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特表2022-541334抗がん剤への耐性を消失させるための剤としての選択的ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２トランスポーター阻害剤
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-09-22
(54)【発明の名称】抗がん剤への耐性を消失させるための剤としての選択的ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２トランスポーター阻害剤
(51)【国際特許分類】
C07D 311/66 20060101AFI20220914BHJP
C07D 405/12 20060101ALI20220914BHJP
A61K 31/352 20060101ALI20220914BHJP
A61K 31/405 20060101ALI20220914BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20220914BHJP
A61P 3/06 20060101ALI20220914BHJP
A61P 1/04 20060101ALI20220914BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20220914BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220914BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20220914BHJP
A61K 38/05 20060101ALI20220914BHJP
【ＦＩ】
C07D311/66 CSP
C07D405/12
A61K31/352
A61K31/405
A61K45/00
A61P3/06
A61P1/04
A61P29/00
A61P43/00 121
A61P35/00
A61K38/05
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022505245
(86)(22)【出願日】2020-06-01
(85)【翻訳文提出日】2022-02-15
(86)【国際出願番号】 IB2020055168
(87)【国際公開番号】W WO2021014229
(87)【国際公開日】2021-01-28
(31)【優先権主張番号】1908485
(32)【優先日】2019-07-25
(33)【優先権主張国・地域又は機関】FR
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】517017399
【氏名又は名称】ウニヴェルシテ・グルノーブル・アルプ
(71)【出願人】
【識別番号】506316557
【氏名又は名称】サントル ナショナル ドゥ ラ ルシェルシュ シアンティフィック
(71)【出願人】
【識別番号】512089645
【氏名又は名称】ウニヴェルシテ クロード ベルナール リヨン １
【氏名又は名称原語表記】ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＥ ＣＬＡＵＤＥ ＢＥＲＮＡＲＤ ＬＹＯＮ １
【住所又は居所原語表記】４３ Ｂｏｕｌｅｖａｒｄ ｄｕ １１ ｎｏｖｅｍｂｒｅ １９１８，Ｆ－６９６２２ Ｖｉｌｌｅｕｒｂａｎｎｅ Ｃｅｄｅｘ，Ｆｒａｎｃｅ
(74)【代理人】
【識別番号】110000855
【氏名又は名称】弁理士法人浅村特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ボーメンディエル、アーセーヌ
(72)【発明者】
【氏名】ファルソン、ピエール
(72)【発明者】
【氏名】モレノ、アレクシス
(72)【発明者】
【氏名】ペレス、バジーレ
(72)【発明者】
【氏名】ルーセル、エミール
【テーマコード（参考）】
4C063
4C084
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C063AA01
4C063BB09
4C063CC79
4C063DD06
4C063EE01
4C084AA19
4C084BA01
4C084BA08
4C084BA14
4C084BA23
4C084BA32
4C084CA59
4C084MA02
4C084NA05
4C084ZB112
4C084ZB262
4C084ZC332
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086AA04
4C086BA08
4C086BC14
4C086MA02
4C086MA04
4C086NA05
4C086NA14
4C086ZC41
4C086ZC75
(57)【要約】
本発明は、式（Ｉ）の化合物
【化１】
又はエナンチオマー、この化合物の薬学的に許容される、塩若しくは溶媒和物、又はそれらの混合物に関し、核Ａ、置換基Ｚ、Ｙ及びＲ１は、本明細書で定義されるとおりである。
【化１】
又はエナンチオマー、この化合物の薬学的に許容される、塩若しくは溶媒和物、又はそれらの混合物に関し、核Ａ、置換基Ｚ、Ｙ及びＲ１は、本明細書で定義されるとおりである。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）の化合物：【化1】
又はその薬学的に許容されるエナンチオマー、塩若しくは溶媒和物、又はそれらの混合物、ここで：
・環Ａが非置換であるか、又は２、３、４、５位でＦ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＲの１つ又は２つによって置換されており、Ｒ＝Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、ｉ－Ｐｒ、ｎ－Ｂｕ；Ｏ－ＣＨ２－（Ｏ－ＣＨ２ＣＨ２）ｎ－Ｏ－ＣＨ３、ｎ＝３、４、５、６である、
・Ｚは
【化2】
又は－ＣＨ２－である、
・Ｙ＝－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２、Ｒ２は以下から選択される：
－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；３－（５－メトキシ）インドリル；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－メトキシ）インドリル）
式（Ｉ）中の
【化3】
及びＹの置換基－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２のＲ３は、独立して、以下から選択される：Ｈ又は
【化4】
【化5】
【化6】
【化7】
ただし、環Ａの４位にＢｒが同時に存在し、Ｒ１＝ＣＨ（ＣＨ３）２又はＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２又はＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、Ｚ＝
【化8】
であり、Ｙ＝－ＯＨ又は－ＯＭｅである化合物は除く。
【請求項2】
環Ａが２、３、４、５位で１つ又は２つのＢｒで置換され、Ｙ＝－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２、ここでＲ１、Ｒ２及びＲ３は請求項１に定義した通りであることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項3】
Ｙが－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）又は－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）であり、ただし、【化9】
は、
【化10】
又は
【化11】
であることを特徴とする、請求項１及び２の１つに記載の化合物。
【請求項4】
以下から選択される請求項１～３のいずれかに記載の化合物：メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－ロイシナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファナート；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシン；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファン；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
（Ｓ）－５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（１－（（２－（５－ヒドロキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド；
（Ｓ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド；及び
（Ｒ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド。
【請求項5】
以下のステップを含むことを特徴とする、請求項１～４の１つに記載の化合物を得るための方法：（ａ）式
【化12】
のアルキル化化合物、
ここで、環Ａは請求項１に定義された通りであり、ＸはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選択されるハロゲンである、
を、式
【化13】
の２，６－ジヒドロキシアセトフェノンで、アセトンの還流温度でアセトン中で反応させ、式
【化14】
の中間体を得る；
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた中間体を、式
【化15】
のシュウ酸ジエチルと、０℃～５０℃の温度で、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）／エタノール（１：１）の混合物中で反応させ、式
【化16】
の中間体を得る；
（ｃ）ステップ（ｂ）で得られた中間体を、５０℃の温度で、酸性又は塩基性媒体中、ＴＨＦ／エタノール／水溶媒（３：１：１．５）中で、エステル官能基の加水分解反応により反応させ、式
【化17】
の中間体を得る；
（ｄ）ステップ（ｃ）で得られた中間体を、式
【化18】
、ここで、Ｒ１、Ｚ及びＹは請求項１に定義した通りである、
のカップリング化合物と無水ＤＭＦ中で室温で反応させて、アミド結合を形成して式（Ｉ）の化合物を得る。
【請求項6】
乳がんの多剤耐性タンパク質（乳がん耐性タンパク質ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２）の阻害に使用するための、式（Ｉ）の化合物：【化19】
又はその薬学的に許容されるエナンチオマー、塩若しくは溶媒和物、又はそれらの混合物、ここで：
・環Ａが非置換であるか、又は２、３、４、５位でＦ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＲの１つ又は２つによって置換されており、Ｒ＝Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、ｉ－Ｐｒ、ｎ－Ｂｕ；Ｏ－ＣＨ２－（Ｏ－ＣＨ２ＣＨ２）ｎ－Ｏ－ＣＨ３、ｎ＝３、４、５、６である、
・Ｚは
【化20】
又は－ＣＨ２－である、
・Ｙ＝－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２、Ｒ２は以下から選択される：
－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；３－（５－メトキシ）インドリル；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；-ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－メトキシ）インドリル）、
・式（Ｉ）中の
【化21】
及びＹの置換基－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２のＲ３は、独立して、以下から選択される：Ｈ又は
【化22】
【化23】
【化24】
【化25】
【請求項7】
環Ａが２、３、４、５位で１つ又は２つのＢｒで置換され、Ｙ＝－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は請求項６で定義した通りであることを特徴とする、請求項６記載の使用のための化合物。
【請求項8】
Ｙが－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）又は－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）であり、ただし、【化26】
は、
【化27】
又は
【化28】
であることを特徴とする、請求項６及び７のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項9】
以下から選択される、請求項６から８のいずれかに記載の使用のための化合物：メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－ロイシナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファナート；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシン；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファン；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
（Ｓ）－５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（１－（（２－（５－ヒドロキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド；
（Ｓ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド、及び
（Ｒ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド。
【請求項10】
少なくとも１つの薬学的に許容される活性剤；及び請求項１～４の１つに記載の少なくとも１つの化合物
を含む医薬組成物。
【請求項11】
薬学的に許容される活性剤が、抗がん剤、腸管抗炎症剤、コレステロール低下剤、抗脂質異常症剤及びキナーゼ阻害剤から選択されることを特徴とする、請求項１０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、新規化合物、その製造方法、及びＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２阻害剤としてのその使用に関するものである。
【背景技術】
【0002】
これらの新しい有機化合物は、すべて天然化合物であるクロモンに由来する同じ化学ファミリーに属している。
【0003】
その主な目的は、抗がん剤に対する腫瘍の多剤耐性現象に関与するＢＣＲＰタンパク質（乳がん耐性タンパク質）（ＡＢＣＧ２としても知られる）を選択的に阻害することである。ＢＣＲＰは排出ポンプとして働き、腫瘍細胞膜で過剰発現している。これらの化合物は、ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２に対して選択的かつ非細胞毒性阻害剤として作用する。
【0004】
最後に、これらの化合物は、参照化合物であるＫｏ１４３よりも阻害活性と選択性が高く、細胞毒性が低い一方で、有機合成が非常に単純であることがわかった。臨床では、これらの化合物を抗がん剤と併用することで、抗がん剤の効果を増強し、腫瘍の根絶を目的とした治療に対する腫瘍の抵抗性に対抗するためのアジュバントとして使用することができる。
【0005】
ＷＨＯによると、がんは世界第２位の死因で、年間約９６０万人が亡くなっている。この病気の治療費は、２０１０年には年間１１，６００億円と推定されている。現在、がんの治療には、ステージや種類に応じて、１）手術、２）放射線治療、３）化学療法という３つの主要な戦略がある。これらの戦略は、治療の全体的な効果を補完するために、互いに追加して使用することができることに留意する必要がある。
【0006】
しかし、化学療法では、同じ抗がん剤を繰り返し使用することで、腫瘍細胞は抗がん剤に対して防御・防衛の反応を起こす。残念ながら、これは様々な抗がん剤に対する腫瘍の感受性を低下させ、化学療法を効かなくし、患者への害を増大させることになる。腫瘍細胞による防御策の一つとして、ＡＴＰ結合カセット（ＡＢＣ）トランスポーターと呼ばれる膜貫通型タンパク質が細胞膜に過剰発現していることが挙げられる。（Ｂｏｒｓｔ，Ｐ．；Ｅｌｆｅｒｉｎｋ，Ｒ．Ｏ．Ｍａｍｍａｌｉａｎ ＡＢＣ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ ｉｎ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ．（健康時及び疾病時における哺乳類ＡＢＣトランスポーター）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００２，７１（１），５３７－５９２．Ｌｉｎｔｏｎ，Ｋ．Ｊ． Ｓｔｒｕｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ＡＢＣ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ．（ＡＢＣトランスポーターの構造と機能）．Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ２００７，２２（２），１２２－１３０．Ｓｈａｒｏｍ，Ｆ．Ｊ．ＡＢＣ Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｏｌｅ ｉｎ Ｃｈｅｍｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．（ＡＢＣ多剤トランスポーター：化学療法抵抗性における構造、機能及び役割）Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ ２-００８，９（１），１０５－１２７）．
【0007】
このスーパーファミリーの４８の膜貫通型タンパク質のうち３つが化学療法の失敗において主要な役割を果たすことが明確にされている：Ｐ－ｇｐ／ＡＢＣＢ１、ＭＲＰ１／ＡＢＣＣ１、ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２（Ｌｅｓｌｉｅ，Ｅ．Ｍ．；Ｄｅｅｌｅｙ，Ｒ．Ｇ．；Ｃｏｌｅ，Ｓ．Ｐ．Ｃ．Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ： Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｐ－Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＭＲＰ１，ＭＲＰ２，ａｎｄ ＢＣＲＰ（ＡＢＣＧ２）ｉｎ Ｔｉｓｓｕｅ Ｄｅｆｅｎｓｅ．（多剤耐性タンパク質：組織防御におけるＰ－糖タンパク質、ＭＲＰ１、ＭＲＰ２、及びＢＣＲＰ（ＡＢＣＧ２）の役割）Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００５，２０４（３），２１６－２３７．Ｅｃｋｆｏｒｄ，Ｐ．Ｄ．Ｗ．；Ｓｈａｒｏｍ，Ｆ．Ｊ．ＡＢＣ Ｅｆｆｌｕｘ Ｐｕｍｐ－Ｂａｓｅｄ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ Ｄｒｕｇｓ．（化学療法薬に対するＡＢＣ排出ポンプベースの耐性）Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２００９，１０９（７），２９８９－３０１１．）．
【0008】
これらの膜は、様々な種類の化学物質の輸送を可能にし、私たちの体内のほとんどの細胞膜や生理的バリアに自然に存在している。したがって、健康な人におけるその生理的役割は、外来物質及び／又は異種物質から小器官や組織を防御し保護することである。しかし、これらのＡＢＣトランスポーターが有効成分の吸収、分布、代謝、排泄を劇的に変化させることが明らかにされている。（Ｓｈａｒｏｍ，Ｆ．Ｊ．ＡＢＣ Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｏｌｅ ｉｎ Ｃｈｅｍｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．（ＡＢＣ多剤トランスポーター：化学療法抵抗性における構造、機能及び役割）Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ ２００８，９（１），１０５－１２７）．
【0009】
