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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-10-07
(54)【発明の名称】抗ウイルス剤およびその使用
(51)【国際特許分類】
   C07D 407/04 20060101AFI20220930BHJP
   A61K 31/4155 20060101ALI20220930BHJP
   A61K 31/437 20060101ALI20220930BHJP
   A61K 31/4162 20060101ALI20220930BHJP
   A61P 31/16 20060101ALI20220930BHJP
   A61P 31/14 20060101ALI20220930BHJP
   C07D 491/056 20060101ALI20220930BHJP
   C07D 471/04 20060101ALI20220930BHJP
   C07D 495/04 20060101ALI20220930BHJP
   C07D 487/04 20060101ALI20220930BHJP
【ＦＩ】
C07D407/04 CSP
A61K31/4155
A61K31/437
A61K31/4162
A61P31/16
A61P31/14
C07D491/056
C07D471/04 105P
C07D495/04 103
C07D487/04 136
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022506292
(86)(22)【出願日】2020-07-30
(85)【翻訳文提出日】2022-03-25
(86)【国際出願番号】 AU2020050784
(87)【国際公開番号】W WO2021016670
(87)【国際公開日】2021-02-04
(31)【優先権主張番号】2019902717
(32)【優先日】2019-07-30
(33)【優先権主張国・地域又は機関】AU
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】509075181
【氏名又は名称】グリフィス・ユニバーシティ
【氏名又は名称原語表記】ＧＲＩＦＦＩＴＨ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
(74)【代理人】
【識別番号】100145403
【弁理士】
【氏名又は名称】山尾 憲人
(74)【代理人】
【識別番号】100156144
【弁理士】
【氏名又は名称】落合 康
(74)【代理人】
【識別番号】100221578
【弁理士】
【氏名又は名称】林 康次郎
(72)【発明者】
【氏名】フォン イッツシュタイン，マーク
(72)【発明者】
【氏名】エル－ディーブ，イブラヒム
(72)【発明者】
【氏名】ハイリグ，ラリッサ
(72)【発明者】
【氏名】ギヨン，パトリス
【テーマコード（参考）】
4C050
4C063
4C065
4C071
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C050AA01
4C050AA08
4C050BB05
4C050CC05
4C050CC17
4C050EE02
4C050EE04
4C050FF01
4C050GG01
4C050HH02
4C063AA01
4C063BB02
4C063CC78
4C063DD22
4C063DD42
4C063EE01
4C065AA19
4C065BB05
4C065CC09
4C065DD03
4C065EE02
4C065HH01
4C065JJ01
4C065LL08
4C065PP07
4C071AA01
4C071AA08
4C071BB01
4C071CC02
4C071CC21
4C071EE13
4C071FF04
4C071HH01
4C071HH28
4C071JJ06
4C071LL01
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086BC36
4C086BC60
4C086CB03
4C086CB05
4C086CB22
4C086CB26
4C086MA01
4C086MA04
4C086MA52
4C086MA55
4C086NA14
4C086ZB33
4C086ZC20
(57)【要約】
本発明は、式(Ｉ)：
の化合物またはその薬学的に許容される塩に関し、Ｒ３は場合により置換されていてよいＮ－結合ナフトトリアゾール、場合により置換されていてよいＮ－結合インダゾール、および特定のＮ－結合トリアゾールから成る群から選択される。本発明はまた、ウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態の処置における化合物の使用および化合物を含む医薬組成物に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式(Ｉ)の化合物：
【化1】
〔式中、
Ｒ１はＣＯＯＨまたはその塩、Ｃ(Ｏ)ＮＲ９Ｒ１０、Ｃ(Ｏ)ＯＲ１１から成る群から選択され、ここで前記Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は独立して、水素、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキルおよび場合により置換されていてよいアリールから成る群から選択され；
Ｒ３は、場合により置換されていてよいＮ－結合ナフトトリアゾール、場合により置換されていてよいＮ－結合インダゾールおよび次の式のＮ－結合トリアゾール
【化2】
(式中、Ｒ２０は
【化3】
から成る群から選択され、ここで＊は結合点であり、前記Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は独立して、場合により置換されていてよいアルキル、場合により置換されていてよいアルケニル、置換アルキニル、場合により置換されていてよいシクロアルキル、場合により置換されていてよいアリール、場合により置換されていてよいヘテロアリール、場合により置換されていてよいヘテロシクリル、場合により置換されていてよいアルキルヘテロ環式、場合により置換されていてよいアルキルヘテロアリール、場合により置換されていてよいアルキルアミン、場合により置換されていてよいジアルキルアミンおよび化合物と別の式(Ｉ)の化合物を結合させる場合により置換されていてよいリンカーから成る群から選択される)
から成る群から選択され；
Ｒ４はスルホンアミド、尿素およびＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１７から成る群から選択され、ここで前記Ｒ１７はＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルおよびＣ３－Ｃ６シクロアルキルから成る群から選択され、これらの全ては場合により置換されていてよく；
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は独立して、ＯＨ、保護されたＯＨ、ＮＨ２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＮＲ１８Ｒ１８’、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６ハロアルコキシ、－ＯＣ(Ｏ)Ｒ１８、－ＮＨ(Ｃ＝Ｏ)Ｒ１８およびＳ(Ｏ)ｎＲ１８から成る群から選択され、ここでｎ＝０～２であり、各Ｒ１８およびＲ１８’は独立して、水素、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキルおよび場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルカノイルから適切に選択される〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項2】
Ｒ１がＣＯＯＨもしくはその塩またはＣ(Ｏ)ＯＲ１１であり、ここで前記Ｒ１１がメチル、エチルおよびプロピルから選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項3】
Ｒ３が場合により置換されていてよいＮ－結合ナフトトリアゾールであるとき、Ｒ３は次の式：
【化4】
〔式中、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、ＲｅおよびＲｆは独立して、水素、ヒドロキシル、シアノ、ハロ、アミド、Ｃ１－Ｃ１２アルキル、Ｃ１－Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１－Ｃ１２ハロアルコキシ、Ｃ１－Ｃ１２アルカノイル、Ｃ１－Ｃ１２ハロアルカノイル、Ｃ１－Ｃ１２ハロアルキル、ピリジルおよびフェニルから成る群から適切に選択され、これらの全ては場合により置換されていてよい〕
のものである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項4】
Ｒ３が場合により置換されていてよいＮ－結合インダゾールであるとき、Ｒ３は次の式：
【化5】
〔式中、
Ｒｇ、Ｒｈ、ＲｉおよびＲｊは独立して、水素、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、シアノ、スルホニル、アミン、アルキルアミン、ジアルキルアミン、アミドおよびカルボキシルから成る群から選択され；
ＲｇとＲｈ、ＲｈとＲｉおよびＲｉとＲｊは一体となって、ヘテロアリール、ヘテロ環式またはアリール環を形成し得て、これらの各々は場合により置換されていてよい〕
のものである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項5】
Ｒ３がＮ－結合トリアゾールであるとき、先に定義されるとおり、Ｒ２１が場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル、場合により置換されていてよいＣ２－Ｃ９アルケニル、場合により置換されていてよい５員または６員アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル－窒素ヘテロ環、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル－窒素ヘテロアリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキルアミン、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－アリール－アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－シクロアルキル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＳＯ２－アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＳＯ２－Ｃ１－Ｃ６アルキル－アリールおよび化合物と別の式(Ｉ)の化合物を結合する場合により置換されていてよいリンカーから成る群から選択され得る、請求項１に記載の化合物。
【請求項6】
Ｒ２１が化合物と別の式(Ｉ)の化合物を結合する場合により置換されていてよいリンカーであるとき、式(Ｉ)の化合物は次の式：
【化6】
〔式中、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は先に定義されるとおりであり、
リンカーはＣ１－Ｃ１２アルキル；Ｃ１－Ｃ９アルキル；Ｃ２－Ｃ９アルケニル；およびＣ２－Ｃ９アルキニルから選択され；これらの全ては場合により置換されていてよく、場合により５員窒素ヘテロアリールに結合していてよい〕
のものである、請求項５に記載の化合物。
【請求項7】
Ｒ３が次から成る群から選択される、請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物。
【化7】
【化8】
【化9】
【化10】
【請求項8】
Ｒ４が、Ｒ２７がＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルおよびＣ３－Ｃ６シクロアルキルから成る群から選択され、これらの全ては場合により置換されていてよいものである、－ＮＨＳ(Ｏ)２Ｒ２７；Ｒ１７がＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルおよびＣ３－Ｃ６シクロアルキルから成る群から選択され、これらの全ては場合により置換されていてよいものである、－ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨＲ１７；ならびに次の式：
【化11】
から成る群から選択されるものである、請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項9】
Ｒ４が、－ＮＨＡｃ、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ(ＣＨ３)２、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＦ３および－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択される、請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項10】
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が独立して、ＯＨおよびＯＡｃから選択される、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項11】
式(Ｉ)の化合物が、式(II)：
【化12】
〔Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、請求項１～１０のいずれか一項に記載されるとおりである〕
の化合物である、請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項12】
化合物が式(IIIa)または式(IIIb)：
【化13】
〔式中、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、ＲｅおよびＲｆは先に定義されるとおりである〕
の化合物である、請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項13】
化合物が式(IVa)または式(IVb)：
【化14】
〔式中、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒｇ、Ｒｈ、ＲｉおよびＲｊは先に記載されるとおりである〕
の化合物である、請求項１～１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項14】
化合物が、式Va、式Vb、式VIa、式VIb、式VIIaおよび式VIIb：
【化15】
〔式中、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は先に記載されるとおりである〕
のいずれか１以上の化合物である、請求項１～１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項15】
式(Ｉ)の化合物が、次のもの：
【化16】
【化17】
【化18】
【化19】
【化20】
【化21】
【化22】
ならびにその保護された形態およびＣ－２カルボキシ基がプロトン化された形態、ナトリウム塩形態またはプロドラッグ形態であるおよびＲ４位が－ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ基で置換され、ここで前記ＲがＣ１－Ｃ４アルキルまたはハロアルキルである、そのアナログから成る群から選択される、請求項１～１４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項16】
有効量の請求項１～１５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体、希釈剤および／または賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項17】
ウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態の処置または予防のためのものである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項18】
有効量の請求項１～１５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に有効な塩または請求項１６または１７に記載の医薬組成物を患者に投与する段階を含む、患者におけるウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態を処置する方法。
【請求項19】
疾患、障害または状態がインフルエンザおよび／またはパラインフルエンザウイルスによって引き起こされる感染である、請求項１８に記載の方法。
【請求項20】
感染が、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、Ｄ型インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、呼吸器多核体ウイルス(ＲＳＶ)およびヒトメタニューモウイルス(ｈＭＰＶ)から成る群から選択されるウイルスにより引き起こされるものである、請求項１９に記載の方法。
【請求項21】
パラインフルエンザウイルスがパラインフルエンザウイルス１型、２型、３型および４型から成る群から選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項22】
患者が飼育動物または家畜またはヒトである、請求項１８～２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項23】
ウイルス性ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼを請求項１～請求項１５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に有効な塩に接触させる段階を含む、ウイルス性ヘマグルチニンおよび／またはノイラミニダーゼ機能を調節する方法。
【請求項24】
調節することが阻害することであり、ウイルス性ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼがパラインフルエンザヘマグルチニン－ノイラミニダーゼである、請求項２３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は医学的処置の分野に関する。より具体的には、本発明は、新規抗ウイルス剤およびウイルス感染により引き起こされる疾患または状態の処置におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【0002】
本明細書における背景技術についてのあらゆる引用文献は、そのような技術がオーストラリアまたは他国で一般に知られた知識を構成することを認めるものであると解釈されるべきではない。
【0003】
ウイルスは、社会にとって大きな損失となる、哺乳類の広範な疾患の原因である。ウイルス感染の影響は、一般的なインフルエンザの症状から重篤な呼吸器の問題までに及び得て、特に地域の幼い者、高齢者および免疫力がない人々の間で死をもたらし得る。
【0004】
インフルエンザウイルスＡ型、Ｂ型およびＣ型を含むオルソミクソウイルス科(Orthomyxoviridae)のウイルスおよびパラミクソウイルス科(Paramyxoviridae)のウイルスは、毎年膨大な数のヒト感染症の原因となる病原体である。
【0005】
一例としてパラミクソウイルス科(Paramyxoviridae)を挙げると、ヒトパラインフルエンザウイルス１型および３型(ｈＰＩＶ－１および３)は、幼児および小児における上下気道疾患の主な原因であり、高齢者および免疫力がない人々に影響を及ぼす。有意に、米国のみで５歳未満の子供において毎年５００万件もの下気道感染症が生じると推測され、これらの症例のおよそ３分の１でｈＰＩＶが単離されている。ｈＰＩＶ感染症は、しばしば、移植患者において報告され、造血幹細胞移植患者で３０％ほどの死亡率である。継続的な努力にもかかわらず、現在、ｈＰＩＶ感染症を予防するワクチンも、これを治療する特定の抗ウイルス療法も存在しない。比較的最近のいくつかのアプローチは、小分子による侵入阻害および成熟前のウイルス融合の誘発に焦点を当てている。
【0006】
パラインフルエンザウイルスの宿主細胞との初期の相互作用は、その表面糖タンパク質、ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼ(ＨＮ)を介するものであり、Ｎ－アセチルノイラミン酸を含有する糖複合体の認識を含む。パラインフルエンザウイルスＨＮは、１つのタンパク質内のみならず、単一の結合部位においても(細胞付着のための)受容体結合および(ウイルス放出を促進する)受容体分解の機能を含む多機能タンパク質である。さらに、ＨＮは標的の宿主細胞の感染を開始するために必要なウイルス表面融合(Ｆ)タンパク質の活性化に関与する。したがって、ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼの阻害は、抗ウイルスのための標的を提供する。
【0007】
本願の出願人が以前に出願した、国際公開第２０１６／０３３６６０号として公開された国際出願に、特定の抗ウイルス化合物がウイルス性ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼ機能のモジュレーターとして記載されている。それらの目的には適しているが、その公報は、特定の重要な位置で許容される変化および有効性の最適な代替についての限定的な指針しか提供しない。
【発明の概要】
【0008】
本発明の第一の態様によれば、式(Ｉ)：
【化1】
〔式中、
Ｒ１はＣＯＯＨまたはその塩、Ｃ(Ｏ)ＮＲ９Ｒ１０、Ｃ(Ｏ)ＯＲ１１から成る群から選択され、ここで前記Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は独立して、水素、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキルおよび場合により置換されていてよいアリールから成る群から選択され；
Ｒ３は、場合により置換されていてよいＮ－結合ナフトトリアゾール、場合により置換されていてよいＮ－結合インダゾールおよび次の式のＮ－結合トリアゾール
【化2】
(式中、Ｒ２０は
【化3】
から成る群から選択され、ここで＊は結合点であり、前記Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は独立して、場合により置換されていてよいアルキル、場合により置換されていてよいアリール、場合により置換されていてよいアルキルヘテロ環式、場合により置換されていてよいアルキルヘテロアリール、場合により置換されていてよいアルキルアミン、場合により置換されていてよいジアルキルアミンおよび化合物と別の式(Ｉ)の化合物を結合させる場合により置換されていてよいリンカーから成る群から選択される)
から成る群から選択され；
Ｒ４はスルホンアミド、尿素およびＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１７から成る群から選択され、ここで前記Ｒ１７はＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルおよびＣ３－Ｃ６シクロアルキルから成る群から選択され、これらの全ては場合により置換されていてよく；
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は独立して、ＯＨ、保護されたＯＨ、ＮＨ２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＮＲ１８Ｒ１８’、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６ハロアルコキシ、－ＯＣ(Ｏ)Ｒ１８、－ＮＨ(Ｃ＝Ｏ)Ｒ１８およびＳ(Ｏ)ｎＲ１８から成る群から選択され、ここでｎ＝０～２であり、各Ｒ１８およびＲ１８’は独立して、水素、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキルおよび場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルカノイルから適切に選択される〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩が提供される。
【0009】
第一の態様のある態様において、式(Ｉ)の化合物は式(II)：
【化4】
〔Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記のとおりである〕
の化合物である。
【0010】
本発明の第二の態様によれば、有効量の第一の態様の化合物またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体、希釈剤および／または賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
