(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-10-07
(54)【発明の名称】治療用化合物の血小板促進型送達
(51)【国際特許分類】
C07K 7/04 20060101AFI20220930BHJP
A61K 47/64 20170101ALI20220930BHJP
A61K 35/19 20150101ALI20220930BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20220930BHJP
C12N 15/11 20060101ALI20220930BHJP
C12N 5/078 20100101ALI20220930BHJP
A61K 38/08 20190101ALN20220930BHJP
【ＦＩ】
C07K7/04
A61K47/64 ZNA
A61K35/19 Z
A61P35/00
C12N15/11 Z
C12N5/078
A61K38/08
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022504588
(86)(22)【出願日】2020-07-23
(85)【翻訳文提出日】2022-03-22
(86)【国際出願番号】 IB2020000630
(87)【国際公開番号】W WO2021014220
(87)【国際公開日】2021-01-28
(31)【優先権主張番号】62/877,459
(32)【優先日】2019-07-23
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522030390
【氏名又は名称】シーエスティーエス ヘルス ケア インク．
(74)【代理人】
【識別番号】100082072
【弁理士】
【氏名又は名称】清原 義博
(72)【発明者】
【氏名】クレメント，ジャンノウラ，ラッカ
【テーマコード（参考）】
4B065
4C076
4C084
4C087
4H045
【Ｆターム（参考）】
4B065AA90X
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4C084ZB262
4C084ZC782
4C087AA01
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4C087ZB26
4H045AA10
4H045AA20
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4H045BA16
4H045BA70
4H045BA72
4H045EA24
4H045FA10
4H045FA74
(57)【要約】
本開示は、薬剤が担持された血小板を含む組成物及び方法を提供する。血小板に担持された薬剤は、一般に分解から保護され、対象は、薬剤の毒性（存在する場合）から保護される。これらの利点は、損傷、炎症、及び／または血管新生の部位へ向かう血小板の生来の能力と相まって、治療有効量の薬剤を標的部位に確実に送達させるのに役立つ。
【選択図】図１Ｂ
【選択図】図１Ｂ
【特許請求の範囲】
【請求項1】
第１の薬剤と第１のポリペプチドとを含む化合物であって、前記第１のポリペプチドが、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができるＧＡＧ結合ペプチドを含む、前記化合物。
【請求項2】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）及び／またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に結合する、請求項１に記載の化合物。
【請求項3】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、ＣＳに優先的に結合する、請求項２に記載の化合物。
【請求項4】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、コンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）に優先的に結合する、請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項5】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合する、請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項6】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに優先的に結合しない、請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項7】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、ＨＳ、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合しないか、検出可能に結合しないか、実質的に結合しないか、または低い親和性で結合する、請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項8】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項9】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、約２ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである、請求項１～８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項10】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、約３ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されない、請求項１～９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項11】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、約０．００１Ｎ～約０．０１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない、請求項１～１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項12】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、少なくとも約０．１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない、請求項１～１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項13】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、少なくとも約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない、請求項１～１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項14】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である、請求項１～１３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項15】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、少なくとも１つの荷電アミノ酸を含む、請求項１４に記載の化合物。
【請求項16】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、少なくとも１つのプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む、請求項１４または請求項１５に記載の化合物。
【請求項17】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１４～１６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項18】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約８０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１４～１７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項19】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１４～１８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項20】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、または９位に荷電アミノ酸を含む、請求項１４～１９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項21】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む、請求項１４～２０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項22】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、少なくとも１０個のアミノ酸を含む、請求項１４～２１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項23】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、１１個のアミノ酸を含む、請求項１４～２２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項24】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、１１個のアミノ酸からなる、請求項１４～２３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項25】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１４～２４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項26】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む、請求項１４～２５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項27】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項１４～２６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項28】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる、請求項１４～２７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項29】
前記第１のポリペプチドが、前記ＧＡＧ結合ペプチドからなる、請求項１４～２８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項30】
前記第１のポリペプチドのＮ末端が、前記第１の薬剤に直接または間接的に連結されている、請求項１～２９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項31】
前記第１のポリペプチドのＣ末端が、前記第１の薬剤に直接または間接的に連結されている、請求項１～２９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項32】
前記第１の薬剤が、少なくとも１つのリンカーを介して前記第１のポリペプチドに間接的に連結されている、請求項１～３１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項33】
前記少なくとも１つのリンカーが、１つ以上の原子を含む、請求項３２に記載の化合物。
【請求項34】
前記少なくとも１つのリンカーが、繰り返し単位のポリマーを含む、請求項３２または３３に記載の化合物。
【請求項35】
前記少なくとも１つのリンカーが、アミノ酸鎖を含む、請求項３２～３４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項36】
前記第１の薬剤が、前記第１のポリペプチドに直接連結されている、請求項１～３５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項37】
前記第１の薬剤が、マレイミド反応、スクシンイミジルエステル反応、酵素反応、またはタンパク質の構造もしくは活性に影響を及ぼさない別のコンジュゲーション系を使用して、前記第１のポリペプチドに直接または間接的に連結されている、請求項１～３６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項38】
前記第１の薬剤が、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子を含む、請求項１～３７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項39】
前記第１の薬剤が、抗体を含む、請求項３８に記載の化合物。
【請求項40】
前記第１の薬剤が、蛍光部分を含む、請求項３８に記載の化合物。
【請求項41】
前記第１の薬剤が、哺乳動物細胞に対して有害であり、及び／または対象に対して毒性である、請求項１～４０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項42】
前記第１の薬剤が、対象の血流に直接投与された場合、分解を受けやすい、請求項１～４１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項43】
前記化合物が、蛍光部分をさらに含む、請求項１～４２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項44】
請求項１～４３のいずれか１項に記載の化合物の少なくとも１つのコピーを含む、単離血小板。
【請求項45】
前記血小板が、合成血小板、同種血小板、自家血小板、または修飾された異種血小板である、請求項４４に記載の単離血小板。
【請求項46】
前記血小板が、自家血小板である、請求項４５に記載の単離血小板。
【請求項47】
前記血小板が、同種血小板である、請求項４５に記載の単離血小板。
【請求項48】
前記血小板が、多血小板血漿から得られる、請求項４６または請求項４７に記載の単離血小板。
【請求項49】
前記血小板が、１～１０００コピーの前記化合物を含む、請求項４６～４８のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項50】
前記１～１０００コピーの化合物が、前記血小板のアルファ顆粒に担持される、請求項４９に記載の単離血小板。
【請求項51】
少なくとも第２の化合物をさらに含み、前記少なくとも第２の化合物が、少なくとも第２の薬剤及び少なくとも第２のポリペプチドを含み、
前記少なくとも第２のポリペプチドが、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む、
請求項４６～５０のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項52】
前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に優先的に結合する、請求項に５１に記載の単離血小板。
【請求項53】
前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である、請求項５１または請求項５２に記載の単離血小板。
【請求項54】
前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項５１～５３のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項55】
前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む、請求項５１～５４のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項56】
前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、１０個のアミノ酸もしくは１１個のアミノ酸を含むか、またはそれからなる、請求項５１～５５のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項57】
前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項５１～５６のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項58】
前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む、請求項５１～５７のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項59】
前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項５１～５８のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項60】
前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる、請求項５１～５９のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項61】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含み、前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項５１～５９のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項62】
前記ＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１のアミノ酸配列を含み、前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項６１に記載の単離血小板。
【請求項63】
前記少なくとも第２の薬剤が、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子を含む、請求項５１～５９のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項64】
前記第１の薬剤が、前記少なくとも第２の薬剤とは異なる、請求項５１～６３のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項65】
前記少なくとも第２の薬剤が、少なくとも１つのリンカーを介して前記少なくとも第２のポリペプチドに間接的に連結されている、請求項５１～６４のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項66】
前記少なくとも第２の薬剤が、前記少なくとも第２のポリペプチドに直接連結されている、請求項５１～６４のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項67】
前記血小板が、１～１０００コピーの前記少なくとも第２の化合物を含む、請求項５１～６６のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項68】
前記化合物が、前記血小板中の第１のアルファ顆粒に担持され、前記少なくとも第２の化合物が、前記血小板中の少なくとも第２のアルファ顆粒に担持される、請求項５１～６７のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項69】
前記化合物及び前記少なくとも第２の化合物が、両方とも同じアルファ顆粒に担持される、請求項５１～６８のいずれか１項に記載の単離血小板。
【請求項70】
請求項４４～５０のいずれか１項に記載の単離血小板と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項71】
請求項５１～６９のいずれか１項に記載の単離血小板と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項72】
第１の薬剤と第１のポリペプチドとを含む第１の化合物を含む第１の単離血小板であって、前記第１のポリペプチドが、前記血小板のアルファ顆粒中の第１のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる第１のＧＡＧ結合ペプチドを含む、前記第１の単離血小板と、少なくとも第２の薬剤と少なくとも第２のポリペプチドとを含む少なくとも第２の化合物を含む少なくとも第２の単離血小板であって、前記少なくとも第２のポリペプチドが、前記血小板のアルファ顆粒中の少なくとも第２のＧＡＧと結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む、前記第２の単離血小板と、
１つ以上の薬学的に許容される賦形剤と、
を含む、医薬組成物。
【請求項73】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）及び／またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に優先的に結合する、請求項７２に記載の医薬組成物。
【請求項74】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、コンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）に優先的に結合する、請求項７３に記載の医薬組成物。
【請求項75】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合する、請求項７２～７４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項76】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに優先的に結合しない、請求項７２～７４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項77】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、ＨＳ、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合しないか、検出可能に結合しないか、実質的に結合しないか、または低い親和性で結合する、請求項７２～７４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項78】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである、請求項７２～７７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項79】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、約２ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである、請求項７２～７８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項80】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、約３ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されない、請求項７２～７９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項81】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、約０．００１Ｎ～約０．０１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない、請求項７２～８０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項82】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、少なくとも約０．１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない、請求項７２～８１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項83】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、少なくとも約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない、請求項７２～８２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項84】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である、請求項７２～８３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項85】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、少なくとも１つの荷電アミノ酸を含む、請求項８４に記載の医薬組成物。
【請求項86】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、少なくとも１つのプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む、請求項８４または請求項８５に記載の医薬組成物。
【請求項87】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項８４～８６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項88】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約８０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項８４～８７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項89】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項８４～８８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項90】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、または９位に荷電アミノ酸を含む、請求項８４～８９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項91】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む、請求項８４～９０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項92】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、少なくとも１０個のアミノ酸を含む、請求項８４～９１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項93】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、１１個のアミノ酸を含む、請求項８４～９２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項94】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、１１個のアミノ酸からなる、請求項８４～９３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項95】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項８４～９４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項96】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む、請求項８４～９５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項97】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項８４～９６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項98】
前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドが、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる、請求項８４～９７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項99】
前記第１のポリペプチド及び／または前記少なくとも第２のポリペプチドが、それぞれ、前記第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または前記少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドからなる、請求項８４～９８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項100】
前記第１のポリペプチド及び／または前記少なくとも第２のポリペプチドのＮ末端が、それぞれ、前記第１の薬剤及び／または前記少なくとも第２の薬剤に直接または間接的に連結されている、請求項７２～９９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項101】
前記第１のポリペプチド及び／または前記少なくとも第２のポリペプチドのＣ末端が、それぞれ、前記第１の薬剤及び／または前記少なくとも第２の薬剤に直接または間接的に連結されている、請求項７２～９９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項102】
前記第１の薬剤及び／または前記少なくとも第２の薬剤が、それぞれ、少なくとも１つのリンカーを介して前記第１のポリペプチド及び／または前記少なくとも第２のポリペプチドに間接的に連結されている、請求項７２～１０１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項103】
前記少なくとも１つのリンカーが、１つ以上の原子を含む、請求項１０２に記載の医薬組成物。
【請求項104】
前記少なくとも１つのリンカーが、繰り返し単位のポリマーを含む、請求項１０２または１０３に記載の医薬組成物。
【請求項105】
前記少なくとも１つのリンカーが、アミノ酸鎖を含む、請求項１０２～１０４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項106】
前記第１の薬剤及び／または前記少なくとも第２の薬剤が、それぞれ、前記第１のポリペプチド及び／または前記少なくとも第２のポリペプチドに直接連結されている、請求項７２～１０５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項107】
前記第１の薬剤が、マレイミド反応、スクシンイミジルエステル反応、酵素反応、またはタンパク質の構造もしくは活性に影響を及ぼさない別のコンジュゲーション系を使用して、前記第１のポリペプチドに直接または間接的に連結されている、請求項７２～１０６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項108】
前記少なくとも第２の薬剤が、マレイミド反応、スクシンイミジルエステル反応、酵素反応、またはタンパク質の構造もしくは活性に影響を及ぼさない別のコンジュゲーション系を使用して、前記少なくとも第２のポリペプチドに直接または間接的に連結されている、請求項７２～１０７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項109】
前記第１の薬剤及び／または前記少なくとも第２の薬剤が、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質またはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストまたは阻害剤）、及び細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、または血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子からなる群から独立して選択される、請求項７２～１０８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項110】
前記第１の薬剤及び／または前記少なくとも第２の薬剤が、抗体を含む、請求項１０９に記載の医薬組成物。
【請求項111】
前記第１の薬剤及び／または前記少なくとも第２の薬剤が、蛍光部分を含む、請求項１０９に記載の医薬組成物。
【請求項112】
前記第１の薬剤及び／または前記少なくとも第２の薬剤が、哺乳動物細胞に対して有害であり、及び／または対象に対して毒性である、請求項７２～１１１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項113】
