特表 2022-535979 可溶性補体受容体１型変異体コンジュゲートおよびその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-08-10

(54)【発明の名称】可溶性補体受容体１型変異体コンジュゲートおよびその使用

(51)【国際特許分類】

   C07K 19/00 20060101AFI20220803BHJP

   C07K 16/00 20060101ALI20220803BHJP

   C07K 14/47 20060101ALI20220803BHJP

   A61P 7/02 20060101ALI20220803BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20220803BHJP

   A61K 47/64 20170101ALI20220803BHJP

   C12N 15/62 20060101ALN20220803BHJP

   C12N 15/13 20060101ALN20220803BHJP

   C12N 15/12 20060101ALN20220803BHJP

【ＦＩ】

C07K19/00

C07K16/00 ZNA

C07K14/47

A61P7/02

A61K39/395 D

A61K39/395 N

A61K47/64

C12N15/62 Z

C12N15/13

C12N15/12

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021573727

(86)(22)【出願日】2020-06-12

(85)【翻訳文提出日】2022-01-28

(86)【国際出願番号】 AU2020050600

(87)【国際公開番号】W WO2020248024

(87)【国際公開日】2020-12-17

(31)【優先権主張番号】2019902044

(32)【優先日】2019-06-12

(33)【優先権主張国・地域又は機関】AU

(31)【優先権主張番号】2019902053

(32)【優先日】2019-06-12

(33)【優先権主張国・地域又は機関】AU

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】521541826

【氏名又は名称】シーエスエル・イノベーション・プロプライエタリー・リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100127926

【弁理士】

【氏名又は名称】結田 純次

(74)【代理人】

【識別番号】100140132

【弁理士】

【氏名又は名称】竹林 則幸

(72)【発明者】

【氏名】マシュー・ハーディー

【テーマコード（参考）】

4C076

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076CC14

4C076EE41

4C076EE59

4C076FF31

4C085AA13

4C085AA14

4C085BB11

4C085BB41

4C085BB43

4C085CC21

4C085EE01

4H045AA10

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA41

4H045CA40

4H045DA50

4H045DA75

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA74

4H045GA26

(57)【要約】

ｓＣＲ１変異体、およびａ）標的に結合して標的によるかそれを通したシグナル伝達を阻害する抗原結合性ドメインを含むタンパク質；またはｂ）血液凝固因子に結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲート。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートであって、
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）標的に結合して該標的によるかそれを通したシグナル伝達を阻害する抗原結合性ドメインを含むタンパク質、
を含む前記ｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項2】

ｓＣＲ１変異体は
（ｉ）配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉｉ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；または
（ｉｖ）配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列
を含む、請求項１に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項3】

ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項4】

ｓＣＲ１変異体は配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して増加した補体阻害活性を有する、請求項１～３のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項5】

ｓＣＲ１変異体は古典的経路、レクチン経路および／または第二補体経路において配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して増加した補体阻害活性を有する、請求項１～４のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項6】

ｓＣＲ１変異体は、
（ｉ）ＬＨＲ－ＡおよびＬＨＲ－Ｂ；
（ｉｉ）ＬＨＲ－Ａ、ＬＨＲ－ＢおよびＬＨＲ－Ｃ；
（ｉｉｉ）ＬＨＲ－ＢおよびＬＨＲ－Ｃ；ならびに
（ｉｖ）ＬＨＲ－Ｂ、ＬＨＲ－ＣおよびＬＨＲ－Ｄ
からなる群から選択される長い相同反復（ＬＨＲ）領域を含む、請求項１～５のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項7】

抗原結合性ドメインは標的に結合するかまたは特異的に結合してシグナル伝達を中和する、請求項１～６のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項8】

標的は顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）またはＧ－ＣＳＦ受容体（Ｇ－ＣＳＦＲ）である、請求項７に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項9】

タンパク質はＧ－ＣＳＦまたはＧ－ＣＳＦＲに結合するかまたは特異的に結合してＧ－ＣＳＦシグナル伝達を中和する、請求項１～８のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項10】

タンパク質は抗体の抗原結合性ドメインを含む、請求項１～９のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項11】

タンパク質は
（ｉ）単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）；
（ｉｉ）二量体ｓｃＦｖ（二ｓｃＦｖ）；
（ｉｉｉ）ダイアボディ；
（ｉｖ）トリアボディ；
（ｖ）テトラボディ；
（ｖｉ）Ｆａｂ；
（ｖｉｉ）Ｆ（ａｂ’）_２；
（ｖｉｉｉ）Ｆｖ；
（ｉｘ）抗体の定常領域、Ｆｃまたは重鎖定常ドメイン（Ｃ_Ｈ）２および／またはＣ_Ｈ３に連結した（ｉ）～（ｖｉｉｉ）のうちの１つ；または
（ｘ）抗体
からなる群から選択される、請求項１０に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項12】

タンパク質はＧ－ＣＳＦＲに結合するかまたは特異的に結合してＧ－ＣＳＦシグナル伝達を中和するｓｃＦｖを含む、請求項１～１１のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項13】

タンパク質は、配列番号４８のアミノ酸残基１１１～１１５、１７０～１７６、２１８～２３４および／または２８６～３００から選択される１つまたは２つまたは３つまたは４つの領域の中の残基を含むエピトープに結合する、請求項１～１２のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項14】

タンパク質は
（ｉ）配列番号３６に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｈおよび配列番号３７に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｌ；
（ｉｉ）配列番号３８に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｈおよび配列番号３９に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｌ；または
（ｉｉｉ）配列番号４６に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｈおよび配列番号４７に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｌ
を含む、請求項１～１３のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項15】

（ｉ）配列番号４９のアミノ酸４２～１６４９に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉ）配列番号５０のアミノ酸４２～１６４９に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉｉ）配列番号５１のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列；
（ｉｖ）配列番号５２のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列；
（ｖ）配列番号５３のアミノ酸４２～１６４８に対応するアミノ酸配列；または
（ｖｉ）配列番号５４のアミノ酸４２～１６４８に対応するアミノ酸配列
を含む、請求項１～１４のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項16】

可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートであって、
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）血液凝固因子に結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質
を含む前記ｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項17】

ｓＣＲ１変異体は
（ｉ）配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列
（ｉｉ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉｉ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；または
（ｉｖ）配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列
を含む、請求項１６に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項18】

ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列を含む、請求項１６または１７に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項19】

ｓＣＲ１変異体は配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して増加した補体阻害活性を有する、請求項１６～１８のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項20】

ｓＣＲ１変異体は古典的経路、レクチン経路および／または第二補体経路において配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して増加した補体阻害活性を有する、請求項１６～１９のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項21】

ｓＣＲ１変異体は、
（ｉ）ＬＨＲ－ＡおよびＬＨＲ－Ｂ；
（ｉｉ）ＬＨＲ－Ａ、ＬＨＲ－ＢおよびＬＨＲ－Ｃ；
（ｉｉｉ）ＬＨＲ－ＢおよびＬＨＲ－Ｃ；および
（ｉｖ）ＬＨＲ－Ｂ、ＬＨＲ－ＣおよびＬＨＲ－Ｄ
からなる群から選択される長い相同反復（ＬＨＲ）領域を含む、請求項１６～２０のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項22】

血液凝固因子は、第Ｉ因子、第ＩＩ因子（プロトロンビン）／トロンビン、第ＩＩＩ因子、第Ｖ因子、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第Ｘ因子、第ＸＩ因子、第ＸＩＩ因子、第ＸＩＩＩ因子および上述のいずれかの活性型からなる群から選択される、請求項１６～２１のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項23】

抗原結合性ドメインは血液凝固因子に結合するかまたは特異的に結合し、血液凝固因子の活性に拮抗し、および／またはその活性化に拮抗する、請求項１６～２２のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項24】

血液凝固因子は第ＸＩＩ因子および／または活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）である、請求項１６～２３のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項25】

タンパク質は第ＸＩＩ因子および／またはＸＩＩａ因子に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗する、請求項１６～２４のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項26】

血液凝固因子は第ＸＩ因子および／または活性化第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）である、請求項１６～２３のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項27】

タンパク質は第ＸＩ因子および／またはＸＩａ因子に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩ因子／ＸＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗する、請求項１６～２３または２６のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項28】

タンパク質は抗体の抗原結合性ドメインを含む、請求項１６～２７のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項29】

タンパク質は
（ｉ）単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）；
（ｉｉ）二量体ｓｃＦｖ（二ｓｃＦｖ）；
（ｉｉｉ）ダイアボディ；
（ｉｖ）トリアボディ；
（ｖ）テトラボディ；
（ｖｉ）Ｆａｂ；
（ｖｉｉ）Ｆ（ａｂ’）_２；
（ｖｉｉｉ）Ｆｖ；
（ｉｘ）抗体の定常領域、Ｆｃまたは重鎖定常ドメイン（Ｃ_Ｈ）２および／またはＣ_Ｈ３に連結した（ｉ）～（ｖｉｉｉ）のうちの１つ；または
（ｘ）抗体
からなる群から選択される、請求項２８に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項30】

タンパク質は第ＸＩＩ因子および／またはＸＩＩａ因子に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗するｓｃＦｖを含む、請求項１６～２５、２８または２９のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項31】

タンパク質は第ＸＩ因子および／またはＸＩａ因子に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩ因子／ＸＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗するｓｃＦｖを含む、請求項１６～２３または２６～２９のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項32】

タンパク質は
（ｉ）配列番号５６に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｈおよび配列番号５７に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｌ；
（ｉｉ）配列番号５８に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｈおよび配列番号５９に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｌ；または
（ｉｉｉ）配列番号６０に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｈおよび配列番号６１に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｌ
を含む、請求項１６～３１のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項33】

（ｉ）配列番号６２のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉ）配列番号６３のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列；または
（ｉｉｉ）配列番号６４のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列
を含む、請求項１６～３２のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項34】

可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートであって、
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）第ＸＩＩ因子および活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）に結合するかまたは特異的に結合するｓｃＦｖを含むタンパク質
を含む前記ｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項35】

可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートであって、
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）第ＸＩＩ因子または活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）に結合するかまたは特異的に結合するｓｃＦｖを含むタンパク質
を含む前記ｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項36】

可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートであって、
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）第ＸＩ因子および活性化第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）に結合するかまたは特異的に結合するｓｃＦｖを含むタンパク質
を含む前記ｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項37】

可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートであって、
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）第ＸＩ因子または活性化第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）に結合するかまたは特異的に結合するｓｃＦｖを含むタンパク質
を含む前記ｓＣＲ１コンジュゲート。

【請求項38】

組成物であって、請求項１～３７のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートならびに医薬担体および／または賦形剤を含む前記組成物。

【請求項39】

対象で補体活性および／またはＧ－ＣＳＦ活性を阻害することにおいて使用するための、請求項１～１５のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物。

【請求項40】

対象で補体活性および／またはＧ－ＣＳＦ活性を阻害する方法であって、請求項１～１５のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物を投与することを含む前記方法。

【請求項41】

対象で補体活性および／またはＧ－ＣＳＦ活性を阻害するための医薬の製造における、請求項１～１５のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物の使用。

【請求項42】

対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて使用するための、請求項１６～３５のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物。

【請求項43】

対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて使用するための、請求項１６～３１もしくは３６～３７のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物。

【請求項44】

対象で補体活性を阻害し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗する方法であって、請求項１６～３５のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物を投与することを含む前記方法。

【請求項45】

対象で補体活性を阻害し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗する方法であって、請求項１６～３１もしくは３６～３７のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物を投与することを含む前記方法。

【請求項46】

対象で補体活性を阻害し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗するための医薬の製造における、請求項１～３５のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物の使用。

【請求項47】

対象で補体活性を阻害し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗するための医薬の製造における、請求項１６～３１もしくは３６～３７のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物の使用。

【請求項48】

対象で疾患または状態を治療または予防することにおける使用のための、請求項１～３７のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物。

【請求項49】

対象で疾患または状態を治療または予防する方法であって、請求項１～３７のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物を投与することを含む前記方法。

【請求項50】

対象で疾患または状態を治療または予防するための医薬の製造における、請求項１～３７のいずれか１項に記載のｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物の使用。

【請求項51】

疾患または状態は補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害である、請求項４８に記載の使用のためのｓＣＲ１コンジュゲートもしくは組成物、請求項４９に記載の方法、または請求項５０に記載の使用。

【請求項52】

対象は補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を患っているかまたはその危険がある、請求項３９、４２、４３、４８もしくは５１のいずれか１項に記載の使用のためのｓＣＲ１コンジュゲートもしくは組成物、請求項４０、４４、４５、４９もしくは５１のいずれか１項に記載の方法、または請求項４１、４６、４７、５０もしくは５１のいずれか１項に記載の使用。

【請求項53】

補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、炎症性関節状態、炎症性関節炎、炎症性の目の状態、炎症性の肺の状態、炎症性神経学的状態、自己免疫性腸管障害、乾癬、がん（その血管新生を含む）またはその転移、固形臓器移植（例えば、肺および／または腎移植）、移植の前、その間または後の虚血再かん流損傷、遅延した移植機能、喘息およびその悪化形、好中球性皮膚症、好中球性皮膚病巣、再かん流による虚血性脳卒中、神経外傷性障害、体性外傷、虚血－再かん流損傷（心筋ＩＲＩ、腸管ＩＲＩ、肝臓ＩＲＩおよび／または膵臓ＩＲＩを含むＩＲＩ）、静脈、動脈または毛細管の血栓形成、心臓の血栓形成、接触媒介血栓炎症、ヒトまたは動物対象の血液を人工表面と接触させる間および／またはその後の血栓形成、間質性肺疾患、炎症、神経学的炎症性疾患、線維素溶解、血管新生、血栓炎症性疾患、ＦＸＩＩ／ＦＸＩＩ誘導キニン形成に関連した疾患、心房細動、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、急性四肢虚血、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ；または急性肺損傷）、ならびにループス腎炎（急性ループス腎炎または慢性ループス腎炎を含む）からなる群から選択される、請求項３９、４２、４３、４８、５１もしくは５２のいずれか１項に記載の使用のためのｓＣＲ１コンジュゲートもしくは組成物、請求項４０、４４、４５、４９、５１もしくは５２のいずれか１項に記載の方法、または請求項４１、４６、４７、５０～５２のいずれか１項に記載の使用。

【請求項54】

ｓＣＲ１コンジュゲートは好中球減少を誘導することなく対象で好中球の数を低減するのに十分な量で投与される、請求項３９、４８、５１～５３のいずれか１項に記載の使用のためのｓＣＲ１コンジュゲートもしくは組成物、請求項４０、４９、５１～５３のいずれか１項に記載の方法、または請求項４１、５０、５１～５３のいずれか１項に記載の使用。

【請求項55】

対象で補体活性および／またはＧ－ＣＳＦ活性を阻害することにおいて使用するためのキットであって、
（ａ）請求項１～１５のいずれか１項に記載の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物；
（ｂ）対象で補体活性および／またはＧ－ＣＳＦ活性を阻害することにおいて該キットを使用するための説明書；および
（ｃ）場合により、少なくとも１つのさらなる治療活性化合物または薬物
を含む前記キット。

【請求項56】

対象で補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を治療または予防することにおいて使用するためのキットであって、
（ａ）請求項１～１５のいずれか１項に記載の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物；
（ｂ）対象で補体活性および／またはＧ－ＣＳＦ活性を阻害することにおいて該キットを使用するための説明書；および
（ｃ）場合により、少なくとも１つのさらなる治療活性化合物または薬物
を含む前記キット。

【請求項57】

対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて使用するためのキットであって、
（ａ）請求項１６～３５のいずれか１項に記載の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物；
（ｂ）対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて該キットを使用するための説明書；および
（ｃ）場合により、少なくとも１つのさらなる治療活性化合物または薬物
を含む前記キット。

【請求項58】

対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて使用するためのキットであって、
（ａ）請求項１６～３１もしくは３６～３７のいずれか１項に記載の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物；
（ｂ）対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて該キットを使用するための説明書；および
（ｃ）場合により、少なくとも１つのさらなる治療活性化合物または薬物
を含む前記キット。

【請求項59】

対象で補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を治療または予防することにおいて使用するためのキットであって、
（ａ）請求項１６～３５のいずれか１項に記載の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物；
（ｂ）対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて該キットを使用するための説明書；および
（ｃ）場合により、少なくとも１つのさらなる治療活性化合物または薬物
を含む前記キット。

【請求項60】

対象で補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を治療または予防することにおいて使用するためのキットであって、
（ａ）請求項１～３１もしくは３６～３７のいずれか１項に記載の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたは請求項３８に記載の組成物；
（ｂ）対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて該キットを使用するための説明書；および
（ｃ）場合により、少なくとも１つのさらなる治療活性化合物または薬物
を含む前記キット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願データ
本出願は、２０１９年６月１２日に出願の「Ｓｏｌｕｂｌｅ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｙｐｅ Ｉ ｖａｒｉａｎｔ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ａｎｄ ｕｓｅｓ ｔｈｅｒｅｏｆ」と題されたオーストラリア特許出願第２０１９９０２０４４号、および２０１９年６月１２日に出願の「Ｓｏｌｕｂｌｅ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｙｐｅ Ｉ ｖａｒｉａｎｔ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ａｎｄ ｕｓｅｓ ｔｈｅｒｅｏｆ」と題されたオーストラリア特許出願第２０１９９０２０５３号の優先権を主張する。その両方の全内容はここに参照により組み入れられる。

【0002】

配列表
本出願は、電子フォーマットで配列表とともに出願される。配列表の全内容はここに参照により組み入れられる。

【0003】

分野
本開示は、可溶性補体受容体１型変異体コンジュゲートおよびその使用に関連する。

【背景技術】

【0004】

先天性免疫系は外来の抗原に応答する体の第１の非特異的防御系の１つであり、化学因子の産生、補体カスケードの活性化、および適応的免疫系を通して感染部位へ免疫細胞を動員する役割をし、加えて感染因子への物理的および化学的障壁として作用する。

【0005】

先天性免疫系の一部として、補体系は宿主を補体関連の傷害から保護しながら外来微生物の排除で役割を果たす、いくつかの細胞表面および可溶性のタンパク質で構成される。補体系の活性化は、血管透過性の増加、食細胞の化学向性、炎症性細胞の活性化、外来粒子のオプソニン化、細胞の直接的殺滅および組織傷害につながる。

【0006】

好中球は哺乳動物において最も豊富なタイプの顆粒球および最も豊富な（６０％～７０％）タイプの白血球であり、先天性免疫系の重要な構成成分である。好中球は、感染部位に移動し、微生物を摂取して微生物を死滅させる酵素を放出することによって感染症との闘いを助ける、先天性免疫系の最初の細胞型の１つである。

【0007】

顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）は、好中球集団の増大および成熟を促進する。Ｇ－ＣＳＦは、顆粒球産生の主要な調節因子である。Ｇ－ＣＳＦは骨髄間質細胞、内皮細胞、マクロファージおよび線維芽細胞によって産生され、産生は炎症性刺激によって誘導される。Ｇ－ＣＳＦはＧ－ＣＳＦ受容体（Ｇ－ＣＳＦＲ）を通して作用し、それは初期の骨髄前駆体、成熟した好中球、単球／マクロファージ、ＴおよびＢリンパ球ならびに内皮細胞で発現される。Ｇ－ＣＳＦまたはＧ－ＣＳＦＲが欠損したマウスは著しい好中球減少を示し、定常状態の顆粒球生成におけるＧ－ＣＳＦの重要性を実証する。Ｇ－ＣＳＦは好中球の産生および放出を増加させ、造血幹細胞および前駆細胞を動員し、成熟した好中球の分化、寿命およびエフェクター機能をモジュレートする。Ｇ－ＣＳＦは、単球／マクロファージ数の増大、食細胞機能の増強ならびに炎症性サイトカインおよびケモカイン産生の調節を含めて、マクロファージに対して効果を発揮することもできる。Ｇ－ＣＳＦは内皮前駆細胞を動員して、血管新生を誘導または促進することも示されている。

【0008】

先天性免疫系は対象の保護で重要であるが、この系の調節不全は疾患につながる可能性がある。この調節不全の間に、血液凝固系は先天性免疫系とともに働く。凝固カスケードの活性化は、病原体伝播を制限し、病原体殺滅を支える。

【0009】

正常な血液凝固は、フィブリン形成および血小板凝集に最終的につながる凝固因子（または、凝集因子）カスケードの活性化を含む複雑な生理的および生化学的プロセスを含む、哺乳動物生物学で高度に保存されたプロセスである。血液凝固カスケードは「外因性の」経路、凝固開始の一次手段、およびフィブリンクロットの安定化に寄与する「内因性の」経路を含む。

【0010】

凝固カスケードに関与する大半の凝固因子は、酵素前駆体として知られるタンパク質分解酵素の前駆体である。これらの酵素は非活性型で血液中を循環し、それらが活性化される（例えばタンパク分解性切断によって）場合に凝固カスケードに参加するだけである。

【0011】

第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ、ハーゲマン因子）は、内因性の凝固カスケードの開始のための必須の凝固タンパク質である。活性化ＦＸＩＩ（ＦＸＩＩａ）を産生するＦＸＩＩの活性化は、第ＸＩ因子から第ＸＩａ因子への、およびＣ１エステラーゼ（Ｃ１ｒ、Ｃ１ｓ）、Ｃ１および古典的補体カスケードの巨大分子複合体の第１の構成成分の活性化につながる。ＦＸＩの活性化はトロンビン生成および止血経路をもたらす一連のタンパク分解反応につながり、他方、補体系の活性化は、血管透過性の増加、食細胞の化学向性、炎症性細胞の活性化、外来粒子のオプソニン化、細胞の直接的殺滅および組織傷害につながる。

【0012】

内因性凝固カスケードの活性化および古典的補体系の活性化におけるその役割にもかかわらず、第ＸＩＩ因子の欠乏症は出血異常と関連していない。しかし、これらの経路の調節不全は重大な状態につながる可能性があり、ＦＸＩＩおよび補体欠乏症の両方は病的血栓形成および脳卒中と関連することが示されている。

【0013】

凝固ホメオスタシスの維持において第ＸＩＩ因子の調節および内因性の凝固経路がそうであるように、先天性免疫系は疾患における免疫系で明らかに重要である。しかし、これらの両方の系は多数のタンパク質によって制御され、その多くは異なっている、かつ非冗長性の作用を有する。例えば、補体受容体１型（ＣＲ１）は、補体活性化の主要な調節因子である。ＣＲ１（Ｃ３ｂ／Ｃ４ｂ受容体としても知られる）は、赤血球、マクロファージ／単球、顆粒球、Ｂ細胞、一部のＴ細胞、脾臓濾胞性樹状細胞および糸球体足細胞に存在する膜結合タンパク質である。少量の可溶性ＣＲ１（ｓＣＲ１）が、細胞表面ＣＲ１から切断される。この可溶性分子の組換え版が以前に生成され、ＴＰ１０として知られている。ＣＲ１はＣ３活性化の負の調節因子であり、したがって、ｓＣＲ１は古典的、レクチンおよび第二経路の各々を阻害することができる。補体系の調節不全は、虚血－再かん流損傷、喘息、アレルギー、がんおよび自己免疫性疾患、例えば、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群（ＳＳ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、慢性関節リウマチ（ＲＡ）、血管炎、多発性硬化症および皮膚筋炎と関連することが示されている。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0014】

したがって、疾患、例えば補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害における複数の経路を標的化することが可能である治療法を開発する必要性が残されている。向上した活性、例えば増加した補体阻害活性および／または増加した半減期を有するそのような治療法の必要性が当技術分野にあることが、当業者にとって明白になる。

【課題を解決するための手段】

【0015】

本開示の作成において、発明者は、抗原結合性ドメインを含むタンパク質（例えば、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を阻害するタンパク質または第ＸＩＩ因子／第ＸＩＩａ因子の活性化および／または活性に拮抗するタンパク質）にコンジュゲートされている、可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）トランケーション変異体、例えば、１つまたはそれ以上の長い相同反復（ＬＨＲ）領域（すなわち、ＬＨＲ－Ａ、ＬＨＲ－Ｂ、ＬＨＲ－Ｃおよび／またはＬＨＲ－Ｄ）に対応する規定のアミノ酸配列を含む変異体を作製した。発明者は、ｓＣＲ１コンジュゲートの場合、発現生成物は可溶性であり、高いレベルでおよび予想されたサイズで発現されることを見出した。発明者は、補体阻害活性についてｓＣＲ１コンジュゲートの効果を研究した。重要なことに、発明者は、抗原結合性ドメインを含むタンパク質（例えば、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を阻害するタンパク質または第ＸＩＩ因子／第ＸＩＩａ因子の活性化および／または活性に拮抗するタンパク質）へのｓＣＲ１変異体のコンジュゲーションが、補体経路阻害の効力に対して悪影響を及ぼさないことを見出した。

【0016】

発明者による所見は、ｓＣＲ１変異体および標的に結合して標的によるまたはそれを通したシグナル伝達を阻害する抗原結合性ドメインを含むタンパク質を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートの根拠を提供する。

【0017】

発明者による所見は、ｓＣＲ１変異体および血液凝固因子に結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートの根拠も提供する。

【0018】

発明者による所見は、ｓＣＲ１コンジュゲートを対象へ投与することを含む、対象で補体活性を阻害する方法の根拠も提供する。さらに、発明者による所見は、対象で障害、例えば、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を治療または予防する方法の根拠を提供する。

【0019】

本開示は、以下を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを提供する：
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）標的に結合して標的を阻害するかそれに拮抗する抗原結合性ドメインを含むタンパク質。

【0020】

本開示は、以下を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを提供する：
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）標的に結合して標的によるかそれを通したシグナル伝達を阻害する抗原結合性ドメインを含むタンパク質。

【0021】

本開示は、以下を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートも提供する：
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）血液凝固因子に結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質。

【0022】

本開示は、以下を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートも提供する：
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）血液凝集因子の酵素前駆体に結合して血液凝固因子の活性化に拮抗する抗原結合性ドメインを含むタンパク質。

【0023】

一例では、ｓＣＲ１変異体は以下を含む：
（ｉ）配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号１のアミノ酸残基１３９３～１９７１が欠如している）；
（ｉｉ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号１のアミノ酸残基９４０～１９７１が欠如している）；
（ｉｉｉ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号１のアミノ酸残基１～４８９および１３９３～１９７１が欠如している）；または
（ｉｖ）配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号１のアミノ酸残基１～４８９が欠如している）。

【0024】

一例では、ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号１のアミノ酸残基１３９３～１９７１が欠如している）を含む。

【0025】

一例では、ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；（例えば、配列番号１のアミノ酸残基９４０～１９７１が欠如している）を含む。

【0026】

一例では、ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号１のアミノ酸残基１～４８９および１３９３～１９７１が欠如している）を含む。

【0027】

一例では、ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号１のアミノ酸残基１～４８９が欠如している）を含む。

【0028】

一例では、ｓＣＲ１変異体は以下からなる：
（ｉ）配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉｉ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；または
（ｉｖ）配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列

【0029】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列からなるか、または配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号１のアミノ酸残基１３９３～１９７１が欠如している）を含む。発明者は、そのようなｓＣＲ１変異体が配列番号１のアミノ酸４２～１９７１を含むｓＣＲ１変異体と比較して向上した補体阻害活性を有することを示した。アミノ酸１３９３～１９７１のＣＲ１領域はＣ１ｑおよびマンノース結合性レクチン（ＭＢＬ）に結合し、その除去は、補体阻害活性に有害であるかまたは影響を及ぼさないことが合理的に予想することができたので、この所見は予想外であった。

【0030】

一例では、ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列からなる。

【0031】

一例では、ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列からなる。

【0032】

一例では、ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列からなる。

【0033】

一例では、ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸１～１９７１に対応するアミノ酸配列からなることもそれを含むこともない。

【0034】

一例では、ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４２～１９７１に対応するアミノ酸配列からなることもそれを含むこともない。

【0035】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、本明細書に開示されるいずれかの配列の１つまたはそれ以上のアミノ酸置換、欠失または挿入を場合により含む。本開示で使用するのに好適なアミノ酸置換は当業者に明らかになり、天然に存在する置換および工学操作された置換を含む。

