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特表2022-544092一酸化窒素供与プロスタグランジン類似体の調製のための方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-10-17
(54)【発明の名称】一酸化窒素供与プロスタグランジン類似体の調製のための方法
(51)【国際特許分類】
C07C 405/00 20060101AFI20221007BHJP
C07C 203/04 20060101ALI20221007BHJP
C07C 201/02 20060101ALI20221007BHJP
A61K 31/5575 20060101ALI20221007BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20221007BHJP
【ＦＩ】
C07C405/00 503T
C07C203/04
C07C201/02
C07C405/00 503P
A61K31/5575
A61P43/00 112
【審査請求】未請求
【予備審査請求】有
(21)【出願番号】P 2022506896
(86)(22)【出願日】2020-08-03
(85)【翻訳文提出日】2022-04-01
(86)【国際出願番号】 EP2020071766
(87)【国際公開番号】W WO2021023693
(87)【国際公開日】2021-02-11
(31)【優先権主張番号】19189993.9
(32)【優先日】2019-08-05
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】516217239
【氏名又は名称】ニコックス エス．エー．
(74)【代理人】
【識別番号】110001508
【氏名又は名称】弁理士法人 津国
(72)【発明者】
【氏名】アルミランテ，ニコレッタ
【テーマコード（参考）】
4C086
4H006
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA03
4C086DA02
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZC12
4H006AA01
4H006AA02
4H006AB20
4H006AB84
4H006AC48
4H006AC59
4H006BB15
4H006BB41
4H006BC10
4H006BC31
4H006BD70
(57)【要約】
本発明は、式（Ｉ）で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルを調製するための方法に関する。本発明によれば、ボロナート保護形態にあるビマトプロストを、高い化学純度を有する６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドとカップリングさせ、ボロナート保護基を除去することにより、化合物（Ｉ）を高純度で効率的に調製することができる。高い化学純度の６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドは、高い化学純度を有する６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸から調製される。本発明はまた、６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸の調製及び精製のための方法に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）：【化1】
で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルの調製のための方法であって、下記工程：
１）化合物（ＩＩ）：
【化2】
を６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）
【化3】
と、遊離型の４－ジメチルアミノピリジンの存在下で反応させて、化合物（ＩＩＩ）
【化4】
を得る工程と、
２）化合物（ＩＩＩ）のボロナート保護基を除去して、式（Ｉ）で示される化合物を得る工程と、
３）化合物（Ｉ）を精製する工程とを含み、
６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）は、下記工程：
４）２－カプロラクトン（Ｖ）
【化5】
をＫＯＨ、ＮａＯＨおよびＬｉＯＨから選択される無機塩基と反応させて、式（ＶＩ）
【化6】
［式中、Ｍは、Ｋ、Ｎａ又はＬｉである］
で示される６－ヒドロキシヘキサン酸塩を得る工程と、
５）式（ＶＩ）で示される化合物をＨＮＯ３とＨ２ＳＯ４との混合物でニトロ化して、６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）：
【化7】
を得る工程と、
６）水中のギ酸（Ｈ２Ｏ＋ＨＣＯＯＨ）及びアセトニトリルを溶出液として使用する逆相クロマトグラフィーにより、このニトロ化混合物を精製して、６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩｂ））
【化8】
をＨＰＬＣ検出限界未満（＜０．０５％）の含量で有する、純粋な式（ＶＩＩａ）で示される６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸を得る工程と、
７）純粋な６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）を塩素化剤と反応させて、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）を得る工程とを含む方法により調製されることを特徴とする、
方法。
【請求項2】
工程１）を非プロトン性有機溶媒中で、０℃～室温の範囲の温度で行う、請求項１記載の方法。
【請求項3】
非プロトン性有機溶媒が、メチルtertブチルエーテルである、請求項２記載の方法。
【請求項4】
工程１）において、化合物（ＩＩ）と６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）とのモル比が、１：１．４～１：１．６であり、化合物（ＩＩ）と４－ジメチルアミノピリジンとのモル比が、好ましくは、１：２．０～１：２．４である、請求項１～３のいずれか一項記載の方法。
【請求項5】
工程４）において、無機塩基が、水酸化カリウムである、請求項１～４のいずれか一項記載の方法。
【請求項6】
工程４）をメタノール、エタノール又はイソプロパノールから選択される溶媒中で行う、請求項１～５のいずれか一項記載の方法。
【請求項7】
溶媒が、メタノールである、請求項６記載の方法。
【請求項8】
工程５）をジクロロメタン中で行う、請求項１～７のいずれか一項記載の方法。
【請求項9】
工程６）において、水中のギ酸（Ｈ２Ｏ＋ＨＣＯＯＨ）の濃度が、０．１%w/wである、請求項１～８のいずれか一項記載の方法。
【請求項10】
工程６）において、化合物（ＶＩＩａ）を含有するクロマトグラフィー画分をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、乾燥させ、溶媒を蒸発させる、請求項１～９のいずれか一項記載の方法。
【請求項11】
工程７）をジクロロメタン中で行い、塩素化剤が、塩化オキサリルである、請求項１～１０のいずれか一項記載の方法。
【請求項12】
工程７）で得られた６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドを更に精製することなく使用する、請求項１～１１のいずれか一項記載の方法。
【請求項13】
９９％の純度を有し、０．０５％未満の｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩｂ））含量を有する、６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩａ））の調製のための方法であって、下記工程：４）２－カプロラクトン（Ｖ）
【化9】
をＫＯＨと、メタノール中で反応させて、式（ＶＩ）
【化10】
［式中、Ｍは、Ｋである］
で示される６－ヒドロキシヘキサン酸塩を得る工程と、
５）式（ＶＩ）で示される化合物をＨＮＯ３とＨ２ＳＯ４との混合物により、ジクロロメタン中において、約５℃～１０℃の温度、好ましくは、１０℃でニトロ化する工程と、
６）水中の０．１％ ギ酸とアセトニトリルとの溶液を溶出液として使用する逆相クロマトグラフィーにより、このニトロ化混合物を精製し、続けて、この画分をジクロロメタンで抽出して、６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）
【化11】
を得る工程とを含む、
方法。
【請求項14】
９８％超の化学純度を有し、ビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））を約０．１２％の量で含み、
【化12】
ビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））を０．０５％未満の量で含む、
【化13】
式（Ｉ）で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル。
【請求項15】
式（Ｉ）で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルと、少なくとも薬学的に許容し得る賦形剤とを含有し、ここで、ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルは、９８％超の化学純度を有し、ビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））を約０．１２％の量で含み、二量体不純物であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））を０．０５％未満の量で含む、
医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、式（Ｉ）で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルの大規模製造に適した改善された方法に関する。この方法により、高い化学純度を有する前記生成物を得ることが可能となる。また、本発明は、合成の重要な中間体である、高純度な６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）の製造も記載する。