前記第１の薬剤及び／または前記少なくとも第２の薬剤が、対象の血流に直接投与された場合、分解を受けやすい、請求項７２～１１２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項114】
前記第１の化合物及び／または前記少なくとも第２の化合物が、蛍光部分をさらに含む、請求項７２～１１３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項115】
前記第１のポリペプチド及び前記少なくとも第２のポリペプチドが異なる、請求項７２～１１４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項116】
前記第１のポリペプチド及び前記少なくとも第２のポリペプチドが同じである、請求項７２～１１４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項117】
前記第１の薬剤及び前記少なくとも第２の薬剤が異なる、請求項７２～１１６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項118】
前記第１の薬剤及び前記少なくとも第２の薬剤が同じである、請求項７２～１１６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項119】
前記第１の単離血小板及び／または前記少なくとも第２の単離血小板が、合成血小板、同種血小板、自家血小板、及び修飾された異種血小板から独立して選択される、請求項７２～１１８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項120】
前記第１の単離血小板及び／または前記少なくとも第２の単離血小板が、自家血小板である、請求項１１９に記載の医薬組成物。
【請求項121】
前記第１の単離血小板及び／または前記少なくとも第２の単離血小板が、同種血小板である、請求項１１９に記載の医薬組成物。
【請求項122】
前記第１の単離血小板及び／または前記少なくとも第２の単離血小板が、多血小板血漿から得られる、請求項１２０または請求項１２１に記載の医薬組成物。
【請求項123】
前記第１の単離血小板が、１～１０００コピーの前記第１の化合物を含む、請求項７２～１２２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項124】
前記少なくとも第２の単離血小板が、１～１０００コピーの前記少なくとも第２の化合物を含む、請求項７２～１２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項125】
前記１～１０００コピーの第１の化合物及び／または前記１～１０００コピーの少なくとも第２の化合物が、前記血小板のアルファ顆粒に担持される、請求項１２３または請求項１２４に記載の医薬組成物。
【請求項126】
疾患または障害を治療するための、請求項７０～１２５のいずれか１項に記載の医薬組成物の使用。
【請求項127】
疾患または障害を治療するための薬物の製造における、請求項７０～１２５のいずれか１項に記載の医薬組成物の使用。
【請求項128】
前記疾患または障害が、がんである、請求項１２６または請求項１２７に記載の使用。
【請求項129】
疾患または障害の治療を必要とする対象において前記疾患または前記障害を治療するための方法であって、治療有効量の請求項７０～１２５のいずれか１項に記載の医薬組成物を前記対象に投与するステップを含む、前記方法。
【請求項130】
疾患または障害の治療を必要とする対象において前記疾患または前記障害を治療するための方法であって、治療有効量の医薬組成物を前記対象に投与するステップを含み、
前記医薬組成物が、請求項１～４３のいずれか１項に記載の化合物と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む、前記方法。
【請求項131】
ヘパラナーゼ、トロンビン及びその断片ペプチド、プロテアーゼ活性化受容体１（ＰＡＲ１）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プロテアーゼ活性化受容体４（ＰＡＲ４）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プラスミン及びその断片、メタロプロテイナーゼ、ペルオキシダーゼ、及び／またはホスホヒドロラーゼのうちの１つ以上を含む第２の医薬組成物を前記対象に投与するステップをさらに含む、請求項１２９または請求項１３０に記載の方法。
【請求項132】
前記第２の医薬組成物が、血小板からの化合物の放出を促進する、請求項１３１に記載の方法。
【請求項133】
前記第２の医薬組成物が、前記医薬組成物が投与された後に投与される、請求項１３１または請求項１３２に記載の方法。
【請求項134】
前記医薬組成物が、前記第２の医薬組成物が投与される前に少なくとも２回投与される、請求項１３３に記載の方法。
【請求項135】
前記疾患または障害が、がんである、請求項１２９～１３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項136】
前記疾患または障害が、損傷である、請求項１２９～１３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項137】
前記疾患または障害が、炎症である、請求項１２９～１３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項138】
前記疾患または障害が、埋植物、移植片、ステント、または補装具の副作用である、請求項１２９～１３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項139】
前記疾患または障害が、欠陥遺伝子に起因する、請求項１２９～１３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項140】
担持血小板を製造するための方法であって、血小板を得るステップと、
前記血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで請求項１～４３のいずれか１項に記載の化合物と接触させるステップと、
前記血小板と前記化合物との間の接触を、前記化合物が前記血小板のアルファ顆粒により内在化されるまで進行させて、これにより担持血小板を生成するステップと、
を含む、前記方法。
【請求項141】
前記血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで少なくとも第２の化合物と接触させるステップと（ここで、前記少なくとも第２の化合物は、少なくとも第２の薬剤及び少なくとも第２のポリペプチドを含み、前記少なくとも第２のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む）、
前記血小板と前記少なくとも第２の化合物との間の接触を、前記少なくとも第２の化合物が前記血小板のアルファ顆粒により内在化されるまで進行させるステップと、
をさらに含む、請求項１４０に記載の方法。
【請求項142】
前記血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで前記化合物と接触させるステップと、前記血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで前記少なくとも第２の化合物と接触させるステップが、逐次的である、請求項１４１に記載の方法。
【請求項143】
前記血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで前記化合物と接触させるステップと、前記血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで前記少なくとも第２の化合物と接触させるステップが、同時である、請求項１４１に記載の方法。
【請求項144】
請求項４４～６９のいずれか１項に記載の単離血小板と、使用説明書とを含む、疾患または障害を治療するためのキット。
【請求項145】
請求項７０～１２５のいずれか１項に記載の医薬組成物と、使用説明書とを含む、疾患または障害を治療するためのキット。
【請求項146】
ヘパラナーゼ、トロンビン及びその断片ペプチド、プロテアーゼ活性化受容体１（ＰＡＲ１）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プロテアーゼ活性化受容体４（ＰＡＲ４）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プラスミン及びその断片、メタロプロテイナーゼ、ペルオキシダーゼ、及び／またはホスホヒドロラーゼのうちの１つ以上を含む少なくとも第２の医薬組成物をさらに含む、請求項１４５に記載のキット。
【請求項147】
請求項１～４３のいずれか１項に記載の化合物と、使用説明書とを含む、担持血小板を製造するためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年７月２３日出願の米国仮特許出願第６２／８７７，４５９号の利益を主張する。上記特許出願の内容全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０１９年７月２３日出願の米国仮特許出願第６２／８７７，４５９号の利益を主張する。上記特許出願の内容全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
配列表
本出願は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩ形式で提出された配列表を含み、この配列表は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。２０２０年７月２３日に作成された上記ＡＳＣＩＩコピーは、５８５３３－７０１．６０１＿ＳＴ２５．ｔｘｔと命名され、サイズは３，１５２バイトである。
本出願は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩ形式で提出された配列表を含み、この配列表は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。２０２０年７月２３日に作成された上記ＡＳＣＩＩコピーは、５８５３３－７０１．６０１＿ＳＴ２５．ｔｘｔと命名され、サイズは３，１５２バイトである。
【背景技術】
【0003】
全身投与される治療用化合物は、その標的部位に到達する前に分解する可能性がある。したがって、それらが少しでも到達したとしても、それらの用量は治療効果を達成するには少なすぎる場合がある。血小板は、損傷、炎症、及び／または血管新生の部位へ自然に向かい、天然のカーゴをこれらの部位へ輸送することが知られている。仮に外来性治療剤を血小板に担持させることができれば、薬剤は、薬剤の全身投与後に生じるであろう分解から保護されるはずである。しかしながら、血小板のアルファ顆粒に外来性治療剤を担持させるための機構については説明がなされていない。したがって、損傷、炎症、及び／または血管新生の部位に外来性治療剤を送達することができる担持血小板に対するアンメットニーズが存在する。
【発明の概要】
【0004】
種々の態様では、本開示は、治療有効用量で、損傷、炎症、及び／または血管新生の標的部位に送達することができる、薬剤が担持された血小板を提供する。部分的に、本発明は、少なくとも薬剤とグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドとを含む化合物に関し、ＧＡＧ結合ペプチドは、化合物を血小板のアルファ顆粒に担持させるのに有用である。薬剤は血小板に担持されるため、薬剤は一般に全身投与時の分解から保護される。さらに、ある特定の薬剤は対象に対して毒性であるが、血小板に担持されると、毒性薬剤は対象に害を及ぼしにくい。これらの利点は、損傷、炎症、及び／または血管新生の部位に向かう血小板の生来の能力と相まって、治療有効量の薬剤を標的部位に確実に送達させるのに役立つ。したがって、本開示は、指向性治療薬を損傷部位（例えば、慢性創傷を治療するため）、病理学的炎症部位（例えば、関節または肺への損傷を治療するため）、及び／または血管新生部位（例えば、がんを治療するため）に治療有効量で提供することにより、現行治療薬の欠陥を克服する。
【0005】
本開示の一態様は、第１の薬剤と第１のポリペプチドとを含む化合物である。第１のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができるＧＡＧ結合ペプチドを含む。
【0006】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）及び／またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ＣＳに優先的に結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）に優先的に結合する。
【0007】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに優先的に結合しない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ＨＳ、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合しないか、検出可能に結合しないか、実質的に結合しないか、または低い親和性で結合する。
【0008】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約２ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約３ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されない。
【0009】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約０．００１Ｎ～約０．０１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約０．１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。
【0010】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である。
【0011】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つの荷電アミノ酸を含む。
【0012】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つのプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0013】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％同一であるか、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約８０％同一であるか、または配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0014】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、または９位に荷電アミノ酸を含む。
【0015】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0016】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１０個のアミノ酸を含む。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸を含む。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸からなる。
【0017】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0018】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む。
【0019】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む。
【0020】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる。
【0021】
実施形態では、第１のポリペプチドは、ＧＡＧ結合ペプチドからなる。あるいは、第１のポリペプチドは、ＧＡＧ結合ペプチド以外のアミノ酸を含む場合があり、いくつかの実施形態では、ポリペプチド中の追加のアミノ酸は、ＧＡＧに対するＧＡＧ結合ペプチドの親和性を増加させない。
【0022】
実施形態では、第１のポリペプチドのＮ末端は、第１の薬剤に直接または間接的に連結されている。実施形態では、第１のポリペプチドのＣ末端は、第１の薬剤に直接または間接的に連結されている。実施形態では、第１の薬剤は、少なくとも１つのリンカーを介して第１のポリペプチドに間接的に連結されている。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、１つ以上の原子を含む。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、繰り返し単位のポリマーを含む。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、アミノ酸鎖を含む。
【0023】
実施形態では、第１の薬剤は、第１のポリペプチドに直接連結されている。
【0024】
実施形態では、第１の薬剤は、マレイミド反応、スクシンイミジルエステル反応、酵素反応、またはタンパク質の構造もしくは活性に影響を及ぼさない別のコンジュゲーション系を使用して、第１のポリペプチドに直接または間接的に連結されている。
【0025】
実施形態では、第１の薬剤は、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子を含む。実施形態では、第１の薬剤は、抗体を含む。実施形態では、第１の薬剤は、蛍光部分を含む。
【0026】
実施形態では、第１の薬剤は、哺乳動物細胞に対して有害であり、及び／または対象に対して毒性である。
【0027】
実施形態では、第１の薬剤は、対象の血流に直接投与された場合、分解を受けやすい。
【0028】
実施形態では、化合物は、蛍光部分をさらに含む。
【0029】
本開示の別の態様は、本明細書に開示される化合物のいずれかの少なくとも１つのコピーを含む単離血小板である。
【0030】
実施形態では、血小板は、合成血小板、同種血小板、自家血小板、または修飾された異種血小板である。実施形態では、血小板は、自家血小板である。実施形態では、血小板は、同種血小板である。実施形態では、血小板は、多血小板血漿から得られる。
【0031】
実施形態では、血小板は、１～１０００コピーの化合物を含む。実施形態では、１～１０００コピーの化合物は、血小板のアルファ顆粒に担持される。
【0032】
実施形態では、単離血小板は、少なくとも第２の化合物をさらに含み、この少なくとも第２の化合物は、少なくとも第２の薬剤及び少なくとも第２のポリペプチドを含み、この少なくとも第２のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む。
【0033】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）及び／またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に優先的に結合する。
【0034】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である。
【0035】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0036】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0037】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１０個のアミノ酸もしくは１１個のアミノ酸を含むか、またはそれからなる。
【0038】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0039】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む。
【0040】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む。
【0041】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる。
【0042】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含み、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１のアミノ酸配列を含み、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列を含む。
【0043】
実施形態では、少なくとも第２の薬剤は、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子を含む。
【0044】
実施形態では、第１の薬剤は、少なくとも第２の薬剤とは異なる。あるいは、第１の薬剤は、少なくとも第２の薬剤と同じである。
【0045】
実施形態では、少なくとも第２の薬剤は、少なくとも１つのリンカーを介して少なくとも第２のポリペプチドに間接的に連結されている。実施形態では、少なくとも第２の薬剤は、少なくとも第２のポリペプチドに直接連結されている。
【0046】
実施形態では、血小板は、１～１０００コピーの少なくとも第２の化合物を、例えば、血小板のアルファ顆粒中に含む。
【0047】
実施形態では、化合物は、血小板中の第１のアルファ顆粒に担持され、少なくとも第２の化合物は、血小板中の少なくとも第２のアルファ顆粒に担持される。
【0048】
実施形態では、化合物及び少なくとも第２の化合物は、両方とも同じアルファ顆粒に担持される。
【0049】
本開示のさらに別の態様は、本明細書に開示される化合物のいずれかの少なくとも１つのコピーを含む単離血小板と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物である。
【0050】
一態様では、本開示は、本明細書に開示される第１の化合物のいずれかの少なくとも１つのコピーと、本明細書に開示される第２の化合物のいずれかの少なくとも１つのコピーとを含む単離血小板と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を提供する。
【0051】
別の態様では、本開示は、第１の単離血小板と、少なくとも第２の単離血小板と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を提供する。第１の単離血小板は、第１の薬剤と第１のポリペプチドとを含む第１の化合物を含み、この第１のポリペプチドは、当該血小板のアルファ顆粒中の第１のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる第１のＧＡＧ結合ペプチドを含む。少なくとも第２の単離血小板は、少なくとも第２の薬剤と少なくとも第２のポリペプチドとを含む少なくとも第２の化合物を含み、この少なくとも第２のポリペプチドは、当該血小板のアルファ顆粒中の少なくとも第２のＧＡＧと結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む。
【0052】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）及び／またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に優先的に結合する。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）に優先的に結合する。
【0053】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合する。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに優先的に結合しない。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、ＨＳ、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合しないか、検出可能に結合しないか、実質的に結合しないか、または低い親和性で結合する。
【0054】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約２ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約３ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されない。
【0055】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約０．００１Ｎ～約０．０１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約０．１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。
【0056】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である。
【0057】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つの荷電アミノ酸を含む。
【0058】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つのプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0059】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％同一であるか、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約８０％同一であるか、または配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0060】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位に荷電アミノ酸を含む。
【0061】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0062】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１０個のアミノ酸を含む。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸を含む。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸からなる。
【0063】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0064】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む。
【0065】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む。
【0066】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる。
【0067】
実施形態では、第１のポリペプチド及び／または少なくとも第２のポリペプチドは、それぞれ、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドからなる。
【0068】
実施形態では、第１のポリペプチド及び／または少なくとも第２のポリペプチドのＮ末端は、それぞれ、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤に直接または間接的に連結されている。実施形態では、第１のポリペプチド及び／または少なくとも第２のポリペプチドのＣ末端は、それぞれ、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤に直接または間接的に連結されている。実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、それぞれ、少なくとも１つのリンカーを介して第１のポリペプチド及び／または少なくとも第２のポリペプチドに間接的に連結されている。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、１つ以上の原子を含む。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、繰り返し単位のポリマーを含む。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、アミノ酸鎖を含む。実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、それぞれ、第１のポリペプチド及び／または少なくとも第２のポリペプチドに直接連結されている。
【0069】
実施形態では、第１の薬剤は、マレイミド反応、スクシンイミジルエステル反応、酵素反応、またはタンパク質の構造もしくは活性に影響を及ぼさない別のコンジュゲーション系を使用して、第１のポリペプチドに直接または間接的に連結されている。
【0070】
実施形態では、少なくとも第２の薬剤は、マレイミド反応、スクシンイミジルエステル反応、酵素反応、またはタンパク質の構造もしくは活性に影響を及ぼさない別のコンジュゲーション系を使用して、少なくとも第２のポリペプチドに直接または間接的に連結されている。
【0071】
実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質またはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストまたは阻害剤）、及び細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、または血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子からなる群から独立して選択される。実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、抗体を含む。実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、蛍光部分を含む。
【0072】
実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、哺乳動物細胞に対して有害であり、及び／または対象に対して毒性である。
【0073】
実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、対象の血流に直接投与された場合、分解を受けやすい。
【0074】
実施形態では、第１の化合物及び／または少なくとも第２の化合物は、蛍光部分をさらに含む。
【0075】
実施形態では、第１のポリペプチド及び少なくとも第２のポリペプチドは異なる。実施形態では、第１のポリペプチド及び少なくとも第２のポリペプチドは同じである。
【0076】
実施形態では、第１の薬剤及び少なくとも第２の薬剤は異なる。実施形態では、第１の薬剤及び少なくとも第２の薬剤は同じである。
【0077】
実施形態では、第１の単離血小板及び／または少なくとも第２の単離血小板は、合成血小板、同種血小板、自家血小板、及び修飾された異種血小板から独立して選択される。実施形態では、第１の単離血小板及び／または少なくとも第２の単離血小板は、自家血小板である。実施形態では、第１の単離血小板及び／または少なくとも第２の単離血小板は、同種血小板である。実施形態では、第１の単離血小板及び／または少なくとも第２の単離血小板は、多血小板血漿から得られる。
【0078】
実施形態では、第１の単離血小板は、１～１０００コピーの第１の化合物を含む。実施形態では、少なくとも第２の単離血小板は、１～１０００コピーの少なくとも第２の化合物を含む。実施形態では、１～１０００コピーの第１の化合物及び／または少なくとも第２の化合物は、血小板のアルファ顆粒に担持される。
【0079】
本開示の一態様は、疾患または障害を治療するための本明細書に開示される医薬組成物のいずれかの使用である。実施形態では、疾患または障害は、がんである。
【0080】
本開示の別の態様は、疾患または障害を治療するための薬物の製造における本明細書に開示される医薬組成物のいずれかの使用である。実施形態では、疾患または障害は、がんである。
【0081】
本開示のさらに別の態様は、疾患または障害の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法である。この方法は、治療有効量の本明細書に開示される医薬組成物のいずれかを対象に投与するステップを含む。
【0082】
一態様では、本開示は、疾患または障害の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法を提供する。この方法は、治療有効量の医薬組成物を対象に投与するステップを含み、この医薬組成物は、本明細書に開示される化合物のいずれかと１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む。
【0083】
実施形態では、この方法は、ヘパラナーゼ、トロンビン及びその断片ペプチド、プロテアーゼ活性化受容体１（ＰＡＲ１）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プロテアーゼ活性化受容体４（ＰＡＲ４）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プラスミン及びその断片、メタロプロテイナーゼ、ペルオキシダーゼ、及び／またはホスホヒドロラーゼのうちの１つ以上を含む第２の医薬組成物を対象に投与するステップをさらに含む。
【0084】
実施形態では、第２の医薬組成物は、血小板からの化合物の放出を促進する。
【0085】
実施形態では、第２の医薬組成物は、医薬組成物が投与された後に投与される。実施形態では、医薬組成物は、第２の医薬組成物が投与される前に少なくとも２回投与される。
【0086】
実施形態では、疾患または障害は、がんである。実施形態では、疾患または障害は、損傷である。実施形態では、疾患または障害は、炎症である。実施形態では、疾患または障害は、埋植物、移植片、ステント、または補装具の副作用である。実施形態では、疾患または障害は、欠陥遺伝子に起因する。
