特表 2022-535718 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者の症状の処置において使用するためのヒトミルクオリゴ糖

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-08-10

(54)【発明の名称】非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者の症状の処置において使用するためのヒトミルクオリゴ糖

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/702 20060101AFI20220803BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20220803BHJP

   A61P 25/20 20060101ALI20220803BHJP

   A61P 25/24 20060101ALI20220803BHJP

   A61P 25/22 20060101ALI20220803BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20220803BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20220803BHJP

   A23L 33/125 20160101ALI20220803BHJP

【ＦＩ】

A61K31/702

A61P37/08

A61P25/20

A61P25/24

A61P25/22

A61P25/00

A61P17/00

A23L33/125

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021569963

(86)(22)【出願日】2020-06-04

(85)【翻訳文提出日】2022-01-24

(86)【国際出願番号】 IB2020055265

(87)【国際公開番号】W WO2020245757

(87)【国際公開日】2020-12-10

(31)【優先権主張番号】PA201900686

(32)【優先日】2019-06-05

(33)【優先権主張国・地域又は機関】DK

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】508278309

【氏名又は名称】グリコム・アクティーゼルスカブ

【氏名又は名称原語表記】Ｇｌｙｃｏｍ Ａ／Ｓ

(74)【代理人】

【識別番号】100107456

【弁理士】

【氏名又は名称】池田 成人

(74)【代理人】

【識別番号】100128381

【弁理士】

【氏名又は名称】清水 義憲

(74)【代理人】

【識別番号】100162352

【弁理士】

【氏名又は名称】酒巻 順一郎

(72)【発明者】

【氏名】マコーネル， ブルース

(72)【発明者】

【氏名】ヴィグスネス， ルイーセ クリスティーン

【テーマコード（参考）】

4B018

4C086

【Ｆターム（参考）】

4B018LB10

4B018MD31

4B018ME07

4B018ME14

4C086AA01

4C086AA02

4C086EA01

4C086MA01

4C086MA04

4C086MA52

4C086MA55

4C086NA14

4C086ZA02

4C086ZA05

4C086ZA12

4C086ZA89

4C086ZB13

(57)【要約】

本発明は、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減する際、並びに患者において非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減する際に使用するための、ヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）、ＨＭＯを含む合成組成物、及び方法に関する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において、症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減する際、
・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者の食事に小麦及び／又はグルテンを再導入する際、
・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、前記患者の食事への小麦及び／又はグルテンの再導入時に、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症の症状の発生又は再発生のリスクを低減する際、及び／又は
・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減する際
に使用するための、ヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）。

【請求項2】

・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において、症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減する際、
・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者の食事に小麦及び／又はグルテンを再導入する際、
・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、前記患者の食事への小麦及び／又はグルテンの再導入時に、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症の症状の発生又は再発生のリスクを低減する際、及び／又は
・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減する際
に使用するための合成組成物であって、少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を含む組成物。

【請求項3】

１ｇ～１５ｇ、好ましくは２ｇ～１０ｇ、より好ましくは３ｇ～７ｇの量の前記ヒトミルクオリゴ糖を含有する、請求項２に記載の使用のための合成組成物。

【請求項4】

前記ヒトミルクオリゴ糖は、２’－ＦＬ、３－ＦＬ、ＤＦＬ、ＬＮＴ、ＬＮｎＴ、３’－ＳＬ、６’－ＳＬ、ＬＮＦＰ－Ｉ又はこれらの混合物を含む、請求項１に記載の使用のためのヒトミルクオリゴ糖又は請求項２若しくは３に記載の使用のための合成組成物。

【請求項5】

前記ヒトミルクオリゴ糖は、２’－ＦＬ及びＤＦＬの少なくとも１つ、並びにＬＮｎＴ及びＬＮＴの少なくとも１つである、請求項４に記載の使用のためのヒトミルクオリゴ糖又は合成組成物。

【請求項6】

・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において、症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減する際、
・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者の食事に小麦及び／又はグルテンを再導入する際、
・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、前記患者の食事への小麦及び／又はグルテンの再導入時に、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症の症状の発生又は再発生のリスクを低減する際、及び／又は
・ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減する際
に使用するためのパックであって、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）の個別の１日用量を少なくとも１４個含むパック。

【請求項7】

前記各用量は、約１ｇ～１５ｇ、好ましくは２ｇ～１０ｇ、より好ましくは３ｇ～７ｇのヒトミルクオリゴ糖を含有する、請求項６に記載の使用のためのパック。

【請求項8】

少なくとも約２１個の１日用量、例えば約２８個の１日用量を含む、請求項６又は７に記載の使用のためのパック。

【請求項9】

非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減するための方法であって、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を前記患者に投与することを含む方法。

【請求項10】

非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者の食事に小麦及び／又はグルテンを再導入するための方法であって、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を前記患者に投与することを含む方法。

【請求項11】

非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、前記患者の食事への小麦及び／又はグルテンの再導入時に、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症の症状の発生又は再発生のリスクを低減するための方法であって、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を前記患者に投与することを含む方法。

【請求項12】

前記患者は、１日当たり２ｇ～１０ｇの量の前記ＨＭＯを投与される、請求項９～１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

小麦及び／又はグルテンの摂取の後に、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖を投与することをさらに含む、請求項９～１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

前記ヒトミルクオリゴ糖は、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に、少なくとも１週間、より好ましくは少なくとも２週間にわたって投与される、請求項９～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減するための方法であって、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を前記患者に投与することを含む方法。

【請求項16】

前記非胃腸症状は、睡眠障害、頭痛、エネルギー不足、集中力欠如、不安、鬱、及び皮膚発疹のうちの１つ又は複数である、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

前記患者は、１日当たり２ｇ～１０ｇの量の前記ＨＭＯを投与される、請求項１５又は１６に記載の方法。

【請求項18】

前記ヒトは、小麦及び／又はグルテンの摂取前の初期段階中にはより多い用量を投与され、小麦及び／又はグルテンの摂取後は、より少ない維持用量を投与される、請求項９～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項19】

前記より多い用量は、１日当たり約３ｇ～約１０ｇ（例えば、１日当たり約４ｇ～約７．５ｇ）であり、前記より少ない維持用量は、１日当たり約２ｇ～約７．５ｇ（例えば、１日当たり約２ｇ～約５ｇ）である、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

前記ヒトミルクオリゴ糖は、２’－ＦＬ、３－ＦＬ、ＤＦＬ、ＬＮＴ、ＬＮｎＴ、３’－ＳＬ、６’－ＳＬ、ＬＮＦＰ－Ｉ又はこれらの混合物を含む、請求項９～１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項21】

前記ヒトミルクオリゴ糖は、２’－ＦＬ及びＤＦＬのうちの少なくとも１つ、並びにＬＮｎＴ及びＬＮＴのうちの少なくとも１つである、請求項２０に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【発明の詳細な説明】

【0001】

［発明の分野］
本発明は、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を有する人の症状を管理するための方法、化合物及び組成物に関する。

【0002】

［発明の背景］
非セリアックグルテン過敏症としても知られている非セリアック小麦過敏症は、セリアック病及び小麦アレルギーと共に、グルテン関連障害である（Ｌｅｃｃｉｏｌｉ ｅｔ ａｌ．Ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ９，１２０３（２０１７））。非セリアック小麦過敏症は、小麦及び／又はグルテンの摂取が他のグルテン関連障害で見られるものと同様の症状をもたらし得る、非アレルギー状態及び非自己免疫状態である。この状態は、症状が小麦及び／又はグルテンの使用中止によって軽減され、小麦及び／又はグルテンを再導入すると再出現するので、小麦及び／又はグルテン過敏症と考えられる。しかしながら、この状態を有する患者は、セリアック病又はグルテンアレルギーに関連する特徴的な自己免疫マーカー又はアレルギーマーカーを示さない。それにもかかわらず、臨床症状は、セリアック病及びグルテンアレルギーと類似している。最も頻度の高い胃腸症状には、腹部膨満、腹痛、心窩部痛、下痢、及び便秘が含まれる。非胃腸症状には、疲労、頭痛、不安、「ぼんやりした心（ｆｏｇｇｙ ｍｉｎｄ）」又は集中困難、鬱及び皮膚発疹が含まれる。これらの症状は、小麦及び／又はグルテンへの曝露の後、数時間～数日以内に発生する可能性があり、そして小麦及び／又はグルテンの使用を中止すると消失し得る。

【0003】

非セリアック小麦過敏症の原因は不明である。この状態は、セリアック病及びグルテンアレルギーにおいて見られるように、潜在的に多数のトリガーに関係し得る。開始トリガーは、主に、腸上皮の小麦及び／又はグルテンへの曝露を含み、免疫介在性及び／又は非免疫介在性応答をもたらす。Ｔ細胞の関与の証拠が欠けており、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）の関与が明らかであるため、この状態は適応免疫応答というよりもむしろ自然免疫応答であり得る。

