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▶ ビージーアイ シェンチェン カンパニー リミテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-11-10
(54)【発明の名称】磁性ビーズのマイクロ流体への作用
(51)【国際特許分類】
G01N 1/00 20060101AFI20221102BHJP
G01N 37/00 20060101ALI20221102BHJP
【ＦＩ】
G01N1/00 101F
G01N37/00 101
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022541718
(86)(22)【出願日】2020-09-09
(85)【翻訳文提出日】2022-04-26
(86)【国際出願番号】 CN2020114156
(87)【国際公開番号】W WO2021047533
(87)【国際公開日】2021-03-18
(31)【優先権主張番号】62/898,454
(32)【優先日】2019-09-10
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】512096768
【氏名又は名称】ビージーアイ シェンチェン カンパニー リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100145403
【弁理士】
【氏名又は名称】山尾 憲人
(74)【代理人】
【識別番号】100189555
【弁理士】
【氏名又は名称】徳山 英浩
(74)【代理人】
【識別番号】100172236
【弁理士】
【氏名又は名称】岩木 宣憲
(72)【発明者】
【氏名】ゴン，ジアン
(72)【発明者】
【氏名】リン，ヤン－ユウ
(72)【発明者】
【氏名】リン，シー－チン
(72)【発明者】
【氏名】ジョン，チェン フランク
【テーマコード（参考）】
2G052
【Ｆターム（参考）】
2G052AA28
2G052AA40
2G052AB01
2G052AB11
2G052AB16
2G052AB27
2G052AD06
2G052AD26
2G052AD46
2G052CA03
2G052CA04
2G052CA08
2G052DA05
2G052GA28
2G052GA29
2G052HA12
2G052HC04
2G052HC32
2G052HC42
2G052JA07
2G052JA08
2G052JA11
(57)【要約】
本開示の実施形態は、第１位置に配置された液滴に磁場を印加することで、マイクロ流体アクチュエータ上でビーズを液滴の本体から分離する方法および装置を含む。液滴は、１以上の磁気応答性ビーズを含み、磁場を移動させて１以上の磁気応答性ビーズを液滴の本体から分離する。実施形態はまた、磁場を１以上の磁気応答性ビーズに印加し、磁場を移動させて１以上の磁気応答性ビーズを第１位置に配置された液滴に導入することによって、１以上のビーズを液滴の本体に導入する方法および装置を含む。液滴は流体を含む。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
マイクロ流体アクチュエータ上の液滴本体から１以上のビーズを磁気的に分離する方法であって、マイクロアクチュエータの第１面の第１位置に配置された液滴にスポット磁場を印加し、前記液滴は１以上の磁気応答性ビーズおよび流体を含み、
前記スポット磁場を移動させて、前記１以上の磁気応答性ビーズを前記液滴の本体から分離する、方法。
【請求項2】
前記１以上の磁気応答性ビーズが、磁気応答性ビーズのセットを含み、前記スポット磁場の前記液滴への印加が、前記磁気応答性ビーズのセットの少なくとも一部をビーズパレットに集め、前記スポット磁場の移動が、前記液滴の本体から前記ビーズパレットを分離することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記スポット磁場の前記液滴への印加が、前記スポット磁場の源を前記第１位置に向かって移動させることを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項4】
前記スポット磁場を移動させて前記ビーズパレットを前記液滴の本体から分離することは、前記スポット磁場の源を前記マイクロアクチュエータの前記第１面に沿って移動させることを含み、前記スポット磁場の移動が、前記ビーズパレットを前記第１面の第２位置に移動させる、請求項３に記載の方法。
【請求項5】
前記スポット磁界の源が永久磁石である、請求項３または４に記載の方法。
【請求項6】
前記マイクロアクチュエータが第１基板を備え、前記第１基板が前記第１面と前記第１面に対向する第２面とを備え、前記永久磁石が前記第２面に隣接して配置されている、請求項５に記載の方法。
【請求項7】
前記スポット磁場の印加が、前記第１位置に近接した位置で第１電磁石を作動させることを含み、前記スポット磁場を移動させて前記液滴の本体から前記ビーズパレットを分離することが、第２位置に近接した位置で第２電磁石を作動させることを含む、請求項２～４のいずれかに記載の方法。
【請求項8】
前記スポット磁場を移動させて前記液滴の本体から前記ビーズパレットを分離することが、前記スポット磁場の源を物理的に移動させることを含む、請求項２～６のいずれかに記載の方法。
【請求項9】
前記ビーズパレットが、前記流体の残量をさらに含む、請求項２～８のいずれかに記載の方法。
【請求項10】
前記マイクロアクチュエータが、第１基板と、前記第１基板から間隔を空けて配置されて前記第１基板との間にギャップを画定する第２基板とを備え、前記液滴が前記ギャップに配置され、前記第２基板が、前記流体が前記第１位置から第２位置に出るのを防止する、または、前記第１位置から第２位置に出る前記流体の量を低減するように構成された前記ギャップ内に延びる物理バリアを含む、請求項１～９のいずれかに記載の方法。
【請求項11】
前記液滴の本体から前記１以上の磁気応答性ビーズを分離することが、前記スポット磁場を第１方向に沿って移動させること、および、前記液滴の本体を前記第１方向とは異なる第２方向に沿って移動させることの両方を含む、請求項１～１０のいずれかに記載の方法。
【請求項12】
エレクトロウェッティングを用いて前記液滴の本体を前記第２方向に移動させる、請求項１１に記載の方法。
【請求項13】
前記液滴の本体の一部を前記第１面の親水性部分に接触させることにより、前記液滴の本体を前記第２方向に移動させる、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項14】
前記本体の第１側面と前記本体の第２側面との間の圧力差を用いて、前記液滴の本体を前記第２方向に移動させる、請求項１１～１３のいずれかに記載の方法。
