特表 2022-544613 デング熱及びＡ型肝炎を予防するための方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-10-19

(54)【発明の名称】デング熱及びＡ型肝炎を予防するための方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/12 20060101AFI20221012BHJP

   A61K 39/39 20060101ALI20221012BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20221012BHJP

   A61K 39/125 20060101ALI20221012BHJP

   C12N 7/01 20060101ALN20221012BHJP

【ＦＩ】

A61K39/12 ZNA

A61K39/39

A61P31/14

A61K39/125

C12N7/01

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022509723

(86)(22)【出願日】2020-03-04

(85)【翻訳文提出日】2022-04-13

(86)【国際出願番号】 US2020020991

(87)【国際公開番号】W WO2021034349

(87)【国際公開日】2021-02-25

(31)【優先権主張番号】PID2019-07241

(32)【優先日】2019-08-16

(33)【優先権主張国・地域又は機関】ID

(31)【優先権主張番号】19195692.9

(32)【優先日】2019-09-05

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(31)【優先権主張番号】16/561,953

(32)【優先日】2019-09-05

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】PCT/US2019/049749

(32)【優先日】2019-09-05

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＰＬＵＲＯＮＩＣ

２．ＴＷＥＥＮ

３．プルロニック

(71)【出願人】

【識別番号】507028479

【氏名又は名称】タケダ ワクチン，インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100080791

【弁理士】

【氏名又は名称】高島 一

(74)【代理人】

【識別番号】100136629

【弁理士】

【氏名又は名称】鎌田 光宜

(74)【代理人】

【識別番号】100125070

【弁理士】

【氏名又は名称】土井 京子

(74)【代理人】

【識別番号】100121212

【弁理士】

【氏名又は名称】田村 弥栄子

(74)【代理人】

【識別番号】100174296

【弁理士】

【氏名又は名称】當麻 博文

(74)【代理人】

【識別番号】100137729

【弁理士】

【氏名又は名称】赤井 厚子

(74)【代理人】

【識別番号】100151301

【弁理士】

【氏名又は名称】戸崎 富哉

(72)【発明者】

【氏名】ウォレス、デレック

【テーマコード（参考）】

4B065

4C085

【Ｆターム（参考）】

4B065AA95X

4B065AB01

4B065BA02

4B065CA45

4C085AA04

4C085AA38

4C085BA51

4C085BA52

4C085EE03

4C085EE06

4C085FF02

4C085GG03

4C085GG04

(57)【要約】

本発明は、デング熱ワクチン組成物及びＡ型肝炎ワクチンの単位用量を同日同時に投与することにより、対象または対象集団におけるデング熱疾患及びＡ型肝炎を予防する方法に関する。デング熱ワクチン組成物の単位用量は、デング熱感染からの保護を改善するために、各デング熱血清型（例えば、ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４）のコンストラクトを様々な濃度で含む。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象または対象集団におけるＡ型肝炎及びデング熱疾患を予防する方法に使用するためのＡ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量であって、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に投与することを含み、前記単位用量が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、前記Ａ型ワクチン組成物及び前記単位用量。

【請求項2】

前記Ａ型肝炎ワクチンが不活化ウイルスワクチンである、請求項１に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項3】

前記デング熱ワクチン組成物が、０．５ｍＬの医薬的に許容される希釈剤で再構成すると以下を含む、請求項１または２に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量：
（ｉ）キメラ型デング熱血清型２／１株の場合、少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、
（ｉｉ）デング熱血清型２株の場合、少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、
（ｉｉｉ）キメラ型デング熱血清型２／３株の場合、少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、及び
（ｉｖ）キメラ型デング熱血清型２／４株の場合、少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度。

【請求項4】

前記対象集団または前記対象が、全てのデング熱血清型に対し血清陰性である、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項5】

前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量が皮下注射によって投与され、前記Ａ型肝炎ワクチンが筋肉内注射によって投与され、前記注射が好ましくは腕に投与され、より好ましくは腕の三角筋領域に投与される、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項6】

前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンが、異なる解剖学的部位（例えば、反対側の腕）に投与される、請求項５に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項7】

前記デング熱ワクチン組成物の２回の前記単位用量が、１２ヵ月以上の範囲内、または６ヵ月以内、または３ヵ月以内に投与される、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項8】

前記デング熱ワクチン組成物の２回の前記単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンの１回の用量を、特定的には以下のスケジュールに従って、投与することを含む、請求項７に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量：
－１日目に、前記デング熱ワクチン組成物の第１の単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンの第１の同時投与、ならびに
－前記第１の同時投与の後に（例えば、約３ヵ月後に）、前記デング熱ワクチン組成物の第２の単位用量の第２の投与。

【請求項9】

前記対象集団または前記対象が２歳～６０歳である、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項10】

前記対象集団または前記対象が、デング熱流行地域出身である、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項11】

前記対象集団または前記対象が、デング熱非流行地域、好ましくはデング熱非流行及びＡ型肝炎非流行地域の出身である、請求項１～９のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項12】

前記Ａ型肝炎ワクチンが、Ａ型肝炎ウイルスＨＭ－１７５株に由来するＡ型肝炎ウイルスを含む、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項13】

前記Ａ型肝炎ワクチンが、不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、前記不活化Ａ型肝炎ウイルスが、Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来する、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項14】

前記Ａ型肝炎ワクチンが、不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、前記不活化Ａ型肝炎ウイルスが、アルミニウムに吸着されている、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項15】

前記アルミニウムが、水酸化アルミニウムまたはアルミニウムヒドロキシホスフェート硫酸塩である、請求項１４に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項16】

前記Ａ型肝炎ワクチンが不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、前記Ａ型肝炎ワクチンが、リン酸緩衝生理食塩水と、その中にアミノ酸形形態及びポリソルベート形態で溶解した賦形剤とを含む、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項17】

前記Ａ型肝炎ワクチンが、ウイルス抗原を発現するＡ型肝炎ウイルスを５００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）～２０００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）の範囲の濃度で含む、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項18】

前記方法が、前記Ａ型肝炎ワクチンの前記投与前及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の前記投与前に、前記対象集団または前記対象が過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定するステップを含まない、あるいは
前記Ａ型肝炎ワクチンの前記投与前及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の前記投与前に、前記対象集団または前記対象のＡ型肝炎の血清状態及び／またはデング熱の血清状態が不明である、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項19】

前記方法が、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を投与するステップの前、間、及び後のいずれの時点でも、前記対象集団または前記対象が過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定するステップを含まない、あるいは
前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の投与のステップの前、間、または後のいずれの時点でも、前記対象集団または前記対象の前記Ａ型肝炎の血清状態及び／または前記デング熱の血清状態が不明である、請求項１８に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項20】

前記方法が、以下のステップからなる一次ワクチン接種を含む、先行請求項のいずれかに記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量：
（Ａ）デング熱感染及びＡ型肝炎感染に対する保護の必要性から四価デング熱ウイルス組成物単位用量及びＡ型肝炎ワクチンの投与を行う対象を、過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定することなく選択すること、ならびに
（Ｂ）前記対象に、前記四価デング熱ウイルス組成物の第１の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンを投与すること、ならびに任意選択で
（Ｃ）前記対象に、前記四価デング熱ウイルス組成物の少なくとも１回のさらなる単位用量を、前記第１の単位用量の投与から３～１２ヵ月以内に投与すること、ならびに任意選択で
（Ｄ）前記対象に、前記Ａ型肝炎ワクチンの少なくとも１回のさらなる用量を、前記第１の単位用量の投与から６～１８ヵ月以内に投与すること。

【請求項21】

前記方法が、以下のステップからなる一次ワクチン接種を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量：
（Ａ）デング熱感染及びＡ型肝炎感染に対する保護の必要性から前記四価デング熱ウイルス組成物の前記単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンの投与を行う対象を選択すること、ならびに
（Ｂ）前記対象に、前記四価デング熱ウイルス組成物の第１の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンを投与すること、ならびに
（Ｃ）前記対象に、前記第１の単位用量の投与から約６ヵ月時及び約１２ヵ月時に、前記四価デング熱ウイルス組成物を２回のさらなる単位用量を投与し、前記第１の単位用量の投与の約６ヵ月時または約１２ヵ月時のいずれかに、前記Ａ型肝炎ワクチンを投与すること。

【請求項22】

ステップ（Ａ）が、過去にＡ型肝炎に感染していたかの判定なしに行われる、請求項２１に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項23】

前記デング熱ワクチン組成物を医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）が、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、前記ｐｆｕ／０．５ｍｌの総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、１０％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、少なくとも６％、少なくとも８％、または少なくとも１０％、または少なくとも１２％、または少なくとも１４％、または少なくとも１６％、または少なくとも１８％である、請求項３～２２のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項24】

前記方法が、前記デング熱ワクチン組成物と前記Ａ型肝炎ワクチンとの間に適合性をもたらす、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項25】

前記方法が、前記デング熱ワクチン組成物と前記Ａ型肝炎ワクチンとの間に相乗効果をもたらす、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項26】

前記方法が、１つの対象集団及び１つの対照対象集団に分けられた少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で非劣性をもたらし、前記対象集団が、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に受け、前記対照対象集団が、Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボ投与物を同日同時に受ける、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項27】

前記Ａ型肝炎ワクチンが、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、投与（０／１日目）から３０日後に、少なくとも９５％、または少なくとも９８％のＡ型肝炎の血清保護率をもたらす、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項28】

前記方法が、Ａ型肝炎の単剤投与に対するＡ型肝炎の血清保護率の差をもたらし、前記差が、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で決定され、
前記健康な対象が、
ｅ）前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団と、
ｆ）Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボの投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または５０例の対象の対照対象集団とに分けられ、
前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対照対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率と、前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率との間の前記差が決定され、
両側９５％信頼区間内の前記差の上限が１０％未満である、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項29】

前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性である少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、前記Ａ型肝炎ワクチンが、投与（０／１日目）から３０日後に、少なくとも９５％、または少なくとも９８％、または少なくとも９９％のＡ型肝炎血清保護率をもたらし、前記健康な対象が、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）、ならびにベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）を含む、請求項１～２６のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項30】

前記方法が、Ａ型肝炎の単剤投与に対するＡ型肝炎の血清保護率の差をもたらし、前記差が、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性である少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で決定され、前記健康な対象が、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含み、
前記健康な対象が、
ｅ）前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団であって、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含む、前記対象集団と、
ｆ）Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボの投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対照対象集団であって、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含む、前記対照対象集団とに分けられ、
前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対照対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率と、前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率との間の前記差が決定され、
両側９５％信頼区間内の前記差の上限が１０％未満である、請求項１～２６のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項31】

前記対象または前記対象集団が、Ａ型肝炎ウイルスの大流行及び／またはデング熱ウイルスの大流行にさらされている、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項32】

前記方法が、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデングウイルス血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、投与（０／１日目）から３０日後にもたらす抗Ａ型肝炎ウイルス抗体幾何平均濃度（ＧＭＣ）が、少なくとも７０ｍＩＵ／ｍｌ、または少なくとも８０ｍＩＵ／ｍｌ、または少なくとも９０ｍＩＵ／ｍｌである、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項33】

前記対象または前記対象集団への、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の前記同日同時の投与が安全である、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項34】

前記同日同時の投与に関連する重篤な有害事象が存在しない、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項35】

前記方法が、以下のＭＮＴ５０によって測定される中和抗体の幾何平均力価（ＧＭＴ）：
－デング熱血清型１の場合、少なくとも１１０、または少なくとも１４０、または少なくとも１５０、
－デング熱血清型２の場合、少なくとも３０００、または少なくとも３５００、または少なくとも３９００、
－デング熱血清型３の場合、少なくとも１００、または少なくとも１２０、または少なくとも１４０、及び／または
－デング熱血清型４の場合、少なくとも８０、または少なくとも１１０、または少なくとも１４０を、
ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、ベースラインで全てのデング熱ウイルスの血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象集団に、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量が同日同時に投与（０／１日目）されてから３０日後にもたらす、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項36】

前記対象または前記対象集団が１８～６０歳である、先行請求項のいずれか１項に記載の使用のためのＡ型肝炎ワクチン及び単位用量。

【請求項37】

Ａ型肝炎及びデング熱疾患に対するキットであって、
少なくとも以下を含む箱を含む、前記キット：
（ａ）Ａ型肝炎ワクチンを保持する第１の容器、及び
（ｂ）デング熱ワクチン組成物の単位用量を保持する第２の容器であって、前記単位用量が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、前記第２の容器。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、対象または対象集団に、デング熱ワクチン組成物の単位用量をＡ型肝炎ワクチンと共に同日同時に投与するための方法に関する。本発明に従う単位用量は、デング熱ウイルスの全ての血清型、すなわち、ＤＥＮＶ－１、ＤＥＮＶ－２、ＤＥＮＶ－３、及びＤＥＮＶ－４に対する免疫応答、ならびにＡ型肝炎ウイルスに対する免疫応答をもたらす。

【背景技術】

【0002】

ウイルス感染症に対する保護のためのワクチンは、ヒトの疾患の発生率を低減するために有効に使用されてきた。ウイルスワクチンのための最も成功している技術の１つは、弱体化または弱毒化ウイルス株（「弱毒化生ウイルス」）で動物またはヒトを免疫するためのものである。免疫後の複製の制限のため、弱毒化ウイルス株は疾患を引き起こさない。しかし、ウイルス複製が制限されていても、ウイルス抗原の完全なレパートリーを発現させるのには十分であり、ウイルスに対し強力で長期に持続する免疫応答を生じることができる。したがって、免疫された個体は、その後病原性ウイルス株に曝露された際に疾患から保護される。これらの弱毒化生ウイルスワクチンは、公衆衛生上最も成功しているワクチンに含まれる。

【0003】

デング熱疾患は、デング熱ウイルスの感染によって引き起こされる蚊媒介疾患である。デング熱ウイルス感染症は、突然の高熱、頭痛、関節痛及び筋肉痛、吐き気、嘔吐及び皮膚発疹を含む消耗性及び疼痛性症状につながり得る。これまでのところ、デング熱ウイルスの４つの血清型：デング熱－１（ＤＥＮＶ－１）、デング熱－２（ＤＥＮＶ－２）、デング熱－３（ＤＥＮＶ－３）、及びデング熱－４（ＤＥＮＶ－４）が同定されている。デング熱ウイルス血清型１～４はまた、デング出血熱（ＤＨＦ）及びデング熱ショック症候群（ＤＳＳ）を引き起こし得る。最も重度の症例では、ＤＨＦ及びＤＳＳは生命を脅かし得る。デング熱ウイルスは、各年に５０００万～１億症例の消耗性デング熱、５００，０００症例のＤＨＦ／ＤＳＳ、及び２０，０００件を超える死亡を引き起こし、その大部分が小児である。デング熱ウイルスの４つの血清型はいずれも世界の熱帯地域全体で流行しており、蚊が媒介するウイルスとしては熱帯地域のヒトに対する最も重大な脅威に相当する。デング熱ウイルスは、主にＡｅｄｅｓ ａｅｇｙｐｔｉ蚊によってヒトに媒介されるが、Ａｅｄｅｓ ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ蚊によっても媒介される。１つのデング熱ウイルス血清型の感染は、その血清型による再感染からの生涯保護をもたらすが、他の３つのデング熱ウイルス血清型のうちの１つによる二次感染を予防するものではない。実際、１つのデング熱ウイルス血清型による過去の感染は、異なる血清型による二次感染時に、重度疾患（ＤＨＦ／ＤＳＳ）のリスクの上昇につながり得る。

【0004】

現在まで、１つのみのワクチン、すなわち、黄熱病骨格に基づく四価デング熱ワクチンＣＹＤ－ＴＤＶ（Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ Ｐａｓｔｅｕｒ、Ｌｙｏｎ、Ｆｒａｎｃｅ）が、アジア及び中南米における小児の５６～６１％のウイルス学的に確認されたデング熱（ＶＣＤ）に対する全体的ワクチン有効性（ＶＥ）の臨床的実証に基づいていくつかの国において認可されている（Ｃａｐｅｄｉｎｇ ＭＲ ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｔｅｔｒａｖａｌｅｎｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｉｎ Ａｓｉａ：ａ ｐｈａｓｅ ３，ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，ｏｂｓｅｒｖｅｒ－ｍａｓｋｅｄ，ｐｌａｃｅｂｏ－ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌ．Ｌａｎｃｅｔ ２０１４，３８４：１３５８－６５；Ｖｉｌｌａｒ ＬＡ ｅｔ ａｌ．Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ａ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｔｅｔｒａｖａｌｅｎｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ９－１６ ｙｅａｒ ｏｌｄｓ：ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ，ｐｈａｓｅ ＩＩ ｔｒｉａｌ ｉｎ Ｌａｔｉｎ Ａｍｅｒｉｃａ． Ｐｅｄｉａｔｒ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ Ｊ ２０１３，３２：１１０２－９）。しかしながら、臨床試験は、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）が、過去にデング熱ウイルスに感染していない個体（血清陰性集団）におけるデング熱感染による重度疾患のリスクを低減するよりむしろ増強し得ることを示している。そのため、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）は、過去に少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に感染した個体（血清陽性集団）において使用するために推奨されているにすぎない。より具体的には、その製品についての欧州医薬品庁の欧州公衆評価報告書（ＥＰＡＲ）によれば、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）は、以前にデング熱ウイルスに感染したことがあり、かつこの感染症が流行している地域に居住している９～４５歳の人々における使用のためのものにすぎない。流行地域は、その疾患が年間を通して定期的に生じる地域である。Ｓｒｉｄｈａｒ Ｓ ｅｔ ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｄｅｎｇｕｅ Ｓｅｒｏｓｔａｔｕｓ ｏｎ Ｄｅｎｇｕｅ Ｖａｃｃｉｎｅ Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ Ｅｆｆｉｃａｃｙ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１８，３７９：３２７－４０；及びＷｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ． Ｄｅｎｇｕｅ ｖａｃｃｉｎｅ：ＷＨＯ ｐｏｓｉｔｉｏｎ ｐａｐｅｒ－Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１８． Ｗｋｌｙ． Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ． Ｒｅｃ．２０１８，９３：４５７－４７６も参照されたい。Ｓ．Ｒ．Ｈａｄｉｎｅｇｏｒｏらは、ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ．３７３，ｐａｇｅ １１９５において“Ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ Ｌｏｎｇ－Ｔｅｒｍ Ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ａ Ｄｅｎｇｕｅ Ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ Ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ Ｅｎｄｅｍｉｃ Ｄｉｓｅａｓｅ”で、９歳未満におけるウイルス学的に確認されたデング熱疾患の入院のプールリスクが１．５８と報告しており、これは、ワクチン接種済み群で重度デング熱のリスクが増加することを示すものである。このため、デング熱ナイーブ個体及び血清陽性個体（流行地域に居住しているデング熱ナイーブ集団、デング熱に対していかなる血清陽性応答も発症したことがないまたはデング熱に曝露されたことがない可能性がある若年の個体、ならびに非流行地域からの渡航者及び個体を含む）のいずれにおいても良好な安全性プロファイルを備えた有効なワクチンに対し、相当程度のアンメットニーズが残されている。１回のみの用量の後にデング熱のリスクを低減する大流行制御または渡航ワクチン接種も必要とされている。

【0005】

現在承認されている唯一のデング熱ワクチンであるＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）の１つのさらなる欠点は、デング熱ウイルスの過去の感染を示す陽性の検査結果を有していた人々、すなわち、デング熱についての既知の血清状態を有する個体のみに提供しなければならないことである（ＥＰＡＲ）。したがって、デング熱の血清状態が不明な個体は、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）でワクチン接種することができない。

【0006】

したがって、より広い年齢群にとって、特定的には９歳以下の対象にとっても安全である、血清陰性及び血清陽性の両方の集団において全てのデング熱血清型に対する免疫応答、好ましくは全ての血清型に対するバランスのとれた免疫応答を刺激し、任意の重症度のデング熱疾患（ＤＳＳ、ＤＨＦを含む）に対して保護するデング熱ワクチン及び対応する接種方法が必要とされている。流行状況において及び渡航の目的のために、血清陰性及び血清陽性の両方の集団、特定的には小児及び若年成人及び高齢対象を含む全ての集団を保護することが可能な安全かつ有効なワクチンの開発は、この世界的な疾患の予防及び制御に対する重要なアプローチに相当する。

【0007】

よって、血清状態にかかわらず、広い年齢群において安全かつ有効であるデング熱ワクチン及び対応する接種方法が医学的に必要とされている。費用及び時間を要する血清状態の検査または血清有病率の検討を回避するデング熱ワクチン及び対応する接種方法が必要とされている。大流行の状況で使用され得るデング熱ワクチン及び対応する接種方法が必要とされている。さらに、安全かつ有効であるだけでなく、デング熱の血清状態が不明の個体、９歳未満の小児、及び血清陰性の個体にも投与することができるデング熱ワクチンが医学的に必要とされている。

【0008】

また、６ヵ月間隔で３回用量を投薬する現在のＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）のスケジュールよりも少ない回数の用量で投与されるワクチン、例えば、有効とするのにわずか２回用量または１回用量で投与することができるワクチンも必要とされている。

【0009】

上記目的は、ＷＨＯがデング熱ワクチンにおいて提供する研究優先度に見合うものである：ＷＨＯ方針説明書－２０１８年９月（Ｗｋｌｙ． Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ． Ｒｅｃ．２０１８、９３：４５７－４７６）。

【0010】

Ａ型肝炎は、Ａ型肝炎ウイルス（ＨＡＶ）によって引き起こされる肝臓疾患である。そのウイルスは、感染していない（及びワクチン未接種の）人が、感染した人の糞便で汚染された食品または水を摂取した場合に主に広がる。その疾患は、安全ではない水または食品、不適切な公衆衛生及び個人的衛生状態の不良と密接に関連している。そのウイルスはまた、感染した人との密接な身体的接触を介して伝染し得る。Ｂ型及びＣ型肝炎とは異なり、Ａ型肝炎感染症は、慢性肝臓疾患を引き起こさず、致命的であることはほとんどないが、消耗性症状及び劇症肝炎（急性肝臓不全）を引き起こし得、それはしばしば致命的である。Ａ型肝炎は、世界中で散発的に流行し、周期的に再発する傾向がある。

【0011】

Ａ型肝炎ウイルスは、食品媒介感染症の最も頻繁な原因のうちの１つである。汚染された食品または水に関連する伝染病は、約３００，０００人の人々に影響を及ぼした１９８８年の上海における伝染病など、爆発的に発生し得る。Ａ型肝炎ウイルスは、環境中に存続し、細菌性病原体を不活化及び／または制御するために慣用的に使用される食品生成プロセスに耐え得る。その疾患は、地域社会において重大な経済的及び社会的結末につながり得る。病気から回復した人が仕事、学校、または日常生活に戻るには、数週間または数ヵ月かかることがある。ウイルスが確認された食品事業所、及び全体的な地域生産性に対する影響は重大であり得る。不十分な衛生状態及び衛生基準が不十分な発展途上国では、ほとんどの小児（９０％）が１０歳になる前にＡ型肝炎ウイルスに感染したことがある。

【0012】

国際渡航をする人々の数は、ここ数十年で大幅に増えている。国連世界観光機関（ＵＮＷＴＯ）によれば、１１億人を超える観光客が２０１４年に外国に渡航した。国際渡航中に病気になるリスクは、訪れた世界の地域、渡航の長さ、及び計画された活動の多様性などの様々な要因に依存する。ワクチンの推奨は、国際渡航前の健康準備の重要な位置を占める。Ａ型肝炎ウイルスに対するワクチン接種は、アジア、アフリカ、及び中南米を含む世界中のリスクのある地域への渡航者に一般的に推奨されている。

【0013】

慣用的なＡ型肝炎ワクチン接種では、とりわけ実質的にＡ型肝炎に罹患するリスクのある渡航者及び免疫不全状態の個体の場合、２回用量スケジュールが推奨されている。しかしながら、健康な個体では、単回用量で同等の有効性が達成されている。小児／若年成人（生後１２ヵ月～１８歳）及び成人（１９歳以上）のためのワクチン接種スケジュールは、筋肉内投与する一次用量及び６～１８ヵ月後に筋肉内投与するさらなるブースター用量からなる。

【0014】

利用可能なＡ型肝炎ワクチンには、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）及びＶＡＱＴＡ（登録商標）が含まれる。

【0015】

したがって、デング熱疾患及びＡ型肝炎を同時に予防する安全で効果的な方法が必要とされている。特定的には、対象または対象集団に同時に投与した場合に非劣性をもたらすＡ型肝炎及びデング熱ワクチン、ならびに相乗効果達成するための好適な投与スケジュールが必要とされている。

【0016】

さらに、自らのＡ型肝炎及び／またはデング熱の血清状態を把握していない対象、特定的には、デング熱及びＡ型肝炎の流行国に渡航する非流行国からの対象におけるデング熱及びＡ型肝炎を有効かつ安全に予防することが必要とされている。

【発明の概要】

【0017】

本発明の目的は、デング熱疾患及びＡ型肝炎に対する安全かつ有効な保護をもたらすことである。

【0018】

本発明の目的は、対象が自分のデング熱及び／またはＡ型肝炎の血清状態を把握しておらず、対応する血清試験が利用できないか、実用的でないか、または信頼できない場合の典型的なワクチン接種の状況で有用である、Ａ型肝炎及びデング熱疾患を予防するための投与方法を提供することである。

【0019】

本発明の目的は、Ａ型肝炎及びデング熱の非流行国からの旅行者、特定的にはトラベルクリニックでワクチン接種を受ける旅行者をデング熱疾患及びＡ型肝炎から安全かつ有効に保護することである。このような状況下では、同じ診察中の重複を回避し、複数の疾患に対するワクチン接種を同時に行うことができれば有益である。

【0020】

本発明の目的は、対象または対象集団におけるＡ型肝炎及びデング熱疾患のための安全で有効なワクチンと、デング熱流行地域及びデング熱非流行地域出身の対象または対象集団におけるＡ型肝炎及びデング熱疾患を予防する対応する方法とを、幅広い年齢層、特定的には、２～６０歳、好ましくは１８～６０歳の対象向けに、過去にいずれかのデング熱ウイルス血清型及び／またはＡ型肝炎ウイルスにさらされた経験とは無関係に、またワクチン接種前のデング熱及び／またはＡ型肝炎に関する対応する血清陽性または血清陰性とは無関係に、提供することである。

【0021】

本発明の目的は、ワクチン及びＡ型肝炎及びデング熱疾患を予防する対応する方法を提供することであり、これは、対象または対象集団に個別にＡ型肝炎及びデング熱ワクチンを投与する前に、個別のデング熱及び／またはＡ型肝炎の血清状態を検査することを回避し、あるいはワクチン接種を行う対象または対象集団におけるデング熱及び／またはＡ型肝炎の血清有病率の分析を回避する。

【0022】

本発明の目的は、対象がＨＡＶ及びデング熱の流行国に海外渡航する前に、旅行用ワクチンとしてＴＤＶと共に安全に同時投与することができるデング熱ワクチン及びＡ型肝炎ワクチン、ならびにこれらのワクチンを安全に投与する方法を提供することである。

【0023】

そのため、本発明は、デング熱疾患及びＡ型肝炎を予防する方法を対象とする。

【0024】

本発明はさらに、対象または対象集団のＡ型肝炎及びデング熱疾患を予防する方法であって、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に投与することを含み、当該単位用量が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、方法を対象とする。

【0025】

定義
本発明を記載する上で、以下の用語は、以下に示されるように使用されるべきである。本明細書で使用する場合、文脈による別段の明確な指示がない限り、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」には複数の指示対象が含まれる。

【0026】

本明細書で使用する場合、「デング熱ワクチン組成物の単位用量」、「単位用量」、及び「本明細書に記載の発明の単位用量」という用語は、単回用量で対象に投与するデング熱ワクチンの量を指す。１つの実施形態において、１回の単位用量がバイアル内に存在し、この単位用量が（例えば、任意選択で再構成後に）対象に投与される。１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物の複数の単位用量は、１つのバイアルの内容物で、複数の対象にワクチン接種することができるように、バイアル内に存在し得る。

【0027】

「凍結乾燥された単位用量」または「凍結乾燥形態の単位用量」は、０．５ｍＬなどの所与の体積の液体デング熱ワクチン組成物を凍結乾燥に供することによって得られる単位用量を指す。したがって、医薬的に許容される賦形剤及び４つのデング熱ウイルス株、好ましくはＴＤＶ－１～ＴＤＶ－４を含むデング熱ウイルス組成物を組み合わせることによって生成されるデング熱ワクチン組成物の水性製剤は、凍結乾燥された単位用量を得るために凍結乾燥に供される。

【0028】

「再構成された単位用量」または「再構成された形態の単位用量」は、医薬的に許容される希釈剤での再構成によって凍結乾燥された用量から得られる。希釈剤は、デング熱ウイルスを含有しない。再構成された単位用量は、例えば、皮下注射などの注射によって対象に投与され得る液体である。

【0029】

本明細書で使用する場合、「０．５ｍＬで再構成すると」という用語は、再構成を０．５ｍＬの希釈剤を使用して実施することに限定するものではないが、０．５ｍＬの希釈剤が再構成のために使用された場合に再構成された単位用量に存在するデング熱ウイルスの濃度を指す。再構成のために異なる体積（例えば、０．８ｍＬ）を使用すると、再構成された単位用量におけるデング熱ウイルスの異なる濃度をもたらすのに対し、単位用量の合計体積（例えば、０．８ｍＬ）の投与は、投与されるデング熱ウイルスの同じ全量をもたらす。

【0030】

本明細書で使用する場合、「少なくともＸｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度」は、０．５ｍＬ中のデング熱血清型の濃度を指すが、単位用量を０．５ｍＬに限定するものではない。単位用量が０．５ｍＬとは異なる体積を有する場合、または０．５ｍＬとは異なる体積から凍結乾燥される場合、または０．５ｍＬとは異なる体積で再構成される場合、当該濃度は、「少なくともＸｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度」とは異なることになる。ただし、単位用量の体積が０．５ｍＬの場合、または０．５ｍＬの体積から凍結乾燥される場合、または０．５ｍＬの体積で再構成される場合、当該濃度は、「少なくともＸｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度」となる。したがって、濃度は異なり得るのに対し、単位用量におけるウイルスの合計量は同じままである。

【0031】

本明細書で使用する場合、「デング熱血清型」という用語は、その細胞表面抗原によって定義され、そのため、当技術分野で知られている血清学的方法によって区別され得るデング熱ウイルスの種を指す。現在のところ、デング熱ウイルスの４つの血清型、すなわち、デング熱血清型１（ＤＥＮＶ－１）、デング熱血清型２（ＤＥＮＶ－２）、デング熱血清型３（ＤＥＮＶ－３）及びデング熱血清型４（ＤＥＮＶ－４）が知られている。

【0032】

本明細書で使用する場合、「四価デング熱ウイルス組成物」という用語は、４つの異なるデング熱血清型ＤＥＮＶ－１、ＤＥＮＶ－２、ＤＥＮＶ－３、及びＤＥＮＶ－４に由来する４つの異なる免疫原性成分を含む、好ましくは４つの異なる弱毒化生デング熱ウイルス（それぞれ１つのデング熱血清型を表す）を含み、かつ４つ全てのデング熱血清型に対する免疫応答を刺激することを目標とするデング熱ウイルス組成物を指す。

【0033】

本明細書で使用する場合、「弱毒化生デング熱ウイルス」という用語は、病原性を低下させるように変異させた生存可能なデング熱ウイルスを指す。弱毒化生デング熱ウイルスは、全ての成分が同じデング熱血清型から誘導されるデング熱ウイルスの場合もあれば、２つ以上のデング熱血清型に由来する部分を有するキメラデング熱ウイルス、または他のフラビウイルスに由来する部分を有する混合型キメラデング熱ウイルスの場合もある。

【0034】

「ウイルス株」及び特定的には「デング熱ウイルス株」は、特定の核酸配列を特徴とするウイルス、特定的にはデング熱ウイルスの遺伝子サブタイプである。デング熱血清型は、同じ細胞表面抗原を有する異なる核酸配列を有する異なる株を含み得る。デング熱ウイルス株は、全ての成分が同じデング熱血清型から誘導されるデング熱ウイルスであり得、またはそれは、２つ以上のデング熱血清型に由来する部分を有するキメラデング熱ウイルスであり得る。

【0035】

本明細書で使用する場合、「ＴＤＶ－２」は、弱毒化生ＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３ウイルス株から誘導される分子的に特徴があり、クローン化されたデング熱血清型２株を指す。ＰＤＫ－５３株は、例えば、Ｂｈａｍａｒａｐｒａｖａｔｉ ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ ６５（２）：１８９－１９５に記載されている。１つの実施形態において、ＴＤＶ－２株は、ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４株に由来する部分が導入されたキメラＴＤＶ－１、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４株のための骨格として機能した。

【0036】

「非キメラデング熱ウイルス」または「非キメラデング熱血清型株」または「非キメラデング熱株」は、１つのデング熱血清型に由来する部分しか含まない。特定的には、非キメラデング熱ウイルスは、異なるフラビウイルス（例えば、黄熱病ウイルス、ジカウイルス、ウエストナイルウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス）に由来する部分を含まない。ＴＤＶ－２は、非キメラデング熱ウイルスの例である。

【0037】

「キメラデング熱ウイルス」または「キメラデング熱血清型株」または「キメラデング熱株」は、少なくとも２つの異なるデング熱血清型に由来する部分を含む。本明細書で使用する場合、キメラデング熱ウイルスは、異なるフラビウイルス（例えば、黄熱病ウイルス、ジカウイルス、ウエストナイルウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス）に由来する部分を含まない。特定的には、本明細書に記載のキメラデング熱ウイルスは、黄熱病ウイルスに由来する部分を含まない。本明細書で使用する場合、「キメラデング熱血清型２／１株」または「ＤＥＮＶ－２／１キメラ」または「ＴＤＶ－１」は、ＤＥＮＶ－２及びＤＥＮＶ－１の両方に由来する部分を含むデング熱ウイルスキメラコンストラクトを指す。特定的には、キメラデング熱血清型２／１株において、ＤＥＮＶ－１に由来するｐｒＭ及びＥタンパク質は、以下に詳述されるようにＤＥＮＶ－２に由来するｐｒＭ及びＥタンパク質に取って代わる。本明細書で使用する場合、「キメラデング熱血清型２／３株」または「ＤＥＮＶ－２／３キメラ」または「ＴＤＶ－３」は、ＤＥＮＶ－２及びＤＥＮＶ－３の両方に由来する部分を含むデング熱ウイルスキメラコンストラクトを指す。特定的には、キメラデング熱血清型２／３株において、ＤＥＮＶ－３に由来するｐｒＭ及びＥタンパク質は、以下に詳述されるようにＤＥＮＶ－２に由来するｐｒＭ及びＥタンパク質に取って代わる。本明細書で使用する場合、「キメラデング熱血清型２／４株」または「ＤＥＮＶ－２／４キメラ」または「ＴＤＶ－４」は、ＤＥＮＶ－２及びＤＥＮＶ－４の両方に由来する部分を含むデング熱ウイルスキメラコンストラクトを指す。特定的には、キメラデング熱血清型２／４株において、ＤＥＮＶ－４に由来するｐｒＭ及びＥタンパク質は、以下に詳述されるようにＤＥＮＶ－２に由来するｐｒＭ及びＥタンパク質に取って代わる。混合型キメラデング熱ウイルスは、他のフラビウイルスの一部を有する。

【0038】

本明細書で使用する場合、「ＴＤＶ」は、４つのデング熱血清型ＤＥＮＶ－１、ＤＥＮＶ－２、ＤＥＮＶ－３及びＤＥＮＶ－４にそれぞれ由来する表面抗原を発現する４つの弱毒化生デング熱ウイルス株ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４の混合物を含む四価弱毒化生デング熱ワクチンを指す。１つの実施形態において（例えば、実施例においても）、ＴＤＶ－１は、配列番号１に記載のヌクレオチド配列及び／または配列番号２に記載のアミノ酸配列を有する。１つの実施形態において、ＴＤＶ－２は、配列番号３に記載のヌクレオチド配列及び／または配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する。１つの実施形態において、ＴＤＶ－３は、配列番号５に記載のヌクレオチド配列及び／または配列番号６に記載のアミノ酸配列を有する。１つの実施形態において、ＴＤＶ－４は、配列番号７に記載のヌクレオチド配列及び／または配列番号８に記載のアミノ酸配列を有する。

【0039】

本明細書で使用する場合、「デング熱疾患」という用語は、デング熱ウイルスの感染が原因で生じる疾患を指す。デング熱疾患の症状には、突然の高熱、頭痛、関節及び筋肉痛、吐き気、嘔吐及び皮膚発疹が含まれる。デング熱疾患という用語にはまた、デング出血熱（ＤＨＦ）及びデング熱ショック症候群（ＤＳＳ）のより重度の形態が含まれる。ＤＨＦの症状には、上昇した血管透過性、血液量減少及び異常な血液凝固メカニズムが含まれる。ＤＨＦを有する対象は、血漿漏出及び出血の重度の徴候を示し得る。ＤＨＦを有する対象がショックを受けた場合、その人は、ＤＳＳを有するものとして分類される。ＤＳＳの症状には、皮膚上の血液の小さな点及び皮膚下の血液の大きな斑点として現れ得る出血が含まれる。持続するショックは、死につながり得る大量の消化器出血を含む合併症に関連する主な要因である。本明細書で使用する場合、ＤＨＦ症例は、ＷＨＯ１９９７ＤＨＦ基準を満たすＶＣＤ症例として定義される。高齢対象のデング熱疾患を予防する文脈において、「デング熱疾患を予防すること」という用語は、好ましくはＤＨＦ及び／またはＤＳＳを予防することを含む。高齢対象のデング熱疾患を予防する文脈において、「デング熱疾患を予防すること」という用語は、好ましくは、デング熱の重度の末期器官徴候（例えば、肝腫大及び急性腎不全）を予防することを含む。

【0040】

本明細書で使用する場合、「デング熱疾患を予防すること」は、デング熱ウイルスでの感染により、デング熱疾患の１つ以上の症状の発症から対象を予防することを指す。特定的には、デング熱疾患を予防することは、本明細書に記載の再構成された単位用量などのデング熱ワクチン組成物を対象にワクチン接種または接種することによって達成される。本明細書で使用する場合、「デング熱疾患を予防的に治療すること」という用語は、「デング熱疾患を予防すること」と等価である。特定の実施形態において、デング熱疾患を予防することは、ＤＨＳ及び／またはＤＳＳを予防することを含む。

【0041】

本明細書で使用する場合、「ウイルス学的に確認されたデング熱疾患」、「ＶＣＤ症例」、または「ＶＣＤ熱」という用語は、陽性の血清型特異的逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）でデング熱疾患であることが臨床的に疑われる熱性疾病または疾病を指す。「ウイルス学的に確認可能なデング熱」疾患という用語は、臨床的にデング熱疾患である疑いのある熱性疾病または疾病を有する対象であって、（例えば、ＲＴ－ＰＣＲを用いた）対象の検査によって少なくとも１つのデング熱血清型の存在が確認されると考えられる対象を指す。ＶＣＤ熱の重度の形態は、以下のように同定される：デング出血熱（ＤＨＦ）がＷＨＯ１９９７基準に従って定義された。重度デング熱は、憲章で再定義された基準に基づいて全ての入院ＶＣＤ症例（重度／非重度）を評価する独立したデング熱症例裁定委員会の評価を通して定義された。全ての入院していない症例は、非重度とみなされる。