【0004】

この状態は、特異的なトリガーが特定されていないので、セリアック病及びグルテンアレルギーとは異なるメカニズムに関係し得る。セリアック病のトリガーであるグルテンはこの状態の重大なトリガーであり得るが、それが主要なトリガーであるのか、又は本当にトリガーであるのかという疑念が増大している。いくつかの他の食物由来の刺激も重要なトリガーであり得る。これらには、アルファアミラーゼ／トリプシン阻害剤（ＡＴＩ）、発酵性オリゴ糖、二糖、単糖及びポリオール（ＦＯＤＭＡＰＳ）並びに他の短鎖フルクタンが含まれる。特に、ＡＴＩは、病態に関与している。免疫応答の開始におけるＡＴＩの役割は動物及びヒト研究モデルにおいて示されており、セリアック病及び非セリアック小麦過敏症の両方において重要な経口抗原であると考えられる。ＡＴＩは、主として、ＴＬＲ複合体の活性化を介して、マクロファージ、好中球及び腸樹状細胞に関係する自然免疫応答を誘発する。反対に、典型的なグリアジン誘導性の腸応答は特徴的に見られないので、グリアジンは主要なトリガーではないと思われ、加えて、グリアジンは主に、非セリアック小麦過敏症を有する患者では見出されていない適応免疫マーカー（例えば、ＩＬ－６、ＩＬ－２１及びＩＮＦ－γ）を活性化する。

【0005】

非セリアック小麦過敏症を有する患者は、ＴＬＲ２発現レベルの上昇、α及びβ上皮内リンパ球の数の増大、並びにＴ制御性細胞の数の減少を示す。また、これらの患者は、リポ多糖結合タンパク質（ＬＢＰ）及び可溶性ＣＤ１４タンパク質のレベルが上昇している。さらに、これらの患者は、腸上皮細胞傷害マーカーである脂肪酸結合タンパク質２（ＦＡＢＰ２）の循環レベルが上昇している（Ｕｈｄｅ ｅｔ ａｌ．Ｇｕｔ ６５，１９３０（２０１６））。現在、非セリアック小麦過敏症を有する患者は、抗原に固有層を横断させる腸透過性の増大を示すことが認められている。

【0006】

腸内細菌叢の変化も、非セリアック小麦過敏症における役割を果たし得る。患者に見られる免疫マーカーは主として自然免疫応答マーカーであり、これは、細菌叢が役割を有することの証拠を提供する。しかしながら、細菌叢の役割の証拠はまだ不明である。組成の観点から、患者はより少ない存在量の酪酸産生細菌及びビフィズス菌を有し得ると思われる。

【0007】

さらに、この状態は、いくつかの遺伝的素因を有する個人において発生するといういくつかの証拠がある。遺伝的素因は一般集団よりも高いが、強い遺伝的要素を有するセリアック病患者よりも低い。しかしながら、遺伝子とのこの関連性は、現在のところ定かではない。

【0008】

この状態の診断は複雑であり、多くの患者はそのプロセスをたどることを嫌がる。診断の第１のステップは、セリアック病、並びに小麦及び／又はグルテンアレルギーの除外である。これは、６週間にわたって患者にグルテン含有食を与えることによって行われる。この期間中に、小麦アレルギー（すなわち、小麦特異的ＩｇＥ及び皮膚プリックテスト）、及びセリアック病（すなわち、ＩｇＡ－ｔＴＧ、ＩｇＧ－ＤＧＰ及びＩｇＡ－ＥＭＡ）を除外するためにいくつかのテストが実施される。必要であれば、確認のために十二指腸生検を行うことができる。第２のステップは、患者に６週間の無グルテン食を開始させ、症状応答をモニターすることからなる。この症状応答は、胃腸症状評価スケール（ＧＳＲＳ）及び数値評価スケール（ＮＲＳ）を用いて評価される。食事を開始して６週間で患者が症状の改善を示すことができなければ、この状態の診断は除外され、ＩＢＳ及び他の腸機能障害などの他の診断を調査する必要がある。第３のステップは、グルテン含有食の再導入を含む。このステップでは、患者は２つのプロトコルのうちの１つにランダムに割り当てられる。患者は、無グルテン食＋プラセボ、又は無グルテン食＋グルテンのいずれかを１週間受ける。次に、患者は、厳密な無グルテン食の１週間のウォッシュアウト期間が置かれた後、１週間クロスオーバーされる。グルテンを含まない食事を導入したときの３０％の症状改善、又はグルテン含有食を導入したときの３０％の症状出現は、陽性結果を示す。この３０％値よりも低いと、陰性結果であると考えられる。

【0009】

診断の難しさは、この状態の有症率が明確でないことを意味する。しかしながら、この状態はより一般的な診断になりつつある。結果として、この状態の有症率は、西洋人で０．６～６％と大きく異なると報告されている。この診断能力の欠如の結果、患者は、正式な臨床検査又は医師による管理推奨なしに自己診断後に無グルテン食を開始することになる。このために、無グルテン食の摂取は、西欧諸国において人気が高まってきている。２０１５年７月に行われたギャラップ世論調査では、米国人の２０％が無グルテン食を選び、１７％は無グルテン食を避けると回答することが示された。

【0010】

現在、この状態の治療法は存在せず、唯一許容される処置は患者に無グルテン食を与えることであり、これは多くの場合、腸内及び腸管外症状の解消を助ける。しかしながら、推奨されるのは、その後無グルテン食を一生続けることである。グルテンを含有する穀物は多数の必須栄養素、特に繊維も含有するので、このことの栄養的な結果は不明である。また、グルテン含有食の除去は、患者の生活の質に著しい影響を与え得る。厄介な症状を誘発することなく、その人が小麦及び／又はグルテンを摂取できるようにする治療介入を患者に提供できることの方が良いであろう。

【0011】

したがって、小麦及び／又はグルテンの摂取を可能にし得る、ヒトにおける非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症の管理のための方法及び化合物が依然として必要とされている。さらに、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減するための方法及び化合物が依然として必要とされている。

【0012】

［発明の概要］
本発明の第１の態様は、
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において、症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減する際、
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者の食事に小麦及び／又はグルテンを再導入する際、
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、前記患者の食事への小麦及び／又はグルテンの再導入時に、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症の症状の発生又は再発生のリスクを低減する際、及び／又は
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減する際
に使用するためのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）に関する。

【0013】

本発明の第２の態様は、
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において、症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減する際、
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者の食事に小麦及び／又はグルテンを再導入する際、
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、前記患者の食事への小麦及び／又はグルテンの再導入時に、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症の症状の発生又は再発生のリスクを低減する際、及び／又は
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減する際
に使用するための合成組成物に関し、本組成物は、少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を含む。

【0014】

好ましくは、合成組成物は、１ｇ～１５ｇ、より好ましくは２ｇ～１０ｇの量のＨＭＯを含有する。例えば、合成組成物は、３ｇ～７ｇのＨＭＯを含有し得る。

【0015】

合成組成物は、ビフィズス菌、例えば、ビフィドバクテリウム・ロングム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）及び／又はビフィドバクテリウム・ビフィドゥム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）を含有し得る。

【0016】

本発明の第３の態様は、
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において、症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減する際、
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者の食事に小麦及び／又はグルテンを再導入する際、
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、前記患者の食事への小麦及び／又はグルテンの再導入時に、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症の症状の発生又は再発生のリスクを低減する際、及び／又は
－ 非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減する際
に使用するためのパックに関し、本パックは、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）の個別の１日用量を少なくとも１４個含む。

【0017】

好ましくは、パック内の各用量は、約１ｇ～１５ｇ、好ましくは２ｇ～１０ｇ、より好ましくは３ｇ～７ｇのヒトミルクオリゴ糖を含有する。

【0018】

パックは、好ましくは、少なくとも約２１個の１日用量、例えば、約２８個の１日用量を含む。

【0019】

パックは、ビフィズス菌、例えば、ビフィドバクテリウム・ロングム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）及び／又はビフィドバクテリウム・ビフィドゥム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）を含有し得る。

【0020】

本発明の第４の態様は、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減するための方法に関し、本方法は、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）をヒトに投与することを含む。

【0021】

好ましくは、ヒトミルクオリゴ糖は、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に、少なくとも１週間、より好ましくは少なくとも２週間にわたって投与される。

【0022】

好ましくは、ヒトミルクオリゴ糖は、小麦及び／又はグルテンの摂取の後にさらに投与される。

【0023】

本発明の第５の態様は、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者の食事に小麦及び／又はグルテンを再導入するための方法に関し、本方法は、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）をヒトに投与することを含む。

