▶ バイオインベント インターナショナル アクティエボラーグの特許一覧 ▶ ユニバーシティ、オブ、サウサンプトンの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-09-22
(54)【発明の名称】特定の患者のがんを治療するための抗体の組み合わせ
(51)【国際特許分類】
A61K 39/395 20060101AFI20220914BHJP
C07K 16/28 20060101ALI20220914BHJP
C12N 15/13 20060101ALI20220914BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20220914BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220914BHJP
G01N 33/68 20060101ALI20220914BHJP
G01N 33/574 20060101ALI20220914BHJP
【ＦＩ】
A61K39/395 T
C07K16/28 ZNA
C12N15/13
A61P35/00
A61P43/00 121
A61K39/395 D
A61K39/395 N
G01N33/68
G01N33/574 A
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022502912
(86)(22)【出願日】2020-07-17
(85)【翻訳文提出日】2022-02-22
(86)【国際出願番号】 EP2020070319
(87)【国際公開番号】W WO2021009358
(87)【国際公開日】2021-01-21
(31)【優先権主張番号】19186840.5
(32)【優先日】2019-07-17
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】520031025
【氏名又は名称】バイオインベント インターナショナル アクティエボラーグ
(71)【出願人】
【識別番号】500125788
【氏名又は名称】ユニバーシティ、オブ、サウサンプトン
【氏名又は名称原語表記】ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ＯＦ ＳＯＵＴＨＡＭＰＴＯＮ
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100141977
【弁理士】
【氏名又は名称】中島 勝
(74)【代理人】
【識別番号】100138210
【弁理士】
【氏名又は名称】池田 達則
(74)【代理人】
【識別番号】100166165
【弁理士】
【氏名又は名称】津田 英直
(72)【発明者】
【氏名】ビョルン フレンデウス
(72)【発明者】
【氏名】イングリッド テイゲ
(72)【発明者】
【氏名】リンダ モルテンソン
(72)【発明者】
【氏名】イングリッド カールソン
(72)【発明者】
【氏名】マーク クラッグ
(72)【発明者】
【氏名】スティーブン ビアーズ
(72)【発明者】
【氏名】ロバート オールダム
【テーマコード（参考）】
2G045
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
2G045AA26
2G045CB02
2G045DA36
4C085AA13
4C085AA14
4C085AA16
4C085BB36
4C085BB42
4C085DD62
4C085EE03
4H045AA11
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA10
4H045CA40
4H045DA76
4H045EA28
4H045FA74
(57)【要約】
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療における、Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦeγ受容体に結合する第１の抗体分子と、Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦeγ受容体に結合する第２の抗体分子との併用、ならびにこれらの２つの抗体分子を含む医薬組成物およびキット、ならびにこれらの２つの抗体を使用するがんの治療方法が記載される。本明細書に記載される治療の恩恵を受ける患者を特定するための診断試験も記載される。
【選択図】図１
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療に使用するための、Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子との組み合わせ。
【請求項2】
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療に使用するための、（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子と、を含む、医薬組成物。
【請求項3】
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療に使用するためのキットであって、（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子と、を含む、キット。
【請求項4】
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療に使用するための薬物の製造における、（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子、および
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子の使用。
【請求項5】
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんを治療するための方法であって、（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子と、を投与することを含む、方法。
【請求項6】
患者が、（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子との併用治療の恩恵を受けるかどうかを判定するための診断試験であって、
試験は前記患者の腫瘍浸潤Ｔリンパ球におけるＰＤ－１発現を判定することを含み、中程度または高度のＰＤ－１発現は、前記患者が併用治療の恩恵を受けることを示す、診断試験。
【請求項7】
前記患者の腫瘍浸潤ＣＤ３陽性Ｔリンパ球が中程度または高度のＰＤ－１発現を示す、請求項１に記載の使用のための組み合わせ、請求項２に記載の使用のための医薬組成物、請求項３に記載のキット、請求項４に記載の使用、請求項５に記載の方法、または請求項６に記載の診断試験。
【請求項8】
前記患者の腫瘍浸潤ＣＤ３陽性Ｔリンパ球の少なくとも１０％が中程度または高度のＰＤ－１発現を有する、請求項７に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項9】
前記患者の腫瘍浸潤ＣＤ３陽性ＣＤ８陽性Ｔリンパ球が中程度または高度のＰＤ－１発現を有する、請求項７または８に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項10】
前記患者の腫瘍浸潤ＣＤ３陽性ＣＤ８陽性Ｔリンパ球の少なくとも１０％が中程度または高度のＰＤ－１発現を有する、請求項９に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項11】
中程度または高度のＰＤ－１発現が、Ｔリンパ球当たり少なくとも１５，５００個のＰＤ－１分子の発現を有する患者からの試料中の腫瘍浸潤Ｔリンパ球の少なくとも１０％として定義される、請求項１～１０のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項12】
中程度または高度のＰＤ－１発現が、抗ＰＤ１抗体ＥＨ１２．２Ｈ７を使用して測定される、請求項１１に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項13】
前記がんが固形がんである、請求項１～１２のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項14】
前記固形がんが、黒色腫、肺がん、頭頸部がん、ホジキンリンパ腫、原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、膀胱がん、結腸直腸がん、胃がん、子宮頸がん、肝臓がん、メルケル細胞がん、腎臓がんおよび皮膚扁平上皮がんからなる群から選択される、請求項１３に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項15】
前記がんが難治性である、請求項１３または１４に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項16】
前記第１の抗体分子および／または前記第２の抗体分子が、ヒト抗体分子、ヒト化抗体分子、およびヒト由来の抗体分子からなる群から選択される、請求項１～１５のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項17】
前記第１の抗体分子および／または前記第２の抗体分子がモノクローナル抗体分子またはモノクローナル由来の抗体分子である、請求項１～１６のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項18】
前記第１の抗体分子および／または前記第２の抗体分子が、そのＦｃ領域を介してＦｃ受容体に結合する能力を保持するフルサイズ抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体、およびそれらの抗原結合性フラグメントからなる群から選択される、請求項１～１７のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項19】
前記第１の抗体分子および／または前記第２の抗体分子が、ヒトＩｇＧ抗体、ヒト化ＩｇＧ抗体分子またはヒト由来のＩｇＧ抗体分子である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項20】
前記第１の抗体分子がＩｇＧ１抗体分子である、請求項１９に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項21】
前記第２の抗体分子がＩｇＧ４抗体分子である、請求項１９または２０に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項22】
前記第１の抗体分子および／または前記第２の抗体分子が、活性化Ｆｃガンマ受容体への結合を改善するように操作されている、請求項１～２１のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項23】
前記第１の抗体分子が以下のＣＤＲ：（ｉ）配列番号５１および配列番号５２および配列番号５３、または
（ｉｉ）配列番号５７および配列番号５８および配列番号５９、または
（ｉｉｉ）配列番号６３および配列番号６４および配列番号６５、または
（ｉｖ）配列番号６９および配列番号７０および配列番号７１、または
（ｖ）配列番号７５および配列番号７６および配列番号７７、または
（ｖｉ）配列番号８１および配列番号８２および配列番号８３、または
（ｖｉｉ）配列番号８７および配列番号８８および配列番号８９、または
（ｖｉｉｉ）配列番号９３および配列番号９４および配列番号９５、または
（ｉｘ）配列番号９９および配列番号１００および配列番号１０１、または
（ｘ）配列番号１０５および配列番号１０６および配列番号１０７、または
（ｘｉ）配列番号１１１および配列番号１１２および配列番号１１３、または
（ｘｉｉ）配列番号１１７および配列番号１１８および配列番号１１９、または
（ｘｉｉｉ）配列番号１２３および配列番号１２４および配列番号１２５、または
（ｘｉｖ）配列番号１２９および配列番号１３０および配列番号１３１、または
（ｘｖ）配列番号１３５および配列番号１３６および配列番号１３７、または
（ｘｖｉ）配列番号１４１および配列番号１４２および配列番号１４３、または
（ｘｖｉｉ）配列番号１４７および配列番号１４８および配列番号１４９、または
（ｘｖｉｉｉ）配列番号１５３および配列番号１５４および配列番号１５５、または
（ｘｉｘ）配列番号１５９および配列番号１６０および配列番号１６１、または
（ｘｘ）配列番号１６５および配列番号１６６および配列番号１６７、または
（ｘｘｉ）配列番号１７１および配列番号１７２および配列番号１７３、または
（ｘｘｉｉ）配列番号１７７および配列番号１７８および配列番号１７９、または
（ｘｘｉｉｉ）配列番号１８３および配列番号１８４および配列番号１８５、または
（ｘｘｉｖ）配列番号１８９および配列番号１９０および配列番号１９１、を含む可変重鎖（ＶＨ）を含む、請求項１～２２のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項24】
前記第１の抗体分子が以下のＣＤＲ：（ｉ）配列番号５４および配列番号５５および配列番号５６、または
（ｉｉ）配列番号６０および配列番号６１および配列番号６２、または
（ｉｉｉ）配列番号６６および配列番号６７および配列番号６８、または
（ｉｖ）配列番号７２および配列番号７３および配列番号７４、または
（ｖ）配列番号７８および配列番号７９および配列番号８０、または
（ｖｉ）配列番号８４および配列番号８５および配列番号８６、または
（ｖｉｉ）配列番号９０および配列番号９１および配列番号９２、または
（ｖｉｉｉ）配列番号９６および配列番号９７および配列番号９８、または
（ｉｘ）配列番号１０２および配列番号１０３および配列番号１０４、または
（ｘ）配列番号１０８および配列番号１０９および配列番号１１０、または
（ｘｉ）配列番号１１４および配列番号１１５および配列番号１１６、または
（ｘｉｉ）配列番号１２０および配列番号１２１および配列番号１２２、または
（ｘｉｉｉ）配列番号１２６および配列番号１２７および配列番号１２８、または
（ｘｉｖ）配列番号１３２および配列番号１３３および配列番号１３４、または
（ｘｖ）配列番号１３８および配列番号１３９および配列番号１４０、または
（ｘｖｉ）配列番号１４４および配列番号１４５および配列番号１４６、または
（ｘｖｉｉ）配列番号１５０および配列番号１５１および配列番号１５２、または
（ｘｖｉｉｉ）配列番号１５６および配列番号１５７および配列番号１５８、または
（ｘｉｘ）配列番号１６２および配列番号１６３および配列番号１６４、または
（ｘｘ）配列番号１６８および配列番号１６９および配列番号１７０、または
（ｘｘｉ）配列番号１７４および配列番号１７５および配列番号１７６、または
（ｘｘｉｉ）配列番号１８０および配列番号１８１および配列番号１８２、または
（ｘｘｉｉｉ）配列番号１８６および配列番号１８７および配列番号１８８、または
（ｘｘｉｖ）配列番号１９２および配列番号１９３および配列番号１９４、を含む可変軽鎖（ＶＬ）を含む、請求項１～２３のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項25】
前記第１の抗体分子が、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、および配列番号２６からなる群から選択される可変重鎖（ＶＨ）アミノ酸配列を含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項26】
前記第１の抗体分子が、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、および配列番号５０からなる群から選択される可変軽鎖（ＶＬ）アミノ酸配列を含む、請求項１～２５のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項27】
前記第１の抗体分子が以下のＣＤＲアミノ酸配列：（ｉ）配列番号５１および配列番号５２および配列番号５３および配列番号５４および配列番号５５および配列番号５６、または
（ｉｉ）配列番号５７および配列番号５８および配列番号５９および配列番号６０および配列番号６１および配列番号６２、または
（ｉｉｉ）配列番号６３および配列番号６４および配列番号６５および配列番号６６および配列番号６７および配列番号６８、または
（ｉｖ）配列番号６９および配列番号７０および配列番号７１および配列番号７２および配列番号７３および配列番号７４、または
（ｖ）配列番号７５および配列番号７６および配列番号７７および配列番号７８および配列番号７９および配列番号８０、または
（ｖｉ）配列番号８１および配列番号８２および配列番号８３および配列番号８４および配列番号８５および配列番号８６、または
（ｖｉｉ）配列番号８７および配列番号８８および配列番号８９および配列番号９０および配列番号９１および配列番号９２、または
（ｖｉｉｉ）配列番号９３および配列番号９４および配列番号９５および配列番号９６および配列番号９７および配列番号９８、または
（ｉｘ）配列番号９９および配列番号１００および配列番号１０１および配列番号１０２および配列番号１０３および配列番号１０４、または
（ｘ）配列番号１０５および配列番号１０６および配列番号１０７および配列番号１０８および配列番号１０９および配列番号１１０、または
（ｘｉ）配列番号１１１および配列番号１１２および配列番号１１３および配列番号１１４および配列番号１１５および配列番号１１６、または
（ｘｉｉ）配列番号１１７および配列番号１１８および配列番号１１９および配列番号１２０および配列番号１２１および配列番号１２２、または
（ｘｉｉｉ）配列番号１２３および配列番号１２４および配列番号１２５および配列番号１２６および配列番号１２７および配列番号１２８、または
（ｘｉｖ）配列番号１２９および配列番号１３０および配列番号１３１および配列番号１３２および配列番号１３３および配列番号１３４、または
（ｘｖ）配列番号１３５および配列番号１３６および配列番号１３７および配列番号１３８および配列番号１３９および配列番号１４０、または
（ｘｖｉ）配列番号１４１および配列番号１４２および配列番号１４３および配列番号１４４および配列番号１４５および配列番号１４６、または
（ｘｖｉｉ）配列番号１４７および配列番号１４８および配列番号１４９および配列番号１５０および配列番号１５１および配列番号１５２、または
（ｘｖｉｉｉ）配列番号１５３および配列番号１５４および配列番号１５５および配列番号１５６および配列番号１５７および配列番号１５８、または
（ｘｉｘ）配列番号１５９および配列番号１６０および配列番号１６１および配列番号１６２および配列番号１６３および配列番号１６４、または
（ｘｘ）配列番号１６５および配列番号１６６および配列番号１６７および配列番号１６８および配列番号１６９および配列番号１７０、または
（ｘｘｉ）配列番号１７１および配列番号１７２および配列番号１７３および配列番号１７４および配列番号１７５および配列番号１７６、または
（ｘｘｉｉ）配列番号１７７および配列番号１７８および配列番号１７９および配列番号１８０および配列番号１８１および配列番号１８２、または
（ｘｘｉｉｉ）配列番号１８３および配列番号１８４および配列番号１８５および配列番号１８６および配列番号１８７および配列番号１８８、または
（ｘｘｉｖ）配列番号１８９および配列番号１９０および配列番号１９１および配列番号１９２および配列番号１９３および配列番号１９４を含む、請求項１～２６のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項28】
前記第１の抗体分子が以下のアミノ酸配列：（ｉ）配列番号３および配列番号２７、または
（ｉｉ）配列番号４および配列番号２８、または
（ｉｉｉ）配列番号５および配列番号２９、または
（ｉｖ）配列番号６および配列番号３０、または
（ｖ）配列番号７および配列番号３１、または
（ｖｉ）配列番号８および配列番号３２、または
（ｖｉｉ）配列番号９および配列番号３３、または
（ｖｉｉｉ）配列番号１０および配列番号３４、または
（ｉｘ）配列番号１１および配列番号３５、または
（ｘ）配列番号１２および配列番号３６、または
（ｘｉ）配列番号１３および配列番号３７、または
（ｘｉｉ）配列番号１４および配列番号３８、または
（ｘｉｉｉ）配列番号１５および配列番号３９、または
（ｘｉｖ）配列番号１６および配列番号４０、または
（ｘｖ）配列番号１７および配列番号４１、または
（ｘｖｉ）配列番号１８および配列番号４２、または
（ｘｖｉｉ）配列番号１９および配列番号４３、または
（ｘｖｉｉｉ）配列番号２０および配列番号４４、または
（ｘｉｘ）配列番号２１および配列番号４５、または
（ｘｘ）配列番号２２および配列番号４６、または
（ｘｘｉ）配列番号２３および配列番号４７、または
（ｘｘｉｉ）配列番号２４および配列番号４８、または
（ｘｘｉｉｉ）配列番号２５および配列番号４９、または
（ｘｘｉｖ）配列番号２６および配列番号５０を含む、請求項１～２７のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【請求項29】
前記第１の抗体分子が、請求項２３～２８のいずれか一項に記載の抗体分子とＦｃｙＲＩＩｂへの結合について競合することができる抗体分子である、請求項１～２２のいずれか一項に記載の使用のための組み合わせ、使用のための医薬組成物、キット、使用、方法、または診断試験。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ＣＤ３陽性腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）でＰＤ－１の中程度または高度の発現を有する患者のがんの治療における、１）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、２）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子との併用に関する。
【背景技術】
【0002】
免疫抑制性チェックポイント受容体、例えばＣＴＬＡ－４またはＰＤ－１（ＰＤ１とも表される）は、それらのリガンド受容体、例えばＢ７ファミリーメンバーＣＤ８０およびＣＤ８６、ならびにＰＤ－Ｌ１がそれぞれ結合すると、抑制シグナルを細胞内部に伝達し、細胞の活性化および増殖を制限し、過度の炎症を防ぎ、自己寛容の維持に寄与する細胞表面受容体である。そのような抑制性免疫チェックポイントが遺伝的に不足している動物は、炎症反応の悪化と関連しており、自己に対する寛容を発達させることまたは維持することができず、結果として自己免疫疾患を引き起こす。免疫チェックポイント受容体ＣＴＬＡ－４およびＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１に対する抗体は、特に複数の固形がん腫、例えば、黒色腫、肺がん、膀胱がん、および頭頸部がんを含む様々ながんを有する患者の全体的な生存率の増加をもたらし、そのような抗体は米国食品医薬品局によって承認されている（Ｐａｒｄｏｌｌ，Ｄ．Ｍ．（２０１２）Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ １２（４）：２５２－２６４；Ｔｏｐａｌｉａｎ，Ｓ．Ｌ．ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２７（４）：４５０－４６１；Ｓｈａｒｍａ，Ｐ．ｅｔ ａｌ（２０１７）Ｃｅｌｌ １６８（４）：７０７－７２３）。
【0003】
免疫抑制性のチェックポイント軸ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１に対する抗体は、がん免疫療法で特に効果的であることが証明されており、患者の約２０％に客観的奏効（完全奏効および部分奏効）を誘発するが、これは標準治療と比べて著しい改善である（Ｃａｒｒｅｔｅｒｏ－Ｇｏｎｚａｌｅｚ，Ａ．ｅｔ ａｌ （２０１８）Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ９（９）：８７０６－８７１５）。しかしながら、奏効率から明らかなように、現在利用可能な抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１抗体は、少数の患者においてのみ有効である。さらに、最初に奏効した患者の一部は、最終的に抵抗性を発症し、それ以上は治療の恩恵を受けることができなくなる。そのため、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１抗体に対する無反応性および抵抗性の機構は、臨床的に重要な問題である。ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１抗体に対する抵抗性の機構を特定して克服することは、この臨床的に重要な薬物クラスに対するがん患者の生存を改善するための大きな課題であり、また機会である。
【0004】
さらに、抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１チェックポイント遮断に反応する可能性が最も高い患者を特定するための予測バイオマーカーが、治療に反応する可能性が高い患者を特定するための重要な戦略であることは一般的に認められている。逆に、重大な、時には致命的な、忍容性の問題に関連することが多いこれらの薬物による患者の不必要な治療を防ぐことも同様に重要である。費用が高いことから、これらの治療法は支払者および医療システムにさらに大きな負担となる。抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１抗体療法にとって臨床的に重要な既存の予測バイオマーカーの例は、マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）（Ｌｅ，Ｄ．Ｔ．ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３７２（２６）：２５０９－２５２０；Ｌｅ，Ｄ．Ｔ．ｅｔ ａｌ（２０１７）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３５７（６３４９）：４０９－４１３）、腫瘍変異負荷（Ｇｕｂｉｎ，Ｍ．Ｍ．ｅｔ ａｌ（２０１４）Ｎａｔｕｒｅ ５１５（７５２８）：５７７－５８１；Ｓｎｙｄｅｒ，Ａ．，ｅｔ ａｌ（２０１４）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３７１（２３）：２１８９－２１９９；Ｔｒａｎ，Ｅ．ｅｔ ａｌ（２０１４）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４４（６１８４）：６４１－６４５，Ｔｒａｎ，Ｅ．ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３５０（６２６６）：１３８７－１３９０）、および腫瘍ＰＤ－Ｌ１発現（Ｇｉｂｎｅｙ、Ｗｅｉｎｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１６、Ｔｏｐａｌｉａｎ、Ｔａｕｂｅ ｅｔ ａｌ．２０１６））、腫瘍変異負荷、および腫瘍ＰＤ－Ｌ１発現である。
