(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-07-20
(54)【発明の名称】選択的ＢＡＣＥ１阻害活性を有する縮合複素環誘導体
(51)【国際特許分類】
C07D 498/04 20060101AFI20220712BHJP
A61K 31/5365 20060101ALI20220712BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20220712BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220712BHJP
【ＦＩ】
C07D498/04 111
C07D498/04 CSP
A61K31/5365
A61P25/28
A61P43/00 111
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2020572578
(86)(22)【出願日】2019-07-04
(85)【翻訳文提出日】2021-02-16
(86)【国際出願番号】 JP2019026598
(87)【国際公開番号】W WO2020009179
(87)【国際公開日】2020-01-09
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＲＩＴＯＮ
(71)【出願人】
【識別番号】000001926
【氏名又は名称】塩野義製薬株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】100113789
【弁理士】
【氏名又は名称】杉田 健一
(74)【代理人】
【識別番号】100209598
【弁理士】
【氏名又は名称】渡部 秀昭
(72)【発明者】
【氏名】吉田 周平
(72)【発明者】
【氏名】只野 元太
(72)【発明者】
【氏名】山田 徹
(72)【発明者】
【氏名】小熊 卓也
(72)【発明者】
【氏名】日下部 兼一
(72)【発明者】
【氏名】ロンボウツ フレデリック
(72)【発明者】
【氏名】ミーサル アントニオ
【テーマコード（参考）】
4C072
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C072AA01
4C072BB02
4C072CC01
4C072CC12
4C072EE06
4C072FF15
4C072FF16
4C072GG08
4C072HH07
4C072UU01
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086CB22
4C086GA16
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZA16
4C086ZC20
(57)【要約】
本発明は、アミロイドβ産生抑制作用、特にＢＡＣＥ１阻害作用を有し、アミロイドβタンパク質の産生、分泌および／または沈着により誘発される疾患の治療または予防剤として有用な化合物を提供する。
式（Ｉ）の化合物（式中、環Ａは、Ｒ３などで置換されていてもよいＴＨＰであり；
Ｒ２は、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
Ｒ３は各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ８アルキルなどであり；
ｔは０～３の整数であり；
Ａ１は、ＣＲ６またはＮであり；
Ａ２は、ＣＲ１０またはＮであり；
Ｒ５は水素原子またはハロゲンであり；
Ｒ６は水素原子などであり；
Ｒ８は水素などであり；
Ｒ１０は水素原子などであり；
環Ｂは、シアノで置換されたピラジンなどである）
、またはその製薬上許容される塩。
式（Ｉ）の化合物（式中、環Ａは、Ｒ３などで置換されていてもよいＴＨＰであり；
Ｒ２は、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
Ｒ３は各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ８アルキルなどであり；
ｔは０～３の整数であり；
Ａ１は、ＣＲ６またはＮであり；
Ａ２は、ＣＲ１０またはＮであり；
Ｒ５は水素原子またはハロゲンであり；
Ｒ６は水素原子などであり；
Ｒ８は水素などであり；
Ｒ１０は水素原子などであり；
環Ｂは、シアノで置換されたピラジンなどである）
、またはその製薬上許容される塩。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）の化合物：【化1】
（式中、
【化2】
であり、
式中、
Ｒ２は、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり;
Ｒ３は、各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ８アルキル；
（Ｃ１～Ｃ３アルキルおよびＣ１～Ｃ３ハロアルキル）から選択される１以上の基で置換されていてもよい芳香族複素環式基；またはハロゲンであり；
ｓは０～３の整数であり；
ｔは０～３の整数であり；
Ｒ５は水素原子またはハロゲンであり；
Ａ１は、ＣＲ６またはＮであり；
Ａ２は、ＣＲ１０またはＮであり；
Ｒ６は、水素原子、ハロゲン、または、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
Ｒ１０は、水素原子、ハロゲン、または、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
【化3】
であり、
式中、Ｒ７ａはハロゲン；シアノ；シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、非芳香族炭素環式基および芳香族複素環式基から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルオキシ；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキル；シアノおよびハロゲンから選択される１以上の基で置換されていてもよい非芳香族炭素環式基；シアノおよび芳香族複素環式基から選択される１以上の基で置換されていてもよい非芳香族複素環式基；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルケニルオキシ；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキニルオキシ；またはＣ１～Ｃ６アルキルから選択される１以上の基で置換されていてもよい芳香族複素環式基であり；
Ｒ７ｂは、水素原子、ハロゲン、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキル、またはアミノであり、
Ｒ８は水素原子またはハロゲンであり；
Ｒ９はハロゲンであり；
ただし、Ｒ８が水素原子の場合、ｓは１～３の整数であり；
ただし、以下の化合物：
【化4】
を除く）またはその製薬上許容される塩。
【請求項2】
ｓが１～３の整数であり；および、Ｒ３が各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ８アルキルである、請求項１に記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項3】
Ａ１がＣＲ６またはＮであり；Ａ２がＣＲ１０またはＮであり；ただし、Ａ１がＮの場合、Ａ２がＣＲ１０である、請求項１または２に記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項4】
Ａ１がＣＲ６であり；Ａ２がＣＲ１０であり；Ｒ６がフルオロまたはクロロであり；および、Ｒ１０が水素原子である、請求項１～３のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項5】
Ｒ５が水素原子またはフルオロである、請求項１～４のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項6】
Ｒ５が水素原子である、請求項１～４のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項7】
【化5】
であり、式中、各記号は請求項１と同義である、請求項１～６のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項8】
【化6】
であり、式中、各記号は請求項１と同義である、請求項７に記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項9】
【化7】
であり、式中、各記号は請求項１と同義である、請求項１～６のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項10】
Ｒ２がモノフルオロメチルまたはジフルオロメチルである、請求項１～９のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項11】
Ｒ３が各々独立してハロゲン、シアノおよびアルキルオキシからなる群から選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルである、請求項１～１０のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項12】
Ｒ３が各々独立してメチル、またはフルオロで置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである、請求項１１に記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項13】
【化8】
である、請求項１～１２のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項14】
化合物Ｉ－００１、Ｉ－００２、Ｉ－００３、Ｉ－００４、Ｉ－００５、Ｉ－００６、Ｉ－０１３、Ｉ－０１４、Ｉ－０１５、Ｉ－０３０、Ｉ－０８２、Ｉ－１１２、Ｉ－１１６およびＩ－１１７からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項15】
請求項１～１４のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩、を含む、医薬組成物。
【請求項16】
請求項１～１４のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩、を含む、ＢＡＣＥ１阻害剤。
【請求項17】
ＢＡＣＥ１活性を阻害する方法に使用するための、請求項１～１４のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項18】
アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の治療もしくは予防、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の進行予防、または、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者における進行予防のための、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項19】
アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の治療もしくは予防、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の進行予防、または、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者における進行予防に使用するための、請求項１～１４のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項20】
請求項１～１４のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を投与することを含む、ＢＡＣＥ１活性を阻害する方法。
【請求項21】
請求項１～１４のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を投与することを含む、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の治療もしくは予防、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の進行予防、または、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者における進行予防のための方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、アミロイドβ産生阻害活性を有し、アミロイドβタンパク質の産生、分泌および／または沈着により誘発される疾患の治療または予防剤として有用な化合物に関する。
【背景技術】
【0002】
アルツハイマー病患者の脳内には、アミロイドβタンパク質と呼ばれる約４０個のアミノ酸残基から構成されるペプチドが蓄積して神経細胞外に形成した不溶性の斑点（老人斑）が広範囲に観察される。これらの老人斑が神経細胞を死滅させることによりアルツハイマー病を引き起こすことが懸念されており、そのため、アミロイドβタンパク質の分解剤およびアミロイドワクチンなどのアルツハイマー病治療剤が研究されている。
【0003】
セクレターゼは、アミロイドβ前駆体タンパク質（ＡＰＰ）と呼ばれるタンパク質を細胞内で切断し、アミロイドβタンパク質を生成させる酵素である。アミロイドβタンパク質のＮ末端の生成を制御する酵素はβセクレターゼ（ｂｅｔａ－ｓｉｔｅ ＡＰＰ－ｃｌｅａｖｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ １、ＢＡＣＥ１）と呼ばれている。この酵素を阻害することによりアミロイドβタンパク質生成が抑制され、アルツハイマー病の治療剤または予防剤になり得ると考えられる。
【0004】
特許文献１～１０には本発明化合物と構造が類似した化合物が開示されている。これらの文献には、各化合物がアルツハイマー病、アルツハイマー関連症状、または糖尿病等の治療剤として有用である旨が開示されているが、実質的に開示された化合物は、いずれも本発明化合物とは異なる構造を有するものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0005】
【特許文献1】日本特許公開２０１７／０７１６０３号
【特許文献2】国際公開第２０１５／１５６４２１号
【特許文献3】日本特許公開２０１４／１０１３５４号
【特許文献4】国際公開第２０１４／０６５４３４号
【特許文献5】国際公開第２０１４／００１２２８号
【特許文献6】国際公開第２０１３／０４１４９９号
【特許文献7】米国特許公開第２０１３／００７２４７８号
【特許文献8】日本特許公開２０１２／２５０９３３号
【特許文献9】国際公開第２０１２／１０７３７１号
【特許文献10】国際公開第２０１１／０７１１３５号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
本発明は、アミロイドβタンパク質の産生低減効果、特に選択的ＢＡＣＥ１阻害活性を有し、アミロイドβタンパク質の産生、分泌および／または沈着により誘発される疾患の治療剤として有用な化合物を提供する。
【発明の効果】
【0007】
本発明化合物は、選択的ＢＡＣＥ１阻害活性を有し、アミロイドβタンパク質の産生、分泌または沈着により誘発される、アルツハイマー型認知症等の疾患の治療剤および／または予防剤として有用である。
【課題を解決するための手段】
【0008】
本発明は、例えば、以下の項目に記載の発明を提供する。
【0009】
（１）式（Ｉ）の化合物：
（式中、
であり、
式中、
Ｒ２は、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
Ｒ３は、各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ８アルキル；
（Ｃ１～Ｃ３アルキルおよびＣ１～Ｃ３ハロアルキル）から選択される１以上の基で置換されていてもよい芳香族複素環式基；またはハロゲンであり；
ｓは０～３の整数であり；
ｔは０～３の整数であり；
Ｒ５は水素原子またはハロゲンであり；
Ａ１は、ＣＲ６またはＮであり；
Ａ２は、ＣＲ１０またはＮであり；
Ｒ６は、水素原子、ハロゲン、または、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
Ｒ１０は、水素原子、ハロゲン、または、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
であり、
式中、Ｒ７ａはハロゲン；シアノ；シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、非芳香族炭素環式基および芳香族複素環式基から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルオキシ；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキル；シアノおよびハロゲンから選択される１以上の基で置換されていてもよい非芳香族炭素環式基；シアノおよび芳香族複素環式基から選択される１以上の基で置換されていてもよい非芳香族複素環式基；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルケニルオキシ；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキニルオキシ；またはＣ１～Ｃ６アルキルから選択される１以上の基で置換されていてもよい芳香族複素環式基であり；
Ｒ７ｂは、水素原子、ハロゲン、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキル、またはアミノであり；
Ｒ８は水素原子またはハロゲンであり；
Ｒ９はハロゲンであり；
ただし、Ｒ８が水素原子の場合、ｓは１～３の整数であり；
ただし、以下の化合物：
を除く）またはその製薬上許容される塩。
（１）’式（Ｉ’）の化合物：
（式中、
であり、
式中、
Ｒ２は、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
Ｒ３は各々独立して、（ハロゲン、シアノ、アルキルオキシおよびハロアルキルオキシ）からなる群から選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキル；または
Ｃ１～Ｃ３アルキルで置換されていてもよいヘテロアリールであり；
ｔは０～３の整数であり；
Ｒ５は水素原子またはハロゲンであり；
Ｒ６は、水素原子、ハロゲン、またはハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
であり、
式中、Ｒ７ａはシアノ；シアノまたはハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルオキシ；または芳香族複素環式基であり；
Ｒ７ｂは、水素原子、ハロゲン、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキル、またはアミノであり；
ただし、以下の化合物：
を除く）またはその製薬上許容される塩。
（２）ｓが１～３の整数であり；および、Ｒ３が各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ８アルキルである、項目（１）または（１）’記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（３）Ａ１がＣＲ６またはＮであり；Ａ２がＣＲ１０またはＮであり；
ただし、Ａ１がＮの場合、Ａ２がＣＲ１０である、項目（１）、（２）および（１）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（４）Ａ１がＣＲ６であり；Ａ２がＣＲ１０であり；Ｒ６がフルオロまたはクロロであり；および、Ｒ１０が水素原子である、項目（１）～（３）および（１）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（４）’Ｒ６がフルオロまたはクロロである、項目（１）記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（５）Ｒ５が水素原子またはフルオロである、項目（１）～（４）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（６）Ｒ５が水素原子である、項目（１）～（５）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（７）
であり、
式中、各記号は項目（１）と同義である、項目（１）～（６）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物、またはその製薬上許容される塩。
（７）’
であり、
式中、各記号は項目（１）と同義である、項目（１）～（７）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（７－２）
であり、
式中、各記号は項目（１）と同義である、項目（１）～（７）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（８）
であり、
式中、各記号は項目（１）と同義である、項目（１）～（７）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（９）
であり、
式中、各記号は項目（１）と同義である、項目（１）～（７）および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１０）Ｒ２がモノフルオロメチルまたはジフルオロメチルである、項目（１）～（９）、（１）’、（４）’、（７）’および（７－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１１）Ｒ３が各々独立して、（ハロゲン、シアノおよびアルキルオキシ）からなる群から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルである、項目（１）～（１０）、（１）’、（４）’、（７）’および（７－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１２）Ｒ３が各々独立してメチル、またはフルオロで置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである、項目（１）～（１１）、（１）’、（４）’、（７）’および（７－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１３）
である、項目（１）～（１２）、（１）’、（４）’、（７）’および（７－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１３－２）
であり、
Ｒ２がモノフルオロメチルであり、
Ｒ３が、メチル、またはフルオロで置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５が水素原子であり、
Ｒ６がフルオロである、項目（１）～（１２）、（１）’、（４）’、（７）’および（７－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１４）化合物Ｉ－００１、Ｉ－００２、Ｉ－００３、Ｉ－００４、Ｉ－００５、Ｉ－００６、Ｉ－０１３、Ｉ－０１４、Ｉ－０１５、Ｉ－０３０、Ｉ－０８２、Ｉ－１１２、Ｉ－１１６およびＩ－１１７からなる群から選択される、項目（１）記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１４－２）化合物：
からなる群から選択される、項目（１）記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１５）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）および（１３－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩、を含む医薬組成物。
（１５－２）項目（１５）に記載の化合物またはその製薬上許容される塩、を含む、ＢＡＣＥ１阻害活性を有する医薬組成物。
（１６）アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病（ｐｒｏｄｒｏｍａｌ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）の治療もしくは予防、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の進行予防、または、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者（ａ ｐａｔｉｅｎｔ ａｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ ａｔ ｒｉｓｋ ｆｏｒ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ ｄｅｍｅｎｔｉａ）における進行予防のための、項目（１５）または（１５－２）記載の医薬組成物。
（１７）ＢＡＣＥ１活性を阻害するための方法において使用する、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）、および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１８）アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の治療もしくは予防、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の進行予防、または、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者における進行予防のために使用する、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１９）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を投与することを含む、ＢＡＣＥ１活性を阻害するための方法。
（２０）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を投与することを含む、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の治療もしくは予防、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の進行予防、または、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者における進行予防のための方法。
（１８）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を含有するＢＡＣＥ１阻害剤。
（２１）ＢＡＣＥ１活性を阻害するための医薬を製造するための、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（２２）アミロイドβタンパク質の産生、分泌または沈着により誘発される疾患の治療または予防のための項目（１５）または（１５－２）記載の医薬組成物。
（２３）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を投与することを含む、アミロイドβタンパク質の産生、分泌または沈着により誘発される疾患の治療または予防のための方法。
（２４）アミロイドβタンパク質の産生、分泌または沈着により誘発される疾患の治療または予防のために使用する、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（２５）アミロイドβタンパク質の産生、分泌または沈着により誘発される疾患の治療または予防のための医薬を製造するための、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（２６）アルツハイマー型認知症の治療または予防のための項目（１５）または（１５－２）記載の医薬組成物。
（２７）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を投与することを含む、アルツハイマー型認知症の治療または予防のための方法。
（２８）アルツハイマー型認知症の治療または予防のために使用する、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（２９）アルツハイマー型認知症の治療または予防のための医薬を製造するための、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
【化1】
（式中、
【化2】
であり、
式中、
Ｒ２は、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
Ｒ３は、各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ８アルキル；
（Ｃ１～Ｃ３アルキルおよびＣ１～Ｃ３ハロアルキル）から選択される１以上の基で置換されていてもよい芳香族複素環式基；またはハロゲンであり；
ｓは０～３の整数であり；
ｔは０～３の整数であり；
Ｒ５は水素原子またはハロゲンであり；
Ａ１は、ＣＲ６またはＮであり；
Ａ２は、ＣＲ１０またはＮであり；
Ｒ６は、水素原子、ハロゲン、または、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
Ｒ１０は、水素原子、ハロゲン、または、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
【化3】
であり、
式中、Ｒ７ａはハロゲン；シアノ；シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、非芳香族炭素環式基および芳香族複素環式基から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルオキシ；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキル；シアノおよびハロゲンから選択される１以上の基で置換されていてもよい非芳香族炭素環式基；シアノおよび芳香族複素環式基から選択される１以上の基で置換されていてもよい非芳香族複素環式基；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルケニルオキシ；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキニルオキシ；またはＣ１～Ｃ６アルキルから選択される１以上の基で置換されていてもよい芳香族複素環式基であり；
Ｒ７ｂは、水素原子、ハロゲン、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキル、またはアミノであり；
Ｒ８は水素原子またはハロゲンであり；
Ｒ９はハロゲンであり；
ただし、Ｒ８が水素原子の場合、ｓは１～３の整数であり；
ただし、以下の化合物：
【化4】
を除く）またはその製薬上許容される塩。
（１）’式（Ｉ’）の化合物：
【化5】
（式中、
【化6】
であり、
式中、
Ｒ２は、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
Ｒ３は各々独立して、（ハロゲン、シアノ、アルキルオキシおよびハロアルキルオキシ）からなる群から選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキル；または
Ｃ１～Ｃ３アルキルで置換されていてもよいヘテロアリールであり；
ｔは０～３の整数であり；
Ｒ５は水素原子またはハロゲンであり；
Ｒ６は、水素原子、ハロゲン、またはハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルであり；
【化7】
であり、
式中、Ｒ７ａはシアノ；シアノまたはハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルオキシ；または芳香族複素環式基であり；
Ｒ７ｂは、水素原子、ハロゲン、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキル、またはアミノであり；
ただし、以下の化合物：
【化8】
を除く）またはその製薬上許容される塩。
（２）ｓが１～３の整数であり；および、Ｒ３が各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ８アルキルである、項目（１）または（１）’記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（３）Ａ１がＣＲ６またはＮであり；Ａ２がＣＲ１０またはＮであり；
ただし、Ａ１がＮの場合、Ａ２がＣＲ１０である、項目（１）、（２）および（１）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（４）Ａ１がＣＲ６であり；Ａ２がＣＲ１０であり；Ｒ６がフルオロまたはクロロであり；および、Ｒ１０が水素原子である、項目（１）～（３）および（１）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（４）’Ｒ６がフルオロまたはクロロである、項目（１）記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（５）Ｒ５が水素原子またはフルオロである、項目（１）～（４）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（６）Ｒ５が水素原子である、項目（１）～（５）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（７）
【化9】
であり、
式中、各記号は項目（１）と同義である、項目（１）～（６）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物、またはその製薬上許容される塩。
（７）’
【化10】
であり、
式中、各記号は項目（１）と同義である、項目（１）～（７）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（７－２）
【化11】
であり、
式中、各記号は項目（１）と同義である、項目（１）～（７）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（８）
【化12】
であり、
式中、各記号は項目（１）と同義である、項目（１）～（７）、（１）’および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（９）
【化13】
であり、
式中、各記号は項目（１）と同義である、項目（１）～（７）および（４）’のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１０）Ｒ２がモノフルオロメチルまたはジフルオロメチルである、項目（１）～（９）、（１）’、（４）’、（７）’および（７－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１１）Ｒ３が各々独立して、（ハロゲン、シアノおよびアルキルオキシ）からなる群から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルである、項目（１）～（１０）、（１）’、（４）’、（７）’および（７－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１２）Ｒ３が各々独立してメチル、またはフルオロで置換されたＣ１～Ｃ６アルキルである、項目（１）～（１１）、（１）’、（４）’、（７）’および（７－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１３）
【化14】
である、項目（１）～（１２）、（１）’、（４）’、（７）’および（７－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１３－２）
【化15】
であり、
Ｒ２がモノフルオロメチルであり、
Ｒ３が、メチル、またはフルオロで置換されたＣ１～Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５が水素原子であり、
Ｒ６がフルオロである、項目（１）～（１２）、（１）’、（４）’、（７）’および（７－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１４）化合物Ｉ－００１、Ｉ－００２、Ｉ－００３、Ｉ－００４、Ｉ－００５、Ｉ－００６、Ｉ－０１３、Ｉ－０１４、Ｉ－０１５、Ｉ－０３０、Ｉ－０８２、Ｉ－１１２、Ｉ－１１６およびＩ－１１７からなる群から選択される、項目（１）記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１４－２）化合物：
【化16】
からなる群から選択される、項目（１）記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１５）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）および（１３－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩、を含む医薬組成物。
（１５－２）項目（１５）に記載の化合物またはその製薬上許容される塩、を含む、ＢＡＣＥ１阻害活性を有する医薬組成物。
（１６）アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病（ｐｒｏｄｒｏｍａｌ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）の治療もしくは予防、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の進行予防、または、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者（ａ ｐａｔｉｅｎｔ ａｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ ａｔ ｒｉｓｋ ｆｏｒ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ ｄｅｍｅｎｔｉａ）における進行予防のための、項目（１５）または（１５－２）記載の医薬組成物。
（１７）ＢＡＣＥ１活性を阻害するための方法において使用する、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）、および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１８）アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の治療もしくは予防、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の進行予防、または、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者における進行予防のために使用する、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（１９）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を投与することを含む、ＢＡＣＥ１活性を阻害するための方法。
（２０）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を投与することを含む、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の治療もしくは予防、アルツハイマー型認知症、軽度認知障害もしくは前駆期アルツハイマー病の進行予防、または、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者における進行予防のための方法。
（１８）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を含有するＢＡＣＥ１阻害剤。
（２１）ＢＡＣＥ１活性を阻害するための医薬を製造するための、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（２２）アミロイドβタンパク質の産生、分泌または沈着により誘発される疾患の治療または予防のための項目（１５）または（１５－２）記載の医薬組成物。
（２３）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を投与することを含む、アミロイドβタンパク質の産生、分泌または沈着により誘発される疾患の治療または予防のための方法。
（２４）アミロイドβタンパク質の産生、分泌または沈着により誘発される疾患の治療または予防のために使用する、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（２５）アミロイドβタンパク質の産生、分泌または沈着により誘発される疾患の治療または予防のための医薬を製造するための、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（２６）アルツハイマー型認知症の治療または予防のための項目（１５）または（１５－２）記載の医薬組成物。
（２７）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を投与することを含む、アルツハイマー型認知症の治療または予防のための方法。
（２８）アルツハイマー型認知症の治療または予防のために使用する、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩。
（２９）アルツハイマー型認知症の治療または予防のための医薬を製造するための、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
【0010】
（１０１）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を含有する、経口投与のための医薬組成物。
（１０２）錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、フィルム剤、懸濁剤、乳剤、エリキシル剤、シロップ剤、リモナーデ剤、酒精剤、芳香水剤、エキス剤、煎剤またはチンキ剤である、（１０１）記載の医薬組成物。
（１０３）糖衣錠、フィルムコーティング錠、腸溶性コーティング錠、徐放錠、トローチ錠、舌下錠、バッカル錠、チュアブル錠、口腔内崩壊錠、ドライシロップ剤、ソフトカプセル剤、マイクロカプセル剤または徐放性カプセル剤である、（１０１）または（１０２）記載の医薬組成物。
（１０４）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を含有する、非経口投与のための医薬組成物。
（１０５）経皮、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、経粘膜、吸入、経鼻、点眼、内耳または膣内投与のための、（１０４）記載の医薬組成物。
（１０６）注射剤、点滴剤、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、エアゾール剤、吸入剤、ローション剤、注入剤、リニメント剤、洗口剤、浣腸剤、軟膏剤、プラスター剤、ゼリー剤、クリーム剤、貼付剤、パップ剤、外用散剤または坐剤である、（１０４）または（１０５）記載の医薬組成物。
（１０７）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を含有する、小児用または高齢者用の医薬組成物。
（１０８）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩と、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、ＮＭＤＡ拮抗剤、またはその他のアルツハイマー型認知症のための医薬との組み合わせからなる医薬組成物。
（１０９）アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、ＮＭＤＡ拮抗剤、またはその他のアルツハイマー型認知症のための医薬との併用療法のための、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
（１０２）錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、フィルム剤、懸濁剤、乳剤、エリキシル剤、シロップ剤、リモナーデ剤、酒精剤、芳香水剤、エキス剤、煎剤またはチンキ剤である、（１０１）記載の医薬組成物。
（１０３）糖衣錠、フィルムコーティング錠、腸溶性コーティング錠、徐放錠、トローチ錠、舌下錠、バッカル錠、チュアブル錠、口腔内崩壊錠、ドライシロップ剤、ソフトカプセル剤、マイクロカプセル剤または徐放性カプセル剤である、（１０１）または（１０２）記載の医薬組成物。
（１０４）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を含有する、非経口投与のための医薬組成物。
（１０５）経皮、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、経粘膜、吸入、経鼻、点眼、内耳または膣内投与のための、（１０４）記載の医薬組成物。
（１０６）注射剤、点滴剤、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、エアゾール剤、吸入剤、ローション剤、注入剤、リニメント剤、洗口剤、浣腸剤、軟膏剤、プラスター剤、ゼリー剤、クリーム剤、貼付剤、パップ剤、外用散剤または坐剤である、（１０４）または（１０５）記載の医薬組成物。
（１０７）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を含有する、小児用または高齢者用の医薬組成物。
（１０８）項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩と、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、ＮＭＤＡ拮抗剤、またはその他のアルツハイマー型認知症のための医薬との組み合わせからなる医薬組成物。
（１０９）アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、ＮＭＤＡ拮抗剤、またはその他のアルツハイマー型認知症のための医薬との併用療法のための、項目（１）～（１４）、（１）’、（４）’、（７）’、（７－２）、（１３－２）および（１４－２）のいずれかに記載の化合物またはその製薬上許容される塩を含有する医薬組成物。
【発明を実施するための形態】
【0011】
以下に、実施形態を参照して本発明を説明する。本明細書を通して、特に指定のない限り、単数形の表現はその複数形の概念を包含するものと理解すべきである。これに応じて、単数形の冠詞（例えば、英語における「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」等）は、特に指定のない限り、その複数形の概念を包含するものと理解すべきである。さらに、本明細書において用いられる用語は、特に指定のない限り、当該分野で普通に用いられている意味で用いられることを理解すべきである。したがって、特に断りのない限り、本明細書において用いられる全ての専門用語および科学用語は、本発明が関係する分野の当業者が一般的に理解するものと同一の意味を有する。矛盾がある場合、本明細書（定義を含む）が優先される。
以下に本明細書において用いられる各用語の意味を説明する。各用語は特に断りのない限り、単独で用いられる場合も、または他の用語と組み合わせて用いられる場合も、同一の意味で用いられる。
本明細書中、「からなる」という用語は、構成要件のみを有することを意味する。
本明細書中、「含む」という用語は、構成要件に限定されず、記載されていない要素を排除しないことを意味する。
本明細書中、「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素、およびヨウ素を包含する。特にフッ素および塩素が好ましい。
本明細書中、「アルキル」とは、炭素数１～１５、例えば炭素数１～１０、例えば炭素数１～６、例えば炭素数１～４の直鎖または分枝状のアルキルを包含する。例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ｎ－へプチル、イソヘプチル、ｎ－オクチル、イソオクチル、ｎ－ノニル、およびｎ－デシル等を包含する。例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、およびｎ－ペンチル等が挙げられる。
一実施形態において、「アルキル」は、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、またはｔｅｒｔ－ブチルである。
以下に本明細書において用いられる各用語の意味を説明する。各用語は特に断りのない限り、単独で用いられる場合も、または他の用語と組み合わせて用いられる場合も、同一の意味で用いられる。
本明細書中、「からなる」という用語は、構成要件のみを有することを意味する。
本明細書中、「含む」という用語は、構成要件に限定されず、記載されていない要素を排除しないことを意味する。
本明細書中、「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素、およびヨウ素を包含する。特にフッ素および塩素が好ましい。
本明細書中、「アルキル」とは、炭素数１～１５、例えば炭素数１～１０、例えば炭素数１～６、例えば炭素数１～４の直鎖または分枝状のアルキルを包含する。例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ｎ－へプチル、イソヘプチル、ｎ－オクチル、イソオクチル、ｎ－ノニル、およびｎ－デシル等を包含する。例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、およびｎ－ペンチル等が挙げられる。
一実施形態において、「アルキル」は、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、またはｔｅｒｔ－ブチルである。
【0012】
「ハロアルキル」という用語は、上記「アルキル」の１以上の炭素原子に結合している１以上の水素原子が１以上の上記「ハロゲン」と置換している基を包含する。例えば、
モノフルオロメチル、モノフルオロエチル、モノフルオロプロピル、
ジフルオロメチル、ジフルオロエチル、ジフルオロプロピル、
トリフルオロメチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、ペンタフルオロプロピル、
モノクロロメチル、モノクロロエチル、モノクロロプロピル、
ジクロロメチル、ジクロロエチル、ジクロロプロピル、
トリクロロメチル、トリクロロエチル、トリクロロプロピル、ペンタクロロプロピル、
１－フルオロエチル、２－フルオロエチル、１，１－ジフルオロエチル、２，２－ジフルオロエチル、２，２，２－トリフルオロエチル、
１－クロロエチル、２－クロロエチル、１，１－ジクロロエチル、２，２－ジクロロエチル、２，２，２－トリクロロエチル、
１，２－ジブロモエチル、１，１，１－トリフルオロプロパン－２－イル、および２，２，３，３，３－ペンタフルオロプロピル等が挙げられる。
例えば、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、１－フルオロエチル、１，１－ジフルオロエチル、および２，２－ジフルオロエチル等が挙げられる。例えば、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、１－フルオロエチル、１，１－ジフルオロエチル、および２，２－ジフルオロエチル等が挙げられる。
モノフルオロメチル、モノフルオロエチル、モノフルオロプロピル、
ジフルオロメチル、ジフルオロエチル、ジフルオロプロピル、
トリフルオロメチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、ペンタフルオロプロピル、
モノクロロメチル、モノクロロエチル、モノクロロプロピル、
ジクロロメチル、ジクロロエチル、ジクロロプロピル、
トリクロロメチル、トリクロロエチル、トリクロロプロピル、ペンタクロロプロピル、
１－フルオロエチル、２－フルオロエチル、１，１－ジフルオロエチル、２，２－ジフルオロエチル、２，２，２－トリフルオロエチル、
１－クロロエチル、２－クロロエチル、１，１－ジクロロエチル、２，２－ジクロロエチル、２，２，２－トリクロロエチル、
１，２－ジブロモエチル、１，１，１－トリフルオロプロパン－２－イル、および２，２，３，３，３－ペンタフルオロプロピル等が挙げられる。
例えば、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、１－フルオロエチル、１，１－ジフルオロエチル、および２，２－ジフルオロエチル等が挙げられる。例えば、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、１－フルオロエチル、１，１－ジフルオロエチル、および２，２－ジフルオロエチル等が挙げられる。
【0013】
「アルケニル」という用語は、可能な任意の位置に１以上の二重結合を有する、炭素数２～１５、例えば炭素数２～１０、例えば炭素数２～６、例えば炭素数２～４の直鎖または分枝状のアルケニルを包含する。例えば、ビニル、アリル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル、プレニル、ブタジエニル、ペンテニル、イソペンテニル、ペンタジエニル、ヘキセニル、イソヘキセニル、ヘキサジエニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、トリデセニル、テトラデセニル、およびペンタデセニル等を包含する。例えば、ビニル、アリル、プロペニル、イソプロペニル、およびブテニルが挙げられる。
「アルキニル」という用語は、任意選択の位置に１以上の三重結合を有する、炭素数２～１５、例えば炭素数２～１０、例えば炭素数２～８、例えば炭素数２～６、例えば炭素数２～４の直鎖または分枝状のアルキニルを包含する。具体的には、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、およびデシニルが挙げられる。これらはさらに、可能な任意の位置に二重結合を有していてもよい。例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、およびペンチニルが挙げられる。
「アルキニル」という用語は、任意選択の位置に１以上の三重結合を有する、炭素数２～１５、例えば炭素数２～１０、例えば炭素数２～８、例えば炭素数２～６、例えば炭素数２～４の直鎖または分枝状のアルキニルを包含する。具体的には、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、およびデシニルが挙げられる。これらはさらに、可能な任意の位置に二重結合を有していてもよい。例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、およびペンチニルが挙げられる。
【0014】
「アルキレン」という用語は、炭素数１～１５、例えば炭素数１～１０、例えば炭素数１～６、例えば炭素数１～３の直鎖または分枝状の２価の炭素鎖を包含する。例えば、メチレン、ジメチレン、およびトリメチレン等が挙げられる。
式（Ｉ）で示される化合物のアルキレンの１以上の水素は、水素の同位体２Ｈ（重水素）と置換され得る。
式（Ｉ）で示される化合物のアルキレンの１以上の水素は、水素の同位体２Ｈ（重水素）と置換され得る。
【0015】
「アルキルオキシ」という用語は、酸素原子が上記「アルキル」で置換されている基を包含する。例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、ｎ－ブチルオキシ、ｔｅｒｔ－ブチルオキシ、イソブチルオキシ、ｓｅｃ－ブチルオキシ、ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ、およびへキシルオキシ等が挙げられる。
一実施形態において、「アルキルオキシ」は、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロピルオキシ、イソプロピルオキシまたはｔｅｒｔ－ブチルオキシである。
一実施形態において、「アルキルオキシ」は、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロピルオキシ、イソプロピルオキシまたはｔｅｒｔ－ブチルオキシである。
【0016】
「アルケニルオキシ」という用語は、酸素原子が上記「アルケニル」で置換されている基を包含する。例えば、ビニルオキシ、アリルオキシ、１－プロペニルオキシ、２－ブテニルオキシ、２－ペンテニルオキシ、２－ヘキセニルオキシ、２－ヘプテニルオキシ、および２－オクテニルオキシ等が挙げられる。
【0017】
「アルキニルオキシ」という用語は、酸素原子が上記「アルキニル」で置換されている基を包含する。例えば、エチニルオキシ、１－プロピニルオキシ、２－プロピニルオキシ、２－ブチニルオキシ、２－ペンチニルオキシ、２－ヘキシニルオキシ、２－ヘプチニルオキシ、および２－オクチニルオキシ等が挙げられる。
一実施形態において、「アルキニルオキシ」は、エチニルオキシ、１－プロピニルオキシおよび２－プロピニルオキシである。
一実施形態において、「アルキニルオキシ」は、エチニルオキシ、１－プロピニルオキシおよび２－プロピニルオキシである。
【0018】
「炭素環」という用語は、非芳香族炭素環および芳香族炭素環を包含する。
「非芳香族炭素環式基」という用語は、単環のまたは２環以上からなる、飽和炭素環または非芳香族不飽和炭素環を包含する。２環以上の「非芳香族炭素環」は、単環非芳香族炭素環または２環以上の非芳香族炭素環が、上記「芳香族炭素環」における環に縮合した縮合環式基を包含する。
さらに、「非芳香族炭素環」は、以下のように架橋している環式基、またはスピロ環を形成する環式基も包含する。
「単環非芳香族炭素環」という用語は、炭素数３～１６、例えば炭素数３～１２、例えば炭素数３～８、例えば炭素数３～５の基を包含する。例えば、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタン、シクロノナン、シクロデカン、シクロプロペナン、シクロブテナン、シクロペンテナン、シクロヘキセナン、シクロヘプテナン、およびシクロヘキサジエナン等が挙げられる。
２環以上からなる非芳香族炭素環は炭素数６～１４の基を包含し、例えば、インダン、インデナン、アセナフタレン、テトラヒドロナフタレン、およびフルオレナン等が挙げられる。
「芳香族炭素環」という用語は、単環のまたは２環以上からなる、芳香族炭化水素環基を包含する。例えば、炭素数６～１４の芳香族炭化水素基であり、具体的には、ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、およびフェナントレン等が挙げられる。
一実施形態において、「芳香族炭素環」はベンゼンである。
一実施形態において、「炭素環」は、シクロプロパン、シクロブタン、およびシクロペンタンである。
「非芳香族炭素環式基」という用語は、単環のまたは２環以上からなる、飽和炭素環または非芳香族不飽和炭素環を包含する。２環以上の「非芳香族炭素環」は、単環非芳香族炭素環または２環以上の非芳香族炭素環が、上記「芳香族炭素環」における環に縮合した縮合環式基を包含する。
さらに、「非芳香族炭素環」は、以下のように架橋している環式基、またはスピロ環を形成する環式基も包含する。
【化17】
「単環非芳香族炭素環」という用語は、炭素数３～１６、例えば炭素数３～１２、例えば炭素数３～８、例えば炭素数３～５の基を包含する。例えば、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタン、シクロノナン、シクロデカン、シクロプロペナン、シクロブテナン、シクロペンテナン、シクロヘキセナン、シクロヘプテナン、およびシクロヘキサジエナン等が挙げられる。
２環以上からなる非芳香族炭素環は炭素数６～１４の基を包含し、例えば、インダン、インデナン、アセナフタレン、テトラヒドロナフタレン、およびフルオレナン等が挙げられる。
「芳香族炭素環」という用語は、単環のまたは２環以上からなる、芳香族炭化水素環基を包含する。例えば、炭素数６～１４の芳香族炭化水素基であり、具体的には、ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、およびフェナントレン等が挙げられる。
一実施形態において、「芳香族炭素環」はベンゼンである。
一実施形態において、「炭素環」は、シクロプロパン、シクロブタン、およびシクロペンタンである。
【0019】
「複素環」という用語は、非芳香族複素環および芳香族複素環を包含する。
「非芳香族複素環」という用語は、Ｏ、ＳおよびＮの原子から独立して選択される１以上のヘテロ原子を有する、単環のまたは２環以上からなる、非芳香族の基を包含する。
２環以上の「非芳香族複素環」は、単環の非芳香族複素環または２環以上の非芳香族複素環が、上記「芳香族炭素環」、「非芳香族炭素環」および／または「芳香族複素環」の環に縮合した縮合環式基を包含する。
さらに、「非芳香族複素環」は、以下のように架橋している環式基、またはスピロ環を形成する環式基も包含する。
「単環の非芳香族複素環」という用語は、３～８員環を包含し、例えば、４員、５員または６員環である。例えば、ジオキサン、チイラン、オキシラン、オキセタン、オキサチオラン、アゼチジン、チアン、チアゾリジン、ピロリジン、ピロリン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピラゾリジン、ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリニル、モルホリン、チオモルホリン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、ジヒドロチアゾリン、テトラヒドロチアゾリン、テトラヒドロイソチアゾリン、ジヒドロオキサジン、ヘキサヒドロアゼピン、テトラヒドロジアゼピン、テトラヒドロピリダジン、ヘキサヒドロピリミジン、ジオキソラン、ジオキサジン、アジリジン、ジオキソリン、オキセパン、チオラン、チイン、およびチアジン等が挙げられる。
２環以上の非芳香族複素環としては、９～１４員環式基を包含し、例えば、インドリン、イソインドリン、クロマン、およびイソクロマン等が挙げられる。
「非芳香族複素環」という用語は、Ｏ、ＳおよびＮの原子から独立して選択される１以上のヘテロ原子を有する、単環のまたは２環以上からなる、非芳香族の基を包含する。
２環以上の「非芳香族複素環」は、単環の非芳香族複素環または２環以上の非芳香族複素環が、上記「芳香族炭素環」、「非芳香族炭素環」および／または「芳香族複素環」の環に縮合した縮合環式基を包含する。
さらに、「非芳香族複素環」は、以下のように架橋している環式基、またはスピロ環を形成する環式基も包含する。
【化18】
「単環の非芳香族複素環」という用語は、３～８員環を包含し、例えば、４員、５員または６員環である。例えば、ジオキサン、チイラン、オキシラン、オキセタン、オキサチオラン、アゼチジン、チアン、チアゾリジン、ピロリジン、ピロリン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピラゾリジン、ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリニル、モルホリン、チオモルホリン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、ジヒドロチアゾリン、テトラヒドロチアゾリン、テトラヒドロイソチアゾリン、ジヒドロオキサジン、ヘキサヒドロアゼピン、テトラヒドロジアゼピン、テトラヒドロピリダジン、ヘキサヒドロピリミジン、ジオキソラン、ジオキサジン、アジリジン、ジオキソリン、オキセパン、チオラン、チイン、およびチアジン等が挙げられる。
２環以上の非芳香族複素環としては、９～１４員環式基を包含し、例えば、インドリン、イソインドリン、クロマン、およびイソクロマン等が挙げられる。
【0020】
「芳香族複素環」という用語は、Ｏ、ＳおよびＮの原子から独立して選択される１以上のヘテロ原子を有する、単環のまたは２環以上からなる、芳香環を包含する。
２環以上の「芳香族複素環」は、単環の芳香族複素環式基または２環以上からなる非芳香族複素環式基が、上記「芳香族炭素環」に縮合した縮合環式基を包含する。
「単環の芳香族複素環」としては、５～８員環式基を包含し、例えば５員または６員環である。例えば、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、トリアゾール、トリアジン、テトラゾール、フラン、チオフェン、イソオキサゾール、オキサゾール、オキサジアゾール、イソチアゾール、チアゾール、およびチアジアゾール等が挙げられる。