【0024】

好ましくは、ヒトミルクオリゴ糖は、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に、少なくとも１週間、より好ましくは少なくとも２週間にわたって投与される。

【0025】

好ましくは、ヒトミルクオリゴ糖は、小麦及び／又はグルテンの摂取の後にさらに投与される。

【0026】

本発明の第６の態様は、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において、前記患者の食事への小麦及び／又はグルテンの再導入時に、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症の症状の発生又は再発生のリスクを低減するための方法に関し、本方法は、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を患者に投与することを含む。

【0027】

好ましくは、ヒトミルクオリゴ糖は、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に、少なくとも１週間、より好ましくは少なくとも２週間にわたって投与される。

【0028】

好ましくは、ヒトミルクオリゴ糖は、小麦及び／又はグルテンの摂取の後にさらに投与される。

【0029】

本発明の第７の態様は、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者において非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減する方法に関し、本方法は、有効量の少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を患者に投与することを含む。

【0030】

好ましくは、非胃腸症状は、睡眠障害、頭痛、エネルギー不足、集中力欠如、不安、鬱、及び皮膚発疹のうちの１つ又は複数である。

【0031】

好ましくは、少なくとも１つのヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）は、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に投与される。より好ましくは、ヒトミルクオリゴ糖は、小麦及び／又はグルテンの摂取の後にさらに投与される。

【0032】

投与されるＨＭＯの量は、好ましくは、ヒトの腸内の酪酸産生細菌及び／又はビフィズス菌の存在量を増大させるのに有効である。さらに、投与されるＨＭＯの量は、好ましくは、ヒトの腸のバリア特性、特に結腸におけるバリア特性を改善するのに有効である。

【0033】

好ましくは、ヒトは、１日当たり１ｇ～１５ｇ、より好ましくは１日当たり２ｇ～１０ｇの量のＨＭＯを投与される。例えば、ヒトは、１日当たり３ｇ～７ｇを投与され得る。好ましくは、ヒトは、少なくとも１週間、より好ましくは少なくとも２週間にわたってＨＭＯを投与される。

【0034】

患者は、初期段階中にはより多い用量、そして維持段階中にはより少ない用量を投与され得る。好ましくは、ヒトは、初期段階中に少なくとも１週間、より好ましくは少なくとも２週間にわたってＨＭＯを投与される。初期段階は、小麦及び／又はグルテンの摂取の前に存在し得る。ヒトは、維持段階中に少なくとも４週間、より好ましくは少なくとも８週間にわたってＨＭＯを投与され得る。維持段階は、小麦及び／又はグルテンの摂取の後に存在し得る。初期段階中に投与される用量は、好ましくは、１日当たり約３ｇ～約１０ｇ（例えば、１日当たり約４ｇ～約７．５ｇ）であり、維持段階中に投与される用量は、好ましくは、１日当たり約２ｇ～約７．５ｇ（例えば、１日当たり約２ｇ～約５ｇ）である。

【0035】

特定の実施形態では、ＨＭＯは、中性ＨＭＯ又は酸性ＨＭＯであり得る。中性ＨＭＯは、１つ若しくは複数のフコシル化ＨＭＯ、又は１つ若しくは複数の非フコシル化ＨＭＯであり得る。好ましくは、ＨＭＯは、２’－ＦＬ、３－ＦＬ、ＤＦＬ、ＬＮＴ、ＬＮｎＴ、３’－ＳＬ、６’－ＳＬ、ＬＮＦＰ－Ｉ又はこれらの混合物から選択される。好ましくは、ＨＭＯは、２’－ＦＬ、並びにＬＮｎＴ及びＬＮＴの少なくとも１つ；２’－ＦＬ及びＤＦＬの少なくとも１つ、並びにＬＮｎＴ及びＬＮＴの少なくとも１つ（例えば、２’－ＦＬ、ＤＦＬ、並びにＬＮｎＴ及びＬＮＴの少なくとも１つ）；２’－ＦＬ及び６’－ＳＬ；ＤＦＬ及び６’－ＳＬ；２’－ＦＬ、ＤＦＬ及び６’－ＳＬ；２’－ＦＬ、６’－ＳＬ、並びにＬＮｎＴ及びＬＮＴの少なくとも１つ；そして２’－ＦＬ、ＤＦＬ、６’－ＳＬ、並びにＬＮｎＴ及び／又はＬＮＴの少なくとも１つを含む。

【0036】

［発明の詳細な説明］
驚くべきことに、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者への１つ又は複数のヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）の経口又は腸内投与は、小麦及び／又はグルテンを後に摂取する非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において、症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減できることが今見出された。さらに、１つ又は複数のヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）の経口又は腸内投与により、患者は、食事に小麦及び／又はグルテンを再導入できるようになる。また驚くべきことに、非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症を患っている患者への１つ又は複数のヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）の経口又は腸内投与は、患者の非胃腸症状の重症度及び／又は発生を低減することも見出された。またＨＭＯは、消化管内のビフィズス菌、特にＢ．アドレセンティス（Ｂ．ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）系統発生群のビフィズス菌、ビフィドバクテリウム・ロングム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）及び／又はビフィドバクテリウム・ビフィドゥム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）の存在量を優先的に増大させる。これらの細菌はラクテート及びアセテートを産生し、これらは次に、酪酸産生細菌によってブチレートに変換され得る。

【0037】

ヒトミルクオリゴ糖は、人乳中に見られる可溶性グリカンの不均一な混合物である。これは、人乳中でラクトース及び脂質に次いで３番目に豊富な固体成分であり、５～２５ｇ／ｌの濃度で存在する（Ｂｏｄｅ：Ｈｕｍａｎ ｍｉｌｋ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｂｅｎｅｆｉｃｉａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ，ｉｎ：Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ ｄｉｅｔａｒｙ ａｎｄ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｂｒｅａｓｔ ｍｉｌｋ（Ｚｉｂａｄｉ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．），ｐｐ．５１５－３１，Ｗａｇｅｎｉｎｇｅｎ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（２０１３））。ＨＭＯは小腸での酵素加水分解に対して抵抗性であり、したがって、ほとんど消化及び吸収されずに、無傷で結腸に到達する。結腸に到達するＨＭＯの大部分は、特定の細菌の増殖を選択的に刺激することによって腸の生態系を形成するための基質としての機能を果たす。ＨＭＯは、乳児の腸内細菌叢を実質的に調節し、人工栄養児と母乳栄養児の細菌叢の違いにおいて決定的な役割を果たすと考えられる。これらの違いとしては、人工栄養児のより多様な腸内細菌叢と比較して、母乳栄養児の腸内のビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）の優勢が挙げられる。ビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）種の菌株は腸の健康に対して好影響を与えると考えられるので、このことは、乳児にとって有益であるとみなされる。

【0038】

またＨＭＯは、消化管内のビフィズス菌、特にＢ．アドレセンティス（Ｂ．ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）系統発生群のビフィズス菌、ビフィドバクテリウム・ロングム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）及び／又はビフィドバクテリウム・ビフィドゥム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）の存在量を優先的に増大させる。

【0039】

本明細書では、以下の用語は以下の意味を有する。

【0040】

「Ｂ．アドレセンティス（Ｂ．ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）系統発生群のビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）」は、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・アングラツム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｎｇｕｌａｔｕｍ）、ビフィドバクテリウム・カテヌラツム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、ビフィドバクテリウム・シュードカテヌラツム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｓｅｕｄｏｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、ビフィドバクテリウム・カシワノヘンス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｋａｓｈｉｗａｎｏｈｅｎｓｅ）、ビフィドバクテリウム・デンツム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｅｎｔｕｍ）及びビフィドバクテリウム・ステルコリス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｔｅｒｃｏｒｉｓ）からなる群から選択される細菌を意味する（Ｄｕｒａｎｔｉ ｅｔ ａｌ．Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．７９，３３６（２０１３），Ｂｏｔｔａｃｉｎｉ ｅｔ ａｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｅｌｌ Ｆａｃｔ．１３：Ｓ４（２０１４））。好ましくは、Ｂ．アドレセンティス（Ｂ．ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）系統発生群のビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）は、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）及び／又はビフィドバクテリウム・シュードカテヌラツム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｓｅｕｄｏｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）である。

【0041】

「有効量」は、ヒトにおいて所望の処置結果を与えるのに十分な量のＨＭＯを提供する組成物の量を意味する。所望の処置結果を達成するために、有効量は、１回又は複数回の用量で投与することができる。