【0036】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、本明細書に開示される配列と比較して１つまたはそれ以上の保存的アミノ酸置換を含む。一部の例では、ｓＣＲ１変異体は、１０以下の、例えば、９または８または７または６または５または４または３または２または１つの保存的アミノ酸置換を含む。

【0037】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、１つまたはそれ以上の非保存的アミノ酸変化を含む。例えば、非保存的アミノ酸置換は、本開示のｓＣＲ１変異体の半減期を増加させ、免疫原性を低減し、および／または阻害活性を増加させる。一例では、ｓＣＲ１変異体は、６または５または４または３または２または１より少ない非保存的アミノ酸置換を含む。

【0038】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、本明細書に開示される配列と少なくとも約８５％または約９０％または約９５％または約９７％または約９８％または約９９％同一である配列を含む。

【0039】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号１のアミノ酸残基１３９３～１９７１が欠如している）と少なくとも約８５％または約９０％または約９５％または約９７％または約９８％または約９９％同一であるアミノ酸配列を含む。例えば、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列と約８５％同一であるアミノ酸配列を含む。一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列と約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列と約９５％同一であるアミノ酸配列を含む。さらなる例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列と約９７％同一であるアミノ酸配列を含む。一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列と約９８％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列と約９９％同一であるアミノ酸配列を含む。

【0040】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列と少なくとも約８５％または約９０％または約９５％または約９７％または約９８％または約９９％同一であるアミノ酸配列からなる。例えば、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列と約８５％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列と約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列と約９５％同一であるアミノ酸配列を含む。さらなる例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列と約９７％同一であるアミノ酸配列を含む。一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列と約９８％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列と約９９％同一であるアミノ酸配列を含む。

【0041】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列と少なくとも約８５％または約９０％または約９５％または約９７％または約９８％または約９９％同一であるアミノ酸配列からなる。例えば、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列と約８５％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列と約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列と約９５％同一であるアミノ酸配列を含む。さらなる例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列と約９７％同一であるアミノ酸配列を含む。一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列と約９８％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列と約９９％同一であるアミノ酸配列を含む。

【0042】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列と少なくとも約８５％または約９０％または約９５％または約９７％または約９８％または約９９％同一であるアミノ酸配列からなる。例えば、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列と約８５％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列と約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列と約９５％同一であるアミノ酸配列を含む。さらなる例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列と約９７％同一であるアミノ酸配列を含む。一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列と約９８％同一であるアミノ酸配列を含む。別の例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列と約９９％同一であるアミノ酸配列を含む。

【0043】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して増加した補体阻害活性を有する。例えば、本開示のｓＣＲ１変異体の補体阻害活性は、配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して少なくとも約１．５倍、または約２倍、または約３倍、または約３．５倍、または約４倍、または約５倍、または約６倍、または約８倍、または約１０倍増加する。

【0044】

ｓＣＲ１変異体および／またはｓＣＲ１コンジュゲートの阻害活性を決定する方法は当業者に明らかになり、および／または本明細書に記載される。一例では、補体阻害活性は、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイを使用して決定される。例えば、補体活性は酵素免疫測定法（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ（登録商標）補体アッセイキットなどの補体活性化を測定する免疫測定法）を使用して測定される。例えば、補体阻害活性は、補体活性化の間に産生される抗原またはエピトープ（例えば、Ｃ５ｂ－９またはＣ５ｂ－Ｃ９に存在するエピトープ）に特異的な標識抗体を使用して決定される。一例では、マイクロタイタープレートのウェルは、古典的、レクチンまたは第二経路の特異的活性化因子でコーティングされる。一例では、ｓＣＲ１変異体および／またはコンジュゲートは、正常なヒト血清および適当なアッセイ希釈剤（すなわち、古典的、レクチンまたは第二経路の特異的活性化を確保するための適当なブロッキング構成成分を含む希釈剤）とインキュベートされ、古典的、レクチンまたは第二経路の特異的活性化因子でコーティングされたマイクロタイタープレートウェルに加えられ、形成されるＣ５ｂ－９複合体の量がＣ５ｂ－９に対する特異的アルカリ性ホスファターゼ標識抗体を使用して検出される。一例では、産生される補体活性化生成物（すなわち、Ｃ５ｂ－９）の量は、補体経路の機能的活性に比例する。一例では、半最大阻害濃度（すなわち、ＩＣ_５０）が決定される。例えば、ｓＣＲ１変異体のＩＣ_５０が決定され、配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１のＩＣ_５０と比較される。別の例では、補体阻害活性は、溶血アッセイ（例えば、古典経路（すなわち、ＣＨ５０）および第二経路（ＡｐＨ５０）阻害アッセイ）を使用して決定される。

【0045】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、古典経路、レクチン経路および／または第二補体経路において配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して増加した補体阻害活性を有する。

【0046】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、古典補体経路において配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して増加した阻害活性を有する。例えば、古典補体経路における本開示のｓＣＲ１変異体の阻害活性は、配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して少なくとも１．２５倍、または約１．５倍、または約１．７５倍、または約２倍、または約２．５倍、または約３倍、または約３．５倍、または約４倍、または約５倍増加する。

【0047】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、古典的補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１より低いＩＣ_５０を有する。例えば、本開示のｓＣＲ１変異体は、古典的補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約１．０ｎＭ、例えば約０．９５ｎＭ、または約０．９０ｎＭ、または約０．８５ｎＭ、または約０．８０ｎＭ、または約０．７５ｎＭ、または約０．７０ｎＭより低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、古典的補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．８５ｎＭ～０．９０ｎＭ、例えば約０．８８ｎＭのＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、古典的補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．６５ｎＭ、または約０．６０ｎＭ、または約０．５５ｎＭ、または約０．５０ｎＭ、または約０．４５ｎＭ、または約０．４０ｎＭ、または約０．３５ｎＭ、または約０．３０ｎＭ、または約０．２５ｎＭ、または約０．２０ｎＭ、または約０．１５ｎＭまたは約０．１０ｎＭより低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、古典的補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．３５ｎＭ～０．４５ｎＭ、例えば約０．４０ｎＭのＩＣ_５０を有する。

【0048】

一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートは、古典経路、レクチン経路および／または第二補体経路において本開示の未コンジュゲートｓＣＲ１変異体と比較して増加した補体阻害活性を有する。

【0049】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、古典補体経路において本開示の未コンジュゲートｓＣＲ１変異体と比較して増加した阻害活性を有する。例えば、古典補体経路における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートの阻害活性は、本開示の未コンジュゲートｓＣＲ１変異体と比較して少なくとも１．２５倍、または約１．５倍、または約１．７５倍、または約２倍、または約２．５倍、または約３倍、または約３．５倍、または約４倍、または約５倍増加する。

【0050】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、古典的補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において本開示の未コンジュゲートｓＣＲ１変異体より低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、古典的補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約１．０ｎＭ未満、例えば約０．９５ｎＭ、または約０．９０ｎＭ、または約０．８５ｎＭ、または約０．８０ｎＭ、または約０．７５ｎＭ、または約０．７０ｎＭ、または約０．６５ｎＭ、または約０．６０ｎＭのＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、古典的補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．７５ｎＭ～０．８０ｎＭ、例えば約０．７８ｎＭのＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、古典的補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．６０ｎＭ～０．６５ｎＭ、例えば約０．６３ｎＭのＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、古典的補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．６５ｎＭ、または約０．６０ｎＭ、または約０．５５ｎＭ、または約０．５０ｎＭ、または約０．４５ｎＭ、または約０．４０ｎＭ、または約０．３５ｎＭ、または約０．３０ｎＭ、または約０．２５ｎＭ、または約０．２０ｎＭ、または約０．１５ｎＭ、または約０．１０ｎＭより低いＩＣ_５０を有する。例えば、約０．４８ｎＭ。

【0051】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、レクチン補体経路において配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して増加した阻害活性を有する。例えば、レクチン補体経路における本開示のｓＣＲ１変異体の阻害活性は、配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して少なくとも１．２５倍、または約１．５倍、または約１．７５倍、または約２倍、または約２．５倍、または約３倍、または約３．５倍、または約４倍、または約５倍増加する。

【0052】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、レクチン補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１より低いＩＣ_５０を有する。例えば、本開示のｓＣＲ１変異体は、レクチン補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．６０ｎＭ、または約０．５５ｎＭ、または約０．５０ｎＭより低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、レクチン補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．５０ｎＭ～０．６０ｎＭ、例えば約０．５４７ｎＭのＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、レクチン補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．５０ｎＭ、または約０．４５ｎＭ、または約０．４０ｎＭ、または約０．３５ｎＭ、または約０．３０ｎＭより低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、レクチン補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．４０ｎＭ～０．４５ｎＭ、例えば約０．４３ｎＭのＩＣ_５０を有する。

【0053】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、レクチン補体経路において本開示の未コンジュゲートｓＣＲ１変異体と比較して増加した阻害活性を有する。例えば、レクチン補体経路における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートの阻害活性は、本開示の未コンジュゲートｓＣＲ１変異体と比較して少なくとも１．２５倍、または約１．５倍、または約１．７５倍、または約２倍、または約２．５倍、または約３倍、または約３．５倍、または約４倍、または約５倍増加する。

【0054】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、レクチン補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において本開示の未コンジュゲートｓＣＲ１変異体より低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、レクチン補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．７０ｎＭ、または約０．６０ｎＭ、または約０．５５ｎＭ、または約０．５０ｎＭ、または約０．４５ｎＭより低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、レクチン補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．５０ｎＭ～０．６０ｎＭ、例えば約０．５３ｎＭまたは約０．５５ｎＭのＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、レクチン補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．４５ｎＭ～０．５０ｎＭ、例えば約０．４６ｎＭのＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、レクチン補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．５０ｎＭ、または約０．４５ｎＭ、または約０．４０ｎＭ、または約０．３５ｎＭ、または約０．３０ｎＭより低い、例えば約０．３７ｎＭのＩＣ_５０を有する。

【0055】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、第二補体経路において配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して増加した阻害活性を有する。例えば、第二補体経路における本開示のｓＣＲ１変異体の阻害活性は、配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１と比較して少なくとも１．２５倍、または約１．５倍、または約１．７５倍、または約２倍、または約２．５倍、または約３倍、または約３．５倍、または約４倍、または約５倍増加する。

【0056】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、第二補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１より低いＩＣ_５０を有する。例えば、本開示のｓＣＲ１変異体は、第二補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．７５ｎＭ、または約０．７０ｎＭ、または約０．６５ｎＭ、または約０．６０ｎＭ、または約０．５５ｎＭ、または約０．５０ｎＭ、または約０．４５ｎＭ、または約０．４０ｎＭ、または約０．３５ｎＭ、または約０．３０ｎＭ、または約０．２５ｎＭより低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、第二補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．３５ｎＭ～約０．４０ｎＭ、例えば約０．３８ｎＭのＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、第二補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．２５ｎＭ～約０．３０ｎＭ、例えば約０．２７ｎＭのＩＣ_５０を有する。

【0057】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、第二補体経路において本開示の未コンジュゲートｓＣＲ１変異体と比較して増加した阻害活性を有する。例えば、第二補体経路における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートの阻害活性は、本開示の未コンジュゲートｓＣＲ１変異体と比較して少なくとも１．２５倍、または約１．５倍、または約１．７５倍、または約２倍、または約２．５倍、または約３倍、または約３．５倍、または約４倍、または約５倍増加する。

【0058】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、第二補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において本開示の未コンジュゲートｓＣＲ１変異体より低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、第二補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．７５ｎＭ、または約０．７０ｎＭ、または約０．６５ｎＭ、または約０．６０ｎＭ、または約０．５５ｎＭ、または約０．５０ｎＭ、または約０．４５ｎＭ、または約０．４０ｎＭ、または約０．３５ｎＭ、または約０．３０ｎＭ、または約０．２５ｎＭより低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、第二補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．３５ｎＭ～約０．４０ｎＭ、例えば約０．３６８ｎＭのＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、第二補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約０．４５ｎＭ～約０．５０ｎＭ、例えば約０．４７９ｎＭのＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、第二補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約７５ｐＭ、または約７０ｐＭ、または約６５ｐＭ、または約６０ｐＭ、または約５５ｐＭ、または約５０ｐＭ、または約４５ｐＭ、または約４０ｐＭ、または約３５ｐＭ、または約３０ｐＭ、または約２５ｐＭより低いＩＣ_５０を有する。一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、第二補体アッセイ（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ補体アッセイ）において約５０ｐＭ～約５５ｐＭ、例えば約５０．２２ｐＭまたは約５３．５５ｐＭのＩＣ_５０を有する。

【0059】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、以下からなる群から選択される長い相同反復（ＬＨＲ）領域を含む：
（ｉ）ＬＨＲ－ＡおよびＬＨＲ－Ｂ；
（ｉｉ）ＬＨＲ－Ａ、ＬＨＲ－ＢおよびＬＨＲ－Ｃ；
（ｉｉｉ）ＬＨＲ－ＢおよびＬＨＲ－Ｃ；ならびに
（ｉｖ）ＬＨＲ－Ｂ、ＬＨＲ－ＣおよびＬＨＲ－Ｄ。

【0060】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、ＬＨＲ－ＡおよびＬＨＲ－ＢからなるがＬＨＲ－ＣおよびＬＨＲ－Ｄを欠くＬＨＲ領域を含む。

【0061】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、ＬＨＲ－Ａ、ＬＨＲ－ＢおよびＬＨＲ－ＣからなるがＬＨＲ－Ｄを欠くＬＨＲ領域を含む。

【0062】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、ＬＨＲ－ＢおよびＬＨＲ－ＣからなるがＬＨＲ－ＡおよびＬＨＲ－Ｄを欠くＬＨＲ領域を含む。

【0063】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、ＬＨＲ－Ｂ、ＬＨＲ－ＣおよびＬＨＲ－ＤからなるがＬＨＲ－Ａを欠くＬＨＲ領域を含む。

【0064】

一例では、ＬＨＲ領域ＬＨＲ－Ａは、配列番号１のアミノ酸４２～４８９に対応するアミノ酸配列を含む。例えば、ＬＨＲ－Ａ領域は、配列番号１３に示すアミノ酸配列を含む。一例では、ＬＨＲ領域ＬＨＲ－Ａは、短いコンセンサス反復配列（ＳＣＲ）である配列１～７を含む。例えば、ＳＣＲ配列１～３（すなわち、部位１）は、Ｃ４ｂに結合することが可能である。

【0065】

一例では、ＬＨＲ領域ＬＨＲ－Ｂは、配列番号１のアミノ酸４９０～９３９に対応するアミノ酸配列を含む。例えば、ＬＨＲ－Ｂ領域は、配列番号１４に示すアミノ酸配列を含む。一例では、ＬＨＲ領域ＬＨＲ－Ｂは、ＳＣＲ配列８～１４を含む。例えば、ＳＣＲ配列８～１０（すなわち、部位２）は、Ｃ３ｂおよびＣ４ｂに結合することが可能である。

【0066】

一例では、ＬＨＲ領域ＬＨＲ－Ｃは、配列番号１のアミノ酸９４０～１３９２に対応するアミノ酸配列を含む。例えば、ＬＨＲ－Ｃ領域は、配列番号１５に示すアミノ酸配列を含む。一例では、ＬＨＲ領域ＬＨＲ－Ｃは、ＳＣＲ配列１５～２１を含む。例えば、ＳＣＲ配列１５～１７は、Ｃ３ｂおよびＣ４ｂに結合することが可能である。

【0067】

一例では、ＬＨＲ領域ＬＨＲ－Ｄは、配列番号１のアミノ酸１３９３～１９７１に対応するアミノ酸配列を含む。例えば、ＬＨＲ－Ｄ領域は、配列番号１６に示すアミノ酸配列を含む。一例では、ＬＨＲ領域ＬＨＲ－Ｄは、ＳＣＲ配列２２～２８を含む。例えば、ＳＣＲ配列２２～２８は、Ｃ１ｑおよびＭＢＬに結合することが可能である。

【0068】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、以下からなる群から選択されるＳＣＲ配列を含む（またはそれからなる）：
（ｉ）ＳＣＲ－１～ＳＣＲ－１４（例えば、ＳＣＲ－１５～ＳＣＲ－２８を欠く）；
（ｉｉ）ＳＣＲ－１～ＳＣＲ－２１（例えば、ＳＣＲ－２２～ＳＣＲ－２８を欠く）；
（ｉｉｉ）ＳＣＲ－８～ＳＣＲ－２１（例えば、ＳＣＲ－１～ＳＣＲ－７およびＳＣＲ－２２～ＳＣＲ－２８を欠く）；ならびに
（ｉｖ）ＳＣＲ－８～ＳＣＲ－２８（例えば、ＳＣＲ－１～ＳＣＲ－７を欠く）。

【0069】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、ＳＣＲ配列ＳＣＲ－１～ＳＣＲ－１４（例えば、ＳＣＲ－１５～ＳＣＲ－２８を欠く）を含む。

【0070】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、ＳＣＲ配列ＳＣＲ－１～ＳＣＲ－２１（例えば、ＳＣＲ－２２～ＳＣＲ－２８を欠く）を含む。

【0071】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、ＳＣＲ配列ＳＣＲ－８～ＳＣＲ－２１（例えば、ＳＣＲ－１～ＳＣＲ－７およびＳＣＲ－２２～ＳＣＲ－２８を欠く）を含む。

【0072】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、ＳＣＲ配列ＳＣＲ－８～ＳＣＲ－２８（例えば、ＳＣＲ－１～ＳＣＲ－７を欠く）を含む。

【0073】

一例では、ｓＣＲ１変異体は単量体（すなわち、１コピーのｓＣＲ１変異体）である。

【0074】

一例では、ｓＣＲ１変異体は二量体であるかまたは二量体化される（すなわち、２コピーのｓＣＲ１変異体が融合タンパク質の中で連結される）。

【0075】

一例では、ｓＣＲ１変異体は多量体であるかまたは多量体化される（すなわち、複数のコピーのｓＣＲ１変異体が融合タンパク質の中で連結される）。

【0076】

一例では、２つ以上の同じｓＣＲ１変異体が融合される（すなわち、融合タンパク質として発現される）。

【0077】

一例では、２つ以上の異なるｓＣＲ１変異体が融合される（すなわち、融合タンパク質として発現される）。

【0078】

一例では、二量体化または多量体化されたｓＣＲ１変異体は、ｓＣＲ１変異体の間にリンカーを含む。

【0079】

一例では、本開示は、多量体化ドメインを含む２つ以上のｓＣＲ１変異体を含む多量体タンパク質を提供し、ここで、多量体化ドメインは相互作用して多量体タンパク質を形成する。

【0080】

一例では、多量体タンパク質中の各ｓＣＲ１変異体は、１つのｓＣＲ１変異体を含む。別の例では、多量体タンパク質中の１つまたはそれ以上のｓＣＲ１変異体は２つ以上のｓＣＲ１変異体を含み、例えば、これらのｓＣＲ１変異体は融合タンパク質の中で連結される。

【0081】

一例では、多量体化ドメインは免疫グロブリンヒンジドメインを含む。

【0082】

一例では、多量体化ドメインは、ロイシンジッパードメイン、シスチンノットまたは抗体Ｆｃ領域である。

【0083】

一例では、多量体化ｓＣＲ１変異体は線状である。

【0084】

一例では、多量体化ｓＣＲ１変異体は環状である。

【0085】

本開示は、いずれかの例で本明細書に記載される、標的に結合して標的によるかそれを通したシグナル伝達を阻害する抗原結合性ドメインを含むタンパク質にコンジュゲートされるｓＣＲ１コンジュゲートを提供する（例えば、ｓＣＲ１変異体の記載は、ｓＣＲ１コンジュゲートそれ自体に関する以下の記載に適用されるととるものとする）。

【0086】

本開示は、いずれかの例で本明細書に記載される、血液凝固因子に結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質にコンジュゲートされるｓＣＲ１コンジュゲートも提供する（例えば、ｓＣＲ１変異体の記載は、ｓＣＲ１コンジュゲートそれ自体に関する以下の記載に適用されるととるものとする）。

【0087】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、抗原結合性ドメインを含むタンパク質に化学的にコンジュゲートされる。別の例では、ｓＣＲ１変異体は抗原結合性ドメインを含むタンパク質に融合され、例えばそれとの融合タンパク質として発現される。一例では、抗原結合性ドメインを含むタンパク質は、ｓＣＲ１変異体のＣ末端にコンジュゲートされる。一例では、抗原結合性ドメインを含むタンパク質は、ｓＣＲ１変異体のＮ末端にコンジュゲートされる。

【0088】

一例では、ｓＣＲ１変異体は抗原結合性ドメインを含むタンパク質にコンジュゲートされ、ここで、抗原結合性ドメインは標的に結合するかまたは特異的に結合して、シグナル伝達を中和する。

【0089】

一例では、タンパク質はＧ－ＣＳＦシグナル伝達を中和する。

【0090】

一例では、標的は顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）またはＧ－ＣＳＦ受容体（Ｇ－ＣＳＦＲ）である。

【0091】

一例では、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を中和するタンパク質は、Ｇ－ＣＳＦまたはＧ－ＣＳＦ受容体（Ｇ－ＣＳＦＲ）に結合するかまたは特異的に結合する。一例では、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を中和するタンパク質は、Ｇ－ＣＳＦに結合するかまたは特異的に結合する。一例では、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を中和するタンパク質は、Ｇ－ＣＳＦ受容体（Ｇ－ＣＳＦＲ）に結合するかまたは特異的に結合する。

【0092】

一例では、タンパク質はＧ－ＣＳＦに結合するかまたは特異的に結合し、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を中和する。Ｇ－ＣＳＦ「に結合する」タンパク質または抗体への本明細書での言及は、Ｇ－ＣＳＦ「に特異的に結合する」タンパク質または抗体への文字通りの支持を提供する。

【0093】

一例では、タンパク質はＧ－ＣＳＦＲに結合するかまたは特異的に結合し、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を中和する。Ｇ－ＣＳＦＲ「に結合する」タンパク質または抗体への本明細書での言及は、Ｇ－ＣＳＦＲ「に特異的に結合する」タンパク質または抗体への文字通りの支持を提供する。

【0094】

一例では、ｓＣＲ１変異体は抗原結合性ドメインを含むタンパク質にコンジュゲートされ、ここで、抗原結合性ドメインは血液凝固因子に結合するかまたは特異的に結合し、血液凝固因子の活性に拮抗し、および／またはその活性化に拮抗する。

【0095】

一例では、血液凝固因子は、第Ｉ因子、第ＩＩ因子（プロトロンビン）／トロンビン、第ＩＩＩ因子、第Ｖ因子、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第Ｘ因子、第ＸＩ因子、第ＸＩＩ因子、第ＸＩＩＩ因子および上述のいずれかの活性型からなる群から選択される。例えば、血液凝固因子は、第ＸＩＩ因子および／または活性化第ＸＩＩ因子（ＸＩＩａ因子）である。別の例では、血液凝固因子は、第ＸＩ因子および／または活性化第ＸＩ因子（ＸＩａ因子）である。

【0096】

一例では、第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａに結合するタンパク質は、第ＸＩＩ因子または活性化第ＸＩＩ因子（ＸＩＩａ因子）に結合するかまたは特異的に結合する。一例では、第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａに結合するタンパク質は、第ＸＩＩ因子に結合するかまたは特異的に結合する。一例では、第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａに結合するタンパク質は、活性化第ＸＩＩ因子（ＸＩＩａ因子）に結合するかまたは特異的に結合する。

【0097】

一例では、タンパク質は第ＸＩＩ因子に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗する。第ＸＩＩ因子「に結合する」タンパク質または抗体への本明細書での言及は、第ＸＩＩ因子「に特異的に結合する」タンパク質または抗体への文字通りの支持を提供する。

【0098】

一例では、タンパク質は活性化第ＸＩＩ因子（ＸＩＩａ因子）に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗する。活性化第ＸＩＩ因子「に結合する」タンパク質または抗体への本明細書での言及は、活性化第ＸＩＩ因子「に特異的に結合する」タンパク質または抗体への文字通りの支持を提供する。

【0099】

一例では、第ＸＩ因子／ＸＩａに結合するタンパク質は、第ＸＩ因子または活性化第ＸＩ因子（ＸＩａ因子）に結合するかまたは特異的に結合する。一例では、第ＸＩ因子／ＸＩａに結合するタンパク質は、第ＸＩ因子に結合するかまたは特異的に結合する。一例では、第ＸＩ因子／ＸＩａに結合するタンパク質は、活性化第ＸＩ因子（ＸＩａ因子）に結合するかまたは特異的に結合する。

【0100】

一例では、タンパク質は第ＸＩ因子に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩ因子／ＸＩａ活性を中和する。第ＸＩ因子「に結合する」タンパク質または抗体への本明細書での言及は、第ＸＩ因子「に特異的に結合する」タンパク質または抗体への文字通りの支持を提供する。

【0101】

一例では、タンパク質は活性化第ＸＩ因子（ＸＩａ因子）に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩ因子／ＸＩａの活性化に拮抗し、および／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性に拮抗する。活性化第ＸＩ因子「に結合する」タンパク質または抗体への本明細書での言及は、活性化第ＸＩ因子「に特異的に結合する」タンパク質または抗体への文字通りの支持を提供する。

【0102】

一例では、タンパク質は抗体の抗原結合性ドメインを含む。例えば、タンパク質は少なくともＶ_ＨおよびＶ_Ｌを含み、ここで、Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌは結合して抗原結合性ドメインを含むＦｖを形成する。

【0103】

一例では、Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌは単一のポリペプチド鎖の中にある。例えば、タンパク質は以下の通りである：
（ｉ）単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）；
（ｉｉ）二量体ｓｃＦｖ（二ｓｃＦｖ）；または
（ｉｉｉ）抗体の定常領域、Ｆｃまたは重鎖定常ドメイン（Ｃ_Ｈ）２および／またはＣ_Ｈ３に連結した（ｉ）および／または（ｉｉ）の少なくとも１つ。

【0104】

一例では、Ｖ_ＬおよびＶ_Ｈは別々のポリペプチド鎖の中にある。例えば、タンパク質は以下の通りである：
（ｉ）ダイアボディ；
（ｉｉ）トリアボディ；
（ｉｉｉ）テトラボディ；
（ｉｖ）Ｆａｂ；
（ｖ）Ｆ（ａｂ’）_２；
（ｖｉ）Ｆｖ；または
（ｖｉｉ）抗体の定常領域、Ｆｃまたは重鎖定常ドメイン（Ｃ_Ｈ）２および／またはＣ_Ｈ３に連結した（ｉ）～（ｖｉ）のうちの１つ。

【0105】

前述のタンパク質（前の２つのリストに記載される）は、抗体の抗原結合性ドメインと呼ぶこともできる。

【0106】

一例では、タンパク質は抗体またはその抗原結合性断片（例えば、抗体の可変領域を含むｓｃＦｖ）である。例示的な抗体は、例えば、参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１２１７１０５７に記載される完全長抗体である。追加の例示的な抗体は、例えば、参照により本明細書に組み入れられる、ＷＯ２０１３０１４０９２、ＷＯ２００９０６７６６０、ＷＯ２００９１５４４６１、ＷＯ２０１００８０６２３、ＷＯ２０１３１６７６６９、ＷＯ２０１６２０７８５８、ＷＯ２０１７０１５６１９、ＷＯ２０１７１６２７９１、ＷＯ２０１７１２７４６８およびＷＯ２０１７２１８３７１に記載される。

【0107】

一例では、タンパク質はＦｃ領域を含む。例えば、Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ_１ Ｆｃ領域またはヒトＩｇＧ_４ Ｆｃ領域または安定化ヒトＩｇＧ_４ Ｆｃ領域である。例えば、Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ_４ Ｆｃ領域である。一例では、抗体Ｆｃ領域は二量体化を阻止するように改変される（例えば、本明細書に議論されるように）。

