特表2022-539200グルカゴン及びＧＬＰ－１コアゴニストペプチドのための医薬組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-09-07
(54)【発明の名称】グルカゴン及びＧＬＰ－１コアゴニストペプチドのための医薬組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 38/26 20060101AFI20220831BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20220831BHJP
A61K 47/10 20060101ALI20220831BHJP
A61K 47/02 20060101ALI20220831BHJP
A61K 47/18 20060101ALI20220831BHJP
A61P 3/06 20060101ALI20220831BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20220831BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20220831BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20220831BHJP
C07K 14/00 20060101ALI20220831BHJP
C07K 14/605 20060101ALN20220831BHJP
【ＦＩ】
A61K38/26
A61K47/26
A61K47/10
A61K47/02
A61K47/18
A61P3/06
A61P1/16
A61P3/10
A61K9/08
C07K14/00 ZNA
C07K14/605
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021577897
(86)(22)【出願日】2020-06-30
(85)【翻訳文提出日】2022-02-24
(86)【国際出願番号】 EP2020068411
(87)【国際公開番号】W WO2021001374
(87)【国際公開日】2021-01-07
(31)【優先権主張番号】62/869,263
(32)【優先日】2019-07-01
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】508098350
【氏名又は名称】メドイミューン・リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ
【住所又は居所原語表記】Ｍｉｌｓｔｅｉｎ Ｂｕｉｌｄｉｎｇ，Ｇｒａｎｔａ Ｐａｒｋ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ ＣＢ２１ ６ＧＨ，Ｅｎｇｌａｎｄ
(74)【代理人】
【識別番号】100106518
【弁理士】
【氏名又は名称】松谷 道子
(74)【代理人】
【識別番号】100138911
【弁理士】
【氏名又は名称】櫻井 陽子
(72)【発明者】
【氏名】ゴメス ドス サントス，アナ ルシア
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076AA12
4C076BB16
4C076CC16
4C076CC21
4C076DD22Z
4C076DD26Z
4C076DD38D
4C076DD50Z
4C076FF36
4C084AA02
4C084BA01
4C084BA19
4C084MA17
4C084MA66
4C084NA03
4C084ZA75
4C084ZC33
4C084ZC35
4H045AA10
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA18
4H045BA55
4H045DA30
4H045EA27
4H045FA33
(57)【要約】
本発明は、ＧＬＰ－１／ペグルカゴンアゴニストペプチドを非経口投与するための製剤、このような製剤を製造する方法及びこのような製剤を使用する治療方法を提供する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
配列番号４を含むペプチドを含む医薬組成物であって、前記組成物のｐＨは、約８．１である医薬組成物。
【請求項2】
配列番号４及びソルビトールを含むペプチドを含む医薬組成物。
【請求項3】
配列番号４及びメタ－クレゾールを含むペプチドを含む医薬組成物。
【請求項4】
前記組成物のｐＨは、少なくとも７．９である、請求項２又は３に記載の医薬組成物。
【請求項5】
前記組成物のｐＨは約７．９～約８．４であり、任意選択的に、前記組成物の前記ｐＨは約８．１である、請求項２又は３に記載の医薬組成物。
【請求項6】
前記組成物は、ｐＨ調整剤を含む、請求項１～３の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項7】
前記組成物は、水酸化ナトリウムを含む、請求項１～３の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項8】
前記組成物は、前記組成物のｐＨを少なくとも７．９にさせるために十分な濃度で水酸化ナトリウムを含む、請求項２又は３に記載の医薬組成物。
【請求項9】
前記組成物は、前記組成物のｐＨを約７．９～約８．４、任意選択的に約８．１にさせるために十分な濃度で水酸化ナトリウムを含む、請求項２又は３に記載の医薬組成物。
【請求項10】
前記組成物は、等張化剤を含む、請求項１又は３～９の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項11】
前記等張化剤は、ソルビトール、マンニトール又はプロピレングリコールである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項12】
前記ソルビトールの濃度は、約１９０ｍＭ～約２５０ｍＭである、請求項２又は１１に記載の医薬組成物。
【請求項13】
前記ソルビトールの濃度は、約２２０ｍＭであり、任意選択的に、前記濃度は、２２０．３ｍＭである、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項14】
前記ソルビトールの濃度は、約３５ｍｇ／ｍＬ～約４５ｍｇ／ｍＬである、請求２又は１１に記載の医薬組成物。
【請求項15】
前記ソルビトールの濃度は、約４０ｍｇ／ｍＬ～約４１ｍｇ／ｍＬであり、任意選択的に、前記濃度は、４０．１３ｍｇ／ｍＬである、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項16】
前記組成物は、抗菌剤を含み、任意選択的に、前記抗菌剤は、メタ－クレゾール又はフェノールである、請求項１、２又は４～１４の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項17】
前記メタ－クレゾールの濃度は、約０．２７重量／体積％～約０．４５重量／体積％である、又は前記メタ－クレゾールの濃度は、約２５ｍＭ～約３０ｍＭである、請求項３又は１６に記載の医薬組成物。
【請求項18】
前記メタ－クレゾールの濃度は、約０．３１重量／体積％であり、前記メタ－クレゾールの濃度は、約２８．６ｍＭである、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項19】
前記メタ－クレゾールの濃度は、約２．７ｍｇ／ｍｌ～約４．５ｍｇ／ｍｌである、請求項３又は１６に記載の医薬組成物。
【請求項20】
前記メタ－クレゾールの濃度は、約３．１ｍｇ／ｍｌである、請求項３又は１９に記載の医薬組成物。
【請求項21】
前記組成物は、バッファーを含み、任意選択的に、前記バッファーは、リン酸ナトリウム又はＴＲＩＳである、請求項１～２０の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項22】
前記リン酸ナトリウムの濃度は、約５ｍＭ～約２５ｍＭである、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項23】
前記リン酸ナトリウムの濃度は、約２０ｍＭであり、任意選択的に、前記濃度は、２０ｍＭ又は２０．１ｍＭである、請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項24】
前記リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む、請求項２１～２３の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項25】
前記リン酸ナトリウム一塩基性一水和物の濃度は、約１ｍＭであり、前記リン酸ナトリウム二塩基性七水和物の濃度は、約１９ｍＭ、任意選択的に、１９ｍＭ又は１９．１ｍＭである、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項26】
前記リン酸ナトリウムの濃度は、約１０ｍＭである、請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項27】
前記リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物である、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項28】
前記リン酸ナトリウムの濃度は、約１ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬである、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項29】
前記リン酸ナトリウムの濃度は、約５．２５ｍｇ／ｍＬである、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項30】
前記リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む、請求項２１、２８及び２９の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項31】
前記リン酸ナトリウム一塩基性一水和物の濃度は、約０．１３ｍｇ／ｍＬであり、前記リン酸ナトリウム二塩基性七水和物の濃度は、約５．１２ｍｇ／ｍＬである、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項32】
前記リン酸ナトリウムの濃度は、約２．６８ｍｇ／ｍＬである、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項33】
前記リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物である、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項34】
配列番号４を含む前記ペプチドの前記濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬである、請求項１～３３の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項35】
配列番号４を含む前記ペプチドの前記濃度は、約１ｍｇ／ｍＬである、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項36】
配列番号４を含む前記ペプチドの前記濃度は、約２ｍｇ／ｍＬである、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項37】
配列番号４を含む前記ペプチドの前記濃度は、約５ｍｇ／ｍＬである、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項38】
配列番号４を含む約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬのペプチド、約１９０ｍＭ～約２５０ｍＭのソルビトール、約５ｍＭ～約２５ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．２７重量／体積％～約０．４５重量／体積％のメタ－クレゾールを含む医薬組成物であって、前記医薬組成物のｐＨは、約７．９～約８．４である医薬組成物。
【請求項39】
配列番号４を含む約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬのペプチド、約２２０．３ｍＭのソルビトール、約２０．１ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．３１重量／体積％のメタ－クレゾールを含む医薬組成物であって、前記医薬組成物のｐＨは、約８．１である医薬組成物。
【請求項40】
配列番号４を含む約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬのペプチド、約２２０．３ｍＭのソルビトール、約２０ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．３１重量／体積％のメタ－クレゾールを含む医薬組成物であって、前記医薬組成物のｐＨは、約８．１である医薬組成物。
【請求項41】
前記リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む、請求項３９又は４０に記載の医薬組成物。
【請求項42】
配列番号４を含む約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬのペプチド、約２２０．３ｍＭのソルビトール、約１０ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．３１重量／体積％のメタ－クレゾールを含む医薬組成物であって、前記医薬組成物のｐＨは、約８．１である医薬組成物。
【請求項43】
前記リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物である、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項44】
水酸化ナトリウムを含む、請求項３８～４３の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項45】
配列番号４を含む約１ｍｇ／ｍＬの前記ペプチドを含む、請求項３８～４４の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項46】
配列番号４を含む約２ｍｇ／ｍＬの前記ペプチドを含む、請求項３８～４４の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項47】
配列番号４を含む約５ｍｇ／ｍＬの前記ペプチドを含む、請求項３８～４４の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項48】
前記組成物は、液体である、請求項１～４７の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項49】
前記組成物は、非経口投与用である、請求項１～４８の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項50】
前記組成物は、皮下投与用である、請求項１～４９の何れか一項に記載の医薬組成物。
【請求項51】
請求項１～５０の何れか一項に記載の医薬組成物を含むシリンジ、バイアル又はペンであって、任意選択的に、複数回用量シリンジ、バイアル又はペンである、シリンジ、バイアル又はペン。
【請求項52】
非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）又は非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を治療する方法であって、それを必要とするヒト対象に請求項１～５０の何れか一項に記載の医薬組成物を投与する工程を含む方法。
【請求項53】
肝臓脂肪を低減させる方法であって、それを必要とするヒト対象に請求項１～５０の何れか一項に記載の医薬組成物を投与する工程を含む方法。
【請求項54】
２型真性糖尿病を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、請求項１～５０の何れか一項に記載の医薬組成物を投与する工程を含む方法。
【請求項55】
前記ペプチドは、毎日投与され、任意選択的に、前記ペプチドは、１日１回投与される、請求項５２～５４の何れか一項に記載の方法。
【請求項56】
前記ペプチドは、注射によって投与され、任意選択的に、前記注射は、皮下である、請求項５２～５５の何れか一項に記載の方法。
【請求項57】
前記投与は、食事及び運動を補助するものである、請求項５２～５６の何れか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
電子的手段によって提出された配列表の参照
本願とともに提出したＡＳＣＩＩテキストファイルにおいて電子提出した配列リスト（名称ＧＬＰＧＧ－３００－ＷＯ－ＰＣＴ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ；サイズ：１，８４０バイト；及び作成日：２０２０年６月２２日）の内容は、その全体において参照により本明細書中に組み込まれる。
本願とともに提出したＡＳＣＩＩテキストファイルにおいて電子提出した配列リスト（名称ＧＬＰＧＧ－３００－ＷＯ－ＰＣＴ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ；サイズ：１，８４０バイト；及び作成日：２０２０年６月２２日）の内容は、その全体において参照により本明細書中に組み込まれる。
【0002】
本開示は、グルカゴン及びＧＬＰ－１コアゴニストペプチドを投与するための医薬組成物及びそれを投与する方法に関する。
【背景技術】
【0003】
肥満は、世界規模で主要な、増大し続ける健康問題である。肥満は、心血管疾患、腎臓病、高血圧、発作、不妊、呼吸不全及び２型糖尿病等の生命を脅かす多くの疾患に関連している。
【0004】
グルカゴン及びグルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）は、１５８アミノ酸前駆体ポリペプチドであるプレプログルカゴンに由来し、これは、様々な組織でプロセシングされて、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）、グルカゴン様ペプチド－２（ＧＬＰ－２）及びオキシントモジュリン（ＯＸＭ）等、幾つかの異なるプログルカゴン由来のペプチドを形成するが、これらは、グルコースホメオスタシス、インスリン分泌、胃内容排出及び腸成長並びに食物摂取の制御等の多様な生理学的機能に関与する。グルカゴンは、プログルカゴンのアミノ酸３３～６１（プレプログルカゴンの５３～８１）に対応する２９アミノ酸ペプチドであるのに対し、ＧＬＰ－１は、プログルカゴンのアミノ酸７２～１０８（プレプログルカゴンの９２～１２８）に対応する３７アミノ酸ペプチドとして生成される。
【0005】
グルカゴンは、膵臓により生成され、グルカゴン受容体（「ｇｌｕｃＲ」）と相互作用する。グルカゴンは、肝臓内で作用して、糖新生とグリコーゲン分解によって血糖を高める。血糖が下がり始めると、グルカゴンは、グリコーゲンを分解し、グルコースを放出するように肝臓にシグナルを送り、血糖値を通常のレベルへと上昇させる。
【0006】
ＧＬＰ－１は、グルカゴンと比較して異なる生物活性を有する。ＧＬＰ－１は、消化管内Ｌ細胞（ｇｕｔ Ｌ ｃｅｌｌｓ）から分泌され、ＧＬＰ－１受容体に結合する。その活性には、インスリン合成及び分泌の刺激、グルカゴン分泌の阻害及び食物摂取の阻害が含まれる。ＧＬＰ－１（７～３６）アミド又はＧＬＰ－１（７～３７）酸は、ＧＬＰ－１受容体で本質的に同等の活性を示すＧＬＰ－１の生物活性の形態である。
【0007】
グルカゴン及びＧＬＰ－１はどちらも、それぞれの各受容体でアゴニストとして作用し、体重減少に有効であることが証明されている。所定のＧＬＰ－１類似体は、販売されているか、又は肥満の治療のために開発中であり、例えば、Ｌｉｒａｇｌｕｔｉｄｅ（Ｎｏｖｏ ＮｏｒｄｉｓｋからのＶＩＣＴＯＺＡ（登録商標））及びＥｘｅｎａｔｉｄｅ（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ／ＡｍｙｌｉｎからのＢｙｅｔｔａ（登録商標））等がある。グルカゴン／ＧＬＰ－１アゴニストペプチドは、特許文献１にも開示されている。
【0008】
幾つかの療法は、血糖管理のために利用可能であるが、これまでのところ実質的な体重減少を達成するものは皆無であり、患者にとって重要な必要は未だ満たされていないままである。５０％の患者は、血糖管理のための経口単剤療法（通常、メトホルミンを用いる）から１０年以内にインスリン療法の開始へと進行し、多くの場合、インスリン療法を開始する前に複数の経口併用療法を採用する。インスリンの使用は、体重増加を悪化させ、これはインスリン療法の開始後の１年目で６キログラム（ｋｇ）もの増加となり得る。この体重増加は、インスリン抵抗性の増大を招く恐れがあり、これは、高血圧、脂質異常症及び主要有害心血管事象のリスク増大に関連する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0009】
【特許文献1】国際公開第２０１４／０９１３１６号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0010】
インスリン抵抗性の低減に関して、有意な体重減少（＞５％）が、インスリン抵抗性を低減するための最適な介入であるが、これは、現時点で、集中的な食事及びライフスタイル介入並びに／又は肥満手術によってしか確実に達成することができない。ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドを投与するための医薬組成物が依然として必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【0011】
ＭＥＤＩ０３８２は、Ｃ１６脂肪酸（パルミチン酸）を含む３０アミノ酸を含有する合成ペプチドである。ＭＥＤＩ０３８２は、グルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）及びグルカゴン受容体の共作動性活性の両方を結びつける。ＧＬＰ－１及びグルカゴン活性の組み合わせは、大きな体重減少を誘発し、血糖管理及び脂質プロファイルにおける改善をもたらし得る。デュアルアゴニスト応答を引き出すために、全ペプチドを安全且つ有効に作成する所定のアミノ酸を構造的に配列した。この配列は、製剤の安定性に対する挑戦課題を生じさせた。構造的障害に加えて、保存剤の添加は、溶液安定性への追加の制約を導入した。保存剤は、患者の便宜性のための複数回用量製剤としてＭＥＤＩ０３８２を製剤化するために含められた。安全性を維持しながら製剤安定性を支持する好適な溶液条件を同定するために広範な製剤開発を実施した。溶液のｐＨ、バッファー濃度及び保存剤を選択して、複数回用量製剤を生成した。
【0012】
ＭＥＤＩ０３８２複数回用量製剤は、有益にも２種の異なる薬物製品の提示を可能にするので、患者はＭＥＤＩ０３８２を１ｍｇ／ｍＬ（「滴定用量」）で使用する治療を開始し、５ｍｇ／ｍＬ（「維持用量」）に切り換えることができる。維持用量の前の滴定用量の使用は、副作用を低減することができる。
【0013】
より高次の会合体を回避し、長期（例えば、２年間の）安定性を達成する組成物を達成するための本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物。
【0014】
本明細書では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を投与するための医薬組成物が提供される。
【0015】