【0042】

本明細書で使用する場合、「熱性疾病」という用語は、連続した３日のうちの任意の２日で体温が３８℃以上となるものとして定義される。

【0043】

本明細書で使用する場合、「入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患」という用語は、重度デング熱の代わりに用いられる用語とみなされ、「入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患の発生率」は安全性パラメーターとして使用される。本明細書で使用する場合、「入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患に関する相対リスク」は、入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患の事象数を本明細書に開示する単位用量で処置した対象数で割った値を、入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患の事象数をプラセボで処置した対象数で割った値で割ったものを意味する。「入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患に関する相対リスク」が１以下である場合、ワクチンは、入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患のリスクをプラセボ以下のリスクにし、「安全」と考えられる。この文脈において、入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患のリスクは、特定的には、第２の投与の３０日後から第２の投与の１２ヵ月後に決定する場合、特定的には、４～１６歳の対象の年齢群、４歳から９歳未満の対象の年齢群、２歳から９歳未満の対象の年齢群、４～５歳の対象の年齢群、６～１１歳の対象の年齢群、及び１２～１６歳の対象の年齢群から選択される年齢群で決定する場合、０．９以下、０．８以下、０．７以下、０．６以下、０．５以下、０．４以下、０．３以下、０．２以下、または０．１以下であってもよい。

【0044】

本明細書で使用する場合、代替的に、ワクチンは、入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患に関するワクチン有効性（ＶＥ）が０％以上である場合、「安全」と考えられる。これは、ワクチンが、入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患の可能性をプラセボ以下にすることを意味する。特定的に考慮される「安全性」は、両側９５％信頼区間で４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する複合ワクチン有効性であって、特定的には、当該単位用量または当該プラセボが６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与したときに、およそ投与スケジュールの第１の投与からまたは第２のまたは最後の投与の３０日後から投与スケジュールの第２のまたは最後の投与の少なくとも１２ヵ月後まで、１２～１８ヵ月後まで、１２ヵ月後まで、または１８ヵ月後まで、特定的には、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性であり、またはベースラインで少なくとも１つの血清型に対し血清陽性である少なくとも１，５００例または少なくとも２，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに（特定的には、４～１６歳の対象の年齢群、４歳から９歳未満の対象の年齢群、２歳から９歳未満の対象の年齢群、４～５歳の対象の年齢群、６～１１歳の対象の年齢群、及び１２～１６歳の対象の年齢群から選択される年齢群で測定したときに）、下限が２５％を超える、複合ワクチン有効性である。特定的には、下限は、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、６５％を超え、６６％を超え、６７％を超え、６８％を超え、７０％を超え、または７５％を超え得る。特定的には、４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する複合ワクチン有効性の両側９５％信頼区間は、血清陽性及び血清陰性の対象を比較した場合、両側信頼区間の下限を１０％ポイント以内または１５％ポイント以内または２０％ポイント以内にする。特定の実施形態において、「安全」とは、両側９５％信頼区間で４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する複合ワクチン有効性であって、投与スケジュールの第１の投与から投与スケジュールの最後の投与の１２～１８ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な４～１６歳の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が６５％を超える、複合ワクチン有効性をもたらすことを意味する。

【0045】

「安全」という用語についての上記で定義される基準のうちの１つが満たされる場合、ワクチンは、本発明の意味の範囲内で安全とみなされる。この文脈において、安全は、特定的には、ベースラインの血清状態にかかわらず全ての対象にとって安全であるワクチンを指す。これは、ワクチンが、投与前の対象における過去のデング熱感染の発生の決定を必要とせずに投与することができることを意味する。好ましくは、ワクチンは、好ましくは血清状態にかかわらず、４歳から開始する全ての年齢群に関して、特定的には４～６０歳または４～１６歳に関して、上記で定義されるように安全である。この文脈における関連のある下位群は、９歳未満、２歳から９歳未満、４歳から９歳未満、４～５歳、６～１１歳及び１２～１６歳または４～１６歳の範囲内の任意の年齢群である。入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患に対するＶＥのさらなる定義については、ある特定の治療方法に関する以下の開示で言及する。

【0046】

本明細書で使用する場合、「ワクチン有効性」または「ＶＥ」は、ワクチン接種済みの人々の症例の比例的減少を測定する。ワクチン有効性（ＶＥ）は、ワクチン接種済みの人々及びワクチン未接種の人々における疾患のリスクを計算し、ワクチン未接種の人々に対するワクチン接種済み人々の疾患リスクの減少パーセンテージを決定することにより、測定される。ワクチン接種済み群の疾病の減少パーセンテージが高いほど、ワクチン有効性が高くなる。例えば、９０％のＶＥは、ワクチン接種済み群における疾患発生の９０％の減少、またはワクチン未接種の場合に予測される症例数の９０％の減少を示す。ワクチン有効性は、式：１００＊（１－ＨＲ）（式中、ＨＲは、ワクチンのハザード率（λｖ）をプラセボのハザード率（λｃ）で割ったもの、すなわち、ＨＲ＝λｖ／λｃとして定義されるハザード比である）によって計算される。λｖは、本明細書に開示する四価デング熱ワクチン組成物でワクチン接種した対象におけるハザード率を示し、λｃは、ワクチン接種未接種の対象、すなわち、プラセボ投与対象におけるハザード率を示す。ハザード率比ＨＲは、ファクターとしての試験ワクチンを用いたＣｏｘ比例ハザードモデルから推定され、年齢について調整され、地域によって層別化される。本明細書で使用する場合、「４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性」という用語は、ウイルス学的に確認されたデング熱疾患の原因となる血清型及び対象のベースラインの血清状態にかかわらないデング熱疾患のリスクに関するワクチン有効性として定義される。ワクチンは、複合有効性が３０％を超える場合に「有効」とみなされる。この文脈において、複合ワクチン有効性は、特定的には、４～１６歳の対象の年齢群、４歳から９歳未満の対象の年齢群、２歳から９歳未満の対象の年齢群、４～５歳の対象の年齢群、６～１１歳の対象の年齢群、及び１２～１６歳の対象の年齢群から選択される年齢群で決定したときに、特定的には、第２の投与から３０日後～第２の投与から１２ヵ月後または第２のワクチン接種から１８ヵ月後に決定したときに、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、７２％以上、または８０％以上であり得る。この文脈において、有効は、特定的には、ベースラインの血清状態にかかわらず全ての対象にとって有効であるワクチンを指す。好ましくは、ワクチンは、好ましくは、血清状態にかかわらず４歳から開始する全ての年齢群に関して、特定的には、血清状態にかかわらず４～６０歳または４～１６歳に関して有効である。この文脈における関連のある下位群は、９歳未満、２歳から９歳未満、４歳から９歳未満、４～５歳、６～１１歳及び１２～１６歳または４～１６歳の範囲内の任意の年齢群である。ある特定の実施形態において、「有効」とは、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、投与スケジュールの第１の投与から投与スケジュールの最後の投与の１８ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性の下限が６０％を超える、複合ワクチン有効性をもたらすことを意味する。さらなる具体的な有効性が定義され得る。本明細書で使用する場合、「血清陰性対象の４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性」は、ベースラインで血清陰性である対象で測定された有効性を指す。本明細書で使用する場合、「特定の血清型、例えば、血清型１に対するワクチン有効性」は、ウイルス学的に確認されたデング熱疾患の原因となる特定の血清型に関する有効性を指す。本明細書で使用する場合、「入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性」とは、入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱症例のみが考慮される有効性を指す。このようなワクチン有効性は、ベースラインで血清陰性または血清陽性である対象に関して、また、異なる年齢群毎に決定され得る。

【0047】

本明細書で使用する場合、「相対リスク」は、ウイルス学的に確認されたデング熱疾患の事象の数を本明細書に開示する単位用量で処置した対象数で割った値を、ウイルス学的に確認されたデング熱疾患の事象数をプラセボで処置した対象数で割った値で割ったものを意味する。本明細書で使用する場合、「４つ全ての血清型に対する複合相対リスク」という用語は、ウイルス学的に確認されたデング熱疾患の原因となる血清型及び対象のベースラインの血清状態にかかわらないデング熱疾患のリスクに関する相対リスクとして定義される。

【0048】

本明細書で使用する場合、「ワクチン接種」または「接種」は、対象が疾患の１つ以上の症状を発症するのを予防することを目的とする、対象へのワクチンの投与を指す。本明細書で使用する場合、「デング熱疾患に対するワクチン接種」または「デング熱疾患に対する接種」は、対象がデング熱疾患の１つ以上の症状を発症するのを予防することを目的とする、対象へのデング熱ワクチン組成物の投与を指す。原理的には、方法は、一次ワクチン接種と、任意選択で１つ以上のブースターワクチン接種とを含む。一次ワクチン接種は、保護的免疫応答を確立するための本明細書で開示する組成物または単位用量を投与するための一次投与スケジュールとして定義され、例えば、３ヵ月以内の、例えば、２回の投与からなる。本開示の範囲内で投与が言及される際は常に、このような投与は、ブースターワクチン接種として指定されない限り一次ワクチン接種を指す。ブースターワクチン接種とは、一次ワクチン接種後、例えば、一次ワクチン接種スケジュールの最後の投与、例えば、第２の投与の少なくとも１年後、または４～４．５年、または５もしくは１０年後においても行われる投与または投与スケジュールを指す。ブースター投与は、一次ワクチン接種の免疫応答を増強または再確立することを試みる。

【0049】

本明細書で使用する場合、「対象（単数または複数）」という用語は、ヒト対象（例えば、幼児、小児または成人）に限定される。「高齢対象（単数または複数）」という用語は、年齢が６０歳超、例えば、６１～１００歳、６１～９０歳、６１～８０歳、６１～７５歳、または６１～７０歳の対象を指す。

【0050】

本明細書で使用する場合、「対象集団」は、対象の群を指す。対象集団は、少なくとも４０例の対象、少なくとも５０例の対象、少なくとも６０例の対象、少なくとも１００例の対象または少なくとも１０００例の対象を指すことができ、ある特定のパラメーターによって定義される。対象集団を定義するために使用され得るパラメーターには、限定されるものではないが、対象がデング熱流行地域の出身であるか、またはデング熱非流行地域の出身であるかにかかわらず、対象の年齢及び対象の血清状態が含まれる。

【0051】

本明細書で使用する場合、「流行地域」は、この地域内の集団において疾患または感染性物質が絶えず存在しており、及び／または通常蔓延している地域を指す。本明細書で使用する場合、「非流行地域」は、疾患が存在しないか、または通常は蔓延していない地域を指す。したがって、「デング熱流行地域」は、デング熱ウイルスの感染症がベースラインレベルで絶えず維持される地理的地域を指す。「デング熱非流行地域」は、デング熱ウイルスの感染症がベースラインレベルで絶えず維持されない地理的地域である。したがって、「デング熱流行地域の出身」または「デング熱非流行地域の出身」の対象集団または対象は、上記で定義される地理的地域に居住している対象集団または対象を指す。地理的地域または対象集団がデング熱流行であるかそうでないかは、Ｂｈａｔｔ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｎａｔｕｒｅ ４９６（７４４６）：５０４－５０７及び補充資料ならびにＳｔａｎａｗａｙ ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｌａｎｃｅｔ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ．１６（６）：７１２－７２３及び補充資料に記載されているものなどの異なる計算方法によって決定され得る。デング熱流行地域及びデング熱疫学の概要は、例えば、ＷＨＯまたはＣＤＣによって定期的に公開されている。典型的なデング熱流行地域は、中南米、東南アジア及び太平洋諸島にあり、デング熱流行国には、オーストラリア、ブラジル、バングラディシュ、コロンビア、中国、ドミニカ共和国、インドネシア、インド、メキシコ、マレーシア、ニカラグア、ナイジェリア、パキスタン、パナマ、フィリピン、プエルトリコ、シンガポール、スリランカ、タイ及びベトナムが含まれるがこれらに限定されない。地域の感染力は、血清有病率として提供される血清有病性調査によって測定される。極めて高い感染力を有する地域は、８０％を超える血清有病率を有すると考えられる。本明細書で使用する場合、「地域」という用語は、血清有病率に関する場合、血清有病率が決定される可能性があるか、または知られている地理的地域、例えば、村、町、都市、地域、郡、州、地区または前述の一部または国全体を指す。

【0052】

本明細書で使用する場合、「血清状態」は、対象がある特定の感染性物質、特定的にはデング熱ウイルスに関して有する抗体の量を指す。本明細書で使用する場合、「血清陰性」または「血清ナイーブ」は、対象が、血清中にデング熱血清型ＤＥＮＶ－１、ＤＥＮＶ－２、ＤＥＮＶ－３、及びＤＥＮＶ－４のいずれか１つに対する中和抗体を有しないことを意味する。血清陰性または血清ナイーブ対象または対象集団は、４つのデング熱血清型の各１つについて１０未満の中和抗体力価によって定義される。少なくとも１つのデング熱血清型について１０以上の中和抗体力価を有する対象または対象集団は、当該デング熱血清型に関して「血清陽性」として定義される。ベースラインにおける血清状態は、本明細書に記載されるデング熱ワクチン組成物の投与前の血清状態を指す。

【0053】

本明細書で使用する場合、「中和抗体力価」は、それぞれのデング熱血清型を中和する対象の血清中の抗体の量を指す。ＤＥＮＶ－１、ＤＥＮＶ－２、ＤＥＮＶ－３、及びＤＥＮＶ－４に対する中和抗体力価は、ＷＨＯガイドライン（Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ Ｖａｃｃｉｎｅｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ（２００７）Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｐｌａｑｕｅ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ ｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｔｏ ｄｅｎｇｕｅ ｖｉｒｕｓｅｓ，ＷＨＯ／ＩＶＢ／０７．０７）に記載されているプラーク減少中和試験（ＰＲＮＴ）または本明細書に記載されるマイクロ中和（ＭＮＴ５０）アッセイなどの既知の方法を使用して対象の血清サンプルにおいて決定される。本明細書で使用する場合、「２０以下のデング熱血清型２の中和抗体力価のデング熱血清型４の中和抗体力価に対する比」は、デング熱血清型２の中和抗体力価をデング熱血清型４の中和抗体力価で割って得られた比が２０以下であることを意味する。すなわち、そのデング熱血清型２の中和抗体力価は、対象におけるデング熱血清型４の中和抗体力価の２０倍以下の高さである。

【0054】

本明細書で使用する場合、「幾何平均中和抗体力価」及び「ＧＭＴ」という用語は、対象集団における対象の血清中の対応するデング熱血清型に対する中和抗体の力価の幾何平均値を指す。幾何平均値は、よく知られている式によって計算される。本明細書で使用する場合、「２０以下のデング熱血清型２のＧＭＴのデング熱血清型４のＧＭＴに対する比」は、デング熱血清型２の幾何平均中和抗体力価（ＧＭＴ ＤＥＮＶ－２）をデング熱血清型４の幾何平均中和抗体力価（ＧＭＴ ＤＥＮＶ－４）で割って得られた比が２０以下であることを意味する。すなわち、そのデング熱血清型２の幾何平均中和抗体力価は、対象集団におけるデング熱血清型４の幾何平均中和抗体力価の２０倍以下の高さである。

【0055】

本明細書で使用する場合、「免疫応答」とは、デング熱ワクチンの投与に対する対象の応答を指す。特定的には、免疫応答には、１つ以上のデング熱血清型に対する中和抗体の形成が含まれる。また免疫応答には、細胞媒介応答の刺激または非構造タンパク質（例えば、ＮＳ１）に対する抗体の形成が含まれ得る。免疫応答が本明細書に記載の発明の単位用量の投与によって刺激されるのは、前述の単位用量の前述の投与後に、少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型、好ましくは４つ全てのデング熱ウイルス血清型に対する中和抗体の力価が上昇する場合である。免疫応答が本明細書に記載の発明の単位用量の投与によって刺激されるのは、当該単位用量の当該投与後に、デング熱ウイルスタンパク質に由来するペプチドで刺激される末梢血単球細胞によるインターフェロンガンマの分泌が上昇する場合である。免疫応答が本明細書に記載の発明の単位用量の投与によって刺激されるのは、当該単位用量の当該投与後に、非構造タンパク質（例えば、ＮＳ１）に対する抗体の力価が上昇する場合である。特定の実施形態において、本明細書に記載の本発明の再構成された単位用量の投与は、１つ以上のデング熱血清型に対する中和抗体の形成、細胞媒介応答、及び非構造タンパク質（例えば、ＮＳ１）に対する抗体の形成を刺激する。

【0056】

本明細書で使用する場合、「バランスのとれた免疫応答」は、４つのデング熱血清型に対する免疫応答が、４つ全てのデング熱血清型による感染に対する保護をもたらすのに十分であり、好ましくは４つのデング熱血清型に対する免疫応答が同様の強さを有することを意味する。特定的には、本明細書に記載の発明の第１の再構成された単位用量の投与後１８０日目または３６５日目での４つのデング熱血清型に対する中和抗体力価は同様であり、すなわち、それは、３０倍未満、２５倍未満または２０倍未満だけ異なる。

【0057】

四価デング熱ワクチンの各個々の成分についての濃度パーセンテージの計算のための基準値として機能する「ｐｆｕ／０．５ｍｌでの総濃度」は、３．６０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型１、４．００ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型２、４．６０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型３及び５．１１ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型４を含む１つの例示的な四価ワクチン組成物のために示される。
主として、濃度の対数値は数値に変換される。この変換の結果は、血清型１については４×１０^３ｐｆｕ／０．５ｍｌ、血清型２については１×１０^４ｐｆｕ／０．５ｍｌ、血清型３については４×１０^４ｐｆｕ／０．５ｍｌ及び血清型４については１．３×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌである。ｐｆｕ／０．５ｍｌでの総濃度は、１．８４×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌをもたらす先行数値の合計である。

【0058】

血清型１、２、３、及び４の各々についての「濃度パーセンテージ」は、個々の血清型の濃度数値（ｐｆｕ／０．５ｍｌとして表される）を総濃度（ｐｆｕ／０．５ｍｌで表される）で除算し、その結果に１００を乗算することによって得られる。すなわち、
血清型１の濃度パーセンテージ＝（４×１０^３ｐｆｕ／０．５ｍｌ÷１．８４×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌ）×１００＝２％
血清型２の濃度パーセンテージ＝（１×１０^４ｐｆｕ／０．５ｍｌ÷１．８４×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌ）×１００＝５％
血清型３の濃度パーセンテージ＝（４×１０^４ｐｆｕ／０．５ｍｌ÷１．８４×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌ）×１００＝２２％
血清型４の濃度パーセンテージ＝（１．３×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌ÷１．８４×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌ）×１００＝７１％。
濃度パーセンテージは、四捨五入して整数にする。

【0059】

本明細書で使用する場合、「同時」投与とは、デング熱ワクチン及びＡ型肝炎ワクチンなどの少なくとも２つの異なるワクチンを同日に投与することを意味する。「同日」は、２４時間以内（例えば、１暦日内）という通常の意味を有する。同時投与は、同じ医師によって、例えば、同一の医学的診察中に投与され得る。

【0060】

本明細書で使用する場合、「連続」投与とは、少なくとも２つの異なるワクチン（例えば、デング熱ワクチン及び黄熱ワクチン、またはデング熱ワクチン及びＡ型肝炎ワクチン）を、異なる日または後続の日に、例えば９０日以内に、ただし複合投与スケジュールで投与することを意味する。

【0061】

本明細書で使用する場合、「慢性疾患または状態」という用語には、高齢対象で３ヵ月以上持続する疾患及び状態が含まれる。特定的には、それには、糖尿病、高血圧、アレルギー、過去の脳卒中、虚血性心疾患、慢性腎障害及び慢性閉塞性肺疾患が含まれる。

【0062】

本明細書で使用する場合、「免疫機能不全」という用語は、免疫系の少なくとも１つの成分の少なくとも１つの機能が、より若い対象、すなわち、６０歳未満の年齢を有する対象におけるものよりも弱いことを意味する。これらの機能には、デング熱ウイルスによって誘発される酸化ストレスに対する単球の抗酸化応答の低下及びデング熱ウイルス感染症に応答するＴ細胞応答及びサイトカイン産生の低下が含まれる。

【0063】

本明細書で使用する場合、６歳未満の小児における「非自発的全身性有害事象」は、各ワクチン接種後１４日内に生じた発熱、過敏性／癇癪、眠気及び食欲の喪失として定義され、６歳以上の小児では、各ワクチン接種後１４日内に生じた発熱、頭痛、無力症、不快感及び筋肉痛として定義される。

【0064】

本明細書で使用する場合、「非自発的局所有害事象」は、各ワクチン接種後７日以内に生じた注射部位の疼痛、注射部位の紅斑、注射部位の腫れである。

【0065】

本明細書で使用する場合、「自発的有害事象」は、上記で定義される非自発的局所または全身性ＡＥではない任意の有害事象（ＡＥ）である。

【0066】

本明細書で使用する場合、「重篤な有害事象」または「ＳＡＥ」は、任意の用量で死亡に至る、生命を脅かす、入院または既存の入院の延長を必要とする、持続的または重大な障害／能力不全をもたらす、先天性異常／出生時欠損である、または上記の基準以外の理由により医学的に重要である任意の予期せぬ医学的事象または影響である。

【0067】

試験ワクチン（複数可）に対する非自発的全身性ＡＥ（非自発的局所ＡＥが関連していると考えられる）を含む各ＡＥの関係は、以下のカテゴリーを使用して評価される：本明細書で使用する場合、「ＩＰ関連ＡＥ」または「ワクチン関連ＡＥ」は、ワクチンとＡＥとの間の関係があること（見込みの程度の決定を伴わない）；ワクチンがＡＥに寄与した合理的可能性があることを意味する。本明細書で使用する場合、「非ＩＰ関連」または「非ワクチン関連」は、ワクチンとＡＥとの間の関係があるという疑いがないこと；他のより可能性のある原因があること、及びワクチンの投与がＡＥに寄与したと疑われないことを意味する。

【0068】

本明細書で使用する場合、「２～６０歳」または「１８～６０歳」である対象または対象集団は、本明細書に記載されるデング熱ワクチン組成物の投与の１日目に２～６０歳または１８～６０歳である対象または対象集団を指す。

【0069】

本明細書で使用する場合、「％ポイント」は、２つの％値の％値の差を指す。例えば、％での２つの値が５％ポイント以内にある場合、例えば、１つの値が１％で、２つ目の値が６％であることを指す。

【0070】

本明細書で使用する場合、「投与前の対象における過去のデング熱感染の判定」という用語は、適切に認証された血清学的試験により、例えば、実施例２に記載のＭＮＴ５０試験などの本明細書に開示する方法または地域疾患疫学に基づく特異性及び交差反応性の観点から適正な性能を有する任意の血清試験によって実験室で確認されたデング熱の既往歴があるという過去のデング熱感染がワクチン接種前に評価されなければならないことを意味する。

【0071】

本明細書で使用する場合、％ｗ／ｖは％ｍｇ／ｍｌを指し、例えば、１５０ｍｇ／ｍｌは１５％ｗ／ｖである。

【0072】

本明細書で使用する場合、「Ａ型肝炎ウイルス」という用語は「ＨＡＶ」と略記されることがある。

【0073】

本明細書で使用する場合、「プラセボ」という用語は「Ｐｂｏ」と略記されることがある。

【0074】

本明細書で使用する場合、「ベースラインでＡ型肝炎血清陰性」または「（ベースラインで）Ａ型肝炎ナイーブ」は各々、対象が血清中に予め定義された量の抗Ａ型肝炎抗体を有しないことを意味する。定量的には、対象のＡ型肝炎血清陰性度は、抗Ａ型肝炎抗体レベル＜１０ｍＩＵ／ｍｌとして定義される。ＥＬＩＳＡによって抗Ａ型肝炎抗体を決定する場合、定量化の下位レベルは１２．５ｍＩＵ／ｍｌであり、これが血清陰性を決定するための抗ＨＡＶ抗体の事実上の下位レベルとなる。抗Ａ型肝炎抗体レベル≧１２．５ｍＩＵ／ｍｌの対象をＡ型肝炎血清陽性として定義する。抗Ａ型肝炎抗体を決定するためのＥＬＩＳＡは、例えば、Ｂｅｃｋ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｔｒａｖｅｌ Ｍｅｄ ２００４；１１：２０１－２０７に開示されている。

【0075】

本明細書で使用する場合、「ベースラインで」は、最初のワクチン接種の前に対象の血清状態を最後に測定した時点を指す。

【0076】

本明細書で使用する場合、「ｍＩＵ／ｍｌ」という単位は、１ミリメートル当たりのミリ国際単位を意味する。この濃度単位は、（例えば、ワクチン接種前または接種後に測定したときの）対象の血清中の抗Ａ型肝炎抗体の量を指す。本明細書で使用する場合、本発明の「Ａ型肝炎ワクチンのウイルス抗原活性」は、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を用いたＷＨＯの標準勧告の観点から表される。このＷＨＯの勧告（２０１２年６月発行のＷＨＯ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｈｅｅｔ“Ｏｂｓｅｒｖｅｄ Ｒａｔｅ ｏｆ Ｖａｃｃｉｎｅ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ － Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ａ Ｖａｃｃｉｎｅ”参照）によると、Ａ型肝炎ワクチンのウイルス抗原活性はＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）の観点で表される。Ａ型肝炎ワクチンのウイルス抗原活性は、例えば、Ａｎｄｒｅ ＦＥ．，Ｈｅｐｂｕｒｎ Ａ．Ｄ’Ｈｏｎｄｔ Ｅ．，“Ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｖａｃｃｉｎｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ”，Ａ．Ｐｒｏｇ Ｍｅｄ Ｖｉｒｏｌ １９９０；３７：７２－９５に従い、ＥＬＩＳＡによって決定することができる。

【0077】

本明細書で使用する場合、「ＣＣＩＤ」という用語は、細胞培養物の５０％に感染するウイルス（例えば、ワクチンウイルス）の量を指す。ＣＣＩＤ５０アッセイは、統計的力価計算を用いた限界希釈アッセイである（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ Ｄ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ．２０１０；２０１（３）：３７０－７））。

【0078】

本明細書で使用する場合、Ａ型肝炎ワクチン及び四価デング熱ワクチンの同日同時投与に関する「非劣性」とは、特定的には、ＨＡＶ及びプラセボを受ける対象群（同日同時に受ける対象群、すなわち対照対象集団）のＳＰＲと、ＨＡＶ及びＴＤＶを（同日同時に）受ける対象群のＳＰＲとの間の血清保護率（ＳＰＲ）の差が、１０％に設定した非劣性マージンよりも低い両側９５％信頼区間の上限を有する場合に結論付けられ、このとき血清保護率は、１日目に同時投与してから３０日後の測定値に基づいており、ニューコムスコア法を用いて算出される。非劣性臨床試験は、少なくとも２つの治療方法を比較するように設計された試験であり、本事例では、デング熱ワクチン及びＡ型肝炎ワクチンの同時投与と、デング熱ワクチンまたはＡ型肝炎ワクチンのいずれかの単剤投与とを比較する。

【0079】

本明細書で使用する場合、「血清保護率」（「ＳＰＲ」と略記）という用語は、ベースラインでＨＡＶまたはＤＥＮ－ナイーブの対象が最初のワクチン接種から３０日後（１ヵ月後）にそれぞれＨＡＶまたはＤＥＮＶに対し血清保護されている割合／パーセンテージによって定義される。

【0080】

本明細書で使用する場合、「対照対象集団」という用語は、臨床試験設定（例えば、非劣性臨床試験）で、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量の同時投与を受けるのではなく、１つのｖｅｒｕｍ（例えば、Ａ型肝炎ワクチンまたはデング熱ワクチン組成物の単位用量）及びプラセボを同じ日に受ける対象の群を指す。

【0081】

本明細書で使用する場合、「相乗性（ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ）」または「相乗作用（ｓｙｎｅｒｇｙ）」という用語は、対象または対象集団に、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を、同日同時に投与することによる効果として定義され、当該投与は、デング熱ウイルスの各血清型に対し、対応するＡ型肝炎ワクチン及びプラセボの同日同時投与、及び／またはデング熱ワクチン組成物の単位用量及びプラセボの同日同時投与（単剤投与）よりも高い抗Ａ型肝炎抗体濃度及び／または高い中和抗体の平均力価をもたらす。このように、単剤投与に比べて同時投与後の抗体濃度が高いことは、同時投与に有利な徴候である。

【図面の簡単な説明】

【0082】

【図1】ＴＤＶに含有される４つのデング熱株の遺伝子構造。赤抜きの三角形は、５’ＮＣＲ、ＮＳ１及びＮＳ３タンパク質に存在する３つの弱毒化変異を示している。ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４株は、デング熱血清型１、３、及び４に由来するｐｒＭ及びＥ遺伝子がそれぞれＴＤＶ－２骨格内に挿入されているキメラウイルスである。

【図2】中和抗体の力価を決定するために使用されるマイクロ中和試験（ＭＮＴ）を示す概略図。

【図3】実施例３の臨床試験のフロー図。

【図4】ベースラインの血清状態毎のパート１試験期間中の経時的なＡ）ウイルス学的に確認されたデング熱症例及びＢ）入院したウイルス学的に確認されたデング熱症例の累積発生率（安全性セットデータ；１８ヵ月目で切り取られて示されたデータ）。表は、パート１試験期間の終了までの様々な時点における追跡調査下の参加者の数を示している。

【図5】実施例３に記載の第ＩＩＩ相試験の試験設計。

【図6】実施例４に記載のＨＡＶ及びＴＤＶの同時投与試験の試験設計のスキーム。

【発明を実施するための形態】

【0083】

デング熱ウイルス株
デング熱ウイルスは、フラビウイルス科の一本鎖プラス鎖ＲＮＡウイルスである。分類法が表１にまとめられている。フラビウイルス科には、３つの属、すなわち、フラビウイルス属、ヘパシウイルス属及びペスチウイルス属が含まれる。フラビウイルス属は、非常に病原性があり、かつ潜在的に出血性の熱ウイルス、例えば、黄熱病ウイルス及びデング熱ウイルス、脳炎ウイルス、例えば、日本脳炎ウイルス、マレーバレー脳炎ウイルス及びウエストナイルウイルス、ならびに多数のより病原性が低いウイルスを含有する。

【0084】

【表1】

【0085】

フラビウイルスゲノムは、５’から３’方向で（図１参照）：
－５’－ノンコーディング領域（５’－ＮＣＲ）、
－カプシドタンパク質（Ｃ）コード領域、
－プレメンブレンタンパク質（ｐｒＭ）コード領域、
－エンベロープタンパク質（Ｅ）コード領域、
－非構造タンパク質（ＮＳ１、ＮＳ２Ａ、ＮＳ２Ｂ、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５）をコードする領域及び
－３’ノンコーディング領域（３’－ＮＣＲ）、を含む。

【0086】

ウイルス構造タンパク質は、Ｃ、ｐｒＭ及びＥであり、非構造タンパク質は、ＮＳ１～ＮＳ５である。構造及び非構造タンパク質は、単一のポリタンパク質として翻訳され、細胞及びウイルスプロテアーゼによって処理される。

【0087】

本明細書に記載の発明の単位用量は、デング熱血清型１、デング熱血清型２、デング熱血清型３、及びデング熱血清型４を表す４つの弱毒化生デング熱ウイルス株（四価デング熱ウイルス組成物）を含むデング熱ウイルス組成物を含む。好ましくは、組成物は、キメラデング熱ウイルス及び任意選択で少なくとも１つの非キメラデング熱ウイルス、特定的には、弱毒化生ＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３ウイルス株（ＴＤＶ－２）から誘導される分子的に特徴付けられ、クローン化されたデング熱血清型２株、ならびにＴＤＶ－２株に由来する構造タンパク質ｐｒＭ及びＥを他のデング熱血清型に由来する対応する構造タンパク質に置き換え、以下のキメラデング熱株：
－ＤＥＮＶ－２／１キメラ（ＴＤＶ－１）、
－ＤＥＮＶ－２／３キメラ（ＴＤＶ－３）及び
－ＤＥＮＶ－２／４キメラ（ＴＤＶ－４）、をもたらすことによってＴＤＶ－２株から誘導された３つのキメラデング熱株を含む。

【0088】

遺伝子修飾された四価デング熱ワクチンＴＤＶは、分子的に特徴付けられ、クローン化されたデング熱－２ウイルス株（ＴＤＶ－２）に基づく。この弱毒化ＴＤＶ－２株は、Ｍａｈｉｄｏｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂａｎｇｋｏｋ，Ｔｈａｉｌａｎｄ（Ｋｉｎｎｅｙ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ２３０（２）：３００－３０８）において元々単離された実験室由来の弱毒化ＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３ウイルス株のｃＤＮＡクローニングによって生成された。ＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３は、初代イヌ腎臓（ＰＤＫ）細胞において３２℃で５３回の連続継代によって生成された（Ｂｈａｍａｒａｐｒａｖａｔｉ ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｂｕｌｌ． Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎ．６５（２）：１８９－１９５）。

【0089】

弱毒化ＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３株（ＴＤＶ－２の前駆体）は、野生型ウイルス株ＤＥＮ－２ １６６８１（配列番号１１）から誘導され、以下のように９個のヌクレオチドにおいて野生型とは異なる（Ｋｉｎｎｅｙ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ２３０（２）：３００－３０８）：
（ｉ）５’－ノンコーディング領域（ＮＣＲ）－５７（ｎｔ－５７ ＣからＴ）：主要弱毒化遺伝子座
（ｉｉ）ｐｒＭ－２９ ＡｓｐからＶａｌ（ｎｔ－５２４ ＡからＴ）
（ｉｉｉ）ｎｔ－２０５５ ＣからＴ（Ｅ遺伝子）サイレント変異
（ｉｖ）ＮＳ１－５３ ＧｌｙからＡｓｐ（ｎｔ－２５７９ ＧからＡ）：主要弱毒化遺伝子座
（ｖ）ＮＳ２Ａ－１８１ ＬｅｕからＰｈｅ（ｎｔ－４０１８ ＣからＴ）
（ｖｉ）ＮＳ３－２５０ ＧｌｕからＶａｌ（ｎｔ－５２７０ ＡからＴ）：主要弱毒化遺伝子座
（ｖｉｉ）ｎｔ－５５４７（ＮＳ３遺伝子） ＴからＣ サイレント変異
（ｖｉｉｉ）ＮＳ４Ａ－７５ ＧｌｙからＡｌａ（ｎｔ－６５９９ ＧからＣ）
^＊ｎｔ－８５７１ ＣからＴ（ＮＳ５遺伝子）サイレント変異

【0090】

５’ノンコーディング領域（ＮＣＲ）（ヌクレオチド５７）（変異（ｉ））、ＮＳ－１（配列番号４のアミノ酸８２８）（変異（ｉｖ））及びＮＳ－３遺伝子（配列番号４のアミノ酸１７２５）（変異（ｖｉ））に位置する３つのヌクレオチド変化は、ＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３株の弱毒化表現型のための基礎を形成する（Ｂｕｔｒａｐｅｔ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７４（７）：３１１１－３１１９）（表２）。これらの３つの変異は、「弱毒化変異」として本明細書で称され、ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４に含まれる。

【0091】

【表2】

【0092】

１つの実施形態において、ＴＤＶ－２は、３つの弱毒化変異に加えて、
ａ）ｐｒＭ遺伝子におけるヌクレオチド５２４でのアデニンからチミジンへの変異であって、位置１４３でのアスパラギンからバリンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｂ）Ｅ遺伝子におけるヌクレオチド２０５５でのシトシンからチミジンへのサイレント変異、及び／または
ｃ）ＮＳ２Ａ遺伝子におけるヌクレオチド４０１８でのシトシンからチミジンへの変異であって、位置１３０８でのロイシンからフェニルアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｄ）ＮＳ３遺伝子におけるヌクレオチド５５４７でのチミジンからシトシンへのサイレント変異、及び／または
ｅ）ＮＳ４Ａ遺伝子におけるヌクレオチド６５９９でのグアニンからシトシンへの変異であって、位置２１６８でのグリシンからアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｆ）ｐｒＭ遺伝子におけるヌクレオチド９００でのチミジンからシトシンへのサイレント変異、から選択される１つ以上の変異を含む。
ＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３のＮＳ５遺伝子におけるヌクレオチド８５７１でのシトシンからチミジンへのサイレント変異は、ＴＤＶ－２株には存在しない。

【0093】

別の実施形態において、ＴＤＶ－２は、３つの弱毒化変異に加えて、
ｇ）ｐｒＭ遺伝子におけるヌクレオチド５９２でのアデニンからグアニンへの変異であって、位置１６６でのリジンからグルタミンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｈ）ＮＳ５遺伝子におけるヌクレオチド８８０３でのアデニンからグアニンへの変異であって、位置２９０３でのイソロイシンからバリンへのアミノ酸変化をもたらす変異 から選択される１つ以上の変異を含む。

【0094】

別の実施形態において、ＴＤＶ－２は、３つの弱毒化変異に加えて、変異ａ）及びｇ）、好ましくは変異ａ）、ｇ）、ｃ）、ｅ）、及びｈ）、より好ましくは変異ａ）、ｇ）、ｃ）、ｅ）、ｈ）、及びｂ）、さらにより好ましくは変異ａ）、ｇ）、ｃ）、ｅ）、ｈ）、ｂ）、及びｄ）、最も好ましくは変異ａ）～ｈ）を含む。ＴＤＶ－２のヌクレオチド位置及びアミノ酸位置は、配列番号３に示されるヌクレオチド配列及び配列番号４に示されるアミノ酸配列を指す。

【0095】

デング熱ウイルスの構造エンベロープ（Ｅ）タンパク質及びプレメンブレン（ｐｒＭ）タンパク質は、中和保護抗体応答を誘発する一次抗原として同定されている（Ｐｌｏｔｋｉｎ ２００１）。四価デング熱ワクチン（ＴＤＶ）の作製のため、標準的な分子遺伝子操作法（Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７７（２１）：１１４３６－１１４４７）を使用してＤＥＮＶ－２のｐｒＭ及びＥの糖タンパク質をコードする核酸配列をＤＥＮＶ－１、ＤＥＮＶ－３、及びＤＥＮＶ－４の野生型株ＤＥＮＶ－１ １６００７、ＤＥＮＶ－３ １６５６２またはＤＥＮＶ－４ １０３６ウイルスにそれぞれ由来する対応する野生型ｐｒＭ及びＥの糖タンパク質をコードする核酸配列に置き換えることによってＴＤＶ－２を修飾した（表３参照）。

【0096】

【表3】

【0097】

デング熱ワクチン組成物に含まれる４つのＴＤＶ株の図が図１に示されている。

【0098】

キメラデング熱株ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４は、表３にそれぞれ示されるように、ＤＥＮＶ－１、ＤＥＮＶ－３、またはＤＥＮＶ－４ウイルスの表面抗原ｐｒＭ及びＥを発現し、ＴＤＶ－２の弱毒化の原因となる遺伝子的変化を保持している。したがって、ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４株の各々は、表２に記載の弱毒化変異を含む。

