特表 2022-545259 動物用の抗ＩＬ３１抗体

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-10-26

(54)【発明の名称】動物用の抗ＩＬ３１抗体

(51)【国際特許分類】

   C12N 15/13 20060101AFI20221019BHJP

   C07K 16/24 20060101ALI20221019BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20221019BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20221019BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20221019BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20221019BHJP

   C12P 21/02 20060101ALI20221019BHJP

   C12P 21/08 20060101ALI20221019BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20221019BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20221019BHJP

   A61P 17/04 20060101ALI20221019BHJP

   A61P 17/06 20060101ALI20221019BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20221019BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20221019BHJP

   A61P 11/06 20060101ALI20221019BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20221019BHJP

【ＦＩ】

C12N15/13

C07K16/24 ZNA

C12N1/15

C12N1/19

C12N1/21

C12N5/10

C12P21/02 C

C12P21/08

A61K39/395 N

A61K45/00

A61P17/04

A61P17/06

A61P17/00

A61P37/08

A61P11/06

A61P43/00 121

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022511238

(86)(22)【出願日】2020-08-28

(85)【翻訳文提出日】2022-04-04

(86)【国際出願番号】 US2020048618

(87)【国際公開番号】W WO2021041972

(87)【国際公開日】2021-03-04

(31)【優先権主張番号】62/893,799

(32)【優先日】2019-08-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/894,526

(32)【優先日】2019-08-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】517299032

【氏名又は名称】キンドレッド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110002077

【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人

(72)【発明者】

【氏名】リー， シー ジアン

(72)【発明者】

【氏名】グェン， ラム

(72)【発明者】

【氏名】チャン， ハンチュン

【テーマコード（参考）】

4B064

4B065

4C084

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B064AG26

4B064AG27

4B064BJ12

4B064CA02

4B064CA05

4B064CA08

4B064CA09

4B064CA10

4B064CA11

4B064CA19

4B064CC24

4B064DA01

4B064DA04

4B064DA13

4B065AA01X

4B065AA57X

4B065AA83X

4B065AA86X

4B065AA87X

4B065AA87Y

4B065AA90X

4B065AA90Y

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA24

4B065CA25

4B065CA43

4B065CA46

4C084AA19

4C084MA02

4C084NA05

4C084NA14

4C084ZA591

4C084ZA891

4C084ZB131

4C084ZC202

4C084ZC75

4C085AA14

4C085BB36

4C085BB41

4C085BB43

4C085CC23

4C085EE01

4C085EE03

4C085GG01

4C085GG03

4C085GG04

4C085GG06

4C085GG10

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045CA40

4H045DA02

4H045DA75

4H045DA76

4H045EA20

4H045EA50

4H045FA74

(57)【要約】

イヌＩＬ３１及びネコＩＬ３１への結合性が増強された抗ＩＬ３１抗体に関する様々な実施態様が提供される。そのような抗体は、イヌ及びネコなどのコンパニオンアニマルにおけるＩＬ３１誘発状態を治療する方法において使用できる。イヌＩＬ３１及びネコＩＬ３１への結合性が増強された抗体が提供される。イヌ及びネコＩＬ３１に結合する抗体を形成することができる抗体重鎖及び軽鎖がまた提供される。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

イヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する単離された抗体であって、
ａ）配列番号：１４若しくは配列番号：１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ３配列を含む重鎖；及び／又は
ｂ）配列番号：２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ１配列を含む軽鎖；及び／又は
ｃ）配列番号：２３若しくは配列番号：２４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ３配列を含む軽鎖
を含む、抗体。

【請求項2】

イヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する単離された抗体であって、
ａ）配列番号：１１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ１配列、配列番号：１２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ２配列、及び配列番号：１３、配列番号：１４、若しくは配列番号：１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ３配列を含む重鎖；及び／又は
ｂ）配列番号：２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ１配列、配列番号：２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ２配列、及び配列番号：２２、配列番号：２３、若しくは配列番号：２４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ３配列を含む軽鎖
を含む、抗体。

【請求項3】

抗体が、バイオレイヤー干渉法で測定して、５×１０^－８Ｍ未満、１×１０^－８Ｍ未満、５×１０^－９Ｍ未満、１×１０^－９Ｍ未満、５×１０^－１０Ｍ未満、１×１０^－１０Ｍ未満、５×１０^－１１Ｍ未満、１×１０^－１１Ｍ未満、５×１０^－１２Ｍ未満、又は１×１０^－１２Ｍ未満の解離定数（Ｋｄ）でイヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する、請求項１又は２に記載の抗体。

【請求項4】

ＳＴＡＴ－１、ＳＴＡＴ－３、及び／又はＳＴＡＴ－５リン酸化の低下によって測定されて、抗体がコンパニオンアニマル種においてＩＬ３１シグナル伝達機能を低下させる、請求項１から３の何れか一項に記載の抗体。

【請求項5】

コンパニオンアニマル種がイヌ又はネコである、請求項４に記載の抗体。

【請求項6】

イムノブロット解析及び／又はバイオレイヤー干渉法によって決定されて、抗体がイヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する、請求項１から５の何れか一項に記載の抗体。

【請求項7】

抗体がイヌＩＬ３１への結合においてモノクローナルＭ１４抗体と競合する、請求項１から６の何れか一項に記載の抗体。

【請求項8】

抗体がネコＩＬ３１への結合においてモノクローナルＭ１４抗体と競合する、請求項１から７の何れか一項に記載の抗体。

【請求項9】

イムノブロット解析及び／又はバイオレイヤー干渉法によって決定されて、抗体がヒトＩＬ３１に結合しない、請求項１から８の何れか一項に記載の抗体。

【請求項10】

抗体がモノクローナル抗体である、請求項１から９の何れか一項に記載の抗体。

【請求項11】

抗体が、イヌ化、ネコ化、又はキメラ抗体である、請求項１から１０の何れか一項に記載の抗体。

【請求項12】

（ａ）配列番号：１６の可変領域重鎖フレームワーク１（ＨＣ－ＦＲ１）配列；（ｂ）配列番号：１７のＨＣ－ＦＲ２配列；（ｃ）配列番号：１８のＨＣ－ＦＲ３配列；（ｄ）配列番号：１９のＨＣ－ＦＲ４配列；（ｅ）配列番号：２５の可変領域軽鎖フレームワーク１（ＬＣ－ＦＲ１）配列；（ｆ）配列番号：２６のＬＣ－ＦＲ２配列；（ｇ）配列番号：２７のＬＣ－ＦＲ３配列；又は（ｈ）配列番号：２８のＬＣ－ＦＲ４配列のうちの一又は複数を更に含む、請求項１から１１の何れか一項に記載の抗体。

【請求項13】

（ａ）配列番号：５５若しくは配列番号：５６の可変領域重鎖フレームワーク１（ＨＣ－ＦＲ１）配列；（ｂ）配列番号：５７、配列番号：５８、配列番号：５９のＨＣ－ＦＲ２配列；（ｃ）配列番号：６０若しくは配列番号：６１のＨＣ－ＦＲ３配列；（ｄ）配列番号：６２若しくは配列番号：６３のＨＣ－ＦＲ４配列；（ｅ）配列番号：６４若しくは配列番号：６５の可変領域軽鎖フレームワーク１（ＬＣ－ＦＲ１）配列；（ｆ）配列番号：６６、配列番号：６７、若しくは配列番号：６８のＬＣ－ＦＲ２配列；（ｇ）配列番号：６９若しくは配列番号：７０のＬＣ－ＦＲ３配列；又は（ｈ）配列番号：７１若しくは配列番号：７２のＬＣ－ＦＲ４配列のうちの一又は複数を更に含む、請求項１から１１の何れか一項に記載の抗体。

【請求項14】

抗体が、
ａ）（ｉ）配列番号：５、配列番号：６、若しくは配列番号：７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変重鎖配列；（ｉｉ）配列番号：８、配列番号：９、若しくは配列番号：１０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変軽鎖配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）のような可変重鎖配列と（ｉｉ）のような可変軽鎖配列；あるいは
ｂ）（ｉ）配列番号：４９、配列番号：５０、配列番号：５１、若しくは配列番号：９０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変重鎖配列；（ｉｉ）配列番号：５２、配列番号：５３、若しくは配列番号：５４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変軽鎖配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）のような可変重鎖配列と（ｉｉ）のような可変軽鎖配列
を含む、請求項１から１３の何れか一項に記載の抗体。

【請求項15】

抗体が、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７、配列番号：４９、配列番号：５０、配列番号５１、又は配列番号：９０の可変重鎖配列を含む、請求項１から１４の何れか一項に記載の抗体。

【請求項16】

抗体が、配列番号：８、配列番号：９、配列番号：１０、配列番号：５２、配列番号：５３、若しくは配列番号：５４の可変軽鎖配列を含む、請求項１から１５の何れか一項に記載の抗体。

【請求項17】

抗体が、
ａ）配列番号：５、配列番号：７、若しくは配列番号：８の可変重鎖配列；及び配列番号：９、配列番号：１０、若しくは配列番号：１１の可変軽鎖配列；又は
ｂ）配列番号：４９、配列番号：５０、配列番号：５１、若しくは配列番号：９０の可変重鎖配列；及び配列番号：５２、配列番号：５３、若しくは配列番号：５４の可変軽鎖配列
を含む、請求項１から１６の何れか一項に記載の抗体。

【請求項18】

抗体がイヌ若しくはネコ定常重鎖領域及び／又はイヌ若しくはネコ定常軽鎖領域を含む、請求項１から１７の何れか一項に記載の抗体。

【請求項19】

抗体が、（ａ）ＩｇＧ－Ａ、ＩｇＧ－Ｂ、ＩｇＧ－Ｃ、及びＩｇＧ－Ｄ定常領域から選択されるイヌ重鎖定常領域；又は（ｂ）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、及びＩｇＧ２ｂ定常領域から選択されるネコ重鎖定常領域を含む、請求項１から１８の何れか一項に記載の抗体。

【請求項20】

抗体が、
ａ）（ｉ）配列番号：３４、配列番号：３５、配列番号：３６、配列番号：３７、配列番号：３８、配列番号：３９、配列番号：４０、配列番号：４１、配列番号：４２、配列番号：４３、配列番号：４４、若しくは配列番号：４５の重鎖アミノ酸配列；（ｉｉ）配列番号：４６、配列番号：４７、若しくは配列番号：４８の軽鎖アミノ酸配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）のような重鎖アミノ酸配列と（ｉｉ）のような軽鎖アミノ酸配列；あるいは
ｂ）（ｉ）配列番号：７３、配列番号：７４、配列番号：７５、若しくは配列番号：９１の重鎖アミノ酸配列；（ｉｉ）配列番号：７６、配列番号：７７、若しくは配列番号７８の軽鎖アミノ酸配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）のような重鎖アミノ酸配列と（ｉｉ）のような軽鎖アミノ酸配列
を含む、請求項１から１９の何れか一項に記載の抗体。

【請求項21】

配列番号：３の可変重鎖アミノ酸配列及び／又は配列番号：４の可変軽鎖アミノ酸配列を含む、単離された抗体。

【請求項22】

配列番号：５、配列番号：６、又は配列番号：７の可変重鎖アミノ酸配列を含む、単離された抗体。

【請求項23】

配列番号：８、配列番号：９、又は配列番号：１０の可変軽鎖アミノ酸配列を含む、単離された抗体。

【請求項24】

抗体が、配列番号：８、配列番号：９、又は配列番号：１０の可変軽鎖アミノ酸配列を含む、請求項２１に記載の単離された抗体。

【請求項25】

配列番号：４９、配列番号：５０、配列番号：５１、又は配列番号：９０の可変重鎖アミノ酸配列を含む、単離された抗体。

【請求項26】

配列番号：５２、配列番号：５３、又は配列番号：５４の可変軽鎖アミノ酸配列を含む、単離された抗体。

【請求項27】

抗体が、配列番号：５２、配列番号：５３、又は配列番号：５４の可変軽鎖アミノ酸配列を含む、請求項１から２４の何れか一項に記載の単離された抗体。

【請求項28】

抗体が、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、及びＦａｂ’－ＳＨから選択される抗体断片である、請求項１から２７の何れか一項に記載の抗体。

【請求項29】

抗体が二重特異性であり、抗体がＩＬ３１と、ＩＬ１７、ＴＮＦα、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２５、ＩＬ４、ＩＬ１３、ＩＬ２３、ＩｇＥ、ＣＤ１１α、ＩＬ６Ｒ、α４－インテルグリン、ＩＬ１２、ＩＬ１β、又はＢｌｙＳから選択される一又は複数の抗原に結合する、請求項１から２８の何れか一項に記載の抗体。

【請求項30】

請求項１から２９の何れか一項に記載の抗体をコードする単離された核酸。

【請求項31】

請求項３０に記載の核酸を含む宿主細胞。

【請求項32】

請求項３１に記載の宿主細胞を培養し、抗体を単離することを含む、抗体を産生する方法。

【請求項33】

請求項１から２９の何れか一項に記載の抗体と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。

【請求項34】

ＩＬ３１誘発状態を有するコンパニオンアニマル種を治療する方法であって、治療有効量の請求項１から２９の何れか一項に記載の抗体又は請求項３３に記載の薬学的組成物をコンパニオンアニマル種に投与することを含む、方法。

【請求項35】

コンパニオンアニマル種がイヌ又はネコである、請求項３４に記載の方法。

【請求項36】

ＩＬ３１誘発状態がそう痒性又はアレルギー性状態である、請求項３４又は請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

ＩＬ３１誘発状態が、アトピー性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、そう痒症、喘息、乾癬、強皮症及び湿疹から選択される、請求項３４から３６の何れか一項に記載の方法。

【請求項38】

抗体又は薬学的組成物が非経口的に投与される、請求項３４から３７の何れか一項に記載の方法。

【請求項39】

抗体又は薬学的組成物が、筋肉内経路、腹腔内経路、脳脊髄内経路、皮下経路、動脈内経路、滑液中経路、髄腔内経路、又は吸入経路によって投与される、請求項３４から３８の何れか一項に記載の方法。

【請求項40】

抗体又は薬学的組成物と組み合わせて、Ｊａｋ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、又はＭＡＰＫ阻害剤を投与することを含む、請求項３４から３９の何れか一項に記載の方法。