【請求項15】
前記マイクロアクチュエータが、第１基板と、前記第１基板から間隔をあけて配置され、前記第１基板との間にギャップを画定する第２基板とを備え、前記液滴が前記ギャップに配置され、前記圧力差は、前記マイクロアクチュエータ上の前記液滴が配置される前記ギャップの容量変化によって生じる、請求項１４に記載の方法。
【請求項16】
マイクロ流体アクチュエータ上の液滴本体に１以上のビーズを磁気的に導入する方法であって、マイクロアクチュエータの第１面の第２位置で、１以上の磁気応答性ビーズにスポット磁場を印加すること、および、
前記スポット磁場を移動させて、前記１以上の磁気応答性ビーズを第１位置に配置された液滴に導入することを含む、方法。
【請求項17】
前記１以上の磁気応答性ビーズが磁気応答性ビーズのセットを含み、前記スポット磁場の前記磁気応答性ビーズのセットへの印加が、前記磁気応答性ビーズのセットをビーズパレットに集め、前記スポット磁場の移動が、前記ビーズパレットを前記液滴の本体に導入することを含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項18】
前記スポット磁場の印加が、前記スポット磁場の源を前記第２位置に向かって移動させることを含む、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項19】
前記スポット磁場を移動させて前記１以上の磁気応答性ビーズを前記液滴に導入することが、前記スポット磁場の源を前記第１面に沿って移動させることを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項20】
前記スポット磁場の源が永久磁石である、請求項１８または１９に記載の方法。
【請求項21】
前記マイクロアクチュエータが第１基板を備え、前記第１基板が、第１面と、前記第１面に対向する第２面とを備え、前記永久磁石が前記第２面に隣接して位置している、請求項２０に記載の方法。
【請求項22】
前記スポット磁場の印加が、前記第２位置に近接した位置で第２電磁石を作動させることを含み、前記スポット磁場を移動させて前記１以上の磁気応答性ビーズを前記液滴に導入することが、前記第１位置に近接した位置で第１電磁石を作動させることを含む、請求項１７～１９のいずれかに記載の方法。
【請求項23】
前記スポット磁場を移動させて前記１以上の磁気応答性ビーズを前記液滴に導入することは、前記スポット磁場の源を物理的に移動させることを含む、請求項１７～２１のいずれかに記載の方法。
【請求項24】
前記ビーズパレットが流体の容量をさらに含む、請求項１７～２３のいずれかに記載の方法。
【請求項25】
前記マイクロアクチュエータが、第１基板と、前記第１基板から間隔を空けて配置され前記第１基板との間にギャップを画定する第２基板とを備え、前記液滴が前記ギャップに配置され、前記第２基板が、前記流体が前記第１位置から出ることを防止する、または、前記第１位置から出る前記流体の量を低減するように構成された前記ギャップ内に延びる物理バリアを含む、請求項１６～２４のいずれかに記載の方法。
【請求項26】
前記１以上の磁気応答性ビーズを前記液滴に導入することが、スポット磁場を第１方向に沿って移動させること、および、前記液滴の本体を前記第１方向とは異なる第２方向に沿って移動させることの両方を含む、請求項１６～２５のいずれかに記載の方法。
【請求項27】
エレクトロウェッティングを用いて前記液滴の本体を前記第２方向に移動させる、請求項２６に記載の方法。
【請求項28】
前記液滴の本体の一部を前記第１面の親水性部分に接触させることによって、前記液滴の本体を前記第２方向に移動させる、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項29】
前記本体の第１側面と前記本体の第２側面との間の圧力差を用いて、前記液滴の本体を前記第２方向に移動させる、請求項２６～２８のいずれかに記載の方法。
【請求項30】
前記マイクロアクチュエータが、第１基板と、前記第１基板から間隔をあけて配置され、前記第１基板との間にギャップを画定する第２基板とを備え、前記液滴が前記ギャップに配置され、前記圧力差は、前記マイクロアクチュエータ上の前記液滴が配置される前記ギャップの容量変化によって生じる、請求項２９に記載の方法。
【請求項31】
１以上の液滴を受けるように構成された第１面と、前記第１面に対向する第２面とを有する第１基板と、磁界の源と
を備え、
第１面の第１位置に配置された第１液滴にスポット磁場を印加し、前記第１液滴が１以上の磁気応答性ビーズと流体とを含むように構成されていると共に、
前記スポット磁場を移動させて、前記１以上の磁気応答性ビーズを前記第１液滴の本体から分離させるように構成されている、液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項32】
前記１以上の磁気応答性ビーズが、磁気応答性ビーズのセットを含み、前記液滴マイクロアクチュエータが、前記スポット磁場を前記第１液滴に印加して前記磁気応答性ビーズのセットをビーズパレットに集めるように構成されていると共に、前記液滴マイクロアクチュエータは、前記スポット磁場を移動させて前記ビーズパレットを前記第１液滴の本体から分離するように構成されている、請求項３１に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項33】
前記スポット磁場の源を前記第１位置に向かって移動させることで、前記第１液滴に前記スポット磁場を印加するように構成されている、請求項３１または３２に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項34】
前記スポット磁場の源を前記液滴マイクロアクチュエータの前記第１面に沿って移動させることで、前記スポット磁場を移動させるように構成されている、請求項３３に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項35】
前記スポット磁場の源が永久磁石である、請求項３２～３４のいずれかに記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項36】
前記永久磁石が前記第２面に隣接して位置している、請求項３５に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項37】
前記スポット磁場の源が電磁石であり、前記第１液滴の前記スポット磁場への導入が、前記第１位置の近くの位置で前記電磁石を作動させることを含む、請求項３２～３４のいずれかに記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項38】