所定の実施形態では、医薬組成物は、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含むペプチドを含み、組成物のｐＨは、約８．１である。
【0016】
所定の実施形態では、医薬組成物は、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含むペプチド及びソルビトールを含む。
【0017】
所定の実施形態では、医薬組成物は、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含むペプチド及びメタ－クレゾールを含む。
【0018】
所定の実施形態では、組成物のｐＨは、少なくとも７．９である。所定の実施形態では、組成物のｐＨは、約７．９～約８．４である。所定の実施形態では、組成物のｐＨは、約８．１である。
【0019】
所定の実施形態では、組成物は、ｐＨ調整剤を含む。所定の実施形態では、組成物は、水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、組成物は、組成物のｐＨを少なくとも７．９にさせるために十分な濃度で水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、組成物は、組成物のｐＨを約７．９～約８．４にさせるために十分な濃度で水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、組成物は、組成物のｐＨを約８．１にさせるために十分な濃度で水酸化ナトリウムを含む。
【0020】
所定の実施形態では、組成物は、等張化剤を含む。所定の実施形態では、等張化剤は、ソルビトール、マンニトール又はプロピレングリコールである。所定の実施形態では、組成物は、ソルビトールを含む。所定の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約１９０ｍＭ～約２５０ｍＭである。所定の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約２２０ｍＭである。所定の実施形態では、ソルビトールの濃度は、２２０．３ｍＭである。所定の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約３５ｍｇ／ｍＬ～約４５ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約４０ｍｇ／ｍＬ～約４１ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、ソルビトールの濃度は、４０．１３ｍｇ／ｍＬである。
【0021】
所定の実施形態では、組成物は、抗菌剤を含む。所定の実施形態では、抗菌剤は、メタ－クレゾール又はフェノールである。所定の実施形態では、組成物は、メタ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、メタ－クレゾールの濃度は、約０．２７重量／体積％～約０．４５重量／体積％である。所定の実施形態では、メタ－クレゾールの濃度は、約０．３１重量／体積％である。所定の実施形態では、メタ－クレゾールの濃度は、約２５ｍＭ～約３０ｍＭである。所定の実施形態では、メタ－クレゾールの濃度は、約２８．６ｍＭである。所定の実施形態では、メタ－クレゾールの濃度は、約０．４重量／体積％である。所定の実施形態では、メタ－クレゾールの濃度は、約２．７ｍｇ／ｍＬ～約４．５ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、メタ－クレゾールの濃度は、約３．１ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、メタ－クレゾールの濃度は、約４ｍｇ／ｍＬである。
【0022】
所定の実施形態では、組成物は、バッファーを含む。所定の実施形態では、バッファーは、リン酸ナトリウム又はＴＲＩＳである。
【0023】
所定の実施形態では、組成物は、リン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、約５ｍＭ～約２５ｍＭである。
【0024】
所定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、約２０ｍＭである。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、２０ｍＭである。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、２０．１ｍＭである。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。所定の実施形態では、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物の濃度は約１ｍＭであり、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物の濃度は約１９ｍＭである。所定の実施形態では、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物の濃度は１ｍＭであり、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物の濃度は１９ｍＭである。所定の実施形態では、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物の濃度は１ｍＭであり、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物の濃度は１９．１ｍＭである。
【0025】
所定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、約１０ｍＭである。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物である。
【0026】
所定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、約１ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、約５．２５ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。所定の実施形態では、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物の濃度は約０．１３ｍｇ／ｍＬであり、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物の濃度は約５．１２ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムの濃度は、約２．６８ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物である。
【0027】
所定の実施形態では、医薬組成物は、リン酸ナトリウムを含んでいない。所定の実施形態では、医薬組成物は、リシン、トレハロース、塩化マグネシウム、ヒスチジン、アルギニン及び／又はグルタミン酸を含んでいない。
【0028】
所定の実施形態では、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含むペプチドの濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含むペプチドの濃度は、約１ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含むペプチドの濃度は、約２ｍｇ／ｍＬである。所定の実施形態では、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含むペプチドの濃度は、約５ｍｇ／ｍＬである。
【0029】
所定の実施形態では、医薬組成物は、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含む約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬのペプチド、約１９０ｍＭ～約２５０ｍＭのソルビトール、約５ｍＭ～約２５ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．２７重量／体積％～約０．４５重量／体積％のメタ－クレゾールを含み、医薬組成物のｐＨは、約７．９～約８．４である。
【0030】
所定の実施形態では、医薬組成物は、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含む約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬ（例えば、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ若しくは約５ｍｇ／ｍＬ）のペプチド、約２２０．３ｍＭのソルビトール、約２０．１ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．３１重量／体積％のメタ－クレゾールを含み、医薬組成物のｐＨは、約８．１である。所定の実施形態では、医薬組成物は、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含む約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬ（例えば、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ若しくは約５ｍｇ／ｍＬ）のペプチド、約２２０．３ｍＭのソルビトール、約２０ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．３１重量／体積％のメタ－クレゾールを含み、医薬組成物のｐＨは、約８．１である。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。
【0031】
所定の実施形態では、医薬組成物は、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含む約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬ（例えば、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ若しくは約５ｍｇ／ｍＬ）のペプチド、約２２０．３ｍＭのソルビトール、約１０ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．３１重量／体積％のメタ－クレゾールを含み、医薬組成物のｐＨは、約８．１である。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物である。
【0032】
所定の実施形態では、医薬組成物は、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含む約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬ（例えば、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ若しくは約５ｍｇ／ｍＬ）のペプチド、約２２０ｍＭのソルビトール、約２０ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．３１重量／体積％のメタ－クレゾールを含み、医薬組成物のｐＨは、約８．１である。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。
【0033】
所定の実施形態では、医薬組成物は、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含む約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬ（例えば、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ若しくは約５ｍｇ／ｍＬ）のペプチド、約２２０ｍＭのソルビトール、約２０ｍＭのリン酸ナトリウム及び約０．４重量／体積％のメタ－クレゾールを含み、医薬組成物のｐＨは、約８．１である。
【0034】
所定の実施形態では、組成物は、水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。所定の実施形態では、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物対リン酸ナトリウム二塩基性七水和物の比率は、約０．５：１９．５である。
【0035】
所定の実施形態では、組成物は、配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）を含む約０．０５ｍｇ～約０．５ｍｇのペプチドを含む。所定の実施形態では、組成物は、約０．３ｍｇの配列番号４（ＭＥＤＩ０３８２）のペプチドを含む。
【0036】
所定の実施形態では、組成物は、液体である。所定の実施形態では、組成物は、非経口投与のためである。所定の実施形態では、組成物は、皮下投与のためである。
【0037】
所定の実施形態では、バイアル、シリンジ又はペンは、本明細書に提供した医薬組成物を含む。所定の実施形態では、バイアル、シリンジ又はペンは、複数回用量バイアル、シリンジ又はペンである。
【0038】
所定の実施形態では、体重を低減させる方法は、それを必要とするヒト対象に本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。
【0039】
所定の実施形態では、体脂肪を低減させる方法は、それを必要とするヒト対象に本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。
【0040】
所定の実施形態では、肥満を治療する方法は、それを必要とするヒト対象に本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。
【0041】
所定の実施形態では、過体重により引き起こされるか又は過体重を特徴とする疾患若しくは状態を治療若しくは予防する方法は、それを必要とするヒト対象に本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。
【0042】
所定の実施形態では、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）を治療する方法は、それを必要とするヒト対象に本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。所定の実施形態では、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を治療する方法は、それを必要とするヒト対象に本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。
【0043】
所定の実施形態では、肝臓脂肪を低減させる方法は、それを必要とするヒト対象に本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。
【0044】
所定の実施形態では、脂質酸化を増加させる方法は、それを必要とするヒト対象に本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。
【0045】
所定の実施形態では、食物摂取量を低減させる方法は、それを必要とするヒト対象に本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。
【0046】
所定の実施形態では、血漿グルコースを低減させる方法は、それを必要とするヒト対象に本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。
【0047】
本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、対象は糖尿病を有する。所定の実施形態では、糖尿病は、２型真性糖尿病である。
【0048】
所定の実施形態では、２型真性糖尿病を治療する方法は、それを必要とするヒトに、本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む。
【0049】
所定の実施形態では、２型真性糖尿病を有するヒト対象の血糖管理を改善する方法は、本明細書に提供した医薬組成物をその対象に投与する工程を含む。
【0050】
本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、投与は、体重を低減させる。本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、投与は、肥満を治療する。本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、投与は、体脂肪を低減させる。
【0051】
本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、約０．０５ｍｇ～約０．３ｍｇのペプチドが投与される。本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、約０．０５ｍｇ、約０．１ｍｇ、約０．１５ｍｇ、約０．２ｍｇ、約０．２５ｍｇ又は約０．３ｍｇのペプチドが投与される。
【0052】
本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、ペプチドは毎日投与される。本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、ペプチドは１日１回投与される。本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、ペプチドは、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間又は少なくとも４週間に渡り投与される。
【0053】
本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、ペプチドは、注射によって投与される。本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、投与は、皮下である。
【0054】
本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、対象は、２７ｋｇ／ｍ２～４０ｋｇ／ｍ２のボディマスインデックス（ＢＭＩ）を有する。本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２～３９．９ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、対象は、少なくとも４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、対象は、過体重である。本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、対象は、肥満である。
【0055】
本明細書に提供した方法の所定の実施形態では、投与は、食事及び運動を補助するものである。
【図面の簡単な説明】
【0056】
【図1】ＭＥＤＩ０３８２（配列番号４）の化学構造、化学式（Ｃ１６７Ｈ２５２Ｎ４２Ｏ５５）及び分子量（３７２８．０９）を示す図である。
【図2】アミノ酸、クエン酸塩及び塩化マグネシウムの存在下におけるチオフラビンＴ結合（ＴｈＴ）アッセイの結果を示す図である（実施例１１を参照されたい）。
【図3】トレハロース、プロピレングリコール、ソルビトール、スクロース、マンニトール、リシン及びクエン酸ナトリウムの存在下におけるＴｈＴアッセイの結果を示す図である（実施例１１を参照されたい）。
【図4】４０℃で保存された様々なＭＥＤＩ０３８２組成物の純度レベルを示す図である（実施例１１を参照されたい）。
【図5】ＭＥＤＩ０３８２の純度及びフィブリル化にｍ－クレゾール及びフェノールが及ぼす作用を示す図である（実施例１３を参照されたい）。
【図6】ある範囲のｐＨ、フェノール、グリセロール及びソルビトールに渡る流体力学半径（Ｒ（ｈ））及びフィブリル化（遅延時間）を示す図である（実施例１３を参照されたい）。
【図7】６カ月に渡る２５℃で７種の異なる組成物中のＭＥＤＩ０３８２の純度を示す図である（実施例１４を参照されたい）。
【図8】総純度（ＤＳ）、不純物（酸化、異性体１５及び異性体９）及び総不純物に及ぼす７種のＭＥＤＩ０３８２組成物中の成分の影響に関する予測プロファイラーの推定値を示す図である（実施例１４を参照されたい）。
【図9】１２週間に渡る５℃及び２５℃での１ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２の化学的安定性に液体フェノールが及ぼす作用を示す図である（実施例１７を参照されたい）。
【図10】１２週間に渡る５℃及び２５℃での１ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２の化学的安定性に固体フェノールが及ぼす作用を示す図である（実施例１７を参照されたい）。
【図11】１２週間に渡る５℃及び２５℃での２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２の化学的安定性に固体フェノールが及ぼす作用を示す図である（実施例１７を参照されたい）。
【図12】１２週間に渡る５℃及び２５℃での１ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２の化学的安定性にｍ－クレゾール（Ｓｉｇｍａ）が及ぼす作用を示す図である（実施例１７を参照されたい）。
【図13】１２週間に渡る５℃及び２５℃での１ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２の化学的安定性にｍ－クレゾール（Ｈｅｄｉｎｇｅｒ）が及ぼす作用を示す図である（実施例１７を参照されたい）。
【図14A-14C】高分子量（ＨＷＭ）ＭＥＤＩ０３８２不純物の形成にリン酸ナトリウム濃度及び塩のタイプが及ぼす作用を示す図である（実施例１９を参照されたい）。
【図15】４０℃でのＨＭＷ不純物レベルにバッファーのタイプが及ぼす影響（ＳＥＣの結果）を示す図である（実施例１９を参照されたい）。
【図16A】ＭＥＤＩ０３８２の５ｍｇ／ｍＬの製剤が１ｍｇ／ｍＬ又は２ｍｇ／ｍＬの製剤より低レベルの総不純物を有することを示す図である（実施例２０を参照されたい）。
【図16B】４０℃、２５℃及び５℃でのＭＥＤＩ０３８２の５ｍｇ／ｍＬ及び１ｍｇ／ｍＬの製剤中の高分子量（ＨＭＷ）不純物を示す図である（実施例２０を参照されたい）。
【図17】ＭＥＤＩ０３８２の１ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬ又は５ｍｇ／ｍＬの製剤中でＦＡＣＳによって同定される有意なフィブリル化陽性粒子がないことを示す図である（実施例２０を参照されたい）。
【図18】ＭＥＤＩ０３８２の１ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬの製剤中のフィブリルのＴＥＭ画像を示す図である（実施例２０を参照されたい）。
【図19】４０℃、２５℃及び５℃でのＭＥＤＩ０３８２の５ｍｇ／ｍＬ及び１ｍｇ／ｍＬの製剤中の総不純物を示す図である（実施例２１を参照されたい）。
【図20】４０℃、２５℃及び５℃でのＭＥＤＩ０３８２の５ｍｇ／ｍＬ及び１ｍｇ／ｍＬの製剤中の高分子量（ＨＭＷ）不純物を示す図である（実施例２１を参照されたい）。
【図21】ＦＡＣＳによって観察される５℃でのＴｈＴ陽性粒子を示す図である（実施例２１を参照されたい）。
【図22】ＭＥＤＩ０３８２の１ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬの製剤中のフィブリルのＴＥＭ画像を示す図である（実施例２１を参照されたい）。