【背景技術】
【0002】
発明の背景
式（Ｉ）
で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルは、ＩＯＰ低下剤として有効であることが証明されているプロスタグランジン類似体である（Impagnatiello F, Toris CB, Batugo M, Prasanna G, Borghi V, Bastia E, Ongini E, Krauss AHP; Invest Ophthalmol Vis Sci. 2015; 56:6558-64）。
式（Ｉ）
【化1】
で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルは、ＩＯＰ低下剤として有効であることが証明されているプロスタグランジン類似体である（Impagnatiello F, Toris CB, Batugo M, Prasanna G, Borghi V, Bastia E, Ongini E, Krauss AHP; Invest Ophthalmol Vis Sci. 2015; 56:6558-64）。
【0003】
式（Ｉ）で示される化合物を製造するための方法は、国際公開第２００９／１３６２８１号に開示されている。
【0004】
国際公開第２００９／１３６２８１号には、化合物（Ｉ）の合成及び一般的には、ビマトプロストの１５－硝酸アルキルエステルの調製が具体的に開示されている。
【0005】
国際公開第２００９／１３６２８１号には、ボロナート保護形態にあるビマトプロストを（化合物（ＩＩ））を６－ブロモヘキサノイルクロリドと反応させて、ビマトプロストの１５－（６－ブロモヘキサノイル）エステルをボロナート保護形態（化合物（ＸＩ））で得、これをアセトニトリル中で硝酸銀により硝酸誘導体に変換し、逆相クロマトグラフィー下で脱保護／精製して、式（Ｉ）で示される化合物を生成することにより、式（Ｉ）で示される化合物を合成することが開示されている（実施例Ｂ－１）。
【化2】
【0006】
この方法の別の主な欠点は、不純物及び副生成物、例えば、ビマトプロストの１５－（６－ブロモヘキサノイル）エステル（化合物（ＩＸ））及びビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））が形成されることである。これらは、化合物（Ｉ）と類似するクロマトグラフィーにおける極性、類似する親油性及び／又は溶解性を有するため、複数回の精製後であっても除去するのが困難である。更に、化合物（Ｘ）は、細菌のｉｎ ｖｉｔｒｏ変異原性について陽性であると予測される。これらの不純物の除去には、繰り返しの精製が必要であり、このため、収率は、更に低下し、商業的規模での製造コストが増加する。
【化3】
【0007】
国際公開第２００９／１３６２８１号に開示されている手法によれば、ビマトプロストの１５－（６－ブロモヘキサノイル）エステル（化合物（ＩＸ））は、ボロナート保護の除去後の化合物（ＸＩ）と硝酸銀との未完了反応に由来する不純物である。ビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））は、ボロナート保護形態にあるビマトプロストの１５－（６－ブロモヘキサノイル）エステル（化合物（ＸＩ））の臭素原子とエステル化工程中に形成される４－ジメチルアミノピリジン塩酸塩の遊離塩素アニオンとの間のハロゲン交換反応により形成される副生成物である。ボロナート保護形態にあるビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（ＸＩａ）（スキーム３）は、硝酸銀と反応せず、保護基を除去した後、化合物（Ｘ）を生成する。
【0008】
また、国際公開第２００９／１３６２８１号には、１５－アシルアルキルニトラートビマトプロスト誘導体（実施例Ｎ－１及びＯ－１）の調製のための代替的な方法も開示されている。合成は、ボロナート保護形態にあるビマトプロスト（式（ＩＩ）で示される化合物）を硝酸－アルキルカルボン酸クロリドと、樹脂上に担持された４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（ＰＳ－ＤＭＡＰ）の存在下で反応させ、続けて、ボロナート保護基を除去し、シリカゲルクロマトグラフィーを使用して精製することを含む。
【0009】
上記方法によれば、６－ブロモヘキサノイルクロリドの使用及び最終生成物からの銀塩の除去が回避される。ただし、この方法には、樹脂上に担持された４－ジメチルアミノピリジンを使用するという別の主な欠点があり、これにより、この方法は、商業的な規模拡大に適しておらず、高価である。更に、硝酸－アルキルカルボン酸クロリドが、２つの連続した工程において、式（ＩＩ）で示される化合物に対して高過剰に加えられる。実際に、アルキルカルボン酸クロリドは、約２～４当量の量で加えられる。
【0010】
また、国際公開第２００９／１３６２８１号には、１５－アシルアルキルニトラートビマトプロスト誘導体の調製のための別の方法（実施例Ｑ１）も開示されている。この方法において、この化合物は、ボロナート保護形態にあるビマトプロスト（ＩＩ）を過剰の硝酸－アルキル－（ｐ－ニトロフェニル）－カルボキシラートにより、４－ジメチルアミノピリジンの存在下でエステル化することにより得られた。
【0011】
クロマトグラフィー法を使用して、式（Ｉ）で示される化合物と等モル量で形成された未反応の硝酸－アルキル－（ｐ－ニトロフェニル）－カルボキシラート及び副生成物であるｐ－ニトロフェノールを除去することが、この方法の主な欠点である。
【0012】
国際公開第２０１６／１５５９０６号には、フルプロステノールの１５－ニトロオキシ誘導体が開示されており、フルプロステノールイソプロピルエステルの１５－ニトロオキシ－ヘキシルエステルの合成が報告されている。この化合物は、ボロナート保護形態にあるフルプロステノールイソプロピルエステルを（４－ニトロフェニル）－６－ニトロオキシヘキサノエートと、過剰の４－ジメチルアミノピリジンの存在下で反応させることにより調製された。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0013】
上記報告されたように、クロマトグラフィー法による未反応の硝酸－アルキル－（ｐ－ニトロフェニル）－カルボキシラートの除去、特に、ｐ－ニトロフェノール副生成物の除去が、この方法の主な欠点である。
【0014】
本発明の関連する日付の前に出願され、その後に公開された欧州特許出願公開第３５３０６４９号には、ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ），（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（化合物（Ｉ））の調製のための方法が開示されている。化合物（Ｉ）は、ボロナート保護形態にあるビマトプロストを６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドとカップリングさせ、ボロナート保護基を除去することにより調製される。６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド中間体は、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル酸から調製される。６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル酸は、２－カプロラクトンの開環反応、続けて、ジクロロメタン中でのＨＮＯ３とＨ２ＳＯ４との混合物による６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩のニトロ化により調製される。６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸は、精製することなく対応するアシルクロリドの調製に使用される。
【0015】
過去数年間、種々の規制当局が、有効医薬成分（ＡＰＩ）中の純度要件及び不純物の特定に重点を置いてきた。現在、原薬以外に、医薬品の有効性及び安全性に影響を及ぼす可能性のある不純物は、いずれも有機物質と考えられている。したがって、各不純物の特定及び不純物の定量、特に、突然変異原性についての構造的警戒を有する不純物の定量は、必須の規制要件となっている。加えて、この製品は、医薬用途が意図されているため、有効成分の合成に使用することができる工業的に許容し得る試薬、溶媒、触媒等の範囲は、医薬産業上許容されるものに限定される。
【0016】
式（Ｉ）で示される化合物は、油であり、その大量精製は、結晶化することができないため困難であり、したがって、不純物の存在は、大規模製造にとって重要な問題である。不純物の主な発生源は、合成の中間体及び副生成物であるため、中間体の純度及び反応条件の制御は、薬学的に許容し得る純度を有する最終生成物を得るための重要な要件である。
【0017】
まとめると、式（Ｉ）で示される化合物の調製のための先行技術の方法は、幾つかの欠点を有する。例えば、６－ブロモヘキサノイルクロリドの使用及び反応条件により、副生成物であるビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））が形成される。この副生成物は、統計に基づく方法と規制当局により要求される専門家の規則に基づく方法との両方に基づいて、細菌のｉｎ ｖｉｔｒｏ変異原性について陽性であると予測される。中間体である硝酸－アルキルカルボン酸クロリドの調製又はボロナート保護形態にあるビマトプロストの１５－（６－ブロモヘキサノイル）エステル（化合物（ＸＩ））のニトロ化のための硝酸銀の使用により、大量の硝酸銀廃水の管理がもたらされ、更に、有効医薬成分中の金属含量は、特定の許容基準を満たさなければならない。
【0018】
このため、高純度のヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（化合物（Ｉ））を良好な収率で提供する、工業的に実行可能な方法を開発する必要がある。
【課題を解決するための手段】
【0019】
