキソプロピル）イソインドリン－１，３－ジオン（１２）の合成
１０ｍｌのＴＨＦ中の１２ｉｉ（１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、１ｉ（１ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に５ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌した。混合物を静置して層状に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＥＡ／ＰＥ勾配溶出（８０～１００％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。
１０ｍｌのＴＨＦ中の１２ｉｉ（１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、１ｉ（１ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に５ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌した。混合物を静置して層状に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＥＡ／ＰＥ勾配溶出（８０～１００％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。
【0162】
４．３． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３，４－ジヒドロイソキノリン－２（１Ｈ）－イル）プロパン－１－オン（１３）の合成
１０ｍｌのＴＨＦ中の１３ｉｉ（１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、１ｉ（１ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に５ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌した。混合物を静置して層状に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＥＡ／ＰＥ勾配溶出（８０～１００％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。
１０ｍｌのＴＨＦ中の１３ｉｉ（１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、１ｉ（１ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に５ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌した。混合物を静置して層状に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＥＡ／ＰＥ勾配溶出（８０～１００％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。
【0163】
４．４． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３，４－ジヒドロキノリン－１（２Ｈ）－イル）プロパン－１－オン（１４）の合成
１，２，３，４－テトラヒドロキノリン ９８ｍｇ（０．７３８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ １２０ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ １８ｍｇ（０．１４８ｍｍｏｌ）、およびＴＨＦ ８ｍｌを２０ｍｌのバイアル中で混合した。３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン ２００ｍｇ（０．７３８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で３時間撹拌し、反応を停止し、前の反応バッチに進んだ。反応混合物を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＥＡ（酢酸エチル）／ＰＥ（石油）（０～３０％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーに供して、１８０ｍｇの白色固体を得た。分析結果：収率７５．５％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．８４分；純度９７％；ESI m/z [M+1]+=324.39.
１，２，３，４－テトラヒドロキノリン ９８ｍｇ（０．７３８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ １２０ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ １８ｍｇ（０．１４８ｍｍｏｌ）、およびＴＨＦ ８ｍｌを２０ｍｌのバイアル中で混合した。３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン ２００ｍｇ（０．７３８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で３時間撹拌し、反応を停止し、前の反応バッチに進んだ。反応混合物を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＥＡ（酢酸エチル）／ＰＥ（石油）（０～３０％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーに供して、１８０ｍｇの白色固体を得た。分析結果：収率７５．５％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．８４分；純度９７％；ESI m/z [M+1]+=324.39.
【0164】
４．５． ３－（２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル））プロパン－１－オン（１５）の合成
１５ｉｉ（１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＴＨＦの溶液に添加し、１ｉ（１ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に５ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌した。混合物を静置して層に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄した。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（８０～１００％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。
１５ｉｉ（１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＴＨＦの溶液に添加し、１ｉ（１ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に５ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌した。混合物を静置して層に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄した。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（８０～１００％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。
【0165】
４．６． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－１－オン（１６）の合成
ピロリドン３１．４ｍｇ（０．４４２ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ １３４．１ｍｇ（１．３２６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ １１ｍｇ（０．０８４ｍｍｏｌ）、およびＴＨＦ ４ｍｌを２０ｍｌのバイアル中で混合した。３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン １００ｍｇ（０．４４２ｍｍｏｌ）を添加した。次に、混合物を室温で２時間撹拌した。反応を停止し、濃縮により粗生成物を得た。粗生成物を、ＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）勾配溶出（０～３％）を伴う２５ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。４０ｍｇの黄色固体が得られた。分析結果：収率３４．７％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２６分；純度：９９．５％；ESI m/z [M+1]+=262.32.
ピロリドン３１．４ｍｇ（０．４４２ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ １３４．１ｍｇ（１．３２６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ １１ｍｇ（０．０８４ｍｍｏｌ）、およびＴＨＦ ４ｍｌを２０ｍｌのバイアル中で混合した。３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン １００ｍｇ（０．４４２ｍｍｏｌ）を添加した。次に、混合物を室温で２時間撹拌した。反応を停止し、濃縮により粗生成物を得た。粗生成物を、ＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）勾配溶出（０～３％）を伴う２５ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。４０ｍｇの黄色固体が得られた。分析結果：収率３４．７％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２６分；純度：９９．５％；ESI m/z [M+1]+=262.32.
【0166】
４．７． １－（３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－オキソプロピル）ピロリジン－３－オン（１７）の合成
ピロリジン－３－オン塩酸塩 １１６ｍｇ（０．７３８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ ２２４ｍｇ（２．２１４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ １８ｍｇ（０．１４８ｍｍｏｌ）、および８ｍｌのテトラヒドロフランを２０ｍｌのボトルで混合し、１５分間撹拌した。３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロピル－１－オン ２００ｍｇ（０．７３８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で４時間撹拌した。反応を停止し、濃縮して粗生成物を得、これを、ＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～１０％）勾配溶出を伴う１２０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、６０ｍｇの白色固体を得た。分析結果：収率２９．６％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝０．９５分；９０．０％の純度；ESI m/z [M+1]+=276.30.
ピロリジン－３－オン塩酸塩 １１６ｍｇ（０．７３８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ ２２４ｍｇ（２．２１４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ １８ｍｇ（０．１４８ｍｍｏｌ）、および８ｍｌのテトラヒドロフランを２０ｍｌのボトルで混合し、１５分間撹拌した。３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロピル－１－オン ２００ｍｇ（０．７３８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で４時間撹拌した。反応を停止し、濃縮して粗生成物を得、これを、ＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～１０％）勾配溶出を伴う１２０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、６０ｍｇの白色固体を得た。分析結果：収率２９．６％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝０．９５分；９０．０％の純度；ESI m/z [M+1]+=276.30.
【0167】
４．８． １－（３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－オキソプロピル）－５－（４－フルオロフェニル）ピリジン－２（１Ｈ）－オン（１８）の合成
５－（４－フルオロフェニル）－１Ｈ－ピリジン－２－１（１６３ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（２７０ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）－クロロ－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（２０４ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＴＨＦ溶液に添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌し、静置して層状に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を合わせ、１０ｍｌ×２のＮａＨＣＯ3および１０ｍｌのブラインで洗浄した。溶媒を真空下で除去して粗生成物を得、これを、メタノール／ＤＣＭ（０～１０％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、６０ｍｇの無色油が得られた。分析結果：収率１８．４％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．５９分；＞９５％の純度；ESI m/z [M+Na]+ = 402 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ． 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ7.79 (d, J = 2.4 Hz,1H), 7.56-7.53 (m, 1H), 7.49-7.45 (m, 2H), 7.37-7.36 (m, 2H), 7.11-7.07 (m, 2H), 6.86(d, J = 8.4 Hz,1H), 6.62(d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.38 (t, J = 5.6Hz, 4H), 4.37-4.27 (m, 2H), 4.25-4.23 (m, 2H), 3.50-3.43 (m, 2H).
５－（４－フルオロフェニル）－１Ｈ－ピリジン－２－１（１６３ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（２７０ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）－クロロ－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（２０４ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＴＨＦ溶液に添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌し、静置して層状に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を合わせ、１０ｍｌ×２のＮａＨＣＯ3および１０ｍｌのブラインで洗浄した。溶媒を真空下で除去して粗生成物を得、これを、メタノール／ＤＣＭ（０～１０％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、６０ｍｇの無色油が得られた。分析結果：収率１８．４％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．５９分；＞９５％の純度；ESI m/z [M+Na]+ = 402 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ． 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ7.79 (d, J = 2.4 Hz,1H), 7.56-7.53 (m, 1H), 7.49-7.45 (m, 2H), 7.37-7.36 (m, 2H), 7.11-7.07 (m, 2H), 6.86(d, J = 8.4 Hz,1H), 6.62(d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.38 (t, J = 5.6Hz, 4H), 4.37-4.27 (m, 2H), 4.25-4.23 (m, 2H), 3.50-3.43 (m, 2H).
【0168】
４．９． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（ピリミジン－２－イル）ピペリジン－１－イル）ピロリジン－１－オン（１９）の合成
２－（ピペラジン－１－イル）ピリミジン（１８０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３３３ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を１５ｍｌのＴＨＦの溶液に加え、そして３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（２４９ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌し、静置して層状に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＤＣＭ／ＭｅＯＨ勾配溶出（０～１０％）を用いた４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、２４０ｍｇの黄色油が得られた。分析結果：収率６１．９％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．０１分； ＞ ９５％の純度；ESI m/z [M+H]+=355 FA mobile system. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (d, J = 4.5 Hz, 2H), 7.52-7.51 (m, 2H), 6.92-6.91 (m, 1H), 6.49 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.33-4.28 (m, 4H), 3.87 (s, 4H), 3.19 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.91 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.62 (t, J = 4.5 Hz, 4H).
２－（ピペラジン－１－イル）ピリミジン（１８０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３３３ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を１５ｍｌのＴＨＦの溶液に加え、そして３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（２４９ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌し、静置して層状に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＤＣＭ／ＭｅＯＨ勾配溶出（０～１０％）を用いた４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、２４０ｍｇの黄色油が得られた。分析結果：収率６１．９％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．０１分； ＞ ９５％の純度；ESI m/z [M+H]+=355 FA mobile system. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (d, J = 4.5 Hz, 2H), 7.52-7.51 (m, 2H), 6.92-6.91 (m, 1H), 6.49 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.33-4.28 (m, 4H), 3.87 (s, 4H), 3.19 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.91 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.62 (t, J = 4.5 Hz, 4H).
【0169】
４．１０． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（イソキノリン－６－イルアミノ）プロパン－１－オン（２０）の合成
３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン ２８１ｍｇ（１．０４ｍｍｏｌ）、イソキノリン－６－アミン、１００ｍｇ（０．６９ｍｍｏｌ）、ＮａＩ １０４ｍｇ（０．６９ｍｍｏｌ） Ｋ2ＣＯ3 ２００ｍｇ（１．３８ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ／Ｈ2Ｏを２０ｍｌバイアルで混合した。室温で２時間撹拌した。薄層クロマトグラフィーでは反応は検出されず、反応混合物を７０℃に加熱し、一晩撹拌した。反応を停止し、濃縮して粗生成物を得、これを、ＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～３％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２０ｍｇの黄色固体を得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２２分；純度：９５．０％；ESI m/z [M+1]+=335.22. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 8.86 (s, 1H), 8.17 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.53-7.45 (m, 3H), 7.07-7.05 (m, 1H), 6.98 (d, J = 8.0 Hz, 1H) ,6.69-6.62 (m, 2H), 4.33-4.28 (m, 5H), 3.51-3.48 (m, 3H).
３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン ２８１ｍｇ（１．０４ｍｍｏｌ）、イソキノリン－６－アミン、１００ｍｇ（０．６９ｍｍｏｌ）、ＮａＩ １０４ｍｇ（０．６９ｍｍｏｌ） Ｋ2ＣＯ3 ２００ｍｇ（１．３８ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ／Ｈ2Ｏを２０ｍｌバイアルで混合した。室温で２時間撹拌した。薄層クロマトグラフィーでは反応は検出されず、反応混合物を７０℃に加熱し、一晩撹拌した。反応を停止し、濃縮して粗生成物を得、これを、ＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～３％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２０ｍｇの黄色固体を得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２２分；純度：９５．０％；ESI m/z [M+1]+=335.22. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 8.86 (s, 1H), 8.17 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.53-7.45 (m, 3H), 7.07-7.05 (m, 1H), 6.98 (d, J = 8.0 Hz, 1H) ,6.69-6.62 (m, 2H), 4.33-4.28 (m, 5H), 3.51-3.48 (m, 3H).
【0170】
４．１１． １－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ジオックス－６－イル）－３－（３－フェニル-ピペリジン－１－イル）－プロパン－１－オン（２１）の合成
１５ｍｌのＴＨＦ中の３－フェニルピペリジン（４００ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（７５０ｍｇ、７．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（６１ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（５６１ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌し、静置して層状に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＭｅＯＨ／ＤＣＭ勾配溶出（０～１０％）を用いた４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、２８０ｍｇのパーム油が得られた。分析結果：収率３４．７％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．３１分；＞９５％の純度；ESI m/z [M+H]+ = 352 FA mobile system. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.51-7.49 (m, 2H), 7.32-7.29 (m, 2H), 7.24-7.22 (m, 3H), 6.91-6.89 (m, 1H), 4.32-4.26 (m, 4H), 3.23 (s, 2H),3.11 (t, J = 14.5 Hz,2H), 2.94 (s, 3H),2.20 (s, 2H), 1.96(d, J = 13.0 Hz,1H), 1.84 (s, 2H), 1.19-1.17 (m, 1H).
１５ｍｌのＴＨＦ中の３－フェニルピペリジン（４００ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（７５０ｍｇ、７．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（６１ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（５６１ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌し、静置して層状に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＭｅＯＨ／ＤＣＭ勾配溶出（０～１０％）を用いた４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、２８０ｍｇのパーム油が得られた。分析結果：収率３４．７％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．３１分；＞９５％の純度；ESI m/z [M+H]+ = 352 FA mobile system. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.51-7.49 (m, 2H), 7.32-7.29 (m, 2H), 7.24-7.22 (m, 3H), 6.91-6.89 (m, 1H), 4.32-4.26 (m, 4H), 3.23 (s, 2H),3.11 (t, J = 14.5 Hz,2H), 2.94 (s, 3H),2.20 (s, 2H), 1.96(d, J = 13.0 Hz,1H), 1.84 (s, 2H), 1.19-1.17 (m, 1H).
【0171】
４．１２． ３－（３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－オキソプロピル）－２－チオチアゾリジン－４－オン（２２）の合成
２－チオフェンチアゾリジノン－４－ １，６１ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）および１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロプ－２－エン－１－オン ８０ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を２０ｍｌバイアルで混合し、１１０℃で１時間撹拌した。反応が停止した後、表題化合物を、ＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ（５～９５％）勾配溶出を伴う６０ｇのＣ１８カラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、２０ｍｇの黄色固体が得られた。分析結果：収率１２．４％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．５７分；純度９１．０％；ESI m/z [M-1]+= 321.93.
２－チオフェンチアゾリジノン－４－ １，６１ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）および１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロプ－２－エン－１－オン ８０ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を２０ｍｌバイアルで混合し、１１０℃で１時間撹拌した。反応が停止した後、表題化合物を、ＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ（５～９５％）勾配溶出を伴う６０ｇのＣ１８カラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、２０ｍｇの黄色固体が得られた。分析結果：収率１２．４％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．５７分；純度９１．０％；ESI m/z [M-1]+= 321.93.
【0172】
４．１３． ｔｅｒｔ－ブチル（（１－（３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－オキソプロピル）－３－ヒドロキシアゼチジン－３－イル）メチル）カルバメート（２３）の合成
１０ｍｌのＴＨＦ中のｔｅｒｔ－ブチル（（３－ヒドロキシアゼチジン－３－アシル）メチル）カルバメート（２０２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３０３ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２５ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（２７１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に１０ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌し、静置して層状に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を合わせ、１０ｍｌ×２のＮａＨＣＯ3および１０ｍｌのブラインで洗浄した。溶媒を真空下で除去して粗生成物を得、これを、メタノール／ＤＣＭ（０～１０％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、２６０ｍｇの白色固体が得られた。分析結果：収率６６．３％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２２分；＞９５％の純度 ESI m/z [M+H]+ = 393 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ．
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.50-7.48 (m, 2H), 6.91(d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.33-4.29 (m, 6H), 3.87-3.82 (m, 4H), 3.65-3.55 (m, 2H), 3.50-3.47 (m, 2H).