【図23】酸素置換を用いて配合したＭＥＤＩ０３８２に２５℃（左）、３２℃（中央）及び４０℃（右）での安定性試験の結果を示す図である。ＤＯ＝溶存酸素。モデル系は、標準大気条件下において配合されたＭＥＤＩ０３８２を用いた安定性試験データから開発されたアレニウスモデルを指す（実施例２３を参照されたい）。
【図24】標準大気条件下において配合されたＭＥＤＩ０３８２のアレニウスモデルを用いて５％の溶存酸素（ＤＯ）及び２０％のＤＯ中で配合されたＭＥＤＩ０３８２を用いて得られた安定性データの比較を示す図である（実施例２３を参照されたい）。
【発明を実施するための形態】
【0057】
本明細書で示し、説明した特定の実施は実施例であり、如何なる形であれ他の方法で本出願の範囲を限定することを意図するものではないことを理解されたい。
【0058】
本明細書で言及した公開特許、特許出願、ウェブサイト、会社名及び科学文献は、それぞれが参照により組み込まれることが具体的且つ個別に示されるのと同程度に、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書で引用した任意の参考文献と本明細書の特定の教示との間に矛盾があれば、後者を優先して解決されるものとする。同様に、当技術分野で理解される単語又は語句の定義と、本明細書で具体的に教示する単語又は語句の定義との間の矛盾は、後者を優先して解決されるものとする。
【0059】
Ｉ．定義
本明細書中で使用する単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、内容が明確に他のことを指示しない限り、具体的に、それらが指す用語の複数形も包含する。従って、用語「１つの」（又は「１つの（ａｎ）」）、「１つ以上の」及び「少なくとも１つの」は、本明細書では互換的に使用され得る。
本明細書中で使用する単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、内容が明確に他のことを指示しない限り、具体的に、それらが指す用語の複数形も包含する。従って、用語「１つの」（又は「１つの（ａｎ）」）、「１つ以上の」及び「少なくとも１つの」は、本明細書では互換的に使用され得る。
【0060】
用語「約」は、本明細書では、おおよそ、～の辺り、大体又はおよそを意味するために使用される。「約」という用語が数値範囲とともに使用される場合、記載される数値の上下の限界を拡張することによってその範囲が変更される。一般に、特に言及されない限り「約」という用語は、２０％の変動で述べられる値を上回る、及び下回る数値を修飾するために本明細書中で使用される。
【0061】
更に、本明細書で使用する「及び／又は」は、他方の有無にかかわらず、２つの指定された特徴又は成分のそれぞれの特定の開示と見なされるべきである。従って本明細書において、「Ａ及び／又はＢ」等の語句で使用される「及び／又は」という用語は、「Ａ及びＢ」、「Ａ又はＢ」、「Ａ」（単独）並びに「Ｂ」（単独）を含むことが意図されている。同様に、用語「及び／又は」は、「Ａ、Ｂ及び／又はＣ」等の語句で用いられるとき、以下の態様：Ａ、Ｂ及びＣ；Ａ、Ｂ又はＣ；Ａ又はＣ；Ａ又はＢ；Ｂ又はＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；並びにＣ（単独）のそれぞれを包含することが意図される。
【0062】
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という語とともに態様が本明細書中に記載されるときは如何なる場合も、「から成る（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」及び／又は「基本的にから成る（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という用語で記載される類似の態様も提供されることを理解されたい。特定のアミノ酸配列を「含む」ペプチドは、当該アミノ酸配列を含むペプチドを指し、ここで、ペプチドは、別のアミノ酸又は当該アミノ酸配列に対する他の修飾を含んでいてもよいし、又は含んでいなくてもよい。特定のアミノ酸配列「から成る」ペプチドは、当該アミノ酸配列のみを含み、別のアミノ酸又は当該アミノ酸配列に対する他の修飾を含まないペプチドを指す。特定のアミノ酸配列「から成る」アミノ酸配列を「含む」ペプチドは、当該アミノ酸配列を含み、別のアミノ酸を含まないペプチドを指すが；ペプチドは、アミノ酸配列（例えば、アシル部分又はパルミトイル部分）に対する他の修飾を含み得る。
【0063】
本明細書中で使用する技術用語及び科学用語は、別段の定めがない限り、本願が属する技術分野の当業者により一般的に理解される意味を有する。本明細書中では、当業者にとって公知の様々な方法及び材料について言及する。ペプチド合成の一般的原理を説明する標準的な参考書としては、Ｗ．Ｃ．Ｃｈａｎ及びＰ．Ｄ．Ｗｈｉｔｅ．，“Ｆｍｏｃ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ”，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ（２００４）が挙げられる。更に、Ｃｏｎｃｉｓｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｕｏ，Ｐｅｉ－Ｓｈｏｗ，２ｎｄ ｅｄ．，２００２，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ；Ｔｈｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，３ｒｄ ｅｄ．，１９９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；及びｔｈｅ Ｏｘｆｏｒｄ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ Ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｒｅｖｉｓｅｄ，２０００，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓは、本開示で使用される用語の多くの一般的な辞書を当業者に提供する。
【0064】
単位、接頭辞及び記号は、それらの国際単位系（ＳＩ）承認形態で示される。数値範囲は、範囲を定義する数を含む。別段の指示がない限り、アミノ酸配列は、アミノからカルボキシ方向に向けて左から右に記述される。本明細書に提供した見出しは本開示の様々な態様の制限ではなく、これは、全体として本明細書を参照することによって得られる。従って、直後に定義される用語は、本明細書を全体として参照することによってより詳細に定義される。
【0065】
用語「ペプチド」、「ポリペプチド」、「タンパク質」及び「タンパク質断片」は、２個以上のアミノ酸残基のポリマーを指すために本明細書中で互換的に使用される。これらの用語は、１個以上のアミノ酸残基が、対応する天然型アミノ酸の人工的な化学模倣物であるアミノ酸ポリマーに、並びに天然型アミノ酸ポリマー及び非天然型アミノ酸ポリマーに適用される。「ペプチド」という用語は、翻訳後又は合成後修飾、例えばグリコシル化、アセチル化、リン酸化、アミド化、既知の保護／ブロッキング基による誘導体化、タンパク質分解性切断又は非天然のアミノ酸による修飾が起こったペプチドを更に含む。「ペプチド」は、半減期を延長させるためのＦｃドメイン又はアルブミンドメイン等のさらなる構成成分を含む融合ペプチドの一部であり得る。本明細書に記載したペプチドは、多数の異なる方法で誘導体化することもできる。
【0066】
用語「アミノ酸」は、天然型アミノ酸及び合成アミノ酸、並びに天然型アミノ酸と同様に機能するアミノ酸類似体及びアミノ酸模倣物を指す。天然型アミノ酸は、遺伝暗号によってコードされるもの、並びに後に修飾されるアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、γ－カルボキシグルタミン酸及びＯ－ホスホセリンである。アミノ酸類似体は、天然型アミノ酸と同じ基本的化学構造、例えば、水素、カルボキシル基、アミノ基及びＲ基に結合するα炭素を有する化合物、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムを指す。このような類似体は、修飾Ｒ基（例えば、ノルロイシン）又は修飾ペプチド骨格を有し得るが、天然型アミノ酸と同じ基本的化学構造を保持している。アミノ酸模倣物は、アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、天然型アミノ酸と同様に機能する化学化合物を指す。用語「アミノ酸」及び「アミノ酸残基」は、全体を通して互換的に使用される。
【0067】
用語「単離された」は、ペプチド又は核酸が、一般に本開示に従っているであろう状態を指す。単離ペプチド及び単離核酸は、それらの天然の環境、又はこのような調製がｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｉｎ ｖｉｖｏで実施される組み換えＤＮＡ技術による場合には、それらが調製される環境（例えば、細胞培養）でそれらが一緒に見られる他のペプチド又は核酸等、それらが天然に結び付いている物質について不含であるか又は実質的に不含である。ペプチド及び核酸は、希釈剤又はアジュバントとともに製剤化され得、更に実際的な目的のためには単離され得、例えば本ペプチドは、一般的に、免疫アッセイでの使用のためのマイクロタイタープレートをコーティングするために使用される場合、ゼラチン若しくは他の担体と混合されるか、又は診断若しくは治療で使用される場合、薬学的に許容される担体若しくは希釈剤と混合されるであろう。
【0068】
「組み換え」ペプチドは、組み換えＤＮＡ技術を介して生成されたペプチドを指す。宿主細胞中で発現した組み換え生成ペプチドは、分離されているか、分画化されているか又は何らかの適切な技術により部分的若しくは実質的に精製されている天然ポリペプチド又は組み換えポリペプチドであるので、本開示の目的のために単離されているとみなされる。
【0069】
用語「断片」、「類似体」、「誘導体」又は「変異体」は、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドを指す場合、少なくとも一部の要望される活性、例えば、グルカゴン及び／又はＧＬＰ－１受容体への結合を保持する任意のペプチドを含む。本明細書に記載したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドの断片は、発現、精製及び／又は対象への投与の際に、望ましい特性を呈示するタンパク質分解断片、欠失断片を含む。
【0070】
本明細書で使用する用語「変異体」は、アミノ酸の置換、欠失、挿入及び／又は修飾のために、列挙したペプチドとは異なるペプチドを指す。変異体は、当技術分野で公知の変異誘発技術を用いて作製することができる。変異体は更に、又はその代わりに、他の修飾を含み得る。例えば、ペプチドは、例えば、半減期を延長する、溶解性を高める、又は安定性を高めるために、異種アミノ酸配列又は他の部分にコンジュゲート又は結合する、例えば、融合することができる。本明細書に提供したペプチドにコンジュゲート又は結合する部分の例としては、限定されるものではないが、アルブミン、免疫グロブリンＦｃ領域及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等が挙げられる。ペプチドは、ペプチド（例えば、６－Ｈｉｓ）の合成、精製若しくは同定を容易にするため、又はポリペプチドの固体支持体への結合を促進するために、リンカー又は他の配列に結合させてコンジュゲートする、又は作り出すこともできる。
【0071】
用語「組成物」又は「医薬組成物」は、治療を必要とする対象、例えば、肥満を治療中のヒト対象への投与のための、例えば、薬学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤と一緒に、本明細書に記載のＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドを含有する組成物を指す。
【0072】
用語「薬学的に許容される」は、健全な医学的判断の範囲内で、合理的なリスク／ベネフィット比と釣り合った、過剰な毒性又は他の合併症がない、ヒト及び動物の組織との接触に適切である組成物を指す。
【0073】
「薬学的に許容される担体」という用語は、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドの生物活性の有効性を妨害しない１つ以上の無毒性物質を指す。
【0074】
「有効量」は、単一用量又はシリーズの一部としての何れかで、対象に投与した場合、治療、例えば、肥満の治療に有効な、本明細書に記載するＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドの量である。ある量は、例えば、その投与により、体重減少又は体重維持（例えば、体重増加の予防）、体脂肪の減少、低血糖の予防若しくは調節、高血糖の予防若しくは調節、インスリン合成の促進又は食物摂取の抑制のうち１つ以上が達成されるとき、有効である。この量は、治療を受ける全ての対象について一定量であってもよいし、又は治療しようとする対象の体重、健康状態及び体調、要望される体重減少又は体重維持の程度、ペプチドの製剤化、医学的状況の専門家による評価並びに他の関連因子に応じて変動し得る。
【0075】
用語「対象」は、本明細書に記載するＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドを用いた治療を必要とする任意の対象、特に哺乳動物の対象を意味する。哺乳動物対象としては、ヒト、イヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、マウス、ウマ、ウシ、クマ、乳牛、類人猿、サル、オランウータン及びチンパンジー等が挙げられるが限定されない。一実施形態では、対象はヒト対象である。
【0076】
本明細書で用いる「それを必要とする対象」は、治療することが望ましい個体、例えば、体重若しくは体脂肪減少、体重若しくは体脂肪維持を促進すること、又は指定された期間に渡って体重増加を予防若しくは最小限にすることが望ましい肥満の対象、又は肥満になり易い対象を指す。
【0077】
「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」又は「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」又は「治療する（ｔｏ ｔｒｅａｔ）」等の用語は、診断された病的状態又は障害を治癒させる、及び／又はその進行を停止させる治療的手段を指す。「予防する（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」等の用語は、標的とされる病的状態又は障害の発現を予防及び／又は緩徐にする予防的若しくは防御的手段を指す。従って、治療を必要とする者としては、疾患又は状態が既にある者が挙げられる。予防を必要とする者としては、疾患若しくは状態を有する傾向がある者及び疾患若しくは状態が予防されるべきである者が挙げられる。例えば過体重により引き起こされるか又は過体重を特徴とする疾患又は状態を有する「患者を治療する」という句は、対象がその疾患又は状態により不快感に苦しむ及び／又は機能変化に苦しむことがなくなる程度まで、疾患又は状態の重症度を軽減することを指す。過体重により引き起こされるか又は過体重を特徴とする疾患又は状態を「予防する」という句は、疾患若しくは状態に対する可能性を低下させること及び／又は疾患又は状態の発症を減少させること（例えば未治療患者と比較した場合の相対的な発生低下）を指す。
【0078】
「重症度を軽減すること」等の用語は、診断された病的状態又は障害の症状を緩徐にするか又は減少させる治療的手段を指す。例えば、過体重により引き起こされるか又は過体重を特徴とする疾患又は状態の「重症度を低減すること」という句は、疾患若しくは状態の重症度を低減すること（例えば、非治療患者と比較して体重の減少、又は血糖管理の向上）を指す。
【0079】
本明細書で用いる「ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド」は、アッセイ１の条件下で、グルカゴン受容体において、天然グルカゴンと比べ、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％以上の活性を呈示し、且つアッセイ１の条件下で、ＧＬＰ－１受容体において、天然ＧＬＰ－１と比べ、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％以上の活性を呈示するキメラペプチドである。
【0080】
本明細書で使用する用語「天然グルカゴン」は、ＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴ（配列番号１）の配列を含む、天然型グルカゴン、例えば、ヒトグルカゴンを指す。用語「天然ＧＬＰ－１」は、天然型ＧＬＰ－１、例えば、ヒトＧＬＰ－１を指し、例えば、ＧＬＰ－１（７～３６）アミド（ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲ；配列番号２）、ＧＬＰ－１（７～３７）酸（ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＧ；配列番号３）又はこれら２種の化合物の混合物を包含する総称である。本明細書で使用する「グルカゴン」又は「ＧＬＰ－１」との一般的参照は、それ以上の呼称がない場合、天然ヒトグルカゴン又は天然ＧＬＰ－１をそれぞれ意味することが意図されている。他に指示のない限り、「グルカゴン」は、ヒトグルカゴンを指し、更に、「ＧＬＰ－１」は、ヒトＧＬＰ－１を指す。
【0081】
ＩＩ．ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド
本明細書では、グルカゴン受容体とＧＬＰ－１受容体の両方に結合するペプチドが提供される。ＭＥＤＩ０３８２（Ｇ９３３；コタデュチド（ｃｏｔａｄｕｔｉｄｅ））等の代表的なペプチドは、それぞれ、その全体において参照により本明細書中に組み込まれる国際公開第２０１４／０９１３１６号パンフレット及び同第２０１７／１５３５７５号パンフレットにおいて提供されている。所定の実施形態では、ペプチドはＭＥＤＩ０３８２、即ちＨＳＱＧＴＦＴＳＤＸ１０ＳＥＹＬＤＳＥＲＡＲＤＦＶＡＷＬＥＡＧＧ酸（式中、Ｘ１０＝γグルタミン酸リンカー（即ち、Ｋ（ｇＥ－パーム））（配列番号４）を通して、ε窒素にコンジュゲート化したパルミトイル基を備えるリシンである）の配列を備える３０アミノ酸直鎖ペプチドである。所定の実施形態では、本明細書に提供したペプチドは、グルカゴン及びＧＬＰ－１活性のコアゴニストである。このようなペプチドは、本明細書では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドと呼ぶ。本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、体重減少を促進し、体重増加を予防するか、又は望ましい体重を維持する上で好都合な比でＧＬＰ－１及びグルカゴン活性を有し、且つ最適化された可溶性、製剤化性及び安定性を備える。所定の実施形態では、本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、ヒトＧＬＰ１及びヒトグルカゴン受容体で活性である。所定の実施形態では、本明細書に開示したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、グルカゴン及びＧＬＰ－１受容体において望ましい力価を有し、体重減少を促進する上で望ましい相対力価を有する。
本明細書では、グルカゴン受容体とＧＬＰ－１受容体の両方に結合するペプチドが提供される。ＭＥＤＩ０３８２（Ｇ９３３；コタデュチド（ｃｏｔａｄｕｔｉｄｅ））等の代表的なペプチドは、それぞれ、その全体において参照により本明細書中に組み込まれる国際公開第２０１４／０９１３１６号パンフレット及び同第２０１７／１５３５７５号パンフレットにおいて提供されている。所定の実施形態では、ペプチドはＭＥＤＩ０３８２、即ちＨＳＱＧＴＦＴＳＤＸ１０ＳＥＹＬＤＳＥＲＡＲＤＦＶＡＷＬＥＡＧＧ酸（式中、Ｘ１０＝γグルタミン酸リンカー（即ち、Ｋ（ｇＥ－パーム））（配列番号４）を通して、ε窒素にコンジュゲート化したパルミトイル基を備えるリシンである）の配列を備える３０アミノ酸直鎖ペプチドである。所定の実施形態では、本明細書に提供したペプチドは、グルカゴン及びＧＬＰ－１活性のコアゴニストである。このようなペプチドは、本明細書では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドと呼ぶ。本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、体重減少を促進し、体重増加を予防するか、又は望ましい体重を維持する上で好都合な比でＧＬＰ－１及びグルカゴン活性を有し、且つ最適化された可溶性、製剤化性及び安定性を備える。所定の実施形態では、本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、ヒトＧＬＰ１及びヒトグルカゴン受容体で活性である。所定の実施形態では、本明細書に開示したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、グルカゴン及びＧＬＰ－１受容体において望ましい力価を有し、体重減少を促進する上で望ましい相対力価を有する。
【0082】
ＭＥＤＩ０３８２は、１２位でグルタミン酸塩残基を有し、グルカゴン及びＧＬＰ－１受容体の両方で安定した活性を維持する。対応する残基は、エキセンディン－４（エキセナチド）及びグルカゴンではリシンであり、ＧＬＰ－１ではセリンである。この残基は、受容体と接触するとは考えられないが、正から負への電荷の変化が隣接する環境を改変し得る。更に、ＭＥＤＩ０３８２は、２７位でグルタミン酸塩残基を有する。残基２７は、エキセンディン４ではリシンであり、ＧＬＰ－１（バリン）及びグルカゴン（メチオニン）では非荷電疎水性残基である。エキセンディン４のリシンは、残基Ｇｌｕ１２７及びＧｌｕ２４におけるＧＬＰ１受容体との静電気的相互作用をもたらす（Ｃ．Ｒ．Ｕｎｄｅｒｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８５ ７２３－７３０（２０１０）；Ｓ．Ｒｕｎｇｅ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８３ １１３４０－１１３４７（２００８））。２７位の電荷が負に変化すると、ＧＬＰ１Ｒ力価の損失を予想し得るのに対し、この変化は、ＭＥＤＩ０３８２におけるＧＬＰ１Ｒ活性と適合性である。
【0083】
ＭＥＤＩ０３８２は、血清アルブミンとの連関によってその半減期を延長させるために、従ってその腎クリアランスの傾向を低減させるためにパルミトイル化されている。
【0084】
上記に代わり、又はこれに加えて、例えば、半減期を延長するために、本明細書に開示のＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドを異種部分と結合することができる。異種部分は、タンパク質、ペプチド、タンパク質ドメイン、リンカー、有機ポリマー、無機ポリマー、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ビオチン、アルブミン、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、ＨＳＡ ＦｃＲｎ結合部分、抗体、抗体のドメイン、抗体断片、単鎖抗体、ドメイン抗体、アルブミン結合ドメイン、酵素、リガンド、受容体、結合ペプチド、非ＦｎＩＩＩスカフォールド、エピトープタグ、組み換えポリペプチドポリマー、サイトカイン又はこれらの部分の２つ以上の組み合わせであってよい。
【0085】