化合物（Ｉ）を、ボロナート保護形態にあるビマトプロスト（化合物（ＩＩ））を６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドとカップリングさせることにより効率的に調製することができる。６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドは、カプロラクトンをアルカリ金属水酸化物溶液と開環反応させ、続けて、６－ヒドロキシヘキサン酸アルカリ金属塩を、ＨＮＯ３とＨ２ＳＯ４との混合物を使用してニトロ化して、６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸をもたらすことにより調製される。６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸は、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドに変換される。６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸及び６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドは、更に精製することなく使用される。しかしながら、本出願人により行われた実験から、この方法を使用して調製された化合物（Ｉ）は、「二量体不純物」であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））
を含有することを示された。
【化4】
を含有することを示された。
【0020】
化合物（Ｉ）及び化合物（ＸＩＩ）は、クロマトグラフィーにおいて類似する極性を有するため、化合物（ＸＩＩ）を除去するには、プロセスの収率を低下させる反復精製が必要である。
【0021】
化合物（ＸＩＩ）は、６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサノイルクロリド（化合物（ＩＶｂ））がカップリング工程中に化合物（ＩＩ）と反応すると形成される。ＨＮＯ３とＨ２ＳＯ４との混合物を使用して行われる６－ヒドロキシヘキサン酸アルカリ塩のニトロ化の酸性反応条件により、６－［６－ヒドロキシヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸不純物の形成がもたらされ、この不純物は、ＨＮＯ３の存在下で、硝酸誘導体である６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩｂ））
に変換されることが見出された。
【化5】
に変換されることが見出された。
【0022】
したがって、何ら精製することなくニトロ化反応の粗生成物を塩素化剤と反応させると、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）及び６－［６－ヒドロキシヘキサノイル］オキシ｝ヘキサノイルクロリド（ＩＶｂ）：
の形成がもたらされる。
【化6】
の形成がもたらされる。
【0023】
化合物（Ｉ）を高収率かつ高純度で得るための重要な要因は、高純度の６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸中間体（ＶＩＩａ）
の使用であることが見出された。この中間体は、逆相クロマトグラフィーを使用して、ニトロ化反応の粗生成物を精製することにより得ることができる。
【化7】
の使用であることが見出された。この中間体は、逆相クロマトグラフィーを使用して、ニトロ化反応の粗生成物を精製することにより得ることができる。
【0024】
本発明は、安全レベル未満の量の予測遺伝毒性不純物であるビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（Ｘ）及び０．１%w/w未満の量の「二量体不純物」であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサノイン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））を含有する、ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（化合物（Ｉ））を高収率で得ることを可能にする、大規模製造に適した方法を提供する。
【0025】
「安全レベル量」は、慢性処置のための１．５μg/日の毒性学的懸念の閾値（ＴＴＣ）許容摂取量に従って計算される。
【0026】
更に、本発明は、高純度の式（ＶＩＩａ）
で示される６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸中間体の調製のための方法に関する。
【化8】
で示される６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸中間体の調製のための方法に関する。
【発明を実施するための形態】
【0027】
本発明の説明
本発明の目的は、式（Ｉ）：
で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルの調製のための方法であって、下記工程：
１）化合物（ＩＩ）：
を６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）
と、遊離型の４－ジメチルアミノピリジンの存在下で反応させて、化合物（ＩＩＩ）
を得る工程と、
２）化合物（ＩＩＩ）のボロナート保護基を除去して、式（Ｉ）で示される化合物を得る工程と、
３）化合物（Ｉ）を精製する工程とを含み、
６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）は、下記工程：
４）２－カプロラクトン（Ｖ）：
をＫＯＨ、ＮａＯＨおよびＬｉＯＨから選択される無機塩基と反応させて、式（ＶＩ）：
［式中、Ｍは、Ｋ、Ｎａ又はＬｉである］
で示される６－ヒドロキシヘキサン酸塩を得る工程と、
５）式（ＶＩ）で示される化合物をＨＮＯ３とＨ２ＳＯ４との混合物によりニトロ化して、６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）
を得る工程と、
（得られた生成物（ＶＩＩａ）は、１%w/wの量の副生成物である６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（ＶＩＩｂ）
を含有することができる）
６）水中のギ酸（Ｈ２Ｏ＋ＨＣＯＯＨ）及びアセトニトリルを溶出液として使用する逆相クロマトグラフィーにより、このニトロ化混合物を精製して、化合物（ＶＩＩｂ）をＨＰＬＣ検出限界未満（＜０．０５％）の含量で有する、純粋な式（ＶＩＩａ）で示される６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸を得る工程と、
７）純粋な６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）を塩素化剤と反応させて、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）を得る工程とを含む方法により調製されることを特徴とする、方法である。
本発明の目的は、式（Ｉ）：
【化9】
で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルの調製のための方法であって、下記工程：
１）化合物（ＩＩ）：
【化10】
を６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）
【化11】
と、遊離型の４－ジメチルアミノピリジンの存在下で反応させて、化合物（ＩＩＩ）
【化12】
を得る工程と、
２）化合物（ＩＩＩ）のボロナート保護基を除去して、式（Ｉ）で示される化合物を得る工程と、
３）化合物（Ｉ）を精製する工程とを含み、
６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）は、下記工程：
４）２－カプロラクトン（Ｖ）：
【化13】
をＫＯＨ、ＮａＯＨおよびＬｉＯＨから選択される無機塩基と反応させて、式（ＶＩ）：
【化14】
［式中、Ｍは、Ｋ、Ｎａ又はＬｉである］
で示される６－ヒドロキシヘキサン酸塩を得る工程と、
５）式（ＶＩ）で示される化合物をＨＮＯ３とＨ２ＳＯ４との混合物によりニトロ化して、６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）
【化15】
を得る工程と、
（得られた生成物（ＶＩＩａ）は、１%w/wの量の副生成物である６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（ＶＩＩｂ）
【化16】
を含有することができる）
６）水中のギ酸（Ｈ２Ｏ＋ＨＣＯＯＨ）及びアセトニトリルを溶出液として使用する逆相クロマトグラフィーにより、このニトロ化混合物を精製して、化合物（ＶＩＩｂ）をＨＰＬＣ検出限界未満（＜０．０５％）の含量で有する、純粋な式（ＶＩＩａ）で示される６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸を得る工程と、
７）純粋な６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）を塩素化剤と反応させて、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）を得る工程とを含む方法により調製されることを特徴とする、方法である。
【0028】
好ましくは、工程７）で得られた６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドを更に精製することなく、工程１）において、式（ＩＩ）で示される化合物と直接反応させる。
【0029】
工程１）を０℃～室温の範囲の温度で行い、好ましくは、メチルtertブチルエーテル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド又はジクロロメタンから選択される非プロトン性有機溶媒中で行うことが好ましい。最も好ましくは、有機溶媒は、メチルtertブチルエーテルである。遊離型の４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）は、ＤＭＡＰが樹脂に結合していないことを意味する。
【0030】
化合物（ＩＩ）と６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）とのモル比は、好ましくは、１：１．４～１：１．６の範囲である。
【0031】
化合物（ＩＩ）と４－ジメチルアミノピリジンとのモル比は、好ましくは、１：２．０～１：２．４の範囲である。
【0032】
工程２）において、ボロナート保護基の除去を好ましくは、１７℃～２４℃の温度でメタノールを使用して行う。
【0033】
