特表 2022-545181 がん治療のためのセプチン阻害剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-10-26

(54)【発明の名称】がん治療のためのセプチン阻害剤

(51)【国際特許分類】

   C07D 213/75 20060101AFI20221019BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20221019BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20221019BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20221019BHJP

   A61K 45/06 20060101ALI20221019BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20221019BHJP

   A61K 31/337 20060101ALI20221019BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20221019BHJP

   A61K 31/4409 20060101ALI20221019BHJP

   C07D 401/12 20060101ALI20221019BHJP

   A61K 31/4439 20060101ALI20221019BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20221019BHJP

【ＦＩ】

C07D213/75 CSP

A61P35/00

A61P35/02

A61K45/00

A61K45/06

A61P43/00 121

A61K31/337

A61K39/395 T

A61K31/4409

C07D401/12

A61K31/4439

A61K31/506

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022507705

(86)(22)【出願日】2020-08-31

(85)【翻訳文提出日】2022-02-07

(86)【国際出願番号】 US2020048712

(87)【国際公開番号】W WO2021042022

(87)【国際公開日】2021-03-04

(31)【優先権主張番号】62/894,424

(32)【優先日】2019-08-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

２．ＳＰＡＮ

(71)【出願人】

【識別番号】508146307

【氏名又は名称】ユニバーシティ オブ ロチェスター

(74)【代理人】

【識別番号】100092783

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 浩

(74)【代理人】

【識別番号】100120134

【弁理士】

【氏名又は名称】大森 規雄

(74)【代理人】

【識別番号】100227008

【弁理士】

【氏名又は名称】大賀 沙央里

(72)【発明者】

【氏名】シン，ラケシュ ケイ．

(72)【発明者】

【氏名】キム，キュ ケイ．

(72)【発明者】

【氏名】ターナー，レイチェル

(72)【発明者】

【氏名】ムーア，リチャード ジー．

【テーマコード（参考）】

4C055

4C063

4C084

4C085

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C055AA01

4C055BA03

4C055BA39

4C055CA01

4C055DA53

4C055FA01

4C063AA01

4C063BB09

4C063CC12

4C063CC31

4C063DD04

4C063DD12

4C063EE01

4C084AA19

4C084AA23

4C084MA02

4C084ZB261

4C084ZB262

4C084ZB271

4C084ZB272

4C084ZC751

4C085AA14

4C085BB31

4C085CC23

4C085DD61

4C085EE03

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086BA02

4C086BC17

4C086BC42

4C086GA07

4C086GA08

4C086MA02

4C086MA03

4C086MA05

4C086NA05

4C086NA14

4C086ZB26

4C086ZB27

4C086ZC75

(57)【要約】

本開示は、１つ以上のセプチンタンパク質、例えばセプチン－２を調節するための新規な化合物、組成物、および方法を提供する。そのような化合物および組成物は、がん、例えば、子宮内膜がん、膵臓がん、肺がん、乳がんまたは漿液性および卵巣明細胞がんなどの卵巣がんの治療に有用である。
【選択図】 図７Ａ

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）の構造：

【化1】

を含む化合物、またはその薬学的に許容される塩であって、
式中、
Ｘ^１、Ｘ^２、およびＸ^３のそれぞれは、独立して、ＣまたはＮであり、Ｘ^１、Ｘ^２、およびＸ^３のうちの少なくとも１つはＮであり、
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｎ－ＯＨ、Ｎ－ＯＲ^１１、またはＮＲ^１１であり、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、およびＲ^１０－のそれぞれは、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含み、
Ｒ^７、Ｒ^８、およびＲ^９のそれぞれは、存在する場合、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含み、
それぞれのＲ^１１は、独立して、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、（Ｃ＝Ｏ）－Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、または（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）_２による１、２、３、またはそれ以上の置換を含む、化合物またはその薬学的に許容される塩。

【請求項2】

構造：

【化2】

またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

Ｘ^２が、Ｎである、請求項１に記載の化合物。

【請求項4】

Ｘ^１およびＸ^３の両方が、Ｃである、請求項３に記載の化合物。

【請求項5】

式（ＩＩ）の構造：

【化3】

またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項４に記載の化合物。

【請求項6】

式（ＩＩＩ）の構造：

【化4】

またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項５に記載の化合物。

【請求項7】

式（ＩＶ）の構造：

【化5】

またはその薬学的に許容される塩を含み、
式中、
それぞれのＲ^１２は、独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含み、
ｎが、１または２である、請求項６に記載の化合物。

【請求項8】

Ｒ^１が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルが、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む、請求項１および３～７のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項9】

Ｒ^２が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルが、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む、請求項１および３～８のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項10】

Ｒ^１およびＲ^２のそれぞれが、独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルが、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む、請求項１および３～９のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項11】

Ｒ^１２が、オルト置換基である、請求項７～１０のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項12】

それぞれのＲ^１２が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルが、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む、請求項７～１１のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項13】

それぞれのＲ^１１が、独立して、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、（Ｃ＝Ｏ）－Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、または（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）_２による１、２、３、またはそれ以上の置換を含む、請求項１および３～１２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項14】

ｉ）Ｒ^２が、フェノキシではないか、または
ｉｉ）Ｒ^３が、イミダゾリルもしくはピリミジニルではない、請求項１および３～５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項15】

構造：

【化6-1】

【化6-2】

またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項１に記載の化合物。

【請求項16】

構造：

【化7】

またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項１および３～１４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項17】

構造：

【化8】

またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項１～１６のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項18】

請求項１～１７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。

【請求項19】

１つ以上の追加の治療薬をさらに含む、請求項１８に記載の医薬組成物。

【請求項20】

前記追加の治療薬が化学療法剤、または抗体、または核酸分子、または治療細胞である、請求項１９に記載の医薬組成物。

【請求項21】

がんの治療を必要とする対象のがんを治療する方法であって、治療有効量の請求項１～１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項１８に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項22】

前記がんが、膵臓がん、乳がん、肺がん（例えば、小細胞および非小細胞肺がん）、腎臓（腎）がん、肝臓がん、卵巣がん、子宮内膜がん、基底細胞がん、胆道がん、膀胱がん、骨がん、脳および／またはＣＮＳがん、子宮頸がん、絨毛がん、結腸および直腸がん、結合組織がん、消化器系がん、子宮内膜がん、食道がん、眼がん、線維腫、頭頸部がん、胃がん、上皮内新生物、喉頭がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病など）、リンパ腫（例えば、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫）、黒色腫、口腔がん（例えば、唇、舌、口、および咽頭がん）、前立腺がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸がん、呼吸器系がん、肉腫、皮膚がん、胃がん、精巣がん、甲状腺がん、子宮がん、泌尿器系がん、またはそれらの任意の組み合わせ、を含む、請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

前記方法が、１つ以上の追加の治療薬を投与することをさらに含む、請求項２１または２２に記載の方法。

【請求項24】

前記１つ以上の追加の治療薬が、化学療法剤を含む、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

前記化学療法剤が、タキサン、またはパクリタキセルを含む、請求項２４に記載の方法。

【請求項26】

前記１つ以上の追加の治療薬が、抗体を含む、請求項２３に記載の方法。

【請求項27】

前記抗体が、抗ＨＥＲ２抗体を含む、請求項２６に記載の方法。

【請求項28】

前記抗ＨＥＲ２抗体が、トラスツズマブを含む、請求項２７に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年８月３０日に出願された米国仮出願番号第６２／８９４，４２４号の優先権の利益を主張するものであり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0002】

肝臓、肺、腎臓、膵臓のがんの治療のための治療選択肢が引き続き必要とされている。同様に、卵巣がんおよび子宮内膜がんなどの進行がんの患者にとって、効果的な治療選択肢は限られている。連続した二次および三次治療は、多くの生命を衰弱させる毒性を追加する以外に、意味のある応答を追加しない。したがって、これらの致命的な悪性腫瘍と診断された患者の生存率を改善するには、腫瘍形成を促進する分子標的の同定およびそのようなドライバー遺伝子に対する標的療法の開発が必要である。

【0003】

セプチンは細胞骨格様のＧＴＰ結合タンパク質であり、細胞質分裂、細胞移動、染色体動態、およびタンパク質分泌などのいくつかの生物学的プロセスに不可欠である。（Ｄｏｌａｔ ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２０７（２）：２２５－２３５、Ｍｏｓｔｏｗｙ ａｎｄ Ｃｏｓｓａｒｔ（２０１２）Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ １３（３）：１８３－１９４、およびＴｏｋｈｔａｅｖａ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２９０（９）：５２８０－５２９７）。セプチンの発現および遺伝子変異の変化は、複数の悪性腫瘍で同定されている。

【発明の概要】

【0004】

本発明は、化合物、組成物、キット、製品、およびそれらを使用するための方法を提供する。それらの構造とともに示される例示的な化合物が、本明細書に提供される。例示的な使用法が本明細書に記載されており、これらに限定するものではないが、インビトロ、エクスビボ、またはインビボで、セプチンタンパク質の発現レベルおよび／または活性の阻害または低減、セプチンを発現する細胞の生存および／または増殖の阻害または低減、ならびにセプチンを発現するがん細胞の生存率および／または増殖を阻害または低減することにより、がん、腫瘍、転移、ならびに他の神経学的および／または心理学的障害または状態の症状を予防または治療、例えば、低減および／または遅らせる。例示的ながん、腫瘍、転移、障害または状態には、婦人科がん、膵臓がん、子宮内膜がん、肝臓がん、腎がん、血液がん、中枢神経系（ＣＮＳ）がん、および本明細書に記載の他のものが含まれるが、これらに限定されない。

【0005】

本発明は、セプチンタンパク質のモジュレーターとしての化合物を提供する。そのようなモジュレーターは、インビトロ、エクスビボ、および／またはインビボでセプチンの発現および／または活性を低減または増加させることができる。いくつかの実施形態では、そのようなモジュレーターは、セプチンの発現および／または活性を低減または拮抗させることができる。

【0006】

本明細書に記載のセプチンタンパク質は、当技術分野で知られているセプチンタンパク質のいずれか１つまたは組み合わせであり、例えば、セプチン－１、セプチン－２、セプチン－３、セプチン－４、セプチン－５、セプチン－６、セプチン－７、セプチン－８、セプチン－９、セプチン－１０、セプチン－１１、セプチン－１２、および／またはセプチン－１４である。いくつかの実施形態では、セプチンタンパク質は、セプチン－２、セプチン－４、セプチン－９、および／またはセプチン－１４である。いくつかの実施形態では、セプチンタンパク質は、セプチン－２およびセプチン－９である。いくつかの実施形態では、セプチンタンパク質は、セプチン－２である。

【0007】

一実施形態では、本発明は、例えば、セプチンタンパク質を阻害するための、新規の化合物、組成物、およびそれらの使用方法を提供する。特定の実施形態では、化合物は、がん、例えば、卵巣明細胞がんなどの卵巣がんを治療するための方法において使用され得る。

【0008】

本明細書に開示されるのは、式（Ｉ）：

【化1】

の例示的な化合物、またはその薬学的に許容される塩であって、
式中、
Ｘ^１、Ｘ^２、およびＸ^３のそれぞれは、独立して、ＣまたはＮであり、Ｘ^１、Ｘ^２、およびＸ^３のうちの少なくとも１つはＮであり、
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｎ－ＯＨ、Ｎ－ＯＲ^１１、またはＮＲ^１１であり、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、およびＲ^１０のそれぞれは、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含み、
Ｒ^７、Ｒ^８、およびＲ^９のそれぞれは、存在する場合、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含み、
それぞれのＲ^１１は、独立して、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、（Ｃ＝Ｏ）－Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、または（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）_２による１、２、３、またはそれ以上の置換を含む、化合物またはその薬学的に許容される塩である。

【0009】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の構造：

【化2】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0010】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の構造：

【化3】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0011】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物のＸ^２位置はＮである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物のＸ^１およびＸ^３位置の両方がＣである。

【0012】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、式（ＩＩ）の構造：

【化4】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0013】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、式（ＩＩＩ）の構造：

【化5】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0014】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、式（ＩＶ）の構造：

【化6】

またはその薬学的に許容される塩を含む。任意選択的には、本明細書に記載の化合物は、式（ＩＶ）の構造を含み、式中
それぞれのＲ^１２が、独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含み、
ｎが、１または２である。

【0015】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物について、
Ｒ^１が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。

【0016】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物について、
Ｒ^２が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。

【0017】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物について、
Ｒ^１およびＲ^２のそれぞれが、独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。

【0018】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物について、Ｒ^１２がオルト置換基である。

【0019】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物について、それぞれのＲ^１２が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。

【0020】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物について、それぞれのＲ^１１が、独立して、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、（Ｃ＝Ｏ）－Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、または（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）_２による１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。

【0021】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、フォルクロルフェヌロン（ＦＣＦ）である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物はＦＣＦではない。例えば、本明細書に記載の化合物は、ＦＣＦ類似体を含むが、ＦＣＦは含まない。

【0022】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物について、
ｉ）Ｒ^２はフェノキシではないか、または
ｉｉ）Ｒ^３はイミダゾリルまたはピリミジニルではない。

【0023】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の構造：

【化7-1】

【化7-2】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0024】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の構造：

【化8】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0025】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の構造：

【化9】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0026】

本発明は、本明細書に記載の化合物のうちの少なくとも１つ、またはその薬学的に許容される塩、および任意選択的に、薬学的に許容される賦形剤を含む組成物、好ましくは医薬組成物を提供する。

【0027】

本発明はまた、本明細書に記載の化合物のうちの少なくとも１つ、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載の組成物のうちの少なくとも１つ、好ましくは医薬組成物と、任意選択的に、上記化合物のうちの少なくとも１つ、その薬学的に許容される塩、または上記組成物のうちの少なくとも１つの使用のための説明書と、を含む、キットを提供する。

【0028】

本発明はまた、本明細書に記載の化合物のうちの少なくとも１つ、もしくはその薬学的に許容される塩、または本明細書に記載の組成物のうちの少なくとも１つ、好ましくは医薬組成物の単位用量を、上記化合物のうちの少なくとも１つ、その薬学的に許容される塩、または上記組成物のうちの少なくとも１つの使用のための適切なパッケージングで含む製品を提供する。

【0029】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物、組成物、好ましくは医薬組成物、キット、または製造品は、以下が可能である：
ｉ）セプチンフィラメントの壊滅の誘導、
ｉｉ）セプチンタンパク質の活性の低減、
ｉｉｉ）細胞内のセプチン、アクチンおよび／もしくはチューブリンタンパク質の活性の低減、
ｉｖ）セプチンタンパク質の細胞内位置の破壊、
ｖ）セプチンタンパク質を発現する細胞の生存率もしくは増殖の低減、
ｖｉ）細胞周期の進行の停止、
ｖｉｉ）細胞アポトーシスの誘導、
ｖｉｉｉ）細胞からのＨＥ（例えば、ＨＥ４）分泌の減少、
ｉｘ）細胞内のＨＥＲ２発現の低減、または
ｘ）治療上有効な量の下にあるとき、セプチンタンパク質の発現もしくは活性の増加を特徴とする疾患または障害を有する対象の治療。いくつかの実施形態では、細胞はがん細胞である。

【0030】

本発明はまた、セプチンタンパク質の活性を低減させる方法であって、セプチンタンパク質を、本明細書に記載の化合物、組成物、好ましくは医薬組成物、キット、または製造品と接触させることを含む、方法を提供する。

【0031】

本発明はまた、細胞内のセプチンタンパク質の活性を低減させる方法であって、セプチンタンパク質を、本明細書に記載の化合物、組成物、好ましくは医薬組成物、キット、または製造品と接触させることを含む、方法を提供する。

【0032】

本発明はまた、細胞の生存率を低減させる方法であって、細胞を、本明細書に記載の化合物、組成物、好ましくは医薬組成物、キット、または製造品と接触させることを含む、方法を提供する。

【0033】

いくつかの実施形態では、化合物または組成物は、セプチンタンパク質の細胞位置を破壊し、細胞増殖を低減させ、細胞周期の進行を停止させ（例えば、Ｓ期で）、細胞アポトーシスを誘導し、細胞からのＨＥ４分泌を減少させ、（好ましくは、ＥＧＦＲ発現を低減させることなく）細胞におけるＨＥＲ２発現を低減させる。いくつかの実施形態では、細胞はがん細胞である。いくつかの実施形態では、細胞は、セプチン－２および／またはセプチン－９などのセプチンタンパク質を過剰発現する。

【0034】

本明細書に記載の化合物、組成物、好ましくは医薬組成物、キット、または製造品を使用する治療のためのがんの種類には、膵臓がん、乳がん、肺がん（例えば、小細胞および非小細胞肺がん）、腎臓（腎）がん、肝臓がん、卵巣がん、子宮内膜がん、基底細胞がん、胆道がん、膀胱がん、骨がん、脳および／またはＣＮＳがん、子宮頸がん、絨毛がん、結腸および直腸がん、結合組織がん、消化器系がん、子宮内膜がん、食道がん、眼がん、線維腫、頭頸部がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、上皮内新生物、喉頭がん、白血病（例えば、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病など）、リンパ腫（例えば、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫）、黒色腫、口腔がん（例えば、唇、舌、口、および咽頭がん）、前立腺がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸がん、呼吸器系がん、肉腫、皮膚がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、精巣がん、甲状腺がん、子宮がん、泌尿器系がん、ならびに他のがん腫および肉腫、またはそれらの任意の組み合わせなどの本明細書に記載のがんのうちの少なくとも１つが、含まれる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のがんは、卵巣がん、子宮内膜がん、腎臓（腎）がん、肺がん、肝臓がん、膵臓がん、結腸直腸がん、皮膚がん、脳がん、神経芽腫、乳がん、または白血病および／もしくはリンパ腫などの血液がんを含む。いくつかの実施形態では、がんは、膵臓がん、乳がん、肺がん、腎臓がん、肝臓がん、卵巣がん、または子宮内膜がん、またはそれらの任意の組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、がんは、卵巣明細胞がん（ＯＣＣＣ）を含む。

【0035】

任意選択的には、本明細書に記載の化合物、組成物、好ましくは医薬組成物、キット、または製造品を細胞に投与する場合、細胞生存率を低減させることができる第２の薬剤または療法もまた、本明細書に記載の化合物、組成物、好ましくは医薬組成物、キット、または製造品を投与すると同時に、投与する前または後に、投与される。

【0036】

本発明はまた、がんの治療を必要とする対象（好ましくは、セプチンタンパク質を発現または過剰発現している対象）のがんを治療する方法であって、治療有効量の本明細書に記載の化合物、組成物、好ましくは医薬組成物、キット、または製造品を対象に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、化合物または組成物は、セプチンタンパク質の細胞位置を破壊し、細胞増殖を低減させ、細胞周期の進行を停止させ（例えば、Ｓ期で）、細胞アポトーシスを誘導し、細胞からのＨＥ４分泌を減少させ、（好ましくは、ＥＧＦＲ発現を低減させることなく）細胞におけるＨＥＲ２発現を低減させる。いくつかの実施形態では、細胞はがん細胞である。いくつかの実施形態では、細胞は、セプチン－２および／またはセプチン－９などのセプチンタンパク質を過剰発現する。

【0037】

本明細書に記載の化合物および組成物は、医師によって適切であると認められた、かつ／または当技術分野で知られている経路のうちのいずれか１つを介して対象に送達される。例示的な送達経路には、髄腔内、静脈内（ＩＶ）、皮下、経口、皮膚パッチ、鼻エアロゾルなどが含まれる。いくつかの実施形態では、投与経路は、経口またはＩＶ投与などの最も侵入性（ｉｎｔｒｕｓｉｖｅ）の低い送達様式を含む。

【0038】

対象は、本明細書に記載されるいずれかの対象のうちの１つである。いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、対象は、ヒト、非ヒト霊長類、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、サル、類人猿、ウサギ、ネコ、イヌ、ウマ、ブタ、ライオン、トラ、またはオオカミである。

【図面の簡単な説明】

【0039】

【図1】卵巣がんおよび子宮内膜がん細胞株の生存率に対するＦＣＦの効果を示す。がん細胞株をＦＣＦ（０、１００、３００μＭ）で２４時間または７２時間処理した後、細胞生存率をＭＴＳアッセイで測定した。

【図2A】卵巣がんおよび子宮内膜がん細胞株の生存率に対する本明細書に記載の化合物の効果を示す。図２Ａにおいて、細胞株を固定濃度（１００μＭ）のＦＣＦまたは開示された化合物で２４時間処理した。処理後、細胞生存率をＭＴＳアッセイによって決定した。（Ｎ＝３）。

【図2B】図２Ｂにおいて、ＥＣＣ－１細胞を列挙された濃度のＵＲ２１４－７またはＵＲ２１４－９で４８時間処理した。処理後、細胞生存率をＭＴＳアッセイによって決定した（左）。細胞増殖をＢｒｄＵの取り込みによって測定した（右）。

【図2C】図２Ｃにおいて、ＥＣＣ－１細胞は、ビヒクル、ＵＲ２１４－７、およびＵＲ－２１４－９で、指示濃度で２４または７２時間処理された。細胞生存率をＭＴＳアッセイによって決定した。

【図2D】図２Ｄにおいて、ＥＣＣ－１細胞をＵＲ２１４－７およびＵＲ２１４－９で３３μＭで４８時間処理した。アポトーシスを起こしている細胞を、カスパーゼ－３／７活性アッセイによって測定した。

【図2E】図２Ｅにおいて、示された各細胞を、開示された化合物の濃度で７２時間処理した。処理後、細胞生存率をＭＴＳアッセイによって決定した。

【図3A】ＨＥＲ２発現に対する開示された化合物の効果を示す。図３Ａにおいて、ＥＣＣ－１またはＨＣＨ－１細胞をＵＲ２１４－７（３３μＭ）、ＵＲ２１４－９（３３μＭ）、またはＦＣＦ（３００μＭ）で２４時間インキュベートした。各タンパク質のレベルを、ウエスタンブロット分析によって決定した。

【図3B】図３Ｂにおいて、ＨＣＨ－１細胞を、ＵＲ２１４－９（１０μＭ）もしくはＦＣＦ（１００μＭ）で４８時間インキュベートするか（上）、あるいはセプチン－２標的化ｓｉＲＮＡまたは非標的化対照ｓｉＲＮＡで２４時間もしくは４０時間トランスフェクトした（下）。細胞溶解物を収集した。ＨＥＲ２の細胞レベルを、ヒトＨＥＲ２酵素結合免疫吸着測定法によって決定した。

【図3C】図３Ｃにおいて、細胞をセプチン－２標的化ｓｉＲＮＡまたは非標的化対照ｓｉＲＮＡでトランスフェクトした。トランスフェクションの４８時間後、細胞集団およびセプチン２の相対的発現を、それぞれスルホローダミンＢアッセイ（上）およびウエスタンブロット分析（下）によって決定した。

【図4A】ＨＥ４の発現に対する開示された化合物の効果を示す。図４Ａにおいて、ＨＥ４過剰発現クローン（ＯＶＣＡＲ８－Ｃ５）をＦＣＦ（３００μＭ）ありもしくはなしで７時間処理した後、細胞溶解物および対応する培地を収集し、酵素免疫測定法を使用してＨＥ４のレベルを分析した。分泌されたＨＥ４の量を、それぞれの細胞溶解物のタンパク質濃度に対して正規化した。

【図4B】図４Ｂにおいて、示された濃度のＦＣＦで５時間処理されたＥＣＣ－１およびＨＣＨ－１細胞、ならびにＨＥ４の分泌レベルを測定した。

【図4C】図４Ｃにおいて、ＥＣＣ－１細胞をＵＲ２１４－１、ＵＲ２１４－７、またはＦＣＦのいずれかで示された濃度で５時間処理し、その時点でＨＥ４の分泌レベルを測定した。

【図4D】図４Ｄにおいて、ＥＣＣ－１細胞を洗浄し、ＦＣＦ（３００μＭ）とともに基本培地で５時間インキュベートした。相対的なＨＥ４発現を、リアルタイムＰＣＲ（Ｂ２Ｍに正規化）によって決定した。

【図4E】図４Ｅにおいて、ＥＣＣ－１細胞をセプチン－２標的化ｓｉＲＮＡまたは非標的化対照ｓｉＲＮＡで４８時間（下）または７２時間（上）トランスフェクトした。ＨＥ４の相対的な遺伝子発現を、リアルタイムＰＣＲによって決定した（ＴＢＰに正規化、下）。ＨＥ４の細胞内レベルを、酵素免疫測定法を使用して測定した（上）。

【図5A】セプチンの過剰発現が、がんによる死亡率の増加とどのように関連しているかを示す。図５Ａにおいて、セプチンと子宮内膜がん患者の生存率との相関関係を、ＴＣＧＡデータセットを使用して分析した。（ｐ＜０．０５）、ｘ軸：日数、ｙ軸：生存率（ｓｕｒｖｉｖａｌ ｆｒａｃｔｉｏｎ）。

【図5B】図５Ｂは、子宮内膜がんにおけるセプチン－２、－３、および－７の相対的発現を示す（ＴＣＧＡデータセット）。

【図5C】図５Ｃにおいて、様々なセプチンの相対的な遺伝子発現を、高悪性度の漿液性卵巣がん患者（赤）および正常な卵巣間質（青）からの顕微解剖されたがん間質試料の遺伝子発現プロファイリングを含むデータセット（Ｗｏｎｇ－７７－ＭＡＳ５．０－ｕ１３３ｐ２）から分析した。（＊＊ｐ＜０．０１、顕微解剖された正常な卵巣間質に対するスチューデントのｔ検定）。

【図6A】セプチンの富化が、がん患者の生存率の低下とどのように相関するかを示す。図６Ａ、６Ｂ、および６Ｃにおいて、正常および悪性の膵臓がん、卵巣がん、および乳がん組織におけるセプチン－２の発現は、Ｒ２－Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ Ｐｌａｔｆｏｒｍに寄託された公的にアクセス可能な患者の腫瘍マイクロアレイデータを使用して分析された。

【図6B】図６Ａ、６Ｂ、および６Ｃにおいて、正常および悪性の膵臓がん、卵巣がん、および乳がん組織におけるセプチン－２の発現は、Ｒ２－Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ Ｐｌａｔｆｏｒｍに寄託された公的にアクセス可能な患者の腫瘍マイクロアレイデータを使用して分析された。

【図6C】図６Ａ、６Ｂ、および６Ｃにおいて、正常および悪性の膵臓がん、卵巣がん、および乳がん組織におけるセプチン－２の発現は、Ｒ２－Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ Ｐｌａｔｆｏｒｍに寄託された公的にアクセス可能な患者の腫瘍マイクロアレイデータを使用して分析された。

【図6D】図６Ｄにおいて、Ｈｕｍａｎ ｐｒｏｔｅｉｎ ＡｔｌａｓまたはＲ２－Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ Ｐｌａｔｆｏｒｍで利用可能なデータおよびツールを使用した膵臓がん、卵巣がんおよび乳がん患者のカプラン・マイヤー生存分析は、セプチン－２富化が生存率の減少と相関することを示す。

【図6E】図６Ｅにおいて、ＵＳ Ｂｉｏｍａｘ Ｉｎｃの膵臓腫瘍マイクロアレイをセプチン－２抗体で染色した後、ソースと一致した二次抗体で染色した。画像を本明細書に記載されているように記録した。悪性組織は、正常な膵臓から単離された組織よりも高いセプチン－２発現を示した。

【図6F】図６Ｆにおいて、悪性漿液性卵巣がん組織は、正常な卵巣よりもセプチン－２発現の増加を示した。ＵＳ Ｂｉｏｍａｘ Ｉｎｃの卵巣腫瘍マイクロアレイをセプチン－２抗体で染色した後、ソースと一致した二次抗体で染色した。画像を本明細書に記載されているように取得した。

【図7A】ＵＲ２１４－９が細胞内でセプチン－２の壊滅を引き起こすことを示す。図７Ａは、ＦＣＦおよびＵＲ２１４－９の化学構造を示しており、ＵＲ２１４－９につながるＦＣＦへの構造変化を強調している。

【図7B】図７Ｂにおいて、ＢＸＰＣ－３、ＣＡＰＡＮ－１、およびＰＡＮＣ－１細胞をスライドガラスに播種し、ＤＭＳＯまたはＦＣＦ（６０μＭ）で４８時間処理した。細胞を固定し、処理し、検証済みのセプチン－２抗体およびソースと一致した二次抗体で染色し、共焦点画像を６０×２の倍率で記録した。

【図7C】図７Ｃにおいて、ガラスチャンバースライド細胞に播種されたＰＡＮＣ－１およびＪＩＭＴ－１を、ＤＭＳＯ（ビヒクル）またはＵＲ２１４－９（１μＭ）で４８時間処理した。細胞を固定し、透過処理し、セプチン－２抗体およびＤｙＬｉｇｈｔ ４８８コンジュゲート二次抗体で染色し、共焦点画像を６０×２の倍率で記録した。

【図7D】図７Ｄにおいて、ＰＡＮＣ－１細胞を１００ｍｍ^３の皿に播種し、ＤＭＳＯ、ＦＣＦ（６０μＭ）、ＵＲ２１４－９（１．０および１０．０μＭ）で４８時間処理した。全細胞溶解物を免疫ブロットし、検証済みのセプチン－２、－６、－７、および－９抗体でプローブした。

【図7E】図７Ｅにおいて、１００ｍｍ^３のペトリ皿に播種したＭＤＡ－ＭＴ－２３１、ＪＩＭＴ－１、およびＭＣＦ－７細胞を、ＤＭＳＯまたはＵＲ２１４－９（１０および３０μＭ）で４８時間処理した。全細胞溶解物を免疫ブロットし、検証済みのセプチン－２、－６、および－９抗体でプローブした。

【図7F】図７Ｆ－７Ｇにおいて、ガラスチャンバースライド上に播種されたＳＫＯＶ－３卵巣がん細胞をＤＭＳＯ（ビヒクル）またはＵＲ２１４－９（１μＭ）で４８時間処理した。細胞を固定し、透過処理し、検証済みのセプチン－２、－６、－７、および－９抗体、続いてＤｙＬｉｇｈｔ ４８８コンジュゲート二次抗体で染色し、共焦点画像を６０×２の倍率で記録した。

【図7G】図７Ｆ－７Ｇにおいて、ガラスチャンバースライド上に播種されたＳＫＯＶ－３卵巣がん細胞をＤＭＳＯ（ビヒクル）またはＵＲ２１４－９（１μＭ）で４８時間処理した。細胞を固定し、透過処理し、検証済みのセプチン－２、－６、－７、および－９抗体、続いてＤｙＬｉｇｈｔ ４８８コンジュゲート二次抗体で染色し、共焦点画像を６０×２の倍率で記録した。

【図8】ＵＲ２１４－９が、膵臓がん細胞および乳がん細胞のアクチンフィラメント破壊を引き起こすことを示す。ＰＡＮＣ－１膵臓がん細胞およびＪＩＭＴ－１乳がん細胞をビヒクルまたはＵＲ２１４－９（１μＭ）で４８時間処理し、固定し、透過処理し、ファロイジン－ＴＲＩＴＣで染色した。共焦点画像を６０×２の倍率で記録した。関心のある領域を白いボックスで示す。

【図9A】ＵＲ３１４－９ががん細胞の生存率を損ない、細胞周期の進行を阻止することを示す。図９Ａ～９Ｂにおいて、セプチン－２：セプチン－２二量体複合体を、ＭｏｌｓｏｆｔのＩＣＭソフトウェアパッケージ（ｖ．３．８－７）を使用して、ＦＣＦ、ＵＲ２１４－８、ＵＲ２１４－９、およびＵＲ２１４－１０とドッキングさせた。化合物は、ＰＤＢ ＩＤ ２ＱＮＲのヌクレオチド結合部位にドッキングされた。これは、利用可能なセプチン－２二量体複合体の最高品質の構造である。受容体の調製（鎖ＡのＧＤＰ結合部位に基づく）およびリガンドの構築は、標準設定を使用してＩＣＭ内で実行された。化合物は、２．０のエフォートおよび化合物あたり２０ポーズの設定で、「ドックテーブル」機能とドッキングされた。

【図9B】ＵＲ３１４－９ががん細胞の生存率を損ない、細胞周期の進行を阻止することを示す。図９Ａ～９Ｂにおいて、セプチン－２：セプチン－２二量体複合体を、ＭｏｌｓｏｆｔのＩＣＭソフトウェアパッケージ（ｖ．３．８－７）を使用して、ＦＣＦ、ＵＲ２１４－８、ＵＲ２１４－９、およびＵＲ２１４－１０とドッキングさせた。化合物は、ＰＤＢ ＩＤ ２ＱＮＲのヌクレオチド結合部位にドッキングされた。これは、利用可能なセプチン－２二量体複合体の最高品質の構造である。受容体の調製（鎖ＡのＧＤＰ結合部位に基づく）およびリガンドの構築は、標準設定を使用してＩＣＭ内で実行された。化合物は、２．０のエフォートおよび化合物あたり２０ポーズの設定で、「ドックテーブル」機能とドッキングされた。

【図9C】図９Ｃ～９Ｄにおいて、ＧＤＰ結合ドメインでＵＲ２１４－９と相互作用するアミノ酸残基が示される。

【図9D】図９Ｃ～９Ｄにおいて、ＧＤＰ結合ドメインでＵＲ２１４－９と相互作用するアミノ酸残基が示される。

【図10A】ＵＲ２１４－９処理がＨＥＲ２＋異種移植腫瘍の成長を遅らせることを示す。図１０Ａにおいて、ＵＲ２１４－９（ＤＭＳＯ、１．２５、２．５、５、１０、および２０μＭ）で７２時間処理したＰＡＮＣ－１およびＢＸＰＣ－３細胞の細胞生存率。ＤＭＳＯ群と比較した処理群の細胞生存率をＭＴＳアッセイを使用して評価し、ＢｉｏＲａｄマイクロプレートリーダーを使用して４９０ｎＭで吸光度を読み取った。

【図10B】図１０Ｂ～１０Ｃにおいて、ＰＡＮＣ－１およびＢＸＰＣ－３細胞をＵＲ２１４－９（３μＭ）またはＤＭＳＯで４８時間処理した。細胞を生－死（Ｌｉｖｅ－ｄｅａｄ）近赤外色素で染色し、ビヒクルおよび対照群の生および死集団をフローサイトメトリーによって推定した。

【図10C】図１０Ｂ～１０Ｃにおいて、ＰＡＮＣ－１およびＢＸＰＣ－３細胞をＵＲ２１４－９（３μＭ）またはＤＭＳＯで４８時間処理した。細胞を生－死（Ｌｉｖｅ－ｄｅａｄ）近赤外色素で染色し、ビヒクルおよび対照群の生および死集団をフローサイトメトリーによって推定した。

【図10D】図１０Ｄにおいて、ＮＳＧマウス（ｎ＝１０）にＰＡＮＣ－１細胞（１００万個／動物）を接種した。腫瘍が触知可能になったら、マウスをそれぞれｎ－５の２つの群に分け、ビヒクルまたはＵＲ２１４－９（２５ｍｇ、Ｍ－Ｆ、ＩＰ、１日１回）で５２日間処理した。腫瘍サイズを定期的に測定した。

【図10E】図１０Ｅにおいて、ＪＩＭＴ１細胞をＵＲ２１４－９（３μＭ）またはＤＭＳＯで４８時間処理した。細胞を生／死（ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ）近赤外色素で染色し、ビヒクルおよび対照群の生および死集団をフローサイトメトリーによって推定した。