これらの機能により、これら３つのトランスポーターは、化学療法抵抗性の問題を抑制するための有効な治療解決策として、研究における有効、新規かつ主要な治療標的となっている。（Ｂｕｇｄｅ，Ｐ．；Ｂｉｓｗａｓ，Ｒ．；Ｍｅｒｉｅｎ，Ｆ．；Ｌｕ，Ｊ．；Ｌｉｕ，Ｄ．－Ｘ．；Ｃｈｅｎ，Ｍ．；Ｚｈｏｕ，Ｓ．；Ｌｉ，Ｙ．Ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ＡＢＣ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ ｔｏ Ｃｏｍｂａｔ Ｍｕｌｔｉ－Ｄｒｕｇ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．（多剤耐性を克服するためのＡＢＣトランスポーターを標的とする治療の可能性）Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｔａｒｇｅｔｓ２０１７，２１（５），５１１－５３０．）
【0010】
Ｋｏ１４３は、３つの非対称中心を含有する多環式有機分子で、現在、ＢＣＲＰの参照阻害剤として研究に使用されている。しかし、その最適化された５段階合成は、全体の収率が５％と面倒であり、３つの非対称中心の制御が依然として制限的なパラメーターである（Ｌｉ，Ｙ．；Ｈａｙｍａｎ，Ｅ．；Ｐｌｅｓｅｓｃｕ，Ｍ．；Ｐｒａｋａｓｈ，Ｓ．Ｒ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｐｏｔｅｎｔ ＢＣＲＰ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ－ Ｋｏ１４３．（強力なＢＣＲＰ阻害剤－Ｋｏ１４３の合成）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．２００８，４９（９），１４８０－１４８３．）
【0011】
この化合物は、良好な活性（５０％阻害濃度、ＩＣ５０＝０．０９μＭ±０．０１）にもかかわらず、比較的低い溶解度を有しており、これがバイオアベイラビリティに影響を及ぼしている。Ｋｏ１４３は、３級ブチルエステルの加水分解により速やかに代謝され（６０分）、不活性代謝物を生成することが臨床試験で明らかにされている。（Ｌｉｕ，Ｋ；Ｚｈｕ，Ｊ；Ｈｕａｎｇ，Ｙ；Ｌｉ，Ｃ．；Ｌｕ，Ｊ；Ｓａｃｈａｒ，Ｍ；Ｌｉ，Ｓ．；Ｍａ，Ｘ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｏｆ ＫＯ１４３， ａｎ ＡＢＣＧ２ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ．（ＡＢＣＧ２阻害剤ＫＯ１４３の代謝）Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．２０１７，３２（４），１９３－２００．）その結果、臨床試験は中止となった。当初ＢＣＲＰに選択的であると発表されたこの化合物は、最終的にＡＢＣＧ２に非選択的であることが判明した（Ｗｅｉｄｎｅｒ，Ｌ．Ｄ．；Ｚｏｇｈｂｉ，Ｓ．Ｓ．；Ｌｕ，Ｓ．；Ｓｈｕｋｌａ，Ｓ；Ａｍｂｕｄｋａｒ，Ｓ．Ｖ．；Ｐｉｋｅ，Ｖ．Ｗ．；Ｍｕｌｄｅｒ，Ｊ．；Ｇｏｔｔｅｓｍａｎ，Ｍ．Ｍ．；Ｉｎｎｉｓ，Ｒ．Ｂ．；Ｈａｌｌ，Ｍ．Ｄ．Ｔｈｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ Ｋｏ１４３ Ｉｓ Ｎｏｔ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｆｏｒ ＡＢＣＧ２．（阻害剤Ｋｏ１４３はＡＢＣＧ２に対して特異的ではない）Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２０１５，３５４（３），３８４－３９３．Ａｌｌｅｎ，Ｊ．Ｄ．；ｖａｎ Ｌｏｅｖｅｚｉｊｎ，Ａ．；Ｌａｋｈａｉ，Ｊ．Ｍ．；ｖａｎ ｄｅｒ Ｖａｌｋ，Ｍ．；ｖａｎ Ｔｅｌｌｉｎｇｅｎ，Ｏ．；Ｒｅｉｄ，Ｇ．；Ｓｃｈｅｌｌｅｎｓ，Ｊ．Ｈ．Ｍ．；Ｋｏｏｍｅｎ，Ｇ．－Ｊ．；Ｓｃｈｉｎｋｅｌ，Ａ．Ｈ．Ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ ｉｎ Ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ Ｍｏｕｓｅ Ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ｂｙ ａ Ｎｏｖｅｌ Ａｎａｌｏｇｕｅ ｏｆ Ｆｕｍｉｔｒｅｍｏｒｇｉｎ Ｃ．（Ｆｕｍｉｔｒｅｍｏｒｇｉｎ Ｃの新規アナログによるｉｎ ｖｉｔｒｏ及びマウス腸管での乳がん耐性タンパク質多剤トランスポーターに対する強力かつ特異的な阻害作用。）Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．２００２，１（６），４１７．）
【0012】
本出願人は過去に、ＭＢＬ－ＩＩ－１４１と呼ばれる、選択的で毒性がなく、前臨床モデルで良好な活性を有する阻害剤を開発した。（Ｈｏｎｏｒａｔ，Ｍ；Ｇｕｉｔｔｏｎ，Ｊ；Ｇａｕｔｈｉｅｒ，Ｃ；Ｂｏｕａｒｄ，Ｃ；Ｌｅｃｅｒｆ－Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｆ；Ｐｅｒｅｓ，Ｂ；Ｔｅｒｒｅｕｘ，Ｒ；Ｇｅｒｖｏｔ，Ｈ；Ｒｉｏｕｆｏｌ，Ｃ；Ｂｏｕｍｅｎｄｊｅｌ，Ａ；ｅｔ ａｌ．ＭＢＬ－ＩＩ－１４１，ａ Ｃｈｒｏｍｏｎｅ Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ，Ｅｎｈａｎｃｅｓ Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ（ＣＰＴ－１１）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎ ＡＢＣＧ２－Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ．（クロモン誘導体であるＭＢＬ－ＩＩ－１４１がＡＢＣＧ２陽性異所性幹細胞のイリノテカン（ＣＰＴ－１１）抗がん効率を向上させる。）Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ２０１４，５（２３），１１９５７－１１９７０．Ｈeｎｉｎ，Ｅ；Ｈｏｎｏｒａｔ，Ｍ；Ｇｕｉｔｔｏｎ，Ｊ；Ｄｉ Ｐｉｅｔｒｏ，Ａ；Ｐａｙｅｎ，Ｌ；Ｔｏｄ，Ｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｍｉｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ ａｎｄ ＭＢＬ－ＩＩ－１４１，ａｎ ＡＢＣＧ２ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ：Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ ＭＢＬＩ－ＩＩ－１４１ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ．（イリノテカンとＡＢＣＧ２阻害剤ＭＢＬ－ＩＩ－１４１のマウスにおける薬物動態的相互作用：イリノテカンＭＢＬＩ－ＩＩ－１４１相互作用。）Ｂｉｏｐｈａｒｍ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｐｏｓ．２０１７．Ｖａｌｄａｍｅｒｉ，Ｇ．；Ｇｅｎｏｕｘ－Ｂａｓｔｉｄｅ，Ｅ．；Ｐｅｒｅｓ，Ｂ．；Ｇａｕｔｈｉｅｒ，Ｃ．；Ｇｕｉｔｔｏｎ，Ｊ．；Ｔｅｒｒｅｕｘ，Ｒ．；Ｗｉｎｎｉｓｃｈｏｆｅｒ，Ｓ．Ｍ．Ｂ．；Ｒｏｃｈａ，Ｍ．Ｅ．Ｍ．；Ｂｏｕｍｅｎｄｊｅｌ，Ａ．；Ｄｉ Ｐｉｅｔｒｏ，Ａ． Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ Ｃｈｒｏｍｏｎｅｓ ａｓ Ｈｉｇｈｌｙ Ｐｏｔｅｎｔ Ｎｏｎｔｏｘｉｃ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ， Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ．（乳がん抵抗性タンパク質に特異的な高活性・無毒の阻害剤としての置換クロモン類。）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１２，５５（２），９６６－９７０．Ｌｅｃｅｒｆ－Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｆ．；Ｐｅｒｅｓ，Ｂ．；Ｖａｌｄａｍｅｒｉ，Ｇ．；Ｇａｕｔｈｉｅｒ，Ｃ．；Ｗｉｎｔｅｒ，Ｅ．；Ｐａｙｅｎ，Ｌ．；Ｄｉ Ｐｉｅｔｒｏ，Ａ．；Ｂｏｕｍｅｎｄｊｅｌ，Ａ．ＡＢＣＧ２： Ｒｅｃｅｎｔ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ Ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ Ｈｉｇｈｌｙ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ（ＡＢＣＧ２：強力かつ高選択性の阻害剤に関する最近の発見。）Ｆｕｔｕｒｅ Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１３，５（９），１０３７－１０４５．Ｗｉｎｔｅｒ，Ｅ．；Ｌｅｃｅｒｆ－Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｆ．；Ｇｏｚｚｉ，Ｇ．；Ｐｅｒｅｓ，Ｂ．；Ｌｉｇｈｔｂｏｄｙ，Ｍ．；Ｇａｕｔｈｉｅｒ，Ｃ．；Ｏｚｖｅｇｙ－ Ｌａｃｚｋａ，Ｃ．；Ｓｚａｋａｃｓ，Ｇ．；Ｓａｒｋａｄｉ，Ｂ．；Ｃｒｅｃｚｙｎｓｋｉ－Ｐａｓａ，Ｔ．Ｂ．；ｅｔ ａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ－Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ ｏｆ Ｃｈｒｏｍｏｎｅ Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｔｏｗａｒｄ ｔｈｅ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ａｎｄ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ ＡＢＣＧ２．（クロモン誘導体の乳がん耐性蛋白質ＡＢＣＧ２との相互作用と阻害のメカニズムに関する構造活性相関。）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１３，５６（２４），９８４９－９８６０．Ｐｉｒｅｓ，Ａ．ｄｏ Ｒ．Ａ．；Ｌｅｃｅｒｆ－Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｆ．；Ｇｕｒａｇｏｓｓｉａｎ，Ｎ．；Ｐａｚｉｎａｔｏ，Ｊ．；Ｇｏｚｚｉ，Ｇ．Ｊ．；Ｗｉｎｔｅｒ，Ｅ．；Ｖａｌｄａｍｅｒｉ，Ｇ．；Ｖｅａｌｅ，Ａ．；Ｂｏｕｍｅｎｄｊｅｌ，Ａ；Ｄｉ Ｐｉｅｔｒｏ，Ａ．；ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ，Ｈｉｇｈｌｙ Ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ Ｎｏｎ－Ｔｏｘｉｃ， Ｃｈｒｏｍｏｎｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ ＡＢＣＧ２．（ヒト乳がん耐性タンパク質ＡＢＣＧ２に対する新規高力価かつ非毒性クロモンインヒビター）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１６，１２２，２９１－３０１．）。今回、この最近の刊行物において合成中間体として使用された化合物が、乳がんの多剤耐性タンパク質（乳がん耐性タンパク質ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２）の阻害剤であることが判明した。
【0013】
市場に出回っている抗がん剤の更新が速やかに行われないため、化学療法抵抗性の問題が増加している。新しい抗がん剤の不足に対抗するためには、耐性問題の根源に位置づけることが、現実的で経済的な解決策となる。実際、腫瘍細胞の自己防衛能力を抑制することで、現在の抗がん剤の効果を維持し、その有効量を制限することができる。その結果、副作用を抑え、患者や社会にとって化学療法にかかる総費用を抑えることができる。さらに、ＭＢＬ－ＩＩ－１４１やＫｏ１４３よりもさらに有効な新規化合物が見つかれば興味深いであろう。
【発明の概要】
【0014】
本発明は、式（Ｉ）の化合物：
又はその薬学的に許容されるエナンチオマー、塩若しくは溶媒和物、又はそれらの混合物に関する。ここで：
・環Ａが非置換であるか、又は２、３、４、５位でＦ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＲの１つ又は２つによって置換されており、Ｒ＝Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、ｉ－Ｐｒ、ｎ－Ｂｕ；Ｏ－ＣＨ２－（Ｏ－ＣＨ２ＣＨ２）ｎ－Ｏ－ＣＨ３、ｎ＝３、４、５、６である、
・Ｚは
又は－ＣＨ２－である、
・Ｙ＝－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２、Ｒ２は以下から選択される：
－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；３－（５－メトキシ）インドリル；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－メトキシ）インドリル）
式（Ｉ）中の
及びＹの置換基－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２のＲ３は、独立して、以下から選択される：Ｈ又は
ただし、環Ａの４位にＢｒが同時に存在し、Ｒ１＝ＣＨ（ＣＨ３）２又はＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２又はＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、Ｚ＝
であり、Ｙ＝－ＯＨ又は－ＯＭｅである化合物は除く。
【化1】
又はその薬学的に許容されるエナンチオマー、塩若しくは溶媒和物、又はそれらの混合物に関する。ここで：
・環Ａが非置換であるか、又は２、３、４、５位でＦ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＲの１つ又は２つによって置換されており、Ｒ＝Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、ｉ－Ｐｒ、ｎ－Ｂｕ；Ｏ－ＣＨ２－（Ｏ－ＣＨ２ＣＨ２）ｎ－Ｏ－ＣＨ３、ｎ＝３、４、５、６である、
・Ｚは
【化2】
又は－ＣＨ２－である、
・Ｙ＝－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２、Ｒ２は以下から選択される：
－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；３－（５－メトキシ）インドリル；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－メトキシ）インドリル）
式（Ｉ）中の
【化3】
及びＹの置換基－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２のＲ３は、独立して、以下から選択される：Ｈ又は
【化4】
【化5】
【化6】
【化7】
ただし、環Ａの４位にＢｒが同時に存在し、Ｒ１＝ＣＨ（ＣＨ３）２又はＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２又はＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、Ｚ＝
【化8】
であり、Ｙ＝－ＯＨ又は－ＯＭｅである化合物は除く。
【発明を実施するための形態】
【0015】
特に、環Ａは２、３、４、５の位置で、１つ又は２つのＢｒで置換されていてもよく、Ｙ＝－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は上で定義した通りである。
【0016】
特定の実施形態において、Ｙは、－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）又は－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）であり、ただし、
は
又は
である。
【化9】
は
【化10】
又は
【化11】
である。
【0017】
特に、本発明による化合物は、以下から選択することができる。
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－ロイシナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファナート；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシン；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファン；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
（Ｓ）－５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（１－（（２－（５－ヒドロキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド；
（Ｓ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド；及び
（Ｒ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド。
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－ロイシナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファナート；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシン；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファン；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
（Ｓ）－５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（１－（（２－（５－ヒドロキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド；
（Ｓ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド；及び
（Ｒ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド。
【0018】
本発明はまた、以下のステップを含むことを特徴とする、本発明による化合物を得るための方法に関する：
（ａ）式
のアルキル化化合物、
ここで、環Ａは請求項１に定義された通りであり、ＸはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選択されるハロゲンである、
を、式
の２，６－ジヒドロキシアセトフェノンで、アセトンの還流温度で、アセトン中で反応させ、式
の中間体を得る；
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた中間体を、式
のシュウ酸ジエチルと、０℃～５０℃の温度で、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）／エタノール（１：１）の混合物中で反応させ、式
の中間体を得る；
（ｃ）ステップ（ｂ）で得られた中間体を、５０℃の温度で、酸性又は塩基性媒体中、ＴＨＦ／エタノール／水溶媒（３：１：１．５）中で、エステル官能基の加水分解反応により反応させ、式
の中間体を得る；
（ｄ）ステップ（ｃ）で得られた中間体を、式
ここで、Ｒ１、Ｚ及びＹは請求項１に定義した通りである、
のカップリング化合物と、室温で無水ＤＭＦ中で反応させ、アミド結合を形成して式（Ｉ）の化合物を得る。
（ａ）式
【化12】
のアルキル化化合物、
ここで、環Ａは請求項１に定義された通りであり、ＸはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選択されるハロゲンである、
を、式
【化13】
の２，６－ジヒドロキシアセトフェノンで、アセトンの還流温度で、アセトン中で反応させ、式
【化14】
の中間体を得る；
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた中間体を、式
【化15】
のシュウ酸ジエチルと、０℃～５０℃の温度で、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）／エタノール（１：１）の混合物中で反応させ、式
【化16】
の中間体を得る；
（ｃ）ステップ（ｂ）で得られた中間体を、５０℃の温度で、酸性又は塩基性媒体中、ＴＨＦ／エタノール／水溶媒（３：１：１．５）中で、エステル官能基の加水分解反応により反応させ、式
【化17】
の中間体を得る；
（ｄ）ステップ（ｃ）で得られた中間体を、式
【化18】