２環の芳香族複素環としては、９～１０員環を包含し、例えばインドリン、イソインドリン、インダゾリン、インドリジン、キノリン、イソキノリン、シンノリン、フタラジン、キナゾリン、ナフチリジン、キノキサリン、プリン、プテリジン、ベンズイミダゾール、ベンズイソオキサゾール、ベンズオキサゾール、ベンズオキサジアゾール、ベンズイソチアゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾチアジアゾール、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾトリアゾール、イミダゾピリジン、トリアゾロピリジン、イミダゾチアゾール、ピラジノピリダジン、オキサゾロピリジン、およびチアゾロピリジン等が挙げられる。
３環以上の芳香族複素環としては、１３～１４員環式基を包含し、例えばカルバゾール、アクリジン、キサンテン、フェノチアジン、フェノキサチイン、フェノキサジン、およびジベンゾフラン等が挙げられる。
一実施形態において、「複素環」は１，４－オキサチアンである。
２環以上の「芳香族複素環」は、単環の芳香族複素環式基または２環以上からなる非芳香族複素環式基が、上記「芳香族炭素環」に縮合した縮合環式基を包含する。
「単環の芳香族複素環」としては、５～８員環式基を包含し、例えば５員または６員環である。例えば、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、トリアゾール、トリアジン、テトラゾール、フラン、チオフェン、イソオキサゾール、オキサゾール、オキサジアゾール、イソチアゾール、チアゾール、およびチアジアゾール等が挙げられる。
２環の芳香族複素環としては、９～１０員環を包含し、例えばインドリン、イソインドリン、インダゾリン、インドリジン、キノリン、イソキノリン、シンノリン、フタラジン、キナゾリン、ナフチリジン、キノキサリン、プリン、プテリジン、ベンズイミダゾール、ベンズイソオキサゾール、ベンズオキサゾール、ベンズオキサジアゾール、ベンズイソチアゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾチアジアゾール、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾトリアゾール、イミダゾピリジン、トリアゾロピリジン、イミダゾチアゾール、ピラジノピリダジン、オキサゾロピリジン、およびチアゾロピリジン等が挙げられる。
３環以上の芳香族複素環としては、１３～１４員環式基を包含し、例えばカルバゾール、アクリジン、キサンテン、フェノチアジン、フェノキサチイン、フェノキサジン、およびジベンゾフラン等が挙げられる。
一実施形態において、「複素環」は１，４－オキサチアンである。
【0021】
「非芳香族炭素環式基」および「非芳香族複素環式基」は「オキソ」で置換されていてもよい。以下のように同一の炭素原子に結合する２個の水素原子がオキソと置換されている基を包含する。
【化19】
【0022】
以下の式中、橋頭炭素に結合しているＲ８、Ｒ９および「Ｈ」は、Ｒ３で置換されない。
【化20】
【0023】
式（Ｉ）および（Ｉ’）の各記号の具体的な実施形態を以下に例示する。
（式中、各記号は前記と同義である。）
【化21】
（式中、各記号は前記と同義である。）
【0024】
式（Ｉ）、（Ｉ’）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＣ）、および（ＩＤ）の各記号の具体的な実施形態を以下に例示する。これらの実施形態の全ての可能な組み合わせが、式（Ｉ）、（Ｉ’）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＣ）および（ＩＤ）の化合物の例である。
【0025】
【化22】
である。
【化23】
である。
【化24】
である。
【化25】
である。
【化26】
である。
【0026】
Ｒ２がハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルである。
Ｒ２がハロゲンで置換されていてもよいメチルである。
Ｒ２がハロゲンで置換されたＣ１～Ｃ３アルキルである。
Ｒ２がモノフルオロメチルまたはジフルオロメチルである。
Ｒ２がモノフルオロメチルである。
Ｒ２がメチルである。
Ｒ２がハロゲンで置換されていてもよいメチルである。
Ｒ２がハロゲンで置換されたＣ１～Ｃ３アルキルである。
Ｒ２がモノフルオロメチルまたはジフルオロメチルである。
Ｒ２がモノフルオロメチルである。
Ｒ２がメチルである。
【0027】
Ｒ３が各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ８アルキル；
Ｃ１～Ｃ３アルキルおよびＣ１～Ｃ３ハロアルキルから選択される１以上の基で置換されていてもよい芳香族複素環式基；またはハロゲンである。
Ｒ３が各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルである。
Ｒ３が各々独立して、（ハロゲン、シアノおよびアルキルオキシ）からなる群から選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルである。
Ｒ３が各々独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキルまたはＣ１～Ｃ３ハロアルキルである。
Ｒ３が各々独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキルである。
Ｒ３が各々独立して、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルである。
Ｒ３が各々独立して、メチルまたはエチルである。
Ｒ３が各々独立して、メチルである。
Ｃ１～Ｃ３アルキルおよびＣ１～Ｃ３ハロアルキルから選択される１以上の基で置換されていてもよい芳香族複素環式基；またはハロゲンである。
Ｒ３が各々独立して、（ハロゲン、シアノ、Ｃ１～Ｃ３アルキルオキシ、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルオキシ、ハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族炭素環式基およびハロゲンで置換されていてもよい３～６員非芳香族複素環式基）から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルである。
Ｒ３が各々独立して、（ハロゲン、シアノおよびアルキルオキシ）からなる群から選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルである。
Ｒ３が各々独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキルまたはＣ１～Ｃ３ハロアルキルである。
Ｒ３が各々独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキルである。
Ｒ３が各々独立して、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキルである。
Ｒ３が各々独立して、メチルまたはエチルである。
Ｒ３が各々独立して、メチルである。
【0028】
ｓが０～３の整数である。
ｓが１～３の整数である。
ｓが１または２である。
ｓが１である。
ｓが１～３の整数である。
ｓが１または２である。
ｓが１である。
【0029】
ｔが０～３の整数である。
ｔが１～３の整数である。
ｔが１または２である。
ｔが１である。
ｔが０または１である。
ｔが１～３の整数である。
ｔが１または２である。
ｔが１である。
ｔが０または１である。
【0030】
Ｒ５が水素原子またはハロゲンである。
Ｒ５が水素原子である。
Ｒ５がフルオロである。
Ｒ５が水素原子である。
Ｒ５がフルオロである。
【0031】
Ａ１がＣＲ６またはＮであり；およびＡ２はＣＲ１０またはＮである。
Ａ１がＣＲ６またはＮであり；およびＡ２はＣＲ１０またはＮであり、ただし、Ａ１がＮである場合、Ａ２はＣＲ１０である。
Ａ１がＣＲ６であり；およびＡ２はＣＲ１０である。
Ａ１はＣＨであり；およびＡ２はＣＦである。
Ａ１がＣＲ６またはＮであり；およびＡ２はＣＲ１０またはＮであり、ただし、Ａ１がＮである場合、Ａ２はＣＲ１０である。
Ａ１がＣＲ６であり；およびＡ２はＣＲ１０である。
Ａ１はＣＨであり；およびＡ２はＣＦである。
【0032】
Ｒ６が水素原子、ハロゲン、またはハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルである。
Ｒ６が水素原子またはハロゲンである。
Ｒ６がフルオロまたはクロロである。
Ｒ６がフルオロである。
Ｒ６が水素原子またはハロゲンである。
Ｒ６がフルオロまたはクロロである。
Ｒ６がフルオロである。
【0033】
Ｒ１０が水素原子、ハロゲン、またはハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルである。
Ｒ１０が水素原子またはハロゲンである。
Ｒ１０が水素原子である。
Ｒ１０が水素原子またはハロゲンである。
Ｒ１０が水素原子である。
【0034】
【化27】
である。
【化28】
である。
【化29】
である。
【化30】
である。
【0035】
Ｒ７ａがハロゲン；シアノ；シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、非芳香族炭素環式基および芳香族複素環式基から選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルオキシ；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキル；シアノおよびハロゲンから選択される１以上の基で置換されていてもよい非芳香族炭素環式基；シアノおよび芳香族複素環式基から選択される１以上の基で置換されていてもよい非芳香族複素環式基；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルケニルオキシ；シアノ、ハロゲンおよびヒドロキシから選択される１以上の基で置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキニルオキシ；またはＣ１～Ｃ６アルキルから選択される１以上の基で置換されていてもよい芳香族複素環式基である。
Ｒ７ａがシアノ；シアノまたはハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルオキシ；または芳香族複素環式基である。
Ｒ７ａがシアノ；またはハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルオキシである。
Ｒ７ａがＣ１～Ｃ３ハロアルキルオキシである。
Ｒ７ａがシアノである。
Ｒ７ａが
である。
Ｒ７ａがシアノ；シアノまたはハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ６アルキルオキシ；または芳香族複素環式基である。
Ｒ７ａがシアノ；またはハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキルオキシである。
Ｒ７ａがＣ１～Ｃ３ハロアルキルオキシである。
Ｒ７ａがシアノである。
Ｒ７ａが
【化31】
である。
【0036】
Ｒ７ｂが水素原子、ハロゲン、ハロゲンで置換されていてもよいＣ１～Ｃ３アルキル、またはアミノである。
Ｒ７ｂが水素原子またはハロゲンである。
Ｒ７ｂが水素原子である。
Ｒ７ｂが水素原子またはハロゲンである。
Ｒ７ｂが水素原子である。
【0037】
Ｒ８が水素原子またはハロゲンである。
Ｒ８が水素原子である。
Ｒ８がフルオロである。
Ｒ８が水素原子である。
Ｒ８がフルオロである。
【0038】
Ｒ９がハロゲンである。
Ｒ９がフルオロである。
Ｒ９がフルオロである。
【0039】
式（Ｉ）で示される化合物は、特定の異性体に限定するものではなく、全ての可能な異性体（例えば、ケト－エノール異性体、イミン－エナミン異性体、ジアステレオ異性体、光学異性体、回転異性体等）、ラセミ体またはそれらの混合物を含む。例えば式（Ｉ）で示される化合物は、以下のような互変異性体を包含する。
【化32】
【0040】
式（Ｉ）で示される化合物の１以上の水素、炭素および／または他の原子は、それぞれ水素、炭素および／または他の原子の同位体と置換し得る。同位体の例としては、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、１２３Ｉおよび３６Ｃｌのように、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、ヨウ素および塩素の同位体が包含される。式（Ｉ）で示される化合物は、そのような同位体で置換された化合物も包含する。そのような同位体で置換された化合物は、医薬品としても有用であり、式（Ｉ）で示される化合物の全ての放射性標識化合物を包含する。本発明は、「放射標識化合物」を製造する「放射標識方法」を含み、この方法は、結合アッセイおよび／または診断における研究である、代謝薬物動態研究用のツールとして有用である。
式（Ｉ）の化合物の放射標識化合物は、当該技術分野で既知の方法によって調製することができる。例えば、式（Ｉ）で示されるトリチウム標識化合物は、例えば、トリチウムを用いた触媒的脱ハロゲン化反応によって、式（Ｉ）で示される特定の化合物にトリチウムを導入することで調製できる。この方法は、適切な触媒、例えばＰｄ／Ｃの存在下、塩基の存在下または非存在下で、式（Ｉ）で示される化合物の適切なハロゲン化前駆体をトリチウムガスと反応させることを包含してもよい。他のトリチウム標識化合物を調製するための適切な方法としては、Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．１，Ｌａｂｅｌｅｄ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ （Ｐａｒｔ Ａ），Ｃｈａｐｔｅｒ ６ （１９８７年）を参照できる。１４Ｃ－標識化合物は、１４Ｃ炭素を有する出発物質を用いることによって調製できる。
式（Ｉ）の化合物の放射標識化合物は、当該技術分野で既知の方法によって調製することができる。例えば、式（Ｉ）で示されるトリチウム標識化合物は、例えば、トリチウムを用いた触媒的脱ハロゲン化反応によって、式（Ｉ）で示される特定の化合物にトリチウムを導入することで調製できる。この方法は、適切な触媒、例えばＰｄ／Ｃの存在下、塩基の存在下または非存在下で、式（Ｉ）で示される化合物の適切なハロゲン化前駆体をトリチウムガスと反応させることを包含してもよい。他のトリチウム標識化合物を調製するための適切な方法としては、Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．１，Ｌａｂｅｌｅｄ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ （Ｐａｒｔ Ａ），Ｃｈａｐｔｅｒ ６ （１９８７年）を参照できる。１４Ｃ－標識化合物は、１４Ｃ炭素を有する出発物質を用いることによって調製できる。
【0041】
式（Ｉ）で示される化合物の製薬上許容される塩としては、例えば、アルカリ金属（例えば、リチウム、ナトリウム、およびカリウム）、アルカリ土類金属（例えば、カルシウムおよびバリウム）、マグネシウム、遷移金属（例えば、亜鉛および鉄）、アンモニア、有機塩基（例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、メグルミン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、ピリジン、ピコリン、キノリン）、およびアミノ酸との塩、ならびに無機酸（例えば、塩酸、硫酸、硝酸、炭酸、臭化水素酸、リン酸およびヨウ化水素酸）、および有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、マンデル酸、グルタル酸、リンゴ酸、安息香酸、フタル酸、アスコルビン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸およびエタンスルホン酸）との塩が挙げられる。具体的な例としては、塩酸、硫酸、リン酸、酒石酸、またはメタンスルホン酸との塩が挙げられる。これらの塩は、通常行われる方法によって形成させることができる。
本発明の式（Ｉ）で示される化合物またはそれらの製薬上許容される塩は、溶媒和物（例えば、水和物等）および／または結晶多形を形成する場合がある。本発明は、これらの様々な溶媒和物および結晶多形を包含する。「溶媒和物」は、式（Ｉ）で示される化合物に任意の数の溶媒分子（例えば、水分子等）が配位したものでもよい。式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を、大気中に静置することにより、化合物が水分を吸収し、吸着水が付着する場合や、水和物を形成する場合がある。式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を、再結晶することでそれらの結晶多形を生成する場合がある。
本発明の式（Ｉ）で示される化合物またはそれらの製薬上許容される塩は、溶媒和物（例えば、水和物等）および／または結晶多形を形成する場合がある。本発明は、これらの様々な溶媒和物および結晶多形を包含する。「溶媒和物」は、式（Ｉ）で示される化合物に任意の数の溶媒分子（例えば、水分子等）が配位したものでもよい。式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を、大気中に静置することにより、化合物が水分を吸収し、吸着水が付着する場合や、水和物を形成する場合がある。式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を、再結晶することでそれらの結晶多形を生成する場合がある。
【0042】
本発明の式（Ｉ）で示される化合物またはそれらの製薬上許容される塩は、プロドラッグを形成する場合がある。本発明はそのような様々なプロドラッグも包含する。プロドラッグとは、化学的または代謝的に分解できる基を有する本発明化合物の誘導体であり、加溶媒分解によりまたは生体内の生理条件下で薬学的に活性な本発明化合物に変換される化合物である。プロドラッグは、生体内における生理条件下で酵素的に酸化、還元、加水分解などを受けて式（Ｉ）で示される化合物に変換される化合物、および胃酸などにより加水分解されて式（Ｉ）で示される化合物に変換される化合物等を包含する。適当なプロドラッグ誘導体を選択する方法および製造する方法は、例えばＤｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ， Ｅｌｓｅｖｉｅｒ， Ａｍｓｔｅｒｄａｍ １９８５に記載されている。プロドラッグは、それ自身が活性化合物である場合がある。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩がヒドロキシ基を有する場合は、ヒドロキシ基を有する化合物と適当なアシルハライド、適当な酸無水物、適当なスルホニルクロライド、適当なスルホニルアンハイドライドおよびミックスドアンハイドライドとを反応させることにより、または縮合剤を用いて反応させることにより調製され得るアシルオキシ誘導体やスルホニルオキシ誘導体のようなプロドラッグが例示される。例えば、ＣＨ３ＣＯＯ－、Ｃ２Ｈ５ＣＯＯ－、ｔ－ＢｕＣＯＯ－、Ｃ１５Ｈ３１ＣＯＯ－、ＰｈＣＯＯ－、（ｍ－ＮａＯＯＣＰｈ）ＣＯＯ－、ＮａＯＯＣＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ－、ＣＨ３ＣＨ（ＮＨ２）ＣＯＯ－、ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２ＣＯＯ－、ＣＨ３ＳＯ３－、ＣＨ３ＣＨ２ＳＯ３－、ＣＦ３ＳＯ３－、ＣＨ２ＦＳＯ３－、ＣＦ３ＣＨ２ＳＯ３－、ｐ－ＣＨ３Ｏ－ＰｈＳＯ３－、ＰｈＳＯ３－、およびｐ－ＣＨ３ＰｈＳＯ３－が挙げられる。
式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩がヒドロキシ基を有する場合は、ヒドロキシ基を有する化合物と適当なアシルハライド、適当な酸無水物、適当なスルホニルクロライド、適当なスルホニルアンハイドライドおよびミックスドアンハイドライドとを反応させることにより、または縮合剤を用いて反応させることにより調製され得るアシルオキシ誘導体やスルホニルオキシ誘導体のようなプロドラッグが例示される。例えば、ＣＨ３ＣＯＯ－、Ｃ２Ｈ５ＣＯＯ－、ｔ－ＢｕＣＯＯ－、Ｃ１５Ｈ３１ＣＯＯ－、ＰｈＣＯＯ－、（ｍ－ＮａＯＯＣＰｈ）ＣＯＯ－、ＮａＯＯＣＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ－、ＣＨ３ＣＨ（ＮＨ２）ＣＯＯ－、ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２ＣＯＯ－、ＣＨ３ＳＯ３－、ＣＨ３ＣＨ２ＳＯ３－、ＣＦ３ＳＯ３－、ＣＨ２ＦＳＯ３－、ＣＦ３ＣＨ２ＳＯ３－、ｐ－ＣＨ３Ｏ－ＰｈＳＯ３－、ＰｈＳＯ３－、およびｐ－ＣＨ３ＰｈＳＯ３－が挙げられる。
【0043】
式（Ｉ）で示される化合物は、当業者にとって既知の合成方法と共に、下記に示す方法を用いて調製すればよい。
出発物質は市販されているか、または既知の方法に従って調製することができる。
下記の合成のいずれの間でも、任意の分子の感受性または反応性の基を保護することが必要な、または好ましい場合がある。この場合、Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｙ ＆ Ｓｏｎｓ，２００７に記載のもの等の従来の保護基を用いることにより、これらの保護を実施できる。
下記の化合物は、ジアステレオマーおよび／またはエナンチオマーの混合物として生成し、そうした混合物は、続く手順の適切な段階で、従来の技術、例えば結晶化、シリカゲルクロマトグラフィー、キラルまたはアキラル高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、およびキラル超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）を用いて分離して、本発明の単一エナンチオマーを与え得ることは、当業者であれば理解されよう。
下記全ての工程について、実施する工程の順序を適宜変更することができる。各工程において、各中間体を単離し、次いで、次工程に用いてもよい。反応時間、反応温度、溶媒、試薬、および保護基等は全て単なる例示であり、反応に支障がない限り、特に限定されない。
出発物質は市販されているか、または既知の方法に従って調製することができる。
下記の合成のいずれの間でも、任意の分子の感受性または反応性の基を保護することが必要な、または好ましい場合がある。この場合、Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｙ ＆ Ｓｏｎｓ，２００７に記載のもの等の従来の保護基を用いることにより、これらの保護を実施できる。
下記の化合物は、ジアステレオマーおよび／またはエナンチオマーの混合物として生成し、そうした混合物は、続く手順の適切な段階で、従来の技術、例えば結晶化、シリカゲルクロマトグラフィー、キラルまたはアキラル高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、およびキラル超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）を用いて分離して、本発明の単一エナンチオマーを与え得ることは、当業者であれば理解されよう。
下記全ての工程について、実施する工程の順序を適宜変更することができる。各工程において、各中間体を単離し、次いで、次工程に用いてもよい。反応時間、反応温度、溶媒、試薬、および保護基等は全て単なる例示であり、反応に支障がない限り、特に限定されない。
【0044】
一般合成法Ａ
（式中、Ｐはベンゾイル、またはベンジルなどの保護基であり、その他の記号は上記（１）と同義である。）
一般合成法Ａは、化合物Ａ－１から工程１～工程８の複数工程を経て化合物Ａ－９で示される化合物を調製する方法である。後の工程で用いられる反応条件に応じて保護基Ｐを選択できることは、当業者であれば理解できる。
工程１
１，３－双極子付加環化（１，３－ｄｉｐｏｌａｒ ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ）により化合物Ａ－２を調製することができる。この種類の反応は、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９６０，８２，５３３９－５３４２またはＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９８，６３，５２７２－５２７４に記載の条件と同様の条件を用いることで実施できる。この１，３－双極子付加環は、環状化合物Ａ－１と、例えばフェニルイソシアネート、フェニルジイソシアネートまたは（Ｂｏｃ）２Ｏなどの適切な脱水剤、および例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンまたはＮ－メチルモルホリンなどの適切な塩基を使用して、対応するニトロアルカンから反応系内で生成された対応するニトリルオキシドによって実施することができる。別法として、ニトリルオキシドは、対応する塩化ヒドロキシモイルから、例えば、トリエチルアミン、ジプロピルエチルアミン、またはＮ－メチルモルホリン等の適当な塩基を用いて反応系内で生成できる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは室温～１２０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
工程２
適当なアリールリチウム試薬またはＧｒｉｇｎａｒｄ試薬を化合物Ａ－２に求核付加することにより、化合物Ａ－３を調製することができる。この種類の反応は、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００５，１２７，５３７６－５３８４に記載の条件と同様の条件を用いることで実施できる。好ましくは、アリールリチウム試薬またはＧｒｉｇｎａｒｄ試薬は、例えば、ｎ－、ｓｅｃ－もしくはｔｅｒｔ－ブチルリチウム、臭化イソプロピルマグネシウムまたは金属マグネシウム等の適当な塩基を用いて対応する芳香族ハライドから調製でき、次いでこれを例えばＢＦ３－ＯＥｔ２などのルイス酸と共に化合物Ａ－２と反応させて化合物Ａ－３を得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程３
化合物Ａ－３のＮ－Ｏ結合を還元開裂反応することにより、化合物Ａ－４を調製することができる。この還元開裂は、酢酸、ギ酸、または塩酸等の適当な酸と共に亜鉛を用いて実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、水およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－２０℃～溶媒還流温度である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
別法として、この反応は、水素下で酸化白金などの金属触媒を用いて実施することもできる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、メタノール、エタノール、水およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは室温～５０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
さらに、この種類の反応は、水素化アルミニウムリチウムを使用して実施することもできる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテルおよびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－２０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程４
化合物Ａ－４から反応系内で対応するチオ尿素を形成し、続く環化反応により、化合物Ａ－５を調製することができる。この種類の反応は、当業者に既知であり、国際公開第２０１４／０６５４３４号に記載された条件下で実施することができる。チオ尿素は、例えばベンゾイルイソチオシアネート、またはベンジルイソチオシアネート等の適当なイソチオシアネートを用いて化合物Ａ－４から反応系内で得ることができ、次いで、例えばｍ－ＣＰＢＡ、過酸化水素、またはカルボジイミド試薬（例えばＤＣＣ、ＤＩＣまたはＥＤＣ）などの試薬を加えて環化させることができる。別法として、ヨウ化メチルなどのアルキル化剤、ならびに水素化ナトリウム、重炭酸ナトリウムおよび炭酸カリウムなどの適当な塩基を用いてもこの環化を実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、クロロホルム、ジクロロメタン、ジクロロエタン、テトラヒドロフラン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、通常０℃～６０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
工程５
化合物Ａ－５の脱保護により、化合物Ａ－６を調製することができる。この脱保護反応は当業者に既知であり、Ｇｒｅｅｎ’ｓ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，４ｔｈ ｅｄに記載の条件下で実施できる。保護基がベンゾイルの場合、硫酸もしくは塩酸などの酸性条件下で、またはヒドラジン、ＤＢＵ、もしくは水酸化ナトリウムなどの塩基条件下で脱保護反応を実施できる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、メタノール、トルエン、ベンゼンおよびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは室温～１００℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
工程６
化合物Ａ－６のニトロ化により、化合物Ａ－７を調製することができる。典型的な手順は、硫酸およびトリフルオロ酢酸に溶解した化合物Ａ６を、例えば硝酸カリウムまたは硝酸などのニトロニウムイオン源で処理することである。反応温度は、好ましくは－２０℃～０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～５時間であり、好ましくは３０分～２時間である。
工程７
化合物Ａ－７の還元により、化合物Ａ－８を調製することができる。還元は、水素雰囲気下で、例えばパラジウム炭素などの適切な触媒によって、または、例えば鉄、亜鉛もしくは塩化スズ（ＩＩ）などの還元剤を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、水、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、通常は室温～８０℃であり、好ましくは室温～６０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
工程８
化合物Ａ－９は、化合物Ａ－８と対応するカルボン酸とのアミドカップリング反応により調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法で実施することができ、適切なカップリング条件は、Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１１，１１１，６５５７－６６０２に記載されており、ａ）縮合剤を用いる反応；ｂ）酸クロリドまたは酸フルオリドを用いる反応、を包含する。
反応ａ）は、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ塩酸塩）、Ｏ－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、および１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ－トリ（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）などの縮合剤を用いて実施できる。ＨＡＴＵやＰｙＢＯＰなどのウロニウム塩やホスホニウム塩を用いる場合、反応はトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基存在下で行うことができる。１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）や１－ヒドロキシ－７－アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）などの触媒の使用により、本反応を促進できる場合がある。反応に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、およびテトラヒドロフランを包含する。反応温度は通常０℃～５０℃であり、好ましくは室温である。
反応ｂ）は、市販の酸塩化物または当業者に既知の方法を用いて合成したものを用い、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、および酢酸エチルなどの溶媒中、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、およびＮ，Ｎ－ジメチル－４－アミノピリジンなどの塩基存在下で行うことができる。反応温度は通常０℃～６０℃であり、好ましくは０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは２０分～６時間である。
【化33】
（式中、Ｐはベンゾイル、またはベンジルなどの保護基であり、その他の記号は上記（１）と同義である。）
一般合成法Ａは、化合物Ａ－１から工程１～工程８の複数工程を経て化合物Ａ－９で示される化合物を調製する方法である。後の工程で用いられる反応条件に応じて保護基Ｐを選択できることは、当業者であれば理解できる。
工程１
１，３－双極子付加環化（１，３－ｄｉｐｏｌａｒ ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ）により化合物Ａ－２を調製することができる。この種類の反応は、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９６０，８２，５３３９－５３４２またはＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９８，６３，５２７２－５２７４に記載の条件と同様の条件を用いることで実施できる。この１，３－双極子付加環は、環状化合物Ａ－１と、例えばフェニルイソシアネート、フェニルジイソシアネートまたは（Ｂｏｃ）２Ｏなどの適切な脱水剤、および例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンまたはＮ－メチルモルホリンなどの適切な塩基を使用して、対応するニトロアルカンから反応系内で生成された対応するニトリルオキシドによって実施することができる。別法として、ニトリルオキシドは、対応する塩化ヒドロキシモイルから、例えば、トリエチルアミン、ジプロピルエチルアミン、またはＮ－メチルモルホリン等の適当な塩基を用いて反応系内で生成できる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは室温～１２０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
工程２
適当なアリールリチウム試薬またはＧｒｉｇｎａｒｄ試薬を化合物Ａ－２に求核付加することにより、化合物Ａ－３を調製することができる。この種類の反応は、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００５，１２７，５３７６－５３８４に記載の条件と同様の条件を用いることで実施できる。好ましくは、アリールリチウム試薬またはＧｒｉｇｎａｒｄ試薬は、例えば、ｎ－、ｓｅｃ－もしくはｔｅｒｔ－ブチルリチウム、臭化イソプロピルマグネシウムまたは金属マグネシウム等の適当な塩基を用いて対応する芳香族ハライドから調製でき、次いでこれを例えばＢＦ３－ＯＥｔ２などのルイス酸と共に化合物Ａ－２と反応させて化合物Ａ－３を得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程３
化合物Ａ－３のＮ－Ｏ結合を還元開裂反応することにより、化合物Ａ－４を調製することができる。この還元開裂は、酢酸、ギ酸、または塩酸等の適当な酸と共に亜鉛を用いて実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、水およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－２０℃～溶媒還流温度である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
別法として、この反応は、水素下で酸化白金などの金属触媒を用いて実施することもできる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、メタノール、エタノール、水およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは室温～５０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
さらに、この種類の反応は、水素化アルミニウムリチウムを使用して実施することもできる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテルおよびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－２０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程４
化合物Ａ－４から反応系内で対応するチオ尿素を形成し、続く環化反応により、化合物Ａ－５を調製することができる。この種類の反応は、当業者に既知であり、国際公開第２０１４／０６５４３４号に記載された条件下で実施することができる。チオ尿素は、例えばベンゾイルイソチオシアネート、またはベンジルイソチオシアネート等の適当なイソチオシアネートを用いて化合物Ａ－４から反応系内で得ることができ、次いで、例えばｍ－ＣＰＢＡ、過酸化水素、またはカルボジイミド試薬（例えばＤＣＣ、ＤＩＣまたはＥＤＣ）などの試薬を加えて環化させることができる。別法として、ヨウ化メチルなどのアルキル化剤、ならびに水素化ナトリウム、重炭酸ナトリウムおよび炭酸カリウムなどの適当な塩基を用いてもこの環化を実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、クロロホルム、ジクロロメタン、ジクロロエタン、テトラヒドロフラン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、通常０℃～６０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
工程５
化合物Ａ－５の脱保護により、化合物Ａ－６を調製することができる。この脱保護反応は当業者に既知であり、Ｇｒｅｅｎ’ｓ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，４ｔｈ ｅｄに記載の条件下で実施できる。保護基がベンゾイルの場合、硫酸もしくは塩酸などの酸性条件下で、またはヒドラジン、ＤＢＵ、もしくは水酸化ナトリウムなどの塩基条件下で脱保護反応を実施できる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、メタノール、トルエン、ベンゼンおよびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは室温～１００℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
工程６
化合物Ａ－６のニトロ化により、化合物Ａ－７を調製することができる。典型的な手順は、硫酸およびトリフルオロ酢酸に溶解した化合物Ａ６を、例えば硝酸カリウムまたは硝酸などのニトロニウムイオン源で処理することである。反応温度は、好ましくは－２０℃～０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～５時間であり、好ましくは３０分～２時間である。
工程７
化合物Ａ－７の還元により、化合物Ａ－８を調製することができる。還元は、水素雰囲気下で、例えばパラジウム炭素などの適切な触媒によって、または、例えば鉄、亜鉛もしくは塩化スズ（ＩＩ）などの還元剤を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、水、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、通常は室温～８０℃であり、好ましくは室温～６０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
工程８
化合物Ａ－９は、化合物Ａ－８と対応するカルボン酸とのアミドカップリング反応により調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法で実施することができ、適切なカップリング条件は、Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１１，１１１，６５５７－６６０２に記載されており、ａ）縮合剤を用いる反応；ｂ）酸クロリドまたは酸フルオリドを用いる反応、を包含する。
反応ａ）は、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ塩酸塩）、Ｏ－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、および１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ－トリ（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）などの縮合剤を用いて実施できる。ＨＡＴＵやＰｙＢＯＰなどのウロニウム塩やホスホニウム塩を用いる場合、反応はトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基存在下で行うことができる。１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）や１－ヒドロキシ－７－アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）などの触媒の使用により、本反応を促進できる場合がある。反応に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、およびテトラヒドロフランを包含する。反応温度は通常０℃～５０℃であり、好ましくは室温である。
反応ｂ）は、市販の酸塩化物または当業者に既知の方法を用いて合成したものを用い、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、および酢酸エチルなどの溶媒中、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、およびＮ，Ｎ－ジメチル－４－アミノピリジンなどの塩基存在下で行うことができる。反応温度は通常０℃～６０℃であり、好ましくは０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは２０分～６時間である。
【0045】
一般合成法Ｂ
（式中、Ａ’は、置換または非置換のＣ１～２アルキレンであり、Ｒ３’およびＲ３’’は各々独立して、（ハロゲン、シアノ、アルキルオキシ、ハロアルキルオキシまたは非芳香族炭素環式基）で置換されていてもよいアルキル、およびアルキルで置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され、他の記号は上記と同義である）
一般合成法Ｂは、化合物Ｂ－１から複数工程を経て、化合物Ｂ－５を調製する方法である。化合物Ｂ－４を用い、一般合成法Ａに記載の方法に従って化合物Ｂ－５を調製することができる。
工程１
１，３－双極子付加環化により、化合物Ｂ－２を調製することができる。この種類の反応は、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９６０，８２，５３３９～５３４２またはＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９８，６３，５２７２～５２７４に記載の条件と同様の条件を用いることで実施できる。この１，３－双極子付加環化は、環状化合物Ｂ－１と、例えばフェニルイソシアネート、フェニルジイソシアネートまたは（Ｂｏｃ）２Ｏなどの適切な脱水剤、および例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンまたはＮ－メチルモルホリンなどの適切な塩基を使用して対応するニトロアルカンから反応系内で生成された対応するニトリルオキシドによって実施することができる。また、別法として、ニトリルオキシドは、対応する塩化ヒドロキシモイルと、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、またはＮ－メチルモルホリン等の適当な塩基から反応系内で生成できる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは室温～１２０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
工程２
Ｒ３’が水素原子である場合、化合物Ｂ－２のカルボニル還元によって化合物Ｂ－３を調製することができる。この種類の反応は、例えば、ＤＩＢＡＬ－Ｈ、水素化リチウムトリ－ｔｅｒｔ－ブトキシアルミニウム（ｌｉｔｈｉｕｍ ｔｒｉ－ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙａｌｕｍｉｎｕｍ ｈｙｄｒｉｄｅ）またはナトリウムビス（２－メトキシエトキシ）アルミニウムなどの適切な金属水素化物を使用し、化合物Ｂ－２への求核付加によって実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’が水素原子以外である場合、化合物Ｂ－２への求核付加反応によって化合物Ｂ－３を調製することができる。この種類の反応は、例えば、ＢＦ３－ＯＥｔ２、ＡｌＣｌ３またはＴｉＣｌ４などのルイス酸の存在下または非存在下で、例えば、有機リチウム、マグネシウム、亜鉛またはシリル試薬などの適切な求核試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程３
Ｒ３’’が水素原子である場合、化合物Ｂ－３の還元によって化合物Ｂ－４を調製することができる。この種類の反応は、トリエチルシラン、水素化ホウ素ナトリウムなどの適切な還元剤を使用して、ＢＦ３－ＯＥｔ２などのルイス酸の存在下または非存在下で実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－２０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’’が水素原子以外である場合、化合物Ｂ－２への求核付加反応によって化合物Ｂ－４を調製することができる。この種類の反応は、例えば、ＢＦ３－ＯＥｔ２、ＡｌＣｌ３またはＴｉＣｌ４などのルイス酸の存在下または非存在下で、例えば、有機リチウム、マグネシウム、亜鉛またはシリル試薬などの適切な求核試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
【化34】
（式中、Ａ’は、置換または非置換のＣ１～２アルキレンであり、Ｒ３’およびＲ３’’は各々独立して、（ハロゲン、シアノ、アルキルオキシ、ハロアルキルオキシまたは非芳香族炭素環式基）で置換されていてもよいアルキル、およびアルキルで置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され、他の記号は上記と同義である）
一般合成法Ｂは、化合物Ｂ－１から複数工程を経て、化合物Ｂ－５を調製する方法である。化合物Ｂ－４を用い、一般合成法Ａに記載の方法に従って化合物Ｂ－５を調製することができる。
工程１
１，３－双極子付加環化により、化合物Ｂ－２を調製することができる。この種類の反応は、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９６０，８２，５３３９～５３４２またはＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９８，６３，５２７２～５２７４に記載の条件と同様の条件を用いることで実施できる。この１，３－双極子付加環化は、環状化合物Ｂ－１と、例えばフェニルイソシアネート、フェニルジイソシアネートまたは（Ｂｏｃ）２Ｏなどの適切な脱水剤、および例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンまたはＮ－メチルモルホリンなどの適切な塩基を使用して対応するニトロアルカンから反応系内で生成された対応するニトリルオキシドによって実施することができる。また、別法として、ニトリルオキシドは、対応する塩化ヒドロキシモイルと、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、またはＮ－メチルモルホリン等の適当な塩基から反応系内で生成できる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは室温～１２０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
工程２
Ｒ３’が水素原子である場合、化合物Ｂ－２のカルボニル還元によって化合物Ｂ－３を調製することができる。この種類の反応は、例えば、ＤＩＢＡＬ－Ｈ、水素化リチウムトリ－ｔｅｒｔ－ブトキシアルミニウム（ｌｉｔｈｉｕｍ ｔｒｉ－ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙａｌｕｍｉｎｕｍ ｈｙｄｒｉｄｅ）またはナトリウムビス（２－メトキシエトキシ）アルミニウムなどの適切な金属水素化物を使用し、化合物Ｂ－２への求核付加によって実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’が水素原子以外である場合、化合物Ｂ－２への求核付加反応によって化合物Ｂ－３を調製することができる。この種類の反応は、例えば、ＢＦ３－ＯＥｔ２、ＡｌＣｌ３またはＴｉＣｌ４などのルイス酸の存在下または非存在下で、例えば、有機リチウム、マグネシウム、亜鉛またはシリル試薬などの適切な求核試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程３
Ｒ３’’が水素原子である場合、化合物Ｂ－３の還元によって化合物Ｂ－４を調製することができる。この種類の反応は、トリエチルシラン、水素化ホウ素ナトリウムなどの適切な還元剤を使用して、ＢＦ３－ＯＥｔ２などのルイス酸の存在下または非存在下で実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－２０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’’が水素原子以外である場合、化合物Ｂ－２への求核付加反応によって化合物Ｂ－４を調製することができる。この種類の反応は、例えば、ＢＦ３－ＯＥｔ２、ＡｌＣｌ３またはＴｉＣｌ４などのルイス酸の存在下または非存在下で、例えば、有機リチウム、マグネシウム、亜鉛またはシリル試薬などの適切な求核試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
【0046】
一般合成法Ｃ
（式中、Ｐはベンゾイル、またはベンジルなどの保護基であり、Ｒ３’’’はエチルまたはシクロプロピルであり、その他の記号は上記（１）と同義である。）
一般合成法Ｃは、化合物Ｂ－１から複数工程を経て、化合物Ｃ－５を調製する方法である。化合物Ｃ－２およびＣ－５から、一般合成法Ａに記載の方法に従って化合物Ｃ－３および化合物Ｃ－５を調製することができる。
工程１
アリル部位を化合物Ｂ－２のカルボニル基に求核付加することにより、化合物Ｃ－１を調製することができる。この種類の反応は、例えばアリルシラン、リチウム、マグネシウム、亜鉛試薬などの適切な市販の、または反応系内で生成したアリル試薬を使用して、例えばＢＦ３－ＯＥｔ２、ＡｌＣｌ３、またはＴｉＣｌ４などのルイス酸の存在下または非存在下で実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程２
化合物Ｃ－１の還元により、化合物Ｃ－２を調製することができる。この種類の反応は、トリエチルシランまたは水素化ホウ素ナトリウムなどの適切な還元剤を使用して、ＢＦ３－ＯＥｔ２などのルイス酸の存在下または非存在下で実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－２０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程３
Ｒ３’’’がエチルである場合、化合物Ｃ－４の水素化によって化合物Ｃ－５を得ることができる。水素化は、例えばパラジウム炭素などの適切な触媒を水素雰囲気下で使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、水、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、通常は室温～８０℃であり、好ましくは室温～６０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’’’がシクロプロピルである場合、化合物Ｃ－４のシクロプロパン化によって化合物Ｃ－５を得ることができる。この種類の反応は、ジアゾメタンなどの適切な試薬を使用して、適切な触媒の存在下もしくは非存在下で、または、例えばジヨードメタンとジエチル亜鉛などのシモンズ－スミス反応条件下で実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、またはそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は通常－３０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
【化35】
（式中、Ｐはベンゾイル、またはベンジルなどの保護基であり、Ｒ３’’’はエチルまたはシクロプロピルであり、その他の記号は上記（１）と同義である。）
一般合成法Ｃは、化合物Ｂ－１から複数工程を経て、化合物Ｃ－５を調製する方法である。化合物Ｃ－２およびＣ－５から、一般合成法Ａに記載の方法に従って化合物Ｃ－３および化合物Ｃ－５を調製することができる。
工程１
アリル部位を化合物Ｂ－２のカルボニル基に求核付加することにより、化合物Ｃ－１を調製することができる。この種類の反応は、例えばアリルシラン、リチウム、マグネシウム、亜鉛試薬などの適切な市販の、または反応系内で生成したアリル試薬を使用して、例えばＢＦ３－ＯＥｔ２、ＡｌＣｌ３、またはＴｉＣｌ４などのルイス酸の存在下または非存在下で実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程２
化合物Ｃ－１の還元により、化合物Ｃ－２を調製することができる。この種類の反応は、トリエチルシランまたは水素化ホウ素ナトリウムなどの適切な還元剤を使用して、ＢＦ３－ＯＥｔ２などのルイス酸の存在下または非存在下で実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－２０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程３
Ｒ３’’’がエチルである場合、化合物Ｃ－４の水素化によって化合物Ｃ－５を得ることができる。水素化は、例えばパラジウム炭素などの適切な触媒を水素雰囲気下で使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、水、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、通常は室温～８０℃であり、好ましくは室温～６０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’’’がシクロプロピルである場合、化合物Ｃ－４のシクロプロパン化によって化合物Ｃ－５を得ることができる。この種類の反応は、ジアゾメタンなどの適切な試薬を使用して、適切な触媒の存在下もしくは非存在下で、または、例えばジヨードメタンとジエチル亜鉛などのシモンズ－スミス反応条件下で実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、またはそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は通常－３０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
【0047】
一般合成法Ｄ
（式中、Ｐはベンゾイル、またはベンジルなどの保護基であり、Ｒ３’’’’は、（フッ素またはアルキルオキシ）で置換されたアルキルであり、その他の記号は上記（１）と同義である。）
一般合成法Ｄは、化合物Ｃ－３から複数工程を経て、化合物Ｄ－３を調製する方法である。化合物Ｄ－２から、一般合成法Ａに記載の方法に従って化合物Ｄ－３を調製することができる。
工程１
化合物Ｃ－３をオゾン分解させ、得られたアルデヒドの還元を行うことにより、化合物Ｄ－１を調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。オゾン分解は、オゾン雰囲気下、ジクロロメタン、メタノール、およびそれらの混合溶媒などの適切な溶媒中において実施でき、また、窒素雰囲気下トリフェニルホスフィン、ピリジン、ジメチルスルフィド、およびトリメチルアミンなどの適切な試薬を用いて還元的後処理を実施することができる。オゾニドを生成する温度は、好ましくは－７８℃であり、次いで温度を還元的後処理のために室温に温めることができる。反応時間は特に限定されないが、通常３０分～５時間であり、好ましくは３０分～２時間である。得られたアルデヒドの還元反応は、水素化ホウ素ナトリウム、または水素化アルミニウムリチウムなどの適切な還元剤を使用してワンポットで実施することができる。反応温度は、好ましくは０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常３０分～５時間であり、好ましくは３０分～２時間である。
工程２
Ｒ３’’’’がＣＦ３、ＣＨＦ２またはＣＨ２Ｆである場合、一連の２工程：化合物Ｄ－１を酸化してアルデヒドもしくはカルボン酸を生成し、後続してフッ素化を行うか、または化合物Ｄ－１を直接フッ素化することにより、化合物Ｄ－２を得ることができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。例えば、ＴＥＭＰＯ、Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎ、またはＳｗｅｒｎ酸化などの適切な酸化条件下で化合物Ｄ－１を酸化させて対応するアルデヒドを得ることができる。対応するカルボン酸は、得られたアルデヒドの酸化反応により、または例えばＰｉｎｎｉｃｋ、ＴＥＭＰＯ、またはＪｏｎｓｅ酸化などの適切な条件を用いて化合物Ｄ－１を直接酸化させることにより得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。反応温度は通常－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。フッ素化反応は、例えばＤＡＳＴ、Ｄｅｏｘｏｆｌｕｏｒ、または四フッ化硫黄などの適切な試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～５０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’’’がアルキルオキシである場合、化合物Ｄ－１の末端アルコールのアルキル化によって化合物Ｄ－２を得ることができる。この反応は、水素化ナトリウムなどの適切な塩基と、アルキルハライド、メシレート、またはトリフレートなどの対応する求電子試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、アセトン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ＤＭＦ、ＤＭＡ、ＤＭＳＯ、トルエン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは０℃～１００℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
【化36】
（式中、Ｐはベンゾイル、またはベンジルなどの保護基であり、Ｒ３’’’’は、（フッ素またはアルキルオキシ）で置換されたアルキルであり、その他の記号は上記（１）と同義である。）
一般合成法Ｄは、化合物Ｃ－３から複数工程を経て、化合物Ｄ－３を調製する方法である。化合物Ｄ－２から、一般合成法Ａに記載の方法に従って化合物Ｄ－３を調製することができる。
工程１
化合物Ｃ－３をオゾン分解させ、得られたアルデヒドの還元を行うことにより、化合物Ｄ－１を調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。オゾン分解は、オゾン雰囲気下、ジクロロメタン、メタノール、およびそれらの混合溶媒などの適切な溶媒中において実施でき、また、窒素雰囲気下トリフェニルホスフィン、ピリジン、ジメチルスルフィド、およびトリメチルアミンなどの適切な試薬を用いて還元的後処理を実施することができる。オゾニドを生成する温度は、好ましくは－７８℃であり、次いで温度を還元的後処理のために室温に温めることができる。反応時間は特に限定されないが、通常３０分～５時間であり、好ましくは３０分～２時間である。得られたアルデヒドの還元反応は、水素化ホウ素ナトリウム、または水素化アルミニウムリチウムなどの適切な還元剤を使用してワンポットで実施することができる。反応温度は、好ましくは０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常３０分～５時間であり、好ましくは３０分～２時間である。
工程２
Ｒ３’’’’がＣＦ３、ＣＨＦ２またはＣＨ２Ｆである場合、一連の２工程：化合物Ｄ－１を酸化してアルデヒドもしくはカルボン酸を生成し、後続してフッ素化を行うか、または化合物Ｄ－１を直接フッ素化することにより、化合物Ｄ－２を得ることができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。例えば、ＴＥＭＰＯ、Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎ、またはＳｗｅｒｎ酸化などの適切な酸化条件下で化合物Ｄ－１を酸化させて対応するアルデヒドを得ることができる。対応するカルボン酸は、得られたアルデヒドの酸化反応により、または例えばＰｉｎｎｉｃｋ、ＴＥＭＰＯ、またはＪｏｎｓｅ酸化などの適切な条件を用いて化合物Ｄ－１を直接酸化させることにより得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。反応温度は通常－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。フッ素化反応は、例えばＤＡＳＴ、Ｄｅｏｘｏｆｌｕｏｒ、または四フッ化硫黄などの適切な試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～５０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’’’がアルキルオキシである場合、化合物Ｄ－１の末端アルコールのアルキル化によって化合物Ｄ－２を得ることができる。この反応は、水素化ナトリウムなどの適切な塩基と、アルキルハライド、メシレート、またはトリフレートなどの対応する求電子試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、アセトン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ＤＭＦ、ＤＭＡ、ＤＭＳＯ、トルエン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは０℃～１００℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
【0048】
一般合成法Ｅ
（式中、Ｐは、ベンゾイルまたはベンジルなどの保護基であり、Ｒ３’’’’’は、エチルまたはシクロプロピルであり、Ｘは、ハロゲン、メシレート、またはトリフレートなどの脱離基であり、その他の記号は上記の（１）と同義である。）
一般合成法Ｅは、化合物Ｄ－１から複数工程を経て、化合物Ｅ－４を調製する方法である。化合物Ｅ－２から、一般合成法Ａに記載の方法に従って化合物Ｅ－４を調製することができる。
工程１
化合物Ｅ－１は、化合物Ｄ－３の末端アルコールを脱離基に変換することによって調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。例えばＳＯＸ２、ＰＯＸ３（Ｘ＝ＣｌもしくはＢｒ）を使用するような適切なハロゲン化条件、またはトリフェニルホスフィンとＣＸ４（Ｘ＝ＣｌもしくはＢｒ）もしくはヨウ素などのＡｐｐｅｌ反応条件下で化合物Ｅ－１を得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、トルエン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは０℃～１００℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程２