工程４）において、使用される無機塩基は、好ましくは、水酸化カリウムである。
【0034】
工程４）を好ましくは、メタノール、エタノール又はイソプロパノール、最も好ましくは、メタノールから選択される溶媒中で行う。
【0035】
工程５）及び工程７）をジクロロメタン中で行う。
【0036】
工程６）において、水中のギ酸（Ｈ２Ｏ＋ＨＣＯＯＨ）の濃度は、０．１％である。
【0037】
好ましくは、純粋な式（ＶＩＩａ）で示される６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸は、化合物（ＶＩＩａ）を含有する画分をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発させることにより得られる。
【0038】
工程７）で使用される好ましい塩素化剤は、塩化オキサリルである。
【0039】
化合物（ＩＩ）は、ビマトプロストをブチルボロン酸と反応させることにより得られる。好ましくは、この反応を溶媒としてのメチルtertブチルエーテル中で行う。
【0040】
本発明の更なる目的は、以下に記載され、スキームI（スキームで報告される工程の参照符号は、上記報告されているものに対応する）で示される化合物（ＶＩＩａ）の調製のための方法であり、
２－カプロラクトン（Ｖ）をＫＯＨと、メタノール中で反応させて、６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（式（ＶＩ）（式中、Ｍは、カリウムである）で示される化合物）得る工程４）と、
６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩をＨＮＯ３とＨ２ＳＯ４との混合物により、ジクロロメタン中において、好ましくは、約５℃～１０℃、好ましくは、１０℃の温度で反応させて、副生成物である６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（ＶＩＩｂ）を含有する粗製の６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）を得る工程５）と、
６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）と６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（ＶＩＩｂ）とを含有する粗混合物を、好ましくは、溶出液として９０：１０～７５：２５のＨ２Ｏ＋０．１％ＨＣＯＯＨ／アセトニトリルを使用する逆相クロマトグラフィー、例えば、Ｃ１８、２５μ－標準型フラッシュカートリッジ等により精製し、化合物（ＶＩＩａ）を含有する画分をＣＨ２Ｃｌ２で抽出して、ＨＰＬＣ検出限界未満（＜０．０５％）の量の副産物である６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（ＶＩＩｂ）を含有する、純粋な６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）を得る工程６）とを含む、方法である。
２－カプロラクトン（Ｖ）をＫＯＨと、メタノール中で反応させて、６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（式（ＶＩ）（式中、Ｍは、カリウムである）で示される化合物）得る工程４）と、
６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩をＨＮＯ３とＨ２ＳＯ４との混合物により、ジクロロメタン中において、好ましくは、約５℃～１０℃、好ましくは、１０℃の温度で反応させて、副生成物である６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（ＶＩＩｂ）を含有する粗製の６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）を得る工程５）と、
６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）と６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（ＶＩＩｂ）とを含有する粗混合物を、好ましくは、溶出液として９０：１０～７５：２５のＨ２Ｏ＋０．１％ＨＣＯＯＨ／アセトニトリルを使用する逆相クロマトグラフィー、例えば、Ｃ１８、２５μ－標準型フラッシュカートリッジ等により精製し、化合物（ＶＩＩａ）を含有する画分をＣＨ２Ｃｌ２で抽出して、ＨＰＬＣ検出限界未満（＜０．０５％）の量の副産物である６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（ＶＩＩｂ）を含有する、純粋な６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）を得る工程６）とを含む、方法である。
【0041】
上記工程６）で得られた純粋な化合物（ＶＩＩａ）を、工程７）において、純粋な６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸を塩化オキサリルと反応させて、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）を得るのに使用することができる。６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）は、上記されたように、式（Ｉ）で示される化合物を得るための方法において、更に精製することなく使用される。
【0042】
式（Ｉ）で示される化合物を製造する好ましい方法は、スキーム２に示されており、前記好ましい方法は、下記工程：
ビマトプロストをブチルボロン酸（１．１～１．８当量）と、メチルtertブチルエーテル（ＭＴＢＥ）中において、約４０℃の温度で反応させ、ついで、共沸蒸留により水を除去して、ビマトプロストボロナート（ＩＩ）を得る工程１ａ）と、
ビマトプロストボロナート（ＩＩ）を６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）（１．４～１．６当量）と、メチルtertブチルエーテル中において、４－ジメチルアミノピリジン（２．０～２．４当量）の存在下で、０℃～約室温の範囲の温度で反応させて、（１Ｓ，２Ｅ）－３－｛（６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－７［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－（オキソヘプタ－２－エン－１－イル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタ－６－イル｝－１－（２－フェニルエチル）－プロパ－２－エン－１－イル ６－（ニトロオキシ）ヘキサノアート（ＩＩＩ）を得る工程１）と、
（１Ｓ，２Ｅ）－３｛（６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－７［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソヘプタ－２－エン－１－イル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタ－６－イル｝－１－（２－フェニルエチル）－プロパ－２－エン－１－イル ６－（ニトロオキシ）ヘキサノアート（ＩＩＩ）をメタノールと室温で反応させて、保護基を除去し、粗製のヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルを得る工程２）と、
（粗製の反応混合物のＨＰＬＣ定量分析から、約７０％の含量の化合物（Ｉ）、約０．１２％の量のビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））及び０．０５％のＨＰＬＣ検出限界未満の量の二量体不純物であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））が検出される（表１を参照のこと）
クロマトグラフィーにより工程２の粗製の反応混合物を精製して、９８％超の化学純度を有するヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（Ｉ）、約０．１２％の量のビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））及び０．０５％のＨＰＬＣ検出限界未満の量の二量体不純物であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））を得る工程３）とを含む。
ビマトプロストをブチルボロン酸（１．１～１．８当量）と、メチルtertブチルエーテル（ＭＴＢＥ）中において、約４０℃の温度で反応させ、ついで、共沸蒸留により水を除去して、ビマトプロストボロナート（ＩＩ）を得る工程１ａ）と、
ビマトプロストボロナート（ＩＩ）を６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）（１．４～１．６当量）と、メチルtertブチルエーテル中において、４－ジメチルアミノピリジン（２．０～２．４当量）の存在下で、０℃～約室温の範囲の温度で反応させて、（１Ｓ，２Ｅ）－３－｛（６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－７［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－（オキソヘプタ－２－エン－１－イル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタ－６－イル｝－１－（２－フェニルエチル）－プロパ－２－エン－１－イル ６－（ニトロオキシ）ヘキサノアート（ＩＩＩ）を得る工程１）と、
（１Ｓ，２Ｅ）－３｛（６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－７［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソヘプタ－２－エン－１－イル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタ－６－イル｝－１－（２－フェニルエチル）－プロパ－２－エン－１－イル ６－（ニトロオキシ）ヘキサノアート（ＩＩＩ）をメタノールと室温で反応させて、保護基を除去し、粗製のヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルを得る工程２）と、