【図10F】図１０Ｆにおいて、ＮＳＧマウス（ｎ＝１０）にＪＩＭＴ１細胞（１００万個／動物）を接種した。腫瘍が触知可能になったら、マウスをそれぞれｎ－５の２つの群に分け、ビヒクルまたはＵＲ２１４－９（２５ｍｇ、Ｍ－Ｆ、ＩＰ、１日１回）で２８日間処理した。腫瘍サイズを定期的に測定した。

【図10G】図１０Ｇにおいて、対照群および処理群の両方の動物からの腫瘍を採取し、較正された天秤で秤量した。統計分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ８ソフトウェアを使用して実行した。０．０５未満のＰ値は有意であるとみなされた。

【図11A】ＵＲ２１４－９がＨＥＲ２の発現を阻害し、ＳＴＡＴ－３のリン酸化を阻止することを示す。図１１Ａ－１１Ｂにおいて、付着したＢＸＰＣ－３およびＰＡＮＣ－１細胞をＦＣＦ（６０μＭ）およびＵＲ２１４－９（ＤＭＳＯ、０．１、１．０、および１０μＭ）で４８時間処理した。細胞を溶解し、ＨＥＲ２、ｐＳＴＡＴ－３、ＳＴＡＴ－３、ＡＫＴおよびＧＡＰＤＨ抗体で免疫ブロットした。

【図11B】図１１Ａ－１１Ｂにおいて、付着したＢＸＰＣ－３およびＰＡＮＣ－１細胞をＦＣＦ（６０μＭ）およびＵＲ２１４－９（ＤＭＳＯ、０．１、１．０、および１０μＭ）で４８時間処理した。細胞を溶解し、ＨＥＲ２、ｐＳＴＡＴ－３、ＳＴＡＴ－３、ＡＫＴおよびＧＡＰＤＨ抗体で免疫ブロットした。

【図11C】図１１Ｃにおいて、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＪＩＭＴ－１、およびＭＣＦ－７細胞を、ＤＭＳＯまたはＵＲ２１４－９（１０および３０μＭ）で２４時間処理した。細胞を溶解し、免疫ブロットし、ＨＥＲ２および蛍光体（ｐｈｏｓｐｈｏｒ）－ＳＴＡＴ－３抗体でプローブした。

【図11D】図１１Ｄおよび１１Ｅにおいて、ＨＥＲ２発現ＳＫＯＶ－３細胞（５００，０００細胞／動物）をＮＳＧマウスの右脇腹に皮下移植した。触知可能になったとき、群（各ｎ＝５）のマウスをビヒクル、ＵＲ２１４－９（２５ｍｇ／ｋｇ、Ｍ－Ｆ、Ｉ．Ｐ．）、またはトラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（商標））（１０ｍｇ／ｋｇ、Ｍ、Ｉ．Ｐ．）で処理した。第４の群をＵＲ２１４－９（２５ｍｇ／ｋｇ、Ｍ－Ｆ、Ｉ．Ｐ．）およびトラスツズマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、Ｍ、Ｉ．Ｐ．）の両方で処理した。腫瘍サイズを、デジタルノギスを使用して定期的に測定した。最長の長さおよび幅を記録した。腫瘍体積を、式（Ｌ＊Ｗ＾２）＊０．５を使用して計算した。Ｌは最長の直径を表し、Ｗはデジタルノギスで測定された腫瘍の幅を表す。処理を２７日目に中止し、腫瘍サイズを示された日に測定した。接種から５３日目に、マウスを安楽死させ、腫瘍を採取した。腫瘍重量を、較正された天秤を使用して記録した。統計分析を、Ｇｒａｐｈ Ｐｒｉｓｍ８．１．１を使用して実行した。群間のＴ検定分析を実行し、ｐ＜０．０５が有意であるとみなされた。２２日目：ビヒクル対ＵＲ２１４－９：ｐ－０．００３５^＊＊、ビヒクル対トラスツズマブ：ｐ＝０．００１１^＊＊、ビヒクル対ＵＲ２１４－９＋トラスツズマブ：ｐ＝０．００１^＊＊＊、ＵＲ２１４－９対ＵＲ２１４－９＋トラスツズマブ：ｐ＝０．００５９^＊＊、トラスツズマブ対ＵＲ２１４－９＋トラスツズマブ：ｐ＝０．０４９^＊、２７日目：ビヒクル対ＵＲ２１４－９：ｐ＝０．０００４^＊＊＊、ビヒクル対トラスツズマブ：ｐ＝０．０００２^＊＊＊、ビヒクル対ＵＲ２１４－９＋トラスツズマブ：ｐ＜０．０００１^＊＊＊＊。

【図11E】図１１Ｄおよび１１Ｅにおいて、ＨＥＲ２発現ＳＫＯＶ－３細胞（５００，０００細胞／動物）をＮＳＧマウスの右脇腹に皮下移植した。触知可能になったとき、群（各ｎ＝５）のマウスをビヒクル、ＵＲ２１４－９（２５ｍｇ／ｋｇ、Ｍ－Ｆ、Ｉ．Ｐ．）、またはトラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（商標））（１０ｍｇ／ｋｇ、Ｍ、Ｉ．Ｐ．）で処理した。第４の群をＵＲ２１４－９（２５ｍｇ／ｋｇ、Ｍ－Ｆ、Ｉ．Ｐ．）およびトラスツズマブ（１０ｍｇ／ｋｇ、Ｍ、Ｉ．Ｐ．）の両方で処理した。腫瘍サイズを、デジタルノギスを使用して定期的に測定した。最長の長さおよび幅を記録した。腫瘍体積を、式（Ｌ＊Ｗ＾２）＊０．５を使用して計算した。Ｌは最長の直径を表し、Ｗはデジタルノギスで測定された腫瘍の幅を表す。処理を２７日目に中止し、腫瘍サイズを示された日に測定した。接種から５３日目に、マウスを安楽死させ、腫瘍を採取した。腫瘍重量を、較正された天秤を使用して記録した。統計分析を、Ｇｒａｐｈ Ｐｒｉｓｍ８．１．１を使用して実行した。群間のＴ検定分析を実行し、ｐ＜０．０５が有意であるとみなされた。２２日目：ビヒクル対ＵＲ２１４－９：ｐ－０．００３５^＊＊、ビヒクル対トラスツズマブ：ｐ＝０．００１１^＊＊、ビヒクル対ＵＲ２１４－９＋トラスツズマブ：ｐ＝０．００１^＊＊＊、ＵＲ２１４－９対ＵＲ２１４－９＋トラスツズマブ：ｐ＝０．００５９^＊＊、トラスツズマブ対ＵＲ２１４－９＋トラスツズマブ：ｐ＝０．０４９^＊、２７日目：ビヒクル対ＵＲ２１４－９：ｐ＝０．０００４^＊＊＊、ビヒクル対トラスツズマブ：ｐ＝０．０００２^＊＊＊、ビヒクル対ＵＲ２１４－９＋トラスツズマブ：ｐ＜０．０００１^＊＊＊＊。

【図12A】トランスクリプトーム分析全体から、ＵＲ２１４－９が標的選択的であることが明らかであることを示す。対照と比較したアファチニブで処理したＪＩＭＴ－１乳がん細胞における１２３４個の有意に差次的に発現する遺伝子（ｐ値＜０．０５０に調整されたＢＨのｍＲＮＡ発現の階層的にクラスタ化されたヒートマップ（図１２Ａ）および関連するボルケーノプロット（ｖｏｌｃａｎｏ ｐｌｏｔ）（図１２Ｃ）。

【図12B】対照と比較したＵＲ２１４－９で処理したＪＩＭＴ－１乳がん細胞における１１個の有意に差次的に発現された遺伝子（ｐ－値＜０．０５に調整されたＢＨ）のｍＲＮＡ発現の階層的にクラスタ化されたヒートマップ（図１２Ｂ）および関連するボルケーノプロット（図１２Ｄ）。ヒートマップカラーキーはｒＬｏｇ変換された発現の値の行スケーリング（ｒｏｗ ｓｃａｌｉｎｇ）を表す。ボルケーノプロットは、ｐ値０．０５の水平線を有する。

【図12C】対照と比較したアファチニブで処理したＪＩＭＴ－１乳がん細胞における１２３４個の有意に差次的に発現する遺伝子（ｐ値＜０．０５０に調整されたＢＨのｍＲＮＡ発現の階層的にクラスタ化されたヒートマップ（図１２Ａ）および関連するボルケーノプロット（ｖｏｌｃａｎｏ ｐｌｏｔ）（図１２Ｃ）。

【図12D】対照と比較したＵＲ２１４－９で処理したＪＩＭＴ－１乳がん細胞における１１個の有意に差次的に発現された遺伝子（ｐ－値＜０．０５に調整されたＢＨ）のｍＲＮＡ発現の階層的にクラスタ化されたヒートマップ（図１２Ｂ）および関連するボルケーノプロット（図１２Ｄ）。ヒートマップカラーキーはｒＬｏｇ変換された発現の値の行スケーリング（ｒｏｗ ｓｃａｌｉｎｇ）を表す。ボルケーノプロットは、ｐ値０．０５の水平線を有する。

【図13】本明細書に記載の化合物ＵＲ２１４－９の質量スペクトルを提供する。

【発明を実施するための形態】

【0040】

本開示は、セプチン－２などのセプチンタンパク質の発現または活性を調節するための化合物、組成物、および方法を提供する。様々な置換を有するピリジンを含む新規分子、例えば、アリール尿素の設計、合成およびスクリーニングが本明細書に開示されている。実施例に開示されているこれらの例示的な分子は、腫瘍細胞におけるセプチン－２の集合を強力に破壊し、マイクロナノモル範囲で細胞増殖を減少させる。本明細書に記載の化合物、例えば、ジアリール尿素はまた、膵臓腫瘍組織量および他の腫瘍モデルを低減することができた。

【0041】

セプチン－２はフィラメント形成細胞骨格ＧＴＰａｓｅであり、セプチン－７、セプチン－６、セプチン－９、セプチン－４、およびその他のセプチンとフィラメント状のオリゴマー構造を形成する。セプチン－２を介したフィラメント状構造は、減数分裂後の分化中の精子尾部の構造的完全性および運動性に不可欠である（Ｋｕｏ ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｊ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ １２８（５）：９２３－９３４）。セプチン－２は、アクチン細胞骨格の正常な組織化に必要であり、ポリグルタミル化微小管を維持し、効率的な小胞輸送を促進し、ＭＡＰ４のチューブリンへの結合を妨げることにより、分極した円柱状の上皮の生合成に役割を果たす。セプチン－２は有糸分裂の進行に必要である。セプチン－２は、動原体および染色体の集合での局在化を維持するために必要な有糸分裂紡錘体の中央平面で足場を形成する。分裂後期の間、セプチン－２は染色体分離および紡錘体伸長に関与する。セプチン－２は繊毛形成および細胞運動に役割を果たしている。繊毛では、セプチン－２はＴＭＥＭ２３１タンパク質を局在化することによって構造様複合体（Ｂ９複合体）の集合を調節することによって作用する。繊毛は、繊毛と原形質膜との間の膜貫通タンパク質の拡散を防ぐ一次繊毛の基部にある拡散バリアの完全性に必要である。セプチン－２は、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓおよびＳｈｉｇｅｌｌａ ｆｌｅｘｎｅｒｉなどの２つの細胞内微生物病原体の内在化に役割を果たす。セプチン－２の過剰発現は漿液性および明細胞卵巣がんの腫瘍形成を促進する（Ｃａｎｔｉｌｌｏ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ １４５：Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ １，ｐｐ．１２３－１２４）。

【0042】

セプチンはヘテロマーオリゴマーに集合して、細胞内にフィラメント、バンドル、およびリングなどの高次の足場構造を生成する。それらは、アクチンフィラメント、微小管、および中間径フィラメントに似た細胞骨格成分である。セプチンは、拡散バリアの制御、タンパク質の局在化、細胞外膜融合、オートファゴソーム調節、リソソーム恒常性維持、ミトコンドリア分裂、ならびに膜性細胞小器官および多小胞体の生合成を含む、多様な必須細胞メカニズムに関与していることが知られている（Ｋａｒｔｍａｎｎ ａｎｄ Ｒｏｔｈ（２００１）Ｊ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ １１４（Ｐｔ ５）：８３９－８４４、Ｃａｕｄｒｏｎ ａｎｄ Ｂａｒｒａｌ（２００９）Ｄｅｖ Ｃｅｌｌ １６（４）：４９３－５０６、Ｂｒｉｄｇｅｓ ａｎｄ Ｇｌａｄｆｅｌｔｅｒ（２０１５）Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２９０（２８）：１７１７３－１７１８０、Ｐａｇｌｉｕｓｏ ｅｔ ａｌ．（２０１６）ＥＭＢＯ Ｒｅｐ １７（６）：８５８－８７３、Ｓｉｒｉａｎｎｉ ｅｔ ａｌ．（２０１６）ＥＭＢＯ Ｒｅｐ １７（７）：１０２９－１０４３、Ｍｏｓｔｏｗｙ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｃｅｌｌ Ｈｏｓｔ Ｍｉｃｒｏｂｅ ８（５）：４３３－４４４、Ｔｒａｉｋｏｖ ｅｔ ａｌ．（２０１４）ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ９（１１）：ｅ１０９３７２、およびＤｏｌａｔ ａｎｄ Ｓｐｉｌｉｏｔｉｓ（２０１６）Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２１４（５）：５１７－５２７）。セプチンはＲＡＳがん遺伝子と構造的に関連しており、それらの発現レベルは、腎臓、肺、結腸直腸、皮膚、脳、子宮内膜、卵巣、および乳房など、いくつかの種類のがんで変化することがわかっている（Ｃｅｒｖｅｉｒａ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ３９２（８－９）：７１３－７２４、Ｃｏｎｎｏｌｌｙ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ３９２（８－９）：７２５－７３８、およびＡｎｇｅｌｉｓ ａｎｄ Ｓｐｉｌｉｏｔｉｓ（２０１６）Ｆｒｏｎｔ Ｃｅｌｌ Ｄｅｖ Ｂｉｏｌ ４：１２２）。さらに、異常なセプチンの発現は、神経変性／神経筋疾患、血液障害、不妊症、および発達障害に関連している（Ｄｏｌａｔ ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ３９５（２）：１２３－１４１、およびＭａｒｔｔｉｎｅｎ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｍｏｌ Ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒ １０：１６）。

【0043】

本開示は、セプチン－２などのセプチンタンパク質の発現または活性を調節するための化合物を提供する。いくつかの好ましい実施形態では、そのような化合物は、セプチン－２などのセプチンタンパク質の発現または活性を低減または阻害することができる。

【0044】

本明細書に開示されるのは、式（Ｉ）の例示的な化合物：

【化10】

またはその薬学的に許容される塩であり、
式中、
Ｘ^１、Ｘ^２、およびＸ^３のそれぞれは、独立して、ＣまたはＮであり、Ｘ^１、Ｘ^２、およびＸ^３のうちの少なくとも１つはＮであり、
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｎ－ＯＨ、Ｎ－ＯＲ^１１、またはＮＲ^１１であり、好ましくはＹはＯまたはＳであり、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、およびＲ^１０のそれぞれは、独立して、アルキル、アルケン、アルケニル、フェニル、ピリジルまたはナフチルから選択され、ここで、クロロ、フルオロ、ブロモ、メチル、エチル、イソプロピル、－ＯＣＨ_３、－ＯＨ、－ＮＨ_２／－ＣＦ_３、－ＯＣＦ_３、－ＳＣＨ_３、－ＯＣＨ_３、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３、－ＣＨ_２ＮＨ_２、－Ｎ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２－ピロリジンおよび－ＣＨＯＨ。Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、およびＲ^１０のそれぞれは、フェニルもしくは５～６員の芳香族複素環系、または芳香族炭素環式環、芳香族複素環式環、または芳香族炭素環式環と芳香族複素環式環との組み合わせを含む８～１０員の二環式環系でさらに置換することができ、これらのそれぞれは、独立して、ハロ、任意選択的にＮＲ_２、ＯＲ、ＣＯ_２ＲもしくはＣＯＮＲ_２で置換されたＣ_１－Ｃ_３アルキル、任意選択的にＮＲ_２、ＯＲ、ＣＯ_２ＲもしくはＣＯＮＲで置換されたＯ－（Ｃ_１－Ｃ_３）－アルキル、ＮＲ_２、ＯＣＦ_３、ＣＦ_３、ＮＯ_２、ＣＯ_２Ｒ、ＣＯＮＲ、ＳＲ、Ｓ（Ｏ_２）Ｎ（Ｒ）_２、ＳＣＦ_３、ＣＮ、Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ_２）Ｒ、Ｎ（Ｒ）Ｒ、Ｎ（Ｒ）_２、ＯＲ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＯＰ（Ｏ）_３Ｈ_２、またはＮ＝Ｃ－Ｎ（Ｒ）_２である。これらの置換におけるＲは、アミン、－ＯＨ、－ＳＨ、ハロ、－Ｏ－、－Ｓ－；ＮＲ_２、ＯＲ、ＣＯ_２Ｒ、Ｓ（Ｏ_２）Ｎ（Ｒ）_２、Ｎ＝Ｃ－Ｎ（Ｒ）_２、Ｒ、もしくはＣＯＮＲ_２で任意選択的に置換されたＣ１－Ｃ_３直鎖または分岐アルキル；Ｏ－（Ｃ_１－Ｃ_３）－アルキル；ＮＲ_２、ＯＲ、ＣＯ_２Ｒ、Ｓ（Ｏ_２）Ｎ（Ｒ）_２、Ｎ＝Ｃ－Ｎ（Ｒ）_２、Ｒ、もしくはＣＯＮＲ_２で任意選択的に置換されたＯ－（Ｃ_１－Ｃ_３）－アルキル；ＮＲ_２、ＯＣＦ_３、ＣＦ_３、ＮＯ_２、ＣＯ_２Ｒ、ＣＯＮＲ、Ｒ、ＯＲ、ＮＨＲ；ＮＲ２、ＳＲ；Ｃ（Ｏ）Ｒ、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）Ｒ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＳＲ、Ｓ（Ｏ_２）Ｎ（Ｒ）_２、ＳＣＦ_３、Ｎ＝Ｃ－Ｎ（Ｒ）_２、またはＣＮにより、さらにまたは任意選択的に置換されている。Ｒ基は、Ｒ。Ｒ^１およびＲ^２でさらに置換されていてもよく、あるいはＮ（Ｒ^２）ＳＯ_２－Ｎ（Ｒ^２）_２、Ｎ（Ｒ）ＳＯ_２－Ｎ（Ｒ^２）（Ｒ^３）、Ｎ（Ｒ^２）Ｃ（Ｏ）－ＯＲ^２、Ｎ（Ｒ^２）Ｃ（Ｏ）－Ｎ（Ｒ^２）_２、Ｎ（Ｒ^２）Ｃ（Ｏ）－Ｎ（Ｒ^２）（Ｒ^３）、Ｎ（Ｒ^２）Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、Ｎ（Ｒ^２）_２、Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、ＣＨ（ＯＨ）－Ｒ^２、Ｃ（Ｏ）－Ｎ（Ｒ^２）_２、Ｃ（Ｏ）－ＯＲ^２、Ｊ、またはＮ（Ｒ’）_２、ＯＲ’、ＣＯ_２Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）_２、Ｒ^３、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＯＣ（Ｏ）Ｒ^２、ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^２）_２、－Ｎ（Ｒ^４）（Ｒ^５）、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）（Ｒ^２）、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^５、－Ｎ（Ｒ^２）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^２）（Ｒ^５）、－ＮＣ（Ｏ）ＯＲ^５、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^２）（Ｒ^５）、もしくは－Ｊで任意選択的に置換された（Ｃχ－Ｃ_４）直鎖もしくは分岐アルキル、Ｎ（Ｒ’）、ＯＲ’、ＣＯ_２Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）_２、もしくはＳＯ_２Ｎ（Ｒ^２）_２で任意選択的に置換された５～６員の炭素環式もしくは複素環式環系、またはＮ（Ｒ’）_２、ＯＲ’、ＣＯ_２Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）_２、もしくはＳＯ_２Ｎ（Ｒ^２）_２で任意選択的に置換された８～１０員の炭素環式もしくは複素環式環系、から独立して選択されてもよい；
いくつかの実施形態では、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、およびＲ^１０のそれぞれは、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含み、
Ｒ^７、Ｒ^８、およびＲ^９のそれぞれは、存在する場合、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含み、
それぞれのＲ^１１は、独立して、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、（Ｃ＝Ｏ）－Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、または（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）_２による１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。

【0045】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物中のＸ^２はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ^１およびＸ^３の両方がＣである。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物中のＸ^２はＮであり、Ｘ^１およびＸ^３の両方がＣである。

【0046】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物中のＲ^２は、フェノキシではない。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物中のＲ^３は、イミダゾリルまたはピリミジニルではない。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物中のＲ^２はフェノキシではなく、Ｒ^３はイミダゾリルまたはピリミジニルではない。

【0047】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物中のＸ^２がＮであり、Ｘ^１およびＸ^３の両方がＣであり、Ｒ^２はフェノキシではなく、Ｒ^３はイミダゾリルまたはピリミジニルではない。

【0048】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、フォルクロルフェヌロン（ＦＣＦ）、またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、フォルクロルフェヌロン（ＦＣＦ）、またはその薬学的に許容される塩ではない。

【化11】

【0049】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩ）の構造：

【化12】

またはその薬学的に許容される塩を有する。

【0050】

式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ^３、Ｒ^４、およびＲ^５のそれぞれは、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。

【0051】

いくつかの実施形態では、式（ＩＩ）の化合物中のＲ^２は、フェノキシではない。いくつかの実施形態では、式（ＩＩ）の化合物中のＲ^３は、イミダゾリルまたはピリミジニルではない。いくつかの実施形態では、式（ＩＩ）の化合物中のＲ^２はフェノキシではなく、Ｒ^３はイミダゾリルまたはピリミジニルではない。

【0052】

いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、フォルクロルフェヌロン（ＦＣＦ）、またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、フォルクロルフェヌロン（ＦＣＦ）、またはその薬学的に許容される塩ではない。

【0053】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩＩ）の構造：

【化13】

またはその薬学的に許容される塩を有する。

【0054】

式（Ｉ）、（ＩＩ）、および／または（ＩＩＩ）の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^９およびＲ^１０のそれぞれは、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。

【0055】

いくつかの実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物中のＲ^２は、フェノキシではない。

【0056】

いくつかの実施形態において、式（ＩＩＩ）の化合物は、フォルクロルフェヌロン（ＦＣＦ）、またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態において、式（ＩＩＩ）の化合物は、フォルクロルフェヌロン（ＦＣＦ）、またはその薬学的に許容される塩ではない。

【0057】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＶ）の構造：

【化14】

またはその薬学的に許容される塩を有し、
式中
それぞれのＲ^１２が、独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_６－Ｃ_１０アリールまたは５～１０員ヘテロアリールによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含み、
ｎが、１または２である。

【0058】

いくつかの実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物中のＲ^２は、フェノキシではない。

【0059】

式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、および／または（ＩＶ）の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ^１が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである。例えば、Ｒ^１は、Ｆであり得る。

【0060】

式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、および／または（ＩＶ）の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ^２が、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）－Ｒ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＯＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨＲ^１１、（Ｃ＝Ｏ）－Ｎ（Ｒ^１１）_２、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む、Ｃ_１－Ｃ_６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、任意選択的にＦまたはＣｌによる１、２または３置換を含む、Ｃ_１－Ｃ_３アルキルである。例えば、Ｒ^２は、ＣＦ_３であり得る。

【0061】

式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、および／または（ＩＶ）の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ^１およびＲ^２のそれぞれが、独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルは、任意選択的にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり、Ｒ^２は、任意選択的にＦまたはＣｌによる１、２または３置換を含む、Ｃ_１－Ｃ_３アルキルである。

【0062】

式（ＩＶ）の化合物のいくつかの実施形態では、各Ｒ^１２は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＣ_１－Ｃ_６アルキルであり、上記Ｃ_１－Ｃ_６アルキルは、任意選択的に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩによる１、２、３、またはそれ以上の置換を含む。いくつかの実施形態では、それぞれのＲ^１２は、Ｆ、ＣｌまたはＢｒである。いくつかの実施形態では、それぞれのＲ^１２はＣｌである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１２が、オルト置換基である。

【0063】

いくつかの実施形態では、式（ＩＶ）の化合物は、フォルクロルフェヌロン（ＦＣＦ）、またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態では、式（ＩＶ）の化合物は、フォルクロルフェヌロン（ＦＣＦ）、またはその薬学的に許容される塩ではない。

【0064】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、フォルクロルフェヌロン（ＦＣＦ）の類似体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の構造：

【化15-1】

【化15-2】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0065】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の構造：

【化16】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0066】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の構造：

【化17】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0067】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の構造：

【化18】

またはその薬学的に許容される塩を含む。

【0068】

特定の実施形態では、本開示は、本開示の化合物（例えば、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、および／または（ＩＶ）の化合物）、またはその薬学的に許容される塩、ならびに薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。

【0069】

特定の実施形態では、医薬組成物は、１つ以上の追加の治療薬を含む。

【0070】

本明細書に開示される化合物またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物は、通常の慣行に従って選択され得る１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とともに調製され得る。錠剤は、流動促進剤（ｇｌｉｄａｎｔ）、充填剤、結合剤などを含む賦形剤を含み得る。水性組成物は、無菌形態で調製することができ、経口投与以外による送達を意図する場合、一般に等張性であり得る。すべての組成物は、任意選択的に、Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，６^ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｉｓｔｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，２００９に記載されているような賦形剤を含み得る。賦形剤には、アスコルビン酸および他の抗酸化剤、ＥＤＴＡなどのキレート剤、デキストリン、ヒドロキシアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルメチルセルロース、ステアリン酸などの炭水化物が含まれ得る。特定の実施形態では、組成物は、固体経口剤形を含む固体剤形として提供される。

【0071】

組成物は、経口投与を含む様々な投与経路に適したものを含む。組成物は、単位剤形で提供されてもよく、薬学分野での周知方法のいずれかによって調製することができる。そのような方法は、有効成分（例えば、本開示の化合物またはその薬学的な塩）を１つ以上の薬学的に許容される賦形剤と会合させるステップを含む。組成物は、有効成分を液体賦形剤もしくは細分された固体賦形剤またはその両方と均一かつ密接に会合させ、次いで、必要に応じて生成物を成形することによって調製される。技術および製剤化は、一般的に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１^ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，２００６に記載されている。

【0072】

経口投与に適した本明細書に記載の組成物は、それぞれが所定量の有効成分を含むカプセル、カシェ剤または錠剤を含むがこれらに限定されない別個の単位（単位剤形）として提示することができる。一実施形態では、医薬組成物は錠剤である。

【0073】

本明細書に開示される医薬組成物は、本明細書に開示される１つ以上の化合物、またはその薬学的に許容される塩を、薬学的に許容される賦形剤および任意選択的に他の治療薬とともに含む。有効成分を含む医薬組成物は、意図される投与方法に適した任意の形態であり得る。例えば、経口使用に使用される場合、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性または油性懸濁液、分散性粉末または顆粒、乳濁液、硬質または軟質カプセル、シロップまたはエリキシル剤を調製することができる。経口使用を意図とした組成物は、医薬組成物の製造のための当技術分野で知られている任意の方法に従って調製することができ、そのような組成物は、口当たりの良い調製物を提供するために、甘味剤、香味剤、着色剤および保存剤を含む１つ以上の賦形剤を含み得る。錠剤の製造に適した、毒性のない薬学的に許容される賦形剤と混合した有効成分を含む錠剤が許容される。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウム、ラクトース、ラクトース一水和物、クロスカルメロースナトリウム、ポビドン、リン酸カルシウムまたはナトリウムなどの不活性希釈剤、トウモロコシデンプンまたはアルギン酸などの造粒および崩壊剤、セルロース、微結晶性セルロース、デンプン、ゼラチンまたはアカシアなどの結合剤、ならびにステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、またはタルクなどの潤滑剤であり得る。錠剤は、コーティングされていないか、またはマイクロカプセル化を含む既知の技術によってコーティングされて、消化管での崩壊および吸着を遅らせ、それによって長期間にわたって持続的な作用を提供し得る。例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料を単独でまたはワックスとともに使用することができる。

【0074】

剤形を生成するために不活性成分と組み合わせることができる有効成分の量は、意図される治療対象および特定の投与様式に応じて変化し得る。例えば、いくつかの実施形態では、ヒトへの経口投与のための剤形は、適切かつ便利な量の薬学的に許容される賦形剤とともに製剤化された約１～１０００ｍｇの活性物質を含み得る。特定の実施形態では、薬学的に許容される賦形剤は、全組成物（重量：重量）の約５～約９５％変化する。

【0075】

特定の実施形態では、本開示の化合物またはその薬学的に許容される塩を１つの変形例で含む組成物は、有効成分が代謝される速度に影響を与える薬剤を含まない。したがって、一態様で本開示の化合物を含む組成物は、本開示の化合物または本開示の化合物と別々に、連続してまたは同時に投与される任意の他の有効成分の代謝に影響を与える（例えば、遅くする、妨げる、もしくは遅らせる）薬剤を含まないことが理解される。

【0076】

したがって、一態様で本明細書に詳述される方法、キット、製造品などのいずれも、本開示の化合物または本開示の化合物と別々に、連続してまたは同時に投与される任意の他の有効成分の代謝に影響を与える（例えば、遅くする、妨げる、もしくは遅らせる）薬剤を含まないことが理解される。

【0077】

本開示はさらに、当技術分野で知られている従来の方法によって、例えば、有効成分を薬学的に許容される治療的に不活性な有機および／もしくは無機担体または賦形剤に結合させることによって、あるいはそれらと混合することによって調製することができる、薬学的に許容される組成物の単一の有効成分として投与するための本開示の化合物を含む。

【0078】

別の可能性は、既知の薬物における他の有効成分との相乗効果を有する第２のまたは他の有効成分としての本開示の化合物の使用、またはそのような薬物と一緒の本開示の化合物の投与である。

【0079】

本開示の化合物はまた、インビボで有効成分を放出するプロドラッグまたは他の適切に改変された形態の形態で使用され得る。

【0080】

本開示は、本開示の化合物またはその薬学的に許容される塩を使用する方法を提供する。

【0081】

例えば、いくつかの実施形態では、セプチンタンパク質の活性を低減または阻害する方法は、セプチンタンパク質を本開示の化合物または組成物、あるいはその薬学的に許容される塩と接触させることを含む。セプチンタンパク質は、当技術分野で知られているセプチンタンパク質のうちのいずれか１つまたは組み合わせであり、例えば、セプチン－１、セプチン－２、セプチン－３、セプチン－４、セプチン－５、セプチン－６、セプチン－７、セプチン－８、セプチン－９、セプチン－１０、セプチン－１１、セプチン－１２、および／またはセプチン－１４であり得る。いくつかの実施形態では、セプチンタンパク質は、セプチン－２、セプチン－４、セプチン－９、および／またはセプチン－１４である。いくつかの実施形態では、セプチンタンパク質は、セプチン－２およびセプチン－９である。いくつかの実施形態では、セプチンタンパク質は、セプチン－２である。

【0082】

いくつかの実施形態では、本開示は、細胞を本開示の化合物もしくは組成物、またはその薬学的に許容される塩と接触させることを含む、細胞生存率および／または増殖を阻害する方法を提供する。

【0083】

本明細書でさらに開示されるのは、疾患または障害の治療を必要とする対象に、治療有効量の本開示の化合物もしくは組成物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、疾患または障害を治療する方法である。いくつかの実施形態では、疾患または障害はがんである。

【0084】

一般に、本開示の化合物またはその薬学的に許容される塩で治療することができるがんは、上記のようなセプチンタンパク質の異常な発現または活性を有するがんである。いくつかの実施形態では、がんは、肺がん、卵巣がん、腎がん、尿路上皮がん、子宮内膜がん、結腸直腸がん、皮膚がん、脳がん、乳がん、肝臓がん、膵臓がん、またはそれらの任意の組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、がんは、肺がん、卵巣がん、腎がん、子宮内膜がん、肝臓がん、膵臓がん、またはそれらの任意の組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、がんは、卵巣がん、子宮内膜がん、膵臓がん、またはそれらの任意の組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、がんは、卵巣明細胞がんなどの卵巣がんを含む。

【0085】

本開示は、本開示の化合物もしくは組成物、またはその薬学的に許容される塩を含むキットを提供する。任意選択的に、キットは、例えば、がんの治療に使用するための使用説明書をさらに含む。使用説明書は一般的に書面による説明書であるが、説明書を含む電子記憶媒体（例えば、磁気ディスケットまたは光ディスクなど）も使用することができる。

【0086】

本開示はまた、本開示の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む１つ以上の容器を含む医薬キットを提供する。任意選択的に、そのような容器に関連付けられるのは、医薬品の製造、使用、または販売を規制する政府機関によって規定された形態の通知であり、この通知は、人間の管理のための製造、使用、または販売に対する政府機関による承認を反映している。各成分（２つ以上の成分がある場合）は、別々の容器にパッケージ化するか、交差反応性および貯蔵寿命が許す限り、いくつかの成分を１つの容器に組み合わせることができる。キットは、単位剤形、バルクパッケージ（例えば、複数回投与パッケージ）、またはサブユニット投与であることができる。任意選択的に、キットには、複数の単位用量の化合物および使用説明書が含まれており、薬局（例えば、病院の薬局および調剤薬局など）での保管および使用に十分な量でパッケージ化されている。

【0087】

本明細書に記載の方法で使用するのに適したパッケージングで、本開示の化合物またはその薬学的に許容される塩の単位用量を含む製造品も提供される。適切な包装は当技術分野で知られており、例えば、バイアル、容器、アンプル、ボトル、ジャー、可撓性パッケージングなどが含まれる。任意選択的に、製造品はさらに滅菌および／または密封される。

【0088】

別途定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、当業者に一般に理解されるのと同じ意味を有する。化学基の前部または端部のダッシュは、親部分への結合点を示すための便宜上の事項であり、化学基は、通常の意味を失うことなく、１つ以上のダッシュを伴ってまたは伴わずに表すことができる。「Ｃ_ｕ－ｖ」または「Ｃ_ｕ－Ｃ_ｖ」などの接頭辞は、後に続く基がｕ～ｖ個の炭素原子を有することを示し、ここで、ｕおよびｖは整数である。例えば、「Ｃ_１－６アルキル」または「Ｃ_１－Ｃ_６アルキル」は、アルキル基が１～６個の炭素原子を有することを示す。