ここで、Ｒ１、Ｚ及びＹは請求項１に定義した通りである、
のカップリング化合物と、室温で無水ＤＭＦ中で反応させ、アミド結合を形成して式（Ｉ）の化合物を得る。
【0019】
また、本発明は、乳がんの多剤耐性タンパク質（乳がん耐性タンパク質ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２）の阻害に使用するための、式（Ｉ）の化合物：
又はその薬学的に許容されるエナンチオマー、塩若しくは溶媒和物、又はそれらの混合物に関する。
式中、
・環Ａが非置換であるか、又は２、３、４、５位でＦ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＲの１つ又は２つによって置換されており、Ｒ＝Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、ｉ－Ｐｒ、ｎ－Ｂｕ；Ｏ－ＣＨ２－（Ｏ－ＣＨ２ＣＨ２）ｎ－Ｏ－ＣＨ３、ｎ＝３、４、５、６である、
・Ｚは
又は－ＣＨ２－である、
・Ｙ＝－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２、Ｒ２は以下から選択される：
－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；３－（５－メトキシ）インドリル；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－メトキシ）インドリル）、
・式（Ｉ）中の
及びＹの置換基－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２のＲ３は、独立して、以下から選択される：Ｈ又は
【化19】
又はその薬学的に許容されるエナンチオマー、塩若しくは溶媒和物、又はそれらの混合物に関する。
式中、
・環Ａが非置換であるか、又は２、３、４、５位でＦ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＲの１つ又は２つによって置換されており、Ｒ＝Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、ｉ－Ｐｒ、ｎ－Ｂｕ；Ｏ－ＣＨ２－（Ｏ－ＣＨ２ＣＨ２）ｎ－Ｏ－ＣＨ３、ｎ＝３、４、５、６である、
・Ｚは
【化20】
又は－ＣＨ２－である、
・Ｙ＝－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２、Ｒ２は以下から選択される：
－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＯＥｔ；－ＯＰｒ；－ＮＨ２；－ＮＨＭｅ；－Ｎ（Ｍｅ）２；－Ｎ（Ｍｅ）ＯＣＨ３；３－（５－メトキシ）インドリル；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－メトキシ）インドリル）、
・式（Ｉ）中の
【化21】
及びＹの置換基－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２のＲ３は、独立して、以下から選択される：Ｈ又は
【化22】
【化23】
【化24】
【化25】
【0020】
乳がんの多剤耐性タンパク質（乳がん耐性タンパク質ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２）の阻害は、乳がん治療における役割に加え、腫瘍細胞の再感作や、治療効果を発揮するために血液脳関門や消化管関門などの生理学的膜やバリアを通過する必要がある薬剤の薬物動態や効果の改善を可能にする可能性がある。
【0021】
特に、環Ａは２、３、４、５位で１つ又は２つのＢｒで置換されていてもよく、Ｙ＝－ＯＨ；－ＯＭｅ；－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）；－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）；－ＮＨ－ＣＨ（Ｒ３）－ＣＯＲ２、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は上で定義した通りである。
【0022】
特定の実施形態において、Ｙは、－ＮＨ－（ＣＨ２）２－（３－インドリル）又は－ＮＨ（ＣＨ２）２－３－（（５－ヒドロキシ）インドリル）であり、ただし
は、
又は
である。
【化26】
は、
【化27】
又は
【化28】
である。
【0023】
本発明による乳がんの多剤耐性タンパク質（乳がん耐性タンパク質ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２）の阻害に使用するための化合物は、以下から選択することができる：
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－ロイシナート
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファナート；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシン；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファン；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート。
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
（Ｓ）－５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（１－（（２－（５－ヒドロキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド；
（Ｓ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド、及び
（Ｒ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）－５－（（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド。
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－ロイシナート
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファナート；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシン；
（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン；
（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファン；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート；
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート。
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート；
（Ｓ）－５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（１－（（２－（５－ヒドロキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド；
（Ｓ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド、及び
（Ｒ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）－５－（（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド。
【0024】
また、本発明は、
少なくとも１つの薬学的に許容される活性剤；及び
上記で定義された少なくとも１つの化合物
を含む医薬組成物に関する。
少なくとも１つの薬学的に許容される活性剤；及び
上記で定義された少なくとも１つの化合物
を含む医薬組成物に関する。
【0025】
特に、薬学的に許容される活性剤は、抗がん剤、腸管抗炎症剤、コレステロール低下剤、抗脂質血症剤及びキナーゼ阻害剤から選択され得る。
【0026】
例えば、腸管抗炎症剤としては、スルファサラジンを、コレステロール低下剤としては、アトルバスタチンを、抗脂質異常症剤としては、ロスバスタチンを、抗がん剤又はキナーゼ阻害剤としては、イマチニブメシル酸塩を使用することができる。
【0027】
天然アミノ酸又は天然アミノ酸のエナンチオマーがクロモンユニットに結合していることで区別できるこれらの化合物は、市販の２，６－ジヒドロキシアセトフェノン１（スキーム１）から４ステップで合成することができ、全体の収率は１３～４１％であった。中間体２は、アルキル化、コスタネキ反応、ケン化という標準的な３つのステップでアクセスでき、全体の収率は４５％である。最後のステップは、カップリング反応、例えば、天然アミノ酸又は天然アミノ酸のエナンチオマーをクロモンユニットに結合させるペプチドカップリングによって行われ、反応を促進し、反応物の当量数を制限するカップリング剤によって支援される。
【0028】
試薬は安価であり、一般的に実験室で使用されている。さらに、この反応はエネルギーをあまり消費せず、沈殿や再結晶によって生成物を精製するため、有機溶媒の使用量や、それ故に廃棄物量が制限される。最終的に、化合物は純粋な形で単離され、様々な分析技術（ＮＭＲ、質量分析、Ｘ線回折）により、その構造が確立され、検証された。なお、Ｘ線回折により、市販のアミノ酸の非対称中心のラセミ化がないことが確認された。
【0029】
スキーム１：本発明のＢＣＲＰ阻害剤の合成経路。
【化29】
【0030】
以下の例は、本発明をその範囲を限定することなく説明するものである。
【0031】
これらの例では：
ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ－４００ ４００ ＭＨｚ装置（４００ＭＨｚ）又はＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ－５００ ５００ ＭＨｚ装置（５００ＭＨｚ）で記録した。
ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ－４００ ４００ ＭＨｚ装置（４００ＭＨｚ）又はＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ－５００ ５００ ＭＨｚ装置（５００ＭＨｚ）で記録した。
【0032】
化学シフト（δ）は内部標準として用いたＭｅ４Ｓｉに対するｐｐｍで報告した。
【0033】
エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）質量スペクトルは、グルノーブル大学分析学部がＷａｔｅｒｓ Ｘｅｖｏ Ｇ２－Ｓ Ｑ ＴＯＦ装置でナノスプレー入力により取得したものである。正確な質量はｍ／ｚで示された。
【0034】
ＨＰＬＣ分析は、ダイオードアレイ検出器とＣ１８逆相カラム（Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ Ｃ１８、Ｍａｃｈｅｒｅｙ－Ｎａｇｅｌ、粒子径５ｍｍ、１２５ｍｍ×３ｍｍ）を用いたＡｇｉｌｅｎｔ １１００シリーズシステムで、４５℃で、Ａ：水と０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）及びＢ：メタノール（ＭｅＯＨ）と０．１％ＴＦＡからなる移動相で、Ａ：Ｂ勾配を８５：１５から０：１００まで１４分かけて、１ｍＬ／分、１０μＬ注入、２５４ｎｍで検出して実施した。
【0035】
摂氏（℃）で表す融点（ｍ．ｐ．）はＢｕｃｈｉ Ｂ５４０融点で得た。
【0036】
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、Ｍｅｒｃｋ Ｆ－２５４シリカゲルプレート（０．２５ｍｍ厚）を用いて行った。
【0037】
特に断りのない限り，試薬は市販品（Ａｌｐｈａ Ａｅｓａｒ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ及びＴＣＩ）から入手し，さらに精製することなく使用した。
【実施例】
【0038】
例１～２０
シリーズ１
シリーズ１
【化30】
【0039】
注）以下のプロトコルにおいて、「分子番号＋ａ」は臭素が芳香環の２位にある場合、「分子番号＋ｂ」は臭素が芳香環の４位にある場合を指す。
【0040】
一般的な手順Ａ：
２，６－ジヒドロキシアセトフェノン１（１当量）のアセトン（６ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（３当量）及びあらかじめ一緒に均質化したテトラ－ｎ－ブチルアンモニウムブロミド（０．４当量）を同時に添加した。
２，６－ジヒドロキシアセトフェノン１（１当量）のアセトン（６ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（３当量）及びあらかじめ一緒に均質化したテトラ－ｎ－ブチルアンモニウムブロミド（０．４当量）を同時に添加した。
【0041】
この溶液を３０～６０分間還流させた後、アセトン（１５ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の対応するブロモベンジルブロミド（１当量）を滴下して加えた。
【0042】
その後、溶液を４～５時間還流し、ＴＬＣ（酢酸エチル／シクロヘキサン３：７）でモニターした。この溶液を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を集め、水とブラインで洗浄した後、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させた。
【0043】
一般的手順Ｂ：
無水ＴＨＦ（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の２（１当量）の溶液に、０℃、不活性雰囲気下、無水エタノール（１５ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のナトリウム（６当量）からｉｎ ｓｉｔｕ生成したナトリウムエタノラートの溶液を添加した。
無水ＴＨＦ（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の２（１当量）の溶液に、０℃、不活性雰囲気下、無水エタノール（１５ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のナトリウム（６当量）からｉｎ ｓｉｔｕ生成したナトリウムエタノラートの溶液を添加した。
【0044】
この溶液を室温で３０分間撹拌し、シュウ酸ジエチル（４当量）を溶液に滴下して添加した。その後、溶液を沈殿するまで５０℃に加熱し、２時間還流させた。反応はＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル １：１）でモニターした。
【0045】
その後、濃塩酸（３７％）を数滴溶液に、形成された沈殿物が白色になるまで加えた。
【0046】
この溶液を１時間還流させた後、室温に冷却した。真空下で濃縮した後、溶液を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を集め、水とブラインで洗浄した後、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させた。
【0047】
一般的操作手順Ｃ：
ＴＨＦ（２５ｍＬ／ｍｍｏｌ）及びエタノール（８ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の３（１当量）の溶液に、水（１２ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のＫ２ＣＯ３（１．３当量）の溶液を追加した。
ＴＨＦ（２５ｍＬ／ｍｍｏｌ）及びエタノール（８ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の３（１当量）の溶液に、水（１２ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のＫ２ＣＯ３（１．３当量）の溶液を追加した。
【0048】
この溶液を５０℃に４時間加熱し、ＴＬＣ（酢酸エチル／シクロヘキサン １：１）でモニターした。この溶液を真空下で濃縮し、次いで塩基性水（Ｋ２ＣＯ３２０％）に注ぎ、酢酸エチルで洗浄した。塩基性水相を濃塩酸（３７％）で酸性化し、酢酸エチルで抽出した。
【0049】
その後、有機相を集め、水とブラインで洗浄した後、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【0050】
一般的操作手順Ｄ：
カルボン酸誘導体４（１等量）の無水ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（２０ｍＬ／ｍｍｏｌ）溶液に、２－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルアミニウムテトラフルオロボラート（ＴＢＴＵ）（２等量）を添加した。この溶液を室温で３０分間攪拌した。
カルボン酸誘導体４（１等量）の無水ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（２０ｍＬ／ｍｍｏｌ）溶液に、２－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルアミニウムテトラフルオロボラート（ＴＢＴＵ）（２等量）を添加した。この溶液を室温で３０分間攪拌した。
【0051】
次に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）（４当量）の存在下、アミノ酸誘導体（２当量）のＤＭＦ（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）溶液を先のものに注意深く添加した。反応を室温で１２時間又は２４時間撹拌し、ＴＬＣ（酢酸エチル／シクロヘキサン １：１）でモニターした。この溶液を真空下で濃縮し、次いで酸性化した水（１Ｍ ＨＣｌ）に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。
【0052】
有機相を集め、ＮａＨＣＯ３溶液（２０％）、水、ブラインで洗浄した後、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。
【0053】
一般的操作モードＥ：
ＴＨＦ（２５ｍＬ／ｍｍｏｌ）及びメタノール（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のエステル誘導体５（１当量）の溶液に、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のＬｉＯＨ（１．５当量）の溶液を添加した。反応を室温で２時間撹拌し、ＴＬＣ（酢酸エチル／シクロヘキサン １：１）でモニターした。
ＴＨＦ（２５ｍＬ／ｍｍｏｌ）及びメタノール（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のエステル誘導体５（１当量）の溶液に、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のＬｉＯＨ（１．５当量）の溶液を添加した。反応を室温で２時間撹拌し、ＴＬＣ（酢酸エチル／シクロヘキサン １：１）でモニターした。
【0054】
この溶液を塩基性水（２０％ＮａＨＣＯ３）に注ぎ、酢酸エチルで洗浄した。水相を濃塩酸（３７％）で酸性化し、酢酸エチルで抽出した。
【0055】
次に、有機相を集め、ブラインで洗浄した後、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。
【0056】
例１
１－（２－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－６－ヒドロキシフェニル）エタン－１）オン（２ａ）の調製
１－（２－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－６－ヒドロキシフェニル）エタン－１）オン（２ａ）の調製
【化31】
【0057】
１（１．５００ｇ，９．８６ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ａに従って粗製物を調製し、メタノール又は酢酸エチルでの再結晶により精製して２ａ（２．５８３ｇ，８２％）Ｃ１５Ｈ１３ＢｒＯ３を得た。
【0058】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11,69 (s, 1H), 7,71 (dd, J = 8,0, 1,1 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 7,6, 1,6 Hz, 1H), 7,46 (td, J = 7,5, 1,2 Hz, 1H), 7,39 - 7,29 (m, 2H), 6,67 (dd, J = 8,4, 0,5 Hz, 1H), 6,56 (dd, J = 8,3, 0,7 Hz, 1H), 5,19 (s, 2H), 2,47 (s, 3H).