【0042】

「腸内投与」は、消化管（胃を含む）内で組成物の堆積を引き起こす、非乳児に組成物を送達するための任意の従来の形態を意味する。腸内投与の方法には、経鼻胃管又は空腸管、経口、舌下及び直腸による供給が含まれる。

【0043】

「ヒトミルクオリゴ糖」又は「ＨＭＯ」は、ヒト母乳中に見られる複合炭水化物を意味する（Ｕｒａｓｈｉｍａ ｅｔ ａｌ．：Ｍｉｌｋ Ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．Ｎｏｖａ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒ（２０１１）；Ｃｈｅｎ Ａｄｖ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．７２，１１３（２０１５））。ＨＭＯは、１つ若しくは複数のβ－Ｎ－アセチル－ラクトサミニル、及び／又は１つ若しくは複数のβ－ラクト－Ｎ－ビオシル単位によって伸長され得る、還元末端にラクトース単位を含むコア構造を有し、このコア構造は、αＬ－フコピラノシル及び／又はα－Ｎ－アセチル－ノイラミニル（シアリル）部分によって置換され得る。これに関して、非酸性（又は中性）ＨＭＯはシアリル残基を欠いており、酸性ＨＭＯは、その構造内に少なくとも１つのシアリル残基を有する。非酸性（又は中性）ＨＭＯは、フコシル化又は非フコシル化され得る。このような中性非フコシル化ＨＭＯの例としては、ラクト－Ｎ－テトラオース（ＬＮＴ）、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）、ラクト－Ｎ－ネオヘキサオース（ＬＮｎＨ）、パラ－ラクト－Ｎ－ネオヘキサオース（ｐＬＮｎＨ）、パラ－ラクト－Ｎ－ヘキサオース（ｐＬＮＨ）及びラクト－Ｎ－ヘキサオース（ＬＮＨ）が挙げられる。中性フコシル化ＨＭＯの例としては、２’－フコシルラクトース（２’－ＦＬ）、ラクト－Ｎ－フコペンタオースＩ（ＬＮＦＰ－Ｉ）、ラクト－Ｎ－ジフコヘキサオースＩ（ＬＮＤＦＨ－Ｉ）、３－フコシルラクトース（３－ＦＬ）、ジフコシルラクトース（ＤＦＬ）、ラクト－Ｎ－フコペンタオースＩＩ（ＬＮＦＰ－ＩＩ）、ラクト－Ｎ－フコペンタオースＩＩＩ（ＬＮＦＰ－ＩＩＩ）、ラクト－Ｎ－ジフコヘキサオースＩＩＩ（ＬＮＤＦＨ－ＩＩＩ）、フコシル－ラクト－Ｎ－ヘキサオースＩＩ（ＦＬＮＨ－ＩＩ）、ラクト－Ｎ－フコペンタオースＶ（ＬＮＦＰ－Ｖ）、ラクト－Ｎ－ジフコヘキサオースＩＩ（ＬＮＤＦＨ－ＩＩ）、フコシル－ラクト－Ｎ－ヘキサオースＩ（ＦＬＮＨ－Ｉ）、フコシル－パラ－ラクト－Ｎ－ヘキサオースＩ（ＦｐＬＮＨ－Ｉ）、フコシル－パラ－ラクト－Ｎ－ネオヘキサオースＩＩ（ＦｐＬＮｎＨ ＩＩ）及びフコシル－ラクト－Ｎ－ネオヘキサオース（ＦＬＮｎＨ）が挙げられる。酸性ＨＭＯの例としては、３’－シアリルラクトース（３’－ＳＬ）、６’－シアリルラクトース（６’－ＳＬ）、３－フコシル－３’－シアリルラクトース（ＦＳＬ）、ＬＳＴ ａ、フコシル－ＬＳＴ ａ（ＦＬＳＴ ａ）、ＬＳＴ ｂ、フコシル－ＬＳＴ ｂ（ＦＬＳＴ ｂ）、ＬＳＴ ｃ、フコシル－ＬＳＴ ｃ（ＦＬＳＴ ｃ）、シアリル－ＬＮＨ（ＳＬＮＨ）、シアリル－ラクト－Ｎ－ヘキサオース（ＳＬＮＨ）、シアリル－ラクト－Ｎ－ネオヘキサオースＩ（ＳＬＮＨ－Ｉ）、シアリル－ラクト－Ｎ－ネオヘキサオースＩＩ（ＳＬＮＨ－ＩＩ）及びジシアリル－ラクト－Ｎ－テトラオース（ＤＳＬＮＴ）が挙げられる。

【0044】

「細菌叢」、「ミクロフローラ」及び「ミクロビオーム」は、通常ヒトの身体の器官又は一部、特に胃腸器官に存在する、生きている微生物の群集を意味する。胃腸内細菌叢の最も優勢なメンバーとしては、ファーミキューテス門（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）、バクテロイデス門（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）、アクチノバクテリア門（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ）、プロテオバクテリア門（Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ）、シネルギステス門（Ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｅｔｅｓ）、ベルコミクロビウム門（Ｖｅｒｒｕｃｏｍｉｃｒｏｂｉａ）、フソバクテリウム門（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉａ）、及びユリアーキオータ門（Ｅｕｒｙａｒｃｈａｅｏｔａ）の微生物；属レベルでは、バクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、フィーカリバクテリウム属（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ローズブリア属（Ｒｏｓｅｂｕｒｉａ）、アリスティペス属（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、コリンセラ属（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ）、ブラウティア属（Ｂｌａｕｔｉａ）、コプロコッカス属（Ｃｏｐｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ルミノコッカス属（Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ）、ユーバクテリウム属（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）及びドレア属（Ｄｏｒｅａ）；種レベルでは、バクテロイデス・ユニフォルミス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｕｎｉｆｏｒｍｉｓ）、アリスティペス・プトレディニス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｐｕｔｒｅｄｉｎｉｓ）、パラバクテロイデス・メルダエ（Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｍｅｒｄａｅ）、ルミノコッカス・ブロミイ（Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｂｒｏｍｉｉ）、ドレア・ロンギカテナ（Ｄｏｒｅａ ｌｏｎｇｉｃａｔｅｎａ）、バクテロイデス・カッカエ（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｃａｃｃａｅ）、バクテロイデス・テタイオタオミクロン（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｔｈｅｔａｉｏｔａｏｍｉｃｒｏｎ）、ユーバクテリウム・ハリイ（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｌｌｉｉ）、ルミノコッカス・トルケス（Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｔｏｒｑｕｅｓ）、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｒａｕｓｎｉｔｚｉｉ）、ルミノコッカス・ラクタリス（Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｓ）、コリンセラ・アエロファシエンス（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ ａｅｒｏｆａｃｉｅｎｓ）、ドレア・フォルミキゲネランス（Ｄｏｒｅａ ｆｏｒｍｉｃｉｇｅｎｅｒａｎｓ）、バクテロイデス・ブルガタス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｖｕｌｇａｔｕｓ）及びロセブリア・インテスティナリス（Ｒｏｓｅｂｕｒｉａ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓ）が挙げられる。胃腸内細菌叢には、消化管の上皮を被覆する粘膜層内に位置するか又は付着した粘膜関連細菌叢と、消化管の内腔に見られる管腔関連細菌叢とが含まれる。

【0045】

「細菌叢の調節」は、細菌叢に対する調節又は制御作用、例えば、ビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バルネシエラ属（Ｂａｒｎｅｓｉｅｌｌａ）、フィーカリバクテリウム属（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）及び／又は他の酪酸産生細菌の常在性の腸内存在量の増大をもたらす作用を与えることを意味する。別の例では、この作用は、ルミノコッカス・グナブス（Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ ｇｎａｖｕｓ）及び／又はプロテオバクテリア門（Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ）の腸内存在量の減少をもたらし得る。「プロテオバクテリア」はグラム陰性細菌の門であり、エシェリキア属（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、ビブリオ属（Ｖｉｂｒｉｏ）、ヘリコバクター属（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）、エルシニア（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）属及び多数の他の注目すべき属などの様々な種類の病原性細菌が含まれる。

【0046】

「非セリアック小麦過敏症」は、セリアック病又は小麦アレルギーのいずれによる影響も受けていない対象において、グルテン含有食の摂取に関連する腸内及び腸管外症状を特徴とする症候群を意味する。「非セリアックグルテン過敏症」は同じ意味を有し、２つの用語は互換的に使用される。グルテン含有食は、通常、小麦、大麦及びライ麦などのグルテン含有穀物を含有する。