【0089】

「アルキル」は、線状または分枝状の飽和一価炭化水素である。例えば、アルキル基は、１～１０個の炭素原子（すなわち、Ｃ_１－１０アルキル）または１～８個の炭素原子（すなわち、Ｃ_１－８アルキル）または１～６個の炭素原子（すなわち、Ｃ_１－６アルキル）または１～４個の炭素原子（すなわち、Ｃ_１－４アルキル）を有することができる。アルキル基の例としては、限定されるものではないが、メチル（Ｍｅ、－ＣＨ_３）、エチル（Ｅｔ、－ＣＨ_２ＣＨ_３）、１－プロピル（ｎ－Ｐｒ、ｎ－プロピル、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、２－プロピル（ｉ－Ｐｒ、ｉ－プロピル、－ＣＨ（ＣＨ_３）_２）、１－ブチル（ｎ－Ｂｕ、ｎ－ブチル、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、２－メチル－１－プロピル（ｉ－Ｂｕ、ｉ－ブチル、－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２）、２－ブチル（ｓ－Ｂｕ、ｓ－ブチル、－ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３）、２－メチル－２－プロピル（ｔ－Ｂｕ、ｔ－ブチル、－Ｃ（ＣＨ_３）_３）、１－ペンチル（ｎ－ペンチル、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、２－ペンチル（－ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、３－ペンチル（－ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２）、２－メチル－２－ブチル（－Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、３－メチル－２－ブチル（－ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）_２）、３－メチル－１－ブチル（－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２）、２－メチル－１－ブチル（－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３）、１－ヘキシル（－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、２－ヘキシル（－ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、３－ヘキシル（－ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３））、２－メチル－２－ペンチル（－Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３）、３－メチル－２－ペンチル（－ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_３）、４－メチル－２－ペンチル（－ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２）、３－メチル－３－ペンチル（－Ｃ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２）、２－メチル－３－ペンチル（－ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）_２）、２，３－ジメチル－２－ブチル（－Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２）、３，３－ジメチル－２－ブチル（－ＣＨ（ＣＨ_３）Ｃ（ＣＨ_３）_３、およびオクチル（－（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３）が含まれる。

【0090】

「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を有する線状または分枝状の一価炭化水素ラジカルである。例えば、アルケニル基は、２～８個の炭素原子（すなわち、Ｃ_２－８アルケニル）または２～６個の炭素原子（すなわち、Ｃ_２－６アルケニル）または２～４個の炭素原子（すなわち、Ｃ_２－４アルケニル）を有することができる。アルケニル基の例には、エテニル（－ＣＨ＝ＣＨ_２）、アリル（－ＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ_２）、および－ＣＨ_２－ＣＨ＝ＣＨ－ＣＨ_３が含まれるが、これらに限定されない。

【0091】

「アルキニル」は、少なくとも１つの炭素－炭素三重結合を有する線状または分枝状の一価炭化水素ラジカルである。例えば、アルキニル基は、２～８個の炭素原子（すなわち、Ｃ_２－８アルキニル）または２～６個の炭素原子（すなわち、Ｃ_２－６アルキニル）または２～４個の炭素原子（すなわち、Ｃ_２－４アルキニル）を有することができる。アルキニル基の例には、アセチレニル（－Ｃ≡ＣＨ）、プロパルギル（－ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨ）、および－ＣＨ_２－Ｃ≡Ｃ－ＣＨ_３が含まれるが、これらに限定されない。

【0092】

本明細書で使用される「ハロ」または「ハロゲン」は、フルオロ（－Ｆ）、クロロ（－Ｃｌ）、ブロモ（－Ｂｒ）およびヨード（－Ｉ）を指す。

【0093】

本明細書で使用される「アリール」は、単一のすべてが炭素の芳香族環、または環のうちの少なくとも１つが芳香族である複数の縮合のすべて炭素の環系を指す。例えば、特定の実施形態では、アリール基は、６～２０個の炭素原子、６～１４個の炭素原子、または６～１２個の炭素原子を有する。アリールにはフェニルラジカルが含まれる。アリールはまた、少なくとも１つの環が芳香族であり、他の環が芳香族または非芳香族（すなわち、炭素環）である約９～２０個の炭素原子を有する多重縮合環系（例えば、２、３または４環を含む環系）を含む。そのような多重縮合環系は、任意選択的に、多重縮合環系の任意の炭素環部分上、１つ以上（例えば、１、２または３個）のオキソ基で置換されている。多重縮合環系の環は、原子価要件で可能な場合、縮合、スピロ、およびブリッジ結合を介して相互に接続することができる。特定の原子範囲（ａｔｏｍ ｒａｎｇｅ）のメンバーのアリール（例えば、６～１０員のアリール）を参照する場合、原子範囲は、アリールの全環原子に対するものであることも理解されたい。例えば、６員のアリールにはフェニルが含まれ、１０員のアリールにはナフチルと１，２，３，４－テトラヒドロナフチルが含まれる。アリール基の非限定的な例には、フェニル、インデニル、ナフチル、１，２，３，４－テトラヒドロナフチル、アントラセニルなどが含まれるが、これらに限定されない。

【0094】

本明細書で使用される「ヘテロアリール」は、環内に炭素以外の少なくとも１つの原子を有する単一芳香環を指し、原子は、酸素、窒素および硫黄からなる群から選択され、「ヘテロアリール」はまた、少なくとも１つのそのような芳香環を有する多重縮合環系を含み、この多重縮合環系を以下にさらに説明する。したがって、「ヘテロアリール」は、約１～６個の炭素原子、ならびに酸素、窒素、および硫黄からなる群から選択される約１～４個のヘテロ原子の単一芳香環を含む。任意選択的に、環が芳香族である場合、硫黄原子および窒素原子も酸化された形で存在する。例示的なヘテロアリール環系には、ピリジル、ピリミジニル、オキサゾリルまたはフリルが含まれるが、これらに限定されない。「ヘテロアリール」はまた、上記で定義されたヘテロアリール基が、ヘテロアリール（例えば、１，８－ナフチリジニルを形成するため）、複素環（例えば、１，２，３，４－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジニルを形成するため）、炭素環（例えば、５，６，７，８－テトラヒドロキノリルを形成するため）およびアリール（例えば、インダゾリルを形成するため）から選択される１つ以上の環と縮合して多重縮合環系を形成する、多重縮合環系（例えば、２つの環を含む環系）を含む。したがって、ヘテロアリール（単一芳香環または多重縮合環系）は、ヘテロアリール環内に約１～９個の炭素原子および約１～６個のヘテロ原子を有する。そのような多重縮合環系は、任意選択的に縮合環の炭素環または複素環部分上の１つ以上（例えば、１、２、３または４）のオキソ基で置換されている。多重縮合環系の環は、原子価要件で可能な場合、縮合、スピロ、およびブリッジ結合を介して相互に接続できる。多重縮合環系の個々の環は、任意選択的に、互いに対して任意の順序で接続されることを理解されたい。ヘテロアリールまたはヘテロアリール多重縮合環系の結合点は、炭素原子およびヘテロ原子（例えば、窒素）を含むヘテロアリールまたはヘテロアリール多重縮合環系の任意の適切な原子であり得ることが理解されるべきである。特定の原子範囲のメンバーのヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール）を参照する場合、原子範囲は、ヘテロアリールの全環原子に対するものであり、炭素原子およびヘテロ原子を含むことも理解されたい。例えば、５員のヘテロアリールにはチアゾリルが含まれ、１０員のヘテロアリールにはキノリニルが含まれる。例示的なヘテロアリールには、ピリジル、ピロリル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラゾリル、チエニル、インドリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、フリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、キノリル、イソキノリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、インダゾリル、キノキサリル、キナゾリル、５，６，７，８－テトラヒドロイソキノリニルベンゾフラニル、ベンズイミダゾリル、チアナフテニル、ピロロ［２，３－ｂ］ピリジニル、キナゾリニル－４（３Ｈ）－オン、およびトリアゾリルが含まれるが、これらに限定されない。

【0095】

「本開示の化合物」は、本明細書に開示される化合物を含み、例えば、本開示の化合物は、実施例の化合物を含む、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物を含む。

【0096】

本明細書で使用される「治療」または「治療する」または「治療すること」は、有益なまたは所望の結果を得るためのアプローチを指す。本開示の目的のために、有益なまたは所望の結果には、症状の緩和および／または症状の程度の縮減、および／または疾患もしくは状態に関連する症状の悪化の予防が含まれるが、これらに限定されない。一実施形態では、「治療」または「治療すること」は、以下のうちの１つ以上を含む：ａ）疾患または状態を阻害すること（例えば、疾患または状態に起因する１つ以上の症状を減少させること、および／または疾患もしくは状態の程度を縮減させること）、ｂ）疾患または状態に関連する１つ以上の症状の発症を遅延させることまたは阻止すること（例えば、疾患または状態を安定させること、疾患または状態の悪化または進行を遅延させること）、ならびにｃ）疾患または状態を緩和すること、例えば、臨床症状の退行を引き起こすこと、病状を改善すること、疾患の進行を遅延させること、生活の質を高めること、および／または生存を延長すること。

【0097】

本明細書で使用される疾患または状態の発症で参照される「遅延させること」は、疾患または状態の発症を延期、妨害、遅延、遅らせる、安定化および／または延期することを意味する。この遅延には、疾患の病歴および／または治療されている個人に応じて、様々な長さの時間になる可能性がある。当業者には明らかであるように、十分なまたは有意な遅延は、事実上、個体が疾患または状態を発症しないという点で、予防を包含することができる。

【0098】

本明細書で使用される「予防する」または「予防」または「予防すること」は、疾患の臨床症状が発症しないように、疾患または障害の発症に対し保護するレジメンを指す。したがって、「予防」は、対象において疾患の徴候が検出可能になる前の対象への療法の施与（例えば、治療物質の投与）に関連する。対象は、疾患または障害の発症（ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）または発症（ｏｎｓｅｔ）に関連することが知られている１つ以上のリスク因子を有する個体など、疾患または障害を発症するリスクのある個体であり得る。また、予防には１００％の成功率は必要ないことも理解されている。

【0099】

本明細書で使用されるタンパク質、例えば、セプチンタンパク質の活性の「調節」または「調節すること」は、活性が増加または減少するような活性の変化を指す。いくつかの実施形態では、調節は活性を減少させる。

【0100】

本明細書で使用される「低減させる」または「低減」または「低減させること」は、特定のレベル（例えば、タンパク質および／またはｍＲＮＡの発現レベルおよび／または活性もしくは機能）を減少させる効果を指す。結果として低減したレベルは、以前のレベルの、約９９％、９８％、９５％、９０％、８５％、８０％、７５％、７０％、６５％、６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％、３％、１％以下、または１００％よりも小さい上記に列挙されていない任意のパーセンテージである。具体的には、結果として生じる低減したレベルはゼロである可能性があり、これは実験的に検出できないことを意味する（例えば、発現レベルおよび／または活性もしくは機能に対して）。本明細書で使用される「低減させる」などの用語は、「阻害する」などの用語と交換可能である。

【0101】

本明細書で使用される「対象」は、哺乳動物、例えば、脊索動物門内の動物を指し、これらに限定されないが、霊長類（ヒト、他の大型類人猿（ヒト科（ｈｏｍｉｎｉｄ））、テナガザル（テナガザル科（ｈｙｌｏｂａｔｉｄ））、旧世界サル（オナガザル科（ｃｅｒｃｏｐｉｔｈｅｃｉｄ））、新世界サル（広鼻猿類、少なくともマーモセット科（Ｃａｌｌｉｔｒｉｃｈｉｄ）、オマキザル科（Ｃｅｂｉｄ）、ヨザル科（Ａｏｔｉｄ）、サキ科（Ｐｉｔｈｅｃｉｉｄ）、クモザル科（Ａｔｅｌｉｄ）を含む、広鼻猿類）、メガネザルおよび曲鼻亜目（Ｓｔｒｅｐｓｉｒｒｈｉｎｅ）（少なくともキツネザルおよびノロマザルのような霊長類を含む））、グリレス大目（Ｇｌｉｒｅ）（ナキウサギ、ウサギ、ノウサギ、およびげっ歯類（少なくともマウスのようなげっ歯類、ウロコオリスのようなげっ歯類、ビーバーのようなげっ歯類、ヤマアラシのようなげっ歯類、およびリスのようなげっ歯類を含む））、ネコのような肉食動物（少なくともネコ、オビリンサン属（Ａｓｉａｔｉｃ ｌｉｎｓａｎｇ）、キノボリジャコウネコ科（Ａｆｒｉｃａｎ ｐａｌｍ ｃｉｖｅｔ）、ジャコウネコ科（Ｖｉｖｅｒｒｏｉｄ）、ハイエナ、およびマングースを含むネコ亜目（ｆｅｌｉｆｏｒｍ））、イヌのような肉食動物（少なくともイヌ、クマ、レッサーパンダ、スカンク、イタチ、ミンク、クズリ、アライグマ、セイウチ、アシカ、アザラシを含むイヌ亜目（ｃａｎｉｆｏｒｍ））、ハリネズミ、トガリネズミ、モグラ、ラクダ類（少なくともラクダとラマを含む）、ブタ（少なくともブタおよびペッカリー）、カバ、クジラ、イルカ、コウモリ、ウマ、有袋類などを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の対象は、ブタ、ウシ、ウマ、ラクダ類、イヌ、ネコ、ラット、マウスなどの家畜、カニクイザルまたはチンパンジーなどの非ヒト霊長類、またはヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、サル、類人猿、ウサギ、ネコ、イヌ、ウマ、ブタ、ライオン、トラ、オオカミなどを含むがこれらに限定されない動物である。

【0102】

本明細書で使用される「リスクのある個体」は、治療されるべき状態を発症するリスクのある個体を指す。「リスクのある」個体は、検出可能な疾患または状態を有していてもいなくてもよく、本明細書に記載の方法の治療前に検出可能な疾患を示していても示さなくてもよい。「リスクのある」とは、個体が１つ以上のいわゆるリスク因子を有することを意味し、これは、疾患または状態の発症と相関し、当技術分野で知られている測定可能なパラメータである。これらのリスク因子のうちの１つ以上を有している個体は、これらのリスク因子を有していない個体よりも疾患または状態を発症する可能性が高くなる。

【0103】

本明細書で使用される「治療有効量」または「有効量」は、疾患を治療するために対象に投与されたときに、疾患のそのような治療を行うのに十分である化合物の量を含む、所望の生物学的または医学的応答を引き出すのに有効な量を指す。有効量は、化合物、疾患およびその重症度、ならびに、治療される対象の年齢、体重などに応じて変化する。有効量には、ある範囲の量を含めることができる。当技術分野で理解されているように、有効量は、１つ以上の用量であり得、すなわち、所望の治療エンドポイントを達成するために、単一の用量または複数の用量が必要とされ得る。有効量は、１つ以上の治療薬を投与する状況で考慮され得、単一の薬剤は、１つ以上の他の薬剤と組み合わせて、望ましいまたは有益な結果が可能であるまたは達成される場合、有効量で与えられるとみなされ得る。任意の同時投与される化合物の適切な用量は、化合物の組み合わせ作用（例えば、相加効果または相乗効果）のために、任意選択的に低下させることができる。

【0104】

「薬学的に許容される賦形剤」には、限定することなく、任意の、アジュバント、担体、賦形剤、流動促進剤、甘味剤、希釈剤、防腐剤、染料／着色剤、風味増強剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、安定剤、等張剤、溶媒、またはヒトもしくは家畜での使用が許容されるものとして米国食品医薬品局によって承認された乳化剤が含まれる。

【0105】

本明細書に記載の化合物の薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、互変異性型、多形体、およびプロドラッグも提供される。「薬学的に許容される」または「生理学的に許容される」とは、獣医学的またはヒトの医薬用途に適した医薬組成物を調製するのに有用な化合物、塩、組成物、剤形および他の材料を指す。

【0106】

本明細書に記載の化合物は、薬学的に許容される塩として、または適切な場合には遊離塩基として調製および／または製剤化することができる。薬学的に許容される塩は、遊離塩基の所望の薬理学的活性を有する化合物の遊離塩基形態の非毒性塩である。これらの塩は、無機もしくは有機の酸または塩基に由来し得る。例えば、塩基性窒素を含む化合物は、化合物を無機酸または有機酸と接触させることにより、薬学的に許容される塩として調製することができる。薬学的に許容される塩の非限定的な例には、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオン酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン－１，４－ジオエート、ヘキシン－１，６－ジオエート、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、メチルスルホン酸塩、プロピルスルホン酸塩、ベシル酸塩、キシレンスルホン酸塩、ナフタレン－１－スルホン酸塩、ナフタレン－２－スルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ－ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、およびマンデル酸塩が含まれる。他の適切な薬学的に許容される塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１^ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，２００６に記載されている。

【0107】

本明細書に開示される化合物の「薬学的に許容される塩」の例には、アルカリ金属（例えば、ナトリウム、カリウム）、アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム）、アンモニウムおよびＮＸ_４ ^＋（Ｘは、Ｃ_１－Ｃ_４アルキルである）などの適切な塩基に由来する塩も含まれる。ナトリウム塩またはカリウム塩などの塩基付加塩も含まれる。

【0108】

本明細書で使用される「がん」という用語は、身体の臓器およびシステムの正常な機能を妨害する臓器の器官の制御されていない細胞の増殖を指す。元の場所から移動して重要な臓器に播種するがん細胞は、影響を受けた臓器の機能低下を通じて、最終的には対象の死につながる可能性がある。がん細胞は、異常に分裂して増殖する細胞である。場合によっては、発現された遺伝子およびタンパク質のプロファイル、ならびにそれらの発現のレベルに基づいて、がん細胞をそれらの正常な対応物から区別することが可能である。がん細胞で一般的に影響を受ける遺伝子には、がん遺伝子が含まれる。がん関連の変異は、それらの発現の減少または完全な欠失につながる。他では、変異は、発現の増加または正常な対応物の活性化されたバリアントの発現を引き起こす。

【0109】

「腫瘍」という用語は通常、新生物（ｎｅｏｐｌａｓｍ）と同等であり、文字通り「新生物（ｎｅｗ ｇｒｏｗｔｈ）」を意味し、「がん」と交換可能に使用される。「腫瘍性障害」は、細胞増殖、特に新生物に関連する任意の障害である。「新生物」は、その出現を開始した発がん性因子の除去後も持続および増殖する組織の異常な塊である。新生物には、良性および悪性の２種類がある。ほぼすべての良性腫瘍は被包性であり、非侵襲的であり、対照的に、悪性腫瘍はほとんど被包性でなく、浸潤性の破壊的な増殖によって隣接する組織に侵入する。この浸潤性増殖の後に、元の腫瘍とは不連続な部位に腫瘍細胞が移植される可能性がある。

【0110】

転移は原発腫瘍から身体の他の部分へのがん細胞の播種に起因する原発腫瘍の位置とは異なるがん細胞の領域である。原発腫瘍塊の診断時に、対象は転移の存在についてモニターされ得る。転移は、特定の症状のモニタリングに加えて、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）スキャン、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャン、血液および血小板数、肝機能検査、胸部Ｘ線、ならびに骨スキャンの単独または併用によって最も頻繁に検出される。

【0111】

本発明の化合物および組成物は、対象のがんを治療するために使用することができる。いくつかの実施形態では、がんは、婦人科がん（卵巣がんなど）、膵臓がん、子宮内膜がん、肝臓がん、腎がん、血液がん、中枢神経系（ＣＮＳ）がん、またはそれらの任意の組み合わせを含む。いくつかの重要なＣＮＳがんの例には、神経芽腫、髄芽腫、末梢悪性神経鞘腫瘍、上衣腫、ｃｈｒａｎｉｏｐｈａｒｙｎｇｉｏｍａ、星状細胞腫、髄膜腫、胚細胞腫、神経膠腫、混合性神経膠腫、脈絡叢腫瘍、乏突起膠腫、末梢性神経外胚葉性腫瘍、原始神経外胚葉性腫瘍（ＰＮＥＴ）、ＣＮＳリンパ腫、下垂体腺腫、およびシュワン腫、が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、星状細胞腫は、グレードＩ、グレードＩＩ、グレードＩＩＩ、またはグレードＩＶである。星状細胞腫は、低悪性度または高悪性度の場合がある。星状細胞腫は、若年性毛様細胞性星状細胞腫、上衣下巨細胞性星状細胞腫、多形性（ｐｌｅｉｍｏｒｐｈｉｃ）黄色星状膠細胞腫、退形成性星状細胞腫、または大脳神経膠腫症であり得る。いくつかの実施形態では、乏突起膠腫は、混合性神経膠腫（乏突起星細胞腫）または退形成性乏突起膠腫である。１つの好ましい実施形態では、がんは神経芽腫を含む。

【0112】

本発明の化合物および組成物によって治療することができるがんには、基底細胞がん、胆道がん、膀胱がん、骨がん、脳およびＣＮＳがん、乳がん、子宮頸がん、絨毛がん、結腸および直腸がん、結合組織がん、消化器系がん、子宮内膜がん、食道がん、眼がん、線維腫、頭頸部がん、胃がん、上皮内新生物、腎臓がん、喉頭がん、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病を含む白血病、肝臓がん、肺がん（例えば、小細胞および非小細胞）、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫を含むリンパ腫、黒色腫、口腔がん（例えば、唇、舌、口、および咽頭）、前立腺がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸がん、呼吸器系がん、肉腫、皮膚がん、胃がん、精巣がん、甲状腺がん、子宮がん、泌尿器系がん、ならびに他のがん腫および肉腫も含まれるが、これらに限定されない。

【0113】

本発明の化合物および組成物による治療を目的とする例示的ながん腫には、限定されないが、腺房がん、小葉がん、濾胞状腺がん（腺嚢がん種、腺筋上皮腫、篩状がんおよび円柱腫とも呼ばれる）、がん腺腫（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｄｅｎｏｍａｔｏｓｕｍ）、腺がん、副腎皮質がん、肺胞がん、肺胞上皮がん（細気管支がん、肺胞上皮腫および肺腺腫症とも呼ばれる）、基底細胞がん（ｂａｓａｌ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、基底細胞がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｂａｓｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）（基底細胞がん（ｂａｓａｌｏｍａ）または基礎細胞腫、および毛母がんとも呼ばれる）、類基底細胞がん、基底扁平細胞がん、乳がん、気管支肺胞上皮がん、細気管支がん、気管支原性がん、大脳様がん（ｃｅｒｅｂｒｉｆｏｒｍ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、胆管細胞がん（胆管腫および胆管がんとも呼ばれる）、絨毛がん（ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液がん（ｃｏｌｌｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、面皰がん、体がん（ｃｏｒｐｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、篩状がん、よろい状がん、皮膚がん、円柱状がん（ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、円柱細胞がん、腺管がん、硬性がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｄｕｒｕｍ）、胎児性がん、髄様がん、眼球上がん、類表皮がん、上皮腺様がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｅ ａｄｅｎｏｉｄｅ）、潰瘍がん、線維がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｆｉｂｒｏｓｕｍ）、ゼラチン状がん、膠様がん、巨細胞がん、巨大細胞、腺がん、顆粒膜細胞がん、毛母体がん、血球様がん、肝細胞がん（肝細胞腫、悪性肝がんおよび肝臓がんとも呼ばれる）、ヒュルトレ細胞がん、硝子質がん（ｈｙａｌｉｎｅ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、副腎様がん（ｈｙｐｅｒｎｅｐｈｒｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、乳児胎児性がん（ｉｎｆａｎｔｉｌｅ ｅｍｂｒｙｏｎａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、上皮内がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｓｉｔｕ）、表皮内がん、上皮内がん（ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、クロムペッカーがん（Ｋｒｏｍｐｅｃｈｅｒ’ｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、クルチスキー細胞がん（Ｋｕｌｃｈｉｔｚｋｙ－ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、レンズ状がん（ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、レンズ状がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒｅ）、脂肪腫性がん、リンパ上皮がん、乳腺炎様がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍａｓｔｉｔｏｉｄｅｓ）、髄様がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｅｄｕｌｌａｒｅ）、髄様がん（ｍｅｄｕｌｌａｒｙ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、黒色がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｅｌａｎｏｄｅｓ）、黒色がん（ｍｅｌａｎｏｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液性がん（ｍｕｃｉｎｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液性がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｕｃｉｐａｒｕｍ）、粘膜細胞がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｕｃｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、粘液性類表皮がん、粘液がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｕｃｏｓｕｍ）、粘膜がん（ｍｕｃｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液腫様がん、鼻咽頭がん、黒色がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｎｉｇｒｕｍ）、燕麦細胞がん、骨化性がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｏｓｓｉｆｉｃａｎｓ）、類骨がん（ｏｓｔｅｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、卵巣がん、乳頭がん、門脈周囲がん（ｐｅｒｉｐｏｒｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、前浸潤がん、前立腺がん、腎臓の腎細胞がん（腎臓の腺がんおよび腎明細胞がん（ｈｙｐｅｒｎｅｐｈｏｒｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）と呼ばれる）、予備細胞がん、肉腫様がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｓａｒｃｏｍａｔｏｄｅｓ）、シュナイダーがん腫（ｓｃｈｅｉｎｄｅｒｉａｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、硬性がん（ｓｃｉｒｒｈｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、陰嚢がん、印環細胞がん、単純がん、小細胞がん、ソラノイドがん（ｓｏｌａｎｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、回転楕円面細胞がん腫、紡錘細胞がん、海綿様がん、扁平上皮がん、有棘細胞がん、ストリングがん（ｓｔｒｉｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、毛細血管拡張性がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔａｔｉｃｕｍ）、毛細血管拡張様がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔｏｄｅｓ）、移行上皮がん、結節がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）、結節がん（ｔｕｂｅｒｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、疣状がん、絨毛がん（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｖｉｌｏｓｕｍ）が含まれる。

【0114】

例示的な肉腫は、骨および軟部組織で発生するまれな間葉性新生物である。様々な種類の肉腫が認識されており、これらには以下が含まれる：例えば、脂肪肉腫（粘液性脂肪肉腫および多形性脂肪肉腫を含む）、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、悪性末梢神経鞘腫瘍（悪性シュワン腫、神経線維肉腫、または神経原性肉腫とも呼ばれる）、ユーイング腫瘍（骨のユーイング肉腫、骨外性（すなわち非骨性）ユーイング肉腫、および原始神経外胚葉性腫瘍［ＰＮＥＴ］）、滑膜肉腫、血管肉腫（ａｎｇｉｏｓａｒｃｏｍａｓ）、血管肉腫（ｈｅｍａｎｇｉｏｓａｒｃｏｍａｓ）、リンパ管肉腫、カポジ肉腫、血管内皮腫、線維肉腫、類腱腫（侵襲性線維腫症とも呼ばれる）、隆起性皮膚線維肉腫（ＤＦＳＰ）、悪性線維性組織球腫（ＭＦＨ）、血管周囲細胞腫、悪性間葉腫、胞状軟部肉腫、類上皮肉腫、明細胞肉腫、線維形成性小細胞腫瘍、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）（ＧＩ間質性肉腫としても知られる）、骨肉腫（ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ）（骨肉腫（ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ ｓａｒｃｏｍａ）としても知られる）－骨格および骨格外、ならびに軟骨肉腫。

【0115】

本発明の化合物および組成物はまた、難治性がんを治療するために使用することができる。難治性がんは、処方された通常の標準治療に耐性のあるがんである。したがって、難治性がんに対する本発明に従って治療される対象は、そのがんに対する別の治療にすでに曝露されている可能性がある。あるいは、がんが難治性である可能性が高い場合（例えば、がん細胞または対象の病歴の分析が得られている場合）、対象はまだ別の治療に曝露されていない可能性がある。難治性がんの例には、白血病、黒色腫、腎細胞がん、結腸がん、肝臓（肝）がん、膵臓がん、非ホジキンリンパ腫、および肺がんが含まれるが、これらに限定されない。

【0116】

本発明の化合物および組成物はまた、免疫原性のあるがんを治療するために使用することができる。免疫原性のあるがんは、その表面または細胞死時に免疫原を発現する可能性があるがんである。これらの免疫原は、がん抗原のインビボ内在源であり、その放出は、がんを治療するために本発明の方法によって利用することができる。例示的な免疫原性のあるがんには、悪性黒色腫および腎細胞がん、マンテル細胞リンパ腫（Ｍａｎｔｅｌ Ｃｅｌｌ Ｌｙｍｐｈｏｍａ）、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞性急性リンパ芽球性白血病、バーキットリンパ腫、骨髄腫、免疫細胞腫、急性前骨髄球性白血病、慢性骨髄性／急性リンパ芽球性白血病、急性白血病、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病、未分化大細胞白血病、骨髄異形成症候群／急性骨髄性白血病、非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、一般的（ｃｏｍｍｏｎ）（ｐｒｅ－Ｂ）急性リンパ性白血病、悪性黒色腫、Ｔ細胞リンパ腫、白血病、Ｂ細胞リンパ腫、上皮性悪性腫瘍、リンパ性悪性腫瘍、婦人科がん、胆管腺がん、および膵管腺がんが含まれる。

【0117】

本発明の化合物および組成物はまた、血管新生を治療するために使用することができる。血管新生は、内皮細胞の異常な急速な増殖であり、異常な新しい血管の持続的かつ衰えることのない形成をもたらす。数か月または数年続く血管新生は、がんの増殖および進行をサポートする可能性があり、例えば、眼、皮膚、心臓、血管、肺、消化管、および尿生殖器管などの様々な臓器および組織に損傷を与える可能性がある。

【0118】

本明細書で使用される場合、「血管新生を阻害する」という用語は、本発明に記載の化合物での治療時、またはセプチン－２もしくは他のセプチンファミリーのタンパク質を個別にまたは集合的に標的化することによる異常な微小血管の数または密度の低減を指す。臨床現場で最も広く使用されている方法は、生検（開腹または針）または検体における血管（微小血管）の組織化学的または免疫組織化学的染色に依存している。検査することができる血管新生の特徴には、例えば、血管密度ならびに／または血管周囲カフの形態および／もしくは厚さが含まれる。組織学的生検または検体における微小血管密度の領域が定量化される。微小血管密度の高い領域（「ホットスポット」）は、例えば、最も多くの腫瘍細胞を含み、かつ／または転移の可能性が最も高い可能性がある。微小血管密度を決定する１つの技術は、毛細血管間距離を測定することである。血管新生を評価する別の方法は、血管周囲のカフの厚さを測定することである。血管周囲カフの厚さの増加は、血管新生の進行に関連しており、疾患の悪化を示している可能性がある。

【0119】

本発明の一態様である血管新生の阻害は、血管新生（ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）（血管新生（ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ））因子の血液、血清、血漿、もしくは組織レベル、または血管新生（ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）の代理マーカーとして機能する血管新生（ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ）因子のレベルを測定することによって評価することができる。血管新生の代理マーカーとして機能することができる例示的な血管新生因子には、アンギオゲニン、アンギオポイエチン－１、Ｄｅｌ－１、線維芽細胞増殖因子：酸性（ａＦＧＦ）および塩基性（ｂＦＧＦ）、フォリスタチン、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）／散乱因子（ＳＦ）、インターロイキン－８（ＩＬ－８）、レプチン、ミッドカイン、胎盤増殖因子、血小板由来内皮細胞増殖因子（ＰＤ－ＥＣＧＦ）、血小板由来増殖因子－ＢＢ（ＰＤＧＦ－ＢＢ）、プレイオトロフィン（ＰＴＮ）、プログラニュリン、プロリフェリン、トランスフォーミング増殖因子－アルファ（ＴＧＦ－アルファ）、トランスフォーミング増殖因子－ベータ（ＴＧＦ－ベータ）、腫瘍壊死因子－アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、および血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）／血管透過性因子（ＶＰＦ）、が含まれるが、これらに限定されない。画像処理技術は、血管新生の評価にも有用である。適切な画像処理技術またはデバイスには、ＣＴ、回転ＣＴ、マイクロＣＴ、マルチプルエナジーコンピュータ断層撮影（ＭＥＣＴ）、単一検出器ＣＴ（ＳＤＣＴ）、多検出器ＣＴ（ＭＤＣＴ）、体積測定ＣＴ（ＶＣＴ）、ＭＲＩ、マイクロＭＲ、Ｘ線、回転Ｘ線、ＰＥＴ、近赤外線／光学などの非侵襲的デバイス、ならびに対象の体外で使用するか、または体腔に非侵襲的に挿入することができるその他の非侵襲的スキャン技術およびデバイスが含まれる。血管新生は、ＣＴ血管造影（ＣＴＡ）、トモシンセシス、Ｘ線マイクロ血管造影、およびその他の技術によっても画像化できる。血管新生画像処理技術の１つとして、腫瘍微小血管灌流の灌流変化を検出する、超音波およびコントラスト特異的なイメージングモダリティと組み合わせたマイクロバブルベースの造影剤（ＳｏｎｏＶｕｅ）の使用を含む。他の血管新生画像処理技術には、カラードップラーおよびマンモグラフィが含まれる。カラードップラー画像処理は、乳がんなどの腫瘍における血管新生を示すことができる。マンモグラフィにより、乳房腫瘍の血管新生した縁を明らかにすることができる。広範囲の画像または放射線学的徴候を、色素によって増強することができる。

【0120】

血管新生はまた、身体の関心領域に少なくとも１つの造影剤を導入することを含むプロセスによって対象において評価することができる。例えば、血管を検出するための造影剤を血管に注射することができる。少量の造影剤を局所的に導入して、特定の身体の関心領域の血管の検出を増強することができる。あるいは、造影剤は、広い身体領域または対象の身体全体における血管の検出を増強するのに十分な量で提供され得る。構造データは、対象の身体について取得することができるか、または１つ以上の標的臓器、例えば、肺、心臓、乳房、結腸など、臓器の一部、もしくは対象の身体の別の標的体積について取得することができる。標的体積は、対象の身体の任意の部分、例えば、手足、腹部、胴体、首、頭、またはそれらの任意の部分にすることができる。本明細書に記載されていない血管新生を評価するための他の方法または技術を、本発明の目的のために使用することができる。血管新生を評価するための方法および技術は、当業者に知られている。

【0121】

本発明に記載の化合物および組成物の使用は、放射線療法、外科手術、従来の化学療法などの他の療法と組み合わせることができるか、または１つ以上の追加の療法との組み合わせと組み合わせることができる。

【0122】

本発明に記載の化合物および組成物は、医薬組成物として単独で投与されるか、または治療上有効かつ生理学的に許容される量の１つ以上の他の有効成分または薬剤と組み合わせて投与される。そのような他の有効成分には、グルタチオン拮抗薬、血管新生阻害剤、化学療法剤、および抗体（例えば、がん抗体）が含まれるが、これらに限定されない。本発明に記載の化合物および組成物ならびに他の有効成分または薬剤は、同時にまたは連続して投与される。本発明に記載の化合物および組成物を別の活性剤と同時に投与する場合、または別の有効成分と組み合わせて投与する場合、化合物および組成物および他の有効成分は、同じまたは別個の製剤で投与されるが、同時に投与される。他の活性剤およびセプチン標的化合物の投与が時間的に離れている場合、他の活性剤は、互いに、かつ本発明の化合物および組成物とともに順次投与される。投与間の時間の区切りは、数分、数時間、数日、またはそれ以上の時間である。

【0123】

グルタチオン拮抗薬の例には、ブチオニンスルホキシミン、シクロホスファミド、イフォスファミド、アクチノマイシンＤ、およびＮ－（４－ヒドロキシフェニル）レチナミド（４－ＨＰＲ）が含まれるが、これらに限定されない。