【0059】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 203,38, 159,60, 157,95, 135,31, 133,90, 132,72, 130,64, 130,41, 128,00, 123,04, 114,62, 109,83, 103,19, 70,02, 32,86.
【0060】
m. p.: 75,5 - 77,4 ℃.
【0061】
MS (ESI) m/z 321 (７９Br), 323 (８１Br) [M+H]+, 319 (７９Br), 321 (８１Br) [M-H]+.
【0062】
例２
１－（２－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－６－ヒドロキシフェニル）エタン－１－オン（２ｂ）の調製
１－（２－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－６－ヒドロキシフェニル）エタン－１－オン（２ｂ）の調製
【化32】
【0063】
１（１．５００ｇ，９．８６ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ａに従って粗製物を調製し、酢酸エチルでの再結晶により精製して２ｂ（２．３２１，７３％）Ｃ１５Ｈ１３ＢｒＯ３を得た。
【0064】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11,64 (s, 1H), 7,62 - 7,58 (m, 2H), 7,45 - 7,41 (m, 2H), 7,30 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 6,62 (dd, J = 8,4, 0,5 Hz, 1H), 6,52 (dd, J = 8,3, 0,7 Hz, 1H), 5,14 (s, 2H), 2,48 (s, 3H).
【0065】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 203,43, 159,52, 157,94, 135,96, 133,77, 131,41, 129,98, 121,15, 114,75, 109,63, 103,41, 69,30, 33,04.
【0066】
m. p.: 114,8 - 116,8 ℃.
【0067】
MS (ESI) m/z 320 (７９Br), 322 (８１Br) [M]+.
【0068】
例３
エチル５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキシレート（３ａ）の調製
エチル５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキシレート（３ａ）の調製
【化33】
【0069】
２ａ（２．５８３ｇ，８．０４ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｂに従って粗製物を調製し、メタノール又は酢酸エチルでの再結晶により精製して３ａ（２．４７８，７６％）Ｃ１９Ｈ１５ＢｒＯ５を得た。
【0070】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,11 (dd, J = 7,7, 1,4 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,68 (dd, J = 8,0, 1,0 Hz, 1H), 7,51 (td, J = 7,6, 1,1 Hz, 1H), 7,33 (td, J = 7,8, 1,7 Hz, 1H), 7,30 - 7,25 (m, 1H), 7,18 - 7,13 (m, 1H), 6,79 (s, 1H), 5,23 (s, 2H), 4,40 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,36 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
【0071】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,40, 172,49, 160,01, 158,25, 157,43, 150,24, 135,70, 135,44, 132,17, 129,57, 129,12, 127,85, 121,05, 115,43, 114,62, 110,78, 108,85, 69,72, 62,61, 13,87.
【0072】
m. p.: 155,3 - 157,1 ℃.
【0073】
MS (ESI) m/z 403 (７９Br), 405 (８１Br) [M-H]+.
【0074】
例４
エチル５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキシラート（３ｂ）の調製
エチル５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキシラート（３ｂ）の調製
【化34】
【0075】
２ｂ（１．７１８ｇ，５．３５ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｂに従って粗製物を調製し、メタノール又は酢酸エチルでの再結晶により精製して３ｂ（１．５１６，７０％）Ｃ１９Ｈ１５ＢｒＯ５を得た。
【0076】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7,74 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,64 - 7,56 (m, 4H), 7,25 - 7,21 (m, 1H), 7,13 - 7,08 (m, 1H), 6,77 (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,38 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
【0077】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,39, 160,01, 157,70, 157,23, 150,19, 136,23, 135,29, 131,21, 128,90, 120,61, 115,43, 114,68, 110,54, 109,02, 69,22, 62,59, 13,87.
【0078】
m. p.: 148,0 - 149,4 ℃.
【0079】
MS (ESI) m/z 402 (７９Br), 404 (８１Br) [M]+.
【0080】
例５
５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボン酸（４ａ）の調製
５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボン酸（４ａ）の調製
【化35】
【0081】
３ａ（１．０００ｇ，２．４８ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｃに従って粗製物を調製し、メタノールでトリチュレーションして精製し、ジエチルエーテルで洗浄して４ａ（０．７７７，８４％）を得た。また、メタノールで再結晶することにより、目的の生成物を結晶として得ることができる。Ｃ１７Ｈ１１ＢｒＯ５。
【0082】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,14 (dd, J = 7,7, 1,1 Hz, 1H), 7,77 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,68 (dd, J = 8,0, 0,9 Hz, 1H), 7,51 (td, J = 7,6, 0,9 Hz, 1H), 7,32 (td, J = 7,8, 1,5 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,74 (s, 1H), 5,23 (s, 2H).
【0083】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,70, 161,44, 157,42, 157,36, 151,31, 135,75, 135,24, 132,13, 129,52, 129,13, 127,82, 121,01, 115,17, 114,63, 110,80, 108,71, 69,71.
【0084】
m. p.: 244,3 ℃.
【0085】
MS (ESI) m/z 373 (７９Br), 375 (８１Br) [M-H]-.
【0086】
例６
５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボン酸（４ｂ）の調製
５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボン酸（４ｂ）の調製
【化36】
【0087】
３ｂ（１．５８６ｇ，３．９３ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｃに従って粗製物を調製し、メタノールでトリチュレーションして精製し、ジエチルエーテルで洗浄して４ｂ（１．２５９，８５％）を得た。目的物はメタノールで結晶化させ、白色結晶を得ることができる。Ｃ１７Ｈ１１ＢｒＯ５。
【0088】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7,76 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,66 - 7,59 (m, 4H), 7,24 (dd, J = 8,4, 0,7 Hz, 1H), 7,14 - 7,10 (m, 1H), 6,76 (s, 1H), 5,27 (s, 2H).
【0089】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,69, 161,44, 157,69, 157,35, 151,15, 136,27, 135,14, 131,20, 128,89, 120,58, 115,21, 114,69, 110,58, 108,93, 69,23.
【0090】
m. p.: 204,6 - 205,3 ℃.
【0091】
MS (ESI) m/z 374 (７９Br), 376 (８１Br) [M]+.
【0092】
例７
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート（５ａ）の調製
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート（５ａ）の調製
【化37】
【0093】
４ａ（５１１ｍｇ，１．３６ｍｍｏｌ）とイソロイシンメチルエステル塩酸塩（０．４８５ｇ，２．７２ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｄに従って粗製物を調製し、メタノール中で再結晶により精製して５ａ（０．３５２ｇ，５１％）Ｃ２４Ｈ２４ＢｒＮＯ６を得た。
【0094】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,23 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,82 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,74 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,39 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 2,10 - 1,99 (m, 1H), 1,60 - 1,48 (m, J = 11,6, 5,8 Hz, 1H), 1,33 - 1,23 (m, 1H), 0,97 - 0,86 (m, 6H).
【0095】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,44, 171,41, 159,61, 157,38, 157,05, 152,97, 135,76, 135,11, 132,17, 129,56, 129,14, 127,85, 121,04, 114,49, 112,75, 111,09, 108,81, 69,70, 57,26, 51,90, 35,48, 25,09, 15,37, 10,77.
【0096】
m. p.: 123,1 - 125,7 ℃.
【0097】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C24H25BrNO6 (M+H+) : 502,0865,
実測 502,0860.
計算 C24H25BrNO6 (M+H+) : 502,0865,
実測 502,0860.
【0098】
純度（ＨＰＬＣ）＞９５％．
【0099】
例８
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート（５ｂ）の調製
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシナート（５ｂ）の調製
【化38】
【0100】
４ｂ（３００ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ）とＬ－イソロイシンメチルエステル塩酸塩（２９０ｍｇ，１．６０ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｄに従って粗製物を調製し、メタノール中での再結晶により精製して５ｂ（３１８ｍｇ，７９％）Ｃ２４Ｈ２４ＢｒＮＯ６を得た。
【0101】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,17 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,77 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,64 - 7,56 (m, 4H), 7,34 (dd, J = 8,5, 0,7 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,70 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,37 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 3,68 (s, 3H), 2,07 - 1,96 (m, 1H), 1,58 - 1,45 (m, 1H), 1,32 - 1,19 (m, 1H), 0,95 - 0,84 (m, 6H).
【0102】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,41, 171,40, 159,62, 157,63, 157,04, 152,91, 136,29, 134,95, 131,21, 128,92, 120,59, 114,54, 112,73, 110,86, 108,99, 69,19, 57,24, 51,88, 35,48, 25,09, 15,37, 10,77.
【0103】
例９
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－ロイシナート（５ｃ）の調製
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－ロイシナート（５ｃ）の調製
【化39】
【0104】
４ａ（５００ｍｇ，１．３３ｍｍｏｌ）とＬ－ロイシンメチルエステル塩酸塩（０．４８３ｇ，２．６６ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｄに従って粗製物を調製し、メタノール中での再結晶により精製して５ｃ（２３４ｍｇ，３５％）Ｃ２４Ｈ２４ＢｒＮＯ６を得た。
【0105】
1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8,13 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,38 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,18 - 7,05 (m, 3H), 6,98 (s, 1H), 6,90 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,18 (s, 2H), 4,82 - 4,73 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 1,80 - 1,60 (m, 3H), 0,99 - 0,87 (m, 6H).
【0106】
13C NMR (101 MHz, CDCl 3) δ 177,52, 172,93, 159,05, 158,46, 157,33, 152,34, 135,55, 134,74, 132,10, 129,07, 128,79, 128,12, 120,82, 115,42, 114,21, 110,63, 108,66, 70,38, 52,73, 51,14, 41,81, 25,02, 22,82, 22,05.
【0107】
m. p.: 60,3 - 60,4 ℃.
【0108】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C24H25BrNO6 (M+H+) : 502,0865,
実測 502,0865.
計算 C24H25BrNO6 (M+H+) : 502,0865,
実測 502,0865.
【0109】
純度（ＨＰＬＣ）＞９８％。
【0110】
例１０
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－バリナート（５ｄ）の調製
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－バリナート（５ｄ）の調製
【化40】
【0111】
４ａ（０．２００ｇ，０．５３ｍｍｏｌ）とＬ－バリンメチルエステル塩酸塩（０．１７９ｇ，１．０７ｍｍｏｌ）から出発し、一般的手順Ｄに従って粗製物を調製し、メタノール中での再結晶により精製して５ｄ（０．１２６ｇ，４８％）Ｃ２３Ｈ２２ＢｒＮＯ６を得た。
【0112】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,20 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,82 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,74 (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,33 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 2,32 - 2,19 (m, 1H), 1,06 - 0,92 (m, 6H).
【0113】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,42, 171,34, 159,69, 157,41, 157,07, 153,03, 135,76, 135,09, 132,17, 129,57, 129,18, 127,84, 121,07, 114,53, 112,74, 111,10, 108,88, 69,76, 58,56, 51,90, 29,46, 19,04, 18,95.
【0114】
m. p.: 127,0 - 128,2 ℃.
【0115】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C23H23BrNO6 (M+H+) : 488,0709,
実測 488,0719.
計算 C23H23BrNO6 (M+H+) : 488,0709,
実測 488,0719.
【0116】
純度（ＨＰＬＣ）＞９８％。
【0117】
例１１
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート（５ｅ）の調製
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート（５ｅ）の調製
【化41】
【0118】
４ａ（０．１９４ｇ，０．５２ｍｍｏｌ）とＬ－フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩（０．２２３ｇ，１．０４ｍｍｏｌ）から出発し、一般的手順Ｄに従って粗製物を調製し、ジエチルエーテルとシクロヘキサンでの沈殿により精製して５ｅ（０．１８７ｇ，７０％）Ｃ２７Ｈ２２ＢｒＮＯ６を得た。
【0119】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,47 (s, 1H), 8,13 (dd, J = 7,7, 1,5 Hz, 1H), 7,82 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,68 (dd, J = 8,0, 1,1 Hz, 1H), 7,51 (td, J = 7,6, 1,1 Hz, 1H), 7,35 - 7,27 (m, 6H), 7,25 - 7,19 (m, 1H), 7,16 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,64 (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,77 - 4,71 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,26 (dd, J = 13,8, 5,4 Hz, 1H), 3,21 - 3,13 (m, 1H).
【0120】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,33, 171,26, 159,21, 157,42, 156,95, 152,77, 137,22, 135,74, 135,24, 132,15, 129,54, 129,11, 129,06, 128,31, 127,84, 126,62, 121,01, 114,43, 112,57, 110,82, 108,85, 69,69, 54,13, 52,20, 35,93, 30,67.
【0121】
m. p.: 145,5 - 147,5 ℃.
【0122】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C27H23BrNO6 (M+H+) : 536,0709,
実測 536,0711.
計算 C27H23BrNO6 (M+H+) : 536,0709,
実測 536,0711.
【0123】
純度（ＨＰＬＣ）＞９７％．
【0124】
例１２
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート（５ｆ）の調製
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニナート（５ｆ）の調製
【化42】
【0125】
４ｂ（０．４７２ｇ，１．２６ｍｍｏｌ）とＬ－フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩（０．４５３ｇ，２．５２ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｄに従って粗製物を調製し、メタノール中での再結晶により精製して５ｆ（０．５５１ｇ，９０％）Ｃ２７Ｈ２２ＢｒＮＯ６を得た。
【0126】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,43 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,68 - 7,54 (m, 4H), 7,30 (d, J = 12,6 Hz, 5H), 7,23 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,63 (s, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,73 (dd, J = 13,5, 9,1 Hz, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,26 (dd, J = 13,8, 5,2 Hz, 1H), 3,16 (dd, J = 13,6, 10,3 Hz, 1H).
【0127】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,31, 171,22, 159,22, 157,68, 156,94, 152,71, 137,20, 136,26, 135,08, 131,20, 129,05, 128,91, 128,31, 126,62, 120,59, 114,50, 112,56, 110,60, 109,06, 69,21, 54,10, 52,20, 35,93.