【0005】
Ｆｃガンマ受容体（ＦｃγＲ）は、単球、マクロファージ、樹状細胞、好中球、肥満細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞、およびＢリンパ球等の免疫エフェクター細胞の細胞表面に見られる膜タンパク質である。この名称は、抗体のＦｃ領域へのそれらの結合特異性に由来する。Ｆｃ受容体は細胞膜に見られ、原形質膜または細胞質膜としても既知である。ＦｃγＲは、活性化ＦｃγＲと抑制性ＦｃγＲに細分することができ、これらは、クラスター化した免疫グロブリンＧ Ｆｃの結合により細胞の活性化を協調的に制御し、それぞれ、細胞内ＩＴＡＭまたはＩＴＩＭモチーフを介して活性化または抑制性シグナルを細胞に伝達することが知られている。クラスター化した免疫グロブリンまたは免疫複合体のＦｃγＲ結合は、細胞への抗体の内在化を媒介し、抗体媒介性食作用、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害、または抗原提示もしくは交差提示をもたらす可能性がある。ＦｃγＲは、抗体に結合した細胞表面受容体の架橋を媒介または増強することも知られている。このような架橋は、一部の抗体には必要であるが（Ｌｉ，Ｆ．ｅｔ ａｌ（２０１１）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３３（６０４５）：１０３０－１０３４；Ｗｈｉｔｅ，Ａ．Ｌ．ｅｔ ａｌ（２０１１）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １８７（４）：１７５４－１７６３）、すべての（Ｒｉｃｈｍａｎ、Ｌ．Ｐ．ｅｔ ａｌ（２０１４）Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ３：ｅ２８６１０）抗体が標的細胞においてシグナル伝達を活性化する能力に必要ではないことが分かっており、治療効果を達成するために必要な場合と必要でない場合がある。
【0006】
ヒトにおいて、ＦｃγＲＩＩｂ（ＣＤ３２ｂ）は、抑制性Ｆｃγ受容体であり、一方ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩａ（ＣＤ３２ａ）、ＦｃγＲＩＩｃ（ＣＤ３２ｃ）、およびＦｃγＲＩＩＩａ（ＣＤ１６ａ）は、活性化Ｆｃγ受容体である。ＦｃγｇＲＩＩＩｂは、ＩＴＡＭモチーフを欠く好中球に発現するＧＰＩ結合受容体であり、活性化ＦｃγＲシグナル伝達を相殺するデコイ受容体として作用すると考えられている（Ｔｒｅｆｆｅｒｓ、Ｌ．Ｗ．ｅｔ ａｌ（２０１８）Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ９：３１２４）。マウスにおいて、活性化受容体は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＩおよびＦｃγＲＩＶである。
【0007】
抗体がＦｃγ受容体との相互作用を介して免疫細胞活性を調節し得ることは、公知である。具体的には、抗体免疫複合体が免疫細胞の活性化をどのように調節するかは、活性化Ｆｃγ受容体および抑制性Ｆｃγ受容体の相対的な関与によって判定される。異なる抗体アイソタイプは、異なる親和性で活性化Ｆｃγ受容体および抑制性Ｆｃγ受容体に結合し、結果として異なるＡ：Ｉ比率（活性化：抑制の比率）をもたらす（Ｎｉｍｍｅｒｊａｈｎ ｅｔ ａｌ；Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００５ Ｄｅｃ ２；３１０（５７５３）：１５１０－２）。
【0008】
抗体は、そのＦｃドメインを介して抑制性Ｆｃγ受容体に結合することにより、エフェクター細胞機能を抑制、遮断、および／または下方調節することができる。抗体は、そのＦｃドメインを介して抑制性ＦｃγＲに結合することにより、標的細胞上の抗体が標的とするシグナル伝達受容体の凝集により細胞活性化を刺激することができる（Ｌｉ，Ｆ．ｅｔ ａｌ（２０１１）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３３（６０４５）：１０３０－１０３４；Ｗｈｉｔｅ，Ａ．Ｌ．ｅｔ ａｌ（２０１１）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １８７（４）：１７５４－１７６３；Ｗｈｉｔｅ，Ａ．Ｌ．ｅｔ ａｌ（２０１１）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １８７（４）：１７５４－１７６３Ｗｈｉｔｅ，Ａ．Ｌ．ｅｔ ａｌ（２０１４）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９３（４）：１８２８－１８３５。
【0009】
抗体は、活性化Ｆｃγ受容体に結合することにより、エフェクター細胞の機能を活性化し、それによって抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）、サイトカイン放出、および／または抗体依存性エンドサイトーシス、ならびに好中球の場合、ネトーシス（すなわち、ＮＥＴ（好中球細胞外トラップ）の活性化および放出）等の機構を誘発することができる。活性化Ｆｃγ受容体に結合する抗体も、ＣＤ４０、ＭＨＣＩＩ、ＣＤ３８、ＣＤ８０、および／またはＣＤ８６等の特定の活性化マーカーの増加を引き起こすことができる。
【0010】
活性化Ｆｃγ受容体および抑制性Ｆｃγ受容体による抗体誘導エフェクター細胞応答の協調的調節と一致して、活性化Ｆｃγ受容体は、腫瘍細胞の枯渇および腫瘍を直接標的とする抗体の治療活性を促進することが示されている。前臨床および臨床研究により、腫瘍を直接標的とする抗体、すなわちその治療活性が腫瘍細胞の直接結合および死滅に関与する抗体、例えば、抗ＣＤ２０、抗Ｈｅｒ２および抗ＥＧＦＲ抗体の抗腫瘍活性が、活性化Ｆｃγ受容体に対してより高い親和性を示す対立遺伝子を保有し（Ｃａｒｔｒｏｎ，Ｇ．ｅｔ ａｌ（２００２）Ｂｌｏｏｄ ９９（３）：７５４－７５８；Ｍｕｓｏｌｉｎｏ，Ａ．，ｅｔ ａｌ（２００８）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２６（１１）：１７８９－１７９６；Ｚｈａｎｇ，Ｗ．ｅｔ ａｌ（２００７）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２５（２４）：３７１２－３７１８）、抑制性Ｆｃγ受容体と比較して活性化Ｆｃγ受容体へのより強い結合を示す抗体アイソタイプおよびフォーマット（高Ａ：Ｉ比）を有する患者において増強されることが実証されている（Ｇｏｅｄｅ，Ｖ．ｅｔ ａｌ（２０１４）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３７０（１２）：１１０１－１１１０）。逆に、腫瘍を直接標的とする抗体の治療活性は、抑制性ＦｃγＲＩＩＢを欠く動物において（Ｃｌｙｎｅｓ、Ｒ．Ａ．ｅｔ ａｌ（２０００）Ｎａｔ Ｍｅｄ ６（４）：４４３－４４６）、または本発明者の一部によってより最近示されたように、抑制性ＦｃγＲＩＩＢが拮抗性抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体によって遮断された場合に増強される（Ｒｏｇｈａｎｉａｎ、Ａ。ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２７（４）：４７３－４８８）。
【0011】
新たな前臨床および臨床データは、Ｆｃγ受容体が、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１を標的とする免疫チェックポイント阻害抗体を含む免疫調節抗体の有効性も制御することを示している。ヒトおよびマウスにおいて、抗ＣＴＬＡ－４抗体の治療活性が活性化Ｆｃγ受容体の関与によって促進されるという証拠がある：ＦｃγＲＩＩＩａ遺伝子の高親和性対立遺伝子を保有する黒色腫患者は、低親和性ＦｃγＲＩＩＩａ対立遺伝子を発現する患者と比較して、イピリムマブに応答して生存率の改善を示した。さらに、活性化受容体および抑制性受容体についてヒト化されたマウスにおいて、治療有効性がＦｃγＲ依存性であり、高いＡ：Ｉ比の抗体アイソタイプで増強されることが示された（Ａｒｃｅ Ｖａｒｇａｓ，Ｆ．ｅｔ ａｌ（２０１８）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ３３（４）：６４９－６６３ ｅ６４４）。
【0012】
これらの発見は、ＦｃγＲＩＩＢ遮断抗体が抗ＣＴＬＡ－４抗体の活性を増強する能力を調査することを私たちに促した。活性化ヒトＦｃγＲおよび抑制性ヒトＦｃγＲの両方に結合する能力が高いヒトＩｇＧ１と、Ｆｃドメインを介したＦｃγＲへの結合が著しく損なわれていることを示すＦｃ操作された変異体との、２つの異なるタイプのＦｃγＲＩＩＢ遮断抗体が、本発明者らの一部によって以前に生成され、開示されている（Ｒｏｇｈａｎｉａｎ，Ａ．，ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２７（４）：４７３－４８８）。これらの２つの異なるタイプの抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体は、Ｂ細胞におけるＣＤ２０内在化およびＦｃγＲＩＩＢシグナル伝達の遮断において同等に拮抗的であることが示されており、どちらもヒトＦｃγＲＩＩＢおよびヒトＣＤ２０を発現する動物トランスジェニック動物における抗ＣＤ２０ｍＡｂ媒介Ｂ細胞枯渇を改善した。
【0013】
国際特許出願第ＰＣＴ／ＥＰ２０１９／０５０５６６号において、我々は、Ｆｃ領域を欠いた、またはＦｃ領域がＦｃγＲへの低下したもしくは損なわれた結合を示した抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体のみが、抗ＣＴＬＡ－４抗体の治療活性の治療活性を増強できることを実証した。固形がんの異なるマウス実験モデルにおいて、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合能の高い抗ＦｃγＲＩＩＢではなく、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合が損なわれた抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体との併用治療が、抗ＣＴＬＡ－４の治療活性を増強し、ヒト化ＰＢＭＣのインビボモデルにおいて、臨床的に関連する抗ＣＴＬＡ－４抗体イピリムマブのＴｒｅｇ枯渇の促進が示された。ＩＬ－２Ｒ（ＣＤ２５）およびＰＤ－Ｌ１に特異的な抗体の枯渇および／または治療有効性に対する同様の増強効果が、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合が損なわれた抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体との併用治療後に観察され、促進効果が特定の標的または細胞型に限定されなかったことが示された。
【0014】
抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１抗体の治療活性の制御におけるＦｃγ受容体の役割は前臨床試験によって示されているが、活性化Ｆｃγ受容体および抑制性Ｆｃγ受容体の個々の役割は明らかになっていない。Ｄａｈａｎらは、ＰＤ－Ｌ１に対するマウス抗体は抗腫瘍活性に対するＦｃγＲの関与から恩恵を受けるが、逆に抗ＰＤ－１抗体の活性はＦｃγＲの関与によって損なわれることを報告した（Ｄａｈａｎ，Ｒ．ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２８（３）：２８５－２９５）。特に、高いＡ：Ｉ比を有する、すなわち抑制性Ｆｃγ受容体と比較して活性化Ｆｃγ受容体の強い関与をもたらす抗ＰＤ－１抗体アイソタイプ（ｍＩｇＧ２ａ）は、より低いＡ：Ｉ比を有する、すなわち抑制性Ｆｃγ受容体の比較的強い関与を示すｍＩｇＧ１アイソタイプと比較して、またＦｃ：ＦｃγＲ結合に欠陥のある抗ＰＤ－１変異抗体と比較して、より低い治療活性を示した。
【0015】
臨床的に関連するヒト抗ＰＤ－１ＩｇＧ４抗体ニボルマブ、および特許請求される同様のＦｃγ受容体結合プロファイルを有する代替ラットＩｇＧ２ａ抗体を使用して、Ａｒｌａｕｋａｓと同僚は、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合が損なわれた（脱グリコシル化）抗ＰＤ－１変異体抗体が、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合能の高い野生型ヒトＩｇＧ４およびラットＩｇＧ２ａ抗ＰＤ－１同等物と比較して治療活性を改善したことを同様に発見した（Ａｒｌａｕｃｋａｓ，Ｓ．Ｐ．ｅｔ ａｌ（２０１７）Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ９（３８９））。しかしながら、Ｄａｈａｎらとは対照的に、著者らは、個々のＦｃγ受容体に対する遮断抗体を使用して、抗ＰＤ－１抗体の有効性の低下の根底にあるものとして、活性化マウスＦｃγ受容体ＩＩＩおよび抑制性マウスＦｃγ受容体ＩＩを特定した。その結果、抗ＰＤ－１抗体の有効性の低下の根底にある（個々の）活性化Ｆｃγ受容体および抑制性Ｆｃγ受容体の相対的な重要性、それらが臨床的に関連するヒト抗ＰＤ－１抗体の有効性をどのように制限するか、または抗ＰＤ－１抗体活性を増強するためにどの活性化ＦｃγＲまたは抑制性ＦｃγＲを遮断する必要があるかは、先行技術からは明らかではない。
【発明の概要】
【0016】
本明細書で開示されるのは、
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療に使用するための、
Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子との組み合わせである。
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療に使用するための、
Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子との組み合わせである。
【0017】
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療に使用するための、
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子と、を含む医薬組成物もまた本明細書において開示される。
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子と、を含む医薬組成物もまた本明細書において開示される。
【0018】
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療に使用するためのキットであって、
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子と、を含むキットがさらに本明細書において開示される。
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子と、を含むキットがさらに本明細書において開示される。
【0019】
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療に使用するための薬物の製造における、
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子、および
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子の使用が本明細書においてさらに開示される
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子、および
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子の使用が本明細書においてさらに開示される
【0020】
中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんを治療するための方法であって、
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子と、を投与することを含む方法もまた本明細書において開示される。
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子と、を投与することを含む方法もまた本明細書において開示される。
【0021】
患者が、
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子との併用治療の恩恵を受けるかどうかを判定するための診断試験であって、
試験は患者の腫瘍浸潤Ｔリンパ球におけるＰＤ－１発現を判定することを含み、中程度または高度のＰＤ－１発現は、患者が併用治療の恩恵を受けることを示す診断試験が、本明細書においてさらに開示される。それに応じて、Ｔリンパ球における中程度または高度のＰＤ－１発現を欠く一方で、ＰＤ－１発現が低いことは、患者が併用治療の恩恵を受けないことを示唆する。
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子との併用治療の恩恵を受けるかどうかを判定するための診断試験であって、
試験は患者の腫瘍浸潤Ｔリンパ球におけるＰＤ－１発現を判定することを含み、中程度または高度のＰＤ－１発現は、患者が併用治療の恩恵を受けることを示す診断試験が、本明細書においてさらに開示される。それに応じて、Ｔリンパ球における中程度または高度のＰＤ－１発現を欠く一方で、ＰＤ－１発現が低いことは、患者が併用治療の恩恵を受けないことを示唆する。
【発明を実施するための形態】
【0022】
本明細書では、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合が損なわれた抗ＦｃγＲＩＩＢではなく、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合能の高い抗ＦｃγＲＩＩＢのみが、インビボで抗ＰＤ－１抗体の治療有効性を高め、インビトロでＰＤ－１高発現Ｔ細胞の臨床的に関連するヒト抗ＰＤ－１抗体によって誘発される食作用を防ぐことを示す。抗ＰＤ－１療法におけるＦｃγＲの役割に関する上記の研究は、根底にある損なわれた抗ＰＤ－１抗体活性として、抑制性ＦｃγＲと比較した活性化ＦｃγＲの幅広い役割（Ｄａｈａｎ，Ｒ．ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２８（３）：２８５－２９５）、または個々の活性化（ＦｃγＲＩＩＩ）および抑制性ＦｃγＲＩＩＢ（Ａｒｌａｕｃｋａｓ，Ｓ．Ｐ．ｅｔ ａｌ（２０１７）Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ９（３８９））のいずれかを示しているため、この発見は新規であり、かつ予想外である。
【0023】
本発明は、特に、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合能の高い抗ＦｃγＲＩＩＢではなく、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合が損なわれた抗ＦｃγＲＩＩＢのみが治療活性を増強する、抗ＣＴＬＡ－４を含む、他の免疫チェックポイントに対する抗体に関する本発明者らの以前の発見のいくつかを考慮するとさらに驚くべきことである。
【0024】
したがって、本発明は、中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者のがんの治療における
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する抗体分子（本明細書では第１の抗体分子と表される）と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する抗体分子（本明細書では第２の抗体分子と表される）との併用に関する。
（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する抗体分子（本明細書では第１の抗体分子と表される）と、
（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する抗体分子（本明細書では第２の抗体分子と表される）との併用に関する。
【0025】
この組み合わせは、ＦｃγＲＩＩＢを含むＦｃγＲへの結合を減少させることにより、ＰＤ－１に特異的に結合する抗体分子、すなわち抗ＰＤ－１抗体の治療有効性を改善することを目的として、患者の固形がん等のがんの治療に使用されることを意図している。
【0026】
ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する本発明による抗体分子、すなわち第１の抗体は、抗体のＦａｂ領域を介して、すなわち、それぞれ重鎖および軽鎖の１つの定常領域および１つの可変領域で構成される、抗原に結合する抗体上の抗原結合領域を介して、このＦｃγ受容体に結合または相互作用する。特に、それは、免疫エフェクター細胞上に存在するＦｃγＲＩＩｂ、特に免疫エフェクター細胞の表面に存在するＦｃγＲＩＩｂに結合する。
【0027】
上記に加えて、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する本発明による抗体分子、すなわち第１の抗体分子は、既知であるように（Ｂｒｕｈｎｓ，Ｐ．ｅｔ ａｌ（２００９）Ｂｌｏｏｄ １１３（１６）：３７１６－３７２５）、またヒトＩｇＧ１アイソタイプの抗体について広く特徴付けられているように、Ｆｃ領域とＦｃ受容体との間の相互作用によって活性化Ｆｃγ受容体にも結合する。
【0028】
これは、少なくとも以下の治療上重要な結果をもたらす：活性化Ｆｃγ受容体および抑制性Ｆｃγ受容体の両方が抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体依存性（Ｆａｂ－およびＦｃ－）の様式で遮断され、マクロファージの食作用、または他のＦｃγ受容体を発現する免疫エフェクター細胞の抗ＰＤ－１抗体によって媒介される、抗ＰＤ－１抗体でコーティングされた抗腫瘍Ｔ細胞の除去を防止する（この文脈においてコーティングされたということは、抗ＰＤ－１抗体が細胞に結合したことを意味する）。この機構は、以前に記載されているように、Ｔ細胞からＦｃγＲ発現エフェクター細胞、例えばマクロファージへの、ＰＤ－１抗体のマクロファージＦｃγＲ依存性転移の阻害にさらに関与し得る（Ａｒｌａｕｃｋａｓ，Ｓ．Ｐ．ｅｔ ａｌ（２０１７）Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ９（３８９））。
【0029】
Ｆｃガンマ受容体を発現する免疫エフェクター細胞は、本明細書では主に自然エフェクター細胞を指し、具体的には、マクロファージ、好中球、単球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好塩基球、好酸球、肥満細胞、および血小板を含む。細胞傷害性Ｔ細胞およびメモリーＴ細胞は、通常はＦｃγＲを発現しないが、特定の状況下では発現し得る。いくつかの実施形態において、免疫エフェクター細胞は、自然免疫エフェクター細胞である。いくつかの実施形態において、免疫エフェクター細胞はマクロファージである。
【0030】
ＰＤ－１に特異的に結合または相互作用する抗体分子、すなわち第２の抗体分子は、抗ＰＤ－１抗体でコーティングされた抗腫瘍Ｔ細胞の抗体－ＰＤ－１抗体依存性ＦｃγＲエフェクター細胞依存性の除去を可能にする活性化Ｆｃγ受容体に結合または相互作用するＦｃ領域を有する。抗ＰＤ－１抗体分子が結合する免疫細胞は、ＣＤ８＋またはＣＤ４＋Ｔ細胞等の重要な抗腫瘍活性を付与する免疫細胞である。
【0031】
その結果、ＰＤ－１を発現する抗腫瘍Ｔ細胞のＦｃγＲ発現エフェクター細胞の除去をもたらす程度までＦｃ領域が活性化Ｆｃγ受容体に結合または相互作用する、ヒトＩｇＧ４、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、およびＩｇＧ３アイソタイプのものを含む任意の抗ＰＤ－１変異抗体は、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合能の高い抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体、すなわち、Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する抗体分子と組み合わせることができる。
【0032】
第２の抗体は抗ＰＤ－１抗体である。ＣＤ２７９としても知られるＰＤ－１（プログラム細胞死タンパク質１）は、免疫チェックポイント、すなわち、免疫細胞上のチェックポイントタンパク質である。それはリンパ節の抗原特異的Ｔ細胞のアポトーシスを促進し、制御性Ｔ細胞のアポトーシスを減少させる。ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（登録商標））、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標））、およびセミプリマブ（ＬＩＢＴＡＹＯ（登録商標））等のＰＤ－１阻害剤は、免疫系を活性化して腫瘍を攻撃するためにがん治療に使用される。ＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１のいずれかを標的とするモノクローナル抗体は、ＰＤ－１のＰＤ－Ｌ１への結合を遮断することができ、がん細胞に対する免疫応答を高め得る。