（粗製の反応混合物のＨＰＬＣ定量分析から、約７０％の含量の化合物（Ｉ）、約０．１２％の量のビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））及び０．０５％のＨＰＬＣ検出限界未満の量の二量体不純物であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））が検出される（表１を参照のこと）
クロマトグラフィーにより工程２の粗製の反応混合物を精製して、９８％超の化学純度を有するヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（Ｉ）、約０．１２％の量のビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））及び０．０５％のＨＰＬＣ検出限界未満の量の二量体不純物であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））を得る工程３）とを含む。
【0043】
【化17】
【化18】
【0044】
本発明の方法の工程の実験手法を以下に詳細に記載する。
【0045】
本発明の更なる目的は、９８％超の化学純度を有し、ビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））を約０．１２％の量で含み、
ビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））を０．０５％未満の量で含む、
式（Ｉ）で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルである。
【化19】
ビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））を０．０５％未満の量で含む、
【化20】
式（Ｉ）で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルである。
【0046】
本発明の別の目的は、式（Ｉ）で示されるヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルと、少なくとも薬学的に許容し得る賦形剤とを含有し、
ここで、ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルは、９８％超の化学純度を有し、約０．１２％の量のビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））及び０．０５％未満の量の二量体不純物であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））を含有する、医薬製剤である。
ここで、ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステルは、９８％超の化学純度を有し、約０．１２％の量のビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））及び０．０５％未満の量の二量体不純物であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））を含有する、医薬製剤である。
【0047】
一般的な合成
６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）の調製
全ての工程を窒素雰囲気下で行う。
６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）の調製
全ての工程を窒素雰囲気下で行う。
【0048】
６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（化合物（ＶＩ））の調製
メタノール中の水酸化カリウム（１当量）の溶液をメタノール中の２－カプロラクトン溶液（１当量）に滴加し、この混合物を約５℃～２０℃に冷却し、添加終了後、１５℃～２０℃で約５時間撹拌し、溶媒を除去し（温度は、４０℃以下である）、粗生成物をメチルtertブチルエーテル中にスラリー化し、６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩をろ過し、メチルtertブチルエーテルで洗浄し、乾燥させる。６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（ＶＩ）を９５％の収率及び９８．５％の純度（１Ｈ－ＮＭＲ及びＨＣｌアッセイ）で得る。
メタノール中の水酸化カリウム（１当量）の溶液をメタノール中の２－カプロラクトン溶液（１当量）に滴加し、この混合物を約５℃～２０℃に冷却し、添加終了後、１５℃～２０℃で約５時間撹拌し、溶媒を除去し（温度は、４０℃以下である）、粗生成物をメチルtertブチルエーテル中にスラリー化し、６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩をろ過し、メチルtertブチルエーテルで洗浄し、乾燥させる。６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（ＶＩ）を９５％の収率及び９８．５％の純度（１Ｈ－ＮＭＲ及びＨＣｌアッセイ）で得る。
【0049】
６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩａ））の調製
６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（ＶＩ）（１当量）を０℃～５℃に冷却されたジクロロメタン中のＨＮＯ３（４．６当量）とＨ２ＳＯ４（３．１当量）との混合物に、１０℃未満の温度を保ちながら、窒素下で約３０分間かけて少しずつ加え、得られた混合物を０℃～１０℃で２～３時間撹拌し、１Ｈ－ＮＭＲ分析により反応の終了をモニターし、この混合物を０℃～５℃の温度に冷却し、飽和塩化ナトリウム水溶液を約２０分間かけて滴加する。この反応混合物を１０℃未満の温度に維持し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去して、６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）を８６～８８％の収率及び９６．２％のＨＰＬＣ純度で得る。主な不純物は、二量体化合物である６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩｂ））
（約１％）である。
６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（ＶＩ）（１当量）を０℃～５℃に冷却されたジクロロメタン中のＨＮＯ３（４．６当量）とＨ２ＳＯ４（３．１当量）との混合物に、１０℃未満の温度を保ちながら、窒素下で約３０分間かけて少しずつ加え、得られた混合物を０℃～１０℃で２～３時間撹拌し、１Ｈ－ＮＭＲ分析により反応の終了をモニターし、この混合物を０℃～５℃の温度に冷却し、飽和塩化ナトリウム水溶液を約２０分間かけて滴加する。この反応混合物を１０℃未満の温度に維持し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去して、６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）を８６～８８％の収率及び９６．２％のＨＰＬＣ純度で得る。主な不純物は、二量体化合物である６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩｂ））
【化21】
（約１％）である。
【0050】
粗製の６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩａ））（１当量）をPurezza（登録商標）-SpheraPlus Flash Cartridges－Ｃ１８、２５μ－標準型フラッシュカートリッジ、４８ｇにロードし、９０：１０～７５：２５でのＨ２Ｏ＋０．１％ ＨＣＯＯＨ／アセトニトリルで溶出する。化合物（ＶＩＩａ）を含有する画分を集め、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、乾燥させ、溶媒を蒸発させて、純粋な６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸を８０～９０％の収率で得る。化合物（ＶＩＩａ）のＨＰＬＣ純度は、９９％であり、化合物（ＶＩＩｂ）の含量は、０．０５％未満である。
【0051】
６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（化合物（ＩＶａ））の調製
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド及び塩化オキサリルを、溶液の温度を０℃～５℃に保ちながら、ジクロロメタン中の６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸の溶液に１時間滴加し、ついで、この混合物を１５℃～３０℃で２４時間撹拌し、溶媒を蒸発させて、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドを８８～９７%w/wの収率で得る。これを更に精製することなく使用する。
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド及び塩化オキサリルを、溶液の温度を０℃～５℃に保ちながら、ジクロロメタン中の６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸の溶液に１時間滴加し、ついで、この混合物を１５℃～３０℃で２４時間撹拌し、溶媒を蒸発させて、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリドを８８～９７%w/wの収率で得る。これを更に精製することなく使用する。
【0052】
ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（化合物（Ｉ））の調製
全ての工程を窒素雰囲気下で行う。
全ての工程を窒素雰囲気下で行う。
【0053】