【0099】

１つの実施形態において、ＴＤＶ－１は、３つの弱毒化変異に加えて、
ｃ）ＮＳ２Ａ遺伝子におけるヌクレオチド４０１８でのシトシンからチミジンへの変異であって、位置１３０８でのロイシンからフェニルアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｄ）ＮＳ３遺伝子におけるヌクレオチド５５４７でのチミジンからシトシンへのサイレント変異、及び／または
ｅ）ＮＳ４Ａ遺伝子におけるヌクレオチド６５９９でのグアニンからシトシンへの変異であって、位置２１６８でのグリシンからアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｉ）Ｅ遺伝子におけるヌクレオチド１５７５でのチミジンからシトシンへのサイレント変異、及び／または
ｊ）ｐｒＭ－Ｅ遺伝子とＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３骨格との間の接合部位におけるヌクレオチド４５３でのアデニンからグアニンへのサイレント変異、及び／または
ｋ）ｐｒＭ－Ｅ遺伝子とＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３骨格との間の接合部位におけるヌクレオチド２３８１／２３８２でのチミジン－グアニンからシトシン－シトシンへの変異であって、位置７６２でのバリンからアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、から選択される１つ以上の変異を含む。

【0100】

別の実施形態において、ＴＤＶ－１は、３つの弱毒化変異に加えて、
ｌ）ＮＳ２Ａ遺伝子におけるヌクレオチド３８２３でのアデニンからシトシンへの変異であって、位置１２４３でのイソロイシンからロイシンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｍ）ＮＳ２Ｂ遺伝子におけるヌクレオチド４４０７でのアデニンからチミジンへの変異であって、位置１４３７でのグルタミンからアスパラギンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｎ）ＮＳ４Ｂ遺伝子におけるヌクレオチド７３１１でのアデニンからグアニンへのサイレント変異、から選択される１つ以上の変異を含む。

【0101】

別の実施形態において、ＴＤＶ－１株は、３つの弱毒化変異に加えて、変異ｌ）及びｍ）、好ましくは変異ｌ）、ｍ）、ｃ）、及びｅ）、さらにより好ましくは変異ｌ）、ｍ）、ｃ）、ｅ）、ｄ）及びｎ）、最も好ましくは変異ｌ）、ｍ）、ｃ）、ｅ）、ｄ）、ｎ）、ｉ）、ｊ）、及びｋ）を含む。ＴＤＶ－１のヌクレオチド位置及びアミノ酸位置は、配列番号１に示されるヌクレオチド配列及び配列番号２に示されるアミノ酸配列を指す。

【0102】

１つの実施形態において、ＴＤＶ－３は、３つの弱毒化変異に加えて、
ｃ）ＮＳ２Ａ遺伝子におけるヌクレオチド４０１２でのシトシンからチミジンへの変異であって、位置１３０６でのロイシンからフェニルアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｄ）ＮＳ３遺伝子におけるヌクレオチド５５４１でのチミジンからシトシンへのサイレント変異、及び／または
ｅ）ＮＳ４Ａ遺伝子におけるヌクレオチド６５９３でのグアニンからシトシンへの変異であって、位置２１６６でのグリシンからアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｊ）ｐｒＭ－Ｅ遺伝子とＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３骨格との間の接合部位におけるヌクレオチド４５３でのアデニンからグアニンへのサイレント変異、及び／または
ｋ）ｐｒＭ－Ｅ遺伝子とＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３骨格との間の接合部位におけるヌクレオチド２３７５／２３７６でのチミジン－グアニンからシトシン－シトシンへの変異であって、位置７６０でのバリンからアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｏ）ｐｒＭ遺伝子におけるヌクレオチド５５２でのシトシンからチミジンへのサイレント変異、及び／または
ｐ）Ｅ遺伝子におけるヌクレオチド１９７０でのアデニンからチミジンへの変異であって、位置６２５でのヒスチジンからロイシンへのアミノ酸変化をもたらす変異、から選択される１つ以上の変異を含む。

【0103】

別の実施形態において、ＴＤＶ－３は、３つの弱毒化変異に加えて、
ｑ）Ｅ遺伝子におけるヌクレオチド１６０３でのアデニンからチミジンへの変異であって、位置５０３でのトレオニンからセリンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｒ）ＮＳ５遺伝子におけるヌクレオチド７６２０でのアデニンからグアニンへのサイレント変異、から選択される１つ以上の変異を含む。

【0104】

別の実施形態において、ＴＤＶ－３は、３つの弱毒化変異に加えて、変異ｐ）及びｑ）、好ましくは変異ｐ）、ｑ）、ｃ）、及びｅ）、さらにより好ましくは変異ｐ）、ｑ）、ｃ）、ｅ）、ｄ）、及びｒ）、最も好ましくは変異ｐ）、ｑ）、ｃ）、ｅ）、ｄ）、ｒ）、ｊ）、ｋ）、及びｏ）を含む。ＴＤＶ－３のヌクレオチド位置及びアミノ酸位置は、配列番号５に示されるヌクレオチド配列及び配列番号６に示されるアミノ酸配列を指す。

【0105】

１つの実施形態において、ＴＤＶ－４は、３つの弱毒化変異に加えて、
ｃ）ＮＳ２Ａ遺伝子におけるヌクレオチド４０１８でのシトシンからチミジンへの変異であって、位置１３０８でのロイシンからフェニルアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｄ）ＮＳ３遺伝子におけるヌクレオチド５５４７でのチミジンからシトシンへのサイレント変異、及び／または
ｅ）ＮＳ４Ａ遺伝子におけるヌクレオチド６５９９でのグアニンからシトシンへの変異であって、位置２１６８でのグリシンからアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｊ）ｐｒＭ－Ｅ遺伝子とＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３骨格との間の接合部位におけるヌクレオチド４５３でのアデニンからグアニンへのサイレント変異、及び／または
ｋ）ｐｒＭ－Ｅ遺伝子とＤＥＮ－２ ＰＤＫ－５３骨格との間の接合部位におけるヌクレオチド２３８１／２３８２でのチミジン－グアニンからシトシン－シトシンへの変異であって、位置７６２でのバリンからアラニンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｓ）Ｃ遺伝子におけるヌクレオチド３９６でのアデニンからシトシンへの変異であって、位置１００でのアルギニンからセリンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｔ）Ｅ遺伝子におけるヌクレオチド１４０１でのアデニンからグアニンへのサイレント変異、及び／または
ｕ）Ｅ遺伝子におけるヌクレオチド２０２７でのシトシンからチミジンへの変異であって、位置６４４でのアラニンからバリンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｖ）Ｅ遺伝子におけるヌクレオチド２２７５でのアデニンからシトシンへの変異であって、位置７２７でのメチオニンからロイシンへのアミノ酸変化をもたらす変異、から選択される１つ以上の変異を含む。

【0106】

別の実施形態において、ＴＤＶ－４は、３つの弱毒化変異に加えて、
ｗ）Ｃ遺伝子におけるヌクレオチド２２５でのアデニンからチミジンへのサイレント変異、及び／または
ｘ）ＮＳ２Ａ遺伝子におけるヌクレオチド３６７４でのアデニンからグアニンへの変異であって、位置１１９３でのアスパラギンからグリシンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｙ）ＮＳ２Ａ遺伝子におけるヌクレオチド３７７３でのアデニンからアデニン／グアニンミックスへの変異であって、位置１２２６でのリジンからリジン／アスパラギンミックスへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｚ）ＮＳ３遺伝子におけるヌクレオチド５３９１でのシトシンからチミジンへのサイレント変異、及び／または
ａａ）ＮＳ４Ａ遺伝子におけるヌクレオチド６４３７でのシトシンからチミジンへの変異であって、位置２１１４でのアラニンからバリンへのアミノ酸変化をもたらす変異、及び／または
ｂｂ）ＮＳ４Ｂ遺伝子におけるヌクレオチド７０２６でのチミジンからチミジン／シトシンミックスへのサイレント変異、及び／または
ｃｃ）ＮＳ５遺伝子におけるヌクレオチド９７５０でのアデニンからシトシンへのサイレント変異、から選択される１つ以上の変異を含む。

【0107】

別の実施形態において、ＴＤＶ－４は、３つの弱毒化変異に加えて、変異ｓ）、ｕ）、及びｖ）、好ましくは変異ｓ）、ｕ）、ｖ）、ｃ）、ｅ）、ｘ）、ｙ）、及びａａ）、さらにより好ましくは変異ｓ）、ｕ）、ｖ）、ｃ）、ｅ）、ｘ）、ｙ）、ａａ）、及びｗ）、さらにより好ましくは変異ｓ）、ｕ）、ｖ）、ｃ）、ｅ）、ｘ）、ｙ）、ａａ）、ｗ）、ｄ）、ｚ）、ｂｂ）、及びｃｃ）、最も好ましくは変異ｓ）、ｕ）、ｖ）、ｃ）、ｅ）、ｘ）、ｙ）、ａａ）、ｗ）、ｄ）、ｚ）、ｂｂ）、ｃｃ）、ｊ）、ｋ）、及びｔ）を含む。ＴＤＶ－４のヌクレオチド位置及びアミノ酸位置は、配列番号７に示されるヌクレオチド配列及び配列番号８に示されるアミノ酸配列を指す。

【0108】

好ましい実施形態において、ＴＤＶ－１は、配列番号１のヌクレオチド配列を有し、ＴＤＶ－２は、配列番号３のヌクレオチド配列を有し、ＴＤＶ－３は、配列番号５のヌクレオチド配列を有し、及び／またはＴＤＶ－４は、配列番号７のヌクレオチド配列を有する。さらに好ましい実施形態において、ＴＤＶ－１は、配列番号２のアミノ酸配列を有し、ＴＤＶ－２は、配列番号４のアミノ酸配列を有し、ＴＤＶ－３は、配列番号６のアミノ酸配列を有し、ＴＤＶ－４は、配列番号８のアミノ酸配列を有する。さらに好ましい実施形態において、ＴＤＶ－１は、配列番号２のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を有し、ＴＤＶ－２は、配列番号４のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を有し、ＴＤＶ－３は、配列番号６のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を有し、ＴＤＶ－４は、配列番号８のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を有する。

【0109】

【表4】

【0110】

したがって、特定の好ましい実施形態において、本明細書に記載の発明の単位用量は、弱毒化生デング熱ウイルス株ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４を含み、ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４は、ＴＤＶ－２に基づいており、それぞれＤＥＮＶ－１、－３、及び－４のｐｒＭ及びＥ領域を含む。別の特定の好ましい実施形態において、ＴＤＶ－１は、配列番号１に記載のヌクレオチド配列及び配列番号２に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－２は、配列番号３に記載のヌクレオチド配列及び配列番号４に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－３は、配列番号５に記載のヌクレオチド配列及び配列番号６に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－４は、配列番号７に記載のヌクレオチド配列及び配列番号８に記載のアミノ酸配列を特徴とする。

【0111】

ＤＥＮＶ－３のＥタンパク質は、ＤＥＮＶ－２のＥタンパク質よりも２つ少ないアミノ酸を有する。そのため、配列番号５のヌクレオチド２３７４及び配列番号６のアミノ酸７６０でＤＥＮＶ－３のＥ領域の後に開始するＴＤＶ－２のヌクレオチド及びコードされるアミノ酸骨格は、元々のＴＤＶ－２ヌクレオチド及びアミノ酸位置よりもそれぞれ６ヌクオチド及び２アミノ酸少ない。

【0112】

デング熱ワクチン組成物
本発明は、部分的には、記載のようなデング熱ワクチン組成物の単位用量を対象とする。デング熱ワクチン組成物は、デング熱ウイルス組成物とも称される四価デング熱ウイルス組成物及び医薬的に許容される賦形剤を含む。

【0113】

デング熱ウイルス組成物、ウイルス濃度及び％濃度
本発明は、部分的には、デング熱ワクチン組成物の単位用量であって、デング熱ワクチン組成物が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株：
（ｉ）好ましくは少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型１、
（ｉｉ）好ましくは少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型２、
（ｉｉｉ）好ましくは少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型３、及び
（ｉｖ）好ましくは少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型４株、を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、デング熱ワクチン組成物の単位用量を対象とする。

【0114】

１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株：
（ｉ）好ましくは少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～３．８ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型１、
（ｉｉ）好ましくは少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型２、
（ｉｉｉ）好ましくは少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型３、及び
（ｉｖ）好ましくは少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌまたは４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ、任意選択で６．２ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌまでの濃度のデング熱血清型４株、を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む。

【0115】

本発明はさらに、部分的には、デング熱ワクチン組成物の単位用量であって、デング熱ワクチン組成物が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株：
（ｉ）少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のキメラデング熱血清型２／１株、
（ｉｉ）少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型２株、
（ｉｉｉ）少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のキメラデング熱血清型２／３株、及び
（ｉｖ）少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のキメラデング熱血清型２／４株、を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、デング熱ワクチン組成物の単位用量を対象とする。

【0116】

１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株：
（ｉ）少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～３．８ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のキメラデング熱血清型２／１株、
（ｉｉ）少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型２株、
（ｉｉｉ）少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のキメラデング熱血清型２／３株、及び
（ｉｖ）少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬまたは少なくとも４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ、任意選択で６．２ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌまでの濃度のキメラデング熱血清型２／４株、を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む。

【0117】

好ましくは、キメラデング熱血清型２／１株は、ＴＤＶ－１であり、デング熱血清型２株は、ＴＤＶ－２であり、キメラデング熱血清型２／３株は、ＴＤＶ－３であり、キメラデング熱血清型２／４株は、ＴＤＶ－４である。

【0118】

１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～６．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～６．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有する。

【0119】

１つのこのような実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～４．９ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～６．２ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有する。

【0120】

さらにこのような実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．９ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有する。

【0121】

さらにこのような実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．１ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～３．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有する。

【0122】

さらにこのような実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～３．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌまたは４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．１ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有する。

【0123】

別の実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、４．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～４．４ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、３．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～３．８ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有する。

【0124】

特に好ましい実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、４．４ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、３．８ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、５．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有する。

【0125】

別の特に好ましい実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、５．１ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有する。

【0126】

別の好ましい実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、４つ全ての血清型の算術的合計は、６．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ未満、好ましくは５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ未満である。ある特定のこのような実施形態において、４つ全ての血清型の算術的合計は、少なくとも４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬである。好ましい実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、４つ全ての血清型の算術的合計は、４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～６．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの範囲内、好ましくは４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの範囲内である。

【0127】

好ましくは、前述の実施形態において、キメラデング熱血清型２／１株は、ＴＤＶ－１であり、デング熱血清型２株は、ＴＤＶ－２であり、キメラデング熱血清型２／３株は、ＴＤＶ－３であり、キメラデング熱血清型２／４株は、ＴＤＶ－４である。より好ましくは、ＴＤＶ－１は、配列番号１に記載のヌクレオチド配列及び配列番号２に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－２は、配列番号３に記載のヌクレオチド配列及び配列番号４に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－３は、配列番号５に記載のヌクレオチド配列及び配列番号６に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－４は、配列番号７に記載のヌクレオチド配列及び配列番号８に記載のアミノ酸配列を特徴とする。

【0128】

本発明は、部分的には、デング熱ワクチン組成物の単位用量であって、デング熱ワクチン組成物が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株：
（ｉ）少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度のデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）、
（ｉｉ）少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度のデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）、
（ｉｉｉ）少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度のデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）、及び
（ｉｖ）少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度のデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）、を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、デング熱ワクチン組成物の単位用量を対象とする。

【0129】

１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～６．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～６．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有する。

【0130】

１つのこのような実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．９ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～６．２ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有する。

【0131】

さらにこのような実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．９ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有する。

【0132】

さらにこのような実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．１ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～３．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有する。

【0133】

さらにこのような実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～３．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．１ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有する。

【0134】

別の実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、４．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．４ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、３．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～３．８ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有する。

【0135】

特に好ましい実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、４．４ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、３．８ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、５．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有する。

【0136】

別の特に好ましい実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、５．１ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の濃度を有する。

【0137】

別の好ましい実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、４つ全ての血清型の算術的合計は、６．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量未満、好ましくは５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量未満である。ある特定のこのような実施形態において、４つ全ての血清型の算術的合計は、少なくとも４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量である。好ましい実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、４つ全ての血清型の算術的合計は、４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～６．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の範囲内、好ましくは４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量の範囲内である。

【0138】

１つの実施形態において、組成物において、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該濃度を基準として、（ｉｉｉ）の濃度は、ｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも１０％である。

【0139】

１つの実施形態において、組成物において、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、１０％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも６％、少なくとも８％、または少なくとも１０％、または少なくとも１２％、または少なくとも１４％、または少なくとも１６％、または少なくとも１８％である。

【0140】

ｐｆｕ／０．５ｍＬでの（ｉｉｉ）の再構成された単位用量における濃度は、少なくとも１０％であることが好ましい。

【0141】

１つの実施形態において、組成物において、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、前述の総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、２％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも６％である。

【0142】

好ましくは、前述の実施形態において、キメラデング熱血清型２／１株は、ＴＤＶ－１であり、デング熱血清型２株は、ＴＤＶ－２であり、キメラデング熱血清型２／３株は、ＴＤＶ－３であり、キメラデング熱血清型２／４株は、ＴＤＶ－４である。より好ましくは、ＴＤＶ－１は、配列番号１に記載のヌクレオチド配列及び配列番号２に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－２は、配列番号３に記載のヌクレオチド配列及び配列番号４に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－３は、配列番号５に記載のヌクレオチド配列及び配列番号６に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－４は、配列番号７に記載のヌクレオチド配列及び配列番号８に記載のアミノ酸配列を特徴とする。

【0143】

異なるデング熱ウイルスの濃度は、好ましくは当該技術分野で知られているイムノフォーカスアッセイによって決定される。例えば、濃度は、デング熱ウイルスの段階希釈物が、Ｖｅｒｏ細胞などの接着細胞の単層に適用されるイムノフォーカスアッセイによって決定され得る。感染性ウイルスが細胞に結合し、細胞に取り込まれることを可能にする期間後、子孫ウイルスが元の感染した細胞に隣接する細胞にしか感染できないようにウイルスの拡散を防止するためにアガロースまたはカルボキシメチルセルロースなどの増粘剤を含有するオーバーレイが添加される。ウイルス複製を可能とするためのインキュベート期間後、細胞は固定され、血清型特異的抗デング熱モノクローナル抗体及びアルカリホスファターゼで標識された抗体などの二次抗体を使用して染色される。５－ブロモ－４－クロロ－３－インドリル－ホスフェート／ニトロブルーテトラゾリウムホスファターゼ基質などの、二次抗体に結合した酵素のための好適な基質を添加することによって輝点が染色される。プレート上のプラークの数は、細胞に適用された溶液中のウイルスのプラーク形成単位に相当する。例えば、１，０００ｐｆｕ／μｌの濃度は、細胞に適用された１μｌの溶液が、細胞単層中に１，０００プラークを生成するのに十分なウイルスを含有することを示す。

【0144】

デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、キメラデング熱血清型２／１株、デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株は、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られる。「ｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度」または「ｐｆｕ／用量での総濃度」という用語は、デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）、デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）、デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）及びデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）の濃度の合計、好ましくはＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４の濃度の合計であり、０．５ｍＬ中または用量中のｐｆｕ（プラーク形成単位）によって決定される１００％のデング熱ウイルス濃度として定義される。

【0145】

１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）、デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）、デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）、及びデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該総濃度を基準として、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）の濃度は、総濃度の１０％未満、または総濃度の８％未満、または６％未満であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）の濃度は、総濃度の少なくとも５０％または少なくとも６０％または少なくとも６５％である。１つの実施形態において、当該総濃度を基準として、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）の濃度は、総濃度の０．３～１０％または０．５～８％であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）の濃度は、総濃度の５０％～９０％または６０％～８８％である。これは、デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）の濃度が、デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）の濃度よりも低いことを意味する。

【0146】

１つのこのような実施形態において、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）の濃度は、総濃度の少なくとも１％であり、及び／またはｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）の濃度は、総濃度の少なくとも６％、または総濃度の少なくとも７％、または８％、１０％、１２％、１４％、１６％、もしくは１８％である。１つのこのような実施形態において、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型２（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）の濃度は、総濃度の１％～７％または２％～６％または２．０％～５．０％であり、及び／またはｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）の濃度は、総濃度の６％～２５％または７％～２５％または１０％～２５％または１８％～２５％である。これは、デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）の濃度が、デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）の濃度よりも低いことを意味する。

【0147】

好ましい実施形態において、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－２などのデング熱血清型２株の濃度は、総濃度の１０％未満、好ましくは６％未満または２％未満であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－４などのデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）の濃度は、総濃度の少なくとも５０％、好ましくは少なくとも６５％であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－１などのデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）の濃度は、総濃度の少なくとも１％、好ましくは１％～７％の間または２．０％～５．０％であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－３などのデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）の濃度は、総濃度の少なくとも６％、好ましくは６％～２５％の間または１０％～２５％または１８％～２５％である。

【0148】

さらに好ましい実施形態において、ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４などのデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）、デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）、デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）、及びデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）を含むデング熱ウイルス組成物が提供され、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）の濃度は、総濃度の少なくとも１％、好ましくは１％～７％の間または２．０％～５．０％であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）の濃度は、総濃度の１０％未満、好ましくは６％未満または２％未満であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）の濃度は、総濃度の少なくとも６％、好ましくは６％～２５％または１０％～２５％の間または１８％～２５％である。デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４つ全てのデング熱血清型のうち最も高い濃度を有することが特に好ましい。

【0149】

さらに好ましい実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）の濃度は、総濃度の１％～７％であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）の濃度は、総濃度の８％未満、例えば、総濃度の１％～８％の範囲内であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）の濃度は、総濃度の少なくとも１０％であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）の濃度は、総濃度の少なくとも６５％、例えば、６５％～８０％の範囲内である。ある特定のこのような実施形態において、４つ全ての血清型の算術的合計は、４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～６．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの範囲内、好ましくは４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの範囲内である。

【0150】

さらに好ましい実施形態において、ＴＤＶ－１などのデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）及びＴＤＶ－２などのデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、それぞれ、ｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度を基準として、互いに５％ポイント以内の濃度で存在し、及び／または合わせてｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の約１０％未満である。ある特定のこのような実施形態において、ＴＤＶ－３などのデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、好ましくはｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約１０％であり、より好ましくはＴＤＶ－４などのデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約７０％である。ある特定のこのような実施形態において、デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）（例えば、ＴＤＶ－４）は、４つ全ての血清型のうち組成物において最も高い濃度を表し、好ましくはｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約７０％を有し、デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）（例えば、ＴＤＶ－３）は、４つ全ての血清型のうち組成物において２番目に高い濃度を表し、好ましくはｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約１０％を有し、デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）（例えば、ＴＤＶ－１）及びデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）（例えば、ＴＤＶ－２）は、それぞれ、血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）（例えば、ＴＤＶ－３）の濃度よりも低い濃度を表し、任意選択で合わせてｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の約１０％未満を表す。

【0151】

好ましくは、前述の実施形態において、キメラデング熱血清型２／１株は、ＴＤＶ－１であり、デング熱血清型２株は、ＴＤＶ－２であり、キメラデング熱血清型２／３株は、ＴＤＶ－３であり、キメラデング熱血清型２／４株は、ＴＤＶ－４である。より好ましくは、ＴＤＶ－１は、配列番号１に記載のヌクレオチド配列及び配列番号２に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－２は、配列番号３に記載のヌクレオチド配列及び配列番号４に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－３は、配列番号５に記載のヌクレオチド配列及び配列番号６に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－４は、配列番号７に記載のヌクレオチド配列及び配列番号８に記載のアミノ酸配列を特徴とする。

【0152】

さらなる実施形態によれば、キメラデング熱血清型２／４株、好ましくはＴＤＶ－４は、デング熱ワクチン組成物において最も高い濃度を有し、その次がキメラデング熱血清型２／３株、好ましくはＴＤＶ－３、その次がキメラデング熱血清型２／１株、好ましくはＴＤＶ－１、その次がデング熱血清型２株、好ましくはＴＤＶ－２である。デング熱血清型２株は、デング熱ワクチン組成物に存在する４つの株のうち最も低い濃度を有することが特に好ましい。

【0153】

濃度／０．５ｍｌに言及するときはいつでも、これは、本明細書に記載の単位用量の体積を０．５ｍｌに限定するものではない。０．５ｍｌは、ｐｆｕ／ｍｌでの組成物中のウイルス株の濃度の決定のための参照体積である。単位用量当たりの体積及び／または量は、それぞれのチャプターに記載されている。

【0154】

医薬的に許容される賦形剤
本発明は、部分的には、デング熱ワクチン組成物の単位用量であって、デング熱ワクチン組成物が１つ以上の医薬的に許容される賦形剤を含む、デング熱ワクチン組成物の単位用量を対象とする。１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、非還元糖、界面活性剤、タンパク質、及び無機塩を含む。好ましくは、非還元糖は、トレハロースであり、界面活性剤は、ポロキサマー４０７であり、タンパク質は、ヒト血清アルブミンであり、無機塩は、塩化ナトリウムである。

【0155】

１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物の単位用量は、以下の医薬的に許容される賦形剤：
－約１０％ｗ／ｖ～約２０％ｗ／ｖのα，α－トレハロース二水和物または等モル量のα，α－トレハロースの他の形態、
－約０．５％ｗ／ｖ～約１．５％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、
－約０．０５％ｗ／ｖ～約２％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン、及び
－約７０ｍＭ～１４０ｍＭの塩化ナトリウム、を含む。

【0156】

１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物の単位用量は、０．５ｍｌ中で測定された場合、以下の医薬的に許容される賦形剤：
－約１０％ｗ／ｖ～約２０％ｗ／ｖのα，α－トレハロースまたは等モル量のα，α－トレハロースの他の形態、
－約０．５％ｗ／ｖ～約１．５％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、
－約０．０５％ｗ／ｖ～約２％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン、及び
－約７０ｍＭ～１４０ｍＭの塩化ナトリウムを含み、好ましくは
－７～８．５のｐＨを有する。

【0157】

１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物の単位用量は、０．５ｍｌ中で測定された場合、以下の医薬的に許容される賦形剤：
－約１４３ｍｇ／ｍｌ～約１８５ｍｇ／ｍｌのα，α－トレハロース二水和物または等モル量のα，α－トレハロースの他の形態、
－約９．１ｍｇ／ｍｌ～約１２．４ｍｇ／ｍｌのポロキサマー４０７、
－約０．８８％ｍｇ／ｍｌ～約１．３２ｍｇ／ｍｌのヒト血清アルブミン、及び
－約７０ｍＭ～１４０ｍＭの塩化ナトリウムを含み、好ましくは
－７～８．５のｐＨを有する。

【0158】

好ましい実施形態において、本明細書に記載の発明の凍結乾燥された単位用量は、以下の医薬的に許容される賦形剤：
－約１５％ｗ／ｖのα，α－トレハロース二水和物、
－約１％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、
－約０．１％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン、及び
－約１００ｍＭの塩化ナトリウム、を含む。

【0159】

好ましい実施形態において、本明細書に記載の発明の凍結乾燥された単位用量は、０．５ｍｌ中で測定された場合、以下の医薬的に許容される賦形剤：
－約１５％ｗ／ｖのα，α－トレハロース、
－約１％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、
－約０．１％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン、及び
－約１００ｍＭの塩化ナトリウム、を含む。

【0160】

好ましい実施形態において、本明細書に記載の発明の凍結乾燥された単位用量は、以下の医薬的に許容される賦形剤：
－約８２．９ｍｇのα，α－トレハロース二水和物、
－約５ｍｇのポロキサマー４０７、
－約０．５ｍｇのヒト血清アルブミン、及び
－約５０μモルの塩化ナトリウム、を含む。

【0161】

好ましい実施形態において、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量は、以下の医薬的に許容される賦形剤：
－約１５％ｗ／ｖのα，α－トレハロース二水和物、
－約１％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、
－約０．１％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン、及び
－約１３７ｍＭの塩化ナトリウムを含み、好ましくは
－７～８．５のｐＨを有する

【0162】

好ましい実施形態において、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量は、０．５ｍｌ中で測定された場合、以下の医薬的に許容される賦形剤：
－約１５％ｗ／ｖのα，α－トレハロース、
－約１％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、
－約０．１％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン、及び好ましくは
－約１３７ｍＭの塩化ナトリウムを含み、好ましくは
－７～８．５のｐＨを有する。

【0163】

好ましい実施形態において、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量は、以下の医薬的に許容される賦形剤：
－約８２．９ｍｇのα，α－トレハロース二水和物、
－約５ｍｇのポロキサマー４０７、
－約０．５ｍｇのヒト血清アルブミン、及び好ましくは
－約６８．５μモルの塩化ナトリウムを含み、好ましくは
－７～８．５のｐＨを有する。

【0164】

ヒト血清アルブミンは、天然または組換えヒト血清アルブミン（ｒＨＳＡ）であり得る。ポロキサマー４０７は、例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ１２７であり得る。

【0165】

１つの実施形態において、単位用量はさらに、緩衝液を含む。緩衝液は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）であり得る。緩衝液は、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、リン酸二水素一ナトリウム（ＮａＨ_２ＰＯ_４）、リン酸水素二ナトリウム（Ｎａ_２ＨＰＯ_４）、塩化カリウム（ＫＣｌ）、及びリン酸二水素カリウム（ＫＨ_２ＰＯ_４）のうちの少なくとも１つを含み得る。好ましい実施形態において、緩衝液は、リン酸水素二ナトリウム（Ｎａ_２ＨＰＯ_４）、塩化カリウム（ＫＣｌ）、及びリン酸二水素カリウム（ＫＨ_２ＰＯ_４）を含み得る。緩衝液は、２５℃で７．０～８．５の範囲内のｐＨを有し得る。

【0166】

単位用量
本発明は、部分的には、本明細書に記載の四価デング熱ウイルス組成物と、本明細書に記載の医薬的に許容される賦形剤とを含むデング熱ワクチン組成物の単位用量を対象とする。

【0167】

本発明は、部分的には、例えば、
（ｉ）少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有するデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）、
（ｉｉ）少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有するデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）、
（ｉｉｉ）少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有するデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）、及び
（ｉｖ）少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有するデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）、の上述したデング熱ワクチン組成物の単位用量を対象とする。

【0168】

好ましくは、キメラデング熱血清型２／１株は、ＴＤＶ－１であり、デング熱血清型２株は、ＴＤＶ－２であり、キメラデング熱血清型２／３株は、ＴＤＶ－３であり、キメラデング熱血清型２／４株は、ＴＤＶ－４である。より好ましくは、ＴＤＶ－１は、配列番号１に記載のヌクレオチド配列及び配列番号２に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－２は、配列番号３に記載のヌクレオチド配列及び配列番号４に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－３は、配列番号５に記載のヌクレオチド配列及び配列番号６に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－４は、配列番号７に記載のヌクレオチド配列及び配列番号８に記載のアミノ酸配列を特徴とする。

【0169】

１つの実施形態において、単位用量は、凍結乾燥されている。１つのこのような実施形態において、凍結乾燥された単位用量は、本明細書に記載の医薬的に許容される賦形剤と、４つのデング熱ウイルス株、特定的にはＴＤＶ－１～ＴＤＶ－４を含む本明細書に記載のデング熱ワクチン組成物を組み合わせることによって生成された体積０．５ｍＬの水性デング熱ワクチン組成物を凍結乾燥に供することによって得られる。好ましい実施形態において、カール・フィッシャー測定によって決定される残留水分含有量は、５．０％以下であり、好ましくは３％以下である。

【0170】

別の実施形態において、単位用量は再構成される。再構成された単位用量は、好ましくはデング熱ワクチンの投与前に、凍結乾燥された単位用量を医薬的に許容される希釈剤での再構成に供することによって得られる。１つのこのような実施形態において、再構成は、注射用水、リン酸緩衝生理食塩水または塩化ナトリウム水溶液などの医薬的に許容される希釈剤を凍結乾燥された単位用量に添加することによって達成される。１つの実施形態において、塩化ナトリウム水溶液（例えば、３７ｍＭの塩化ナトリウム水溶液）が、再構成のために凍結乾燥された単位用量に添加される。１つのこのような実施形態において、凍結乾燥された単位用量は、０．３～０．８ｍＬ、または０．４～０．７ｍＬ、または０．５ｍＬの希釈剤で再構成される。好ましい実施形態において、凍結乾燥された単位用量は、０．３～０．８ｍＬ、０．４～０．７ｍＬ、または０．５ｍＬの３７ｍＭの塩化ナトリウム水溶液で再構成される。より好ましい実施形態において、凍結乾燥された単位用量は、０．５ｍＬの３７ｍＭの塩化ナトリウム水溶液で再構成される。その後、再構成された単位用量は、皮下投与され得る。

【0171】

凍結乾燥された形態の単位用量は、単位用量の製造後の最終製品かつ単位用量の保存形態であり、再構成された形態の単位用量は、単位用量の対象への投与前に調製されることが好ましい。

【0172】

本発明はさらに、部分的には、
４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価ウイルス組成物を含むデング熱ワクチン組成物の単位用量であって、単位用量が、凍結乾燥されており、０．５ｍＬの医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、
（ｉ）少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のキメラデング熱血清型２／１株などのデング熱血清型１、
（ｉｉ）少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型２株などのデング熱血清型２、
（ｉｉｉ）少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のキメラデング熱血清型２／３株などのデング熱血清型３、及び
（ｉｖ） 少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のキメラデング熱血清型２／４株などのデング熱血清型４、を含む、デング熱ワクチン組成物の単位用量を対象とする。

【0173】

１つの実施形態において、再構成された単位用量の体積は、例えば０．５ｍＬであり、医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該濃度を基準として、（ｉｉｉ）の濃度は、ｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも１０％である。

【0174】

別の実施形態において、再構成された単位用量の体積は、例えば０．５ｍＬであり、医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、１０％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも６％、少なくとも８％、または少なくとも１０％、または少なくとも１２％、または少なくとも１４％、または少なくとも１６％、または少なくとも１８％である。

【0175】

ｐｆｕ／０．５ｍＬでの（ｉｉｉ）の再構成された単位用量における濃度は、少なくとも１０％であることが好ましい。

【0176】

１つの実施形態において、再構成された単位用量の体積は、例えば０．５ｍＬであり、医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、２％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも６％である。

【0177】

１つの実施形態において、本発明は、デング熱ワクチン組成物の凍結乾燥された単位用量であって、０．５ｍＬの医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有するデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）、少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有するデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）、少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有するデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）、及び少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有するデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）、ならびに本明細書に記載の医薬的に許容される賦形剤を含み、単位用量が、好ましくは凍結乾燥前に０．５ｍＬで製剤化される、デング熱ワクチン組成物の凍結乾燥された単位用量を対象とする。好ましくは、キメラデング熱血清型２／１株は、ＴＤＶ－１であり、デング熱血清型２株は、ＴＤＶ－２であり、キメラデング熱血清型２／３株は、ＴＤＶ－３であり、キメラデング熱血清型２／４株は、ＴＤＶ－４である。より好ましくは、ＴＤＶ－１は、配列番号１に記載のヌクレオチド配列及び配列番号２に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－２は、配列番号３に記載のヌクレオチド配列及び配列番号４に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－３は、配列番号５に記載のヌクレオチド配列及び配列番号６に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－４は、配列番号７に記載のヌクレオチド配列及び配列番号８に記載のアミノ酸配列を特徴とする。

【0178】

１つのこのような実施形態において、凍結乾燥された単位用量は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．９ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）、及び４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）、ならびに本明細書に記載の医薬的に許容される賦形剤を含む０．５ｍＬのデング熱ワクチン組成物を凍結乾燥させることによって得られる。好ましくは、キメラデング熱血清型２／１株は、ＴＤＶ－１であり、デング熱血清型２株は、ＴＤＶ－２であり、キメラデング熱血清型２／３株は、ＴＤＶ－３であり、キメラデング熱血清型２／４株は、ＴＤＶ－４である。

【0179】

１つのこのような実施形態において、凍結乾燥された単位用量は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～３．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）、及び４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬまたは４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．１ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）、ならびに本明細書に記載の医薬的に許容される賦形剤を含む０．５ｍＬのデング熱ワクチン組成物を凍結乾燥させることによって得られる。好ましくは、キメラデング熱血清型２／１株は、ＴＤＶ－１であり、デング熱血清型２株は、ＴＤＶ－２であり、キメラデング熱血清型２／３株は、ＴＤＶ－３であり、キメラデング熱血清型２／４株は、ＴＤＶ－４である。

【0180】

ある特定の実施形態において、凍結乾燥された単位用量は、ＴＤＶ－２及びＴＤＶ－４が、ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４のｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度を基準として、ある特定の相対量で存在し、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－２の濃度が、１０％未満または８％未満または６％未満であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－４の濃度が、少なくとも５０％または少なくとも６５％である、凍結乾燥前の０．５ｍＬを指す。これらの実施形態の一部では、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－１の濃度は、少なくとも１％であり、及び／またはｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－３の濃度は、少なくとも６％、７％、８％、１０％、１２％、１４％、１６％または少なくとも１８％である。

【0181】

ある特定の実施形態において、再構成された単位用量の体積は０．５ｍＬであり、ＴＤＶ－２及びＴＤＶ－４は、ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４のｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度を基準として、ある特定の相対量で存在し、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－２の濃度は、１０％未満または８％未満または６％未満であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－４の濃度は、少なくとも５０％または少なくとも６５％である。これらの実施形態の一部では、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－１の濃度は、少なくとも１％であり、及び／またはｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるＴＤＶ－３の濃度は、少なくとも６％、７％、８％、１０％、１２％、１４％、１６％または少なくとも１８％である。

【0182】

さらに好ましい実施形態において、再構成された単位用量の体積は０．５ｍＬであり、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型１（例えば、デング熱血清型２／１株）の濃度は、総濃度の１％～７％であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）の濃度は、総濃度の８％未満、例えば、総濃度の１％～８％の範囲内であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型３（例えば、デング熱血清型２／３株）の濃度は、総濃度の少なくとも１０％であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）の濃度は、総濃度の少なくとも６５％、例えば、６５％～８０％の範囲内である。ある特定のこのような実施形態において、４つ全ての血清型の算術的合計は、４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～６．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの範囲内、好ましくは４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの範囲内である。

【0183】

さらに好ましい実施形態において、再構成された単位用量の体積は０．５ｍＬであり、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、ＴＤＶ－１などのデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）及びＴＤＶ－２などのデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、それぞれ、ｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度を基準として、互いに５％ポイント以内の濃度で存在し、及び／または合わせてｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の約１０％未満である。ある特定のこのような実施形態において、ＴＤＶ－３などのデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、好ましくはｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約１０％であり、より好ましくはＴＤＶ－４などのデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約７０％である。ある特定のこのような実施形態において、デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）（例えば、ＴＤＶ－４）は、４つ全ての血清型のうち組成物において最も高い濃度を表し、好ましくはｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約７０％を有し、デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）（例えば、ＴＤＶ－３）は、４つ全ての血清型のうち組成物において２番目に高い濃度を表し、好ましくはｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約１０％を有し、デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）（例えば、ＴＤＶ－１）及びデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）（例えば、ＴＤＶ－２）は、それぞれ、血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）（例えば、ＴＤＶ－３）の濃度よりも低い濃度を表し、任意選択で合わせてｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の約１０％未満を表す。

