特表 2022-544704 ヒトサイトメガロウイルスのＵＬ１８によるＴ細胞応答の調節

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-10-20

(54)【発明の名称】ヒトサイトメガロウイルスのＵＬ１８によるＴ細胞応答の調節

(51)【国際特許分類】

   C12N 15/86 20060101AFI20221013BHJP

   C12N 7/01 20060101ALI20221013BHJP

   C12N 15/49 20060101ALI20221013BHJP

   C12N 5/0783 20100101ALI20221013BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20221013BHJP

   C12N 15/11 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 37/04 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 31/00 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 31/18 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 31/22 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 31/20 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 33/06 20060101ALI20221013BHJP

   A61P 31/06 20060101ALI20221013BHJP

   A61K 35/17 20150101ALI20221013BHJP

   A61K 35/763 20150101ALI20221013BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20221013BHJP

   A61K 39/00 20060101ALI20221013BHJP

   A61K 39/04 20060101ALI20221013BHJP

   A61K 39/015 20060101ALI20221013BHJP

   A61K 39/21 20060101ALI20221013BHJP

   A61K 39/245 20060101ALI20221013BHJP

   A61K 39/12 20060101ALI20221013BHJP

   A61K 39/29 20060101ALI20221013BHJP

【ＦＩ】

C12N15/86 Z ZNA

C12N7/01

C12N15/49

C12N5/0783

C12N5/10

C12N15/11 Z

A61P37/04

A61P35/00

A61P31/00

A61P37/02

A61P35/02

A61P31/18

A61P31/22

A61P31/20

A61P31/14

A61P33/06

A61P31/06

A61K35/17 Z

A61K35/763

A61K48/00

A61K39/00 H

A61K39/00 G

A61K39/04

A61K39/015

A61K39/21

A61K39/245

A61K39/12

A61K39/29

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022511223

(86)(22)【出願日】2020-08-19

(85)【翻訳文提出日】2022-04-15

(86)【国際出願番号】 US2020047050

(87)【国際公開番号】W WO2021034964

(87)【国際公開日】2021-02-25

(31)【優先権主張番号】62/889,310

(32)【優先日】2019-08-20

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】512208051

【氏名又は名称】オレゴン ヘルス アンド サイエンス ユニバーシティ

(74)【代理人】

【識別番号】100105924

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 賢樹

(72)【発明者】

【氏名】フルー、クラウス、ジェイ．

(72)【発明者】

【氏名】ハンセン、スコット、ジー．

(72)【発明者】

【氏名】マルーリ、ダニエル

(72)【発明者】

【氏名】ピッカー、ルイス、ジェイ．

【テーマコード（参考）】

4B065

4C084

4C085

4C087

【Ｆターム（参考）】

4B065AA95X

4B065AB01

4B065AC20

4B065BA02

4B065CA45

4C084AA13

4C084MA52

4C084MA66

4C084NA14

4C084ZB071

4C084ZB072

4C084ZB091

4C084ZB092

4C084ZB261

4C084ZB262

4C084ZB271

4C084ZB272

4C084ZB311

4C084ZB312

4C084ZB331

4C084ZB332

4C084ZB351

4C084ZB352

4C084ZB381

4C084ZB382

4C084ZC551

4C084ZC552

4C085AA03

4C085BA01

4C085BA06

4C085BA09

4C085BA51

4C085BA69

4C085BA78

4C085BA87

4C085BA89

4C085BB01

4C085EE01

4C085GG02

4C085GG03

4C085GG06

4C085GG08

4C087AA01

4C087AA02

4C087BB64

4C087BB65

4C087BC83

4C087CA04

4C087CA09

4C087CA12

4C087MA52

4C087MA66

4C087NA14

4C087ZB07

4C087ZB09

4C087ZB26

4C087ZB27

4C087ZB31

4C087ZB33

4C087ZB35

4C087ZB38

4C087ZC55

(57)【要約】

本開示は、ヒトサイトメガロウイルスのＵＬ１８によるＴ細胞応答を調節する方法に関する。本開示はまた、ＭＨＣ－Ｉａ、ＭＨＣ－ＩＩ、および／またはＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法に関する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

異種抗原をコードする核酸配列を含む組換えＨＣＭＶベクターであって、ＵＬ１８を発現しない、組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項2】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１２８を発現しない、請求項１に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項3】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１３０を発現しない、請求項１または２に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項4】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１２８およびＵＬ１３０を発現しない、請求項１～３のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項5】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１４６およびＵＬ１４７を発現しない、請求項４に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項6】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における１つ以上の変異の存在により、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質、またはそれらのオーソログを発現しない、請求項１～５のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項7】

前記ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における前記変異が、点変異、フレームシフト変異、切断変異、および前記ウイルスタンパク質をコードする前記核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される、請求項６に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項8】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ４０をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項9】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＳ２８をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項10】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ８２（ｐｐ７１）またはそのオーソログを発現しない、請求項１～９のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項11】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＳ１１またはそのオーソログを発現しない、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項12】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列をさらに含み、前記ＭＲＥが、内皮細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項13】

前記内皮細胞で発現するｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ１２６、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－２１０、ｍｉＲ－２２１／２２２、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－２９６、またはｍｉＲ－３２８である、請求項１２に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項14】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＭＲＥをコードする核酸配列をさらに含み、前記ＭＲＥが、骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項15】

前記骨髄細胞で発現するｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－６５２、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－２１、またはｍｉＲ－１２５である、請求項１４に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項16】

前記異種抗原が、病原体特異的抗原、腫瘍抗原、組織特異的抗原、または宿主自己抗原である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項17】

前記病原体特異的抗原が、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、またはＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓである、請求項１６に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項18】

前記病原体特異的抗原が、ＭＨＣ－Ｅスーパートープである、請求項５～１０および１２～１３のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項19】

前記病原体特異的抗原が、ＨＩＶエピトープを含む、請求項１８に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項20】

前記ＨＩＶエピトープが、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である、請求項１９に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項21】

前記腫瘍抗原が、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん（ＲＣＣ）、または生殖細胞腫瘍に関連する、請求項１６に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項22】

前記宿主自己抗原が、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変領域に由来する抗原またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である、請求項１６に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項23】

請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターと、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。

【請求項24】

請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターと、薬学的に許容される担体とを含む、免疫原性組成物。

【請求項25】

対象における少なくとも１つの異種抗原に対する免疫応答を生成する方法であって、前記少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量の請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターを前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項26】

対象における免疫応答の生成に使用するための医薬の製造における請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターの使用。

【請求項27】

対象における免疫応答の生成に使用するための請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項28】

対象におけるがんを治療または予防する方法であって、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量の請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターを投与することを含む、方法。

【請求項29】

対象におけるがんの治療または予防に使用するための医薬の製造における請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターの使用。

【請求項30】

対象におけるがんの治療または予防に使用するための請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項31】

対象における病原体感染症を治療または予防する方法であって、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量の請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターを前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項32】

対象における病原体感染症の治療または予防に使用するための医薬の製造における請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターの使用。

【請求項33】

対象における病原体感染症の治療または予防に使用するための請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項34】

対象における自己免疫疾患または障害を治療する方法であって、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量の請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターを前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項35】

対象における自己免疫疾患または障害の治療に使用するための医薬の製造における請求項１～２２に記載の組換えＨＣＭＶベクターの使用。

【請求項36】

対象における自己免疫疾患または障害の治療に使用するための請求項１～２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項37】

前記組換えＨＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％が、ＭＨＣ－Ｅまたはそのオーソログによって拘束される、請求項２５～３６のいずれか一項に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項38】

前記組換えＨＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％が、ＭＨＣ－Ｅまたはそのオーソログによって拘束される、請求項３７に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項39】

前記組換えＨＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％が、ＭＨＣ－ＩＩまたはそのオーソログによって拘束される、請求項２５～３６のいずれか一項に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項40】

前記組換えＨＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、または少なくとも７５％が、ＭＨＣ－ＩＩまたはそのオーソログによって拘束される、請求項３９に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項41】

前記組換えＨＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の１０％未満、２０％未満、３０％未満、４０％未満、または５０％未満が、ＭＨＣクラスＩａまたはそのオーソログによって拘束される、請求項２５～３６のいずれか一項に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項42】

前記組換えＨＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％が、ＭＨＣクラスＩａまたはそのオーソログによって拘束される、請求項２５～３６のいずれか一項に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項43】

前記組換えＨＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％が、ＭＨＣクラスＩａまたはそのオーソログによって拘束される、請求項４２に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項44】

前記組換えＨＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋ＴＣＲを特定することをさらに含み、前記ＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、請求項２５～３６のいずれか一項に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項45】

前記ＨＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋ＴＣＲを特定することをさらに含み、前記ＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、請求項２５～３６のいずれか一項に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項46】

前記ＨＣＭＶベクターによって誘発される前記ＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋ＴＣＲを特定することをさらに含み、前記ＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣクラスＩａ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、請求項２５～３６のいずれか一項に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項47】

前記ＣＤ８＋ＴＣＲが、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定される、請求項４４～４６に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項48】

前記ＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する、請求項４４に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項49】

前記ＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する、請求項４５に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項50】

前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、ヒト免疫不全ウイルスエピトープである、請求項４９に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項51】

前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である、請求項５０に記載の方法、使用のためのＣＭＶベクター、または製造における使用。

【請求項52】

ＭＨＣ－Ｅ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
ａ．ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量の請求項５～１０、１２～１３、または１６～１７のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターを第１の対象に投与することと、
ｂ．前記ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定することと、
ｃ．第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、
ｄ．前記１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、前記発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法。

【請求項53】

ＭＨＣ－Ｅ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
ａ．ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、前記ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、請求項５～１０、１２～１３、または１６～１７のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターから生成され、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定することと、
ｂ．第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、
ｃ．前記１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、前記発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識する１つ以上のＴＣＲトランスジェニックＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法。

【請求項54】

前記第１のＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する、請求項５２または５３に記載の方法。

【請求項55】

前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、ヒト免疫不全ウイルスエピトープを含む、請求項５４に記載の方法。

【請求項56】

前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である、請求項５４または５５に記載の方法。

【請求項57】

前記第２のＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する、請求項５２～５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項58】

前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、ヒト免疫不全ウイルスエピトープを含む、請求項５７に記載の方法。

【請求項59】

前記ＭＨＣ－Ｅスーパートープが、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である、請求項５７または５８に記載の方法。

【請求項60】

前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定される、請求項５２～５９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項61】

前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列が、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列と同一である、請求項５２～６０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項62】

前記第１の対象が、ヒトである、請求項５２～６１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項63】

前記第２の対象が、ヒトである、請求項５２～６２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項64】

ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
ａ．ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７のオーソログを欠損した組換えアカゲザルＣＭＶ（ＲｈＣＭＶ）またはカニクイザルＣＭＶ（ＣｙＣＭＶ）ベクターを非ヒト霊長類に投与して、請求項１８～２０に記載のＨＩＶスーパートープペプチドとの複合体におけるＭＨＣ－Ｅを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量のＨＩＶ抗原を発現させることと、
ｂ．前記ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、前記第１が、ＭＨＣ－Ｅ／スーパートープペプチド複合体を認識する、特定することと、
ｃ．第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、
ｄ．前記１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、前記発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法。

【請求項65】

ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
ａ．請求項１８～２０に記載のＨＩＶスーパートープペプチドとの複合体におけるＭＨＣ－Ｅを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットからＭＨＣ－Ｅ／スーパートープペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、前記ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７のオーソログを欠損した組換えアカゲザル（ＲｈＣＭＶ）またはカニクイザルＣＭＶ（ＣｙＣＣＭＶ）ベクターから生成される、特定することと、前記ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量のＨＩＶ抗原を発現させることと、
ｂ．第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、
ｃ．前記１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、前記発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法。

【請求項66】

前記第１の対象が、非ヒト霊長類であり、前記第２の対象が、ヒトであり、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲの前記非ヒト霊長類ＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含むキメラ非ヒト霊長類－ヒトＣＤ８＋ＴＣＲである、請求項６４または６５に記載の方法。

【請求項67】

前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲの前記非ヒト霊長類ＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βを含む、請求項６４～６６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項68】

前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βを含む、請求項６４～６７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項69】

前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、キメラＣＤ８＋ＴＣＲである、請求項６４～６８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項70】

前記組換えＨＣＭＶベクターを前記第１の対象に投与することが、前記第１の対象への前記組換えＨＣＭＶベクターの静脈内、筋肉内、腹腔内、または経口投与を含む、請求項６４～６９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項71】

前記トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を前記第２の対象に投与して、がんを治療または予防することをさらに含む、請求項５２～７０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項72】

前記がんが、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん（ＲＣＣ）、または生殖細胞腫瘍である、請求項７１に記載の方法。

【請求項73】

前記トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を前記第２の対象に投与して、病原体感染症を治療または予防することをさらに含む、請求項５２～７０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項74】

前記病原体感染症が、ヒト免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、またはＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓによって引き起こされる、請求項７３に記載の方法。

【請求項75】

前記トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を前記対象に投与して、前記宿主自己抗原に対する自己免疫応答を誘導することをさらに含む、請求項５２～７０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項76】

ＭＨＣ－ＩＩ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
ａ．ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量の請求項１～１１、１４、または１５のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターを第１の対象に投与することと、
ｂ．前記ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定することと、
ｃ．第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、
ｄ．前記１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、前記発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法。

【請求項77】

ＭＨＣ－ＩＩ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
ａ．ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットからＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、前記ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、請求項１～１１、１４、または１５のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターから生成される、特定することと、
ｂ．第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、
ｃ．前記１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、前記発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法。

【請求項78】

前記第１のＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する、請求項７６または７７に記載の方法。

【請求項79】

前記第２のＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する、請求項７６～７８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項80】

前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定される、請求項７６～７９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項81】

前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列が、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列と同一である、請求項７６～８０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項82】

前記第１の対象が、ヒトである、請求項７６～８１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項83】

前記第２の対象が、ヒトである、請求項７６～８２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項84】

前記ＨＣＭＶベクターを前記第１の対象に投与することが、前記第１の対象への前記ＨＣＭＶベクターの静脈内、筋肉内、腹腔内、または経口投与を含む、請求項７６～８３に記載の方法。

【請求項85】

前記トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を前記第２の対象に投与して、がんを治療または予防することをさらに含む、請求項７６～８４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項86】

前記がんが、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん（ＲＣＣ）、および生殖細胞腫瘍からなる群から選択される、請求項８５に記載の方法。

【請求項87】

前記トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を前記第２の対象に投与して、病原体感染症を治療または予防することをさらに含む、請求項７６～８４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項88】

前記病原体感染症が、ヒト免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓからなる群から選択される病原体によって引き起こされる、請求項８７に記載の方法。

【請求項89】

前記宿主自己抗原に対する自己免疫応答を誘導するために、前記トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を前記対象に投与することをさらに含む、請求項７６～８４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項90】

ＭＨＣ－Ｉ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
ａ．ＭＨＣ－Ｉ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量の請求項１～１１のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターを第１の対象に投与することと、
ｂ．前記ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定することと、
ｃ．第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、
ｄ．前記１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、前記発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｉペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法。

【請求項91】

ＭＨＣ－Ｉ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、
ａ．ＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットからＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、前記ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、請求項１～１１のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターから生成される、特定することと、
ｂ．第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、
ｃ．前記１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、前記発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｉペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法。

【請求項92】

前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定される、請求項９０～９１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項93】

前記第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列が、前記第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする前記核酸配列と同一である、請求項９０～９２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項94】

前記第１の対象が、ヒトである、請求項９０～９３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項95】

前記第２の対象が、ヒトである、請求項９０～９４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項96】

前記第１の対象に前記ＨＣＭＶベクターを投与することが、前記第１の対象への前記ＨＣＭＶベクターの静脈内、筋肉内、腹腔内、または経口投与を含む、請求項９０～９５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項97】

前記トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を前記第２の対象に投与して、がんを治療または予防することをさらに含む、請求項９０～９６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項98】

前記がんが、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん（ＲＣＣ）、および生殖細胞腫瘍からなる群から選択される、請求項９７に記載の方法。

【請求項99】

前記トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を前記第２の対象に投与して、病原体感染症を治療または予防することをさらに含む、請求項９０～９６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項100】

前記病原体感染症が、ヒト免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓからなる群から選択される病原体によって引き起こされる、請求項９９に記載の方法。

【請求項101】

前記トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を前記対象に投与して、前記宿主自己抗原に対する自己免疫応答を誘導することをさらに含む、請求項９０～９６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項102】

請求項２５～１０１に記載の方法によって生成されるＣＤ８＋Ｔ細胞。

【請求項103】

前記病原体特異的抗原が、ヒト免疫不全ウイルス、サル免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、またはＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓである、請求項１０２に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞。

【請求項104】

前記腫瘍抗原が、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん（ＲＣＣ）、または生殖細胞腫瘍に関連する、請求項１０２に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞。

【請求項105】

前記宿主自己抗原が、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変領域に由来する抗原またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である、請求項１０２に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞。

【請求項106】

対象における病原体感染症を治療または予防する方法であって、請求項１０２または１０３に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項107】

対象における病原体感染症の治療または予防に使用するための医薬の製造における請求項１０２または１０３に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞の使用。

【請求項108】

対象における病原体感染症の治療または予防に使用するための請求項１０２または１０３に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞。

【請求項109】

対象におけるがんを治療または予防する方法であって、請求項１０２または１０４に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項110】

対象におけるがんの治療または予防に使用するための医薬の製造における請求項１０２または１０４に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞の使用。

【請求項111】

対象におけるがんの治療または予防に使用するための請求項１０２または１０４に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞。

【請求項112】

自己免疫疾患または障害を治療する方法であって、請求項１０２または１０５に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞を対象に投与することを含む、方法。

【請求項113】

自己免疫疾患または障害の治療に使用するための医薬の製造における請求項１０２または１０５に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞の使用。

【請求項114】

自己免疫疾患または障害の治療に使用するための請求項１０２または１０５に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞。

【請求項115】

宿主自己抗原に対する自己免疫応答を誘導する方法であって、請求項１０２または１０５に記載のＣＤ８＋Ｔ細胞を対象に投与することを含む、方法。

【請求項116】

長さが９～１５個のアミノ酸であり、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）のアミノ酸配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である、ヒト免疫不全ウイルス抗原。

【請求項117】

請求項１１６に記載のヒト免疫不全ウイルス抗原のうちの１つ以上をコードする核酸を含む、組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項118】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１８を発現しない、請求項１１７に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項119】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１２８を発現しない、請求項１１７または１１８に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項120】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１３０を発現しない、請求項１１７～１１９のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項121】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１２８およびＵＬ１３０を発現しない、請求項１１７～１２０のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項122】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１４６およびＵＬ１４７を発現しない、請求項１２１に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項123】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における１つ以上の変異の存在により、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質、またはそれらのオーソログを発現しない、請求項１１７～１２２のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項124】

前記ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における前記変異が、点変異、フレームシフト変異、切断変異、および前記ウイルスタンパク質をコードする前記核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される、請求項１２３に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項125】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ４０をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む、請求項１１７～１２４のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項126】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＳ２８をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む、請求項１１７～１２５のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項127】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＬ８２（ｐｐ７１）またはそのオーソログを発現しない、請求項１１７～１２６のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項128】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＵＳ１１またはそのオーソログを発現しない、請求項１１７～１２７のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項129】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列をさらに含み、前記ＭＲＥが、内皮細胞内で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む、請求項１１７～１２８のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項130】

前記内皮細胞で発現されるｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ１２６、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－２１０、ｍｉＲ－２２１／２２２、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－２９６、またはｍｉＲ－３２８である、請求項１２９に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項131】

前記組換えＨＣＭＶベクターが、ＭＲＥをコードする核酸配列をさらに含み、前記ＭＲＥが、骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む、請求項１１７～１３０のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【請求項132】

前記骨髄細胞に発現するｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－６５２、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－２１、またはｍｉＲ－１２５である、請求項１３１に記載の組換えＨＣＭＶベクター。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる２０１９年８月２０日に出願された米国仮特許出願第６２／８８９，３１０号の利益を主張する。

【0002】

連邦政府支援研究開発に関する記述
本発明は、国立アレルギー感染病研究所によって授与された助成番号ＲＯ１ ＡＩ０５９４５７およびＵ１９ ＡＩ１２８７４１での政府支援によりなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。

【0003】

電子式に提出された配列表の参照
本出願とともに提出された電子式に提出されたＡＳＣＩＩテキストファイル中の配列表の内容（名称４１５３＿０１３ＰＣ０１＿Ｓｅｑｌｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５、サイズ：１１，０２９バイト、および作成日：２０２０年８月１９日）は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0004】

