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特表2022-537994Ｄ１ポジティブアロステリックモジュレーターとしての置換されたテトラヒドロイソキノリン誘導体
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-08-31
(54)【発明の名称】Ｄ１ポジティブアロステリックモジュレーターとしての置換されたテトラヒドロイソキノリン誘導体
(51)【国際特許分類】
C07D 401/06 20060101AFI20220824BHJP
A61K 31/4725 20060101ALI20220824BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220824BHJP
A61P 25/18 20060101ALI20220824BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20220824BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20220824BHJP
A61P 25/16 20060101ALI20220824BHJP
A61P 25/14 20060101ALI20220824BHJP
A61P 25/20 20060101ALI20220824BHJP
A61P 17/02 20060101ALI20220824BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20220824BHJP
A61P 25/24 20060101ALI20220824BHJP
A61P 25/02 20060101ALI20220824BHJP
【ＦＩ】
C07D401/06 CSP
A61K31/4725
A61P43/00 111
A61P25/18
A61P25/28
A61P25/00
A61P25/16
A61P25/14
A61P25/20
A61P17/02
A61P29/00
A61P25/24
A61P25/02 101
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021575050
(86)(22)【出願日】2020-06-29
(85)【翻訳文提出日】2021-12-16
(86)【国際出願番号】 EP2020068181
(87)【国際公開番号】W WO2021001286
(87)【国際公開日】2021-01-07
(31)【優先権主張番号】19183641.0
(32)【優先日】2019-07-01
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】514232085
【氏名又は名称】ユーシービー バイオファルマ エスアールエル
(74)【代理人】
【識別番号】110000855
【氏名又は名称】特許業務法人浅村特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ヴァレーデ、アンヌ
【テーマコード（参考）】
4C063
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C063AA01
4C063BB04
4C063CC15
4C063DD12
4C063EE01
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086BC30
4C086GA07
4C086GA08
4C086GA16
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZA01
4C086ZA02
4C086ZA05
4C086ZA08
4C086ZA15
4C086ZA16
4C086ZA18
4C086ZA20
4C086ZA22
4C086ZC41
(57)【要約】
本発明は、式（Ｉ）による化合物に関するものであり、
【化１】
これは、Ｄ１のポジティブアロステリックモジュレーターであり、従ってＤ１受容体が関与する疾患の治療のための医薬として有用である。
【化１】
これは、Ｄ１のポジティブアロステリックモジュレーターであり、従ってＤ１受容体が関与する疾患の治療のための医薬として有用である。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩である。【化1】
【請求項2】
２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］‐１‐［（１Ｓ）‐５‐［（１Ｓ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐イル］エテノンであり、式（ＩＡ）で表される請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。【化2】
【請求項3】
治療に使用するための、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項4】
Ｄ１受容体が関与する疾患及び／又は障害の治療及び／又は予防に使用するための、請求項１に定義された式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項5】
統合失調症における認知症状及び陰性症状、神経遮断療法に関連する認知機能障害、軽度認知機能障害（ＭＣＩ）、衝動性、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、パーキンソン病及びその他の運動障害、ジストニア、パーキンソン病性認知症、ハンチントン病、レビー小体型認知症、アルツハイマー病の薬物依存症、睡眠障害、アパシー、外傷性脊髄損傷、又は神経因性疼痛の治療及び／又は予防に使用するための、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項6】
パーキンソン病及びその他の運動障害、アルツハイマー病、又は統合失調症における認知症状及び陰性症状の治療に使用するための、請求項１に定義された式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項7】
請求項１で定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を、薬学的に許容される担体と共に含む医薬組成物。
【請求項8】
Ｄ１ポジティブアロステリックモジュレーターの投与が適応となる疾患の治療及び／又は予防のための方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項１で定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、上記方法。
【請求項9】
統合失調症における認知症状及び陰性症状、神経遮断薬治療に関連した認知障害、軽度認知障害（ＭＣＩ）、衝動性、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、パーキンソン病及びその他の運動障害、ジストニア、パーキンソン病性認知症、ハンチントン病、レビー小体型認知症、アルツハイマー病薬物中毒、睡眠障害、アパシー、外傷性脊髄損傷又は神経因性疼痛の治療及び／又は予防のための方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項１で定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、上記方法。
【請求項10】
パーキンソン病及びその他の運動障害、アルツハイマー病、又は統合失調症における認知症状及び陰性症状の治療方法であって、そのような治療を必要とする患者に、請求項１で定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む、上記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、テトラヒドロイソキノリン誘導体及び治療におけるその使用に関するものである。特に本発明は、薬理学的に活性な置換されたテトラヒドロイソキノリン誘導体に関するものである。
【0002】
本化合物は、Ｄ１ポジティブアロステリックモジュレーターとして作用し、したがってＤ１受容体が関与する疾患の治療薬として有用である。
【背景技術】
【0003】
モノアミンであるドーパミンは、２つのＧＰＣＲファミリーを介して作用し、運動機能、報酬メカニズム、認知プロセス、及びその他の生理的機能を調節する。具体的には、ドーパミンＤ１とＤ５を含むＤ１様受容体（主にＧｓ Ｇタンパク質に結合し、それによりｃＡＭＰの産生を促進する）と、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４受容体を含むＤ２様受容体（Ｇｉ／ｑ Ｇタンパク質に結合し、ｃＡＭＰの産生を抑制する）を介して、ドーパミンが神経細胞に作用している。これらの受容体は、脳のさまざまな部位に広く発現している。特にＤ１受容体は、多くの生理機能や行動プロセスに関与している。例えば、Ｄ１受容体は、シナプス可塑性、認知機能、目標指向の運動機能に加え、報酬プロセスにも関与している。Ｄ１受容体は、様々な生理的・神経学的プロセスに関与していることから、統合失調症の認知・陰性症状、古典的な抗精神病薬治療に関連する認知障害、衝動性、多動性注意障害（ＡＤＨＤ）、パーキンソン病及び関連する運動障害、ジストニア、ハンチントン病、レビー小体型認知症、アルツハイマー病、加齢に伴う認知機能の低下、軽度認知障害（ＭＣＩ）、薬物中毒、睡眠障害、無気力など、様々な疾患に関与していると考えられる。
【0004】
Ｄ１受容体を標的とした経口投与可能な低分子化合物の開発は困難であることがわかっている。これまでに開発されたＤ１アゴニストは、一般的にカテコール部位を特徴としており、そのためその臨床使用は侵襲的な治療に限られていた。また、ドーパミン受容体のサブタイプ（例：ドーパミンＤ１とＤ５）の間では、リガンド結合部位の相同性が高いため、十分な選択性を得ることは困難であった。また、Ｄ１アゴニストには、ジスキネジアや低血圧などを含むがそれには限定されない、潜在的に限定的な副作用と関連している。
【0005】
そのため、Ｄ１受容体を調節する新しい薬剤を設計する必要がある。
ＧＰＣＲのアロステリックモジュレーターの同定は、受容体のメカニズムを理解するためのツールとして、また治療薬としての可能性を秘めており、大きな関心を集めている。ＧＰＣＲは、細胞表面に存在する受容体の中で最大のファミリーであり、市販されている多くの医薬品は、これらの受容体が介在するシグナル伝達経路を直接活性化又は遮断する。しかし、一部のＧＰＣＲ（ペプチド受容体など）では、サブタイプ間でリガンド結合部位の相同性が高いため（例えば、ドーパミンＤ１とＤ５、Ｄ２とＤ３など）、低分子の開発や十分な選択性を得ることが困難であることがわかっている。そのため、薬物研究の多くは、オルトステリックな天然アゴニストとは異なる部位を標的とする小分子の同定に移行している。これらの部位に結合するリガンドは、ＧＰＣＲのコンフォメーションを変化させ、受容体の機能をアロステリックに調節する。アロステリックリガンドは、親和性及び／又は有効性に影響を与えることにより、内因性リガンドの作用を増強（ポジティブアロステリックモジュレーター：ＰＡＭ）又は減弱（ネガティブアロステリックモジュレーター：ＮＡＭ）させる能力を含む、多様な活性を有している。アロステリックモジュレーターは、サブタイプの選択性だけでなく、直接的な効果や本質的な有効性がないこと、ネイティブな伝達物質が放出されている場所やタイミングでその効果を増強するだけであること、アゴニストに常にさらされることで生じる脱感作を誘発する傾向が少ないこと、標的に関連する副作用を誘発する傾向が少ないことなど、創薬の観点から他の潜在的な利点があると考えられる。
ＧＰＣＲのアロステリックモジュレーターの同定は、受容体のメカニズムを理解するためのツールとして、また治療薬としての可能性を秘めており、大きな関心を集めている。ＧＰＣＲは、細胞表面に存在する受容体の中で最大のファミリーであり、市販されている多くの医薬品は、これらの受容体が介在するシグナル伝達経路を直接活性化又は遮断する。しかし、一部のＧＰＣＲ（ペプチド受容体など）では、サブタイプ間でリガンド結合部位の相同性が高いため（例えば、ドーパミンＤ１とＤ５、Ｄ２とＤ３など）、低分子の開発や十分な選択性を得ることが困難であることがわかっている。そのため、薬物研究の多くは、オルトステリックな天然アゴニストとは異なる部位を標的とする小分子の同定に移行している。これらの部位に結合するリガンドは、ＧＰＣＲのコンフォメーションを変化させ、受容体の機能をアロステリックに調節する。アロステリックリガンドは、親和性及び／又は有効性に影響を与えることにより、内因性リガンドの作用を増強（ポジティブアロステリックモジュレーター：ＰＡＭ）又は減弱（ネガティブアロステリックモジュレーター：ＮＡＭ）させる能力を含む、多様な活性を有している。アロステリックモジュレーターは、サブタイプの選択性だけでなく、直接的な効果や本質的な有効性がないこと、ネイティブな伝達物質が放出されている場所やタイミングでその効果を増強するだけであること、アゴニストに常にさらされることで生じる脱感作を誘発する傾向が少ないこと、標的に関連する副作用を誘発する傾向が少ないことなど、創薬の観点から他の潜在的な利点があると考えられる。
【0006】
本発明による化合物は、Ｄ１受容体に対するＤ１アゴニスト又は内因性リガンドの効果をアロステリックなメカニズムで増強するので、Ｄ１ポジティブアロステリックモジュレーター（Ｄ１ ＰＡＭ）である。
【0007】
本発明に係る化合物は、Ｄ１ ＰＡＭであることから、Ｄ１受容体が関与する疾患や障害の治療及び／又は予防に有益である。このような疾患としては、統合失調症における認知・陰性症状、神経遮断療法に関連する認知障害、軽度認知障害（ＭＣＩ）、衝動性、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、パーキンソン病及びその他の運動障害、ジストニア、パーキンソン病性認知症、ハンチントン病、レビー小体型認知症、アルツハイマー病、薬物依存症、睡眠障害、アパシー、外傷性脊髄損傷又は神経因性疼痛などが挙げられる。
【0008】
国際特許出願ＷＯ２０１３／０５１８６９Ａ１は、ＮＫ２アンタゴニストである特定の３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐イル誘導体を開示している。
【0009】
国際特許出願ＷＯ２００８／１０９３３６Ａ１は、ヒスタミンＨ３受容体のモジュレーターである特定のテトラヒドロイソキノリン化合物を開示している。
【0010】
国際特許出願ＷＯ２０１４／１９３７８１Ａ１は、パーキンソン病又は統合失調症に伴う認知機能障害の治療に有用であると考えられる特定の３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐イル誘導体を開示している。