【0033】
抗ＰＤ－１抗体は、腫瘍内Ｔ細胞に発現するＰＤ－１に結合する。
【0034】
本発明による治療の恩恵を受ける患者は、承認された抗ＰＤ－１抗体含有レジメンの標準的な基準に従って、抗ＰＤ－１療法に適格であり、中程度または高度のＰＤ－１発現を伴う腫瘍浸潤Ｔリンパ球（すなわち、腫瘍浸潤ＣＤ３＋リンパ球）を有する患者である。抗ＰＤ－１療法に適格な患者には、黒色腫；小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）および非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を含む肺がん（非扁平上皮ＮＳＣＬＣおよび扁平上皮ＮＳＣＬＣを含み、転移性ＮＳＣＬＣを含む）；頭頸部扁平上皮がん（ＨＮＳＣＣ）を含む頭頸部がん；ホジキンリンパ腫；原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）；進行性尿路上皮がんを含む膀胱がん；不安定性が高い（ＭＳＩ－Ｈ）および／またはミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）のがんを含む結腸直腸がん；進行胃がんおよび胃または胃食道接合部（ＧＥＪ）腺がんを含む胃がん；子宮頸がん；肝細胞がんを含む肝臓がん；メルケル細胞がん（ＭＣＣ）；治癒的手術または治癒的放射線療法の候補ではない患者における局所進行ＣＳＣＣを含む、腎細胞がん（ＲＣＣ）および皮膚扁平上皮がん（ＣＳＣＣ）を含む腎臓がんを患っている患者が含まれる。当業者には既知であるように、治療することができる適応症の数は、新しい治験、新しい抗ＰＤ－１抗体、および新しい組み合わせによって急速に拡大している。
【0035】
本発明に至る研究において、抗ＰＤ－１抗体がＰＤ－１の中程度または高度の発現を有するＴ細胞に投与されると、これは、抗ＰＤ－１抗体でコーティングされたＴ細胞の、特にＣＤ８陽性Ｔ細胞の、食作用につながる可能性があることが観察された。本発明に至る研究において、Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する抗体分子を、抗ＰＤ－１抗体とともに投与することにより、ＰＤ－１の中程度または高度の発現を有するＴ細胞で食作用が遮断される可能性があることがさらに見出された。後述の実施例でさらに説明される、上記の発見に使用されたインビトロアッセイのインビボ関連性は、免疫能のあるマウスを含む２つの異なる固形がん実験モデルで確認され、抗ＰＤ－１による単剤治療と比較して、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合能の高い抗ＦｃγＲＩＩＢおよび抗ＰＤ－１抗体との併用治療の生存率が大幅に向上したことが観察された。これはまた、後述の実施例により詳細に示される。インビトロアッセイのインビボ関連性をさらに支持するように、腫瘍内インビボＴ細胞のＰＤ－１発現レベルは２つの設定で類似していた。インビボでの腫瘍内Ｔ細胞のＰＤ－１発現は、細胞当たり約２０，０００～８０，０００個のＰＤ－１分子の範囲であり、ＰＤ－１のインビトロ発現レベルは中程度（１５，５００～７８，０００個のＰＤ－１分子）および高度に発現する（細胞当たり６５，０００～３９１，０００個のＰＤ－１分子）ヒトＴ細胞におよび、どちらもヒト抗ＰＤ－１媒介性食作用のＦｃ：ＦｃγＲ結合の高い抗ＦｃγＲＩＩＢによる遮断に感受性を示した。
【0036】
したがって、本発明の文脈において、本明細書に記載の治療の恩恵を受ける可能性のある患者は、ＰＤ－１の中程度または高度の発現を有する少なくとも１０％の腫瘍浸潤Ｔリンパ球を有する患者である。
【0037】
本明細書において、中程度または高度の発現は、腫瘍浸潤Ｔリンパ球の少なくとも１０％の、細胞当たり≧１５，５００個のＰＤ－１分子の発現を指す。後にさらに説明するように、ＰＤ－１発現の絶対数は、どの抗ＰＤ－１抗体および／またはどの方法がＰＤ－１発現の測定に使用されるかによって異なる場合がある。したがって、本明細書で使用される細胞当たり１５，５００個以上のＰＤ－１分子の中程度または高度の発現は、本明細書に記載の方法で、かつ／または抗ヒトＰＤ－１抗体ＥＨ１２．２Ｈ７（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄから入手可能）を使用して測定される。
【0038】
インビボ設定と同様に、個々の患者の腫瘍内Ｔ細胞は不均一なＰＤ－１発現を示す。個々の患者は、ＰＤ－１の異なる発現を有する異なる細胞集団を有する可能性があり、例えば、ある集団は低度の発現を有し、ある集団は中程度または高度の発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも１５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも２０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも２５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも３０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも３５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも４０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも４５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも５０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも５５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも６０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも６５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも７０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも７５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも８０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも８５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋Ｔリンパ球の少なくとも９０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。
【0039】
いくつかの実施形態において、中程度または高度のＰＤ－１発現を有するのは、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３陽性およびＣＤ８陽性（ＣＤ３＋ＣＤ８＋）Ｔリンパ球である。
【0040】
いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも１０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも１５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも２０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも２５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも３０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも３５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも４０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも４５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも５０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも５５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも６０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも６５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも７０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも７５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも８０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも８５％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。いくつかの実施形態において、患者の腫瘍浸潤ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔリンパ球の少なくとも９０％は、中程度または高度のＰＤ－１発現を有する。
【0041】
個々の患者の腫瘍細胞におけるＰＤ－１の発現は、腫瘍生検由来の細胞または組織を使用して測定することができる。より具体的には、Ｔ細胞の絶対発現レベルは、本明細書に記載されるか、または同等のフローサイトメトリーおよびビーズベースの抗体および細胞エピトープ定量化キットを使用して定量化することができる。代替的に、腫瘍組織生検を使用した免疫組織化学によって半定量分析を実行し、患者の生検の抗ＰＤ－１染色を、抗ＦｃγＲＩＩＢ媒介性の抗ＰＤ－１抗体活性の増強に感受性のある（細胞当たり≧１５，５００個のＰＤ－１分子）または感受性のない（細胞当たり＜１５，５００個のＰＤ－１分子）ことと関連する定義および判定されたＰＤ－１レベルを発現する組織またはサイトスピンした細胞の染色と比較することができる。重要なことに、ヒトＴ細胞ＰＤ－１発現を判定する方法が本明細書に記載の定量化方法と異なる場合、または異なる抗ＰＤ－１抗体クローンまたは蛍光標識を使用する場合、アッセイを、例えば、後述の実施例、特に図１を参照する実施例１に詳細に記載される方法と比較および検証する必要がある。一般的には、図１を参照して実施例１に例示されるように、ＰＤ－１発現を定量化する１つの方法は、定義された比率で蛍光色素で標識された抗体を使用することであり、例えば、また好ましくはいくつかの実施形態におけるように、１：１の比率でフィコエリトリン（ＰＥ）で標識された抗体を使用することである。これにより、定義された数の蛍光色素（例えばＰＥ）分子を含むビーズを使用して標準曲線を作成し、細胞に結合した抗体の分子数を判定することができる。試験する細胞を標識した抗ＰＤ１抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄの抗ヒトＰＤ－１抗体ＥＨ１２．２Ｈ７等）とインキュベートし、ビーズおよび細胞を同じ設定で流すことができるように設定されたＦＡＣＳ機を使用して分析する。例えば、ビーズ当たりのＬｏｇ分子とＬｏｇ蛍光をプロットすることによって標準曲線を作成し、次いで蛍光色素で標識した抗ＰＤ１抗体染色細胞を流し、Ｌｏｇ平均蛍光強度（ＭＦＩ）を用いて結合した抗体の数を計算する。
【0042】
上で言及されるように、絶対数は、どの抗ＰＤ１抗体が測定に使用されるかによって異なる場合がある。
【0043】
免疫細胞上のＰＤ－１に特異的に結合することに加えて、第２の抗体分子は、そのＦｃ領域を介して少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体分子は、そのＦｃ領域を介して少なくとも１つの活性化Ｆｃγ受容体に結合する。第２の抗体は、そのＦｃ領域を介して、免疫エフェクター細胞上に存在する活性化Ｆｃγ受容体等の活性化Ｆｃγ受容体に結合することができる可能性がある。活性化Ｆｃγ受容体に結合できるようにするために、第２の抗体のＦｃ領域は、少なくともいくつかの実施形態において、２９７位でグリコシル化され得る。この位置の炭水化物残基は、Ｆｃγ受容体への結合に役立つ。いくつかの実施形態において、これらの残基は、末端ガラクトース残基およびシアル酸とともに、ＧｌｎＮＡｃ、マンノースを含む二分岐炭水化物であることが好ましい。Ｆｃ分子のＣＨ2部分を含む必要がある。
【0044】
本発明はさらに、本明細書に記載の治療、すなわち、（ｉ）Ｆａｂ領域を介してＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合し、Ｆｃ領域を介してＦｃγ受容体に結合する、第１の抗体分子と、（ｉｉ）Ｆｃ領域を介してＰＤ－１に特異的に結合し、少なくとも１つのＦｃγ受容体に結合する、第２の抗体分子との併用治療の恩恵を受ける患者を特定するために使用することができる診断試験に関する。抗ＦｃγＲＩＩＢ媒介性の抗ＰＤ－１抗体の有効性の向上に関連するインビボＰＤ－１発現レベル、ならびに治療上関連するヒト抗ＰＤ－１抗体およびヒトＴ細胞およびマクロファージを組み込んだインビトロ食作用アッセイに基づいて、本発明者らは、特定のＴ細胞ＰＤ－１受容体発現レベルが、抗ＦｃγＲＩＩＢ媒介性の抗ＰＤ－１治療有効性の増強に関連し、またそれに必要であると判定した。本発明による診断試験は、この所見に基づいており、したがって、患者から得られた腫瘍生検由来の細胞または組織等の試料中の腫瘍細胞におけるＰＤ－１の発現の測定を含む。上記のように、Ｔ細胞におけるＰＤ－１発現レベルの絶対分析または半定量分析を用いることができる。いくつかの実施形態において、診断試験は、ＰＤ－１発現の測定のための抗ＰＤ１抗体ＥＨ１２．２Ｈ７の使用に基づく。Ｔリンパ球当たり少なくとも１５，５００個のＰＤ－１分子の発現から、上記および実施例１でさらに説明されるように、患者が本発明による併用治療の恩恵を受ける可能性があることが予測される。
【0045】
抗体は、免疫学および分子生物学分野の当業者には公知である。通常は、抗体は、２つの重鎖（Ｈ）と、２つの軽鎖（Ｌ）と、を含む。本明細書では、時には、この完全な抗体分子をフルサイズ抗体または完全長抗体と称する。抗体の重鎖は、１つの可変領域（ＶＨ）および３つの定常領域（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３）を含み、抗体分子の軽鎖は、１つの可変領域（ＶＬ）および１つの定常領域（ＣＬ）を含む。可変領域（時にＦV領域と総称される）は、抗体の標的、または抗原に結合する。各可変領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される３つのループを含み、これらのループが標的の結合に関与する。定常領域は、抗体の抗原への結合には直接関与しないが、種々のエフェクター機能を呈する。それらの重鎖の定常領域のアミノ酸配列に応じて、抗体または免疫グロブリンを異なるクラスに割り当てることができる。免疫グロブリンには、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭの５つの主要なクラスがあり、ヒトでは、これらのうちのいくつかは、さらにサブクラス（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４；ＩｇＡ１およびＩｇＡ２に分割される。
【0046】
抗体の別の部分は、Ｆｃ領域（あるいはフラグメント結晶化可能ドメインとしても既知である）であり、抗体の重鎖の各々に２つの定常ドメインを含む。上で言及されるように、Ｆｃ領域は抗体とＦｃ受容体との間の相互作用に関与する。
【0047】
本明細書で用いる場合、抗体分子という用語は、完全長抗体またはフルサイズ抗体、ならびに完全長抗体の機能的フラグメントおよびこのような抗体分子の誘導体を包含する。
【0048】
フルサイズ抗体の機能的フラグメントは、対応するフルサイズ抗体と同じ抗原結合特徴を有し、対応するフルサイズ抗体と同じ可変ドメイン（すなわち、ＶＨ配列およびＶＬ配列）および／または同じＣＤＲ配列のいずれかを含む。機能的フラグメントが、対応するフルサイズ抗体と同じ抗原結合特徴を有するということは、標的上のフルサイズ抗体と同じエピトープに結合することを意味する。このような機能的フラグメントは、フルサイズ抗体のＦｖ部分に対応し得る。代替的に、このようなフラグメントは、Ｆｃ部分を含有しない、一価の抗原結合性フラグメントであるＦ（ａｂ）とも表されるＦａｂ、またはジスルフィド結合によって一緒に結合された２つの抗原結合Ｆａｂ部分を含有する二価の抗原結合性フラグメントであるＦ（ａｂ’）2、またはＦ（ａｂ’）、すなわちＦ（ａｂ’）2の一価の変異体であり得る。このようなフラグメントは、一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）でもあり得る。
【0049】
機能的フラグメントは、対応するフルサイズ抗体の６個のＣＤＲのすべてを常に含有するわけではない。３つ以下のＣＤＲ領域（場合によっては、単一のＣＤＲだけまたはその一部）を含有する分子は、そのＣＤＲに由来する抗体の抗原結合活性を保持することが可能であることが理解される。例えば、全ＶＬ鎖（３個のＣＤＲをすべて含む）がその基質に対して高い親和性を有することが、Ｇａｏ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６９：３２３８９－９３に記載されている。
【0050】
２つのＣＤＲ領域を含有する分子については、例えば、Ｖａｕｇｈａｎ＆Ｓｏｌｌａｚｚｏ ２００１，Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｈｉｇｈ Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，４：４１７－４３０に記載されている。４１８頁（右欄－３（Ｏｕｒ Ｓｔｒａｔｅｇｙ ｆｏｒ Ｄｅｓｉｇｎ））に、フレームワーク領域内に散在するＨ１およびＨ２ ＣＤＲ超可変領域のみを含むミニボディについて記載されている。ミニボディは、標的に結合することが可能であると記載されている。Ｐｅｓｓｉ ｅｔ ａｌ．，１９９３，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：３６７－９、およびＢｉａｎｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２３６：６４９－５９は、Ｖａｕｇｈａｎ＆Ｓｏｌｌａｚｚｏによって参照され、Ｈ１およびＨ２ミニボディ、ならびにその特性についてより詳細に記載している。Ｑｉｕ ｅｔ ａｌ．，２００７，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２５：９２１－９では、２つの結合されたＣＤＲからなる分子が抗原に結合することが可能であることが示されている。Ｑｕｉｏｃｈｏ １９９３，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２９３－４は、「ミニボディ」技術の概要を提供している。Ｌａｄｎｅｒ ２００７，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２５：８７５－７は、２個のＣＤＲを含有する分子が抗原結合活性を保持することが可能であると見解を述べている。
【0051】
単一のＣＤＲ領域を含有する抗体分子については、例えば、Ｌａｕｎｅ ｅｔ ａｌ．，１９９７，ＪＢＣ，２７２：３０９３７－４４に記載されており、ここでは、ＣＤＲに由来する一連のヘキサペプチドが抗原結合活性を示すことが実証され、完全な単一のＣＤＲの合成ペプチドが強力な結合活性を示すことが留意されている。Ｍｏｎｎｅｔ ｅｔ ａｌ．，１９９９，ＪＢＣ，２７４：３７８９－９６では、様々な１２量体ペプチドおよび関連するフレームワーク領域が、抗原結合活性を有することが示されており、ＣＤＲ３様ペプチド単独で抗原に結合することが可能であると見解を述べている。Ｈｅａｐ ｅｔ ａｌ．，２００５，Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．，８６：１７９１－１８００では、「マイクロ抗体」（単一のＣＤＲを含有する分子）は抗原に結合することが可能であることが報告されており、抗ＨＩＶ抗体からの環状ペプチドが、抗原結合活性および機能を有することが示されている。Ｎｉｃａｉｓｅ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１３：１８８２－９１では、単一のＣＤＲが、そのリゾチーム抗原に対する抗原結合活性および親和性を付与し得ることが示されている。
【0052】
したがって、５個、４個、３個またはそれ以下のＣＤＲを有する抗体分子は、それらが由来する完全長抗体の抗原結合特性を保持することが可能である。
【0053】
抗体分子は、完全長抗体の誘導体またはそのような抗体のフラグメントであってもよい。誘導体が、対応するフルサイズ抗体と同じ抗原結合特徴を有するということは、フルサイズ抗体と同じ標的上のエピトープに結合することを意味する。
【0054】
したがって、本明細書で用いる場合、「抗体分子」という用語は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、合成抗体、組換えで生成された抗体、多重特異性抗体、二重特異性抗体、ヒト抗体、ヒト由来抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）2フラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、抗体重鎖、抗体軽鎖、抗体重鎖のホモ二量体、抗体軽鎖のホモ二量体、抗体重鎖のヘテロ二量体、抗体軽鎖のヘテロ二量体、そのようなホモ二量体およびヘテロ二量体の抗原結合機能的フラグメントを含む、すべての種類の抗体分子、ならびにそれらの機能的フラグメントおよびそれらの誘導体を含む。
【0055】
さらに、本明細書で用いる場合、「抗体分子」という用語は、特に明記しない限り、ＩｇＧ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、およびＩｇＥを含む、すべてのクラスの抗体分子および機能的フラグメントを含む。
【0056】
いくつかの実施形態において、第１の抗体は、ヒトＩｇＧ１である。当業者は、マウスＩｇＧ２ａおよびヒトＩｇＧ１が結合して、活性化Ｆｃガンマ受容体を遮断することができ、それにより、免疫エフェクター細胞上の活性化Ｆｃガンマ受容体の抗ＰＤ－１抗体媒介性の関与、およびその後の、例えば、ＡＤＣＰまたはＡＤＣＣによる、抗ＰＤ－１抗体でコーティングされたエフェクターＴ細胞の除去を防止することを理解するであろう。このように、マウスＩｇＧ２ａがマウスにおける欠失に好ましいアイソタイプである実施形態において、ヒトＩｇＧ１は、そのような実施形態においてヒトにおける欠失に好ましいアイソタイプである。
【0057】
いくつかの実施形態において、第１の抗体は、ヒトＩｇＧ１である。他の実施形態において、第１の抗体は、ヒトＩｇＧ４、ＩｇＧ３またはＩｇＧ２である。他の実施形態において、第１の抗体は、Ｆｃガンマ受容体への結合を増強するようにＦｃ操作されたヒトＩｇＧ抗体である。いくつかの実施形態において、ヒトＩｇＧ抗体は、１つまたはいくつかの活性化Ｆｃγ受容体への結合を改善するようにＦｃ操作され、かつ／または抑制性Ｆｃγ受容体よりも活性化受容体への相対的結合を改善するように操作される。いくつかの実施形態において、抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体は、Ｆｃ操作されたヒトＩｇＧ抗体である。そのような操作された抗体変異体の例としては、ＦｃγＲＩＩＩＡへの選択的に改善された抗体結合を有する非フコシル化抗体、および抑制性ＦｃγＲＩＩＢと比較して、１つまたはいくつかの活性化Ｆｃγ受容体への結合の改善をもたらす、指向性、突然変異性、または他の手段のアミノ酸置換によって操作された抗体が含まれる（Ｒｉｃｈａｒｄｓ ｅｔ ａｌ．２００８．‘Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｂｉｎｄｉｎｇ ｔｏ ＦｃｇａｍｍａＲＩＩａ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ’，Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ，７：２５１７－２７；Ｌａｚａｒ ｅｔ ａｌ．２００６．‘Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｆｃ ｖａｒｉａｎｔｓ ｗｉｔｈ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ’，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１０３：４００５－１０）。いくつかの実施形態において、活性化Ｆｃガンマ受容体への結合を改善するように操作されたヒトＩｇＧ抗体は、そのＦｃ部分に、２つの突然変異Ｓ２３９ＤおよびＩ３３２Ｅ、または３つの突然変異Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２ＥおよびＡ３３０Ｌ、ならびに／またはＧ２３６Ａ突然変異を有するヒトＩｇＧ抗体であり得る。いくつかの実施形態において、活性化Ｆｃガンマ受容体への結合を改善するように操作されたヒトＩｇＧ抗体は、非フコシル化されたヒトＩｇＧ抗体であり得る。
【0058】
