▶ ▲ザン▼州片仔▲ファン▼薬業股▲フン▼有限公司の特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-09-06
(54)【発明の名称】ピラジン－２（１Ｈ）－オン系化合物の製造方法
(51)【国際特許分類】
C07F 5/02 20060101AFI20220830BHJP
C07D 403/14 20060101ALI20220830BHJP
A61K 31/497 20060101ALN20220830BHJP
A61P 43/00 20060101ALN20220830BHJP
C07B 61/00 20060101ALN20220830BHJP
【ＦＩ】
C07F5/02 C
C07D403/14
A61K31/497
A61P43/00 111
C07B61/00 300
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022507754
(86)(22)【出願日】2020-08-04
(11)【特許番号】
(45)【特許公報発行日】2022-08-17
(85)【翻訳文提出日】2022-02-07
(86)【国際出願番号】 CN2020106895
(87)【国際公開番号】W WO2021023193
(87)【国際公開日】2021-02-11
(31)【優先権主張番号】201910731662.9
(32)【優先日】2019-08-08
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】201911059973.1
(32)【優先日】2019-11-01
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＢＲＩＪ
(71)【出願人】
【識別番号】520089004
【氏名又は名称】▲ザン▼州片仔▲ファン▼薬業股▲フン▼有限公司
【氏名又は名称原語表記】ＺＨＡＮＧＺＨＯＵ ＰＩＥＮ ＴＺＥ ＨＵＡＮＧ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＣＯ．， ＬＴＤ．
(74)【代理人】
【識別番号】110001519
【氏名又は名称】特許業務法人太陽国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ホアン、チンミン
(72)【発明者】
【氏名】ユイ、チュアン
(72)【発明者】
【氏名】リン、チンシア
(72)【発明者】
【氏名】ヤン、リーメイ
(72)【発明者】
【氏名】ツォン、チンシアン
(72)【発明者】
【氏名】フー、チーフェイ
(72)【発明者】
【氏名】ルオ、ミャオロン
(72)【発明者】
【氏名】チャン、ヤン
(72)【発明者】
【氏名】リー、チエン
(72)【発明者】
【氏名】チェン、シューホイ
【テーマコード（参考）】
4C063
4C086
4H039
4H048
【Ｆターム（参考）】
4C063AA03
4C063BB01
4C063CC34
4C063DD34
4C063EE01
4C086AA02
4C086AA04
4C086BC48
4C086GA07
4C086GA14
4C086ZC20
4C086ZC42
4H039CA99
4H039CD20
4H048AA02
4H048AC30
4H048VA12
4H048VA20
4H048VA32
4H048VA75
(57)【要約】
本発明は式（Ｉ）で表される化合物及びその中間体の製造方法を提供する。
【化１】
【化１】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
化合物５を用いて化合物６を製造する方法であって、その反応ステップは、下記のとおりである方法。【化1】
【請求項2】
化合物２を用いて式（Ｉ）で表される化合物を製造する方法であって、その反応ステップは、下記のとおりである方法。【化2】
【請求項3】
化合物６を用いて式（Ｉ）で表される化合物を製造する方法であって、その反応ステップは、下記のとおりである方法。【化3】
【請求項4】
反応温度は、１０～６０℃から選ばれ、化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの当量比は、０．３～３である、請求項１に記載の方法。
【請求項5】
反応温度は、２０～４０℃から選ばれ、化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの当量比は、０．５～１．５である、請求項４に記載の方法。
【請求項6】
反応温度は、３０℃から選ばれ、化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの当量比は、１．０である、請求項５に記載の方法。
【請求項7】
【化4】
温度１が７０～１１０℃から選ばれ、
時間１が２～２０時間から選ばれ、
アルカリ１が炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒１がテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物３と化合物２との投入比が０．５～１．６：１であり、
温度２が８０～１２０℃から選ばれ、
時間２が２～２４時間から選ばれ、
アルカリ２が炭酸ナトリウム、酢酸カリウム、酢酸ナトリウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒２がテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
ビス（ピナコラート）ジボロンと化合物４との投入比が０．７～３であり、
温度３が１０～６０℃から選ばれ、
化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの投入比が０．３～３であり、
温度５が５０～１１０℃から選ばれ、
時間５が１～２０時間から選ばれ、
アルカリ５が炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒５がテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物７と化合物６との投入比が０．６～１．８であり、
温度６が５０～１１０℃から選ばれ、
時間６が２～２０時間から選ばれ、
アルカリ６が炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒６がテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物９と化合物８との投入比が０．６～１．８である、請求項２に記載の方法。
【請求項8】
温度１が８５～９０℃から選ばれ、時間１が４～１０時間から選ばれ、化合物３と化合物２との投入比が０．７～１．３であり、温度２が８５～１００℃から選ばれ、時間２が１０～２０時間から選ばれ、ビス（ピナコラート）ジボロンと化合物４との投入比が１．５～２．５であり、温度３が２０～４０℃から選ばれ、化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの投入比が０．５～１．５であり、温度５が５０～７０℃から選ばれ、時間５が１～３時間から選ばれ、化合物７と化合物６との投入比が１．２～１．８であり、温度６が７０～９０℃から選ばれ、時間６が１４～１８時間から選ばれ、化合物９と化合物８との投入比が１．２～１．６である、請求項７に記載の方法。
【請求項9】
温度１が８５℃から選ばれ、時間１が６時間から選ばれ、化合物３と化合物２との投入比が０．７であり、温度２が９５℃から選ばれ、時間２が１６時間から選ばれ、ビス（ピナコラート）ジボロンと化合物４との投入比が２．０であり、温度３が３０℃から選ばれ、化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの投入比が１．０であり、温度５が６０℃から選ばれ、時間５が２時間から選ばれ、化合物７と化合物６との投入比が１．５であり、温度６が８０℃から選ばれ、時間６が１６時間から選ばれ、化合物９と化合物８との投入比が１．４である、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
【化5】
温度４が５０～１１０℃から選ばれ、