【請求項41】

抗体又は薬学的組成物と組み合わせて、抗ＩＬ１７抗体、抗ＴＮＦα抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＩＬ４抗体、抗ＩＬ１３抗体、抗ＩＬ２３抗体、抗ＩｇＥ抗体、抗ＣＤ１１α抗体、抗ＩＬ６Ｒ抗体、抗ＩＬ６Ｒ抗体α４－インテルグリン抗体、抗ＩＬ１２抗体、抗ＩＬ１β抗体、及び抗ＢｌｙＳ抗体から選択される一又は複数の抗体を投与することを含む、請求項３４から４０の何れか一項に記載の方法。

【請求項42】

細胞におけるＩＬ３１シグナル伝達機能を低下させる方法であって、細胞外ＩＬ３１への抗体の結合を許容する条件下で、請求項１から２９の何れか一項に記載の抗体又は請求項３３に記載の薬学的組成物を細胞に曝露し、それにより、ＩＬ３１受容体への結合を低下させ、且つ／又は細胞によるＩＬ３１シグナル伝達機能を低下させることを含む、方法。

【請求項43】

細胞がエクスビボで抗体又は薬学的組成物に曝露される、請求項４２に記載の方法。

【請求項44】

細胞がインビボで抗体又は薬学的組成物に曝露される、請求項４２に記載の方法。

【請求項45】

細胞がイヌ細胞又はネコ細胞である、請求項４２から４４の何れか一項に記載の方法。

【請求項46】

コンパニオンアニマル種からのサンプル中のＩＬ３１を検出する方法であって、抗体のＩＬ３１への結合を許容する条件下で、サンプルを請求項１から２９の何れか一項に記載の抗体又は請求項３３に記載の薬学的組成物と接触させることと、抗体とサンプル中のＩＬ３１の間に複合体が形成されるかどうかを検出することを含む、方法。

【請求項47】

サンプルが、イヌ又はネコから得られた生物学的サンプルである、請求項４６に記載の方法。

【請求項48】

ＩＬ３１アンタゴニストを同定する方法であって、改変された細胞株をＩＬ３１アンタゴニスト候補と接触させることを含み、改変された細胞株がイヌ又はネコに由来しない哺乳動物細胞株であり、改変された細胞株がイヌＩＬ３１Ｒａ及び／又はネコＩＬ３１Ｒａを発現する、方法。

【請求項49】

改変された細胞株がＨｅＬａ細胞株である、請求項４８に記載の方法。

【請求項50】

改変された細胞株がイヌＩＬ３１Ｒａ又はネコＩＬ３１Ｒａを発現する、請求項４８又は４９に記載の方法。

【請求項51】

改変された細胞株が、配列番号：９２又は配列番号：９３のアミノ酸配列を有するポリペプチドを発現する、請求項４８から５０の何れか一項に記載の方法。

【請求項52】

改変された細胞株がイヌ又はネコオンコスタチンＭ受容体（ＯＳＭＲ）を発現しない、請求項４８から５１の何れか一項に記載の方法。

【請求項53】

ＩＬ３１アンタゴニスト候補が、ＩＬ３１抗体、可溶性ＩＬ３１受容体、ＩＬ３１Ｒａ抗体、又は小分子、アプタマー、又はペプチドである、請求項４８から５２の何れか一項に記載の方法。

【請求項54】

方法が、ＩＬ３１シグナル伝達機能を測定することを含む、請求項４８から５３の何れか一項に記載の方法。

【請求項55】

ＩＬ３１シグナル伝達機能が、ＳＴＡＴ－１、ＳＴＡＴ－３、及び／又はＳＴＡＴ－５リン酸化のレベルによって測定される、請求項５４に記載の方法。

【請求項56】

ＩＬ３１アンタゴニスト候補が、ＳＴＡＴ－１、ＳＴＡＴ－３、及び／又はＳＴＡＴ－５リン酸化の低下を検出することによって同定される、請求項５５に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

［関連出願との相互参照］
この出願は、各々があらゆる目的のためにその全体について出典明示によりここに援用される、２０１９年８月２９日出願の米国仮出願第６２／８９３７９９号、及び２０１９年８月３０日出願の米国仮出願第６２／８９４５２６号の利益を主張する。

【0002】

［分野］
本発明は、例えば、イヌＩＬ３１及びネコＩＬ３１への結合性が増強された単離された抗ＩＬ３１抗体、並びに例えばイヌ及びネコなどのコンパニオンアニマルにおいて、前記抗体を使用して、例えばＩＬ３１誘発状態を治療するか、又は細胞におけるＩＬ３１シグナル伝達機能を低下させる方法に関する。

【背景技術】

【0003】

インターロイキン３１（ＩＬ３１）は、大部分はＴｈ２細胞によって産生されるサイトカインであり、そう痒性及び他の形態のアレルギー性疾患（例えば、アトピー性皮膚炎）などの皮膚疾患の促進に関与していると理解される。ＩＬ３１は、その受容体複合体（ＩＬ３１受容体Ａ（ＩＬ－３１Ｒａ）とオンコスタチンＭ受容体（ＯＳＭＲ）サブユニットの複合体）への結合と、下流活性の活性化、例えばＪＡＫキナーゼの活性化とそれに続くリン酸化及びＳＴＡＴ１、ＳＴＡＴ３、及びＳＴＡＴ５の活性化により、機能する。この経路の活性化は、皮膚炎及び他の障害に関連する臨床的問題の多くを引き起こすと考えられている。
ネコ、イヌ、及びウマなどのコンパニオンアニマルは、アトピー性皮膚炎を含む、ヒト皮膚疾患と同様の多くの皮膚疾患に罹患する。しかし、ＩＬ３１配列は、ヒト、ネコ、イヌ、及びウマの間で多岐にわたる。従って、ＩＬ３１誘発状態を治療し、ＩＬ３１シグナル伝達を低下させるためにコンパニオンアニマルＩＬ３１に特異的に結合するために使用できる方法及び化合物の必要性が残っている。

【発明の概要】

【0004】

実施態様１． イヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する単離された抗体であって、
ａ）配列番号：１４若しくは配列番号：１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ３配列を含む重鎖；及び／又は
ｂ）配列番号：２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ１配列を含む軽鎖；及び／又は
ｃ）配列番号：２３若しくは配列番号：２４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ３配列を含む軽鎖
を含む、抗体。
実施態様２． イヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する単離された抗体であって、
ａ）配列番号：１１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ１配列、配列番号：１２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ２配列、及び配列番号：１３、配列番号：１４、若しくは配列番号：１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ３配列を含む重鎖；及び／又は
ｂ）配列番号：２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ１配列、配列番号：２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ２配列、及び配列番号：２２、配列番号：２３、若しくは配列番号：２４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ３配列を含む軽鎖
を含む、抗体。
実施態様３． 抗体が、バイオレイヤー干渉法で測定して、５×１０^－８Ｍ未満、１×１０^－８Ｍ未満、５×１０^－９Ｍ未満、１×１０^－９Ｍ未満、５×１０^－１０Ｍ未満、１×１０^－１０Ｍ未満、５×１０^－１１Ｍ未満、１×１０^－１１Ｍ未満、５×１０^－１２Ｍ未満、又は１×１０^－１２Ｍ未満の解離定数（Ｋｄ）でイヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様４． ＳＴＡＴ－３リン酸化の低下によって測定されて、抗体がコンパニオンアニマル種においてＩＬ３１シグナル伝達機能を低下させる、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様５． コンパニオンアニマル種がイヌ又はネコである、実施態様４の抗体。
実施態様６． イムノブロット解析及び／又はバイオレイヤー干渉法によって決定されて、抗体がイヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様７． 抗体がイヌＩＬ３１への結合においてモノクローナルＭ１４抗体と競合する、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様８． 抗体がネコＩＬ３１への結合においてモノクローナルＭ１４抗体と競合する、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様９． イムノブロット解析及び／又はバイオレイヤー干渉法によって決定されて、抗体がヒトＩＬ３１に結合しない、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様１０． 抗体がモノクローナル抗体である、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様１１． 抗体が、イヌ化、ネコ化、又はキメラ抗体である、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様１２． （ａ）配列番号：１６の可変領域重鎖フレームワーク１（ＨＣ－ＦＲ１）配列；（ｂ）配列番号：１７のＨＣ－ＦＲ２配列；（ｃ）配列番号：１８のＨＣ－ＦＲ３配列；（ｄ）配列番号：１９のＨＣ－ＦＲ４配列；（ｅ）配列番号：２５の可変領域軽鎖フレームワーク１（ＬＣ－ＦＲ１）配列；（ｆ）配列番号：２６のＬＣ－ＦＲ２配列；（ｇ）配列番号：２７のＬＣ－ＦＲ３配列；又は（ｈ）配列番号：２８のＬＣ－ＦＲ４配列のうちの一又は複数を更に含む、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様１３． （ａ）配列番号：５５若しくは配列番号：５６の可変領域重鎖フレームワーク１（ＨＣ－ＦＲ１）配列；（ｂ）配列番号：５７、配列番号：５８、配列番号：５９のＨＣ－ＦＲ２配列；（ｃ）配列番号：６０若しくは配列番号：６１のＨＣ－ＦＲ３配列；（ｄ）配列番号：６２若しくは配列番号：６３のＨＣ－ＦＲ４配列；（ｅ）配列番号：６４若しくは配列番号：６５の可変領域軽鎖フレームワーク１（ＬＣ－ＦＲ１）配列；（ｆ）配列番号：６６、配列番号：６７、若しくは配列番号：６８のＬＣ－ＦＲ２配列；（ｇ）配列番号：６９若しくは配列番号：７０のＬＣ－ＦＲ３配列；又は（ｈ）配列番号：７１若しくは配列番号：７２のＬＣ－ＦＲ４配列のうちの一又は複数を更に含む、実施態様１から１１の何れか一の抗体。
実施態様１４． 抗体が、
ａ）（ｉ）配列番号：５、配列番号：６、若しくは配列番号：７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変重鎖配列；（ｉｉ）配列番号：８、配列番号：９、若しくは配列番号：１０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変軽鎖配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）のような可変重鎖配列と（ｉｉ）のような可変軽鎖配列；あるいは
ｂ）（ｉ）配列番号：４９、配列番号：５０、配列番号：５１、若しくは配列番号：９０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変重鎖配列；（ｉｉ）配列番号：５２、配列番号：５３、若しくは配列番号：５４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変軽鎖配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）のような可変重鎖配列と（ｉｉ）のような可変軽鎖配列
を含む、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様１５． 抗体が、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７、配列番号：４９、配列番号：５０、配列番号５１、又は配列番号：９０の可変重鎖配列を含む、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様１６． 抗体が、配列番号：８、配列番号：９、配列番号：１０、配列番号：５２、配列番号：５３、若しくは配列番号：５４の可変軽鎖配列を含む、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様１７． 抗体が、
ａ）配列番号：５、配列番号：７、若しくは配列番号：８の可変重鎖配列；及び配列番号：９、配列番号：１０、若しくは配列番号：１１の可変軽鎖配列；又は
ｂ）配列番号：４９、配列番号：５０、配列番号：５１、若しくは配列番号：９０の可変重鎖配列；及び配列番号：５２、配列番号：５３、若しくは配列番号：５４の可変軽鎖配列
を含む、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様１８． 抗体がイヌ若しくはネコ定常重鎖領域及び／又はイヌ若しくはネコ定常軽鎖領域を含む、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様１９． 抗体が、（ａ）ＩｇＧ－Ａ、ＩｇＧ－Ｂ、ＩｇＧ－Ｃ、及びＩｇＧ－Ｄ定常領域から選択されるイヌ重鎖定常領域；又は（ｂ）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、及びＩｇＧ２ｂ定常領域から選択されるネコ重鎖定常領域を含む、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様２０． 抗体が、
ａ）（ｉ）配列番号：３４、配列番号：３５、配列番号：３６、配列番号：３７、配列番号：３８、配列番号：３９、配列番号：４０、配列番号：４１、配列番号：４２、配列番号：４３、配列番号：４４、若しくは配列番号：４５の重鎖アミノ酸配列；（ｉｉ）配列番号：４６、配列番号：４７、若しくは配列番号：４８の軽鎖アミノ酸配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）のような重鎖アミノ酸配列と（ｉｉ）のような軽鎖アミノ酸配列；あるいは
ｂ）（ｉ）配列番号：７３、配列番号：７４、配列番号：７５、若しくは配列番号：９１の重鎖アミノ酸配列；（ｉｉ）配列番号：７６、配列番号：７７、若しくは配列番号７８の軽鎖アミノ酸配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）のような重鎖アミノ酸配列と（ｉｉ）のような軽鎖アミノ酸配列
を含む、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様２１． 配列番号：３の可変重鎖アミノ酸配列及び／又は配列番号：４の可変軽鎖アミノ酸配列を含む、単離された抗体。
実施態様２２． 配列番号：５、配列番号：６、又は配列番号：７の可変重鎖アミノ酸配列を含む、単離された抗体。
実施態様２３． 配列番号：８、配列番号：９、又は配列番号：１０の可変軽鎖アミノ酸配列を含む、単離された抗体。
実施態様２４． 抗体が、配列番号：８、配列番号：９、又は配列番号：１０の可変軽鎖アミノ酸配列を含む、実施態様２１の単離された抗体。
実施態様２５． 配列番号：４９、配列番号：５０、配列番号：５１、又は配列番号：９０の可変重鎖アミノ酸配列を含む、単離された抗体。
実施態様２６． 配列番号：５２、配列番号：５３、又は配列番号：５４の可変軽鎖アミノ酸配列を含む、単離された抗体。
実施態様２７． 抗体が、配列番号：５２、配列番号：５３、又は配列番号：５４の可変軽鎖アミノ酸配列を含む、実施態様１から２５の何れか一の単離された抗体。
実施態様２８． 抗体が、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、及びＦａｂ’－ＳＨから選択される抗体断片である、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様２９． 抗体が二重特異性であり、抗体がＩＬ３１と、ＩＬ１７、ＴＮＦα、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２５、ＩＬ４、ＩＬ１３、ＩＬ２３、ＩｇＥ、ＣＤ１１α、ＩＬ６Ｒ、α４－インテルグリン（Intergrin）、ＩＬ１２、ＩＬ１β、又はＢｌｙＳから選択される一又は複数の抗原に結合する、先の実施態様の何れか一の抗体。
実施態様３０． 実施態様１から２９の何れか一の抗体をコードする単離された核酸。
実施態様３１． 実施態様３０の核酸を含む宿主細胞。
実施態様３２． 実施態様３１の宿主細胞を培養し、抗体を単離することを含む、抗体を産生する方法。
実施態様３３． 実施態様１から２９の何れか一の抗体と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。
実施態様３４． ＩＬ３１誘発状態を有するコンパニオンアニマル種を治療する方法であって、治療有効量の実施態様１から２９の何れか一の抗体又は実施態様３３の薬学的組成物をコンパニオンアニマル種に投与することを含む、方法。
実施態様３５． コンパニオンアニマル種がイヌ又はネコである、実施態様３３の方法。
実施態様３６． ＩＬ３１誘発状態がそう痒性又はアレルギー性状態である、実施態様３４又は実施態様３５の方法。
実施態様３７． ＩＬ３１誘発状態が、アトピー性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、そう痒症、喘息、乾癬、強皮症及び湿疹から選択される、実施態様３４から３６の何れか一の方法。
実施態様３８． 抗体又は薬学的組成物が非経口的に投与される、実施態様３４から３７の何れか一の方法。
実施態様３９． 抗体又は薬学的組成物が、筋肉内経路、腹腔内経路、脳脊髄内経路、皮下経路、動脈内経路、滑液嚢内経路、くも膜下腔内経路、又は吸入経路によって投与される、実施態様３４から３８の何れか一の方法。
実施態様４０． 方法が、抗体又は薬学的組成物と組み合わせて、Ｊａｋ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、又はＭＡＰＫ阻害剤を投与することを含む、実施態様３４から３９の何れか一の方法。
実施態様４１． 方法が、抗体又は薬学的組成物と組み合わせて、抗ＩＬ１７抗体、抗ＴＮＦα抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＩＬ４抗体、抗ＩＬ１３抗体、抗ＩＬ２３抗体、抗ＩｇＥ抗体、抗ＣＤ１１α抗体、抗ＩＬ６Ｒ抗体、抗α４－インテルグリン抗体、抗ＩＬ１２抗体、抗ＩＬ１β抗体、及び抗ＢｌｙＳ抗体から選択される一又は複数の抗体を投与することを含む、実施態様３４から４０の何れか一の方法。
実施態様４２． 細胞におけるＩＬ３１シグナル伝達機能を低下させる方法であって、細胞外ＩＬ３１への抗体の結合を許容する条件下で、実施態様１から２９の何れか一の抗体又は実施態様３３の薬学的組成物を細胞に曝露し、それにより、ＩＬ３１受容体への結合を低下させ、且つ／又は細胞によるＩＬ３１シグナル伝達機能を低下させることを含む、方法。
実施態様４３． 細胞がエクスビボで抗体又は薬学的組成物に曝露される、実施態様４２の方法。
実施態様４４． 細胞がインビボで抗体又は薬学的組成物に曝露される、実施態様４２の方法。
実施態様４５． 細胞がイヌ細胞又はネコ細胞である、実施態様４２から４４の何れか一の方法。
実施態様４６． コンパニオンアニマル種からのサンプル中のＩＬ３１を検出する方法であって、抗体のＩＬ３１への結合を許容する条件下で、サンプルを実施態様１から２９の何れか一の抗体又は実施態様３３の薬学的組成物と接触させることと、抗体とサンプル中のＩＬ３１の間に複合体が形成されるかどうかを検出することを含む、方法。
実施態様４７． サンプルが、イヌ又はネコから得られた生物学的サンプルである、実施態様４６の方法。
実施態様４８． ＩＬ３１アンタゴニストを同定する方法であって、改変された細胞株をＩＬ３１アンタゴニスト候補と接触させることを含み、改変された細胞株がイヌ又はネコに由来しない哺乳動物細胞株であり、改変された細胞株がイヌＩＬ３１Ｒａ及び／又はネコＩＬ３１Ｒａを発現する、方法。
実施態様４９． 改変された細胞株がＨｅＬａ細胞株である、実施態様４８の方法。
実施態様５０． 改変された細胞株がイヌＩＬ３１Ｒａ又はネコＩＬ３１Ｒａを発現する、実施態様４８又は４９の方法。
実施態様５１． 改変された細胞株が、配列番号：９２又は配列番号：９３のアミノ酸配列を有するポリペプチドを発現する、実施態様４８から５０の何れか一の方法。
実施態様５２． 改変された細胞株がイヌ又はネコオンコスタチンＭ受容体（ＯＳＭＲ）を発現しない、実施態様４８から５１の何れか一の方法。
実施態様５３． ＩＬ３１アンタゴニスト候補が、ＩＬ３１抗体、可溶性ＩＬ３１受容体、ＩＬ３１Ｒａ抗体、又は小分子、アプタマー、又はペプチドである、実施態様４８から５２の何れか一の方法。
実施態様５４． 方法が、ＩＬ３１シグナル伝達機能を測定することを含む、実施態様４８から５３の何れか一の方法。
実施態様５５． ＩＬ３１シグナル伝達機能が、ＳＴＡＴ－１、ＳＴＡＴ－３、及び／又はＳＴＡＴ－５リン酸化のレベルによって測定される、実施態様５４の方法。
実施態様５６． ＩＬ３１アンタゴニスト候補が、ＳＴＡＴ－１、ＳＴＡＴ－３、及び／又はＳＴＡＴ－５リン酸化の低下を検出することによって同定される、実施態様４８から５５の方法。