【0011】
適切には、医薬組成物は、ウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態の処置または予防のためのものである。
【0012】
本発明の第三の態様は、有効量の第一の態様の化合物またはその薬学的に有効な塩または第二の態様の医薬組成物を患者に投与することを含む、患者におけるウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態を処置する方法に属する。
【0013】
本発明の第四の態様は、患者におけるウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態の処置における使用のための、第一の態様の化合物またはその薬学的に有効な塩または第二の態様の医薬組成物を提供する。
【0014】
本発明の第五の態様は、ウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態の処置のための医薬の製造における、第一の態様の化合物またはその薬学的に有効な塩の使用を提供する。
【0015】
第三、第四または第五の態様のある実施態様において、疾患、障害または状態は、パラインフルエンザ、インフルエンザ、偽膜性喉頭炎、細気管支炎および肺炎から選択される。
【0016】
第三、第四または第五の態様のある実施態様において、疾患、障害または状態はパラインフルエンザおよび／またはインフルエンザである。
【0017】
ある実施態様において、ウイルス性呼吸器感染症は、インフルエンザＡ型ウイルス、インフルエンザＢ型ウイルス、インフルエンザＣ型ウイルス、インフルエンザＤ型ウイルス、パラインフルエンザウイルス、呼吸器多核体ウイルス(ＲＳＶ)およびヒトメタニューモウイルス(ｈＭＰＶ)の１以上により引き起こされる。
【0018】
疾患、障害または状態がインフルエンザであるとき、それはＡ型、Ｂ型、Ｃ型またはＤ型インフルエンザであり得る。
【0019】
疾患、障害または状態がパラインフルエンザウイルス感染症であるとき、それはｈＰＩＶ－１、ｈＰＩＶ－２、ｈＰＩＶ－３およびｈＰＩＶ－４ウイルスから成る群から選択され得る。これらは全てのウイルスサブタイプ、例えば４ａおよび４ｂを含み得る。
【0020】
疾患、障害または状態がＲＳＶにより引き起こされるとき、それはＡおよび／またはＢサブタイプ、例えば、ｈＲＳＶ－ＡおよびｈＲＳＶ－Ｂにより引き起こされ得る。
【0021】
疾患、障害または状態がｈＭＰＶにより引き起こされるとき、それはｈＭＰＶ Ａ１、Ａ２、Ｂ１およびＢ２サブタイプのいずれか１種以上により引き起こされ得る。
【0022】
好ましくは、患者は飼育動物または家畜またはヒトである。
【0023】
本発明の第六の態様は、ウイルス性ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼを第一の態様の化合物と接触させる段階を含む、ウイルス性ヘマグルチニンおよび／またはノイラミニダーゼ機能を調節する方法が提供される。
【0024】
上記の個々の節において言及される本発明の多様な特徴および実施態様は、適切に、必要な変更を加えて他のセクションに適用する。結果的に、あるセクションで特定された特徴は、適切に、他のセクションにおいて特定された特徴と組み合わせられ得る。
【0025】
本発明のさらなる特徴および利点は、次の詳細な説明から明らかとなる。
【0026】
詳細な説明
本発明は、少なくとも一部、環のＣ－４位を含む重要な位置に修飾を有する特定のノイラミン酸誘導体がウイルス性呼吸器感染症により引き起こされる疾患の処置において有用な効力を示すという知見に基づく。特に、本発明の化合物はパラインフルエンザヘマグルチニン－ノイラミニダーゼ機能の阻害において有用である。これは、赤血球凝集機能および／またはノイラミニダーゼ(酵素)機能をブロックする点で考慮され得る。抗ウイルス化合物は、国際公開第２０１６／０３３６６０号として公開された、本出願人が以前に出願した国際出願において、ウイルス性ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼのモジュレーターとして記載されているが、本願は、ｈＰＩＶ ＨＮ－結合ポケットのより完全な利用をもたらした、その以前の刊行物では想定されていなかった新規化合物テンプレートを提供する。本明細書に開示された特定の化合物はまた、阻害剤骨格をｈＰＩＶ ＨＮ－結合ポケットの外側まで伸長し、効能の改善および多価のための有益な結合相互作用の獲得を利用する。
【0027】
定義
本願明細書において、用語「含む(comprises)」、「含む(comprising)」、「含む(includes)」、「含む(including)」または類似の用語は、要素の一覧を含む方法または組成物が、それらの要素のみを含むのではないが、列挙されていない他の要素もまた含み得る、非排他的包含を意味することを意図する。
【0028】
他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術的および科学的用語は、本発明の当業者により一般に理解されるものと同一の意味を有する。
【0029】
本明細書で使用される「有効量」とは、処置される状態の症状の発生を予防する、症状の悪化の停止をもたらす、症状の重篤度を処置および軽減もしくは少なくとも低減するのに十分な関連する活性剤の量の投与を示す。有効量は、患者の年齢、性別、体重などとともに、当業者により理解される程度に変化する。適切な投与量または投与レジメンは、慣例の試験により確認され得る。
【0030】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容される塩」とは、全身または局所投与について毒性学的に安全な塩、例えば、無機塩基または有機塩基および無機酸または有機酸を含む薬学的に許容される非毒性の塩基または酸から製造される塩を示す。薬学的に許容される塩は、アルカリおよびアルカリ土類塩、アンモニウム塩、アルミニウム塩、鉄塩、アミン塩、グルコサミン塩、クロライド塩、硫酸塩、スルホン酸塩、二硫酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、二酒石酸塩、リン酸塩、炭酸塩塩、重炭酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、ナプシル酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酢酸塩、安息香酸塩、テレフタル酸塩、パモ酸塩、ピペラジン塩、ペクチン酸塩およびＳ－メチルメチオニン塩などを含む群から選択され得る。
【0031】
本明細書における使用の各々の場合および任意の特定の部分について明確に列挙されない場合における用語「置換された」および「場合により置換されていてよい」とは、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６ハロアルコキシ(例えば、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシなど)、ＣＮ、ＯＨ、オキソ、ＮＨ２、ＮＲ２８Ｒ２８’(ここで、Ｒ２８およびＲ２８’は独立して、水素、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル、場合により置換されていてよいアリール、Ｒ２９Ｃ＝Ｏ、Ｒ２９ＳＯ２およびＲ２９がＣ１－Ｃ９アルキルであるＲ２９ＮＨＣ＝Ｏから選択される)、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、Ｉ、アリールおよびヘテロシクリルから選択される１以上の基での、関連する部分、例えば、アルキル鎖または環構造の置換を示し、最後の２つの部分は、それ自体、場合により置換されていてよい。多数の官能基の記載の前にその用語が記載されるとき、それは、特に明らかでない限り、全ての列挙された官能基に適用されることが意図される。例えば、「場合により置換されていてよいアミノ、ヘテロ環式、アリール」は、全てのアミノ、ヘテロ環式およびアリール基が場合により置換されていてよいことを意味する。関連する基がＲ３であり、それが別の式(Ｉ)の化合物と結合して二量体を形成する実施態様において、記載される部分、例えば、「場合により置換されていてよいアルキル」または「場合により置換されていてよいアルキルヘテロアリール／アルキルヘテロシクリル」は、それが二量体を形成する他の式(Ｉ)の化合物のＲ３に結合するアルキル鎖および／またはトリアゾール環を含むリンカーで置換され得る。
【0032】
用語「アルキル」とは、例えば、１～約１２個の炭素原子、好ましくは１～約８個の炭素原子、より好ましくは１～約６個の炭素原子、さらにより好ましくは１～約４個の炭素原子、さらにより好ましくは１～２個の炭素原子を含む直鎖または分岐アルキル置換基をいう。このような置換基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、イソアミル、２－メチルブチル、３－メチルブチル、ヘキシル、ヘプチル、２－メチルペンチル、３－メチルペンチル、４－メチルペンチル、２－エチルブチル、３－エチルブチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシルドデシルなどを含む。言及される炭素の数は、炭素骨格および炭素の分岐に関するものであるが、任意の置換基に属する炭素原子、例えば、主要な炭素鎖から分岐するアルコキシ置換基の炭素原子を含まない。
【0033】
用語「シクロアルキル」とは、場合により置換されていてよい非芳香族単環式、二環式または三環式炭素基を示す。適切な場合、シクロアルキル基は特定の数の炭素原子を有し得て、例えば、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキルは３個、４個、５個または６個の炭素原子を有する炭素環式基である。非限定的な例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニルなどを含む。いくつかの実施態様において、「シクロアルキル」とは、場合により置換されていてよい飽和単環式、二環式または三環式炭素基を示す。
【0034】
用語「アリール」とは、当業者により一般に理解される非置換または置換芳香族炭素環式置換基を示す。それは、用語アリールはヒュッケル則に従って、平面であり、かつ４ｎ＋２のπ電子を含む環状置換基を適用することが理解される。Ｃ６アリールが好ましい。
【0035】
特定の「Ｒ」基と関連して本明細書で特定的に使用される用語「ヘテロ環式」および「ヘテロシクリル」とは、環に５～７個の原子を有し得て、その原子の１～４個がヘテロ原子であるヘテロ環式化合物の環原子から水素原子を除去することにより得られる部分を示し、前記環は第二の環から離れているか、または第二の環と縮合し、ここで前記ヘテロ原子は独立して、Ｏ、ＮおよびＳから選択される。ヘテロ環式およびヘテロシクリルは、芳香族ヘテロシクリルおよび非芳香族ヘテロシクリルを含む。ヘテロ環式系は、ラジカルの任意の数の炭素原子またはヘテロ原子を介して別の部分と結合し得て、飽和および不飽和の両者であり得る。ヘテロシクリル系は、ラジカルの任意の数の炭素原子またはヘテロ原子を介して別の部分と結合し得て、飽和および不飽和の両者であり得る。ヘテロ環式の非限定的な例は、ピラゾール、イミダゾール、インドール、イソインドール、トリアゾール、ベンゾトリアゾール、テトラゾール、ピリミジン、ピリジン、ピラジン、ジアジン、トリアジン、テトラジン、ピロリジニル、ピロリニル、ピラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、ピラゾリニル、ジチオリル、オキサチオリル、ジオキサニル、ジオキシニル、オキサジニル、アゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、オキセピニルおよびチアピニル、イミダゾリニル、チオモルホリニルなどから選択され得る。
【0036】
用語「ヘテロアリール」または「芳香族ヘテロシクリル」とは、１以上の(特に１～４個の)非炭素原子(特に、Ｎ、ＯまたはＳ)またはその組合せを含むアリール基を示し、そのヘテロアリール基は場合により、１以上の炭素または窒素原子で置換されていてよい。ヘテロアリール環はまた、１以上の環状炭化水素、ヘテロ環式、アリールまたはヘテロアリール環と縮合し得る。ヘテロアリールは、限定されないが、１個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール(例えば、チオフェン、ピロール、フラン)；１，２位または１，３位に２個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール(例えば、オキサゾール、ピラゾール、イミダゾール、チアゾール、プリン)；３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール(例えば、トリアゾール、チアジアゾール)；４個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリールヘテロ原子(例えば、テトラゾール)；１個のヘテロ原子を有する６員ヘテロアリール(例えば、ピリジン、キノリン、イソキノリン、フェナントリン、５，６－シクロヘプテノピリジン)；２個のヘテロ原子を有する６員ヘテロアリール(例えば、ピリダジン、シンノリン、フタラジン、ピラジン、ピリミジン、キナゾリン)；３個のヘテロ原子を有する６員ヘテロアリール(例えば、１，３，５－トリアジン)；および４個のヘテロ原子を有する６員ヘテロアリールを含む。「置換ヘテロアリール」は、置換基として１以上の非干渉基を有し、かつ「場合により置換されていてよい」と定義される非干渉基を含むヘテロアリールを意味する。ヘテロアリールの例は、チオフェン、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、ベンゾイミダゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンズイソチアゾール、ナフト[２，３－ｂ]チオフェン、フラン、イソインドリジン、キサントレン、フェノキサチン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドール、イソインドール、１Ｈ－インダゾール、プリン、キノリン、イソキノリン、フタラジン、ナフチリジン、キノキサリン、シンノリン、カルバゾール、フェナントリジン、アクリジン、フェナジン、チアゾール、イソチアゾール、フェノチアジン、オキサゾール、イソキサゾール、フラザン、フェノキサジン、２－ピリジル、３－ピリジルまたは４－ピリジル、２－キノリル、３－キノリル、４－キノリル、５－キノリルまたは８－キノリル、１－イソキノリニル、３－イソキノリニル、４－イソキノリニル、または５－イソキノリニル、１－インドリル、２－インドリルまたは３－インドリルおよび２－チエニルまたは３－チエニルを含む。基は、末端基または架橋基であり得る。
【0037】
用語「アルキルアミン」および「ジアルキルアミン」とは、それぞれ、「Ｒ」および「Ｒ’」が場合により置換されていてよいアルキルである－ＮＨＲおよび－ＮＲＲ’基を示し、それらは独立して、上記で定義されるとおりであり得る。すなわち、ＲおよびＲ’は、必ずしもではないが、同一のアルキル部分であり得る。
【0038】
用語「アミン」は、－ＮＨ２、上記で定義される「アルキルアミン」および「ジアルキルアミン」を示し得る。
【0039】
用語「保護されたＯＨ」または「保護されたヒドロキシ」とは、Ｃ１－Ｃ３アシル、エーテルを形成するためのＣ１－Ｃ４アルキル基またはエーテルまたはＣ１－Ｃ４エステルを形成するアリール、例えばベンジルを含むアシル基、エーテル基またはエステル基のような一般的な保護基で保護されたヒドロキシル基を示す。
【0040】
式(Ｉ)および式(II)の化合物を含む第一の態様の化合物、例えば、「Ｎ－結合トリアゾール」、「Ｎ－結合ナフトトリアゾール」、「Ｎ－結合インダゾール」または「Ｎ－結合ヘテロ環」について本明細書で使用される用語「Ｎ－結合」は、ノイラミン酸中心(式(Ｉ)および式(II)中のＲ３)のＣ－４位で結合した部分を示し、その結合は、環炭素と窒素原子との間の直接結合を含むことに限定される。好ましくは、それは適切なヘテロ環の一部、例えば、トリアゾール環、インダゾール、ナフトトリアゾールなどの窒素の１つをそれ自体が形成する窒素原子を介してノイラミン酸核と結合したＲ３部分を示す
【0041】
構造において原子数の範囲が示されるとき(例えば、Ｃ１－Ｃ１２、Ｃ１－Ｃ１０、Ｃ１－Ｃ９、Ｃ１－Ｃ６、Ｃ１－Ｃ４、アルキルなど)は常に、任意の部分範囲またはその示された範囲に含まれる個々の炭素原子の数もまた使用されることが、具体的に企図される。このように、例えば、本明細書において参照された任意の化学基について使用される(例えば、アルキルなど)１～１２個の炭素原子(例えば、Ｃ１－Ｃ１２)、１～９個の炭素原子(例えば、Ｃ１－Ｃ９)、１～６個の炭素原子(例えば、Ｃ１－Ｃ６)、１～４個の炭素原子(例えば、Ｃ１－Ｃ４)、１～３個の炭素原子(例えば、Ｃ１－Ｃ３)または２～８個の炭素原子(例えば、Ｃ２－Ｃ８)の範囲の記載は、適切に、１個、２個、３個、４個、５、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個および／または１２個の炭素原子ならびにその任意の部分範囲(適切に、例えば、１～２個の炭素原子、１～３個の炭素原子、１～４個の炭素原子、１～５個の炭素原子、１～６個の炭素原子、１～７個の炭素原子、１～８個の炭素原子、１～９個の炭素原子、１～１０個の炭素原子、１～１１個の炭素原子、１～１２個の炭素原子、２～３個の炭素原子、２～４個の炭素原子、２～５個の炭素原子、２～６個の炭素原子、２～７個の炭素原子、２～８個の炭素原子、２～９個の炭素原子、２～１０個の炭素原子、２～１１個の炭素原子、２～１２個の炭素原子、３～４個の炭素原子、３～５個の炭素原子、３～６個の炭素原子、３～７個の炭素原子、３～８個の炭素原子、３～９個の炭素原子、３～１０個の炭素原子、３～１１個の炭素原子、３～１２個の炭素原子、４～５個の炭素原子、４～６個の炭素原子、４～７個の炭素原子、４～８個の炭素原子、４～９個の炭素原子、４～１０個の炭素原子、４～１１個の炭素原子および／または４～１２個の炭素原子など)を包含し、具体的に記載する。
【0042】
本明細書で使用される「対象」または「個体」または「患者」とは、治療が望ましい任意の対象、特に脊椎動物対象、およびより具体的には、哺乳動物対象を示す。適切な脊椎動物は、限定されないが、霊長類、鳥類、家畜(例えば、ヒツジ、ウシ、ウマ、ロバ、ブタ)、実験動物(例えば、ウサギ、マウス、ラット、モルモット、ハムスター)、コンパニオンアニマル(例えば、ネコ、イヌ)および捕獲野生動物(例えば、キツネ、シカ、ディンゴ)を含む。好ましい対象は、ウイルス感染により引き起こされる疾患または状態についての処置を必要とするヒトである。しかしながら、前記用語は症状が必ず存在することを示唆しないことが理解される。
【0043】
本明細書における「ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼ」、「ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼタンパク質」などへの言及は、「ヘマグルチニンおよび／またはノイラミニダーゼ機能」と相互変換可能であると考えられ得る。それらは赤血球凝集機能のブロックまたはノイラミニダーゼ(酵素)機能の阻害の一方または両方を包含すると考えられ得る。従って、赤血球凝集機能のブロックは、いかなる理論にも縛られないが、本明細書に記載の化合物の作用の一つのメカニズムであり得るヘマグルチニン－ノイラミニダーゼタンパク質の調節、ブロックまたは阻害を含み得る。
【0044】
本発明の第一の態様によれば、式(Ｉ)：
【化5】
〔式中、
Ｒ１はＣＯＯＨまたはその塩、Ｃ(Ｏ)ＮＲ９Ｒ１０、Ｃ(Ｏ)ＯＲ１１から成る群から選択され、ここで前記Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は独立して、水素、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキルおよび場合により置換されていてよいアリールから成る群から選択され；
Ｒ３は、場合により置換されていてよいＮ－結合ナフトトリアゾール、場合により置換されていてよいＮ－結合インダゾールおよび次の式のＮ－結合トリアゾール
【化6】
(式中、Ｒ２０は
【化7】
から成る群から選択され、ここで＊は結合点であり、前記Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は独立して、場合により置換されていてよいアルキル、場合により置換されていてよいアルケニル、置換アルキニル、場合により置換されていてよいシクロアルキル、場合により置換されていてよいアリール、場合により置換されていてよいヘテロアリール、場合により置換されていてよいヘテロシクリル、場合により置換されていてよいアルキルヘテロ環式、場合により置換されていてよいアルキルヘテロアリール、場合により置換されていてよいアルキルアミン、場合により置換されていてよいジアルキルアミンおよび化合物と別の式(Ｉ)の化合物を結合する場合により置換されていてよいリンカーから成る群から選択される)
から成る群から選択され；
Ｒ４はスルホンアミド、尿素およびＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１７から成る群から選択され、ここで前記Ｒ１７はＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルおよびＣ３－Ｃ６シクロアルキルから成る群から選択され、これらの全ては場合により置換されていてよく；
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は独立して、ＯＨ、保護されたＯＨ、ＮＨ２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＮＲ１８Ｒ１８’、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６ハロアルコキシ、－ＯＣ(Ｏ)Ｒ１８、－ＮＨ(Ｃ＝Ｏ)Ｒ１８およびＳ(Ｏ)ｎＲ１８から成る群から選択され、ここでｎ＝０～２であり、各Ｒ１８およびＲ１８’は独立して、水素、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキルおよび場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルカノイルから適切に選択される〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩が提供される。
【0045】
第一の態様のある態様において、式(Ｉ)の化合物は式(II)：
【化8】
〔Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は先に記載されるとおりである〕
の化合物である。
【0046】
式(Ｉ)または式(II)の化合物のある実施態様において、Ｒ１はＣＯＯＨもしくはその塩またはＣ(Ｏ)ＯＲ１１であり、ここで前記Ｒ１１はメチル、エチルおよびプロピルから選択される。
【0047】
ある特定の実施態様において、Ｒ１はＣＯＯＨ、ＣＯＯＮａおよびＣ(Ｏ)ＯＭｅから成る群から選択される。
【0048】
式(Ｉ)または式(II)の化合物のある実施態様において、Ｒ３が場合により置換されていてよいＮ－結合ナフトトリアゾールであるとき、それは次の式のものである。
【化9】
〔式中、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、ＲｅおよびＲｆは独立して、水素、ヒドロキシル、シアノ、ハロ、アミド、Ｃ１－Ｃ１２アルキル、Ｃ１－Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１－Ｃ１２ハロアルコキシ、Ｃ１－Ｃ１２アルカノイル、Ｃ１－Ｃ１２ハロアルカノイル、Ｃ１－Ｃ１２ハロアルキル、ピリジルおよびフェニルから成る群から適切に選択され、これらの全ては場合により置換されていてよい〕
【0049】
特定の実施態様において、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、ＲｅおよびＲｆは独立して、水素、ヒドロキシル、シアノ、ハロ、アセトアミド、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ９アルコキシ、Ｃ１－Ｃ９アルカノイル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、場合により置換されていてよいピリジルおよび場合により置換されていてよいフェニルから成る群から選択される。
【0050】
特定の実施態様において、ＲａとＲｂ；ＲｂとＲｃ；ＲｃとＲｄ；ＲｄとＲｅ；およびＲｅとＲｆの１以上は、５員または６員アリールまたはヘテロアリールまたはヘテロ環式環を形成し得る。
【0051】
式(Ｉ)または式(II)の化合物のある実施態様において、Ｒ３が場合により置換されていてよいＮ－結合インダゾールであるとき、それは次の式のものである。
【化10】
〔式中、Ｒｇ、Ｒｈ、ＲｉおよびＲｊは独立して、水素、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、シアノ、スルホニル、アミン、アミドおよびカルボキシルから成る群から選択され；