時間４が２～２０時間から選ばれ、
アルカリ４が炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒４がテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物１０と化合物６との投入比が０．６～１．８である、請求項３に記載の方法。
【請求項11】
温度４が８５～９０℃から選ばれ、時間４が４～１０時間から選ばれ、化合物１０と化合物６との投入比が０．８～１．２である、請求項１０に記載の方法。
【請求項12】
温度４が１００℃から選ばれ、時間４が５時間から選ばれ、化合物１０と化合物６との投入比が１．０である、請求項１１に記載の方法。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本願は下記の優先権を主張する。
ＣＮ２０１９１０７３１６６２．９、２０１９年８月８日
ＣＮ２０１９１１０５９９７３．１、２０１９年１１月１日
ＣＮ２０１９１０７３１６６２．９、２０１９年８月８日
ＣＮ２０１９１１０５９９７３．１、２０１９年１１月１日
【0002】
本発明は、式（Ｉ）で表される化合物及びその中間体の製造方法に関する。
【背景技術】
【0003】
繊維芽細胞成長因子受容体（ＦＧＦＲ）は、繊維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）シグナル伝達の受容体であり、そのファミリーは、４つのメンバー（ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４）からなり、細胞外免疫グロブリン（Ｉｇ）様ドメイン、疎水性膜貫通領域及びチロシンキナーゼ領域を含む細胞内部分からなる糖タンパク質である。繊維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）は、これらの受容体（ＦＧＦＲ）を通じて細胞増殖、細胞分化、細胞遊走及び血管新生などの多くの生理学的調節過程において重要な役割を果たしている。多くの証拠は、ＦＧＦシグナル経路異常（高発現、遺伝子増幅、遺伝子変異、染色体組み換えなど）を腫瘍細胞の増殖、遷移、侵入及び血管形成などの多くの病的過程と直接関連している。そのため、ＦＧＦＲは、重要な治療ターゲットの１つとして広範な研究開発が注目されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
本発明は、以下の反応ステップを含む、式（Ｉ）で表される化合物を製造する方法を提供する。
【0005】
【化1】
【0006】
本発明は、化合物５を用いて化合物６を製造する方法を提供し、その反応ステップは、以下のとおりである。
【0007】
【化2】
【0008】
本発明は、化合物２を用いて式（Ｉ）で表される化合物を製造する方法を提供し、その反応ステップは、以下のとおりである。
【0009】
【化3】
【0010】
本発明は、化合物６を用いて式（Ｉ）で表される化合物を製造する方法を提供し、その反応ステップは、以下のとおりである。
【0011】
【化4】
【課題を解決するための手段】
【0012】
本発明のいくつかの態様では、化合物５を用いて化合物６を製造する前記方法の反応温度は、１０～６０℃から選ばれ、化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの当量比は、０．３～３である。
【0013】
本発明のいくつかの態様では、化合物５を用いて化合物６を製造する前記方法の反応温度は、２０～４０℃から選ばれ、化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの当量比は、０．５～１．５である。
【0014】
本発明のいくつかの態様では、化合物５を用いて化合物６を製造する前記方法の反応温度は、３０℃から選ばれ、化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの当量比は、１．０である。
【0015】
本発明のいくつかの態様では、化合物２を用いて式（Ｉ）で表される化合物を製造する前記方法において、
ここで、
温度１は７０～１１０℃から選ばれ、
時間１は２～２０時間から選ばれ、
アルカリ１は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒１はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物３と化合物２との投入比は０．５～１．６であり、
温度２は８０～１２０℃から選ばれ、
時間２は２～２４時間から選ばれ、
アルカリ２は炭酸ナトリウム、酢酸カリウム、酢酸ナトリウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒２はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
ビス（ピナコラート）ジボロンと化合物４との投入比は０．７～３であり、
温度３は１０～６０℃から選ばれ、
化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの投入比は０．３～３であり、
温度５は５０～１１０℃から選ばれ、
時間５は１～２０時間から選ばれ、
アルカリ５は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒５はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物７と化合物６との投入比は０．６～１．８であり、
温度６は５０～１１０℃から選ばれ、
時間６は２～２０時間から選ばれ、
アルカリ６は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒６はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物９と化合物８との投入比は０．６～１．８である。
【化5】
ここで、
温度１は７０～１１０℃から選ばれ、
時間１は２～２０時間から選ばれ、
アルカリ１は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒１はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物３と化合物２との投入比は０．５～１．６であり、
温度２は８０～１２０℃から選ばれ、
時間２は２～２４時間から選ばれ、
アルカリ２は炭酸ナトリウム、酢酸カリウム、酢酸ナトリウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒２はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
ビス（ピナコラート）ジボロンと化合物４との投入比は０．７～３であり、
温度３は１０～６０℃から選ばれ、
化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの投入比は０．３～３であり、
温度５は５０～１１０℃から選ばれ、
時間５は１～２０時間から選ばれ、
アルカリ５は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒５はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物７と化合物６との投入比は０．６～１．８であり、
温度６は５０～１１０℃から選ばれ、
時間６は２～２０時間から選ばれ、
アルカリ６は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒６はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物９と化合物８との投入比は０．６～１．８である。
【0016】