【0124】

血管新生阻害剤の例には、これらに限定されないが、２－メトキシエストラジオール（２－ＭＥ）、ＡＧ３３４０、アンギオスタチン、アンチトロンビンＩＩＩ、抗ＶＥＧＦ抗体、バチマスタット、ベバシズマブ（アバスタチン）、ＢＭＳ－２７５２９１、ＣＡＩ、カンスタチン、カプトプリル、軟骨由来阻害剤（ＣＤＩ）、ＣＣ－５０１３、セレコキシブ（ＣＥＬＥＢＲＥＸ（登録商標））、ＣＯＬ－３、コンブレタスタチン、コンブレタスタチンＡ４リン酸、ダルテパリン（ＦＲＡＧＩＮ（登録商標））、ＥＭＤ １２１９７４（シレンジタイド）、エンドスタチン、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標））、ゲフィチニブ（イレッサ）、ゲニステイン、臭化水素酸ハロフジノン（ＴＥＭＰＯＳＴＡＴＩＮ（商標））、Ｉｄ１、Ｉｄ３、ＩＭ８６２、メシル酸イマチニブ、誘導タンパク質１０、インターフェロン－アルファ、インターロイキン１２、ラベンダスチンＡ、ＬＹ３１７６１５またはＡＥ－９４１（ＮＥＯＶＡＳＴＡＴ（商標））、マリマスタット、マスピン、メドロキシプロゲステロンアセテート（Ｍｅｄｒｏｘｐｒｅｇｅｓｔｅｒｏｎｅ）、Ｍｅｔｈ－１、Ｍｅｔｈ－２、ネオバスタット（Ｎｅｏｖａｓｔａｔ）、オステオポンチン切断産物、ＰＥＸ、色素上皮増殖因子（ＰＥＧＦ）、血小板因子第４因子、プロラクチンフラグメント、プロリフェリン関連タンパク質（ＰＲＰ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ ２２２５８４、組換えヒト血小板第４因子（ｒＰＦ４）、レスチン（Ｒｅｓｔｉｎ）、スクアラミン、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、スラミン、タキソール、テコガラン（Ｔｅｃｏｇａｌａｎ）、サリドマイド、トロンボスポンジン、ＴＮＰ－４７０、トロポニンＩ、バソスタチン、ＶＥＧ１、ＶＥＧＦ－Ｔｒａｐ、およびＺＤ６４７４が含まれる。いくつかの実施形態では、血管新生阻害剤は、ＶＥＧＦ拮抗薬である。ＶＥＧＦ拮抗薬は、ＶＥＧＦ結合分子であり得る。ＶＥＧＦ結合分子には、ＶＥＧＦ抗体またはその抗原結合フラグメントが含まれる。ＶＥＧＦ拮抗薬の一例はＮｅＸｓｔａｒである。

【0125】

化学療法剤は、本発明の化合物および組成物に対する追加の有効成分として使用することができる。このような化学療法剤には、限定されないが、ＤＮＡ損傷剤が含まれ、これらには、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシド、ランプトテシン、トポテカン、テニポシド、ミトキサントロン）、抗微小管剤（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン）、抗代謝剤（例えば、シタラビン、メトトレキサート、ヒドロキシ尿素、５－フルオロウラシル、フロクスウリジン、６－チオグアニン、６－メルカプトプリン、フルダラビン、ペントスタチン、クロロデオキシアデノシン）、ＤＮＡアルキル化剤（例えば、シスプラチン、メクロレタミン、シクロホスファミド、イフォスファミド、メルファラン、クロラムブシル（ｃｈｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、ブスルファン、チオテパ、カルムスチン、ロムスチン、カルボプラチン、ダカルバジン、プロカルバジン）、およびＤＮＡ鎖切断誘導剤（例えば、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、イダルビシン、マイトマイシンＣ）が含まれる。化学療法剤には合成、半合成および天然由来の薬剤が含まれる。重要な化学療法剤には、限定されないが、以下が含まれる：アシビシン、アクラルビシン、塩酸アコダゾール（Ａｃｏｄａｚｏｌｅ）、アクロニン、アドゼレシン、アドリアマイシン、アルデスロイキン、アリトレチノイン、アロプリノールナトリウム、アルトレタミン、アンボマイシン（Ａｍｂｏｍｙｃｉｎ）、酢酸アメタントロン、アミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、バンレイシ科（Ａｎｎｏｎａｃｅｏｕｓ）アセトゲニン、アントラマイシン、アシミシン、アスパラギナーゼ、アスペルリン、アザシチジン、アゼテパ、アゾトマイシン、バチマスタット、ベンゾデパ、ベキサロテン、ビカルタミド、塩酸ビサントレン、ジメシル酸ビスナフィド、ビゼレシン、硫酸ブレオマイシン、ブレキナルナトリウム、カルボメチル、ブロピリミン、ブラタシン、ブスルファン、カベルゴリン、カクチノマイシン、カルステロン、カラセミド、カルベチマー、カルボプラチン、カルムスチン、塩酸カルビシン、カルゼルシン、セデフィンゴール、セレコキシブ、クロラムブシル、シロレマイシン（Ｃｉｒｏｌｅｍｙｃｉｎ）、シスプラチン、クラドリビン、メシル酸クリスナトール、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ＤＡＣＡ（Ｎ－［２－（ジメチル－アミノ）エチル］アクリジン－４－カルボキサミド）、ダクチノマイシン、塩酸ダウノルビシン、ダウノマイシン、デシタビン、デニロイキンジフチトクス、デキソルマプラチン（Ｄｅｘｏｒｍａｐｌａｔｉｎ）、デザグアニン、メシル酸デザグアニン、ジアジクオン、ドセタキセル、ドキソルビシン、塩酸ドキソルビシン、ドロロキシフェン、クエン酸ドロロキシフェン、プロピオン酸ドロモスタノロン、デュアゾマイシン（Ｄｕａｚｏｍｙｃｉｎ）、エダトレキサート、塩酸エフロニチン、エルサミトルシン、エンロプラチン（ｅｎｌｏｐｌａｔｉｎ）、エンプロマート、エピプロピジン、塩酸エピルビシン、エルブロゾール、塩酸エソルビシン、エストラムスチン、エストラムスチンリン酸エステルナトリウム、エタニダゾール、エチオダイドオイル（Ｅｔｈｉｏｄｉｚｅｄ Ｏｉｌ）Ｉ １３１、エトポシド、リン酸エトポシド、エトプリン、塩酸ファドロゾール、ファザラビン、フェンレチニド、フロクスウリジン、フルダラビンリン酸エステル、フルオロウラシル、５－ＦｄＵＭＰ、フルオロシタビン（Ｆｌｕｏｒｏｃｉｔａｂｉｎｅ）、ホスキドン、ホストリエシンナトリウム、ＦＫ－３１７、ＦＫ－９７３、ＦＲ－６６９７９、ＦＲ－９００４８２、ゲムシタビン、塩酸ゲムシタビン、ゲムツズマブオゾガマイシン、ゴールドＡｕ １９８、酢酸ゴセレリン、グアナコン（ｇｕａｎａｃｏｎｅ）、ヒドロキシ尿素、塩酸イダルビシン、イフォスファミド、イルモフォシン、インターフェロンアルファ－２ａ、インターフェロンアルファ－２ｂ、インターフェロンアルファ－ｎ１、インターフェロンアルファ－ｎ３、インターフェロンベータ－Ｉａ、インターフェロンガンマ－Ｉｂ、イプロプラチン（Ｉｐｒｏｐｌａｔｉｎ）、塩酸イリノテカン、酢酸ランレオチド、レトロゾール、酢酸リュープロリド、塩酸リアロゾール、ロメトレキソール（Ｌｏｍｅｔｒｅｘｏｌ）ナトリウム、ロムスチン、塩酸ロソキサントロン、マソプロコール、マイタンシン、塩酸メクロレタミン、酢酸メゲストロール、酢酸メレンゲストロール、メルファラン、メノガリル、メルカプトプリン、メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、メトキサレン、メトプリン、メツレデパ、ミチンドミド、ミトカルシン（Ｍｉｔｏｃａｒｃｉｎ）、ミトクロミン（Ｍｉｔｏｃｒｏｍｉｎ）、ミトギリン（Ｍｉｔｏｇｉｌｌｉｎ）、ミトマルシン（Ｍｉｔｏｍａｌｃｉｎ）、マイトマイシン、マイトマイシンＣ、ミトスパー（Ｍｉｔｏｓｐｅｒ）、ミトタン、塩酸ミトキサントロン、ミコフェノール酸、ノコダゾール、ノガラマイシン、オプレルベキン、オルマプラチン、オキシスラン、パクリタキセル、パミドロン酸二ナトリウム、ペグアスパラガーゼ、ペリオマイシン（Ｐｅｌｉｏｍｙｃｉｎ）、ペンタムスチン、硫酸ペプロマイシン、ペルホスファミド、ピポブロマン、ピポスルファン、ピロキサントロン塩酸塩、プリカマイシン、プロメスタン、ポルフィマーナトリウム、ポルフィロマイシン、プレドニムスチン、塩酸プロカルバジン、ピューロマイシン、塩酸ピューロマイシン、ピラゾフリン、リボプリン、リツキシマブ、ログレチミド、ロリニアスタチン（Ｒｏｌｌｉｎｉａｓｔａｔｉｎ）、サフィンゴール、塩酸サフィンゴール、サマリウム／レキシドロナム、セムスチン、シムトラゼン、スパルホサート（Ｓｐａｒｆｏｓａｔｅ）ナトリウム、スパルソマイシン、スピロゲルマニウム塩酸塩、スピロムスチン、スピロプラチン、スクアモシン（Ｓｑｕａｍｏｃｉｎ）、スクアモタシン（Ｓｑｕａｍｏｔａｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、塩化ストロンチウムＳｒ８９、スロフェヌル、タリソマイシン、タキサン、タキソイド、テコガラン（Ｔｅｃｏｇａｌａｎ）ナトリウム、テガフール、塩酸テロキサントロン、テモポルフィン、テニポシド、テロキシロン、テストラクトン、チアミプリン、チオグアニン、チオテパ、チミタク（Ｔｈｙｍｉｔａｑ）、チアゾフリン、チラパザミン、トムデックス、ＴＯＰ－５３、塩酸トポテカン、クエン酸トレミフェン、トラスツズマブ、酢酸トレストロン（Ｔｒｅｓｔｏｌｏｎｅ）、リン酸トリシリビン、トリメトレキサート、グルクロン酸トリメトレキサート、トリプトレリン、塩酸ツブロゾール、ウラシルマスタード、ウレデパ、バルルビシン、バプレオチド、ベルテポルフィン、ビンブラスチン、硫酸ビンブラスチン、ビンクリスチン、硫酸ビンクリスチン、ビンデシン、硫酸ビンデシン、硫酸ビネピジン、ビングリシナート（Ｖｉｎｇｌｙｃｉｎａｔｅ）スルファート、硫酸ビンロイロシン（Ｖｉｎｌｅｕｒｏｓｉｎｅ）、酒石酸ビノレルビン、硫酸ビンロシジン（Ｖｉｎｒｏｓｉｄｉｎｅ）、硫酸ビンゾリジン（Ｖｉｎｚｏｌｉｄｉｎｅ）、ボロゾール、ゼニプラチン、ジノスタチン、塩酸ゾルビシン、２－クロロデオキシアデノシン、２’－デオキシホルマイシン、９－アミノカンプトテシン、ラルチトレキセド、Ｎ－プロパルギル－５，８－ジデアザ葉酸、２－クロロ－２’－アラビノ－フルオロ－２’－デオキシアデノシン、２－クロロ－２’－デオキシアデノシン、アニソマイシン、トリコスタチンＡ、ｈＰＲＬ－Ｇ１２９Ｒ、ＣＥＰ－７５１、リノマイド（ｌｉｎｏｍｉｄｅ）、硫黄マスタード、ナイトロジェンマスタード（メクロルエタミン）、シクロホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、イフォスファミド、ブスルファン、Ｎ－メチル－Ｎ－ニトロソウレア（ＭＮＵ）、Ｎ、Ｎ’－ビス（２－クロロエチル）－Ｎ－ニトロソウレア（ＢＣＮＵ）、Ｎ－（２－クロロエチル）－Ｎ’－シクロヘキシル－Ｎ－ニトロソウレア（ＣＣＮＵ）、Ｎ－（２－クロロエチル）－Ｎ’－（トランス－４－メチルシクロヘキシル－Ｎ－ニトロソウレア（ＭｅＣＣＮＵ）、Ｎ－（２－クロロエチル）－Ｎ’－（ジエチル）エチルホスホネート－Ｎ－ニトロソウレア（ホテムスチン）、ストレプトゾトシン、ジアカルバジン（ｄｉａｃａｒｂａｚｉｎｅ）（ＤＴＩＣ）、ミトゾロミド、テモゾロミド、チオテパ、マイトマイシンＣ、ＡＺＱ、アドゼレシン、シスプラチン、カルボプラチン、オルマプラチン、オキサリプラチン、Ｃ１－９７３、ＤＷＡ２１１４Ｒ、ＪＭ２１６、ＪＭ３３５、Ｂｉｓ（プラチナ）、トムデックス、アザシチジン、シタラビン、ゲムシタビン、６－メルカプトプリン、６－チオグアニン、ヒポキサンチン、テニポシド、９－アミノカンプトテシン、トポテカン、ＣＰＴ－１１、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、ダルビシン、ミトキサントロン、ロソキサントロン、ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ）、アムサクリン、ピラゾロアクリジン、オールトランスレチノール、１４－ヒドロキシレトロレチノール、オールトランスレチノイン酸、Ｎ－（４－ヒドロキシフェニル）レチナミド、１３－シスレチノイン酸、３－メチルＴＴＮＥＢ、９－シスレチノイン酸、フルダラビン（２－Ｆ－ａｒａ－ＡＭＰ）、および２－クロロデオキシアデノシン（２－Ｃｄａ）。

【0126】

本発明の化合物および組成物と組み合わせることが意図される他の化学療法剤には、これらに限定されないが、以下が含まれる：２０－エピ－１，２５ジヒドロキシビタミンＤ３、５－エチニルウラシル、アビラテロン、アクラルビシン、アシルフルベン、アデシペノール、アドゼレシン、アルデスロイキン、ＡＬＬ－ＴＫ拮抗薬、アルトレタミン、アンバムスチン、アミドックス、アミフォスチン、アミノレブリン酸、アムルビシン、アムサクリン、アナグレリド、アナストロゾール、アンドログラホリド、血管新生阻害剤、アンタゴニストＤ、アンタゴニストＧ、アンタレリックス（ａｎｔａｒｅｌｉｘ）、抗背側形成タンパク質－１（ａｎｔｉ－ｄｏｒｓａｌｉｚｉｎｇ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ－１）、抗アンドロゲン、前立腺がん、抗エストロゲン、アンチネオプラストン、アンチセンスオリゴヌクレオチド、グリシン酸アフィジコリン、アポトーシス遺伝子モジュレーター、アポトーシスレギュレーター、アプリン酸、ａｒａ－ＣＤＰ－ＤＬ－ＰＴＢＡ、アルギニンデアミナーゼ、アスラクリン（ａｓｕｌａｃｒｉｎｅ）、アタメスタン、アトリムスチン（ａｔｒｉｍｕｓｔｉｎｅ）、アキシナスタチン１、アキシナスタチン２、アキシナスタチン３、アザセトロン、アザトキシン、アザチロシン（ａｚａｔｙｒｏｓｉｎｅ）、バッカチンＩＩＩ誘導体、バラノール、バチマスタット、ＢＣＲ／ＡＢＬアンタゴニスト、ベンゾクロリン（ｂｅｎｚｏｃｈｌｏｒｉｎ）、ベンゾイルスタウロスポリン、ベータラクタム誘導体、ベータ－アレチン（ａｌｅｔｈｉｎｅ）、ベータクラマイシンＢ（ｂｅｔａｃｌａｍｙｃｉｎ Ｂ）、ベツリン酸、ｂＦＧＦ阻害剤、ビカルタミド、ビスアントレン、ビスアジリジニルスペルミン（ｂｉｓａｚｉｒｉｄｉｎｙｌｓｐｅｒｍｉｎｅ）、ビスナフィド（ｂｉｓｎａｆｉｄｅ）、ビストラテンＡ、ビゼレシン、ブレフラート（ｂｒｅｆｌａｔｅ）、ブレオマイシンＡ２、ブレオマイシンＢ２、ブロピリミン、ブドチタン（ｂｕｄｏｔｉｔａｎｅ）、ブチオニンスルホキシミン、カルシポトリオール、カルホスチンＣ、カンプトテシン誘導体（例えば、１０－ヒドロキシ－カンプトテシン）、カナリア痘ＩＬ－２；カペシタビン、カルボキサミド－アミノ－トリアゾール、カルボキシアミドトリアゾール、ＣａＲｅｓｔ Ｍ３、ＣＡＲＮ ７００、軟骨由来阻害剤、カルゼレシン、カゼインキナーゼ阻害剤（ＩＣＯＳ）、カスタノスペルミン、セクロピンＢ、セトロレリックス、クロリン（ｃｈｌｏｒｉｎｓ）、クロロキノキサリンスルホンアミド、シカプロスト、シス－ポルフィリン、クラドリビン類似体、クロトリマゾール、コリスマイシン（ｃｏｌｌｉｓｍｙｃｉｎ）Ａ、コリスマイシンＢ、コンブレタスタチンＡ４、コンブレタスタチン類似体、コナゲニン、クランベシジン（ｃｒａｍｂｅｓｃｉｄｉｎ）８１６、クリスナトール、クリプトフィシン８、クリプトフィシンＡ誘導体、クラシンＡ、シクロペンタントラキノン（ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅ）、シクロプラタム（ｃｙｃｌｏｐｌａｔａｍ）、シペマイシン（ｃｙｐｅｍｙｃｉｎ）、シタラビンオクホスファート、細胞溶解因子、サイトスタチン、ダクリキシマブ（ｄａｃｌｉｘｉｍａｂ）、デシタビン、デヒドロジデムニン（ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｄｅｍｎｉｎ）Ｂ、２’デオキシコホルマイシン（ＤＣＦ）、デスロレリン、デキシホスファミド（ｄｅｘｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、デクスラゾキサン、デクスベラパミル、ジアジクオン、ジデムニンＢ、ジドックス（ｄｉｄｏｘ）、ジエチルノルスペルミン、ジヒドロ－５－アザシチジン、ジヒドロタキソール、ジオキサマイシン（ｄｉｏｘａｍｙｃｉｎ）、ジフェニルスピロムスチン、ディスコデルモリド、ドコサノール、ドラセトロン、ドキシフルリジン、ドロロキシフェン、ドロナビノール、デュオカルマイシンＳＡ、エブセレン、エコムスチン、エデルホシン、エドレコロマブ、エフロルニチン、エレメン、エミテフル、エピルビシン、エポチロン（Ａ、Ｒ＝Ｈ、Ｂ、Ｒ＝Ｍｅ）、エピチロン、エプリステリド、エストラムスチン類似体、エストロゲンアゴニスト、エストロゲンアンタゴニスト、エタニダゾール、エトポシド、エトポシド４’－リン酸（エトポフォス）、エキセメスタン、ファドロゾール、ファザラビン、フェンレチニド、フィルグラスチム、フィナステリド、フラボピリドール、フレゼラスチン、フルアステロン、フルダラビン、塩酸フルオロダウノルニシン（ｆｌｕｏｒｏｄａｕｎｏｒｕｎｉｃｉｎ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ホルフェニメクス、ホルメスタン、ホストリエシン、ホテムスチン、ガドリニウムテキサフィリン、硝酸ガリウム、ガロシタビン、ガニレリックス、ゲラチナーゼ阻害剤、ゲムシタビン、グルタチオン阻害剤、ヘプスルファム（ｈｅｐｓｕｌｆａｍ）、ヘレグリン、ヘキサメチレンビスアセトアミド、ホモハリントンニン（ＨＨＴ）、ハイペリシン、イバンドロン酸イダルビシン、イドキシフェン、イドラマントン、イルモフォシン、イロマスタット、イミダゾアクリドン（ｉｍｉｄａｚｏａｃｒｉｄｏｎｅ）、イミキモド、免疫刺激ペプチド、インスリン様成長因子－１受容体阻害剤、インターフェロンアゴニスト、インターフェロン、インターロイキン、ヨーベングアン、ヨードドキソルビシン、イポメアノール、４－、イリノテカン、イロプラクト（ｉｒｏｐｌａｃｔ）、イルソグラジン、イソベンガゾール（ｉｓｏｂｅｎｇａｚｏｌｅ）、イソホモハリコンドリン（ｉｓｏｈｏｍｏｈａｌｉｃｏｎｄｒｉｎ）Ｂ、イタセトロン、ジャスプラキノリド、カハラリド（ｋａｈａｌａｌｉｄｅ）Ｆ、ラメラリン－Ｎトリアセテート、ランレオチド、レイナマイシン、レノグラスチム、硫酸レンチナン、レプトルスタチン（ｌｅｐｔｏｌｓｔａｔｉｎ）、レトロゾール、白血病抑制因子、白血球αインターフェロン、ロイプロリド＋エストロゲン＋プロゲステロン、ロイプロレリン、レバミソール、リアロゾール、線状ポリアミン類似体、親油性二糖ペプチド（ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ ｄｉｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｐｅｐｔｉｄｅ）、親油性白金化合物、リッソクリナミド（ｌｉｓｓｏｃｌｉｎａｍｉｄｅ）７、ロバプラチン、ロンブリシン、ロメトレキソール、ロニダミン、ロソキサントロン、ロバスタチン、ロキソリビン、ルルトテカン（ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ）、ルテチウムテキサフィリン、リゾフィリン（ｌｙｓｏｆｙｌｌｉｎｅ）、溶解ペプチド、マイタンシン、マンノプロテインＡ、マリマスタット、マソプロコール、マスピン、マトリリシン阻害剤、マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤、メノガリル、メルバロン、メテレリン、メチオニナーゼ、メトクロプラミド、ＭＩＦ阻害剤、ミフェプリストン、ミルテフォシン、ミリモスティム、ミスマッチ二本鎖ＲＮＡ、ミトラシン、ミトグアゾン、ミトラクトール、マイトマイシン類似体、ミトナフィド、マイトトキシン線維芽細胞成長因子－サポリン、ミトキサントロン、モファロテン、モルグラモスチム、モノクローナル抗体、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、モピダモール、多剤耐性遺伝子阻害剤、複数腫瘍抑制因子１（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ １）ベースの治療、マスタード抗がん剤、ミカペルオキシド（ｍｙｃａｐｅｒｏｘｉｄｅ）Ｂ、マイコバクテリア細胞壁抽出物、ミリアポロン（ｍｙｒｉａｐｏｒｏｎｅ）、Ｎ－アセチルジナリン、Ｎ－置換ベンズアミド、ナファレリン、ナグレスチップ（ｎａｇｒｅｓｔｉｐ）、ナロキソン＋ペンタゾシン、ナパビン（ｎａｐａｖｉｎ）、ナフテルピン、ナルトグラスチム、ネダプラチン、ネモルビシン（ｎｅｍｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ネリドロン酸、中性エンドペプチダーゼ、ニルタミド、ニサマイシン（ｎｉｓａｍｙｃｉｎ）、一酸化窒素モジュレーター、ニトロキシド抗酸化剤、ニトルリン（ｎｉｔｒｕｌｌｙｎ）、Ｏ６－ベンジルグアニン、オクトレオチド、オキセノン（ｏｋｉｃｅｎｏｎｅ）、オリゴヌクレオチド、オナプリストン、オンダンセトロン、オンダンセトロン、オラシン（ｏｒａｃｉｎ）、経口サイトカイン誘導物質、オルマプラチン、オサテロン、オキサリプラチン、オキサウノマイシン（ｏｘａｕｎｏｍｙｃｉｎ）、パクリタキセル類似体、パクリタキセル誘導体、パラウアミン（ｐａｌａｕａｍｉｎｅ）、パルミトイルリゾキシン、パミドロン酸、パナキシトリオール、パノミフェン、パラバクチン、パゼリプチン、ペガスパルガーゼ、ペルデシン、ペントサンポリサルフェートナトリウム、ペントスタチン、ペントロゾール（ｐｅｎｔｒｏｚｏｌｅ）、ペルフルブロン、ペルホスファミド、ペリリルアルコール、フェナジノマイシン、フェニルアセテート、ホスファターゼ阻害剤、ピシバニル、塩酸ピロカルピン、ピラルビシン、ピリトレキシム、プラセチン（ｐｌａｃｅｔｉｎ）Ａ、プラセチンＢ、プラスミノーゲンアクチベーター阻害剤、プラチナ複合体、プラチナ化合物、プラチナ－トリアミン複合体、ポドフィロトキシン、ポルフィマーナトリウム、ポルフィロマイシン、プロピルビスアクリドン、プロスタグランジンＪ２、プロテアソーム阻害剤、プロテインＡベースの免疫モジュレーター、プロテインキナーゼＣ阻害剤、複数のプロテインキナーゼＣ阻害剤、微細藻類、タンパク質チロシンホスファターゼ阻害剤、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害剤、プルプリン、ピラゾロアクリジン、ピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレンコンジュゲート、ｒａｆアンタゴニスト、ラルチトレキセド、ラモセトロン、ｒａｓファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、ｒａｓ阻害剤、ｒａｓ－ＧＡＰ阻害剤、レテリプチン脱メチル化、レニウムＲｅ１８６エチドロネート、リゾキシン、リボザイム、ＲＩＩレチナミド、ログレチミド（ｒｏｇｌｅｔｉｍｉｄｅ）、ロヒツキン（ｒｏｈｉｔｕｋｉｎｅ）、ロムルチド、ロキニメックス、ルビジノン（ｒｕｂｉｇｉｎｏｎｅ）Ｂ１、ルボキシル（ｒｕｂｏｘｙｌ）、サフィンゴール、サイントピン（ｓａｉｎｔｏｐｉｎ）、ＳａｒＣＮＵ、サルコフィトール（ｓａｒｃｏｐｈｙｔｏｌ）Ａ、サルグラモスチム、Ｓｄｉ １模倣薬、セムスチン、老化由来阻害剤１（ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ １）、センスオリゴヌクレオチド、シグナル伝達阻害剤、シグナル伝達モジュレーター、一本鎖抗原結合タンパク質、シゾフィラン、ソブゾキサン、ボロカプテイト（ｓｏｄｉｕｍ ｂｏｒｏｃａｐｔａｔｅ）、フェニル酢酸ナトリウム、ソルベロール（ｓｏｌｖｅｒｏｌ）、ソマトメジン結合タンパク質、ソネルミン（ｓｏｎｅｒｍｉｎ）、スパルフォシン酸（ｓｐａｒｆｏｓｉｃ ａｃｉｄ）、スピカマイシンＤ（ｓｐｉｃａｍｙｃｉｎ Ｄ）、スピロムスチン、スプレノペンチン（ｓｐｌｅｎｏｐｅｎｔｉｎ）、スポンギスタチン１（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ １）、スクアラミン、幹細胞阻害剤、幹細胞分裂阻害剤、スチピアミド（ｓｔｉｐｉａｍｉｄｅ）、ストロメライシン阻害剤、スルフィノシン、超活性血管作用性腸管ペプチド拮抗薬、スラディスタ（ｓｕｒａｄｉｓｔａ）、スラミン、スウェインソニン、合成グリコサミノグリカン、タリムスチン、タモキシフェンメチオジド、タウロムスチン（ｔａｕｒｏｍｕｓｔｉｎｅ）、タザロテン、テコガランナトリウム（ｔｅｃｏｇａｌａｎ ｓｏｄｉｕｍ）、テガフール、テルラピリリウム（ｔｅｌｌｕｒａｐｙｒｙｌｉｕｍ）、テロメラーゼ阻害剤、テモポルフィン、テモゾロミド、テニポシド、テトラクロロデカオキシド、テトラゾミン（ｔｅｔｒａｚｏｍｉｎｅ）、タリブラスチン（ｔｈａｌｉｂｌａｓｔｉｎｅ）、サリドマイド、チオコラリン（ｔｈｉｏｃｏｒａｌｉｎｅ）、トロンボポエチン、トロンボポエチン模倣薬、チマルファシン（ｔｈｙｍａｌｆａｓｉｎ）、チモポイエチン受容体アゴニスト、チモトリナン（ｔｈｙｍｏｔｒｉｎａｎ）、甲状腺刺激ホルモン、エチルエチオプルプリンすず、チラパザミン、二塩化チタノセン、トポテカン、トプセンチン（ｔｏｐｓｅｎｔｉｎ）、トレミフェン、全能性幹細胞因子、翻訳阻害剤、トレチノイン、トリアセチルウリジン、トリシリビン、トリメトレキサート、トリプトレリン、
トロピセトロン、ツロステリド（ｔｕｒｏｓｔｅｒｉｄｅ）、チロシンキナーゼ阻害剤、チルホスチン、ＵＢＣ阻害剤、ウベニメクス、泌尿生殖洞由来成長阻害因子、ウロキナーゼ受容体拮抗薬、バプレオチド、バリオリンＢ（ｖａｒｉｏｌｉｎ Ｂ）、ベクター系、赤血球遺伝子療法、ベラレソール（ｖｅｌａｒｅｓｏｌ）、ベラミン（ｖｅｒａｍｉｎｅ）、ベルジン（ｖｅｒｄｉｎ）、ベルテポルフィン、ビノレルビン、ビンキサルチン（ｖｉｎｘａｌｔｉｎｅ）、ビタキシン（ｖｉｔａｘｉｎ）、ボロゾール、ザノテロン（ｚａｎｏｔｅｒｏｎｅ）、ゼニプラチン（ｚｅｎｉｐｌａｔｉｎ）、ジラスコルブ（ｚｉｌａｓｃｏｒｂ）、およびジノスタチンスチマラマー。

【0127】

本発明の化合物および組成物と組み合わせることが意図される他の化学療法剤には、これらに限定されないが、抗増殖剤（例えば、ピリトレキシムイソチオネート（Ｐｉｒｉｔｒｅｘｉｍ Ｉｓｏｔｈｉｏｎａｔｅ））、抗前立腺肥大剤（例えば、シトグルシド）、良性前立腺肥大症療法剤（例えば、塩酸タムスロシン）、前立腺成長阻害剤（例、ペントモン（Ｐｅｎｔｏｍｏｎｅ））、および放射性物質：フィブリノーゲン１ １２５、フルデオキシグルコースＦ １８、フルオロドパＦ １８、インスリンＩ １２５、インスリンＩ １３１、ヨーベングアンＩ １２３、ヨージパミドナトリウムＩ １３１、ヨードアンチピリンＩ １３１、ヨードコレステロールＩ １３１、ヨードヒプル酸ナトリウムＩ １２３、ヨードヒプル酸ナトリウムＩ １２５、ヨードヒプル酸ナトリウムＩ １３１、ヨードピラセットＩ １２５、ヨードピラセットＩ １３１、イオフェタミン塩酸塩Ｉ １２３、イオメチン（Ｉｏｍｅｔｈｉｎ）Ｉ １２５、イオメチンＩ １３１、ヨータラム酸ナトリウムＩ １２５、ヨータラム酸ナトリウムＩ １３１、ヨーチロシンＩ １３１、リオチロニンＩ １２５、リオチロニンＩ １３１、酢酸メリソプロール（Ｍｅｒｉｓｏｐｒｏｌ Ａｃｅｔａｔｅ）Ｈｇ １９７、酢酸メリソプロールＨｇ ２０３、メリソプロールＨｇ １９７、メチルヨードベンゾグアニン（Ｍｅｔｈｙｌ Ｉｏｄｏｂｅｎｚｏ Ｇｕａｎｉｎｅ）（ＭＩＢＧ－Ｉ１３１またはＭＩＢＧ－Ｉ１２３）、セレノメチオニンＳｅ ７５、テクネチウムＴｃ ９９ｍ三硫化アンチモンコロイド、テクネチウムＴｃ ９９ｍビシセート、テクネチウムＴｃ ９９ｍジソフェニン、エチドロン酸Ｔｃ ９９ｍテクネチウム、テクネチウムＴｃ ９９ｍエキサメタジン（Ｅｘａｍｅｔａｚｉｎｅ）、テクネチウムＴｃ ９９ｍフリホスミン、テクネチウムＴｃ ９９ｍグルセプタート、テクネチウムＴＣ ９９ｍリドフェニン、テクネチウムＴｃ ９９ｍメブロフェニン、メドロン酸Ｔｃ ９９ｍテクネチウム、テクネチウムＴｃ ９９ｍメドロン酸二ナトリウム、テクネチウムＴｃ ９９ｍメリチアジド、テクネチウムＴｃ ９９ｍオキシドロネート、テクネチウムＴｃ ９９ｍペンテタート、テクネチウムＴｃ ９９ｍペンテト酸カルシウム三ナトリウム、テクネチウムＴｃ ９９ｍセスタミビ、テクネチウムＴｃ ９９ｍシボロキシム、テクネチウムＴｃ ９９ｍサクシマー、テクネチウムＴｃ ９９ｍ硫黄コロイド、テクネチウムＴｃ ９９ｍテボロキシム、テクネチウムＴｃ ９９ｍテトロホスミン、テクネチウムＴｃ ９９ｍチアチド（Ｔｉａｔｉｄｅ）、チロキシンＩ １２５、チロキシンＩ １３１、トルポビドン（Ｔｏｌｐｏｖｉｄｏｎｅ）Ｉ １３１、トリオレインＩ １２５、およびトリオレインＩ １３１が含まれる。ＭＩＢＧ－Ｉ１３１およびＭＩＢＧ－Ｉ１２３は、本発明の化合物および組成物との同時投与のための特に好ましい化学療法剤である。

【0128】

本発明の化合物および組成物と組み合わせることが意図される化学療法剤の別のカテゴリーには、１つ以上の抗がん補助増強剤、例えば、三環系抗うつ薬（例えば、イミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、クロミプラミン、トリミプラミン、ドキセピン、ノルトリプチリン、プロトリプチリン、アモキサピンおよびマプロチリン）、非三環系抗うつ薬（例えば、セルトラリン、トラゾドンおよびシタロプラム）、Ｃａ^＋＋拮抗薬（例えば、ベラパミル、ニフェジピン、ニトレンジピンおよびカロベリン）、カルモジュリン阻害剤（例えば、プレニラミン、トリフルオロペラジンおよびクロミプラミン）、アンホテリシンＢ、トリパラノール類似体（例えば、タモキシフェン）、抗不整脈薬（例えば、キニジン）、抗高血圧薬（例えば、レセルピン）、チオール枯渇剤（Ｔｈｉｏｌ ｄｅｐｌｅｔｅｒ）（例えば、ブチオニンおよびスルホキシミン）および多剤耐性低減剤（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｄｒｕｇ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ａｇｅｎｔ）、例えばクレマフォール（Ｃｒｅｍａｐｈｏｒ）ＥＬなどが含まれるが、これらに限定されない。本発明に記載されている薬剤と組み合わせることができる他の化学療法剤には、以下が含まれる：バンレイシ科（ａｎｎｏｎａｃｅｏｕｓ）アセトゲニン、アシミシン、ロリニアスタチン（ｒｏｌｌｉｎｉａｓｔａｔｉｎ）、グアナコン（ｇｕａｎａｃｏｎｅ）、スクアモシン（ｓｑｕａｍｏｃｉｎ）、ブラタシン、スクアモタシン（ｓｑｕａｍｏｔａｃｉｎ）、タキサン、パクリタキセル、ゲムシタビン、メトトレキサートＦＲ－９００４８２、ＦＫ－９７３、ＦＲ－６６９７９、ＦＫ－３１７、５－ＦＵ、ＦＵＤＲ、ＦｄＵＭＰ、ヒドロキシ尿素、ドセタキセル、ディスコデルモリド、エポチロン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、メタパック（ｍｅｔａ－ｐａｃ）、イリノテカン、ＳＮ－３８、１０－ＯＨカンプト、トポテカン、エトポシド、アドリアマイシン、フラボピリドール、シス－Ｐｔ、カルボ－Ｐｔ、ブレオマイシン、マイトマイシンＣ、ミトラマイシン、カペシタビン、シタラビン、２－Ｃｌ－２’デオキシアデノシン、フルダラビン－ＰＯ４、ミトキサントロン、ミトゾロミド、ペントスタチン、およびトムデックス。