化合物Ｄ－３の末端アルコールを脱離基に変換することにより、化合物Ｅ－２を調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。例えばＳＯＸ２、ＰＯＸ３（Ｘ＝ＣｌもしくはＢｒ）を使用するような適切なハロゲン化条件、またはトリフェニルホスフィンとＣＸ４（Ｘ＝ＣｌもしくはＢｒ）もしくはヨウ素などのＡｐｐｅｌ反応条件下で化合物Ｅ－１を得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、トルエン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは０℃～１００℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程３
化合物Ｅ－１の脱離反応により、化合物Ｅ－２を調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。例えばナトリウムもしくはカリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ＤＢＵ、またはピリジンなどの適切な塩基を使用して化合物Ｅ－２を得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、トルエン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは０℃～６０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程４
Ｒ３’’’’’がエチルである場合、化合物Ｅ－２の水素化によって化合物Ｅ－３を得ることができる。水素化は、例えばパラジウム炭素などの適切な触媒を水素雰囲気下で使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、水、それらの混合溶媒を包含する。反応温度は、通常は室温～８０℃であり、好ましくは室温～６０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’’’’’がシクロプロピルである場合、化合物Ｃ－４のシクロプロパン化によって化合物Ｅ－３を得ることができる。この種類の反応は、ジアゾメタンなどの適切な試薬を使用して、適切な触媒の存在下もしくは非存在下で、または、例えばジヨードメタンとジエチル亜鉛などのシモンズ－スミス反応条件下で実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、またはそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は通常－３０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
【化37】
（式中、Ｐは、ベンゾイルまたはベンジルなどの保護基であり、Ｒ３’’’’’は、エチルまたはシクロプロピルであり、Ｘは、ハロゲン、メシレート、またはトリフレートなどの脱離基であり、その他の記号は上記の（１）と同義である。）
一般合成法Ｅは、化合物Ｄ－１から複数工程を経て、化合物Ｅ－４を調製する方法である。化合物Ｅ－２から、一般合成法Ａに記載の方法に従って化合物Ｅ－４を調製することができる。
工程１
化合物Ｅ－１は、化合物Ｄ－３の末端アルコールを脱離基に変換することによって調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。例えばＳＯＸ２、ＰＯＸ３（Ｘ＝ＣｌもしくはＢｒ）を使用するような適切なハロゲン化条件、またはトリフェニルホスフィンとＣＸ４（Ｘ＝ＣｌもしくはＢｒ）もしくはヨウ素などのＡｐｐｅｌ反応条件下で化合物Ｅ－１を得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、トルエン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは０℃～１００℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程２
化合物Ｄ－３の末端アルコールを脱離基に変換することにより、化合物Ｅ－２を調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。例えばＳＯＸ２、ＰＯＸ３（Ｘ＝ＣｌもしくはＢｒ）を使用するような適切なハロゲン化条件、またはトリフェニルホスフィンとＣＸ４（Ｘ＝ＣｌもしくはＢｒ）もしくはヨウ素などのＡｐｐｅｌ反応条件下で化合物Ｅ－１を得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、トルエン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは０℃～１００℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程３
化合物Ｅ－１の脱離反応により、化合物Ｅ－２を調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。例えばナトリウムもしくはカリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ＤＢＵ、またはピリジンなどの適切な塩基を使用して化合物Ｅ－２を得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、トルエン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは０℃～６０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
工程４
Ｒ３’’’’’がエチルである場合、化合物Ｅ－２の水素化によって化合物Ｅ－３を得ることができる。水素化は、例えばパラジウム炭素などの適切な触媒を水素雰囲気下で使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、水、それらの混合溶媒を包含する。反応温度は、通常は室温～８０℃であり、好ましくは室温～６０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’’’’’がシクロプロピルである場合、化合物Ｃ－４のシクロプロパン化によって化合物Ｅ－３を得ることができる。この種類の反応は、ジアゾメタンなどの適切な試薬を使用して、適切な触媒の存在下もしくは非存在下で、または、例えばジヨードメタンとジエチル亜鉛などのシモンズ－スミス反応条件下で実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、またはそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は通常－３０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
【0049】
一般合成法Ｆ
（式中、Ｐはベンゾイル、またはベンジルなどの保護基であり、Ｒ３’’’’’’はフッ素またはアルキルオキシで置換されたアルキルであり、その他の記号は前記と同義である）
一般合成法Ｆは、化合物Ｅ２から複数工程を経て、化合物Ｆ－３を調製する方法である。化合物Ｆ－２から、一般合成法Ａに記載の方法に従って化合物Ｆ－３を調製することができる。
工程１
化合物Ｆ－３をオゾン分解させ、得られたアルデヒドの還元を行うことにより、化合物Ｆ－１を調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。オゾン分解は、オゾン雰囲気下、ジクロロメタン、メタノール、およびそれらの混合溶媒などの適切な溶媒中において実施でき、また、窒素雰囲気下トリフェニルホスフィン、ピリジン、ジメチルスルフィド、およびトリメチルアミンなどの適切な試薬を用いて還元的後処理を実施することができる。オゾニドを生成する温度は、好ましくは－７８℃であり、次いで温度を還元的後処理のために室温に温めることができる。反応時間は特に限定されないが、通常３０分～５時間であり、好ましくは３０分～２時間である。得られたアルデヒドの還元は、水素化ホウ素ナトリウム、または水素化アルミニウムリチウムなどの適切な還元剤を使用してワンポットで実施することができる。反応温度は、好ましくは０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常３０分～５時間であり、好ましくは３０分～２時間である。
工程２
Ｒ３’’’’’’がＣＦ３、ＣＨＦ２またはＣＨ２Ｆである場合、一連の２工程：化合物Ｆ－１を酸化してアルデヒドもしくはカルボン酸を生成し、フッ素化を行うか、または化合物Ｆ－１を直接フッ素化することにより、化合物Ｆ－２を得ることができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。例えば、ＴＥＭＰＯ、Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎ、またはＳｗｅｒｎ酸化などの適切な酸化条件下で化合物Ｆ－１を酸化させて対応するアルデヒドを得ることができる。対応するカルボン酸は、得られたアルデヒドの酸化反応により、または例えばＰｉｎｎｉｃｋ、ＴＥＭＰＯ、またはＪｏｎｓｅ酸化などの適切な条件を用いて化合物Ｆ－１を直接酸化させることにより得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。反応温度は通常－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。フッ素化反応は、例えばＤＡＳＴ、Ｄｅｏｘｏｆｌｕｏｒ、または四フッ化硫黄などの適切な試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～５０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’’’’’’がアルキルオキシである場合、化合物Ｆ－１の末端アルコールのアルキル化によって化合物Ｆ－２を得ることができる。この反応は、水素化ナトリウムなどの適切な塩基と、アルキルハライド、メシレート、またはトリフレートなどの対応する求電子試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、アセトン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ＤＭＦ、ＤＭＡ、ＤＭＳＯ、トルエン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは０℃～１００℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
【化38】
（式中、Ｐはベンゾイル、またはベンジルなどの保護基であり、Ｒ３’’’’’’はフッ素またはアルキルオキシで置換されたアルキルであり、その他の記号は前記と同義である）
一般合成法Ｆは、化合物Ｅ２から複数工程を経て、化合物Ｆ－３を調製する方法である。化合物Ｆ－２から、一般合成法Ａに記載の方法に従って化合物Ｆ－３を調製することができる。
工程１
化合物Ｆ－３をオゾン分解させ、得られたアルデヒドの還元を行うことにより、化合物Ｆ－１を調製することができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。オゾン分解は、オゾン雰囲気下、ジクロロメタン、メタノール、およびそれらの混合溶媒などの適切な溶媒中において実施でき、また、窒素雰囲気下トリフェニルホスフィン、ピリジン、ジメチルスルフィド、およびトリメチルアミンなどの適切な試薬を用いて還元的後処理を実施することができる。オゾニドを生成する温度は、好ましくは－７８℃であり、次いで温度を還元的後処理のために室温に温めることができる。反応時間は特に限定されないが、通常３０分～５時間であり、好ましくは３０分～２時間である。得られたアルデヒドの還元は、水素化ホウ素ナトリウム、または水素化アルミニウムリチウムなどの適切な還元剤を使用してワンポットで実施することができる。反応温度は、好ましくは０℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常３０分～５時間であり、好ましくは３０分～２時間である。
工程２
Ｒ３’’’’’’がＣＦ３、ＣＨＦ２またはＣＨ２Ｆである場合、一連の２工程：化合物Ｆ－１を酸化してアルデヒドもしくはカルボン酸を生成し、フッ素化を行うか、または化合物Ｆ－１を直接フッ素化することにより、化合物Ｆ－２を得ることができる。この反応は、当業者に既知の方法によって実施することができる。例えば、ＴＥＭＰＯ、Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎ、またはＳｗｅｒｎ酸化などの適切な酸化条件下で化合物Ｆ－１を酸化させて対応するアルデヒドを得ることができる。対応するカルボン酸は、得られたアルデヒドの酸化反応により、または例えばＰｉｎｎｉｃｋ、ＴＥＭＰＯ、またはＪｏｎｓｅ酸化などの適切な条件を用いて化合物Ｆ－１を直接酸化させることにより得ることができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。反応温度は通常－７８℃～室温である。反応時間は特に限定されないが、通常５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。フッ素化反応は、例えばＤＡＳＴ、Ｄｅｏｘｏｆｌｕｏｒ、または四フッ化硫黄などの適切な試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは－７８℃～５０℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
Ｒ３’’’’’’がアルキルオキシである場合、化合物Ｆ－１の末端アルコールのアルキル化によって化合物Ｆ－２を得ることができる。この反応は、水素化ナトリウムなどの適切な塩基と、アルキルハライド、メシレート、またはトリフレートなどの対応する求電子試薬を使用して実施することができる。本工程に用いる溶媒は、反応を阻害しない限り特に限定されない。溶媒の例としては、アセトン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ＤＭＦ、ＤＭＡ、ＤＭＳＯ、トルエン、およびそれらの混合溶媒を包含する。反応温度は、好ましくは０℃～１００℃である。反応時間は、特に限定されないが、通常は５分～２４時間であり、好ましくは３０分～２４時間である。
【0050】
本発明化合物は、ＢＡＣＥ１阻害活性を有し、アミロイドβタンパク質の産生、分泌または沈着により誘発される疾患の治療および／または予防、症状改善ならびに進行予防に有効である。このような疾患の例としては、アルツハイマー病、アルツハイマー型認知症、アルツハイマー型老年認知症、軽度認知障害（ＭＣＩ）、前駆期アルツハイマー病（例えばアルツハイマー症に起因するＭＣＩ等）、ダウン症候群、記憶障害、プリオン病（クロイツフェルト・ヤコブ病）、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血、脳アミロイド血管症、他の種類の変性認知症、混合型認知症（例えばアルツハイマー病と血管性認知症の併発など）、パーキンソン病を伴う認知症、進行性核上麻痺を伴う認知症、皮質基底核変性症を伴う認知症、びまん性レビー小体病を伴うアルツハイマー病、加齢黄斑変性症、パーキンソン病、アミロイドアンジオパシー等が挙げられる。
さらに、本発明化合物は、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の（前臨床期アルツハイマー病の）患者における進行予防にも有効である。
「アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者」は、認識的および機能的には正常であるが、アルツハイマー病の潜在的な超早期徴候もしくは典型的な加齢による変化（例えば、ＭＲＩ上での軽度の白質病変）がみられる、ならびに／または、低い脳脊髄液Ａβ１－４２レベルによって示されるアミロイドの沈着のエビデンスを有する対象を包含する。例えば、「アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者」は、臨床認知症評価法（ＣＤＲ）もしくは臨床認知症評価法－日本版（ＣＤＲ－Ｊ）のスコアが０である、および／または機能評価ステージ（Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｓｔａｇｉｎｇ， ＦＡＳＴ）がステージ１もしくは２である対象を包含する。
さらに、本発明化合物は、アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の（前臨床期アルツハイマー病の）患者における進行予防にも有効である。
「アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者」は、認識的および機能的には正常であるが、アルツハイマー病の潜在的な超早期徴候もしくは典型的な加齢による変化（例えば、ＭＲＩ上での軽度の白質病変）がみられる、ならびに／または、低い脳脊髄液Ａβ１－４２レベルによって示されるアミロイドの沈着のエビデンスを有する対象を包含する。例えば、「アルツハイマー型認知症のリスクを有する無症候性の患者」は、臨床認知症評価法（ＣＤＲ）もしくは臨床認知症評価法－日本版（ＣＤＲ－Ｊ）のスコアが０である、および／または機能評価ステージ（Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｓｔａｇｉｎｇ， ＦＡＳＴ）がステージ１もしくは２である対象を包含する。
【0051】
本発明化合物は、ＢＡＣＥ１阻害活性のみならず、医薬としての有用性を備えている。該化合物は、好ましくは下記のいずれか１以上の優れた特徴を有している。
ａ）ＣＹＰ酵素（例えば、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ３Ａ４等）に対する阻害作用が弱い。
ｂ）高いバイオアベイラビリティーまたは低いクリアランスなどの優れた薬物動態プロファイルを示す。
ｃ）代謝安定性が高い。
ｄ）ＣＹＰ酵素（例えば、ＣＹＰ３Ａ４）に対し、本明細書に記載する測定条件の濃度範囲内で不可逆的阻害を示さない。
ｅ）突然変異誘発性を示さない。
ｆ）心血管系のリスクが低い。
ｇ）高い溶解性を示す。
ｈ）脳内分布率が高い。
ｉ）経口吸収性が高い。
ｊ）半減期が長い。
ｋ）非タンパク結合率が高い。
ｌ）Ａｍｅｓ試験が陰性である。
ｍ）ＢＡＣＥ２に対するＢＡＣＥ１への選択性が高い。
ｎ）ＣＹＰ酵素に対するメカニズムベース阻害（ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｂａｓｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）が弱い。例えば、本化合物の反応性代謝物のＣＹＰ酵素に対する阻害が弱い。
ｏ）反応性代謝物の生成量が少ない。
ｐ）Ｐ－ｇｐ基質性が弱い。
本発明化合物は、ＢＡＣＥ１に対する阻害活性が高い、および／または、他の酵素、例えばＢＡＣＥ２などに対する選択性が高いため、副作用が軽減された医薬品となりうる。さらに細胞系でのアミロイドβ産生抑制効果が高い、特に脳内でのアミロイドβ産生抑制効果が高いため、優れた医薬品となりうる。さらに、適切な立体化学を有する光学活性体とすることで、副作用に対するより安全マージンの広い医薬品となりうる。
ａ）ＣＹＰ酵素（例えば、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ３Ａ４等）に対する阻害作用が弱い。
ｂ）高いバイオアベイラビリティーまたは低いクリアランスなどの優れた薬物動態プロファイルを示す。
ｃ）代謝安定性が高い。
ｄ）ＣＹＰ酵素（例えば、ＣＹＰ３Ａ４）に対し、本明細書に記載する測定条件の濃度範囲内で不可逆的阻害を示さない。
ｅ）突然変異誘発性を示さない。
ｆ）心血管系のリスクが低い。
ｇ）高い溶解性を示す。
ｈ）脳内分布率が高い。
ｉ）経口吸収性が高い。
ｊ）半減期が長い。
ｋ）非タンパク結合率が高い。
ｌ）Ａｍｅｓ試験が陰性である。
ｍ）ＢＡＣＥ２に対するＢＡＣＥ１への選択性が高い。
ｎ）ＣＹＰ酵素に対するメカニズムベース阻害（ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｂａｓｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）が弱い。例えば、本化合物の反応性代謝物のＣＹＰ酵素に対する阻害が弱い。
ｏ）反応性代謝物の生成量が少ない。
ｐ）Ｐ－ｇｐ基質性が弱い。
本発明化合物は、ＢＡＣＥ１に対する阻害活性が高い、および／または、他の酵素、例えばＢＡＣＥ２などに対する選択性が高いため、副作用が軽減された医薬品となりうる。さらに細胞系でのアミロイドβ産生抑制効果が高い、特に脳内でのアミロイドβ産生抑制効果が高いため、優れた医薬品となりうる。さらに、適切な立体化学を有する光学活性体とすることで、副作用に対するより安全マージンの広い医薬品となりうる。
【0052】
本発明の医薬組成物を投与する場合、経口的または非経口的に投与することができる。経口投与用組成物は、経口固形製剤（例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、フィルム剤等）、経口液体製剤（例えば懸濁剤、乳剤、エリキシル剤、シロップ剤、リモナーデ剤、酒精剤、芳香水剤、エキス剤、煎剤、チンキ剤等）などの通常用いられる剤形で投与することができ、また、通常用いられる方法に従って調製し、投与してもよい。錠剤は糖衣錠、フィルムコーティング錠、腸溶性コーティング錠、徐放錠、トローチ錠、舌下錠、バッカル錠、チュアブル錠、または口腔内崩壊錠でもよい。散剤および顆粒剤はドライシロップ剤でもよい。カプセル剤はソフトカプセル剤、マイクロカプセル剤または徐放性カプセル剤でもよい。
非経口投与用組成物は、経皮、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、経粘膜、吸入、経鼻、点眼、内耳または膣内投与等の通常用いられる非経口剤形で好適に投与することができる。非経口投与の場合、注射剤、点滴剤、外用剤（例えば点眼剤、点鼻剤、点耳剤、エアゾール剤、吸入剤、ローション剤、注入剤、リニメント剤、洗口剤、浣腸剤、軟膏剤、プラスター剤、ゼリー剤、クリーム剤、貼付剤、パップ剤、外用散剤、坐剤等）など、通常用いられるいずれの形態でも好ましく投与することができる。注射剤は、Ｏ／Ｗ、Ｗ／Ｏ、Ｏ／Ｗ／Ｏ、Ｗ／Ｏ／Ｗ型等のエマルジョンでもよい。
本発明化合物は経口吸収性が高いため、経口剤形として好ましく投与できる。
医薬組成物は、必要に応じて、製剤に適した賦形剤、結合剤、崩壊剤、および滑沢剤などの様々な医薬用添加剤を、有効量の本発明化合物と混合して製剤化することができる。さらに、本発明化合物の有効量、製剤および／または各種医薬用添加剤を適宜変えることで、小児患者、高齢患者、重症患者または手術用の医薬組成物としてもよい。小児用の医薬組成物は、１２または１５歳以下の患者に好ましく投与できる。加えて、小児用の医薬組成物は、生後２７日齢未満、生後２８日～２３か月齢、２～１１歳、１２～１６歳、１７歳または１８歳の患者に投与することができる。高齢者用の医薬組成物は、６５歳以上の患者に好ましく投与される。
非経口投与用組成物は、経皮、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、経粘膜、吸入、経鼻、点眼、内耳または膣内投与等の通常用いられる非経口剤形で好適に投与することができる。非経口投与の場合、注射剤、点滴剤、外用剤（例えば点眼剤、点鼻剤、点耳剤、エアゾール剤、吸入剤、ローション剤、注入剤、リニメント剤、洗口剤、浣腸剤、軟膏剤、プラスター剤、ゼリー剤、クリーム剤、貼付剤、パップ剤、外用散剤、坐剤等）など、通常用いられるいずれの形態でも好ましく投与することができる。注射剤は、Ｏ／Ｗ、Ｗ／Ｏ、Ｏ／Ｗ／Ｏ、Ｗ／Ｏ／Ｗ型等のエマルジョンでもよい。
本発明化合物は経口吸収性が高いため、経口剤形として好ましく投与できる。
医薬組成物は、必要に応じて、製剤に適した賦形剤、結合剤、崩壊剤、および滑沢剤などの様々な医薬用添加剤を、有効量の本発明化合物と混合して製剤化することができる。さらに、本発明化合物の有効量、製剤および／または各種医薬用添加剤を適宜変えることで、小児患者、高齢患者、重症患者または手術用の医薬組成物としてもよい。小児用の医薬組成物は、１２または１５歳以下の患者に好ましく投与できる。加えて、小児用の医薬組成物は、生後２７日齢未満、生後２８日～２３か月齢、２～１１歳、１２～１６歳、１７歳または１８歳の患者に投与することができる。高齢者用の医薬組成物は、６５歳以上の患者に好ましく投与される。
【0053】
本発明の医薬組成物の投与量は、患者の年齢および体重、疾患の種類および程度、投与経路などを考慮して決定されるべきである。成人への経口投与量は、通常０．０５～１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内であり、好ましくは０．１～１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内である。非経口投与では、投与量は、投与経路により大きく異なり、通常の投与量は、０．００５～１０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０１～１ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。これを１日１回～数回に分けて投与してもよい。
本発明化合物は、該化合物の活性の増強または該化合物の投与量の低減等を目的として、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤等のアルツハイマー病、アルツハイマー型認知症などを治療する他の薬物（以下、併用薬剤と略記する）と組み合わせて用いることができる。この場合、本発明化合物と併用薬剤の投与時期は限定されず、これらを対象に同時に、または一定間隔で投与してもよい。さらに、本発明化合物および併用薬剤は、各活性成分を含有する２つの異なる組成物として、または両方の活性成分を含有する単一の組成物として投与してもよい。
併用薬剤の用量は、臨床上用いられている用量を基準として適切に選択することができる。さらに、本発明化合物と併用薬剤の配合比は、投与の対象、投与経路、標的疾患、症状、組み合わせ等を考慮して適切に選択することができる。例えば、投与の対象がヒトである場合、本発明化合物１重量部に対し、併用薬剤を０．０１～１００重量部の範囲内で用いることができる。
併用薬剤としては、例えば、塩酸ドネペジル、タクリン、ガランタミン、リバスチグミン、ザナペジル、メマンチン、およびビンポセチン等が挙げられる。
（実施例）
本発明化合物は、該化合物の活性の増強または該化合物の投与量の低減等を目的として、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤等のアルツハイマー病、アルツハイマー型認知症などを治療する他の薬物（以下、併用薬剤と略記する）と組み合わせて用いることができる。この場合、本発明化合物と併用薬剤の投与時期は限定されず、これらを対象に同時に、または一定間隔で投与してもよい。さらに、本発明化合物および併用薬剤は、各活性成分を含有する２つの異なる組成物として、または両方の活性成分を含有する単一の組成物として投与してもよい。
併用薬剤の用量は、臨床上用いられている用量を基準として適切に選択することができる。さらに、本発明化合物と併用薬剤の配合比は、投与の対象、投与経路、標的疾患、症状、組み合わせ等を考慮して適切に選択することができる。例えば、投与の対象がヒトである場合、本発明化合物１重量部に対し、併用薬剤を０．０１～１００重量部の範囲内で用いることができる。
併用薬剤としては、例えば、塩酸ドネペジル、タクリン、ガランタミン、リバスチグミン、ザナペジル、メマンチン、およびビンポセチン等が挙げられる。
（実施例）
【0054】
以下に実施例および試験例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらにより限定されるものではない。
実施例中で用いる略語は以下の意味を表す。
Ａｃ：アセチル
Ｅｔ：エチル
Ｂｚ：ベンゾイル
ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＩＣ：ジイソプロピルカルボジイミド
ｉＰｒ：イソプロピル
Ｍｅ：メチル
Ｐｈ：フェニル
ｔ－Ｂｕ：ｔｅｒｔ－ブチル
ＴＢＳ：ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル
ＡＩＢＮ：アゾビスイソブチロニトリル
ＡＤＤＰ：１，１’－（アゾジカルボニル）ジピペリジン
ＡＩＢＮ：２，２’－アゾビス（イソブチロニトリル）
（Ｂｏｃ）２Ｏ：ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート
ＢＯＭＣＩ：塩化ベンジルクロロメチルエーテルオキシメチル
ＤＡＳＴ：三フッ化Ｎ，Ｎ－ジエチルアミノ硫黄
ＤＢＵ：１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＥＡＤ：アゾジカルボン酸ジエチル
ＤＩＡＤ：アゾジカルボン酸ジイソプロピル
ＤＩＢＡＬ：水素化ジイソブチルアルミニウム
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド
ＤＭＡＰ：４－ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ：１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＨＡＴＵ：Ｏ－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＡｔ：１－ヒドロキシ－７－アザ－ベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ：１－ヒドロキシ－ベンゾトリアゾール
ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド
ＬＨＭＤＳ：リチウムビス（トリメチルシリル）アミド
ｍＣＰＢＡ：ｍ－クロロ過安息香酸
ＮＣＳ：Ｎ－クロロスクシンイミド
ＮＭＰ：Ｎ－メチルピロリドン
ＰＰＴＳ：ピリジニウムｐ－トルエンスルホネート
ＰｙＢＯＰ：１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ－トリ（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＴＥＭＰＯ：２，２，６，６－テトラメチルピペリジン１－オキシルフリーラジカル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＨＰ：２－テトラヒドロピラニル
実施例中で用いる略語は以下の意味を表す。
Ａｃ：アセチル
Ｅｔ：エチル
Ｂｚ：ベンゾイル
ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＩＣ：ジイソプロピルカルボジイミド
ｉＰｒ：イソプロピル
Ｍｅ：メチル
Ｐｈ：フェニル
ｔ－Ｂｕ：ｔｅｒｔ－ブチル
ＴＢＳ：ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル
ＡＩＢＮ：アゾビスイソブチロニトリル
ＡＤＤＰ：１，１’－（アゾジカルボニル）ジピペリジン
ＡＩＢＮ：２，２’－アゾビス（イソブチロニトリル）
（Ｂｏｃ）２Ｏ：ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート
ＢＯＭＣＩ：塩化ベンジルクロロメチルエーテルオキシメチル
ＤＡＳＴ：三フッ化Ｎ，Ｎ－ジエチルアミノ硫黄
ＤＢＵ：１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＥＡＤ：アゾジカルボン酸ジエチル
ＤＩＡＤ：アゾジカルボン酸ジイソプロピル
ＤＩＢＡＬ：水素化ジイソブチルアルミニウム
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド
ＤＭＡＰ：４－ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ：１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＨＡＴＵ：Ｏ－（７－アザ－１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＡｔ：１－ヒドロキシ－７－アザ－ベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ：１－ヒドロキシ－ベンゾトリアゾール
ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド
ＬＨＭＤＳ：リチウムビス（トリメチルシリル）アミド
ｍＣＰＢＡ：ｍ－クロロ過安息香酸
ＮＣＳ：Ｎ－クロロスクシンイミド
ＮＭＰ：Ｎ－メチルピロリドン
ＰＰＴＳ：ピリジニウムｐ－トルエンスルホネート
ＰｙＢＯＰ：１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ－トリ（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＴＥＭＰＯ：２，２，６，６－テトラメチルピペリジン１－オキシルフリーラジカル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＨＰ：２－テトラヒドロピラニル
【0055】
ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｄｖａｎｃｅ ４００ＭＨｚ分光計により記録し、ケミカルシフトは、テトラメチルシランまたは残留溶媒ピーク（ＣＤＣｌ３＝７．２６ｐｐｍ、ＤＭＳＯ－ｄ６＝２．５０ｐｐｍ）に対して示した。
分析ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ ポジティブまたはネガティブ、保持時間（ＲＴ））データは、Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＵＦＬＣまたはＷａｔｅｒｓ ＵＰＬＣシステムを用い、以下の条件で記録した。
メソッドＡ
カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）Ｃ１８（５μｍ、内径４．６×５０ｍｍ）（Ｗａｔｅｒｓ）
流速：３ｍＬ／分
ＵＶ検出波長：２５４ｎｍ
移動相：［Ａ］は０．１％ギ酸溶液であり、［Ｂ］はアセトニトリル溶媒中の０．１％ギ酸である。
グラジエント：溶媒［Ｂ］１０％－１００％のリニアグラジエントを３分間実施し、溶媒［Ｂ］１００％を１分間維持した。
メソッドＢ
カラム：Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ ＸＲ－ＯＤＳ（２．２μｍ、内径５０×３．０ｍｍ）（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）
流速：１．６ｍＬ／分
カラムオーブン：５０℃
ＵＶ検出波長：２５４ｎｍ
移動相：［Ａ］０．１％ギ酸含有水溶液；［Ｂ］０．１％ギ酸含有アセトニトリル溶液
グラジエント：溶媒［Ｂ］１０％－１００％のリニアグラジエントを３分間実施し、溶媒［Ｂ］１００％を１分間維持した。
メソッドＣ
カラム：ＢＥＨ Ｃ１８（１．７μｍ、２．１×５０ｍｍ）（Ｗａｔｅｒｓ）
流速：０．８ｍＬ／分
ＵＶ検出波長：２５４ｎｍ
移動相：［Ａ］は９５％Ｈ２Ｏ＋５％ＣＨ３ＣＮ中で１０ｍＭのＣＨ３ＣＯＯＮＨ４であり、［Ｂ］はアセトニトリルである。
グラジエント：溶媒［Ｂ］５％－９５％のリニアグラジエントを１．３分間実施し、溶媒［Ｂ］９５％を０．７分間維持した。
メソッドＤ
カラム：ＨＳＳ Ｔ３（１．８μｍ、２．１×１００ｍｍ）（Ｗａｔｅｒｓ）
流速：０．７ｍＬ／分
ＵＶ検出波長：２５４ｎｍ
移動相：［Ａ］は９５％Ｈ２Ｏ＋５％ＣＨ３ＣＮ中で１０ｍＭのＣＨ３ＣＯＯＮＨ４であり、［Ｂ］はアセトニトリルである。
グラジエント：溶媒［Ｂ］０％－９５％のリニアグラジエントを２．１分間実施し、溶媒［Ｂ］９５％を０．５分間維持した。
分析ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ ポジティブまたはネガティブ、保持時間（ＲＴ））データは、Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＵＦＬＣまたはＷａｔｅｒｓ ＵＰＬＣシステムを用い、以下の条件で記録した。
メソッドＡ
カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）Ｃ１８（５μｍ、内径４．６×５０ｍｍ）（Ｗａｔｅｒｓ）
流速：３ｍＬ／分
ＵＶ検出波長：２５４ｎｍ
移動相：［Ａ］は０．１％ギ酸溶液であり、［Ｂ］はアセトニトリル溶媒中の０．１％ギ酸である。
グラジエント：溶媒［Ｂ］１０％－１００％のリニアグラジエントを３分間実施し、溶媒［Ｂ］１００％を１分間維持した。
メソッドＢ
カラム：Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ ＸＲ－ＯＤＳ（２．２μｍ、内径５０×３．０ｍｍ）（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）
流速：１．６ｍＬ／分
カラムオーブン：５０℃
ＵＶ検出波長：２５４ｎｍ
移動相：［Ａ］０．１％ギ酸含有水溶液；［Ｂ］０．１％ギ酸含有アセトニトリル溶液
グラジエント：溶媒［Ｂ］１０％－１００％のリニアグラジエントを３分間実施し、溶媒［Ｂ］１００％を１分間維持した。
メソッドＣ
カラム：ＢＥＨ Ｃ１８（１．７μｍ、２．１×５０ｍｍ）（Ｗａｔｅｒｓ）
流速：０．８ｍＬ／分
ＵＶ検出波長：２５４ｎｍ
移動相：［Ａ］は９５％Ｈ２Ｏ＋５％ＣＨ３ＣＮ中で１０ｍＭのＣＨ３ＣＯＯＮＨ４であり、［Ｂ］はアセトニトリルである。
グラジエント：溶媒［Ｂ］５％－９５％のリニアグラジエントを１．３分間実施し、溶媒［Ｂ］９５％を０．７分間維持した。
メソッドＤ
カラム：ＨＳＳ Ｔ３（１．８μｍ、２．１×１００ｍｍ）（Ｗａｔｅｒｓ）
流速：０．７ｍＬ／分
ＵＶ検出波長：２５４ｎｍ
移動相：［Ａ］は９５％Ｈ２Ｏ＋５％ＣＨ３ＣＮ中で１０ｍＭのＣＨ３ＣＯＯＮＨ４であり、［Ｂ］はアセトニトリルである。
グラジエント：溶媒［Ｂ］０％－９５％のリニアグラジエントを２．１分間実施し、溶媒［Ｂ］９５％を０．５分間維持した。
【0056】
（実施例１）
【0057】
化合物Ｉ－００１の合成
工程１：化合物１－２の合成
ガンマ－クロトノラクトン１－１（４．８０ｇ、５７．１ｍｍｏｌ）およびフェニルイソシアネート（１２．４ｍｌ、１１４ｍｍｏｌ）のトルエン（７２ｍｌ）溶液に、２－（２－ニトロエトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン（１５．０ｇ、８６．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．４９９ｍｌ、２．８５ｍｍｏｌ）のトルエン（２４ｍｌ）混合液を１１０℃で加えた。還流温度で３時間撹拌した後、反応混合液にＤＩＰＥＡ（０．４９９ｍｌ、２．８５ｍｍｏｌ）を加えた。還流温度で１時間撹拌した後、反応混合液を室温に冷却した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを２０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－２（６．５０ｇ、２６．９ｍｍｏｌ、４７％）を褐色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.57-1.90 (6H, m), 3.51-3.62 (1H, m), 3.90 (1H, dt, J = 38.1, 9.9 Hz), 4.33-4.48 (2H, m), 4.54-4.79 (4H, m), 5.56-5.49 (1H, m).
工程２：化合物１－３の合成
化合物１－２（６．５０ｇ、２６．９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（６５ｍｌ）溶液に、ＴｓＯＨ－Ｈ２Ｏ（０．５１３ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）を室温で加えた。同じ温度で２時間撹拌した後、Ｅｔ３Ｎ（０．３７３ｍｌ、２．６９ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、次いで減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－３（２．７８ｇ、１７．７ｍｍｏｌ、６６％）を褐色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.38 (1H, br s), 4.44 (1H, d, J = 9.7 Hz), 4.74-4.58 (4H, m), 5.57-5.52 (1H, m).
工程３：化合物１－４の合成
化合物１－３（２．７８ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２８ｍｌ）溶液に、９０％のＤＡＳＴ（３．１２ｍｌ、２１．２ｍｍｏｌ）を－７８℃で加えた。反応混合物を室温で５時間撹拌し、炭酸カリウム水溶液で処理した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を水で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－４（１．５８ｇ、９．９３ｍｍｏｌ、５６％）を褐色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 4.41 (1H, d, J = 9.7 Hz), 4.62 (1H, d, J = 11.3 Hz), 4.69 (1H, dd, J = 11.3, 5.3 Hz), 5.20-5.41 (2H, m), 5.63-5.57 (1H, m).
工程４：化合物１－５の合成
化合物１－４（１．５８ｇ、９．９３ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１２ｍｌ）およびトルエン（２４ｍｌ）溶液に、ＤＩＢＡＬ（１．０２Ｍヘキサン溶液、１０．７ｍｌ、１０．９ｍｍｏｌ）を－７８℃で加えた。同じ温度で３０分間撹拌した後、反応混合物をＭｅＯＨ（１．３３ｍｌ、３２．８ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（２４ｍｌ）およびＨ２Ｏ（０．８８５ｍｌ、４９．２ｍｍｏｌ）に加えた。室温で３０分間撹拌した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－５（８２９ｍｇ、５．１４ｍｍｏｌ、５２％）を黄色の固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.60 (1H, d, J = 2.3 Hz), 3.95 (1H, d, J = 8.9 Hz), 4.25-4.31 (2H, m), 5.15 (1H, dd, J = 18.4, 11.7 Hz), 5.26 (1H, dd, J = 18.4, 11.7 Hz), 5.40-5.36 (1H, m), 5.72 (1H, d, J = 2.1 Hz).
工程５：化合物１－６の合成
化合物１－５（７７０ｍｇ、４．７８ｍｍｏｌ）およびアリルトリメチルシラン（３．８０ｍｌ、２３．９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５ｍｌ）およびＭｅＣＮ（１５ｍｌ）溶液に、ＢＦ３－ＯＥｔ２（３．０３ｍｌ、２３．９ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で１時間撹拌した後、反応を炭酸ナトリウム水溶液でクエンチした。混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－６（７１１ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ、８０％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.25-2.44 (2H, m), 3.74 (1H, d, J = 9.5 Hz), 4.03-4.14 (2H, m), 4.24-4.29 (1H, m), 5.08-5.26 (4H, m), 5.35-5.29 (1H, m), 5.86-5.75 (1H, m).
工程６：化合物１－７の合成
１－ブロモ－２－フルオロベンゼン（１．６８ｇ、９．６０ｍｍｏｌ）のトルエン（２８ｍＬ）およびＴＨＦ（７ｍＬ）溶液に、ｎ－ＢｕＬｉ（１．６４Ｍ ｎ－ヘキサン溶液、５．８５ｍＬ、９．６０ｍｍｏｌ）を－７８℃で加え、同じ温度で１０分間撹拌した。反応混合物に、ＢＦ３－ＯＥｔ２（０．４８７ｍｌ、３．８４ｍｍｏｌ）、および、化合物１－６のトルエン（７ｍＬ）溶液を、－７８℃で加え、同じ温度で１時間撹拌した。反応混合物にＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－７（８８３ｍｇ、３．１４ｍｍｏｌ、８２％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.34 (2H, t, J = 6.7 Hz), 3.23-3.29 (1H, m), 3.96 (2H, d, J = 3.3 Hz), 4.52-4.76 (3H, m), 4.95 (1H, dd, J = 10.4, 47.1 Hz), 5.14 (1H, s), 5.18 (1H, d, J = 5.1 Hz), 5.80-5.93 (1H, m), 6.18 (1H, brs), 7.03-7.12 (1H, m), 7.15-7.20 (1H, m), 7.28-7.34 (1H, m), 7.69 (1H, brs).
工程７：化合物１－８の合成
化合物１－７（８８３ｍｇ、３．１４ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（８．８ｍｌ）溶液に、Ｚｎ（２．０５ｇ、３１．４ｍｍｏｌ）を室温で加えた。６０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を室温に冷却し、炭酸カリウム水溶液をこの混合物に加えた。混合液をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ろ液をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－８（７８３ｍｇ、２．７６ｍｍｏｌ、８８％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.21-2.31 (1H, m), 2.50-2.58 (1H, m), 2.65 (1H, dd, J = 8.5, 4.6 Hz), 3.63-3.73 (2H, m), 3.96 (1H, t, J = 3.3 Hz), 4.34-4.40 (1H, m), 4.50 (1H, dd, J = 47.8, 9.3 Hz), 4.90 (1H, ddd, J = 47.8, 9.3, 2.8 Hz), 5.12 (1H, s), 5.15 (1H, s), 5.84-5.96 (1H, m), 7.09 (1H, dd, J = 12.7, 8.2 Hz), 7.15-7.20 (1H, m), 7.21-7.28 (1H, m), 7.32-7.38 (1H, m), 7.62-7.68 (1H, m).
工程８：化合物１－９の合成
化合物１－８（７８３ｍｇ、２．７６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（７．８ｍｌ）溶液に、ベンゾイルイソチオシアネート（０．４１７ｍｌ、３．０４ｍｍｏｌ）を室温で加えた。同じ温度で１日撹拌した後、反応混合物をＥＤＣ－ＨＣｌ（１．０６ｇ、５．５３ｍｍｏｌ）に加えた。同じ温度で１日撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－９（８６４ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ、７６％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.31-2.40 (1H, m), 2.65-2.73 (1H, m), 3.15 (1H, dd, J = 8.8, 4.2 Hz), 3.86 (1H, dd, J = 10.7, 2.5 Hz), 4.19 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.41-4.47 (1H, m), 4.57-4.61 (1H, m), 4.85 (2H, dt, J = 9.5, 46.6 Hz), 5.22-5.29 (2H, m), 5.87-5.98 (1H, m), 7.14-7.25 (2H, m), 7.33-7.55 (5H, m), 8.27 (2H, d, J = 7.4 Hz), 12.16 (1H, brs).
工程９：化合物１－１０の合成
化合物１－９（８６４ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１７ｍｌ）溶液を、オゾン雰囲気下、－７８℃で撹拌した。同じ温度で２０分間撹拌した後、反応混合物にＰＰｈ３（１．２６ｇ、４．８２ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で加えた。室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物にＭｅＯＨ（８．６ｍｌ）およびＮａＢＨ４（２３８ｍｇ、６．２８ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で２時間撹拌した後、反応混合物にＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１０（８７２ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ、１００％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.87-1.97 (1H, m), 1.99-2.08 (1H, m), 2.29-2.34 (1H, m), 3.11 (1H, dd, J = 9.1, 4.2 Hz), 3.83-3.97 (3H, m), 4.21 (1H, d, J = 10.5 Hz), 4.51 (1H, t, J = 8.8 Hz), 4.58-4.62 (1H, m), 4.86 (2H, ddd, J = 46.7, 20.7, 9.3 Hz), 7.14-7.25 (2H, m), 7.35-7.51 (5H, m), 8.27 (2H, d, J = 7.3 Hz), 12.18 (1H, brs).
工程１０：化合物１－１１の合成
化合物１－１０（８７２ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ３（１．１０ｇ、４．１９ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（２８５ｍｇ、４．１９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１７ｍｌ）溶液に、Ｉ２（１．０６ｇ、４．１９ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。同じ温度で１．５時間撹拌した後、反応混合物にＮａＨＳＯ３水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１１（９１１ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ、８３％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.12-2.29 (2H, m), 3.04 (1H, dd, J = 8.7, 4.4 Hz), 3.29 (1H, q, J = 8.7 Hz), 3.38-3.44 (1H, m), 3.86 (1H, dd, J = 10.8, 2.2 Hz), 4.20 (1H, d, J = 10.8 Hz), 4.37 (1H, t, J = 8.7 Hz), 4.59-4.63 (1H, m), 4.85 (2H, ddd, J = 46.7, 22.6, 9.5 Hz), 7.13-7.26 (2H, m), 7.33-7.56 (5H, m), 8.28 (2H, d, J = 7.5 Hz), 12.18 (1H, brs).
工程１１：化合物１－１２の合成
ＫＯｔＢｕ（１．０Ｍ ＴＨＦ溶液、６．９２ｍｌ、６．９２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９ｍｌ）溶液に、化合物１－１１（９１１ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９ｍｌ）混合液を０℃で加えた。同じ温度で３０分間撹拌した後、反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液で処理し、水層をＡｃＯＥｔで抽出した。合わせた有機層をＨ２Ｏおよび食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、化合物１－１２（６７７ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ、９８％）を白色固体として得、精製することなしに次工程に使用した。
1H NMR (CDCl3) δ: 3.07 (1H, dd, J = 9.6, 4.1 Hz), 4.02 (1H, dd, J = 10.7, 2.9 Hz), 4.24 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.61-5.00 (4H, m), 5.42 (1H, d, J = 10.2 Hz), 5.54 (1H, d, J = 16.9 Hz), 5.91-6.01 (1H, m), 7.13-7.25 (2H, m), 7.34-7.56 (5H, m), 8.29 (2H, d, J = 7.5 Hz), 12.23 (1H, brs).
工程１２：化合物１－１３の合成
化合物１－１２（４５２ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２３ｍｌ）溶液を、オゾン雰囲気下、－７８℃で撹拌した。同じ温度で２０分間撹拌した後、反応混合物にＰＰｈ３（６８４ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で加えた。室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物にＭｅＯＨ（１１ｍｌ）およびＮａＢＨ４（１２９ｍｇ、３．４０ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で１．５時間撹拌した後、反応混合物にＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１３（４５７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、１００％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.98 (1H, dd, J = 5.4, 7.8 Hz), 3.50 (1H, dd, J = 8.9, 4.3 Hz), 3.70-3.78 (1H, m), 3.92 (1H, dd, J = 10.5, 2.4 Hz), 3.99-4.05 (1H, m), 4.24 (1H, d, J = 10.5 Hz), 4.46-4.40 (1H, m), 4.65 (1H, t, J = 3.2 Hz), 4.86 (2H, ddd, J = 10.2, 12.5, 47.2 Hz), 7.14-7.25 (2H, m), 7.34-7.52 (5H, m), 8.27 (2H, d, J = 7.4 Hz), 12.17 (1H, brs).
工程１３：化合物１－１４の合成
化合物１－１３（４５７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ３（５９６ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（１５５ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９ｍｌ）溶液に、Ｉ２（５７６ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物にＮａＨＳＯ３水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１４（４１８ｍｇ、０．８１６ｍｍｏｌ、７２％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 3.42 (1H, dd, J = 8.6, 4.2 Hz), 3.51 (1H, dd, J = 11.5, 2.8 Hz), 3.78 (1H, dd, J = 11.5, 2.8 Hz), 4.06-4.16 (2H, m), 4.21 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.62-5.01 (3H, m), 7.17-7.27 (2H, m), 7.35-7.57 (5H, m), 8.27 (2H, d, J = 6.8 Hz), 12.19 (1H, brs).
工程１４：化合物１－１５の合成
化合物１－１４（４１８ｍｇ、０．８１６ｍｍｏｌ）のトルエン（４ｍｌ）溶液に、Ｂｕ３ＳｎＨ（０．２６３ｍｌ、０．９７９ｍｍｏｌ）およびＡＩＢＮ（６．７０ｍｇ、０．０４１０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。８０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１５（２８０ｍｇ、０．７２５ｍｍｏｌ、８９％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.48 (3H, d, J = 5.9 Hz), 2.89 (1H, dd, J = 9.2, 4.1 Hz), 3.98 (1H, dd, J = 10.8, 2.9 Hz), 4.17 (1H, d, J = 10.8 Hz), 4.35-4.44 (1H, m), 4.61 (1H, t, J = 3.5 Hz), 4.79 (1H, dd, J = 10.0, 46.5 Hz), 4.94 (1H, dd, J = 10.0, 46.5 Hz), 7.13-7.26 (2H, m), 7.34-7.55 (5H, m), 8.28 (2H, d, J = 7.4 Hz), 12.18 (1H, brs).
工程１５：化合物１－１６の合成
化合物１－１５（２８０ｍｇ、０．７２５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３ｍｌ）およびＴＨＦ（３ｍｌ）溶液に、ヒドラジン水和物（０．３５２ｍｌ、７．２５ｍｍｏｌ）を室温で加えた。同じ温度で１４時間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを４０％から６０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１６（２０５ｍｇ、０．７２５ｍｍｏｌ、１００％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.44 (3H, d, J = 5.9 Hz), 2.77 (1H, dd, J = 8.9, 4.4 Hz), 3.81-3.88 (2H, m), 4.24-4.37 (3H, m), 4.54-4.76 (2H, m), 7.06 (1H, dd, J = 12.5, 8.2 Hz), 7.20-7.15 (1H, m), 7.27-7.33 (1H, m), 7.42-7.47 (1H, m).
工程１６：化合物１－１８の合成
化合物１－１６（２０５ｍｇ、０．７２５ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（３ｍｌ）溶液に、硫酸（０．７７４ｍｌ、１４．５ｍｍｏｌ）を－８℃で加えた。同じ温度で５分間撹拌した後、反応混合物にＨＮＯ３（０．０４９０ｍｌ、１．０９ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で１０分間撹拌した後、反応混合物をＫ２ＣＯ３水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、化合物１－１７を白色アモルファスとして得、精製することなしに次工程に使用した。
化合物１－１７および１０％Ｐｄ－Ｃ（２４５ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２ｍｌ）溶液を、Ｈ２雰囲気下、室温で撹拌した。同じ温度で２時間撹拌した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ、４０％のイソプロピルアルコール（０．１％のジエチルアミンを含む））により精製して、化合物１－１８（７８．０ｍｇ、０．２６２ｍｍｏｌ、３６％）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.42 (3H, d, J = 6.0 Hz), 2.75 (1H, dd, J = 9.0, 4.2 Hz), 3.61 (1H, brs), 3.84 (2H, dd, J = 14.2, 10.4 Hz), 4.25-4.34 (1H, m), 4.34-4.37 (1H, m), 4.50-4.74 (2H, m), 6.59-6.53 (1H, m), 6.72 (1H, dd, J = 6.7, 2.9 Hz), 6.85 (1H, dd, J = 11.9, 8.6 Hz).
工程１７：化合物Ｉ－００１の合成
化合物１－１８（１０．０ｍｇ、０．０３４０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（０．６６ｍｌ）溶液に、５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（５．７９ｍｇ、０．０３４０ｍｍｏｌ）および２ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ（０．０１６８ｍｌ、０．０３４０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物に、ＥＤＣ－ＨＣｌ（９．８６ｍｇ、０．０３７０ｍｍｏｌ）を同じ温度で加えた。３０分間撹拌した後、反応混合物をＮａＨＣＯ３水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮して化合物Ｉ－００１（１０．０ｍｇ、０．０２２０ｍｍｏｌ、６６％）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.45 (3H, d, J = 6.0 Hz), 2.80 (1H, dd, J = 8.7, 4.1 Hz), 3.87 (2H, s), 4.29-4.42 (2H, m), 4.59 (1H, dd, J = 13.8, 8.7 Hz), 4.71 (1H, dd, J = 13.8, 8.7 Hz), 6.15 (2H, dd, J = 51.2, 5.0 Hz), 7.12 (1H, dd, J = 11.6, 9.0 Hz), 7.48-7.53 (1H, m), 8.03-7.98 (1H, m), 8.30 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.52 (1H, s).
【化39】
工程１：化合物１－２の合成
ガンマ－クロトノラクトン１－１（４．８０ｇ、５７．１ｍｍｏｌ）およびフェニルイソシアネート（１２．４ｍｌ、１１４ｍｍｏｌ）のトルエン（７２ｍｌ）溶液に、２－（２－ニトロエトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン（１５．０ｇ、８６．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．４９９ｍｌ、２．８５ｍｍｏｌ）のトルエン（２４ｍｌ）混合液を１１０℃で加えた。還流温度で３時間撹拌した後、反応混合液にＤＩＰＥＡ（０．４９９ｍｌ、２．８５ｍｍｏｌ）を加えた。還流温度で１時間撹拌した後、反応混合液を室温に冷却した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを２０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－２（６．５０ｇ、２６．９ｍｍｏｌ、４７％）を褐色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.57-1.90 (6H, m), 3.51-3.62 (1H, m), 3.90 (1H, dt, J = 38.1, 9.9 Hz), 4.33-4.48 (2H, m), 4.54-4.79 (4H, m), 5.56-5.49 (1H, m).