ＩＩＩ．ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドの製造方法
本開示は、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドの製造方法を提供する。本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、任意の好適な方法により製造することができる。例えば、所定の実施形態では、本明細書に記載するＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、当業者には周知の方法、例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（１９６３，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９－２１５４）により記載された固相合成法により、化学的に合成される。固相ペプチド合成は、例えば、国際公開第２０１４／０９１３１６号パンフレットの実施例１に説明されているように、標準的試薬を用いる、例えば自動合成装置によって達成することができる。
本開示は、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドの製造方法を提供する。本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、任意の好適な方法により製造することができる。例えば、所定の実施形態では、本明細書に記載するＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、当業者には周知の方法、例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（１９６３，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９－２１５４）により記載された固相合成法により、化学的に合成される。固相ペプチド合成は、例えば、国際公開第２０１４／０９１３１６号パンフレットの実施例１に説明されているように、標準的試薬を用いる、例えば自動合成装置によって達成することができる。
【0086】
又は、本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドは、当業者には周知である好都合なベクター／宿主細胞の組み合わせを用いて、組み換えにより製造することもできる。ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドを組み換えにより製造するための様々な方法が入手可能である。一般に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を適切な発現ビヒクル、例えば、挿入されたコード配列の転写及び翻訳に必要なエレメントを含有するベクターに挿入する。ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドをコードする核酸を適正なリーディングフレーム内のベクターに挿入する。次に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドを発現する好適な宿主細胞に、発現ベクターをトランスフェクトする。好適な宿主細胞としては、限定はしないが、細菌、酵母又は哺乳動物細胞が挙げられる。市販の様々な宿主発現ベクター系を用いると、本明細書に記載のＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドを発現させることができる。
【0087】
ＩＶ．医薬組成物
更には、代謝性疾患、例えば、肥満の治療のために製剤化される、有効量の本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含有する組成物、例えば、医薬組成物が提供される。
更には、代謝性疾患、例えば、肥満の治療のために製剤化される、有効量の本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含有する組成物、例えば、医薬組成物が提供される。
【0088】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、液剤である。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、非経口投与のために製剤化される。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、非経口投与のために製剤化される液体である。
【0089】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、少なくとも１種の固定用量を含有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、１～１０種の固定用量を含有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、１～６種の固定用量（例えば、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０及び６００ｍｃｇ）を含有する。
【0090】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、冷蔵条件（２℃～８℃）で少なくとも１２カ月の保存寿命を有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、冷蔵条件（２℃～８℃）で少なくとも２年の保存寿命を有する。
【0091】
所定の実施形態では、医薬組成物は、約０．５ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬのＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む。所定の実施形態では、医薬組成物は、約１ｍｇ／ｍＬのＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む。所定の実施形態では、医薬組成物は、約２ｍｇ／ｍＬのＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む。所定の実施形態では、医薬組成物は、約５ｍｇ／ｍＬのＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む。
【0092】
所定の実施形態では、医薬組成物は、約０．０５ｍｇ～約０．５ｍｇのＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む。所定の実施形態では、医薬組成物は、約０．３ｍｇのＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む。
【0093】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、少なくとも７．９のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約７．９～約８．５のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約７．９～約８．４のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約７．９～約８．３のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約７．９～約８．２のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約７．９～約８．１のｐＨを有する。
【0094】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、少なくとも８のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８～約８．５のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８～約８．４のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８～約８．３のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８～約８．２のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８．１～約８．５のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８．１～約８．４のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８．１～約８．３のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８．１～約８．２のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８．１のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８．２のｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約８．４のｐＨを有する。
【0095】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、ｐＨ調整剤を含む。幾つかの実施形態では、ｐＨ調整剤は、水酸化ナトリウムである。幾つかの実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、水酸化ナトリウムを含む。
【0096】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを少なくとも７．９にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約７．９～約８．５にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約７．９～約８．４にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約７．９～約８．３にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約７．９～約８．２にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約７．９～約８．１にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。
【0097】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを少なくとも８にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約８～約８．５にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約８～約８．４にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約８～約８．３にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約８～約８．２にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約８．１～約８．５にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約８．１～約８．４にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含むｐＨを有する。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約８．１～約８．３にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約８．１～約８．２にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、組成物のｐＨを約８．１にさせるために十分な濃度にある水酸化ナトリウムを含む。
【0098】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、等張化剤を含む。所定の実施形態では、等張化剤は、ソルビトール、マンニトール又はプロピレングリコールである。
【0099】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、ソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１９０ｍＭ～約２７０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１９０ｍＭ～約２５０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２００ｍＭ～約２５０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２１０ｍＭ～約２５０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２２０ｍＭ～約２５０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２００ｍＭ～約２４０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２１０ｍＭ～約２４０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２２０ｍＭ～約２４０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２１０ｍＭ～約２３０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２２０ｍＭ～約２３０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２００ｍＭ～約２２０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２１０ｍＭ～約２２０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２１５ｍＭ～約２２５ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２１９ｍＭ～約２２１ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２２０ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、２２０．１ｍＭ、２２０．２ｍＭ、２２０．３ｍＭ、２２０．４ｍＭ又は２２０．５ｍＭのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、２２０．３ｍＭのソルビトールを含む。
【0100】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３５ｍｇ／ｍＬ～約４５ｍｇ／ｍＬのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約４０ｍｇ／ｍＬ～約４１ｍｇ／ｍＬのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約４０ｍｇ／ｍＬ～約４０．５ｍｇ／ｍＬのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約４０．１ｍｇ／ｍＬ～約４０．２ｍｇ／ｍＬのソルビトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約４０．１３ｍｇ／ｍＬのソルビトールを含む。
【0101】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、マンニトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約５０ｍＭ～約３００ｍＭのマンニトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１００ｍＭ～約３００ｍＭのマンニトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１５０ｍＭ～約３００ｍＭのマンニトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約５０ｍＭのマンニトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１００ｍＭのマンニトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１５０ｍＭのマンニトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２００ｍＭのマンニトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２２０ｍＭのマンニトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２５０ｍＭのマンニトールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３００ｍＭのマンニトールを含む。
【0102】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、プロピレングリコールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．０５重量／体積％～約２重量／体積％のプロピレングリコールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１重量／体積％～約２重量／体積％のプロピレングリコールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１．５重量／体積％～約２重量／体積％のプロピレングリコールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１重量／体積％のプロピレングリコールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１．３５重量／体積％のプロピレングリコールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１．５重量／体積％のプロピレングリコールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１．８５重量／体積％のプロピレングリコールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２重量／体積％のプロピレングリコールを含む。
【0103】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、保存剤／抗菌剤を含む。所定の実施形態では、保存剤又は抗菌剤は、メタ－クレゾール（ｍ－クレゾール）又はフェノールである。
【0104】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、メタ－クレゾール（ｍ－クレゾール）を含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．２重量／体積％～約０．５重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、少なくとも０．２７重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．２７重量／体積％～約０．４５重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．２７重量／体積％～約０．４重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．２７重量／体積％～約０．３５重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．２８重量／体積％～約０．３４重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．２９重量／体積％～約０．３３重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．３重量／体積％～約０．３２重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．３１重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。
【0105】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、少なくとも０．３４重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．３４重量／体積％～約０．４５重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．３８重量／体積％～約０．４２重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．３９重量／体積％～約０．４１重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．４重量／体積％のｍ－クレゾールを含む。
【0106】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２．７ｍｇ／ｍＬ～約４．５ｍｇ／ｍＬのｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２ｍｇ／ｍＬ～約４ｍｇ／ｍＬのｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３ｍｇ／ｍＬ～約３．５ｍｇ／ｍＬのｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３．１ｍｇ／ｍＬのｍ－クレゾールを含む。
【0107】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬのｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３．５ｍｇ／ｍＬ～約４．５ｍｇ／ｍＬのｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約４ｍｇ／ｍＬのｍ－クレゾールを含む。
【0108】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、フェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．０５重量／体積％～約２重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．１重量／体積％～約２重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．２重量／体積％～約２重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．３重量／体積％～約２重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．４重量／体積％～約２重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．０５重量／体積％～約１重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．１重量／体積％～約１重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．２重量／体積％～約１重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．３重量／体積％～約１重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．４重量／体積％～約１重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．４重量／体積％～約０．６重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．４重量／体積％～約０．５重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．５重量／体積％～約０．６重量／体積％のフェノールを含む。
