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▶ エーピーアール アプライド ファーマ リサーチ ソシエテ アノニムの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-09-06
(54)【発明の名称】酸化性低張性酸溶液の治療的使用
(51)【国際特許分類】
A61K 33/20 20060101AFI20220830BHJP
A61P 17/02 20060101ALI20220830BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20220830BHJP
A61P 17/14 20060101ALI20220830BHJP
A61P 17/12 20060101ALI20220830BHJP
A61P 1/02 20060101ALI20220830BHJP
A61P 1/00 20060101ALI20220830BHJP
A61P 17/04 20060101ALI20220830BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20220830BHJP
A61P 25/02 20060101ALI20220830BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220830BHJP
A61P 31/04 20060101ALI20220830BHJP
A61K 33/06 20060101ALI20220830BHJP
A61K 31/451 20060101ALI20220830BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20220830BHJP
A61P 17/00 20060101ALI20220830BHJP
A61K 45/06 20060101ALI20220830BHJP
A61P 39/06 20060101ALI20220830BHJP
A61K 31/496 20060101ALI20220830BHJP
A61K 31/7036 20060101ALI20220830BHJP
A61K 31/7048 20060101ALI20220830BHJP
A61K 31/4709 20060101ALI20220830BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20220830BHJP
A61P 11/04 20060101ALI20220830BHJP
A61P 11/02 20060101ALI20220830BHJP
【ＦＩ】
A61K33/20
A61P17/02
A61P31/14
A61P17/14
A61P17/12
A61P1/02
A61P1/00
A61P17/04
A61P29/00
A61P25/02 101
A61P43/00 111
A61P31/04
A61K33/06
A61K31/451
A61K45/00
A61P17/00 101
A61P17/00
A61K45/06
A61P39/06
A61P43/00 105
A61K31/496
A61K31/7036
A61K31/7048
A61K31/4709
A61P11/00
A61P11/04
A61P11/02
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021578102
(86)(22)【出願日】2020-07-02
(85)【翻訳文提出日】2022-01-21
(86)【国際出願番号】 IB2020056277
(87)【国際公開番号】W WO2021001789
(87)【国際公開日】2021-01-07
(31)【優先権主張番号】62/870,096
(32)【優先日】2019-07-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/870,100
(32)【優先日】2019-07-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/935,283
(32)【優先日】2019-11-14
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/937,884
(32)【優先日】2019-11-20
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/937,885
(32)【優先日】2019-11-20
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＲＩＴＯＮ
(71)【出願人】
【識別番号】508318801
【氏名又は名称】エーピーアール アプライド ファーマ リサーチ ソシエテ アノニム
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100141977
【弁理士】
【氏名又は名称】中島 勝
(74)【代理人】
【識別番号】100138210
【弁理士】
【氏名又は名称】池田 達則
(74)【代理人】
【識別番号】100170852
【弁理士】
【氏名又は名称】白樫 依子
(72)【発明者】
【氏名】ジョルジョ レイネル
(72)【発明者】
【氏名】パオロ ガルフェッティ
(72)【発明者】
【氏名】ロベルト デ ノーニ
【テーマコード（参考）】
4C084
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C084AA22
4C084AA23
4C084NA05
4C084ZA892
4C084ZA912
4C084ZB352
4C084ZC082
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC21
4C086BC29
4C086CB25
4C086EA09
4C086EA13
4C086HA05
4C086HA09
4C086HA21
4C086HA24
4C086MA03
4C086MA04
4C086MA13
4C086MA17
4C086MA59
4C086MA63
4C086NA14
4C086ZA34
4C086ZA59
4C086ZA66
4C086ZA67
4C086ZA89
4C086ZA90
4C086ZA92
4C086ZB21
4C086ZB33
4C086ZB35
4C086ZC20
4C086ZC37
4C086ZC41
4C086ZC54
(57)【要約】
次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性溶液を罹患領域に局所適用することによって、表皮水疱症（「ＥＢ」）によって引き起こされる潰瘍、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病（「ＨＨＤ」）によって引き起こされる病変、ブルーリ潰瘍、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を治療又は予防するための方法。
【選択図】図１
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
表皮水疱症（「ＥＢ」）によって引き起こされる創傷の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、前記創傷に局所適用することを含み、前記遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法。
【請求項2】
ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、前記皮膚毒性に罹患した皮膚に局所適用することを含み、前記遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法。
【請求項3】
ヘイリー－ヘイリー病（「ＨＨＤ」）によって引き起こされる局所障害の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、前記障害に罹患した皮膚に局所適用することを含み、前記遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法。
【請求項4】
ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓによって引き起こされるブルーリ潰瘍の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、前記潰瘍に局所適用することを含み、前記遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法。
【請求項5】
ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、前記患者の鼻腔及び／又は喉及び／又は上気道に局所適用することを含み、前記遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法。
【請求項6】
前記創傷が、皮膚水疱、粘膜水疱、頭皮水疱形成、瘢痕性脱毛症、萎縮性瘢痕、過角化症、粟粒腫、う蝕症、嚥下障害、及び皮膚の痒み又は痛みからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項7】
前記創傷が、皮膚及び粘膜の水疱並びに裂傷から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項8】
前記創傷が、皮膚及び粘膜の水疱並びに裂傷から選択され、前記治療が、前記創傷の閉鎖に必要な時間の低減を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項9】
前記創傷が、創傷面スコア（ＷＢＳ）を有し、前記投与が、前記ＷＢＳを低減する、請求項１に記載の方法。
【請求項10】
前記患者が、ＭＭＰ２及びＭＭＰ９活性の上昇に罹患しており、前記投与が、前記上昇を低減する、請求項１に記載の方法。
【請求項11】
局所包帯、塩化アルミニウム、シプロヘプタジン、角質溶解剤（keratolytic）、又は局所軟化剤を前記患者に投与することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項12】
前記投与が、前記表皮水疱症に続発する任意の細菌感染をさらに治療する、請求項１に記載の方法。
【請求項13】
前記毒性が、乾燥症、裂溝、掻痒、湿疹、皮膚感染症、痒み、蕁麻疹、毛髪成長異常、及び丘疹膿疱性皮疹からなる群から選択され、前記適用が、前記毒性のうちの１以上を治療する、請求項２に記載の方法。
【請求項14】
前記毒性が、創傷面スコア（ＷＢＳ）を有する創傷を含み、前記投与が、前記ＷＢＳを低減する、請求項２に記載の方法。
【請求項15】
前記投与が、ＮＣＩ－ＣＴＣＡＥ ｖ５．０、ＦＡＣＴ－ＥＧＦＲＩ－１８、ＤＩＥＨＬ－２４、及びＭＥＳＴＴからなる群から選択されるスケールにおいて、毒性グレードを低減する、請求項２に記載の方法。
【請求項16】
前記投与が、ＱＡＬＹに対するＥＱ－５Ｄ－５Ｌ／３Ｌ、及び／又はＤＬＱＩ（皮膚科生活品質指数）、Ｓｋｉｎｄｅｘ－１６、若しくはＦＡＣＴ－ＥＧＦＲＩ－１８から選択される追加の状態特異的質問票によって測定される際、前記患者の生活の質を改善する、請求項２に記載の方法。
【請求項17】
前記皮膚毒性が標的病変であり、前記治療が前記標的病変のサイズを低減する、請求項２に記載の方法。
【請求項18】
経口若しくは局所用抗生物質又はコルチコステロイド又は皮膚保湿剤を前記患者に投与することをさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項19】
前記投与が、前記ＥＧＦＲ阻害剤誘発性毒性に続発する任意の細菌感染をさらに治療する、請求項２に記載の方法。
【請求項20】
前記局所障害が、皮膚発疹、痒み、灼熱感、皮膚ひび割れ、又は二次感染からなる群から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項21】
前記局所障害が、皮膚及び粘膜の水疱並びに裂傷から選択される創傷である、請求項３に記載の方法。
【請求項22】
前記局所障害が、皮膚及び粘膜の水疱並びに裂傷から選択される創傷であり、前記治療が、創傷閉鎖に必要な時間の低減を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項23】
前記局所障害が、創傷面スコア（ＷＢＳ）を有する創傷を含み、前記投与が、前記ＷＢＳを低減する、請求項３に記載の方法。
【請求項24】
前記局所障害が、再発性及び寛解性の皮膚病変を含み、前記適用が、前記病変の発生（outbreak）の長さ又は前記病変の発生（occurrences）間の時間を低減する、請求項３に記載の方法。
【請求項25】
前記患者が、機能的ＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイト活性の喪失、１以上の皮膚病変における酸化ストレス、ＮＲＦ２活性の低下、又はＴＧＦβ１及びＴＧＦβ２発現の不均衡、増殖ケラチノサイトの低減に罹患しており、前記方法が、前記状態を治療する、請求項３に記載の方法。
【請求項26】
冷湿布、局所包帯、コルチコステロイドクリーム、局所用抗生物質、又は全身用抗生物質を前記患者に投与することをさらに含む、請求項３に記載の方法。
【請求項27】
前記投与が、前記ヘイリー－ヘイリー病に続発する任意の細菌感染をさらに治療する、請求項４に記載の方法。
【請求項28】
前記ブルーリ潰瘍が、創傷を特徴とし、前記治療が、創傷閉鎖に必要な時間の低減を含む、請求項４に記載の方法。
【請求項29】
前記ブルーリ潰瘍が、創傷面スコア（ＷＢＳ）を有する創傷を特徴とし、前記投与が、前記ＷＢＳを低減する、請求項４に記載の方法。
【請求項30】
前記ブルーリ潰瘍が、ミコラクトン分泌を特徴とし、前記投与が、前記分泌を低減する、請求項４に記載の方法。
【請求項31】
リファンピシンと、ストレプトマイシン、クラリスロマイシン及びモキシフロキサシンから選択される１以上の抗生物質と、を前記患者に投与することをさらに含む、請求項４に記載の方法。
【請求項32】
前記ブルーリ潰瘍が、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓの一次細菌負荷を特徴とし、前記投与が、前記細菌負荷を低減する、請求項４に記載の方法。
【請求項33】
前記投与が、前記ブルーリ潰瘍に続発する任意の細菌感染をさらに治療する、請求項４に記載の方法。
【請求項34】
前記投与が、前記鼻腔及び上気道におけるＳＡＲＳ Ｃｏｖ２のウイルス負荷を低減する、請求項５に記載の方法。
【請求項35】
前記投与が、気管又は肺などの下気道へのＳＡＲＳ Ｃｏｖ２の広がりを低減する、請求項５に記載の方法。
【請求項36】
前記投与が、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症及び損傷から鼻腔内嗅覚ニューロンを保護する、請求項５に記載の方法。
【請求項37】
前記患者が、核内因子カッパＢ（ＮＦ－κＢ）シグナル伝達、Ｎｒｆ２活性、ＩＬ－１活性、顆粒球マクロファージコロニー－刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）活性、ＩＬ－６活性、ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＴＮＦ－α活性、ＫＧＦ発現、ＴＧＦβ２発現、ＴＧＦβ１発現、及びｓｉＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイト増殖から選択される１以上の生化学的異常に罹患しており、前記投与が、前記生化学的異常のうちの１以上を治療する、請求項１～５のいずれかに記載の方法。
【請求項38】
前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与される、請求項１～４及び６～３３のいずれかに記載の方法。
【請求項39】
前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥される、請求項１～４及び６～３３のいずれかに記載の方法。
【請求項40】
前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥され、その後、二次治療の局所投与が行われる、請求項１～４及び６～３３のいずれかに記載の方法。
【請求項41】
前記組成物が、投与当たり鼻孔当たり１００～１５００ｍｃｌ、２５０～１０００ｍｃｌ、４００～７５０ｍｃｌ、又は５００ｍｃｌの体積で噴霧型装置から鼻内噴霧として投与され、前記投与が、前記装置の２回以上の作動を含み得る、請求項５及び３４～３６のいずれかに記載の方法。
【請求項42】
前記組成物が、投与当たり鼻孔当たり１００～１５００ｍｃｌ、２５０～１０００ｍｃｌ、４００～７５０ｍｃｌ、又は５００ｍｃｌの体積で噴霧型装置から鼻内噴霧として各鼻孔に一日当たり少なくとも３回投与され、前記投与が、前記装置の２回以上の作動を含み得る、請求項５及び３４～３６のいずれかに記載の方法。
【請求項43】
前記組成物が、作動当たり１００～１０００ｍｃｌ、作動当たり２００～３００ｍｃｌ、又は作動当たり４００～６００ｍｃｌを分配する噴霧ポンプから投与される、請求項５及び３４～３６のいずれかに記載の方法。
【請求項44】
前記組成物が、２．５～４．５のｐＨ、≦３００ｍｇ／ｌの塩化物含有量、及び８５０～１３５０ｍＶの酸化還元電位（ＯＲＰ）を有する、請求項１～３６のいずれかに記載の方法。
【請求項45】
前記組成物が、ａ）２５０ｍｇ／ｌ未満の塩化物含有量と、
ｂ）２．５～４のｐＨと、
ｃ）８５０～１３５０ｍＶの酸化還元電位（ＯＲＰ）と、
ｄ）≧９２．５％のＨＣｌＯ、≦７．５％のＣｌ2、及び＜１％又は０％のＣｌＯ-を含む、２５～１２０ｍｇ／ｌの遊離塩素含有量と、を含む、請求項１～３６のいずれかに記載の方法。
【請求項46】
前記組成物が、ａ）２００ｍｇ／ｌ未満の塩化物含有量と、
ｂ）２．５～３のｐＨと、
ｃ）１０００～１３００ｍＶの酸化還元電位（ＯＲＰ）と、
ｄ）≧９５％のＨＣｌＯ、≦５％のＣｌ2、及び＜０．１％又は０％のＣｌＯ-を含む、４０～１００ｍｇ／ｌの遊離塩素含有量と、を含む、請求項１～３６のいずれかに記載の方法。
【請求項47】
前記組成物が、表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病、又はブルーリ潰瘍に罹患した局所表面に投与され、前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として投与される、請求項４４に記載の方法。
【請求項48】
前記組成物が、表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病、又はブルーリ潰瘍に罹患した局所表面に投与され、前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥される、請求項４４に記載の方法。