【図面の簡単な説明】

【0005】

【図1】図１は実施例２に係るネコＩＬ－３１に対する６種のキメラ抗体の結合解析である。

【所定の配列の説明】

【0006】

表１は、ここで参照される所定の配列のリストを提供する。

【発明を実施するための形態】

【0007】

イヌＩＬ３１及びネコＩＬ３１への結合性が増強された抗体が提供される。イヌ及びネコＩＬ３１に結合する抗体を形成することができる抗体重鎖及び軽鎖もまた提供される。加えて、一又は複数の特定の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む抗体、重鎖、及び軽鎖が提供される。イヌ及びネコＩＬ３１に対する抗体をコードするポリヌクレオチドが提供される。イヌ及びネコＩＬ３１に対する抗体を産生し又は精製する方法もまた提供される。イヌ及びネコＩＬ３１に対する抗体を使用する治療方法が提供される。そのような方法には、限定されないが、コンパニオンアニマル種におけるＩＬ３１誘発状態を治療する方法が含まれる。コンパニオンアニマル種からのサンプル中のＩＬ３１を検出する方法が提供される。

【0008】

読者の便宜のために、ここで使用される用語に次の定義が提供される。

【0009】

ここで使用される場合、Ｋｄなどの数値用語は、科学的測定に基づいて計算され、従って、適当な測定誤差の影響を受ける。場合によっては、数値用語は、最も近い有効数字に丸められた数値を含みうる。

【0010】

ここで使用される場合、「ａ」又は「ａｎ」は、別段の指定がない限り、「少なくとも一」又は「一又は複数」を意味する。ここで使用される場合、「又は」という用語は、特に明記しない限り、「及び／又は」を意味する。複数項に従属する請求項の文脈では、他の請求項を引用する際の「又は」の使用は、その代替の請求項のみを引用する。

【0011】

［例示的な抗ＩＬ３１抗体］
イヌＩＬ３１及びネコＩＬ３１への親和性が増強された抗体が提供される。ここに提供される抗ＩＬ３１抗体には、限定されないが、モノクローナル抗体、キメラ抗体、イヌ化抗体、及びネコ化抗体が含まれる。

【0012】

またここに提供されるのは、イヌ及びネコＩＬ－３１への結合性が増強された親和性成熟抗体のアミノ酸配列である。例えば、例示的な親和性成熟抗体（イヌ化及びネコ化）に対する可変重鎖ＣＤＲ（配列番号：１１－１５）、可変軽鎖ＣＤＲ（配列番号：２０－２４）、可変領域重鎖フレームワーク配列（配列番号：１６－１９、２５－２８、５５－７２）、及び可変領域軽鎖フレームワーク配列（配列番号１１－１４）が提供される。例示的な親和性成熟抗体（イヌ化及びネコ化）の可変軽鎖、軽鎖、可変重鎖、及び重鎖の例示的アミノ酸配列が提供される（例えば、配列番号：５－１０、２９－５４、７３－７８）。

【0013】

ここにおける「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、限定されないがモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性（例えば二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー）及び三重特異性抗体）、及びそれらが所望の抗原結合活性を示す限り、抗体断片（Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）_２、ＳｃＦｖ、ミニボディ、ダイアボディ、トリアボディ、及びテトラボディなど）を含む様々な抗体構造を包含する。イヌ、ネコ、及びウマ種は、多くの哺乳動物によって共有される異なる種類（クラス）の抗体を有している。

【0014】

抗体という用語は、限定されないが、抗原に結合することができる断片、例えばＦｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｄｉ－ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ（単一ドメイン抗体）及び（Ｆａｂ’）２（化学的に結合したＦ（ａｂ’）２を含む）を含む。抗体のパパイン消化により、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる、それぞれに単一の抗原結合部位がある二つの同一の抗原結合断片と、その名が容易に結晶化するその能力を反映している残りの「Ｆｃ」断片が生成される。ペプシン処理により、二つの抗原結合部位を有し、尚も抗原を架橋できるＦ（ａｂ’）２断片が生成される。抗体という用語はまた、限定されないが、キメラ抗体、ヒト化抗体、及びマウス、ヒト、カニクイザル、イヌ、ネコ、ウマなどの様々な種の抗体を含む。更に、ここに提供される全ての抗体コンストラクトに対して、他の生物由来の配列を有するバリアントもまた企図される。従って、抗体のマウス型が開示される場合、当業者には、マウス配列に基づく抗体をネコ、イヌ、ウマなどの配列に変換する方法が分かるであろう。抗体断片はまた、何れかの配向の単鎖ｓｃＦｖ、タンデムｄｉ－ｓｃＦｖ、ダイアボディ、タンデムｔｒｉ－ｓｄｃＦｖ、ミニボディなどを含む。抗体断片はまた、ナノボディ（ｓｄＡｂ、軽鎖のない重鎖の可変ドメイン対などの単一の単量体ドメインを有する抗体）を含む。抗体断片は、幾つかの実施態様では特定の種であると言うことができる（例えば、マウスｓｃＦｖ又はイヌｓｃＦｖ）。これは、コンストラクト源ではなく、非ＣＤＲ領域の少なくとも一部の配列を示す。幾つかの実施態様では、抗体は、標識を含むか、又は第二の部分にコンジュゲートされる。

【0015】

「標識」及び「検出可能な標識」という用語は、特異的結合対のメンバー間の反応（例えば、結合）を検出可能にするために抗体又はその分析物に付着させた部分を意味する。特異的結合対の標識されたメンバーは、「検出可能に標識された」と呼ばれる。従って、「標識された結合タンパク質」という用語は、結合タンパク質の同定をもたらす標識が導入されたタンパク質を指す。幾つかの実施態様では、標識は、視覚的又は機器的手段、例えば、放射標識アミノ酸の取り込み又はマークされたアビジン（例えば、光学的又は比色法で検出できる蛍光マーカー又は酵素活性を含むストレプトアビジン）によって検出できるビオチニル部分のポリペプチドへの付着によって検出可能であるシグナルを生成しうる検出可能なマーカーである。ポリペプチドのための標識の例には、限定されないが、次のものが含まれる：放射性同位元素又は放射性核種（例えば、^３Ｈ、^１４Ｃ、^３５Ｓ、^９０Ｙ、^９９Ｔｃ、^１１１Ｉｎ、^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、^１７７Ｌｕ、^１６６Ｈｏ、又は^１５３Ｓｍ）；色素原、蛍光標識（例えば、ＦＩＴＣ、ローダミン、ランタニドリン光体）、酵素標識（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ）；化学発光マーカー；ビオチニル基；二次レポーター（例えば、ロイシンジッパー対配列、二次抗体の結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ）によって認識される予め決められたポリペプチドエピトープ；及びガドリニウムキレートなどの磁性剤。イムノアッセイに一般的に用いられる標識の代表的な例には、光を生じる部分、例えばアクリジニウム化合物と、蛍光を生じる部分、例えばフルオレセインが含まれる。この点に関して、部分自体は検出可能に標識されていないが、更に別の部分との反応時に検出可能になる場合がある。

【0016】

「モノクローナル抗体」という用語は、抗体の実質的に均質な集団の抗体を指し、すなわち、集団を構成する個々の抗体は、少量で存在しうる可能な天然に生じる変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原部位に対して産生されている。更に、典型的には異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して産生されている。而して、モノクローナル抗体のサンプルは、抗原上の同じエピトープに結合することができる。「モノクローナル」との修飾語は、実質的に均一な抗体集団から得られるという抗体の性質を示し、何らかの特定の方法による抗体の産生を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎ，１９７５，Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５によって最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製されうるか、あるいは米国特許第４８１６５６７号に記載されたような組換えＤＮＡ法によって作製されうる。モノクローナル抗体はまた、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ等，１９９０，Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２－５５４に記載された技術を使用して作製されたファージライブラリーから単離されうる。

【0017】

「アミノ酸配列」は、ペプチド又はタンパク質中のアミノ酸残基の配列を意味する。「ポリペプチド」及び「タンパク質」という用語は、アミノ酸残基のポリマーを指すために交換可能に使用され、最小の長さに限定されない。アミノ酸残基のそのようなポリマーは、天然又は非天然のアミノ酸残基を含み得、限定されないが、アミノ酸残基のペプチド、オリゴペプチド、二量体、三量体、及び多量体を含む。完全長タンパク質とその断片の両方が定義に包含される。該用語はまた、ポリペプチドの発現後修飾、例えば、グリコシル化、シアリル化、アセチル化、リン酸化などを含む。更に、本開示の目的では、「ポリペプチド」は、タンパク質が所望の活性を維持する限り、天然配列に対して欠失、付加、及び置換（一般に性質が保存的）などの修飾を含むタンパク質を指す。これらの修飾は、部位特異的変異誘発などによる意図的なものである場合もあれば、タンパク質を産生する宿主の変異やＰＣＲ増幅によるエラーなどによる偶発的なものである場合もある。