【0129】

本発明の化合物および組成物と組み合わせることが意図されている化学療法剤の１つの重要なクラスは、タキサン（例えば、パクリタキセルおよびドセタキセル）である。例えば、本発明の化合物および組成物と組み合わせたタモキシフェンまたはアロマターゼ阻害剤アリミデックス（すなわち、アナストロゾール）は、乳がんおよび婦人科がん（卵巣がんなど）に特に有用である。

【0130】

本発明の重要な態様として、本発明の化合物および組成物は、抗体と組み合わせて投与される。本発明による他の有効成分として使用することができる抗体の例には、これらに限定されないが、抗ＣＤ２０抗体（モノクローナル抗体、またはｍＡｂを含む）、リツキシマブ、リツキサン（商標）、トシツモマブベクサール、抗ＨＥＲ２抗体、トラスツズマブ、ハーセプチン（商標）、ＭＤＸ－２１０、抗ＣＡ１２５ｍＡｂ、オレゴボマブ、Ｂ４３．１３、Ｏｖａｒｅｘ（商標）、Ｂｒｅｖａ－Ｒｅｘ、ＡＲ５４、ＧｉｖａＲｅｘ、ＰｒｏｓｔａＲｅｘ、抗ＥＧＦ受容体ｍＡｂ、ＩＭＣ－Ｃ２２５、アービタックス（商標）、抗ＥＧＦ受容体ｍＡｂ、ＭＤＸ－４４７、ゲムツズマブオゾガマイシン、マイロターグ、ＣＭＡ－６７６、抗ＣＤ３３（Ｗｙｅｔｈ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、抗組織因子タンパク質（ＴＦ）、ｉｏｒ－ｃ５、抗ｃ５抗体、抗ＥＧＦ受容体ｍＡｂ、ＭＤＸ－４４７、抗１７－１Ａ ｍＡｂ、エドレコロマブ、パノレックス、抗ＣＤ２０ ｍＡｂ（Ｙ－９０標識）、イブリツモマブチウキセタン（ＩＤＥＣ－Ｙ２Ｂ８）、ゼバリン、ガングリオシドＧＤ３エピトープの抗イディオタイプｍＡｂ模倣物、ＢＥＣ２、抗ＨＬＡ－Ｄｒ１０ ｍＡｂ（１３１Ｉ ＬＹＭ－１）、Ｏｎｃｏｌｙｍ（商標）、抗ＣＤ３３ヒト化ｍＡｂ（ＳＭＡＲＴ Ｍ１９５）、Ｚａｍｙｌ（商標）、抗ＣＤ５２ ｈｕｍＡｂ（ＬＤＰ－０３）、ＣＡＭＰＡＴＨ、抗ＣＤ１ ｍＡｂ、抗ｔ６抗体、抗ＣＡＲ（補体活性化受容体）ｍＡｂ、ＭＤＸ－１１、ヒト化二重特異性ｍＡｂコンジュゲート（補体カスケード活性化因子）、ＭＤＸ－２２、ＯＶ１０３（Ｙ－９０標識抗体）、セロゴバブ、ＯｎｃｏＳｃｉｎｔ（商標）、抗１７－１Ａ ｍＡｂ、３６２２Ｗ９４、抗ＶＥＧＦ（ＲｈｕｍＡｂ－ＶＥＧＦ）、ベバシズマブ、Ａｖａｓｔｉｎ（商標）、抗ＴＡＣ（ＩＬ－２受容体）ヒト化抗体（ＳＭＡＲＴ）、ダクリズマブ、ゼナパックス、抗ＴＡＧ－７２部分ヒト化二重特異性抗体、ＭＤＸ－２２０、高分子量プロテオグリカン（Ｉ－Ｍｅｌ－１）の抗イディオタイプｍＡｂ模倣物、ＭＥＬＩＭＭＵＮＥ－１、高分子量プロテオグリカン（Ｉ－Ｍｅｌ－２）の抗イディオタイプｍＡｂ模倣物、ＭＥＬＩＭＭＵＮＥ－２、抗ＣＥＡ Ａｂ（ｈＭＮ１４）、ＣＥＡＣｉｄｅ（商標）、Ｐｒｅｔａｒｇｅｔ（商標）放射性標的薬剤、ｈｍＡｂＨ１１ ｓｃＦｖフラグメント（ＮｏｖｏｍＡｂ－Ｇ２）、Ｈ１１ ｓｃＦｖ、抗ＤＮＡまたはＤＮＡ関連タンパク質（ヒストン）ｍＡｂおよびコンジュゲート、ＴＮＴ（例：Ｃｏｔａｒａ（商標））、Ｇｌｉｏｍａｂ－Ｈ ｍＡｂ、ＧＮＩ－２５０ ｍＡｂ、抗ＥＧＦ受容体ｍＡｂ、ＥＭＤ－７２０００、抗ＣＤ２２ヒト化Ａｂ、ＬｙｍｐｈｏＣｉｄｅ、非ホジキンのカリケアマイシン（ＣＭＡ ６７６）との抗ＣＤ３３ ｍＡｂコンジュゲート、ゲムツズマブオゾガマイシン、マイロターグ（商標）、Ｍｏｎｏｐｈａｒｍ－Ｃ、結腸、ＧＤ２ガングリオシドに対する抗イディオタイプヒトｍＡｂ、４Ｂ５、黒色腫、抗ＥＧＦ受容体ヒト化Ａｂ、ｉｏｒ ｅｇｆ／ｒ３、抗ｉｏｒ ｃ２糖タンパク質ｍＡｂ、ＢＡＢＳ（生合成抗体結合部位）タンパク質、抗ＦＬＫ－２／ＦＬＴ－３ ｍＡｂ、ｍＡｂ／小分子コンジュゲート、ＴＡＰ（腫瘍活性化プロドラッグ）、抗ＧＤ－２二重特異性ｍＡｂ、ＭＤＸ－２６０、抗核自己抗体（モノクローナル抗体を結合）、ＡＮＡ Ａｂ、抗ＨＬＡ－ＤＲ Ａｂ（ＳＭＡＲＴ １Ｄ１０ Ａｂ）、Ｒｅｍｉｔｏｇｅｎ（商標）、ＳＭＡＲＴ ＡＢＬ ３６４ Ａｂ、抗ＣＥＡ Ｉ１３１標識ｍＡｂ、およびＩｍｍｕＲＡＩＴ－ＣＥＡ、が含まれる。

【0131】

本発明の化合物および組成物との組み合わせのための他の抗体には、これらに限定されないが、関節リウマチおよびクローン病のためのインフリキシマブ（レミケード）およびエタネルセプト（エンブレル）などの抗ＴＮＦα抗体、パリビズマ（ｐａｌｉｖｉｚｕｍａ）、小児対象のための抗ＲＳＶ抗体、ベバシズマブ、アレムツズマブ、キャンパス－１Ｈ、ＢＬｙＳ－ｍＡｂ、ｆＳＬＥ、抗ＶＥＧＦ２、抗Ｔｒａｉｌ受容体、Ｂ３ ｍＡｂ、ｍ１７０ ｍＡｂ、ｍＡＢ ＢＲ９６、およびＡｂｘ－Ｃｂｌ ｍＡｂ、が含まれる。本発明は、がん抗原（本明細書に記載される）、細胞表面分子、間質細胞分子、細胞外マトリックス分子、および腫瘍血管系関連分子に向けられた抗体を含むがこれらに限定されない、いくつかのクラスの抗体およびそのフラグメントを包含する。

【0132】

細胞表面分子は、細胞の表面で発現する分子である。細胞外ドメインに加えて、それはさらに膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含み得る。例には、ＨＥＲ２、ＣＤ２０、ＣＤ３３、ＥＧＦ受容体、ＨＬＡ－ＤＲ、ＣＤ５２、ＣＤ１、ＣＥＡ、ＣＤ２２、ＧＤ２ガングリオシド、ＦＬＫ２／ＦＬＴ３、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲなどのＨＬＡマーカーが含まれる。

【0133】

間質細胞分子は、間質細胞によって発現される分子である。例には、ＦＡＰおよびＣＤ２６が含まれるが、これらに限定されない。

【0134】

細胞外マトリックス分子は、細胞外マトリックスに見られる分子である。例には、コラーゲン、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）、プロテオグリカン、エラスチン、フィブロネクチン、およびラミニンが含まれるが、これらに限定されない。

【0135】

腫瘍血管系関連分子は、腫瘍の血管系によって発現される分子である（すなわち、白血病などの全身性がんではなく固形がん）。がん抗原と同様に、腫瘍血管系関連分子は正常な血管系によって発現され得るが、腫瘍の血管系上に存在することにより、それは抗がん療法の適切な標的となる。場合によっては、腫瘍血管系関連分子は、正常な血管系よりも腫瘍血管系においてより高いレベルで発現される。例には、これらに限定されないが、エンドグリン（米国特許第５，６６０，８２７号を参照されたい）、ＥＬＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１、ＩＣＡＭ－１、ＬＡＭ－１と反応するリガンド、ＭＨＣクラスＩＩ抗原、ホスファチジルセリンおよびホスファチジルエタノールアミンなどのアミノリン脂質（米国特許第６，３１２，６９４号に記載されるような）、ＶＥＧＦＲ１（Ｆｌｔ－１）およびＶＥＧＦＲ２（ＫＤＲ／Ｆｌｋ－１）、ならびに米国特許第５，７７６，４２７号に記載されているような他の腫瘍血管系関連分子、が含まれる。エンドグリンに対する抗体は、米国特許第５，６６０，８２７号に記載されており、ＴＥＣ－４およびＴＥＣ－１１、ならびにこれらの抗体と同一のエピトープを認識する抗体、が含まれる。アミノリン脂質に対する抗体は、米国特許第６，３１２，６９４号に記載されている。ＶＥＧＦを阻害する抗体は、米国特許６，３４２，２１９号に記載され、かつ２Ｃ３（ＡＴＣＣ ＰＴＡ１５９５）を含む。腫瘍血管系に特異的な他の抗体には、ＦＧＦとＦＧＦＲとの複合体またはＴＧＦβとＴＧＦβＲとの複合体などの成長因子とその受容体との複合体に反応する抗体が含まれる。この後者のクラスの抗体は、米国特許第５，９６５，１３２号に記載され、かつＧＶ３９およびＧＶ９７を含む。

【0136】

本発明に含まれる抗体には、本明細書に明示的に記載されている抗体、および本明細書に記載されているものと同じエピトープに結合する抗体も含まれることが理解されるべきである。

【0137】

本発明に記載の化合物および組成物は、アポトーシス抗体と組み合わせて、優れた結果を達成することができる。例示的なアポトーシス抗体には、これらに限定されないが、抗ＢＡＸ抗体（これは、ヒト、ネズミ、および／または異なる動物源由来のそれらのＢＡＸ抗原と拮抗する）、抗ｆｌａｘ抗体、抗Ｆａｓ／Ｆａｓリガンド抗体、抗グランザイム抗体、（例えば、抗グランザイムＢ抗体）、抗ＢＣＬ抗体、抗シトクロムＣ抗体、ＴＲＡＤＤ、ＴＲＡＩＬ、ＴＲＡＦＦ、および／またはＤＲ３と拮抗する（ａｎｔａｇｎｉｚｉｎｇ）抗体、抗ＢＩＭ抗体、抗ＰＡＲＰ抗体、抗カスパーゼ抗体、抗ＣＤ２９、ＰＬ１８－５ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ２９、ＰＬ４－３ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ４１ａ、ＰＴ２５－２ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ４２ｂ、ＰＬ５２－４ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ４２ｂ、ＧＵＲ２０－５ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ４２ｂ、ＷＧＡ－３ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ４３、１Ｄ４ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ４６、ＭＣＰ７５－６ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ６１、ＰＬ１１－７ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ６１、ＰＬ８－５ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ６２／Ｐ－ｓｌｃｔｎ、ＰＬ７－６ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ６２／Ｐ－ｓｌｃｔｎ、ＷＧＡ－１ ＰａｎＶｅｒａ、抗ＣＤ１５４、５Ｆ３ ＰａｎＶｅｒａ、ならびに抗ＣＤ１、抗ＣＤ２、抗ＣＤ３、抗ＣＤ４、抗ＣＤ５、抗ＣＤ６、抗ＣＤ７、抗ＣＤ８、抗ＣＤ９、抗ＣＤ１０、抗ＣＤ１１、抗ＣＤ１２、抗ＣＤ１３、抗ＣＤ１４、抗ＣＤ１５、抗ＣＤ１６、抗ＣＤ１７、抗ＣＤ１８、抗ＣＤ１９、抗ＣＤ２０、抗ＣＤ２１、抗ＣＤ２２、抗ＣＤ２３、抗ＣＤ２４、抗ＣＤ２５、抗ＣＤ２６、抗ＣＤ２７、抗ＣＤ２８、抗ＣＤ２９、抗ＣＤ３０、抗ＣＤ３１、抗ＣＤ３２、抗ＣＤ３３、抗ＣＤ３４、抗ＣＤ３５、抗ＣＤ３６、抗ＣＤ３７、抗ＣＤ３８、抗ＣＤ３９、抗ＣＤ４０ 抗ＣＤ４１、抗ＣＤ４２、抗ＣＤ４３、抗ＣＤ４４、抗ＣＤ４５、抗ＣＤ４６、抗ＣＤ４７、抗ＣＤ４８、抗ＣＤ４９、抗ＣＤ５０、抗ＣＤ５１、抗ＣＤ５２、抗ＣＤ５３、抗ＣＤ５４、抗ＣＤ５５、抗ＣＤ５６、抗ＣＤ５７、抗ＣＤ５８、抗ＣＤ５９、抗ＣＤ６０、抗ＣＤ６１、抗ＣＤ６２、抗ＣＤ６３、抗ＣＤ６４、抗ＣＤ６５、抗ＣＤ６６、抗ＣＤ６７、抗ＣＤ６８、抗ＣＤ６９、抗ＣＤ７０、抗ＣＤ７１、抗ＣＤ７２、抗ＣＤ７３、抗ＣＤ７４、抗ＣＤ７５、抗ＣＤ７６、抗ＣＤ７７、抗ＣＤ７８、抗ＣＤ７９、抗ＣＤ８０、抗ＣＤ８１、抗ＣＤ８２、抗ＣＤ８３、抗ＣＤ８４、抗ＣＤ８５、抗ＣＤ８６、抗ＣＤ８７、抗ＣＤ８８、抗ＣＤ８９、抗ＣＤ９０、抗ＣＤ９１、抗ＣＤ９２、抗ＣＤ９３、抗ＣＤ９４、抗ＣＤ９５、抗ＣＤ９６、抗ＣＤ９７、抗ＣＤ９８、抗ＣＤ９９、抗ＣＤ１００、抗ＣＤ１０１、抗ＣＤ１０２、抗ＣＤ１０３、抗ＣＤ１０４、抗ＣＤ１０５、抗ＣＤ１０６、抗ＣＤ１０７、抗ＣＤ１０８、抗ＣＤ１０９、抗ＣＤ１１０、抗ＣＤ１１１、抗ＣＤ１１２、抗ＣＤ１１３、抗ＣＤ１１４、抗ＣＤ１１５、抗ＣＤ１１６、抗ＣＤ１１７、抗ＣＤ１１８、抗ＣＤ１１９、抗ＣＤ１２０、抗ＣＤ１２１、抗ＣＤ１２２、抗ＣＤ１２３、抗ＣＤ１２４、抗ＣＤ１２５、抗ＣＤ１２６、抗ＣＤ１２７、抗ＣＤ１２８、抗ＣＤ１２９、抗ＣＤ１３０、抗ＣＤ１３１、抗ＣＤ１３２、抗ＣＤ１３３、抗ＣＤ１３４、抗ＣＤ１３５、抗ＣＤ１３６、抗ＣＤ１３７、抗ＣＤ１３８、抗ＣＤ１３９、抗ＣＤ１４０、抗ＣＤ１４１、抗ＣＤ１４２、抗ＣＤ１４３、抗ＣＤ１４４、抗ＣＤ１４５、抗ＣＤ１４６、抗ＣＤ１４７、抗ＣＤ１４８、抗ＣＤ１４９、抗ＣＤ１５０、抗ＣＤ１５１、抗ＣＤ１５２、抗ＣＤ１５３、抗ＣＤ１５４、抗ＣＤ１５５、抗ＣＤ１５６、抗ＣＤ１５７、抗ＣＤ１５８、抗ＣＤ１５９、抗ＣＤ１６０、抗ＣＤ１６１、抗ＣＤ１６２、抗ＣＤ１６３、抗ＣＤ１６４、抗ＣＤ１６５、抗ＣＤ１６６、抗ＣＤ１６７、抗ＣＤ１６８、抗ＣＤ１６９、抗ＣＤ１７０、抗ＣＤ１７１、抗ＣＤ１７２、抗ＣＤ１７３、抗ＣＤ１７４、抗ＣＤ１７５、抗ＣＤ１７６、抗ＣＤ１７７、抗ＣＤ１７８、抗ＣＤ１７９、抗ＣＤ１８０、抗ＣＤ１８１、抗ＣＤ１８２、抗ＣＤ１８３、抗ＣＤ１８４、抗ＣＤ１８５、抗ＣＤ１８６、抗ＣＤ１８７、抗ＣＤ１８８、抗ＣＤ１８９、抗ＣＤ１９０、抗ＣＤ１９１、抗ＣＤ１９２、抗ＣＤ１９３、抗ＣＤ１９４、抗ＣＤ１９５、抗ＣＤ１９６、抗ＣＤ１９７、抗ＣＤ１９８、抗ＣＤ１９９、抗ＣＤ２００、抗ＣＤ２０１、抗ＣＤ２０２、抗ＣＤ２０３、抗ＣＤ２０４、抗ＣＤ２０５、抗ＣＤ２０６、抗ＣＤ２０７、抗ＣＤ２０８、抗ＣＤ２０９、抗ＣＤ２１０、抗ＣＤ２１１、抗ＣＤ２１２、抗ＣＤ２１３、抗ＣＤ２１４、抗ＣＤ２１５、抗ＣＤ２１６、抗ＣＤ２１７、抗ＣＤ２１８、抗ＣＤ２１９、抗ＣＤ２２０、抗ＣＤ２２１、抗ＣＤ２２２、抗ＣＤ２２３、抗ＣＤ２２４、抗ＣＤ２２５、抗ＣＤ２２６、抗ＣＤ２２７、抗ＣＤ２２８、抗ＣＤ２２９、抗ＣＤ２３０、抗ＣＤ２３１、抗ＣＤ２３２、抗ＣＤ２３３、抗ＣＤ２３４、抗ＣＤ２３５、抗ＣＤ２３６、抗ＣＤ２３７、抗ＣＤ２３８、抗ＣＤ２３９、抗ＣＤ２４０ 抗ＣＤ２４１、抗ＣＤ２４２、抗ＣＤ２４３、抗ＣＤ２４４、抗ＣＤ２４５、抗ＣＤ２４６、抗ＣＤ２４７、抗ＣＤ２４８、抗ＣＤ２４９、抗ＣＤ２５０、などの抗体が含まれる。

【0138】

本発明に記載の化合物および組成物と組み合わせて投与される他の例示的なヒトケモカイン抗体には、ヒトＣＮＴＦ抗体、ヒトエオタキシン抗体、ヒト上皮（Ｅｐｉｔｈｅｒｌｉａｌ）好中球活性化ペプチド－７８、ヒトエクソダス抗体、ヒトＧＲＯ抗体、ヒトＨＣＣ－１抗体、ヒトＩ－３０９抗体、ヒトＩＰ－１０抗体、ヒトＩ－ＴＡＣ抗体、ヒトＬＩＦ抗体、ヒト肝臓発現ケモカイン抗体、ヒトリンホトキシン抗体、ヒトＭＣＰ抗体、ヒトＭＩＰ抗体、ＩＦＮ－ガンマ抗体による誘導ヒトモノカイン、ヒトＮＡＰ－２抗体、ヒトＮＰ－１抗体、ヒト血小板第４因子抗体、ヒトＲＡＮＴＥＳ抗体、ヒトＳＤＦ抗体、およびヒトＴＥＣＫ抗体が含まれるが、これらに限定されない。

【0139】

本発明に記載の化合物および組成物と組み合わせて投与される他の例示的なケモカイン抗体には、ヒトＢ細胞誘引マウスケモカイン抗体、ケモカイン－１抗体、マウスエオタキシン抗体、マウスエクソダス抗体、マウスＧＣＰ－２抗体、マウスＫＣ抗体、マウスＭＣＰ抗体、マウスＭＩＰ抗体、マウスＲＡＮＴＥＳ抗体、ラットケモカイン抗体、ラットケモカイン抗体、ラットＣＮＴＦ抗体、ラットＧＲＯ抗体、ラットＭＣＰ抗体、ラットＭＩＰ抗体、およびラットＲＡＮＴＥＳ抗体が含まれるが、これらに限定されない。

【0140】

本発明に記載の化合物および組成物と組み合わせて投与される例示的なサイトカイン／サイトカイン受容体抗体には、ヒトビオチン化サイトカイン／サイトカイン受容体抗体、ヒトＩＦＮ抗体、ヒトＩＬ抗体、ヒトレプチン抗体、ヒトオンコスタチン抗体、ヒトＴＮＦ抗体、ヒトＴＮＦ受容体ファミリー抗体、マウスビオチン化サイトカイン／サイトカイン受容体抗体、マウスＩＦＮ抗体、マウスＩＬ抗体、マウスＴＮＦ抗体、マウスＴＮＦ受容体抗体、マウス抗ＣＣＲ４抗体、ラットビオチン化サイトカイン／サイトカイン受容体抗体、ラットＩＦＮ抗体、ラットＩＬ抗体、およびラットＴＮＦ抗体が含まれるが、これらに限定されない。

【0141】

本発明に記載の化合物および組成物と組み合わせて投与される例示的なＥＣＭ抗体には、コラーゲン／プロコラーゲン、ラミニン、コラーゲン（ヒト）、ラミニン（ヒト）、プロコラーゲン（ヒト）、ビトロネクチン／ビトロネクチン受容体、ビトロネクチン（ヒト）、ビトロネクチン受容体（ヒト）、フィブロネクチン／フィブロネクチン受容体、フィブロネクチン（ヒト）、およびフィブロネクチン受容体（ヒト）が含まれるが、これらに限定されない。

【0142】

本発明に記載の化合物および組成物と組み合わせて投与される例示的な増殖因子抗体には、ヒト増殖因子抗体、マウス増殖因子抗体、およびブタ増殖因子抗体が含まれるが、これらに限定されない。

【0143】

本発明に記載の化合物および組成物と組み合わせて投与される他の例示的な増殖因子抗体には、バキュロウイルス抗体、カドヘリン抗体、補体抗体、Ｃｌｑ抗体、フォンヴィルブランド因子抗体、Ｃｒｅ抗体、ＨＩＶ抗体、インフルエンザ抗体、ヒトレプチン。抗体、マウスレプチン抗体、マウスＣＴＬＡ－４抗体、ヒトＣＴＬＡ－４抗体、Ｐ４５０抗体、およびＲＮＡポリメラーゼ抗体が含まれるが、これらに限定されない。

【0144】

本発明に記載の化合物および組成物と組み合わせて投与される例示的な神経生物学的抗体には、アミロイド抗体、ＧＦＡＰ抗体、ヒトＮＧＦ抗体、ヒトＮＴ－３抗体、およびヒトＮＴ－４抗体が含まれるが、これらに限定されない。

【0145】

本発明に記載の化合物および組成物と組み合わせて投与されるさらなる例示的な抗体には、一次抗体のＭＳＲＳカタログおよびリンスコットディレクトリなどの参考文献に記載されている抗体が含まれるが、これらに限定されない。

【0146】

本発明のいくつかの好ましい実施形態では、本発明に記載される化合物および組成物と組み合わせて投与される抗体には、アバスチン（ベバシズマブ）、ＢＥＣ２（ミツモマブ（ｍｉｔｕｍｏｍａｂ））、ベキサール（トシツモマブ）、キャンパス（アレムツズマブ）、ＣｅａＶａｃ、ハーセプチン（トラスツズマブ）、ＩＭＣ－Ｃ２２５（セツキシマブ）、ＬｙｍｐｈｏＣｉｄｅ（エプラツズマブ）、ＭＤＸ－２１０、マイロターグ（ゲムツズマブオゾガマイシン）、Ｐａｎｏｒｅｘ（エドレコロマブ）、リツキサン（リツキシマブ）、セラギン（Ｔｈｅｒａｇｙｎ）（ペンツモマブ（ｐｅｍｔｕｍｏｍａｂ））、Ｚａｍｙｌ、およびゼバリン（イブリツモマブチツキセタン）が含まれるが、これらに限定されない。本発明はまた、その抗体フラグメントを包含する。

【0147】

いくつかの好ましい実施形態では、がん抗原は、ＶＥＧＦ、抗イディオタイプｍＡｂ（ＧＤ３ガングリオシド模倣物）、ＣＤ２０、ＣＤ５２；抗イディオタイプｍＡｂ（ＣＥＡ模倣物）、ＥＲＢＢ２、ＥＧＦＲ、ＣＤ２２、ＥＲＢＢ２ Ｘ ＣＤ６５（ｆｃγＲＩ）、ＥｐＣａｍ、ＰＥＭおよびＣＤ３３である。

【0148】

本発明に記載の化合物および組成物と組み合わせて投与される抗体には、従来の方法論によって調製することができるモノクローナル抗体またはポリクローナル抗体が含まれるが、これらに限定されない。それらはさらに単離されるか、腹水に存在する可能性がある。そのような抗体は、以下でより詳細に議論されるように、キメラまたはヒト化抗体を作製するためにさらに操作することができる。

【0149】

重要なことに、当技術分野でよく知られているように、抗体分子のごく一部であるパラトープのみが、そのエピトープへの抗体の結合に関与している（一般に、Ｃｌａｒｋ，Ｗ．Ｒ．（１９８６）Ｔｈｅ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｍｏｄｅｒｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｒｏｉｔｔ，Ｉ．（１９９１）Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，７ｔｈ Ｅｄ．，Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｏｘｆｏｒｄを参照されたい）。例えば、ｐＦｃ’およびＦｃ領域は補体カスケードのエフェクターであるが、抗原結合には関与していない。ｐＦｃ’領域が酵素的に切断された抗体、またはｐＦｃ’領域なしで生成された抗体は、Ｆ（ａｂ’）_２フラグメントと呼ばれ、インタクトな抗体の抗原結合部位の両方を保持する。同様に、Ｆｃ領域が酵素的に切断された抗体、またはＦｃ領域なしで生成された抗体は、Ｆａｂフラグメントと呼ばれ、インタクトな抗体分子の抗原結合部位の１つを保持する。さらに進むと、Ｆａｂフラグメントは、共有結合した抗体軽鎖と、Ｆｄで示される抗体重鎖の一部とから構成される。Ｆｄフラグメントは抗体特異性の主要な決定因子であり（単一のＦｄフラグメントは、抗体特異性を変えることなく最大１０の異なる軽鎖に結合する可能性がある）、Ｆｄフラグメントは単独でもエピトープ結合能を保持する。

【0150】

本発明に含まれるのは、抗原のエピトープと直接相互作用する抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ）、およびパラトープの三次構造を維持するフレームワーク領域（ＦＲ）である（一般に、Ｃｌａｒｋ，１９８６；Ｒｏｉｔｔ，１９９１を参照されたい）。

【0151】

哺乳動物抗体の非ＣＤＲ領域も含まれ、元の抗体のエピトープ特異性を保持しながら、共特異的または異種特異的抗体の同様の領域で置き換えることができる。このような抗体は、抗原結合能を有するインタクトな抗体のフラグメントを含め、「キメラ」抗体と呼ばれる。

【0152】

本発明はまた、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆａｂ、ＦｖおよびＦｄフラグメント；Ｆｃおよび／またはＦＲおよび／またはＣＤＲ１および／またはＣＤＲ２および／または軽鎖ＣＤＲ３領域が相同なヒトまたは非ヒト配列によって置き換えられているキメラ抗体；ＦＲおよび／またはＣＤＲ１および／またはＣＤＲ２および／または軽鎖ＣＤＲ３領域が相同なヒトまたは非ヒト配列によって置き換えられているキメラＦ（ａｂ’）_２フラグメント抗体；ＦＲおよび／またはＣＤＲ１および／またはＣＤＲ２および／または軽鎖ＣＤＲ３領域が相同なヒトまたは非ヒト配列によって置き換えられているキメラＦａｂフラグメント抗体；ならびにＦＲおよび／またはＣＤＲ１および／またはＣＤＲ２領域が相同なヒトまたは非ヒト配列によって置き換えられているキメラＦｄフラグメント抗体を提供する。本発明はまた、いわゆる一本鎖抗体を含む。

【0153】

本明細書に記載の化合物および組成物は、治療上有効かつ生理学的に許容可能な量で投与されるが、これは、所望の有益な生物学的効果、この場合はがんの治療または血管新生の阻害を実現するために必要または十分な、対象に対して生理学的に許容される量である。生物学的に有益な効果は、例えば、治療の投与後の治療の生理学的効果を決定することによって測定することができる。生物学的に有益な効果は、治療されている障害に起因する症状の改善および／もしくは絶対的な排除、または、例えば、画像化における微小血管（例えば、異常な微小血管）の数の低減によって証明されるように、治療されている障害における血管新生の阻害であり得る。

【0154】

治療上有効かつ生理学的に許容される量は、特定の化合物もしくは化合物の組み合わせ、組成物もしくは組成物の組み合わせ、および／または使用される療法に応じて変化し得る。それはまた、治療されている状態（例えば、がん）、対象のサイズ、または疾患もしくは状態の重症度などの要因に応じて変化する可能性がある。当業者は、過度の実験を必要とせずに、特定のセプチン標的化合物の化合物または組み合わせの有効量を経験的に決定することができる。本明細書で提供される教示と組み合わせて、効力、相対的生物学的利用能、患者の体重、有害な副作用の重症度および好ましい投与様式などの様々な化合物および重み係数から選択することにより、効果的な予防的または治療的治療レジメンを計画することができ、これは実質的な毒性を引き起こさないが、それでも特定の対象を治療するのに完全に効果的である。

【0155】

場合によっては、本明細書に記載の化合物もしくは組成物または第２の薬剤のいずれかの治療量以下の投与量、あるいは両方の治療量以下の投与量が、対象を治療するために使用される。例えば、本明細書に記載の化合物または組成物を抗がん剤と一緒に使用する場合、化合物または組成物および抗がん剤は、治療量以下の用量で投与され、それでも望ましい治療効果を生み出す。本明細書で使用される「治療量以下の用量」は、他の薬剤の非存在下で投与された場合に対象に治療結果をもたらすであろう用量よりも少ない投与量を指す。したがって、抗がん剤の治療量以下の用量は、本明細書に記載の化合物または組成物の投与がない場合、対象において同じまたは実質的に同様の治療結果をもたらさない用量である。抗がん剤の治療量は、医学の分野で知られている。これらの用量は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ ｅｄ．，１９９０などの参考文献、およびがん治療のガイダンスとして医療専門家によって信頼されている他の多くの医学参考文献に広く記載されており、当技術分野でよく知られている。

【0156】

本明細書に記載の化合物および組成物の場合、治療有効量は、細胞培養アッセイなどのインビトロアッセイから最初に決定される。治療有効量は、動物実験でも決定することができる。例えば、第２の薬剤を伴うまたは伴わない本明細書に記載の化合物または組成物の有効量は、例えば、腫瘍退縮および／または腫瘍形成の防止のインビボアッセイを使用して評価される。関連する動物モデルには、例えば、悪性細胞が動物対象に、通常は定義された部位に注射されるアッセイが含まれる。一般に、ある範囲のセプチン標的化合物用量が動物に投与される。悪性細胞の注射後の腫瘍の増殖の阻害は、がんを発症するリスクを低減する能力を示している。既存の腫瘍のさらなる増殖（またはサイズの縮小）の阻害は、がんを治療する能力を示している。

【0157】

両方の薬剤の適用用量は、投与された化合物の相対的な生物学的利用能および効力に基づいて調整することができる。上記の方法および他の方法に基づいて最大の有効性を達成するように用量を調整することは、通常の当業者の能力の範囲内である。

【0158】

本明細書に記載の化合物および組成物の好ましい対象用量は、典型的には約０．１μｇ～３０，０００ｍｇ、より典型的には約１μｇ／日～２０，０００ｍｇ、さらにより典型的には約１０μｇ～１５，０００ｍｇ、最も典型的には約１００μｇ～１０，０００μｇの範囲である。対象の体重に関して述べると、典型的な投与量は、約０．１μｇ～２００ｍｇ／ｋｇ／日、より典型的には約０．５～１５０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。いくつかの重要な実施形態では、化合物は、約１～１００ｍｇ／ｋｇ／日の量で投与される。いくつかの他の重要な実施形態では、化合物は、１０～６０ｍｇ／ｋｇ／日の量で投与される。

【0159】

本明細書で使用される「ルーチンスケジュール」は、本発明に記載の化合物または組成物を送達するために選択される所定の指定された期間を指す。ルーチンスケジュールは、スケジュールが事前に決定されている限り、同一または長さが異なる期間を含む。ルーチンスケジュールは、例えば、１日あたり２、３、４、または６回の投与で、毎日の投与、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、毎週の投与、毎月の投与またはその間の任意の設定された日数または週数－その間で、２か月ごと、３か月ごと、４か月ごと、５か月ごと、６か月ごと、７か月ごと、８か月ごと、９か月ごと、１０か月ごと、１１か月ごと、１２か月ごとなど、が含まれる。あるいは、所定のルーチンスケジュールは、最初の週は毎日、続いて数か月は毎月、その後は３か月ごとに投与することを含み得る。適切なスケジュールが特定の日の投与を含むことが事前に決まっている限り、任意の特定の組み合わせはルーチンスケジュールによってカバーされる。

【0160】

本発明の化合物または組成物は、薬学的に許容される担体で、またはベクターもしくは送達システムの状況で投与される。本発明の化学的／物理的ベクターの例は、コロイド分散系である。コロイド分散系には、水中油型エマルジョン、ミセル、混合ミセル、およびリポソームを含む脂質ベースの系が含まれる。本発明の好ましいコロイド系はリポソームである。リポソームは、インビボまたはインビトロでの送達ベクターとして有用な人工膜容器である。サイズが０．２～４．０μｍの大きな単層容器（ＬＵＶ）は、大きな高分子をカプセル化できることが示されている。ＲＮＡ、ＤＮＡ、およびインタクトなビリオンは、水性内部にカプセル化され、生物学的に活性な形で細胞に送達される（Ｆｒａｌｅｙ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．，（１９８１）６：７７）。

【0161】

リポソームを使用して、本発明を具体化する化合物を送達することができる。リポソームを糖、糖脂質、またはタンパク質などの特定のリガンドに結合させることにより、リポソームを特定の組織に標的化することができる。リポソームを細胞に標的化するのに有用であり得るリガンドには、細胞特異的受容体と相互作用する分子のインタクトなものまたはフラグメント、および細胞の細胞表面マーカーと相互作用する抗体などの分子が含まれるが、これらに限定されない。そのようなリガンドは、当業者によく知られている結合アッセイによって容易に同定することができる。さらに他の実施形態では、リポソームは、例えば、前述の免疫療法抗体のうちの１つにそれを結合することによって、がんを標的化することができる。さらに、ベクターは、ベクターを宿主細胞の核に向ける核標的化ペプチドに結合することができる。