アカゲザルサイトメガロウイルス（ＲｈＣＭＶ）の株６８－１は、従来のＭＨＣ－Ｉではなく、ＭＨＣ－ＩＩおよびＭＨＣ－Ｅによって提示されるペプチドを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発することが以前に示されている。この効果は、カニクイザルＣＭＶ（ＣｙＣＭＶ）において再現され、したがって、ＨＣＭＶ ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７のＲｈＣＭＶおよびＣｙＣＭＶホモログの欠失が、ＭＨＣ－Ｅ拘束（ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ）ＣＤ８＋Ｔ細胞の誘導を可能とするために必要であることを示している（ＷＯ２０１６／１３０６９３、ＷＯ２０１８／０７５５９１）。さらに、これらのベクターは、ＭＨＣ－ＩＩ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発する。しかしながら、内皮細胞特異的マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）１２６の標的部位をこれらのベクターの必須ウイルス遺伝子に挿入することにより、ＭＨＣ－ＩＩ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の誘導が無くなり、ＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞を専ら誘発する「ＭＨＣ－Ｅのみ（ＭＨＣ－Ｅ ｏｎｌｙ）」ベクターが得られる（ＷＯ２０１８／０７５５９１）。対照的に、骨髄細胞特異的ｍｉＲ１４２－３ｐを６８－１ＲｈＣＭＶに挿入することにより、ＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の誘導が妨げられ、ＭＨＣ－ＩＩによって専ら拘束されるＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発するベクターが得られる（ＷＯ２０１７／０８７９２１）。同様に、ＵＬ４０ホモログであるＲｈ６７の欠失により、ＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の誘導が妨げられ、「ＭＨＣ－ＩＩのみベクター」が得られる（ＷＯ２０１６／１３０６９３）。

【発明の概要】

【0005】

本開示は、異種抗原をコードする核酸配列を含む組換えヒトＣＭＶ（ＨＣＭＶ）ベクターであって、ＵＬ１８を発現しない、組換えＨＣＭＶベクターに関する。

【0006】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、ＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８およびＵＬ１３０を発現しない。

【0007】

本開示はまた、異種抗原をコードする核酸配列を含むＨＣＭＶベクターであって、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７を発現しない、組換えＨＣＭＶベクターに関する。

【0008】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における１つ以上の変異の存在により、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質、またはそれらのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における変異は、点変異、フレームシフト変異、切断変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される。

【0009】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ４０をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ２８をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ８２（ｐｐ７１）またはそのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ１１またはそのオーソログを発現しない。

【0010】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列をさらに含み、ＭＲＥは、内皮細胞で発現されるマイクロＲＮＡの標的部位を含む。いくつかの実施形態では、内皮細胞で発現されるＭＲＥは、ｍｉＲ１２６、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－２１０、ｍｉＲ－２２１／２２２、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－２９６、およびｍｉＲ－３２８である。

【0011】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列をさらに含み、ＭＲＥは、骨髄細胞で発現されるマイクロＲＮＡの標的部位を含む。いくつかの実施形態では、骨髄細胞で発現されるＭＲＥは、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－６５２、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－２１、およびｍｉＲ－１２５である。

【0012】

いくつかの実施形態では、異種抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍抗原、組織特異的抗原、または宿主自己抗原である。いくつかの実施形態では、病原体特異的抗原は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓからなる群から選択される。

【0013】

いくつかの実施形態では、病原体特異的抗原は、ＭＨＣ－Ｅスーパートープである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＨＩＶエピトープである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である。

【0014】

いくつかの実施形態では、腫瘍抗原は、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん（ＲＣＣ）、および生殖細胞腫瘍からなる群から選択されるがんに関連する。

【0015】

いくつかの実施形態では、宿主自己抗原は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変領域に由来する抗原またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である。

【0016】

本開示はまた、組換えＨＣＭＶベクターと、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物に関する。

【0017】

本開示はまた、組換えＨＣＭＶベクターと、薬学的に許容される担体とを含む、免疫原性組成物に関する。

【0018】

本開示はまた、対象における少なくとも１つの異種抗原に対する免疫応答を生成する方法であって、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量の組換えＨＣＭＶベクターを対象に投与することを含む、方法に関する。

【0019】

本開示はまた、対象における免疫応答の生成に使用するための医薬の製造における組換えＨＣＭＶベクターの使用に関する。

【0020】

本開示はまた、対象における免疫応答の生成に使用するための組換えＨＣＭＶに関する。

【0021】

本開示はまた、対象におけるがんを治療または予防する方法であって、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量の組換えＨＣＭＶベクターを投与することを含む、方法に関する。

【0022】

本開示はまた、対象におけるがんの治療または予防に使用するための医薬の製造における組換えＨＣＭＶベクターの使用に関する。

【0023】

本開示はまた、対象におけるがんの治療または予防に使用するための組換えＨＣＭＶベクターに関する。

【0024】

本開示はまた、対象における病原体感染症を治療または予防する方法であって、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量で組換えＨＣＭＶベクターを対象に投与することを含む、方法に関する。

【0025】

本開示はまた、対象における病原体感染症の治療または予防に使用するための医薬の製造における組換えＨＣＭＶベクターの使用に関する。

【0026】

本開示はまた、対象における病原体感染症を治療または予防するのに使用するための組換えＨＣＭＶベクターに関する。

【0027】

本開示はまた、対象における自己免疫疾患または障害を治療する方法であって、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量の組換えＨＣＭＶベクターを対象に投与することを含む、方法に関する。

【0028】

本開示はまた、対象における自己免疫疾患または障害の治療に使用するための医薬の製造における組換えＨＣＭＶベクターの使用に関する。

【0029】

本開示はまた、対象における自己免疫疾患または障害の治療に使用するための組換えＨＣＭＶベクターに関する。

【0030】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％は、ＭＨＣ－Ｅまたはそのオーソログによって拘束される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％は、ＭＨＣ－Ｅまたはそのオーソログによって拘束される。

【0031】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％は、ＭＨＣ－ＩＩまたはそのオーソログによって拘束される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、または少なくとも７５％は、ＭＨＣ－ＩＩまたはそのオーソログによって拘束される。

【0032】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞の１０％未満、２０％未満、３０％未満、４０％未満、または５０％未満は、ＭＨＣクラスＩａまたはそのオーソログによって拘束される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％は、ＭＨＣクラスＩａまたはそのオーソログによって拘束される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターによって誘発される少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、またはＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣクラスＩａまたはそのオーソログによって拘束される。

【0033】

いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、組換えＨＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞から特定され、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＨＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞から特定され、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＨＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞から特定され、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣクラスＩａ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。

【0034】

いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定される。

【0035】

いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する。

【0036】

いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ヒト免疫不全ウイルスエピトープである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）のアミノ酸配と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である。

【0037】

本開示はまた、ＭＨＣ－Ｅ－ペプチド複合体を認識するＴＣＲトランスジェニックＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量の組換えＨＣＭＶベクターを第１の対象に投与することと、（ｂ）ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定することと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｄ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法に関する。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、および／またはＵＬ１４７を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における１つ以上の変異の存在により、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質、またはそれらのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における変異は、点変異、フレームシフト変異、切断変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ４０をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ２８をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列をさらに含み、ＭＲＥは、内皮細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む。いくつかの実施形態では、内皮細胞で発現されるｍｉＲＮＡは、ｍｉＲ１２６、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－２１０、ｍｉＲ－２２１／２２２、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－２９６、またはｍｉＲ－３２８である。いくつかの実施形態では、異種抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍抗原、組織特異的抗原、または宿主自己抗原である。いくつかの実施形態では、病原体特異的抗原は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、またはＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓである。

【0038】

本開示はまた、ＭＨＣ－Ｅ－ペプチド複合体を認識するＴＣＲトランスジェニックＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、請求項５～１０、１２～１３、または１６～１７のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターから生成され、第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定することと、（ｂ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｃ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識する１つ以上のＴＣＲトランスジェニックＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法に関する。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、および／またはＵＬ１４７を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における１つ以上の変異の存在により、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質、またはそれらのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における変異は、点変異、フレームシフト変異、切断変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ４０をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ２８をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列をさらに含み、ＭＲＥは、内皮細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む。いくつかの実施形態では、内皮細胞で発現されるｍｉＲＮＡは、ｍｉＲ１２６、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－２１０、ｍｉＲ－２２１／２２２、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－２９６、またはｍｉＲ－３２８である。いくつかの実施形態では、異種抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍抗原、組織特異的抗原、または宿主自己抗原である。いくつかの実施形態では、病原体特異的抗原は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、またはＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓである。

【0039】

いくつかの実施形態では、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ヒト免疫不全ウイルスエピトープを含む。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である。

【0040】

いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ヒト免疫不全ウイルスエピトープを含む。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である。

【0041】

いくつかの実施形態では、第１のＣＤ８＋ＴＣＲは、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定される。

【0042】

いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列は、第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と同一である。

【0043】

いくつかの実施形態では、第１の対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、第２の対象は、ヒトである。

【0044】

本開示はまた、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７のオーソログを欠損した組換えアカゲザルＣＭＶ（ＲｈＣＭＶ）またはカニクイザルＣＭＶ（ＣｙＣＭＶ）ベクターを非ヒト霊長類に投与し、ＨＩＶスーパートープペプチドとの複合体におけるＭＨＣ－Ｅを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量のＨＩＶ抗原を発現させることと、（ｂ）ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、第１が、ＭＨＣ－Ｅ／スーパートープペプチド複合体を認識する、特定することと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｄ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する１つ以上のトランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法に関する。いくつかの実施形態では、ＨＩＶエピトープは、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である。本開示はまた、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＨＩＶスーパートープペプチドとの複合体におけるＭＨＣ－Ｅを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから、ＭＨＣ－Ｅ／スーパートープペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７のオーソログを欠損した組換えアカゲザル（ＲｈＣＭＶ）またはカニクイザルＣＭＶ（ＣｙＣＣＭＶ）ベクターから生成される、特定することと、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量のＨＩＶ抗原を発現させることと、（ｂ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｃ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法に関する。いくつかの実施形態では、ＨＩＶエピトープは、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である。

【0045】

いくつかの実施形態では、第１の対象は、非ヒト霊長類であり、第２の対象は、ヒトであり、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含むキメラ非ヒト霊長類－ヒトＣＤ８＋ＴＣＲである。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βを含む。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βを含む。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、キメラＣＤ８＋ＴＣＲである。

【0046】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターを第１の対象に投与することは、第１の対象への組換えＨＣＭＶベクターの静脈内、筋肉内、腹腔内、または経口投与を含む。

【0047】

いくつかの実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、がんを治療または予防するために第２の対象に投与される。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん（ＲＣＣ）、および生殖細胞腫瘍からなる群から選択される。

【0048】

いくつかの実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、病原体感染症を治療または予防するために第２の対象に投与される。いくつかの実施形態では、病原体感染症は、ヒト免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓからなる群から選択される病原体によって引き起こされる。

【0049】

いくつかの実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、宿主自己抗原に対する自己免疫応答を誘導するために第２の対象に投与される。

【0050】

本開示はまた、ＭＨＣ－ＩＩ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量の組換えＨＣＭＶベクターを第１の対象に投与することと、（ｂ）ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定することと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｄ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－ＩＩ＋ペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法に関する。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、異種抗原をコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８およびＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１４６およびＵＬ１４７を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における１つ以上の変異の存在により、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質、またはそれらのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における変異は、点変異、フレームシフト変異、切断変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ４０をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ２８をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ８２（ｐｐ７１）またはそのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ１１またはそのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＭＲＥをコードする核酸配列をさらに含み、ＭＲＥは、骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む。いくつかの実施形態では、骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡは、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－６５２、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－２１、またはｍｉＲ－１２５である。

【0051】

本開示はまた、ＭＨＣ－ＩＩ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットからＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来のペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、組換えＨＣＭＶベクターから生成される、特定することと、（ｂ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｃ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法に関する。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、異種抗原をコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８およびＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１４６およびＵＬ１４７を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における１つ以上の変異の存在により、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質、またはそれらのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における変異は、点変異、フレームシフト変異、切断変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ４０をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ２８をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ８２（ｐｐ７１）またはそのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ１１またはそのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＭＲＥをコードする核酸配列をさらに含み、ＭＲＥは、骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む。いくつかの実施形態では、骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡは、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－６５２、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－２１、またはｍｉＲ－１２５である。

【0052】

いくつかの実施形態では、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する。

【0053】

いくつかの実施形態では、第１のＣＤ８＋ＴＣＲは、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定される。

【0054】

いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列は、第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と同一である。

【0055】

いくつかの実施形態では、第１の対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、第２の対象は、ヒトである。

【0056】

いくつかの実施形態では、ＨＣＭＶベクターを第１の対象に投与することは、第１の対象へのＨＣＭＶベクターの静脈内、筋肉内、腹腔内、または経口投与を含む。

【0057】

いくつかの実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、がんを治療または予防するために第２の対象に投与される。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん（ＲＣＣ）、および生殖細胞腫瘍からなる群から選択される。

【0058】

いくつかの実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、病原体感染症を治療または予防するために第２の対象に投与される。いくつかの実施形態では、病原体感染症は、ヒト免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓからなる群から選択される病原体によって引き起こされる。

【0059】

いくつかの実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、宿主自己抗原に対する自己免疫応答を誘導するために第２の対象に投与される。

【0060】

本開示はまた、ＭＨＣ－Ｉ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＭＨＣ－Ｉ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量の組換えＨＣＭＶベクターを第１の対象に投与することと、（ｂ）ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定することと、（ｃ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｄ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｉペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法に関する。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、異種抗原をコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８およびＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１４６およびＵＬ１４７を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における１つ以上の変異の存在により、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質、またはそれらのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における変異は、点変異、フレームシフト変異、切断変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ４０をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ２８をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ８２（ｐｐ７１）またはそのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ１１またはそのオーソログを発現しない。

【0061】

本開示はまた、ＭＨＣ－Ｉ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットからＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、請求項１～１１のいずれか一項に記載の組換えＨＣＭＶベクターから生成される、特定することと、（ｂ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｃ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｉペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法に関する。

【0062】

いくつかの実施形態では、第１のＣＤ８＋ＴＣＲは、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定される。

【0063】

いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列は、第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と同一である。

【0064】

いくつかの実施形態では、第１の対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、第２の対象は、ヒトである。

【0065】

いくつかの実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、がんを治療または予防するために第２の対象に投与される。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん（ＲＣＣ）、および生殖細胞腫瘍からなる群から選択される。

【0066】

いくつかの実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、病原体感染症を治療または予防するために第２の対象に投与される。いくつかの実施形態では、病原体感染症は、ヒト免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓからなる群から選択される病原体によって引き起こされる。

【0067】

いくつかの実施形態では、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞は、宿主自己抗原に対する自己免疫応答を誘導するために第２の対象に投与される。

【0068】

いくつかの実施形態では、病原体特異的抗原は、ヒト免疫不全ウイルス、サル免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓからなる群から選択される。

【0069】

いくつかの実施形態では、腫瘍抗原は、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん（ＲＣＣ）、および生殖細胞腫瘍からなる群から選択されるがんに関連する。

【0070】

いくつかの実施形態では、宿主自己抗原は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変領域に由来する抗原またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である。

【0071】

本開示はまた、対象における病原体感染症を治療または予防する方法であって、ＣＤ８＋Ｔ細胞を対象に投与することを含む、方法に関する。

【0072】

本開示はまた、対象における病原体感染症の治療または予防に使用するための医薬の製造におけるＣＤ８＋Ｔの使用に関する。

【0073】

本開示はまた、対象における病原体感染症の治療または予防に使用するためのＣＤ８＋Ｔ細胞に関する。

【0074】

本開示はまた、対象におけるがんを治療または予防する方法であって、ＣＤ８＋Ｔ細胞を対象に投与することを含む、方法に関する。

【0075】

本開示はまた、対象におけるがんの治療または予防に使用するための医薬の製造におけるＣＤ８＋Ｔ細胞の使用に関する。

【0076】

本開示はまた、対象におけるがんの治療または予防に使用するためのＣＤ８＋Ｔ細胞に関する。

【0077】

本開示はまた、自己免疫疾患または障害を治療する方法であって、ＣＤ８＋Ｔ細胞を対象に投与することを含む、方法に関する。

【0078】

本開示はまた、自己免疫疾患または障害の治療に使用するための医薬の製造におけるＣＤ８＋Ｔ細胞の使用に関する。

【0079】

本開示はまた、自己免疫疾患または障害の治療に使用するためのＣＤ８＋Ｔ細胞に関する。

【0080】

本開示はまた、宿主自己抗原に対する自己免疫応答を誘導する方法であって、ＣＤ８＋Ｔ細胞を対象に投与することを含む、方法に関する。

【0081】

本開示はまた、長さが９～１５個のアミノ酸であって、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）のアミノ酸配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である、ヒト免疫不全ウイルスＭＨＣ－Ｅスーパートープに関する。

【0082】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、１つ以上のヒト免疫不全ウイルス抗原をコードする核酸を含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８およびＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１４６およびＵＬ１４７を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における１つ以上の変異の存在により、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質、またはそれらのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における変異は、点変異、フレームシフト変異、切断変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ４０をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ２８をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ８２（ｐｐ７１）またはそのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ１１またはそのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列をさらに含み、ＭＲＥは、内皮細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む。いくつかの実施形態では、内皮細胞で発現されるｍｉＲＮＡは、ｍｉＲ１２６、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－２１０、ｍｉＲ－２２１／２２２、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－２９６、またはｍｉＲ－３２８である。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＭＲＥをコードする核酸配列をさらに含み、ＭＲＥは、骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む。いくつかの実施形態では、骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡは、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－６５２、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－２１、またはｍｉＲ－１２５である。

【図面の簡単な説明】

【0083】

【図1】示されたコホートにおけるＳＩＶ抗原由来ペプチドプールに応答するＣＤ４＋またはＣＤ８＋Ｔ細胞の平均頻度を示す。ＳＩＶ抗原を表す重複する（１１Ａによる）１５ｍｅｒペプチドのプールの存在下で、ＩＦＮγまたはＴＮＦαについての細胞内サイトカイン染色（ＩＣＳ）により、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）において、示される時点でＴ細胞発生頻度を決定した。必須遺伝子Ｒｈ１０８（ＵＬ７９）およびＲｈ１５６（ＩＥ２）の３’非翻訳領域においてｍｉｒ１２６の認識部位を有し、かつ、ＳＩＶ抗原であるＳＩＶｇａｇ、ＳＩＶｒｅｔａｎｅｆ（ｒｅｖ、ｔａｔ、およびｎｅｆの融合物）、およびＳＩＶｐｏｌの５’セグメントを発現する、３つの「ＭＨＣ－Ｅのみ」６８－１ＲｈＣＭＶベクターで、コホート１を免疫化した。Ｒｈ６７（ＵＬ４０）を欠失し、かつ、ＳＩＶ抗原であるＳＩＶｇａｇ、ＳＩＶｒｅｔａｎｅｆ、またはＳＩＶｐｏｌの５’セグメントを発現する、３つの「ＭＨＣ－ＩＩのみ」６８－１ＲｈＣＭＶベクターで、コホート２を免疫化した。必須遺伝子Ｒｈ１０８（ＵＬ７９）およびＲｈ１５６（ＩＥ２）の３’非翻訳領域においてｍｉｒ１４２の認識部位を有し、かつ、ＳＩＶ抗原であるＳＩＶｇａｇ、ＳＩＶｒｅｔａｎｅｆ、またはＳＩＶｐｏｌの５’セグメントを発現する、３つの「ＭＨＣ－ＩＩのみ」６８－１ＲｈＣＭＶベクターで、コホート３を免疫化した。ＳＩＶ抗原であるＳＩＶｇａｇ、ＳＩＶｒｅｔａｎｅｆ、またはＳＩＶｐｏｌの５’セグメントを発現する３つの６８－１ＲｈＣＭＶベクターで、コホート４（対照コホート）免疫化した。

【図2】個々のペプチドの存在下で測定された、示された各コホートでの３匹のアカゲザル（ＲＭ）から得られたＰＢＭＣにおけるＳＩＶｇａｇ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を示す。特異的なＣＤ８＋Ｔ細胞応答をもたらすペプチドは、ボックスによって示され、ボックスの色は、抗汎（ｐａｎ）ＭＨＣ－Ｉ ｍＡｂ Ｗ６／３２、ＭＨＣ－ＥブロッキングペプチドＶＬ９、およびＭＨＣ－ＩＩブロッキングペプチドＣＬＩＰでブロックすることによって決定されるＭＨＣ拘束を示す。