１０ｍｌのＴＨＦ中のｔｅｒｔ－ブチル（（３－ヒドロキシアゼチジン－３－アシル）メチル）カルバメート（２０２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（３０３ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２５ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（２７１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。その後、室温で２時間撹拌した。反応混合物に１０ｍｌの水を添加し、１０分間撹拌し、静置して層状に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を合わせ、１０ｍｌ×２のＮａＨＣＯ3および１０ｍｌのブラインで洗浄した。溶媒を真空下で除去して粗生成物を得、これを、メタノール／ＤＣＭ（０～１０％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、２６０ｍｇの白色固体が得られた。分析結果：収率６６．３％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２２分；＞９５％の純度 ESI m/z [M+H]+ = 393 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ．
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.50-7.48 (m, 2H), 6.91(d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.33-4.29 (m, 6H), 3.87-3.82 (m, 4H), 3.65-3.55 (m, 2H), 3.50-3.47 (m, 2H).
【0173】
４．１４． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル）プロパン－１－オン（２４）の合成
（（２ｈ－インドール－５－アシル）オキシ）メチル １２７ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）、および１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロプ－２－エン－１－オン １２７ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）を２０ｍｌバイアルで混合し、１１０℃で１時間撹拌した。化合物を、ＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ（５～９５％）勾配溶出を伴う６０ｇのＣ１８カラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、３０ｍｇの黄色固体が得られた。分析結果：収率１９．６％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．５４分；純度９９．０％；ESI m/z [M+1]+= 339.26.
（（２ｈ－インドール－５－アシル）オキシ）メチル １２７ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）、および１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロプ－２－エン－１－オン １２７ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）を２０ｍｌバイアルで混合し、１１０℃で１時間撹拌した。化合物を、ＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ（５～９５％）勾配溶出を伴う６０ｇのＣ１８カラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、３０ｍｇの黄色固体が得られた。分析結果：収率１９．６％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．５４分；純度９９．０％；ESI m/z [M+1]+= 339.26.
【0174】
４．１５． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン－１－イル）プロパン－１－オン（２５）の合成
１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）プロプ－２－エン－１－ １ １６０ｍｇ（０．８４ｍｍｏｌ）、１ｈ－ピラゾリン［３，４－ｃ］ピリジン１００ｍｇ（０．８４ｍｍｏｌ）を２０ｍｌバイアルで混合した。次にそれを１１０℃で２時間撹拌した。反応混合物を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０～５％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２０ｍｇの白色固体を得た。分析結果：収率７．６９％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１１分；純度：９７．０％；ESI m/z [M+1]+=310.25.1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.43(s, 1H), 7.28 (d, J = 6.0Hz, 1H), 6.80 (d, J = 5.6Hz, 1H), 6.62-6.60 (m, 2H), 6.40 (s, 1H), 6.03 (d, J = 9.2Hz, 1H), 4.13(t,J=6Hz, 2H), 2.86(t,J=6Hz, 2H), 0.469-0.389(m, 4H).
１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）プロプ－２－エン－１－ １ １６０ｍｇ（０．８４ｍｍｏｌ）、１ｈ－ピラゾリン［３，４－ｃ］ピリジン１００ｍｇ（０．８４ｍｍｏｌ）を２０ｍｌバイアルで混合した。次にそれを１１０℃で２時間撹拌した。反応混合物を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０～５％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２０ｍｇの白色固体を得た。分析結果：収率７．６９％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１１分；純度：９７．０％；ESI m/z [M+1]+=310.25.1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.43(s, 1H), 7.28 (d, J = 6.0Hz, 1H), 6.80 (d, J = 5.6Hz, 1H), 6.62-6.60 (m, 2H), 6.40 (s, 1H), 6.03 (d, J = 9.2Hz, 1H), 4.13(t,J=6Hz, 2H), 2.86(t,J=6Hz, 2H), 0.469-0.389(m, 4H).
【0175】
４．１６． ３－（（１Ｈ－イソインドール－３－イル）アミノ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキサン－６－イル）プロパン－１－オン（２６）の合成
１Ｈ－イソインドール－３－ｍｏｌ）、ＤＭＡＰ ２１ｍｇ（０．１７７ｍｍｏｌ）および２ｍｌのテトラヒドロフランを２０ｍｌのボトルで混合し、３０分間撹拌した。３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキセン－６－イル）プロパン－１－オン ２４０ ｍｇ（０．８８５ｍｍｏｌ）を添加し、室温で４時間撹拌した。濃縮して粗生成物を得、これをＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ（０～４０％）勾配溶出を伴う４０ｇのＣ１８カラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、１００ｍｇの褐色固体を得た。分析結果：収率２６．２％。
ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２３分；純度９０．０％； ESI m/z [M+1]+ =323.25.
１Ｈ－イソインドール－３－ｍｏｌ）、ＤＭＡＰ ２１ｍｇ（０．１７７ｍｍｏｌ）および２ｍｌのテトラヒドロフランを２０ｍｌのボトルで混合し、３０分間撹拌した。３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキセン－６－イル）プロパン－１－オン ２４０ ｍｇ（０．８８５ｍｍｏｌ）を添加し、室温で４時間撹拌した。濃縮して粗生成物を得、これをＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ（０～４０％）勾配溶出を伴う４０ｇのＣ１８カラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、１００ｍｇの褐色固体を得た。分析結果：収率２６．２％。
ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２３分；純度９０．０％； ESI m/z [M+1]+ =323.25.
【0176】
４．１７． １－（３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－オキソプロピル）－２，３－ジヒドロキノリン－４（１Ｈ）－オン（２７）の合成
２，３－ジヒドロキノリン－４（１Ｈ）－オン１００ｍｇ（０．６８ｍｍｏｌ）、および１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロプ－２－エン－１－オン １２９ｍｇ（０．６８ｍｍｏｌ）を２０ｍｌバイアルで混合し、１１０℃で１時間撹拌した。反応が停止した後、ＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ勾配溶出（５～９５％）を伴う６０ｇのＣ１８カラムを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用して、最終的に４０ｍｇの黄色固体を得た。分析結果：収率２６．０％。
ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．５９分；純度９５．０％； ESI m/z [M+1]+= 338.34.
２，３－ジヒドロキノリン－４（１Ｈ）－オン１００ｍｇ（０．６８ｍｍｏｌ）、および１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロプ－２－エン－１－オン １２９ｍｇ（０．６８ｍｍｏｌ）を２０ｍｌバイアルで混合し、１１０℃で１時間撹拌した。反応が停止した後、ＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ勾配溶出（５～９５％）を伴う６０ｇのＣ１８カラムを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用して、最終的に４０ｍｇの黄色固体を得た。分析結果：収率２６．０％。
ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．５９分；純度９５．０％； ESI m/z [M+1]+= 338.34.
【0177】
４．１８． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（４－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロパン－１－オン（２８）の合成
４－フェニル－１Ｈ－ピラゾール６１ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）、１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロプ－２－エン－１－オン ８０ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を２０ｍｌのボトルで混合し、１４０℃で３０分間撹拌した。反応を停止し、ＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ（０～５％）勾配溶出を伴う６０ｇのＣ１８カラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーに送って、表題化合物を精製した。最終的に、３０ｍｇの白色粉末が得られた。分析結果：収率２１．２％。ＬＣ－ＭＳ：ＥＰＮ１８０２７－０８１－Ａ ＲＴ＝１．６５分；純度９５．０％；ESI m/z [M+1]+= 335.22.
４－フェニル－１Ｈ－ピラゾール６１ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）、１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロプ－２－エン－１－オン ８０ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を２０ｍｌのボトルで混合し、１４０℃で３０分間撹拌した。反応を停止し、ＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ（０～５％）勾配溶出を伴う６０ｇのＣ１８カラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーに送って、表題化合物を精製した。最終的に、３０ｍｇの白色粉末が得られた。分析結果：収率２１．２％。ＬＣ－ＭＳ：ＥＰＮ１８０２７－０８１－Ａ ＲＴ＝１．６５分；純度９５．０％；ESI m/z [M+1]+= 335.22.
【0178】
実施例５
５． ２－（３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロピル）イソインドリン（２９）
５． ２－（３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロピル）イソインドリン（２９）
【0179】
【化27】
【0180】
１００ｍｇ（０．３２３ｍｍｏｌ）の化合物１および１ｍｌのＴＦＡを１０ｍｌのバイアル中で混合した。混合物を１０℃に冷却した。１５０ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）のトリエチルシランを滴下して添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。反応が停止した。混合物を真空下で濃縮して、粗生成物を得た。粗生成物を、ＡＣＮ（アセトニトリル）／Ｈ2Ｏ（０～４０％）勾配溶出法を用いた４０ｇのＣ１８カラムフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用して精製した。最終的に、２０ｍｇのバターが得られた。分析結果：収率２１．０％ ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．８７分；純度９５．０％；ESI m/z [M+1]+=296.20.
【0181】
実施例６
６． 化合物３０～３８の一般的な調製方法
６． 化合物３０～３８の一般的な調製方法
【0182】
【化28】
【0183】
６．１． ３－（イソインドリン－２－イル）－１－（１，２，３，４－テトラヒドロキノリン－７－イル）プロパン－１－オン（３０）の合成
７００ｍｇ（４．５ｍｍｏｌ）の塩酸イソインドリン、４００ｍｇ（１３．５ｍｍｏｌ）のＣｓ2ＣＯ3、およびＡＣＮ（１０ｍｌ）＋Ｈ2Ｏ（０．５ＭＬ）を混合し、５０ｍｌバイアル中で撹拌した。１５分後、３０ｉ（４．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で一晩撹拌した。反応を停止し、水に注ぎ、ＣＨ2Ｃｌ2 ２５ｍｌ×３に抽出し、２５ｍｌ×２の水で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させた。濾過後、溶媒を除去して黄色固体を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝０～５％で溶出して、７００ｍｇの３－（イソインドリン－２－イル）－１－（１，２，３，４－テトラヒドロキノリン－７－イル）－プロパン－１－オンを得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２２分；ESI m/z [M+1]+=307.25.
７００ｍｇ（４．５ｍｍｏｌ）の塩酸イソインドリン、４００ｍｇ（１３．５ｍｍｏｌ）のＣｓ2ＣＯ3、およびＡＣＮ（１０ｍｌ）＋Ｈ2Ｏ（０．５ＭＬ）を混合し、５０ｍｌバイアル中で撹拌した。１５分後、３０ｉ（４．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で一晩撹拌した。反応を停止し、水に注ぎ、ＣＨ2Ｃｌ2 ２５ｍｌ×３に抽出し、２５ｍｌ×２の水で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させた。濾過後、溶媒を除去して黄色固体を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝０～５％で溶出して、７００ｍｇの３－（イソインドリン－２－イル）－１－（１，２，３，４－テトラヒドロキノリン－７－イル）－プロパン－１－オンを得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２２分；ESI m/z [M+1]+=307.25.
【0184】
６．２． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－４－（イソインドリン－２－イル）ブタン－１－オン（３１）
９７．３ｍｇ（０．６２５ｍｍｏｌ）の塩酸イソインドリン、６１１ｍｇ（１．８７５ｍｍｏｌ）のＣｓ2ＣＯ3、９３．７５ｍｇ（０．６２５ｍｍｏｌ）のＮａＩ、およびＡＣＮ（６ｍｌ）を混合し、２０ｍｌのバイアル中で撹拌した。１５分後、４－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）ブタン－１－オン、１７８ｍｇ（０．６２５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で一晩撹拌した。反応を停止し、水に注ぎ、ＣＨ2Ｃｌ2 ２５ｍｌ×３で抽出し、２５ｍｌ×２の水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。濾過後、溶媒を濃縮して白色固体にし、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝０～５％で溶出して、１２０ｍｇの白色固体を得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２３分； ９６．１％の純度；ESI m/z [M+1]+=324.25. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.53-7.51 (m ,4H), 6.92-6.90 (m, 2H), 4.33-4.27 (m, 5H), 3.74-3.72 (m, 4H), 3.07-3.04 (m, 4H), 2.02-1.97 (m, 4H).
９７．３ｍｇ（０．６２５ｍｍｏｌ）の塩酸イソインドリン、６１１ｍｇ（１．８７５ｍｍｏｌ）のＣｓ2ＣＯ3、９３．７５ｍｇ（０．６２５ｍｍｏｌ）のＮａＩ、およびＡＣＮ（６ｍｌ）を混合し、２０ｍｌのバイアル中で撹拌した。１５分後、４－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）ブタン－１－オン、１７８ｍｇ（０．６２５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で一晩撹拌した。反応を停止し、水に注ぎ、ＣＨ2Ｃｌ2 ２５ｍｌ×３で抽出し、２５ｍｌ×２の水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。濾過後、溶媒を濃縮して白色固体にし、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝０～５％で溶出して、１２０ｍｇの白色固体を得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２３分； ９６．１％の純度；ESI m/z [M+1]+=324.25. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.53-7.51 (m ,4H), 6.92-6.90 (m, 2H), 4.33-4.27 (m, 5H), 3.74-3.72 (m, 4H), 3.07-3.04 (m, 4H), 2.02-1.97 (m, 4H).
【0185】
６．３． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－２－（イソインドリン－２－イル）エタン－１－オン（３２）の合成
７８ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）のイソインドリン塩酸塩、１５１ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）のＥｔ3Ｎ、１２ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰ、および１０ｍｌのＴＨＦを２０ｍｌのバイアル中で混合し、そして１５分間撹拌した。３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン １２８ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。反応を停止し、真空濃縮により粗生成物を得た。粗生成物を、ＥＡ（酢酸エチル）／ＰＥ（石油）勾配溶出（０～３０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、２０ｍｇの褐色の半固体が得られた。分析結果：収率１３．６％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１８分；純度９１．０％；ESI m/z [M+1]+= 296.38.
７８ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）のイソインドリン塩酸塩、１５１ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）のＥｔ3Ｎ、１２ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰ、および１０ｍｌのＴＨＦを２０ｍｌのバイアル中で混合し、そして１５分間撹拌した。３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン １２８ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。反応を停止し、真空濃縮により粗生成物を得た。粗生成物を、ＥＡ（酢酸エチル）／ＰＥ（石油）勾配溶出（０～３０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、２０ｍｇの褐色の半固体が得られた。分析結果：収率１３．６％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．１８分；純度９１．０％；ESI m/z [M+1]+= 296.38.
【0186】
６．４． （２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）（イソインドリン－２－イル）メタノン（３３）の合成
２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－カルボン酸（２００ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３３６．３ｍｇ ３．３３ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（３ｍｌ）に溶解し、混合物を３０分間撹拌し、ＨＡＴＵ（５０５．４ｍｇ １．３３ｍｍｏｌ）を加えた。 次に、イソインドリン塩酸塩（206mg、1.33ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、１０ｍｌの飽和ＮａＣｌ水溶液を添加し、生成物をＣＨ2Ｃｌ2 １０ｍｌ×３で抽出した。有機層を混合し、５％ＮａＨＣＯ3、飽和ＮａＣｌ水溶液１０ｍｌで洗浄し、有機層を濃縮して粗生成物を得、溶出を伴うシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って粗生成物を得た。ＬＣＭＳ：ＲＴ＝１．５３分；純度：９７．３％；ESI m/z [M+1]+=282.20.1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 7.39-7.38 (m, 1H), 7.30-7.28 (m, 3H), 7.14-7.11 (m, 2H), 6.94-6.93 (m, 1H), 4.82 (d, J = 13.0Hz, 4H), 4.31-4.28 (m, 4H).
２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－カルボン酸（２００ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３３６．３ｍｇ ３．３３ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（３ｍｌ）に溶解し、混合物を３０分間撹拌し、ＨＡＴＵ（５０５．４ｍｇ １．３３ｍｍｏｌ）を加えた。 次に、イソインドリン塩酸塩（206mg、1.33ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、１０ｍｌの飽和ＮａＣｌ水溶液を添加し、生成物をＣＨ2Ｃｌ2 １０ｍｌ×３で抽出した。有機層を混合し、５％ＮａＨＣＯ3、飽和ＮａＣｌ水溶液１０ｍｌで洗浄し、有機層を濃縮して粗生成物を得、溶出を伴うシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行って粗生成物を得た。ＬＣＭＳ：ＲＴ＝１．５３分；純度：９７．３％；ESI m/z [M+1]+=282.20.1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 7.39-7.38 (m, 1H), 7.30-7.28 (m, 3H), 7.14-7.11 (m, 2H), 6.94-6.93 (m, 1H), 4.82 (d, J = 13.0Hz, 4H), 4.31-4.28 (m, 4H).