【0018】

ここで使用される「ＩＬ３１」は、細胞中でのＩＬ３１の発現及びプロセシングから生じる任意の天然ＩＬ３１を指す。この用語には、特に明記されていない限り、霊長類（例えば、ヒト及びカニクイザル）及び齧歯類（例えば、マウス及びラット）、及びコンパニオンアニマル（例えば、イヌ、ネコ、及びウマ）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物由来のＩＬ３１が含まれる。この用語にはまた、ＩＬ３１の天然に生じるバリアント、例えば、スプライスバリアント又は対立遺伝子バリアントが含まれる。

【0019】

幾つかの実施態様では、イヌＩＬ３１は、配列番号：７９又は配列番号：８０のアミノ酸配列を含む。幾つかの実施態様では、ネコＩＬ３１は、配列番号：８１のアミノ酸配列を含む。幾つかの実施態様では、マウスＩＬ３１は、配列番号：８２のアミノ酸配列を含む。

【0020】

抗体の「ＩＬ３１結合ドメイン」という用語は、ＩＬ３１に結合する、抗ＩＬ３１抗体の軽鎖及び重鎖によって形成される結合ドメインを意味する。

【0021】

幾つかの実施態様では、ＩＬ３１結合ドメインは、それがヒトＩＬ３１に結合するよりも高親和性でイヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する。幾つかの実施態様では、ＩＬ３１結合ドメインは、ウマＩＬ３１などの他のコンパニオンアニマルのＩＬ３１に結合する。幾つかの実施態様では、ＩＬ３１結合ドメインは、ヒトＩＬ３１に結合しない。

【0022】

ここで使用される場合、「エピトープ」という用語は、抗原結合分子（例えば抗体、抗体断片、又は抗体結合領域を含むスカフォールドタンパク質）が結合する標的分子（例えば抗原、例えばタンパク質、核酸、糖又は脂質）上の部位を意味する。エピトープは、アミノ酸、ポリペプチド又は糖側鎖等の分子の化学的に活性な表面グループを含むことが多く、特定の三次元構造特性並びに特定の荷電特性を有している。エピトープは、標的分子の近接した又は並置された非近接の残基（例えばアミノ酸、ヌクレオチド、糖、脂質部分）の両方から形成されうる。近接した残基（例えばアミノ酸、ヌクレオチド、糖、脂質部分）から形成されたエピトープは、典型的には変性溶媒への曝露で保持される一方、三次フォールディングによって形成されたエピトープは、典型的には変性溶媒での処理で失われる。エピトープは、限定されないが、少なくとも３残基、少なくとも５残基、又は８－１０残基（例えばアミノ酸又はヌクレオチド）を含みうる。幾つかの例では、エピトープ長は２０残基（例えばアミノ酸又はヌクレオチド）未満、１５残基未満又は１２残基未満である。二つの抗体は、それらが抗原に対して競合結合性を示す場合は、抗原内の同じエピトープに結合しうる。幾つかの実施態様では、エピトープは、抗原結合分子上のＣＤＲ残基に対する所定の最小距離で同定されうる。幾つかの実施態様では、エピトープは上記の距離によって同定され得、更に抗体残基と抗原残基との間の結合（例えば水素結合）に関与するその残基に限定される。エピトープは様々なスキャンによってまた同定することができ、例えばアラニン又はアルギニンスキャンは、抗原結合分子が相互作用しうる一又は複数の残基を示しうる。明示的に示されていない限り、エピトープとしての残基セットは、その他の残基を特定の抗体に対するエピトープの一部であることから排除しない。むしろ、そのようなセットの存在は、エピトープの最小シリーズ（又は種のセット）を表す。従って、幾つかの実施態様では、エピトープとして同定された残基セットは、抗原上のエピトープの残基の排他的なリストというより、抗原に関連する最小エピトープを表わす。

【0023】

「ＣＤＲ」という用語は、当業者による少なくとも一つの識別法によって定義される相補性決定領域を意味する。幾つかの実施態様では、ＣＤＲはＣｈｏｔｈｉａ番号付けスキーム、Ｋａｂａｔ番号付けスキーム、ＫａｂａｔとＣｈｏｔｈｉａの組合せ、ＡｂＭ定義、接触定義、又はＫａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、若しくは接触定義の組合せの何れかに従って定義することができる。抗体内の様々なＣＤＲは、限定されないがＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含むその適切な番号及び鎖型によって表わすことができる。「ＣＤＲ」という用語は、ここでは超可変ループを含む「超可変領域」又はＨＶＲをまた包含するように使用される。

【0024】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、
ａ）配列番号：１４若しくは配列番号：１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ３配列を含む重鎖；及び／又は
ｂ）配列番号：２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ１配列を含む軽鎖；及び／又は
ｃ）配列番号：２３若しくは配列番号：２４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ３配列を含む軽鎖
を含む。

【0025】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、
ａ）配列番号：１１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ１配列、配列番号：１２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ２配列、及び配列番号：１３、配列番号：１４、若しくは配列番号：１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ３配列を含む重鎖；並びに／又は
ｂ）配列番号：２０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ１配列、配列番号：２１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ２配列、及び配列番号：２２、配列番号：２３、若しくは配列番号：２４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ３配列を含む軽鎖
を含む。

【0026】

ここで使用される「可変領域」という用語は、少なくとも三のＣＤＲを含む領域を意味する。幾つかの実施態様では、可変領域は三のＣＤＲと少なくとも一のフレームワーク領域（「ＦＲ」）を含む。「重鎖可変領域」又は「可変重鎖」という用語は交換可能に使用され、少なくとも三の重鎖ＣＤＲを含む領域を意味する。「軽鎖可変領域」又は「可変軽鎖」という用語は交換可能に使用され、少なくとも三の軽鎖ＣＤＲを含む領域を意味する。幾つかの実施態様では、可変重鎖又は可変軽鎖は少なくとも一のフレームワーク領域を含む。幾つかの実施態様では、抗体は、ＨＣ－ＦＲ１、ＨＣ－ＦＲ２、ＨＣ－ＦＲ３、及びＨＣ－ＦＲ４から選択される少なくとも一の重鎖フレームワーク領域を含む。幾つかの実施態様では、抗体は、ＬＣ－ＦＲ１、ＬＣ－ＦＲ２、ＬＣ－ＦＲ３、及びＬＣ－ＦＲ４から選択される少なくとも一の軽鎖フレームワーク領域を含む。フレームワーク領域は軽鎖ＣＤＲの間、又は重鎖ＣＤＲの間に並置されていてもよい。例えば、抗体は次の構造：（ＨＣ－ＦＲ１）－（ＣＤＲ－Ｈ１）－（ＨＣ－ＦＲ２）－（ＣＤＲ－Ｈ２）－（ＨＣ－ＦＲ３）－（ＣＤＲ－Ｈ３）－（ＨＣ－ＦＲ４）を有する可変重鎖を含みうる。抗体は次の構造：（ＣＤＲ－Ｈ１）－（ＨＣ－ＦＲ２）－（ＣＤＲ－Ｈ２）－（ＨＣ－ＦＲ３）－（ＣＤＲ－Ｈ３）を有する可変重鎖を含みうる。抗体は次の構造：（ＬＣ－ＦＲ１）－（ＣＤＲ－Ｌ１）－（ＬＣ－ＦＲ２）－（ＣＤＲ－Ｌ２）－（ＬＣ－ＦＲ３）－（ＣＤＲ－Ｌ３）－（ＬＣ－ＦＲ４）を有する可変軽鎖をまた含みうる。抗体は次の構造：（ＣＤＲ－Ｌ１）－（ＬＣ－ＦＲ２）－（ＣＤＲ－Ｌ２）－（ＬＣ－ＦＲ３）－（ＣＤＲ－Ｌ３）を有する可変軽鎖をまた含みうる。

【0027】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、（ａ）配列番号：１６の可変領域重鎖フレームワーク１（ＨＣ－ＦＲ１）配列；（ｂ）配列番号：１７のＨＣ－ＦＲ２配列；（ｃ）配列番号：１８のＨＣ－ＦＲ３配列；（ｄ）配列番号：１９のＨＣ－ＦＲ４配列；（ｅ）配列番号：２５の可変領域軽鎖フレームワーク１（ＬＣ－ＦＲ１）配列；（ｆ）配列番号：２６のＬＣ－ＦＲ２配列；（ｇ）配列番号：２７のＬＣ－ＦＲ３配列；又は（ｈ）配列番号：２８のＬＣ－ＦＲ４配列のうちの一又は複数を含む。

【0028】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、（ａ）配列番号：５５若しくは配列番号：５６の可変領域重鎖フレームワーク１（ＨＣ－ＦＲ１）配列；（ｂ）配列番号：５７、配列番号：５８、配列番号：５９のＨＣ－ＦＲ２配列；（ｃ）配列番号：６０若しくは配列番号：６１のＨＣ－ＦＲ３配列；（ｄ）配列番号：６２若しくは配列番号：６３のＨＣ－ＦＲ４配列；（ｅ）配列番号：６４若しくは配列番号：６５の可変領域軽鎖フレームワーク１（ＬＣ－ＦＲ１）配列；（ｆ）配列番号：６６、配列番号：６７、若しくは配列番号：６８のＬＣ－ＦＲ２配列；（ｇ）配列番号：６９若しくは配列番号：７０のＬＣーＦＲ３配列；又は（ｈ）配列番号：７１若しくは配列番号：７２のＬＣ－ＦＲ４配列のうちの一又は複数を含む。

【0029】

ここで使用される「定常領域」という用語は、少なくとも三の定常ドメインを含む領域を意味する。「重鎖定常領域」又は「定常重鎖」という用語は交換可能に用いられ、少なくとも三の重鎖定常ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む領域を意味する。非限定的な例示的重鎖定常領域には、γ、δ、α、ε、及びμが含まれる。各重鎖定常領域は、抗体アイソタイプに対応する。例えば、γ定常領域を含む抗体はＩｇＧ抗体であり、δ定常領域を含む抗体はＩｇＤ抗体であり、α定常領域を含む抗体はＩｇＡ抗体であり、μ定常領域を含む抗体はＩｇＭ抗体であり、ε定常領域を含む抗体はＩｇＥ抗体である。所定のアイソタイプはサブクラスに更に細分割することができる。例えば、ＩｇＧ抗体は、限定されないが、（γ_１定常領域を含む）ＩｇＧ１、（γ_２定常領域を含む）ＩｇＧ２、（γ_３定常領域を含む）ＩｇＧ３、及び（γ_４定常領域を含む）ＩｇＧ４抗体を含み；ＩｇＡ抗体は、限定されないが、（α_１定常領域を含む）ＩｇＡ１及び（α_２定常領域を含む）ＩｇＡ２抗体を含み；ＩｇＭ抗体は、限定されないが、ＩｇＭ１及びＩｇＭ２を含む。「軽鎖定常領域」又は「定常軽鎖」という用語は交換可能に使用され、軽鎖定常ドメインＣＬを含む領域を意味する。非限定的な例示的軽鎖定常領域には、λ及びκが含まれる。ドメイン内の機能を変化させない欠失及び変化は、他に指定されない限り、「定常領域」という用語の範囲内に包含される。イヌ、ネコ、及びウマは、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、及びＩｇＭ等の抗体クラスを有する。イヌＩｇＧ抗体クラスの中にはＩｇＧ－Ａ、ＩｇＧ－Ｂ、ＩｇＧ－Ｃ、及びＩｇＧ－Ｄがある。ネコＩｇＧ抗体クラスの中にはＩｇＧ１ａ、ＩｇＧ１ｂ、及びＩｇＧ２がある。

【0030】

「キメラ抗体」又は「キメラ」という用語は、重鎖又は軽鎖の一部が特定の供給源又は種に由来する一方、重鎖又は軽鎖の残りの少なくとも一部が異なる供給源又は種に由来する抗体を意味する。幾つかの実施態様では、キメラ抗体は、第一の種（例えばマウス、ラット、カニクイザル等々）からの少なくとも一の可変領域と第二の種（例えばヒト、イヌ、ネコ、ウマ等々）からの少なくとも一の定常領域を含む抗体を意味する。

【0031】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、ＩｇＧ－Ａ、ＩｇＧ－Ｂ、ＩｇＧ－Ｃ、及びＩｇＧ－Ｄ定常領域から選択されるイヌ重鎖定常領域を含む。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、（ａ）配列番号：８３の重鎖アミノ酸配列を含むイヌＩｇＧ－Ａ抗体；（ｂ）配列番号：８４の重鎖アミノ酸配列を含むイヌＩｇＧ－Ｂ抗体；（ｃ）配列番号：８５の重鎖アミノ酸配列を含むイヌＩｇＧ－Ｃ抗体；又は（ｄ）配列番号：８６の重鎖アミノ酸配列を含むイヌＩｇＧ－Ｄ抗体である。

【0032】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、及びＩｇＧ２ｂ定常領域から選択されるネコ重鎖定常領域を含む。

【0033】

「イヌ化抗体」は、非イヌ可変領域の一部における少なくとも一のアミノ酸がイヌ可変領域からの対応するアミノ酸で置き換えられている抗体を意味する。幾つかの実施態様では、イヌ化抗体は少なくとも一のイヌ定常領域（例えばγ定常領域、α定常領域、δ定常領域、ε定常領域、μ定常領域等々）又はその断片を含む。幾つかの実施態様では、イヌ化抗体は抗体断片、例えばＦａｂ、ｓｃＦｖ、（Ｆａｂ’）_２等である。「イヌ化」という用語は、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、又は非イヌ免疫グロブリンの最小配列を含むその断片（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、若しくは抗体の他の抗原結合配列）である非イヌ（例えばマウス）抗体の形態をまた示す。イヌ化抗体は、レシピエントのＣＤＲからの残基が所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、又はウサギ等の非イヌ種（ドナー抗体）のＣＤＲからの残基によって置換されたイヌ免疫グロブリン（レシピエント抗体）を含みうる。ある場合には、イヌ免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、対応する非イヌ残基によって置き換えられる。更に、イヌ化抗体は、レシピエント抗体にも移入されたＣＤＲ又はフレームワーク配列にも見出されないが、抗体性能を更に改良し最適化するために含められる残基を含みうる。