【図3】コホート１、２、および３におけるＲＭの用量制限されたＳＩＶｍａｃ２３９の反復チャレンジ後の血漿ウイルス負荷（左パネル）、およびコホート１、２、および３におけるＲＭのＳＩＶｖｉｆ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞応答（右パネル）を示す。ＳＩＶ感染を制御した動物（ＲＭコントローラー）が白色ボックスに示され、非コントローラーが黒色ボックスに示される。コホート２のうちの１匹の動物は、最初はＳＩＶ感染を制御したが、ＣＤ８＋Ｔ細胞を欠失したときに制御を失い、このＲＭが自然発生的なエリートコントローラーであることと合致する。

【図4】ＳＩＶスーパートープ融合構築物の免疫ブロットを示す。テロメア化（ｔｅｌｏｍｅｒｉｚｅｄ）アカゲザル線維芽細胞（ＴＲＦ）に感染させるか、または非感染とし、示されたＲｈＣＭＶ構築物および感染した細胞の溶解物を電気泳動で分離後、免疫ブロッティングを行った。ＳＩＶスーパートープを含む融合タンパク質を抗ＨＡ抗体を用いて可視化し、特異的抗体を使用してウイルスタンパク質ＩＥ１、Ｒｈ１０７、およびＲｈ１０８を検出した。ＩＥ抗体を有する擬感染または非感染ＴＲＦ溶解物において観察されるタンパク質バンドは、非特異的である。

【図5】図５Ａは、コホート５動物（ｎ＝８）のＰＢＭＣにおけるＳＩＶ抗原由来ペプチドに応答するＣＤ８＋Ｔ細胞の平均発生頻度を示す。必須遺伝子Ｒｈ１０８（ＵＬ７９）およびＲｈ１５６（ＩＥ２）の３’非翻訳領域においてｍｉｒ１２６の認識部位を有し、かつ、ＭＨＣ－Ｅスーパートープ融合タンパク質を発現する、６８－１ＲｈＣＭＶベクターでコホート５を免疫化した。ＳＩＶスーパートープを表す個々の１５ｍｅｒペプチドのプールの存在下でのＩＦＮγまたはＴＮＦαの細胞内サイトカイン染色（ＩＣＳ）により、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）において、示される時点でＴ細胞発生頻度を決定した。図５Ｂは、個々のＲＭにおける特定のＭＨＣ－Ｅ拘束スーパートープに応答するＣＤ８＋Ｔ細胞の発生頻度を示す。ＭＨＣ－Ｅ拘束スーパートープ（Ｇａｇ６９およびＧａｇ１２０）および他のＭＨＣ－Ｅ拘束Ｇａｇエピトープを示す。

【図6】コホート５におけるＲＭの用量制限されたＳＩＶｍａｃ２３９のチャレンジ後のＳＩＶ血漿ウイルス負荷（左パネル）およびＳＩＶｖｉｆ特異的Ｔ細胞応答（右パネル）を示す。ＲＭコントローラーを白色ボックスで示し、非コントローラーを黒色ボックスで示す。ＳＩＶｖｉｆ特異的応答は、コントローラー動物においてＳＩＶ感染を「受けたこと」を示している。

【図7】図７Ａは、ＳＩＶｇａｇを発現する６８－１ＲｈＣＭＶを接種したＲＭ（ｎ＝２）、ＵＬ１８およびＳＩＶｒｅｔａｎｅｆを発現する６８－１ＲｈＣＭＶを接種したＲＭ（ｎ＝２）、またはＵＬ１８およびＳＩＶｐｏｌを発現する６８－１ＲｈＣＭＶを接種したＲＭ（ｎ＝２）におけるＳＩＶ抗原ペプチドプールに応答するＣＤ８＋Ｔ細胞の発生頻度を示す。図７Ｂは、各ＲＭにおけるＭＨＣ－Ｅ拘束スーパートープに応答するＣＤ８＋Ｔ細胞の発生頻度を示す。図７Ｃは、各ＲＭにおけるＭＨＣ－ＩＩ拘束スーパートープに応答するＣＤ８＋Ｔ細胞の発生頻度を示す。

【図8】ＵＬ１８およびＳＩＶｐｏｌを発現する６８－１ＲｈＣＭＶを接種した３匹のＲＭから得られたＰＢＭＣにおけるＳＩＶｐｏｌ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を示す。ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を個々のペプチドの存在下で測定した。特異的なＣＤ８＋Ｔ細胞応答をもたらすペプチドは、ボックスによって示され、ボックスの色は、抗汎ＭＨＣ－Ｉ－ｍＡｂ Ｗ６／３２、ＭＨＣ－ＥブロッキングペプチドＶＬ９、およびＭＨＣ－ＩＩブロッキングペプチドＣＬＩＰでブロックすることによって決定されるＭＨＣ拘束を示す。すべてのペプチド応答は、Ｗ６／３２でブロックされたが、ＶＬ９ペプチドまたはＣＬＩＰペプチドではブロックされなかった。したがって、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－Ｉによって専ら拘束される。

【図9A】ＵＬ１８およびＳＩＶｐｏｌを発現する６８－１ＲｈＣＭＶを接種したＲＭ由来のＳＩＶｐｏｌペプチドに応答してＩＦＮγまたはＴＮＦαを生成するＣＤ８＋Ｔ細胞の発生頻度を示すドットプロットを示す。

【図9B】ＵＬ１８Ｄ１９６Ｓ変異体およびＳＩＶｐｏｌを発現する６８－１ＲｈＣＭＶを接種したＲＭ由来のＳＩＶｐｏｌペプチドに応答してＩＦＮγまたはＴＮＦαを生成するＣＤ８＋Ｔ細胞の発生頻度を示すドットプロットを示す。ＳＩＶｐｏｌまたはＭＨＣ－Ｅ拘束スーパートープペプチドＳＩＶｐｏｌ４１またはＭＨＣ－ＩＩ拘束スーパートープペプチドＳＩＶｐｏｌ９０を含む、重複する１５ｍｅｒペプチドのプールに応答するＣＤ８＋Ｔ細胞の発生頻度を示す。インタクトなＵＬ１８はスーパートープ応答の誘導を妨げるが、これはＵＬ１８のＤ１９６Ｓ変異体では観察されない。

【図10】ＨＣＭＶ－ＴＲ３（Ｃａｐｏｓｉｏ Ｐ．ｅｔ ａｌ．２０１９．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｌｉｖｅ－ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ ＨＣＭＶ－ｂａｓｅｄ ｖａｃｃｉｎｅ ｐｌａｔｆｏｒｍ．Ｓｃｉ Ｒｅｐ ９：１９２３６）、またはＵＬ１８がＨＩＶｇａｇ、ＨＩＶｎｅｆ、およびＨＩＶｐｏｌ融合タンパク質で置き換えられたＨＣＭＶ－ＴＲ３ベースのベクターに感染していないまたは感染した、ヒトＭＲＣ５線維芽細胞の免疫ブロットを示す。さらに、ＵＬ１８欠失ベクターは、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７を欠如しているが、それは、以前の研究により、これらの遺伝子がＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を阻害することが示されたためである（米国特許第１０，５３２，０９９号）。さらに、対照のために、ＨＩＶｇａｇのｐ２４断片を付加した。上のブロットは、ＨＩＶｇａｇタンパク質に対する抗体でプロービングした。下のブロットは、ＨＣＭＶｐｐ６５タンパク質に対する抗体でプロービングした。

【図11】ＵＬ１８を欠失したベクターを接種したＲＭから得られたＰＢＭＣにおけるＨＩＶｇａｇ、ｎｅｆ、およびｐｏｌ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞の応答を示す（図１１、ｎ＝２）。ワクチン接種後５６日目に、抗原の各部分に対応する重複するペプチドのプールを使用して、ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を測定した。

【発明を実施するための形態】

【0084】

Ｉ．用語
別段で明記しない限り、専門用語は、従来の用法に従って使用される。

【0085】

本明細書に引用されるか、または２０１９年８月２０日に出願された米国特許出願第６２／８８９，３１０号を含む出願データシートに列挙される、すべての刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト、および受託番号／データベース配列（ポリヌクレオチドおよびポリペプチド配列の両方を含む）は、個々の刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト、または受託番号／データベース配列が各々が、参照により組み込まれるように具体的かつ個別に示されているかのように、あらゆる目的のために、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0086】

本明細書に記載されるものと同様または同等の方法および材料が本開示の実施または試験において使用され得るが、好適な方法および材料を以下に記載する。さらに、材料、方法、および例は、例示されるだけであり、限定することを意図しない。本開示の様々な実施形態の検討を容易にするために、具体的な用語の説明を以下に提供する。

【0087】

文脈が別途必要としている場合を除き、本明細書および特許請求の範囲全体を通して、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という文言ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などのその変形形態は、開放的、包括的な意味で、すなわち、「含むがこれらに限定されない」と解釈されるべきである。「からなる」とは、本明細書に開示される他の成分の微量元素および実質的な方法工程を除外することを意味する。「から本質的になる」という用語は、特許請求の範囲を、特定の材料もしくはステップ、または特許請求の範囲に記載される発明の基本的な特徴に実質的に影響を与えないものに限定する。例えば、本明細書に定義される構成要素から本質的になる組成物は、単離および精製方法からの微量汚染物質、ならびに薬学的に許容される担体、例えば、リン酸緩衝食塩水、防腐剤などを除外しない。同様に、タンパク質が、該タンパク質の長さの最大２０％に寄与し、かつ、タンパク質の活性に実質的に影響を与えない（例えば、タンパク質の活性を５０％以下変化させる）追加のアミノ酸を含む場合、タンパク質は、本質的に特定のアミノ酸配列からなる。移行用語のそれぞれによって定義される実施形態は、本発明の範囲内である。

【0088】

抗原：本明細書で使用する場合、「抗原」または「免疫原」という用語は、対象における免疫応答を誘導することができる物質、典型的にはタンパク質を指すために互換的に使用される。この用語はまた、対象に投与したときに（対象に、直接投与するか、またはタンパク質をコードするヌクレオチド配列もしくはベクターを投与することによって）、タンパク質が該タンパク質に対して指向される体液性および／または細胞性免疫応答を誘発することができるという意味で、免疫学的に活性であるタンパク質を指す。

【0089】

抗原特異的Ｔ細胞：特定の抗原を認識するＣＤ８^＋またはＣＤ４^＋リンパ球。一般に、抗原特異的Ｔ細胞は、ＭＨＣ分子によって提示される特定の抗原に特異的に結合するが、同じＭＨＣによって提示される他の抗原には特異的に結合しない。

【0090】

投与：本明細書で使用する場合、「投与」という用語は、任意の有効な経路により、有効量の外因性抗原を含むＣＭＶベクターを含む組成物などの薬剤を対象に付与または投与することを意味する。例示的な投与経路には、注射（例えば、皮下、筋肉内、皮内、腹腔内、および静脈内）、経口、舌下、直腸、経皮、経鼻、膣、および吸入経路が含まれるが、これらに限定されない。

【0091】

有効量：本明細書で使用する場合、「有効量」という用語は、状態もしくは疾患の徴候もしくは症状を低減もしくは無くす、または抗原に対する免疫応答を誘導するなどの所望の応答を生成するのに十分な薬剤の量、例えば、異種抗原を含むＣＭＶベクター、またはＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体、もしくはＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞の量を指す。いくつかの例では、「有効量」は、障害または疾患のいずれかの１つ以上の症状および／または根本的な原因を治療する（予防を含む）ものである。有効量は、感染症またはがんに関連する１つ以上の徴候または症状などの特定の疾患または状態の１つ以上の徴候または症状が発症することを防止する量を含む、治療有効量であり得る。

【0092】

異種抗原：本明細書で使用する場合、「異種抗原」という用語は、ＣＭＶに由来しない任意のタンパク質またはその断片を指す。異種抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍ウイルス抗原、腫瘍抗原、宿主自己抗原、または任意の他の抗原であり得る。

【0093】

過剰増殖性疾患：制御されない細胞増殖を特徴とする疾患または障害。過剰増殖性疾患には、悪性腫瘍および非悪性腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。

【0094】

免疫寛容：本明細書で使用する場合、「免疫寛容」は、免疫応答を誘導する能力がある物質に対する免疫系の無応答の状態を指す。個体自身の抗原、例えば、腫瘍抗原に対する自己寛容は、中心性寛容および末梢性寛容機序の両方によって達成される。

【0095】

免疫原性ペプチド：ペプチドがＭＨＣ分子に結合して、細胞傷害性Ｔリンパ球（「ＣＴＬ」）応答または免疫原性ペプチドが由来する抗原に対するＢ細胞応答（例えば、抗体産生）を誘導するように、対立遺伝子特異的モチーフまたはＮ末端反復などの他の配列を含むペプチド。

【0096】

いくつかの実施形態では、免疫原性ペプチドは、配列モチーフ、またはニューラルネットもしくは多項式決定などの当該技術分野で既知の他の方法を使用して特定される。典型的には、特定の親和性で結合する高い可能性を与えるスコアを有し、かつ、免疫原性であるペプチドを選択するためのペプチドの「結合閾値」を決定するために、アルゴリズムが使用される。アルゴリズムは、特定の位置での特定のアミノ酸のＭＨＣ結合に対する効果、特定の位置での特定のアミノ酸の抗体結合に対する効果、またはモチーフ含有ペプチド中の特定の置換の結合に対する効果のいずれかに基づく。免疫原性ペプチドの関連内で、「保存された残基」は、ランダム分布によって予想されるよりも有意に高い頻度で、ペプチド中の特定の位置に現れる残基である。いくつかの実施形態では、保存された残基は、ＭＨＣ構造が免疫原性ペプチドとの接触点を提供し得る残基である。

【0097】

マイクロＲＮＡ：本明細書で使用する場合、「マイクロＲＮＡ」とう用語は、遺伝子発現の制御に関与する生体分子の主要なクラスを指す。例えば、ヒトの心臓、肝臓、または脳において、ｍｉＲＮＡは、組織仕様または細胞系統決定における役割を果たし、さらに、ｍｉＲＮＡは、早期発達、細胞増殖、および細胞死、ならびにアポトーシスおよび脂肪代謝を含む様々なプロセスに影響を与える。多数のｍｉＲＮＡ遺伝子、多様な発現パターン、および潜在的なｍｉＲＮＡ標的が豊富であることは、ｍｉＲＮＡが遺伝的多様性の重要な供給源であり得ることを示唆している。

【0098】

成熟ｍｉＲＮＡは、典型的には、ｍｉＲＮＡに相補的な配列を含むｍＲＮＡの発現を調節する８～２５ヌクレオチドの非コードＲＮＡである。これらの小さなＲＮＡ分子は、ｍＲＮＡの安定性および／または翻訳を調節することによって遺伝子発現を制御することが既知である。例えば、ｍｉＲＮＡは、標的ｍＲＮＡの３’ＵＴＲに結合し、翻訳を抑制する。ｍｉＲＮＡはまた、標的ｍＲＮＡに結合し、ＲＮＡｉ経路を介して遺伝子サイレンシングを媒介し得る。ｍｉＲＮＡはまた、クロマチン凝縮を引き起こすことによって遺伝子発現を調節し得る。

【0099】

ｍｉＲＮＡは、ｍｉＲＮＡ転写産物上のどこかでｍｉＲＮＡと直接塩基対を形成してｍｉＲＮＡと相互作用する任意の配列として定義されるｍｉＲＮＡ認識エレメント（ＭＲＥ）に結合することによって、１つ以上の特異的ｍＲＮＡ分子の翻訳をサイレンシングする。ＭＲＥは、多くの場合、ｍＲＮＡの３’非翻訳領域（ＵＴＲ）に存在するが、ＭＲＥは、コード配列または５’ＵＴＲにも存在し得る。ＭＲＥは、必ずしもｍｉＲＮＡに対して完全な相補体ではなく、通常、ｍｉＲＮＡに対して相補性であるいくつかの塩基のみしか有さず、多くの場合、それらの相補性の塩基内に１つ以上のミスマッチを含む。ＭＲＥは、ＭＲＥが作動可能に連結されている遺伝子（インビボでの増殖に必須であるかまたはそれを増強するＣＭＶ遺伝子など）の翻訳がＲＩＳＣなどのｍｉＲＮＡサイレンシング機序によって抑制されるように、ｍｉＲＮＡによって十分に結合可能な任意の配列であり得る。

【0100】

変異：本明細書で使用する場合、「変異」という用語は、正常な配列、コンセンサス配列、または「野生型」配列由来の核酸またはポリペプチド配列における任意の差異を指す。変異体は、変異を含む任意のタンパク質または核酸配列である。さらに、変異を有する細胞または生物は、変異体と称され得る。コード配列変異のいくつかの種類には、点変異（個々のヌクレオチドまたはアミノ酸の差異）、サイレント変異（アミノ酸変化をもたらさないヌクレオチドの差異）、欠失（１つ以上のヌクレオチドまたはアミノ酸を失う差異、最大で遺伝子のコード配列全体の欠失を含む）、フレームシフト変異（３によって割ることができない多くのヌクレオチドの欠失がアミノ酸配列の変化をもたらす差異）が含まれる。アミノ酸の差異をもたらす変異は、アミノ酸置換変異とも呼ばれ得る。アミノ酸置換変異は、アミノ酸配列中の特定の位置における野生型に対するアミノ酸変化によって説明され得る。

【0101】

ヌクレオチド配列または核酸配列：「ヌクレオチド配列」および「核酸配列」という用語は、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、ＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッド、または合成核酸を含むがこれらに限定されない、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）またはリボ核酸（ＲＮＡ）配列を指す。核酸は、一本鎖、または部分的もしくは完全に二本鎖（二重鎖）であり得る。二重鎖核酸は、ホモ二重鎖またはヘテロ二重鎖であり得る。

【0102】

作動可能に連結：「作動可能に連結された」という用語を本明細書で使用する場合、第１の核酸配列が第２の核酸配列に影響を及ぼすような様式で配置されるときに、第１の核酸配列は、第２の核酸配列と作動可能に連結される。作動可能に連結されたＤＮＡ配列は、連続であり得、または離れて作動し得る。

【0103】

プロモーター：本明細書で使用する場合、「プロモーター」という用語は、核酸の転写を指示する多くの核酸制御配列のうちのいずれかを指し得る。典型的には、真核生物プロモーターは、ポリメラーゼＩＩ型プロモーターの場合などの転写の開始部位近くに必要な核酸配列、ＴＡＴＡエレメント、または１つ以上の転写因子によって認識される任意の他の特異的ＤＮＡ配列が含まれる。プロモーターによる発現は、エンハンサーまたはリプレッサーエレメントによってさらに調節され得る。プロモーターの多数の例が利用可能であり、当業者に周知である。特定のポリペプチドをコードする核酸配列と作動可能に連結されたプロモーターを含む核酸は、発現ベクターと称され得る。

【0104】

組換え：本明細書で使用する場合、核酸またはポリペプチドに関して「組換え」という用語は、天然に存在しない配列を有するものか、または異種抗原を含むＣＭＶベクターなどの、分離された２つ以上の配列セグメントの人工的な組み合わせによって作製された配列を有するものを指す。この人工的な組み合わせは、多くの場合、化学合成によって達成され、またはより一般的には、単離された核酸セグメントの人工的な操作、例えば、遺伝子工学技術によって達成される。組換えポリペプチドは、ポリペプチドの天然供給源ではない宿主生物に転写される組換え核酸（例えば、異種抗原を含むＣＭＶベクターを形成するポリペプチドをコードする核酸）を含む組換え核酸を使用して作製されたポリペプチドも指し得る。

【0105】

薬学的に許容される担体：本明細書で使用する場合、使用される「薬学的に許容される担体」は、従来のものである。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｂｙ Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９５は、本明細書に開示される組成物の薬学的送達に好適な組成物および製剤を記載している。一般に、担体の性質は、使用される特定の投与様式に依存する。例えば、非経口製剤は、通常、ビヒクルとして、水、生理食塩水、平衡塩溶液、水性デキストロース、グリセロールなどの薬学的および生理学的に許容される流体を含む、注射可能な流体を含む。固体組成物（散剤、丸剤、錠剤、またはカプセル形態など）のために、従来の非毒性固体担体は、例えば、医薬グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、またはステアリン酸マグネシウムを含み得る。生物学的に中性の担体に加えて、投与される医薬組成物は、少量の非毒性補助物質、例えば、湿潤剤または乳化剤、防腐剤、およびｐＨ緩衝剤など、例えば、酢酸ナトリウムまたはソルビタンモノラウレートを含み得る。