ＲｇおよびＲｈ、ＲｈおよびＲｉおよびＲｉおよびＲｊは一体となって、ヘテロアリール、ヘテロ環式またはアリール環を形成してよく、これらの各々は場合により置換されていてよい〕
【0052】
ある実施態様において、ＲｇとＲｈ、ＲｈとＲｉおよびＲｉとＲｊは一体となって、５員、６員または７員：ヘテロアリール、ヘテロ環式またはアリール環(特に、５員または６員ヘテロアリール、ヘテロ環式またはアリール環；より具体的には、１，３－ジオキソラン、ピリジン、チオフェン、イミダゾール、ピロールまたはフェニル)を形成してよく、これらの各々は場合により(特に、ハロおよびシアノの少なくとも１個で；より具体的には、Ｆ、Ｂｒおよびシアノの少なくとも１個で)置換されていてよい。
【0053】
特定の実施態様において、Ｒｇは水素、ヒドロキシル、シアノ、ハロ(フルオロを含む)、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、アミドおよびカルボキシルから成る群から選択される。
【0054】
ある実施態様において、Ｒｈは水素、ヒドロキシル、ハロ(フルオロまたはブロモを含む)、シアノ、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、スルホニル、カルボキシルおよびアミンから成る群から選択される。
【0055】
ある実施態様において、Ｒｇ、Ｒｈ、ＲｉおよびＲｊのいずれか１以上がアミンであるとき、それらはアルキルアミンまたはジアルキルアミンであり得る。
【0056】
特定の実施態様において、ＲｇおよびＲｈは一体となって、６員ヘテロアリールまたはアリール環を形成し得て、これらの各々は場合により置換されていてよい。
【0057】
ある実施態様において、Ｒｉは水素、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、シアノおよびカルボキシルから成る群から選択される。
【0058】
特定の実施態様において、ＲｈおよびＲｉは一体となって、５員または６員ヘテロ環式、ヘテロアリールまたはアリール環(例えば、１，３－ジオキソラン)を形成し得て、これらの各々は場合により置換されていてよい。
【0059】
ある実施態様において、Ｒｊは水素、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、アミドおよびカルボキシから成る群から選択される。
【0060】
特定の実施態様において、ＲｉおよびＲｊは一体となって、５員または６員ヘテロアリールまたはアリール環を形成し得て、これらの各々は場合により置換されていてよい。いくつかの実施態様において、ＲｉおよびＲｊは一体となって、ピロール、ピリジン、チオフェンまたはイミダゾール環(特に、ピリジン、チオフェンまたはイミダゾール環)を形成し得て、これらは場合により(特に、ハロおよびシアノの少なくとも１個で；より具体的には、Ｆ、Ｂｒおよびシアノの少なくとも１個で)置換されていてよい。
【0061】
ある実施態様において、Ｒｇは水素、ヒドロキシル、Ｂｒ、Ｆ、メトキシ、エトキシ、アセトアミドおよびカルボキシルから成る群から選択される。
【0062】
ある実施態様において、Ｒｈは水素、ヒドロキシル、Ｂｒ、Ｆ、トリフルオロアルキル、メトキシ、エトキシ、メチルスルホニル、シアノ、カルボキシル、ジメチルアミンおよびジエチルアミンから成る群から選択される。
【0063】
特定の実施態様において、ＲｇおよびＲｈは一体となって、場合により置換されていてよいフェニル環を形成し得る。
【0064】
ある実施態様において、Ｒｉは水素、ヒドロキシル、Ｂｒ、Ｆ、メトキシ、エトキシ、シアノおよびカルボキシルから成る群から選択される。
【0065】
特定の実施態様において、ＲｈおよびＲｉは一体となって、５員酸素含有ヘテロ環またはフェニル環を形成し得て、これらの各々は場合により置換されていてよい。
【0066】
ある実施態様において、Ｒｊは水素、ヒドロキシル、Ｂｒ、Ｆ、メトキシ、エトキシ、アセトアミドおよびカルボキシから成る群から選択される。
【0067】
特定の実施態様において、ＲｉおよびＲｊは一体となって、フェニル環を形成し得て、これらの各々は場合により置換されていてよい。
【0068】
ある実施態様において、Ｒ３が上記で定義される次の式のＮ－結合トリアゾール：
【化11】
〔式中、Ｒ２０は
【化12】
である〕
である場合、ある実施態様において、Ｒ２１は場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ１２アルキル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ１２アルケニル、場合により置換されていてよい５員または６員アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ１２アルキル－窒素ヘテロ環、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル－窒素ヘテロアリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ１２アルキルアミン、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ１２ジアルキルアミン、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－アリール－アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－シクロアルキル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＳＯ２－アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＳＯ２－Ｃ１－Ｃ６アルキル－アリールおよび化合物と別の式(Ｉ)の化合物を結合する場合により置換されていてよいリンカーから成る群から選択され得る。
【0069】
ある実施態様において、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は独立して、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ１２アルキル、場合により置換されていてよいＣ２－Ｃ１２アルケニル、場合により置換されていてよいＣ２－Ｃ１２アルキニル、場合により置換されていてよいＣ６シクロアルキル、場合により置換されていてよい５員または６員アリール、場合により置換されていてよい５員または６員ヘテロアリール、場合により置換されていてよい５員または６員ヘテロシクリル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル５員または６員ヘテロ環式、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル５員または６員ヘテロアリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ１２アルキルアミン、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ１２ジアルキルアミン、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－アリール－アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－シクロアルキル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＳＯ２－アリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＳＯ２－Ｃ１－Ｃ６アルキル－アリールおよび化合物と別の式(Ｉ)の化合物を結合する場合により置換されていてよいリンカーから成る群から選択される。
【0070】
ある実施態様において、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は独立して、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル、場合により置換されていてよいＣ２－Ｃ９アルケニル、場合により置換されていてよいＣ２－Ｃ９アルキニル、場合により置換されていてよいＣ６シクロアルキル、場合により置換されていてよい５員または６員アリール、場合により置換されていてよい５員または６員窒素ヘテロアリール、場合により置換されていてよい５員または６員窒素ヘテロシクリル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル５員または６員ヘテロ環式、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル、５員または６員窒素ヘテロアリール、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキルアミン、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９ジアルキルアミン、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－フェニル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－フェニル－フェニル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＣＯ－(３～６員)シクロアルキル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＳＯ２－フェニル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨ－ＳＯ２－Ｃ１－Ｃ６アルキル－フェニルおよび化合物と別の式(Ｉ)の化合物を結合する場合により置換されていてよいリンカーから成る群から選択される。
【0071】
特定の実施態様において、Ｒ２１は、アジド、場合により置換されていてよいアミノおよび場合により置換されていてよい５員窒素ヘテロアリールから成る群から選択される部分に結合する対応する鎖の末端炭素を有する、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル、Ｃ２－Ｃ９アルケニルおよびＣ２－Ｃ９アルキニルから選択され得る。好ましくは、場合により置換されていてよい５員窒素ヘテロアリールはピロール、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、テトラゾール、ベンゾトリアゾールおよびイソインドールから成る群から選択され、これらの各々は適切に、場合により置換されていてよい。より好ましくは、場合により置換されていてよい５員窒素ヘテロアリールは、場合により置換されていてよいトリアゾールである。
【0072】
特定の実施態様において、Ｒ２１は場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル、Ｃ２－Ｃ９アルケニル、Ｃ２－Ｃ９アルキニル、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキルアミノ、場合により置換されていてよいフェニル(特に、任意の置換基は、ハロ、－ＯＣ１－Ｃ６アルキル、Ｏ－Ｃ１－Ｃ６－ハロアルキル、ニトロおよびＣ１－Ｃ６－アルキルから成る群の少なくとも１つから選択される)、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨＣＯ－フェニル(特に、フェニルは場合により、－Ｎ(Ｃ１－Ｃ６アルキル)２およびフェニルから成る群の少なくとも１つで置換されていてよい)、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨＳＯ２－フェニル(特に、フェニルは場合によりニトロで置換されていてよい)、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨＳＯ２－Ｃ１－Ｃ６アルキル－フェニルおよび場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルキル－ＮＨＣＯ－(３～６員)シクロアルキルから選択され得る。
【0073】
特定の実施態様において、Ｒ２３はＣ１－Ｃ６アルキルおよび場合により置換されていてよいフェニル(特に、任意の置換基は、ニトロであり得る)から選択され得る。
【0074】
Ｒ２１が化合物と別の式(Ｉ)の化合物を結合する場合により置換されていてよいリンカーであるとき、リンカーは、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ１２アルキル；場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ９アルキル；場合により置換されていてよいＣ２－Ｃ９アルケニル；および場合により置換されていてよいＣ２－Ｃ９アルキニルから成る群から選択され得て；これらのいずれかは５員窒素ヘテロアリールに結合し得る。適切には、５員窒素ヘテロアリールはトリアゾールであり得る。
【0075】
Ｒ２１が化合物と別の式(Ｉ)の化合物を結合する場合により置換されていてよいリンカーであるとき、式(Ｉ)の化合物は次の式のものであり得る。
【化13】
〔式中、
Ｒ１、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は先に定義されるとおりであり、
リンカーはＣ１－Ｃ１２アルキル；Ｃ１－Ｃ９アルキル；Ｃ２－Ｃ９アルケニル；およびＣ２－Ｃ９アルキニルから選択され；これらのいずれかは場合により置換されていてよく、場合により５員窒素ヘテロアリールに結合していてよい〕
【0076】
任意の置換基は先に定義されたとおりであり得て、ヒドロキシル、アリール、ヘテロアリール、アミドおよびエーテルの１以上を有するものが、特に好ましい。
【0077】
特定の実施態様において、リンカーは次のもの：
Ｃ１－Ｃ１２アルキル、Ｃ１－Ｃ９アルキル、Ｃ２－Ｃ９アルケニル、Ｃ２－Ｃ９アルキニル、
【化14】
【化15】
から選択され、ここで言及された前記Ｃ１－Ｃ１２アルキル、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ１－Ｃ２０アルキル部分は全て、ヒドロキシル、アリール、ヘテロアリール、アミドおよびエーテルの１以上で場合により置換されていてよい。
【0078】
ある実施態様において、２個のトリアゾール環に結合したＣ１～Ｃ２０アルキルを有する構造において、Ｃ１～Ｃ２０アルキルはＣ１～Ｃ１６アルキル、Ｃ１～Ｃ１２アルキル、Ｃ１～Ｃ９アルキルおよびＣ１～Ｃ６アルキルから成る群から選択され得て、これらは全て、アリール、ヘテロアリール、アミドおよびエーテルの１以上で場合により置換されていてよい。
【0079】
特定の実施態様において、Ｒ３は：
【化16】
【化17】
【化18】
【化19】
から成る群から選択され得る。
【0080】
特定の部分または上記に列挙された任意のＲ３基の開示は、本明細書に記載のＲ１、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７またはＲ８基のいずれかの開示と組み合わせられ得る。
【0081】
先に記載された実施態様のいくつかにおいて、Ｒ４は－ＮＨＳ(Ｏ)２Ｒ２７から成る群から選択され得て、ここで前記Ｒ２７はＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルおよびＣ３－Ｃ６シクロアルキルから成る群から成る群から選択され、これらの全ては場合により－ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨＲ１７で置換されていてよく、ここで前記Ｒ１７は先で定義されたとおりであり得て、次のものであり得る。
【化20】
【化21】
【0082】
第一の態様について記載された式のいずれかの実施態様において、Ｒ４は－ＮＨＡｃ、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ(ＣＨ３)２、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＦ３および－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択される。
【0083】
式(Ｉ)または式(II)の化合物のいずれかの実施態様において、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は独立して、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ３アルコキシ、－ＯＣ(Ｏ)Ｒ１８から成る群から選択され得て、ここで前記Ｒ１８は場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ３アルキル、および－ＮＲ１８Ｒ１８’であり、ここで前記Ｒ１８およびＲ１８’は水素、場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ３アルキルおよび場合により置換されていてよいＣ１－Ｃ６アルカノイルから選択される。Ｒ１８がＣ(Ｏ)Ｒ(すなわちアルカノイル)であるとき、「Ｒ」はＣ１－Ｃ６アルキルまたはＣ５－Ｃ６シクロアルキルであり得る。
【0084】
第一の態様について記載された式のいずれかの実施態様において、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は独立して、ＯＨおよびＯＡｃから選択され得る。
【0085】
ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物は、式(IIIa)または式(IIIb)の化合物であり得る。
【化22】
〔式中、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、ＲｅおよびＲｆは先に記載されるとおりである〕
【0086】
式(IIIa)または式(IIIb)の特定の実施態様において、Ｒ１はＣＯＯＨもしくはその塩またはＣ(Ｏ)ＯＲ１１から選択され得て、ここで前記Ｒ１１はメチル、エチルおよびプロピルから選択され、好ましくは、Ｒ１はＣＯＯＨ、ＣＯＯＮａおよびＣ(Ｏ)ＯＭｅから選択され；Ｒ４は－ＮＨＡｃ、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ２(ＣＨ３)２、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＦ３、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ２ＣＨ３、－ＮＨＳ(Ｏ)２Ｒ２７から選択され、ここで前記Ｒ２７はＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキルおよびＣ３－Ｃ６シクロアルキルから成る群から選択され、これらの全ては場合により－ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨＲ１７で置換されていてよく、ここで前記Ｒ１７は先に定義されるとおりであり；Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は独立して、ＯＨおよびＯＡｃから選択され得る
【0087】
ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物は、式(IVa)または式(IVb)の化合物であり得る。
【化23】
〔式中、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒｇ、Ｒｈ、ＲｉおよびＲｊは先に記載されるとおりである〕
【0088】
式(IVa)および式(IVb)の特定の実施態様において、Ｒ１はＣＯＯＨもしくはその塩またはＣ(Ｏ)ＯＲ１１であり得て、ここで前記Ｒ１１はメチル、エチルおよびプロピルから選択され、好ましくは、Ｒ１はＣＯＯＨ、ＣＯＯＮａおよびＣ(Ｏ)ＯＭｅから選択され；Ｒ４は－ＮＨＡｃ、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ２(ＣＨ３)２、－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＦ３および－ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され；Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は独立して、ＯＨおよびＯＡｃから選択され得る。
【0089】
ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物は、式Va、式Vb、式VIa、式VIb、式VIIaおよび式VIIbのいずれか１以上であり得る。
【化24】
〔式中、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２３は、第一の態様のいずれか１以上について先に定義されるとおりである〕
【0090】
式(Va)および式(Vb)のある実施態様において、化合物は下記の式のものである。
【化25】
〔式中、
ｎは１～９、好ましくは、１～６であり、
ここでＲ２４は、アジド；場合によりさらなる環系と縮合していてよい５員窒素ヘテロアリール；ＣＯＯＲ３０から成る群から選択され、ここで前記Ｒ３０は水素、Ｃ１－Ｃ１２アルキルおよびアリール；および－ＮＲ２５Ｒ２６から成る群から選択され、ここで前記Ｒ２５およびＲ２６は独立して、水素およびＣ１－Ｃ６アルキルから選択される〕
【0091】
ある実施態様において、Ｒ２４が場合によりさらなる環系と縮合していてよい５員窒素ヘテロアリールであるとき、それはフェニル環を含む５員または６員アリール環と縮合し得る。例えば、イソインドールおよび類似の縮合環系が形成され得る。
【0092】
上記の式の化合物は、本明細書に記載の式(Ｉ)の化合物の二量体の形成における使用に適切であり得る。すなわち、特定の式VaおよびVbの化合物は、特に、式(Ｉ)の二量体への変換に有用であり得る。
【0093】
式(Ｉ)および式(II)の実施態様において、化合物は
【化26】
【化27】
【化28】
【化29】
【化30】
【化31】
【化32】
ならびに遊離のヒドロキシルの水素を置換するアセチルを含むその保護された形態、Ｃ－２カルボキシ基がプロトン化された形態、ナトリウム塩形態またはプロドラッグ形態であるその全てのＣ－２アナログからなる群から選択され得て、ここで各化合物は、Ｒ４位は任意の－ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ基で明確に置換され、ここで前記ＲはＣ１－Ｃ４アルキルまたはハロアルキルである、開示された密接なアナログを有すると考えられ得る。
【0094】
ＣＯＯＨ基は塩形態またはエステル保護基、例えば、メチルエステル基と容易に相互変換可能であり、そのため、全てのこのような形態は上記で列挙された化合物について本明細書で開示されていると考えられることが、合成化学の当業者により理解される。
【0095】
上記の化合物のプロドラッグ形態は、Ｃ１－Ｃ２０エステルまたはシクロアルキルを含むエステルまたはアリール部分を含むと明示的に考えられ得る。アリール部分は、置換フェニルまたは縮合２～３環式芳香環を含み得る。
【0096】
ある実施態様において、第一の態様の化合物はヘマグルチニン－ノイラミニダーゼモジュレーターである。すなわち、第一の態様の化合物はヘマグルチニンおよび／またはノイラミニダーゼ機能のモジュレーターである。好ましくは、一の態様の化合物はヘマグルチニン－ノイラミニダーゼ阻害剤である。すなわち、ヘマグルチニンおよび／またはノイラミニダーゼ機能の阻害剤である。これはヘマグルチニンタンパク質の調節による赤血球凝集機能のブロックを含み得る。
【0097】
ある実施態様において、ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼ阻害剤は、インフルエンザまたはパラインフルエンザヘマグルチニンおよび／またはノイラミニダーゼ阻害剤またはブロッカーであることが好ましいことがある。換言すると、ある実施態様において、ヘマグルチニンおよび／またはノイラミニダーゼ機能の阻害剤はインフルエンザまたはパラインフルエンザヘマグルチニンおよび／またはノイラミニダーゼ機能の阻害剤であることが好ましいことがある。これは、インフルエンザまたはパラインフルエンザ赤血球凝集機能のブロックおよびインフルエンザヘマグルチニンタンパク質またはパラインフルエンザヘマグルチニン－ノイラミニダーゼタンパク質のそのような調節を含み得る。
【0098】
本発明の化合物に到達するために、多くの合成経路が利用され得る。実験項には、特定の本発明の阻害剤が参照化合物として合成される特定の経路が記載される。第一の態様の化合物の合成にもまた適用され得る関連する合成技術は、Nature Scientific Reports, 7:4507, 03 July 2017；Angew. Chem. Int. Ed. 2015, 54, 2936-2940；Nature Scientific Reports, 6:24138, 07 April 2016；Med. Chem. Commun., 2017, 8, 130-134; J. Med. Chem. 2014, 57, 7613-7623；Carbohydr. Res. 244, 181-185 (1993) ；Nature Communications, 5:5268, 20 Oct 2014; Viruses, 2019, 11, 417, 05 May 2019；Carbohydr. Res. 342, 1636-1650 (2007) ；Bioorg. Med. Chem. Lett. 16, 5009-5013 (2006)；ＰＣＴ出願国際公開第２００２０７６９７１号；およびＰＣＴ出願国際公開第２０１６０３３６６０号に開示され、これらの各々は全体の参照より本明細書に包含させる。このような技術および合成アプローチは、全ての第一の態様の化合物に到達するために使用され得る。