【0108】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、抗体にコンジュゲートされる。一例では、抗体は、ｓＣＲ１変異体のＮ末端にコンジュゲートされる。別の例では、抗体は、ｓＣＲ１変異体のＣ末端にコンジュゲートされる。例えば、ｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列からなるか、または配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号１のアミノ酸残基１３９３～１９７１が欠如している）を含み、抗体は、ｓＣＲ１変異体のＮ末端に融合される。

【0109】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、抗体のＦｃ領域に融合される。一例では、ｓＣＲ１変異体のＣ末端は、抗体のＦｃ領域のＣ末端にコンジュゲートされる。例えば、ｓＣＲ１変異体のＣ末端は抗体のＦｃ領域のＣ末端に架橋している。例えば、ｓＣＲ１変異体のＣ末端はシステイン残基を含むことができ、Ｆｃ領域のＣ末端はシステイン残基を含むことができ、システイン残基は架橋している。

【0110】

一例では、タンパク質はｓｃＦｖを含む。一例では、タンパク質はＧ－ＣＳＦＲに結合するかまたは特異的に結合してＧ－ＣＳＦシグナル伝達を中和するｓｃＦｖを含む。例えば、本開示のｓＣＲ１変異体は、Ｇ－ＣＳＦＲに結合するｓｃＦｖにコンジュゲートされる。一例では、タンパク質は血液凝固因子に結合するかまたは特異的に結合する（および、例えば、血液凝固因子の活性に拮抗するかまたは血液凝固因子の活性化に拮抗する）ｓｃＦｖを含む。例えば、本開示のｓＣＲ１変異体は、血液凝固因子、例えば、第ＸＩＩ因子またはＸＩＩａ因子または第ＸＩ因子またはＸＩａ因子に結合するｓｃＦｖにコンジュゲートされる。一例では、タンパク質は、第ＸＩＩ因子および／または活性化第ＸＩＩ因子（ＸＩＩａ因子）に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗するｓｃＦｖを含む。例えば、本開示のｓＣＲ１変異体は、第ＸＩＩ因子に結合するｓｃＦｖにコンジュゲートされる。別の例では、タンパク質は、第ＸＩ因子および／または活性化第ＸＩ因子（ＸＩａ因子）に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩ因子／ＸＩａの活性化に拮抗し、および／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性に拮抗するｓｃＦｖを含む。例えば、本開示のｓＣＲ１変異体は、第ＸＩ因子に結合するｓｃＦｖにコンジュゲートされる。

【0111】

一例では、ｓｃＦｖはｓＣＲ１変異体のＮ末端にコンジュゲートされる。例えば、ｓｃＦｖのＣ末端はｓＣＲ１変異体のＮ末端にコンジュゲートされる。

【0112】

一例では、ｓｃＦｖはｓＣＲ１変異体のＣ末端にコンジュゲートされる。例えば、ｓｃＦｖのＣ末端はｓＣＲ１変異体のＣ末端にコンジュゲートされる。

【0113】

別の例では、ｓｃＦｖのＮ末端はｓＣＲ１変異体のＣ末端にコンジュゲートされる。例えば、ｓｃＦｖのＶ_ＨのＮ末端はｓＣＲ１変異体のＣ末端にコンジュゲートされる。例えば、ｓｃＦｖのＶ_ＬのＮ末端はｓＣＲ１変異体のＣ末端にコンジュゲートされる。

【0114】

一例では、Ｇ－ＣＳＦＲに結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質は、抗体、すなわち完全長抗体である。別の例では、血液凝固因子に結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質は、抗体、すなわち完全長抗体である。一例では、ｓＣＲ１変異体は、抗体重鎖のＣ末端にコンジュゲートされる。例えば、ｓＣＲ１変異体のＣ末端は、抗体重鎖のＣ末端にコンジュゲートされる。

【0115】

例えば、ｓＣＲ１変異体のＣ末端は、抗体の重鎖のＣ末端に架橋している。例えば、ｓＣＲ１変異体のＣ末端はシステイン残基を含むことができ、抗体の重鎖のＣ末端はシステイン残基を含むことができ、システイン残基は架橋している。

【0116】

別の例では、ｓＣＲ１変異体は、抗体重鎖のＮ末端にコンジュゲートされる。例えば、ｓＣＲ１変異体のＣ末端は、抗体重鎖のＣ末端にコンジュゲートされる。一例では、ｓＣＲ１変異体は、抗体重鎖のＣ末端に融合される。

【0117】

別の例では、ｓＣＲ１変異体は、抗体軽鎖のＮ末端にコンジュゲートされる。例えば、ｓＣＲ１変異体のＣ末端は、抗体軽鎖のＣ末端にコンジュゲートされる。一例では、ｓＣＲ１変異体は、抗体軽鎖のＣ末端に融合される。

【0118】

お互いにコンジュゲートされるタンパク質に関して本明細書で議論されるように、記載は、追加の構成成分、例えばリンカーがタンパク質の間に含まれてもよいことが理解されるべきである。例えば、抗体重鎖のＮ末端へのｓＣＲ１変異体のコンジュゲーションの記載は、ｓＣＲ１変異体がリンカー、例えばアミノ酸リンカーによって抗体重鎖のＮ末端から分離されてもよいことを意味すると理解される。

【0119】

一例では、タンパク質はキメラ、脱免疫化、ヒト化、ヒトまたは霊長類化されている。一例では、タンパク質または抗体はヒトのものである。

【0120】

一例では、タンパク質は、配列番号３８に示す配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）および配列番号３９に示す配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む抗体Ｃ１．２Ｇの、Ｇ－ＣＳＦＲへの結合を競合的に阻害する抗体可変領域を含む。

【0121】

一例では、タンパク質は、配列番号４８の１１１～１１５、１７０～１７６、２１８～２３４および／または２８６～３００から選択される１つまたは２つまたは３つまたは４つの領域の中の残基を含むエピトープに結合する。

【0122】

一例では、タンパク質は、配列番号３６に示すアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）および配列番号３７に示すアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む。

【0123】

一例では、タンパク質は、配列番号３６に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｈの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むＶ_Ｈ、および配列番号３７に示すアミノ酸配列を含むＶ_ＬのＣＤＲを含むＶ_Ｌを含む抗体またはその抗原結合性断片である。例えば、タンパク質は以下を含む：
（ｉ）以下を含むＶ_Ｈ：
（ａ）配列番号３６のアミノ酸２５～３４に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号３６のアミノ酸４９～６５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号３６のアミノ酸９８～１０８に示す配列を含むＣＤＲ３；および／または
（ｉｉ）以下を含むＶ_Ｌ：
（ａ）配列番号３７のアミノ酸２３～３３に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号３７のアミノ酸４９～５５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号３７のアミノ酸８８～９６に示す配列を含むＣＤＲ３。

【0124】

一例では、タンパク質は以下を含む：
（ｉ）以下を含むＶ_Ｈ：
（ａ）配列番号４０に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号４１に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号４２に示す配列を含むＣＤＲ３；および／または
（ｉｉ）以下を含むＶ_Ｌ：
（ａ）配列番号４３に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号４４に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号４５に示す配列を含むＣＤＲ３。

【0125】

一例では、タンパク質は配列番号３８に示すアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）および配列番号３９に示すアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む。

【0126】

一例では、タンパク質は、配列番号３８に示すアミノ酸配列を含むＶ_ＨのＣＤＲを含むＶ_Ｈ、および配列番号３９に示すアミノ酸配列を含むＶ_ＬのＣＤＲを含むＶ_Ｌを含む抗体またはその抗原結合性断片である。例えば、タンパク質は以下を含む：
（ｉ）以下を含むＶ_Ｈ：
（ａ）配列番号３８のアミノ酸２５～３４に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号３８のアミノ酸４９～６５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号３８のアミノ酸９８～１０８に示す配列を含むＣＤＲ３；および／または
（ｉｉ）以下を含むＶ_Ｌ：
（ａ）配列番号３９のアミノ酸２３～３３に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号３９のアミノ酸４９～５５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号３９のアミノ酸８８～９６に示す配列を含むＣＤＲ３。

【0127】

一例では、タンパク質は、配列番号４６に示すアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）および配列番号４７に示すアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む。

【0128】

一例では、タンパク質は、配列番号４６に示すアミノ酸配列を含むＶ_ＨのＣＤＲを含むＶ_Ｈ、および配列番号４７に示すアミノ酸配列を含むＶ_ＬのＣＤＲを含むＶ_Ｌを含む抗体またはその抗原結合性断片である。例えば、タンパク質は以下を含む：
（ｉ）以下を含むＶ_Ｈ：
（ａ）配列番号４６のアミノ酸２５～３４に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号４６のアミノ酸４９～６５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号４６のアミノ酸９８～１０８に示す配列を含むＣＤＲ３；および／または
（ｉｉ）以下を含むＶ_Ｌ：
（ａ）配列番号４７のアミノ酸２３～３３に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号４７のアミノ酸４９～５５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号４７のアミノ酸８８～９６に示す配列を含むＣＤＲ３。

【0129】

一例では、タンパク質、抗体またはその抗原結合性断片は、前述のタンパク質、抗体または機能的断片のいずれかをコードする核酸によってコードされるタンパク質、抗体またはその機能的断片の任意の形である。

【0130】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは以下を含む：
（ｉ）配列番号４９のアミノ酸４２～１６４９に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉ）配列番号５０のアミノ酸４２～１６４９に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉｉ）配列番号５１のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列；
（ｉｖ）配列番号５２のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列；
（ｖ）配列番号５３のアミノ酸４２～１６４８に対応するアミノ酸配列；または
（ｖｉ）配列番号５４のアミノ酸４２～１６４８に対応するアミノ酸配列。

【0131】

一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートは、配列番号４９のアミノ酸４２～１６４９に対応するアミノ酸配列からなるか、または配列番号４９のアミノ酸４２～１６４９に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号４９のアミノ酸残基１～４１が欠如している）を含む。

【0132】

一例では、コンジュゲートされたｓＣＲ１変異体は、配列番号５０のアミノ酸４２～１６４９に対応するアミノ酸配列からなるか、または配列番号５０のアミノ酸４２～１６４９に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号５０のアミノ酸残基１～４１が欠如している）を含む。

【0133】

一例では、コンジュゲートされたｓＣＲ１変異体は、配列番号５１のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列からなるか、または配列番号５１のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号５１のアミノ酸残基１～４１が欠如している）を含む。

【0134】

一例では、コンジュゲートされたｓＣＲ１変異体は、配列番号５２のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列からなるか、または配列番号５２のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号５２のアミノ酸残基１～４１が欠如している）を含む。

【0135】

一例では、コンジュゲートされたｓＣＲ１変異体は、配列番号５３のアミノ酸４２～１６４８に対応するアミノ酸配列からなるか、または配列番号５３のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号５３のアミノ酸残基１～４１が欠如している）を含む。

【0136】

一例では、コンジュゲートされたｓＣＲ１変異体は、配列番号５４のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列からなるか、または配列番号５４のアミノ酸４２～１６５６に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号５４のアミノ酸残基１～４１が欠如している）を含む。

【0137】

一例では、タンパク質は、配列番号５６に示す配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）および配列番号５７に示す配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む抗体３Ｆ７の、第ＸＩＩ因子への結合を競合的に阻害する抗体可変領域を含む。

【0138】

一例では、タンパク質は、配列番号５８に示す配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）および配列番号５９に示す配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む生殖系列抗体３Ｆ７（３Ｆ７Ｇ）の、第ＸＩＩ因子への結合を競合的に阻害する抗体可変領域を含む。

【0139】

一例では、タンパク質は、配列番号６０に示す配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）および配列番号６１に示す配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む親和性成熟抗体３Ｆ７（３Ｆ７^ａｆｆ）の、第ＸＩＩ因子への結合を競合的に阻害する抗体可変領域を含む。

【0140】

一例では、タンパク質は、配列番号５６に示すアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）および配列番号５７に示すアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む。

【0141】

一例では、タンパク質は、配列番号５６に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｈの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むＶ_Ｈ、および配列番号５７に示すアミノ酸配列を含むＶ_ＬのＣＤＲを含むＶ_Ｌを含む抗体またはその抗原結合性断片である。例えば、タンパク質は以下を含む：
（ｉ）以下を含むＶ_Ｈ：
（ａ）配列番号５６のアミノ酸２５～３４に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号５６のアミノ酸４９～６５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号５６のアミノ酸９８～１０８に示す配列を含むＣＤＲ３；および／または
（ｉｉ）以下を含むＶ_Ｌ：
（ａ）配列番号５７のアミノ酸２３～３３に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号５７のアミノ酸４９～５５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号５７のアミノ酸８８～９６に示す配列を含むＣＤＲ３。

【0142】

一例では、タンパク質は、配列番号５８に示すアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）および配列番号５９に示すアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む。

【0143】

一例では、タンパク質は、配列番号５８に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｈの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むＶ_Ｈ、および配列番号５９に示すアミノ酸配列を含むＶ_ＬのＣＤＲを含むＶ_Ｌを含む抗体またはその抗原結合性断片である。例えば、タンパク質は以下を含む：
（ｉ）以下を含むＶ_Ｈ：
（ａ）配列番号５８のアミノ酸２５～３４に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号５８のアミノ酸４９～６５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号５８のアミノ酸９８～１０８に示す配列を含むＣＤＲ３；および／または
（ｉｉ）以下を含むＶ_Ｌ：
（ａ）配列番号５９のアミノ酸２３～３３に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号５９のアミノ酸４９～５５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号５９のアミノ酸８８～９６に示す配列を含むＣＤＲ３。

【0144】

一例では、タンパク質は、配列番号６０に示すアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）および配列番号６１に示すアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む。

【0145】

一例では、タンパク質は、配列番号６０に示すアミノ酸配列を含むＶ_Ｈの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むＶ_Ｈ、および配列番号６１に示すアミノ酸配列を含むＶ_ＬのＣＤＲを含むＶ_Ｌを含む抗体またはその抗原結合性断片である。
例えば、タンパク質は以下を含む：
（ｉ）以下を含むＶ_Ｈ：
（ａ）配列番号６０のアミノ酸２５～３４に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号６０のアミノ酸４９～６５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号６０のアミノ酸９８～１０８に示す配列を含むＣＤＲ３；および／または
（ｉｉ）以下を含むＶ_Ｌ：
（ａ）配列番号６１のアミノ酸２３～３３に示す配列を含むＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号６１のアミノ酸４９～５５に示す配列を含むＣＤＲ２；および
（ｃ）配列番号６１のアミノ酸８８～９６に示す配列を含むＣＤＲ３。

【0146】

一例では、タンパク質、抗体またはその抗原結合性断片は、前述のタンパク質、抗体または機能的断片のいずれかをコードする核酸によってコードされるタンパク質、抗体またはその機能的断片の任意の形である。

【0147】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは以下を含む：
（ｉ）配列番号６２のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列；
（ｉｉ）配列番号６３のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列；または
（ｉｉｉ）配列番号６４のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列。

【0148】

一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートは、配列番号６２のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列からなるか、または、配列番号６２のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号６２のアミノ酸残基１～４１が欠如している）を含む。

【0149】

一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートは、配列番号６３のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列からなるか、または、配列番号６３のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号６３のアミノ酸残基１～４１が欠如している）を含む。

【0150】

一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートは、配列番号６４のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列からなるか、または、配列番号６４のアミノ酸４２～１６６３に対応するアミノ酸配列（例えば、配列番号６４のアミノ酸残基１～４１が欠如している）を含む。

【0151】

一例では、本開示は、以下を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを提供する：
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）第ＸＩＩ因子および活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）に結合するかまたは特異的に結合するｓｃＦｖを含むタンパク質。

【0152】

別の例では、本開示は、以下を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを提供する：
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）第ＸＩＩ因子または活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）に結合するかまたは特異的に結合するｓｃＦｖを含むタンパク質。

【0153】

一例では、本開示は、以下を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを提供する：
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）第ＸＩ因子および活性化第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）に結合するかまたは特異的に結合するｓｃＦｖを含むタンパク質。

【0154】

別の例では、本開示は、以下を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを提供する：
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）第ＸＩ因子または活性化第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）に結合するかまたは特異的に結合するｓｃＦｖを含むタンパク質。

【0155】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、配列番号２に示すｓＣＲ１を含むｓＣＲ１コンジュゲートと比較してより長い血清半減期を有する。増加した血清半減期および血清半減期を決定するためのアッセイの例は本明細書に記載されており、必要な変更を加えて本開示のこの例に適用されるととることができる。

【0156】

本開示は、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートおよび医薬担体および／または賦形剤を含む組成物も提供する。

【0157】

本開示は対象で補体活性を阻害する方法であって、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を投与することを含む方法を提供する。

【0158】

本開示は、対象でＧ－ＣＳＦ活性を阻害する方法であって、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を投与することを含む方法も提供する。

【0159】

一例では、本開示は、対象で補体活性およびＧ－ＣＳＦ活性を阻害する方法を提供する。

【0160】

本開示は、対象で疾患または状態を治療または予防する方法であって、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を投与することを含む方法も提供する。

【0161】

一例では、本開示は、対象で補体活性およびＧ－ＣＳＦ活性を阻害することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。例えば、本開示は、対象で補体活性を阻害することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。別の例では、本開示は、対象でＧ－ＣＳＦ活性を阻害することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。

【0162】

一例では、本開示は、対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。一例では、本開示は、対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性化に拮抗することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。例えば、本開示は、対象で補体活性を阻害することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。別の例では、本開示は、対象で第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。別の例では、本開示は、対象で第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。さらなる例では、本開示は、対象で第ＸＩ因子／ＸＩａの活性化に拮抗することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。さらなる例では、本開示は、対象で第ＸＩ因子／ＸＩａの活性に拮抗することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。

【0163】

一例では、本開示は、対象で疾患または状態を治療または予防することにおいて使用するための、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を提供する。

【0164】

一例では、本開示は、対象で補体活性およびＧ－ＣＳＦ活性を阻害するための医薬の製造における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物の使用を提供する。例えば、本開示は、対象で補体活性を阻害するための医薬の製造における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物の使用を提供する。別の例では、本開示は、対象でＧ－ＣＳＦ活性を阻害するための医薬の製造における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物の使用を提供する。

【0165】

一例では、本開示は、対象で補体活性を阻害し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗するための医薬の製造における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物の使用を提供する。別の例では、本開示は、対象で補体活性を阻害し、および／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性化に拮抗するための医薬の製造における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物の使用を提供する。例えば、本開示は、対象で補体活性を阻害するための医薬の製造における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物の使用を提供する。別の例では、本開示は、対象で第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗するための医薬の製造における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物の使用を提供する。さらなる例では、本開示は、対象で第ＸＩ因子／ＸＩａの活性に拮抗し、および／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性化に拮抗するための医薬の製造における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物の使用を提供する。

【0166】

一例では、本開示は、対象で疾患または状態の治療または予防のための医薬の製造における本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物の使用を提供する。

【0167】

一例では、対象は本開示のｓＣＲ１コンジュゲートによる処置を必要とする（すなわち、それを必要とする）。

【0168】

一例では、疾患または状態は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害である。例えば、対象は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を患っているかまたはその危険がある。

【0169】

一例では、対象は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を患う。

【0170】

一例では、対象は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を患っていると診断されている。

【0171】

一例では、対象は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害のための処置を受けている。

【0172】

本明細書に記載されるいずれかの方法の一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の発生の前か後に投与される。本明細書に記載されるいずれかの方法の一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の発生の前に投与される。本明細書に記載されるいずれかの方法の一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の発生の後に投与される。

【0173】

一例では、対象は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を起こす危険がある。

【0174】

一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の症状の発生の前か後に投与される。一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の症状の発生の前に投与される。一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の症状の発生の後に投与される。一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の症状の１つまたはそれ以上を軽減または低減する用量で投与される。

【0175】

補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の症状は当業者に明らかになり、状態に依存する。補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の例示的な症状には、例えば以下のものが含まれる：
・再発感染症；
・関節炎；
・筋力低下；
・皮膚の発疹または変色；
・水腫、特に四肢（例えば、足、手、脚または腕）または目における；
・腹痛；
・呼吸困難（例えば、喘鳴、息切れ、胸部締めつけおよび／または咳）；
・吐き気；
・疲労；
・血尿症；
・潰瘍
・部分的または完全な麻痺；
・劣った認知能力；
・患部における疼痛、腫脹および圧痛；
・患部における鈍痛または激痛；
・血栓領域の温かい皮膚；
・赤色皮膚；
・胸痛；および
・片方の腕または脚における急激な筋力低下。

【0176】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、補体系の一次調節不全、自己免疫障害、急性損傷、がん（転移を含む）および／または炎症性状態によって引き起こされる。例えば、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、炎症性関節状態、炎症性関節炎、炎症性目状態、炎症性肺状態、炎症性神経学的状態、自己免疫性腸管障害、乾癬、がん（その血管新生を含む）またはその転移、固形臓器移植（例えば、肺および／または腎移植（抗体媒介拒絶を含む））、移植の前、間または後の虚血再かん流損傷、遅延した移植機能、喘息およびその悪化形、好中球性皮膚症、好中球性皮膚病巣、再かん流による虚血性脳卒中、神経外傷性障害、体性外傷、虚血－再かん流損傷（心筋ＩＲＩ、腸管ＩＲＩ、肝臓ＩＲＩおよび／または膵臓ＩＲＩを含むＩＲＩ）、静脈、動脈または毛細管の血栓形成、心臓の血栓形成、接触媒介血栓炎症、ヒトまたは動物対象の血液の人工表面との接触の間および／または後の血栓形成、間質性肺疾患、炎症、神経学的炎症性疾患、線維素溶解、血管新生、血栓炎症性疾患、ＦＸＩＩ／ＦＸＩＩ誘導キニン形成に関連した疾患、心房細動、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、急性四肢虚血、急性呼吸器窮迫症候群（ＡＲＤＳ；または急性肺損傷）、ならびにループス腎炎（急性ループス腎炎または慢性ループス腎炎を含む）からなる群から選択される。

【0177】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）、非定型的溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）、血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、血栓性微小血管障害、Ｃ３糸球体症、膜性増殖性糸球体腎炎（抗Ｔｈｙ１糸球体腎炎、抗ｃｏｎＡ散在性増殖性糸球体腎炎および／または受動ハイマン腎炎を含む）、および／またはギランバレー症候群、重症筋無力症（自己免疫性重症筋無力症、脱髄性アレルギー性脳脊髄炎、ＩｇＧ免疫複合体肺胞炎、逆受動アルチュス反応を含む）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ＩｇＡ腎症、自己免疫性溶血性貧血、天疱瘡（尋常性天疱瘡を含む）、類天疱瘡（水疱性類天疱瘡を含む）、抗リン脂質症候群、多発外傷、血液透析、感染後ＨＵＳ、黄斑変性症、ＡＮＣＡ関連血管炎、アテローム硬化症、気分障害、慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシー（ＣＩＤＰ）、アナフィラキシー、脳マラリア、皮膚筋炎、骨関節炎、認知症、緑内障、糖尿病性脈管症、心筋梗塞、抗糸球体基底膜（ＧＢＭ）腎炎（または、グッドパスチャー症候群）、自己免疫性てんかん、ヘルペス状皮膚炎、多発血管炎を有する好酸性肉芽腫症（ＥＧＰＡ；またはチャーグ－ストラウス症候群）、シェーグレン症候群およびシェーグレン症候群血管炎からなる群から選択される。

【0178】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は炎症性関節状態である。例えば、炎症性関節状態は、炎症性関節炎、慢性関節リウマチまたは特発性関節炎、例えば若年性特発性関節炎である。一例では、炎症性関節炎は乾癬性関節炎である。

【0179】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は炎症性の目の状態である。例えば、炎症性の目の状態はブドウ膜炎である。

【0180】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は炎症性の肺の状態である。例えば、炎症性の肺の状態は、好中球浸潤に関連した肺疾患、例えば慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）およびその悪化形（例えば、急性の悪化したＣＯＰＤ（ＡＥＣＯＰＤ）およびそれから起こる合併症またはその徴候、例えば、慢性気管支炎、酸化ストレス、気腫、粘液過分泌、不整脈または肺炎および肺がん）である。

【0181】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は炎症性の神経学的状態である。例えば、炎症性神経学的状態は、ドヴィック病（視神経脊髄炎）、脳のウイルス感染症、または多発性硬化症（慢性進行性の多発性硬化症または再発寛解型多発性硬化症を含む）である。

【0182】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は自己免疫性腸障害である。例えば、自己免疫性腸障害はクローン病または潰瘍性大腸炎である。

【0183】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は乾癬である。

【0184】

一例では、がん（その血管新生を含む）またはその転移。

【0185】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は固形臓器移植である。例えば、固形臓器移植は肺移植である。さらなる例では、固形臓器移植は腎移植である。

【0186】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、移植の前、その間またはその後の虚血再かん流損傷である。

【0187】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は遅延した移植機能である。

【0188】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は喘息およびその悪化形である。例えば、喘息およびその悪化形は、アレルギー性喘息、好中球性喘息、混合顆粒球喘息、重度の喘息、中等度の喘息、制御不十分か無制御の喘息、抗療性の喘息または慢性喘息である。

【0189】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、好中球性皮膚症または好中球性の皮膚病巣である。例えば、好中球性皮膚症は、膿疱性乾癬、しわの非微生物性膿疱症（ＡＰＦ）；ＣＡＲＤ１４媒介膿疱性乾癬（ＣＡＭＰＳ）；クリオピリン関連周期性症候群（ＣＡＰＳ）；インターロイキン１受容体欠乏症（ＤＩＲＡ）；インターロイキン３６受容体アンタゴニスト欠乏症（ＤＩＲＴＡ）；化膿性汗腺炎（ＨＳ）；掌蹠膿疱症；化膿性関節炎；壊疽性膿皮症およびにきび（ＰＡＰＡ）；壊疽性膿皮症、にきびおよび化膿性汗腺炎（ＰＡＳＨ）；壊疽性膿皮症（ＰＧ）；ベーチェット病の皮膚病巣；スチル病；スイート症候群；角層下膿疱症（スネッドン－ウィルキンソン）；膿疱性乾癬；掌蹠膿疱症；急性の全身性発疹膿疱症；乳児の先端膿疱症；滑膜炎、にきび、膿疱症；骨化過剰および骨炎（ＳＡＰＨＯ）症候群；腸関連皮膚症－関節炎症候群（ＢＡＤＡＳ）；手の甲の好中球性皮膚症；好中球性エクリン汗腺炎；持久性隆起性紅斑；および壊疽性膿皮症からなる群から選択される。

【0190】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、再かん流による虚血性脳卒中である。例えば、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、脳卒中の二次態様（例えば、虚血性または出血性脳卒中の二次態様）である。

【0191】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は神経外傷性障害である。例えば、神経外傷性障害は、脊髄損傷および外傷性脳損傷を含む中枢神経系（ＣＮＳ）の外傷性損傷である。一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は脊髄損傷である。別の例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は外傷性脳損傷である。

【0192】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は虚血－再かん流損傷（ＩＲＩ）である。例えば、ＩＲＩは天然の事象（例えば、心筋梗塞の後の血流の復旧）、外傷、または、血液供給の減少を受けた組織または臓器への血流を回復する１つまたはそれ以上の外科的処置または他の治療的介入によって引き起こされる。そのような外科的処置は、例えば、冠状動脈バイパス移植手術、冠動脈再建術、臓器移植手術、選択的手術、再建手術、血管の手術、心臓手術、外傷手術、クラッシュもしくは挫傷手術、がん手術、整形外科手術、移植または最小限侵襲的手術を含むことができる。一例では、外科的処置は、薬理活性物質、例えば血栓溶解剤または血管拡張薬の送達用の器具、または完全もしくは部分的閉塞、例えば血管の閉塞を機械的に除去する器具の挿入を含むことができる。

【0193】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は静脈、動脈または毛細管の血栓である。例えば、静脈または動脈の血栓は、脳卒中、心筋梗塞、深在性静脈血栓症（ＤＶＴ）、門脈血栓症、血栓塞栓症、腎静脈血栓症、頸静脈血栓症、脳静脈洞血栓症、バッド－キアリ症候群、無症候性脳虚血（ＳＢＩ）およびパジェット－シュレッター病からなる群から選択される疾患または状態に関連する。

