特表 2022-543149 自家胸腺組織の移植

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-10-07

(54)【発明の名称】自家胸腺組織の移植

(51)【国際特許分類】

   A61K 35/26 20150101AFI20220930BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20220930BHJP

   A61P 21/04 20060101ALI20220930BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20220930BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20220930BHJP

   A61P 37/00 20060101ALI20220930BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20220930BHJP

   A61P 31/00 20060101ALI20220930BHJP

   A61P 31/12 20060101ALI20220930BHJP

   A61P 7/00 20060101ALI20220930BHJP

   A61P 3/00 20060101ALI20220930BHJP

【ＦＩ】

A61K35/26

A61P9/00

A61P21/04

A61P35/00

A61P37/08

A61P37/00

A61P21/00

A61P31/00

A61P31/12

A61P7/00

A61P3/00

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022507407

(86)(22)【出願日】2020-08-05

(85)【翻訳文提出日】2022-03-29

(86)【国際出願番号】 US2020044940

(87)【国際公開番号】W WO2021026195

(87)【国際公開日】2021-02-11

(31)【優先権主張番号】62/882,887

(32)【優先日】2019-08-05

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】506339556

【氏名又は名称】ユニバーシティ オブ ピッツバーグ － オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイヤー エデュケイション

【氏名又は名称原語表記】Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ － Ｏｆ ｔｈｅ Ｃｏｍｍｏｎｗｅａｌｔｈ Ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ Ｈｉｇｈｅｒ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ

【住所又は居所原語表記】１ｓｔ Ｆｌｏｏｒ Ｇａｒｄｎｅｒ Ｓｔｅｅｌ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｅｎｔｅｒ，１３０ Ｔｈａｃｋｅｒａｙ Ａｖｅｎｕｅ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ １５２６０（ＵＳ）

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】ラガッセ， エリック

【テーマコード（参考）】

4C087

【Ｆターム（参考）】

4C087AA01

4C087AA02

4C087BB42

4C087BB64

4C087MA66

4C087NA14

4C087ZA36

4C087ZA51

4C087ZA94

4C087ZB02

4C087ZB05

4C087ZB13

4C087ZB26

4C087ZB33

4C087ZB35

(57)【要約】

本開示は、胸腺機能の保護または修復を必要とする被験体の胸腺機能を保護または修復するための方法およびキットを提供する。本明細書中に開示の方法およびキットは、自家胸腺組織を少なくとも１つの被験体のリンパ節内に送達させる工程を含む。１つの態様では、本開示は、胸腺摘出術を受けていたか、胸腺摘出術を受ける予定の被験体の胸腺機能を保護または修復する方法を提供する。本発明は、例えば、胸腺機能の保護または修復を必要とする被験体の胸腺機能を保護または修復する方法であって、胸腺組織を少なくとも１つの前記被験体のリンパ節内に送達させる工程を含み、ここで、前記胸腺組織が前記被験体に対して自家である、方法を提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

胸腺機能の保護または修復を必要とする被験体の胸腺機能を保護または修復する方法であって、胸腺組織を少なくとも１つの前記被験体のリンパ節内に送達させる工程を含み、ここで、前記胸腺組織が前記被験体に対して自家である、方法。

【請求項2】

前記被験体が先天性心臓欠陥を有する、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記被験体が、開心術を受けていたか、開心術を受ける予定である、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

前記被験体が新生児または乳児であった時に胸腺摘出術を行った、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項5】

前記被験体がヒト被験体である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項6】

前記被験体が、新生児または乳児である、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項7】

前記被験体が、小児、青年、または成人である、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

前記被験体が、胸腺摘出術を受けていたか、胸腺摘出術を受ける予定である、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

前記胸腺組織を胸腺摘出術中の被験体から得る、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記胸腺組織を胸腺摘出術前の被験体から得る、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項11】

前記胸腺組織が、切り刻まれた胸腺切片である、請求項１～１０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項12】

前記胸腺組織を、前記送達させる工程の前にｅｘ ｖｉｖｏで培養する、請求項１～１０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項13】

前記胸腺組織を、前記送達させる工程の前に少なくとも２４時間ｅｘ ｖｉｖｏで培養する、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記胸腺組織を、針によって前記被験体のリンパ節内に送達させる、請求項１～１３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項15】

前記胸腺組織を、前記胸腺摘出術中に前記リンパ節内に送達させる、請求項８～１３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項16】

前記胸腺組織を、前記胸腺摘出術後に前記リンパ節内に送達させる、請求項８～１３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

前記胸腺組織が、前記胸腺摘出術後のリンパ節内への送達前に低温保存されている、請求項１６に記載の方法。

【請求項18】

前記低温保存された胸腺組織を、リンパ節内に、前記胸腺摘出術から約１週間後、約２週間後、約３週間後、約４週間後、約２ヶ月後、約４ヶ月後、約６ヶ月後、約１年後、約２年後、約３年後、約４年後、約５年後、約１０年後、約１５年後、約２０年後、またはそれを超えた期間の後に送達させる、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

前記胸腺組織の量が、前記被験体の胸腺機能を修復するのに有効な量である、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項20】

前記胸腺組織の量が、前記リンパ節中で拡大するのに有効な量であり、ここで、前記拡大した胸腺組織が前記被験体の胸腺機能を修復する、請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項21】

前記胸腺組織の量が、少なくとも約０．１グラムである、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項22】

前記胸腺組織の量が、約２０グラムまでである、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項23】

前記胸腺組織のサイズが、少なくとも約０．１ｃｍ^３である、請求項１～２２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項24】

前記胸腺組織のサイズが、約２０ｃｍ^３までである、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項25】

前記胸腺組織を、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、または少なくとも１０個の前記被験体のリンパ節内に送達させる、請求項１～２４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項26】

前記被験体の総胸腺重量の少なくとも約１／３を、少なくとも１つの前記被験体のリンパ節内に送達させる、請求項１～２５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項27】

被験体の胸腺機能を保護または修復するためのキットであって、胸腺組織および少なくとも１つの前記被験体のリンパ節への前記胸腺組織の送達のためのツールを含み、ここで、前記胸腺組織が前記被験体に対して自家である、キット。

【請求項28】

前記キットは溶液をさらに含み、ここで、前記胸腺組織が前記溶液中に提供される、請求項２７に記載のキット。

【請求項29】

前記溶液が、薬学的に許容され得る賦形剤、薬学的に許容され得る希釈剤、または薬学的に許容され得る担体を含む、請求項２７または２８に記載のキット。

【請求項30】

前記胸腺組織の量が、前記被験体の胸腺機能を修復するのに有効な量である、請求項２７～２９のいずれか１項に記載のキット。

【請求項31】

前記胸腺組織の量が、前記リンパ節中で拡大するのに有効な量であり、ここで、前記拡大した胸腺組織が前記被験体の胸腺機能を修復する、請求項２７～３０のいずれか１項に記載のキット。

【請求項32】

指示書をさらに含み、ここで、指示が、前記少なくとも１つの被験体のリンパ節への前記胸腺組織の送達を含む、請求項２７～３１のいずれか１項に記載のキット。

【請求項33】

前記指示が、前記被験体の総胸腺重量の少なくとも約１／３の、前記少なくとも１つの被験体のリンパ節内への送達を含む、請求項３２に記載のキット。

【請求項34】

前記胸腺組織の送達のためのツールが、低侵襲手技に必要な針およびツールを含む、請求項２７～３３のいずれか１項に記載のキット。

【請求項35】

前記胸腺組織が、低温保存された胸腺組織である、請求項２７～３４のいずれか１項に記載のキット。

【請求項36】

前記被験体が、胸腺摘出術を受けていたか、胸腺摘出術を受ける予定である、請求項２７～３５のいずれか１項に記載のキット。

【請求項37】

被験体のリンパ節内に胸腺組織を送達させる工程を含む方法であって、前記被験体中のＴ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の後に少なくとも２０％である、方法。

【請求項38】

前記Ｔ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の後に少なくとも２５％である、請求項３７に記載の方法。

【請求項39】

前記Ｔ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の後に少なくとも３０％である、請求項３７に記載の方法。

【請求項40】

被験体のリンパ節内に胸腺組織を送達させる工程を含む方法であって、前記被験体中のＴ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の前の前記被験体中のＴ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度より少なくとも５％増加する、方法。

【請求項41】

前記Ｔ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の前の前記被験体中のＴ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度より少なくとも１０％増加する、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記Ｔ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の前の前記被験体中のＴ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度より少なくとも２０％増加する、請求項４０に記載の方法。

【請求項43】

前記Ｔ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の前の前記被験体中のＴ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度より少なくとも３０％増加する、請求項４０に記載の方法。

【請求項44】

被験体のリンパ節内に胸腺組織を送達させる工程を含む方法であって、前記被験体の末梢血中のＴ細胞の濃度が、前記送達させる工程の前の前記被験体の末梢血中のＴ細胞の濃度と比較して少なくとも５％増加する、方法。

【請求項45】

前記被験体の末梢血中のＴ細胞の濃度が、前記送達させる工程の前の前記被験体の末梢血中のＴ細胞の濃度と比較して少なくとも１０％増加する、請求項４４に記載の方法。

【請求項46】

前記被験体の末梢血中のＴ細胞の濃度が、前記送達させる工程の前の前記被験体の末梢血中のＴ細胞の濃度と比較して少なくとも２０％増加する、請求項４４に記載の方法。

【請求項47】

前記被験体の末梢血中のＴ細胞の濃度が、前記送達させる工程の前の前記被験体の末梢血中のＴ細胞の濃度と比較して少なくとも３０％増加する、請求項４４に記載の方法。

【請求項48】

被験体のリンパ節内に胸腺組織を送達させる工程を含む方法であって、前記被験体中のナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の後に少なくとも２０％である、方法。

【請求項49】

前記ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の後に少なくとも２５％である、請求項４８に記載の方法。

【請求項50】

前記ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の後に少なくとも３０％である、請求項４８に記載の方法。

【請求項51】

前記ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、送達させる工程の後に少なくとも４０％である、請求項４８に記載の方法。

【請求項52】

前記ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の後に少なくとも５０％である、請求項４８に記載の方法。

【請求項53】

被験体のリンパ節内に胸腺組織を送達させる工程を含む方法であって、前記被験体中のナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、送達前の前記被験体中のナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度より少なくとも５％増加する、方法。

【請求項54】

前記ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の前の前記被験体中のナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度より少なくとも１０％増加する、請求項５３に記載の方法。

【請求項55】

前記ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の前の前記被験体中のナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度より少なくとも２０％増加する、請求項５３に記載の方法。

【請求項56】

前記ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の前の前記被験体中のナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度より少なくとも３０％増加する、請求項５３に記載の方法。

【請求項57】

前記ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の前の前記被験体中のナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度より少なくとも４０％増加する、請求項５３に記載の方法。

【請求項58】

前記ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度が、前記送達させる工程の前の前記被験体中のナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度より少なくとも５０％増加する、請求項５３に記載の方法。

【請求項59】

被験体のリンパ節内に胸腺組織を送達させる工程を含む方法であって、前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度が、前記送達させる工程の前の前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度と比較して少なくとも５％増加する、方法。

【請求項60】

前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度が、前記送達させる工程の前の前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度と比較して少なくとも１０％増加する、請求項５９に記載の方法。

【請求項61】

前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度が、前記送達させる工程の前の前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度と比較して少なくとも２０％増加する、請求項５９に記載の方法。

【請求項62】

前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度が、前記送達させる工程の前の前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度と比較して少なくとも３０％増加する、請求項５９に記載の方法。

【請求項63】

前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度が、前記送達させる工程の前の前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度と比較して少なくとも４０％増加する、請求項５９に記載の方法。

【請求項64】

前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度が、前記送達させる工程の前の前記被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度と比較して少なくとも５０％増加する、請求項５９に記載の方法。

【請求項65】

前記ナイーブＴ細胞がＣＤ４５ＲＡ＋ＣＣＲ７＋である、請求項４８～６４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項66】

前記ナイーブＴ細胞が、ＣＤ４４－ＣＤ６２Ｌ＋またはそのヒト等価物である、請求項４８～６４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項67】

被験体中の１またはそれを超えるリンパ節内に少なくとも約７グラムの胸腺組織を送達させる工程を含む方法。

【請求項68】

少なくとも８グラムの胸腺組織を、前記被験体中の１またはそれを超えるリンパ節内に送達させる、請求項３７～６７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項69】

少なくとも９グラムの胸腺組織を、前記被験体中の１またはそれを超えるリンパ節内に送達させる、請求項３７～６７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項70】

少なくとも１０グラムの胸腺組織を、前記被験体中の１またはそれを超えるリンパ節内に送達させる、請求項３７～６７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項71】

被験体のリンパ節内に胸腺組織を送達させる工程を含む方法であって、前記被験体が少なくとも４０歳である、方法。

【請求項72】

前記被験体が少なくとも５０歳である、請求項３７～７１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項73】

前記被験体が少なくとも５５歳である、請求項３７～７１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項74】

前記被験体が少なくとも６０歳である、請求項３７～７１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項75】

前記被験体が少なくとも６５歳である、請求項３７～７１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項76】

前記被験体が少なくとも７０歳である、請求項３７～７１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項77】

被験体のリンパ節内に胸腺組織を送達させる工程を含む方法であって、前記被験体の体重１キログラムあたり少なくとも５０ミリグラムの胸腺組織を送達させる、方法。

【請求項78】

前記被験体の体重１キログラムあたり少なくとも１００ミリグラムの胸腺組織を送達させる、請求項３７～７７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項79】

前記胸腺組織が低温保存されていた、請求項３７～７８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項80】

前記胸腺組織がｅｘ ｖｉｖｏで培養されていた、請求項３７～７９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項81】

前記胸腺組織を、前記被験体の胸腺機能を増大させるのに有効な量で送達させる、請求項３７～８０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項82】

前記胸腺組織を、前記リンパ節中で異所性胸腺組織を形成するのに有効な量で送達させる、請求項３７～８１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項83】

前記胸腺組織を、前記被験体におけるＴ細胞受容体密度レベルを増加させるのに有効な量で送達させる、請求項３７～８２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項84】

前記胸腺組織を単回用量で送達させる、請求項３７～８３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項85】

前記胸腺組織を、２回またはそれを超える用量で送達させる、請求項３７～８３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項86】

前記胸腺組織を単一のリンパ節に送達させる、請求項３７～８５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項87】

前記胸腺組織を２またはそれを超えるリンパ節に送達させる、請求項３７～８５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項88】

前記胸腺組織が切り刻まれた胸腺切片を含む、請求項３７～８７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項89】