【0099】
本発明の第二の態様によれば、有効量の任意の実施態様もしくは第一の態様の式の化合物またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体、希釈剤および／または賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
【0100】
適切には、医薬組成物はウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態の処置または予防のためのものである。
【0101】
医薬組成物は、２以上の式(Ｉ)の化合物を含み得る。組成物が２以上の化合物を含むとき、化合物は任意の比で存在し得る。組成物は既知の共活性剤、送達ビークルまたはアジュバントをさらに含み得る。
【0102】
いずれかの実施態様または第一の態様の式の化合物は、処置の対象である疾患、障害または状態を阻害または改善するために十分な量で医薬組成物中に存在する。化合物およびそのような化合物を含む医薬組成物の適切な投与形態および速度は、当業者によって容易に決定され得る。
【0103】
投与形態は、錠剤、分散剤、噴霧剤、エアロゾル剤、懸濁液剤、注射剤、溶液剤、シロップ剤、トローチ剤、カプセル剤などであり得る。
【0104】
本発明の第三の態様は、いずれかの実施態様または第一の態様の式の化合物またはその薬学的に有効な塩または第二の態様の医薬組成物を患者に投与する段階を含む、患者におけるウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態を処置する方法に属する。
【0105】
本発明の第四の態様は、患者におけるウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態の処置における使用のための、いずれかの実施態様または第一の態様の式またはその薬学的に有効な塩の化合物または第二の態様の医薬組成物を提供する。
【0106】
本発明の第五の態様は、ウイルス感染により引き起こされる疾患、障害または状態の処置のための医薬の製造における、いずれかの実施態様または第一の態様の式の化合物またはその薬学的に有効な塩の使用を提供する。
【0107】
第三の、第四または第五の態様のある実施態様において、疾患、障害または状態は、インフルエンザおよび／またはパラインフルエンザウイルスにより引き起こされる感染症である。
【0108】
感染症は、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、Ｄ型インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、呼吸器多核体ウイルス(ＲＳＶ)およびヒトメタニューモウイルス(ｈＭＰＶ)の１以上により引き起こされ得る。
【0109】
疾患、障害または状態がパラインフルエンザウイルス感染であるとき、それはｈＰＩＶ－１、－２、－３および－４ウイルスからなる群から選択され得る。これらは全てのウイルスサブタイプ、例えば、４ａおよび４ｂを含み得る。
【0110】
疾患、障害または状態がＲＳＶにより引き起こされるとき、それはＡおよび／またはＢサブタイプ、例えば、ｈＲＳＶ－ＡおよびｈＲＳＶ－Ｂであり得る。
【0111】
疾患、障害または状態がｈＭＰＶにより引き起こされるとき、それはｈＭＰＶ Ａ１、Ａ２、Ｂ１およびＢ２サブタイプのいずれか１以上により引き起こされ得る
【0112】
好ましくは、患者は飼育動物または家畜またはヒトである。
【0113】
本発明の第六の態様は、ウイルス性ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼといずれかの実施態様または第一の態様の式の化合物と接触させる段階を含む、ウイルス性ヘマグルチニンおよび／またはノイラミニダーゼ機能を調節する方法を提供する。
【0114】
好ましくは、調節はウイルス性ヘマグルチニンおよび／またはノイラミニダーゼ機能またはウイルス性ヘマグルチニン－ノイラミニダーゼ酵素を阻害することを含む。
【0115】
次の実験項には、特定の本発明の化合物およびこれらの抗ウイルス活性の特徴がより詳細に記載される。これは、本発明を何ら限定することなく、本発明の化合物の特定の具体的な実施態様およびそれらの有効性を示すことを意図する。
【実施例】
【0116】
化学
一般的方法
試薬および乾燥溶媒は、商業的な供給元から購入し、さらに精製することなく使用した。無水反応は、アルゴン雰囲気下、オーブン乾燥したガラス器具中で実施した。シリカゲル６０ Ｆ２５４(Ｅ．Ｍｅｒｃｋ)でコーティングされたアルミニウムプレート上の薄層クロマトグラフィー(ＴＬＣ)を用いて、反応をモニタリングした。展開したプレートを２５４ｎｍでＵＶ光下で観察し、Ｈ２ＳＯ４のＥｔＯＨ溶液(５％ ｖ／ｖ)の適用および加熱後に可視化した。蒸留した溶媒を用いて、シリカゲル６０(０.０４０～０.０６３ｍｍ)上でフラッシュクロマトグラフィーを実施した。ＢｒｕｋｅｒＡｖａｎｃｅ ４００ＭＨｚスペクトロメーターで、１Ｈおよび１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを４００ＭＨｚおよび１００ＭＨｚでそれぞれ記録した。内部標準[１ＨについてはＣＤＣｌ３：７.２６(ｓ)、１３Ｃについては７７.０(ｔ)；１ＨについてはＣＤ３ＯＤ：４.７８(ｓ)および３.３１(ｐｅｎｔ)、１３Ｃについては４９.１５(ｈｅｐｔ)；Ｄ２Ｏ：１Ｈについては４.７９(ｓ)]として、残存溶媒と比較して、化学シフト(δ)を百万分率で示す。帰属を裏付けるために、２Ｄ ＣＯＳＹおよびＨＳＱＣ試験を実施した。BrukerDaltonics Esquire 3000 ESIスペクトロメーターで、ポジティブモードを用いて、エレクトロスプレーイオン化モードで、低分解能質量スペクトル(ＬＲＭＳ)を実施した。
【0117】
合成
ナフトトリアゾール合成
【化33】
スキーム１．「ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－(３Ｈ－ナフト[１，２－ｄ][１，２，３]トリアゾール－３－イル)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１７７８－６４)」の合成。
【0118】
アジド誘導体１(６０ｍｇ、０.１３ｍｍｏｌ)の無水アセトニトリル(３ｍＬ)溶液にフッ化セシウム(４０ｍｇ、０.２６ｍｍｏｌ)を添加し、１－(トリメチルシリル)－２－ナフチルトリフルオロメタンスルホネート(５５μＬ、０.１９７ｍｍｏｌ)を添加し、アルゴン下、反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ３(２０ｍＬ)を添加し、混合物を酢酸エチル(１００ｍＬ)で抽出した。有機層を分離し、水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。乾燥させた有機溶媒を真空下で濃縮し、酢酸エチル：ヘキサン(６：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏの１：１混合物(２ｍＬ)に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後、溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液を、その後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調製し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いて、化合物をＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭ カートリッジで精製し、凍結乾燥した後、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１７７８－６４を綿毛状の白色粉末(３８ｍｇ、２工程で収率６４％)として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.６２(ｓ、３Ｈ)、３.６３－３.７６(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１２.１、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０７(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.５８(ｔ、Ｊ＝１０.３Ｈｚ、１Ｈ)、４.６７－４.７４(ｍ、１Ｈ)、５.９１(ｄｄ、Ｊ＝９.７、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、６.１２(ｄ、Ｊ＝２.３Ｈｚ、１Ｈ)、７.６０－７.７３(ｍ、２Ｈ)、７.７４－７.８３(ｍ、１Ｈ)、７.９０(ｄ、Ｊ＝９.１Ｈｚ、１Ｈ)、８.０３(ｄ、Ｊ＝８.０Ｈｚ、１Ｈ)、８.５１(ｄ、Ｊ＝８.２Ｈｚ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)： ２１.４４、４８.０７、５９.０１、６３.０９、６８.１０、６９.７６、７５.３９、１０２.３７、１０９.５２、１２１.３０、１２４.００、１２６.９６、１２８.５０、１２８.９１、１３０.２６、１３０.６２、１３１.４２、１４１.５６、１５０.４８、１６８.８３、１７３.２２；ＬＲＭＳ[Ｃ２１Ｈ２１Ｎ４ＮａＯ７](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)４８７.１[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0119】
【化34】
スキーム２．鍵中間体「２，６－アンヒドロ－４－アジド－３，４，５－トリデオキシ－５－(２，２，２－トリフルオロアセトアミド)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１５３０－５７)」の一工程合成。
【0120】
アジド誘導体１(１００ｍｇ、０.２２ｍｍｏｌ)のアセトニトリル(０.５ｍＬ)溶液にトリフルオロ酢無水物(２２０μＬ、１.５４ｍｍｏｌ)を添加し、混合物をマイクロ波中、１３５℃で１０分間加熱した。冷却後、ＭｅＯＨ(１ｍＬ)を添加し、反応混合物を真空下で濃縮した。ヘキサン：アセトン(３：２)を溶媒として用いて、シリカゲルクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、純粋なＩＥ１５３０－５７(８４ｍｇ、７５％)を得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３)：δ ２.０５(ｓ、３Ｈ)、２.０８(ｓ、３Ｈ)、２.１４(ｓ、３Ｈ)、３.８２(ｓ、３Ｈ)、３.９２(ｑ、Ｊ＝８.９Ｈｚ、１Ｈ)、４.１９(ｄｄ、Ｊ＝１２.５、６.５Ｈｚ、１Ｈ)、４.４７－４.５７(ｍ、２Ｈ)、４.６６(ｄｄ、Ｊ＝１２.５、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、５.３１(ｔｄ、Ｊ＝６.０、５.４、２.８Ｈｚ、１Ｈ)、５.３９(ｄｄ、Ｊ＝５.２、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、６.０２(ｄ、Ｊ＝２.７Ｈｚ、１Ｈ)、７.２２(ｄ、Ｊ＝８.８Ｈｚ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３)：δ ２０.６１、２０.６６、２０.８７、４９.０５、５２.７７、５７.０３、６１.７９、６７.５４、７０.８４、７５.０１、１０７.０５、１１５.３９(ｑ、Ｊ＝２８８.０Ｈｚ)、１４５.２５、１５７.６６(ｄ、Ｊ＝３８.３Ｈｚ)、１６１.２５、１７０.５０、１７０.６５、１７０.９２；ＬＲＭＳ[Ｃ１８Ｈ２１Ｆ３Ｎ４Ｏ１０](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５３３.２[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0121】
【化35】
スキーム３．「ナトリウム ２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－(２，２，２－トリフルオロアセトアミド)－４－(３Ｈ－ナフト[１，２－ｄ][１，２，３]トリアゾール－３－イル)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１７７８－７４)」の合成。
【0122】
アジド誘導体ＩＥ１５３０－５７(６０ｍｇ、０.１１８ｍｍｏｌ)無水アセトニトリル(３ｍＬ)溶液にフッ化セシウム(３６ｍｇ、０.２４ｍｍｏｌ)を添加し、１－(トリメチルシリル)－２－ナフチルトリフルオロメタンスルホネート(５０μＬ、０.１７７ｍｍｏｌ)を添加し、アルゴン下、反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ３(２０ｍＬ)を添加し、混合物を酢酸エチル(１００ｍＬ)で抽出した。有機層を分離し、水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。乾燥させた有機溶媒を真空下で濃縮し、ヘキサン：アセトン(２：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏの１：１混合物(２ｍＬ)に懸濁した。０℃で、この懸濁液にトリエチルアミン(１ｍＬ)を滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。溶液を真空下で濃縮し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨを８.０に調製し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、凍結乾燥した後、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１７７８－７４を綿毛状の黄色粉末(３６ｍｇ、２工程で５９％)として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ３.６３－３.７５(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０８(ｄｄｄ、Ｊ＝９.４、６.５、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.６６－４.７３(ｍ、１Ｈ)、４.７５(ｓ、１Ｈ)、５.９９(ｄｄ、Ｊ＝９.５、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、６.１４(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.６７－７.７７(ｍ、２Ｈ)、７.８１(ｄｄｄ、Ｊ＝８.２、７.１、１.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.９５(ｄ、Ｊ＝９.２Ｈｚ、１Ｈ)、８.０７(ｄ、Ｊ＝８.０Ｈｚ、１Ｈ)、８.５３－８.６０(ｍ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ４９.４９、５８.８６、５８.９５、６３.１０、６８.２７、６９.７８、７５.５６、１０２.４１、１０９.７０、１２１.３４、１２４.０１、１２７.０３、１２８.５４、１２８.９７、１３０.３３、１３０.７４、１３１.４６、１４１.６３、１５０.５６、１６８.７７；ＬＲＭＳ[Ｃ２１Ｈ１８Ｆ３Ｎ４ＮａＯ７](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５４１.１[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0123】
インダゾール合成
【化36】
スキーム４．「ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－４－(２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１５３０－６６)」の合成。
【0124】
アミン誘導体２(６０ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ)の無水アセトニトリル(１ｍＬ)溶液に２－アジドベンズアルデヒド(３０ｍｇ、０.２１ｍｍｏｌ)を添加し、反応混合物をマイクロ波照射下、１３５℃で１５分間加熱した。混合物を静置し、室温まで冷却し、真空下で濃縮し、酢酸エチル：ヘキサン(４：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、凍結乾燥した後、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１５３０－６６を綿毛状粉末(３３ｍｇ、２工程で５８％)として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.８３(ｓ、３Ｈ)、３.６３－３.７３(ｍ、２Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.４７－４.６１(ｍ、２Ｈ)、５.４０－５.４７(ｍ、１Ｈ)、５.９３(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.１８(ｄｄｄ、Ｊ＝８.５、６.６、０.９Ｈｚ、１Ｈ)、７.４１(ｄｄｄ、Ｊ＝８.８、６.７、１.１Ｈｚ、１Ｈ)、７.６７(ｄ、Ｊ＝８.８Ｈｚ、１Ｈ)、７.７９(ｄ、Ｊ＝８.５Ｈｚ、１Ｈ)、８.３５(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：２１.６１、４８.９８、６１.７８、６３.１０、６８.１８、６９.７８、７５.３９、１０３.５４、１１６.０２、１２０.９４、１２２.０１、１２４.７０、１２７.２８、１４８.４２、１４９.７７、１６９.０８、１７３.４６；ＬＲＭＳ[Ｃ１８Ｈ２０Ｎ３ＮａＯ７](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)４３６.２[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0125】
【化37】
スキーム５．中間体アミン(１５３０－６１)および最終阻害剤(ＩＥ１５３０－７４)の合成
【0126】
メチル ７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－４－アミノ－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－５－(２，２，２－トリフルオロアセトアミド)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１５３０－６１)
【化38】
アジド誘導体ＩＥ１５３０－５６(２００ｍｇ、０.４１ｍｍｏｌ)のエタノール(５ｍＬ)溶液にリンドラー触媒(２０ｍｇ)を添加し、Ｈ２雰囲気下、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応完了後、反応混合物をセライトベッドでろ過し、エタノール(５０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液を合わせ、真空下で濃縮し、良好な純度の粗製のＩＥ１５３０－６１(定量的収率)を得て、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。ＬＲＭＳ[Ｃ１８Ｈ２６Ｎ２Ｏ１０](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５０７.２[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0127】
ナトリウム ２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－(２Ｈ－インダゾール－２－イル)－５－(２，２，２－トリフルオロアセトアミド)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１５３０－７４)
【化39】
アミン誘導体ＩＥ１５３０－６１(５０ｍｇ、０.１０３ｍｍｏｌ)の無水アセトニトリル(１ｍＬ)に２－アジドベンズアルデヒド(２２ｍｇ、０.１５ｍｍｏｌ)を添加し、反応混合物をマイクロ波照射下、１３５℃で１５分間加熱した。混合物を静置し、室温まで冷却し、真空下で濃縮し、酢酸エチル：ヘキサン(３：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にトリエチルアミン(１ｍＬ)を滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。溶液を真空下で濃縮し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨを８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１５３０－７４(２６ｍｇ、２工程で５５％)。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ３.６３－３.７３(ｍ、２Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０５(ｄｄｄ、Ｊ＝９.４、６.４、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.５８－４.７７(ｍ、２Ｈ)、５.５４(ｄｄ、Ｊ＝９.４、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.９９(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.１９(ｄｄｄ、Ｊ＝８.５、６.７、０.９Ｈｚ、１Ｈ)、７.４２(ｄｄｄ、Ｊ＝８.８、６.６、１.１Ｈｚ、１Ｈ)、７.６６(ｄｄ、Ｊ＝８.８、１.０Ｈｚ、１Ｈ)、７.７９(ｄ、Ｊ＝８.５Ｈｚ、１Ｈ)、８.３９(ｄ、Ｊ＝１.０Ｈｚ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：４９.７９、６１.２９、６３.０５、６８.２１、６９.７３、７４.９３、１０３.１８、１１１.１９－１１９.６３(ｍ)、１２０.９４、１２１.４６、１２２.１６、１２４.６９、１２７.４４、１４８.５７、１５０.０６、１５８.３２(ｑ、Ｊ＝３８.０、３７.１Ｈｚ)、１６８.８５；ＬＲＭＳ[Ｃ１８Ｈ１７Ｆ３Ｎ３ＮａＯ７](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)４９０.２[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0128】
【化40】
スキーム６．「ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－４－(２Ｈ－ベンゾ[ｇ]インダゾール－２－イル)－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１５３０－６５)」の合成。
【0129】
アミン誘導体２(６０ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ)の無水アセトニトリル(１ｍＬ)溶液に１－アジド－２－ナフトアルデヒド(４１ｍｇ、０.２１ｍｍｏｌ)を添加し、反応混合物をマイクロ波照射下、１３５℃で１５分間加熱した。混合物を静置し、室温まで冷却し、真空下で濃縮し、酢酸エチル：ヘキサン(３：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５)まで酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、凍結乾燥した後、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１５３０－６５を綿毛状粉末(３６ｍｇ、２工程で５６％)として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.８１(ｓ、３Ｈ)、３.６３－３.７５(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０４(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.５１(ｔ、Ｊ＝１０.２Ｈｚ、１Ｈ)、４.５６－４.６４(ｍ、１Ｈ)、５.４３(ｄｄ、Ｊ＝９.５、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.９７(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.４３(ｄ、Ｊ＝９.０Ｈｚ、１Ｈ)、７.５６－７.６９(ｍ、３Ｈ)、７.８６－７.９５(ｍ、１Ｈ)、８.２７(ｓ、１Ｈ)、８.４３－８.５０(ｍ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.６２、４９.０９、６１.５４、６３.１１、６８.１９、６９.７９、７５.４８、１０３.５１、１１８.６９、１１８.８９、１２１.７４、１２３.６２、１２４.０５、１２５.２１、１２６.９３、１２７.２８、１２８.６５、１３２.４９、１４５.８２、１４９.９４、１６９.１３、１７３.４８；ＬＲＭＳ[Ｃ２２Ｈ２２Ｎ３ＮａＯ７](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)４８６.２[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0130】