本発明のいくつかの態様では、化合物２を用いて式（Ｉ）で表される化合物を製造する前記方法において、温度１は８５～９０℃から選ばれ、時間１は４～１０時間から選ばれ、化合物３と化合物２との投入比は０．７～１．３であり、温度２は８５～１００℃から選ばれ、時間２は１０～２０時間から選ばれ、ビス（ピナコラート）ジボロンと化合物４との投入比は１．５～２．５であり、温度３は２０～４０℃から選ばれ、化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの投入比は０．５～１．５であり、温度５は５０～７０℃から選ばれ、時間５は１～３時間から選ばれ、化合物７と化合物６との投入比は１．２～１．８であり、温度６は７０～９０℃から選ばれ、時間６は１４～１８時間から選ばれ、化合物９と化合物８との投入比は１．２～１．６である。
【0017】
本発明のいくつかの態様では、化合物２を用いて式（Ｉ）で表される化合物を製造する前記方法において、温度１は８５℃から選ばれ、時間１は６時間から選ばれ、化合物３と化合物２との投入比は０．７であり、温度２は９５℃から選ばれ、時間２は１６時間から選ばれ、ビス（ピナコラート）ジボロンと化合物４との投入比は２．０であり、温度３は３０℃から選ばれ、化合物５とＮ－クロロスクシンイミドとの投入比は１．０であり、温度５は６０℃から選ばれ、時間５は２時間から選ばれ、化合物７と化合物６との投入比は１．５であり、温度６は８０℃から選ばれ、時間６は１６時間から選ばれ、化合物９と化合物８との投入比は１．４である。
【0018】
本発明のいくつかの態様では、化合物６を用いて式（Ｉ）で表される化合物を製造する前記方法において、
ここで、
温度４は５０～１１０℃から選ばれ、
時間４は２～２０時間から選ばれ、
アルカリ４は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒４はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物１０と化合物６との投入比は０．６～１．８である。
【化6】
ここで、
温度４は５０～１１０℃から選ばれ、
時間４は２～２０時間から選ばれ、
アルカリ４は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸パラジウム及びリン酸カリウムから選ばれ、
触媒４はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、酢酸パラジウム、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２及びＰｄ２ｄｂａ３から選ばれ、
化合物１０と化合物６との投入比は０．６～１．８である。
【0019】
本発明のいくつかの態様では、化合物６を用いて式（Ｉ）で表される化合物を製造する前記方法において、温度４は８５～９０℃から選ばれ、時間４は４～１０時間から選ばれ、化合物１０と化合物６との投入比は０．８～１．２である。
【0020】
本発明のいくつかの態様では、化合物６を用いて式（Ｉ）で表される化合物を製造する前記方法において、温度４は１００℃から選ばれ、時間４は５時間から選ばれ、化合物１０と化合物６との投入比は１．０である。
【0021】
本発明では、化合物６は、式（Ｉ）で表される化合物を製造する中間体である。
【発明の効果】
【0022】
式（Ｉ）で表される化合物のトリフルオロ酢酸塩は、野生型ＦＧＦＲに対して良好な阻害活性を示し、かつＦＧＦＲ２、３は、ＦＧＦＲ１、４に対する選択性が高かった。式（Ｉ）で表される化合物のトリフルオロ酢酸塩のマウスの薬物動態指標は、良好であった。
【0023】
本発明が提供する式（Ｉ）で表される化合物及びその化合物６を合成するプロセスの有益な効果は、原材料が安価で入手しやすく、使用される試薬の腐食性が強く、毒性が強く、反応条件が厳しく、分離精製困難及び工業化しにくいなどの欠点を克服することである。
【0024】
具体的には、
１）本発明の化合物６を製造する方法の原料は、常規又は汎用の試薬であり、市場で容易に入手可能であり、かつ安価である。
２）化合物６を製造する時、反応条件が温和で、制御しやすく、後処理が簡単で、固体生成物を直接析出し、簡単な再結晶により純度が比較的高い生成物を得ることができ、収率が高く、工業化しやすい。
１）本発明の化合物６を製造する方法の原料は、常規又は汎用の試薬であり、市場で容易に入手可能であり、かつ安価である。
２）化合物６を製造する時、反応条件が温和で、制御しやすく、後処理が簡単で、固体生成物を直接析出し、簡単な再結晶により純度が比較的高い生成物を得ることができ、収率が高く、工業化しやすい。
【0025】
＜定義と説明＞
【0026】
他の説明がない限り、本明細書で使用される以下の用語及び語句は、以下の意味を有するように意図されている。ある特定の用語又は語句は、特に定義されていない場合に、「不確実」又は「不明瞭」であるものと理解されるべきではなく、通常の意味として理解されるべきである。本明細書で商品名が記載した場合、それに対応する商品やその有効成分を指すことが意図されている。
【0027】
本発明の化合物は、以下に列挙する具体的な実施形態、他の化学合成方法との組み合わせによって形成された実施形態、及び当業者に知られている等価代替方式を含む当業者に知られている様々な合成方法によって製造することができ、好適な実施形態は、本発明の実施例を含むが、それらに限らない。
【0028】
本発明の具体的な実施形態の化学反応は、本発明の化学変化及びそれに必要な試薬と材料に合わねばならない適切な溶媒中で達成される。本発明の化合物を得るために、当業者が既存の実施形態からさらに、合成ステップ又は反応工程を修正又は選択する必要がある場合がある。
【0029】
以下、実施例を用いて本発明を具体的に説明するが、これらの実施例は、本発明に対するいかなる限定を構成しない。
【0030】
本発明で使用される溶媒はいずれも市販されているものであり、さらなる精製を必要とせずに使用可能である。
【0031】
本明細で使用される略語は次のように定義される。ｅｑは当量、等量を表し、ＤＣＭはジクロロメタンを表し、ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを表し、ＭｅＯＨはメタノールを表し、ＴＦＡはトリフロロ酢酸を表し、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２は［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィン）フェロセン］ジクロロパラジウムを表し、Ｐｄ２ｄｂａ３はトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウムを表す。
【0032】
本発明で使用される溶媒は市販されているものであってもよく、市販化合物は供給者のディレクトリ名を採用している。混合溶媒を反応液に加える時に、まず、各溶媒を混合し、次いで、反応液に加えるか、又は反応液に各単一溶媒を順次に加えて反応系にて混合してもよい。
【0033】
化合物は本分野の常規命名ルール又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）ソフトウェアを用いて命名され、供給者のディレクトリ名を採用している。
【発明を実施するための形態】
【0034】
以下、実施例を用いて本発明を詳細に説明するが、本発明に対していかなる不利な制限を意味しない。本明細書では、本発明について詳細に説明し、その具体的な実施形態も開示されているが、本発明の主旨及び範囲から逸脱することなく、本発明の具体的な実施形態に対して様々な変更及び改良を行うことができることは当業者には明らかであろう。
【0035】
実施例１式（Ｉ）で表される化合物の合成
【0036】
【化7】
【0037】
ステップ１：化合物４の合成
１，４－ジオキサン（１４．８２Ｌ）、化合物２（３．０ｋｇ、１６．７７ｍｏｌ）を５０Ｌ反応釜に入れ、水（８．７２Ｌ）、化合物３（２．１８ｋｇ、１１．９８ｍｏｌ）を加え、窒素ガスを３０分送気し、炭酸ナトリウム（１．９ｋｇ、１７．９７ｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２７７ｇ、０．２４ｍｏｌ）を加え、窒素で３回置換し、この反応液を８５℃まで昇温して６ｈｒ反応させた。冷却し、２０．９Ｌ水を加え、室温まで冷却し、ろ過し、ろ過ケーキを水洗し、石油エステル：酢酸エチル＝２：１（４．５Ｌ×２）で洗脱した。乾燥して黄色固体、即ち化合物４（３．３９ｋｇ）を得た。
ステップ２：化合物５の合成