前記胸腺組織を前記リンパ節に注射する、請求項３７～８５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項90】

前記胸腺組織を低侵襲手技の一部として前記リンパ節内に注射する、請求項８９に記載の方法。

【請求項91】

前記被験体が新生児である、請求項３７～７０または７７～９０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項92】

前記被験体が乳児である、請求項３７～７０または７７～９０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項93】

前記被験体が小児である、請求項３７～７０または７７～９０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項94】

前記被験体が青年である、請求項３７～７０または７７～９０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項95】

前記被験体が成人である、請求項３７～７０または７７～９０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項96】

前記被験体が哺乳動物である、請求項３７～７０または７７～９０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項97】

前記被験体がヒトである、請求項３７～９６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項98】

前記被験体が胸腺摘出術を受けていた、請求項３７～９７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項99】

前記胸腺組織を前記胸腺摘出術中に得る、請求項９８に記載の方法。

【請求項100】

前記胸腺組織を前記胸腺摘出術中に前記リンパ節に送達させる、請求項９８または請求項９９に記載の方法。

【請求項101】

前記胸腺組織を前記胸腺摘出術後に前記リンパ節に送達させる、請求項９８または請求項９９に記載の方法。

【請求項102】

前記被験体が、胸腺に影響を及ぼす容態を有する、請求項３７～１０１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項103】

前記胸腺に影響を及ぼす容態が、重症筋無力症、真性赤血球系無形成、低ガンマグロブリン血症、胸腺癌、胸腺腫、Ａ型胸腺腫、Ｂ型胸腺腫、自己免疫疾患、Ｔ細胞媒介性自己免疫、Ｔ細胞リンパ球減少症、胸腺萎縮、加齢性胸腺萎縮、胸腺嚢胞、胸腺過形成、胸腺低形成、胸腺無形成、胸腺形成異常、重症複合型免疫不全、ネゼロフ症候群、ウィスコット・アルドリッチ症候群（Ｗｉｓｃｏｔｔ－Ａｌｄｒｉｃｈ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）ディジョージ症候群、再発性感染症、再発性ウイルス感染、免疫学的早期老化、または癌である、請求項１０２に記載の方法。

【請求項104】

前記胸腺組織が前記被験体に対して自家である、請求項３７～１０３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項105】

前記胸腺組織が前記被験体に対して同種である、請求項３７～１０３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項106】

前記胸腺組織のＨＬＡが前記被験体と適合する、請求項３７～１０３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項107】

免疫抑制レジメンを前記被験体に施す工程をさらに含む、請求項３７～１０６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項108】

前記送達させる工程の後の前記被験体の末梢血のＣＤ４Ｔ細胞：ＣＤ８Ｔ細胞比が約５：１と１：１との間である、請求項３７～１０７のいずれか１項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

１．関連出願への相互参照
本出願は、２０１９年８月５日提出の米国仮出願第６２／８８２，８８７号（その内容全体が本明細書に参照により援用される）に基づく優先権を主張する。

【0002】

２．技術分野
本開示は、例えば、胸腺摘出術後に胸腺機能の保護または修復を必要とする被験体（例えば、ヒト被験体）の胸腺機能を保護または修復する方法を提供する。

【背景技術】

【0003】

３．背景
胸腺は、免疫系のリンパ系器官であり、Ｔ細胞を産生し、成熟させることができる。種々の胸腺関連障害を処置するために胸腺を外科的に除去する胸腺摘出手技がしばしば実施される。胸腺摘出は、重症筋無力症、胸腺腫、または胸腺の腫瘍を有する患者に有効な処置の選択肢であり得る。

【0004】

胸腺は胎児期および出生後早期に最も活動することが知られているので、そのサイズおよび活動は、出生後に低下し始め得る。胸腺摘出は、ある特定の小児（例えば、新生児および乳児）において先天性心臓欠陥の修復のために日常的に行われ得る。胸腺は心臓への経路を遮断するように胸骨下に存在し得るので、胸腺の部分的摘出または全摘を行うことにより、心臓および大血管への接近および可視化を容易にすることができる。米国では、毎年約２０，０００人の乳児が胸腺摘出を受けている。

【0005】

しかしながら、胸腺摘出は、Ｔ細胞成熟のための主な情報源が排除されると考えられており、重篤な長期にわたる臨床的影響（自己免疫疾患、癌、感染症、アトピー性疾患、および免疫学的早期老化など）を引き起こし得る。胸腺摘出が頻繁に実施されているにもかかわらず、胸腺摘出を受けた小児が利用できる十分に有効な処置は存在しない。

【0006】

したがって、胸腺摘出を行った被験体の胸腺機能の保護または修復に有効な処置が依然として必要である。本明細書中に開示の発明の対象は、かかる処置を提供する。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0007】

４．発明の概要
本開示は、胸腺機能の保護または修復を必要とする被験体（例えば、ヒト被験体）の胸腺機能を保護または修復するための技術およびキットを提供する。本明細書中に開示の発明の対象は、少なくともその一部が、胸腺摘出を受けた小児、特に新生児および乳児が重篤な長期の臨床障害および臨床疾患（自己免疫疾患、癌、感染症、アトピー性疾患、および免疫学的早期老化が含まれる）を発症し得るという発見に基づく。

【0008】

１つの態様では、本開示は、胸腺摘出術を受けていたか、胸腺摘出術を受ける予定の被験体の胸腺機能を保護または修復する方法を提供する。本方法は、胸腺組織を少なくとも１つの被験体のリンパ節内に送達させる工程を含み、ここで、前述の胸腺組織は前述の被験体に対して自家である。

【0009】

ある特定の実施形態では、被験体は、先天性心臓欠陥を有する。ある特定の実施形態では、被験体は、開心術を受けていたか、開心術を受ける予定である。

【0010】

ある特定の実施形態では、被験体は、胸腺摘出術を受けていたか、胸腺摘出術を受ける予定である。非限定的な実施形態では、被験体が新生児または乳児であった時に胸腺摘出術を行った。

【0011】

ある特定の実施形態では、被験体はヒト被験体である。ある特定の実施形態では、被験体は、新生児または乳児である。ある特定の実施形態では、被験体は、小児、成人、または青年である。

【0012】

ある特定の実施形態では、胸腺組織を、胸腺摘出術中の被験体から得る。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、胸腺摘出術前の被験体から得る。

【0013】

ある特定の実施形態では、胸腺組織は、切り刻まれた胸腺切片である。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、送達前にｅｘ ｖｉｖｏで培養する。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、送達前に少なくとも２４時間ｅｘ ｖｉｖｏで培養する。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、針によって被験体のリンパ節内に送達させる。

【0014】

ある特定の実施形態では、胸腺組織を、針によって被験体のリンパ節内に送達させる。

【0015】

ある特定の実施形態では、胸腺組織を、胸腺摘出術中にリンパ節内に送達させる。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、胸腺摘出術後にリンパ節内に送達させる。

【0016】

ある特定の実施形態では、胸腺組織は、リンパ節内への送達前に低温保存されている。ある特定の実施形態では、低温保存された胸腺組織を、胸腺摘出術後にリンパ節内に送達させる。ある特定の実施形態では、低温保存された胸腺組織を、リンパ節内に、胸腺摘出術から約１週間後、約２週間後、約３週間後、約４週間後、約２ヶ月後、約４ヶ月後、約６ヶ月後、約１年後、約２年後、約３年後、約４年後、約５年後、約１０年後、約１５年後、約２０年後、またはそれを超えた期間の後に送達させる。

【0017】

ある特定の実施形態では、胸腺組織の量は、被験体の胸腺機能を修復するのに有効な量である。ある特定の実施形態では、胸腺組織の量は、リンパ節中で拡大するのに有効な量であり、ここで、拡大した胸腺組織が被験体の胸腺機能を修復する。

【0018】

ある特定の実施形態では、胸腺組織の量は、少なくとも約０．１グラムである。ある特定の実施形態では、胸腺組織の量は、約２０グラムまでである。ある特定の実施形態では、胸腺組織のサイズは、少なくとも約０．１ｃｍ^３である。ある特定の実施形態では、胸腺組織のサイズは、約２０ｃｍ^３までである。

【0019】

ある特定の実施形態では、胸腺組織を、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、または少なくとも１０個の被験体のリンパ節内に送達させる。ある特定の実施形態では、胸腺組織は、低温保存された胸腺組織である。非限定的な実施形態では、被験体の総胸腺重量の少なくとも約１／３を、少なくとも１つの被験体のリンパ節に送達させる。

【0020】

別の態様では、本開示は、被験体の胸腺機能を保護または修復するためのキットを提供する。キットは、胸腺組織および少なくとも１つの被験体のリンパ節への前述の胸腺組織の送達のためのツールを含み、ここで、前述の胸腺組織が前述の被験体に対して自家である。

【0021】

ある特定の実施形態では、キットは溶液をさらに含み、ここで、胸腺組織は溶液中に提供される。ある特定の実施形態では、溶液は、薬学的に許容され得る賦形剤、薬学的に許容され得る希釈剤、または薬学的に許容され得る担体を含む。

【0022】

ある特定の実施形態では、胸腺組織の量は、被験体の胸腺機能を修復するのに有効な量である。ある特定の実施形態では、胸腺組織の量は、リンパ節中で拡大するのに有効な量であり、ここで、拡大した胸腺組織が被験体の胸腺機能を修復する。

【0023】

ある特定の実施形態では、キットは、少なくとも１つの被験体のリンパ節への胸腺組織の送達を含む指示書をさらに含む。非限定的な実施形態では、指示は、被験体の総胸腺重量の少なくとも約１／３の、少なくとも１つの被験体のリンパ節内への送達を含む。

【0024】

ある特定の実施形態では、胸腺組織の送達のためのツールは、低侵襲手技に必要な針およびツールを含む。

【0025】

ある特定の実施形態では、被験体は、胸腺摘出術を受けていたか、胸腺摘出術を受ける予定である。
５．図面の簡単な説明

【図面の簡単な説明】

【0026】

【図1A】図１Ａ～１Ｃは、回収および移植された野生型新産仔胸腺を説明している。図１Ａは、本開示の移植のために使用されたＢＡＬＢ／ｃ野生型新産仔胸腺の重量の棒グラフを示す。図１Ｂは、本開示の１／４葉、１／２葉、または１葉の胸腺、または全胸腺を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウス数の棒グラフを示す。図１Ｃは、本開示のｍｇで表示した各用量の胸腺を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウス数を示す棒グラフである。

【図1B】同上。

【図1C】同上。

【図2A】図２Ａ～２Ｅは、移植４ヶ月後の末梢血Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す。図２Ａは、本開示の非移植（ＵｎＴｘ）ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス、胸腺移植（Ｔｘ）ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス、およびＢＡＬＢ／ｃ野生型マウスにおけるＣＤ３＋Ｔ細胞の百分率のフローサイトメトリーのドットプロットを示す。細胞を最初にシングレット、その後に生細胞、ＣＤ４５＋細胞、最後にＣＤ３発現についてゲーティングした。図２Ｂは、本開示のＣＤ３＋であるＣＤ４５＋細胞の百分率の平均を用いた散布図を示す。図２Ｃは、本開示のＣＤ４＋であるＣＤ３＋細胞の百分率の平均を用いた散布図を示す。図２Ｄは、本開示のＣＤ８＋であるＣＤ３＋細胞の百分率の平均を用いた散布図を示す。図２Ｅは、本開示の胸腺を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウスにおけるＣＤ３＋Ｔ細胞であるＣＤ４５＋細胞の百分率の平均およびＳＥＭを用いた散布図を示す。

【図2B】同上。

【図2C】同上。

【図2D】同上。

【図2E】同上。

【図3A】図３Ａ～３Ｂは、移植５ヶ月後の末梢血Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す。図３Ａは、本開示の１／４葉、１／２葉、１葉、または２葉の胸腺を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウスにおけるＣＤ３＋Ｔ細胞であるＣＤ４５＋細胞の百分率の平均および標準偏差を用いた棒グラフを示す。図３Ｂは、図３ＡにあるようなマウスにおけるＴＣＲ－Ｖβバリアントを発現するＴ細胞の百分率の棒グラフを示す。ＢＡＬＢ／ｃ野生型マウスは、正の対照（ＣＮＴＲＬ）を示す。

【図3B】同上。

【図4A】図４Ａ～４Ｂは、胸腺組織断片の移植６ヶ月後のリンパ節の重量を示す。図４Ａは、本開示の胸腺の葉を移植されたＢＡＬＢ／ｃヌードマウスにおけるリンパ節（ＬＮ）の重量の平均を用いた散布図を示す。図４Ｂは、本開示の胸腺を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウスにおけるリンパ節（ＬＮ）の重量の平均およびＳＥＭを用いた散布図を示す。

【図4B】同上。

【図5A】図５Ａ～５Ｈは、本開示のエフェクター／エフェクターメモリーＴ細胞（ＣＤ４＋ＣＤ３＋ＣＤ４４＋ＣＤ６２Ｌ－）および（ＣＤ８＋ＣＤ３＋ＣＤ４４＋ＣＤ６２Ｌ－）；セントラルメモリーＴ細胞（ＣＤ４＋ＣＤ３＋ＣＤ４４＋ＣＤ６２Ｌ＋）および（ＣＤ８＋ＣＤ３＋ＣＤ４４＋ＣＤ６２Ｌ＋）；活性化されたエフェクターＴ細胞（ＣＤ４＋ＣＤ３＋ＣＤ４４－ＣＤ６２Ｌ－）および（ＣＤ８＋ＣＤ３＋ＣＤ４４－ＣＤ６２Ｌ－）；ナイーブＴ細胞（ＣＤ４＋ＣＤ３＋ＣＤ４４－ＣＤ６２Ｌ＋）および（ＣＤ８＋ＣＤ３＋ＣＤ４４－ＣＤ６２Ｌ＋）についてフローサイトメトリーを使用したゲーティングアプローチを示すフローサイトメトリーのドットプロットを示す。図５Ａは、前方散乱ゲート対側方散乱ゲートを示す。図５Ｂは、単一細胞についてのゲートを示す。図５Ｃは、生細胞についてのゲートを示す。図５Ｄは、ＣＤ４５＋細胞についてのゲートを示す。図５Ｅは、ＣＤ３＋細胞についてのゲートを示す。図５Ｆは、ＣＤ４＋細胞およびＣＤ８＋細胞についてのゲートを示す。図５Ｇは、ナイーブ細胞、活性化されたエフェクター細胞、エフェクターメモリー細胞、およびセントラルメモリー細胞についてのＣＤ４＋細胞のゲーティングを示す。図５Ｈは、ナイーブ細胞、活性化されたエフェクター細胞、エフェクターメモリー細胞、およびセントラルメモリー細胞についてのＣＤ８＋細胞のゲーティングを示す。