【0109】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．３５重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．４重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．４５重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．５重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．５重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．５５重量／体積％のフェノールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．５６重量／体積％のフェノールを含む。
【0110】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、バッファーを含む。所定の実施形態では、バッファーは、リン酸ナトリウム又はＴＲＩＳである。
【0111】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、リン酸ナトリウムを含む。
【0112】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、３０ｍＭまでのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約５ｍＭ～約３０ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１０ｍＭ～約３０ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約５ｍＭ～約２５ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１０ｍＭ～約２５ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１５ｍＭ～約２５ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１８ｍＭ～約２２ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約５ｍＭ～約２０ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１０ｍＭ～約２０ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１５ｍＭ～約２０ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１０ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２０ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２０．１ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約５０ｍＭのリン酸ナトリウムを含む。
【0113】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１ｍｇ／ｍＬ～約９ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１ｍｇ／ｍＬ～約８ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１ｍｇ／ｍＬ～約７ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１ｍｇ／ｍＬ～約６ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２ｍｇ／ｍＬ～約８ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２ｍｇ／ｍＬ～約６ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３ｍｇ／ｍＬ～約８ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３ｍｇ／ｍＬ～約６ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約４ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約４ｍｇ／ｍＬ～約８ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約４ｍｇ／ｍＬ～約６ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約４ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約４ｍｇ／ｍＬ～約８ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約５ｍｇ／ｍＬ～約６ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約５．２５ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウムを含む。
【0114】
所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物を含む。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。所定の実施形態では、リン酸ナトリウムは、約０．１３ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウム一塩基性一水和物及び約５．１２ｍｇ／ｍＬのリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。所定の実施形態では、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物対リン酸ナトリウム二塩基性七水和物の比率は、約０．２５：１９．５～約１：１９．５である。所定の実施形態では、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物対リン酸ナトリウム二塩基性七水和物の比率は、約０．５：１９．５である。
【0115】
所定の実施形態では、２０ｍＭのリン酸ナトリウムは、約０．５ｍＭのリン酸ナトリウム一塩基性一水和物及び約１９．５ｍＭのリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。所定の実施形態では、２０ｍＭのリン酸ナトリウムは、１ｍＭのリン酸ナトリウム一塩基性一水和物及び約１９ｍＭのリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。所定の実施形態では、２０．１ｍＭのリン酸ナトリウムは、約１ｍＭのリン酸ナトリウム一塩基性一水和物及び約１９．１ｍＭのリン酸ナトリウム二塩基性七水和物を含む。
【0116】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、ＴＲＩＳを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２５ｍＭ～約１５０ｍＭのＴＲＩＳ（例えば、ｐＨ７．５）を含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約５０ｍＭ～約１００ｍＭのＴＲＩＳ（例えば、ｐＨ７．５）を含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２５ｍＭのＴＲＩＳ（例えば、ｐＨ７．５）を含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約５０ｍＭのＴＲＩＳ（例えば、ｐＨ７．５）を含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約７５ｍＭのＴＲＩＳ（例えば、ｐＨ７．５）を含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１００ｍＭのＴＲＩＳ（例えば、ｐＨ７．５）を含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１２５ｍＭのＴＲＩＳ（例えば、ｐＨ７．５）を含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１５０ｍＭのＴＲＩＳ（例えば、ｐＨ７．５）を含む。
【0117】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、リン酸ナトリウムを含有していない。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、バッファーを含有していない。
【0118】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、リシンを含有していない。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、トレハロースを含有していない。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、スクロースを含有していない。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、塩化マグネシウムを含有していない。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、ヒスチジンを含有していない。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、アルギニンを含有していない。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、グルタミン酸を含有していない。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、リシン、トレハロース、スクロース、塩化マグネシウム、ヒスチジン、アルギニン及び／又はグルタミン酸を含有していない。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、アミノ酸を含有していない。
【0119】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１９０ｍＭ～約２７０ｍＭのソルビトール及び約０．２％～約０．５％のｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１９０ｍＭ～約２７０ｍＭのソルビトール及び３０ｍＭまでのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約０．２％～約０．５％のｍ－クレゾール及び３０ｍＭまでのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約１９０ｍＭ～約２７０ｍＭのソルビトール、約０．２％～約０．５％のｍ－クレゾール及び／又は３０ｍＭまでのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ｐＨは、少なくとも７．９、例えば、約８．１である。
【0120】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３５ｍｇ／ｍＬ～約４５ｍｇ／ｍＬのソルビトール及び約２．７ｍｇ／ｍＬ～約４．５ｍｇ／ｍＬのｍ－クレゾールを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３５ｍｇ／ｍＬ～約４５ｍｇ／ｍＬのソルビトール及び１０ｍｇ／ｍＬまでのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２．７ｍｇ／ｍＬ～約４．５ｍｇ／ｍＬのｍ－クレゾール及び１０ｍｇ／ｍＬまでのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約３５ｍｇ／ｍＬ～約４５ｍｇ／ｍＬのソルビトール、約２．７ｍｇ／ｍＬ～約４．５ｍｇ／ｍＬのｍ－クレゾール及び１０ｍｇ／ｍＬまでのリン酸ナトリウムを含む。所定の実施形態では、ｐＨは、少なくとも７．９、例えば、約８．１である。
【0121】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２２０ｍＭ若しくは約２２０．３ｍＭのソルビトール、約２０ｍＭ若しくは約２０．１ｍＭのリン酸ナトリウム（例えば、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物の混合物）、並びに約０．３１重量／体積％のメタ－クレゾール及び約８．１のｐＨを含む。所定の実施形態では、医薬組成物は、約１ｍｇ／ｍＬのＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む。所定の実施形態では、医薬組成物は、更に水酸化ナトリウムを含む。
【0122】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２２０ｍＭ若しくは約２２０．３ｍＭのソルビトール、約１０ｍＭのリン酸ナトリウム（例えば、リン酸ナトリウム二塩基性七水和物）、並びに約０．３１重量／体積％のメタ－クレゾール及び約８．１のｐＨを含む。所定の実施形態では、医薬組成物は、約１ｍｇ／ｍＬのＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む。
【0123】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、約２２０ｍＭ若しくは約２２０．３ｍＭのソルビトール、約２０ｍＭ若しくは約２０．１ｍＭのリン酸ナトリウム（例えば、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物の混合物）、並びに約０．４重量／体積％のメタ－クレゾール及び約８．１のｐＨを含む。所定の実施形態では、医薬組成物は、約１ｍｇ／ｍＬのＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む。所定の実施形態では、医薬組成物は、更に水酸化ナトリウムを含む。
【0124】
所定の実施形態では、本明細書で提供した医薬組成物は、ペン、例えば、複数回用量ペン中に含有される。所定の実施形態では、本明細書で提供した医薬組成物は、シリンジ、例えば、複数回用量シリンジ中に含有される。所定の実施形態では、本明細書で提供した医薬組成物は、バイアル、例えば、ガラスバイアル中に含有される。バイアル、例えば、ガラスバイアルは、複数回用量バイアルであり得る。
【0125】
所定の実施形態では、本明細書に提供した医薬組成物は、物理的に安定性である。所定の実施形態では、本明細書に提供した医薬組成物は、化学的に安定性である。所定の実施形態では、本明細書に提供した医薬組成物は、物理的に安定性且つ化学的に安定性である。所定の実施形態では、本明細書に提供した医薬組成物は、高次凝集体を形成しない。所定の実施形態では、本明細書に提供した医薬組成物は、フィブリル形成の増加を示さない。所定の実施形態では、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）は、室温で２８日後に本明細書に提供した医薬組成物中では増殖しない。所定の実施形態では、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）は、室温で２８日後に本明細書に提供した医薬組成物中では増殖しない。所定の実施形態では、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）も大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）も室温で２８日後に本明細書に提供した医薬組成物中では増殖しない。
【0126】
Ｖ．治療方法
ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）は、グルカゴンの作用、例えば、食物摂取の抑制又は血糖値の調節と、ＧＬＰ－１の作用、例えば、胃運動性の抑制又はインスリン放出の促進とを組み合わせることができる。従って、これらは、過剰な脂肪組織の排除を加速し、持続可能な体重減少を誘導するとともに、血糖管理を改善するように作用することができる。ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）は又、高コレステロール及び高ＬＤＬ－コレステロール又は異常なＨＤＬ／ＬＤＬ比等の心血管リスク因子を低減するように作用することもできる。
ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）は、グルカゴンの作用、例えば、食物摂取の抑制又は血糖値の調節と、ＧＬＰ－１の作用、例えば、胃運動性の抑制又はインスリン放出の促進とを組み合わせることができる。従って、これらは、過剰な脂肪組織の排除を加速し、持続可能な体重減少を誘導するとともに、血糖管理を改善するように作用することができる。ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）は又、高コレステロール及び高ＬＤＬ－コレステロール又は異常なＨＤＬ／ＬＤＬ比等の心血管リスク因子を低減するように作用することもできる。
【0127】
本開示は、肥満又は肥満関連疾患若しくは障害を治療する方法であって、治療を必要とする対象に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む方法を提供する。所定の例では、投与は、食事及び運動を補助するものである。所定の例では、対象は、２型真性糖尿病を有する。所定の例では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２～３９．９ｋｇ／ｍ２のボディマスインデックス（ＢＭＩ）を有する。所定の例では、対象は、少なくとも４０のＢＭＩを有する。
【0128】
本開示は、体重を低減させる方法であって、治療を必要とする対象に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む方法を提供する。所定の例では、投与は、食事及び運動を補助するものである。所定の例では、対象は、２型真性糖尿病を有する。所定の例では、対象は、２ｋｇ／ｍ２７～４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２～３９．９ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、少なくとも４０のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、過体重である。所定の例では、対象は、肥満である。
【0129】
本開示は、体脂肪を低減させる方法であって、治療を必要とする対象に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む方法を提供する。所定の例では、投与は、食事及び運動を補助するものである。所定の例では、対象は、２型真性糖尿病を有する。所定の例では、対象は、２７ｋｇ／ｍ２～４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２～３９．９ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、少なくとも４０のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、過体重である。所定の例では、対象は、肥満である。所定の例では、脂肪は、肝臓脂肪である。
【0130】
本開示は、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）を治療する方法であって、治療を必要とする対象に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む方法を提供する。所定の例では、投与は、食事及び運動を補助するものである。投与は又、体重を低減させ得るか又は肥満を治療し得る。所定の例では、対象は、２７ｋｇ／ｍ２～４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２～３９．９ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、少なくとも４０のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、過体重である。所定の例では、対象は、肥満である。
【0131】
本開示は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を治療する方法であって、治療を必要とする対象に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む方法を提供する。所定の例では、投与は、食事及び運動を補助するものである。投与は又、体重を低減させ得るか又は肥満を治療し得る。所定の例では、対象は、２７ｋｇ／ｍ２～４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２～３９．９ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、少なくとも４０のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、過体重である。所定の例では、対象は肥満である。
【0132】
本開示は、肝臓脂肪を低減させる方法であって、治療を必要とする対象に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む方法を提供する。所定の例では、投与は、食事及び運動を補助するものである。投与は又、体重を低減させ得るか又は肥満を治療し得る。所定の例では、対象は、２７ｋｇ／ｍ２～４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２～３９．９ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、少なくとも４０のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、過体重である。所定の例では、対象は、肥満である。
【0133】