【0034】

幾つかの実施態様では、イヌ化可変鎖は、イヌ定常重鎖又はイヌ定常軽鎖に融合される。

【0035】

「ネコ化抗体」は、非ネコ可変領域の一部における少なくとも一のアミノ酸がネコ可変領域からの対応するアミノ酸で置き換えられている抗体を意味する。幾つかの実施態様では、ネコ化抗体は少なくとも一のネコ定常領域（例えばγ定常領域、α定常領域、δ定常領域、ε定常領域、μ定常領域等々）又はその断片を含む。幾つかの実施態様では、ネコ化抗体はＦａｂ、ｓｃＦｖ、（Ｆａｂ’）_２等の抗体断片である。「ネコ化」という用語は、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、又は非ネコ免疫グロブリンの最小配列を含むその断片（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、若しくは抗体の他の抗原結合配列）である非ネコ（例えばマウス）抗体の形態をまた示す。ネコ化抗体は、レシピエントのＣＤＲからの残基が所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、又はウサギ等の非ネコ種（ドナー抗体）のＣＤＲからの残基によって置換されたネコ免疫グロブリン（レシピエント抗体）を含みうる。ある場合には、ネコ免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、対応する非ネコ残基によって置き換えられる。更に、ネコ化抗体は、レシピエント抗体にも移入されたＣＤＲ又はフレームワーク配列にも見出されないが、抗体性能を更に改良し最適化するために含められる残基を含みうる。

【0036】

幾つかの実施態様では、ネコ化可変鎖は、ネコ定常重鎖又はネコ定常軽鎖に融合される。「ＩｇＸ Ｆｃ」という用語は、Ｆｃ領域が特定の抗体アイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭ等々）に由来することを意味し、ここで、「Ｘ」は抗体アイソタイプを示す。従って、「ＩｇＧ Ｆｃ」はγ鎖のＦｃ領域を示し、「ＩｇＡ Ｆｃ」はα鎖のＦｃ領域を示し、「ＩｇＤ Ｆｃ」はδ鎖のＦｃ領域を示し、「ＩｇＥ Ｆｃ」はε鎖のＦｃ領域を示し、「ＩｇＭ Ｆｃ」は、μ鎖のＦｃ領域を示す等々である。幾つかの実施態様では、ＩｇＧ Ｆｃ領域は、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３、及びＣＬ１を含む。「ＩｇＸ－Ｎ－Ｆｃ」は、Ｆｃ領域が抗体アイソタイプの特定のサブクラス（イヌＩｇＧサブクラスＡ、Ｂ、Ｃ、又はＤ；又はネコＩｇＧサブクラス１、２ａ、又は２ｂ等々）に由来することを示し、ここで、「Ｎ」はサブクラスを示す。幾つかの実施態様では、ＩｇＸ Ｆｃ又はＩｇＸ－Ｎ－Ｆｃ領域は、イヌ又はネコなどのコンパニオンアニマルに由来する。幾つかの実施態様では、ＩｇＧ Ｆｃ領域は、ＩｇＧ－Ａ、ＩｇＧ－Ｂ、ＩｇＧ－Ｃ、又はＩｇＧ－Ｄなどのイヌγ重鎖から単離される。場合によっては、ＩｇＧ Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、又はＩｇＧ２ｂなどのネコγ重鎖から単離される。ＩｇＧ－Ａ、ＩｇＧ－Ｂ、ＩｇＧ－Ｃ、又はＩｇＧ－ＤのＦｃ領域を含む抗体は、組換え産生系でより高い発現レベルをもたらす可能性がある。

【0037】

「親和性」という用語は、分子（例えば、抗体）の単一の結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有結合性相互作用の全体の強さを意味する。分子ＸのそのパートナーＹに対する親和性は、一般に解離定数（Ｋ_Ｄ）で表すことができる。親和性は、例えば、イムノブロット、ＥＬＩＳＡ ＫＤ、ＫｉｎＥｘ Ａ、バイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）、又は表面プラズモン共鳴装置などの当該技術分野で知られている一般的な方法によって測定することができる。

【0038】

「Ｋ_Ｄ」、「Ｋ_ｄ」、「Ｋｄ」又は「Ｋｄ値」という用語は、抗体－抗原相互作用の平衡解離定数を指すために交換可能に使用される。幾つかの実施態様では、抗体のＫ_Ｄは、Ｏｃｔｅｔ（登録商標）システム（Ｐａｌｌ ＦｏｒｔｅＢｉｏ ＬＬＣ，Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ）などのバイオセンサーをサプライヤーの説明書に従って使用するバイオレイヤー干渉アッセイを使用することによって測定される。簡単に説明すると、ビオチン化抗原がセンサー先端に結合され、抗体の結合が９０秒間モニターされ、解離が６００秒間モニターされる。希釈及び結合工程の緩衝液は、２０ｍＭのリン酸、１５０ｍＭのＮａＣｌ，ｐＨ７．２である。ドリフトを補正するために、緩衝液のみのブランク曲線が差し引かれる。データは、ＦｏｒｔｅＢｉｏデータ解析ソフトウェアを使用して２：１結合モデルに適合させて、結合速度定数（ｋ_ｏｎ）、解離速度定数（ｋ_ｏｆｆ）、及びＫ_ｄを決定する。平衡解離定数（Ｋ_ｄ）は、ｋ_ｏｆｆ／ｋ_ｏｎの比として計算される。「ｋｏｎ」という用語は、抗体が抗原に結合する際の速度定数を指し、「ｋｏｆｆ」という用語は、抗体が抗体／抗原複合体から解離する際の速度定数を指す。

【0039】

抗原又はエピトープへ「結合する」という用語は、当該技術分野でよく理解されている用語であり、そのような結合性を決定する方法もまた当該技術分野でよく知られている。分子は、それが特定の細胞又は物質に対して反応し、会合し、又は親和性を有し、反応、会合、又は親和性が、例えば、当該技術分野で知られている一又は複数の方法、例えばイムノブロット、ＥＬＩＳＡ ＫＤ、ＫｉｎＥｘ Ａ、バイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）、表面プラズモン共鳴装置などによって検出可能である場合、「結合性」を示すと言われる。

【0040】

「表面プラズモン共鳴」は、例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ^ＴＭシステム（ＢＩＡｃｏｒｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＡＢ，ａ ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ｃｏｍｐａｎｙ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ ａｎｄ Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）を使用して、バイオセンサーマトリックス内のタンパク質濃度の変化を検出することにより、リアルタイムの生体分子特異的相互作用の分析を可能にする光学現象を示す。更なる説明については、Ｊｏｎｓｓｏｎ等（１９９３）Ａｎｎ．Ｂｉｏｌ．Ｃｌｉｎ．５１：１９－２６を参照のこと。

【0041】

「バイオレイヤー干渉法」は、バイオセンサー先端上の固定化タンパク質の層と内部参照層から反射した光の干渉パターンを分析する光学分析技術を指す。バイオセンサー先端に結合した分子の数の変化が、リアルタイムで測定できる干渉パターンのシフトを引き起こす。バイオレイヤー干渉法のための非限定的で例示的な装置は、Ｏｃｔｅｔ（登録商標）システム（Ｐａｌｌ ＦｏｒｔｅＢｉｏ ＬＬＣ）である。例えば、Ａｂｄｉｃｈｅ等，２００８，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３７７：２０９－２７７を参照のこと。

【0042】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、バイオレイヤー干渉法により測定して、５×１０^－６Ｍ未満、１×１０^－６Ｍ未満、５×１０^－７Ｍ未満、１×１０^－７Ｍ未満、５×１０^－８Ｍ未満、１×１０^－８Ｍ未満、５×１０^－９Ｍ未満、１×１０^－９Ｍ未満、５×１０^－１０Ｍ未満、１×１０^－１０Ｍ未満、５×１０^－１１Ｍ未満、１×１０^－１１Ｍ未満、５×１０^－１２Ｍ未満、又は１×１０^－１２Ｍ未満の解離定数（Ｋｄ）でイヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、バイオレイヤー干渉法により測定して、５×１０^－６Ｍと１×１０^－６Ｍの間、５×１０^－６Ｍと５×１０^－７Ｍの間、５×１０^－６Ｍと１×１０^－７Ｍの間、５×１０^－６Ｍと５×１０^－８Ｍの間、５×１０^－６Ｍと１×１０^－８Ｍの間、５×１０^－６Ｍと５×１０^－９Ｍの間、５×１０^－６Ｍと１×１０^－９Ｍの間、５×１０^－６Ｍと５×１０^－１０Ｍの間、５×１０^－６Ｍと１×１０^－１０Ｍの間、５×１０^－６Ｍと５×１０^－１１Ｍの間、５×１０^－６Ｍと１×１０^－１１Ｍの間、５×１０^－６Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－６Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、１×１０^－６Ｍと５×１０^－７Ｍの間、１×１０^－６Ｍと１×１０^－７Ｍの間、１×１０^－６Ｍと５×１０^－８Ｍの間、１×１０^－６Ｍと１×１０^－８Ｍの間、１×１０^－６Ｍと５×１０^－９Ｍの間、１×１０^－６Ｍと１×１０^－９Ｍの間、１×１０^－６Ｍと５×１０^－１０Ｍの間、１×１０^－６Ｍと１×１０^－１０Ｍの間、１×１０^－６Ｍと５×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－６Ｍと１×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－６Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、１×１０^－６Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－７Ｍと１×１０^－７Ｍの間、５×１０^－７Ｍと５×１０^－８Ｍの間、５×１０^－７Ｍと１×１０^－８Ｍの間、５×１０^－７Ｍと５×１０^－９Ｍの間、５×１０^－７Ｍと１×１０^－９Ｍの間、５×１０^－７Ｍと５×１０^－１０Ｍの間、５×１０^－７Ｍと１×１０^－１０Ｍの間、５×１０^－７Ｍと５×１０^－１１Ｍの間、５×１０^－７Ｍと１×１０^－１１Ｍの間、５×１０^－７Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－７Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、１×１０^－７Ｍと５×１０^－８Ｍの間、１×１０^－７Ｍと１×１０^－８Ｍの間、１×１０^－７Ｍと５×１０^－９Ｍの間、１×１０^－７Ｍと１×１０^－９Ｍの間、１×１０^－７Ｍと５×１０^－１０Ｍの間、１×１０^－７Ｍと１×１０^－１０Ｍの間、１×１０^－７Ｍと５×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－７Ｍと１×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－７Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、１×１０^－７Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－８Ｍと１×１０^－８Ｍの間、５×１０^－８Ｍと５×１０^－９Ｍの間、５×１０^－８Ｍと１×１０^－９Ｍの間、５×１０^－８Ｍと５×１０^－１０Ｍの間、５×１０^－８Ｍと１×１０^－１０Ｍの間、５×１０^－８Ｍと５×１０^－１１Ｍの間、５×１０^－８Ｍと１×１０^－１１Ｍの間、５×１０^－８Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－８Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、１×１０^－８Ｍと５×１０^－９Ｍの間、１×１０^－８Ｍと１×１０^－９Ｍの間、１×１０^－８Ｍと５×１０^－１０Ｍの間、１×１０^－８Ｍと１×１０^－１０Ｍの間、１×１０^－８Ｍと５×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－８Ｍと１×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－８Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、１×１０^－８Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－９Ｍと１×１０^－９Ｍの間、５×１０^－９Ｍと５×１０^－１０Ｍの間、５×１０^－９Ｍと１×１０^－１０Ｍの間、５×１０^－９Ｍと５×１０^－１１Ｍの間、５×１０^－９Ｍと１×１０^－１１Ｍの間、５×１０^－９Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－９Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、１×１０^－９Ｍと５×１０^－１０Ｍの間、１×１０^－９Ｍと１×１０^－１０Ｍの間、１×１０^－９Ｍと５×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－９Ｍと１×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－９Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、１×１０^－９Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－１０Ｍと１×１０^－１０Ｍの間、５×１０^－１０Ｍと５×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－１０Ｍと５×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－１０Ｍと１×１０^－１１Ｍの間、１×１０^－１０Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、１×１０^－１０Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－１１Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－１１Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、５×１０^－１１Ｍと１×１０^－１２Ｍの間、１×１０^－１１Ｍと５×１０^－１２Ｍの間、又は１×１０^－１１Ｍと１×１０^－１２Ｍの間のＫｄでイヌＩＬ３１、ネコＩＬ３１、又はウマＩＬ３１に結合する。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、イムノブロット解析によって決定されて、イヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１に結合する。

【0043】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、イムノブロット解析及び／又はバイオレイヤー干渉法によって決定されて、ヒトＩＬ３１に結合しない。

【0044】

幾つかの実施態様では、ＩＬ３１への結合についてＭ１４と競合する抗ＩＬ３１抗体が提供される。

【0045】

「バリアント」とは、配列を整列させ、必要に応じてギャップを導入して最大パーセントの配列同一性を達成した後、如何なる保存的置換も配列同一性の一部として考慮しないで、天然配列ポリペプチドと少なくとも約５０％のアミノ酸配列同一性を有する生物学的に活性なポリペプチドを意味する。そのようなバリアントには、例えば、ポリペプチドのＮ末端又はＣ末端に一又は複数のアミノ酸残基が付加され、欠失されているポリペプチドが含まれる。

【0046】

幾つかの実施態様では、バリアントは、天然配列ポリペプチドと少なくとも約５０％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約６０％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約６５％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約７０％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約７５％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約８５％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約９０％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約９５％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約９７％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約９８％のアミノ酸配列同一性、少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有する。