【0162】

本明細書に記載の化合物または組成物を送達するために使用されるリポソームは、例えば、Ｎ－［１－（２，３ジオレイルオキシ）－プロピル］－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）およびジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）などのカチオン性脂質から形成されるＬＩＰＯＦＥＣＴＩＮ（商標）およびＬＩＰＯＦＥＣＴＡＣＥ（商標）として、Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬから市販されている。リポソームを作製するための方法は当技術分野で周知であり、多くの刊行物に記載されている。リポソームは、Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ，Ｇ．ｉｎ Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，（１９８５）３：２３５－２４１によっても概観されている。

【0163】

他の実施形態では、本発明を具体化する化合物を送達するために使用される化学的／物理的ベクターは、経口または粘膜送達などの送達に適した生体適合性ミクロスフェアを含む。このようなミクロスフェアは、Ｃｈｉｃｋｅｒｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ａｎｄ Ｂｉｏｅｎｇ．，（１９９６）５２：９６－１０１およびＭａｔｈｉｏｗｉｔｚ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，（１９９７）３８６：４１０－４１４ならびにＰＣＴ特許出願第ＷＯ９７／０３７０２号に開示されている。

【0164】

本発明に記載の化合物または組成物を送達するために使用することができる非生分解性および生分解性ポリマーマトリックスは両方とも、生分解性マトリックスを含む。そのようなポリマーは、天然または合成ポリマーであり得る。ポリマーは、放出が望まれる期間に基づいて、一般に数時間から１年以上のオーダーで選択される。通常、数時間から３か月～１２か月の範囲の期間にわたる放出が最も望ましい。ポリマーは、任意選択で、水中でその重量の最大約９０％を吸収することができるヒドロゲルの形態であり、さらに、任意選択で、多価イオンまたは他のポリマーと架橋される。

【0165】

本明細書に記載の薬剤の処方に使用されると考えられるポリマーマトリックスは、好ましくは、ミクロスフェア（薬剤が固体高分子マトリックス全体に分散している）またはマイクロカプセル（薬剤が高分子シェルのコアに格納される）などの微粒子の形態である。本発明を具体化する化合物を送達するために利用することができる薬剤を含むための他の形態のポリマーマトリックスには、フィルム、コーティング、ゲル、インプラント、およびステントが含まれる。ポリマーマトリックスデバイスのサイズおよび組成は、マトリックスが導入される組織において好ましい放出動態をもたらすように選択される。ポリマーマトリックスのサイズは、使用される送達方法、典型的には組織への注射、またはエアロゾルによる鼻および／または肺領域への懸濁液の投与に従ってさらに選択される。好ましくは、エアロゾル経路が使用される場合、ポリマーマトリックスおよびセプチン標的化合物の化合物は、界面活性剤ビヒクルに含まれる。ポリマーマトリックス組成物は、好ましい分解速度を有すること、および生体接着性である材料から形成されることの両方を有するように選択され得、マトリックスが損傷を受けた鼻および／または肺表面に投与されるときの移動の有効性をさらに高める。マトリックス組成物はまた、分解しないように選択することができ、むしろ、長期間にわたる拡散によって放出するように選択することができる。いくつかの好ましい実施形態では、本明細書に記載の化合物または組成物は、インプラントを介して対象に投与される。

【0166】

特に興味深い生体接着性ポリマーには、生体内分解性ヒドロゲル（Ｈ．Ｓ．Ｓａｗｈｎｅｙ，Ｃ．Ｐ．Ｐａｔｈａｋ ａｎｄ Ｊ．Ａ．Ｈｕｂｅｌｌ ｉｎ Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，（１９９３）２６：５８１－５８７によって記述されたものなど）、ポリヒアルロン酸、カゼイン、ゼラチン、グルチン、ポリ酸無水物、ポリアクリル酸、アルギン酸塩、キトサン、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（エチルメタクリレート）、ポリ（ブチルメタクリレート）、ポリ（イソブチルメタクリレート）、ポリ（ヘキシルメタクリレート）、ポリ（イソデシルメタクリレート））、ポリ（ローレル（ｌａｕｒｅｌ）メタクリレート）、ポリ（フェニルメタクリレート）、ポリ（メチルアクリレート）、ポリ（イソプロピルアクリレート）、ポリ（イソブチルアクリレート）、およびポリ（オクタデシルアクリレート）が含まれる。

【0167】

本発明の組成物および方法は、既存の外科的処置または薬物療法を置き換えるのに有用であるが、場合によっては、本発明は、そのような状態を治療するための既存の療法の有効性を改善するのに有用である。したがって、併用療法は、がんの治療を受けている、または受ける予定の対象を治療するために使用することができる。例えば、薬剤は、別の抗増殖（例えば、抗がん）療法と組み合わせて対象に投与され得る。適切な抗がん療法には、腫瘍塊を除去するための外科的処置、化学療法、または局所放射線療法が含まれる。他の抗増殖療法は、本発明の薬剤による治療の前、同時、または後に投与することができる。異なる治療の投与の間に数時間、数日、場合によっては数週間の遅れがあってもよく、その結果、薬剤は他の治療の前または後に投与され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物または組成物は、他の抗増殖治療と一緒にまたはそれなしで（例えば、手術、放射線または化学療法の前に）投与されるが、タイミングはそれほど限定されない。

【0168】

本明細書に記載の化合物または組成物はまた、非外科的、抗増殖性（例えば、抗がん性）薬物療法と組み合わせて投与することができる。いくつかの実施形態では、薬剤は、細胞増殖抑制性化合物などの抗がん剤と組み合わせて投与され得る。細胞増殖抑制性化合物は、細胞の成長および／または増殖を抑制する化合物（例えば、核酸、タンパク質）である。いくつかの実施形態では、細胞増殖抑制性化合物は、腫瘍の悪性細胞に向けられる。さらに他の実施形態では、細胞増殖抑制性化合物は、血管平滑筋細胞または線維芽細胞の成長および／または増殖を阻害するものである。

【0169】

本発明の方法によれば、本明細書に記載の化合物または組成物は、他の抗がん剤の前、同時、または後に投与される。投与スケジュールには、異なる薬剤を交互に投与することが含まれる。他の実施形態において、本発明の併用療法は、他の療法による治療の前および最中、または最中および後、または前および後に送達される。場合によっては、薬剤は他の抗増殖治療の投与の２４時間以上前に投与される。他の実施形態では、２つ以上の抗増殖療法が対象に投与される。例えば、対象は、手術および少なくとも１つの他の抗増殖性化合物の両方と組み合わせて、本発明の薬剤を受け取る。あるいは、薬剤は、２つ以上の抗がん剤と組み合わせて投与される。

【0170】

本明細書に記載の化合物または組成物は、免疫応答を増強するために、アジュバントなどの他の治療薬と組み合わせることができる。本明細書に記載の化合物または組成物および他の治療薬は、同時にまたは連続して投与することができる。他の治療薬が同時に投与される場合、それらは同じまたは別々の製剤で投与することができるが、同時に投与される。他の治療薬および本明細書に記載の化合物または組成物の投与はまた、時間的に離すことができ、これは、治療薬が、本明細書に記載の化合物または組成物の投与の前または後のいずれかの異なる時間に投与されることを意味する。これらの化合物と薬剤の投与の間の時間の分離は、数分またはそれ以上の時間であってもよい。他の治療薬には、核酸アジュバント、非核酸アジュバント、サイトカイン、非免疫療法抗体、抗原などが含まれるが、これらに限定されない。

【0171】

核酸アジュバントは、核酸であるアジュバントである。例には、２００１年２月２７日に発行された米国特許第６，１９４，３８８号Ｂ１、２００１年３月２７日に発行された米国特許第６，２０７，６４６号Ｂ１、および２００１年５月２９日に発行された米国特許第６，２３９，１１６号Ｂ１に記載されているような、ＣｐＧジヌクレオチドを含むものなどの免疫刺激性核酸分子が含まれる。

【0172】

「非核酸アジュバント」は、体液性および／または細胞性免疫応答を刺激することができる、本明細書に記載の免疫刺激性核酸を除く任意の分子または化合物である。非核酸アジュバントには、例えば、デポ効果（ｄｅｐｏ ｅｆｆｅｃｔ）を生み出すアジュバント、免疫刺激アジュバント、デポ効果を生み出し免疫系を刺激するアジュバント、および粘膜アジュバントが含まれる。

【0173】

本明細書で使用される「デポ効果を生み出すアジュバント」は、がんワクチンに存在するがん抗原などの抗原を体内でゆっくりと放出させ、それにより免疫細胞の抗原への曝露を延長させるアジュバントである。このクラスのアジュバントには、ミョウバン（例えば、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム）、またはミネラルオイル、非ミネラルオイル、油中水型もしくは油中水中油型（ｏｉｌ－ｉｎ－ｗａｔｅｒ－ｉｎ ｏｉｌ）エマルジョン、例えばＳｅｐｐｉｃ ＩＳＡシリーズのＭｏｎｔａｎｉｄｅアジュバント（例えば、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ ７２０、ＡｉｒＬｉｑｕｉｄｅ、Ｐａｒｉｓ，Ｆｒａｎｃｅ）などの水中油型エマルジョン、ＭＦ－５９（Ｓｐａｎ８５およびＴｗｅｅｎ８０で安定化された水中スクアレンエマルジョン、Ｃｈｉｒｏｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ，ＣＡ、およびＰＲＯＶＡＸ（安定化された洗剤とミセル形成剤を含む水中油型エマルジョン、ＤＥＣ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．）、を含むエマルジョンベースの製剤が含まれるが、これらに限定されない。

【0174】

「免疫刺激アジュバント」は、免疫系の細胞の活性化を引き起こすアジュバントである。例えば、免疫細胞にサイトカインを産生および分泌させる可能性がある。このクラスのアジュバントには、ＱＳ２１（ＨＰＬＣ分画で２１番目のピークで溶出する糖脂質、Ａｎｔｉｇｅｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．、Ｗａｌｔｈａｍ，Ｍａｓｓ．）などのＱ．ｓａｐｏｎａｒｉａの木の樹皮から精製されたサポニン、ポリ［ジ（カルボキシラトフェノキシ）ホスファゼン（ＰＣＰＰポリマー、Ｖｉｒｕｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、ＵＳＡ）、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ、Ｒｉｂｉ ＩｍｍｕｎｏＣｈｅｍ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｉｎｃ．、Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ｍｏｎｔ．）、ムラミルジペプチド（ＭＤＰ、Ｒｉｂｉ）およびスレオニル－ムラミルジペプチド（ｔ－ＭＤＰ、Ｒｉｂｉ）などのリポ多糖の誘導体、ＯＭ－１７４（リピドＡに関連するグルコサミン二糖、ＯＭ Ｐｈａｒｍａ ＳＡ、Ｍｅｙｒｉｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、およびＬｅｉｓｈｍａｎｉａ伸長因子（精製されたＬｅｉｓｈｍａｎｉａタンパク質、Ｃｏｒｉｘａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈ．）が含まれるが、これらに限定されない。

【0175】

「デポ効果を生み出し、免疫系を刺激するアジュバント」は、上記の両方の機能を備えた化合物である。このクラスのアジュバントには、ＩＳＣＯＭＳ（混合サポニン、脂質を含み、抗原を保持できる細孔を持つウイルスサイズの粒子を形成する免疫刺激複合体、ＣＳＬ、Ｍｅｌｂｏｕｒｎｅ，Ａｕｓｔｒａｌｉａ）、ＳＢ－ＡＳ２（ＭＰＬおよびＱＳ２１を含む水中油型エマルジョンであるＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍアジュバントシステム＃２：ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ ［ＳＢＢ］、Ｒｉｘｅｎｓａｒｔ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）、ＳＢ－ＡＳ４（ミョウバンおよびＭＰＬを含むＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍアジュバントシステム＃４、ＳＢＢ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）、ＣＲＬ １００５などのミセルを形成する非イオン性ブロックコポリマー（これらは、ポリオキシエチレンの鎖で挟んだ疎水性のポリオキシプロピレンの直鎖を含む、Ｖａｘｃｅｌ，Ｉｎｃ．、Ｎｏｒｃｒｏｓｓ，Ｇａ．）、およびＳｙｎｔｅｘアジュバント製剤（ＳＡＦ、Ｔｗｅｅｎ８０および非イオン性ブロックコポリマーを含む水中油型エマルジョン、Ｓｙｎｔｅｘ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、Ｂｏｕｌｄｅｒ，Ｃｏｌｏ．）が含まれるが、これらに限定されない。

【実施例】

【0176】

実施例１開示された化合物ＵＲ２１４－９の代表的な合成
化合物ＵＲ２１４－９は、以下の一般的な手順を使用して合成された。

【化19】

【0177】

乾燥ＤＭＦ中のアミン（０．０１～０．１ｍｏｌ）の溶液に、イソシアネート（０．０１～０．１ｍｏｌ）の溶液を滴下して加え、続いて反応混合物を加熱し、６５℃で一晩撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ＤＭＦを減圧下で除去した。得られた反応混合物の一部を、溶離液としてヘキサン：酢酸エチルまたはＤＣＭ：ＭｅＯＨを使用する分取薄層クロマトグラフィーを使用して精製した。所望のバンドをこすり取り、ＭｅＯＨ：ＤＣＭ（９０：１０）を使用して化合物をシリカゲルから剥がした。溶媒を減圧下で蒸発させ、所望の化合物を粉末として収集した。

【0178】

本出願において開示または例示されるものなどの本出願の他の化合物（例えば、式（Ｉ）～（ＩＶ）の化合物）もまた、同じ合成経路に従って調製される。

【0179】

このプロセスによって得られたＵＲ２１４－９の代表的な質量スペクトルを図１３に提示する。

【0180】

実施例２強力なセプチン阻害剤の開発とがん細胞株におけるそれらの細胞毒性効果
導入
卵巣と子宮の悪性腫瘍は比較的一般的であり、残念ながら非常に致命的である。女性で４番目に多いがんである子宮がんは、米国で年間約６０，０００件の新規のがんの診断と１０，０００件のがんによる死亡を示している（Ｓｉｅｇｅｌ，Ｒ．Ｌ．，Ｍｉｌｌｅｒ，Ｋ．Ｄ．＆ Ｊｅｍａｌ，Ａ．Ｃａｎｃｅｒ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ，２０１７．ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ．Ｃｌｉｎ．６７，７－３０，２０１７を参照されたい）。あまり一般的ではないが、卵巣がんはさらに致命的であり、５年生存率は４６．６％である（ｗｗｗ．ｃｄｃ．ｇｏｖ／ｃａｎｃｅｒ／ｄａｔａｖｉｚ、２０１９年６月）。これらの疾患の現在の治療は、外科的管理と医療的管理の組み合わせに依存している。進化する一方で、両者の第一選択医療の基盤は、プラチナベースの薬とタキサン薬の組み合わせであり、１０年以上にわたってそうなっている。

【0181】

ジアリール尿素誘導体は医薬品化学において非常に興味深い存在であり、抗炎症作用、抗血栓作用、抗菌作用など幅広い生物活性を有する低分子である（Ｇａｒｕｔｉ，Ｌ．，Ｒｏｂｅｒｔｉ，Ｍ．，Ｂｏｔｔｅｇｏｎｉ，Ｇ．＆ Ｆｅｒｒａｒｏ，Ｍ．Ｄｉａｒｙｌ Ｕｒｅａ：Ａ Ｐｒｉｖｉｌｅｇｅｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｉｎ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ａｇｅｎｔｓ．Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２３，１５２８－１５４８，２０１６を参照されたい）。さらに、ソラフェニブやレゴラフェニブなどのジアリール尿素誘導体は、がん治療に臨床的に使用されている（Ｓａｄｅｇｈｉａｎ－Ｒｉｚｉ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｍｅ ｎｏｖｅｌ ｄｉａｒｙｌ ｕｒｅａ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｂｅａｒｉｎｇ ｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｄｉｏｎｅ ｍｏｉｅｔｙ．Ｒｅｓ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１３，８２－９２，２０１８を参照されたい）。フォルクロロフェヌロン（ＦＣＦ、Ｎ－（２－クロロ－４－ピリジル）－Ｎ’－フェニル尿素）は、現在農業で利用されている小さな合成尿素誘導体である。ＦＣＦは強力なサイトカイニン活性を示し、果実のサイズを大きくする植物肥料として世界中で使用されている。興味深いことに、ＦＣＦは、がん細胞株の増殖、足場非依存性増殖、遊走および浸潤を阻害することが示されている（Ｂｌｕｍ，Ｗ．ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｐｈｙｔｏｈｏｒｍｏｎｅ ｆｏｒｃｈｌｏｒｆｅｎｕｒｏｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｓ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ １０，６９４４－６９５６，２０１９、Ｚｈａｎｇ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ＳＥＰＴ２ ａｎｄ ＳＥＰＴ７ ｆｏｒ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｖａｓｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｖｉａ ＭＥＫ／ＥＲＫ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ７，６１５８７－６１６００，２０１６、およびＶａｒｄｉ－Ｏｋｎｉｎ，Ｄ．，Ｇｏｌａｎ，Ｍ．＆ Ｍａｂｊｅｅｓｈ，Ｎ．Ｊ．Ｆｏｒｃｈｌｏｒｆｅｎｕｒｏｎ ｄｉｓｒｕｐｔｓ ＳＥＰＴ９＿ｉ１ ｆｉｌａｍｅｎｔｓ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ＨＩＦ－１．Ｐｌｏｓ Ｏｎｅ ８，ｅ７３１７９，２０１３を参照されたい）。ＦＣＦの効果は、前立腺、中皮腫、肺、結腸、乳房、卵巣、子宮頸部など、様々な種類のがんで実証されている。ＦＣＦは、腫瘍の成長が抑制されたマウスモデルでも有効であることが見出されている。分子レベルでは、ＦＣＦ治療は、ＨＩＦ－１αとＨＥＲ２の抑制を引き起こし、これらは両方とも、より悪性のがん表現型に関連していることが知られている（Ｍａｒｃｕｓ，Ｅ．Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｓｅｐｔｉｎ ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＥｒｂＢ２／ＨＥＲ２ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．４７３，１７０３－１７１８，２０１６を参照されたい）。

【0182】

本実施例では、婦人科がん細胞株のパネルに対する細胞毒性活性をテストできる強力なセプチン阻害剤を開発することを目的として、ＦＣＦの化学構造を最適化するために焦点を絞った構造活性相関研究が実施された。また、ＦＣＦまたは誘導された阻害剤が、卵巣がんの進行だけでなく、進行した疾患や生存率の低下などの患者の転帰不良にも関連しているヒト精巣上体タンパク質４（ＨＥ４）分泌に寄与するかどうかも調査された（Ｊａｍｅｓ，Ｎ．Ｅ．，Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ，Ｃ．＆ Ｒｉｂｅｉｒｏ，Ｊ．Ｒ．Ｂｅｙｏｎｄ ｔｈｅ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ：Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ｔｈｅ Ｄｉｖｅｒｓｅ Ｒｏｌｅｓ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｅｐｉｄｉｄｙｍｉｓ Ｐｒｏｔｅｉｎ ４ ｉｎ ｔｈｅ Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ Ｏｖａｒｉａｎ Ｃａｎｃｅｒ．Ｆｒｏｎｔ．Ｏｎｃｏｌ．８，１２４，２０１８を参照されたい）。がん細胞増殖因子受容体の発現に対する開示された阻害剤の役割も調査された。

【0183】

方法
細胞株、培養、および試薬。細胞は、加湿インキュベーター内で５％ＣＯ_２を含む３７℃で１０％ウシ胎児血清（またはＯＶＣＡＲ－３の場合は２０％）、ペニシリン（１００単位／ｍＬ）、およびストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）を補充したＤＭＥＭ（ＳＫＯＶ－３、ＫＬＥ、ＯＶＣＡＲ－３、ＯＶＣＡＲ８－Ｃ５およびＩＧＲＯＶ－１）またはＲＰＭＩ－１６４０（ＥＣＣ－１およびＨＣＨ－１）のいずれかで維持された。抗体は、Ａｂｃａｍ（セプチン－２、ａｂ１７９４３６）およびＣｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ＥＲＫ（９１０２）、ｐ－ＥＲＫ（４３７０）、β－アクチン（３７００）、α－チューブリン（２１４４）、ＥＧＦＲ（４２６７）およびＨＥＲ２（４２９０）から購入した。ＦＣＦはアブカムから購入した。他のすべての化学物質はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈからのものであった。

【0184】

誘導体の合成。ＦＣＦの誘導体は、様々に置換されたアリールイソシアネートを異なって置換された４－アミノピリジンと、６５℃で一晩乾燥ＤＭＦ中で（０．１：０．１）モル比でカップリングすることによって合成された。溶離液としてＤＣＭ－ＭｅＯＨまたは純粋な酢酸エチルを用いる薄層クロマトグラフィープレートを使用して反応をモニターした。スポットはＵＶチャンバーでモニターした。反応終了後、反応混合物を湿った氷（ｗｅｔ ｉｃｅ）混合物に注ぎ、粉砕し、次いで分離した固体を真空で濾過した。生成物をヘキサン、続いてジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させた。化合物は、分光光度法によって特徴づけられた。

【0185】

定量的リアルタイムＰＣＲ。示された細胞株は、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ３０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、セプチン－２を標的とするｓｉＲＮＡまたは非標的化対照ｓｉＲＮＡ（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：ｓｃ－３７００７またはｓｃ－４０９３６）でトランスフェクトされた。Ｔｒｉ試薬とＤｉｒｅｃｔ－ｚｏｌキット（Ｚｙｍｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）を使用して、全ＲＮＡを溶解および単離した。逆転写は、ｉＳｃｒｉｐｔ ｃＤＮＡ合成キット（ＢｉｏＲａｄ）を使用して、どちらもメーカーの推奨に従って実行された。定量的リアルタイムＰＣＲは、ＱｕａｎｔＳｔｕｄｉｏ １２ Ｋ ＦｌｅｘリアルタイムＰＣＲシステム（ＡＢＩ）と、次のようなＦＡＭ標識プローブ：ＳＥＰＴ２（Ｈｓ０１５６５４１７＿ｍ１）、ＷＦＤＣ２（Ｈｓ００８９９４８４＿ｍ１）、ＴＢＰ（Ｈｓ００４２７６２０＿ｍ１）またはＢ２Ｍ（Ｈｓ００１８７８４２＿ｍ１）（正規化の参照として使用された）で構成されているＴａｑｍａｎ遺伝子発現アッセイ（ＡＢＩ）を使用して実施した。

【0186】

細胞生存率、増殖およびアポトーシスアッセイ。細胞生存率、増殖、および細胞アポトーシスは、ＭＴＳ（Ｐｒｏｍｅｇａ）、ＢｒｄＵ細胞増殖（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、およびカスパーゼ－Ｇｌｏ ３／７アポトーシス検出（Ｐｒｏｍｅｇａ）アッセイを使用して、適切な変更を加えたそれぞれのメーカーの推奨に従って測定した。

【0187】

酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）およびイムノブロッティング。上記の培地で細胞を一晩維持した。培地を除去し、示された条件でビヒクル（ＤＭＳＯ）またはＦＣＦ／開示された阻害剤のいずれかを含む新鮮な完全培地と交換した。処理後、細胞溶解物と上清を収集し、ＨＥ４アッセイ（Ｈｕｍａｎ ＨＥ４ Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ ＥＬＩＳＡ Ｋｉｔ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）に供した。上清中のＨＥ４の量は、一致する細胞溶解物のタンパク質濃度に対して正規化された。ＨＥＲ２のレベルは、Ｈｕｍａｎ Ｔｏｔａｌ ＥｒｂＢ２／Ｈｅｒ２ ＤｕｏＳｅｔ ＩＣ ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓによって決定された。ウェスターブロット分析は、以前に公開されたプロトコルを使用して実施された（Ｋｉｍ，Ｋ．Ｋ．ｅｔ ａｌ．Ｔｅｔｒａｔｈｉｏｍｏｌｙｂｄａｔｅ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｃｏｍｐｌｅｘ ＩＶ ａｎｄ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｙｐｏｘｉａ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ－１ａｌｐｈａ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｓｃｉ．Ｒｅｐ．５，１４２９６，２０１５を参照されたい）。

【0188】

データ取得および統計分析。顕微解剖された正常な卵巣間質（Ｎ＝８）を、高悪性度漿液性卵巣がん患者からの腫瘍間質サンプル（Ｎ＝３１）と比較するセプチンの遺伝子発現プロファイリングは、’Ｒ２：Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ Ｐｌａｔｆｏｒｍ （ｈｔｔｐ：／／ｒ２／ａｍ／ｎｌ）によるＭｉｘｅｄ Ｏｖａｒｉａｎ Ｃａｎｃｅｒ（ＣＡＦ）－Ｗｏｎｇ－７７－ｕ１３３ｐ２データセットから得られた。ＳＤの平均値をプロットし、スチューデントのｔ検定を使用して比較した（両側、対応のない不均一分散ｔ検定、ｐ＜０．０１の場合の有意差）。様々ながんの中でのセプチン－２または子宮内膜がんのセプチンの予後評価は、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｔｌａｓ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐｒｏｔｅｉｎａｔｌａｓ．ｏｒｇ）を通じて取得したＴＣＧＡデータを使用して実施された（Ｕｈｌｅｎ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｔｏｗａｒｄｓ ａ ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ－ｂａｓｅｄ Ｈｕｍａｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｔｌａｓ．Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２８，１２４８－１２５０，２０１０を参照されたい）。セプチンの高集団と低集団の間の生存曲線とそれらの統計的有意性は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（Ｍａｎｔｅｌ－Ｃｏｘ ｔｅｓｔ）を使用して分析された。

【0189】

結果
ＦＣＦの処理は、子宮内膜がんおよび卵巣がん細胞株の生存率を低減させた。細胞生存率に対するＦＣＦの効果は、子宮内膜（ＥＣＣ－１およびＫＬＥ）および卵巣（ＨＣＨ－１、ＯＶＣＡＲ－３、およびＳＫＯＶ－３）のがん細胞株を使用する婦人科がん細胞株のパネルで最初に試験された。ＦＣＦ処理は、これらの細胞の生存率を時間および用量依存的に低減させた（図１）。ＦＣＦは細胞株のパネルに対して顕著な細胞毒性活性を示したが、そのような阻害は比較的高濃度（１００μＭ以上）でのみ達成された。

【0190】

ＦＣＦの構造変更。非常に強力な誘導体を生成することを目的として、ＦＣＦ足場の体系的な構造変更が行われた（表１）。フェニル部分の置換基は最初に変化させ、２－クロロピリジン（ｃｈｏｌｏｐｙｒｉｄｉｎｅ）を一定に保った（ＵＲ２１４－５およびＵＲ２１４－６を除く）。分子の抗増殖活性に対する改変の効果を読み取るために、置換基を変化させた。図２Ａに記載されているように、ベンジルオキシ（ＵＲ２１４－２）、ピリミジニル（ＵＲ２１４－４）およびピロリル（ＵＲ２１４－３）などの置換は許容されなかった。ただし、ＦＣＦのフェニル環のＣＦ３Ｓ置換（ＵＲ２１４－１）は、非常に強力な細胞毒性活性を生成した。２－クロロピリジンの重要性は、ＣＦ３Ｓ－Ｐｈ部分（ＵＲ２１４－６）を残したまま、２－クロロピリジンを２－クロロピリミジンに置き換えることにより実証され、この変更により、活性が欠如した。ＵＲ２１４－１ががん細胞に対して最も強力な分子として出現し、次にＵＲ２１４－７が続いた（図２Ａ）。ＵＲ２１４－１はそれ以上変更されなかったが、有効性を高めるためにさらに最適化するためＵＲ２１４－７が選択された。

【表1】

【0191】

合成された誘導体が細胞の生存率と増殖に及ぼす影響。ＵＲ２１４－７の構造をさらに精緻化して、分子ＵＲ２１４－８からＵＲ２１４－１１までの分子を開発した。これらの化合物（ＵＲ２１４－７～ＵＲ２１４－１１）の腫瘍細胞の生存率に対する用量依存的な効果をＭＴＳアッセイを用いて試験した（図２Ｅ）。化合物ＵＲ２１４－７～ＵＲ２１４－１１による処理は、卵巣（ＳＫＯＶ－３、ＯＶＣＡＲ－３、およびＨＣＨ－１）および子宮内膜（ＥＣＣ－１およびＫＬＥ）のがん細胞に対して強力な抗生存率効果を発揮した。シリーズの中で最も活性の高い化合物（ＵＲ２１４－９）を製造するために、ピリジンの６番目の炭素に塩化物を設置した。ＵＲ２１４－９は、不明確な理由でＵＲ２１４－７が優れた効力を有したＨＣＨ－１を除いて、ほとんどの細胞株にわたって強力な活性を示した（図２Ｅ）。ほとんどの場合、ピリジンのハロゲン化物置換基は十分に許容された。驚いたことに、２－クロロの２－ブロモへの置換は許容されたため、ＵＲ２１４－１１は活性を失うことはなく、さらなる変更のための機会が開かれていた。次に、ＢｒｄＵアッセイを使用して、低用量範囲でのＥＣＣ－１細胞に対するＵＲ２１４－７およびＵＲ２１４－９の抗増殖活性を測定した。このアッセイでは、ＦＣＦを陽性対照として利用した。図２Ｂに示すように、４８時間のＵＲ２１４－９処理は、それぞれ約３３μＭおよび４μＭの生存率と増殖とを抑制した。ＵＲ２１４－７は、１１μＭ未満で腫瘍細胞の生存率を変化させなかったが、増殖を低減させた（図２Ｂ、右）。両方のアッセイで、ＦＣＦは活性が欠如していた。次に、ＥＣＣ－１細胞のアポトーシスを誘導するＵＲ２１４－７およびＵＲ２１４－９の能力を分析した。図２Ｄに示すように、ＵＲ２１４－７およびＵＲ２１４－９の両方での処理はアポトーシスを引き起こしたが、後者ははるかに効果的であった。ＵＲ２１４－７およびＵＲ２１４－９処理の効果は、時間および用量に依存していた（図２Ｃ）。

【0192】

誘導体はＨＥＲ２発現を選択的に阻害する。ＦＣＦは、いくつかの種類のがんの侵襲性に関与している細胞膜に固定された増殖因子であるＨＥＲ２を下方調節することが示されている。したがって、新しく生成された誘導体ががん細胞株におけるＨＥＲ２発現に影響を与えるかどうかが調査された。ＵＲ２１４－７およびＵＲ２１４－９による処理は、ＥＧＦＲ発現に影響を与えなかった。しかしながら、ＵＲ２１４－７およびＵＲ２１４－９での処理は、有意に高い用量でのＦＣＦがそうであったように、ＥＣＣ－１およびＨＣＨ－１細胞の両方でＨＥＲ２発現の阻害をもたらした（図３Ａ）。以前の研究は、ＨＥＲ２に対するＦＣＦの効果は、セプチンの破壊よって達成される可能性があり、セプチン－２のノックダウンがＨＥＲ２発現を減少させることを示唆している。したがって、セプチン－２がノックダウンされ、ＨＥＲ２レベルに対するその影響が決定された。セプチン－２のノックダウンはＨＥＲ２の下方調節をもたらした（図３Ｂ）。セプチン－２の阻害はまた、がん細胞株の生存率を減少させた（図３Ｃ）。

【0193】

誘導体はＨＥ４分泌を減少させる。ＨＥ４は、卵巣がんおよび子宮内膜がんの患者で高度に上方調節され（Ｍｏｏｒｅ，Ｒ．Ｇ．ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｎｏｖｅｌ ｔｕｍｏｒ ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａ ｐｅｌｖｉｃ ｍａｓｓ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．１０８，４０２－４０８，２００８、およびＭｏｏｒｅ，Ｒ．Ｇ．ｅｔ ａｌ．Ｓｅｒｕｍ ＨＥ４ ｌｅｖｅｌｓ ａｒｅ ｌｅｓｓ ｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙ ｅｌｅｖａｔｅｄ ｔｈａｎ ＣＡ１２５ ｉｎ ｗｏｍｅｎ ｗｉｔｈ ｂｅｎｉｇｎ ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．Ａｍ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．２０６，３５１ ｅ３５１－３５８，２０１２を参照されたい）、がんの悪性表現型に関連する小さな分泌糖タンパク質である。したがって、ＦＣＦまたはその強力な類似体がＨＥ４の分泌に影響を与える可能性があるかどうかを決定した。図４Ａに示すように、ＦＣＦ処理（３００μＭで７時間）は、ＨＥ４の細胞内レベルのわずかな増加とともに、ＨＥ４を安定して過剰発現するＯＶＣＡＲ８－Ｃ５によるＨＥ４分泌の減少をもたらした。この効果は、ＥＣＣ－１細胞とＨＣＨ－１細胞の両方で用量依存的であることが見出された（図４Ｂ）。ＦＣＦと比較して、ＨＥ４分泌の同様の阻害は、はるかに低い濃度でＵＲ２１４－１およびＵＲ２１４－７によって達成された（＜１０～２７倍、図４Ｃ）。ＦＣＦ処理は、ＨＥ４ ｍＲＮＡをある程度抑制することが見出された（図４Ｄ）。低分子干渉ＲＮＡによるセプチン－２の破壊もまた、ＨＥ４発現の低減をもたらした（図４Ｅ）。