【請求項49】
前記組成物が、表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病、又はブルーリ潰瘍に罹患した局所表面に投与され、前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥され、その後、二次治療の局所投与が行われる、請求項４４に記載の方法。
【請求項50】
前記組成物が、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２に感染した人に経鼻投与され、前記組成物が、投与当たり鼻孔当たり１００～１５００ｍｃｌ、２５０～１０００ｍｃｌ、４００～７５０ｍｃｌ、又は５００ｍｃｌの体積で噴霧型装置から鼻内噴霧として投与され、前記投与が、前記装置の２回以上の作動を含み得る、請求項４４に記載の方法。
【請求項51】
前記組成物が、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２に感染した人に経鼻投与され、前記組成物が、投与当たり鼻孔当たり１００～１５００ｍｃｌ、２５０～１０００ｍｃｌ、４００～７５０ｍｃｌ、又は５００ｍｃｌの体積で噴霧型装置から鼻内噴霧として各鼻孔に一日当たり少なくとも３回投与され、前記投与が、前記装置の２回以上の作動を含み得る、請求項４４に記載の方法。
【請求項52】
前記組成物が、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２に感染した人に経鼻投与され、前記組成物が、作動当たり５０～１０００ｍｃｌ、作動当たり７５～５００ｍｃｌ、又は作動当たり８５～３００ｍｃｌを分配する噴霧ポンプから投与される、請求項４４に記載の方法。
【請求項53】
前記組成物が、表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病、又はブルーリ潰瘍に罹患した局所表面に投与され、前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として投与される、請求項４５に記載の方法。
【請求項54】
前記組成物が、表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病、又はブルーリ潰瘍に罹患した局所表面に投与され、前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥される、請求項４５に記載の方法。
【請求項55】
前記組成物が、表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病、又はブルーリ潰瘍に罹患した局所表面に投与され、前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥され、その後、二次治療の局所投与が行われる、請求項４５に記載の方法。
【請求項56】
前記組成物が、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２に感染した人に経鼻投与され、前記組成物が、投与当たり１００～１５００ｍｃｌ、２５０～１０００ｍｃｌ、４００～７５０ｍｃｌ、又は５００ｍｃｌの体積で噴霧型装置から鼻内噴霧として投与され、前記投与が、前記装置の２回以上の作動を含み得る、請求項４５に記載の方法。
【請求項57】
前記組成物が、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２に感染した人に経鼻投与され、前記組成物が、投与当たり鼻孔当たり１００～１５００ｍｃｌ、２５０～１０００ｍｃｌ、４００～７５０ｍｃｌ、又は５００ｍｃｌの体積で噴霧型装置から鼻内噴霧として各鼻孔に一日当たり少なくとも３回投与され、前記投与が、前記装置の２回以上の作動を含み得る、請求項４５に記載の方法。
【請求項58】
前記組成物が、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２に感染した人に経鼻投与され、前記組成物が、作動当たり５０～１０００ｍｃｌ、作動当たり７５～５００ｍｃｌ、又は作動当たり８５～３００ｍｃｌを分配する噴霧ポンプから投与される、請求項４５に記載の方法。
【請求項59】
前記組成物が、表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病、又はブルーリ潰瘍に罹患した局所表面に投与され、前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として投与される、請求項４６に記載の方法。
【請求項60】
前記組成物が、表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病、又はブルーリ潰瘍に罹患した局所表面に投与され、前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥される、請求項４６に記載の方法。
【請求項61】
前記組成物が、表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病、又はブルーリ潰瘍に罹患した局所表面に投与され、前記組成物が、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥され、その後、二次治療の局所投与が行われる、請求項４６に記載の方法。
【請求項62】
前記組成物が、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２に感染した人に経鼻投与され、前記組成物が、投与当たり鼻孔当たり１００～１５００ｍｃｌ、２５０～１０００ｍｃｌ、４００～７５０ｍｃｌ、又は５００ｍｃｌの体積で噴霧型装置から鼻内噴霧として投与され、前記投与が、前記装置の２回以上の作動を含み得る、請求項４６に記載の方法。
【請求項63】
前記組成物が、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２に感染した人に経鼻投与され、前記組成物が、投与当たり鼻孔当たり１００～１５００ｍｃｌ、２５０～１０００ｍｃｌ、４００～７５０ｍｃｌ、又は５００ｍｃｌの体積で噴霧型装置から鼻内噴霧として各鼻孔に一日当たり少なくとも３回投与され、前記投与が、前記装置の２回以上の作動を含み得る、請求項４６に記載の方法。
【請求項64】
前記組成物が、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２に感染した人に経鼻投与され、前記組成物が、作動当たり５０～１０００ｍｃｌ、作動当たり７５～５００ｍｃｌ、又は作動当たり８５～３００ｍｃｌを分配する噴霧ポンプから投与される、請求項４６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性溶液を罹患領域に局所適用することによって、表皮水疱症（「ＥＢ」）によって引き起こされる潰瘍、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病（「ＨＨＤ」）によって引き起こされる病変、ブルーリ潰瘍、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を治療又は予防するための方法に関する。
【背景技術】
【0002】
表皮水疱症によって引き起こされる潰瘍、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病によって引き起こされる病変、及びブルーリ潰瘍を含む天然及び人工起源の両方の様々な皮膚障害が、効果的な治療を必要としている。
【0003】
ＥＢは、ごくわずかな接触で皮膚に水疱及び裂傷が生じる、希少な遺伝性皮膚疾患の不均一な群である。ＥＢを持って生まれた人は、皮膚が非常に脆弱であるため、「バタフライ・チルドレン」と呼ばれる。彼らの皮膚は蝶の羽のように非常に脆弱である。このきわめて脆弱な皮膚が損傷している箇所には痛みを伴う開放創及び傷が形成され、場合によっては内膜及び器官も影響を受ける。二次感染及び広範囲の瘢痕化の結果としての合併症は、ＥＢと共に生きる人々がしばしば直面しなければならない要因である。悲劇的なことに、乳児期に致命的となり得るタイプのＥＢもあれば、重度に生命を制限するタイプのＥＢもある。ＥＢは、優性又は劣性のいずれかの形式で遺伝し得る。ＥＢは、新たな自然突然変異によっても生じる可能性がある。どちらの親もＥＢを保有していないが、遺伝子が受胎前に精子又は卵子のいずれかにおいて自然に突然変異する。まれに、自己免疫疾患の結果として重症型のＥＢが「獲得」されることがある。この場合、身体は自身の組織タンパク質を攻撃する抗体を開発する。
【0004】
上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ－１又はＨＥＲ－１としても知られている）は、一部の細胞の表面上に見られるタンパク質であって、上皮成長因子が受容体に結合するときに細胞を分裂させる。ＥＧＦＲは、癌細胞において異常に高いレベルで見られ、ＥＧＦＲの活性化は、腫瘍の成長及び進行において重要であるように思われる。ＥＧＦＲは、表皮上、基底細胞層上、皮脂腺のレベルで、及びケラチノサイト上で高度に発現されている。ＥＧＦＲ阻害剤は、ＥＧＦＲの特定の部分に結合し、細胞成長を遅らせるか、又は停止する。ＥＧＦＲ阻害剤に基づく治療スキームに供された癌患者において、丘疹膿疱性発疹、爪囲炎、毛髪成長の変化、痒み及び皮膚乾燥などの皮膚に対する有害反応は、一般には、前述の薬剤が皮膚細胞増殖プロセスに影響を及ぼすために発現される。
【0005】
ヘイリー－ヘイリー病は、１９３９年にＨａｉｌｅｙ兄弟によって最初に説明された常染色体優性遺伝性皮膚病である。ケラチノサイトにおいてＡＴＰ２Ｃ１が欠如すると、おそらくは接着斑板からのケラチン中間径フィラメントの後退に起因して、表皮の基底上層の細胞間の細胞間接着が失われる（棘融解）。この疾患は通常、生後３０年又は４０年以内に発症し、主に首、間質領域、皮膚の屈曲領域に発生する、水疱性病変、痂皮性びらん、及び疣贅性丘疹を特徴とする。疾患は、成人では完全に浸透性であるが、発現度が変化する変動経過を有する。この状態の管理は困難であり、既存の治療では長期にわたるプラスの治療効果が得られない。発汗、ＵＶ曝露、摩擦、並びに細菌、真菌及びウイルスによる重複感染などの外部要因は、病変の悪化及び持続において重要な役割を果たす。
【0006】
ブルーリ潰瘍は、主に皮膚、時には骨に影響を及ぼす慢性消耗性疾患である。１８９７年にウガンダでＡｌｂｅｒｔ Ｃｏｏｋ卿によって最初に説明され、Ｐｅｔｅｒ ＭａｃＣａｌｌｕｍが率いるオーストラリアの科学者達がバーンズデール地域の患者の病変から微生物を培養することに最初に成功したのは１９３０年代になってからであった。ブルーリ潰瘍は、ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓによって引き起こされ、結核及びハンセン病を引き起こす細菌のファミリーに属する。ブルーリ潰瘍の原因微生物は環境細菌であるが、ヒトへの感染様式は依然として不明である。微生物は、皮膚に損傷を与える独特の毒素であるマイコラクトンを生成する。
【0007】
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、コウモリのコロナウイルスと遺伝的に類似した呼吸器ウイルスである。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、感染者が咳又はくしゃみをしたときに、主に唾液の飛沫又は鼻からの分泌物を介して広がると考えられている。ＣｏＶの物理化学的特性に関する知識の大半は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ及びＭＥＲＳ－ＣｏＶから得られる。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、ＵＶで不活化させることができるか、又は５６℃で３０分加熱することができ、また、ジエチルエーテル、７５％エタノール、塩素、過酢酸、及びクロロホルムなどのほとんどの消毒薬に対して感受性がある。現時点で、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する特定のワクチン又は治療はない。しかしながら、最重症形態に対する潜在的な治療法を評価する多くの臨床試験が進行中であるが、ウイルス感染を減らして制御できる全人口に対する治療法はまだない。
【0008】
ニーズについての記述
表皮水疱症（「ＥＢ」）、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病（「ＨＨＤ」）によって引き起こされる病変、ブルーリ潰瘍、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を治療するための安全かつ効果的な療法に対する医学的ニーズはまだ満たされていない。これらの状態の根底にある病因を治療し、創傷に罹患した状態における創傷ケアを促進させるために、迅速で使いやすく、かつ安全な治療は、これらの状態に苦しむ患者とその家族の生活の質を大幅に改善するであろう。
表皮水疱症（「ＥＢ」）、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性、ヘイリー－ヘイリー病（「ＨＨＤ」）によって引き起こされる病変、ブルーリ潰瘍、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を治療するための安全かつ効果的な療法に対する医学的ニーズはまだ満たされていない。これらの状態の根底にある病因を治療し、創傷に罹患した状態における創傷ケアを促進させるために、迅速で使いやすく、かつ安全な治療は、これらの状態に苦しむ患者とその家族の生活の質を大幅に改善するであろう。
【発明の概要】
【0009】
ｐＨ、塩化物含有量、及び遊離塩素含有量によって定義される低張性酸酸化性水溶液は、いくつかの定義された局所状態及び呼吸器感染症を治療する驚くべき多様性を伴って開発されている。したがって、第１の主要な実施形態において、本発明は、表皮水疱症（「ＥＢ」）によって引き起こされる創傷の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、当該創傷に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法を提供する。
【0010】
第２の主要な実施形態では、本発明は、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、皮膚毒性に罹患した皮膚に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法を提供する。
【0011】
第３の主要な実施形態では、本発明は、ヘイリー－ヘイリー病（「ＨＨＤ」）によって引き起こされる局所障害の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、当該障害に罹患した皮膚に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法。
【0012】
第４の主要な実施形態では、本発明は、ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓによって引き起こされるブルーリ潰瘍の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、当該潰瘍に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法を提供する。
【0013】
第５の主要な実施形態では、本発明は、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、当該患者の鼻腔及び／又は喉及び／又は上気道に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法を提供する。
【0014】
本発明の追加の利点は、以下の説明に部分的に記載されており、部分的には明細書の記載から明らかであるか、又は本発明の実施によって習得され得る。本発明の利点は、添付の特許請求の範囲で特に指摘した要素及び組み合わせによって実現及び達成されるであろう。前述の一般的な説明及び以下の詳細な説明は、例示的で説明的なものに過ぎず、特許請求されるような本発明を限定するものではないことを理解されたい。
【図面の簡単な説明】
【0015】
本明細書に組み込まれ、その一部を構成する添付の図面は、本発明のいくつかの実施形態を例示し、説明と共に本発明の原理を説明するのに役立つ。
【図1】実施例３に記載されるように、アクティブな治療（ＡＰＲ ＴＤ０１１）を適用した後の、損傷から４時間後及び２４時間後の損傷組織並びに陰性対照の組織学的分析である。
【図2】実施例３に記載されるように、本発明の方法に従って治療した重度の全身性の劣性栄養障害型表皮水疱症を有する２４歳の患者における結果を示す一連の写真である。
【図3】実施例３に記載されるように、本発明の方法に従って治療した接合部型表皮水疱症患者の２歳の慢性創傷の下肢を示す一対の写真である。
【図4】本発明の実施例５に記載されるように、本発明の溶液の効果を示し、ヘイリー－ヘイリー病に特に関連するモデルにおいてビヒクルで処理したｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞におけるよりも、本発明の溶液で処理したｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞において、Ｎｒｆ２タンパク質発現レベルが有意に高いことを示す。
【図5】本発明の実施例５に記載されるように、ヘイリー－ヘイリー病に特に関連するモデルにおける、ＡＴＰ２Ｃ１欠損ケラチノサイトにおけるＴＧＦＢ１及びＴＧＦＢ２サイトカイン発現に対する本発明の溶液の効果を示す。
【図6】本発明の実施例５に記載されるように、本発明の溶液によるｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞の処理の効果、及びｓｉＡＴＰ２Ｃ１で処理したＨａＣａＴ細胞の増殖不良の救済を示す。
【図7】ブルーリ潰瘍への特定の適用を伴う本発明の実施例６に記載されるように、本発明の溶液に曝露したＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ細菌の計算された代謝活性。
【図8】ブルーリ潰瘍への特定の適用を伴う実施例６に記載されているように、ＣＦＵのプレーティング及びカウントによって、本発明の溶液のＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ殺菌活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【0016】
用語の定義及び使用