いくつかの実施形態において、第２の抗体は、ヒトＩｇＧ４であり、これは、現在ＦＤＡによって承認されている抗ＰＤ－１抗体であるニボルマブ、ペムブロリズマブ、およびセプリズマブ（ｃｅｐｌｉｚｕｍａｂ）のアイソタイプである。当業者は、いくつかのマウス抗体アイソタイプが、活性化Ｆｃガンマ受容体および抑制性Ｆｃガンマ受容体の両方に結合することができることを理解するであろう。重要なことに、当業者は、マウス活性化および抑制性Ｆｃガンマ受容体に結合するラットＩｇＧ２ａアイソタイプが、ヒト活性化および抑制性Ｆｃガンマ受容体に結合するヒトＩｇＧ４アイソタイプを厳密に模倣することが既知であることを理解するであろう（Ａｒｌａｕｃｋａｓ，Ｓ．Ｐ．ｅｔ ａｌ（２０１７）Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ９（３８９））。当業者はさらに、ヒトアイソタイプＩｇＧ１およびＩｇＧ４に加えて、ヒトＩｇＧ３およびＩｇＧ２抗体がヒトＦｃγＲと生産的に結合し（Ｓａｎｄｅｒｓ，Ｌ．Ａ．ｅｔ ａｌ（１９９５）Ｉｎｆｅｃｔ Ｉｍｍｕｎ ６３（１）：７３－８１）、免疫細胞を有する活性化Ｆｃガンマ受容体の活性化に続いて、例えば、ＡＤＣＰおよびＡＤＣＣによる、抗体依存性Ｔ細胞枯渇を媒介し得ることを理解するであろう（Ａｒｃｅ Ｖａｒｇａｓ，Ｆ．ｅｔ ａｌ（２０１８）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ３３（４）：６４９－６６３ｅ６４４）。結果として、いくつかの実施形態において、第２の抗体は、ヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ２またはＩｇＧ３抗体であり得る。
【0059】
上記の概略のように、抗体分子の異なる種類および形態は本発明に包含され、免疫学分野の当業者には既知であろう。治療目的に使用される抗体は、多くの場合、抗体分子の特性を修正する追加の構成成分を用いて改変されることが公知である。
【0060】
したがって、本発明の抗体分子または本発明に従って使用される抗体分子（例えば、モノクローナル抗体分子、および／またはポリクローナル抗体分子、および／または二重特異性抗体分子）は、検出可能な部分および／または細胞傷害性部分を備える場合を含む。
【0061】
「検出可能な部分」とは、酵素、放射性原子、蛍光部分、化学発光部分、生物発光部分で構成される群からの１つ以上を含む。検出可能な部分により、抗体分子をインビトロ、および／またはインビボ、および／またはエクスビボで視覚化することが可能になる。
【0062】
「細胞傷害性部分」とは、放射性部分および／または酵素が挙げられ、酵素はカスパーゼおよび／または毒素であり、毒素は細菌毒素または毒液であり、細胞傷害性部分は細胞溶解を誘導することが可能である。
【0063】
さらに、抗体分子は、単離された形態および／または精製された形態であってよく、ならびに／またはＰＥＧ化されてもよいことを含む。ＰＥＧ化は、その挙動を改変する、例えば、その流体力学的サイズを増加させ、腎クリアランスを予防することでその半減期を延ばすように、ポリエチレングリコールポリマーを抗体分子または誘導体等の分子に付加する方法である。
【0064】
上で考察したように、抗体のＣＤＲは、抗体標的に結合する。本明細書に記載の各ＣＤＲへのアミノ酸の割り当ては、Ｋａｂａｔ ＥＡ ｅｔ ａｌ．１９９１，”Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２，ｐｐ ｘｖ－ｘｖｉｉによる定義に従う。
【0065】
当業者が認識するように、アミノ酸を各ＣＤＲに割り当てるための他の方法も存在する。例えば、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ（ＩＭＧＴ（登録商標））（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／およびＡｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，２００１により出版のＬｅｆｒａｎｃ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ“Ｔｈｅ Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ＦａｃｔｓＢｏｏｋ”）。
【0066】
さらなる実施形態において、本発明の抗体分子、または本発明に従って使用される抗体分子は、本明細書で提供される特定の抗体と競合することが可能である抗体分子であり、特定の標的に結合するため、例えば、配列番号１～１９４に提示されるアミノ酸配列のうちのいずれかを含む抗体分子である。
【0067】
「競合することが可能である」とは、競合抗体が、本明細書で定義される抗体分子の特定の標的への結合を少なくとも部分的に抑制またはその他の方法で干渉する能力があることを意味する。
【0068】
例えば、そのような競合抗体分子は、本明細書に記載の抗体分子の結合を、少なくとも約１０％、例えば少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、約１００％抑制する能力があり得、および／あるいは特定の標的への結合を防止もしくは低減する本明細書に記載の抗体の結合能力を少なくとも約１０％、例えば少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または約１００％抑制することが可能であり得る。
【0069】
競合結合は、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）等の当業者に公知の方法によって判定することができる。
【0070】
ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、エピトープ修飾抗体または遮断抗体を評価することができる。競合抗体を同定するために好適な追加の方法は、参照により本明細書に組み込まれるＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｈａｒｌｏｗ＆Ｌａｎｅに開示されている（例えば、５６７～５６９頁、５７４～５７６頁、５８３頁、および５９０～６１２頁、１９８８，ＣＳＨＬ，ＮＹ，ＩＳＢＮ０－８７９６９－３１４－２を参照されたい）。
【0071】
抗体が定義された標的分子または抗原に特異的に結合するか、またはそれと相互作用すること、および、これは、抗体が、標的ではない分子ではなく、その標的に優先的かつ選択的に結合することを意味することはよく知られている。
【0072】
本発明による抗体の標的、または本発明に従って使用される抗体の標的は、細胞の表面で発現する、すなわち、それらは抗体にとっての、エピトープ（あるいは、これに関連して細胞表面エピトープとして既知である）を含む細胞表面抗原である。細胞表面抗原およびエピトープは、免疫学または細胞生物学の当業者によって容易に理解される用語である。
【0073】
「細胞表面抗原」とは、細胞表面抗原が、細胞膜の細胞外側に露出されているが、細胞膜の細胞外側に一時的にのみ露出される場合を含む。「一時的に露出される」とは、細胞表面抗原が、細胞内に内部移行する、あるいは細胞膜の細胞外側から細胞外空間に放出されている場合を含む。細胞表面抗原は、切断によって細胞膜の細胞外側から放出され得、これはプロテアーゼによって媒介され得る。
【0074】
また、細胞表面抗原は、細胞膜に結合し得るが、一時的にのみ細胞膜と会合する場合を含む。「一時的に会合する」とは、細胞表面抗原が、細胞膜の細胞外側から細胞外空間に放出されている場合を含む。細胞表面抗原は、切断によって細胞膜の細胞外側から放出され得、これはプロテアーゼによって媒介され得る。
【0075】
さらに、細胞表面抗原は、ペプチド、またはポリペプチド、または炭水化物、またはオリゴ糖鎖、または脂質、および／またはタンパク質、もしくは糖タンパク質、もしくはリポタンパク質上に存在するエピトープである場合を含む。
【0076】
タンパク質の結合を評価する方法は、生化学および免疫学の当業者には既知である。当業者であれば、それらの方法を使用して、抗体の標的への結合および／または抗体のＦｃ領域のＦｃ受容体への結合、ならびにそれらの相互作用の相対的な強度、もしくは特異性、もしくは抑制、もしくは防止、もしくは低減を評価することができることを理解するであろう。タンパク質の結合を評価するために使用され得る方法の例は、例えば、イムノアッセイ、ＢＩＡｃｏｒｅ、ウエスタンブロット、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、および酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）がある（抗体特異性に関する考察については、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ ａｔ ｐａｇｅｓ ３３２－３３６（１９８９）を参照されたい）。
【0077】
したがって、「特異的に結合する抗体分子」または「標的特異性抗体分子」とは、抗体分子が標的に特異的に結合するが、非標的には結合しないか、あるいは非標的に、標的よりも（例えば低い親和性で）弱く結合する場合を含む。
【0078】
また、抗体が、非標的よりも標的に少なくとも２倍強く、または少なくとも５倍強く、または少なくとも１０倍強く、または少なくとも２０倍強く、または少なくとも５０倍強く、または少なくとも１００倍強く、または少なくとも２００倍強く、または少なくとも５００倍強く、または少なくとも約１０００倍強く、特異的に結合するという意味を含む。
【0079】
加えて、抗体が標的に、少なくとも約１０-1Ｋd、または少なくとも約１０-2Ｋd、または少なくとも約１０-3Ｋd、または少なくとも約１０-4Ｋd、または少なくとも約１０-5Ｋd、または少なくとも約１０-6Ｋd、または少なくとも約１０-7Ｋd、または少なくとも約１０-8Ｋd、または少なくとも約１０-9Ｋd、または少なくとも約１０-10Ｋd、または少なくとも約１０-11Ｋd、または少なくとも約１０-12Ｋd、または少なくとも約１０-13Ｋd、または少なくとも約１０-14Ｋd、または少なくとも約１０-15ＫdのＫdで結合する場合、抗体が標的に特異的に結合するという意味を含む。
【0080】
いくつかの実施形態において、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子は、ヒト抗体である。
【0081】
いくつかの実施形態において、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子は、ヒト由来の抗体、すなわち、本明細書に記載されるように改変されたヒト由来の抗体である。
【0082】
いくつかの実施形態において、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子は、ヒト化抗体、すなわち、ヒト抗体に対する類似性を高めるように改変された非ヒト由来の抗体である。ヒト化抗体は、例えば、マウス抗体またはラマ抗体であってよい。
【0083】
いくつかの実施形態において、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子は、以下の定常領域（ＣＨおよびＣＬ）を含む：
ＩｇＧ１－ＣＨ［配列番号１］
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
ＩｇＧ１－ＣＬ［配列番号２］
ＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣＳ
ＩｇＧ１－ＣＨ［配列番号１］
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
ＩｇＧ１－ＣＬ［配列番号２］
ＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣＳ
【0084】
いくつかの実施形態において、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子は、以下のクローンのうちの１つ以上の配列を含む：
抗体クローン：１Ａ０１
１Ａ０１－ＶＨ［配列番号：３］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＹＭＮＷＩＲＱＴＰＧＫＧＬＥＷＶＳＬＩＧＷＤＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＥＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＡＹＳＧＹＥＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
１Ａ０１－ＶＬ［配列番号２７］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＡＳＩＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＤＹＹＭＮ［配列番号５１］
ＣＤＲＨ２：ＬＩＧＷＤＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号５２］
ＣＤＲＨ３：ＡＹＳＧＹＥＬＤＹ［配列番号５３］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮ［配列番号５４］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＮＲＰＳ［配列番号５５］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＡＳＩ［配列番号５６］
抗体クローン：１Ｂ０７
１Ｂ０７－ＶＨ［配列番号４］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＦＴＲＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＲＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＮＩＤＡＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
１Ｂ０７－ＶＬ［配列番号２８］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＱＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＥＡＷＤＤＲＬＦＧＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号５７］
ＣＤＲＨ２：ＦＴＲＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＲＧ［配列番号５８］
ＣＤＲＨ３：ＥＮＩＤＡＦＤＶ［配列番号５９］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮ［配列番号６０］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＱＱＲＰＳ［配列番号６１］
ＣＤＲＬ３：ＷＤＤＲＬＦＧＰＶ［配列番号６２］
抗体クローン：１Ｃ０４
１Ｃ０４－ＶＨ［配列番号５］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＤＳＧＡＧＲＹＹＡＤＳＶＥＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＴＨＤＳＧＥＬＬＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
１Ｃ０４－ＶＬ［配列番号２９］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＨＶＬＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＡＭＳ［配列番号６３］
ＣＤＲＨ２：ＳＩＳＤＳＧＡＧＲＹＹＡＤＳＶＥＧ［配列番号６４］
ＣＤＲＨ３：ＴＨＤＳＧＥＬＬＤＡＦＤＩ［配列番号６５］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＨＶＬ［配列番号６６］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＳＮＲＰＳ［配列番号６７］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＷＶ［配列番号６８］
抗体クローン：１Ｅ０５
１Ｅ０５－ＶＨ［配列番号６］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＡＭＮＷＶＲＱＶＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＮＹＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＦＤＮＳＧＹＡＩＰＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
１Ｅ０５－ＶＬ［配列番号３０］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＳＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＧＧＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＴＹＡＭＮ［配列番号６９］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＮＹＶＤＳＶＫＧ［配列番号７０］
ＣＤＲＨ３：ＮＦＤＮＳＧＹＡＩＰＤＡＦＤＩ［配列番号７１］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号７２］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＳＲＰＳ［配列番号７３］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＧＧＰＶ［配列番号７４］
抗体クローン：２Ａ０９
２Ａ０９－ＶＨ［配列番号７］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＡＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＹＩＳＲＤＡＤＩＴＨＹＰＡＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＴＴＧＦＤＹＡＧＤＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
２Ａ０９－ＶＬ［配列番号３１］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＡＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＤＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＲＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＡＷＭＳ［配列番号７５］
ＣＤＲＨ２：ＹＩＳＲＤＡＤＩＴＨＹＰＡＳＶＫＧ［配列番号７６］
ＣＤＲＨ３：ＧＦＤＹＡＧＤＤＡＦＤＩ［配列番号７７］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＡＶＮ［配列番号７８］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＳＤＲＰＳ［配列番号７９］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＲＷＶ［配列番号８０］
抗体クローン：２Ｂ０８
２Ｂ０８－ＶＨ［配列番号８］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＹＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＬＩＧＨＤＧＮＮＫＹＹＬＤＳＬＥＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＡＴＤＳＧＹＤＬＬＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
２Ｂ０８－ＶＬ［配列番号３２］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＹＤＤＬＬＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＴＴＷＤＤＳＬＳＧＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＤＹＹＭＳ［配列番号８１］
ＣＤＲＨ２：ＬＩＧＨＤＧＮＮＫＹＹＬＤＳＬＥＧ［配列番号８２］
ＣＤＲＨ３：ＡＴＤＳＧＹＤＬＬＹ［配列番号８３］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮ［配列番号８４］
ＣＤＲＬ２：ＹＤＤＬＬＰＳ［配列番号８５］
ＣＤＲＬ３：ＴＴＷＤＤＳＬＳＧＶＶ［配列番号８６］
抗体クローン：２Ｅ８－ＶＨ
２Ｅ８－ＶＨ［配列番号９］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＹＭＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＧＦＳＤＤＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＧＧＤＧＳＧＷＳＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
２Ｅ８－ＶＬ［配列番号３３］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＴＷＤＤＳＬＲＧＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＤＹＹＭＳ［配列番号８７］
ＣＤＲＨ２：ＡＩＧＦＳＤＤＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号８８］
ＣＤＲＨ３：ＧＤＧＳＧＷＳＦ［配列番号８９］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮ［配列番号９０］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＫＲＰＳ［配列番号９１］
ＣＤＲＬ３：ＡＴＷＤＤＳＬＲＧＷＶ［配列番号９２］
抗体クローン：５Ｃ０４
５Ｃ０４－ＶＨ［配列番号１０］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＷＲＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｃ０４－ＶＬ［配列番号３４］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＳＤＮＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＳＧＳＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＹＧＭＨ［配列番号９３］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号９４］
ＣＤＲＨ３：ＷＲＤＡＦＤＩ［配列番号９５］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号９６］
ＣＤＲＬ２：ＳＤＮＱＲＰＳ［配列番号９７］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＳＧＳＷＶ［配列番号９８］
抗体クローン：５Ｃ０５
５Ｃ０５－ＶＨ［配列番号１１］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＮＦＤＡＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｃ０５－ＶＬ［配列番号３５］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＳＮＳＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＱＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＴＹＧＭＨ［配列番号９９］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１００］
ＣＤＲＨ３：ＥＮＦＤＡＦＤＶ［配列番号１０１］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１０２］
ＣＤＲＬ２：ＳＮＳＱＲＰＳ［配列番号１０３］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＱＶＶ［配列番号１０４］
抗体クローン：５Ｄ０７
５Ｄ０７－ＶＨ［配列番号１２］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＡＹＤＧＳＫＫＤＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＹＲＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｄ０７－ＶＬ［配列番号３６］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＴＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＶＳＧＷＭＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＴＹＧＭＨ［配列番号１０５］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＡＹＤＧＳＫＫＤＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１０６］
ＣＤＲＨ３：ＥＹＲＤＡＦＤＩ［配列番号１０７］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１０８］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＳＮＲＰＳ［配列番号１０９］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＶＳＧＷＭ［配列番号１１０］