【0087】
別の態様では、本開示は、担持血小板を製造するための方法を提供する。この方法は、血小板を得るステップと、血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで本明細書に開示される化合物のいずれかと接触させるステップと、血小板と化合物との間の接触を、化合物が血小板のアルファ顆粒により内在化されるまで進行させて、これにより担持血小板を生成するステップとを含む。
【0088】
実施形態では、方法は、血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで少なくとも第２の化合物と接触させるステップと（ここで、この少なくとも第２の化合物は、少なくとも第２の薬剤及び少なくとも第２のポリペプチドを含み、この少なくとも第２のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む）、血小板と少なくとも第２の化合物との間の接触を、少なくとも第２の化合物が血小板のアルファ顆粒により内在化されるまで進行させるステップとをさらに含む。
【0089】
実施形態では、血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで化合物と接触させるステップと血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで少なくとも第２の化合物と接触させるステップは、逐次的である。実施形態では、血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで化合物と接触させるステップと血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで少なくとも第２の化合物と接触させるステップは、同時である。
【0090】
本開示の一態様は、疾患または障害を治療するためのキットである。キットには、本明細書に開示される単離血小板のいずれか及び使用説明書が含まれる。
【0091】
本開示の別の態様は、疾患または障害を治療するためのキットである。キットには、本明細書に開示される医薬組成物のいずれか及び使用説明書が含まれる。
【0092】
実施形態では、キットは、ヘパラナーゼ、トロンビン及びその断片ペプチド、プロテアーゼ活性化受容体１（ＰＡＲ１）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プロテアーゼ活性化受容体４（ＰＡＲ４）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プラスミン及びその断片、メタロプロテイナーゼ、ペルオキシダーゼ、及び／またはホスホヒドロラーゼのうちの１つ以上を含む少なくとも第２の医薬組成物をさらに含む。
【0093】
本開示のさらに別の態様は、担持血小板を製造するためのキットである。キットには、本明細書に開示される化合物のいずれか及び使用説明書が含まれる。
【0094】
本明細書に開示される任意の態様または実施形態は、本明細書に開示される任意の他の態様または実施形態と組み合わせることができる。
【0095】
本発明の新規特徴を、添付の特許請求の範囲に具体的に記載する。本開示の特徴及び利点のより良い理解は、本発明の原理を利用した例示的な実施形態を記載する以下の詳細な説明及び添付図面（本明細書ではまた「図（ｆｉｇｕｒｅ）」及び「図（ＦＩＧ．）」でもある）を参照することによって得られる。
【図面の簡単な説明】
【0096】
【図1A】付着したカーゴを血小板中に捕捉させる例示的なグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドの能力を示すグラフである。
【図1B】付着したカーゴを血小板中に捕捉させる例示的なグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドの能力を示すグラフである。
【図2A】付着したカーゴを血小板のアルファ顆粒中に捕捉させる例示的なグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドの能力を示す免疫蛍光画像である。
【図2B】付着したカーゴを血小板のアルファ顆粒中に捕捉させる例示的なグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドの能力を示すグラフである。
【図3A】等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）実験を示す模式図である。
【図3B】配列番号１のＧＡＧ結合ペプチドに関する、例示的なＧＡＧ結合ペプチドを保持するセルに滴定したコンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）のＩＴＣ解離動態のグラフ表示を示す。
【図3C】配列番号２のＧＡＧ結合ペプチドに関する、例示的なＧＡＧ結合ペプチドを保持するセルに滴定したコンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）のＩＴＣ解離動態のグラフ表示を示す。
【図3D】電荷を持たないリガンドに関する、例示的なＧＡＧ結合ペプチドを保持するセルに滴定したコンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）のＩＴＣ解離動態のグラフ表示を示す。
【図4】前の図の３つの例示的なＧＡＧ結合ペプチドのアフィニティークロマトグラフィーデータ（但し、ヘパラン硫酸（ＨＳ）に結合する場合である）を示す。
【図5】グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドと薬剤とを含む例示的な化合物の血小板への担持を示すグラフである。
【図6A】グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドと薬剤とを含む例示的な化合物が、血小板のアルファ顆粒に担持される能力を示す免疫蛍光画像である。
【図6B】グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドと薬剤とを含む例示的な化合物が、血小板のアルファ顆粒に担持される能力を示すグラフである。
【図7A】ＰＡＬ１を含む例示的な化合物を保持するセルに滴定したコンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）のＩＴＣ解離動態のグラフ表示を含む。
【図7B】ＰＡＬ２を含む例示的な化合物を保持するセルに滴定したコンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）のＩＴＣ解離動態のグラフ表示を含む。
【図7C】ＣＦＬを含む対照化合物を保持するセルに滴定したコンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）のＩＴＣ解離動態のグラフ表示を含む。
【図8】前の図の３つの例示的な化合物のアフィニティークロマトグラフィーデータ（但し、ヘパラン硫酸（ＨＳ）に結合する場合である）を示す。
【図9A】追加の例示的な化合物を保持するセルに滴定したコンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）のＩＴＣ解離動態のグラフ表示を含む。これらの追加の例示的な化合物は、ＰＡＬ１Ａ～ＰＡＬ１１Ａとして識別され、配列番号３～配列番号１３のアミノ酸配列を有するＧＡＧ結合ペプチドをそれぞれ含む。
【図9M】追加の例示的な化合物及び陰性対照化合物の平均解離定数を示すグラフである。
【図10A】本開示の化合物を形成するときにＧＡＧ結合ペプチドを薬剤にコンジュゲートさせる際の例示的なステップを示す図である。
【図10B】グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドと薬剤とを含む例示的な化合物が、血小板のアルファ顆粒に担持される能力を示す免疫蛍光画像である。
【図10C】グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドと薬剤とを含む例示的な化合物が、血小板のアルファ顆粒に担持される能力を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【0097】
本発明は、損傷、病理学的炎症、及び／または血管新生の部位に指向性治療薬を提供する、薬剤が担持された血小板の創出に部分的に基づく。血小板、例えば血小板アルファ顆粒内に捕捉されたそのような薬剤は、一般に、全身投与時に起こり得る分解から保護される。この利点は、損傷、炎症、及び／または血管新生の部位に向かう血小板の生来の能力と相まって、治療有効量の薬剤を標的部位に確実に送達させるのに役立つ。さらに、本発明において有用な血小板は、複数の異なる薬剤を担持することができ、異なる薬剤は、空間的及び時間的に制御された方法でアルファ顆粒から放出され得る。したがって、本発明は、指向性がありかつ制御された治療薬を、損傷部位（例えば、慢性創傷を治療するため）、病理学的炎症部位（例えば、関節または肺への損傷を治療するため）、及び／または血管新生部位（例えば、がんを治療するため）に提供する。
【0098】
本発明以前は、薬剤をアルファ顆粒中の特定のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）に固定することによって血小板に内在化させることができること、及び特定のＧＡＧ結合ペプチドを使用して内在化プロセスを促進することができることは、直感に反するものであった。実際、以前は、血小板アルファ顆粒に薬剤を担持させるための既知の方法は存在しなかった。さらに、アルファ顆粒の亜集団に異なる薬剤を担持させることができ、それにより異なる薬剤の空間的及び／または時間的に制御された放出が可能となることは知られていなかった。そのような制御放出は、異なる薬剤の逐次送達を可能にし、これにより、異なる薬剤を同時に投与する場合には観察され得ない相乗的な治療効果がもたらされる可能性がある。
【0099】
本発明は、以下を含むがこれらに限定されない多くの利点を提供する。
（１）原発腫瘍または転移性増殖の部位への薬剤の標的送達により、高用量の薬剤の全身投与の必要性が回避される。したがって、標的部位での治療有効濃度の薬剤を実現するのに必要な薬剤の用量が、より低くなる。
（２）血小板アルファ顆粒中に捕捉された薬剤は、標的外の受容体と結合することができない。したがって、薬剤単独の全身投与に関連する副作用（例えば、毒性）が回避される。また、
（３）血小板アルファ顆粒中に捕捉された薬剤は、天然のプロセス（例えば、組織プロテアーゼ）による分解から保護される。したがって、この薬剤の半減期は、単独で全身投与された場合の薬剤と比較して延長される。
（１）原発腫瘍または転移性増殖の部位への薬剤の標的送達により、高用量の薬剤の全身投与の必要性が回避される。したがって、標的部位での治療有効濃度の薬剤を実現するのに必要な薬剤の用量が、より低くなる。
（２）血小板アルファ顆粒中に捕捉された薬剤は、標的外の受容体と結合することができない。したがって、薬剤単独の全身投与に関連する副作用（例えば、毒性）が回避される。また、
（３）血小板アルファ顆粒中に捕捉された薬剤は、天然のプロセス（例えば、組織プロテアーゼ）による分解から保護される。したがって、この薬剤の半減期は、単独で全身投与された場合の薬剤と比較して延長される。
【0100】
血小板、血小板顆粒、及びグリコサミノグリカン
本発明は、疾患、障害、または損傷を治療するための化合物、医薬組成物、及び方法であって、血小板が天然の最初の応答するものであり、かつ血小板が少なくともその疾患、障害、または損傷の初期症状を改善する、化合物、医薬組成物、及び方法を提供する。例示的な疾患、障害、または損傷としては、がん、関節リウマチ、糖尿病網膜症、肥満、アテローム性動脈硬化、虚血性心疾患及び虚血性四肢疾患、潰瘍性大腸炎、脳卒中、火傷、及び他の創傷が挙げられるが、これらに限定されない。生理学的条件下において、循環血小板は組織の健康状態及び安定性を維持する。
本発明は、疾患、障害、または損傷を治療するための化合物、医薬組成物、及び方法であって、血小板が天然の最初の応答するものであり、かつ血小板が少なくともその疾患、障害、または損傷の初期症状を改善する、化合物、医薬組成物、及び方法を提供する。例示的な疾患、障害、または損傷としては、がん、関節リウマチ、糖尿病網膜症、肥満、アテローム性動脈硬化、虚血性心疾患及び虚血性四肢疾患、潰瘍性大腸炎、脳卒中、火傷、及び他の創傷が挙げられるが、これらに限定されない。生理学的条件下において、循環血小板は組織の健康状態及び安定性を維持する。
【0101】
創傷及び腫瘍微小環境における血小板の役割に関する新たな情報が明らかとなった（例えば、Ｋｌｅｍｅｎｔ ｅｔ ａｌ．，“Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ ａｃｔｉｖｅｌｙ ｓｅｑｕｅｓｔｅｒ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ”，Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１３：２８３５－４２及びＫｌｅｍｅｎｔ ｅｔ ａｌ．，“Ｔｈｅ Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ ｉｎ Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｉｎ：Ｍｉｃｈｅｌｓｏｎ Ａ，ｅｄｉｔｏｒ．Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ．Ｔｈｉｒｄ ｅｄ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ：Ｍｏｓｂｙ Ｅｌｓｅｖｉｅｒ；２０１３．ｐ．４８７－５０３を参照されたい）。しかしながら、血小板／組織の相互作用の複雑性、ならびに組織増殖及び血管新生の調節における血小板の役割についての理解は遅れている。血小板には、アルファ顆粒、濃染顆粒、及びリソソームを含む、異なる機能を果たす異なるタイプの顆粒が含まれていることが知られている。増殖因子を通常含むアルファ顆粒は、最も主なタイプの顆粒である。Ｂｌａｉｒ ａｎｄ Ｆｌａｕｍｅｎｈａｆｔ，“Ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｌｐｈａ－ｇｒａｎｕｌｅｓ：ｂａｓｉｃ ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ”．Ｂｌｏｏｄ Ｒｅｖｉｅｗｓ．２００９，２３（４）：１７７－８９及びＨａｒｒｉｓｏｎ ａｎｄ Ｃｒａｍｅｒ，“Ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｌｐｈａ－ｇｒａｎｕｌｅｓ”．Ｂｌｏｏｄ Ｒｅｖｉｅｗｓ．１９９３，７（１）：５２－６２を参照されたい。通常、アルファ顆粒のカーゴは血管新生の阻害物質を主に含む（例えば、Ｐｅｔｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｎｏｒｍａｌ ｒａｎｇｅｓ ｏｆ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｌａｔｅｌｅｔｓ．”Ａｍｅｒｉｃａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ．２０１０；８５：４８７－９３を参照されたい）。しかしながら、対象ががんを有する場合、血小板のカーゴが変化し、アルファ顆粒は主に刺激物質を担持するようになる（例えば、Ｐｅｔｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ．２０１０；８５：４８７－９３及びＰｅｔｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，“ＶＥＧＦ，ＰＦ４ ａｎｄ ＰＤＧＦ ａｒｅ ｅｌｅｖａｔｅｄ ｉｎ ｐｌａｔｅｌｅｔｓ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ．”Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ．２０１２；１５：２６５－７３を参照されたい）。
【0102】
本発明は、カーゴをアルファ顆粒に担持させることができ、この担持が受容体媒介性ではないという発見に部分的に基づく。代わりに、血小板、特にそのアルファ顆粒へのカーゴの担持は、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）への結合に依存する。血小板が非特異的ＧＡＧ阻害剤（すなわち、スルフェン（Ｓｕｒｆｅｎ））と接触すると、量が減少したカーゴが血小板に担持される。
【0103】
本発明はさらに、血小板のカーゴが機能別に組織化され、血管新生の刺激物質及び阻害物質が血小板アルファ顆粒の別個のサブセットに取り込まれるという発見に部分的に基づいており、この区別は、コンドロイチン硫酸またはヘパラン硫酸に対するカーゴの結合親和性に基づいている。さらに、Ｐセレクチンにより規定されるアルファ顆粒のサブセットは、ＧＡＧに対する親和性が比較的弱い（すなわち、Ｋｄが比較的高い）ＧＡＧ結合化合物を引き寄せ、フォン・ヴィレブランド因子（ＶＷＦ）により規定されるアルファ顆粒のサブセットは、コンドロイチン硫酸と強い親和性（すなわち、比較的高いＫｄ）で相互作用するタンパク質を収容する。
【0104】
さらに、本発明は、アルファ顆粒のカーゴが凝集及び凝固の際に一緒に放出されないという驚くべき発見に部分的に基づく。代わりに、血管新生増殖刺激物質または阻害物質は、トロンビンの局所レベルなどの特定の刺激に応答して、空間的及び時間的に制御された形で放出される。このため、Ｐ－セレクチンで標識されたアルファ顆粒の初期応答型サブセットは、血管損傷の直後（例えば、低トロンビン状態）、及びＰＡＲ１（高親和性トロンビン受容体）が結合されたときにその内容物を放出する。対照的に、ｖＷＦ因子で標識されたアルファ顆粒の後期応答型サブセットは、ＰＡＲ４（すなわち、低親和性トロンビン受容体）が結合したときにその内容物を放出する。
【0105】
したがって、本発明は、血管の内皮層の裂け目を標的とする血小板の生来の能力を利用する。がんという状況では、これにより血小板のカーゴを腫瘍部位に送達することが可能となる。重要なことに、本開示によれば、血小板のアルファ顆粒には事前に薬剤が担持されており、この薬剤は、腫瘍部位で形成された一時的なマトリックスに特異的に送達される。したがって、本発明は、綿密な（すなわち時間的及び空間的に制御された）酵素作用により、組織プロテアーゼによって一時的なマトリックスから放出される血小板関連薬剤を提供する。
【0106】
血小板には、ヘパラン硫酸及びコンドロイチン硫酸の２つの主要なＧＡＧが存在する。
【0107】
ヘパラン硫酸（ＨＳ）は、グルコサミンに１→４結合したウロン酸の直鎖状コポリマーであるが、可変性の高い構造を有する。ＨＳには相当量のｌ－イズロン酸が存在し得るが、ｄ－グルクロン酸が優勢である。ヘパリンと比較して、ＨＳはスルホ基における置換がはるかに少ない。
【0108】
ヘパリンは、１→４結合ピラノシルウロン酸及び２－アミノ－２－デオキシグルコピラノース（グルコサミン）残基の繰り返し単位からなる、極めて不均一な直鎖状の多分散多糖である。ウロン酸残基は、通常、９０％のｌ－イドピラノシルウロン酸（ｌ－イズロン酸）及び１０％のｄ－グルコピラノシルウロン酸（ｄ－グルクロン酸）からなる。グルコサミン残基のアミノ基は、アセチル基もしくはスルホ基で置換されてもよく、または非置換であってもよい。グルコサミン残基の３位及び６位は、Ｏ－スルホ基で置換されてもよく、または非置換であってもよい。ｌ－イズロン酸またはｄ－グルクロン酸のいずれかであり得るウロン酸は、２－Ｏ－スルホ基も含有し得る。
【0109】
大部分のヘパリン結合タンパク質は、ヘパリンとヘパラン硫酸の両方と結合する。両方とも、多数のタンパク質を幅広い可能な結合部位に結合させる不均一な糖配列を有する多分散多糖である。ヘパリンは主に細胞内に存在するが、ＨＳプロテオグリカン（ＨＳＰＧ）は多くの細胞表面に局在し、例えば、増殖因子及びタンパク質リガンドの安定化により、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の機能に寄与する。
【0110】
コンドロイチン硫酸（ＣＳ）は、以下の二糖の反復単位のランダム配列の直鎖状ポリマーである：２－アセチルアミノ－２－デオキシ－４－０－サルフェート－３－０－～－Ｄ－グルコピラヌロシル－Ｄ－ガラクトース、２－アセチルアミノ－２－デオキシ－６－０－サルフェート－３－０－～－Ｄ－グルコピラヌロシル－Ｄ－ガラクトース、２－アセチルアミノ－２－デオキシ－４，６－０－ジサルフェート－３－０－～－Ｄ－グルコピラヌロシル－Ｄ－ガラクトース、及び２－アセチルアミノ－２－デオキシ－６－０－サルフェート－３－０－～－２’－０－サルフェート－Ｄ－グルコピラヌロシル－Ｄ－ガラクトース。各一硫酸化二糖単位の分子量は５００～６００ｇ／ｍｏｌであり、総質量は５～５０ｋＤａである。コンドロイチン硫酸の分子の体積は、多数の負電荷を有するため、脱水固体中よりも溶液中ではるかに大きい。溶液中では、可変分岐部の負電荷が互いに反発し、このことが分子を伸長したコンフォメーションにさせる。そのため、ＣＳ分子には多数のリガンド結合部位が存在する。
【0111】
新規の非天然ＧＡＧ結合ペプチドは、血小板のアルファ顆粒へのカーゴの担持に不可欠であるため、本開示の化合物及び方法において有用である。本開示のＧＡＧ結合ペプチドは、化学的もしくは酵素的に（直接もしくは間接的に）薬剤に連結されるか、または薬剤及び当該結合ペプチドを含有する融合タンパク質を産生するように遺伝的に発現される。ＧＡＧ結合ペプチド及びカップリングされた薬剤は、当該新規化合物または融合産物中でそれらの機能を保持する。したがって、新規化合物または融合産物を、血小板のアルファ顆粒に選択的に担持させることができる。
【0112】
グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチド
本開示のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドは、ＧＡＧ鎖上に空間的に画定された負に帯電したスルホ基またはカルボキシル基とイオン対を形成する、正に帯電した塩基性アミノ酸の存在を特徴とする。例えば、ヘパラン硫酸（ＨＳ）は、スルホ基及びカルボキシル基により提供される二糖１つ当たり平均２つの負電荷を有する。したがって、水素結合及び疎水性相互作用などの一部の他の非静電相互作用も複合体の安定性に寄与し得るが、ＨＳとタンパク質間の最も一般的なタイプの相互作用はイオン性である。ＧＡＧの高度に陰イオン性の性質は、非特異的結合をもたらすと考えられていた。しかしながら、血小板のアルファ顆粒では、特定のアルファ顆粒サブセットにおけるＨＳまたはコンドロイチン硫酸（ＣＳ）へのＧＡＧ結合ペプチドの結合は、高い特異性で生じる。この相互作用は、ＧＡＧ結合親和性とＧＡＧ結合ペプチドとを適合させることによって促進される。ＧＡＧ－ペプチド相互作用は、ポリマーの多糖配列に沿ったスルホ基及びカルボキシル基の規定されたパターン及び方向と、複合体の適切な親和性及び特異性を確保するためのＧＡＧ結合ペプチドの塩基性アミノ酸の正確なパターンとに部分的に依存する。
本開示のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドは、ＧＡＧ鎖上に空間的に画定された負に帯電したスルホ基またはカルボキシル基とイオン対を形成する、正に帯電した塩基性アミノ酸の存在を特徴とする。例えば、ヘパラン硫酸（ＨＳ）は、スルホ基及びカルボキシル基により提供される二糖１つ当たり平均２つの負電荷を有する。したがって、水素結合及び疎水性相互作用などの一部の他の非静電相互作用も複合体の安定性に寄与し得るが、ＨＳとタンパク質間の最も一般的なタイプの相互作用はイオン性である。ＧＡＧの高度に陰イオン性の性質は、非特異的結合をもたらすと考えられていた。しかしながら、血小板のアルファ顆粒では、特定のアルファ顆粒サブセットにおけるＨＳまたはコンドロイチン硫酸（ＣＳ）へのＧＡＧ結合ペプチドの結合は、高い特異性で生じる。この相互作用は、ＧＡＧ結合親和性とＧＡＧ結合ペプチドとを適合させることによって促進される。ＧＡＧ－ペプチド相互作用は、ポリマーの多糖配列に沿ったスルホ基及びカルボキシル基の規定されたパターン及び方向と、複合体の適切な親和性及び特異性を確保するためのＧＡＧ結合ペプチドの塩基性アミノ酸の正確なパターンとに部分的に依存する。
【0113】
静電相互作用は、ＧＡＧ－ペプチド相互作用において主要な役割を果たしており、ＧＡＧ結合ペプチドの結合配列内のアルギニン及びリジンなどの塩基性アミノ酸の位置が関係している。ＧＡＧ結合部位に特定の方法で配置された塩基性アミノ酸のコンセンサス配列があるか否かを判定するために、多数の研究が行われてきた。例えば、４つのタンパク質、すなわちアポリポタンパク質Ｂ、アポリポタンパク質Ｅ、ビトロネクチン、及び血小板第４因子のヘパリン結合部位の比較により、これらの領域は、アミノ酸の２つのコンセンサス配列、すなわちＸＢＢＸＢＸ及びＸＢＢＢＸＸＢＸ（ここで、Ｂは塩基性残基であり、Ｘはハイドロパシー（ｈｙｄｒｏｐａｔｈｉｃ）残基である）を特徴とすることが示された。分子モデリング研究により、βストランドコンフォメーションでモデル化された配列ＸＢＢＸＢＸが、塩基性アミノ酸をβストランドの片面に配向させ、ハイドロパシー残基をタンパク質コアへと向け戻させることが示された。同様に、配列ＸＢＢＢＸＸＢＸがα－ヘリックスへとフォールディングされている場合、塩基性アミノ酸はヘリックスの片側に表れる。一部のヘパリン結合タンパク質にはこのコンセンサス配列が含まれているが、含まれていないものもある。このように、塩基性残基が空間的に近接しているが、必ずしも一次アミノ酸配列中で近接しているとは限らない構造モチーフもまた、ヘパリンと結合し得る。
【0114】
ヘパリン結合部位には、１つ、２つ、または３つの塩基性アミノ酸のクラスター（ＸＢｎＸ（式中、ｎ＝１、２、または３））が含まれることが多い。このようなクラスターと１つまたは２つの非塩基性残基との間隔を空けた配置（ＢＸｍＢ（式中、ｍ＝１または２））は、天然タンパク質で観察される。これは、ヘパリン結合タンパク質が通常、生体系でＨＳと結合するという観察結果と一致する。ＨＳの電荷密度が低いため、最適なタンパク質結合には、間隔を空けた塩基性アミノ酸のクラスターが関与し得る。アルギニン及びリジンは、ヘパリン結合タンパク質及びＨＳ結合タンパク質中で最も多い残基である。両方のアミノ酸は生理的ｐＨで正電荷を有するが、アルギニンはヘパリンと約２．５倍密接に結合する。アルギニンは、スルホ基とのより安定した水素結合及びより強力な静電相互作用を形成する。非塩基性残基もまた、ヘパリン－タンパク質相互作用に重要な役割を果たす可能性がある。それらの中で、セリン及びグリシンは、ヘパリン結合ペプチド中で最も多い非塩基性残基であることが判明している。両方とも小さな側鎖を有しており、ＧＡＧとのペプチド相互作用に最小限の立体的制約及び良好な柔軟性をもたらす。
【0115】
本発明は、新規の非天然グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドに部分的に基づく。本開示のＧＡＧ結合ペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のＧＡＧと結合することができる。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、静電相互作用を通じてＧＡＧと結合する。
【0116】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）及び／またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ＣＳに優先的に結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）に優先的に結合する。
【0117】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに優先的に結合しない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ＨＳ、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合しないか、検出可能に結合しないか、実質的に結合しないか、または低い親和性で結合する。
【0118】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約２ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約３ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されない。
【0119】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約０．００１Ｎ～約０．０１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約０．１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。
【0120】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である。
【0121】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つの荷電アミノ酸を含む。
【0122】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つのプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0123】
例示的なＧＡＧ結合ペプチドは、以下のアミノ酸配列のうちの１つを含む：ＥＲＲＩＷＦＰＹＲＲＦ（配列番号１）、ＲＦＲＷＰＹＲＩＲＥＦ（配列番号２）、ＡＲＲＩＷＦＰＹＲＲＦ（配列番号３）、ＥＡＲＩＷＦＰＹＲＲＦ（配列番号４）、ＥＲＡＩＷＦＰＹＲＲＦ（配列番号５）、ＥＲＲＡＷＦＰＹＲＲＦ（配列番号６）、ＥＲＲＩＡＦＰＹＲＲＦ（配列番号７）、ＥＲＲＩＷＡＰＹＲＲＦ（配列番号８）、ＥＲＲＩＷＦＡＹＲＲＦ（配列番号９）、ＥＲＲＩＷＦＰＡＲＲＦ（配列番号１０）、ＥＲＲＩＷＦＰＹＡＲＦ（配列番号１１）、ＥＲＲＩＷＦＰＹＲＡＦ（配列番号１２）、及びＥＲＲＩＷＦＰＹＲＲＡ（配列番号１３）。
【0124】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％同一であるか、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約８０％同一であるか、または配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0125】
理論に束縛されることを望まないが、塩基性残基（例えば、アルギニン）は、ＧＡＧ結合ペプチドの特性を規定するのに重要であり、ハイドロパシー残基は安定化を提供するように思われる。
【0126】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、または９位に荷電アミノ酸を含む。
【0127】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。例として、ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び４位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、及び７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び７位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び４位及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ならびにこれらの間の任意の組み合わせを含む。ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にアルギニンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にイソロイシンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位、７位、及び９位にアルギニンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位及び７位にアルギニン、ならびに９位にイソロイシンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位にアルギニン、及び９位にイソロイシンを含み得るか；またはＧＡＧ結合ペプチドは、４位にアルギニン及び９位にプロリンを含み得る。１位、４位、７位、及び／または９位のプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンの任意の組み合わせが、本開示によって包含される。
【0128】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１０個のアミノ酸を含む。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸を含む。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸からなる。
【0129】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0130】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む。
【0131】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む。
【0132】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる。
【0133】
本発明は、本明細書に開示されるＧＡＧ結合ペプチドのアミノ酸配列に、例えば、欠失、変異、挿入、または翻訳後修飾を含めることによりバリアントＧＡＧ結合ペプチドを生成することによって、ＧＡＧ結合ペプチドを最適化するための方法を提供する。
【0134】
バリアントは、バリアントＧＡＧ結合ペプチドがその機能を保持している限り、１つのアミノ酸位置で配列番号１～配列番号１３のＧＡＧ結合ペプチドとは異なり得る。
【0135】
バリアントは、バリアントＧＡＧ結合ペプチドがその機能を保持している限り、２つのアミノ酸位置で配列番号１～配列番号１３のＧＡＧ結合ペプチドとは異なり得る。
【0136】
バリアントは、バリアントＧＡＧ結合ペプチドがその機能を保持している限り、３つのアミノ酸位置で配列番号１～配列番号１３のＧＡＧ結合ペプチドとは異なり得る。