【0194】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は慢性および／または急性の血栓塞栓症である。例えば、慢性および／または急性の血栓塞栓症は、心房細動によって誘導された血栓形成（例えば、心房細動での脳卒中予防（ＳＰＡＦ））に続く肺塞栓症、脳血栓塞栓症である。

【0195】

一例では、脳卒中は血栓性脳卒中である。別の例では、脳卒中は心房細動における脳卒中予防（ＳＰＡＦ）である。

【0196】

一例では、血栓塞栓症は肺塞栓症である。別の例では、血栓塞栓症は全身性塞栓である。さらなる例では、血栓塞栓症は慢性血栓塞栓性肺高血圧である。

【0197】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は接触媒介血栓炎症である。

【0198】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は心房細動である。

【0199】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）である。

【0200】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は急性の四肢虚血である。

【0201】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、ヒトまたは動物対象の血液の人工表面との接触の間のおよび／またはその後の血栓形成である。例えば、弁置換、ステント、経皮的冠動脈介入（ＰＣＩ）、体外膜酸素投与（ＥＣＭＯ）を有するかまたは心肺バイパス術（ＣＰＢ手術）を受けている対象において。

【0202】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は間質性肺疾患である。例えば、間質性肺疾患は、線維増殖性および／または特発性の肺線維症である。

【0203】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は炎症である。例えば、炎症は神経学的炎症性疾患（または、神経炎症性疾患）である。一例では、神経学的炎症性疾患は、脊髄損傷（ＳＣＩ）、脳卒中、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、二次性脳水腫、中枢神経系の水腫、多発性硬化症（ＭＳ）、横断脊髄炎または視神経脊髄炎（ドヴィック病）である。

【0204】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は線維素溶解である。

【0205】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は血管新生である。

【0206】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は血栓炎症性疾患である。

【0207】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害はＦＸＩＩ／ＦＸＩＩ誘導キニン形成に関連した疾患である。例えば、この疾患は遺伝性血管性水腫、肺の細菌感染症、トリパノソーマ感染症、低血圧ショック、膵臓炎、シャーガス病、関節痛風、関節炎、播種性血管内血液凝固（ＤＩＣ）および敗血症からなる群から選択される。

【0208】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害はループス腎炎である。例えば、ループス腎炎は急性ループス腎炎または慢性ループス腎炎である。

【0209】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）である。

【0210】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は急性呼吸器窮迫症候群（ＡＲＤＳ；または、急性肺損傷）である。例えば、ＡＲＤＳは軽度、中等度または重度のＡＲＤＳである。

【0211】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）である。

【0212】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は非定型的溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）である。

【0213】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）である。

【0214】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は血栓性微小血管障害である。

【0215】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害はＣ３糸球体症である。例えば、Ｃ３糸球体症は、膜性増殖性糸球体腎炎（抗Ｔｈｙ１糸球体腎炎、抗ｃｏｎＡ散在性増殖性糸球体腎炎および／または受動ハイマン腎炎を含む）である。

【0216】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害はギランバレー症候群である。

【0217】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は重症筋無力症である。例えば、重症筋無力症は自己免疫性重症筋無力症、脱髄性アレルギー性脳脊髄炎、ＩｇＧ免疫複合体肺胞炎または逆受動アルチュス反応である。

【0218】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害はＩｇＡ腎症である。

【0219】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は自己免疫性溶血性貧血である。

【0220】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は天疱瘡である。例えば、天疱瘡は尋常性天疱瘡である。

【0221】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は類天疱瘡である。例えば、類天疱瘡は水疱性類天疱瘡である。

【0222】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は抗リン脂質症候群である。

【0223】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は多発外傷である。

【0224】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は血液透析である。

【0225】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は感染後溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）である。

【0226】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は黄斑変性症である。

【0227】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害はＡＮＣＡ関連の血管炎である。

【0228】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害はアテローム硬化症である。

【0229】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は気分障害である。

【0230】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシー（ＣＩＤＰ）である。

【0231】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害はアナフィラキシーである。

【0232】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は脳マラリアである。

【0233】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は皮膚筋炎である。

【0234】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は骨関節炎である。

【0235】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は認知症である。

【0236】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は緑内障である。

【0237】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は糖尿病性脈管症である。

【0238】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は心筋梗塞である。

【0239】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は抗糸球体基底膜（ＧＢＭ）腎炎（または、グッドパスチャー症候群）である。

【0240】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は自己免疫性てんかんである。

【0241】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害はヘルペス皮膚炎である。

【0242】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は多発血管炎を有する好酸性肉芽腫症（ＥＧＰＡ；または、チャーグ－ストラウス症候群）である。

【0243】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害はシェーグレン症候群である。例えば、障害はシェーグレン症候群血管炎である。

【0244】

一例では、対象は、予防的処置を必要とする状態を有する。

【0245】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、対象における補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の重症度を低減する量で対象に投与される。

【0246】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、好中球減少を誘導することなく対象で好中球の数を低減するのに十分な量で対象に投与される。

【0247】

本明細書に記載されるいずれかの方法の一例では、対象は哺乳動物、例えばヒトなどの霊長類である。

【0248】

本明細書に記載される処置の方法は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の影響を低減、治療または予防するためにさらなる化合物を投与することをさらに含むことができる。

【0249】

本開示は、本開示の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を、対象で補体活性および／またはＧ－ＣＳＦ活性を阻害することにおいて使用するための説明書と一緒にパッケージされて含むキットを提供する。場合により、キットはさらなる治療活性化合物または薬物を追加的に含む。

【0250】

本開示は、本開示の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を、対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａの活性化に拮抗することにおいて使用するための説明書と一緒にパッケージされて含むキットも提供する。場合により、キットはさらなる治療活性化合物または薬物を追加的に含む。

【0251】

本開示は、本開示の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を、対象で補体活性を阻害すること、および／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性に拮抗すること、および／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性化に拮抗することにおいて使用するための説明書と一緒にパッケージされて含むキットも提供する。場合により、キットはさらなる治療活性化合物または薬物を追加的に含む。

【0252】

本開示は、本開示の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を、対象で補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を治療または予防することにおいて使用するための説明書と一緒にパッケージされて含むキットをさらに提供する。場合により、キットはさらなる治療活性化合物または薬物を追加的に含む。

【0253】

本開示は、本開示の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を、コンジュゲートまたは組成物を補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を患っているかまたは患う危険がある対象に投与するための説明書と一緒に、場合によりさらなる治療活性化合物または薬物と組み合わせてパッケージされて含むキットも提供する。

【0254】

本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物の例示的な効果は本明細書に記載されており、前の５つの段落に示す本開示の例に必要な変更を加えて適用されるととることができる。

【図面の簡単な説明】

【0255】

【図1】血漿半減期に及ぼすｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓのシアリル化の影響を示す図面である。

【0256】

配列表への鍵

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【発明を実施するための形態】

【0257】

一般
この明細書全体で、別途具体的に明記されない限り、または文脈が別途要求しない限り、単一の工程、物質の組成物、工程群または物質の組成物の群への言及は、それらの工程、物質の組成物、工程群または物質の組成物の群の１つおよび複数（すなわち、１つまたはそれ以上）を包含するととるものとする。

【0258】

当業者は、本開示が具体的に記載されるもの以外の変更および修正を受けやすいことを理解する。本開示は全てのそのような変更および修正を含むことを理解すべきである。本開示は、個々にまたは一括してこの明細書で言及または指示される工程、構成、組成物および化合物の全て、ならびに前記工程または構成のあらゆる組合せまたは任意の２つ以上も含む。

【0259】

本開示は、例示だけを目的とする本明細書に記載される具体的な例によって範囲が限定されるものではない。機能的に同等の生成物、組成物および方法は、明らかに本開示の範囲内である。

【0260】

本明細書において、本開示のいずれの例も、別途特記されない限り本開示の任意の他の例に必要な変更を加えて適用されるととるべきである。言い換えると、本開示のいずれの具体的な例も、本開示のいずれの他の具体的な例と組み合わせることができる（互いに排他的な場合を除き）。

【0261】

具体的な構成または構成の群または方法または方法工程を開示する本開示のいずれの例も、具体的な構成または構成の群または方法または方法工程を否定するための明確な支持を提供するととられる。

【0262】

別途具体的に規定されない限り、本明細書で使用される全ての専門用語および科学用語は、当分野の（例えば、細胞培養、分子遺伝学、免疫学、免疫組織化学、タンパク質化学および生化学の）当業者が一般に理解するのと同じ意味を有するととるべきである。

【0263】

別途指示がない限り、本開示で利用される組換えタンパク質、細胞培養および免疫学的技術は、当業者に周知である標準方法である。そのような技術は、Ｊ．Ｐｅｒｂａｌ、Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ（１９８４）、Ｊ．Ｓａｍｂｒｏｏｋ等Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｕｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ（１９８９）、Ｔ．Ａ．Ｂｒｏｗｎ（編）、Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ、第１巻および２巻、ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ（１９９１）、Ｄ．Ｍ．ＧｌｏｖｅｒおよびＢ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ（編）、ＤＮＡ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ、第１～４巻、ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ（１９９５年および１９９６年）、ならびにＦ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ等（編）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ａｎｄ Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ（１９８８、現在までの全ての最新版を含む）、Ｅｄ ＨａｒｌｏｗおよびＤａｖｉｄ Ｌａｎｅ（編）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｕｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、（１９８８）およびＪ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎ等（編）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ（現在までの全ての最新版を含む）などの出典の文献全体で記載および説明される。

【0264】

本明細書における可変領域およびその部分、免疫グロブリン、抗体およびその断片の記載および定義は、カバットのＳｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．、１９８７年および１９９１年、Ｂｏｒｋ等、Ｊ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２４２巻、３０９～３２０頁、１９９４年、ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ Ｊ．Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．１９６巻：９０１～９１７頁、１９８７年、Ｃｈｏｔｈｉａ等Ｎａｔｕｒｅ ３４２巻、８７７～８８３頁、１９８９年および／またはＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ等、Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２７３巻、９２７～９４８頁、１９９７年での議論によってさらに明快にすることができる。

【0265】

用語「および／または」、例えば「Ｘおよび／またはＹ」は、「ＸおよびＹ」または「ＸまたはＹ」を意味すると理解すべきであり、両方の意味またはいずれかの意味のための明確な支持を提供するととるべきである。

【0266】

本明細書全体で、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」もしくは「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変異形は、明示される要素、整数もしくは工程、または要素、整数もしくは工程の群が含まれることを暗示するが、いかなる他の要素、整数もしくは工程または要素、整数もしくは工程の群が除外されることを暗示するものでないことが理解される。

【0267】

本明細書で使用されるように、用語「から導かれる」は、特定される整数は特定の供与源から得ることができるが、必ずしもその供与源から直接的に得られる必要はないことを示すととるべきである。

【0268】

選択された定義
Ｃ３ｂ／Ｃ４ｂ受容体またはＣＤ３５としても知られる補体受容体１型（ＣＲ１）は、補体活性化の調節因子のファミリーのメンバーである。ＣＲ１は赤血球、単球／マクロファージ、顆粒球、Ｂ細胞、一部のＴ細胞、脾臓濾胞性樹状細胞および糸球体足細胞の膜に存在し、活性化補体を有する粒子および免疫複合体への細胞結合を媒介する。コードされるタンパク質は、４１アミノ酸のシグナルペプチド、１９３０残基の細胞外ドメイン、２５残基の膜貫通ドメインおよび４３アミノ酸のＣ末端細胞質領域を有する。命名法のためだけであり、制限が目的ではないが、ヒトＣＲ１の例示的な配列がＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿０００５６４で示される。

【0269】

可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）は細胞表面ＣＲ１の切断によって天然に産生され、炎症部位における補体活性化の制御において役割を果たす。「ｓＣＲ１」への言及は、膜貫通細胞質ドメインが欠如しているトランケーションされたＣＲ１を指すことを理解すべきである。命名法のためだけであり、制限が目的ではないが、ヒトｓＣＲ１の例示的な配列が配列番号１に示される。本明細書においてアミノ酸の位置は、１９７１アミノ酸（例えば、配列番号１に示すような）からなるｓＣＲ１タンパク質への参照によって呼ばれる。完全長ｓＣＲ１は４つの長い相同反復（ＬＨＲ）領域、すなわちＬＨＲ－Ａ、Ｂ、ＣおよびＤを含む。ＬＨＲ領域は、ヒトｓＣＲ１（配列番号１に示すような）を参照して規定することができる。例えば、ＬＨＲ－Ａは配列番号１のアミノ酸４２～４８９を含み、ＬＨＲ－Ｂは配列番号１のアミノ酸４９０～９３９を含み、ＬＨＲ－Ｃは配列番号１のアミノ酸９４０～１３９２を含み、ＬＨＲ－Ｄは配列番号１のアミノ酸１３９３～１９７１を含む。各ＬＨＲは合計３０のＳＣＲ配列による短いコンセンサス反復配列（ＳＣＲ）を含み、各々６０～７０アミノ酸を有する。例えば、ＬＨＲ－ＡはＳＣＲ１～７（配列番号１のアミノ酸４２～４８９に対応する）を含み、ＬＨＲ－ＢはＳＣＲ８～１４（配列番号１のアミノ酸４９１～９３９に対応する）を含み、ＬＨＲ－ＣはＳＣＲ１５～２１（配列番号１のアミノ酸９４１～１３８９に対応する）を含み、ＬＨＲ－ＤはＳＣＲ２２～２８（配列番号１のアミノ酸１３９４～１８４２に対応する）およびＳＣＲ２９～３０（配列番号１のアミノ酸１８４６～１９６７に対応する）を含む。成熟ヒトｓＣＲ１の配列は配列番号１のアミノ酸１～４１に対応するＮ末端シグナルペプチドが欠如している。例えば、成熟ヒトｓＣＲ１の配列（すなわち、Ｎ末端シグナルペプチドが欠如している）は、配列番号２に示す。

【0270】

他の種からのｓＣＲ１の配列は本明細書でおよび／または公開データベースで提供される配列を使用して決定することができ、および／または標準技術を使用して決定することができる（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ等、（編）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ａｎｄ Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ（１９８８、現在までの全ての最新版を含む）またはＳａｍｂｒｏｏｋ等、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ（１９８９）に記載されている）。

【0271】

本明細書で使用されるように、配列番号１におけるアミノ酸の位置に関する語句「に対応する」は、必ずしも配列番号１を含む配列ではないがｓＣＲ１配列の中のアミノ酸残基または位置への言及と理解するべきである。例えば、４１アミノ酸のＮ末端トランケーションを含むｓＣＲ１配列（すなわち、成熟ｓＣＲ１）の中の「配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応する位置」への言及は、位置１～８９８のアミノ酸を必然的に指すだろう。一例では、ｓＣＲ１は配列番号１に示す配列を含む。

【0272】

本明細書で使用されるように、用語「変異体」は、周知の技術を使用して１つまたはそれ以上のアミノ酸の欠失またはトランケーションを受けたｓＣＲ１を指す。

【0273】

本明細書で使用されるように、補体活性との関連で用語「阻害する」または「阻害すること」は、本開示のｓＣＲ１変異体コンジュゲートが補体活性レベルを低減または低下させることを意味すると理解すべきである。上述のことから本開示のｓＣＲ１変異体コンジュゲートが補体活性を完全に阻害する必要性はなく、むしろ、それは統計的に有意な量、例えば少なくとも約１０％、または約２０％、または約３０％、または約４０％、または約５０％、または約６０％、または約７０％、または約８０％、または約９０％、または約９５％、活性を低減するだけでよいことが明らかである。補体活性の阻害を決定する方法は当技術分野で公知であり、および／または本明細書に記載される。

【0274】

本明細書で使用されるように、本開示との関連で用語「血清半減期」または「血漿半減期」は、例えば、天然の機構による分解および／またはクリアランスもしくは隔離のために血清中のｓＣＲ１コンジュゲートの濃度または量が５０％（すなわち、半分）に低減されるのに必要とされる時間を指す。当業者は、対象におけるｓＣＲ１の血清半減期が様々な生理的状態（例えば、健康状態、体のサイズ／重量）に依存することを認めるだろう。健康なヒト対象では、ｓＣＲ１の血清半減期は概ね７０時間（３日間）である。ｓＣＲ１の血清半減期を決定する方法は当技術分野で公知であり、例えば薬物動態学的分析がある。本開示のために、「増加」または「増強された」血清半減期は、ｓＣＲ１変異体の血清濃度が配列番号２に示すｓＣＲ１と比較して５０％低減するのにとられる時間の上昇または増加を指す。

【0275】

Ｇ－ＣＳＦは、顆粒球産生の主要な調節因子である。Ｇ－ＣＳＦは骨髄間質細胞、内皮細胞、マクロファージおよび線維芽細胞によって産生され、産生は炎症性刺激によって誘導される。Ｇ－ＣＳＦはＧ－ＣＳＦ受容体（Ｇ－ＣＳＦＲ）を通して作用し、それは初期の骨髄前駆体、成熟した好中球、単球／マクロファージ、ＴおよびＢリンパ球ならびに内皮細胞で発現される。

【0276】

本明細書において「顆粒球コロニー刺激因子」（Ｇ－ＣＳＦ）への言及は、Ｇ－ＣＳＦの天然形、その突然変異体形、例えばフィルグラスチムおよびＧ－ＣＳＦまたはフィルグラスチムのペグ化された形を含む。この用語は、Ｇ－ＣＳＦＲ（例えば、ヒトＧ－ＣＳＦＲ）に結合してシグナル伝達を誘導する活性を保持するＧ－ＣＳＦの突然変異体形も包含する。

【0277】

命名法のためだけであり、制限が目的ではないが、ヒトＧ－ＣＳＦＲの例示的な配列がＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿０００７５１．１で示される（および、配列番号４８に示す）。他の種からのＧ－ＣＳＦＲの配列は本明細書でおよび／または公開データベースで提供される配列を使用して決定することができ、および／または標準技術（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ等、（編）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ａｎｄ Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ（１９８８、現在までの全ての最新版を含む）またはＳａｍｂｒｏｏｋ等、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ（１９８９）に記載されている）を使用して決定することができる。ヒトＧ－ＣＳＦＲへの言及はｈＧ－ＣＳＦＲに略すことができ、例えば、カニクイザルＧ－ＣＳＦＲへの言及はｃｙｎｏＧ－ＣＳＦＲに略すことができる。可溶性Ｇ－ＣＳＦＲへの言及は、Ｇ－ＣＳＦＲのリガンド結合性領域を含むポリペプチドを指す。Ｇ－ＣＳＦＲのＩｇおよびＣＲＨドメインは、リガンド結合性および受容体二量体化に関与する（Ｌａｙｔｏｎ等、Ｊ．Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．、２７２巻：２９７３５～２９７４１頁、１９９７年およびＦｕｋｕｎａｇａ等、ＥＭＢＯ Ｊ．１０巻：２８５５～２８６５頁、１９９１年）。受容体のこれらの部分を含むＧ－ＣＳＦＲの可溶性形は受容体の様々な研究で使用され、受容体の位置７８、１６３および２２８の遊離システインの突然変異はリガンド結合性に影響を及ぼすことなく可溶性受容体ポリペプチドの発現および単離を支援する（Ｍｉｎｅ等、Ｂｉｏｃｈｅｍ．、４３巻：２４５８～２４６４頁、２００４年）。

【0278】

本明細書で使用されるように、用語「凝固因子」は、血餅、すなわち血液凝固の形成に関連する因子を指す。凝固因子は当技術分野で公知であり、限定されずに第Ｉ因子、第ＩＩ因子、第ＩＩＩ因子、第Ｖ因子、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第Ｘ因子、第ＸＩ因子、第ＸＩＩ因子および第ＸＩＩＩ因子または上述のいずれかの活性型が含まれる。この用語は、例えば当技術分野で公知であるようにおよび／または本明細書に記載されるように、凝固因子の組換え形および／またはその改変形も含む。

【0279】

ハーゲマン因子またはＦＸＩＩとしても知られる第ＸＩＩ凝固因子は、血漿タンパク質である。それは、ＸＩＩａ因子、セリンプロテアーゼ（または、セリンエンドペプチダーゼ）クラスの酵素の酵素前駆体形である。ヒトでは、第ＸＩＩ因子はＦ１２遺伝子によってコードされる。命名法のためだけであり、制限が目的ではないが、ヒト第ＸＩＩ因子の例示的な配列がＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿０００４９６．２；ＮＣＰＩタンパク質受託番号ＮＰ＿０００４９６、および配列番号６５に示される。第ＸＩＩ因子の追加の配列は、本明細書でおよび／または公開データベースで提供される配列を使用して決定することができ、および／または標準技術（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ等、（編）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ａｎｄ Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ（１９８８、現在までの全ての最新版を含む）またはＳａｍｂｒｏｏｋ等、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ（１９８９）に記載されている）を使用して決定することができる。

【0280】

本明細書で使用されるように、用語「第ＸＩＩ因子阻害剤」または「ＦＸＩＩ阻害剤」または「ＦＸＩＩの阻害剤」は、第ＸＩＩ因子（活性化前、すなわちその酵素前駆体）および活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）のいずれかまたは両方、ならびにＦＸＩＩの活性化の阻害剤を指す。したがって、「ＦＸＩＩの阻害剤（複数可）」はＦＸＩＩおよびＦＸＩＩａ（αＦＸＩＩａとも呼ばれる）のいずれかまたは両方、ならびにＦＸＩＩａ切断生成物ＦＸＩＩａアルファおよびＦＸＩＩａベータ（ＦＸＩＩｆとも呼ばれる）を含むＦＸＩＩの活性化の阻害剤を含むことができる。ＦＸＩＩ阻害剤は、野生型阻害剤の機能的変異体および断片を包含する。機能的変異体または断片は、ＦＸＩＩ、ＦＸＩＩａまたはＦＸＩＩの活性化を阻害する野生型分子の能力の少なくとも５０％（例えば、約５０％、または約６０％、または約７０％、または約８０％、または約９０％、または約９５％、または約９９％、または約１００％）を保持する分子である。一例では、ＦＸＩＩ阻害剤は非内因性阻害剤である；すなわち、それらはヒトまたは動物の体内に天然に存在する阻害剤でない。

【0281】

用語「アミド溶解活性」は、別のポリペプチド中の少なくとも１つのペプチド結合の加水分解を触媒する本開示のタンパク質の能力を指す。

【0282】

本明細書で使用されるように、用語「コンジュゲートされた」は、非共有結合性または共有結合性または遺伝子のコンジュゲーション（「融合」とも呼ばれる）であってもよい、化学的コンジュゲーションを包含すると理解すべきである。一例では、コンジュゲーションは共有結合性、例えばジスルフィド結合である。一例では、本開示のコンジュゲートは、遺伝子コンジュゲーションによって連結される２つの構成成分を含む融合タンパク質である。

【0283】

用語「組換え」は、人工遺伝子組換えの生成物を意味すると理解すべきである。組換えタンパク質は、例えばそれが発現される細胞、組織または対象の中にそれがある場合、人工組換え手段によって発現されるタンパク質も包含する。

【0284】

用語「タンパク質」は、単一のポリペプチド鎖、すなわちペプチド結合によって連結される一連の連続したアミノ酸か、または、お互いに共有結合または非共有結合的に連結された一連のポリペプチド鎖（すなわち、ポリペプチド複合体）を含むととるべきである。例えば、一連のポリペプチド鎖は好適な化学的またはジスルフィド結合を使用して共有結合的に連結されてもよい。非共有結合の例には、水素結合、イオン結合、ファンデルワールス力および疎水性相互作用が含まれる。

【0285】

用語「ポリペプチド」または「ポリペプチド鎖」は、前の段落からペプチド結合によって連結される一連の連続したアミノ酸を意味すると理解すべきである。

【0286】

当業者は、「抗体」が複数のポリペプチド鎖、例えば、Ｖ_Ｌを含むポリペプチドおよびＶ_Ｈを含むポリペプチドで構成される可変領域を含むタンパク質であると一般的にみなされることを知る。抗体は定常ドメインも一般的に含み、その一部は重鎖の場合定常断片または結晶性断片（Ｆｃ）を含む定常領域の中に配置されてもよい。Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌは相互作用した結果、１つまたは２、３の緊密に関係した抗原に特異的に結合することが可能である抗原結合性領域を含むＦｖを形成する。一般的に、哺乳動物からの軽鎖はκ軽鎖またはλ軽鎖であり、哺乳動物からの重鎖はα、δ、ε、γまたはμである。抗体は、任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ_１、ＩｇＧ_２、ＩｇＧ_３、ＩｇＧ_４、ＩｇＡ_１およびＩｇＡ_２）またはサブクラスであってよい。用語「抗体」は、ヒト化抗体、霊長類化抗体、ヒト抗体およびキメラ抗体も包含する。

【0287】

用語「完全長抗体」、「無傷の抗体」または「全抗体」は互換的に使用されて、抗体の抗原結合性断片に対してその実質的に無傷の形の抗体を指す。具体的には、全抗体には、Ｆｃ領域を含む重鎖および軽鎖を有するものが含まれる。定常ドメインは野生型配列の定常ドメイン（例えば、ヒト野生型配列の定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列変異体であってよい。

【0288】

「抗ＦＸＩＩ抗体」には、ＦＸＩＩならびにＦＸＩＩａアルファおよびＦＸＩＩａベータ切断断片を含む活性化タンパク質（ＦＸＩＩａ）の酵素前駆体のいずれかまたは両方に結合し、および／または阻害する抗体が含まれる。一部の例では、抗体はＦＸＩＩａまたはＦＸＩＩａのアルファもしくはベータ鎖断片に特異的に結合する。

【0289】

本明細書で使用されるように、用語「生殖系列」抗体は、フレームワーク残基に変更を導入した一部または全ての体性突然変異がゲノム、例えばヒトゲノムに存在する元の配列に戻される抗体を指す。この点に関して、全ての変更が生殖系列抗体で戻される必要性があるとは限らない。

【0290】

本明細書で使用されるように、「可変領域」は、抗原に特異的に結合することが可能である本明細書で規定される抗体の軽鎖および／または重鎖の一部を指し、相補性決定領域（ＣＤＲ）；すなわち、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３、ならびにフレームワーク領域（ＦＲ）のアミノ酸配列を含む。例示的な可変領域は、３つまたは４つのＦＲ（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３および場合によりＦＲ４）を３つのＣＤＲと一緒に含む。ＩｇＮＡＲに由来するタンパク質の場合、タンパク質はＣＤＲ２が欠如していてもよい。Ｖ_Ｈは、重鎖の可変領域を指す。Ｖ_Ｌは、軽鎖の可変領域を指す。

【0291】

本明細書で使用されるように、用語「相補性決定領域」（同義語ＣＤＲ；すなわち、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３）は抗体可変領域のアミノ酸残基を指し、その存在は抗原結合のために必要である。各可変領域は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３と特定される３つのＣＤＲ領域を一般的に有する。ＣＤＲおよびＦＲに割り当てられるアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．、１９８７年および１９９１年、またはこの開示の実施における他の番号付けシステム、例えば、ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ Ｊ．Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．１９６巻：９０１～９１７頁、１９８７年；Ｃｈｏｔｈｉａ等Ｎａｔｕｒｅ ３４２巻、８７７～８８３頁、１９８９年；および／またはＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ等、Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２７３巻：９２７～９４８頁、１９９７年の正規の番号付けシステム；Ｌｅｆｒａｎｃ等、Ｄｅｖｅｌ．Ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２７巻：５５～７７頁、２００３年のＩＭＧＴ番号付けシステム；または、ＨｏｎｎｅｇｈｅｒおよびＰｌｕｋｔｈｕｎ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、３０９巻：６５７～６７０頁、２００１年のＡＨＯ番号付けシステムにより規定することができる。例えば、カバットの番号付けシステムにより、Ｖ_Ｈフレームワーク領域（ＦＲ）およびＣＤＲは以下の通りに配置される：残基１～３０（ＦＲ１）、３１～３５（ＣＤＲ１）、３６～４９（ＦＲ２）、５０～６５（ＣＤＲ２）、６６～９４（ＦＲ３）、９５～１０２（ＣＤＲ３）および１０３～１１３（ＦＲ４）。カバットの番号付けシステムにより、Ｖ_Ｌ ＦＲおよびＣＤＲは以下の通りに配置される：残基１～２３（ＦＲ１）、２４～３４（ＣＤＲ１）、３５～４９（ＦＲ２）、５０～５６（ＣＤＲ２）、５７～８８（ＦＲ３）、８９～９７（ＣＤＲ３）および９８～１０７（ＦＲ４）。本開示は、カバットの番号付けシステムによって規定されるＦＲおよびＣＤＲに限定されずに、上で議論されるものを含む全ての番号付けシステムを含む。一例では、本明細書においてＣＤＲ（または、ＦＲ）への言及は、カバットの番号付けシステムによる領域に関するものである。