【0106】

ポリヌクレオチド：本明細書で使用する場合、「ポリヌクレオチド」という用語は、リボ核酸（ＲＮＡ）またはデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）のポリマーを指す。ポリヌクレオチドは、アデニン、シトシン、グアニン、およびチミン／ウラシル（ウラシルはＲＮＡで使用される）の４つの塩基からなる。核酸由来のコード配列は、核酸によってコードされるタンパク質の配列を示す。

【0107】

ポリペプチド：「タンパク質」、「ペプチド」、「ポリペプチド」、および「アミノ酸配列」という用語は、任意の長さのアミノ酸残基のポリマーを指すために本明細書で互換的に使用される。ポリマーは、直鎖状または分枝状であり得、修飾されたアミノ酸またはアミノ酸類似体を含み得、アミノ酸以外の化学部分によって中断され得る。この用語はまた、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、または標識もしくは生物活性成分との結合などの任意の他の操作もしくは修飾などの、天然で修飾されたまたは介入によって修飾されたアミノ酸ポリマーを包含する。

【0108】

タンパク質のオーソログは、典型的には、デフォルトパラメータに設定されたＡＬＩＧＮを使用して、特定のタンパク質のアミノ酸配列との全長アラインメントにわたってカウントされる７５％超の配列同一性を有することによって特徴付けられる。参照配列とさらに大きな類似性を有するタンパク質は、この方法によって評価したときに、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、または少なくとも９８％の配列同一性などの増加した同一性パーセンテージを示す。さらに、配列同一性は、本開示のペプチドの特定のドメインの完全長にわたって比較することができる。

【0109】

配列同一性／類似性：本明細書で使用する場合、２つ以上の核酸配列間または２つ以上のアミノ酸配列間の同一性／類似性は、配列間の同一性または類似性に関して表される。配列同一性は、同一性パーセンテージに関して測定され得、パーセンテージが高いほど、配列はより同一である。配列類似性は、（保存的アミノ酸置換を考慮に入れた）同一性または類似性パーセンテージに関して測定され得、パーセンテージが高いほど、配列が類似している。有意な量の配列同一性を有し、かつ、互いに同じまたは類似した機能も発揮するポリペプチドまたはそのタンパク質ドメイン（例えば、異なる種において同じ機能を果たすタンパク質またはタンパク質の機能もしくはその大きさを変化させないタンパク質の変異形態）は、「ホモログ」と呼ばれ得る。

【0110】

比較のための配列のアラインメント方法は、当該技術分野で周知である。様々なプログラムおよびアラインメントアルゴリズムが、Ｓｍｉｔｈ ＆ Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖ Ａｐｐｌ Ｍａｔｈ ２，４８２（１９８１）、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ＆ Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ４８，４４３（１９７０）、Ｐｅａｒｓｏｎ ＆ Ｌｉｐｍａｎ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８５，２４４４（１９８８）、Ｈｉｇｇｉｎｓ ＆ Ｓｈａｒｐ，Ｇｅｎｅ ７３，２３７－２４４（１９８８）、Ｈｉｇｇｉｎｓ ＆ Ｓｈａｒｐ，ＣＡＢＩＯＳ ５，１５１－１５３（１９８９）、Ｃｏｒｐｅｔ ｅｔ ａｌ，Ｎｕｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ １６，１０８８１－１０８９０（１９８８）、Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ，Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｐｐ Ｂｉｏｓｃｉ ８，１５５－１６５（１９９２）、およびＰｅａｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｍｅｔｈ Ｍｏｌ Ｂｉｏ ２４，３０７－３３１（１９９４）に記載される。さらに、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２１５，４０３－４１０（１９９０）は、配列アラインメント方法および相同性計算の詳細な考察を提供する。

【0111】

ＮＣＢＩ Ｂａｓｉｃ Ｌｏｃａｌアラインメント検索ツール（ＢＬＡＳＴ）（上記のＡｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ，（１９９０）は、配列分析プログラムｂｌａｓｔｐ、ｂｌａｓｔｎ、ｂｌａｓｔｘ、ｔｂｌａｓｔｎ、およびｔｂｌａｓｔｘに関連した使用のために、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｌｉｂｒａｒｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｂｕｉｌｄｉｎｇ ３８Ａ，Ｒｏｏｍ ８Ｎ８０５，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ ２０８９４）およびインターネットを含むいくつかの供給源から入手可能である。追加の情報は、ＮＣＢＩのウェブサイトで見出し得る。

【0112】

ＢＬＡＳＴＮは、核酸配列の比較に使用され、ＢＬＡＳＴＰは、アミノ酸配列の比較に使用される。比較した２つの配列が相同性を有する場合、指定された出力ファイルはそれらの相同性領域をアラインメントされた配列として提示する。２つの比較された配列が相同性を有しない場合、指定された出力ファイルはアラインメントされた配列を提示しない。

【0113】

アラインした際に、同一のヌクレオチドまたはアミノ酸残基が両方の配列において提示されている位置の数をカウントすることにより、一致する数が決定される。配列同一性パーセントは、一致する数を、特定された配列中に示される配列の長さまたは連接した（ａｒｔｉｃｕｌａｔｅｄ）長さ（特定された配列中に示される配列由来の１００個の連続したヌクレオチドまたはアミノ酸残基など）のいずれかで割り、続いて、得られた値を１００倍することによって決定される。例えば、１１６６個の一致を有する核酸配列は、１１５４個のヌクレオチドを有する試験配列とアラインしたときに、試験配列と７５．０パーセント同一である（１１６６÷１５５４＊１００＝７５．０）。配列同一性パーセント値は、切り捨てを行って最も近い１０分の１とする。例えば、７５．１１、７５．１２、７５．１３、および７５．１４は切り捨てを行って７５．１となり、７５．１５、７５．１６、７５．１７、７５．１８、および７５．１９は切り捨てを行って７５．２となる。長さの値は常に整数である。別の例では、以下のように、特定された配列由来の２０個の連続したヌクレオチドとアラインする２０個のヌクレオチド領域を含む標的配列は、その特定された配列と７５パーセントの配列同一性を有する領域を含む（すなわち、１５÷２０×１００＝７５）。

【0114】

アミノ酸が約３０より大きいアミノ酸配列の比較のために、Ｂｌａｓｔ２配列機能を使用し、デフォルトパラメータに設定されたデフォルトＢＬＯＳＵＭ６２マトリックス（ギャップ存在コスト（ｇａｐ ｅｘｉｓｔｅｎｃｅ ｃｏｓｔ）１１および１残基当たりギャップコスト（ｐｅｒ ｒｅｓｉｄｕｅ ｇａｐ ｃｏｓｔ）１）を用いる。ホモログは、典型的には、ＮＣＢＩ Ｂａｓｉｃ Ｂｌａｓｔ２．０、ｎｒデータベース、ｓｗｉｓｓｐｒｏｔデータベース、および特許取得配列データベースなどのデータベースを用いたギャップド（ｇａｐｐｅｄ）ｂｌａｓｔｐを使用して、アミノ酸配列との全長アラインメントにわたってカウントされる少なくとも７０％の配列同一性を有することを特徴とする。ｂｌａｓｔｎプログラムで検索されたクエリは、ＤＵＳＴでフィルタリングされる（Ｈａｎｃｏｃｋ ＆ Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ，Ｃｏｍｐｕｔ Ａｐｐｌ Ｂｉｏｓｃｉ １０，６７－７０（１９９４））。他のプログラムはＳＥＧを使用する。さらに、手動アラインメントを行い得る。さらにより大きな類似性を有するタンパク質は、この方法によって評価したときに、タンパク質と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％の配列同一性などの増加した同一性パーセンテージを示す。

【0115】

短いペプチド（約３０アミノ酸未満）をアラインメントする場合、Ｂｌａｓｔ２配列機能を使用し、デフォルトパラメータ（オープンギャップ９、伸長ギャップ１ペナルティ）に設定されたＰＡＭ３０マトリックスを用いて、アラインメントを行う。参照配列とさらにより大きい類似性を有するタンパク質は、この方法によって評価したときに、タンパク質と少なくとも約６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％の配列同一性などの増加した同一性パーセンテージを示す。全配列未満を配列同一性について比較する場合、ホモログは、典型的には、１０～２０個のアミノ酸の短い窓にわたって少なくとも７５％の配列同一性を有し、参照配列との同一性に依存して少なくとも８５％、９０％、９５％、または９８％の配列同一性を有し得る。そのような短いウィンドウでの配列同一性を決定するための方法は、ＮＣＢＩウェブサイトに記載されている。

【0116】

２つの核酸分子が密接に関連していることを示す１つの指標は、上記のように、２つの分子がストリンジェントな条件下で互いにハイブリダイズすることである。それにもかかわらず、高い程度の同一性を示さない核酸配列は、遺伝子コードの縮重により、同一または類似の（保存された）アミノ酸配列をコードし得る。すべてが実質的に同じタンパク質をコードする複数の核酸分子を生成するために、核酸配列における変化は、この変性を使用して行われ得る。そのような相同な核酸配列は、例えば、タンパク質をコードする核酸と少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％の配列同一性を有することができる。

【0117】

対象：本明細書で使用する場合、「対象」という用語は、ヒトおよび非ヒト哺乳動物の両方を含むカテゴリーである、生きている多細胞脊椎動物を指す。

【0118】

スーパートープ：本明細書で使用される「スーパートープ」または「スーパートープペプチド」という用語は、ＭＨＣハプロタイプに関係なく、すなわち、所与のＭＨＣ－Ｉ、ＭＨＣ－ＩＩ、またはＭＨＣ－Ｅ対立遺伝子の存在の有無によらず、ヒト集団の約９０％超においてＴ細胞によって認識されるエピトープまたはペプチドを指す。

【0119】

治療：本明細書で使用する場合、「治療」という用語は、疾患または病的状態の徴候または症状を改善する介入を指す。本明細書で使用する場合、疾患、病的状態または症状に関する「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「治療する（ｔｒｅａｔ）」、および「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語はまた、治療の任意の観察可能な有益な効果を指す。有益な効果は、例えば、罹患しやすい対象における疾患の臨床症状の発症の遅延、いくつかまたはすべての疾患臨床症状の重症度の低減、疾患の進行の遅延、疾患の再発数の低減、対象の全体的な健康または福祉の改善、または特定の疾患に特異的な当該技術分野で周知の他のパラメータによって証明付けされ得る。予防的治療は、病状を発症するリスクを低下させる目的で、疾患の徴候を示さない、または初期徴候のみを示す対象に施される治療である。療法的治療（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）は、疾患の徴候および症状が発現した後に対象に施される治療である。

【0120】

ワクチン：疾患または他の病的状態に対する能動免疫などの免疫を付与するために、ヒトなどの哺乳動物に投与することができる免疫原性組成物。ワクチンは、予防的または治療的に使用することができる。したがって、ワクチンは、疾患（腫瘍もしくは病的感染症など）を発症する可能性を低減するか、または疾患もしくは状態の症状の重症度を低減するか、または疾患もしくは状態（腫瘍もしくは病的感染症など）の進行を制限するか、または疾患もしくは状態（腫瘍など）の再発を制限するために使用することができる。特定の実施形態では、ワクチンは、肺、前立腺、卵巣、乳房、結腸、子宮頸部、肝臓、腎臓、骨の腫瘍、または黒色腫に由来する腫瘍関連抗原などの異種抗原を発現する複製欠損ＣＭＶである。

【0121】

ベクター：特定の配列の核酸分子をベクターに組み込むことができ、次いで該ベクターは宿主細胞に導入され、それによって、形質転換された宿主細胞が生成される。ベクターは、宿主細胞においてその複製を可能にする核酸配列、例えば、複製起点を含み得る。ベクターはまた、１つ以上の選択可能なマーカー遺伝子、および核酸発現を指示するプロモーターエレメントを含む当該技術分野で既知の他の遺伝子エレメントを含み得る。ベクターは、ＣＭＶベクターなどのウイルスベクターであり得る。ウイルスベクターは、野生型ウイルスまたは複製欠損ウイルスを含む減弱ウイルスから構築され得る。

【0122】

ＩＩ．ＨＣＭＶのＵＬ１８によるＴ細胞応答の調節方法
本明細書では、ＨＣＭＶのＵＬ１８によるＴ細胞応答の調節方法を開示する。本方法は、有効量の、少なくとも１つの異種抗原を含む少なくとも１つの組換えＨＣＭＶベクターを対象に投与することを含み、ＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８を発現しない。

【0123】

いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量のＨＣＭＶベクターを対象に投与することを含む、少なくとも１つの異種抗原に対する免疫応答を生成することをさらに含む。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも１つの異種抗原に対してＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量のＨＣＭＶベクターを投与することを含む、対象におけるがんを治療または予防することをさらに含む。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量のＨＣＭＶベクターを投与することを含む、対象における病原体感染症を治療または予防することをさらに含む。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量のＨＣＭＶベクターを対象に投与することを含む、対象における自己免疫疾患または障害を治療することをさらに含む。

【0124】

いくつかの実施形態では、ＵＬ１８欠損ＨＣＭＶベクターはまた、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における変異の存在により、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７タンパク質を発現しない。さらに、ＵＬ１８欠損ＨＣＭＶベクターのいずれかは、ＵＳ１１および／またはＵＬ８２をコードする核酸配列における変異の存在により、ＵＳ１１および／またはＵＬ８２タンパク質を欠損し得る。変異は、活性タンパク質の発現の欠如をもたらす任意の変異であり得る。そのような変異には、点変異、フレームシフト変異、タンパク質をコードする配列のすべて未満の欠失（切断変異）、もしくはタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失、または任意の他の変異が含まれ得る。

【0125】

いくつかの実施形態では、ＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７を欠如し、ＵＬ４０およびＵＳ２８を発現する。

【0126】

いくつかの実施形態では、ＨＣＭＶベクターは、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７（および任意選択的にＵＬ８２）を欠如し、ＵＬ４０およびＵＳ２８を発現し、ＭＲＥは、内皮細胞で発現されるマイクロＲＮＡの標的部位を含む。内皮細胞で発現されるそのようなｍｉＲＮＡの例は、ｍｉＲ１２６、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－２１０、ｍｉＲ－２２１／２２２、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－２９６、およびｍｉＲ－３２８である。いくつかの実施形態では、ＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８を欠如し、ＭＲＥは、骨髄細胞で発現されるマイクロＲＮＡの標的部位を含む。骨髄細胞で発現されるそのようなｍｉＲＮＡの例は、ｍｉＲ－１４２－ｅｐ、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－６５２、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－２１、およびｍｉＲ－１２５である。

【0127】

ＭＲＥは、内皮細胞によって発現されるｍｉＲＮＡの存在下で発現をサイレンシングする任意のｍｉＲＮＡ認識エレメントであり得る。ＭＲＥは、骨髄細胞によって発現されるｍｉＲＮＡの存在下で発現をサイレンシングする任意のｍｉＲＮＡ認識エレメントであり得る。そのようなＭＲＥは、ｍｉＲＮＡの正確な相補体であり得る。あるいは、他の配列を所与のｍｉＲＮＡのためのＭＲＥとして使用し得る。例えば、ＭＲＥは、配列から予測され得る。一例では、ｍｉＲＮＡは、ウェブサイトｍｉｃｒｏＲＮＡ．ｏｒｇ（ｗｗｗ．ｍｉｃｒｏｒｎａ．ｏｒｇ）で検索され得る。次いで、ｍｉＲＮＡのｍＲＮＡ標的のリストが列挙される。そのページの列挙された各標的について、「アラインメントの詳細」にアクセスし、推定ＭＲＥにアクセスし得る。

【0128】

当業者は、文献から、マクロファージなどの骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡの存在下でサイレンシングを誘導すると予測される妥当な、推定の、または変異したＭＲＥ配列を選択し得る。一例には、上記の参照のウェブサイトが含まれる。次いで、当業者は、レポーター遺伝子（蛍光タンパク質、酵素、または他のレポーター遺伝子など）が、構成的に活性なプロモーターまたは細胞特異的プロモーターなどのプロモーターによって駆動される発現を有する、発現構築物を取得し得る。次いで、ＭＲＥ配列を発現構築物に導入し得る。発現構築物を適切な細胞にトランスフェクトし、細胞には関心のあるｍｉＲＮＡをトランスフェクトし得る。レポーター遺伝子の発現の欠如は、ＭＲＥがｍｉＲＮＡの存在下で遺伝子発現をサイレンシングしていることを示す。

【0129】

いくつかの実施形態では、異種抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍抗原、腫瘍特異的抗原、または宿主自己抗原であり得る。いくつかの実施形態では、宿主自己抗原は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変領域に由来し、またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である。

【0130】

病原体特異的抗原は、例えば、ヒト免疫不全ウイルス、サル免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに由来し得る。

【0131】

腫瘍抗原は、腫瘍細胞に比較的限定され、免疫応答を誘導する任意のタンパク質であり得る。しかしながら、多くの腫瘍抗原は、宿主（自己）タンパク質であり、したがって、典型的には、宿主免疫系によって抗原性とみなされない。腫瘍抗原はまた、がん細胞によって異常発現され得る。腫瘍抗原はまた、がん細胞で発現される生殖細胞系列／精巣抗原、成人組織で発現されない細胞系統分化抗原、またはがん細胞で過剰発現される抗原であり得る。腫瘍抗原には、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）；ウィルムス腫瘍抑制タンパク質（ＷＴ１）；メソテリン（ＭＳＬＮ）；Ｈｅｒ－２（ＨＥＲ２）；ＨＰＶ１６株のヒトパピローマウイルス抗原Ｅ６；ＨＰＶ１６株のヒトパピローマウイルス抗原Ｅ７；ＨＰＶ１８株のヒトパピローマウイルス抗原Ｅ６；ＨＰＶ１８株のヒトパピローマウイルス抗原Ｅ７；ＨＰＶ１６およびＨＰＶ１８株由来のヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７の融合タンパク質；ムチン１（ＭＵＣ１）；ＬＭＰ２；皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）；ｐ５３；ニューヨーク食道１（ＮＹ－ＥＳＯ－１）；前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）；ＧＤ２、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）；黒色腫抗原ａ／Ｔ細胞によって認識される黒色腫抗原１（ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１）；Ｒａｓ；ｇｐ１００、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、Ｂｃｒ－ａｂｌ；サバイビン；前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）；ヒトテロメラーゼ逆転写酵素（ｈＴＥＲＴ）；ＥｐｈＡ２；ＭＬ－ＩＡＰ；アルファフェトタンパク質（ＡＦＰ）；ＥｐＣＡＭ；ＥＲＧ；ＮＡ１７；ＰＡＸ３；ＡＬＫ；アンドロゲン受容体（ＡＲ）；サイクリンＢ１；ＭＹＣＮ；ＲｈｏＣ；チロシン関連タンパク質２（ＴＲＰ－２）；ＧＤ３；フコシルＧＭ１；ＰＳＣＡ；ｓＬｅ（ａ）；ＣＹＰ１Ｂ１；ＰＬＣＡ１；ＧＭ３；ＢＯＲＩＳ；Ｔｎ；グロボＨ（ＧｌｏｂｏＨ）；Ｅｔｓバリアント遺伝子６／急性骨髄性白血病１遺伝子ＥＴＳ（ＥＴＶ６－ＡＭＬ）；ＮＹ－ＢＲ－１；ＲＧＳ５；扁平上皮抗原拒絶腫瘍または３（ＳＡＲＴ３）；ＳＴｎ；炭酸脱水酵素ＩＸ；ＰＡＸ５；ＯＹ－ＴＥＳ１；精子タンパク質１７；ＬＣＫ；ＨＭＷＭＡＡ；ＡＫＡＰ－４；ＳＳＸ２；Ｂ７Ｈ３；レグマイン；Ｔｉｅ２；Ｐａｇｅ４；ＶＥＧＦＲ２；ＭＡＤ－ＣＴ－１；ＦＡＰ；ＰＤＧＦＲ；ＭＡＤ－ＣＴ－２；Ｆｏｓ関連抗原１；ＴＡＧ－７２；９Ｄ７；ＥｐｈＡ３；テロメラーゼ；ＳＡＰ－１；ＢＡＧＥファミリー；ＣＡＧＥファミリー；ＧＡＧＥファミリー；ＭＡＧＥファミリー；ＳＡＧＥファミリー；ＸＡＧＥファミリー；黒色腫優先発現抗原（ＰＲＡＭＥ）；メラノコルチン１受容体（ＭＣ１Ｒ）；β－カテニン；ＢＲＣＡ１／２；ＣＤＫ４；慢性骨髄性白血病６６（ＣＭＬ６６）；ＴＧＦ－βが含まれるが、これらに限定されない。特定の実施形態では、宿主自己抗原には、前立腺酸性ホスファターゼ、ウィルムス腫瘍抑制タンパク質、メソテリン、またはＨｅｒ－２が含まれる。