【0187】
６．５． １－（２，３－ジヒドロベンゾフラン－５－イル）－３－（イソインドリン－２－イル）プロパン－１－オン（３４）の合成
７００ｍｇ（４．５ｍｍｏｌ）のイソインドリン塩酸塩、４００ｍｇ（１３．５ｍｍｏｌ）のＣｓ2ＣＯ3、およびＡＣＮ（１０ｍｌ）＋Ｈ2Ｏ（０．５ｍＬ）を混合し、５０ｍｌバイアル中で撹拌した。１５分後、３４ｉ（４．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で一晩撹拌した。反応を停止し、水に注ぎ、ＣＨ2Ｃｌ2 ２５ｍｌ×３に抽出し、２５ｍｌ×２の水で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させた。濾過後、溶媒を除去して黄色固体を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝０～５％で溶出して、７００ｍｇの３－（イソインドリン－２－イル）－１－（１，２，３，４－テトラヒドロキノリン－７－イル）プロピル－１－オンを得た。
７００ｍｇ（４．５ｍｍｏｌ）のイソインドリン塩酸塩、４００ｍｇ（１３．５ｍｍｏｌ）のＣｓ2ＣＯ3、およびＡＣＮ（１０ｍｌ）＋Ｈ2Ｏ（０．５ｍＬ）を混合し、５０ｍｌバイアル中で撹拌した。１５分後、３４ｉ（４．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で一晩撹拌した。反応を停止し、水に注ぎ、ＣＨ2Ｃｌ2 ２５ｍｌ×３に抽出し、２５ｍｌ×２の水で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させた。濾過後、溶媒を除去して黄色固体を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝０～５％で溶出して、７００ｍｇの３－（イソインドリン－２－イル）－１－（１，２，３，４－テトラヒドロキノリン－７－イル）プロピル－１－オンを得た。
【0188】
６．６． １－（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール－５－イル）－３－（イソインドリン－２－イル）プロパン－１－オン（３５）の合成
イソインドール塩酸（１４６ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（２８５ｍｇ、２．８２ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２３ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ ）１－（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキサピリミジン－５－アシル－３－クロロプロピル－１－オン（２００ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＴＨＦに添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物は褐色溶液であった。ＬＣＭＳ検出の結果は以下の通りであった：反応混合物に水５ｍｌを添加し、混合物を１０分間撹拌した。混合物を静置して層状に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌで１回抽出した。その後、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（５０～８０％）を伴う２５ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、１３０ｍｇの暗色固体が得られた。分析結果：収率４６．７％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．７３分、純度９９％。
イソインドール塩酸（１４６ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（２８５ｍｇ、２．８２ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２３ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ ）１－（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキサピリミジン－５－アシル－３－クロロプロピル－１－オン（２００ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＴＨＦに添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物は褐色溶液であった。ＬＣＭＳ検出の結果は以下の通りであった：反応混合物に水５ｍｌを添加し、混合物を１０分間撹拌した。混合物を静置して層状に分離した後、水層をＥＡ １０ｍｌで１回抽出した。その後、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（５０～８０％）を伴う２５ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、１３０ｍｇの暗色固体が得られた。分析結果：収率４６．７％。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．７３分、純度９９％。
【0189】
６．７． ６－（３－（イソインドリン－２－イル）プロピオニル）クロマン－４－オン（３６）の合成
イソインドリン塩酸塩２６０．５ｍｇ（１．６８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ ５１０ｍｇ（５．０４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ ４１ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、およびＴＨＦ（６ｍｌ）を２０ｍｌのバイアル中で混合した。１５分間撹拌した後、４００ｍｇ（１．６８ｍｍｏｌ）の３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オンを添加した。その後、室温で２時間撹拌し、反応を停止させた。反応混合物を真空下で濃縮して、粗生成物を得た。残留物を、ｄｃｍ／ＭｅＯＨ＝０～５％で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、１５５ｍｇの６－（３－（イソインドリン－２－イル）プロピオニル）クロマン－４－オンを得た。 ＬＣＭＳ：ＲＴ＝１．１６分；純度９８．０％；ESI m/z [M+1]+=322.17. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 8.53 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.17-8,15 (m, 1H), 7.20 (s, 4H), 7.06 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.62 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.05 (s, 4H), 3.32-3.22 (m, 4H), 2.88 (t, J = 6.5 Hz, 2H).
イソインドリン塩酸塩２６０．５ｍｇ（１．６８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ ５１０ｍｇ（５．０４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ ４１ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、およびＴＨＦ（６ｍｌ）を２０ｍｌのバイアル中で混合した。１５分間撹拌した後、４００ｍｇ（１．６８ｍｍｏｌ）の３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オンを添加した。その後、室温で２時間撹拌し、反応を停止させた。反応混合物を真空下で濃縮して、粗生成物を得た。残留物を、ｄｃｍ／ＭｅＯＨ＝０～５％で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、１５５ｍｇの６－（３－（イソインドリン－２－イル）プロピオニル）クロマン－４－オンを得た。 ＬＣＭＳ：ＲＴ＝１．１６分；純度９８．０％；ESI m/z [M+1]+=322.17. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 8.53 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.17-8,15 (m, 1H), 7.20 (s, 4H), 7.06 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.62 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.05 (s, 4H), 3.32-3.22 (m, 4H), 2.88 (t, J = 6.5 Hz, 2H).
【0190】
６．８． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］オキサチオール－６－イル）－３－（イソインドリン－２－イル）プロパン－１－オン（３７）の合成
イソインドリン塩酸塩 ７７．１７ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ １２５ｍｇ（１．２４ｍｍｏｌ）、ＫＩ ８２ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、およびアセトン（６ｍｌ）を２０ｍｌのバイアル中で混合し、１５分間撹拌し、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］オキシフロキサシン－６－アシル）－プロピル－１－オン １００ｍｇ（０．４１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、室温で一晩連続して撹拌した。反応が停止した。反応混合物を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝０～５％で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、４０ｍｇのピンク色固体を得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２７分；純度９５．０％；ESI m/z [M+1]+ =326.25. 1HNMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.75-7.65 (m, 1H), 7.50-7.45 (m, 1H) ,7.23-7.20 (m, 4H), 7.14-7.13(m, 0.5H), 6.89-6.87 (m, 0.5H), 4.50-4.43 (m, 2H), 4.15 (d, J = 9.0 Hz, 4H), 3.33 (t, J = 4.5Hz, 4H), 3.19-3,14 (m, 2H).
イソインドリン塩酸塩 ７７．１７ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ １２５ｍｇ（１．２４ｍｍｏｌ）、ＫＩ ８２ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、およびアセトン（６ｍｌ）を２０ｍｌのバイアル中で混合し、１５分間撹拌し、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］オキシフロキサシン－６－アシル）－プロピル－１－オン １００ｍｇ（０．４１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、室温で一晩連続して撹拌した。反応が停止した。反応混合物を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝０～５％で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、４０ｍｇのピンク色固体を得た。ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．２７分；純度９５．０％；ESI m/z [M+1]+ =326.25. 1HNMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.75-7.65 (m, 1H), 7.50-7.45 (m, 1H) ,7.23-7.20 (m, 4H), 7.14-7.13(m, 0.5H), 6.89-6.87 (m, 0.5H), 4.50-4.43 (m, 2H), 4.15 (d, J = 9.0 Hz, 4H), 3.33 (t, J = 4.5Hz, 4H), 3.19-3,14 (m, 2H).
【0191】
６．９． １－（３，４－ジメトキシフェニル）－３－（イソインドリン－２－イル）プロパン－１－オン（３８）の合成
塩酸塩（１３５ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（２６４ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２１ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ） ３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（２００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＴＨＦに添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物は褐色溶液であり、ＬＣ－ＭＳによる検出は以下の通りであった。反応混合物に５ｍｌの水を加え、混合物を１０分間撹拌した。混合物を静置して層に分離した後、水層を１０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（５０～８０％）を伴うシリカゲルカラム２５ｇを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、１３５ｍｇの褐色の固体が得られた。分析結果：収率４７．８％。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．４４分；純度９９％；ESI m/z [M+H]+ = 312 BASE mobile system. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ7.63 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.18 (s, 4H), 6.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.01 (s, 4H), 3.93 (d, J = 10.2 Hz,5.6H), 3.26-3.20 (m, 4H).
塩酸塩（１３５ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（２６４ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２１ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ） ３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（２００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＴＨＦに添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物は褐色溶液であり、ＬＣ－ＭＳによる検出は以下の通りであった。反応混合物に５ｍｌの水を加え、混合物を１０分間撹拌した。混合物を静置して層に分離した後、水層を１０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＥＡ／ＰＥ勾配溶出（５０～８０％）を伴うシリカゲルカラム２５ｇを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、１３５ｍｇの褐色の固体が得られた。分析結果：収率４７．８％。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．４４分；純度９９％；ESI m/z [M+H]+ = 312 BASE mobile system. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ7.63 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.18 (s, 4H), 6.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.01 (s, 4H), 3.93 (d, J = 10.2 Hz,5.6H), 3.26-3.20 (m, 4H).
【0192】
実施例７
７． 化合物３９の合成
７． 化合物３９の合成
【0193】
【化29】
【0194】
１－（３，４－ジメトキシフェニル）－３－（イソインドール－２－イル）－プロピル－１－オン（８０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＤＣＭに添加し、ＢＢｒ3（１９５ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）を滴下して添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物は褐色溶液であり、ＬＣ－ＭＳによる検出は以下の通りであった。反応はＥＰＮ１８０３４－００８－１と組み合わせて処理された。メタノールを滴下して添加することで混合物をクエンチした。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＥＡ／ＰＥ勾配溶出（５０～８０％）を伴う２５ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、４０ｍｇの暗色固体が得られた。分析結果：収率35.4％。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．９３分；９５％の純度；ESI m/z [M+H]+=284 ＢＡＳＥ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ7.53 (dd, J = 2.0, 8.5Hz, 1H), 7.49 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 2.0 Hz, 4H), 6.88 (d, J = 8.5 Hz, 1H),4.96 (d, J = 13.5 Hz, 2H),4.67 (d, J = 13.5 Hz, 2H),3.85 (t,J = 6.5 Hz,2H), 3.61 (t,J = 6.5 Hz,2H).
【0195】
実施例８
８． 化合物４０および４１を調製する方法
８． 化合物４０および４１を調製する方法
【0196】
【化30】
【0197】
８．１．１． ５－ブロモイソインドリン－１，３－ジオン（４０ａ）の合成
尿素（５３ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を、２ｍｌのＤＭＦ中の５－ブロモイソベンゾフラン－１，３－ジオンの溶液に添加した。次にそれを１３０℃で３時間撹拌した。反応混合物は無色溶液であり、１０ｍｌの水を添加して反応を停止させた。混合物を静置して層に分離した後、水層をＥＡ ６ｍｌ×２で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮した。粗生成物１００ｍｇは、さらなる精製を必要とせずに淡黄色固体であった。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．３５分；純度９０％；ESI m/z [M-H]+ =224 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ.
尿素（５３ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を、２ｍｌのＤＭＦ中の５－ブロモイソベンゾフラン－１，３－ジオンの溶液に添加した。次にそれを１３０℃で３時間撹拌した。反応混合物は無色溶液であり、１０ｍｌの水を添加して反応を停止させた。混合物を静置して層に分離した後、水層をＥＡ ６ｍｌ×２で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ５ｍｌ×２およびブライン５ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮した。粗生成物１００ｍｇは、さらなる精製を必要とせずに淡黄色固体であった。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．３５分；純度９０％；ESI m/z [M-H]+ =224 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ.
【0198】
８．１．２． ５－ブロモイソインドリン（４０ｂ）の合成
５－ブロモイソインドール－１，３－ジオン（４ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）を１２０ｍｌのＢＨ3／ＴＨＦに７０℃で一晩添加し、そして１０ｍｌのＭｅＯＨを滴下することによって反応を停止させた。混合溶液を真空下で濃縮し、混合物を添加した。塩酸塩４０ｍｌを添加し、混合物を７０℃で４時間撹拌した。次に、１Ｍ ＮａＯＨ水溶液を添加し、ｐＨを１４に調整した。層を静的に分離した後、水層をＤＣＭ １００ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、ブライン５０ｍｌ×２、水５０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して、２．０ｇの粗生成物を得た。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝０．９５分；ESI m/z [M+H]+=198 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ．
５－ブロモイソインドール－１，３－ジオン（４ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）を１２０ｍｌのＢＨ3／ＴＨＦに７０℃で一晩添加し、そして１０ｍｌのＭｅＯＨを滴下することによって反応を停止させた。混合溶液を真空下で濃縮し、混合物を添加した。塩酸塩４０ｍｌを添加し、混合物を７０℃で４時間撹拌した。次に、１Ｍ ＮａＯＨ水溶液を添加し、ｐＨを１４に調整した。層を静的に分離した後、水層をＤＣＭ １００ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、ブライン５０ｍｌ×２、水５０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して、２．０ｇの粗生成物を得た。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝０．９５分；ESI m/z [M+H]+=198 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ．
【0199】
８．１．３． ５－ブロモイソインドリン（４０ｃ）の合成
５－ブロモ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール（１．８ｇ、９．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ ４０ｍｌ中のＢｏｃ2Ｏ（４．０ｍｇ、１８．０ｍｍｏｌ） Ｎａ2ＣＯ3水溶液１０ｍｌを添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。次に、３０ｍｌの水を反応混合物に加え、混合物を１０分間撹拌した。混合物を静置して層に分離した後、水層をＥＡ ３０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ２０ｍｌ×２およびブライン２０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＰＥ／ＥＡ勾配溶出（１０～３０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に黄色固体（１．６ｇ、収率５９．２％）が得られた。
ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．８７分；ESI m/z [M+H]+=299 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ．
５－ブロモ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール（１．８ｇ、９．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ ４０ｍｌ中のＢｏｃ2Ｏ（４．０ｍｇ、１８．０ｍｍｏｌ） Ｎａ2ＣＯ3水溶液１０ｍｌを添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。次に、３０ｍｌの水を反応混合物に加え、混合物を１０分間撹拌した。混合物を静置して層に分離した後、水層をＥＡ ３０ｍｌ×３で抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 ２０ｍｌ×２およびブライン２０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＰＥ／ＥＡ勾配溶出（１０～３０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に黄色固体（１．６ｇ、収率５９．２％）が得られた。
ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．８７分；ESI m/z [M+H]+=299 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ．
【0200】
８．１．４． ｔｅｒｔ－ブチル５－（４－フルオロフェニル）イソインドリン－２－カルボキシレート（４０ｅ）の合成
ｔｅｒｔ－ブチル５－ブロモイソインドール－２－カルボキシレート（３００ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、Ｋ3ＰＯ4（５３５ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１４６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）および２－（４－フルオロフェニル）－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオックスボラン（４４４ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）を１，４－ジオックスボラン／Ｈ2Ｏ ９．６ｍｌ中で２時間撹拌した。反応を停止し、真空下で濃縮して粗生成物を得、得られた粗生成物を、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ勾配溶出（０～１０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。 最終的に白色固体（２７５ｍｇ、収率６８．２％）が得られた。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．９５分；ESI m/z [M+H]+ =314 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ．
ｔｅｒｔ－ブチル５－ブロモイソインドール－２－カルボキシレート（３００ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、Ｋ3ＰＯ4（５３５ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１４６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）および２－（４－フルオロフェニル）－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオックスボラン（４４４ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）を１，４－ジオックスボラン／Ｈ2Ｏ ９．６ｍｌ中で２時間撹拌した。反応を停止し、真空下で濃縮して粗生成物を得、得られた粗生成物を、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ勾配溶出（０～１０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。 最終的に白色固体（２７５ｍｇ、収率６８．２％）が得られた。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．９５分；ESI m/z [M+H]+ =314 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ．
【0201】
８．１． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（５－（４－フルオロフェニル）イソインドリン－２－イル）プロパン－１－オン（４０）の合成
１５ｍｌのＴＨＦ中の５－（４－フルオロフェニル）イソインドリン（１８７ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（２６７ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２２ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の溶液に、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（２００ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を加え、混合物を１０分間撹拌し、静置して層に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄した。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ勾配溶出（０～１０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、２３０ｍｇの赤色固体が得られた。分析結果：収率６９．３％。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．４３分；＞９５％の純度；ESI m/z [M+H]+ = 404 FA mobile system. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.55-7.52 (m, 2H), 7.50-7.46 (m, 2H), 7.38-7.35 (m, 2H), 7.26-7.24 (m, 1H), 7.11-7.07 (m, 2H), 6.90(d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.32-4.26 (m, 4H), 4.13 (d, J = 4.0 Hz,4H), 3.30 (s, 4H).