【図5B】同上。

【図5C】同上。

【図5D】同上。

【図5E】同上。

【図5F】同上。

【図5G】同上。

【図5H】同上。

【図6A】図６Ａ～６Ｅは、成体マウスおよび高齢マウスのリンパ節内への胸腺組織断片の移植から７週間後の末梢血Ｔ細胞サブセットのフローサイトメトリー分析を示す。図６Ａは、本開示の１／４胸腺葉を移植した（Ｔｘ）か移植していない成体または老齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊ雌マウスにおけるＣＤ４＋のナイーブＴ細胞、エフェクターＴ細胞、およびエフェクターメモリーＴ細胞、およびセントラルメモリーのＴ細胞の亜集団のフローサイトメトリーのドットプロットを示す。図６Ｂ～６Ｅは、本開示の１／４胸腺葉を移植したか移植していない成体または老齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊ雌および雄マウスにおける活性化されたＣＤ４＋Ｔ細胞エフェクター（図６Ｂ）、ＣＤ４＋エフェクターメモリーＴ細胞（図６Ｃ）、ＣＤ４＋セントラルメモリーＴ細胞（図６Ｄ）、およびＣＤ４＋ナイーブＴ細胞（図６Ｅ）であるＣＤ４＋Ｔ細胞の百分率の平均およびＳＥＭを用いた散布図を示す。

【図6B】同上。

【図6C】同上。

【図6D】同上。

【図6E】同上。

【発明を実施するための形態】

【0027】

６．詳細な説明
本開示の非限定的な実施形態を、本明細書および実施例によって説明する。本開示を制限するためではなく明確にするために、詳細な説明を以下の小節に分けている：
６．１ 定義；
６．２ 処置方法；および
６．３ キット。

【0028】

６．１ 定義
本明細書中で使用した用語は、一般に、当該分野、本開示の発明の対象の文脈内、および各用語が使用される特定の文脈において通常の意味を有する。ある特定の用語を、開示の発明の対象の組成物および方法ならびにこれらの作製方法および用途を説明する上での実施者に対するさらなる指針を提供するために、以下または本明細書中の他所で考察している。

【0029】

本明細書中で使用される場合、単語「ａ」または「ａｎ」は、特許請求の範囲中および／または本明細書中で用語「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」と併せて使用される場合、「１」を意味し得るが、「１またはそれを超える」、「少なくとも１つ」、および「１または１を超える」の意味とも一致する。なおさらには、用語「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、相互に置き替えることができ、当業者は、これらの用語が非制限の用語であることを認識している。

【0030】

用語「約」または「およそ」は、当業者によって決定された特定の値についての許容され得る誤差範囲内であることを意味し、この誤差範囲は、値が測定または決定される方法（すなわち、測定系の限界）に一部依存するであろう。例えば、「約」は、当該分野の実務に従って３または３を超える標準偏差内であることを意味し得る。あるいは、「約」は、所与の値の２０％まで、好ましくは１０％まで、より好ましくは５％まで、より好ましくはさらに１％までの範囲を意味し得る。あるいは、特に生物学的な系またはプロセスに関して、この用語は、値の一桁以内、好ましくは５倍以内、より好ましくは２倍以内を意味し得る。

【0031】

本明細書中の「個体」または「被験体」は、ヒトまたは非ヒト動物（例えば、哺乳動物）などの脊椎動物である。哺乳動物には、ヒト、非ヒト霊長類、家畜、競技用動物、げっ歯類、および愛玩動物が含まれるが、これらに限定されない。非ヒト動物被験体の非限定的な例には、げっ歯類（マウス、ラット、ハムスター、およびモルモットなど）；ウサギ；イヌ；ネコ；ヒツジ；ブタ；ヤギ；ウシ；ウマ；および非ヒト霊長類（類人猿およびサルなど）が含まれる。

【0032】

成人ヒト被験体は、少なくとも約１８歳に到達している被験体である。成体非ヒト被験体は、性的成熟に到達している被験体である。ある特定の実施形態では、新生児は、最長で約１ヶ月に到達しているヒト被験体である。ある特定の実施形態では、乳児は、約１ヶ月と約２歳との間の年齢に到達しているヒト被験体である。ある特定の実施形態では、小児は、約２歳と約１２歳との間の年齢に到達しているヒト被験体である。ある特定の実施形態では、青年は、約１２歳と約１８歳との間の年齢に到達しているヒト被験体である。

【0033】

本明細書中で使用される場合、用語「疾患」は、細胞、組織、または器官の通常の機能が損傷を受けているか、妨害を受けている任意の容態または障害を指す。

【0034】

物質の「有効量」は、この用語が本明細書中で使用される場合、有益であるか望ましい結果（臨床結果が含まれる）を得るのに十分な量であり、そのようなものとして、「有効量」は、この用語が適用される状況に依存する。有効量を、１回または複数回で投与することができる。

【0035】

本明細書中で使用される場合、また、当該分野において十分に理解されているように、「処置」は、臨床結果を含む有益な結果または所望の結果を得るためのアプローチである。この主題の目的を果たすために、有益な臨床結果または所望の臨床結果としては、１またはそれを超える兆候または症状の軽減もしくは回復、疾患の程度の低下、安定化された（すなわち、悪化していてない）疾患状態、疾患の防止、疾患の進行の遅延もしくは減速、ならびに／または疾患状態の回復もしくは緩和が挙げられるがこれらに限定されない。減少は、合併症または症状の重症度の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％の減少であり得る。「処置」はまた、処置を受けていない場合に予想される生存期間と比較した生存期間の延長を意味し得る。ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の発明の対象を、被験体（例えば、ヒト被験体、新生児、乳児、小児、青年、または成人）における胸腺機能を修復するために使用する。ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の発明の対象を、被験体中の循環Ｔ細胞（例えば、末梢血中のナイーブＴ細胞）のレベルを増加させるために使用する。

【0036】

本明細書中で使用される場合、任意の濃度範囲、百分率の範囲、比の範囲、または整数の範囲は、別段の指示がない限り、列挙した範囲内の任意の整数の値が含まれ、適切な場合、その分数（整数の１／１０および１／１００など）が含まれると理解されるものとする。

【0037】

本明細書中で使用される場合、用語「薬学的に許容され得る」は、健全な医学的判断の範囲内で、妥当なベネフィット／リスク比に見合う過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずに被験体（例えば、ヒト被験体または非ヒト動物）の組織と接触させて用いるのに適切な化合物、材料、組成物、および／または投薬形態を指すことができる。

【0038】

本明細書中で使用される場合、用語「薬学的に許容され得る賦形剤」は、身体の器官または一部への発明の対象となる化合物、材料、または細胞の運搬または輸送に関与する薬学的に許容され得る材料、組成物、またはビヒクル、例えば、液体または固体の充填剤、希釈剤、担体、製造助剤（例えば、潤滑剤、タルク マグネシウム、ステアリン酸カルシウムもしくはステアリン酸亜鉛、またはステアリン酸）、または溶媒をカプセル化する材料などを指すことができる。各賦形剤は、製剤の他の成分（例えば、移植されるべき細胞）と適合し、かつ被験体に有害でないという意味で「許容され得」なければならない。

【0039】

６．２ 処置方法
本開示は、胸腺機能の保護または修復を必要とする被験体を保護または修復する方法を提供する。方法は、被験体の胸腺機能を保護、増加、または修復するために少なくとも１つの被験体のリンパ節内に胸腺組織（例えば、自家胸腺組織）を送達させる工程を含む。ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法は、胸腺摘出術の短期または長期の臨床的影響（自己免疫疾患、癌、感染症、アトピー性疾患、免疫学的早期老化、またはその組み合わせなど）を予防または軽減することができる。

【0040】

６．２．１ 胸腺組織
ある特定の実施形態では、被験体は、胸腺摘出術を受けていたか、胸腺摘出術を受ける予定である。ある特定の実施形態では、被験体内に送達される自家胸腺組織を、胸腺摘出術中の被験体から得る。ある特定の実施形態では、被験体内に送達される自家胸腺組織を、胸腺摘出術前の被験体から得る。ある特定の実施形態では、被験体が新生児、乳児、または小児である時に胸腺摘出術を行った。

【0041】

いくつかの実施形態では、被験体に送達される胸腺組織は、自家ではない（例えば、同種である）。いくつかの実施形態では、胸腺組織は、被験体と１またはそれを超えるヒト白血球抗原（ＨＬＡ）対立遺伝子が適合する（例えば、１、２、３、４、５、または６つのＨＬＡ対立遺伝子の一方または両方のコピーが適合する）ドナーに由来する。胸腺組織は、被験体とＨＬＡが部分的に適合するか、ＨＬＡが完全に適合するか、ハプロタイプが一致するドナーに由来し得る。移植片拒絶の可能性を低下させるために、被験体に免疫抑制レジメンを施すことができる。免疫抑制レジメンの一部として投与することができる薬物の非限定的な例には、ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、ラパマイシン）、ＣＤ２８－Ｂ７の阻害剤（例えば、ＣＴＬＡ４－Ｉｇ）、ＣＤ４０－ＣＤ４０Ｌの阻害剤（例えば、ＭＲ１）、ステロイド（コルチコステロイド、デキサメタゾン、およびプレドニゾンなど）、Ｃｏｘ－１阻害剤およびＣｏｘ－２阻害剤、マクロライド系抗生物質（ラパマイシンおよびタクロリムスなど）、シクロスポリン、アザチオプリン、Ａｔｇａｍ、サイモグロブリン、ＯＫＴ３、バシリキシマブ、ソルメドロール、ダクリズマブ、ミコフェノール酸モフェチル、プログラフ、およびＢ細胞、Ｔ細胞、および／または他の先天性免疫活性を限定、軽減、または抑制する他の物質が含まれる。免疫抑制レジメンは、所望の効果を達成するために投与される１つの薬物または適切な薬物の任意の組み合わせを含むことができる。

【0042】

送達のための胸腺組織を、当該分野で公知の任意の適切な技術（例えば、Ｍａｒｋｅｔ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １０２，１１２１－１１３０（２００３）（その内容全体が本明細書に参照により援用される）に記載の技術が含まれるが、これらに限定されない）を使用して調製することができる。ある特定の実施形態では、被験体から採取された胸腺組織を、小断片に処理し（例えば、切り刻むかスライスし）、液体に再懸濁して、リンパ節内に送達させるための溶液を形成する。いくつかの実施形態では、胸腺断片を含む移植片は、機能的な異所性胸腺の生成において、単一細胞懸濁液の胸腺移植片より優れている。例えば、胸腺断片を含む移植片により、胸腺組織の植え付け量を増加させるか、循環Ｔ細胞の比率または数を増加させるか、循環ナイーブＴ細胞の比率または数を増加させるか、本明細書中に開示の他のパラメーターを有利にすることができる。溶液は、好ましくは、無菌であり得る。溶液は、製造および貯蔵の条件下で安定であることができ、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、およびチロメサールなどを使用することによって細菌および真菌などの微生物に汚染されずに保存することができる。

【0043】

ある特定の実施形態では、溶液は、胸腺組織を構成する異なる細胞型を含む。ある特定の実施形態では、溶液は、薬学的に許容され得る賦形剤、希釈剤、または担体をさらに含む。薬学的に許容され得る担体および希釈剤には、生理食塩液、緩衝液、溶媒、および／または分散媒が含まれる。本開示の方法と共に使用することができる薬学的に許容され得る賦形剤の非限定的な例には、以下が含まれる：糖（ラクトース、グルコース、およびスクロースなど）；デンプン（トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンなど）；セルロース、およびその誘導体（カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、エチルセルロース、微結晶性セルロース、および酢酸セルロースなど）；トラガカント末；麦芽；ゼラチン；潤滑剤（ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、およびタルクなど）；カカオバターおよび坐剤用ワックス；油（ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、およびダイズ油など）；グリコール（プロピレングリコールなど）；ポリオール（グリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）など）；エステル（オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなど）；寒天；緩衝剤（水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなど）；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張生理食塩液；リンゲル液；エチルアルコール；ｐＨ調整緩衝液；ポリエステル、ポリカーボネート、および／またはポリ酸無水物；増量剤（ポリペプチドおよびアミノ酸など）；血清成分（血清アルブミン、ＨＤＬ、およびＬＤＬなど）；Ｃ２～Ｃ１２アルコール（エタノールなど）；および医薬製剤で使用される他の非毒性の適合物質。

【0044】

ある特定の実施形態では、胸腺組織を、処理して被験体内に送達させる前にｅｘ ｖｉｖｏで培養する。器官の培養のための当該分野で公知の任意の培養培地を、本開示の方法と共に使用することができる。ある特定の実施形態では、培地は、組織の生存能を維持するための栄養素、胸腺組織の微生物感染を予防するための少なくとも１つの抗生物質、および培地の適切なｐＨ範囲を維持するための緩衝系を含む。ある特定の実施形態では、培地は、Ｆ１２栄養混合物、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、２ｍＭ Ｌ－グルタミン、１０％ウシ胎児血清、１００ｕｇ／ｍＬ硫酸ストレプトマイシン、１ｕｇ／ｍＬゲンタマイシン、および１００ｕｇ／ｄＬアンホテリシンＢを含む。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、培地中で５％ＣＯ_２インキュベーター中にて３７℃で培養する。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、胸腺組織を処理するか、被験体内に送達させる前に、ｅｘ ｖｉｖｏで少なくとも約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約２日間、約３日間、約４日間、約５日間、約６日間、約７日間、約８日間、約１０日間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約９週間、もしくは約１０週間、またはそれを超えて培養する。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、低温保存前、低温保存後、またはその組み合わせで培養する。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、処理および／または被験体内への送達前にｅｘ ｖｉｖｏで培養しない。

【0045】

ある特定の実施形態では、胸腺組織を、処理または被験体内への送達前に低温保存する。当該分野で公知の胸腺組織の任意の低温保存方法を、本明細書中に開示の方法（例えば、Ｊａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔｅｇｒ Ｍｅｄ Ｒｅｓ．２０１７ Ｍａｒ；６（１）：１２－１８（その内容全体が本明細書に参照により援用される）に開示の方法であるが、これに限定されない）と共に使用することができる。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、リンパ節内への送達前に少なくとも約１２時間、約２４時間、約２日間、約３日間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約２ヶ月間、約３ヶ月間、約４ヶ月間、約５ヶ月間、約６ヶ月間、約８ヶ月間、約１０ヶ月間、約１年間、約２年間、約３年間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１５年間、約２０年間、またはそれを超える期間低温保存する。ある特定の実施形態では、低温保存された胸腺組織を、胸腺摘出術から長期間を経た後にリンパ節内に送達させる。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、処理および／または被験体内への送達前に低温保存しない。