抗体クローン：５Ｅ１２
５Ｅ１２－ＶＨ［配列番号１３］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＩＮＫＤＹＡＤＳＭＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＲＫＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｅ１２－ＶＬ［配列番号３７］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＳＮＮＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＴＷＤＤＳＬＮＧＬＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１１１］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＩＮＫＤＹＡＤＳＭＫＧ［配列番号１１２］
ＣＤＲＨ３：ＥＲＫＤＡＦＤＩ［配列番号１１３］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１１４］
ＣＤＲＬ２：ＳＮＮＱＲＰＳ［配列番号１１５］
ＣＤＲＬ３：ＡＴＷＤＤＳＬＮＧＬＶ［配列番号１１６］
抗体クローン：５Ｇ０８
５Ｇ０８－ＶＨ［配列番号１４］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＮＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＲＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＭＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＷＮＧＭＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｇ０８－ＶＬ［配列番号３８］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＡＮＮＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＹＧＭＨ［配列番号：１１７］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＲＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１１８］
ＣＤＲＨ３：ＤＲＷＮＧＭＤＶ［配列番号１１９］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１２０］
ＣＤＲＬ２：ＡＮＮＱＲＰＳ［配列番号１２１］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＷＶ［配列番号１２２］
抗体クローン：５Ｈ０６
５Ｈ０６－ＶＨ［配列番号１５］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＤＴＡＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＨＳＶＩＧＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｈ０６－ＶＬ［配列番号３９］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＡＧＳＮＮＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１２３］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＤＴＡＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１２４］
ＣＤＲＨ３：ＤＨＳＶＩＧＡＦＤＩ［配列番号１２５］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮ［配列番号１２６］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＫＲＰＳ［配列番号１２７］
ＣＤＲＬ３：ＳＳＹＡＧＳＮＮＶＶ［配列番号１２８］
抗体クローン：６Ａ０９
６Ａ０９－ＶＨ［配列番号１６］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＴＳＹＤＧＮＴＫＹＹＡＮＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＤＣＧＧＤＣＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ａ０９－ＶＬ［配列番号４０］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＥＧＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１２９］
ＣＤＲＨ２：ＶＴＳＹＤＧＮＴＫＹＹＡＮＳＶＫＧ［配列番号１３０］
ＣＤＲＨ３：ＥＤＣＧＧＤＣＦＤＹ［配列番号１３１］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１３２］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＳＮＲＰＳ［配列番号１３３］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＥＧＶ［配列番号１３４］
抗体クローン：６Ｂ０１
６Ｂ０１－ＶＨ［配列番号１７］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＱＬＧＥＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｂ０１－ＶＬ［配列番号４１］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＴＷＤＤＳＬＳＧＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＹＧＭＨ［配列番号１３５］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１３６］
ＣＤＲＨ３：ＤＱＬＧＥＡＦＤＩ［配列番号１３７］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１３８］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＫＲＰＳ［配列番号１３９］
ＣＤＲＬ３：ＡＴＷＤＤＳＬＳＧＰＶ［配列番号１４０］
抗体クローン：６Ｃ１１
６Ｃ１１－ＶＨ［配列番号１８］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＳＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＧＧＤＩＤＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬｓＶＴＶＳＳ
６Ｃ１１－ＶＬ［配列番号４２］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＦＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＥＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＤＹＧＭＳ［配列番号１４１］
ＣＤＲＨ２：ＡＩＳＧＳＧＳＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１４２］
ＣＤＲＨ３：ＧＤＩＤＹＦＤＹ［配列番号１４３］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＦＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１４４］
ＣＤＲＬ２：ＥＮＮＫＲＰＳ［配列番号１４５］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＶ［配列番号１４６］
抗体クローン：６Ｃ１２
６Ｃ１２－ＶＨ［配列番号１９］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＲＲＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｃ１２－ＶＬ［配列番号４３］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＳＤＮＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＴＷＤＳＤＴＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１４７］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１４８］
ＣＤＲＨ３：ＥＲＲＤＡＦＤＩ［配列番号１４９］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１５０］
ＣＤＲＬ２：ＳＤＮＱＲＰＳ［配列番号１５１］
ＣＤＲＬ３：ＡＴＷＤＳＤＴＰＶ［配列番号１５２］
抗体クローン：６Ｄ０１
６Ｄ０１－ＶＨ［配列番号２０］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＤＨＳＡＡＧＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｄ０１－ＶＬ［配列番号４４］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＩＲＰＳＧＧＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＳＷＤＤＳＬＳＳＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１５３］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１５４］
ＣＤＲＨ３：ＤＨＳＡＡＧＹＦＤＹ［配列番号１５５］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮ［配列番号１５６］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＳＩＲＰＳ［配列番号１５７］
ＣＤＲＬ３：ＡＳＷＤＤＳＬＳＳＰＶ［配列番号１５８］
抗体クローン：６Ｇ０３
６Ｇ０３－ＶＨ［配列番号２１］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＧＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＤＳＡＩＩＤＹＡＧＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＤＥＡＡＡＧＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｇ０３－ＶＬ［配列番号４５］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＴＤＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＳＧＰＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１５９］
ＣＤＲＨ２：ＧＩＳＷＤＳＡＩＩＤＹＡＧＳＶＫＧ［配列番号１６０］
ＣＤＲＨ３：ＤＥＡＡＡＧＡＦＤＩ［配列番号１６１］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１６２］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＴＤＲＰＳ［配列番号１６３］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＳＧＰＶＶ［配列番号１６４］
抗体クローン：６Ｇ０８
６Ｇ０８－ＶＨ［配列番号２２］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＬＳＳＹＧＩＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＧＳＧＧＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳＳＶＧＡＹＡＮＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｇ０８－ＶＬ［配列番号４６］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＤＴＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＩＳ［配列番号１６５］
ＣＤＲＨ２：ＧＩＳＧＳＧＧＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１６６］
ＣＤＲＨ３：ＳＶＧＡＹＡＮＤＡＦＤＩ［配列番号１６７］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１６８］
ＣＤＲＬ２：ＧＤＴＮＲＰＳ［配列番号１６９］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＶ［配列番号１７０］
抗体クローン：６Ｇ１１
６Ｇ１１－ＶＨ［配列番号２３］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＬＹＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｇ１１－ＶＬ［配列番号４７］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＡＤＤＨＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＳＷＤＤＳＱＲＡＶＩＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１７１］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１７２］
ＣＤＲＨ３：ＥＬＹＤＡＦＤＩ［配列番号１７３］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１７４］
ＣＤＲＬ２：ＡＤＤＨＲＰＳ［配列番号１７５］
ＣＤＲＬ３：ＡＳＷＤＤＳＱＲＡＶＩ［配列番号１７６］
抗体クローン：６Ｈ０８
６Ｈ０８－ＶＨ［配列番号２４］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＮＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＫＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＹＫＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｈ０８－ＶＬ［配列番号４８］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＱＡＷＧＴＧＩＲＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＹＧＭＨ［配列番号１７７］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１７８］
ＣＤＲＨ３：ＥＹＫＤＡＦＤＩ［配列番号１７９］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮ［配列番号１８０］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＫＲＰＳ［配列番号１８１］
ＣＤＲＬ３：ＱＡＷＧＴＧＩＲＶ［配列番号１８２］
抗体クローン：７Ｃ０７
７Ｃ０７－ＶＨ［配列番号２５］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＱＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＦＧＹＩＩＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
７Ｃ０７－ＶＬ［配列番号４９］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＲＤＹＥＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＭＡＷＤＤＳＬＳＧＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１８３］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１８４］
ＣＤＲＨ３：ＥＦＧＹＩＩＬＤＹ［配列番号１８５］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮ［配列番号１８６］
ＣＤＲＬ２：ＲＤＹＥＲＰＳ［配列番号１８７］
ＣＤＲＬ３：ＭＡＷＤＤＳＬＳＧＶＶ［配列番号１８８］
抗体クローン：４Ｂ０２
４Ｂ０２－ＶＨ［配列番号２６］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＨＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＴＮＫＹＹＡＤＳＶＲＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＴＷＤＡＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
４Ｂ０２－ＶＬ［配列番号５０］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＮＡＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＱＡＷＤＳＳＴＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＨＧＭＨ［配列番号１８９］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＴＮＫＹＹＡＤＳＶＲＧ［配列番号１９０］
ＣＤＲＨ３：ＥＴＷＤＡＦＤＶ［配列番号１９１］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＮＡＮ［配列番号１９２］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＫＲＰＳ［配列番号１９３］
ＣＤＲＬ３：ＱＡＷＤＳＳＴＶＶ［配列番号１９４］
抗体クローン：１Ａ０１
１Ａ０１－ＶＨ［配列番号：３］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＹＭＮＷＩＲＱＴＰＧＫＧＬＥＷＶＳＬＩＧＷＤＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＥＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＡＹＳＧＹＥＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
１Ａ０１－ＶＬ［配列番号２７］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＡＳＩＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＤＹＹＭＮ［配列番号５１］
ＣＤＲＨ２：ＬＩＧＷＤＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号５２］
ＣＤＲＨ３：ＡＹＳＧＹＥＬＤＹ［配列番号５３］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮ［配列番号５４］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＮＲＰＳ［配列番号５５］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＡＳＩ［配列番号５６］
抗体クローン：１Ｂ０７
１Ｂ０７－ＶＨ［配列番号４］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＦＴＲＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＲＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＮＩＤＡＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
１Ｂ０７－ＶＬ［配列番号２８］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＱＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＥＡＷＤＤＲＬＦＧＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号５７］
ＣＤＲＨ２：ＦＴＲＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＲＧ［配列番号５８］
ＣＤＲＨ３：ＥＮＩＤＡＦＤＶ［配列番号５９］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮ［配列番号６０］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＱＱＲＰＳ［配列番号６１］
ＣＤＲＬ３：ＷＤＤＲＬＦＧＰＶ［配列番号６２］
抗体クローン：１Ｃ０４
１Ｃ０４－ＶＨ［配列番号５］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＤＳＧＡＧＲＹＹＡＤＳＶＥＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＴＨＤＳＧＥＬＬＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
１Ｃ０４－ＶＬ［配列番号２９］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＨＶＬＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＡＭＳ［配列番号６３］
ＣＤＲＨ２：ＳＩＳＤＳＧＡＧＲＹＹＡＤＳＶＥＧ［配列番号６４］
ＣＤＲＨ３：ＴＨＤＳＧＥＬＬＤＡＦＤＩ［配列番号６５］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＨＶＬ［配列番号６６］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＳＮＲＰＳ［配列番号６７］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＷＶ［配列番号６８］
抗体クローン：１Ｅ０５
１Ｅ０５－ＶＨ［配列番号６］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＡＭＮＷＶＲＱＶＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＮＹＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＮＦＤＮＳＧＹＡＩＰＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
１Ｅ０５－ＶＬ［配列番号３０］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＳＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＧＧＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＴＹＡＭＮ［配列番号６９］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＮＹＶＤＳＶＫＧ［配列番号７０］
ＣＤＲＨ３：ＮＦＤＮＳＧＹＡＩＰＤＡＦＤＩ［配列番号７１］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号７２］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＳＲＰＳ［配列番号７３］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＧＧＰＶ［配列番号７４］
抗体クローン：２Ａ０９
２Ａ０９－ＶＨ［配列番号７］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＡＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＹＩＳＲＤＡＤＩＴＨＹＰＡＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＴＴＧＦＤＹＡＧＤＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
２Ａ０９－ＶＬ［配列番号３１］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＡＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＤＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＲＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＡＷＭＳ［配列番号７５］