１５ｍｌのＴＨＦ中の５－（４－フルオロフェニル）イソインドリン（１８７ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（２６７ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２２ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の溶液に、３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（２００ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を加え、混合物を１０分間撹拌し、静置して層に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄した。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ勾配溶出（０～１０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、２３０ｍｇの赤色固体が得られた。分析結果：収率６９．３％。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．４３分；＞９５％の純度；ESI m/z [M+H]+ = 404 FA mobile system. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.55-7.52 (m, 2H), 7.50-7.46 (m, 2H), 7.38-7.35 (m, 2H), 7.26-7.24 (m, 1H), 7.11-7.07 (m, 2H), 6.90(d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.32-4.26 (m, 4H), 4.13 (d, J = 4.0 Hz,4H), 3.30 (s, 4H).
【0202】
８．２．１． ｔｅｒｔ－ブチル５－（ピリジン－４－イル）イソインドリン－２－カルボキシレート（４１ｅ）の合成
ｔｅｒｔ－ブチル５－ブロモイソインドール－２－カルボキシレート（２５０ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）、Ｋ3ＰＯ4（５３５ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１４６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、および４－（４，４，５，５－四酢酸－１，３，２－ジオキソボラン－２－アシル）ピリジン（３４５ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）を８０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０～１０％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、２７０ｍｇの白色固体が得られた。分析結果：鈴木カップリングは成功した。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．３０分；ESI m/z [M+H]+ = 297 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ．
ｔｅｒｔ－ブチル５－ブロモイソインドール－２－カルボキシレート（２５０ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）、Ｋ3ＰＯ4（５３５ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１４６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、および４－（４，４，５，５－四酢酸－１，３，２－ジオキソボラン－２－アシル）ピリジン（３４５ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）を８０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して粗生成物を得、これを、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０～１０％）勾配溶出を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。最終的に、２７０ｍｇの白色固体が得られた。分析結果：鈴木カップリングは成功した。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．３０分；ESI m/z [M+H]+ = 297 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ．
【0203】
８．２． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（５－（ピリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）プロパン－１－オン（４１）の合成
１５ｍｌのＴＨＦ中の５－（ピリジン－４－アシル）イソインドリン（２７０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（４１８ｍｇ、４．１４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（３４ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の溶液に３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（３１３ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）を添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、混合物を１０分間撹拌し、静置して層に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＤＣＭ／ＭｅＯＨ勾配溶出（０～１０％）を用いた４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、８０ｍｇの黄色油が得られた。分析結果：１５．１％の収率。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．０１分；＞９５％の純度；ESI m/z [M+H]+ = 387 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ． 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ8.61(d, J = 4.0 Hz, 2H), 7.69-7.66 (m, 2H), 7.62 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.36 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.33-4.29 (s, 4H), 3.95-3.93 (m, 4H), 3.20 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.06 (t, J = 7.0 Hz, 2H).
１５ｍｌのＴＨＦ中の５－（ピリジン－４－アシル）イソインドリン（２７０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（４１８ｍｇ、４．１４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（３４ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の溶液に３－クロロ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（３１３ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）を添加した。次にそれを室温で４時間撹拌した。反応混合物に２０ｍｌの水を添加し、混合物を１０分間撹拌し、静置して層に分離し、水層を２０ｍｌのＥＡで１回抽出した。次に、有機層を混合し、飽和ＮａＨＣＯ3 １０ｍｌ×２およびブライン１０ｍｌで洗浄し、有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＤＣＭ／ＭｅＯＨ勾配溶出（０～１０％）を用いた４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、８０ｍｇの黄色油が得られた。分析結果：１５．１％の収率。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．０１分；＞９５％の純度；ESI m/z [M+H]+ = 387 ＦＡ ｍｏｂｉｌｅ ｓｙｓｔｅｍ． 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ8.61(d, J = 4.0 Hz, 2H), 7.69-7.66 (m, 2H), 7.62 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.36 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.33-4.29 (s, 4H), 3.95-3.93 (m, 4H), 3.20 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.06 (t, J = 7.0 Hz, 2H).
【0204】
実施例９
１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロプ－２－エン－１－オン（４２）の合成
１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロプ－２－エン－１－オン（４２）の合成
【0205】
【化31】
【0206】
３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（１００ｍｇ、０．３６９ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ ５ｍｌを、２０ｍｌバイアル中で混合した。混合物を１０に冷却した。１４９ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌの茶葉を添加した。 混合物を室温で一晩撹拌した。反応を停止し、真空下で濃縮して、粗生成物を得た。 ＭｅＯＨ（メタノール）／ ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～５％）勾配溶出を伴う２５ｇのシリカゲルカラムを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用して、白色固体（８０ｍｇ）を得た。分析結果：収率５７．１％。 ＬＣ－ＭＳ：ＥＰＮ１８０２７－０６０－Ａ Ｒｔ＝１．４５分；純度９９．０％；ESI m/z [M+1]+= 191.20.
【0207】
実施例１０ 化合物４３、４４の調製方法
【0208】
【化32】
【0209】
１０．１． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３－（４－フルオロフェニル）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）プロパン－１－オン（４３）の合成
化合物４３ａの１．３ｍｌ（１．３ｍｍｏｌ）の溶液を、３ｍｌのＴＨＦ中の１７（２９７ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）の溶液に滴下して添加し、混合物を５０ｍｌフラスコに入れ、 ０℃で１時間加熱した。反応混合物を塩化アンモニウム水溶液に注ぎ、ＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。有機層を合わせ、５ｍｌのブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで４時間乾燥させた。溶媒を除去した後、ＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～５％）勾配溶出を伴う２５ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用して、白色固体（２０ｍｇ）を得た。
化合物４３ａの１．３ｍｌ（１．３ｍｍｏｌ）の溶液を、３ｍｌのＴＨＦ中の１７（２９７ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）の溶液に滴下して添加し、混合物を５０ｍｌフラスコに入れ、 ０℃で１時間加熱した。反応混合物を塩化アンモニウム水溶液に注ぎ、ＥＡ １０ｍｌ×３で抽出した。有機層を合わせ、５ｍｌのブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで４時間乾燥させた。溶媒を除去した後、ＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～５％）勾配溶出を伴う２５ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用して、白色固体（２０ｍｇ）を得た。
【0210】
１０．２． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３－ヒドロキシ－３－フェニルピロリジン－１－イル）プロパン－１－オン（４４）の合成
１－（３－（２，３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－３－オキソプロピル）ピロリドン－３－ １，２００ｍｇ（０．７２８ｍｍｏｌ）、５ｍｌのＴＨＦを２０ｍｌのバイアル中で混合し、ドライアイスと共にアセトンに入れて－４０℃に冷却した。０．７２８ｍｌ（０．７２８ｍｍｏｌ）のベンゼン臭化マグネシウムを混合物に滴下して加え、混合物を－４０℃で１時間撹拌した。２ｍｌの飽和ＮＨ4Ｃｌを滴下して添加し、反応を停止させた。反応混合物に冷水５ｍｌを加え、１０分間撹拌し、静置して層状に分離し、次に水層をＥＡ ２０ｍｌ×２で抽出した。次に有機層を混合し、ｓａｔ５ｍｌブラインで洗浄した。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～５％）勾配溶出を伴う８０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、２０ｍｇの白色固体が得られた。分析結果：収率７．８％。ＬＣ－ＭＳ：ＥＰＮ１８０２７－０３１－ ＲＴ＝１．２１分；９０．５％の純度；ESI m/z [M+1]+=354.42.
１－（３－（２，３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－３－オキソプロピル）ピロリドン－３－ １，２００ｍｇ（０．７２８ｍｍｏｌ）、５ｍｌのＴＨＦを２０ｍｌのバイアル中で混合し、ドライアイスと共にアセトンに入れて－４０℃に冷却した。０．７２８ｍｌ（０．７２８ｍｍｏｌ）のベンゼン臭化マグネシウムを混合物に滴下して加え、混合物を－４０℃で１時間撹拌した。２ｍｌの飽和ＮＨ4Ｃｌを滴下して添加し、反応を停止させた。反応混合物に冷水５ｍｌを加え、１０分間撹拌し、静置して層状に分離し、次に水層をＥＡ ２０ｍｌ×２で抽出した。次に有機層を混合し、ｓａｔ５ｍｌブラインで洗浄した。有機溶媒を真空下で濃縮して粗生成物を得、これをＭｅＯＨ（メタノール）／ＤＣＭ（ジクロロメタン）（０～５％）勾配溶出を伴う８０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。最終的に、２０ｍｇの白色固体が得られた。分析結果：収率７．８％。ＬＣ－ＭＳ：ＥＰＮ１８０２７－０３１－ ＲＴ＝１．２１分；９０．５％の純度；ESI m/z [M+1]+=354.42.
【0211】
実施例１１
１１． 化合物４５～５０の一般的な調製方法
１１． 化合物４５～５０の一般的な調製方法
【0212】
【化33】
【0213】
１１．１．１． ｔｅｒｔ－ブチル３－ヒドロキシ－３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピロリジン－１－カルボキシレート（４５ｂ）の合成
４５ａ（６．６７ｍｍｏｌ）の溶液をＴＨＦ（３０ｍＬ）に添加し、ｎ－ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ、３．５ｍＬ、８．６７ｍｍｏｌ）を－７８℃で滴下して添加した。添加後、－７８℃で１時間撹拌した。ＴＨＦ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－オキソピロリドン－１－カルボキシレート（１．８５ｇ、９．９９ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して添加した。添加した混合物を－７８℃で３時間撹拌した。次に、混合物をＮＨ4Ｃｌ（飽和、５０ｍｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ ２）で抽出し、混合した有機溶液をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝４：１）によって精製して、所望の生成物４５ｂ（１．０ｇ、収率４５％）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.66-7.60 (m, 4H), 3.78-3.57 (m, 4H), 2.38-2.14 (m, 2H), 2.13-2.04 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
４５ａ（６．６７ｍｍｏｌ）の溶液をＴＨＦ（３０ｍＬ）に添加し、ｎ－ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ、３．５ｍＬ、８．６７ｍｍｏｌ）を－７８℃で滴下して添加した。添加後、－７８℃で１時間撹拌した。ＴＨＦ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－オキソピロリドン－１－カルボキシレート（１．８５ｇ、９．９９ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して添加した。添加した混合物を－７８℃で３時間撹拌した。次に、混合物をＮＨ4Ｃｌ（飽和、５０ｍｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ ２）で抽出し、混合した有機溶液をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝４：１）によって精製して、所望の生成物４５ｂ（１．０ｇ、収率４５％）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.66-7.60 (m, 4H), 3.78-3.57 (m, 4H), 2.38-2.14 (m, 2H), 2.13-2.04 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
【0214】
１１．１．２． ３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール２，２，２－トリフルオロアセテート（４５ｃ）の合成
ＴＦＡ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－ヒドロキシ－３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピロリドン－１－カルボキシレート（４５ｂ）（７００ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルシラン（２ｍｌ）を添加した。混合物を１０５℃で１２時間撹拌した。混合物を濃縮して、生成物４５ｃ（１．０ｇの粗生成物）を黄色の粗生成物として得、これを次の工程ＬＣＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ ＮＨ4ＯＡｃ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ ＮＨ4ＯＡｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで、３分以内］で直接使用した。Ｒｔ＝１．３５５分；MS calculated value: 213; MS measured value: 214 [M+H]+.
ＴＦＡ（５ｍｌ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－ヒドロキシ－３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピロリドン－１－カルボキシレート（４５ｂ）（７００ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルシラン（２ｍｌ）を添加した。混合物を１０５℃で１２時間撹拌した。混合物を濃縮して、生成物４５ｃ（１．０ｇの粗生成物）を黄色の粗生成物として得、これを次の工程ＬＣＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ ＮＨ4ＯＡｃ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ ＮＨ4ＯＡｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで、３分以内］で直接使用した。Ｒｔ＝１．３５５分；MS calculated value: 213; MS measured value: 214 [M+H]+.
【0215】
１１．１．３． ３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピロリジン２，２，２－トリフルオロ酢酸塩（４５ｄ）の合成
３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール２，２，２－トリフルオロアセテート（４５ｃ）（１．０ｇの粗生成物、２．１０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２０ｍｌ）、Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）に添加した。混合物をＨ２（５０ｐｓｉ）下で４０℃で一晩撹拌した。次に、混合物を濾過し、濾液を濃縮して、粗生成物４５ｄ（６９１粗生成物）を黄色固体として得、これを次の工程で直接使用した。
ＬＣＭＳ ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで３分で］、Ｒｔ＝１．３６３分；MS calculated value: 215; MS measured value: 216 [M+H]+.
３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール２，２，２－トリフルオロアセテート（４５ｃ）（１．０ｇの粗生成物、２．１０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２０ｍｌ）、Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）に添加した。混合物をＨ２（５０ｐｓｉ）下で４０℃で一晩撹拌した。次に、混合物を濾過し、濾液を濃縮して、粗生成物４５ｄ（６９１粗生成物）を黄色固体として得、これを次の工程で直接使用した。
ＬＣＭＳ ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで３分で］、Ｒｔ＝１．３６３分；MS calculated value: 215; MS measured value: 216 [M+H]+.
【0216】
１１．１． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピロリジン－１－イル）プロパン－１－オン（４５）の合成
３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピロリジン２，２，２－トリフルオロアセテート（４５ｄ）（４００ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（３１５ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５ｍｌ）中で混合し、３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（ｉ、３９７ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で３時間撹拌した。次に、反応混合物を濃縮し、残留物をＣ１８カラム（ＣＨ3ＣＮ／水、４０％～７０％、４０分）で精製して、表題化合物４５（５０ｍｇ、収率１０％）を白色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：６０％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および４０％ＣＨ3ＣＮから３０％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および７０％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、純度：９８．８９％（２１４ｎｍ）、９６．２５％（２５４ｎｍ）； Ｒｔ＝３．２７３分；MS calculated value: 405; MS measured value: 406 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.61 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.53-7.47 (m, 4H), 6.96 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.33-4.27 (m, 4H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.17-3.07 (m, 2H), 2.91-2.70 (m, 4H), 2.67-2.61 (m, 1H), 2.58-2.51 (m, 1H), 2.32-2.19 (m, 1H), 1.75-1.64 (m, 1H).
３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピロリジン２，２，２－トリフルオロアセテート（４５ｄ）（４００ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（３１５ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５ｍｌ）中で混合し、３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（ｉ、３９７ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で３時間撹拌した。次に、反応混合物を濃縮し、残留物をＣ１８カラム（ＣＨ3ＣＮ／水、４０％～７０％、４０分）で精製して、表題化合物４５（５０ｍｇ、収率１０％）を白色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：６０％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および４０％ＣＨ3ＣＮから３０％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および７０％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、純度：９８．８９％（２１４ｎｍ）、９６．２５％（２５４ｎｍ）； Ｒｔ＝３．２７３分；MS calculated value: 405; MS measured value: 406 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.61 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.53-7.47 (m, 4H), 6.96 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.33-4.27 (m, 4H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.17-3.07 (m, 2H), 2.91-2.70 (m, 4H), 2.67-2.61 (m, 1H), 2.58-2.51 (m, 1H), 2.32-2.19 (m, 1H), 1.75-1.64 (m, 1H).