前記第１基板から間隔を空けて配置され、前記第１基板との間にギャップを画定する第２基板をさらに備え、前記第１液滴が前記ギャップに配置され、前記第２基板が、前記液体が前記第１位置から前記第２位置に搬送されるのを防止する、または、前記第１位置から前記第２位置に搬送される前記流体の量を低減するように構成された前記ギャップ内に延びる物理バリアを含む、請求項３１～３７のいずれかに記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項39】
前記スポット磁場を第１方向に沿って移動させ、前記第１液滴の本体を前記第１方向とは異なる第２方向に沿って移動させることで、前記第１液滴の本体から前記１以上の磁気応答性ビーズを分離するように構成されている、請求項３１～３８のいずれかに記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項40】
エレクトロウェッティングを用いて前記第１液滴の本体を前記第２方向に移動させるように構成されている、請求項３９に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項41】
前記第１液滴の本体の一部を前記第１面の親水性部分に接触させることによって、前記第１液滴の本体を前記第２方向に移動させるように構成されている、請求項３９または４０に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項42】
前記本体の第１側面と前記本体の第２側面との圧力差を用いて、前記第１液滴の本体を前記第２方向に移動させるように構成されている、請求項３９～４１のいずれかに記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項43】
前記第１基板と前記第２基板とが、前記第１基板と前記第２基板との間のギャップを画定し、前記第１液滴が前記ギャップに配置され、前記圧力差は、前記液滴マイクロアクチュエータ上の前記第１液滴が配置される前記ギャップの容量変化によって生じる、請求項４２に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項44】
第１面と、前記第１面に対向する第２面とを有する第１基板と、前記第１基板から間隔を空けて配置され、前記第１基板との間にギャップを画定する第２基板であって、前記ギャップが、第１位置で、その中に液滴を配置可能に構成されている、第２基板と、
前記第１基板の下に配置された磁界源と
を備え、
前記磁界源は、（１）前記第１基板に向かって移動可能であると共に、前記第１基板から離れて移動可能であり、（２）前記第１基板に沿って移動可能である、液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項45】
前記磁界源は、前記第１基板によって画定される平面に対して垂直なベクトルによって少なくとも一部が画定される軌道に沿って移動可能であり、前記第１基板によって画定される平面に対して平行なベクトルによって少なくとも一部が画定される軌道に沿ってさらに移動可能である、請求項４４に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項46】
前記磁界源は、前記第１基板によって画定される平面に対して垂直な第１ベクトル成分を有するベクトルによって画定される軌道に沿って移動可能であり、前記第１基板によって画定される平面に対して平行なベクトルによって少なくとも部分的に画定される軌道に沿ってさらに移動可能である、請求項４４または４５に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項47】
前記第２基板が、前記流体が前記第１位置から出るのを防止する、または、前記第１位置から出る流体の量を低減するように構成された前記ギャップ内に延びる物理バリアを含む、請求項４４～４６のいずれかに記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項48】
前記第１基板が下基板であり、前記第２基板が上基板である、請求項４４～４７のいずれかに記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項49】
前記スポット磁場を第１方向に沿って移動させるように構成され、同時または略同時に、前記液滴の本体を前記第１方向と異なる第２方向に沿って移動させるようにさらに構成されている、請求項４４～４８のいずれかに記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項50】
エレクトロウェッティングを用いて、前記液滴の本体を前記第２方向に移動させるように構成されている、請求項４９に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項51】
前記液滴の本体の一部を前記第１面の親水性部分に接触させることにより、前記液滴の本体を前記第２方向に移動させるように構成されている、請求項４９または５０に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項52】
前記本体の第１側面と前記本体の第２側面との圧力差を用いて、前記第１液滴の本体を前記第２方向に移動させるように構成されている、請求項４９～５１のいずれかに記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【請求項53】
前記第１基板および前記第２基板が、前記第１基板および前記第２基板の間のギャップを画定し、前記液滴が前記ギャップに配置され、前記圧力差が、前記液滴マイクロアクチュエータ上の前記液滴が配置される前記ギャップの容量変化によって生じる、請求項５２に記載の液滴マイクロアクチュエータ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
（関連出願に対するクロスリファレンス）
本出願は、２０１９年９月１０日に出願された米国仮特許出願第６２／８９８，４５４号の優先権を主張し、その内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０１９年９月１０日に出願された米国仮特許出願第６２／８９８，４５４号の優先権を主張し、その内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0002】
本開示は、ビーズを操る装置および方法、特に、マイクロアクチュエータで磁気応答性ビーズを操る装置および方法に関する。
【背景技術】
【0003】