本出願を通して、様々な刊行物が参照される。これらの刊行物の開示は、本発明が関係する技術の状態をより完全に説明するために、その全体が本出願に参照により本明細書に組み込まれる。開示された参考文献はまた、参考文献が依拠する文において考察されている、それらに含まれる資料について、参照により本明細書に個別かつ具体的に組み込まれている。
本出願を通して、様々な刊行物が参照される。これらの刊行物の開示は、本発明が関係する技術の状態をより完全に説明するために、その全体が本出願に参照により本明細書に組み込まれる。開示された参考文献はまた、参考文献が依拠する文において考察されている、それらに含まれる資料について、参照により本明細書に個別かつ具体的に組み込まれている。
【0017】
本明細書及び特許請求の範囲で使用する場合、単数形の「１つの（a）」、「１つの（an）」、及び「その（the）」は、文脈により別途明確に示されない限り、複数形の参照物を含む。例えば、「仕様」という用語は、現在開示されている方法及びシステムで使用するための１以上の仕様を指す。「炭化水素」は、２以上のそのような炭化水素の混合物などを含む。本明細書で使用される場合、単語「又は（or）」又は同様の用語は、特定のリストの任意の１つのメンバーを意味し、そのリストのメンバーの任意の組み合わせも含む。
【0018】
本明細書及び以下の特許請求の範囲で使用される場合、「含む（comprise）」という単語並びに「含む（comprising）」及び「含む（comprises）」などの単語の変形は、「～を含むがこれらに限定されない（including but not limited to）」を意味し、例えば、他の添加剤、成分、整数又はステップを除外することを意図しない。要素が１つ又は複数の構成要素、ステップ、若しくは条件を含むものとして説明される場合、要素はまた、構成要素、ステップ、若しくは条件、又は複数の構成要素、ステップ、若しくは条件「からなる（consisting of）」又は「から本質的になる（consisting essentially of）」ものとして説明され得ることが理解されよう。
【0019】
範囲の代替の上限及び下限を特定することによって、本明細書において範囲を表す場合、端点は、数学的に実現可能な任意の様式で組み合わせることができることが理解されよう。したがって、例えば、５０又は８０～１００又は７０の範囲は、５０～１００、５０～７０、及び８０～１００の一連の範囲として代替的に表すことができる。一連の上限及び下限が、相（phase）「及び」又は「又は」を使用して関連する場合、上限は、下限に制限されないか、又は下限と組み合わせることができ、逆もまた同様であることが理解されよう。したがって、例えば、４０％超及び／又は８０％未満の範囲は、４０％超、８０％未満、及び４０％超であるが８０％未満の範囲を含む。
【0020】
プロセス又は物の要素が、１以上の例、構成要素、特性又は特徴を参照することによって定義される場合、それらの構成要素、特性、又は特徴のうちの任意の１つ又は組み合わせもまた、問題の主題を定義するために使用され得ることが理解されよう。これは、例えば、要素の特定の例が請求項（マーカッシュグループの場合のように）に列挙されている場合、又は要素が複数の特徴によって定義される場合に生じ得る。したがって、例えば、特許請求されるシステムが、要素Ａ１、Ａ２及びＡ３によって定義される要素Ａを、要素Ｂ１、Ｂ２及びＢ３によって定義される要素Ｂと組み合わせて含む場合、本発明はまた、要素Ｂなしに要素Ａによって定義されるシステム、要素Ａが、要素Ｂ２及びＢ３によって定義される要素Ｂと組み合わせて、要素Ａ１及びＡ２によって定義されるシステム、並びに全ての他の可能な変形（permutation）を含むことが理解されよう。
【0021】
「治療有効量」は、代謝プロセスを支持若しくは代謝プロセスに影響を及ぼすために、又は疾患を治療又は予防するためにヒトに投与される場合、疾患のそのような治療又は予防を引き起こすか、又は代謝プロセスに支持若しくは代謝プロセスに影響を及ぼすのに十分である量を意味する。
【0022】
本明細書で使用される場合、「約」という用語は、製造の変動及び時間に起因する製品の劣化による製品強度の差異など、製薬業界で許容され、本業界の製品に固有のばらつきを補償する。この用語は、良好な製造業務の実施において、製品が、ヒトにおいて治療的に同等又は生物学的に同等であると評価されることを特許請求される製品の記載された強度と見なすことができる任意の変動を可能にする。
【0023】
本発明の文脈において、本明細書に記載される疾患状態のうちのいずれかに関するものである限り、「治療」という用語は、症状若しくは状態の発生を低減するか、又はそのような状態に関連する少なくとも１つの症状を緩和する若しくは軽減するか、又はそのような状態に基づく代謝プロセスを遅らせる若しくは逆転させるか、又はそのような状態に基づいて代謝プロセスを管理する若しくは代謝プロセスに影響を及ぼすことを意味する。本発明の意味の範囲内で、本用語はまた、停止し、発症を遅らせる（すなわち、疾患の臨床症状発現の前の期間）、及び／又は疾患を発症若しくは悪化させるリスクを低減することを示す。治療が本明細書で指定される場合、又は治療の特定の標的が示される場合はいつでも、そのような治療が臨床的有意義な利益をもたらすことが理解されよう。したがって、例えば、治療が細菌負荷を低減するか、又は二次感染を治療する場合、細菌負荷は臨床的に有意義な量で低減するか、又は二次感染が臨床的に有意な程度まで治療されることが理解されよう。
【0024】
本発明の組成物に関連して使用される場合、「許容される（acceptable）」という語句は、生理学的に忍容可能であり、典型的には対象（例えば、ヒトなどの哺乳動物）に投与されたときに不利な反応を生じない、そのような組成物の分子実体及び他の成分を指す。
【0025】
公開された試験方法及び診断器具が本明細書で参照される場合、本明細書では反対の記載がない限り、２０１９年７月１日に有効なバージョンに基づいて、試験方法又は診断器具が実行されることが理解されよう。
【0026】
主要な実施形態の考察
本発明は、いくつかの主要な実施形態に基づいて定義することができ、これらの実施形態は、追加の実施形態を作成するために物理的かつ数学的に可能な任意の様式で、それらの間で、及び任意の下位実施形態（subembodiment）と、組み合わせることができる。第１の主要な実施形態において、本発明は、表皮水疱症（「ＥＢ」）によって引き起こされる創傷の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、当該創傷に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法を提供する。
本発明は、いくつかの主要な実施形態に基づいて定義することができ、これらの実施形態は、追加の実施形態を作成するために物理的かつ数学的に可能な任意の様式で、それらの間で、及び任意の下位実施形態（subembodiment）と、組み合わせることができる。第１の主要な実施形態において、本発明は、表皮水疱症（「ＥＢ」）によって引き起こされる創傷の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、当該創傷に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法を提供する。
【0027】
第２の主要な実施形態では、本発明は、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、皮膚毒性に罹患した皮膚に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法を提供する。
【0028】
第３の主要な実施形態では、本発明は、ヘイリー－ヘイリー病（「ＨＨＤ」）によって引き起こされる局所障害の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、当該障害に罹患した皮膚に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法。
【0029】
第４の主要な実施形態では、本発明は、ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓによって引き起こされるブルーリ潰瘍の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、当該潰瘍に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法を提供する。
【0030】
第５の主要な実施形態では、本発明は、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症の治療を必要とする患者において、それを治療する方法であって、２．５～６のｐＨ、４００ｍｇ／ｍＬ未満の塩化物含有量、及び２０～１４０ｍｇ／ｍＬの遊離塩素含有量を含む、治療有効量の低張性酸酸化性水溶液を、当該患者の鼻腔及び／又は喉及び／又は上気道に局所適用することを含み、当該遊離塩素含有量が、≧９０％の次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）、≦１０％の塩素（Ｃｌ2）、及び≦３％の次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）を含む、方法を提供する。
【0031】
表皮水疱症（「ＥＢ」）の下位実施形態
ＥＢの最新の２００８年の分類は、真皮／表皮接合部における切断のレベルによって定義された４つのカテゴリにＥＢを分類している。参照：Ｆｉｎｅ ＪＤ，Ｅａｄｙ ＲＡＪ，Ｂａｕｅｒ ＥＡ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｈｅｒｉｔｅｄ ｅｐｉｄｅｒｍｏｌｙｓｉｓ ｂｕｌｌｏｓａ（ＥＢ）：ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｈｉｒｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｍｅｅｔｉｎｇ ｏｎ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＥＢ．Ｊ Ａｍ Ａｃａｄ Ｄｅｒｍａｔｏｌ ２００８；５８：９３１－５０。したがって、１つの下位実施形態では、ＥＢを治療するための方法は、単純型表皮水疱症（ＥＢＳ）を有する患者において実施され、水疱形成が皮膚の上層（表皮）で起こる。別の下位実施形態では、方法は、栄養障害型表皮水疱症（ＤＥＢ）を有する患者において実施され、水疱形成が、真皮上部の基底膜領域の下で起こる。さらに別の下位実施形態では、方法は、接合部型表皮水疱症（ＪＥＢ）を有する患者において実施され、水疱形成が、基底膜領域として知られる皮膚の層における表皮と真皮との間の接合部（皮膚の下層）で起こる。さらに別の下位実施形態では、本方法は、乳児期の水疱形成に続いて小児期の水疱症及び光線過敏症を伴う非常に希少な劣性遺伝性障害であるキンドラー症候群（ＫＳ）において実施される。（Ｂｕｒｃｈ ＪＭ，Ｆａｓｓｉｈｉ Ｈ，Ｊｏｎｅｓ ＣＡ，Ｍｅｎｇｓｈｏｌ ＳＣ，Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ ＪＥ，ＭｃＧｒａｔｈ ＪＡ（２００６）Ｋｉｎｄｌｅｒ ｓｙｎｄｒｏｍｅ：ｎｅｗ ｍｕｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｎｅｗ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｐｏｓｓｉｂｉｌｉｔｉｅｓ．Ａｒｃｈ Ｄｅｒｍａｔｏｌ １４２（５）：６２０－４を参照されたい）。水疱形成は、皮膚の任意の層で起こり得る。
ＥＢの最新の２００８年の分類は、真皮／表皮接合部における切断のレベルによって定義された４つのカテゴリにＥＢを分類している。参照：Ｆｉｎｅ ＪＤ，Ｅａｄｙ ＲＡＪ，Ｂａｕｅｒ ＥＡ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｈｅｒｉｔｅｄ ｅｐｉｄｅｒｍｏｌｙｓｉｓ ｂｕｌｌｏｓａ（ＥＢ）：ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｈｉｒｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｍｅｅｔｉｎｇ ｏｎ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＥＢ．Ｊ Ａｍ Ａｃａｄ Ｄｅｒｍａｔｏｌ ２００８；５８：９３１－５０。したがって、１つの下位実施形態では、ＥＢを治療するための方法は、単純型表皮水疱症（ＥＢＳ）を有する患者において実施され、水疱形成が皮膚の上層（表皮）で起こる。別の下位実施形態では、方法は、栄養障害型表皮水疱症（ＤＥＢ）を有する患者において実施され、水疱形成が、真皮上部の基底膜領域の下で起こる。さらに別の下位実施形態では、方法は、接合部型表皮水疱症（ＪＥＢ）を有する患者において実施され、水疱形成が、基底膜領域として知られる皮膚の層における表皮と真皮との間の接合部（皮膚の下層）で起こる。さらに別の下位実施形態では、本方法は、乳児期の水疱形成に続いて小児期の水疱症及び光線過敏症を伴う非常に希少な劣性遺伝性障害であるキンドラー症候群（ＫＳ）において実施される。（Ｂｕｒｃｈ ＪＭ，Ｆａｓｓｉｈｉ Ｈ，Ｊｏｎｅｓ ＣＡ，Ｍｅｎｇｓｈｏｌ ＳＣ，Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ ＪＥ，ＭｃＧｒａｔｈ ＪＡ（２００６）Ｋｉｎｄｌｅｒ ｓｙｎｄｒｏｍｅ：ｎｅｗ ｍｕｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｎｅｗ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｐｏｓｓｉｂｉｌｉｔｉｅｓ．Ａｒｃｈ Ｄｅｒｍａｔｏｌ １４２（５）：６２０－４を参照されたい）。水疱形成は、皮膚の任意の層で起こり得る。
【0032】
さらに、非遺伝性ＥＢの形態も同様の特徴で存在する。したがって、さらに別の下位実施形態では、方法は、後天性表皮水疱症（ＥＢＡ）を有する患者において実施され、水疱形成が基底真皮で起こる。それは、基底膜を真皮構造に接続する固定フィブリルの主成分である、ＶＩＩ型コラーゲンを標的とする抗体によって引き起こされる慢性自己免疫である。Ｋａｓｐｅｒｋｉｅｗｉｃｚ Ｍ，Ｓａｄｉｋ ＣＤ，Ｂｉｅｂｅｒ Ｋ，Ｉｂｒａｈｉｍ ＳＭ，Ｍａｎｚ ＲＡ，Ｓｃｈｍｉｄｔ Ｅ，Ｚｉｌｌｉｋｅｎｓ Ｄ，Ｌｕｄｗｉｇ ＲＪ．Ｅｐｉｄｅｒｍｏｌｙｓｉｓ Ｂｕｌｌｏｓａ Ａｃｑｕｉｓｉｔａ：Ｆｒｏｍ Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ｔｏ Ｎｏｖｅｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｏｐｔｉｏｎｓ．Ｊ Ｉｎｖｅｓｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２０１６ Ｊａｎ；１３６（１）：２４－３３を参照されたい。
【0033】
表現型及び遺伝子型並びに遺伝様式に従って、上記のカテゴリは、さらに様々なサブグループに分類され、そのいくつかは非常に希少なサブエンティティを含む。Ｌａｉｍｅｒ Ｍ，Ｐｒｏｄｉｎｇｅｒ Ｃ，Ｂａｕｅｒ ＪＷ Ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ Ｅｐｉｄｅｒｍｏｌｙｓｉｓ Ｂｕｌｌｏｓａ．Ｊ Ｄｔｓｃｈ Ｄｅｒｍａｔｏｌ Ｇｅｓ．２０１５ Ｎｏｖ；１３（１１）：１１２５－３３。したがって、さらなる下位実施形態において、
・ＥＢＳ患者は、ケラチン５及び１４、プレクチン、α６β４インテグリン、プラコフィリン－１、又はデスプラキンに変異を有する；
・ＪＥＢ患者は、ラミニン３３２（ラミニン５）、ＸＶＩＩ型コラーゲン、又はα６β４インテグリンに変異を有する；
・ＤＥＢ患者は、ＶＩＩ型コラーゲンに変異を有する；あるいは、又は
・ＫＳ患者は、キンドリン－１に変異を有する。
・ＥＢＳ患者は、ケラチン５及び１４、プレクチン、α６β４インテグリン、プラコフィリン－１、又はデスプラキンに変異を有する；
・ＪＥＢ患者は、ラミニン３３２（ラミニン５）、ＸＶＩＩ型コラーゲン、又はα６β４インテグリンに変異を有する；
・ＤＥＢ患者は、ＶＩＩ型コラーゲンに変異を有する；あるいは、又は
・ＫＳ患者は、キンドリン－１に変異を有する。
【0034】
参照：Ｄｅｎｙｅｒ，Ｊ．，Ｐｉｌｌａｙ，Ｅ．ａｎｄ Ｃｌａｐｈａｍ，Ｊ．Ｂｅｓｔ ｐｒａｃｔｉｃｅ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｓｋｉｎ ａｎｄ ｗｏｕｎｄ ｃａｒｅ ｉｎ ｅｐｉｄｅｒｍｏｌｙｓｉｓ ｂｕｌｌｏｓａ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ．Ｄｅｂｒａ．２００７ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｄｅｂｒａ－ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ．ｏｒｇ／ｃｌｉｎｉｃａｌ－ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ／ｃｏｍｐｌｅｔｅ－ｅｂ－ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ／ｗｏｕｎｄ－ｃａｒｅ．ｈｔｍｌ。
【0035】
別の下位実施形態において、表皮水疱症を治療する方法において、創傷は、皮膚水疱、粘膜水疱、頭皮水疱形成、瘢痕性脱毛症、萎縮性瘢痕、過角化症、粟粒腫、う蝕症、嚥下障害、及び皮膚の痒み又は痛みからなる群から選択される。
【0036】
別の下位実施形態では、表皮水疱症を治療する方法において、創傷は、皮膚及び粘膜の水疱並びに裂傷から選択される。
【0037】
別の下位実施形態では、表皮水疱症を治療する方法において、創傷は、皮膚及び粘膜の水疱並びに裂傷から選択され、当該治療は、当該創傷の閉鎖に必要な時間の低減を含む。
【0038】
別の下位実施形態では、表皮水疱症を治療する方法において、創傷は、創傷面スコア（ＷＢＳ）を有し、当該投与は、当該ＷＢＳを低減する。
【0039】
別の下位実施形態では、表皮水疱症を治療する方法において、患者は、ＭＭＰ２及びＭＭＰ９活性の上昇に罹患しており、当該投与が、当該上昇を低減する。
【0040】
別の下位実施形態では、表皮水疱症を治療する方法において、方法は、局所包帯、塩化アルミニウム、シプロヘプタジン、角質溶解剤（keratolytic）、又は局所軟化剤を当該患者に投与することをさらに含む。褥瘡性潰瘍及び他のタイプの創傷を治療するために一般的に使用される任意の種類の包帯を、本発明の溶液で処理した後、表皮水疱症に罹患した領域に適用することができ、これには生理食塩水ガーゼ、プロテアーゼ調節包帯、コラゲナーゼ軟膏、フォーム包帯、塩基性創傷接触包帯、及びポリビニルピロリドン＋酸化亜鉛包帯が含まれる。
【0041】
ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性を治療する方法に適用可能な別の下位実施形態では、方法は、経口若しくは局所用抗生物質又はコルチコステロイド又は皮膚保湿剤を当該患者に投与することをさらに含む。抗生物質は、予防的に、又は活動性感染症に応答して投与できる。
【0042】
さらに別の下位実施形態では、方法は、表皮水疱症に罹患した皮膚に本発明の溶液を投与することによって、表皮水疱症に続発する感染症を予防することをさらに含む。
【0043】
ＥＧＦＲ阻害剤毒性の下位実施形態
様々な下位実施形態は、毒性を引き起こしたＥＧＦＲ阻害剤に基づいて定義される。したがって、いくつかの下位実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ）、又はモノクローナル抗体（例えば、セツキシマブ、ネシツムマブ）からなる群から選択される。他の下位実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤は、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、セツキシマブ、ネラチニブ、オシメルチニブ、パニツムマブ、バンデタニブ、ネシツムマブ、及びダコミチニブからなる群から選択される。
様々な下位実施形態は、毒性を引き起こしたＥＧＦＲ阻害剤に基づいて定義される。したがって、いくつかの下位実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ）、又はモノクローナル抗体（例えば、セツキシマブ、ネシツムマブ）からなる群から選択される。他の下位実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤は、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、セツキシマブ、ネラチニブ、オシメルチニブ、パニツムマブ、バンデタニブ、ネシツムマブ、及びダコミチニブからなる群から選択される。
【0044】
現在、ＥＧＦＲ阻害剤によって誘発される有害皮膚事象の管理のための共有国際治療プロトコルはない。しかしながら、有害事象ガイドライン（ＣＴＣＡＥ ｖ５．０）の一般的な用語基準において、国際癌サポーティブケア学会（Multinational Association of Supportive Care in Cancer，ＭＡＳＣＣ）及び全米総合癌センターネットワーク（National Comprehensive Cancer Network，ＮＣＣＮ）における、いくつかの推奨は、急性症状発現における損傷皮膚病変の薬理学的治療に関して排他的に行われる。
【0045】
したがって、１つの下位実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性毒性を治療する方法は、局所用防腐剤、局所用及び／又は全身用抗生物質（予防的なもの及び感染症に応答するものの両方）、局所用レチノイド、及び局所用及び／又は全身用ステロイドからなる群から選択される第２の治療と組み合わせて実施される。別の下位実施形態において、患者は、軽度～中程度の臨床的湿疹化に罹患しており、本発明は、局所クリンダマイシン２％又はエリスロマイシン４％から選択されるテトラサイクリン治療と組み合わせて、任意選択で局所用ステロイド、又はミノサイクリン１００ｍｇ／日若しくはドキシサイクリン１００ｍｇ／日（経口）から選択される経口治療と組み合わせて実施される。さらに別の下位実施形態では、患者は、強力な痒みの症状に罹患しており、本発明は、セチリジンなどの抗ヒスタミンと組み合わせて実施される。
【0046】
ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性を治療する方法に適用可能な別の下位実施形態では、毒性は、乾燥症、裂溝、掻痒、湿疹、皮膚感染症、痒み、蕁麻疹、毛髪成長異常、及び丘疹膿疱性皮疹からなる群から選択され、当該適用は、当該毒性のうちの１以上を治療する。
【0047】
ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性を治療する方法に適用可能な別の下位実施形態では、毒性は、創傷面スコア（ＷＢＳ）を有する創傷を含み、当該投与は、当該ＷＢＳを低減する。
【0048】
ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性を治療する方法に適用可能な別の下位実施形態では、投与は、ＮＣＩ－ＣＴＣＡＥ ｖ５．０、ＦＡＣＴ－ＥＧＦＲＩ－１８、ＤＩＥＨＬ－２４、及びＭＥＳＴＴからなる群から選択されるスケールにおいて、毒性グレードを低減する。
【0049】
ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性を治療する方法に適用可能な別の下位実施形態では、投与は、ＱＡＬＹに対する５Ｄ－５Ｌ／３Ｌ、及び／又はＤＬＱＩ（皮膚科生活品質指数）、Ｓｋｉｎｄｅｘ－１６、若しくはＦＡＣＴ－ＥＧＦＲＩ－１８から選択される追加の状態特異的質問票によって測定される際、当該患者の生活の質を改善する。
【0050】
別の下位実施形態では、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性を治療する方法に適用可能な別の下位実施形態では、皮膚毒性は標的病変であり、当該治療は、当該標的病変のサイズを低減する。
【0051】
ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性を治療する方法に適用可能な別の下位実施形態では、方法は、経口若しくは局所用抗生物質又はコルチコステロイド又は皮膚保湿剤を当該患者に投与することをさらに含む。抗生物質は、予防的に、又は活動性感染症に応答して投与できる。
【0052】
さらに別の下位実施形態では、方法は、毒性に罹患した皮膚に本発明の溶液を投与することによって、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性毒性に続発する感染症を予防することをさらに含む。
【0053】
ヘイリー－ヘイリー病の下位実施形態
ヘイリー－ヘイリー病の診断は、徹底的な臨床評価、詳細な患者の病歴、特徴的な所見の識別、及び様々な専門検査に基づいて行われる。したがって、１つの下位実施形態では、ヘイリー－ヘイリー病は、罹患した皮膚組織の外科的除去及び顕微鏡検査（生検）によって診断される。１つの下位実施形態では、生検皮膚は、ケラチン組織の異常な形成（角化）及び細胞間接着の不良（棘融解）を明らかにする。別の下位実施形態では、患者は、診断を確認するために、ＡＴＰ２Ｃ１遺伝子の変異について試験されている。さらに別の下位実施形態では、ヘイリー－ヘイリー患者は、二次的な細菌及び真菌による重複感染を有し、これらは任意選択で植物性又は悪臭を伴うプラークを生じ得る。
ヘイリー－ヘイリー病の診断は、徹底的な臨床評価、詳細な患者の病歴、特徴的な所見の識別、及び様々な専門検査に基づいて行われる。したがって、１つの下位実施形態では、ヘイリー－ヘイリー病は、罹患した皮膚組織の外科的除去及び顕微鏡検査（生検）によって診断される。１つの下位実施形態では、生検皮膚は、ケラチン組織の異常な形成（角化）及び細胞間接着の不良（棘融解）を明らかにする。別の下位実施形態では、患者は、診断を確認するために、ＡＴＰ２Ｃ１遺伝子の変異について試験されている。さらに別の下位実施形態では、ヘイリー－ヘイリー患者は、二次的な細菌及び真菌による重複感染を有し、これらは任意選択で植物性又は悪臭を伴うプラークを生じ得る。
【0054】
他の下位実施形態では、本発明の方法は、冷湿布、包帯、コルチコステロイドクリーム、局所用抗生物質、及び全身用抗生物質から選択される療法と組み合わせて実施される。またさらなる下位実施形態は、ボツリヌス毒素及びグリコピロレートを含む汗腺を閉鎖するための療法と組み合わせて実施される。さらなる下位実施形態は、アシトレチン及びエトレチナートなどのビタミンＡ誘導体（レチノイド）、アレファセプト及びタクロリムスなどの免疫系を抑制する薬物、並びにイオンポンプの働きを向上させるのに役立つ経口塩化マグネシウムと組み合わせて実施される。
【0055】
特にヘイリー－ヘイリー病に適用可能な別の下位実施形態では、局所障害は、皮膚発疹、痒み、灼熱感、皮膚ひび割れ、又は二次感染からなる群から選択される。
【0056】
特にヘイリー－ヘイリー病に適用可能な別の下位実施形態では、局所障害は、皮膚及び粘膜の水疱並びに裂傷から選択される創傷である。
【0057】
特にヘイリー－ヘイリー病に適用可能な別の下位実施形態では、局所障害は、皮膚及び粘膜の水疱並びに裂傷から選択される創傷であり、当該治療は、創傷閉鎖に必要な時間の低減を含む。
【0058】
特にヘイリー－ヘイリー病に適用可能な別の下位実施形態では、局所障害は、創傷面スコア（ＷＢＳ）を有する創傷を含み、当該投与は、当該ＷＢＳを低減する。
【0059】
特にヘイリー－ヘイリー病に適用可能な別の下位実施形態では、局所障害は、再発性及び寛解性の皮膚病変を含み、当該適用は、当該病変の発生（outbreak）の長さ又は当該病変の発生（occurrences）間の時間を低減する。
【0060】
特にヘイリー－ヘイリー病に適用可能な別の下位実施形態では、患者は、機能的ＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイト活性の喪失、１以上の皮膚病変における酸化ストレス、ＮＲＦ２活性の低減、又はＴＧＦβ１及びＴＧＦβ２発現の不均衡、増殖ケラチノサイトの低減に罹患しており、当該方法は、当該状態を治療する。
【0061】
特にヘイリー－ヘイリー病に適用可能な別の下位実施形態では、方法は、冷湿布、局所包帯、コルチコステロイドクリーム、局所用抗生物質、又は全身用抗生物質（予防的なもの及び活動性感染症に応答するものの両方）を当該患者に投与することをさらに含む。
【0062】
褥瘡性潰瘍及び他のタイプの創傷を治療するために一般的に使用される任意の種類の包帯を、本発明の溶液で処理した後、ヘイリー－ヘイリー病に罹患した領域に適用することができ、これには生理食塩水ガーゼ、プロテアーゼ調節包帯、コラゲナーゼ軟膏、フォーム包帯、塩基性創傷接触包帯、及びポリビニルピロリドン＋酸化亜鉛包帯が含まれる。
【0063】
さらに別の下位実施形態では、方法は、ヘイリー－ヘイリー病に罹患した皮膚に本発明の溶液を投与することによって、ヘイリー－ヘイリー病に続発する感染症を予防することをさらに含む。
【0064】
ブルーリ潰瘍
特にブルーリ潰瘍の治療に適用可能な別の下位実施形態では、ブルーリ潰瘍は創傷を特徴とし、当該治療は創傷閉鎖に必要な時間の低減を含む。
特にブルーリ潰瘍の治療に適用可能な別の下位実施形態では、ブルーリ潰瘍は創傷を特徴とし、当該治療は創傷閉鎖に必要な時間の低減を含む。
【0065】
特にブルーリ潰瘍の治療に適用可能な別の下位実施形態では、ブルーリ潰瘍は、創傷面スコア（ＷＢＳ）を有する創傷を特徴とし、当該投与は、当該ＷＢＳを低減する。
【0066】
特にブルーリ潰瘍の治療に適用可能な別の下位実施形態では、ブルーリ潰瘍は、ミコラクトン分泌を特徴とし、当該投与は、当該分泌を低減する。
【0067】
特にブルーリ潰瘍の治療に適用可能な別の下位実施形態では、ブルーリ潰瘍は、ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓの細菌負荷を特徴とし、当該投与は、当該細菌負荷を低減する。
【0068】
特にブルーリ潰瘍の治療に適用可能な別の下位実施形態では、方法は、リファンピシンと、ストレプトマイシン、クラリスロマイシン及びモキシフロキサシンから選択される１以上の抗生物質と、を当該患者に投与することをさらに含む。
【0069】
褥瘡性潰瘍及び他のタイプの創傷を治療するために一般的に使用される任意の種類の包帯を、本発明の溶液で処理した後、ブルーリ潰瘍に罹患した領域に適用することができ、これには生理食塩水ガーゼ、プロテアーゼ調節包帯、コラゲナーゼ軟膏、フォーム包帯、塩基性創傷接触包帯、及びポリビニルピロリドン＋酸化亜鉛包帯が含まれる。
【0070】
さらに別の下位実施形態では、方法は、ブルーリ潰瘍に罹患した皮膚に本発明の溶液を投与することによって、ブルーリ潰瘍に続発する感染症を予防することをさらに含む。
【0071】
ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２の下位実施形態
特にＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症の治療に適用可能な別の下位実施形態では、鼻腔及び上気道におけるＳＡＲＳ Ｃｏｖ２のウイルス負荷を低減する。
特にＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症の治療に適用可能な別の下位実施形態では、鼻腔及び上気道におけるＳＡＲＳ Ｃｏｖ２のウイルス負荷を低減する。
【0072】
特にＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症の治療に適用可能な別の下位実施形態では、投与は、気管又は肺などの下気道へのＳＡＲＳ Ｃｏｖ２の広がりを低減する。
【0073】
特にＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症の治療に適用可能な別の下位実施形態では、ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症及び損傷から鼻腔内嗅覚ニューロンを保護する。
【0074】
ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症の治療に特に適用可能な別の下位実施形態では、組成物は、投与当たり鼻孔当たり１００～１５００ｍｃｌ、２５０～１０００ｍｃｌ、４００～７５０ｍｃｌ、又は５００ｍｃｌの体積で噴霧型装置から鼻内噴霧として投与され、投与は、装置の２回以上の作動を含み得る。別の好ましい実施形態では、これらの体積は、１日当たり少なくとも３回、各鼻孔に投与される。
【0075】
ＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症の治療に特に適用可能な特に好ましい実施形態では、溶液は、作動当たり５０～１０００ｍｃｌ、作動当たり７５～５００ｍｃｌ、又は作動当たり８５～３００ｍｃｌを分配する噴霧ポンプから分配される。
【0076】
特にＳＡＲＳ Ｃｏｖ２感染症の治療に適用可能な別の好ましい実施形態では、溶液は、各鼻孔に対して少なくとも３回又は４回投与される。
【0077】
本発明の複数の方法に適用可能な追加の下位実施形態
本発明の方法の全てに適用可能な別の下位実施形態では、患者は、核内因子カッパＢ（ＮＦ－κＢ）シグナル伝達、Ｎｒｆ２活性、ＩＬ－１活性、顆粒球マクロファージコロニー－刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）活性、ＩＬ－６活性、ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＴＮＦ－α活性、ＫＧＦ発現、ＴＧＦβ２発現、ＴＧＦβ１発現、及びｓｉＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイト増殖から選択される１以上の生化学的異常に罹患しており、当該投与は、当該生化学的異常のうちの１以上を治療する。
本発明の方法の全てに適用可能な別の下位実施形態では、患者は、核内因子カッパＢ（ＮＦ－κＢ）シグナル伝達、Ｎｒｆ２活性、ＩＬ－１活性、顆粒球マクロファージコロニー－刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）活性、ＩＬ－６活性、ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＴＮＦ－α活性、ＫＧＦ発現、ＴＧＦβ２発現、ＴＧＦβ１発現、及びｓｉＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイト増殖から選択される１以上の生化学的異常に罹患しており、当該投与は、当該生化学的異常のうちの１以上を治療する。
【0078】
本発明の方法の全てに適用可能な別の下位実施形態では、溶液は、ボトルに噴霧ノズルが取り付けられているか否かに関わらず、珀色のガラス瓶を一次包装して保存される。
【0079】
表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性毒性、ヘイリー－ヘイリー病、及びブルーリ潰瘍の治療に適用可能な別の下位実施形態では、組成物は、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与される。
【0080】
別の下位実施形態では、表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性毒性、ヘイリー－ヘイリー病、及びブルーリ潰瘍の治療に適用可能な別の下位実施形態では、組成物は、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約５０～５００ｍｃｌ、７５～４００、７５～１５０、１５０～４００ｍｃｌ、１００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥される。
【0081】
表皮水疱症、ＥＧＦＲ阻害剤誘発性毒性、ヘイリー－ヘイリー病、及びブルーリ潰瘍の場合、投与ごとに投与される溶液の総量は、皮膚の病変のサイズ及び病変の重症度に依存する。したがって、限定されることを意図するものではないが、小さな創傷の場合には１００若しくは２５０ｍｃｌを２若しくは３回の噴霧で、又はより大きな創傷の場合には１００若しくは２５０ｍｃｌを１０～２０回の噴霧で適用することができる。溶液は、病変の重症度及び必要とされる洗浄の量に応じて、１日当たり２回、３回、又はそれ以上の回数投与することができる。
【0082】
薬物製品／製剤
薬物製品は、塩化ナトリウム溶液電解プロセスを通して得られた次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性溶液である。このプロセスにより、（ｉ）ｐＨ、（ｉｉ）酸化還元電位（ＯＲＰ）、（ｉｉｉ）遊離塩素種、（ｉｖ）ＨＣｌＯの純度、（ｖ）塩化物含有量、及び（ｖｉ）長期安定性の特性に関して定義される低張溶液が得られる。
薬物製品は、塩化ナトリウム溶液電解プロセスを通して得られた次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性溶液である。このプロセスにより、（ｉ）ｐＨ、（ｉｉ）酸化還元電位（ＯＲＰ）、（ｉｉｉ）遊離塩素種、（ｉｖ）ＨＣｌＯの純度、（ｖ）塩化物含有量、及び（ｖｉ）長期安定性の特性に関して定義される低張溶液が得られる。
【0083】
遊離塩素種（塩素（Ｃｌ2）、次亜塩素酸塩（ＣｌＯ-）及び次亜塩素酸（ＨＣｌＯ））の濃度は、ｐＨ及び塩化物総含有量の関数であり、水中のガス状塩素の解離平衡を利用することによって操作することができる。
【0084】
【化1】
【0085】
以下の式に従って、３つの遊離塩素種のパーセンテージを計算することが可能である。