【0011】
国際特許出願ＷＯ２０１６／０５５４７９は、Ｄ１受容体が役割を果たす疾患の治療に有用な置換３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐イル誘導体及びその類縁体を開示している。
【0012】
国際特許出願ＷＯ２０１９／２０４４１８は、Ｄ１ポジティブアロステリックモジュレーターであり、パーキンソン病やその他の運動障害、アルツハイマー病、統合失調症、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）の治療に有用であると考えられる特定のピラゾ‐テトラヒドロイソキノリン誘導体を開示している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0013】
しかし、運動障害や認知障害など、選択的Ｄ１アゴニストを用いた治療で従来見られた副作用を軽減しつつ、優れた薬物動態学的及び薬力学的特性を兼ね備えた強力なＤ１ポジティブアロステリックモジュレーターの開発が求められている。
【課題を解決するための手段】
【0014】
本発明は、式（Ｉ）の２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］‐１‐［５‐［２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐イル］エテノン
又はその薬学的に許容される塩を提供するものである。
【化1】
又はその薬学的に許容される塩を提供するものである。
【発明を実施するための形態】
【0015】
本発明による化合物は、共に係属している国際特許出願ＷＯ２０１６／０５５４７９の一般的な範囲に包含される。しかし、そこには、上に描かれているような式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩の具体的な開示はない。
【0016】
本発明はまた、治療に使用するための、上記で定義した式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【0017】
別の態様では、本発明は、Ｄ１受容体が役割を果たしている疾患及び／又は障害の治療及び／又は予防に使用するための、上記で定義した式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩も提供する。
【0018】
別の態様では、本発明は、統合失調症における認知症状及び陰性症状、神経遮断療法に関連する認知障害、軽度認知障害（ＭＣＩ）、衝動性、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、パーキンソン病及びその他の運動障害、ジストニア、パーキンソン病性認知症、ハンチントン病、レビー小体型認知症、アルツハイマー病薬物依存症、睡眠障害、アパシー、外傷性脊髄損傷又は神経因性疼痛の治療及び／又は予防に使用するための、上記で定義した式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【0019】
この局面の特定の実施形態において、本発明は、パーキンソン病及びその他の運動障害、アルツハイマー病、又は統合失調症における認知症状及び陰性症状の治療に使用するための、上記で定義した式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【0020】
したがって、１つの特定の局面において、本発明は、パーキンソン病及び他の運動障害の治療に使用するための、上記で定義した式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【0021】
さらなる局面では、本発明は、Ｄ１受容体が役割を果たしている疾患及び／又は障害の治療及び／又は予防に有用な医薬品の製造のための、上記で定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【0022】
別のさらなる局面では、本発明は、統合失調症における認知症状及び陰性症状、神経遮断療法に関連する認知障害、軽度認知障害（ＭＣＩ）、衝動性、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、パーキンソン病及びその他の運動障害、ジストニア、パーキンソン病性認知症、ハンチントン病、レビー小体型認知症、アルツハイマー病、薬物依存症、睡眠障害、アパシー、外傷性脊髄損傷、神経因性疼痛の治療及び／又は予防に有用な医薬品の製造のための、上記で定義した式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【0023】
この局面の特定の実施形態では、本発明は、パーキンソン病及びその他の運動障害、アルツハイマー病、又は統合失調症における認知症状及び陰性症状の治療に有用な医薬品の製造のための、上記で定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用を提供するものである。
【0024】
ある特定の局面では、本発明は、パーキンソン病及び他の運動障害の治療に有用な医薬品の製造のための、上記で定義された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用を提供するものである。
【0025】
本発明はまた、Ｄ１ポジティブアロステリックモジュレーターの投与が適応となる疾患の治療及び／又は予防のための方法であって、そのような治療を必要とする患者に、上記で定義した式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む方法を提供する。
【0026】
別の局面では、本発明は、統合失調症における認知症状及び陰性症状、神経遮断薬治療に関連する認知障害、軽度認知障害（ＭＣＩ）、衝動性、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、パーキンソン病及びその他の運動障害、ジストニア、パーキンソン病性認知症、ハンチントン病、レビー小体型認知症、アルツハイマー病、薬物中毒、睡眠障害、アパシー、外傷性脊髄損傷又は神経因性疼痛の治療及び／又は予防のための方法であって、そのような治療を必要とする患者に、上記で定義した式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む方法を提供する。
【0027】
この局面の特定の実施形態では、本発明は、パーキンソン病及びその他の運動障害、アルツハイマー病、又は統合失調症における認知症状及び陰性症状の治療方法であって、そのような治療を必要とする患者に、上で定義した式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む方法を提供する。
【0028】
ある特定の局面において、本発明は、パーキンソン病及びその他の運動障害の治療方法であって、そのような治療を必要とする患者に、上記で定義した式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを含む方法を提供する。
【0029】
薬剤に使用する場合、式（Ｉ）の化合物の塩は、薬学的に許容される塩となる。しかし、他の塩は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の調製に有用であり得る。薬学的に許容される塩の選択及び調製の基礎となる標準的な原理は、例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ，ｅｄ．Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ＆Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ，Ｗｉｌｅｙ‐ＶＣＨ，２００２に記載されている。式（Ｉ）の化合物の適切な薬学的に許容される塩には、例えば、式（Ｉ）の化合物の溶液と薬学的に許容される酸の溶液とを混合することによって形成され得る酸付加塩が含まれる。
【0030】
式（Ｉ）や以下の式に含まれる個々の原子は、実際には天然に存在する同位体のいずれかの形で存在していてもよいが、最も豊富な同位体が好ましいことを理解していただきたい。同様に、式（Ｉ）又は以下に示す式中の個々の水素原子は、１Ｈ、２Ｈ（重水素）又は３Ｈ（トリチウム）原子、好ましくは１Ｈとして存在してもよい。同様に、式（Ｉ）又は以下に示す式中の個々の炭素原子は、１２Ｃ、１３Ｃ又は１４Ｃ原子、好ましくは１２Ｃとして存在してもよい。
【0031】
本発明は、上記式（Ｉ）の化合物の溶媒和物をその範囲に含む。そのような溶媒和物は、一般的な有機溶媒又は水で形成することができる。
【0032】
また、本発明は、上記式（Ｉ）の化合物の共結晶もその範囲に含まれる。「共結晶」という技術用語は、結晶性化合物の中に中性分子成分が一定の化学量論的比率で存在している状態を表すために用いられる。医薬用共結晶の調製は、医薬活性成分の結晶形に変更を加えることを可能にし、それにより、意図された生物学的活性を損なうことなく、その物理化学的特性を変化させることができる（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ ａｎｄ Ｃｏ‐ｃｒｙｓｔａｌｓ，ｅｄ．Ｊ．Ｗｏｕｔｅｒｓ＆Ｌ．Ｊ．Ｗｏｕｔｅｒｓ＆Ｌ．Ｑｕｅｒｅ，ＲＳＣ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，２０１２を参照）。）
【0033】
本発明による化合物は、異なる多形の形態で存在してもよい。上記の式では明示的に示されていないが、そのような形態は本発明の範囲に含まれることが意図されている。
【0034】
また、本発明は、式（Ｉ）の化合物のプロドラッグ形態、及びその様々なサブスコープとサブグループをその範囲内に含む。
【0035】
式（Ｉ）の化合物は、２つの不斉中心を含むため、それに応じてジアステレオマーが存在する可能性がある。本発明は、このようなジアステレオ異性体のすべて、及びそれらの任意の割合での混合物の使用にも及ぶものと理解されるべきである。したがって、式（Ｉ）は、別段の記載又は表示がない限り、すべての個々の立体異性体及びその可能な混合物を表すことを意図している。
【0036】
本発明の特定の局面では、式（ＩＡ）の２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］‐１‐［（１Ｓ）‐５‐［（１Ｓ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐イル］エテノン
又はその薬学的に許容される塩が提供される。
【化2】
又はその薬学的に許容される塩が提供される。
【0037】
もちろん、上述の治療上の適応症や疾患における活性は、特定の適応症について及び／又は一般的な臨床試験のデザインにおいて、当業者に知られている方法で適切な臨床試験を実施することによって決定することができる。
【0038】
疾患の治療には、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を１日あたりの有効量で使用し、医薬組成物の形で投与することができる。
【0039】
したがって、本発明は、上記の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を、１つ又は複数の薬学的に許容される担体と関連させて含む医薬組成物も提供する。
【0040】
本発明による医薬組成物を調製するには、当業者に知られている従来の医薬配合技術に従って、式（Ｉ）の化合物の１つ又は複数又はその医薬的に許容される塩を、医薬用希釈剤又は担体と密接に混合する。
【0041】
適切な希釈剤や担体は、経口、直腸、非経口、鼻腔内など、目的の投与経路に応じてさまざまな形態をとることができる。
【0042】
本発明による医薬組成物は、例えば、経口、非経口、すなわち、静脈内、筋肉内、皮下、髄腔内、吸入、鼻腔内に投与することができる。
【0043】
経口投与に適した医薬組成物は、固体又は液体であり、例えば、錠剤、ピル、ドラジェ、ゼラチンカプセル、溶液、シロップ、チューイングガムなどの形態とすることができる。
【0044】
そのために、活性成分を不活性な希釈剤や、デンプンやラクトースなどの非毒性の薬学的に許容される担体と混合することができる。任意で、これらの医薬組成物は、微結晶性セルロース、トラガカントガム、ゼラチンなどの結合剤、アルギン酸などの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、コロイド状二酸化ケイ素などの滑剤、スクロース、サッカリンなどの甘味料、又は着色料、又はペパーミント、サリチル酸メチルなどの香料を含むこともできる。
【0045】
また、本発明は、活性物質を制御された方法で放出することができる組成物も意図している。非経口投与に使用できる医薬組成物は、水性又は油性の溶液又は懸濁液のような従来の形態であり、一般にアンプル、使い捨て注射器、ガラス又はプラスチック製のバイアル、又は輸液容器に入っている。
【0046】
これらの溶液や懸濁液には、有効成分のほかに、注射用水、生理食塩水、油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又はその他の合成溶媒などの無菌希釈剤、ベンジルアルコールなどの抗菌剤、アスコルビン酸や重亜硫酸ナトリウムなどの抗酸化剤、エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤、酢酸塩、クエン酸塩、リン酸塩などの緩衝剤、塩化ナトリウムやデキストロースなどの浸透圧調整剤を任意に配合することができる。
【0047】
これらの医薬品は、薬剤師が日常的に使用している方法で調製される。
【0048】
特定の症状の予防又は治療に必要な本発明で使用する化合物の量は、選択した化合物及び治療を受ける患者の状態によって異なる。しかし、一般的には、１日の投与量は０．０５～３０００ｍｇ、非経口組成物の場合は通常０．５ｍｇ～１０００ｍｇの範囲であり得る。
【0049】
本発明に係る化合物又はその薬学的に許容される塩は、単独で投与しても（単剤療法）、Ｌ‐ドーパと組み合わせて投与しても（併用療法）よい。本発明に係る式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、患者の運動障害を改善するのに必要なＬ‐ドーパの用量の一部を単独で、又は併用して、Ｌ‐ドーパの投与に伴うジスキネジアの治療に有用であり得る。例えば、本発明による式（Ｉ）の化合物を、患者に投与されるＬ‐ドーパの用量の一部分と一緒に使用したり、Ｌ‐ドーパの代わりに単独で使用した場合、本発明による式（Ｉ）の化合物は、厄介なジスキネジアを誘発することなく、運動障害に対して有効であると考えられる。従って、本発明による化合物は、運動機能障害及びレボドパ誘発性ジスキネジア（ＬＩＤ）の治療に有用であると考えられる。