エレクトロウェッティング・オン・ダイエレクトリック（ＥＷＯＤ）は、疎水性表面上の２つの電極間で水滴の接触角を変化させる液体駆動機構である。これは、電界を用いて表面の疎水性を変更することで行われる。例えば、電圧をかけることで、表面を変更して、疎水状態から親水状態に切り替えることができる。無機基板（例えば、シリコン／ガラス基板）または有機基板（例えば、環状オレフィンポリマ／ポリカーボネート基板）等の基板上に配置された電極のアレイによって、数ｍｍの大きさ（例えば、数マイクロリットルの容量）のバルク液体滴を移動させることができる。
【0004】
マイクロ流体アクチュエータ（以下、マイクロアクチュエータ）は、非常に小さなサイズの液滴を操るために使用できるデバイスである。マイクロアクチュエータは、次世代ＤＮＡ／ＲＮＡシーケンスライブラリ調製のような多くの生物学的アッセイワークフローで有用に使用されている。このようなワークフローは、通常、ビーズを使用して、ＤＮＡ、ＲＮＡまたは抗体などのターゲットを捕捉し、ビーズをキャリアとして使用して、ターゲットをマイクロ流体アクチュエータ上の所望の位置に搬送する、および／または、１以上の反応を実行させる。
【発明の概要】
【0005】
本開示は、マイクロアクチュエータでビーズを操るための装置、システムおよび方法を提示する。いくつかの実施形態では、ビーズは、磁場を使用して移動または他の方法で操られ得るように、磁気応答性であってもよい。いくつかの実施形態では、ビーズは、ＤＮＡ分子、ＲＮＡ分子または抗体などのターゲットに結合していてもよく、これらのターゲットを操るための手段として使用されてもよい。例えば、ターゲットのＤＮＡ分子に結合したビーズをマイクロアクチュエータ内の液滴に出し入れし、液滴内に試薬を含ませて液滴内で反応を起こさせることができる。ビーズを液滴に出し入れする従来の方法は、ビーズを固定化し、エレクトロウェッティングによって液滴をビーズに近づけるか、またはビーズから遠ざけることを含む。このような方法は、いくつかの欠点がある。例えば、エレクトロウェッティングの使用は、特にビーズから液滴を遠ざけるために使用される場合、マイクロアクチュエータの誘電体表面全体に比較的高い電圧（例えば、３００Ｖ）の印加が必要である。場合によっては、これらの電圧は、単に液滴を輸送するために必要な電圧よりも高くてもよく、１５０Ｖ～２００Ｖであってもよい。高い電圧を繰り返し印加すると、マイクロアクチュエータが損傷する可能性がある。例えば、イオンや他の不純物が誘電体に入り込み、結果的に誘電体が導電体となる絶縁破壊を引き起こす可能性がある。一度誘電体が導体になると、マイクロアクチュエータが無効化され（例えば、そのような誘電体に電圧を印加すると、マイクロアクチュエータ内の液滴が局在化する）、結果的に交換が必要となる場合がある。もう一つの欠点は、エレクトロウェッティングを使用して液滴をビーズから遠ざけると、しばしば、ビーズから遠ざけられた液滴の本体内に相当数のビーズが残る、および／または、ビーズを含む液滴から相当量の残留液が残ることである。これは、一部、エレクトロウェッティングアプローチの不正確性に起因する。例えば、エレクトロウェッティングアプローチは、液滴の流体と一緒にビーズを引きずり込むことができる程度の流れを誘発する。さらに、エレクトロウェッティングアプローチでは、流量を細かく制御できないため、ビーズに不要な量の液体が残ってしまう。
【0006】
本開示の実施形態は、液滴の内外にビーズを磁気的に移動させることによって、上述した従来の方法から脱却している。いくつかの実施形態では、開示された方法は、液滴自体が静止したままである間に実行されてもよい。本開示によって説明される方法は、従来の方法を超える１以上の次の利点を提供し得る。第一に、液滴の内外にビーズを移動させるのにエレクトロウェッティングを必要としないため、絶縁破壊のリスクが大幅に軽減される。第二に、磁気によるビーズの移動が、はるかに精密で制御可能である。ビーズはマイクロアクチュエータの基板に接する領域に集められ、任意の所望の速度で移動できる。この速度の微調整は、磁場（例えば、磁場を発生させる永久磁石の動き）の制御レベルによってのみ制限され、エレクトロウェッティングから生じる流れよりもはるかに精密で制御可能である。最後に、本明細書に記載された磁気ビーズ搬送技術は、エレクトロウェッティングを必要としない用途にも適用できる。例えば、磁気ビーズは、流体輸送の他の方法（例えば、連続流マイクロ流体工学、紙ベースのマイクロ流体工学、糸ベースのマイクロ流体工学）に依存するマイクロ流体工学カートリッジ内で使用され得る。これらは利点の例に過ぎないことに留意されたい。他の利点は、本開示に照らして容易に明らかになる場合がある。
【0007】
いくつかの実施形態において、方法は、マイクロアクチュエータの第１面の第１位置に配置された液滴にスポット磁場を印加すること（液滴は、１以上の磁気応答性ビーズおよび流体を含む）、および、スポット磁場を移動させて、液滴の本体から１以上の磁気応答性ビーズを分離することを含んでもよい。いくつかの実施形態では、１以上の磁気応答性ビーズは、磁気応答性ビーズのセット（例えば、２以上のビーズ）を含んでもよい。いくつかの実施形態において、液滴にスポット磁場を印加することが、磁気応答性ビーズのセットの少なくともいくつかをビーズパレット（例えば、ビーズのクラスタを含み得る）に集めてもよいし、スポット磁場の移動が、例えば、スポット磁場の源（例えば、１以上の永久磁石、１以上の電磁石）を第１位置に向かって移動させることによって、ビーズパレットを液滴の本体から分離することを含んでもよい。いくつかの実施形態では、ビーズパレットは、流体の残留容量を更に含んでもよい。いくつかの実施形態では、スポット磁場を移動させてビーズパレットを液滴の本体から分離することは、スポット磁場の源をマイクロアクチュエータの第１面（例えば、第１面によって規定される平面に実質的に平行）に沿って移動させることを含み、スポット磁場の移動が、ビーズパレットを第１面の第２位置に移動させてもよい。いくつかの実施形態では、磁界源（例えば、磁石）は、（１）第１基板に向かって、および、第１基板から離れるように、（２）第１基板に沿って、移動可能であってもよい。例えば、磁界源は、第１基板によって画定される平面に垂直なベクトルによって少なくとも部分的に画定される軌道に沿って移動可能であってもよく、第１基板によって画定される平面に平行なベクトルによって少なくとも部分的に画定される軌道に沿ってさらに移動可能であってもよい。
【0008】
いくつかの実施形態において、マイクロアクチュエータは、第１基板を含んでもよい。第１基板は、第１面と、第１面と対向する第２面とを含んでもよい。いくつかの実施形態において、磁場の源は、第２面に隣接して位置する永久磁石であってもよい。いくつかの実施形態では、第２面は、マイクロアクチュエータの底面であってもよく、永久磁石は、第２面の下に（例えば、第２面に隣接して）位置してもよい。