αＣｌ2＝［Ｈ+］２［Ｃｌ-］／（［Ｈ+｝２［Ｃｌ-］＋［Ｈ+］Ｋａ１＋Ｋａ１ Ｋａ２）
αＨＣｌＯ＝［Ｈ+］Ｋａ１／（［Ｈ+｝２［Ｃｌ-］＋［Ｈ+］Ｋａ１＋Ｋａ１ Ｋａ２）
αＣｌＯ-＝Ｋａ１ Ｋａ２／（Ｈ+｝２［Ｃｌ-］＋［Ｈ+］Ｋａ１＋Ｋａ１ Ｋａ２）
αＣｌ2＝［Ｈ+］２［Ｃｌ-］／（［Ｈ+｝２［Ｃｌ-］＋［Ｈ+］Ｋａ１＋Ｋａ１ Ｋａ２）
αＨＣｌＯ＝［Ｈ+］Ｋａ１／（［Ｈ+｝２［Ｃｌ-］＋［Ｈ+］Ｋａ１＋Ｋａ１ Ｋａ２）
αＣｌＯ-＝Ｋａ１ Ｋａ２／（Ｈ+｝２［Ｃｌ-］＋［Ｈ+］Ｋａ１＋Ｋａ１ Ｋａ２）
【0086】
％で表される結果の場合、上記の式に１００を掛ける必要がある。上記のイオン濃度（［Ｈ＋］及び［Ｃｌ－］）は、モル濃度として表される。
【0087】
遊離塩素含有量は、２０～４００ｍｇ／ｌ（ｐｐｍ）の範囲であり得るが、好ましくは２０～２００ｍｇ／ｌ（ｐｐｍ）又は２０～１４０ｍｇ／ｌ（ｐｐｍ）の範囲である。また、ｐＨ、ＯＲＰ、ＨＣｌＯの純度、及び低張度（低塩化物含有量）に関して生成物の特性を保証するため、４０～１００ｐｐｍの遊離塩素範囲も好ましい。本発明の組成物は、常に酸性ｐＨを有し、低張性であり、優勢な遊離塩素種として次亜塩素酸を含有する。さらに、組成物は、単独で又は組み合わせて、以下の特性のうちのいずれかによって定義することができる：
・２０～４００ｍｇ／ｌ、２０～２００ｍｇ／ｌ、２０～１４０ｍｇ／ｌ、４０～１００ｍｇ／ｌ、４０～７０ｍｇ／ｌ、又は７０～１００ｍｇ／ｌの遊離塩素含有量、
・５００ｍｇ／ｌ未満、４００ｍｇ／ｌ未満、３００ｍｇ／ｌ未満、又は２００ｍｇ／ｌ未満、及び好ましくは２０又は５０ｍｇ／ｌを超える塩化物含有量と、
・５ｍｇ／ｌ未満、２ｍｇ／ｌ、０．５ｍｇ／ｌ、又は０．１ｍｇ／ｌ未満のＣｌＯ-濃度、
・２～６、５、４若しくは３、又は２．５～６、５、４若しくは３のｐＨと、
・８５０～１３５０ｍＶ又は１０００～１３００ｍＶの酸化還元電位（ＯＲＰ）、並びに／あるいは
・≧９０％のＨＣｌＯ及び≦１０％のＣｌ2、又は≧９５％のＨＣｌＯ、＜５％％のＣｌＯ-及び≦５％のＣｌ2を含む遊離塩素含有量。
・２０～４００ｍｇ／ｌ、２０～２００ｍｇ／ｌ、２０～１４０ｍｇ／ｌ、４０～１００ｍｇ／ｌ、４０～７０ｍｇ／ｌ、又は７０～１００ｍｇ／ｌの遊離塩素含有量、
・５００ｍｇ／ｌ未満、４００ｍｇ／ｌ未満、３００ｍｇ／ｌ未満、又は２００ｍｇ／ｌ未満、及び好ましくは２０又は５０ｍｇ／ｌを超える塩化物含有量と、
・５ｍｇ／ｌ未満、２ｍｇ／ｌ、０．５ｍｇ／ｌ、又は０．１ｍｇ／ｌ未満のＣｌＯ-濃度、
・２～６、５、４若しくは３、又は２．５～６、５、４若しくは３のｐＨと、
・８５０～１３５０ｍＶ又は１０００～１３００ｍＶの酸化還元電位（ＯＲＰ）、並びに／あるいは
・≧９０％のＨＣｌＯ及び≦１０％のＣｌ2、又は≧９５％のＨＣｌＯ、＜５％％のＣｌＯ-及び≦５％のＣｌ2を含む遊離塩素含有量。
【0088】
したがって、１つの下位実施形態では、薬学的に許容される組成物は、２０ｍｇ／ｌを超える遊離塩素含有量を含む低張水溶液である。あるいは、遊離塩素含有量は、２０ｍｇ／ｌ～４００ｍｇ／ｌ、２０ｍｇ／ｌ～２５０ｍｇ／ｌ、又は２０～１４０ｍｇ／ｌの範囲であり得る。
【0089】
別の下位実施形態では、薬学的に許容される組成物は、４００ｍｇ／ｌ未満の塩化物含有量を含む低張水溶液である。
【0090】
さらに別の下位実施形態では、薬学的に許容される組成物は、４００ｍｇ／ｌ未満の塩化物含有量及び２０～１４０ｍｇ／ｌの遊離塩素含有量を含む、２．５～６のｐＨでの低張水溶液である。
【0091】
さらに別の下位実施形態では、薬学的に許容される組成物は、４００ｍｇ／ｌ未満の塩化物含有量及び２０～４００ｍｇ／ｌの遊離塩素含有量を含む、２．５～６のｐＨでの低張水溶液であり、遊離塩素は、≧９０％のＨＣｌＯ、≦１０％のＣｌ2、及び５％未満のＣｌＯ-濃度を含む。
【0092】
さらに別の下位実施形態では、薬学的に許容される組成物は、４００ｍｇ／ｌ未満の塩化物含有量、２０～４００ｍｇ／ｌの遊離塩素含有量、及び８５０～１３５０ｍＶの酸化還元電位（ＯＲＰ）を含む、２．５～６のｐＨでの低張水溶液であり、遊離塩素は、≧９０％のＨＣｌＯ、≦１０％のＣｌ2、及び５％未満のＣｌＯ-濃度を含む。
【0093】
別の下位実施形態では、薬学的に許容される組成物は、（ａ）２００ｍｇ／ｌ未満の塩化物含有量と、（ｂ）２．５～３のｐＨと、（ｃ）１０００～１３００ｍＶの酸化還元電位（ＯＲＰ）と、（ｄ）≧９５％のＨＣｌＯ、≦５％のＣｌ2、及び＜２％若しくは０．５％のＣｌＯ-又は０％のＣｌＯ-を含む、４０～１００ｍｇ／ｌの遊離塩素含有量と、を含む低張水溶液である。
【0094】
別の下位実施形態では、薬学的に許容される組成物は、２．５～４．５のｐＨ、≦３００ｍｇ／ｌの塩化物含有量、及び８５０～１３５０ｍＶの酸化還元電位（ＯＲＰ）を含む低張水溶液である。
【0095】
別の下位実施形態では、薬学的に許容される組成物は、（ａ）２５０ｍｇ／ｌ未満の塩化物含有量と、（ｂ）２．５～４のｐＨと、（ｃ）８５０～１３５０ｍＶの酸化還元電位（ＯＲＰ）と、（ｄ）≧９２．５％のＨＣｌＯ、≦７．５％のＣｌ2、及び＜１％若しくは０％のＣｌＯ-を含む、２５～１２０ｍｇ／ｌの遊離塩素含有量と、を含む低張水溶液である。
【0096】
別の下位実施形態では、薬学的に許容される組成物は、（ａ）２００ｍｇ／ｌ未満の塩化物含有量と、（ｂ）２．５～３のｐＨと、（ｃ）１０００～１３００ｍＶの酸化還元電位（ＯＲＰ）と、（ｄ）≧９５％のＨＣｌＯ、≦５％のＣｌ2、及び＜０．１％若しくは０％のＣｌＯ-を含む、４０～１００ｍｇ／ｌの遊離塩素含有量と、を含む低張水溶液である。
【0097】
本発明の溶液は、好ましくは、１００～５００マイクロリットル／吹き、好ましくは約２５０マイクロリットル／吹きをどこかに分配する噴霧ポンプを備えた噴霧ボトルで供給される。治療方法では、溶液は、好ましくは１日２回又は３回適用される。
【0098】
したがって、さらに別の下位実施形態では、薬学的に許容される組成物は、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約２５０マイクロリットルの噴霧として投与される低張水溶液である。
【0099】
投与方法／作用機構
一実施形態では、溶液は、機械的クレンジング機能を有する。したがって、１つの特定の実施形態では、本方法は、罹患した皮膚に有効量の溶液を投与して、罹患した皮膚を通って流れ、生物学的及び不活性材料を除去して実施される。
一実施形態では、溶液は、機械的クレンジング機能を有する。したがって、１つの特定の実施形態では、本方法は、罹患した皮膚に有効量の溶液を投与して、罹患した皮膚を通って流れ、生物学的及び不活性材料を除去して実施される。
【0100】
驚くべきことに、この洗浄は、罹患した皮膚に水を流したり、罹患した皮膚を布又はティッシュで乾燥させたり、あるいは罹患した皮膚を創面切除したりするなど、従来の意味で皮膚を洗うことなく行われることが分かっている。むしろ、いかなる理論にも拘束されることを望むものではないが、溶液が皮膚と協調して作用することにより、生物学的で不活性な物質が皮膚の表面に押しつけられ、皮膚表面下での治癒プロセス妨害することができなくなると考えられている。
【0101】
したがって、いくつかの実施形態では、溶液が治癒及び再生を促進するのに十分な期間皮膚を湿らせることができるように、溶液を皮膚上に保持することが重要である。したがって、さらに別の実施形態では、本発明の方法は、生理学的治癒を維持及び促進するのに有効な期間、溶液の湿潤層を皮膚上に保持することをさらに含む。他の実施形態では、投与は、罹患した皮膚上に溶液の湿潤層を形成し、機械的介入を伴わずに周囲条件下で溶液を蒸発させることをさらに含む。
【0102】
別の下位実施形態では、組成物は、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約１５０～４００ｍｃｌ、２００～３００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与される。
【0103】
さらに別の下位実施形態では、組成物は、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約１５０～４００ｍｃｌ、２００～３００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥される。
【0104】
別の下位実施形態では、組成物は、ポンプ型噴霧装置から、作動当たり約１５０～４００ｍｃｌ、２００～３００ｍｃｌ、又は２５０ｍｃｌの噴霧として身体上の罹患した局所表面に投与され、物理的介入を伴わずに空気乾燥され、その後、二次治療の局所投与が行われる。
【0105】
さらに別の下位実施形態では、組成物は、投与当たり１００～１０００ｍｃｌの体積で噴霧型装置から鼻内噴霧として投与され、投与は、装置の２回以上の作動を含み得る。
【0106】
別の実施形態では、本発明の方法は、罹患した皮膚をたっぷりと覆うために溶液を局所的に投与し、溶液を乾燥させ、投与を繰り返すことを含む。好ましい実施形態では、本発明の方法は、１日当たり１回又は２回繰り返される。
【0107】
さらに別の実施形態では、本発明の方法は、保湿クリーム、ローション、ゲル、又は軟膏を、罹患した皮膚に局所適用することをさらに含む。
【実施例】
【0108】
以下の実施例では、数（例えば、量、温度など）に関する精度を確保するための努力がなされているが、いくらかの誤差及び偏差を考慮するべきである。以下の実施例は、本明細書において特許請求される方法がどのように作製され評価されるかについての完全な開示及び説明を用いて当業者に提供され、本発明を純粋に例示するものであることが意図されており、本発明者らが発明としてみなす範囲を限定することを意図するものではない。
【0109】
実施例１．本発明のＨＣＬＯ溶液の説明
生成物は、塩化ナトリウム溶液電解プロセスを通して得られた次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸性酸化性溶液である。このプロセスにより、（ｉ）ｐＨ、（ｉｉ）酸化還元電位（ＯＲＰ）、（ｉｉｉ）遊離塩素種、及び（ｉｖ）長期安定性の特性を有するＨＣｌＯの純度に関して定義される低張溶液が得られる。生成物を生成するための方法は、ＷＯ／２００８／１３１９３６及びＷＯ／２００７／０４８７７２に記載されており、それらの開示が参照により本明細書に組み込まれる。
生成物は、塩化ナトリウム溶液電解プロセスを通して得られた次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸性酸化性溶液である。このプロセスにより、（ｉ）ｐＨ、（ｉｉ）酸化還元電位（ＯＲＰ）、（ｉｉｉ）遊離塩素種、及び（ｉｖ）長期安定性の特性を有するＨＣｌＯの純度に関して定義される低張溶液が得られる。生成物を生成するための方法は、ＷＯ／２００８／１３１９３６及びＷＯ／２００７／０４８７７２に記載されており、それらの開示が参照により本明細書に組み込まれる。
【0110】
次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸性酸化性溶液の仕様を以下の表１に示す。
【0111】
【表1】
【0112】
表２は、表１に記載の仕様を満たす特定のバッチについての試験結果を示す。
【0113】
【表2】
【0114】
次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸性酸化性溶液は、琥珀色のガラス瓶に入れ、約１００又は２５０μｌ／吹きを分配する噴霧ポンプを備えることができる。ＩＣＨ（調和国際会議）。安定性はいくつかのバッチに対して行われ、生成されたデータに基づき、５℃～２５℃に保存された場合、割り当てられた貯蔵寿命は２４ヶ月である。
【0115】
実施例２．使用説明
実施例１の生成物を含む、本発明の溶液を使用するための好適な説明を以下に示す。
実施例１の生成物を含む、本発明の溶液を使用するための好適な説明を以下に示す。
【0116】
作用機序
投与後に病変上に残った湿潤層は、溶液の３つの特徴（高純度ＨＣｌＯ、ｐＨ＜３．０、及びＯＲＰ＞１０００ｍＶ）により、生理学的治癒プロセスを維持するのに理想的な微小環境が作製されたことを説明する。
投与後に病変上に残った湿潤層は、溶液の３つの特徴（高純度ＨＣｌＯ、ｐＨ＜３．０、及びＯＲＰ＞１０００ｍＶ）により、生理学的治癒プロセスを維持するのに理想的な微小環境が作製されたことを説明する。
【0117】
溶液は次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有し、この次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）は、溶液内の微生物の成長を阻害することによって抗微生物剤及び防腐剤として作用し、病変表面上で局所的かつ補助的な抗微生物効果を発揮することによって汚染を防止する。
【0118】
中性電荷を特徴とするＨＣｌＯは、負に帯電した細菌膜に非常に効率的に浸透し、そこで抗菌作用を発揮する。
【0119】
ｐＨ＜３．０は、細菌成長に好ましくない環境を作製することによって細菌成長に影響を及ぼす。さらに、酸環境は、ボーア効果によって組織酸素化を促進し、細菌異化作用のアンモニア副生物による健康な細胞への浸透を阻害する。
【0120】
高ＯＲＰは、微生物の細胞膜を物理的に損傷し、それらの防御機構を不活性化する。
【0121】
低ｐＨ及び高ＯＲＰの組み合わせは、マトリックス・メタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）の阻害において役割を有する。ＭＭＰ活性の上昇は、治癒プロセスに重要なコラーゲンマトリックスの分解によって、創傷治癒の遅延を引き起こす。ＭＭＰ活性の阻害は、生理学的治癒プロセスの再開に寄与し得る。
【0122】
使用方向
徴候の発症時に溶液を適用する。この溶液は、混合又は希釈を必要とせずにすぐに使用できる。
徴候の発症時に溶液を適用する。この溶液は、混合又は希釈を必要とせずにすぐに使用できる。
【0123】
罹患領域に直接溶液を適用する。
－キャップを緩めてボトルを開ける。
－噴霧キャップが入っているプラスチックの小袋を、上側を切って開ける。
－噴霧キャップを小袋から取り出し、ストローに触れないように注意しながらキャップから取り出す。
－ストローをボトルに挿入する。
－ボトルネック上に噴霧キャップをねじ込む。
－生成物を初めて使用する前に、噴霧（nebulized）溶液が見えるまで、空気中に噴霧してポンプを始動する。
－罹患した領域をたっぷりと覆うために、溶液を噴霧することによって損傷領域上に溶液を直接適用し、乾燥させ、適用を繰り返す。
－１日１回又は２回治療を適用する。
－設置後に噴霧キャップを緩めないこと。噴霧キャップの設置後に、スクリューキャップをボトルに再び適用しないこと。
－使用直後にオーバーキャップで閉じる。
－最初の開封後３０日以内に装置を使用する。
－キャップを緩めてボトルを開ける。
－噴霧キャップが入っているプラスチックの小袋を、上側を切って開ける。
－噴霧キャップを小袋から取り出し、ストローに触れないように注意しながらキャップから取り出す。
－ストローをボトルに挿入する。
－ボトルネック上に噴霧キャップをねじ込む。
－生成物を初めて使用する前に、噴霧（nebulized）溶液が見えるまで、空気中に噴霧してポンプを始動する。
－罹患した領域をたっぷりと覆うために、溶液を噴霧することによって損傷領域上に溶液を直接適用し、乾燥させ、適用を繰り返す。
－１日１回又は２回治療を適用する。
－設置後に噴霧キャップを緩めないこと。噴霧キャップの設置後に、スクリューキャップをボトルに再び適用しないこと。
－使用直後にオーバーキャップで閉じる。
－最初の開封後３０日以内に装置を使用する。
【0124】
治療投与のために、患者がメイクアップ又は別の局所包帯を使用する場合、その適用後に生成物を少なくとも２分間乾燥させた後にのみ、そうするべきである。患者が剃毛する必要がある場合、生成物を適用する前に、そうするべきである。
【0125】
実施例３．表皮水疱症への特定の適用を伴う、抗炎症特性及び組織再生特性の評価
実施例１の仕様を満たす次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）（この表示ではＡＰＲ ＴＤ－０１１と呼ばれる）を含有する低張性酸性酸化性溶液の役割を、ＦＴ－ＳＫＩＮのインビトロ創傷治癒モデルにおいて評価して、その作用機序を定義し、損傷後処理の４時間及び２４時間後の表皮及び真皮レベルでの組織再生特性を転写試験（ｑＲＴ－ＰＣＲ）で評価している。
実施例１の仕様を満たす次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）（この表示ではＡＰＲ ＴＤ－０１１と呼ばれる）を含有する低張性酸性酸化性溶液の役割を、ＦＴ－ＳＫＩＮのインビトロ創傷治癒モデルにおいて評価して、その作用機序を定義し、損傷後処理の４時間及び２４時間後の表皮及び真皮レベルでの組織再生特性を転写試験（ｑＲＴ－ＰＣＲ）で評価している。
【0126】
方法：
試験システム：
創傷治癒の実験的インビトロモデルは、表皮及び真皮区画の両方を含む再現可能な機械的損傷を誘発し、治癒プロセスの様々な段階を模倣することにより、「全厚皮膚モデル」（ＦＴ皮膚）上で開発されている。
試験システム：
創傷治癒の実験的インビトロモデルは、表皮及び真皮区画の両方を含む再現可能な機械的損傷を誘発し、治癒プロセスの様々な段階を模倣することにより、「全厚皮膚モデル」（ＦＴ皮膚）上で開発されている。
【0127】
Ｐｈｅｎｉｏｎ（登録商標）全厚皮膚モデルは、Ｈｅｎｋｅｌ（ドイツ、デュッセルドルフ、直径１．３ｃｍ）によって製造されている。このモデルでは、表皮ケラチノサイト及び真皮線維芽細胞（健康なドナーの生検材料に由来）は、培養条件下でヒトの皮膚に似た多層皮膚を形成する。簡潔には、線維芽細胞は、線維芽細胞牽引力下で収縮しない特殊な安定したマトリックスにおいて成長させる。この真皮等価物の発生後、ケラチノサイトを重ね合わせ、数日以内に、明確に認識可能な層で表皮を発達させる。表皮及び真皮は、生理学的に機能的なユニットを形成し、ヒトの皮膚と同様、表皮は、様々な分化マーカー（サイトケラチン１０、フィラググリン、トランスグルタミナーゼ、及びインボルクリン）を生成する。表皮－真皮接合部は、基底膜タンパク質（ラミニン及びコラーゲンＩＶ）を特徴とする。皮膚区画では、エラスチン及びフィブロネクチンのデノボ合成が実証されている。基底膜の増殖細胞は、Ｋｉ－６７染色によって識別される。モデルは、５週間の培養期間後に完全に開発される。
【0128】
この実験における損傷を、直径２ｍｍの生検パンチでシミュレートした。真皮及び表皮の両方の区画に到達する４つの対称性損傷が誘発されている。
【0129】
試験生成物を、５０μＬの総体積で各創傷に適用した。
【0130】
リアルタイムＰＣＲ：
ＲＮＡ抽出、ｃＤＮＡ逆転写（Retrotranscription）、及びリアルタイムＰＣＲ：