【0047】

「非乳児ヒト」又は「非乳児」は、３歳以上のヒトを意味する。非乳児ヒトは、子供、ティーンエイジャー、成人又は高齢者であり得る。

【0048】

「経口投与」は、組成物をヒトに口から送達するための任意の従来の形態を意味する。したがって、経口投与は、腸内投与の一形態である。

【0049】

本明細書の文脈における「予防的処置」又は「予防」は、疾患の発症又は再発のリスクを低下させるために与えられる処置又は取られる行動を意味する。

【0050】

「症状の重症度及び／又は発生を予防的に低減する」は、その後の時点で、小麦及び／又はグルテンへの曝露時に症状の重症度及び／又は発生を低減することを意味する。

【0051】

「ビフィズス菌の相対存在量」は、ヒトの消化管の細菌叢内の他のビフィズス菌に対する、ある１つのビフィズス菌種の存在量を意味する。

【0052】

「ビフィズス菌の相対増殖」は、ヒトの消化管の細菌叢内の他のビフィズス菌に対する、ある１つのビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）種の増殖を意味する。

【0053】

「二次予防」は、高リスク患者における状態の発症の予防、又は既にその状態を有する患者における症状の再発の防止を意味する。「高リスク」患者は、その状態を発生する素因のある個人、例えば、その状態の家族歴がある人である。

【0054】

「合成組成物」は人工的に調製された組成物を意味し、好ましくは、生体外で化学的及び／又は生物学的に、例えば、化学反応、酵素反応、又は組換えによって生成される少なくとも１つの化合物を含有する組成物を意味する。いくつかの実施形態では、本発明の合成組成物は天然に存在する組成物と同一であってもよいが、好ましくは、同一ではない。合成組成物は、通常、ヒトにおける小麦及び／又はグルテン過敏症の症状を低減するか、或いは耐性を引き起こすことができる、１つ又は複数のＨＭＯを含む１つ又は複数の化合物を含む。また、いくつかの実施形態では、合成組成物は、上記の化合物の効力に悪影響を与えない、１つ又は複数の栄養的又は薬学的に活性な成分を含み得る。また本発明の合成組成物のいくつかの非限定的な実施形態は、以下に記載される。

【0055】

「処置する（ｔｒｅａｔ）」は、処置されている人における結果を改善又は安定化する目的で、或いは基本的な栄養必要量に対処する目的で、医学的状態又は疾患に対処することを意味する。したがって、処置は、処置されている人の栄養必要量に対処することによる、医学的状態又は疾患の食事又は栄養管理を含む。「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」及び「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、文法的に対応する意味を有する。

【0056】

「治療」は、疾患又は病態の症状を低減又は排除するために与えられる処置又は取られる行動を意味する。

【0057】

ＨＭＯは、ヒト、ウシ、ヒツジ、ブタ、又はヤギ種を含むがこれらに限定されない哺乳類により分泌されるミルクから、周知のプロセスによって単離又は濃縮することができる。ＨＭＯは、微生物発酵、酵素プロセス、化学合成、又はこれらの技術の組み合わせを用いる周知のプロセスによって生成することもできる。例として、化学的性質を用いて、ＬＮｎＴは、国際公開第２０１１／１００９８０号パンフレット及び国際公開第２０１３／０４４９２８号パンフレットに記載されるように製造することができ、ＬＮＴは、国際公開第２０１２／１５５９１６号パンフレット及び国際公開第２０１３／０４４９２８号パンフレットに記載されるように合成することができ、ＬＮＴ及びＬＮｎＴの混合物は、国際公開第２０１３／０９１６６０号パンフレットに記載されるように製造することができ、２’－ＦＬは、国際公開第２０１０／１１５９３４号パンフレット及び国際公開第２０１０／１１５９３５号パンフレットに記載されるように製造することができ、３－ＦＬは、国際公開第２０１３／１３９３４４号パンフレットに記載されるように製造することができ、６’－ＳＬ及びその塩は、国際公開第２０１０／１００９７９号パンフレットに記載されるように製造することができ、シアリル化オリゴ糖は、国際公開第２０１２／１１３４０４号パンフレットに記載されるように製造することができ、そしてヒトミルクオリゴ糖の混合物は、国際公開第２０１２／１１３４０５号パンフレットに記載されるように製造することができる。酵素生成の例として、シアリル化オリゴ糖は、国際公開第２０１２／００７５８８号パンフレットに記載されるように製造することができ、フコシル化オリゴ糖は、国際公開第２０１２／１２７４１０号パンフレットに記載されるように製造することができ、そして有利に多様化されたヒトミルクオリゴ糖のブレンドは、国際公開第２０１２／１５６８９７号パンフレット及び国際公開第２０１２／１５６８９８号パンフレットに記載されるように製造することができる。遺伝子改変大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）を用いて、フコース又はシアル酸によって任意選択的に置換されたコア（非フコシル化中性）ヒトミルクオリゴ糖を製造する方法を説明するバイオテクノロジー法は、国際公開第０１／０４３４１号パンフレット及び国際公開第２００７／１０１８６２号パンフレットにおいて見出すことができる。

【0058】

上記態様のいずれかにおけるＨＭＯは、本発明の目的に適した単一のＨＭＯ又は任意のＨＭＯの混合物であり得る。

【0059】

一実施形態では、混合物は、中性ＨＭＯ、好ましくは少なくとも第１の中性ＨＭＯ及び少なくとも第２の中性ＨＭＯを含むか、これらからなるか、又はこれらから本質的になり、ここで、第１の中性ＨＭＯはフコシル化中性ＨＭＯであり、第２の中性ＨＭＯはコアＨＭＯ（非フコシル化中性ＨＭＯとも呼ばれる）である。特に、ＨＭＯの混合物は、２’－ＦＬ、３－ＦＬ、ＤＦＬ、ＬＮＦＰ－Ｉ、ＬＮＦＰ－ＩＩ、ＬＮＦＰ－ＩＩＩ、ＬＮＦＰ－Ｖ、ＬＮＤＦＨ－Ｉ、ＬＮＤＦＨ－ＩＩ、ＬＮＤＦＨ－ＩＩＩ、ＦＬＮＨ－Ｉ、ＦＬＮＨ－ＩＩ、ＦＬＮｎＨ、ＦｐＬＮＨ－Ｉ及びＦ－ｐＬＮｎＨ ＩＩからなるリストから選択されるフコシル化ＨＭＯと、ＬＮＴ、ＬＮｎＴ、ＬＮＨ、ＬＮｎＨ、ｐＬＮＨ及びｐＬＮｎＨからなるリストから選択されるコアＨＭＯとを含有し得る。より好ましくは、中性ＨＭＯの混合物は、２’－ＦＬ、３－ＦＬ及びＤＦＬからなるリストから選択されるフコシル化ＨＭＯと、ＬＮＴ及びＬＮｎＴからなるリストから選択されるコアＨＭＯとを含有するか、これらからなるか、又はこれらから本質的になる。有利には、混合物は、２’－ＦＬ、並びにＬＮｎＴ及びＬＮＴの少なくとも１つ；若しくは２’－ＦＬ及びＤＦＬの少なくとも１つ、並びにＬＮｎＴ及びＬＮＴの少なくとも１つ；若しくは２’－ＦＬ、ＤＦＬ、並びにＬＮｎＴ及びＬＮＴの少なくとも１つを含むか、これらからなるか、又はこれらから本質的になる。

【0060】

他の実施形態では、混合物は、少なくとも第１の（酸性）ＨＭＯ及び少なくとも第２の（中性）ＨＭＯを含むか、これらからなるか、又はこれらから本質的になり、ここで、第１の（酸性）ＨＭＯは、３’－ＳＬ、６’－ＳＬ及びＦＳＬからなるリストから選択され、第２の（中性）ＨＭＯは、２’－ＦＬ、３－ＦＬ、ＤＦＬ、ＬＮＴ及びＬＮｎＴからなるリストから選択される。有利には、混合物は、２’－ＦＬ及び６’－ＳＬ；若しくは６’－ＳＬ、並びに２’－ＦＬ及びＤＦＬの少なくとも１つ；若しくは２’－ＦＬ、６’－ＳＬ、並びにＬＮｎＴ及びＬＮＴの少なくとも１つ；若しくは２’－ＦＬ、ＤＦＬ、６’－ＳＬ、並びにＬＮｎＴ及び／又はＬＮＴの少なくとも１つを含むか、これらからなるか、又はこれらから本質的になる。

【0061】

さらに、一実施形態では、合成組成物は、栄養組成物の形態であり得る。例えば、栄養組成物は、食品組成物、水分補給溶液、医療食品又は特別な医療目的のための食品、栄養サプリメントなどであり得る。栄養組成物は、タンパク質、脂質及び／又は消化可能な炭水化物の供給源を含有することができ、粉末又は液体形態であり得る。組成物は唯一の栄養源であるように、又は栄養サプリメントとして設計することができる。