【0046】

ある特定の実施形態では、胸腺組織を、胸腺摘出術中の被験体内に送達させる。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、胸腺摘出術後の被験体内に送達させる。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、胸腺摘出術から約１０分後、約３０分後、約１時間後、約２時間後、約３時間後、約６時間後、約１２時間後、約２４時間後、約２日後、約３日後、約１週間後、約２週間後、約３週間後、約４週間後、約２ヶ月後、約３ヶ月後、約４ヶ月後、約５ヶ月後、約６ヶ月後、約８ヶ月後、約１０ヶ月後、約１年後、約２年後、約３年後、約４年後、約５年後、約６年後、約７年後、約８年後、約９年後、約１０年後、約１５年後、約２０年後、またはそれを超えた後に被験体内に送達させる。非限定的な実施形態では、胸腺組織を、胸腺摘出術の実施中に被験体内に送達させる。

【0047】

ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達量は、被験体の胸腺機能を修復するのに有効な量である。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達量は、被験体の胸腺機能を増大させるのに有効な量である。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達量は、リンパ節中で拡大するのに有効な量であり、例えば、ここで、拡大した胸腺組織が被験体の胸腺機能を修復する。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達量は、リンパ節内に植え付けるのに有効な量である。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達量は、リンパ節中で異所性胸腺組織を形成するのに有効な量である。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達量は、被験体中の循環Ｔ細胞（例えば、末梢血中のＴ細胞および／またはナイーブＴ細胞）のレベルを増加させるのに有効な量である。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達量は、被験体における循環Ｔ細胞の密度を増加させる（例えば、ＴＣＲのレパートリーおよび認識される同種抗原を増加させる）のに有効な量である。有効量は、被験体の病歴、年齢、容態、性別、ならびに被験体における病状の重症度および型、ならびに他の薬学的に活性な作用因子の投与に応じて変動させることができる。

【0048】

ある特定の実施形態では、方法および系を、胸腺細胞または胸腺断片を被験体のリンパ節内に送達させるために使用し、それにより、胸腺の細胞または断片をリンパ節中に植え付けて異所性胸腺を産生することが可能である。ある特定の実施形態では、異所性胸腺は、被験体の胸腺機能を修復する（例えば、通常の健康な胸腺器官が果たすことができる１またはそれを超える機能を補足するか増強する）。例えば、制限されないが、異所性胸腺は、Ｔ細胞の成長、発生、成熟、および選択に関与するために身体の免疫調節に関与し得る。本開示の異所性胸腺の産生は、免疫系に機能障害を有する被験体（例えば、胸腺摘出術（例えば、胸腺の部分的または完全な除去）を受けている被験体における免疫系機能の増強または調整で使用することができる。

【0049】

ある特定の実施形態では、本開示は、新生児被験体または乳児被験体由来の胸腺組織の、前述の被験体自身のリンパ節内への移植に関する。いくつかの実施形態では、被験体は、胸腺組織を身体から得た時点またはその直後に（例えば、２４時間以内、１週間以内、１ヶ月以内、または１年以内に）移植を受ける。これらの実施形態のうちのいくつかでは、被験体は、リンパ節内への移植を受ける時に新生児または乳児である。いくつかの実施形態では、被験体は、胸腺組織を被験体から除去してから複数年後に移植を受ける。例えば、被験体が新生児または乳児であった時に胸腺組織が被験体から除去されていたが、移植を受ける時には、被験体は成人、小児、または青年である。

【0050】

ある特定の実施形態では、新生児または乳児由来の自家胸腺組織の、被験体が新生児、乳児、または小児である時点での被験体のリンパ節内への移植を含む方法および系は、成人被験体内への胎児の胸腺組織または成人の胸腺組織の移植と比較して有利である。ある特定の理論に拘束されることを望まないが、本発明の方法および系は、数ある利点のうちで特に、若年期の被験体（例えば、新生児、乳児、または小児）のリンパ節内に自家新生児胸腺組織を移植すると、移植された胸腺細胞に、生来の新生児胸腺が成長し発達する環境に類似の環境において成長および機能するための環境を提供することができるので、有利である。新産児哺乳動物（例えば、ヒト）は、出生直後の末梢性免疫系を制限することができ、末梢組織中に存在するＴリンパ球はわずかである。したがって、生来の胸腺は、末梢性免疫系にリンパ球（例えば、ナイーブＴリンパ球）を配置するために拡大し続ける必要があり得る。この初期の新生児の発生過程中に、生来の胸腺は、胸腺自体の発達ならびに発達と同時に成熟している被験体からの種々の影響（被験体のホルモン系および免疫系の発達が含まれる）に起因して、分子レベルおよび細胞レベルで劇的な変化を経験し得る。新生児胸腺組織の固有の分子および細胞の特徴が報告されている。例えば、胎児／新生児胸腺の発達中に生じるγ／δＴ細胞は、成人胸腺で発達することができないか、発達が低下し得る（Ｉｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，（１９８９）８６：６３１）。さらに、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の別個の集団が周産期の胸腺中に産生される。これらの特定のＴｒｅｇは、自己寛容の維持に不可欠な役割を果たすことができ、分子プロフィールおよび活性化プロフィールに基づいて成人由来のＴｒｅｇと区別することができる（Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．２０１５ Ｍａｙ １；３４８（６２３４）：５８９－５９４）。別の例としては、新生児胸腺由来のＣＤ４＋Ｔ細胞は、成人胸腺由来細胞と異なる機能特性を有することができる（Ｂｅｃｋｙ Ａｄｋｉｎｓ，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００３，１７１：５１５７－５１６４）。小児期早期における新生児胸腺のかかる固有の発達環境および変化は、他の発達段階では存在しないかもしれず、胸腺の構造的および機能的な成熟に依然として重要であり得る。結果として、本発明の方法および系は、被験体の生涯の他の段階（例えば、被験体が成人である時）で存在しないかもしれない発達環境を提供することができる。本明細書中に開示の方法および系は、数ある利点のうちで特に、新生児胸腺組織が胎児胸腺組織と比較して発達することができ、また、加齢性退化を経験していたかもしれない成人胸腺組織と比較して成長能力を有し得るので、有利であり得る。したがって、新生児胸腺組織は、被験体における免疫系（例えば、ナイーブＴリンパ球）の発達および成熟を修復するのに十分な質量および機能を有する異所性胸腺組織に成長するためのより有利な機械を有し得る。

【0051】

ある特定の実施形態では、胸腺組織の拡大には、リンパ節中に異所性胸腺組織を産生するためのリンパ節中の胸腺組織の生着、増殖、分化、および／または成長が含まれる。産生された異所性胸腺組織は、生物学的に活性であり、かつ胸腺機能を有する。ある特定の実施形態では、胸腺組織は、最終的に産生された異所性組織の質量がリンパ節に送達される胸腺組織の元の質量より高くなるように、リンパ節中で拡大する。ある特定の実施形態では、最終的に産生された異所性組織の質量は、リンパ節に送達される胸腺組織の元の質量の少なくとも約１．１倍、１．２倍、少なくとも約１．３倍、少なくとも約１．４倍、少なくとも約１．５倍、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約１５倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約３０倍、少なくとも約４０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約１５０倍、少なくとも約２００倍、少なくとも約５００倍、または少なくとも約１０００倍である。

【0052】

ある特定の実施形態では、胸腺組織を受け取ったリンパ節中で血管新生が起こり得る（例えば、リンパ節内および異所性胸腺組織内に浸潤して脈管構造ネットワークを形成する血管が存在し得る）。ある特定の実施形態では、脈管構造ネットワークの浸潤により、異所性胸腺組織への血液供給の基礎を形成することができる。ある特定の実施形態では、脈管構造ネットワークの浸潤により、異所性胸腺組織を往復するＴ細胞の輸送を補助することができる。ある特定の実施形態では、リンパ循環系は、異所性組織によって産生された物質（例えば、Ｔ細胞）のための輸送チャネルとしての機能も果たす。したがって、リンパ系は、ある特定の実施形態では、身体の他の部分とのクロストークを介して、かかる物質を血液循環系に提供することができる。

【0053】

ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達量（例えば、本明細書中に開示の有効量）は、少なくとも約０．１グラム、少なくとも約０．２グラム、少なくとも約０．３グラム、少なくとも約０．４グラム、少なくとも約０．５グラム、少なくとも約０．６グラム、少なくとも約０．７グラム、少なくとも約０．８グラム、少なくとも約０．９グラム、少なくとも約１グラム、少なくとも約１．５グラム、少なくとも約２グラム、少なくとも約２．５グラム、少なくとも約３グラム、少なくとも約４グラム、少なくとも約５グラム、少なくとも約６グラム、少なくとも約７グラム、少なくとも約８グラム、少なくとも約９グラム、または少なくとも約１０グラムである。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達量（例えば、本明細書中に開示の有効量）は、約５グラムまで、約１０グラムまで、約１５グラムまで、または約２０グラムまでである。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達量（例えば、本明細書中に開示の有効量）は、約０．１グラム、約０．２グラム、約０．３グラム、約０．４グラム、約０．５グラム、約０．６グラム、約０．７グラム、約０．８グラム、約０．９グラム、約１グラム、約２グラム、約３グラム、約４グラム、約５グラム、約６グラム、約８グラム、約１０グラム、約１３グラム、約１５グラム、約１８グラム、約２０グラム、またはそれを超える量である。重量を、処理前（例えば、胸腺組織を切り刻み、液体に添加して懸濁液を生成する前）に測定することができる。いくつかの実施形態では、重量を、処理後（例えば、胸腺組織を切り刻み、液体に添加して懸濁液を生成した後）に測定する。本明細書中に開示のように、前述の量の胸腺組織を、１つのリンパ節に送達させることができるか、２またはそれを超えるリンパ節の間で分割して送達させることができる。本明細書中に開示のように、前述の量の胸腺組織を、１回で投与するか、２回またはそれを超える回数に分割して任意の適切な期間に投与することができる。２回またはそれを超える回数の場合、前述の量は、２回またはそれを超える回数に分割した量（すなわち、１回あたりの量）の合計であり得る。

【0054】

いくつかの実施形態では、胸腺組織を、被験体の体重と比較した量（例えば、本明細書中に開示の有効量）で被験体内に送達させる。例えば、胸腺組織を、少なくとも約０．００１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．００５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．０１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．０５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約４０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約６０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約７０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約８０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約９０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１２０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１３０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１４０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１６０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１７０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１８０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１９０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１０００ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも約１５００ｍｇ／ｋｇの量で被験体に送達させることができる。いくつかの実施形態では、胸腺組織を、最大で約１ｍｇ／ｋｇ、最大で約１０ｍｇ／ｋｇ、最大で約２０ｍｇ／ｋｇ、最大で約５０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１００ｍｇ／ｋｇ、最大で約１１０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１２０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１３０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１４０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１５０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１６０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１７０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１８０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１９０ｍｇ／ｋｇ、最大で約２００ｍｇ／ｋｇ、最大で約２５０ｍｇ／ｋｇ、最大で約５００ｍｇ／ｋｇ、最大で約１０００ｍｇ／ｋｇ、または最大で約１５００ｍｇ／ｋｇの量で被験体内に送達させる。いくつかの実施形態では、胸腺組織を、約０．００１ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約７０ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ、約１１０ｍｇ／ｋｇ、約１２０ｍｇ／ｋｇ、約１３０ｍｇ／ｋｇ、約１４０ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１６０ｍｇ／ｋｇ、約１７０ｍｇ／ｋｇ、約１８０ｍｇ／ｋｇ、約１９０ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ、約２５０ｍｇ／ｋｇ、約５００ｍｇ／ｋｇ、約１０００ｍｇ／ｋｇ、または約１５００ｍｇ／ｋｇである量で被験体内に送達させる。本明細書中に開示の有効量は、被験体の体重と比較した量であり得る。胸腺組織の量を、処理前（例えば、胸腺組織を切り刻み、液体に添加して懸濁液を生成する前）に測定することができる。本明細書中に開示のように、前述の量の胸腺組織を、１つのリンパ節に送達させることができるか、２またはそれを超えるリンパ節の間で分割して送達させることができる。本明細書中に開示のように、所与のサイズの胸腺組織を、１回で投与するか、２回またはそれを超える回数に分割して任意の適切な期間に投与することができる。２回またはそれを超える回数の場合、胸腺組織の量は、２回またはそれを超える回数に分割した量（すなわち、１回あたりの量）の合計であり得る。

【0055】

ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達サイズは、少なくとも約０．１ｃｍ^３、少なくとも約０．２ｃｍ^３、少なくとも約０．３ｃｍ^３、少なくとも約０．４ｃｍ^３、少なくとも約０．５ｃｍ^３、少なくとも約０．６ｃｍ^３、少なくとも約０．７ｃｍ^３、少なくとも約０．８ｃｍ^３、少なくとも約０．９ｃｍ^３、少なくとも約１ｃｍ^３、少なくとも約１．５ｃｍ^３、少なくとも約２ｃｍ^３、少なくとも約２．５ｃｍ^３、または少なくとも約３ｃｍ^３である。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達サイズは、約５ｃｍ^３まで、約１０ｃｍ^３まで、約１５ｃｍ^３まで、または約２０ｃｍ^３までである。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達サイズは、約０．１ｃｍ^３、約０．２ｃｍ^３、約０．３ｃｍ^３、約０．４ｃｍ^３、約０．５ｃｍ^３、約０．６ｃｍ^３、約０．７ｃｍ^３、約０．８ｃｍ^３、約０．９ｃｍ^３、約１ｃｍ^３、約２ｃｍ^３、約３ｃｍ^３、約４ｃｍ^３、約５ｃｍ^３、約６ｃｍ^３、約８ｃｍ^３、約１０ｃｍ^３、約１３ｃｍ^３、約１５ｃｍ^３、約１８ｃｍ^３、約２０ｃｍ^３、またはそれを超える。本明細書中に開示の有効量を、サイズで表すことができる。サイズを、処理前（例えば、胸腺組織を切り刻み、液体に添加して懸濁液を生成する前）に測定することができる。いくつかの実施形態では、サイズを、処理後（例えば、胸腺組織を切り刻み、液体に添加して懸濁液を生成した後）に測定する。本明細書中に開示のように、所与のサイズの胸腺組織を、１つのリンパ節に送達させることができるか、２またはそれを超えるリンパ節の間で分割して送達させることができる。本明細書中に開示のように、所与のサイズの胸腺組織を、１回で投与するか、２回またはそれを超える回数に分割して任意の適切な期間に投与することができる。２回またはそれを超える回数の場合、所与のサイズの胸腺組織は、２回またはそれを超える回数に分割した量（すなわち、１回あたりの量）の合計であり得る。