ビマトプロストをメチルtertブチルエーテルに加え、得られた溶液を約１５℃～１８℃に冷却し、続けて、ｎ－ブチルボロン酸（１．１１～１．１８当量）を一度に加え、この混合物を４０℃で約１～１．５時間撹拌する。反応の終了を１ＨＮＭＲ分析によりモニターし、この反応混合物を約２０℃～２５℃に冷却し、ろ過し、形成された水を４０℃以下の温度で、含水量が０．２５％以下になるまで、メチルtertブチルエーテルの共沸蒸留により除去して、粗製のビマトプロストボロナート（化合物（ＩＩ））を与える。これを更に精製することなく、次の工程で使用する。
【0054】
粗製のビマトプロストボロナート（化合物（ＩＩ））をメチルtertブチルエーテルに加え、得られた溶液を約０℃～５℃に冷却し、４－ジメチルアミノピリジン（約２．１～２．３当量）を加え、メチルtertブチルエーテルに溶解させた６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（ＩＶａ）（１．５当量）を、混合物の温度を約０℃～５℃に保ちながら滴加する。添加後、この混合物を約０℃～５℃で最長４時間撹拌し、ついで、１５℃～２０℃まで一晩撹拌し、反応の終了をＨＰＬＣ分析によりモニターし、（１Ｓ，２Ｅ）－３－｛（６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－７［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソヘプタ－２－エン－１－イル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタ－６－イル｝－１－（２－フェニルエチル）－プロパ－２－エン－１－イル－６－（ニトロオキシ）ヘキサノアート（化合物（ＩＩＩ））を標準的な後処理法により単離する（後処理の例を実施例１に記載する）。
【0055】
（１Ｓ，２Ｅ）－３－｛（６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－７［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソヘプタ－２－エン－１－イル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタ－６－イル｝－１－（２－フェニルエチル）－プロパ－２－エン－１－イル－６－（ニトロオキシ）ヘキサノアート（化合物（ＩＩＩ））をメタノール中に溶解させ、得られた溶液を１７℃～２５℃で約１８時間撹拌し、化合物（ＩＩＩ）の化合物（Ｉ）への変換を１ＨＮＭＲによりモニターする。反応が停止した場合、この混合物を蒸発させ、完全に変換するまで、新たなメタノールに再溶解させる。ついで、この反応混合物を真空下、４０℃未満の温度で濃縮し、粗製のヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（化合物（Ｉ））を標準的な後処理法により単離する。
【0056】
粗反応混合物のＨＰＬＣ定量分析により、約７０％の含量の化合物（Ｉ）、約０．１２％の量のビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））及び０．０５％のＨＰＬＣ検出限界未満の量の二量体不純物（化合物（ＸＩＩ））が検出される（表１を参照のこと）。
【0057】
粗反応混合物を、シリカゲルカラム及びジクロロメタンとメタノールとの混合溶媒を使用するカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物（Ｉ）をビマトプロストに対して６０%w/w超の全収率で得る。
【0058】
化合物（Ｉ）のＨＰＬＣ定量分析純度は、９８％超であり、ビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））の量は、０．１５％未満であり、二量体不純物（化合物（ＸＩＩ））の含量は、０．０５％未満である。
【0059】
本発明の方法は、副生成物、特に、（Ｓ，Ｅ）－１－（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－（（Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソヘプタ－２－エニル）－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル）－５－フェニルペンタ－１－エン－３－イル ６－クロロヘキサノアート（化合物（Ｘ））及びビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステルの（化合物（ＸＩＩ））（この化合物は、細菌のｉｎ ｖｉｔｒｏ変異原性について陽性であると予測される）を減少した量で有する、ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（Ｉ）を高収率かつ高純度で提供する。
【0060】
上記利点により、本発明の方法は、工業規模に容易に移行可能な費用効果の高い方法となる。
【実施例】
【0061】
実験例
以下に記載される全ての合成工程を窒素雰囲気下で行った。
以下に記載される全ての合成工程を窒素雰囲気下で行った。
【0062】
実施例１
ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（化合物（Ｉ））の合成
６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（化合物（ＩＶ））の合成
工程１：６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（化合物（ＶＩ））の合成
メタノール（１０ml）中の水酸化カリウム（１．９８ｇ、１当量）の溶液を１５℃～２０℃に冷却しながら調製し、メタノール（６ml）中の３．６５ｇ ２－カプロラクトン（１当量）の溶液に、５℃～２０℃で０．５時間以内に加えた。この混合物を１５℃～２０℃で４．５時間撹拌した。この反応混合物を真空下（４０℃以下の温度）で濃縮して、粗製の６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（６．１０ｇ）を与えた。この粗生成物をメチルtertブチルエーテル（１０ml）中において、２０℃～２５℃で４時間再スラリー化し、ろ過し、メチルtertブチルエーテル（２×２５ml）で洗浄し、真空下（４０℃以下の温度）で乾燥させて、６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（５．１６ｇ）を９３．７％の収率で得た。融点２０８℃。
ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（化合物（Ｉ））の合成
６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（化合物（ＩＶ））の合成
工程１：６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（化合物（ＶＩ））の合成
メタノール（１０ml）中の水酸化カリウム（１．９８ｇ、１当量）の溶液を１５℃～２０℃に冷却しながら調製し、メタノール（６ml）中の３．６５ｇ ２－カプロラクトン（１当量）の溶液に、５℃～２０℃で０．５時間以内に加えた。この混合物を１５℃～２０℃で４．５時間撹拌した。この反応混合物を真空下（４０℃以下の温度）で濃縮して、粗製の６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（６．１０ｇ）を与えた。この粗生成物をメチルtertブチルエーテル（１０ml）中において、２０℃～２５℃で４時間再スラリー化し、ろ過し、メチルtertブチルエーテル（２×２５ml）で洗浄し、真空下（４０℃以下の温度）で乾燥させて、６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（５．１６ｇ）を９３．７％の収率で得た。融点２０８℃。
【0063】
工程２：６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩａ））の合成
発煙ＨＮＯ３（４．６当量）を濃Ｈ２ＳＯ４（３．１相当）に、０℃～５℃の温度で１４分かけて加え、ついで、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ml）を０℃～５℃の温度で１２分かけて加えた。６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（１０．１３ｇ、１当量）を１０℃未満の温度で２８分かけて少量ずつ加えた。この混合物を０℃～１０℃で２．２時間撹拌し、この反応を１Ｈ－ＮＭＲでモニターしたところ、９９．９％の変換を示した。この混合物を０℃～５℃に冷却し、飽和塩化ナトリウム水溶液を１０℃以下の温度で１７分以内に注意深く添加した。ろ過後、有機層をデカントし、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下（４０℃以下の温度）で濃縮して、９．１５ｇ ６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（収率８７．７％）を９６．２％のＨＰＬＣ純度及び０．７５％の含量の６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩｂ））で得た。
発煙ＨＮＯ３（４．６当量）を濃Ｈ２ＳＯ４（３．１相当）に、０℃～５℃の温度で１４分かけて加え、ついで、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ml）を０℃～５℃の温度で１２分かけて加えた。６－ヒドロキシヘキサン酸カリウム塩（１０．１３ｇ、１当量）を１０℃未満の温度で２８分かけて少量ずつ加えた。この混合物を０℃～１０℃で２．２時間撹拌し、この反応を１Ｈ－ＮＭＲでモニターしたところ、９９．９％の変換を示した。この混合物を０℃～５℃に冷却し、飽和塩化ナトリウム水溶液を１０℃以下の温度で１７分以内に注意深く添加した。ろ過後、有機層をデカントし、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下（４０℃以下の温度）で濃縮して、９．１５ｇ ６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（収率８７．７％）を９６．２％のＨＰＬＣ純度及び０．７５％の含量の６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩｂ））で得た。
【0064】