急速なフェノールを含まないフィルタベースのＲＮＡ単離系を使用して、細胞試料から全ＲＮＡを抽出した。高容量ｃＤＮＡ逆転写キットを使用して、ＲＮＡからｃＤＮＡを合成した。ＴａｑＭａｎアッセイを実施する蛍光ベースのＰＣＲ化学を備えた機器Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ７５００ Ｆａｓｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ ＰＣＲを使用して、重要なバイオマーカーの遺伝子発現を研究した。
ＲＮＡ抽出、ｃＤＮＡ逆転写（Retrotranscription）、及びリアルタイムＰＣＲ：
急速なフェノールを含まないフィルタベースのＲＮＡ単離系を使用して、細胞試料から全ＲＮＡを抽出した。高容量ｃＤＮＡ逆転写キットを使用して、ＲＮＡからｃＤＮＡを合成した。ＴａｑＭａｎアッセイを実施する蛍光ベースのＰＣＲ化学を備えた機器Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ７５００ Ｆａｓｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ ＰＣＲを使用して、重要なバイオマーカーの遺伝子発現を研究した。
【0131】
遺伝子発現は、ＤＮＡ配列などの遺伝子における遺伝性情報が、タンパク質又はＲＮＡなどの機能的遺伝子産物に作製されるプロセスである。相対的定量により、キャリブレータ試料中の同じ配列と比較した試験試料中の核酸配列の発現の変化が判定される。ＧＡＰＤＨを内因性対照遺伝子として使用して、入力量を正規化した。
【0132】
各複製を３回評価した。２Ｘ ＴａｑＭａｎ Ｆａｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘにおいて、Ｔａｑｍａｎ遺伝子発現アッセイ及びｃＤＮＡ（２５ｎｇ）を総体積で２０μＬ加えた。ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ ７５００ Ｆａｓｔにおける熱条件ステップは、９５℃で２０秒、４０サイクル（９５℃で３秒＋６０℃で３０秒）である。
【0133】
以下の遺伝子を分析した。
４時間：ＮＲＦ－２、ＨＯ－１、ＧＰＸ、ＧＳＲ、ＧＳＴ、ＫＧＦ、ＴＧＦβ２、ＴＧＦβ３、Ｎｆ－ｋｂ、ＶＥＧＦ－Ｃ、ＰＤＧＦ
２４時間：ＩＬ－１α、ＴＮＦ－α、Ｎｆ－ｋＢ、Ｎｒｆ２、ＫＧＦ ｅＴＧＦβ２ ｅβ３、ＶＥＧＦ－Ｃ、ＰＤＧＦ
４時間：ＮＲＦ－２、ＨＯ－１、ＧＰＸ、ＧＳＲ、ＧＳＴ、ＫＧＦ、ＴＧＦβ２、ＴＧＦβ３、Ｎｆ－ｋｂ、ＶＥＧＦ－Ｃ、ＰＤＧＦ
２４時間：ＩＬ－１α、ＴＮＦ－α、Ｎｆ－ｋＢ、Ｎｒｆ２、ＫＧＦ ｅＴＧＦβ２ ｅβ３、ＶＥＧＦ－Ｃ、ＰＤＧＦ
【0134】
初期の時点では、初期炎症期と共に、生成物の抗酸化作用機序の評価が可能である。２４時間の時点では、血管の増殖及び安定化に関与する成長因子の発現を誘発する、組織回復の最初の兆候を考慮に入れた、再上皮化の重複、増殖期を伴う創傷治癒の後期炎症期の評価が可能である。
【0135】
生成物の有効性を損傷組織と比較して、損傷状況の回復を評価する。オレンジ色のボックスは、遺伝子の有意な過剰発現に対応し、緑色のボックスは、陰性対照（ＣＮ）（損傷しておらず、処理されていない）と、損傷しているが処理されていない（ＩＮＪ）の両方に関する遺伝子発現の有意な下方制御に対応する。比較を表３の２つの列に示す。特に、表３は、ＡＰＲ ＴＤ０１１のリアルタイムＰＣＲ結果を報告している（損傷しており、ＡＰＲ ＴＤ０１１で処理されている）。全ての遺伝子を、損傷から４時間及び２４時間後に分析した。
Ａ）全ての試料のキャリブレータ試料は、陰性対照（処理されておらず、損傷していない組織（ＣＮ））である。
Ｂ）全ての試料のキャリブレータ試料は、損傷対照（損傷しており、処理されていない（ＩＮＪ））。
Ａ）全ての試料のキャリブレータ試料は、陰性対照（処理されておらず、損傷していない組織（ＣＮ））である。
Ｂ）全ての試料のキャリブレータ試料は、損傷対照（損傷しており、処理されていない（ＩＮＪ））。
【0136】
【表3】
【0137】
結果の考察
抗炎症特性
得られた結果に基づいて、ＡＰＲ ＴＤ０１１が、分子レベルで、ＮＦ－ｋＢの低発現とＩＬ－１及びＴＮＦ－αの有意な下方制御に基づいて、２４時間後に炎症反応を調節すると結論付けることができる。
抗炎症特性
得られた結果に基づいて、ＡＰＲ ＴＤ０１１が、分子レベルで、ＮＦ－ｋＢの低発現とＩＬ－１及びＴＮＦ－αの有意な下方制御に基づいて、２４時間後に炎症反応を調節すると結論付けることができる。
【0138】
４時間の時点で、ＡＰＲ ＴＤ０１１は、損傷対照に対するＧＳＲ及びＧＳＴＡ１の増加と、陰性対照に対するＮＲＦ２の増加とを実証し、これは、ＡＰＲ ＴＤ０１１が、ケロイド瘢痕に対する組織応答をシフトすることが知られているＴＧＦβ－２シグナル伝達を伴わずに、生理学的方法で炎症性組織応答を調節するという結論を裏付けていた。
【0139】
ＮＦ－ｋＢの発現がより低く、ＩＬ－１α、ＴＮＦ－αが（損傷組織と比較して）有意に下方制御されていることから、ＡＰＲ ＴＤ０１１の抗炎症活性が確認され、これはＥＢ患者の皮膚創傷に潜在的に良好であった。
【0140】
組織再生特性
哺乳動物に存在するＴＧＦβの３つのアイソフォームは、ほとんどのインビトロアッセイにおいて同様の生物学的活性を示す。しかしながら、インビボ効力及びいくつかの生物学的活性の点で差異がある。ＴＧＦβ－１、ＴＧＦβ－２及びＴＧＦβ－３間の相対バランスは、創傷治癒プロセスの結果を判定する。皮膚の瘢痕化（線維性修復応答）にはＴＧＦβ－１及びＴＧＦβ－２が関与しており、瘢痕化（再生応答）の予防にはＴＧＦβ－３が関与している。
哺乳動物に存在するＴＧＦβの３つのアイソフォームは、ほとんどのインビトロアッセイにおいて同様の生物学的活性を示す。しかしながら、インビボ効力及びいくつかの生物学的活性の点で差異がある。ＴＧＦβ－１、ＴＧＦβ－２及びＴＧＦβ－３間の相対バランスは、創傷治癒プロセスの結果を判定する。皮膚の瘢痕化（線維性修復応答）にはＴＧＦβ－１及びＴＧＦβ－２が関与しており、瘢痕化（再生応答）の予防にはＴＧＦβ－３が関与している。
【0141】
ＴＧＦβ－３は、過剰増殖性上皮において最も豊富なＴＧＦβアイソフォームであり、したがって、ケラチノサイトの増殖及び分化において重要な役割を果たす可能性がある。酸性条件下（ｐＨ＜３．８）では、タンパク質がおそらく凝集せず、このモノマー形態が単独で創傷を加速させることができ、線維性障害の予防及び／又は治療に使用可能であることを強調することが重要である。
【0142】
以下の結果に基づいて、分子レベルで、ＡＰＲ ＴＤ０１１が、４時間及び２４時間後にＥＢにおける組織再生にプラスの影響を及ぼすと結論付けることが可能である。その理由は、以下のとおりである。
（１）４時間及び２４時間の両方でＫＧＦの発現を有意に増加させる。ＫＧＦは、表皮創傷治癒において重要な役割を果たすことが知られている。線維芽細胞によるその生成は、インターロイキン－１の存在によって上方制御される。ケラチノサイトの増殖は、ＫＧＦの存在によって上方制御される。ＫＧＦの増加が大きくなるにつれ、より厚い新表皮（neoepidermis）の発生を誘発する。
（２）損傷対照と比較して、２４時間でのＴＧＦβ－２の発現が低いと、ケロイド瘢痕のリスクを低減する（ＴＧＦβ－２シグナル伝達は、ケロイド瘢痕に対する組織応答をシフトすることが知られている）。
（３）ＴＧＦ－β３のモノマー形態は、上皮損傷の部位で上皮再生を促進して、（陰性対照と比較して）ＫＧＦ遺伝子発現を増加させることができ、これは、再上皮化作用を明らかにする。
（１）４時間及び２４時間の両方でＫＧＦの発現を有意に増加させる。ＫＧＦは、表皮創傷治癒において重要な役割を果たすことが知られている。線維芽細胞によるその生成は、インターロイキン－１の存在によって上方制御される。ケラチノサイトの増殖は、ＫＧＦの存在によって上方制御される。ＫＧＦの増加が大きくなるにつれ、より厚い新表皮（neoepidermis）の発生を誘発する。
（２）損傷対照と比較して、２４時間でのＴＧＦβ－２の発現が低いと、ケロイド瘢痕のリスクを低減する（ＴＧＦβ－２シグナル伝達は、ケロイド瘢痕に対する組織応答をシフトすることが知られている）。
（３）ＴＧＦ－β３のモノマー形態は、上皮損傷の部位で上皮再生を促進して、（陰性対照と比較して）ＫＧＦ遺伝子発現を増加させることができ、これは、再上皮化作用を明らかにする。
【0143】
ＴＧＦ－β３は主に、以下の２つの主要な形態で存在する：
・低ｐＨの溶液中のモノマー、及び
・生理学的ｐＨでの大きな沈殿凝集体。
・低ｐＨの溶液中のモノマー、及び
・生理学的ｐＨでの大きな沈殿凝集体。
【0144】
凝集は、４．３＜ｐＨ＜９．８のｐＨ範囲で顕著であり、ｐＨ６．５～８．５で最大であった。ＡＰＲ ＴＤ０１１によって誘発される酸性条件下で（ｐＨ＜３．８）、タンパク質は凝集しなかった。その低ｐＨを有するＡＰＲ ＴＤ０１１は、上皮再生の促進並びに線維性障害の予防及び／又は治療における、創傷治癒及び／又は瘢痕化の阻害の加速に有用であり得るＴＧＦ－β３のモノマー形態を維持するようである。
【0145】
図１に示され、以下の表４で考察されるように、４時間及び２４時間後の組織の組織学的分析により、ＡＰＲ ＴＤ０１１（「ＡＮＷ」）の最適な組織再生特性が確認された。４時間のＡＰＲ ＴＤ０１１処理後、組織の形態は、損傷組織と比較して著しく保存されており、マトリックスの完全性が十分に保存されており、死細胞の数が少ないように見え、これは組織の完全性の早期保護／回復を示唆していた。
【0146】
【表4】
【0147】
ＥＢを有する二人の患者、及びＥＢに由来する皮膚の開放病変を、実施例１に記載の溶液で処理した。患者に、実施例２に従って溶液を適用するように指示した。数週間の処理後、各患者は、慢性創傷サイズの低減、病変周囲の炎症徴候の改善（生理学的治癒プロセスが開始したという指標）、及び掻痒の低減（全て患者の観点から価値ある側面）によって示されるような改善を報告した。
【0148】
図２は、重度の一般化ＲＤＥＢを有する２４歳の患者における治療結果を示す。図２（Ａ）は、０週目（Ａ－１；病変周囲の炎症と落屑、痂皮、滲出液）及び６週目（Ａ－２；創傷洗浄剤、病変周囲の炎症徴候が最小限で、より小さくかつより表面的）の胸部創傷の比較である。図２（Ｂ）は、２週間以内でのサイズの低減及びより少ない病変周囲の落屑を示す右肩甲骨上の創傷の写真である。図２（Ｃ）は、０週目（Ｃ－１）から８週目（Ｃ－２）までの間に改善された、赤み、痂皮及び鱗屑を含む左軸索の炎症徴候を示す。
【0149】
図３は、生成物で処理したＪＥＢ患者の２歳の慢性創傷の下肢の写真である。写真３（Ａ）は、いくつかの異なる処理後に創傷が依然として解決されていないことを示す。写真３（Ｂ）は、４週間の処理後の創傷の強い改善を示す。
【0150】
実施例４．ＥＧＦＲ阻害剤誘発性皮膚毒性を治療するための生成物及びその能力の評価
実施例１で報告された仕様を満たす、次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性水の役割（この表示ではＡＰＲ ＴＭ－０１１と呼ばれる）を、セツキシマブ治療下の患者において臨床試験で評価している。
実施例１で報告された仕様を満たす、次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性水の役割（この表示ではＡＰＲ ＴＭ－０１１と呼ばれる）を、セツキシマブ治療下の患者において臨床試験で評価している。
【0151】
方法：
セツキシマブをベースとする投薬計画の患者の間で証拠を収集した。各患者は、次のように編成された外来診療を、３ヶ月以内に３回受けた。
－初期診療
－中間診療
－最終診療。
セツキシマブをベースとする投薬計画の患者の間で証拠を収集した。各患者は、次のように編成された外来診療を、３ヶ月以内に３回受けた。
－初期診療
－中間診療
－最終診療。
【0152】
中間診療は、患者の健康状態に応じて、１５／３０日の間隔で初期及び最終診療からスケジュールした。評価形態は、最初の診療時に臨床医によって記入され、その後の２回の診療で更新された。患者に対する最初の診療時に、以下の治療スキームに従って毎日の治療を示した。
－朝：ベースクリームによる水分補給
－昼：顔、胸及び背中に次亜塩素酸を含有する低張性酸溶液を数回吹いて（ｐｕｆｆｓ）分配
－晩：ベースクリームによる水分補給
－朝：ベースクリームによる水分補給
－昼：顔、胸及び背中に次亜塩素酸を含有する低張性酸溶液を数回吹いて（ｐｕｆｆｓ）分配
－晩：ベースクリームによる水分補給
【0153】
臨床医による評価形態は、評価に焦点を当てた９項目：以前の治療、次亜塩素酸を含有する低張性酸溶液による治療、在宅治療、アジュバント治療、創傷のタイプ、病変の評価（センチメートル単位での幅及び長さ）、病変周囲皮膚、生活の質の評価、並びに評価の一時中止で構成された。
【0154】
病変周囲皮膚の臨床的外観は、紅斑、浸軟、乾燥症、焼灼感（burning）、痒み、及び炎症の状態によって調査し、その重症度レベルを示した：軽度、中程度、又は重度。創傷面の特徴及び進化を、修正した創傷面スコア（ＷＢＳ）によって検出した。調査したパラメータは次のとおりであった。活性端（active edge）、黒痂皮、肉芽組織（granulation）の深さ／組織、滲出液量、浮腫量、病変周囲皮膚、皮膚毒性／湿疹、胼胝／線維症、バラ色の創傷面、現在の治療前の潰瘍持続時間。各パラメータには、０～２の範囲であり得るスコアが割り当てられた。全てのスコアの合計は、合計スコアを定義し、これは、０（最小又は最悪スコア）から１８（最大又は最良スコア）までの間の値をとり得る。
【0155】
生活の質をＱｏＬ－ＥＱ５Ｄによって評価した。調査した健康状態の一般的な領域は次のとおりであった：移動性、パーソナルケア、通常の活動、不快感／疼痛、不安、及びうつ病。前述の領域の各々の条件は、以下の状態のうちの１つを特徴とすることができる：問題がない、何らかの問題がある、又は重大な問題がある。
【0156】
最後に、患者の現在の状態の知覚は、０（悪い健康状態に等しい）から１００（より良い健康）までの値の範囲を特徴とする数値スケールを使用して測定した。治療の安全性は、以下のような症状発現の有無に基づいて評価した：不耐性、創傷感染、又は有害事象。回答方法は、７項目については多肢選択式、２項目についてはオープンであった。
【0157】
結果：
最初の化学療法治療の後に、ざ瘡様のセツキシマブ病変を示した、平均年齢６０歳の１０人の男性及び５人の女性からなる１５人の患者に対して観察を行った。
最初の化学療法治療の後に、ざ瘡様のセツキシマブ病変を示した、平均年齢６０歳の１０人の男性及び５人の女性からなる１５人の患者に対して観察を行った。
【0158】
病変は、胸部、腕及び顔に位置していた。治療開始時：
病変評価－測定した病変は、異なるサイズを有していた。幅及び長さは、センチメートル単位で測定した。１５人の患者において、測定した幅は５ｃｍ～２２ｃｍの範囲であり、長さは１０ｃｍ～４０ｃｍの範囲であった。最小の損傷領域を有する患者の病変は、５ｃｍ×１０ｃｍのサイズであり、最大の損傷領域を有する患者の病変は、２２ｃｍ×４０ｃｍであった。
病変評価－測定した病変は、異なるサイズを有していた。幅及び長さは、センチメートル単位で測定した。１５人の患者において、測定した幅は５ｃｍ～２２ｃｍの範囲であり、長さは１０ｃｍ～４０ｃｍの範囲であった。最小の損傷領域を有する患者の病変は、５ｃｍ×１０ｃｍのサイズであり、最大の損傷領域を有する患者の病変は、２２ｃｍ×４０ｃｍであった。
【0159】
病変周囲皮膚－全ての患者の病変周囲皮膚は、主に痒み及び炎症を示した。掻痒は、患者の６０％が中程度、４０％が軽度であった。中程度の炎症が患者の６０％に存在し、軽度の炎症が４０％に存在した。患者の６．７％において、皮膚はわずかな焼灼感を示した。
【0160】
ＷＢＳスコア（修正）－患者の４０％において、総ＷＢＳスコアは、１４に等しかった。患者の３３．３％において、総ＷＢＳスコアは、１５であった。患者の２６．７％において、総ＷＢＳスコアは１６であった。
【0161】
生活の質－ＱｏＬ－ＥＱ５Ｄを使用して生活の質を評価した。重大な問題は、患者の４６．７％では不快感／疼痛であり、一方、患者の３３．３％は、通常の活動の実施に困難を示した。
【0162】
全ての患者は、何らかの不安及びうつ病に罹患していると報告した。８６．７％がパーソナルケアにおいて何らかの困難を示し、４６．７％が通常の活動において何らかの困難を示し、２０％が不快感及び疼痛の状態を経験した。
【0163】
患者のいずれも、移動性の問題を経験しなかった。さらに、患者の３３．３％では不快感及び疼痛の問題は明言されず、患者の２０％では通常の活動の問題は明言されず、患者の１３．３％ではパーソナルケアの問題は明言されなかった。
【0164】
合計１００のうち、今日の発現状態の評価は、患者の２０％が４０、患者の４０％がそれぞれ５０及び６０であった。
【0165】
治療終了時：
病変評価－全ての患者において、病変面積の低減が検出された。患者の９３．３％では面積が９０％以上低減し、１人の患者では８８．９％の低減が見られた（表５）。
病変評価－全ての患者において、病変面積の低減が検出された。患者の９３．３％では面積が９０％以上低減し、１人の患者では８８．９％の低減が見られた（表５）。
【0166】
病変周囲皮膚－いずれの患者も、病変周囲皮膚上の症状の病理学的発現を報告しなかった。
【0167】
ＷＢＳスコア（修正）－全ての患者のＷＢＳスコアは１８であった。（表６）
【0168】
生活の質－全ての患者は、不安及びうつ病を除くいかなる問題にも罹患していないことを報告した。（表７）
【0169】
全ての患者について、治療終了時の今日の状態の評価は８０であった。さらに、全ての患者は、いずれの時にも不耐性の現象を経験することなく、次亜塩素酸を含有する低張性酸溶液に基づく治療を完了することができた。
【0170】
【表5】
【0171】
【表6】
【0172】
【表7】
【0173】
結論：
次亜塩素酸を含有する低張性酸化性酸溶液をセツキシマブ皮膚病変に適用することにより、化学療法治療に対する患者の応答が改善される。病変は、寸法だけでなく、特徴及び相関する症状においても漸進的に改善される。病変は、限局性のままであり、サイズが低減する。病変周囲皮膚は、無傷のままであり、また、痒み及び炎症の事象を低減する。
次亜塩素酸を含有する低張性酸化性酸溶液をセツキシマブ皮膚病変に適用することにより、化学療法治療に対する患者の応答が改善される。病変は、寸法だけでなく、特徴及び相関する症状においても漸進的に改善される。病変は、限局性のままであり、サイズが低減する。病変周囲皮膚は、無傷のままであり、また、痒み及び炎症の事象を低減する。
【0174】
疾患の主要な状態に関連する不安及びうつ病以外にも、自身の身体イメージの知覚を悪化させない皮膚状況の制御及び忍容性が、社会的レベルでより良好な生活の質につながることも明らかである。治療終了時に、「今日の健康状態」を示すパラメータは、全ての患者で８０／１００であった。得られた良好な結果は、生成物が、抗癌療法の第１、第２のサイクルで通常現れる皮膚症状の最初の発症時に使用されるべきであるという事実の確認である。
【0175】
実施例５．ヘイリー－ヘイリー病への特定の適用を伴う、酸化防止特性の及び組織再生特性の評価