本明細書に提供するように、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物は、体重増加の予防、脂肪（例えば、肝臓脂肪）増加の予防、体重減少の促進、脂肪（例えば、肝臓脂肪）減少の促進、過体重の低減、脂肪（例えば、肝臓脂肪）の低減、又は病的肥満を含む肥満の治療（例えば、食欲、給餌、食物摂取、カロリー摂取及び／又はエネルギー消費の管理により）のために投与され得る。本開示は、更に過体重又は過剰体脂肪により引き起こされるか又は過体重又は過剰体脂肪を特徴とする疾患若しくは状態を治療若しくは予防する方法であって、治療を必要とする対象に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む方法を提供する。所定の例では、投与は、食事及び運動を補助するものである。更に、本明細書に提供したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む医薬組成物は、他の肥満関連代謝障害の治療に用いることもできる。他の肥満関連（過体重関連）障害の例としては、以下の：インスリン抵抗性、耐糖能障害、糖尿病前期、空腹時血糖値上昇、２型糖尿病、高血圧、脂質異常症（又はこれら代謝リスク因子の組み合わせ）、グルカゴン産生腫瘍、心血管疾患、例えば、うっ血性心不全、アテローム性動脈硬化（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、動脈硬化症、冠動脈性心疾患又は抹消動脈疾患、発作、呼吸不全又は腎疾患が挙げられるが、これらに限定されない。
【0134】
本開示は、２型真性糖尿病を治療する方法であって、治療を必要とする対象に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む方法を提供する。所定の例では、投与は、食事及び運動を補助するものである。投与は又、体重を低減させ得るか又は肥満を治療し得る。所定の例では、対象は、２７ｋｇ／ｍ２～４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２～３９．９ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、少なくとも４０のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、過体重である。所定の例では、対象は、肥満である。
【0135】
本開示は、血糖管理を改善する方法であって、治療を必要とする対象に、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物を投与する工程を含む方法を提供する。所定の例では、投与は、食事及び運動を補助するものである。投与は又、体重を低減させ得るか又は肥満を治療し得る。所定の例では、対象は、２型真性糖尿病を有する。所定の例では、対象は、２７ｋｇ／ｍ２～４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２～３９．９ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、少なくとも４０のＢＭＩを有する。所定の例では、対象は、過体重である。所定の例では、対象は、肥満である。
【0136】
所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物の投与経路は、非経口である。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物の投与経路は、皮下である。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物は、注射によって投与される。所定の実施形態では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物は、皮下注射によって投与される。
【0137】
所定の例では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物は、１日１回投与され得る。所定の例では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物は、注射（例えば、皮下投与）によって１日１回投与され得る。所定の例では、ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド（例えば、ＭＥＤＩ０３８２）を含む本明細書に提供した医薬組成物は、少なくとも１週間の期間に渡り、少なくとも２週間の期間に渡り、少なくとも３週間の期間に渡り、又は少なくとも４週間の期間に渡り、注射（例えば、皮下投与）によって１日１回投与され得る。
【0138】
ＶＩ．キット
更に他の実施形態では、本開示は、本明細書に記載したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドの医薬組成物を含むキットを提供する。所定の実施形態では、キットは、１つ以上の容器に入った、本明細書に開示したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド組成物を含む。当業者であれば、当技術分野では公知の確立されたキットフォーマットの１つに、本明細書に開示したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド組成物を容易に組み込むことができることを容易に認識するであろう。
更に他の実施形態では、本開示は、本明細書に記載したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドの医薬組成物を含むキットを提供する。所定の実施形態では、キットは、１つ以上の容器に入った、本明細書に開示したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド組成物を含む。当業者であれば、当技術分野では公知の確立されたキットフォーマットの１つに、本明細書に開示したＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチド組成物を容易に組み込むことができることを容易に認識するであろう。
【実施例】
【0139】
実施例１：ＭＥＤＩ０３８２の溶解性及びｐＨ安定性プロファイル
ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドＭＥＤＩ０３８２の溶解性及びｐＨ安定性（図１）について試験した。詳細には、溶解性を様々なタイプのバッファー、様々なバッファーイオン強度、純水及び有機溶媒において試験した。ＭＥＤＩ０３８２の水性ｐＨ溶解性についても評価した。（逆相超高性能液体クロマトグラフィー（ＲＰ－ＵＰＬＣ）によって測定される）化学的安定性及び（フーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）及び紫外線円二色性分光法（ＣＤ）によって測定される）二次構造についても、様々なｐＨで評価した。更に、ＭＥＤＩ０３８２凝集の動態にｐＨが及ぼす作用についても、チオフラビンＴ結合（ＴｈＴ）アッセイにおいて評価した。これらの実験の結果は、表２に要約した。
ＧＬＰ－１／グルカゴンアゴニストペプチドＭＥＤＩ０３８２の溶解性及びｐＨ安定性（図１）について試験した。詳細には、溶解性を様々なタイプのバッファー、様々なバッファーイオン強度、純水及び有機溶媒において試験した。ＭＥＤＩ０３８２の水性ｐＨ溶解性についても評価した。（逆相超高性能液体クロマトグラフィー（ＲＰ－ＵＰＬＣ）によって測定される）化学的安定性及び（フーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）及び紫外線円二色性分光法（ＣＤ）によって測定される）二次構造についても、様々なｐＨで評価した。更に、ＭＥＤＩ０３８２凝集の動態にｐＨが及ぼす作用についても、チオフラビンＴ結合（ＴｈＴ）アッセイにおいて評価した。これらの実験の結果は、表２に要約した。
【0140】
【表1】
【0141】
表２に記載の試験は、さらなる開発に含められるバッファー及びｐＨ製剤の選択を誘導するための足がかりであった。
【0142】
実施例２：賦形剤のスクリーニング
溶解性及びｐＨ安定性試験の結果に基づいて、皮下経路によって投与され得る液体製剤のための一般に安全と認められる（ＧＲＡＳ）賦形剤を用いてＭＥＤＩ０３８２の適合性に注目した。１５種の製剤中におけるＭＥＤＩ０３８２の安定性は、動的光散乱（ＤＬＳ）法によって評価した。結果は表３に要約する。
溶解性及びｐＨ安定性試験の結果に基づいて、皮下経路によって投与され得る液体製剤のための一般に安全と認められる（ＧＲＡＳ）賦形剤を用いてＭＥＤＩ０３８２の適合性に注目した。１５種の製剤中におけるＭＥＤＩ０３８２の安定性は、動的光散乱（ＤＬＳ）法によって評価した。結果は表３に要約する。
【0143】
【表2】
【0144】
促進条件において、リン酸バッファー、アルギニン及びグリシン（ｐＨ６．５）を含有する製剤は、Ｚ平均値における劇的な増加を示し、低い物理的安定性を示した。ＭＥＤＩ０３８２の実験的ｐＩは、４．１～４．５である。好ましいバッファー選択肢は、ＴＲＩＳ及びリン酸ナトリウムであり、最も許容される賦形剤は、マンニトール、プロピレングリコール及びソルビトールであった。
【0145】
表３において使用した製剤順位付けの原則は、促進条件でのペプチド純度の消失（主要エリアピーク／全ピークエリア）（純度消失≦４０℃で１週間に付き３％、低リスク；純度消失＞４０℃で１週間に付き５％＝高リスク）及び４０℃若しくは５℃での物理的安定性（Ｚ平均値＜１０ｎｍ＝低リスク、＞１０ｎｍ＝中リスク；＞１００ｎｍ＝高リスク）であった。安定性の順位付けは、アルギニン（製剤４及び５）、３重量／体積％のソルビトール（製剤９）、低いリン酸ナトリウムバッファーのイオン強度（製剤１）及び７．０未満のｐＨ（製剤５及び１３）を用いた場合の低い安定性性能を示している。
【0146】
全体として、本試験の結果は、リン酸ナトリウム（＞２５ｍＭ）及びＴＲＩＳバッファー、プロピレングリコール、グリセロール、メチオニン、マンニトール及び≧７のｐＨの方を指している。
【0147】
実施例３：１カ月及び３カ月安定性試験
開発を進めるために６種の製剤を設計した。これらの製剤は、表４に提供する。
開発を進めるために６種の製剤を設計した。これらの製剤は、表４に提供する。
【0148】
【表3】
【0149】
６種の選択した製剤を冷蔵（２℃～８℃）及びストレス条件（３７℃）下の１カ月安定性試験において使用した。試料は、時点ゼロ、２週間後及び４週間後にＲＰ－ＵＰＬＣ、ＤＬＳ、目視検査、マイクロフローイメージング（ＭＦＩ）、サイズ排除クロマトグラフィー－多角度光散乱法（ＳＥＣ－ＭＡＬＳ）によって評価した。
【0150】
ＲＰ－ＵＰＬＣによって測定した分解率は、温度依存性であった。５℃で保存した場合、全製剤は、４週間以内に≧９６．５％の純度レベルを示した。しかしながら、３７℃では、製剤１（ＴＲＩＳ、マンニトール）は、他の製剤（≧９０％の純度レベル）と比較して有意に高い分解率（≧８０％の純度レベル）を示す。４週間以内にＳＥＣ ＭＡＬＳプロファイルについての有意な変化は見られなかった（５℃）。より高次の構造は、ストレス条件下でさえ三量体であった。
【0151】
安定性試験は、試験した全６種の製剤は、５℃で保存した場合に、４週間以内には有意な物理化学的不安定性の変化を示さないことを示唆している。製剤１（「ＤＦ」：１００ｍＭのＴＲＩＳ、１５０ｍＭのマンニトール１）は、熱ストレス条件下で有意に低安定性であった。製剤２（ＤＦ＋メチオニン）は、強制条件（３７℃）で熱安定性に関する有意な改善を示した。製剤２（ＤＦ＋メチオニン）は、強制条件（３７℃）で熱安定性に関する有意な改善を示した。全体としては、製剤２、４及び６は、ストレス条件下で限界的により優れた安定性プロファイルを証明している。
【0152】
製剤２、４及び６は、ストレス条件データに基づいて下記の実施例においてｐＫ試験のために選択した。
【0153】
１カ月試験と一緒に、３カ月安定性試験は、製剤１（デフォルト製剤、１００ｍＭのＴＲＩＳ／１５０ｍＭのマンニトール、ｐＨ７．２±０．２）を用いて実施した。
【0154】
製剤１は、５℃での３カ月データに基づき、下記の実施例において薬物動態（ＰＫ）試験のために、及び以前の前臨床試験（ＭｓＣ）との比較可能性のために選択された。
【0155】
実施例４：製剤のＰＫ試験
ＰＫ分析は、以前の実施例から選択された製剤１、２、４及び６を用いてラット（０．１ｍｇ／ｋｇの皮下（ｓｃ又はＳＱ））において実施した。ＰＫ分析は、試験した全４種の製剤について匹敵する半減期及びバイオアベイラビリティを示唆した。しかしながら、製剤２（ＴＲＩＳ、マンニトール、メチオニン）は、他の製剤に比してわずかに低いバイオアベイラビリティを有していた。これらの類似性を考慮して、製剤の優先順位を付けるために化学的安定性プロファイルを使用した。製剤２（５０ｍＭのリン酸ナトリウム、１．８５重量／体積％のプロピレングリコール、５ｍｇ／ｍＬ、ｐＨ７．２±０．３）は、最高の性能を示した。製剤１は、さらなる比較可能性試験のために保持したが、製剤４は低下した酸化レベルを示した。
ＰＫ分析は、以前の実施例から選択された製剤１、２、４及び６を用いてラット（０．１ｍｇ／ｋｇの皮下（ｓｃ又はＳＱ））において実施した。ＰＫ分析は、試験した全４種の製剤について匹敵する半減期及びバイオアベイラビリティを示唆した。しかしながら、製剤２（ＴＲＩＳ、マンニトール、メチオニン）は、他の製剤に比してわずかに低いバイオアベイラビリティを有していた。これらの類似性を考慮して、製剤の優先順位を付けるために化学的安定性プロファイルを使用した。製剤２（５０ｍＭのリン酸ナトリウム、１．８５重量／体積％のプロピレングリコール、５ｍｇ／ｍＬ、ｐＨ７．２±０．３）は、最高の性能を示した。製剤１は、さらなる比較可能性試験のために保持したが、製剤４は低下した酸化レベルを示した。
【0156】
実施例５：長期安定性試験
全部が５ｍｇ／ｍＬの濃度でＭＥＤＩ０３８２を含有する３種の製剤を長期安定性試験のために選択した。これらの製剤は、表５に提供する。
全部が５ｍｇ／ｍＬの濃度でＭＥＤＩ０３８２を含有する３種の製剤を長期安定性試験のために選択した。これらの製剤は、表５に提供する。
【0157】
【表4】
【0158】
純度（ＲＰ－ＵＰＬＣ）、凝集（ＤＬＳ）、ペプチド濃度（Ａ２８０）、高次構造（ＳＥＣ－ＭＡＬＳ）（多角度（レーザー）光散乱）、肉眼では視認できない粒子（ＭＦＩ）、オスモル濃度、立体配座安定性（円二色性（ＣＤ）分光法）及びｐＨ試験を実施した。下記の温度：５℃、１５℃；２５℃、４０℃及び－８０℃について試験した。下記の時点：０、２週間後、１カ月後、２カ月後、３カ月後、６カ月後、９カ月後、１２カ月後、２４カ月後及び３６カ月後について試験した。
【0159】
１カ月当たり低量のＭＥＤＩ０３８２分解（０．３％以下）が見られた。分解経路は、４０℃のデータに基づいてＬＣ－ＭＳによって解明された可能性のある異性化、脱アミド化、酸化及び断片化を含んでいた。ＲＰ－ＵＰＬＣによって測定されるように、分解は製剤３について最大であり、製剤１について最小であった。
【0160】
凝集の動的光散乱（ＤＬＳ）評価は、低温（５℃～２５℃）での凝集における有意な変化がないことを示している。しかしながら、製剤２においてより有意であった強制条件（４０℃）でのＺ平均値における急増が生じた。
【0161】
マイクロフローイメージング（ＭＦＩ）は、全製剤及び全条件について≧１０μｍ～２５μｍの低レベルの範囲内で肉眼では視認できない粒子形成を示した。ＳＥＣ－ＭＡＬＳ結果は、オリゴマー形態は３カ月に渡り安定性を維持する傾向があることを示した。製剤１は、四量体から三量体への着実な低下を示したが（従って、オリゴマー状態における変化を示している）、しかし観察は方法の変動性に関連した可能性がある。
【0162】
試験した全条件下で３カ月以内にペプチド濃度、オスモル濃度又はｐＨへの有意な変化は見られなかった。
【0163】
要するに、全３種の製剤は、３カ月以内に５℃及び－８０℃で十分な安定性を示した。分解率は温度に高度に依存していたが、分解の動態は３種の製剤について極めて類似していた。３種の製剤のラットＰＫ（ＳＱ）は、極めて類似するプロファイルを示している。製剤３は、製剤１及び２と比較してわずかに優れた安定性を証明した。
【0164】
しかしながら、６カ月後の時点に、ＤＬＳ及びＭＦＩによって得られた物理的安定性データは、凝集プロセスが開始された可能性があることを示唆している。ＤＬＳデータは、経時的に、温度に依存していた粒径の急成長を示した。更に、ＭＦＩ分析は、５℃及び－８０℃で１μｍ～２μｍの粒子数の増大を示した。これらの結果は、冷蔵条件（２℃～８℃）において６カ月保存した後に液体製剤及び冷凍製剤の両方について凝集／粒子形成リスクがあることを示した。
【0165】
実施例６：非ＧＬＰ毒性試験
ＭＥＤＩ０３８２の化学的安定性は、５０ｍＭのリン酸バッファー、１．８５重量／体積％のプロピレングリコール、ｐＨ７．４中で試験した。ＭＥＤＩ０３８２は、凍結融解ストレス条件下で安定性であり、これは３回の凍結融解ストレスサイクル後に５℃で１週間の期間に渡り発生した許容されるレベルの完全分解を示した。同一試験は、同一期間に渡る動的光散乱（ＤＬＳ）及び目視検査による製剤物理的安定性を示した。
ＭＥＤＩ０３８２の化学的安定性は、５０ｍＭのリン酸バッファー、１．８５重量／体積％のプロピレングリコール、ｐＨ７．４中で試験した。ＭＥＤＩ０３８２は、凍結融解ストレス条件下で安定性であり、これは３回の凍結融解ストレスサイクル後に５℃で１週間の期間に渡り発生した許容されるレベルの完全分解を示した。同一試験は、同一期間に渡る動的光散乱（ＤＬＳ）及び目視検査による製剤物理的安定性を示した。
【0166】
ＰＥＳ Ｍｉｌｌｅｘ－ＧＰフィルター（０．２２μｍ）は、製剤滅菌のために推奨されたフィルターである。
【0167】
このＭＥＤＩ０３８２製剤は、室温で少なくとも４時間に渡りＢＤ Ｐｌａｓｔｉｐａｋシリンジ内で安定性であった。
【0168】
しかしながら、低レベルの投与（０．１ｍｇ／ｍＬ未満）での容器へのペプチドの吸着が同定された。このＭＥＤＩ０３８２製剤は、薬理学的（アゴニスト）作用を達成するために必要とされる可能性が高い低用量の薬物は、この方法で実行可能に送達できなかったために除外された。
【0169】
実施例７：吸着制御の評価
ＭＥＤＩ０３８２について必要とされた低用量要件及び容器閉鎖面の吸着問題を前提にして、界面活性剤のポリソルベート８０の添加について試験した。製剤は、以下の通りであった：１．８５重量／体積％のプロピレングリコール（ＰＧ）及び０．０３体積／体積％のポリソルベート８０（ＰＳ８０）を含有する５０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ＰＢ）、ｐＨ７．５、５ｍｇ／ｍＬ又は２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２。
ＭＥＤＩ０３８２について必要とされた低用量要件及び容器閉鎖面の吸着問題を前提にして、界面活性剤のポリソルベート８０の添加について試験した。製剤は、以下の通りであった：１．８５重量／体積％のプロピレングリコール（ＰＧ）及び０．０３体積／体積％のポリソルベート８０（ＰＳ８０）を含有する５０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ＰＢ）、ｐＨ７．５、５ｍｇ／ｍＬ又は２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２。
【0170】
試料に温度及び凍結／融解によってストレスをかけ、純度、凝集、目視検査及び肉眼では視認できない粒子の存在について分析した。
【0171】
ＲＰ－ＵＰＬＣを使用して、５℃、２５℃、３２℃及び４０℃で２カ月に渡り製剤の純度を評価した。結果は、温度安定性の依存性を示しており、高温であるほど純度の低下を生じさせた。
【0172】
１カ月後、物理的安定性をＤＬＳによって測定した。Ｚ平均値は、－８０℃を除き全温度で１カ月に渡り急激に増加し、高レベルの凝集を示唆した。ＤＬＳ所見と一致して、目視検査は、２カ月の保存後にゲル様外観を示した。要約すると、全技術は、－８０℃を除く全温度で製剤の物理的不安定性を示した。
【0173】
凍結／融解試験では、製剤は、２ｍｇ／ｍＬ又は５ｍｇ／ｍＬ何れかのタンパク質を含むポリソルベート８０（０．３体積／体積％）の存在下又は非存在下において試験した。新鮮溶液（ガラスバイアル、Ｉ型、透明）は、３回の凍結／融解サイクルによって凍結させた。融解後、試料は、５℃及び２５℃で３週間まで維持し、目視検査によって分析した。凍結を行わなかった試料は、コントロールとして並行してランした。第２試験では、容器栓適合性は、Ｎａｌｇｅｎｅ ＨＤＰＥ（毒物学試験のためにより適合する）を用いて評価した。この場合には、５ｍｇ／ｍＬの製剤だけを分析した。
【0174】
液体及び凍結／融解ストレス試験の両方をまとめて考慮すると、データは、ポリソルベート８０が製剤の物理的安定性（ゲル様外観）に影響を及ぼすことを示している。ペプチド濃度、温度及び凍結／融解ストレスは、このＭＥＤ０３８２製剤の物理的安定性を調節する最も重要な同定された因子である。
【0175】
実施例８：９カ月安定性試験
２種の５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤の安定性について、９カ月に渡って分析した。第１製剤は、５０ｍＭのリン酸バッファー（１．８５重量／体積％）及びプロピレングリコール、ｐＨ７．４を含有しており、第２製剤は、１００ｍＭのＴＲＩＳ、１５０ｍＭのマンニトール、２０ｍＭのメチオニン（ｐＨ７．４）を含有していた。２種の異なる製剤は、９カ月以内に極めて類似する純度の消失を示す。
２種の５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤の安定性について、９カ月に渡って分析した。第１製剤は、５０ｍＭのリン酸バッファー（１．８５重量／体積％）及びプロピレングリコール、ｐＨ７．４を含有しており、第２製剤は、１００ｍＭのＴＲＩＳ、１５０ｍＭのマンニトール、２０ｍＭのメチオニン（ｐＨ７．４）を含有していた。２種の異なる製剤は、９カ月以内に極めて類似する純度の消失を示す。
【0176】
別の９カ月試験では、３種のＭＥＤＩ０３８２製剤の安定性を冷蔵条件下において試験した。第１製剤は、１００ｍＭのＴＲＩＳ、１５０ｍＭのマンニトール、ｐＨ７．４を含有していた。第２製剤は、１００ｍＭのＴＲＩＳ、１５０ｍＭのマンニトール、２０ｍＭのメチオニンを含有し、第３製剤は、５０ｍＭのリン酸バッファー；１．８５重量／体積％のプロピレングリコール、ｐＨ７．４を含有していた。製剤は、ＤＬＳ及びＭＦＩによって分析した。第３製剤は、３～９カ月後にＺ平均粒径（ＤＬＳ）の急激な増加を示した。ＭＦＩ分析により肉眼では視認できない粒子について類似のパターンが観察されたが、これは高凝集レベル及び肉眼では視認できない粒子の形成を示唆している。
【0177】
要するに、許容される化学的安定性が観察されたが、６カ月後時点からは高レベルの凝集が同定された。フィブリル化が凝集の機序であろう。
【0178】
実施例９：ＭＥＤＩ０３８２のタンパク質濃度を２ｍｇ／ｍＬへ減少させる
製剤の半減期を改善するために、２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２を備える製剤を評価した。２ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬ製剤の化学的安定性は、極めて類似していたが、ペプチド濃度の減少は、物理的安全性を改善しなかった。全部の肉眼では視認できない粒子の急激な増加は、２ｍｇ／ｍＬ製剤については６カ月後及び５ｍｇ／ｍＬ製剤については１２カ月後にＭＦＩによって観察された。同様に、ＤＬＳ分析は、２ｍｇ／ｍＬ製剤については６カ月後から、及び５ｍｇ／ｍＬ製剤については１２カ月後からＺ平均値の増加を示した。５ｍｇ／ｍＬでの５例の試料中２例は、１３カ月後にゲルに変化し、１８カ月後には、他の３例の５ｍｇ／ｍＬの試料がゲルに変化した。２ｍｇ／ｍＬの試料は、１例も１８カ月後までゲルに変化しなかった。