【0217】
１１．２． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３－（４－ニトロフェニル）ピロリジン－１－イル）プロパン－１－オン塩酸塩（４６）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中に、３－（４－ニトロフェニル）ピロリドン塩酸塩（４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（８８ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）の混合物を添加した。５分間撹拌した後、混合物を５℃に冷却した。次に、ＤＣＭ（１ｍｌ）に、３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（５５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。得られた混合物を５～１５℃で２時間撹拌した。反応溶液を水（１０ｍｌ）に注ぎ、ＤＣＭ（１０ｍｌ ３）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮した後、残留物をＣ１８カラムクロマトグラフィー（２０～５０％ＭｅＣＮ水溶液、１５分）によって精製して、黄色固体として粗生成物（４５ｍｇ）を得た。次に、それをＣ１８［水中１０～５０％ＭｅＣＮ（０．１％塩酸塩）、１０分］カラムクロマトグラフィーによってさらに精製して、所望の生成物４６（３５ｍｇ、収率４８％）を黄色固体として得た。
ＬＣ－ＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）、および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）、および９５％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内に］、純度：９５．８２％（２１４ｎｍ）、９５．００％（２５４ｎｍ）； Ｒｔ＝３．８７０分；MS calculated value: 382; MS measured value: 383 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.43-11.25 (m, 1H), 8.30-8.16 (m, 2H), 7.75-7.68 (m, 2H), 7.56-7.51 (m, 2H), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.36-4.29 (m, 4H), 4.02-3.88 (m, 1H), 3.84-3.74 (m, 6H), 3.42-3.37 (m, 1H), 3.30-3.19 (m, 1H), 2.48-2.42 (m, 1H), 2.20-1.98 (m, 1H).
ＤＣＭ（２ｍＬ）中に、３－（４－ニトロフェニル）ピロリドン塩酸塩（４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（８８ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）の混合物を添加した。５分間撹拌した後、混合物を５℃に冷却した。次に、ＤＣＭ（１ｍｌ）に、３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（５５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。得られた混合物を５～１５℃で２時間撹拌した。反応溶液を水（１０ｍｌ）に注ぎ、ＤＣＭ（１０ｍｌ ３）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮した後、残留物をＣ１８カラムクロマトグラフィー（２０～５０％ＭｅＣＮ水溶液、１５分）によって精製して、黄色固体として粗生成物（４５ｍｇ）を得た。次に、それをＣ１８［水中１０～５０％ＭｅＣＮ（０．１％塩酸塩）、１０分］カラムクロマトグラフィーによってさらに精製して、所望の生成物４６（３５ｍｇ、収率４８％）を黄色固体として得た。
ＬＣ－ＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）、および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）、および９５％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内に］、純度：９５．８２％（２１４ｎｍ）、９５．００％（２５４ｎｍ）； Ｒｔ＝３．８７０分；MS calculated value: 382; MS measured value: 383 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.43-11.25 (m, 1H), 8.30-8.16 (m, 2H), 7.75-7.68 (m, 2H), 7.56-7.51 (m, 2H), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.36-4.29 (m, 4H), 4.02-3.88 (m, 1H), 3.84-3.74 (m, 6H), 3.42-3.37 (m, 1H), 3.30-3.19 (m, 1H), 2.48-2.42 (m, 1H), 2.20-1.98 (m, 1H).
【0218】
１１．３． ３－（３－（４－ブロモフェニル）ピロリジン－１－イル）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オン（４７）の合成
３－（４－ブロモフェニル）ピロリジン２，２，２－トリフルオロアセテート（４９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、および３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（４５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（５４ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に添加した。 得られた混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残留物をＣ１８カラム（ＣＨ3ＣＮ／水、４５％～７５％、４０分）で精製して、表題化合物４７（２０ｍｇ、収率３４％）を黄色固体として得た。
ＬＣ－ＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）、および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）、および９５％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内に］、純度：９６．４８％（２１４ｎｍ）、９１．２５％（２５４ｎｍ）； Ｒｔ＝４．０８１分；MS calculated value: 415; MS measured value: 416 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.52-7.50 (m, 2H), 7.40-7.38 (m, 2H), 7.13 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.92-6.90 (m, 1H), 4.35-4.26 (m, 4H), 3.38-3.26 (m, 1H), 3.17-3.14 (m, 2H), 3.09-3.06 (m, 2H), 2.97-2.89 (m, 1H), 2.87-2.73 (m, 2H), 2.62-2.53 (m, 1H), 2.38-2.27 (m, 1H), 1.88-1.76 (m, 1H).
３－（４－ブロモフェニル）ピロリジン２，２，２－トリフルオロアセテート（４９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、および３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（４５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（５４ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に添加した。 得られた混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残留物をＣ１８カラム（ＣＨ3ＣＮ／水、４５％～７５％、４０分）で精製して、表題化合物４７（２０ｍｇ、収率３４％）を黄色固体として得た。
ＬＣ－ＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）、および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）、および９５％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内に］、純度：９６．４８％（２１４ｎｍ）、９１．２５％（２５４ｎｍ）； Ｒｔ＝４．０８１分；MS calculated value: 415; MS measured value: 416 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.52-7.50 (m, 2H), 7.40-7.38 (m, 2H), 7.13 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.92-6.90 (m, 1H), 4.35-4.26 (m, 4H), 3.38-3.26 (m, 1H), 3.17-3.14 (m, 2H), 3.09-3.06 (m, 2H), 2.97-2.89 (m, 1H), 2.87-2.73 (m, 2H), 2.62-2.53 (m, 1H), 2.38-2.27 (m, 1H), 1.88-1.76 (m, 1H).
【0219】
１１．４． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３－（ｐ－トリル）ピロリジン－１－イル）プロパン－１－オン塩酸塩（４８）の合成
ＤＣＭ（２ｍｌ）中の３－（ｐ－トリル）ピロリジン（３０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（４８ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）の混合物に、３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ）［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（５６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。反応溶液を１０ｍｌの水に注ぎ、ＤＣＭ（２０ｍｌ２）で抽出し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。残留物をＤＭＳＯ（１ｍｌ）および濃縮物に溶解した。 塩酸（１）を添加した。Ｃ１８［水中１０～４０％ＭｅＣＮ（０．１％塩酸塩）、１０分］カラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物４８（３０ｍｇ、収率４１％）を黄色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：水８０％（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ3ＣＮから水３０％（０．１％ＴＦＡ）および７０％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、純度：９９．３６％（２１４ｎｍ）、９８．４３％（２５４ｎｍ）； Ｒｔ＝３．０１１分；MS calculated value: 351; MS measured value: 352[M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.47-11.28 (m, 1H), 7.55-7.51 (m, 2H), 7.30-7.24 (m, 2H), 7.18-7.15 (m, 2H), 7.01 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.35-4.30 (m, 4H), 3.91-3.74 (m, 1H), 3.70-3.52 (m, 6H), 3.39-3.32 (m, 1H), 3.21-3.08 (m, 1H), 2.41-2.35 (m, 1H), 2.28 (m, 3H), 2.13-1.94 (m, 1H).
ＤＣＭ（２ｍｌ）中の３－（ｐ－トリル）ピロリジン（３０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（４８ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）の混合物に、３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ）［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（５６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。反応溶液を１０ｍｌの水に注ぎ、ＤＣＭ（２０ｍｌ２）で抽出し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。残留物をＤＭＳＯ（１ｍｌ）および濃縮物に溶解した。 塩酸（１）を添加した。Ｃ１８［水中１０～４０％ＭｅＣＮ（０．１％塩酸塩）、１０分］カラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物４８（３０ｍｇ、収率４１％）を黄色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：水８０％（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ3ＣＮから水３０％（０．１％ＴＦＡ）および７０％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、純度：９９．３６％（２１４ｎｍ）、９８．４３％（２５４ｎｍ）； Ｒｔ＝３．０１１分；MS calculated value: 351; MS measured value: 352[M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.47-11.28 (m, 1H), 7.55-7.51 (m, 2H), 7.30-7.24 (m, 2H), 7.18-7.15 (m, 2H), 7.01 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.35-4.30 (m, 4H), 3.91-3.74 (m, 1H), 3.70-3.52 (m, 6H), 3.39-3.32 (m, 1H), 3.21-3.08 (m, 1H), 2.41-2.35 (m, 1H), 2.28 (m, 3H), 2.13-1.94 (m, 1H).
【0220】
１１．５． ３－（３－（４－クロロフェニル）ピロリジン－１－イル）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オン塩酸塩（４９）の合成
３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（１０７ｍｇ、０．３９６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２ｍＬ）中の３－（４－クロロフェニル）ピロリジン（５０ｍｇ、０．３３０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（８５ｍｇ、０．６６０ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。反応液を１０ｍｌの水に注ぎ、ジクロロメタン（２０ｍｌ ２）で抽出し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして濃縮した。それをＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１ｍｌ）および濃縮物で溶解した。塩酸塩（１滴）を添加した。Ｃ１８［水中１０～４０％ＭｅＣＮ（０．１％塩酸塩）］カラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物４９（３０ｍｇ、収率４１％）を黄色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、Ｒｔ＝３．３２５分。純度：９８．１２％（２１４ｎｍ）、９７．１４％（２５４ｎｍ）；MS calculated value: 371.1; MS measured value: 371.9 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 13.10 (s, 0.4H), 12.92 (s, 0.6H), 7.54-7.52 (m, 2H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.33-7.31 (m, 2H), 7.18-7.16 (m, 1H), 6.92-6.90 (m, 1H), 4.32-4.31 (m, 2H), 4.28-3.26 (m, 2H), 3.94-3.61 (m, 7H), 3.40-3.89 (m, 0.4H), 3.19-3.16 (m, 0.6H), 3.00-2.88 (m, 0.4H), 2.86-2.81 (m, 0.6H), 2.63-2.61 (m, 0.4 H), 2.47-2.38 (m, 1H), 2.18-2.11 (m, 0.6H).
３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（１０７ｍｇ、０．３９６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２ｍＬ）中の３－（４－クロロフェニル）ピロリジン（５０ｍｇ、０．３３０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（８５ｍｇ、０．６６０ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。反応液を１０ｍｌの水に注ぎ、ジクロロメタン（２０ｍｌ ２）で抽出し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして濃縮した。それをＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１ｍｌ）および濃縮物で溶解した。塩酸塩（１滴）を添加した。Ｃ１８［水中１０～４０％ＭｅＣＮ（０．１％塩酸塩）］カラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物４９（３０ｍｇ、収率４１％）を黄色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、Ｒｔ＝３．３２５分。純度：９８．１２％（２１４ｎｍ）、９７．１４％（２５４ｎｍ）；MS calculated value: 371.1; MS measured value: 371.9 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 13.10 (s, 0.4H), 12.92 (s, 0.6H), 7.54-7.52 (m, 2H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.33-7.31 (m, 2H), 7.18-7.16 (m, 1H), 6.92-6.90 (m, 1H), 4.32-4.31 (m, 2H), 4.28-3.26 (m, 2H), 3.94-3.61 (m, 7H), 3.40-3.89 (m, 0.4H), 3.19-3.16 (m, 0.6H), 3.00-2.88 (m, 0.4H), 2.86-2.81 (m, 0.6H), 2.63-2.61 (m, 0.4 H), 2.47-2.38 (m, 1H), 2.18-2.11 (m, 0.6H).
【0221】
１１．６． ４－（１－（３－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－オキソプロピル）ピロリジン－３－イル）ベンゾニトリル（５０）の合成
ＤＣＭ（８ｍＬ）中の４－（ピロリドン－３－イル）ベンゾニトリル２，２，２－トリフルオロアセテート（７５ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、および３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（８５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）にＤＩＰＥＡ（１０１ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。次に、反応混合物を濃縮し、残留物をＣ１８カラム（ＣＨ3ＣＮ／水、４５％～７８％、４０分）で精製して、表題化合物５０（２０ｍｇ、収率２１％）を黄色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ3ＣＮから３０％水（０．１％ＴＦＡ）および７０％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、純度：９９．２０％（２１４ｎｍ）、８５．２７％（２５４ｎｍ）；Ｒｔ＝３．１６２分；MS calculated value: 362; MS measured value: 363 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.57-7.50 (m, 4H), 7.36 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.91 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.33-4.28 (m, 4H), 3.45-3.31 (m, 1H), 3.21-3.09 (m, 2H), 3.04-2.91 (m, 3H), 2.89-2.73 (m, 2H), 2.69-2.59 (m, 1H), 2.41-2.28 (m, 1H), 1.89-1.75 (m, 1H).
ＤＣＭ（８ｍＬ）中の４－（ピロリドン－３－イル）ベンゾニトリル２，２，２－トリフルオロアセテート（７５ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、および３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－プロピル－１－オン（８５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）にＤＩＰＥＡ（１０１ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。次に、反応混合物を濃縮し、残留物をＣ１８カラム（ＣＨ3ＣＮ／水、４５％～７８％、４０分）で精製して、表題化合物５０（２０ｍｇ、収率２１％）を黄色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ3ＣＮから３０％水（０．１％ＴＦＡ）および７０％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、純度：９９．２０％（２１４ｎｍ）、８５．２７％（２５４ｎｍ）；Ｒｔ＝３．１６２分；MS calculated value: 362; MS measured value: 363 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.57-7.50 (m, 4H), 7.36 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.91 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.33-4.28 (m, 4H), 3.45-3.31 (m, 1H), 3.21-3.09 (m, 2H), 3.04-2.91 (m, 3H), 2.89-2.73 (m, 2H), 2.69-2.59 (m, 1H), 2.41-2.28 (m, 1H), 1.89-1.75 (m, 1H).
【0222】
実施例１２
１２． 化合物５１、５２の一般的な調製方法
１２． 化合物５１、５２の一般的な調製方法
【0223】
【化34】
【0224】
１２．１．１． １－ブロモ－４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）ベンゼン（５１ａ）の合成
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中の２－ブロモ－５－フルオロフェノール（１）（４．５０ｇ、２３．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＥＡ（６．９０ｇ、４７．２ｍｍｏｌ）を添加した。次に、ブロモ（メトキシ）メタン（３．２５ｇ、２６．０ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を０℃で１時間撹拌した。次に、混合物を水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、そして濃縮した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝５０：１）により精製して、表題化合物（５．０ｇ、収率９０％）を無色油として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 (dd, J = 8.4, 6.4 Hz, 1H), 6.93 (dd, J = 10.4, 2.8 Hz, 1H), 6.66-6.62 (m, 1H), 5.23 (s, 2H), 3.52 (s, 3H).
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中の２－ブロモ－５－フルオロフェノール（１）（４．５０ｇ、２３．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＥＡ（６．９０ｇ、４７．２ｍｍｏｌ）を添加した。次に、ブロモ（メトキシ）メタン（３．２５ｇ、２６．０ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を０℃で１時間撹拌した。次に、混合物を水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、そして濃縮した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝５０：１）により精製して、表題化合物（５．０ｇ、収率９０％）を無色油として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 (dd, J = 8.4, 6.4 Hz, 1H), 6.93 (dd, J = 10.4, 2.8 Hz, 1H), 6.66-6.62 (m, 1H), 5.23 (s, 2H), 3.52 (s, 3H).