【0292】

「フレームワーク領域」（ＦＲ）は、ＣＤＲ残基以外の可変領域残基である。

【0293】

本明細書で使用されるように、用語「Ｆｖ」は、複数のポリペプチドまたは単一のポリペプチドで構成されるにせよ、Ｖ_ＬおよびＶ_Ｈが結合して、抗原結合性部位を有し、すなわち抗原に特異的に結合することが可能な複合体を形成する任意のタンパク質を意味するととるべきである。抗原結合性部位（または、抗原結合性ドメイン）を形成するＶ_ＨおよびＶ_Ｌは、単一のポリペプチド鎖に、または異なるポリペプチド鎖にあってもよい。さらに、本開示のＦｖ（ならびに本開示のいずれかのタンパク質）は、同じ抗原に結合してもしなくてもよい複数の抗原結合性部位を有することができる。この用語は、抗体に直接的に由来する断片ならびに組換え手段を使用して生成されるそのような断片に対応するタンパク質を包含すると理解するべきである。一部の例では、Ｖ_Ｈは重鎖定常ドメイン（Ｃ_Ｈ）１に連結しておらず、および／またはＶ_Ｌは軽鎖定常ドメイン（Ｃ_Ｌ）に連結していない。例示的なＦｖ含有ポリペプチドまたはタンパク質には、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）断片、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディもしくはより高次の複合体、または、定常領域もしくはそのドメイン、例えばＣ_Ｈ２もしくはＣ_Ｈ３ドメインに連結している上述のいずれか、例えばミニボディが含まれる。「Ｆａｂ断片」は、免疫グロブリンの一価の抗原結合性断片からなり、全抗体を酵素パパインで消化して、無傷の軽鎖および重鎖の一部からなる断片を与えることによって生成することができるか、または組換え手段を使用して生成することができる。抗体の「Ｆａｂ’断片」は、全抗体をペプシンで処理し、続いて還元して、無傷の軽鎖ならびにＶ_Ｈおよび単一の定常ドメインを含む重鎖の一部からなる分子を与えることによって得ることができる。このように処理した抗体ごとに、２つのＦａｂ’断片が得られる。Ｆａｂ’断片は、組換え手段によって生成することもできる。抗体の「Ｆ（ａｂ’）２断片」は、２つのジスルフィド結合によって一緒にされる２つのＦａｂ’断片の二量体からなり、全抗体分子を酵素ペプシンで処理することによって以降の還元なしで得られる。「Ｆａｂ_２」断片は、例えばロイシンジッパーまたはＣ_Ｈ３ドメインを使用して連結した２つのＦａｂ断片を含む組換え断片である。「単鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」は、軽鎖の可変領域および重鎖の可変領域が好適な柔軟なポリペプチドリンカーによって共有結合的に連結される、抗体の可変領域断片（Ｆｖ）を含有する組換え分子である。

【0294】

本明細書で使用されるように、用語「結合する」は、化合物またはその抗原結合性部位の抗原との相互作用に関して、相互作用が抗原の上の特定の構造（例えば、抗原性決定基またはエピトープ）の存在に依存することを意味する。例えば、抗体は、タンパク質一般ではなく特異的タンパク質構造を認識して結合する。抗体がエピトープ「Ａ」に結合する場合、標識された「Ａ」およびタンパク質を含有する反応におけるエピトープ「Ａ」（または、遊離の非標識の「Ａ」）を含有する分子の存在は、抗体に結合する標識された「Ａ」の量を低減する。

【0295】

本明細書で使用されるように、用語「特異的に結合する」または「特異的に結合する」は、本開示の化合物が、代わりの抗原または細胞より頻繁に、より速やかに、より長い期間および／またはより大きな親和性で特定の抗原またはそれを発現する細胞と反応または結合することを意味するととるべきである。例えば、他のサイトカイン受容体または多反応性の天然抗体によって一般的に認識される抗原にそれが結合する（すなわち、ヒトで天然に見出される様々な抗原に結合することが知られている天然に存在する抗体によって）よりも実質的に大きな（例えば、２０倍または４０倍または６０倍または８０倍から１００倍、または１５０倍または２００倍）親和性でＧ－ＣＳＦＲ（例えば、ｈＧ－ＣＳＦＲ）に結合する抗体Ｆｃを含むコンジュゲート。一般的に、しかしそれに限らないが、結合への言及は特異的結合を意味し、各用語は他の用語のための明確な支持を提供すると理解すべきである。

【0296】

本明細書で使用されるように、用語「エピトープ」（同義語「抗原決定基」）は、抗体の抗原結合性部位を含むタンパク質が結合するｈＧ－ＣＳＦＲの領域を意味すると理解すべきである。この用語は、タンパク質が接触する特異的な残基または構造に必ずしも限定されない。例えば、この用語は、タンパク質が接触するアミノ酸および／またはこの領域の外側の５～１０もしくは２～５もしくは１～３アミノ酸にわたる領域を含む。一部の例では、エピトープは、ｈＧ－ＣＳＦＲが折りたたまれるときにお互いの近くに配置される一連の不連続なアミノ酸を含む、すなわち「コンホメーション依存エピトープ」。例えば、コンホメーション依存エピトープは、配列番号４８の１１１～１１５、１７０～１７６、２１８～２３４および／または２８６～３００に対応する領域の１つまたはそれ以上、または２つ以上または全ての中のアミノ酸を含む。当業者は、用語「エピトープ」がペプチドまたはポリペプチドに限定されないことも知る。例えば、用語「エピトープ」は、糖側鎖、ホスホリル側鎖またはスルホニル側鎖などの分子の化学的活性表面基を含み、ある特定の例では、特異的３次元構造的特徴および／または特異的荷電特徴を有することができる。

【0297】

用語「競合的に阻害する」は、本開示のタンパク質（または、その抗原結合性部位）が、列挙される抗体またはタンパク質のＧ－ＣＳＦＲ、例えばｈＧ－ＣＳＦＲまたは第ＸＩＩ因子および／またはＸＩＩａ因子への結合を低減または阻止することを意味すると理解すべきである。これは、同じかまたは重複するエピトープへのタンパク質（または、抗原結合性部位）および抗体の結合によることができる。上述のものから、タンパク質が抗体の結合を完全に阻害する必要性はないことが明らかであり、むしろ、それは統計的に有意な量だけ、例えば、少なくとも約１０％または２０％または３０％または４０％または５０％または６０％または７０％または８０％または９０％または９５％結合を低減するだけでよい。好ましくは、タンパク質は抗体の結合を少なくとも約３０％、より好ましくは少なくとも約５０％、より好ましくは少なくとも約７０％、さらにより好ましくは少なくとも約７５％、さらにより好ましくは少なくとも約８０％または８５％、さらにより好ましくは少なくとも約９０％低減する。結合の競合的阻害を決定する方法は当技術分野で公知であり、および／または本明細書に記載される。例えば、抗体はタンパク質の存在下または不在下でＧ－ＣＳＦＲまたは第ＸＩＩ因子に曝露させられる。タンパク質の不在下よりタンパク質の存在下でより少ない抗体が結合する場合、タンパク質は抗体の結合を競合的に阻害するとみなされる。一例では、競合的阻害は立体的障害によるものでない。

【0298】

２つのエピトープとの関連で「重複」は、２つのエピトープが、１つのエピトープに結合するタンパク質（または、その抗原結合性部位）が、他のエピトープに結合するタンパク質（または、抗原結合性部位）の結合を競合的に阻害することを許すのに十分な数のアミノ酸残基を共有することを意味するととるべきである。例えば、「重複する」エピトープは、少なくとも１または２または３または４または５または６または７または８または９または２０アミノ酸を共有する。

【0299】

本明細書で使用されるように、用語「中和する」は、化合物がＧ－ＣＳＦＲまたは第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａ媒介活性を通して、細胞におけるＧ－ＣＳＦ媒介シグナル伝達をブロック、低減または阻止することが可能なことを意味するととるべきである。中和を決定する方法は当技術分野で公知であり、および／または本明細書に記載される。

【0300】

ここで使用されるように、用語「拮抗する」は、タンパク質が血液凝固因子の活性化および／または活性をブロック、低減または阻止することが可能であることを意味すると理解すべきである。拮抗を決定する方法は当技術分野で公知であり、および／または本明細書に記載される。

【0301】

語句「保存的アミノ酸置換」は、アミノ酸残基の類似の側鎖および／または疎水性および／または親水性を有するアミノ酸残基による置き換えまたは置換を指す。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、塩基性側鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、無電荷極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、無極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、β分枝状側鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）、および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を含めて当技術分野で規定されている。疎水性指数は、例えばＫｙｔｅおよびＤｏｏｌｉｔｔｌｅ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１５７巻：１０５～１３２頁、１９８２年に記載され、親水性指数は、例えば米国特許第４５５４１０１号に記載される。

【0302】

本明細書で使用されるように、用語「状態」は正常な機能の破壊またはそれに対する干渉を指し、いかなる特定の状態にも限定されるものではなく、疾患または障害を含む。

【0303】

「補体媒介」障害、「好中球媒介」および／または「血液凝固」障害は、障害がそれぞれ補体、好中球および／または血液凝固因子によって少なくとも一部媒介されることを意味する。

【0304】

本明細書で使用されるように、疾患または状態またはその再発または再発を起こす「危険がある」対象は、検出可能な疾患または疾患の症状を有していても有していなくてもよく、本開示による処置の前に検出可能な疾患または疾患の症状を提示していても提示していなくてもよい。「危険がある」は、当技術分野で公知であるようにおよび／または本明細書に記載されるように、疾患または状態の発達と相関する測定可能なパラメータである１つまたはそれ以上の危険因子を対象が有することを表す。

【0305】

本明細書で使用されるように、用語「処置すること」、「処置する」または「処置」は、本明細書に記載されるコンジュゲートおよび／または組成物を投与し、それによって特定される疾患もしくは状態の少なくとも１つの症状を低減もしくは消去するか、または疾患もしくは状態の進行を遅らせることを含む。

【0306】

本明細書で使用されるように、用語「予防すること」、「予防する」または「予防」は、個体において特定される疾患または状態の発生または再発に関して予防処置を提供することを含む。個体は、疾患または疾患再発を起こす素因または危険があってもよいが、疾患または再発とまだ診断されていない。

【0307】

本明細書で使用されるように、用語「対象」は、ヒトを含む任意の動物、例えば哺乳動物を意味するととるべきである。例示的な対象には、限定されずにヒトおよび非ヒト霊長類が含まれる。例えば、対象はヒトである。

【0308】

可溶性補体受容体１型変異体コンジュゲート
本開示は、本明細書に記載されるいずれかの方法で使用するためのｓＣＲ１コンジュゲートを提供する。

【0309】

ｓＣＲ１変異体
一例では、本開示は、ｓＣＲ１変異体を含むｓＣＲ１コンジュゲートを提供し、ここで、ｓＣＲ１変異体は、配列番号２に示す配列を含むコンジュゲートと比較して向上したまたは増加した補体阻害活性を有する。発明者は、配列番号１の残基４２～９３９および／または残基４９０～１３９２を含むｓＣＲ１変異体は、向上したおよび／または増加した補体阻害活性を有すると決定した。

【0310】

本開示は、以下を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）変異体コンジュゲートを提供する：
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）標的に結合して標的によるかそれを通したシグナル伝達を阻害する抗原結合性ドメインを含むタンパク質。

【0311】

本開示は、以下を含む可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）変異体コンジュゲートも提供する：
（ｉ）以下からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むｓＣＲ１変異体：
ａ）配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列；
ｂ）配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列；および
（ｉｉ）血液凝固因子に結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質。

【0312】

例えば、発明者は配列番号１に示す配列において、機能を失わずに欠失させることができるかまたは向上した機能をもたらすアミノ酸残基を特定した。一例では、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１に示す配列と比較して４８９～１０７３のアミノ酸の欠失を含む。例えば、ｓＣＲ１変異体は、配列番号１に示す配列と比較して、４８９または６２０または１０６８または１０７３のアミノ酸の欠失を含む。

【0313】

一例では、本開示は、配列番号１に示す配列と比較して８９８～１４８２のアミノ酸を含むトランケーションされたｓＣＲ１を提供する。例えば、トランケーションされたｓＣＲ１は、配列番号１に示す配列と比較して、８９８または９０３または１３５１または１４８２のアミノ酸を含む。

【0314】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、配列番号１に示す配列の変異体を含み、ここで、変異体配列は配列番号１のアミノ酸４２～１３９２に対応するアミノ酸配列を含む。

【0315】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、配列番号１に示す配列の変異体を含み、ここで、変異体配列は配列番号１のアミノ酸４２～９３９に対応するアミノ酸配列を含む。

【0316】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、配列番号１に示す配列の変異体を含み、ここで、変異体配列は配列番号１のアミノ酸４９０～１３９２に対応するアミノ酸配列を含む。

【0317】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、配列番号１に示す配列の変異体を含み、ここで、変異体配列は配列番号１のアミノ酸４９０～１９７１に対応するアミノ酸配列を含む。

【0318】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、配列番号１および／または配列番号２に示す配列を含まず、それからなることもない。

【0319】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸１～４１に対応するアミノ酸配列を含まない。

【0320】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸９４０～１９７１に対応するアミノ酸配列を含まない。

【0321】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸１３９３～１９７１に対応するアミノ酸配列を含まない。

【0322】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は配列番号１のアミノ酸１～４８９に対応するアミノ酸配列を含まない。

【0323】

一例では、ｓＣＲ１変異体は単量体（すなわち、１コピーのｓＣＲ１変異体）である。

【0324】

一例では、ｓＣＲ１変異体は二量体であるかまたは二量体化される（すなわち、２コピーのｓＣＲ１変異体が融合タンパク質の中で連結される）。

【0325】

一例では、ｓＣＲ１変異体は多量体であるかまたは多量体化される（すなわち、複数のコピーのｓＣＲ１変異体が融合タンパク質の中で連結される）。

【0326】

ｓＣＲ１変異体の二量体化または多量体化を達成する方法は当技術分野で公知であり、および／または本明細書に記載されており、例には、２つ以上のｓＣＲ１変異体の間の直接コンジュゲーションまたは間接結合（例えば、２つ以上のｓＣＲ１変異体の間のリンカーによる）が含まれる。一例では、二量体化または多量体化は、化学的コンジュゲーションによって（例えば、ジスルフィド結合またはシスチンノットによる）、または遺伝子融合によって形成される。

【0327】

一例では、２つ以上の同じｓＣＲ１変異体が融合される（すなわち、融合タンパク質として発現される）。

【0328】

一例では、２つ以上の異なるｓＣＲ１変異体が融合される（すなわち、融合タンパク質として発現される）。

【0329】

一例では、二量体化または多量体化されたｓＣＲ１変異体は、ｓＣＲ１変異体の間にリンカーを含む。

【0330】

一例では、本開示は、多量体化ドメインを含む２つ以上のｓＣＲ１変異体を含む多量体タンパク質を提供し、ここで、多量体化ドメインは相互作用して多量体タンパク質を形成する。

【0331】

一例では、多量体タンパク質中の各ｓＣＲ１変異体は１つのｓＣＲ１変異体を含む。別の例では、多量体タンパク質中の１つまたはそれ以上のｓＣＲ１変異体は２つ以上のｓＣＲ１変異体を含み、例えば、変異体は融合タンパク質の中で連結される。

【0332】

一例では、多量体化ドメインは免疫グロブリンヒンジドメインを含む。

【0333】

一例では、多量体化ドメインは、ロイシンジッパードメイン、シスチンノットまたは抗体Ｆｃ領域である。例えば、多量体化ドメインはロイシンジッパードメインである。好適なロイシンジッパーポリペプチドは当技術分野で公知であり、ｃ－Ｊｕｎおよびｃ－Ｆｏｓロイシンジッパードメインを含む。ロイシンジッパー融合は、参照により本明細書に組み入れられるＲｉｌｅｙ等、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．（１９９６）に記載される。別の例では、多量体化ドメインはシスチンノットである。例えば、シスチンノットは、３つ以上の混交したジスルフィド結合のコアドメインを含む長さが最高６０アミノ酸を含む。さらなる例では、多量体化ドメインは、抗体Ｆｃ領域（例えば、本明細書に記載される）である。

【0334】

一例では、多量体化ｓＣＲ１変異体は線状である。

【0335】

一例では、多量体化ｓＣＲ１変異体は環状である。例えば、多量体化されたｓＣＲ１変異体は、参照により本明細書に組み込まれるＰｏｐｐ，Ｍ．Ｗ．等ＰＮＡＳ（２０１１）に記載されているように、ソルターゼ酵素切断部位を含むことができる。

【0336】

一例では、本開示で使用するためのｓＣＲ１変異体は、少なくとも２つのシアル酸付加グリカン（例えば、二、三または四シアル酸付加グリカン）を含む。例えば、本明細書に記載されるいずれかの方法で使用するための組成物は、シアル酸付加ｓＣＲ１変異体グリコ型を含む。一例では、本明細書に記載されるいずれかの方法で使用するためのシアル酸付加ｓＣＲ１変異体グリコ型は、二、三または四シアル酸付加グリコ型を含む。少なくとも２つのシアル酸付加グリカン（例えば、二、三または四シアル酸付加グリカン）を含む変異体ｓＣＲ１グリコ型の生成方法は当業者に明らかになり、および／または本明細書に記載される。

【0337】

本開示のｓＣＲ１変異体の生物活性を決定する例示的方法は当業者に明らかになり、および／または本明細書に記載される。例えば、古典的、レクチンおよび／または第二経路の阻害活性を決定する方法は、本明細書に記載される。

【0338】

抗原結合性ドメインを含むタンパク質
本開示は、標的に結合して標的によるかそれを通したシグナル伝達を阻害する抗原結合性ドメインを含むタンパク質とコンジュゲートされるｓＣＲ１変異体を提供する。例えば、タンパク質は少なくともＶ_ＨおよびＶ_Ｌを含み、ここで、Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌは結合して抗原結合性ドメインを含むＦｖを形成する。

【0339】

一例では、抗原結合性ドメインは標的に結合するかまたは特異的に結合して、シグナル伝達を中和する。

【0340】

一例では、タンパク質はＧ－ＣＳＦまたはＧ－ＣＳＦＲに結合するかまたは特異的に結合して、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を中和する。例えば、タンパク質はＧ－ＣＳＦに結合するかまたは特異的に結合して、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を中和する。別の例では、タンパク質はＧ－ＣＳＦＲに結合するかまたは特異的に結合して、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を中和する。

【0341】

本開示は、血液凝固因子に結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質とコンジュゲートされるｓＣＲ１変異体も提供する。例えば、タンパク質は少なくともＶ_ＨおよびＶ_Ｌを含み、ここで、Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌは結合して抗原結合性ドメインを含むＦｖを形成する。

【0342】

一例では、抗原結合性ドメインは血液凝固因子に結合するかまたは特異的に結合して、その活性を中和する。例えば、血液凝固因子は第ＸＩＩ因子および／または活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）である。別の例では、血液凝固因子は第ＸＩ因子および／または活性化第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）である。

【0343】

一例では、タンパク質は、第ＸＩＩ因子および／もしくは活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）に結合するかもしくは特異的に結合し、第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性化に拮抗し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性に拮抗する。例えば、タンパク質は第ＸＩＩ因子に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩＩ因子および／またはＸＩＩａ因子の活性に拮抗する。例えば、タンパク質は第ＸＩＩ因子に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩＩ因子のＸＩＩａ因子への活性化を阻害する（すなわち、活性化に拮抗する）。

【0344】

別の例では、タンパク質は、第ＸＩ因子および／もしくは活性化第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）に結合するかもしくは特異的に結合し、第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性化に拮抗し、ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性に拮抗する。例えば、タンパク質は第ＸＩ因子に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩ因子および／またはＸＩａ因子の活性に拮抗する。例えば、タンパク質は第ＸＩ因子に結合するかまたは特異的に結合し、第ＸＩ因子のＸＩａ因子への活性化を阻害する（すなわち、活性化に拮抗する）。

【0345】

抗体および抗体断片
一例では、標的に結合して標的によるかそれを通したシグナル伝達を阻害する抗原結合性ドメインを含むタンパク質は、抗体または抗原結合性断片である。例えば、タンパク質は、Ｇ－ＣＳＦまたはＧ－ＣＳＦＲに結合する抗体または抗原結合性断片である。例えば、タンパク質は、Ｇ－ＣＳＦＲに結合する抗体または抗原結合性断片である。別の例では、タンパク質は、Ｇ－ＣＳＦに結合する抗体または抗原結合性断片である。

【0346】

一例では、血液凝固因子に結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質は、抗体または抗原結合性断片である。例えば、タンパク質は、第ＸＩＩ因子または活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）に結合する抗体または抗原結合性断片である。例えば、タンパク質は、第ＸＩＩ因子に結合する抗体または抗原結合性断片である。別の例では、タンパク質は、活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）に結合する抗体または抗原結合性断片である。

【0347】

抗体を作製する方法は当技術分野で公知であり、および／またはＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（編）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、（１９８８）に記載される。 一般的に、そのような方法では、場合により任意の好適であるか所望の担体、アジュバントまたは薬学的に許容される賦形剤で製剤化される、Ｇ－ＣＳＦＲもしくはＧ－ＣＳＦ（例えば、ｈＧ－ＣＳＦＲまたはｈＧ－ＣＳＦ）、または第ＸＩＩ因子（例えば、ｈＦＸＩＩ）もしくはその領域（例えば、細胞外ドメイン）、またはその免疫原性断片もしくはエピトープ、またはそれ（すなわち、免疫原）を発現および提示する細胞は、非ヒト動物、例えば、マウス、ニワトリ、ラット、ウサギ、モルモット、イヌ、ウマ、ウシ、ヤギまたはブタに投与される。免疫原は、鼻腔内、筋肉内、皮下、静脈内、皮内、腹腔内にまたは他の公知の経路によって投与することができる。

【0348】

モノクローナル抗体は、本開示によって企図される抗体の１つの例示的な形態である。用語「モノクローナル抗体」または「ｍＡｂ」は、同じ抗原（複数可）、例えば抗原の中の同じエピトープに結合することが可能である均一な抗体集団を指す。この用語は、抗体の供与源またはそれが作製される方法に関して限定されるものでない。

【0349】

ｍＡｂの生産のために、いくつかの公知技術、例えば上記の米国特許第４１９６２６５号またはＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８）に例示されるような方法のいずれか１つを使用することができる。

【0350】

あるいは、ＡＢＬ－ＭＹＣ技術（ＮｅｏＣｌｏｎｅ、Ｍａｄｉｓｏｎ ＷＩ ５３７１３、ＵＳＡ）がＭＡｂを分泌する細胞系を生産するために使用される（例えば、Ｌａｒｇａｅｓｐａｄａ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ。１９７巻：８５～９５頁、１９９６年に記載される）。

【0351】

抗体は、ディスプレイライブラリー、例えばファージディスプレイライブラリー、例えば米国特許第６３０００６４号および／または米国特許第５８８５７９３号に記載されるものをスクリーニングすることによって生産または単離することもできる。例えば、本発明者は、ファージディスプレイライブラリーから完全ヒト抗体を単離した。

【0352】

本開示の抗体は、合成抗体であってよい。例えば、抗体はキメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体または脱免疫化抗体である。

【0353】

一例では、本明細書に記載される抗体はキメラ抗体である。用語「キメラ」抗体は、重鎖および／または軽鎖の一部が特定の種（例えば、マウスのようなネズミ）に由来するかまたは特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応配列と同一であるか相同的であり、一方では鎖（複数可）の残りは別の種（例えば、ヒトなどの霊長類）に由来するか別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応配列と同一であるか相同的である抗体を指す。キメラ抗体を作製するための方法は、例えば、米国特許第４８１６５６７号；および米国特許第５８０７７１５号に記載される。

【0354】

本開示の抗体は、ヒト化されたかまたはヒトの抗体であってよい。

【0355】

用語「ヒト化抗体」は、非ヒト種からの抗体に由来する抗原結合性部位または可変領域を有し、残りの抗体構造はヒト抗体の構造および／または配列に基づくキメラ抗体のサブクラスを指すものと理解するべきである。ヒト化抗体では、抗原結合性部位は、ヒト抗体の可変領域中の適当なＦＲに接がれる非ヒト抗体からの相補性決定領域（ＣＤＲ）、およびヒト抗体からの残りの領域を一般的に含む。抗原結合性部位は野生型（すなわち、非ヒト抗体のものと同一）であるかまたは１つまたはそれ以上のアミノ酸置換によって改変されてもよい。一部の例では、ヒト抗体のＦＲ残基は対応する非ヒト残基で置き換えられる。

【0356】

非ヒト抗体またはその一部（例えば、可変領域）をヒト化する方法は、当技術分野で公知である。ヒト化は、米国特許第５２２５５３９号または米国特許第５５８５０８９号の方法に従って実行することができる。抗体をヒト化する他の方法は、排除されない。

【0357】

本明細書で使用される用語「ヒト抗体」は、可変領域（例えば、Ｖ_Ｈ、Ｖ_Ｌ）を、および場合によりヒトで、例えばヒト生殖系または体細胞で見出される配列に由来するかそれに対応する定常領域を有する抗体を指す。

【0358】

本開示で使用するための追加の例示的抗体またはその抗原結合性断片は本明細書に記載されるかまたは当技術分野で公知であり、以下を含む：
・合成ヒト化抗体またはその断片、例えば、新世界霊長類抗体可変領域からのＦＲを含む可変領域、および非新世界霊長類抗体可変領域からのＣＤＲを含む抗体（例えば、ＷＯ２００７０１９６２０に記載される方法によって作製される）。
・霊長類化抗体またはその断片、例えば、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）の免疫化の後に生成される抗体からの可変領域（複数可）を含む抗体（例えば、米国特許第６１１３８９８号に記載される方法によって作製される）。
・脱免疫化抗体またはその抗原結合性断片、例えば、１つまたはそれ以上のエピトープ、例えばＢ細胞エピトープまたはＴ細胞エピトープが除去され（すなわち、突然変異し）、それによって、対象が抗体またはタンパク質に対して免疫応答を立ち上げる可能性が低減された抗体および断片（例えば、ＷＯ２００００３４３１７およびＷＯ２００４１０８１５８に記載される）。
・二重特異性抗体またはその断片、例えば、異なる抗原またはエピトープに特異性を有する２種類の抗体または抗体断片（例えば、２つの半抗体）を含む抗体（例えば、米国特許第５７３１１６８号に記載される）。

【0359】

Ｇ－ＣＳＦまたはＧ－ＣＳＦＲに結合する例示的なヒト抗体が本明細書に記載され、Ｃ１．２およびＣ１．２Ｇおよび／またはその可変領域を含む。これらのヒト抗体は、非ヒト抗体と比較してヒトにおいて低減された免疫原性という利点を提供する。例示的な抗体は、参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１２１７１０５７に記載される。本開示の方法に従って使用するのに好適な他の抗体には、ＷＯ２０１８／１４５２０６に記載されるものが含まれる。