【0050】
従って、１つの特定の局面において、本発明は、レボドパ誘発性ジスキネジア（ＬＩＤ）の治療に有用な、式（Ｉ）の化合物も提供する。
【0051】
本発明に係る化合物又はその薬学的に許容される塩は、単独で投与してもよいし、他の薬学的活性成分と組み合わせて投与してもよい。
【0052】
式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩ）の中間体と式（ＩＩＩ）の中間体を反応させることを含むプロセスによって調製することができる。
【化3】
【0053】
次に、中間体（ＩＩＩ）の塩酸塩を、（２‐（１Ｈ‐ベンゾトリアゾール‐１‐イル）‐１，１，３，３‐テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）又は当業者に知られている他のカップリング剤の存在下、適切な溶媒、例えばジメチルホルムアミド中で、過剰の塩基、例えばＮ，Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミンを用いて、式（ＩＩ）の中間体と反応させる。
【0054】
式（ＩＩＩ）の中間体は、Ｙがハロゲン、例えばブロモを表す式（ＩＶ）の中間体と、市販のフルオロアセトンとの反応を含むプロセスによって調製することができる。
【化4】
【0055】
この反応は、当業者に知られている方法に従って、例えばｎ‐ＢｕＬｉの存在下で、適切な溶媒、例えばテトラヒドロフラン中で、低温で金属‐ハロゲン交換によって好都合に行われる。
【0056】
上記の反応において、式（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の中間体のアミノ基は、一般に、さらなる試薬と反応させる前に、当業者に知られている方法に従って、まず適切な保護基、例えばｔｅｒｔ‐ブトキシカルボニル基で保護される。
【0057】
式（ＩＩＩａ）の中間体は、式（Ｖ）の中間体の反応を含むプロセスによって調製することができる。
式中、Ｙは上で定義されている通りである。
【化5】
式中、Ｙは上で定義されている通りである。
【0058】
この反応は、適切な還元剤、例えば水素化ホウ素ナトリウムの存在下で、適切な溶媒、例えばエタノール中で、低温で、当業者に知られている方法に従って行われるのが好都合である。
【0059】
式（Ｖ）の中間体は、式（ＶＩ）の中間体の反応を含むプロセスによって調製することができる。
式中、Ｙは上で定義されている通りである。
【化6】
式中、Ｙは上で定義されている通りである。
【0060】
この反応は、適切な溶媒、例えばメタノール中、硫酸の存在下で、室温で行うのが好ましい。
【0061】
式（ＶＩ）の中間体は、市販の中間体（ＶＩＩ）の反応を含むプロセスによって調製することができる。
式中、Ｙは上で定義されている通りである。
【化7】
式中、Ｙは上で定義されている通りである。
【0062】
この反応は、塩化オキサリルの存在下で、適切な溶媒、例えばジクロロメタンを用いて、低温で行い、その後、室温で塩化第二鉄を添加するのが好ましい。
【0063】
式（ＩＩ）の中間体は、式（ＶＩＩＩ）で表される中間体の反応を含む多段階プロセスによって調製することができる。
式中
Ｒ１は、水素、‐ＣＨ２ＯＨ、‐ＣＯＯＲａ、又は上で定義したＹを表す。
Ｒ２は‐ＣＯＯＲａを表す。
Ｒａは、水素又はＣ１‐６アルキルを表す。
【化8】
式中
Ｒ１は、水素、‐ＣＨ２ＯＨ、‐ＣＯＯＲａ、又は上で定義したＹを表す。
Ｒ２は‐ＣＯＯＲａを表す。
Ｒａは、水素又はＣ１‐６アルキルを表す。
【0064】
第一段階では、Ｒ１が水素を表し、Ｒａがメチルを表す式（ＶＩＩＩ）の中間体を、適切な溶媒、例えばジクロロメタン中で、酸化剤、例えばｍ‐クロロ過安息香酸（ｍ‐ＣＰＢＡ）と低温で反応させて、対応するＮ‐オキシドを得る。
【0065】
第二段階では、第一段階の結果として得られたＮ‐オキシドを、オキシ臭化リンと反応させて、Ｒ１が上で定義されたＹを表し、Ｒａがメチルを表す式（ＶＩＩＩ）の対応する中間体を得る。
【0066】
第３のステップでは、Ｒ１が上で定義されたＹを表す式（ＶＩＩＩ）の中間体を、塩基、例えばＮ，Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミンの存在下で、遷移金属触媒、例えば１，４‐ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン‐パラジウム（ＩＩ）クロリドの存在下で、一酸化炭素と反応させて、Ｒ１が‐ＣＯＯＲａを表し、Ｒａがメチルを表す式（ＶＩＩＩ）の対応する中間体を得る。この反応は、高温高圧で行うのが好ましい。
【0067】
続いて、後者の中間体のＲ１のエステル基を対応するアルコールに還元し、続いてＲ２のエステル基を対応するカルボン酸に加水分解して、式（ＩＩ）の中間体を得る。この反応は、当業者によく知られた方法と、添付の実施例でさらに詳しく説明した方法に従って行われる。
【0068】
Ｒ１が水素を表し、Ｒａがメチルを表す式（ＶＩＩＩ）の中間体は、添付の実施例に記載されている方法に類似した方法、又は当業者に知られている標準的な方法で調製することができる。
【0069】
本発明による化合物の調製のための上述のプロセスのいずれかから生成物の混合物が得られた場合、目的の生成物は、適切な段階で、分取ＨＰＬＣなどの、又は適切な溶媒系と組み合わせた、例えばシリカ及び／又はアルミナを利用したカラムクロマトグラフィーなどの、従来の方法によって、そこから分離することができる。
【0070】
本発明による化合物の調製のための上述のプロセスが、立体異性体の混合物を生じさせる場合、これらの異性体は、従来の技術によって分離することができる。特に、式（Ｉ）の化合物の特定のエナンチオマーを得ることが望まれる場合には、これはエナンチオマーを分離するための任意の適切な従来の手順を用いて、エナンチオマーの対応する混合物から生成することができる。例えば、式（Ｉ）のエナンチオマーの混合物（例えばラセミ体）と、適切なキラル化合物（例えばキラル塩基）を反応させることにより、ジアステレオマーの誘導体（例えば塩）を製造することができる。次に、ジアステレオマーを結晶化などの任意の方法で分離し、ジアステレオマーが塩である場合には酸で処理するなどして、目的のエナンチオマーを回収することができる。別の分離プロセスでは、キラルＨＰＬＣを用いて式（Ｉ）のラセミ体を分離することができる。さらに、必要に応じて、上述のプロセスの１つで適切なキラル中間体を使用して、特定のエナンチオマーを得ることができる。また、特定のエナンチオマーは、エナンチオマー特異的な酵素的生体変換、例えば、エステラーゼを用いたエステル加水分解を行い、その後、エナンチオマー的に純粋な加水分解された酸のみを未反応のエステル対掌体から精製することによって得ることができる。本発明の特定の幾何学的異性体を得ることが望まれる場合、中間体又は最終製品に、クロマトグラフィー、再結晶、及びその他の従来の分離手順を使用することもできる。あるいは、酸又は塩基の存在下で、当業者に知られている方法、又は添付の実施例に記載されている方法に従って、非所望のエナンチオマーを所望のエナンチオマーにラセミ化してもよい。
【0071】
上記の合成過程では、関与する分子のいずれかの感受性の基や反応性の基を保護することが必要及び／又は望ましい場合がある。これは、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｅｄ．Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，１９７３；及びＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ＆Ｐ．Ｇ．Ｍ． Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，３ｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９９に記載されているような、従来の保護基を用いて達成することができる。保護基は、その後の任意の好都合な段階で、当技術分野で知られている方法を用いて除去することができる。
【0072】
本発明による式（Ｉ）の化合物は、ドーパミンＤ１受容体を直接活性化するのではなく、Ｄ１アゴニスト又はＤ１受容体に対する内因性リガンドであるドーパミンの作用をアロステリックなメカニズムで増強するので、Ｄ１ポジティブアロステリックモジュレーター（Ｄ１ ＰＡＭ）である。
【0073】
ドーパミン及びその他のＤ１アゴニストは、それ自体でドーパミンＤ１受容体を直接活性化する。
【0074】
ドーパミンが存在しない場合（「活性化アッセイ」）と、ドーパミンが存在する場合（「増強アッセイ」）に、本発明に係る化合物の効果を測定するアッセイが設計されている。
【0075】
活性化アッセイでは、均質時間分解蛍光（ＨＴＲＦ；Ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ Ｔｉｍｅ Ｒｅｓｏｌｖｅｄ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ）アッセイにおけるサイクリックアデノシンモノホスファート（ｃＡＭＰ）の産生の刺激を測定し、内因性アゴニストであるドーパミンの濃度上昇によるｃＡＭＰの最大増加を１００％活性化と定義した。
【0076】
テストしたところ、実施例による式（Ｉ）の化合物は、１０μＭの濃度で存在する場合、（ドーパミンの最大応答と比較して）約２０％未満の活性化をもたらすという点で、有意な直接アゴニスト様効果を欠いている。
【0077】
増強アッセイでは，低閾値濃度のドーパミンによって生成されるｃＡＭＰレベルを増加させる化合物の能力を測定する。使用したドーパミン濃度（［ＥＣ２０］）は、ドーパミン濃度を上げたときの最大反応（１００％）に対して、２０％の刺激を与えるように設計されている。この増強効果を測定するために、ドーパミンの［ＥＣ２０］に合わせて化合物の濃度を上げてインキュベートし、ｃＡＭＰ産生の増加として増強効果を測定し、ｃＡＭＰレベルの増強効果の５０％をもたらす化合物の濃度を測定する。
【0078】
ｃＡＭＰ ＨＴＲＦアッセイでテストしたところ、実施例に従った式（Ｉ）の化合物は、ｐＥＣ５０の値が約６．５より大きく、Ｄ１ポジティブアロステリックモジュレーターであることがわかった。
【0079】
ＧＡＢＡＡ受容体の阻害は、発作やてんかんと密接な関係があることが知られている。そのため、Ｄ１ポジティブアロステリックモジュレーターであると同時に、そのような影響を最小限に抑える化合物の開発が望まれている。
【0080】
本明細書に記載のＧＡＢＡ‐Ａ受容体阻害アッセイで試験した場合、式（Ｉ）の化合物は、１０μＭの濃度の式（Ｉ）の化合物で測定したＧＡＢＡＡ受容体の阻害率が約２０％以下であることを示した。
【0081】
治療用の化合物を開発する際に直面し得る問題は、特定の化合物がＣＹＰ４５０酵素を阻害する能力である。このような酵素の阻害は、そのような化合物や、それと一緒に患者に投与される可能性のある他の化合物の曝露に影響を与え、それによってそれぞれの安全性や有効性を変化させる可能性がある。従って、このような阻害の可能性を最小限に抑えた化合物を開発することが望ましい。
【0082】
本発明による式（Ｉ）の化合物のＣＹＰ４５０阻害能は、本発明による化合物の濃度を増加させてインキュベートしたヒト肝細胞におけるＣＹＰ４５０活性の潜在的な減少を測定することによって試験されている。
【0083】
本特許出願に記載されているプロトコルに従って、１及び２０μＭの濃度でＣＹＰ３Ａ４阻害アッセイで試験した場合、本発明による式（Ｉ）の化合物は、約４０％未満、理想的には約３０％未満の阻害を示す。
【0084】
治療用の化合物を開発する際には、体内に投与された後の排泄について把握しておくことが重要である。
【0085】
クリアランスとは、その情報を提供するパラメータであるが、それは対象となる化合物が完全に除去された血漿（又は血液）の体積を時間単位で表したものだからである。これは通常、ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ又はＬ／ｈで表される。この値を生理的な血流（例：肝臓の血流）と比較することで、クリアランスが低いか、中程度か、高いかを評価することができる。
【0086】
クリアランスが低い場合は、分布容積に応じて、低用量を必要とし、比較的長い作用時間が得られると考えられる。クリアランスが高い場合は、やはり分布容積に応じて、高用量が必要となり、作用時間は比較的短くなると考えられる。
【0087】
一般的にクリアランスは、本明細書に記載されているプロトコルに従って、主な排泄経路が代謝であると仮定し、肝細胞培養とスケーリング計算を用いて評価される。肝細胞から評価される固有のクリアランスは、μｌ／ｍｉｎ／１０６細胞で表される。
【0088】
本明細書に記載のクリアランスアッセイで試験した場合、本発明に係る式（Ｉ）の化合物は、有利にも約１０μｌ／分／１０６細胞未満のクリアランスを示す。
【0089】
ｃＡＭＰ ＨＴＲＦ アッセイ
化合物をテストした特定の条件を以下に示す。
化合物をテストした特定の条件を以下に示す。
【0090】
ａ．方法 Ｄ１ 細胞培養
細胞は、５％ＣＯ２の加湿雰囲気下、３７℃で培養した。細胞は，１０％ウシ胎児血清（ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ（登録商標），Ｌｏｎｚａ，Ｖｅｒｖｉｅｒｓ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）、４００μｇ／ｍＬゲネチシン（ＧＩＢＣＯ（登録商標））、１００ＩＵ／ｍＬペニシリン及び１００ＩＵ／ｍＬストレプトマイシン（Ｐｅｎ‐Ｓｔｒｅｐ ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ（登録商標））を含むＤＭＥＭ‐Ｆ１２＋ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）‐Ｉ培地（ＧＩＢＣＯ（登録商標），Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｍｅｒｅｌｂｅｋｅ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）で培養した。ドーパミンＤ１受容体を発現するＬＭｔｋ（Ｌｔｋ‐）マウス線維芽細胞（ＢｉｏＳｉｇｎａｌ Ｉｎｃ，Ｍｏｎｔｒｅａｌ，Ｃａｎａｄａ，現Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）は、効率的にカップリングし、強固な機能的応答を与えることが示されているので、これを使用した（Ｗａｔｔｓ ｅｔ ａｌ，１９９５）。