【0056】

ある特定の実施形態では、被験体内に送達される胸腺組織は、液体懸濁液の形態である。いくつかの実施形態では、被験体内への液体懸濁液の胸腺組織の送達体積は、少なくとも約０．１ｍＬ、少なくとも約０．２ｍＬ、少なくとも約０．３ｍＬ、少なくとも約０．４ｍＬ、少なくとも約０．５ｍＬ、少なくとも約０．６ｍＬ、少なくとも約０．７ｍＬ、少なくとも約０．８ｍＬ、少なくとも約０．９ｍＬ、少なくとも約１ｍＬ、少なくとも約１．５ｍＬ、少なくとも約２ｍＬ、少なくとも約２．５ｍＬ、少なくとも約３ｍＬ、少なくとも約４ｍＬ、少なくとも約５ｍＬ、少なくとも約６ｍＬ、少なくとも約７ｍＬ、少なくとも約８ｍＬ、少なくとも約９ｍＬ、または少なくとも約１０ｍＬ（例えば、リンパ節あたりの体積、または２またはそれを超えるリンパ節への分割体積の総体積）である。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達体積は、約５ｍＬまで、約１０ｍＬまで、約１５ｍＬまで、または約２０ｍＬまで（例えば、２またはそれを超えるリンパ節への送達のために分割される）である。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達体積は、リンパ節あたり約０．１ｍＬ、約０．２ｍＬ、約０．３ｍＬ、約０．４ｍＬ、約０．５ｍＬ、約０．６ｍＬ、約０．７ｍＬ、約０．８ｍＬ、約０．９ｍＬ、約１ｍＬ、約２ｍＬ、または約３ｍＬである。ある特定の実施形態では、被験体内への胸腺組織の送達体積は、約０．２ｍＬ、約０．３ｍＬ、約０．４ｍＬ、約０．５ｍＬ、約０．６ｍＬ、約０．７ｍＬ、約０．８ｍＬ、約０．９ｍＬ、約１ｍＬ、約２ｍＬ、約３ｍＬ、約４ｍＬ、約５ｍＬ、約６ｍＬ、約８ｍＬ、約１０ｍＬ、約１３ｍＬ、約１５ｍＬ、約１８ｍＬ、約２０ｍＬ、またはそれを超える（２またはそれを超えるリンパ節への送達のために分割される）。本明細書中に開示のように、前述の体積を、１回で投与するか、２回またはそれを超える回数に分割して任意の適切な期間に投与することができる。２回またはそれを超える回数の場合、体積は、２回またはそれを超える回数に分割した体積（すなわち、１回あたりの体積）の合計であり得る。本明細書中に開示の有効量を、体積で表すことができる。

【0057】

被験体に、胸腺組織を、１回投与するか、２回またはそれを超える回数に分割して任意の適切な期間に投与することができる。一定の間隔または不規則な間隔で複数回に分けることができる。例えば、約半時間、約１時間、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、約６時間、約８時間、約１０時間、約１２時間、約１６時間、約１８時間、約２４時間、約２日間、約３日間、約４日間、約５日間、約６日間、約７日間、約８日間、約９日間、約１０日間、約１１日間、約１２日間、約１３日間、約１４日間、約３週間、約４週間、約１ヶ月間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約２ヶ月間、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、約３ヶ月間、約１６週間、約４ヶ月間、約５ヶ月間、約６ヶ月間、約７ヶ月間、約８ヶ月間、約９ヶ月間、約１０ヶ月間、約１１ヶ月間、約１２ヶ月間、約１４ヶ月間、約１６ヶ月間、約１８ヶ月間、約２０ヶ月間、約２２ヶ月間、約２４ヶ月間、約３０ヶ月間、約３６ヶ月間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、または約１０年間で２回に分けることができる。いくつかの実施形態では、胸腺組織を、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０回被験体に投与することができる。

【0058】

ある特定の実施形態では、開示の発明の対象は、被験体の血中循環Ｔ細胞数を増加させ、正常な免疫機能に修復することができる。非限定的な実施形態では、被験体の総胸腺重量の少なくとも約１／３を植え込んで、血中循環Ｔ細胞数を増加させ、正常な免疫に修復することができる。例えば、約３ｍｇを超える胸腺の組織を、新産児胸腺の標準サイズが平均約８．５ｍｇであるマウス被験体内に送達させることができる。ヒト被験体では、約７グラム（ｇｒ）、約８ｇｒ、約９ｇｒ、または約１０ｇｒの胸腺の組織を、小児期胸腺の標準サイズが平均２５ｇｒであるヒト被験体内に送達することができる。総胸腺重量は、新生児胸腺の標準重量であり得る。総胸腺重量は、乳児胸腺の標準重量であり得る。総胸腺重量は、小児胸腺の標準重量であり得る。総胸腺重量は、小児胸腺の標準重量であり得る。総胸腺重量は、成人胸腺の標準重量であり得る。いくつかの実施形態では、総胸腺重量は、被験体と類似の年齢の正常な（例えば、健康なまたは免疫適格性の）個体の総胸腺重量であり得る。いくつかの実施形態では、総胸腺重量は、被験体と年齢が異なる正常個体の総胸腺重量であり得る。

【0059】

ある特定の実施形態では、開示の発明の対象は、被験体の血中循環ＣＤ３＋Ｔ細胞を増加させ、ナイーブＴ細胞集団を修復することができる。例えば、被験体は、メモリーＴ細胞集団の減少を伴ってナイーブＴ細胞を減少させ得るリンパ球減少症を罹患し得る。Ｔ細胞区分が量的に欠乏すると、ナイーブＴ細胞集団にも影響を及ぼし得る。開示の発明の対象は、血中循環ＣＤ３＋Ｔ細胞の増加によってかかる被験体のナイーブＴ細胞集団を修復することができる。いくつかの実施形態では、開示の発明の対象は、被験体におけるＴ細胞の老化を軽減することができる。

【0060】

いくつかの実施形態では、被験体におけるＴ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度を、本明細書中に開示の組成物および方法によって増加または維持することができる。例えば、一部の例では、Ｔ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度は、本明細書中に開示のリンパ節への胸腺組織の送達後に、少なくとも約１％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％であり得る。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度を、本明細書中に開示の胸腺組織の送達前、または胸腺組織を受けていない同等な被験体と比較して、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、またはそれを超えて増加させることができる。例えば、Ｔ細胞であるＣＤ４５＋末梢血球の頻度は、本明細書中に開示の胸腺組織の送達前に１％であり得、胸腺組織を送達させた後に１０％増加させて頻度１１％を達成することができる。

【0061】

いくつかの実施形態では、被験体の末梢血中のＴ細胞の濃度を、本明細書中に開示の組成物および方法によって増加させることができる。例えば、一部の例では、被験体の末梢血中のＴ細胞の濃度を、例えば、本明細書中に開示の胸腺組織の送達前、または胸腺組織を受けていない同等な被験体と比較して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約２００倍、少なくとも約５００倍、少なくとも約１０００倍、または少なくとも約１０，０００倍、またはそれを超えて増加させることができる。濃度を、例えば、立方ミリメートル、マイクロリットル、デシリットル、ミリリットル、またはリットルあたりの細胞数として表すことができる。

【0062】

Ｔ細胞の同定方法は、当該分野で公知である。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞を、ＣＤ３＋、ＣＤ３＋ＣＤ４＋、ＣＤ３＋ＣＤ８＋、ＣＤ３＋ＣＤ４＋ＣＤ４５＋、またはＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ４５＋であることに基づいて同定する。

【0063】

いくつかの実施形態では、ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度を、本明細書中に開示の方法によって患者において増加させるか、維持することができる。例えば、一部の例では、ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度は、本明細書中に開示のリンパ節への胸腺組織に送達後に、少なくとも約１％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％であり得る。いくつかの実施形態では、ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度を、本明細書中に開示の胸腺組織の送達前、または胸腺組織を受けていない同等な被験体と比較して、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、またはそれを超えて増加させることができる。例えば、ナイーブＴ細胞であるＣＤ３＋末梢血球の頻度は、本明細書中に開示の胸腺組織の送達前に１％であり得、胸腺組織を送達させた後に１０％増加させて頻度１１％を達成することができる。

【0064】

いくつかの実施形態では、被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度を、本明細書中に開示の組成物および方法によって増加させることができる。例えば、一部の例では、被験体の末梢血中のナイーブＴ細胞の濃度を、例えば、本明細書中に開示の胸腺組織の送達前、または胸腺組織を受けていない同等な被験体と比較して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約２００倍、少なくとも約５００倍、少なくとも約１０００倍、または少なくとも約１０，０００倍、またはそれを超えて増加させることができる。濃度を、例えば、立方ミリメートル、マイクロリットル、デシリットル、ミリリットル、またはリットルあたりの細胞数として表すことができる。

【0065】

ナイーブＴ細胞、本明細書中に開示の他のサブセット、および他の種（例えば、ヒト）の等価な集団を同定する方法は、当該分野で公知である。いくつかの実施形態では、ナイーブＴ細胞は、ＣＤ３＋ＣＤ４＋ＣＤ４４－ＣＤ６２Ｌ＋またはＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ４４－ＣＤ６２Ｌ＋である。いくつかの実施形態では、ナイーブＴ細胞は、ＣＤ３＋ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＡ＋ＣＣＲ７＋、ＣＤ３＋ＣＤ８＋ＣＤ４５ＲＡ＋ＣＣＲ７＋、またはＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＣＲ７＋、ＣＤ４５ＲＯ－、およびＣＤ２７＋の任意の組み合わせである。

【0066】

いくつかの実施形態では、本開示の組成物および方法を使用して、被験体におけるある特定のＣＤ４Ｔ細胞：ＣＤ８Ｔ細胞比（例えば、循環総Ｔ細胞、循環総ナイーブＴ細胞、循環総エフェクターＴ細胞、循環総エフェクター／メモリーＴ細胞、循環総セントラルメモリーＴ細胞、またはその組み合わせのＣＤ４：ＣＤ８比）を得ることができる。例えば、本明細書中に開示の組成物および方法によって得られるＣＤ４：ＣＤ８比は、少なくとも約１：１、少なくとも約１．１：１、少なくとも約１．２：１、少なくとも約１．３：１、少なくとも約１．４：１、少なくとも約１．５：１、少なくとも約１．６：１、少なくとも約１．７：１、少なくとも約１．８：１、少なくとも約１．９：１、または少なくとも約２：１であり得る。いくつかの実施形態では、本明細書中に開示の組成物および方法によって得られるＣＤ４：ＣＤ８比は、最大で約２：１、最大で約２．１：１、最大で約２．２：１、最大で約２．３：１、最大で約２．４：１、最大で約２．５：１、最大で約２．６：１、最大で約２．７：１、最大で約２．８：１、最大で約２．９：１、最大で約３：１、最大で約２．５：１、最大で約３：１、最大で約４：１、または最大で約５：１であり得る。いくつかの実施形態では、本明細書中に開示の組成物および方法によって得られるＣＤ４：ＣＤ８比は約２：１である。

【0067】

本明細書中に開示のアウトカムに及ぼす本開示の組成物および方法の影響を、被験体のリンパ節への胸腺組織の送達後の任意の適切な時間で評価することができる。例えば、末梢血Ｔ細胞の数および／もしくは頻度、ナイーブ末梢血Ｔ細胞の濃度および／もしくは頻度、ＣＤ４：ＣＤ８比、リンパ節重量、リンパ節中の胸腺組織の拡大、または本明細書中に開示の任意の他のアウトカムに及ぼす影響を、被験体のリンパ節への胸腺組織の送達から約１週間後、約２週間後、約３週間後、約４週間後、約１ヶ月後、約５週間後、約６週間後、約７週間後、約８週間後、約２ヶ月後、約９週間後、約１０週間後、約１１週間後、約１２週間後、約３ヶ月後、約１６週間後、約４ヶ月後、約５ヶ月後、約６ヶ月後、約７ヶ月後、約８ヶ月後、約９ヶ月後、約１０ヶ月後、約１１ヶ月後、約１２ヶ月後、約１４ヶ月後、約１６ヶ月後、約１８ヶ月後、約２０ヶ月後、約２２ヶ月後、約２４ヶ月後、約３０ヶ月後、約３６ヶ月後、約４年後、約５年後、約６年後、約７年後、約８年後、約９年後、または約１０年後に評価することができる。

【0068】

被験体の内部臓器に作用因子、材料、または細胞を送達させるための当該分野で公知の任意の方法を、本開示の発明の対象と共に使用することができる。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、針によって被験体のリンパ節に送達させる。ある特定の実施形態では、針は、微量注入針である。ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法は、針を被験体のリンパ節に導入する工程を含む。低侵襲手技を超音波のガイド下で行い、この手技は、切開手術より身体への損傷が小さいという操作上の利点を有し得る。さらに、低侵襲手技は、切開手術よりも痛みを少なくし、入院期間を短くし、合併症を抑えることができる。ある特定の実施形態では、本発明で開示の方法を、低侵襲手技を用いて行う。ある特定の実施形態では、低侵襲手技を、超音波のガイド下で行う。使用することができる低侵襲手技の非限定的な例には、ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０２７７８３号（その全体が本明細書に参照により援用される）に開示の手技が含まれる。

【0069】

６．２．２ リンパ節
ある特定の実施形態では、胸腺組織を、少なくとも１箇所の被験体のリンパ節内に送達させる。ある特定の実施形態では、胸腺組織を、少なくとも２箇所、少なくとも３箇所、少なくとも４箇所、少なくとも５箇所、少なくとも６箇所、少なくとも５箇所、少なくとも７箇所、少なくとも８箇所、少なくとも９箇所、少なくとも１０箇所、またはそれを超える被験体のリンパ節内に送達させる。非限定的な実施形態では、約０．０５ｍｌ、約０．１ｍｌ、約０．５ｍｌ、約１ｍｌ、約２ｍｌ、または約３ｍｌの胸腺組織を、リンパ節内に送達させることができる。