【0184】

０．５ｍＬで再構成された凍結乾燥された単位用量は、４つのデング熱血清型について上記の濃度が得られる。本明細書に記載のデング熱ワクチン組成物の単位用量は、０．５ｍＬ中のデング熱血清型の濃度を指すのに対し、凍結乾燥された単位用量は、投与されるウイルス絶対量も互いのウイルスの比も変化させることなく、他の体積の医薬的に許容される希釈剤、例えば、塩化ナトリウム水溶液で再構成され得る。

【0185】

ある特定の実施形態において、本発明の凍結乾燥された単位用量は、非還元糖、界面活性剤、タンパク質、及び無機塩を含む溶液から調製される。

【0186】

ある特定の実施形態において、本発明の凍結乾燥された単位用量は、トレハロース、ポロキサマー４０７、ヒト血清アルブミン、及び塩化ナトリウムを含む溶液から調製される。

【0187】

ある特定の実施形態において、本発明の凍結乾燥された単位用量は、約１０％ｗ／ｖ～約２０％ｗ／ｖのα，α－トレハロース二水和物または等モル量のα，α－トレハロースの他の形態、約０．５％ｗ／ｖ～約１．５％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、約０．０５％ｗ／ｖ～約２％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン、及び約７０ｍＭ～約１２０ｍＭの塩化ナトリウムを含む溶液から調製される。

【0188】

好ましい実施形態において、本明細書に記載の発明の凍結乾燥された単位用量は、約１５％ｗ／ｖのα，α－トレハロース二水和物、約１％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、約０．１％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン、及び約１００ｍＭの塩化ナトリウムを含む溶液から調製される。

【0189】

１つの実施形態において、凍結乾燥された単位用量が調製される溶液はさらに、緩衝液を含む。緩衝液は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）であり得る。緩衝液は、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、リン酸二水素一ナトリウム（ＮａＨ_２ＰＯ_４）、リン酸水素二ナトリウム（Ｎａ_２ＨＰＯ_４）、塩化カリウム（ＫＣｌ）、及びリン酸二水素カリウム（ＫＨ_２ＰＯ_４）のうちの少なくとも１つを含み得る。好ましい実施形態において、緩衝液は、リン酸水素二ナトリウム（Ｎａ_２ＨＰＯ_４）、塩化カリウム（ＫＣｌ）、及びリン酸二水素カリウム（ＫＨ_２ＰＯ_４）を含み得る。緩衝液は、２５℃で約７．０～約８．５の範囲のｐＨまたは２５℃で約６．８～約７．６のｐＨ、好ましくは２５℃で約７．２のｐＨを有し得る。

【0190】

好ましい実施形態において、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量は、約１５％ｗ／ｖのα，α－トレハロース二水和物、約１％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、約０．１％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン、及び約１３７ｍＭの塩化ナトリウムを含む。再構成された単位用量は、２５℃で約７．０～約８．５のｐＨ、好ましくは２５℃で約７．２のｐＨを有し得る。

【0191】

本明細書に記載の発明の単位用量は、血清陰性及び血清陽性の両方の対象集団または血清陰性及び血清陽性の両方の対象において免疫系（中和抗体、細胞性免疫及び、抗ＮＳ１抗体）の複数の手段を活性化する。したがって、本明細書に記載の発明の単位用量は、デング熱疾患に対しデング熱血清陰性の対象集団または対象及びデング熱血清陽性の対象集団または対象を共に保護する。

【0192】

１つの実施形態において、１回の単位用量は、容器、好ましくはバイアル内に存在し、当該単位用量は、再構成後に対象に投与される。１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物の複数の単位用量は、１つの容器、好ましくはバイアルの内容物で、複数の対象にワクチン接種することができるように、容器、好ましくはバイアル内に存在し得る。１つの実施形態において、本明細書に記載の発明の複数の単位用量を含む容器は、本明細書に記載の発明の方法で使用する再構成された単位用量をもたらすために使用される。

【0193】

ある特定の実施形態において、本発明の単位用量を含む容器は、キットの一部である。したがって、本発明は、部分的には、本明細書に記載の本発明の凍結乾燥された単位用量と、医薬的に許容される再構成用希釈剤とを含む、再構成された単位用量を調製するためのキットを対象とする。

【0194】

ある特定の実施形態において、再構成用希釈剤は、容器、好ましくはバイアル、またはプレフィルドシリンジ内に提供される。いくつかの実施形態において、再構成用希釈剤は、注射用水、リン酸緩衝生理食塩水、または塩化ナトリウム水溶液から選択される。好ましい実施形態において、再構成用希釈剤は、３０～４０ｍＭの塩化ナトリウム、例えば、３７ｍＭの塩化ナトリウムである。

【0195】

ある特定の実施形態において、キットはさらに、Ａ型肝炎ワクチン、例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標）を含み得る。いくつかの実施形態において、Ａ型肝炎ワクチンは、別々の容器、例えば、バイアル内に存在し得る。別の実施形態において、Ａ型肝炎ワクチン及び本発明の単位用量は、同じ容器内に存在し得る。したがって、本発明は、部分的には、複合デング熱／Ａ型肝炎ワクチンであって、本明細書に記載の発明の単位用量がＡ型肝炎ワクチンと組み合わされる、デング熱／Ａ型肝炎ワクチンを対象とする。このような複合デング熱／Ａ型肝炎ワクチンは、同じ製剤中に本明細書に記載の発明の単位用量及びＡ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））を含む。ある特定の実施形態において、本発明は、このような複合デング熱／Ａ型肝炎ワクチンと、本明細書に記載の発明の単位用量とを含むキットを対象とする。

【0196】

Ａ型肝炎ワクチン
ある特定の実施形態において、Ａ型肝炎ワクチンは、不活化Ａ型肝炎ワクチンである。

【0197】

ある特定の実施形態において、Ａ型肝炎ワクチンは、Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来するＡ型肝炎ウイルスを含む。

【0198】

ある特定の実施形態において、Ａ型肝炎ワクチンは、不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、不活化Ａ型肝炎ウイルスは、野生型Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来する。

【0199】

ある特定の実施形態において、不活化Ａ型肝炎ウイルスは、担体アルミニウムに吸着させる。これらの実施形態の一部において、アルミニウムは水酸化アルミニウムまたはアルミニウムヒドロキシホスフェート硫酸塩である。

【0200】

ある特定の実施形態において、Ａ型肝炎ワクチンは、リン酸緩衝生理食塩水と、アミノ酸の形態及びポリソルベートの形態でその中に溶解している賦形剤とを含む。このような実施形態において、アミノ酸は０．２～０．８％ｗ／ｖの濃度で存在し、及び／またはポリソルベートは０．０１～０．０９ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。

【0201】

ある特定の実施形態において、Ａ型肝炎ワクチンは、５００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）～２０００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）、好ましくは７００ＥＬ．Ｕ～１６００ＥＬ．Ｕ．、最も好ましくは１３００～１５５０ＥＬ．Ｕ．の範囲の濃度でウイルス抗原を発現するＡ型肝炎ウイルスを含む。代替的に、濃度は５００ＥＬ．Ｕ．～９００ＥＬ．Ｕ．の範囲である。さらなる実施形態において、濃度は２００～４００ＥＬ．Ｕ．の範囲である。

【0202】

ある特定の実施形態において、Ａ型肝炎ワクチンは、液体の１ｍｌ用量または０．５ｍｌ用量に含まれる。

【0203】

このようなＡ型肝炎ワクチンの例としては、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ製のＨＡＶＲＩＸ（登録商標）があり、これは筋肉内投与用の不活化ウイルスの無菌懸濁液である。ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）は、野生型Ａ型肝炎ウイルス（ＨＡＶ）ＨＭ－１７５に由来するＡ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５を使用しており、その完全なヌクレオチド配列は、Ｃｏｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６１，Ｎｏ．１（ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ Ｊａｎ．１９８７）の５０～５９ページに開示されている（特定的には、野生型Ａ型肝炎ウイルスＨＭ－１７５の全塩基配列は、当該刊行物の図１に示されている）。

【0204】

ウイルス（ＨＭ１７５株）は、ＭＲＣ－５ヒト２倍体細胞内で増殖する。細胞培養培地の除去後、細胞を溶解して懸濁液を形成する。この懸濁液は、限外濾過及びゲル浸透クロマトグラフィーの手順により精製される。この溶解物のホルマリンでの処置により、ウイルス不活化を確保する。ウイルス抗原活性は、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）を使用して標準に対して参照され、そのため、ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）の観点で表される。ワクチンの成人（≧１８歳）のための各１ｍＬ用量は、水酸化アルミニウムとして０．５ｍｇのアルミニウムに吸着された１４４０ＥＬ．Ｕ．のウイルス抗原を含有する。ワクチンの小児及び若年成人（生後１２ヵ月～１８歳）の各０．５ｍＬ用量は、水酸化アルミニウムとしての０．２５ｍｇのアルミニウムに吸着された７２０ＥＬ．Ｕ．のウイルス抗原を含有する。ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）は、以下の賦形剤：リン酸緩衝生理食塩水中のアミノ酸補充物（０．３％ｗ／ｖ）及びポリソルベート２０（０．０５ｍｇ／ｍＬ）を含有する。製造プロセスから、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）は、細胞成長培地に含まれる残留ＭＲＣ－５細胞性タンパク質（５μｇ／ｍＬ以下）、ホルマリン（０．１ｍｇ／ｍＬ以下）、及びアミノグリコシド系抗生物質である硫酸ネオマイシン（４０ｎｇ／ｍＬ以下）も含有する。ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）は、防腐剤を用いずに製剤化される。

【0205】

Ｍｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ ＆ Ｄｏｈｍｅ Ｃｏｒｐ．製のＡ型肝炎ワクチンであるＶＡＱＴＡ（登録商標）は、ヒトＭＲＣ－５の２倍体線維芽細胞の細胞培養で成長させたＡ型肝炎ウイルスから誘導された不活化全体ウイルスワクチンである。このワクチンは、元は実証済みの弱毒化株をさらに連続継代することによって誘導された株の不活化ウイルスを含有する。このウイルスを成長させ、採取し、Ｍｅｒｃｋ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓで開発された物理的及び高速液体クロマトグラフィー技術の組合せによって精製し、ホルマリン不活化し、次いで非晶質アルミニウムヒドロキシホスフェートスルフェートに吸着させる。ＶＡＱＴＡ（登録商標）は、筋肉内注射のための滅菌懸濁液である。１ミリリットルのワクチンは、防腐剤を用いずに精製及び製剤化されたおよそ５０ＵのＡ型肝炎ウイルス抗原である。現在のアッセイの利用可能性の限界の範囲内で、５０Ｕ用量のＶＡＱＴＡ（登録商標）は、０．１μｇ未満の非ウイルスタンパク質、４×１０^－６μｇ未満のＤＮＡ、１０^－４μｇ未満のウシアルブミン、及び０．８μｇ未満のホルムアルデヒドを含有する。ネオマイシンを含む他のプロセスの化学的残留物は、１０パーツパービリオン（ｐｐｂ）未満である。各０．５ｍＬの小児用量は、０．９％の塩化ナトリウム中に、非晶質アルミニウムヒドロキシホスフェート硫酸塩として提供されるおよそ０．２２５ｍｇのアルミニウムに吸着された２５ＵのＡ型肝炎ウイルス抗原、及びｐＨ安定化剤としての３５μｇのホウ酸ナトリウムを含有する。各１ｍＬの成人用量は、０．９％の塩化ナトリウム中に、非晶質アルミニウムヒドロキシホスフェート硫酸塩として提供されるおよそ０．４５ｍｇのアルミニウムに吸着された５０ＵのＡ型肝炎ウイルス抗原、及びｐＨ安定化剤としての７０μｇのホウ酸ナトリウムを含有する。

【0206】

黄熱病ワクチン
皮下使用のためのＳａｎｏｆｉ製の黄熱病ワクチンであるＹＦ－ＶＡＸ（登録商標）は、生存トリ白血病ウイルスフリー（ＡＬＶフリー）ニワトリ胚において黄熱病ウイルスのＹＦ－１７Ｄ株を培養することによって調製される。そのワクチンは、ソルビトール及びゼラチン（安定化剤として）を含有し、凍結乾燥されている。防腐剤は添加されない。ＹＦ－ＶＡＸは、その製品の寿命全体を通して０．５ｍＬの用量当たり４．７４ｌｏｇ_１０ｐｆｕ以上を含有するように製剤化される。

【0207】

複合ワクチン組成物
本発明はさらに、部分的には、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）やＶＡＱＴＡ（登録商標）などのＡ型肝炎抗原と、デング熱抗原（例えば、本明細書に開示する四価デング熱ワクチン（ＴＤＶ）または他の任意の好適な四価弱毒化生デング熱ウイルスワクチン）とを含む、複合ワクチン組成物も対象とする。

【0208】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、デング熱ワクチン組成物が、四価弱毒化生デング熱ウイルス株：
（ｉ）好ましくは少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型１、
（ｉｉ）好ましくは少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型２、
（ｉｉｉ）好ましくは少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型３、及び
（ｉｖ）好ましくは少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型４株、を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、デング熱ワクチン組成物の単位用量を対象とする。

【0209】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、デング熱ワクチン組成物が、四価弱毒化生デング熱ウイルス株：
（ｉ）少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～３．８ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のキメラデング熱血清型２／１株、
（ｉｉ）少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のデング熱血清型２株、
（ｉｉｉ）少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度のキメラデング熱血清型２／３株、及び
（ｉｖ）少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬまたは少なくとも４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ、任意選択で６．２ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌまでの濃度のキメラデング熱血清型２／４株、を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、複合ワクチン組成物を対象とする。

【0210】

好ましくは、前述の実施形態において、キメラデング熱血清型２／１株は、ＴＤＶ－１であり、デング熱血清型２株は、ＴＤＶ－２であり、キメラデング熱血清型２／３株は、ＴＤＶ－３であり、キメラデング熱血清型２／４株は、ＴＤＶ－４である。より好ましくは、ＴＤＶ－１は、配列番号１に記載のヌクレオチド配列及び配列番号２に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－２は、配列番号３に記載のヌクレオチド配列及び配列番号４に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－３は、配列番号５に記載のヌクレオチド配列及び配列番号６に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－４は、配列番号７に記載のヌクレオチド配列及び配列番号８に記載のアミノ酸配列を特徴とする。

【0211】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、デング熱ワクチン組成物を医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）が、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該ｐｆｕ／０．５ｍｌの総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、１０％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも６％、少なくとも８％、または少なくとも１０％、または少なくとも１２％、または少なくとも１４％、または少なくとも１６％、または少なくとも１８％である、複合ワクチン組成物を対象とする。

【0212】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、デング熱ワクチン組成物が１つ以上の医薬的に許容される賦形剤を含む、複合ワクチン組成物を対象とする。１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物は、非還元糖、界面活性剤、タンパク質、及び無機塩を含む。好ましくは、非還元糖は、トレハロースであり、界面活性剤は、ポロキサマー４０７であり、タンパク質は、ヒト血清アルブミンであり、無機塩は、塩化ナトリウムである。

【0213】

さらに、当業者に知られている任意のワクチン賦形剤またはその組合せ（例えば、ＷＯ２０１８／０２７０７５Ａ１に開示されているもの）を複合ワクチン組成物に使用することができる。

【0214】

１つの実施形態において、デング熱ワクチン組成物の単位用量は、以下の医薬的に許容される賦形剤：
－約１０％ｗ／ｖ～約２０％ｗ／ｖのα，α－トレハロース二水和物または等モル量のα，α－トレハロースの他の形態、
－約０．５％ｗ／ｖ～約１．５％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、
－約０．０５％ｗ／ｖ～約２％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン、及び
－約７０ｍＭ～１４０ｍＭの塩化ナトリウム、を含む。

【0215】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、デング熱ワクチン組成物が他のデング熱ワクチン（例えば、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標））を含む、複合ワクチン組成物を対象とする。Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）は、黄熱病骨格に基づく混合されたキメラデング熱ウイルスを含む四価デング熱ワクチンＣＹＤ－ＴＤＶ（Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）；Ｓａｎｏｆｉ Ｐａｓｔｅｕｒ，Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ）であり、アジア及び中南米における小児の５６～６１％のウイルス学的に確認されたデング熱（ＶＣＤ）に対する全体的ワクチン有効性（ＶＥ）の臨床的実証に基づいていくつかの国において認可されている（Ｃａｐｅｄｉｎｇ ＭＲ ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｔｅｔｒａｖａｌｅｎｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｉｎ Ａｓｉａ：ａ ｐｈａｓｅ ３，ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，ｏｂｓｅｒｖｅｒ－ｍａｓｋｅｄ，ｐｌａｃｅｂｏ－ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌ．Ｌａｎｃｅｔ ２０１４，３８４：１３５８－６５；Ｖｉｌｌａｒ ＬＡ ｅｔ ａｌ．Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ａ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｔｅｔｒａｖａｌｅｎｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ９－１６ ｙｅａｒ ｏｌｄｓ：ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ，ｐｈａｓｅ ＩＩ ｔｒｉａｌ ｉｎ Ｌａｔｉｎ Ａｍｅｒｉｃａ． Ｐｅｄｉａｔｒ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ Ｊ ２０１３，３２：１１０２－９）。これらの特定の株ＣＹＤ１、ＣＹＤ２、ＣＹＤ３、及びＣＹＤ４の調製は、国際特許出願ＷＯ９８／３７９１１、ＷＯ０３／１０１３９７、ＷＯ０７／０２１６７２、ＷＯ０８／００７０２１、ＷＯ０８／０４７０２３、及びＷＯ０８／０６５３１５に詳細に記載されており、それらの調製のためのプロセスの正確な記載のためにこれらに対する参照がなされ得る。ＣＹＤ１、ＣＹＤ２、ＣＹＤ３、及びＣＹＤ４のｐｒＭ－Ｅ領域の対応するヌクレオチド配列は、ＷＯ２０１６０３４６２９で提供されており、配列番号は、この参考文献の表１６に示されている。

【0216】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、本発明のワクチン組成物に含まれるＣＹＤ－ＴＤＶ内のキメラデング熱ウイルスの量が約１０^５ＣＣＩＤ５０～約１０^６ＣＣＩＤ５０の範囲内にある、複合ワクチン組成物に関する。ＣＹＤ剤形（例えば、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標））に含まれる血清型１～４の各々の弱毒化生キメラデング熱ウイルスの量は、好ましくは等しい。

【0217】

このような実施形態において、ＣＹＤ－ＴＤＶは、０．４％のＮａＣｌを含む溶液に溶解させる／溶解可能である。

【0218】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、デング熱ワクチン組成物が、他のデング熱ワクチン（例えば、ＴＶ００３またはＴＶ００５）を含む、複合ワクチン組成物を対象とする。米国国立アレルギー・感染症研究所が開発したＴＶ００３は、ワクチン成分ｒＤＥＮ１Δ３０、ｒＤＥＮ２／４Δ３０、ｒＤＥＮ３Δ３０／３１、及びｒＤＥＮ４Δ３０を含み、これらの成分の各々が３ｌｏｇ_１０ＰＦＵの濃度で存在する。ＴＶ００５はＴＶ００３に類似するが、ＴＶ００５中のｒＤＥＮ２／４Δ３０の濃度が４ｌｏｇ_１０ＰＦＵである点が異なる。ワクチンＴＶ００３、ＴＶ００５、及びこれらのワクチン成分、ならびにこれらの生産については、ＷＯ２００８／０２２１９６Ａ２及びＳ．Ｓ．Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｖａｃｃｉｎｅｓ，２０１６，１５（４）：５０９ ｔｏ ５１７でより詳細に説明されている。組換えＤＮＡ技術を用いて、ＴＶ００３またはＴＶ００５のワクチン成分に対し、３’非翻訳領域の欠失及び構造遺伝子のキメラ化という２つの弱毒化戦略を利用した。例えば、成分ｒＤＥＮ４Δ３０は、野生型ＤＥＮＶ－４の全ての構造タンパク質及び非構造タンパク質を含むが、３’非翻訳領域内の３０ヌクレオチドの欠失（「Δ３０」と表記）によって弱毒化されている。他方のワクチン成分も、３’非翻訳領域内の３０ヌクレオチドの欠失によって弱毒化されている。加えて、ｒＤＥＮ３Δ３０／３１は、３’非翻訳領域内に３１ヌクレオチドの欠失を含む（ＷＯ２００８／０２２１９６Ａ２の図１ｃ及び図１３に詳細に示されている）。ｒＤＥＮ２／４Δ３０成分は、ＤＥＮＶ－２のｐｒＭ及びＥ遺伝子を置換してｒＤＥＮ４Δ３０ゲノムにすることによって作出された。ＴＶ００３またはＴＶ００５の生産に使用することができるデング熱株の完全なゲノム配列は、ＷＯ２００８／０２２１９６Ａ１の表ＡのＧｅｎｂａｎｋアクセッション番号で利用可能である。

【0219】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、Ａ型肝炎ワクチンが不活化Ａ型肝炎ワクチンである、複合ワクチン組成物を対象とする。

【0220】

ある特定の実施形態において、Ａ型肝炎ワクチンは、Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来するＡ型肝炎ウイルスを含む。

【0221】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、Ａ型肝炎ワクチンが不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、不活化Ａ型肝炎ウイルスが野生型Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来する、複合ワクチン組成物を対象とする。

【0222】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、不活化Ａ型肝炎ウイルスを担体アルミニウムに吸着させている、複合ワクチン組成物を対象とする。これらの実施形態の一部において、アルミニウムは水酸化アルミニウムまたはアルミニウムヒドロキシホスフェート硫酸塩である。

【0223】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、Ａ型肝炎ワクチンが、リン酸緩衝生理食塩水と、アミノ酸の形態及びポリソルベートの形態でその中に溶解している賦形剤とを含む、複合ワクチン組成物を対象とする。このような実施形態において、アミノ酸は０．２～０．８％ｗ／ｖの濃度で存在し、及び／またはポリソルベートは０．０１～０．０９ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。

【0224】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、Ａ型肝炎ワクチンが、５００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）～２０００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）、好ましくは７００ＥＬ．Ｕ～１６００ＥＬ．Ｕ．、最も好ましくは１３００～１５５０ＥＬ．Ｕ．の範囲の濃度でウイルス抗原を発現するＡ型肝炎ウイルスを含む、複合ワクチン組成物を対象とする。代替的に、濃度は５００ＥＬ．Ｕ．～９００ＥＬ．Ｕ．の範囲である。さらなる実施形態において、濃度は２００～４００ＥＬ．Ｕ．の範囲である。

【0225】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物であって、複合ワクチンが液体を含む用量に含まれ、液体の体積が０．５ｍｌ、１ｍｌ、または１．５ｍｌである、複合ワクチン組成物を対象とする。

【0226】

ある特定の実施形態において、複合ワクチン組成物は、液体形態または脱水形態（例えば、凍結乾燥形態）の１つのバイアルで提供される。

【0227】

ある特定の実施形態において、複合ワクチン組成物は、シリンジ内でデング熱ワクチン組成物の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンの用量を混合することから得られる。

【0228】

また、本発明は、部分的には、上記の複合ワクチン組成物のいずれかを対象または対象集団に投与する方法も対象とする。

【0229】

ある特定の実施形態において、本発明は、複合ワクチン組成物が皮下または筋肉内に投与される当該方法も対象とする。

【0230】

デング熱疾患及びＡ型肝炎を予防する方法、対応する使用、ならびに対応するキット
本発明は、Ａ型肝炎及びデング熱疾患を予防する方法を対象とする。

【0231】

本発明は、部分的には、対象または対象集団のＡ型肝炎及びデング熱疾患を予防する方法であって、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に投与することを含み、当該単位用量が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、方法を対象とする。

【0232】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標））が不活化ウイルスを含む、方法を対象とする。好ましくは、Ａ型肝炎ワクチンは、不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、不活化Ａ型肝炎ウイルスは、Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来する。

【0233】

ある特定の実施形態において、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標））は、Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来する。

【0234】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標））（好ましくは、Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来するウイルスである）をアルミニウムに吸着させる、方法を対象とする。これらの実施形態の一部によれば、アルミニウムは水酸化アルミニウムまたはアルミニウムヒドロキシホスフェート硫酸塩である。

【0235】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標））、好ましくはＡ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来するＡ型肝炎ワクチンが、リン酸緩衝生理食塩水と、その中にアミノ酸形態及びポリソルベート形態で溶解している賦形剤とを含む、方法を対象とする。

【0236】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標））が、５００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）～２０００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）、好ましくは７００ＥＬ．Ｕ～１６００ＥＬ．Ｕ．、最も好ましくは１３００～１５５０ＥＬ．Ｕ．の範囲の濃度でウイルス抗原を発現するＡ型肝炎ウイルスを含む、方法を対象とする。代替的に、濃度は５００ＥＬ．Ｕ．～９００ＥＬ．Ｕ．の範囲である。さらなる実施形態において、濃度は２００～４００ＥＬ．Ｕ．の範囲である。

【0237】

例えば、Ａ型肝炎ワクチンのウイルス抗原活性は、Ａｎｄｒｅ ＦＥ．，Ｈｅｐｂｕｒｎ Ａ．，Ｄ’Ｈｏｎｄｔ Ｅ．，“Ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｖａｃｃｉｎｅｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ”，Ａ．Ｐｒｏｇ Ｍｅｄ Ｖｉｒｏｌ １９９０；３７：７２－９５に開示されている方法に従って測定することができる。

【0238】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、デング熱ワクチン組成物が、０．５ｍＬの医薬的に許容される希釈剤で再構成すると以下を含む、方法を対象とする：
（ｉ）キメラ型デング熱血清型２／１株の場合、少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、
（ｉｉ）デング熱血清型２株の場合、少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、
（ｉｉｉ）キメラ型デング熱血清型２／３株の場合、少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、及び
（ｉｖ）キメラ型デング熱血清型２／４株の場合、少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度。

【0239】

これらの実施形態の一部によれば、デング熱ワクチン組成物を医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）が、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該ｐｆｕ／０．５ｍｌの総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、１０％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも６％、少なくとも８％、または少なくとも１０％、または少なくとも１２％、または少なくとも１４％、または少なくとも１６％、または少なくとも１８％である。

【0240】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団が、全てのデング熱血清型に関して血清陰性である、方法を対象とする。これらの実施形態の一部によれば、対象集団または対象は、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性である。

【0241】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の単位用量及びＡ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））が０／１日目に投与される、方法を対象とする。

【0242】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の単位用量が皮下注射によって投与され、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））が筋肉内注射によって投与される、方法を対象とする。いくつかの実施形態によれば、注射は、腕、好ましくは腕の三角筋領域に投与される。これらの実施形態の一部によれば、本明細書に記載の発明の単位用量の皮下注射及びＡ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））の筋肉内注射）は、異なる解剖学的部位（例えば、反対の腕）に投与される。

【0243】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明のデング熱ワクチン組成物の２回の単位用量が投与される、方法を対象とする。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の発明の２回の単位用量は、１２ヵ月以上の範囲内、または６ヵ月以内、または３ヵ月以内（例えば、０／１日目及び９０日目）に投与される。これらの実施形態の一部によれば、本明細書に記載の発明のさらなる第３の単位用量が第２の投与後に投与される。このような第３の投与は、第１の投与の６～１２ヵ月後、例えば、第１の投与の１２ヵ月後、または第１の投与の１２ヵ月後よりも遅く、例えば、第２の投与の１２ヵ月（１年）後または第１もしくは第２の投与の５年以上後でさえ投与され得、ブースターとして作用し得る。

【0244】

ある特定の実施形態において、本発明は、本明細書に記載の発明の２回の単位用量及びＡ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））の１回の用量は、特定的には以下のスケジュールに従って投与される：
－０／１日目に、第１の単位用量及び当該Ａ型肝炎ワクチンの第１の同時投与、及び
－当該第１の同時投与の後、例えば、３ヵ月後、好ましくは９０日目に、第２の再構成された単位用量の第２の投与。

【0245】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量が、対象または対象集団に皮下投与され、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））が、対象または対象集団に筋肉内投与され、対象または対象集団が、全てのデング熱血清型に関して血清陰性である、方法を対象とする。他の実施形態において、対象または対象集団は、少なくとも１つのデング熱血清型に関して血清陽性である。

【0246】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の単位用量及びＡ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））が、デング熱流行地域の出身の対象または対象集団に投与される、方法を対象とする。ある特定の実施形態において、デング熱流行地域の出身の対象または対象集団に、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量が皮下投与され、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））が筋肉内投与される。

【0247】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団は、デング熱非流行地域、好ましくはデング熱非流行及びＡ型肝炎非流行地域の出身である、方法を対象とする。

【0248】

いくつかの実施形態によれば、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））の第２の用量が投与される。Ａ型肝炎ワクチンの第２の用量は、Ａ型肝炎ワクチンの第１の投与の後に投与され得る。このような第２の投与は、ブースターとしての機能を果たすことができ、Ａ型肝炎ワクチンの第１の投与の６～１２ヵ月または６～１８ヵ月後、例えば９ヵ月後（例えば、２７０日目）に投与され得る。

【0249】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量が皮下投与され、Ａ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））が、１７歳超、または１８歳超、または１８～６０歳の対象または対象集団に筋肉内投与される、方法を対象とする。さらなる実施形態において、対象または対象集団は、２１歳超、または２１～６０歳、または２１～４５歳の成人である。いくつかの実施形態において、対象または対象集団は、デング熱流行地域の出身である。別の実施形態において、対象または対象集団は、デング熱非流行地域、好ましくはデング熱非流行及びＡ型肝炎非流行地域の出身である。ある特定の実施形態によれば、対象または対象集団は、４つ全てのデング熱血清型に関して血清陰性である。

【0250】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、Ａ型肝炎ワクチンの投与前及びデング熱ワクチン組成物の単位用量の投与前に、対象集団または対象が過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定するステップを含まない、あるいはＡ型肝炎ワクチンの投与前及びデング熱ワクチン組成物の単位用量の投与前に、対象集団または対象のＡ型肝炎の血清状態及び／またはデング熱の血清状態が不明である、方法を対象とする。ある特定の実施形態によれば、当該方法は、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量の投与のステップの前、間、または後のいずれの時点でも、対象集団または対象が過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定するステップを含まない、あるいは、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量の投与のステップの前、間、または後のいずれかの時点でも、対象集団または対象のＡ型肝炎の血清状態及び／またはデング熱の血清状態が不明である。

【0251】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、以下のステップからなる一次ワクチン接種を含む、方法を対象とする：
（Ａ）デング熱感染及びＡ型肝炎感染に対する保護の必要性から四価デング熱ウイルス組成物の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンの投与を行う対象を、過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定することなく選択すること、ならびに
（Ｂ）対象に、四価デング熱ウイルス組成物の第１の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンを同日同時に投与すること、ならびに任意選択で
（Ｃ）対象に、四価デング熱ウイルス組成物の第２の単位用量を、第１の単位用量の投与から３～１２ヵ月以内に投与すること、ならびに任意選択で
（Ｄ）対象に、Ａ型肝炎ワクチンの少なくとも１回のさらなる用量を、第１の単位用量の投与から６～１８ヵ月以内に、投与すること。

【0252】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、以下のステップからなる一次ワクチン接種を含む、方法を対象とする：
（Ａ）デング熱感染及びＡ型肝炎感染に対する保護の必要性から四価デング熱ウイルス組成物の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンの投与を行う対象を選択すること、ならびに
（Ｂ）対象に、四価デング熱ウイルス組成物の第１の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンを同日同時に投与すること、ならびに
（Ｃ）対象に、四価デング熱ウイルス組成物のさらなる２回の単位用量を、第１の単位用量の投与の約６ヵ月後及び約１２ヵ月後に投与し、さらなるＡ型肝炎ワクチンを、第１の単位用量の投与の約６ヵ月後または約１２ヵ月後のいずれかに投与すること。これらの実施形態の一部において、対象を選択するステップ（Ａ）は、過去にＡ型肝炎に感染していたかの判定なしで行われる。

【0253】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、単位用量を医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）が、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該ｐｆｕ／０．５ｍｌの総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、１０％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも６％、少なくとも８％、または少なくとも１０％、または少なくとも１２％、または少なくとも１４％、または少なくとも１６％、または少なくとも１８％である、複合ワクチン組成物を対象とする。

【0254】

特定の実施形態において、当該方法は、デング熱ワクチン組成物とＡ型肝炎ワクチンとの間の適合性をもたらす。適合性とは、特定的には、同時投与後の免疫応答が、これらのワクチンの単回投与と比較して劣っていないことを意味する。

【0255】

特定の実施形態において、当該方法は、デング熱ワクチン組成物とＡ型肝炎ワクチンとの間の相乗作用をもたらす。相乗作用とは、特定的には、同時投与後の免疫応答が、一方または両方のワクチンを単剤投与した場合よりも良好であることを意味する。

【0256】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、１つの対象集団及び１つの対照対象集団に分けられた少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で非劣性をもたらし、対象集団が、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に受け、対照対象集団が、Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボ投与物を同日同時に受ける、方法を対象とする。

【0257】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、Ａ型肝炎ワクチンが、投与（０／１日目）から３０日後に、少なくとも９５％、または少なくとも９８％のＡ型肝炎の血清保護率をもたらす、方法を対象とする。

【0258】

ある特定の実施形態において、本発明は、Ａ型肝炎の単剤投与に対するＡ型肝炎の血清保護率の差をもたらす前述の方法であって、当該差が、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で決定され、
健康な対象が、
ａ）Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量の投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団と、
ｂ）Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボの投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または５０例の対象の対照対象集団とに分けられ、
投与（０／１日目）から３０日後の対照対象集団のＡ型肝炎の血清保護率と、投与（０／１日目）から３０日後の対象集団のＡ型肝炎の血清保護率との間の差が決定され、
両側９５％信頼区間内の当該差の上限が１０％未満である、方法を対象とする。

【0259】

ある特定の実施形態において、本発明は、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性である少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、Ａ型肝炎ワクチンが、投与（０／１日目）から３０日後に、少なくとも９５％、または少なくとも９８％、または少なくとも９９％のＡ型肝炎の血清保護率をもたらす前述の方法であって、健康な対象が、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含む、方法を対象とする。

【0260】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、Ａ型肝炎の単剤投与に対するＡ型肝炎の血清保護率の差をもたらし、当該差が、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性である少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で決定され、当該健康な対象が、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含み、
健康な対象が、
ａ）Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量の投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団であって、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含む、対象集団と、
ｂ）Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボの投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対照対象集団であって、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含む、対照対象集団とに分けられ、
投与（０／１日目）から３０日後の対照対象集団のＡ型肝炎の血清保護率と、投与（０／１日目）から３０日後の対象集団のＡ型肝炎の血清保護率との間の差が決定され、
両側９５％信頼区間内の当該差の上限が１０％未満である、方法を対象とする。

【0261】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団が、Ａ型肝炎ワクチン大流行及び／またはデング熱ウイルス大流行にさらされている、方法を対象とする。
ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデングウイルス血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、投与（０／１日目）から３０日後にもたらす抗Ａ型肝炎ウイルス抗体幾何平均濃度（ＧＭＣ）が、少なくとも７０ｍＩＵ／ｍｌ、または少なくとも８０ｍＩＵ／ｍｌ、または少なくとも９０ｍＩＵ／ｍｌである、方法を対象とする。

【0262】

抗Ａ型肝炎抗体を決定するためのＥＬＩＳＡは、例えば、Ｂｅｃｋ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｔｒａｖｅｌ Ｍｅｄ ２００４；１１：２０１－２０７に開示されている。

【0263】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量の対象または対象集団への同時投与が、同時投与に関連する重篤な有害事象をもたらさない、方法を対象とする。加えて、同時投与に関連する死亡例も認められない。

【0264】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、以下のＭＮＴ５０によって測定される中和抗体の幾何平均力価（ＧＭＴ）：
－デング熱血清型１の場合、少なくとも１１０、または少なくとも１４０、または少なくとも１５０、
－デング熱血清型２の場合、少なくとも３０００、または少なくとも３５００、または少なくとも３９００、
－デング熱血清型３の場合、少なくとも１００、または少なくとも１２０、または少なくとも１４０、及び／または
－デング熱血清型４の場合、少なくとも８０、または少なくとも１１０、または少なくとも１４０を、
ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、ベースラインで全てのデング熱ウイルスの血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象集団に、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量が同日同時に投与（０／１日目）されてから３０日後にもたらす、方法を対象とする。

【0265】

いくつかの実施形態において、対象集団の幾何平均中和抗体力価（ＧＭＴ）または対象の中和抗体力価は、マイクロ中和試験に従って（例えば、実施例２に記載の方法に従って）決定される。

【0266】

本発明は、部分的には、対象または対象集団におけるＡ型肝炎及びデング熱疾患を予防する方法であって、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に投与することを含み、当該単位用量が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、前記４つの弱毒化生デング熱ウイルス株が、上記で定義した単位用量で使用されたものとは異なる、方法を対象とする。

【0267】

本発明の１つの実施形態において、当該方法は、Ａ型肝炎ワクチンを他のデング熱ワクチン（例えば、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標））と共に同日同時に投与することを対象とする。Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）は、黄熱病骨格に基づく四価デング熱ワクチンＣＹＤ－ＴＤＶ（Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ Ｐａｓｔｅｕｒ、Ｌｙｏｎ、Ｆｒａｎｃｅ）であり、アジア及び中南米における小児の５６～６１％のウイルス学的に確認されたデング熱（ＶＣＤ）に対する全体的ワクチン効力（ＶＥ）の臨床的実証に基づいていくつかの国において認可されている（Ｃａｐｅｄｉｎｇ ＭＲ ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｔｅｔｒａｖａｌｅｎｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｉｎ Ａｓｉａ：ａ ｐｈａｓｅ ３，ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，ｏｂｓｅｒｖｅｒ－ｍａｓｋｅｄ，ｐｌａｃｅｂｏ－ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌ．Ｌａｎｃｅｔ ２０１４，３８４：１３５８－６５；Ｖｉｌｌａｒ ＬＡ ｅｔ ａｌ．Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ａ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｔｅｔｒａｖａｌｅｎｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ９－１６ ｙｅａｒ ｏｌｄｓ：ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ，ｐｈａｓｅ ＩＩ ｔｒｉａｌ ｉｎ Ｌａｔｉｎ Ａｍｅｒｉｃａ． Ｐｅｄｉａｔｒ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ Ｊ ２０１３，３２：１１０２－９）。これらの特定の株ＣＹＤ１、ＣＹＤ２、ＣＹＤ３、及びＣＹＤ４の調製は、国際特許出願ＷＯ９８／３７９１１、ＷＯ０３／１０１３９７、ＷＯ０７／０２１６７２、ＷＯ０８／００７０２１、ＷＯ０８／０４７０２３、及びＷＯ０８／０６５３１５に詳細に記載されており、それらの調製のためのプロセスの正確な記載のためにこれらに対する参照がなされ得る。ＣＹＤ１、ＣＹＤ２、ＣＹＤ３、及びＣＹＤ４のｐｒＭ－Ｅ領域の対応するヌクレオチド配列は、ＷＯ２０１６０３４６２９で提供されており、配列番号は、この参考文献の表１６に示されている。