細胞は、５％ＣＯ２の加湿雰囲気下、３７℃で培養した。細胞は，１０％ウシ胎児血清（ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ（登録商標），Ｌｏｎｚａ，Ｖｅｒｖｉｅｒｓ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）、４００μｇ／ｍＬゲネチシン（ＧＩＢＣＯ（登録商標））、１００ＩＵ／ｍＬペニシリン及び１００ＩＵ／ｍＬストレプトマイシン（Ｐｅｎ‐Ｓｔｒｅｐ ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ（登録商標））を含むＤＭＥＭ‐Ｆ１２＋ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）‐Ｉ培地（ＧＩＢＣＯ（登録商標），Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｍｅｒｅｌｂｅｋｅ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）で培養した。ドーパミンＤ１受容体を発現するＬＭｔｋ（Ｌｔｋ‐）マウス線維芽細胞（ＢｉｏＳｉｇｎａｌ Ｉｎｃ，Ｍｏｎｔｒｅａｌ，Ｃａｎａｄａ，現Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）は、効率的にカップリングし、強固な機能的応答を与えることが示されているので、これを使用した（Ｗａｔｔｓ ｅｔ ａｌ，１９９５）。
【0091】
ｂ．ｃＡＭＰアッセイ
細胞内サイクリックアデノシンモノホスファート（ｃＡＭＰ）の変化の測定は、ＣｉｓＢｉｏ社（Ｃｏｄｏｌｅｔ，Ｆｒａｎｃｅ）のＨＴＲＦ ｃＡＭＰダイナミックアッセイキットを用いて行った。このアッセイは、均質な時間分解蛍光法を用いて、細胞が産生するネイティブなｃＡＭＰと色素ｄ２で標識したｃＡＭＰとの競合に基づいている。トレーサーの結合は、クリプト酸で標識した抗ｃＡＭＰ抗体によって決定される。化合物単独の効果（アゴニズム）はドーパミンの非存在下でアッセイを行うことにより測定し、一方、ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）としての化合物の効果はＥＣ２０濃度のドーパミンの存在下で測定した。イソブチルメチルキサンチン（Ｓｉｇｍａ社、最終０．１ｍＭ）、ドーパミン（最終１．１ｎＭ）の存在下及び非存在下で濃度を変化させた試験化合物（通常１０－９．５Ｍ～１０－４．５Ｍ）を含む最終体積２０μＬのＨＢＳＳ（Ｌｏｎｚａ社、カルシウム、マグネシウム、ＨＥＰＥＳ緩衝液２０ｍＭ、ｐＨ７．４）中で、細胞（ウェルあたり２０，０００個）を３８４プレートに入れて、室温で１時間インキュベートする。その後、メーカーの指示に従い、溶解バッファー中のｄ２検出試薬（１０μＬ）と、溶解バッファー中のクリプト酸試薬（１０μＬ）を加えて反応を終了し、細胞を溶解する。これを室温でさらに６０分間インキュベートし、レーザー励起のＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ，Ｚａｖｅｎｔｅｍ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）を用いて、メーカーの指示に従ってＨＴＲＦ蛍光発光比の変化を測定した。すべてのインキュベーションは二回行い、結果はドーパミンに対する濃度効果曲線と比較した。（１０－１１Ｍから１０－６Ｍ）。
細胞内サイクリックアデノシンモノホスファート（ｃＡＭＰ）の変化の測定は、ＣｉｓＢｉｏ社（Ｃｏｄｏｌｅｔ，Ｆｒａｎｃｅ）のＨＴＲＦ ｃＡＭＰダイナミックアッセイキットを用いて行った。このアッセイは、均質な時間分解蛍光法を用いて、細胞が産生するネイティブなｃＡＭＰと色素ｄ２で標識したｃＡＭＰとの競合に基づいている。トレーサーの結合は、クリプト酸で標識した抗ｃＡＭＰ抗体によって決定される。化合物単独の効果（アゴニズム）はドーパミンの非存在下でアッセイを行うことにより測定し、一方、ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）としての化合物の効果はＥＣ２０濃度のドーパミンの存在下で測定した。イソブチルメチルキサンチン（Ｓｉｇｍａ社、最終０．１ｍＭ）、ドーパミン（最終１．１ｎＭ）の存在下及び非存在下で濃度を変化させた試験化合物（通常１０－９．５Ｍ～１０－４．５Ｍ）を含む最終体積２０μＬのＨＢＳＳ（Ｌｏｎｚａ社、カルシウム、マグネシウム、ＨＥＰＥＳ緩衝液２０ｍＭ、ｐＨ７．４）中で、細胞（ウェルあたり２０，０００個）を３８４プレートに入れて、室温で１時間インキュベートする。その後、メーカーの指示に従い、溶解バッファー中のｄ２検出試薬（１０μＬ）と、溶解バッファー中のクリプト酸試薬（１０μＬ）を加えて反応を終了し、細胞を溶解する。これを室温でさらに６０分間インキュベートし、レーザー励起のＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ，Ｚａｖｅｎｔｅｍ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）を用いて、メーカーの指示に従ってＨＴＲＦ蛍光発光比の変化を測定した。すべてのインキュベーションは二回行い、結果はドーパミンに対する濃度効果曲線と比較した。（１０－１１Ｍから１０－６Ｍ）。
【0092】
ｃ．データ分析
Ｅｘｃｅｌ及びＰＲＩＳＭ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いてデータを解析し、４パラメータロジスティック式（ＤｅＬｅａｎ ｅｔ ａｌ，１９７８）を用いてｐＥＣ５０及びＥｒｅｌを求めた。Ｅｒｅｌは、被験物質の最大反応から基底状態を差し引いた値を、ドーパミンで得られた反応を１００％とした場合の相対的な割合で表したものである。
Ｅｘｃｅｌ及びＰＲＩＳＭ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いてデータを解析し、４パラメータロジスティック式（ＤｅＬｅａｎ ｅｔ ａｌ，１９７８）を用いてｐＥＣ５０及びＥｒｅｌを求めた。Ｅｒｅｌは、被験物質の最大反応から基底状態を差し引いた値を、ドーパミンで得られた反応を１００％とした場合の相対的な割合で表したものである。
【0093】
化合物のｐＥＣ５０は、ｃＡＭＰレベルの５０％の増強をもたらす化合物の濃度の－ｌｏｇ１０である。
【0094】
Ｅｒｅｌは相対的な有効性を示すもので、濃度を上げたドーパミンで生じる最大反応と比較して、化合物で生じる最大増強％として定義される（１のＥｒｅｌ＝ドーパミンの最大反応）。
【0095】
本アッセイで試験する場合、式（Ｉａ）の化合物のｐＥＣ５０値は約６．９、式（Ｉｂ）の化合物のｐＥＣ５０値は約６．７であった。
【0096】
式（Ｉａ）の化合物が示す対応するＥｒｅｌは約６４％、式（Ｉｂ）の化合物が示す対応するＥｒｅｌは約６１％である。
【0097】
ＧＡＢＡ
Ａ
受容体細胞の自動パッチクランプ試験
ヒトＧＡＢＡＡ受容体α１、β２、及びβ２サブユニットを安定的に発現させたＣＨＯ‐Ｋ１細胞を用いた。細胞はトリプシンを用いて採取し、無血清培地で室温に維持した。試験前に細胞を洗浄し，細胞外液に再懸濁した。
ヒトＧＡＢＡＡ受容体α１、β２、及びβ２サブユニットを安定的に発現させたＣＨＯ‐Ｋ１細胞を用いた。細胞はトリプシンを用いて採取し、無血清培地で室温に維持した。試験前に細胞を洗浄し，細胞外液に再懸濁した。
【0098】
パッチクランプ試験
ヒトＧＡＢＡＡ（α１β２γ２）チャネルの実験は，自動パッチクランプアッセイ（ＩｏｎＦｌｕｘ（商標）ＨＴ）を用いて行った。化合物は３つの濃度（０．１，１，１０μＭ）で３～４個の細胞で試験した。ＧＡＢＡＡ電流を記録するための外部溶液は、塩化ナトリウム１３７ｍＭ、塩化カリウム４ｍＭ、塩化カルシウム１．８ｍＭ、塩化マグネシウム１ｍＭ、ＨＥＰＥＳ１０ｍＭ、グルコース１０ｍＭで構成された。外部溶液と内部溶液の両方をＮａＯＨ又はＫＯＨで滴定し、それぞれ７．３５又は７．３のｐＨを得た。内部ピペット液は、フッ化カリウム７０ｍＭ、塩化カリウム６０ｍＭ、塩化ナトリウム７０ｍＭ、ＨＥＰＥＳ５ｍＭ、ＥＧＴＡ５ｍＭ、及びマグネシウムＡＴＰ４ｍＭを含んでいた。化合物を希釈するために使用したビヒクルの最終濃度は、各ウェルで０．３３％のＤＭＳＯとした。ビククリン（０．０３２～１００μＭ）をポジティブコントロールの阻害剤として使用した。アゴニストとしてＧＡＢＡ（１５μＭ）を使用した。すべての記録は、－６０ｍＶの保持電位から得られた。
ヒトＧＡＢＡＡ（α１β２γ２）チャネルの実験は，自動パッチクランプアッセイ（ＩｏｎＦｌｕｘ（商標）ＨＴ）を用いて行った。化合物は３つの濃度（０．１，１，１０μＭ）で３～４個の細胞で試験した。ＧＡＢＡＡ電流を記録するための外部溶液は、塩化ナトリウム１３７ｍＭ、塩化カリウム４ｍＭ、塩化カルシウム１．８ｍＭ、塩化マグネシウム１ｍＭ、ＨＥＰＥＳ１０ｍＭ、グルコース１０ｍＭで構成された。外部溶液と内部溶液の両方をＮａＯＨ又はＫＯＨで滴定し、それぞれ７．３５又は７．３のｐＨを得た。内部ピペット液は、フッ化カリウム７０ｍＭ、塩化カリウム６０ｍＭ、塩化ナトリウム７０ｍＭ、ＨＥＰＥＳ５ｍＭ、ＥＧＴＡ５ｍＭ、及びマグネシウムＡＴＰ４ｍＭを含んでいた。化合物を希釈するために使用したビヒクルの最終濃度は、各ウェルで０．３３％のＤＭＳＯとした。ビククリン（０．０３２～１００μＭ）をポジティブコントロールの阻害剤として使用した。アゴニストとしてＧＡＢＡ（１５μＭ）を使用した。すべての記録は、－６０ｍＶの保持電位から得られた。
【0099】
化合物の添加順序は以下の通りであった。ベースライン反応を確立するためにＥＣ８０濃度のＧＡＢＡを１回添加した。化合物の各濃度を３０秒間適用した後、化合物の存在下で１５μＭのＧＡＢＡを２秒間添加した。このプロセスを、次の昇順の濃度の化合物で繰り返した。単一濃度の化合物の存在下でのＧＡＢＡ添加に応じたピーク内向き電流を測定した。すべての化合物のデータは，１５μＭのＧＡＢＡを２秒間添加することで誘発されるベースラインのピーク電流で正規化した。
【0100】
上述のアッセイでテストした場合、１０μＭの濃度で、式（Ｉａ）の化合物は、約１３％のＧＡＢＡＡ受容体の阻害率を示す。
【0101】
上述のアッセイでテストした場合、１０μＭの濃度で、式（Ｉｂ）の化合物は、約２０％のＧＡＢＡＡ受容体の阻害率を示す。
【0102】
凍結保存されたヒトミクロソームを用いたｉｎ ｖｉｔｒｏでのＣＹＰ３Ａ４阻害能の評価
ヒトミクロソームアッセイの目的は、特異的なＣＹＰ３Ａ４基質であるミダゾラムと共存させた後のＣＹＰ３Ａ４活性を測定することにより、式（Ｉ）の化合物の阻害能を明らかにすることにある。
ヒトミクロソームアッセイの目的は、特異的なＣＹＰ３Ａ４基質であるミダゾラムと共存させた後のＣＹＰ３Ａ４活性を測定することにより、式（Ｉ）の化合物の阻害能を明らかにすることにある。
【0103】
この目的のために、凍結保存されたヒトミクロソーム（ドナーをプールしたもの）を、最終濃度が０．２５ｍｇ／ｍｌになるように４８ウェルのコラーゲンコートプレートに分割する。その後、ＵＣＢ化合物を１μＭ及び２０μＭの濃度で２回に分けてウェルに添加する。３０分のインキュベーション後、ミダゾラムを２．５μＭの濃度で添加する。１５分後、アリコートを取り出し、内部標準物質を含む同量のメタノールに入れる。サンプルを２５００ｒｐｍ、４℃で２０分間遠心分離する。上澄み液のアリコートを脱イオン水で希釈し、一般的なＬＣ ＭＳ／ＭＳ法を用いて１‐ヒドロキシミダゾラムの濃度を定量する。
【0104】
濃度は、同じ濃度でのミダゾラムインキュベートの後に得られた濃度と比較しているが、ＵＣＢ化合物のプレインキュベーションは行っていない。結果は阻害率（％）で表した。
【0105】
本発明による式（Ｉａ）の化合物は、２０μＭの濃度で約２８％、１μＭの濃度で約２０％のＣＹＰ３Ａ４の阻害率を示す。
【0106】
アザムリン アッセイ
凍結保存されたヒト肝細胞（２０人のドナーのプール、Ｃｅｌｓｉｓ／ＩＶＴ／ＢｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎのＢＳＵバッチ）を提供者の情報に従って解凍した。（トリパンブルー排除による）生存率は７５％より上であった。プレインキュベーション（２ｘ１０個６の肝細胞／ｍＬの肝細胞懸濁液２５０μＬ）は、グルタミン２ｍＭとＨｅｐｅｓ１５ｍＭを含むＷｉｌｌｉａｍ培地を用いて、４８ウェルプレートで＋３７℃のインキュベーター（５％ＣＯ２）内で、穏やかな攪拌（振動攪拌機Ｔｉｔｒａｍａｘ １００，約３００ｒｐｍ）の下、３０分間行った。プレインキュベーション後、ＵＣＢ化合物（１μＭ）又はミダゾラム（ポジティブコントロール）を含む２５０μＬの培養液（上記組成参照）を肝細胞に添加してインキュベーションを開始した。培養液中のＵＣＢ化合物の最終濃度は０．５μＭである。細胞懸濁液は、２回のインアウトピペッティングにより迅速に再ホモジナイズした。０分，３０分，６０分，１２０分，１８０分，２４０分培養した後，５０μｌの培養液を，内部標準物質として１μＭのケトコナゾールを含む５０μＬの氷冷したアセトニトリルが入った９６ウェルプレートの適切なウェルに移して反応を停止した。各サンプリングの前に、細胞インキュベートを２回のインアウトピペッティングで再度ホモジナイズした。
凍結保存されたヒト肝細胞（２０人のドナーのプール、Ｃｅｌｓｉｓ／ＩＶＴ／ＢｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎのＢＳＵバッチ）を提供者の情報に従って解凍した。（トリパンブルー排除による）生存率は７５％より上であった。プレインキュベーション（２ｘ１０個６の肝細胞／ｍＬの肝細胞懸濁液２５０μＬ）は、グルタミン２ｍＭとＨｅｐｅｓ１５ｍＭを含むＷｉｌｌｉａｍ培地を用いて、４８ウェルプレートで＋３７℃のインキュベーター（５％ＣＯ２）内で、穏やかな攪拌（振動攪拌機Ｔｉｔｒａｍａｘ １００，約３００ｒｐｍ）の下、３０分間行った。プレインキュベーション後、ＵＣＢ化合物（１μＭ）又はミダゾラム（ポジティブコントロール）を含む２５０μＬの培養液（上記組成参照）を肝細胞に添加してインキュベーションを開始した。培養液中のＵＣＢ化合物の最終濃度は０．５μＭである。細胞懸濁液は、２回のインアウトピペッティングにより迅速に再ホモジナイズした。０分，３０分，６０分，１２０分，１８０分，２４０分培養した後，５０μｌの培養液を，内部標準物質として１μＭのケトコナゾールを含む５０μＬの氷冷したアセトニトリルが入った９６ウェルプレートの適切なウェルに移して反応を停止した。各サンプリングの前に、細胞インキュベートを２回のインアウトピペッティングで再度ホモジナイズした。
【0107】
サンプルはＬＣ‐ＭＳ‐ＭＳバイオ分析法により分析し、ＵＣＢ化合物の濃度が測定する。濃度対時間のプロファイルをフィッティングして、μｌ／ｍｉｎ／１０６細胞で表される固有のクリアランス（Ｃｌｉｎｔ）を決定する。
【0108】
異なる濃度のヒト肝細胞懸濁液でインキュベートした場合、本発明による式（Ｉａ）の化合物の固有のクリアランス（Ｃｌｉｎｔ）は約８．８μｌ／ｍｉｎ／１０６細胞に等しく、式（Ｉｂ）の化合物の固有のクリアランス（Ｃｌｉｎｔ）は約９．２μｌ／ｍｉｎ／１０６細胞である。
【0109】