１，４－ジオキサン（１７．６Ｌ）を５０Ｌ反応釜に入れ、化合物４（２．３５ｋｇ、８．３７ｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（３．１９ｋｇ、１２．５６ｍｏｌ）、酢酸カリウム（１．６４ｋｇ、１６．７４ｍｏｌ）、トリシクロヘキシルホスフィン（１４０．９ｇ、０．５０ｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１５３．３ｇ、０．１６７ｍｏｌ）を加え、窒素で３回置換し、この反応液を９５℃まで昇温して１６ｈｒ反応させた。室温まで冷却し、ろ過し、ろ過ケーキを石油エステルで洗脱し、ろ過ケーキにジクロロメタン（１７．６Ｌ）、水（１１．５Ｌ）を加え、分液し、有機相を水洗し、硫酸ナトリウムで乾燥し、珪藻土でろ過し、ろ過液を減圧濃縮し、粗生成物を石油エステル：酢酸エチル＝１：１で叩解した。ろ過し、ろ過ケーキを石油エステル：酢酸エチル＝２：１（１．５Ｌ）で洗脱し、乾燥して灰色固体、化合物５（２．３７ｋｇ）を得た。
ステップ３：化合物６の合成
アセトニトリル２５．１Ｌを５０Ｌジャケット反応釜に入れ、攪拌を起動し、次いで、化合物５（２５０１．２１ｇ）を５０Ｌジャケット反応釜に入れ、黄色懸濁液になり、３０℃まで昇温し始め、次いで、三塩化アルミニウム９０．３１ｇ、Ｎ－クロロスクシンイミド８６１．２２ｇを順次に加え、３０℃の温度下で、１４ｈ続けて反応させた。次いで、亜硫酸ナトリウム８５．５１ｇを加え、１０分攪拌し、ジクロロメタン５．１Ｌを加え、０．５時間続けて攪拌し、珪藻土でろ過し、ろ過ケーキを０．５Ｌ×２ ＤＣＭで洗脱し、ろ過液を収集した。ＤＣＭ５Ｌをジャケット反応釜に入れ、次いで、濃縮された固体粗生成物を反応釜に移してからノルマルヘプタン１５．５Ｌを徐々に加え、２０～３０℃で１時間攪拌し、ろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭ／ノルマルヘプタン（ｖ／ｖ＝１／３）０．５Ｌ×２で洗脱し、ろ過ケーキを収集して４５～５０℃でオーブン乾燥し、固体を収集して化合物６（薄黄色固体）１７５０．４１ｇを得た。
ステップ４：化合物８の合成
１，４－ジオキサン１０．５Ｌ、水２．６５Ｌをジャケット反応釜に入れ、攪拌し始め、化合物６（１７５０．４１ｇ）、化合物７（１６３０．９１ｇ）、炭酸カリウム８９４．５２ｇを５０Ｌジャケット反応釜に入れ、黄色懸濁液になり、次いで窒素で２回置換し、窒素ガス流れ下で、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム９９．６７ｇを反応系に加え、窒素ガス雰囲気下で、６０℃まで昇温し始め、２時間続けて反応させた。水７．９Ｌを反応系に加え、固体を溶出し、１時間続けて攪拌し、次いで、室温まで冷却し、冷却完了後、テーブル型吸引ろ過漏斗を用いて吸引ろ過し、ろ過ケーキを水１Ｌ×２で洗脱した。エタノール／酢酸エチル（１／１）７．１Ｌを５０Ｌジャケット反応釜に入れ、攪拌し始め、ろ過ケーキを５０Ｌジャケット反応釜に移し、６０℃まで昇温し、１～２時間続けて攪拌し、室温まで冷却し、テーブル型吸引ろ過漏斗を用いて吸引ろ過し、ろ過ケーキをエタノール／酢酸エチル（１／１）０．５Ｌ×２で洗脱した。オーブン乾燥し、固体を収集して化合物８（黄色固体）１４４１．４２ｇを得た。
ステップ５：式（Ｉ）で表される化合物の合成
１，４－ジオキサン１１．６Ｌ、水２．９Ｌをジャケット反応釜に入れ、攪拌し始め、化合物８（１４４０．２１ｇ）、化合物９（９８９．８１ｇ）、炭酸カリウム６５９．５５ｇをジャケット反応釜に入れ、窒素で２回置換し、窒素ガス流れ下で、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム７３．５８ｇを反応系に加え、窒素ガス雰囲気下で、８０℃まで昇温し始め、１６時間続けて反応させた。水１７．８Ｌを反応系に加え、固体を溶出し、１時間続けて攪拌し、次いで、室温まで冷却し、冷却完了後、吸引ろ過し、ろ過ケーキを水３Ｌ×２で洗脱した。エタノール／脱イオン水（１／１）７．３Ｌを５０Ｌジャケット反応釜に入れ、攪拌し始め、ろ過ケーキを５０Ｌジャケット反応釜に移し、６０℃まで昇温し、１時間続けて攪拌し、室温まで冷却し、吸引ろ過し、ろ過ケーキをエタノール３Ｌ×２で洗脱した。オーブン乾燥し、固体を収集して式（Ｉ）で表される化合物（１１６７．２１ｇ）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．５１ （ｓ， １Ｈ）， ８．１５ （ｓ， １Ｈ）， ６．７１ （ｄ， Ｊ＝２．８Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６３ （ｄ， Ｊ＝２．８Ｈｚ， １Ｈ）， ６．４３ （ｂｒｓ， ２Ｈ）， ３．９４ （ｓ， ３Ｈ）， ３．９２ （ｓ， ３Ｈ）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ）， ３．７９ （ｓ， ３Ｈ）， ２．５５ （ｓ， ３Ｈ）。
１，４－ジオキサン（１４．８２Ｌ）、化合物２（３．０ｋｇ、１６．７７ｍｏｌ）を５０Ｌ反応釜に入れ、水（８．７２Ｌ）、化合物３（２．１８ｋｇ、１１．９８ｍｏｌ）を加え、窒素ガスを３０分送気し、炭酸ナトリウム（１．９ｋｇ、１７．９７ｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２７７ｇ、０．２４ｍｏｌ）を加え、窒素で３回置換し、この反応液を８５℃まで昇温して６ｈｒ反応させた。冷却し、２０．９Ｌ水を加え、室温まで冷却し、ろ過し、ろ過ケーキを水洗し、石油エステル：酢酸エチル＝２：１（４．５Ｌ×２）で洗脱した。乾燥して黄色固体、即ち化合物４（３．３９ｋｇ）を得た。
ステップ２：化合物５の合成
１，４－ジオキサン（１７．６Ｌ）を５０Ｌ反応釜に入れ、化合物４（２．３５ｋｇ、８．３７ｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（３．１９ｋｇ、１２．５６ｍｏｌ）、酢酸カリウム（１．６４ｋｇ、１６．７４ｍｏｌ）、トリシクロヘキシルホスフィン（１４０．９ｇ、０．５０ｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１５３．３ｇ、０．１６７ｍｏｌ）を加え、窒素で３回置換し、この反応液を９５℃まで昇温して１６ｈｒ反応させた。室温まで冷却し、ろ過し、ろ過ケーキを石油エステルで洗脱し、ろ過ケーキにジクロロメタン（１７．６Ｌ）、水（１１．５Ｌ）を加え、分液し、有機相を水洗し、硫酸ナトリウムで乾燥し、珪藻土でろ過し、ろ過液を減圧濃縮し、粗生成物を石油エステル：酢酸エチル＝１：１で叩解した。ろ過し、ろ過ケーキを石油エステル：酢酸エチル＝２：１（１．５Ｌ）で洗脱し、乾燥して灰色固体、化合物５（２．３７ｋｇ）を得た。
ステップ３：化合物６の合成
アセトニトリル２５．１Ｌを５０Ｌジャケット反応釜に入れ、攪拌を起動し、次いで、化合物５（２５０１．２１ｇ）を５０Ｌジャケット反応釜に入れ、黄色懸濁液になり、３０℃まで昇温し始め、次いで、三塩化アルミニウム９０．３１ｇ、Ｎ－クロロスクシンイミド８６１．２２ｇを順次に加え、３０℃の温度下で、１４ｈ続けて反応させた。次いで、亜硫酸ナトリウム８５．５１ｇを加え、１０分攪拌し、ジクロロメタン５．１Ｌを加え、０．５時間続けて攪拌し、珪藻土でろ過し、ろ過ケーキを０．５Ｌ×２ ＤＣＭで洗脱し、ろ過液を収集した。ＤＣＭ５Ｌをジャケット反応釜に入れ、次いで、濃縮された固体粗生成物を反応釜に移してからノルマルヘプタン１５．５Ｌを徐々に加え、２０～３０℃で１時間攪拌し、ろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭ／ノルマルヘプタン（ｖ／ｖ＝１／３）０．５Ｌ×２で洗脱し、ろ過ケーキを収集して４５～５０℃でオーブン乾燥し、固体を収集して化合物６（薄黄色固体）１７５０．４１ｇを得た。
ステップ４：化合物８の合成