【0268】

１つのこのような実施形態において、当該方法は、以下のステップからなるワクチン接種を含む：
（Ａ）デング熱感染及びＡ型肝炎感染に対する保護の必要性からＣＹＤ－ＴＤＶ組成物（例えば、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標））の等用量及びＡ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））の投与を行う対象を選択すること、ならびに
（Ｂ）対象に、第１の用量のＣＹＤ－ＴＤＶ組成物（例えば、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標））及びＡ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））を０ヵ月目に投与すること、
（Ｃ）対象に、ＣＹＤ－ＴＤＶ組成物（例えば、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標））のさらなる用量、及び任意選択でＡ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））を、第１のＣＹＤ－ＴＤＶ用量の投与から３～１１ヵ月以内、特定的には約６ヵ月時に投与すること、ならびに
（Ｄ）対象に、ＣＹＤ－ＴＤＶ（例えば、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標））の最終用量、及び任意選択でＡ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標）またはＶＡＱＴＡ（登録商標））を、約１２ヵ月時に投与すること。

【0269】

ある特定の実施形態において、対象は２～６０歳である。

【0270】

特定の好ましい実施形態において、対象は、２～１８歳、４～１６歳、または１８～６０歳である。

【0271】

好ましくは、投与するＣＹＤ－ＴＤＶの各成分の正確な量は、ワクチン接種する対象の年齢及び体重、投与頻度、ならびに組成物中の他の成分に応じて変化し得る。ワクチン組成物の用量に含まれるＣＹＤ－ＴＤＶ内のキメラデング熱ウイルスの量は、約１０^５ＣＣＩＤ５０～約１０^６ＣＣＩＤ５０の範囲内にある。ＣＹＤ剤形（例えば、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標））に含まれる血清型１～４の各々の弱毒化生キメラデング熱ウイルスの量は、好ましくは等しい。有利には、このセクションに記載のワクチン組成物は、本明細書で定義されるデング抗原の有効量を含む。

【0272】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、デング熱ワクチン組成物が、他のデング熱ワクチン（例えば、ＴＶ００３またはＴＶ００５）を含む、方法を対象とする。米国国立アレルギー・感染症研究所が開発したＴＶ００３は、ワクチン成分ｒＤＥＮ１Δ３０、ｒＤＥＮ２／４Δ３０、ｒＤＥＮ３Δ３０／３１、及びｒＤＥＮ４Δ３０を含み、これらの成分の各々が３ｌｏｇ_１０ＰＦＵの濃度で存在する。ＴＶ００５はＴＶ００３に類似するが、ＴＶ００５のｒＤＥＮ２／４Δ３０の濃度が４ｌｏｇ_１０ＰＦＵである点が異なる。ワクチンＴＶ００３、ＴＶ００５、及びこれらのワクチン成分、ならびにこれらの生産については、ＷＯ２００８／０２２１９６Ａ２及びＳ．Ｓ．Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｖａｃｃｉｎｅｓ，２０１６，１５（４）：５０９ ｔｏ ５１７でより詳細に説明されている。組換えＤＮＡ技術を用いて、ＴＶ００３またはＴＶ００５のワクチン成分に対し、３’非翻訳領域の欠失及び構造遺伝子のキメラ化という２つの弱毒化戦略を利用した。例えば、成分ｒＤＥＮ４Δ３０は、野生型ＤＥＮＶ－４の全ての構造タンパク質及び非構造タンパク質を含むが、３’非翻訳領域内の３０ヌクレオチドの欠失（「Δ３０」と表記）によって弱毒化されている。他方のワクチン成分も、３’非翻訳領域内の３０ヌクレオチドの欠失によって弱毒化されている。加えて、ｒＤＥＮ３Δ３０／３１は、３’非翻訳領域内に３１ヌクレオチドの欠失を含む（ＷＯ２００８／０２２１９６Ａ２の図１ｃ及び図１３に詳細に示されている）。ｒＤＥＮ２／４Δ３０成分は、ＤＥＮＶ－２のｐｒＭ及びＥ遺伝子を置換してｒＤＥＮ４Δ３０ゲノムにすることによって作出された。ＴＶ００３またはＴＶ００５の生産に使用することができるデング熱株の完全なゲノム配列は、ＷＯ２００８／０２２１９６Ａ１の表ＡのＧｅｎｂａｎｋアクセッション番号で利用可能である。

【0273】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量、特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む単位用量と、本明細書に開示するＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）と、本明細書に開示するＡ型肝炎ワクチンを同日同時に投与する、方法を対象とする。

【0274】

ある特定の実施形態において、本発明は前述の方法であって、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量、特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む単位用量と、本明細書に開示するＡ型肝炎ワクチンとを、第１の投与として、０／１日目に同日同時に投与し、続いて、対象または対象集団に、本明細書に開示するＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）を、第２の投与として、第１の投与から３ヵ月以内、例えば第１の投与から９０日目に投与する、方法を対象とする。代替的に、本明細書に開示するＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）及び本明細書に開示するＡ型肝炎ワクチンは、対象または対象集団に、第１の投与として、０／１日目に同日同時に投与し、続いて、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量（特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む）は、第２の投与として、第１の投与から３ヵ月以内、例えば第１の投与から９０日目に投与する。

【0275】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量、特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む単位用量と、本明細書に開示するＴＶ００３またはＴＶ００５と、本明細書に開示するＡ型肝炎ワクチンを同日同時に投与する、方法を対象とする。

【0276】

ある特定の実施形態において、本発明は前述の方法であって、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量、特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む単位用量と、本明細書に開示するＡ型肝炎ワクチンとを、第１の投与として、０／１日目に同日同時に投与し、続いて、対象または対象集団に、本明細書に開示するＴＶ００３またはＴＶ００５を、第２の投与として、第１の投与から３ヵ月以内、例えば第１の投与から９０日目に投与する、方法を対象とする。代替的に、本明細書に開示するＴＶ００３またはＴＶ００５及び本明細書に開示するＡ型肝炎ワクチンは、対象または対象集団に、第１の投与として、０／１日目に同日同時に投与し、続いて、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量（特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む）は、第２の投与として、第１の投与から３ヵ月以内、例えば第１の投与から９０日目に投与する。

【0277】

上記の方法は、デング熱疾患及びＡ型肝炎を予防するこのような方法のための本明細書に開示するデング熱ワクチンの単位用量の使用の文脈においても、デング熱疾患及びＡ型肝炎を予防するこのような方法のための医薬品の製造のためのデング熱ワクチンの単位用量の使用の文脈においても、考慮される。

【0278】

さらに、本発明は、Ａ型肝炎及びデング熱疾患に対するキットであって、
少なくとも以下を含む箱を含む、キットを対象とする：
（ａ）上記で定義されるようなＡ型肝炎ワクチン（例えば、ＨＡＶＲＩＸ（登録商標））を保持する第１の容器、及び
（ｂ）上記で定義されるようなデング熱ワクチン組成物の単位用量を保持する第２の容器であって、当該単位用量が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、第２の容器。

【0279】

デング熱疾患及び黄熱病を予防する方法及び使用
本発明は、部分的には、対象におけるデング熱疾患及び黄熱病を予防する方法を対象とする。したがって、ある特定の実施形態において、本発明は、対象におけるデング熱疾患を予防する方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量を対象に投与することを含み、当該方法がさらに、黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）の対象への併用投与によって対象における黄熱病を予防することを含む、方法を対象とする。

【0280】

本発明は、部分的には、対象集団におけるデング熱疾患及び黄熱病を予防する方法を対象とする。したがって、ある特定の実施形態において、本発明は、対象集団におけるデング熱疾患を予防する方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量を対象集団に投与することを含み、当該方法がさらに、黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）の対象集団への併用投与によって対象集団における黄熱病を予防することを含む、方法を対象とする。

【0281】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の単位用量及び黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）が同時に投与される、方法を対象とする。これらの実施形態の一部において、同時投与は０日目または９０日目、好ましくは０日目に行われる。他の実施形態において、本明細書に記載の本発明の単位用量及び黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）の投与は、黄熱病ワクチンが、本明細書に記載のデング熱ワクチンの単位用量の前または後（例えば約６週間以内、例えば約４週間以内、例えば約２週間以内、または例えば約１週間以内）に投与されるように、順次行われる。

【0282】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、皮下注射によって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量が投与され、黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）が投与される、方法を対象とする。いくつかの実施形態によれば、皮下注射は、腕、好ましくは腕の三角筋領域に投与される。これらの実施形態の一部によれば、本明細書に記載の発明の単位用量及び黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）の皮下注射は、特定的には、ワクチンが同時に投与される場合、異なる解剖学的部位、例えば、反対の腕に投与される。

【0283】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の２回の単位用量が投与される、方法を対象とする。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の発明の２回の単位用量は、１２ヵ月以上の範囲内、または６ヵ月以内、または３ヵ月以内、例えば、０／１日目及び９０日目に投与される。これらの実施形態の一部によれば、本明細書に記載の発明のさらなる第３の単位用量が第２の後に投与される。このような第３の投与は、ブースターとして作用し得、第１の投与から６～１２ヵ月後、例えば、第１の投与から１２ヵ月後、または第１の投与から１２ヵ月後よりも遅く、例えば、第２の投与から１２ヵ月（１年）後または第１もしくは第２の投与から５年以上後でさえ投与され得る。

【0284】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の２回の再構成された単位用量及び黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）の１回の用量が、特定的には以下のスケジュールに従って投与される、方法を対象とする：
－０日目に、当該黄熱病ワクチンの投与、
－当該黄熱病ワクチンを投与した後、例えば、３ヵ月後、好ましくは９０日目に、第１の再構成された単位用量の第１の投与、及び
－再構成された単位用量の当該第１の投与の後、例えば、３ヵ月後、好ましくは１８０日目、第２の再構成された単位用量の第２の投与。

【0285】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の２回の再構成された単位用量及び黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）の１回の用量が、特定的には以下のスケジュールに従って投与される、方法を対象とする：
－０日目に、第１の再構成された単位用量の第１の投与、
－再構成された単位用量の当該第１の投与の後、例えば、３ヵ月後、好ましくは９０日目に、第２の再構成された単位用量の第２の投与、及び
－再構成された単位用量の当該第２の投与の後、例えば、３ヵ月後、好ましくは１８０日目に、黄熱病ワクチンの投与。

【0286】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の２回の再構成された単位用量及び黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）の１回の用量が、特定的には以下のスケジュールに従って投与される、方法を対象とする：
－０日目に、第１の再構成された単位用量及び当該黄熱病ワクチンの同時投与、及び
－当該同時投与の後、例えば、３ヵ月後、好ましくは９０日目に、第２の再構成された単位用量の第２の投与。

【0287】

好ましい実施形態において、黄熱病ワクチン及び本明細書に記載の発明の単位用量は、０日目に同時に、または９０日目に同時に投与される。

【0288】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団が、全てのデング熱血清型に対し血清陰性である、方法を対象とする。ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量が対象または対象集団に皮下投与され、黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄワクチン）が対象または対象集団に皮下投与され、対象または対象集団が、全てのデング熱血清型に関して血清陰性である、方法を対象とする。他の実施形態において、対象または対象集団は、少なくとも１つのデング熱血清型に関して血清陽性である。

【0289】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の単位用量及び黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）が、デング熱流行地域の出身の対象または対象集団に投与される、方法を対象とする。ある特定の実施形態において、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量及び黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）は、デング熱流行地域の出身の対象または対象集団に皮下投与される。他の実施形態において、対象または対象集団は、デング熱非流行地域の出身である。このような対象集団またはこのような対象は、デング熱流行地域及び黄熱病流行地域への渡航の状況下で本発明に従ってワクチン接種され得る。

【0290】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量及び黄熱病ワクチン（特定的には、ＹＦ－１７Ｄ）が、１７歳超、または１８歳超、または１８～６０歳の対象または対象集団に皮下投与される、方法を対象とする。さらなる実施形態において、対象または対象集団は、２１歳超、または２１～６０歳、または２１～４５歳の成人である。いくつかの実施形態において、対象または対象集団は、デング熱流行地域の出身である。別の実施形態において、対象または対象集団は、デング熱非流行地域、好ましくはデング熱非流行及び黄熱病非流行地域の出身である。これらの実施形態の一部によれば、対象または対象集団は、４つ全てのデング熱血清型に関して血清陰性である。

【0291】

上記の方法は、このような方法のための本明細書に開示するデング熱ワクチンの単位用量の使用の文脈においても、このような方法のための医薬品の製造のためのデング熱ワクチンの単位用量の使用の文脈においても、考慮される。

【0292】

デング熱に対する予防する方法及び使用、接種する方法及び使用
本発明は、部分的には、対象におけるデング熱疾患（特定的には、ウイルス学的に確認可能なデング熱、ＶＣＤ）を予防する方法を対象とする。したがって、ある特定の実施形態において、本発明は、対象におけるデング熱疾患を予防する方法であって、本明細書に記載の発明の単位用量／四価デング熱ウイルス組成物、特定的には、再構成された単位用量を対象に投与することを含む、方法を対象とする。

【0293】

本発明は、部分的には、デング出血熱（ＤＨＦ）及びデング熱ショック症候群（ＤＳＳ）を予防する方法を対象とする。したがって、ある特定の実施形態において、本発明は、デング出血熱（ＤＨＦ）及びデング熱ショック症候群（ＤＳＳ）を予防する方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物を対象に投与することを含む、方法を対象とする。

【0294】

そのため、本発明は、血清型１、血清型２、血清型３、及び血清型４を表す４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物をウイルス学的に確認可能なデング熱疾患に対して対象に接種する方法であって、特定的には、四価デング熱ウイルス組成物は、キメラデング熱血清型２／１株及びデング熱血清型２株及びキメラデング熱血清型２／３株及びキメラデング熱血清型２／４株を含み、特定的には、デング熱血清型２株は、野生型ウイルス株ＤＥＮ－２ １６６８１（配列番号１１）から誘導され、以下のように少なくとも３つのヌクレオチドにおいてその野生型とは異なり、
ａ）５’－ノンコーディング領域（ＮＣＲ）－５７（ｎｔ－５７ ＣからＴ）：主要弱毒化遺伝子座
ｂ）ＮＳ１－５３ ＧｌｙからＡｓｐ（ｎｔ－２５７９ ＧからＡ）：主要弱毒化遺伝子座
ｃ）ＮＳ３－２５０ ＧｌｕからＶａｌ（ｎｔ－５２７０ ＡからＴ）：主要弱毒化遺伝子座、
３つのキメラデング熱株は、血清型２株に由来する構造タンパク質ｐｒＭ及びＥを他のデング熱血清型に由来する対応する構造タンパク質に置き換え、以下のキメラデング熱株：
－ＤＥＮＶ－２／１キメラ、
－ＤＥＮＶ－２／３キメラ及び
－ＤＥＮＶ－２／４キメラ、をもたらすことによって血清型２株から誘導される、方法を対象とする。

【0295】

四価組成物の血清型に関するさらなる情報は、上記のセクション「デング熱ウイルス株」から誘導され得る。

【0296】

このような方法のための四価デング熱ウイルス組成物は、
（ｉ）少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型１、
（ｉｉ）少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型２、
（ｉｉｉ）少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型３、及び
（ｉｖ）少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型４、を含む単位用量の形態であり得る。

【0297】

本発明は、特定的には、単位用量が、凍結乾燥されており、０．５ｍＬの医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、
（ｉ）少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型１、
（ｉｉ）少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型２、
（ｉｉｉ）少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型３、及び
（ｉｖ）少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型４を含むような方法を対象とする。

【0298】

四価組成物または単位用量に関するさらなる情報は、上記のセクション「デング熱ワクチン組成物」及び「単位用量」から誘導することができる。

【0299】

そのため、本発明は、方法及び対応する使用であって、当該方法が、以下のステップ：
（Ａ）四価デング熱ウイルス組成物の第１の単位用量を対象に投与することと、
（Ｂ）第１の単位用量の投与から３ヵ月以内に、四価デング熱ウイルス組成物の第２の単位用量を対象に投与することと、を含む、２回のみの単位用量の投与による一次ワクチン接種を含む、方法及び対応する使用を対象とする。
この実施形態によれば、３ヵ月以内に２回の用量を投与するだけで、後のデング熱感染に対する有効な保護をもたらすのに十分である。

【0300】

このような方法は好ましくは、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性をもたらし、このとき、投与スケジュールの第１の投与から投与スケジュールの第２の投与の１８ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、１４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限は６０％を超える。

【0301】

このような方法はまた好ましくは、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性をもたらし、このとき、投与スケジュールの第２の投与の３０日後から投与スケジュールの第２の投与の１８ヵ月後まで、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である１４～１６歳の少なくとも１，５００例または少なくとも２，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限は４５％を超える。

【0302】

ある特定の実施形態によれば、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患に対する接種方法は、デング熱血清型２、及び／またはデング熱血清型１によるものである。当該方法は、デング熱血清型２及びデング熱血清型１に対する極めて高い有効性及びデング熱血清型２に対する最も高い有効性を有する。

【0303】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、血清型１に対するワクチン有効性を有する前述の方法であって、第２の投与の３０日後から第２の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例、または少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超える、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、３５％を超えは、４０％を超え、４５％を超え、５０％を超え、または５４％を超える。ある特定のこのような実施形態において、少なくとも１，５００例の対象集団は、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性であり、下限は、３５％を超える。ある特定のこのような実施形態において、血清陰性及び血清陽性の集団は各々、両側９５％信頼区間で血清型１に対するワクチン有効性が得られ、下限は１０％ポイント以内である。

【0304】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、第２の投与の３０日後から第２の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例、または少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、血清型１に対するワクチン有効性を有する、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、または６５％を超える。ある特定のこのような実施形態において、少なくとも１，５００例の対象集団は、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である。ある特定のこのような実施形態において、血清陰性及び血清陽性の集団は各々、５％ポイント以内の血清型１に対するワクチン有効性が得られる。

【0305】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、血清型２に対するワクチン有効性を有する前述の方法であって、第２の投与の３０日後から第２の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例、または少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超える、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、５０％を超え、６０％を超え、７０％を超え、８０％を超え、または８５％を超える。ある特定のこのような実施形態において、少なくとも１，５００例の対象集団は、全ての血清型に対し血清陰性である。ある特定のこのような実施形態において、血清陰性及び血清陽性の集団は各々、両側９５％信頼区間で血清型２に対するワクチン有効性が得られ、下限は５％ポイント以内である。

【0306】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、第２の投与の３０日後から第２の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例、または少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、血清型２に対するワクチン有効性を有する、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ワクチン有効性は、６０％を超え、７０％を超え、８０％を超え、または９０％を超える。ある特定のこのような実施形態において、少なくとも１，５００例の対象集団は、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である。ある特定のこのような実施形態において、血清陰性及び血清陽性の集団は各々、５％ポイント以内の血清型２に対するワクチン有効性が得られる。

【0307】

当該方法の有効性については、以下のこのセクションでさらにより詳細に説明する。

【0308】

ある特定の実施形態において、単位用量は、再構成され、皮下注射によって投与される。これらの実施形態の一部によれば、皮下注射は、腕、好ましくは腕の三角筋領域に投与される。

【0309】

１つの実施形態によれば、このような方法は、単位用量の投与前に対象が過去にデング熱に感染していたかの判定のステップを含まず、または単位用量の投与前に対象の血清状態が不明である。

【0310】

１つの実施形態によれば、このような方法は、好ましくは投与のステップの前、間、もしくは後のいずれの時点でも、対象が過去にデング熱に感染していたかの判定のステップを含まず、または好ましくは投与のステップの前、間、もしくは後のいずれの時点でも対象の血清状態が不明である。

【0311】

本発明による方法は、ワクチン接種前の血清状態の検査を必要とせず、よって、即時の処置及び大流行制御を可能にする。ある特定の実施形態によれば、当該使用は、対象がデング熱大流行に曝露される場合の方法に用いられる。ある特定のこのような実施形態において、大流行は、デング熱血清型２に起因し、及び／または血清型１に起因する。

【0312】

このような方法の１つの実施形態によれば、対象は、血清有病率が不明の地域、及び／または血清有病率が８０％未満、または７０％未満、または６０％未満の地域の出身である。

【0313】

このような方法の１つの実施形態によれば、対象は、ベースラインで血清陰性であり、血清有病率が血清型１及び／または血清型２に関して高い、すなわち、８０％、または９０％、またはそれを超える地域の出身であり、またはその地域に渡航する。

【0314】

この実施形態によれば、ワクチン及び対応する方法は、血清陰性及び血清陽性の対象にとって安全であり、よって、血清状態の分析も、過去のデング熱感染または地域における高い血清有病率の決定も必要としない。このような方法は好ましくは、両側９５％信頼区間で４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する複合ワクチン有効性をもたらし、このとき、投与スケジュールの第１の投与から投与スケジュールの第２の投与の１２～１８ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な４～１６歳の対象集団で、好ましくはベースラインで血清陰性である少なくとも１，５００例の健康な４～１６歳の対象でプラセボに対し測定したときに、下限は６５％を超える。好ましくは、４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する複合ワクチン有効性の両側９５％信頼区間は、血清陽性及び血清陰性の対象を比較したときに、両側信頼区間の下限が１０％ポイント以内または１５％ポイント以内または２０％ポイント以内を示す。当該方法は、好ましくは血清型１及び血清型２に関して安全であり、そのため、血清型１及び／または血清型２に起因する大流行の状況下で使用することができ、あるいは血清陰性対象（例えば、渡航者）や血清型１及び／または血清型２に起因する血清有病率（＞８０％）が極めて高い地域で血清状態が不明の対象にさえも、使用することができる。

【0315】

当該方法の安全性については、セクション「予防する方法、接種する方法」でさらにより詳細に説明する。

【0316】

１つの実施形態によれば、このような方法は、第１及び第２の単位用量の投与後に対象の熱性疾病に関する積極的監視を含まない。積極的監視中に、熱性疾病（連続した３日のうちの任意の２日における≧３８℃の発熱として定義される）を有する任意の対象は、治験責任医師によってデング熱評価のための検査施設に戻るように求められる。対象／保護者は、対象／保護者に熱性疾病の場合にその検査施設に戻る彼らの義務を思い出させることによって熱性疾病の確実な特定を確保するために少なくとも週１回連絡される。この連絡は、各試験の検査施設において異なり得る適切な方法（例えば、電話、テキストメッセージ、自宅訪問、学校ベースの監視）を介して実行される。

【0317】

１つの実施形態によれば、このような方法は、デング熱中和抗体についてのＧＭＴを含むワクチン免疫原性分析を含まない。

【0318】

１つの実施形態によれば、このような方法は、反応原性分析を含まない。このような反応原性分析は、例えば、日誌カードの収集により各ワクチン接種後７日間及び１４日間（ワクチン接種日が含まれる）それぞれ評価される非自発的局所ＡＥ（注射部位の疼痛、注射部位の紅斑、及び注射部位の腫れ）及び非自発的全身性ＡＥ（＜６歳の小児：発熱、過敏性／癇癪、眠気及び食欲の喪失；≧６歳の小児：無力症、発熱、頭痛、不快感及び筋肉痛）に関する。

【0319】

１つの実施形態によれば、当該方法は、積極的監視、免疫原性分析、及び反応原性分析を含まない。

【0320】

このような実施形態によれば、ワクチン及び対応する接種方法は、安全であり、そのため、監視または分析のさらなるステップを必要としない。

【0321】

上記の観点から、１つの実施形態による方法は、以下のステップ：
（Ａ）デング熱感染に対する保護の必要性から四価デング熱ウイルス組成物の単位用量の投与を行う対象を、過去のデング熱感染の判定なしで選択することと、
（Ｂ）四価デング熱ウイルス組成物の第１の単位用量を対象に投与することと、
（Ｃ）第１の単位用量の投与から３ヵ月以内に四価デング熱ウイルス組成物の第２の単位用量を対象に投与することとからなる、一次ワクチン接種を含む。
そのため、接種する方法は、過去にデング熱に感染したかの判定なしで終了する。当該方法はさらに、任意選択で、単位用量のブースター用量を、第２の単位用量の投与の少なくとも１年後に含む。

【0322】

対象の選択には、全てのタイプの考慮が含まれ得るが、過去にデング熱に感染していたかの判定が含まれないことが好ましい。選択には、年齢、健康状態、及び感染の恐れの考慮が含まれ得る。感染の恐れには、対象が通常居住しているか、または渡航することを意図している地域における血清有病率、血清型特異的血清有病率、及び大流行の状況または血清型特異的な大流行の状況の考慮が含まれる。対象は、その血清型１及び／または血清型２への曝露によりまたはそれが特定のデング熱血清型、すなわち、血清型１及び／または血清型２に対する保護を必要とするという事実により選択され得る。

【0323】

本発明によれば、当該方法は、全ての種類の年齢の対象に適用可能である。１つの実施形態によれば、対象は、９歳未満、または４～５歳、または６～１１歳、または１２～１６歳、または６～１６歳、または４～１６歳、または２～１７歳、または９歳、または９歳超、または９～１７歳、または１８～４５歳、または４６～６０歳、または６０歳超である。

【0324】

特定的には、本発明は、方法が安全であるような方法を対象とする。

【0325】

特定的には、本発明は、両側９５％信頼区間で４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する複合ワクチン有効性をもたらす方法であって、投与スケジュールの第１の投与から投与スケジュールの最後の投与の１２～１８ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な４～１６歳の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が６５％を超える、方法を対象とする。

【0326】

特定的には、本発明は、方法が有効であるような方法を対象とする。

【0327】

特定的には、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性をもたらす方法であって、投与スケジュールの第１の投与から投与スケジュールの最後の投与の１８ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、１４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が６０％を超える、方法を対象とする。

【0328】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象が、全てのデング熱血清型に関して血清陰性である、方法を対象とする。

【0329】

本発明は、部分的には、対象集団におけるデング熱疾患（特定的には、ウイルス学的に確認可能なデング熱、ＶＣＤ）を予防する方法を対象とする。したがって、ある特定の実施形態において、本発明は、対象集団におけるデング熱疾患を予防する方法であって、単位用量、特定的には、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量を対象集団に投与することを含む、方法を対象とする。

【0330】

本発明は、部分的には、対象集団におけるデング熱疾患（特定的には、ウイルス学的に確認可能なデング熱、ＶＣＤ）を予防するための前述の方法であって、少なくとも本明細書に記載の発明の第１の再構成された単位用量を対象集団に投与することを含み、対象集団への前述の第１の単位用量の投与後１８０日目または３６５目における幾何平均中和抗体力価（ＧＭＴ）のある特定の比が達成される、方法を対象とする。いくつかの実施形態によれば、デング熱血清型２についての幾何平均中和抗体力価（ＧＭＴ ＤＥＮＶ－２）及びデング熱血清型４についての幾何平均中和抗体力価（ＧＭＴ ＤＥＮＶ－４）は、少なくとも４０例、または少なくとも５０例、または少なくとも６０例の対象で、少なくとも本明細書に記載の発明の当該再構成された単位用量の第１の投与の後、及び任意選択で当該第１の投与の９０日後の本明細書に記載の発明の再構成された単位用量の第２の投与の後、１８０日目または３６５日目に試験したときに、ＧＭＴ ＤＥＮＶ－２：ＧＭＴ ＤＥＮＶ－４の比を５０以下、または４０以下、または３０以下、または２０以下にする。これらの実施形態の一部において、ＧＭＴ ＤＥＮＶ－２：ＧＭＴ ＤＥＮＶ－１の比は、当該第１の再構成された単位用量の投与後１８０日目または３６５日目に２０以下、または１８以下、または１５以下であり、及び／またはＧＭＴ ＤＥＮＶ－２：ＧＭＴ ＤＥＮＶ－３の比は、当該第１の再構成された単位用量の投与後１８０日目または３６５日目に２０以下、または１８以下、または１５以下である。

【0331】

本発明は、部分的には、対象におけるデング熱疾患（特定的には、ウイルス学的に確認可能なデング熱、ＶＣＤ）を予防するための前述の方法であって、少なくとも本明細書に記載の発明の第１の再構成された単位用量を対象に投与することを含み、対象への前述の第１の単位用量の投与後１８０日目または３６５目における中和抗体力価のある特定の比が達成される、方法を対象とする。いくつかの実施形態によれば、少なくとも本明細書に記載の発明の再構成された単位用量の第１の投与の後、及び任意選択で第１の投与の９０日後の本明細書に記載の発明の再構成された単位用量の第２の投与の後、１８０日目または３６５日目における、デング熱血清型２に対する中和抗体力価及びデング熱血清型４に対する中和抗体力価は、ＤＥＮＶ－２に対する中和抗体力価：ＧＭＴ ＤＥＮＶ－４に対する中和抗体力価の比を５０以下、または４０以下、または３０以下、または２０以下にする。これらの実施形態の一部において、ＤＥＮＶ－２：ＤＥＮＶ－１の中和抗体力価の比は、第１の再構成された単位用量の投与から１８０日後または３６５日後において２０以下、または１８以下、または１５以下であり、及び／またはＤＥＮＶ－２：ＤＥＮＶ－３の中和抗体力価の比は、第１の再構成された単位用量の投与から１８０日後または３６５日後において２０以下、または１８以下、または１５以下である。

【0332】

対象集団の幾何平均中和抗体力価（ＧＭＴ）または対象の中和抗体力価は、本明細書に開示するマイクロ中和試験に従って、例えば、実施例２に記載の方法に従って決定される。いかなる理論にも束縛されることは望まないが、現時点では、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量の投与によるよりバランスのとれた免疫応答を誘導する方法が、４つのデング熱血清型に対する幾何平均中和抗体力価（ＧＭＴ）または４つのデング熱血清型に対する中和抗体力価の間で差がより少ないという観点から、ワクチン接種する対象または対象集団に有益であるものと理解されている。特定的には、４つの血清型のいずれか１つ（例えば、ＤＥＮＶ－２）に対するはるかに大きな応答は、他の血清型と比較してあまり有益ではないことが理解される。

【0333】

本発明は、部分的には、対象または対象集団におけるデング熱疾患（特定的には、ウイルス学的に確認可能なデング熱、ＶＣＤ）を予防するための前述の方法であって、１日目及び９０日目に、２回の単位用量の皮下投与を含めて、少なくとも５０例の対象の対象集団に血清陽性率をもたらし、対象集団の対象が、ベースラインで全てのデング熱血清型に対し血清陰性である、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、対象集団の少なくとも８０％は、第１の単位用量の投与の少なくとも１ヵ月後、例えば、３０日目に４つ全てのデング熱血清型について血清陽性であり、及び／または対象集団の少なくとも８０％は、第２の単位用量の投与の前または投与時に、例えば、９０日目に４つ全てのデング熱血清型について血清陽性であり、及び／または対象集団の少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％は、第２の単位用量の投与後、例えば、１２０日目に４つ全てのデング熱血清型について血清陽性であり、及び／または対象集団の少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％は、第２の単位用量の投与後、例えば、２７０日目に４つ全てのデング熱血清型について血清陽性である。

【0334】

本発明は、部分的には、対象または対象集団におけるデング熱疾患（特定的には、ウイルス学的に確認可能なデング熱、ＶＣＤ）を予防するための前述の方法であって、１日目及び９０日目での２回の単位用量の皮下投与を含む少なくとも１００例の対象の対象集団における血清陽性率をもたらし、対象集団の対象が、全てのデング熱血清型に対し血清陰性である２０％～４０％の対象と、ベースラインで少なくとも１つのデング熱血清型に対し血清陽性である６０％～８０％の対象とを含み、１２０日目及び／または２７０日目に、対象集団の血清陰性パートにおける４つ全てのデング熱血清型の血清陽性率と、対象集団の血清陽性パートにおける４つ全てのデング熱血清型の血清陽性率とが、１０％ポイントを超えて逸脱せず、及び／または、１２０日目に、対象集団の血清陰性パートにおける４つ全てのデング熱血清型の血清陽性率と、対象集団の血清陽性パートにおける４つ全てのデング熱血清型の血清陽性率とが、５％ポイントを超えて逸脱しない、方法を対象とする。

【0335】

本発明は、部分的には、対象または対象集団におけるウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する方法であって、対象または対象集団に、４つの弱毒化生デング熱血清型（特定的には、本明細書に記載のウイルス株）を含む四価デング熱ウイルス組成物の再構成された単位用量を投与することを含む、方法を対象とする。

【0336】

本発明は、部分的には、対象または対象集団における入院を伴うウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する方法であって、対象または対象集団に、４つの弱毒化生デング熱血清型（特定的には、本明細書に記載のウイルス株）を含む四価デング熱ウイルス組成物の再構成された単位用量を投与することを含む、方法を対象とする。

【0337】

ある特定の実施形態において、方法は、対象または対象集団におけるデング熱疾患を予防するために投与されるデング熱ワクチン組成物の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物を含み、再構成された単位用量は、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価ウイルス組成物を含み、単位用量は、凍結乾燥されており、０．５ｍＬの医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、
（ｉ）少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）、
（ｉｉ）少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）、
（ｉｉｉ）少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）、及び
（ｖｉ）少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）を含む、再構成された単位用量が得られる。

【0338】

好ましくは、再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物は、本発明のデング熱疾患を予防する方法で使用され、医薬的に許容される希釈剤で単位用量を再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、２％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも６％であり、対象または対象集団は、１８～６０歳である。

【0339】

別の好ましい実施形態において、再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物は、本発明のデング熱疾患を予防する方法で使用され、医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、当該総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、１０％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度は、少なくとも８％であり、対象または対象集団は、２～１７歳である。

【0340】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、当該単位用量が、４つの弱毒化生デング熱血清型（特定的には、本明細書に記載のウイルス株）を含む四価デング熱ウイルス組成物を含み、血清型が、ウイルス組成物及び単位用量に対し、本明細書に記載のようなある特定の濃度を有する、例えば、
（ｉ）デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）は、３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量、または３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｉ）デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）は、２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～４．９ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５用量、または２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌ～４．９ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度を有し、
（ｉｉｉ）デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５用量、または４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、
（ｉｖ）デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／用量～５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５用量、または４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有する、方法を対象とする。
好ましいこのような実施形態において、対象または対象集団は、２～１７歳、例えば、４～１６歳、好ましくは９歳未満である。他の好ましい実施形態において、対象または対象集団は、４～５歳、６～１１歳または１２～１６歳である。

【0341】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、当該単位用量が、０．５ｍＬの医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）については３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～３．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、デング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）については２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）については４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有し、デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）については４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬまたは４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．１ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度を有する、方法を対象とする。好ましいこのような実施形態において、対象または対象集団は、２～１７歳、例えば、４～１６歳、好ましくは９歳未満である。他の好ましい実施形態において、対象または対象集団は、４～５歳、６～１１歳または１２～１６歳である。

【0342】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）の濃度が、総濃度の１％～７％であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）の濃度が、総濃度の８％未満、例えば、総濃度の１％～８％の範囲内であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）の濃度が、総濃度の少なくとも１０％であり、ｐｆｕ／０．５ｍＬで測定されるデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）の濃度が、総濃度の少なくとも６５％、例えば、６５％～８０％の範囲内である、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、４つ全ての血清型の算術的合計は、４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～６．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの範囲内、好ましくは４．６ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬ～５．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの範囲内である。好ましくは、当該実施形態において、対象または対象集団は、２～１７歳、例えば、４～１６歳、さらにより好ましくは９歳未満である。他の好ましい実施形態において、対象または対象集団は、４～５歳、６～１１歳または１２～１６歳である。

【0343】

さらに好ましい実施形態において、本発明は、前述の方法であって、ＴＤＶ－１などのデング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）及びＴＤＶ－２などのデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）が、それぞれ、ｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度を基準として、互いに５％ポイント以内の濃度で存在し、及び／または合わせてｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の約１０％未満である、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ＴＤＶ－３などのデング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）は、好ましくはｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約１０％であり、より好ましくはＴＤＶ－４などのデング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）は、ｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約７０％である。ある特定のこのような実施形態において、デング熱血清型４（例えば、キメラデング熱血清型２／４株）（例えば、ＴＤＶ－４）は、４つ全ての血清型のうち組成物において最も高い濃度、好ましくはｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約７０％に相当し、デング熱血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）（例えば、ＴＤＶ－３）は、４つ全ての血清型のうち組成物において２番目に高い濃度、好ましくはｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の少なくとも約１０％に相当し、デング熱血清型１（例えば、キメラデング熱血清型２／１株）（例えば、ＴＤＶ－１）及びデング熱血清型２（例えば、デング熱血清型２株）（例えば、ＴＤＶ－２）は各々、血清型３（例えば、キメラデング熱血清型２／３株）（例えば、ＴＤＶ－３）の濃度よりも低い濃度に相当し、任意選択で、合わせてｐｆｕ／０．５ｍＬでの総濃度の約１０％未満に相当する。

【0344】

好ましくは、キメラデング熱血清型２／１株は、ＴＤＶ－１であり、デング熱血清型２株は、ＴＤＶ－２であり、キメラデング熱血清型２／３株は、ＴＤＶ－３であり、キメラデング熱血清型２／４株は、ＴＤＶ－４である。より好ましくは、ＴＤＶ－１は、配列番号１に記載のヌクレオチド配列及び配列番号２に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－２は、配列番号３に記載のヌクレオチド配列及び配列番号４に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－３は、配列番号５に記載のヌクレオチド配列及び配列番号６に記載のアミノ酸配列を特徴とし、ＴＤＶ－４は、配列番号７に記載のヌクレオチド配列及び配列番号８に記載のアミノ酸配列を特徴とする。

【0345】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量が、皮下注射によって投与される、方法を対象とする。これらの実施形態の一部によれば、皮下注射は、腕、好ましくは腕の三角筋領域に投与される。

【0346】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、再構成された単位用量が、血清状態が不明の対象に投与される、及び／または本明細書に記載の単位用量が投与される（前）に対象が血清陽性もしくは血清陰性かを判定するための検査が行われていない、方法を対象とする。ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、１例または複数例の対象における過去のデング熱感染の決定のステップを含まない、方法を対象とする。ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、地域における血清有病率の分析を含まない、または８０％未満、７０％未満、もしくは６０％未満の血清有病性を有する地域で行われる、方法を対象とする。ある特定の実施形態において、本発明は、対象の血清状態が不明な場合の方法を対象とする。このような実施形態において、血清状態は、この方法に関して投与の前及び後の任意の時点で決定されない。本発明のある特定の実施形態において、当該方法は、大流行の状況で使用される。ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、臨床試験外で行われる、方法を対象とする。

【0347】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団が、全てのデング熱血清型に対し血清陰性である、方法を対象とする。

【0348】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の２回の単位用量が投与される、方法を対象とする。いくつかの実施形態において、２回の単位用量は、１２ヵ月以上の範囲内、または６ヵ月以内、または３ヵ月以内に、かつ任意選択で少なくとも４週間隔てて、例えば、０日目及び９０日目、または１日目及び９０日目に投与される。これらの実施形態の一部によれば、本明細書に記載される発明のさらなる第３の単位用量が、第２の投与後に投与される。このような第３の投与は、ブースターとして作用し得、第１の投与から６～１２ヵ月後、例えば、第１の投与から１２ヵ月後、または第１の投与から１２ヵ月後よりも遅く、例えば、第２の投与から１２ヵ月（１年）後または第１もしくは第２の投与から５年以上後でさえ投与され得る。