実施例１で報告された仕様を満たす次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性水の役割（この表示ではＡＰＲ ＴＤ－０１２と呼ばれる）を、ＨＨＤにおいてＡＰＲ ＴＤ０１２によって調節される分子経路のより良い理解を得るために、インビトロモデルで評価している。ＨａＣａＴケラチノサイト由来細胞株は、ＨＨＤ患者で発生する遺伝子発現のノックダウン（ｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞と呼ばれる）を得るために、ヒトＡＴＰ２Ｃ１に対して検証された低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）でトランスフェクトされている。
実施例１で報告された仕様を満たす次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性水の役割（この表示ではＡＰＲ ＴＤ－０１２と呼ばれる）を、ＨＨＤにおいてＡＰＲ ＴＤ０１２によって調節される分子経路のより良い理解を得るために、インビトロモデルで評価している。ＨａＣａＴケラチノサイト由来細胞株は、ＨＨＤ患者で発生する遺伝子発現のノックダウン（ｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞と呼ばれる）を得るために、ヒトＡＴＰ２Ｃ１に対して検証された低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）でトランスフェクトされている。
【0176】
方法：
細胞培養：
ＨａＣａＴケラチノサイト由来細胞株を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、５％ Ｌ－グルタミン、２％ペニシリン、及びストレプトマイシンを含むＤＭＥＭ培地内で、３７℃で５％ ＣＯ２を用いて成長させた。
細胞培養：
ＨａＣａＴケラチノサイト由来細胞株を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、５％ Ｌ－グルタミン、２％ペニシリン、及びストレプトマイシンを含むＤＭＥＭ培地内で、３７℃で５％ ＣＯ２を用いて成長させた。
【0177】
細胞培養及びトランスフェクション：
ＨａＣａＴ細胞（７０～８０％コンフルエント）を改変低カルシウム培地内に維持し、検証済みのヒトＡＴＰ２Ｃ１（Ｌ－００６１１９－００；Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ／Ｄｈａｒｍａｃｏｎ、米国コロラド州ラファイエット）用の１００ｎｍｏｌ Ｌ-1低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）及び対応する対照スクランブルｓｉＲＮＡを含むＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ＲＮＡｉＭＡＸトランスフェクション試薬を、製造元の指示（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、米国マサチューセッツ州）に従って使用してトランスフェクトした。
ＨａＣａＴ細胞（７０～８０％コンフルエント）を改変低カルシウム培地内に維持し、検証済みのヒトＡＴＰ２Ｃ１（Ｌ－００６１１９－００；Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ／Ｄｈａｒｍａｃｏｎ、米国コロラド州ラファイエット）用の１００ｎｍｏｌ Ｌ-1低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）及び対応する対照スクランブルｓｉＲＮＡを含むＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ＲＮＡｉＭＡＸトランスフェクション試薬を、製造元の指示（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、米国マサチューセッツ州）に従って使用してトランスフェクトした。
【0178】
細胞生存率アッセイ：
ＨａＣａＴ細胞（ｓｉＣＴＲ及びｓｉＡＴＰ２Ｃ１）をコラーゲン処理皿内で培養し、２回目の継代で[3H]チミジンアッセイに使用した。細胞を、ＲＮＡｉＭＡＸ試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によって１００ｎｍのｓｉＡＴＰ２Ｃ１又はｓｉ－ＣＴＲ（Ａｍｂｉｏｎ）のいずれかで２４時間トランスフェクトし、１００μＭのＡＰＲ－ＴＤ０１２で処理した。対照試料として、細胞を等量のビヒクル（Ｈ２Ｏ）で処理した。細胞生存率を、ＭＴＳベースのアッセイＣｅｌｌＴｉｔｅｒ ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ（Ｇ ３５８０；Ｐｒｏｍｅｇａ、米国ウィスコンシン州マディソン）を使用してアッセイした。吸光度は、ＧｌｏＭａｘ Ｍｕｌｔｉｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、４９０ｎｍで測定した。測定は、技術に３回実行した。図は、少なくとも２つの生物学的複製の平均±ＳＥＭを示す。
ＨａＣａＴ細胞（ｓｉＣＴＲ及びｓｉＡＴＰ２Ｃ１）をコラーゲン処理皿内で培養し、２回目の継代で[3H]チミジンアッセイに使用した。細胞を、ＲＮＡｉＭＡＸ試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によって１００ｎｍのｓｉＡＴＰ２Ｃ１又はｓｉ－ＣＴＲ（Ａｍｂｉｏｎ）のいずれかで２４時間トランスフェクトし、１００μＭのＡＰＲ－ＴＤ０１２で処理した。対照試料として、細胞を等量のビヒクル（Ｈ２Ｏ）で処理した。細胞生存率を、ＭＴＳベースのアッセイＣｅｌｌＴｉｔｅｒ ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ（Ｇ ３５８０；Ｐｒｏｍｅｇａ、米国ウィスコンシン州マディソン）を使用してアッセイした。吸光度は、ＧｌｏＭａｘ Ｍｕｌｔｉｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、４９０ｎｍで測定した。測定は、技術に３回実行した。図は、少なくとも２つの生物学的複製の平均±ＳＥＭを示す。
【0179】
ウエスタンブロットアッセイ：
細胞を、Ｔｒｉｓ ＨＣｌ ２０ｍＭ（ｐＨ７．５）、ＮａＣｌ １５０ｍＭ、ＥＤＴＡ １ｍＭ（ｐＨ８）、Ｔｒｉｔｏｎ １％、ＮａＦ ３０ｍＭ、Ｎａ３ＶＯ４ １ｍＭ、ＰＭＦＳ １ｍＭ、及びプロテアーゼ阻害剤（Ｃｏｃｋｔａｉｌ－Ｒｏｃｈｅ）中で溶解し、試料を１３０００ｒｐｍで１５分間遠心分離し、上清を回収した。定量は、Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）で行った。溶解物を９５℃で変性させ、８％アクリルアミドゲル上のＳＤＳ－ＰＡＧＥを通して分離した。ＰＶＤＦ膜に移した後、標準的な手順を使用してタンパク質を免疫ブロットした。以下の試薬は、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（米国カリフォルニア州サンタクルス）から購入した：チューブリン。ＮＲＦ２（Ａｂｃａｍ、英国ケンブリッジ）。
細胞を、Ｔｒｉｓ ＨＣｌ ２０ｍＭ（ｐＨ７．５）、ＮａＣｌ １５０ｍＭ、ＥＤＴＡ １ｍＭ（ｐＨ８）、Ｔｒｉｔｏｎ １％、ＮａＦ ３０ｍＭ、Ｎａ３ＶＯ４ １ｍＭ、ＰＭＦＳ １ｍＭ、及びプロテアーゼ阻害剤（Ｃｏｃｋｔａｉｌ－Ｒｏｃｈｅ）中で溶解し、試料を１３０００ｒｐｍで１５分間遠心分離し、上清を回収した。定量は、Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）で行った。溶解物を９５℃で変性させ、８％アクリルアミドゲル上のＳＤＳ－ＰＡＧＥを通して分離した。ＰＶＤＦ膜に移した後、標準的な手順を使用してタンパク質を免疫ブロットした。以下の試薬は、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（米国カリフォルニア州サンタクルス）から購入した：チューブリン。ＮＲＦ２（Ａｂｃａｍ、英国ケンブリッジ）。
【0180】
ＲＮＡ分析及び逆転写酵素－ポリメラーゼ連鎖反応：
全ＲＮＡを、グアニジンイソチオシアネート（Ｔｒｉｚｏｌ試薬、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、米国マサチューセッツ州）中で細胞から単離し、逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）によってさらに処理した。各試料をｑＲＴ－ＰＣＲによって３回分析し、少なくとも２つの独立した実験で分析した。ｑＲＴ－ＰＣＲを、以下に示されるプライマー：ＳｅｎｓｉＦＡＳＴ ＳｙＢｒ Ｈｉ－ＲＯＸキット（Ｂｉｏｌｉｎｅ、英国）を用いて、又はＴａｑｍａｎ遺伝子発現アッセイ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、米国マサチューセッツ州）を使用した特定のＴａｑＭａｎ ＭＧＢプライマー／プローブを用いて、適切なアニーリング温度で実行した。
全ＲＮＡを、グアニジンイソチオシアネート（Ｔｒｉｚｏｌ試薬、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、米国マサチューセッツ州）中で細胞から単離し、逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）によってさらに処理した。各試料をｑＲＴ－ＰＣＲによって３回分析し、少なくとも２つの独立した実験で分析した。ｑＲＴ－ＰＣＲを、以下に示されるプライマー：ＳｅｎｓｉＦＡＳＴ ＳｙＢｒ Ｈｉ－ＲＯＸキット（Ｂｉｏｌｉｎｅ、英国）を用いて、又はＴａｑｍａｎ遺伝子発現アッセイ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、米国マサチューセッツ州）を使用した特定のＴａｑＭａｎ ＭＧＢプライマー／プローブを用いて、適切なアニーリング温度で実行した。
【0181】
統計分析：
各実験を、少なくとも２回独立して繰り返した。全ての結果は、平均ＳＤとして表し、有意性にはＰ＜０．０５を使用した。独立した試料の一元配置分散分析を使用して、統計的有意性を判定した。
各実験を、少なくとも２回独立して繰り返した。全ての結果は、平均ＳＤとして表し、有意性にはＰ＜０．０５を使用した。独立した試料の一元配置分散分析を使用して、統計的有意性を判定した。
【0182】
結果：
ＡＰＲ ＴＤ０１２によるｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞の処理は、ＡＰＲ ＴＤ０１２が、酸化ストレスに応答して重要な役割を果たす転写因子Ｎｒｆ２の発現を回復することができることを実証する（Ｋｅｎｓｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００７；Ｍｏｉ ｅｔ ａｌ．，１９９４；Ｚｈａｎｇ，２００６）。ＡＰＲ ＴＤ０１２は、異なる方法でサイトカインＴＧＦベータ１及び２を調節することができ、ＡＰＲ ＴＤ０１２は、ｓｉＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイトの増殖可能性を回復することができる。一緒に、これらの結果は、ＡＰＲ ＴＤ０１２が病理学用モデルであるｓｉＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイトで観察された欠陥のうちのいくつかを元に戻すことによってケラチノサイトに直接作用できることを示している。
ＡＰＲ ＴＤ０１２によるｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞の処理は、ＡＰＲ ＴＤ０１２が、酸化ストレスに応答して重要な役割を果たす転写因子Ｎｒｆ２の発現を回復することができることを実証する（Ｋｅｎｓｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００７；Ｍｏｉ ｅｔ ａｌ．，１９９４；Ｚｈａｎｇ，２００６）。ＡＰＲ ＴＤ０１２は、異なる方法でサイトカインＴＧＦベータ１及び２を調節することができ、ＡＰＲ ＴＤ０１２は、ｓｉＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイトの増殖可能性を回復することができる。一緒に、これらの結果は、ＡＰＲ ＴＤ０１２が病理学用モデルであるｓｉＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイトで観察された欠陥のうちのいくつかを元に戻すことによってケラチノサイトに直接作用できることを示している。
【0183】
Ｎｒｆ２タンパク質発現：
ＮＲＦ２の発現は、ｓｉＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイト（Ｃｉａｌｆｉ ｅｔ ａｌ，２０１６）で減少したことが以前に観察されている。ＡＴＰ２Ｃ１損失はＤＮＡ損傷応答阻害をもたらす機構を誘発するため、この事象はＨＨＤ発症において重要な役割を果たし得る。ＮＦＲ２下方調節の結果としてＲＯＳレベルが増加することにより、ケラチノサイトが修復することができない閾値までＤＮＡ損傷が生じ、次いで病変の発現が促進される。このインビトロモデルでは、Ｎｒｆ２タンパク質発現レベルは、ビヒクルで処理したｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞におけるよりも、ＡＰＲ ＴＤ０１２で処理したｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞において有意に高かった（図４）。これらのデータは、ＡＰＲ ＴＤ０１２がＮｒｆ２経路を活性化することによって抗酸化防止応答を促進することを示唆している。ＨａＣａＴ細胞、ケラチノサイト由来細胞株に、ｓｉＲＮＡ－ＣＴＲ又はｓｉＲＮＡ ＡＴＰ２Ｃ１のいずれかをトランスフェクトし、２４時間後、ＡＰＲ ＴＤ０１２又はＨ２Ｏのいずれかでさらに２４時間処理した。ＨａＣａＴ細胞におけるＮＲＦ２発現の密度測定分析。２つの独立した実験の平均±標準誤差を示す。
ＮＲＦ２の発現は、ｓｉＡＴＰ２Ｃ１ケラチノサイト（Ｃｉａｌｆｉ ｅｔ ａｌ，２０１６）で減少したことが以前に観察されている。ＡＴＰ２Ｃ１損失はＤＮＡ損傷応答阻害をもたらす機構を誘発するため、この事象はＨＨＤ発症において重要な役割を果たし得る。ＮＦＲ２下方調節の結果としてＲＯＳレベルが増加することにより、ケラチノサイトが修復することができない閾値までＤＮＡ損傷が生じ、次いで病変の発現が促進される。このインビトロモデルでは、Ｎｒｆ２タンパク質発現レベルは、ビヒクルで処理したｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞におけるよりも、ＡＰＲ ＴＤ０１２で処理したｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞において有意に高かった（図４）。これらのデータは、ＡＰＲ ＴＤ０１２がＮｒｆ２経路を活性化することによって抗酸化防止応答を促進することを示唆している。ＨａＣａＴ細胞、ケラチノサイト由来細胞株に、ｓｉＲＮＡ－ＣＴＲ又はｓｉＲＮＡ ＡＴＰ２Ｃ１のいずれかをトランスフェクトし、２４時間後、ＡＰＲ ＴＤ０１２又はＨ２Ｏのいずれかでさらに２４時間処理した。ＨａＣａＴ細胞におけるＮＲＦ２発現の密度測定分析。２つの独立した実験の平均±標準誤差を示す。
【0184】
ＴＧＦＢ２及びＴＧＦＢ１のｍＲＮＡレベル：
ＨＨＤ病変は、調節解除されたサイトカイン発現及び低減された修復特性を特徴とする（Ｃｉａｌｆｉ ｅｔ ａｌ，２０１６）。ＡＴＰ２Ｃ１欠損ケラチノサイトにおいて変化したサイトカインＴＧＦＢ１及びＴＧＦＢ２の発現レベルを分析した。ｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞において、ＴＧＦＢ２及びＴＧＦＢ１のｍＲＮＡレベルは、対照であるｓｉＣＴＲ対照細胞のｍＲＮＡレベルよりも有意に高かった。図５は、ＡＴＰ２Ｃ１欠損ケラチノサイトにおけるサイトカインに対するＡＰＲ ＴＤ０１２溶液の効果を示す。ＴＧＦＢ－１及びＴＧＦＢ２は、ｑ－ＲＴ－ＰＣＲアッセイを定量した。データは、３回実行した２つの独立した実験の平均±ＳＤとして表す。
ＨＨＤ病変は、調節解除されたサイトカイン発現及び低減された修復特性を特徴とする（Ｃｉａｌｆｉ ｅｔ ａｌ，２０１６）。ＡＴＰ２Ｃ１欠損ケラチノサイトにおいて変化したサイトカインＴＧＦＢ１及びＴＧＦＢ２の発現レベルを分析した。ｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞において、ＴＧＦＢ２及びＴＧＦＢ１のｍＲＮＡレベルは、対照であるｓｉＣＴＲ対照細胞のｍＲＮＡレベルよりも有意に高かった。図５は、ＡＴＰ２Ｃ１欠損ケラチノサイトにおけるサイトカインに対するＡＰＲ ＴＤ０１２溶液の効果を示す。ＴＧＦＢ－１及びＴＧＦＢ２は、ｑ－ＲＴ－ＰＣＲアッセイを定量した。データは、３回実行した２つの独立した実験の平均±ＳＤとして表す。
【0185】
ビヒクルとＡＰＲ ＴＤ０１２処理細胞との間でＴＧＦＢ１及びＴＧＦＢ２レベルの有意差が観察された。特定のＴＧＦＢ１発現は、ｓｉＣＴＲ細胞と比較してｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞で上方制御された。ＡＰＲ ＴＤ０１２で処理したｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞では、ＴＧＢＦ１発現の有意な上方制御が観察された。
【0186】
ＴＧＦＢ２サイトカインのレベルは、対照細胞のものよりもｓｉＡＴＰ２Ｃ１処理細胞において有意に高かった。ＴＧＦＢ２発現レベルの発現の減少が、ＡＰＲ ＴＤ０１２で処理したｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞で観察された。これらのデータは、ＡＰＲ ＴＤ０１２がＨＨＤ－ケラチノサイト中のいくつかのサイトカインのパターンに影響を及ぼす可能性があることを示唆している。
【0187】
ｓｉＡＴＰ２Ｃ１で処理したＨａＣａＴ細胞の増殖：
ｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞は、ｓｉＣＴＲ処理細胞と比較して増殖が低減していることが既に実証されており、この実験でも確認されている。ＡＰＲ ＴＤ０１２でｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞を処理することにより、ｓｉＡＴＰ２Ｃ１で処理したＨａＣａＴ細胞の増殖不良を救済した。図６は、ＡＰＲ ＴＤ０１２処理細胞の増殖率の分析を示す。ＨａＣａＴ細胞、ケラチノサイト由来細胞株に、ｓｉＲＮＡ－ＣＴＲ又はｓｉＲＮＡＡＴＰ２Ｃ１のいずれかをトランスフェクトし、２４時間後、ＡＰＲ ＴＤ０１２又はＨ２Ｏのいずれかでさらに２４時間処理した。細胞数を、トランスフェクションの４８時間後にＭＴＳアッセイによって分析した。３回行った２つの独立した実験の平均±標準誤差を示す。
ｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞は、ｓｉＣＴＲ処理細胞と比較して増殖が低減していることが既に実証されており、この実験でも確認されている。ＡＰＲ ＴＤ０１２でｓｉＡＴＰ２Ｃ１細胞を処理することにより、ｓｉＡＴＰ２Ｃ１で処理したＨａＣａＴ細胞の増殖不良を救済した。図６は、ＡＰＲ ＴＤ０１２処理細胞の増殖率の分析を示す。ＨａＣａＴ細胞、ケラチノサイト由来細胞株に、ｓｉＲＮＡ－ＣＴＲ又はｓｉＲＮＡＡＴＰ２Ｃ１のいずれかをトランスフェクトし、２４時間後、ＡＰＲ ＴＤ０１２又はＨ２Ｏのいずれかでさらに２４時間処理した。細胞数を、トランスフェクションの４８時間後にＭＴＳアッセイによって分析した。３回行った２つの独立した実験の平均±標準誤差を示す。
【0188】
実施例６．ブルーリ潰瘍への特定の適用を伴うＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓに対する活性の試験
実施例１に報告されている仕様を満たす、２つの異なる濃度で次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性水の役割（この表示ではＡＰＲ ＴＤ－０１３と呼ばれる）を、ブルーリ潰瘍の病因に関与する活性細菌であるＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓに対するそれらの活性を評価するためのインビトロモデルにおいて評価している。
実施例１に報告されている仕様を満たす、２つの異なる濃度で次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性水の役割（この表示ではＡＰＲ ＴＤ－０１３と呼ばれる）を、ブルーリ潰瘍の病因に関与する活性細菌であるＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓに対するそれらの活性を評価するためのインビトロモデルにおいて評価している。
【0189】
代謝活性試験
第１のステップでは、試験溶液（溶液１と命名された、４０～７０ｐｐｍの遊離塩素含有量を有する溶液、及び溶液２と命名された、７０～１００ｐｐｍの遊離塩素含有量を有する第２の溶液）が、多くの抗菌処理に耐性のあるＭ．ｕｌｃｅｒａｎｓに対して活性を有するか否かを分析するために、レザズリンアッセイを採用した。培養細菌（新たに単離されたアフリカ参照株Ｓ１０１３；ＯＤ０．３；対数期）を試験溶液に曝露した。０．１ｍｌの細菌培養物を１．９ｍｌの試験溶液と混合し、様々な時間インキュベートした。混合物をすぐにボルテックスし、チューブを１分、４分、９分、１９分、又は２９分間放置した。時間が経過した後、細菌を遠心分離（１３，３００×ｇで１分間）にペレット化し、上清を除去した。ペレットを直ちに０．２ｍｌの７Ｈ９培地に再懸濁した。この懸濁液を、レザズリンアッセイ用の接種材料として使用した。
第１のステップでは、試験溶液（溶液１と命名された、４０～７０ｐｐｍの遊離塩素含有量を有する溶液、及び溶液２と命名された、７０～１００ｐｐｍの遊離塩素含有量を有する第２の溶液）が、多くの抗菌処理に耐性のあるＭ．ｕｌｃｅｒａｎｓに対して活性を有するか否かを分析するために、レザズリンアッセイを採用した。培養細菌（新たに単離されたアフリカ参照株Ｓ１０１３；ＯＤ０．３；対数期）を試験溶液に曝露した。０．１ｍｌの細菌培養物を１．９ｍｌの試験溶液と混合し、様々な時間インキュベートした。混合物をすぐにボルテックスし、チューブを１分、４分、９分、１９分、又は２９分間放置した。時間が経過した後、細菌を遠心分離（１３，３００×ｇで１分間）にペレット化し、上清を除去した。ペレットを直ちに０．２ｍｌの７Ｈ９培地に再懸濁した。この懸濁液を、レザズリンアッセイ用の接種材料として使用した。
【0190】
代謝活性アッセイについて、２０μｌのレザズリンを細菌懸濁液に添加し、３０℃で７２時間インキュベートした。蛍光を測定し、含まれる対照を使用して代謝活性を計算した。上記の全てのプロセスを２回行い、以下に示す結果は両方の複製の平均である。両方の試験溶液を用いた２分間の曝露により、未処理の対照と比較して、代謝活性が＞９０％低減した。このアッセイにおいて、Ｍ．ｕｌｃｅｒａｎｓの２つの試験溶液の活性に識別可能な差異はなかった。曝露された細菌の計算された代謝活性を図７に示す。
【0191】
殺菌活性試験
次のステップでは、溶液１及び２の殺菌活性を、プレーティングアッセイにおいてコロニー形成単位（ＣＦＵ）の数を判定することによって試験した。培養細菌（新たに単離されたアフリカ参照株Ｓ１０１３；ＯＤ０．３；対数期）を、実施例１の仕様を満たす２つの試験溶液に曝露した。０．１ｍｌの細菌培養物を１．９ｍｌの試験溶液と混合し、１分、４分、及び９分間インキュベートした。時間が経過した後、細菌を遠心分離（１３，３００×ｇで１分間）によってペレット化し、上清を除去した。ペレットを直ちに０．２ｍｌの７Ｈ９培地に再懸濁した。この懸濁液を、ＣＦＵ数を２通りで判定するための接種材料として使用した。各懸濁液の１０倍段階希釈液を７Ｈ９培地で調製した（１０-1～１０-3）。各希釈物を７Ｈ９寒天プレート上にプレーティングした（プレート当たり１００μｌ）。全てのプレートを密閉し、３０℃で最大１２週間インキュベートした。
次のステップでは、溶液１及び２の殺菌活性を、プレーティングアッセイにおいてコロニー形成単位（ＣＦＵ）の数を判定することによって試験した。培養細菌（新たに単離されたアフリカ参照株Ｓ１０１３；ＯＤ０．３；対数期）を、実施例１の仕様を満たす２つの試験溶液に曝露した。０．１ｍｌの細菌培養物を１．９ｍｌの試験溶液と混合し、１分、４分、及び９分間インキュベートした。時間が経過した後、細菌を遠心分離（１３，３００×ｇで１分間）によってペレット化し、上清を除去した。ペレットを直ちに０．２ｍｌの７Ｈ９培地に再懸濁した。この懸濁液を、ＣＦＵ数を２通りで判定するための接種材料として使用した。各懸濁液の１０倍段階希釈液を７Ｈ９培地で調製した（１０-1～１０-3）。各希釈物を７Ｈ９寒天プレート上にプレーティングした（プレート当たり１００μｌ）。全てのプレートを密閉し、３０℃で最大１２週間インキュベートした。
【0192】
図８に示される結果は、各希釈についての平均ＣＦＵである。２つの生成物に２分間曝露した後、ＣＦＵ数は＞８０％低減した。１０分後、細菌の溶液１（遊離塩素種の４０～７０ｐｐｍ）では＞９９％、溶液２（遊離塩素種の７０～１００ｐｐｍ）では＞９９．９％が死滅した。
【0193】
実施例７．ＣＯＶＩＤ－１９殺ウイルス活性のインビボ試験
実施例１で報告された仕様を満たす次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性水の役割を、鼻の忍容性及びＳＡＲＳ－Ｃｏｖ－３に対する生成物の有効性を評価するために、インビトロ試験で評価している。
実施例１で報告された仕様を満たす次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸酸化性水の役割を、鼻の忍容性及びＳＡＲＳ－Ｃｏｖ－３に対する生成物の有効性を評価するために、インビトロ試験で評価している。
【0194】
方法：
ウイルス、培地、及び細胞
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスストックを、Ｖｅｒｏ７６細胞においてウイルスを成長させることによって調製した。使用した試験培地は、２％ＦＢＳ及び５０μｇ／ｍＬゲンタマイシンを補充したＭＥＭであった。
ウイルス、培地、及び細胞
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスストックを、Ｖｅｒｏ７６細胞においてウイルスを成長させることによって調製した。使用した試験培地は、２％ＦＢＳ及び５０μｇ／ｍＬゲンタマイシンを補充したＭＥＭであった。
【0195】
殺ウイルスアッセイ
実施例１の仕様を満たす低張性酸性酸化性溶液を、薄めずそのまま試験し、９０％の試料を１０体積％のウイルス溶液に添加して、９０％の最終試験濃度を達成した。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスストックを３つのチューブに添加し、培地のみを各調製濃度の１つのチューブに添加して、毒性対照として機能させた。エタノールを陽性対照として並行して試験し、水のみをウイルス対照として機能するように使用した。
実施例１の仕様を満たす低張性酸性酸化性溶液を、薄めずそのまま試験し、９０％の試料を１０体積％のウイルス溶液に添加して、９０％の最終試験濃度を達成した。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスストックを３つのチューブに添加し、培地のみを各調製濃度の１つのチューブに添加して、毒性対照として機能させた。エタノールを陽性対照として並行して試験し、水のみをウイルス対照として機能するように使用した。
【0196】
化合物及びウイルスを室温で１分未満及び３分間の２つの接触時間でインキュベートした。接触期間に続いて、溶液を１０％ＦＢＳを含有する試験培地で１／１０希釈によって中和した。
【0197】
ウイルス定量
３回の試験の平均を定量するために中和試料を合わせた。試料を、試験培地中で８つの半対数希釈物を使用して段階希釈した。各希釈物を、８０～１００％コンフルエントなＶｅｒｏ７６細胞を含む９６ウェルプレートの４ウェルに添加した。毒性対照を追加の４ウェルに添加し、これらのウェルのうちの２つをウイルスに感染させて中和対照として機能させ、プレーティングした力価アッセイにおける残留試料が生存ウイルスの成長及び検出を阻害しないようにした。全てのプレートを３７±２℃、５％ＣＯ2でインキュベートした。
３回の試験の平均を定量するために中和試料を合わせた。試料を、試験培地中で８つの半対数希釈物を使用して段階希釈した。各希釈物を、８０～１００％コンフルエントなＶｅｒｏ７６細胞を含む９６ウェルプレートの４ウェルに添加した。毒性対照を追加の４ウェルに添加し、これらのウェルのうちの２つをウイルスに感染させて中和対照として機能させ、プレーティングした力価アッセイにおける残留試料が生存ウイルスの成長及び検出を阻害しないようにした。全てのプレートを３７±２℃、５％ＣＯ2でインキュベートした。
【0198】
感染後６日目に、ウイルス細胞変性効果（ＣＰＥ）の有無について、プレートをスコアリングした。リードミュンヒ法を使用して、試料のエンドポイント力価（５０％細胞培養感染量、ＣＣＩＤ50）を判定し、陰性（水）対照と比較した化合物の対数低減値（ＬＲＶ）を計算した。
【0199】
対照
ウイルス対照を水中で試験すると、対数低減値（ＬＲＶ）として計算されたウイルス対照と比較して、試験ウェル中のウイルスが低減した。試料が細胞に対して毒性であるか否かを確認するために、ウイルスを含まない培地を用いて毒性対照を試験した。ウイルスの不活性化が特定の接触時間の後に継続せず、力価アッセイプレート内の残留試料が生存ウイルスの成長及び検出を阻害しないように、中和対照を試験した。これは、毒性試料を力価試験プレートに添加し、次いで、インキュベーション期間中に観察可能な量のＣＰＥを生成する少量のウイルスで各ウェルをスパイクすることによって行った。
ウイルス対照を水中で試験すると、対数低減値（ＬＲＶ）として計算されたウイルス対照と比較して、試験ウェル中のウイルスが低減した。試料が細胞に対して毒性であるか否かを確認するために、ウイルスを含まない培地を用いて毒性対照を試験した。ウイルスの不活性化が特定の接触時間の後に継続せず、力価アッセイプレート内の残留試料が生存ウイルスの成長及び検出を阻害しないように、中和対照を試験した。これは、毒性試料を力価試験プレートに添加し、次いで、インキュベーション期間中に観察可能な量のＣＰＥを生成する少量のウイルスで各ウェルをスパイクすることによって行った。
【0200】
結果：
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸性酸化性溶液のウイルス力価及びＬＲＶを表８に示す。
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する次亜塩素酸（ＨＣｌＯ）を含有する低張性酸性酸化性溶液のウイルス力価及びＬＲＶを表８に示す。
【0201】
【表8】
【0202】
溶液を９０％で１分未満及び３分間試験すると、殺ウイルス活性が示され、ウイルスは、ウイルス対照中０．１ｍＬ当たり３．５ｌｏｇのＣＣＩＤ５０から０．７ｌｏｇの検出限界未満（＞９９．８％）まで低下した。より低い濃度で再現性及び潜在的に活性を評価するために、さらなる試験が保証され得る。
【0203】
中和対照は、残留試料が、細胞傷害性を有しなかったウェルにおいてエンドポイント力価アッセイにおけるウイルス成長及び検出を阻害しなかったことを実証した。陽性対照は予想通りに実行されたが、エタノールは、１／１０の希釈物において細胞に対して毒性であり、ウイルスの検出を０．１ｍＬ当たり＜１．７ｌｏｇ ＣＣＩＤ５０に制限する。
【0204】
実施例７．鼻刺激試験
この鼻刺激試験の目的は、試験種ニュージーランド白ウサギが試験項目と共に１日２回、５日間連続して投与されたときに、次亜塩素酸を含有する低張性酸性酸化性溶液の潜在的な刺激可能性を評価することであった。
この鼻刺激試験の目的は、試験種ニュージーランド白ウサギが試験項目と共に１日２回、５日間連続して投与されたときに、次亜塩素酸を含有する低張性酸性酸化性溶液の潜在的な刺激可能性を評価することであった。
【0205】
研究デザイン
試験項目は、ＭＡＤ（登録商標）（粘膜噴霧装置）を取り付けた１ｍＬのシリンジを使用して、２００μＬ／鼻孔及び５００μＬ／鼻孔で、各鼻孔に１日２回、４時間間隔で５日間連続して鼻腔内に適用した。さらに、生理食塩水（５００μＬ／鼻孔）を対照群動物に適用した。
試験項目は、ＭＡＤ（登録商標）（粘膜噴霧装置）を取り付けた１ｍＬのシリンジを使用して、２００μＬ／鼻孔及び５００μＬ／鼻孔で、各鼻孔に１日２回、４時間間隔で５日間連続して鼻腔内に適用した。さらに、生理食塩水（５００μＬ／鼻孔）を対照群動物に適用した。
【0206】
方法
ウサギを、治療日には投与前（最初の適用前）及び投与後（最後の適用後）に１日２回、非治療日には１日１回、一般的な臨床徴候、罹患率、及び死亡率について観察した。適用部位における局所反応を、全ての適用日には１日２回、すなわち、最初の適用前及び各日の最後の適用後（適用後約３０分）、並びに非治療日には１日１回検査した。局所反応は、ペントーチを使用して目視観察した。局所反応は、Ｄｒａｉｚｅ（１９５９）の方法に従って評価した。全ての動物を最後の適用の２４時間後に安楽死させ（６日目）、詳細な肉眼的病理学的検査に供した。動物を、外部異常について慎重に検査した。周囲の組織と共に全ての動物からの適用部位（鼻孔）を巨視的に検査した。胸腔及び腹腔を切り開き、臓器の徹底的な検査を行って、異常を検出した。組織病理学的検査は、全ての動物の鼻に対して行った。鼻（適用部位）の４つのレベルの横方向切片を顕微鏡検査した。組織を、常套的なパラフィン包埋のために処理し、５マイクロメートル切片をヘマトキシリン及びエオシン染色で染色した。組織切片を評価し、ＩＳＯ１０９９３－１０の方法Ｂ．３に従ってスコアを記録し、ＩＳＯ１０９９３－１０の方法Ｂ．４に従って刺激指数を計算した。
ウサギを、治療日には投与前（最初の適用前）及び投与後（最後の適用後）に１日２回、非治療日には１日１回、一般的な臨床徴候、罹患率、及び死亡率について観察した。適用部位における局所反応を、全ての適用日には１日２回、すなわち、最初の適用前及び各日の最後の適用後（適用後約３０分）、並びに非治療日には１日１回検査した。局所反応は、ペントーチを使用して目視観察した。局所反応は、Ｄｒａｉｚｅ（１９５９）の方法に従って評価した。全ての動物を最後の適用の２４時間後に安楽死させ（６日目）、詳細な肉眼的病理学的検査に供した。動物を、外部異常について慎重に検査した。周囲の組織と共に全ての動物からの適用部位（鼻孔）を巨視的に検査した。胸腔及び腹腔を切り開き、臓器の徹底的な検査を行って、異常を検出した。組織病理学的検査は、全ての動物の鼻に対して行った。鼻（適用部位）の４つのレベルの横方向切片を顕微鏡検査した。組織を、常套的なパラフィン包埋のために処理し、５マイクロメートル切片をヘマトキシリン及びエオシン染色で染色した。組織切片を評価し、ＩＳＯ１０９９３－１０の方法Ｂ．３に従ってスコアを記録し、ＩＳＯ１０９９３－１０の方法Ｂ．４に従って刺激指数を計算した。
【0207】
結果
臨床的徴候又は最終的な死亡はなく、体重に影響はなかった。適用部位での巨視的検査中に局所反応は観察されなかった。最後の適用の約２４時間後、全ての動物を安楽死させ、全ての動物から鼻腔の下鼻甲介及び鼻中隔粘膜の下縁部の鼻粘膜を収集し、肉眼的観察を記録し、組織病理学のために処理した。剖検時に試験動物のいずれにおいても肉眼的病変はなかった。ＩＳＯ１０９９３－１０の方法Ｂ．３及びＢ．４による鼻粘膜の顕微鏡評価では、２００μＬ／鼻孔及び５００μＬ／鼻孔投与群でそれぞれ０及び０．０８３の刺激指数が示された（表９）。
臨床的徴候又は最終的な死亡はなく、体重に影響はなかった。適用部位での巨視的検査中に局所反応は観察されなかった。最後の適用の約２４時間後、全ての動物を安楽死させ、全ての動物から鼻腔の下鼻甲介及び鼻中隔粘膜の下縁部の鼻粘膜を収集し、肉眼的観察を記録し、組織病理学のために処理した。剖検時に試験動物のいずれにおいても肉眼的病変はなかった。ＩＳＯ１０９９３－１０の方法Ｂ．３及びＢ．４による鼻粘膜の顕微鏡評価では、２００μＬ／鼻孔及び５００μＬ／鼻孔投与群でそれぞれ０及び０．０８３の刺激指数が示された（表９）。
【0208】
【表9】
【0209】
結論
上記の結果に基づくと、２００μＬ／鼻孔及び５００μＬ／鼻孔の用量レベルでの、次亜塩素酸を含有する低張性酸性酸化性溶液の、ニュージーランド白ウサギへの１日２回の経鼻投与は、ニュージーランド白ウサギの鼻粘膜に対して「非刺激性」であると推測される。
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上記の結果に基づくと、２００μＬ／鼻孔及び５００μＬ／鼻孔の用量レベルでの、次亜塩素酸を含有する低張性酸性酸化性溶液の、ニュージーランド白ウサギへの１日２回の経鼻投与は、ニュージーランド白ウサギの鼻粘膜に対して「非刺激性」であると推測される。
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【0210】
本出願を通して、様々な刊行物が参照される。これらの刊行物の開示は、本発明が関係する技術の状態をより完全に説明するために、その全体が本出願に参照により本明細書に組み込まれる。本発明の範囲又は趣旨から逸脱することなく、本発明において様々な修正及び変更を行うことができることは、当業者には明らかであろう。本発明の他の実施形態は、本明細書に開示される本発明の明細書及び実施を考慮することにより当業者には明らかであろう。本明細書及び実施例は、例示的なものとしてのみ考慮され、本発明の真の範囲及び趣旨は、以下の特許請求の範囲によって示されることが意図される。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【国際調査報告】