【0047】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、
ａ）（ｉ）配列番号：５、配列番号：６、若しくは配列番号：７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変重鎖配列；（ｉｉ）配列番号：８、配列番号：９、若しくは配列番号：１０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変軽鎖配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）のような可変重鎖配列及び（ｉｉ）のような可変軽鎖配列；あるいは
ｂ）（ｉ）配列番号：４９、配列番号：５０、配列番号：５１、若しくは配列番号：９０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変重鎖配列；（ｉｉ）配列番号：５２、配列番号：５３、若しくは配列番号：５４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する可変軽鎖配列；又は（ｉｉｉ）（ｉ）のような可変重鎖配列及び（ｉｉ）のような可変軽鎖配列
を含む。

【0048】

ここで使用される場合、ペプチド、ポリペプチド、又は抗体配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」及び「相同性」は、配列を整列させ、最大パーセントの配列同一性を達成するために必要ならば、ギャップを導入した後、配列同一性の一部として保存的置換を考慮しないで、特定のペプチド又はポリペプチド配列において、アミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基のパーセンテージとして定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的でのアラインメントは、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、又はＭＥＧＡＬＩＮＥ^ＴＭ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどの公的に利用可能なコンピューターソフトウェアを使用して、当該技術分野の技量の範囲内にある様々な方法で達成することができる。当業者は、比較されている配列の全長にわたって最大のアラインメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメーターを決定することができる。

【0049】

アミノ酸置換には、限定されないが、ポリペプチド中のあるアミノ酸を別のアミノ酸にと置換することが含まれうる。例示的な置換を表２に示す。アミノ酸置換は目的の抗体に導入され得、生成物が所望の活性、例えば、抗原結合性の保持／改善、免疫原性の減少、又はＡＤＣＣ又はＣＤＣの改善についてスクリーニングされうる。

【0050】

【0051】

アミノ酸は、共通の側鎖特性に従ってグループ分けされうる：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。

【0052】

非保存的置換は、これらのクラスの一つのメンバーを別のクラスと交換することを伴う。

【0053】

「ベクター」という用語は、クローン化されたポリヌクレオチド又は宿主細胞内で増殖することができるポリヌクレオチドを含むように操作することができるポリヌクレオチドを記述するために使用される。ベクターは、次のエレメントの一又は複数を含みうる：複製起点、目的のポリペプチドの発現を調節する一又は複数の制御配列（例えば、プロモーター又はエンハンサーなど）、又は一若しくは複数の選択可能なマーカー遺伝子（例えば、抗生物質耐性遺伝子及び比色分析において使用できる遺伝子、例えば、βガラクトシダーゼなど）。「発現ベクター」という用語は、宿主細胞において目的のポリペプチドを発現させるために使用されるベクターを指す。

【0054】

「宿主細胞」は、ベクター又は単離ポリヌクレオチドのレシピエントでありうるか、又はレシピエントであった細胞を指す。宿主細胞は、原核細胞又は真核細胞でありうる。例示的な真核細胞には、哺乳動物細胞、例えば霊長類又は非霊長類の動物細胞；真菌細胞、例えば酵母；植物細胞；及び昆虫細胞が含まれる。非限定的で例示的な哺乳動物細胞には、限定されないが、ＮＳ０細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞（Ｃｒｕｃｅｌｌ）、２９３細胞、及びＣＨＯ細胞、並びにそれらの派生体、例えば、２９３－６Ｅ、ＤＧ４４、ＣＨＯ－Ｓ、及びＣＨＯ－Ｋ細胞が含まれる。宿主細胞には単一の宿主細胞の子孫が含まれ、子孫は、自然の、偶発的、又は意図的な変異のために、必ずしも元の親細胞と（形態又はゲノムＤＮＡ相補鎖において）完全に同一であるとは限らない。宿主細胞は、ここに提供されるアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチドでインビボでトランスフェクトされた細胞を含む。

【0055】

ここで使用される「単離された」という用語は、それが典型的には天然に見出されるか又は産生される成分の少なくとも幾つかから分離された分子を指す。例えば、ポリペプチドは、それが産生された細胞の成分の少なくとも幾つかから分離される場合、「単離された」と呼ばれる。ポリペプチドが発現後に細胞によって分泌される場合、ポリペプチドを含む上清を、それを産生した細胞から物理的に分離することは、ポリペプチドを「単離する」ことと考えられる。同様に、ポリヌクレオチドは、それが典型的には自然界に見出されるより大きなポリヌクレオチド（例えば、ＤＮＡポリヌクレオチドの場合はゲノムＤＮＡ又はミトコンドリアＤＮＡ）の一部ではないか、あるいは例えばＲＮＡポリヌクレオチドの場合、それが産生された細胞の成分の少なくとも幾つかから分離される場合、「単離された」と呼ばれる。従って、宿主細胞内のベクターに含まれるＤＮＡポリヌクレオチドは、「単離された」と呼ばれる場合がある。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、サイズ排除クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、プロテインＡカラムクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、及びＣＨＴクロマトグラフィーなどのクロマトグラフィーを使用して精製される。

【0056】

「コンパニオンアニマル種」という用語は、ヒトのコンパニオンとなるのに適した動物を指す。幾つかの実施態様では、コンパニオンアニマル種は、イヌ（canine）、ネコ（feline）、犬（dog）、猫（cat）、ウマ、ウサギ、フェレット、モルモット、齧歯類などの小型哺乳動物である。幾つかの実施態様では、コンパニオンアニマル種は、ウマ、ウシ、ブタなどの家畜である。

【0057】

「ＩＬ３１シグナル伝達機能」という用語は、ＩＬ３１がその受容体又は受容体複合体に結合するときに生じる下流の活性の何れか一又は組合せを指す。幾つかの実施態様では、ＩＬ３１シグナル伝達機能は、ヤヌスキナーゼ（Ｊａｋ）１又はＪａｋ２シグナル伝達分子の活性化を含む。幾つかの実施態様では、ＩＬ３１シグナル伝達機能は、ＳＴＡＴ－３又はＳＴＡＴ－５タンパク質のリン酸化を含む。幾つかの実施態様では、ＩＬ３１シグナル伝達機能は、ＥＲＫ１／２ＭＡＰキナーゼシグナル伝達経路を活性化することを含む。幾つかの実施態様では、ＩＬ３１シグナル伝達機能は、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴシグナル伝達経路を活性化することを含む。幾つかの実施態様では、ＩＬ３１シグナル伝達機能は、Ｊａｋ１／２シグナル伝達経路を活性化することを含む。

【0058】

「ＳＴＡＴリン酸化」とは、リン酸化によるＳＴＡＴタンパク質の発現後修飾を意味する。例えば、「ＳＴＡＴ－３リン酸化」は、ＳＴＡＴ－３のリン酸化を指し、「ＳＴＡＴ－５リン酸化」は、ＳＴＡＴ－５のリン酸化を指す。幾つかの実施態様では、ＳＴＡＴ－３のリン酸化は、イムノブロット解析によって測定される。

【0059】

例えば、細胞（例えば、イヌ単球ＤＨ８２細胞、あるいはイヌ及び／又はネコＩＬ３１Ｒａでトランスフェクトされた哺乳動物細胞（例えば、ＨｅＬａ細胞））を、ここに記載の抗ＩＬ３１抗体の存在下で３７℃において２４時間、１５％の熱不活化ウシ胎仔血清、２ｍｍｏｌ／ＬのＧｌｕｔａＭａｘ、１ｍｍｏｌ／Ｌのピルビン酸ナトリウム、及び１０ｎｍ／ｍＬのイヌインターフェロン－ｃ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ，ＵＳＡ）を含む増殖培地（例えば、ＭＥＭ，Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（登録商標））を含む培地に１ウェル当たり１×１０^５細胞の密度で９６ウェル細胞培養プレートに蒔く。抗ホスホＳＴＡＴ－３、抗ＳＴＡＴ－３、抗ホスホＳＴＡＴ－１、抗ＳＴＡＴ－１、抗ホスホＳＴＡＴ－５、又は抗ＳＴＡＴ－５抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を使用する細胞可溶化物のイムノブロット解析を使用して、リン酸化ＳＴＡＴタンパク質と非リン酸化ＳＴＡＴタンパク質の濃度を相互に検出し、ベータアクチン対照と比較することができる。イムノブロットによって定性的又は定量的にタンパク質の濃度を決定するための方法は、当業者によって理解される。幾つかの実施態様では、相対濃度は、イムノブロットの目視検査によって定性的に決定される。幾つかの実施態様では、リン酸化ＳＴＡＴタンパク質及び非リン酸化ＳＴＡＴタンパク質の濃度は、イムノブロットをデジタル的に画像化し、バンドの強度を決定し、既知の濃度のＳＴＡＴタンパク質の線形標準曲線を使用してサンプル中のリン酸化又は非リン酸化ＳＴＡＴタンパク質の濃度を逆算することによって定量的に決定される。

【0060】

「低下させる」又は「阻害する」とは、参照と比較して、活性、機能、又は量を減少させ、低下させ、又は停止させることを意味する。幾つかの実施態様では、「低下させる」又は「阻害する」とは、２０％以上の全体的な減少を引き起こす能力を意味する。幾つかの実施態様では、「低下させる」又は「阻害する」とは、５０％以上の全体的な減少を引き起こす能力を意味する。幾つかの実施態様では、「低下させる」又は「阻害する」とは、７５％、８５％、９０％、９５％、又はそれ以上の全体的な減少を引き起こす能力を意味する。幾つかの実施態様では、上記の量は、同じ期間にわたり対照用量（プラセボなど）と比較して、ある期間にわたって阻害され又は減少される。ここで使用される「参照」とは、比較目的で使用される任意のサンプル、標準、又はレベルを指す。参照は、健康な又は非罹患のサンプルから取得されうる。幾つかの例では、参照は、コンパニオンアニマルの非罹患又は未治療のサンプルから得られる。幾つかの例では、参照は、試験又は治療されている動物ではない特定の種の一又は複数の健康な動物から得られる。

【0061】

ここで使用される「実質的に低下した」という用語は、当業者が二つの値の差を、該値によって測定される生物学的特性の文脈において統計的に有意であるとみなすような、数値と参照数値との間の十分に高度な低下を意味する。幾つかの実施態様では、実質的に低下した数値は、参照値と比較しておよそ１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、又は１００％の何れか一よりも多く低下される。

【0062】

幾つかの実施態様では、ＩＬ３１抗体は、コンパニオンアニマル種におけるＩＬ３１シグナル伝達機能を、ＳＴＡＴ－３リン酸化の低下によって測定し、抗体の非存在下でのＩＬ３１シグナル伝達機能と比較して、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は１００％低下させることができる。幾つかの実施態様では、ＩＬ３１シグナル伝達機能の低下又はＳＴＡＴ－３リン酸化の低下は、１０％と１５％の間、１０％と２０％の間、１０％と２５％の間、１０％と３０％の間、１０％と３５％の間、１０％と４０％の間、１０％と４５％の間、１０％と５０％の間、１０％と６０％の間、１０％と７０％の間、１０％と８０％の間、１０％と９０％の間、１０％と１００％の間、１５％と２０％の間、１５％と２５％の間、１５％と３０％の間、１５％と３５％の間、１５％と４０％の間、１５％と４５％の間、１５％と５０％の間、１５％と６０％の間、１５％と７０％の間、１５％と８０％の間、１５％と９０％の間、１５％と１００％の間、２０％と２５％の間、２０％と３０％の間、２０％と３５％の間、２０％と４０％の間、２０％と４５％の間、２０％と５０％の間、２０％と６０％の間、２０％と７０％の間、２０％と８０％の間、２０％と９０％の間、２０％と１００％の間、２５％と３０％の間、２５％と３５％の間、２５％と４０％の間、２５％と４５％の間、２５％と５０％の間、２５％と６０％の間、２５％と７０％の間、２５％と８０％の間、２５％と９０％の間、２５％と１００％の間、３０％と３５％の間、３０％と４０％の間、３０％と４５％の間、３０％と５０％の間、３０％と６０％の間、３０％と７０％の間、３０％と８０％の間、３０％と９０％の間、３０％と１００％の間、３５％と４０％の間、３５％と４５％の間、３５％と５０％の間、３５％と６０％の間、３５％と７０％の間、３５％と８０％の間、３５％と９０％の間、３５％と１００％の間、４０％と４５％の間、４０％と５０％の間、４０％と６０％の間、４０％と７０％の間、４０％と８０％の間、４０％と９０％の間、４０％と１００％の間、４５％と５０％の間、４５％と６０％の間、４５％と７０％の間、４５％と８０％の間、４５％と９０％の間、４５％と１００％の間、５０％と６０％の間、５０％と７０％の間、５０％と８０％の間、５０％と９０％の間、５０％と１００％の間、６０％と７０％の間、６０％と８０％の間、６０％と９０％の間、６０％と１００％の間、７０％と８０％の間、７０％と９０％の間、７０％と１００％の間、８０％と９０％の間、８０％と１００％の間、又は９０％と１００％の間である。

【0063】

［例示的な薬学的組成物］
「薬学的製剤」及び「薬学的組成物」という用語は、活性成分の生物学的活性が有効になることを可能にするような形態であり、製剤が投与される対象に対して容認できないほど毒性のある追加の成分を含まない調製物を指す。

【0064】

「薬学的に許容される担体」とは、対象への投与のための「薬学的組成物」を一緒に含む治療剤と共に使用するための、当該分野で一般的な非毒性固体、半固体、又は液体の充填剤、希釈剤、カプセル化材料、製剤補助剤、又は担体を指す。薬学的に許容される担体は、用いられる投薬量及び濃度でレシピエントに対して非毒性であり、製剤の他の成分と適合性がある。薬学的に許容される担体は、用いられる製剤に適切である。薬学的に許容される担体の例には、アルミナ；ステアリン酸アルミニウム；レシチン；血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、イヌ又は他の動物アルブミン；緩衝液、例えばホスフェート、シトレート、トロメタミン又はＨＥＰＥＳ緩衝液；グリシン；ソルビン酸；ソルビン酸カリウム；飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物；水；塩又は電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、又は三ケイ酸マグネシウム；ポリビニルピロリドン、セルロース系物質；ポリエチレングリコール；スクロース；マンニトール；又はアルギニンを含むがこれに限定されないアミノ酸が含まれる。