【0225】
１２．１．２． ３－（４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）フェニル）－３－ヒドロキシピロリジン－１－カルボン酸ベンジルエステル（５１ｂ）の合成
ＴＨＦ（３０ｍｌ）中に、１－ブロモ－４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）ベンゼン（５．０ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）およびＮ１，Ｎ１，Ｎ２，Ｎ２－テトラメチルエタン－１，２－ジアミン（３．７１ｇ、３２．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。ｎ－ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ、１２．８ｍＬ、３２．０ｍｍｏｌ）を－７０℃で滴下して添加した。添加後、－７０℃で１時間撹拌した。次に、３－オキソピロリドン－１－カルボン酸ベンジルエステル（４．６６ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）の溶液を－７０℃で滴下して添加した。添加後、－７０℃で１時間撹拌した。水（２０ｍＬ）を添加して反応を冷却した。次に、混合物を室温に温め、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ ２）で抽出し、合わせた有機相をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１０：１～５：１）で精製して、表題化合物５１ｂ（２．４ｇ、収率３０％）を黄色油として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41-7.31 (m, 5H), 7.23-7.19 (m, 1H), 6.95 (dd, J = 17.6, 8.4 Hz, 1H), 6.77-6.72 (m, 1H), 5.30-5.25 (m, 2H), 5.17-5.16 (m, 2H), 4.31-4.18 (m, 1H), 3.74-3.65 (m, 3H), 3.51-3.43 (m, 3H), 2.58-2.37 (m, 2H).
ＴＨＦ（３０ｍｌ）中に、１－ブロモ－４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）ベンゼン（５．０ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）およびＮ１，Ｎ１，Ｎ２，Ｎ２－テトラメチルエタン－１，２－ジアミン（３．７１ｇ、３２．０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。ｎ－ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ、１２．８ｍＬ、３２．０ｍｍｏｌ）を－７０℃で滴下して添加した。添加後、－７０℃で１時間撹拌した。次に、３－オキソピロリドン－１－カルボン酸ベンジルエステル（４．６６ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）の溶液を－７０℃で滴下して添加した。添加後、－７０℃で１時間撹拌した。水（２０ｍＬ）を添加して反応を冷却した。次に、混合物を室温に温め、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ ２）で抽出し、合わせた有機相をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１０：１～５：１）で精製して、表題化合物５１ｂ（２．４ｇ、収率３０％）を黄色油として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41-7.31 (m, 5H), 7.23-7.19 (m, 1H), 6.95 (dd, J = 17.6, 8.4 Hz, 1H), 6.77-6.72 (m, 1H), 5.30-5.25 (m, 2H), 5.17-5.16 (m, 2H), 4.31-4.18 (m, 1H), 3.74-3.65 (m, 3H), 3.51-3.43 (m, 3H), 2.58-2.37 (m, 2H).
【0226】
１２．１．３． ３－（４－フルオロ－２－ヒドロキシフェニル）－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－カルボン酸ベンジルエステル（５１ｃ）の合成
ベンジル３－（４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）フェニル）－３－ヒドロキシピロリドン－１－カルボキシレート（５１ｂ）（１．４０ｇ、３．７３ｍｍｏｌ）、ＴｓＯＨ（６４ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）をトルエン（２０ｍｌ）に添加した。混合物を１００℃に加熱し、３０分間撹拌し、そして反応溶液を冷却し、そして濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１０：１～２：１）で精製して、所望の生成物５（７００ｍｇ、収率６０％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.25-10.23 (m, 1H), 7.40-7.32 (m, 5H), 7.16-7.10 (m, 1H), 6.74-6.72 (m, 1H), 6.68-6.63 (m, 1H), 6.26-6.24 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.52-4.48 (m, 2H), 4.30-4.25 (m, 2H).
ベンジル３－（４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）フェニル）－３－ヒドロキシピロリドン－１－カルボキシレート（５１ｂ）（１．４０ｇ、３．７３ｍｍｏｌ）、ＴｓＯＨ（６４ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）をトルエン（２０ｍｌ）に添加した。混合物を１００℃に加熱し、３０分間撹拌し、そして反応溶液を冷却し、そして濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１０：１～２：１）で精製して、所望の生成物５（７００ｍｇ、収率６０％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.25-10.23 (m, 1H), 7.40-7.32 (m, 5H), 7.16-7.10 (m, 1H), 6.74-6.72 (m, 1H), 6.68-6.63 (m, 1H), 6.26-6.24 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.52-4.48 (m, 2H), 4.30-4.25 (m, 2H).
【0227】
１２．１．４． ３－（４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）フェニル）－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－カルボン酸ベンジルエステル（５１ｄ）の合成
ベンジル３－（４－フルオロ－２－ヒドロキシフェニル）－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－カルボキシレート（５１ｃ）（７００ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（５７８ｍｇ、４．４８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍｌ）に添加した。次に、ブロモメトキシメタン（２８０ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。添加後、０℃で２０分間撹拌し、次に水（１５ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）で精製して、表題化合物５１ｄ（３４０ｍｇ、収率４３％）を無色油として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42-7.30 (m, 5H), 7.21-7.15 (m, 1H), 6.93 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.79-6.73 (m, 1H), 6.10 (d, J = 21.2 Hz, 1H), 5.20-5.18 (m, 4H), 4.60-4.56 (m, 2H), 4.40-4.38 (m, 2H), 3.47-3.45 (m, 3H).
ベンジル３－（４－フルオロ－２－ヒドロキシフェニル）－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－カルボキシレート（５１ｃ）（７００ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（５７８ｍｇ、４．４８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍｌ）に添加した。次に、ブロモメトキシメタン（２８０ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。添加後、０℃で２０分間撹拌し、次に水（１５ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）で精製して、表題化合物５１ｄ（３４０ｍｇ、収率４３％）を無色油として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42-7.30 (m, 5H), 7.21-7.15 (m, 1H), 6.93 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.79-6.73 (m, 1H), 6.10 (d, J = 21.2 Hz, 1H), 5.20-5.18 (m, 4H), 4.60-4.56 (m, 2H), 4.40-4.38 (m, 2H), 3.47-3.45 (m, 3H).
【0228】
１２．１．５． ３－（４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）フェニル）ピロリジン（５１ｅ）の合成
ＣＨ３ＯＨ（５ｍｌ）に、ベンジル３－（４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）フェニル－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－カルボキシレート（５１ｄ）（２４０ｍｇ）、０．６７２ｍｍｏｌ））の溶液、Ｐｄ／Ｃ（１０％、５０ｍｇ）およびＣＨ3ＣＯＯＨ（４滴）を添加した。混合物を、Ｈ２雰囲気（１気圧）下、室温で１時間撹拌した。次に、混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解した。混合物をＮａＨＣＯ3溶液（飽和、１０ｍｌ）およびブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、そして濃縮した。残留物をＣ１８カラムクロマトグラフィー（水中の５～７０％ＭｅＣＮ、３０分）によって精製して、所望の生成物５１ｅ（５０ｍｇ、収率３３％）を黄色油として得た。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.12-7.06 (m, 1H), 6.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.73-6.69 (m, 1H), 5.19 (s, 2H), 3.74-3.68 (m, 1H), 3.48 (s, 3H), 3.24-3.15 (m, 2H), 3.08-2.96 (m, 2H), 2.11-2.04 (m, 1H), 2.00-1.93 (m, 1H).
ＣＨ３ＯＨ（５ｍｌ）に、ベンジル３－（４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）フェニル－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－カルボキシレート（５１ｄ）（２４０ｍｇ）、０．６７２ｍｍｏｌ））の溶液、Ｐｄ／Ｃ（１０％、５０ｍｇ）およびＣＨ3ＣＯＯＨ（４滴）を添加した。混合物を、Ｈ２雰囲気（１気圧）下、室温で１時間撹拌した。次に、混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解した。混合物をＮａＨＣＯ3溶液（飽和、１０ｍｌ）およびブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、そして濃縮した。残留物をＣ１８カラムクロマトグラフィー（水中の５～７０％ＭｅＣＮ、３０分）によって精製して、所望の生成物５１ｅ（５０ｍｇ、収率３３％）を黄色油として得た。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.12-7.06 (m, 1H), 6.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.73-6.69 (m, 1H), 5.19 (s, 2H), 3.74-3.68 (m, 1H), 3.48 (s, 3H), 3.24-3.15 (m, 2H), 3.08-2.96 (m, 2H), 2.11-2.04 (m, 1H), 2.00-1.93 (m, 1H).
【0229】
１２．１．６． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３－（４－フルオロ－２－（メトキシメトキシ）フェニル）ピロリジン－１－イル）プロパン－１－ オン（５１ｆ）の合成
ＤＣＭ（３ｍｌ）中に、３－（４－フルオロ－２－（メトキシメトキシフェニル）ピロリジン（５１ｅ）（５０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、および３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オン（１ｉｉ）（７０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。その後、混合物を濃縮し、残留物をＣ１８［水中の５～７０％ＭｅＣＮ、４０分］カラムクロマトグラフィーにより、精製し、所望の生成物５１ｆ（６０ｍｇ、収率６６％）を黄色油として得た。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.53-7.50 (m, 2H), 7.12-7.07 (m, 1H), 6.91 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.73-6.68 (m, 1H), 5.18 (s, 2H), 4.33-4.27 (m, 4H), 4.02-3.93 (m, 1H), 3.48 (s, 3H), 3.18-3.15 (m, 2H), 3.13-3.09 (m, 2H), 3.03-2.93 (m, 2H), 2.66-2.56 (m, 2H), 2.25-2.16 (m, 1H), 2.11-2.06 (m, 1H).
ＤＣＭ（３ｍｌ）中に、３－（４－フルオロ－２－（メトキシメトキシフェニル）ピロリジン（５１ｅ）（５０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、および３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）プロパン－１－オン（１ｉｉ）（７０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。その後、混合物を濃縮し、残留物をＣ１８［水中の５～７０％ＭｅＣＮ、４０分］カラムクロマトグラフィーにより、精製し、所望の生成物５１ｆ（６０ｍｇ、収率６６％）を黄色油として得た。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.53-7.50 (m, 2H), 7.12-7.07 (m, 1H), 6.91 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.73-6.68 (m, 1H), 5.18 (s, 2H), 4.33-4.27 (m, 4H), 4.02-3.93 (m, 1H), 3.48 (s, 3H), 3.18-3.15 (m, 2H), 3.13-3.09 (m, 2H), 3.03-2.93 (m, 2H), 2.66-2.56 (m, 2H), 2.25-2.16 (m, 1H), 2.11-2.06 (m, 1H).
【0230】
１２．１． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３－（４－フルオロ－２－ヒドロキシフェニル）ピロリジン－１－イル）プロパン－１－オン塩酸塩（５１）の合成
ＥｔＯＡｃ（１ｍｌ）の溶液中に、１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３－（４－フルオロ－２－（メトキシル）フェニル）ピロリドン－１－１（５１ｆ）（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）塩酸塩／ＥｔＯＡｃ（４ｍ、２ｍｌ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物を３回ＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）と蒸留し、粗生成物（３０ｍｇ）を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィーＣ１８［水中１０～４０％ＭｅＣＮ（０．１％塩酸塩）、１５分］により精製して、所望の生成物５１（１４ｍｇ、収率）３１％）白色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ3ＣＮから３０％水（０．１％ＴＦＡ）および７０％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、純度：９９．０５％（２１４ｎｍ）、９７．５２％（２５４ｎｍ）；Ｒｔ＝３．２５３分； MS calculated value: 371; MS measured value: 372 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 10.46-10.40 (m, 1H), 7.55-7.52 (m, 2H), 7.15-7.09 (m, 1H), 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.77-6.75 (m, 1H), 6.65 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.35-4.30 (m, 4H), 4.04-3.86 (m, 1H), 3.79-3.71 (m, 2H), 3.60-3.48 (m, 4H), 3.28-3.25 (m, 2H), 2.33-2.24 (m, 2H).
ＥｔＯＡｃ（１ｍｌ）の溶液中に、１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３－（４－フルオロ－２－（メトキシル）フェニル）ピロリドン－１－１（５１ｆ）（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）塩酸塩／ＥｔＯＡｃ（４ｍ、２ｍｌ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物を３回ＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）と蒸留し、粗生成物（３０ｍｇ）を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィーＣ１８［水中１０～４０％ＭｅＣＮ（０．１％塩酸塩）、１５分］により精製して、所望の生成物５１（１４ｍｇ、収率）３１％）白色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ3ＣＮから３０％水（０．１％ＴＦＡ）および７０％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、純度：９９．０５％（２１４ｎｍ）、９７．５２％（２５４ｎｍ）；Ｒｔ＝３．２５３分； MS calculated value: 371; MS measured value: 372 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.96 (s, 1H), 10.46-10.40 (m, 1H), 7.55-7.52 (m, 2H), 7.15-7.09 (m, 1H), 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.77-6.75 (m, 1H), 6.65 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.35-4.30 (m, 4H), 4.04-3.86 (m, 1H), 3.79-3.71 (m, 2H), 3.60-3.48 (m, 4H), 3.28-3.25 (m, 2H), 2.33-2.24 (m, 2H).
【0231】
１２．２． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（３－（４－フルオロ－３－ヒドロキシフェニル）ピロリジン－１－イル）プロパン－１－オン（５２）の合成
ＤＣＭ（３ｍｌ）中に、３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（１ｉｉ）（８１）ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５２ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の溶液中に、３－（４－フルオロ－３－（メトキシ）フェニル）ピロリドン（５２ｆ）（４５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃ（１５ｍｌ）に溶解した。溶液を水（１０ｍｌ）およびブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（１ｍｌ）に溶解し、塩酸塩／ＥｔＯＡｃ（４ｍ、２ｍｌ）を添加した。室温で３０分間撹拌した。濃縮後、残留物をＥｔＯＡｃ（３ｍｌ）で摩砕した。混合物を濾過した。固体を収集し、Ｃ１８［１０～４０％ＭｅＣＮ、水中の０．１％塩酸塩、１５分］カラムクロマトグラフィーによってさらに精製して、所望の生成物５２（１６ｍｇ、収率２０％）を白色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：水８０％（０．１％ＴＦＡ）およびＣＨ3ＣＮ ２０％から水３０％（ＴＦＡ ０．１％）およびＣＨ3ＣＮ ７０％まで、６．５分以内］、純度：９２．７９％（２１４ｎｍ）、９３．０１％（２５４ｎｍ）；Ｒｔ＝２．５２２分； MS calculated value: 371; MS measured value: 372 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.96-10.81 (m, 1H), 9.92 (s, 1H), 7.55-7.51 (m, 2H), 7.15-7.09 (m, 1H), 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.95-6.92 (m, 1H), 6.82-6.77 (m, 1H), 4.35-4.29 (m, 4H), 3.91-3.73 (m, 1H), 3.67-3.51 (m, 6H), 3.39-3.33 (m, 1H), 3.20-3.05 (m, 1H), 2.41-2.31 (m, 1H), 2.10-1.88 (m, 1H).
ＤＣＭ（３ｍｌ）中に、３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（１ｉｉ）（８１）ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５２ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の溶液中に、３－（４－フルオロ－３－（メトキシ）フェニル）ピロリドン（５２ｆ）（４５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃ（１５ｍｌ）に溶解した。溶液を水（１０ｍｌ）およびブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（１ｍｌ）に溶解し、塩酸塩／ＥｔＯＡｃ（４ｍ、２ｍｌ）を添加した。室温で３０分間撹拌した。濃縮後、残留物をＥｔＯＡｃ（３ｍｌ）で摩砕した。混合物を濾過した。固体を収集し、Ｃ１８［１０～４０％ＭｅＣＮ、水中の０．１％塩酸塩、１５分］カラムクロマトグラフィーによってさらに精製して、所望の生成物５２（１６ｍｇ、収率２０％）を白色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：水８０％（０．１％ＴＦＡ）およびＣＨ3ＣＮ ２０％から水３０％（ＴＦＡ ０．１％）およびＣＨ3ＣＮ ７０％まで、６．５分以内］、純度：９２．７９％（２１４ｎｍ）、９３．０１％（２５４ｎｍ）；Ｒｔ＝２．５２２分； MS calculated value: 371; MS measured value: 372 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.96-10.81 (m, 1H), 9.92 (s, 1H), 7.55-7.51 (m, 2H), 7.15-7.09 (m, 1H), 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.95-6.92 (m, 1H), 6.82-6.77 (m, 1H), 4.35-4.29 (m, 4H), 3.91-3.73 (m, 1H), 3.67-3.51 (m, 6H), 3.39-3.33 (m, 1H), 3.20-3.05 (m, 1H), 2.41-2.31 (m, 1H), 2.10-1.88 (m, 1H).