【0062】

適切なタンパク質源には、乳タンパク質、大豆タンパク質、米タンパク質、エンドウ豆タンパク質及びオート麦タンパク質、又はこれらの混合物が含まれる。乳タンパク質は、乳タンパク質濃縮物、乳タンパク質単離物、乳清タンパク質若しくはカゼイン、又は両方の混合物の形態であり得る。タンパク質は、タンパク質全体、又は部分的に加水分解されるか若しくは広範囲に加水分解された加水分解タンパク質であり得る。加水分解タンパク質は消化がより容易であるという利点を提供し、これは、炎症性又は易感染性の消化管を有するヒトにとって重要であり得る。タンパク質は、遊離アミノ酸の形態で提供されることも可能である。タンパク質は、栄養組成物のエネルギーの約５％～約３０％、通常は約１０％～２０％を構成することができる。

【0063】

タンパク質源は、グルタミン、スレオニン、システイン、セリン、プロリン、又はこれらのアミノ酸の組み合わせの供給源であり得る。グルタミン源は、グルタミンジペプチド及び／又はグルタミン強化タンパク質であり得る。グルタミンは腸細胞によりエネルギー源として使用されるため、グルタミンが包含され得る。スレオニン、セリン及びプロリンは、ムチンの産生のために重要なアミノ酸である。ムチンは消化管を被覆し、腸のバリア機能及び粘膜の治癒を改善することができる。システインは、身体の抗酸化防御の鍵であるグルタチオンの主要な前駆体である。

【0064】

適切な消化可能な炭水化物には、マルトデキストリン、加水分解若しくは加工デンプン若しくはコーンスターチ、グルコースポリマー、コーンシロップ、コーンシロップ固体、高フルクトースコーンシロップ、米由来の炭水化物、エンドウ豆由来の炭水化物、ジャガイモ由来の炭水化物、タピオカ、スクロース、グルコース、フルクトース、スクロース、ラクトース、ハチミツ、糖アルコール（例えば、マルチトール、エリスリトール、ソルビトール）、又はこれらの混合物が含まれる。好ましくは、組成物は、添加ラクトース又は他のＦＯＤＭＡＰ炭水化物が低減されているか、又は含まない。一般に、消化可能な炭水化物は、栄養組成物のエネルギーの約３５％～約５５％を提供する。特に適切な消化可能な炭水化物は、低デキストロース当量（ＤＥ）マルトデキストリンである。

【0065】

適切な脂質には、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）及び長鎖トリグリセリド（ＬＣＴ）が含まれる。好ましくは、脂質は、ＭＣＴ及びＬＣＴの混合物である。例えば、ＭＣＴは、脂質の約３０重量％～約７０重量％、より具体的には約５０重量％～約６０重量％を構成することができる。ＭＣＴは消化がより容易であるという利点を提供し、これは、炎症性又は易感染性の消化管を有するヒトにとって重要であり得る。一般的に、脂質は、栄養組成物のエネルギーの約３５％～約５０％を提供する。脂質は、必須脂肪酸（オメガ－３及びオメガ－６脂肪酸）を含有することができる。好ましくは、これらの多価不飽和脂肪酸は、脂質源の総エネルギーの約３０％未満を提供する。

【0066】

長鎖トリグリセリドの適切な供給源は、菜種油、ヒマワリ種子油、ヤシ油、大豆油、乳脂肪、コーン油、高オレイン酸油、及び大豆レシチンである。分画したココナッツ油は、中鎖トリグリセリドの適切な供給源である。栄養組成物の脂質プロファイルは、好ましくは、約４：１～約１０：１の多価不飽和脂肪酸オメガ－６（ｎ－６）対オメガ－３（ｎ－３）比を有するように設計される。例えば、ｎ－６対ｎ－３脂肪酸比は、約６：１～約９：１であり得る。

【0067】

栄養組成物は、ビタミン及びミネラルも含み得る。栄養組成物は、唯一の栄養源であることが意図される場合、好ましくは、完全なビタミン及びミネラルプロファイルを含む。ビタミンの例としては、ビタミンＡ、Ｂ複合体（例えば、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ６及びＢ１２）、Ｃ、Ｄ、Ｅ及びＫ、ナイアシン、並びにパントテン酸、葉酸及びビオチンなどの酸ビタミンが挙げられる。ミネラルの例としては、カルシウム、鉄、亜鉛、マグネシウム、ヨウ素、銅、リン、マンガン、カリウム、クロム、モリブデン、セレン、ニッケル、スズ、ケイ素、バナジウム及びホウ素が挙げられる。

【0068】

栄養組成物は、ルテイン、リコピン、ゼアキサンチン、及びベータ－カロテンなどのカロテノイドも含むことができる。含有されるカロテノイドの総量は、約０．００１μｇ／ｍｌ～約１０μｇ／ｍｌで異なり得る。ルテインは、約０．００１μｇ／ｍｌ～約１０μｇ／ｍｌ、好ましくは約０．０４４μｇ／ｍｌ～約５μｇ／ｍｌのルテインの量で含有され得る。リコピンは、約０．００１μｇ／ｍｌ～約１０μｇ／ｍｌ、好ましくは約０．０１８５μｇ／ｍｌ～約５μｇ／ｍｌのリコピンの量で含有され得る。ベータ－カロテンは、約０．００１μｇ／ｍｌ～約１０ｍｇ／ｍｌ、例えば、約０．０３４μｇ／ｍｌ～約５μｇ／ｍｌのベータ－カロテンを含むことができる。

【0069】

栄養組成物は、好ましくは、低減された濃度、例えば、約３００ｍｇ／ｌ～約４００ｍｇ／ｌのナトリウムも含有する。残りの電解質は、腎機能に過度の腎溶質負荷を与えることなく必要性を満たすように設定された濃度で存在し得る。例えば、カリウムは、好ましくは約１１８０～約１３００ｍｇ／ｌの範囲で存在し、塩化物は、好ましくは約６８０～約８００ｍｇ／ｌの範囲で存在する。

【0070】

栄養組成物は、防腐剤、乳化剤、増粘剤、緩衝剤、繊維及びプレバイオティクス（例えば、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖）、プロバイオティクス（例えば、Ｂ．アニマリス亜種ラクティス（Ｂ．ａｎｉｍａｌｉｓ ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ）ＢＢ－１２、Ｂ．ラクティス（Ｂ．ｌａｃｔｉｓ）ＨＮ０１９、Ｂ．ラクティス（Ｂ．ｌａｃｔｉｓ）Ｂｉ０７、Ｂ．インファンティス（Ｂ．ｉｎｆａｎｔｉｓ）ＡＴＣＣ １５６９７、Ｌ．ラムノサス（Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）ＧＧ、Ｌ．ラムノサス（Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）ＨＮＯＯｌ、Ｌ．アシドフィルス（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）ＬＡ－５、Ｌ．アシドフィルス（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）ＮＣＦＭ、Ｌ．フェルメンツム（Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）ＣＥＣＴ５７１６、Ｂ．ロングム（Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ）ＢＢ５３６、Ｂ．ロングム（Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ）ＡＨ１２０５、Ｂ．ロングム（Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ）ＡＨ１２０６、Ｂ．ブレーベ（Ｂ．ｂｒｅｖｅ）Ｍ－１６Ｖ、Ｌ．レウテリ（Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ）ＡＴＣＣ ５５７３０、Ｌ．レウテリ（Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ）ＡＴＣＣ ＰＴＡ－６４８５、Ｌ．レウテリ（Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ）ＤＳＭ １７９３８）、抗酸化剤／抗炎症化合物（トコフェロール、カロテノイド、アスコルベート／ビタミンＣ、パルミチン酸アスコルビル、ポリフェノール、グルタチオン、及びスーパーオキシドジスムターゼ（メロン）を含む）、他の生物活性因子（例えば、成長ホルモン、サイトカイン、ＴＦＧ－β）、着色剤、香料、及び安定剤、潤滑剤などの種々の他の従来の成分も含有することができる。

【0071】

栄養組成物は、可溶性粉末、液体濃縮物、又はすぐに使える製剤として配合することができる。組成物は、経鼻胃管を介して又は経口的に、必要としているヒトに供給することができる。種々の香料、繊維及び他の添加剤も存在することができる。