工程２：化合物１－３の合成
化合物１－２（６．５０ｇ、２６．９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（６５ｍｌ）溶液に、ＴｓＯＨ－Ｈ２Ｏ（０．５１３ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）を室温で加えた。同じ温度で２時間撹拌した後、Ｅｔ３Ｎ（０．３７３ｍｌ、２．６９ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、次いで減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－３（２．７８ｇ、１７．７ｍｍｏｌ、６６％）を褐色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.38 (1H, br s), 4.44 (1H, d, J = 9.7 Hz), 4.74-4.58 (4H, m), 5.57-5.52 (1H, m).
工程３：化合物１－４の合成
化合物１－３（２．７８ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２８ｍｌ）溶液に、９０％のＤＡＳＴ（３．１２ｍｌ、２１．２ｍｍｏｌ）を－７８℃で加えた。反応混合物を室温で５時間撹拌し、炭酸カリウム水溶液で処理した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を水で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－４（１．５８ｇ、９．９３ｍｍｏｌ、５６％）を褐色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 4.41 (1H, d, J = 9.7 Hz), 4.62 (1H, d, J = 11.3 Hz), 4.69 (1H, dd, J = 11.3, 5.3 Hz), 5.20-5.41 (2H, m), 5.63-5.57 (1H, m).
工程４：化合物１－５の合成
化合物１－４（１．５８ｇ、９．９３ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１２ｍｌ）およびトルエン（２４ｍｌ）溶液に、ＤＩＢＡＬ（１．０２Ｍヘキサン溶液、１０．７ｍｌ、１０．９ｍｍｏｌ）を－７８℃で加えた。同じ温度で３０分間撹拌した後、反応混合物をＭｅＯＨ（１．３３ｍｌ、３２．８ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（２４ｍｌ）およびＨ２Ｏ（０．８８５ｍｌ、４９．２ｍｍｏｌ）に加えた。室温で３０分間撹拌した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－５（８２９ｍｇ、５．１４ｍｍｏｌ、５２％）を黄色の固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.60 (1H, d, J = 2.3 Hz), 3.95 (1H, d, J = 8.9 Hz), 4.25-4.31 (2H, m), 5.15 (1H, dd, J = 18.4, 11.7 Hz), 5.26 (1H, dd, J = 18.4, 11.7 Hz), 5.40-5.36 (1H, m), 5.72 (1H, d, J = 2.1 Hz).
工程５：化合物１－６の合成
化合物１－５（７７０ｍｇ、４．７８ｍｍｏｌ）およびアリルトリメチルシラン（３．８０ｍｌ、２３．９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５ｍｌ）およびＭｅＣＮ（１５ｍｌ）溶液に、ＢＦ３－ＯＥｔ２（３．０３ｍｌ、２３．９ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で１時間撹拌した後、反応を炭酸ナトリウム水溶液でクエンチした。混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－６（７１１ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ、８０％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.25-2.44 (2H, m), 3.74 (1H, d, J = 9.5 Hz), 4.03-4.14 (2H, m), 4.24-4.29 (1H, m), 5.08-5.26 (4H, m), 5.35-5.29 (1H, m), 5.86-5.75 (1H, m).
工程６：化合物１－７の合成
１－ブロモ－２－フルオロベンゼン（１．６８ｇ、９．６０ｍｍｏｌ）のトルエン（２８ｍＬ）およびＴＨＦ（７ｍＬ）溶液に、ｎ－ＢｕＬｉ（１．６４Ｍ ｎ－ヘキサン溶液、５．８５ｍＬ、９．６０ｍｍｏｌ）を－７８℃で加え、同じ温度で１０分間撹拌した。反応混合物に、ＢＦ３－ＯＥｔ２（０．４８７ｍｌ、３．８４ｍｍｏｌ）、および、化合物１－６のトルエン（７ｍＬ）溶液を、－７８℃で加え、同じ温度で１時間撹拌した。反応混合物にＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－７（８８３ｍｇ、３．１４ｍｍｏｌ、８２％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.34 (2H, t, J = 6.7 Hz), 3.23-3.29 (1H, m), 3.96 (2H, d, J = 3.3 Hz), 4.52-4.76 (3H, m), 4.95 (1H, dd, J = 10.4, 47.1 Hz), 5.14 (1H, s), 5.18 (1H, d, J = 5.1 Hz), 5.80-5.93 (1H, m), 6.18 (1H, brs), 7.03-7.12 (1H, m), 7.15-7.20 (1H, m), 7.28-7.34 (1H, m), 7.69 (1H, brs).
工程７：化合物１－８の合成
化合物１－７（８８３ｍｇ、３．１４ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（８．８ｍｌ）溶液に、Ｚｎ（２．０５ｇ、３１．４ｍｍｏｌ）を室温で加えた。６０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を室温に冷却し、炭酸カリウム水溶液をこの混合物に加えた。混合液をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ろ液をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－８（７８３ｍｇ、２．７６ｍｍｏｌ、８８％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.21-2.31 (1H, m), 2.50-2.58 (1H, m), 2.65 (1H, dd, J = 8.5, 4.6 Hz), 3.63-3.73 (2H, m), 3.96 (1H, t, J = 3.3 Hz), 4.34-4.40 (1H, m), 4.50 (1H, dd, J = 47.8, 9.3 Hz), 4.90 (1H, ddd, J = 47.8, 9.3, 2.8 Hz), 5.12 (1H, s), 5.15 (1H, s), 5.84-5.96 (1H, m), 7.09 (1H, dd, J = 12.7, 8.2 Hz), 7.15-7.20 (1H, m), 7.21-7.28 (1H, m), 7.32-7.38 (1H, m), 7.62-7.68 (1H, m).
工程８：化合物１－９の合成
化合物１－８（７８３ｍｇ、２．７６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（７．８ｍｌ）溶液に、ベンゾイルイソチオシアネート（０．４１７ｍｌ、３．０４ｍｍｏｌ）を室温で加えた。同じ温度で１日撹拌した後、反応混合物をＥＤＣ－ＨＣｌ（１．０６ｇ、５．５３ｍｍｏｌ）に加えた。同じ温度で１日撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－９（８６４ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ、７６％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.31-2.40 (1H, m), 2.65-2.73 (1H, m), 3.15 (1H, dd, J = 8.8, 4.2 Hz), 3.86 (1H, dd, J = 10.7, 2.5 Hz), 4.19 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.41-4.47 (1H, m), 4.57-4.61 (1H, m), 4.85 (2H, dt, J = 9.5, 46.6 Hz), 5.22-5.29 (2H, m), 5.87-5.98 (1H, m), 7.14-7.25 (2H, m), 7.33-7.55 (5H, m), 8.27 (2H, d, J = 7.4 Hz), 12.16 (1H, brs).
工程９：化合物１－１０の合成
化合物１－９（８６４ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１７ｍｌ）溶液を、オゾン雰囲気下、－７８℃で撹拌した。同じ温度で２０分間撹拌した後、反応混合物にＰＰｈ３（１．２６ｇ、４．８２ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で加えた。室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物にＭｅＯＨ（８．６ｍｌ）およびＮａＢＨ４（２３８ｍｇ、６．２８ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で２時間撹拌した後、反応混合物にＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１０（８７２ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ、１００％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.87-1.97 (1H, m), 1.99-2.08 (1H, m), 2.29-2.34 (1H, m), 3.11 (1H, dd, J = 9.1, 4.2 Hz), 3.83-3.97 (3H, m), 4.21 (1H, d, J = 10.5 Hz), 4.51 (1H, t, J = 8.8 Hz), 4.58-4.62 (1H, m), 4.86 (2H, ddd, J = 46.7, 20.7, 9.3 Hz), 7.14-7.25 (2H, m), 7.35-7.51 (5H, m), 8.27 (2H, d, J = 7.3 Hz), 12.18 (1H, brs).
工程１０：化合物１－１１の合成
化合物１－１０（８７２ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ３（１．１０ｇ、４．１９ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（２８５ｍｇ、４．１９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１７ｍｌ）溶液に、Ｉ２（１．０６ｇ、４．１９ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。同じ温度で１．５時間撹拌した後、反応混合物にＮａＨＳＯ３水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１１（９１１ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ、８３％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.12-2.29 (2H, m), 3.04 (1H, dd, J = 8.7, 4.4 Hz), 3.29 (1H, q, J = 8.7 Hz), 3.38-3.44 (1H, m), 3.86 (1H, dd, J = 10.8, 2.2 Hz), 4.20 (1H, d, J = 10.8 Hz), 4.37 (1H, t, J = 8.7 Hz), 4.59-4.63 (1H, m), 4.85 (2H, ddd, J = 46.7, 22.6, 9.5 Hz), 7.13-7.26 (2H, m), 7.33-7.56 (5H, m), 8.28 (2H, d, J = 7.5 Hz), 12.18 (1H, brs).
工程１１：化合物１－１２の合成
ＫＯｔＢｕ（１．０Ｍ ＴＨＦ溶液、６．９２ｍｌ、６．９２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９ｍｌ）溶液に、化合物１－１１（９１１ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９ｍｌ）混合液を０℃で加えた。同じ温度で３０分間撹拌した後、反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液で処理し、水層をＡｃＯＥｔで抽出した。合わせた有機層をＨ２Ｏおよび食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、化合物１－１２（６７７ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ、９８％）を白色固体として得、精製することなしに次工程に使用した。
1H NMR (CDCl3) δ: 3.07 (1H, dd, J = 9.6, 4.1 Hz), 4.02 (1H, dd, J = 10.7, 2.9 Hz), 4.24 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.61-5.00 (4H, m), 5.42 (1H, d, J = 10.2 Hz), 5.54 (1H, d, J = 16.9 Hz), 5.91-6.01 (1H, m), 7.13-7.25 (2H, m), 7.34-7.56 (5H, m), 8.29 (2H, d, J = 7.5 Hz), 12.23 (1H, brs).
工程１２：化合物１－１３の合成
化合物１－１２（４５２ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２３ｍｌ）溶液を、オゾン雰囲気下、－７８℃で撹拌した。同じ温度で２０分間撹拌した後、反応混合物にＰＰｈ３（６８４ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下で加えた。室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物にＭｅＯＨ（１１ｍｌ）およびＮａＢＨ４（１２９ｍｇ、３．４０ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で１．５時間撹拌した後、反応混合物にＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１３（４５７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、１００％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.98 (1H, dd, J = 5.4, 7.8 Hz), 3.50 (1H, dd, J = 8.9, 4.3 Hz), 3.70-3.78 (1H, m), 3.92 (1H, dd, J = 10.5, 2.4 Hz), 3.99-4.05 (1H, m), 4.24 (1H, d, J = 10.5 Hz), 4.46-4.40 (1H, m), 4.65 (1H, t, J = 3.2 Hz), 4.86 (2H, ddd, J = 10.2, 12.5, 47.2 Hz), 7.14-7.25 (2H, m), 7.34-7.52 (5H, m), 8.27 (2H, d, J = 7.4 Hz), 12.17 (1H, brs).
工程１３：化合物１－１４の合成
化合物１－１３（４５７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ３（５９６ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（１５５ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９ｍｌ）溶液に、Ｉ２（５７６ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物にＮａＨＳＯ３水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１４（４１８ｍｇ、０．８１６ｍｍｏｌ、７２％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 3.42 (1H, dd, J = 8.6, 4.2 Hz), 3.51 (1H, dd, J = 11.5, 2.8 Hz), 3.78 (1H, dd, J = 11.5, 2.8 Hz), 4.06-4.16 (2H, m), 4.21 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.62-5.01 (3H, m), 7.17-7.27 (2H, m), 7.35-7.57 (5H, m), 8.27 (2H, d, J = 6.8 Hz), 12.19 (1H, brs).
工程１４：化合物１－１５の合成
化合物１－１４（４１８ｍｇ、０．８１６ｍｍｏｌ）のトルエン（４ｍｌ）溶液に、Ｂｕ３ＳｎＨ（０．２６３ｍｌ、０．９７９ｍｍｏｌ）およびＡＩＢＮ（６．７０ｍｇ、０．０４１０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。８０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１５（２８０ｍｇ、０．７２５ｍｍｏｌ、８９％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.48 (3H, d, J = 5.9 Hz), 2.89 (1H, dd, J = 9.2, 4.1 Hz), 3.98 (1H, dd, J = 10.8, 2.9 Hz), 4.17 (1H, d, J = 10.8 Hz), 4.35-4.44 (1H, m), 4.61 (1H, t, J = 3.5 Hz), 4.79 (1H, dd, J = 10.0, 46.5 Hz), 4.94 (1H, dd, J = 10.0, 46.5 Hz), 7.13-7.26 (2H, m), 7.34-7.55 (5H, m), 8.28 (2H, d, J = 7.4 Hz), 12.18 (1H, brs).
工程１５：化合物１－１６の合成
化合物１－１５（２８０ｍｇ、０．７２５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３ｍｌ）およびＴＨＦ（３ｍｌ）溶液に、ヒドラジン水和物（０．３５２ｍｌ、７．２５ｍｍｏｌ）を室温で加えた。同じ温度で１４時間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを４０％から６０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１－１６（２０５ｍｇ、０．７２５ｍｍｏｌ、１００％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.44 (3H, d, J = 5.9 Hz), 2.77 (1H, dd, J = 8.9, 4.4 Hz), 3.81-3.88 (2H, m), 4.24-4.37 (3H, m), 4.54-4.76 (2H, m), 7.06 (1H, dd, J = 12.5, 8.2 Hz), 7.20-7.15 (1H, m), 7.27-7.33 (1H, m), 7.42-7.47 (1H, m).
工程１６：化合物１－１８の合成
化合物１－１６（２０５ｍｇ、０．７２５ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（３ｍｌ）溶液に、硫酸（０．７７４ｍｌ、１４．５ｍｍｏｌ）を－８℃で加えた。同じ温度で５分間撹拌した後、反応混合物にＨＮＯ３（０．０４９０ｍｌ、１．０９ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で１０分間撹拌した後、反応混合物をＫ２ＣＯ３水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、化合物１－１７を白色アモルファスとして得、精製することなしに次工程に使用した。
化合物１－１７および１０％Ｐｄ－Ｃ（２４５ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２ｍｌ）溶液を、Ｈ２雰囲気下、室温で撹拌した。同じ温度で２時間撹拌した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ、４０％のイソプロピルアルコール（０．１％のジエチルアミンを含む））により精製して、化合物１－１８（７８．０ｍｇ、０．２６２ｍｍｏｌ、３６％）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.42 (3H, d, J = 6.0 Hz), 2.75 (1H, dd, J = 9.0, 4.2 Hz), 3.61 (1H, brs), 3.84 (2H, dd, J = 14.2, 10.4 Hz), 4.25-4.34 (1H, m), 4.34-4.37 (1H, m), 4.50-4.74 (2H, m), 6.59-6.53 (1H, m), 6.72 (1H, dd, J = 6.7, 2.9 Hz), 6.85 (1H, dd, J = 11.9, 8.6 Hz).
工程１７：化合物Ｉ－００１の合成
化合物１－１８（１０．０ｍｇ、０．０３４０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（０．６６ｍｌ）溶液に、５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（５．７９ｍｇ、０．０３４０ｍｍｏｌ）および２ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ（０．０１６８ｍｌ、０．０３４０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物に、ＥＤＣ－ＨＣｌ（９．８６ｍｇ、０．０３７０ｍｍｏｌ）を同じ温度で加えた。３０分間撹拌した後、反応混合物をＮａＨＣＯ３水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮して化合物Ｉ－００１（１０．０ｍｇ、０．０２２０ｍｍｏｌ、６６％）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.45 (3H, d, J = 6.0 Hz), 2.80 (1H, dd, J = 8.7, 4.1 Hz), 3.87 (2H, s), 4.29-4.42 (2H, m), 4.59 (1H, dd, J = 13.8, 8.7 Hz), 4.71 (1H, dd, J = 13.8, 8.7 Hz), 6.15 (2H, dd, J = 51.2, 5.0 Hz), 7.12 (1H, dd, J = 11.6, 9.0 Hz), 7.48-7.53 (1H, m), 8.03-7.98 (1H, m), 8.30 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.52 (1H, s).
【0058】
（実施例２）
【0059】
化合物Ｉ－００２の合成
工程１：化合物２－３の合成
化合物１－１２（２００ｍｇ、０．５０２ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ－Ｃ（２０３ｍｇ、０．０９００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍｌ）溶液を、Ｈ２雰囲気下、室温で撹拌した。同じ温度で３時間撹拌した後、反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して、化合物２－２を白色アモルファスとして得、精製することなしに次工程に使用した。
化合物２－２のＥｔＯＨ（４ｍｌ）溶液に、ヒドラジン水和物（０．２４４ｍｌ、５．０２ｍｍｏｌ）を室温で加えた。５０℃で３０分間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを５０％から６０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物２－３（１２４ｍｇ、０．４１８ｍｍｏｌ、８３％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.07 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.52-1.63 (1H, m), 1.78-1.90 (1H, m), 2.89 (1H, dd, J = 8.7, 4.4 Hz), 3.73 (1H, dd, J = 10.3, 2.0 Hz), 3.87 (1H, d, J = 10.3 Hz), 4.14-4.20 (1H, m), 4.27-4.30 (1H, m), 4.33 (1H, brs), 4.57 (1H, dd, J = 16.3, 8.9 Hz), 4.69 (1H, dd, J = 16.3, 8.9 Hz), 7.06 (1H, dd, J = 12.5, 7.9 Hz), 7.17 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.27-7.33 (1H, m), 7.44 (1H, t, J = 7.9 Hz).
工程２：化合物２－５の合成
化合物２－３（１２４ｍｇ、０．４１８ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（１．８ｍｌ）溶液に、硫酸（０．４４６ｍｌ、８．３７ｍｍｏｌ）を－８℃で加えた。同じ温度で５分間撹拌した後、反応混合物にＨＮＯ３（０．０２８０ｍｌ、０．６２８ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で１０分間撹拌した後、反応混合物をＫ２ＣＯ３水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して、化合物２－４を白色アモルファスとして得、精製することなしに次工程に使用した。
化合物２－４および１０％Ｐｄ－Ｃ（１４１ｍｇ、０．０６３０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（６ｍｌ）溶液を、Ｈ２雰囲気下、室温で撹拌した。同じ温度で２時間撹拌した後、反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ、４０％のイソプロピルアルコール（０．１％のジエチルアミンを含む））により精製して、化合物２－５（５２．０ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ、４０％）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.06 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.51-1.63 (1H, m), 1.77-1.89 (1H, m), 2.87 (1H, dd, J = 8.7, 4.3 Hz), 3.62 (1H, brs), 3.74 (1H, dd, J = 10.2, 2.2 Hz), 3.87 (1H, d, J = 10.2 Hz), 4.11-4.18 (1H, m), 4.33-4.37 (1H, m), 4.54 (1H, dd, J = 25.9, 8.7 Hz), 4.66 (1H, dd, J = 25.9, 8.7 Hz), 6.59-6.54 (1H, m), 6.72 (1H, dd, J = 6.7, 2.9 Hz), 6.84 (1H, dd, J = 11.9, 8.5 Hz).
工程３：化合物Ｉ－００２の合成
化合物２－５（１７．０ｍｇ、０．０５５０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１ｍｌ）溶液に、５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（９．４０ｍｇ、０．０５５０ｍｍｏｌ）および２ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ（０．０２７３ｍＬ、０．０５５０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物に、ＥＤＣ－ＨＣｌ（１６．０ｍｇ、０．０６００ｍｍｏｌ）を同じ温度で加えた。１時間撹拌した後、反応混合物をＮａＨＣＯ３水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮して化合物Ｉ－００２（２０．０ｍｇ、０．０４３０ｍｍｏｌ、７９％）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.08 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.78-1.90 (1H, m), 2.90-2.96 (1H, m), 3.76 (1H, dd, J = 10.3, 2.1 Hz), 3.90 (1H, d, J = 10.3 Hz), 4.17 (1H, t, J = 8.5 Hz), 4.35-4.39 (1H, m), 4.63 (2H, d, J = 47.1 Hz), 6.15 (2H, dd, J = 51.2, 5.0 Hz), 7.11 (1H, dd, J = 11.6, 8.8 Hz), 7.47-7.51 (1H, m), 7.98-8.03 (1H, m), 8.29 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.51 (1H, s).
【化40】
工程１：化合物２－３の合成
化合物１－１２（２００ｍｇ、０．５０２ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ－Ｃ（２０３ｍｇ、０．０９００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍｌ）溶液を、Ｈ２雰囲気下、室温で撹拌した。同じ温度で３時間撹拌した後、反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して、化合物２－２を白色アモルファスとして得、精製することなしに次工程に使用した。
化合物２－２のＥｔＯＨ（４ｍｌ）溶液に、ヒドラジン水和物（０．２４４ｍｌ、５．０２ｍｍｏｌ）を室温で加えた。５０℃で３０分間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを５０％から６０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物２－３（１２４ｍｇ、０．４１８ｍｍｏｌ、８３％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.07 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.52-1.63 (1H, m), 1.78-1.90 (1H, m), 2.89 (1H, dd, J = 8.7, 4.4 Hz), 3.73 (1H, dd, J = 10.3, 2.0 Hz), 3.87 (1H, d, J = 10.3 Hz), 4.14-4.20 (1H, m), 4.27-4.30 (1H, m), 4.33 (1H, brs), 4.57 (1H, dd, J = 16.3, 8.9 Hz), 4.69 (1H, dd, J = 16.3, 8.9 Hz), 7.06 (1H, dd, J = 12.5, 7.9 Hz), 7.17 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.27-7.33 (1H, m), 7.44 (1H, t, J = 7.9 Hz).
工程２：化合物２－５の合成
化合物２－３（１２４ｍｇ、０．４１８ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（１．８ｍｌ）溶液に、硫酸（０．４４６ｍｌ、８．３７ｍｍｏｌ）を－８℃で加えた。同じ温度で５分間撹拌した後、反応混合物にＨＮＯ３（０．０２８０ｍｌ、０．６２８ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で１０分間撹拌した後、反応混合物をＫ２ＣＯ３水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して、化合物２－４を白色アモルファスとして得、精製することなしに次工程に使用した。
化合物２－４および１０％Ｐｄ－Ｃ（１４１ｍｇ、０．０６３０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（６ｍｌ）溶液を、Ｈ２雰囲気下、室温で撹拌した。同じ温度で２時間撹拌した後、反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ、４０％のイソプロピルアルコール（０．１％のジエチルアミンを含む））により精製して、化合物２－５（５２．０ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ、４０％）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.06 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.51-1.63 (1H, m), 1.77-1.89 (1H, m), 2.87 (1H, dd, J = 8.7, 4.3 Hz), 3.62 (1H, brs), 3.74 (1H, dd, J = 10.2, 2.2 Hz), 3.87 (1H, d, J = 10.2 Hz), 4.11-4.18 (1H, m), 4.33-4.37 (1H, m), 4.54 (1H, dd, J = 25.9, 8.7 Hz), 4.66 (1H, dd, J = 25.9, 8.7 Hz), 6.59-6.54 (1H, m), 6.72 (1H, dd, J = 6.7, 2.9 Hz), 6.84 (1H, dd, J = 11.9, 8.5 Hz).
工程３：化合物Ｉ－００２の合成
化合物２－５（１７．０ｍｇ、０．０５５０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１ｍｌ）溶液に、５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（９．４０ｍｇ、０．０５５０ｍｍｏｌ）および２ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ（０．０２７３ｍＬ、０．０５５０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物に、ＥＤＣ－ＨＣｌ（１６．０ｍｇ、０．０６００ｍｍｏｌ）を同じ温度で加えた。１時間撹拌した後、反応混合物をＮａＨＣＯ３水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮して化合物Ｉ－００２（２０．０ｍｇ、０．０４３０ｍｍｏｌ、７９％）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.08 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.78-1.90 (1H, m), 2.90-2.96 (1H, m), 3.76 (1H, dd, J = 10.3, 2.1 Hz), 3.90 (1H, d, J = 10.3 Hz), 4.17 (1H, t, J = 8.5 Hz), 4.35-4.39 (1H, m), 4.63 (2H, d, J = 47.1 Hz), 6.15 (2H, dd, J = 51.2, 5.0 Hz), 7.11 (1H, dd, J = 11.6, 8.8 Hz), 7.47-7.51 (1H, m), 7.98-8.03 (1H, m), 8.29 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.51 (1H, s).
【0060】
（実施例３）
【0061】
化合物Ｉ－００３の合成
Ｉ－００３の合成では、ラセミ体３－１を使用し、したがって化合物３－２は４つのジアステレオマーの混合物だった。２つのジアステレオマーを、工程３でシリカゲルクロメートによって分離することができ、そのため、化合物３－３はエナンチオマー混合物だった。
工程１：化合物３－２の合成
５－メチルフラン－２（５Ｈ）－オン３－１（ラセミ体）（１０．０ｇ、１０２ｍｍｏｌ）およびフェニルイソシアネート（２２．２ｍｌ、２０４ｍｍｏｌ）のトルエン（１５０ｍｌ）溶液に、２－（２－ニトロエトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン（２６．８ｇ、１５３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．８９０ｍｌ、５．１０ｍｍｏｌ）のトルエン（５０ｍｌ）混合液を１１０℃で加えた。還流温度で３時間撹拌した後、反応混合液を室温に冷却した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを２０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、不純物を含有する化合物３－２（４つのジアステレオマーの混合物）（１４．４ｇ、５６．４ｍｍｏｌ、５５％）を褐色の油状物として得た。
工程２：化合物３－３の合成
化合物３－２（１４．４ｇ、５６．４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４３ｍｌ）溶液に、ＰＰＴＳ（２．８４ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）を室温で加えた。６０℃で３．５時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを５０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－３（エナンチオマー混合物）（３．６９ｇ、２１．６ｍｍｏｌ、３８％）を褐色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.51 (3H, d, J = 6.8 Hz), 2.52-2.58 (1H, m), 4.50 (1H, d, J = 9.5 Hz), 4.60-4.64 (2H, m), 4.82 (1H, dq, J = 2.0, 6.8 Hz), 5.09 (1H, dd, J = 9.5, 2.0 Hz).
工程３：化合物３－４の合成
化合物３－３（３．６９ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３７ｍｌ）溶液に、９０％のＤＡＳＴ（３．８０ｍｌ、２５．９ｍｍｏｌ）を－７８℃で加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、炭酸カリウム水溶液で処理した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を水で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを２０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－４（３．３１ｇ、１９．１ｍｍｏｌ、８９％）を黄色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.51 (3H, d, J = 6.8 Hz), 4.46 (1H, dd, J = 9.5, 1.6 Hz), 4.80-4.86 (1H, m), 5.16 (1H, d, J = 9.5 Hz), 5.24 (1H, dd, J = 19.3, 11.5 Hz), 5.36 (1H, dd, J = 19.3, 11.5 Hz).
工程４：化合物３－５の合成
化合物３－４（３．３１ｇ、１９．１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（６６ｍｌ）溶液に、ＤＩＢＡＬ（１．０２Ｍ ヘキサン溶液、２２．５ｍｌ、２２．９ｍｍｏｌ）を－７８℃で加えた。同じ温度で２０分間撹拌した後、反応混合物にロッシェル塩水溶液を加えた。室温で３時間撹拌した後、混合物に２ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ（ｐＨ＝４）を加えた。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を水で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを２０％から８０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、ジアステレオマーを含有する化合物３－５（２．１９ｇ、１２．５ｍｍｏｌ、６５％）を黄色固体として得た。
工程５：化合物３－７の合成
化合物３－５（１．９６ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）およびトリエチルシラン（８．９４ｍｌ、５５．９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１４ｍｌ）およびＭｅＣＮ（１４ｍｌ）溶液に、ＢＦ３－ＯＥｔ２（７．０９ｍｌ、５５．９ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。同じ温度で１５分間撹拌した後、反応混合物を炭酸ナトリウム水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して、化合物３－６を黄色の油状物として得、精製することなしに次工程に使用した。
１－ブロモ－２－フルオロベンゼン（４．９０ｇ、２８．０ｍｍｏｌ）のトルエン（８０ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、ｎ－ＢｕＬｉ（１．６２Ｍ ｎ－ヘキサン溶液、１７．１ｍＬ、２８．０ｍｍｏｌ）を－７８℃で加え、反応混合物を同じ温度で１０分間撹拌した。反応混合物に、ＢＦ３－ＯＥｔ２（１．４２ｍｌ、１１．２ｍｍｏｌ）、ならびに化合物３－６のＴＨＦ（１０ｍＬ）およびトルエン（１８ｍＬ）溶液を－７８℃で加え、反応混合物を同じ温度で３０分間撹拌した。反応混合物にＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを０％から２０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－７（１．３１ｇ、５．１３ｍｍｏｌ、４６％）を黄色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.18 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.52-3.59 (1H, m), 4.03 (1H, dd, J = 10.6, 7.3 Hz), 4.21-4.38 (3H, m), 4.68 (1H, dd, J = 47.4, 9.8 Hz), 4.85-5.03 (1H, m), 6.16 (1H, s), 7.07 (1H, dd, J = 11.9, 8.2 Hz), 7.18 (1H, t, J = 7.2 Hz), 7.28-7.35 (1H, m), 7.67 (1H, brs).
工程７：化合物３－８の合成
化合物３－７（１．３１ｇ、５．１３ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（１３ｍｌ）溶液に、Ｚｎ（２．０１ｇ、３０．８ｍｍｏｌ）を室温で加えた。６０℃で２時間撹拌した後、反応混合物を室温に冷却し、この混合物に炭酸カリウム水溶液を加えた。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ろ液をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－８（１．０８ｇ、４．２０ｍｍｏｌ、８２％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.06 (3H, d, J = 6.8 Hz), 2.84-2.92 (1H, m), 3.55 (1H, d, J = 4.3 Hz), 3.95 (1H, q, J = 6.8 Hz), 4.00-4.06 (1H, m), 4.09-4.19 (1H, m), 4.34 (1H, dd, J = 48.2, 9.1 Hz), 4.90 (1H, ddd, J = 48.2, 9.1, 2.5 Hz), 7.08-7.15 (1H, m), 7.23-7.27 (1H, m), 7.33-7.40 (1H, m), 7.70-7.64 (1H, m).
工程８：化合物３－９の合成
化合物３－８（１．０８ｍｇ、４．２０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１１ｍｌ）溶液に、ベンゾイルイソチオシアネート（０．６３３ｍｌ、４．６２ｍｍｏｌ）を室温で加えた。同じ温度で３時間撹拌した後、反応混合物にＥＤＣ－ＨＣｌ（１．６１ｇ、８．４０ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で１４時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－９（１．０４ｇ、２．６９ｍｍｏｌ、６４％）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.18 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.27-3.35 (1H, m), 3.98 (1H, t, J = 10.0 Hz), 4.24-4.31 (2H, m), 4.42 (1H, q, J = 6.8 Hz), 4.71 (1H, dd, J = 46.4, 9.4 Hz), 4.85 (1H, dd, J = 46.4, 9.4 Hz), 7.15-7.26 (2H, m), 7.56-7.35 (5H, m), 8.27 (2H, d, J = 7.4 Hz), 12.14 (1H, s).
工程８：化合物３－１０の合成
化合物３－９（１．０４ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍｌ）およびＴＨＦ（１０ｍｌ）溶液に、ヒドラジン水和物（１．３１ｍｌ、２６．９ｍｍｏｌ）を室温で加えた。５０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを５０％から８０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－１０（７３４ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ、９７％）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.11 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.16-3.24 (1H, m), 3.89 (1H, t, J = 9.9 Hz), 3.95 (1H, d, J = 4.4 Hz), 4.17-4.30 (3H, m), 4.51 (1H, dd, J = 9.2, 47.1 Hz), 4.66 (1H, ddd, J = 47.1, 9.0, 1.5 Hz), 7.07 (1H, dd, J = 12.3, 7.7 Hz), 7.18 (1H, t, J = 7.2 Hz), 7.27-7.35 (1H, m), 7.51-7.44 (1H, m).
工程９：化合物３－１１の合成
化合物３－１０（７３４ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（５．６ｍｌ）溶液に、硫酸（１．３９ｍｌ、２６．０ｍｍｏｌ）を－８℃で加えた。同じ温度で５分間撹拌した後、反応混合物にＨＮＯ３（０．１７４ｍｌ、３．９０ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で１０分間撹拌した後、反応混合物をＫ２ＣＯ３水溶液で処理し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をアミノシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを６０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－１１（８２０ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ、９６％）を白色のアモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.14 (3H, d, J = 6.7 Hz), 3.13-3.20 (1H, m), 3.88 (1H, t, J = 9.8 Hz), 3.97 (1H, d, J = 4.8 Hz), 4.09-4.23 (2H, m), 4.34 (2H, s), 4.48 (1H, dd, J = 20.6, 8.2 Hz), 4.60 (1H, dd, J = 20.6, 8.2 Hz), 7.23-7.28 (1H, m), 8.26-8.20 (1H, m), 8.45 (1H, dd, J = 6.8, 2.8 Hz).
工程１０：化合物３－１２の合成
化合物３－１１（８２０ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ－Ｃ（１６９ｍｇ、０．０７５０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１６ｍｌ）溶液を、Ｈ２雰囲気下、室温で撹拌した。同じ温度で２時間撹拌した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＤ、２０％のイソプロピルアルコール（０．１％のジエチルアミンを含む））により精製して、化合物３－１２（３００ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ、４０％）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.11 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.14-3.21 (1H, m), 3.61 (2H, s), 3.86 (1H, t, J = 9.9 Hz), 4.01 (1H, d, J = 4.3 Hz), 4.08-4.20 (2H, m), 4.47 (1H, dd, J = 46.9, 8.8 Hz), 4.63 (1H, ddd, J = 46.9, 8.8, 1.6 Hz), 6.60-6.55 (1H, m), 6.75 (1H, dd, J = 6.7, 2.9 Hz), 6.86 (1H, dd, J = 11.9, 8.7 Hz).
工程１１：化合物Ｉ－００３の合成
化合物３－１２（２０．０ｍｇ、０．０６７０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１ｍｌ）溶液に、５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（１１．６ｍｇ、０．０６７０ｍｍｏｌ）および２ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ（０．０３３６ｍｌ、０．０６７０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物に、ＥＤＣ－ＨＣｌ（１９．７ｍｇ、０．０７４０ｍｍｏｌ）を同じ温度で加えた。１時間撹拌した後、反応混合物をＮａＨＣＯ３水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮して化合物Ｉ－００３（２２．０ｍｇ、０．０４９０ｍｍｏｌ、７２％）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.13 (3H, d, J = 6.7 Hz), 3.18-3.25 (1H, m), 3.89 (1H, t, J = 9.9 Hz), 4.03 (1H, d, J = 4.5 Hz), 4.13 (1H, q, J = 6.7 Hz), 4.17-4.24 (1H, m), 4.33 (2H, br s), 4.46-4.71 (2H, m), 6.15 (2H, ddd, J = 51.1, 7.1, 2.0 Hz), 7.13 (1H, dd, J = 11.7, 8.9 Hz), 7.54 (1H, dd, J = 6.9, 2.8 Hz), 7.97-8.02 (1H, m), 8.29 (1H, d, J = 1.3 Hz), 9.08 (1H, d, J = 1.3 Hz), 9.51 (1H, s).
【化41】
Ｉ－００３の合成では、ラセミ体３－１を使用し、したがって化合物３－２は４つのジアステレオマーの混合物だった。２つのジアステレオマーを、工程３でシリカゲルクロメートによって分離することができ、そのため、化合物３－３はエナンチオマー混合物だった。
工程１：化合物３－２の合成
５－メチルフラン－２（５Ｈ）－オン３－１（ラセミ体）（１０．０ｇ、１０２ｍｍｏｌ）およびフェニルイソシアネート（２２．２ｍｌ、２０４ｍｍｏｌ）のトルエン（１５０ｍｌ）溶液に、２－（２－ニトロエトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン（２６．８ｇ、１５３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．８９０ｍｌ、５．１０ｍｍｏｌ）のトルエン（５０ｍｌ）混合液を１１０℃で加えた。還流温度で３時間撹拌した後、反応混合液を室温に冷却した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを２０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、不純物を含有する化合物３－２（４つのジアステレオマーの混合物）（１４．４ｇ、５６．４ｍｍｏｌ、５５％）を褐色の油状物として得た。
工程２：化合物３－３の合成
化合物３－２（１４．４ｇ、５６．４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４３ｍｌ）溶液に、ＰＰＴＳ（２．８４ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）を室温で加えた。６０℃で３．５時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを５０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－３（エナンチオマー混合物）（３．６９ｇ、２１．６ｍｍｏｌ、３８％）を褐色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.51 (3H, d, J = 6.8 Hz), 2.52-2.58 (1H, m), 4.50 (1H, d, J = 9.5 Hz), 4.60-4.64 (2H, m), 4.82 (1H, dq, J = 2.0, 6.8 Hz), 5.09 (1H, dd, J = 9.5, 2.0 Hz).
工程３：化合物３－４の合成
化合物３－３（３．６９ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３７ｍｌ）溶液に、９０％のＤＡＳＴ（３．８０ｍｌ、２５．９ｍｍｏｌ）を－７８℃で加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、炭酸カリウム水溶液で処理した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を水で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを２０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－４（３．３１ｇ、１９．１ｍｍｏｌ、８９％）を黄色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.51 (3H, d, J = 6.8 Hz), 4.46 (1H, dd, J = 9.5, 1.6 Hz), 4.80-4.86 (1H, m), 5.16 (1H, d, J = 9.5 Hz), 5.24 (1H, dd, J = 19.3, 11.5 Hz), 5.36 (1H, dd, J = 19.3, 11.5 Hz).
工程４：化合物３－５の合成
化合物３－４（３．３１ｇ、１９．１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（６６ｍｌ）溶液に、ＤＩＢＡＬ（１．０２Ｍ ヘキサン溶液、２２．５ｍｌ、２２．９ｍｍｏｌ）を－７８℃で加えた。同じ温度で２０分間撹拌した後、反応混合物にロッシェル塩水溶液を加えた。室温で３時間撹拌した後、混合物に２ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ（ｐＨ＝４）を加えた。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を水で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを２０％から８０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、ジアステレオマーを含有する化合物３－５（２．１９ｇ、１２．５ｍｍｏｌ、６５％）を黄色固体として得た。
工程５：化合物３－７の合成
化合物３－５（１．９６ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）およびトリエチルシラン（８．９４ｍｌ、５５．９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１４ｍｌ）およびＭｅＣＮ（１４ｍｌ）溶液に、ＢＦ３－ＯＥｔ２（７．０９ｍｌ、５５．９ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。同じ温度で１５分間撹拌した後、反応混合物を炭酸ナトリウム水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して、化合物３－６を黄色の油状物として得、精製することなしに次工程に使用した。
１－ブロモ－２－フルオロベンゼン（４．９０ｇ、２８．０ｍｍｏｌ）のトルエン（８０ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、ｎ－ＢｕＬｉ（１．６２Ｍ ｎ－ヘキサン溶液、１７．１ｍＬ、２８．０ｍｍｏｌ）を－７８℃で加え、反応混合物を同じ温度で１０分間撹拌した。反応混合物に、ＢＦ３－ＯＥｔ２（１．４２ｍｌ、１１．２ｍｍｏｌ）、ならびに化合物３－６のＴＨＦ（１０ｍＬ）およびトルエン（１８ｍＬ）溶液を－７８℃で加え、反応混合物を同じ温度で３０分間撹拌した。反応混合物にＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを０％から２０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－７（１．３１ｇ、５．１３ｍｍｏｌ、４６％）を黄色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.18 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.52-3.59 (1H, m), 4.03 (1H, dd, J = 10.6, 7.3 Hz), 4.21-4.38 (3H, m), 4.68 (1H, dd, J = 47.4, 9.8 Hz), 4.85-5.03 (1H, m), 6.16 (1H, s), 7.07 (1H, dd, J = 11.9, 8.2 Hz), 7.18 (1H, t, J = 7.2 Hz), 7.28-7.35 (1H, m), 7.67 (1H, brs).
工程７：化合物３－８の合成
化合物３－７（１．３１ｇ、５．１３ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（１３ｍｌ）溶液に、Ｚｎ（２．０１ｇ、３０．８ｍｍｏｌ）を室温で加えた。６０℃で２時間撹拌した後、反応混合物を室温に冷却し、この混合物に炭酸カリウム水溶液を加えた。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ろ液をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－８（１．０８ｇ、４．２０ｍｍｏｌ、８２％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.06 (3H, d, J = 6.8 Hz), 2.84-2.92 (1H, m), 3.55 (1H, d, J = 4.3 Hz), 3.95 (1H, q, J = 6.8 Hz), 4.00-4.06 (1H, m), 4.09-4.19 (1H, m), 4.34 (1H, dd, J = 48.2, 9.1 Hz), 4.90 (1H, ddd, J = 48.2, 9.1, 2.5 Hz), 7.08-7.15 (1H, m), 7.23-7.27 (1H, m), 7.33-7.40 (1H, m), 7.70-7.64 (1H, m).
工程８：化合物３－９の合成
化合物３－８（１．０８ｍｇ、４．２０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１１ｍｌ）溶液に、ベンゾイルイソチオシアネート（０．６３３ｍｌ、４．６２ｍｍｏｌ）を室温で加えた。同じ温度で３時間撹拌した後、反応混合物にＥＤＣ－ＨＣｌ（１．６１ｇ、８．４０ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で１４時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－９（１．０４ｇ、２．６９ｍｍｏｌ、６４％）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.18 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.27-3.35 (1H, m), 3.98 (1H, t, J = 10.0 Hz), 4.24-4.31 (2H, m), 4.42 (1H, q, J = 6.8 Hz), 4.71 (1H, dd, J = 46.4, 9.4 Hz), 4.85 (1H, dd, J = 46.4, 9.4 Hz), 7.15-7.26 (2H, m), 7.56-7.35 (5H, m), 8.27 (2H, d, J = 7.4 Hz), 12.14 (1H, s).
工程８：化合物３－１０の合成
化合物３－９（１．０４ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍｌ）およびＴＨＦ（１０ｍｌ）溶液に、ヒドラジン水和物（１．３１ｍｌ、２６．９ｍｍｏｌ）を室温で加えた。５０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを５０％から８０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－１０（７３４ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ、９７％）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.11 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.16-3.24 (1H, m), 3.89 (1H, t, J = 9.9 Hz), 3.95 (1H, d, J = 4.4 Hz), 4.17-4.30 (3H, m), 4.51 (1H, dd, J = 9.2, 47.1 Hz), 4.66 (1H, ddd, J = 47.1, 9.0, 1.5 Hz), 7.07 (1H, dd, J = 12.3, 7.7 Hz), 7.18 (1H, t, J = 7.2 Hz), 7.27-7.35 (1H, m), 7.51-7.44 (1H, m).
工程９：化合物３－１１の合成
化合物３－１０（７３４ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（５．６ｍｌ）溶液に、硫酸（１．３９ｍｌ、２６．０ｍｍｏｌ）を－８℃で加えた。同じ温度で５分間撹拌した後、反応混合物にＨＮＯ３（０．１７４ｍｌ、３．９０ｍｍｏｌ）を加えた。同じ温度で１０分間撹拌した後、反応混合物をＫ２ＣＯ３水溶液で処理し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。粗生成物をアミノシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを６０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物３－１１（８２０ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ、９６％）を白色のアモルファスとして得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.14 (3H, d, J = 6.7 Hz), 3.13-3.20 (1H, m), 3.88 (1H, t, J = 9.8 Hz), 3.97 (1H, d, J = 4.8 Hz), 4.09-4.23 (2H, m), 4.34 (2H, s), 4.48 (1H, dd, J = 20.6, 8.2 Hz), 4.60 (1H, dd, J = 20.6, 8.2 Hz), 7.23-7.28 (1H, m), 8.26-8.20 (1H, m), 8.45 (1H, dd, J = 6.8, 2.8 Hz).
工程１０：化合物３－１２の合成
化合物３－１１（８２０ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ－Ｃ（１６９ｍｇ、０．０７５０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１６ｍｌ）溶液を、Ｈ２雰囲気下、室温で撹拌した。同じ温度で２時間撹拌した後、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＤ、２０％のイソプロピルアルコール（０．１％のジエチルアミンを含む））により精製して、化合物３－１２（３００ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ、４０％）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.11 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.14-3.21 (1H, m), 3.61 (2H, s), 3.86 (1H, t, J = 9.9 Hz), 4.01 (1H, d, J = 4.3 Hz), 4.08-4.20 (2H, m), 4.47 (1H, dd, J = 46.9, 8.8 Hz), 4.63 (1H, ddd, J = 46.9, 8.8, 1.6 Hz), 6.60-6.55 (1H, m), 6.75 (1H, dd, J = 6.7, 2.9 Hz), 6.86 (1H, dd, J = 11.9, 8.7 Hz).
工程１１：化合物Ｉ－００３の合成
化合物３－１２（２０．０ｍｇ、０．０６７０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１ｍｌ）溶液に、５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（１１．６ｍｇ、０．０６７０ｍｍｏｌ）および２ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ（０．０３３６ｍｌ、０．０６７０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物に、ＥＤＣ－ＨＣｌ（１９．７ｍｇ、０．０７４０ｍｍｏｌ）を同じ温度で加えた。１時間撹拌した後、反応混合物をＮａＨＣＯ３水溶液で処理した。水層をＡｃＯＥｔで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮して化合物Ｉ－００３（２２．０ｍｇ、０．０４９０ｍｍｏｌ、７２％）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.13 (3H, d, J = 6.7 Hz), 3.18-3.25 (1H, m), 3.89 (1H, t, J = 9.9 Hz), 4.03 (1H, d, J = 4.5 Hz), 4.13 (1H, q, J = 6.7 Hz), 4.17-4.24 (1H, m), 4.33 (2H, br s), 4.46-4.71 (2H, m), 6.15 (2H, ddd, J = 51.1, 7.1, 2.0 Hz), 7.13 (1H, dd, J = 11.7, 8.9 Hz), 7.54 (1H, dd, J = 6.9, 2.8 Hz), 7.97-8.02 (1H, m), 8.29 (1H, d, J = 1.3 Hz), 9.08 (1H, d, J = 1.3 Hz), 9.51 (1H, s).
【0062】
（実施例４）
【0063】
化合物Ｉ－００４の合成
工程１：化合物４－１の合成
化合物４－１は、上記プロトコル（実施例１の工程１から工程１２）と同様の方法で化合物３－１から合成した。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.18 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.49 (1H, dd, J = 9.9, 4.3 Hz), 3.68-3.74 (1H, m), 4.02 (1H, d, J = 10.4 Hz), 4.28 (1H, d, J = 4.3 Hz), 4.39 (1H, d, J = 9.9 Hz), 4.48 (1H, q, J = 6.8 Hz), 4.75-4.86 (1H, m), 4.87-4.96 (1H, m), 7.14-7.26 (2H, m), 7.34-7.58 (4H, m), 7.62-7.72 (1H, m), 8.27 (2H, d, J = 7.0 Hz).