【0349】

ある特定の実施形態において、本発明の方法は、投与を行う本発明の単回単位用量を含むかまたはそれからなる。

【0350】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量が、全てのデング熱血清型に関して血清陰性である対象または対象集団に皮下投与される、方法を対象とする。他の実施形態において、対象または対象集団は、少なくとも１つのデング熱血清型に関して血清陽性である。

【0351】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の単位用量が、デング熱流行地域の出身の対象または対象集団に投与される、方法を対象とする。これらの実施形態の一部では、対象または対象集団は、シンガポール、ドミニカ共和国、パナマ、フィリピン、コロンビア、プエルトリコまたはタイ、特定的には、シンガポール、ドミニカ共和国、パナマ、またはフィリピンの出身である。好ましい実施形態において、対象または対象集団は、アジア太平洋または中南米の出身である。これらの実施形態の他の一部では、対象または対象集団は、タイ、スリランカ、フィリピン、パナマ、ニカラグア、ドミニカ共和国、コロンビアまたはブラジルの出身である。他の実施形態において、対象または対象集団は、デング熱非流行地域の出身である。このような対象集団またはこのような対象は、デング熱流行地域への渡航の観点から本発明に従ってワクチン接種され得る。ある特定の実施形態において、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量は、デング熱流行地域またはデング熱非流行地域の出身の対象、または対象集団に皮下投与される。

【0352】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量が、２～６０歳の対象または対象集団に皮下投与される、方法を対象とする。いくつかの実施形態において、対象または対象集団は、１７歳を超え、または１８歳を超え、または１８～６０歳の成人である。さらなる特定の実施形態において、対象または対象集団は、２１歳を超え、または２１～６０歳、または２１～４５歳の成人である。

【0353】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量が、２～１７歳の小児及び若年成人に皮下投与される、方法を対象とする。いくつかの実施形態において、対象または対象集団は、９歳未満、または４歳未満である。いくつかの実施形態において、対象または対象集団は、２～９歳、または２～５歳、または４～９歳、または６～９歳である。他の実施形態において、対象または対象集団は、４～１６歳である。いくつかのこのような実施形態において、対象または対象集団は、４～５歳、６～１１歳、または１２～１６歳である。任意選択で、対象または対象集団は、全てのデング熱血清型に関して血清陰性である。

【0354】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の単位用量が、２歳未満、好ましくは２ヵ月～２歳、または２ヵ月～１．５歳、または２ヵ月～１歳の小児対象または小児対象集団に投与される、方法を対象とする。これらの実施形態の一部によれば、小児対象または小児対象集団は、血清陰性であり、デング熱流行地域の出身である。

【0355】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量が、２歳未満、好ましくは２ヵ月～２歳、または２ヵ月～１．５歳、または２ヵ月～１歳の小児対象または小児対象集団に、好ましくは皮下注射によって投与される、方法を対象とする。これらの実施形態の一部によれば、小児対象または小児対象集団は、血清陰性であり、デング熱流行地域の出身である。

【0356】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団が、４～５歳でありかつアジア太平洋の出身であり、６～１１歳でありかつアジア太平洋の出身であり、または１２～１６歳でありかつアジア太平洋の出身である、方法を対象とする。他の実施形態において、対象または対象集団は、４～５歳でありかつ中南米の出身であり、６～１１歳でありかつ中南米の出身であり、または１２～１６歳でありかつ中南米の出身である。

【0357】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団が、４～５歳でありかつ少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性である、６～１１歳でありかつ少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性である、または１２～１６歳でありかつ少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性である、方法を対象とする。他の実施形態において、対象または対象集団は、４～５歳でありかつ全てのデング熱血清型について血清陰性である、６～１１歳でありかつ全てのデング熱血清型について血清陰性である、または１２～１６歳でありかつ全てのデング熱血清型について血清陰性である。

【0358】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団が、アジア太平洋または中南米の出身でありかつベースラインで少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性である、方法を対象とする。他の実施形態において、対象または対象集団は、アジア太平洋または中南米の出身でありかつベースラインで全てのデング熱血清型について血清陰性である。

【0359】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団が、アジア太平洋の出身であり、ベースラインで少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性であり、４～５歳、６～１１歳、または１２～１６歳である、方法を対象とする。他の実施形態において、対象または対象集団は、アジア太平洋の出身であり、ベースラインで全てのデング熱血清型について血清陰性であり、４～５歳、６～１１歳、または１２～１６歳である。さらに他の実施形態において、対象または対象集団は、中南米の出身であり、ベースラインで少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性であり、４～５歳、６～１１歳、または１２～１６歳である。他の実施形態において、対象または対象集団は、アメリカの出身であり、ベースラインで全てのデング熱血清型について血清陰性であり、４～５歳、６～１１歳、または１２～１６歳である。

【0360】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団が、黄熱病に対する事前のワクチン接種を受けた、方法を対象とする。他の実施形態において、対象または対象集団は、日本脳炎に対する事前のワクチン接種を受けている。さらに他の実施形態において、対象または対象集団は、黄熱病に対する事前のワクチン接種を受けていない。他の実施形態において、対象または対象集団は、日本脳炎に対する事前のワクチン接種を受けていない。事前のワクチン接種は、本明細書に記載の再構成された単位用量を用いた第２の投与から３０日後より前（例えば、第１の投与後４ヵ月以内）のワクチン接種を示す。例えば、第２のワクチン接種の３０日後から実施例６で決定されるワクチン有効性（ＶＥ）について、黄熱病の事前のワクチン接種は、第２のワクチン接種の３０日後より前に行われる黄熱病ワクチン接種として定義される。ある特定の実施形態において、対象または対象集団は、本明細書に記載の投与レジメンの範囲内または第１の用量の投与から４．５年以内にＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）を受けている。

【0361】

特に、４つのデング熱血清型に対する中和抗体のバランスがとれていない力価は、市販のデング熱ワクチンの投与後に血清陰性集団または対象において観察される。本発明は、特定的には、血清陰性対象が、本明細書に記載の発明の再構成された単位用量の投与の後に４つのデング熱血清型に対するよりバランスのとれた免疫応答を示すことを示す。そのため、本明細書に記載の発明の単位用量及び本明細書に記載の本発明の方法は、血清陽性及び血清陰性の両方の対象を含む対象集団においてより強力な免疫応答をもたらし得ることが企図される。このバランスのとれた応答ならびにバランスのとれた有効性及び安全性は、事前の血清状態分析なしで接種を可能にするのに必要となるものであり、これは、ワクチン接種プログラムにおいて、とりわけ大流行の状況下では大きな利点である。

【0362】

本発明は、部分的には、対象におけるウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する方法であって、対象に、血清型１、血清型２、血清型３、及び血清型４を表す４つのデング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を投与することを含み、ウイルス株は、任意選択で弱毒化生デング熱ウイルス株である、方法を対象とする。

【0363】

本発明は、部分的には、対象におけるウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する方法であって、血清型１、血清型２、血清型３、及び血清型４を表す４つのデング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を対象に投与することからなり、ウイルス株は、任意選択で弱毒化生デング熱ウイルス株である、方法を対象とする。

【0364】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、ベースラインで対象の血清状態を決定するステップがない、すなわち、前述の方法が、四価デング熱ウイルス組成物の投与前に、ベースラインで対象の過去のデング熱感染歴を決定することを含まない、方法を対象とする。特定的には、このような方法は、安全かつ有効である。したがって、ある特定のこのような実施形態において、対象は、過去のデング熱感染の有無について検査されていない。

【0365】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象が四価デング熱ウイルス組成物の投与前に過去にデング熱に感染していたという判定の有無にかかわらず、ワクチン投与が安全である、方法を対象とする。特定的には、このような方法は有効でもある。

【0366】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、方法が安全及び／または有効である、方法を対象とする。

【0367】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、組成物が少なくとも１つのキメラデング熱ウイルスを含む、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、本発明は、前述の方法であって、組成物が、少なくとも１つの非キメラデング熱ウイルス及び少なくとも１つのキメラデング熱ウイルス、特定的には、キメラデング熱血清型２／１株及びデング熱血清型２株及びキメラデング熱血清型２／３株及びキメラデング熱血清型２／４株を含む、方法を対象とする。組成物の詳細は、上述されている。

【0368】

そのため、ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、ワクチン有効性、好ましくは４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、第１の投与後または第２の／最後の投与の３０日後から第２の／最後の投与の少なくとも１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、例えば、１４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。諸実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、ワクチン有効性、好ましくは４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの第１の投与の１５～２１ヵ月（例えば、１５ヵ月または２１ヵ月）後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量もしくは四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが少なくとも１回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、５５％を超え、６０％を超え、６５％を超え、７０％を超え、または７２％を超える。好ましくは、前述の再構成された単位用量またはプラセボは、約３ヵ月以内、例えば、０日目及び９０日目に皮下投与される。

【0369】

そのため、ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、第１の投与後から最後の投与の１８ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が６０％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。これらの実施形態において、下限は、例えば、６２％を超え、６４％を超え、６６％を超え、６８％を超え、または６９％を超える。

【0370】

ある特定の実施形態において、本発明は、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、第１の投与後または第２の投与／最後の投与の３０日後から第２の投与／最後の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、例えば、１４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、ワクチン有効性、好ましくは４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量もしくは四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定の実施形態において、本発明は、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、投与スケジュールの第１の投与の１５ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、ワクチン有効性、好ましくは４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量もしくは四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが少なくとも１回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、５５％を超え、６０％を超え、６５％を超え、７０％を超え、７５％を超え、７８％を超え、７９％を超え、または約８０％である。好ましくは、前述の再構成された単位用量またはプラセボは、約３ヵ月以内、例えば、０日目及び９０日目に皮下投与される。

【0371】

そのため、ある特定の実施形態において、本発明は、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、第１の投与後から最後の投与の１８ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、１４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性が６６％を超える前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量もしくは四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内に）少なくとも２回投与される、方法を対象とする。これらの実施形態において、ワクチン有効性は、例えば、６８％を超え、７０％を超え、７２％を超え、または７４％を超える。

【0372】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で入院を伴うウイルス学的に確認可能なウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、ワクチン有効性、好ましくは４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１８ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が０％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量もしくは四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、１０％を超え、２０％を超え、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、５５％を超え、６０％を超え、６５％を超え、７０％を超え、または８０％を超え、または９０％を超える。

【0373】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で血清陰性対象において４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの第２の投与の約３０日後から投与スケジュールの第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である少なくとも１，５００例または少なくとも２，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、または５５％を超える。

【0374】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である４～１６歳の少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例、または少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、３５％を超え、４０％を超え、または４５％を超える。

【0375】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、ベースラインで血清陽性である４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、４０％を超え、４５％を超え、５０％を超え、６０％を超え、または６５％を超える。

【0376】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、ベースラインで血清陽性であるまたはベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ベースラインで血清陽性の対象及びベースラインで全ての血清型に対し血清陰性の対象によってもたらされる下限間の差は、１５％ポイント以下である。

【0377】

ある特定の実施形態において、本発明は、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、血清陰性対象における４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、血清陰性対象における４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、６５％を超え、または７０％を超える。

【0378】

ある特定の実施形態において、本発明は、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である４～１６歳の少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例、または少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、当該ワクチン有効性は、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、５５％を超え、６０％を超え、または６５％を超える。

【0379】

ある特定の実施形態において、本発明は、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、ベースラインで血清陽性である４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、当該ワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、６５％を超え、７０％を超え、または７５％を超える。

【0380】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、ベースラインで血清陽性であるまたはベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ベースラインで血清陽性の対象及びベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である対象によってもたらされる下限間の差は、１５％ポイント以下、または１０％ポイント以下である。

【0381】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの第２の投与の約３０日後から投与スケジュールの第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、ランダム化時において４～５歳の少なくとも１，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、４０％を超え、４５％を超える。

【0382】

ある特定の実施形態において、本発明は、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、ランダム化時に４～５歳の少なくとも１，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、６５％を超え、または７０％を超える。

【0383】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの第２の投与の約３０日後から投与スケジュールの第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、ランダム化時に６～１１歳の少なくとも１，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、または７０％を超える。

【0384】

ある特定の実施形態において、本発明は、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、ランダム化時において６～１１歳の少なくとも１，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、７０％を超え、７５％を超え、または８０％を超える。

【0385】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの第２の投与の約３０日後から投与スケジュールの第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、ランダム化時に１２～１６歳の少なくとも１，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、６５％を超え、または６８％を超える。

【0386】

ある特定の実施形態において、本発明は、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、ランダム化時において１２～１６歳の少なくとも１，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、４つ全てのデング熱血清型に対する複合ワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、７０％を超え、７５％を超え、または８０％を超える。

【0387】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で血清型１に対するワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの第２の投与の約３０日後から投与スケジュールの第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象、または少なくとも１０，０００例の健康な対象、または少なくとも１５，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、４０％を超え、または５０％を超える。

【0388】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、血清型１に対するワクチン有効性を有する前述の方法であって、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例、または少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、３５％を超えは、４０％を超え、４５％を超え、５０％を超え、または５４％を超える。ある特定のこのような実施形態において、少なくとも１，５００例の対象集団は、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性であり、下限は、３５％を超える。ある特定のこのような実施形態において、血清陰性及び血清陽性の集団は各々、両側９５％信頼区間で血清型１に対するワクチン有効性が得られ、下限は１０％ポイント以内である。

【0389】

ある特定の実施形態において、本発明は、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象、または少なくとも１０，０００例の健康な対象、または少なくとも１５，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、デング熱血清型１に対するワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、デング熱血清型１に対するワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、６５％を超え、または７０％を超える。

【0390】

ある特定の実施形態において、本発明は、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例、または少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、血清型１に対するワクチン有効性を有する前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、または６５％を超える。ある特定のこのような実施形態において、少なくとも１，５００例の対象集団は、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である。ある特定のこのような実施形態において、血清陰性及び血清陽性の集団は各々、５％ポイント以内の血清型１に対するワクチン有効性が得られる。

【0391】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で血清型２に対するワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの第２の投与の約３０日後から投与スケジュールの第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象、または少なくとも１０，０００例の健康な対象、または少なくとも１５，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、４０％を超え、５０を超え、６０を超え、７０を超え、８０を超え、または９０％を超える。

【0392】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間でウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、血清型２に対するワクチン有効性を有する前述の方法であって、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例、または少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、５０％を超え、６０％を超え、７０％を超え、８０％を超え、または８５％を超える。ある特定のこのような実施形態において、少なくとも１，５００例の対象集団は、全ての血清型に対し血清陰性である。ある特定のこのような実施形態において、血清陰性及び血清陽性の集団は各々、両側９５％信頼区間で血清型２に対するワクチン有効性が得られ、下限は５％ポイント以内である。

【0393】

ある特定の実施形態において、本発明は、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象、または少なくとも１０，０００例の健康な対象、または少なくとも１５，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、デング熱血清型２に対するワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、デング熱血清型２に対するワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、７０％を超え、８０を超え、または９０％を超える。

【0394】

ある特定の実施形態において、本発明は、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも１，５００例、または少なくとも２，０００例、または少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、血清型２に対するワクチン有効性を有する前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ワクチン有効性は、６０％を超え、７０％を超え、８０％を超え、または９０％を超える。ある特定のこのような実施形態において、少なくとも１，５００例の対象集団は、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である。ある特定のこのような実施形態において、血清陰性及び血清陽性の集団は各々、５％ポイント以内の血清型２に対するワクチン有効性が得られる。

【0395】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で血清型３に対するワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの第２の投与の約３０日後から投与スケジュールの第２の投与の少なくとも１２ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象、または少なくとも１０，０００例の健康な対象、または少なくとも１５，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、４０％を超える。

【0396】

ある特定の実施形態において、本発明は、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象、または少なくとも１０，０００例の健康な対象、または少なくとも１５，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、デング熱血清型３に対するワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、デング熱血清型３に対するワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、５５％を超え、または６０％を超える。

【0397】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で入院を伴うウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、第１の投与から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月もしくは１８ヵ月時に）、または最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２もしくは１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、１０％を超え、２０％を超え、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、５５％を超え、６０％を超え、６５％を超え、６６％を超え、６７％を超え、７０％を超え、７５％を超え、７７％を超え、または８０％を超える。

【0398】

ある特定の実施形態において、本発明は、入院を伴うウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、第１の投与から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月もしくは１８ヵ月時に）、または最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２もしくは１８ヵ月時に）、ベースラインの血清状態にかかわらず、４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ワクチン有効性は、７０％を超え、７５％を超え、８０％を超え、または８２％を超え、または８５％を超え、８８％を超える。

【0399】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対し、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの第２の投与の約３０日後から投与スケジュールの第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である少なくとも１，５００例または少なくとも２，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、７０％を超え、または７５％を超える。

【0400】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で入院を伴うウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、６０％を超え、６５％を超え、６６％を超え、６７％を超え、７０％を超え、７５％を超え、７７％を超え、または８０％を超える。

【0401】

ある特定の実施形態において、本発明は、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である少なくとも１，５００例または少なくとも２，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する複合ワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する複合ワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、７０％を超え、８０％を超え、または９０％を超える。

【0402】

ある特定の実施形態において、本発明は、入院を伴うウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、ベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、当該ワクチン有効性は、６０％を超え、６５％を超え、６６％を超え、６７％を超え、７０％を超え、７５％を超え、７７％を超え、８０を超え、または８５％を超える。

【0403】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱疾患に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの第２の投与の約３０日後から投与スケジュールの第２の投与の少なくとも１２ヵ月後または１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインで血清陽性である少なくとも１，５００例または少なくとも２，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、７０％を超え、または８０％を超える。

【0404】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で入院を伴うウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、ベースラインで血清陽性である４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、下限は、６０％を超え、６５％を超え、７０％を超え、７５％を超え、または８０％を超える。

【0405】

ある特定の実施形態において、本発明は、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月後までまたは１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２または１８ヵ月時に）、ベースラインで血清陽性である少なくとも１，５００例または少なくとも２，０００例の健康な対象の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する複合ワクチン有効性が３０％を超える前述の方法であって、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、４つ全ての血清型に対する入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱に対する複合ワクチン有効性は、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、７０％を超え、８０％を超え、または９０％を超える。

【0406】

ある特定の実施形態において、本発明は、入院を伴うウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、ベースラインで血清陽性である４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ワクチン有効性は、７５％を超え、７０％を超え、８０％を超え、８５％を超え、または９０％を超える。

【0407】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で入院を伴うウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、ベースラインで血清陽性またはベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が２５％を超え、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ベースラインで血清陽性の対象及びベースラインで全ての血清型に対し血清陰性の対象によってもたらされる下限間の差は、１５％ポイント以下である。

【0408】

ある特定の実施形態において、本発明は、入院を伴うウイルス学的に確認可能なデング熱疾患を予防する上で、ベースラインで血清陽性またはベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である４～１６歳の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、最後の投与の３０日後から最後の投与の１２～１８ヵ月後まで（例えば、１２ヵ月または１８ヵ月時に）、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、例えば、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内に）少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ベースラインで血清陽性の対象及びベースラインで全ての血清型に対し血清陰性である対象によってもたらされるワクチン有効性間の差は、１０％ポイント以下または５％ポイント以下である。

【0409】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で相対リスク、好ましくは４つ全ての血清型に対する複合相対リスクを有する前述の方法であって、第２の投与の３０日後、第２の投与の少なくとも１２ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、上限が０．７５未満であり、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、上限は、０．７０未満、０．６５未満、０．６０未満、０．５５未満、０．５０未満、０．４５未満、０．４０未満、０．３５未満、０．３０未満、または０．２８未満である。好ましくは、前述の再構成された単位用量またはプラセボは、約３ヵ月以内、例えば、０日目及び９０日目に皮下投与される。

【0410】

ある特定の実施形態において、本発明は、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、相対リスク、好ましくは４つ全ての血清型に対する複合相対リスクが０．７０未満である前述の方法であって、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、相対リスクは、０．６５未満、０．６０未満、０．５５未満、０．５０未満、０．４５未満、０．４０未満、０．３５未満、０．３０未満、０．２５未満、または０．２３未満である。好ましくは、前述の再構成された単位用量またはプラセボは、約３ヵ月以内、例えば、０日目及び９０日目に皮下投与される。

【0411】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、第２の投与の３０日後から第２の投与の少なくとも１２ヵ月または少なくとも１８ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患が対象の２．５％未満で生じ、本明細書に記載の再構成された単位用量／四価デング熱ウイルス組成物またはプラセボが、６ヵ月未満以内（例えば、３ヵ月以内）に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。ある特定のこのような実施形態において、ウイルス学的に確認可能なデング熱疾患は、対象の２．０％未満、対象の１．５％未満、対象の１．０％未満、対象の０．８％未満、または対象の０．６％未満に生じる。好ましくは、前述の再構成された単位用量またはプラセボは、約３ヵ月以内、例えば、０日目及び９０日目に皮下投与される。

【0412】

ある特定の実施形態において、本発明は、両側９５％信頼区間で４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性を有する前述の方法であって、投与スケジュールの最後の投与の約３０日後から投与スケジュールの最後の投与の少なくとも１２または１３ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、ランダム化時に４～１６歳の対象からなる群から選択される流行地域の出身の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、下限が６１．０％を超え、または６５．０を超え、または７０．０％を超え、または７２．０％を超え、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月以下以内に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。

【0413】

ある特定の実施形態において、本発明は、投与スケジュールの最後の投与の約３０日後から投与スケジュールの最後の投与から少なくとも１２ヵ月または１３ヵ月後まで、ベースラインの血清状態にかかわらず、ランダム化時に４～１６歳の対象からなる群から選択される流行地域の出身の少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性が６６％を超え、または７０％を超え、または７５％を超え、または７７％を超え、または８０．０％を超える前述の方法であって、当該単位用量／四価デング熱ウイルス組成物または当該プラセボが、６ヵ月以下以内に少なくとも２回投与される、方法を対象とする。

【0414】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性が、投与スケジュールの最後の投与の約３０日後から投与スケジュールの最後の投与の１２または１３ヵ月後まで測定される、方法を対象とする。

【0415】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、当該単位用量または当該プラセボが、３ヵ月以内に少なくとも２回、特定的には約１日目及び約９０日目に投与され、４つ全ての血清型に対する複合ワクチン有効性が、投与スケジュールの第２の投与の３０日後から第２の投与の１２または１３ヵ月後まで測定される、方法を対象とする。

【0416】

ある特定の実施形態において、本発明は、有効かつ安全である前述の方法を対象とする。これらの実施形態の一部では、対象または対象集団は、９歳未満、４歳未満、または２歳未満または２～９歳、または２～５歳、または４～９歳、または６～９歳である。任意選択で、対象は、全てのデング熱血清型に関して血清陰性である。

【0417】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、少なくとも５，０００例の健康な対象（または少なくとも１０，０００例、または少なくとも１５，０００例の健康な対象）の対象集団でプラセボに対し測定したときに、入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱の相対リスクが１以下、または０．８以下、または０．６以下である、方法を対象とする。これらの実施形態の一部において、対象または対象集団は、９歳未満、４歳未満、もしくは２歳未満、または２～９歳、もしくは２～５歳、もしくは４～９歳、もしくは６～９歳である。任意選択で、対象は、全てのデング熱血清型に関して血清陰性である。

【0418】

ある特定の実施形態において、本発明は、対象集団の健康な対象が４～１６歳である、前述の方法を対象とする。このような実施形態の一部では、対象集団の健康な対象は、４～５歳、６～１１歳、または１２～１６歳である。

【0419】

ある特定の実施形態において、本発明は、対象集団の健康な対象が、実施例６で規定された除外基準の観点から健康であるものとして定義される、前述の方法を対象とする。

【0420】

ある特定の実施形態において、本発明は、対象集団の健康な対象が、アジア太平洋または中南米の出身である、前述の方法を対象とする。

【0421】

ある特定の実施形態において、本発明は、対象集団の健康な対象が、少なくとも１つの血清型に関して血清陽性である、前述の方法を対象とする。他の実施形態において、対象集団の健康な対象は、全ての血清型に関して血清陰性である。

【0422】

ある特定の実施形態において、本発明は、対象集団の健康な対象が、４～５歳でありかつアジア太平洋の出身であり、６～１１歳でありかつアジア太平洋の出身であり、または１２～１６歳でありかつアジア太平洋の出身である、前述の方法を対象とする。他の実施形態において、対象集団の健康な対象は、４～５歳でありかつ中南米の出身であり、６～１１歳でありかつ中南米の出身であり、または１２～１６歳でありかつ中南米の出身である。

【0423】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象集団の健康な対象が、４～５歳でありかつ少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性である、６～１１歳でありかつ少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性である、または１２～１６歳でありかつ少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性である、方法を対象とする。他の実施形態において、対象集団の健康な対象は、４～５歳でありかつ全てのデング熱血清型について血清陰性である、６～１１歳でありかつ全てのデング熱血清型について血清陰性である、または１２～１６歳でありかつ全てのデング熱血清型について血清陰性である。

【0424】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象集団の健康な対象が、アジア太平洋または中南米の出身であり、ベースラインで少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性である、方法を対象とする。他の実施形態において、対象集団の健康な対象は、アジア太平洋または中南米の出身であり、ベースラインで全てのデング熱血清型について血清陰性である。

【0425】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象集団の健康な対象が、アジア太平洋の出身であり、ベースラインで少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性であり、４～５歳、６～１１歳、または１２～１６歳である、方法を対象とする。他の実施形態において、対象集団の健康な対象は、アジア太平洋の出身であり、ベースラインで全てのデング熱血清型について血清陰性であり、４～５歳、６～１１歳、または１２～１６歳である。さらに他の実施形態において、対象集団の健康な対象は、中南米の出身であり、ベースラインで少なくとも１つのデング熱血清型について血清陽性であり、４～５歳、６～１１歳、または１２～１６歳である。他の実施形態において、対象集団の健康な対象は、アメリカの出身であり、ベースラインで全てのデング熱血清型について血清陰性であり、４～５歳、６～１１歳、または１２～１６歳である。

【0426】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象集団の健康な対象が、黄熱病に対する事前のワクチン接種を受けた、方法を対象とする。他の実施形態において、対象集団の健康な対象は、黄熱病に対する事前のワクチン接種を受けていない。事前のワクチン接種は、本明細書に記載の再構成された単位用量での第１のワクチン接種より前に行うワクチン接種を示す。例えば、第２のワクチン接種の３０日後から実施例６で決定されるワクチン有効性（ＶＥ）について、黄熱病の事前のワクチン接種は、第２のワクチン接種の３０日後より前に行われる黄熱病ワクチン接種として定義される。

【0427】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象集団の健康な対象が、日本脳炎に対する事前のワクチン接種を受けた、方法を対象とする。他の実施形態において、対象集団の健康な対象は、日本脳炎に対する事前のワクチン接種を受けていない。

【0428】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象集団の健康な対象が、本明細書に記載の投与レジメン内または第１の用量の投与から４．５年以内にＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）を受けた、方法を対象とする。ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、ワクチン関連重篤有害事象の発生が０．１％未満である、方法を対象とする。

【0429】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、投与から４週間以内に生じるワクチン関連自発的有害事象の発生が２％未満である、方法を対象とする。

【0430】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、投与から２週間以内に生じるワクチン関連非自発的有害事象の発生が３５％未満である、方法を対象とする。

【0431】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、投与から１週間以内に生じるワクチン関連非自発的局所反応の発生が４０％未満である、方法を対象とする。

【0432】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、個体（例えば、血清陰性の個体）における入院を伴うウイルス学的に確認されたデング熱のリスクを上昇させない、方法を対象とする。

【0433】

上記の方法は、このような方法で使用するための単位用量、またはこのような方法のための医薬品の製造で使用するための単位用量の使用の文脈においても考慮される。

【0434】

ある特定の実施形態において、デング熱疾患に対する接種のために四価デング熱ワクチン（例えば、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標））が使用される。Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）は、黄熱病骨格に基づく四価デング熱ワクチンＣＹＤ－ＴＤＶ（Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ Ｐａｓｔｅｕｒ、Ｌｙｏｎ、Ｆｒａｎｃｅ）であり、アジア及び中南米における小児の５６～６１％のウイルス学的に確認されたデング熱（ＶＣＤ）に対する全体的ワクチン効力（ＶＥ）の臨床的実証に基づいていくつかの国において認可されている（Ｃａｐｅｄｉｎｇ ＭＲ ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｔｅｔｒａｖａｌｅｎｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｉｎ Ａｓｉａ：ａ ｐｈａｓｅ ３，ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，ｏｂｓｅｒｖｅｒ－ｍａｓｋｅｄ，ｐｌａｃｅｂｏ－ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌ．Ｌａｎｃｅｔ ２０１４，３８４：１３５８－６５；Ｖｉｌｌａｒ ＬＡ ｅｔ ａｌ．Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ａ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｔｅｔｒａｖａｌｅｎｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ９－１６ ｙｅａｒ ｏｌｄｓ：ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ，ｐｈａｓｅ ＩＩ ｔｒｉａｌ ｉｎ Ｌａｔｉｎ Ａｍｅｒｉｃａ． Ｐｅｄｉａｔｒ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ Ｊ ２０１３，３２：１１０２－９）。これらの特定の株ＣＹＤ１、ＣＹＤ２、ＣＹＤ３、及びＣＹＤ４の調製は、国際特許出願ＷＯ９８／３７９１１、ＷＯ０３／１０１３９７、ＷＯ０７／０２１６７２、ＷＯ０８／００７０２１、ＷＯ０８／０４７０２３、及びＷＯ０８／０６５３１５に詳細に記載されており、それらの調製のためのプロセスの正確な記載のためにこれらに対する参照がなされ得る。ＣＹＤ１、ＣＹＤ２、ＣＹＤ３、及びＣＹＤ４のｐｒＭ－Ｅ領域の対応するヌクレオチド配列は、ＷＯ２０１６０３４６２９で提供されており、配列番号は、この参考文献の表１６に示されている。

【0435】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量、特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む単位用量と、本明細書に開示するＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）とを、同日同時に投与する、方法を対象とする。

【0436】

ある特定の実施形態において、本発明は前述の方法であって、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量、特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む単位用量を第１の投与として０／１日目に投与し、続いて、対象または対象集団に、本明細書に開示するＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）を、第２の投与として、第１の投与から３ヵ月以内、例えば第１の投与から９０日目に投与する、方法を対象とする。代替的に、本明細書に開示するＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）は、対象または対象集団に、第１の投与として０／１日目に投与し、続いて、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量、特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む単位用量は、第２の投与として、第１の投与から３ヵ月以内、例えば第１の投与から９０日目に投与する。

【0437】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、デング熱ワクチン組成物が、他のデング熱ワクチン（例えば、ＴＶ００３またはＴＶ００５）を含む、方法を対象とする。米国国立アレルギー・感染症研究所が開発したＴＶ００３は、ワクチン成分ｒＤＥＮ１Δ３０、ｒＤＥＮ２／４Δ３０、ｒＤＥＮ３Δ３０／３１、及びｒＤＥＮ４Δ３０を含み、これらの成分の各々が３ｌｏｇ_１０ＰＦＵの濃度で存在する。ＴＶ００５はＴＶ００３に類似するが、ＴＶ００５中のｒＤＥＮ２／４Δ３０の濃度が４ｌｏｇ_１０ＰＦＵである点が異なる。ワクチンＴＶ００３、ＴＶ００５、及びこれらのワクチン成分、ならびにこれらの生産については、ＷＯ２００８／０２２１９６Ａ２及びＳ．Ｓ．Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｖａｃｃｉｎｅｓ，２０１６，１５（４）：５０９ ｔｏ ５１７でより詳細に説明されている。組換えＤＮＡ技術を用いて、ＴＶ００３またはＴＶ００５のワクチン成分に対し、３’非翻訳領域の欠失及び構造遺伝子のキメラ化という２つの弱毒化戦略を利用した。例えば、成分ｒＤＥＮ４Δ３０は、野生型ＤＥＮＶ－４の全ての構造タンパク質及び非構造タンパク質を含むが、３’非翻訳領域内の３０ヌクレオチドの欠失（「Δ３０」と表記）によって弱毒化されている。他方のワクチン成分も、３’非翻訳領域内の３０ヌクレオチドの欠失によって弱毒化されている。加えて、ｒＤＥＮ３Δ３０／３１は、３’非翻訳領域内に３１ヌクレオチドの欠失を含む（ＷＯ２００８／０２２１９６Ａ２の図１ｃ及び図１３に詳細に示されている）。ｒＤＥＮ２／４Δ３０成分は、ＤＥＮＶ－２のｐｒＭ及びＥ遺伝子を置換してｒＤＥＮ４Δ３０ゲノムにすることによって作出された。ＴＶ００３またはＴＶ００５の生産に使用することができるデング熱株の完全なゲノム配列は、ＷＯ２００８／０２２１９６Ａ１の表ＡのＧｅｎｂａｎｋアクセッション番号で利用可能である。

【0438】

ある特定の実施形態において、本発明は、前述の方法であって、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量、特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む単位用量と、本明細書に開示するＴＶ００３またはＴＶ００５とを同日同時に投与する、方法を対象とする。

【0439】

ある特定の実施形態において、本発明は前述の方法であって、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量、特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む単位用量を第１の投与として０／１日目に投与し、続いて、対象または対象集団に、本明細書に開示するＴＶ００３またはＴＶ００５を、第２の投与として、第１の投与から３ヵ月以内、例えば第１の投与から９０日目に投与する、方法を対象とする。代替的に、本明細書に開示するＴＶ００３またはＴＶ００５は、対象または対象集団に、第１の投与として０／１日目に投与し、続いて、対象または対象集団に、本明細書に開示する単位用量（特定的には、キメラデング熱血清型２／１株、弱毒化生デング熱血清型２株、キメラデング熱血清型２／３株、及びキメラデング熱血清型２／４株を含む）は、第２の投与として、第１の投与から３ヵ月以内、例えば第１の投与から９０日目に投与する。

【実施例】

【0440】

以下の実施例は、特許請求の範囲に記載される本発明のある特定の態様及び実施形態を実証するために含まれる。しかしながら、以下の記載は例示的なものにすぎず、本発明の限定としてどのようにも解釈されるべきではないことは、当業者によって理解されるべきである。

【0441】

実施例１：デング熱ウイルス株の調製
キメラデング熱株ＴＤＶ－１、－３、及び－４を生成するために使用した方法は、標準的な分子クローニング及びＤＮＡ工学的方法であり、ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ７７（２１）：１１４３６－１１４４７に記載されている。デング熱血清型１、３、及び４のｐｒＭ－Ｅ遺伝子をＴＤＶ－２骨格内に構築及び導入するために以下のよく知られている方法を使用した：逆転写酵素ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）、ＰＣＲ、制限酵素消化、ＤＮＡ断片ライゲーション、エレクトロポレーションによる細菌形質転換、プラスミドＤＮＡ調製、Ｔ７ＲＮＡポリメラーゼによるｉｎ ｖｉｔｒｏ転写、及びエレクトロポレーションによるＶｅｒｏ細胞の形質移入。

【0442】

Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１３）ＰＬＯＳ Ｎｅｇｌｅｃｔｅｄ Ｄｉｓ，７（５）：ｅ２２４３に記載のように、異なるデング熱血清型を別々に成長させ、精製した後、これを実施例４に示されているある特定の濃度で混合する。デング熱血清型の混合物は、デング熱ワクチン組成物中に存在し、医薬的に許容される賦形剤の組成物と合わせて、１５％ｗ／ｖのα，αトレハロース二水和物、１％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、０．１％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン及び１００ｍＭの塩化ナトリウムを含むデング熱ワクチン組成物が得られる。デング熱ワクチン組成物は凍結乾燥されており、ＴＤＶの凍結乾燥単位用量に相当する。凍結乾燥された単位用量を３７ｍＭの塩化ナトリウム水溶液で再構成し、再構成された単位用量は、１５％ｗ／ｖのα，αトレハロース二水和物、１％ｗ／ｖのポロキサマー４０７、０．１％ｗ／ｖのヒト血清アルブミン及び１３７ｍＭの塩化ナトリウムを含む。

【0443】

実施例２：マイクロ中和試験
免疫原性は、プラーク値の５０％減少（ＭＮＴ５０）をもたらす希釈として定義される力価を用いて４つのデング熱血清型の各１つに対するマイクロ中和アッセイによって測定した。簡潔には、１日目にＶｅｒｏ細胞を９６ウェルアッセイプレート上でＤＭＥＭ及び１０％ＦＢＳ中に２．５×１０^５細胞／ｍｌの密度で播種し、３７℃で２４時間インキュベートした。２日目に熱不活化抗体含有試験及び対照血清サンプルの段階希釈物（希釈物は１：１０～１：２０４８０の範囲である）を調製し、９６ウェルマイクロタイタープレートにおいて一定濃度のデング熱ウイルス（特定的には、ＤＥＮＶ－１株１６００７、ＤＥＮＶ－２株１６６８１、ＤＥＮＶ－３株１６５６２、及びＤＥＮＶ－４株１０３６）と混合し（目標６０～８０ｐｆｕ／ウェル）、２～８℃で一晩インキュベートして、血清中に存在する抗体によるウイルスの中和を可能にした。インキュベート後、ウイルスと抗体との混合物をＶｅｒｏ細胞を有する９６ウェルプレートに移し、プレートを３７℃で９０～１２０分間インキュベートして、Ｖｅｒｏ細胞を感染させた。ＤＭＥＭ中の１％メチルセルロースオーバーレイをプレートに適用して、子孫ウイルスの拡散を制限し、プレートをデング熱血清型に応じて３４℃で４６～７０時間インキュベートした：
ＤＥＮＶ１－６６±２時間
ＤＥＮＶ２－７０±２時間
ＤＥＮＶ３－６６±２時間
ＤＥＮＶ４－４６±２時間

【0444】

インキュベート後、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、冷メタノールを添加し、≦－２０℃の温度で６０分間インキュベートすることによって固定した。固定後、プレートを乾燥させ、洗浄緩衝液（１×ＰＢＳ、０．５％Ｔｗｅｅｎを有するｐＨ７．４）で３回洗浄してから、ウェル当たりブロッキング溶液（ＰＢＳＴ中の２．５％脱脂粉乳）中５０μｌの血清型特異的抗デング熱モノクローナル抗体を添加し、細胞と共に２～８℃で１８±４時間インキュベートした。

【0445】

モノクローナル抗体は、Ｇｅｎｔｒｙ ｅｔ ａｌ．（１９８２）Ａｍ．Ｊ．Ｔｒｏｐ． Ｍｅｄ．Ｈｙｇ．３１，５４８－５５５；Ｈｅｎｃｈａｌ ｅｔ ａｌ．（１９８５）Ａｍ．Ｊ．Ｔｒｏｐ． Ｍｅｄ．Ｈｙｇ．３４，１６２－１６９；及びＨｅｎｃｈａｌ ｅｔ ａｌ．（１９８２）Ａｍ．Ｊ．Ｔｒｏｐ． Ｍｅｄ．Ｈｙｇ．３１（４）：８３０－６）に記載されているように作製した。簡潔には、抗ＤＥＮＶ－１ ＨＢＤはデング熱１株Ｈａｗａｉｉのエンベロープに対して作製し、抗ＤＥＮＶ－２はデング熱２株Ｎｅｗ Ｇｕｉｎｅａ Ｃのエンベロープのアイソタイプ１に対して作製し、抗ＤＥＮＶ－３ ＨＢＤはデング熱３株Ｈ８７のエンベロープのアイソタイプ２Ａに対して作製し、抗ＤＥＮＶ－４ ＨＢＤはデング熱４株Ｈ２４１のエンベロープのアイソタイプ２Ａに対して作製した。