工程３：６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩｂ））を含有する粗製の６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（化合物（ＶＩＩａ））の精製
１．５ｇ 工程２で得られた粗製の６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）をPurezza（登録商標）-SpheraPlus Flash Cartridges－Ｃ１８、２５μ－標準型フラッシュカートリッジ、４８ｇにロードし、９０：１０～７５：２５でのＨ２Ｏ＋０．１％ ＨＣＯＯＨ／アセトニトリルで溶出した。７８：２２で溶出された化合物（ＶＩＩａ）を含有する画分を集め、ついで、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１５０mL）で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下、４０℃未満の温度で濃縮して、９９．５％超のＨＰＬＣ純度及び０．０５％未満の量の化合物（ＶＩＩｂ）を有する、１．０４ｇ ６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（収率６９％）を与えた。
１．５ｇ 工程２で得られた粗製の６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（ＶＩＩａ）をPurezza（登録商標）-SpheraPlus Flash Cartridges－Ｃ１８、２５μ－標準型フラッシュカートリッジ、４８ｇにロードし、９０：１０～７５：２５でのＨ２Ｏ＋０．１％ ＨＣＯＯＨ／アセトニトリルで溶出した。７８：２２で溶出された化合物（ＶＩＩａ）を含有する画分を集め、ついで、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１５０mL）で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下、４０℃未満の温度で濃縮して、９９．５％超のＨＰＬＣ純度及び０．０５％未満の量の化合物（ＶＩＩｂ）を有する、１．０４ｇ ６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（収率６９％）を与えた。
【0065】
工程４：６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（化合物（ＩＶａ））の合成
６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（２．６１ｇ、１当量）をジクロロメタン（１５ml）中に溶解させ、窒素下で０℃～５℃に冷却した。ついで、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（０．１６ml）及び塩化オキサリル（１．９３ｇ）を０℃～５℃で３４分以内に加えた。この反応混合物を０℃～５℃で３．５時間、ついで、１５℃～２０℃で１４時間撹拌した。ついで、この反応混合物を真空下で濃縮し（温度は、４０℃以下）、ジクロロメタンと共蒸発させて、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（化合物（ＩＶａ））（２．８ｇ）を９７％の収率で得た。
６－（ニトロオキシ）ヘキサン酸（２．６１ｇ、１当量）をジクロロメタン（１５ml）中に溶解させ、窒素下で０℃～５℃に冷却した。ついで、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（０．１６ml）及び塩化オキサリル（１．９３ｇ）を０℃～５℃で３４分以内に加えた。この反応混合物を０℃～５℃で３．５時間、ついで、１５℃～２０℃で１４時間撹拌した。ついで、この反応混合物を真空下で濃縮し（温度は、４０℃以下）、ジクロロメタンと共蒸発させて、６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（化合物（ＩＶａ））（２．８ｇ）を９７％の収率で得た。
【0066】
工程５：（Ｚ）－７－［（１Ｓ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－６－［（（Ｅ，３Ｓ）－３－ヒドロキシ－５－フェニル－ペンタ－１－エニル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１）オクタン－７－イル］－Ｎ－エチル－ヘプタ－５－エナミド（化合物（ＩＩ））の合成
ビマトプロスト（２．３ｇ、１当量）をメチルtertブチルエーテル（３０ml）に溶解させ、ブチルボロン酸（０．６２ｇ、１．１３当量）を加えた。この混合物を４０℃に１時間加熱した。この反応を変換率が９７％になるまで、１ＨＮＭＲによりモニターした。
ビマトプロスト（２．３ｇ、１当量）をメチルtertブチルエーテル（３０ml）に溶解させ、ブチルボロン酸（０．６２ｇ、１．１３当量）を加えた。この混合物を４０℃に１時間加熱した。この反応を変換率が９７％になるまで、１ＨＮＭＲによりモニターした。
【0067】
この反応混合物をメチルtertブチルエーテル（１０ml）ですすぎ、この混合物を、共沸蒸留のために、真空下、約４０℃の温度で加熱した。（Ｚ）－７－［（１Ｓ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－６－［（（Ｅ，３Ｓ）－３－ヒドロキシ－５－フェニル－ペンタ－１－エニル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１）オクタン－７－イル］－Ｎ－エチル－ヘプタ－５－エナミド（化合物（ＩＩ））の含水率が、０．２５％以下になるまで、メチルtertブチルエーテルによるすすぎと共沸蒸留とを続けた。化合物（ＩＩ）を定量収量（２．８４ｇ）で得た。
【0068】
工程６：（１Ｓ，２Ｅ）－３－｛（６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－７［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソヘプタ－２－エン－１－イル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタ－６－イル｝－１－（２－フェニルエチル）－プロパ－２－エン－１－イル ６－（ニトロオキシ）ヘキサノアート（化合物（ＩＩＩ））の合成
（Ｚ）－７－［（１Ｓ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－６－［（（Ｅ，３Ｓ）－３－ヒドロキシ－５－フェニル－ペンタ－１－エニル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１）オクタン－７－イル］－Ｎ－エチル－ヘプタ－５－エナミド（化合物（ＩＩ）（３．２１ｇ、１当量）をメチルtertブチルエーテル（３０ml）中に溶解させ、０℃～５℃に冷却した。４－ジメチルアミノピリジン（１．８５ｇ、２．２７当量）を一度に加えた。メチルtertブチルエーテル（５ml）中の６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（化合物（ＩＶａ））（１．９６、１．５当量）の溶液を０℃～５℃で１時間以内に滴加した。０℃～５℃で２４分間及び１５°～２０℃で１４．５時間攪拌後、この反応混合物を０℃～５℃で冷却し、脱イオン水を１５℃の最高温度で２０分以内に加えた。
（Ｚ）－７－［（１Ｓ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－６－［（（Ｅ，３Ｓ）－３－ヒドロキシ－５－フェニル－ペンタ－１－エニル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１）オクタン－７－イル］－Ｎ－エチル－ヘプタ－５－エナミド（化合物（ＩＩ）（３．２１ｇ、１当量）をメチルtertブチルエーテル（３０ml）中に溶解させ、０℃～５℃に冷却した。４－ジメチルアミノピリジン（１．８５ｇ、２．２７当量）を一度に加えた。メチルtertブチルエーテル（５ml）中の６－（ニトロオキシ）ヘキサノイルクロリド（化合物（ＩＶａ））（１．９６、１．５当量）の溶液を０℃～５℃で１時間以内に滴加した。０℃～５℃で２４分間及び１５°～２０℃で１４．５時間攪拌後、この反応混合物を０℃～５℃で冷却し、脱イオン水を１５℃の最高温度で２０分以内に加えた。
【0069】
この混合物を５分間攪拌した。水層を廃棄した。有機層を１N 塩酸溶液、ついで、脱イオン水、最後に、ブラインで洗浄した。
【0070】
有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮して、（１Ｓ，２Ｅ）－３－｛（６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－７［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソヘプタ－２－エン－１－イル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタ－６－イル｝－１－（２－フェニルエチル）－プロパ－２－エン－１－イル ６－（ニトロキシ）ヘキサノエアート（化合物（ＩＩＩ））（４．１ｇ，収率９４％）を与えた。
【0071】
工程７：ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（Ｉ）（化合物（Ｉ））の合成
（１Ｓ、２Ｅ）－３－｛（６Ｒ、７Ｒ）－３－ブチル－７［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソヘプタ－２－エン－１－イル］－２、４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタ－６－イル｝－１－（２－フェニルエチル）－プロパ－２－エン－１－イル ６－（ニトロキシ）ヘキサノアート（化合物（ＩＩＩ））（４ｇ 粗製物、１当量）をメタノール（３０ml）中に溶解させ、得られた溶液を１Ｈ－ＮＭＲにより反応をモニターしながら、室温で２４時間撹拌した。ついで、メタノールを真空下、３５℃～４０℃で除去した。残留物をメチルtertブチルエーテルに溶解させ、脱イオン水、ついで、ブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下、４０℃未満の温度で濃縮して、粗反応混合物（３．８ｇ）を与えた。ＨＰＬＣ（％ 面積）逆相定量分析後、この混合物は、この混合物中の化合物（Ｉ）の量が７３％であり、ビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））の含量が０．１１％であり、二量体不純物であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））の含量が０．０５％未満であることを示した（表１を参照のこと）。