【0009】
いくつかの実施形態において、スポット磁場を印加することは、第１位置に近接した位置で第１電磁石を作動させることを含んでもよい。これらの実施形態において、スポット磁場を移動させてビーズパレットを液滴の本体から分離することは、第２位置に近接した位置で第２電磁石を作動させることを含んでもよい。
【0010】
いくつかの実施形態において、スポット磁場を移動させてビーズパレットを液滴の本体から分離することは、スポット磁場の源を物理的に移動させることを含んでもよい。
【0011】
いくつかの実施形態において、マイクロアクチュエータが、第１基板と、第１基板から間隔を空けて配置され第１基板との間にギャップを画定する第２基板とを含み、液滴がギャップに配置され、第２基板が、流体が第１位置から第２位置へ出ることを防止する、または、第１位置から第２位置へ出る流体の量を低減するように構成されたギャップ内に延びる物理バリアを含んでもよい。
【0012】
いくつかの実施形態において、方法および装置は、マイクロアクチュエータの第１面の第２位置で１以上の磁気応答性ビーズにスポット磁場を印加することを含み（構成され）、および、スポット磁場を移動させて第１位置に配置された液滴に１以上の磁気応答性ビーズを導入することを含んでもよい（構成されてもよい）。この方法および装置において、液滴は流体を含み得る。
【0013】
いくつかの実施形態では、スポット磁場を第１方向に沿って（例えば、磁石を第１方向に移動させることによって）移動させ、液滴の本体を第１方向とは異なる第２方向に沿って（例えば、第１方向と正反対の方向に）移動させてもよい。例えば、スポット磁場を第１方向に沿って移動させる同時または略同時に、液滴の本体を第２方向に沿って移動させてもよい。このような技術は、例えば、液滴からビーズをより迅速に分離するため、または、液滴にビーズをより迅速に導入するために使用され得る。いくつかの実施形態において、液滴の本体は、エレクトロウェッティングを使用して第２方向に移動されてもよい。いくつかの実施形態では、液滴の本体の一部を第１面の親水性部分に接触させることによって、液滴の本体を第２方向に移動させる。いくつかの実施形態では、圧力差を用いて液滴の本体を第２方向に移動させてもよい。液滴の本体は、本体の第１側面と本体の第２側面との間の圧力差を用いて、第２方向に移動してもよい。例えば、マイクロアクチュエータが、第１基板と、第１基板から間隔を空けて配置され第１基板との間に間隙を画定する第２基板とを含み、液滴がギャップに配置されてもよい。この例では、液滴の本体は、マイクロアクチュエータ上の液滴が配置されるギャップの容量変化によって生じる圧力差を用いて、第２方向に移動してもよい。
【0014】
この概要は、以下でさらに詳細に説明される本開示の異なる実施形態を簡略化した形で導入するために提供される。この概要は、請求された主題の範囲を限定するために使用されることを意図していない。請求された主題の他の特徴、詳細、効用および利点は、以下の詳細な説明から明らかになる。
【図面の簡単な説明】
【0015】
【発明を実施するための形態】
【0016】
以下の詳細な説明において、本書の一部を構成する添付図面を参照し、その中に、本発明を実施できる具体的かつ非限定的な実施例を図示する。用語「上」、「下」、「垂直」、「高さ」、「頂」、「底」などは、説明される図の向きを参照して使用される。本発明の実施形態の構成要素は、多数の異なる向きに配置され得るので、この用語は、説明の目的で使用され、限定するものでない。
【0017】
いくつかの図は、マイクロアクチュエータにおける液滴を模式的に示している。これらの例では、液滴は、一例えば、約数ミリリットル（１０－３）から約数マイクロリットル（１０－６）の間の定の容量を有する表面張力によって少なくとも部分的に境界が形成された液体であると考えることができる。液滴は、生体分子、タンパク質、生体または死体、試薬、および、それらの任意の組み合わせなどの任意の有機種または無機種を含む水性（ａｑｕｅｏｕｓ）液滴であってもよい。液滴は、非水性液体であってもよい。液滴は、球状であっても非球状であってもよく、約１マイクロメートルから数ミリメートルの範囲のサイズを有していてもよい。いくつかの実施形態では、液滴は、１×１×０．３ｍｍ～１．５×１．５×０．５ｍｍの寸法を有していてもよい。いくつかの実施形態では、液滴は、フィラー流体によってカプセル化されてもよい。液滴は、１以上のビーズを含んでもよい。
【0018】
いくつかの図では、マイクロアクチュエータにおけるビーズを模式的に示している。これらの例において、ビーズは、マイクロアクチュエータで操れる、または、マイクロアクチュエータ上若しくはマイクロアクチュエータに近接する液滴と相互作用できる粒子である任意の粒子であると考えることができる。ビーズは、球形、略球形、卵形、円盤形、立方体および他の三次元形状などの多種多様な任意の形状であってもよい。
【0019】
いくつかの実施形態では、ビーズは磁気応答性であってもよい。これらの実施形態において、ビーズは、磁場源によって操り可能（例えば、マイクロアクチュエータの第１位置から第２位置に移動可能）であってもよい。例えば、磁気応答性ビーズは、磁場源に引き寄せられてもよいし、または、磁場源により斥けられてもよい。ビーズは、例えば、常磁性材料、強磁性材料、フェリ磁性材料、および／または、メタ磁性材料などの磁気応答性材料を含むことによって、磁気応答性を有していてもよい。
【0020】
いくつかの実施形態では、１以上の試薬がマイクロアクチュエータによって採用され得る。これらの実施形態において、試薬は、（例えば、液滴中に存在する種との）反応を誘発するか、または、促進するために使用される物質であると考えることができる。
【0021】
図１Ａは、マイクロアクチュエータ１０の一例を示す模式図である。図１Ａの図示されたマイクロアクチュエータは、１以上の基板に沿って液滴および／または粒子（例えば、ビーズ）を操れるマイクロ流体液滴アクチュエータ（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ ｄｒｏｐｌｅｔ ａｃｔｕａｔｏｒ）である。マイクロアクチュエータ１０は、下基板１２、基板上の絶縁層１３、および、絶縁層内または絶縁層下の電極１４ａおよび１４ｂのアレイを有する基板構造体１１を含む。電極１４ａおよび１４ｂのアレイは、互いに平行に配置され、第１方向に互いに間隔を空けて配置された電極の第１のセット１４ａと、互いに平行に配置され、第１方向と実質的に垂直な第２方向に互いに間隔を空けて配置された電極の第２のセット１４ｂとを含んでもよい。第１セットおよび第２のセットの電極は、同じまたは異なる材料の複数の誘電体層を含むことができる絶縁層１３内で互いに間隔を空けて配置されてもよい。マイクロアクチュエータ１０はまた、基板に入出力回路１５を含んでもよい。入出力回路１５は、マイクロアクチュエータ１０に統合されていてもよいし、マイクロアクチュエータ１０の外部にあってもよい制御回路（図１Ａに図示せず）とインターフェースで接続して、電極１４ａおよび１４ｂのアレイに時間変化する電圧波形を有する制御電圧を提供するよう構成され得る。