【0132】

いくつかの実施形態では、腫瘍抗原は、がんに由来する。がんには、急性リンパ芽球性白血病；急性骨髄性白血病；副腎皮質がん；エイズ関連のがん；エイズ関連リンパ腫；肛門がん；虫垂がん；星状細胞腫、小児小脳または大脳；基底細胞がん；胆管がん、肝外；膀胱がん；骨のがん、骨肉腫／悪性線維性組織球腫；脳幹神経膠腫；脳腫瘍；脳腫瘍、小脳星状細胞腫；脳腫瘍、大脳星状細胞腫／悪性神経膠腫；脳腫瘍、上衣腫；脳腫瘍、髄芽腫；脳腫瘍、テント上原始神経外胚葉性腫瘍；脳腫瘍、視覚経路および視床下部神経膠腫；乳がん；気管支腺腫／カルチノイド；バーキットリンパ腫；カルチノイド腫瘍、小児；カルチノイド腫瘍、胃腸；原発不明がん；中枢神経系リンパ腫、原発性；小脳星状細胞腫、小児；大脳星状細胞腫／悪性神経膠腫、小児；子宮頚がん；小児がん；慢性リンパ性白血病；慢性骨髄性白血病；慢性骨髄増殖性疾患；結腸がん；皮膚Ｔ細胞リンパ腫；線維形成性小円形細胞腫瘍；子宮内膜がん；上衣腫；食道がん；ユーイング腫瘍ファミリーにおけるユーイング肉腫；頭蓋外胚細胞腫瘍、小児；性腺外胚細胞腫瘍；肝外胆管がん；眼のがん、眼内黒色腫；眼のがん、網膜芽細胞腫；胆嚢がん；胃（Ｇａｓｔｒｉｃ）（胃（Ｓｔｏｍａｃｈ））がん；消化管カルチノイド腫瘍；消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）；胚細胞腫瘍：頭蓋外、性腺外、または卵巣；妊娠性絨毛腫瘍；脳幹の神経膠腫；神経膠腫、小児大脳星状細胞腫；神経膠腫、小児視覚経路および視床下部；胃カルチノイド；有毛細胞白血病；頭頸部がん；心臓がん；肝細胞（肝臓）がん；ホジキンリンパ腫；下咽頭がん；視床下部および視覚経路神経膠腫、小児；眼内黒色腫；膵島細胞がん（内分泌膵臓）；カポジ肉腫；腎臓がん（腎細胞がん）；喉頭がん；白血病；白血病、急性リンパ芽球性（急性リンパ性白血病とも呼ばれる）；白血病、急性骨髄性（急性骨髄性白血病とも呼ばれる）；白血病、慢性リンパ性白血病（慢性リンパ性白血病とも呼ばれる）；白血病、慢性骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）（慢性骨髄性（ｍｙｅｌｏｉｄ）白血病とも呼ばれる）；白血病、有毛細胞；唇および口腔がん；肝臓がん（原発性）；肺がん、非小細胞；肺がん、小細胞；リンパ腫；リンパ腫、エイズ関連；リンパ腫、バーキット；リンパ腫、皮膚Ｔ細胞；リンパ腫、ホジキン；リンパ腫、非ホジキン（ホジキンを除くすべてのリンパ腫の古い分類）；リンパ腫、原発性中枢神経系；マーカスホイットル、致死性疾患；マクログロブリン血症、ワルデンシュトレーム；骨の悪性線維性組織球腫／骨肉腫；髄芽腫、小児；黒色腫；黒色腫、眼内（眼）；メルケル細胞がん；中皮腫、成人悪性；中皮腫、小児；原発不明の転移性頸部扁平上皮がん；口腔がん；多発性内分泌腫瘍症候群、小児期；多発性骨髄腫／形質細胞新生物；菌状息肉腫；骨髄異形成症候群；骨髄異形成／骨髄増殖性疾患；骨髄性白血病、慢性；骨髄性白血病、成人急性；骨髄性白血病、小児急性；骨髄腫、多発性（骨髄のがん）；骨髄増殖性疾患、慢性；鼻腔および副鼻腔がん；鼻咽頭がん；神経芽腫；非ホジキンリンパ腫；非小細胞肺がん；口腔がん；中咽頭がん；骨肉腫／骨の悪性線維性組織球腫；卵巣がん；卵巣上皮がん（表層上皮性・間質腫瘍）；卵巣胚細胞腫瘍；卵巣低悪性度腫瘍；膵臓がん；膵臓がん、膵島細胞；副鼻腔および鼻腔がん；副甲状腺がん；陰茎がん；咽頭がん；褐色細胞腫；松果体星状細胞腫；松果体胚細胞腫；松果体芽腫およびテント上原始神経外胚葉性腫瘍、小児；下垂体腺腫；形質細胞新生物／多発性骨髄腫；胸膜肺芽腫；原発性中枢神経系リンパ腫；前立腺がん；直腸がん；腎細胞がん（腎臓がん）；腎盂および尿管、移行上皮がん；網膜芽腫；横紋筋肉腫、小児；唾液腺がん；肉腫、ユーイング腫瘍ファミリー；肉腫、カポジ；肉腫、軟部組織；肉腫、子宮；セザリー症候群；皮膚がん（非黒色腫）；皮膚がん（黒色腫）；皮膚がん、メルケル細胞；小細胞肺がん；小腸がん；軟部肉腫；扁平上皮がん－皮膚がん（非黒色腫）を参照されたい；原発不明の頸部扁平上皮がん、転移性；胃がん；テント上原始神経外胚葉性腫瘍、小児；Ｔ細胞リンパ腫、皮膚（菌状息肉腫およびセザリー症候群）；精巣がん；咽喉がん；胸腺腫、小児；胸腺腫および胸腺がん；甲状腺がん；甲状腺がん、小児；腎盂および尿管の移行上皮がん；絨毛性腫瘍、妊娠；原発部位不明のがん、成人；原発部位不明のがん、小児；尿管および腎盂、移行上皮がん；尿道がん；子宮がん、子宮内膜；子宮肉腫；膣がん；視覚経路および視床下部神経膠腫、小児；外陰がん；ワルデンシュトレームマクログロブリン血症；およびウィルムス腫瘍（腎臓がん）が含まれるが、これに限定されない。

【0133】

いくつかの実施形態では、病原体特異的抗原は、ＭＨＣ－Ｅスーパートープである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＨＩＶエピトープである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）と少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープのうちの１つ以上は、融合タンパク質を生成するために使用される。融合タンパク質は、任意の順序で、ＭＨＣ－Ｅスーパートープのうちの１つ以上を含み得る。

【0134】

いくつかの実施形態では、ＨＣＭＶベクターは、少なくとも１つの異種抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発するのに有効な量で投与される。いくつかの実施形態では、ベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞応答は、ＭＨＣ－Ｅによって提示されるエピトープに対して指向されるＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％を有することを特徴とする。さらなる例では、ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％が、ＭＨＣ－Ｅによって拘束される。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅによって拘束されるＣＤ８＋Ｔ細胞は、ベクターで免疫化した他の対象の少なくとも９０％によって保有されるペプチドを認識した。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－Ｅによって提示されるスーパートープに対して指向される。

【0135】

いくつかの実施形態では、方法は、ＨＣＭＶベクターから誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞から、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を特定することをさらに含む。

【0136】

ＴＣＲは、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定され得る。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ヒト免疫不全ウイルスエピトープである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）と少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である。

【0137】

いくつかの実施形態では、方法は、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７（および任意選択でＵＬ８２）のオーソログの発現を欠損し、かつ、ＵＬ４０およびＵＳ２８のオーソログを発現する、アカゲザルまたはカニクイザルマカクＣＭＶ（ＲｈＣＭＶまたはＣｙＣＭＶ）などの非ヒト霊長類ＣＭＶによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞からＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を特定するための、スーパートープペプチドの使用をさらに含む。ＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ＋Ｔ細胞は、ＲｈＣＭＶを用いてアカゲザルマカクで誘発されるか、またはＣｙＣＭＶを用いてカニクイザルマカクで誘発される。

【0138】

いくつかの実施形態では、ＨＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞応答は、ＭＨＣ－ＩＩによって提示されるエピトープに対して指向されるＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％を有することを特徴とする。さらなる例では、ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％は、ＭＨＣ－ＩＩによって拘束される。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－ＩＩによって拘束されるＣＤ８＋Ｔ細胞は、ベクターで免疫化した他の対象の少なくとも９０％によって保有されるペプチドを認識した。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－ＩＩによって提示されるスーパートープに対して指向される。

【0139】

いくつかの実施形態では、方法は、ＨＣＭＶベクターから誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を特定することをさらに含む。ＴＣＲは、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定され得る。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する。

【0140】

いくつかの実施形態では、ＵＳ１１も欠如するＵＬ１８欠損ＨＣＭＶベクターによって誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞応答は、ＭＨＣ－Ｉａによって提示されるエピトープに対して指向されるＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１０％を有することを特徴とする。さらなる例では、ＣＤ８＋Ｔ細胞の少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９５％は、ＭＨＣ－Ｉａによって拘束される。

【0141】

いくつかの実施形態では、方法は、ＵＬ１８およびＵＳ１１欠損ＨＣＭＶベクターから誘発されるＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を特定することをさらに含む。ＴＣＲは、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって特定され得る。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋ＴＣＲは、ＭＨＣ－Ｉａ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。

【0142】

ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法も本明細書で開示される。この方法は、ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量のＨＣＭＶベクターを第１の対象に投与することを含む。ＣＭＶベクターは、少なくとも１つの異種抗原をコードする第１の核酸配列を含み、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質を発現しない。ベクターはまた、ＵＬ８２タンパク質を欠如し得る。いくつかの実施形態では、ＨＣＭＶベクターは、ＵＬ４０およびＵＳ２８を発現する。いくつかの実施形態では、ＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１３８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７タンパク質を発現せず、ＵＬ４０、ＵＳ２８、およびマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＲＥは、内皮細胞で発現されるマイクロＲＮＡの標的部位を含む。内皮細胞で発現されるそのようなｍｉＲＮＡの例は、ｍｉＲ１２６、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－２１０、ｍｉＲ－２２１／２２２、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－２９６、およびｍｉＲ－３２８である。

【0143】

抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍ウイルス抗原、腫瘍抗原、または宿主自己抗原を含む任意の抗原であり得る。いくつかの実施形態では、宿主自己抗原は、Ｔ細胞受容体またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である。

【0144】

この方法は、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。いくつかの実施形態では、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって識別される。いくつかの実施形態では、この方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることをさらに含み得、発現ベクターは、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列と、Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体のＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する１つ以上のトランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する。発現ベクターをトランスフェクトするための１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞は、第１の対象または第２の対象から単離され得る。

【0145】

いくつかの実施形態では、方法は、ＨＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。いくつかの実施形態では、方法は、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７のオーソログの発現を欠損し、かつ、ＵＬ４０およびＵＳ２８のオーソログを発現する、アカゲザルまたはカニクイザルマカクＣＭＶ（ＲｈＣＭＶまたはＣｙＣＭＶ）などの非ヒト霊長類ＣＭＶによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞からＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含む。ＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＲｈＣＭＶを用いてアカゲザルで誘発されるか、またはＣｙＣＭＶを用いてカニクイザルで誘発される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって特定される。いくつかの実施形態では、方法は、ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をさらに含む。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ヒト免疫不全ウイルスエピトープである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）と少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である。

【0146】

ＭＨＣ－Ｅ－ペプチド複合体を認識するＴＣＲトランスジェニックＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、組換えＨＣＭＶベクターから生成され、第１のＣＤ８＋ＴＣＲが、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定することと、（ｂ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｃ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識する１つ以上のＴＣＲトランスジェニックＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法も本明細書に開示される。

【0147】

（１）ＭＨＣ－Ｅ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量のＨＣＭＶベクター（ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、ＵＬ１４７、およびいくつかの実施形態ではＵＬ８２を欠失し、ＵＬ４０およびＵＳ２８を発現し、いくつかの実施形態では、マイクロＲＮＡ認識エレメントをコードする核酸配列を発現する）を第１の対象に投与する工程であって、組換えＨＣＭＶベクターが少なくとも１つの異種抗原を含む、投与する工程と、（２）ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定する工程であって、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞がＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定する工程と、（３）第１の対象または第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離する工程と、（４）第１または第２の対象から単離された１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトする工程であって、それによって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を作製し、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体に対する免疫応答を生成する、プロセスによって調製されるＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するＴＣＲトランスフェクト（ＴＣＲ－ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ）ＣＤ８＋Ｔ細胞も開示される。

【0148】

いくつかの実施形態では、この方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることをさらに含み得、発現ベクターは、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列と、Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体のＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する１つ以上の切断型（ｔｒａｎｓｅｃｔｅｄ）ＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する。発現ベクターをトランスフェクトするための１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞は、第１の対象または第２の対象から単離され得る。

【0149】

いくつかの実施形態では、第１および／または第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって特定される。いくつかの実施形態では、第１および／または第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＭＨＣ－Ｅスーパートープを認識する。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ヒト免疫不全ウイルスエピトープである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ－Ｅスーパートープは、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）と少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である。

【0150】

いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列は、第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と同一である。いくつかの実施形態では、第１および／または第２の対象は、ヒトまたは非ヒト霊長類である。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、キメラＣＤ８＋ＴＣＲである。いくつかの実施形態では、第１の対象は、非ヒト霊長類であり、第２の対象は、ヒトであり、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含むキメラ非ヒト霊長類－ヒトＣＤ８＋ＴＣＲである。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βを含む。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βを含む。

【0151】

がん、病原体感染症、または免疫疾患もしくは障害などの疾患を治療する方法であって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を第１または第２の対象に投与することを含む、方法も、本明細書で開示される。宿主自己抗原または組織特異的抗原に対する免疫応答を誘導する方法であって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を第１または第２の対象に投与することを含む、方法も、本明細書で開示される。

【0152】

がんには、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、中皮腫、悪性中皮腫、腎臓がん、子宮頚がん、中咽頭がん、肛門がん、陰茎がん、膣がん、外膣がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん、および胚細胞腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。

【0153】

病原体感染症には、ヒト免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓが含まれるが、これらに限定されない。

【0154】

ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＨＩＶスーパートープペプチドとの複合体におけるＭＨＣ－Ｅを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットからＭＨＣ－Ｅ／スーパートープペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７のオーソログを欠損した組換えアカゲザル（ＲｈＣＭＶ）またはカニクイザルＣＭＶ（ＣｙＣＣＭＶ）ベクターから生成される、特定することと、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量のＨＩＶ抗原を発現させることと、（ｂ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｃ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｅペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法も本明細書に開示される。

【0155】

ＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法も本明細書に開示される。この方法は、ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量のＣＭＶベクターを第１の対象（または動物）に投与することを含む。ＣＭＶベクターは、少なくとも１つの異種抗原をコードする第１の核酸配列を含み、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、またはＵＬ１４７タンパク質、およびいくつかの実施形態ではＵＬ８２タンパク質を発現しない。

【0156】

いくつかの実施形態では、ＵＬ１８欠損ＨＣＭＶベクターはまた、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＲＥは、骨髄細胞で発現されるマイクロＲＮＡの標的部位を含む。骨髄細胞で発現されるそのようなｍｉＲＮＡの例は、ｍｉＲ－１４２－ｅｐ、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－６５２、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－２１、およびｍｉＲ－１２５である。

【0157】

抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍ウイルス抗原、腫瘍抗原、または宿主自己抗原を含む任意の抗原であり得る。いくつかの実施形態では、宿主自己抗原は、Ｔ細胞受容体またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である。

【0158】

この方法は、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。いくつかの実施形態では、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって識別される。いくつかの実施形態では、この方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることをさらに含み得、発現ベクターは、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列と、Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体のＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する１つ以上のトランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する。発現ベクターをトランスフェクトするための１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞は、第１の対象または第２の対象から単離され得る。

【0159】

いくつかの実施形態では、方法は、ＨＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって特定される。いくつかの実施形態では、方法は、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をさらに含む。

【0160】

ＭＨＣ－ＩＩ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットからＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来のペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、組換えＨＣＭＶベクターから生成される、特定することと、（ｂ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｃ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法に関する。

【0161】

（１）ＭＨＣ－ＩＩ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量のＵＬ１８欠損ＨＣＭＶベクター（ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、もしくはＵＬ１４７（もしくはそれらの組み合わせ）、およびいくつかの実施形態ではＵＬ８２を欠損し、ならびに／またはマイクロＲＮＡ認識エレメントをコードする核酸を発現する）を第１の対象に投与することであって、組換えＣＭＶベクターが、少なくとも１つの異種抗原を含む、投与する工程と、（２）ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定する工程であって、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定する工程と、（３）第１の対象または第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離する工程と、（４）第１または第２の対象から単離された１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトする工程とを含み、それによって、ＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を作製し、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体に対する免疫応答を生成する、プロセスによって調製されたＭＨＣ－ＩＩ－ペプチド複合体を認識するＴＣＲトランスフェクトＣＤ８＋Ｔ細胞も開示される。

【0162】

いくつかの実施形態では、この方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることをさらに含み得、発現ベクターは、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列と、Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体のＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－ＩＩ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する１つ以上の切断型ＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する。発現ベクターをトランスフェクトするための１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞は、第１の対象または第２の対象から単離され得る。

【0163】

いくつかの実施形態では、第１および／または第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって特定される。いくつかの実施形態では、第１および／または第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＭＨＣ－ＩＩスーパートープを認識する。

【0164】

いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列は、第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と同一である。いくつかの実施形態では、第１および／または第２の対象は、ヒトまたは非ヒト霊長類である。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、キメラＣＤ８＋ＴＣＲである。いくつかの実施形態では、第１の対象は非ヒト霊長類であり、第２の対象はヒトであり、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含むキメラ非ヒト霊長類－ヒトＣＤ８＋ＴＣＲである。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲの非ヒト霊長類ＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βを含む。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βを含む。

【0165】

がん、病原体感染症、または免疫疾患もしくは障害などの疾患を治療する方法であって、ＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を第１または第２の対象に投与することを含む、方法も本明細書に開示される。宿主自己抗原または組織特異的抗原に対する免疫応答を誘導する方法であって、ＭＨＣ－ＩＩペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を第１または第２の対象に投与することを含む方法も本明細書に開示される。

【0166】

がんには、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、中皮腫、悪性中皮腫、腎臓がん、子宮頚がん、中咽頭がん、肛門がん、陰茎がん、膣がん、外膣がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん、および胚細胞腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。

【0167】

病原体感染症には、ヒト免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓが含まれるが、これらに限定されない。

【0168】

ＭＨＣ－Ｉａペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法も本明細書に開示される。この方法は、ＭＨＣ－Ｉａ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量の、ＵＳ１１タンパク質も欠損しているＵＬ１８欠損ＣＭＶベクターを第１の対象に投与することを含む。ＣＭＶベクターは、少なくとも１つの異種抗原をコードする第１の核酸配列を含み、ＵＳ１１タンパク質およびＵＬ１８タンパク質を発現しない。ベクターはまた、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、もしくはＵＬ１４６タンパク質、ＵＬ１４７タンパク質、および／またはＵＬ８２タンパク質を欠如し得る。抗原は、病原体特異的抗原、腫瘍ウイルス抗原、腫瘍抗原、または宿主自己抗原を含む任意の抗原であり得る。いくつかの実施形態では、宿主自己抗原は、Ｔ細胞受容体またはＢ細胞受容体の可変領域に由来する抗原である。

【0169】

この方法は、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＭＨＣ－Ｉａ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。いくつかの実施形態では、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列決定によって識別される。いくつかの実施形態では、この方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることをさらに含み得、発現ベクターは、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列と、Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体のＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｉａ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する１つ以上のトランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する。発現ベクターをトランスフェクトするための１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞は、第１の対象または第２の対象から単離され得る。

【0170】

いくつかの実施形態では、方法は、ＣＭＶベクターによって誘発されたＣＤ８＋Ｔ細胞からＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定することをさらに含み、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＭＨＣ－Ｉａ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって特定される。