工程２：化合物４－２の合成
化合物４－１（１６５ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）溶液に、ＤＡＳＴ（１２８ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を、窒素下、０℃で加えた。混合物を０℃で２時間撹拌した。室温で１時間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＳＯ３水溶液によってクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物４－２を白色固体として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 417 [M+H]+
工程３：化合物４－３の合成
化合物４－３は、上記プロトコル（実施例１の工程１５）と同様の方法で調製した。（収率：未精製）
MS (メソッドB) : m/z = 315 [M+H]+
工程４：化合物４－４の合成
化合物４－４は、上記プロトコル（実施例１の工程１６）と同様の方法で調製した。（収率：未精製）
MS (メソッドB) : m/z = 360 [M+H]+
工程５：化合物４－５の合成
化合物４－５は、上記プロトコル（実施例１の工程１７、ＳＦＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＤ、１０％のメタノール（０．１％ジエチルアミンを含む））と同様の方法で調製した。（収率：２０％、４工程）
MS (メソッドB) : m/z = 330 [M+H]+
工程５：化合物Ｉ－００４の合成
化合物Ｉ－００４は、上記プロトコル（実施例１の工程１８）と同様の方法で調製した。（収率：７０％）
MS (メソッドB) : m/z = 484 [M+H]+
1H NMR (CDCl3) δ: 1.13 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.39 (1H, dd, J = 9.7, 4.5 Hz), 4.10 (1H, d, J = 4.5 Hz), 4.38-4.49 (3H, m), 4.55 (1H, d, J = 9.3 Hz), 4.64-4.70 (1H, m), 4.72-4.89 (2H, m), 6.09 (1H, d, J = 3.9 Hz), 6.22 (1H, d, J = 3.9 Hz), 7.10-7.16 (1H, m), 7.56 (1H, dd, J = 6.8, 2.7 Hz), 7.94-7.98 (1H, m), 8.30 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.52 (1H, s).
【化42】
工程１：化合物４－１の合成
化合物４－１は、上記プロトコル（実施例１の工程１から工程１２）と同様の方法で化合物３－１から合成した。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.18 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.49 (1H, dd, J = 9.9, 4.3 Hz), 3.68-3.74 (1H, m), 4.02 (1H, d, J = 10.4 Hz), 4.28 (1H, d, J = 4.3 Hz), 4.39 (1H, d, J = 9.9 Hz), 4.48 (1H, q, J = 6.8 Hz), 4.75-4.86 (1H, m), 4.87-4.96 (1H, m), 7.14-7.26 (2H, m), 7.34-7.58 (4H, m), 7.62-7.72 (1H, m), 8.27 (2H, d, J = 7.0 Hz).
工程２：化合物４－２の合成
化合物４－１（１６５ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）溶液に、ＤＡＳＴ（１２８ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を、窒素下、０℃で加えた。混合物を０℃で２時間撹拌した。室温で１時間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＳＯ３水溶液によってクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物４－２を白色固体として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 417 [M+H]+
工程３：化合物４－３の合成
化合物４－３は、上記プロトコル（実施例１の工程１５）と同様の方法で調製した。（収率：未精製）
MS (メソッドB) : m/z = 315 [M+H]+
工程４：化合物４－４の合成
化合物４－４は、上記プロトコル（実施例１の工程１６）と同様の方法で調製した。（収率：未精製）
MS (メソッドB) : m/z = 360 [M+H]+
工程５：化合物４－５の合成
化合物４－５は、上記プロトコル（実施例１の工程１７、ＳＦＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＤ、１０％のメタノール（０．１％ジエチルアミンを含む））と同様の方法で調製した。（収率：２０％、４工程）
MS (メソッドB) : m/z = 330 [M+H]+
工程５：化合物Ｉ－００４の合成
化合物Ｉ－００４は、上記プロトコル（実施例１の工程１８）と同様の方法で調製した。（収率：７０％）
MS (メソッドB) : m/z = 484 [M+H]+
1H NMR (CDCl3) δ: 1.13 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.39 (1H, dd, J = 9.7, 4.5 Hz), 4.10 (1H, d, J = 4.5 Hz), 4.38-4.49 (3H, m), 4.55 (1H, d, J = 9.3 Hz), 4.64-4.70 (1H, m), 4.72-4.89 (2H, m), 6.09 (1H, d, J = 3.9 Hz), 6.22 (1H, d, J = 3.9 Hz), 7.10-7.16 (1H, m), 7.56 (1H, dd, J = 6.8, 2.7 Hz), 7.94-7.98 (1H, m), 8.30 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.52 (1H, s).
【0064】
（実施例５）
【0065】
化合物Ｉ－００５の合成
工程１：化合物５－１の合成
化合物５－１は、上記プロトコル（実施例１の工程１から工程１２）と同様の方法で化合物１－１から合成した。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.78 (3H, s), 2.01 (1H, t, J = 6.5 Hz), 3.39 (1H, dd, J = 8.8, 4.5 Hz), 3.74-3.81 (1H, m), 3.92 (1H, dd, J = 10.5, 2.5 Hz), 4.00-4.07 (1H, m), 4.24 (1H, d, J = 10.5 Hz), 4.28-4.34 (1H, m), 4.58 (1H, dd, J = 4.5, 2.5 Hz), 7.10-7.19 (2H, m), 7.25-7.30 (1H, m), 7.32-7.38 (1H, m), 7.44 (2H, t, J = 7.4 Hz), 7.52 (1H, t, J = 7.4 Hz), 8.23-8.29 (2H, m), 11.70 (1H, s).
工程２：化合物５－２の合成
化合物５－１（１６５ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（６ｍｌ）溶液に、（１ｒ、３ｒ、５ｒ、７ｒ）－２－（１１－オキシダニル）－２－アザアダマンタン（ＡＺＡＤＯ、０．９ｍｇ、６μｍｏｌ）、臭化カリウム（１４．１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（７４．８ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（３ｍｌ）混合液を０℃で加えた。０℃で３０分間撹拌した後、反応混合物を、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３５Ｈ２Ｏ（２９４ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＮａＣｌ（２９５ｍｇ、５．０４ｍｍｏｌ、８．５当量）のＨ２Ｏ（１０ｍｌ）混合液によってクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、化合物５－２を白色固体として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 399 [M+H]+
工程３：化合物５－３の合成
化合物５－２のＣＨ２Ｃｌ２（８．６ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｏ－ジメチルヒドロキシアミン塩酸塩（１０５ｍｇ、１．０７５ｍｍｏｌ）、Ｎ－エチル－Ｎ－イソプロピルプロパン－２－アミン（１８８μｌ、１．０７５ｍｍｏｌ）、および３－（（（エチルイミノ）メチレン）アミノ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－１－アミン塩酸塩（１１３ｍｇ、０．５９１ｍｍｏｌ）を室温で加えた。室温で３０分間撹拌した後、反応混合物をＨ２Ｏによってクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、化合物５－３を黄色の油状物として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 442 [M+H]+
工程４：化合物５－４の合成
化合物５－３のＴＨＦ（１０．５ｍｌ）溶液に、臭化メチルマグネシウム（０．７８９ｍＬ、２．３６７ｍｍｏｌ）を窒素下、０℃で加えた。０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液によってクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、化合物５－４を黄色の油状物として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 397 [M+H]+
工程５：化合物５－５の合成
化合物５－３４のＭｅＯＨ（８ｍｌ）溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（３８．８ｍｇ、１．０２７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液によってクエンチし、混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、化合物５－５を黄色の油状物として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 399 [M+H]+
工程６：化合物５－６の合成
化合物６－６は、上記プロトコル（実施例３の工程２）と同様の方法で調製した。（収率：３４％）
MS (メソッドB) : m/z = 401 [M+H]+
1H NMR (CDCl3) δ: 1.53 (3H, d, J = 6.3 Hz), 1.75 (3H, s), 3.46 (1H, t, J = 6.3 Hz), 3.83 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.22 (1H, d, J = 22.1 Hz), 4.55-4.82 (2H, m), 5.44 (1H, dd, J = 50.3, 13.7 Hz), 7.11-7.17 (2H, m), 7.23-7.28 (1H, m), 7.32-7.36 (1H, m), 7.42-7.45 (2H, m), 7.50-7.52 (1H, m), 8.26-8.27 (2H, m), 11.54 (1H, s).
工程７：化合物５－７の合成
化合物５－７は、上記プロトコル（実施例１の工程１５）と同様の方法で調製した。（収率：未精製）
MS (メソッドB) : m/z = 297 [M+H]+
工程８：化合物５－８の合成
化合物５－８は、上記プロトコル（実施例１の工程１６）と同様の方法で調製した。（収率：未精製）
MS (メソッドB) : m/z = 342 [M+H]+
工程９：化合物５－９の合成
化合物５－９は、上記プロトコル（実施例１の工程１７）と同様の方法で調製した。（収率：８０％、３工程）
MS (メソッドB) : m/z = 312 [M+H]+
工程９：化合物Ｉ－００５の合成
化合物Ｉ－００５は、上記プロトコル（実施例１の工程１８、ＳＦＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＥ、３５％ＭｅＯＨ（０．１％ジエチルアミンを含む））と同様の方法で調製した（収率：２５％）。この化合物は、ジアステレオマー混合物（比：１：０．３）だった。
MS (メソッドB) : m/z = 466 [M+H]+
1H NMR (CDCl3) δ: 1.44 (0.9H, d, J = 6.4 Hz), 1.50 (3H, d, J = 6.4 Hz), 1.58 (3.9H, s), 1.59-1.96 (0.3H, br m), 2.88 (0.3H, dd, J = 8.6, 4.3 Hz), 3.14 (1H, dd, J = 8.6, 4.3 Hz), 3.76 (1.3H, d, J = 10.3 Hz), 3.90 (0.3H, d, J = 10.3 Hz), 3.97 (1H, d, J = 10.3 Hz), 4.05-4.07 (0.3H, m), 4.21-4.29 (1H, m), 4.29-4.32 (0.3H, br m), 4.37-4.39 (1H, br m), 4.74-4.86 (1H, m), 6.08 (1.3H, d, J = 2.7 Hz), 6.21 (1.3H, d, J = 2.7 Hz), 7.08-7.11 (1.3H, m), 7.37-7.40 (1.3H, m), 7.93-7.97 (1.3H, m), 8.29 (1.3H, d, J = 1.3 Hz), 9.08 (1.3H, s), 9.49 (1.3H, s).
【化43】
工程１：化合物５－１の合成
化合物５－１は、上記プロトコル（実施例１の工程１から工程１２）と同様の方法で化合物１－１から合成した。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.78 (3H, s), 2.01 (1H, t, J = 6.5 Hz), 3.39 (1H, dd, J = 8.8, 4.5 Hz), 3.74-3.81 (1H, m), 3.92 (1H, dd, J = 10.5, 2.5 Hz), 4.00-4.07 (1H, m), 4.24 (1H, d, J = 10.5 Hz), 4.28-4.34 (1H, m), 4.58 (1H, dd, J = 4.5, 2.5 Hz), 7.10-7.19 (2H, m), 7.25-7.30 (1H, m), 7.32-7.38 (1H, m), 7.44 (2H, t, J = 7.4 Hz), 7.52 (1H, t, J = 7.4 Hz), 8.23-8.29 (2H, m), 11.70 (1H, s).
工程２：化合物５－２の合成
化合物５－１（１６５ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（６ｍｌ）溶液に、（１ｒ、３ｒ、５ｒ、７ｒ）－２－（１１－オキシダニル）－２－アザアダマンタン（ＡＺＡＤＯ、０．９ｍｇ、６μｍｏｌ）、臭化カリウム（１４．１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（７４．８ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（３ｍｌ）混合液を０℃で加えた。０℃で３０分間撹拌した後、反応混合物を、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３５Ｈ２Ｏ（２９４ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＮａＣｌ（２９５ｍｇ、５．０４ｍｍｏｌ、８．５当量）のＨ２Ｏ（１０ｍｌ）混合液によってクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、化合物５－２を白色固体として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 399 [M+H]+
工程３：化合物５－３の合成
化合物５－２のＣＨ２Ｃｌ２（８．６ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｏ－ジメチルヒドロキシアミン塩酸塩（１０５ｍｇ、１．０７５ｍｍｏｌ）、Ｎ－エチル－Ｎ－イソプロピルプロパン－２－アミン（１８８μｌ、１．０７５ｍｍｏｌ）、および３－（（（エチルイミノ）メチレン）アミノ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－１－アミン塩酸塩（１１３ｍｇ、０．５９１ｍｍｏｌ）を室温で加えた。室温で３０分間撹拌した後、反応混合物をＨ２Ｏによってクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、化合物５－３を黄色の油状物として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 442 [M+H]+
工程４：化合物５－４の合成
化合物５－３のＴＨＦ（１０．５ｍｌ）溶液に、臭化メチルマグネシウム（０．７８９ｍＬ、２．３６７ｍｍｏｌ）を窒素下、０℃で加えた。０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液によってクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、化合物５－４を黄色の油状物として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 397 [M+H]+
工程５：化合物５－５の合成
化合物５－３４のＭｅＯＨ（８ｍｌ）溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（３８．８ｍｇ、１．０２７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液によってクエンチし、混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、化合物５－５を黄色の油状物として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 399 [M+H]+
工程６：化合物５－６の合成
化合物６－６は、上記プロトコル（実施例３の工程２）と同様の方法で調製した。（収率：３４％）
MS (メソッドB) : m/z = 401 [M+H]+
1H NMR (CDCl3) δ: 1.53 (3H, d, J = 6.3 Hz), 1.75 (3H, s), 3.46 (1H, t, J = 6.3 Hz), 3.83 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.22 (1H, d, J = 22.1 Hz), 4.55-4.82 (2H, m), 5.44 (1H, dd, J = 50.3, 13.7 Hz), 7.11-7.17 (2H, m), 7.23-7.28 (1H, m), 7.32-7.36 (1H, m), 7.42-7.45 (2H, m), 7.50-7.52 (1H, m), 8.26-8.27 (2H, m), 11.54 (1H, s).
工程７：化合物５－７の合成
化合物５－７は、上記プロトコル（実施例１の工程１５）と同様の方法で調製した。（収率：未精製）
MS (メソッドB) : m/z = 297 [M+H]+
工程８：化合物５－８の合成
化合物５－８は、上記プロトコル（実施例１の工程１６）と同様の方法で調製した。（収率：未精製）
MS (メソッドB) : m/z = 342 [M+H]+
工程９：化合物５－９の合成
化合物５－９は、上記プロトコル（実施例１の工程１７）と同様の方法で調製した。（収率：８０％、３工程）
MS (メソッドB) : m/z = 312 [M+H]+
工程９：化合物Ｉ－００５の合成
化合物Ｉ－００５は、上記プロトコル（実施例１の工程１８、ＳＦＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＥ、３５％ＭｅＯＨ（０．１％ジエチルアミンを含む））と同様の方法で調製した（収率：２５％）。この化合物は、ジアステレオマー混合物（比：１：０．３）だった。
MS (メソッドB) : m/z = 466 [M+H]+
1H NMR (CDCl3) δ: 1.44 (0.9H, d, J = 6.4 Hz), 1.50 (3H, d, J = 6.4 Hz), 1.58 (3.9H, s), 1.59-1.96 (0.3H, br m), 2.88 (0.3H, dd, J = 8.6, 4.3 Hz), 3.14 (1H, dd, J = 8.6, 4.3 Hz), 3.76 (1.3H, d, J = 10.3 Hz), 3.90 (0.3H, d, J = 10.3 Hz), 3.97 (1H, d, J = 10.3 Hz), 4.05-4.07 (0.3H, m), 4.21-4.29 (1H, m), 4.29-4.32 (0.3H, br m), 4.37-4.39 (1H, br m), 4.74-4.86 (1H, m), 6.08 (1.3H, d, J = 2.7 Hz), 6.21 (1.3H, d, J = 2.7 Hz), 7.08-7.11 (1.3H, m), 7.37-7.40 (1.3H, m), 7.93-7.97 (1.3H, m), 8.29 (1.3H, d, J = 1.3 Hz), 9.08 (1.3H, s), 9.49 (1.3H, s).
【0066】
（実施例６）
【0067】
化合物Ｉ－００６の合成
工程１：化合物６－２の合成
化合物６－１（１９８ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６ｍｌ）溶液に、ＮａＨ（４８ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を室温で加えた。室温で３０分間撹拌した後、ＭｅＩ（６８ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を混合物に加えた。室温で一晩撹拌した後、反応混合物を水によってクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をＮＨシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを４０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物６－２を無色の油状物として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 431 [M+H]+
工程２：化合物６－３の合成
化合物６－３は、上記プロトコル（実施例１の工程１５）と同様の方法で調製した（収率：未精製）。
MS (メソッドB) : m/z = 327 [M+H]+
工程３：化合物６－４の合成
化合物６－４は、上記プロトコル（実施例１の工程１６）と同様の方法で調製した（収率：未精製）。
MS (メソッドB) : m/z = 372 [M+H]+
工程４：化合物６－５の合成
化合物６－５は、上記プロトコル（実施例１の工程１７、ＳＦＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ、１０％ＭｅＯＨ（０．１％ジエチルアミンを含む））と同様の方法で調製した（収率：３６％、４工程）。
MS (メソッドB) : m/z = 330 [M+H]+
工程５：化合物Ｉ－００６の合成
化合物６－６は、上記プロトコル（実施例１の工程１８）と同様の方法で調製した（収率：８０％）。
MS (メソッドB) : m/z = 496 [M+H]+
1H NMR (CDCl3) δ: 1.13 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.27 (1H, dd, J = 10.7, 4.3 Hz), 3.47 (3H, s), 3.55 (1H, dd, J = 10.7, 4.3 Hz), 3.73 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.07 (1H, d, J = 4.3 Hz), 4.44-4.64 (5H, m), 6.09 (1H, d, J = 4.9 Hz), 6.21 (1H, d, J = 4.9 Hz), 7.11-7.14 (1H, m), 7.51 (1H, dd, J = 6.7, 2.8 Hz), 7.96-8.00 (1H, m), 8.29 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.51 (1H, s).
【化44】
工程１：化合物６－２の合成
化合物６－１（１９８ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６ｍｌ）溶液に、ＮａＨ（４８ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を室温で加えた。室温で３０分間撹拌した後、ＭｅＩ（６８ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を混合物に加えた。室温で一晩撹拌した後、反応混合物を水によってクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をＮＨシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを４０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物６－２を無色の油状物として得、精製することなしに次工程に使用した。
MS (メソッドB) : m/z = 431 [M+H]+
工程２：化合物６－３の合成
化合物６－３は、上記プロトコル（実施例１の工程１５）と同様の方法で調製した（収率：未精製）。
MS (メソッドB) : m/z = 327 [M+H]+
工程３：化合物６－４の合成
化合物６－４は、上記プロトコル（実施例１の工程１６）と同様の方法で調製した（収率：未精製）。
MS (メソッドB) : m/z = 372 [M+H]+
工程４：化合物６－５の合成
化合物６－５は、上記プロトコル（実施例１の工程１７、ＳＦＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ、１０％ＭｅＯＨ（０．１％ジエチルアミンを含む））と同様の方法で調製した（収率：３６％、４工程）。
MS (メソッドB) : m/z = 330 [M+H]+
工程５：化合物Ｉ－００６の合成
化合物６－６は、上記プロトコル（実施例１の工程１８）と同様の方法で調製した（収率：８０％）。
MS (メソッドB) : m/z = 496 [M+H]+
1H NMR (CDCl3) δ: 1.13 (3H, d, J = 6.8 Hz), 3.27 (1H, dd, J = 10.7, 4.3 Hz), 3.47 (3H, s), 3.55 (1H, dd, J = 10.7, 4.3 Hz), 3.73 (1H, d, J = 10.7 Hz), 4.07 (1H, d, J = 4.3 Hz), 4.44-4.64 (5H, m), 6.09 (1H, d, J = 4.9 Hz), 6.21 (1H, d, J = 4.9 Hz), 7.11-7.14 (1H, m), 7.51 (1H, dd, J = 6.7, 2.8 Hz), 7.96-8.00 (1H, m), 8.29 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.51 (1H, s).
【0068】
（実施例７）
【0069】
化合物Ｉ－０１３の合成
【0070】
【化45】
工程１：化合物１３－２の合成
既知の合成法（国際公開第２０１４００１２２８号）に従って調製した化合物１３－１（４２．３ｇ、３０４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４２３ｍｌ）溶液に、ｍＣＰＢＡ（７０ｗｔ％、７４．９ｇ、３０４．０ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で一晩撹拌した後、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液を反応混合物に加えた。反応混合液を減圧下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃで溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１３－２（４２．０ｇ、２７１ｍｍｏｌ、８９％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 2.08-2.17 (4H, m), 2.34 (1H, ddd, J = 14.7, 7.5, 3.8 Hz), 2.43-2.57 (2H, m), 4.80-4.76 (1H, m), 5.54 (1H, d, J = 9.0 Hz).
工程２：化合物１３－３の合成
化合物１３－２（１３．４ｇ、８６ｍｍｏｌ）のトルエン（１３４ｍｌ）溶液に、ＤＩＢＡＬ（１．０Ｍ ｎ－ヘキサン溶液、９５．０ｍＬ、９５．０ｍｍｏｌ）を－７８℃で加えた。混合物を同じ温度で１時間撹拌した。反応混合物をロッシェル塩水溶液で処理した。不溶性物質をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾去した。ろ液に塩化ナトリウムを加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮し、粗化合物１３－３（４．０５ｇ、３０％）をジアステレオマー混合物として得た。
工程３：化合物１３－４の合成
化合物１３－３（３．０ｇ、１９．１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＣＮ（４．５ｍＬ／４．５ｍＬ）溶液に、トリエチルシラン（６．６６ｇ、５７．３ｍｍｏｌ）およびＢＦ３－ＯＥｔ２（８．１３ｇ、５７．３ｍｍｏｌ）を０℃で加え、反応混合物を同じ温度で３０分間撹拌した。反応混合物にＮａＨＣＯ３水溶液を加え、水層をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃで溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１３－４（７２０ｍｇ、５．１６ｍｍｏｌ、２７％）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.54-1.62 (1H, m), 1.72-1.95 (2H, m), 2.09 (3H, s), 2.21-2.15 (1H, m), 3.46 (1H, ddd, J = 12.2, 8.1, 3.2 Hz), 3.68-3.73 (1H, m), 4.15-4.18 (1H, m), 4.54 (1H, d, J = 6.0 Hz).
工程４：化合物１３－５の合成
１－ブロモ－２－フルオロベンゼン（２．２３ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）のトルエン／ＴＨＦ（２８．８ｍＬ／５．７６ｍＬ）溶液に、ｎ－ＢｕＬｉ（１．５５Ｍ ｎ－ヘキサン溶液、８．２３ｍＬ、１２．８ｍｍｏｌ）を－７８℃で加え、反応混合液を同じ温度で３０分間撹拌した。反応混合物に、ＢＦ３－ＯＥｔ２（７２４ｍｇ、５．１０ｍｍｏｌ）、ならびに化合物１３－４のＴＨＦ／トルエン（０．７２ｍＬ／３．６０ｍＬ）溶液を－７８℃で加え、反応混合物を同じ温度で１時間撹拌した。反応混合物にＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃで溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１３－５（７２０ｍｇ、５．１６ｍｍｏｌ、２７％）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.42-1.38 (1H, m), 1.58 (3H, s), 1.60-1.69 (1H, m), 1.75-1.87 (1H, m), 1.99-2.05 (1H, m), 3.41-3.48 (1H, m), 3.57-3.59 (1H, m), 3.99-4.03 (1H, m), 4.25-4.27 (1H, m), 6.20 (1H, br s), 6.99-7.04 (1H, m), 7.13-7.18 (1H, m), 7.23-7.28 (1H, m), 7.91 (1H, td, J = 7.9, 1.8 Hz).
工程５：化合物１３－６の合成
化合物１３－５（１．２ｇ、５．１０ｍｍｏｌ）の酢酸（１２．１ｍＬ）溶液に、亜鉛（３．３３ｇ、５１．０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を６０℃で２時間撹拌した。不溶性物質をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾去した。ろ液を減圧下で濃縮した。残渣に、ＮａＨＣＯ３水溶液を加え、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の残渣の溶液に、ベンゾイルイソチオシアネート（６４１ｍｇ、３．９３ｍｍｏｌ）を室温で加え、反応混合物を１時間撹拌した。反応混合物に、ＥＤＣ（７５３ｍｇ、３．９３ｍｍｏｌ）を室温で加え、反応混合物を１時間撹拌した。反応混合液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃで溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１３－６（１．１ｇ、３．０ｍｍｏｌ、５９％）を得た。LC/MS: 方法A, M+1 = 369, tR = 1.80分.
工程６：化合物１３－７の合成
化合物１３－６（１．１ｇ、３．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１１ｍＬ／１１ｍＬ）溶液に、ヒドラジン水和物（１．５０ｇ、３０．０ｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃで溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮して、化合物１３－７（１．３ｇ）を得、さらに精製することなく次の反応に使用した。LC/MS: 方法A, M+1 = 265, tR = 0.88分.
工程７：化合物１３－８の合成
粗化合物１３－７（１．３ｇ）のトリフルオロ酢酸（９．７ｍＬ）溶液に、硫酸（２．４ｍＬ、４５ｍｍｏｌ）および硝酸（０．４０ｍＬ、９００ｍｍｏｌ）を０℃で加え、反応混合物を同じ温度で３０分間撹拌した。反応混合物を、冷やしたＫ２ＣＯ３（１．６ｇ、１２０ｍｍｏｌ）水溶液に注入した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃで溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１３－８（９２７ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ、定量）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.39-1.42 (1H, m), 1.53-1.62 (1H, m), 1.59 (3H, d, J = 1.9 Hz), 1.88-2.02 (2H, m), 3.53-3.60 (1H, m), 3.66-3.67 (1H, m), 3.86 (1H, s), 4.10-4.14 (2H, m), 4.23 (1H, br s), 7.17 (1H, dd, J = 10.7, 8.9 Hz), 8.16 (1H, ddd, J = 8.9, 4.0, 2.9 Hz), 8.41 (1H, dd, J = 6.8, 2.9 Hz).
工程８：化合物１３－９の合成
粗化合物１３－８（９９６ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）溶液に、Ｐｄ－Ｃ（５ｗｔ％、３４３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、水素雰囲気下、室温で１時間撹拌した。不溶性物質をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾去した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ；５０％エタノール（０．１％のジエチルアミンを含む））により精製して、化合物１３－９（２３５ｍｇ、２６％）を単一のエナンチオマーとして得た。LC/MS: 方法A, M+1 = 280, tR = 0.77分.
工程９：化合物Ｉ－０１３の合成
化合物１３－９（５０．０ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）溶液に、２Ｍの塩化水素水溶液（０．０９ｍＬ、０．１７９ｍｍｏｌ）を加えた。溶液に、５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（３０．８ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（３７．７ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）を室温で加え、反応混合物を１時間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチした。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水および食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をＭｅＯＨ／水で粉末化して、化合物Ｉ－０１３（５８．０ｍｇ、７５％）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ: 1.25-1.42 (2H, m), 1.61 (3H, s), 1.87-2.01 (2H, m), 3.55-3.62 (1H, m), 3.81 (1H, s), 3.94 (1H, s), 4.09-4.13 (1H, m), 6.15 (3H, ddd, J = 51.1, 9.4, 2.0 Hz), 7.07 (1H, dd, J = 11.4, 8.8 Hz), 7.42 (1H, dd, J = 6.8, 2.7 Hz), 8.01-8.05 (1H, m), 8.29 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.52 (1H, br s).
【0071】
（実施例８）
【0072】
化合物Ｉ－０１４の合成
【0073】
【化46】
工程１
化合物１４－１（１０．９ｇ、９９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２１９ｍＬ）溶液に、１．４５ｍｏｌ／Ｌの塩化ビニルマグネシウム ＴＨＦ（８２ｍＬ、１１９ｍｍｏｌ）溶液を－７８℃で加えた。－７８℃で３時間撹拌した後、反応混合物を塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、炭酸カリウムで塩基性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水で洗浄した。溶媒を減圧下で濃縮し、残渣をアミノシリカゲルカラムに加え、ヘキサン／ＥｔＯＡｃの２０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１４－２（９．９７ｇ、７２．２ｍｍｏｌ、７３％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.76 (1H, d, J = 6.4 Hz), 3.88 (3H, s), 5.18-5.23 (2H, m), 5.36 (1H, d, J = 17.3 Hz), 6.09 (1H, ddd, J = 17.1, 10.4, 6.0 Hz), 7.33 (1H, s), 7.45 (1H, s).
工程２
化合物１４－２（９．９７ｇ、７２．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５０ｍＬ）溶液に、６０ｗｔ％の水素化ナトリウム（４．３３ｇ、１０８ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０分間撹拌した後、反応混合物に臭化アリル（１２．５ｍＬ、１４４ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌した後、反応混合物を冷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から８０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１４－３（１２．０ｇ、６７．３ｍｍｏｌ、９３％）を白色の泡状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 3.88 (3H, s), 3.94-4.05 (2H, m), 4.81 (1H, d, J = 7.0 Hz), 5.15-5.33 (4H, m), 5.87-6.02 (2H, m), 7.31 (1H, s), 7.42 (1H, s).
工程３
化合物１４－３（１２．０ｇ、６７．３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６０ｍＬ）溶液に、［１，３－ビス（２，４，６－トリメチルフェニル）イミダゾリジン－２－イリデン］（クロロ）（フェニルメチリデン）ルテニウム；トリシクロヘキシルホスファン（１．１４ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を加えた。４０℃で３時間撹拌した後、溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを２０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１４－４（４．０５ｇ、２７．０ｍｍｏｌ、４０％）を白色アモルファスとして得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 3.87 (3H, s), 4.64-4.70 (1H, m), 4.73-4.80 (1H, m), 5.78-5.82 (1H, m), 5.86-5.90 (1H, m), 6.02-6.05 (1H, m), 7.42 (1H, s), 7.45 (1H, s).
工程４
化合物１４－４（４．０５ｇ、２７．０ｍｍｏｌ）のトルエン（８１ｍＬ）溶液に、ニトロエタン（５．８１ｍＬ、８１ｍｍｏｌ）、イソシアナトベンゼン（１１．７ｍＬ、１０８ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．１８ｍＬ、６．７４ｍｍｏｌ）を加えた。１３０℃で１０時間撹拌した後、反応混合物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムに加え、クロロホルム／メタノールの０％から２０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から７０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１４－５（２．７５ｇ、１３．３ｍｍｏｌ、異性体の混合物として４９％）を橙色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.98-2.08 (2H, m), 3.77-4.12 (6H, m), 5.10-5.30 (2H, m), 7.29-7.48 (2H, m).
工程５
１－ブロモ－２－フルオロベンゼン（１１．６ｇ、６６．５ｍｍｏｌ）のトルエン（１１０ｍＬ）およびＴＨＦ（２７．５ｍＬ）溶液に、１．６ｍｏｌ／Ｌ ｎ－ブチルリチウム ｎ－ヘキサン溶液（４１．５ｍＬ、６６．５ｍｍｏｌ）を－７８℃で、続いて三フッ化ホウ素ジエチルエーテレート（５．０５ｍＬ、３９．９ｍｍｏｌ）、および化合物１４－５（２．７５ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）のトルエン（１１０ｍＬ）溶液を加えた。－７８℃で１時間撹拌した後、反応混合物を塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを４０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１４－６（２．３１ｇ、７．６２ｍｍｏｌ、異性体の混合物として５７％）を黄色のアモルファスとして得た。LC/MS: 方法A, M+1 = 304, tR = 1.37, 1.47分.
工程６
化合物１４－６（２．３１ｇ、７．６２ｍｍｏｌ）の酢酸（２３．１ｍＬ）溶液に、亜鉛（４．９８ｇ、７６ｍｍｏｌ）を加えた。９０℃で１時間撹拌した後、反応混合物に追加の亜鉛（４．９８ｇ、７６ｍｍｏｌ）を加えた。９０℃で１時間撹拌した後、反応を２ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）でクエンチし、混合物を酢酸エチルで希釈した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して、化合物１４－７（２．０２ｇ、６．６１ｍｍｏｌ、８７％）を白色のアモルファスとして得た。生成物をさらに精製することなく次の反応に使用した。LC/MS: 方法A, M+1 = 306, tR = 0.36分.
工程７
化合物１４－７（２．０２ｇ、６．６１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０．１ｍＬ）溶液に、ベンゾイルイソチオシアネート（０．９７８ｍＬ、７．２７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分間撹拌した後、反応混合物にＥＤＣ塩酸塩（１．５２ｇ、７．９３ｍｍｏｌ）を加えた。４０℃で１時間撹拌した後、反応混合物に追加のＥＤＣ塩酸塩（０．３８０ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を加えた。４０℃でさらに１時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムに加え、ヘキサン／ＥｔＯＡｃの１０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１４－８（１．０８ｇ、２．４８ｍｍｏｌ、３８％）を黄色アモルファスとして得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 3.47-3.53 (1H, m), 3.94 (3H, s), 4.05-4.15 (1H, m), 4.22 (1H, d, J = 11.0 Hz), 4.64-4.68 (1H, m), 5.16 (1H, d, J = 9.0 Hz), 7.09-7.56 (10H, m), 7.64 (1H, s), 8.28 (2H, d, J = 7.3 Hz), 11.66-11.75 (1H, br).
工程８
化合物１４－８（１．０７ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０．７ｍＬ）溶液に、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（０．６８６ｍＬ、２．９５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（６０．１ｍｇ、０．４９２ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムに加え、ヘキサン／ＥｔＯＡｃの５０％から１００％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１４－９（８３９ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ、６４％）を白色の泡状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.29 (3H, s), 1.46 (9H, s), 3.24 (1H, dd, J = 10.3, 3.8 Hz), 3.92 (3H, s), 4.00-4.05 (2H, m), 4.51-4.53 (1H, m), 4.95 (1H, d, J = 10.2 Hz), 7.05 (1H, ddd, J = 12.7, 7.9, 1.1 Hz), 7.16 (1H, td, J = 7.5, 1.2 Hz), 7.23-7.30 (1H, m), 7.43-7.52 (3H, m), 7.55-7.64 (3H, m), 7.81 (2H, d, J = 6.9 Hz).
(2.21m, 535)
工程９
化合物１４－９（８３９ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）のメタノール（８．３０ｍＬ）懸濁液に、炭酸カリウム（３２５ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３時間撹拌した後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。ジクロロメタン（４．２ｍＬ）中の残渣の溶液に、ＴＦＡ（４．２ｍＬ、５４．５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌した後、反応混合物を炭酸カリウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。残渣をアミノシリカゲルカラムに加え、クロロホルム／メタノールの０％から１０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１４－１０（５６５ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ、９６％）を白色の泡状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.39 (3H, s), 3.32 (1H, dd, J = 9.3, 4.3 Hz), 3.89-3.97 (5H, m), 4.32-4.35 (1H, m), 5.07 (1H, d, J = 9.4 Hz), 7.05 (1H, dd, J = 12.5, 8.0 Hz), 7.13 (1H, t, J = 7.5 Hz), 7.22-7.29 (1H, m), 7.38 (1H, td, J = 8.0, 1.3 Hz), 7.46 (1H, s), 7.62 (1H, s).
工程１０
化合物１４－１０（５６５ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（２．４４ｍＬ、３１．７ｍｍｏｌ）溶液に、濃硫酸、続いて７０ｗｔ％の硝酸（０．１１６ｍＬ、１．８１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を－１０℃で１時間撹拌した。－１０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を炭酸カリウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。粗生成物をアミノシリカゲルカラムに加え、クロロホルム／メタノールの０％から１０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１４－１１（５６６ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ、１００％）を黄色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.39 (3H, s), 3.27 (1H, dd, J = 9.3, 4.4 Hz), 3.94 (3H, s), 3.94-4.01 (2H, m), 4.32-4.36 (1H, m), 5.09 (1H, d, J = 5.1 Hz), 7.21 (1H, dd, J = 11.0, 9.0 Hz), 7.45 (1H, s), 7.61 (1H, s), 8.18 (1H, ddd, J = 8.9, 4.0, 3.0 Hz), 8.35 (1H, dd, J = 7.0, 2.9 Hz).
工程１１
化合物１４－１１（５６６ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）のメタノール（１１．３ｍＬ）懸濁液に、濃塩酸（１．５１ｍＬ、１８．１ｍｍｏｌ）、続いて亜鉛（６９０ｍｇ、１０．６ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。０℃で１．５時間撹拌した後、反応混合物を水および酢酸エチルで希釈し、２ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液で塩基性化した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して、化合物１４－１２（３７２ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、７１％）を白色のアモルファスとして得た。生成物をさらに精製することなく次の反応に使用した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.35 (3H, s), 3.30-3.35 (1H, m), 3.51-3.69 (2H, m), 3.89-3.98 (5H, m), 4.39-4.44 (1H, m), 5.03 (1H, d, J = 9.3 Hz), 6.49-6.54 (1H, m), 6.66-6.71 (1H, m), 6.84 (1H, J = 9.3 Hz), 7.45 (1H, s), 7.60 (1H, s).
(0.38min, 346)
工程１２
化合物１４－１２（８６ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）および５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（４７．３ｍｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）のメタノール（１．７３ｍＬ）懸濁液に、濃塩酸（０．１２５ｍＬ、０．２５ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ塩酸塩（５７．５ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３時間撹拌した後、反応混合物を炭酸カリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。粗生成物を超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ；３０％エタノール（０．１％のジエチルアミンを含む））により精製して、化合物Ｉ－０１４（４５．３ｍｇ、０．０９１ｍｍｏｌ、収率３６％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.62 (3H, s), 3.31-3.38 (1H, m), 3.91-3.97 (5H, m), 4.39-4.45 (1H, m), 5.07 (1H, d, J = 9.7 Hz), 6.15 (2H, d, J = 50.6 Hz), 7.09 (1H, t, J = 10.2 Hz), 7.42-7.47 (2H, m), 7.62 (1H, s), 7.92-7.97 (1H, m), 8.29 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.49 (1H, s).
【0074】
（実施例９）
【0075】
化合物Ｉ－０１５の合成
工程１
亜鉛（４０．６ｇ、６２１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３１３ｍＬ）懸濁液に、二塩化ジ（シクロペンタジエニル）チタン（１．１０ｇ、４．４３ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０分間撹拌した後、化合物１５－１（１２．５ｇ、８９ｍｍｏｌ）および２－ブロモ－２，２－ジフルオロ酢酸エチル（２２．６ｍＬ、１７７ｍｍｏｌ）を反応混合物に加えた。室温で８時間撹拌した後、反応混合物をろ過した。ろ液を酢酸エチルおよび塩化アンモニウム水溶液で希釈した。懸濁液をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水－食塩水（１：１）および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から７０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－２（６．３２ｇ、２３．８ｍｍｏｌ、２７％）を黄色の油状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.40 (3H, t, J = 7.2 Hz), 2.08 (3H, s), 4.12 (1H, s), 4.18 (1H, d, J = 10.4 Hz), 4.26-4.36 (2H, m), 4.42 (2H, q, J = 7.2 Hz), 5.25-5.31 (1H, m).
工程２
化合物１５－２（６．３２ｇ、２３．８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６３．２ｍＬ）溶液に、塩化チオニル（３．４８ｍＬ、４７．６ｍｍｏｌ）、続いてピリジン（５．７８ｍＬ、７１．５ｍｍｏｌ）を－１０℃で加えた。－１０℃で２０分間撹拌した後、反応混合物を冷水でクエンチし、クロロホルムで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から１５％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－３（６．２３ｇ、２２．０ｍｍｏｌ、９２％）を黄色の油状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.39 (3H, t, J = 7.2 Hz), 2.12 (3H, s), 4.37-4.46 (3H, m), 4.51 (1H, dd, J = 10.9, 4.3 Hz), 4.67 (1H, d, J = 10.9 Hz), 5.42 (1H, dd, J = 9.2, 4.3 Hz).
工程３
化合物１５－３（１．１４ｇ、４ｍｍｏｌ）およびトリブチルスタンナン（２．９１ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）のメタノール（５．６ｍＬ）溶液に、ＡＩＢＮ（３２．８ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）を加えた。８０℃で２時間撹拌した後、反応混合物をフッ化カリウム水溶液でクエンチした。懸濁液をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。メタノール（５．６ｍＬ）をろ液の有機層に加えた。混合物に、水素化ホウ素ナトリウム（３７８ｍｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で３時間撹拌した後、反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から７０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－４（５００ｍｇ、２．４１ｍｍｏｌ、６０％）を黄色アモルファスとして得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 2.01-2.09 (4H, m), 3.86-4.03 (3H, m), 4.09-4.23 (2H, m), 4.41 (1H, d, J = 26.1 Hz), 5.26-5.31 (1H, m).
工程４
化合物１５－４（４９５ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．９５ｍＬ）溶液に、塩化ｔ－ブチルジフェニルシリル（０．７３７ｍＬ、２．８７ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（２４４ｍｇ、３．５９ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌した後、追加の塩化ｔ－ブチルジフェニルシリル（０．１８４ｍＬ、０．７１７ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（８１ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）を反応混合物に加えた。室温でさらに２時間撹拌した後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを５％から１５％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－５（８８９ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ、８３％）を黄色の泡状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.06 (9H, s), 2.07 (3H, s), 3.80 (1H, ddd, J = 12.9, 11.4, 5.0 Hz), 3.93-4.20 (4H, m), 4.55 (1H, d, J = 26.2 Hz), 5.26 (1H, dd, J = 9.3, 3.9 Hz), 7.38-7.48 (6H, m), 7.67 (4H, d, J = 7.8 Hz).
工程５
化合物１５－６は、上記プロトコル（実施例１の工程５）と同様の方法で調製した。（収率：１００％）
LC/MS: メソッドA, M+1 = 542, tR = 3.16分.
工程６
化合物１５－７は、上記プロトコル（実施例１の工程６）と同様の方法で調製した。（収率：３４％）
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.01 (9H, s), 1.74 (3H, s), 3.36 (1H, dd, J = 6.8, 4.6 Hz), 3.68 (1H, ddd, J = 15.2, 11.3, 4.3 Hz), 3.79-3.86 (2H, m), 3.92-4.04 (2H, m), 4.36-4.50 (2H, m), 7.06-7.15 (2H, m), 7.23-7.33 (1H, m), 7.36-7.48 (7H, m), 7.61 (2H, d, J = 6.9 Hz), 7.65 (2H, d, J = 6.1 Hz).
工程７
化合物１５－８は、上記プロトコル（実施例１の工程７）と同様の方法で調製した（収率：８６％）
LC/MS: メソッドA, M+1 = 673, tR = 3.23分.
工程８
化合物１５－８（３９６ｍｇ、０．５８９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３．９６ｍＬ）溶液に、１ｍｏｌ／ＬのＴＢＡＦ ＴＨＦ溶液（０．７０６ｍＬ、０．７０６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌した後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から７０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－９（２４４ｍｇ、０．５６２ｍｍｏｌ、９６％）を黄色アモルファスとして得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.76 (3H, d, J = 3.3 Hz), 2.15-2.22 (1H, br), 3.86-4.10 (4H, m), 4.23 (1H, dd, J = 10.5, 2.1 Hz), 4.58 (1H, dd, J = 24.7, 6.8 Hz), 4.66 (1H, dd, J = 5.3, 1.9 Hz), 7.11-7.18 (2H, m), 7.23 (1H, td, J = 8.1 Hz, 1.6 Hz), 7.31-7.39 (1H, m), 7.44 (2H, t, J = 7.4 Hz), 7.50 (1H, t, J = 7.3 Hz), 8.26 (2H, d, J = 7.0 Hz), 11.44-11.57 (1H, br).
工程９
化合物１５－９（２４４ｍｇ、０．５６２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．４４ｍＬ）溶液に、ＤＡＳＴ（０．４４５ｍＬ、３．３７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で２時間および４０℃で１時間撹拌した後、反応混合物に水（０．０２０ｍＬ、１．１２ｍｍｏｌ）を加えた。４０℃で３時間撹拌した後、混合物を重炭酸ナトリウム水溶液でクエンチし、クロロホルムで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。残渣のジクロロメタン（２．４４ｍＬ）溶液に、ＤＡＳＴ（０．４４５ｍＬ、３．３７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で１５時間撹拌した後、混合物を重炭酸ナトリウム水溶液でクエンチし、クロロホルムで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－１０（１５８ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ、６４％）を黄色アモルファスとして得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.76 (3H, d, J = 3.4Hz), 3.86-3.93 (2H, m), 4.25 (1H, dd, J = 10.4, 2.0 Hz), 4.48-4.89 (4H, m), 7.12-7.19 (2H, m), 7.23 (1H, td, J = 8.2, 1.9 Hz), 7.33-7.39 (1H, m), 7.44 (2H, t, J = 7.5 Hz), 7.52 (1H, t, J = 7.4 Hz), 8.27 (2H, d, J = 7.2 Hz), 11.49-11.57 (1H, br).
工程１０
化合物１５－１１は、上記プロトコル（実施例１の工程１５）と同様の方法で調製した。（収率：９３％）
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.59 (3H, s), 3.66-3.71 (1H, m), 3.79 (1H, d, J = 10.0 Hz), 3.92 (1H, d, J = 10.0 Hz), 4.35-4.85 (4H, m), 7.03-7.15 (2H, m), 7.22-7.36 (2H, m).
工程１１
化合物１５－１２は、上記プロトコル（実施例１の工程１６）と同様の方法で調製した。（収率：９９％）
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.57 (3H, s), 3.62-3.67 (1H, m), 3.81 (1H, d, J = 10.5 Hz), 3.96 (1H, J = 10.5 Hz), 4.24-4.93 (4H, m), 7.19-7.30 (1H, m), 8.16-8.22 (1H, m), 8.27-8.31 (1H,m).
工程１２
化合物１５－１３は、上記プロトコル（実施例１の工程１７）と同様の方法で調製した。（収率：９５％）
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.52 (3H, s), 3.52-3.60 (2H, br), 3.66 (1H, t, J = 5.6 Hz), 3.78 (1H, d, J = 10.0 Hz), 3.92 (1H, d, J = 10.0 Hz), 4.34-4.84 (4H, m), 6.50-6.55 (1H, m), 6.59-6.64 (1H, m), 6.85 (1H, dd, J = 11.3, 8.5 Hz).
工程１３
化合物Ｉ－０１５は、上記プロトコル（実施例１の工程１８、ＳＦＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ、５０％ＭｅＯＨ（０．１％ジエチルアミンを含む））と同様の方法で調製した（収率：３７％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.58 (3H, s), 3.70 (1H, t, J = 5.5 Hz), 3.81 (1H, d, J = 9.8 Hz), 3.94 (1H, d, J = 9.8 Hz), 4.39-4.86 (4H, m), 6.15 (2H, d, J = 51.7 Hz), 7.10 (1H, t, J = 9.9 Hz), 7.43-7.47 (1H, m), 7.85-7.91 (1H, m), 8.28 (1H, s), 9.07 (1H, s), 9.47 (1H, s).