【0022】
図１Ａを参照すると、絶縁層１３の表面に配置された流体液滴１６は、液滴の下の電極および隣接する電極において制御電圧をオン／オフすることによって（または電圧レベルを調節することによって）、表面上を移動してもよい。
【0023】
図１Ｂは、図１Ａに示すマイクロアクチュエータ１０のＢ－Ｂ’線に沿った断面図である。第２セットの電極１４ｂの断面図が示されている。第１セットの電極１４ａ（図示せず）は、第２セットの電極１４ｂの上、下または同じ平面内に配置されてもよく、１以上の誘電体層によって第２セットの電極から間隔をあけて配置されてもよい。
【0024】
図２Ａは、マイクロアクチュエータ２０Ａの他の実施例の一部を示す断面図である。図２Ａを参照すると、マイクロアクチュエータ２０Ａは、第１基板２２と、基板２１上の誘電体層２３と、誘電体層２３内の一組の作動電極２４ａ、２４ｂ、２４ｃと、第２基板２８に取り付けられ作動電極２４に対向する共通電極２７とを含む。いくつかの実施形態では、共通電極２７は接地されてもよいし、他の共通電圧を有する基準電極であってもよい。いくつかの実施形態では、誘電体層２３および共通電極２７は、スペーサ２９によって互いに離間され、ギャップが形成されている。他の実施形態では、ギャップは、第１基板２２を第２基板２８に固定するシーラント（例えば、接着剤または他の結合剤）で形成されてもよいし、他の方法で形成されてもよい。
【0025】
図２Ａを参照すると、２つの基板構造体が別々に形成されてもよい。例えば、第１基板構造体は、基板２２と、誘電体層２３と、誘電体層２３内の作動電極２４ａ、２４ｂ、２４ｃとを含むように形成されてもよい。基板２２は、従来の薄膜トランジスタの製造工程によって形成される薄膜トランジスタ（ＴＦＴ）アレイ基板であってもよい。第２基板構造体は、基板２８と、基板２８上の共通電極層２７とを含んでもよい。スペーサ２９は、第１基板構造体または第２基板構造体のいずれかに形成されていてもよい。特定の実施形態では、スペーサ２９は、数マイクロメートルから数ミリメートルの範囲内の高さを有する。一般に、スペーサ２９の高さは、誘電体層２３上に配置された液滴が第２基板構造体と物理的に接触するようにマイクロアクチュエータが構成される液滴の直径より小さい。第１基板構造体および第２基板構造体は、共に結合されてマイクロアクチュエータ２０Ａを形成する。言い換えると、本実施例における第１基板構造体および第２基板構造体間のスペースまたはギャップは、スペーサ２９の高さまたは厚さによって決定される。このスペースまたはギャップが、液滴の流路を形成する。
【0026】
図２Ａに示す例では、共通電極２７および一組の作動電極２４ａ、２４ｂ、２４ｃが、図１Ａに示す入出力回路１５を介して制御回路（図示せず）により供給される電圧に接続されている。共通電極は、接地電位または安定した直流電圧に接続されてもよい。制御回路は、それぞれの電子スイッチ（例えば、基板またはオフチップの薄膜トランジスタまたはＭＯＳ回路であり得る）を介して、入出力回路を介して時間的に変化する電圧を一組の作動電極に印加し、液滴を横切る電場を発生させて、液滴を経路に沿って移動させる。いくつかの実施形態では、共通電極２７の表面は、疎水性材料から作られた絶縁層によって覆われている。他の実施形態では、誘電体層２３の表面は、サブミクロンの厚さを有する薄い疎水性フィルムで覆われている。
【0027】
図２Ａを参照すると、液滴２６は、第１基板２２および第２基板２８の間（ひいては作動電極２４ａ、２４ｂ、２４ｃおよび共通電極２７の間）に配置されてもよい。一実施形態において、マイクロアクチュエータ２０Ａは、共通電極２７および作動電極２４に制御電圧を供給するように構成された制御回路（図示せず）をさらに含んでいてもよい。液滴２６は、共通電極に対して作動電極に印加される電圧レベルを変更または変化させることによって、誘電体層２３の表面を横切る横方向に沿って移動させてもよい。このように特定の作動電極に電圧を印加する（または電圧レベルを上げる）ことは、特定の作動電極の位置のすぐ周囲の第１基板２２の一部分の疎水性を低下させる（すなわち、親水性を高める）効果を有する場合がある。この効果は、一般にエレクトロウェッティング（または、より具体的には、エレクトロウェッティングが誘電体上で起こる場合には、エレクトロウェッティング・オン・ダイアリック（ＥＷＯＤ））として知られており、表面を横切って液滴を移動させるために使用され得る。作動電極に印加される電圧をオン・オフすることで、制御回路は、液滴２６を誘電体層２３の表面を横切る横方向に移動させることができる。例えば、液滴２６の下方の作動電極２４ａに第１電圧を印加し、隣接する作動電極２４ｂに第２電圧を印加することで電界を発生させ、発生した電界が液滴２６を作動電極２４ｂに向かって移動させる。液滴２６の速度は、隣接する作動電極間の電圧差の大きさによって制御され得る。一実施形態では、流体液滴２６の形状は、液滴２６がその間に配置される作動電極２４ａ、２４ｂ、２４ｃおよび共通電極２７の間の電圧差を変化させることにより、変えることができる。一組の作動電極における作動電極数は、任意の整数であることが理解される。図２Ａに示される例では、３つの作動電極が一組の作動電極に使用される。しかし、その数は例示的な実施形態を説明するために任意に選ばれたものであり、限定されるべきものではないことが理解される。
【0028】
図２Ｂは、マイクロアクチュエータの他の実施例の一部を示す断面図である。図２Ｂを参照すると、マイクロアクチュエータ２０Ｂは、基板２２ｂと、基板２１ｂ上の誘電体層２３ｂと、誘電体層２３ｂ内の一組の作動電極２４ａ、２４ｂ、２４ｃと、誘電体層２３ｂ上の一組の共通電極２７（１つの電極２７ｂのみが示されている）とを含んでいる。共通電極２７ｂおよび作動電極は、誘電体層の一部によって互いに間隔をあけている。図２Ａと同様に、液滴２６は、液滴２６の下の作動電極（例えば、２４ａ）で第１電圧を印加し、隣接する作動電極（例えば、２４ｂ）で第２電圧を印加することで、誘電体層２３ｂの表面を横切る横方向に経路に沿って移動できる。液滴２６の移動および方向は、一組の電子スイッチ（基板２２ｂ内のＭＯＳ回路、図示せず）を介して特定の作動電極に電圧を印加する制御回路（図示せず）により制御される。図２０Ａに示すマイクロアクチュエータ２０Ａと異なり、マイクロアクチュエータ２０Ｂは、作動電極２４に近い共通電極２７ｂを有し、液滴２６が共通電極２７および作動電極２４間に挟まれない。マイクロアクチュエータ２０Ｂは、スペーサ２９を有していない点でも、マイクロアクチュエータ２０Ａと異なっている。