【0232】
実施例１３
１３． 化合物５３、５４の一般的な調製方法
１３． 化合物５３、５４の一般的な調製方法
【0233】
【化35】
【0234】
１３．１．１． ２－（２－ヨードフェニル）エチルアミン塩酸塩（５３ａ）の合成
２－（２－ヨードフェニル）アセトニトリル（４．００ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）の溶液をＴＨＦ（１２ｍｌ）に添加し、ボラン／ＴＨＦ（１ｍ、４０ｍｌ、４０ｍｍｏｌ）を室温で滴下して添加した。次に、混合物を１０時間還流した。混合物を０℃に冷却し、１０ｍｌのエタノールおよび塩酸塩／エタノール（１ｍ、２０ｍｌ、２０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた懸濁液を濃縮して粗生成物にし、アセトン（２０ｍＬ）に分散させた。次に、混合物を濾過し、固体を収集して、表題化合物５３ａ（３．１ｇの粗生成物）を白色固体として得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。 ＬＣＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで２．５分以内］、Ｒｔ＝１．２５分； MS calculated value: 247; MS measured value: 248 [M+H]+.
２－（２－ヨードフェニル）アセトニトリル（４．００ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）の溶液をＴＨＦ（１２ｍｌ）に添加し、ボラン／ＴＨＦ（１ｍ、４０ｍｌ、４０ｍｍｏｌ）を室温で滴下して添加した。次に、混合物を１０時間還流した。混合物を０℃に冷却し、１０ｍｌのエタノールおよび塩酸塩／エタノール（１ｍ、２０ｍｌ、２０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた懸濁液を濃縮して粗生成物にし、アセトン（２０ｍＬ）に分散させた。次に、混合物を濾過し、固体を収集して、表題化合物５３ａ（３．１ｇの粗生成物）を白色固体として得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。 ＬＣＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで２．５分以内］、Ｒｔ＝１．２５分； MS calculated value: 247; MS measured value: 248 [M+H]+.
【0235】
１３．１．２． Ｎ－ベンジル－２－（２－ヨードフェニル）エチルアミン（５３ｂ）の合成
２－（２－ヨードフェニル）エチルアミン塩酸塩（１．００ｇ、３．５３ｍｍｏｌ）およびベンズアルデヒド（３７４ｍｇ、３．５３ｍｍｏｌ）をエタノール（１８ｍＬ）中で室温で１時間撹拌した。次に、シアン化ナトリウム（５５６ｍｇ、８．８３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。水（３０ｍｌ）と混合してクエンチし、酢酸エチル（２） ３０ｍｌで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（アセトニトリル：水（０．１％重炭酸アンモニウム）６５％から７０％）で精製して、表題化合物５３ｂ（５６０ｍｇ、収率５１％）を白色油として得た。
ＬＣ－ＭＳ［移動相：２．５分以内に９５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで］、Ｒｔ＝１．７８分； MS calculated value: 337; MS measured value: 338 [M+H]+.
２－（２－ヨードフェニル）エチルアミン塩酸塩（１．００ｇ、３．５３ｍｍｏｌ）およびベンズアルデヒド（３７４ｍｇ、３．５３ｍｍｏｌ）をエタノール（１８ｍＬ）中で室温で１時間撹拌した。次に、シアン化ナトリウム（５５６ｍｇ、８．８３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。水（３０ｍｌ）と混合してクエンチし、酢酸エチル（２） ３０ｍｌで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（アセトニトリル：水（０．１％重炭酸アンモニウム）６５％から７０％）で精製して、表題化合物５３ｂ（５６０ｍｇ、収率５１％）を白色油として得た。
ＬＣ－ＭＳ［移動相：２．５分以内に９５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4０Ａｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで］、Ｒｔ＝１．７８分； MS calculated value: 337; MS measured value: 338 [M+H]+.
【0236】
１３．１．３． ２－（ベンジル（２－ヨードフェニルエチル）アミノ）－１－（４－フルオロフェニル）エタノン（５３ｃ）の合成
Ｎ－ベンジル－２－（２－ヨードフェニル）エタノールアミン（５３ｂ）（４６０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１４５ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）の溶液を、ＤＭＦ（７ｍｌ）、および２－ブロモ－１－（４－フルオロベンゼン）エタノール（３０９ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）に０℃で添加した。混合物を室温で５時間撹拌した。次に、水（３０ｍＬ）および酢酸エチル（３０ｍＬ×２）を添加して、所望の化合物を抽出した。有機層を濃縮し、Ｃ１８（アセトニトリル：９５％～１００％水）でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物５３ｃ（５４２ｍｇ、収率８４％）を白色油として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.95-7.90 (m, 2H), 7.75 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.33-7.26 (m, 4.5H), 7.25-7.18 (m, 1.5H), 7.14-7.11 (m, 1H), 7.07-7.02 (m, 2H), 6.87-6.83 (m, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 2.98-2.93 (m, 2H), 2.89-2.84 (m, 2H).
Ｎ－ベンジル－２－（２－ヨードフェニル）エタノールアミン（５３ｂ）（４６０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１４５ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）の溶液を、ＤＭＦ（７ｍｌ）、および２－ブロモ－１－（４－フルオロベンゼン）エタノール（３０９ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）に０℃で添加した。混合物を室温で５時間撹拌した。次に、水（３０ｍＬ）および酢酸エチル（３０ｍＬ×２）を添加して、所望の化合物を抽出した。有機層を濃縮し、Ｃ１８（アセトニトリル：９５％～１００％水）でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物５３ｃ（５４２ｍｇ、収率８４％）を白色油として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.95-7.90 (m, 2H), 7.75 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.33-7.26 (m, 4.5H), 7.25-7.18 (m, 1.5H), 7.14-7.11 (m, 1H), 7.07-7.02 (m, 2H), 6.87-6.83 (m, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 2.98-2.93 (m, 2H), 2.89-2.84 (m, 2H).
【0237】
１３．１．４． ３－ベンジル－１－（４－フルオロフェニル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］アゼチジン－１－オール（５３ｄ）の合成
Ｎ１，Ｎ１，Ｎ２，Ｎ２－テトラメチル－１，２－ジアミン（２４０ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）およびｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍトルエン、０．８３ｍＬ、２．０７ｍｍｏｌ）の溶液をテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）、および２－（ベンジル（２－ヨードフェネチル）－１－（４－フルオロフェネチル）エタノール（５３ｃ）（５６０ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。ＴＨＦ（１３ｍＬ）を窒素雰囲気下、－７８℃で滴下して添加した。添加した混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を水（１０ｍｌ）でクエンチし、酢酸エチル（１５ｍｌ ２）で抽出し、Ｃ１８（アセトニトリル：６０％～６５％水）でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物５３ｄ（１００ｍｇ、収率２４％）を黄色油として得た。 ＬＣＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮ、２．５分以内］、Ｒｔ＝１．９３分； MS calculated value: 347; MS measured value: 348 [M+H]+.
Ｎ１，Ｎ１，Ｎ２，Ｎ２－テトラメチル－１，２－ジアミン（２４０ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）およびｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍトルエン、０．８３ｍＬ、２．０７ｍｍｏｌ）の溶液をテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）、および２－（ベンジル（２－ヨードフェネチル）－１－（４－フルオロフェネチル）エタノール（５３ｃ）（５６０ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。ＴＨＦ（１３ｍＬ）を窒素雰囲気下、－７８℃で滴下して添加した。添加した混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を水（１０ｍｌ）でクエンチし、酢酸エチル（１５ｍｌ ２）で抽出し、Ｃ１８（アセトニトリル：６０％～６５％水）でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物５３ｄ（１００ｍｇ、収率２４％）を黄色油として得た。 ＬＣＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮ、２．５分以内］、Ｒｔ＝１．９３分； MS calculated value: 347; MS measured value: 348 [M+H]+.
【0238】
１３．１．５． １－（４－フルオロフェニル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］アザ－１－オール（５３ｅ）の合成
３－ベンジル－１－（４－フルオロフェニル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ（ｄ）アゾピン－１－オール（５３ｄ）（１００ｍｇ、０．２８８ｍｍｏｌ）を室温でエタノール（１５ｍｌ）Ｐｄ／Ｃ（１０％、５０ｍｇ）に添加した。次に、混合物を水素雰囲気（５０ｐｓｉ）下、５０℃で一晩撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、表題化合物５３ｅ（６５ｍｇ、収率８８％）を白色固体として得た。 ＬＣＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）、および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで２．５分以内］、Ｒｔ＝１．４７分； MS calculated value: 257; MS measured value: 258 [M+H]+
３－ベンジル－１－（４－フルオロフェニル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ（ｄ）アゾピン－１－オール（５３ｄ）（１００ｍｇ、０．２８８ｍｍｏｌ）を室温でエタノール（１５ｍｌ）Ｐｄ／Ｃ（１０％、５０ｍｇ）に添加した。次に、混合物を水素雰囲気（５０ｐｓｉ）下、５０℃で一晩撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、表題化合物５３ｅ（６５ｍｇ、収率８８％）を白色固体として得た。 ＬＣＭＳ［移動相：９５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）、および５％ＣＨ3ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ4ＯＡｃ）および９５％ＣＨ3ＣＮまで２．５分以内］、Ｒｔ＝１．４７分； MS calculated value: 257; MS measured value: 258 [M+H]+
【0239】
１３．１． １－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－イル）－３－（１－（４－フルオロフェニル）－１－ヒドロキシ－４，５－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［］ｄ］ａｚａ－３（２Ｈ）－イル）プロパン－１－オン（５３）の合成
３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（１ｉ、１０２ｍｇ、０．３７９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）中の１－（４－フルオロフェニル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］アゾピン－１－オール（５３ｅ）（６５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６５ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液に室温で添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。次に、水（１０ｍｌ）およびジクロロメタン（１０ｍｌ）を添加して、所望の化合物を抽出した。有機層を濃縮し、Ｃ１８（アセトニトリル：３０％～６５％水）でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物５３（２０．７ｍｇ、収率１８％）を白色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：９８％水（０．１％ＴＦＡ）および２％ＣＨ3ＣＮから４０％水（０．１％ＴＦＡ）および６０％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、純度：９２．２７％（２１４ｎｍ）、９３．９０％（２５４ｎｍ）；Ｒｔ＝４．３９８分； MS calculated value: 447; MS measured value: 448 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.52-7.49 (m, 2H), 7.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.24-7.14 (m, 4H), 7.09-7.07 (m, 1H), 7.01-6.95 (m, 3H), 5.61 (s, 1H), 4.33-4.28 (m, 4H), 3.47-3.44 (m, 1H), 3.10 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.90-2.84 (m, 3H), 2.71-2.61 (m, 3H), 2.47-2.41 (m, 1H).
３－ブロモ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ダイオキシン－６－アシル）－プロピル－１－オン（１ｉ、１０２ｍｇ、０．３７９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）中の１－（４－フルオロフェニル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］アゾピン－１－オール（５３ｅ）（６５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６５ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液に室温で添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。次に、水（１０ｍｌ）およびジクロロメタン（１０ｍｌ）を添加して、所望の化合物を抽出した。有機層を濃縮し、Ｃ１８（アセトニトリル：３０％～６５％水）でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物５３（２０．７ｍｇ、収率１８％）を白色固体として得た。 ＬＣ－ＭＳ［移動相：９８％水（０．１％ＴＦＡ）および２％ＣＨ3ＣＮから４０％水（０．１％ＴＦＡ）および６０％ＣＨ3ＣＮまで、６．５分以内］、純度：９２．２７％（２１４ｎｍ）、９３．９０％（２５４ｎｍ）；Ｒｔ＝４．３９８分； MS calculated value: 447; MS measured value: 448 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.52-7.49 (m, 2H), 7.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.24-7.14 (m, 4H), 7.09-7.07 (m, 1H), 7.01-6.95 (m, 3H), 5.61 (s, 1H), 4.33-4.28 (m, 4H), 3.47-3.44 (m, 1H), 3.10 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.90-2.84 (m, 3H), 2.71-2.61 (m, 3H), 2.47-2.41 (m, 1H).
【0240】
１３．２． ６－（３－（１－（４－フルオロフェニル）－１－ヒドロキシ-１，２，４，５－テトラヒドロ－３Ｈ－ベンゾ［ｄ］アザゼピン－３－イル）プロピオニル）クロマン－４－オン（５４）の合成
１－（４－フルオロフェニル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ（ｄ）アゾピン－１－オール（６５ｍｇ、０．２５３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－シイソプロピルエチルアミン（６５ｍｇ、０．５０６ｍｍｏｌ）を、１－（４－フルオロフェニル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ（１０２ｍｇ、０．３７９ｍｍｏｌ）に室温で添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。次にそれを水（１０ｍｌ）でクエンチし、ジクロロメタン（１０ｍｌ）で抽出した。粗生成物を、ＥＡ／ＰＥ勾配溶出（４０～６０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。白色固体１２ｍｇが得られた。分析結果：１０．３％の収率。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．３７分；純度：９３．０％； ESI m/z [M+1]+ =460.37 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.45-8.44 (m, 1H), 8.09-8.06 (m, 1H),7.34-7.31 (m, 2H), 7.10-6.08 (m, 7H), 4.60 (t,J=6.4Hz, 2H), 2.84 (t,J=6.4Hz, 2H), 1.58 (s, 4H), 1.40-1.24(m, 6H).
１－（４－フルオロフェニル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ（ｄ）アゾピン－１－オール（６５ｍｇ、０．２５３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－シイソプロピルエチルアミン（６５ｍｇ、０．５０６ｍｍｏｌ）を、１－（４－フルオロフェニル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ（１０２ｍｇ、０．３７９ｍｍｏｌ）に室温で添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。次にそれを水（１０ｍｌ）でクエンチし、ジクロロメタン（１０ｍｌ）で抽出した。粗生成物を、ＥＡ／ＰＥ勾配溶出（４０～６０％）を伴う４０ｇシリカゲルカラムでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。白色固体１２ｍｇが得られた。分析結果：１０．３％の収率。 ＬＣ－ＭＳ：ＲＴ＝１．３７分；純度：９３．０％； ESI m/z [M+1]+ =460.37 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.45-8.44 (m, 1H), 8.09-8.06 (m, 1H),7.34-7.31 (m, 2H), 7.10-6.08 (m, 7H), 4.60 (t,J=6.4Hz, 2H), 2.84 (t,J=6.4Hz, 2H), 1.58 (s, 4H), 1.40-1.24(m, 6H).