【0360】

例示的なヒト第ＸＩＩ因子抗体は本明細書に記載され、３Ｆ７、３Ｆ７Ｇおよび親和性成熟３Ｆ７および／またはその可変領域を含む。さらなる例示的な抗体は、抗ＦＸＩＩ抗体ガラダシマブである。これらのヒト抗体は、非ヒト抗体と比較してヒトにおいて低減された免疫原性という利点を提供する。例示的な抗体は、参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１３／０１４０９２、ＷＯ２００９／０６７６６０、ＷＯ２００９／１５４４６１、ＷＯ２０１０／０８０６２３、ＷＯ２０１３／１６７６６９、ＷＯ２０１６／２０７８５８、ＷＯ２０１７／０１５６１９、ＷＯ２０１７／１６２７９１、ＷＯ２０１７／１２７４６８およびＷＯ２０１７／２１８３７１に記載される。可変領域を含む追加の抗体およびタンパク質は、ＷＯ２００６／０６６８７８に、およびＲａｖｏｎ等、Ｂｌｏｏｄ ８６巻：４１３４～４３頁（１９９５）に記載される。

【0361】

抗原結合性ドメインを含むタンパク質
一部の例では、本開示のタンパク質は、単一ドメイン抗体（用語「ドメイン抗体」または「ｄＡｂ」と互換的に使用される）であるかまたはそれを含むタンパク質である。単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変領域の全体または一部を含む単一ポリペプチド鎖である。ある特定の例では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ；例えば、米国特許第６２４８５１６号を参照する）。

【0362】

一部の例では、本開示のタンパク質は、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディまたは高次タンパク質複合体、例えば、ＷＯ１９９８／０４４００１および／またはＷＯ１９９４／００７９２１に記載されるものであるかまたはそれらを含む。

【0363】

一部の例では、本開示のタンパク質はｓｃＦｖであるかまたはそれを含む。当業者は、ｓｃＦｖが単一ポリペプチド鎖の中のＶ_ＨおよびＶ_Ｌ領域、ならびにｓｃＦｖが抗原結合のための所望の構造を形成するのを可能にする（すなわち、単一ポリペプチド鎖のＶ_ＨおよびＶ_Ｌがお互いと結合してＦｖを形成するために）、Ｖ_ＨとＶ_Ｌの間のポリペプチドリンカーを含むことを知る。例えば、リンカーは１２を超えるアミノ酸残基を含み、（Ｇｌｙ_４Ｓｅｒ）_３がｓｃＦｖのためにより有利なリンカーの１つである。

【0364】

一部の例では、本開示のタンパク質は重鎖抗体であるかまたはそれを含む。重鎖抗体はそれらが重鎖を含むが軽鎖を含まない限り、抗体の多くの他の形と構造的に異なる。したがって、これらの抗体は「重鎖のみの抗体」とも呼ばれる。重鎖抗体は、例えば、ラクダおよび軟骨魚類で見出される（ＩｇＮＡＲとも呼ばれる）。ラクダからの重鎖抗体およびその可変領域、ならびにそれらの作製および／または単離および／または使用の方法の一般記載は、とりわけ以下の参考文献ＷＯ１９９４／０４６７８、ＷＯ１９９７／４９８０５およびＷＯ１９９７／４９８０５に見出される。軟骨魚類からの重鎖抗体およびその可変領域、ならびにそれらの作製および／または単離および／または使用の方法の一般記載は、とりわけＷＯ２００５／１１８６２９に見出される。

【0365】

他の抗体および抗体断片
本開示は、以下などの、他の抗体および抗体断片も企図する：
（ｉ）米国特許第５，７３１，１６８号に記載されている「キーホール」二重特異的タンパク質；
（ｉｉ）ヘテロコンジュゲートタンパク質、例えば米国特許第４，６７６，９８０号に記載されているもの；
（ｉｉｉ）化学的架橋剤、例えば米国特許第４，６７６，９８０号に記載されるものを使用して作製されるヘテロコンジュゲートタンパク質；および
（ｉｖ）Ｆａｂ_３（例えば、ＥＰ１９９３０３０２８９４に記載されるもの）。

【0366】

安定化タンパク質
本開示のタンパク質は、ＩｇＧ４定常領域または安定化ＩｇＧ４定常領域を含むことができる。用語「安定化ＩｇＧ４定常領域」は、Ｆａｂ腕交換、またはＦａｂ腕交換もしくは半抗体の形成を受ける傾向、または半抗体を形成する傾向を低減するように改変されたＩｇＧ４定常領域を意味すると理解される。「Ｆａｂ腕交換」は、ＩｇＧ４重鎖および結合している軽鎖（半分子）が別のＩｇＧ４分子からの重鎖－軽鎖対に換えられる、ヒトＩｇＧ４の一種のタンパク質改変を指す。したがって、ＩｇＧ４分子は２つの異なる抗原を認識する２つの異なるＦａｂ腕を獲得することができる（二重特異的分子をもたらす）。Ｆａｂ腕交換はｉｎ ｖｉｖｏで天然に存在し、精製された血液細胞または還元グルタチオンなどの還元剤によってｉｎ ｖｉｔｒｏで誘導することができる。「半抗体」は、ＩｇＧ４抗体が解離して各々単一の重鎖および単一の軽鎖を含有する２つの分子を形成するときに形成される。

【0367】

一例では、安定化ＩｇＧ４定常領域は、カバットのシステム（Ｋａｂａｔ等、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ ＤＣ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、１９８７年および／または１９９１年）によるヒンジ領域の２４１位のプロリンを含む。この位置は、ＥＵ番号付けシステムによるヒンジ領域の２２８位に対応する（Ｋａｂａｔ等、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ ＤＣ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、２００１年およびＥｄｅｌｍａｎ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．ＵＳＡ、６３巻、７８～８５頁、１９６９年）。ヒトＩｇＧ４では、この残基は一般的にセリンである。セリンのプロリンへの置換の後、ＩｇＧ４ヒンジ領域は配列ＣＰＰＣを含む。この点に関して、当業者は「ヒンジ領域」がＦｃおよびＦａｂ領域を連結し、抗体の２つのＦａｂ腕に移動性を付与する抗体重鎖定常領域の高プロリン部分であることを知る。ヒンジ領域は、重鎖間ジスルフィド結合に関与するシステイン残基を含む。それはカバットの番号付けシステムによるヒトＩｇＧ１のＧｌｕ２２６からＰｒｏ２４３に及ぶと一般的に規定される。他のＩｇＧアイソタイプのヒンジ領域は、同じ位置に重鎖間ジスルフィド（Ｓ－Ｓ）結合を形成する最初および最後のシステイン残基を置くことによって、ＩｇＧ１配列と整列させることができる（例えばＷＯ２０１０／０８０５３８を参照する）。

【0368】

コンジュゲーション
ｓＣＲ１変異体および抗原結合性ドメインを含むタンパク質のコンジュゲーションの方法は当業者に明らかになり、および／または本明細書に記載される。例えば本明細書に記載されるｓＣＲ１変異体と抗原結合性ドメインを含むタンパク質の間の直接的なコンジュゲーション、または間接結合（例えば、ｓＣＲ１変異体と抗原結合性ドメインを含むタンパク質の間のリンカーによる）を含む、コンジュゲーション（すなわち、結合）の全ての形態および方法が本開示によって企図される。一例では、コンジュゲートは化学的コンジュゲーションによって（例えば、アミン結合またはジスルフィド結合により）、または遺伝子融合によって形成される。

【0369】

一例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、標的に結合して標的によるかそれを通したシグナル伝達を阻害する抗原結合性ドメインを含むタンパク質とコンジュゲートされる。別の例では、本開示のｓＣＲ１変異体は、血液凝固因子に結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質とコンジュゲートされる。例えば、タンパク質はｓＣＲ１変異体に直接的または間接的に結合することができる（例えば、間接的結合の場合はリンカーを含むことができる）。

【0370】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、抗原結合性ドメインを含むタンパク質にアミン結合によってコンジュゲートされる。

【0371】

一例では、本開示は、ｓＣＲ１変異体および抗原結合性ドメインを含むタンパク質を含む融合タンパク質を提供する。例えば、抗原結合性ドメインを含むタンパク質は、ｓＣＲ１変異体のＮ末端、ｓＣＲ１変異体のＣ末端に、またはその任意の組合せで配置される。

【0372】

一例では、ｓＣＲ１変異体は、抗原結合性ドメインを含むタンパク質にリンカーを通してコンジュゲートされる。例えば、リンカーはペプチドリンカーである。

【0373】

一例では、リンカーはフレキシブルリンカーである。「フレキシブル」リンカーは、溶液中で固定された構造（二次または三次構造）を有しないアミノ酸配列である。したがって、そのようなフレキシブルリンカーは様々な立体配置を自由に採用する。本開示で使用するのに好適なフレキシブルリンカーは、当技術分野で公知である。本発明で使用するためのフレキシブルリンカーの例は、リンカー配列ＳＧＧＧＧＳ／ＧＧＧＧＳ／ＧＧＧＧＳまたは（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３である。フレキシブルリンカーは、ＷＯ１９９９／０４５１３２でも開示されている。

【0374】

リンカーは、結合性領域のその標的との相互作用を実質的に妨げない任意のアミノ酸配列を含むことができる。フレキシブルリンカー配列のための好ましいアミノ酸残基には、グリシン、アラニン、セリン、トレオニン、プロリン、リジン、アルギニン、グルタミンおよびグルタミン酸が限定されずに含まれる。

【0375】

結合性領域の間のリンカー配列は、５つ以上のアミノ酸残基を好ましくは含む。本開示によるフレキシブルリンカー配列は５つ以上の残基、好ましくは５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０または２５または３０またはそれ以上の残基からなる。本発明の非常に好ましい実施形態では、フレキシブルリンカー配列は５、７、１０、１３、１５、１６、２０または３０の残基からなる。

【0376】

一例では、フレキシブルリンカーは配列番号３１によるアミノ酸配列、すなわち、ＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＳ（ＧＳ１３）を有する。

【0377】

一例では、フレキシブルリンカーは配列番号３２によるアミノ酸配列、すなわち、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（ＧＳ１５）を有する。

【0378】

一例では、フレキシブルリンカーは配列番号３３によるアミノ酸配列、すなわち、ＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（ＧＳ１６）を有する。

【0379】

一例では、フレキシブルリンカーは配列番号５５によるアミノ酸配列、すなわち、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＧＳ（ＧＳ１６）を有する。

【0380】

一例では、フレキシブルリンカーは配列番号３４によるアミノ酸配列、すなわち、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（ＧＳ２０）を有する。

【0381】

一例では、フレキシブルリンカーは配列番号３５によるアミノ酸配列、すなわち、ＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＳ（ＧＳ３０）を有する。

【0382】

本開示のｓＣＲ１変異体にコンジュゲートすることができる抗原結合性ドメインを含む例示的なタンパク質、およびそのようなコンジュゲーションの方法は当技術分野で公知であり、本明細書に記載される。

【0383】

補体活性および／またはＧ－ＣＳＦ活性および／または第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａ活性および／または第ＸＩ因子／ＸＩａ活性を阻害する
本開示は、例えば、対象で補体活性を阻害する方法であって、対象に本開示の可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを投与することを含む方法を提供する。

【0384】

本開示は、例えば、対象でＧ－ＣＳＦ活性を阻害する方法であって、対象に本開示の可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを投与することを含む方法も提供する。

【0385】

本開示は、例えば、対象で補体活性およびＧ－ＣＳＦ活性を阻害する方法であって、対象に本開示の可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを投与することを含む方法も提供する。

【0386】

本開示は、例えば、対象で第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性化に拮抗する方法であって、対象に本開示の可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを投与することを含む方法も提供する。

【0387】

本開示は、例えば、対象で補体活性を阻害し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性化に拮抗する方法であって、対象に本開示の可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを投与することを含む方法も提供する。

【0388】

本開示は、例えば、対象で第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性化に拮抗する方法であって、対象に本開示の可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを投与することを含む方法も提供する。

【0389】

本開示は、例えば、対象で補体活性を阻害し、ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性化に拮抗する方法であって、対象に本開示の可溶性補体受容体１型（ｓＣＲ１）コンジュゲートを投与することを含む方法も提供する。

【0390】

本開示は、対象で疾患または状態を治療または予防する方法であって、対象に本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物を投与することを含む方法も提供する。一例では、本開示は、それを必要とする対象で疾患または状態を処置する方法を提供する。

【0391】

本開示は、対象で疾患または状態を治療または予防するための本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物の使用も提供する。

【0392】

一例では、本開示は、それを必要とする対象で疾患または状態を処置するための本開示のｓＣＲ１－抗Ｇ－ＣＳＦＲコンジュゲートの使用を提供する。

【0393】

一例では、本開示は、それを必要とする対象で疾患または状態を処置するための本開示のｓＣＲ１－抗第ＸＩＩ因子コンジュゲートの使用も提供する。別の例では、本開示は、それを必要とする対象で疾患または状態を処置するための本開示のｓＣＲ１－抗ＸＩＩａ因子コンジュゲートの使用を提供する。さらなる例では、本開示は、それを必要とする対象で疾患または状態を処置するための本開示のｓＣＲ１－抗第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａコンジュゲートの使用を提供する。

【0394】

一例では、本開示は、それを必要とする対象で疾患または状態を処置するための本開示のｓＣＲ１－抗第ＸＩ因子コンジュゲートの使用を提供する。別の例では、本開示は、それを必要とする対象で疾患または状態を処置するための本開示のｓＣＲ１－抗ＸＩａ因子コンジュゲートの使用を提供する。さらなる例では、本開示は、それを必要とする対象で疾患または状態を処置するための本開示のｓＣＲ１－抗第ＸＩ因子／ＸＩａ因子コンジュゲートの使用を提供する。

【0395】

一例では、本方法は古典経路、レクチン経路および／または第二補体経路において活性を阻害することを含む。例えば、本方法は、古典補体経路の活性化を阻害するために本開示のｓＣＲ１コンジュゲートを投与することを含む。別の例では、本方法は、レクチン経路の活性化を阻害するために本開示のｓＣＲ１コンジュゲートを投与することを含む。さらなる例では、本方法は、第二補体経路の活性化を阻害するために本開示のｓＣＲ１コンジュゲートを投与することを含む。

【0396】

一例では、本方法は外因性補体経路において活性を阻害することを含む。例えば、本方法は、外因性補体経路の活性化を阻害するために本開示のｓＣＲ１コンジュゲートを投与することを含む。

【0397】

一例では、疾患または状態は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害である。

【0398】

一例では、対象は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を患っている。補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、遺伝性であっても後天性であってもよい。

【0399】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、炎症性関節状態、炎症性関節炎、炎症性の目の状態、炎症性の肺の状態、炎症性神経学的状態、自己免疫性腸管障害、乾癬、がん（その血管新生を含む）またはその転移、固形臓器移植（例えば、肺および／または腎移植（抗体媒介拒絶を含む））、移植の前、その間または後の虚血再かん流損傷、遅延した移植機能、喘息およびその悪化形、好中球性皮膚症および好中球性皮膚病巣、再かん流による虚血性脳卒中、神経外傷性障害、体性外傷、虚血－再かん流損傷（心筋ＩＲＩ、腸管ＩＲＩ、肝臓ＩＲＩおよび／または膵臓ＩＲＩを含むＩＲＩ）、静脈、動脈または毛細管の血栓形成、心臓の血栓形成、接触媒介血栓炎症、ヒトまたは動物対象の血液を人工表面と接触させる間および／またはその後の血栓形成、間質性肺疾患、炎症、神経学的炎症性疾患、線維素溶解、血管新生、血栓炎症性疾患、ＦＸＩＩ／ＦＸＩＩ誘導キニン形成に関連した疾患、心房細動、急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）、急性四肢虚血、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ；または急性肺損傷）、ならびにループス腎炎（急性ループス腎炎または慢性ループス腎炎を含む）からなる群から選択される。

【0400】

一例では、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害は、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）、非定型的溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）、血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、血栓性微小血管障害、Ｃ３糸球体症、膜性増殖性糸球体腎炎（抗Ｔｈｙ１糸球体腎炎、抗ｃｏｎＡ散在性増殖性糸球体腎炎および／または受動ハイマン腎炎を含む）、および／またはギランバレー症候群、重症筋無力症（自己免疫性重症筋無力症、脱髄性アレルギー性脳脊髄炎、ＩｇＧ免疫複合体肺胞炎、逆受動アルチュス反応を含む）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ＩｇＡ腎症、自己免疫性溶血性貧血、天疱瘡（尋常性天疱瘡を含む）、類天疱瘡（水疱性類天疱瘡を含む）、抗リン脂質症候群、多発性外傷、血液透析、感染後ＨＵＳ、黄斑変性症、ＡＮＣＡ関連の血管炎、アテローム硬化症、気分障害、慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシー（ＣＩＤＰ）、アナフィラキシー、脳マラリア、皮膚筋炎、骨関節炎、認知症、緑内障、糖尿病性脈管症、心筋梗塞、抗糸球体基底膜（ＧＢＭ）腎炎（または、グッドパスチャー症候群）、自己免疫性てんかん、ヘルペス状皮膚炎、多発血管炎による好酸性肉芽腫症（ＥＧＰＡ；または、チャーグ－ストラウス症候群）、シェーグレン症候群およびシェーグレン症候群血管炎からなる群から選択される。

【0401】

補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の診断方法は当業者に容易に明らかになり、例としては、溶血性古典的補体経路（ＣＨ－５０）検査、溶血性第二補体経路（ＡＰ－５０）検査、免疫複合体疾患のためのスクリーニング、ループス検査のための反核血清学、尿検査および完全血球算定（ＣＢＣ）が含まれる。

【0402】

一例では、本方法は対象でＧ－ＣＳＦ活性を阻害することを含む。例えば、本方法は、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達経路の活性化を阻害するために本開示のｓＣＲ１コンジュゲートを投与することを含む。

【0403】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、好中球減少を誘導することなく対象で好中球の数を低減するのに十分な量で対象に投与される。

【0404】

一例では、本方法は対象で第ＸＩＩ因子および／またはＸＩＩａ因子活性を阻害することを含む。一例では、本方法は、第ＸＩＩ因子の活性化および／またはＸＩＩａ因子活性を阻害するために本開示のｓＣＲ１コンジュゲートを投与することを含む。例えば、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、第ＸＩＩ因子のＸＩＩａ因子への活性化を阻害する。

【0405】

一例では、本方法は、対象で第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性化に拮抗することを含む。

【0406】

一例では、本方法は対象で第ＸＩ因子および／またはＸＩａ因子活性を阻害することを含む。一例では、本方法は、第ＸＩ因子および／またはＸＩａ因子の活性化を阻害するために本開示のｓＣＲ１コンジュゲートを投与することを含む。例えば、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、第ＸＩ因子のＸＩａ因子への活性化を阻害する。

【0407】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、ヒトＸＩＩａ因子のアミド溶解活性を阻害するのに十分な量で対象に投与される。

【0408】

一例では、対象は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を起こす危険がある。男女を問わず補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を起こす危険が対照集団より高い場合、対象は危険がある。対照集団は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を患っていないかまたはその家族病歴を有する一般集団（例えば、年齢、性別、人種および／または民族性をマッチさせた）から無作為に選択される１人またはそれ以上の対象を含むことができる。補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害に関連した「危険因子」が対象と関連していることが見出される場合、対象は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の危険があるとみなすことができる。危険因子は、例えば対象の集団の統計的または疫学的研究を通して、所与の障害に関連した任意の活性、形質、事象または特性を含むことができる。したがって、根底にある危険因子を特定した研究が対象を具体的に含まなかったとしても、対象は補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の危険があると分類することができる。

【0409】

一例では、対象は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を起こす危険があり、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の症状の発生の前か後にｓＣＲ１コンジュゲートが投与される。一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートは、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の症状の発生の前に投与される。一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートは、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の症状の発生の後に投与される。一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、危険のある対象で補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の症状の１つまたはそれ以上を軽減または低減する用量で投与される。

【0410】

本開示の方法は、対象の補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害のいかなる形態にも容易に適用することができる。

【0411】

一例では、本開示の方法は、当技術分野で知られている、および／または本明細書に記載される補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の任意の症状を軽減する。

【0412】

当業者に明らかになるように、対象における補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の症状の「軽減」は、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を同じく患っているが、本明細書に記載される方法による処置を受けていない別の対象と比較される。これは、２人の対象の並んだ比較を必ずしも必要としない。むしろ、集団データに頼ることができる。例えば、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害を患っている、本明細書に記載される方法による処置を受けていない対象の集団（場合により、処置対象と、例えば、年齢、体重、人種が類似した対象の集団）が調査され、その平均値は本明細書に記載される方法で処置された対象または対象の集団の結果と比較される。

【0413】

臓器移植によるかまたはそれに関連した虚血－再かん流損傷である、補体媒介障害、好中球媒介障害および／または血液凝固障害の場合、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートまたはｓＣＲ１コンジュゲートを含む組成物は、移植の前、その間または後に投与することができる。一部の例では、ｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物は、臓器移植ドナーへ投与される。他の例では、ｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物は、臓器移植レシピエントである対象へ投与される。一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物は、臓器移植の前に採取された臓器へｅｘ ｖｉｖｏで投与される。例えば、採取された臓器は、移植の前にｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物を含む溶液をかん流または注入することができる。

【0414】

一例では、臓器移植は固形臓器移植である。例えば、固形臓器移植は肺移植である。別の例では、固形臓器移植は腎移植である。

【0415】

上述から、本開示が臓器移植の方法、または臓器移植の結果を向上させる方法、または移植臓器の機能を向上させる方法、または遅延した移植機能を阻止する方法を提供することが当業者に明らかになり、本方法は、臓器の収集の前に臓器移植ドナーにｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物を投与すること；臓器を収集して、臓器を臓器移植レシピエントに移植することを含む。

【0416】

本開示は、臓器移植レシピエントにおける臓器機能を向上させるために臓器ドナーからの移植臓器を調製する方法であって、臓器の収集の前に臓器ドナーにｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物を投与することを含む方法も提供する。

【0417】

本開示は、臓器移植拒絶を予防する方法であって、臓器の収集の前に臓器ドナーにｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物を投与すること、臓器を収集すること、および臓器を臓器移植レシピエントに移植することを含む方法をさらに提供する。

【0418】

一部の例では、本方法は、臓器移植レシピエントにｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物を投与することをさらに含む。例えば、ｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物は移植の前に、または臓器移植時点で（すなわち、移植の間に）臓器移植レシピエントに投与される。

【0419】

本開示は臓器移植の方法、または臓器移植の結果を向上させる方法、または移植臓器の機能を向上させる方法、または遅延した移植機能を阻止する方法も提供し、本方法は、臓器移植の前に臓器移植レシピエントにｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物を投与すること、次に臓器を臓器移植レシピエントに移植することを含む。

【0420】

一例では、臓器移植ドナーは脳死状態である。例えば、臓器ドナーは生命維持のおかげで生きているが、脳死状態である。

【0421】

本開示の一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物は再かん流の前に投与され、例えば、臓器移植の場合、ｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物は移植臓器の再かん流の前に臓器移植レシピエントに投与される（例えば、ｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物は移植の前に、または移植の間であるが再かん流の前に投与される）。

【0422】

脳死ドナーへの投与の場合、ｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物は、脳死と臓器収集の間のいかなるときでも投与することができる。一部の例では、ｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物は、臓器移植の前に採取された臓器へｅｘ ｖｉｖｏで投与される。例えば、採取された臓器は、移植の前にｓＣＲ１コンジュゲートまたは組成物を含む溶液をかん流または注入することができる。

【0423】

ｓＣＲ１コンジュゲートの活性を検定する
本開示のｓＣＲ１変異体および／またはコンジュゲートは、例えば下記のように生物活性について容易にスクリーニングされる。

【0424】

補体活性を測定する
一例では、補体活性は酵素免疫測定法（例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ（登録商標）補体アッセイキット）を使用して測定される。例えば、補体阻害活性は、補体活性化の間に産生される抗原またはエピトープに特異的な標識抗体を使用して決定される（例えば、Ｃ５ｂ－９またはＣ５ｂ－Ｃ９に存在するエピトープ）。一例では、マイクロタイタープレートのウェルは、古典的、レクチンまたは第二経路の特異的活性化因子でコーティングされる。別の例では、ｓＣＲ１変異体および／またはコンジュゲートは、正常なヒト血清および適当なアッセイ希釈剤（すなわち、古典的、レクチンまたは第二経路の特異的活性化を確保するための適当な構成成分を含む希釈剤）とインキュベートされ、古典的、レクチンまたは第二経路の特異的活性化因子でコーティングされたマイクロタイタープレートウェルに加えられ、形成されるＣ５ｂ－９複合体の量がＣ５ｂ－９に対する特異的アルカリ性ホスファターゼ標識抗体を使用して検出される。一例では、産生される補体活性化生成物（すなわち、Ｃ５ｂ－９）の量は、補体経路の機能的活性に比例する。一例では、半最大阻害濃度（すなわち、ＩＣ_５０）が決定される。例えば、ｓＣＲ１変異体のＩＣ_５０が決定され、配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１のＩＣ_５０と比較される。別の例では、ｓＣＲ１コンジュゲートのＩＣ_５０が決定され、配列番号２に示す配列を含むｓＣＲ１を含むｓＣＲ１コンジュゲートのＩＣ_５０と比較される。

【0425】

別の例では、補体阻害活性は、溶血アッセイ（例えば、古典的経路（すなわち、ＣＨ５０）および第二経路（ＡｐＨ５０）阻害アッセイ）を使用して決定される。ＣＨ５０アッセイは、血清中の全古典的補体活性を測定するための方法である。この検査は、抗体感作赤血球を古典的補体経路の活性化因子として、およびヒト血清を補体源として使用する溶解アッセイである。パーセント溶血は、例えば、分光計を使用して決定することができる。ＣＨ５０アッセイは末端補体複合体（ＴＣＣ）形成の間接的な尺度を提供するが、その理由はＴＣＣ自身が測定される溶血の役割を直接的に担うからである。このアッセイは周知である。簡潔には、古典的補体経路の阻害を調査するために、前もって希釈されたヒト血清を連続希釈のｓＣＲ１変異体および／またはコンジュゲートと一緒にマイクロアッセイウェルの中でプレインキュベートする。次に、抗体感作赤血球（例えば、ウサギ抗ヒツジ抗体で感作させたヒツジ赤血球）を加える。遠心分離の後、分光計を使用して遊離ヘモグロビンを上清中で測定する。遊離ヘモグロビンの減少は、ＴＣＣ媒介赤血球溶解の阻害を反映する。ヒト血清（１００％溶解試料）だけとインキュベートした赤血球と比較してｓＣＲ１媒介阻害を次に計算する。

【0426】

補体阻害は、例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏザイモサンアッセイ、赤血球の溶解のためのアッセイ、抗体または免疫複合体活性化アッセイ、第二経路活性化アッセイおよびレクチン経路活性化アッセイを含む、当技術分野で公知であるいずれかの方法に基づいて評価することもできる。

【0427】

Ｇ－ＣＳＦＲおよびその突然変異体、第ＸＩＩ因子および／またはＸＩＩａ因子および／または第ＸＩ因子および／またはＸＩａ因子への結合
本明細書の開示から、本開示の一部のタンパク質はｈＧ－ＣＳＦＲのリガンド結合性ドメインに、およびｈＧ－ＣＳＦＲのリガンド結合性ドメインの特異的突然変異形（例えば、ある特定の点突然変異のないかまたはある配列番号４８）に結合し、および／またはヒトおよびカニクイザルのＧ－ＣＳＦＲの両方に結合することが当業者に明らかになる。

【0428】

本明細書の開示から、本開示の一部のタンパク質は、第ＸＩＩ因子および／もしくは活性化第ＸＩＩ因子（すなわち、ＸＩＩａ因子）および／または第ＸＩ因子および／もしくは活性化第ＸＩ因子（すなわち、ＸＩａ因子）のリガンド結合性ドメインに結合することも当業者に明らかになる。

【0429】

タンパク質への結合を調査する方法は、例えば、スコープス（典拠：Ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ ｐｒａｃｔｉｃｅ、第３版、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ、１９９４年）に記載されるように当技術分野で公知である。そのような方法は、タンパク質を標識し、それを固定化化合物と接触させることを一般的に含む。非特異的結合タンパク質を除去するために洗浄した後、標識の、および結果として結合したタンパク質の量を検出する。当然ながら、タンパク質を固定化し、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を阻害するかまたは第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子に結合する化合物を標識することができる。パニングタイプのアッセイを使用することもできる。あるいは、またはさらに、表面プラズモン共鳴アッセイを使用することもできる。