以下の実施例は、本発明による式（Ｉ）の化合物の調製を説明するものである。
【実施例】
【0110】
例
略語／繰り返し登場する試薬
ＡＣＮ：アセトニトリル
ｃＡＭＰ：サイクリックアデノシンモノホスファート
ブライン：飽和塩化ナトリウム水溶液
ｎＢｕ：ｎ‐ブチル
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ‐ブチル
ＣＨＯ：チャイニーズハムスター卵巣
ｍ‐ＣＰＢＡ：３‐クロロ過安息香酸
ＣＹＰ４５０：シトクロムＰ４５０
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ‐ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＥＣ２０／５０：最大反応の２０％／５０％をもたらす濃度
ＥＧＴＡ：エグタズ酸
Ｅｒｅｌ：相対的有効性
ＥＳ＋：エレクトロスプレー陽イオン化
Ｅｔ：エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＧＡＢＡ：γ‐アミノ酪酸
ｈ：時間
ＨＥＰＥＳ：４‐（２‐ヒドロキシエチル）‐１‐ピペラジンエタンスルホン酸
ＨＰＬＣ：高圧液体クロマトグラフィー
ＨＴＲＦ：均質時間分解蛍光
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析
ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド
ＭｅＯＨ：メタノール
ｍｉｎ．：分
ＮＭＲ：核磁気共鳴
ｉＰｒＯＨ：イソプロパノール
ｒｔ：室温
ＳＦＣ：超臨界流体クロマトグラフィー
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＩＵＰＡＣ名はＢｉｏｖｉａ Ｄｒａｗ １６．１を用いて決定している。
略語／繰り返し登場する試薬
ＡＣＮ：アセトニトリル
ｃＡＭＰ：サイクリックアデノシンモノホスファート
ブライン：飽和塩化ナトリウム水溶液
ｎＢｕ：ｎ‐ブチル
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ‐ブチル
ＣＨＯ：チャイニーズハムスター卵巣
ｍ‐ＣＰＢＡ：３‐クロロ過安息香酸
ＣＹＰ４５０：シトクロムＰ４５０
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ‐ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＥＣ２０／５０：最大反応の２０％／５０％をもたらす濃度
ＥＧＴＡ：エグタズ酸
Ｅｒｅｌ：相対的有効性
ＥＳ＋：エレクトロスプレー陽イオン化
Ｅｔ：エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＧＡＢＡ：γ‐アミノ酪酸
ｈ：時間
ＨＥＰＥＳ：４‐（２‐ヒドロキシエチル）‐１‐ピペラジンエタンスルホン酸
ＨＰＬＣ：高圧液体クロマトグラフィー
ＨＴＲＦ：均質時間分解蛍光
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析
ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド
ＭｅＯＨ：メタノール
ｍｉｎ．：分
ＮＭＲ：核磁気共鳴
ｉＰｒＯＨ：イソプロパノール
ｒｔ：室温
ＳＦＣ：超臨界流体クロマトグラフィー
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＩＵＰＡＣ名はＢｉｏｖｉａ Ｄｒａｗ １６．１を用いて決定している。
【0111】
分析方法
空気や水分の影響を受けやすい試薬を含む反応はすべて、乾燥した溶媒やガラス器具を用いて、窒素又はアルゴン雰囲気下で行った。市販の溶媒や試薬は、必要に応じて無水溶媒（一般にはＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ社のＳｕｒｅ‐Ｓｅａｌ（商標）製品やＡＣＲＯＳ Ｏｒｇａｎｉｃｓ社のＡｃｒｏＳｅａｌ（商標））を含め、通常はさらに精製せずに使用した。一般的には、反応後に薄層クロマトグラフィー、ＨＰＬＣ、又は質量分析を行った。
空気や水分の影響を受けやすい試薬を含む反応はすべて、乾燥した溶媒やガラス器具を用いて、窒素又はアルゴン雰囲気下で行った。市販の溶媒や試薬は、必要に応じて無水溶媒（一般にはＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ社のＳｕｒｅ‐Ｓｅａｌ（商標）製品やＡＣＲＯＳ Ｏｒｇａｎｉｃｓ社のＡｃｒｏＳｅａｌ（商標））を含め、通常はさらに精製せずに使用した。一般的には、反応後に薄層クロマトグラフィー、ＨＰＬＣ、又は質量分析を行った。
【0112】
ＨＰＬＣ分析は、Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ＭＳ Ｃ１８，５ｐｍ，１５０Ｘ４．６ｍｍカラムを搭載したＡｇｉｌｅｎｔ １１００シリーズＨＰＬＣシステムを用いて実施した。グラジエントは、１００％溶媒Ａ（水／ＡＣＮ／ギ酸アンモニウム溶液 ８５／５／１０（ｖ／ｖ／ｖ））から１００％溶媒Ｂ（水／ＡＣＮ／ギ酸アンモニウム溶液 ５／８５／１０（ｖ／ｖ／ｖ））まで６分間で行い、１００％Ｂでのホールドは５分間とした。流速は、６分間は８ｍＬ／ｍｉｎ、２分間は３ｍＬ／ｍｉｎで増加し、３分間は３ｍＬ／ｍｉｎで保持する。ＡＰＩソースの直前で１／２５のスプリットを使用する。クロマトグラフィーは４５℃で行われる。ギ酸アンモニウム溶液（ｐＨ～８．５）は、ギ酸アンモニウム（６３０ｍｇ）を水（１Ｌ）に溶解し、水酸化アンモニウム３０％（５００μＬ）を加えて調製する。
【0113】
当業者であれば、異なる分析条件を用いれば、ＬＣデータで異なる保持時間が得られることは明らかであろう。
【0114】
ＬＣＭＳモードでの質量分析の測定は以下のように行う。
【0115】
‐ 塩基性の溶出については、以下の方法で分析を行う。
ＬＣＭＳ分析には，ＱＤＡ Ｗａｔｅｒｓ社製のシンプルな四重極型質量分析計を使用する。この質量分析計には，ＥＳＩ源と，ダイオードアレイ検出器（２００～４００ｎｍ）を備えたＵＰＬＣ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｈｃｌａｓｓが搭載されている。データは、塩基性の溶出を用いたポジティブモードでｍ／ｚ ７０から８００までのフルＭＳスキャンで取得される。逆相分離は、塩基性溶出用のＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨＣ１８ １．７μｍ（２．１ｘ５０ｍｍ）カラムを用いて４５℃で行われる。水／ＡＣＮ／ギ酸アンモニウム（９５／５／６３ｍｇ／Ｌ）（溶媒Ａ）及びＡＣＮ／水／ギ酸アンモニウム（９５／５／６３ｍｇ／Ｌ）（溶媒Ｂ）でグラジエント溶出を行う。注入量：１μＬ。ＭＳで全流速。
ＬＣＭＳ分析には，ＱＤＡ Ｗａｔｅｒｓ社製のシンプルな四重極型質量分析計を使用する。この質量分析計には，ＥＳＩ源と，ダイオードアレイ検出器（２００～４００ｎｍ）を備えたＵＰＬＣ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｈｃｌａｓｓが搭載されている。データは、塩基性の溶出を用いたポジティブモードでｍ／ｚ ７０から８００までのフルＭＳスキャンで取得される。逆相分離は、塩基性溶出用のＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨＣ１８ １．７μｍ（２．１ｘ５０ｍｍ）カラムを用いて４５℃で行われる。水／ＡＣＮ／ギ酸アンモニウム（９５／５／６３ｍｇ／Ｌ）（溶媒Ａ）及びＡＣＮ／水／ギ酸アンモニウム（９５／５／６３ｍｇ／Ｌ）（溶媒Ｂ）でグラジエント溶出を行う。注入量：１μＬ。ＭＳで全流速。
【0116】
塩基性プログラム 「４ｍｉｎ」
【表1】
【0117】
塩基性プログラム 「１０ｍｉｎ」
【表2】
【0118】
‐酸性の溶出の場合は、以下の方法で分析を行う。
ＬＣＭＳ分析には，ＱＤＡ Ｗａｔｅｒｓ社製のシンプルな四重極型質量分析計を使用する。この質量分析計には，ＥＳＩ源と，ダイオードアレイ検出器（２００～４００ｎｍ）を備えたＵＰＬＣ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｈｃｌａｓｓが搭載されている。データは、酸性溶出液を用いたポジティブモードで、ｍ／ｚ ７０から８００までのフルＭＳスキャンで取得される。逆相分離は、酸性溶出用のＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｔ３ １．８μｍ（２．１ｘ５０ｍｍ）カラムを用いて、４５℃で行われる。水／ＡＣＮ／ＴＦＡ（９５／５／０．５ｍＬ／Ｌ）（溶媒Ａ）とＡＣＮ（溶媒Ｂ）でグラジエント溶出を行う。注入量：１μＬ。ＭＳで全流速。
ＬＣＭＳ分析には，ＱＤＡ Ｗａｔｅｒｓ社製のシンプルな四重極型質量分析計を使用する。この質量分析計には，ＥＳＩ源と，ダイオードアレイ検出器（２００～４００ｎｍ）を備えたＵＰＬＣ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｈｃｌａｓｓが搭載されている。データは、酸性溶出液を用いたポジティブモードで、ｍ／ｚ ７０から８００までのフルＭＳスキャンで取得される。逆相分離は、酸性溶出用のＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｔ３ １．８μｍ（２．１ｘ５０ｍｍ）カラムを用いて、４５℃で行われる。水／ＡＣＮ／ＴＦＡ（９５／５／０．５ｍＬ／Ｌ）（溶媒Ａ）とＡＣＮ（溶媒Ｂ）でグラジエント溶出を行う。注入量：１μＬ。ＭＳで全流速。
【0119】
酸性プログラム 「４分」
【表3】
【0120】
酸性プログラム「１０分」
【表4】
【0121】
粗原料は、順相クロマトグラフィー、（酸性又は塩基性）逆相クロマトグラフィー、キラル分離、再結晶により精製することができる。
【0122】
通常の逆相クロマトグラフィーは、シリカゲルカラム（１００：２００メッシュのシリカゲル、又はＩｎｔｅｒｃｈｉｍ社のＰｕｒｉｆｌａｓｈ（登録商標）‐５０ＳＩＨＣ‐ＪＰカラム）を用いて行う。
【0123】
分取逆相クロマトグラフィーは以下のように行う。
ＬＣＭＳ精製には、ＳＱＤ又はＱＭ Ｗａｔｅｒｓトリプル四重極型質量分析計を使用するＬＣＭＳ精製（基本モード、ＬＣＭＳ分取）を用いる。このスペクトロメーターには、ＥＳＩ源と、ダイオードアレイ検出器（２１０～４００ｎｍ）を備えた分取型ＬＣコントローラＷａｔｅｒｓ四重極ポンプが搭載されている。
ＬＣＭＳ精製には、ＳＱＤ又はＱＭ Ｗａｔｅｒｓトリプル四重極型質量分析計を使用するＬＣＭＳ精製（基本モード、ＬＣＭＳ分取）を用いる。このスペクトロメーターには、ＥＳＩ源と、ダイオードアレイ検出器（２１０～４００ｎｍ）を備えた分取型ＬＣコントローラＷａｔｅｒｓ四重極ポンプが搭載されている。
【0124】
ＭＳパラメータ：ＥＳＩキャピラリー電圧３ｋＶ。コーン及びエクストラクタ電圧１０。ソースブロック温度１２０℃。脱溶媒和温度３００℃。コーンｇａｚ流速３０Ｌ／ｈ（窒素）、脱溶媒和気体流速６５０Ｌ／ｈ。データは、ポジティブモードでｍ／ｚ１００から７００までのフルＭＳスキャンで、酸性又は塩基性の溶出で取得される。
【0125】
ＬＣパラメータ：逆相分離は、ＸＢｒｉｄｇｅ ｐｒｅｐ ＯＢＤ Ｃ１８カラム（５μｍ，３０ｘ５０ｍｍ）（塩基性溶出）を用いてｒｔで行われる。勾配溶出は、水（溶媒Ａ）、ＡＣＮ（溶媒Ｂ）、水中の重炭酸アンモニウム８ｇ／Ｌ＋５００μＬ／Ｌ ＮＨ４ＯＨ ３０％（溶媒Ｃ）で行う（ｐＨ～８．５）。ＨＰＬＣの流速３５ｍＬ／ｍｉｎ～６０ｍＬ／ｍｉｎ、注入量：１ｍＬ。分割比は，ＭＳに対して±１／６０００とした。
【0126】
【表5】
【0127】
粗原料は、順相クロマトグラフィー、（酸性又は塩基性）逆相クロマトグラフィー、キラル分離、再結晶により精製することができる。
【0128】
生成物は最終的な分析や生物学的試験に提出する前に、一般的に真空下で乾燥した。
【0129】
すべてのＮＭＲスペクトルは、２５０ＭＨｚ、３００ＭＨｚ、４００ＭＨｚ又は５００ＭＨｚで得られた。
【0130】
１．中間体（ＩＩ）‐２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］酢酸の調製
【化9】
【0131】
１．１ ３，５‐ジクロロ‐４‐メチル‐ピリジンａ２の調製
ＬＤＡ（１．８６Ｌ、ＴＨＦ中の２Ｍ溶液、３．７２ｍｏｌ）とＴＨＦ（５．０Ｌ）を窒素下の反応器に投入する。３，５‐ジクロロ‐４‐メチル‐ピリジンａ１（５００ｇ、３．３８ｍｏｌ）を－２０℃で加え、混合物を－１０℃で３０分間撹拌する。反応物を－７０℃まで冷却し、ヨウ化メチル（８１５ｇ、５．７４ｍｏｌ）を加える。混合物を室温まで温め、４時間撹拌する。この全体的な手順は、同じサイズの４つのバッチで並行して行われ、それらは一緒に作業される。混合物を０℃に冷却し、水（５Ｌ）でクエンチし、１０分間撹拌する。水相を酢酸エチル（２×３Ｌ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１０Ｌ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮する。粗生成物を－７０℃のエタノール（４Ｌ）から再結晶により精製し、３，５‐ジクロロ‐４‐メチル‐ピリジンａ２を黄色の固体として得る（１．５ｋｇ、収率６８．５％）。
ＬＤＡ（１．８６Ｌ、ＴＨＦ中の２Ｍ溶液、３．７２ｍｏｌ）とＴＨＦ（５．０Ｌ）を窒素下の反応器に投入する。３，５‐ジクロロ‐４‐メチル‐ピリジンａ１（５００ｇ、３．３８ｍｏｌ）を－２０℃で加え、混合物を－１０℃で３０分間撹拌する。反応物を－７０℃まで冷却し、ヨウ化メチル（８１５ｇ、５．７４ｍｏｌ）を加える。混合物を室温まで温め、４時間撹拌する。この全体的な手順は、同じサイズの４つのバッチで並行して行われ、それらは一緒に作業される。混合物を０℃に冷却し、水（５Ｌ）でクエンチし、１０分間撹拌する。水相を酢酸エチル（２×３Ｌ）で抽出し、合わせた有機相をブライン（１０Ｌ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮する。粗生成物を－７０℃のエタノール（４Ｌ）から再結晶により精製し、３，５‐ジクロロ‐４‐メチル‐ピリジンａ２を黄色の固体として得る（１．５ｋｇ、収率６８．５％）。
【0132】
１．２ メチル２‐（３，５‐ジクロロ‐４‐ピリジル）アセタート‐中間体ａ３の調製