【0072】

栄養組成物は、固体又は液体形態の栄養組成物を調製するために一般的に使用される任意の製造技術によって調製することができる。例えば、組成物は、種々の供給溶液を混ぜ合わせることによって調製され得る。脂肪中タンパク質供給溶液は、脂質源を加熱及び混合し、次に、乳化剤（例えば、レシチン）、脂溶性ビタミン、及びタンパク質源の少なくとも一部を加熱及び攪拌しながら添加することによって調製され得る。次に、炭水化物供給溶液は、ミネラル、微量及び超微量ミネラル、増粘剤又は懸濁化剤を、加熱及び攪拌しながら水に添加することによって調製される。得られた溶液は加熱及び攪拌を継続しながら１０分間保持された後、炭水化物（例えば、ＨＭＯ及び消化可能な炭水化物源）が添加される。得られた供給溶液は、次に、加熱及び攪拌しながら一緒にブレンドされ、ｐＨが６．６～７．０に調整され、その後、組成物は高温短時間処理にさらされ、その間に組成物は加熱処理され、乳化され、均質化されてから、冷却される。水溶性ビタミン及びアスコルビン酸が添加され、必要であればｐＨが所望の範囲に調整され、香料が添加され、水が添加されて、所望の全固体レベルを達成する。

【0073】

液体製品の場合、得られた溶液は次に無菌的に包装されて、無菌包装栄養組成物を形成することができる。この形態では、栄養組成物は、すぐに供給できる形態又は濃縮液体形態であり得る。或いは、組成物はスプレー乾燥及び加工され、再構成可能な粉末として包装され得る。

【0074】

栄養製品がすぐに供給できる栄養液体である場合、液体中のＨＭＯの総濃度は、液体の重量により、約０．２％～約１．０％、例えば約０．３％～約０．７％を含む、約０．１％～約１．５％であるのが好ましいことがある。栄養製品が濃縮栄養液体である場合、液体中のＨＭＯの総濃度は、液体の重量により、約０．４％～約２．０％、例えば、約０．６％～約１．５％を含む、約０．２％～約３．０％であるのが好ましいことがある。

【0075】

別の実施形態では、栄養組成物は単位剤形である。単位剤形は、許容される食品グレードの担体、例えば、リン酸緩衝生理食塩水、水中のエタノールの混合物、水、及びエマルション（例えば、油／水又は水／油エマルション）、並びに種々の湿潤剤又は賦形剤を含有することができる。単位剤形は、ヒトに投与されたときに有害反応、アレルギー反応、又は他の望ましくない反応を生じない他の材料も含有することができる。担体及び他の材料は、溶媒、分散剤、コーティング、吸収促進剤、制御放出剤、並びに１つ又は複数の不活性賦形剤、例えば、デンプン、ポリオール、造粒剤、微結晶性セルロース、希釈剤、潤滑剤、結合剤、及び崩壊剤を含むことができる。

【0076】

本発明の単位剤形は、例えば、所定量の混合物を含有する錠剤、カプセル、若しくはペレットとして、又は所定濃度の混合物を含有する粉末若しくは顆粒として、又は所定濃度の混合物を含有する水性若しくは非水性液体中のゲル、ペースト、溶液、懸濁液、エマルション、シロップ、ボーラス、舐剤、若しくはスラリーとして経口投与することができる。経口投与される組成物は、１つ又は複数の結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、香味剤、及び保湿剤を含むことができる。錠剤などの経口投与される組成物は、任意選択的に被覆することができ、ＨＭＯの持続、遅延又は制御放出を提供するように配合することができる。

【0077】

本発明の単位剤形は、経鼻胃管、又は消化管若しくは胃への直接注入によって投与することもできる。

【0078】

本発明の単位剤形は、抗生物質、プロバイオティクス、鎮痛薬、及び抗炎症薬などの治療薬も含むことができる。このような組成物のヒトに適した投与量は、ヒトの状態、免疫状態、体重及び年齢などの因子に基づいて従来の方法で決定することができる。場合により、投与量は、ヒト母乳中の組成物のＨＭＯに見られるものと同様の濃度であり得る。必要とされる量は一般的に１日当たり約１ｇ～約１５ｇ、特定の実施形態では１日当たり約２ｇ～約１０ｇ、例えば１日当たり約３ｇ～約７ｇの範囲であり得る。適切な用法は、当業者に知られている方法によって決定することができる。

【0079】

さらなる実施形態において、ＨＭＯは、医薬組成物として配合することができる。医薬組成物は、薬学的に許容される担体、例えば、リン酸緩衝生理食塩水、水中のエタノールの混合物、水、及びエマルション（例えば、油／水又は水／油エマルション）、並びに種々の湿潤剤又は賦形剤を含有することができる。医薬組成物は、非乳児に投与されたときに有害反応、アレルギー反応、又は他の望ましくない反応を生じない他の材料も含有することができる。担体及び他の材料は、溶媒、分散剤、コーティング、吸収促進剤、制御放出剤、並びに１つ又は複数の不活性賦形剤、例えば、デンプン、ポリオール、造粒剤、微結晶性セルロース、希釈剤、潤滑剤、結合剤、及び崩壊剤を含むことができる。

【0080】

医薬組成物は、例えば、所定量を含有する錠剤、カプセル、若しくはペレットとして、又は所定濃度を含有する粉末若しくは顆粒として、又は所定濃度を含有する水性若しくは非水性液体中のゲル、ペースト、溶液、懸濁液、エマルション、シロップ、ボーラス、舐剤、若しくはスラリーとして経口投与することができる。経口投与される組成物は、結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、香味剤、及び保湿剤を含むことができる。錠剤などの経口投与される組成物は、任意選択的に被覆することができ、その中の混合物の持続、遅延又は制御放出を提供するように配合することができる。

【0081】

医薬組成物は、直腸坐薬、エアロゾル管、経鼻胃管、又は消化管若しくは胃への直接注入によって投与することもできる。

【0082】

医薬組成物は、抗生物質、プロバイオティクス、鎮痛薬、及び抗炎症薬などの治療薬も含むことができる。ヒトに適したこれらの組成物の投与量は、状態、免疫状態、体重及び年齢などの因子に基づいて従来の方法で決定することができる。場合により、投与量は、ヒト母乳中のＨＭＯに見られるものと同様の濃度であり得る。必要とされる量は一般的に１日当たり約１ｇ～約１５ｇ、特定の実施形態では１日当たり約２ｇ～約１０ｇ、例えば１日当たり約３ｇ～約７ｇの範囲であり得る。適切な用法は、従来の方法によって決定することができる。

【0083】

非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者において症状の重症度及び／又は発生を低減するため、或いは非セリアック小麦及び／又はグルテン過敏症患者の食事に小麦及び／又はグルテンを再導入するために、投与される必要があるＨＭＯの量は、疲労のリスク及び重症度、根底にある任意の医学的状態又は疾患、年齢、組成物の形態、並びに投与されている他の薬物などの因子に応じて異なり得る。さらに、量は、ＨＭＯが予防的に使用されているか（用量がより多い可能性のある場合）、又はＨＭＯが維持段階で使用されているか（用量がより少ない可能性のある場合）に応じて異なり得る。しかしながら、必要とされる量は医師によって容易に設定することができ、一般に、１日当たり約１ｇ～約１５ｇ、特定の実施形態では１日当たり約２ｇ～約１０ｇ、例えば１日当たり約３ｇ～約７ｇの範囲であり得る。適切な用量は、例えば、体重及び／又は状態、処置又は予防されている疲労の重症度、他の病気及び／又は疾患、副作用の発生率及び／又は重症度、並びに投与の方法を含むいくつかの因子に基づいて決定することができる。適切な用量範囲は、当業者に知られている方法によって決定され得る。小麦及び／又はグルテンの摂取前の初期段階の間、投薬量はより多い可能性がある（例えば、１日当たり３ｇ～１５ｇ、好ましくは１日当たり３ｍｇ～１０ｇ）。維持段階の間、投薬量を低減することができる（例えば、１日当たり１ｇ～１０ｇ、好ましくは１日当たり２ｇ～７．５ｇ）。

【0084】

［実施例］
［実施例１］
合計４０人の男女の患者を研究への参加のために採用する。各患者は、小麦及び／又はグルテン過敏症であると自己診断している。参加者は基本的なスクリーニング調査を完了し、そこで、任意の他の医学的状態、並びに種々の胃腸及び生活の質の症状の重症度を表示する。症状を測定するために、スコア１が「症状なし」を意味し、スコア５が「重篤な症状」を意味する５段階リッカート尺度が使用される。

【0085】

各参加者は、３週間分の約４ｇのＨＭＯの１日用量に十分な量のＨＭＯが提供される。ＨＭＯは、２’－ＦＬ単独又は２’－ＦＬ及びＬＮｎＴの４：１混合物（重量による）のいずれかで提供される。参加者は、その通常の食事を継続する。