【0430】

上記のアッセイは、本開示のタンパク質のｈＧ－ＣＳＦＲもしくはそのリガンド結合性ドメイン（例えば、配列番号４８）もしくはその突然変異形、または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子もしくはそのリガンド結合性ドメインへの結合のレベルを検出するために使用することもできる。結合レベルを検出する方法は当業者に明らかになり、および／または本明細書に記載される。例えば、結合レベルはバイオセンサーを使用して決定される。

【0431】

エピトープマッピング
別の例では、本明細書に記載されるタンパク質が結合するエピトープがマッピングされる。エピトープマッピング方法は、当業者に明らかになる。例えば、目的のエピトープ、例えば１０～１５アミノ酸を含むペプチドを含む、ｈＧ－ＣＳＦＲ配列またはその領域にわたる一連の重複ペプチドが作製される。タンパク質は次に各ペプチドと接触させ、それが結合するペプチド（複数可）を決定する。これは、タンパク質が結合するエピトープを含むペプチド（複数可）の決定を可能にする。複数の不連続ペプチドにタンパク質が結合する場合、タンパク質はコンホメーション依存エピトープに結合することができる。

【0432】

あるいは、またはさらに、例えばアラニンスキャン突然変異誘発によってｈＧ－ＣＳＦＲ中のアミノ酸残基を突然変異させ、タンパク質結合を低減または阻止する突然変異を決定する。タンパク質の結合を低減または阻止するいかなる突然変異も、タンパク質が結合するエピトープの中に入る可能性がある。

【0433】

さらなる方法が本明細書に例示され、ｈＧ－ＣＳＦＲまたはその領域を本開示の固定化タンパク質に結合させ、生じた複合体をプロテアーゼで消化することを含む。固定化タンパク質に結合したままのペプチドを次に単離し、それらの配列を決定するために例えば質量分析を使用して分析する。

【0434】

さらなる方法は、ｈＧ－ＣＳＦＲまたはその領域中の水素を重陽子へ変換し、生じたタンパク質を本開示の固定化タンパク質に結合させることを含む。重陽子を次に水素に戻し変換し、ｈＧ－ＣＳＦＲまたはその領域を単離し、酵素で消化し、本明細書に記載されるタンパク質の結合によって水素への変換から保護されていただろう重陽子を含む領域を特定するために、例えば質量分析を使用して分析する。

【0435】

場合により、ｈＧ－ＣＳＦＲまたはそのエピトープに対するタンパク質の解離定数（Ｋｄ）が決定される。ｈＧ－ＣＳＦＲ結合性タンパク質の「Ｋｄ」または「Ｋｄ値」は、一例では、放射標識または蛍光標識ｈＧ－ＣＳＦＲ結合アッセイによって測定される。このアッセイは、非標識のｈＧ－ＣＳＦＲの滴定系列の存在下で、タンパク質を標識Ｇ－ＣＳＦＲの最小濃度と平衡させる。未結合のｈＧ－ＣＳＦＲを除去するために洗浄した後、タンパク質のＫｄの指標となる標識の量が決定される。

【0436】

別の例により、ＫｄまたはＫｄ値は、表面プラズモン共鳴アッセイを使用して、例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ表面プラズモン共鳴（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）を固定化ｈＧ－ＣＳＦＲまたはその領域と使用して測定される。

【0437】

一部の例では、Ｃ１．２またはＣ１．２Ｇと類似のＫｄまたはより高いＫｄを有するタンパク質が選択されるが、その理由はそれらがｈＧ－ＣＳＦＲへの結合に関して競合する可能性があるからである。

【0438】

第ＸＩＩ因子／ＸＩＩａおよび／または第ＸＩ因子／ＸＩａの活性を測定する
タンパク質の阻害活性を調査する方法は当技術分野で公知であり、例としては発色アッセイが含まれる。阻害活性を測定するための発色アッセイは当技術分野で公知である。

【0439】

一例では、アッセイ緩衝剤をＸＩＩａ因子および／またはＸＩａ因子とプレミックスする。本開示のコンジュゲートが加えられ、続いて発色基質が加えられる。発色反応の停止の後、コンジュゲートの阻害活性が調査される。

【0440】

競合的結合を決定する
抗体Ｃ１．２、Ｃ１．２Ｇ、３Ｆ７および／または３Ｆ７Ｇ（または、本明細書に記載される任意の他の抗体）の結合を競合的に阻害するタンパク質を決定するアッセイは、当業者に明らかになる。例えば、Ｃ１．２、Ｃ１．２Ｇ、３Ｆ７または３Ｆ７Ｇは、検出可能な標識、例えば蛍光標識または放射性標識にコンジュゲートされる。標識抗体および試験タンパク質を次に混合し、ｈＧ－ＣＳＦＲもしくはその領域（例えば、配列番号４８を含むポリペプチド）または第ＸＩＩ因子もしくはその領域、またはそれを発現する細胞と接触させる。標識Ｃ１．２またはＣ１．２Ｇ（または、３Ｆ７もしくは３Ｆ７Ｇ）のレベルを次に決定し、標識抗体をタンパク質の不在下でｈＧ－ＣＳＦＲ（または、第ＸＩＩ因子）、領域または細胞と接触させたときに決定されるレベルと比較する。標識Ｃ１．２またはＣ１．２Ｇ（または、３Ｆ７もしくは３Ｆ７Ｇ）のレベルがタンパク質の不在と比較して試験タンパク質の存在下で低減される場合、タンパク質は、ｈＧ－ＣＳＦＲへのＣ１．２またはＣ１．２Ｇ（または、第ＸＩＩ因子への３Ｆ７または３Ｆ７Ｇ）の結合を競合的に阻害するとみなされる。

【0441】

場合により、試験タンパク質は、Ｃ１．２またはＣ１．２Ｇへの異なる標識にコンジュゲートされる。この代わりの標識化は、ｈＧ－ＣＳＦＲまたはその領域または細胞への試験タンパク質の結合レベルの検出を可能にする。

【0442】

場合により、試験タンパク質は、３Ｆ７または３Ｆ７Ｇへの異なる標識にコンジュゲートされる。この代わりの標識化は、第ＸＩＩ因子またはその領域または細胞への試験タンパク質の結合レベルの検出を可能にする。

【0443】

別の例では、ｈＧ－ＣＳＦＲ、領域または細胞をＣ１．２またはＣ１．２Ｇと接触させる前に、タンパク質をｈＧ－ＣＳＦＲもしくはその領域（例えば、配列番号４８を含むポリペプチド）またはそれを発現する細胞に結合させる。タンパク質の不在下と比較したタンパク質の存在下での結合したＣ１．２またはＣ１．２Ｇの量の低減は、タンパク質がｈＧ－ＣＳＦＲへのＣ１．２またはＣ１．２Ｇの結合を競合的に阻害することを示す。標識タンパク質を使用し、最初にＣ１．２またはＣ１．２ＧをＧ－ＣＳＦＲに結合させることによって、逆アッセイを実行することもできる。この場合、Ｃ１．２またはＣ１．２Ｇの不在下と比較したＣ１．２またはＣ１．２Ｇの存在下でのｈＧ－ＣＳＦＲに結合した標識タンパク質の量の低減は、タンパク質がｈＧ－ＣＳＦＲへのＣ１．２またはＣ１．２Ｇの結合を競合的に阻害することを示す。

【0444】

例えば本明細書に記載されるように、上述のアッセイのいずれも、ｈＧ－ＣＳＦＲの突然変異形および／または配列番号４８および／またはＣ１．２またはＣ１．２Ｇが結合するｈＧ－ＣＳＦＲのリガンド結合性領域で実行することができる。

【0445】

別の例では、第ＸＩＩ因子、領域または細胞を３Ｆ７または３Ｆ７Ｇと接触させる前に、タンパク質を第ＸＩＩ因子またはその領域またはそれを発現する細胞に結合させる。タンパク質の不在下と比較したタンパク質の存在下での結合した３Ｆ７または３Ｆ７Ｇの量の低減は、タンパク質が第ＸＩＩ因子への３Ｆ７または３Ｆ７Ｇの結合を競合的に阻害することを示す。標識タンパク質を使用し、最初に３Ｆ７または３Ｆ７Ｇを第ＸＩＩ因子に結合させることによって、逆アッセイを実行することもできる。この場合、３Ｆ７または３Ｆ７Ｇの不在下と比較した３Ｆ７または３Ｆ７Ｇの存在下での第ＸＩＩ因子に結合した標識タンパク質の量の低減は、タンパク質が第ＸＩＩ因子への３Ｆ７または３Ｆ７Ｇの結合を競合的に阻害することを示す。

【0446】

Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達の阻害を決定する
本開示の一部の例では、ｓＣＲ１コンジュゲート（例えば、抗原結合性ドメインを含むタンパク質にコンジュゲートしたｓＣＲ１変異体）は、ｈＧ－ＣＳＦＲシグナル伝達を中和することが可能である。

【0447】

受容体を通してリガンドのシグナル伝達を中和する能力を調査するために、様々なアッセイが当技術分野で公知である。

【0448】

一例では、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を阻害するタンパク質は、ｈＧ－ＣＳＦＲへのＧ－ＣＳＦの結合を低減または阻止する。これらのアッセイは、標識Ｇ－ＣＳＦおよび／または標識タンパク質を使用して、本明細書に記載される競合結合アッセイとして実行することができる。

【0449】

一例では、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を阻害するタンパク質を含むｓＣＲ１コンジュゲートは、ＣＤ３４^＋骨髄細胞をＧ－ＣＳＦの存在下で培養したときのＣＦＵ－Ｇの形成を低減する。そのようなアッセイでは、ＣＤ３４^＋骨髄細胞は、試験化合物（例えば、Ｇ－ＣＳＦＲに結合する抗原結合性ドメインを含むタンパク質にコンジュゲートされたｓＣＲ１）の存在下または不在下で、Ｇ－ＣＳＦ（例えば、細胞培養培地１ｍｌにつき約１０ｎｇ）および、場合により幹細胞因子（例えば、細胞培養培地１ｍｌにつき約１０ｎｇ）の存在下で半固体細胞培養培地で培養される。顆粒球クローン（ＣＦＵ－Ｇ）が形成するのに十分な時間の後、クローンまたはコロニーの数を決定する。化合物の不在下と比較した化合物の存在下でのコロニー数の低減は、化合物がＧ－ＣＳＦシグナル伝達を中和することを示す。

【0450】

さらなる例では、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を阻害するタンパク質を含むｓＣＲ１コンジュゲートは、Ｇ－ＣＳＦの存在下で培養されるｈＧ－ＣＳＦＲを発現する細胞（例えば、ＢａＦ３細胞）の増殖を低減する。細胞は、Ｇ－ＣＳＦ（例えば、０．５ｎｇ／ｍｌ）の存在下、および試験化合物（例えば、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を阻害するタンパク質にコンジュゲートされたｓＣＲ１変異体）の存在下または不在下で培養される。細胞増殖を調査する方法は当技術分野で公知であり、例としてはＭＴＴ還元およびチミジン組込みが含まれる。化合物の不在下で観察されるレベルと比較して増殖レベルを低減する化合物は、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を中和するとみなされる。

【0451】

さらなる例では、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を阻害するｓＣＲ１コンジュゲートは、Ｇ－ＣＳＦ投与の後のｉｎ ｖｉｖｏでの造血幹細胞および／または内皮前駆体細胞の動員を低減し、および／または、例えばＧ－ＣＳＦ投与の後のｉｎ ｖｉｖｏにおける好中球数を低減する（しかし、これは必須でない）。例えば、化合物（例えば、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を阻害するタンパク質にコンジュゲートされたｓＣＲ１変異体）は、場合によりＧ－ＣＳＦまたはその改変形（例えば、ペグ化Ｇ－ＣＳＦまたはフィルグラスチム）の投与の前、そのとき、またはその後に投与される。造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４および／またはＴｈｙ１を発現する）および／または内皮前駆体細胞（例えば、ＣＤ３４およびＶＥＧＦＲ２を発現する）および／または好中球（形態学的に特定された、および／または例えばＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ３１および／またはＣＤ８８を発現する）の数を調査する。化合物の不在下で観察されるレベルと比較して細胞（複数可）のレベルを低減する化合物は、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を中和するとみなされる。一例では、Ｇ－ＣＳＦシグナル伝達を阻害する化合物は、好中球減少を誘導することなしに好中球の数を低減する。

【0452】

ＦＸＩＩａアミド溶解活性
本開示に包含される一部のコンジュゲートは、ヒトＸＩＩａ因子のアミド溶解活性を阻害する。本開示のコンジュゲートのアミド溶解活性を決定する方法は当業者に明らかになり、および／または本明細書に記載される。

【0453】

一例では、ＦＸＩＩａアミド溶解活性のレベルを決定するために、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイが使用される。例えば、アミド溶解活性は、本開示のコンジュゲートおよび緩衝剤の存在下でのＦＸＩＩの切断のアッセイによって測定することができる。例えば、ＦＸＩＩは本開示のコンジュゲートまたは対照の存在下または不在下でインキュベートされる。インキュベーションおよび検出基質の添加の後、アミド溶解活性が光学密度の変化（すなわち、色変化）として分光測光法で決定される。アミド溶解活性を効果的に阻害することが見出されるタンパク質は、ＦＸＩＩ活性を阻害するタンパク質として特定される。

【0454】

半減期を決定する
本開示に包含される一部のコンジュゲートは向上した半減期を有し、例えば、未改変のコンジュゲートと比較してそれらの半減期を延長するように改変される。向上した半減期を有するタンパク質を決定する方法は、当業者に明らかになる。

【0455】

例えば、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合するコンジュゲートの能力が調査される。この方法により、本開示のコンジュゲートのｉｎ ｖｉｖｏ半減期は、ヒトＦｃＲｎトランスジェニックマウス（例えば、Ｂ６．Ｃｇ－Ｆｃｇｒｔｔｍ１Ｄｃｒ Ｔｇ（ＦＣＧＲＴ）３２Ｄｃｒ／ＤｃｒＪ）で測定することができる。例えば、コンジュゲートおよび様々な時点で収集された血漿をマウスに静脈内注射する。血液を、例えば血液８部クエン酸緩衝液２部の比でクエン酸緩衝液と混合する。ヒトｓＣＲ１の血漿レベルを、抗ヒトＣＤ３５ ＥＬＩＳＡで測定する。標準の統計式を使用して、平均滞留時間（ＭＲＴ）および曲線下面積（ＡＵＣ）を計算する。この点に関して、ＦｃＲｎへの結合親和性の増加は、分子の血清半減期を増加させた（例えば、Ｋｉｍ等、Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２４巻：２４２９頁、１９９４年を参照する）。

【0456】

本開示のコンジュゲートの半減期は、薬物動態学的研究によって、例えば、Ｋｉｍ等、Ｅｕｒ Ｊ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２４巻：５４２頁、１９９４年、によって記載される方法によって測定することもできる。この方法により、放射標識タンパク質をマウスに静脈内注射し、その血漿濃度を、時間の関数として周期的に、例えば、注射の３分後から７２時間後に測定する。このように得られるクリアランス曲線は二相性、すなわちアルファ相およびベータ相であるべきである。タンパク質のｉｎ ｖｉｖｏ半減期の決定のために、ベータ相のクリアランス速度を計算し、野生型または未改変タンパク質のそれと比較する。

【0457】

医薬組成物および処置方法
好適には、投与のための組成物または方法では、当技術分野で理解されているように、本開示のｓＣＲ１コンジュゲート（すなわち、抗原結合性ドメインを含むタンパク質にコンジュゲートされるｓＣＲ１変異体）は薬学的に許容される担体と組み合わされる。したがって、本開示の１つの例は、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートを薬学的に許容される担体と組み合わせて含む組成物（例えば、医薬組成物）を提供する。

【0458】

一般用語では、「担体」は、任意の対象、例えばヒトに安全に投与することができる、固形もしくは液体のフィラー、結合剤、希釈剤、封入物質、乳化剤、湿潤剤、溶媒、懸濁剤、コーティングまたは滑沢剤を意味する。特定の投与経路によって、当技術分野で公知である様々な許容される担体、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．Ｎ．Ｊ．ＵＳＡ、１９９１年）に記載されているものを使用することができる。

【0459】

本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、予防的または治療的処置のための非経口、トピカル、経口または局所の投与、噴霧器投与、クモ膜下投与、または経皮投与のために有益である。一例では、ｓＣＲ１コンジュゲートは非経口的に、例えば皮下または静脈内に投与される。例えば、ｓＣＲ１コンジュゲートは静脈内投与される。

【0460】

投与されるｓＣＲ１コンジュゲートの製剤は、選択される投与経路および製剤（例えば、溶液、乳濁液、カプセル）によって異なる。投与される適当な医薬組成物は、生理的に許容される担体で調製することができる。溶液または乳濁液の場合、好適な担体には、例えば、食塩水および緩衝媒体を含む水性またはアルコール性／水溶液、乳濁液または懸濁液が含まれる。非経口ビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、リンガーブドウ糖、ブドウ糖および塩化ナトリウム、乳酸加リンガー液、または不揮発性油を含めることができる。水、緩衝水、緩衝食塩水、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール）、ブドウ糖溶液、および例えばグリシンまたはプロリンを含む任意のアミノ酸を含む、様々な適当な水性担体が当業者に公知である。静脈内ビヒクルには、様々な添加剤、保存剤または流体、栄養素または電解質補液を含めることができる（一般的に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、第１６版、Ｍａｃｋ編１９８０年を参照する）。場合により組成物は、生理的状態に近づけるために必要に応じて薬学的に許容される補助物質、例えばｐＨ調整および緩衝剤、ならびに毒性調整剤、例えば酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウムおよび乳酸ナトリウムを含有することができる。組成物は液体段階で保存することができるか、または当技術分野で公知である凍結乾燥および再構成技術により、保存のために凍結乾燥させ、使用前に好適な担体で再構成することができる。

【0461】

本開示の方法は、本開示によるｓＣＲ１コンジュゲートの、補体活性および／もしくはＧ－ＣＳＦ活性を阻害するための、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性化に拮抗するための、または補体媒介障害、好中球媒介障害および／もしくは血液凝固障害の予防もしくは治療のための別の治療的有効薬剤の投与と一緒の同時投与も含むことができる。

【0462】

一例では、本開示のｓＣＲ１コンジュゲートは、補体活性を阻害するためにまたは補体媒介障害を予防もしくは治療するために現在使用されているかまたは開発中である、少なくとも１つの追加の公知の化合物または治療タンパク質と併用される。補体媒介障害の処置で現在使用されている化合物は当技術分野で公知であり、Ｃ５およびその活性型（Ｃ５ａ）に対する抗体、例えば、エクリズマブ、ＢｅｒｉｎｅｒｔヒトＣ１エステラーゼ阻害剤、ヒトＣ１エステラーゼ阻害剤、Ｒｕｃｏｎｅｓｔ組換えＣ１エステラーゼ阻害剤、ＣｉｎｒｙｚｅヒトＣ１エステラーゼ阻害剤、抗ヒトＭＡＳＰ－２モノクローナル抗体、ＡＰＬ－２ Ｃ３阻害ペプチド、ラムパリズマブ、ＴＮＴ００９抗Ｃ１ｓ抗体が含まれる。追加の化合物は、Ｒｅｉｓ等、Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｄｅｃ；１６１巻（２号）：２２５～２４０頁、２０１５年、に記載される。好中球媒介障害の処置で現在使用されている化合物は当技術分野で公知であり、例としては、抗炎症化合物、免疫調節薬または免疫抑制薬、コルチコステロイド（例えばグルココルチコイド、プレドニゾン、プレドニゾロン、ベクロメタゾン、ブデソニド、シクレソニドまたはフルチカゾン）、メトトレキセート、シクロホスファミド、ベータ２アゴニスト（例えば、サルブタモール、硫酸テルブタリン、フォルモテロール、ビランテロールまたはサルメテロール）、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト（例えば、モンテルカスト）、ムスカリン様アンタゴニスト（例えば、イプラトロピウムブロミド）、テオフィリン（例えば、アミノフィリン）、硫酸マグネシウム、肥満細胞安定剤（例えば、クロモグリク酸ナトリウムまたはネドクロミル）、抗ＩＬ－５抗体（例えば、メポリズマブ）、抗ＩｇＥ抗体（例えば、オマリズマブ）、抗ＩＬ－１７Ａ抗体（例えば、セクキヌマブ）、抗ＣＤ２０抗体（例えば、リツキシマブまたはオファツムマブ）、抗ＣＤ２２抗体（例えば、エプラツズマブ）、抗ＴＮＦ抗体（例えば、インフリキシマブまたはアダリムマブまたはゴリムマブ）または可溶性ＴＮＦ受容体（例えば、エタナーセプト）、およびＣＴＬＡ－４アンタゴニスト（例えば、アバタセプト、ＣＴＬＡ４－Ｉｇ）が含まれる。

【0463】

上述のものから明らかになるように、本開示は対象の同時治療処置の方法であって、それを必要とする対象に第１の薬剤および第２の薬剤の有効量を投与することを含み、ここで第１の薬剤は本開示のｓＣＲ１コンジュゲートであり、第２の薬剤も補体活性および／もしくはＧ－ＣＳＦ活性を阻害するための、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性化に拮抗するための、または補体媒介障害、好中球媒介障害および／もしくは血液凝固障害の予防もしくは治療のためのものである方法を提供する。

【0464】

本明細書で使用されるように、「同時治療処置」という語句におけるような「同時」という用語は、第２の薬剤の存在下で第１の薬剤を投与することを含む。同時治療処置方法は、第１、第２、第３またはさらなる薬剤が同時投与される方法を含む。同時治療処置方法は、第１またはさらなる薬剤が、第２またはさらなる薬剤の存在下で投与される方法も含み、ここで、第２またはさらなる薬剤は、例えば以前に投与されてもよい。同時治療処置は、異なる行為者によって段階的に実行されてもよい。例えば、１人の行為者は対象に第１の薬剤を投与することができ、第２の行為者は対象に第２の薬剤を投与することができ、第１の薬剤（および／またはさらなる薬剤）が第２の薬剤（および／またはさらなる薬剤）の存在下での投与の後である限り、投与ステップは同時に、またはほぼ同時に、または離れた時間で実行することができる。行為者および対象は、同じ実体（例えばヒト）であってよい。

【0465】

選択された培地における活性成分（複数可）の最適な濃度は当業者に公知である手順によって経験的に決定することができ、所望される最終的な医薬製剤に依存する。

【0466】

本開示のｓＣＲ１コンジュゲートの投与のための投薬量範囲は、所望の効果をもたらすのに十分大きなものである。例えば、組成物はｓＣＲ１コンジュゲートの有効量を含む。一例では、組成物はｓＣＲ１コンジュゲートの治療的有効量を含む。別の例では、組成物はｓＣＲ１コンジュゲートの予防的有効量を含む。

【0467】

投薬量は有害な副作用を引き起こすほど大きいものであるべきでない。一般的に、投薬量は患者の年齢、状態、性別および疾患の程度によって異なり、当業者が決定することができる。いかなる合併症も発生した場合、投薬量を個々の医師が調整することができる。

【0468】

投薬量は、１日または数日の間、毎日１用量またはそれ以上の用量の投与において、約０．１ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇまで、例えば約０．２ｍｇ／ｋｇから約２００ｍｇ／ｋｇまで、例えば約０．５ｍｇ／ｋｇから約２０ｍｇ／ｋｇまで変動することができる。

【0469】

一部の例では、ｓＣＲ１コンジュゲートは、以降の（維持用量）より高い初期（または、初回負荷）用量で投与される。例えば、ｓＣＲ１コンジュゲートは、約１０ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇの初期用量で投与される。ｓＣＲ１コンジュゲートは、その後約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇの維持用量で投与される。維持用量は２～３０日おきに、例えば、２または３または６または９または１２または１５または１８または２１または２４または２７または３０日おきに投与することができる。

【0470】

一部の例では、ｓＣＲ１コンジュゲートが以降の用量で使用されるより低い用量で最初に投与される、用量漸増体系が使用される。この投与体系は、対象が有害事象を初期に患う場合に有益である。

【0471】

処置に十分に応答しない対象の場合、１週間に複数の用量を投与することができる。あるいは、またはさらに、漸増用量を投与することができる。

【0472】

複数回の曝露または用量のセット、例えば少なくとも約２回の曝露、例えば、約２～６０回の曝露、より詳細には約２～４０回の曝露、最も詳細には約２～２０回の曝露を与えることによって、対象をｓＣＲ１コンジュゲートで再処置することができる。

【0473】

一例では、疾患、例えば細菌感染症の徴候または症状が戻るとき、任意の再処置を与えることができる。

【0474】

別の例では、規定の間隔で任意の再処置を与えることができる。例えば、以降の曝露を様々な間隔で、例えば約２４～２８週間または４８～５６週間、またはより長い間隔で投与することができる。例えば、そのような曝露は、各々約２４～２６週間または約３８～４２週間、または約５０～５４週間の間隔で投与される。

【0475】

処置に十分に応答しない対象の場合、１週間に複数の用量を投与することができる。あるいは、またはさらに、漸増用量を投与することができる。

【0476】

別の例では、有害反応を経験する対象の場合、初期（または、初回負荷）用量を１週間の多くの日数にわたって、または多くの連続日にわたって分割することができる。

【0477】

本開示の方法によるｓＣＲ１コンジュゲートの投与は、例えば投与の目的が治療であるかまたは予防であるかにかかわらずレシピエントの生理的状態、および熟練者に公知である他の因子によって、連続的であっても間欠的であってもよい。投与はあらかじめ選択された時間の間事実上連続的であってよいか、または、例えば状態の発達の間かまたはその後の一連の間隔をあけた投与であってよい。

【0478】

物質のキットおよび他の組成物
本開示の別の例は、上記のように補体活性および／もしくはＧ－ＣＳＦ活性を阻害するために、または補体媒介障害、好中球媒介障害および／もしくは血液凝固障害の治療もしくは予防のために有益である本開示のｓＣＲ１コンジュゲートを含有するキットを提供する。

【0479】

本開示の別の例は、上記のように補体活性を阻害するために、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子および／もしくは第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子および／もしくは第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性化に拮抗するために、または補体媒介障害、好中球媒介障害および／もしくは血液凝固障害の治療もしくは予防のために有益である本開示のｓＣＲ１コンジュゲートを含有するキットを提供する。

【0480】

一例では、キットは、（ａ）ｓＣＲ１コンジュゲートを場合により薬学的に許容される担体または希釈剤の中に含む容器；ならびに（ｂ）対象において補体活性および／もしくはＧ－ＣＳＦ活性を阻害するための、または補体媒介障害および／もしくは好中球媒介障害を治療もしくは予防するための使用説明書を含む添付文書、を含む。

【0481】

一例では、キットは、（ａ）場合により薬学的に許容される担体または希釈剤の中の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲート；（ｂ）対象において補体活性および／もしくはＧ－ＣＳＦ活性を阻害することにおいて、または補体媒介障害および／もしくは好中球媒介障害を治療もしくは予防することにおいてキットを使用するための使用説明書；ならびに（ｃ）場合により、少なくとも１つのさらなる治療活性化合物または薬物を含む。

【0482】

一例では、キットは、（ａ）ｓＣＲ１コンジュゲートを場合により薬学的に許容される担体または希釈剤の中に含む容器；ならびに（ｂ）対象において補体活性を阻害するための、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性化に拮抗するための、または補体媒介障害、好中球媒介障害および／もしくは血液凝固障害を治療もしくは予防するための使用説明書を含む添付文書を含む。

【0483】

一例では、キットは、（ａ）ｓＣＲ１コンジュゲートを場合により薬学的に許容される担体または希釈剤の中に含む容器；ならびに（ｂ）対象において補体活性を阻害するための、ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性化に拮抗するための、または補体媒介障害、好中球媒介障害および／もしくは血液凝固障害を治療もしくは予防するための使用説明書を含む添付文書を含む。