【0194】

セプチンの過剰発現は、がんによる死亡率の増加と関連する。本研究では、セプチン２ノックダウンにより、ＨＥＲ２およびＨＥ４の発現が低下し、がん細胞株の生存率が減少した。さらに、セプチンは悪性のがんの表現型に関連している（Ｄｏｌａｔ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．Ｓｅｐｔｉｎｓ ｐｒｏｍｏｔｅ ｓｔｒｅｓｓ ｆｉｂｅｒ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｃａｌ ａｄｈｅｓｉｏｎｓ ａｎｄ ｒｅｎａｌ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｍｏｔｉｌｉｔｙ．Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．２０７，２２５－２３５，２０１４、Ｍｉｚｕｔａｎｉ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．Ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ａ ｓｅｐｔｉｎ，ＳＥＰＴ１，ｉｎ ｓｐｒｅａｄｉｎｇ ｉｎ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ＤＪＭ－１ ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．３９４，２８１－２９０，２０１３、Ｊｉａｎｇ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１２７－３ｐ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｅｌｌ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｖａｓｉｏｎ ｂｙ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ－ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ｇｅｎｅ ＳＥＰＴ７．Ｏｎｃｏｌ．Ｒｅｐ．３１，２２６１－２２６９，２０１４、Ｆｒｏｉｄｅｖａｕｘ－Ｋｌｉｐｆｅｌ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．Ｓｅｐｔｉｎ ｃｏｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｕｂｕｌｉｎ ｐｏｌｙｇｌｕｔａｍｙｌａｔｉｏｎ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ａｄａｐｔａｔｉｏｎ ｔｏ ｔａｘａｎｅｓ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ６，３６０６３－３６０８０，２０１５、およびＧｏｎｚａｌｅｚ，Ｍ．Ｅ．，Ｍａｋａｒｏｖａ，Ｏ．，Ｐｅｔｅｒｓｏｎ，Ｅ．Ａ．，Ｐｒｉｖｅｔｔｅ，Ｌ．Ｍ．＆ Ｐｅｔｔｙ，Ｅ．Ｍ．Ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＳＥＰＴ９＿ｖ１ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｓ ｃ－Ｊｕｎ－Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｌ ｋｉｎａｓｅ ａｎｄ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ｉｔｓ ｐｒｏ－ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｍａｍｍａｒｙ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌ．２１，４７７－４８７，２００９を参照されたい）。したがって、セプチンの発現が子宮内膜がんおよび卵巣がんの患者の転帰と関連しているかどうかが調査された。カプラン・マイヤー生存分析は、セプチン－２、－３、および－７の発現によって層別化された子宮内膜がんに対して実施された。これらのセプチンは、ＦＣＦの結合研究に使用されたため、特に興味深いものである（Ａｎｇｅｌｉｓ，Ｄ．，Ｋａｒａｓｍａｎｉｓ，Ｅ．Ｐ．，Ｂａｉ，Ｘ．＆ Ｓｐｉｌｉｏｔｉｓ，Ｅ．Ｔ．Ｉｎ ｓｉｌｉｃｏ ｄｏｃｋｉｎｇ ｏｆ ｆｏｒｃｈｌｏｒｆｅｎｕｒｏｎ（ＦＣＦ）ｔｏ ｓｅｐｔｉｎｓ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ｔｈａｔ ＦＣＦ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｓ ｗｉｔｈ ＧＴＰ ｂｉｎｄｉｎｇ．Ｐｌｏｓ Ｏｎｅ ９，ｅ９６３９０，２０１４を参照されたい）。Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍｅ Ａｔｌａｓ（ＴＣＧＡ）（図５Ａ）の分析は、セプチン－２とセプチン－３の両方の過剰発現が子宮内膜がんの死亡率の増加と相関していることを示している。子宮内膜がんでは、セプチン－２の相対的発現が最も高く、次にセプチン－７が続いた。セプチン－３の発現は非常に低いことがわかった（図５Ｂ）。セプチン－２の発現と死亡率の増加との相関関係は、腎臓、肺、肝臓、膵臓のがんでも見られたが、卵巣がんでは見られなかった。がん関連線維芽細胞（ＣＡＦ）は、がん細胞を取り囲み、支持する間質に見られる。セプチンネットワークは、腫瘍形成促進性の微小環境を作り出す際にＣＡＦをサポートすることが知られている（Ｃａｌｖｏ，Ｆ．ｅｔ ａｌ．Ｃｄｃ４２ＥＰ３／ＢＯＲＧ２ ａｎｄ Ｓｅｐｔｉｎ Ｎｅｔｗｏｒｋ Ｅｎａｂｌｅｓ Ｍｅｃｈａｎｏ－ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ Ｅｍｅｒｇｅｎｃｅ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ－Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ．Ｃｅｌｌ Ｒｅｐ．１３，２６９９－２７１４，２０１５を参照されたい）。したがって、卵巣がん関連間質と正常な卵巣間質におけるセプチン発現をプロファイリングしたデータも分析された（Ｗｏｎｇ－７７－ＭＡＳ５．０－ｕ１３３ｐ２）。がん関連間質では、セプチン－２およびセプチン－９の発現は有意に上方調節されたが、セプチン－６およびセプチン－７は変化しなかった（図５Ｃ）。

【0195】

考察
この実施例では、ＦＣＦによる処理により、卵巣がんおよび子宮内膜がんの細胞株の細胞生存率が１００～３００μＭの範囲で低減することが判明したが、これは薬理学的に望ましない。ＦＣＦの構造を最適化するための取り組みを通じて、非常に強力な類似体であるＵＲ２１４－１、ＵＲ２１４－７、およびＵＲ２１４－９が生成された。これらの類似体による処理は、ＦＣＦよりもかなり低い用量で複数の子宮内膜および卵巣がん細胞の増殖を阻止した。ＵＲ２１４－９は、４～５μＭの範囲でがん細胞の増殖を阻害することがわかった。さらなる構造最適化は、さらなる動物および潜在的にヒトの試験に適切であるナノモルディスラプターにつながる可能性がある。

【0196】

セプチンは、がんの悪性表現型に関連する細胞骨格タンパク質の部類のものである。さらに、セプチンは、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＩＦ－１α／血管新生軸などのがん遺伝子発現にますます関連している（Ｄｉｅｓｅｎｂｅｒｇ，Ｋ．，Ｂｅｅｒｂａｕｍ，Ｍ．，Ｆｉｎｋ，Ｕ．，Ｓｃｈｍｉｅｄｅｒ，Ｐ．＆ Ｋｒａｕｓｓ，Ｍ．ＳＥＰＴ９ ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＥＧＦＲ．Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．１２８，３９７－４０７，２０１５、Ａｎｇｅｌｉｓ，Ｄ．＆ Ｓｐｉｌｉｏｔｉｓ，Ｅ．Ｔ．Ｓｅｐｔｉｎ Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｃａｎｃｅｒｓ．Ｆｒｏｎｔ．Ｃｅｌｌ Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．４，１２２，２０１６、およびＡｍｉｒ，Ｓ．，Ｗａｎｇ，Ｒ．，Ｓｉｍｏｎｓ，Ｊ．Ｗ．＆ Ｍａｂｊｅｅｓｈ，Ｎ．Ｊ．ＳＥＰＴ９＿ｖ１ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｈｙｐｏｘｉａ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ １ ｂｙ ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ ｉｔｓ ＲＡＣＫ１－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８４，１１１４２－１１１５１，２００９を参照されたい）。したがって、高セプチン－２レベルが子宮内膜がんを含むいくつかのがんの種類で患者の生存率の低下に関連していることは驚くべきことではない。さらに、卵巣腫瘍間質はセプチン－２および－９が高度に富んでいることがわかっており、卵巣がんにおけるこれら２つの構造タンパク質の役割についてさらに調査が求められている。

【0197】

ＨＥ４は、ＷＦＤＣ２によってコードされる分泌糖タンパク質である。卵巣がんおよび子宮内膜がんでは上方調節されることが見出されており（Ｍｏｏｒｅ，Ｒ．Ｇ．ｅｔ ａｌ．Ｕｔｉｌｉｔｙ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｓｅｒｕｍ ｔｕｍｏｒ ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ＨＥ４ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｉｄ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｏｆ ｔｈｅ ｕｔｅｒｕｓ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．１１０，１９６－２０１，２００８を参照されたい）、がん細胞の増殖、移動、浸潤、転移、および化学療法抵抗性を増加させることが示されている。本結果では、ＵＲ２１４－１およびＵＲ２１４－７による処理がＨＥ４分泌の低減をもたらすことを示す。したがって、これらのＦＣＦ類似体は、婦人科がんにおいて特に治療上の利益をもたらす可能性がある。

【0198】

ＦＣＦは現在までに知られている唯一の小分子セプチン阻害剤である。セプチンは陸上植物には見られないため（Ｙａｍａｚａｋｉ，Ｔ．ｅｔ ａｌ．Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｐｔｉｎｓ ｉｎ ａｌｇａｅ．Ｐｌａｎｔ．Ｊ．７４，６０５－６１４，２０１３を参照されたい）、植物の成長に大きな影響を与えるＦＣＦが（Ｋｏｐｅｃｎｙ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．Ｐｈｅｎｙｌ－ａｎｄ ｂｅｎｚｙｌｕｒｅａ ｃｙｔｏｋｉｎｉｎｓ ａｓ ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ ｏｘｉｄａｓｅ／ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ：ａ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｓｔｕｄｙ．Ｂｉｏｃｈｉｍ．９２，１０５２－１０６２，２０１０を参照されたい）、セプチンを含まない細胞プロセスに関与していることは理にかなっているように思われる。実際、ＦＣＦの非セプチン効果が説明されている（Ｈｅａｓｌｅｙ，Ｌ．Ｒ．，Ｇａｒｃｉａ，Ｇ．ＩＩＩ ＆ ＭｃＭｕｒｒａｙ，Ｍ．Ａ．Ｏｆｆ－ｔａｒｇｅｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｐｔｉｎ ｄｒｕｇ ｆｏｒｃｈｌｏｒｆｅｎｕｒｏｎ ｏｎ ｎｏｎｐｌａｎｔ ｅｕｋａｒｙｏｔｅｓ．Ｅｕｋａｒｙｏｔ．Ｃｅｌｌ １３，１４１１－１４２０，２０１４を参照されたい）。それにもかかわらず、ＦＣＦはセプチンのダイナミクスを阻害し、セプチンベースの構造の組み立てを妨害することも示されている（Ｈｕ，Ｑ．，Ｎｅｌｓｏｎ，Ｗ．Ｊ．＆ Ｓｐｉｌｉｏｔｉｓ，Ｅ．Ｔ．Ｆｏｒｃｈｌｏｒｆｅｎｕｒｏｎ ａｌｔｅｒｓ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｓｅｐｔｉｎ ａｓｓｅｍｂｌｙ，ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，ａｎｄ ｄｙｎａｍｉｃｓ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８３，２９５６３－２９５７１，２００８を参照されたい）。インシリコ研究は、ＦＣＦがセプチンのヌクレオチド結合ポケットと相互作用する可能性があることを示唆している。本実施例では、ＦＣＦ類似体での処理により、ＨＥＲ２とＨＥ４の両方が下方調節され、セプチン－２ノックダウンの効果を模倣しているように見られた。

【0199】

実施例３。セプチン破壊は腫瘍成長を制御し、トラスツズマブ（ハーセプチン（商標））の有効性を高める
セプチンは、細胞質分裂、細胞移動、染色体動態、およびタンパク質分泌に関与するＧＴＰ結合細胞骨格タンパク質のファミリーである。セプチンはヘテロオリゴマー化して、細胞内に足場フィラメント、バンドル、およびリングを生成する。さらに、セプチンはチューブリンおよびアクチンの機能を調節する重要な細胞骨格成分である。膵臓、腎臓、肺、結腸直腸、皮膚、脳、子宮内膜、卵巣、乳房および他の悪性腫瘍におけるセプチンタンパク質発現の変化が観察されている。異常なセプチンの発現は、神経変性／神経筋疾患、血液障害、不妊症、および発達障害にも関連している。個々のセプチンファミリーメンバーの異常な富化が腫瘍形成を増強するのに十分であるかどうか、または特定のヘテロオリゴマーアセンブリが関係している可能性があるかどうかは不明である。セプチンを標的とする薬剤は、主にセプチンのオリゴマー構造構成が治療法の設計において困難な課題をもたらすため、依然としてわかりにくいままである。

【0200】

本実施例では、膵臓がん、乳がん、肺がん、腎臓がん、肝臓がん、または黒色腫の患者の生存に対する個々のセプチンの影響を調査した。セプチンが生存に及ぼす影響を調べるために、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｔｌａｓ（ＨＰＡ）、およびＲ２：Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ Ｐｌａｔｆｏｒｍ（ｈｔｔｐｓ：／／ｈｇｓｅｒｖｅｒ１．ａｍｃ．ｎｌ／ｃｇｉ－ｂｉｎ／ｒ２／ｍａｉｎ．ｃｇｉ）で公開されている転写データおよびツールを使用した。強力なセプチンモジュレーターであるＵＲ２１４－９が記載されており、セプチン－２とセプチン－９、およびβ－アクチンの構造組織を破壊し、がん細胞の増殖と腫瘍の成長を制御する。分子ドッキング技術を使用して、ＵＲ２１４－９およびその類似体がＧＤＰ結合ドメインおよび既知のＦＣＦ結合ポケットの要素とどのように相互作用するかを調査した。遺伝子発現がＵＲ２１４－９によってどのように影響を受けるかを特定し、それによってそのオフターゲットの傾向を特徴づけるために、ＵＲ２１４－９で処理された乳がんおよび膵臓がん細胞のトランスクリプトーム解析を実施した。要約すると、この実施例は、強力なセプチンフィラメントモジュレーターとしてＵＲ２１４－９を提示し、ＵＲ２１４－９による膵臓、卵巣、および乳がん細胞のセプチン構造の解体が効果的な治療戦略になり得ることを示している。

【0201】

方法
細胞株、細胞培養、および試薬。ＰＡＮＣ－１、ＢＸＰＣ－３およびＣＡＰＡＮ－１、ＳＫＯＶ－３、ＭＣＦ７、ＭＤＡ－ＭＤ－２３１細胞は、ＡＴＣＣから入手し、１０％ウシ胎児血清ペニシリン（１００単位／ｍＬ）およびストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）を補充した、ＤＭＥＭ、ＲＰＭＩ－１６４０、およびＩＭＤＭで、３７℃の５％ＣＯ２を含む加湿インキュベーター内で維持した。ＪＩＭＴ－１細胞は、米国のＡｄｄｅｘＢｉｏ Ｉｎｃから購入し（カタログ番号：Ｃ０００６００５）、１０％ＦＢＳおよび抗生物質を添加したＤＭＥＭで維持した。セプチン－２（カタログ番号：ＨＰＡ０１８４８１）、セプチン－７（カタログ番号：ＨＰＡ０２９５２４）、セプチン－９（カタログ番号：ＨＰＡ０２９５２４）抗体はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ Ｉｎｃ．から購入した。ＤｙＬｉｇｈｔ ４８８（カタログ番号：ＤＩ－１４８８，ウサギ、Ｄｙｌｉｇｈｔ５９４（カタログ番号：ＤＩ－２５９４，マウス）は、Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ．から購入した。ファイロジン－ＴＲＩＴＣはＥＣＭ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓから購入した（カタログ番号：ＰＦ７５５１）。ＨＥＲ２（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カタログ番号：４２９０）、ｐＳＴＡＴ－３（カタログ番号：９１４５ｐ）、ＳＴＡＴ－３（カタログ番号：４９０４）およびＧＡＰＤＨ抗体（カタログ番号：２１１８ｓ）はＣｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ．ＵＳＡから購入し、メーカー推奨の希釈で使用した。

【0202】

誘導体の合成。ＵＲ２１４－９は、アルゴンフラッシュ雰囲気下、６５℃で一晩、乾燥ＤＭＦ中、（０．１：０．１）モル比でアリールイソシアネートと２，６－ジクロロ４－アミノピリジンをカップリングすることにより合成した。溶離液としてＤＣＭ－ＭｅＯＨまたは純粋な酢酸エチルを用いる薄層クロマトグラフィープレートを使用して反応をモニターした。スポットはＵＶチャンバーでモニターした。反応終了後、反応混合物を湿った氷混合物に注ぎ、粉砕し、分離した固体を真空下で濾過した。生成物をヘキサン、続いてジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させた。化合物は、質量分析によって特徴づけられた。

【0203】

分子ドッキング。９と関連化合物の潜在的な結合モードを調査するためのドッキング実験は、ＭｏｌｓｏｆｔのＩＣＭソフトウェアパッケージ（ｖ．３．８－７）を使用して実行した。分子はかなり小さく、やや対称的である（２つの親油性置換芳香環が両側にある中央の尿素基で構成されている）。化合物８、９、および１０が最も活性の高いものであるため、同様の結合モードを共有している可能性があると想定した。したがって、化合物ＦＣＦ、ＵＲ２１４－８、－９、および－１０は、これまでに利用可能なセプチン－２二量体複合体の最高品質の構造であるＰＤＢ ＩＤ ２ＱＮＲのヌクレオチド結合部位にドッキングされた（Ａｎｇｅｌｉｓ，Ｄ．，ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ ｓｉｌｉｃｏ ｄｏｃｋｉｎｇ ｏｆ ｆｏｒｃｈｌｏｒｆｅｎｕｒｏｎ（ＦＣＦ）ｔｏ ｓｅｐｔｉｎｓ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ｔｈａｔ ＦＣＦ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｓ ｗｉｔｈ ＧＴＰ ｂｉｎｄｉｎｇ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ．９，ｅ９６３９０，２０１４を参照されたい）。受容体の調製（鎖ＡのＧＤＰ結合部位に基づく）およびリガンドの構築は、標準設定を使用してＩＣＭ内で実行された。各化合物およびそのポーズのＩＣＭスコアが計算され、ＦＣＦと比較された。化合物は、２．０のエフォートおよび化合物あたり２０ポーズの設定で、「ドックテーブル」機能とドッキングされた。ドッキングポーズを目視で確認すると、２セットの低エネルギーポーズ（「セットＡ」および「セットＢ」）が際立っており、高活性化合物が同様のコンフォメーションをとることができる。

【0204】

細胞生存率と細胞周期分析。ＵＲ２１４－９で処理されたＰＡＮＣ－１、ＢＸＰＣ－３、およびＣＡＰＡＮ－１膵臓がん細胞の細胞生存率は、先に公開された手順に従ってＣｅｌｌ Ｔｉｔｒｅ９６Ｒ Ａｑｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐ．、カタログ番号：Ｇ３５８０）を使用して測定された。Ｌｉｖｅ／Ｄｅａｄ色素キット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｏ．，カタログ番号：Ｌ３４９７５）をＵＲ２１４－９またはビヒクルで処理されたＰＡＮＣ－１およびＢＸＰＣ－３膵臓がん細胞の生細胞および死細胞の数を推定するために使用した。簡単に説明すると、細胞をビヒクルまたはＵＲ２１４－９（３μＭ）で７２時間処理した。細胞をトリプシン処理によって回収し、固定－透過処理試薬（濃縮液を希釈液で１：３の比率で希釈して調製）（Ｂｉｏｇｅｍ Ｉｎｃ．、希釈液：カタログ番号９２１６０－００－１６０および濃縮液カタログ番号：２５５０－００－５０）を使用して固定および透過処理し、Ｌｉｖｅ／Ｄｅａｄ色素で１時間染色した。細胞を１０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、ペレットを洗浄し、ＤＰＢＳで３回スピンダウンした。細胞を３０５フローサイトメーターで分析し、ビヒクル群と対照群の両方に同数の細胞を入力することにより、相対的な生細胞と死細胞の集団を計算した。

【0205】

細胞周期分析のために、ＢＸＰＣ－３およびＰＡＮＣ－１およびＪＩＭＴ－１細胞（１００，０００／ウェル）を６ウェルディッシュに一晩播種し、一晩付着させた。培地をＤＭＳＯまたはＵＲ２１４－９（１００ｎＭおよび３μＭ）を添加した新鮮な完全培地と交換し、細胞を７２時間インキュベートした。薬物を含む培地を除去し、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、穏やかにトリプシン処理した。細胞を１５ｍＬチューブに収集し、完全なＤＭＥＭ培地を加えてトリプシンをブロックし、細胞を遠心分離した。上清を除去し、細胞を７０％冷ＥｔＯＨで３０分間穏やかに処理した。固定された細胞を遠心分離し、得られたペレットをフローサイトメトリーチューブに収集し、事前に処方されたＰＩ／ＲＮａｓｅ溶液（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カタログ番号：４０８７ｓ）で３０分間染色した。ＰＩ含有量はフローサイトメーターを使用して分析した。Ｆｌｏｗｊｏソフトウェアを使用してデータを処理した。

【0206】

細胞周期タンパク質の発現。定性的／半定量的タンパク質発現プロファイリング用に設計された、ハイスループットＥＬＩＳＡベースの抗体アレイである、Ｃｅｌｌ Ｃｙｃｌｅ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ａｒｒａｙ（ＦｕｌｌＭｏｏｎ ＢｉｏＳｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ、カタログ番号：ＡＣＣ：０５８）を使用して、薬物処理後のタンパク質の変化を調査した。ＰＡＮＣ－１細胞は、プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、カタログ番号：９８０３Ｓ）を含む緩衝液で溶解した。総タンパク質含有量はブラッドフォードアッセイによって定量化され、製造元の指示に従って、６０個のプローブのそれぞれに４～６個のスポットを含むアレイを使用して等量のタンパク質を２回分析した（ＡＣＣ０５８、Ｃｅｌｌ Ｃｙｃｌｅ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ａｒｒａｙ、Ｆｕｌｌ Ｍｏｏｎ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）。バックグラウンド補正後、ＦｕｌｌＭｏｏｎ Ｉｎｃのイメージングサービスを使用して平均シグナル強度を測定した。ナイーブおよび
３２８の処理グループの両方でのタンパク質発現は、ＧＡＰＤＨシグナルに対して正規化された。

【0207】

セプチンの乱れ（Ｄｉｓａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ）の共焦点解析。細胞内のセプチン－２構造に対するＵＲ２１４－９処理の影響を決定するために、ＰＡＮＣ－１またはＪＩＭＴ－１細胞をスライドガラスに播種し、一晩付着させた。培地をＤＭＳＯまたはＵＲ２１４－９（１μＭおよび７０ｎＭ）を添加した完全ＤＭＥＭ培地と交換し、細胞を４８時間インキュベートした。培地を再び新しい完全培地と交換し、中性緩衝ホルマリンで４０Ｃで１５分間固定した。培地を除去し、細胞をＰＢＳＴ（５ｘ５ｍＬ）で繰り返し洗浄した。細胞をＰＳＢ中のセプチン－２抗体（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号：ＨＰＡ０１８４８１）で４０℃で一晩染色した。培地を再度除去し、細胞を２ｘ５ｍＬ ＰＢＳＴで洗浄した。細胞を暗所で１時間蛍光結合二次抗体で染色した。スライドを暗所で７ｘ５ｍＬ ＰＢＳＴで繰り返し洗浄し、ＤＡＰＩ（Ｖｅｃｔｏｒ ｌａｂｓ）を含む封入剤を塗布し、スライドガラスで覆った。スライドは分析まで４０℃で暗所に保存された。共焦点画像は、基本的に以前に公開されたように取得および処理された（Ｍｏｏｒｅ，Ｒ．Ｇ．，Ｈｉｌｌ，Ｅ．Ｋ．，Ｈｏｒａｎ，Ｔ．，Ｙａｎｏ，Ｎ．，Ｋｉｍ，Ｋ．，ＭａｃＬａｕｇｈｌａｎ，Ｓ．，Ｌａｍｂｅｒｔ－Ｍｅｓｓｅｒｌｉａｎ，Ｇ．，Ｔｓｅｎｇ，Ｙ．Ｄ．，Ｐａｄｂｕｒｙ，Ｊ．Ｆ．，Ｍｉｌｌｅｒ，Ｍ．Ｃ．，Ｌａｎｇｅ，Ｔ．Ｓ．，Ｓｉｎｇｈ，Ｒ．Ｋ．Ｓｃｉ Ｒｅｐ．４，３５７４，２０１４を参照されたい）。膵臓腫瘍マイクロアレイ（ＵＳ Ｂｉｏｍａｘ、カタログ番号Ｔ１４２ａ）を脱パラフィンし、処理し、セプチン－２抗体（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号：ＨＰＡ０１８４８１）で一晩染色し、ＰＢＳＴで洗浄し、ソースに一致する二次（ＦＩＴＣ）で１時間インキュベートした。スライドをＰＢＳＴ（５ｘ１０ｍＬ）でそれぞれ５分間洗浄した。封入剤を含むＤＡＰＩを塗布し、スライドガラスで覆った。共焦点画像は、ダイオードレーザー４０２、４８８、および５６１を使用してＮｉｋｏｎ Ｃ１ｓｉ共焦点顕微鏡（Ｎｉｋｏｎ Ｉｎｃ．Ｍｅｌｌｖｉｌｌｅ，ＮＹ．）で取得した。連続したオプティカルセクションはＥＺ－Ｃ１コンピュータソフトウェア（Ｎｉｋｏｎ Ｉｎｃ．Ｍｅｌｌｖｉｌｌｅ，ＮＹ）により得られた。Ｚシリーズセクションは、４０ｘ ＰｌａｎＡｐｏレンズとスキャンズーム２で０．３μｍで、または６０ｘ Ｐｌａｎ Ａｐｏ対物レンズおよびスキャンズーム２で、０．２５μｍごとに収集した。デコンボリューション測定は、Ｅｌｅｍｅｎｔｓ（Ｎｉｋｏｎ Ｉｎｃ．Ｍｅｌｌｖｉｌｌｅ，ＮＹ）コンピュータソフトウェアを使用して行った。フィールドあたり５つの細胞のアウトライン化および分析が行われた。

【0208】

ＵＲ２１４－９の抗腫瘍反応を評価するための異種移植研究。ＮＳＧマウス３５６の左脇腹に、それぞれマトリゲル：培地（１：１）中の１００万個のＰＡＮＣ－１（ＨＥＲ２＋、ｎ＝１２）、ＪＩＭＴ１（動物数＝１０）およびＳＫＯＶ－３（動物数＝１０）細胞を移植した。マウスを無作為化し、耳パンチで識別し、腫瘍が触知可能であることが判明した時点で、ビヒクル群と処理群に細分した。ＪＩＭＴ１とＳＫＯＶ－３の両方は１週間以内に侵襲性腫瘍を形成し、ビヒクルまたはＵＲ２１４－９（２５ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ、週７日）で処理した。ＰＡＮＣ－１は成長の遅い腫瘍を形成し、腫瘍の長さが５ｍｍを超えた時点で、処理が開始された。ＳＫＯＶ－３細胞の群はまた、トラスツズマブまたはトラスツズマブ＋ＵＲ２１４－９で処理された。ビヒクルの処方は：滅菌水中の４０％ヒドロキシプロピル－ベータ－シクロデキストリン［Ａｃｒｏｓ Ｏｒｇａｎｉｃｓ］およびソルトールＨＳ１５（Ｓｉｇｍａ］）であった。２５ｍｇ／ｋｇ当量のＵＲ２１４－９（ＤＭＳＯ中１ｕＬ＝２００ｕｇ）を６００ｕＬのＰＢＳ＋４００ｕＬのビヒクルに溶解し、ボルテックスして透明な懸濁液を得た。腫瘍量と動物の体重は、毎週または隔週のルーチンでデジタルノギスによって手動で測定された。腫瘍体積は、式１／２（ＬｘＷ＾２）を使用して計算された（式中、Ｌは最も長い直径であり、Ｗは最も広い幅である。）。ビヒクル群と処理群の間の統計的差異は、一元配置分散分析を使用してＧｒａｐｈＰｒｉｓｍ－８ソフトウェアによって分析された。Ｐ＜０．０５が有意であるとみなされた。処理期間後のマウスを安楽死させ、腫瘍を切除し、秤量し、液体窒素で凍結させた。対照群と処理群の腫瘍の一部は、中性緩衝ホルムアルデヒドとパラフィン包埋で固定された。組織化学用に５μＭの厚さの組織スライドを調製した。

【0209】

ｍＲＮＡシーケンシング。総ＲＮＡ濃度は、ＮａｎｏｐＤｒｏｐ １０００分光光度計（ＮａｎｏＤｒｏｐ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ）で測定し、ＲＮＡ品質はＡｇｉｌｅｎｔ Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ（Ａｇｉｌｅｎｔ、Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ，ＣＡ）で評価した（Ｂｏｌｇｅｒ，Ａ．Ｍ．，Ｌｏｈｓｅ，Ｍ．，Ｕｓａｄｅｌ，Ｂ．Ｔｒｉｍｍｏｍａｔｉｃ：ａ ｆｌｅｘｉｂｌｅ ｔｒｉｍｍｅｒ ｆｏｒ Ｉｌｌｕｍｉｎａ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｄａｔａ．Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．３０，２１１４－２１２０，２０１４を参照されたい）。ＴｒｕＳｅｑ Ｓｔｒａｎｄｅｄ ｍＲＮＡ Ｓａｍｐｌｅ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ｉｌｌｕｍｉｎａ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）をメーカーのプロトコルに従って次世代シーケンシングライブラリーの構築に使用した。簡単に説明すると、ｍＲＮＡをオリゴｄＴ磁気ビーズを用いて２００ｎｇの全ＲＮＡから精製し、フラグメント化した。ランダムヘキサマープライミングで第１鎖ｃＤＮＡ合成を行い、続いて鎖マーキングのためにｄＵＴＰ組み込みを使用して第２鎖ｃＤＮＡ合成を行った。次に、二本鎖ｃＤＮＡに対して末端修復および３’アデニル化を行った。イルミナアダプターをｃＤＮＡの両端にライゲーションし、ゲル電気泳動で精製し、アダプター配列に特異的なＰＣＲプライマーで増幅して、サイズが約２００～５００ｂｐのｃＤＮＡアンプリコンを生成した。増幅されたライブラリーは、Ｉｌｌｕｍｉｎａシングルエンドフローセルにハイブリダイズし、ｃＢｏｔ（Ｉｌｌｕｍｉｎａ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して増幅された。ＩｌｌｕｍｉｎａのＮｅｘｔＳｅｑ５５０を使用して、サンプルごとに７５ｎｔのシングルエンドリードが生成された（Ｄｏｂｉｎ，Ａ．，Ｄａｖｉｓ，Ｃ．Ａ．，Ｓｃｈｌｅｓｉｎｇｅｒ，Ｆ．，Ｄｒｅｎｋｏｗ，Ｊ．，Ｚａｌｅｓｋｉ，Ｃ．，Ｊｈａ，Ｓ．，Ｂａｔｕｔ，Ｐ．，Ｃｈａｉｓｓｏｎ，Ｍ．，Ｇｉｎｇｅｒａｓ，Ｔ．Ｒ．ＳＴＡＲ：ｕｌｔｒａｆａｓｔ ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＲＮＡ－ｓｅｑ ａｌｉｇｎｅｒ．Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．２９，１５－２１，２０１２を参照されたい）。

【0210】

全トランスクリプトームデータ解析。ＮｏｖａＳｅｑ６０００シーケンサーから生成された生の読み取りは、ｂｃｌ２ｆａｓｔｑバージョン２．１９．０を使用して逆多重化された。品質フィルタリングおよびアダプターの削除は、Ｔｒｉｍｍｏｍａｔｉｃ－０．３６と次のパラメータを使用して実行される：「ＴＲＡＩＬＩＮＧ：１３ ＬＥＡＤＩＮＧ：１３ ＩＬＬＵＭＩＮＡＣＬＩＰ：ａｄａｐｔｅｒｓ．ｆａｓｔａ：２：３０：１０ ＳＬＩＤＩＮＧＷＩＮＤＯＷ：４：２０ ＭＩＮＬＥＮ：３５」次に、処理／クリーニングされた読み取りは、ＳＴＡＲ－２．６．０ｃを使用して次のパラメータを指定して、Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓリファレンスシーケンス（ＧＲＣｈ３８、ｈｇ３８）にマッピングされた：「－－ｔｗｏｐａｓｓＭｏｄｅ Ｂａｓｉｃ－－ｒｕｎＭｏｄｅ ａｌｉｇｎＲｅａｄｓ－－ｇｅｎｏｍｅＤｉｒ ＄｛ＧＥＮＯＭＥ｝－－ｒｅａｄＦｉｌｅｓＩｎ ＄｛ＳＡＭＰＬＥ｝－－ｏｕｔＳＡＭｔｙｐｅ ＢＡＭ ＳｏｒｔｅｄＢｙＣｏｏｒｄｉｎａｔｅ－－ｏｕｔＳＡＭｓｔｒａｎｄＦｉｅｌｄ ｉｎｔｒｏｎＭｏｔｉｆ－ｏｕｔＦｉｌｔｅｒＩｎｔｒｏｎＭｏｔｉｆｓ ＲｅｍｏｖｅＮｏｎｃａｎｏｎｉｃａｌ」。ｓｕｂｒｅａｄ－１．６．１パッケージ（ｆｅａｔｕｒｅＣｏｕｎｔｓ）を使用して、次のパラメータを指定して遺伝子カウントを導出した：「－ｓ ２－ｔ ｅｘｏｎ －ｇ ｇｅｎｅ＿ｎａｍｅ」。差次的発現解析およびデータ正規化は、Ｒ－３．４．１環境内で０．０５の調整されたｐ値しきい値でＤＥＳｅｑ２－１．１６．１を使用して実行した。ヒートマップは、ｐｈｅａｔｍａｐ Ｒパッケージを使用して作成された（Ｒ Ｃｏｒｅ Ｔｅａｍ．Ｒ：Ａ ｌａｎｇｕａｇｅ ａｎｄ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｆｏｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ．Ｒ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ，Ｖｉｅｎｎａ，Ａｕｓｔｒｉａ．（２０１６）．ＵＲＬ ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．Ｒ－ｐｒｏｊｅｃｔ．ｏｒｇ／、Ｌｏｖｅ，Ｍ．Ｉ．，Ｈｕｂｅｒ，Ｗ．，Ａｎｄｅｒｓ，Ｓ．“Ｍｏｄｅｒａｔｅｄ ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｌｄ ｃｈａｎｇｅ ａｎｄ ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ ｆｏｒ ＲＮＡ－ｓｅｑ ｄａｔａ ｗｉｔｈ ＤＥＳｅｑ２．”Ｇｅｎｏｍｅ Ｂｉｏｌｏｇｙ １５，５５０（２０１４）、および３９．Ｌｉａｏ，Ｙ．，Ｓｍｙｔｈ，ＧＫ．，Ｓｈｉ，Ｗ．ｆｅａｔｕｒｅＣｏｕｎｔｓ：ａｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｇｅｎｅｒａｌ－ｐｕｒｐｏｓｅ ｐｒｏｇｒａｍ ｆｏｒ ａｓｓｉｇｎｉｎｇ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｒｅａｄｓ ｔｏ ｇｅｎｏｍｉｃ ｆｅａｔｕｒｅｓ．Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ３０，９２３－９３０，２０１４を参照されたい）

【0211】

データ取得および統計分析。様々ながんのパネルにおけるセプチン－２、－７、および－９の予後評価は、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｔｌａｓツールを使用して実施された。あるいは、Ｒ２ Ｇｅｎｏｍｅ．ｏｒｇツールを使用して、セプチン富化が生存の見通しに与える影響を判断した。０．０５未満のｐ値は有意であるとみなされた。ナイーブ群と処理群の相対的な腫瘍サイズは、一元配置分散分析（ａｎｎｏｖａ）設定を使用してＧｒａｐｈＰｒｉｓｍ８を使用して計算された。０．０５未満のｐ値は有意であるとみなされた。

【0212】

結果
セプチンの富化は、がん患者の生存率の低下と相関する。Ｒ２：Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ Ｐｌａｔｆｏｒｍ（ｈｔｔｐｓ：／／ｈｇｓｅｒｖｅｒ１．ａｍｃ．ｎｌ／ｃｇｉ－ｂｉｎ／ｒ２／ｍａｉｎ．ｃｇｉ）に寄託された膵臓がんおよび卵巣がん患者の公的にアクセス可能なマイクロアレイデータベースを解析した。セプチン－２ｍＲＮＡは正常な膵臓と比較して悪性膵臓に富化していた（図６Ａ、ｐ＝１．３ｅ－４）。同様に、卵巣がん上皮は、正常な間質と比較して、セプチン－２を有意に富化して発現した（図６Ｂ、左、ｐ＝１．２ｅ－７）。悪性卵巣間質の顕微解剖された間質はまた、正常な間質よりもセプチン－２ ｍＲＮＡの発現の上昇を示した（図６Ｂ、右、ｐ＝１．２１ｅ－４）。同様に、正常な間質と比較して、悪性乳房の腫瘍上皮成分は、セプチン－２ ｍＲＮＡ富化の増加を示した（図６Ｃ、左、ｐ＝０．４９ｅ－３）。さらに、乳房腫瘍の浸潤領域の増加は、セプチン－２富化の増加につながった（図６Ｃ、右、ｐ＝８．９ｅ－３）。セプチン－２発現の程度によってグループ分けされた膵臓がん患者のカプラン・マイヤー生存率（ｈｔｔｐｓ：／／ｈｇｓｅｒｖｅｒ１．ａｍｃ．ｎｌ／ｃｇｉ－ｂｉｎ／ｒ２／ｍａｉｎ．ｃｇｉ２０ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｔｌａｓ２１で入手可能なマイクロアレイデータより）は、セプチン－２ ｍＲＮＡ富化が死亡率の増加と有意に（ｐ＝０．００１１）相関することを示す（図６Ｄ、左）。同様に、セプチン－７および－９の富化は、膵臓がん患者の死亡率の増加と相関している。セプチン－２の富化はまた、乳がん（図６Ｄ、中央、ｐ＝３．９ｅ－３）および卵巣がん（図６Ｄ、右、ｐ＝０．０１１）の患者にとっても不利な要因である。他のセプチンに基づく生存の見通しの解析は、セプチン－７の富化が乳房の悪性腫瘍と診断された患者にとって不利であることが判明したことを示している（ｐ＝０．００７９）。