ＣＤＲＨ２：ＹＩＳＲＤＡＤＩＴＨＹＰＡＳＶＫＧ［配列番号７６］
ＣＤＲＨ３：ＧＦＤＹＡＧＤＤＡＦＤＩ［配列番号７７］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＡＶＮ［配列番号７８］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＳＤＲＰＳ［配列番号７９］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＲＷＶ［配列番号８０］
抗体クローン：２Ｂ０８
２Ｂ０８－ＶＨ［配列番号８］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＹＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＬＩＧＨＤＧＮＮＫＹＹＬＤＳＬＥＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＡＴＤＳＧＹＤＬＬＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
２Ｂ０８－ＶＬ［配列番号３２］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＹＤＤＬＬＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＴＴＷＤＤＳＬＳＧＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＤＹＹＭＳ［配列番号８１］
ＣＤＲＨ２：ＬＩＧＨＤＧＮＮＫＹＹＬＤＳＬＥＧ［配列番号８２］
ＣＤＲＨ３：ＡＴＤＳＧＹＤＬＬＹ［配列番号８３］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮ［配列番号８４］
ＣＤＲＬ２：ＹＤＤＬＬＰＳ［配列番号８５］
ＣＤＲＬ３：ＴＴＷＤＤＳＬＳＧＶＶ［配列番号８６］
抗体クローン：２Ｅ８－ＶＨ
２Ｅ８－ＶＨ［配列番号９］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＹＭＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＧＦＳＤＤＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＧＧＤＧＳＧＷＳＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
２Ｅ８－ＶＬ［配列番号３３］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＴＷＤＤＳＬＲＧＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＤＹＹＭＳ［配列番号８７］
ＣＤＲＨ２：ＡＩＧＦＳＤＤＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号８８］
ＣＤＲＨ３：ＧＤＧＳＧＷＳＦ［配列番号８９］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＮＮＡＶＮ［配列番号９０］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＫＲＰＳ［配列番号９１］
ＣＤＲＬ３：ＡＴＷＤＤＳＬＲＧＷＶ［配列番号９２］
抗体クローン：５Ｃ０４
５Ｃ０４－ＶＨ［配列番号１０］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＷＲＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｃ０４－ＶＬ［配列番号３４］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＳＤＮＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＳＧＳＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＹＧＭＨ［配列番号９３］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号９４］
ＣＤＲＨ３：ＷＲＤＡＦＤＩ［配列番号９５］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号９６］
ＣＤＲＬ２：ＳＤＮＱＲＰＳ［配列番号９７］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＳＧＳＷＶ［配列番号９８］
抗体クローン：５Ｃ０５
５Ｃ０５－ＶＨ［配列番号１１］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＮＦＤＡＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｃ０５－ＶＬ［配列番号３５］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＳＮＳＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＱＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＴＹＧＭＨ［配列番号９９］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１００］
ＣＤＲＨ３：ＥＮＦＤＡＦＤＶ［配列番号１０１］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１０２］
ＣＤＲＬ２：ＳＮＳＱＲＰＳ［配列番号１０３］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＱＶＶ［配列番号１０４］
抗体クローン：５Ｄ０７
５Ｄ０７－ＶＨ［配列番号１２］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＡＹＤＧＳＫＫＤＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＹＲＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｄ０７－ＶＬ［配列番号３６］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＴＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＶＳＧＷＭＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＴＹＧＭＨ［配列番号１０５］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＡＹＤＧＳＫＫＤＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１０６］
ＣＤＲＨ３：ＥＹＲＤＡＦＤＩ［配列番号１０７］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１０８］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＳＮＲＰＳ［配列番号１０９］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＶＳＧＷＭ［配列番号１１０］
抗体クローン：５Ｅ１２
５Ｅ１２－ＶＨ［配列番号１３］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＩＮＫＤＹＡＤＳＭＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＲＫＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｅ１２－ＶＬ［配列番号３７］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＳＮＮＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＴＷＤＤＳＬＮＧＬＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１１１］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＩＮＫＤＹＡＤＳＭＫＧ［配列番号１１２］
ＣＤＲＨ３：ＥＲＫＤＡＦＤＩ［配列番号１１３］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１１４］
ＣＤＲＬ２：ＳＮＮＱＲＰＳ［配列番号１１５］
ＣＤＲＬ３：ＡＴＷＤＤＳＬＮＧＬＶ［配列番号１１６］
抗体クローン：５Ｇ０８
５Ｇ０８－ＶＨ［配列番号１４］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＮＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＲＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＭＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＷＮＧＭＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｇ０８－ＶＬ［配列番号３８］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＡＮＮＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＹＧＭＨ［配列番号：１１７］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＲＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１１８］
ＣＤＲＨ３：ＤＲＷＮＧＭＤＶ［配列番号１１９］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１２０］
ＣＤＲＬ２：ＡＮＮＱＲＰＳ［配列番号１２１］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＷＶ［配列番号１２２］
抗体クローン：５Ｈ０６
５Ｈ０６－ＶＨ［配列番号１５］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＤＴＡＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＨＳＶＩＧＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
５Ｈ０６－ＶＬ［配列番号３９］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＡＧＳＮＮＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１２３］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＤＴＡＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１２４］
ＣＤＲＨ３：ＤＨＳＶＩＧＡＦＤＩ［配列番号１２５］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮ［配列番号１２６］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＫＲＰＳ［配列番号１２７］
ＣＤＲＬ３：ＳＳＹＡＧＳＮＮＶＶ［配列番号１２８］
抗体クローン：６Ａ０９
６Ａ０９－ＶＨ［配列番号１６］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＴＳＹＤＧＮＴＫＹＹＡＮＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＤＣＧＧＤＣＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ａ０９－ＶＬ［配列番号４０］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＥＧＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１２９］
ＣＤＲＨ２：ＶＴＳＹＤＧＮＴＫＹＹＡＮＳＶＫＧ［配列番号１３０］
ＣＤＲＨ３：ＥＤＣＧＧＤＣＦＤＹ［配列番号１３１］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１３２］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＳＮＲＰＳ［配列番号１３３］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＥＧＶ［配列番号１３４］
抗体クローン：６Ｂ０１
６Ｂ０１－ＶＨ［配列番号１７］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＱＬＧＥＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｂ０１－ＶＬ［配列番号４１］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＴＷＤＤＳＬＳＧＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＹＧＭＨ［配列番号１３５］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１３６］
ＣＤＲＨ３：ＤＱＬＧＥＡＦＤＩ［配列番号１３７］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１３８］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＫＲＰＳ［配列番号１３９］
ＣＤＲＬ３：ＡＴＷＤＤＳＬＳＧＰＶ［配列番号１４０］
抗体クローン：６Ｃ１１
６Ｃ１１－ＶＨ［配列番号１８］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＳＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＧＧＤＩＤＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬｓＶＴＶＳＳ
６Ｃ１１－ＶＬ［配列番号４２］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＦＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＥＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＤＹＧＭＳ［配列番号１４１］
ＣＤＲＨ２：ＡＩＳＧＳＧＳＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１４２］
ＣＤＲＨ３：ＧＤＩＤＹＦＤＹ［配列番号１４３］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＦＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１４４］
ＣＤＲＬ２：ＥＮＮＫＲＰＳ［配列番号１４５］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＶ［配列番号１４６］
抗体クローン：６Ｃ１２
６Ｃ１２－ＶＨ［配列番号１９］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＲＲＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｃ１２－ＶＬ［配列番号４３］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＳＤＮＱＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＴＷＤＳＤＴＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１４７］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１４８］
ＣＤＲＨ３：ＥＲＲＤＡＦＤＩ［配列番号１４９］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１５０］
ＣＤＲＬ２：ＳＤＮＱＲＰＳ［配列番号１５１］
ＣＤＲＬ３：ＡＴＷＤＳＤＴＰＶ［配列番号１５２］
抗体クローン：６Ｄ０１
６Ｄ０１－ＶＨ［配列番号２０］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＤＨＳＡＡＧＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｄ０１－ＶＬ［配列番号４４］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＳＩＲＰＳＧＧＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＳＷＤＤＳＬＳＳＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１５３］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１５４］
ＣＤＲＨ３：ＤＨＳＡＡＧＹＦＤＹ［配列番号１５５］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮ［配列番号１５６］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＳＩＲＰＳ［配列番号１５７］
ＣＤＲＬ３：ＡＳＷＤＤＳＬＳＳＰＶ［配列番号１５８］
抗体クローン：６Ｇ０３
６Ｇ０３－ＶＨ［配列番号２１］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＧＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＤＳＡＩＩＤＹＡＧＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＤＥＡＡＡＧＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｇ０３－ＶＬ［配列番号４５］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＮＴＤＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＳＧＰＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１５９］
ＣＤＲＨ２：ＧＩＳＷＤＳＡＩＩＤＹＡＧＳＶＫＧ［配列番号１６０］
ＣＤＲＨ３：ＤＥＡＡＡＧＡＦＤＩ［配列番号１６１］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１６２］
ＣＤＲＬ２：ＧＮＴＤＲＰＳ［配列番号１６３］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＳＧＰＶＶ［配列番号１６４］
抗体クローン：６Ｇ０８
６Ｇ０８－ＶＨ［配列番号２２］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＬＳＳＹＧＩＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＧＳＧＧＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＳＳＶＧＡＹＡＮＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｇ０８－ＶＬ［配列番号４６］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＧＤＴＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＩＳ［配列番号１６５］
ＣＤＲＨ２：ＧＩＳＧＳＧＧＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１６６］
ＣＤＲＨ３：ＳＶＧＡＹＡＮＤＡＦＤＩ［配列番号１６７］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１６８］
ＣＤＲＬ２：ＧＤＴＮＲＰＳ［配列番号１６９］
ＣＤＲＬ３：ＡＡＷＤＤＳＬＮＧＰＶ［配列番号１７０］
抗体クローン：６Ｇ１１
６Ｇ１１－ＶＨ［配列番号２３］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＬＹＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｇ１１－ＶＬ［配列番号４７］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＡＤＤＨＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＡＳＷＤＤＳＱＲＡＶＩＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１７１］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１７２］
ＣＤＲＨ３：ＥＬＹＤＡＦＤＩ［配列番号１７３］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨ［配列番号１７４］
ＣＤＲＬ２：ＡＤＤＨＲＰＳ［配列番号１７５］
ＣＤＲＬ３：ＡＳＷＤＤＳＱＲＡＶＩ［配列番号１７６］
抗体クローン：６Ｈ０８
６Ｈ０８－ＶＨ［配列番号２４］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＮＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＫＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＹＫＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
６Ｈ０８－ＶＬ［配列番号４８］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＱＡＷＧＴＧＩＲＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＹＧＭＨ［配列番号１７７］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１７８］
ＣＤＲＨ３：ＥＹＫＤＡＦＤＩ［配列番号１７９］
ＣＤＲＬ１：ＴＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮ［配列番号１８０］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＫＲＰＳ［配列番号１８１］
ＣＤＲＬ３：ＱＡＷＧＴＧＩＲＶ［配列番号１８２］
抗体クローン：７Ｃ０７
７Ｃ０７－ＶＨ［配列番号２５］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＱＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＦＧＹＩＩＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
７Ｃ０７－ＶＬ［配列番号４９］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＲＤＹＥＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＭＡＷＤＤＳＬＳＧＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＳＹＧＭＨ［配列番号１８３］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹＡＤＳＶＫＧ［配列番号１８４］
ＣＤＲＨ３：ＥＦＧＹＩＩＬＤＹ［配列番号１８５］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＴＶＮ［配列番号１８６］
ＣＤＲＬ２：ＲＤＹＥＲＰＳ［配列番号１８７］
ＣＤＲＬ３：ＭＡＷＤＤＳＬＳＧＶＶ［配列番号１８８］
抗体クローン：４Ｂ０２
４Ｂ０２－ＶＨ［配列番号２６］
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＨＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＴＮＫＹＹＡＤＳＶＲＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＴＷＤＡＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
４Ｂ０２－ＶＬ［配列番号５０］
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＡＳＧＴＰＧＱＲＶＴＩＳＣＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＮＡＮＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＳＧＬＲＳＥＤＥＡＤＹＹＣＱＡＷＤＳＳＴＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧ
ＣＤＲ領域
ＣＤＲＨ１：ＮＨＧＭＨ［配列番号１８９］
ＣＤＲＨ２：ＶＩＳＹＤＧＴＮＫＹＹＡＤＳＶＲＧ［配列番号１９０］
ＣＤＲＨ３：ＥＴＷＤＡＦＤＶ［配列番号１９１］
ＣＤＲＬ１：ＳＧＳＳＳＮＩＧＳＮＮＡＮ［配列番号１９２］
ＣＤＲＬ２：ＤＮＮＫＲＰＳ［配列番号１９３］
ＣＤＲＬ３：ＱＡＷＤＳＳＴＶＶ［配列番号１９４］
【0085】
いくつかの実施形態、時として好ましい実施形態において、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子は、次のＣＤＲ領域、配列番号１７１（ＣＤＲＨ１）、配列番号１７２（ＣＤＲＨ２）、配列番号１７３（ＣＤＲＨ３）、配列番号１７４（ＣＤＲＬ１）、配列番号１７５（ＣＤＲＬ２）および配列番号１７６（ＣＤＲＬ３）、すなわちクローン６Ｇ１１のＣＤＲ領域を含む。
【0086】
いくつかの実施形態、時として好ましい実施形態において、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子は、次の定常領域、配列番号１（ＣＨ）および配列番号２（ＣＬ）、ならびに次の可変領域、配列番号２３（ＶＬ）および配列番号４７（ＶＨ）、すなわちクローン６Ｇ１１の定常領域ならびに可変領域を含む。
【0087】
いくつかの実施形態において、ＰＤ－１分子は、ヒト抗体分子またはヒト由来の抗体分子である。いくつかのこのような実施形態において、ヒト抗体分子またはヒト由来の抗体分子は、ＩｇＧ抗体である。いくつかのこのような実施形態において、ヒト抗体分子またはヒト由来の抗体分子は、ＩｇＧ４である。
【0088】
抗ＰＤ－１抗体分子は、ＰＤ－１に特異的に結合する抗体分子である。
【0089】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－Ｌ２のＰＤ－１への結合を遮断し、次いで、ＰＤ－１アンタゴニストと見なされ得る。
【0090】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ヒト化抗体分子である。
【0091】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、キメラ抗体である。
【0092】
上で言及されるように、ＰＤ－１抗体は、ＦｃγＲに結合する能力を有する必要がある。
【0093】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（登録商標））、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標））およびセミプリマブ（ＬＩＢＴＡＹＯ（登録商標））からなる群から選択される。
【0094】
いくつかの実施形態において、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子および抗ＰＤ－１抗体分子は、同時に患者に投与され、すなわち、それらは同時にまたは互いに非常に近い時間内に別々に投与されるいずれかを意味する。
【0095】
いくつかの実施形態において、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子は、抗ＰＤ－１抗体分子の投与前に患者に投与される。このような連続投与は、２つの抗体を時間的に分離することで達成され得る。代替的に、または第１の選択肢と組み合わせて、連続投与は、抗体分子が抗ＰＤ－１抗体分子に先立ってがんに達するように腫瘍内投与等の方法で、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子の投与により、次いで、抗体分子が、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子の後にがんに達するように全身投与等の方法で投与される、２つの抗体分子の空間的分離によっても達成されてよい。
【0096】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子の投与前に患者に投与される。上記と同様に、そのような連続投与は、２つの抗体の時間的分離によって、および／または２つの抗体分子の空間的分離によって達成され得る。空間的投与の場合、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子に先立ってがんに到達するように腫瘍内投与等の方法で投与され、次いで、ＰＤ－１抗体分子の後にがんに到達するように全身投与等の方法で投与される。
【0097】
例えば、薬剤が体に吸収される速度を変更するように、薬剤は、異なる添加物で改変することができ、例えば身体への特定の投与経路を可能にするように異なる形態で改変することができることは、医薬当業者には既知であろう。
【0098】
したがって、本発明の組成物、および／または抗体、および／または薬物は、賦形剤および／もしくは薬学的に許容される担体および／もしくは薬学的に許容される希釈剤および／もしくはアジュバントと組み合わせる場合を含む。
【0099】
本発明の組成物、および／または抗体、および／または薬物は、抗酸化剤、および／もしくは緩衝剤、および／もしくは静菌剤、および／もしくは意図するレシピエントの血液と製剤を等張にする溶質を含有することができる、水性および／または非水性の無菌注射溶液、ならびに／または懸濁剤および／もしくは増粘剤を含むことができる水性および／または非水性の無菌懸濁液を含む非経口投与に好適であり得る場合を含む。本発明の組成物、および／または抗体、および／または薬剤、および／または薬物は、単位用量または複数回投与の容器、例えば、密封されたアンプルおよびバイアルで提供されてもよく、使用直前に無菌液担体、例えば注射用水の添加のみを必要とするフリーズドライ（すなわち、凍結乾燥）状態で保存されてもよい。
【0100】
即時注射液および懸濁液剤は、前述の種類の滅菌散剤、および／または顆粒剤、および／または錠剤から調製され得る。
【0101】
ヒト患者への非経口投与の場合、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子、および／または抗ＰＤ－１抗体分子の１日投与量レベルは通常、１ｍｇ～２０ｍｇ／ｋｇ（患者体重）であり、または場合によっては、最大１００ｍｇ／kgを単回投与もしくは分割投与で投与される。特別な状況下、例えば長期投与と組み合わせて、より低い用量を使用してもよい。いずれにしても、医師は個々の患者に最も好適であろう実際の投与量を判定し、それは特定の患者の年齢、体重、および反応によって変動するであろう。上述の投与量は平均的な場合の例示である。当然ながら、より高いかまたはより低い投与量範囲が妥当である個々の症例があり得、それらも本発明の範囲内に含まれる。
【0102】
通常は、本発明の組成物および／または薬物は、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子、および／または抗ＰＤ－１抗体をおよそ２ｍｇ／ｍＬ～１５０ｍｇ／ｍＬ、またはおよそ２ｍｇ／ｍＬ～２００ｍｇ／ｍＬの濃度で含有するであろう。好ましい実施形態において、本発明の薬物および／または組成物は、ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子および／または抗ＰＤ－１抗体分子を１０ｍｇ／ｍＬの濃度で含有するであろう。
【0103】
一般に、ヒトでは、本発明の組成物、および／または抗体、および／または薬剤、および／または薬物の経口または非経口投与が好ましい経路であり、最も便利である。獣医学的使用の場合、本発明の組成物、および／または抗体、および／または薬剤、および／または薬物は、通常の獣医学診療に従って好適に許容される製剤として投与され、獣医師は、ある特定の動物にとって最も適切であろう投与計画および投与経路を判定するであろう。したがって、本発明は、（上記および以下でさらに説明する）様々な状態を治療するのに有効な量の、本発明の抗体および／または薬剤を含む薬学的製剤を提供する。好ましくは、組成物、および／または抗体、および／または薬剤、および／または薬物は、静脈内（ＩＶ）、皮下（ＳＣ）、筋肉内（ＩＭ）、または腫瘍内を含む群から選択される経路による送達に適合している。
【0104】
本発明はまた、本発明のポリペプチド結合部分の薬学的に許容される酸付加塩または塩基付加塩を含む組成物、および／または抗体、および／または薬剤、および／または薬物を含む。本発明で有用な前述の塩基化合物の薬学的に許容可能な酸付加塩を調製するために使用される酸は、とりわけ、非毒性の酸付加塩、すなわち塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、重酒石酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、糖酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、およびパモエート、［すなわち、１，１’－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３ナフトエート）］塩等の薬理学的に許容可能なアニオンを含有する塩を形成するものである。また、薬学的に許容可能な塩基付加塩を使用して、本発明に従った薬剤の、薬学的に許容可能な塩の形態を生成してもよい。本質的に酸性である本薬剤の薬学的に許容される塩基塩を調製するための試薬として使用され得る化学塩基は、そのような化合物と非毒性塩基塩を形成するものである。そのような非毒性塩基塩には、これらに限定されないが、とりわけ、アルカリ金属カチオン（例えばカリウムおよびナトリウム）およびアルカリ土類金属カチオン（例えばカルシウムおよびマグネシウム）、アンモニウムまたは水溶性アミン付加塩、例えばＮ－メチルグルカミン－（メグルミン）、および低級アルカノールアンモニウム、ならびに他の薬学的に許容される有機アミンの塩基塩等のそのような薬理学的に許容されるカチオンに由来するものが挙げられる。本発明の薬剤および／またはポリペプチド結合部分は、保存のために凍結乾燥され、使用前に好適な担体で再構成されてもよい。任意の好適な凍結乾燥法（例えば、噴霧乾燥、ケーキ乾燥）、および／または再構成技法を用いてもよい。凍結乾燥および再構成によって、抗体活性低下の程度の変動に至る場合があり（例えば、従来の免疫グロブリンでは、ＩｇＭ抗体はＩｇＧ抗体よりも活性が大きく低下する傾向を有する）、使用レベルを上方調節して補う必要があり得ることを当業者は理解するであろう。一実施形態において、凍結乾燥（フリーズドライ）ポリペプチド結合部分は、再水和されるとき、（凍結乾燥前の）その活性のうちの約２０％未満、または約２５％未満、または約３０％未満、または約３５％未満、または約４０％未満、または約４５％未満、または約５０％未満を損失する。
【0105】
ＦｃγＲＩＩｂに特異的に結合する抗体分子と抗ＰＤ－１抗体分子との組み合わせは、がんの治療において使用することができる。
【0106】
本明細書で用いる場合、「患者」という用語は、ＦｃγＲＩＩｂ陰性がんを有すると診断された、またはＦｃγＲＩＩｂ陰性がんである可能性が高いと考えられる、および／またはそのようながんの症状を示すがんを有すると診断された、ヒトを含む動物を指す。
【0107】
患者は、哺乳類または非哺乳類であり得る場合を含む。好ましくは、患者はヒトであるか、またはウマ、もしくはウシ、もしくはヒツジ、もしくはブタ、もしくはラクダ、もしくはイヌ、もしくはネコ等の哺乳類である。最も好ましくは、哺乳類患者はヒトである。
【0108】
「呈する」とは、対象が、がん症状および／もしくはがん診断マーカーを表すこと、ならびに／またはがん症状および／もしくはがん診断マーカーを測定、および／または評価、および／または定量化できる場合を含む。
【0109】
医薬当業者であれば、がん症状およびがん診断マーカーがどのようなものであるか、ならびにがん症状の重症度に低減または増加があるかどうか、またはがん診断マーカーに低減もしくは増加があるかどうかを測定および／もしくは評価および／もしくは定量化する方法、ならびにがん症状および／もしくはがん診断マーカーを使用して、がんに関する予後診断を形成することができる方法は、容易に明らかであろう。
【0110】
がん治療は、多くの場合、一連の治療として投与される、すなわち治療剤は、ある期間にわたって投与される。一連の治療の時間の長さは、他の理由の中でもとりわけ、投与される治療薬の種類、治療されるがんの種類、治療されるがんの重症度、ならびに患者の年齢および健康状態を含むいくつかの要因に依存する。
【0111】
「治療中」とは、患者が現在、一連の治療を受けていること、および／または治療薬を受けていること、および／または一連の治療薬を受けている場合を含む。
【0112】
本発明に従って治療される患者は、ＰＤ－１陽性腫瘍を特徴とするがんを有する。
【0113】
いくつかの実施形態において、治療されるがんは固形がんである。
【0114】
いくつかの実施形態において、治療される固形がんは、その治療が通常、抗ＰＤ－１抗体による免疫療法からなるか、またはそれを含むがんである。
【0115】
いくつかの実施形態において、治療されるがんは、黒色腫；小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）および非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を含む肺がん（非扁平上皮ＮＳＣＬＣおよび扁平上皮ＮＳＣＬＣを含み、転移性ＮＳＣＬＣを含む）；頭頸部扁平上皮がん（ＨＮＳＣＣ）を含む頭頸部がん；ホジキンリンパ腫；原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）；進行性尿路上皮がんを含む膀胱がん；不安定性が高い（ＭＳＩ－Ｈ）および／またはミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）のがんを含む結腸直腸がん；進行胃がんおよび胃または胃食道接合部（ＧＥＪ）腺がんを含む胃がん；子宮頸がん；肝細胞がんを含む肝臓がん；メルケル細胞がん（ＭＣＣ）；治癒的手術または治癒的放射線療法の候補ではない患者における局所進行ＣＳＣＣを含む、腎細胞がん（ＲＣＣ）および皮膚扁平上皮がん（ＣＳＣＣ）を含む腎臓がんからなる群から選択される。抗ＰＤ－１免疫療法に関連する適応症の数および種類が急速に拡大していることは、当業者には既知であろう。
【0116】
いくつかの実施形態において、がんは難治性がんである。いくつかのそのような実施形態において、難治性がんは、治療の開始時に、既に抗ＰＤ－１抗体による治療に抵抗性を示すことが分かっているがんである。この抵抗性は、患者が治療にまったく反応しないか、または治療にもかかわらず、がんがいくらか進行したことから明らかとなり得る。いくつかの実施形態において、難治性がんは、抗ＰＤ－１抗体による治療中にその抗体に抵抗性を示すようになるがんであり、これは、患者が治療に反応しなくなるか、または治療に対する反応の低下を示すことを意味する。いくつかの実施形態において、難治性がんは、抗ＰＤ－１抗体による成功裏の治療の後または最終段階で抵抗性を示し、これは、がんが再発した場合に、抗ＰＤ－１抗体は効果がないか、または効果が低下することを意味する。
【0117】
上述のがんのいずれもが公知であり、症状およびがん診断マーカーは、それらのがんを治療するのに使用される治療剤であるため、十分に説明されている。したがって、上記の種類のがんを治療するために用いられる症状、がん診断マーカーおよび治療剤は、医薬当業者には既知であろう。
【0118】
大多数のがんの診断、予後診断、進行の臨床的定義は、ステージ分類として既知である、ある特定の分類による。それらのステージ分類システムは、多くの異なるがん診断マーカーおよびがん症状を照合して、がんの診断、および／または予後診断、および／または進行の概要を提供するように機能する。ステージ分類システムを使用して、がんの診断、および／または予後診断、および／または進行を評価する方法、ならびにそのためにどのがん診断マーカーおよびがん症状を使用するべきかということは、腫瘍学当業者には既知であろう。
【0119】
「がんのステージ分類」とは、ステージ０、ステージＩ、ステージＩＩ、ステージＩＩＩ、およびステージＩＶを含む、Ｒａｉステージ分類、ならびに／またはステージＡ、ステージＢ、およびステージＣを含むＢｉｎｅｔステージ分類、ならびに／またはステージＩ、ステージＩＩ、ステージＩＩＩ、およびステージＩＶを含む、Ａｎｎ Ａｒｂｏｕｒステージ分類が挙げられる。
【0120】
がんは、細胞の形態に異常を引き起こし得ることが既知である。これらの異常は、多くの場合、ある特定のがんで再現性よく生じ、これは形態におけるこれらの変化の検査（あるいは組織学的検査としても既知である）が、がんの診断または予後診断に使用することができることを意味する。細胞の形態を検査するために試料を視覚化し、視覚化用に試料を準備するための技法は、例えば、光学顕微鏡法または共焦点顕微鏡法等、当技術分野で公知である。
【0121】
「組織学的検査」とは、小さな成熟リンパ球の存在、および／または細胞質の境界が狭い小さな成熟リンパ球の存在、識別可能な核小体が欠如する密な核を有する小さな成熟リンパ球の存在、および／または細胞質の境界が狭く、識別可能な核小体が欠如する密な核を有する小さな成熟リンパ球の存在、および／または異型細胞、および／もしくは切断細胞、および／もしくは前リンパ球の存在が挙げられる。
【0122】
がんは、細胞のＤＮＡの変異の結果であり、これによって細胞の細胞死回避、または制御不能な増殖に至り得ることは公知である。したがって、これらの変異の検査（細胞遺伝学的検査としても既知である）は、がんの診断および／または予後診断を評価するための有用なツールであり得る。この例は、慢性リンパ球性白血病の特徴である染色体上の位置１３ｑ１４．１の欠失である。細胞内の変異を検査するための技法は、例えば、蛍光インサイチュハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）等、当技術分野で公知である。
【0123】
「細胞遺伝学的検査」とは、細胞内のＤＮＡ、具体的には染色体の検査を含む。細胞遺伝学的検査を使用して、難治性がんおよび／または再発したがんの存在に関連し得る、ＤＮＡの変化を同定することができる。そのようなものとしては、１３番染色体の長腕の欠失、および／または染色体位置１３ｑ１４．１の欠失、ならびに／または１２番染色体のトリソミー、および／または１２番染色体の長腕の欠失、ならびに／または１１番染色体の長腕の欠失、および／または１１ｑの欠失、ならびに／または６番染色体の長腕の欠失、および／または６ｑの欠失、ならびに／または１７番染色体の短腕の欠失、および／または１７ｐの欠失、ならびに／またはｔ（１１：１４）転座、ならびに／または（ｑ１３：ｑ３２）転座、ならびに／または抗原遺伝子受容体再配列、ならびに／またはＢＣＬ２再配列、ならびに／またはＢＣＬ６再配列、ならびに／またはｔ（１４：１８）転座、ならびに／またはｔ（１１：１４）転座、ならびに／または（ｑ１３：ｑ３２）転座、ならびに／または（３：ｖ）転座、ならびに／または（８：１４）転座、ならびに／または（８：ｖ）転座、ならびに／またはｔ（１１：１４）および（ｑ１３：ｑ３２）転座を挙げることができる。
【0124】
がん患者は、ある特定の身体症状を呈することが既知であり、これは多くの場合、がんが身体に負担をかけている結果である。これらの症状は、多くの場合、同じがんで再発するため、疾患の診断、および／または予後診断、および／または進行の特徴であり得る。医薬当業者であれば、どの身体症状がどのがんに関連しているか、ならびにそれらの身体系の評価が疾患の診断、および／または予後診断、および／または進行とどのように相関し得るかを理解するであろう。「身体的症状」としては、肝腫大および／または脾腫が挙げられる。
【図面の簡単な説明】
【0125】
以下の実施例では、以下の図を参照している。
【0126】
【図1】ＰＤ－１をトランスフェクトしたヒトＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞におけるＰＤ－１発現を示す。ＰＤ－１をトランスフェクトしたＪｕｒｋａｔ細胞を、低度、中程度、および高度のＰＤ－１を発現する細胞に分類した。増殖後、ＰＤ－１発現を３つの異なるサブセットで定量化し、ＰＤ－１分子／細胞の数を図１Ａ（低度）、図１Ｂ（中程度）、および図１Ｃ（高度）に示す。
【図2A-B】ＢＩ－１２０６（６Ｇ１１ ＷＴ）は、中程度および高度に発現する細胞のＰＤ－１媒介性食作用を阻害するが、低度に発現する細胞の食作用は阻害しないことを示している。図２Ａは、貪食されたＪｕｒｋａｔ細胞を示す一例を示している。ｙ軸のＦＬ４はＣＤ１４＋マクロファージを示し、ｘ軸のＦＬ１はＣＦＳＥで標識されたＪｕｒｋａｔ細胞を示す。したがって、丸で囲まれた右上の象限は、貪食されたＪｕｒｋａｔ細胞である二重陽性ＣＤ１４＋ＣＦＳＥ＋細胞を示すこの例は、ＰＤ－１高発現Ｊｕｒｋａｔ細胞の食作用を示している。図２Ｂは、ＰＤ－１中発現Ｊｕｒｋａｔ細胞の食作用を示す。
【図2C-D】図２Ｃは、高発現Ｊｕｒｋａｔ細胞を示す。値は、アイソタイプのオプソニン化（ゼロ％に設定）および抗ＣＤ３のオプソニン化（ＯＫＴ３ ｈＩｇＧ１、１００％に設定）に対して正規化されている。この図は、ＢＩ－１２０６（図中では６Ｇ１１ ＷＴと表される）が、試験したすべての濃度でニボルマブ媒介性食作用を阻害することを示している。さらに、この図は、アミノ酸アスパラギン（Ｎ）からアミノ酸グルタミン（Ｑ）（すなわち、本明細書で６Ｇ１１ＮＱと表される抗体）への２９７位の変異を誘発することによって引き起こされるＦｃγＲ結合の破壊が、ニボルマブ媒介性食作用を阻害する能力を低下させるため、６Ｇ１１抗体が食作用を阻害するために無傷のＦｃ部分を必要とすることを示している。この図は、中程度に発現する細胞における２回の実験、および高程度に発現する細胞における３回の実験を示している。図２Ｄは、低度に発現する細胞にはニボルマブ媒介性食作用が認められないことを示す。
【図3A】Ｆｃ：ＦｃγＲ結合が損なわれた抗ＦｃγＲＩＩＢ（ＡＴ－１３０－２ ｍＩｇＧ１ ＮＡ）ではなく、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合能の高い抗ＦｃγＲＩＩＢ（ＡＴ－１３０－２ ｍＩｇＧ２ａおよびｍＩｇＧ１）が、抗ＰＤ－１抗体の治療有効性およびインビボでの生存を高めることを示す。ＣＴ２６（図ＡおよびＢ）またはＭＣ３８（図３Ｃおよび図３Ｄ）の腫瘍担持マウスを、２００μｇの抗ＰＤ－１（クローン２９Ｆ．１Ａ１２；Ｂｉｏｘｃｅｌｌ）抗体単独で、または２００μｇの指定された抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体変異体もしくはアイソタイプ対照（ＷＲ１７）との併用で３回（１００μｌのＰＢＳ中の５ｘ１０5腫瘍細胞を皮下接種した後、８日目、１２日目、および１５日目に）処理した。最初の処理では、抗ＰＤ１抗体の６時間前にＡＴ１３０－２を投与した。その後の処理のために、両方の抗体を一緒に投与した。すべての注射は、２００μｌのＰＢＳ中で腹腔内に注射した。腫瘍は、ＣＴ２６の場合は４００ｍｍ2、ＭＣ３８の場合は２２５ｍｍ2の面積に達したときに末期であると見なした。グラフは、動物の腫瘍増殖（図３Ａおよび図３Ｃ）および生存（図３Ｂおよび図３Ｄ）を示す（＊＊Ｐ＜０．０１；ログランク検定）。実験は８～１４週齢の雌マウスで行われた。
【図3B】Ｆｃ：ＦｃγＲ結合が損なわれた抗ＦｃγＲＩＩＢ（ＡＴ－１３０－２ ｍＩｇＧ１ ＮＡ）ではなく、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合能の高い抗ＦｃγＲＩＩＢ（ＡＴ－１３０－２ ｍＩｇＧ２ａおよびｍＩｇＧ１）が、抗ＰＤ－１抗体の治療有効性およびインビボでの生存を高めることを示す。ＣＴ２６（図ＡおよびＢ）またはＭＣ３８（図３Ｃおよび図３Ｄ）の腫瘍担持マウスを、２００μｇの抗ＰＤ－１（クローン２９Ｆ．１Ａ１２；Ｂｉｏｘｃｅｌｌ）抗体単独で、または２００μｇの指定された抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体変異体もしくはアイソタイプ対照（ＷＲ１７）との併用で３回（１００μｌのＰＢＳ中の５ｘ１０5腫瘍細胞を皮下接種した後、８日目、１２日目、および１５日目に）処理した。最初の処理では、抗ＰＤ１抗体の６時間前にＡＴ１３０－２を投与した。その後の処理のために、両方の抗体を一緒に投与した。すべての注射は、２００μｌのＰＢＳ中で腹腔内に注射した。腫瘍は、ＣＴ２６の場合は４００ｍｍ2、ＭＣ３８の場合は２２５ｍｍ2の面積に達したときに末期であると見なした。グラフは、動物の腫瘍増殖（図３Ａおよび図３Ｃ）および生存（図３Ｂおよび図３Ｄ）を示す（＊＊Ｐ＜０．０１；ログランク検定）。実験は８～１４週齢の雌マウスで行われた。
【図3C】Ｆｃ：ＦｃγＲ結合が損なわれた抗ＦｃγＲＩＩＢ（ＡＴ－１３０－２ ｍＩｇＧ１ ＮＡ）ではなく、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合能の高い抗ＦｃγＲＩＩＢ（ＡＴ－１３０－２ ｍＩｇＧ２ａおよびｍＩｇＧ１）が、抗ＰＤ－１抗体の治療有効性およびインビボでの生存を高めることを示す。ＣＴ２６（図ＡおよびＢ）またはＭＣ３８（図３Ｃおよび図３Ｄ）の腫瘍担持マウスを、２００μｇの抗ＰＤ－１（クローン２９Ｆ．１Ａ１２；Ｂｉｏｘｃｅｌｌ）抗体単独で、または２００μｇの指定された抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体変異体もしくはアイソタイプ対照（ＷＲ１７）との併用で３回（１００μｌのＰＢＳ中の５ｘ１０5腫瘍細胞を皮下接種した後、８日目、１２日目、および１５日目に）処理した。最初の処理では、抗ＰＤ１抗体の６時間前にＡＴ１３０－２を投与した。その後の処理のために、両方の抗体を一緒に投与した。すべての注射は、２００μｌのＰＢＳ中で腹腔内に注射した。腫瘍は、ＣＴ２６の場合は４００ｍｍ2、ＭＣ３８の場合は２２５ｍｍ2の面積に達したときに末期であると見なした。グラフは、動物の腫瘍増殖（図３Ａおよび図３Ｃ）および生存（図３Ｂおよび図３Ｄ）を示す（＊＊Ｐ＜０．０１；ログランク検定）。実験は８～１４週齢の雌マウスで行われた。