（１Ｓ、２Ｅ）－３－｛（６Ｒ、７Ｒ）－３－ブチル－７［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソヘプタ－２－エン－１－イル］－２、４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタ－６－イル｝－１－（２－フェニルエチル）－プロパ－２－エン－１－イル ６－（ニトロキシ）ヘキサノアート（化合物（ＩＩＩ））（４ｇ 粗製物、１当量）をメタノール（３０ml）中に溶解させ、得られた溶液を１Ｈ－ＮＭＲにより反応をモニターしながら、室温で２４時間撹拌した。ついで、メタノールを真空下、３５℃～４０℃で除去した。残留物をメチルtertブチルエーテルに溶解させ、脱イオン水、ついで、ブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下、４０℃未満の温度で濃縮して、粗反応混合物（３．８ｇ）を与えた。ＨＰＬＣ（％ 面積）逆相定量分析後、この混合物は、この混合物中の化合物（Ｉ）の量が７３％であり、ビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））の含量が０．１１％であり、二量体不純物であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））の含量が０．０５％未満であることを示した（表１を参照のこと）。
【0072】
残留物を、溶出液として９５：５のジクロロメタン／メタノールを使用するシリカゲルカラムでクロマトグラフィーにかけた。画分をＴＬＣによりモニターし、純粋画分のみを混合し、真空下、４０℃以下の温度で濃縮して、化合物（Ｉ）を９８％超のＨＰＬＣ純度で生成した。ビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））の含量は、０．１１％であり、二量体不純物であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））の含量は、０．０５％未満であった。
【0073】
実施例２（比較例）
国際公開第２００９／１３６２８１号に開示されている手法（以下のスキーム３）に従ったヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（化合物（Ｉ））の合成
工程Ａ：（Ｚ）－７－［（１Ｓ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－６－［（（Ｅ，３Ｓ）－３－ヒドロキシ－５－フェニル－ペンタ－１－エニル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１）オクタン－７－イル］－Ｎ－エチル－ヘプタ－５－エナミド（化合物（ＩＩ））の調製
ブチルボロン酸（１．１２９当量）をジクロロメタン（１６ml）中のビマトプロスト（１ｇ、１当量）の溶液に加えた。この混合物を４０℃に１時間加熱し、１Ｈ－ＮＭＲにより反応の進行をモニターした。溶媒を減圧下で２時間除去した。ジクロロメタン（１６ml）を加え、この混合物を４０℃に更に１時間加熱した。溶媒を加圧下で４０分間除去した。ジクロロメタン（１６ml）を加え、この混合物を４０℃に１６時間加熱した。溶媒を蒸発させ、粗生成物を、高真空下、４０℃で３時間乾燥させ、化合物（ＩＩ）を定量収率で生成した。これを何ら更に精製することなく、次の工程で使用した。
ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３８［Ｍ＋Ｈ］＋
国際公開第２００９／１３６２８１号に開示されている手法（以下のスキーム３）に従ったヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（化合物（Ｉ））の合成
工程Ａ：（Ｚ）－７－［（１Ｓ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ）－３－ブチル－６－［（（Ｅ，３Ｓ）－３－ヒドロキシ－５－フェニル－ペンタ－１－エニル］－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１）オクタン－７－イル］－Ｎ－エチル－ヘプタ－５－エナミド（化合物（ＩＩ））の調製
ブチルボロン酸（１．１２９当量）をジクロロメタン（１６ml）中のビマトプロスト（１ｇ、１当量）の溶液に加えた。この混合物を４０℃に１時間加熱し、１Ｈ－ＮＭＲにより反応の進行をモニターした。溶媒を減圧下で２時間除去した。ジクロロメタン（１６ml）を加え、この混合物を４０℃に更に１時間加熱した。溶媒を加圧下で４０分間除去した。ジクロロメタン（１６ml）を加え、この混合物を４０℃に１６時間加熱した。溶媒を蒸発させ、粗生成物を、高真空下、４０℃で３時間乾燥させ、化合物（ＩＩ）を定量収率で生成した。これを何ら更に精製することなく、次の工程で使用した。
ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３８［Ｍ＋Ｈ］＋
【0074】
工程Ｂ：（Ｓ，Ｅ）－１－（（１Ｓ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｓ）－３－ブチル－７－（（Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソヘプタ－２－エン－１－イル）－２，４－ジオキサ－３－ボラビシクロ［３．２．１］オクタン－６－イル）－５－フェニルペンタ－１－エン－３－イル ６－ブロモヘキサノアート（化合物（ＸＩ））の合成
４－ジメチルアミノピリジン（１．１当量）及び６－ブロモヘキサノイルクロリド（１．１５当量）を０～５℃に冷却したジクロロメタン（１５．３ml）中の化合物（ＩＩ）（０．８ｇ、１当量）の溶液に加えた。この混合物を０℃～５℃で０．５時間及び２０℃～２５℃で１６時間撹拌した。
４－ジメチルアミノピリジン（１．１当量）及び６－ブロモヘキサノイルクロリド（１．１５当量）を０～５℃に冷却したジクロロメタン（１５．３ml）中の化合物（ＩＩ）（０．８ｇ、１当量）の溶液に加えた。この混合物を０℃～５℃で０．５時間及び２０℃～２５℃で１６時間撹拌した。
【0075】
４－ジメチルアミノピリジン（０．２５当量）及び６－ブロモヘキサノイルクロリド（０．２５当量）を加え、この混合物を更に１９時間撹拌した。この反応を変換が完了するまで、１Ｈ－ＮＭＲによりモニターした。この混合物をジクロロメタン（１５．３ml）で希釈し、有機溶液を脱イオン水（６．２５ml）及びブライン（６．２５ml）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、化合物（ＸＩ）を淡黄色の油状物として与えた（定量収率として計算）。これを更に精製することなく、次の工程で使用した。
【0076】
工程Ｃ：ヘキサン酸，６－（ニトロオキシ）－，（１Ｓ，２Ｅ）－３－［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）－２－［（２Ｚ）－７－（エチルアミノ）－７－オキソ－２－ヘプテン－１－イル］－３，５－ジヒドロキシシクロペンチル］－１－（２－フェニルエチル）－２－プロペン－１－イルエステル（化合物（Ｉ））の合成
硝酸銀（３．７２当量）をアセトニトリル（９．４ml）中の化合物（ＶＩＩＩ）（０．８ｇ、１当量）の溶液に加えた。この混合物を２０℃～２５℃で１８時間撹拌した。変換をＤＭＳＯ中での１Ｈ－ＮＭＲによりモニターした。
硝酸銀（３．７２当量）をアセトニトリル（９．４ml）中の化合物（ＶＩＩＩ）（０．８ｇ、１当量）の溶液に加えた。この混合物を２０℃～２５℃で１８時間撹拌した。変換をＤＭＳＯ中での１Ｈ－ＮＭＲによりモニターした。
【0077】
硝酸銀（０．５当量）を加え、ついで、この混合物をＨＰＬＣ分析が９９．７％の変換を示すまで、更に２０時間撹拌した。
【0078】
この混合物をWhatmanフィルターでろ過した。ろ液を真空下で濃縮した。残留物を酢酸エチル（３０ml）に溶解させた。有機相を脱イオン水（５ml）及びブライン（５ml）で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた後、層を真空下で濃縮した。残留物を、溶出液として９５：５のジクロロメタン／メタノールを使用するシリカゲルカラムでクロマトグラフィーにかけた。画分をＴＬＣによりモニターし、純粋な画分を混合し、真空下、４０℃以下の温度で濃縮して、４．２７％ ビマトプロストを伴う、８６％の全収率で化合物（Ｉ）を生成した。
【0079】
ＨＰＬＣ（％ 面積）逆相定量分析により、クロマトグラフィー後の化合物（Ｉ）の純度が、７７％であり、ビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステル（化合物（Ｘ））の含量が、８．３４％であることが示された。
【0080】
【表1】
【0081】
表１に、本発明の方法（実施例１）及び国際公開第２００９／１３６２８１号に開示されている方法（実施例２）による化合物（Ｉ）及び化合物（Ｉ）の調製中に形成された主な不純物のＨＰＬＣ定量分析の結果を報告する。
【0082】
化合物（Ｘ）は、ビマトプロストの１５－（６－クロロヘキサノイル）エステルであり、これは、細菌のｉｎ ｖｉｔｒｏ変異原性について陽性であると予測される。結果から、本発明の方法は、０．１１％の含量の化合物（Ｘ）及び０．０５％の検出限界未満の含量の「二量体不純物」であるビマトプロストの６－｛［６－（ニトロオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ヘキサン酸エステル（化合物（ＸＩＩ））を伴う、化合物（Ｉ）を提供する。先行技術に開示された方法は、より低い化学純度及び８．３４％の含量、すなわち、本発明の方法で形成される化合物（Ｘ）の量より３０倍超多い含量の化合物（Ｘ）を有する化合物（Ｉ）をもたらす。
【0083】
結果から、本発明の方法は、先行技術に記載された方法を上回る改善を示すことが実証される。
【0084】
【化22】
【国際調査報告】