３，５‐ジクロロ‐４‐メチル‐ピリジンａ２（３７５ｇ、２．３１ｍｏｌ）とＤＭＦ（１．８７Ｌ）を反応器に投入し、混合物を１５℃まで冷却する。カリウムｔｅｒｔ‐ブトキシド（７７９ｇ、６．９４ｍｏｌ）を窒素下で１０～１５℃で加え、混合物を１５℃で３０分間撹拌する。炭酸ジメチル（７３０ｇ、８．１０ｍｏｌ）を１０‐１５℃で加え、混合物を３０℃で４時間撹拌する。この全体的な手順は、同じサイズの４つのバッチを並行して行い、それらは一緒に作業される。混合物を０℃に冷却し、水（１０Ｌ）で反応をクエンチし、１０分間撹拌する。反応混合物をろ過し、フィルターケーキを酢酸エチル（２Ｌ）で２回洗浄する。水相を酢酸エチル（３Ｌ）で２回抽出し、合わせた有機相をブライン（５Ｌ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮して、メチル２‐（３，５‐ジクロロ‐４‐ピリジル）アセタートａ３を黒褐色の液体として得た（１．３ｋｇ、収率６３．８％）。これをさらに精製することなく次のステップで使用する。
３，５‐ジクロロ‐４‐メチル‐ピリジンａ２（３７５ｇ、２．３１ｍｏｌ）とＤＭＦ（１．８７Ｌ）を反応器に投入し、混合物を１５℃まで冷却する。カリウムｔｅｒｔ‐ブトキシド（７７９ｇ、６．９４ｍｏｌ）を窒素下で１０～１５℃で加え、混合物を１５℃で３０分間撹拌する。炭酸ジメチル（７３０ｇ、８．１０ｍｏｌ）を１０‐１５℃で加え、混合物を３０℃で４時間撹拌する。この全体的な手順は、同じサイズの４つのバッチを並行して行い、それらは一緒に作業される。混合物を０℃に冷却し、水（１０Ｌ）で反応をクエンチし、１０分間撹拌する。反応混合物をろ過し、フィルターケーキを酢酸エチル（２Ｌ）で２回洗浄する。水相を酢酸エチル（３Ｌ）で２回抽出し、合わせた有機相をブライン（５Ｌ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮して、メチル２‐（３，５‐ジクロロ‐４‐ピリジル）アセタートａ３を黒褐色の液体として得た（１．３ｋｇ、収率６３．８％）。これをさらに精製することなく次のステップで使用する。
【0133】
１．３．メチル２‐（３，５‐ジクロロ‐１‐オキシド‐ピリジン‐１‐イウム‐４‐イル）アセタート‐中間体ａ４の調製
メチル２‐（３，５‐ジクロロ‐４‐ピリジル）アセタートａ３（６５０ｇ、２．９５ｍｏｌ）とジクロロメタン（３．２５Ｌ）を反応器に入れる。窒素下０℃でｍ‐ＣＰＢＡ（１．２７ｋｇ、５．９１ｍｏｌ、純度８０％）を加え、混合物を２５℃で５時間撹拌する。この全体的な手順は、一緒に作業する同じサイズの２つのバッチで並行して実施される。混合物を０℃に冷却し、水（４Ｌ）で反応をクエンチし、１０分間撹拌する。反応混合物をろ過し、フィルターケーキをジクロロメタン（３Ｌ）で２回洗浄する。水相をジクロロメタン（２Ｌ）で２回抽出し、合わせた有機相をＮａ２Ｓ２Ｏ３の飽和溶液（１５Ｌ）で３回、ブライン（１０Ｌ）で２回洗浄した後、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル２０：１～１：１）で精製し、メチル２‐（３，５‐ジクロロ‐１‐オキシド‐ピリジン‐１‐イウム‐４‐イル）アセタートａ４を黄色の固体として得る（９００ｇ、収率６４．２％）。
メチル２‐（３，５‐ジクロロ‐４‐ピリジル）アセタートａ３（６５０ｇ、２．９５ｍｏｌ）とジクロロメタン（３．２５Ｌ）を反応器に入れる。窒素下０℃でｍ‐ＣＰＢＡ（１．２７ｋｇ、５．９１ｍｏｌ、純度８０％）を加え、混合物を２５℃で５時間撹拌する。この全体的な手順は、一緒に作業する同じサイズの２つのバッチで並行して実施される。混合物を０℃に冷却し、水（４Ｌ）で反応をクエンチし、１０分間撹拌する。反応混合物をろ過し、フィルターケーキをジクロロメタン（３Ｌ）で２回洗浄する。水相をジクロロメタン（２Ｌ）で２回抽出し、合わせた有機相をＮａ２Ｓ２Ｏ３の飽和溶液（１５Ｌ）で３回、ブライン（１０Ｌ）で２回洗浄した後、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル２０：１～１：１）で精製し、メチル２‐（３，５‐ジクロロ‐１‐オキシド‐ピリジン‐１‐イウム‐４‐イル）アセタートａ４を黄色の固体として得る（９００ｇ、収率６４．２％）。
【0134】
１．４．メチル２‐（２‐ブロモ‐３，５‐ジクロロ‐４‐ピリジル）アセタート‐中間体ａ５の調製
メチル２‐（３，５‐ジクロロ‐１‐オキシド‐ピリジン‐１‐イウム‐４‐イル）アセタートａ４（９００ｇ，３．８１ｍｏｌ）とアセトニトリル（８Ｌ）を２０℃の反応器に投入する。オキシ臭化リン（ＰＯＢｒ３，１．０９ｋｇ，３．８１ｍｏｌ）を窒素下、０℃で加え、混合物を２５℃で１２時間撹拌する。この全体的な手順を別のバッチ（１．６４ｍｏｌスケール）にも並行して行い、２つを一緒に作業する。混合物を０℃に冷却し、水（３Ｌ）で反応をクエンチし、１０分間撹拌する。水相を酢酸エチル（２Ｌ）で２回抽出する。合わせた有機相をブライン（５Ｌ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル５０：１～１：１）で精製し、メチル２‐（２‐ブロモ‐３，５‐ジクロロ‐４‐ピリジル）アセタートａ５をオフホワイトの固体として得る（５０３ｇ、収率４３％）。
メチル２‐（３，５‐ジクロロ‐１‐オキシド‐ピリジン‐１‐イウム‐４‐イル）アセタートａ４（９００ｇ，３．８１ｍｏｌ）とアセトニトリル（８Ｌ）を２０℃の反応器に投入する。オキシ臭化リン（ＰＯＢｒ３，１．０９ｋｇ，３．８１ｍｏｌ）を窒素下、０℃で加え、混合物を２５℃で１２時間撹拌する。この全体的な手順を別のバッチ（１．６４ｍｏｌスケール）にも並行して行い、２つを一緒に作業する。混合物を０℃に冷却し、水（３Ｌ）で反応をクエンチし、１０分間撹拌する。水相を酢酸エチル（２Ｌ）で２回抽出する。合わせた有機相をブライン（５Ｌ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル５０：１～１：１）で精製し、メチル２‐（２‐ブロモ‐３，５‐ジクロロ‐４‐ピリジル）アセタートａ５をオフホワイトの固体として得る（５０３ｇ、収率４３％）。
【0135】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．３２（ｓ，１Ｈ），４．０７（ｓ，２Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ）
【0136】
１．５．メチル３，５‐ジクロロ‐４‐（２‐メトキシ‐２‐オキソエチル）ピリジン‐２‐カルボキシラート‐中間体ａ６の調製
メタノール（６０ｍＬ）中のメチル２‐（２‐ブロモ‐３，５‐ジクロロ‐４‐ピリジル）アセタートａ５（３ｇ、１０．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミン（２．４２ｍＬ、１４．６ｍｍｏｌ）及び１，４‐ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタンパラジウム（ＩＩ）クロリド（９１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応器を窒素で３回フラッシュした後、５バールの一酸化炭素で加圧（３回フラッシュ）し、混合物を８０℃で３時間加熱した。反応混合物を室温でセライト上でろ過し、減圧下で溶媒を除去した。その粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製した。（Ｂｉｏｔａｇｅ ＳＮＡＰ Ｕｌｔｒａ ２５ｇ、溶離液：酢酸エチル：ヘキサン１：１）。溶媒を真空下で除去して、３，５‐ジクロロ‐４‐（２‐メトキシ‐２‐オキソエチル）ピリジン‐２‐カルボキシラートａ６を黄色の液体として得た（１．８４ｇ、収率６６％）。
メタノール（６０ｍＬ）中のメチル２‐（２‐ブロモ‐３，５‐ジクロロ‐４‐ピリジル）アセタートａ５（３ｇ、１０．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミン（２．４２ｍＬ、１４．６ｍｍｏｌ）及び１，４‐ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタンパラジウム（ＩＩ）クロリド（９１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応器を窒素で３回フラッシュした後、５バールの一酸化炭素で加圧（３回フラッシュ）し、混合物を８０℃で３時間加熱した。反応混合物を室温でセライト上でろ過し、減圧下で溶媒を除去した。その粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製した。（Ｂｉｏｔａｇｅ ＳＮＡＰ Ｕｌｔｒａ ２５ｇ、溶離液：酢酸エチル：ヘキサン１：１）。溶媒を真空下で除去して、３，５‐ジクロロ‐４‐（２‐メトキシ‐２‐オキソエチル）ピリジン‐２‐カルボキシラートａ６を黄色の液体として得た（１．８４ｇ、収率６６％）。
【0137】
ＬＣＭＳ（ＭＨ＋）：２７８
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）δ８．７５（ｓ，１Ｈ），４．１２（ｓ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ）．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）δ８．７５（ｓ，１Ｈ），４．１２（ｓ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ）．
【0138】
１．６．メチル２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］アセタート‐中間体ａ７の調製
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のメチル３，５‐ジクロロ‐４‐（２‐メトキシ‐２‐オキソエチル）ピリジン‐２‐カルボキシラートａ６（３０５ｍｇ，１．０９ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で水素化ホウ素ナトリウム（１２４ｍｇ，３．２９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１８時間撹拌させた。反応混合物をろ過し、真空下で溶媒を除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ ＳＮＡＰ Ｕｌｔｒａ ２５ｇ、溶離液：ジクロロメタン：メタノール１００：０～９０：１０）で精製した。溶媒を真空下で除去し、メチル２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］アセタートａ７を固体として得た（１３９ｍｇ、収率５０％）。
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のメチル３，５‐ジクロロ‐４‐（２‐メトキシ‐２‐オキソエチル）ピリジン‐２‐カルボキシラートａ６（３０５ｍｇ，１．０９ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で水素化ホウ素ナトリウム（１２４ｍｇ，３．２９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１８時間撹拌させた。反応混合物をろ過し、真空下で溶媒を除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ ＳＮＡＰ Ｕｌｔｒａ ２５ｇ、溶離液：ジクロロメタン：メタノール１００：０～９０：１０）で精製した。溶媒を真空下で除去し、メチル２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］アセタートａ７を固体として得た（１３９ｍｇ、収率５０％）。
【0139】
ＬＣＭＳ（ＭＨ＋）：２５０
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．５１（ｓ，１Ｈ），４．７８（ｓ，２Ｈ），４．０４（ｓ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ）．ＯＨプロトンは観測されなかった。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．５１（ｓ，１Ｈ），４．７８（ｓ，２Ｈ），４．０４（ｓ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ）．ＯＨプロトンは観測されなかった。
【0140】
１．７．中間体（ＩＩ）‐２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］酢酸の調製。
ＴＨＦ（１．１Ｌ）と水（１１０ｍＬ）の混合液中のメチル２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］アセタートａ７（９８．１ｇ、３９２ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化リチウム一水和物（２５．２ｇ、５８９ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１８時間撹拌した後、真空下で濃縮した。残留物をトルエン（３×２５０ｍＬ）と共沸させて、２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］酢酸（ＩＩ）を流動性のあるオフホワイトの粉末として得た（９２．６ｇ、収率１００％）。この製品は、さらに精製することなく次のステップに使用した。
ＴＨＦ（１．１Ｌ）と水（１１０ｍＬ）の混合液中のメチル２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］アセタートａ７（９８．１ｇ、３９２ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化リチウム一水和物（２５．２ｇ、５８９ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１８時間撹拌した後、真空下で濃縮した。残留物をトルエン（３×２５０ｍＬ）と共沸させて、２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］酢酸（ＩＩ）を流動性のあるオフホワイトの粉末として得た（９２．６ｇ、収率１００％）。この製品は、さらに精製することなく次のステップに使用した。
【0141】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）δ８．５４（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），２．４６（ｓ，２Ｈ）．２つのＯＨプロトンは見られなかった。
【0142】
２．中間体（ＩＩＩ）の調製
（１Ｒ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｒ，Ｓ）及び（１Ｓ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｓ，Ｓ）の調製
（１Ｒ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｒ，Ｓ）及び（１Ｓ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｓ，Ｓ）の調製