【0171】

ＭＨＣ－Ｉ－ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する方法であって、（ａ）ＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットからＭＨＣ－Ｉ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する第１のＣＤ８＋ＴＣＲを特定することであって、ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットが、組換えＨＣＭＶベクターから生成される、特定することと、（ｂ）第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離することと、（ｃ）１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることであって、発現ベクターが、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋ＴＣＲが、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｉペプチド複合体を認識する１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する、方法も開示される。

【0172】

（１）ＭＨＣ－Ｉａ／ペプチド複合体を認識するＣＤ８＋Ｔ細胞のセットを生成するのに有効な量のＵＳ１１およびＵＬ１８を欠損するＣＭＶベクター（さらに、ベクターは、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、ＵＬ１４７、および／またはＵＬ８２を欠損し得、ＵＬ４０および／またはＵＳ２８を発現する）を第１の対象に投与する工程であって、組換えＣＭＶベクターが少なくとも１つの異種抗原を含む、投与する工程と、（２）ＣＤ８＋Ｔ細胞のセットから第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体を特定する工程であって、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体がＭＨＣ－Ｉａ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する、特定する工程と、（３）第１の対象または第２の対象から１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞を単離する工程と、（４）第１または第２の対象から単離された１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトする工程であって、それによって、ＭＨＣ－Ｉａペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を作製し、トランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞がＭＨＣ－Ｉａ／異種抗原由来ペプチド複合体に対する免疫応答を生成する、プロセスによって調製されるＭＨＣ－Ｉａペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＣＤ８＋Ｔ細胞も開示される。

【0173】

いくつかの実施形態では、この方法は、１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞に発現ベクターをトランスフェクトすることをさらに含み得、発現ベクターは、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列と、Ｔ細胞受容体をコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーターとを含み、第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、第１のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体のＣＤＲ３αおよびＣＤＲ３βを含む、トランスフェクトすることと、を含み、それによって、ＭＨＣ－Ｉａ／異種抗原由来ペプチド複合体を認識する１つ以上の切断型ＣＤ８＋Ｔ細胞を生成する。発現ベクターをトランスフェクトするための１つ以上のＣＤ８＋Ｔ細胞は、第１の対象または第２の対象から単離され得る。

【0174】

いくつかの実施形態では、第１および／または第２のＣＤ８＋Ｔ細胞受容体は、ＲＮＡまたはＤＮＡ配列決定によって特定される。

【0175】

いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列は、第１のＣＤ８＋ＴＣＲをコードする核酸配列と同一である。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、キメラＣＤ８＋ＴＣＲである。いくつかの実施形態では、第２のＣＤ８＋ＴＣＲは、第１のＣＤ８＋ＴＣＲのＣＤＲ１α、ＣＤＲ２α、ＣＤＲ３α、ＣＤＲ１β、ＣＤＲ２β、およびＣＤＲ３βを含む。

【0176】

がん、病原体感染症、または免疫疾患もしくは障害などの疾患を治療する方法であって、ＭＨＣ－Ｉａペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を第１または第２の対象に投与することを含む、方法も、本明細書で開示される。宿主自己抗原または組織特異的抗原に対する免疫応答を誘導する方法であって、ＭＨＣ－Ｉａペプチド複合体を認識するトランスフェクトされたＴ細胞を第１または第２の対象に投与することを含む方法も、本明細書で開示される。

【0177】

がんには、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、悪性黒色腫、中皮腫、悪性中皮腫、腎臓がん、子宮頚がん、中咽頭がん、肛門がん、陰茎がん、膣がん、外膣がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、腎細胞がん、および胚細胞腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。

【0178】

病原体感染症には、ヒト免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ寄生虫、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓが含まれるが、これらに限定されない。

【0179】

ＩＩＩ．ＨＩＶスーパートープ構築物
長さが９～１５個のアミノ酸であって、ＬＤＡＷＥＫＩＲＬＲＰＧＧＫＫ（配列番号１３）、ＤＡＷＥＫＩＲＬＲ（配列番号１４）、ＫＫＡＱＱＡＡＡＤＴＧＮＳＳＱ（配列番号１５）、ＫＡＱＱＡＡＡＤＴ（配列番号１６）、ＱＭＶＨＱＡＩＳＰＲＴＬＮＡＷ（配列番号１７）、ＨＱＡＩＳＰＲＴＬ（配列番号１８）、ＮＴＭＬＮＴＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号１９）、ＶＧＧＨＱＡＡＭＱ（配列番号２０）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷＭＴＮＮＰＰ（配列番号２１）、ＳＴＬＱＥＱＩＧＷ（配列番号２２）、ＩＶＲＭＹＳＰＶＳＩＬＤＩＲＱ（配列番号２３）、ＲＭＹＳＰＶＳＩＬ（配列番号２４）、ＱＫＱＥＰＩＤＫＥＬＹＰＬＡＳ（配列番号２５）、ＫＱＥＰＩＤＫＥＬ（配列番号２６）、ＳＦＳＦＰＱＩＴＬＷＱＲＰＬＶ（配列番号２７）、ＶＲＱＹＤＱＩＬＩＥＩＣＧＫＫ（配列番号２８）、ＥＰＦＲＫＱＮＰＤＩＶＩＹＱＬ（配列番号２９）、ＹＶＤＧＡＡＮＲＥＴＫＬＧＫＡ（配列番号３０）、ＥＥＨＥＫＹＳＮＷＲＡＭＡＳ（配列番号３１）、またはＩＬＤＬＷＶＹＨＴＱＧＹＦＰＤ（配列番号３２）のアミノ酸配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一であるヒト免疫不全ウイルス抗原も本明細書で開示される。

【0180】

いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、１つ以上のヒト免疫不全ウイルス抗原をコードする核酸を含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１２８およびＵＬ１３０を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１４６およびＵＬ１４７を発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における１つ以上の変異の存在により、ＵＬ１８タンパク質、ＵＬ１２８タンパク質、ＵＬ１３０タンパク質、ＵＬ１４６タンパク質、およびＵＬ１４７タンパク質、またはそれらのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、ＵＬ１８、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、またはＵＬ１４７をコードする核酸配列における変異は、点変異、フレームシフト変異、切断変異、およびウイルスタンパク質をコードする核酸配列のすべての欠失からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ４０をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ２８をコードする核酸配列またはそのオーソログをさらに含む。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＬ８２（ｐｐ７１）またはそのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＵＳ１１またはそのオーソログを発現しない。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）認識エレメント（ＭＲＥ）をコードする核酸配列をさらに含み、ＭＲＥは、内皮細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む。いくつかの実施形態では、内皮細胞で発現されるｍｉＲＮＡは、ｍｉＲ１２６、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－２１０、ｍｉＲ－２２１／２２２、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－２９６、またはｍｉＲ－３２８である。いくつかの実施形態では、組換えＨＣＭＶベクターは、ＭＲＥをコードする核酸配列をさらに含み、ＭＲＥは、骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡの標的部位を含む。いくつかの実施形態では、骨髄細胞で発現されるｍｉＲＮＡは、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－６５２、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－２１、またはｍｉＲ－１２５である。

【0181】

本明細書に開示されるＣＭＶベクターは、組換えＣＭＶウイルスまたはベクターと、薬学的に許容される担体または希釈剤とを含む、免疫原性またはワクチン組成物として使用され得る。組換えＣＭＶウイルスまたはベクター（またはその発現産物）を含む免疫組成物は、局所的または全身的な免疫応答を誘発する。応答は、保護用であってもよいが、保護用である必要はない。ワクチン組成物は、局所または全身の保護または治療応答を誘発する。したがって、「免疫原性組成物」という用語には、「ワクチン組成物」が含まれる（前者の用語は保護用組成物であってもよいため）。

【0182】

本明細書に開示される組換えＣＭＶベクターは、組換えＣＭＶウイルスまたはベクターと、薬学的に許容される担体または希釈剤とを含む免疫原性、免疫、またはワクチン組成物を対象に投与することを含む、対象における免疫応答を誘導する方法において使用され得る。

【0183】

本明細書に開示される組換えＣＭＶベクターは、組換えＣＭＶウイルスまたはベクターと、薬学的に許容される担体または希釈剤とを含む治療組成物中で使用され得る。本明細書に開示されるＣＭＶベクターは、腫瘍抗原をコードする配列を含むＤＮＡをＣＭＶゲノムの必須または非必須領域に挿入することによって調製され得る。方法は、ＣＭＶゲノムから１つ以上の領域を欠失させることをさらに含み得る。この方法は、インビボでの組換えを含み得る。したがって、方法は、ＣＭＶゲノムの部分と相同なＤＮＡ配列に隣接する異種ＤＮＡを含むドナーＤＮＡの存在下で、細胞適合培地中で細胞にＣＭＶ ＤＮＡをトランスフェクトし、それによって、異種ＤＮＡをＣＭＶのゲノムに導入することと、任意選択で、次いでインビボ組換えによって修飾されたＣＭＶを回収することと、を含み得る。方法は、ＣＭＶ ＤＮＡを切断して切断型ＣＭＶ ＤＮＡを得ることと、異種ＤＮＡを切断型ＣＭＶ ＤＮＡに連結してハイブリッドＣＭＶ－異種ＤＮＡを得ることと、細胞にハイブリッドＣＭＶ－異種ＤＮＡをトランスフェクトすることと、任意選択で、次いで異種ＤＮＡの存在によって修飾されたＣＭＶを回収することと、を含み得る。インビボ組換えが含まれるため、方法はまた、ＣＭＶに対して外来性であるポリペプチドをコードする、ＣＭＶ中に天然では存在しないドナーＤＮＡを含むプラスミドを提供し、該ドナーＤＮＡは、さもなくばＣＭＶゲノムの必須または非必須領域と共直鎖状である（ｃｏ－ｌｉｎｅａｒ）ＣＭＶ ＤＮＡのセグメント内にあり、したがって、ＣＭＶの必須または非必須領域由来のＤＮＡがドナーＤＮＡに隣接している。異種ＤＮＡは、そのＤＮＡの安定的な組み込みおよび所望する場合にはその発現を生じさせる任意の配向で組換えＣＭＶを生成するように、ＣＭＶに挿入され得る。

【0184】

組換えＣＭＶベクターにおける異種抗原をコードするＤＮＡはまた、プロモーターを含み得る。プロモーターは、内因性サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、例えば、ヒトＣＭＶ（ＨＣＭＶ）、アカゲザルマカクＣＭＶ（ＲｈＣＭＶ）、マウス、または他のＣＭＶプロモーターを含む、ヘルペスウイルスなどの任意の供給源に由来し得る。プロモーターはまた、ＥＦ１αプロモーターなどの非ウイルスプロモーターであり得る。プロモーターは、ウイルスによって提供されるトランス活性化タンパク質でトランス活性化された領域と、切断型転写活性プロモーターが由来する全長プロモーターの最小プロモーター領域と、を含む、切断型転写活性プロモーターであり得る。プロモーターは、最小限のプロモーターおよび上流の調節配列に対応するＤＮＡ配列の結合からなり得る。最小限のプロモーターは、ＣＡＰ部位およびＡＴＡボックス（転写の非調節レベルである、転写の基本レベルのための最小配列）からなり、「上流の調節配列」は、上流のエレメントおよびエンハンサー配列からなる。さらに、「切断型の（ｔｒｕｎｃａｔｅｄ）」という用語は、全長プロモーターが完全には存在しないこと、すなわち、全長プロモーターのある部分が除去されていることを示す。また、切断型プロモーターは、ＭＣＭＶまたはＨＣＭＶ、例えばＨＣＭＶ－ＩＥまたはＭＣＭＶ－ＩＥなどのヘルペスウイルスに由来し得る。塩基対に基づいて、完全長プロモーターから最大４０％、さらには最大９０％のサイズ縮小があり得る。プロモーターはまた、修飾された非ウイルスプロモーターであり得る。ＨＣＭＶプロモーターに関して、米国特許第５，１６８，０６２号および第５，３８５，８３９号を参照されたい。発現のためのプラスミドＤＮＡを細胞にトランスフェクトすることに関して、Ｆｅｉｇｎｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９４），Ｊ Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９，２５５０－２５６１を参照されたい。また、様々な感染疾患に対する簡素かつ効果的なワクチン接種方法としてのプラスミドＤＮＡの直接注射に関しては、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５９：１７４５－４９，１９９３を参照されたい。したがって、ベクターＤＮＡの直接注射によってベクターを使用し得ることは本開示の範囲内である。

【0185】

切断型転写活性プロモーターを含む組換えウイルスまたはプラスミドに挿入され得る発現カセットも開示される。発現カセットは、機能的な切断型ポリアデニル化シグナル、例えば、切断されているがなおも機能的であるＳＶ４０ポリアデニル化シグナルをさらに含み得る。天然ではより大きいシグナルが付与されていることを考慮すると、切断型ポリアデニル化シグナルが機能的であることは実に驚くべきことである。切断型ポリアデニル化シグナルは、ＣＭＶなどの組換えウイルスの挿入サイズ制限の問題に対処する。発現カセットはまた、異種ＤＮＡが挿入されるウイルスまたはシステムに関連して、異種ＤＮＡを含み得、ＤＮＡは本明細書に記載の異種ＤＮＡであり得る。

【0186】

ワクチンまたは免疫組成物での使用のための抗原に関して、Ｓｔｅｄｍａｎ’ｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ（第２４版、１９８２年、例えば、ワクチンの定義（ワクチン製剤で使用される抗原のリストについて）も参照されたい。関心のあるそのような抗原またはそれらの抗原由来のエピトープを使用し得る。腫瘍抗原に関して、当業者は、過度の実験なしに、ペプチドまたはポリペプチドのアミノ酸および対応するＤＮＡ配列の知識、ならびに特定のアミノ酸の性質（例えば、サイズ、電荷など）およびコドン辞書から、腫瘍抗原およびそのコードＤＮＡを選択し得る。

【0187】

抗原のＴエピトープを決定する１つの方法は、エピトープマッピングを含む。腫瘍抗原の重複ペプチドは、オリゴペプチド合成によって生成される。次いで、個々のペプチドが、Ｔ細胞活性化を誘導する能力について試験される。このアプローチは、ＭＨＣ分子と複合体化された短い直鎖状ペプチドをＴ細胞が認識するため、Ｔ細胞エピトープのマッピングに特に有用である。

【0188】

腫瘍抗原に対する免疫応答は、一般に、以下のように生成される：タンパク質がより小さなペプチドに切断されて、別の細胞の表面に位置する「主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）」と呼ばれる複合体で提示される場合にのみ、Ｔ細胞はタンパク質を認識する。ＭＨＣ複合体には、クラスＩおよびクラスＩＩの２つのクラスがあり、各クラスは、多くの異なる対立遺伝子からなる。異なる種および個々の対象は、異なる種類のＭＨＣ複合体対立遺伝子を有する。それらは、異なるＭＨＣ種を有すると言う。ＭＨＣクラスＩ分子の１つの種類は、ＭＨＣ－Ｅ（ヒトではＨＬＡ－Ｅ、ＲＭではＭａｍｕ－Ｅ、マウスではＱａ－ｌｂ）と呼ばれる。他のＭＨＣ－Ｉ分子とは異なり、ＭＨＣ－Ｅは、哺乳動物種内および哺乳動物種間で高度に保存されている。

【0189】

腫瘍抗原をコードする配列を含むＤＮＡがそれ自体、発現を駆動するためのプロモーターをＣＭＶベクター中に含み得、またはＤＮＡが、腫瘍抗原のコードＤＮＡに限定され得ることに留意されたい。この構築物は、プロモーターに作動可能に連結され、それによって発現されるように、内因性ＣＭＶプロモーターに対する配向で配置され得る。さらに、腫瘍抗原をコードするＤＮＡの複数コピー、または強力もしくは早期プロモーターもしくは早期および後期プロモーターの使用、またはそれらの任意の組み合わせは、発現を増幅または増加させるために行われ得る。したがって、腫瘍抗原をコードするＤＮＡは、ＣＭＶ内因性プロモーターに関して好適に配置され得、またはそれらのプロモーターは、腫瘍抗原をコードするＤＮＡとともに別の位置に挿入されるように位置を変え得る。２つ以上の腫瘍抗原をコードする核酸が、ＣＭＶベクターにパッケージ化され得る。

【0190】

本開示のＣＭＶベクターを含む医薬組成物および他の組成物がさらに開示される。そのような医薬組成物および他の組成物は、当該技術分野で既知の任意の投与手順で使用されるように製剤化され得る。そのような医薬組成物は、非経口経路（皮内、腹腔内、筋肉内、皮下、静脈内、またはその他）を介し得る。投与はまた、経口、鼻、生殖器などの粘膜経路を介し得る。

【0191】

本開示の医薬組成物は、医薬分野において当業者に周知の標準的な技術に従って調製され得る。そのような組成物は、特定の患者の種（ｂｒｅｅｄ）または種（ｓｐｅｃｉｅｓ）、年齢、性別、体重、および状態、ならびに投与経路などの要因を考慮して、医学分野の当業者に周知の投与量でおよび技術により投与され得る。組成物は、単独で投与され得るか、あるいは他のＣＭＶベクターとともに、または他の免疫、抗原、もしくワクチン、または治療組成物とともに、同時にまたは順次投与され得る。そのような他の組成物は、精製された天然抗原もしくはエピトープ、または組換えＣＭＶもしくは別のベクター系による発現からの抗原もしくはエピトープを含み得、上記の要因を考慮して投与される。

【0192】

組成物の例には、オリフィス、例えば、経口、鼻、肛門、生殖器、例えば、膣などの投与のための液体調製物、例えば、懸濁液、シロップ剤、またはエリキシル剤、ならびに非経口、皮下、腹腔内、皮内、筋肉内、または静脈内投与（例えば、注射可能な投与）のための調製物、例えば、滅菌懸濁液または乳剤が含まれる。そのような組成物において、組換え体は、滅菌水、生理食塩水、グルコースなどの好適な担体、希釈剤、または賦形剤との混合物中にあってもよい。

【0193】

抗原、免疫、またはワクチン組成物は、典型的には、所望の応答を誘発するために、アジュバントおよびある量のＣＭＶベクターまたは発現生成物を含み得る。ヒト用途では、ミョウバン（リン酸アルミニウムまたは水酸化アルミニウム）が典型的なアジュバントである。サポニンおよびその精製成分であるＱｕｉｌＡ、完全フロイントアジュバント、ならびに研究および獣医学的用途で使用される他のアジュバントは、ヒトワクチンにおけるそれらの潜在的な使用を制限する毒性を有する。ムラミルジペプチド、モノホスホリル脂質Ａ、リン脂質コンジュゲートなどの化学的に定義された調製物、例えば、Ｇｏｏｄｍａｎ－Ｓｎｉｔｋｏｆｆ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：４１０－４１５（１９９１）に記載されるもの、Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７６：１７３９－１７４４（１９９２）に記載されるようなプロテオリポソーム内のタンパク質のカプセル化、およびＮｏｖａｓｏｍｅ脂質小胞などの脂質小胞中でのタンパク質のカプセル化（Ｍｉｃｒｏ Ｖｅｓｃｕｌａｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．、Ｎａｓｈｕａ，Ｎ．Ｈ．）も使用され得る。

【0194】

組成物は、非経口（例えば、筋肉内、皮内、または皮下）投与またはオリフィスでの投与、例えば、舌下（例えば、経口）、胃内、口腔内、肛門内、膣内などを含む粘膜の投与による免疫化のために、単一の剤形でパッケージングされ得る。再び、有効な投与量および投与経路は、組成物の性質、発現産物の性質、組換えＣＭＶが直接使用される場合の発現レベル、ならびに種または種、年齢、性別、体重、状態、および宿主の性質などの既知の因子、ならびにＬＤ５０および過度の実験を必要としない既知の他のスクリーニング手順によって決定される。発現される生成物の用量は、数マイクログラム～数百マイクログラム、例えば、５～５００μｇの範囲であり得る。ＣＭＶベクターは、これらの用量レベルの発現を達成するために、任意の好適な量で投与され得る。非限定的な例では、ＣＭＶベクターは、少なくとも１０２ｐｆｕの量で投与され得、したがって、ＣＭＶベクターは、少なくともこの量で投与されるか、または約１０２ｐｆｕ～約１０７ｐｆｕの範囲で投与され得る。他の好適な担体または希釈剤は、防腐剤を含むまたは含まない、水または緩衝生理食塩水であり得る。ＣＭＶベクターは、投与時に再懸濁のために凍結乾燥されるか、または溶液中にあり得る。「約」は、定義された値の１％、５％、１０％、または２０％以内を意味し得る。