【0213】

ＵＲ２１４－９は細胞内でセプチン－２の壊滅を引き起こす。ＵＲ２１４－９の化学構造を図７Ａに示す。ＵＲ２１４－９は、ＦＣＦの構造活性相関に基づく最適化によって取得された。フェニル環にフッ素原子の基を組み込み、ピリジン環のＣ－６に塩素原子を設置することで、ＵＲ２１４－９はセプチンのフィラメント構造の強力なディスラプターになった。高解像度（６０ｘ２）の共焦点顕微鏡を使用して、ＢＸＰＣ－３、ＣＡＰＡＮ－１、Ｐａｎｃ－１（膵臓）およびＪＩＭＴ－１（乳房）およびＳＫＯＶ－３卵巣がん細胞のパネルにおけるセプチン－２、６、７、および－９の構造配置に対するＤＭＳＯ、ＦＣＦ（陽性対照）およびＵＲ２１４－９の影響を測定した。ＦＣＦはＢＸＰＣ－３細胞のセプチン－２フィラメントを強化しているように見えるが（図７Ｂ、左下）、ＰＡＮＣ－１のセプチン－２針状物（ｎｅｅｄｌｅ）は、ＵＲ２１４－９処理（１ｕＭ）後に細胞表面で乱れ、転位置した（図７Ｃ、左下）。同様に、薬物処理後のＪＩＭＴ－１細胞のセプチン－２針状物は、構造的破壊と核周辺への再配置を示した（図７Ｃ、右下）。次に、共焦点顕微鏡を使用して、ＵＲ２１４－９で処理したときのＰＡＮＣ－１細胞における他のセプチンファミリーメンバーの応答を調査した。セプチン－７は発現の低減を示したが、セプチン－９はフィラメント構造の乱れを示した。セプチン－４、－６は明確なフィラメント構造を示さず、代わりに点状の染色を示し、これは、ＤＭＳＯで処理した対照と比較して処理群で低減したか、薬物効果は決定的ではなかった（データは示さず）。同様に、ＵＲ２１４－９で処理されたＪＩＭＴ－１乳がん細胞は、核の周辺にセプチン－２の強い構造的混乱と再配置を示した。ＪＩＭＴ－１細胞は明確なセプチン－７構造を示さなかったため、セプチン－７に対するＵＲ２１４－９の効果はあいまいなままであった。しかし、ＵＲ２１４－９で処理したＰＡＮＣ－１およびＪＩＭＴ－１細胞の共焦点顕微鏡では、セプチン－９のフィラメント構造に明らかな乱れを示した。ＵＲ２１４－９処理がセプチンファミリーのタンパク質の発現を変化させるかどうかを、ＰＡＮＣ－１、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＪＩＭＴ－１、およびＭＣＦ－７がん細胞の全細胞溶解物をイムノブロッティングすることによって調べた。免疫ブロットは、検証済みのセプチン－２、６、７、および－９抗体でプローブした。ＰＡＮＣ－１細胞では、セプチン－９の発現は興味深いことに完全に阻害されたが、セプチン－２、－６、および－７の発現は影響を受けなかった（図７Ｄ）。同様に、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＪＩＭＴ－１、およびＭＣＦ－７細胞のウエスタンブロット分析は、それらのフィラメント構造が圧倒的に破壊されているにもかかわらず、ＵＲ２１４－９がセプチン－２，６および－９ファミリーのタンパク質のタンパク質発現レベルを変化させないことを示した（図７Ｅ）。がん細胞におけるセプチン壊滅現象は、ＵＲ２１４－９での処理時（１μＭ、４８時間）に、セプチン－２が薬物曝露後に細胞表面に再配置されたように見えるセプチン－２フィラメントの完全な破壊を示したＳＫＯＶ－３卵巣がん細胞を使用してさらに検証された（図７Ｆ）。薬物処理されたＳＫＯＶ－３細胞における１２５のセプチン－６、７および－９構造のさらなる検査は、セプチン－９の再編成を示した（図７Ｇ、下）。セプチン－６は非針状であり、ＵＲ２１４－９で処理すると減少することがわかった（図７Ｇ、上）。セプチン－７発現の変化は、ＵＲ２１４－９の非針状および拡散／点状の発現のために明確ではなかった（図７Ｇ、中央）。

【0214】

ＵＲ２１４－９は、膵臓がんおよび乳がん細胞でアクチンフィラメントの破壊を引き起こす。セプチンは、アクチンの機能を制御することが以前に示されている（Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｋ．，Ｎｉｃｈｏｌｓ，ＢＪ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｉｎｔｅｒｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｅｐｔｉｎ ａｎｄ ａｃｔｉｎ ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ．ＢＭＣ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１２，４３，２００４を参照されたい）。ＵＲ２１４－９で処理されたＰＡＮＣ－１およびＪＩＭＴ１細胞の共焦点顕微鏡は、１μＭの用量で４８時間処理された場合、アクチンフィラメントの破壊を示した（図８）。ＰＡＮＣ－１細胞とＪＩＭＴ１細胞の両方のアクチンフィラメント針の代表的な構造的混乱（図８）。関心領域は、白いボックスに示される中に示される。

【0215】

インシリコドッキングでは、ＵＲ２１４－９とセプチン－２の主要な相互作用が示される。ＵＲ２１４－９および関連化合物（ＦＣＦを含む）の潜在的な結合モードを調査するためのドッキング実験を実施した。ＵＲ２１４－９とその類似体はサイズが小さく、構造と対称性が似ていおり、それらは、２つの親油性置換芳香環が両側にある中央の尿素基で構成されている。化合物ＵＲ２１４－８、９、および１０は、本明細書に記載されている最も活性な化合物であり、これを考慮に入れて、それらは同様の結合モードを共有できると仮定した。したがって、化合物ＦＣＦ、ＵＲ２１４－８、ＵＲ２１４－９、およびＵＲ２１４－１０は、利用可能なセプチン－２二量体複合体の最高品質の構造であるＰＤＢ ＩＤ ２ＱＮＲのヌクレオチド結合部位にドッキングされた。ドッキングポーズを目視検査したところ、すべての高活性化合物が同様のコンフォメーションをとることができる２セットの低エネルギーポーズ（「セットＡ、上下」および「セットＢ、上下」）が特定された。

【0216】

２つのセットは、分子の３つの主要部分（中央の尿素部分、ピリジン、フェニル環）がほぼ同じ領域にあり、ＧＤＰでグアニンの代わりにピリジン環を有する点で互いに類似している（図９Ａ－９Ｄ）。セットＡでは、ピリジン窒素原子がグアニンカルボニル酸素原子の代わりに見られ、鎖ＡのＧ２４１の１５２骨格と水素結合を形成している。セットＡのＩＣＭスコアは、化合物ＵＲ２１４－８：－８．８５、化合物ＵＲ２１４－９：－８．５９、化合物ＵＲ２１４－１０：－１０．４、およびＦＣＦ：－７．２１であることがわかり、親ＦＣＦよりも合成された類似体の結合エネルギーが強いことを示している。セットＢは、Ａｕｔｏｄｏｃｋソフトウェアで取得した、同じ構造テンプレートで以前に報告されたＦＣＦのドッキングポーズと同じように見える。図９Ｃおよび９Ｄにおいて、ＵＲ２１４－９またはその類似体の原子と相互作用するアミノ酸残基の同一性が示される。

【0217】

ＵＲ２１４－９は、がん細胞の生存率を低下させ、細胞周期の進行を阻止する。ＵＲ２１４－９での処理は、７２時間の処理の間、ヒト膵臓がん細胞（ＢＸＰＣ－３およびＰＡＮＣ－１）細胞（図９Ａ）の生存率を低下させた。ＵＲ２１４－９で処理したＰＡＮＣ－１およびＢＸＰＣ－３細胞は、処理７２時間後のＬｉｖｅ－Ｄｅａｄ細胞キットによる染色およびフローサイトメトリーに基づいて、非生存細胞の大集団を示した。（図９Ｂおよび－９Ｃ）。細胞周期プロセスにおけるセプチンの役割を考慮して、１００ｎＭの非細胞毒性濃度でのＰＡＮＣ－１およびＢＸＰＣ－３膵臓がん細胞の細胞周期進行に対するＵＲ２１４－９の効果を分析した。１００ｎＭ用量のＵＲ２１４－９による処理は、ＰＡＮＣ－１で軽度のＳ期停止を引き起こしたが、ＢＸＰＣ－３細胞は非毒性用量で細胞周期分布に変化を示さなかった。用量を３μＭ濃度のＵＲ２１４－９に増やすと、ＢＸＰＣ－３細胞のＧ１期で圧倒的な停止を引き起こした（２１％と比較して約９５％）が、ＰＡＮＣ－１細胞はサブＧ１／Ｇ０期で完全な停止を示した。同様に、ＵＲ２１４－９の用量を増やして（３μＭ）処理したＪＩＭＴ－１細胞は、Ｇ１期の停止を示し、Ｇ０期での蓄積物が大幅に増加した。

【0218】

細胞周期タンパク質発現の分析。スポット抗体アレイを使用して、薬物処理またはナイーブＰＡＮＣ－１細胞で発現する複数の細胞周期関連タンパク質を同時に研究した。相対光子数の測定により、Ｃｕｌｌｉｎ－３、グリコーゲンシンターゼキナーゼ－３（ＧＳＫ－３ｂ）、ｐ１９ＡＲＦ、１４．３．３．Ｐａｎ、ＡＰＣ１１、ＡＰＣ２、ＡＴＭ、Ｃ－ａｂｌｅ、ＣＤ１４Ａホスファターゼ、ＣＤＣ２５Ｃ、ＣＤＣ３４、ＣＤＣ３７、ＣＤＣ４７、ＣＤＣ７、ＣＤＨ１、ＣＤＫ１およびＣＤＫ－３が、処理されたＰＡＮＣ－１とナイーブのＰＡＮＣ－１で＞２．０の倍率変化が意味のあるものとみなされる、最も発現および影響を受けたタンパク質であることが示された。β－アクチンは最も顕著な発現を示したが、発現レベルは処理後も変化しなかった。一方、Ｃｕｌｌｉｎ－３は、処理されたＰＡＮＣ－１細胞とナイーブなＰＡＮＣ－１細胞とで最も顕著な上方調節を示した。ＣｕｌｌｉｎベースのユビキチンリガーゼファミリーのメンバーであるＣｕｌｌｉｎ－３は、Ｈｒｔ１およびＢＴＢドメインを含むタンパク質と相互作用する。得られた複合体は、Ｃｕｌｌｉｎ３ベースのＥ３リガーゼとして機能し、特定の基質をユビキチン化および分解させ（Ｐｉｎｔａｒｄ，Ｌ．，Ｗｉｌｌｅｍｓ，Ａ．，Ｐｅｔｅｒ，Ｍ．Ｃｕｌｌｉｎ－ｂａｓｅｄ ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ ｌｉｇａｓｅｓ：Ｃｕｌ３－ＢＴＢ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ｊｏｉｎ ｔｈｅ ｆａｍｉｌｙ．ＥＭＢＯ Ｊ．２３，１６８１－７，２００４を参照されたい）、これはＣｕｌｌｉｎ－３を介したユビキチン化およびその後の分解の抑制におけるセプチンの役割を示している。

【0219】

ＵＲ２１４－９処理は、ＨＥＲ２＋異種移植腫瘍の成長を遅らせる。セプチン－２は胃がん細胞におけるＨＥＲ２発現を調節する（Ｋｕｍａｒ，Ｖ．，Ａｂｂａｓ，Ａ．，Ａｓｔｅｒ，Ｊ．Ｒｏｂｂｉｎｓ ｂａｓｉｃ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｅｌｓｅｖｉｅｒ／Ｓａｕｎｄｅｒｓ．２０１３；ｐ．６９７．ＩＳＢＮ ９７８１４３７７１７８１５を参照されたい）。ＨＥＲ２は様々な悪性腫瘍で過剰発現しており（Ｂｕｚａ，Ｎ．，Ｒｏｑｕｅ，ＤＭ．，Ｓａｎｔｉｎ，ＡＤ．“ＨＥＲ２／ｎｅｕ ｉｎ Ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ Ｃａｎｃｅｒ：Ａ Ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｔａｒｇｅｔ Ｗｉｔｈ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ”．Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ＆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．１３８，３４３－５０，２０１４、およびＲｕｓｃｈｏｆｆ，Ｊ．，Ｈａｎｎａ，Ｗ．，Ｂｉｌｏｕｓ，Ｍ．，Ｈｏｆｍａｎｎ，Ｍ．，Ｏｓａｍｕｒａ，Ｒ．Ｙ．，Ｐｅｎａｕｌｔ－Ｌｌｏｒｃａ，Ｆ．，ｖａｎ ｄｅ Ｖｉｊｖｅｒ，Ｍ，，Ｖｉａｌｅ，Ｇ．“ＨＥＲ２ ｔｅｓｔｉｎｇ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ：ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ”．Ｍｏｄｅｒｎ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．２５：６３７－５０，２０１２を参照されたい）、腫瘍の発生、進行、転移、化学療法抵抗性を促進することが知られている（Ｒｕｉｚ－Ｓａｅｎｚ，Ａ．，Ｄｒｅｙｅｒ，Ｃ．，Ｃａｍｐｂｅｌｌ，Ｍ．Ｒ．，Ｓｔｅｒｉ，Ｖ．，Ｇｕｌｉｚｉａ，Ｎ．，Ｍｏａｓｓｅｒ，Ｍ．Ｍ．ＨＥＲ２ Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ Ｔｕｍｏｒｓ Ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｏｆ ＨＥＲ３．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．７８，３６４５－３６５８，２０１８を参照されたい）。セプチンは、腫瘍細胞の原形質膜でＨＥＲ２受容体を保護および安定化して、ＨＥＲ２の組織化された腫瘍形成を永続させることが示されている（Ｍａｒｃｕｓ，Ｅ．Ａ．，Ｔｏｋｈｔａｅｖａ，Ｅ．，Ｔｕｒｄｉｋｕｌｏｖａ，Ｓ．，Ｃａｐｒｉ，Ｊ．，Ｗｈｉｔｅｌｅｇｇｅ，Ｊ．Ｐ．，Ｓｃｏｔｔ，Ｄ．Ｒ．，Ｓａｃｈｓ，Ｇ．，Ｂｅｒｄｉｔｃｈｅｖｓｋｉ，Ｆ．，Ｖａｇｉｎ，Ｏ．Ｓｅｐｔｉｎ ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＥｒｂＢ２／ＨＥＲ２ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．４７３，１７０３－１８，２０１６を参照されたい）。セプチン－２を標的とすることが、ＨＥＲ２の組織化された腫瘍形成を制御するための新しいアプローチとして潜在的に現れ得ると仮定した。ＭＴＳアッセイは、ＵＲ２１４－９処理が、薬物曝露の４８時間までに、用量依存的にＢＸＰＣ－３およびＰＡＮＣ－１膵臓がんの増殖を低減させることを示した（図１０Ａ）。ＵＲ２１４－９［３μＭ］による処理では、ＢＸＰＣ－３細胞の全集団をＬｉｖｅ－ｄｅａｄキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｉｎｃ）で分析したところ、４８時間の薬物曝露中に２９．４％の死細胞が生成された。同様に、ＰＡＮＣ－１細胞は、ＵＲ２１４－９［３μＭ］で処理すると、３８％を超える死細胞の２０３集団を示した。次に、インビボでの膵臓がん異種移植片腫瘍成長に対するＵＲ２１４－９処理の影響を決定した。ＨＥＲ２＋ＰＡＮＣ－１細胞を異種移植したマウスは、有意に遅延した増殖を示した（ｐ＜０．０００１）（図１０Ｄ）。ＵＲ２１４－９の抗腫瘍効果は、ＪＩＭＴ１（乳がん）細胞に由来するＨＥＲ２陽性異種移植片に対してさらに評価された。インビトロでのＵＲ２１４－９曝露によるＪＩＭＴ－１細胞の細胞死の増加（図１０Ｅ）に加えて、ＵＲ２１４－９で処理されたＪＩＭＴ１異種移植腫瘍は、腫瘍の体積と重量の両方の測定に基づいて（図１０Ｇ）、有意な増殖制御をもたらした（図１０Ｆ）。

【0220】

ＵＲ２１４－９はＨＥＲ２の発現を阻害し、ＳＴＡＴ－３のリン酸化を阻止する。膵臓がん細胞ＰＡＮＣ－１（ＨＥＲ２＋）の全細胞溶解物のイムノブロット分析で、ＵＲ２１４－９で７２時間処理された細胞はＰＡＮＣ－１におけるＨＥＲ２発現の用量依存的な減少を示した（図１１Ａ、上）。ＳＴＡＴ３のリン酸化は、ＨＥＲ２活性化の下流の読み出しであり３３、したがって、ＵＲ２１４－９処理は、ＰＡＮＣ－１細胞のリン酸化されたＳＴＡＴ－３も低減させた（図１１Ａ、下）。同様に、ＵＲ２１４－９処理は、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＪＩＭＴ－１、およびＭＣＦ－７乳がん細胞のパネルでＨＥＲ２発現を低減させ（図１１Ｂ）各細胞株でＳＴＡＴ－３のリン酸化を低減させた（図１１Ｃ）。我々は最近、セプチン－２が卵巣がんで高度に過剰発現していることを示した（Ｊａｍｅｓ，Ｎ．Ｅ．，Ｃａｎｔｉｌｌｏ，Ｅ．，Ｙａｎｏ，Ｎ．，Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ，Ｃ．Ｏ．，ＤｉＳｉｌｖｅｓｔｒｏ，．ＰＡ．，Ｈｏｖａｎｅｓｉａｎ，Ｖ．，Ｒａｏ，Ｒ．Ｓ．Ｐ．，Ｋｉｍ，Ｋ．Ｋ．，Ｍｏｏｒｅ，Ｒ．Ｇ．，Ａｈｓａｎ，Ｎ．，Ｒｉｂｅｉｒｏ，Ｊ．Ｒ．Ｓｅｐｔｉｎ－２ ｉｓ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｖｉａ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．１０，２９５９－２９７２，２０１９を参照されたい）。ＪＩＭＴ－１およびＰＡＮＣ－１細胞株と同様に、ＳＫＯＶ－３、プラチナ耐性の卵巣がん細胞株はＨＥＲ２増幅を特徴としている（ＤｅＦａｚｉｏ－Ｅｌｉ，Ｌ．，Ｓｔｒｏｍｍｅｎ，Ｋ．，Ｄａｏ－Ｐｉｃｋ，Ｔ．，Ｐａｒｒｙ，Ｇ．，Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｌ．，Ｗｉｎｓｌｏｗ，Ｊ．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ａｓｓａｙｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ＨＥＲ１－ＨＥＲ２ ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ａｎｄ ｂｒｅａｓｔ ｔｕｍｏｒｓ：ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｄｒｕｇ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ．Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１３（２），Ｒ４４，２０１１、およびＥｎｇｌｉｓｈ，Ｄ．Ｐ．，Ｒｏｑｕｅ，Ｄ．Ｍ．，Ｓａｎｔｉｎ，Ａ．Ｄ．ＨＥＲ２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｅｙｏｎｄ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ：ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．Ｍｏｌ．Ｄｉａｇｎ．Ｔｈｅｒ．１７，８５－９９，２０１３を参照されたい）。したがって、ＳＫＯＶ－３細胞株由来の異種移植片を使用して、ＨＥＲ２増幅異種移植片腫瘍に対するＵＲ２１４－９の抗腫瘍効果を検証した。ＵＲ２１４－９とトラスツズマブの併用の結果をさらに確認するために、マウスをトラスツズマブ単独またはＵＲ２１４－９との併用でさらに処理した。図１１Ｄに示すように、ＵＲ２１４－９とトラスツズマブの両方が腫瘍の成長を制御した。この組み合わせは明らかに、両方の薬剤単独よりも腫瘍の成長を大幅に制御した。ＵＲ２１４－９とトラスツズマブの併用の真の利点は、処理を中止し、腫瘍を成長させたときに明らかになった。図１１Ｄに示すように、ＵＲ２１４－９およびトラスツズマブ群の腫瘍サイズは、処理を中止したときに対照の平均サイズに達したが、組み合わせは腫瘍成長に対するより大きな制御を維持した（組み合わせｐ＜０．０００１＊＊＊＊対、ビヒクル対ＵＲ２１４－９およびトラスツズマブに対するｐ＝０．０００４＊＊＊および０．０００１＊＊＊）。抽出された腫瘍の重さを量ったとき、組み合わせ群はより小さな腫瘍の存在を示したが、ＵＲ２１４－９群とトラスツズマブ群の両方がビヒクル群で見られた平均サイズと一致する腫瘍を生成した（図１１Ｅ）。

【0221】

全トランスクリプトーム解析により、ＵＲ－２１４－９が選択的であることが明らかとなった。ＲＮＡ－Ｓｅｑは、ＪＩＭＴ－１およびＰａｎｃ－１細胞株で、それぞれ４つの複製からなる３つの処理グループ（１０ｎＭアファチニブ、１μＭ ＵＲ２１４－９、およびＤＭＳＯ）で実行された。試料は、平均深度５，８００万回の読み取りでシーケンスされ、各試料の読み取りデータの９０％以上が、アダプターと品質のトリミング後にヒト参照ゲノム（ｈｇ３８）に一意にアラインメントされた。薬物処理を対照群と比較し、差次的に発現する遺伝子を決定した（調整されたｐ値＜０．０５）。アファチニブ処理と対照との間に１２３６個（７１３個のアップおよび５２３個のダウン）の調節不全遺伝子があった（図１２Ａおよび１２Ｃ）。ＥＮＲＩＣＨＲ Ｗｅｂツールを使用して、上方調節された遺伝子（ＡＬＰＰ、ＴＲＩＭ２９、ＣＹＰ１Ａ１）が細胞外マトリックスの組織化とカドヘリン結合に関連し、下方調節された遺伝子（ＥＧＲ１、ＤＵＳＰ６、ＨＭＧＡ２など）がプリン代謝とリボソーム生合成に関連していることを確認した。逆に、１１個（７個のアップおよび４個のダウン）の遺伝子のみが、ＵＲ２１４－９処理と対照の間で調節不全と呼ばれた（図１２Ｂおよび１２Ｄ）。ＰＡＮＣ－１細胞株に関しては、対照群と比較してアファチニブ処理で有意に差次的に発現すると決定された遺伝子は２つ（ＣＯＬ１３Ａ１およびＰＲＳＳ２２）のみであり、ＵＲ２１４－９と対照の間で差次的に発現する遺伝子は呼ばれなかった。

【0222】

考察
セプチンと悪性腫瘍との関連性が次々と明らかになり、がん細胞におけるセプチンの異常な機能を阻害するセプチン標的治療薬の特定が重要となっている。セプチン－２４０を本質的に強化するＦＣＦを出発点として、細胞を殺したり細胞内のセプチンタンパク質レベルを変化させたりすることなく、がん細胞のセプチン－２および－９フィラメントアセンブリを分解する小分子であるＵＲ２１４－９が開発された。ＵＲ２１４－９処理を介してオリゴマーのセプチンフィラメント構造を破壊することは、細胞質分裂に影響を与え、がん細胞の増殖を制御するための鍵となる可能性がある。ＵＲ２１４－９によるセプチンフィラメントの破壊は、インビトロでの膵臓がん細胞（および乳がん、卵巣子宮内膜がん、肺がん、および腎臓がん）の増殖を低減させただけでなく、ＵＲ２１４－９で処理された乳がん、卵巣、膵臓および肺の悪性腫瘍の異種移植腫瘍も腫瘍成長の低減を示した。興味深いことに、トラスツズマブとの併用により、ＨＥＲ２陽性ＳＫＯＶ－３異種移植片の成長をより強力に制御できるようになった（図１１Ｄ）。

【0223】

ＨＥＲ２陽性卵巣がん異種移植モデルにおけるＵＲ２１４－９との併用処理によるトラスツズマブの抗腫瘍効果の増強は、おそらくセプチン－２とＨＥＲ２の関連に起因している。セプチン－２はがん細胞でＨＥＲ２シグナル伝達を維持することが示されている。セプチンは、腫瘍細胞の原形質膜にあるＨＥＲ２受容体を保護および安定化して、ＨＥＲ２で組織化された発がん性シグナル伝達と腫瘍形成を永続させる。セプチンを標的とすることで、ＨＥＲ２陽性の乳房、膵臓、および卵巣や肺などの他の悪性腫瘍の生存率を改善できると予想される。ＨＥＲ２の過剰発現は、侵襲性の乳房悪性腫瘍と患者の生存率の低下につながる（Ｓｌａｍｏｎ，Ｄ．Ｊ．，Ｃｌａｒｋ，Ｇ．Ｍ．，Ｗｏｎｇ，Ｓ．Ｇ．，Ｌｅｖｉｎ，Ｗ．Ｊ．，Ｕｌｌｒｉｃｈ，Ａ．，ＭｃＧｕｉｒｅ，Ｗ．Ｌ．Ｈｕｍａｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ：ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｌａｐｓｅ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｗｉｔｈ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＨＥＲ－２／ｎｅｕ ｏｎｃｏｇｅｎｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３５：１７７－１８２，１９８７を参照されたい）。ＨＥＲ２＋悪性腫瘍の治療法の現在のレパートリーは不十分である。ＨＥＲ２＋乳がん患者の６０％より多くがトラスツズマブ治療に反応せず、治療に対する抵抗性は事実上すべての患者で急速に発症する（Ｐｏｈｌｍａｎｎ，Ｐ．Ｒ．，Ｍａｙｅｒ，Ｉ．Ａ．，Ｍｅｒｎａｕｇｈ，Ｒ．Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ ｉｎ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１５：７４７９－７４９１，２００９を参照されたい）。さらに、トラスツズマブが固形乳房腫瘍に浸透して、耐性および転移を促進する分泌型（短縮型）のＨＥＲ２を遮断できないため、ＨＥＲ２で組織化された乳房腫瘍の成長を完全かつ持続的に制御する上での有用性が制限される（Ｈａｙｅｓ，Ｄ．Ｆ．，Ｙａｍａｕｃｈｉ，Ｈ．，Ｂｒｏａｄｗａｔｅｒ，Ｇ．，Ｃｉｒｒｉｎｃｉｏｎｅ，Ｃ．Ｔ．，Ｒｏｄｒｉｇｕｅ，Ｓ．Ｐ．，Ｂｅｒｒｙ，Ｄ．Ａ．，Ｙｏｕｎｇｅｒ，Ｊ．，Ｐａｎａｓｃｉ，Ｌ．Ｌ．，Ｍｉｌｌａｒｄ，Ｆ．，Ｄｕｇｇａｎ，Ｄ．Ｂ．，Ｎｏｒｔｏｎ，Ｌ．，Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ，Ｉ．Ｃ．；Ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｇｒｏｕｐ Ｂ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ＨＥＲ－２／ｅｒｂＢ－２／ｃ－ｎｅｕ（ＨＥＲ－２）ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｏｍａｉｎ ａｓ ａ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ：Ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｇｒｏｕｐ Ｂ Ｓｔｕｄｙ ８６６２．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．７，２７０３－１１，２００１を参照されたい）。同様に、ＨＥＲ２＋乳がん患者の脳転移の治療または予防は、とりわけトラスツズマブ治療後の段階では困難である（Ｂｅｌｋａｃｅｍｉ，Ｙ．，Ｈａｎｎａ，Ｎ．Ｅ．，Ｂｅｓｎａｒｄ，Ｃ．，Ｍａｊｄｏｕｌ，Ｓ．，Ｇｌｉｇｏｒｏｖ，Ｊ．Ｌｏｃａｌ ａｎｄ Ｒｅｇｉｏｎａｌ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅｓ：Ｓａｌｖａｇｅ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｏｐｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｒａ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｕｂｔｙｐｅｓ．Ｆｒｏｎｔ Ｏｎｃｏｌ．８，１１２，２０１８）。患者の約３分の２は、トラスツズマブに対する頭蓋外疾患の制御または奏功にもかかわらず、脳転移を発症する（Ｃｌａｙｔｏｎ，Ａ．Ｊ．，Ｄａｎｓｏｎ，Ｓ．，Ｊｏｌｌｙ，Ｓ．，Ｒｙｄｅｒ，Ｗ．Ｄ．，Ｂｕｒｔ，Ｐ．Ａ．，Ｓｔｅｗａｒｔ，Ａ．Ｌ．，Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ，Ｐ．Ｍ．，Ｗｅｌｃｈ，Ｒ．Ｓ．，Ｍａｇｅｅ，Ｂ．，Ｗｉｌｓｏｎ，Ｇ．，Ｈｏｗｅｌｌ，Ａ．，Ｗａｒｄｌｅｙ，Ａ．Ｍ．Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ ｆｏｒ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ．Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ９１，６３９－６４３，２００４を参照されたい）。トラスツズマブは中枢神経系に浸透しないため、脳は聖域として機能する可能性がある（Ｍｏｒｒｉｓ ＰＧ，ＭｃＡｒｔｈｕｒ ＨＬ，Ｈｕｄｉｓ ＣＡ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｏｐｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ．Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．１０，９６７－９８１，２００９を参照されたい）。血液脳関門（ＢＢＢ）浸透剤は、ＨＥＲ２＋陽性がん患者の脳転移をより適切に制御するために必要である。ＵＲ２１４－９は、ＢＢＢを通過しやすくする小さな極性表面積の特徴の構造的属性を備えている（Ｕｒ２１４－９に対する計算＝５３．４９に対し＜９０がＢＢＢを通過するため必要とされる）。

【0224】

したがって、ＵＲ２１４－９は、ＨＥＲ２＋がんからの脳転移を有する患者の転帰を改善する可能性がある。

【0225】

セプチンのシグナル伝達の関連性は完全には理解されていない。セプチンとＵＲ２１４－９処理がもたらす摂動のシグナル伝達の関連性を決定するために、ＵＲ２１４－９および、比較対象として、ＨＥＲ２標的療法であるアファチニブで処理された乳がんおよび膵臓がん細胞のグローバルｒｎａ－ｓｅｑ解析を実施した。図１２Ａ～１２Ｄに示されるように、アファチニブ処理は明らかにＰＡＮＣ－１細胞の転写プロファイルに最も大きな影響を及ぼしたが、ＤＭＳＯおよびＵＲ２１４－９による処理はトランスクリプトームにあまり影響を与えなかった。ＵＲ２１４－９処理と対照の間に差次的に発現する遺伝子がないことは、ＵＲ２１４－９の作用機序が非転写であり、ＵＲ２１４－９による処理が全体的な転写応答を誘発しないように思われることを示唆している。

【0226】

まとめると、この例では、セプチンの異常な発現ががん患者の予後不良を示していることを示している。ＵＲ２１４－９は、これまでに説明されていない細胞の薬理学的および細胞骨格反応であるセプチン－２および－９フィラメントの壊滅を誘導し、がん細胞の増殖と腫瘍の成長を制御することができる小分子の最初のプロトタイプである。さらに、ＵＲ２１４－９の重要な薬理学的特徴は、限定されたオフターゲット関与の利点である。図１２Ａ～１２Ｄに示すように、ＪＩＭＴ－１乳がん細胞における１２００を超える遺伝子の遺伝子発現に影響を与えるＥＧＦＲ標的療法であるアファチニブと比較して、１００倍高い用量でもＵＲ２１４－９処理は２０未満の遺伝子にしか有意に影響を及ぼさなかった。ＵＲ２１４－９はＦＣＦの密接な構造類似体であるが、ＵＲ２１４－９は薬理学的にＦＣＦとは大きく異なる。ＦＣＦはセプチン２を強化することが示されているが、ＵＲ２１４－９はセプチン－２とセプチン－９のフィラメント状の集合体を解体する。分子ドッキングによって計算されたＩＣＭスコアは、ＦＣＦよりもセプチン－２：セプチン－２二量体複合体とのＵＲ２１４－９の結合親和性が高いことを示した。弱い薬理学的効果、オフターゲット効果、およびセプチン－２フィラメントの強化に関連する機能のために臨床的に不適当であるＦＣＦを除いて、ＵＲ２１４－９は、ナノモル濃度（７０ｎＭ～１ｕＭ）でセプチンの構造配列を解体できる、これまでに説明されている唯一のセプチンモジュレーターである可能性がある。乳がん、膵臓がん、卵巣がん、および肺がんの異種移植モデルにおける予備的な抗腫瘍反応（データは示していない）と、ＨＥＲ２発現異種移植腫瘍におけるトラスツズマブの反応を有意に増強するその処理能力を考えると、セプチンを解体することは、腫瘍の成長を防ぐための効果的で臨床的に有望なアプローチであることは明らかであるが、投与量、送達処方、および投与頻度を最適化する必要があり、腫瘍の成長を超えてより完全な制御を達成するために相乗的または少なくとも相加的な組み合わせ剤を特定する必要がある。トラスツズマブとの併用による有望な結果に基づいて、ＵＲ２１４－９の臨床的有用性を高めるために、乳がんモデルにおけるＵＲ２１４－９とパクリタキセルおよびトラスツズマブの併用の結果を現在評価している。

【0227】

本発明は、その詳細な説明と併せて説明されてきたが、前述の説明は、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲を説明することを意図しており、限定するものではない。その他の態様、利点、および変更は、以下の特許請求の範囲内にある。

【0228】

本明細書で参照される特許および科学文献は、当業者が利用できる知識を確立している。本明細書に引用されているすべての米国特許および公開済みまたは未公開の米国特許出願は、参照により組み込まれる。本明細書で引用されたすべての公開された外国特許および特許出願は、参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に引用されているアクセッション番号によって示されるＧｅｎｂａｎｋおよびＮＣＢＩの提出物は、参照により本明細書に組み込まれる。本明細書で引用されている他のすべての公開された参考文献、文書、原稿、および科学文献は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0229】

本発明は、特にその好ましい実施形態を参照して示され、説明されてきたが、添付の請求項によって包含される本発明の範囲から逸脱することなく、その形態および詳細の種々の変更がなされ得ることが当業者によって理解されよう。

【図1】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図2E】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図4D】

【図4E】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図6A】

【図6B】

【図6C】

【図6D】

【図6E】

【図6F】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図7D】

【図7E】

【図7F】

【図7G】

【図8】

【図9A】

【図9B】

【図9C】

【図9D】

【図10A】

【図10B】

【図10C】

【図10D】

【図10E】

【図10F】

【図10G】

【図11A】

【図11B】

【図11C】

【図11D】

【図11E】

【図12A】

【図12B】

【図12C】

【図12D】

【図13】

【国際調査報告】