【化41】
スキーム７．「ナトリウム ２，６－アンヒドロ－４－(２Ｈ－ベンゾ[ｇ]インダゾール－２－イル)－３，４，５－トリデオキシ－５－(２，２，２－トリフルオロアセトアミド)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１５３０－６９)」の合成。
【0131】
アミン誘導体ＩＥ１５３０－６１(５０ｍｇ、０.１０３ｍｍｏｌ)の無水アセトニトリル(１ｍＬ)溶液に１－アジド－２－ナフトアルデヒド(３０ｍｇ、０.１５ｍｍｏｌ)を添加し、反応混合物をマイクロ波照射下、１３５℃で１５分間加熱した。混合物を静置し、室温まで冷却し、真空下で濃縮し、酢酸エチル：ヘキサン(２：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にトリエチルアミン(１ｍＬ)を滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。溶液を真空下で濃縮し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨを８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１５３０－６９(２８ｍｇ、２工程で５９％)を得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ３.６４－３.７４(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１１.９、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０６(ｄｄｄ、Ｊ＝９.４、６.４、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.５９(ｔ、Ｊ＝１０.２Ｈｚ、１Ｈ)、４.６９－４.７６(ｍ、１Ｈ)、５.５２(ｄ、Ｊ＝８.８Ｈｚ、１Ｈ)、６.０４(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.４５(ｄ、Ｊ＝９.１Ｈｚ、１Ｈ)、７.６３(ｄｄ、Ｊ＝１９.３、８.１Ｈｚ、３Ｈ)、７.９１(ｄ、Ｊ＝７.２Ｈｚ、１Ｈ)、８.３１(ｓ、１Ｈ)、８.４５(ｄ、Ｊ＝８.２Ｈｚ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ５０.１７、６１.１１、６３.０８、６８.２４、６９.７５、７５.０９、１１５.５３(ｑ、Ｊ＝２８６.１、２８５.１Ｈｚ)、１１８.８３、１２１.８４、１２３.７９、１２３.９９、１２５.０３、１２６.９４、１２７.３６、１２８.６４、１３２.５４、１４５.９８、１５０.３０、１５８.３７(ｄ、Ｊ＝３７.７Ｈｚ)，１６８.９２；ＬＲＭＳ [Ｃ２２Ｈ１９Ｆ３Ｎ３ＮａＯ７](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５４０.２[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0132】
別のインダゾール合成
先に記載されたインダゾールの合成方法は、マイクロ波リアクター中、高温でアミンを２－アジド－１－カルボキシアルデヒド誘導体と加熱し、一工程でイミン形成および環化をさせることを含んだ。この方法は、全ての２－アジド－１－カルボキシアルデヒド誘導体で使用することはできないことが分かった。従って、下記に示す銅触媒によるワンポット合成が開発された。
【化42】
スキーム８．ＩＥ１９９３－８の合成
【0133】
実験方法：
アルゴン下、アミン(５０ｍｇ、０.１０３ｍＭ)、２－アジド－１－カルボキシアルデヒド誘導体(１.２当量)、ＣｕＩ(０.１当量)および４Ａモレキュラーシーブ(５０ｍｇ)の混合物の乾燥１，４－ジオキサン(２ｍＬ)溶液にテトラメチルエチレンジアミン(ＴＭＥＤＡ、１.０当量)を添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、その後セライトでろ過し、濃縮し、フラッシュシリカカラムクロマトグラフィーにより精製した。
【0134】
【化43】
スキーム９．インダゾールの一般的な合成
【0135】
インダゾールの一般的な合成インダゾール(スキーム９)
アルゴン下、アミン(１.０当量)、２－アジド－１－カルボキシアルデヒド誘導体(１.２当量)、ＣｕＩ(０.１当量)および４Ａモレキュラーシーブ(５０ｍｇ)の混合物の乾燥１，４－ジオキサン(２ｍＬ)溶液にテトラメチルエチレン－ジアミン(ＴＭＥＤＡ、１.０当量)を添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、その後セライトでろ過し、濃縮し、フラッシュシリカカラムクロマトグラフィーにより精製し、保護されたインダゾール生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＥｔ３Ｎ(１.０ｍＬ)を滴下添加し、温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。溶液を真空下で濃縮し、その後フラッシュシリカカラムクロマトグラフィーにより精製し、純粋な脱保護された生成物を得た。
ＩＥ１９９３－１０８
【化44】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ３.５６(ｄ、Ｊ＝９.４Ｈｚ、１Ｈ)、３.６８(ｄｄ、Ｊ＝１１.５、５.５Ｈｚ、１Ｈ)、３.８４(ｄｄ、Ｊ＝１１.５、２.９Ｈｚ、１Ｈ)、３.９５(ｄｄｄ、Ｊ＝９.４、５.４、２.９Ｈｚ、１Ｈ)、４.６３－４.７２(ｍ、２Ｈ)、５.５７(ｔｄ、Ｊ＝５.０、２.２Ｈｚ、１Ｈ)、５.８６(ｄ、Ｊ＝２.１Ｈｚ、１Ｈ)、７.１６(ｄｄ、Ｊ＝８.６、７.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.２５(ｄ、Ｊ＝７.１Ｈｚ、１Ｈ)、７.５４－７.５９(ｍ、１Ｈ)、８.２８(ｄ、Ｊ＝０.９Ｈｚ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ４９.７８、６１.３４、６３.３９、６８.６９、６９.９２、７５.０３、１０１.１８、１１２.６８、１１５.７３(ｑ、Ｊ＝２８７.２Ｈｚ)、１１６.０５、１２３.５３、１２３.６０、１２４.１２、１２６.７６、１４８.６９、１５１.０６、１５７.３４(ｑ、Ｊ＝３７.６Ｈｚ)、１６７.８１；ＬＲＭＳ[Ｃ１８Ｈ１７ＢｒＦ３Ｎ３Ｏ７](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５６９.４[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９９３－１０９
【化45】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ３.５６(ｄ、Ｊ＝９.４Ｈｚ、１Ｈ)、３.６８(ｄｄ、Ｊ＝１１.５、５.４Ｈｚ、１Ｈ)、３.８４(ｄｄ、Ｊ＝１１.５、２.９Ｈｚ、１Ｈ)、３.９５(ｄｄｄ、Ｊ＝９.５、５.４、２.９Ｈｚ、１Ｈ)、４.６４－４.７３(ｍ、２Ｈ)、５.５６－５.６５(ｍ、１Ｈ)、５.８４(ｄ、Ｊ＝２.１Ｈｚ、１Ｈ)、７.４２(ｄｄ、Ｊ＝９.０、１.５Ｈｚ、１Ｈ)、７.７２(ｄｔ、Ｊ＝９.０、１.０Ｈｚ、１Ｈ)、８.２７(ｔ、Ｊ＝１.２Ｈｚ、１Ｈ)、８.５４(ｄ、Ｊ＝０.９Ｈｚ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ４９.８０、６１.７０、６３.３８、６８.６４、６９.８９、７５.０４、１００.９１、１０４.５８、１１５.７３(ｑ、Ｊ＝２８７.２Ｈｚ)、１１８.３７、１１９.３０、１２１.０２、１２５.１３、１２６.４０、１２８.７５、１４８.６０、１５１.２４、１５７.３３(ｄ、Ｊ＝３７.４Ｈｚ)、１６７.６９；ＬＲＭＳ[Ｃ１９Ｈ１７Ｆ３Ｎ４Ｏ７](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５１４.５[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９９３－１１０
【化46】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ３.５６(ｄ、Ｊ＝９.５Ｈｚ、１Ｈ)、３.６７(ｄｄ、Ｊ＝１１.５、５.５Ｈｚ、１Ｈ)、３.８４(ｄｄ、Ｊ＝１１.５、２.９Ｈｚ、１Ｈ)、３.９５(ｄｄｄ、Ｊ＝９.５、５.５、２.８Ｈｚ、１Ｈ)、４.６５－４.７２(ｍ、２Ｈ)、５.６２(ｔｄ、Ｊ＝５.０、２.２Ｈｚ、１Ｈ)、５.８４(ｄ、Ｊ＝２.１Ｈｚ、１Ｈ)、７.２３(ｄｄ、Ｊ＝８.７、１.３Ｈｚ、１Ｈ)、７.８７(ｄｄ、Ｊ＝８.７、１.０Ｈｚ、１Ｈ)、８.１０(ｄ、Ｊ＝１.１Ｈｚ、１Ｈ)、８.４５(ｄ、Ｊ＝１.０Ｈｚ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ４９.８３、６１.８１、６３.４１、６８.６８、６９.８８、７５.０６、１０１.０４、１０９.０７、１１５.７０(ｄ、Ｊ＝２８７.１Ｈｚ)、１１９.０３、１２１.７０、１２２.４５、１２３.３６、１２３.７９、１２３.９６、１４６.８４、１５１.１４、１５７.２８(ｑ、Ｊ＝３７.３Ｈｚ)、１６７.６０；ＬＲＭＳ[Ｃ１９Ｈ１７Ｆ３Ｎ４Ｏ７](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５１４.５[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９９３－２５
【化47】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ３.５４(ｄ、Ｊ＝９.５Ｈｚ、１Ｈ)、３.６７(ｄｄ、Ｊ＝１１.５、５.５Ｈｚ、１Ｈ)、３.８４(ｄｄ、Ｊ＝１１.５、２.９Ｈｚ、１Ｈ)、３.９４(ｄｄｄ、Ｊ＝９.０、５.５、２.８Ｈｚ、１Ｈ)、４.６４－４.７０(ｍ、２Ｈ)、５.４９－５.５６(ｍ、１Ｈ)、５.８２(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、６.７９(ｄｄ、Ｊ＝８.９、１.９Ｈｚ、１Ｈ)、７.１８－７.２４(ｍ、１Ｈ)、７.７１(ｄｄ、Ｊ＝８.８、０.８Ｈｚ、１Ｈ)、８.２７(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ４９.６９、６１.１５、６３.４５、６８.７５、６９.８８、７５.００、１０１.３４、１０４.２２、１１３.７８(ｄ、Ｊ＝１０４.８Ｈｚ)、１１５.３７、１１９.８５、１２２.２６、１２３.３９、１３８.６１、１４８.８２、１５０.９９、１５７.２５(ｄ、Ｊ＝３７.５Ｈｚ)、１６７.８３；ＬＲＭＳ[Ｃ１８Ｈ１７Ｆ４Ｎ３Ｏ７](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)４８４.０[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９９３－２６
【化48】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ３.５６(ｄ、Ｊ＝９.３Ｈｚ、１Ｈ)、３.６７(ｄｄ、Ｊ＝１１.５、５.５Ｈｚ、１Ｈ)、３.８０－３.８９(ｍ、４Ｈ)、３.９－３.９７(ｍ、４Ｈ)、４.６２－４.７５(ｍ、２Ｈ)、５.４５－５.５５(ｍ、１Ｈ)、５.８０(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、６.２４(ｄ、Ｊ＝８.０Ｈｚ、１Ｈ)、６.５０(ｄ、Ｊ＝８.０Ｈｚ、１Ｈ)、８.１９(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ４９.５６、５４.３８、５４.７３、６１.０１、６３.４３、６８.７０、７０.００、７５.１１、９７.８６、１０１.６８、１０３.４５、１１４.３０、１１６.９８、１１７.１６、１２１.０９、１４２.８２、１４４.０２、１４７.２５、１５０.７５、１５７.１４；ＬＲＭＳ[Ｃ２０Ｈ２２Ｆ３Ｎ３Ｏ９](ｍ／ｚ)：(－ｖｅ イオンモード)５０３.９[Ｍ－Ｈ]＋。
ＩＥ１９９３－２７
【化49】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ３.５３(ｄ、Ｊ＝９.４Ｈｚ、１Ｈ)、３.６７(ｄｄ、Ｊ＝１１.５、５.５Ｈｚ、１Ｈ)、３.８４(ｄｄ、Ｊ＝１１.６、２.９Ｈｚ、１Ｈ)、３.９４(ｄｄｄ、Ｊ＝９.１、５.６、２.８Ｈｚ、１Ｈ)、４.５８－４.６８(ｍ、２Ｈ)、５.４０(ｄ、Ｊ＝７.１Ｈｚ、１Ｈ)、５.７５－５.８４(ｍ、１Ｈ)、５.９２(ｓ、２Ｈ)、６.８１(ｓ、１Ｈ)、６.８８(ｓ、１Ｈ)、７.９８(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ ４９.５５、６０.５８、６３.４４、６８.７５、６９.９３、７５.０１、９２.６９、９４.７９、１００.９２、１０１.８９、１１４.３３、１１７.３１、１２２.１８、１４５.７１、１４６.０７、１４９.６３、１５０.７０、１５７.２４(ｄ、Ｊ＝３７.１Ｈｚ)；ＬＲＭＳ[Ｃ１９Ｈ１８Ｆ３Ｎ３Ｏ９](ｍ／ｚ)：(－ｖｅ イオンモード)４８７.９[Ｍ－Ｈ]＋。
【0136】
【化50】
スキーム１０．一般的なインダゾール合成
【0137】
インダゾールの一般的な合成(スキーム１０)
アルゴン下、アミン(１.０当量)、２－アジド－１－カルボキシアルデヒド誘導体(１.２当量)、ＣｕＩ(０.１当量)および４Ａモレキュラーシーブ(５０ｍｇ)の混合物の乾燥１，４－ジオキサン(２ｍＬ)溶液にテトラメチルエチレン－ジアミン(ＴＭＥＤＡ、１.０当量)を添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、その後セライトでろ過し、濃縮し、フラッシュシリカカラムクロマトグラフィーにより精製し、保護されたインダゾール生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加し、温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後、溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、１０％ メタノール／水を溶媒として化合物をＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭ カートリッジで精製し、純粋な脱保護された生成物を得た。
ＩＥ１９９３－１０
【化51】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ０.８３(ｄ、Ｊ＝６.９Ｈｚ、３Ｈ)、０.９３(ｄ、Ｊ＝６.９Ｈｚ、３Ｈ)、２.３７(ｐ、Ｊ＝６.９Ｈｚ、１Ｈ)、３.６３－３.７１(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.４、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.５５－４.６６(ｍ、２Ｈ)、５.４８－５.５４(ｍ、１Ｈ)、５.９５(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.６０(ｄｄ、Ｊ＝８.７、１.４Ｈｚ、１Ｈ)、７.８０(ｄｄ、Ｊ＝８.８、１.０Ｈｚ、１Ｈ)、８.１５(ｄ、Ｊ＝１.１Ｈｚ、１Ｈ)、８.３９(ｄ、Ｊ＝１.０Ｈｚ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １８.３９、１８.４９、３５.０２、４８.６４、６２.００、６３.１０、６８.２６、６９.８３、７５.４１、１０３.４３、１１７.５７、１２０.５９、１２１.９９、１２２.６０、１２４.６９、１３５.３５、１４７.９４、１４９.７５、１６９.０８、１７５.７２、１８０.５６；ＬＲＭＳ[Ｃ２１Ｈ２３Ｎ３Ｎａ２Ｏ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５２９.２[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９９３－２０
【化52】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ０.８４(ｄ、Ｊ＝６.９Ｈｚ、３Ｈ)、０.９３(ｄ、Ｊ＝６.９Ｈｚ、３Ｈ)、２.３８(ｐ、Ｊ＝６.９Ｈｚ、１Ｈ)、３.６３－３.７１(ｍ、２Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.４、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.５３－４.６５(ｍ、２Ｈ)、５.５１(ｄｄ、Ｊ＝９.２、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.９５(ｄ、Ｊ＝２.１Ｈｚ、１Ｈ)、７.６５(ｄｔ、Ｊ＝９.２、１.０Ｈｚ、１Ｈ)、７.８５(ｄｄ、Ｊ＝９.１、１.６Ｈｚ、１Ｈ)、８.３４(ｄｄ、Ｊ＝１.６、０.９Ｈｚ、１Ｈ)、８.５０(ｄ、Ｊ＝１.０Ｈｚ、１Ｈ)。
【0138】
フェニルトリアゾール誘導体合成
【化53】
スキーム１１．２－アミノフェニルトリアゾール中間体の合成およびアミノ基の修飾。
【0139】
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－４－((２－アミノフェニル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１３９８－２４)
【化54】
９－アジド誘導体１(５００ｍｇ、１.１ｍｍｏｌ)および１－アミノ－２－エチニルベンゼン(１４０μＬ、１.２ｍｍｏｌ)をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏの４：１混合物(４ｍＬ)に溶解した。混合物に硫化銅(II)五水和物(５０ｍｇ、０.２２ｍｍｏｌ)を添加し、アスコルビン酸ナトリウム(１.０ｍＬの新たに調製した１Ｍ Ｈ２Ｏ溶液)を添加した。混合物を４５℃で一晩撹拌し、静置し、室温まで冷却した。混合物をＤＣＭ(２００ｍＬ)で希釈１０％ ＮＨ４ＯＨ(１００ｍＬ)で洗浄し、塩水(１００ｍＬ)で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮し、保護された生成物を得て、これを酢酸エチル：ヘキサン(３：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋なＩＥ１３９８－２４(４８４ｍｇ、０.８４ｍｍｏｌ)を収率７７％で得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３)：δ １.７０(ｓ、３Ｈ)、２.０４(ｓ、３Ｈ)、２.０５(ｓ、３Ｈ)、２.０７(ｓ、３Ｈ)、３.８０(ｓ、３Ｈ)、４.１９(ｄｄ、Ｊ＝１２.４、７.４Ｈｚ、１Ｈ)、４.３７(ｑ、Ｊ＝１０.０Ｈｚ、１Ｈ)、４.６７(ｄｄ、Ｊ＝１０.８、１.９Ｈｚ、１Ｈ)、４.７３(ｄｄ、Ｊ＝１２.５、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、５.３５(ｄｄｄ、Ｊ＝７.５、４.７、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、５.５３(ｄｄ、Ｊ＝４.６、１.８Ｈｚ、１Ｈ)、５.６７(ｄｄ、Ｊ＝１０.１、２.４Ｈｚ、１Ｈ)、６.０３(ｄ、Ｊ＝２.３Ｈｚ、１Ｈ)、６.６５－６.７６(ｍ、２Ｈ)、６.９７(ｄ、Ｊ＝９.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.０８(ｄｄｄ、Ｊ＝８.３、７.２、１.６Ｈｚ、１Ｈ)、７.３０(ｄｄ、Ｊ＝７.７、１.５Ｈｚ、１Ｈ)、７.８４(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３)：δ ２０.６９、２０.８２、２０.９５、２２.７２、４８.０９、５２.７１、５８.４０、６２.２２、６７.８５、７１.３９、７６.９０、１０７.３６、１１３.５４、１１６.７２、１１７.７８、１１９.３５、１２８.２８、１２９.４３、１４４.８２、１４５.７５、１４８.１４、１６１.３２、１７０.１３、１７０.５１、１７０.７６、１７１.０５；ＬＲＭＳ[Ｃ２６Ｈ３１Ｎ５Ｏ１０](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５９６.２[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0140】
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－(２－(メチルスルホンアミド)フェニル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１７７８－１２)
【化55】
ＩＥ１３９８－２４(５０ｍｇ、０.０８７ｍｍｏｌ)の無水ジクロロメタン(３ｍＬ)溶液にジイソプロピルエチルアミン(４６μＬ、０.２６ｍｍｏｌ)を添加し、メチルスルホニルクロライド(７.０μＬ、０.０９６ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を室温で３時間撹拌し、真空下で濃縮し、粗生成物を得て、これを酢酸エチル：ヘキサン(３：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、凍結乾燥した後、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１７７８－１２を綿毛状粉末(２８ｍｇ、２工程で６０％)として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.９３(ｓ、３Ｈ)、２.８４(ｓ、３Ｈ)、３.６４－３.７６(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.５０(ｄｄ、Ｊ＝１０.９、９.５Ｈｚ、１Ｈ)、４.５７－４.６４(ｍ、１Ｈ)、５.５９(ｄｄ、Ｊ＝９.７、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.９５(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.１２(ｄｄｄ、Ｊ＝７.８、５.７、２.８Ｈｚ、１Ｈ)、７.２８－７.４２(ｍ、２Ｈ)、７.９５(ｄｔ、Ｊ＝７.７、１.３Ｈｚ、１Ｈ)、８.６６(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７７、３９.７４、４８.７２、５９.６１、６３.１１、６８.１６、６９.７６、７５.４２、１０２.３９、１２１.３６、１２３.７３、１２３.９７、１２３.９９、１２７.７６、１２９.２７、１４３.９２、１４５.４１、１５０.１４、１６８.８６、１７３.７５；ＬＲＭＳ[Ｃ２０Ｈ２４Ｎ５ＮａＯ９Ｓ](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５５６.１[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0141】
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－(２－(２－ヒドロキシアセトアミド)フェニル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１７７８－２５)
【化56】