【0446】

インキュベート後、プレートを洗浄緩衝液で３回洗浄し、ブロッキング溶液中の５０μｌの二次ペルオキシダーゼ標識ヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）（ＫＰＬ Ｃａｔ＃０７４－１８０６）を添加し、３７℃で９０～１２０分間インキュベートした。次いでプレートを洗浄緩衝液で３回洗浄し、５０μｌの沈殿剤基質（２．５ｍｌのＤＭＳＯ中の２－アミノ－９－エチルカルバゾール（ＡＥＣ）錠剤、４７．５ｍｌの５０ｍＭ酢酸緩衝液及び２５０μｌの過酸化水素）を添加し、混合物を室温で２０分間インキュベートした。最後に、基質を除去し、プレートをｄＨ_２Ｏですすぎ、乾燥させた。

【0447】

サンプルの力価は、線形回帰法を使用して計算され、各サンプルについてのＭＮＴ５０力価として報告される。臨床データは、各処置群における個々のＭＮＴ５０力価の全てについての幾何平均力価として報告される。簡潔には、各ウェルにおける感染性輝点の数をカウントし、ウイルスのみ含有するウェルと比較した、抗体（試験サンプル）を含有するウェルにおける感染性輝点中心の減少率を比較することによって中和抗体の力価を決定した。ＭＮＴ５０は、以下の線形回帰式を使用して計算した：
ＭＮＴ５０＝１０＾［（５０－ｃ）／ｍ］）（式中、ｃ＝回帰直線のｙ切片及びｍ＝回帰直線の傾き）

【0448】

各試験サンプルを三重に試験し、力価を三重の平均から計算した。この試験で実施したステップの概略図を図２に示す。

【0449】

実施例３：小児における第ＩＩＩ相臨床試験
タイ、スリランカ、フィリピン、パナマ、ニカラグア、ドミニカ共和国、コロンビア、またはブラジルに居住する４～１６歳の２０１００例を対象とする第ＩＩＩ相二重盲検ランダム化プラセボ対照試験を実施し、四価デング熱ワクチン（以下、ＴＤＶ（本明細書に記載のＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４）と称される）の有効性、安全性、及び免疫原性を評価した。本試験は３つのパートを含む。パート１は、ワクチン有効性（ＶＥ）を評価し、以下の２つの基準の両方が満たされるまで継続した：（ｉ）１２０症例のデング熱が確認されること、及び（ｉｉ）第２のワクチン接種後１２ヵ月の対象追跡調査の最小継続期間。パート２は、ＶＥを評価するため及び副次有効性分析のためのさらなる６ヵ月である。パート３は、副作用について参加者を追跡することによって長期安全性を評価し、追加の３年間継続する。

【0450】

パート１：全ての対象における有効性の主要評価のための積極的監視。この期間中、潜在的にデング熱に起因し得る熱性疾病の特定を確実にするために少なくとも週１回対象に連絡した。このパートは、ワクチン接種の日に開始し、以下の２つの基準の両方が満たされると終了した：（ｉ）１２０症例のデング熱が確認されること、及び（ｉｉ）第２のワクチン接種後１２ヵ月の対象追跡調査の最小継続期間。パート１の終了は、第２のワクチン接種後のフォローアップの継続期間が全ての対象についてほぼ同じとなるように各対象について定義した。パート１におけるウイルス学的に確認された症例は、第２のワクチン接種後少なくとも３０日に生じた場合に、主要有効性対象にカウントする。パート１は、第２のワクチン接種の１２ヵ月後に終了した。

【0451】

パート２：パート１の完了後の各対象についての追加の６ヵ月間、すなわち、第２のワクチン接種後１８ヵ月の積極的監視。この期間中、潜在的にデング熱に起因し得る熱性疾病の特定を確実にするために少なくとも週１回対象に連絡した。パート１及び２におけるウイルス学的に確認された症例は、副次有効性対象に対して寄与する。

【0452】

パート３：パート２の完了後各対象に対し３年継続する全ての対象における安全性評価のための改変された積極的監視。パート３中の改変された積極的監視は、試験のパート３を通して少なくとも週１回の連絡を維持するが、入院の必要性に基づいて調査の強度を改変する。監視は、潜在的にデング熱に起因する可能性のある任意の重症度の熱性疾病を特定する。

【0453】

選択基準には以下が含まれる：
●対象は、ランダム化時に４～１６歳（両端を含む）であった。
●病歴、身体検査（バイタルサインを含む）及び治験責任医師の臨床判断によって決定される試験への参加時に良好な健康状態であった個体。
●対象及び／または対象の親／保護者が、地域の規制要件に従って試験の特質が説明された後、任意の試験手順の開始前に、同意書／書面によるインフォームドコンセント用紙（該当する場合）、及び任意の必要とされるプライバシーの承認に署名し、日付を記入した。
●試験手順を遵守することができ、追跡調査の継続期間中に対応可能な個体。

【0454】

除外基準には以下が含まれる：
１．ランダム化時に熱性疾病（体温≧３８℃）または中等度もしくは重度の急性疾病または感染症。
２．治験責任医師の見解において、試験の結果に干渉する可能性があるか、または試験への参加により対象に追加のリスクをもたらす可能性がある、以下を含むがこれらに限定されない既往歴または任意の疾病：
ａ．ワクチン成分のいずれかに対する既知の過敏症またはアレルギー。
ｂ．妊娠中または授乳中の女性対象（初潮後）。
ｃ．治験責任医師の判断により任意の重篤の慢性または進行性疾患（例えば、新生物、インスリン依存性糖尿病、心臓、腎臓もしくは肝臓疾患、神経もしくは発作障害またはギランバレー症候群）を有する個体。
ｄ．以下を含む、既知のまたは疑われている免疫機能の障害／変化：
ｉ．１日目（０ヵ月目）の６０日前以降に経口ステロイドを慢性使用していること（≧１２週間の２０ｍｇ／日のプレドニゾン／≧２週間の≧２ｍｇ／ｋｇ体重／日のプレドニゾンと同等）（吸入、経鼻、または外用コルチコステロイドの使用は認められる）。
ｉｉ．１日目（０ヵ月目）の６０日前以降に非経口ステロイドを受けていること（≧１２週間の２０ｍｇ／日のプレドニゾン／≧２週間の≧２ｍｇ／ｋｇ体重／日のプレドニゾンと同等）
ｉｉｉ．１日目（０ヵ月目）の３ヵ月前以降にイムノグロブリン及び／または任意の血液製剤の投与を受けたか、または試験中に投与を受ける予定があること。
ｉｖ．１日目（０ヵ月目）の６０日前以降に免疫刺激剤を受けていること。
ｖ．１日目（０ヵ月目）の６ヵ月前以降に抗がん剤化学療法または放射線療法などの免疫抑制療法を受けていること。
ｖｉ．ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染またはＨＩＶ関連疾患。
ｖｉｉ．遺伝性免疫不全。
３．１日目（０ヵ月目）の１４日前以降（不活化ワクチンの場合）または２８日前以降（生ワクチンの場合）に任意の他のワクチンを受けているか、または１日目（０ヵ月目）から２８日以内に任意のワクチンを受ける予定があること。
４．１日目（０ヵ月目）の３０日前に別の治験薬での任意の臨床試験への参加またはこの試験の実行中の任意の時点で別の臨床試験に参加する意図。
５．デング熱ワクチンの候補の任意の臨床試験における過去の参加、またはデング熱ワクチンの過去の接種。
６．試験実行に関与する個体の一等親近親者。
７．性的に活動的であり、１日目（０ヵ月目）の前の少なくとも２ヵ月間許容可能な避妊方法のいずれかも使用していない妊娠可能性のある女性。
８．性的に活動的であり、第２のワクチン接種の６週間後まで許容可能な避妊方法の使用を拒否する妊娠可能性のある女性。
９．行政または裁判所の命令によって自由を奪われている、または緊急的状況下にある、または強制的に入院している。
１０．試験手順を遵守する対象の能力を妨げ得る現在のアルコール乱用または薬物依存症。
１１．治験責任医師または試験センターの雇用者として特定されており、提案された試験またはその治験責任医師もしくは試験センターの指示下の他の試験に直接関与している。

【0455】

適格である対象を２つの処置群にランダム化した（２：１）：第１群は、１日目及び９０日目にＴＤＶの１つの皮下（ＳＣ）用量を上腕部に受け、第２群は、１日目及び９０日目にプラセボの１つの皮下用量を上腕部に受けた。ランダム化は、地域（アジア太平洋及び中南米）及び年齢範囲（４～５歳、６～１１歳、及び１２～１６歳の小児）によって層別化され、各年齢範囲で、確実に各地域内のプラセボに対するＴＤＶの比が適切になるようにした。ランダム化後は、脱落者を置き換えなかった。試験１日目は、ＴＤＶまたはプラセボの第１の用量の投与の日と定義される。ＴＤＶを実施例１に記載されているように調製した。ＴＤＶの各皮下用量は０．５ｍＬであり、各用量におけるＴＤＶワクチン中の４つのデング熱血清型の濃度は、ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４のそれぞれ３．６ｌｏｇ_１０ＰＦＵ／用量、４．０ｌｏｇ_１０ＰＦＵ／用量、４．６ｌｏｇ_１０ＰＦＵ／用量、及び５．１ｌｏｇ_１０ＰＦＵ／用量であった。

【0456】

四価デング熱ワクチンの各個々の成分についての濃度パーセンテージの計算のための基準値として機能する「ｐｆｕ／０．５ｍｌでの総濃度」は、３．６０ｌｏｇ_１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型１、４．００ｌｏｇ_１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型２、４．６０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型３、及び５．１１ｌｏｇ_１０ｐｆｕ／０．５ｍｌの濃度のデング熱血清型４を含む１つの例示的な四価ワクチン組成物のために示される。
主として、濃度の対数値は数値に変換される。この変換の結果は、血清型１については４×１０^３ｐｆｕ／０．５ｍｌ、血清型２については１×１０^４ｐｆｕ／０．５ｍｌ、血清型３については４×１０^４ｐｆｕ／０．５ｍｌ及び血清型４については１．３×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌである。ｐｆｕ／０．５ｍｌでの総濃度は、１．８４×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌをもたらす先行数値の合計である。

【0457】

血清型１、２、３、及び４の各々についての「濃度パーセンテージ」は、個々の血清型の濃度数値（ｐｆｕ／０．５ｍｌとして表される）を総濃度（ｐｆｕ／０．５ｍｌで表される）で除算し、その結果に１００を乗算することによって得られる。すなわち、
血清型１の濃度パーセンテージ＝（４×１０^３ｐｆｕ／０．５ｍｌ÷１．８４×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌ）×１００＝２％
血清型２の濃度パーセンテージ＝（１×１０^４ｐｆｕ／０．５ｍｌ÷１．８４×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌ）×１００＝５％
血清型３の濃度パーセンテージ＝（４×１０^４ｐｆｕ／０．５ｍｌ÷１．８４×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌ）×１００＝２２％
血清型４の濃度パーセンテージ＝（１．３×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌ÷１．８４×１０^５ｐｆｕ／０．５ｍｌ）×１００＝７１％。
濃度パーセンテージは、四捨五入して整数にする。

【0458】

主要アウトカム指標には、任意のデング熱血清型によって誘発されたウイルス学的に確認されたデング（ＶＣＤ）熱を予防する上でのＴＤＶの２回の用量のワクチン有効性（ＶＥ）が含まれた［時間枠：第２のワクチン接種の３０日後（１２０日目）からパート１の終了まで］。ＶＥは、１－（λｖ／λｃ）（式中、λｖ及びλｃは、それぞれ、ＴＤＶ及びプラセボ群についてのハザード率を示す）として定義される。ウイルス学的に確認されたデング熱症例は、熱性疾病（連続した３日のうちの任意の２日における≧３８℃の体温として定義される）または陽性の血清型特異的逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）で治験責任医師によってデング熱であることが臨床的に疑われる疾病として定義される。熱性疾病は、１つの発病に由来する急性かつ回復期の来院と２回目の発病のものとの重複を避けるため、過去の熱性疾病から少なくとも１４日の間隔を必要とする。

【0459】

副次アウトカム測定には以下が含まれる：
１）各デング熱血清型によって誘発されたウイルス学的に確認されたデング熱を予防する上でのＴＤＶの２回の用量のＶＥ［時間枠：第２のワクチン接種の３０日後（１２０日目）からパート２の終了まで］。
２）ベースラインでデング熱血清陰性の参加者において任意のデング熱血清型によって誘発されたウイルス学的に確認されたデング熱を予防する上でのＴＤＶの２回の用量のＶＥ［時間枠：第２のワクチン接種の３０日後（１２０日目）からパート２の終了まで（最大で２１ヵ月）］。
３）ベースラインでデング熱血清陽性の参加者において任意のデング熱血清型によって誘発されたウイルス学的に確認されたデング熱を予防する上でのＴＤＶの２回の用量のＶＥ［時間枠：第２のワクチン接種の３０日後（１２０日目）からパート２の終了まで］。
４）任意のデング熱血清型によって誘発されたウイルス学的に確認されたデング熱に起因する入院を予防する上でのＴＤＶの２回の用量のＶＥ［時間枠：第２のワクチン接種の３０日後（１２０日目）からパート２の終了まで］。
５）任意のデング熱血清型によって誘発されたウイルス学的に確認された重度のデング熱を予防する上でのＴＤＶの２回の用量のＶＥ［時間枠：第２のワクチン接種の３０日後（１２０日目）からパート２の終了まで］。
６）安全性サブセットにおける非自発的局所注射部位の有害事象（ＡＥ）を有する参加者のパーセンテージ［時間枠：各ワクチン接種後１日目から７日目］及び非自発的局所注射ＡＥの重症度。注射部位での非自発的局所ＡＥは、各ワクチン接種後７日以内に生じた疼痛、紅斑及び腫れとして定義される。
７）安全性サブセットにおける非自発的全身性有害事象（ＡＥ）を有する参加者のパーセンテージ［時間枠：各ワクチン接種後１日目から１４日目］及び非自発的全身性ＡＥの重症度。小児（＜６歳）における非自発的全身性ＡＥは、各ワクチン接種後１４日以内に生じた発熱、過敏性／癇癪、眠気及び食欲の喪失として定義される。小児（≧６歳）における非自発的全身性ＡＥは、各ワクチン接種後１４日以内に生じた発熱、頭痛、無力症、不快感及び筋肉痛として定義される。
８）安全性サブセットにおける任意の自発的有害事象（ＡＥ）を有する参加者のパーセンテージ［時間枠：各ワクチン接種後１日目から２８日目］。自発的ＡＥは、上記で定義される非自発的局所または全身性ＡＥではない任意のＡＥである。
９）パート１及び２中の重篤有害事象（ＳＡＥ）を有する参加者のパーセンテージ［時間枠：１日目からパート１及び２の終了まで］。重篤な有害事象（ＳＡＥ）は、任意の用量で死亡に至る、生命を脅かす、入院または既存の入院の延長を必要とする、持続的または重大な障害／能力不全をもたらす、先天性異常／出生時欠損である、または上記の基準以外の理由により医学的に重要である任意の予期せぬ医学的事象または影響である。
１０）パート３の前半及び後半の間に、致命的なＳＡＥ及び試験薬に関連するＳＡＥを有する参加者のパーセンテージ［時間枠：パート２の終了（第１のワクチン接種のおよそ２１ヵ月後）から開始して３年間（１８ヵ月で二分割）］。
１１）免疫原性サブセットにおける４つのデング熱血清型の各々についての血清陽性応答を有する参加者のパーセンテージ［時間枠：１日目及び１、３、４、９、１５ヵ月目及び次いで１年毎（最大で３年）］。血清陽性応答は、相互中和力価≧１０として定義される。４つのＤＥＮＶ血清型は、ＤＥＮ－１、ＤＥＮ－２、ＤＥＮ－３、及びＤＥＮ－４である。
１２）免疫原性サブセットにおける複数のデング熱血清型についての血清陽性応答を有する参加者のパーセンテージ［時間枠：１日目及び１、３、４、９、１５ヵ月目及び次いで１年毎（最大で３年）］。
１３）免疫原性サブセットにおける４つのデング熱血清型の各々についての中和抗体の幾何平均力価（ＧＭＴ）［時間枠：１日目及び１、３、４、９、１５ヵ月目及び次いで１年毎（最大で３年）］。中和抗体のＧＭＴを実施例２に記載されているようにマイクロ中和試験（ＭＮＴ）により測定する。

【0460】

ａ）試験集団
スクリーニング後、２０，０９９例の参加者をランダム化し、２０，０７１例は少なくとも１回の注射を受けた。合計で、プラセボ参加者の９７．４％（ｎ／Ｎ：６，５２１／６，６９８）及びワクチン接種者の９７．３％（ｎ／Ｎ：１３，０３８／１３，４０１）が試験のパート１を完了した（図３）。試験中止の理由には、ＡＥ、参加者の追跡調査欠如、妊娠、プロトコル違反、及び参加者（または親／保護者）による中止が含まれた。ベースラインの特徴は、両処置群間で同様であった（表５）。試験参加者の平均年齢は９．６歳であり、２７．７％のベースライン血清陰性率を有し、登録者数は地域間で広くバランスがとれていた（アジアで４６．５％、中南米で５３．５％）。最も高い血清陰性率はパナマ（６２．２％）であり、続いてスリランカ（３８．５％）、タイ（３４．４％）、ブラジル（２８．８％）、ニカラグア（２２．３％）、コロンビア（１５．４％）、フィリピン（１２．４％）、及びドミニカ共和国（２．８％）であった。

【0461】

【表5】

【0462】

ｂ）熱性疾病及びＶＣＤ
パート１の間、熱性疾病の５，７５４件及び４，６６３件の発病がアジア及び中南米の地域でそれぞれ報告された。アジア及び中南米でそれぞれ急性サンプルをこれらの症例の９９．５％及び９６．６％で取得し、サンプルの９８．３％及び８５．１％は５日以内に採取した。パート１の期間全体の間で安全性セットにおける２７８件のＶＣＤ症例（７６件の入院）があり、そのうち２１０件（５８件の入院）は、ＰＰＳにおける第２のワクチン接種の３０日後であり（表６；表８）、主要エンドポイント分析に含めた。

【0463】

ｃ）主要エンドポイント分析に含まれるＶＣＤの分布
ＤＥＮＶ－１は、ＶＣＤを有する全ての国において報告され、パナマでは２１症例の全てを含んでいた。スリランカでは、６０件のＶＣＤのうち５４件がＤＥＮＶ－２であり、フィリピンでは１０９件のＶＣＤのうち８７件がＤＥＮＶ－３であった。７件全てのＤＥＮＶ－４のＶＣＤは、フィリピンで報告された。ニカラグアまたはドミニカ共和国ではＶＣＤは報告されなかった。関連する５８件の入院したＶＣＤのうち、４３件がスリランカで報告された。合計で２件の重度デング熱（両方ともＤＥＮＶ－３）及び５件のデング出血熱（ＤＨＦ；３件のＤＥＮＶ－２；２件のＤＥＮＶ－３）の症例が報告された（表７）。またこのような症例は、パート１の安全性セット全体でこの７件のみであった。

【0464】

ｄ）ワクチン有効性
任意の血清型のＶＣＤに対するＶＥは、８０．２％であった（９５％ＣＩ：７３．３～８５．３；Ｐ＜０．００１）。安全性セットにおける用量間及び第１の用量後の８１％（９５％ＣＩ：６４．１～９０．０）の同様の有効性（表６）は、ワクチンが第１の用量後に効果的であったことを示唆している。副次有効性エンドポイントの探索的分析は、ＤＥＮＶ－２に対する最も高い有効性（９７．７％）、続いてＤＥＮＶ－１（７３．７％）、ＤＥＮＶ－４（６３．２％、ゼロを含むＣＩを伴う）、及びＤＥＮＶ－３（６２．６％；表７）で血清型によって異なる有効性の傾向を示した。全体として、有効性は、ベースラインの血清陰性者（７４．９％）及び血清陽性者（８２．２％；図４上）で同様であったが、これは血清型によって変動した。ＤＥＮＶ－２に対する有効性は、血清状態によって影響を受けなかった；ＤＥＮＶ－１に対する有効性は、ベースライン血清陰性者（６７．２％；９５％ＣＩ：２３．２～８６．０）よりもベースライン血清陽性者（７９．８％；９５％ＣＩ：５１．３～９１．６）でわずかに高かった。有効性は、ＤＥＮＶ－３に対しては、ベースライン血清陽性者（７１．３％；９５％ＣＩ：５４．２～８２．０）と比較してベースライン血清陰性者（－３８．７％；９５％ＣＩ：－３３５．７～５５．８）では観察されなかった。血清状態毎の有効性は、ＤＥＮＶ－４については、ベースライン血清陰性者の症例が観察されなかったため、計算しなかった。ＰＰＳの主要エンドポイント時間枠では、プラセボ群における５３症例と比較してワクチン群では入院を必要とする５件のみのＶＣＤが報告され、９５．４％のＶＥ（９５％ＣＩ：８８．４～９８．２；ベースライン血清陰性者については９７．２％及びベースライン血清陽性者については９４．４％；表７；図４下）を有し、これは第１の用量後からの安全性セットにおける９３．３％のＶＥ（９５％ＣＩ：８６．７～９６．７）と一貫する。

【0465】

任意のデング熱血清型によって誘発されたウイルス学的に確認されたデング（ＶＣＤ）熱を予防する上でのＴＤＶの２回の用量の主要ワクチン有効性（ＶＥ）を表６に示す。

【0466】

【表6-1】

【0467】

【表6-2】

【0468】

表６に示される有効性評価のため、ＶＣＤの症例は、陽性血清型特異的ＲＴ－ＰＣＲ（すなわち、陽性デング熱検出ＲＴ－ＰＣＲ）を用いて、第２のワクチン接種の３０日後（１２０日目［４ヵ月目］）から開始してパート１の終了までの任意の時点で生じた熱性疾病（連続した３日のうちの任意の２日における≧３８℃の発熱として定義される）として定義された。パープロトコルセット（ＰＰＳ）及び安全性セットに対する分析を実施した。

【0469】

本明細書で使用する場合、「パープロトコルセット（ＰＰＳ）」は、重大なプロトコル違反がなかったＴＤＶまたはプラセボの少なくとも１回の用量を受けた全てのランダム化された対象からなる全分析セット（ＦＡＳ）における全ての対象からなる。重大なプロトコル違反は、ＴＤＶまたはプラセボ投与の両方の用量を受けていないこと、正しい間隔で両方の用量を受けていないこと、ＴＤＶまたはプラセボを正しく投与していないこと、対象による禁止された薬剤／ワクチンの使用、対象が上記で定義された２ｄ、３、４または５の除外基準のいずれかを満たすことまたは製品調製の過誤である。

【0470】

ｐ値は、以下の式において臨界値Ｚを解くことによって得られる：
ＨＲの片側（１－ｐ％）ＣＩの上限＝０．７５（式中、ＨＲはハザード比であり、ＨＲ＝λＶ／λＣとして定義される）
ｅ＾［β＾＋Ｚ＊Ｓ＾Ｅ］＝０．７５（式中、β＾は処置を定義し、Ｓ＾Ｅは関連する標準誤差を定義する）
片側ｐ値は、１－（標準正規分布からの臨界値Ｚの左側の面積）である。仮説は５％の有意レベルで両側の確認的手法で試験されるので、計算された片側ｐ値は０．０２５と比較されるべきである。

【0471】

要約すると、この試験のパート１において、４～１６歳の小児で任意の血清型のウイルス学的に確認されたデング熱に対する８０．２％の高いワクチン有効性が認められた。これには、ベースライン血清陰性者における７４．９％の有効性及び入院者における９５．４％の強力な減少が含まれた。第１の用量の後に保護の開始が認められ、用量間の有効性は８１％であった。全体として、これらの結果は、過去のデング熱曝露または年齢に関係なく、各ワクチンレシピエントにとっての潜在的な利益を示唆している。デング熱に対するワクチン開発が、特にデング熱ナイーブの個体については困難であり、デング熱は、２０１９．１９においてＷＨＯの世界の健康に対するトップ１０の脅威の１つであり続けているため、この知見は重要である。さらに、第１の用量の後の保護の開始は、大流行制御または渡航ワクチン接種の状況において潜在的有用性を有し、１回用量のみの後のデング熱のリスクを低減する。

【0472】

デング熱の重度形態は、以下のように評価された：１９９７ＷＨＯ定義によって定義されるデング出血熱（ＤＨＦ）。デング熱症例裁定委員会による重度デング熱。デング熱症例裁定委員会（ＤＣＡＣ）は、４名のメンバー：投票権のある議長１名、投票権のあるメンバー２名、及び独立した投票権のない統計学者１名からなった。ＤＣＡＣの投票権のあるメンバー３名は全て医師であり、臨床デング熱専門家である。ＤＣＡＣのメンバーは、試験の治験責任医師ではなく、試験データのそれらのレビューにバイアスをかけるであろういかなる利益相反も有さない。全ての入院していない症例は、非重度とみなした。ウイルス学的に確認された入院したデング熱症例に盲検法で適用されたＤＣＡＣの重度デング熱症例基準は以下のとおりである：１）出血異常、重度とみなされる場合には、輸血、鼻腔内パッキング、ホルモン療法、または脳などの重要な器官に生じた出血などの出血発症に対して必要とされる重要な介入が必要である；２）血漿漏出、重度とみなされる場合には、血漿漏出及び機能障害の両方の証拠が必要である（血漿漏出には、臨床的証拠、放射線学的証拠、または正常値もしくはベースラインより＞２０％上昇したヘマトクリットが含まれる；ショックまたは呼吸困難として定義される機能障害）；３）肝臓、重度とみなされる場合には、肝炎及び機能障害の両方の証拠が必要である（アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ［ＡＳＴ］またはアラニンアミノトランスフェラーゼ［ＡＬＴ］＞１０正常範囲の上限［ＵＬＮ］として定義される肝炎；プロトロンビン［ＰＴ］＞１．５ＵＬＮ以上または低アルブミン血症として定義される機能障害）；４）腎臓、血清クレアチニン＞ＵＬＮの２．５倍または透析を必要とするもの；５）心臓、心臓に内在する異常（すなわち、血管内容積減少に起因しない）であり、機能障害の証拠を有するもの（内在する異常の例：心筋炎、心膜炎、及び心筋心膜炎；機能障害の例：不規則な心拍リズムをもたらす新たな伝導異常［すなわち、一過性の第１度心ブロックではない］）；６）中枢神経系、単純な熱性痙攣または短時間のせん妄を除く任意の異常；７）ショック、重度とみなされる全てのショック症例。（基準３、４、５、６のうち）少なくとも１つの機能障害が存在する必要があるが、データの全体性がその評価においてメンバーによって考慮された。

【0473】

パート１及びパート２のさらなる結果を表７ａ～ｃに示す。

【0474】

【表7-1】

【0475】

【表7-2】

【0476】

【表8-1】

【0477】

【表8-2】

【0478】

【表9】

【0479】

【表10】

【0480】

安全性セットデータにおけるパート１の試験期間中のウイルス学的に確認されたデング熱症例の臨床的徴候及び症状を表８に示す。

【0481】

【表11-1】

【0482】

【表11-2】

【0483】

ｅ）免疫原性
最も高い幾何平均力価（ＧＭＴ）がベースラインの血清状態に関係なくＤＥＮＶ－２に対して観察された（表１０）。第２の用量の１ヵ月後にベースライン血清陰性者で極めて高い四価血清陽性率（９９．５％）（表９及び１０）が観察された。

【0484】

４つのデング熱血清型の各々についての血清陽性率（血清陽性対象の％）は、１日目（０ヵ月目）でのワクチン接種前、３０日目（１ヵ月目）での第１のワクチン接種後、９０日目（３ヵ月目）でのワクチン接種前、１２０日目（４ヵ月目）での第２のワクチン接種後、２７０日目（９ヵ月目）、４５０日目（１５ヵ月目）、次いで１年毎に決定される。０日目、３０日目、９０日目、１２０日目、及び２７０日目の血清陽性率（参加者％、９５％ＣＩ）を、免疫原性データにおけるデング熱血清型パープロトコルセット毎に表９に示す。

【0485】

３つ以上の血清型（三価）に対するデング熱血清型別及び４つ全ての血清型（四価）に対するデング熱血清型別の血清陽性率（対象％、９５％ＣＩ）を、０日目、３０日目、９０日目、１２０日目、及び２７０日目の免疫原性データにおけるパープロトコルセット毎に表９に示す。ベースライン血清陰性者は、第２の投与の６ヵ月後の四価血清陽性率が高かった（＞９１％）。

【0486】

【表12-1】

【0487】

【表12-2】

【0488】

各デング熱血清型についての中和抗体の幾何平均力価（ＧＭＴ）（マイクロ中和試験［ＭＮＴ］）は、１日目（０ヵ月目）でのワクチン接種前、３０日目（１ヵ月目）での第１のワクチン接種後、９０日目（３ヵ月目）でのワクチン接種前、１２０日目（４ヵ月目）での第２のワクチン接種後、２７０日目（９ヵ月目）、４５０日目（１５ヵ月目）、次いで１年毎に決定される。０日目、３０日目、９０日目、１２０日目、及び２７０日目についての免疫原性データのためのデング熱血清型パープロトコルセット毎の幾何平均力価（９５％ＣＩ）を表１０に示す。

【0489】

【表13-1】

【0490】

【表13-2】

【0491】

各ワクチン接種後３０日以内に熱性疾病を有する対象において３つのＰＣＲ：デング熱検出ＲＴ－ＰＣＲ、ワクチンスクリーニングＰＣＲ及びＴＤＶシーケンシングによってワクチンウイルス血症を評価した。
ｆ）安全性

【0492】

重篤有害事象（ＳＡＥ）の比率は、ワクチン群及びプラセボ群で同様であった（それぞれ参加者の３．１％及び３．８％；表１１）。１例のワクチン接種者及び４例のプラセボレシピエントは、治験責任医師によって盲検化治験薬の投与に関連するものとみなされたＳＡＥを経験した（２例が過敏症を経験し、２例がデング熱と診断され、１例がＤＨＦと診断された）。パート１中に５件の死亡があり、全てが治験薬または試験手順と無関係であるとみなされた。自発的ＡＥの合計比率は、ワクチン群とプラセボ群との間で同様であった。好ましい期間によって任意の用量の４週間以内に最も一般的に（ワクチンレシピエントの≧１％）報告された自発的ＡＥは、発熱（ワクチン群１．５％；プラセボ１．４％）、鼻咽頭炎（ワクチン２．７％；プラセボ３．０％）、上気道感染症（ワクチン２．６％；プラセボ２．９％）、及びウイルス感染症（ワクチン１．１％；プラセボ０．９％）であった。非自発的局所反応は、ワクチン群でより頻繁に報告された。

【0493】

【表14】

【0494】

【表15-1】

【0495】

【表15-2】

【0496】

【表16】

【0497】

【表17-1】

【0498】

【表17-2】

【0499】

追加的に、上述の第ＩＩＩ相試験の後続試験としてのブースター用量の有効性を評価する試験も可能である。この場合、ブースターは、上述の第ＩＩＩ相試験の十分に大きなサブセット（例えば、少なくとも２０例の対象または少なくとも２００例の対象を含む）において、第２の用量から４～４．５年後に投与する。

【0500】

実施例４：Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチンの併用投与
４．１ 本試験の導入、目的、及び目標
デング熱疾患及びＡ型肝炎ウイルス（ＨＡＶ）の非流行国の１８～６０歳の約９００例の健康な成人対象（全年齢範囲にわたり分布）でランダム化オブザーバー盲検第３相試験を行って、四価デング熱ワクチンＴＤＶ（皮下（ＳＣ）注射）の２回用量、ならびにＨＡＶワクチン（不活化ＨＡＶを含む；筋肉内（ＩＭ）注射））及びＴＤＶ（ＳＣ注射）の単回用量の同日同時投与の免疫原性及び安全性を検討した。

【0501】

本試験の目的は、ＨＡＶ及びデング（ＤＥＮＶ）流行国への海外渡航前に、旅行用ワクチンとしてＨＡＶワクチンをＴＤＶと同じ日に安全に同時に投与することができるかを評価することであった。

【0502】

本試験の主要な目的は、ワクチン接種から１ヵ月後のＤＥＮＶ／ＨＡＶ－ナイーブ対象において、ＴＤＶ１回用量と同日にＨＡＶワクチン１回用量を同日同時に投与した場合の免疫応答が、同日にプラセボを同日同時に投与した場合と比較して、非劣性（ＮＩ）を示すことであった。

【0503】

本試験の副次目的は、ＤＥＮＶ／ＨＡＶ－ナイーブ対象におけるＴＤＶの１回用量後のＴＤＶ誘発免疫原性を説明すること、ＤＥＮＶ／ＨＡＶ－ナイーブ対象における９０日間隔のＴＤＶの２回用量後のＴＤＶ誘発免疫原性を説明すること、ＤＥＮＶ／ＨＡＶ－ナイーブ対象におけるＨＡＶワクチン誘発免疫原性を説明すること、及び全試験群における各ワクチン注射後の安全性プロファイルを評価することであった。

【0504】

４．２ 適格基準
選択基準には以下が含まれる：
１．参加者は１８～６０歳（両端を含む）とする。
２．病歴、身体検査（バイタルサインを含む）、及び治験責任医師の臨床判断により、試験への参加時に健康状態が良好と判定される参加者。
３．参加者は、地域の規制要件に従って試験の特質が説明された後、任意の試験手順の開始前に、同意書／書面によるインフォームドコンセント用紙及び任意の必要とされるプライバシーの承認に署名し、日付を記入する。
４．試験手順を遵守することができ、追跡調査の継続期間中に対応可能な参加者。

【0505】

除外基準には以下が含まれる：
１．ワクチン接種予定日から３日以内に口腔温が上昇した（≧３８℃または１００．４°Ｆ）参加者。
２．ワクチン成分（治験用ワクチンまたはプラセボの賦形剤を含む）に対する既知の過敏性またはアレルギーがあること。
３．行動障害もしくは認知障害または精神疾患を有し、試験に参加する能力に干渉する可能性があると治験責任医師が判断する参加者。
４．進行性または重度の神経学的障害、発作性障害、または神経炎症性疾患（例えば、ギラン・バレー症候群）の任意の既往歴がある参加者。
５．試験の結果に干渉する可能性があるか、または試験への参加により参加者に追加のリスクをもたらす可能性がある、既往歴または任意の疾病を有する参加者。
６．以下を含む、既知のまたは疑われている免疫機能の障害／変化：
１．１日目（０ヵ月目）の６０日前以降に経口ステロイドを慢性使用していること（≧１２週間の２０ｍｇ／日のプレドニゾン／≧２週間の≧２ｍｇ／ｋｇ体重／日のプレドニゾンと同等）（吸入、経鼻、または外用コルチコステロイドの使用は認められる）。
２．１日目（０ヵ月目）の６０日前以降に非経口ステロイドを受けていること（≧１２週間の２０ｍｇ／日のプレドニゾン／≧２週間の≧２ｍｇ／ｋｇ体重／日のプレドニゾンと同等）
３．１日目（０ヵ月目）の３ヵ月前以降にイムノグロブリン及び／または任意の血液製剤の投与を受けたか、または試験中に投与を受ける予定があること。
４．１日目（０ヵ月目）の６０日前以降に免疫刺激剤を受けていること。
５．１日目（０ヵ月目）の６ヵ月前以降に抗がん剤化学療法または放射線療法などの免疫抑制療法を受けていること。
６．ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染またはＨＩＶ関連疾患。
７．Ａ型肝炎ウイルス（ＨＡＶ）感染。
８．Ｃ型肝炎ウイルス感染。
９．遺伝性免疫不全。
７．脾臓または胸腺の機能異常。
８．既知の出血性素因、または出血時間の持続に関連し得る任意の状態を有する参加者。
９．任意の重篤な慢性または進行性の疾患を有すると治験責任医師が判断する参加者（例えば、新生物、インスリン依存性糖尿病、心疾患、腎疾患、または肝疾患）。
１０．体格指数（ＢＭＩ）が３５ｋｇ／ｍ＾２（＝体重（ｋｇ）／［身長（ｍ^２）］）以上の参加者。
１１．１日目（０ヵ月目）の３０日前に別の治験薬での任意の臨床試験への参加またはこの試験の実行中の任意の時点で別の臨床試験に参加する参加者。
１２．本試験登録の１４日前以降（不活化ワクチンの場合）もしくは２８日前以降（生ワクチンの場合）に他のワクチンを接種した参加者、または本試験ワクチン投与後２８日以内に他のワクチンを接種する予定のある参加者。
１３．過去にＨＡＶワクチン接種を受けていること（臨床試験中にまたは承認済み製品で）。
１４．試験実施に関与した参加者またはその一親等の親族。
１５．過去２年以内に物質またはアルコールの乱用歴を有する参加者。
１６．妊娠中または授乳中の女性参加者。
１７．性的に活動的であり、１日目（０ヵ月目）以前の少なくとも２ヵ月以上、許容される避妊方法のいずれも使用していない妊娠可能な女性。
１．妊娠可能とは、初潮を迎えた後、以下の状態：両側卵管結紮（少なくとも１年以上前）、両側卵巣摘出（少なくとも１年以上前）、または子宮摘出、のいずれにも該当しない状態として定義される。
２．許容される避妊方法は、以下のうちの１つ以上のものとして定義される。
ｉ． ホルモン系避妊具（例えば、経口薬、注射、経皮パッチ、インプラント、子宮頸管リング）。
ｉｉ． バリア法（殺精子剤入りコンドームまたは殺精子剤入りダイヤフラム）を性交時に毎回行うこと。
ｉｉｉ． 子宮内デバイス（ＩＵＤ）。ｉｖ． 精管切除を受けたパートナーとの一夫一婦の関係（パートナーは、１日目［０ヵ月目］の少なくとも６ヵ月前には精管切除を受けていなければならない）。
その他の避妊法については、治験依頼者との合意において検討し、規制当局及び適切な倫理委員会による実質的な修正が承認された後にのみ実施することができる。
１８．性的に活発であり、試験ワクチンの最終用量から最大６週間後（９０日目［３ヵ月目］）までの許容される避妊法の使用を拒否する妊娠可能な女性。加えて、この期間中は卵子を提供しないよう勧告しなければならない。
１９．任意の妊娠検査が陽性または不確定であること。
２０．任意のフラビウイルス（デング熱ウイルス、黄熱病（ＹＦ）ウイルス、日本脳炎（ＪＥ）ウイルス、またはダニ媒介脳炎を含む）に対するワクチン接種歴及び（試験実施中の）接種予定。
２１．デング熱ウイルスまたは他のフラビウイルス（例えば、西ナイル［ＷＮ］ウイルス）の候補ワクチンの臨床試験に参加したことがあること（ただし、このような試験でプラセボを受けた参加者は除く）。
２２．フラビウイルス（例えば、デング熱、ジカ熱、ＹＦ熱、ＪＥ熱、ＷＮ熱、ダニ媒介脳炎、またはマレーバレー脳炎）に現在感染しているまたは過去に感染した参加者、及びデング熱の流行地域に長期間（１年以上）居住した経験がある参加者。
２３．製品情報に明記されているＨＡＶワクチンの禁忌、警告、及び／または注意事項に該当する参加者。