【0137】
バリアントは、バリアントＧＡＧ結合ペプチドがその機能を保持している限り、４つのアミノ酸位置で配列番号１～配列番号１３のＧＡＧ結合ペプチドとは異なり得る。
【0138】
バリアントは、バリアントＧＡＧ結合ペプチドがその機能を保持している限り、５つのアミノ酸位置で配列番号１～配列番号１３のＧＡＧ結合ペプチドとは異なり得る。
【0139】
バリアントは、バリアントＧＡＧ結合ペプチドがその機能を保持している限り、５つを超えるアミノ酸位置で配列番号１～配列番号１３のＧＡＧ結合ペプチドとは異なり得る。
【0140】
実施形態では、アミノ酸差異は、保存的置換及び／または非保存的置換を含み得る。「保存的置換」は、例えば、関与するアミノ酸残基の極性、電荷、サイズ、溶解性、疎水性、親水性、及び／または両親媒性の性質の類似性に基づいてなされ得る。２０個の天然に存在するアミノ酸は、次の６つの標準アミノ酸グループ、すなわち（１）疎水性：Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；Ａｓｎ、Ｇｌｎ、（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ、（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、（５）鎖の配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、及び（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅに分類され得る。本明細書で使用される場合、「保存的置換」は、あるアミノ酸の、上記の６つの標準アミノ酸グループの同じグループに記載された別のアミノ酸による交換として定義される。例えば、ＧｌｕによるＡｓｐの交換は、そのように修飾されたポリペプチドにおいて１つの負電荷を保持する。さらに、グリシン及びプロリンは、α－ヘリックスを破壊するそれらの能力に基づいて互いに置換され得る。本明細書で使用される場合、「非保存的置換」は、あるアミノ酸の、上記の６つの標準アミノ酸グループ（１）～（６）の異なるグループに記載された別のアミノ酸による交換として定義される。ＧＡＧ結合ペプチドは、アセチル化、カルボキシル化、リン酸化、またはグリコシル化などの化学的変化を含めることにより修飾され得る。
【0141】
したがって、本開示は、種々のグリコサミノグリカンに対するＧＡＧ結合ペプチドを特徴づけ、最適化する（例えば、親和性を増加させる）ための方法を提供する。本開示により提供される最適化されたＧＡＧ結合ペプチドは、血小板のアルファ顆粒に存在するグリコサミノグリカンを対象とし得る。血小板のアルファ顆粒に存在する例示的なグリコサミノグリカンとしては、コンドロイチン硫酸、ヘパラン硫酸、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及びＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａが挙げられる。最適化されたＧＡＧ結合ペプチドのいずれをも本開示の組成物に含めることができ、組成物のいずれをも、例えば、医薬組成物に含めるために、及び／または疾患または障害を治療するために、血小板に担持させることができる。
【0142】
化合物及び薬剤
本明細書に開示されるように、血小板は、選択的かつ能動的に（すなわち、濃度勾配に対抗して）、血管新生調節タンパク質、増殖調節タンパク質、及び炎症調節タンパク質を捕捉することができる。本開示は、タンパク質が血小板によって取り込まれ、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）（主にヘパラン硫酸（ＨＳ）及びコンドロイチン硫酸（ＣＳ））に対する親和性に基づいてアルファ顆粒のサブセットに分離されるという発見に基づく。これらのＧＡＧの長い直鎖状で負に帯電した鎖は、アルファ顆粒に構造上の支持を与えるのみならず、アルファ顆粒の機能的なサブセットも説明する。血小板に存在する２つの主要なＧＡＧ（すなわち、ＨＳ及びＣＳ）は、個々の鎖に見られる二糖の数が主に異なる。ヘパラン硫酸は小型（１５～３０個の二糖／側鎖）であるのに対し、コンドロイチン硫酸は多くの結合部位を有し、側鎖あたり最大２５０個の二糖を有する。両方とも、軟骨及び骨の構造及び完全性を維持するように機能するヒアルロン酸（最大５０，０００個の二糖／ＧＡＧ側鎖）などの大型で剛性のＧＡＧとは異なる。血小板中のＧＡＧの多様性はそれらの機能にとって極めて重要であり、ヘパラン硫酸の比較的短い側鎖及び比較的弱い結合によりＰ－セレクチン顆粒が早期に放出される一方で、比較的緻密で長い鎖結合によりｖＷＦ顆粒が遅く放出される。これらの特徴は、化合物の連続放出のために本発明において利用される。
本明細書に開示されるように、血小板は、選択的かつ能動的に（すなわち、濃度勾配に対抗して）、血管新生調節タンパク質、増殖調節タンパク質、及び炎症調節タンパク質を捕捉することができる。本開示は、タンパク質が血小板によって取り込まれ、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）（主にヘパラン硫酸（ＨＳ）及びコンドロイチン硫酸（ＣＳ））に対する親和性に基づいてアルファ顆粒のサブセットに分離されるという発見に基づく。これらのＧＡＧの長い直鎖状で負に帯電した鎖は、アルファ顆粒に構造上の支持を与えるのみならず、アルファ顆粒の機能的なサブセットも説明する。血小板に存在する２つの主要なＧＡＧ（すなわち、ＨＳ及びＣＳ）は、個々の鎖に見られる二糖の数が主に異なる。ヘパラン硫酸は小型（１５～３０個の二糖／側鎖）であるのに対し、コンドロイチン硫酸は多くの結合部位を有し、側鎖あたり最大２５０個の二糖を有する。両方とも、軟骨及び骨の構造及び完全性を維持するように機能するヒアルロン酸（最大５０，０００個の二糖／ＧＡＧ側鎖）などの大型で剛性のＧＡＧとは異なる。血小板中のＧＡＧの多様性はそれらの機能にとって極めて重要であり、ヘパラン硫酸の比較的短い側鎖及び比較的弱い結合によりＰ－セレクチン顆粒が早期に放出される一方で、比較的緻密で長い鎖結合によりｖＷＦ顆粒が遅く放出される。これらの特徴は、化合物の連続放出のために本発明において利用される。
【0143】
本発明は、少なくとも、また非常に高い親和性でＣＳと結合し、かつ少なくとも中程度の親和性でＨＳと結合する、天然に存在しない新規の血小板固定型グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドを含む。ＧＡＧ結合ペプチドは、本開示の化合物中の薬剤に連結される場合、血小板のアルファ顆粒への薬剤の「担持」を促進する。血小板は絶えず循環し、異常な内皮部位に接着することから、本開示の化合物は様々な病態に広く適用可能である。
【0144】
本開示の一態様は、第１の薬剤と第１のポリペプチドとを含む化合物である。第１のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができるＧＡＧ結合ペプチドを含む。
【0145】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）及び／またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ＣＳに優先的に結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）に優先的に結合する。
【0146】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに優先的に結合しない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ＨＳ、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合しないか、検出可能に結合しないか、実質的に結合しないか、または低い親和性で結合する。
【0147】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約２ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約３ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されない。
【0148】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約０．００１Ｎ～約０．０１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約０．１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。
【0149】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である。
【0150】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つの荷電アミノ酸を含む。
【0151】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つのプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0152】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％同一であるか、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約８０％同一であるか、または配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0153】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、または９位に荷電アミノ酸を含む。
【0154】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。例として、ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び４位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、及び７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び７位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び４位及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ならびにこれらの間の任意の組み合わせを含む。ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にアルギニンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にイソロイシンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位、７位、及び９位にアルギニンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位及び７位にアルギニン、ならびに９位にイソロイシンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位にアルギニン、及び９位にイソロイシンを含み得るか；またはＧＡＧ結合ペプチドは、４位にアルギニン及び９位にプロリンを含み得る。１位、４位、７位、及び／または９位のプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンの任意の組み合わせが、本開示によって包含される。
【0155】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１０個のアミノ酸を含む。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸を含む。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸からなる。
【0156】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0157】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む。
【0158】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む。
【0159】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる。
【0160】
実施形態では、第１のポリペプチドは、ＧＡＧ結合ペプチドからなる。あるいは、第１のポリペプチドは、ＧＡＧ結合ペプチド以外のアミノ酸を含み、いくつかの実施形態では、ポリペプチド中の追加のアミノ酸は、ＧＡＧに対するＧＡＧ結合ペプチドの親和性を増加させない。
【0161】
実施形態では、第１のポリペプチドのＮ末端は、第１の薬剤に直接または間接的に連結されている。実施形態では、第１のポリペプチドのＣ末端は、第１の薬剤に直接または間接的に連結されている。実施形態では、第１の薬剤は、少なくとも１つのリンカーを介して第１のポリペプチドに間接的に連結されている。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、１つ以上の原子を含む。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、繰り返し単位のポリマーを含む。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、アミノ酸鎖を含む。
【0162】
本明細書に開示される任意の態様または実施形態では、薬剤及びＧＡＧ結合ペプチドは、直接連結され得るか、またはそれらは、リンカーと呼ばれる部分を介して連結され得る。リンカーは、共有結合、または薬剤をＧＡＧ結合ペプチドに共有結合させる原子の鎖を含む、化学的部分を指す。リンカーには、アルキレン、アリーレン、ヘテロアリーレンなどの二価基、－（ＣＲ２）ｎＯ（ＣＲ２）ｎ－などの部分、アルキルオキシ（例えば、ポリエチレンオキシ、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリメチレンオキシ）及びアルキルアミノ（例えば、ポリエチレンアミノ、Ｊｅｆｆａｍｉｎｅ（商標））の繰り返し単位のポリマー、ならびにコハク酸エステル、スクシンアミド、ジグリコール酸エステル、マロン酸エステル、及びカプロアミドを含む二酸エステル及びアミドが含まれる。実施形態では、リンカーは、アミノ酸鎖を含む。実施形態では、アミノ酸鎖のリンカーは、約５００アミノ酸長未満、約４５０アミノ酸長未満、約４００アミノ酸長未満、約３５０アミノ酸長未満、約３００アミノ酸長未満、約２５０アミノ酸長未満、約２００アミノ酸長未満、約１５０アミノ酸長未満、または約１００アミノ酸長未満である。例えば、アミノ酸鎖のリンカーは、約１００、約９５、約９０、約８５、約８０、約７５、約７０、約６５、約６０、約５５、約５０、約４５、約４０、約３５、約３０、約２５、約２０、約１９、約１８、約１７、約１６、約１５、約１４、約１３、約１２、約１１、約１０、約９、約８、約７、約６、約５、約４、約３、または約２アミノ酸長未満であり得る。実施形態では、アミノ酸鎖のリンカーは、約１５アミノ酸～約３アミノ酸、例えば、約１０～５アミノ酸である。
【0163】
実施形態では、第１の薬剤は、第１のポリペプチドに直接連結されている。
【0164】
実施形態では、第１の薬剤は、マレイミド反応、スクシンイミジルエステル反応、酵素反応、またはタンパク質の構造もしくは活性に影響を及ぼさない別のコンジュゲーション系を使用して、第１のポリペプチドに直接または間接的に連結されている。
【0165】
実施形態では、第１の薬剤は、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子を含む。実施形態では、第１の薬剤は、抗体を含む。実施形態では、第１の薬剤は、蛍光部分を含む。
【0166】
本発明において有用な例示的な抗体（またはその断片）としては、３Ｆ８、８Ｈ９、アバゴボマブ、アブシキシマブ、アビツズマブ、アブレゼキマブ（Ａｂｒｅｚｅｋｉｍａｂ）、アブリルマブ、アクトクスマブ、アダリムマブ、アデカツムマブ、アデュカヌマブ、アファセビクマブ、アフェリモマブ、アラシズマブペゴル、アレムツズマブ、アリロクマブ、アルツモマブペンテテート、アマツキシマブ、アナツモマブマフェナトックス、アンデカリキシマブ、アネツマブラブタンシン、アニフロルマブ、アンルキンズマブ（ＩＭＡ－６３８）、アポリズマブ、アプルツマブイクサドチン（Ａｐｒｕｔｕｍａｂ ｉｘａｄｏｔｉｎ）、アルシツモマブ、アスクリンバクマブ、アセリズマブ、アテゾリズマブ、アチドルトクスマブ（Ａｔｉｄｏｒｔｏｘｕｍａｂ）、アチヌマブ、アトロリムマブ、アベルマブ、アジンツキシズマブベドチン（Ａｚｉｎｔｕｘｉｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、バピネオズマブ、バシリキシマブ、バビツキシマブ、ＢＣＤ－１００、ベクツモマブ、ベゲロマブ、ベランタマブマフォドチン、ベリムマブ、ベマリツズマブ、ベンラリズマブ、ベルリマトクスマブ（Ｂｅｒｌｉｍａｔｏｘｕｍａｂ）、ベルメキマブ、ベルサンリマブ（Ｂｅｒｓａｎｌｉｍａｂ）、ベルチリムマブ、ベシレソマブ、ベバシズマブ、ベズロトクスマブ、ビシロマブ、ビマグルマブ、ビメキズマブ、ビルタミマブ、ビバツズマブメルタンシン、ブレセルマブ、ブリナツモマブ、ブロンツベトマブ（Ｂｌｏｎｔｕｖｅｔｍａｂ）、ブロソズマブ、ＢＭＳ ９３６５５９、ボコシズマブ、ブラジクマブ、ブレンツキシマブベドチン、ブリアキヌマブ、ブロダルマブ、ブロルシズマブ、ブロンチクツズマブ、ブロスマブ、カビラリズマブ、カミダンルマブテシリン、カムレリズマブ、カナキヌマブ、カンツズマブメルタンシン、カンツズマブラブタンシン、カプラシズマブ、カプロマブペンデチド、カルルマブ、カロツキシマブ、カツマキソマブ、ｃＢＲ９６－ドキソルビシンイムノコンジュゲート、セデリズマブ、セミプリマブ、セルグツズマブアムナロイキン、セルトリズマブペゴル、セトレリマブ、セツキシマブ、シビサタマブ、サームツズマブ（Ｃｉｒｍｔｕｚｕｍａｂ）、シタツズマブボガトックス、シクスツムマブ、クラザキズマブ、クレノリキシマブ、クリバツズマブテトラキセタン、コドリツズマブ、コフェツズマブペリドチン、コルツキシマブラブタンシン、コナツムマブ、コンシズマブ、コスフロビキシマブ、ＣＲ６２６１、クレネズマブ、クリザンリズマブ、クロテデュマブ、クサツズマブ、ダセツズマブ、ダクリズマブ、ダロツズマブ、ダピロリズマブペゴル、ダラツムマブ、デクトレクマブ、デムシズマブ、デニンツズマブマフォドチン、デノスマブ、デパツキシズマブマフォドチン、デルロツキシマブビオチン、デツモマブ、デザミズマブ、ジヌツキシマブ、ジリダブマブ（Ｄｉｒｉｄａｖｕｍａｂ）、ドマグロズマブ、ドルリモマブアリトックス、ドスタルリマブ、ドロジツマブ、ＤＳ－８２０１、デュリゴツズマブ、デュピルマブ、デュルバルマブ、ドゥシギツマブ、ドゥボルツキシズマブ、エクロメキシマブ、エクリズマブ、エドバコマブ、エドレコロマブ、エファリズマブ、エファングマブ、エルデルマブ、エレザヌマブ、エルゲムツマブ（Ｅｌｇｅｍｔｕｍａｂ）、エロツズマブ、エルシリモマブ、エマクツズマブ、エマパルマブ、エミベツズマブ、エミシズマブ、エナポタマブベドチン、エナバツズマブ、エンホルツマブベドチン、エンリモマブペゴル、エノブリツズマブ、エノキズマブ、エノチクマブ、エンシツキシマブ、エピツモマブシツキセタン、エプラツズマブ、エプチネズマブ、エレヌマブ、エルリズマブ、エルツマキソマブ、エタラシズマブ、エチギリマブ、エトロリズマブ、エビナクマブ、エボロクマブ、エクスビビルマブ（Ｅｘｂｉｖｉｒｕｍａｂ）、ファノレソマブ、ファラリモマブ、ファリシマブ、ファルレツズマブ、ファシヌマブ、ＦＢＴＡ０５、フェルビズマブ、フェザキヌマブ、フィバツズマブ（Ｆｉｂａｔｕｚｕｍａｂ）、フィクラツズマブ、フィギツムマブ、フィリブマブ（Ｆｉｒｉｖｕｍａｂ）、フランボツマブ、フレチクマブ、フロテツズマブ、フォントリズマブ、フォラルマブ、フォラビルマブ、フレマネズマブ、フレソリムマブ、フロボキマブ、フルネベトマブ、フルラヌマブ、フツキシマブ、ガルカネズマブ、ガリキシマブ、ガンコタマブ、ガニツマブ、ガンテネルマブ、ガチポツズマブ、ガビリモマブ、ゲジブマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、ゲボキズマブ、ギルベトマブ（Ｇｉｌｖｅｔｍａｂ）、ジムシルマブ、ジレンツキシマブ、グレムバツムマブベドチン、ゴリムマブ、ゴミリキシマブ、ゴスラネマブ、グセルクマブ、イアナルマブ、イバリズマブ、ＩＢＩ３０８、イブリツモマブチウキセタン及び９０Ｙ－イブリツモマブチウキセタン、イクルクマブ、イダルシズマブ、イファボツズマブ、イゴボマブ、イラダツズマブベドチン（Ｉｌａｄａｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ＩＭＡＢ３６２、イマルマブ、イマプレリマブ（Ｉｍａｐｒｅｌｉｍａｂ）、イムシロマブ、イムガツズマブ、インクラクマブ、インダツキシマブラブタンシン、インデュサツマブベドチン、イネビリズマブ、インフリキシマブ、イノリモマブ、イノツズマブオゾガマイシン、インテツムマブ、イオマブ－Ｂ（Ｉｏｍａｂ－Ｂ）、イピリムマブ、イラツムマブ、イサツキシマブ、イスカリマブ、イスチラツマブ、イトリズマブ、イキセキズマブ、ケリキシマブ、ラベツズマブ、ラクノツズマブ（Ｌａｃｎｏｔｕｚｕｍａｂ）、ラジラツズマブベドチン、ランパリズマブ、ラナデルマブ、ランドグロズマブ、ラプリツキシマブエムタンシン（Ｌａｐｒｉｔｕｘｉｍａｂ ｅｍｔａｎｓｉｎｅ）、ラルカビキシマブ、レブリキズマブ、レマレソマブ、レンダリズマブ（Ｌｅｎｄａｌｉｚｕｍａｂ）、レンベルビマブ（Ｌｅｎｖｅｒｖｉｍａｂ）、レンジルマブ、レルデリムマブ、レロンリマブ、レソファブマブ、レトリズマブ、レクサツムマブ、リビビルマブ、リファスツズマブベドチン、リゲリズマブ、リロトマブサテトラキセタン、リンツズマブ、リリルマブ、ロデルシズマブ、ロキベトマブ、ロンカスツキシマブテシリン、ロルボツズマブメルタンシン、ロサツキシズマブベドチン（Ｌｏｓａｔｕｘｉｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ルカツムマブ、ルリズマブペゴル、ルミリキシマブ、ルムレツズマブ、ルパルツマブアマドチン（Ｌｕｐａｒｔｕｍａｂ ａｍａｄｏｔｉｎ）、ルチキズマブ（Ｌｕｔｉｋｉｚｕｍａｂ）、マパツムマブ、マルゲツキシマブ、マルスタシマブ、マスリモマブ、マツズマブ、マブリリムマブ、メポリズマブ、メテリムマブ、ミラツズマブ、ミンレツモマブ、ミリキズマブ、ミルベツキシマブソラブタンシン、ミツモマブ、ＭＫ－３４７５、モドツキシマブ、モガムリズマブ、モナリズマブ、モロリムマブ、モスネツズマブ、モタビズマブ、モキセツモマブパスドトクス、ＭＰＤＬ３２８ＯＡ、ムロモナブ－ＣＤ３、ナコロマブタフェナトックス（Ｎａｃｏｌｏｍａｂ ｔａｆｅｎａｔｏｘ）、ナミルマブ、ナプツモマブエスタフェナトクス、ナラツキシマブエムタンシン、ナルナツマブ、ナタリズマブ、ナビシキシズマブ、ナビブマブ（Ｎａｖｉｖｕｍａｂ）、ナキシタマブ、ネバクマブ、ネシツムマブ、ネモリズマブ、ＮＥＯＤ００１、ネレリモマブ、ネスバクマブ、ネタキマブ、ニモツズマブ、ニルセビマブ、ニボルマブ、ノフェツモマブメルペンタン、オビルトキサキシマブ、オビヌツズマブ、オカラツズマブ、オクレリズマブ、オデュリモマブ、オファツムマブ、オララツマブ、オレクルマブ、オレンダリズマブ、オロキズマブ、オマリズマブ、オムブルタマブ、ＯＭＳ７２１、オナルツズマブ、オンツキシズマブ、オンバチリマブ、オピシヌマブ、オポルツズマブモナトクス、オレゴボマブ、オルチクマブ（Ｏｒｔｉｃｕｍａｂ）、オテリキシズマブ、オチリマブ、オトレルツズマブ、オキセルマブ、オザネズマブ、オゾラリズマブ、パギバキシマブ、パリビズマブ、パムレブルマブ、パニツムマブ、パンコマブ、パノバクマブ、パルサツズマブ、パスコリズマブ、パソツキシズマブ（Ｐａｓｏｔｕｘｉｚｕｍａｂ）、パテクリズマブ、パトリツマブ、ＰＤＲ００１、ペムブロリズマブ、ペムツモマブ、ペラキズマブ、ペルツズマブ、ペキセリズマブ、ピディリズマブ、ピナツズマブベドチン、ピンツモマブ、プラクルマブ、プロザリズマブ、ポガリズマブ（Ｐｏｇａｌｉｚｕｍａｂ）、ポラツズマブベドチン、ポネズマブ、ポルガビキシマブ、プラシネズマブ、プレザリズマブ（Ｐｒｅｚａｌｉｚｕｍａｂ）、プリリキシマブ、プリトキサキシマブ（Ｐｒｉｔｏｘａｘｉｍａｂ）、プリツムマブ、ＰＲＯ １４０、キリズマブ、ラコツモマブ、ラドレツマブ、ラフィビルマブ、ラルパンシズマブ、ラムシルマブ、ラネベトマブ、ラニビズマブ、ラバガリマブ、ラブリズマブ、ラキシバクマブ、レファネズマブ、レガビルマブ、レラトリマブ、レムトルマブ、レスリズマブ、リロツムマブ、リヌクマブ、リサンキズマブ、リツキシマブ、リババズマブペゴル（Ｒｉｖａｂａｚｕｍａｂ ｐｅｇｏｌ）、Ｒｍａｂ、ロバツムマブ、ロレデュマブ（Ｒｏｌｅｄｕｍａｂ）、ロミルキマブ、ロモソズマブ、ロンタリズマブ、ロスマンツズマブ、ロバルピツズマブテシリン、ロベリズマブ、ロザノリキシズマブ、ルプリズマブ、ＳＡ２３７、サシツズマブゴビテカン、サマリズマブ、サムロタマブベドチン（Ｓａｍｒｏｔａｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、サリルマブ、サトラリズマブ、サツモマブペンデチド、セクキヌマブ、セリクレルマブ、セリバンツマブ、セトキサキシマブ（Ｓｅｔｏｘａｘｉｍａｂ）、セトルスマブ、セビルマブ、ＳＧＮ－ＣＤ１９Ａ、ＳＨＰ６４７、シブロツズマブ、シファリムマブ、シルツキシマブ、シムツズマブ、シプリズマブ、シルトラツマブベドチン（Ｓｉｒｔｒａｔｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、シルクマブ、ソフィツズマブベドチン、ソラネズマブ、ソリトマブ、ソネプシズマブ、ソンツズマブ、スパルタリズマブ、スタムルマブ、スレソマブ、スプタブマブ、スチムリマブ、スビズマブ、スブラトクスマブ、タバルマブ、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タラコツズマブ、タリズマブ、タムツベトマブ（Ｔａｍｔｕｖｅｔｍａｂ）、タネズマブ、タプリツモマブパプトクス、タレクツマブ、タボリマブ、テフィバズマブ、テリモマブアリトックス、テリソツズマブベドチン、テナツモマブ、テネリキシマブ、テプリズマブ、テポジタマブ（Ｔｅｐｏｄｉｔａｍａｂ）、テプロツムマブ、テシドルマブ、テツロマブ（Ｔｅｔｕｌｏｍａｂ）、テゼペルマブ、ＴＧＮ１４１２、チブリズマブ、チガツズマブ、チルドラキズマブ、チミグツズマブ、チモルマブ、チラゴツマブ（Ｔｉｒａｇｏｔｕｍａｂ）、チスレリズマブ、チソツマブベドチン、ＴＮＸ－６５０、トシリズマブ、トムゾツキシマブ、トラリズマブ、トサトクスマブ（Ｔｏｓａｔｏｘｕｍａｂ）、トシツモマブ及び１３１Ｉ－トシツモマブ、トベツマブ、トラロキヌマブ、トラスツズマブ、トラスツズマブエムタンシン、ＴＲＢＳ０７、トレガリズマブ、トレメリムマブ、トレボグルマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツビルマブ、ウブリツキシマブ、ウロクプルマブ、ウレルマブ、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ、ウトミルマブ、バダスツキシマブタリリン、バナリマブ（Ｖａｎａｌｉｍａｂ）、バンドルツズマブベドチン、バンチクツマブ、バヌシズマブ、バパリキシマブ、バリサクマブ、バルリルマブ、バテリズマブ、ベドリズマブ、ベルツズマブ、ベパリモマブ、ベセンクマブ、ビシリズマブ、ボバリリズマブ、ボロシキシマブ、ボンレロリズマブ、ボプラテリマブ、ボルセツズマブマフォドチン、ボツムマブ、ブナキズマブ（Ｖｕｎａｋｉｚｕｍａｂ）、キセンツズマブ、ＸＭＡＢ－５５７４、ザルツムマブ、ザノリムマブ、ザツキシマブ（Ｚａｔｕｘｉｍａｂ）、ゼノクツズマブ、ジラリムマブ、ゾルベツキシマブ（ＩＭＡＢ３６２、クローディキシマブ）、ならびにゾリモマブアリトックスが挙げられる。
【0167】
規制当局の承認を満たしているかまたは承認待ちであり、本発明において有用な例示的な抗体（またはその断片）としては、ムロモナブ－ＣＤ３（ＯＲＴＨＯＣＬＯＮＥ ＯＫＴ３）、エファリズマブ（ＲＡＰＴＩＶＡ）、トシツモマブ－Ｉ１３１（ＢＥＸＸＡＲ）、ネバクマブ（ＣＥＮＴＯＸＩＮ）、エドレコロマブ（ＰＡＮＯＲＥＸ）、カツマキソマブ（ＲＥＭＯＶＡＢ）、ダクリズマブ（ＺＩＮＢＲＹＴＡ；ＺＥＮＡＰＡＸ）、アブシキシマブ（ＲＥＯＰＲＯ）、リツキシマブ（ＭＡＢＴＨＥＲＡ、ＲＩＴＵＸＡＮ）、バシリキシマブ（ＳＩＭＵＬＥＣＴ）、パリビズマブ（ＳＹＮＡＧＩＳ）、インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ）、アダリムマブ（ＨＵＭＩＲＡ）、イブリツモマブチウキセタン（ＺＥＶＡＬＩＮ）、オマリズマブ（ＸＯＬＡＩＲ）、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ）、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ）、ナタリズマブ（ＴＹＳＡＢＲＩ）、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ）、ラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ）、エクリズマブ（ＳＯＬＩＲＩＳ）、セルトリズマブペゴル（ＣＩＭＺＩＡ）、ウステキヌマブ（ＳＴＥＬＡＲＡ）、カナキヌマブ（ＩＬＡＲＩＳ）、ゴリムマブ（ＳＩＭＰＯＮＩ）、オファツムマブ（ＡＲＺＥＲＲＡ）、トシリズマブ（ＲＯＡＣＴＥＭＲＡ、ＡＣＴＥＭＲＡ）、デノスマブ（ＰＲＯＬＩＡ）、ベリムマブ（ＢＥＮＬＹＳＴＡ）、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ）、ブレンツキシマブベドチン（ＡＤＣＥＴＲＩＳ）、ペルツズマブ（ＰＥＲＪＥＴＡ）、アドトラスツズマブエムタンシン（ＫＡＤＣＹＬＡ）、ラキシバクマブ）、オビヌツズマブ（ＧＡＺＹＶＡ、ＧＡＺＹＶＡＲＯ）、シルツキシマブ（ＳＹＬＶＡＮＴ）、ラムシルマブ（ＣＹＲＡＭＺＡ）、ベドリズマブ（ＥＮＴＹＶＩＯ）、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ）、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ）、ブリナツモマブ（ＢＬＩＮＣＹＴＯ）、アレムツズマブ（ＬＥＭＴＲＡＤＡ；ＭＡＢＣＡＭＰＡＴＨ、ＣＡＭＰＡＴＨ－１Ｈ）、エボロクマブ（ＲＥＰＡＴＨＡ）、イダルシズマブ（ＰＲＡＸＢＩＮＤ）、ネシツムマブ（ＰＯＲＴＲＡＺＺＡ）、ジヌツキシマブ（ＵＮＩＴＵＸＩＮ）、セクキヌマブ（ＣＯＳＥＮＴＹＸ）、メポリズマブ（ＮＵＣＡＬＡ）、アリロクマブ（ＰＲＡＬＵＥＮＴ）、ダラツムマブ（ＤＡＲＺＡＬＥＸ）、エロツズマブ（ＥＭＰＬＩＣＩＴＩ）、イキセキズマブ（ＴＡＬＴＺ）、レスリズマブ（ＣＩＮＱＡＥＲＯ、ＣＩＮＱＡＩＲ）、オララツマブ（ＬＡＲＴＲＵＶＯ）、ベズロトクスマブ（ＺＩＮＰＬＡＶＡ）、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ）、オビルトキサキシマブ（ＡＮＴＨＩＭ）、ブロダルマブ（ＳＩＬＩＱ、ＬＵＭＩＣＥＦ）、デュピルマブ（ＤＵＰＩＸＥＮＴ）、イノツズマブオゾガマイシン（ＢＥＳＰＯＮＳＡ）、グセルクマブ（ＴＲＥＭＦＹＡ）、サリルマブ（ＫＥＶＺＡＲＡ）、アベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯ）、エミシズマブ（ＨＥＭＬＩＢＲＡ）、オクレリズマブ（ＯＣＲＥＶＵＳ）、ベンラリズマブ（ＦＡＳＥＮＲＡ）、デュルバルマブ（ＩＭＦＩＮＺＩ）、ゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ）、エレヌマブ、エレヌマブ－ａｏｏｅ（ＡＩＭＯＶＩＧ）、ガルカネズマブ、ガルカネズマブ－ｇｎｌｍ（ＥＭＧＡＬＩＴＹ）、ブロスマブ、ブロスマブ－ｔｗｚａ（ＣＲＹＳＶＩＴＡ）、ラナデルマブ、ラナデルマブ－ｆｌｙｏ（ＴＡＫＨＺＹＲＯ）、モガムリズマブ、モガムリズマブ－ｋｐｋｃ（ＰＯＴＥＬＩＧＥＯ）、チルドラキズマブ；チルドラキズマブ－ａｓｍｎ（ＩＬＵＭＹＡ）、フレマネズマブ、フレマネズマブ－ｖｆｒｍ（ＡＪＯＶＹ）、ラブリズマブ、ラブリズマブ－ｃｗｖｚ（ＵＬＴＯＭＩＲＩＳ）、セミプリマブ、セミプリマブ－ｒｗｌｃ（ＬＩＢＴＡＹＯ）、イバリズマブ、イバリズマブ－ｕｉｙｋ（ＴＲＯＧＡＲＺＯ）、エマパルマブ、エマパルマブ－ｌｚｓｇ（ＧＡＭＩＦＡＮＴ）、モキセツモマブパスドトクス、モキセツモマブパスドトクス－ｔｄｆｋ（ＬＵＭＯＸＩＴＩ）、カプラシズマブ、カプラシズマブ－ｙｈｄｐ（ＣＡＢＬＩＶＩ）、リサンキズマブ、リサンキズマブ－ｒｚａａ（ＳＫＹＲＩＺＩ）、ポラツズマブベドチン、ポラツズマブベドチン－ｐｉｉｑ（ＰＯＬＩＶＹ）、ロモソズマブ、ロモソズマブ－ａｑｑｇ（ＥＶＥＮＩＴＹ）、ブロルシズマブ、ブロルシズマブ－ｄｂｌｌ（ＢＥＯＶＵ）、クリザンリズマブ；クリザンリズマブ－ｔｍｃａ（ＡＤＡＫＶＥＯ）、エンホルツマブベドチン、エンホルツマブベドチン－ｅｊｆｖ（ＰＡＤＣＥＶ）、［ｆａｍ－］トラスツズマブデルクステカン、ｆａｍ－トラスツズマブデルクステカン－ｎｘｋｉ（ＥＮＨＥＲＴＵ）、テプロツムマブ、テプロツムマブ－ｔｒｂｗ（ＴＥＰＥＺＺＡ）、エプチネズマブ、エプチネズマブ－ｊｊｍｒ（ＶＹＥＰＴＩ）、イサツキシマブ、イサツキシマブ－ｉｒｆｃ（ＳＡＲＣＬＩＳＡ）、サシツズマブゴビテカン；サシツズマブゴビテカン－ｈｚｉｙ（ＴＲＯＤＥＬＶＹ）、イネビリズマブ；イネビリズマブ－ｃｄｏｎ（ＵＰＬＩＺＮＡ）、サトラリズマブ（ＥＮＳＰＲＹＮＧ）、ドスタルリマブ（ＴＳＲ－０４２）、スチムリマブ（ＢＩＶＶ００９）、レロンリマブ、ナルソプリマブ、タファシタマブ、ＲＥＧＮＥＢ３、ナキシタマブ、オポルツズマブモナトクス、ベランタマブマフォドチン、マルゲツキシマブ、タネズマブ、テプリズマブ、アデュカヌマブ、エビナクマブ、トラロキヌマブ、及びオムブルタマブが挙げられる。
【0168】
抗体の断片は、少なくとも、上記の抗体の抗原結合ドメインを含む。実施形態では、抗原結合ドメインは、抗体、抗体断片、ｓｃＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、（Ｆａｂ’）２、単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）、ＶＨもしくはＶＬドメイン、またはラクダＶＨＨドメイン、例えば、ヒトｓｃＦｖ、ヒトＦｖ、ヒトＦａｂ、ヒト（Ｆａｂ’）２、ヒト単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）、またはヒトＶＨもしくはＶＬドメイン、あるいはヒト化ｓｃＦｖ、ヒト化Ｆｖ、ヒト化Ｆａｂ、ヒト化（Ｆａｂ’）２、ヒト化単一ドメイン抗体（ＳＤＡＢ）、またはヒト化ＶＨもしくはＶＬドメインである。