【0128】
分解点： 153,1℃．
【0129】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C27H23BrNO6 (M+H+) : 536,0709,
実測 536,0704.
計算 C27H23BrNO6 (M+H+) : 536,0709,
実測 536,0704.
【0130】
純度（HPLC）＞96％。
【0131】
例１３
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート（５ｇ）の調製
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート（５ｇ）の調製
【化43】
【0132】
４ａ（０．１００ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）とＬ－トリプトファンメチルエステル塩酸塩（０．１３６ｇ，０．５３ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｄに従って粗製物を調製し、メタノール中での再結晶により精製して５ｇ（０．０４３ｇ，２８％）Ｃ２９Ｈ２３ＢｒＮ２Ｏ６を得た。
【0133】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10,89 (s, 2H), 9,36 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 8,12 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,83 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 7,69 (dd, J = 8,0, 0,9 Hz, 2H), 7,62 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,51 (td, J = 7,5, 0,9 Hz, 2H), 7,39 - 7,28 (m, 6H), 7,25 (d, J = 2,2 Hz, 2H), 7,17 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,07 (td, J = 7,7, 0,9 Hz, 2H), 6,98 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 6,65 (s, 2H), 5,24 (s, 4H), 4,80 - 4,70 (m, 2H), 3,69 (s, 7H).
【0134】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,36, 171,52, 159,18, 157,43, 156,95, 152,81, 136,09, 135,74, 135,21, 132,17, 129,57, 129,15, 127,85, 127,03, 123,79, 121,05, 121,02, 118,44, 118,04, 114,43, 112,55, 111,48, 110,83, 109,47, 108,89, 69,73, 53,80, 52,19, 26,38. 水のピークの下に２つのプロトンシグナル。
【0135】
m. p.: 250 - 252,8 ℃.
【0136】
HRMS (ESI/QTOF):
計算 C29H24BrN2O6(M+H+) : 575,0818,
実測 575,0821.
計算 C29H24BrN2O6(M+H+) : 575,0818,
実測 575,0821.
【0137】
純度（ＨＰＬＣ）＞９９％。
【0138】
例１４
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート（５ｈ）の調製
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－トリプトファナート（５ｈ）の調製
【化44】
【0139】
４ｂ（０．１００ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）とＬ－トリプトファンメチルエステル塩酸塩（０．１３６ｇ，０．５３３ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｄに従って粗製物を調製し、メタノール中での再結晶により精製して５ｈ（０．１２６ｇ，８２％）Ｃ２９Ｈ２３ＢｒＮ２Ｏ６を得た。
【0140】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10,90 (s, 1H), 9,34 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,69 - 7,52 (m, 5H), 7,35 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,10 - 7,03 (m, 1H), 7,02 - 6,94 (m, 1H), 6,63 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,80 - 4,69 (m, 1H), 3,68 (s, 3H).
【0141】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,34, 171,50, 159,19, 157,67, 156,92, 152,76, 136,25, 136,10, 135,04, 131,20, 128,92, 127,03, 123,78, 121,02, 120,59, 118,44, 118,04, 114,48, 112,54, 111,48, 110,61, 109,47, 109,06, 69,23, 53,79, 52,18, 26,39.水のピークの下に２つのプロトンシグナル。
【0142】
m. p.: 235,3 - 236,2 ℃.
【0143】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C29H24BrN2O6(M+H+) : 575,0818,
実測575,0807.
計算 C29H24BrN2O6(M+H+) : 575,0818,
実測575,0807.
【0144】
純度（ＨＰＬＣ）＞９９％。
【0145】
例１５
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファナート（５ｉ）の調製
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファナート（５ｉ）の調製
【化45】
【0146】
４ｂ（０．３００ｇ，０．８０ｍｍｏｌ）とＤ－トリプトファンメチルエステル塩酸塩（０．４０８ｇ，１．６０ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｄに従って粗製物を調製し、酢酸エチル及びシクロヘキサンでの沈殿により精製して５ｉ（０．３７５ｇ，８１％）Ｃ２９Ｈ２３ＢｒＮ２Ｏ６を得た。
【0147】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10,90 (s, 1H), 9,34 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,66 - 7,57 (m, 5H), 7,35 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,63 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,79 - 4,70 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,43 - 3,38 (m, 1H), 3,33 - 3,27 (m, 1H).
【0148】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,33, 171,51, 159,18, 157,67, 156,93, 152,75, 136,26, 136,10, 135,04, 131,20, 128,91, 127,03, 123,78, 121,01, 120,59, 118,43, 118,04, 114,48, 112,54, 111,48, 110,60, 109,47, 109,04, 69,21, 53,79, 52,18, 26,38.
【0149】
m. p.: 236,2 - 237,9 ℃.
【0150】
HRMS (ESI/QTOF):
計算 C29H24BrN2O6(M+H+) : 575,0818,
実測 575,0822.
計算 C29H24BrN2O6(M+H+) : 575,0818,
実測 575,0822.
【0151】
純度（ＨＰＬＣ）＞９９％。
【0152】
例１６
５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシン（６ａ）の調製
５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシン（６ａ）の調製
【化46】
【0153】
５ａ（０．２５６ｇ，０．５１ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｅに従って粗製物を調製し、メタノール中での再結晶により精製して６ａ（０．１１４ｇ，４６％）Ｃ２３Ｈ２２ＢｒＮＯ６を得た。
【0154】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,99 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,82 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 7,9, 0,8 Hz, 1H), 7,52 (td, J = 7,6, 0,8 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,33 (td, J = 7,8, 1,5 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,73 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,39 - 4,31 (m, 1H), 2,08 - 1,98 (m, 1H), 1,61 - 1,48 (m, 1H), 1,35 - 1,23 (m, 1H), 0,97 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,90 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
【0155】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,46, 172,23, 159,43, 157,39, 157,06, 153,18, 135,76, 135,07, 132,16, 129,57, 129,16, 127,84, 121,06, 114,49, 112,64, 111,12, 108,84, 69,73, 57,21, 35,62, 25,04, 15,52, 10,96.
【0156】
m. p.: 242,8 - 243,7 ℃.
【0157】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C23H23BrNO6 (M+H+) : 488,0709,
実測 488,0712.
計算 C23H23BrNO6 (M+H+) : 488,0709,
実測 488,0712.
【0158】
純度（ＨＰＬＣ）＞９８％。
【0159】
例１７
５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニル）－Ｌ－アロイソロイシン（６ｂ）の調製
５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニル）－Ｌ－アロイソロイシン（６ｂ）の調製
【化47】
【0160】
５ｂ（６７１ｍｇ，０．５１ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｅに従って粗製物を調製し、メタノール中での再結晶により精製して６ｂ（４１９ｍｇ，６４％）Ｃ２３Ｈ２２ＢｒＮＯ６を得た。
【0161】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12,91 (s, 1H), 8,98 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,78 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,67 - 7,57 (m, 4H), 7,37 (dd, J = 8,5, 0,6 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,72 (s, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,40 - 4,29 (m, 1H), 2,07 - 1,96 (m, 1H), 1,61 - 1,45 (m, 1H), 1,38 - 1,20 (m, 1H), 0,96 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,90 (t, J = 7,4 Hz, 3H). (ERO1-94)
【0162】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,44, 172,23, 159,44, 157,63, 157,04, 153,12, 136,28, 134,91, 131,20, 128,93, 120,59, 114,54, 112,63, 110,89, 108,99, 69,21, 57,19, 35,63, 25,04, 15,52, 10,96.
【0163】
m. p.: 230,1 - 230,4 ℃.
【0164】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C23H23BrNO6 (M+H+) : 488,0709,
実測488,0715.
計算 C23H23BrNO6 (M+H+) : 488,0709,
実測488,0715.
【0165】
純度（ＨＰＬＣ）＞９８％。
【0166】
例１８
５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン（６ｃ）の調製
５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン（６ｃ）の調製
【化48】
【0167】
５ｅ（０．３２０ｇ，０．６０ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｅに従って粗製物を調製し、メタノール中での再結晶により精製して６ｃ（０．２１０ｇ，６７％）Ｃ２６Ｈ２０ＢｒＮＯ６を得た。
【0168】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,29 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 8,11 (dd, J = 7,6, 1,0 Hz, 2H), 7,82 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 7,68 (dd, J = 7,9, 0,8 Hz, 2H), 7,50 (td, J = 7,6, 0,9 Hz, 2H), 7,37 - 7,25 (m, 11H), 7,24 - 7,10 (m, 4H), 6,63 (s, 2H), 5,23 (s, 4H), 4,72 - 4,58 (m, 2H), 3,14 (dd, J = 13,8, 10,3 Hz, 5H).水のシグナルの下に１つのピーク。
【0169】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,37, 172,20, 159,04, 157,44, 156,96, 153,00, 137,72, 135,73, 135,20, 132,16, 129,57, 129,17, 129,02, 128,25, 127,83, 126,47, 121,06, 114,45, 112,43, 110,85, 108,91, 69,75, 54,18, 36,01.
【0170】
m. p.: 240,4 - 241,7 ℃.
【0171】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C26H21BrNO6 (M+H+) : 522,0552,
実測 522,0558
計算 C26H21BrNO6 (M+H+) : 522,0552,
実測 522,0558
【0172】
例１９
５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン（６ｄ）の調製
５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－フェニルアラニン（６ｄ）の調製
【化49】
【0173】
５ｆ（０．５５１ｇ，１．０３ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｅに従って粗製物を調製し、メタノール中での再結晶により精製して６ｄ（０．４４６ｇ，８３％）Ｃ２６Ｈ２０ＢｒＮＯ６を得た。
【0174】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,51 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,72 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,66 - 7,57 (m, 4H), 7,24 - 7,16 (m, 5H), 7,16 - 7,07 (m, 2H), 6,62 (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,24 (dd, J = 11,0, 5,9 Hz, 1H), 3,26 (dd, J = 13,5, 4,6 Hz, 1H), 3,11 (dd, J = 13,5, 6,8 Hz, 1H). (ERO1-71)
【0175】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,35, 172,19, 159,11, 157,67, 156,94, 152,89, 137,66, 136,26, 135,06, 131,20, 129,02, 128,91, 128,27, 126,50, 120,58, 114,47, 112,44, 110,62, 109,04, 69,21, 54,08, 35,94.
【0176】
分解点： 231,5 ℃.
【0177】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C26H21BrNO6 (M+H+) : 522,0552,
実測 522,0559.
計算 C26H21BrNO6 (M+H+) : 522,0552,
実測 522,0559.
【0178】
純度（ＨＰＬＣ）＞９５％．
【0179】
例２０
５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファン（６ｅ）の調製
５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｄ－トリプトファン（６ｅ）の調製
【化50】
【0180】
５ｉ（０．２５０ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｅに従って粗製物を調製し、酢酸エチル及びシクロヘキサンでの沈殿により精製して６ｅ（０．１５８ｇ，６６％）Ｃ２８Ｈ２１ＢｒＮ２Ｏ６を得た。
【0181】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10,87 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 9,18 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,69 - 7,56 (m, 5H), 7,34 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,10 - 7,04 (m, 1H), 7,01 - 6,95 (m, 1H), 6,63 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,73 - 4,65 (m, 1H).水のピークの下に２つのシグナル。
【0182】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,37, 172,52, 159,06, 157,66, 156,92, 152,92, 136,26, 136,08, 135,04, 131,20, 128,91, 127,09, 123,66, 120,98, 120,58, 118,39, 118,16, 114,44, 112,42, 111,43, 110,59, 109,93, 109,00, 69,18, 53,73, 26,37.水のピークの下に２つのプロトンシグナル。
【0183】
m. p.: 185,5 - 186,7 ℃.
【0184】
HRMS (ESI/QTOF):
計算 C28H22BrN2O6(M+H+) : 561,0661,
実測 561,0672.
計算 C28H22BrN2O6(M+H+) : 561,0661,
実測 561,0672.
【0185】
純度（ＨＰＬＣ）＞９９％。
【0186】
例２１～例２７
シリーズ２
シリーズ２
【化51】
【0187】
注）以下のプロトコルにおいて、「分子番号＋ａ」は臭素が芳香環の２位にある場合、「分子番号＋ｂ」は臭素が芳香環の４位にある場合を指す。
【0188】
注：ステップｅまではシリーズ１と同じ合成スキーム。化合物７へのアクセスを可能にするステップｆだけが異なる。
【0189】
一般的操作手順Ｆ：
無水ＤＭＦ（２０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のカルボン酸誘導体６（１当量）の溶液に、ＴＢＴＵ（１．５当量又は２当量）を加えた。この溶液を室温で３０分間攪拌した。そこで、ＤＩＥＡ（５当量）の存在下、ＤＭＦ（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）に溶かしたアミノ酸誘導体（１．５又は２当量）の溶液を、前記のものに注意深く添加した。反応物を室温で２４時間撹拌し、ＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル３：２）でモニターした。この溶液を酸性化した水（１Ｍ ＨＣｌ）に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を集め、２０％ＮａＨＣＯ３溶液及びブラインで洗浄した後、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させた。
無水ＤＭＦ（２０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のカルボン酸誘導体６（１当量）の溶液に、ＴＢＴＵ（１．５当量又は２当量）を加えた。この溶液を室温で３０分間攪拌した。そこで、ＤＩＥＡ（５当量）の存在下、ＤＭＦ（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）に溶かしたアミノ酸誘導体（１．５又は２当量）の溶液を、前記のものに注意深く添加した。反応物を室温で２４時間撹拌し、ＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル３：２）でモニターした。この溶液を酸性化した水（１Ｍ ＨＣｌ）に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を集め、２０％ＮａＨＣＯ３溶液及びブラインで洗浄した後、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させた。
【0190】
例２１
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート（７ａ）の調製
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート（７ａ）の調製
【化52】
【0191】
６ａ（０．０９１ｇ，０．１９ｍｍｏｌ），Ｌ－バリンメチルエステル（０．０６４ｇ，０．３８ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｆに従って粗製物を調製し、酢酸エチル及び最小量のシクロヘキサン中で沈殿させて精製し、ジエチルエーテルで洗浄して７ａ（０．０４２ｇ，３７％）Ｃ２９Ｈ３３ＢｒＮ２Ｏ７を得た。
【0192】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,79 (d, J = 8,4 Hz, 0,5H), 8,60 - 8,50 (m, 1H), 8,45 (d, J = 7,2 Hz, 0,5H), 8,13 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,81 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,73 - 4,65 (m, 0,5H), 4,54 - 4,45 (m, 0,5H), 4,27 - 4,21 (m, 0,5H), 4,21 - 4,14 (m, 0,5H), 3,65 (d, J = 4,7 Hz, 3H), 2,13 - 1,92 (m, 2H), 1,64 - 1,47 (m, 1H), 1,28 - 1,14 (m, 1H), 1,04 - 0,70 (m, 12H).