ＩＥ１３９８－２４(５０ｍｇ、０.０８７ｍｍｏｌ)の無水ジクロロメタン(３ｍＬ)溶液にジイソプロピルエチルアミン(４６μＬ、０.２６ｍｍｏｌ)を添加し、アセトキシアセチルクロライド(１０μＬ、０.０９６ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を室温で３時間撹拌し、真空下で濃縮し、粗生成物を得て、これを酢酸エチル：ヘキサン(４：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、凍結乾燥した後、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１７７８－２５を綿毛状粉末(３３ｍｇ、２工程で７４％)として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.９３(ｓ、３Ｈ)、３.６３－３.７７(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.２２(ｓ、２Ｈ)、４.４７(ｄｄ、Ｊ＝１０.９、９.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.６０(ｄｄ、Ｊ＝１０.９、１.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.６１(ｄｄ、Ｊ＝９.６、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.８９(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.４５(ｔｄ、Ｊ＝７.６、１.４Ｈｚ、１Ｈ)、７.５３(ｔｄ、Ｊ＝７.８、１.７Ｈｚ、１Ｈ)、７.７６(ｄｄｄ、Ｊ＝１４.６、７.８、１.４Ｈｚ、２Ｈ)、８.３３(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.６８、４８.７３、６０.０６、６１.３３、６３.０８、６８.０７、６９.７２、７５.３９、１０１.８５、１２２.１０、１２３.９２、１２５.５４、１２７.１３、１２９.１８、１２９.６３、１３２.８７、１４５.３１、１５０.５３、１６８.７５、１７３.６５、１７４.１０；ＬＲＭＳ[Ｃ２１Ｈ２４Ｎ５ＮａＯ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５３６.２[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0142】
【化57】
スキーム１２．２－アミノフェニルトリアゾール誘導体で伸長されたアジド。
【0143】
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－４－(２－(６－アジドヘキサンアミド)フェニル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１８２６－５)
【化58】
アルゴン下、２－アミノフェニルトリアゾール誘導体ＩＥ１３９８－２４(４００ｍｇ、０.７０ｍｍｏｌ)、６－アジドヘキサン酸(１１３μＬ、０.７７ｍｍｏｌ)およびＣＯＭＵ(登録商標)(６００ｍｇ、１.４０ｍｍｏｌ)の乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)溶液にＤＩＥＡ(３７０μＬ、２.１ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、その後真空下で濃縮し、粗生成物を得て、これを酢酸エチル：ヘキサン(３：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋なＩＥ１８２６－５(４３０ｍｇ、０.６０ｍｍｏｌ)を収率８６％で得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＭｅＯＨ－ｄ４)：δ １.４１(ｄｄｔ、Ｊ＝９.０、６.７、３.２Ｈｚ、２Ｈ)、１.５４－１.６３(ｍ、２Ｈ)、１.６７－１.７７(ｍ、５Ｈ)、１.８９－２.０６(ｍ、１１Ｈ)、２.４１(ｔ、Ｊ＝７.４Ｈｚ、２Ｈ)、３.７７(ｓ、３Ｈ)、４.１１(ｄｄ、Ｊ＝１２.５、６.２Ｈｚ、１Ｈ)、４.４２(ｔ、Ｊ＝１０.２Ｈｚ、１Ｈ)、４.５７(ｄｄｄ、Ｊ＝１５.２、１１.６、２.４Ｈｚ、２Ｈ)、５.３４(ｔｄ、Ｊ＝６.３、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、５.４７－５.５７(ｍ、２Ｈ)、６.１１(ｄ、Ｊ＝２.５Ｈｚ、１Ｈ)、７.１２(ｔｄ、Ｊ＝７.６、１.３Ｈｚ、１Ｈ)、７.２７(ｄｄｄ、Ｊ＝８.６、７.４、１.６Ｈｚ、１Ｈ)、７.６２(ｄｄ、Ｊ＝８.０、１.６Ｈｚ、１Ｈ)、８.１７(ｄ、Ｊ＝８.０Ｈｚ、１Ｈ)、８.３７(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＭｅＯＨ－ｄ４)：δ １９.２５、１９.３２、１９.３６、２１.１４、２４.８４、２５.９８、２８.２４、３７.１９、３７.２４、５０.８８、５１.７１、５９.６６、６１.７７、６７.３２、７０.２１、７６.５０、１０６.７５、１１９.８６、１２１.０１、１２２.３８、１２４.２４、１２７.７９、１２８.４５、１３５.３８、１４６.１０、１４６.７５、１７０.０１、１７０.１０、１７１.００、１７１.８０、１７２.９５；ＬＲＭＳ[Ｃ３２Ｈ４０Ｎ８Ｏ１１](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)７３５.５ [Ｍ＋Ｎａ]＋
【0144】
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－４－(２－(６－アジドヘキサンアミド)フェニル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１８２６－２３)
【化59】
ＩＥ１８２６－５(４０ｍｇ、０.０５６ｍｍｏｌ)をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、凍結乾燥した後、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１８２６－２３を白色粉末(２３ｍｇ、収率７１％)として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.３５－１.４６(ｍ、２Ｈ)、１.５９－１.７３(ｍ、４Ｈ)、１.９４(ｓ、３Ｈ)、２.４４(ｔ、Ｊ＝７.４Ｈｚ、２Ｈ)、３.３４(ｔ、Ｊ＝６.８Ｈｚ、２Ｈ)、３.６４－３.７３(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.４、６.４、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.４５(ｔ、Ｊ＝１０.２Ｈｚ、１Ｈ)、４.６０(ｄ、Ｊ＝１１.０Ｈｚ、１Ｈ)、５.６１(ｄｄ、Ｊ＝９.６、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.８８(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.４３－７.５７(ｍ、３Ｈ)、７.６９－７.７６(ｍ、１Ｈ)、８.２４(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７３、２４.６３、２５.４７、２７.６４、３５.９０、４８.７８、５０.９４、６０.０４、６３.０９、６８.０７、６９.７０、７５.３８、１０１.６１、１２１.９９、１２５.３５、１２６.９６、１２７.５３、１２９.４１、１２９.７２、１３３.３７、１４５.１５、１５０.７１、１６８.５８、１７３.６４、１７６.１５；ＬＲＭＳ[Ｃ２５Ｈ３１Ｎ８ＮａＯ８](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６１７.３[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0145】
【化60】
スキーム１３．２－アミノフェニルトリアゾール誘導体で伸長されたトリアゾール。
【0146】
一般的方法：
アジド中間体ＩＥ１８２６－５(５０ｍｇ、０.０７ｍｍｏｌ)および適切なアルキン(０.０８４ｍｍｏｌ)をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(４ｍＬ)の４：１混合物に溶解した。混合物に硫酸銅(II)五水和物(３ｍｇ、０.０１４ｍｍｏｌ)を添加し、アスコルビン酸ナトリウム(０.１ｍＬの新たに調製した１Ｍ Ｈ２Ｏ溶液)を添加した。混合物を６０℃で６時間撹拌し、その後静置し、室温まで冷却した。混合物をＤＣＭ(２００ｍＬ)で希釈し、１０％ ＮＨ４ＯＨ(１００ｍＬ)で洗浄し、塩水(１００ｍＬ)で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮し、粗製の保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、純粋な脱保護されたトリアゾールを得た。
【0147】
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－(２－(６－(４－フェニル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル) ヘキサンアミド)フェニル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１８２６－３０)
【化61】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.２５(ｄｔ、Ｊ＝１４.３、７.０Ｈｚ、２Ｈ)、１.６７(ｐ、Ｊ＝７.１Ｈｚ、２Ｈ)、１.８８(ｓ、３Ｈ)、１.９１－１.９８(ｍ、２Ｈ)、２.３７(ｔ、Ｊ＝７.０Ｈｚ、２Ｈ)、３.６３－３.７３(ｍ、２Ｈ)、３.９１(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.０２(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.２、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.３５－４.４６(ｍ、３Ｈ)、４.５４(ｄｄ、Ｊ＝１１.２、１.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.４７(ｄｄ、Ｊ＝９.７、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.７９(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.２７－７.３３(ｍ、２Ｈ)、７.３９－７.５３(ｍ、５Ｈ)、７.５９(ｄｄ、Ｊ＝７.８、１.９Ｈｚ、２Ｈ)、７.９７(ｓ、１Ｈ)、８.１５(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７１、２４.１４、２４.４９、２８.６２、３５.８４、４８.７２、５０.１５、５９.９２、６３.０８、６８.０５、６９.６９、７５.３５、１０１.５１、１２１.６８、１２１.９０、１２３.４３、１２５.４１、１２５.５６、１２６.８１、１２８.６５、１２９.０５、１２９.１１、１２９.３１、１２９.４０、１３３.２９、１４５.２９、１４７.２３、１５０.７３、１６８.５５、１７３.５１、１７５.５４；ＬＲＭＳ[Ｃ３３Ｈ３７Ｎ８ＮａＯ８](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)７１９.４[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0148】
二ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－４－(２－(６－(４－カルボキシ－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)ヘキサンアミド)フェニル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)－３，４，５－トリデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１８２６－３４)
【化62】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.３２(ｑｄ、Ｊ＝８.６、６.０Ｈｚ、２Ｈ)、１.６４－１.７４(ｍ、２Ｈ)、１.９１(ｓ、３Ｈ)、１.９７(ｑ、Ｊ＝７.３Ｈｚ、２Ｈ)、２.４０(ｔ、Ｊ＝７.４Ｈｚ、２Ｈ)、３.６５－３.７６(ｍ、２Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.４２－４.５２(ｍ、３Ｈ)、４.６０(ｄｄ、Ｊ＝１１.０、１.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.６０(ｄｄ、Ｊ＝９.７、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.８７(ｄ、Ｊ＝２.３Ｈｚ、１Ｈ)、７.４２－７.５５(ｍ、３Ｈ)、７.７１(ｄｄ、Ｊ＝７.７、１.７Ｈｚ、１Ｈ)、８.２２(ｄ、Ｊ＝３.８Ｈｚ、２Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７１、２４.４６、２４.９８、２８.９１、３５.７２、４８.７８、５０.２４、６０.０１、６３.０８、６８.０６、６９.７２、７５.３９、１０１.６９、１２２.０２、１２５.３７、１２６.９４、１２７.０８、１２７.５６、１２９.３７、１２９.７３、１３３.２８、１４４.６７、１４５.１４、１５０.６５、１６７.６７、１６８.６３、１７３.５９、１７６.００；ＬＲＭＳ[Ｃ２８Ｈ３２Ｎ８Ｎａ２Ｏ１０](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)７０９.３[Ｍ＋Ｎａ]＋。
【0149】
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－(２－(６－(４－(メトキシメチル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)ヘキサンアミド)フェニル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１８２６－３８)
【化63】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.２７(ｔｄ、Ｊ＝８.８、４.５Ｈｚ、２Ｈ)、１.６７(ｐ、Ｊ＝７.３Ｈｚ、２Ｈ)、１.９３(ｄ、Ｊ＝９.７Ｈｚ、５Ｈ)、２.４０(ｔ、Ｊ＝７.１Ｈｚ、２Ｈ)、３.３３(ｓ、３Ｈ)、３.６８(ｄｄ、Ｊ＝１１.９、６.３Ｈｚ、１Ｈ)、３.７３(ｄ、Ｊ＝９.７Ｈｚ、１Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１１.８、２.４Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.１、２.４Ｈｚ、１Ｈ)、４.４１－４.４９(ｍ、３Ｈ)、４.５３(ｓ、２Ｈ)、４.６０(ｄ、Ｊ＝１０.９Ｈｚ、１Ｈ)、５.６０(ｄｄ、Ｊ＝９.８、２.２Ｈｚ、１Ｈ)、５.８６(ｄ、Ｊ＝１.８Ｈｚ、１Ｈ)、７.４２－７.５４(ｍ、３Ｈ)、７.７２(ｄ、Ｊ＝７.５Ｈｚ、１Ｈ)、８.００(ｓ、１Ｈ)、８.２２(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７１、２４.３５、２４.８４、２８.８３、３５.７５、４８.７９、５０.１３、５７.２６、６０.０３、６３.０８、６４.２８、６８.０６、６９.６９、７５.３８、１０１.６０、１２１.９５、１２４.９４、１２４.９９、１２６.７０、１２７.４３、１２９.３０、１２９.６６、１３３.３１、１４３.５８、１４５.１４、１５０.７２、１６８.５６、１７３.５９、１７５.８６；ＬＲＭＳ[Ｃ２９Ｈ３７Ｎ８ＮａＯ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６８７.３[Ｍ＋Ｎａ]＋。
【0150】
ナトリウム ５－アセトアミド－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－(２－(６－(４－(ヒドロキシメチル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)ヘキサンアミド)フェニル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１８２６－４４)
【化64】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.２２－１.３４(ｍ、２Ｈ)、１.６７(ｐ、Ｊ＝７.５Ｈｚ、２Ｈ)、１.８８－２.００(ｍ、５Ｈ)、２.４０(ｔ、Ｊ＝７.３Ｈｚ、２Ｈ)、３.６５－３.７６(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１１.９、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.４、６.５、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.４０－４.５０(ｍ、３Ｈ)、４.６０(ｄ、Ｊ＝１０.９Ｈｚ、１Ｈ)、４.６６(ｓ、２Ｈ)、５.６０(ｄｄ、Ｊ＝９.７、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.８６(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.４３－７.５５(ｍ、３Ｈ)、７.６８－７.７６(ｍ、１Ｈ)、７.９６(ｓ、１Ｈ)、８.２２(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７２、２４.３８、２４.８９、２８.８７、３５.７５、４８.７８、５０.０９、５４.５５、６０.０２、６３.０８、６８.０６、６９.７１、７５.３９、１０１.６３、１２２.０１、１２３.９７、１２５.１２、１２６.７９、１２７.４７、１２９.３２、１２９.６９、１３３.３１、１４５.１３、１４６.６５、１５０.６９、１６８.５７、１７３.６１、１７５.９１；ＬＲＭＳ[Ｃ２８Ｈ３５Ｎ８ＮａＯ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６７３.１[Ｍ＋Ｎａ]＋。
【0151】
二量体合成および特徴化
【化65】
スキーム１４．二量体ＩＥ１８２６－１の合成。
【0152】
ＩＥ１８２６－１
【化66】
アルゴン下、ＩＥ１３９８－２４(５０ｍｇ、０.０８７ｍｍｏｌ)の無水ジクロロメタン(３ｍＬ)溶液にジイソプロピルエチルアミン(４６μＬ、０.２６ｍｍｏｌ)を添加し、ドデカンジオイルジクロライド(１１μＬ、０.０４３ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を室温で３時間撹拌し、真空下で濃縮し、粗生成物を得て、これを酢酸エチル：ヘキサン(４：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、凍結乾燥した後、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１８２６－１を白色粉末(３２ｍｇ、２工程で６６％)として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.２６(ｑ、Ｊ＝７.８、５.９Ｈｚ、１２Ｈ)、１.６０(ｑ、Ｊ＝６.８Ｈｚ、４Ｈ)、１.９１(ｓ、６Ｈ)、２.３３－２.４３(ｍ、４Ｈ)、３.６４－３.７５(ｍ、４Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、２Ｈ)、４.０２(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.２、２.７Ｈｚ、２Ｈ)、４.４３(ｄｄ、Ｊ＝１１.２、９.３Ｈｚ、２Ｈ)、４.５８(ｄｄ、Ｊ＝１０.８、１.４Ｈｚ、２Ｈ)、５.５７(ｄｄ、Ｊ＝９.６、２.４Ｈｚ、２Ｈ)、５.８５(ｄ、Ｊ＝２.１Ｈｚ、２Ｈ)、７.３９(ｔｄ、Ｊ＝７.５、１.４Ｈｚ、２Ｈ)、７.４７(ｔｄ、Ｊ＝７.７、１.６Ｈｚ、２Ｈ)、７.５５－７.６２(ｍ、２Ｈ)、７.６５(ｄｄ、Ｊ＝７.７、１.６Ｈｚ、２Ｈ)、８.２０(ｓ、２Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７４、２４.９９、２７.９９、２８.１５、３６.２４、４８.７８、５９.９６、６３.０９、６８.０８、６９.６９、７５.３６、１０１.５６、１２１.９９、１２４.５６、１２６.３７、１２７.１８、１２９.２７、１２９.６２、１３３.５３、１４５.２７、１５０.７０、１６８.５２、１７３.５９、１７６.３９；ＬＲＭＳ[Ｃ５０Ｈ６２Ｎ１０Ｎａ２Ｏ１６](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)１１２８.０.０[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0153】
【化67】
スキーム１５．二量体ＩＥ１８２６－１４の合成
【0154】
ＩＥ１８２６－１４
【化68】
アジド誘導体ＩＥ１８２６－５(４０ｍｇ、０.０５６ｍｍｏｌ)およびヘプタジイン(３.０μＬ、０.０２８ｍｍｏｌ)をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(４ｍＬ)の４：１混合物に溶解した。混合物に硫酸銅(II)五水和物(３.０ｍｇ、０.２２ｍｍｏｌ)を添加し、アスコルビン酸ナトリウム(０.１ｍＬの新たに調製した１Ｍ Ｈ２Ｏ溶液)を添加した。混合物を６０℃で６時間撹拌し、その後静置し、室温まで冷却した。その後混合物を真空下で濃縮し、粗生成物を得て、これを酢酸エチル：メタノール(７：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、凍結乾燥した後、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１８２６－１４を白色粉末(２４ｍｇ、２工程で６９％)として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.１９(ｄｄｔ、Ｊ＝１３.６、９.８、６.２Ｈｚ、４Ｈ)、１.６２(ｐ、Ｊ＝７.４Ｈｚ、４Ｈ)、１.７１－１.８２(ｍ、２Ｈ)、１.８５－１.９２(ｍ、１０Ｈ)、２.３４(ｑ、Ｊ＝６.１、５.０Ｈｚ、４Ｈ)、２.５１(ｔｄ、Ｊ＝７.７、３.０Ｈｚ、４Ｈ)、２.８５(ｓ、２Ｈ)、３.６０－３.７５(ｍ、６Ｈ)、３.９１(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、２Ｈ)、４.０２(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.２、２.６Ｈｚ、２Ｈ)、４.３４(ｔ、Ｊ＝６.７Ｈｚ、４Ｈ)、４.３８－４.４６(ｍ、２Ｈ)、４.５７(ｄｄ、Ｊ＝１１.０、１.３Ｈｚ、２Ｈ)、５.５５(ｄｄ、Ｊ＝９.８、２.２Ｈｚ、２Ｈ)、５.８３(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、２Ｈ)、７.２９－７.３７(ｍ、４Ｈ)、７.４０－７.４８(ｍ、２Ｈ)、７.５５－７.６４(ｍ、４Ｈ)、８.１４(ｄ、Ｊ＝９.５Ｈｚ、２Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７３、２３.７７、２４.２９、２４.７９、２７.９２、２８.８０、３５.９４、４８.７７、４９.９２、５９.９５、６３.０９、６８.０７、６９.７０、７５.３８、１０１.５８、１２１.８３、１２３.０１、１２３.８２、１２５.８６、１２６.９１、１２８.９１、１２９.４１、１３３.３９、１４５.２３、１４７.５３、１５０.７３、１６８.５２、１７３.５１、１７５.４７；ＬＲＭＳ[Ｃ５７Ｈ７０Ｎ１６Ｎａ２Ｏ１６](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)１３０４.３[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0155】
【化69】
スキーム１６．二量体ＩＥ１８２６－２８の合成
【0156】
メチル ５－アセトアミド－７，８，９－トリ－Ｏ－アセチル－２，６－アンヒドロ－３，４，５－トリデオキシ－４－(２－(ヘプト－６－インアミド)フェニル)－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル)－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－エノエート(ＩＥ１８２６－２０)
【化70】
アルゴン下、２－アミノフェニルトリアゾール誘導体ＩＥ１３９８－２４(２００ｍｇ、０.３５ｍｍｏｌ)、７－ヘプチン酸(５５μＬ、０.４２ｍｍｏｌ)およびＣＯＭＵ(登録商標)(３００ｍｇ、０.７ｍｍｏｌ)の乾燥ＤＭＦ(５ｍＬ)溶液に、ＤＩＥＡ(２４０μＬ、１.４ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、その後真空下で濃縮し、粗生成物を得て、これを酢酸エチル：ヘキサン(２：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋なＩＥ１８２６－２０(１９０ｍｇ、０.２８ｍｍｏｌ)を収率８０％で得た。ＬＲＭＳ[Ｃ３３Ｈ３９Ｎ５Ｏ１１](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)７３５.５[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0157】
ＩＥ１８２６－２８
【化71】