【0506】

４．３ 試験設計及びワクチン接種
対象を以下の３つの試験群（１群当たり３００例の対象）のうちの１つに均等にランダム化した（１：１：１の比）：
－第１群：１日目（０ヵ月目）にＨＡＶワクチン（ＩＭ）及びプラセボ（ＳＣ）を同日同時に投与し、９０日目（３ヵ月目）にプラセボ（ＳＣ）を投与する。
－第２群：１日目（０ヵ月目）にＴＤＶ（ＳＣ）及びプラセボ（ＩＭ）を同日同時に投与し、９０日目（３ヵ月目）にＴＤＶ（ＳＣ）を投与する。
－第３群：１日目（０ヵ月目）にＴＤＶ（ＳＣ）及びＨＡＶワクチン（ＩＭ）を同日同時に投与し、９０日目（３ヵ月目）にＴＤＶ（ＳＣ）を投与する。
研究設計の詳細を図６に示す。第１のワクチン接種の２８日前までに登録を行い、抗ＨＡＶ抗体のスクリーニングのために血液を採取した。１日目に、ワクチン接種前の血液サンプルを採取した。３０日目（１日目の第１のワクチン接種後）に、ワクチン接種後の血液サンプルを採取した。１２０日目（１日目の第１のワクチン接種後）に、別の血液サンプルを採取した。安全性の追跡調査は（１日目の第１回のワクチン接種後から）２７０日目に行った。

【0507】

ＴＤＶを実施例１に記載のように調製した。ＴＤＶの各皮下用量は０．５ｍＬであり、各用量におけるＴＤＶワクチン中の４つのデング熱血清型の濃度は、ＴＤＶ－１、ＴＤＶ－２、ＴＤＶ－３、及びＴＤＶ－４のそれぞれ５．１ｌｏｇ_１０ＰＦＵ／０．５ｍｌ、４．５ｌｏｇ_１０ＰＦＵ／０．５ｍｌ、５．４ｌｏｇ_１０ＰＦＵ／０．５ｍｌ、及び５．９ｌｏｇ_１０ＰＦＵ／０．５ｍｌであった。１回の皮下用量は、プルロニックＦ１２７（１０．６ｍｇ／ｍｌ）、トレハロース二水和物（１７０ｍｇ／ｍｌ）、及びヒト血清アルブミン（１．０８ｍｇ／ｍｌ）を含む０．５ｍｌの水溶液に分散させたＴＤＶを含む。

【0508】

ＨＡＶワクチンは、Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来する不活化Ａ型肝炎ウイルス（上記定義参照）を含み、上述のようにＨＡＶＲＩＸ（登録商標）という商品名で市販されている。第１）群及び第３）群に投与したＨＡＶワクチンの筋肉内用量は１ｍｌであり、各１ｍｌの用量は約１４４０ＥＬ．Ｕのウイルス抗原活性を有し、ウイルス抗原を水酸化アルミニウムの形態で０．５ｍｇのアルミニウムに吸着させた。Ａ型肝炎ワクチンは、リン酸緩衝生理食塩水に溶解したアミノ酸補充物（約０．３％ｗ／ｖ）の形態及びポリソルベート（約０．０５ｍｇ／ｍｌ）の形態で賦形剤を含む。

【0509】

同日同時に、試験ワクチンを反対側の腕に注射した。注射用生理食塩水（０．９％ＮａＣｌ）をプラセボとして使用した。抗ＨＡＶ抗体検査用の血液サンプルを全ての対象からスクリーニング時に採取して、ワクチン接種の２８日前までに抗ＨＡＶ抗体について陽性である対象を除外した（図６参照）。全ての対象を９０日目（３ヵ月目）の第２のワクチン接種から６ヵ月間追跡調査するため、試験継続期間は、各対象につき２７０日または９ヵ月となる（スクリーニング期間を含まない）。この試験の枠外では、試験手順の完了後、２７０日目（９ヵ月目）に第１群及び第３群の対象にＨＡＶワクチンブースター用量を提供する。

【0510】

第１の試験ワクチン接種前（１日目（０ヵ月目））、第１の試験ワクチン接種の１ヵ月後（３０日目（１ヵ月目））、及び第２の試験ワクチン接種の１ヵ月後（１２０日目（４ヵ月目））に採取した血液サンプルを用いて、デング熱中和抗体（マイクロ中和試験（ＭＮＴ５０））を測定した。第１の試験ワクチン接種前（１日目（０ヵ月目））及び第１の試験ワクチン接種の１ヵ月後（３０日目（１ヵ月目））に、抗ＨＡＶ抗体の測定（酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ））用の血液サンプルを採取した。

【0511】

４．４ 主要エンドポイント
主要エンドポイントには、ベースラインでＨＡＶ／ＤＥＮＶ－ナイーブの対象のうち、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）による測定において３０日目（１ヵ月目）時にＨＡＶに対し血清保護されている対象の割合を含めた。言い換えれば、主要エンドポイントには血清保護率（ＳＰＲ）を含めた。血清保護は、血清抗ＨＡＶ抗体レベル≧１０ｍＩＵ／ｍＬとして定義される。ＨＡＶ／ＤＥＮＶに対する免疫学的ナイーブ性は、抗ＨＡＶ抗体レベル＜１０ｍＩＵ／ｍＬ及び４つ全てのデング熱血清型についての相互中和力価＜１０として定義される。

【0512】

４．５ 副次エンドポイント
ａ）免疫原性に関する副次エンドポイント

【0513】

副次エンドポイントには、ベースラインでＨＡＶ／ＤＥＮＶ－ナイーブの対象において決定される３０日目（１ヵ月目）及び１２０日目（４ヵ月目）での４つのデング熱血清型の各々についての中和抗体の幾何平均力価（ＧＭＴ）（マイクロ中和試験（ＭＮＴ５０））、３０日目（１ヵ月目）及び１２０日目（４ヵ月目）での４つのデング熱血清型の各々について血清陽性であるベースラインでＨＡＶ／ＤＥＮＶナイーブの対象の割合（血清保護率）、及びベースラインでＨＡＶ／ＤＥＮＶナイーブの対象の３０日目（１ヵ月目）での抗ＨＡＶ抗体の幾何平均濃度（ＧＭＣ）を含めた。

【0514】

デング熱ウイルスについての血清陽性は、免疫原性に関する副次エンドポイント内の４つのデング熱血清型のいずれかについての相互中和力価≧１０として定義される。

【0515】

ｂ）安全性に関する副次エンドポイント

【0516】

安全性に関する副次エンドポイントには、各試験ワクチン接種から７日後の非自発的局所有害事象（ＡＥ）の頻度及び重症度、各試験ワクチン接種から１４日後の非自発的全身性ＡＥの頻度及び重症度、各試験ワクチン接種から２８日後の自発的ＡＥが発生した対象のパーセンテージ、試験期間中に重篤な有害事象（ＳＡＥ）が発生した対象のパーセンテージ、ならびに試験期間中に診療を要した有害事象（ＭＡＡＥ）が発生した対象のパーセンテージを含めた。

【0517】

４．６ 本試験の分析セット
以下の表１２は、本試験の各分析セットを示している。合計で、「全てのスクリーニングを受けた」群に属する対象１１９９例には、スクリーニングで失敗したかどうかにかかわらず、インフォームドコンセントに署名した全ての対象が含まれた。最初のスクリーニングの後、９００例の対象を「ランダム化セット」に含めた。これは、ＩＰのいかなる用量を受けたかにかかわらず、ランダム化した全ての対象を含むセットである。８９７例の対象からなる安全性セットには、ＩＰの１回以上の用量を受けた全てのランダム化された対象が含まれる。免疫原性対象には合計３５９例が含まれ、以下の４つのサブセットに分かれている。ＨＡＶ－ｆｕｌｌ分析セット（ＨＡＶ－ＦＡＳ）には、免疫原性サブセットに含まれるランダム化対象のうち、試験ワクチンを１回以上接種し、１日目及び３０日目の抗ＨＡＶ抗体測定値が利用可能な全ての対象が含まれる。ＨＡＶパープロトコルセット（ＨＡＶ－ＰＰＳ）には、重大なプロトコル違反がない全てのＨＡＶ－ＦＡＳのＨＡＶ－及びＤＥＮＶ－ナイーブの対象が含まれる。ＴＤＶ－ｆｕｌｌ分析セット（ＴＤＶ－ＦＡＳ）には、免疫原性サブセットに含まれるランダム化対象のうち、試験ワクチンを１回以上接種し、１日目の１つ以上の用量後測定値が利用可能な全ての対象が含まれる。ＴＤＶパープロトコルセット（ＴＤＶ－ＰＰＳ）は、重大なプロトコル違反がない１９７例からなり、全てのＴＤＶ－ＦＡＳのＨＡＶ－及びＤＥＮＶ－ナイーブの対象が含まれる。

【0518】

【表18-1】

【0519】

【表18-2】

【0520】

免疫原性サブセット内の総数３５９例の対象（１回以上のワクチン接種を受けた全ての対象を含む）のうち、１３例については、ＨＡＶの有効なベースライン及び投与後（３０日目）の測定値が得られなかったため、ＨＡＶ－ＦＡＳから除外した。さらに、ＨＡＶ－ＰＰＳには、重大なプロトコル違反がなかったＨＡＶ－ＦＡＳの全てのＨＡＶ－及びＤＥＮＶ－ナイーブが含まれる。主要な非劣性目的のために分析した対象は、ＨＡＶ／Ｐｂｏ群及びＨＡＶ／ＴＤＶ群のＨＡＶ－ＰＳ対象に基づいているが、これら２つの群（ＨＡＶ／Ｐｂｏ群及びＨＡＶ／ＴＤＶ群）のＨＡＶ－ＰＳに基づき、一部の対象については、３０日目の測定がプロトコル定義受診ウィンドウ外であったために、３０日目の分析には含めなかった（ＨＡＶ／Ｐｂｏ群の対象６例及びＨＡＶ／ＴＤＶ群の対象２例）。そのため、主要な非劣性目的の分析のためにＴＤＶ／Ｐｂｏ群には合計６９例、ＨＡＶ／ＴＤＶ群には合計７９例の対象が含まれた。

【0521】

免疫原性サブセット内の総数３５９例の対象（１回以上のワクチン接種を受けた全ての対象を含む）のうち、１１例については、ＴＤＶの有効なベースライン及び少なくとも１回の投与後の測定値（３０日目及び／または１２０日目）が得られなかったため、ＴＤＶ－ＦＡＳから除外した。さらに、総数１５１例の対象については、ベースラインでＨＡＶ及びＤＥＮＶ－ナイーブである、第１及び第２の両方のワクチン接種を受けていない、第２のワクチン接種（通常は９０日目）がウィンドウ－１５／＋２５日の範囲外であった、ならびに重大なプロトコル違反があった、という理由により、ＴＤＶ－ＰＳから除外した。

【0522】

４．７ ＨＡＶベースライン血清状態ならびに人口統計学的及びベースラインの特徴
ベースラインＨＡＶ抗体レベルを評価した安全性セットには、合計３６２例の対象が含まれ、このうち２７．３％がベースラインでＨＡＶ血清陽性であった（表１３参照）。

【0523】

ＨＡＳ－ＦＡＳには、ベースラインＨＡＶ抗体レベルが評価された合計３４６例の対象が含まれた（表１３参照）。ＨＡＶナイーブ性は、抗ＨＡＶ抗体（ａｂ）レベル＜１０ｍＩＵ／ｍｌ未満として定義した。しかし、血清分析に使用したＥＬＩＳＡは、１２．５ｍＩＵ／ｍｌ未満のレベルでは検証することができなかった。定性スクリーニング検査は、事実上、定量下限値７０ｍＩＵ／ｍｌに相当する仕様であった。これらの基準を考慮すると、ベースラインのＨＡＶ抗体レベルを評価した当該ＨＡＳ－ＦＡＳの対象のうち、７２．５％がベースラインでＨＡＶ－ナイーブであった（表１３参照）。

【0524】

【表19】

【0525】

ＨＡＶ－ＰＰＳには、総数２２７例の対象が含まれた（表１４参照）。ＨＡＶ－ＰＰＳの対象総数のうち、ＤＥＮＶ－及びＨＡＶ－ナイーブである対象の平均年齢は３４．８歳であった。ＨＡＶ－ＰＰＳの対象総数のうち、３１．３％が女性であった（表１４参照）。合計で、ＨＡＶ－ＰＰＳの総対象の９７．８％がヒスパニックまたはラテン系「以外」の民族であり、特定的には、ＨＡＶ－ＰＰＳの８９．９％が「白人ヨーロッパ系」人種であった。これは特に、ＨＡＶ及びデング熱の非流行国の旅行者の状況を反映するためである（表１４参照）。

【0526】

安全性セットには、合計８９７例の対象が含まれた（表１４参照）。安全性セットの対象総数の平均年齢は３５．４歳で、そのうち３１．３％が女性であった。合計で、ＨＡＶ－ＰＰＳの総対象の９７．７％がヒスパニックまたはラテン系「以外」の民族であり、特定的には、ＨＡＶ－ＰＰＳ参加者の８７．１％が「白人ヨーロッパ系」人種であった。これは特に、ＨＡＶ及びデング熱の非流行国の旅行者の状況を反映するためである（表１４参照）。

【0527】

【表20】

【0528】

４．８ 試験結果
ａ）主要エンドポイント及び感度分析

【0529】

本試験は、ＨＡＶ及びＴＤＶの同日同時投与の非劣性という主要な目的を満たすことに成功した。表１５は、第１のワクチン接種（１日目）から３０日後の第１群（ＨＡＶ／Ｐｂｏ投与）及び第３群（ＨＡＶ／ＴＤＶ投与）の血清保護率（ＳＰＲ）、３０日目のＨＡＶ／Ｐｂｏ群及びＨＡＶ／ＴＤＶ群のＳＰＲ差、ならびにＨＡＶ及びＤＥＮＶ－ベースラインナイーブ対象についてのこれらのＳＰＲ差の信頼区間（ＣＩ）を示している。これらの値（ＳＰＲ、ＳＰＲ差；ＣＩ）を本試験の主要エンドポイント評価に使用した。表１５はさらに、対象のベースラインＨＡＶ／ＴＤＶ血清値が異なった（すなわち、混在した）場合の３つの感度分析の結果（非劣性評価にも使用）についてもこれらの値を示している。本試験では、第１群（１日目にＨＡＶ及びプラセボを受けた）と第３群（１日目にＨＡＶ及びＴＤＶを受けた）との間の血清保護率（ＳＰＲ）の差において、ニューカムスコア法を用いて算出した両側９５％信頼区間の上限が１０％の非劣性マージンより低い場合に、同日同時に投与したＡ型肝炎ワクチン及び四価デング熱ワクチンが非劣性であると結論付けた。この基準は、表１５の各群で満たされている。主要エンドポイント群では、ＳＰＲ差の９５％ＣＩの上限は４．３１％であり、１０％の非劣性マージンを下回っている（表１５の上から２行目参照）。

【0530】

上述のように、感度分析１～３を使用して、ベースラインでデング熱及び／またはＡ型肝炎について血清陽性であった対象を含む集団を評価した。これは特定的には、非流行国における「現実の」トラベルクリニックの特定的には状況を反映しており、対象、すなわちデング熱及びＨＡＶの流行国に行く予定の旅行者は、旅行前のワクチン接種を要請する以前のＨＡＶ及び／またはデング熱の血清状態を常に把握しているわけではない。

【0531】

感度分析１～３においても、同日同時投与の非劣性目的は満たされた（ＳＰＲ差の９５％ＣＩの上限は３．２１％、２．９３％、２．５５％であり、各々が非劣性マージンの１０％未満である。）さらに、ＨＡＶ／ＴＤＶ群のＳＰＲ（それぞれ９８．８％、９９．０％、９９．１％、表１５参照）は、ＨＡＶ／Ｐｂｏ群のＳＰＲ（それぞれ９６．２％、９６．９％、９７．２％、表１５参照）よりもそれぞれ高かった。

【0532】

そのため、ＨＡＶ及び全てのデング熱血清型に関してベースライン血清状態が混合している（及びベースラインがナイーブな）対象にＨＡＶワクチン及びＴＤＶの同日同時に投与することが非劣性であることから、ＨＡＶワクチン及びＴＤＶを同日同時に投与する前に、２つの疾患の各々に関する対象のベースライン血清状態を判定する必要も知る必要もない。

【0533】

【表21】

【0534】

ｂ）免疫原性に関する副次エンドポイント

【0535】

表１６は、ＨＡＶ／ＴＤＶ、ＴＤＶ及びプラセボ、ならびにＨＡＶ及びプラセボ（Ｐｂｏ）をそれぞれ受けた群を含むＤＥＮＶ－ＰＳの対象において、１日目の第１のワクチン接種前、（１日目の）第１のワクチン接種から３０日目、（１日目の）第１のワクチン接種から１２０日目に測定したときの（４つのデング熱血清型ＤＥＮＶ１～ＤＥＮＶ４の各々に関する）ＧＭＴを示している。表１６は、全てのデング熱のＧＭＴに関して、（ＨＡＶ／ＴＤＶを受けた）同日同時の投与群に有利なポジティブな傾向を示している。

【0536】

前述の同日同時の投与に有利なポジティブな傾向及び同日同時に投与したワクチンの３０日目の相乗性は、表１７でも確認される。

【0537】

【表22】

【0538】

【表23】

【0539】

ｃ）安全性に関する副次エンドポイント

【0540】

安全性セットについては、試験期間全体にわたり、非自発的有害事象、非自発的全身性有害事象、自発的有害事象、及び重篤な有害事象を調べた。表１８ａ～２１ｃは、安全性の各副次エンドポイントに関する安全性セットの試験結果を示している。

【0541】

【表24】

【0542】

【表25】

【0543】

【表26】

【0544】

【表27】

【0545】

【表28】

【0546】

【表29】

【0547】

【表30】

【0548】

【表31-1】

【0549】

【表31-2】

【0550】

【表32】

【0551】

本発明の第１の項目リスト
１．対象または対象集団におけるＡ型肝炎及びデング熱疾患を予防する方法であって、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に投与することを含み、前記単位用量が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、前記方法。
２．前記Ａ型肝炎ワクチンが不活化ウイルスワクチンである、項目１に記載の方法。
３．前記デング熱ワクチン組成物が、０．５ｍＬの医薬的に許容される希釈剤で再構成すると以下を含む、項目１または２に記載の方法：
（ｉ）キメラ型デング熱血清型２／１株の場合、少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、
（ｉｉ）デング熱血清型２株の場合、少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、
（ｉｉｉ）キメラ型デング熱血清型２／３株の場合、少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、及び
（ｉｖ）キメラ型デング熱血清型２／４株の場合、少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度。
４．前記対象集団または前記対象が、全てのデング熱血清型に対し血清陰性である、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
５．前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量が皮下注射によって投与され、前記Ａ型肝炎ワクチンが筋肉内注射によって投与され、前記注射が好ましくは腕に投与され、より好ましくは腕の三角筋領域に投与される、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
６．前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンが、異なる解剖学的部位、例えば反対側の腕に投与される、項目５に記載の方法。
７．前記デング熱ワクチン組成物の２回の前記単位用量が、１２ヵ月以上の範囲内、または６ヵ月以内、または３ヵ月以内に投与される、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
８．前記デング熱ワクチン組成物の２回の前記単位用量、及び前記Ａ型肝炎ワクチンの１回用量を、特定的には以下のスケジュールに従って、投与することを含む、項目７に記載の方法：
－０日目に、前記デング熱ワクチン組成物の第１の単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンの第１の同時投与、ならびに
－前記第１の同時投与の後に（例えば、約３ヵ月後に）、前記デング熱ワクチン組成物の第２の単位用量の第２の投与。
９．前記対象集団または前記対象が２～６０歳である、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
１０．前記対象集団または前記対象が、デング熱流行地域の出身である、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
１１．前記対象集団または前記対象が、デング熱非流行地域、好ましくはデング熱非流行地域及びＡ型肝炎非流行地域の出身である、項目１～９のいずれか１項に記載の方法。
１２．前記Ａ型肝炎ワクチンが、Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来するＡ型肝炎ウイルスを含む、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
１３．前記Ａ型肝炎ワクチンが不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、前記不活化Ａ型肝炎ウイルスがＡ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来する、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
１４．前記Ａ型肝炎ワクチンが不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、前記不活化Ａ型肝炎ウイルスがアルミニウムに吸着されている、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
１５．前記アルミニウムが、水酸化アルミニウムまたはアルミニウムヒドロキシホスフェート硫酸塩である、項目１４に記載の方法。
１６．前記Ａ型肝炎ワクチンが不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、前記Ａ型肝炎ワクチンが、リン酸緩衝生理食塩水と、その中にアミノ酸形形態及びポリソルベート形態で溶解した賦形剤とを含む、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
１７．前記Ａ型肝炎ワクチンが、ウイルス抗原を発現するＡ型肝炎ウイルスを５００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）～２０００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）の範囲の濃度で含む、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
１８．前記方法が、前記Ａ型肝炎ワクチンの前記投与前及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の前記投与前に、前記対象集団または前記対象が過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定するステップを含まない、あるいは
前記Ａ型肝炎ワクチンの前記投与前及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の前記投与前に、前記対象集団または前記対象のＡ型肝炎の血清状態及び／またはデング熱の血清状態が不明である、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
１９．前記方法が、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を投与するステップの前、間、及び後のいずれの時点でも、前記対象集団または前記対象が過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定するステップを含まない、あるいは
前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の投与のステップの前、間、または後のいずれの時点でも、前記対象集団または前記対象の前記Ａ型肝炎の血清状態及び／または前記デング熱の血清状態が不明である、項目１８に記載の方法。
２０．前記方法が、以下のステップからなる一次ワクチン接種を含む、先行項目のいずれか１項に記載の方法：
（Ａ）デング熱感染及びＡ型肝炎感染に対する保護の必要性から前記四価デング熱ウイルス組成物の前記単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンの投与を行う対象を、過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定することなく選択すること、ならびに
（Ｂ）前記対象に、前記四価デング熱ウイルス組成物の第１の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンを投与すること、ならびに任意選択で
（Ｃ）前記対象に、前記四価デング熱ウイルス組成物の少なくとも１回のさらなる単位用量を、前記第１の単位用量の投与から３～１２ヵ月以内に投与すること、ならびに任意選択で
（Ｄ）前記対象に、前記Ａ型肝炎ワクチンの少なくとも１回のさらなる用量を、前記第１の単位用量の投与から６～１８ヵ月以内に投与すること。
２１．前記方法が、以下のステップからなる一次ワクチン接種を含む、先行項目のいずれか１項に記載の方法：
（Ａ）デング熱感染及びＡ型肝炎感染に対する保護の必要性から前記四価デング熱ウイルス組成物の前記単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンの投与を行う対象を選択すること、ならびに
（Ｂ）前記対象に、前記四価デング熱ウイルス組成物の第１の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンを投与すること、ならびに
（Ｃ）前記対象に、前記第１の単位用量の投与から約６ヵ月時及び約１２ヵ月時に、前記四価デング熱ウイルス組成物を２回のさらなる単位用量を投与し、前記第１の単位用量の投与の約６ヵ月時または約１２ヵ月時のいずれかに、前記Ａ型肝炎ワクチンを投与すること。
２２．ステップ（Ａ）が、過去にＡ型肝炎に感染していたかの判定なしで行われる、項目２１に記載の方法。
２３．前記複合ワクチン組成物を医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）が、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、前記ｐｆｕ／０．５ｍｌの総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、１０％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、少なくとも６％、少なくとも８％、または少なくとも１０％、または少なくとも１２％、または少なくとも１４％、または少なくとも１６％、または少なくとも１８％である、項目３～２２のいずれか１項に記載の方法。
２４．前記方法が、デング熱ワクチン組成物とＡ型肝炎ワクチンとの間の適合性をもたらす、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
２５．前記方法が、デング熱ワクチン組成物とＡ型肝炎ワクチンとの間の相乗作用をもたらす、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
２６．前記方法が、１つの対象集団及び１つの対照対象集団に分けられた少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で非劣性をもたらし、前記対象集団が、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に受け、前記対照対象集団が、Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボ投与物を同日同時に受ける、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
２７．前記Ａ型肝炎ワクチンが、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、投与（０／１日目）から３０日後に、少なくとも９５％、または少なくとも９８％のＡ型肝炎の血清保護率をもたらす、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
２８．前記方法が、Ａ型肝炎の単剤投与に対するＡ型肝炎の血清保護率の差をもたらし、前記差が、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で決定され、
前記健康な対象が、
ａ）前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団と、
ｂ）Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボの投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または５０例の対象の対照対象集団とに分けられ、
前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対照対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率と、前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率との間の前記差が決定され、
両側９５％信頼区間内の前記差の上限が１０％未満である、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
２９．前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性である少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、前記Ａ型肝炎ワクチンが、投与（０／１日目）から３０日後に、少なくとも９５％、または少なくとも９８％、または少なくとも９９％のＡ型肝炎血清保護率をもたらし、前記健康な対象が、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）、ならびにベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）を含む、項目１～２６のいずれか１項に記載の方法。
３０．前記方法が、Ａ型肝炎の単剤投与に対するＡ型肝炎の血清保護率の差をもたらし、前記差が、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性である少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で決定され、前記健康な対象が、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含み、
前記健康な対象が、
ａ）前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団であって、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含む、前記対象集団と、
ｂ）Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボの投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対照対象集団であって、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含む、前記対照対象集団とに分けられ、
前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対照対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率と、前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率との間の前記差が決定され、
両側９５％信頼区間内の前記差の上限が１０％未満である、項目１～２６のいずれか１項に記載の方法。
３１．前記対象または前記対象集団が、Ａ型肝炎ウイルスの大流行及び／またはデング熱ウイルスの大流行にさらされている、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
３２．前記方法が、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデングウイルス血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、投与（０／１日目）から３０日後にもたらす抗Ａ型肝炎ウイルス抗体幾何平均濃度（ＧＭＣ）が、少なくとも７０ｍＩＵ／ｍｌ、または少なくとも８０ｍＩＵ／ｍｌ、または少なくとも９０ｍＩＵ／ｍｌである、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
３３．前記対象または前記対象集団への前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の前記同日同時の投与が安全である、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
３４．前記同日同時の投与に関連する重篤な有害事象が存在しない、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
３５．前記方法が、以下のＭＮＴ５０によって測定される中和抗体の幾何平均力価（ＧＭＴ）：
－デング熱血清型１の場合、少なくとも１１０、または少なくとも１４０、または少なくとも１５０、
－デング熱血清型２の場合、少なくとも３０００、または少なくとも３５００、または少なくとも３９００、
－デング熱血清型３の場合、少なくとも１００、または少なくとも１２０、または少なくとも１４０、及び／または
－デング熱血清型４の場合、少なくとも８０、または少なくとも１１０、または少なくとも１４０を、
ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、ベースラインで全てのデング熱ウイルスの血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象集団に、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量が同日同時に投与（０／１日目）されてから３０日後にもたらす、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
３６．前記対象または前記対象集団が１８～６０歳である、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
３７．Ａ型肝炎及びデング熱疾患に対するキットであって、
少なくとも以下を含む箱を含む、前記キット：
（ａ）Ａ型肝炎ワクチンを保持する第１の容器、及び
（ｂ）デング熱ワクチン組成物の単位用量を保持する第２の容器であって、前記単位用量が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、前記第２の容器。

【0552】

本発明の第２の項目リスト
１．対象または対象集団におけるＡ型肝炎を予防するための医薬品の製造のためのＡ型肝炎ワクチンの使用及び前記対象または前記対象集団におけるデング熱疾患を予防するための医薬品の製造のためのデング熱ワクチン組成物の単位用量の使用であって、Ａ型肝炎及びデング熱疾患の前記予防が、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に投与することを含み、前記単位用量が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、前記使用。
２．前記Ａ型肝炎ワクチンが不活化ウイルスワクチンである、項目１に記載の使用。
３．前記デング熱ワクチン組成物が、０．５ｍＬの医薬的に許容される希釈剤で再構成すると以下を含む、項目１または２に記載の使用：
（ｉ）キメラ型デング熱血清型２／１株の場合、少なくとも３．３ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、
（ｉｉ）デング熱血清型２株の場合、少なくとも２．７ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、
（ｉｉｉ）キメラ型デング熱血清型２／３株の場合、少なくとも４．０ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度、及び
（ｉｖ）キメラ型デング熱血清型２／４株の場合、少なくとも４．５ｌｏｇ１０ｐｆｕ／０．５ｍＬの濃度。
４．前記対象集団または前記対象が、全てのデング熱血清型に関して血清陰性である、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
５．前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量が皮下注射によって投与され、前記Ａ型肝炎ワクチンが筋肉内注射によって投与され、前記注射が好ましくは腕に投与され、より好ましくは腕の三角筋領域に投与される、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
６．前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンが、異なる解剖学的部位、例えば反対側の腕に投与される、項目５に記載の使用。
７．前記デング熱ワクチン組成物の２回の前記単位用量が、１２ヵ月以上の範囲内、または６ヵ月以内、または３ヵ月以内に投与される、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
８．前記デング熱ワクチン組成物の２回の前記単位用量、及び前記Ａ型肝炎ワクチンの１回用量を、特定的には以下のスケジュールに従って、投与することを含む、項目７に記載の使用：
－０日目に、前記デング熱ワクチン組成物の第１の単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンの第１の同時投与、ならびに
－前記第１の同時投与の後に（例えば、約３ヵ月後に）、前記デング熱ワクチン組成物の第２の単位用量の第２の投与。
９．前記対象集団または前記対象が２～６０歳である、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
１０．前記対象集団または前記対象が、デング熱流行地域の出身である、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
１１．前記対象集団または前記対象が、デング熱非流行地域、好ましくはデング熱非流行地域及びＡ型肝炎非流行地域の出身である、項目１～９のいずれか１項に記載の使用。
１２．前記Ａ型肝炎ワクチンが、Ａ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来するＡ型肝炎ウイルスを含む、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
１３．前記Ａ型肝炎ワクチンが不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、前記不活化Ａ型肝炎ウイルスがＡ型肝炎ウイルス株ＨＭ－１７５に由来する、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
１４．前記Ａ型肝炎ワクチンが不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、前記不活化Ａ型肝炎ウイルスがアルミニウムに吸着されている、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
１５．前記アルミニウムが、水酸化アルミニウムまたはアルミニウムヒドロキシホスフェート硫酸塩である、項目１４に記載の使用。
１６．前記Ａ型肝炎ワクチンが不活化Ａ型肝炎ウイルスを含み、前記Ａ型肝炎ワクチンが、リン酸緩衝生理食塩水と、その中にアミノ酸形形態及びポリソルベート形態で溶解した賦形剤とを含む、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
１７．前記Ａ型肝炎ワクチンが、ウイルス抗原を発現するＡ型肝炎ウイルスを５００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）～２０００ＥＬＩＳＡ単位（ＥＬ．Ｕ．）の範囲の濃度で含む、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
１８．前記方法が、前記Ａ型肝炎ワクチンの前記投与前及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の前記投与前に、前記対象集団または前記対象が過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定するステップを含まない、あるいは
前記Ａ型肝炎ワクチンの前記投与前及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の前記投与前に、前記対象集団または前記対象のＡ型肝炎の血清状態及び／またはデング熱の血清状態が不明である、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
１９．前記方法が、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を投与するステップの前、間、及び後のいずれの時点でも、前記対象集団または前記対象が過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定するステップを含まない、あるいは
前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の投与のステップの前、間、または後のいずれの時点でも、前記対象集団または前記対象の前記Ａ型肝炎の血清状態及び／または前記デング熱の血清状態が不明である、項目１８に記載の使用。
２０．前記方法が、以下のステップからなる一次ワクチン接種を含む、先行項目のいずれか１項に記載の使用：
（Ａ）デング熱感染及びＡ型肝炎感染に対する保護の必要性から前記四価デング熱ウイルス組成物の前記単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンの投与を行う対象を、過去にデング熱に感染していたか、及び／または過去にＡ型肝炎に感染していたかを判定することなく選択すること、ならびに
（Ｂ）前記対象に、前記四価デング熱ウイルス組成物の第１の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンを投与すること、ならびに任意選択で
（Ｃ）前記対象に、前記四価デング熱ウイルス組成物の少なくとも１回のさらなる単位用量を、前記第１の単位用量の投与から３～１２ヵ月以内に投与すること、ならびに任意選択で
（Ｄ）前記対象に、前記Ａ型肝炎ワクチンの少なくとも１回のさらなる用量を、前記第１の単位用量の投与から６～１８ヵ月以内に投与すること。
２１．前記方法が、以下のステップからなる一次ワクチン接種を含む、先行項目のいずれか１項に記載の使用：
（Ａ）デング熱感染及びＡ型肝炎感染に対する保護の必要性から前記四価デング熱ウイルス組成物の前記単位用量及び前記Ａ型肝炎ワクチンの投与を行う対象を選択すること、ならびに
（Ｂ）前記対象に、前記四価デング熱ウイルス組成物の第１の単位用量及びＡ型肝炎ワクチンを投与すること、ならびに
（Ｃ）前記対象に、前記第１の単位用量の投与から約６ヵ月時及び約１２ヵ月時に、前記四価デング熱ウイルス組成物を２回のさらなる単位用量を投与し、前記第１の単位用量の投与の約６ヵ月時または約１２ヵ月時のいずれかに、前記Ａ型肝炎ワクチンを投与すること。
２２．ステップ（Ａ）が、過去にＡ型肝炎に感染していたかの判定なしで行われる、項目２１に記載の使用。
２３．医薬的に許容される希釈剤で再構成すると、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｉｖ）が、ｐｆｕ／０．５ｍＬの総濃度が得られ、前記ｐｆｕ／０．５ｍｌの総濃度を基準として、（ｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、１０％未満であり、（ｉｖ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、少なくとも５０％であり、（ｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、少なくとも１％であり、（ｉｉｉ）のｐｆｕ／０．５ｍＬでの濃度が、少なくとも６％、少なくとも８％、または少なくとも１０％、または少なくとも１２％、または少なくとも１４％、または少なくとも１６％、または少なくとも１８％である、項目３～２２のいずれか１項に記載の使用。
２４．前記方法が、デング熱ワクチン組成物とＡ型肝炎ワクチンとの間の適合性をもたらす、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
２５．前記方法が、デング熱ワクチン組成物とＡ型肝炎ワクチンとの間の相乗作用をもたらす、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
２６．前記方法が、１つの対象集団及び１つの対照対象集団に分けられた少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で非劣性をもたらし、前記対象集団が、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に受け、前記対照対象集団が、Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボ投与物を同日同時に受ける、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
２７．前記Ａ型肝炎ワクチンが、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、投与（０／１日目）から３０日後に、少なくとも９５％、または少なくとも９８％のＡ型肝炎の血清保護率をもたらす、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
２８．前記方法が、Ａ型肝炎の単剤投与に対するＡ型肝炎の血清保護率の差をもたらし、前記差が、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で決定され、
前記健康な対象が、
ｃ）前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団と、
ｄ）Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボの投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または５０例の対象の対照対象集団とに分けられ、
前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対照対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率と、前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率との間の前記差が決定され、
両側９５％信頼区間内の前記差の上限が１０％未満である、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
２９．前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性である少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、前記Ａ型肝炎ワクチンが、投与（０／１日目）から３０日後に、少なくとも９５％、または少なくとも９８％、または少なくとも９９％のＡ型肝炎血清保護率をもたらし、前記健康な対象が、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）、ならびにベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）を含む、項目１～２６のいずれか１項に記載の使用。
３０．前記方法が、Ａ型肝炎の単剤投与に対するＡ型肝炎の血清保護率の差をもたらし、前記差が、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性である少なくとも６０例または少なくとも１２０例の健康な対象を含む非劣性臨床試験で決定され、前記健康な対象が、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含み、
前記健康な対象が、
ｃ）前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団であって、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含む、前記対象集団と、
ｄ）Ａ型肝炎ワクチン及びプラセボの投与を（０／１日目に）同日同時に受ける、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対照対象集団であって、ベースラインで少なくとも１つのデング熱ウイルス血清型に関して血清陽性である健康な対象（複数可）と、ベースラインで全てのデング熱ウイルス血清型に関して血清陰性である健康な対象（複数可）とを含む、前記対照対象集団とに分けられ、
前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対照対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率と、前記投与（０／１日目）から３０日後の前記対象集団の前記Ａ型肝炎の血清保護率との間の前記差が決定され、
両側９５％信頼区間内の前記差の上限が１０％未満である、項目１～２６のいずれか１項に記載の使用。
３１．前記対象または前記対象集団が、Ａ型肝炎ウイルスの大流行及び／またはデング熱ウイルスの大流行にさらされている、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
３２．前記方法が、Ａ型肝炎ワクチン及びデング熱ワクチン組成物の単位用量を同日同時に受ける、ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、かつベースラインで全てのデングウイルス血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象の対象集団に対し、投与（０／１日目）から３０日後にもたらす抗Ａ型肝炎ウイルス抗体幾何平均濃度（ＧＭＣ）が、少なくとも７０ｍＩＵ／ｍｌ、または少なくとも８０ｍＩＵ／ｍｌ、または少なくとも９０ｍＩＵ／ｍｌである、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
３３．前記対象または前記対象集団への前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量の前記同日同時の投与が安全である、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
３４．前記同日同時の投与に関連する重篤な有害事象が存在しない、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
３５．前記方法が、以下のＭＮＴ５０によって測定される中和抗体の幾何平均力価（ＧＭＴ）：
－デング熱血清型１の場合、少なくとも１１０、または少なくとも１４０、または少なくとも１５０、
－デング熱血清型２の場合、少なくとも３０００、または少なくとも３５００、または少なくとも３９００、
－デング熱血清型３の場合、少なくとも１００、または少なくとも１２０、または少なくとも１４０、及び／または
－デング熱血清型４の場合、少なくとも８０、または少なくとも１１０、または少なくとも１４０を、
ベースラインでＡ型肝炎に関して血清陰性であり、ベースラインで全てのデング熱ウイルスの血清型に関して血清陰性である、少なくとも３０例または少なくとも５０例の健康な対象集団に、前記Ａ型肝炎ワクチン及び前記デング熱ワクチン組成物の前記単位用量が同日同時に投与（０／１日目）されてから３０日後にもたらす、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
３６．前記対象または前記対象集団が１８～６０歳である、先行項目のいずれか１項に記載の使用。
３７．Ａ型肝炎及びデング熱疾患に対するキットであって、
少なくとも以下を含む箱を含む、前記キット：
（ａ）Ａ型肝炎ワクチンを保持する第１の容器、及び
（ｂ）デング熱ワクチン組成物の単位用量を保持する第２の容器であって、前記単位用量が、４つの弱毒化生デング熱ウイルス株を含む四価デング熱ウイルス組成物を含む、前記第２の容器。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【配列表】

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【国際調査報告】