１，４－ジオキサン１０．５Ｌ、水２．６５Ｌをジャケット反応釜に入れ、攪拌し始め、化合物６（１７５０．４１ｇ）、化合物７（１６３０．９１ｇ）、炭酸カリウム８９４．５２ｇを５０Ｌジャケット反応釜に入れ、黄色懸濁液になり、次いで窒素で２回置換し、窒素ガス流れ下で、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム９９．６７ｇを反応系に加え、窒素ガス雰囲気下で、６０℃まで昇温し始め、２時間続けて反応させた。水７．９Ｌを反応系に加え、固体を溶出し、１時間続けて攪拌し、次いで、室温まで冷却し、冷却完了後、テーブル型吸引ろ過漏斗を用いて吸引ろ過し、ろ過ケーキを水１Ｌ×２で洗脱した。エタノール／酢酸エチル（１／１）７．１Ｌを５０Ｌジャケット反応釜に入れ、攪拌し始め、ろ過ケーキを５０Ｌジャケット反応釜に移し、６０℃まで昇温し、１～２時間続けて攪拌し、室温まで冷却し、テーブル型吸引ろ過漏斗を用いて吸引ろ過し、ろ過ケーキをエタノール／酢酸エチル（１／１）０．５Ｌ×２で洗脱した。オーブン乾燥し、固体を収集して化合物８（黄色固体）１４４１．４２ｇを得た。
ステップ５：式（Ｉ）で表される化合物の合成
１，４－ジオキサン１１．６Ｌ、水２．９Ｌをジャケット反応釜に入れ、攪拌し始め、化合物８（１４４０．２１ｇ）、化合物９（９８９．８１ｇ）、炭酸カリウム６５９．５５ｇをジャケット反応釜に入れ、窒素で２回置換し、窒素ガス流れ下で、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム７３．５８ｇを反応系に加え、窒素ガス雰囲気下で、８０℃まで昇温し始め、１６時間続けて反応させた。水１７．８Ｌを反応系に加え、固体を溶出し、１時間続けて攪拌し、次いで、室温まで冷却し、冷却完了後、吸引ろ過し、ろ過ケーキを水３Ｌ×２で洗脱した。エタノール／脱イオン水（１／１）７．３Ｌを５０Ｌジャケット反応釜に入れ、攪拌し始め、ろ過ケーキを５０Ｌジャケット反応釜に移し、６０℃まで昇温し、１時間続けて攪拌し、室温まで冷却し、吸引ろ過し、ろ過ケーキをエタノール３Ｌ×２で洗脱した。オーブン乾燥し、固体を収集して式（Ｉ）で表される化合物（１１６７．２１ｇ）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．５１ （ｓ， １Ｈ）， ８．１５ （ｓ， １Ｈ）， ６．７１ （ｄ， Ｊ＝２．８Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６３ （ｄ， Ｊ＝２．８Ｈｚ， １Ｈ）， ６．４３ （ｂｒｓ， ２Ｈ）， ３．９４ （ｓ， ３Ｈ）， ３．９２ （ｓ， ３Ｈ）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ）， ３．７９ （ｓ， ３Ｈ）， ２．５５ （ｓ， ３Ｈ）。
【0038】
実施例２ 式（Ｉ）で表される化合物の製造
【0039】
【化8】
【0040】
１００ｍＬバイアルにて、化合物６（１．６４ｇ、４．０３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）、化合物１０（１．０８ｇ、４．０３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（４６６．０１ｍｇ、４０３．２８ｕｍｏｌ、０．１ｅｑ）及び炭酸カリウム（２．７９ｇ、２０．１６ｍｍｏｌ、５ｅｑ）を１，４－ジオキサン（５０ｍＬ）、水（１３ｍＬ）に加え、反応系における空気を窒素で置換し、窒素飽和下で、１００℃まで昇温して５時間還流撹拌した。大部分を減圧濃縮して溶解し、酢酸エチル（２００ｍＬ）を加えて希釈し、水（１００ｍＬ、１００ｍＬ）で２回洗浄した。次いで、塩化ナトリウム飽和溶液（２００ｍＬ）で１回洗浄し、最後に、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮した。得られた粗生成物をＤＭＳＯ（３０ｍＬ）で溶解し、不溶物を濾過し、高速液体クロマトグラフィ（カラム：Ｂｏｓｔｏｎ Ｇｒｅｅｎ ＯＤＳ １５０×３０ｍｍ ５μｍ、移動相：［水（０．１％ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％－４８％、９ｍｉｎ）で分離精製した。式（Ｉ）で表される化合物のトリフルオロ酢酸塩（５００ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ、収率：４９．５０％）を得た。この塩をジクロロメタンに溶解し、飽和炭酸ナトリウムを加えて洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過液をスピン乾燥して式（Ｉ）で表される化合物を得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．５１ （ｓ， １Ｈ）， ８．１５ （ｓ， １Ｈ）， ６．７１ （ｄ， Ｊ＝２．８Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６３ （ｄ， Ｊ＝２．８Ｈｚ， １Ｈ）， ６．４３ （ｂｒｓ， ２Ｈ）， ３．９４ （ｓ， ３Ｈ）， ３．９２ （ｓ， ３Ｈ）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ）， ３．７９ （ｓ， ３Ｈ）， ２．５５ （ｓ， ３Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．５１ （ｓ， １Ｈ）， ８．１５ （ｓ， １Ｈ）， ６．７１ （ｄ， Ｊ＝２．８Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６３ （ｄ， Ｊ＝２．８Ｈｚ， １Ｈ）， ６．４３ （ｂｒｓ， ２Ｈ）， ３．９４ （ｓ， ３Ｈ）， ３．９２ （ｓ， ３Ｈ）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ）， ３．７９ （ｓ， ３Ｈ）， ２．５５ （ｓ， ３Ｈ）。
【0041】
実施例３：式（Ｉ）で表される化合物のトリフルオロ酢酸塩の製造の合成
【0042】
【化9】
【0043】
ステップ１：化合物ＢＢ－１－３の合成
化合物ＢＢ－１－２（２．０ｇ、１１．４９ｍｍｏｌ、１ｅｑ）と化合物ＢＢ－１－１（２．６ｇ、１１．４９ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を水（６．０ｍＬ）とジオキサン（２５．０ｍＬ）に溶解し、次いで、［１，１’－ジ（ジフェニルホスフィン基）フェロセン］ジクロロパラジウム（８４１ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、０．１ｅｑ）と炭酸カリウム（４．８ｇ、３４．４８ｍｍｏｌ、３ｅｑ）を加え、窒素ガス雰囲気下で、１００℃まで加熱して１６時間反応させた。得られた反応液を吸引ろ過してスピン乾燥し、粗生成物をカラムクロマトグラフィ（石油エステル：酢酸エチル＝１：０－０：１）で精製して化合物ＢＢ－１－３を得た。
ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： １９０．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
ステップ２：化合物ＢＢ－１の合成
化合物ＢＢ－１－３（０．５ｇ、２．６４ｍｍｏｌ、１ｅｑ）とピリジニル（２０９ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ、２１３．２８μＬ、１ｅｑ）をクロロフォルム（２０．０ｍＬ）に加え、０℃まで冷却してから臭素（４２２ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ、１３６．２２μＬ、１ｅｑ）を加えた。室温２８℃下で１８時間反応させた。反応物をチオ硫酸ナトリウム（１．０ｍＬ）でクエンチングし、次いで、吸引ろ過し、ろ過液を濃縮し、粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（石油エステル：酢酸エチル＝１：０－１：１）で精製した。化合物ＢＢ－１を得た。ＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ２６７．９ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．１２ （ｓ， １ Ｈ） ７．９０ （ｓ， １ Ｈ） ３．８６ （ｓ， ３ Ｈ） ２．４３ （ｓ， ３ Ｈ）。
ステップ３：化合物２の合成