【0169】
本発明において有用である例示的な化学療法剤としては、２，３，４，５，６－ペンタフルオロ－Ｎ－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）ベンゼンスルホンアミド、３’、４’－ジデヒドロ－４’－デオキシ－８’－ノルビン－カロイコブラスチン、５－ＦＵ（フルオロウラシル）、アベマシクリブ、酢酸アビラテロン、アビトレキサート（Ａｂｉｔｒｅｘａｔｅ）（メトトレキサート）、アブラキサン（パクリタキセルアルブミン安定化ナノ粒子製剤）、ＡＢＶＤ、ＡＢＶＥ、ＡＢＶＥ－ＰＣ、ＡＣ、アカラブルチニブ、ＡＣ－Ｔ、ＡＤＥ、アドリアマイシン（ドキソルビシン）、アファチニブジマレイン酸塩、アフィニトール（エベロリムス）、アフィニトールジフスペルツ（Ａｆｉｎｉｔｏｒ Ｄｉｆｓｐｅｒｚ）（エベロリムス）、アキンゼオ（ネツピタント及びパロノセトロン）、アルダラ（イミキモド）、アルデスロイキン、アレセンサ（アレクチニブ）、アレクチニブ、アリムタ（ＰＥＭＥＴＲＥＸＥＤ）、アリコパ（コパンリシブ塩酸塩）、アルケラン（メルファラン）、アロキシ（パロノセトロン塩酸塩）、アルトレタミン、アルンブリグ（ブリガチニブ）、アンボクロリン（クロラムブシル）、アンボクロリン（クロラムブシル）、アミホスチン、アミノレブリン酸、アナストロゾール、無水ビンブラスチン、アプレピタント、アレディア（パミドロン酸）、アリミデックス（アナストロゾール）、アロマシン（エキセメスタン）、アラノン（ネララビン）、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼエルウィニアクリサンテミ、アウリスタチン、アキシカブタゲンシロルユーセル、アキシチニブ、アザシチジン、ＢＥＡＣＯＰＰ、ベセヌム（Ｂｅｃｅｎｕｍ）（カルムスチン）、ベレオダク（ベリノスタット）、ベリノスタット、ベンダムスチン塩酸塩、ＢＥＰ、ベキサロテン、ビカルタミド、ＢｉＣＮＵ（カルムスチン）、ブレノキサン（ブレオマイシン）、ＢＭＳ１８４４７６、ボルテゾミブ、ボシュリフ（ボスチニブ）、ボスチニブ、ブリガチニブ、ＢｕＭｅｌ、ブスルファン、ブスルフェクス（ブスルファン）Ｃ、カバジタキセル、カボメティクス（カボザンチニブ）、カボザンチニブ－Ｓ－リンゴ酸塩、ＣＡＦ、カルケンス（アカラブルチニブ）、カンプトサール（イリノテカン塩酸塩）、カペシタビン、ＣＡＰＯＸ、カプレルサ（バンデタニブ）、カラック（外用フルオロウラシル）、カルボプラチン、カルボプラチン－タキソール、カルフィルゾミブ、カルムブリス（Ｃａｒｍｕｂｒｉｓ）（カルムスチン）、カルムスチン、カソデックス（ビカルタミド）、カケクチン、ＣｅｅＮＵ（ロムスチン）、ＣＥＭ、セマドチン、セリチニブ、セルビジン（ダウノルビシン）、サーバリックス（組換えＨＰＶ２価ワクチン）、ＣＥＶ、クロラムブシル、クロラムブシル－プレドニゾン、ＣＨＯＰ、シスプラチン、クラドリビン、クラフェン（シクロホスファミド）、クロファラビン、クロファレックス（クロファラビン）、クロラール（クロファラビン）、ＣＭＦ、コビメチニブ、コメトリック（カボザンチニブ）、コパンリシブ塩酸塩、ＣＯＰＤＡＣ、ＣＯＰＰ、ＣＯＰＰ－ＡＢＶ、コスメゲン（ダクチノマイシン）、コテリック（コビメチニブ）、クリプトフィシン、クリゾチニブ、ＣＶＰ、シクロホスファミド、サイフォス（Ｃｙｆｏｓ）（イホスファミド）、シタラビン、シタラビンリポソーム、シトサール－Ｕ（シタラビン）、サイトキサン（シクロホスファミド）、サイトキサン（サイトキサン）、ダブラフェニブ、ダカルバジン、ダコゲン（デシタビン）、ダクチノマイシン、ダサチニブ、ダウノルビシン塩酸塩、ダウノルビシン塩酸塩及びシタラビンリポソーム、ダウノゾーム（ＤａｕｎｏＸｏｍｅ）（ダウノルビシン脂質複合体）、デカドロン（デキサメタゾン）、デシタビン、デフィブロチドナトリウム、デファイテリオ（デフィブロチドナトリウム）、デガレリクス、デニロイキンジフチトクス、デポサイト（シタラビンリポソーム）、デキサメタゾン、デキサメタゾンインテンソール（デキサメタゾン）、デクスパックテーパーパック（Ｄｅｘｐａｋ Ｔａｐｅｒｐａｋ）（デキサメタゾン）、デクスラゾキサン塩酸塩、ドセフレツ（Ｄｏｃｅｆｒｅｚ）（ドセタキセル）、ドセタキセル、ドセタキソール、ドラスタチン、ドキセタキセル、ドキシル（ドキソルビシン塩酸塩リポソーム）、ドキソルビシン塩酸塩、ドキソルビシン塩酸塩リポソーム、Ｄｏｘ－ＳＬ（ドキソルビシン塩酸塩リポソーム）、ドロキシア（ヒドロキシウレア）、ＤＴＩＣ（ダカルバジン）、ＤＴＩＣ－Ｄｏｍｅ（ダカルバジン）、エフデックス（外用フルオロウラシル）、エリガード（ロイプロリド）、エリテック（ラスブリカーゼ）、エレンス（エレンス（エピルビシン））、エロキサチン（オキサリプラチン）、エルスパー（アスパラギナーゼ）、エルトロンボパグオラミン、エムシット（Ｅｍｃｙｔ）（エストラムスチン）、イメンド（アプレピタント）、エナシデニブメシル酸塩、エンザルタミド、エピルビシン塩酸塩、ＥＰＯＣＨ、エリブリンメシル酸塩、エリベッジ（ビスモデギブ）、エルロチニブ塩酸塩、エルウィナーゼ（アスパラギナーゼエルウィニアクリサンテミ）、エチオール（アミホスチン）、エトポホス（エトポシドリン酸塩）、エトポシド、エトポシドリン酸塩、ユーレクシン（フルタミド）、エバセット（Ｅｖａｃｅｔ）（ドキソルビシン塩酸塩リポソーム）、エベロリムス、エビスタ（ラロキシフェン塩酸塩）、エボメラ（メルファラン塩酸塩）、エキセメスタン、フェアストン（トレミフェン）、ファリーダック（パノビノスタット）、フェソロデックス（フルベストラント）、ＦＥＣ、フェマーラ（レトロゾール）、フィルグラスチム、ファーマゴン（デガレリクス）、フィナステリド、フロプレド（ＦｌｏＰｒｅｄ）（プレドニゾロン）、フルダラ（フルダラビン）、フルダラビンリン酸塩、フルオロプレックス（フルオロウラシル）、フルオロウラシル、フルタミド、フォレックス（メトトレキサート）、フォレックスＰＦＳ（メトトレキサート）、ＦＯＬＦＩＲＩ、ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸ、ＦＯＬＦＯＸ、フォロチン（プララトレキサート）、ＦＵＤＲ（ＦＵＤＲ（フロクスウリジン））、ＦＵ－ＬＶ、フルベストラント、ガーダシル（組換えＨＰＶ４価ワクチン）、ガーダシル９（組換えＨＰＶ９価ワクチン）、ゲフィチニブ、ゲムシタビン塩酸塩、ＧＥＭＣＩＴＡＢＩＮＥ－ＣＩＳＰＬＡＴＩＮ、ＧＥＭＣＩＴＡＢＩＮＥ－ＯＸＡＬＩＰＬＡＴＩＮ、ジェムザール（ゲムシタビン）、ジオトリフ（アファチニブジマレイン酸塩）、ジオトリフ（アファチニブ）、グリベック（イマチニブメシル酸塩）、ギリアデル（カルムスチン）、グルカルピダーゼ、ゴセレリン酢酸塩、ハラヴェン（エリブリンメシル酸塩）、ヘマンジオル（プロプラノロール塩酸塩）、ヘキサレン（アルトレタミン）、組換えＨＰＶ２価ワクチン、組換えＨＰＶ９価ワクチン、組換えＨＰＶ４価ワクチン、ハイカムチン（トポテカン塩酸塩）、ハイカムチン（トポテカン）、ハイドレア（ヒドロキシウレア）、ヒドロキシウレア、ヒドロキシウレアタキサン、ハイパーＣＶＡＤ、イブランス（パルボシクリブ）、イブルチニブ、ＩＣＥ、アイクルシグ（ポナチニブ）、イダマイシンＰＦＳ（イダルビシン）、イダルビシン塩酸塩、イデラリシブ、アイディハイファ（エナシデニブ）、イフェックス（Ｉｆｅｘ）（イホスファミド）、イホスファミド、イフォスファミダム（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｕｍ）（イホスファミド）、イマチニブメシル酸塩、イムブルビカ（イブルチニブ）、イミキモド、イムリジック（タリモジンラヘルパレプベク）、インライタ（アキシチニブ）、イレッサ（ゲフィチニブ）、イリノテカン塩酸塩、イリノテカン塩酸塩リポソーム、イストダックス（ロミデプシン）、イクサベピロン、イキサゾミブクエン酸エステル、イグゼンプラ（イクサベピロン）、ジャカフィ（ルキソリチニブリン酸塩）、ジャカフィ（ルキソリチニブ）、ＪＥＢ、ジェブタナ（カバジタキセル）、ケオキシフェン（ラロキシフェン塩酸塩）、ケピバンス（パリフェルミン）、キスカリ（リボシクリブ）、カイプロリス（カルフィルゾミブ）、ランレオチド酢酸塩、レンビマ（レンバチニブ）、二トシル酸ラパチニブ、レナリドミド、レンバチニブメシル酸塩、レンビマ（レンバチニブメシル酸塩）、レトロゾール、ロイコボリンカルシウム、ロイケラン（クロラムブシル）、リューカイン（サルグラモスチム）、ロイプロリド酢酸塩、ロイスタチン（クラドリビン）、レブラン（アミノレブリン酸）、リアロゾール、リンフォリジン（Ｌｉｎｆｏｌｉｚｉｎ）（クロラムブシル）、リポドックス（ドキソルビシン塩酸塩リポソーム）、ロムスチン、ロニダミン、ロンサーフ（トリフルリジン及びチピラシル）、リュープロン（ロイプロリド）、リムパーザ（オラパリブ）、リソドレン（ミトタン）、マルキボ（ビンクリスチン硫酸塩リポソーム）、マルキボキット（ビンクリスチン脂質複合体）、マツラン（Ｍａｔｕｌａｎｅ）（プロカルバジン）、メクロレタミン塩酸塩、メゲース（メゲストロール）、メゲストロール酢酸塩、メキニスト（トラメチニブ）、メルファラン、メルファラン塩酸塩、メルカプトプリン、メスネックス（メスナ）、メタストロン（塩化ストロンチウム－８９）、メタゾラストン（テモゾロミド）、メトトレキサート、メトトレキサートＬＰＦ（メトトレキサート）、メチルナルトレキソン臭化物、メキサート（メトトレキサート）、メキサート－ＡＱ（メトトレキサート）、ミドスタウリン、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン塩酸塩、ミトザイトレックス（Ｍｉｔｏｚｙｔｒｅｘ）（マイトマイシンＣ）、イセチオン酸ミボブリン、ＭＯＰＰ、モスタリナ（Ｍｏｓｔａｒｉｎａ）（プレドニムスチン）、モゾビル（プレリキサホル）、ムスタルゲン（メクロレタミン）、ムタマイシン（マイトマイシン）、ミレラン（ブスルファン）、マイロサール（Ｍｙｌｏｓａｒ）（アザシチジン）、ナノ粒子パクリタキセル（パクリタキセルアルブミン安定化ナノ粒子製剤）、ナベルビン（ビノレルビン）、ネララビン、ネオサール（Ｎｅｏｓａｒ）（シクロホスファミド）、ネラチニブマレイン酸塩、ネリンクス（ネラチニブ）、ネツピタント・パロノセトロン塩酸塩、ニューラスタ（フィルグラスチム）、ニューラスタ（ペグフィルグラスチム）、ニューポジェン（フィルグラスチム）、ネクサバール（ソラフェニブ）、ニランドロン（ニルタミド）、ニロチニブ、ニルタミド、ニンラーロ（イキサゾミブ）、ニペント（ペントスタチン）、ニラパリブトシル酸塩水和物、Ｎ，ｎ－ジメチル－ｌ－バリル－ｌ－バリル－ｎ－メチル－ｌ－バリル－ｌ－プロリ－１－ｌプロリン－ｔ－ブチルアミド、ノルバデックス（タモキシフェン）、ノバントロン（ミトキサントロン）、Ｎプレート（ロミプロスチム）、オドムゾ（ソニデジブ）、ＯＥＰＡ、ＯＦＦ、オラパリブ、オマセタキシンメペスクシナート、オナプリストン、オンカスパー（ペガスパルガーゼ）、オンコビン（ビンクリスチン）、オンダンセトロン塩酸塩、オニバイド（イリノテカン塩酸塩リポソーム）、オンタック（デニロイキンジフチトクス）、オンキソール（パクリタキセル）、ＯＰＰＡ、オラプレド（Ｏｒａｐｒｅｄ）（プレドニゾロン）、オシメルチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パクリタキセルアルブミン安定化ナノ粒子製剤、ＰＡＤ、パルボシクリブ、パリフェルミン、パロノセトロン塩酸塩、パロノセトロン塩酸塩及びネツピタント、パミドロン酸二ナトリウム、パノビノスタット、パンレチン（アリトレチノイン）、パラプラット（Ｐａｒａｐｌａｔ）（カルボプラチン）、パゾパニブ塩酸塩、ＰＣＶ、ＰＥＢ、ペディアプレッド（Ｐｅｄｉａｐｒｅｄ）（プレドニゾロン）、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド二ナトリウム、プラチノール（シスプラチン）、プラチノールＡＱ（シスプラチン）、プレリキサホル、ポマリスト（ポマリドミド）、ポナチニブ塩酸塩、プララトレキサート、プレドニムスチン、プレドニゾン、プロカルバジン塩酸塩、プロロイキン（アルデスロイキン）、プロマクタ（エルトロンボパグオラミン）、プロプラノロール塩酸塩、プリントール（メル
カプトプリン）、プリキサン（メルカプトプリン）、二塩化ラジウム２２３、ラロキシフェン塩酸塩、ラスブリカーゼ、Ｒ－ＣＨＯＰ、Ｒ－ＣＶＰ、リクラスト（ゾレドロン酸）、組換えヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）２価ワクチン、組換えヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）９価ワクチン、組換えヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）４価ワクチン、レゴラフェニブ、レリストール（メチルナルトレキソン臭化物）、Ｒ－ＥＰＯＣＨ、レブリミド（レナリドミド）、リウマトレックス（メトトレキサート）、リゾキシン、リボシクリブ、Ｒ－ＩＣＥ、ロラピタント塩酸塩、ロミデプシン、ロミプロスチム、Ｒｐｒ１０９８８１、ルベックス（ドキソルビシン）、ルビドマイシン（ダウノルビシン塩酸塩）、ルブラカ（ルカパリブ）、ルカパリブカンシル酸塩、ルキソリチニブリン酸塩、ライダプト（ミドスタウリン）、サンドスタチン（オクトレオチド）、サンドスタチンＬＡＲデポー剤（オクトレオチド）、スクレロソル胸膜内エアロゾル（Ｓｃｌｅｒｏｓｏｌ Ｉｎｔｒａｐｌｅｕｒａｌ Ａｅｒｏｓｏｌ）（タルク）、セルテネフ（Ｓｅｒｔｅｎｅｆ）、ソルタモックス（タモキシフェン）、ソマチュリンデポー剤（ランレオチド酢酸塩）、ソニデジブ、ソラフェニブトシル酸塩、スプリセル（ダサチニブ）、ＳＴＡＮＦＯＲＤ Ｖ、ステラプレド（プレドニゾン）、ステラプレドＤＳ（プレドニゾン）、滅菌タルクパウダー（タルク）、ステリタルク（タルク）、ステレシスト（Ｓｔｅｒｅｃｙｓｔ）（プレドニムスチン）、スチバーガ（レゴラフェニブ）、ストラムスチンリン酸塩（Ｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ストレプトゾシン、スニチニブリンゴ酸塩、スプレリンＬＡ（ヒストレリン）、スーテント（スニチニブリンゴ酸塩）、スーテント（スニチニブ）、シンリボ（オマセタキシンメペスクシナート）、タブロイド（チオグアニン）、ＴＡＣ、タフィンラー（ダブラフェニブ）、タグリッソ（オシメルチニブ）、タルク、タリモジンラヘルパレプベク、タモキシフェンクエン酸塩、タラビンＰＦＳ（シタラビン）、タルセバ（エルロチニブ）、タルグレチン（ベキサロテン）、タシグナ（ダカルバジン）、タシグナ（ニロチニブ）、タソネルミン、タキソール（パクリタキセル）、タキソテール（ドセタキセル）、テモダール（テモゾロミド）、テモゾロミド、テムシロリムス、テパディナ（チオテパ）、サリドマイド、サロミド（サリドマイド）、ＴｈｅｒａＣｙｓ ＢＣＧ（ＢＣＧ）、チオグアニン、チオプレックス（チオテパ）、チオテパ、ＴＩＣＥ ＢＣＧ（ＢＣＧ）、チサゲンレクルユーセル、トラク（Ｔｏｌａｋ）、（外用フルオロウラシル）、トポサール（エトポシド）、トポテカン塩酸塩、トレミフェン、トーリセル（テムシロリムス）、トテクト（Ｔｏｔｅｃｔ）（デクスラゾキサン塩酸塩）、ＴＰＦ、トラベクテジン、トラメチニブ、トレアンダ（ベンダムスチン塩酸塩）、トレルスター（トリプトレリン）、トレチノイン、トレキサル（Ｔｒｅｘａｌｌ）（メトトレキサート）、トリフルリジン・チピラシル塩酸塩、トリセノックス（三酸化ヒ素）、タイケルブ（ラパチニブ）、ウリジントリアセテート、ＶＡＣ、バルルビシン、バルスター（Ｖａｌｓｔａｒ）（膀胱内バルルビシン）、バルスター（バルルビシン）、ＶＡＭＰ、バンデタニブ、バンタス（Ｖａｎｔａｓ）（ヒストレリン）、バルビ（Ｖａｒｕｂｉ）（ロラピタント）、ＶｅＩＰ、ベルバン（ビンブラスチン）、ベルケイド（ボルテゾミブ）、ベルサール（Ｖｅｌｓａｒ）（ビンブラスチン硫酸塩）、ベムラフェニブ、ベンクレクスタ（ベネトクラクス）、ベプシド（エトポシド）、ベージニオ（アベマシクリブ）、ベサノイド（トレチノイン）、ビアデュール（Ｖｉａｄｕｒ）（ロイプロリド酢酸塩）、ビダーザ（アザシチジン）、ビンブラスチン、ビンカサールＰＦＳ（ビンクリスチン）、ビンクレックス（Ｖｉｎｃｒｅｘ）（ビンクリスチン）、ビンクリスチン硫酸塩、ビンクリスチン硫酸塩リポソーム、ビンデシン硫酸塩、ビンフルニン、ビノレルビン酒石酸塩、ＶＩＰ、ビスモデギブ、ビストガード（Ｖｉｓｔｏｇａｒｄ）（ウリジントリアセテート）、ボラキサーゼ（Ｖｏｒａｘａｚｅ）（グルカルピダーゼ）、ボリノスタット、ヴォトリエント（パゾパニブ）、ブモン（テニポシド）、ヴィキセオス（ダウノルビシン塩酸塩及びシタラビンリポソーム）、Ｗ、ウェルコボリン（ロイコボリンカルシウム）、ウェルコボリンＩＶ（ロイコボリン）、ザーコリ（クリゾチニブ）、ＸＥＬＩＲＩ、ゼローダ（カペシタビン）、ＸＥＬＯＸ、ゾーフィゴ（二塩化ラジウム２２３）、イクスタンジ（エンザルタミド）、イエスカルタ（アキシカブタゲンシロルユーセル）、ヨンデリス（トラベクテジン）、ザルトラップ（Ｚｉｖ－アフリベルセプト）、ザノサー（ストレプトゾシン）、ザルジオ（フィルグラスチム）、ゼジューラ（ニラパリブ）、ゼルボラフ（ベムラフェニブ）、ザインカード（デクスラゾキサン塩酸塩）、Ｚｉｖ－アフリベルセプト、ゾフラン（オンダンセトロン塩酸塩）、ゾラデックス（ゴセレリン）、ゾレドロン酸、ゾリンザ（ボリノスタット）、ゾメタ（ゾレドロン酸）、ゾルトレス（Ｚｏｒｔｒｅｓｓ）（エベロリムス）、ザイデリグ（イデラリシブ）、ジカディア（セリチニブ）、ザイティガ（アビラテロン酢酸塩）、ならびにザイティガ（アビラテロン）が挙げられる。化学療法剤の他の例は、Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ｂｙ Ｖ．Ｔ．Ｄｅｖｉｔａ ａｎｄ Ｓ．Ｈｅｌｌｍａｎ（ｅｄｉｔｏｒｓ），６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｆｅｂ．１５，２００１），Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（その内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に見ることができる。
カプトプリン）、プリキサン（メルカプトプリン）、二塩化ラジウム２２３、ラロキシフェン塩酸塩、ラスブリカーゼ、Ｒ－ＣＨＯＰ、Ｒ－ＣＶＰ、リクラスト（ゾレドロン酸）、組換えヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）２価ワクチン、組換えヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）９価ワクチン、組換えヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）４価ワクチン、レゴラフェニブ、レリストール（メチルナルトレキソン臭化物）、Ｒ－ＥＰＯＣＨ、レブリミド（レナリドミド）、リウマトレックス（メトトレキサート）、リゾキシン、リボシクリブ、Ｒ－ＩＣＥ、ロラピタント塩酸塩、ロミデプシン、ロミプロスチム、Ｒｐｒ１０９８８１、ルベックス（ドキソルビシン）、ルビドマイシン（ダウノルビシン塩酸塩）、ルブラカ（ルカパリブ）、ルカパリブカンシル酸塩、ルキソリチニブリン酸塩、ライダプト（ミドスタウリン）、サンドスタチン（オクトレオチド）、サンドスタチンＬＡＲデポー剤（オクトレオチド）、スクレロソル胸膜内エアロゾル（Ｓｃｌｅｒｏｓｏｌ Ｉｎｔｒａｐｌｅｕｒａｌ Ａｅｒｏｓｏｌ）（タルク）、セルテネフ（Ｓｅｒｔｅｎｅｆ）、ソルタモックス（タモキシフェン）、ソマチュリンデポー剤（ランレオチド酢酸塩）、ソニデジブ、ソラフェニブトシル酸塩、スプリセル（ダサチニブ）、ＳＴＡＮＦＯＲＤ Ｖ、ステラプレド（プレドニゾン）、ステラプレドＤＳ（プレドニゾン）、滅菌タルクパウダー（タルク）、ステリタルク（タルク）、ステレシスト（Ｓｔｅｒｅｃｙｓｔ）（プレドニムスチン）、スチバーガ（レゴラフェニブ）、ストラムスチンリン酸塩（Ｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ストレプトゾシン、スニチニブリンゴ酸塩、スプレリンＬＡ（ヒストレリン）、スーテント（スニチニブリンゴ酸塩）、スーテント（スニチニブ）、シンリボ（オマセタキシンメペスクシナート）、タブロイド（チオグアニン）、ＴＡＣ、タフィンラー（ダブラフェニブ）、タグリッソ（オシメルチニブ）、タルク、タリモジンラヘルパレプベク、タモキシフェンクエン酸塩、タラビンＰＦＳ（シタラビン）、タルセバ（エルロチニブ）、タルグレチン（ベキサロテン）、タシグナ（ダカルバジン）、タシグナ（ニロチニブ）、タソネルミン、タキソール（パクリタキセル）、タキソテール（ドセタキセル）、テモダール（テモゾロミド）、テモゾロミド、テムシロリムス、テパディナ（チオテパ）、サリドマイド、サロミド（サリドマイド）、ＴｈｅｒａＣｙｓ ＢＣＧ（ＢＣＧ）、チオグアニン、チオプレックス（チオテパ）、チオテパ、ＴＩＣＥ ＢＣＧ（ＢＣＧ）、チサゲンレクルユーセル、トラク（Ｔｏｌａｋ）、（外用フルオロウラシル）、トポサール（エトポシド）、トポテカン塩酸塩、トレミフェン、トーリセル（テムシロリムス）、トテクト（Ｔｏｔｅｃｔ）（デクスラゾキサン塩酸塩）、ＴＰＦ、トラベクテジン、トラメチニブ、トレアンダ（ベンダムスチン塩酸塩）、トレルスター（トリプトレリン）、トレチノイン、トレキサル（Ｔｒｅｘａｌｌ）（メトトレキサート）、トリフルリジン・チピラシル塩酸塩、トリセノックス（三酸化ヒ素）、タイケルブ（ラパチニブ）、ウリジントリアセテート、ＶＡＣ、バルルビシン、バルスター（Ｖａｌｓｔａｒ）（膀胱内バルルビシン）、バルスター（バルルビシン）、ＶＡＭＰ、バンデタニブ、バンタス（Ｖａｎｔａｓ）（ヒストレリン）、バルビ（Ｖａｒｕｂｉ）（ロラピタント）、ＶｅＩＰ、ベルバン（ビンブラスチン）、ベルケイド（ボルテゾミブ）、ベルサール（Ｖｅｌｓａｒ）（ビンブラスチン硫酸塩）、ベムラフェニブ、ベンクレクスタ（ベネトクラクス）、ベプシド（エトポシド）、ベージニオ（アベマシクリブ）、ベサノイド（トレチノイン）、ビアデュール（Ｖｉａｄｕｒ）（ロイプロリド酢酸塩）、ビダーザ（アザシチジン）、ビンブラスチン、ビンカサールＰＦＳ（ビンクリスチン）、ビンクレックス（Ｖｉｎｃｒｅｘ）（ビンクリスチン）、ビンクリスチン硫酸塩、ビンクリスチン硫酸塩リポソーム、ビンデシン硫酸塩、ビンフルニン、ビノレルビン酒石酸塩、ＶＩＰ、ビスモデギブ、ビストガード（Ｖｉｓｔｏｇａｒｄ）（ウリジントリアセテート）、ボラキサーゼ（Ｖｏｒａｘａｚｅ）（グルカルピダーゼ）、ボリノスタット、ヴォトリエント（パゾパニブ）、ブモン（テニポシド）、ヴィキセオス（ダウノルビシン塩酸塩及びシタラビンリポソーム）、Ｗ、ウェルコボリン（ロイコボリンカルシウム）、ウェルコボリンＩＶ（ロイコボリン）、ザーコリ（クリゾチニブ）、ＸＥＬＩＲＩ、ゼローダ（カペシタビン）、ＸＥＬＯＸ、ゾーフィゴ（二塩化ラジウム２２３）、イクスタンジ（エンザルタミド）、イエスカルタ（アキシカブタゲンシロルユーセル）、ヨンデリス（トラベクテジン）、ザルトラップ（Ｚｉｖ－アフリベルセプト）、ザノサー（ストレプトゾシン）、ザルジオ（フィルグラスチム）、ゼジューラ（ニラパリブ）、ゼルボラフ（ベムラフェニブ）、ザインカード（デクスラゾキサン塩酸塩）、Ｚｉｖ－アフリベルセプト、ゾフラン（オンダンセトロン塩酸塩）、ゾラデックス（ゴセレリン）、ゾレドロン酸、ゾリンザ（ボリノスタット）、ゾメタ（ゾレドロン酸）、ゾルトレス（Ｚｏｒｔｒｅｓｓ）（エベロリムス）、ザイデリグ（イデラリシブ）、ジカディア（セリチニブ）、ザイティガ（アビラテロン酢酸塩）、ならびにザイティガ（アビラテロン）が挙げられる。化学療法剤の他の例は、Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ｂｙ Ｖ．Ｔ．Ｄｅｖｉｔａ ａｎｄ Ｓ．Ｈｅｌｌｍａｎ（ｅｄｉｔｏｒｓ），６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｆｅｂ．１５，２００１），Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（その内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に見ることができる。
【0170】
実施形態では、化学療法剤（例えば、上記のリストのもの）は、本開示の化合物に薬剤として含まれ得る。その代わりに、またはそれに加えて、例えば、化学療法剤（例えば、上記のリストのもの）は、本開示の化合物と併せて（すなわち併用療法において）使用され得る。例として、対象に、薬剤としてマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）を含む化合物及び薬剤としてフマギリンを含む化合物の一方または両方が担持された血小板を投与することができ、また化学療法剤も投与することができる。この組み合わせは、膵癌、肺癌、または結腸癌の治療に使用することができる。対象に、薬剤としてＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）を含む化合物及び活性剤としてマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）を含む化合物の一方または両方が担持された血小板を投与することができ、また化学療法剤も投与することができる。これは、肺癌の治療に使用することができる。また、対象に、薬剤としてＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）を含む化合物、薬剤としてマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）を含む化合物、及び薬剤としてＡＬＫ／ＲＯＳ１／ＮＴＲＫ阻害剤（例えば、クリゾチニブ）を含む化合物のうちの１つもしくは両方、または３つ全てが担持された血小板を投与することができ、また化学療法剤も投与することができる。これは、非小細胞肺癌の治療に使用することができる。
【0171】
本発明において有用な例示的な免疫チェックポイント阻害剤としては、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＤ１２２、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＴＬＡ－４、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳ、ＩＤＯ、ＫＩＲ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＮＯＸ２、ＯＸ４０、ＰＤ－１、ＳＩＧＬＥＣ７、ＳＩＧＬＥＣ９、ＴＩＭ－３、及びＶＩＳＴＡのリガンドまたは受容体の完全長または断片が挙げられる。
【0172】
本発明において有用な例示的な増殖因子としては、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、及び血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）、ならびにアンジオポエチンが挙げられる。
【0173】
本発明において有用な例示的な増殖阻害剤としては、アンギオスタチン、エンドスタチン、タムスタチン、トロンボスポンジン－１（ＴＳＰ１）、血小板第４因子（ＰＦ４、ＣＸＣＬ４）、及びメタロプロテイナーゼの組織阻害剤（ＴＩＭＰ）が挙げられる。
【0174】
本発明において有用な例示的なプロテアーゼ／プロテイナーゼとしては、マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）、トロンビン、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）、ウロキナーゼ、及びストレプトキナーゼが挙げられる。
【0175】
本発明において有用な例示的な凝固因子としては、第ＩＩ因子（トロンビン）、アンチトロンビンＩＩＩ（ＡＴＩＩＩ）、カリクレイン、組織因子（ＴＦ）、第Ｖ因子、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第Ｘ因子、第ＸＩ因子、及び第ＸＩＩ因子、第ＸＩＩＩ因子、フィブリノゲン、プロテインＳ、プロテインＣ、トロンボモジュリン、プラスミノーゲン、ならびに組織因子経路阻害剤（ＴＦＰＩ）が挙げられる。
【0176】
本発明において有用な例示的な脂質またはリン脂質としては、アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）、血小板リン脂質、及びスフィンゴシン－１－リン酸（ＳＩＰ）が挙げられる。
【0177】
本発明において有用な例示的な細胞外マトリックスタンパク質としては、インテグリン、フィブロネクチン、ラミニン、接着斑タンパク質（ＦＡＫ）、ビンキュリン、タリン、アクチンフィラメント、及びコラーゲンが挙げられる。
【0178】
本発明において有用な例示的なホルモンとしては、インスリン、ステロイド（例えば、エストロゲン、プロゲステロン、及びテストステロン、ならびにそれらのバリアント）、エリスロポエチン、トロンボポエチン、及び甲状腺ホルモンが挙げられる。
【0179】
本発明において有用な例示的な酵素としては、ヘパラナーゼまたはマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）が挙げられる。
【0180】
本発明において有用な例示的なケモカイン／走化性因子としては、結合組織増殖因子（ＣＴＧＦ）、間質細胞由来因子－１（ＳＤＦ－１）（ＣＸＣＬ１２）、インターロイキン（ＩＬ１、２、６、８）、及びＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ１５４）が挙げられる。
【0181】
本発明において有用な例示的なニューロトロフィンとしては、神経成長因子（ＮＧＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、ニューロトロフィン－３（ＮＴ－３）、及びニューロトロフィン４／５（ＮＴ－４／５）が挙げられる。
【0182】
実施形態では、薬剤は、種々の分類の有用な薬剤を含む以下の非網羅的なリストから選択される：３－４－（１－ホルミルピペラジン－４－イル）－ベンジリデニル－２－インドリノン、アバタセプト、ＡＢＴ－８６９、アカラブルチニブ、アファチニブ、アフリベルセプト、アレクチニブ、アレファセプト、ＡＭＧ １０８、抗リンパ球免疫グロブリン（ウマ）、抗胸腺細胞免疫グロブリン（ウサギ）、アポマブ（Ａｐｏｍａｂ）、アスホターゼアルファ、アスネルセプト（Ａｓｕｎｅｒｃｅｐｔ）、ＡＶＥ９６３３、アキシチニブ、ベラタセプト、ベバシズマブジルコニウムＺｒ－８９、ＢＩＩＢ０１５、ビバツズマブ、ボスチニブ、ブリガチニブ、カボザンチニブ、カネルチニブ、カプマチニブ、セジラニブ、セリチニブ、ＣＲ００２、クレノラニブ、クリゾチニブ、ＣＴ－０１１、ダコミチニブ、ダサチニブ、デパツキシズマブ、ドビチニブ、エドラチド、エヌトレクチニブ、エルダフィチニブ、エルロチニブ、エタネルセプト、ファミチニブ、フェドラチニブ、フィラテグラスト、フルマチニブ、フォレチニブ、フォスタマチニブ、ゲフィチニブ、ゲルダナマイシン、ゲニステイン、ギルテリチニブ、グレサチニブ、ＧＭＡ－１６１、グレムバマブ、ＧＳ－５７４５、ヒトサイトメガロウイルス免疫グロブリン、ヒト免疫グロブリンＧ、ヒト水痘・帯状疱疹免疫グロブリン、イブリツモマブチウキセタン、イブルチニブ、イコチニブ、ＩＧＮ３１１、イマチニブ、インジウムＩｎ－１１１サツモマブペンデチド、ＩＰＨ ２１０１、ラベツズマブゴビテカン、ラパチニブ、ラロトレクチニブ、レカネマブ、レンバチニブ、レスタウルチニブ、ロルカフスプアルファ（Ｌｏｒｕｋａｆｕｓｐ ａｌｆａ）、ミドスタウリン、ミルベツキシマブソラブタンシン、ミタザリマブ（Ｍｉｔａｚａｌｉｍａｂ）、モテサニブ、ムロモナブ、ナプツモマブエスタフェナトクス、ＮＡＶ １８００、ネラチニブ、ニロチニブ、ニンテダニブ、オシメルチニブ、パクリチニブ、パゾパニブ、ＰＤ１７３９５５、ペキシダルチニブ、ピセタノール、ポナチニブ、ラディシコール、ラドチニブ、レゴラフェニブ、ＲＩ ６２４、ロバルピツズマブテシリン、ロズロリムパブ、ルキソリチニブ、サラカチニブ、サボリチニブ、ＳＢ－１５７８、セルペルカチニブ、セルメチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、タファシタマブ、タンズチニブ、ＴＢ－４０２、テクネチウムＴｃ－９９ｍアルシツモマブ、テセバチニブ、ＴＮＸ－９０１、トマラリマブ、トシツモマブ、トラスツズマブデルクステカン、ツカチニブ、バダスツキシマブタリリン、バラナフスプアルファ（Ｖａｌａｎａｆｕｓｐ ａｌｆａ）、バンデタニブ、バタラニブ、ベムラフェニブ、ＶＳ－４７１８、ＸｍＡｂ２５１３、ＸＴＬ－００１、及びゾルベツキシマブ。
【0183】
実施形態では、薬剤は、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）である。
【0184】
実施形態では、薬剤は、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）である。
【0185】
実施形態では、薬剤は、ＰＤＬ１阻害剤（例えば、ペムブロリズマブ）である。
【0186】
実施形態では、薬剤は、ＦＮ１阻害剤（例えば、オクリプラスミン）である。
【0187】
実施形態では、薬剤は、マルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）である。
【0188】
実施形態では、薬剤は、ＦＧＦＲ２アンタゴニスト（例えば、サリドマイド）である。
【0189】
実施形態では、薬剤は、トロンビン及びその類似体である。
【0190】
実施形態では、薬剤は、ＣＳＦ３Ｒアゴニスト（例えば、フィルグラスチム）である。
【0191】
実施形態では、薬剤は、ＰＳＭＢ５阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）である。
【0192】
実施形態では、薬剤は、フマギリンである。
【0193】
実施形態では、薬剤は、ＡＬＫ／ＲＯＳ１／ＮＴＲＫ阻害剤（例えば、クリゾチニブ）である。
【0194】
実施形態では、第１の薬剤は、哺乳動物細胞に対して有害であり、及び／または対象に対して毒性である。
【0195】
実施形態では、第１の薬剤は、対象の血流に直接投与された場合、分解を受けやすい。
【0196】
実施形態では、化合物は、蛍光部分をさらに含む。
【0197】
実施形態では、第１の薬剤は、ヒト細胞に対して有害であり、及び／または対象に対して毒性である。
【0198】
上記の薬剤のいずれも、少なくとも第２の化合物において使用することができる。少なくとも第２の化合物は、少なくとも第２の薬剤及び少なくとも第２のポリペプチドを含み、この少なくとも第２のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む。したがって、本明細書に開示される薬剤のいずれかは、第１の薬剤または少なくとも第２の薬剤であり得る。
【0199】
単離血小板