【化47】
工程１
亜鉛（４０．６ｇ、６２１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３１３ｍＬ）懸濁液に、二塩化ジ（シクロペンタジエニル）チタン（１．１０ｇ、４．４３ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０分間撹拌した後、化合物１５－１（１２．５ｇ、８９ｍｍｏｌ）および２－ブロモ－２，２－ジフルオロ酢酸エチル（２２．６ｍＬ、１７７ｍｍｏｌ）を反応混合物に加えた。室温で８時間撹拌した後、反応混合物をろ過した。ろ液を酢酸エチルおよび塩化アンモニウム水溶液で希釈した。懸濁液をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水－食塩水（１：１）および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から７０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－２（６．３２ｇ、２３．８ｍｍｏｌ、２７％）を黄色の油状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.40 (3H, t, J = 7.2 Hz), 2.08 (3H, s), 4.12 (1H, s), 4.18 (1H, d, J = 10.4 Hz), 4.26-4.36 (2H, m), 4.42 (2H, q, J = 7.2 Hz), 5.25-5.31 (1H, m).
工程２
化合物１５－２（６．３２ｇ、２３．８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６３．２ｍＬ）溶液に、塩化チオニル（３．４８ｍＬ、４７．６ｍｍｏｌ）、続いてピリジン（５．７８ｍＬ、７１．５ｍｍｏｌ）を－１０℃で加えた。－１０℃で２０分間撹拌した後、反応混合物を冷水でクエンチし、クロロホルムで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から１５％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－３（６．２３ｇ、２２．０ｍｍｏｌ、９２％）を黄色の油状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.39 (3H, t, J = 7.2 Hz), 2.12 (3H, s), 4.37-4.46 (3H, m), 4.51 (1H, dd, J = 10.9, 4.3 Hz), 4.67 (1H, d, J = 10.9 Hz), 5.42 (1H, dd, J = 9.2, 4.3 Hz).
工程３
化合物１５－３（１．１４ｇ、４ｍｍｏｌ）およびトリブチルスタンナン（２．９１ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）のメタノール（５．６ｍＬ）溶液に、ＡＩＢＮ（３２．８ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）を加えた。８０℃で２時間撹拌した後、反応混合物をフッ化カリウム水溶液でクエンチした。懸濁液をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。メタノール（５．６ｍＬ）をろ液の有機層に加えた。混合物に、水素化ホウ素ナトリウム（３７８ｍｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で３時間撹拌した後、反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から７０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－４（５００ｍｇ、２．４１ｍｍｏｌ、６０％）を黄色アモルファスとして得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 2.01-2.09 (4H, m), 3.86-4.03 (3H, m), 4.09-4.23 (2H, m), 4.41 (1H, d, J = 26.1 Hz), 5.26-5.31 (1H, m).
工程４
化合物１５－４（４９５ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．９５ｍＬ）溶液に、塩化ｔ－ブチルジフェニルシリル（０．７３７ｍＬ、２．８７ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（２４４ｍｇ、３．５９ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌した後、追加の塩化ｔ－ブチルジフェニルシリル（０．１８４ｍＬ、０．７１７ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（８１ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）を反応混合物に加えた。室温でさらに２時間撹拌した後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを５％から１５％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－５（８８９ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ、８３％）を黄色の泡状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.06 (9H, s), 2.07 (3H, s), 3.80 (1H, ddd, J = 12.9, 11.4, 5.0 Hz), 3.93-4.20 (4H, m), 4.55 (1H, d, J = 26.2 Hz), 5.26 (1H, dd, J = 9.3, 3.9 Hz), 7.38-7.48 (6H, m), 7.67 (4H, d, J = 7.8 Hz).
工程５
化合物１５－６は、上記プロトコル（実施例１の工程５）と同様の方法で調製した。（収率：１００％）
LC/MS: メソッドA, M+1 = 542, tR = 3.16分.
工程６
化合物１５－７は、上記プロトコル（実施例１の工程６）と同様の方法で調製した。（収率：３４％）
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.01 (9H, s), 1.74 (3H, s), 3.36 (1H, dd, J = 6.8, 4.6 Hz), 3.68 (1H, ddd, J = 15.2, 11.3, 4.3 Hz), 3.79-3.86 (2H, m), 3.92-4.04 (2H, m), 4.36-4.50 (2H, m), 7.06-7.15 (2H, m), 7.23-7.33 (1H, m), 7.36-7.48 (7H, m), 7.61 (2H, d, J = 6.9 Hz), 7.65 (2H, d, J = 6.1 Hz).
工程７
化合物１５－８は、上記プロトコル（実施例１の工程７）と同様の方法で調製した（収率：８６％）
LC/MS: メソッドA, M+1 = 673, tR = 3.23分.
工程８
化合物１５－８（３９６ｍｇ、０．５８９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３．９６ｍＬ）溶液に、１ｍｏｌ／ＬのＴＢＡＦ ＴＨＦ溶液（０．７０６ｍＬ、０．７０６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌した後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを３０％から７０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－９（２４４ｍｇ、０．５６２ｍｍｏｌ、９６％）を黄色アモルファスとして得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.76 (3H, d, J = 3.3 Hz), 2.15-2.22 (1H, br), 3.86-4.10 (4H, m), 4.23 (1H, dd, J = 10.5, 2.1 Hz), 4.58 (1H, dd, J = 24.7, 6.8 Hz), 4.66 (1H, dd, J = 5.3, 1.9 Hz), 7.11-7.18 (2H, m), 7.23 (1H, td, J = 8.1 Hz, 1.6 Hz), 7.31-7.39 (1H, m), 7.44 (2H, t, J = 7.4 Hz), 7.50 (1H, t, J = 7.3 Hz), 8.26 (2H, d, J = 7.0 Hz), 11.44-11.57 (1H, br).
工程９
化合物１５－９（２４４ｍｇ、０．５６２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．４４ｍＬ）溶液に、ＤＡＳＴ（０．４４５ｍＬ、３．３７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で２時間および４０℃で１時間撹拌した後、反応混合物に水（０．０２０ｍＬ、１．１２ｍｍｏｌ）を加えた。４０℃で３時間撹拌した後、混合物を重炭酸ナトリウム水溶液でクエンチし、クロロホルムで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。残渣のジクロロメタン（２．４４ｍＬ）溶液に、ＤＡＳＴ（０．４４５ｍＬ、３．３７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で１５時間撹拌した後、混合物を重炭酸ナトリウム水溶液でクエンチし、クロロホルムで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃを１０％から５０％で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１５－１０（１５８ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ、６４％）を黄色アモルファスとして得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.76 (3H, d, J = 3.4Hz), 3.86-3.93 (2H, m), 4.25 (1H, dd, J = 10.4, 2.0 Hz), 4.48-4.89 (4H, m), 7.12-7.19 (2H, m), 7.23 (1H, td, J = 8.2, 1.9 Hz), 7.33-7.39 (1H, m), 7.44 (2H, t, J = 7.5 Hz), 7.52 (1H, t, J = 7.4 Hz), 8.27 (2H, d, J = 7.2 Hz), 11.49-11.57 (1H, br).
工程１０
化合物１５－１１は、上記プロトコル（実施例１の工程１５）と同様の方法で調製した。（収率：９３％）
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.59 (3H, s), 3.66-3.71 (1H, m), 3.79 (1H, d, J = 10.0 Hz), 3.92 (1H, d, J = 10.0 Hz), 4.35-4.85 (4H, m), 7.03-7.15 (2H, m), 7.22-7.36 (2H, m).
工程１１
化合物１５－１２は、上記プロトコル（実施例１の工程１６）と同様の方法で調製した。（収率：９９％）
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.57 (3H, s), 3.62-3.67 (1H, m), 3.81 (1H, d, J = 10.5 Hz), 3.96 (1H, J = 10.5 Hz), 4.24-4.93 (4H, m), 7.19-7.30 (1H, m), 8.16-8.22 (1H, m), 8.27-8.31 (1H,m).
工程１２
化合物１５－１３は、上記プロトコル（実施例１の工程１７）と同様の方法で調製した。（収率：９５％）
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.52 (3H, s), 3.52-3.60 (2H, br), 3.66 (1H, t, J = 5.6 Hz), 3.78 (1H, d, J = 10.0 Hz), 3.92 (1H, d, J = 10.0 Hz), 4.34-4.84 (4H, m), 6.50-6.55 (1H, m), 6.59-6.64 (1H, m), 6.85 (1H, dd, J = 11.3, 8.5 Hz).
工程１３
化合物Ｉ－０１５は、上記プロトコル（実施例１の工程１８、ＳＦＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ、５０％ＭｅＯＨ（０．１％ジエチルアミンを含む））と同様の方法で調製した（収率：３７％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 1.58 (3H, s), 3.70 (1H, t, J = 5.5 Hz), 3.81 (1H, d, J = 9.8 Hz), 3.94 (1H, d, J = 9.8 Hz), 4.39-4.86 (4H, m), 6.15 (2H, d, J = 51.7 Hz), 7.10 (1H, t, J = 9.9 Hz), 7.43-7.47 (1H, m), 7.85-7.91 (1H, m), 8.28 (1H, s), 9.07 (1H, s), 9.47 (1H, s).
【0076】
上記と同様にして以下の化合物を合成する。表中、ｔＲはＬＣ／ＭＳ保持時間（分）を表す。
【表1】
【0077】
【表2】
【0078】
【表3】
【0079】
【表4】
【0080】
【表5】
【0081】
【表6】
【0082】
【表7】
【0083】
【表8】
【0084】
【表9】
【0085】
【表10】
【0086】
【表11】
【0087】
【表12】
【0088】
【表13】
【0089】
【表14】
【0090】
【表15】
【0091】
【表16】
【0092】
【表17】
【0093】
【表18】
【0094】
【表19】
【0095】
【表20】
【0096】
【表21】
【0097】
【表22】
【0098】
【表23】
【0099】
【表24】
【0100】
【表25】
【0101】
【表26】
【0102】
【表27】
【0103】
以下に、さらなる実施例を記載する。
【0104】
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）測定は、ＬＣポンプ、ダイオードアレイ（ＤＡＤ）またはＵＶ検出器、およびそれぞれの方法に特化したカラムを使用して実施した。必要であれば、追加の検出器を含めた（下記の方法の表を参照）。
カラムからのフローを、大気圧イオン源と共に構成された質量分析計（ＭＳ）に供した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）および／または正確な質量のモノアイソトピック分子量の確認を可能にするイオンを得るために、調整パラメーター（例えば、走査範囲、滞留時間など）を設定することは、当業者の知識の範囲内である。データの取得は、適切なソフトウェアによって実施した。
化合物は、これらの実験保持時間（Ｒｔ）およびイオンによって記載される。データの表で特に異なって指定されない限り、報告された分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］＋（プロトン化分子）および／または［Ｍ－Ｈ］－（脱プロトン化分子）に対応する。化合物を直接イオン化できなかった場合は、付加物の種類が特定される（すなわち、［Ｍ＋ＮＨ４］＋、［Ｍ＋ＨＣＯＯ］－など）。複数の同位体パターン（Ｂｒ、Ｃｌ）を有する分子では、報告された値は、最低同位体質量で得たものである。全ての結果は、使用される方法に一般的に関連する実験の不確実性（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｉｅｓ）を伴って得た。
以下、「ＤＡＤ」はダイオードアレイ検出器を、「ＳＱＤ」はシングル四重極質量検出器を意味する。表：ＬＣＭＳメソッドコード（流速（Ｆｌｏｗ）はｍＬ／分で、カラム温度（ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）（Ｔ）は℃で、稼働時間は分で表す）。
カラムからのフローを、大気圧イオン源と共に構成された質量分析計（ＭＳ）に供した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）および／または正確な質量のモノアイソトピック分子量の確認を可能にするイオンを得るために、調整パラメーター（例えば、走査範囲、滞留時間など）を設定することは、当業者の知識の範囲内である。データの取得は、適切なソフトウェアによって実施した。
化合物は、これらの実験保持時間（Ｒｔ）およびイオンによって記載される。データの表で特に異なって指定されない限り、報告された分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］＋（プロトン化分子）および／または［Ｍ－Ｈ］－（脱プロトン化分子）に対応する。化合物を直接イオン化できなかった場合は、付加物の種類が特定される（すなわち、［Ｍ＋ＮＨ４］＋、［Ｍ＋ＨＣＯＯ］－など）。複数の同位体パターン（Ｂｒ、Ｃｌ）を有する分子では、報告された値は、最低同位体質量で得たものである。全ての結果は、使用される方法に一般的に関連する実験の不確実性（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｉｅｓ）を伴って得た。
以下、「ＤＡＤ」はダイオードアレイ検出器を、「ＳＱＤ」はシングル四重極質量検出器を意味する。表：ＬＣＭＳメソッドコード（流速（Ｆｌｏｗ）はｍＬ／分で、カラム温度（ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）（Ｔ）は℃で、稼働時間は分で表す）。
【表28】
【0105】
ＧＣ測定は、質量分析計（ＭＳ）と接続された、それぞれの方法に特化したガスクロマトグラフィーシステムを使用して実施した。ＭＳ検出器は、電子的衝撃イオン化源／化学イオン化源（ＥＩ／ＣＩ）と共に構成されていた。
化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）の確認を可能にするイオンを得るために、調整パラメーター（例えば、走査範囲、ＭＳ温度など）を設定することは、当業者の知識の範囲内である。データの取得は、適切なソフトウェアによって実施した。
化合物は、これらの実験保持時間（Ｒｔ）およびイオンによって記載される。ＥＩについては、データの表で特に異なって指定されない限り、報告された分子イオンは、［Ｍ］＋（分子イオン）に対応する。ＣＩについては、データの表で特に異なって指定されない限り、報告された分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］＋（プロトン化分子イオン）に対応し、化合物を直接イオン化できなかった場合は、付加物の種類が特定される（すなわち、［Ｍ＋ＣＨ５］＋など）。複数の同位体パターン（Ｂｒ、Ｃｌ）を有する分子では、報告された値は、最低同位体質量で得たものである。全ての結果は、使用される方法に一般的に関連する実験の不確実性を伴って得た。
以下の表は、ＧＣＭＳメソッドを示す。表中、流速はｍＬ／分で、稼働時間は分で表す。
（実施例１０）
化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）の確認を可能にするイオンを得るために、調整パラメーター（例えば、走査範囲、ＭＳ温度など）を設定することは、当業者の知識の範囲内である。データの取得は、適切なソフトウェアによって実施した。
化合物は、これらの実験保持時間（Ｒｔ）およびイオンによって記載される。ＥＩについては、データの表で特に異なって指定されない限り、報告された分子イオンは、［Ｍ］＋（分子イオン）に対応する。ＣＩについては、データの表で特に異なって指定されない限り、報告された分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］＋（プロトン化分子イオン）に対応し、化合物を直接イオン化できなかった場合は、付加物の種類が特定される（すなわち、［Ｍ＋ＣＨ５］＋など）。複数の同位体パターン（Ｂｒ、Ｃｌ）を有する分子では、報告された値は、最低同位体質量で得たものである。全ての結果は、使用される方法に一般的に関連する実験の不確実性を伴って得た。
以下の表は、ＧＣＭＳメソッドを示す。表中、流速はｍＬ／分で、稼働時間は分で表す。
【表29】
（実施例１０）
【0106】
化合物ＩＩ－０１６の合成
工程１
１６－１（３．００ｇ、２９．１ｍｍｏｌ）、フェニルイソシアネート（９．４７ｍＬ、８７．２ｍｍｏｌ）、ニトロエタン（３．１５ｍＬ、４３．６ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（０．５０１ｍＬ、２．９１ｍｍｏｌ）のトルエン（９０ｍＬ）混合物をＮ２下、７０℃で５時間撹拌した。混合物を室温に冷却した後、得られたスラリーをろ過した。固体をトルエンで洗浄し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ１００／０～７０／３０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－２（４．３６ｇ、２８．１ｍｍｏｌ、９７％）を黄色の油状物として得た。
GC/MS: メソッド6, M = 155, tR = 3.71分.
工程２
１６－２（４．３６ｇ、２８．１ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＩＢＡＬ（１ｍｏｌ／Ｌ、３０．９ｍＬ、３０．９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４９ｍＬ）混合液をＮ２下、－７８℃で滴下した。混合物を－７８℃で３０分間撹拌した。反応をＭｅＯＨ（５．２ｍＬ）で、続けて硫酸（３．６ｍｏｌ／Ｌ、３５ｍＬ）を－３０℃で用いてクエンチした。得られた溶液を室温で撹拌した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮し粗生成物（３．９４ｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（７．６０ｇ）のＤＣＭ（８５ｍＬ）およびアセトニトリル（８５ｍＬ）混合物に、トリエチルシラン（２３．２ｍＬ、１４５ｍｍｏｌ）、続けてＢＦ３－ＯＥｔ２（１７．９ｍＬ、１４５ｍｍｏｌ）をＮ２下、－７８℃で加えた。反応液を０℃で４５分間撹拌した。反応をＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチした。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ６０／４０～０／１００で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－３（４．９１ｇ、３４．８ｍｍｏｌ、７２％）を黄色の油状物として得た。
GC/MS: メソッド6, M = 139, tR = 3.42分.
工程３
１６－３（４．９１ｇ、３４．８ｍｍｏｌ）の混合物に、ＢｕＬｉ（２．５ｍｏｌ／Ｌ、３４．８ｍＬ、８７．０ｍｍｏｌ）の２－ＭｅＴＨＦ（８１ｍＬ）混合液をＮ２下、－７８℃で滴下した。混合物を－７８℃で１０分間撹拌した。ＢＦ３－ＯＥｔ２（１７．９ｍＬ、１４５ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を同じ温度で１０分間撹拌した後、１６－３（４．９１ｇ、３４．８ｍｍｏｌ）の２－ＭｅＴＨＦ（３０ｍＬ）混合液を－７８℃で滴下した。混合物を－７８℃で１０分間撹拌し、次いで０℃に温めた。反応を水（５．２ｍＬ）でクエンチした。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮し粗生成物（１４．５ｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（１４．５ｇ）、Ｐｄ／Ｃ（１．６４ｇ）のＥｔＯＨ（１０２ｍＬ）混合液を、Ｈ２下、室温で１８時間撹拌した。反応液をＥｔＯＨで希釈した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ＥｔＯＨで洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮し粗生成物（３．７２ｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（３．７２ｇ）、Ｎａ２ＣＯ３（３．３０ｇ、３１．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１６４ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）混合物に、クロロギ酸ベンゾイル（４．４４ｍＬ、３１．１ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をＨ２Ｏで希釈した。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ１００／０～６０／４０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－４（４．５０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ、３工程で３５％）を無色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド2, M+1 = 374, tR = 1.35分.
工程４
化合物１６－４（２．９４ｇ、７．８８ｍｍｏｌ）、ＰＣＣ（１０．２ｇ、４７．３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５１ｍＬ）混合物を室温で６時間撹拌した。反応をＮａＨＣＯ水溶液でクエンチし、有機層を分離した。水層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ１００／０～５０／５０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－５（１．４１ｇ、３．８０ｍｍｏｌ、４８％）を無色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド2, M+1 = 372, tR = 1.37分.
工程５
化合物１６－５（４６０ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ（２．１９ｇ、６．１９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２３ｍＬ）混合物を７０℃で３４時間撹拌した。反応をＮａ２ＣＯ３水溶液でクエンチし、有機層を分離した。水層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ１００／０～４０／６０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－６（１５５ｍｇ、０．３９８ｍｍｏｌ、３２％、ジアステレオマー比＝７：３）を無色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド2, M+1 = 390, tR = 1.41, 1,43分.
工程６
化合物１６－６（１２０ｍｇ、０．３０８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２．４ｍＬ）混合物に、ＮａＢＨ４（２３．３ｍｇ、０．６１６ｍｍｏｌ）を室温で加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。反応をＮａ２ＣＯ３水溶液で希釈し、有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮し粗生成物（１１４ｍｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（９５．０ｍｇ）、Ｐｄ／Ｃ（２５．８ｍｇ）のＭｅＯＨ（４．９ｍＬ）混合液を、Ｈ２下、室温で５時間撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をイオン交換クロマトグラフィーによって精製し、ＭｅＯＨ／アンモニアで溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－７（４５．０ｍｇ、０．１７５ｍｍｏｌ、７２％、４つのジアステレオマー混合物）を無色の油状物として得た。
LC/MS: 方法3, M+1 = 258, tR = 0.67, 0.70, 0.80, 0.87分.
工程７
化合物１６－７（１８３ｍｇ、０．７１５ｍｍｏｌ）およびベンゾイルイソチオシアネート（０．１４ｍＬ、１．０７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７．４ｍＬ）混合物を室温で１８時間撹拌した。ＥＤＣ－ＨＣｌ（２０６ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４５℃で６時間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ１００／０～６０／４０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－８（２０２ｍｇ、０．５２３ｍｍｏｌ、７３％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 387, tR = 2.27分.
工程８
化合物１６－８（２４０ｍｇ、０．６２１ｍｍｏｌ）およびヒドラジン水和物（０．３０ｍＬ、６．２１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４．０ｍＬ）およびＴＨＦ（４．０ｍＬ）混合物を室温で４．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ１００／０～８５／１５で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－９（１７５ｍｇ、０．６２０ｍｍｏｌ、９９％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド2, M+1 = 283, tR = 0.80, 0.84分.
工程９
化合物１６－９（１７５ｍｇ、０．６２０ｍｍｏｌ）のトリフルオロ酢酸（０．９５ｍＬ）溶液に、硫酸（０．１８ｍＬ、３．４１ｍｍｏｌ）および硝酸（０．０４２ｍＬ、１２．４ｍｍｏｌ）を－１５℃で加え、反応混合物を－１０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を、０℃未満でＫ２ＣＯ３水溶液によってクエンチした。混合物をＥｔＯＡｃおよびＨ２Ｏで希釈した。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ９５／５で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－１０（１４５ｍｇ、０．４４３ｍｍｏｌ、７１％、４つのジアステレオマー混合物）を黄色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 328, tR = 1.20, 1.26, 1.28, 1.34分.
工程１０
化合物１６－１０（１４５ｍｇ、０．４４３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ／Ｃ（３３．０ｍｇ）、ＨＣｌ（６ｍｏｌ／Ｌ、０．１７７ｍＬ、０．８８６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４ｍＬ）混合液を、Ｈ２下、室温で１８時間撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ＥｔＯＨで洗浄した。残渣をＨ２ＯおよびＭＴＢＥ中に取り込ませた。水層を分離した。水層をＮａ２ＣＯ３水溶液で塩基性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮し粗生成物（１１２ｍｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（１１２ｍｇ）およびＨＣｌ（６Ｍ、０．０６６ｍＬ、０．３９６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４．７ｍＬ）混合物を室温で１５分間撹拌した。５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（７１．３ｍｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ－ＨＣｌ（９４．９ｍｇ、０．４９４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃおよびＮａ２ＣＯ３水溶液中に取り込ませた。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（７％アンモニア溶液）１００／０～９５／５で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮した。粗生成物をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤ－Ｈ ５μｍ ２５０×２１．１ｍｍ、移動相：８０％ＣＯ２、２０％ＭｅＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））によって精製して、異性体混合物を得た。混合物をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ－Ｈ ５μｍ ２５０×２０ｍｍ、移動相：８５％ＣＯ２、１５％ＥｔＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））によって精製して、白色の固体を得た。固体をＤＣＭで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮し、化合物ＩＩ－０１６（８．０ｍｇ、０．０１７７ｍｏｌ）を得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 452, tR = 1.48分.
1H NMR (CDCl3) δ: 1.64-1.71 (m, 4H), 2.11 (dddt, J = 15.0, 12.4, 5.4, 2.8, 2.8 Hz, 1H), 3.58-3.67 (m, 1H), 3.68-3.83 (m, 2H), 4.12 (brs, 1H), 4.22 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 6.15 (dq, J = 51.2, 2.3 Hz, 2H), 7.08 (dd, J = 11.4, 8.8 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 6.7, 2.6 Hz, 1H), 7.68-7.74 (m, 1H), 8.29 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 9.08 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 9.48 (s, 1H).
【化48】
工程１
１６－１（３．００ｇ、２９．１ｍｍｏｌ）、フェニルイソシアネート（９．４７ｍＬ、８７．２ｍｍｏｌ）、ニトロエタン（３．１５ｍＬ、４３．６ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（０．５０１ｍＬ、２．９１ｍｍｏｌ）のトルエン（９０ｍＬ）混合物をＮ２下、７０℃で５時間撹拌した。混合物を室温に冷却した後、得られたスラリーをろ過した。固体をトルエンで洗浄し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ１００／０～７０／３０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－２（４．３６ｇ、２８．１ｍｍｏｌ、９７％）を黄色の油状物として得た。
GC/MS: メソッド6, M = 155, tR = 3.71分.
工程２
１６－２（４．３６ｇ、２８．１ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＩＢＡＬ（１ｍｏｌ／Ｌ、３０．９ｍＬ、３０．９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４９ｍＬ）混合液をＮ２下、－７８℃で滴下した。混合物を－７８℃で３０分間撹拌した。反応をＭｅＯＨ（５．２ｍＬ）で、続けて硫酸（３．６ｍｏｌ／Ｌ、３５ｍＬ）を－３０℃で用いてクエンチした。得られた溶液を室温で撹拌した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮し粗生成物（３．９４ｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（７．６０ｇ）のＤＣＭ（８５ｍＬ）およびアセトニトリル（８５ｍＬ）混合物に、トリエチルシラン（２３．２ｍＬ、１４５ｍｍｏｌ）、続けてＢＦ３－ＯＥｔ２（１７．９ｍＬ、１４５ｍｍｏｌ）をＮ２下、－７８℃で加えた。反応液を０℃で４５分間撹拌した。反応をＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチした。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ６０／４０～０／１００で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－３（４．９１ｇ、３４．８ｍｍｏｌ、７２％）を黄色の油状物として得た。
GC/MS: メソッド6, M = 139, tR = 3.42分.
工程３
１６－３（４．９１ｇ、３４．８ｍｍｏｌ）の混合物に、ＢｕＬｉ（２．５ｍｏｌ／Ｌ、３４．８ｍＬ、８７．０ｍｍｏｌ）の２－ＭｅＴＨＦ（８１ｍＬ）混合液をＮ２下、－７８℃で滴下した。混合物を－７８℃で１０分間撹拌した。ＢＦ３－ＯＥｔ２（１７．９ｍＬ、１４５ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を同じ温度で１０分間撹拌した後、１６－３（４．９１ｇ、３４．８ｍｍｏｌ）の２－ＭｅＴＨＦ（３０ｍＬ）混合液を－７８℃で滴下した。混合物を－７８℃で１０分間撹拌し、次いで０℃に温めた。反応を水（５．２ｍＬ）でクエンチした。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮し粗生成物（１４．５ｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（１４．５ｇ）、Ｐｄ／Ｃ（１．６４ｇ）のＥｔＯＨ（１０２ｍＬ）混合液を、Ｈ２下、室温で１８時間撹拌した。反応液をＥｔＯＨで希釈した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ＥｔＯＨで洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮し粗生成物（３．７２ｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（３．７２ｇ）、Ｎａ２ＣＯ３（３．３０ｇ、３１．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１６４ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）混合物に、クロロギ酸ベンゾイル（４．４４ｍＬ、３１．１ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をＨ２Ｏで希釈した。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ１００／０～６０／４０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－４（４．５０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ、３工程で３５％）を無色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド2, M+1 = 374, tR = 1.35分.
工程４
化合物１６－４（２．９４ｇ、７．８８ｍｍｏｌ）、ＰＣＣ（１０．２ｇ、４７．３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５１ｍＬ）混合物を室温で６時間撹拌した。反応をＮａＨＣＯ水溶液でクエンチし、有機層を分離した。水層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ１００／０～５０／５０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－５（１．４１ｇ、３．８０ｍｍｏｌ、４８％）を無色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド2, M+1 = 372, tR = 1.37分.
工程５
化合物１６－５（４６０ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ（２．１９ｇ、６．１９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２３ｍＬ）混合物を７０℃で３４時間撹拌した。反応をＮａ２ＣＯ３水溶液でクエンチし、有機層を分離した。水層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ１００／０～４０／６０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－６（１５５ｍｇ、０．３９８ｍｍｏｌ、３２％、ジアステレオマー比＝７：３）を無色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド2, M+1 = 390, tR = 1.41, 1,43分.
工程６
化合物１６－６（１２０ｍｇ、０．３０８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２．４ｍＬ）混合物に、ＮａＢＨ４（２３．３ｍｇ、０．６１６ｍｍｏｌ）を室温で加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。反応をＮａ２ＣＯ３水溶液で希釈し、有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮し粗生成物（１１４ｍｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（９５．０ｍｇ）、Ｐｄ／Ｃ（２５．８ｍｇ）のＭｅＯＨ（４．９ｍＬ）混合液を、Ｈ２下、室温で５時間撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をイオン交換クロマトグラフィーによって精製し、ＭｅＯＨ／アンモニアで溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－７（４５．０ｍｇ、０．１７５ｍｍｏｌ、７２％、４つのジアステレオマー混合物）を無色の油状物として得た。
LC/MS: 方法3, M+1 = 258, tR = 0.67, 0.70, 0.80, 0.87分.
工程７
化合物１６－７（１８３ｍｇ、０．７１５ｍｍｏｌ）およびベンゾイルイソチオシアネート（０．１４ｍＬ、１．０７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７．４ｍＬ）混合物を室温で１８時間撹拌した。ＥＤＣ－ＨＣｌ（２０６ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４５℃で６時間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ１００／０～６０／４０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－８（２０２ｍｇ、０．５２３ｍｍｏｌ、７３％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 387, tR = 2.27分.
工程８
化合物１６－８（２４０ｍｇ、０．６２１ｍｍｏｌ）およびヒドラジン水和物（０．３０ｍＬ、６．２１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４．０ｍＬ）およびＴＨＦ（４．０ｍＬ）混合物を室温で４．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ１００／０～８５／１５で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－９（１７５ｍｇ、０．６２０ｍｍｏｌ、９９％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド2, M+1 = 283, tR = 0.80, 0.84分.
工程９
化合物１６－９（１７５ｍｇ、０．６２０ｍｍｏｌ）のトリフルオロ酢酸（０．９５ｍＬ）溶液に、硫酸（０．１８ｍＬ、３．４１ｍｍｏｌ）および硝酸（０．０４２ｍＬ、１２．４ｍｍｏｌ）を－１５℃で加え、反応混合物を－１０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を、０℃未満でＫ２ＣＯ３水溶液によってクエンチした。混合物をＥｔＯＡｃおよびＨ２Ｏで希釈した。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ９５／５で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１６－１０（１４５ｍｇ、０．４４３ｍｍｏｌ、７１％、４つのジアステレオマー混合物）を黄色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 328, tR = 1.20, 1.26, 1.28, 1.34分.
工程１０
化合物１６－１０（１４５ｍｇ、０．４４３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ／Ｃ（３３．０ｍｇ）、ＨＣｌ（６ｍｏｌ／Ｌ、０．１７７ｍＬ、０．８８６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４ｍＬ）混合液を、Ｈ２下、室温で１８時間撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ＥｔＯＨで洗浄した。残渣をＨ２ＯおよびＭＴＢＥ中に取り込ませた。水層を分離した。水層をＮａ２ＣＯ３水溶液で塩基性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮し粗生成物（１１２ｍｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（１１２ｍｇ）およびＨＣｌ（６Ｍ、０．０６６ｍＬ、０．３９６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４．７ｍＬ）混合物を室温で１５分間撹拌した。５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（７１．３ｍｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ－ＨＣｌ（９４．９ｍｇ、０．４９４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃおよびＮａ２ＣＯ３水溶液中に取り込ませた。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（７％アンモニア溶液）１００／０～９５／５で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮した。粗生成物をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤ－Ｈ ５μｍ ２５０×２１．１ｍｍ、移動相：８０％ＣＯ２、２０％ＭｅＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））によって精製して、異性体混合物を得た。混合物をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ－Ｈ ５μｍ ２５０×２０ｍｍ、移動相：８５％ＣＯ２、１５％ＥｔＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））によって精製して、白色の固体を得た。固体をＤＣＭで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮し、化合物ＩＩ－０１６（８．０ｍｇ、０．０１７７ｍｏｌ）を得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 452, tR = 1.48分.
1H NMR (CDCl3) δ: 1.64-1.71 (m, 4H), 2.11 (dddt, J = 15.0, 12.4, 5.4, 2.8, 2.8 Hz, 1H), 3.58-3.67 (m, 1H), 3.68-3.83 (m, 2H), 4.12 (brs, 1H), 4.22 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 6.15 (dq, J = 51.2, 2.3 Hz, 2H), 7.08 (dd, J = 11.4, 8.8 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 6.7, 2.6 Hz, 1H), 7.68-7.74 (m, 1H), 8.29 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 9.08 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 9.48 (s, 1H).
【0107】
（実施例１１）
【0108】
化合物ＩＩ－０１７の合成
工程１
化合物１７－１（４．０ｇ、１５．５ｍｍｏｌ）のアセトン（１２０ｍＬ）および水（４０ｍＬ）混合物に、三酸化クロム（７．７７ｇ、７７．７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。次いで硫酸（１１．０ｍＬ、２０６ｍｍｏｌ）を０℃で滴下し、混合物を０℃で４時間撹拌した。反応をＮａ２ＣＯ３水溶液でクエンチし、有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ７０／３０～４０／６０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１７－２（３．９２ｇ、１５．４ｍｍｏｌ、９８％）を無色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 256, tR = 1.08, 1.16分.
工程２
トリアセトキシ水素化ホウ素テトラメチルアンモニウム（８．２５ｇ、３１．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２ｍＬ）混合物に、酢酸（４．３８ｍＬ、７６．４ｍｍｏｌ）を－２５℃で加えた。混合物を室温で４０分間撹拌し、０℃で一晩静置した。化合物１７－２（１．０ｇ、３．９２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）混合液を混合物に滴下した。得られた混合物を－２０℃で２４時間撹拌し、２時間静置して０℃に温めた。反応を酒石酸カリウムナトリウム水溶液でクエンチし、次いでＮａＨＣＯ３水溶液を０℃で加えた。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をＨＰＬＣ（固定相：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ５０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：８５％の０．２５％ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、１５％のＣＨ３ＣＮから、６５％の０．２５％ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、３５％のＣＨ３ＣＮまでのグラジエント）によって精製した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１７－３（５２０ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ、５２％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド5, M+1 = 258, tR = 0.90分.
工程３
化合物１７－３（５２０ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）およびベンゾイルイソチオシアネート（０．４０８ｍＬ、３．０３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２１ｍＬ）混合物を室温で一晩撹拌した。ＥＤＣ－ＨＣｌ（５８１ｍｇ、３．０３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４５℃で６時間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ１００／０～６０／４０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１７－４（６３０ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ、８１％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 387, tR = 2.13分.
工程４
化合物１７－４（６３０ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）およびヒドラジン水和物（０．７９２ｍＬ、１６．３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）混合物を室温で４．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ１００／０～８５／１５で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１７－５（６８０ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ、７４％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 283, tR = 0.76分.
工程５
化合物１７－５（６８０ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）のトリフルオロ酢酸（１．８ｍＬ）溶液に、硫酸（０．３５ｍＬ、６．６２ｍｍｏｌ）および硝酸（０．０８２ｍＬ、１．８１ｍｍｏｌ）を－１０℃未満で加え、反応混合物を－１０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を、Ｋ２ＣＯ３水溶液を０℃未満で用いてクエンチした。混合物をＥｔＯＡｃおよびＨ２Ｏで希釈した。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ９７／３で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１７－６（３３５ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ、８５％）を黄色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 328, tR = 0.94分.
工程６
化合物１７－６（３２４ｍｇ、０．９９０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ／Ｃ（７３．７ｍｇ）、ＨＣｌ（６ｍｏｌ／Ｌ、０．３９６ｍＬ、１．９８ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３．２ｍＬ）混合液を、Ｈ２下、室温で１８時間撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ＥｔＯＨで洗浄した。残渣をＨ２ＯおよびＭＴＢＥ中に取り込ませた。水層を分離した。水層をＮａ２ＣＯ３水溶液で塩基性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮し粗生成物（２３０ｍｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（２３０ｍｇ）およびＨＣｌ（６Ｍ、０．１３５ｍＬ、０．８１２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（９．７ｍＬ）混合物を室温で１５分間撹拌した。５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（１４６ｍｇ、０．８５１ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ－ＨＣｌ（１９５ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃおよびＮａ２ＣＯ３水溶液中に取り込ませた。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（７％アンモニア溶液）１００／０～９５／５で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮した。生成物をｉＰｒＯＨ（３．５ｍＬ）に溶解し、５０℃に温めた。ＨＣｌ（６Ｍ、０．１３ｍＬ、０．７７４ｍｍｏｌ）およびイソプロピルエーテル（７ｍＬ）を滴下した。得られた混合物を室温で３０分間撹拌した。スラリーをろ過し、固体を減圧下で乾燥し、化合物ＩＩ－０１７（２６５ｍｇ、０．５８７ｍｍｏｌ、７０％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 452, tR = 1.28分.
1H NMR (DMSO-d6) δ: 1.71-1.84 (m, 4H), 2.12 (dd, J = 12.1, 4.6 Hz, 1H), 2.41 (td, J = 10.8, 4.1 Hz, 1H), 2.55-2.62 (m, 1H), 3.20-3.28 (m, 1H), 3.87 (br dd, J = 11.7, 4.8 Hz, 1H), 4.24 (br d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.44 (td, J = 10.8, 4.9 Hz, 1H), 4.94-5.25 (m, 2H), 6.10-6.36 (m, 2H), 7.33 (dd, J = 12.4, 9.0 Hz, 1H), 7.93 (dd, J = 7.2, 2.6 Hz, 1H), 8.10-8.21 (m, 1H), 8.43 (br s, 1H), 8.60 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.99 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 9.18 (br s, 1H), 10.44 (br s, 1H), 10.88 (s, 1H).
【化49】
工程１
化合物１７－１（４．０ｇ、１５．５ｍｍｏｌ）のアセトン（１２０ｍＬ）および水（４０ｍＬ）混合物に、三酸化クロム（７．７７ｇ、７７．７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。次いで硫酸（１１．０ｍＬ、２０６ｍｍｏｌ）を０℃で滴下し、混合物を０℃で４時間撹拌した。反応をＮａ２ＣＯ３水溶液でクエンチし、有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ７０／３０～４０／６０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１７－２（３．９２ｇ、１５．４ｍｍｏｌ、９８％）を無色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 256, tR = 1.08, 1.16分.
工程２
トリアセトキシ水素化ホウ素テトラメチルアンモニウム（８．２５ｇ、３１．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２ｍＬ）混合物に、酢酸（４．３８ｍＬ、７６．４ｍｍｏｌ）を－２５℃で加えた。混合物を室温で４０分間撹拌し、０℃で一晩静置した。化合物１７－２（１．０ｇ、３．９２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）混合液を混合物に滴下した。得られた混合物を－２０℃で２４時間撹拌し、２時間静置して０℃に温めた。反応を酒石酸カリウムナトリウム水溶液でクエンチし、次いでＮａＨＣＯ３水溶液を０℃で加えた。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をＨＰＬＣ（固定相：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ５０×１００ｍｍ、５μｍ、移動相：８５％の０．２５％ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、１５％のＣＨ３ＣＮから、６５％の０．２５％ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、３５％のＣＨ３ＣＮまでのグラジエント）によって精製した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１７－３（５２０ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ、５２％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド5, M+1 = 258, tR = 0.90分.
工程３
化合物１７－３（５２０ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）およびベンゾイルイソチオシアネート（０．４０８ｍＬ、３．０３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２１ｍＬ）混合物を室温で一晩撹拌した。ＥＤＣ－ＨＣｌ（５８１ｍｇ、３．０３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４５℃で６時間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ｎ－ヘプタン／ＥｔＯＡｃ１００／０～６０／４０で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１７－４（６３０ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ、８１％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 387, tR = 2.13分.
工程４
化合物１７－４（６３０ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）およびヒドラジン水和物（０．７９２ｍＬ、１６．３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）混合物を室温で４．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ１００／０～８５／１５で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１７－５（６８０ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ、７４％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 283, tR = 0.76分.
工程５
化合物１７－５（６８０ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）のトリフルオロ酢酸（１．８ｍＬ）溶液に、硫酸（０．３５ｍＬ、６．６２ｍｍｏｌ）および硝酸（０．０８２ｍＬ、１．８１ｍｍｏｌ）を－１０℃未満で加え、反応混合物を－１０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を、Ｋ２ＣＯ３水溶液を０℃未満で用いてクエンチした。混合物をＥｔＯＡｃおよびＨ２Ｏで希釈した。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ９７／３で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮し、化合物１７－６（３３５ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ、８５％）を黄色の油状物として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 328, tR = 0.94分.
工程６
化合物１７－６（３２４ｍｇ、０．９９０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ／Ｃ（７３．７ｍｇ）、ＨＣｌ（６ｍｏｌ／Ｌ、０．３９６ｍＬ、１．９８ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３．２ｍＬ）混合液を、Ｈ２下、室温で１８時間撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、ＥｔＯＨで洗浄した。残渣をＨ２ＯおよびＭＴＢＥ中に取り込ませた。水層を分離した。水層をＮａ２ＣＯ３水溶液で塩基性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮し粗生成物（２３０ｍｇ）を得、さらに精製することなしに次工程にそのまま使用した。
粗生成物（２３０ｍｇ）およびＨＣｌ（６Ｍ、０．１３５ｍＬ、０．８１２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（９．７ｍＬ）混合物を室温で１５分間撹拌した。５－（フルオロメトキシ）ピラジン－２－カルボン酸（１４６ｍｇ、０．８５１ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ－ＨＣｌ（１９５ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃおよびＮａ２ＣＯ３水溶液中に取り込ませた。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。溶媒を減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムに付し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（７％アンモニア溶液）１００／０～９５／５で溶出した。集めたフラクションを減圧下で濃縮した。生成物をｉＰｒＯＨ（３．５ｍＬ）に溶解し、５０℃に温めた。ＨＣｌ（６Ｍ、０．１３ｍＬ、０．７７４ｍｍｏｌ）およびイソプロピルエーテル（７ｍＬ）を滴下した。得られた混合物を室温で３０分間撹拌した。スラリーをろ過し、固体を減圧下で乾燥し、化合物ＩＩ－０１７（２６５ｍｇ、０．５８７ｍｍｏｌ、７０％）を白色固体として得た。
LC/MS: メソッド1, M+1 = 452, tR = 1.28分.
1H NMR (DMSO-d6) δ: 1.71-1.84 (m, 4H), 2.12 (dd, J = 12.1, 4.6 Hz, 1H), 2.41 (td, J = 10.8, 4.1 Hz, 1H), 2.55-2.62 (m, 1H), 3.20-3.28 (m, 1H), 3.87 (br dd, J = 11.7, 4.8 Hz, 1H), 4.24 (br d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.44 (td, J = 10.8, 4.9 Hz, 1H), 4.94-5.25 (m, 2H), 6.10-6.36 (m, 2H), 7.33 (dd, J = 12.4, 9.0 Hz, 1H), 7.93 (dd, J = 7.2, 2.6 Hz, 1H), 8.10-8.21 (m, 1H), 8.43 (br s, 1H), 8.60 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.99 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 9.18 (br s, 1H), 10.44 (br s, 1H), 10.88 (s, 1H).