【0241】
実施例で調製された化合物、およびそれらの構造および名称を、以下の表Ａに示す。
【0242】
【表1-1】
【表1-2】
【表1-3】
【表1-4】
【表1-5】
【表1-6】
【0243】
実施例１４
１４．１． ＴＤＧミスマッチ修復活性に対する化合物の阻害率の実験的決定
（１）ウラシル塩基を含む二本鎖ＤＮＡプローブＴ１－Ｔ２を合成した。Ｔ１鎖のヌクレオチド配列は次のとおりである： 5'-FAM- TAA UGT GAA TGG AGC TGA AAT -biotin-3' ；Ｔ２鎖のヌクレオチド配列は 5'-ATT TCA GCT CCA TTC ACG TTA-3' である。ＰＣＲアニーリングプログラムを使用して、Ｔ１鎖とＴ２鎖は相補的であり、二本鎖ＤＮＡプローブＴ１－Ｔ２を形成した。
１４．１． ＴＤＧミスマッチ修復活性に対する化合物の阻害率の実験的決定
（１）ウラシル塩基を含む二本鎖ＤＮＡプローブＴ１－Ｔ２を合成した。Ｔ１鎖のヌクレオチド配列は次のとおりである： 5'-FAM- TAA UGT GAA TGG AGC TGA AAT -biotin-3' ；Ｔ２鎖のヌクレオチド配列は 5'-ATT TCA GCT CCA TTC ACG TTA-3' である。ＰＣＲアニーリングプログラムを使用して、Ｔ１鎖とＴ２鎖は相補的であり、二本鎖ＤＮＡプローブＴ１－Ｔ２を形成した。
【0244】
（２）９６ウェルプレートの各ウェルの反応系および工程は以下のとおりであった： ａ．ＴＤＧ（１００ｎＭ／Ｌ）を様々な濃度の化合物と混合し、混合物を３７℃で３０分間インキュベートした。反応緩衝液の組成は、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、１００ｍＭ ＮａＣｌ、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、２．５ｍＭＭｇＣｌ2であった； ｂ．二本鎖ＤＮＡプローブＴ１－Ｔ２を混合物に添加して、最終容量を１００μＬ、濃度を３０ｎＭにし、混合物を２５℃で３０分間インキュベートした； ｃ．１μＬのストレプトアビジン磁気ビーズを反応溶液に加え、ビオチン標識ＤＮＡを１時間完全に結合させた； ｄ．最終濃度が２００ｍＭになるようにＮａＯＨを反応溶液に添加し、混合物を室温で３０分間インキュベートした； ｅ．磁気スタンドの作用下で、ストレプトアビジン磁気ビーズをチューブ壁に吸着させ、上澄みを新しい９６ウェルプレートに移し、蛍光測定のためにＴｅｃａｎマイクロプレートリーダーに入れた。パラメータ設定は次のとおりである：励起波長４８５ｎｍ；発光波長５２０ｎｍ。蛍光強度およびＴＤＧ濃度の間の線形曲線が作成され、Ｒ2＝０．９９６８、線形範囲は０～５０ｎＭ／Ｌであった。
【0245】
本実施例に記載の生物学的方法に従って、本発明の選択された化合物を分析し、結果を表１に示す。これらのうち、表１の「＋＋」は、ＩＣ50≦５μＭでのＴＤＧミスマッチ修復に対する阻害活性を指す。「＋」は、ＩＣ50＞５μＭでのＴＤＧミスマッチ修復の阻害活性を指す。
【0246】
１４．２． Ｃａｌｕ－１細胞の増殖に対する化合物の阻害率の実験的決定
肺がん細胞株Ｃａｌｕ－１を９０％マッコイ５Ａ培地（ＢＩ、０１－０７５－１ＡＣＳ）＋１０％ウシ胎児血清（Ｇｉｂｃｏ、１０２７０１０６）で、培養のためのＣＯ２インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２、９５％空気）培養した。Ｃａｌｕ－１細胞をトリプシン（Ｇｉｂｃｏ、１２６０４－０２１）で消化し、３８４ウェルプレートにウェルあたり５００細胞の密度で播種した。培地は５０μＬで、インキュベーター内で３７℃で一晩培養した。翌日、異なる濃度の試験化合物を添加し、ＤＭＳＯの最終濃度は０．１％であった。７２時間の培養後、細胞を試験のために取り出した。試験する３８４ウェルプレートから細胞培養培地を除去し、ＣＴＧと事前に混合した新鮮な培養培地を直ちに添加した： 培養培地とＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｇ９２４３）の比率は２：１であった。３０ｕｌを各ウェルに添加した。プレートを室温で２０分間振とうした後、試薬の説明書の指示に従って多機能プレートリーダー（ＴＥＣＡＮ、Ｉｎｆｉｎｉｔｅ ２００ Ｐｒｏ）を使用して細胞の生存率を測定した。
肺がん細胞株Ｃａｌｕ－１を９０％マッコイ５Ａ培地（ＢＩ、０１－０７５－１ＡＣＳ）＋１０％ウシ胎児血清（Ｇｉｂｃｏ、１０２７０１０６）で、培養のためのＣＯ２インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２、９５％空気）培養した。Ｃａｌｕ－１細胞をトリプシン（Ｇｉｂｃｏ、１２６０４－０２１）で消化し、３８４ウェルプレートにウェルあたり５００細胞の密度で播種した。培地は５０μＬで、インキュベーター内で３７℃で一晩培養した。翌日、異なる濃度の試験化合物を添加し、ＤＭＳＯの最終濃度は０．１％であった。７２時間の培養後、細胞を試験のために取り出した。試験する３８４ウェルプレートから細胞培養培地を除去し、ＣＴＧと事前に混合した新鮮な培養培地を直ちに添加した： 培養培地とＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｇ９２４３）の比率は２：１であった。３０ｕｌを各ウェルに添加した。プレートを室温で２０分間振とうした後、試薬の説明書の指示に従って多機能プレートリーダー（ＴＥＣＡＮ、Ｉｎｆｉｎｉｔｅ ２００ Ｐｒｏ）を使用して細胞の生存率を測定した。
【0247】
本実施例に記載の生物学的方法に従って、本発明の選択された化合物を分析し、結果を表１に示す。これらのうち、表１の「＋＋」は、ＩＣ50≦５μＭでのｃａｌｕ－１細胞の増殖に対する阻害活性を指す；「＋」は、ＩＣ50＞５μＭでのｃａｌｕ－１細胞の増殖に対する阻害活性を指す。
【0248】
【表2】
【0249】
実施例１５
細胞中の化合物のＴＤＧ阻害活性の実験的決定
本実施例の操作手順は以下のとおりである：
（１）メチル化レポータープラスミドの調製：
（ａ）３２ｍＭのストック溶液濃度であるＳＡＭを超純水で１６００μＭに希釈した；
（ｂ）反応系は、以下の比率に従って調製された： ３０μｌの超純水、５μｌの１０Ｘ ＮＥバッファー２、５μｌの希釈したＳＡＭ、１μｇのｐＣｐＧＬ－ＣＭＶ－ホタルプラスミド、１μｌのＳｓｓＩメチラーゼ（４Ｕ／μｌ）；合計５０μｌ、反応は３７℃で２時間行った；
（ｃ）混合物を６５℃で２０分間加熱した。次に、０．２％ ＳＤＳを添加し、反応を８０℃で１０分間行った。次に、１μｌのプロテイナーゼＫを添加し、５０℃で１時間反応を行った；
（ｄ）メチル化されたプラスミドは、Ｄｒ．ＧｅｎＴＬＥ（登録商標）沈降助剤（ＴＡＫＡＲＡ）を用いて回収された。
細胞中の化合物のＴＤＧ阻害活性の実験的決定
本実施例の操作手順は以下のとおりである：
（１）メチル化レポータープラスミドの調製：
（ａ）３２ｍＭのストック溶液濃度であるＳＡＭを超純水で１６００μＭに希釈した；
（ｂ）反応系は、以下の比率に従って調製された： ３０μｌの超純水、５μｌの１０Ｘ ＮＥバッファー２、５μｌの希釈したＳＡＭ、１μｇのｐＣｐＧＬ－ＣＭＶ－ホタルプラスミド、１μｌのＳｓｓＩメチラーゼ（４Ｕ／μｌ）；合計５０μｌ、反応は３７℃で２時間行った；
（ｃ）混合物を６５℃で２０分間加熱した。次に、０．２％ ＳＤＳを添加し、反応を８０℃で１０分間行った。次に、１μｌのプロテイナーゼＫを添加し、５０℃で１時間反応を行った；
（ｄ）メチル化されたプラスミドは、Ｄｒ．ＧｅｎＴＬＥ（登録商標）沈降助剤（ＴＡＫＡＲＡ）を用いて回収された。
【0250】
（２）５ｆＣ／５ｃａＣ ｐＣｐＧＬ－ＣＭＶ－ホタルレポータープラスミドの調製
（ａ）以下の１０×反応系を調製した：
（ａ）以下の１０×反応系を調製した：
【0251】
【表3】
【0252】
（ｂ）反応系は、以下の比率に従って調製した：
【0253】
【表4】
【0254】
（ｃ）反応を３７℃で１時間行った；
（ｄ）２４μｇのＴｅｔ１タンパク質を２回目に添加し、反応を１時間継続した；
（ｅ）ＳＤＳを最終濃度が０．５％、８０℃で１０分間添加し、次いで１μｌのプロテイナーゼＫを５５℃で一晩添加した。
（ｆ）処理されたｃａＣ－ｃｍｖ－ホタルプラスミドを、Ｄｒ．ＧｅｎＴＬＥ（登録商標）沈降助剤（ＴＡＫＡＲＡ）で回収し、定量化した。
（ｄ）２４μｇのＴｅｔ１タンパク質を２回目に添加し、反応を１時間継続した；
（ｅ）ＳＤＳを最終濃度が０．５％、８０℃で１０分間添加し、次いで１μｌのプロテイナーゼＫを５５℃で一晩添加した。
（ｆ）処理されたｃａＣ－ｃｍｖ－ホタルプラスミドを、Ｄｒ．ＧｅｎＴＬＥ（登録商標）沈降助剤（ＴＡＫＡＲＡ）で回収し、定量化した。
【0255】
（３）ルシフェラーゼ活性アッセイ法を使用して、細胞内ＴＤＧ酵素活性に対する小分子化合物の阻害率を検出する
９６ウェルプレートにおいて、各ウェルの反応系および操作フローは以下のとおりであった：
（ａ）１ｎｇ ｃａＣ－ｃｍｖ－ｆｉｒｅｆｌｙ、１ｎｇ ｐＣｐＧＬ－ＣＭＶ－Ｒｅｌｉｎａおよび１５０ｎｇ ｐＣＤＮＡ４－ＴＤＧまたは１５０ｎｇ ｐＣＤＮＡ４－ｍｙｃプラスミドを、７５μｌのＯｐｔｉ－ＭＥＭに希釈し、十分に混合し、そして５分間静置した；
（ｂ）２μｌのトランスフェクション試薬（Ｈｉｅｆｆ ＴｒａｎｓＴＭリポソームトランスフェクション試薬（０．５μｌ／ウェル、ＹＥＡＥＥＮ、カタログ番号４０８０２））を１００μｌのＯｐｔｉ－ＭＥＭで希釈し、十分に混合し、そして５分間静置した；
（ｃ）７５μｌの（ａ）および（ｂ）をそれぞれ混合し、そして室温で２０分間静置した；
（ｄ）ＨＥＫ ２９３Ｔ ＴＤＧ ＫＯ細胞をトリプシンで消化し、細胞を収集して計数し、懸濁細胞濃度を４×１０5／ｍｌに調整した；
（ｅ）５０μｌの混合物（ｃ）を各ウェルに加え、同時に１００μｌの希釈細胞懸濁液を同じウェルに加え、それらをよく混合した。
（ｆ）細胞が壁に付着した後、試験される異なる濃度の小分子化合物を各ウェルに添加した。ＤＭＳＯの最終濃度は０．１％を超えなかった。
（ｇ）インキュベーションは、３７℃のＣＯ２インキュベーター内で７２時間行った。上清を除去し、細胞を－８０℃で急速に凍結させた。
（ｈ）ルシフェラーゼ活性を検出する前に、試験される細胞を－８０℃から取り出し、室温で３０分間静置した。Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）ルシフェラーゼ試薬（ＰＲＯＭＥＧＡ）の説明書に従い、各ウェルのホタル（ｆｉｒｅｆｌｙ）蛍光値およびウミシイタケ（Ｒｅｎｉｌｌａ）蛍光値を検出しました。
（ｉ）ホタル蛍光値を各ウェルのウミシイタケ蛍光値で割った。９６ウェルプレートＺ’および実験ウィンドウは、トランスフェクトされたcaC-cmv- firefly、pCpGL-CMV-Relina、pCDNA4-TDGプラスミド混合物およびＤＭＳＯ実験群と、トランスフェクトされたcaC-cmv- firefly、pCpGL-CMV-Relina、pCDNA4-mycプラスミド混合物およびＤＭＳＯ実験群の比率によって計算し、各化合物の相対的な酵素活性阻害率を計算した。
本実施例に記載の生物学的方法に従って、本発明の選択された化合物を分析し、その結果を表２に示す。これらのうち、表２の「＋」は、１０μＭ≦２５％の濃度でのＴＤＧ阻害活性を指す；「＋＋」は、１０μＭ＞２５％の濃度でのＴＤＧ阻害活性を指す。
９６ウェルプレートにおいて、各ウェルの反応系および操作フローは以下のとおりであった：
（ａ）１ｎｇ ｃａＣ－ｃｍｖ－ｆｉｒｅｆｌｙ、１ｎｇ ｐＣｐＧＬ－ＣＭＶ－Ｒｅｌｉｎａおよび１５０ｎｇ ｐＣＤＮＡ４－ＴＤＧまたは１５０ｎｇ ｐＣＤＮＡ４－ｍｙｃプラスミドを、７５μｌのＯｐｔｉ－ＭＥＭに希釈し、十分に混合し、そして５分間静置した；
（ｂ）２μｌのトランスフェクション試薬（Ｈｉｅｆｆ ＴｒａｎｓＴＭリポソームトランスフェクション試薬（０．５μｌ／ウェル、ＹＥＡＥＥＮ、カタログ番号４０８０２））を１００μｌのＯｐｔｉ－ＭＥＭで希釈し、十分に混合し、そして５分間静置した；
（ｃ）７５μｌの（ａ）および（ｂ）をそれぞれ混合し、そして室温で２０分間静置した；
（ｄ）ＨＥＫ ２９３Ｔ ＴＤＧ ＫＯ細胞をトリプシンで消化し、細胞を収集して計数し、懸濁細胞濃度を４×１０5／ｍｌに調整した；
（ｅ）５０μｌの混合物（ｃ）を各ウェルに加え、同時に１００μｌの希釈細胞懸濁液を同じウェルに加え、それらをよく混合した。
（ｆ）細胞が壁に付着した後、試験される異なる濃度の小分子化合物を各ウェルに添加した。ＤＭＳＯの最終濃度は０．１％を超えなかった。
（ｇ）インキュベーションは、３７℃のＣＯ２インキュベーター内で７２時間行った。上清を除去し、細胞を－８０℃で急速に凍結させた。
（ｈ）ルシフェラーゼ活性を検出する前に、試験される細胞を－８０℃から取り出し、室温で３０分間静置した。Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標）ルシフェラーゼ試薬（ＰＲＯＭＥＧＡ）の説明書に従い、各ウェルのホタル（ｆｉｒｅｆｌｙ）蛍光値およびウミシイタケ（Ｒｅｎｉｌｌａ）蛍光値を検出しました。
（ｉ）ホタル蛍光値を各ウェルのウミシイタケ蛍光値で割った。９６ウェルプレートＺ’および実験ウィンドウは、トランスフェクトされたcaC-cmv- firefly、pCpGL-CMV-Relina、pCDNA4-TDGプラスミド混合物およびＤＭＳＯ実験群と、トランスフェクトされたcaC-cmv- firefly、pCpGL-CMV-Relina、pCDNA4-mycプラスミド混合物およびＤＭＳＯ実験群の比率によって計算し、各化合物の相対的な酵素活性阻害率を計算した。
本実施例に記載の生物学的方法に従って、本発明の選択された化合物を分析し、その結果を表２に示す。これらのうち、表２の「＋」は、１０μＭ≦２５％の濃度でのＴＤＧ阻害活性を指す；「＋＋」は、１０μＭ＞２５％の濃度でのＴＤＧ阻害活性を指す。
【0256】
【表5】
【0257】
本発明で言及されるすべての文書は、あたかも各文書が参照として個別に引用されたかのように、本出願における参照として引用される。さらに、本発明の上記の教示内容を読んだ後、当業者は本発明に様々な変更または改変を加えることができ、これらの同等の形態もまた、本出願の添付の特許請求の範囲によって定義される範囲内にあることを理解されたい。
【国際調査報告】