疾患または障害の治療に有用な薬剤は、多くの場合、ヒト細胞に有害である可能性があり、及び／または対象に対して毒性であり、特に対象に全身投与された場合にそうである。有害な薬剤を含む化合物を血小板に担持させることにより、対象における意図しない及び望ましくない細胞、組織、及び／または器官の損傷が回避される。さらに、特定の薬剤は、対象の血流に直接投与された場合、分解を受けやすい。分解性薬剤を含む化合物を血小板に担持させることにより、対象の血流に直接投与された場合に生じであろう薬剤の濃度の低減が回避される。したがって、担持血小板は、対象に投与されたときに用量の低減（例えば、有効用量未満）を回避する。総合すると、担持血小板は、望ましい用量で、かつより少ない悪影響で、標的部位に局在化された薬剤の濃縮をもたらす。
疾患または障害の治療に有用な薬剤は、多くの場合、ヒト細胞に有害である可能性があり、及び／または対象に対して毒性であり、特に対象に全身投与された場合にそうである。有害な薬剤を含む化合物を血小板に担持させることにより、対象における意図しない及び望ましくない細胞、組織、及び／または器官の損傷が回避される。さらに、特定の薬剤は、対象の血流に直接投与された場合、分解を受けやすい。分解性薬剤を含む化合物を血小板に担持させることにより、対象の血流に直接投与された場合に生じであろう薬剤の濃度の低減が回避される。したがって、担持血小板は、対象に投与されたときに用量の低減（例えば、有効用量未満）を回避する。総合すると、担持血小板は、望ましい用量で、かつより少ない悪影響で、標的部位に局在化された薬剤の濃縮をもたらす。
【0200】
血小板促進型の薬剤送達の技法は、他の標的送達系に比べて多くの利点を有する。ナノ粒子促進型送達とは異なり、対象に異物がもたらされない。同様に、リポソーム調製物は、細網内皮系（ＲＥＳ）による食作用に起因して有効期間が短く、安定性が低く、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期が短いが、本開示の血小板送達系は、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期を延長させ、元の化合物の安定性及び調製を変化させない。また、異常な血管系を標的とするＲＧＤペプチドなどのほとんどの合成ホーミング機構は、天然血小板の特異性を実現していない。最後に、本発明における自家血小板の使用は、他の者が有する感染性物質のリスクをなくす。これにより、手順の安全性が向上し、提供及び保管された血小板を解凍及び／または調製する必要なしに、血小板への担持速度（数秒間から数分間）が向上する。総合すると、本開示の薬剤の血小板促進型送達を、直ちにかつ容易に臨床現場へと転換することができる。
【0201】
本開示の別の態様は、本明細書に開示される化合物のいずれかの少なくとも１つのコピーを含む単離血小板である。
【0202】
実施形態では、血小板は、合成血小板、同種血小板、自家血小板、または修飾された異種血小板である。実施形態では、血小板は、自家血小板である。実施形態では、血小板は、同種血小板である。実施形態では、血小板は、多血小板血漿から得られる。
【0203】
実施形態では、血小板は、１～１０００コピーの化合物を含む。実施形態では、１～１０００コピーの化合物は、血小板のアルファ顆粒に担持される。
【0204】
実施形態では、化合物は、第１の薬剤及び第１のポリペプチドを含む。第１のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができるＧＡＧ結合ペプチドを含む。
【0205】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）及び／またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ＣＳに優先的に結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）に優先的に結合する。
【0206】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合する。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに優先的に結合しない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、ＨＳ、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合しないか、検出可能に結合しないか、実質的に結合しないか、または低い親和性で結合する。
【0207】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約２ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約３ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されない。
【0208】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約０．００１Ｎ～約０．０１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約０．１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。
【0209】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である。
【0210】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つの荷電アミノ酸を含む。
【0211】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つのプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0212】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％同一であるか、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約８０％同一であるか、または配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0213】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、または９位に荷電アミノ酸を含む。
【0214】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。例として、ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び４位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、及び７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び７位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び４位及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ならびにこれらの間の任意の組み合わせを含む。ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にアルギニンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にイソロイシンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位、７位、及び９位にアルギニンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位及び７位にアルギニン、ならびに９位にイソロイシンを含み得るか；ＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位にアルギニン、及び９位にイソロイシンを含み得るか；またはＧＡＧ結合ペプチドは、４位にアルギニン及び９位にプロリンを含み得る。１位、４位、７位、及び／または９位のプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンの任意の組み合わせが、本開示によって包含される。
【0215】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１０個のアミノ酸を含む。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸を含む。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸からなる。
【0216】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0217】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む。
【0218】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む。
【0219】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる。
【0220】
実施形態では、第１のポリペプチドは、ＧＡＧ結合ペプチドからなる。あるいは、第１のポリペプチドは、ＧＡＧ結合ペプチド以外のアミノ酸を含み、いくつかの実施形態では、ポリペプチド中の追加のアミノ酸は、ＧＡＧに対するＧＡＧ結合ペプチドの親和性を増加させない。
【0221】
実施形態では、第１のポリペプチドのＮ末端は、第１の薬剤に直接または間接的に連結されている。実施形態では、第１のポリペプチドのＣ末端は、第１の薬剤に直接または間接的に連結されている。実施形態では、第１の薬剤は、少なくとも１つのリンカーを介して第１のポリペプチドに間接的に連結されている。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、１つ以上の原子を含む。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、繰り返し単位のポリマーを含む。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、アミノ酸鎖を含む。
【0222】
実施形態では、第１の薬剤は、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子を含む。
【0223】
実施形態では、単離血小板は、少なくとも第２の化合物をさらに含み、この少なくとも第２の化合物は、少なくとも第２の薬剤及び少なくとも第２のポリペプチドを含み、この少なくとも第２のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む。
【0224】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）及び／またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に優先的に結合する。
【0225】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である。
【0226】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0227】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0228】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１０個のアミノ酸もしくは１１個のアミノ酸を含むか、またはそれからなる。
【0229】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0230】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む。
【0231】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む。
【0232】
実施形態では、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる。
【0233】
実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含み、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。実施形態では、ＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１のアミノ酸配列を含み、少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列を含む。
【0234】
実施形態では、少なくとも第２の薬剤は、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子を含む。
【0235】
実施形態では、第１の薬剤は、少なくとも第２の薬剤とは異なる。あるいは、第１の薬剤は、少なくとも第２の薬剤と同じである。
【0236】
実施形態では、少なくとも第２の薬剤は、少なくとも１つのリンカーを介して少なくとも第２のポリペプチドに間接的に連結されている。実施形態では、少なくとも第２の薬剤は、少なくとも第２のポリペプチドに直接連結されている。
【0237】
実施形態では、血小板は、１～１０００コピーの少なくとも第２の化合物を含む。
【0238】
実施形態では、化合物は、血小板中の第１のアルファ顆粒に担持され、少なくとも第２の化合物は、血小板中の少なくとも第２のアルファ顆粒に担持される。
【0239】
実施形態では、化合物及び少なくとも第２の化合物は、両方とも同じアルファ顆粒に担持される。
【0240】
医薬組成物
本開示の担持血小板は、少なくとも一度対象に投与されると血小板の安定性及び有効性を高める、医薬組成物に製剤化することができる。さらに、そのような医薬組成物は、対象への投与前に血小板の安定性を高める。
本開示の担持血小板は、少なくとも一度対象に投与されると血小板の安定性及び有効性を高める、医薬組成物に製剤化することができる。さらに、そのような医薬組成物は、対象への投与前に血小板の安定性を高める。
【0241】
本開示のさらに別の態様は、本明細書に開示される化合物のいずれかの少なくとも１つのコピーを含む単離血小板と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物である。
【0242】
一態様では、本開示は、本明細書に開示される第１の化合物のいずれかの少なくとも１つのコピーと、本明細書に開示される第２の化合物のいずれかの少なくとも１つのコピーとを含む単離血小板と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を提供する。
【0243】
別の態様では、本開示は、第１の単離血小板と、少なくとも第２の単離血小板と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を提供する。第１の単離血小板は、第１の薬剤と第１のポリペプチドとを含む第１の化合物を含み、この第１のポリペプチドは、当該血小板のアルファ顆粒中の第１のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる第１のＧＡＧ結合ペプチドを含む。少なくとも第２の単離血小板は、少なくとも第２の薬剤と少なくとも第２のポリペプチドとを含む少なくとも第２の化合物を含み、この少なくとも第２のポリペプチドは、当該血小板のアルファ顆粒中の少なくとも第２のＧＡＧと結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む。
【0244】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）及び／またはヘパラン硫酸（ＨＳ）に優先的に結合する。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、コンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）に優先的に結合する。
【0245】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合する。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、ヘパラン硫酸（ＨＳ）、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに優先的に結合しない。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、ＨＳ、セルグリシン、パールカン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａに結合しないか、検出可能に結合しないか、実質的に結合しないか、または低い親和性で結合する。
【0246】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約２ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されたままである。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約３ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＣＳ含有カラムに結合されない。
【0247】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約０．００１Ｎ～約０．０１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約０．１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも約１ＮのＮａＣｌに曝露された場合、ＨＳ含有カラム、セルグリシン含有カラム、パールカン含有カラム、デルマタン硫酸含有カラム、ケラタン硫酸含有カラム、及び／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ含有カラムに結合されない。
【0248】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、約８アミノ酸長～約１４アミノ酸長である。
【0249】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つの荷電アミノ酸を含む。
【0250】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１つのプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0251】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約７０％同一であるか、配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約８０％同一であるか、または配列番号１～配列番号１３のうちの１つと少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0252】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、または９位に荷電アミノ酸を含む。
【0253】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のいずれか１つに関して、１位、４位、７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含む。
【0254】
例として、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを含み；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び４位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、及び７位、及び／または９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び７位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び４位及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位及び９位にプロリン、アルギニン及び／またはイソロイシンを含み；ならびにこれらの間の任意の組み合わせを含む。第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にプロリンを含み得るか；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にアルギニンを含み得るか；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位、４位、７位、及び９位にイソロイシンを含み得るか；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位、７位、及び９位にアルギニンを含み得るか；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位及び７位にアルギニン、ならびに９位にイソロイシンを含み得るか；第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１位にプロリン、４位にアルギニン、及び９位にイソロイシンを含み得るか；または第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、４位にアルギニン及び９位にプロリンを含み得る。１位、４位、７位、及び／または９位のプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンの任意の組み合わせが、本開示によって包含される。
【0255】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、少なくとも１０個のアミノ酸を含む。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸を含む。実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、１１個のアミノ酸からなる。
【0256】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２と少なくとも約９０％同一であるアミノ酸配列を含む。
【0257】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列を含む。
【0258】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む。
【0259】
実施形態では、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１～配列番号１３のうちの１つのアミノ酸配列からなる。
【0260】
実施形態では、第１のポリペプチド及び／または少なくとも第２のポリペプチドは、それぞれ、第１のＧＡＧ結合ペプチド及び／または少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドからなる。
【0261】
実施形態では、第１のポリペプチド及び／または少なくとも第２のポリペプチドのＮ末端は、それぞれ、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤に直接または間接的に連結されている。実施形態では、第１のポリペプチド及び／または少なくとも第２のポリペプチドのＣ末端は、それぞれ、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤に直接または間接的に連結されている。実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、それぞれ、少なくとも１つのリンカーを介して第１のポリペプチド及び／または少なくとも第２のポリペプチドに間接的に連結されている。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、１つ以上の原子を含む。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、繰り返し単位のポリマーを含む。実施形態では、少なくとも１つのリンカーは、アミノ酸鎖を含む。実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、それぞれ、第１のポリペプチド及び／または少なくとも第２のポリペプチドに直接連結されている。
【0262】
実施形態では、第１の薬剤は、マレイミド反応、スクシンイミジルエステル反応、酵素反応、またはタンパク質の構造もしくは活性に影響を及ぼさない別のコンジュゲーション系を使用して、第１のポリペプチドに直接または間接的に連結されている。
【0263】
実施形態では、少なくとも第２の薬剤は、マレイミド反応、スクシンイミジルエステル反応、酵素反応、またはタンパク質の構造もしくは活性に影響を及ぼさない別のコンジュゲーション系を使用して、少なくとも第２のポリペプチドに直接または間接的に連結されている。
【0264】
実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質またはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストまたは阻害剤）、及び細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、または血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子からなる群から独立して選択される。実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、抗体を含む。実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、蛍光部分を含む。
【0265】
実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、哺乳動物細胞に対して有害であり、及び／または対象に対して毒性である。
【0266】
実施形態では、第１の薬剤及び／または少なくとも第２の薬剤は、対象の血流に直接投与された場合、分解を受けやすい。
【0267】
実施形態では、第１の化合物及び／または少なくとも第２の化合物は、蛍光部分をさらに含む。
【0268】
実施形態では、第１のポリペプチド及び少なくとも第２のポリペプチドは異なる。実施形態では、第１のポリペプチド及び少なくとも第２のポリペプチドは同じである。
【0269】
実施形態では、第１の薬剤及び少なくとも第２の薬剤は異なる。実施形態では、第１の薬剤及び少なくとも第２の薬剤は同じである。
【0270】
実施形態では、第１の単離血小板及び／または少なくとも第２の単離血小板は、合成血小板、同種血小板、自家血小板、及び修飾された異種血小板から独立して選択される。実施形態では、第１の単離血小板及び／または少なくとも第２の単離血小板は、自家血小板である。実施形態では、第１の単離血小板及び／または少なくとも第２の単離血小板は、同種血小板である。実施形態では、第１の単離血小板及び／または少なくとも第２の単離血小板は、多血小板血漿から得られる。
【0271】
実施形態では、第１の単離血小板は、１～１０００コピーの第１の化合物を含む。実施形態では、少なくとも第２の単離血小板は、１～１０００コピーの少なくとも第２の化合物を含む。実施形態では、１～１０００コピーの第１の化合物及び／または少なくとも第２の化合物は、血小板のアルファ顆粒に担持される。
【0272】
医薬組成物は、薬学的に許容される担体または溶媒を含む。そのような医薬組成物は、適切な投与のための形態を提供するように、好適な量の薬学的に許容される賦形剤を任意選択で含み得る。医薬賦形剤は、水、及びピーナッツ油、大豆油、鉱油、ゴマ油などの石油、動物、植物または合成由来のものを含む油、などの液体であり得る。医薬賦形剤は、例えば、生理食塩水、アラビアゴム、ゼラチン、デンプン糊、タルク、ケラチン、コロイダルシリカ、尿素などであり得る。加えて、助剤、安定剤、増粘剤、滑沢剤、及び着色剤を使用することができる。実施形態では、対象に投与されるとき、薬学的に許容される賦形剤は無菌である。本明細書に開示される任意の薬剤が静脈内投与される場合、水は有用な賦形剤である。生理食塩水溶液ならびにデキストロース及びグリセロールの水溶液もまた、特に注射溶液のために液体賦形剤として用いられ得る。好適な医薬賦形剤には、デンプン、グルコース（すなわち、デキストロース）、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなども含まれる。本明細書に開示される任意の薬剤は、所望により、少量の湿潤剤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含有することもできる。好適な医薬賦形剤の例は、参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １４４７－１６７６（Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ ｅｄｓ．，１９ｔｈ ｅｄ．１９９５）に記載されている。
【0273】
実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物は、生理食塩水緩衝液（ＮａＣｌ溶液、ＴＢＳ、ＰＢＳ、リンゲル液などを含むがこれらに限定されない）を含む。
【0274】
実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物は、血液とおよそ等張であり、約７．３～７．５のｐＨ（すなわち、血液のｐＨ）を有する、無菌注射に適した形態である。
【0275】
実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物は、日常的な手順に従って、本明細書に開示される投与様式に適合した医薬組成物として製剤化される。
【0276】
本開示の一態様は、疾患または障害を治療するための本明細書に開示される医薬組成物のいずれかの使用である。実施形態では、疾患または障害は、がんである。
【0277】
本開示の別の態様は、疾患または障害を治療するための薬物の製造における本明細書に開示される医薬組成物のいずれかの使用である。実施形態では、疾患または障害は、がんである。
【0278】
治療方法
既に開示されたように、薬剤を含む化合物が担持された血小板は、薬剤が血小板に担持されずに対象に投与された場合に生じる薬剤の濃度の低減（例えば、有効用量未満）を回避する。さらに、有害な（例えば、毒性の）薬剤を含む化合物が担持された血小板により、対象における意図しない及び望ましくない細胞、組織、及び／または器官の損傷が回避される。最後に、血小板は、損傷、炎症、及び／または血管新生の部位へ自然に向かう。総合すると、担持血小板は、治療有効量の１つ以上の薬剤を、より少ない悪影響で標的部位に確実に送達させるのに役立つ。
既に開示されたように、薬剤を含む化合物が担持された血小板は、薬剤が血小板に担持されずに対象に投与された場合に生じる薬剤の濃度の低減（例えば、有効用量未満）を回避する。さらに、有害な（例えば、毒性の）薬剤を含む化合物が担持された血小板により、対象における意図しない及び望ましくない細胞、組織、及び／または器官の損傷が回避される。最後に、血小板は、損傷、炎症、及び／または血管新生の部位へ自然に向かう。総合すると、担持血小板は、治療有効量の１つ以上の薬剤を、より少ない悪影響で標的部位に確実に送達させるのに役立つ。
【0279】
組織炎症または組織損傷を特徴とし、血小板が最初の応答するものであることを特徴とする疾患及び障害は全て、本開示の方法に従って治療することができる。これらの疾患及び障害には、新生物形成、血液悪性腫瘍、関節リウマチ、潰瘍性大腸炎、脳卒中、虚血性心疾患、アテローム性動脈硬化、火傷、及び移植片上皮化が含まれるが、これらに限定されない。
【0280】
本発明によって提供される利点は、血流に直接投与される薬剤と比較して、血小板に担持された場合の薬剤の（対象の血流における）半減期が延長されることである。本発明は、薬剤の自然な排出を遅延させ、薬剤を著しく低減させる。通常、薬剤は、腎濾過、酵素分解、細網内皮系（ＲＥＳ）による取り込み、ならびに非標的器官及び組織における蓄積によって循環から排出される。しかしながら、本発明では、薬剤は、血小板の寿命の間（通常は４～７日）、または標的部位に送達されるまで、血小板内で保護される。さらに、本発明は、非標的部位（例えば、組織及び器官）への薬剤の広範な分布を回避することにより、薬剤の全身的曝露を制限する。この利点により、（血小板に担持されていない薬剤の投与と比較して）より低い投与量の薬剤の使用が可能となる。そのような低用量の使用は、少なくとも、望ましくない副作用を減らし経済的コストを低減させるのに役立つ。
【0281】
また、本発明において有用な血小板は、複数の異なる薬剤を担持することができ、異なる薬剤は、空間的及び時間的に制御された方法でアルファ顆粒から放出され得る。したがって、本発明は、指向性がありかつ制御された治療薬を、損傷部位（例えば、慢性創傷を治療するため）、病理学的炎症部位（例えば、関節または肺への損傷を治療するため）、及び／または血管新生部位（例えば、がんを治療するため）に提供する。
【0282】
本開示の一態様は、疾患または障害の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法である。この方法は、治療有効量の本明細書に開示される医薬組成物を対象に投与するステップを含む。本明細書に開示される医薬組成物は、第１の単離血小板、少なくとも第２の単離血小板、及び１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む。第１の単離血小板は、第１の薬剤と第１のポリペプチドとを含む第１の化合物を含み、この第１のポリペプチドは、当該血小板のアルファ顆粒中の第１のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる第１のＧＡＧ結合ペプチドを含む。少なくとも第２の単離血小板は、少なくとも第２の薬剤と少なくとも第２のポリペプチドとを含む少なくとも第２の化合物を含み、この少なくとも第２のポリペプチドは、当該血小板のアルファ顆粒中の少なくとも第２のＧＡＧと結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む。