【0109】
以下に、本発明化合物の試験例を記載する。
薬理例
本発明で提供される化合物は、ｂｅｔａ－ｓｉｔｅ ＡＰＰ－ｃｌｅａｖｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ １（ＢＡＣＥ１）の阻害剤である。アスパラギン酸プロテアーゼであるＢＡＣＥ１の阻害は、アルツハイマー病（ＡＤ）の治療に適切であると考えられている。βアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）からのβアミロイドペプチド（Ａβ）の産生および蓄積は、ＡＤの発症および進行に重要な役割を果たすと考えられている。ＢＡＣＥ１およびγセクレターゼそれぞれによるＡβドメインのＮ－およびＣ－末端での一連の切断により、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）からＡβが産生される。
式（Ｉ）の化合物は、ＢＡＣＥ２に比較してＢＡＣＥ１に選択的に結合し、ＢＡＣＥ２に比較してＢＡＣＥ１の酵素活性を阻害することが可能であり、ＢＡＣＥ２に比較してＢＡＣＥ１に対して選択的に効果を有することが予想される。下記の生化学競合的放射性リガンド結合アッセイ、生化学蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）に基づくアッセイ、および細胞αＬｉｓａアッセイは該化合物の同定に適切であり、これらを利用して該阻害剤の挙動を試験する。
（試験例１：ＢＡＣＥ１およびＢＡＣＥ２生化学競合的放射性リガンド結合アッセイ）
ＢＡＣＥ２に対するＢＡＣＥ１酵素選択性を探索するために、各精製酵素への結合親和性（Ｋｉ）を競合的放射性リガンド結合アッセイ、すなわちトリチウム標識非選択的ＢＡＣＥ１／ＢＡＣＥ２阻害剤を用いた競合において決定した。
簡潔には、試験管中で、対象の化合物を放射性リガンドおよびＢＡＣＥ１またはＢＡＣＥ２を含有するＨＥＫ２９３由来膜と合わせた。競合的結合反応をｐＨ６．２で行い、平衡状態に達するまで室温でインキュベートした。その後、Ｂｒａｎｄｅｌｌ ９６ハーベスターによるろ過で遊離放射性リガンドを結合放射性リガンドから分離した。フィルターを洗浄用緩衝液で４回洗浄し、フィルターシートをシンチレーションバイアル中に打ち抜いた。Ｕｌｔｉｍａ Ｇｏｌｄシンチレーションカクテルを加え、サンプルを振盪させた。翌日に、Ｔｒｉｃａｒｂシンチレーションカウンターでバイアルを計数して、結合放射性リガンドの壊変毎分（ｄｐｍ）を得た。
％ＣＴＬ＝（サンプル／ＨＣ）＊１００を算出し、式中、ＨＣはＨｉｇｈ ｃｏｎｔｒｏｌ、すなわち、放射性リガンドの総結合であり、試験化合物の種々の用量のデータ点を通る曲線に適合させた。ｐＩＣ５０またはＩＣ５０を算出し、式Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋（［ＲＬ］／Ｋｄ））によってＫｉに変換した。式中、［ＲＬ］は放射性リガンドの使用濃度であり、Ｋｄは放射性リガンド－膜複合体で決められた解離定数である。
（試験例２）
（１）ＢＡＣＥ１ ＦＲＥＴ生化学アッセイ
このアッセイは、蛍光共鳴エネルギー移動アッセイ（ＦＲＥＴ）に基づくアッセイである。このアッセイ用の基質は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）βセクレターゼ切断部位の「スウェーデン」Ｌｙｓ－Ｍｅｔ／Ａｓｎ－Ｌｅｕ変異を含有するＡＰＰ由来の１３個のアミノ酸ペプチドである。この基質は２つの蛍光団も含有する。（７－メトキシクマリン－４－イル）酢酸（Ｍｃａ）は、励起波長３２０ｎｍおよび発光４０５ｎｍの蛍光性ドナーであり、２，４－ジニトロフェノール（Ｄｎｐ）は独自の消光アクセプターである。この２つの団の間の距離は、光励起の際、共鳴エネルギー移動でアクセプターによりドナー蛍光エネルギーが有意に消光されるように選択される。ＢＡＣＥ１によって切断されると、蛍光団Ｍｃａが消光団Ｄｎｐから分離し、ドナーの全蛍光収率が回復する。蛍光収率の増加は、タンパク質分解率に線形に相関する。
簡潔にいえば、３８４－ウェル形式で最終濃度０．０４μｇ／ｍＬの組み換えＢＡＣＥ１タンパク質を、化合物の非存在下または存在下、インキュベーション緩衝液（最終濃度：３３．３ｍＭクエン酸緩衝液 ｐＨ５．０、０．０３３％ＰＥＧ、３％ＤＭＳＯ）中で１０μＭ基質とともに室温で４５０分間インキュベートした。次に、Ｔ＝０’～１２０’およびＴ＝４５０’（励起３２０ｎｍ、および発光４０５ｎｍ）で蛍光測定して、タンパク質分解量を直接測定した。結果を、Ｔ４５０およびＴｘ間の差としてＲＦＵ（相対蛍光単位）で表した（Ｔｘは、０～１２０分の反応速度に応じて選択する）。
最適曲線を、二乗法の最小和によって、％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎ対化合物濃度のプロットに適合させた。これにより、ＩＣ５０値（活性の５０％阻害を生じさせる阻害濃度）を得ることができる。
ＬＣ＝Ｌｏｗ ｃｏｎｔｒｏｌ中央値
＝Ｌｏｗ ｃｏｎｔｒｏｌ：酵素が非存在下での反応
ＨＣ＝Ｈｉｇｈ ｃｏｎｔｒｏｌ中央値
＝Ｈｉｇｈ ｃｏｎｔｒｏｌ：酵素が存在下での反応
％Ｅｆｆｅｃｔ＝１００－［（サンプル－ＬＣ）／（ＨＣ－ＬＣ）＊１００］
％Ｃｏｎｔｒｏｌ＝（サンプル／ＨＣ）＊１００
％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎ＝（サンプル－ＬＣ）／（ＨＣ－ＬＣ）＊１００
式（Ｉ）の化合物は、ＢＡＣＥ１阻害活性を有し、化合物がＢＡＣＥ１受容体を阻害できるのに十分である。
具体的には、上記プロトコルにより、ＩＣ５０は、好ましくは５０００ｎＭ以下、より好ましくは１０００ｎＭ以下、さらに好ましくは１００ｎＭ以下である。
（２）ＢＡＣＥ２ ＦＲＥＴ生化学アッセイ
このアッセイは、蛍光共鳴エネルギー移動アッセイ（ＦＲＥＴ）に基づくアッセイである。このアッセイ用の基質は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）βセクレターゼ切断部位の「スウェーデン」Ｌｙｓ－Ｍｅｔ／Ａｓｎ－Ｌｅｕ変異を含有する。この基質は２つの蛍光団も含有する。（７－メトキシクマリン－４－イル）酢酸（Ｍｃａ）は、励起波長３２０ｎｍおよび発光４０５ｎｍの蛍光性ドナーであり、２，４－ジニトロフェノール（Ｄｎｐ）は独自の消光アクセプターである。この２つの団の間の距離は、光励起の際、共鳴エネルギー移動でアクセプターによりドナー蛍光エネルギーが有意に消光されるように選択される。βセクレターゼによって切断されると、蛍光団Ｍｃａが消光団Ｄｎｐから分離され、ドナーの全蛍光収率が回復する。蛍光収率の増加は、タンパク質分解率に線形に相関する。
簡潔にいえば、３８４－ウェル形式で最終濃度０．４μｇ／ｍＬの組み換えＢＡＣＥ２タンパク質を、化合物の非存在下または存在下、インキュベーション緩衝液（最終濃度：３３．３ｍＭクエン酸緩衝液 ｐＨ５．０、０．０３３％ＰＥＧ、２％ＤＭＳＯ）中で１０μＭ基質とともに室温で４５０分間インキュベートした。次に、Ｔ＝０およびＴ＝４５０（励起３２０ｎｍ、および発光４０５ｎｍ）で蛍光測定して、タンパク質分解量を直接測定した。結果を、Ｔ４５０およびＴ０間の差としてＲＦＵ（相対蛍光単位）で表した。
最適曲線を、二乗法の最小和によって、％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎ対化合物濃度のプロットに適合させた。これにより、ＩＣ５０値（活性の５０％阻害を生じさせる阻害濃度）を得ることができる。
ＬＣ＝Ｌｏｗ ｃｏｎｔｒｏｌ中央値
＝Ｌｏｗ ｃｏｎｔｒｏｌ：酵素が非存在下での反応
ＨＣ＝Ｈｉｇｈ ｃｏｎｔｒｏｌ中央値
＝Ｈｉｇｈ ｃｏｎｔｒｏｌ：酵素が存在下での反応
％Ｅｆｆｅｃｔ＝１００－［（サンプル－ＬＣ）／（ＨＣ－ＬＣ）＊１００］
％Ｃｏｎｔｒｏｌ＝（サンプル／ＨＣ）＊１００
％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎ＝（サンプル－ＬＣ）／（ＨＣ－ＬＣ）＊１００
以下の例示化合物を本質的に上記のとおりに試験し、以下の活性を示した：
薬理例
本発明で提供される化合物は、ｂｅｔａ－ｓｉｔｅ ＡＰＰ－ｃｌｅａｖｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ １（ＢＡＣＥ１）の阻害剤である。アスパラギン酸プロテアーゼであるＢＡＣＥ１の阻害は、アルツハイマー病（ＡＤ）の治療に適切であると考えられている。βアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）からのβアミロイドペプチド（Ａβ）の産生および蓄積は、ＡＤの発症および進行に重要な役割を果たすと考えられている。ＢＡＣＥ１およびγセクレターゼそれぞれによるＡβドメインのＮ－およびＣ－末端での一連の切断により、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）からＡβが産生される。
式（Ｉ）の化合物は、ＢＡＣＥ２に比較してＢＡＣＥ１に選択的に結合し、ＢＡＣＥ２に比較してＢＡＣＥ１の酵素活性を阻害することが可能であり、ＢＡＣＥ２に比較してＢＡＣＥ１に対して選択的に効果を有することが予想される。下記の生化学競合的放射性リガンド結合アッセイ、生化学蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）に基づくアッセイ、および細胞αＬｉｓａアッセイは該化合物の同定に適切であり、これらを利用して該阻害剤の挙動を試験する。
（試験例１：ＢＡＣＥ１およびＢＡＣＥ２生化学競合的放射性リガンド結合アッセイ）
ＢＡＣＥ２に対するＢＡＣＥ１酵素選択性を探索するために、各精製酵素への結合親和性（Ｋｉ）を競合的放射性リガンド結合アッセイ、すなわちトリチウム標識非選択的ＢＡＣＥ１／ＢＡＣＥ２阻害剤を用いた競合において決定した。
簡潔には、試験管中で、対象の化合物を放射性リガンドおよびＢＡＣＥ１またはＢＡＣＥ２を含有するＨＥＫ２９３由来膜と合わせた。競合的結合反応をｐＨ６．２で行い、平衡状態に達するまで室温でインキュベートした。その後、Ｂｒａｎｄｅｌｌ ９６ハーベスターによるろ過で遊離放射性リガンドを結合放射性リガンドから分離した。フィルターを洗浄用緩衝液で４回洗浄し、フィルターシートをシンチレーションバイアル中に打ち抜いた。Ｕｌｔｉｍａ Ｇｏｌｄシンチレーションカクテルを加え、サンプルを振盪させた。翌日に、Ｔｒｉｃａｒｂシンチレーションカウンターでバイアルを計数して、結合放射性リガンドの壊変毎分（ｄｐｍ）を得た。
％ＣＴＬ＝（サンプル／ＨＣ）＊１００を算出し、式中、ＨＣはＨｉｇｈ ｃｏｎｔｒｏｌ、すなわち、放射性リガンドの総結合であり、試験化合物の種々の用量のデータ点を通る曲線に適合させた。ｐＩＣ５０またはＩＣ５０を算出し、式Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋（［ＲＬ］／Ｋｄ））によってＫｉに変換した。式中、［ＲＬ］は放射性リガンドの使用濃度であり、Ｋｄは放射性リガンド－膜複合体で決められた解離定数である。
（試験例２）
（１）ＢＡＣＥ１ ＦＲＥＴ生化学アッセイ
このアッセイは、蛍光共鳴エネルギー移動アッセイ（ＦＲＥＴ）に基づくアッセイである。このアッセイ用の基質は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）βセクレターゼ切断部位の「スウェーデン」Ｌｙｓ－Ｍｅｔ／Ａｓｎ－Ｌｅｕ変異を含有するＡＰＰ由来の１３個のアミノ酸ペプチドである。この基質は２つの蛍光団も含有する。（７－メトキシクマリン－４－イル）酢酸（Ｍｃａ）は、励起波長３２０ｎｍおよび発光４０５ｎｍの蛍光性ドナーであり、２，４－ジニトロフェノール（Ｄｎｐ）は独自の消光アクセプターである。この２つの団の間の距離は、光励起の際、共鳴エネルギー移動でアクセプターによりドナー蛍光エネルギーが有意に消光されるように選択される。ＢＡＣＥ１によって切断されると、蛍光団Ｍｃａが消光団Ｄｎｐから分離し、ドナーの全蛍光収率が回復する。蛍光収率の増加は、タンパク質分解率に線形に相関する。
簡潔にいえば、３８４－ウェル形式で最終濃度０．０４μｇ／ｍＬの組み換えＢＡＣＥ１タンパク質を、化合物の非存在下または存在下、インキュベーション緩衝液（最終濃度：３３．３ｍＭクエン酸緩衝液 ｐＨ５．０、０．０３３％ＰＥＧ、３％ＤＭＳＯ）中で１０μＭ基質とともに室温で４５０分間インキュベートした。次に、Ｔ＝０’～１２０’およびＴ＝４５０’（励起３２０ｎｍ、および発光４０５ｎｍ）で蛍光測定して、タンパク質分解量を直接測定した。結果を、Ｔ４５０およびＴｘ間の差としてＲＦＵ（相対蛍光単位）で表した（Ｔｘは、０～１２０分の反応速度に応じて選択する）。
最適曲線を、二乗法の最小和によって、％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎ対化合物濃度のプロットに適合させた。これにより、ＩＣ５０値（活性の５０％阻害を生じさせる阻害濃度）を得ることができる。
ＬＣ＝Ｌｏｗ ｃｏｎｔｒｏｌ中央値
＝Ｌｏｗ ｃｏｎｔｒｏｌ：酵素が非存在下での反応
ＨＣ＝Ｈｉｇｈ ｃｏｎｔｒｏｌ中央値
＝Ｈｉｇｈ ｃｏｎｔｒｏｌ：酵素が存在下での反応
％Ｅｆｆｅｃｔ＝１００－［（サンプル－ＬＣ）／（ＨＣ－ＬＣ）＊１００］
％Ｃｏｎｔｒｏｌ＝（サンプル／ＨＣ）＊１００
％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎ＝（サンプル－ＬＣ）／（ＨＣ－ＬＣ）＊１００
式（Ｉ）の化合物は、ＢＡＣＥ１阻害活性を有し、化合物がＢＡＣＥ１受容体を阻害できるのに十分である。
具体的には、上記プロトコルにより、ＩＣ５０は、好ましくは５０００ｎＭ以下、より好ましくは１０００ｎＭ以下、さらに好ましくは１００ｎＭ以下である。
（２）ＢＡＣＥ２ ＦＲＥＴ生化学アッセイ
このアッセイは、蛍光共鳴エネルギー移動アッセイ（ＦＲＥＴ）に基づくアッセイである。このアッセイ用の基質は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）βセクレターゼ切断部位の「スウェーデン」Ｌｙｓ－Ｍｅｔ／Ａｓｎ－Ｌｅｕ変異を含有する。この基質は２つの蛍光団も含有する。（７－メトキシクマリン－４－イル）酢酸（Ｍｃａ）は、励起波長３２０ｎｍおよび発光４０５ｎｍの蛍光性ドナーであり、２，４－ジニトロフェノール（Ｄｎｐ）は独自の消光アクセプターである。この２つの団の間の距離は、光励起の際、共鳴エネルギー移動でアクセプターによりドナー蛍光エネルギーが有意に消光されるように選択される。βセクレターゼによって切断されると、蛍光団Ｍｃａが消光団Ｄｎｐから分離され、ドナーの全蛍光収率が回復する。蛍光収率の増加は、タンパク質分解率に線形に相関する。
簡潔にいえば、３８４－ウェル形式で最終濃度０．４μｇ／ｍＬの組み換えＢＡＣＥ２タンパク質を、化合物の非存在下または存在下、インキュベーション緩衝液（最終濃度：３３．３ｍＭクエン酸緩衝液 ｐＨ５．０、０．０３３％ＰＥＧ、２％ＤＭＳＯ）中で１０μＭ基質とともに室温で４５０分間インキュベートした。次に、Ｔ＝０およびＴ＝４５０（励起３２０ｎｍ、および発光４０５ｎｍ）で蛍光測定して、タンパク質分解量を直接測定した。結果を、Ｔ４５０およびＴ０間の差としてＲＦＵ（相対蛍光単位）で表した。
最適曲線を、二乗法の最小和によって、％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎ対化合物濃度のプロットに適合させた。これにより、ＩＣ５０値（活性の５０％阻害を生じさせる阻害濃度）を得ることができる。
ＬＣ＝Ｌｏｗ ｃｏｎｔｒｏｌ中央値
＝Ｌｏｗ ｃｏｎｔｒｏｌ：酵素が非存在下での反応
ＨＣ＝Ｈｉｇｈ ｃｏｎｔｒｏｌ中央値
＝Ｈｉｇｈ ｃｏｎｔｒｏｌ：酵素が存在下での反応
％Ｅｆｆｅｃｔ＝１００－［（サンプル－ＬＣ）／（ＨＣ－ＬＣ）＊１００］
％Ｃｏｎｔｒｏｌ＝（サンプル／ＨＣ）＊１００
％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎ＝（サンプル－ＬＣ）／（ＨＣ－ＬＣ）＊１００
以下の例示化合物を本質的に上記のとおりに試験し、以下の活性を示した：
【表30】
【0110】
（試験例３－１：ラット脳内βアミロイド減少作用）
本発明化合物を０．５％メチルセルロースに懸濁させ、最終濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように調整し、これを雄性Ｃｒｌ：ＳＤラット（７～９週齢）に対し、１０ｍｇ／ｋｇとなるように経口投与する。媒体対照群は０．５％メチルセルロースのみを投与し、各群３～８匹で投与試験を実施する。投与３時間後に脳を摘出し、大脳半球を摘出し、その重量を測定した後、速やかに液体窒素中にて凍結させ、抽出日まで－８０℃にて保存する。凍結した大脳半球を氷冷下でＴｅｆｌｏｎ（登録商標）製ホモジナイザーに移し、重量の４倍容量の抽出緩衝液（１％のＣＨＡＰＳ（｛３－〔（３－クロロアミドプロピル）ジメチルアンモニオ〕－１－プロパンスルホネート｝）、２０ｍｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１５０ｍｍｏｌ／ＬのＮａＣｌ、Ｃｏｍｐｌｅｔｅ（Ｒｏｃｈｅ）プロテアーゼ阻害剤を含有する）を加え、上下動を繰り返し、これを２分間ホモジナイズして可溶化する。懸濁液を遠心分離管に移し、氷上に３時間以上静置し、その後、１００，０００×ｇで４℃にて２０分間遠心分離する。遠心後、上清をβアミロイド４０測定用のＥＬＩＳＡプレート（和光純薬工業製：製品番号２９４－６２５０１）に移す。ＥＬＩＳＡ測定は添付の説明書に従い行う。減少作用は各試験のビヒクル対照群の脳内βアミロイド４０レベルに対する比として算出する。
本発明化合物を０．５％メチルセルロースに懸濁させ、最終濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように調整し、これを雄性Ｃｒｌ：ＳＤラット（７～９週齢）に対し、１０ｍｇ／ｋｇとなるように経口投与する。媒体対照群は０．５％メチルセルロースのみを投与し、各群３～８匹で投与試験を実施する。投与３時間後に脳を摘出し、大脳半球を摘出し、その重量を測定した後、速やかに液体窒素中にて凍結させ、抽出日まで－８０℃にて保存する。凍結した大脳半球を氷冷下でＴｅｆｌｏｎ（登録商標）製ホモジナイザーに移し、重量の４倍容量の抽出緩衝液（１％のＣＨＡＰＳ（｛３－〔（３－クロロアミドプロピル）ジメチルアンモニオ〕－１－プロパンスルホネート｝）、２０ｍｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１５０ｍｍｏｌ／ＬのＮａＣｌ、Ｃｏｍｐｌｅｔｅ（Ｒｏｃｈｅ）プロテアーゼ阻害剤を含有する）を加え、上下動を繰り返し、これを２分間ホモジナイズして可溶化する。懸濁液を遠心分離管に移し、氷上に３時間以上静置し、その後、１００，０００×ｇで４℃にて２０分間遠心分離する。遠心後、上清をβアミロイド４０測定用のＥＬＩＳＡプレート（和光純薬工業製：製品番号２９４－６２５０１）に移す。ＥＬＩＳＡ測定は添付の説明書に従い行う。減少作用は各試験のビヒクル対照群の脳内βアミロイド４０レベルに対する比として算出する。
【0111】
（試験例３－２：マウス脳内βアミロイド減少作用）
本発明化合物を２０％ヒドロキシルベータシクロデキストリンに溶解し、最終濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように調整し、これをＣｒｌ：ＣＤ１（ＩＣＲ）雄マウス（６～８週齢）に対し、１～１０ｍｇ／ｋｇとなるように経口投与した。媒体対照群では、２０％ヒドロキシル－ベータ－シクロデキストリンのみを投与し、投与試験を１群あたり３～６匹で実施した。投与の１～６時間後に脳を摘出し、大脳半球を摘出し、その重量を測定し、半球を速やかに液体窒素にて凍結させ、抽出日まで－８０℃で保存した。
凍結した大脳半球を、重量の８倍容量の抽出緩衝液（０．４％のＤＥＡ（ジエチルアミン）、５０ｍｍｏｌ／ＬのＮａＣｌ、Ｃｏｍｐｌｅｔｅプロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ）を含有する）中にセラミックビーズを含有するホモジナイズチューブに移し、氷上で２０分間インキュベートした。その後、ＭＰ ＢＩＯ ＦａｓｔＰｒｅｐ（登録商標）－２４を用い、Ｌｙｓｉｎｇ ｍａｔｒｉｘ Ｄ（１．４ｍｍセラミックビーズ）でホモジナイズした（６ｍ／ｓ、２０秒間）。次いで、チューブを１分間遠心沈殿させ、上清を遠心分離管に移し、２２１，０００×ｇで４℃で５０分間遠心分離した。遠心後、総βアミロイド測定のため、上清を、βアミロイドのＮ末端に対する抗体でコーティングしたＮｕｎｃ Ｍａｘｉｓｏｒｐ（登録商標）プレート（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）に移し、４℃で一晩インキュベートした。プレートをＴＢＳ－Ｔ（０．０５％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００含有トリス緩衝生理食塩水）で洗浄し、０．１％カゼインを含むＰＢＳ（ｐＨ７．４）に溶解したＨＲＰ共役４Ｇ８をプレートに添加し、４℃で１時間インキュベートした。ＴＢＳ－Ｔで洗浄後、ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ ＥＬＩＳＡ Ｐｉｃｏ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）をプレートに添加した。次いで、化学発光をＡＲＶＯ（登録商標）ＭＸ１４２０マルチラベルカウンター（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ社製）で速やかに測定した。減少作用は各試験の媒体対照群の脳内総βアミロイドレベルに対する比として算出した。
本発明化合物を２０％ヒドロキシルベータシクロデキストリンに溶解し、最終濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように調整し、これをＣｒｌ：ＣＤ１（ＩＣＲ）雄マウス（６～８週齢）に対し、１～１０ｍｇ／ｋｇとなるように経口投与した。媒体対照群では、２０％ヒドロキシル－ベータ－シクロデキストリンのみを投与し、投与試験を１群あたり３～６匹で実施した。投与の１～６時間後に脳を摘出し、大脳半球を摘出し、その重量を測定し、半球を速やかに液体窒素にて凍結させ、抽出日まで－８０℃で保存した。
凍結した大脳半球を、重量の８倍容量の抽出緩衝液（０．４％のＤＥＡ（ジエチルアミン）、５０ｍｍｏｌ／ＬのＮａＣｌ、Ｃｏｍｐｌｅｔｅプロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ）を含有する）中にセラミックビーズを含有するホモジナイズチューブに移し、氷上で２０分間インキュベートした。その後、ＭＰ ＢＩＯ ＦａｓｔＰｒｅｐ（登録商標）－２４を用い、Ｌｙｓｉｎｇ ｍａｔｒｉｘ Ｄ（１．４ｍｍセラミックビーズ）でホモジナイズした（６ｍ／ｓ、２０秒間）。次いで、チューブを１分間遠心沈殿させ、上清を遠心分離管に移し、２２１，０００×ｇで４℃で５０分間遠心分離した。遠心後、総βアミロイド測定のため、上清を、βアミロイドのＮ末端に対する抗体でコーティングしたＮｕｎｃ Ｍａｘｉｓｏｒｐ（登録商標）プレート（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）に移し、４℃で一晩インキュベートした。プレートをＴＢＳ－Ｔ（０．０５％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００含有トリス緩衝生理食塩水）で洗浄し、０．１％カゼインを含むＰＢＳ（ｐＨ７．４）に溶解したＨＲＰ共役４Ｇ８をプレートに添加し、４℃で１時間インキュベートした。ＴＢＳ－Ｔで洗浄後、ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ ＥＬＩＳＡ Ｐｉｃｏ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）をプレートに添加した。次いで、化学発光をＡＲＶＯ（登録商標）ＭＸ１４２０マルチラベルカウンター（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ社製）で速やかに測定した。減少作用は各試験の媒体対照群の脳内総βアミロイドレベルに対する比として算出した。
【0112】
（試験例４－１：ＣＹＰ３Ａ４蛍光ＭＢＩ試験）
ＣＹＰ３Ａ４蛍光ＭＢＩ試験は、代謝反応による化合物のＣＹＰ３Ａ４阻害の増強を調べる試験である。ＣＹＰ３Ａ４酵素（大腸菌発現酵素）により７－ベンジルオキシトリフルオロメチルクマリン（７－ＢＦＣ）が脱ベンジル化され、蛍光を発する代謝物７－ハイドロキシトリフルオロメチルクマリン（７－ＨＦＣ）が生じる。７－ＨＦＣ生成反応を標識反応として用いて試験を実施する。
反応条件は以下のとおりである：基質、５．６μｍｏｌ／Ｌ ７－ＢＦＣ；プレ反応時間、０または３０分；基質反応時間、１５分；反応温度、２５℃（室温）；ＣＹＰ３Ａ４含量（大腸菌発現酵素）、プレ反応時６２．５ｐｍｏｌ／ｍＬ、反応時６．２５ｐｍｏｌ／ｍＬ（１０倍希釈）；本発明化合物濃度、０．６２５、１．２５、２．５、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（６点）。
９６ウェルプレートにプレ反応液として、酵素を含むＫ－Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）および本発明化合物溶液をプレ反応の組成で加える。別の９６ウェルプレートにプレ反応液の一部を移し、基質を含むＫ－Ｐｉ緩衝液で１０倍希釈する。補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して標識反応を開始する（プレインキュベーション無）。所定時間の標識反応後、アセトニトリル／０．５ｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ（トリスヒドロキシアミノメタン）＝４／１（ｖ／ｖ）溶液を加えることによって標識反応を停止する。また残りのプレ反応液にもＮＡＤＰＨを添加してプレ反応を開始する（プレインキュベーション有）。所定時間のプレ反応後、別の９６ウェルプレートに一部を移し、Ｋ－Ｐｉ緩衝液中の基質により１０倍希釈して標識反応を開始する。所定時間の標識反応後、アセトニトリル／０．５ｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ（トリスヒドロキシアミノメタン）＝４／１（ｖ／ｖ）溶液を加えることによって標識反応を停止した。それぞれの標識反応を行ったプレートにおいて、代謝物である７－ＨＦＣの蛍光値を蛍光プレートリーダーで測定する（Ｅｘ＝４２０ｎｍ、Ｅｍ＝５３５ｎｍ）。
ＤＭＳＯが本発明化合物を溶解する溶媒として用いられるため、本発明化合物溶液の代わりにＤＭＳＯを反応系に添加したサンプルをコントロール（１００％）とした。溶液として加えられた本発明化合物のそれぞれの濃度における残存活性（％）を算出し、濃度と阻害率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣ５０値を算出する。プレインキュベーション無しのＩＣ５０値からプレインキュベーション有りのＩＣ５０値を引いて求めた差が５μＭ以上の場合を陽性（＋）とする。差が３μＭ以下の場合を陰性（－）とする。
ＣＹＰ３Ａ４蛍光ＭＢＩ試験は、代謝反応による化合物のＣＹＰ３Ａ４阻害の増強を調べる試験である。ＣＹＰ３Ａ４酵素（大腸菌発現酵素）により７－ベンジルオキシトリフルオロメチルクマリン（７－ＢＦＣ）が脱ベンジル化され、蛍光を発する代謝物７－ハイドロキシトリフルオロメチルクマリン（７－ＨＦＣ）が生じる。７－ＨＦＣ生成反応を標識反応として用いて試験を実施する。
反応条件は以下のとおりである：基質、５．６μｍｏｌ／Ｌ ７－ＢＦＣ；プレ反応時間、０または３０分；基質反応時間、１５分；反応温度、２５℃（室温）；ＣＹＰ３Ａ４含量（大腸菌発現酵素）、プレ反応時６２．５ｐｍｏｌ／ｍＬ、反応時６．２５ｐｍｏｌ／ｍＬ（１０倍希釈）；本発明化合物濃度、０．６２５、１．２５、２．５、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（６点）。
９６ウェルプレートにプレ反応液として、酵素を含むＫ－Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）および本発明化合物溶液をプレ反応の組成で加える。別の９６ウェルプレートにプレ反応液の一部を移し、基質を含むＫ－Ｐｉ緩衝液で１０倍希釈する。補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して標識反応を開始する（プレインキュベーション無）。所定時間の標識反応後、アセトニトリル／０．５ｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ（トリスヒドロキシアミノメタン）＝４／１（ｖ／ｖ）溶液を加えることによって標識反応を停止する。また残りのプレ反応液にもＮＡＤＰＨを添加してプレ反応を開始する（プレインキュベーション有）。所定時間のプレ反応後、別の９６ウェルプレートに一部を移し、Ｋ－Ｐｉ緩衝液中の基質により１０倍希釈して標識反応を開始する。所定時間の標識反応後、アセトニトリル／０．５ｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ（トリスヒドロキシアミノメタン）＝４／１（ｖ／ｖ）溶液を加えることによって標識反応を停止した。それぞれの標識反応を行ったプレートにおいて、代謝物である７－ＨＦＣの蛍光値を蛍光プレートリーダーで測定する（Ｅｘ＝４２０ｎｍ、Ｅｍ＝５３５ｎｍ）。
ＤＭＳＯが本発明化合物を溶解する溶媒として用いられるため、本発明化合物溶液の代わりにＤＭＳＯを反応系に添加したサンプルをコントロール（１００％）とした。溶液として加えられた本発明化合物のそれぞれの濃度における残存活性（％）を算出し、濃度と阻害率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣ５０値を算出する。プレインキュベーション無しのＩＣ５０値からプレインキュベーション有りのＩＣ５０値を引いて求めた差が５μＭ以上の場合を陽性（＋）とする。差が３μＭ以下の場合を陰性（－）とする。
【0113】
（試験例４－２：ＣＹＰ３Ａ４（ＭＤＺ）ＭＢＩ試験）
ＣＹＰ３Ａ４（ＭＤＺ）ＭＢＩ試験は、化合物のＣＹＰ３Ａ４阻害に関して機序に基づく阻害（ＭＢＩ）能を評価する試験である。ＣＹＰ３Ａ４阻害は、プールされたヒト肝ミクロソームによるミダゾラム（ＭＤＺ）の１－水酸化反応を標識反応として用いて評価する。
反応条件は以下のとおりであった：基質、１０μｍｏｌ／Ｌ ＭＤＺ；プレ反応時間、０または３０分；基質反応時間、２分；反応温度、３７℃；プールされたヒト肝ミクロソームのタンパク質含量、プレ反応時０．５ｍｇ／ｍＬ、反応時０．０５ｐｍｇ／ｍＬ（１０倍希釈時）；本発明化合物濃度、１、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（４点）。
９６ウェルプレートにプレ反応液としてＫ－Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）中にプールヒト肝ミクロソーム、および本発明化合物溶液をプレ反応の組成で加えた。別の９６ウェルプレートにプレ反応液の一部を移し、基質を含むＫ－Ｐｉ緩衝液で１０倍希釈した。補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して標識反応を開始した（プレインキュベーション無）。所定時間の標識反応後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液を加えることによって標識反応を停止した。また残りのプレ反応液にもＮＡＤＰＨを添加してプレ反応を開始させた（プレインキュベーション有）。所定時間のプレ反応後、別の９６ウェルプレートに一部を移し、基質を含むＫ－Ｐｉ緩衝液で１０倍希釈して標識反応を開始させた。所定時間の標識反応後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液を加えることによって標識反応を停止した。３０００ｒｐｍで１５分間遠心した後、上清中の１－ヒドロキシミダゾラムをＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより定量する。
ＤＭＳＯが本発明化合物を溶解した溶媒として用いられるため、本発明化合物溶液の代わりに、ＤＭＳＯを反応系に添加したサンプルをコントロール（１００％）とした。溶液として加えられた本発明化合物のそれぞれの濃度における残存活性（％）を算出し、濃度と阻害率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣ５０値を算出した。「プレインキュベーション無のＩＣ値（０分）／プレインキュベーション有のＩＣ値（３０分）」を、シフトしたＩＣ値として算出した。シフトしたＩＣ値が１．５以上であった場合、これを陽性と定義した。シフトしたＩＣ値が１．１未満であった場合、これを陰性と定義した。
ＣＹＰ３Ａ４（ＭＤＺ）ＭＢＩ試験は、化合物のＣＹＰ３Ａ４阻害に関して機序に基づく阻害（ＭＢＩ）能を評価する試験である。ＣＹＰ３Ａ４阻害は、プールされたヒト肝ミクロソームによるミダゾラム（ＭＤＺ）の１－水酸化反応を標識反応として用いて評価する。
反応条件は以下のとおりであった：基質、１０μｍｏｌ／Ｌ ＭＤＺ；プレ反応時間、０または３０分；基質反応時間、２分；反応温度、３７℃；プールされたヒト肝ミクロソームのタンパク質含量、プレ反応時０．５ｍｇ／ｍＬ、反応時０．０５ｐｍｇ／ｍＬ（１０倍希釈時）；本発明化合物濃度、１、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（４点）。
９６ウェルプレートにプレ反応液としてＫ－Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）中にプールヒト肝ミクロソーム、および本発明化合物溶液をプレ反応の組成で加えた。別の９６ウェルプレートにプレ反応液の一部を移し、基質を含むＫ－Ｐｉ緩衝液で１０倍希釈した。補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して標識反応を開始した（プレインキュベーション無）。所定時間の標識反応後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液を加えることによって標識反応を停止した。また残りのプレ反応液にもＮＡＤＰＨを添加してプレ反応を開始させた（プレインキュベーション有）。所定時間のプレ反応後、別の９６ウェルプレートに一部を移し、基質を含むＫ－Ｐｉ緩衝液で１０倍希釈して標識反応を開始させた。所定時間の標識反応後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液を加えることによって標識反応を停止した。３０００ｒｐｍで１５分間遠心した後、上清中の１－ヒドロキシミダゾラムをＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより定量する。
ＤＭＳＯが本発明化合物を溶解した溶媒として用いられるため、本発明化合物溶液の代わりに、ＤＭＳＯを反応系に添加したサンプルをコントロール（１００％）とした。溶液として加えられた本発明化合物のそれぞれの濃度における残存活性（％）を算出し、濃度と阻害率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣ５０値を算出した。「プレインキュベーション無のＩＣ値（０分）／プレインキュベーション有のＩＣ値（３０分）」を、シフトしたＩＣ値として算出した。シフトしたＩＣ値が１．５以上であった場合、これを陽性と定義した。シフトしたＩＣ値が１．１未満であった場合、これを陰性と定義した。
【0114】
（試験例５：ＣＹＰ阻害試験）
ＣＹＰ阻害試験は、ヒト肝ミクロソームのＣＹＰ酵素の典型的基質代謝反応に対する本発明化合物の阻害効果を評価する試験である。ヒト主要ＣＹＰ５酵素（ＣＹＰ１Ａ２、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６、および３Ａ４）の標識反応を以下のように使用した：７－エトキシレゾルフィンのＯ－脱エチル化（ＣＹＰ１Ａ２）、トルブタミドのメチル－ヒドロキシル化（ＣＹＰ２Ｃ９）、メフェニトインの４’－ヒドロキシル化（ＣＹＰ２Ｃ１９）、デキストロメトルファンのＯ－脱メチル化（ＣＹＰ２Ｄ６）、およびテルフェナジンのヒドロキシル化（ＣＹＰ３Ａ４）。市販のプールされたヒト肝ミクロソームを酵素源として使用した。
反応条件は以下のとおりであった：基質、０．５μｍｏｌ／Ｌ エトキシレゾルフィン（ＣＹＰ１Ａ２）、１００μｍｏｌ／Ｌ トルブタミド（ＣＹＰ２Ｃ９）、５０μｍｏｌ／Ｌ Ｓ－メフェニトイン（ＣＹＰ２Ｃ１９）、５μｍｏｌ／Ｌ デキストロメトルファン（ＣＹＰ２Ｄ６）、１μｍｏｌ／Ｌ テルフェナジン（ＣＹＰ３Ａ４）；反応時間、１５分；反応温度、３７℃；酵素、プールされたヒト肝ミクロソーム ０．２ｍｇ タンパク質／ｍＬ；本発明化合物濃度、１、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（４点）。
９６ウェルプレートに反応溶液として、５０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｈｅｐｅｓ緩衝液中に５種の基質、ヒト肝ミクロソーム、および本発明化合物溶液を上記組成で加えた。補助因子としてＮＡＤＰＨをこの９６ウェルプレートに加えて、標識反応を開始させた。３７℃で１５分間インキュベートした後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液を加えて、標識反応を停止させた。３０００ｒｐｍ、１５分間の遠心操作後、上清中のレゾルフィン（ＣＹＰ１Ａ２代謝物）を蛍光プレートリーダーまたはＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量し、上清中のヒドロキシトルブタミド（ＣＹＰ２Ｃ９代謝物）、４’－ヒドロキシメフェニトイン（ＣＹＰ２Ｃ１９代謝物）、デキストロルファン（ＣＹＰ２Ｄ６代謝物）、およびテルフェナジンアルコール代謝物（ＣＹＰ３Ａ４代謝物）をＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量した。
ＤＭＳＯが本発明化合物を溶解した溶媒として用いられるため、本発明化合物溶液の代わりに、ＤＭＳＯを反応系に添加したサンプルをコントロール（１００％）とした。本発明化合物のそれぞれの濃度での残存活性（％）を算出し、濃度と阻害率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣ５０値を算出した。
ＣＹＰ阻害試験は、ヒト肝ミクロソームのＣＹＰ酵素の典型的基質代謝反応に対する本発明化合物の阻害効果を評価する試験である。ヒト主要ＣＹＰ５酵素（ＣＹＰ１Ａ２、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６、および３Ａ４）の標識反応を以下のように使用した：７－エトキシレゾルフィンのＯ－脱エチル化（ＣＹＰ１Ａ２）、トルブタミドのメチル－ヒドロキシル化（ＣＹＰ２Ｃ９）、メフェニトインの４’－ヒドロキシル化（ＣＹＰ２Ｃ１９）、デキストロメトルファンのＯ－脱メチル化（ＣＹＰ２Ｄ６）、およびテルフェナジンのヒドロキシル化（ＣＹＰ３Ａ４）。市販のプールされたヒト肝ミクロソームを酵素源として使用した。
反応条件は以下のとおりであった：基質、０．５μｍｏｌ／Ｌ エトキシレゾルフィン（ＣＹＰ１Ａ２）、１００μｍｏｌ／Ｌ トルブタミド（ＣＹＰ２Ｃ９）、５０μｍｏｌ／Ｌ Ｓ－メフェニトイン（ＣＹＰ２Ｃ１９）、５μｍｏｌ／Ｌ デキストロメトルファン（ＣＹＰ２Ｄ６）、１μｍｏｌ／Ｌ テルフェナジン（ＣＹＰ３Ａ４）；反応時間、１５分；反応温度、３７℃；酵素、プールされたヒト肝ミクロソーム ０．２ｍｇ タンパク質／ｍＬ；本発明化合物濃度、１、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（４点）。
９６ウェルプレートに反応溶液として、５０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｈｅｐｅｓ緩衝液中に５種の基質、ヒト肝ミクロソーム、および本発明化合物溶液を上記組成で加えた。補助因子としてＮＡＤＰＨをこの９６ウェルプレートに加えて、標識反応を開始させた。３７℃で１５分間インキュベートした後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液を加えて、標識反応を停止させた。３０００ｒｐｍ、１５分間の遠心操作後、上清中のレゾルフィン（ＣＹＰ１Ａ２代謝物）を蛍光プレートリーダーまたはＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量し、上清中のヒドロキシトルブタミド（ＣＹＰ２Ｃ９代謝物）、４’－ヒドロキシメフェニトイン（ＣＹＰ２Ｃ１９代謝物）、デキストロルファン（ＣＹＰ２Ｄ６代謝物）、およびテルフェナジンアルコール代謝物（ＣＹＰ３Ａ４代謝物）をＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量した。
ＤＭＳＯが本発明化合物を溶解した溶媒として用いられるため、本発明化合物溶液の代わりに、ＤＭＳＯを反応系に添加したサンプルをコントロール（１００％）とした。本発明化合物のそれぞれの濃度での残存活性（％）を算出し、濃度と阻害率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣ５０値を算出した。
【0115】
（試験例６：Ｆｌｕｃｔｕａｔｉｏｎ Ａｍｅｓ ｔｅｓｔ）
凍結保存しているネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ＴＡ９８株およびＴＡ１００株）それぞれ２０μＬを、１０ｍＬの液体栄養培地（２．５％ Ｏｘｏｉｄ ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ Ｎｏ．２）に接種し、培養液を３７℃にて１０時間、振盪培養する。７．７０～８．００ｍＬのＴＡ９８株培養液を遠心（２０００×ｇ、１０分間）して培地を除去し、７．７０ｍＬのＭｉｃｒｏ Ｆ緩衝液（Ｋ２ＨＰＯ４：３．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４：１ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４：１ｇ／Ｌ、クエン酸三ナトリウム二水和物：０．２５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４－７Ｈ２０：０．１ｇ／Ｌ）に菌を懸濁し、懸濁液を１２０ｍＬのＥｘｐｏｓｕｒｅ培地（ビオチン：８μｇ／ｍＬ、ヒスチジン：０．２μｇ／ｍＬ、グルコース：８ｍｇ／ｍＬを含むＭｉｃｒｏ Ｆ緩衝液）に添加する。３．１０～３．４２ｍＬのＴＡ１００培養液をＥｘｐｏｓｕｒｅ培地１３０ｍＬに添加して、試験菌液を調製する。本発明化合物ＤＭＳＯ溶液（最高用量５０ｍｇ／ｍＬから２～３倍比で数段階希釈）、陰性対照としてＤＭＳＯ、ＴＡ９８の非代謝活性化条件の陽性対照として５０μｇ／ｍＬの４－ニトロキノリン－１－オキシドＤＭＳＯ溶液、ＴＡ１００の非代謝活性化条件の陽性対照として０．２５μｇ／ｍＬの２－（２－フリル）－３－（５－ニトロ－２－フリル）アクリルアミドＤＭＳＯ溶液、ＴＡ９８の代謝活性化条件の陽性対照として４０μｇ／ｍＬの２－アミノアントラセンＤＭＳＯ溶液、またはＴＡ１００の代謝活性化条件の陽性対照として２０μｇ／ｍＬの２－アミノアントラセンＤＭＳＯ溶液それぞれ１２μＬと試験菌液５８８μＬ（代謝活性化条件では試験菌液４９８μＬとＳ９ｍｉｘ ９０μＬの混合液）を混和する。混合液を３７℃にて９０分間、振盪培養する。本発明化合物に曝露した菌液４６０μＬを、Ｉｎｄｉｃａｔｏｒ培地（ビオチン：８μｇ／ｍＬ、ヒスチジン：０．２μｇ／ｍＬ、グルコース：８ｍｇ／ｍＬ、ブロモクレゾールパープル：３７．５μｇ／ｍＬを含むＭｉｃｒｏ Ｆ緩衝液）２３００μＬに混和し、５０μＬずつマイクロウェルプレートに４８ウェル／用量で分注し、３７℃にて３日間、静置培養する。アミノ酸（ヒスチジン）合成酵素をコードする遺伝子の突然変異によって増殖能を獲得した菌を含むウェルは、ｐＨ変化により紫色から黄色に変色する。１用量あたり全４８ウェル中の黄色に変色したウェルを計数し、陰性対照群と比較して変異原性を評価する。変異原性が陰性のものを（－）、陽性のものを（＋）として示す。
凍結保存しているネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ＴＡ９８株およびＴＡ１００株）それぞれ２０μＬを、１０ｍＬの液体栄養培地（２．５％ Ｏｘｏｉｄ ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ Ｎｏ．２）に接種し、培養液を３７℃にて１０時間、振盪培養する。７．７０～８．００ｍＬのＴＡ９８株培養液を遠心（２０００×ｇ、１０分間）して培地を除去し、７．７０ｍＬのＭｉｃｒｏ Ｆ緩衝液（Ｋ２ＨＰＯ４：３．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４：１ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４：１ｇ／Ｌ、クエン酸三ナトリウム二水和物：０．２５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４－７Ｈ２０：０．１ｇ／Ｌ）に菌を懸濁し、懸濁液を１２０ｍＬのＥｘｐｏｓｕｒｅ培地（ビオチン：８μｇ／ｍＬ、ヒスチジン：０．２μｇ／ｍＬ、グルコース：８ｍｇ／ｍＬを含むＭｉｃｒｏ Ｆ緩衝液）に添加する。３．１０～３．４２ｍＬのＴＡ１００培養液をＥｘｐｏｓｕｒｅ培地１３０ｍＬに添加して、試験菌液を調製する。本発明化合物ＤＭＳＯ溶液（最高用量５０ｍｇ／ｍＬから２～３倍比で数段階希釈）、陰性対照としてＤＭＳＯ、ＴＡ９８の非代謝活性化条件の陽性対照として５０μｇ／ｍＬの４－ニトロキノリン－１－オキシドＤＭＳＯ溶液、ＴＡ１００の非代謝活性化条件の陽性対照として０．２５μｇ／ｍＬの２－（２－フリル）－３－（５－ニトロ－２－フリル）アクリルアミドＤＭＳＯ溶液、ＴＡ９８の代謝活性化条件の陽性対照として４０μｇ／ｍＬの２－アミノアントラセンＤＭＳＯ溶液、またはＴＡ１００の代謝活性化条件の陽性対照として２０μｇ／ｍＬの２－アミノアントラセンＤＭＳＯ溶液それぞれ１２μＬと試験菌液５８８μＬ（代謝活性化条件では試験菌液４９８μＬとＳ９ｍｉｘ ９０μＬの混合液）を混和する。混合液を３７℃にて９０分間、振盪培養する。本発明化合物に曝露した菌液４６０μＬを、Ｉｎｄｉｃａｔｏｒ培地（ビオチン：８μｇ／ｍＬ、ヒスチジン：０．２μｇ／ｍＬ、グルコース：８ｍｇ／ｍＬ、ブロモクレゾールパープル：３７．５μｇ／ｍＬを含むＭｉｃｒｏ Ｆ緩衝液）２３００μＬに混和し、５０μＬずつマイクロウェルプレートに４８ウェル／用量で分注し、３７℃にて３日間、静置培養する。アミノ酸（ヒスチジン）合成酵素をコードする遺伝子の突然変異によって増殖能を獲得した菌を含むウェルは、ｐＨ変化により紫色から黄色に変色する。１用量あたり全４８ウェル中の黄色に変色したウェルを計数し、陰性対照群と比較して変異原性を評価する。変異原性が陰性のものを（－）、陽性のものを（＋）として示す。
【0116】
（試験例７：溶解度試験）
各本発明化合物の溶解度は、１％ＤＭＳＯ添加条件下で測定した。ＤＭＳＯにて１０ｍｍｏｌ／Ｌ化合物溶液を調製し、本ＪＰ－第１液（塩化ナトリウム２．０ｇ、および塩酸７．０ｍＬに水を加えて１０００ｍＬとした）、およびＪＰ－第２液（リン酸二水素カリウム３．４０ｇおよび無水リン酸水素二ナトリウム３．５５ｇを水に溶かし１０００ｍＬとしたもの１容量に水１容量を加えた）１９８μＬに発明化合物溶液２μＬをそれぞれ添加した。混合物を２５℃で１６時間静置した後、または室温で１時間振盪させた後、混合物を真空濾過した。ろ液をメタノール／水＝１／１（ｖ／ｖ）またはＭｅＣＮ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（＝１／１／２）により１０または１００倍希釈し、ＬＣ／ＭＳまたは固相抽出（ＳＰＥ）／ＭＳを用いて絶対検量線法によりろ液中の化合物濃度を測定した。