窒素雰囲気下で、化合物ＢＢ－２－１（２．０ｇ、１８．７７ｍｍｏｌ、２．１７ｍＬ、１ｅｑ、ＨＣｌ）をクロロベンゼン（１５．０ｍＬ）に溶解し、２５℃で、化合物ＢＢ－２－２（８．３ｇ、６５．６９ｍｍｏｌ、５．８ｍＬ、３．５ｅｑ）を滴加し、混合物を９０℃まで徐々に昇温し、１６時間攪拌した。反応系に水（３０．０ｍＬ）と酢酸エチル（３０．０ｍＬ）を加え、静置分層しながら水相を酢酸エチル（２０．０ｍＬ、２０．０ｍＬ、２０．０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合併し、塩化ナトリウム飽和溶液（３０．０ｍＬ）で１回洗浄し、最後に有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィ（石油エステル：酢酸エチル＝１：０－２：１）で分離精製し、化合物２を得た。ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： １７８．７ ［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ７．２６ （ｓ， １Ｈ）， ３．６１ （ｓ， ３Ｈ）。
ステップ４：化合物４の合成
マイクロ波試験管にて、窒素雰囲気下で、化合物２（０．２ｇ、１．１２ｍｍｏｌ、１ｅｑ）と化合物３（２１３ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、１．０５ｅｑ）をジオキサン（１．５ｍＬ）と水（１．５ｍＬ）との混合溶液に溶解し、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（６５ｍｇ、５５．８６μｍｏｌ、０．０５ｅｑ）、炭酸ナトリウム（１３０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ）を加え、混合物を１２０℃で３０分マイクロ波攪拌した。反応液を直接濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィ（石油エステル：酢酸エチル＝１：０－０：１）（ＴＬＣ検出 石油エステル：酢酸エチル＝１：１）で分離し、化合物４を得た。ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ２８１．０ ［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ７．６４ （ｄ， ２Ｈ）， ７．２８ （ｓ， １Ｈ）， ６．５９ （ｔ， １Ｈ）， ３．８６ （ｓ， ６Ｈ）， ３．６１ （ｓ， ３Ｈ）。
ステップ５：化合物００２７－１の合成
窒素雰囲気下で、化合物４（２５０ｍｇ、８９０．６１μｍｏｌ、１ｅｑ）をアセトニトリル（２０．０ｍＬ）とジクロロメタン（５．０ｍＬ）との混合溶媒に溶解し、スルホン酸塩化物（８４ｍｇ、６２３．４３μｍｏｌ、６２．３３μＬ、０．７ｅｑ）のアセトニトリル（２．５ｍＬ）溶液を０℃で徐々に滴加し、混合物を０℃で１０分攪拌した。反応液にメタノール（５．０ｍＬ）を加えてクエンチング反応し、減圧濃縮乾燥した。粗生成物をカラムクロマトグラフィ（石油エステル：酢酸エチル＝１：０－１：１）（ＴＬＣ検出 石油エステル：酢酸エチル＝１：１）で分離し、化合物００２７－１を得た。ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３１４．９ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
ステップ６：式（Ｉ）で表される化合物の合成
三口フラスコにて、化合物００２７－１（５９ｍｇ、１８６．４９μｍｏｌ、１ｅｑ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（５２ｍｇ、２０５．１４μｍｏｌ、１．１ｅｑ）、酢酸パラジウム（５ｍｇ、２０．５１μｍｏｌ、０．１１ｅｑ）及び２－ジシクロヘキシルホスフィン－２，４，６－トリイソプロピルビフェニル（２０ｍｇ、４１．０３μｍｏｌ、０．２２ｅｑ）、酢酸カリウム（６０ｍｇ、６１５．４２μｍｏｌ、３．３ｅｑ）をジオキサン（４．０ｍＬ）溶液に加え、反応系における空気を窒素で置換し、窒素飽和下で、１００℃まで昇温して３０分還流撹拌し、２５℃まで冷却し、化合物ＢＢ－１（５０ｍｇ、１８６．４９μｍｏｌ、１ｅｑ）、［１，１’－ジ（ジフェニルホスフィン基）フェロセン］ジクロロパラジウムのジクロロメタン錯体化合物（１５ｍｇ、１８．６５μｍｏｌ、０．１ｅｑ）、炭酸カリウム（７７ｍｇ、５５９．４７μｍｏｌ、３ｅｑ）、ジオキサン（４．０ｍＬ）及び水（２．０ｍＬ）を加え、反応系における空気を窒素で置換し、窒素飽和下で、１００℃まで昇温して８時間還流撹拌した。反応液を直接濃縮した。得られた粗生成物を高速液体クロマトグラフィ（カラム：Ｂｏｓｔｏｎ Ｇｒｅｅｎ ＯＤＳ １５０×３０ｍｍ ５μｍ、移動相：［水（０．１％ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％－６０％、８ｍｉｎ）で分離精製し、式（Ｉ）で表される化合物のトリフルオロ酢酸塩を得た。ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４６８．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．７９ （ｓ， １Ｈ）， ８．０９ （Ｍ、２Ｈ）， ６．７６ （Ｍ、２Ｈ）， ３．９３ （ｓ， ３Ｈ）， ３．８９ （ｓ， ３Ｈ）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ），３．８０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．５４ （ｓ， ３Ｈ）。
化合物ＢＢ－１－２（２．０ｇ、１１．４９ｍｍｏｌ、１ｅｑ）と化合物ＢＢ－１－１（２．６ｇ、１１．４９ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を水（６．０ｍＬ）とジオキサン（２５．０ｍＬ）に溶解し、次いで、［１，１’－ジ（ジフェニルホスフィン基）フェロセン］ジクロロパラジウム（８４１ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、０．１ｅｑ）と炭酸カリウム（４．８ｇ、３４．４８ｍｍｏｌ、３ｅｑ）を加え、窒素ガス雰囲気下で、１００℃まで加熱して１６時間反応させた。得られた反応液を吸引ろ過してスピン乾燥し、粗生成物をカラムクロマトグラフィ（石油エステル：酢酸エチル＝１：０－０：１）で精製して化合物ＢＢ－１－３を得た。
ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： １９０．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
ステップ２：化合物ＢＢ－１の合成
化合物ＢＢ－１－３（０．５ｇ、２．６４ｍｍｏｌ、１ｅｑ）とピリジニル（２０９ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ、２１３．２８μＬ、１ｅｑ）をクロロフォルム（２０．０ｍＬ）に加え、０℃まで冷却してから臭素（４２２ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ、１３６．２２μＬ、１ｅｑ）を加えた。室温２８℃下で１８時間反応させた。反応物をチオ硫酸ナトリウム（１．０ｍＬ）でクエンチングし、次いで、吸引ろ過し、ろ過液を濃縮し、粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（石油エステル：酢酸エチル＝１：０－１：１）で精製した。化合物ＢＢ－１を得た。ＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ２６７．９ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．１２ （ｓ， １ Ｈ） ７．９０ （ｓ， １ Ｈ） ３．８６ （ｓ， ３ Ｈ） ２．４３ （ｓ， ３ Ｈ）。
ステップ３：化合物２の合成