アジド誘導体ＩＥ１８２６－５(３２ｍｇ、０.０４４ｍｍｏｌ)およびアルキン誘導体ＩＥ１８２６－２０(３０ｍｇ、０.０４４ｍｍｏｌ)をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏの４：１混合物(４ｍＬ)に溶解した。混合物に硫酸銅(II)五水和物(２.５ｍｇ、０.０１ｍｍｏｌ)を添加し、アスコルビン酸ナトリウム(０.１ｍＬの新たに調製した１Ｍ Ｈ２Ｏ溶液)を添加した。混合物を６０℃で６時間撹拌し、その後静置し、室温まで冷却した。その後混合物を真空下で濃縮し、粗生成物を得て、これを酢酸エチル：メタノール(１０：１)を溶媒として用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、溶媒として２％ アセトニトリル／水を用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで化合物を精製し、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１８２６－２８を白色粉末(１７ｍｇ、２工程で６５％)として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.１８－１.２５(ｍ、２Ｈ)、１.６０(ｑ、Ｊ＝７.７、７.２Ｈｚ、６Ｈ)、１.８５－１.９６(ｍ、８Ｈ)、２.３４(ｄｔ、Ｊ＝１４.６、７.６Ｈｚ、４Ｈ)、２.６４－２.７４(ｍ、２Ｈ)、３.６０－３.７２(ｍ、４Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、２Ｈ)、４.０２(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.２、２.６Ｈｚ、２Ｈ)、４.３５－４.４８(ｍ、４Ｈ)、４.５３－４.６４(ｍ、２Ｈ)、５.４９－５.５９(ｍ、２Ｈ)、５.８２(ｄｄ、Ｊ＝１２.３、２.３Ｈｚ、２Ｈ)、７.３３－７.５５(ｍ、６Ｈ)、７.５７－７.６３(ｍ、１Ｈ)、７.６５(ｄｄ、Ｊ＝７.７、１.４Ｈｚ、１Ｈ)、７.８０(ｓ、１Ｈ)、８.１０(ｓ、１Ｈ)、８.１５(ｓ、１Ｈ)；ＬＲＭＳ[Ｃ５１Ｈ６１Ｎ１３Ｎａ２Ｏ１６](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)１１８１.０[Ｍ＋Ｎａ]＋
【0158】
【化72】
スキーム１７．フェニルトリアゾール合成
【0159】
ＩＥ１９６３－８５
【化73】
アミンＩＥ１３９８－２４(６０ｍｇ、０.１０５ｍｍｏｌ)のピリジン(２ｍＬ)溶液にＡｃ２Ｏ(５０μＬ、０.５２ｍｍｏｌ)を添加し、アルゴン下、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、化合物を１０％ メタノール／水を溶媒として用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭ カートリッジで精製し、凍結乾燥した後、純粋な脱保護された生成物ＩＥ１９６３－８５(２工程で７４％)を得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.９３(ｓ、４Ｈ)、２.１５(ｓ、３Ｈ)、３.６４－３.７６(ｍ、２Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１１.９、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.２、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.４６(ｔ、Ｊ＝１０.３Ｈｚ、１Ｈ)、４.６０(ｄ、Ｊ＝１０.９Ｈｚ、１Ｈ)、５.６０(ｄｄ、Ｊ＝９.６、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.８８(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.４４－７.５４(ｍ、３Ｈ)、７.７３(ｄｄ、Ｊ＝７.３、１.５Ｈｚ、１Ｈ)、８.２５(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７０、２２.３２、４８.７９、６０.０１、６３.０７、６８.０６、６９.７２、７５.３７、１０１.８１、１２２.０７、１２５.４４、１２７.０９、１２７.６１、１２９.２６、１２９.６９、１３３.２８、１４５.００、１５０.５７、１６８.７０、１７３.５７、１７３.６３；ＬＲＭＳ[Ｃ２１Ｈ２４Ｎ５ＮａＯ８](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５１９.３[Ｍ＋Ｎａ]＋。
【0160】
アミドＩＥ１９６３－４１およびＩＥ１９６３－４５の合成
アミンＩＥ１３９８－２４(６０ｍｇ、０.１０５ｍｍｏｌ)の無水ＤＣＭ(２ｍＬ)溶液にＤＩＥＡ(９０μＬ、０.５２ｍｍｏｌ)を添加し、酸クロライド(２当量)を分割して添加し、アルゴン下、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、化合物を１０％ メタノール／水を溶媒として用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで精製し、純粋な脱保護された生成物を得た。
ＩＥ１９６３－４１
【化74】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.７９(ｓ、３Ｈ)、３.６５(ｄｑ、Ｊ＝１１.４、５.９Ｈｚ、２Ｈ)、３.８５－３.９２(ｍ、１Ｈ)、３.９８(ｄｄｄ、Ｊ＝９.４、６.１、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.３６(ｔ、Ｊ＝１０.１Ｈｚ、１Ｈ)、４.５４(ｄ、Ｊ＝１０.９Ｈｚ、１Ｈ)、５.５４(ｄｄ、Ｊ＝９.３、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、５.７７(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.３４(ｔ、Ｊ＝７.７Ｈｚ、１Ｈ)、７.４３(ｔ、Ｊ＝７.６Ｈｚ、１Ｈ)、７.５１(ｄ、Ｊ＝７.１Ｈｚ、１Ｈ)、７.５８(ｔ、Ｊ＝７.８Ｈｚ、１Ｈ)、７.６４(ｄ、Ｊ＝７.７Ｈｚ、１Ｈ)、７.７２(ｓ、１Ｈ)、７.８２(ｄｄ、Ｊ＝１７.３、７.８Ｈｚ、２Ｈ)、８.２７(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.５３、４８.６９、５９.８２、６３.０６、６８.０３、６９.６６、７５.３３、９９.９９、１０１.３９、１１８.９２、１１９.９２、１２１.４５、１２２.９１、１２４.８３、１２５.６３、１２６.７３、１２８.６９、１２９.４４、１３０.７３、１３３.７０、１３５.４２、１４５.９４、１４９.００、１５０.６９、１６５.５３、１６８.４８、１７３.４７；ＬＲＭＳ[Ｃ２７Ｈ２５Ｆ３Ｎ５ＮａＯ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６６５.６[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９６３－４５
【化75】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.８７(ｓ、３Ｈ)、３.６４－３.７３(ｍ、２Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０２(ｄｄｄ、Ｊ＝９.４、６.３、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０８(ｓ、３Ｈ)、４.４０(ｔ、Ｊ＝１０.３Ｈｚ、１Ｈ)、４.５３－４.６１(ｍ、１Ｈ)、５.５９(ｄｄ、Ｊ＝９.９、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.８１(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.３５－７.４２(ｍ、１Ｈ)、７.４６(ｄｄ、Ｊ＝７.６、１.５Ｈｚ、１Ｈ)、７.４９－７.５４(ｍ、１Ｈ)、７.７２(ｔｄ、Ｊ＝８.１、１.５Ｈｚ、２Ｈ)、８.２９(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.６０、４８.７０、５９.９３、６２.４６、６３.０８、６８.０５、６９.６８、７５.３９、１０１.５１、１１０.５６(ｄ、Ｊ＝２１.４Ｈｚ)、１２１.７９、１２４.５５、１２６.１３、１２７.５６、１２９.１８、１２９.６８、１３３.２１、１４５.２６、１４８.４３、１５０.６４、１５１.５５、１６３.７４、１６８.５３、１７３.６０、１７４.００；ＬＲＭＳ[Ｃ２７Ｈ２５Ｆ３Ｎ５ＮａＯ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６６５.６[Ｍ＋Ｎａ]＋。
【0161】
スルホンアミドＩＥ１９６３－５０およびＩＥ１９６３－５４の合成
アミンＩＥ１３９８－２４(６０ｍｇ、０.１０５ｍｍｏｌ)の乾燥ピリジン(２ｍＬ)溶液にスルホニルクロライド(１.２当量)を添加し、アルゴン下、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、化合物１０％ メタノール／水を溶媒として用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで精製し、純粋な脱保護された生成物を得た。
ＩＥ１９６３－５０
【化76】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.９３(ｓ、３Ｈ)、２.８６(ｓ、３Ｈ)、３.６４－３.７４(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１１.９、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.５０(ｔ、Ｊ＝１０.２Ｈｚ、１Ｈ)、４.６０(ｄ、Ｊ＝１０.９Ｈｚ、１Ｈ)、５.５９(ｄｄ、Ｊ＝９.７、２.４Ｈｚ、１Ｈ)、５.９４(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.１６(ｄｄｄ、Ｊ＝８.３、５.０、３.６Ｈｚ、１Ｈ)、７.３４－７.４０(ｍ、２Ｈ)、７.９３(ｄｄ、Ｊ＝７.３、０.８Ｈｚ、１Ｈ)、８.６５(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７７、３９.６７、４８.７２、５９.６６、６３.１１、６８.１５、６９.７６、７５.４２、１０２.３４、１２１.９３、１２３.８９、１２３.９２、１２４.０６、１２７.９１、１２９.３３、１４２.９１、１４５.４１、１５０.１７、１６８.８５、１７３.７５；ＬＲＭＳ[Ｃ２０Ｈ２４Ｎ５ＮａＯ９Ｓ](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)５５５.５[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９６３－５４
【化77】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.８９(ｓ、３Ｈ)、３.６４－３.７３(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.３６(ｔ、Ｊ＝１０.３Ｈｚ、１Ｈ)、４.５３－４.６１(ｍ、１Ｈ)、５.５０(ｄｄ、Ｊ＝９.９、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.８７(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.１５(ｔｄ、Ｊ＝７.４、１.４Ｈｚ、１Ｈ)、７.２３(ｄ、Ｊ＝７.８Ｈｚ、１Ｈ)、７.２８－７.３４(ｍ、１Ｈ)、７.６６(ｄ、Ｊ＝８.８Ｈｚ、２Ｈ)、７.７６(ｄｄ、Ｊ＝７.８、１.７Ｈｚ、１Ｈ)、８.１７(ｄ、Ｊ＝８.８Ｈｚ、２Ｈ)、８.３２(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７０、４８.６４、５９.５５、６３.１１、６８.１２、６９.７４、７５.４０、１０１.９２、１２２.６９、１２３.４２、１２３.９９、１２５.０４、１２５.８８、１２６.４３、１２７.９７、１２９.２８、１４２.６７、１４５.１７、１４８.３９、１４９.７６、１５０.４１、１６８.７５、１７３.６５；ＬＲＭＳ[Ｃ２５Ｈ２５Ｎ６ＮａＯ１１Ｓ](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６６２.６ [Ｍ＋Ｎａ]＋。
【0162】
【化78】
スキーム１８．フェニルトリアゾール合成
【0163】
ＩＥ１８２６－１０８
【化79】
アミンＩＥ１３９８－２４(１.０ｇ、１.７４４ｍｍｏｌ)の乾燥ＤＭＦ(６ｍｌ)溶液にＢｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ(０.６１ｇ、３.４８ｍｍｏｌ、２.０当量)を添加し、ＤＩＥＡ(１.２１ｍｌ、６.９７６ｍｍｏｌ、４.０当量)およびＣＯＭＵ(１.４９ｇ、３.４８ｍｍｏｌ、２.０当量)を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン／アセトン ３：２)により精製し、純粋なＮ－Ｂｏｃ保護された生成物を得た。アルゴン下、０℃で、Ｂｏｃ保護された生成物(１.０ｇ、１.３６９ｍｍｏｌ)の無水ＤＣＭ溶液にＴＦＡ(２.１ｍｌ、２７.３７ｍｍｏｌ、２０当量)を添加し、反応混合物を室温まで昇温させ、一晩撹拌した。反応物をアセトニトリルで希釈し、０℃まで冷却した後、粉末炭酸ナトリウムを添加することによりクエンチし、２分間撹拌し、ろ過し、水で洗浄し、有機溶媒を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製のアミンをフラッシュクロマトグラフィー(酢酸エチル／メタノール／水；７／１／０.５)により精製し、純粋なアミンＩＥ１８２６－１０８を、２工程、４８％で得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ １.８０(ｓ、３Ｈ)、２.０４(ｓ、３Ｈ)、２.０５(ｓ、３Ｈ)、２.０７(ｓ、３Ｈ)、３.８３(ｓ、３Ｈ)、３.９３(ｓ、２Ｈ)、４.１８(ｄｄ、Ｊ＝１２.５、６.２Ｈｚ、１Ｈ)、４.５３(ｔ、Ｊ＝１０.１Ｈｚ、１Ｈ)、４.６３(ｄｄｄ、Ｊ＝１２.５、９.７、２.３Ｈｚ、２Ｈ)、５.４１(ｔｄ、Ｊ＝６.４、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、５.５６(ｔｄ、Ｊ＝８.２、７.４、２.３Ｈｚ、２Ｈ)、６.１８(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.２２－７.３２(ｍ、１Ｈ)、７.３４－７.４４(ｍ、１Ｈ)、７.６７(ｄｄ、Ｊ＝７.８、１.６Ｈｚ、１Ｈ)、８.０７(ｄ、Ｊ＝８.１Ｈｚ、１Ｈ)、８.４２(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ １９.２４、１９.３３、１９.３４、２１.１４、４１.０３、５１.７１、５９.８２、６１.７５、６７.３２、７０.１２、７６.４５、１０６.８１、１２１.６１、１２１.７１、１２３.３５、１２５.３１、１２８.４３、１２８.７１、１３４.４５、１４５.９８、１４６.１２、１６１.５３、１６４.５０、１７０.０１、１７０.０９、１７１.０２、１７２.０４；ＬＲＭＳ[Ｃ２８Ｈ３４Ｎ６Ｏ１１](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６３０.８[Ｍ＋Ｈ]＋。
【0164】
アミドＩＥ１９９３－４、ＩＥ１９６３－１１４およびＩＥ１９６３－６２の合成
アルゴン下、アミンＩＥ１８２６－１０８(５０ｍｇ、０.０８ｍｍｏｌ)の無水ＤＣＭ(２ｍＬ)溶液にＤＩＥＡ(９０μＬ、０.５２ｍｍｏｌ)を添加し、酸クロライド(２当量)を分割して添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、化合物１０％ メタノール／水を溶媒として用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで精製し、純粋な脱保護された生成物を得た。
ＩＥ１９９３－４
【化80】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.８６(ｓ、３Ｈ)、３.６４－３.７４(ｍ、２Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.２、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.１６－４.２９(ｍ、２Ｈ)、４.３８－４.４８(ｍ、１Ｈ)、４.５５(ｄ、Ｊ＝１１.０Ｈｚ、１Ｈ)、５.４１(ｄｄ、Ｊ＝９.８、２.４Ｈｚ、１Ｈ)、５.７５(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.３７(ｔ、Ｊ＝７.５Ｈｚ、１Ｈ)、７.４７(ｔｄ、Ｊ＝７.７、１.６Ｈｚ、１Ｈ)、７.５６(ｔ、Ｊ＝７.６Ｈｚ、２Ｈ)、７.６２－７.６７(ｍ、２Ｈ)、７.８３(ｄ、Ｊ＝８.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.８７(ｄｄ、Ｊ＝７.４、１.８Ｈｚ、２Ｈ)、８.２９(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.６８、４３.９９、４８.６６、５９.８９、６３.０８、６８.０９、６９.７０、７５.３３、１０１.９０、１２２.４１、１２３.００、１２４.９１、１２６.７８、１２７.４３、１２８.８０、１２８.８８、１２９.４６、１３２.３９、１３２.６５、１３３.１８、１４５.２３、１５０.３５、１６８.６８、１７０.９４、１７１.１１、１７３.５９；ＬＲＭＳ[Ｃ２８Ｈ２９Ｎ６ＮａＯ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６３８.４[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９６３－１１４
【化81】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.８４(ｓ、３Ｈ)、２.９９(ｓ、６Ｈ)、３.６８(ｄｄｄ、Ｊ＝１４.３、９.３、３.８Ｈｚ、２Ｈ)、３.９１(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０１(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.１５(ｑ、Ｊ＝１６.８Ｈｚ、２Ｈ)、４.３６(ｔ、Ｊ＝１０.３Ｈｚ、１Ｈ)、４.５１(ｄｄ、Ｊ＝１１.１、１.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.０５(ｄｄ、Ｊ＝９.８、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.５６(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、６.８７(ｄ、Ｊ＝９.０Ｈｚ、２Ｈ)、７.３８(ｔｄ、Ｊ＝７.６、１.４Ｈｚ、１Ｈ)、７.４９(ｔｄ、Ｊ＝７.７、１.７Ｈｚ、１Ｈ)、７.６２－７.６７(ｍ、１Ｈ)、７.７７(ｄ、Ｊ＝８.９Ｈｚ、２Ｈ)、７.８５(ｄ、Ｊ＝８.１Ｈｚ、１Ｈ)、８.１３(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.６２、３９.６０、４４.２１、４８.７２、５９.８８、６３.１３、６８.０６、６９.７１、７５.４３、１０１.９９、１１２.０９、１１８.７９、１２２.５４、１２３.０２、１２４.７６、１２６.７２、１２９.１２、１２９.１８、１２９.５６、１３３.０８、１４４.６９、１５０.１３、１５３.８１、１６８.３９、１７０.５１、１７１.３７、１７３.５６；ＬＲＭＳ[Ｃ３０Ｈ３４Ｎ７ＮａＯ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６８１.５[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９６３－６２
【化82】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.８０(ｓ、３Ｈ)、３.２９(ｄ、Ｊ＝１.７Ｈｚ、２Ｈ)、３.８４(ｔ、Ｊ＝１１.９Ｈｚ、１Ｈ)、３.９５(ｓ、１Ｈ)、４.１３－４.２６(ｍ、２Ｈ)、４.３５(ｔ、Ｊ＝１０.１Ｈｚ、１Ｈ)、４.４４(ｄ、Ｊ＝１１.０Ｈｚ、１Ｈ)、５.２２(ｄ、Ｊ＝９.４Ｈｚ、１Ｈ)、５.６２(ｓ、１Ｈ)、７.３６(ｄ、Ｊ＝７.８Ｈｚ、１Ｈ)、７.４２－７.５６(ｍ、４Ｈ)、７.６１(ｄ、Ｊ＝７.７Ｈｚ、１Ｈ)、７.７１(ｄ、Ｊ＝７.４Ｈｚ、２Ｈ)、７.７８(ｄ、Ｊ＝７.５Ｈｚ、２Ｈ)、７.８９(ｄｄ、Ｊ＝１４.９、８.５Ｈｚ、３Ｈ)、８.２４(ｓ、１Ｈ)；ＬＲＭＳ[Ｃ３４Ｈ３３Ｎ６ＮａＯ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)７１４.６[Ｍ＋Ｎａ]＋。
【0165】
スルホンアミドＩＥ１９９３－９およびＩＥ１９６３－９９
アルゴン下、アミンＩＥ１８２６－１０８(５０ｍｇ、０.０８ｍｍｏｌ)の無水ＤＣＭ(２ｍＬ)溶液にＤＭＡＰ(触媒量)を添加し、スルホニルクロライド(１.２当量)を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、化合物１０％ メタノール／水を溶媒として用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで精製し、純粋な脱保護された生成物を得た。
ＩＥ１９９３－９
【化83】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.９２(ｓ、３Ｈ)、３.６４－３.７６(ｍ、２Ｈ)、３.８６(ｓ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１１.９、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.８Ｈｚ、１Ｈ)、４.５０(ｔ、Ｊ＝１０.２Ｈｚ、１Ｈ)、４.６０(ｄ、Ｊ＝１０.９Ｈｚ、１Ｈ)、５.６３(ｄｄ、Ｊ＝９.７、２.２Ｈｚ、１Ｈ)、５.９１(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.３４－７.４６(ｍ、２Ｈ)、７.６１－７.７６(ｍ、３Ｈ)、８.１６(ｄ、Ｊ＝７.８Ｈｚ、１Ｈ)、８.３４(ｄｔ、Ｊ＝８.２、１.６Ｈｚ、１Ｈ)、８.３７(ｓ、１Ｈ)、８.５７(ｔ、Ｊ＝２.０Ｈｚ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７５、４６.９４、４８.６７、５９.９５、６３.１０、６８.１２、６９.７１、７５.４４、１０１.８８、１２１.６７、１２２.１７、１２２.８１、１２４.５３、１２６.７７、１２７.０５、１２８.８２、１２９.４３、１３０.８４、１３２.５８、１３３.０１、１４１.９０、１４５.１９、１４７.８０、１５０.５０、１６８.７１、１７１.３６、１７３.７１；ＬＲＭＳ[Ｃ２７Ｈ２８Ｎ７ＮａＯ１２Ｓ](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)７１９.５[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９６３－９９
【化84】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.９３(ｓ、３Ｈ)、３.６５－３.７５(ｍ、２Ｈ)、３.８５(ｓ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１１.９、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.５２(ｄｄ、Ｊ＝１０.９、９.５Ｈｚ、１Ｈ)、４.６１(ｄｄ、Ｊ＝１１.０、１.０Ｈｚ、１Ｈ)、５.６４(ｄｄ、Ｊ＝９.６、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.９２(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.３７(ｔｄ、Ｊ＝７.６、１.４Ｈｚ、１Ｈ)、７.４４(ｔｄ、Ｊ＝７.８、１.７Ｈｚ、１Ｈ)、７.６４(ｄｄ、Ｊ＝８.１、１.３Ｈｚ、１Ｈ)、７.７０(ｄｄ、Ｊ＝７.７、１.６Ｈｚ、１Ｈ)、７.９９(ｄ、Ｊ＝８.８Ｈｚ、２Ｈ)、８.２８(ｄ、Ｊ＝８.８Ｈｚ、２Ｈ)、８.３９(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７５、４６.８２、４８.６５、６０.０３、６３.０９、６８.１２、６９.７１、７５.４６、１０１.８８、１２２.１７、１２３.１０、１２４.５２、１２４.７５、１２６.９０、１２７.８２、１２８.８５、１２９.４６、１３２.９７、１４５.１７、１４５.７９、１４９.５０、１５０.５３、１６８.７１、１７１.２６、１７３.６８；ＬＲＭＳ[Ｃ２７Ｈ２８Ｎ７ＮａＯ１２Ｓ](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)７１９.５[Ｍ＋Ｎａ]＋。
【0166】
【化85】
スキーム１９．フェニルトリアゾール合成
【0167】
ＩＥ１８２６－１０６
【化86】