【図3D】Ｆｃ：ＦｃγＲ結合が損なわれた抗ＦｃγＲＩＩＢ（ＡＴ－１３０－２ ｍＩｇＧ１ ＮＡ）ではなく、Ｆｃ：ＦｃγＲ結合能の高い抗ＦｃγＲＩＩＢ（ＡＴ－１３０－２ ｍＩｇＧ２ａおよびｍＩｇＧ１）が、抗ＰＤ－１抗体の治療有効性およびインビボでの生存を高めることを示す。ＣＴ２６（図ＡおよびＢ）またはＭＣ３８（図３Ｃおよび図３Ｄ）の腫瘍担持マウスを、２００μｇの抗ＰＤ－１（クローン２９Ｆ．１Ａ１２；Ｂｉｏｘｃｅｌｌ）抗体単独で、または２００μｇの指定された抗ＦｃγＲＩＩＢ抗体変異体もしくはアイソタイプ対照（ＷＲ１７）との併用で３回（１００μｌのＰＢＳ中の５ｘ１０5腫瘍細胞を皮下接種した後、８日目、１２日目、および１５日目に）処理した。最初の処理では、抗ＰＤ１抗体の６時間前にＡＴ１３０－２を投与した。その後の処理のために、両方の抗体を一緒に投与した。すべての注射は、２００μｌのＰＢＳ中で腹腔内に注射した。腫瘍は、ＣＴ２６の場合は４００ｍｍ2、ＭＣ３８の場合は２２５ｍｍ2の面積に達したときに末期であると見なした。グラフは、動物の腫瘍増殖（図３Ａおよび図３Ｃ）および生存（図３Ｂおよび図３Ｄ）を示す（＊＊Ｐ＜０．０１；ログランク検定）。実験は８～１４週齢の雌マウスで行われた。
【図4】腫瘍担持マウスの免疫細胞におけるＰＤ－１発現を示す。マウス腫瘍からの免疫細胞を、ＰＤ－１発現について定量化した。マウスにＭＣ３８細胞を注射し、約２０日後に腫瘍を採取した。細胞を異なるＴ細胞サブセットについて染色し、ＣＤ８＋Ｔ細胞におけるＰＤ－１発現をＦＡＣＳにより分析した。細胞上のＰＤ－１の平均蛍光強度値は、細胞当たりの受容体の数を判定するために同一の抗ＰＤ－１抗体で染色したＱｕａｎｔｕｍ（商標）Ｓｉｍｐｌｙ Ｃｅｌｌｕｌａｒ（登録商標）ビーズの値と相関していた。
【図5】異なるレベルのＰＤ－１を発現するＪｕｒｋａｔ細胞、すなわち、ＰＤ－１低発現、ＰＤ－１中発現（中）、およびＰＤ－１高発現を示す。ＰＤ－１の発現は、飽和濃度のＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７ヒト抗ヒトＰＤ－１（ペムブロリズマブ）を用いて定義した。
【図6】「Ｊｕｒｋａｔ ＰＤ－１中発現細胞」におけるＰＤ－１発現を示す。ゲートは、腫瘍試料におけるＰＤ－１の「中～高」発現の下端を定義するために使用される半値全幅ゲートを示している。
【図7】ヒト腫瘍試料におけるＰＤ－１発現を定義するために使用されるゲーティング戦略を示す。最初にＣＤ４５＋事象を定義し（Ａ）、続いて生細胞（Ｂ）、次いでＣＤ３＋（Ｃ）またはＣＤ３＋ＣＤ８＋（Ｄ）を定義した。ＰＤ－１高発現のゲートは、ＣＤ３＋（Ｅ）およびＣＤ３＋ＣＤ８＋集団（Ｆ）にそれぞれ設定した。ＰＤ－１「高発現」のゲートは、ＰＤ－１をトランスフェクトしたＪｕｒｋａｔ細胞に基づいて定義し、下端は、ＰＤ－１中発現Ｊｕｒｋａｔ細胞の半値全幅ゲートの下端に従って設定した。（Ｇ）および（Ｈ）は、ＣＤ３＋およびＣＤ３＋ＣＤ８＋集団のそれぞれにおけるＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７ヒト抗ヒトＰＤ－１（ペムブロリズマブ）のＦＭＯを示す。
【図8A】ＰＤ－１発現および予測反応等の患者特性を含む、腫瘍試料を採取した各患者のデータをまとめた表を示す。
【図8B】ＰＤ－１発現および予測反応等の患者特性を含む、腫瘍試料を採取した各患者のデータをまとめた表を示す。
【実施例】
【0127】
ここで、本発明のいくつかの態様を具体的に示す、特定の非限定的な実施例を説明する。これらの実施例は、上に提供した図面の簡単な説明と一緒に読まれるべきである。
【0128】
実施例１
Ｊｕｒｋａｔ細胞のトランスフェクション
Ｊｕｒｋａｔ細胞のトランスフェクションのために、１０％ウシ胎児血清、ＦＣＳ（Ｓｉｇｍａ）、Ｌ－グルタミン（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ピルビン酸ナトリウム（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、およびＰｅｎ－Ｓｔｒｅｐ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を含有するＲＰＭＩ－１６４０培地で細胞を培養した。トランスフェクションの前日、細胞を０．５ｘ１０6／ｍＬに分割し、一晩培養した。細胞をトランスフェクトするために、１×１０6細胞を１０分間９０ｘＧで遠心分離し、その後、２μｇのＤＮＡ（ｐｃＤＮＡ３中のＨＰＤ－１）を添加した１００μＬのＮｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ溶液（Ａｍａｘａ（登録商標）Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ Ｎｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ（登録商標）Ｋｉｔ Ｖ、Ｌｏｎｚａ）に再懸濁した。次いで、混合物をＮｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒキュベットに移した。キュベットをＮｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒＩＩ機に入れ、プログラムＸ－００５でヌクレオフェクトした。室温（約１８～２２℃）で１０分間インキュベートした後、５００ｍＬの培地をキュベットに加え、１ｍＬの培地を含む１２ウェルプレートに移した。トランスフェクトされた細胞を選択するために、トランスフェクションの４８時間後にＧｅｎｅｔｉｃｉｎを１ｍｇ／ｍＬで添加した。１０～１４日後、ＦＡＣＳＡｒｉａ ＩＩ機でＦＡＣＳソーティングを行うことにより、陽性細胞を低、中、および高ＰＤ－１エクスプレッサーに精製した。その後、トランスフェクトされた細胞を、１ｍｇ／ｍＬのＧｅｎｅｔｉｃｉｎを含有する培地中に維持した。
Ｊｕｒｋａｔ細胞のトランスフェクション
Ｊｕｒｋａｔ細胞のトランスフェクションのために、１０％ウシ胎児血清、ＦＣＳ（Ｓｉｇｍａ）、Ｌ－グルタミン（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ピルビン酸ナトリウム（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、およびＰｅｎ－Ｓｔｒｅｐ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を含有するＲＰＭＩ－１６４０培地で細胞を培養した。トランスフェクションの前日、細胞を０．５ｘ１０6／ｍＬに分割し、一晩培養した。細胞をトランスフェクトするために、１×１０6細胞を１０分間９０ｘＧで遠心分離し、その後、２μｇのＤＮＡ（ｐｃＤＮＡ３中のＨＰＤ－１）を添加した１００μＬのＮｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ溶液（Ａｍａｘａ（登録商標）Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ Ｎｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ（登録商標）Ｋｉｔ Ｖ、Ｌｏｎｚａ）に再懸濁した。次いで、混合物をＮｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒキュベットに移した。キュベットをＮｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒＩＩ機に入れ、プログラムＸ－００５でヌクレオフェクトした。室温（約１８～２２℃）で１０分間インキュベートした後、５００ｍＬの培地をキュベットに加え、１ｍＬの培地を含む１２ウェルプレートに移した。トランスフェクトされた細胞を選択するために、トランスフェクションの４８時間後にＧｅｎｅｔｉｃｉｎを１ｍｇ／ｍＬで添加した。１０～１４日後、ＦＡＣＳＡｒｉａ ＩＩ機でＦＡＣＳソーティングを行うことにより、陽性細胞を低、中、および高ＰＤ－１エクスプレッサーに精製した。その後、トランスフェクトされた細胞を、１ｍｇ／ｍＬのＧｅｎｅｔｉｃｉｎを含有する培地中に維持した。
【0129】
ＰＤ－１の定量化
このビーズのセットを使用した定量化の基本原理は、フィコエリトリン（ＰＥ）が１：１の比率で抗体を標識するという事実に基づいている。したがって、定義された数のＰＥ分子を含むビーズを使用して標準曲線を作成することにより、細胞に結合した抗体分子の数を判定することができる。
このビーズのセットを使用した定量化の基本原理は、フィコエリトリン（ＰＥ）が１：１の比率で抗体を標識するという事実に基づいている。したがって、定義された数のＰＥ分子を含むビーズを使用して標準曲線を作成することにより、細胞に結合した抗体分子の数を判定することができる。
【0130】
Ｊｕｒｋａｔ細胞をＦＡＣＳバッファー（２％ＦＣＳを含むＰＢＳ）中でＰＥ標識抗ＰＤ１抗体（ＥＨ１２．２Ｈ７、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）またはアイソタイプ対照を用いて４°Ｃで３０分間染色した後、ＦＡＣＳバッファーで洗浄した。Ｑｕａｎｔｉｂｒｉｔｅ（商標）ビーズのチューブ１本（ＰＥフィコエリトリン定量化キット、ＢＤ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（カタログ番号３４０４９５）を、５００μｌのＰＢＳに再懸濁した。
【0131】
その後、Ｑｕａｎｔｉｂｒｉｔｅ（商標）ビーズとＪｕｒｋａｔ細胞を同じ設定で流すことができるようにＦＡＣＳ機を設定した。１００００個の事象が収集されるまでビーズを流し、そこから、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ＰＥ Ｐｈｙｃｏｅｒｙｔｈｒｉｎ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ Ｋｉｔに記載されているように、すなわち、送達された４集団のＱｕａｎｔｉｂｒｉｔｅ（商標）ビーズについてビーズ当たりのＬｏｇ分子（キット内のロット固有の情報）とＬｏｇ ＭＦＩ（蛍光強度）をプロットすることにより、標準曲線を作成した。次いで、この標準曲線を使用して、ＭＦＩを分子数に変換することにより、細胞株上の分子数を計算した。抗体が飽和濃度で使用され、細胞当たりのＰＤ－１分子への抗体の結合が１：１であることを考慮すると、細胞当たりの結合した抗体の数は、細胞当たりに存在するＰＤ－１分子の数に対応する。
【0132】
その後、ＰＤ１－ＰＥで染色したＪｕｒｋａｔ細胞をＦＡＣＳで流し、目的の試料の対数平均蛍光強度（ＭＦＩ）を用いて結合した抗体の数を計算した。
【0133】
その結果を図１に示す。
【0134】
図１から、低度の発現を有する細胞集団は、中程度の発現を有するいくつかの細胞（約２％）を含むことが明らかであるが、それは集団の無視できる部分であり、以下に示す（および図２に示される）食作用実験から、この小さな部分が食作用に影響を与えないことは明らかである。同様に、中程度の発現を有する細胞集団が低度の発現を有するいくつかの細胞を含むことは明らかであるが、この場合も同様に、この小さな細胞画分は、以下に示すように食作用の結果に影響を及ぼさない。
【0135】
低発現サブセット（図１Ａ）は、平均して３，２４９個のＰＤ－１分子／細胞を有し、下部５％カットオフは１，２５３個のＰＤ－１分子／細胞であり、上部５％カットオフは１０，６４３個のＰＤ－１分子／細胞である。中発現サブセット（図１Ｂ）は、平均して３２，９５１個のＰＤ－１分子／細胞を有し、下部５％カットオフは１５，４９８個のＰＤ－１分子／細胞であり、上部５％カットオフは７７，８２２個のＰＤ－１分子／細胞である。高発現サブセット（図１Ｃ）は、平均して１６５，９６８個のＰＤ－１分子／細胞を有し、下部５％カットオフは６５，４０６個のＰＤ－１分子／細胞であり、上部５％カットオフは３９０，９４６個のＰＤ－１分子／細胞である。異なるサブセット間の重複を少なくするために、上部と下部の５％カットオフ値が提供されている。１５，４９８の下部５％カットオフ値、すなわち、上記で測定された約１５，５００の個のＰＤ－１分子／細胞が、中程度または高度の発現の下限を定義するために本明細書で使用される。
【0136】
食作用
ＳｏｕｔｈａｍｐｔｏｎのＮａｔｉｏｎａｌ Ｂｌｏｏｄ Ｓｅｒｖｉｃｅから入手した白血球コーンから単離したヒトＰＢＭＣを、グルタミン、ピルビン酸、ＰｅｎＳｔｒｅｐ、およびＳｉｇｍａ Ｈｅａｔの１％熱不活化ヒト血清を含有するＲＰＭＩ培地（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を含むプレートで２時間インキュベートして単球を付着させた。次いで、培地を、グルタミン、ピルビン酸、ＰｅｎＳｔｒｅｐ、および＋１０％ＦＣＳ（Ｓｉｇｍａ）を含有するＲＰＭＩ培地と交換した。２４時間後、ＭＣＳＦ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｏｕｔｈａｍｐｔｏｎで生成）を添加した。マクロファージは、２回の培地交換（ＭＣＳＦを含む）により７日間にわたって誘導した。その後、培地を除去し、２ｍＬのＰＢＳを添加し、氷上に１５分間置いてから軽くこすることにより、マクロファージを回収した。次いで、マクロファージを９６ウェルプレートに２時間再播種した。マクロファージを抗ｈＦｃγＲＩＩｂ ｍＡｂ（６Ｇ１１ＷＴまたは６Ｇ１１ＮＱ）で４５分間、２倍の最終濃度で前処理した後、ニボルマブ（ｈＩｇＧ４）で１５分間、２倍の最終濃度でオプソニン化したＣＦＳＥ（分子プローブ）標識Ｊｕｒｋａｔを添加した。細胞を３７℃で１時間共培養した後、４℃のＦＡＣＳバッファーで３０分間インキュベートしてから洗浄することにより抗ＣＤ１４（ＢＤ－Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で染色し、次いでＦＡＣＳ機で読み取った。
ＳｏｕｔｈａｍｐｔｏｎのＮａｔｉｏｎａｌ Ｂｌｏｏｄ Ｓｅｒｖｉｃｅから入手した白血球コーンから単離したヒトＰＢＭＣを、グルタミン、ピルビン酸、ＰｅｎＳｔｒｅｐ、およびＳｉｇｍａ Ｈｅａｔの１％熱不活化ヒト血清を含有するＲＰＭＩ培地（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を含むプレートで２時間インキュベートして単球を付着させた。次いで、培地を、グルタミン、ピルビン酸、ＰｅｎＳｔｒｅｐ、および＋１０％ＦＣＳ（Ｓｉｇｍａ）を含有するＲＰＭＩ培地と交換した。２４時間後、ＭＣＳＦ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｏｕｔｈａｍｐｔｏｎで生成）を添加した。マクロファージは、２回の培地交換（ＭＣＳＦを含む）により７日間にわたって誘導した。その後、培地を除去し、２ｍＬのＰＢＳを添加し、氷上に１５分間置いてから軽くこすることにより、マクロファージを回収した。次いで、マクロファージを９６ウェルプレートに２時間再播種した。マクロファージを抗ｈＦｃγＲＩＩｂ ｍＡｂ（６Ｇ１１ＷＴまたは６Ｇ１１ＮＱ）で４５分間、２倍の最終濃度で前処理した後、ニボルマブ（ｈＩｇＧ４）で１５分間、２倍の最終濃度でオプソニン化したＣＦＳＥ（分子プローブ）標識Ｊｕｒｋａｔを添加した。細胞を３７℃で１時間共培養した後、４℃のＦＡＣＳバッファーで３０分間インキュベートしてから洗浄することにより抗ＣＤ１４（ＢＤ－Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で染色し、次いでＦＡＣＳ機で読み取った。
【0137】
その結果を図２に示す。
【0138】
実施例２．腫瘍担持マウスからの免疫細胞におけるＰＤ－１の定量化
マウス腫瘍からの免疫細胞上のＰＤ－１受容体の数は、Ｑｕａｎｔｕｍ（商標）Ｓｉｍｐｌｙ Ｃｅｌｌｕｌａｒ（登録商標）ビーズ（Ｂａｎｇｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）を用いて判定した。簡単に説明すると、ビーズをラット抗ＰＤ－１抗体（クローン２９Ｆ．１Ａ１２、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色して、標準曲線を作成した。次いで、発現を判定するために、細胞試料を曲線に対して読み取った。
マウス腫瘍からの免疫細胞上のＰＤ－１受容体の数は、Ｑｕａｎｔｕｍ（商標）Ｓｉｍｐｌｙ Ｃｅｌｌｕｌａｒ（登録商標）ビーズ（Ｂａｎｇｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）を用いて判定した。簡単に説明すると、ビーズをラット抗ＰＤ－１抗体（クローン２９Ｆ．１Ａ１２、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色して、標準曲線を作成した。次いで、発現を判定するために、細胞試料を曲線に対して読み取った。
【0139】
腫瘍担持マウスからの細胞について定量化を行った。マウームオフィスのガイドラインに従って、地元の施設で飼育および維持した。６～８週齢の雌のＣ５７／ＢＬ６マウスは、Ｔａｃｏｎｉｃ（Ｂｏｍｈｏｌｔ、Ｄｅｎｍａｒｋ）から供給され、地元の動物施設で維持された。ＭＣ３８細胞（ＡＴＣＣ）を、１０％ＦＢＳを添加したグルタマックス緩衝ＲＰＭＩで増殖させた。細胞が半コンフルエントになったとき、それらをトリプシンで剥離させ、１０×１０6細胞／ｍＬで滅菌ＰＢＳに再懸濁した。マウスに１×１０6細胞／マウスに相当する１００μｌの細胞懸濁液を皮下注射した。腫瘍は採取前に約２０日間増殖させた。ＣＤ８＋Ｔ細胞サブセットは、ＣＤ４５、ＣＤ３、ＣＤ４、およびＣＤ８マーカー（すべてＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ製）を使用したＦＡＣＳによって同定した。異なるＴ細胞サブセットにおけるＰＤ－１発現は、対応するアイソタイプ対照（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）とともに市販のラット抗ＰＤ－１抗体（クローン２９Ｆ．１Ａ１２）を使用して定量化した。その結果を図４に示す。
【0140】
実施例３ インビボでの抗ＰＤ－１との併用効果
マウス細胞におけるＰＤ－１発現は、トランスフェクトされたＪｕｒｋａｔ細胞における「中～高」発現レベルに対応する（実施例１、図１）。食作用アッセイにおいて、ＢＩ－１２０６は、これらの「中～高」ＰＤ－１発現細胞の食作用のレベルを大幅に低下させることが示された（例１、図２）。このデータは、インビボＭＣ３８モデルで抗ＰＤ－１と抗ＦｃγＲＩＩｂ（ＢＩ－１２０６マウス代替）とを組み合わせた場合に見られた改善された治療的な抗腫瘍効果と併せて（図３）、中程度または高度のＰＤ－１発現、すなわち、１５，５００個のＰＤ－１分子／細胞以上のＰＤ－１発現を有する患者におけるＢＩ－１２０６と組み合わせた抗ＰＤ－１の治療効果の改善を示唆している。
マウス細胞におけるＰＤ－１発現は、トランスフェクトされたＪｕｒｋａｔ細胞における「中～高」発現レベルに対応する（実施例１、図１）。食作用アッセイにおいて、ＢＩ－１２０６は、これらの「中～高」ＰＤ－１発現細胞の食作用のレベルを大幅に低下させることが示された（例１、図２）。このデータは、インビボＭＣ３８モデルで抗ＰＤ－１と抗ＦｃγＲＩＩｂ（ＢＩ－１２０６マウス代替）とを組み合わせた場合に見られた改善された治療的な抗腫瘍効果と併せて（図３）、中程度または高度のＰＤ－１発現、すなわち、１５，５００個のＰＤ－１分子／細胞以上のＰＤ－１発現を有する患者におけるＢＩ－１２０６と組み合わせた抗ＰＤ－１の治療効果の改善を示唆している。
【0141】
実施例４ ヒトＴ細胞におけるＰＤ－１発現の定量化
解離した生存凍結腫瘍試料（図８の表を参照）を、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓから購入した。以下の抗体の混合物で染色する前に、細胞を解凍し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄した：Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ７００マウス抗ヒトＣＤ４５（クローンＨＩ３０、ＢＤ ５６０５６６）、ＢＶ６０５マウス抗ヒトＣＤ８（クローンＳＫ１、ＢＤ ５６４１１６）、ＰｅｒＣＰ－Ｃｙ５．５マウス抗ヒトＣＤ３（クローンＵＣＨＴ１、ＢＤ ５６０８３５）、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７ヒト抗ヒトＰＤ－１（ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ）、臨床グレード、ロット番号８ＳＮＬ８０４０６、Ｍｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ＆Ｄｏｈｍｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ）。Ｆｉｘａｂｌｅ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ ７８０も抗体染色混合物に含まれていた（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、６５－０８６５－１４）。染色はＢＤ Ｈｏｒｉｚｏｎ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｓｔａｉｎ Ｂｕｆｆｅｒ（ＢＤ ５６３７９４）中で行った。抗ヒトＰＤ－１は社内でＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７と結合させ、滴定前の実験で示された受容体飽和濃度（５．５μｇ／ｍＬ）で使用した。残りの抗体は、製造業者が推奨する濃度で使用した。細胞を抗体と２０分間インキュベートし、次いで洗浄してＰＢＳに再懸濁した後、ＢＤ ＦＡＣＳＡｒｉａ ＩＩを使用して取得した。分析はＦｌｏｗＪｏソフトウェアを使用して行った。ＰＤ－１をトランスフェクトしたＪｕｒｋａｔ細胞におけるＰＤ－１発現分析も同様の方法で行われたが、染色混合物にはＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７ヒト抗ヒトＰＤ－１およびＦｉｘａｂｌｅ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ ７８０のみを含めた。その結果を図５に示す。腫瘍試料では、ＰＤ－１発現はＣＤ３＋およびＣＤ３＋ＣＤ８＋集団内でそれぞれ定義し、生ＣＤ４５＋細胞に対してプレゲートした（図７）。ＰＤ－１高発現のゲートは、ＰＤ－１をトランスフェクトしたＪｕｒｋａｔ細胞に基づいて定義し、下端は、ＰＤ－１中発現Ｊｕｒｋａｔ細胞の半値全幅ゲートの下端に従って設定した（図６）。
解離した生存凍結腫瘍試料（図８の表を参照）を、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓから購入した。以下の抗体の混合物で染色する前に、細胞を解凍し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄した：Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ７００マウス抗ヒトＣＤ４５（クローンＨＩ３０、ＢＤ ５６０５６６）、ＢＶ６０５マウス抗ヒトＣＤ８（クローンＳＫ１、ＢＤ ５６４１１６）、ＰｅｒＣＰ－Ｃｙ５．５マウス抗ヒトＣＤ３（クローンＵＣＨＴ１、ＢＤ ５６０８３５）、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７ヒト抗ヒトＰＤ－１（ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ）、臨床グレード、ロット番号８ＳＮＬ８０４０６、Ｍｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ＆Ｄｏｈｍｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ）。Ｆｉｘａｂｌｅ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ ７８０も抗体染色混合物に含まれていた（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、６５－０８６５－１４）。染色はＢＤ Ｈｏｒｉｚｏｎ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｓｔａｉｎ Ｂｕｆｆｅｒ（ＢＤ ５６３７９４）中で行った。抗ヒトＰＤ－１は社内でＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７と結合させ、滴定前の実験で示された受容体飽和濃度（５．５μｇ／ｍＬ）で使用した。残りの抗体は、製造業者が推奨する濃度で使用した。細胞を抗体と２０分間インキュベートし、次いで洗浄してＰＢＳに再懸濁した後、ＢＤ ＦＡＣＳＡｒｉａ ＩＩを使用して取得した。分析はＦｌｏｗＪｏソフトウェアを使用して行った。ＰＤ－１をトランスフェクトしたＪｕｒｋａｔ細胞におけるＰＤ－１発現分析も同様の方法で行われたが、染色混合物にはＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７ヒト抗ヒトＰＤ－１およびＦｉｘａｂｌｅ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ ７８０のみを含めた。その結果を図５に示す。腫瘍試料では、ＰＤ－１発現はＣＤ３＋およびＣＤ３＋ＣＤ８＋集団内でそれぞれ定義し、生ＣＤ４５＋細胞に対してプレゲートした（図７）。ＰＤ－１高発現のゲートは、ＰＤ－１をトランスフェクトしたＪｕｒｋａｔ細胞に基づいて定義し、下端は、ＰＤ－１中発現Ｊｕｒｋａｔ細胞の半値全幅ゲートの下端に従って設定した（図６）。
【0142】
図９は、異なる患者から得られた個々の腫瘍試料における、ＰＤ－１を中程度～高度に発現するＣＤ３＋リンパ球とＣＤ３＋ＣＤ８＋リンパ球の割合をそれぞれ示している。Ｔ細胞の１０％が中または高レベルでＰＤ－１を発現している患者は、抗ＰＤ－１と組み合わせた抗ＦｃγＲＩＩｂの恩恵を受けることが期待されるため、１０％の発現の点線が含まれている。
【図1】
【図2A-B】
【図2C-D】
【図3A】
【図3B】
【図3C】
【図3D】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8A】
【図8B】
【図9】
【配列表】
【国際調査報告】