【0070】

本明細書中に開示の方法を使用して胸腺組織を送達させることができるリンパ節の非限定的な例には、腹部リンパ節、腹腔リンパ節、傍大動脈リンパ節、脾門リンパ節、肝門リンパ節、左胃リンパ節、右胃リンパ節、左胃大網（胃大網の）リンパ節、右胃大網（胃大網の）リンパ節、後腹膜リンパ節、幽門リンパ節（例えば、幽門上リンパ節、幽門下リンパ節、幽門後リンパ節）、膵リンパ節（例えば、上膵リンパ節、下膵リンパ節、脾線リンパ節 リンパ節）、脾リンパ節、肝リンパ節（例えば、胆嚢リンパ節、網嚢孔リンパ節、ウィンスロー孔）、膵十二指腸リンパ節（例えば、上膵十二指腸リンパ節、下膵十二指腸リンパ節）、上腸間膜リンパ節、回結腸リンパ節、盲腸前リンパ節、盲腸後リンパ節、虫垂リンパ節、結腸間膜リンパ節（例えば、結腸傍リンパ節、左結腸リンパ節、中結腸リンパ節、右結腸リンパ節、下腸間膜リンパ節、Ｓ状結腸リンパ節、上直腸リンパ節）、総腸骨リンパ節（例えば、内側総腸骨リンパ節、中間総腸骨リンパ節、外側総腸骨リンパ節、大動脈下総腸骨リンパ節、岬角総腸骨リンパ節）、および外腸骨リンパ節（例えば、内側外腸骨リンパ節、中間外腸骨リンパ節、外側外腸骨リンパ節、内側裂孔－大腿部リンパ節、中間裂孔－大腿部リンパ節、外側裂孔－大腿部リンパ節、腸骨動脈間外腸骨リンパ節、閉鎖孔－外部腸骨閉鎖リンパ節）が含まれる。

【0071】

ある特定の実施形態では、移植された胸腺組織が拡大する時にリンパ節が肥大することができることが重要であるため、腹膜腔に存在するリンパ節は、特に、例えば、リンパ節が動脈または大静脈と密接に関連していない場合に特に有用であり得る。

【0072】

６．２．３被験体
ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、胸腺摘出術を受けていた。ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、胸腺摘出術を受けている間に胸腺組織を被験体のリンパ節内に送達させる。ある特定の実施形態では、被験体は、先天性心臓欠陥を有し、かつ開心術を受けていたか、開心術を受ける予定である。開心術は、重篤な先天性心臓欠陥の日常的な処置方法となっている。先天性心臓欠陥のための早期心臓外科的介入は、胸腺摘出（例えば、胸腺の部分的または完全な除去）を伴い得る。ある特定の実施形態では、被験体において開心術中に胸腺摘出を行った。ある特定の実施形態では、被験体が新生児であった時に胸腺摘出を行った。ある特定の実施形態では、被験体が乳児であった時に胸腺摘出を行った。ある特定の実施形態では、被験体が小児であった時に胸腺摘出を行った。ある特定の実施形態では、被験体が最長で１ヶ月、最長で２ヶ月、最長で３ヶ月、最長で４ヶ月、最長で５ヶ月、最長で６ヶ月、最長で８ヶ月、最長で１０ヶ月、最長で１歳、または最長で２歳であった時に胸腺摘出を行った。ある特定の実施形態では、被験体が最長で１ヶ月であった時に胸腺摘出を行った。

【0073】

いくつかの実施形態では、本開示の組成物および方法によって処置すべき被験体は、胸腺に影響を及ぼす容態を有する。胸腺に影響を及ぼす容態の非限定的な例には、重症筋無力症、真性赤血球系無形成、低ガンマグロブリン血症、胸腺癌、胸腺腫、Ａ型胸腺腫、Ｂ型胸腺腫、自己免疫疾患、Ｔ細胞媒介性自己免疫、Ｔ細胞リンパ球減少症、胸腺萎縮、加齢性胸腺萎縮、胸腺嚢胞、胸腺過形成、胸腺低形成、胸腺無形成、胸腺形成異常、重症複合型免疫不全、ネゼロフ症候群、ウィスコット・アルドリッチ症候群（Ｗｉｓｃｏｔｔ－Ａｌｄｒｉｃｈ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）ディジョージ症候群、再発性感染症、再発性ウイルス感染、免疫学的早期老化、および癌が含まれる。

【0074】

本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、任意の年齢であり得る。ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、新生児、乳児、小児、青年、または成人である。

【0075】

ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、最長で約１ヶ月に到達しているヒト新生児である。ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、約１ヶ月と約２歳との間に到達しているヒト乳児である。ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、約２歳と約１２歳との間に到達しているヒト小児である。ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、約１２歳と約１８歳との間に到達しているヒト青年である。ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、少なくとも約１８歳に到達しているヒト成人である。ある特定の実施形態では、処置すべき被験体は、（例えば、加齢により胸腺機能が低下している）中高年のヒトである。

【0076】

ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、最長で約１ヶ月、最長で約３ヶ月、最長で約６ヶ月、最長で約１歳、最長で約２歳、最長で約３歳、最長で約４歳、最長で約５歳、最長で約６歳、最長で約７歳、最長で約８歳、最長で約９歳、最長で約１０歳、最長で約１１歳、最長で約１２歳、最長で約１３歳、最長で約１４歳、最長で約１５歳、最長で約１６歳、最長で約１７歳、最長で約１８歳、または少なくとも１８歳に到達しているヒト被験体である。

【0077】

ある特定の実施形態では、本明細書中に開示の方法によって処置すべき被験体は、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約１歳、少なくとも約２歳、少なくとも約３歳、少なくとも約４歳、少なくとも約５歳、少なくとも約６歳、少なくとも約７歳、少なくとも約８歳、少なくとも約９歳、少なくとも約１０歳、少なくとも約１１歳、少なくとも約１２歳、少なくとも約１３歳、少なくとも約１４歳、少なくとも約１５歳、少なくとも約１６歳、少なくとも約１７歳、少なくとも約１８歳、少なくとも約２５歳、少なくとも約３０歳、少なくとも約３５歳、少なくとも約４０歳、少なくとも約４５歳、少なくとも約５０歳、少なくとも約５５歳、少なくとも約６０歳、少なくとも約６５歳、少なくとも約７０歳、または少なくとも約７５歳に到達しているヒト被験体である。

【0078】

ある特定の実施形態では、胸腺組織を、被験体が新生児、乳児、または小児であった時に被験体から入手し、胸腺組織を低温保存し、その後に解凍して被験体に送達させた。ある特定の実施形態では、低温保存された胸腺組織を、胸腺摘出後に任意の年齢の被験体に送達させることができる。ある特定の実施形態では、被験体から得た胸腺組織を、複数のバイアル中で低温保存することができ、各バイアルは、被験体に送達させることができる単回用量の胸腺組織を含む。ある特定の実施形態では、低温保存された胸腺組織を、被験体の生涯にわたって複数回被験体に送達させる。

【0079】

６．３ キット
本開示は、被験体（例えば、胸腺摘出術を受けていたか、胸腺摘出術を受ける予定である被験体）の胸腺機能の保護、修復、または増大のためのキットを提供する。ある特定の実施形態では、キットは、胸腺組織および被験体への前述の胸腺組織の送達のためのツールを含み、胸腺組織は被験体に対して自家である。ある特定の実施形態では、胸腺組織は、キットに含まれる溶液中に提供される。

【0080】

ある特定の実施形態では、溶液は、胸腺組織を構成する異なる細胞型を含む。ある特定の実施形態では、溶液は、薬学的に許容され得る賦形剤、希釈剤、または担体をさらに含む。薬学的に許容され得る担体および希釈剤には、生理食塩液、緩衝液、溶媒、および／または分散媒が含まれる。本開示のキットと共に使用することができる薬学的に許容され得る賦形剤の非限定的な例には、糖（ラクトース、グルコース、およびスクロースなど）；デンプン（トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンなど）；セルロース、およびその誘導体（カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、エチルセルロース、微結晶性セルロース、および酢酸セルロースなど）；トラガカント末；麦芽；ゼラチン；潤滑剤（ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、およびタルクなど）；カカオバターおよび坐剤用ワックス；油（ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、およびダイズ油など）；グリコール（プロピレングリコールなど）；ポリオール（グリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）など）；エステル（オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなど）；寒天；緩衝剤（水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなど）；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張生理食塩液；リンゲル液；エチルアルコール；ｐＨ調整緩衝液；ポリエステル、ポリカーボネート、および／またはポリ酸無水物；増量剤（ポリペプチドおよびアミノ酸など）；血清成分（血清アルブミン、ＨＤＬ、およびＬＤＬなど）；Ｃ２～Ｃ１２アルコール（エタノールなど）；および医薬製剤で使用される他の非毒性の適合物質が含まれる。

【0081】

ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織を低温保存する。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織を、約１２時間、約２４時間、約２日間、約３日間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約２ヶ月間、約３ヶ月間、約４ヶ月間、約５ヶ月間、約６ヶ月間、約８ヶ月間、約１０ヶ月間、約１年間、約２年間、約３年間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１５年間、約２０年間、またはそれを超えて低温保存する。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織を、少なくとも約１２時間、少なくとも約２４時間、少なくとも約２日間、少なくとも約３日間、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、少なくとも約４週間、少なくとも約２ヶ月間、少なくとも約３ヶ月間、少なくとも約４ヶ月間、少なくとも約５ヶ月間、少なくとも約６ヶ月間、少なくとも約８ヶ月間、少なくとも約１０ヶ月間、少なくとも約１年間、少なくとも約２年間、少なくとも約３年間、少なくとも約４年間、少なくとも約５年間、少なくとも約６年間、少なくとも約７年間、少なくとも約８年間、少なくとも約９年間、少なくとも約１０年間、少なくとも約１５年間、少なくとも約２０年間、またはそれを超えて低温保存する。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織を、最長で約１２時間、最長で約２４時間、最長で約２日間、最長で約３日間、最長で約１週間、最長で約２週間、最長で約３週間、最長で約４週間、最長で約２ヶ月間、最長で約３ヶ月間、最長で約４ヶ月間、最長で約５ヶ月間、最長で約６ヶ月間、最長で約８ヶ月間、最長で約１０ヶ月間、最長で約１年間、最長で約２年間、最長で約３年間、最長で約４年間、最長で約５年間、最長で約６年間、最長で約７年間、最長で約８年間、最長で約９年間、最長で約１０年間、最長で約１５年間、最長で約２０年間、最長で約３０年間、最長で約４０年間、最長で約５０年間、またはそれ未満の期間低温保存する。

【0082】

ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織の量は、少なくとも約０．１グラム、少なくとも約０．２グラム、少なくとも約０．３グラム、少なくとも約０．４グラム、少なくとも約０．５グラム、少なくとも約０．６グラム、少なくとも約０．７グラム、少なくとも約０．８グラム、少なくとも約０．９グラム、少なくとも約１グラム、少なくとも約１．５グラム、少なくとも約２グラム、少なくとも約２．５グラム、少なくとも約３グラム、少なくとも約４グラム、少なくとも約５グラム、少なくとも約６グラム、少なくとも約７グラム、少なくとも約８グラム、少なくとも約９グラム、または少なくとも約１０グラムである。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織の量は、約５グラムまで、約１０グラムまで、約１５グラムまで、または約２０グラムまでである。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織の量は、約０．１グラム、約０．２グラム、約０．３グラム、約０．４グラム、約０．５グラム、約０．６グラム、約０．７グラム、約０．８グラム、約０．９グラム、約１グラム、約２グラム、約３グラム、約４グラム、約５グラム、約６グラム、約８グラム、約１０グラム、約１３グラム、約１５グラム、約１８グラム、約２０グラム、またはそれを超える。

【0083】

ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織のサイズは、少なくとも約０．１ｃｍ^３、少なくとも約０．２ｃｍ^３、少なくとも約０．３ｃｍ^３、少なくとも約０．４ｃｍ^３、少なくとも約０．５ｃｍ^３、少なくとも約０．６ｃｍ^３、少なくとも約０．７ｃｍ^３、少なくとも約０．８ｃｍ^３、少なくとも約０．９ｃｍ^３、少なくとも約１ｃｍ^３、少なくとも約１．５ｃｍ^３、少なくとも約２ｃｍ^３、少なくとも約２．５ｃｍ^３、少なくとも約３ｃｍ^３ 少なくとも約４ｃｍ^３、または少なくとも約５ｃｍ^３である。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織のサイズは、約５ｃｍ^３まで、約１０ｃｍ^３まで、約１５ｃｍ^３まで、または約２０ｃｍ^３までである。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織のサイズは、約０．１ｃｍ^３、約０．２ｃｍ^３、約０．３ｃｍ^３、約０．４ｃｍ^３、約０．５ｃｍ^３、約０．６ｃｍ^３、約０．７ｃｍ^３、約０．８ｃｍ^３、約０．９ｃｍ^３、約１ｃｍ^３、約２ｃｍ^３、約３ｃｍ^３、約４ｃｍ^３、約５ｃｍ^３、約６ｃｍ^３、約８ｃｍ^３、約１０ｃｍ^３、約１３ｃｍ^３、約１５ｃｍ^３、約１８ｃｍ^３、約２０ｃｍ^３、またはそれを超える。

【0084】

ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織の量は、被験体の胸腺機能を修復するのに有効な量である。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織の量は、リンパ節中で拡大するのに有効な量であり、ここで、拡大した胸腺組織が被験体の胸腺機能を修復する。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織の量は、被験体の胸腺機能を増大させるのに有効な量である。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織の量は、リンパ節内に植え付けるのに有効な量である。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織の量は、リンパ節中で異所性胸腺組織を形成するのに有効な量である。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織の量は、被験体中の循環Ｔ細胞（例えば、循環ナイーブＴ細胞）のレベルを増加させるのに有効な量である。ある特定の実施形態では、キット中に含まれる胸腺組織の量は、被験体における循環Ｔ細胞の密度を増加させる（例えば、ＴＣＲのレパートリーおよび認識される同種抗原を増加させる）のに有効な量である。

【0085】

いくつかの実施形態では、本開示のキットは、胸腺組織の採取、胸腺組織の処理、胸腺組織の貯蔵（例えば、低温保存）、胸腺組織の培養、胸腺組織の被験体への送達、またはその組み合わせに適切な成分を含むことができる。ある特定の実施形態では、キットは、胸腺組織を含まない。