各本発明化合物の溶解度は、１％ＤＭＳＯ添加条件下で測定した。ＤＭＳＯにて１０ｍｍｏｌ／Ｌ化合物溶液を調製し、本ＪＰ－第１液（塩化ナトリウム２．０ｇ、および塩酸７．０ｍＬに水を加えて１０００ｍＬとした）、およびＪＰ－第２液（リン酸二水素カリウム３．４０ｇおよび無水リン酸水素二ナトリウム３．５５ｇを水に溶かし１０００ｍＬとしたもの１容量に水１容量を加えた）１９８μＬに発明化合物溶液２μＬをそれぞれ添加した。混合物を２５℃で１６時間静置した後、または室温で１時間振盪させた後、混合物を真空濾過した。ろ液をメタノール／水＝１／１（ｖ／ｖ）またはＭｅＣＮ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（＝１／１／２）により１０または１００倍希釈し、ＬＣ／ＭＳまたは固相抽出（ＳＰＥ）／ＭＳを用いて絶対検量線法によりろ液中の化合物濃度を測定した。
【0117】
（試験例８：代謝安定性試験）
市販のプールヒト肝ミクロソームと本発明化合物を一定時間反応させ、反応サンプルと未反応サンプルの比較により残存率を算出し、それによって肝臓で代謝される程度を評価した。
ヒト肝ミクロソーム０．５ｍｇタンパク質／ｍＬを含む０．２ｍＬの緩衝液（５０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ｐＨ７．４、１５０ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カリウム、１０ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化マグネシウム）中で、１ｍｍｏｌ／Ｌ ＮＡＤＰＨ存在下で３７℃、０分または３０分間反応させた（酸化的反応）。反応後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液１００μＬに反応液５０μＬを添加し、混合し、３０００ｒｐｍで１５分間遠心した。上清中の本発明化合物をＬＣ／ＭＳ／ＭＳまたは固相抽出（ＳＰＥ）／ＭＳにて定量し、反応後の本発明化合物の残存量を、０分反応時の化合物量を１００％として算出した。
市販のプールヒト肝ミクロソームと本発明化合物を一定時間反応させ、反応サンプルと未反応サンプルの比較により残存率を算出し、それによって肝臓で代謝される程度を評価した。
ヒト肝ミクロソーム０．５ｍｇタンパク質／ｍＬを含む０．２ｍＬの緩衝液（５０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ｐＨ７．４、１５０ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カリウム、１０ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化マグネシウム）中で、１ｍｍｏｌ／Ｌ ＮＡＤＰＨ存在下で３７℃、０分または３０分間反応させた（酸化的反応）。反応後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液１００μＬに反応液５０μＬを添加し、混合し、３０００ｒｐｍで１５分間遠心した。上清中の本発明化合物をＬＣ／ＭＳ／ＭＳまたは固相抽出（ＳＰＥ）／ＭＳにて定量し、反応後の本発明化合物の残存量を、０分反応時の化合物量を１００％として算出した。
【表31】
【0118】
（試験例９：ｈＥＲＧ試験）
心電図ＱＴ間隔延長リスク評価を目的として、ヒト遅延整流性カリウムイオンチャネル遺伝子（ｈｕｍａｎ ｅｔｈｅｒ－ａ－ｇｏ－ｇｏ ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅ）（ｈＥＲＧ）チャネルを発現させたＣＨＯ細胞を用いて、心室再分極過程に重要な役割を果たす遅延整流Ｋ＋電流（ＩＫｒ）に対する本発明化合物の効果を検討した。
全自動パッチクランプシステム（ＱＰａｔｃｈ；Ｓｏｐｈｉｏｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ａ／Ｓ）を用い、ホールセルパッチクランプ法により、細胞を－８０ｍＶの膜電位に保持した。－５０ｍＶのリーク電位を与えた後、＋２０ｍＶの脱分極刺激を２秒間、さらに－５０ｍＶの再分極刺激を２秒間与えた際に誘発されるＩＫｒを記録した。
発生する電流が安定した後、本発明化合物を目的の濃度で溶解させた細胞外液（ＮａＣｌ：１４５ｍｍｏｌ／Ｌ、ＫＣｌ：４ｍｍｏｌ／Ｌ、ＣａＣｌ２：２ｍｍｏｌ／Ｌ、ＭｇＣｌ２：１ｍｍｏｌ／Ｌ、ＨＥＰＥＳ（４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸）：１０ｍｍｏｌ／Ｌ、グルコース：１０ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝７．４）を室温条件下で、１０分間細胞に適用させた。記録されたＩＫｒから、解析ソフト（ＱＰａｔｃｈ ａｓｓａｙ ｓｏｆｔｗａｒｅ；Ｓｏｐｈｉｏｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ａ／Ｓ）を使用して、保持膜電位における電流値を基準に最大テール電流の絶対値を測定した。さらに、本発明化合物適用前の最大テール電流に対する阻害率を算出し、媒体適用群（０．１％ジメチルスルホキシド溶液）と比較して、本発明化合物のＩＫｒへの影響を評価した。
以下のデータは、本発明化合物の３μＭにおける阻害を示す。
心電図ＱＴ間隔延長リスク評価を目的として、ヒト遅延整流性カリウムイオンチャネル遺伝子（ｈｕｍａｎ ｅｔｈｅｒ－ａ－ｇｏ－ｇｏ ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅ）（ｈＥＲＧ）チャネルを発現させたＣＨＯ細胞を用いて、心室再分極過程に重要な役割を果たす遅延整流Ｋ＋電流（ＩＫｒ）に対する本発明化合物の効果を検討した。
全自動パッチクランプシステム（ＱＰａｔｃｈ；Ｓｏｐｈｉｏｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ａ／Ｓ）を用い、ホールセルパッチクランプ法により、細胞を－８０ｍＶの膜電位に保持した。－５０ｍＶのリーク電位を与えた後、＋２０ｍＶの脱分極刺激を２秒間、さらに－５０ｍＶの再分極刺激を２秒間与えた際に誘発されるＩＫｒを記録した。
発生する電流が安定した後、本発明化合物を目的の濃度で溶解させた細胞外液（ＮａＣｌ：１４５ｍｍｏｌ／Ｌ、ＫＣｌ：４ｍｍｏｌ／Ｌ、ＣａＣｌ２：２ｍｍｏｌ／Ｌ、ＭｇＣｌ２：１ｍｍｏｌ／Ｌ、ＨＥＰＥＳ（４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸）：１０ｍｍｏｌ／Ｌ、グルコース：１０ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝７．４）を室温条件下で、１０分間細胞に適用させた。記録されたＩＫｒから、解析ソフト（ＱＰａｔｃｈ ａｓｓａｙ ｓｏｆｔｗａｒｅ；Ｓｏｐｈｉｏｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ａ／Ｓ）を使用して、保持膜電位における電流値を基準に最大テール電流の絶対値を測定した。さらに、本発明化合物適用前の最大テール電流に対する阻害率を算出し、媒体適用群（０．１％ジメチルスルホキシド溶液）と比較して、本発明化合物のＩＫｒへの影響を評価した。
以下のデータは、本発明化合物の３μＭにおける阻害を示す。
【表32】
【0119】
（試験例１０：粉末溶解度試験）
適当な容器に本発明化合物を適量入れた。２００μＬのＪＰ第１液（水を２．０ｇの塩化ナトリウムおよび７．０ｍＬの塩酸に加えて１０００ｍＬにする）、２００μＬのＪＰ第２液（１容量の水を、３．４０ｇのリン酸二水素カリウムおよび３．５５ｇの無水リン酸水素二ナトリウムを水に溶解した１容量の溶液に加えて１０００ｍＬにする）、２００μＬの空腹時人工腸液（ｆａｓｔｅｄ ｓｔａｔｅ ｓｉｍｕｌａｔｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ：ＦａＳＳＩＦ）および２００μＬの摂食時人工腸液（ｆｅｄ ｓｔａｔｅ ｓｉｍｕｌａｔｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ：ＦｅＳＳＩＦ）をそれぞれの容器に加える。試験液添加後に本発明化合物の全量が溶解した場合には、適宜、本発明化合物を追加する。容器を密閉し、３７℃で１時間および／または２４時間振盪する。混合物をろ過し、１００μＬのメタノールをそれぞれのろ液（１００μＬ）に加え、それによってろ液が２倍に希釈される。希釈倍率は、必要に応じて変更してもよい。希釈溶液中に気泡および沈殿物のないことを確認後、容器を密閉し、振盪する。定量化は、絶対検量線法を用いてＨＰＬＣにより実施する。
適当な容器に本発明化合物を適量入れた。２００μＬのＪＰ第１液（水を２．０ｇの塩化ナトリウムおよび７．０ｍＬの塩酸に加えて１０００ｍＬにする）、２００μＬのＪＰ第２液（１容量の水を、３．４０ｇのリン酸二水素カリウムおよび３．５５ｇの無水リン酸水素二ナトリウムを水に溶解した１容量の溶液に加えて１０００ｍＬにする）、２００μＬの空腹時人工腸液（ｆａｓｔｅｄ ｓｔａｔｅ ｓｉｍｕｌａｔｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ：ＦａＳＳＩＦ）および２００μＬの摂食時人工腸液（ｆｅｄ ｓｔａｔｅ ｓｉｍｕｌａｔｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ：ＦｅＳＳＩＦ）をそれぞれの容器に加える。試験液添加後に本発明化合物の全量が溶解した場合には、適宜、本発明化合物を追加する。容器を密閉し、３７℃で１時間および／または２４時間振盪する。混合物をろ過し、１００μＬのメタノールをそれぞれのろ液（１００μＬ）に加え、それによってろ液が２倍に希釈される。希釈倍率は、必要に応じて変更してもよい。希釈溶液中に気泡および沈殿物のないことを確認後、容器を密閉し、振盪する。定量化は、絶対検量線法を用いてＨＰＬＣにより実施する。
【0120】
（試験例１１：薬物動態研究）
経口吸収性の検討実験材料と方法
（１）動物：マウスまたはラット
（２）飼育条件：マウスまたはラットは、水道水および固形飼料を自由摂取させた。
（３）用量および群分け：所定の用量での経口または静脈内投与。群分けは以下のとおりであった（用量は化合物によって決まる）。
経口投与：約１～３０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝２～３）
静脈内投与：約０．５～１０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝２～３）
（４）投与製剤：経口投与では溶液または懸濁液の状態、静脈内投与では可溶化された状態。
（５）投与方法：経口投与では、フレキシブル経口ゾンデを付けたシリンジにより強制的に投与した。静脈内投与では、注射針を付けたシリンジにより尾静脈から投与した。
（６）評価項目：予定時刻に採血し、本発明化合物の血漿中濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて測定した。
（７）統計解析：本発明化合物の血漿濃度の推移について、台形法を用いて血漿濃度－時間曲線下面積（ＡＵＣ）を算出し、経口投与群と静脈内投与群のＡＵＣから本発明化合物のバイオアベイラビリティ（ＢＡ）を算出した。
経口吸収性の検討実験材料と方法
（１）動物：マウスまたはラット
（２）飼育条件：マウスまたはラットは、水道水および固形飼料を自由摂取させた。
（３）用量および群分け：所定の用量での経口または静脈内投与。群分けは以下のとおりであった（用量は化合物によって決まる）。
経口投与：約１～３０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝２～３）
静脈内投与：約０．５～１０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝２～３）
（４）投与製剤：経口投与では溶液または懸濁液の状態、静脈内投与では可溶化された状態。
（５）投与方法：経口投与では、フレキシブル経口ゾンデを付けたシリンジにより強制的に投与した。静脈内投与では、注射針を付けたシリンジにより尾静脈から投与した。
（６）評価項目：予定時刻に採血し、本発明化合物の血漿中濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて測定した。
（７）統計解析：本発明化合物の血漿濃度の推移について、台形法を用いて血漿濃度－時間曲線下面積（ＡＵＣ）を算出し、経口投与群と静脈内投与群のＡＵＣから本発明化合物のバイオアベイラビリティ（ＢＡ）を算出した。
【0121】
（試験例１２：脳内分布研究）
ラットに約０．５ｍｇ／ｍＬ／ｋｇの投与量で本発明化合物を静脈内投与した。３０分後に、イソフルラン麻酔下で腹大動脈より全血を抜いて放血死させた。
脳を摘出し、蒸留水で２０～２５％のそのホモジネートを調製した。
得られた血液は遠心処理後、血漿とした。コントロール血漿を脳サンプルに１：１で加えた。コントロール脳ホモジネートを血漿サンプルに１：１で加えた。それぞれのサンプルをＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて測定した。得られた面積比（脳／血漿）を脳Ｋｐ値とした。
ラットに約０．５ｍｇ／ｍＬ／ｋｇの投与量で本発明化合物を静脈内投与した。３０分後に、イソフルラン麻酔下で腹大動脈より全血を抜いて放血死させた。
脳を摘出し、蒸留水で２０～２５％のそのホモジネートを調製した。
得られた血液は遠心処理後、血漿とした。コントロール血漿を脳サンプルに１：１で加えた。コントロール脳ホモジネートを血漿サンプルに１：１で加えた。それぞれのサンプルをＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて測定した。得られた面積比（脳／血漿）を脳Ｋｐ値とした。
【0122】
（試験例１３： Ａｍｅｓ試験）
サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１５３５、ＴＡ１５３７および大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＷＰ２ｕｖｒＡを試験菌株として用い、プレインキュベーション法による代謝活性化を伴って、または伴うことなくＡｍｅｓ試験を実施し、本発明化合物の遺伝子突然変異誘発性の有無を調べる。
サルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１５３５、ＴＡ１５３７および大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＷＰ２ｕｖｒＡを試験菌株として用い、プレインキュベーション法による代謝活性化を伴って、または伴うことなくＡｍｅｓ試験を実施し、本発明化合物の遺伝子突然変異誘発性の有無を調べる。
【0123】
（試験例１４：Ｐ－ｇｐ基質試験）
１．細胞株：
ａ．ＭＤＲ１／ＬＬＣ－ＰＫ１（ベクトン・ディッキンソン）
ｂ．ＬＬＣ－ＰＫ１（ベクトン・ディッキンソン）
２．基準基質：
ａ．ジゴキシン（２μＭ）
方法および手順
１．ＭＤＲ１発現ＬＬＣ－ＰＫ１細胞およびその親細胞を、培地Ａ（１０％ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、ゲンタマイシン（０．０５ｍｇ／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）およびハイグロマイシンＢ（１００μｇ／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を補充したＭｅｄｉｕｍ １９９（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））中において５％ＣＯ２／９５％Ｏ２ガス下、３７℃で通常培養した。輸送実験のため、これらの細胞をＴｒａｎｓｗｅｌｌ（登録商標）インサート（９６ウェル、孔径：０．４μｍ、Ｃｏａｓｔｅｒ）に１．４×１０４細胞／インサートの密度で播種し、培地Ｂ（１０％ＦＢＳおよびゲンタマイシン０．０５ｍｇ／ｍＬを補充したＭｅｄｉｕｍ １９９）をフィーダートレイに加えた。これらの細胞はＣＯ２インキュベーター（５％ＣＯ２／９５％Ｏ２ガス、３７℃）でインキュベートし、播種後４８～７２時間ごとに培養培地の頂端側および側底側の培地を交換した。これらの細胞を播種後４～６日で使用した。
２．ＭＤＲ１発現細胞または親細胞を播種した培養インサートの培地を吸引により除去し、ＨＢＳＳでリンスした。頂端側（１４０μＬ）または側底側（１７５μＬ）を、基準基質および本発明化合物を含む輸送バッファーで置換し、その後、基準基質および本発明化合物の初期濃度を求めるために、ドナー側の一定分量（５０μＬ）の輸送バッファーを採取した。３７℃で一定時間インキュベートした後、ドナー側およびレシーバー側の一定分量（５０μＬ）の輸送バッファーを収集した。アッセイは２回または３回繰り返し実施した。
３．一定分量中の基準基質および本発明化合物を、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて定量した。
計算
単層のＭＤＲ１発現と親細胞を通過した透過量を決定し、透過係数（Ｐｅ）をＥｘｃｅｌ ２００３を使用し、以下の式によって算出した：
Ｐｅ（ｃｍ／秒）＝膜透過量（ｐｍｏｌ）／細胞膜面積（ｃｍ２）／初期濃度（ｎＭ）／インキュベーション時間（秒）
ここで、膜透過量は所定時間（秒）のインキュベーション後の基質の透過濃度（ｎＭ、レシーバー側の濃度）に量（ｍＬ）を乗じて算出し、細胞膜面積は０．１４３３（ｃｍ２）とした。
外向きフラックス比（Ｅｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ）は以下の式により算出した：
Ｅｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ＝側底側から頂端側方向のＰｅ／頂端側から側底側方向のＰｅ
正味フラックス（Ｎｅｔ ｆｌｕｘ）は以下の式により算出した：
Ｎｅｔ ｆｌｕｘ＝ＭＤＲ１発現細胞のＥｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ／親細胞のＥｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ
１．細胞株：
ａ．ＭＤＲ１／ＬＬＣ－ＰＫ１（ベクトン・ディッキンソン）
ｂ．ＬＬＣ－ＰＫ１（ベクトン・ディッキンソン）
２．基準基質：
ａ．ジゴキシン（２μＭ）
方法および手順
１．ＭＤＲ１発現ＬＬＣ－ＰＫ１細胞およびその親細胞を、培地Ａ（１０％ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、ゲンタマイシン（０．０５ｍｇ／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）およびハイグロマイシンＢ（１００μｇ／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を補充したＭｅｄｉｕｍ １９９（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））中において５％ＣＯ２／９５％Ｏ２ガス下、３７℃で通常培養した。輸送実験のため、これらの細胞をＴｒａｎｓｗｅｌｌ（登録商標）インサート（９６ウェル、孔径：０．４μｍ、Ｃｏａｓｔｅｒ）に１．４×１０４細胞／インサートの密度で播種し、培地Ｂ（１０％ＦＢＳおよびゲンタマイシン０．０５ｍｇ／ｍＬを補充したＭｅｄｉｕｍ １９９）をフィーダートレイに加えた。これらの細胞はＣＯ２インキュベーター（５％ＣＯ２／９５％Ｏ２ガス、３７℃）でインキュベートし、播種後４８～７２時間ごとに培養培地の頂端側および側底側の培地を交換した。これらの細胞を播種後４～６日で使用した。
２．ＭＤＲ１発現細胞または親細胞を播種した培養インサートの培地を吸引により除去し、ＨＢＳＳでリンスした。頂端側（１４０μＬ）または側底側（１７５μＬ）を、基準基質および本発明化合物を含む輸送バッファーで置換し、その後、基準基質および本発明化合物の初期濃度を求めるために、ドナー側の一定分量（５０μＬ）の輸送バッファーを採取した。３７℃で一定時間インキュベートした後、ドナー側およびレシーバー側の一定分量（５０μＬ）の輸送バッファーを収集した。アッセイは２回または３回繰り返し実施した。
３．一定分量中の基準基質および本発明化合物を、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて定量した。
計算
単層のＭＤＲ１発現と親細胞を通過した透過量を決定し、透過係数（Ｐｅ）をＥｘｃｅｌ ２００３を使用し、以下の式によって算出した：
Ｐｅ（ｃｍ／秒）＝膜透過量（ｐｍｏｌ）／細胞膜面積（ｃｍ２）／初期濃度（ｎＭ）／インキュベーション時間（秒）
ここで、膜透過量は所定時間（秒）のインキュベーション後の基質の透過濃度（ｎＭ、レシーバー側の濃度）に量（ｍＬ）を乗じて算出し、細胞膜面積は０．１４３３（ｃｍ２）とした。
外向きフラックス比（Ｅｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ）は以下の式により算出した：
Ｅｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ＝側底側から頂端側方向のＰｅ／頂端側から側底側方向のＰｅ
正味フラックス（Ｎｅｔ ｆｌｕｘ）は以下の式により算出した：
Ｎｅｔ ｆｌｕｘ＝ＭＤＲ１発現細胞のＥｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ／親細胞のＥｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ
【表33】
【0124】
（試験例１５：Ｐ－ｇｐ輸送の阻害効果）
材料
１．細胞株：
ａ．ＭＤＲ１／ＬＬＣ－ＰＫ１（ベクトン・ディッキンソン）
ｂ．ＬＬＣ－ＰＫ１（ベクトン・ディッキンソン）
２．基準基質：
ａ．［３Ｈ］ジゴキシン（１μＭ）
ｂ．［１４Ｃ］マンニトール（１μＭ）
３．基準阻害物質：
ベラパミル（１μＭ）
方法および手順
１．ＭＤＲ１発現ＬＬＣ－ＰＫ１細胞およびその親細胞を、培地Ａ（１０％ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、ゲンタマイシン（０．０５ｍｇ／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）およびハイグロマイシンＢ（１００μｇ／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を補充したＭｅｄｉｕｍ １９９（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））中において５％ＣＯ２／９５％Ｏ２ガス下、３７℃で通常培養する。輸送実験のため、これらの細胞をＴｒａｎｓｗｅｌｌ（登録商標）インサート（９６ウェル、孔径：０．４μｍ、Ｃｏａｓｔｅｒ）に１．４×１０４細胞／インサートの密度で播種し、培地Ｂ（１０％ＦＢＳおよびゲンタマイシン０．０５ｍｇ／ｍＬを補充したＭｅｄｉｕｍ １９９）をフィーダートレイに加える。これらの細胞はＣＯ２インキュベーター（５％ＣＯ２／９５％Ｏ２ガス、３７℃）でインキュベートし、播種後４８～７２時間ごとに頂端側および側底側の培地を交換する。これらの細胞を播種後６～９日で使用する。
２．ＭＤＲ１発現細胞または親細胞を播種した培養インサート中の培地を吸引により除去し、ＨＢＳＳでリンスする。頂端側（１５０μＬ）または側底側（２００μＬ）を、基準基質を含み、本発明化合物の存在下または非存在下の輸送バッファーで置換し、その後、基準基質の初期濃度を求めるために、ドナー側の一定分量（５０μＬ）の輸送バッファーを採取する。３７℃で指定時間インキュベートした後、ドナー側およびレシーバー側の一定分量（５０μＬ）の輸送バッファーを収集する。アッセイは３回繰り返し実施する。
３．一定分量（５０μＬ）の輸送緩衝液を５ｍＬのシンチレーションカクテルと混合し、液体シンチレーションカウンターを使用して放射能を測定する。
計算
単層のＭＤＲ１発現細胞と親細胞を通過した膜透過量を決定し、膜透過係数（Ｐｅ）をＥｘｃｅｌ ２００３を用い、以下の式により算出する：
Ｐｅ（ｃｍ／秒）＝膜透過量（ｐｍｏｌ）／細胞膜面積（ｃｍ２）／初期濃度（ｎＭ）／インキュベーション時間（秒）
ここで、膜透過量は所定時間（秒）のインキュベーション後の基質の透過濃度（ｎＭ、レシーバー側の濃度）に量（ｍＬ）を乗じて算出し、細胞膜面積は０．３３（ｃｍ２）とする。
外向きフラックス比（Ｅｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ）は以下の式により求める：
Ｅｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ＝基底面から頂端方向のＰｅ／頂端から基底面方向のＰｅ
Ｎｅｔ ｆｌｕｘは以下の式により求める：
Ｎｅｔ ｆｌｕｘ＝ＭＤＲ１発現細胞のＥｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ／親細胞のＥｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ
コントロールに対する％は、本発明化合物存在下の基準化合物対非存在下の基準化合物の正味フラックス比として求める。
ＩＣ５０値を、曲線適合プログラムＸＬｆｉｔを使用して計算する。
材料
１．細胞株：
ａ．ＭＤＲ１／ＬＬＣ－ＰＫ１（ベクトン・ディッキンソン）
ｂ．ＬＬＣ－ＰＫ１（ベクトン・ディッキンソン）
２．基準基質：
ａ．［３Ｈ］ジゴキシン（１μＭ）
ｂ．［１４Ｃ］マンニトール（１μＭ）
３．基準阻害物質：
ベラパミル（１μＭ）
方法および手順
１．ＭＤＲ１発現ＬＬＣ－ＰＫ１細胞およびその親細胞を、培地Ａ（１０％ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、ゲンタマイシン（０．０５ｍｇ／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）およびハイグロマイシンＢ（１００μｇ／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を補充したＭｅｄｉｕｍ １９９（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））中において５％ＣＯ２／９５％Ｏ２ガス下、３７℃で通常培養する。輸送実験のため、これらの細胞をＴｒａｎｓｗｅｌｌ（登録商標）インサート（９６ウェル、孔径：０．４μｍ、Ｃｏａｓｔｅｒ）に１．４×１０４細胞／インサートの密度で播種し、培地Ｂ（１０％ＦＢＳおよびゲンタマイシン０．０５ｍｇ／ｍＬを補充したＭｅｄｉｕｍ １９９）をフィーダートレイに加える。これらの細胞はＣＯ２インキュベーター（５％ＣＯ２／９５％Ｏ２ガス、３７℃）でインキュベートし、播種後４８～７２時間ごとに頂端側および側底側の培地を交換する。これらの細胞を播種後６～９日で使用する。
２．ＭＤＲ１発現細胞または親細胞を播種した培養インサート中の培地を吸引により除去し、ＨＢＳＳでリンスする。頂端側（１５０μＬ）または側底側（２００μＬ）を、基準基質を含み、本発明化合物の存在下または非存在下の輸送バッファーで置換し、その後、基準基質の初期濃度を求めるために、ドナー側の一定分量（５０μＬ）の輸送バッファーを採取する。３７℃で指定時間インキュベートした後、ドナー側およびレシーバー側の一定分量（５０μＬ）の輸送バッファーを収集する。アッセイは３回繰り返し実施する。
３．一定分量（５０μＬ）の輸送緩衝液を５ｍＬのシンチレーションカクテルと混合し、液体シンチレーションカウンターを使用して放射能を測定する。
計算
単層のＭＤＲ１発現細胞と親細胞を通過した膜透過量を決定し、膜透過係数（Ｐｅ）をＥｘｃｅｌ ２００３を用い、以下の式により算出する：
Ｐｅ（ｃｍ／秒）＝膜透過量（ｐｍｏｌ）／細胞膜面積（ｃｍ２）／初期濃度（ｎＭ）／インキュベーション時間（秒）
ここで、膜透過量は所定時間（秒）のインキュベーション後の基質の透過濃度（ｎＭ、レシーバー側の濃度）に量（ｍＬ）を乗じて算出し、細胞膜面積は０．３３（ｃｍ２）とする。
外向きフラックス比（Ｅｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ）は以下の式により求める：
Ｅｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ＝基底面から頂端方向のＰｅ／頂端から基底面方向のＰｅ
Ｎｅｔ ｆｌｕｘは以下の式により求める：
Ｎｅｔ ｆｌｕｘ＝ＭＤＲ１発現細胞のＥｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ／親細胞のＥｆｆｌｕｘ Ｒａｔｉｏ
コントロールに対する％は、本発明化合物存在下の基準化合物対非存在下の基準化合物の正味フラックス比として求める。
ＩＣ５０値を、曲線適合プログラムＸＬｆｉｔを使用して計算する。
【0125】
（試験例１６：ｍｄｒ１ａ／１ｂ（－／－）Ｂ６マウスを用いたＰ－ｇｐ基質試験）
材料
動物：ｍｄｒ１ａ（－／－）Ｂ６マウス（ノックアウト（ＫＯ）マウス）またはＣ５７ＢＬ／６Ｊマウス（野生型マウス）
方法および手順
１．動物は本発明化合物の投与前に食餌を摂取させてもよい。
２．本発明化合物は３匹の動物に各時点で投与し、血液および脳サンプルは投与後の選択された時点（例えば、１５分、３０分、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間または２４時間）で採取する。血液（０．３～０．７ｍＬ）は血液凝固防止剤（ＥＤＴＡおよびヘパリン）を含むシリンジを用い、体幹採血で採取する。血液および組織（脳など）サンプルは直ちに氷冷する。
３．血液サンプルは遠心（１７８０ｘｇ、１０分間）し細胞を除去して、血漿を得る。その後、血漿サンプルを清潔なチューブに移し、分析するまで－７０℃の冷凍庫で保存する。
４．組織（脳など）サンプルは組織重量：蒸留水（ｍｌ）比＝１：３でホモジナイズし、清潔なチューブに移して分析するまで－７０℃の冷凍庫で保存する。
５．血漿および組織（脳など）サンプルをタンパク質沈殿を用いて調製し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳで分析する。解析方法は、ブランクの血漿または脳サンプルと既知量の分析物で構築した標準曲線を含めることにより較正する。測定法の真度および精度の確認を行うためにクオリティーコントロール用サンプルを用いる。
６．血漿および脳濃度値（ｎｇ／ｍＬおよびｎｇ／ｇ）を、薬物動態パラメーターを計算するために使用される適切な数学的ツールに導入する。一般的なプラットフォームは、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）薬物動態ソフトウェアモデリングプログラムである。
計算
Ｋｐ；組織／血中濃度比
Ｋｐ比＝ＫＯマウスのＫｐ値／野生型マウスのＫｐ値
組織ＡＵＣ／血漿ＡＵＣのＫＯ／野生型比
＝｛組織ＡＵＣ／血漿ＡＵＣ（ＫＯマウス）｝／｛組織ＡＵＣ／血漿ＡＵＣ（野生型マウス）｝
材料
動物：ｍｄｒ１ａ（－／－）Ｂ６マウス（ノックアウト（ＫＯ）マウス）またはＣ５７ＢＬ／６Ｊマウス（野生型マウス）
方法および手順
１．動物は本発明化合物の投与前に食餌を摂取させてもよい。
２．本発明化合物は３匹の動物に各時点で投与し、血液および脳サンプルは投与後の選択された時点（例えば、１５分、３０分、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間または２４時間）で採取する。血液（０．３～０．７ｍＬ）は血液凝固防止剤（ＥＤＴＡおよびヘパリン）を含むシリンジを用い、体幹採血で採取する。血液および組織（脳など）サンプルは直ちに氷冷する。
３．血液サンプルは遠心（１７８０ｘｇ、１０分間）し細胞を除去して、血漿を得る。その後、血漿サンプルを清潔なチューブに移し、分析するまで－７０℃の冷凍庫で保存する。
４．組織（脳など）サンプルは組織重量：蒸留水（ｍｌ）比＝１：３でホモジナイズし、清潔なチューブに移して分析するまで－７０℃の冷凍庫で保存する。
５．血漿および組織（脳など）サンプルをタンパク質沈殿を用いて調製し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳで分析する。解析方法は、ブランクの血漿または脳サンプルと既知量の分析物で構築した標準曲線を含めることにより較正する。測定法の真度および精度の確認を行うためにクオリティーコントロール用サンプルを用いる。
６．血漿および脳濃度値（ｎｇ／ｍＬおよびｎｇ／ｇ）を、薬物動態パラメーターを計算するために使用される適切な数学的ツールに導入する。一般的なプラットフォームは、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）薬物動態ソフトウェアモデリングプログラムである。
計算
Ｋｐ；組織／血中濃度比
Ｋｐ比＝ＫＯマウスのＫｐ値／野生型マウスのＫｐ値
組織ＡＵＣ／血漿ＡＵＣのＫＯ／野生型比
＝｛組織ＡＵＣ／血漿ＡＵＣ（ＫＯマウス）｝／｛組織ＡＵＣ／血漿ＡＵＣ（野生型マウス）｝
【0126】
（試験例１７ 麻酔モルモット心血管系試験）
動物種：モルモット（Ｓｌｃ：Ｈａｒｔｌｅｙ、４～５週齢、雄性）、Ｎ＝４
試験デザイン：
投与量：３、１０、および３０ｍｇ／ｋｇ（原則）
（本発明化合物は累積的に投与する）
製剤：
媒体組成；ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）：ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）：蒸留水（Ｄ．Ｗ．）＝１：７：２（原則）
本発明化合物をＤＭＡに溶解し、次いで、ＰＥＧ４００および蒸留水（Ｄ．Ｗ．）を添加する。最終的に、１．５、５および１５ｍｇ／ｍＬ溶液を調製する。
投与経路および投与スケジュール：
１０分間の静脈内注射（２ｍＬ／ｋｇ）
０～１０分：３ｍｇ／ｋｇ、３０～４０分：１０ｍｇ／ｋｇ、６０～７０分：３０ｍｇ／ｋｇ
媒体も上記と同じスケジュールで投与する。
群の組成：
媒体群および本発明化合物群（１群あたり４匹のモルモット）
評価方法：
評価項目：
平均血圧（ｍｍＨｇ）、心拍数（血圧波形より計測（拍／分））、ＱＴｃ（ｍｓ）およびトキシコキネティクス
実験手順：
モルモットをウレタン（１．４ｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）による麻酔下におき、ポリエチレンチューブを頸動脈（血圧測定および血液サンプリングのため）および頸静脈（試験化合物の注入のため）に挿入する。電極を皮下に装着する（第ＩＩ誘導）。血圧、心拍数および心電図（ＥＣＧ）をＰｏｗｅｒＬａｂ（登録商標）システム（ＡＤＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて測定する。
トキシコキネティクス：
各評価時点で、約０．３ｍＬの血液（血漿として約１２０μＬ）を頸動脈からヘパリンナトリウムを含むシリンジを用いて採取し、直ちに氷冷する。遠心分離（４℃、１００００ｒｐｍ、９３００×ｇ、２分）して血漿サンプルを得る。血漿の分離は氷冷下または４℃で行う。得られた血漿（ＴＫサンプル）は超低温庫（設定温度：－８０℃）で保管する。
分析方法：平均血圧および心拍数は各評価時点で３０秒間の平均値をとる。ＥＣＧパラメーター（ＱＴ間隔［ｍｓ］およびＱＴｃ）は評価時点における１０秒間の連続拍動の平均波形として導き出す。ＱＴｃ（Ｆｒｉｄｅｒｉｃｉａの補正式；ＱＴｃ＝ＱＴ／（ＲＲ）１／３）はＰｏｗｅｒＬａｂ（登録商標）システムを用いて計算する。不整脈の発生率は４匹の全動物において、（投与０．５時間前から試験終了までの）全てのＥＣＧ記録から目視で評価する。
評価時点：
最初の投与前（ｐｒｅ ｄｏｓｉｎｇ）、ならびに最初の投与の１０、２５、４０、５５、７０および８５分後
ＱＴｃデータ解析：
投与前の値からのＱＴｃの変化率（％）を算出する（投与前の値を１００％とみなす）。同じ評価時点で、相対的ＱＴｃを媒体値と比較する。
動物種：モルモット（Ｓｌｃ：Ｈａｒｔｌｅｙ、４～５週齢、雄性）、Ｎ＝４
試験デザイン：
投与量：３、１０、および３０ｍｇ／ｋｇ（原則）
（本発明化合物は累積的に投与する）
製剤：
媒体組成；ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）：ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）：蒸留水（Ｄ．Ｗ．）＝１：７：２（原則）
本発明化合物をＤＭＡに溶解し、次いで、ＰＥＧ４００および蒸留水（Ｄ．Ｗ．）を添加する。最終的に、１．５、５および１５ｍｇ／ｍＬ溶液を調製する。
投与経路および投与スケジュール：
１０分間の静脈内注射（２ｍＬ／ｋｇ）
０～１０分：３ｍｇ／ｋｇ、３０～４０分：１０ｍｇ／ｋｇ、６０～７０分：３０ｍｇ／ｋｇ
媒体も上記と同じスケジュールで投与する。
群の組成：
媒体群および本発明化合物群（１群あたり４匹のモルモット）
評価方法：
評価項目：
平均血圧（ｍｍＨｇ）、心拍数（血圧波形より計測（拍／分））、ＱＴｃ（ｍｓ）およびトキシコキネティクス
実験手順：
モルモットをウレタン（１．４ｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）による麻酔下におき、ポリエチレンチューブを頸動脈（血圧測定および血液サンプリングのため）および頸静脈（試験化合物の注入のため）に挿入する。電極を皮下に装着する（第ＩＩ誘導）。血圧、心拍数および心電図（ＥＣＧ）をＰｏｗｅｒＬａｂ（登録商標）システム（ＡＤＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて測定する。
トキシコキネティクス：
各評価時点で、約０．３ｍＬの血液（血漿として約１２０μＬ）を頸動脈からヘパリンナトリウムを含むシリンジを用いて採取し、直ちに氷冷する。遠心分離（４℃、１００００ｒｐｍ、９３００×ｇ、２分）して血漿サンプルを得る。血漿の分離は氷冷下または４℃で行う。得られた血漿（ＴＫサンプル）は超低温庫（設定温度：－８０℃）で保管する。
分析方法：平均血圧および心拍数は各評価時点で３０秒間の平均値をとる。ＥＣＧパラメーター（ＱＴ間隔［ｍｓ］およびＱＴｃ）は評価時点における１０秒間の連続拍動の平均波形として導き出す。ＱＴｃ（Ｆｒｉｄｅｒｉｃｉａの補正式；ＱＴｃ＝ＱＴ／（ＲＲ）１／３）はＰｏｗｅｒＬａｂ（登録商標）システムを用いて計算する。不整脈の発生率は４匹の全動物において、（投与０．５時間前から試験終了までの）全てのＥＣＧ記録から目視で評価する。
評価時点：
最初の投与前（ｐｒｅ ｄｏｓｉｎｇ）、ならびに最初の投与の１０、２５、４０、５５、７０および８５分後
ＱＴｃデータ解析：
投与前の値からのＱＴｃの変化率（％）を算出する（投与前の値を１００％とみなす）。同じ評価時点で、相対的ＱＴｃを媒体値と比較する。
【0127】
（試験例１８：ビーグル犬における薬理試験）
単回投与後のイヌの脳脊髄液（ＣＳＦ）のβアミロイドプロファイルに対する影響を評価するために、薬物動態（ＰＫ）フォローアップおよび一部の安全性の評価と併せて、試験化合物を試験した。
以下に示す化合物において、２匹または４匹のビーグル犬（雄性１もしくは２匹、雌性１もしくは２匹）に対し、媒体（２０％シクロデキストリン水溶液１ｍＬ／ｋｇ）を投与し、用量群あたり４匹のビーグル犬（雄性２匹、雌性２匹）に対し、以下の表に示す投与量（ｍｇ／ｋｇで表す用量と同一のｍｇ／ｍＬで表される２０％シクロデキストリン水溶液媒体）の試験化合物を空腹状態で投与した。
投与前ならびに投与から４、８、２５および４９時間後、頭蓋骨に挿入され、皮下組織及び皮膚で覆われたカニューレを通じ、無麻酔の動物の側脳室からＣＳＦを直接採取した。投与から８時間後、動物は３０分間の通常食餌が与えられた。ＰＫフォローアップ用に（０．５、１、２、４、８、２５および４９時間に）血液を採取し、生化学試験用に血清サンプルを投与前ならびに投与から８、および２５時間後に採取した。ＣＳＦサンプルは、Ａβ１－３７、Ａβ１－３８、Ａβ１－４０およびＡβ１－４２の測定に使用した。結果を以下の表にまとめる。
減少率は、８時間後および影響のある減少（２０％超の減少率）が観察された最終時点を示す。
単回投与後のイヌの脳脊髄液（ＣＳＦ）のβアミロイドプロファイルに対する影響を評価するために、薬物動態（ＰＫ）フォローアップおよび一部の安全性の評価と併せて、試験化合物を試験した。
以下に示す化合物において、２匹または４匹のビーグル犬（雄性１もしくは２匹、雌性１もしくは２匹）に対し、媒体（２０％シクロデキストリン水溶液１ｍＬ／ｋｇ）を投与し、用量群あたり４匹のビーグル犬（雄性２匹、雌性２匹）に対し、以下の表に示す投与量（ｍｇ／ｋｇで表す用量と同一のｍｇ／ｍＬで表される２０％シクロデキストリン水溶液媒体）の試験化合物を空腹状態で投与した。
投与前ならびに投与から４、８、２５および４９時間後、頭蓋骨に挿入され、皮下組織及び皮膚で覆われたカニューレを通じ、無麻酔の動物の側脳室からＣＳＦを直接採取した。投与から８時間後、動物は３０分間の通常食餌が与えられた。ＰＫフォローアップ用に（０．５、１、２、４、８、２５および４９時間に）血液を採取し、生化学試験用に血清サンプルを投与前ならびに投与から８、および２５時間後に採取した。ＣＳＦサンプルは、Ａβ１－３７、Ａβ１－３８、Ａβ１－４０およびＡβ１－４２の測定に使用した。結果を以下の表にまとめる。
【表34】
減少率は、８時間後および影響のある減少（２０％超の減少率）が観察された最終時点を示す。
【0128】
（試験例１９：ダンシルＧＳＨトラッピング試験）
ダンシルグルタチオン（グルタチオン）トラッピング試験は、反応性代謝物を調べる試験である。
反応条件は以下のとおりであった：基質、５０μｍｏｌ／Ｌ 本発明化合物；トラッピング剤、０．１ｍｍｏｌ／Ｌ ダンシルＧＳＨ；プールヒト肝ミクロソームのタンパク質含量、１ｍｇ／ｍＬ；プレ反応時間、５分；反応時間、６０分；反応温度、３７℃。
９６ウェルプレートにプレ反応液としてＫ－Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）中にプールヒト肝ミクロソーム、および本発明化合物溶液を加えた。補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して反応を開始した。所定時間の反応後、別の９６ウェルプレートに一部を移行し、５ｍｍｏｌ／Ｌジチオスレイトールを含むアセトニトリル溶液を加えることによって反応を停止した。３０００ｒｐｍで１５分間遠心した後、ダンシルＧＳＨと結合した代謝物の蛍光ピーク面積を、ＨＰＬＣを用いて蛍光検出により定量した。
ダンシルグルタチオン（グルタチオン）トラッピング試験は、反応性代謝物を調べる試験である。
反応条件は以下のとおりであった：基質、５０μｍｏｌ／Ｌ 本発明化合物；トラッピング剤、０．１ｍｍｏｌ／Ｌ ダンシルＧＳＨ；プールヒト肝ミクロソームのタンパク質含量、１ｍｇ／ｍＬ；プレ反応時間、５分；反応時間、６０分；反応温度、３７℃。
９６ウェルプレートにプレ反応液としてＫ－Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）中にプールヒト肝ミクロソーム、および本発明化合物溶液を加えた。補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して反応を開始した。所定時間の反応後、別の９６ウェルプレートに一部を移行し、５ｍｍｏｌ／Ｌジチオスレイトールを含むアセトニトリル溶液を加えることによって反応を停止した。３０００ｒｐｍで１５分間遠心した後、ダンシルＧＳＨと結合した代謝物の蛍光ピーク面積を、ＨＰＬＣを用いて蛍光検出により定量した。
【0129】
（試験例２０：［１４Ｃ］－ＫＣＮトラッピング試験）
［１４Ｃ］－シアン化カリウム（ＫＣＮ）トラッピング試験は、反応性代謝物を調べる試験である。
反応条件は以下のとおりである：基質、１０または５０μｍｏｌ／Ｌ 本発明化合物；トラッピング剤、１ｍｍｏｌ／Ｌ ［１４Ｃ］－ＫＣＮ（１１．７μＣｉ／チューブ）；プールヒト肝ミクロソームのタンパク質含量、１ｍｇ／ｍＬ；プレ反応時間、５分；反応時間、６０分；反応温度、３７℃。
９６ウェルプレートにプレ反応液としてＫ－Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）中にプールヒト肝ミクロソーム、および本発明化合物溶液を加える。補助因子としてＮＡＤＰＨを加えて、反応を開始させる。所定時間後、代謝反応を停止し、スピンカラムによって［１４Ｃ］－ＫＣＮと結合した代謝物をメタノール溶液１００μＬに抽出する。［１４Ｃ］－ＫＣＮ捕捉代謝物の放射ピーク面積をＲａｄｉｏ－ＨＰＬＣシステムにより定量する。
［１４Ｃ］－シアン化カリウム（ＫＣＮ）トラッピング試験は、反応性代謝物を調べる試験である。
反応条件は以下のとおりである：基質、１０または５０μｍｏｌ／Ｌ 本発明化合物；トラッピング剤、１ｍｍｏｌ／Ｌ ［１４Ｃ］－ＫＣＮ（１１．７μＣｉ／チューブ）；プールヒト肝ミクロソームのタンパク質含量、１ｍｇ／ｍＬ；プレ反応時間、５分；反応時間、６０分；反応温度、３７℃。
９６ウェルプレートにプレ反応液としてＫ－Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）中にプールヒト肝ミクロソーム、および本発明化合物溶液を加える。補助因子としてＮＡＤＰＨを加えて、反応を開始させる。所定時間後、代謝反応を停止し、スピンカラムによって［１４Ｃ］－ＫＣＮと結合した代謝物をメタノール溶液１００μＬに抽出する。［１４Ｃ］－ＫＣＮ捕捉代謝物の放射ピーク面積をＲａｄｉｏ－ＨＰＬＣシステムにより定量する。
【0130】
製剤例
以下に示す製剤例は例示にすぎないものであり、本発明の範囲を何ら限定することを意図するものではない。
製剤例１：錠剤
本発明化合物 １５ｍｇ
乳糖 １５ｍｇ
ステアリン酸カルシウム ３ｍｇ
ステアリン酸カルシウム以外の全ての上記成分を均一に混合する。次いで混合物を破砕、造粒および乾燥して、適切なサイズの顆粒を得る。次にステアリン酸カルシウムを顆粒に添加する。最後に錠剤化を圧縮力下で実施する。
以下に示す製剤例は例示にすぎないものであり、本発明の範囲を何ら限定することを意図するものではない。
製剤例１：錠剤
本発明化合物 １５ｍｇ
乳糖 １５ｍｇ
ステアリン酸カルシウム ３ｍｇ
ステアリン酸カルシウム以外の全ての上記成分を均一に混合する。次いで混合物を破砕、造粒および乾燥して、適切なサイズの顆粒を得る。次にステアリン酸カルシウムを顆粒に添加する。最後に錠剤化を圧縮力下で実施する。
【0131】
製剤例２：カプセル剤
本発明化合物 １０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム １０ｍｇ
乳糖 ８０ｍｇ
上記成分を均一に混合して粉末または細粒状とし、次いで、得られた混合物をカプセルに充填する。
本発明化合物 １０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム １０ｍｇ
乳糖 ８０ｍｇ
上記成分を均一に混合して粉末または細粒状とし、次いで、得られた混合物をカプセルに充填する。
【0132】
製剤例３：顆粒剤
本発明化合物 ３０ｇ
乳糖 ２６５ｇ
ステアリン酸マグネシウム ５ｇ
上記成分を均一に混合した後、混合物を圧縮する。圧縮した物質を粉砕、造粒および篩別して、適切なサイズの顆粒剤を得る。
本発明化合物 ３０ｇ
乳糖 ２６５ｇ
ステアリン酸マグネシウム ５ｇ
上記成分を均一に混合した後、混合物を圧縮する。圧縮した物質を粉砕、造粒および篩別して、適切なサイズの顆粒剤を得る。
【0133】
製剤例４：口腔内崩壊錠
本発明化合物および結晶セルロースを混合し、造粒後打錠して口腔内崩壊錠とする。
本発明化合物および結晶セルロースを混合し、造粒後打錠して口腔内崩壊錠とする。
【0134】
製剤例５：ドライシロップ剤
本発明化合物および乳糖を混合し、粉砕、整粒、篩別して適当な大きさのドライシロップ剤とする。
本発明化合物および乳糖を混合し、粉砕、整粒、篩別して適当な大きさのドライシロップ剤とする。
【0135】
製剤例６：注射剤
本発明化合物およびリン酸緩衝液を混合し、注射剤とする。
本発明化合物およびリン酸緩衝液を混合し、注射剤とする。
【0136】
製剤例７：点滴剤
本発明化合物およびリン酸緩衝液を混合し、注射剤とする。
本発明化合物およびリン酸緩衝液を混合し、注射剤とする。
【0137】
製剤例８：吸入剤
本発明化合物および乳糖を混合し細かく粉砕することにより、吸入剤とする。
本発明化合物および乳糖を混合し細かく粉砕することにより、吸入剤とする。
【0138】
製剤例９：軟膏剤
本発明化合物およびワセリンを混合し、軟膏剤とする。
本発明化合物およびワセリンを混合し、軟膏剤とする。
【0139】
製剤例１０：貼付剤
本発明化合物および粘着プラスターなどの基剤を混合し、貼付剤とする。
本発明化合物および粘着プラスターなどの基剤を混合し、貼付剤とする。
【産業上の利用可能性】
【0140】
本発明化合物は、アミロイドβタンパク質の産生、分泌および／または沈着により誘発される疾患の治療または予防剤として有用な医薬となり得る。
【国際調査報告】