【0283】
別の態様では、本開示は、疾患または障害の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法を提供する。この方法は、治療有効量の医薬組成物を対象に投与するステップを含み、この医薬組成物は、本明細書に開示される化合物と１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む。本明細書に開示される化合物は、第１の薬剤及び第１のポリペプチドを含む。第１のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができるＧＡＧ結合ペプチドを含む。
【0284】
実施形態では、この方法は、ヘパラナーゼ、トロンビン及びその断片ペプチド、プロテアーゼ活性化受容体１（ＰＡＲ１）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プロテアーゼ活性化受容体４（ＰＡＲ４）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プラスミン及びその断片、メタロプロテイナーゼ、ペルオキシダーゼ、及び／またはホスホヒドロラーゼのうちの１つ以上を含む第２の医薬組成物を対象に投与するステップをさらに含む。
【0285】
実施形態では、第２の医薬組成物は、血小板からの化合物の放出を促進する。
【0286】
実施形態では、第２の医薬組成物は、医薬組成物が投与された後に投与される。実施形態では、医薬組成物は、第２の医薬組成物が投与される前に少なくとも２回投与される。
【0287】
実施形態では、疾患または障害は、癌である。癌は一般に、不適切に高い増殖速度及び／または不適切に低いアポトーシス速度に起因する疾患である。
【0288】
実施形態では、癌は、聴神経腫、急性赤白血病、急性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性リンパ性白血病、急性単球性白血病、急性骨髄芽球性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄単球性白血病、急性前骨髄球性白血病、腺癌、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、血管肉腫、星状細胞腫、基底細胞癌、Ｂ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫を含む）、胆道癌、膀胱癌、骨肉腫、脳及び中枢神経系の癌、乳癌、気管支原性癌、非ホジキンリンパ腫の巨大病変、消化器系癌、頭頸部癌、腹膜癌、呼吸器系癌、泌尿器系癌、子宮頸癌、軟骨肉腫、脊索腫、絨毛癌、慢性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄芽球性白血病、慢性骨髄性白血病、結腸癌及び直腸癌、結合組織癌、頭蓋咽頭腫、嚢胞腺癌、胎児性癌、子宮内膜癌、内皮肉腫（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ）、上衣腫、上皮癌、食道癌、ユーイング腫瘍、眼癌、線維肉腫、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）（胃腸癌を含む）、神経膠芽腫、神経膠腫、有毛細胞白血病、重鎖疾患、血管芽腫、肝細胞癌、肝癌、高悪性度の免疫芽球性非ホジキンリンパ腫、高悪性度のリンパ芽球性非ホジキンリンパ腫、高悪性度の小型非切れ込み核細胞性非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫、中等度のびまん性非ホジキンリンパ腫、中等度／濾胞性非ホジキンリンパ腫、上皮内新生物、腎臓癌または腎癌、喉頭癌、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、肝臓癌、肺癌（ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ）（例えば、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌）、肺癌（ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、リンパ管内皮肉腫（ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ）、リンパ管肉腫、リンパ腫（ホジキン病、非ホジキン病）、マントル細胞リンパ腫、髄様癌、髄芽腫、メイグス症候群、黒色腫、髄膜腫、中皮腫、骨髄腫、粘液肉腫、神経芽細胞腫、胆管癌（ｎｉｌｅ ｄｕｃｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、乏突起膠腫（ｏｌｉｇｏｄｅｎｒｏｇｌｉｏｍａ）、口腔癌（口唇、舌、口、及び咽頭）、骨原性肉腫、卵巣癌、膵癌、乳頭腺癌、乳頭癌、松果体腫、真性赤血球増加症、移植後リンパ増殖性疾患（ＰＴＬＤ）、及び母斑症に関連する異常血管増殖、浮腫（脳腫瘍に関連するものなど）、前立腺癌、直腸癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、肉腫、神経鞘腫、脂腺癌、精上皮腫、皮膚癌、小リンパ球性（ＳＬ）非ホジキンリンパ腫、扁平上皮癌、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、汗腺癌、滑膜腫、精巣癌、甲状腺癌、子宮癌または子宮内膜癌、外陰癌、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、ならびにウィルムス腫瘍から選択される。
【0289】
実施形態では、がんの疾患または障害は、増殖性障害、例えば、リンパ増殖性疾患である。
【0290】
実施形態では、疾患または障害は、損傷、例えば、火傷、脊髄損傷、整形外科的損傷、及び創傷である。
【0291】
実施形態では、疾患または障害は、血友病性関節出血である。
【0292】
実施形態では、疾患または障害は、炎症、例えば、関節炎症及び肺炎症を含む急性または慢性の炎症である。
【0293】
実施形態では、疾患または障害は、糖尿病性潰瘍である。
【0294】
実施形態では、疾患または障害は、埋植物、移植片、ステント、または補装具の副作用である。
【0295】
実施形態では、本開示の方法により治療される疾患または障害は、欠陥遺伝子に起因する。これらの実施形態では、薬剤は、欠損したまたは機能不全のタンパク質を代替する組換えポリペプチドであり得る。その代わりに、またはそれに加えて、組換えタンパク質は、本明細書に開示されるポリペプチドベースの薬剤、すなわち、抗体（もしくはその抗原結合断片）、化学療法剤、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、またはニューロトロフィンのうちのいずれか１つであり得る。
【0296】
遺伝子の欠陥に起因するいくつかの疾患は、ＧＡＧの合成に影響を与え得る。例として、第３染色体の長腕のコンドロイチン硫酸プロテオグリカン５（ＣＳＰＧ５）の欠陥は、脳の異常形態発生を引き起こす可能性があり、ＤＢＱＤ１遺伝子の欠陥は、「手の異常を伴うＤｅｓｂｕｑｕｏｉｓ異形成」とも呼ばれる小肢性小人症を引き起こし、遺伝子異常は、血小板におけるＧＡＧの合成に影響を与える可能性がある。
【0297】
本明細書に開示される医薬組成物の投与により、静脈内または動脈内注射または注入を介して、担持血小板が血流に送達されることになる。あるいは、本明細書に開示される医薬組成物は、活動性疾患の部位に直接再投与される。他の投与経路としては、例えば、皮下注射、腹腔内注射、筋肉内注射、または皮内注射が挙げられる。
【0298】
本明細書に開示される担持血小板を含む医薬組成物の投与量及び投与スケジュールは、治療される疾患、対象の全般的な健康状態、及び投与する医師の判断を含むがこれらに限定されない種々のパラメータに依存し得る。
【0299】
投与量は、状態の重症度、状態が治療されるのかそれとも予防されるのか、ならびに治療される対象の年齢、体重、及び健康状態を含むいくつかの要因に依存し得る。加えて、特定の対象に関する薬理ゲノミクス（治療薬の薬物動態、薬力学、または有効性プロファイルに対する遺伝子型の影響）情報は、使用される投与量に影響を与え得る。さらに、正確な個々の投与量は、投与される薬剤の特定の組み合わせ、投与時間、投与経路、製剤の性質、排出速度、治療中の特定の疾患、障害の重症度、及び障害の解剖学的位置を含む種々の要因に応じてある程度調整することができる。投与量のある程度の変動が予期され得る。
【0300】
一般に、血小板に担持された特定の量の薬剤を含む医薬組成物の投与量は、薬剤が血小板に担持されずに投与された場合の投与量の範囲内である。実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物中の薬剤の投与量は、血小板に担持されていない薬剤の投与量よりも少ないが、これは、本発明が対象における薬剤の標的特異性の増加及び分解に対する耐性の増加をもたらすためである。
【0301】
本明細書に開示される担持血小板を含むいずれの医薬組成物も、１日１回の用量で投与することができ、または１日総投与量は、１日２回、３回、または４回の分割用量で投与することができる。さらに、本明細書に開示される担持血小板を含む任意の医薬組成物は、投与レジメン全体を通して、断続的ではなく連続的に投与することができる。
【0302】
組換えポリペプチドの発現
本発明はさらに、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドを含むポリペプチドに（直接または間接的に）カップリングされた組換えポリペプチド剤のアミノ酸配列を含む融合タンパク質を提供する。
本発明はさらに、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドを含むポリペプチドに（直接または間接的に）カップリングされた組換えポリペプチド剤のアミノ酸配列を含む融合タンパク質を提供する。
【0303】
ＧＡＧ結合ペプチドを含む組換えポリペプチドは、別々のペプチドとして発現させて一緒にライゲーションすることができる。あるいは、ＧＡＧ結合ペプチドを含む組換えポリペプチドは、ＧＡＧ結合ペプチドに作動可能に連結されたポリペプチド剤を含む単一の融合タンパク質として発現される。
【0304】
本発明の組換えポリペプチドは、当業者に公知である実質的にあらゆる方法を使用して生成される。典型的には、組換えポリペプチドは、適切な発現媒体において、ポリペプチドをコードする核酸分子またはその断片の全部または一部を用いて適切な宿主細胞を形質転換することにより生成される。
【0305】
分子生物学の分野の当業者は、多種多様な発現系のいずれを使用しても組換えポリペプチドを発現させることができることを理解するであろう。使用される正確な宿主細胞は、本発明にとって重要ではない。本発明の組換えポリペプチドは、原核生物宿主（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）または真核生物宿主（例えば、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、昆虫細胞（例えば、Ｓｆ２１細胞）、または哺乳動物細胞（例えば、ＮＩＨ ３Ｔ３、ＨｅＬａ、もしくは好ましくはＣＯＳ細胞））中で生成され得る。そのような細胞は、広範な供給源から入手可能である（例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｒｏｃｋｌａｎｄ，Ｍｄ．、また例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９９７も参照されたい）。形質転換またはトランスフェクションの方法及び発現媒体の選択は、選択した宿主系に依存する。形質転換及びトランスフェクションの方法は、例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．に記載されており、発現媒体は、例えば、Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｖｅｃｔｏｒｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｐ．Ｈ．Ｐｏｕｗｅｌｓ ｅｔ ａｌ．，１９８５，Ｓｕｐｐ．１９８７）に提供されているものから選択することができる。
【0306】
本発明の組換えポリペプチドは、発現させた後、単離、濃縮、及び／または精製することができる。
【0307】
一例として、組換えポリペプチドは、アフィニティークロマトグラフィーを使用して単離することができる。一例では、組換えポリペプチドに対して産生された抗体をカラムに付着させ、これを組換えポリペプチドを単離するために使用することができる。ポリペプチドを保有する細胞のアフィニティークロマトグラフィー前の溶解及び分画は、標準的方法によって実施することができる（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．を参照されたい）。あるいは、組換えポリペプチドは、ニッケルカラムに結合するヘキサヒスチジンタグなどの配列タグを使用して単離される。
【0308】
単離したら、組換えタンパク質を所望により、例えば高速液体クロマトグラフィーによってさらに精製することができる（例えば、Ｆｉｓｈｅｒ，Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ Ｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｅｄｓ．，Ｗｏｒｋ ａｎｄ Ｂｕｒｄｏｎ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８０を参照されたい）。
【0309】
本発明のポリペプチド、特に短いペプチド断片はまた、化学合成によって（例えば、Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２ｎｄ ｅｄ．，１９８４ Ｔｈｅ Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌに記載されている方法によって）生成することができる。
【0310】
ポリペプチドの発現及び精製のこれらの一般的技法を使用して、有用なペプチド断片または類似体（本明細書に記載）を生成及び単離することもできる。
【0311】
併用療法
実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物または治療方法のいずれも、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドに連結されていない、及び／または血小板に担持されていない追加の薬剤をさらに含み得る。併用療法の一例では、医薬組成物は、担持血小板及び追加の薬剤を含む。併用療法の別の例では、対象は、担持血小板を含む第１の医薬組成物と、追加の薬剤を含む第２の医薬組成物とを投与される。併用療法はまた、担持血小板と第１の追加の薬剤とを含む第１の医薬組成物、及び第２の追加の薬剤を含む第２の医薬組成物を含み得る。ここで、第１の追加の薬剤及び第２の追加の薬剤は、同じ薬剤であっても、または異なる薬剤であってもよい。本明細書に開示される任意の薬剤が、追加の薬剤として機能し得る。
実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物または治療方法のいずれも、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドに連結されていない、及び／または血小板に担持されていない追加の薬剤をさらに含み得る。併用療法の一例では、医薬組成物は、担持血小板及び追加の薬剤を含む。併用療法の別の例では、対象は、担持血小板を含む第１の医薬組成物と、追加の薬剤を含む第２の医薬組成物とを投与される。併用療法はまた、担持血小板と第１の追加の薬剤とを含む第１の医薬組成物、及び第２の追加の薬剤を含む第２の医薬組成物を含み得る。ここで、第１の追加の薬剤及び第２の追加の薬剤は、同じ薬剤であっても、または異なる薬剤であってもよい。本明細書に開示される任意の薬剤が、追加の薬剤として機能し得る。
【0312】
複数の医薬組成物を含む併用療法の実施形態では、第１の医薬組成物は、第２の医薬組成物の前に投与され得るか、第１の医薬組成物は、第２の医薬組成物の後に投与され得るか、または第１の医薬組成物は、第２の医薬組成物と同時に投与され得る。
【0313】
さらに、併用療法は、本開示の医薬組成物を別の治療レジメンと組み合わせることができる。他の治療レジメンの例としては、放射線療法、ホルモン療法、外科手術、及び凍結外科手術が挙げられる。治療療法は、本明細書に記載の薬剤のいずれをも含み得る。
【0314】
実施形態では、併用療法のうち、化学療法剤が本開示の化合物と併せて使用される。例として、併用療法は、薬剤としてマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）を含む化合物及び薬剤としてフマギリンを含む化合物の一方または両方が担持された血小板と、化学療法剤とを含み得る。この組み合わせは、膵癌、肺癌、または結腸癌の治療に使用することができる。併用療法は、薬剤としてＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）を含む化合物及び活性剤としてマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）を含む化合物の一方または両方が担持された血小板と、化学療法剤とを含み得る。これは、肺癌の治療に使用することができる。併用療法は、薬剤としてＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）を含む化合物、薬剤としてマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）を含む化合物、及び薬剤としてＡＬＫ／ＲＯＳ１／ＮＴＲＫ阻害剤（例えば、クリゾチニブ）を含む化合物のうちの１つもしくは両方、または３つ全てが担持された血小板と、化学療法剤とを含み得る。これは、非小細胞肺癌の治療に使用することができる。
【0315】
追加の実施形態では、併用療法は、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）が担持された血小板及び薬物レムデシビルを含む。これは、ＣＯＶＩＤに関連するであろう急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療に使用することができる。
【0316】
併用療法の実施形態では、医薬組成物は、別の治療レジメンの前に投与され得るか、医薬組成物は、別の治療レジメンの後に投与され得るか、または医薬組成物は、別の治療レジメンと同時に投与され得る。
【0317】
製造方法
本開示の別の態様は、担持血小板を製造するための方法である。この方法は、血小板を得るステップと、血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで本明細書に開示される化合物のいずれかと接触させるステップと、血小板と化合物との間の接触を、化合物が血小板のアルファ顆粒により内在化されるまで進行させて、これにより担持血小板を生成するステップとを含む。
本開示の別の態様は、担持血小板を製造するための方法である。この方法は、血小板を得るステップと、血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで本明細書に開示される化合物のいずれかと接触させるステップと、血小板と化合物との間の接触を、化合物が血小板のアルファ顆粒により内在化されるまで進行させて、これにより担持血小板を生成するステップとを含む。
【0318】
薬剤がグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドに直接もしくは間接的に連結されるか、またはＧＡＧ結合ペプチドと治療用ポリペプチドとを含む組換え組成物が合成されて、本開示の化合物が形成される。この化合物は、自家多血小板血漿、または血液バンクからの同種多血小板血漿のいずれかとともに、３７℃で少なくとも約１５分間インキュベートされる。血小板の半減期が４～７日であるため、化合物が担持された血小板は、例えば、週に１回患者に注入される。薬剤が著しい全身毒性を有している場合、適切な緩衝液を使用して血小板を洗浄し、血小板に担持されていない薬剤の注入を防止する。
【0319】
実施形態では、方法は、血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで少なくとも第２の化合物と接触させるステップと（ここで、この少なくとも第２の化合物は、少なくとも第２の薬剤及び少なくとも第２のポリペプチドを含み、この少なくとも第２のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる少なくとも第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む）、血小板と少なくとも第２の化合物との間の接触を、少なくとも第２の化合物が血小板のアルファ顆粒により内在化されるまで進行させるステップとをさらに含む。
【0320】
実施形態では、血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで化合物と接触させるステップと血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで少なくとも第２の化合物と接触させるステップは、逐次的である。実施形態では、血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで化合物と接触させるステップと血小板をｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで少なくとも第２の化合物と接触させるステップは、同時である。
【0321】
キット
本開示の一態様は、疾患または障害を治療するためのキットである。キットには、本明細書に開示される単離血小板のいずれか及び使用説明書が含まれる。
本開示の一態様は、疾患または障害を治療するためのキットである。キットには、本明細書に開示される単離血小板のいずれか及び使用説明書が含まれる。
【0322】
本開示の別の態様は、疾患または障害を治療するためのキットである。キットには、本明細書に開示される医薬組成物のいずれか及び使用説明書が含まれる。
【0323】
実施形態では、キットは、ヘパラナーゼ、トロンビン及びその断片ペプチド、プロテアーゼ活性化受容体１（ＰＡＲ１）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プロテアーゼ活性化受容体４（ＰＡＲ４）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プラスミン及びその断片、メタロプロテイナーゼ、ペルオキシダーゼ、及び／またはホスホヒドロラーゼのうちの１つ以上を含む少なくとも第２の医薬組成物をさらに含む。
【0324】
本開示のさらに別の態様は、担持血小板を製造するためのキットである。キットには、本明細書に開示される化合物のいずれか及び使用説明書が含まれる。
【0325】
本発明は、損傷、炎症、または腫瘍血管新生の部位を伴う疾患または障害の治療または予防のためのキットを提供する。一実施形態では、キットには、単位剤形の薬剤が担持された有効量の血小板を含む治療的または予防的組成物が含まれる。いくつかの実施形態では、キットは、治療的または予防的組成物を含有する滅菌容器を含む。そのような容器は、箱、アンプル、ボトル、バイアル、チューブ、バッグ、パウチ、ブリスターパック、または当該技術分野で公知の他の適切な容器形態であり得る。そのような容器は、プラスチック、ガラス、ラミネート加工紙、金属箔、または薬物を保持するのに適した他の材料で作製され得る。
【0326】
所望により、本開示の単離血小板を含む医薬組成物は、疾患または障害を有するかまたは発症するリスクのある対象に医薬組成物を投与するための説明書とともに提供される。説明書は、疾患の治療または予防のための、または単離血小板を必要とする組織へ送達させるための医薬組成物の使用に関する情報を含み得る。他の実施形態では、説明書は、以下のうちの少なくとも１つを含む：薬剤の説明、疾患もしくはその症状の治療もしくは予防のための投与スケジュール及び投与、注意事項、警告、適応症、禁忌、過量服用に関する情報、副作用、動物薬理学、臨床試験、及び／または参照文献。説明書は、容器に直接印刷されてもよく（存在する場合）、容器に貼付されたラベルとしてであってもよく、または容器内もしくは容器に付属する別個のシート、パンフレット、カード、もしくはフォルダーとしてであってもよい。
【0327】
本明細書に開示される任意の態様または実施形態は、本明細書に開示される任意の他の態様または実施形態と組み合わせることができる。
【0328】
等価物
本発明を、その特定の実施形態に関連して説明してきたが、さらなる修正ができ、本出願は、一般に、本発明の原理に従って、本発明の任意の変形、使用、または適応を網羅することを意図するものであり、本発明が属する技術分野において公知の範囲内であるかまたは慣行の範囲内であるような本開示からの逸脱、ならびに前述の本質的な特徴に適用され得るような、及び添付の特許請求の範囲に従うような本開示からの逸脱を含むことを理解されたい。
本発明を、その特定の実施形態に関連して説明してきたが、さらなる修正ができ、本出願は、一般に、本発明の原理に従って、本発明の任意の変形、使用、または適応を網羅することを意図するものであり、本発明が属する技術分野において公知の範囲内であるかまたは慣行の範囲内であるような本開示からの逸脱、ならびに前述の本質的な特徴に適用され得るような、及び添付の特許請求の範囲に従うような本開示からの逸脱を含むことを理解されたい。
【0329】
当業者であれば、単なる日常的な実験を使用して、本明細書に具体的に記載される特定の実施形態の多数の等価物を認識するか、または確認することができるであろう。このような等価物は、以下の特許請求の範囲内に包含されることが意図される。
【0330】
定義
本明細書で使用される専門用語は、特定の事例を説明することのみを目的としており、限定することを意図したものではない。
本明細書で使用される専門用語は、特定の事例を説明することのみを目的としており、限定することを意図したものではない。
【0331】
本明細書で使用される場合、別途示さない限り、「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」という用語には、文脈上別途明確に示されない限り、単数形に加えて複数形も含まれることが意図される。
【0332】
本開示及び／または特許請求の範囲のいずれかで使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「有する（ｈａｓ）」、「伴う」という用語、またはこれらの変形は、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語と同様の形で包括的であることが意図される。
【0333】
「約」または「およそ」という用語は、当業者により決定される特定の値についての許容可能な誤差範囲内であることを意味し、これは、値を測定または決定する方法、例えば、測定システムの限界に部分的に依存する。例えば、「約」は、記載された値より１０％多いかまたはそれより１０％少ないことを意味し得る。別の例では、「約」は、所与の値の慣例に従って、１以内または１を超える標準偏差を意味し得る。別途記載のない限り、本出願及び特許請求の範囲に特定の値が記載される場合、「約」という用語は、特定の値の許容可能な誤差範囲を意味するとみなされるべきである。
【0334】
「実質的に」という用語は、概して著しい程度であることを意味するか、または本質的に、を意味する。換言すれば、この用語は、所望の特質に対してほぼ正確であるか、または正確な特質とわずかに異なることを実質的に意味し得る。「実質的に」は、所望の特質と区別不能である場合がある。「実質的に」は、所望の特質と区別できる場合があるが、その違いは重要ではないかまたは無視できるものである。
【0335】
「少なくとも第２の」という用語は、第２の、第３の、第４の、第５の、第６の、第７の、第８の、第９の、第１０の、第２０の、第３０の、第１４の、第５０の、第６０の、第７０の、第８０の、第９０の、第１００の、またはそれ以上、及びそれらの間の任意の反復を意味する。「１つ以上」という用語には、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、またはそれ以上、及びそれらの間の任意の数が含まれる。
【0336】
「カーゴ」という用語は、血小板、例えば血小板のアルファ顆粒に担持させることができる化合物または薬剤を意味する。このような担持は、化合物のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドを介して生じる。いくつかの実施形態では、「薬剤」及び「カーゴ」という用語は同義語であり得る。
【0337】
参照による組み込み
本明細書で参照される全ての特許及び刊行物は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書で参照される全ての特許及び刊行物は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0338】
本明細書で論じられる刊行物は、本出願の出願日前のそれらの開示に対してのみ提供される。本明細書におけるいかなる内容も、本発明が先行発明によりそのような刊行物に先行する資格がないことを認めるものと解釈されるべきではない。
【0339】
本明細書で使用される場合、全ての表題は単に組織化のためのものであり、いかなる形でも本開示を制限することを意図するものではない。いかなる個々のセクションの内容も、全てのセクションに等しく適用可能であり得る。
【実施例】
【0340】
実施例１：グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドは、付着したカーゴを血小板のアルファ顆粒中に捕捉させる
本実施例では、例示的なグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドが血小板のアルファ顆粒へのカーゴの担持を導く能力を判定した。
本実施例では、例示的なグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドが血小板のアルファ顆粒へのカーゴの担持を導く能力を判定した。
【0341】
図１Ａ及び図１Ｂ中でＰＡＬ１及びＰＡＬ２として識別したＡｌｅｘａ６４７標識ＧＡＧ結合ペプチド、ならびにＡｌｅｘａ６４７標識対照ペプチド（陰性対照として機能する電荷を持たないリガンド（ＣＦＬ））を、コンドロイチン硫酸などのグリコサミノグリカンに対する結合親和性及び血小板に進入する能力について試験した。ＰＡＬ１は配列番号１のアミノ酸配列を有し、ＰＡＬ２は配列番号２のアミノ酸配列を有し、ＣＦＬは配列番号１４のアミノ酸配列を有していた。
【0342】
Ａｌｅｘａ６４７標識ペプチド（または陰性対照としてのＡｌｅｘａ６４７単独）の用量反応曲線を図１Ａに示す。Ａｌｅｘａ６４７標識ペプチドまたはＡｌｅｘａ６４７単独を、単離血小板と３７℃で１時間共インキュベートして血小板へ担持させた。血小板への担持能力をそれぞれ、インキュベーション後の上清中の蛍光の減少により示した。対照については、インキュベーション期間なしで同一の実験を実施した（図では「完全」と表記）。次に、共インキュベーション後の血小板を８００ｇで１０分間遠心分離して、血小板を上清から分離した（図では「担持済み」と表記）。
【0343】
図１Ａに示すように、ＰＡＬ１及びＰＡＬ２の吸光度が、完全の測定値と担持済みの測定値との間で減少した。上清からの吸光度のこの低減は、これらのペプチドが上清から捕捉され、血小板に担持されたことを示す。対照的に、Ａｌｅｘａ６４７で標識したＣＦＬ条件の吸光度は、血小板との共インキュベーション後に変化しなかった。したがって、ＣＦＬペプチドは上清に残留し、血小板に担持されなかった。
【0344】
図１Ｂは、各ペプチド実験に対して正規化した図１Ａのデータ（すなわち、完全の条件に対する担持済みの条件の正規化）を表す。図１Ｂは、例示的なＧＡＧ結合ペプチドであるＰＡＬ１及びＰＡＬ２が、付着したカーゴの血小板への担持を促進するのに対し、電荷を持たないリガンドに付着したカーゴは、カーゴの血小板への担持を導くことができないことを示す。
【0345】
Ａｌｅｘａ６４７標識ＧＡＧ結合ペプチドが血小板のアルファ顆粒に担持されたことを確認するために、共焦点顕微鏡を使用した。図１Ａ及び図１Ｂの実験で遠心分離した血小板を、２％パラホルムアルデヒドで固定し、ガラスカバースリップに載置した。透過処理後、血小板のアルファ顆粒のマーカーであるＰＦ４に対して免疫蛍光染色を実施した。血小板をＡｌｅｘａ５６８－二次抗体で染色した。６０倍のオイル対物レンズを備えたＮｉｋｏｎ－Ａ１レーザー走査型顕微鏡により、画像を収集した。
【0346】
図２Ａは、ＰＦ４染色を赤（左列）で示し、Ａｌｅｘａ６４７シグナル（遊離のＡｌｅｘａ６４７、Ａｌｅｘａ６４７標識ＧＡＧ結合ペプチド、またはＡｌｅｘａ６４７標識ＣＦＬからのもの、中央列）を紫で示している代表的な画像である。画像は、表示用に輝度及びコントラストのみを調整した。各実験につきｎ＞５の画像を取得し、ＰＦ４の強度に基づいて関心領域（ＲＯＩ）を選択した。
【0347】
統合した画像（右列）は、Ａｌｅｘａ６４７がＧＡＧ結合ペプチドのカーゴである場合にのみ、アルファ顆粒マーカーＰＦ４とＡｌｅｘａ６４７シグナルとの共局在を示す。共局在化は、遊離のＡｌｅｘａ６４７については、またはＡｌｅｘａ６４７がＣＦＬのカーゴであった場合には観察されなかった。
【0348】
各ＲＯＩのＡｌｅｘａ６４７強度を、ＩｍａｇｅＪを使用して測定し、Ｐｒｉｓｍ８を使用して箱ひげ図にプロットした。図２Ｂは、例示的なＧＡＧ結合ペプチドであるＰＡＬ１及びＰＡＬ２が、血小板のアルファ顆粒への付着したカーゴの担持を促進するのに対し、電荷を持たないリガンドに付着したカーゴは、血小板へ担持されず、言うまでもなく血小板のアルファ顆粒には担持されないことを示す。
【0349】
これらのデータは、本開示のＧＡＧ結合ペプチドが、血小板のアルファ顆粒へのあらゆる付着したカーゴの担持を促進することを実証する。
【0350】
実施例２：グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドは、グリコサミノグリカンと高い親和性で結合する
本実施例では、例示的なグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドの種々のグリコサミノグリカンへの結合親和性を判定した。
本実施例では、例示的なグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドの種々のグリコサミノグリカンへの結合親和性を判定した。