【0086】

ある特定の実施形態では、キットは、胸腺組織を低温保存するのに必要な材料（例えば、試薬および／または容器）を含む。ある特定の実施形態では、キットは、約１２時間、約２４時間、約２日間、約３日間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約２ヶ月間、約３ヶ月間、約４ヶ月間、約５ヶ月間、約６ヶ月間、約８ヶ月間、約１０ヶ月間、約１年間、約２年間、約３年間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１５年間、約２０年間、またはそれを超えて胸腺組織を低温保存することを目的とする。ある特定の実施形態では、キットは、少なくとも約１２時間、少なくとも約２４時間、少なくとも約２日間、少なくとも約３日間、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、少なくとも約４週間、少なくとも約２ヶ月間、少なくとも約３ヶ月間、少なくとも約４ヶ月間、少なくとも約５ヶ月間、少なくとも約６ヶ月間、少なくとも約８ヶ月間、少なくとも約１０ヶ月間、少なくとも約１年間、少なくとも約２年間、少なくとも約３年間、少なくとも約４年間、少なくとも約５年間、少なくとも約６年間、少なくとも約７年間、少なくとも約８年間、少なくとも約９年間、少なくとも約１０年間、少なくとも約１５年間、少なくとも約２０年間、またはそれを超えて胸腺組織を低温保存することを目的とする。ある特定の実施形態では、キットは、最長で約１２時間、最長で約２４時間、最長で約２日間、最長で約３日間、最長で約１週間、最長で約２週間、最長で約３週間、最長で約４週間、最長で約２ヶ月間、最長で約３ヶ月間、最長で約４ヶ月間、最長で約５ヶ月間、最長で約６ヶ月間、最長で約８ヶ月間、最長で約１０ヶ月間、最長で約１年間、最長で約２年間、最長で約３年間、最長で約４年間、最長で約５年間、最長で約６年間、最長で約７年間、最長で約８年間、最長で約９年間、最長で約１０年間、最長で約１５年間、最長で約２０年間、最長で約３０年間、最長で約４０年間、最長で約５０年間、またはそれ未満の期間胸腺組織を低温保存することを目的とする。

【0087】

ある特定の実施形態では、キットは、少なくとも約０．１グラム、少なくとも約０．２グラム、少なくとも約０．３グラム、少なくとも約０．４グラム、少なくとも約０．５グラム、少なくとも約０．６グラム、少なくとも約０．７グラム、少なくとも約０．８グラム、少なくとも約０．９グラム、少なくとも約１グラム、少なくとも約１．５グラム、少なくとも約２グラム、少なくとも約２．５グラム、少なくとも約３グラム、少なくとも約４グラム、少なくとも約５グラム、少なくとも約６グラム、少なくとも約７グラム、少なくとも約８グラム、少なくとも約９グラム、または少なくとも約１０グラムの量の胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。

【0088】

ある特定の実施形態では、キットは、約５グラムまで、約１０グラムまで、約１５グラムまで、または約２０グラムまでの量の胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。ある特定の実施形態では、キットは、約０．１グラム、約０．２グラム、約０．３グラム、約０．４グラム、約０．５グラム、約０．６グラム、約０．７グラム、約０．８グラム、約０．９グラム、約１グラム、約２グラム、約３グラム、約４グラム、約５グラム、約６グラム、約８グラム、約１０グラム、約１３グラム、約１５グラム、約１８グラム、約２０グラム、またはそれを超える量の胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。

【0089】

ある特定の実施形態では、キットは、少なくとも約０．１ｃｍ^３、少なくとも約０．２ｃｍ^３、少なくとも約０．３ｃｍ^３、少なくとも約０．４ｃｍ^３、少なくとも約０．５ｃｍ^３、少なくとも約０．６ｃｍ^３、少なくとも約０．７ｃｍ^３、少なくとも約０．８ｃｍ^３、少なくとも約０．９ｃｍ^３、少なくとも約１ｃｍ^３、少なくとも約１．５ｃｍ^３、少なくとも約２ｃｍ^３、少なくとも約２．５ｃｍ^３、少なくとも約３ｃｍ^３ 少なくとも約４ｃｍ^３、または少なくとも約５ｃｍ^３のサイズの胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。ある特定の実施形態では、キットは、約５ｃｍ^３まで、約１０ｃｍ^３まで、約１５ｃｍ^３まで、または約２０ｃｍ^３までのサイズを有する胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。ある特定の実施形態では、キットは、約０．１ｃｍ^３、約０．２ｃｍ^３、約０．３ｃｍ^３、約０．４ｃｍ^３、約０．５ｃｍ^３、約０．６ｃｍ^３、約０．７ｃｍ^３、約０．８ｃｍ^３、約０．９ｃｍ^３、約１ｃｍ^３、約２ｃｍ^３、約３ｃｍ^３、約４ｃｍ^３、約５ｃｍ^３、約６ｃｍ^３、約８ｃｍ^３、約１０ｃｍ^３、約１３ｃｍ^３、約１５ｃｍ^３、約１８ｃｍ^３、約２０ｃｍ^３、またはそれを超えるサイズを有する胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。

【0090】

いくつかの実施形態では、キットは、少なくとも約０．１ｍＬ、少なくとも約０．２ｍＬ、少なくとも約０．３ｍＬ、少なくとも約０．４ｍＬ、少なくとも約０．５ｍＬ、少なくとも約０．６ｍＬ、少なくとも約０．７ｍＬ、少なくとも約０．８ｍＬ、少なくとも約０．９ｍＬ、少なくとも約１ｍＬ、少なくとも約１．５ｍＬ、少なくとも約２ｍＬ、少なくとも約２．５ｍＬ、少なくとも約３ｍＬ、少なくとも約４ｍＬ、少なくとも約５ｍＬ、少なくとも約６ｍＬ、少なくとも約７ｍＬ、少なくとも約８ｍＬ、少なくとも約９ｍＬ、または少なくとも約１０ｍＬ（例えば、リンパ節あたりの体積、または２またはそれを超えるリンパ節への分割体積の総体積）の体積の胸腺組織を送達させることを目的とする。いくつかの実施形態では、キットは、約５ｍＬまで、約１０ｍＬまで、約１５ｍＬまで、または約２０ｍＬまでの体積（例えば、２またはそれを超えるリンパ節への送達のために分割される）の胸腺組織を送達させることを目的とする。いくつかの実施形態では、キットは、リンパ節あたり約０．１ｍＬ、約０．２ｍＬ、約０．３ｍＬ、約０．４ｍＬ、約０．５ｍＬ、約０．６ｍＬ、約０．７ｍＬ、約０．８ｍＬ、約０．９ｍＬ、約１ｍＬ、約２ｍＬ、または約３ｍＬの体積の胸腺組織を送達させることを目的とする。いくつかの実施形態では、キットは、約０．２ｍＬ、約０．３ｍＬ、約０．４ｍＬ、約０．５ｍＬ、約０．６ｍＬ、約０．７ｍＬ、約０．８ｍＬ、約０．９ｍＬ、約１ｍＬ、約２ｍＬ、約３ｍＬ、約４ｍＬ、約５ｍＬ、約６ｍＬ、約８ｍＬ、約１０ｍＬ、約１３ｍＬ、約１５ｍＬ、約１８ｍＬ、約２０ｍＬ、またはそれを超える体積の胸腺組織を、２またはそれを超えるリンパ節への送達のために分割して送達させることを目的とする。

【0091】

いくつかの実施形態では、キットは、被験体の体重と比較した量の胸腺組織（例えば、少なくとも約０．００１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．００５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．０１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．０５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約４０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約６０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約７０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約８０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約９０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１２０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１３０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１４０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１６０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１７０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１８０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１９０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１０００ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも約１５００ｍｇ／ｋｇ）を被験体に送達させることを目的とする。いくつかの実施形態では、量は、最大で約１ｍｇ／ｋｇ、最大で約１０ｍｇ／ｋｇ、最大で約２０ｍｇ／ｋｇ、最大で約５０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１００ｍｇ／ｋｇ、最大で約１１０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１２０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１３０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１４０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１５０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１６０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１７０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１８０ｍｇ／ｋｇ、最大で約１９０ｍｇ／ｋｇ、最大で約２００ｍｇ／ｋｇ、最大で約２５０ｍｇ／ｋｇ、最大で約５００ｍｇ／ｋｇ、最大で約１０００ｍｇ／ｋｇ、または最大で約１５００ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、量は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約７０ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ、約１１０ｍｇ／ｋｇ、約１２０ｍｇ／ｋｇ、約１３０ｍｇ／ｋｇ、約１４０ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１６０ｍｇ／ｋｇ、約１７０ｍｇ／ｋｇ、約１８０ｍｇ／ｋｇ、約１９０ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ、約２５０ｍｇ／ｋｇ、約５００ｍｇ／ｋｇ、約１０００ｍｇ／ｋｇ、または約１５００ｍｇ／ｋｇである。

【0092】

ある特定の実施形態では、キットは、被験体の胸腺機能を修復するのに有効な量の胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。ある特定の実施形態では、キットは、例えば、拡大された胸腺組織が被験体の胸腺機能を修復する場合、リンパ節中で拡大するのに有効な量の胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。ある特定の実施形態では、キットは、被験体の胸腺機能を増大させるのに有効な量の胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。ある特定の実施形態では、キットは、リンパ節内に植え付けるのに有効な量の胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。ある特定の実施形態では、キットは、リンパ節中で異所性胸腺組織を形成するのに有効な量の胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。ある特定の実施形態では、キットは、被験体における循環Ｔ細胞（例えば、循環ナイーブＴ細胞）のレベルを増加させるのに有効な量の胸腺組織の採取、処理、貯蔵、培養、および／または送達を目的とする。

【0093】

ある特定の実施形態では、キットは、胸腺摘出術を受けていたか、胸腺摘出術を受ける予定である被験体の胸腺機能の保護、増大、または修復のための指示書をさらに含む。ある特定の実施形態では、指示は、例えば、本明細書中（例えば、本開示の第６．２節中）に記載の方法を含む。

【0094】

被験体のリンパ節に胸腺組織を送達させるための当該分野で公知の任意の適切なツールを、本明細書中に開示のキットに含めることができる。胸腺組織の送達のためのツールの非限定的な例には、チューブ、シリンジ、針（例えば、微量注入用ガラス針）、低温保存に適切な容器、組織培養に適切な容器、および低侵襲手技に必要な任意のツールが含まれる。

【0095】

本開示の発明の対象およびそのある特定の利点を詳細に記載しているが、本開示の意図および範囲を逸脱することなく本明細書において種々の変化、置き換え、および変更が可能であると理解すべきである。さらに、本出願の範囲は、本明細書中に記載の過程、装置、製造物、および組成物、ならびに方法の特定の実施形態に制限されることを意図しない。当業者は本開示の発明の対象の開示から容易に認識するであろうが、本明細書中に記載の対応する実施形態と実質的に同一の機能を果たすか実質的に同一の結果が得られる既存のまたはその後に開発される過程、装置、製造物、組成物、または方法を、本開示の発明の対象にしたがって利用することができる。したがって、添付の特許請求の範囲は、かかる過程、装置、製造物、組成物、または方法の範囲内に含まれることが意図される。

【0096】

種々の特許、特許出願、刊行物、製品の指示書、プロトコール、および配列の受入番号が本出願の至るところに引用されており、その開示は、全ての目的のためにその全体が本明細書に参照により援用される。

【実施例】

【0097】

７．実施例
本開示の発明の対象は、以下の実施例を参照することによってより深く理解されるであろう。実施例は本開示の発明の対象の例示として提供され、本発明を決して制限しない。

【0098】

７．１ 実施例１：ヌードマウスによる投薬量の研究
ヌードマウスは胸腺を欠くので、Ｔ細胞を産生することができない。その結果、ヌードマウスは免疫不全である。これらのマウスでは、腸間膜リンパ節に胸腺を移植することによって機能的な免疫系が得られる。ここでは、血中Ｔ細胞を再度存在させるために必要な胸腺組織の量、および十分な数の血中循環Ｔ細胞を得ることができるリンパ節内への胸腺組織の移植量についての問題に取り組んでいる。

【0099】

２３匹の１５週齢ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスを登録した（雌ｎ＝１６；雄ｎ＝７）。２１匹のマウスに、１／４葉～２葉のＢＡＬＢ／ｃ野生型新産仔胸腺をマウスのリンパ節（２葉の胸腺＝１個の全胸腺）に移植した。残りの２匹のマウスに、同一のドナーマウス由来の胸腺単一細胞懸濁液を移植した。移植すべき試料を、２リットルの１２の異なる胸腺から回収し、試料の重量は平均８．５ｍｇであった（６．２～１１ｍｇの範囲；図１Ａ）。８匹のマウスに１／４葉の胸腺を移植し、６匹のマウスに１／２葉または全葉の胸腺のいずれかを移植し、１匹のマウスに胸腺全体（２葉）を移植した（図１Ｂ）。１／２葉の用量を使用する場合、組織を移植のために２片にさらに断片化した。１葉用量については、合計で４個の断片をリンパ節中に移植し、一方、２葉用量については、合計で８個の断片を移植した。ヌードマウスのリンパ節のサイズが小さく（平均で１ｍｍ３をわずかに超える）、組織断片の移植が困難であるため、このアプローチを採用した。図１Ｃは、動物内の胸腺断片の推定移植重量を示す。

【0100】

移植４ヶ月後に、２０匹の生存マウスを、フローサイトメトリーによって血中のＴ細胞の存在について分析した。３匹の非移植ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス、および３匹のＢＡＬＢ／ｃ野生型マウスを、それぞれ血中循環Ｔ細胞の負の対照および正の対照として使用した。フローサイトメトリー分析を使用して、図２Ａは、異なる条件下でのＣＤ３発現の代表的なドットプロットを示す。細胞を最初にシングレットについてゲーティングし、その後に生細胞、ＣＤ４５＋細胞、最後にＣＤ３発現についてゲーティングした。文字はマウスＩＤを示す。各マウスについてのＣＤ３＋Ｔ細胞の百分率を図２Ｂに示し、ここで、円形ドットは雌を示し、四角のドットは雄を示す。少なくとも１／４葉またはそれを超える胸腺を移植した全ての群は、移植を受けていなかった対照と比較して、循環ＣＤ３＋Ｔ細胞の比率が増加した。１／４葉または１／２葉の用量のいずれかを移植したマウスは、ＣＤ３＋Ｔ細胞の百分率が類似していた（それぞれ、１４．１３±３．２９および１１．７６±３．９８；Ｐ＝０．２６３４）。ＣＤ３＋Ｔ細胞の百分率は、１葉の胸腺を移植した場合に半葉と比較してわずかに高かった（２４．０２±７．４３；１／２葉群対１葉群についてＰ＝０．００６７）。２葉を移植した場合のＣＤ３＋Ｔ細胞の百分率は１葉の用量に類似しており、一方、胸腺細胞懸濁液を移植すると循環Ｔ細胞の頻度が有意に増加しなかった。組織の移植量と無関係に、正常なＣＤ４／ＣＤ８比を得ることができた（図２Ｃおよび２Ｄ）。各ドットはマウスを示す。円形ドットは雌を示し、四角のドットは雄を示す。