【0029】
図２Ｂを参照すると、一組の作動電極２４ａ、２４ｂ、２４ｃおよび一組の共通電極２７は、基板の異なる平面上で互いに交差する二層の帯状電極であってもよい。作動電極２４ａ、２４ｂ、２４ｃおよび共通電極２７は、誘電体層２３ｂの表面を横切って液滴２６を移動させるように動作する。いくつかの実施形態では、共通電極２７ｂは、疎水性材料から作られた絶縁層によって覆われる表面を有する。他の実施形態では、誘電体層２３の表面は、サブミクロンの厚さを有する薄い疎水性フィルムで覆われている。
【0030】
図１および図２のマイクロアクチュエータの使用方法の一例は、マイクロ流体チップの液滴デジタルＰＣＲの一部として、均一または類似のサイズを有する多数の液滴の操作である。各サンプルの容量が小さく、ポアソン分布の要件を満たす特定のＤＮＡ濃度以下では、液滴の各サンプルは、１つのＤＮＡ分子を有するか、ＤＮＡ分子を全く有していない場合がある。このサンプルを従来のＰＣＲを用いて熱サイクルさせるか、等温ＰＣＲを用いて一定温度下で培養することにより、環境（例：オイル）内の各サンプルで、標的領域内の単一のＤＮＡ分子を増幅させることができる。オンチップ集積化されたイオン選択性電界効果トランジスタ（ＩＳＦＥＴ）センサーを介して、最終的な液滴のＤＮＡ濃度を光学的検出またはｐＨ測定により読み取った後、サンプルのアレイにおけるターゲットＤＮＡの絶対数を定量化し、その絶対数を用いてバルク液滴内のＤＮＡ濃度を計算できる。いくつかの例では、複数の異なるＤＮＡターゲットを含む液滴は、単一のマイクロ流体チップの領域上に分注され、サンプルの検出または測定のために液滴から多数のサンプル（ＤＮＡ標的のコピー）を生成する次の領域に、液滴をエレクトロウェッティングによって移動させる。
【0031】
図３～６に、ＤＮＡ分子などのターゲットが磁気応答性ビーズに結合されるマイクロアクチュエータの例を示す。ターゲットを磁気応答性ビーズに結合させることで、ターゲットを所望の位置に移動させる、または、マイクロアクチュエータで操ることができる。例えば、源から発生した磁場を制御することで、１以上の磁気応答性ビーズに結合したＤＮＡ分子をマイクロアクチュエータのある場所から別の場所に移動させることができる。
【0032】
ある実施例では、磁気応答性ビーズは、１以上の試薬を含む液滴の中に移動させ、または、１以上の試薬を含む液滴から移動させ、磁気応答性ビーズに結合したターゲットと適切な反応を起こすことができる。例えば、一本鎖ＤＮＡ分子に結合した磁気応答性ビーズは、適切な重合体および／またはヌクレオチドを含む液滴に導入され、ＰＣＲを開始することができる。ある実施形態では、一度、磁気応答性ビーズからターゲットが溶出されたら、磁気応答性ビーズは「洗浄」されてもよい。例えば、第１液滴内の１以上の磁気応答性ビーズのＤＮＡ分子に関して所望の反応が生じた後、磁気応答性ビーズは、第１液滴から、ＤＮＡ分子を磁気応答性ビーズから取り除く第２液滴に移動させてもよい。磁気応答性ビーズは、第１液滴から、磁気応答性ビーズを洗浄するための緩衝液を含む第３液滴に移動させてもよい。最後に、洗浄された磁気応答性ビーズは、第３液滴から移動させ、必要に応じて（例えば、ＤＮＡ分子およびＤＮＡ分子を磁気応答性ビーズに結合させることができる酵素を含む第４液滴に導入することにより）マイクロアクチュエータ内で再度使用してもよい。ある実施態様では、磁気応答性ビーズは、マイクロアクチュエータの特定のゾーン内または特定のゾーン外に（例えば、磁気的に）移動してもよい。例えば、ＤＮＡを含む磁気応答性ビーズは、第１温度を有する第１ゾーンから第２温度を有する第２ゾーンに移動してもよい。ある実施態様では、磁気応答性ビーズは、マイクロアクチュエータの入口にまたは出口から（例えば、磁気的に）移動してもよい。
【0033】
図３Ａ～３Ｃは、マイクロアクチュエータのある位置に位置し、その位置に一時的に保持されたビーズのセットを含む液滴の一例を示す図である。いくつかの実施形態では、液滴は、作動電極３４を動作させることによって、ここで議論されるエレクトロウェッティングの原理を用いて、その位置に移動し、保持されてもよい。例えば、図３Ａを参照すると、複数のビーズ３１ａを含む液滴３６は、マイクロアクチュエータ３０Ａのギャップ内に配置されてもよい。いくつかの実施形態では、図示されているように、マイクロアクチュエータ３０Ａは、共通電極３７および１以上の作動電極３４を含んでもよい。これらの実施形態において、ギャップは、第１基板３２および共通電極３７によって形成されてもよい。共通電極３７および第１基板３２は、比較的大きな接触角を可能にするために、疎水性であってもよい。液滴３６は、この疎水性を利用して、所定の位置に保持されてもよい。特定の実施形態では、作動電極３４は、誘電体であり得る第１基板３２内に収容されてもよい。別の例として、図３Ｂを参照すると、液滴３６は、液滴３６が着座するギャップに少なくとも部分的に延びる物理バリア３５を用いて、マイクロアクチュエータ３０Ｂ内の所定の位置に保持されてもよい。ギャップは、第１基板３２および第２基板３８によって形成されている。例えば、図３Ｂに示されるように、液滴３６の両端に配置された２つの物理バリア３５があってもよい。いくつかの実施形態では、物理バリアは、ギャップの狭窄、ギャップ内に突出する個別突起、または、それらの組み合わせであってもよい。別の例として、図３Ｃを参照すると、液滴３６は、疎水性であり得る基板３２に取り付けられた親水性パッチ３３を用いて、マイクロアクチュエータ３０Ｃ内に保持されてもよい。この例では、液滴３６は、水性パッチ３３に引き付けられ、疎水性基板３２によって斥けられて、液滴が所定の位置に保持されてもよい。
【0034】
いくつかの実施形態では、ビーズは、磁場源を用いて移動できる、または、他の方法で操れるように、磁気応答性であってもよい。いくつかの実施形態において、１以上のビーズは、単一のビーズ（例えば、１つの「スーパービーズ」）のみを含んでいてもよい。いくつかの実施形態では、１以上のビーズは、ビーズのセット（例えば、２以上のビーズ）を含んでいてもよい。
【0035】