【0065】

薬学的組成物は、凍結乾燥形態で保存することができる。従って、幾つかの実施態様では、調製方法は、凍結乾燥工程を含む。次に、凍結乾燥された組成物は、イヌ、ネコ、又はウマへの投与の前に、典型的には非経口投与に適した水性組成物として、再処方されうる。他の実施態様では、特に抗体が熱的及び酸化的変性に対して非常に安定である場合、薬学的組成物は、イヌ、ネコ、又はウマに直接又は適切に希釈して投与されうる液体として、すなわち水性組成物として保存されうる。凍結乾燥された組成物は、注射用滅菌水（ＷＦＩ）で再構成することができる。抗菌剤（例えば、ベンジルアルコールなどの静菌試薬）が含まれる場合がある。従って、本発明は、固体又は液体形態の薬学的組成物を提供する。

【0066】

薬学的組成物のｐＨは、投与される場合、約ｐＨ５から約ｐＨ８の範囲でありうる。本発明の組成物は、それらが治療目的で使用される場合、無菌である。無菌性は、除菌濾過膜（例えば、０．２ミクロン膜）による濾過を含む、当該技術分野で知られている幾つかの手段の何れかによって達成することができる。無菌性は、抗菌剤の有無にかかわらず維持されうる。

【0067】

［抗体及び薬学的組成物の例示的使用］
本発明の抗体又は抗体を含む薬学的組成物は、ＩＬ３１誘発状態を治療するために有用でありうる。ここで使用される場合、「ＩＬ３１誘発状態」とは、ＩＬ３１濃度の上昇したレベル又は変化した勾配に関連し、それによって引き起こされ、又はそれによって特徴付けられる疾患を意味する。そのようなＩＬ３１誘発状態には、限定されないが、そう痒性又はアレルギー性疾患が含まれる。幾つかの実施態様では、ＩＬ３１誘発状態は、アトピー性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、そう痒症、喘息、乾癬、強皮症、又は湿疹である。ＩＬ３１誘発状態は、イヌ又はネコを含むがこれらに限定されないコンパニオンアニマルにおいて示されうる。

【0068】

ここで使用される場合、「治療」は、有益な又は望ましい臨床結果を得るためのアプローチである。ここで使用される「治療」は、コンパニオンアニマルを含む哺乳動物における疾患のための治療薬の任意の投与又は適用を包含する。この開示の目的では、有益な又は望ましい臨床結果には、限定されないが、以下の何れか一又は複数が含まれる：一又は複数の症状の緩和、疾患の程度の減少、疾患の拡大の予防又は遅延化、疾患の再発の予防又は遅延化、疾患進行の遅延化又は緩徐化、病状の回復、疾患又は疾患進行の阻害、疾患又はその進行の阻害又は緩徐化、その発生の抑止、及び寛解（部分又は完全）。また「治療」に包含されるものは、増殖性疾患の病理学的帰結の減少である。ここに提供される方法は、治療のこれらの態様の何れか一又は複数を企図している。上記と一致して、治療という用語は、障害の全ての態様の１００パーセントの除去を必要としない。

【0069】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体又はそれを含む薬学的組成物は、ＩＬ３１誘発状態を治療するために、ここの方法に従って利用されうる。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体又は薬学的組成物は、ＩＬ３１誘発状態を治療するために、イヌ又はネコなどのコンパニオンアニマルに投与される。

【0070】

物質／分子、アゴニスト又はアンタゴニストの「治療上有効な量」は、治療される疾患のタイプ、疾患状態、疾患の重症度と経過、治療目的のタイプ、以前の治療法、臨床歴、以前の治療への反応、主治医の裁量、動物の年齢、性別、及び体重、並びに動物において所望の応答を誘発する物質／分子、アゴニスト又はアンタゴニストの能力などの要因に応じて変化しうる。治療上有効な量は、物質／分子、アゴニスト又はアンタゴニストの毒性又は有害な効果よりも治療上有益な効果が上回る量でもある。治療上有効な量は、一又は複数回の投与で送達されうる。治療上有効な量とは、所望の治療又は予防結果を達成するために、必要な投薬量及び期間で有効な量を指す。

【0071】

幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体又は抗ＩＬ３１抗体を含む薬学的組成物は、皮下投与、静脈内注入、又は筋肉内注射によって非経口的に投与される。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体又は抗ＩＬ３１抗体を含む薬学的組成物は、ボーラス注射として又は所定の期間にわたる持続注入によって投与される。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体又は抗ＩＬ３１抗体を含む薬学的組成物は、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、動脈内、関節滑液嚢内、くも膜下腔内、又は吸入経路によって投与される。

【0072】

ここに記載の抗ＩＬ３１抗体は、１用量当たり０．０１ｍｇ／ｋｇ体重から１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与されうる。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、１用量当たり０．５ｍｇ／ｋｇ体重から５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与されうる。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、１用量当たり０．１ｍｇ／ｋｇ体重から１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与されうる。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、１用量当たり０．１ｍｇ／ｋｇ体重から１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与されうる。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、１用量当たり１ｍｇ／ｋｇ体重から１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与されうる。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、１用量当たり０．５ｍｇ／ｋｇ体重から１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、１ｍｇ／ｋｇ体重から１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、５ｍｇ／ｋｇ体重から１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、１０ｍｇ／ｋｇ体重から１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、２０ｍｇ／ｋｇ体重から１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、５０ｍｇ／ｋｇ体重から１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、１ｍｇ／ｋｇ体重から１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、５ｍｇ／ｋｇ体重から１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、０．５ｍｇ／ｋｇ体重から１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、０．０１ｍｇ／ｋｇ体重から０．５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、０．０１ｍｇ／ｋｇ体重から０．１ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、又は５ｍｇ／ｋｇ体重から５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与されうる。

【0073】

抗ＩＬ３１抗体又は抗ＩＬ３１抗体を含む薬学的組成物は、コンパニオンアニマルに一度に又は一連の治療にわたって投与されうる。例えば、抗ＩＬ３１抗体又は抗ＩＬ３１抗体を含む薬学的組成物は、少なくとも一回、一回より多く、少なくとも二回、少なくとも三回、少なくとも四回、又は少なくとも五回投与されうる。

【0074】

幾つかの実施態様では、用量は、少なくとも二週間又は三週間連続して週に一回投与され、幾つかの実施態様では、この治療サイクルは二回以上繰り返され、場合によっては一又は複数週の無治療期間が散在する。他の実施態様では、治療上有効な用量は、二から五日間連続して一日一回投与され、幾つかの実施態様では、この治療サイクルは、二回以上繰り返され、場合によっては、一又は複数の日又は週の無治療期間が散在する。

【0075】

一又は複数の更なる治療剤「と組み合わせて（in combination with）」の投与には、任意の順序での同時（併用）及び連続又は逐次投与が含まれる。「併用」という用語は、ここでは、二以上の治療剤の投与を指すために使用され、ここで、投与の少なくとも一部が時間的に重複し、又は一方の治療剤の投与が他の治療剤の投与に対して短時間内にある。例えば、二以上の治療剤が、およそ特定数の分以下の時間間隔で投与される。「逐次的」という用語は、一又は複数の他の薬剤の投与を中止した後、一又は複数の薬剤の投与が続くか、又は一又は複数の他の薬剤の投与前に一又は複数の薬剤の投与が開始される、二以上の治療剤の投与を指すためにここでは使用される。例えば、二以上の治療剤の投与は、およそ特定数の分を超える時間間隔で投与される。ここで使用される場合、「と併せて（in conjunction with）」は、別の治療様式に加えてある治療様式を施すことを指す。而して、「と併せて」とは、動物へ他の治療様式を施す前、施す間、又は施した後に、ある治療様式を施すことを指す。

【0076】

幾つかの実施態様では、本方法は、抗ＩＬ３１抗体又は抗ＩＬ３１抗体を含む薬学的組成物と組み合わせて、Ｊａｋ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、又はＭＡＰＫ阻害剤を投与することを含む。幾つかの実施態様では、本方法は、抗ＩＬ３１抗体又は抗ＩＬ３１抗体を含む薬学的組成物と組み合わせて、抗ＩＬ１７抗体、抗ＴＮＦα抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＩＬ４抗体、抗ＩＬ１３抗体、抗ＩＬ２３抗体、抗ＩｇＥ抗体、抗ＣＤ１１α抗体、抗ＩＬ６Ｒ抗体、抗α４－インテルグリン抗体、抗ＩＬ１２抗体、抗ＩＬ１β抗体、又は抗ＢｌｙＳ抗体を投与することを含む。

【0077】

ここに提供されるのは、抗体のＩＬ３１への結合を許容する条件下で、抗ＩＬ３１抗体又は抗ＩＬ３１抗体を含む薬学的組成物を細胞に曝露する方法である。幾つかの実施態様では、細胞は、エクスビボで抗体又は薬学的組成物に曝露される。幾つかの実施態様では、細胞は、インビボで抗体又は薬学的組成物に曝露される。幾つかの実施態様では、細胞は、細胞内ＩＬ３１への抗体の結合を許容する条件下で、抗ＩＬ３１抗体又は薬学的組成物に曝露される。幾つかの実施態様では、細胞は、細胞外ＩＬ３１への抗体の結合を許容する条件下で、抗ＩＬ３１抗体又は薬学的組成物に曝露される。幾つかの実施態様では、細胞は、限定されないが対象への腹腔内、筋肉内、静脈内注射を含む、ここに記載の投与方法の何れか一又は複数によって、抗ＩＬ３１抗体又は薬学的組成物にインビボで曝露されうる。幾つかの実施態様では、細胞は、抗体又は薬学的組成物を含む培養培地に細胞を曝露することによって、抗ＩＬ３１抗体又は薬学的組成物にエクスビボで曝露されうる。幾つかの実施態様では、細胞膜の透過性は、抗体又は薬学的組成物を含む培養培地に細胞を曝露する前の、当業者によって理解される任意の数の方法（例えば細胞のエレクトロポレーション又は塩化カルシウムを含む溶液への細胞の曝露など）の使用によって影響を受けうる。

【0078】

幾つかの実施態様では、結合は、細胞によるＩＬ３１シグナル伝達機能の低下をもたらす。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は、ＳＴＡＴ－３リン酸化の低下によって測定して、抗体の非存在下でのＩＬ３１シグナル伝達機能と比較して、細胞におけるＩＬ３１シグナル伝達機能を、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は１００％低下させることができる。幾つかの実施態様では、ＩＬ３１シグナル伝達機能の低下又はＳＴＡＴ－３リン酸化の低下は、１０％と１５％の間、１０％と２０％の間、１０％と２５％の間、１０％と３０％の間、１０％と３５％の間、１０％と４０％の間、１０％と４５％の間、１０％と５０％の間、１０％と６０％の間、１０％と７０％の間、１０％と８０％の間、１０％と９０％の間、１０％と１００％の間、１５％と２０％の間、１５％と２５％の間、１５％と３０％の間、１５％と３５％の間、１５％と４０％の間、１５％と４５％の間、１５％と５０％の間、１５％と６０％の間、１５％と７０％の間、１５％と８０％の間、１５％と９０％の間、１５％と１００％の間、２０％と２５％の間、２０％と３０％の間、２０％と３５％の間、２０％と４０％の間、２０％と４５％の間、２０％と５０％の間、２０％と６０％の間、２０％と７０％の間、２０％と８０％の間、２０％と９０％の間、２０％と１００％の間、２５％と３０％の間、２５％と３５％の間、２５％と４０％の間、２５％と４５％の間、２５％と５０％の間、２５％と６０％の間、２５％と７０％の間、２５％と８０％の間、２５％と９０％の間、２５％と１００％の間、３０％と３５％の間、３０％と４０％の間、３０％と４５％の間、３０％と５０％の間、３０％と６０％の間、３０％と７０％の間、３０％と８０％の間、３０％と９０％の間、３０％と１００％の間、３５％と４０％の間、３５％と４５％の間、３５％と５０％の間、３５％と６０％の間、３５％と７０％の間、３５％と８０％の間、３５％と９０％の間、３５％と１００％の間、４０％と４５％の間、４０％と５０％の間、４０％と６０％の間、４０％と７０％の間、４０％と８０％の間、４０％と９０％の間、４０％と１００％の間、４５％と５０％の間、４５％と６０％の間、４５％と７０％の間、４５％と８０％の間、４５％と９０％の間、４５％と１００％の間、５０％と６０％の間、５０％と７０％の間、５０％と８０％の間、５０％と９０％の間、５０％と１００％の間、６０％と７０％の間、６０％と８０％の間、６０％と９０％の間、６０％と１００％の間、７０％と８０％の間、７０％と９０％の間、７０％と１００％の間、８０％と９０％の間、８０％と１００％の間、又は９０％と１００％の間である。

【0079】

ここに提供されるのは、抗ＩＬ３１誘発状態の検出、診断、及びモニタリングのために抗ＩＬ３１抗体、ポリペプチド、及びポリヌクレオチドを使用する方法である。ここに提供されるのは、コンパニオンアニマルが抗ＩＬ３１抗体療法に応答するかどうかを決定する方法である。幾つかの実施態様では、本方法は、抗ＩＬ３１抗体を使用して、動物がＩＬ３１を発現する細胞を有するかどうかを検出することを含む。幾つかの実施態様では、検出の方法は、サンプルを抗体、ポリペプチド、又はポリヌクレオチドと接触させ、結合のレベルが参照又は比較サンプル（対照など）のレベルと異なるかどうかを決定することを含む。幾つかの実施態様では、本方法は、ここに記載の抗体又はポリペプチドが対象動物にとって適切な治療剤であるかどうかを決定するために有用でありうる。

【0080】

幾つかの実施態様では、サンプルは生物学的サンプルである。「生物学的サンプル」という用語は、生体又は以前生体であったものからのある量の物質を意味する。幾つかの実施態様では、生物学的サンプルは、細胞又は細胞／組織可溶化物である。幾つかの実施態様では、生物学的サンプルは、限定されないが、血液（例えば、全血）、血漿、血清、尿、滑液、及び上皮細胞を含む。

【0081】

幾つかの実施態様では、細胞又は細胞／組織可溶化物を抗ＩＬ３１抗体と接触させ、抗体と細胞の間の結合を決定する。試験細胞が同じ組織型の参照細胞と比較して結合活性を示す場合には、対象が抗ＩＬ３１抗体での処置から恩恵を受けるであろうことが示されうる。幾つかの実施態様では、試験細胞は、コンパニオンアニマルの組織からのものである。