【0195】

本開示のタンパク質およびそれらをコードする核酸は、本明細書に示され記載される正確な配列とは異なり得ることを理解されたい。したがって、本開示は、配列が本開示の方法に従って機能する限り、示される配列に対する欠失、付加、切断、および置換を企図する。これに関して、置換は、一般に、性質において保存的であり、すなわち、アミノ酸のファミリー内で生じる置換である。例えば、アミノ酸は、一般に、以下の４つのファミリーに分かれる：（１）酸性－アスパラギン酸塩およびグルタミン酸塩、（２）塩基性－リジン、アルギニン、およびヒスチジン、（３）非極性－アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、およびトリプトファン、ならびに（４）非荷電極性－グリシン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セリン、スレオニン、およびチロシン。フェニルアラニン、トリプトファン、およびチロシンは、芳香族アミノ酸として分類されることがある。イソロイシンまたはバリンによるロイシンの単離された置換またはその逆、グルタミン酸塩によるアスパラギン酸塩の置換またはその逆、セリンによるスレオニンの置換またはその逆、または構造的に関連するアミノ酸によるアミノ酸の類似の保存的置換は、生物学的活性に大きな影響を及ぼさないことが合理的に予測可能である。したがって、記載されるタンパク質と実質的に同じアミノ酸配列を有するが、タンパク質の免疫原性に実質的に影響を及ぼさないわずかなアミノ酸置換を有するタンパク質は、本開示の範囲内である。

【0196】

本開示のヌクレオチド配列は、コドン最適化され得、例えば、コドンは、ヒト細胞での使用のために最適化され得る。例えば、任意のウイルスまたは細菌配列がそのように修飾され得る。ＨＩＶおよび他のレンチウイルスを含む多くのウイルスは、Ａｎｄｒｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｖｉｒｏｌ．７２：１４９７－１５０３，１９９８に記載されるように、多くの希少なコドンを使用し、所望の対象において一般的に使用されるコドンに対応するようにこれらのコドンを修飾することによって、腫瘍抗原の発現の増強が達成され得る。

【0197】

ＣＭＶベクターおよびこれに含まれる糖タンパク質の機能的および／または抗原的に同等のバリアントおよび誘導体をコードするヌクレオチド配列が企図される。これらの機能的に同等のバリアント、誘導体、および断片は、抗原活性を保持する能力を示す。例えば、コードされたアミノ酸配列を変化させないＤＮＡ配列の変化、ならびにアミノ酸残基の保存的置換、１個または数個のアミノ酸の欠失または付加、およびアミノ酸類似体によるアミノ酸残基の置換をもたらす変化は、コードされたポリペプチドの特性に著しく影響を及ぼさないものである。保存的アミノ酸置換は、グリシン／アラニン、バリン／イソロイシン／ロイシン、アスパラギン／グルタミン、アスパラギン酸／グルタミン酸、セリン／トレオニン／メチオニン、リジン／アルギニン、およびフェニルアラニン／チロシン／トリプトファンである。いくつかの実施形態では、バリアントは、関心のある抗原、エピトープ、免疫原、ペプチド、またはポリペプチドと少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の相同性または同一性を有する。

【0198】

配列同一性または相同性は、配列ギャップを最小限に抑えながら重複および同一性を最大化するようにアラインしたときの配列を比較することによって決定される。特に、配列同一性は、多くの数学アルゴリズムのうちのいずれかを使用して決定され得る。２つの配列の比較に使用される数学アルゴリズムの非限定的な例は、Ｋａｒｌｉｎ ＆ Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９９３；９０：５８７３－５８７７におけるように修正されたＫａｒｌｉｎ ＆ Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９９０；８７：２２６４－２２６８のアルゴリズムである。

【0199】

配列の比較に使用される数学アルゴリズムの別の例は、Ｍｙｅｒｓ ＆ Ｍｉｌｌｅｒ，ＣＡＢＩＯＳ １９８８；４：１１－１７のアルゴリズムである。そのようなアルゴリズムは、ＧＣＧ配列アラインメントソフトウェアパッケージの一部であるＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれる。アミノ酸配列を比較するためのアラインプログラムを利用する場合、ＰＡＭ１２０残基重み付け表、ギャップ長ペナルティ１２、およびギャップペナルティ４が使用され得る。局所配列の類似性およびアラインメントの領域を特定するのに有用なさらに別のアルゴリズムは、Ｐｅａｒｓｏｎ ＆ Ｌｉｐｍａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９８８；８５：２４４４－２４４８に記載されるＦＡＳＴＡアルゴリズムである。

【0200】

ＷＵ－ＢＬＡＳＴ（ワシントン大学ＢＬＡＳＴ）バージョン２．０ソフトウェアが、本開示による使用に有利である。いくつかのＵＮＩＸ（登録商標）プラットフォームのためのＷＵ－ＢＬＡＳＴバージョン２．０実行可能プログラムがダウンロードされ得る。このプログラムは、ＷＵ－ＢＬＡＳＴバージョン１．４に基づき、これは次いでパブリックドメインＮＣＢＩ－ＢＬＡＳＴバージョン１．４に基づく（Ａｌｔｓｃｈｕｌ ＆ Ｇｉｓｈ，１９９６，Ｌｏｃａｌ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ，Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ ｅｄ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ２６６：４６０－４８０、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １９９０；２１５：４０３－４１０、Ｇｉｓｈ ＆ Ｓｔａｔｅｓ，１９９３；Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ３：２６６－２７２、Ｋａｒｌｉｎ ＆ Ａｌｔｓｃｈｕｌ，１９９３；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５８７３－５８７７、これらのすべては、参照により本明細書に組み込まれる）。

【0201】

本開示の様々な組換えヌクレオチド配列および抗体ならびに／または抗原は、標準的な組換えＤＮＡおよびクローニング技術を使用して作製される。そのような技術は、当業者に周知である。例えば、’’Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，’’ｓｅｃｏｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．１９８９）を参照されたい。

【0202】

本開示のウイルスの発現を可能にする任意のベクターが、本開示に従って使用され得る。特定の実施形態では、本開示のウイルスは、タンパク質ワクチンの産生などの様々な用途に使用され得る、コードされた異種抗原（例えば、腫瘍ウイルス抗原、ＨＩＶ抗原、腫瘍抗原、および抗体）を産生するために、インビトロで（例えば、無細胞発現系を使用して）および／またはインビトロで増殖した培養細胞において使用され得る。そのような用途のために、インビトロおよび／または培養細胞でのウイルスの発現を可能にする任意のベクターが使用され得る。

【0203】

本開示の腫瘍抗原が発現されるためには、腫瘍抗原のタンパク質コード配列は、タンパク質の転写および翻訳を指示する調節配列または核酸制御配列に「作動可能に連結」される必要がある。本明細書で使用する場合、コード配列および核酸制御配列またはプロモーターが、コード配列の発現または転写および／または翻訳を核酸制御配列の影響または制御下に置くような様式で共有結合されている場合、上記コード配列および核酸制御配列またはプロモーターが「作動可能に連結された」と言う。「核酸制御配列」は、核酸エレメントに作動可能に結合された核酸配列またはコード配列の発現を指示する、プロモーター、エンハンサー、ＩＲＥＳ、イントロン、および本明細書に記載の他のエレメントなどであるがこれらに限定されない任意の核酸エレメントであり得る。「プロモーター」という用語は、ＲＮＡポリメラーゼＩＩの開始部位の周りでクラスター化され、かつ、本開示のタンパク質コード配列に作動可能に連結された場合にコードタンパク質の発現を生じさせる、転写制御モジュールの群を指すために本明細書で使用される。本開示の導入遺伝子の発現は、限定されないが、テトラサイクリンなどの抗生物質、エクジソンなどのホルモン、または重金属などのいくつかの特定の外部刺激に曝露されたときにのみ転写を開始する構成的プロモーターまたは誘導性プロモーターの制御下にあり得る。プロモーターはまた、特定の細胞種、組織、または臓器に特異的であり得る。多くの好適なプロモーターおよびエンハンサーが当該技術分野で既知であり、任意のそのような好適なプロモーターまたはエンハンサーが、本開示の導入遺伝子の発現のために使用され得る。例えば、好適なプロモーターおよび／またはエンハンサーは、真核生物プロモーターデータベース（ＥＰＤＢ）から選択され得る。

【0204】

本開示に従って使用されるベクターは、本開示の抗原が発現され得るように、プロモーターまたはエンハンサーなどの好適な遺伝子調節領域を含み得る。

【0205】

本明細書に記載されるＣＭＶベクターは、宿主から宿主への拡散を妨げ、それによって、ウイルスが、ＣＭＶ感染の結果として合併症になり得る免疫不全対象または他の対象に感染できなくし得る変異を含み得る。本明細書に記載のＣＭＶベクターはまた、免疫優性および非免疫優性エピトープの提示ならびに非典型的なＭＨＣ拘束をもたらす変異を含み得る。しかしながら、本明細書に記載のＣＭＶベクターにおける変異は、以前にＣＭＶに感染した対象を再感染させるベクターの能力に影響を及ぼさない。そのようなＣＭＶ変異は、例えば、米国特許公開第２０１３－０１３６７６Ｓ号、第２０１０－０１４２Ｓ２３号、第２０１４－０１４１０３Ｓ号、およびＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１４／１３Ｓ２０９号に記載されており、これらのすべては参照により本明細書に組み込まれる。

【0206】

本開示のＣＭＶベクターは、例えば、ＭＨＣ－Ｅ、ＭＨＣ－ＩＩ、またはＭＨＣ－Ｉ（またはそれらのホモログまたはオーソログ）によって拘束されるＣＤ８＋Ｔ細胞応答の割合が高いことを特徴とする免疫応答を含む、ＣＤ８＋免疫応答を含む免疫原応答を生じさせることを目的とする場合に、インビボで投与され得る。例えば、いくつかの例では、アカゲザルなどの実験動物において、ＲｈＣＭＶを使用した免疫原性組成物およびワクチンの前臨床試験のために、本開示のＣＭＶベクターを使用することが所望され得る。他の例では、臨床試験などのヒト対象において、ＨＣＭＶを使用する免疫原性組成物の実際の臨床使用のために、本開示のＣＭＶベクターを使用することが望ましい。

【0207】

そのようなインビボ用途のために、本開示のＣＭＶベクターは、薬学的に許容される担体をさらに含む免疫原性組成物の構成要素として投与される。いくつかの実施形態では、本開示の免疫原性組成物は、腫瘍抗原、腫瘍ウイルス抗原、または宿主自己抗原を含む異種抗原に対する免疫応答を刺激するのに有用であり、がんの予防、改善、または治療のために、腫瘍抗原、腫瘍ウイルス抗原、または宿主自己抗原に対する予防または治療ワクチンの１つ以上の構成要素として使用されてもよい。本開示の核酸およびベクターは、遺伝子ワクチン、すなわち、本開示の抗原をコードする核酸をヒトなどの対象に送達し、それによって、次いで抗原が対象において発現され、免疫応答を誘発するためのワクチンを提供するために特に有用である。

【0208】

免疫化スケジュール（またはレジメン）は、動物（ヒトを含む）について周知であり、特定の対象および免疫原性組成物について容易に決定され得る。したがって、免疫原は、対象に１回以上投与されてもよい。好ましくは、免疫原性組成物の別々の投与間における設定時間間隔が存在する。この間隔は、対象ごとで異なるが、典型的には、１０日から数週間の範囲であり、多くの場合、２、４、６、または８週間である。ヒトの場合、間隔は、典型的には２～６週間である。本開示の特に有利な実施形態では、間隔は、より長く、有利には、約１０週間、１２週間、１４週間、１６週間、１８週間、２０週間、２２週間、２４週間、２６週間、２８週間、３０週間、３２週間、３４週間、３６週間、３８週間、４０週間、４２週間、４４週間、４６週間、４８週間、５０週間、５２週間、５４週間、５６週間、５８週間、６０週間、６２週間、６４週間、６６週間、６８週間、または７０週間である。免疫化レジームは、典型的には、免疫原性組成物の１～６回の投与を有するが、１回、２回、または４回と少なくてもよい。免疫応答を誘導する方法はまた、免疫原とともにアジュバントを投与することを含んでもよい。いくつかの場合では、毎年、年２回、または他の長い間隔（５～１０年）のブースター免疫化により、初期の免疫化プロトコルが補完されてもよい。本発明方法はまた、様々なプライム－ブーストレジメンを含む。これらの方法では、１つ以上のプライミング免疫化の後に、１つ以上のブースト免疫化が行われる。実際の免疫原性組成物は、各免疫化について同じでもまたは異なっていてもよく、免疫原性組成物（例えば、タンパク質または発現ベクターを含む）の種類、経路、および免疫原の製剤も変動してもよい。例えば、発現ベクターがプライミングおよびブースト工程に使用される場合、それは同じまたは異なる種類（例えば、ＤＮＡまたは細菌またはウイルス発現ベクター）のいずれかであってもよい。１つの有用なプライムブーストレジメンは、４週間離れた２つのプライミング免疫化、続いて最後のプライミング免疫化後の４週間目および８週目における２つのブースティング免疫化を提供する。本開示のＤＮＡ、細菌、およびウイルス発現ベクターを使用してプライミングおよびブースティングレジメンを提供するために、いくつかの置換および組み合わせが包含されることも当業者に容易に明らかでなければならない。異なる病原体に由来する異なる抗原を発現しながら、ＣＭＶベクターを繰り返し使用し得る。

【実施例】

【0209】

実施例１：ＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の誘導によるＳＩＶに対する保護
いくつかの研究において、ＳＩＶ抗原を発現する株６８－１由来ＲｈＣＭＶベクターが、高病原性ＳＩＶｍａｃ２３９による感染を制御し、最終的に感染が無くなることが示された（Ｈａｎｓｅｎ ２０１９．Ａ ｌｉｖｅ－ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ ＲｈＣＭＶ／ＳＩＶ ｖａｃｃｉｎｅ ｓｈｏｗｓ ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｇａｉｎｓｔ ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ ＳＩＶ ｃｈａｌｌｅｎｇｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １１：ｅａａｗ２６０７、Ｈａｎｓｅｎ ２０１３．Ｉｍｍｕｎｅ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｏｆ ｈｉｇｈｌｙ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ＳＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ ５０２：１００－４）。この保護は、株６８－１ＲｈＣＭＶがＭＨＣ－ＩＩおよびＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞を誘発する能力と相関した（Ｈａｎｓｅｎ ２０１６．Ｂｒｏａｄｌｙ ｔａｒｇｅｔｅｄ ＣＤ８（＋）Ｔ ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｂｙ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ Ｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３５１：７１４－２０、Ｈａｎｓｅｎ．Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ Ｖｅｃｔｏｒｓ Ｖｉｏｌａｔｅ ＣＤ８＋ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ Ｐａｒａｄｉｇｍｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４０：１２３７８７４－１２３７８７４。しかしながら、ＭＨＣ－ＩＩおよび／またはＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞がこの保護のために必要かどうかは知られていなかった。

【0210】

したがって、ＭＨＣ－ＥまたはＭＨＣ－ＩＩによって専ら拘束されるＣＤ８＋Ｔ細胞を特異的にプログラムする能力によって、ＭＨＣ－ＥまたはＭＨＣ－ＩＩ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞がＳＩＶｍａｃ２３９に対する特有の保護に関与するかの検査が可能となった。以下に記載するように、４つのアカゲザルマカク（ＲＭ）のコホートに異なる６８－１ＲｈＣＭＶ株を接種した。

【0211】

コホート１：９匹のＲＭに、必須遺伝子Ｒｈ１０８（ＵＬ７９）およびＲｈ１５６（ＩＥ２）の３’非翻訳領域においてｍｉｒ１２６の３つの認識部位をそれぞれ有し、かつ、ＳＩＶ抗原であるＳＩＶｇａｇ、ＳＩＶｒｅｔａｎｅｆ（ｒｅｖ、ｔａｔ、およびｎｅｆの融合物）、およびＳＩＶｐｏｌの５’セグメントをそれぞれ発現する（１ベクター当たり１つの挿入）、３つの６８－１ＲｈＣＭＶ「ＭＨＣ－Ｅのみ」ベクターを接種した。

【0212】

コホート２：１５匹のＲＭに、Ｒｈ６７（ＵＬ４０）を欠失し、かつ、ＳＩＶ抗原であるＳＩＶｇａｇ、ＳＩＶｒｅｔａｎｅｆ（ｒｅｖ、ｔａｔ、およびｎｅｆの融合物）、およびＳＩＶｐｏｌの５’セグメントをそれぞれ発現する（１ベクター当たり１つの挿入）、３つの６８－１ＲｈＣＭＶ「ＭＨＣ－ＩＩのみ」ベクターを接種した。

【0213】

コホート３：１２匹のＲＭに、必須遺伝子Ｒｈ１０８（ＵＬ７９）およびＲｈ１５６（ＩＥ２）の３’非翻訳領域においてｍｉｒ１４２の３つの認識部位をそれぞれ有し、かつ、ＳＩＶ抗原であるＳＩＶｇａｇ、ＳＩＶｒｅｔａｎｅｆ（ｒｅｖ、ｔａｔ、およびｎｅｆの融合物）、およびＳＩＶｐｏｌの５’セグメントをそれぞれ発現する（１ベクター当たり１つの挿入）、３つの６８－１ＲｈＣＭＶ「ＭＨＣ－ＩＩのみ」ベクターを接種した。

【0214】

コホート４：（対照コホート）１５匹のＲＭに、ＳＩＶ抗原であるＳＩＶｇａｇ、ＳＩＶｒｅｔａｎｅｆ（ｒｅｖ、ｔａｔ、およびｎｅｆの融合物）、およびＳＩＶｐｏｌの５’セグメントをそれぞれ発現する（１ベクター当たり１つの挿入）、３つの６８－１ＲｈＣＭＶベクターを接種した。

【0215】

ＳＩＶ抗原由来ペプチドプールに応答するＣＤ４＋またはＣＤ８＋Ｔ細胞の平均発生頻度を定量化した。ＳＩＶ抗原を表す重複する（１１Ａによる）１５ｍｅｒペプチドのプールの存在下でのＩＦＮγまたはＴＮＦαの細胞内サイトカイン染色により、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）において、示される時点でＴ細胞発生頻度を決定した。ＲＭの各々は、ＳＩＶ抗原の各々に対して堅牢な（ｒｏｂｕｓｔ）ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞応答を生じた（図１）。

【0216】

次に、ＳＩＶｇａｇ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞応答のＭＨＣ拘束を分析した。各コホートにおける３匹のＲＭから得られたＰＢＭＣにおけるＳＩＶｇａｇ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を個々のペプチドの存在下で測定した。抗汎ＭＨＣ－Ｉ ｍＡｂ Ｗ６／３２、ＭＨＣ－ＥブロッキングペプチドＶＬ９、およびＭＨＣ－ＩＩブロッキングペプチドＣＬＩＰでブロックすることにより、ＭＨＣ拘束を決定した。コホート１の動物におけるすべてのペプチド応答はＶＬ９ペプチドによってブロックされ、コホート２および３におけるペプチド応答はＣＬＩＰペプチドによってブロックされた（図２）。したがって、コホート１におけるＣＤ８＋Ｔ細胞はＭＨＣ－Ｅによって専ら拘束され、コホート２および３におけるＣＤ８＋Ｔ細胞はＭＨＣ－ＩＩによって専ら拘束される。コホート４の動物におけるＣＤ８＋Ｔ細胞応答（図示せず）は、以前に報告されたように、ＭＨＣ－ＩＩおよびＭＨＣ－Ｅの両方によって拘束される（Ｈａｎｓｅｎ ２０１６．Ｂｒｏａｄｌｙ ｔａｒｇｅｔｅｄ ＣＤ８（＋）Ｔ ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｂｙ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ Ｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３５１：７１４－２０、Ｈａｎｓｅｎ ２０１３．Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ Ｖｅｃｔｏｒｓ Ｖｉｏｌａｔｅ ＣＤ８＋ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ Ｐａｒａｄｉｇｍｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４０：１２３７８７４－１２３７８７４）。