窒素雰囲気下で、化合物ＢＢ－２－１（２．０ｇ、１８．７７ｍｍｏｌ、２．１７ｍＬ、１ｅｑ、ＨＣｌ）をクロロベンゼン（１５．０ｍＬ）に溶解し、２５℃で、化合物ＢＢ－２－２（８．３ｇ、６５．６９ｍｍｏｌ、５．８ｍＬ、３．５ｅｑ）を滴加し、混合物を９０℃まで徐々に昇温し、１６時間攪拌した。反応系に水（３０．０ｍＬ）と酢酸エチル（３０．０ｍＬ）を加え、静置分層しながら水相を酢酸エチル（２０．０ｍＬ、２０．０ｍＬ、２０．０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合併し、塩化ナトリウム飽和溶液（３０．０ｍＬ）で１回洗浄し、最後に有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィ（石油エステル：酢酸エチル＝１：０－２：１）で分離精製し、化合物２を得た。ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： １７８．７ ［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ７．２６ （ｓ， １Ｈ）， ３．６１ （ｓ， ３Ｈ）。
ステップ４：化合物４の合成
マイクロ波試験管にて、窒素雰囲気下で、化合物２（０．２ｇ、１．１２ｍｍｏｌ、１ｅｑ）と化合物３（２１３ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、１．０５ｅｑ）をジオキサン（１．５ｍＬ）と水（１．５ｍＬ）との混合溶液に溶解し、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（６５ｍｇ、５５．８６μｍｏｌ、０．０５ｅｑ）、炭酸ナトリウム（１３０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ）を加え、混合物を１２０℃で３０分マイクロ波攪拌した。反応液を直接濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィ（石油エステル：酢酸エチル＝１：０－０：１）（ＴＬＣ検出 石油エステル：酢酸エチル＝１：１）で分離し、化合物４を得た。ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ２８１．０ ［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ７．６４ （ｄ， ２Ｈ）， ７．２８ （ｓ， １Ｈ）， ６．５９ （ｔ， １Ｈ）， ３．８６ （ｓ， ６Ｈ）， ３．６１ （ｓ， ３Ｈ）。
ステップ５：化合物００２７－１の合成
窒素雰囲気下で、化合物４（２５０ｍｇ、８９０．６１μｍｏｌ、１ｅｑ）をアセトニトリル（２０．０ｍＬ）とジクロロメタン（５．０ｍＬ）との混合溶媒に溶解し、スルホン酸塩化物（８４ｍｇ、６２３．４３μｍｏｌ、６２．３３μＬ、０．７ｅｑ）のアセトニトリル（２．５ｍＬ）溶液を０℃で徐々に滴加し、混合物を０℃で１０分攪拌した。反応液にメタノール（５．０ｍＬ）を加えてクエンチング反応し、減圧濃縮乾燥した。粗生成物をカラムクロマトグラフィ（石油エステル：酢酸エチル＝１：０－１：１）（ＴＬＣ検出 石油エステル：酢酸エチル＝１：１）で分離し、化合物００２７－１を得た。ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３１４．９ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
ステップ６：式（Ｉ）で表される化合物の合成
三口フラスコにて、化合物００２７－１（５９ｍｇ、１８６．４９μｍｏｌ、１ｅｑ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（５２ｍｇ、２０５．１４μｍｏｌ、１．１ｅｑ）、酢酸パラジウム（５ｍｇ、２０．５１μｍｏｌ、０．１１ｅｑ）及び２－ジシクロヘキシルホスフィン－２，４，６－トリイソプロピルビフェニル（２０ｍｇ、４１．０３μｍｏｌ、０．２２ｅｑ）、酢酸カリウム（６０ｍｇ、６１５．４２μｍｏｌ、３．３ｅｑ）をジオキサン（４．０ｍＬ）溶液に加え、反応系における空気を窒素で置換し、窒素飽和下で、１００℃まで昇温して３０分還流撹拌し、２５℃まで冷却し、化合物ＢＢ－１（５０ｍｇ、１８６．４９μｍｏｌ、１ｅｑ）、［１，１’－ジ（ジフェニルホスフィン基）フェロセン］ジクロロパラジウムのジクロロメタン錯体化合物（１５ｍｇ、１８．６５μｍｏｌ、０．１ｅｑ）、炭酸カリウム（７７ｍｇ、５５９．４７μｍｏｌ、３ｅｑ）、ジオキサン（４．０ｍＬ）及び水（２．０ｍＬ）を加え、反応系における空気を窒素で置換し、窒素飽和下で、１００℃まで昇温して８時間還流撹拌した。反応液を直接濃縮した。得られた粗生成物を高速液体クロマトグラフィ（カラム：Ｂｏｓｔｏｎ Ｇｒｅｅｎ ＯＤＳ １５０×３０ｍｍ ５μｍ、移動相：［水（０．１％ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％－６０％、８ｍｉｎ）で分離精製し、式（Ｉ）で表される化合物のトリフルオロ酢酸塩を得た。ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４６８．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．７９ （ｓ， １Ｈ）， ８．０９ （Ｍ、２Ｈ）， ６．７６ （Ｍ、２Ｈ）， ３．９３ （ｓ， ３Ｈ）， ３．８９ （ｓ， ３Ｈ）， ３．８４ （ｓ， ３Ｈ），３．８０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．５４ （ｓ， ３Ｈ）。
【0044】
実験例１：野生型キナーゼ体外阻害活性評価
３３Ｐ同位体標識キナーゼ活性試験（Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐ）を用いてＩＣ５０値を測定することで、被験化合物のヒトＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ４に対する阻害能力を評価した。
緩衝液条件：２０ｍＭ ４－（２－ヒドロキシエチル基）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（Ｈｅｐｅｓ）（ｐＨ７．５）、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１ｍＭ グリコール－ビス－（２－アミノエチルエーテル）テトラ酢酸（ＥＧＴＡ）、０．０２％ポリオキシエチレンラウリルエーテル（Ｂｒｉｊ３５）、０．０２ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、０．１ｍＭバナジン酸ナトリウム（Ｎａ３ＶＯ４）、２ｍＭジチオスレイトール（ＤＴＴ）、１％ＤＭＳＯ。
実験手順：室温下で、被験化合物をＤＭＳＯに溶解して１０ｍＭ溶液に調製し、使用に備えた。基質を新たに調製した緩衝液に溶解し、その中に被測定キナーゼを加えて均一混合した。音響技法（Ｅｃｈｏ ５５０）を用いて、被験化合物を溶解したＤＭＳＯ溶液を上記均一混合した反応液に加えた。反応液における化合物の濃度は、１０μＭ、３．３３μＭ、１．１１μＭ、０．３７０μＭ、０．１２３μＭ、４１．２ｎＭ、１３．７ｎＭ、４．５７ｎＭ、１．５２ｎＭ、０．５０８ｎＭ、又は１０μＭ、２．５０μＭ、０．６２μＭ、０．１５６μＭ、３９．１ｎＭ、９．８ｎＭ、２．４ｎＭ、０．６１ｎＭ、０．１５ｎＭ、０．０３８ｎＭであった。１５分孵化した後、３３Ｐ－ＡＴＰ（活性度０．０１μＣｉ／μＬ、相応な濃度を表１に示す）を加えて反応し始めた。ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ４とその基質の供給者製品番号、ロット番号及び反応液における濃度についての情報を表１に示す。反応を室温下で１２０分行った後、反応液をＰ８１イオン交換濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ＃３６９８－９１５）上に滴下した。濾紙を０．７５％リン酸溶液で繰り返し洗浄した後、濾紙上に残留したリン酸化基質の放射性を測定した。キナーゼ活性データは、被験化合物を含有するキナーゼ活性とブランク対照群（ＤＭＳＯのみを含有する）のキナーゼ活性の比較で表示され、Ｐｒｉｓｍ４ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ）によりカーブフィッティングを行ってＩＣ５０値を得た。実験結果は、表２に示されるとおりである。