製剤の半減期を改善するために、２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２を備える製剤を評価した。２ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬ製剤の化学的安定性は、極めて類似していたが、ペプチド濃度の減少は、物理的安全性を改善しなかった。全部の肉眼では視認できない粒子の急激な増加は、２ｍｇ／ｍＬ製剤については６カ月後及び５ｍｇ／ｍＬ製剤については１２カ月後にＭＦＩによって観察された。同様に、ＤＬＳ分析は、２ｍｇ／ｍＬ製剤については６カ月後から、及び５ｍｇ／ｍＬ製剤については１２カ月後からＺ平均値の増加を示した。５ｍｇ／ｍＬでの５例の試料中２例は、１３カ月後にゲルに変化し、１８カ月後には、他の３例の５ｍｇ／ｍＬの試料がゲルに変化した。２ｍｇ／ｍＬの試料は、１例も１８カ月後までゲルに変化しなかった。
【0179】
２ｍｇ／ｍＬ製剤のｐＨ安定性についてもガラスバイアル中で７．０、７．５及び８．０のｐＨで試験した。次に製剤は、３カ月に渡り５℃及び４０℃の安定に配置した。試料は、ＲＰ－ＵＰＬＣ、ＤＬＳ及びＡＦＭによって分析した。ｐＨ７～７．５では、増加した凝集レベル及び純度消失が観察された。ｐＨを７．８に上昇させることによって、物理化学的安定性が改善された。
【0180】
２ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬ両方の製剤の化学的安定性は、液剤製品としてヒトを対象とする試験のために許容されるレベル内であった（１２カ月後に≧９４％）。ポリソルベート８０の存在は、製剤の物理的安定性（ゲル様外観）に影響を及ぼす。ペプチド濃度、温度及び凍結／融解ストレスは、ＰＳ８０を含有するＭＥＤ０３８２の物理的安定性に影響を及ぼす最も重要な同定要素である。温度は、容器閉鎖具のタイプに依存してゲル様外観を形成するために要する時間に様々な作用を示す。ガラスバイアルの場合には、ゲル様形成は、低い温度（５℃）によって加速される。対照的に、Ｎａｌｇｅｎｅ ＨＤＰＥ中で保存された製剤については、ゲル化は、より高い温度によって加速される。ＭＥＤＩ０３８２の物理的安定性は、最終製剤のｐＨに対して高度に感受性である。増加した物理的安定性は、ｐＨを７から７．８へ上昇させることによって達成される。ＭＥＤＩ０３８２の凝集の機序は、ペプチドのフィブリルへの重合である。ＭＥＤＩ０３８２の濃度を５ｍｇ／ｍＬから２ｍｇ／ｍＬ（ＰＳ８０を含まない）へ変化させることは、凝集動態を改善しない。２ｍｇ／ｍＬ及びｐＨ７．８にある製剤は、冷蔵条件下では７ヶ月後までの保存でフィブリルを形成しない。サイクル製剤安定性のＧＭＰ安定性は、冷蔵条件では少なくとも３０カ月である。
【0181】
ヒトに投与するためには、ガラスバイアル及びシリンジ投与のための１．８５重量／体積％のプロピレングリコール（ＰＧ）を含有する５０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ＰＢ）（ｐＨ７．８）、ＭＥＤＩ０３８２の２ｍｇ／ｍＬの液剤製品（ＤＰ）を含有する製剤が推奨された。製剤の処方は、以下の表６に示す。
【0182】
【表5】
【0183】
実施例１０：ＭＥＤＩ０３８２のタンパク質濃度を０．５ｍｇ／ｍＬに減少させる
ヒト患者に投与されるべき薬物の意図される量に基づくと、ＭＥＤＩ０３８２タンパク質濃度のさらなる減少が望ましかった。そこで、プレフィルドシリンジ（ＰＦＳ）使用と適合する０．５ｍｇ／ｍＬ製剤について評価した。５０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ７．８）、１．８５重量／体積％のプロピレングリコール及びＭＥＤＩ０３８２を含有する製剤を３種の異なる条件下：（ｉ）２ｍｇ／ｍＬでガラスバイアル中、（ｉｉ）０．５ｍｇ／ｍＬでガラスバイアル中、及び（ｉｉｉ）０．５ｍｇ／ｍＬでＰＦＳ中（シリコンで表面処理したＢＤ ２９ ＰＦＳ）に配置した。ＰＦＳは、０．１５ｍＬの充填容量を有していた。ガラスバイアルは、１．０ｍＬの充填容量で、２．０ｍｇ／ｍＬ又は０．５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２を手作業で充填した。安定性は、５℃、２５℃及び４５℃で０、２週間後、４週間後、６週間後及び３カ月後に評価した。
ヒト患者に投与されるべき薬物の意図される量に基づくと、ＭＥＤＩ０３８２タンパク質濃度のさらなる減少が望ましかった。そこで、プレフィルドシリンジ（ＰＦＳ）使用と適合する０．５ｍｇ／ｍＬ製剤について評価した。５０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ７．８）、１．８５重量／体積％のプロピレングリコール及びＭＥＤＩ０３８２を含有する製剤を３種の異なる条件下：（ｉ）２ｍｇ／ｍＬでガラスバイアル中、（ｉｉ）０．５ｍｇ／ｍＬでガラスバイアル中、及び（ｉｉｉ）０．５ｍｇ／ｍＬでＰＦＳ中（シリコンで表面処理したＢＤ ２９ ＰＦＳ）に配置した。ＰＦＳは、０．１５ｍＬの充填容量を有していた。ガラスバイアルは、１．０ｍＬの充填容量で、２．０ｍｇ／ｍＬ又は０．５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２を手作業で充填した。安定性は、５℃、２５℃及び４５℃で０、２週間後、４週間後、６週間後及び３カ月後に評価した。
【0184】
結果は、全３種の異なる提示について匹敵する安定性及びヒトに投与するための許容される安定性を示した（純度≧９５％）。しかしながら、ガラスバイアル製剤に比較してＰＦＳ製剤中には、より多くの肉眼では視認できない粒子（ＭＦＩによって測定した）が存在した。０．５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２を目標とする下記の製剤を考案した。
【0185】
【表6】
【0186】
実施例１１－バッファー及び賦形剤が安定性に及ぼす作用
１日１回皮下注射のための複数回用量ペン及び可変用量ペン（６用量まで）を開発することが望ましかったが、ここで各ペンは３０用量までを含有することができ、各１日量は５０ｍｃｇ～３００ｍｃｇのＭＥＤＩ０３８２であろう。ペン型デバイスが作動された後の微生物安全性を保証するためには保存剤が必要とされるであろう。このため、この製剤を開発するために追加の製剤分析を実施した。詳細には、抗菌剤の存在下においてｐＨ、バッファー及び賦形剤がＭＥＤＩ０３８２の物理的及び化学的安全性に及ぼす影響は、濃度が５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２を用いて評価した。
１日１回皮下注射のための複数回用量ペン及び可変用量ペン（６用量まで）を開発することが望ましかったが、ここで各ペンは３０用量までを含有することができ、各１日量は５０ｍｃｇ～３００ｍｃｇのＭＥＤＩ０３８２であろう。ペン型デバイスが作動された後の微生物安全性を保証するためには保存剤が必要とされるであろう。このため、この製剤を開発するために追加の製剤分析を実施した。詳細には、抗菌剤の存在下においてｐＨ、バッファー及び賦形剤がＭＥＤＩ０３８２の物理的及び化学的安全性に及ぼす影響は、濃度が５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２を用いて評価した。
【0187】
賦形剤が線維形成に及ぼす作用は、アミノ酸及び二価イオンがｐＨ７．５での線維形成を防止し得るか否かを評価することによって分析した。ＭＥＤＩ０３８２を最終ｐＨが７．５の５０ｍＭのリン酸バッファー中のＬ－グルタミン酸、クエン酸、Ｌ－アルギニン、Ｌ－ヒスチジン又は塩化マグネシウムと混合した。線維形成は、チオフラビンＴ結合アッセイ（ＴｈＴ）アッセイを使用して評価した。図２に示した結果は、何れの賦形剤もＭＥＤＩ０３８２を安定させなかったことを証明している。実際に、ネガティブコントロールと比較して、試験した賦形剤の全部がＭＥＤＩ０３８２を不安定にさせた。
【0188】
最終ｐＨが７．５の５０ｍＭのリン酸バッファーの存在下でのＭＥＤＩ０３８２の安全性にトレハロース、スクロース、Ｌ－リシン、ソルビトール、マンニトール、クエン酸ナトリウム及びプロピレングリコールが及ぼす影響を理解するために、別の試験を実施した。線維形成は、再びＴｈＴアッセイを使用して評価した。図３に示した結果は、マンニトール、ソルビトール、トレハロース及びプロピレングリコールがフィブリル化の大きな増加を誘発しなかったことを示しているが（図３におけるソルビトール及びトレハロースのデータは、コントロールデータに重なる）、他方スクロース、リシン及びクエン酸ナトリウムは、不安定性を増加させた。これらの賦形剤と関連する化学的分解については、ＲＰ－ＵＰＬＣアッセイを使用して５℃及び４０℃で保存した試料について更に１カ月監視した。結果は、トレハロースが化学的分解を有意に促進することを証明した。ソルビトール及びマンニトール（５℃で純度９７％）はどちらもプロピレングリコール（純度９５％）より少ない化学的分解を誘導した（４０℃でのデータについては図４を参照されたい）。これらの賦形剤と関連する粒子形成についても、振とうストレス（４時間に渡り８００ｒｐｍ）後の目視検査によって監視した。トレハロース、ソルビトール、プロピレングリコール及びコントロール試料は、ほんの少数の粒子しか生じさせなかった。しかしながら、クエン酸塩及び溶解液試料は、それぞれ固体の白色ゲル及び軟質ゲルに変化し、マンニトール製剤は混濁した。
【0189】
この一連の実験に基づくと、ソルビトール、マンニトール及びプロピレングリコールは最高の結果を提供した。
【0190】
実施例１２：ＭＥＤＩ０３８２のゲル形成のｐＨ依存性
ポリソルベート８０は、一般に凝集を防止するために使用されるが、ＭＥＤＩ０３８２がｐＨ７．５の製剤中では急速にゲルを形成することを誘発した（実施例７を参照されたい）。このため、６．８及び８．３の２つの他のｐＨでのゲル形成について試験した。
ポリソルベート８０は、一般に凝集を防止するために使用されるが、ＭＥＤＩ０３８２がｐＨ７．５の製剤中では急速にゲルを形成することを誘発した（実施例７を参照されたい）。このため、６．８及び８．３の２つの他のｐＨでのゲル形成について試験した。
【0191】
これらの実験では、０．０３％のポリソルベート８０を含む製剤をポリソルベート８０を含まない製剤と比較した。試料は、７日間に渡り５０℃でインキュベートした。ｐＨ６．９でポリソルベート８０を含有する試料は固体ゲルに変化したが、ｐＨ８．３の試料は変化しなかった。この段階で、１０ｍＭのＮａＯＨをゲル化試料に添加すると、試料は再び液体に変化した。全試料は、その後更に１２日間に渡りインキュベートした。ポリソルベート８０を含まないｐＨ６．９の試料は軟質ゲルに変化したが、他の試料は液体のままであった。これらの結果は、ポリソルベート８０がゲル形成を促進し得るが、その作用がｐＨ依存性且つ可逆性であることを証明している。
【0192】
実施例１３：抗菌剤の存在下で賦形剤が安定性に及ぼす作用
ＭＥＤＩ０３８２の物理的安定性は、＞７．８の最適ｐＨを有する。このｐＨ範囲では、少数の保存剤しか活性ではない。保存剤のフェノール及びｍ－クレゾール中の種々のバッファー及び賦形剤中における促進条件において、ＭＥＤＩ０３８２の物理的及び化学的安定性を評価するために３セットの実験を実施した。
ＭＥＤＩ０３８２の物理的安定性は、＞７．８の最適ｐＨを有する。このｐＨ範囲では、少数の保存剤しか活性ではない。保存剤のフェノール及びｍ－クレゾール中の種々のバッファー及び賦形剤中における促進条件において、ＭＥＤＩ０３８２の物理的及び化学的安定性を評価するために３セットの実験を実施した。
【0193】
１セットの実験で、マンニトール（０ｍＭ～３００ｍＭ）及びプロピレングリコール（０％～２％）をｐＨ８．０の５０ｍＭのリン酸バッファー中におけるｍ－クレゾール（０％～０．３％）及びフェノール（０％～１％）を用いて評価した。試料を５℃及び４０℃でインキュベートし、４週間に渡り化学的純度について監視した。全試料について振とう試験を実施し、目視検査を実施した。物理的安定性は、ＴｈＴアッセイを用いて評価した。
【0194】
これらの実験では、ｐＨが８で一定で維持された場合は、化学的及び物理的安定性に関して保存剤の反対の作用が観察された（図５）。保存剤にはフィブリル化へのわずかなネガティブ作用があったが、化学的安定性にはわずかなポジティブ作用がみられた。マンニトール及びプロピレングリコールは、純度又は物理的安定性への大きな影響を有していなかった。
【0195】
別のセットの実験では、７～８．２のｐＨ範囲内におけるソルビトール（０ｍＭ～２５０ｍＭ）、プロピレングリコール（０％～２％）及びフェノール（０％～２％）がＭＥＤＩ０３８２の物理的安定性に及ぼす影響を探索した。物理的安定性は、ＤＬＳ（ＤｙｎａＰｒｏプレートリーダー、Ｗｙａｔｔ）及びＴｈＴアッセイを用いて監視した。図６に示した結果は、試験した全賦形剤の存在下では、高ｐＨがＭＥＤＩ０３８２の物理的安定性のために好都合であることを証明している。
【0196】
第３セットの実験では、７～８．２のｐＨ範囲内におけるソルビトール（０ｍＭ～２５０ｍＭ）、グリセロール（０％～５％）、メチオニン（０ｍＭ～１０ｍＭ）及びｍ－クレゾール（０％～０．３％）がＭＥＤＩ０３８２の安定性に及ぼす影響を探索した。化学的安定性は、ＲＰ－ＵＰＬＣを用いて監視した。物理的安定性は、ＴｈＴ及び振とう実験により評価した。化学的安定性は、ＲＰ－ＵＰＬＣを用いて監視した。これらの実験の結果は、物理的安定性へのｍ－クレゾールのわずかなネガティブ作用及びメチオニンのわずかなポジティブ作用を示している。
【0197】
全体として、これらの３セットの実験からの結果は、ｐＨがＭＥＤＩ０３８２の物理的及び化学的安定性の両方に寄与する主要因子であること、そしてこれは試験した何れかの賦形剤若しくは保存剤によって対抗され得ないことを示している。ｐＨ≧８では物理的安定性及び化学的安定性のどちらも改善する。ＭＥＤＩ０３８２は、リシン、トレハロース、スクロース、クエン酸ナトリウム、塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ２）、クエン酸塩、ヒスチジン、アルギニン又はグルタミン酸の存在下では低安定性である。Ｍ－クレゾール若しくはフェノールは、ソルビトール、マンニトール、プロピレングリコール若しくはグリセロールの存在下ではＭＥＤＩ０３８２の物理的又は化学的安定性に小さな影響しか示さなかったが、１０ｍＭまでのメチオニンの添加は、ＭＥＤＩ０３８２の物理的安定性を増加させることができた。
【0198】
実施例１４：長期安定性
実施例１３において考察した試験は、短期促進安定性試験を用いて、ＭＥＤＩ０３８２の安定性を最大化する潜在的賦形剤を同定した。しかしながら、ＭＥＤＩ０３８２凝集の動態は、極めて緩徐で有り得、粒子形成及びゲル化等の安定性問題は、長期間を経て発生し得る。このため、長期安定性試験のために７種の製剤を設計した。
実施例１３において考察した試験は、短期促進安定性試験を用いて、ＭＥＤＩ０３８２の安定性を最大化する潜在的賦形剤を同定した。しかしながら、ＭＥＤＩ０３８２凝集の動態は、極めて緩徐で有り得、粒子形成及びゲル化等の安定性問題は、長期間を経て発生し得る。このため、長期安定性試験のために７種の製剤を設計した。
【0199】
アッセイするための等張化剤として、ソルビトール、プロピレングリコール及びマンニトールを選択した。ＭＥＤＩ０３８２についての製品目標プロファイルは、２９０ｍＯｓｍ／ｋｇ～３００ｍＯｓｍ／ｋｇであり、等張化剤の濃度は、それを達成することを目的に調整した。フェノール及びｍ－クレゾールは、どちらも保存剤としてアッセイした。更に、安定性のための８．１のｐＨが望ましいことを前提に、濃度が２０ｍＭであるリン酸ナトリウムを緩衝剤としてアッセイした。リン酸ナトリウムは、ｐＨ８．１では低い緩衝能力を有し、ＭＥＤＩ０３８２の濃度が最終ｐＨ製剤に影響を及ぼすので、製剤の最終ｐＨを調整するために水酸化ナトリウムを使用した。表８の下記の７種の製剤をこれらの基準に基づいてアッセイした。
【0200】
【表7】
【0201】
メチオニン（１０ｍＭ）は、ＭＥＤＩ０３８２の化学的安定性を増加させる能力を評価するために製剤Ａ及びＢに添加し、クエン酸塩（１０ｍＭ）が抗菌剤として作用する能力を評価するために製剤Ｅに添加した。
【0202】
７種の製剤は、２倍の最終ペプチド濃度を達成するためにＭＥＤＩ０３８２を０．１８５Ｍの水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）中に緩徐に溶解させることによって調製した。次に、２倍のＭＥＤＩ０３８２溶液に最終製剤の他の全構成要素の２倍の濃度を含有する溶液を添加した。混合した溶液を濾過し、必要であれば０．１ＭのＮａＯＨを用いてｐＨを調整した。充填するために、各製剤Ａ～Ｇのためのプラセボを調製した。製剤は、カートリッジ及びバイアルに充填した。
【0203】
ＭＥＤＩ０３８２の一次容器は、透過性膜及びゴム栓（ＦＯＲＭＵＬＡ ＡＲＴ２２２３４０２３／５０ＧＲＹ）を備えた３ｍＬカートリッジ（Ｏｍｐｉ ＥＺ充填カートリッジ、製品番号７０１０９０７９）である。カートリッジには手作業で充填し、手動閉栓ツールを用いて栓を閉めた。充填容量は、３ｍＬであった。
【0204】
７種の製剤（Ａ～Ｇ）内のＭＥＤＩ０３８２の純度は、２５℃で６カ月に渡り、及び５℃で２４カ月に渡り監視した。２５℃で保存した製剤の化学的分解は、製剤間で何の差も明らかにせず、純度消失は、１カ月当たり約２％で一貫していた（図７）。
【0205】
幾つかの製剤については、流体力学直径の増加が見られ、これは凝集が発生していることを示唆している。製剤Ｄ、Ｅ及びＦでは、５℃で保存したカートリッジについて９～１２カ月間に増加が出現した（下記の表９を参照されたい）。製剤Ｄ、Ｅ及びＦは、全部が等張化剤としてプロピレングリコールを含有している。
【0206】
【表8】
【0207】
予測プロファイラーモデルを使用して、７種の５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤の総純度及び不純物に様々な製剤の構成要素が及ぼす影響を推定した。結果は、図８に示す。マンニトール及びクエン酸塩は、純度プロファイルに何の影響も及ぼさなかった。ソルビトールは、製薬原料の総純度レベル（若しくは「ＤＳ」）を改善し、酸化のレベルを低減する。メチオニンは、酸化レベルをわずかに増加させ、総不純物を減少させる。リン酸ナトリウムは、総純度を減少させ、総不純物を増加させる。ｍ－クレゾールは、酸化レベルを減少させる。
【0208】
７種の製剤におけるオスモル濃度、粘度又はｐＨの大きな変化は、観察されなかった。製剤Ｇは、リン酸バッファーを有していなかったにもかかわらず、経時的にｐＨを変化させなかった。これは、この製剤におけるｐＨを制御するためにリン酸ナトリウムが必要とされないことを示唆している。
【0209】
２４カ月後の目視検査は、気泡を含有する、又は含有しないカートリッジ内の外観の変動を示した。気泡を含有するカートリッジの大多数は肉眼で視認できる粒子を含有していたが、他方気泡を含有していないカートリッジは全部が肉眼で視認できる粒子を含有していなかった。例外は、気泡を含有するカートリッジ、気泡を含有していないカートリッジの何れも肉眼で視認できる粒子を含有していなかった製剤Ｇであった。
【0210】
肉眼では視認できない粒子についても又監視した。２４カ月の期間に渡り、製剤Ｆは、５℃で保存したカートリッジ内で粒子の増加を示した唯一の製剤であった。約６カ月後に、２５℃でバイアル内で保存した数種の製剤中でも線維様粒子を肉眼で視認できた。粒子の径は、約５ｕｍ～１００ｕｍであった。５℃で２４カ月後に製剤Ｆについてのカートリッジ内の線維様粒子の径は、より小さく５ｕｍ～４０ｕｍであった。線維は、潜在的にバイアル内のより大きな空気界面の結果として、カートリッジ内よりバイアル内における方がより容易に形成されると思われた。
【0211】
全体として、製剤Ａ～Ｇは、５℃で１年当たり約１．１％～２％の率で類似の分解プロファイルを有した。分解率は、等張化剤（ソルビトール、マンニトール又はプロピレングリコール）のタイプによって影響を受けなかったが、プロピレングリコールを含有する全製剤は、５℃で保存した場合に、１２カ月後に開始したＤＬＳによって測定すると高レベルの凝集を有した。５℃で２年間又は２５℃で６カ月に渡りゲル化は観察されなかった。等張化剤としてのソルビトールとマンニトールとの間に測定可能な差は見られなかった。ソルビトールを含有する全製剤並びにマンニトール製剤は、２年間に渡って物理化学的安定性を示した。ソルビトール及びｍ－クレゾールは、総不純物レベルを改善し得る。従って、等張化剤としてのソルビトール及び８．１の目標ｐＨは、最も安定性の製剤を提供すると思われた。低濃度のＭＥＤＩ０３８２がリン酸ナトリウムバッファーの非存在下において安定性であるかどうかは不明確であるので、リン酸ナトリウムバッファーは、それが総純度を減少させる可能性があるとしても有用であるとみなされた。
【0212】
実施例１５：保存剤の有効性
実施例１４において評価した７種のＭＥＤＩ０３８２製剤中における保存剤の有効性についても、欧州薬局方の抗菌性保存剤試験を用いて評価した。結果は、表１０に示す。
実施例１４において評価した７種のＭＥＤＩ０３８２製剤中における保存剤の有効性についても、欧州薬局方の抗菌性保存剤試験を用いて評価した。結果は、表１０に示す。
【0213】
【表9】
【0214】
【表10】
【0215】
製剤Ａ～Ｇの何れも厳格な（「Ａ」）欧州基準に合格した。これは、製剤が以前に米国食品医薬品局によって承認された最高濃度に近い濃度のフェノール又はｍ－クレゾール（即ち、Ｖｉｃｔｏｚａ（登録商標）中の０．５５重量／体積％のフェノール及びＨｕｍａｌｏｇ（登録商標）中の０．３１５重量／体積％のｍ－クレゾール）を含有していたという事実にもかかわらずである。典型的には、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）及び大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）は、６時間後又は２４時間後の時点に不合格であった。
【0216】
実施例１６：１ｍｇ／ｍＬ～２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤
臨床結果は、ＭＥＤＩ０３８２の低濃度の製剤が望ましいであろうことを証明したので、１ｍｇ／ｍＬ及び２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤の長期安定性を評価するため、及び製剤の抗菌活性を更に改善するための追加の試験を実施した。表１１に示した３種の製剤を長期安定性（ＬＴＳ）試験において試験した。
臨床結果は、ＭＥＤＩ０３８２の低濃度の製剤が望ましいであろうことを証明したので、１ｍｇ／ｍＬ及び２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤の長期安定性を評価するため、及び製剤の抗菌活性を更に改善するための追加の試験を実施した。表１１に示した３種の製剤を長期安定性（ＬＴＳ）試験において試験した。
【0217】
【表11】
【0218】
長期安定性アッセイの結果は、表１２に示す。
【0219】
【表12】
【0220】
保存効力試験（ＰＥＴ）は更に、同一の３種の製剤を対象に、実施例１５における不合格を誘発した２種の微生物をアッセイして実施した。結果は、表１３に示す。
【0221】
【表13】
【0222】
１ｍｇ／ｍＬ及び２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤の全部が黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）についての低ストリンジェントな欧州基準（「Ｂ」）（６時間後の＜２の対数減少）及び大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）についてのより厳密な欧州基準（「Ａ」）（６時間後に＜２及び２４時間後の＞３の対数減少）に合格した。時点ゼロと２５℃でカートリッジ内での１カ月の保存後との間の結果において有意差は見られなかった。
【0223】
実施例１７：２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤の安定性及び抗菌活性