Ｂｏｃ－β－アラニン－ＯＨ(３３３ｍｇ、１.７６ｍｍｏｌ)をＤＩＥＡ(０.６１ｍＬ、３.５ｍｍｏｌ)およびＣＯＭＵ(７５０ｍｇ、１.７６ｍｍｏｌ)のＤＭＦ(３ｍｌ)溶液で活性化し、その後、撹拌中のアミンＩＥ１３９８－２４(５０４ｍｇ、０.８７９ｍｍｏｌ)のＤＭＦ(３ｍｌ)溶液に添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、真空下で濃縮した。その後粗生成物を水に溶解し、酢酸エチル(５０ｍＬ×４)で抽出し、有機層を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮し、その後酢酸エチル／ヘキサン(４：１)を用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。アルゴン下、０℃で、Ｂｏｃ保護された生成物の無水ＤＣＭ(１５ｍＬ)溶液に、ＴＦＡ(２.０ｍｌ、２６.０ｍｍｏｌ、２０当量)を添加し、反応混合物を室温まで昇温させ、一晩撹拌した。反応物をアセトニトリルで希釈し、その後０℃まで冷却し、粉末炭酸ナトリウムを添加することによりクエンチし、５分間撹拌し、ろ過し、水で洗浄し、有機溶媒を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製のアミンをフラッシュクロマトグラフィー(アセトン／メタノール(４：１)により精製し、純粋なアミンＩＥ１８２６－１０６を２工程、４４％で得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ １.８０(ｓ、３Ｈ)、２.０４(ｓ、３Ｈ)、２.０５(ｓ、３Ｈ)、２.０７(ｓ、３Ｈ)、２.６４(ｔ、Ｊ＝６.９Ｈｚ、２Ｈ)、３.０５(ｔ、Ｊ＝７.３Ｈｚ、２Ｈ)、３.８３(ｓ、３Ｈ)、４.１８(ｄｄ、Ｊ＝１２.５、６.３Ｈｚ、１Ｈ)、４.５２(ｔ、Ｊ＝１０.１Ｈｚ、１Ｈ)、４.６１(ｄｄ、Ｊ＝１２.５、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.６７(ｄｄ、Ｊ＝１０.８、２.０Ｈｚ、１Ｈ)、５.４１(ｔｄ、Ｊ＝６.４、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、５.５３－５.６６(ｍ、２Ｈ)、６.１８(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.２１(ｔ、Ｊ＝７.６Ｈｚ、１Ｈ)、７.３０－７.４０(ｍ、１Ｈ)、７.６３－７.７３(ｍ、１Ｈ)、８.２１(ｄ、Ｊ＝８.１Ｈｚ、１Ｈ)、８.５０(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ)：δ １９.２５、１９.３３、１９.３８、２１.１８、３３.７２、３８.９８、５１.７２、５９.７０、６１.７８、６７.３３、７０.１３、７６.４６、１０６.８８、１２０.０２、１２１.６８、１２２.５６、１２４.４７、１２７.８９、１２８.４８、１３５.１７、１４５.９８、１４６.５９、１６１.５６、１７０.００、１７０.１０、１７１.０１、１７１.３９、１７１.８３；ＬＲＭＳ[Ｃ２９Ｈ３６Ｎ６Ｏ１１](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６４５.３[Ｍ＋Ｈ]＋。
【0168】
アミドＩＥ１９６３－８４の合成
【化87】
アルゴン下、アミンＩＥ１８２６－１０６(６０ｍｇ、０.０９３ｍｍｏｌ)の無水ＤＣＭ(２ｍＬ)溶液にＤＩＥＡ(８０μＬ、０.４７ｍｍｏｌ)を添加し、シクロプロパンカルボニルクロライド(２当量)を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、化合物１０％ メタノール／水を溶媒として用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで精製し、純粋な脱保護された生成物を得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ０.７６－０.８５(ｍ、４Ｈ)、１.５９(ｄｑ、Ｊ＝７.２、６.０、５.５Ｈｚ、１Ｈ)、１.９３(ｓ、３Ｈ)、２.５７－２.６７(ｍ、２Ｈ)、３.５３(ｔ、Ｊ＝６.５Ｈｚ、２Ｈ)、３.６５－３.７５(ｍ、２Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.２、６.２、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.４５(ｄｄ、Ｊ＝１０.９、９.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.５５－４.６３(ｍ、１Ｈ)、５.６０(ｄｄ、Ｊ＝９.６、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.８８(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.４５(ｔｄ、Ｊ＝７.６、１.５Ｈｚ、１Ｈ)、７.５１(ｔｄ、Ｊ＝７.６、１.７Ｈｚ、１Ｈ)、７.５９(ｄｄ、Ｊ＝８.０、１.４Ｈｚ、１Ｈ)、７.７１(ｄｄ、Ｊ＝７.６、１.６Ｈｚ、１Ｈ)、８.３１(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ６.６４、１４.０３、２１.７２、３５.８３、３６.２４、４８.７８、６０.０３、６３.０７、６８.０６、６９.７０、７５.３６、１０１.７４、１２２.１３、１２４.７３、１２６.５２、１２７.３９、１２９.３２、１２９.６５、１３３.２５、１４５.３３、１５０.６２、１６８.６６、１７３.３１、１７３.６０、１７７.２２；ＬＲＭＳ[Ｃ２６Ｈ３１Ｎ６ＮａＯ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)６１６.５[Ｍ＋Ｎａ]＋。
【0169】
スルホンアミドＩＥ１９９３－１３およびＩＥ１９９３－２３の合成
アルゴン下、アミンＩＥ１８２６－１０６(６０ｍｇ、０.０９３ｍｍｏｌ)の無水ＤＣＭ(２ｍＬ)溶液にＤＭＡＰ(触媒量)を添加し、スルホニルクロライド(１.２当量)を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、純粋な保護された生成物を得た。保護された生成物をＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ(２ｍＬ)の１：１混合物に懸濁した。０℃で、この懸濁液にＮａＯＨ溶液(１.０Ｍ)をｐＨ約１４まで滴下添加した。温度を室温まで徐々に昇温させ、混合物を室温で一晩撹拌した。その後溶液をアンバーライト(登録商標)ＩＲ－１２０(Ｈ＋)樹脂で(ｐＨ＝５まで)酸性化し、ろ過し、ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)およびＨ２Ｏ(１０ｍＬ)で洗浄した。合わせたろ液および洗浄液をその後真空下で濃縮し、蒸留水(５ｍＬ)で希釈し、０.０５Ｍ ＮａＯＨを用いてｐＨ＝８.０に調整し、化合物をそのナトリウム塩に変換した。最後に、化合物１０％ メタノール／水を溶媒として用いてＣ１８－ＧｒａｃｅＰｕｒｅＴＭカートリッジで精製し、純粋な脱保護された生成物を得た。
ＩＥ１９９３－１３
【化88】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.９５(ｓ、３Ｈ)、２.５２－２.６１(ｍ、２Ｈ)、３.４３(ｔ、Ｊ＝６.１Ｈｚ、２Ｈ)、３.６５－３.７８(ｍ、２Ｈ)、３.９３(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０４(ｄｄｄ、Ｊ＝９.３、６.３、２.６Ｈｚ、１Ｈ)、４.４９(ｔ、Ｊ＝１０.２Ｈｚ、１Ｈ)、４.６０(ｄ、Ｊ＝１０.９Ｈｚ、１Ｈ)、５.６０(ｄｄ、Ｊ＝９.７、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.８９(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.２７(ｔ、Ｊ＝７.６Ｈｚ、１Ｈ)、７.３７(ｔｄ、Ｊ＝７.７、１.６Ｈｚ、１Ｈ)、７.５８(ｄｄ、Ｊ＝８.３、１.３Ｈｚ、１Ｈ)、７.６６(ｄ、Ｊ＝８.１Ｈｚ、１Ｈ)、７.８９(ｄ、Ｊ＝８.８Ｈｚ、２Ｈ)、８.０８(ｄ、Ｊ＝８.８Ｈｚ、２Ｈ)、８.３３(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７８、３７.３８、３９.４８、４８.６８、６０.００、６３.１０、６８.１０、６９.７３、７５.４８、１０１.８１、１２１.５５、１２１.９８、１２４.０６、１２４.４２、１２６.３０、１２７.６９、１２８.４７、１２９.２９、１３３.４５、１４５.５４、１４５.５８、１４９.２２、１５０.６２、１６８.６８、１７２.１０、１７３.６０；ＬＲＭＳ[Ｃ２１Ｈ２３Ｎ３Ｎａ２Ｏ９](ｍ／ｚ)：(＋ｖｅ イオンモード)７３３.５[Ｍ＋Ｎａ]＋。
ＩＥ１９９３－２３
【化89】
１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ １.９０(ｓ、３Ｈ)、２.５７－２.６６(ｍ、２Ｈ)、３.３６(ｔ、Ｊ＝６.２Ｈｚ、２Ｈ)、３.６３－３.７５(ｍ、２Ｈ)、３.９２(ｄｄ、Ｊ＝１２.０、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.０３(ｄｄｄ、Ｊ＝９.４、６.３、２.７Ｈｚ、１Ｈ)、４.４０－４.５２(ｍ、３Ｈ)、４.５７(ｄｄ、Ｊ＝１０.９、１.２Ｈｚ、１Ｈ)、５.５６(ｄｄ、Ｊ＝９.７、２.３Ｈｚ、１Ｈ)、５.８６(ｄ、Ｊ＝２.２Ｈｚ、１Ｈ)、７.４０－７.４８(ｍ、６Ｈ)、７.５１(ｔｄ、Ｊ＝７.７、１.７Ｈｚ、１Ｈ)、７.６０(ｄｄ、Ｊ＝７.９、１.４Ｈｚ、１Ｈ)、７.７２(ｄｄ、Ｊ＝７.７、１.７Ｈｚ、１Ｈ)、８.２４(ｓ、１Ｈ)；１３Ｃ ＮＭＲ(１０１ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ)：δ ２１.７１、３７.０６、３９.３５、４８.７２、５７.５０、５９.９９、６３.０９、６８.０９、６９.７１、７５.３８、１０１.８６、１２２.３６、１２４.７８、１２６.６５、１２７.４２、１２８.７４、１２８.８８、１２９.３０、１２９.６２、１３０.７０、１３３.１６、１４４.９６、１５０.５２、１６８.６９、１７２.８７、１７３.６０。
【0170】
生物実施例
細胞およびウイルス：
ＬＬＣ－ＭＫ２細胞(アカゲザル腎臓、ＡＴＣＣ ＣＣＬ－７)およびＭＡ１０４細胞(アカゲザル腎臓、ＡＴＣＣ ＣＲＬ－２３７８.１)を、１％ グルタミン(２００ｍＭ)および２％ ウシ胎児血清を補充したイーグル最小必須培地(ＥＭＥＭ)で培養した。ｈＰＩＶ－３(ＬＬＣ－ＭＫ２)およびｈＰＩＶ－１(ＭＡ１０４)感染ならびに感染後インキュベートの間、ＬＬＣ－ＭＫ２およびＭＡ１０４細胞を１％ グルタミンのみを補充したＥＭＥＭで維持した。全ての細胞株を５％ ＣＯ２の加湿雰囲気で、３７℃でインキュベートした。ｈＰＩＶ－３(Ｃ－２４３株)およびｈＰＩＶ－１(Ｃ－３５株)をＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ(ＡＴＣＣ)から入手した。ｈＰＩＶ－３(ＪＳ株)をＶｉｒａｔｒｅｅから入手した。ｈＰＩＶ－３(ＣＩ００２株)は、ゴールドコースト大学病院から入手した臨床分離株である。グルタミンのみを添加したＥＭＥＭを用いて、ＣＯ２の加湿雰囲気で３５℃で、ｈＰＩＶ－３についてはＬＬＣ－ＭＫ２細胞に、およびｈＰＩＶ－１についてはＭＡ１０４細胞に、ウイルスを、伝播させた。ウイルスを含む培地上清を感染後３～４日目に回収し、細胞変性効果を観測しながら、遠心分離(３，０００ＲＣＦ、１５分間)により細胞片から分離させた。血液凝集阻害(ＨＩ)アッセイに使用される３０ｋＤａアミコンウルトラフィルターユニットを用いて、ウイルスを少なくとも１０回濃縮した。ノイラミニダーゼ阻害(Ｎｌ)アッセイは、ＰＥＧ沈殿させ、下記のとおり精製したウイルスを使用した。分離したｈＰＩＶ－３またはｈＰＩＶ－１上清をＰＥＧ６０００(最終濃度８％)およびＮａＣＩ(最終濃度０.４Ｍ)と混合し、その後、穏やかに撹拌しながら４℃で一晩インキュベートした。３，０００ＲＣＦで、４℃で３０分間遠心分離することにより、ＰＥＧ６０００／ｈＰＩＶ複合体を沈殿させた。上清を廃棄し、初めのウイルス懸濁液体積の少なくとも１：４０に対応する体積のＧＮＴＥ緩衝液(２００ｍＭ グリシン、２００ｍＭ ＮａＣｌ、２０ｍＭ トリス－ＨＣｌ、２ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ ７.４)を使用し、４℃で一晩、沈殿物を再懸濁した。上下のピペッティングによりウイルス懸濁液を均一化し、「ｔｉｇｈｔ」のペストルを備えたダウンス型を使用して、残りのウイルス凝集体を機械的に破砕した。ｈＰＩＶ－３またはｈＰＩＶ－１ホモジネートをＧＮＴＥ緩衝液中で調製した３０％～６０％ 非線形スクロースグラジエントに充填し、１００，０００ＲＣＦで、４℃で２時間３０分間、減速のために制動することなく遠心分離した。ウイルスを３０％～６０％ スクロースインターフェースで濃縮し、その後Ｎ１アッセイのために－４℃で保存した。
【0171】
ｈＰＩＶ ＨＮ阻害剤：
化合物は凍結乾燥させた粉末として提供され、その後、１０ｍＭ 原液を調製するために無菌水またはＤＭＳＯに溶解した。完全に溶解させるために、溶液を１５分間超音波処理した。原液を琥珀色ガラスバイアル中－２０℃で保存し、使用前に適切な緩衝液で新たに希釈した。
【0172】
血液凝集阻害アッセイ：
ＨＮ阻害剤をＵ底９６ウェルプレートアッセイで、デュプリケートでアッセイした。化合物を試験する各濃度について、４×溶液としてＰＢＳ中で希釈した(２５μＬ／ウェル、１×最終)。各希釈物をｈＰＩＶ－３またはｈＰＩＶ－１の４倍量の赤血球凝集単位(ＨＡＵ)と混合し(２５μＬ／ウェル、１ＨＡＵ最終)、室温で２０分間インキュベートした。同体積(５０μＬ／ウェル)の１％ ヒト赤血球(ｈ－ＲＢＣ)を各ウェルに添加した。その後、プレートを室温(２２～２３℃)で１時間インキュベートした後、凝集の程度を読み取った。未処理ウイルス懸濁液の１ＨＡＵと比較してヘマグルチニン活性(凝集)を５０％減少させる阻害剤の濃度をＨＩ ＩＣ５０とした。
【0173】
ノイラミニダーゼ阻害アッセイ：
精製したｈＰＩＶ－３またはｈＰＩＶ－１、阻害剤およびＭＵＮを調製し、ＮＡ反応緩衝液[ＮａＯＡｃ ５０ｍＭ、ＣａＣＩ２ ５ｍＭ、ｐＨ ４.６(ｈＰＩＶ３)または５.０(ｈＰＩＶ－１)]に希釈した。種々のｈＰＩＶ－３またはｈＰＩＶ－１希釈物を使用して、ノイラミニダーゼアッセイを初めに測定し、アッセイで使用する最小ウイルス濃度を決定した。十分に精製したウイルスを用いてノイラミニダーゼアッセイを実施し、統計的に有意であると考えられる試験の背景より少なくとも５倍高い最大蛍光シグナルを得た。ノイラミニダーゼ阻害(Ｎｌ)アッセイをトリプリケートで実施した。試験した各濃度について、２μＬの精製したｈＰＩＶおよび４μＬの２.５×阻害剤溶液(１×最終)を各ウェルに添加した。プレートを室温で２０分間保持した後、４μＬの５ｍＭ ２’－(４－メチルウンベリフェリル)－α－Ｄ－Ｎ－アセチルノイラミン酸(ＭＵＮ)(２ｍＭ最終)を各ウェルに添加し、その後、撹拌(１１００ｒｐｍ)しながらプレートを３７℃で３０分間インキュベートした。各ウェルに１９０μｌのグリシン緩衝液(グリシン ０.２５Ｍ、ｐＨ １０.４)を添加することにより酵素反応を停止させた。ウイルスにＭＵＮを添加し、ｔ＝０分で酵素反応を停止させることにより、陰性対照が含まれた。Tecan Infinite M200 Proで相対蛍光(ＲＦ)を測定した。背景差分(陰性対照ＲＦ)によりデータを処理し、その後GraphPadPrismを用いてＩＣ５０値を計算した(非線形回帰(曲線適合)、用量応答阻害、３または４パラメータロジスティック)。未処理ウイルス懸濁液と比較してノイラミニダーゼ活性(相対蛍光)を５０％減少させる阻害剤の濃度をＮｌ ＩＣ５０値とした。全てのアッセイはトリプリケートで実施した。
【0174】
インサイチュ酵素結合免疫吸着アッセイ(ＥＬＩＳＡ)：
インサイチュＥＬＩＳＡはウイルス増殖阻害を評価するために有用な技術である。それは、感染したＬＬＣ－ＭＫ２細胞単一層の細胞表面でのｈＰＩＶ－３ＨＮ発現レベルを一工程で測定する。発現レベルは、非固定ウイルスが標的細胞に感染または再感染する能力と直接的に相関する。細胞ベースアッセイにおける最良の阻害剤を評価する前に、化合物細胞毒性を評価するためにＭＴＴアッセイが実施され得る。９６ウェルプレートに２００ＦＦＵ／ウェルで播種したコンフルエントのＬＬＣ－ＭＫ２細胞単一層を感染させた。ｈＰＩＶ３Ｃ ２４３株、ＪＳ株またはＣＩ００２株を用いた感染をトリプリケートで実施し、１５分毎に穏やかに撹拌しながら、３７℃で１時間継続した。化合物を１０倍希釈物として、最終濃度２５０ｍＭ～２.５ｎＭに希釈した。接種源を除去し、１００μＬ／ウェルの各々の化合物希釈物でそれぞれ置き換えた。阻害剤を除いて同一の条件を使用することにより、感染についての陽性対照を含めた。ウイルス増殖のために、感染した細胞単一層を３７℃、５％ ＣＯ２で保持した。１００μＬの７.４％ ホルムアルデヒド／ＰＢＳ細胞を直接添加することにより、ウイルスを不活性化させ、細胞を固定した。プレートを室温で１５分間維持し、その後ＰＢＳで５分間、３回洗浄し、その後、３７℃で、０.３％ Ｈ２Ｏ２／ＰＢＳで３０分間処理することにより、内因性ペルオキシダーゼを不活性化させた。細胞単一層を洗浄し、５％ ミルク／ＰＢＳ中１μｇ／ｍＬのモノクローナル ＩｇＧ抗ｈＰＩＶ－３ＨＮ(Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ、クローン番号Ｍ０２１２２３２１ 、２.０ｍｇ／ｍＬ)を用いて、３７℃で１時間インキュベートした。ウェルを０.０２％ Ｔｗｅｅｎ２０／ＰＢＳで５分間、３回洗浄した。５％ ミルク／ＰＢＳ中で１：４０００に希釈したヤギ抗マウス－ＩｇＧ(Ｈ＋Ｌ)－ＨＲＰコンジュゲート(ＢｉｏＲａｄ、番号１７０６５１６)を各ウェルに添加し、３７℃で１時間インキュベートした。細胞単一層を０.０２％ Ｔｗｅｅｎ２０／ＰＢＳで洗浄し、その後、ＰＢＳで２回洗浄した。ＢＤ ＯｐｔＥＩＡ ＴＭＢ基質を各ウェルに添加し、その後、プレートを３７℃でインキュベートした。３～５分後、５０μＬの０.６Ｍ Ｈ２ＳＯ４をウェル毎に添加することにより、酵素反応を停止させた。ｘＭａｒｋＴＭマイクロプレート吸光度分光光度計を用いて、各ウェルの吸光度(ＯＤ)を４５０ｎｍで読み取ることにより、生データを得た。開始時のＯＤ読み取りからの陰性対照(非固定細胞)ＯＤの減算およびＩＣ５０値(非線形回帰(曲線適合)、用量応答阻害、３または４パラメータロジスティック)を計算するためにＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ４で分析したデータにより、最終ＯＤを得た。ＩＣ５０値は、未処理の感染細胞単一層と比較して、４５０ｎｍでの吸光度を５０％減少させる阻害剤の濃度として考えた。
【0175】
本発明の化合物は、公開されたモデルを用いて、エクスビボで分化したヒト気道上皮性(ＨＡＥ)細胞に対するｈＰＩＶ－３阻害アッセイで試験され得る。簡潔には、試験方法は次のとおりである：先に記載のとおり、ヒト気道上皮性(ＨＡＥ)細胞を単離し、培養し、分化させる(Muller et al., 2013)。簡潔には、ヒト経鼻気道上皮性細胞を単離し、拡張し、コラーゲン被覆透過性膜支持体(トランスウェル)上に播種する。細胞がコンフルエントになった後、頂部の培地を除去し、細胞を約４～６週間空気－液体界面に維持して、上皮分化を可能にする。繊毛細胞を含む培養物をトランスウェル当たり４００フォーカス形成単位のｈＰＩＶ－３とともに、先端表面を介して１時間接種する。細胞がウイルスに１時間感染した直後に、種々の濃度の試験化合物を、ＨＡＥの先端側(２０μＬ／トランスウェル)に添加する。ＬＬＣ－ＭＫ２細胞におけるフォーカス形成アッセイまたはインサイチュＥＬＩＳＡを用いたウイルス滴定により、感染後１日、３日および６日にウイルス負荷減少を評価した、以前に公開されたとおり(Guillon et al, 2014)。
【0176】
構造生物学
組み換えＨＮ発現および精製
実質的に修飾された文献手順に基づくＢａｃ－ｔｏ－Ｂａｃ(登録商標)バキュロウイルス発現系(Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カールスバッド、カリフォルニア州)を用いて、ＨＮタンパク質を発現させた。このように、ミツバチメリチンシグナルペプチド(ＨＢＭ)についてのヌクレオチド配列を、ＨＮエクトドメイン(アミノ酸１２５～５７２)についてコードする配列の下流に加えた。この配列(ＨＢＭ＋ＨＮ)は、ツマジロクサヨトウ(Spodoptera frugiperda)細胞(Ｓｆ９)における発現のために最適化され、ＨＢＭ－ＨＮｈＰＩＶ－３ｏｐｔと命名された遺伝子として、ＤＮＡ２.０遺伝子合成サービス(ＤＮＡ２.０、メンローパーク、カリフォルニア州)を介して直接配列決定されたコドンであった。ＨＢＭ－ＨＮｈＰＩＶ－３ｏｐｔはＰＣＲにより増幅され、精製および検出の目的でさらなるＣ末端６－ヒスチジンタグ(Ｈｉｓ－Ｔａｇ)を提供するｐＦａｓｔＢａｃ／ＣＴ－ＴＯＰＯ(登録商標)ベクターに結合された。
【0177】
製造者の説明書に従って、ＨＢＭ－ ＨＮｈＰＩＶ－３ｏｐｔを含む組み換えバキュロウイルスの形成および増幅を実施した。Ｉｎｓｅｃｔ－ＸＰＲＥＳＳタンパク質フリー昆虫細胞培地(Ｌｏｎｚａ)中で培養したＳｆ９細胞(Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ)を高いＭＯＩのＨＢＭ－ＨＮｈＰＩＶ－３ｏｐｔバキュロウイルスに感染させた。感染４日後、組み換えＨＮを含む上清を回収し、最も高いタンパク質発現を得た。製造者のプロトコルに従って、上清を遠心分離(３，０００ ＲＣＦで１５分間)により清浄化し、細胞片を除去し、その後５ｍＬカラム(ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ｌｉｆｅ ｓｃｉｅｎｃｅｓ、バッキンガムシャー、イングランド)で精製した。組み換えＨＮを５００ｍＭ イミダゾール溶液で溶出し、それらのノイラミニダーゼ酵素活性について回収したフラクションを評価した(上記を参照)。最も活性が高いフラクションをプールし、１０ｋＤａ アミコンウルトラフィルターユニット(Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ)を用いて、最終体積８００μＬに濃縮した。４℃で、Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ７５ゲルろ過カラム(ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ)による高速タンパク質液体クロマトグラフィー(Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ)を利用するさらなる精製工程を実施し、Ｆｒａｃ－９２０を用いて１ｍＬのフラクションを回収した。２８０ｎｍでフラクション回収物をモニタリングクスことにより決定したタンパク質を含むフラクションを、それらのノイラミニダーゼ酵素活性について評価し、ＳＤＳ－ＰＡＧＥに供した。精製し、濃縮した組み換えＨＮタンパク質を４℃で保存した。
【0178】
結晶化、データ収集および構造決定
いくつかのｈＰＩＶ３－ＨＮ複合体(化合物ＩＥ－１８２６.２３を有する)は、１～２４時間の種々の時間、５ｍＭの阻害剤を含む結晶化溶液(０.１Ｍ クエン酸緩衝液 ｐＨ ４.６、０.２Ｍ (ＮＨ４)２ＳＯ４、１５％ｖ／ｖ ポリエチレングリコール(ＰＥＧ)３０００)に結晶を浸漬することにより調製した。他のｈＰＩＶ－３ ＨＮ複合体は、(化合物ＩＥ－１８２６.３０、ＩＥ－１５３０.７４、ＩＥ－１５３０.６９およびＩＥ－１７７８.３９との)共結晶化により調製し、４ｍｇ／ｍＬ ｈＰＩＶ３ ＨＮタンパク質原液を０.１Ｍ クエン酸緩衝液 ｐＨ ４.６、０.２Ｍ (ＮＨ４)２ＳＯ４および１０％ ＰＥＧ３０００中、最終濃度１.５ｍＭの阻害剤と３０分間前培養した。ハンギングドロップ蒸気拡散法を用いて、２μＬの前培養した原液として結晶化試験を設定した。５００μＬの容器(０.１Ｍ クエン酸緩衝液 ｐＨ ４.６、０.２Ｍ (ＮＨ４)２ＳＯ４および１０％または１５％ ＰＥＧ３０００)に対して滴下を平衡化させた。結晶をナイロンループ(Ｈａｍｐｔｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ)に固定し、グリセロールと沈殿溶液を含む凍結保護溶液中で、１００Ｋで瞬間凍結した。
【0179】
Ｂｌｕ－Ｉｃｅソフトウェアを用いて、ＭＸ２ビームラインでＡｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｓｙｎｃｈｒｏｔｒｏｎで、Ｘ線回折データを収集した。データセットをＸＤＳを使用して処理し、ＣＣＰ４ ｓｕｉｔｅでＡｉｍｌｅｓｓを使用して調整した。Ｐｈａｓｅｒおよび鋳型としてのアポｈＰＩＶ３－ＨＮモデル(ＰＤＢ ＩＤ：４ＸＪＱ)を用いて、分子置換により構造を解析した。Ｐｈｅｎｉｘ.Ｒｅｆｉｎｅを用いてモデルを精密化し、ＭｏｌＰｒｏｂｉｔｙを用いて構造確認を実施した。ＣｏｏｔおよびＰｙＭＯＬ(http://www.pymol.org/;DeLano Scientific LLC)を用いて、構造解析を実施した。
【0180】
結果
【表1-1】
【表1-2】
【表1-3】
【表1-4】
【0181】
【表2-1】
【表2-2】
【表2-3】
【表2-4】
【国際調査報告】
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