【0193】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 172,31, 171,91, 171,88, 157,84, 157,83, 157,82, 157,51, 157,49, 157,46, 157,43, 157,42, 153,69, 153,67, 153,65, 135,92, 132,79, 130,34, 129,78, 128,33, 121,94, 114,74, 114,72, 114,70, 114,66, 112,89, 112,87, 112,69, 111,52, 111,46, 109,48, 109,46, 109,37, 109,35, 70,33, 70,31, 58,31, 58,30, 58,21, 58,05, 58,02, 57,96, 52,33, 52,26, 52,23, 52,21, 36,32, 30,00, 25,02, 19,31, 19,17, 19,13, 18,66, 18,59, 15,29, 15,28, 10,85.
【0194】
HRMS (ESI/QTOF) :
計算 C29H34BrN2O7(M+H+) : 601,1549,
実測 601,1533.
計算 C29H34BrN2O7(M+H+) : 601,1549,
実測 601,1533.
【0195】
例２２
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート（７ｂ）の調製
メチル（５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート（７ｂ）の調製
【化53】
【0196】
６ａ（０．０８２ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ），Ｌ－ロイシンメチルエステル（０．０６１ｇ，０．３２ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｆに従って粗製物を調製し、酢酸エチル及び最小量のシクロヘキサン中で沈殿させて精製し、ジエチルエーテルで洗浄して７ｂ（０．０３０ｇ，３１％）Ｃ３０Ｈ３５ＢｒＮ２Ｏ７を得た。
【0197】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,79 (d, J = 8,8 Hz, 0,5H), 8,64 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,56 (d, J = 7,7 Hz, 0,5H), 8,13 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,81 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,40 (dd, J = 8,3, 4,4 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,64 - 4,56 (m, 0,5H), 4,41 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 4,37 - 4,27 (m, 0,5H), 3,63 (s, 1H), 2,05 - 1,92 (m, 1H), 1,74 - 1,43 (m, 4H), 1,27 - 1,13 (m, 1H), 0,98 - 0,81 (m, 12H) ).
【0198】
13C NMR (126 MHz, DMSO) δ 177,64, 174,72, 173,46, 173,29, 171,55, 171,48, 159,81, 159,64, 157,82, 157,41, 153,65, 153,63, 135,89, 135,84, 132,77, 130,31, 129,75, 128,32, 121,89, 114,67, 112,93, 112,88, 111,50, 109,43, 70,31, 58,05, 57,49, 52,53, 52,42, 52,32, 51,52, 51,02, 50,90, 41,57, 40,89, 37,32, 36,39, 25,92, 24,96, 24,70, 24,64, 23,10, 23,01, 22,99, 21,82, 21,57, 21,44, 21,23, 15,31, 14,95, 11,64, 10,85.
【0199】
HRMS (ESI/QTOF):
計算 C30H36BrN2O7(M+H+) : 615,1690,
実測 615,1684.
計算 C30H36BrN2O7(M+H+) : 615,1690,
実測 615,1684.
【0200】
例２３
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート（７ｃ）の調製
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－バリナート（７ｃ）の調製
【化54】
【0201】
６ａ（０．１２３ｇ，０．２５ｍｍｏｌ），Ｌ－バリンメチルエステル（０．０８４ｇ，０．５０ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｆに従って粗製物を調製し、ジエチルエーテル中で粉砕することにより精製して７ｃ（０．０６１ｇ，４１％）Ｃ２９Ｈ３３ＢｒＮ２Ｏ７を得た。
【0202】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,76 (d, J = 8,6 Hz, 0,5H), 8,54 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 8,43 (d, J = 7,5 Hz, 0,5H), 7,76 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 7,60 (q, J = 8,6 Hz, 4H), 7,35 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,67 (dd, J = 8,8, 6,9 Hz, 0,5H), 4,48 (t, J = 8,8 Hz, 0,5H), 4,22 (dd, J = 7,9, 6,9 Hz, 0,5H), 4,15 (t, J = 7,0 Hz, 0,5H), 3,63 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 2,12 - 1,90 (m, 2H), 1,59 - 1,36 (m, 1H), 1,25 - 1,11 (m, 1H), 0,99 - 0,81 (m, 12H).
【0203】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,43, 171,93, 171,64, 170,88, 170,67, 159,10, 158,94, 157,64, 157,01, 153,21, 136,29, 134,90, 131,19, 128,91, 120,58, 114,52, 112,61, 112,54, 110,83, 109,00, 69,21, 57,66, 57,42, 57,24, 56,72, 51,72, 51,53, 37,09, 35,99, 29,85, 29,58, 25,65, 24,62, 19,02, 18,84, 18,35, 18,20, 14,95, 14,58, 11,37, 10,55.
【0204】
HRMS (ESI/QTOF):
計算 C29H34BrN2O7(M+H+) : 601,1549,
実測 601,1545.
計算 C29H34BrN2O7(M+H+) : 601,1549,
実測 601,1545.
【0205】
例２４
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート（７ｄ）の調製
メチル（５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボニルアミノ）－Ｌ－アロイソロイシル－Ｌ－ロイシナート（７ｄ）の調製
【化55】
【0206】
６ｂ（０．１２３ｇ，０．２５ｍｍｏｌ），Ｌ－ロイシンメチルエステル（０．０９１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）から出発し、一般的手順Ｆに従って粗製物を調製し、ジエチルエーテル中で粉砕することにより精製して７ｄ（０．０５２ｇ，３４％）Ｃ３０Ｈ３５ＢｒＮ２Ｏ７を得た。
【0207】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,76 (d, J = 8,7 Hz, 0,5H), 8,62 (d, J = 7,8 Hz, 0,5H), 8,54 (dd, J = 8,0, 4,5 Hz, 1H), 7,76 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,66 - 7,56 (m, 4H), 7,35 (dd, J = 8,4, 4,2 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H), 4,58 (dd, J = 8,6, 6,5 Hz, 0,5H), 4,39 (t, J = 8,6 Hz, 0,5H), 4,36 - 4,24 (m, 1H), 3,62 (d, J = 2,3 Hz, 3H), 2,03 - 1,89 (m, 1H), 1,70 - 1,55 (m, 2H), 1,55 - 1,45 (m, 2H), 1,24 - 1,10 (m, 1H), 0,96 - 0,79 (m, 12H).
【0208】
13C NMR 176,43, 172,81, 172,60, 170,56, 170,42, 159,14, 158,95, 157,63, 157,01, 153,19, 136,28, 134,90, 131,19, 128,91, 120,57, 114,51, 112,62, 112,54, 110,84, 109,00, 69,20, 57,29, 56,64, 51,86, 51,71, 50,39, 50,23, 36,98, 36,00, 25,59, 24,56, 24,23, 24,18, 22,78, 22,66, 21,28, 20,90, 14,99, 14,62, 10,54.
【0209】
HRMS (ESI/QTOF):
計算 C30H36BrN2O7(M+H+) : 615,1690,
実測 615,1690.
計算 C30H36BrN2O7(M+H+) : 615,1690,
実測 615,1690.
【0210】
例２５
（Ｓ）－５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（１－（（２－（５－ヒドロキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド（７ｅ）の調製
（Ｓ）－５－（（２－ブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（１－（（２－（５－ヒドロキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド（７ｅ）の調製
【化56】
【0211】
６ｃ（０．１２７ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）、５－ヒドロキシトリプタミン塩酸塩（０．１０３ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｆに従って粗製物を調製し、メタノールで粉砕することにより精製し、続いてジエチルエーテルで洗浄して７ｅ（０．０６３ｇ，３８％）Ｃ３６Ｈ３０ＢｒＮ３Ｏ６を得た。
【0212】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10,49 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 9,11 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,61 (s, 1H), 8,31 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 8,10 (dd, J = 7,7, 0,8 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 (dd, J = 8,0, 0,7 Hz, 1H), 7,48 (td, J = 7,6, 0,7 Hz, 1H), 7,37 - 7,23 (m, 6H), 7,18 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,04 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,63 (s, 1H), 6,60 (dd, J = 8,6, 2,2 Hz, 1H), 5,21 (s, 2H), 4,73 - 4,65 (m, 1H), 3,34 - 3,26 (m, 1H), 3,17 (dd, J = 13,7, 4,5 Hz, 1H), 3,05 (dd, J = 13,6, 10,2 Hz, 1H), 2,73 (t, J = 7,5 Hz, 2H).
【0213】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,46, 170,03, 158,99, 157,41, 156,99, 153,19, 150,16, 137,88, 135,74, 135,14, 132,15, 130,81, 129,55, 129,15, 128,14, 127,83, 126,38, 123,13, 121,06, 114,44, 112,36, 111,65, 111,27, 110,93, 110,64, 108,83, 102,20, 69,74, 54,91, 37,11, 25,14. 31C + 2EQ 3C消失.
【0214】
HRMS (ESI/QTOF):
計算 C36H31BrN3O6(M+H+) : 680,1396,
実測 680,1392.
計算 C36H31BrN3O6(M+H+) : 680,1396,
実測 680,1392.
【0215】
例２６
（Ｓ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド（７ｆ）の調製
（Ｓ）－Ｎ－（１－（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド（７ｆ）の調製
【化57】
【0216】
６ｄ（０．０９０ｇ，０．１７ｍｍｏｌ），トリプタミン塩酸塩（０．０６７ｇ，０．３４ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｆに従って粗製物を調製し、酢酸エチル及び最小量のシクロヘキサン中で粉砕し、ジエチルエーテルで洗浄することにより、７ｆ（０．０１４ｇ，１２％）Ｃ３６Ｈ３０ＢｒＮ３Ｏ５を得た。
【0217】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,20 (s, 1H), 7,68 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 - 7,44 (m, 5H), 7,32 - 7,15 (m, 6H), 7,12 - 7,06 (m, 2H), 7,06 - 7,01 (m, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,80 (s, 1H), 5,99 - 5,91 (m, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,72 (dd, J = 13,5, 7,7 Hz, 1H), 3,53 (dd, J = 11,8, 5,9 Hz, 2H), 3,20 (dd, J = 13,4, 5,6 Hz, 1H), 3,06 (dd, J = 13,3, 8,4 Hz, 1H), 2,88 (dt, J = 13,1, 6,4 Hz, 1H), 2,84 - 2,73 (m, 1H).
【0218】
13C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 177,67, 170,09, 159,03, 158,55, 157,39, 152,34, 136,50, 136,16, 135,38, 134,72, 131,87, 129,44, 128,91, 128,45, 127,44, 127,17, 122,32, 122,19, 121,84, 119,59, 118,58, 115,56, 113,88, 112,34, 111,42, 110,84, 109,06, 70,35, 60,54, 55,24, 39,94, 38,96, 29,82, 25,00, 21,18, 14,33. 32の代わりに36Ｃ。
【0219】
HRMS (ESI/QTOF):
計算 C36H31BrN3O5(M+H+) : 664,1447,
実測 664,1432.
計算 C36H31BrN3O5(M+H+) : 664,1447,
実測 664,1432.
【0220】
例２７
（Ｒ）－Ｎ－（１－(（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド（７ｇ）の調製
（Ｒ）－Ｎ－（１－(（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）アミノ）－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）－５－（（４－ブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド（７ｇ）の調製
【化58】
【0221】
６ｅ（０．０６９ｇ，０．１３ｍｍｏｌ），トリプタミン塩酸塩（０．０４８ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｆに従って粗製物を調製し、ジエチルエーテル中で粉砕することにより精製して７ｇ（０．０５１ｍｇ，５９％）Ｃ３８Ｈ３１ＢｒＮ４Ｏ５を得た。
【0222】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10,83 (s, 2H), 8,98 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,34 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 7,78 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,60 (q, J = 8,6 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,36 - 7,26 (m, 3H), 7,18 (dd, J = 31,1, 0,9 Hz, 2H), 7,11 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,08 - 7,01 (m, 2H), 7,00 - 6,92 (m, 2H), 6,61 (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,72 - 4,63 (m, 1H), 3,30 - 3,14 (m, 2H), 2,82 (t, J = 7,3 Hz, 2H).水のピークの下に２つのシグナル。
【0223】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,46, 170,44, 158,90, 157,64, 156,94, 153,16, 136,27, 136,19, 136,04, 134,99, 131,20, 128,90, 127,24, 127,15, 123,76, 122,67, 120,89, 120,88, 120,58, 118,53, 118,21, 114,43, 112,31, 111,66, 111,33, 110,67, 110,08, 108,95, 69,17, 54,44, 27,38, 25,02. 32C + 2 EQ 4C消失.
【0224】
HRMS (ESI/QTOF) : 計算 C38H31BrN4O5(M+H+) : 703,1556, 実測 703,1553.