【0101】

移植マウスにおけるＣＤ３＋Ｔ細胞の百分率は、移植された胸腺の組織の実重量（ｍｇ）と相関する。移植マウスを２群に分割し、一方の群は１ｍｇ超から３ｍｇ未満までの胸腺の組織を移植したマウスを含み、他の群は３ｍｇ超から７ｍｇ未満までの胸腺の組織を移植したマウスを含む。これらの２群間でＣＤ３＋血中Ｔ細胞の産生において統計的有意差があった（Ｐ＝０．０００２；図２Ｅ）。この分析では、マウスを、胸腺葉断片の代わりにマウスのリンパ節中に移植された胸腺の実重量（ｍｇ）に基づいてマウスを２群に分割した。^＊＊＊は、Ｐ値が０．００１未満であることを示す。^＊＊は、Ｐ値が０．０１未満であることを示す。ｎｓは、「有意でない」（すなわち、Ｐ値が０．０５を超える）ことを示す。

【0102】

これらの結果から、以下の２つの結論が示唆される：（１）移植されたマウスにおけるリンパ節中に移植された胸腺の組織の重量と循環Ｔ細胞の百分率との間に用量－応答が存在する。（２）野生型により近い循環Ｔ細胞（Ｔ細胞機能が改善された可能性がある）の数を増加させるためのリンパ節中の胸腺組織の移植重量には閾値が存在する。

【0103】

１ヶ月後、５匹の移植マウスにおける血中循環Ｔ細胞のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）Ｖβレパートリーを、１５種類のバリアントに対して指向するモノクローナル抗体を使用したフローサイトメトリーによって分析した。この時点で得られたＣＤ３＋Ｔ細胞の百分率は、１ヶ月前に得た百分率に匹敵しており、唯一の例外として、胸腺全体を移植されたマウスのＴ細胞の百分率がわずかに増加した（図３Ａ）。１６の異なる測定値から平均を得た。移植マウスおよび１つの対照ＢＡＬＢ／ｃ野生型マウスの両方で９種のＴＣＲ－Ｖβバリアントが発現されることが同定された（図３Ｂ）。ＢＡＬＢ／ｃ野生型マウスを正の対照（ＣＮＴＲＬ）として含めた。異なる条件の間で差は認められず（１元配置ＡＮＯＶＡ Ｐ＝０．９９５６）、これにより、リンパ節内に胸腺組織を送達させると、胸腺を欠くか、機能を欠く胸腺を有するレシピエントにおいて循環Ｔ細胞の多様性を増大させることができることが実証された。

【0104】

移植から６ヶ月半後に２０匹のマウスの全てを屠殺した。図４Ａは、単離したリンパ節の重量を示す。

【0105】

図２Ｂと同様に、１／４葉の胸腺を移植したリンパ節の重量は、１／２葉の胸腺を移植したリンパ節の重量に類似していた（それぞれ、１３．４９±７．６５および１８．３３±７．０３；Ｐ＝０．２６２８；図４Ａ）。各ドットはマウスを示す。円形ドットは雌を示し；四角のドットは雄を示す。リンパ節の重量は、１葉の胸腺を移植したときに有意に重かった（２８．８±１３．６２；１／４葉群対１葉群についてＰ＝０．０３１５）。図２Ｅ中のデータと同一の方法で、単離したリンパ節を、移植された胸腺の組織の重量（ｍｇ）に基づいて２群に分割した。この場合も、これらの２群の間に統計的に有意差があった（Ｐ＝０．０４２８；図４Ｂ）。^＊は、Ｐ値が００．５未満であることを示す。

【0106】

開示のデータは、移植されたマウスにおいて、リンパ節中に移植された胸腺の組織の重量と、屠殺時のリンパ節の重量と、血中循環Ｔ細胞数との間に関係があることを示唆している。これらの結果は、サイズが制限される被験体において、より高い血中循環Ｔ細胞レベル（例えば、正常に機能する胸腺を有する被験体の百分率に近い百分率）を得るために、より多くのリンパ節に移植することができることを示唆している。また、これらの結果は、このモデルにおいて雌の方が有効に胸腺移植後に新規のＴ細胞の産生することができることを示唆している。理論に拘束されることを望まないが、胸腺移植に関する性差は、このモデルにおける雌と雄の間のホルモンの差の結果であり得る。

【0107】

上記の結果は、胸腺の移植重量の増加がナイーブＴ細胞再構成レベルの増加に関連し得ることを示す。例えば、いくつかの実施形態では、総胸腺重量の少なくとも１／３を移植すると、総胸腺重量の１／３未満の移植と比較して、ナイーブＴ細胞の再構成レベルを増加させることができる。例えば、標準サイズが平均８．５ｍｇの新産仔マウス胸腺のうちの３ｍｇ超とは、ヒト患者における標準サイズが２５ｇｒの小児期胸腺のうちの９ｇｒより少し少ない量と解釈することができる。一部の例においてヒトリンパ節内に注射することができる最大体積がおよそ１ｍｌであることを考慮すると、全部で９箇所のリンパ節の各リンパ節に（１リンパ節あたり１ｇｒの胸腺組織を）注射して完全な小児期胸腺の１／３を得ることができる。

【0108】

胸腺摘出により、Ｔ細胞リンパ球減少症（メモリーＴ細胞集団の増加を伴うナイーブＴ細胞の減少を特徴とする）を発症し得る。さらに、胸腺摘出を受けたある特定の患者（例えば、６ヶ月未満などの年少期に９０％を超える胸腺が除去された患者）は、後年にＴ細胞区画が量的に欠乏し、これは主にナイーブＴ細胞集団に影響を及ぼす。

【0109】

本開示の組成物および方法によってこれらの患者に胸腺組織を自家移植した場合、血中循環ＣＤ３＋Ｔ細胞を増加させることができ、特にナイーブＴ細胞集団を修復することができる。

【0110】

７．２ 実施例２：老化野生型マウスの研究
この実施例では、低用量の胸腺（１／４葉の胸腺）をリンパ節中に移植すると、移植されたマウスの免疫機能を回復させることができるかどか、および雌と雄の間に何らかの相違があるかどうかについて検討する。

【0111】

３２匹のＣ５７ＢＬ／６Ｊマウス（雌１６匹および雄１６匹）を登録した。各マウス群については、成体マウス８匹（１８週齢）および老齢マウス８匹（６２週齢）から構成されていた。各群のマウスの半分に、１／４葉の胸腺を移植した。ドナー胸腺を、同腹仔由来のＧＦＰ＋Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ新産仔マウスから単離した。胸腺移植の７週間後、３２匹の全てのマウスを、フローサイトメトリーによってナイーブＴ細胞、エフェクターＴ細胞、およびメモリーＴ細胞について分析し、これらの亜集団におけるＣＤ４４およびＣＤ６２Ｌの発現の相違を調査した（図５Ａ～５Ｈ）。ゲーティングストラテジーを図５Ａ～５Ｈに提供する。図５Ａは、前方散乱ゲート対側方散乱ゲートを示す。図５Ｂは、単一細胞についてのゲートを示す。図５Ｃは、生細胞についてのゲートを示す。図５Ｄは、ＣＤ４５＋細胞についてのゲートを示す。図５Ｅは、ＣＤ３＋細胞についてのゲートを示す。図５Ｆは、ＣＤ４＋細胞およびＣＤ８＋細胞についてのゲートを示す。図５Ｇは、ナイーブ細胞、活性化されたエフェクター細胞、エフェクターメモリー細胞、およびセントラルメモリー細胞についてのＣＤ４＋細胞のゲーティングを示す。図５Ｈは、ナイーブ細胞、活性化されたエフェクター細胞、エフェクターメモリー細胞、およびセントラルメモリー細胞についてのＣＤ８＋細胞のゲーティングを示す。

【0112】

ナイーブＴ細胞は胸腺中で継続的に生成されるが、マウスが老化して胸腺が退行するにつれて、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋の各ナイーブＴ細胞の比率が低下する。したがって、老齢動物における胸腺移植がナイーブＴ細胞集団を増加させることができるかどうかを試験した。

【0113】

老齢雌マウスは、成体雌マウスと比較してＣＤ４＋ナイーブＴ細胞の減少が統計的に有意に高かった（Ｐ＜０．０００１）（図６Ａおよび６Ｅ）。これらのマウスにおいてＣＤ４＋ナイーブＴ細胞が減少すると、活性化されたＣＤ４＋Ｔ細胞エフェクター（Ｐ＝０．００６２）、ＣＤ４＋エフェクター／メモリー（Ｐ＜０．０００１）、およびＣＤ４＋セントラルメモリーＴ細胞（Ｐ＝０．０２９７）がそれに対応して有意に減少した（図６Ａ～６Ｄ）。細胞を最初にシングレット、その後に生細胞、ＣＤ４５＋細胞、ＣＤ３＋細胞、ＣＤ４＋、最後にＣＤ４４発現およびＣＤ６２Ｌ発現についてゲーティングした（図５Ａ～５Ｈ）。各ドットはマウスを示す。円形ドットは雌を示し；四角のドットは雄を示す。^＊は、Ｐ値が０．０５未満であることを示す。^＊＊は、Ｐ値が０．０１未満であることを示す。^＊＊＊は、Ｐが０．００１未満であることを示す。^＊＊＊＊は、Ｐ値が０．０００１未満であることを示す。興味深いことに、老齢オスマウスは、成体雄マウスと比較して、これらの集団のいかなる有意な変化も示さなかった（図６Ｂ～６Ｅ）。

【0114】

老齢雌マウスにおけるＣＤ４＋ナイーブＴ細胞が非移植対応マウスと比較して胸腺移植後に有意に増加し（Ｐ＝０．０１２７）、一方で、ＣＤ４＋エフェクター／メモリーＴ細胞集団が有意に減少したことが重要である（Ｐ＝０．０３２１）（図６Ａ～６Ｅ）。また、非移植対応マウスと比較して、胸腺移植後の老齢雄マウスにおいてＣＤ４＋エフェクター／メモリーＴ細胞集団が有意に減少した（Ｐ＝０．０１１２）（図６Ｂ～６Ｅ）。胸腺移植後の成体の雌マウスおよび雄マウスの両方においてＣＤ４＋亜集団の変化は認められなかった（図６Ｂ～６Ｅ）。

【0115】

これらの暫定的結果は、（１）老齢雌マウスは、このモデルにおける年齢を適合させた雄マウスよりナイーブＴ細胞の百分率が低いこと；（２）高齢雌マウスは、このモデルにおける年齢を適合させた雄マウスよりナイーブＴ細胞の低下がより顕著であること；および（３）老齢雌マウスにおいて、低用量の胸腺の移植によってＣＤ４＋ナイーブＴ細胞の百分率が増加する一方で、ＣＤ４＋エフェクター／メモリーＴ細胞の比率が低下することを示す。

【0116】

７．３ 実施例３：ヒト自家胸腺組織の移植
ヒトの新生児または乳児の被験体は、胸腺摘出を必要とする適応症（例えば、外科的矯正および手術の一部としての胸腺摘出を必要とする先天性心臓欠陥）を呈する。胸腺組織を手術中に回収し、無菌手技を使用して切断するか小断片に切り刻む。必要に応じて、本明細書中に開示のように、胸腺組織をｅｘ ｖｉｖｏで培養し、そして／または低温保存する。本明細書中に開示のように、胸腺組織断片を、適切な薬学的に許容され得る賦形剤、希釈剤、または担体を含む溶液に懸濁し、（例えば、超音波のガイド下で低侵襲手技を使用して）被験体の１またはそれを超えるリンパ節内に注射する。１ヶ月後または数カ月後、被験体の末梢血試料を、末梢血Ｔ細胞および／またはナイーブＴ細胞のレベルが注射を受けていなかった同等な被験体と比較して高いかどうか、または、断片を注射される前の被験体のレベルと比較して高いかどうかを判定するために評価する。末梢血Ｔ細胞および／またはナイーブＴ細胞のレベルが依然として非常に低いと見なされる場合、十分な数の末梢血Ｔ細胞および／またはナイーブＴ細胞が得られるまでより多くの胸腺組織を移植することができる。

【0117】

７．４ 実施例４：ヒト被験体への胸腺組織の移植
ヒト被験体は、胸腺機能に影響を及ぼす容態（例えば、加齢性胸腺萎縮）を呈する。適切なドナー（例えば、被験体とＨＬＡが適合するインタクトな胸腺を有する死体ドナー）を同定する。胸腺組織をドナーから採取し、無菌手技を使用して切断するか小断片に切り刻む。必要に応じて、本明細書中に開示のように、胸腺組織をｅｘ ｖｉｖｏで培養し、そして／または低温保存する。本明細書中に開示のように、胸腺組織断片を、適切な薬学的に許容され得る賦形剤、希釈剤、または担体を含む溶液に懸濁し、（例えば、超音波のガイド下で低侵襲手技を使用して）被験体の１またはそれを超えるリンパ節内に注射する。移植片の受け入れを改善するために、必要に応じて被験体に免疫抑制レジメンを施す。１ヶ月後または数カ月後、被験体の末梢血試料を、末梢血Ｔ細胞および／またはナイーブＴ細胞のレベルが注射を受けていなかった同等な被験体と比較して高いかどうか、または、断片を注射される前の被験体のレベルと比較して高いかどうかを判定するために評価する。末梢血Ｔ細胞および／またはナイーブＴ細胞のレベルが依然として非常に低いと見なされる場合、十分な数の末梢血Ｔ細胞および／またはナイーブＴ細胞が得られるまでより多くの胸腺組織を移植することができる。

【0118】

本開示の発明の対象およびその利点を詳細に記載しているが、本開示の意図および範囲を逸脱することなく本明細書において種々の変化、置き換え、および変更が可能であると理解すべきである。さらに、本出願の範囲は、本明細書中に記載の過程、装置、製造物、および組成物、ならびに方法の特定の実施形態に制限されることを意図しない。当業者は本開示の発明の対象の開示から容易に認識するであろうが、本明細書中に記載の対応する実施形態と実質的に同一の機能を果たすか実質的に同一の結果が得られる既存のまたはその後に開発される過程、装置、製造物、組成物、または方法を、本開示の発明の対象にしたがって利用することができる。したがって、添付の特許請求の範囲は、かかる過程、装置、製造物、組成物、または方法の範囲内に含まれることが意図される。

【0119】

種々の特許、特許出願、刊行物、製品の指示書、プロトコール、および配列の受入番号が本出願の至るところに引用されており、その開示は、全ての目的のためにその全体が本明細書に参照により援用される。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図2E】

【図3A】

【図3B】

【図4A】

【図4B】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図5D】

【図5E】

【図5F】

【図5G】

【図5H】

【図6A】

【図6B】

【図6C】

【図6D】

【図6E】

【国際調査報告】