【0217】

ＭＨＣ－ＥまたはＭＨＣ－ＩＩ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞が保護に関与するかを決定するために、用量制限されたＳＩＶｍａｃ２３９の反復直腸内接種により、コホート１、２、および３をチャレンジした。最初の血漿ウイルス負荷（ｐｖｌ）またはＳＩＶｖｉｆ応答が検出されるまで、ＲＭを毎週チャレンジした（感染の開始を前のチャレンジとして定めた）。ワクチンベクターはＳＩＶｖｉｆを発現しないため、検出可能なＳＩＶ血漿ウイルス負荷の不在下で新規なＳＩＶｖｉｆ応答が生ずることは感染の証明となる。一度感染すると典型的なピークおよびプラトーなパターンを有する持続性ウイルス血症を呈する非コントローラー（黒色ボックス）と異なり、血漿ウイルス血症が最初の陽性ｐｖｌから２週間以内に観察されなかったか、または検出不可能となり、次いで、その後の５週間のうちの少なくとも４週間で閾値未満に維持された場合に、ＲＭをコントローラーとみなした（白色ボックス）。

【0218】

コホート２および３のすべての動物は、全身性の進行性ＳＩＶウイルス血症を発症したが、これは、ＭＨＣ－ＩＩ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞がＳＩＶｍａｃ２３９感染に対する保護を与えることができなかったことを示唆している（図３）。対照的に、６８－１ＲｈＣＭＶ／ＳＩＶ／ｍｉＲ１２６ベクターでワクチン接種したコホート１の動物のうちの６／９（６７％）は、ＳＩＶｍａｃ２３９による感染を厳密に制御した。これらのデータは、ＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞応答が強毒性ＳＩＶに対する保護を与えたことを示している。

【0219】

株６８－１由来ＲｈＣＭＶベクターが、非常に高いエピトープ密度（＝所与の抗原内でのＴ細胞によって認識されるペプチドの数）を示すＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発することが以前に示された（Ｈａｎｓｅｎ．２０１３．Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ Ｖｅｃｔｏｒｓ Ｖｉｏｌａｔｅ ＣＤ８＋ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ Ｐａｒａｄｉｇｍｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４０：１２３７８７４－１２３７８７４）。いわゆるスーパートープである、これらのＭＨＣ－ＥおよびＭＨＣ－ＩＩエピトープのうちのいくつが、すべての動物で認識されることがさらに示された（Ｈａｎｓｅｎ ２０１６．Ｂｒｏａｄｌｙ ｔａｒｇｅｔｅｄ ＣＤ８（＋）Ｔ ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｂｙ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ Ｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３５１：７１４－２０）。スーパートープは、ＭＨＣ－Ｉ分子によって提示される「古典的」エピトープに関して記載されてなく、したがって、ＣＭＶベースのベクターの特有の特徴を表す。上記の「ＭＨＣ－Ｅのみ」ＲｈＣＭＶベクターで観察される保護についてスーパートープ単独で説明することができるかどうかを決定するために、個々のＳＩＶ抗原由来のスーパートープ配列からなる人工融合タンパク質を生成した（表１、１５ｍｅｒおよび最小スーパートープペプチド配列には下線が引かれている）。

【表1】

【0220】

人工融合タンパク質の配列は、以下の通りである（ＨＡ－エピトープタグには下線が引かれている）：
ＭＲＲＷＲＲＲＷＱＱＬＬＡＬＡＤＲＩＹＳＦＰＤＰＴＳＳＡＳＮＫＰＩＳＮＲＴＲＨＣＱＰＥＩＳＭＲＲＳＲＰＳＧＤＬＲＱＲＬＬＲＡＥＫＬＡＹＲＫＱＮＭＤＤＩＤＥＥＤＤＤＡＱＴＳＱＷＤＤＰＷＧＥＶＬＡＷＫＦＤＹＶＲＹＰＥＥＦＧＳＫＳＧＬＳＥＥＥＶＧＧＩＧＧＦＩＮＴＫＥＹＫＮＶＥＩＶＬＧＫＲＮＴＰＴＦＡＩＫＫＫＤＫＮＫＷＲＭＬＩＤＦＲＥＷＭＧＹＥＬＷＰＴＫＷＫＬＱＫＩＥＬＰＬＧＬＱＫＣＶＲＭＹＮＰＴＮＩＬＤＶＫＹＭＱＬＧＫＱＱＲＥＫＱＲＥＳＲＥＫＰＹＫＥＶＹＰＹＤＶＰＤＹＡＤ（配列番号１２）。抗ＨＡ抗体でプローブすることによってＳＩＶスーパートープ融合構築物の発現を示すために、免疫ブロッティングを行った（図４）。

【0221】

ＭＨＣ－Ｅ拘束エピトープの小さなセットに対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答に焦点を合わせることを目標として、ＳＩＶ ＭＨＣ－Ｅスーパートープ融合タンパク質をｍｉｒ１２６標的化部位を含む６８－１ＲｈＣＭＶに挿入した。得られた構築物を８匹のＲＭ（コホート５）に接種した。ＳＩＶスーパートープを表す個々の１５ｍｅｒペプチドのプールの存在下でのＩＦＮγまたはＴＮＦαの細胞内サイトカイン染色により、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）において、示される時点でＴ細胞発生頻度を決定した（図５）。ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＳＩＶ抗原由来ペプチドに応答した（図５Ａ）。ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－Ｅ拘束スーパートープＧａｇ６９およびＧａｇ１２０に応答したが、ＳＩＶｇａｇ挿入物全体を発現する６８－１ＲｈＣＭＶ／ｇａｇベクターで免疫化したＲＭ由来のＣＤ８＋Ｔ細胞によって一般的に認識される他のＭＨＣ－Ｅ拘束ＧＡＧエピトープには応答しなかった（図５Ｂ）。これらの結果は、すべての動物が、専らスーパートープに対するＳＩＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発したことを示す。

【0222】

ＭＨＣ－Ｅスーパートープ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞が「ＭＨＣ－Ｅのみ」ベクターで観察された保護を再現することができるかどうかを決定するために、上記のように低用量のＳＩＶｍａｃ２３９の反復直腸内接種によって、コホート５をチャレンジした。最初の血漿ウイルス負荷（ｐｖｌ）またはＳＩＶｖｉｆ応答が検出されるまで、ＲＭを毎週チャレンジした（感染の開始を前のチャレンジとして定めた）。一度感染すると典型的なピークおよびプラトーなパターンを伴う持続性のウイルス血症を呈する非コントローラーと対照的に（黒色ボックス）、ｐｖｌが最初の陽性ｐｖｌから２週間以内に検出できなくなり、次いで、その後の５週間のうちの少なくとも４週間にわたって閾値未満に維持された場合に、ＲＭをコントローラーとみなした（黒色ボックス）。

【0223】

重要なことに、動物のうちの５／７（７１％）に、ＳＩＶｍａｃ２３９によるスーパートープ融合タンパク質制御感染を発現する単一の６８－１ＲｈＣＭＶ／ＳＩＶ／ｍｉＲ１２６ベクターをワクチン接種した（図６）。これらのデータは、ＭＨＣ－Ｅスーパートープに特異的なＣＤ８＋Ｔ細胞が高病原性ＳＩＶに対する保護に関与していることを示す。

【0224】

ＨＩＶベースのスーパートープ抗原を設計するために、ＨＩＶ抗原を６８－１ＲｈＣＭＶに挿入し、ＲＭに接種することによって、ＨＩＶスーパートープをマッピングした。表２は、特定されたＨＩＶスーパートープのリストを含む。最適な最小ペプチド配列には下線が引かれている。

【表2】

【0225】

実施例２：ＵＬ１８の発現は、ＭＨＣ－ＥおよびＭＨＣ－ＩＩ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の誘導を防げる。
株６８－１ＲｈＣＭＶベクターがＭＨＣ－ＩＩおよびＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発する能力に対するＵＬ１８の影響を決定するために、２つのＲｈＣＭＶ構築物を生成した：

【0226】

構築物１：ベクター骨格として、ＲｈＣＭＶ遺伝子Ｒｈ２１１中にＥＦ１αプロモーターの制御下のＳＩＶｐｏｌの５’断片についての発現カセットを含む、６８－１ＲｈＣＭＶ。遺伝子Ｒｈ１３．１を置き換えることによってＵＬ１８を挿入し、したがって、Ｒｈ１３．１の代わりにＵＬ１８が発現される。挿入されたＵＬ１８配列は、ＨＣＭＶ ＴＲ単離物のＵＬ１８に対応する。

【0227】

構築物２：ベクター骨格として、遺伝子Ｒｈ１０７（ＨＣＭＶ ＵＬ７８のホモログ）がＳＩＶｒｅｖ、ｔａｔ、およびｎｅｆの融合タンパク質（ＳＩＶｒｔｎ）で置き換えられた、６８－１ＲｈＣＭＶ。遺伝子Ｒｈ１３．１を置き換えることにより、ＵＬ１８を挿入した。

【0228】

構築物１の５×１０^６プラーク形成単位（ＰＦＵ）を３匹のＲｈＣＭＶ血清陽性ＲＭに接種し、０日目に同じ量の構築物２を２匹のＲｈＣＭＶ血清陽性ＲＭに接種した。対照のために、ＥＦ１αプロモーターの制御下でＳＩＶｇａｇを発現する６８－１ＲｈＣＭＶをＲＭに接種した。

【0229】

７日目、１４日目、およびその後の隔週に、ＰＢＭＣを２匹のＲＭから単離し、構築物１、２、または対照によって誘発されたＳＩＶ抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を、ＳＩＶｐｏｌ、ＳＩＶｒｔｎ、またはＳＩＶｇａｇをそれぞれ包含する重複した１５ｍｅｒペプチドプールを使用したＩＦＮγおよびＴＮＦαについての細胞内サイトカイン染色（ＩＣＳ）によって測定した。ＭＨＣ－ＥまたはＭＨＣ－ＩＩの関連でペプチドを認識するＣＤ８＋Ｔ細胞を特異的に検出するために、各ＳＩＶ抗原内のスーパートープをすべての動物が有することが有利であった（Ｈａｎｓｅｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０１３，Ｈａｎｓｅｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０１６）。したがって、スーパートープペプチドの各々を、それぞれのＲＭのＰＢＭＣにおいて、ＩＣＳによって個別に試験した。

【0230】

各群の２匹の動物における総抗原特異的応答を表す、ＳＩＶ抗原ペプチドプールに応答するＣＤ８＋Ｔ細胞の発生頻度を分析した（図７Ａ）。同じ２匹の動物についても、ＭＨＣ－Ｅ拘束スーパートープおよびＭＨＣ－ＩＩ拘束スーパートープに応答するＣＤ８＋Ｔ細胞の発生頻度を分析した（図７Ｂ、７Ｃ）。

【0231】

すべての動物は、接種に使用されるＲｈＣＭＶベクターによって発現されるＳＩＶ抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を生じた。しかしながら、スーパートープ応答は、６８－１ＲｈＣＭＶ／ＳＩＶｇａｇについてのみ観察され、ＵＬ１８を発現する両方のベクターは、スーパートープを認識するＴ細胞を誘発しなかった。これらの結果により、ＵＬ１８がＭＨＣ－ＥおよびＭＨＣ－ＩＩ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の誘導を妨げることが示された。

【0232】

次に、ＭＨＣ分子が、ＵＬ１８発現６８－１ＲｈＣＭＶ／ＳＩＶｐｏｌを受けた３匹の動物におけるＳＩＶｐｏｌ特異的応答の誘発に関与するかをさらに決定するために、ＭＨＣ拘束マッピングを行った。構築物１を接種した３つのＲＭから得たＰＢＭＣにおけるＳＩＶｐｏｌ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を個々のペプチドの存在下で測定した。ＭＨＣ－Ｉ、ＭＨＣ－ＩＩ、またはＭＨＣ－Ｅ提示のいずれかをブロックする特定の試薬（ＭＨＣ－ＩおよびＭＨＣ－Ｅは抗体Ｗ６／３２でブロックされ、ＭＨＣ－ＩＩはＨＬＡ－ＤＲ特異的抗体およびＣＬＩＰペプチドでブロックされ、ＭＨＣ－ＥはＶＬ９ペプチドでブロックされる）の存在下で、ＳＩＶｐｏｌ内の個々のペプチドに対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を測定した。

【0233】

図８に示す結果は、各個々のペプチドによるＣＤ８＋Ｔ細胞の刺激が、汎ＭＨＣ－Ｉ阻害抗体Ｗ６／３２によって阻害されたが、ＭＨＣ－Ｅ特異的ペプチドＶＬ９またはＭＨＣ－ＩＩ特異的抗体およびＣＬＩＰペプチドによって阻害されなかったことを明らかにしている。したがって、すべてのＣＤ８＋Ｔ細胞エピトープは、ＭＨＣ－Ｉによって拘束される。対照的に、６８－１ＲｈＣＭＶ発現ＳＩＶ抗原を接種した動物由来のＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＭＨＣ－ＩＩまたはＭＨＣ－Ｅの関連ですべてのペプチドを認識する（Ｈａｎｓｅｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０１３，Ｈａｎｓｅｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０１６）。

【0234】

これらの結果は、最も可能性高くは、ＵＬ１８がＭＨＣ－ＩＩおよびＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の誘導を妨げることによって、ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を再プログラミングしたことを示している。ＵＬ１８は、宿主阻害受容体ＬＩＲ－１に関与することが既知である（Ｙａｎｇ Ｚ，Ｂｊｏｒｋｍａｎ ＰＪ．２００８．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＵＬ１８，ａ ｐｅｐｔｉｄｅ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｖｉｒａｌ ＭＨＣ ｍｉｍｉｃ，ｂｏｕｎｄ ｔｏ ａ ｈｏｓｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０５：１００９５－１００、Ｃｈａｐｍａｎ ＴＬ，Ｈｅｉｋｅｍａｎ ＡＰ，Ｂｊｏｒｋｍａｎ ＰＪ．１９９９．Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＬＩＲ－１ ｕｓｅｓ ａ ｃｏｍｍｏｎ ｂｉｎｄｉｎｇ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｔｏ ｒｅｃｏｇｎｉｚｅ ｃｌａｓｓ Ｉ ＭＨＣ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｖｉｒａｌ ｈｏｍｏｌｏｇ ＵＬ１８．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １１：６０３－１３）。したがって、この再プログラミングのあり得る機序は、Ｔ細胞上の阻害性白血球阻害受容体（ＬＩＲ）に関与することにより、ＵＬ１８が、６８－１ＲｈＣＭＶによるＣＤ８＋Ｔ細胞の直接プライミングを妨げることである（直接プライミングは、感染細胞によってプライミングされているＴ細胞を指す）。直接プライミングの不存在下では、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、交差プライミングによって、すなわち、感染細胞から得られた抗原を提示する非感染細胞（例えば、樹状細胞）によって間接的に誘発される。これまで、ＵＬ１８はＴ細胞プライミングを妨げることに関与していなかった。これらの結果は、予想外であり、かつ、前例がない。

【0235】

阻害性受容体ＬＩＲ１との相互作用が、ＭＨＣ－ＩＩおよびＭＨＣ－Ｅ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の誘導を妨げるＵＬ１８の能力に関与するかを決定するために、α－３ドメインにおける１９６位のアミノ酸アスパラギン酸塩をセリン（Ｄ１９６Ｓ）で置き換えるように、上記の構築物１におけるＵＬ１８のコード領域を変異させた。以前の構造研究は、このアスパラギン酸塩がＬＩＲ１へのＵＬ１８の結合に関与していることを示している（Ｙａｎｇ Ｚ，Ｂｊｏｒｋｍａｎ ＰＪ．２００８．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＵＬ１８，ａ ｐｅｐｔｉｄｅ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｖｉｒａｌ ＭＨＣ ｍｉｍｉｃ，ｂｏｕｎｄ ｔｏ ａ ｈｏｓｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０５：１００９５－１００）。さらに、この残基は、すべてのＬＩＲ１結合ＨＬＡ分子では保存されているが、ＬＩＲ１に結合しないＨＬＡ様分子では存在しない。ＵＬ１８のＤ１９６Ｓ変異体をＳＩＶｐｏｌを発現する６８－１ＲｈＣＭＶに挿入し、得られた構築物を２匹のＲＭに接種した。９１日目に、ＰＢＭＣを単離し、ＳＩＶｐｏｌまたはＳＩＶｐｏｌ ＭＨＣ－ＥスーパートープペプチドＰｏｌ４１（ＧＦＩＮＴＫＥＹＫＮＶＥＩＥＶ；配列番号３３）またはＭＨＣ－ＩＩスーパートープＰｏｌ９０（ＬＰＱＧＷＫＧＳＰＡＩＦＱＹＴ；配列番号３４）を包含する重複する１５ｍｅｒペプチドのプールを使用したＩＦＮγおよびＴＮＦαについてのＩＣＳによって、ＳＩＶｐｏｌに対するＣＤ８＋Ｔ細胞の応答を測定した。インタクトなＵＬ１８を発現する６８－１ＲｈＣＭＶを接種した動物とは対照的に（図９Ａ）、ＵＬ１８のＤ１９６Ｓ変異体を発現する６８－１ＲｈＣＭＶを接種した動物において両方のＳＩＶｐｏｌスーパートープに対するＴ細胞応答が観察された（図９Ｂ）。したがって、これらの結果は、ＵＬ１８が、ＭＨＣ－ＥおよびＭＨＣ－ＩＩ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞の誘導を妨げるためにＬＩＲ１受容体に関与する必要があることを示した。

【0236】

ＵＬ１８は、ＮＫ細胞の回避における役割を果たすと考えられている（Ｐｒｏｄ’ｈｏｍｍｅ ２００７．Ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ ＭＨＣ ｃｌａｓｓ Ｉ ｈｏｍｏｌｏｇ ＵＬ１８ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ＬＩＲ－１＋ ｂｕｔ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＬＩＲ－１－ ＮＫ ｃｅｌｌｓ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １７８：４４７３－８１）。ＮＫ細胞の回避は、ベクター機能に重要であり得るので（Ｓｔｕｒｇｉｌｌ ２０１６．Ｎａｔｕｒａｌ Ｋｉｌｌｅｒ Ｃｅｌｌ Ｅｖａｓｉｏｎ Ｉｓ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｂｙ Ｒｈｅｓｕｓ Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ．ＰＬｏＳ Ｐａｔｈｏｇ １２：ｅ１００５８６８）、ＨＣＭＶベースのベクターからのＵＬ１８の欠失が、異種抗原に対する免疫応答を誘発するそれらの能力を妨げると考えられた。ＵＬ１８欠失ＨＣＭＶが挿入された抗原に対するＴ細胞応答を誘発することができるかどうかを決定するために、ＵＬ１８をＨＩＶ抗原で置き換え、それによって、ＵＬ１８を欠失させ、内因性ＵＬ１８プロモーターを使用してＨＩＶｇａｇ／ｎｅｆ／ｐｏｌ融合タンパク質の発現を駆動した。さらに、遺伝子ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１４６、およびＵＬ１４７も、これらの遺伝子産物がＭＨＣ－ＥおよびＭＨＣ－ＩＩ拘束ＣＤ８＋Ｔ細胞応答を阻害することが以前に示されていたので、ＵＬ１８欠失ベクターから欠失させた（米国特許第１０，５３２，０９９号）。ベクター骨格として、ＨＣＭＶ ＴＲ３を使用した（Ｃａｐｏｓｉｏ．２０１９．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｌｉｖｅ－ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ ＨＣＭＶ－ｂａｓｅｄ ｖａｃｃｉｎｅ ｐｌａｔｆｏｒｍ．Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ ９：１９２３６）。ヒト線維芽細胞の免疫ブロットにより、得られたウイルスベクター（ＨＣＭＶ ＴＲ３ ΔＵＬ１８／ＨＩＶ融合ΔＵＬ１２８－１３０ΔＵＬ１４６－１４７）でのＨＩＶ融合タンパク質の発現を確認した（図１０）。

【0237】

ＵＬ１８欠失ＨＣＭＶベクターもＲＭに接種し、ＨＩＶ抗原に対する免疫応答を接種後５６日目にＩＣＳによってＰＢＭＣにおいて決定した。図１１に示すように、ベクターは、ＲＭにおいてＨＩＶｇａｇ、ＨＩＶｎｅｆ、およびＨＩＶｐｏｌに対するＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘発し、このことは、これらの抗原の各々を含む重複したペプチドのプールを使用することによって示された。したがって、ＵＬ１８を欠如するＨＣＭＶベクターは、異種抗原に対するＴ細胞応答を誘発する能力を保持していると結論付けた。

【図1】

【図2】

【図3-1】

【図3-2】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9A】

【図9B】

【図10】

【図11】

【配列表】

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【手続補正書】

【提出日】2022-05-09

【手続補正1】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０００２

【補正方法】変更

【補正の内容】

【0002】

連邦政府支援研究開発に関する記述
本発明は、国立衛生研究所によって授与された助成番号ＡＩ０５９４５７およびＡＩ１２８７４１での政府支援によりなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。

【国際調査報告】