【0082】

特異的抗体－抗原結合を検出するための当該技術分野で知られている様々な方法を使用することができる。実施できる例示的なイムノアッセイには、蛍光分極イムノアッセイ（ＦＰＩＡ）、蛍光イムノアッセイ（ＦＩＡ）、酵素イムノアッセイ（ＥＩＡ）、比濁阻害イムノアッセイ（ＮＩＡ）、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、及びラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）が含まれる。指示薬部分、又は標識グループは、対象抗体に結合させることができ、アッセイ装置の入手可能性及び適合するイムノアッセイ手順によって決定されることが多い様々な方法の使用の必要性に合致するように選択される。適切な標識には、限定されはないが、放射性核種（例えば^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、^３５Ｓ、^３Ｈ、又は^３２Ｐ）、酵素（例えばアルカリホスファターゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ルシフェラーゼ、又はｐ－グラクトシダーゼ）、蛍光性部分又はタンパク質（例えばフルオレセイン、ローダミン、フィコエリスリン、ＧＦＰ、又はＢＦＰ）、又は発光部分（例えばＱｕａｎｔｕｍ Ｄｏｔ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ，Ｃａｌｉｆ．によって供給されるＱｄｏｔ^ＴＭナノ粒子）が含まれる。上記の様々なイムノアッセイを実施する際に使用される一般的な技術は、当業者に知られている。

【0083】

診断の目的では、抗体を含むポリペプチドは、限定しないが、放射性同位体、蛍光標識、及び当該分野で知られている様々な酵素－基質標識を含む検出可能な部分で標識することができる。標識を抗体にコンジュゲートさせる方法は当該技術分野で知られている。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体は標識される必要はなく、その存在は、第一の抗ＩＬ３１抗体に結合する第二の標識化抗体を使用して検出することができる。幾つかの実施態様では、抗ＩＬ３１抗体を、競合結合アッセイ、直接及び間接サンドイッチアッセイ、並びに免疫沈降アッセイ等の任意の既知のアッセイ法において用いることができる。Ｚｏｌａ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｐｐ．１４７－１５８（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．１９８７）。抗ＩＬ３１抗体及びポリペプチドは、インビボイメージング等のインビボ診断アッセイにもまた用いることができる。一般に、抗体又はポリペプチドは、目的の細胞又は組織の位置がイムノシンチオグラフィーを使用して特定されうるように、放射性核種（例えば^１１１Ｉｎ、^９９Ｔｃ、^１４Ｃ、^１３１Ｉ、^１２５Ｉ、^３Ｈ、又はここに概略を示したものを含む任意の他の放射性核種標識）で標識される。抗体は当該技術分野で周知の手法を使用して病理学における染色試薬として使用してもよい。

【0084】

幾つかの実施態様では、第一の抗体は診断用に使用され、第二の抗体は治療剤として使用される。幾つかの実施態様では、第一の抗体と第二の抗体は異なる。幾つかの実施態様では、第一の抗体と第二の抗体は別々のエピトープに結合することによって、両方とも同時に抗原に結合しうる。

【0085】

次の実施例は、開示の特定の態様を例示するものであり、決して開示を限定することを意図するものではない。

【実施例】

【0086】

実施例１： ＩＬ３１への結合性を増強するためのインビトロ親和性成熟
ＩＬ－３１に対して産生されたマウスモノクローナル抗体Ｍ１４の可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）配列が同定された（配列番号：１及び２）。あらゆる目的のためにその全体が出典明示によりここに援用される国際公開第２０１８／１５６３６７号を参照のこと。Ｍ１４ ＶＨ及びＶＬ配列は、ＣＤＲグラフト化の鋳型として適切なイヌ生殖系列抗体配列を検索し選択し、続いてタンパク質モデリングを行うことにより、イヌ化した（配列番号：３及び４）。

【0087】

イヌ化されたＭ１４ ＶＨ及びＶＬ配列（配列番号：３及び４）のＣＤＲ内及びその周辺に変異を有するバリアントＦａｂポリペプチドのファージライブラリーを調製し、イヌＩＬ３１解離アッセイによってより遅いｋ_ｏｆｆ速度についてスクリーニングした。イヌＩＬ３１に対してファージライブラリーを３ラウンドパニングした後、潜在的にイヌＩＬ３１結合性が増強されているバリアントＦａｂポリペプチドを発現するファージコロニーを同定し、ポリペプチドの配列を決定した。

【0088】

ＳＡＳＡタグを含む同定されたバリアントＦａｂポリペプチドのそれぞれを発現する単一の大腸菌コロニーを培養し、ポリペプチドを発現するように誘導した。バリアントＦａｂポリペプチドを含む細胞培養培地を、プレート又はＢｉａｃｏｒｅチップの何れかに固定化されたＢＳＡに曝露した。バリアントＦａｂポリペプチドが結合したプレート又はチップを可溶性イヌＩＬ３１に曝露して、遅いｋ_ｏｆｆ速度についてスクリーニングした。

【0089】

３つのリードイヌ化成熟可変重鎖ポリペプチド（ｃｍＶＨ１（配列番号：５）、ｃｍＶＨ２（配列番号：６）、及びｃｍＶＨ３（配列番号：７））と３つのイヌ化成熟軽鎖ポリペプチド（ｃｍＶＬ１（配列番号：８）、ｃｍＶＬ２（配列番号：９）、及びｃｍＶＬ３（配列番号：１０））を選択した。リードイヌ化成熟可変鎖の例示的なＣＤＲ配列は、配列番号：１１、１２、１３、１４、１５、２０、２１、２２、２３、及び２４で表され、フレームワーク領域配列は、配列番号：１６、１７、１８、１９、２５、２６、２７、及び２８で表される。

【0090】

ヒトＩｇＧ１重鎖に融合されたｃｍＶＨ１、ｃｍＶＨ２、又はｃｍＶＨ３と、ヒトカッパ定常軽鎖に融合されたｃｍＶＬ１、ｃｍＶＬ２、及びｃｍＶＬ３の異なる組み合わせから構成されるキメラ抗体を作製した。ヒトＩｇＧ１重鎖に融合されたＭ１４のイヌ化ＶＨ（配列番号：３）と、ヒトカッパ定常軽鎖に融合されたＭ１４のイヌ化ＶＬ（配列番号：４）もまた作製した。イヌＩＬ３１の異なるキメラ抗体に対する親和性を、以下の表３に記載されるように、ＢＩＡｃｏｒｅ ８Ｋを使用して測定した：

【0091】

【0092】

イヌＩＬ３１に対する試験された各キメラ抗体の親和性及び動態を、以下の表４に要約する。試験した親和性成熟抗体（分析物２－６）のそれぞれは、イヌ化ＶＨ－ＶＬ Ｍ１４抗体対照（分析物１）と比較して、（より低いＫｄ値によって証明されるような）より高い親和性及び（より低いｋ_ｏｆｆ値によって証明されるような）遅いオフ速度を示した。

【0093】

【0094】

実施例２： ネコＩＬ３１への結合性が増強された変異
表３及び４（上記）におけるイヌＩＬ－３１への親和性について試験した６種のキメラ抗体をまたネコＩＬ３１への親和性についても試験した。結合分析は、次のようにバイオセンサーＯｃｔｅｔＲｅｄを使用して実施した。簡単に説明すると、ネコＩＬ３１をビオチン化した。遊離の未反応ビオチンを、大規模な透析によってビオチン化ＩＬ３１から除去した。ビオチン化ネコＩＬ３１を、ストレプトアビジンセンサー先端に捕捉した。抗体（２０ｕｇ／ｍＬ）とネコＩＬ３１の結合を３００秒間モニターした。解離を３００秒間モニターした。希釈及び全結合工程用の緩衝液は、２０ｍＭのリン酸、１５０ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．２であった。結合分析の結果を図２に示す。試験した抗体の親和性は、（ｃｍＶＨ３＋ｃｍＶＬ２）又は（ｃｍＶＨ３＋ｃｍＶＬ３）＞（ｃｍＶＨ２＋ｃｍＶＬ３）＞（ｃｍＶＨ２＋ｃｍＶＬ２）＞（ｃｍＶＨ１＋ｃｍＶＬ１）＞（イヌ化ＶＨ－ＶＬ Ｍ１４）とランク付けされた。

【0095】

実施例３： イヌ定常ドメインを含むイヌ化された成熟可変鎖
イヌ化された成熟ＶＨ（例えば、配列番号：５、６、及び７）及びＶＬ（例えば、配列番号：８、９、及び１０）は、イヌＩｇＧ－Ａ、ＩｇＧ－Ｂ、ＩｇＧ－Ｃ、又はＩｇＧ－Ｄ重鎖定常ドメイン（例えば、配列番号：８３、８４、８５、及び８６）及びイヌカッパ軽鎖定常ドメイン（例えば、配列番号：８７）にそれぞれ融合されうる。イヌ定常ドメインを有する例示的なイヌ化された成熟重鎖及び軽鎖配列には、配列番号：３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、及び４８が含まれる。

【0096】

実施例４： 親和性が増強された可変重鎖及び軽鎖のネコ化及び発現
親和性が増強された可変重鎖及び軽鎖（例えば、ｃｍＶＨ１－３及びｃｍＶＬ１－３）は、当該技術分野で理解されている方法を使用してネコ化することができる。例えば、ｃｍＶＨ２（配列番号：６）は、例示的な配列番号：９０にネコ化され；ｃｍＶＨ３（配列番号：７）は、例示的な配列番号：４９、５０、及び５１にネコ化され；ｃｍＶＬ３（配列番号：１０）は、配列番号：５２、５３、及び５４の何れか一つにネコ化された。それぞれネコＩｇＧ重鎖定常ドメイン（例えば、配列番号：８８）及びネコカッパ軽鎖定常ドメイン（例えば、配列番号：８９）を伴うネコ化ＶＨ及びＶＬが発現されうる。ネコ定常領域を有する例示的なネコ化された成熟重鎖及び軽鎖配列には、配列番号：７３、７４、７５、９１、７６、７７、及び７８が含まれる。

【0097】

配列番号：９１の重鎖（ＶＨ２）及び配列番号：７８の軽鎖（ＶＬ３ｃ）を有するネコ化ＩＬ－３１抗体をコードするＤＮＡ配列を、哺乳動物細胞で発現させ、精製した。実施例５の細胞ベースアッセイを使用して、ネコ化ＶＨ２－ＶＬ３ ＩＬ３１抗体は、ネコＩＬ３１Ｒ及びイヌＩＬ３１ＲでトランスフェクトされたＨｅＬａ細胞の両方においてネコＩＬ３１誘発性ＳＴＡＴ３リン酸化を定量的にブロックした。

【0098】

実施例５： イヌＩＬ３１細胞ベースのシグナル伝達アッセイの開発
ヒト上皮細胞株であるＨｅＬａ細胞株（アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）、カタログ番号ＣＣＬ－２）を購入し、１０％の胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）（ＡＴＣＣ、カタログ番号３０－２０２０）を補充したＡＴＣＣ処方のイーグル最小必須培地（ＡＴＣＣ、カタログ番号３０－２０３３）で培養した。イヌ又はネコＩＬ３１Ｒａ－ＦＬＡＧ発現プラスミド（ｐｃＤＮＡ３．１＿ｃａｎｉｎｅ ＩＬ３１Ｒａ＿ＦＬＡＧ（配列番号：９２）又はｐｃＤＮＡ３．１＿ｆｅｌｉｎｅ ＩＬ３１Ｒａ－ＦＬＡＧ（配列番号：９３）で安定的にトランスフェクトされたＨｅＬａ細胞を、リポフェクタミン法（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号１１６６８０２７）を使用して作製し、最終濃度４００μｇ／ｍＬでＧ４１８を使用してＧ４１８耐性トランスフェクタント（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒカタログ番号１０１３１０３５）について選択した。Ｇ４１８耐性クローンを、ウエスタンブロッティングによるイヌＩＬ３１又はネコＩＬ３１誘発に応答するＳＴＡＴ１、ＳＴＡＴ３、及びＳＴＡＴ５リン酸化についてスクリーニングした。ＩＬ３１誘発に応答したＩＬ３１Ｒａで安定的にトランスフェクトされたＨｅＬａクローンをその後の研究に使用した。

【0099】

イヌ又はネコＩＬ３１媒介ＳＴＡＴタンパク質リン酸化を、ＨｅＬａ／ＩＬ３１Ｒａ細胞をウェル当たり１０ｅ５細胞で９６ウェルプレートに播種し、（ＡＴＣＣが推奨するように１０％のＦＢＳ Ｄ－ＭＥＭ中）３７℃、５％ＣＯ_２で一晩インキュベートすることによって実施した。各ウェルの培地を５％ＣＯ_２、３７℃において１時間ＦＢＳを補充しない培地と交換することによって、細胞の血清飢餓を達成した。段階希釈した抗ＩＬ３１抗体をＩＬ３１サイトカインと１時間プレインキュベートした後、９６ウェルプレートの各ウェルの血清飢餓細胞に室温において５分間添加した。次に、２０μＬの停止液（Ｔｈｅｒｍｏ ＦｉｓｈｅｒのＭ－ＰＥＲ、カタログ番号７８５０１）を各ウェルに添加して、細胞を溶解させた。細胞可溶化物をＳＤＳ－ＰＡＧＥ（４－１２％のＢｉｓ－Ｔｒｉｓゲル、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号ＮＰ０３２９）で分離した。ＩＬ３１誘発性ＳＴＡＴリン酸化を、抗ホスホＳＴＡＴ３抗体（ＲｎＤ、カタログ番号ＡＦ４６０７）、抗ホスホＳＴＡＴ１抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、カタログ番号７６４９）、又は抗ホスホＳＴＡＴ５抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｃａｔａｌｏｇ番号９３５９）の何れかを使用したウエスタンブロッティングによってアッセイした。

【0100】

驚くべきことに、イヌ又はネコ共受容体ＯＳＭＲの発現は、ＩＬ３１シグナル伝達に必要ではなかった。

【図1】

【配列表】

2022545259000001.app

【国際調査報告】