【0351】
図３Ａは、本実施例で実施した等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）実験を示す模式図である。ここでは、コンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳＡ）を使用して、グリコサミノグリカンに対する例示的なＧＡＧ結合ペプチドの親和性を試験した。３ｍＭ ＣＳＡをシリンジに充填し、ＧＡＧ結合ペプチドまたは電荷を持たないリガンド（ＣＦＬ）（陰性対照として機能した）の０．２５ｍＭ溶液を保持する試料セルにＣＳＡを滴定した。温度を２２℃に設定し、緩衝液は５ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．３５）及び１％ＤＭＳＯであった。ＣＳＡの注入を２６回行い、初回の体積は０．１μｌであり、後続の２５回の体積はそれぞれ１．５μｌであった。これらの実験では、例示的なＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列をそれぞれ有するＰＡＬ１及びＰＡＬ２であり、ＣＦＬは、配列番号１４のアミノ酸配列を有していた。
【0352】
【0353】
図３Ｂ及び図３Ｃの実験中に得られたデータを使用して、ＣＳＡとＧＡＧ結合ペプチドとの相互作用の解離定数を決定した。逐次結合モデルを使用した滴定カーブフィッティングによりこれらを決定した。これらのデータを図３Ｅ（ＰＡＬ１に関して）及び図３Ｆ（ＰＡＬ２に関して）に示す。これらのデータは、２つの例示的なＧＡＧ結合ペプチドがグリコサミノグリカンであるコンドロイチン硫酸Ａに対して高い親和性を有していることを示す。
【0354】
さらに、ヘパラン硫酸（ＨＳ）に対する２つの例示的なＧＡＧ結合ペプチド及びＣＦＬの結合親和性を、アフィニティークロマトグラフィーを使用して判定した。図４に示すように、ＣＦＬはＨＳに結合しなかったが、例示的なＧＡＧ結合ペプチドは両方ともＨＳと結合し、高い親和性であった。興味深いことに、ＰＡＬ２ペプチドはＨＳに対してＰＡＬ１よりもより高い親和性を示した。
【0355】
これらのデータは、本開示のＧＡＧ結合ペプチドが、血小板のアルファ顆粒に存在するグリコサミノグリカンに対して高い親和性を有することを実証する。
【0356】
実施例３：グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドと血小板のアルファ顆粒に担持された薬剤とを含む化合物
本実施例では、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドと薬剤とを含む例示的な化合物が血小板のアルファ顆粒に担持される能力を判定した。
本実施例では、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドと薬剤とを含む例示的な化合物が血小板のアルファ顆粒に担持される能力を判定した。
【0357】
本開示の２つの例示的な化合物及び２つの対照化合物を構築した。例示的な化合物には、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドに間接的に（９アミノ酸リンカーを介して）連結させた薬剤（例えば、ｍＮｅｏｎＧｒｅｅｎ）を含めた。これらの実験では、例示的なＧＡＧ結合ペプチドは、配列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列をそれぞれ有するＰＡＬ１及びＰＡＬ２であった。陰性対照化合物には、配列番号１４のアミノ酸配列を有し、ｍＮｅｏｎＧｒｅｅｎに間接的に（９アミノ酸リンカーを介して）連結させた、電荷を持たないリガンド（ＣＦＬ）を含めた。陽性対照化合物には、ｍＮｅｏｎＧｒｅｅｎに間接的に（９アミノ酸リンカーを介して）連結させたＰＦ４（天然血小板因子）を含めた。使用前に、精製目的のＨｉｓタグ、及びＨｉｓタグの除去を容易にするＴＥＶプロテアーゼ切断部位も化合物に含めた。化合物を、ｍＮｅｏｎ－Ｌ９－ＣＦＬはｍＣＦＬ、ｍＮｅｏｎ－Ｌ９－ＰＡＬ１はｍＰＡＬ１、ｍＮｅｏｎ－Ｌ９－ＰＡＬ２はｍＰＡＬ２、ＰＦ４－Ｌ９－ｍＮｅｏｎはＰＦ４ｍとして識別した。
【0358】
血小板を、４つの化合物のうちの１つと３７℃で１時間共インキュベートした。インキュベーション期間後、血小板を８００ｇで１０分間遠心分離した。次に、「担持済み」上清の（５０５ｎｍでの）蛍光吸光度を測定し、「完全」担持対照（血小板を化合物と混合し、次いでインキュベーション期間なしで直ちに遠心分離した各条件の上清）と比較した。データをさらに正規化し、実験の各群の担持率を図５に示すようにプロットした。
【0359】
図５は、２つの例示的な化合物が、陰性対照よりも高い血小板への担持能力、及び陽性対照ＰＦ４よりもわずかに高い担持能力を有していたことを示す。
【0360】
ＧＡＧ結合ペプチドを含む化合物が血小板のアルファ顆粒に担持されたことを確認するために、共焦点顕微鏡を使用した。図５の実験で遠心分離した血小板を、２％パラホルムアルデヒドで固定し、ガラスカバースリップに載置した。透過処理後、血小板のアルファ顆粒のマーカーであるＰＦ４に対して免疫蛍光染色を実施した。血小板をＡｌｅｘａ５６８－二次抗体で染色した。６０倍のオイル対物レンズを備えたＮｉｋｏｎ－Ａ１レーザー走査型顕微鏡により、画像を収集した。
【0361】
図６Ａは、ＰＦ４染色を赤で示し（左列）、ｍＮｅｏｎシグナルを緑で標識した（中央列）代表的な画像である。画像は、表示用に輝度及びコントラストのみを調整した。各実験につきｎ＞５の画像を取得し、ＰＦ４の強度に基づいて関心領域（ＲＯＩ）を選択した。
【0362】
統合した画像（右列）は、ＧＡＧ結合ペプチドを含む２つの例示的な化合物のアルファ顆粒マーカーＰＦ４とｍＮｅｏｎシグナルとの共局在を示す。ＣＦＬを含む化合物では共局在は観察されなかった。
【0363】
各ＲＯＩのｍＮｅｏｎ強度を、ＩｍａｇｅＪを使用して測定し、Ｐｒｉｓｍ８を使用して箱ひげ図にプロットした。図６Ｂは、ＧＡＧ結合ペプチドを含む例示的な化合物が血小板のアルファ顆粒へ担持されるのに対し、電荷を持たないリガンドを含む化合物は、血小板へ担持されず、言うまでもなく血小板のアルファ顆粒には担持されないことを示す。
【0364】
これらのデータは、ＧＡＧ結合ペプチドと薬剤とを含む本開示の化合物が、血小板のアルファ顆粒に担持されることを実証する。
【0365】
実施例４：グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドと薬剤とを含む化合物は、グリコサミノグリカンと高い親和性で結合する
本実施例では、本開示の例示的な化合物（グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチド及び薬剤を含む）の種々のグリコサミノグリカンへの結合親和性を判定した。
本実施例では、本開示の例示的な化合物（グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチド及び薬剤を含む）の種々のグリコサミノグリカンへの結合親和性を判定した。
【0366】
図３Ａに示す通りの、また実施例２に記載の通りの等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）実験を、本実施例において実施した（但し、本開示の例示的な化合物及び陰性対照化合物を用いた）。実施例２の実験と同様に、ここでは、滴定緩衝液は５ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．３５）であり、温度は２２℃に設定した。但し、実施例２の実験とは異なり、緩衝液はＤＭＳＯを欠いていた。
【0367】
図７Ａ～図７Ｃは、ＰＡＬ１を含む例示的な化合物（図７Ａ）、ＰＡＬ２を含む例示的な化合物（図７Ｂ）、及びＣＦＬを含む陰性対照化合物（図７Ｃ）を保持するセルに滴定したＣＳＡのＩＴＣ解離動態のグラフ表示を示す。これらの化合物には、その薬剤としてｍＮｅｏｎＧｒｅｅｎを含めた。
【0368】
図７Ｂ～図７Ｃの実験中に得られたデータを使用して、ＣＳＡと化合物との相互作用の解離定数を決定した。連続結合モデルを使用した滴定カーブフィッティングによりこれらを決定した。これらのデータを図７Ｃ（ＰＡＬ１を含む例示的な化合物に関して）、図７Ｄ（ＰＡＬ２を含む例示的な化合物に関して）、及び図７Ｅ（ＣＦＬを含む陰性対照化合物に関して）に示す。これらのデータは、２つの例示的なＧＡＧ結合ペプチドがグリコサミノグリカンであるコンドロイチン硫酸Ａに対して高い親和性を有していることを示す。
【0369】
さらに、ヘパラン硫酸（ＨＳ）に対する、化合物を含有する２つの例示的なＧＡＧ結合ペプチド及びＣＦＬの結合親和性を、アフィニティークロマトグラフィーを使用して判定した。図８に示すように、いずれかのＧＡＧ結合ペプチドを含む化合物は、ＨＳと高い親和性で結合する。とりわけ、ＨＳに対する２つの例示的なＧＡＧ結合ペプチドの相対結合親和性は、ＰＡＬ２がＰＡＬ１よりもＨＳと密接に結合するため、ｍＰＡＬ２がｍＰＡＬ１よりもＨＳと密接に結合するという点で先の実験で観察されたものと類似していた。対照ペプチドを含む化合物（ｍＣＦＬ）は、ある程度の残存結合能を有しており、ＨＳカラムに保持され、比較的低濃度の塩で溶出したが、これはおそらく化合物の薬剤（例えば、ｍＮｅｏｎＧｒｅｅｎ）の荷電特性に起因する。
【0370】
これらのデータは、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドと薬剤とを含む本開示の例示的な化合物が、血小板のアルファ顆粒に存在するグリコサミノグリカンに対して高い親和性を有することを実証する。
【0371】
実施例５：グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドのグリコサミノグリカンと結合する能力に重要な配列特異性の同定
本実施例では、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドを含む追加の例示的な化合物の種々のグリコサミノグリカンへの結合親和性を判定した。より具体的には、（配列番号１の）ＧＡＧ結合ペプチドのアラニンスキャニング変異誘発により、１つのアミノ酸が異なる追加の例示的なＧＡＧ結合ペプチドを生成し、次いで、これらを実施例３に記載の通りに薬剤（例えば、ｍＮｅｏｎＧｒｅｅｎ）に間接的に連結させた。
本実施例では、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドを含む追加の例示的な化合物の種々のグリコサミノグリカンへの結合親和性を判定した。より具体的には、（配列番号１の）ＧＡＧ結合ペプチドのアラニンスキャニング変異誘発により、１つのアミノ酸が異なる追加の例示的なＧＡＧ結合ペプチドを生成し、次いで、これらを実施例３に記載の通りに薬剤（例えば、ｍＮｅｏｎＧｒｅｅｎ）に間接的に連結させた。
【0372】
図３Ａに示す通りの、また実施例４に記載の通りの等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）実験を、本実施例において実施した（但し、本開示の追加の例示的な化合物を用いた）。
【0373】
図９Ａでは、化合物をＰＡＬ１Ａ～ＰＡＬ１１Ａとして識別する。これらの例示的な化合物は、配列番号３～配列番号１３のアミノ酸配列を有するＧＡＧ結合ペプチドを有する。特に、ＰＡＬ１ＡのＧＡＧ結合ペプチドは、１位にアラニンを有することにより配列番号１とは異なっており、ＰＡＬ２ＡのＧＡＧ結合ペプチドは、２位にアラニンを有することにより配列番号１とは異なっており、ＰＡＬ３ＡのＧＡＧ結合ペプチドは、３位にアラニンを有することにより配列番号１とは異なっていた。
【0374】
図９Ａは、ＰＡＬ１Ａ～ＰＡＬ１１Ａとして識別した例示的な化合物のうちの１つを保持するセルに滴定したＣＳＡのＩＴＣ解離動態のグラフ表示を示す。記載した各化合物を含有する試料セルへのＣＳＡ滴定によって生成された各ＩＴＣ曲線に見られるように、電荷及び配列の両方がコンドロイチン硫酸Ａとの相互作用に重要である。
【0375】
図９Ａの実験中に得られたデータを使用して、ＣＳＡと追加の例示的な化合物との相互作用の解離定数を決定した。逐次結合モデルを使用した滴定カーブフィッティングによりこれらを決定した。これらのデータを図９Ｂ～図９Ｌ（それぞれＰＡＬ１Ａ～ＰＡＬ１１Ａに関する）に示す。これらのデータは、追加の例示的な化合物がグリコサミノグリカンであるコンドロイチン硫酸Ａに対して様々な親和性を有していることを示す。
【0376】
図９Ｍは、例示的な化合物及び対照化合物の平均解離定数を示すグラフである。このグラフは、化合物間のＣＳＡへの結合親和性の様々な程度を示している。グラフ中で、「１Ａ」と識別したデータは「ＰＡＬ１Ａ」化合物を表し、「２Ａ」と識別したデータは「ＰＡＬ２Ａ」化合物を表しており、以下も同様である。
【0377】
とりわけ、１位、４位、７位、または９位にアラニンを有するこれらの例示的な化合物は、親和性が最も低く、最も劣っていた。このことにより、ＧＡＧ結合ペプチドがそれらの位置にプロリン、アルギニン、及び／またはイソロイシンを有する場合に、結合能の改善が示される。
【0378】
位置にあるプロリン、アルギニン、イソロイシンなどの極めて重要なアミノ酸は、結合の親和性に影響を与える。興味深いことに、これらのアミノ酸は、予想どおり正に荷電したアルギニンを含み、また特殊なコンフォメーションを維持することにより寄与し得る非荷電のプロリン及びイソロイシンも含む。
【0379】
これらのデータは、荷電アミノ酸の位置が異なるＧＡＧ結合ペプチドを有する追加の化合物が、グリコサミノグリカンに対して様々な親和性を有することを実証する。また、極めて重要な残基（配列番号１に関しては１位、４位、７位、及び９位）及び特定のアミノ酸（プロリン、アルギニン、及びイソロイシンなど）は、例えば、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカンへのＧＡＧ結合ペプチドの結合親和性に影響を及ぼす。
【0380】
実施例６：本開示の化合物を形成するときにグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドを薬剤にコンジュゲートさせるための例示的な方法
本実施例では、薬剤をグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドにコンジュゲートさせて、本開示の例示的な化合物を形成する。
本実施例では、薬剤をグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ペプチドにコンジュゲートさせて、本開示の例示的な化合物を形成する。
【0381】
図１０Ａに示すように、マレイミド反応を使用して薬剤をＧＡＧ結合ペプチドにコンジュゲートさせ、それにより本開示の化合物を形成する。当該技術分野で公知の他のコンジュゲーション反応、例えば、スクシンイミジルエステル反応または酵素反応を使用することができる。図１０Ａでは、ＧＡＧ結合ペプチド（図１０Ａには「ＧＡＧ－ｐｅｐ」として示す）は、蛍光部分を含む。本開示のある特定の実施形態では、蛍光部分は化合物に含まれない。
【0382】
（上記の実施例に記載されるような）本開示の化合物のそのカーゴを血小板に担持させる能力をさらに実証するために、ここでは、ＧＡＧ結合ペプチドと治療用抗体（ＶＥＧＦＲ２阻害剤であるＤＣ１０１）を含む例示的な化合物を生成した。同様の方法を使用して、抗体以外の薬剤を使用して本開示の化合物を生成することができる。例として、薬剤は、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子であり得る。
【0383】
血小板のアルファ顆粒に担持される蛍光部分をさらに含む例示的な化合物（薬剤として抗体を含む）の能力を判定した。
【0384】
４つの化合物、すなわち、陰性対照としてのＡｌｅｘａ６４７標識ＤＣ１０１（図１０ＢではＡ－ＤＣ１０１として識別する）、配列番号１４の電荷を持たないリガンド（ＣＦＬ）とＤＣ１０１抗体とを含むＡｌｅｘａ６４７標識化合物（図１０ＢではＡ－ＣＬＦ－ＤＣ１０１として識別する）、配列番号１のＧＡＧ結合ペプチドとＤＣ１０１抗体とを含むＡｌｅｘａ６４７標識化合物（図１０ＢではＡ－ＰＡＬ１－ＤＣ１０１として識別する）、及び配列番号２のＧＡＧ結合ペプチドとＤＣ１０１抗体とを含むＡｌｅｘａ６４７標識化合物（図１０ＢではＡ－ＰＡＬ２－ＤＣ１０１として識別する）を調製した。
【0385】
血小板を各化合物と３７℃で１時間共インキュベートした。次に、血小板を８００ｇで１０分間遠心分離し、２％パラホルムアルデヒドで固定し、ガラスカバースリップに載置した。透過処理後、血小板中のＰＦ４に対して免疫蛍光染色を実施し、さらにＡｌｅｘａ５６８－二次抗体で染色した。６０倍のオイル対物レンズを備えたＮｉｋｏｎ－Ａ１レーザー走査型顕微鏡により、画像を収集した。
【0386】
図１０Ｂの代表的な画像では、ＰＦ４染色は赤で表示し（左列）、Ａｌｅｘａ６４７シグナルは紫で示した（中央列）。画像は、表示用に輝度及びコントラストのみを調整した。各実験につきｎ＞５の画像を取得し、ＰＦ４の強度に基づいて関心領域（ＲＯＩ）を選択した。
【0387】
統合した画像（右列）は、Ａｌｅｘａ６４７がＧＡＧ結合ペプチドに会合している場合にのみアルファ顆粒マーカーＰＦ４とＡｌｅｘａ６４７シグナルとの共局在を示し、Ａｌｅｘａ６４７がＣＦＬまたはＤＣ１０１抗体のみに会合している場合には示されない。不都合なことに、Ａ－ＰＡＬ２－ＤＣ１０１化合物と共インキュベートした血小板については、ＰＦ４免疫染色反応に失敗した。したがって、この群に関してはＡｌｅｘａ６４７強度に基づいてＲＯＩを選択した。
【0388】
各ＲＯＩのＡｌｅｘａ６４７強度を、ＩｍａｇｅＪを使用して測定し、Ｐｒｉｓｍ８を使用して箱ひげ図にプロットした。図１０Ｃに示すように、本開示の２つの例示的な化合物は血小板のアルファ顆粒へ担持されるのに対し、電荷を持たないリガンドを含む化合物または抗体を含む化合物（ＧＡＧ結合ペプチドを含まない）は、血小板へ担持されず、言うまでもなく血小板のアルファ顆粒には担持されない。
【0389】
これらのデータは、ＧＡＧ結合ペプチドと薬剤とを含む本開示の化合物が、血小板のアルファ顆粒に担持されることを実証する。
【0390】
実施例７：本開示の化合物を担持した単離血小板を製造するための例示的な方法
本実施例では、単離血小板は、本開示の化合物を担持する。
本実施例では、単離血小板は、本開示の化合物を担持する。
【0391】
単離血小板を得る。血小板は、合成血小板、同種血小板、自家血小板、または修飾された異種血小板であり得る。実施形態では、血小板を多血小板血漿から得る。
【0392】
血小板を、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで本開示の化合物と接触させる。化合物は、第１の薬剤及び第１のポリペプチドを含む。第１のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができるＧＡＧ結合ペプチドを含む。好ましくは、ＧＡＧ結合ペプチドは、少なくともコンドロイチン硫酸（ＣＳ）に優先的に結合する。
【0393】
接触を、適切な温度、培地組成（塩濃度、ｐＨ、栄養素を含む）で、及び化合物が血小板のアルファ顆粒によって内在化されるまでの期間で継続させる。このようにして担持血小板を得る。多くの場合、温度は血小板を得るかまたは投与する体温、例えば３７℃である。同様に、組成物のｐＨは、血小板を得るかまたは投与する血液／血漿のｐＨ付近、例えば約７．４のｐＨである。
【0394】
本実施例では、本開示に記載されているかまたは当該技術分野で公知の任意の薬剤を使用することができる。薬剤は、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子であり得る。
【0395】
いくつかの実施形態では、第１の薬剤は、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）、ＰＤＬ１阻害剤（例えば、ペムブロリズマブ）、ＦＮ１阻害剤（例えば、オクリプラスミン）、マルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）、ＦＧＦＲ２アンタゴニスト（例えば、サリドマイド）、トロンビン及びその類似体、ＣＳＦ３Ｒアゴニスト（例えば、フィルグラスチム）、ＰＳＭＢ５阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、フマギリン、またはＡＬＫ／ＲＯＳ１／ＮＴＲＫ阻害剤（例えば、クリゾチニブ）のうちの１つであり得る。
【0396】
場合によっては、担持血小板を、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで第２の化合物と接触させる。第２の化合物は、第２の薬剤及び第２のポリペプチドを含む。第２のポリペプチドは、血小板のアルファ顆粒中のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）と結合することができる第２のＧＡＧ結合ペプチドを含む。接触を、適切な温度、培地組成で、及び第２の化合物が血小板のアルファ顆粒によって内在化されるまでの期間で継続させる。
【0397】
第２の薬剤は、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）、ＰＤＬ１阻害剤（例えば、ペムブロリズマブ）、ＦＮ１阻害剤（例えば、オクリプラスミン）、マルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）、ＦＧＦＲ２アンタゴニスト（例えば、サリドマイド）、トロンビン及びその類似体、ＣＳＦ３Ｒアゴニスト（例えば、フィルグラスチム）、ＰＳＭＢ５阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、フマギリン、またはＡＬＫ／ＲＯＳ１／ＮＴＲＫ阻害剤（例えば、クリゾチニブ）のうちの１つであり得る。
【0398】
薬剤及び第２の薬剤は同じであっても異なっていてもよく、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは同じであっても異なっていてもよく、及び／または第１のＧＡＧ結合ペプチド及び第２のＧＡＧ結合ペプチドは同じであっても異なっていてもよい。
【0399】
例として、第１の薬剤及び第２の薬剤は、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）及びＰＤＬ１阻害剤（例えば、ペムブロリズマブ）、またはＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）及びマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）、またはフマギリン及びマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）であり得る。
【0400】
第３のポリペプチドと第３の薬剤（例えば、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）及びマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）、及びＡＬＫ／ＲＯＳ１／ＮＴＲＫ阻害剤（例えば、クリゾチニブ））とを含む第３の化合物を組み合わせることができる。
【0401】
実施形態では、化合物及び第２の化合物は、上記のように逐次的に担持される。代替の実施形態では、化合物及び第２の化合物は、同時に担持される。
【0402】
好ましくは、単離血小板は、１～１０００コピーの化合物を含み、及び／または１～１０００コピーの第２の化合物を含む。実施形態では、この１～１０００コピーは、血小板のアルファ顆粒に担持される。
【0403】
このように製造した担持血小板を、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて、医薬組成物を生成することができる。
【0404】
さらに、医薬組成物は、本開示の第１の化合物を担持した第１の単離血小板、本開示の第２の（または第３の）化合物を担持した第２の単離血小板、及び１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を組み合わせることによって生成することができる。上記の任意の第１の薬剤及び／または第２の薬剤ならびにそれらの任意の組み合わせを使用することができる。
【0405】
実施例８：本開示の化合物を担持した単離血小板を対象に投与することにより疾患または障害を治療するための例示的な方法
本実施例では、本開示の化合物を担持した単離血小板を、必要とする対象に（例えば、疾患または障害を有する者に）投与する。
本実施例では、本開示の化合物を担持した単離血小板を、必要とする対象に（例えば、疾患または障害を有する者に）投与する。
【0406】
ここでは、１つ以上の本開示の化合物を担持した血小板をそれぞれ含む治療有効量の１つ以上の医薬組成物を、必要とする対象に（例えば、注入または注射により）投与する。
【0407】
本実施例では、本開示に記載されているかまたは当該技術分野で公知の任意の薬剤を使用することができる。薬剤は、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子であり得る。
【0408】
いくつかの実施形態では、１つ以上の化合物は、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）、ＰＤＬ１阻害剤（例えば、ペムブロリズマブ）、ＦＮ１阻害剤（例えば、オクリプラスミン）、マルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）、ＦＧＦＲ２アンタゴニスト（例えば、サリドマイド）、トロンビン及びその類似体、ＣＳＦ３Ｒアゴニスト（例えば、フィルグラスチム）、ＰＳＭＢ５阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、フマギリン、ならびにＡＬＫ／ＲＯＳ１／ＮＴＲＫ阻害剤（例えば、クリゾチニブ）から選択される薬剤を含み得る。
【0409】
血小板は、本開示の組み合わせ化合物を担持することができる。例として、第１の薬剤及び第２の薬剤は、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）及びＰＤＬ１阻害剤（例えば、ペムブロリズマブ）であり得、これは膵癌の治療に使用することができる。また、第１の薬剤及び第２の薬剤は、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）及びマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）であり得、これは肺癌の治療に使用することができる。第１の薬剤及び第２の薬剤は、マルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）及びフマギリンであり得、これは、膵癌、肺癌、または結腸癌の治療に使用することができる。
【0410】
あるいは、２つを超える化合物を使用することができ、第１、第２、及び第３の薬剤は、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）及びマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）、及びＡＬＫ／ＲＯＳ１／ＮＴＲＫ阻害剤（例えば、クリゾチニブ）であり、これは非小細胞肺癌の治療に使用することができる。
【0411】
ヘパラナーゼ、トロンビン及びその断片ペプチド、プロテアーゼ活性化受容体１（ＰＡＲ１）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プロテアーゼ活性化受容体４（ＰＡＲ４）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プラスミン及びその断片、及び／またはメタロプロテイナーゼ、ペルオキシダーゼ、及び／またはホスホヒドロラーゼのうちの１つ以上を含む第２の医薬組成物を、対象にさらに投与することができる。第２の医薬組成物は、血小板からの化合物の放出を促進する。
【0412】
第２の医薬組成物は、医薬組成物が例えば、第２の医薬組成物が投与される前に少なくとも２回投与された後、投与することができる。
【0413】
担持血小板を含む医薬組成物と併せて、追加の治療剤を対象に投与することができる。一例として、対象に、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）が担持された血小板を投与することができ、さらにレムデシビルを投与することができる。これは、ＣＯＶＩＤに関連するであろう急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療に使用することができる。対象に、マルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）及びフマギリンの一方または両方が担持された血小板を投与することができ、また低用量の化学療法剤も投与することができる。これは、膵癌、肺癌、または結腸癌の治療に使用することができる。対象に、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）及びマルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）の一方または両方が担持された血小板を投与することができ、また低用量の化学療法剤も投与することができる。これは、肺癌の治療に使用することができる。対象に、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）、マルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）、及びＡＬＫ／ＲＯＳ１／ＮＴＲＫ阻害剤（例えば、クリゾチニブ）のうちの１つもしくは両方、または３つ全てが担持された血小板を投与することができ、また低用量の化学療法剤も投与することができる。これは、非小細胞肺癌の治療に使用することができる。
【0414】
血小板は、本開示の２つ以上の化合物の組み合わせを担持することができる。例として、化合物は、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）及びＰＤＬ１阻害剤（例えば、ペムブロリズマブ）である第１の薬剤及び第２の薬剤を有することができ、これは膵癌の治療に使用することができる。また、第１の薬剤及び第２の薬剤は、マルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）及びフマギリンであり得、これは、膵癌、肺癌、または結腸癌の治療に使用することができる。
【0415】
必要とする対象は、がんまたは損傷から選択される疾患または障害を有し得る。炎症は、疾患または障害の症状であり得る。疾患または障害は、埋植物、移植片、ステント、または補装具の副作用であり得る。疾患または障害は、欠陥遺伝子に起因し得る。
【0416】
実施例９：本開示の化合物を対象に投与することにより疾患または障害を治療するための例示的な方法
本実施例では、本開示の化合物を必要とする対象に（例えば、疾患または障害を有する者に）投与する。
本実施例では、本開示の化合物を必要とする対象に（例えば、疾患または障害を有する者に）投与する。
【0417】
ここでは、本開示の化合物を含む治療有効量の医薬組成物を、必要とする対象に（例えば、注入または注射により）投与する。この方法では、化合物をｉｎ ｖｉｖｏで血小板に担持させる。
【0418】
本実施例では、本開示に記載されているかまたは当該技術分野で公知の任意の薬剤を使用することができる。薬剤は、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子であり得る。
【0419】
いくつかの実施形態では、化合物は、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、セツキシマブ）、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）、ＰＤＬ１阻害剤（例えば、ペムブロリズマブ）、ＦＮ１阻害剤（例えば、オクリプラスミン）、マルチキナーゼ阻害剤（例えば、レゴラフェニブ）、ＦＧＦＲ２アンタゴニスト（例えば、サリドマイド）、トロンビン及びその類似体、ＣＳＦ３Ｒアゴニスト（例えば、フィルグラスチム）、ＰＳＭＢ５阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、フマギリン、またはＡＬＫ／ＲＯＳ１／ＮＴＲＫ阻害剤（例えば、クリゾチニブ）から選択される薬剤を含み得る。複数の化合物を対象に投与することができ、追加の化合物は、すぐ上のリストまたは当該技術分野で公知の任意の薬剤から選択される薬剤、例えば、抗体、化学療法剤、細胞毒性化合物、小分子、蛍光部分、放射性元素、免疫チェックポイント阻害剤、増殖因子、増殖阻害剤、プロテアーゼ／プロテイナーゼ、凝固因子、脂質もしくはリン脂質、細胞外マトリックスタンパク質、ホルモン、酵素、ケモカイン／走化性因子、ニューロトロフィン、チロシンキナーゼ（アゴニストもしくは阻害剤）、または細胞増殖、血管新生、炎症、免疫、もしくは血小板により媒介されるか、もしくは血小板に関連する別の生理的プロセスを阻害する因子を有し得る。
【0420】
ヘパラナーゼ、トロンビン及びその断片ペプチド、プロテアーゼ活性化受容体１（ＰＡＲ１）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プロテアーゼ活性化受容体４（ＰＡＲ４）アゴニストもしくはアンタゴニストペプチド、プラスミン及びその断片、及び／またはメタロプロテイナーゼ、ペルオキシダーゼ、及び／またはホスホヒドロラーゼのうちの１つ以上を含む第２の医薬組成物を、対象にさらに投与することができる。第２の医薬組成物は、血小板からの化合物の放出を促進する。
【0421】
第２の医薬組成物は、医薬組成物が例えば、第２の医薬組成物が投与される前に少なくとも２回投与された後、投与することができる。
【0422】
本開示の化合物を含む医薬組成物と併せて、追加の治療剤を対象に投与することができる。追加の治療剤は、レムデシビル及び／または低用量の化学療法であり得る。
【0423】
必要とする対象は、がんまたは損傷から選択される疾患または障害を有し得る。炎症は、疾患または障害の症状であり得る。疾患または障害は、埋植物、移植片、ステント、または補装具の副作用であり得る。疾患または障害は、欠陥遺伝子に起因し得る。
【図1A】
【図1B】
【図2A】
【図2B】
【図3A】
【図3B】
【図3C】
【図3D】
【図3E】
【図3F】
【図4】
【図5】
【図6A】
【図6B】
【図7A】
【図7B】
【図7C】
【図7D】
【図7E】
【図7F】
【図8】
【図9A】
【図9B】
【図9C】
【図9D】
【図9E】
【図9F】
【図9G】
【図9H】
【図9I】
【図9J】
【図9K】
【図9L】
【図9M】
【図10A】
【図10B】
【図10C】
【配列表】
【国際調査報告】