３３Ｐ同位体標識キナーゼ活性試験（Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐ）を用いてＩＣ５０値を測定することで、被験化合物のヒトＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ４に対する阻害能力を評価した。
緩衝液条件：２０ｍＭ ４－（２－ヒドロキシエチル基）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（Ｈｅｐｅｓ）（ｐＨ７．５）、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１ｍＭ グリコール－ビス－（２－アミノエチルエーテル）テトラ酢酸（ＥＧＴＡ）、０．０２％ポリオキシエチレンラウリルエーテル（Ｂｒｉｊ３５）、０．０２ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、０．１ｍＭバナジン酸ナトリウム（Ｎａ３ＶＯ４）、２ｍＭジチオスレイトール（ＤＴＴ）、１％ＤＭＳＯ。
実験手順：室温下で、被験化合物をＤＭＳＯに溶解して１０ｍＭ溶液に調製し、使用に備えた。基質を新たに調製した緩衝液に溶解し、その中に被測定キナーゼを加えて均一混合した。音響技法（Ｅｃｈｏ ５５０）を用いて、被験化合物を溶解したＤＭＳＯ溶液を上記均一混合した反応液に加えた。反応液における化合物の濃度は、１０μＭ、３．３３μＭ、１．１１μＭ、０．３７０μＭ、０．１２３μＭ、４１．２ｎＭ、１３．７ｎＭ、４．５７ｎＭ、１．５２ｎＭ、０．５０８ｎＭ、又は１０μＭ、２．５０μＭ、０．６２μＭ、０．１５６μＭ、３９．１ｎＭ、９．８ｎＭ、２．４ｎＭ、０．６１ｎＭ、０．１５ｎＭ、０．０３８ｎＭであった。１５分孵化した後、３３Ｐ－ＡＴＰ（活性度０．０１μＣｉ／μＬ、相応な濃度を表１に示す）を加えて反応し始めた。ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ４とその基質の供給者製品番号、ロット番号及び反応液における濃度についての情報を表１に示す。反応を室温下で１２０分行った後、反応液をＰ８１イオン交換濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ＃３６９８－９１５）上に滴下した。濾紙を０．７５％リン酸溶液で繰り返し洗浄した後、濾紙上に残留したリン酸化基質の放射性を測定した。キナーゼ活性データは、被験化合物を含有するキナーゼ活性とブランク対照群（ＤＭＳＯのみを含有する）のキナーゼ活性の比較で表示され、Ｐｒｉｓｍ４ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ）によりカーブフィッティングを行ってＩＣ５０値を得た。実験結果は、表２に示されるとおりである。
【0045】
【表1】
【0046】
【表2】
【0047】
結論：式（Ｉ）で表される化合物のトリフルオロ酢酸塩は、野生型ＦＧＦＲに対して、いずれも良好な阻害活性を示し、かつＦＧＦＲ２、３は、ＦＧＦＲ１、４に対する選択性が比較的高かった。
【0048】
実験例２：化合物薬物動態評価
実験目的：マウス体内における化合物の薬物動態を評価する
実験材料：
ＣＤ－１マウス（雄性）、溶媒（０．５％（ｗ／ｖ）メチルセルロース０．５％（ｖ／ｖ）トゥイーン８０水溶液）、化合物００２７のトリフルオロ酢酸塩。
１、投与製剤の調製：
溶媒は、０．５％（ｗ／ｖ）メチルセルロース０．５％（ｖ／ｖ）トゥイーン８０水溶液であり、以下の手順に従って調製した。
ａ．約５０％体積の精製水を適切な容器に入れ、約６０℃ないし７０℃に加熱した。
ｂ．水温が所定値の範囲に達した時、ヒータをオフにした。所要量のメチルセルロースを上記容器に徐々に加えて続けて攪拌した。
ｃ．上澄み溶液と目視されるまで４℃で続けて攪拌した。
ｄ．所要体積のトゥイーン８０を上記溶液に加えた。トゥイーン８０が均一に分散され、かつ上澄み溶液と目視されるまで続けて攪拌した。
ｅ．上記溶液を適量の精製水で最終体積に定容した。
ｆ．均一溶液が形成されるまで続けて攪拌した。
胃内投与製剤の調製：
ａ．適量の供試品を秤取してガラス瓶に入れた。
ｂ．７０％体積の溶媒（０．５％（ｗ／ｖ）メチルセルロース０．５％（ｖ／ｖ）トゥイーン８０水溶液）を加えた。
ｃ．均一と目視されるまで製剤を攪拌し、必要な場合、超音波ウォーターバスを行った。
ｄ．残余体積の０．５％メチルセルロース＋０．５％トゥイーン８０を補充し、均一に攪拌した。
２、薬剤投与
第１、２群の動物は、それぞれ、５ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬの化合物を単回胃内投与し、投与体積は１０ｍＬ／ｋｇであった。
薬剤投与の前に、動物の体重を秤量し、体重に基づいて投与体積を算出した。
３、試料採集と処理
伏静脈採血方式により、所定の時間（０．２５、０．５、１、２、４、６、８、２４ｈ）で全血試料（３０μＬ）を採集し、実際の採血時間を試験記録に記入した。採集時間点の許容可能な誤差は、投与１時間以内の時間点±１分であり、その他の時間点では理論時間±５％であった。
全ての血液試料を直ちにラベルが貼られたＫ２－ＥＤＴＡを含有する商品化遠心管に移送した。血液試料を採集した後、４℃で、３２００回転／分で１０分遠心し、上清血漿を吸引し、迅速にドライアイスに置き、－２０℃又はそれ以下の温度に維持し、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析に用いられた。薬物動態パラメータを算出した。実験結果を表３に示す。
実験目的：マウス体内における化合物の薬物動態を評価する
実験材料：
ＣＤ－１マウス（雄性）、溶媒（０．５％（ｗ／ｖ）メチルセルロース０．５％（ｖ／ｖ）トゥイーン８０水溶液）、化合物００２７のトリフルオロ酢酸塩。
１、投与製剤の調製：
溶媒は、０．５％（ｗ／ｖ）メチルセルロース０．５％（ｖ／ｖ）トゥイーン８０水溶液であり、以下の手順に従って調製した。
ａ．約５０％体積の精製水を適切な容器に入れ、約６０℃ないし７０℃に加熱した。
ｂ．水温が所定値の範囲に達した時、ヒータをオフにした。所要量のメチルセルロースを上記容器に徐々に加えて続けて攪拌した。
ｃ．上澄み溶液と目視されるまで４℃で続けて攪拌した。
ｄ．所要体積のトゥイーン８０を上記溶液に加えた。トゥイーン８０が均一に分散され、かつ上澄み溶液と目視されるまで続けて攪拌した。
ｅ．上記溶液を適量の精製水で最終体積に定容した。
ｆ．均一溶液が形成されるまで続けて攪拌した。
胃内投与製剤の調製：
ａ．適量の供試品を秤取してガラス瓶に入れた。
ｂ．７０％体積の溶媒（０．５％（ｗ／ｖ）メチルセルロース０．５％（ｖ／ｖ）トゥイーン８０水溶液）を加えた。
ｃ．均一と目視されるまで製剤を攪拌し、必要な場合、超音波ウォーターバスを行った。
ｄ．残余体積の０．５％メチルセルロース＋０．５％トゥイーン８０を補充し、均一に攪拌した。
２、薬剤投与
第１、２群の動物は、それぞれ、５ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬの化合物を単回胃内投与し、投与体積は１０ｍＬ／ｋｇであった。
薬剤投与の前に、動物の体重を秤量し、体重に基づいて投与体積を算出した。
３、試料採集と処理
伏静脈採血方式により、所定の時間（０．２５、０．５、１、２、４、６、８、２４ｈ）で全血試料（３０μＬ）を採集し、実際の採血時間を試験記録に記入した。採集時間点の許容可能な誤差は、投与１時間以内の時間点±１分であり、その他の時間点では理論時間±５％であった。
全ての血液試料を直ちにラベルが貼られたＫ２－ＥＤＴＡを含有する商品化遠心管に移送した。血液試料を採集した後、４℃で、３２００回転／分で１０分遠心し、上清血漿を吸引し、迅速にドライアイスに置き、－２０℃又はそれ以下の温度に維持し、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析に用いられた。薬物動態パラメータを算出した。実験結果を表３に示す。
【0049】
【表3】
【0050】
結論：式（Ｉ）で表される化合物のトリフルオロ酢酸塩のマウス薬物動態指標は良好であった。
【国際調査報告】