【化10】
【0143】
２．１．中間体（ＶＩ）‐７‐ブロモ‐１０ｂ‐メチル‐６，１０ｂ‐ジヒドロ‐５Ｈ‐［１，３］オキサゾロ［２，３‐ａ］イソキノリン‐２，３‐ジオンａ９の調製
ＤＣＭ（１．５Ｌ）中のＮ‐［２‐（２‐ブロモフェニル）エチル］アセトアミドａ８（市販品、１０６．５ｇ、４３９．８ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で塩化オキサリル（７２ｍＬ、８３８．７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この混合物を０℃で２時間撹拌した後、ｒｔに温めて３時間撹拌した。その後、反応混合物を０℃に冷却し、塩化第二鉄（８６ｇ、５３０．２ｍｍｏｌ）を２回に分けて加えた。反応混合物をｒｔまで温め、ｒｔで一晩撹拌し、ＤＣＭ（２．５Ｌ）で希釈した後、０℃で１２Ｍのアンモニア濃厚溶液（２００ｍＬ）でクエンチした。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮して、１０８ｇの７‐ブロモ‐１０ｂ‐メチル‐６，１０ｂ‐ジヒドロ‐５Ｈ‐［１，３］オキサゾロ［２，３‐ａ］イソキノリン‐２，３‐ジオンａ９を褐色の固体として得、これをさらに精製することなく次のステップに使用した。
ＤＣＭ（１．５Ｌ）中のＮ‐［２‐（２‐ブロモフェニル）エチル］アセトアミドａ８（市販品、１０６．５ｇ、４３９．８ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で塩化オキサリル（７２ｍＬ、８３８．７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この混合物を０℃で２時間撹拌した後、ｒｔに温めて３時間撹拌した。その後、反応混合物を０℃に冷却し、塩化第二鉄（８６ｇ、５３０．２ｍｍｏｌ）を２回に分けて加えた。反応混合物をｒｔまで温め、ｒｔで一晩撹拌し、ＤＣＭ（２．５Ｌ）で希釈した後、０℃で１２Ｍのアンモニア濃厚溶液（２００ｍＬ）でクエンチした。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮して、１０８ｇの７‐ブロモ‐１０ｂ‐メチル‐６，１０ｂ‐ジヒドロ‐５Ｈ‐［１，３］オキサゾロ［２，３‐ａ］イソキノリン‐２，３‐ジオンａ９を褐色の固体として得、これをさらに精製することなく次のステップに使用した。
【0144】
収率（粗）：８３％。
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：２９６／２９８（Ｍ＋Ｈ＋）．
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：２９６／２９８（Ｍ＋Ｈ＋）．
【0145】
２．２．中間体（Ｖ）‐５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリンａ１０の調製
ＭｅＯＨ（１．５Ｌ）中の７‐ブロモ‐１０ｂ‐メチル‐６，１０ｂ‐ジヒドロ‐５Ｈ‐［１，３］オキサゾロ［２，３‐ａ］イソキノリン‐２，３‐ジオンａ９（１０８ｇ，３６４．７２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ｒｔで硫酸（７５ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合物を６５℃で一晩攪拌した後、０℃で１５Ｍのアンモニア濃厚溶液（３００ｍＬ）でクエンチした。混合物を真空下で濃縮し、水（３００ｍＬ）を加えた。水性層をＤＣＭ（１Ｌ）で６回抽出した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮して、８６．４４ｇの５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリンａ１０を褐色の固体として得たが、これをさらに精製することなく次のステップに使用した。
ＭｅＯＨ（１．５Ｌ）中の７‐ブロモ‐１０ｂ‐メチル‐６，１０ｂ‐ジヒドロ‐５Ｈ‐［１，３］オキサゾロ［２，３‐ａ］イソキノリン‐２，３‐ジオンａ９（１０８ｇ，３６４．７２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ｒｔで硫酸（７５ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合物を６５℃で一晩攪拌した後、０℃で１５Ｍのアンモニア濃厚溶液（３００ｍＬ）でクエンチした。混合物を真空下で濃縮し、水（３００ｍＬ）を加えた。水性層をＤＣＭ（１Ｌ）で６回抽出した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮して、８６．４４ｇの５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリンａ１０を褐色の固体として得たが、これをさらに精製することなく次のステップに使用した。
【0146】
収率（粗）：定量的
ＨＰＬＣ（基本モード）：ＲＴ４．７５分、純度８７％。
ＨＰＬＣ（基本モード）：ＲＴ４．７５分、純度８７％。
【0147】
２．３．中間体（ＩＶ）‐５‐ブロモ‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリンａ１１の調製
ＥｔＯＨ（２Ｌ）中の５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリンａ１０（８６．４４ｇ，３８５．９ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で水素化ホウ素ナトリウム（１３．２ｇ，３４９ｍｍｏｌ）を分注で加えた（１３＊１ｇ）。混合物を０℃で２時間撹拌した後、５ＮのＨＣｌ水溶液（２５０ｍＬ）を０℃で加えた。反応混合物をｒｔで一晩撹拌した後、ＥｔＯＨを真空下で濃縮した。ＤＣＭ（１Ｌ）を加え、混合物を０℃で６Ｍアンモニア濃厚溶液（４００ｍＬ）でクエンチした。有機層をＤＣＭ（５００ｍＬ）で２回抽出し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮して、８３ｇの５‐ブロモ‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリンａ１１を茶色の固体として得た。これはさらに精製することなく次のステップに使用した。
ＥｔＯＨ（２Ｌ）中の５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリンａ１０（８６．４４ｇ，３８５．９ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で水素化ホウ素ナトリウム（１３．２ｇ，３４９ｍｍｏｌ）を分注で加えた（１３＊１ｇ）。混合物を０℃で２時間撹拌した後、５ＮのＨＣｌ水溶液（２５０ｍＬ）を０℃で加えた。反応混合物をｒｔで一晩撹拌した後、ＥｔＯＨを真空下で濃縮した。ＤＣＭ（１Ｌ）を加え、混合物を０℃で６Ｍアンモニア濃厚溶液（４００ｍＬ）でクエンチした。有機層をＤＣＭ（５００ｍＬ）で２回抽出し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮して、８３ｇの５‐ブロモ‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリンａ１１を茶色の固体として得た。これはさらに精製することなく次のステップに使用した。
【0148】
収率（粗）：９５％。
ＨＰＬＣ（基本モード）：ＲＴ４．５３分、純度８０％。
ＨＰＬＣ（基本モード）：ＲＴ４．５３分、純度８０％。
【0149】
２．４．ｔｅｒｔ‐ブチル５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐カルボキシラート‐中間体ａ１２、ａ１２‐Ｓ及びａ１２‐Ｒの調製
ＤＣＭ（１Ｌ）中の５‐ブロモ‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリンａ１１（７８ｇ，３４５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＴＥＡ（１６０ｍＬ，１１３６ｍｍｏｌ）を加えた。続いて、ＤＣＭ（２５０ｍＬ）中のジ‐ｔｅｒｔ‐ブチルジカーボナート（６５ｇ，２９４．８ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で滴下して加えた。反応混合物をｒｔで一晩撹拌し、水（１００ｍＬ）でクエンチした。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。残渣をＭｅＯＨ／ｎ‐ヘキサン（１：２、４５０ｍＬ）の混合液で２回トリチュレートし、６３ｇのｔｅｒｔ‐ブチル５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐カルボキシラートａ１２（収率：５６％、ＨＰＬＣ（基本モード）：ＲＴ６．５９分、純度９８％）を白色固体として得た。
ラセミ体ｔｅｒｔ‐ブチル５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐カルボキシラートａ１２のキラル分離（ＳＦＣ，Ｗｈｅｌｋｏ ０１（Ｒ，Ｒ），５０＊２２７ｍｍ，３６０ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ，２５℃，溶離液：２０％ｉＰｒＯＨから）により、
‐２５．１ｇのｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐カルボキシラートａ１２‐Ｓを固体として得た。
ＤＣＭ（１Ｌ）中の５‐ブロモ‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリンａ１１（７８ｇ，３４５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＴＥＡ（１６０ｍＬ，１１３６ｍｍｏｌ）を加えた。続いて、ＤＣＭ（２５０ｍＬ）中のジ‐ｔｅｒｔ‐ブチルジカーボナート（６５ｇ，２９４．８ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で滴下して加えた。反応混合物をｒｔで一晩撹拌し、水（１００ｍＬ）でクエンチした。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。残渣をＭｅＯＨ／ｎ‐ヘキサン（１：２、４５０ｍＬ）の混合液で２回トリチュレートし、６３ｇのｔｅｒｔ‐ブチル５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐カルボキシラートａ１２（収率：５６％、ＨＰＬＣ（基本モード）：ＲＴ６．５９分、純度９８％）を白色固体として得た。
ラセミ体ｔｅｒｔ‐ブチル５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐カルボキシラートａ１２のキラル分離（ＳＦＣ，Ｗｈｅｌｋｏ ０１（Ｒ，Ｒ），５０＊２２７ｍｍ，３６０ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ，２５℃，溶離液：２０％ｉＰｒＯＨから）により、
‐２５．１ｇのｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐カルボキシラートａ１２‐Ｓを固体として得た。
【0150】
収率：２２％。
ＨＰＬＣ（基本モード）：ＲＴ６．５９分、純度９１％。
キラル分析（ＬＣ，Ｗｈｅｌｋｏ‐０１（Ｒ，Ｒ），２５０＊４．６ｍｍ，１ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ、３０℃、溶離液：ｉＰｒＯＨ／ｎ‐へプタン／ＤＥＡ ５０／５０／０．１） ＲＴ４．８６分，９７．７％ｅｅ．
‐固体として２９．３ｇのｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｒ）‐５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐カルボキシラートａ１２‐Ｒ。
ＨＰＬＣ（基本モード）：ＲＴ６．５９分、純度９１％。
キラル分析（ＬＣ，Ｗｈｅｌｋｏ‐０１（Ｒ，Ｒ），２５０＊４．６ｍｍ，１ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ、３０℃、溶離液：ｉＰｒＯＨ／ｎ‐へプタン／ＤＥＡ ５０／５０／０．１） ＲＴ４．８６分，９７．７％ｅｅ．
‐固体として２９．３ｇのｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｒ）‐５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロイソキノリン‐２（１Ｈ）‐カルボキシラートａ１２‐Ｒ。
【0151】
収率：２６％。
ＨＰＬＣ（基本モード）：ＲＴ６．５９分、純度９８％。
キラル分析（ＬＣ，Ｗｈｅｌｋｏ‐０１（Ｒ，Ｒ），２５０＊４．６ｍｍ，１ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ，３０℃，溶離液：ｉＰｒＯＨ／ｎ‐へプタン／ＤＥＡ５０／５０／０．１）ＲＴ５．６２ｍｉｎ，９２．４％ｅｅ．
ＨＰＬＣ（基本モード）：ＲＴ６．５９分、純度９８％。
キラル分析（ＬＣ，Ｗｈｅｌｋｏ‐０１（Ｒ，Ｒ），２５０＊４．６ｍｍ，１ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ，３０℃，溶離液：ｉＰｒＯＨ／ｎ‐へプタン／ＤＥＡ５０／５０／０．１）ＲＴ５．６２ｍｉｎ，９２．４％ｅｅ．
【0152】
２．５．ｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐［（１Ｒ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラート中間体ａ１３‐（Ｓ，Ｒ）とｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐［（１Ｓ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラート‐中間体ａ１３‐（Ｓ，Ｓ）の調製
ｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラートａ１２‐Ｓ（７ｇ，２１．４５ｍｍｏｌ）を－７８℃の乾燥テトラヒドロフラン（１０７ｍＬ）に溶解し、ｎ‐ＢｕＬｉ（３２．９３ｍｍｏｌ）を滴下して加え、混合物を－７８℃で１０分間撹拌した。フルオロアセトン（４．７８ｍＬ，６４．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物をｒｔで１時間撹拌した。反応混合物を１Ｎ塩酸水溶液（３５０ｍＬ）でクエンチした後、ジクロロメタンで３回抽出した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。残留物を逆相クロマトグラフィー（基本モード、標準ＬＣ）で精製した。キラル分離（ＬＣ，ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ，８０＊３８０ｍｍ，３００ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ，３０℃，溶離液：ヘプタン中の１０％ｉＰｒＯＨ）により、