【0484】

一例では、キットは、（ａ）場合により薬学的に許容される担体または希釈剤の中の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲート；（ｂ）対象において補体活性を阻害することにおいて、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性化に拮抗することにおいて、または補体媒介障害、好中球媒介障害および／もしくは血液凝固障害を治療もしくは予防することにおいてキットを使用するための使用説明書；ならびに（ｃ）場合により、少なくとも１つのさらなる治療活性化合物または薬物を含む。

【0485】

一例では、キットは、（ａ）場合により薬学的に許容される担体または希釈剤の中の少なくとも１つのｓＣＲ１コンジュゲート；（ｂ）対象において補体活性を阻害することにおいて、ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性化に拮抗することにおいて、または補体媒介障害、好中球媒介障害および／もしくは血液凝固障害を治療もしくは予防することにおいてキットを使用するための使用説明書；ならびに（ｃ）場合により、少なくとも１つのさらなる治療活性化合物または薬物を含む。

【0486】

本開示のこの例により、添付文書は容器の上にあるかまたはそれに付随している。適する容器には、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ等が含まれる。容器はガラスまたはプラスチックなどの様々な材料で形成することができる。容器は、補体活性および／もしくはＧ－ＣＳＦ活性を阻害するために、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩＩ因子および／もしくはＸＩＩａ因子の活性化に拮抗し、ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性に拮抗し、ならびに／または第ＸＩ因子および／もしくはＸＩａ因子の活性化に拮抗するために、または補体媒介障害、好中球媒介障害および／もしくは血液凝固障害を治療もしくは予防するために有効である組成物を保持するかまたは含有し、無菌アクセスポートを有することができる（例えば、容器は、皮下注射針で穿刺可能なストッパを有する静脈内注射用溶液バッグまたはバイアルであってもよい）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、ｓＣＲ１コンジュゲートである。ラベルまたは添付文書は、組成物が処置に適格な対象、例えば、補体媒介障害および／または好中球媒介障害を有するかまたはそれを起こす素因を有する対象を、ｓＣＲ１コンジュゲートおよび提供される任意の他の医薬の投薬量および間隔に関する具体的指針により処置するために使用されることを示す。キットは、薬学的に許容される希釈緩衝液、例えば静菌性注射用水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー液および／またはブドウ糖溶液を含む追加の容器をさらに含むことができる。キットは、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針およびシリンジを含む、商業的およびユーザーの見地から望ましい他の材料をさらに含むことができる。

【0487】

キットは、場合により第２の医薬を含む容器をさらに含み、ここでｓＣＲ１コンジュゲートは第１の医薬であり、本品は対象を有効な量の第２の医薬で処置するための使用説明書を添付文書の上にさらに含む。第２の医薬は、上に示す治療タンパク質であってよい。

【0488】

本開示は、以下の非限定的実施例を含む。

【実施例1】

【0489】

ｓＣＲ１変異体の生成
ヒト補体受容体１型（ＣＲ１）ｃＤＮＡ（ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿０００５６４）はヒト発現のためにコドン最適化され、Ｇｅｎｅａｒｔ（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標）、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって合成された。完全長のおよびトランケーションされた可溶性ＣＲ１（ｓＣＲ１）変異体は、標準のＰＣＲベースの突然変異誘発技術を使用して生成した。ｃＤＮＡは、開始メチオニンのすぐ上流（＋１）でコザックコンセンサス配列（ＧＣＣＡＣＣ）により生成し、続いて、それをＮｈｅＩおよびＸｈｏＩで消化し、ｐｃＤＮＡ３．１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標）、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）にライゲーションした。ｓＣＲ１変異体ｃＤＮＡを、Ｃ末端の８×ヒスチジンタグとインフレームでクローニングした。ｓＣＲ１－８Ｈｉｓ変異体のリストについて、表１を参照する。

【0490】

プラスミドＤＮＡの大規模製造は、製造業者の使用説明書によりＱＩＡＧＥＮプラスミドギガキットを使用して実行した。全てのプラスミド構築物のヌクレオチド配列は、ＢｉｇＤｙｅ（商標）ターミネーター版３．１ Ｒｅａｄｙ Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｃｙｃｌｅ Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標）、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）およびＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ３１３０ｘｌ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ａｎａｌｙｚｅｒを使用して両方の鎖を配列決定することによって、検証した。

【0491】

ｓＣＲ１発現プラスミドによるＥｘｐｉ２９３Ｆ（商標）細胞の一時的トランスフェクションは、製造業者の推奨（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標）、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によりＥｘｐｉ２９３（商標）発現系を使用して実行した。全ての細胞培養培地に抗生物質－抗真菌剤（ＧＩＢＣＯ（登録商標）、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を補い、細胞を８％ＣＯ_２の雰囲気のインキュベーターの中で３７℃で維持した。

【0492】

ｓＣＲ１－８Ｈｉｓポリペプチドを精製した。簡潔には、ヘキサヒスチジン標識ｓＣＲ１タンパク質の精製のために、培養上清を２０ｍＭ ＮａＨ_２ＰＯ_４、５００ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ イミダゾール、ｐＨ７．４、で前もって平衡させたニッケルセファロースエクセル親和性樹脂（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）の上へ直接ロードした。ローディングの後、樹脂を２０ｍＭ ＮａＨ_２ＰＯ_４、５００ｍＭ ＮａＣｌ、２５ｍＭイミダゾール、ｐＨ７．４、で洗浄した。樹脂に結合したｓＣＲ１は２０ｍＭ ＮａＨ_２ＰＯ_４、５００ｍＭ ＮａＣｌ、５００ｍＭイミダゾール、ｐＨ７．４、でブロック溶出し、２８０ｎｍの吸光度に基づいて溶出タンパク質を収集した。収集したタンパク質は、ｍｔ－ＰＢＳ（１３７ｍＭ ＮａＣｌ、２７ｍＭ ＫＣｌ、８．１ｍＭ Ｎａ_２ＨＰＯ_４、１．１５ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４、ｐＨ７．４）で前もって平衡させたＨｉＬｏａｄ２６／６０ ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００プレップグレードカラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）にロードしていかなる混入タンパク質も除去し、所望の緩衝液に緩衝液を交換した。精製したタンパク質はａｍｉｃｏｎ超遠心フィルターを５０ｋＤａ ＭＷＣＯと使用して所望の濃度に濃縮し、滅菌濾過し、－８０℃で保存した。細胞内プロセシングのために、成熟ｓＣＲ１－８Ｈｉｓ変異体はＮ末端４１ａａヒトＣＲ１シグナルペプチドを欠く。

【0493】

【表2】

【実施例2】

【0494】

ｓＣＲ１－８Ｈｉｓ変異体は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで補体阻害活性を有する
補体阻害活性を調査するために、ｓＣＲ１－８Ｈｉｓ変異体を製造業者の使用説明書によりＷｉｅｓｌａｂ（登録商標）補体アッセイ（Ｅｕｒｏ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ）で試験した。簡潔には、ｓＣＲ１－８Ｈｉｓ変異体タンパク質を、９６ウェルプレートの中のＰＢＳで連続希釈した。希釈した各ｓＣＲ１－８Ｈｉｓ変異体試料の５０μｌまたはＰＢＳだけを、各補体経路のために適当なアッセイ希釈液の中の前もって希釈したヒト血清（古典的／レクチンの場合１：１０１）の２０２．５μｌまたは希釈した血清（第二経路の場合１：１８）の２２０μｌに加え（製造業者の使用説明書に従って）、室温（ＲＴ）で３０分間インキュベートした。前もって希釈した血清に加えられると、各タンパク質の最終の開始濃度は４０ｎＭであった。各試料の１００μｌを２反復でアッセイプレートに移し、３７℃で１時間インキュベートした（ＣＯ_２なしで）。ウェルを空にし、３００μｌ／ウェルの１×洗浄緩衝液によって３回洗浄した（製造業者の使用説明書に従って）。Ｃ５ｂ－９の末端複合体は、１００μｌ／ウェルのアルカリ性ホスファターゼコンジュゲート抗Ｃ５ｂ－９特異的モノクローナル抗体を使用して検出し、それは室温で３０分間インキュベートした。未結合の抗体を捨て、ウェルを３００μｌ／ウェルの１×洗浄緩衝液によって３回洗浄した。結合した抗体は１００μｌ／ウェルのアルカリ性ホスファターゼ基質溶液を使用して検出し、室温で３０分間インキュベートした。Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーを使用して４０５ｎｍの吸光度を読み取った。

【0495】

生の値は血清およびＰＢＳだけの対照（すなわち、１００％のＣ５ｂ－９形成）によるＣ５ｂ－９形成のパーセンテージで表した。結果は対数（阻害剤）対応答－可変勾配（４つのパラメータ）フィットを使用して、ＩＣ_５０値のためにＧｒａｐｈ Ｐａｄ Ｐｒｉｓｍで分析した。底およびトップはそれぞれ０および１００の値に制約した。

【0496】

ｓＣＲ１（４９０～９３９）－８Ｈｉｓ、ｓＣＲ１（９４０～１３９２）－８ＨｉｓおよびｓＣＲ１（１３９３～１９７１）－８Ｈｉｓ以外の全てのｓＣＲ１－８Ｈｉｓ変異体は、古典的、レクチンおよび第二経路で機能的活性を有した。ｓＣＲ１（４９０～９３９）－８Ｈｉｓは第二経路だけで機能的活性を有したが、ｓＣＲ１（９４０～１３９２）－８Ｈｉｓはレクチンおよび第二経路で機能的活性を有した。ｓＣＲ１（１９３９～１９７１）－８Ｈｉｓは、古典的、レクチンまたは第二経路のいずれでも検出可能な活性を有していなかった。

【0497】

下の表２に示すように、Ｗｉｅｓｌａｂアッセイにおいて、ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓは全ての３つの補体経路（すなわち、古典的、レクチンおよび第二）において完全長ｓＣＲ１（１９７１）－８Ｈｉｓおよび他のｓＣＲ１断片と比較して増加した阻害活性を有した。

【0498】

ｓＣＲ１－８Ｈｉｓ変異体は、溶血アッセイ（例えば、古典経路（すなわち、ＣＨ５０）および第二経路（ＡｐＨ５０）阻害アッセイ）を使用して機能活性についても試験した。

【0499】

ｓＣＲ１変異体による補体系の古典的経路（すなわち、ＣＨ５０）の阻害を調査するために、ヒツジ赤血球（Ｓｉｅｍｅｎｓ）をウサギ抗ヒツジ抗体（Ａｍｂｏｚｅｐｔｏｒ６０００；Ｓｉｅｍｅｎｓ）で感作させ、４×１０^８細胞／ｍＬ ＧＶＢ^＋＋（ＧＶＢ、０．１５ｍＭ ＣａＣｌ_２、０．５ｍＭ ＭｇＣｌ_２）に希釈した。ｓＣＲ１変異体を１／４０希釈ＮＨＳの中でプレインキュベートし（室温で３０分間）、その後１／１（ｖ／ｖ）比で赤血球に加え、マイクロタイタープレート振盪装置の中で３７℃で１時間インキュベートした。氷冷ＧＶＢＥ（ＧＶＢ、１０ｍＭ ＥＤＴＡ）の添加および遠心分離（１２５０×ｇ、４℃で５分間）の後に、４１２ｎｍでの放出ヘモグロビンの吸光度を測定することによって溶血を上清で決定した。ＮＨＳおよび緩衝剤だけでインキュベートした細胞は、１００％溶解対照の役目をした。ｓＣＲ１変異体による溶解の阻害を、対照と比較して計算した。

【0500】

ｓＣＲ１変異体による補体系の第二経路（すなわち、ＡｐＨ５０）の阻害を調査するために、ウサギ赤血球（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を洗浄して２×１０^８細胞／ｍＬ ＧＶＢ／ＭｇＥＧＴＡ（ＧＶＢ、５ｍＭ ＭｇＥＧＴＡ）に希釈した。ｓＣＲ１変異体を１／６希釈ＮＨＳの中でプレインキュベートし（室温で３０分間）、その後２／１（ｖ／ｖ）比で赤血球に加え、マイクロタイタープレート振盪装置の中で３７℃で１時間インキュベートした。氷冷ＧＶＢＥの添加および遠心分離（１２５０×ｇ、１０分間）の後に、４１２ｎｍでの放出ヘモグロビンの吸光度を測定することによって溶血を上清で決定した。
ＮＨＳおよび緩衝剤だけでインキュベートした細胞は、１００％溶解対照の役目をした。ｓＣＲ１変異体による溶解の阻害を、対照と比較して計算した。

【0501】

ｓＣＲ１（１３９３～１９７１）－８Ｈｉｓ以外の全ての変異体は、ＣＨ５０およびＡｐＨ５０アッセイの両方で機能活性を示した。表３に示すように、ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓは、両方のアッセイにおいてｓＣＲ１（１９７１）－８Ｈｉｓと比較して増加した活性を有した。

【0502】

【表3】

【0503】

【表4】

【実施例3】

【0504】

ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓ変異体はｓＣＲ１（１９７１）－８Ｈｉｓと比較して増加した安定性を示す
異なる緩衝条件におけるｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓの安定性を調査するために、完全長ｓＣＲ１（１９７１）－８Ｈｉｓタンパク質と比較してｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓタンパク質の熱安定性を測定するために、示差走査蛍光定量（ＤＳＦ）アッセイを実行した。タンパク質の安定性を、ある範囲の塩（ＮａＣｌ ０ｍＭ、５０ｍＭ、１５０ｍＭおよび５００ｍＭ）および以下の緩衝剤のｐＨ条件の下で調査した：クエン酸、ＨＥＰＥＳ、酢酸ナトリウム、リン酸、グリシン、ヒスチジン、ＴＲＩＳおよびプロリン。

【0505】

簡潔には、５μｌの４×濃縮緩衝液を３８４ウェルプレートに２反復で分注した。ｓＣＲ１（１３９２）－８ＨｉｓおよびｓＣＲ１（１９７１）－８Ｈｉｓタンパク質を、ＭＴ－ＰＢＳ中で０．１３ｍｇ／ｍｌに希釈し、次に水の中で構成された１／２０の色素保存液（Ｓｙｐｒｏ（登録商標）オレンジ；Ｓｉｇｍａ）を混入して、各アッセイ反応で１／４００の最終希釈溶液を与えた。次に１５μｌのタンパク質／色素混合液を、濃縮緩衝液を含有する３８４ウェルプレートの各ウェルに分注した。プレートは光学接着剤カバーで密封し、３２２０ｇで１分間遠心分離した後、ＱｕａｎｔＳｔｕｄｉｏ（商標）リアルタイムＰＣＲ機器（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）に流した。冷却させて温度を２０．０℃で１分間保持した後、０．０５℃／秒の速度で２０．０℃から９９．０℃に上昇させることによって融解曲線を作成した。第１の導関数を使用して各融解曲線から遷移中間（Ｔ_ｍ）値を計算するために、タンパク質サーマルシフトソフトウェア（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用した。Ｔ_ｍ値がＮａＣｌ濃度（ｘ軸）およびｐＨ（ｙ軸）に対してどのように変化するかを図式で示すために、ＪＭＰ１３を使用して等高線プロットを作成した。

【0506】

ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓは、以下を含むいくつかの緩衝条件下で安定していた：リン酸（ｐＨ６．０～８．０；ＮａＣｌ ０～５００ｍＭ）；リン酸－クエン酸（ｐＨ６．０～８．０；ＮａＣｌ ０～５００ｍＭ）；トリス（ｐＨ７．０～９．０；ＮａＣｌ ０～５００ｍＭ）；グリシン（ｐＨ９．０～１０．０；ＮａＣｌ ０～５００ｍＭ）；ＨＥＰＥＳ（ｐＨ６．５～８．５；ＮａＣｌ ０～５００ｍＭ）およびヒスチジン（ｐＨ６．０～７．０；ＮａＣｌ ０～５００ｍＭ）。測定された最大Ｔ_ｍ値は、ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓでは６１．４℃およびｓＣＲ１（１９７１）－８Ｈｉｓでは６１．７℃であった。

【0507】

緩衝剤スクリーニングに基づいて、ｓＣＲ１（１３９２）－８ＨｉｓはｓＣＲ１（１９７１）－８Ｈｉｓより安定していた。

【実施例4】

【0508】

シアル酸付加ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓは向上したｉｎ ｖｉｖｏ半減期を有する
ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓのｉｎ ｖｉｖｏ半減期を延長できるかどうか調査するために、ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓのシアル酸付加版を調製した（ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓ^ＳＩＡ）。簡潔には、Ｅｘｐｉ２９３Ｆ細胞を、ヒトＳＴ３ＧＡＬ３（ＳＴ３ベータガラクトシドアルファ－２，３－シアリルトランスフェラーゼ３、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００６２７０）をコードするｃＤＮＡおよびヒトＢ４ＧＡＬＴ１（ヒトβ１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１４８８．２）をコードするｃＤＮＡと一緒にｓＣＲ１（１３９２）－８ＨｉｓをコードするｃＤＮＡにより９４：３：３の比でコトランスフェクトすることによってシアル酸付加材料を作製した。

【0509】

表４に示すように、ＳＴ３ＧＡＬ３／Ｂ４ＧＡＬＴ１トランスフェクション細胞で作製されたｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓ^ＳＩＡ材料は、大いにより高い割合のシアル酸付加グリカンを有した。特に、シアル酸付加ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓ^ＳＩＡ材料は、より高い割合の二、三および四シアル酸付加グリカンを有した。

【0510】

【表5】

【0511】

ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓおよびそのシアル酸付加版（ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓ^ＳＩＡ）のｉｎ ｖｉｖｏ半減期を、ヒトＦｃＲｎトランスジェニックマウス（Ｂ６．Ｃｇ－Ｆｃｇｒｔ^{ｔｍ１Ｄｃｒ} Ｔｇ（ＦＣＧＲＴ）３２Ｄｃｒ／ＤｃｒＪ；Ｔｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙストック番号０１４５６５）で試験した。マウスは３０ｍｇ／ｋｇのｓＣＲ１（１３９２）－８ＨｉｓまたはｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓ^ＳＩＡで静脈内注射し、様々な時点で血漿を収集した（群Ａ：５分および４時間、ｎ＝３；群Ｂ：０．５時間および８時間、ｎ＝３；群Ｃ：１時間および１６時間、ｎ＝３；群Ｄ：２時間および４８時間、ｎ＝３）。血液を、血液８部クエン酸緩衝液２部の比でクエン酸緩衝液と混合した。ヒトｓＣＲ１の血漿レベルは、以下の改変で製造業者の使用説明書に従って抗ヒトＣＤ３５ ＥＬＩＳＡ（ＲａｙＢｉｏｔｅｃｈ、カタログ番号ＥＬＨ ＣＤ３５）で測定した：各試験品を使用して標準曲線（３～２５０ｎｇ／ｍＬの範囲）を作成し、使用したアッセイ緩衝液は、１％ＢＳＡ熱ショック分画、プロテアーゼフリー（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ａ３０５９）であり、洗浄緩衝液はＰＢＳ＋０．０５％ｖ／ｖＴｗｅｅｎ－２０であった。標準の統計式を使用して、平均滞留時間（ＭＲＴ）および曲線下面積（ＡＵＣ）を計算した。

【0512】

図１に示すように、ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓ^ＳＩＡは、ｓＣＲ１（１３９２）－８Ｈｉｓと比較して向上したｉｎ ｖｉｖｏ保持を有し、２５倍のＭＲＴ増加（１４．７時間対３５分）および８倍のＡＵＣ増加（ＡＵＣ＝５１６．５対６５．７４）であった。

【実施例5】

【0513】

ｓＣＲ１変異体－抗Ｇ－ＣＳＦＲコンジュゲートの作製
ｓＣＲ１（１３９２）変異体をマウス抗Ｇ－ＣＳＦＲ抗体ＶＲ８１のｓｃＦｖと、または抗体Ｃ１．２のｓｃＦｖとｓＣＲ１配列のＣ末端で融合させることによって、組換えｓＣＲ１融合体を作製した（表５）。

【0514】

ＶＲ８１はマウスのＧ－ＣＳＦＲの細胞外ドメインに対して生成されるマウスモノクローナルＩｇＧ１κ抗体であり、記載されるようにＧ－ＣＳＦＲへのＧ－ＣＳＦ結合をブロックする（Ｃａｍｐｂｅｌｌ等、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１９７巻（１１号）（２０１６）４３９２～４４０２頁）。この点に関して、ＶＲ８１はＣ１．２のためのマウス代用抗体であり、それはＷＯ２０１２１７１０５７に記載される。

【0515】

組換え融合体は、標準のクローニング技術を使用して作製した。ｓＣＲ１配列および抗Ｇ－ＣＳＦＲ配列を連結するために、ＧＳ１６リンカーを使用した。シグナルペプチドも用いた。全ての融合タンパク質はＥｘｐｉ２９３Ｆ（商標）細胞で発現させ、ｓＣＲ１タンパク質は前記の通りに精製した。

【0516】

【表6】

【0517】

１７４ｋＤａの発現生成物および１７５ｋＤａの発現生成物の高レベル発現が、各ｓＣＲ１（１３９２）－Ｃ１．２ｓｃＦｖ融合体および各ｓＣＲ１（１３９２）－５Ｅ２ＶＲ８１ｓｃＦｖ融合体でそれぞれ観察された（データ示さず）。発現生成物は可溶性であり、高いレベルでおよび予想されたサイズで発現された。

【0518】

補体阻害活性を調査するために、ｓＣＲ１－抗Ｇ－ＣＳＦＲコンジュゲートをＷｉｅｓｌａｂ（登録商標）補体アッセイ（Ｅｕｒｏ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ）で製造業者の使用説明書により、および前記の通り試験した。下の表６に示すように、全てのｓＣＲ１－抗Ｇ－ＣＳＦＲコンジュゲート（すなわち、両配向）は、非コンジュゲートｓＣＲ１（１３９２）変異体と比較して古典的、レクチンおよび第二経路で増加した機能的活性を有した。

【0519】

【表7】

【実施例6】

【0520】

ｓＣＲ１変異体－抗Ｇ－ＣＳＦＲコンジュゲートは、ｉｎ ｖｉｔｒｏでＧ－ＣＳＦシグナル伝達阻害活性を有する
Ｇ－ＣＳＦ依存性細胞系（マウスＮＦＳ－６０）のマウスＧ－ＣＳＦ（ｍＧ－ＣＳＦ）依存性増殖を阻害するそれらの能力を決定することによって、ｓＣＲ１－５Ｅ２ＶＲ８１抗Ｇ－ＣＳＦＲコンジュゲートのＧ－ＣＳＦシグナル伝達阻害活性をｉｎ ｖｉｔｒｏで調査した（Ｃａｍｐｂｅｌｌ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１６年、に前述されている通り）。

【0521】

第１に、ｍＧ－ＣＳＦへのマウスＮＦＳ－６０細胞の用量応答を決定した。簡潔には、細胞を９６ウェルプレートに平板培養し（１ウェルにつき１×１０^４細胞）、ｍＧ－ＣＳＦの滴定濃度（１００ｎｇ／ｍｌ、１／３希釈、１２時点）およびｍＩＬ－３を細胞に加え、３７℃、５％ＣＯ_２で４８時間インキュベートさせた。インキュベーションの後、細胞生存能力を測定するために、Ｖｉａｌｉｇｈｔキットを製造業者の使用説明書に従って使用して細胞を分析した。０．０５３４３ｎｇ／ｍｌおよび０．１４３１ｎｇ／ｍｌのＥＣ_５０を、それぞれｍＧ－ＣＳＦおよびｍＩＬ－３のために決定した。

【0522】

ｓＣＲ１－抗Ｇ－ＣＳＦＲコンジュゲートおよびマウスＶＲ８１抗体によるｍ－Ｇ－ＣＳＦの相対的阻害を調査するために、マウスＮＦＳ－６０細胞を９６ウェルプレート（１ウェルにつき１×１０^４細胞）に平板培養し、ＶＲ８１、ｓＣＲ１（１３９２）－ＧＳ１６－５Ｅ２ＶＲ８１ｓｃＦｖＬＨおよびｓＣＲ１（１３９２）－ＧＳ１６－５Ｅ２ＶＲ８１ｓｃＦｖＨＬの滴定濃度を対応するウェルに加えた（１００μｇ／ｍｌ、１／３希釈、１６時点）。ｍＧ－ＣＳＦの１ｎｇ／ｍｌまたは０．１ｎｇ／ｍｌの固定濃度を対応するウェルに加え、プレートを３７℃、５％ＣＯ_２で４８時間インキュベートした。インキュベーションの後、細胞生存能力を測定するために、Ｖｉａｌｉｇｈｔキットを製造業者の使用説明書に従って使用して細胞を分析した。

【0523】

下の表７に示すように、ｓＣＲ１－抗Ｇ－ＣＳＦＲコンジュゲートは、細胞を０．１ｎｇ／ｍｌのＧ－ＣＳＦまたは１ｎｇ／ｍｌのＧ－ＣＳＦで刺激したとき、類似の効果を示した。両方のｓＣＲ１－５Ｅ２ＶＲ８１ｓｃＦｖコンジュゲート（ＬＨおよびＨＬ配向）はＧ－ＣＳＦ阻害アッセイで類似の効力を有したが、コンジュゲートはＶＲ８１抗体と比較して効力が概ね５００倍低かった。

【0524】

【表8】

【実施例7】

【0525】

ｓＣＲ１変異体－抗第ＸＩＩ因子ｓｃＦｖコンジュゲートの作製
ｓＣＲ１（１３９２）変異体を抗体３Ｆ７または３Ｆ７ＧのｓｃＦｖとｓＣＲ１配列のＣ末端で融合させることによって、組換えｓＣＲ１融合体を作製した（表８）。

【0526】

【表9】

【0527】

１７５ｋＤａの発現生成物の高レベル発現が観察された（データ示さず）。発現生成物は可溶性であり、高いレベルでおよび予想されたサイズで発現された。

【実施例8】

【0528】

ｓＣＲ１変異体－抗第ＸＩＩ因子ｓｃＦｖコンジュゲートはｉｎ ｖｉｔｒｏでＦＸＩＩａ阻害活性を有する
上で生成されるｓＣＲ１－抗第ＸＩＩ因子ｓｃＦｖコンジュゲートの阻害活性を調査するために、発色阻害アッセイを実行した。

【0529】

簡潔には、２０μＬのＸＩＩａ因子（１μｇ）を、ｓＣＲ１（１３９２）－ＧＳ１６－３Ｆ７ｓｃＦｖＨＬ、ｓＣＲ１（１３９２）－ＧＳ１６－３Ｆ７ＧｓｃＦｖＨＬまたは非コンジュゲート３Ｆ７（ｃｈ３Ｆ７－ｍＧ１Ｌ－ａＦＸＩＩ）を含有する緩衝液と、ＥＬＩＳＡプレート中に１６０μＬの量まで混合した。３７℃で５分間のインキュベーションの後、発色基質４０μＬを加えた。混合液を３７℃で１５分間インキュベートした後、停止液４０μＬを加えた。測定は、プレートリーダーで４０５ｎｍで実行した。

【0530】

下の表９に示すように、全てのｓＣＲ１－抗第ＸＩＩ因子ｓｃＦｖコンジュゲートは、３Ｆ７抗体のそれに類似した機能的ＦＸＩＩａ阻害活性を有した。

【0531】

【表10】

【実施例9】

【0532】

ｓＣＲ１変異体－抗第ＸＩＩ因子ｓｃＦｖコンジュゲートはｉｎ ｖｉｔｒｏで補体阻害活性を有する
補体阻害活性を調査するために、ｓＣＲ１－抗ＦＸＩＩコンジュゲートをＷｉｅｓｌａｂ（登録商標）補体アッセイ（Ｅｕｒｏ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ）で製造業者の使用説明書により、および前記の通り試験した。下の表１０に示すように、全てのｓＣＲ１－抗ＦＸＩＩコンジュゲート（すなわち、両配向）は、非コンジュゲートｓＣＲ１（１３９２）変異体と比較して古典的、レクチンおよび第二経路で増加した機能的活性を有した。

【0533】

【表11】

【図1】

【配列表】

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【国際調査報告】