【0225】
例２８～例３６
シリーズ３
シリーズ３
【化59】
【0226】
注）以下のプロトコルで、「分子番号＋ａ」は芳香環の２位と４位に臭素がある場合、「分子番号＋ｂ」は芳香環の３位と５位に臭素がある場合を指す。
【0227】
一般的操作モードＡ：
２，５－ジヒドロキシアセトフェノン３（１等量）をアセトン（１１ｍＬ／ｍｍｏｌ）に溶解させた。次に、Ｋ２ＣＯ３（３等量）及びテトラ－ｎ－ブチルアンモニウムブロミド（ＴＢＡＢ）（１．５等量）を混合し、計量して溶液に添加した。得られた懸濁液を３０分間還流し、ジブロモ－１－（ブロモメチル）ベンゼン（１当量）のアセトン（４ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の溶液を加えた。この懸濁液を３０分間還流した後、真空下で濃縮した。反応はＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル ７：３）でモニターされた。
２，５－ジヒドロキシアセトフェノン３（１等量）をアセトン（１１ｍＬ／ｍｍｏｌ）に溶解させた。次に、Ｋ２ＣＯ３（３等量）及びテトラ－ｎ－ブチルアンモニウムブロミド（ＴＢＡＢ）（１．５等量）を混合し、計量して溶液に添加した。得られた懸濁液を３０分間還流し、ジブロモ－１－（ブロモメチル）ベンゼン（１当量）のアセトン（４ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の溶液を加えた。この懸濁液を３０分間還流した後、真空下で濃縮した。反応はＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル ７：３）でモニターされた。
【0228】
反応混合物を酢酸エチル及び酸性水（１Ｍ ＨＣｌ）に注いだ。水層を酢酸エチルで抽出し（３回）、次いで合わせた有機層を酸性水（１Ｍ ＨＣｌ）及びブラインで洗浄した（１回）。合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させた。最後に、この粗製物を高真空下で乾燥させた。
【0229】
一般的手順Ｂ：
ナトリウム（６当量）を冷たい無水エタノール（３ｍＬ／ｍｍｏｌ）に溶解し、ナトリウムエタノアートの新鮮な溶液を得た。この溶液を、乾燥ＴＨＦ（エタノールと同量）中の４（１当量）の冷（０℃）溶液に滴下した。次にシュウ酸ジエチル（４等量）を溶液に加え、室温で３０分間攪拌した。得られた溶液を５０℃に温め、ＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル３：２）でモニターした。反応中に反応中間体の沈殿が発生した。
ナトリウム（６当量）を冷たい無水エタノール（３ｍＬ／ｍｍｏｌ）に溶解し、ナトリウムエタノアートの新鮮な溶液を得た。この溶液を、乾燥ＴＨＦ（エタノールと同量）中の４（１当量）の冷（０℃）溶液に滴下した。次にシュウ酸ジエチル（４等量）を溶液に加え、室温で３０分間攪拌した。得られた溶液を５０℃に温め、ＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル３：２）でモニターした。反応中に反応中間体の沈殿が発生した。
【0230】
４時間後、沈殿物が白色になるまで３７％塩酸を溶液に滴下した。反応液を色が変わった後、１．５時間還流させた。その後、反応混合物を蒸発させ、酢酸エチル及び酸性水（１Ｍ ＨＣｌ）に注いだ。水層を酢酸エチルで色が変わるまで抽出した（３回）。合わせた有機層を酸性水（１Ｍ ＨＣｌ）及びブラインで洗浄し（１回）、ＭｇＳＯ４上で乾燥させた後、蒸発させた。
【0231】
一般的操作手順Ｃ：
水（１５ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のＫ２ＣＯ３（１．３等量）の溶液を、ＴＨＦ（３０ｍＬ／ｍｍｏｌ）及びエタノール（ＥｔＯＨ）（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の５（１等量）の溶液に追加した。得られた溶液を５０℃に加熱し、１．５時間攪拌した。反応はＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル ７：３）でモニターされた。反応混合物を濃縮し、ジクロロメタンと酸性水（１Ｍ ＨＣｌ）に注いだ。
水（１５ｍＬ／ｍｍｏｌ）中のＫ２ＣＯ３（１．３等量）の溶液を、ＴＨＦ（３０ｍＬ／ｍｍｏｌ）及びエタノール（ＥｔＯＨ）（１０ｍＬ／ｍｍｏｌ）中の５（１等量）の溶液に追加した。得られた溶液を５０℃に加熱し、１．５時間攪拌した。反応はＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル ７：３）でモニターされた。反応混合物を濃縮し、ジクロロメタンと酸性水（１Ｍ ＨＣｌ）に注いだ。
【0232】
有機層への目的生成物の溶解度を高めるために、メタノールを数滴加えた。水層をジクロロメタンで抽出し（３回）、合わせた有機層を酸性水（１Ｍ ＨＣｌ）及びブラインで洗浄した（１回）。その後、合わせた有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【0233】
例２８
２，４－ジブロモ－１－（ブロモメチル）ベンゼン（２）の調製
２，４－ジブロモ－１－（ブロモメチル）ベンゼン（２）の調製
【化60】
【0234】
２，４－ジブロモトルエン １（１０００ｇ，４．００ｍｍｏｌ）と精製したてのＮ－ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）（０．９２５ｇ，５．２０ｍｍｏｌ）を不活性雰囲気下で１２ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解させた。この溶液を１０分間還流し、アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）（０．３２８ｇ，２．００ｍｍｏｌ）を添加した。得られた懸濁液を６時間攪拌還流させた。反応はＴＬＣ（１００％シクロヘキサン）でモニターされた。その後、反応混合物を蒸発させ、冷えた１：１シクロヘキサン／ジクロロメタン溶液を加え、副生成物（白色固体）を沈殿させた。濾過及び蒸発後、粗生成物２（１．４７６ｇ，４．４９ｍｍｏｌ）を精製せずにそのまま使用した。Ｃ７Ｈ５Ｂｒ３
【0235】
例２９
１－（２－（（２，４－ジブロモベンジル）オキシ）－６－ヒドロキシフェニル）エタン－１－オン（４ａ）の調製
１－（２－（（２，４－ジブロモベンジル）オキシ）－６－ヒドロキシフェニル）エタン－１－オン（４ａ）の調製
【化61】
【0236】
２（１．３１５ｇ，４．００ｍｍｏｌ）及び３（１．０００ｇ，４．００ｍｍｏｌ）から出発して、一般的手順Ａに従って粗製物を調製した。粗製物を１：１ シクロヘキサン／ジクロロメタン溶液で沈殿させ、次いでイソプロパノールで再結晶し、４ａ（０．７９３ｇ，５０％）Ｃ１５Ｈ１２Ｂｒ２Ｏ３を得た。
【0237】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11,64 (s, 1H), 7,95 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,2, 1,8 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,32 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,13 (s, 2H), 2,45 (s, 3H).
【0238】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 203,27, 159,54, 157,71, 134,92, 134,60, 133,83, 132,06, 131,01, 123,92, 122,19, 114,68, 109,93, 103,16, 69,38, 32,88.
【0239】
HRMS (ESI/LTQ Orbitrap) :
計算 C15H11O3Br2(M-H+) : 396,9080,
実測 396,9082.
計算 C15H11O3Br2(M-H+) : 396,9080,
実測 396,9082.
【0240】
例３０
１－（２－（（３，５－ジブロモベンジル）オキシ）－６－ヒドロキシフェニル）エタン－１－オン（４ｂ）の調製
１－（２－（（３，５－ジブロモベンジル）オキシ）－６－ヒドロキシフェニル）エタン－１－オン（４ｂ）の調製
【化62】
【0241】
１，３－ジブロモ－５－（ブロモメチル）ベンゼン（１．３１５ｇ，４．００ｍｍｏｌ）及び３（１．０００ｇ，４．００ｍｍｏｌ）から一般的手順Ａに従って粗製物を調製した。ジエチルエーテルで粉砕することにより精製し、４ｂ（１．１０３ｇ，７０％）Ｃ１５Ｈ１２Ｏ３Ｂｒ２を得た。
【0242】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11,53 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,69 (d, J = 1,5 Hz, 2H), 7,29 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,17 (s, 2H), 2,53 - 2,46 (m, 5H).
【0243】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 203,16, 158,98, 157,30, 141,43, 133,41, 132,81, 129,45, 122,49, 115,30, 109,78, 103,40, 68,24, 32,91.
【0244】
HRMS (ESI/LTQ Orbitrap) :
計算 C15H11O3Br2(M-H+) : 396,9080,
実測 396,9078.
計算 C15H11O3Br2(M-H+) : 396,9080,
実測 396,9078.
【0245】
例３１
エチル５－（（２，４－ジブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキシラート（５ａ）の調製
エチル５－（（２，４－ジブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキシラート（５ａ）の調製
【化63】
【0246】
４ａ（０．４３５ｇ，１．０９ｍｍｏｌ）とシュウ酸ジエチル（０．６３６ｇ，４．３５ｍｍｏｌ）から出発して、一般的手順Ｂに従って粗製物を調製した。得られたオイルを高真空下で固化し、イソプロパノールを加えて加熱した。
【0247】
得られた懸濁液を濾過し、ペースト状の生成物をジクロロメタンに溶解し、蒸発させた後、白色の固体を得た。目的の生成物５ａ（０．１４４ｇ，２７％）。Ｃ１９Ｈ１４Ｏ５Ｂｒ２
【0248】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,08 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,80 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,74 (dd, J = 8,3, 1,9 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,81 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,40 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,36 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
【0249】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,44, 159,99, 157,23, 157,22, 150,30, 135,46, 135,43, 134,04, 130,85, 130,60, 121,82, 121,29, 115,42, 114,59, 110,90, 108,90, 69,29, 62,62, 13,87.
【0250】
HRMS (ESI/LTQ Orbitrap):
計算 C19H15O5Br2(M+H+) : 480,9281,
実測 480,9271.
計算 C19H15O5Br2(M+H+) : 480,9281,
実測 480,9271.
【0251】
例３２
エチル５－（（３，５－ジブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキシラート（５ｂ）の調製
エチル５－（（３，５－ジブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキシラート（５ｂ）の調製
【化64】
【0252】
４ｂ（１．１０３ｇ，２．７６ｍｍｏｌ）とシュウ酸ジエチル（１．６１２ｇ，１４．０３ｍｍｏｌ）から出発して、一般的手順Ｂに従って粗製物を調製した。ジエチルエーテルでトリチュレーションして精製し、５ｂ（０．７８５ｇ，５９％）Ｃ１９Ｈ１４Ｂｒ２Ｏ５を得た。
【0253】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7,91 (d, J = 1,6 Hz, 2H), 7,81 - 7,74 (m, 2H), 7,26 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,83 (s, 1H), 5,27 (s, 2H), 4,38 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
【0254】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,55, 159,99, 157,32, 157,22, 150,28, 141,68, 135,40, 132,26, 128,38, 122,44, 115,46, 114,62, 110,82, 108,83, 68,21, 62,60, 13,86.
【0255】
HRMS (ESI/LTQ Orbitrap):
計算 C19H15Br2O5(M+H+) : 480,9281,
実測 480,9274.
計算 C19H15Br2O5(M+H+) : 480,9281,
実測 480,9274.
【0256】
例３３
５－（（２，４－ジブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボン酸（６ａ）の調製
５－（（２，４－ジブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボン酸（６ａ）の調製
【化65】
【0257】
５ａ（０．１４４ｇ，０．３０ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｃに従って粗製物を調製し、１：１ジエチルエーテル／ジクロロメタンで粉砕することにより精製して６ａ（０．０７４ｇ，５５％）Ｃ１７Ｈ１０Ｂｒ２Ｏ５を得た。
【0258】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,07 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,76 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,70 (dd, J = 8,3, 1,9 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,75 (s, 1H), 5,15 (s, 2H).
【0259】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,72, 161,42, 157,30, 157,17, 151,21, 135,46, 135,28, 133,97, 130,81, 130,55, 121,71, 121,23, 115,20, 114,54, 110,90, 108,69, 69,23, 64,89.
【0260】
HRMS (ESI/LTQ Orbitrap):
計算 C17H11Br2O5(M+H+) : 454,8948,
実測 454,8937.
計算 C17H11Br2O5(M+H+) : 454,8948,
実測 454,8937.
【0261】
例３４
５－（（３，５－ジブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボン酸（６ｂ）の調製
５－（（３，５－ジブロモベンジル）オキシ）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボン酸（６ｂ）の調製
【化66】
【0262】
５ｂ（０．７８５ｇ，１．６３ｍｍｏｌ）から出発して一般的手順Ｃに従って粗製物を調製し、１：１ジエチルエーテル／ジクロロメタンで粉砕することにより精製して６ｂ（０．４９３ｇ，６７％）Ｃ１７Ｈ１０Ｂｒ２Ｏ５を得た。
【0263】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7,91 (s, 2H), 7,82 - 7,72 (m, 2H), 7,24 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,79 (s, 1H), 5,27 (s, 2H).
【0264】
13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 176,82, 161,44, 157,31, 157,29, 151,21, 141,70, 135,23, 132,22, 128,34, 122,42, 115,23, 114,58, 110,83, 108,67, 68,19.
【0265】
HRMS (ESI/LTQ Orbitrap):
計算 C17H11Br2O5(M+H+) : 454,8948,
実測 454,8941.
計算 C17H11Br2O5(M+H+) : 454,8948,
実測 454,8941.
【0266】
例３５
５－（（２，４－ジブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（２－（５－メトキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド（７ａ）の調製
５－（（２，４－ジブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（２－（５－メトキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド（７ａ）の調製
【化67】
【0267】
６ａ（０．０７４ｇ，０．１６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ２ｍＬに溶解させた。その後、ＤＩＥＡ（０．０８４ｇ，０．６５ｍｍｏｌ）及びＴＢＴＵ（０．１０５ｇ，０．３３ｍｍｏｌ）を順次溶液に添加した。完全に溶解した後、５－メトキシトリプタミン（０．０７４ｇ，０．３３ｍｍｏｌ）を加え、得られた溶液を室温で２４時間攪拌した。反応はＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル １：４）でモニターされた。
【0268】
反応混合物を酸性水（１Ｍ ＨＣｌ）に注ぎ、ジクロロメタンで抽出した（３回）。有機相を集め，酸性水（１Ｍ ＨＣｌ）、塩基性水（１０％ ＮａＯＨ）及びブラインで洗浄（１回）した後，ＭｇＳＯ４上で乾燥し，ろ過して蒸発させた。得られたオイルを数滴のジエチルエーテルで沈殿させた。
【0269】
ろ過後、粗生成物を１２ｇシリカカラムを用い、溶離液としてシクロヘキサン／ジクロロメタン４：１からジクロロメタン１００％で精製した。最初の生成物を溶出した後、９：１ジクロロメタン／メタノールで目的の生成物を得た。所望の生成物７ａ（０．００６ｇ，５．６％）は固体である。Ｃ２８Ｈ２２Ｂｒ２Ｎ２Ｏ５
【0270】
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8,12 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,72 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,60 - 7,55 (m, 2H), 7,31 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,10 (dd, J = 9,8, 2,3 Hz, 2H), 7,05 (s, 1H), 6,95 - 6,89 (m, 3H), 6,85 (dd, J = 8,4, 0,5 Hz, 1H), 5,16 (s, 2H), 3,84 - 3,78 (m, 5H), 3,11 (t, J = 6,6 Hz, 2H).
【0271】
13C NMR (126 MHz, CDCl3) δ 177,59, 159,14, 158,11, 157,22, 154,32, 152,90, 134,78, 134,48, 134,36, 131,54, 131,28, 130,13, 127,80, 122,96, 121,80, 121,15, 115,29, 113,68, 112,63, 112,36, 112,17, 110,59, 108,41, 100,40, 69,86, 55,84, 40,52, 24,94.
【0272】
HRMS (ESI/LTQ Orbitrap) :
計算 C28H23Br2N2O5(M+H+) : 626,9948,
実測 626,9929.
計算 C28H23Br2N2O5(M+H+) : 626,9948,
実測 626,9929.