【0086】

３週間の摂取の後、各参加者は２回目の調査を完了し、そこで、種々の胃腸及び生活の質の症状の重症度を表示する。同じ５段階リッカート尺度を使用して、症状を評価する。

【0087】

次に、各参加者は、さらに３週間分の約４ｇのＨＭＯの１日用量に十分な追加量のＨＭＯが提供される。プロセスは６週間後、９週間後、及び１２週間後に繰り返される。

【0088】

１２週間の過程で、参加者は、胃腸症状の低減、特に、痛み、下痢、腹部膨満及びガスの低減を表示する。さらに、患者は、疲労の改善を表示する。

【0089】

［実施例２］
非セリアックグルテン過敏症コンセンサス基準を用いて、１８～７５歳の非セリアック小麦過敏症患者を消化器外来センターから採用する。患者がセリアック病特異的ＩｇＡ抗筋内膜及び／又は抗ＴＧ２抗体に陽性であるか、又はセリアック病に特徴的な組織学的所見を示す場合、その患者は除外される。さらに、患者が小麦アレルギー特異的ＩｇＥ血清学的検査又は皮膚プリックテストに陽性である場合、その患者は除外される。他の除外基準は、炎症性腸疾患、精神障害、腹部大手術（特に、腸切除）、真性糖尿病、全身性自己免疫疾患、これまでのアナフィラキシー発症、あらゆる全身性障害、妊娠中又は授乳中の女性、及び既に薬理療法を受けている患者である。

【0090】

最初の来診（スクリーニング）時に、研究について書面及び口頭の両方の情報を各患者に与える。インフォームドコンセント用紙にサインをするように患者に依頼する。病歴の全面的な再調査によって各患者を評価し、適格性分析のための血液サンプルを採取する。便のサンプリングのための器具を各患者に配布する。次の来診までそのサンプルを冷凍庫に保存するように患者に指示する。無グルテン食について各患者を教育する。専門の医療関係者が食事について説明し、食事が記載され、許容される食品及び許容されない食品が列挙され、そして食品ラベルを読む方法についてアドバイスされている小冊子を各患者に提供する。また患者には、その食事についてのあらゆる質問のために、その登録センターへの直接の連絡先（電子メール及び電話による）も与えられる。

【0091】

合計８０人の患者が含まれる。それぞれ４０人の患者である２つの群に患者をランダムに分け、１つの群は処置製品、１つの群はプラセボ製品を８週間摂取する。処置製品は５グラムの２’－ＦＬ及びＬＮｎＴの組み合わせを含有し、プラセボ製品は５グラムのグルコースを含有する。製品は両方とも単位投与容器内の粉末形態である。

【0092】

２回目の来診（治療介入の開始）時に、適格基準性をチェックし、適格対象を治験の２つの群にランダムに分ける。身体的及び精神的な健康の症状、胃腸症状、生活の質、並びに便の硬さ（ＳＦ３６、ＧＳＲＳ、ＢＳＦＳ及びＱｏＬ質問票により測定される）について評価を行う。電子コンプライアンス日記の使用についての説明書と共に、治験補足物（ｔｒｉａｌ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ）を配布する。便サンプルを集め、新しいサンプルを採取するための器具を配布する。患者に厳密な無グルテン食を８週間与える。

【0093】

バイオマーカー及び免疫細胞研究並びにバイオバンキングのために血液サンプルを採取する。血液サンプルからの血清をクライオチューブに移し、－８０℃で貯蔵する。以下のバイオマーカーを測定する：ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β、ＩＬ－８、ＩＬ－６、ＩＬ－１２、ＩＬ－１０、ＭＩＰ－１β、ｈｓ－ＣＲＰ、リポ多糖結合タンパク質、脂肪酸結合タンパク質２、トリプターゼ、抗フラジェリン、ゾヌリン、ヒスタミン、プロスタグランジン２及びコルチゾール。免疫細胞のレベルを決定するために血液においてフローサイトメトリーを実施する。

【0094】

便サンプルを分析まで－８０℃で貯蔵する。１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子配列を使用して、便サンプルにおいて微生物学的分析を実施する。

【0095】

８週間後の３回目の来診時に、便サンプルを集め、血液サンプルを採取し、身体的及び精神的な健康の症状、胃腸症状、生活の質、並びに便の硬さ（ＳＦ３６、ＧＳＲＳ、ＢＳＦＳ及びＱｏＬ質問票により測定される）について評価を行う。治験補足物及び新しいサンプルを採取するための器具を配布する。次に、１週間にわたって、１０ｇのグルテンの１日用量に相当するグルテン含有食を各患者に与える。

【0096】

治療介入の最後（９週目）に、各患者は医療チームに面会する。身体検査を行い、症状（ＧＳＲＳ、ＩＢＳ－ＳＳＳ、ＢＳＦＳ及びＱｏＬスケールなどにより測定される）を再評価する。治験補足製品を集めて、コンプライアンスをチェックする。便サンプル及び血液サンプルを集め、これまでのように分析する。

【0097】

処置製品を受けている患者では、プラセボ群と比較して、ＧＳＲＳスコアの低下、及び便の硬さの改善が報告される。血液の分析により、処置患者は、炎症マーカーのレベルの低下、粘膜関門の改善を示す腸透過性の低下、及び制御性免疫細胞の増加を有していることが示される。便の分析により、処置患者は、細菌過剰増殖／ディスバイオシスのレベルの低下、及びより高レベルのビフィズス菌、特に、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）系統発生群のメンバーのビフィドバクテリウム・ロングム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）及びビフィドバクテリウム・ビフィドゥム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）を有していることが示される。さらに、処置製品を受けている患者では、頭痛の頻度及び重症度の低下、エネルギーレベルの改善、睡眠障害の改善、より少ない不安、より少ない鬱、より少ない「ぼんやりした心」又は集中力欠如、並びに生活の質の改善が示される。

【0098】

［実施例３］
杯細胞のヒトＬＳ１７４Ｔ細胞培養モデルにおいてＭＵＣ２、ＴＦＦ３、ＥＩＭβ、ＣＨＳＴ５、及びＧＡＬ３ＳＴ２の発現を誘導するその能力に関して、２’－ＦＬ及びＬＮｎＴを試験する。ヒトＬＳ１７４Ｔ細胞株は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手する。５％のＣＯ_２を含有する空気中３７℃において、使用説明書に従って補充した最小必須培地（ＭＥＭ）中でＬＳ１７４Ｔ細胞を維持する。所要の濃度になるように細胞培養グレードの水中に２’－ＦＬ及びＬＮｎＴを溶解させる。０又は５ｍｇのＨＭＯ／ｍｌを含有するＨＭＯ溶液によりＬＳ１７４Ｔ細胞を処理する。

【0099】

ＬＳ１７４Ｔ細胞を集め、Ｔｒｉｚｏｌ試薬中に懸濁し、製造業者の使用説明書に従ってＲＮＡ分析キット（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて全ＲＮＡを単離し、Ｎａｎｏｄｒｏｐ分析（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いてＲＮＡ単離物を定量する。大容量ｃＤＮＡ逆転写キット（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いてＲＮＡ単離物を逆転写してｃＤＮＡを作成し、次にこれを用いて、定量的ＲＴ－ＰＣＲにより遺伝子発現を評価する。

【0100】

定量的ＲＴ－ＰＣＲのために、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓから、ＭＵＣ２、ＴＦＦ３、ＣＨＳＴ５及びＧＡＬ３ＳＴ２の発現アッセイを含む特異的なＴａｑＭＡＮ遺伝子発現アッセイを入手する。定量的リアルタイムＰＣＲは、ＴａｑＭＡＮ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて実施される。Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ７９００ＨＴ Ｆａｓｔ Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍを用いて、３８４ウェルプレートにおいて反応を２回繰り返して実行する。ＳＤＳ ２．３ソフトウェアを用いて結果を分析し、デルタＣｔ法により計算する。全てのサンプルをＧｕｓ－β発現に対して基準化し、未処理の対照に対して誘導倍率（ｆｏｌｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ）を計算する。遺伝子発現は、ＨＭＯを含まない対照細胞と比較した増大倍率として表される。実験は、３回繰り返される。

【0101】

結果は、２’－ＦＬ及びＬＮｎＴによる処理が、対照培養物と比較して、ＭＵＣ２及びＴＦＦ３遺伝子の発現を増大させることを示す。それぞれＣＨＳＴ５及びＧＡＬ３ＳＴ２の最小の誘導又は誘導の欠如によって証明されるように、杯細胞遺伝子の発現の増大は特異的であって、一般的ではない。ＭＵＣ２及びＴＦＦ３は粘膜関門の重要な成分であり、粘膜関門の機能を改善する。

【0102】

［実施例４］
ＨＭＯの２’－ＦＬ及びＬＮｎＴを、４：１の質量比でロータリーブレンダーに導入する。０．２５ｗ％の量のステアリン酸マグネシウムをブレンダーに導入し、混合物を１０分間ブレンドする。次に、混合物を流動床で凝集させ、５グラムのスティックパックに充填し、パックを密封する。

【国際調査報告】