‐ベージュ色の固体として、１．１３７ｇのｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐［（１Ｒ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラートａ１３‐（Ｓ，Ｒ）を得た。
ｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐ブロモ‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラートａ１２‐Ｓ（７ｇ，２１．４５ｍｍｏｌ）を－７８℃の乾燥テトラヒドロフラン（１０７ｍＬ）に溶解し、ｎ‐ＢｕＬｉ（３２．９３ｍｍｏｌ）を滴下して加え、混合物を－７８℃で１０分間撹拌した。フルオロアセトン（４．７８ｍＬ，６４．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物をｒｔで１時間撹拌した。反応混合物を１Ｎ塩酸水溶液（３５０ｍＬ）でクエンチした後、ジクロロメタンで３回抽出した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。残留物を逆相クロマトグラフィー（基本モード、標準ＬＣ）で精製した。キラル分離（ＬＣ，ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ，８０＊３８０ｍｍ，３００ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ，３０℃，溶離液：ヘプタン中の１０％ｉＰｒＯＨ）により、
‐ベージュ色の固体として、１．１３７ｇのｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐［（１Ｒ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラートａ１３‐（Ｓ，Ｒ）を得た。
【0153】
収率：１６
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：２６８．０（Ｍ‐ｔＢｕ＋Ｈ＋）．
キラル分析（ＬＣ，Ｗｈｅｌｋｏ‐０１（Ｒ，Ｒ），１５０＊４．６ｍｍ，１．５ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ，３０℃，溶離液：ｉＰｒＯＨ／ｎ‐ヘプタン／ＤＥＡ １０／９０／０．１）：ＲＴ２．３７分，１００％ｅｅ．
‐ベージュ色の固体として、１．０７４ｇのｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐［（１Ｓ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラートａ１３‐（Ｓ，Ｓ）
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：２６８．０（Ｍ‐ｔＢｕ＋Ｈ＋）．
キラル分析（ＬＣ，Ｗｈｅｌｋｏ‐０１（Ｒ，Ｒ），１５０＊４．６ｍｍ，１．５ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ，３０℃，溶離液：ｉＰｒＯＨ／ｎ‐ヘプタン／ＤＥＡ １０／９０／０．１）：ＲＴ２．３７分，１００％ｅｅ．
‐ベージュ色の固体として、１．０７４ｇのｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐［（１Ｓ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラートａ１３‐（Ｓ，Ｓ）
【0154】
収率：１５％
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：２６８．０（Ｍ‐ｔＢｕ＋Ｈ）＋．
キラル分析（ＬＣ，Ｗｈｅｌｋｏ‐０１（Ｒ，Ｒ），１５０＊４．６ｍｍ，１．５ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ，３０℃，溶離液：ｉＰｒＯＨ／ｎ‐ヘプタン／ＤＥＡ １０／９０／０．１）。ＲＴ２．７２分，１００％ｅｅ．
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：２６８．０（Ｍ‐ｔＢｕ＋Ｈ）＋．
キラル分析（ＬＣ，Ｗｈｅｌｋｏ‐０１（Ｒ，Ｒ），１５０＊４．６ｍｍ，１．５ｍＬ／ｍｉｎ，２２０ｎｍ，３０℃，溶離液：ｉＰｒＯＨ／ｎ‐ヘプタン／ＤＥＡ １０／９０／０．１）。ＲＴ２．７２分，１００％ｅｅ．
【0155】
２．６．（１Ｒ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｒ，Ｓ）及び（１Ｓ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩‐中間体ａ１４‐（Ｓ，Ｓ）の調製
ｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐［（１Ｒ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラートａ１３‐（Ｓ，Ｒ）（１．１３７ｇ，３．５１６ｍｍｏｌ）を、ｒｔでジオキサン（１８ｍＬ）に溶解した。ジオキサン中のＨＣｌの４Ｎ溶液（８．８ｍＬ、３５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物をｒｔで一晩攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮して、９５０ｍｇの（１Ｒ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｒ，Ｓ）をベージュ色の固体として得た。
ｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐［（１Ｒ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラートａ１３‐（Ｓ，Ｒ）（１．１３７ｇ，３．５１６ｍｍｏｌ）を、ｒｔでジオキサン（１８ｍＬ）に溶解した。ジオキサン中のＨＣｌの４Ｎ溶液（８．８ｍＬ、３５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物をｒｔで一晩攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮して、９５０ｍｇの（１Ｒ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｒ，Ｓ）をベージュ色の固体として得た。
【0156】
収率（粗）：定量的
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：２２４．０（Ｍ＋Ｈ）＋．
（１Ｓ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｓ，Ｓ）
化合物ａ１４‐（Ｓ，Ｓ）は、ｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐［（１Ｓ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラートａ１３‐（Ｓ，Ｓ）を出発物質として、同様の方法に従って合成することができる。
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：２２４．０（Ｍ＋Ｈ）＋．
（１Ｓ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｓ，Ｓ）
化合物ａ１４‐（Ｓ，Ｓ）は、ｔｅｒｔ‐ブチル（１Ｓ）‐５‐［（１Ｓ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐カルボキシラートａ１３‐（Ｓ，Ｓ）を出発物質として、同様の方法に従って合成することができる。
【0157】
収率（粗）：定量的
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：２２４（Ｍ＋Ｈ）＋．
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：２２４（Ｍ＋Ｈ）＋．
【0158】
３．式（Ｉ）の化合物の調製
３．１．式（Ｉａ）の化合物‐２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］‐１‐［（１Ｓ）‐５‐［（１Ｓ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐イル］エタノンの調製
３．１．式（Ｉａ）の化合物‐２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］‐１‐［（１Ｓ）‐５‐［（１Ｓ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐イル］エタノンの調製
【化11】
【0159】
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］酢酸Ａ（１１２ｍｇ，０．４７６ｍｍｏｌ）と（２Ｓ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｓ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｓ，Ｓ）（１３６ｍｇ，０．５２４ｍｍｏｌ）の溶液に、（２‐（１Ｈ‐ベンゾトリアゾール‐１‐イル）‐１，１，３，３‐テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ、２１７ｍｇ、０．５７１ｍｍｏｌ）を加えた。次に、Ｎ，Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミン（０．２４ｍＬ，１．４３ｍｍｏｌ）を室温で加え、混合物を２時間撹拌した。反応混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で溶媒を除去して粗生成物を得た。粗生成物を逆相クロマトグラフィー（基本モード）で精製し、真空下で溶媒を除去して、２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］‐１‐［（１Ｓ）‐５‐［（１Ｓ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐イル］エタノン１（１１６ｍｇ、収率５５％）を固体として得た。
【0160】
ＬＣＭＳ。４４１（ＭＨ＋）
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）δ８．５９（２ｓ，１Ｈ，ロータマー），７．３７‐７．０９（ｍ，３Ｈ），５．４８（ｍ，１Ｈ），５．３４（ｍ，２Ｈ），４．７２‐４．５３（ｍ，３Ｈ），４．５３‐４．２５（ｍ，１．３Ｈ），４．２５‐４．０３（ｍ，１．７Ｈ），４．０２‐３．６９（ｍ，２Ｈ），３．４８（ｍ，０．７Ｈ），３．３８‐３．３３（ｍ，０．３Ｈ 部分的に水のシグナルの下），３．３１‐３．０７（ｍ，１Ｈ），１．６０（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），１．５３（ｍ，３Ｈ），１．３７（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）δ８．５９（２ｓ，１Ｈ，ロータマー），７．３７‐７．０９（ｍ，３Ｈ），５．４８（ｍ，１Ｈ），５．３４（ｍ，２Ｈ），４．７２‐４．５３（ｍ，３Ｈ），４．５３‐４．２５（ｍ，１．３Ｈ），４．２５‐４．０３（ｍ，１．７Ｈ），４．０２‐３．６９（ｍ，２Ｈ），３．４８（ｍ，０．７Ｈ），３．３８‐３．３３（ｍ，０．３Ｈ 部分的に水のシグナルの下），３．３１‐３．０７（ｍ，１Ｈ），１．６０（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），１．５３（ｍ，３Ｈ），１．３７（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）．
【0161】
３．２． ２‐［３，５‐ジクロロ‐２‐（ヒドロキシメチル）‐４‐ピリジル］‐１‐［（１Ｓ）‐５‐［（１Ｒ）‐２‐フルオロ‐１‐ヒドロキシ‐１‐メチル‐エチル］‐１‐メチル‐３，４‐ジヒドロ‐１Ｈ‐イソキノリン‐２‐イル］エタノンの式（Ｉｂ）の化合物の調製
表題の化合物は、（２Ｓ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｒ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｓ，Ｒ）から、式（Ｉａ）の化合物で説明したのと同様の手順で調製した。
表題の化合物は、（２Ｓ）‐１‐フルオロ‐２‐［（１Ｒ）‐１‐メチル‐１，２，３，４‐テトラヒドロイソキノリン‐５‐イル］プロパン‐２‐オール塩酸塩ａ１４‐（Ｓ，Ｒ）から、式（Ｉａ）の化合物で説明したのと同様の手順で調製した。
【0162】
ＬＣＭＳ：４４１（ＭＨ＋）
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）δ８．５８（２ｓ，１Ｈ，２つのロータマー），７．４２‐７．０７（ｍ，４Ｈ），５．４７（ｓ，１Ｈ，ロータマー），５．４１‐５．２４（ｍ，２Ｈ），４．８５‐４．６６（ｍ，１Ｈ），４．５７‐４．２４（ｍ，２Ｈ），４．０９（ｓ，３Ｈ），４．０１‐３．７０（ｍ，２Ｈ），３．５８‐３．１９（ｍ，１Ｈ 部分的に水のシグナルの下），１．５９（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），１．５３（ｍ，３Ｈ），１．３６（ｄｄ，Ｊ＝６．８，２．０Ｈｚ，２Ｈ）．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）δ８．５８（２ｓ，１Ｈ，２つのロータマー），７．４２‐７．０７（ｍ，４Ｈ），５．４７（ｓ，１Ｈ，ロータマー），５．４１‐５．２４（ｍ，２Ｈ），４．８５‐４．６６（ｍ，１Ｈ），４．５７‐４．２４（ｍ，２Ｈ），４．０９（ｓ，３Ｈ），４．０１‐３．７０（ｍ，２Ｈ），３．５８‐３．１９（ｍ，１Ｈ 部分的に水のシグナルの下），１．５９（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），１．５３（ｍ，３Ｈ），１．３６（ｄｄ，Ｊ＝６．８，２．０Ｈｚ，２Ｈ）．
【国際調査報告】