【0273】
例３６
（（３，５－ジブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（２－（５－メトキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド（７ｂ）の調製
（（３，５－ジブロモベンジル）オキシ）－Ｎ－（２－（５－メトキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）－４－オキソ－４Ｈ－クロメン－２－カルボキサミド（７ｂ）の調製
【化68】
【0274】
６ｂ（０．１００ｇ，０．２２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、完全に溶解するまで攪拌した。次に、（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ）（トリ－１－ピロリジニル）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）カップリング剤（０．１９５ｇ，０．４４ｍｍｏｌ）を溶液に加え、続いてＤＩＥＡ（０．１１４ｇ，０．８８ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を室温で１時間攪拌した。色の変化が現れた。
【0275】
次に、５－メトキシトリプタミン（０．１００ｇ，０．４４ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で２日間攪拌した。シクロヘキサン／酢酸エチル １：１ ＴＬＣに変化がない状態で、ビス（２－オキソ－１，３－オキサゾリジン－３－イル）ホスフィン酸クロリド（ＢＯＰ－Ｃｌ）（０．１１２ｇ，０．４４ｍｍｏｌ）を溶液に添加した。２日後、１：１シクロヘキサン／酢酸エチルＴＬＣで生成物の生成を確認した。
【0276】
反応混合物を蒸発させ、酢酸エチルに注いだ。有機相を塩基性水（飽和Ｋ２ＣＯ３）、次いで酸性水（１Ｍ ＨＣｌ）及び塩水で洗浄した（３回）。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発させて茶色の固体を得た。
【0277】
この固体を、乾燥した試料と１００％ジクロロメタンに続いて２．４：０．１ ジクロロメタン／メタノールなどの溶離液を用いたシリカカラムクロマトグラフィーで精製した。５ ｍＬ のフラクションをフュームフード内で一晩静置し、目的の生成物を沈殿させた。濾過後、目的物７ｂ，（０．００７ｇ，６．６％）を得た。Ｃ２８Ｈ２２Ｏ５Ｎ２Ｂｒ２
【0278】
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10,71 (s, 1H), 9,23 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 1,3 Hz, 2H), 7,85 - 7,79 (m, 2H), 7,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,12 - 7,06 (m, 2H), 6,76 - 6,70 (m, 2H), 5,30 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,58 (dd, J = 14,2, 6,6 Hz, 2H), 2,97 (t, J = 7,4 Hz, 2H).
【0279】
13C NMR (126 MHz, DMSO) δ 177,14, 159,37, 157,83, 157,49, 154,21, 153,51, 142,26, 135,54, 132,78, 131,88, 128,94, 128,03, 123,91, 122,94, 114,95, 112,57, 112,53, 111,72, 111,56, 111,36, 109,32, 100,65, 68,76, 55,81, 25,35.
【0280】
HRMS (ESI/LTQ Orbitrap):
計算 C28H23O5N2Br2(M+H+) : 626,9948,
実測 626,9937.
計算 C28H23O5N2Br2(M+H+) : 626,9948,
実測 626,9937.
【0281】
例３７
生物学的評価
素材
ＧｌｕｔａＭＡＸ(商標)（Ｇｉｂｃｏ）を添加した高グルコースＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ／Ｖｏｇｔ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｉｎｉｍａｌ ｍｅｄｉｕｍ）及びウシ胎児血清（ＦＢＳ，ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｈｙｃｌｏｎｅ）は Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入した。ペニシリン／ストレプトマイシン（１ｍｌあたり１０，０００Ｕ／１０ｍｇ）、Ｇ４１８、トリプシン及びダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ（フランス）から購入した。ミトキサントロン（ＭＸ）、ローダミン１２３（Ｒ１２３）、カルセイン－ＡＭ（ｃＡＭ）及び３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－２，５－ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）も同様である。市販品はすべて最高純度のものを使用した。
生物学的評価
素材
ＧｌｕｔａＭＡＸ(商標)（Ｇｉｂｃｏ）を添加した高グルコースＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ／Ｖｏｇｔ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｉｎｉｍａｌ ｍｅｄｉｕｍ）及びウシ胎児血清（ＦＢＳ，ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｈｙｃｌｏｎｅ）は Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入した。ペニシリン／ストレプトマイシン（１ｍｌあたり１０，０００Ｕ／１０ｍｇ）、Ｇ４１８、トリプシン及びダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ（フランス）から購入した。ミトキサントロン（ＭＸ）、ローダミン１２３（Ｒ１２３）、カルセイン－ＡＭ（ｃＡＭ）及び３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－２，５－ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）も同様である。市販品はすべて最高純度のものを使用した。
【0282】
化合物
すべてのクロモン誘導体はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した後、高グルコースＤＭＥＭで希釈した。ストック溶液は－２０℃で保存し、使用直前に２５℃に加温した。
すべてのクロモン誘導体はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した後、高グルコースＤＭＥＭで希釈した。ストック溶液は－２０℃で保存し、使用直前に２５℃に加温した。
【0283】
細胞株と培養
ＡＢＣＢ１トランスフェクトＮＩＨ／３Ｔ３、ＡＢＣＣ１トランスフェクトＦｌｐ－Ｉｎ２９３及びＡＢＣＧ２トランスフェクトＨＥＫ２９３細胞及びそれらの空プラスミド対応物を、以前に記載されたように生成した（Ｂｏｒｓｔ，Ｐ．；Ｅｌｆｅｒｉｎｋ，Ｒ．Ｏ．Ｍａｍｍａｌｉａｎ ＡＢＣ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ ｉｎ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ．（健康時及び疾病時の哺乳類ＡＢＣトランスポーター。）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００２，７１（１），５３７－５９２）．
ＡＢＣＢ１トランスフェクトＮＩＨ／３Ｔ３、ＡＢＣＣ１トランスフェクトＦｌｐ－Ｉｎ２９３及びＡＢＣＧ２トランスフェクトＨＥＫ２９３細胞及びそれらの空プラスミド対応物を、以前に記載されたように生成した（Ｂｏｒｓｔ，Ｐ．；Ｅｌｆｅｒｉｎｋ，Ｒ．Ｏ．Ｍａｍｍａｌｉａｎ ＡＢＣ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ ｉｎ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ．（健康時及び疾病時の哺乳類ＡＢＣトランスポーター。）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００２，７１（１），５３７－５９２）．
【0284】
具体的には、ＡＢＣＧ２トランスフェクトＨＥＫ２９３モノクローナル細胞株を、フィコエリスリン結合５Ｄ３抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈ）を内因性発現レポーターとして用いて蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）の後に選択した。
【0285】
細胞は、１０％熱不活性化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）と１％ペニシリン／ストレプトマイシンを添加したＧｌｕｔａＭＡＸ(商標)入り高グルコースＤＭＥＭで、３７℃、５％ＣＯ２の加湿雰囲気下で増殖・維持した。さらに、ＮＩＨ／３Ｔ３、Ｆｌｐ－Ｉｎ２９３、又はＨＥＫ２９３トランスフェクト細胞の選択剤として、それぞれ２００μｇ／ｍＬ ハイグロマイシンＢ、９０ｎｇ／ｍＬ コルヒチン、又は７５０μｇ／ｍＬ Ｇ４１８を増殖培地に添加した。
【0286】
細胞毒性アッセイ
化合物の細胞毒性は、文献に報告されているように、比色ＭＴＴアッセイを用いて決定した（Ｌｉｎｔｏｎ，Ｋ．Ｊ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ＡＢＣ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ．（ＡＢＣトランスポーターの構造と機能。）Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ２００７，２２（２），１２２－１３０．Ｓｈａｒｏｍ，Ｆ．Ｊ．ＡＢＣ Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｏｌｅ ｉｎ Ｃｈｅｍｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ（ＡＢＣ多剤トランスポーター：化学療法抵抗性における構造、機能及び役割）．Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ ２００８，９（１），１０５－１２７）。
化合物の細胞毒性は、文献に報告されているように、比色ＭＴＴアッセイを用いて決定した（Ｌｉｎｔｏｎ，Ｋ．Ｊ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ＡＢＣ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ．（ＡＢＣトランスポーターの構造と機能。）Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ２００７，２２（２），１２２－１３０．Ｓｈａｒｏｍ，Ｆ．Ｊ．ＡＢＣ Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｏｌｅ ｉｎ Ｃｈｅｍｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ（ＡＢＣ多剤トランスポーター：化学療法抵抗性における構造、機能及び役割）．Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ ２００８，９（１），１０５－１２７）。
【0287】
簡単に説明すると、細胞を９６ウェルプレートに１×１０５細胞／ウェルの密度で播種し、全増殖培地体積を１００μＬとし、一晩インキュベートした。次に、試験する化合物（ＤＭＳＯに０、２、２０μＭの濃度範囲で溶解）の濃度を高めた新鮮な培地１００μＬを各ウェルに加え、一方ＤＭＳＯ対照は０．５％（ｖ／ｖ）に固定した。７２時間インキュベートした後、ＰＢＳ中のＭＴＴ色素（５ｍｇ／ｍＬ）２２μＬを各ウェルに加え、プレートを３７℃でさらに４時間インキュベートした。培地を除去して乾燥させた後、２００μＬのＤＭＳＯ／エタノール（１：１、ｖ／ｖ）でフォルマザン色素結晶を可溶化させた。吸光度は、分光光度計を用いて、５７０ｎｍと６９０ｎｍを基準波長として測定した。すべての細胞株における各化合物の細胞生存率への影響は、試験培地ウェルと対照培地ウェルの吸光度の差として計算された。
【0288】
本発明による化合物の細胞毒性結果を表１に示す。
【0289】
【表1】
【0290】
したがって、本発明による化合物は、非常に低い細胞毒性を示すか、又は細胞毒性を示さない。
【0291】
ＭＤＲ関連薬物排出阻害試験
この細胞を９６ウェルプレートに５×１０４細胞／ウェルの密度で２００μＬの培地に播種し、一晩インキュベートした。その後、増殖培地を化合物を含む新鮮な培地に変え、ＢＣＲＰを介した排出のための蛍光プローブとして４μＭ ＭＸの存在下で、最終濃度０．５％（ｖ／ｖ）ＤＭＳＯとした。３７℃で３０分間インキュベートした後，培地を除去し，１００μＬのダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）で細胞を洗浄し，その後２５μＬのトリプシンを介して３７℃で５分間細胞を解離させた。最後に、トリプシンを２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含む１７５μＬの氷冷ＤＰＢＳで中和し、細胞を注意深く再懸濁させた。選択性アッセイとして、ＭＸの代わりに０．５μＭ Ｒ１２３又は０．２μＭ ｃＡＭをそれぞれの蛍光基質として、Ｐ－ｇｐ及びＭＲＰ１を介した排出について同じ実験を行った。
この細胞を９６ウェルプレートに５×１０４細胞／ウェルの密度で２００μＬの培地に播種し、一晩インキュベートした。その後、増殖培地を化合物を含む新鮮な培地に変え、ＢＣＲＰを介した排出のための蛍光プローブとして４μＭ ＭＸの存在下で、最終濃度０．５％（ｖ／ｖ）ＤＭＳＯとした。３７℃で３０分間インキュベートした後，培地を除去し，１００μＬのダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）で細胞を洗浄し，その後２５μＬのトリプシンを介して３７℃で５分間細胞を解離させた。最後に、トリプシンを２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含む１７５μＬの氷冷ＤＰＢＳで中和し、細胞を注意深く再懸濁させた。選択性アッセイとして、ＭＸの代わりに０．５μＭ Ｒ１２３又は０．２μＭ ｃＡＭをそれぞれの蛍光基質として、Ｐ－ｇｐ及びＭＲＰ１を介した排出について同じ実験を行った。
【0292】
細胞内蛍光は、ＭａｃｓＱＵＡＮＴ ＶＲＢ Ａｎａｌｙｚｅｒフローサイトメーター（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を用いて、少なくとも５０００イベントを記録して測定した。ＭＸは６３５ｎｍで励起し、６５５～７３０ｎｍのウィンドウで蛍光発光を記録したのに対し、Ｒ１２３とｃＡＭは４８８ｎｍで励起し、５２５／５０ｎｍのフィルターで記録した。化合物阻害収率は、以下の式で推定した。
ここで、Ｇ２ＦＡは、蛍光基質と試験物質とともにインキュベートした排出ポンプを発現している細胞における蓄積蛍光体の蛍光発光（ａ．ｕ．）である。Ｇ２ＦＢＧは、ＡＢＣＧ２を導入した細胞で得られたバックグラウンド蛍光発光（ａ．ｕ．）である（基質も試験物質もなし）。Ｇ２Ｓは、基質のみでインキュベートした排出ポンプを発現する細胞において蓄積された蛍光体の蛍光発光（ａ．ｕ．）である。ＨＥＫＦＡは、基質及び試験物質でインキュベートした対照細胞に蓄積した蛍光色素の蛍光発光（ａ．ｕ．）である。ＨＥＫＦＢＧは、対照細胞（基質も試験物質もなし）で得られたバックグラウンド蛍光発光（ａ．ｕ．）である。すべての値は、５０００イベントにわたって測定された６５５～７３０ｎｍのフィルター（６３５ｎｍの励起）における幾何平均蛍光発光（ａ．ｕ．）として与えられている。試験は３連で行った。
【数1】
ここで、Ｇ２ＦＡは、蛍光基質と試験物質とともにインキュベートした排出ポンプを発現している細胞における蓄積蛍光体の蛍光発光（ａ．ｕ．）である。Ｇ２ＦＢＧは、ＡＢＣＧ２を導入した細胞で得られたバックグラウンド蛍光発光（ａ．ｕ．）である（基質も試験物質もなし）。Ｇ２Ｓは、基質のみでインキュベートした排出ポンプを発現する細胞において蓄積された蛍光体の蛍光発光（ａ．ｕ．）である。ＨＥＫＦＡは、基質及び試験物質でインキュベートした対照細胞に蓄積した蛍光色素の蛍光発光（ａ．ｕ．）である。ＨＥＫＦＢＧは、対照細胞（基質も試験物質もなし）で得られたバックグラウンド蛍光発光（ａ．ｕ．）である。すべての値は、５０００イベントにわたって測定された６５５～７３０ｎｍのフィルター（６３５ｎｍの励起）における幾何平均蛍光発光（ａ．ｕ．）として与えられている。試験は３連で行った。
【0293】
ＡＢＣＧ２阻害剤としてのクロモン類の活性
【表2】
【0294】
上の表から、化合物は良好なＩＣ５０値を示していることがわかる。特に、シリーズ１の化合物５ｄ、シリーズ２の化合物７ａ及び７ｂ、シリーズＩＩＩの化合物７ａは、ＭＢＬ－ＩＩ－１４１阻害剤及び参照阻害剤Ｋｏ１４３よりも優れた結果を示している。
【0295】
ＢＣＲＰｖｓ．Ｐ－ｇｐ及びＭＲＰ１に対するクロモンの選択性
【表3】
【国際調査報告】