２２０ｍＭのソルビトール、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、ｐＨを８．１に調整するための水酸化ナトリウム、ＭＥＤＩ０３８２（１ｍｇ／ｍＬ又は２ｍｇ／ｍＬ）及びフェノール（固体又は液体）若しくはメタ－クレゾールのどちらかを含有する様々な製剤について更に試験した。これらの実験において試験した製剤は、表１４に示す。
２２０ｍＭのソルビトール、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、ｐＨを８．１に調整するための水酸化ナトリウム、ＭＥＤＩ０３８２（１ｍｇ／ｍＬ又は２ｍｇ／ｍＬ）及びフェノール（固体又は液体）若しくはメタ－クレゾールのどちらかを含有する様々な製剤について更に試験した。これらの実験において試験した製剤は、表１４に示す。
【0224】
【表14】
【0225】
これらの製剤を製造するために、リン酸ナトリウム一塩基性一水和物（３４ｍｇ）及びリン酸ナトリウム二塩基性七水和物（１．０１ｇ）を２０～３０分間に渡り磁気撹拌しながら８０％充填（１６０ｍＬ）の１ｍＭ又は２ｍＭのＮａＯＨ（表１４に列挙）中に溶解させた。この溶液に、Ｄ－ソルビトール（８．０２ｇ）を添加し、１０分間混合した。フェノール、ｍ－クレゾール及びＭＥＤＩ０３８２の添加は、グローブボックス内で実施した。保存剤に依存して、密度及び純度を補正した重量を添加した。次に溶液は、磁気撹拌を活用して１時間に渡り混合するに任せた。純度及び含水量を構成するために、１０％過剰となるようにＭＥＤＩ０３８２を添加した。試料は次に、室温で３０分間に渡り撹拌せずに溶解するに任せた。
【0226】
次にｐＨを決定し、１００ｍＭのＮａＯＨを用いて調整した。次に溶液は、脱イオンｍｉｌｌｉ－Ｑ水を用いて２００ｍＬにした。各溶液についてのペプチド及び保存剤濃度は、ＲＰ－ＵＰＬＣを用いて決定したが、ここでＭＥＤＩ０３８２は０．５ｍｇ／ｍＬに希釈した。試料には、表１４に列挙した所望の濃度を達成するために、ペプチド又は保存剤の何れかをトッピングした。目標濃度と比較して（ＲＰ－ＵＰＬＣによって測定した）実際濃度は、表１５に示す。
【0227】
【表15】
【0228】
生じた溶液は、光線から保護し、各溶液３ｍＬは、０．２μｍのＰＶＤＦフィルター及び５ｍＬのＢＤ Ｐｌａｓｔｉｋフィルターを用いて無菌的に３ｃｃバイアル（ＳＣＨＯＴＴ １０ｃｃ、２０ｍｍのＦａｌｃｏｎ １０Ｒ；部品番号；ＣＭ１０２３）に充填した。
【0229】
各試料を安定性及び保存剤有効性について試験した。化学的安定性アッセイの結果は、図９～１３に示す。物理的安定性アッセイの結果は、下記の表１６に示す。
【0230】
【表16】
【0231】
保存効力アッセイでは、それにより調製した製剤の抗菌有効性を評価するために、２種の微生物（黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）及び大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ））を使用する短期試験を実施した。試料は、ｔ＝０（バルク）及び２５℃で保存したｔ＝１カ月後に試験した。これらのアッセイの結果は、下記の表１７に示す。
【0232】
【表17】
【0233】
安定性に関して、これらの試験は、何れの保存剤の濃度も試験した範囲内のペプチドの化学的又は物理的安定性に有意な影響を及ぼさないことを証明した。更に、ペプチド濃度（１ｍｇ／ｍＬ又は２ｍｇ／ｍＬの何れか）は、保存剤として固体フェノールを使用した場合は、分解率に影響を及ぼさなかった。保存剤型のタイプは、ＭＥＤＩ０３８２の化学的分解率に同一の作用を示した。Ｈｅｄｉｎｇｅｒ製のｍ－クレゾールは、Ｓｉｇｍａ製のｍ－クレゾールを用いて観察された分解率と比較して、化学的分解率を緩徐化させると思われた。
【0234】
抗菌活性に関して、これらの試験は、試験した全保存剤が試験した最高濃度で低ストリンジェントな欧州薬局方（「Ｂ」）基準に合格したことを証明した。しかしながら、Ｈｅｄｉｎｇｅｒ製のｍ－クレゾールは、最高濃度を使用した場合によりストリンジェントな欧州薬局方（「Ａ」）基準に合格した。低ストリンジェントな欧州薬局方（「Ｂ」）基準を達成するためには、１ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２とともに少なくとも０．４４重量／体積％のフェノールが必要とされる、又は２ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２とともに少なくとも０．５４重量／体積％のフェノールが必要とされる。０．５６重量／体積％までのフェノールを含有する製剤は、何れもよりストリンジェントな欧州薬局方（「Ａ」）基準に不合格であった。２５℃で１カ月保存した後には、保存剤有効性は保持された。
【0235】
これらの結果に基づくと、製剤３（２２０ｍＭのソルビトール、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、１ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２、０．３重量／体積％のメタ－クレゾール及びｐＨ８．１へ調整するためのＮａＯＨ）は、最も好都合な製剤であると思われた。
【0236】
実施例１８：メタ－クレゾール濃度の選択
追加の実験を実施して、上記の実施例１７における製剤３に基づいて製剤中で使用できるメタ－クレゾールの最適濃度を同定した。表１８に示したように、ｍ－クレゾールの濃度は、製剤３では様々であり、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）及び他の細菌に対する抗菌有効性について試験した。
追加の実験を実施して、上記の実施例１７における製剤３に基づいて製剤中で使用できるメタ－クレゾールの最適濃度を同定した。表１８に示したように、ｍ－クレゾールの濃度は、製剤３では様々であり、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）及び他の細菌に対する抗菌有効性について試験した。
【0237】
【表18】
【0238】
更に、アッセイ変動性を評価するために、ｍ－クレゾール濃度の目標０．３１重量／体積％での補足試験を実施した。これらの試験を表１９に要約する。
【0239】
【表19】
【0240】
これらの結果は、保存剤の有効性がＭＥＤＩ０３８２の濃度に依存性であり、多少の変動性を示すことを証明している。更に、欧州薬局方基準Ｂを一貫して達成するためには、最小０．２７重量／体積％のメタ－クレゾールが必要とされ、欧州薬局方基準Ａを達成するためには、最小０．３４重量／体積％のメタ－クレゾールが必要とされる。
【0241】
これを考慮に入れると、０．３１重量／体積％（±１０％）のｍ－クレゾール濃度が好ましいと思われる。この濃度は、２４時間後の全細菌を３対数減少させる、１日１回投与製品についての有効性の適切なレベル（ｌｅａｖｅ）を示している。
【0242】
２２０ｍＭのソルビトール、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、０．３１重量／体積％のメタ－クレゾール及びｐＨ８．１へ調整するためのＮａＯＨを含有する高度に有益な製剤を製造するための処方は、表２０に示す。１ｍｇのＭＥＤＩ０３８２製剤は滴定用量製品であり、５ｍｇのＭＥＤＩ０３８２製剤は、維持用量製品である。
【0243】
【表20】
【0244】
実施例１９：リン酸ナトリウムの濃度及び塩のタイプが高分子量不純物に及ぼす影響
共有結合二量体は、ＭＥＤＩ０３８２の複数回投与製剤中の不純物であると同定された。従って、リン酸ナトリウムがＭＥＤＩ０３８２上の高分子量（ＨＷＭ）不純物の形成に及ぼす影響について試験した。
共有結合二量体は、ＭＥＤＩ０３８２の複数回投与製剤中の不純物であると同定された。従って、リン酸ナトリウムがＭＥＤＩ０３８２上の高分子量（ＨＷＭ）不純物の形成に及ぼす影響について試験した。
【0245】
０．３１重量／体積％のｍ－クレゾール、２２０ｍＭのソルビトール及びＭＥＤＩ０３８２（１ｍｇ／ｍＬ）を含有する製剤は、様々な量（０ｍＭ～２０ｍＭ）のリン酸ナトリウム一塩基性塩及び二塩基性塩、二塩基性塩のみ及び一塩基性塩のみを用いて調製した。試料を５℃及び２５℃に配置し、ＳＥＣ、ＲＰ ＵＰＬＣ及びＬＣ－ＭＳによって安定性について分析した。図１４Ａ、１４Ｂ及び１４Ｃに示した結果は、リン酸ナトリウム濃度が試験した温度でＨＭＷ不純物の率に有意な影響を及ぼすことを証明している。ＬＣ ＭＳによる不純物の同定は、リン酸ナトリウムを含まない製剤が製剤中で見いだされる主要なＨＭＷ不純物を減少させたことを示している。
【0246】
これらのデータは、より低いリン酸ナトリウム濃度が安定性を改善することを示している。従って、より少ない塩を含む代替ＭＥＤＩ０３８２製剤並びにリン酸ナトリウムの置換物としての低濃度のＴＲＩＳ塩基（トロメタミン）を含む代替製剤を開発した。代替製剤についての処方は、下記の表２１～２５に示す。
【0247】
【表21】
【0248】
【表22】
【0249】
【表23】
【0250】
【表24】
【0251】
【表25】
【0252】
濃度が１ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２濃度で二塩基性リン酸ナトリウムを含むＴＲＩＳ塩基を比較する安定性試験（製剤４及び５対製剤１）は、ガラスバイアル中でランした。ＳＥＣデータは、二塩基性リン酸ナトリウムをＴＲＩＳ塩基で置換すると、ＨＭＷ不純物のレベルを低減させられることを示している（図１５及び表２６）。
【0253】
【表26】
【0254】
実施例２０：５ｍｇ／ｍＬの濃度のＭＥＤＩ０３８２が及ぼす影響
表２０に記載した１ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤は、本質的に上記に記載した方法を用いてＨＭＷ種及び総不純物について試験した。結果は、図１６Ａ及び図１６Ｂに示す。１ｍｇ／ｍＬ及び２ｍｇ／ｍＬ製剤間で、ＨＭＷ種又は総不純物の量における有意差は見られなかった。しかしながら、ＨＭＷ種及び総不純物は、５ｍｇ／ｍＬ製剤においては一貫してより低かった。
表２０に記載した１ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤は、本質的に上記に記載した方法を用いてＨＭＷ種及び総不純物について試験した。結果は、図１６Ａ及び図１６Ｂに示す。１ｍｇ／ｍＬ及び２ｍｇ／ｍＬ製剤間で、ＨＭＷ種又は総不純物の量における有意差は見られなかった。しかしながら、ＨＭＷ種及び総不純物は、５ｍｇ／ｍＬ製剤においては一貫してより低かった。
【0255】
３種の製剤の安定性について、３０日間に渡ってペプチド含量及びｍ－クレゾール含量においても測定した。結果は、表２７～表３４に示す。
【0256】
【表27】
【0257】
【表28】
【0258】
【表29】
【0259】
【表30】
【0260】
【表31】
【0261】
【表32】
【0262】
【表33】
【0263】
【表34】
【0264】
これらのデータは、開始点と比較して、ペプチド含量又はｍ－クレゾール含量について、３種の製剤において有意差は見られなかったことを示している。
【0265】
製剤は更に、ＴｈＴ染料の存在下での蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）（図１７を参照されたい）及び透過電子顕微鏡（ＴＥＭ）（図１８）によってフィブリル化陽性粒子について評価した。予備形成線維（ポジティブコントロール）並びに製剤バッファー（ネガティブコントロール）を含む１ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬの試料の比較は、試験した任意の条件下の任意の時点でフィブリル化陽性粒子を全く検出できなかったことを示している。
【0266】
保存効力試験（ＰＥＴ）も又、ｐＨ８．２で２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー、２２０ｍＭのソルビトール及びｍ－クレゾール（表３５に指示した濃度で）を含有する２ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤上で実施した。
【0267】
【表35】
【0268】
ＰＥＴ実行可能性試験から、０．２８重量／体積％～０．３４重量／体積％のｍ－クレゾールを含む全２ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤は、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）についての欧州薬局方（「Ｂ」）基準に合格した。
【0269】
実施例２１：ＭＥＤＩ０３８２の濃度（１ｍｇ／ｍＬ対５ｍｇ／ｍＬ）が二塩基性ナトリウム系製剤の安定性に及ぼす影響
表２１に記載した１ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤（代替ＭＥＤＩ０３８２製剤１）の安定性は、上述した方法を用いて、ＨＭＷ種及び総不純物試験によって評価した。結果は、図１９及び図２０に示す。５ｍｇ／ｍＬ製剤についての総不純物及びＨＭＷ不純物は、１ｍｇ／ｍＬ製剤と比較して顕著な低減が生じたが、その作用はＨＭＭ不純物の場合により顕著であった。
表２１に記載した１ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２製剤（代替ＭＥＤＩ０３８２製剤１）の安定性は、上述した方法を用いて、ＨＭＷ種及び総不純物試験によって評価した。結果は、図１９及び図２０に示す。５ｍｇ／ｍＬ製剤についての総不純物及びＨＭＷ不純物は、１ｍｇ／ｍＬ製剤と比較して顕著な低減が生じたが、その作用はＨＭＭ不純物の場合により顕著であった。
【0270】
２種の製剤の安定性は、更に５℃、２５℃及び４０℃で３０日間に渡ってペプチド含量及びｍ－クレゾール含量に関しても評価した。ペプチド含量についての結果は、表３６～３８に示しており、クレゾール含量については表３９～４１に示す。
【0271】
【表36】
【0272】
【表37】
【0273】
【表38】
【0274】
【表39】
【0275】
【表40】
【0276】
【表41】
【0277】
これらのデータは、開始点と比較して、１ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬ両方の製剤について経時的にペプチド含量又はｍ－クレゾール含量における有意な変動は見られなかったことを示唆している。
【0278】
製剤は更に、ＦＡＣＳ（図２１を参照されたい）及び透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）（図２２）によってフィブリル化陽性粒子についても評価した。予備形成線維（ポジティブコントロール）並びに製剤バッファー（ネガティブコントロール）を含む１ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬの試料の比較は、試験した任意の時点で又は任意の条件下でのフィブリル化陽性粒子を全く検出できなかったことを示している。
【0279】
実施例２２：５ｍｇ／ｍＬのＭＥＤＩ０３８２の複数回用量製剤の保存剤有効性のロバスト性
ｍ－クレゾール含量、リン酸ナトリウム濃度及びｍ－クレゾール含量が５ｍｇ／ｍＬの複数回用量製剤の保存剤有効性に及ぼす影響を調査するために、多変量ロバスト性試験を実施した。１ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬでの以前の試験は、ペプチド濃度が保存剤有効性とのネガティブ相関を有することを示したので、このロバスト性試験は、全製剤について５．５ｍｇ／ｍＬの設定濃度で実施した。計２０バルクの製剤を調製し、欧州薬局方第１０．０版第５．１．３セクション及び米国薬局方４２＜５１＞に従って試験した。
ｍ－クレゾール含量、リン酸ナトリウム濃度及びｍ－クレゾール含量が５ｍｇ／ｍＬの複数回用量製剤の保存剤有効性に及ぼす影響を調査するために、多変量ロバスト性試験を実施した。１ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬ及び５ｍｇ／ｍＬでの以前の試験は、ペプチド濃度が保存剤有効性とのネガティブ相関を有することを示したので、このロバスト性試験は、全製剤について５．５ｍｇ／ｍＬの設定濃度で実施した。計２０バルクの製剤を調製し、欧州薬局方第１０．０版第５．１．３セクション及び米国薬局方４２＜５１＞に従って試験した。
【0280】
表４２に記載のデータは、０．２４重量／体積％以上のｍ－クレゾール濃度では、ＥＰ基準Ｂが満たされた黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）を除く全微生物について、ＵＳＰ及びＥＰ基準Ａが一貫して満たされることを示している。この微生物に対しては、２４時間後に３より大きい対数減少を一貫して達成するためには、０．２８重量／体積％以上のｍ－クレゾール濃度が必要とされる。データの統計的分析は、ｍ－クレゾールが保存剤有効性に最高の影響を有したこと、並びにｐＨ及びリン酸ナトリウム濃度がよりマイルドな影響を有することを示した。本試験は、高濃度複数回用量製剤が１日１回投与のための適正な抗菌特性を有することを確証した。
【0281】
【表42】
【0282】
【表43】
【0283】
【表44】
【0284】
【表45】
【0285】
【表46】
【0286】
【表47】
【0287】
【表48】
【0288】
実施例２３：ＨＭＷ凝集体を制御するために複数回用量薬物製品内の溶存酸素を制御する
有益な製剤は、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、２２０ｍＭのソルビトール、０．３１％のｍ－クレゾール、ｐＨ＝８．１である。ｍ－クレゾールは、患者気候条件下でのＭＥＤＩ０３８２の複数回用量使用を支持するために特に有用である。この要件を満たすために、ＭＥＤＩ０３８２薬物製品は、提案された（５℃での）長期保存条件に追加して十分な（＞３週間）使用中安定性（３０℃で）を明らかに示すはずである。冷蔵条件での２４カ月及び３０℃での４週間の終了時までに、この製剤は、ＳＥＣ分析方法を使用すると約５％のＨＭＷ不純物を有している。
有益な製剤は、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、２２０ｍＭのソルビトール、０．３１％のｍ－クレゾール、ｐＨ＝８．１である。ｍ－クレゾールは、患者気候条件下でのＭＥＤＩ０３８２の複数回用量使用を支持するために特に有用である。この要件を満たすために、ＭＥＤＩ０３８２薬物製品は、提案された（５℃での）長期保存条件に追加して十分な（＞３週間）使用中安定性（３０℃で）を明らかに示すはずである。冷蔵条件での２４カ月及び３０℃での４週間の終了時までに、この製剤は、ＳＥＣ分析方法を使用すると約５％のＨＭＷ不純物を有している。
【0289】
探究的試験は、酸化がＨＭＷ不純物を形成する可能性に焦点を当てた。標準大気条件下で実施されるために設計されているＭＥＤＩ０３８２配合プロセスについて再評価した。標準大気条件は、気相内で他の成分と一緒に約２０％の酸素を有する。この高レベルの酸素濃度は、ＭＥＤＩ０３８２と潜在的に相互作用し、ＨＭＷ不純物の形成を開始させる。標準工業的手法は、酸化を制御するためにメチオニン等の酸化防止剤の使用を強調した；しかしながら、メチオニンの使用は、ＭＥＤＩ０３８２製剤中のＨＭＷ不純物形成を制御しなかった。
【0290】
配合段階中の複数回用量ペプチドの酸化を制御するための公知の技術はなかった。従って、複数回用量ペプチド製剤のための配合プロセスは、新規な方法を用いて溶存酸素含量を枯渇させることによって開発した。この方法は、乾燥窒素ガスを利用して、複数回用量ペプチド製剤中に存在する溶存酸素を置換する。酸素置換方法は、下記の段階を含む。
【0291】
段階１：低減溶存酸素複数回用量製剤バッファー処方
水面下窒素チューブを使用して、溶存酸素含量が大気含量の５％未満になるまで、十分な期間（溶液１リットルに対しておよそ３０分間）に渡り乾燥窒素を定常状態条件で複数回用量製剤バッファー中にパージする。
水面下窒素チューブを使用して、溶存酸素含量が大気含量の５％未満になるまで、十分な期間（溶液１リットルに対しておよそ３０分間）に渡り乾燥窒素を定常状態条件で複数回用量製剤バッファー中にパージする。
【0292】
段階２：処方薬剤物質製剤
密閉条件下で低減溶存酸素複数回用量製剤バッファーにペプチドを加えよく混ぜる。
密閉条件下で低減溶存酸素複数回用量製剤バッファーにペプチドを加えよく混ぜる。
【0293】
段階３：低減溶存酸素複数回用量薬物製品製剤
溶液を滅菌濾過し、溶存酸素含量を測定する。溶存酸素含量が５％超である場合は、過剰な溶存酸素に置換するために乾燥酸素を使用する。
溶液を滅菌濾過し、溶存酸素含量を測定する。溶存酸素含量が５％超である場合は、過剰な溶存酸素に置換するために乾燥酸素を使用する。
【0294】
このプロセスを用いて製造したＭＥＤＩ０３８２薬物製品を安定性試験にかけ、結果を標準大気条件において配合したＭＥＤＩ０３８２に対して比較した。結果は、図２３及び表４３に示す。表４３に記載の結果は、アレニウスモデルとの適合率（５％のＤＯ、２０％のＤＯから）を比較している。アレニウスプロットは、対数（率）対１／温度を使用する。
【0295】
【表49】
【0296】
全試験条件において、５％の溶存酸素（ＤＯ）を用いてこのプロセスを使用して製造されたＭＥＤＩ０３８２薬物製品は、標準大気条件において製造された薬物製品より有意に低い（％）ＨＭＷ不純物を有していた。
【0297】
試験結果を事前に開発したアレニウスモデル（以前の製造プロセスからのＤＰを用いて開発した）に対して比較した。図２４に示したアレニウス適合は、溶存酸素を用いたプロセスからのＭＥＤＩ０３８２薬物製品が標準大気条件下で製造された薬物製品より統計的有意に低いＨＭＷ分解率を有することを確証している。
【0298】
これらの安定性試験及びそれらの分析は、複数回用量製剤バッファー中の溶存酸素のレベルが配合段階中に制御され得ることを示している。これは、酸化へのＭＥＤＩ０３８２の暴露を最小限に抑え、低ＨＭＷ不純物を含む薬物製品を一貫して製造する配合プロセスを提供するであろう。このプロセスからの薬物製品は、＞４週間の使用中安定性を有する。
【0299】
概要及び要約のセクションではなく、詳細な説明のセクションが、特許請求の範囲の解釈に用いられるように意図されていることは理解されるべきである。概要及び要約のセクションは、本発明者によって検討されるように、１つ以上であるがすべてでない本発明の例示的な実施形態を示す場合があり、故に、本発明及び添付の特許請求の範囲を限定することは決して意図されていない。
【0300】
本発明は、機能的構成要素を用いて上に説明されており、その具体的な機能及び関係の実施を例示している。これらの機能的構成要素の境界は、本明細書において、説明の便宜のために自由裁量で画定される。代替の境界は、特定の機能及びそれらの関係性が適切に作動しさえすれば、画定され得る。
【0301】
具体的な実施形態の先行する記載は、他者が、当技術分野の技術内の知識を適用することにより、本発明の全般的な概念から逸脱することなく、不要な実験なしでこのような具体的な実施形態等の様々な適用のために容易に改変し且つ／又は適合させ得る本発明の全般的な性質を完全に明らかにする。従って、このような適応及び改変は、本明細書中で提示される教示及び指針に基づき、開示される実施形態の同等物の意味及び範囲内にあるものとする。本明細書中の専門用語又は用語は、本明細書中での用語又は専門用語が教示及び指針に照らして当業者により解釈されるべきであるように、説明を目的とするものであり、限定ではないことを理解されたい。
【0302】
本発明の広がり及び範囲は、上記の代表的な実施形態の何れによっても限定されるべきものではなく、以下の特許請求の範囲及びそれらの均等物によってのみ定められるべきものである。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14A】
【図14B】
【図14C】
【図15】
【図16A】
【図16B】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【配列表】
【国際調査報告】