図４Ａ～４Ｅは、磁場源４９を用いて液滴本体４６ａから１以上のビーズを分離するマイクロアクチュエータ４０の例を示している。マイクロアクチュエータ４０は、いくつかの実施形態において、第１基板４２（例えば、上部基板）および対向する第２基板４８（例えば、下部基板）を含んでいてもよい。マイクロアクチュエータ４０は、ここで論じられているエレクトロウェッティングの原理を用いるように構成されてもよく、第２基板４８に取り付けられた共通電極４７および第１基板４２内に収容されたまたは取り付けられた１以上の作動電極４４を含んでいてもよい。いくつかの実施形態では、１以上の磁場が、マイクロアクチュエータ上の液滴４６から１以上のビーズを分離するために使用されてもよい。いくつかの実施形態において、スポット（または局所）磁場は、マイクロアクチュエータの第１面の第１位置に配置された液滴に印加されてもよい。液滴は、１以上のビーズおよび流体を含んでもよい。マイクロアクチュエータ４０は、スポット磁場を発する磁場源として、磁石４９（例えば、永久磁石、電磁石）を含んでもよい。いくつかの実施形態では、磁石４９は、第１基板４２の下に位置していてもよい。一例として、磁石４９は、１／１６インチの直径を有する永久磁石であってもよい。本開示は、磁石４９が第１基板４２の下に位置する構成を説明するが、本開示は、磁石４９が代替的に第２基板４８の上に位置してもよいことを想定している。
【0036】
いくつかの実施形態では、スポット磁場が、液滴が配置されている第１位置に向かって移動し、液滴内の磁気応答性ビーズがスポット磁場の源に向かって引き付けられてもよい。いくつかの実施形態では、スポット磁場を移動させることは、スポット磁場の源を移動させることを含んでもよい。例えば、図４Ａに示されるように、スポット磁場は、第１基板４２と距離がある初期位置から第１基板４２に近接する位置に向かって磁石４９を移動させることで、第１位置に向かって移動してもよい。磁石４９は、第１位置に隣接するように横方向（図４Ａでは図示せず）に移動してもよい。この移動は、例えば、磁石を３次元的に移動させることができるＸＹＺリニアモータに磁石４９を結合することによって、磁石４９に与えられてもよい。この例では、磁石４９は、表面４２によって画定されるＸＹ平面に実質的に平行なベクトルに沿って横方向に、および／または、表面４２によって画定されるＸＹ平面に直交するＺ方向のベクトルに沿って縦方向に、移動してもよい。図４Ａは、磁石４９のＺ方向への移動を示す図である。いくつかの実施形態では、磁石４９は、表面４２によって画定されるＸＹ平面に平行および垂直の両方のベクトル成分を有するベクトルによって画定される単一の軌道に沿って、横方向および縦方向の両方に移動してもよい。例えば、このようなベクトルは、初期点（０、０、０）が適切な場所（例えば、表面４２の下）に配置され、（１、－２、３）のＸＹＺ座標系における終点を有していてもよい。純粋に例示の目的で、図４Ｅは、ＸＹ平面が表面４２によって定義されるＸＹＺ座標系を示している。
【0037】
ある実施態様では、スポット磁場は、１以上の磁気応答性ビーズを液滴の本体から分離するように移動してもよい。いくつかの実施形態では、図４Ｂに例示されるように、複数のビーズがある場合、スポット磁場を液滴に適用することで、ビーズのセット（複数ある場合）が、２以上のビーズの集合体またはクラスタを含む本体を意味する場合がある用語である「ビーズパレット」に集められてもよい。図４Ｂに示されるように、磁石４９がビーズ４１ａに近接すると、磁石４９は、ビーズ４１ａにスポット磁場を及ぼし、ビーズ４１ａをビーズパレット４１に集合させる。図４Ｃに示されるように、いくつかの実施形態において、ビーズパレット４１がマイクロアクチュエータの第１面の第２位置に向かって磁石４９と共に移動するように、磁石４９を横方向に移動させてもよい。これらの実施形態において、液滴４６は、比較的静止した状態で保持されてもよく、第１位置におけるその初期位置に留まっていてもよい。図４Ｄに示されるように、磁石４９は横方向に移動し続け、その結果、ビーズパレット４１が、液滴本体４６ａから摘み取られ、最終的に分離されてもよい。いくつかの実施形態では、多くのビーズが残される可能性がある。しかしながら、先に論じたように、ここに開示される方法およびシステムは、より多くの従来の技術と比較して、残留ビーズの数を最小限に抑えることができる。
【0038】
いくつかの実施形態では、１以上の磁場が、マイクロアクチュエータ上の液滴本体に１以上のビーズを導入するのに使用されてもよい。これは、例えば、図４Ａ～４Ｄに関して議論されたステップを逆に実行することで達成され得る。例えば、磁石４９をマイクロアクチュエータの第１面の第２位置に配置された１以上の磁気応答性ビーズに向けて移動させ、磁気応答性ビーズが磁石４９に向かって引き寄せられてビーズパレット４１に集められるようなスポット磁場を作り出してもよい。スポット磁場を（例えば、磁石４９を液滴に向かって横方向に移動させることによって）液滴が配置されている第１位置に移動させて、磁気応答性ビーズを液滴に導入してもよい。
【0039】
図５Ａ～５Ｃは、ビーズを操るための一連の磁場源を有するマイクロアクチュエータの例を示す図である。いくつかの実施形態では、マイクロアクチュエータは、複数の定常磁場源を使用して、１以上の磁気応答性ビーズを移動させてもよいし、操ってもよい。定常磁場源は、例えば、オン又はオフにされ得る電磁石であってもよい（または、その磁場強度が変調され得る電磁石であってもよい）。図５Ａを参照すると、液滴５６内の磁気ビーズは、第１基板５２の下に（例えば、隣接して）位置してもよい磁石５９ｂを作動させることによって、ビーズパレット５１に集められてもよい。図示されているように、磁石５９ｂは、液滴５６に近接して配置されている。図５Ｂを参照すると、液滴本体が比較的静止したまま、磁石５９ｂを作動させて、ビーズパレット５１を液滴本体５６ａから離し始めてもよい。図５Ｃに示されるように、磁石５９ａが活性化されたまま、磁石５９Ｂが非活性化され、液滴本体５６ａからのビーズパレット５１の分離を完了させてもよい。いくつかの実施形態では、このプロセスは、ビーズパレットを液滴に導入するために、逆に行われてもよい。
【0040】
いくつかの実施形態では、ビーズパレット（またはビーズ）は、少量または残量の流体を含むこともできる。この流体の残量は、単に、液滴（例えば、ある時点でビーズがその中にあったかもしれない液滴）からの流体の残物であってよい。いくつかの実施形態では、ビーズパレットから流体の残量を減少または除去することが望ましい場合がある。これは、流体の無駄を減らすのに有利であり得る。例えば、試薬液滴から分離されたビーズパレットは、ビーズパレットと共に流出した試薬の残量を含む場合がある。この例では、ビーズパレットのビーズが再度使用される前に、（例えば、ビーズパレットをバッファ液に導入することによって）試薬の残量を洗浄する必要があるかもしれない。または、ビーズを廃棄する必要があるかもしれない。いずれの場合も、試薬の不必要な無駄が生じる。その結果、試薬の量は、試薬の液滴からのビーズの導入および分離と共に減少し、所定の反応に必要な量よりも多くの量の試薬が必要になる場合がある。
【0041】
図６は、流体の無駄を防止または低減するための物理バリアを有するマイクロアクチュエータの例を示す。いくつかの実施形態では、マイクロアクチュエータは、ビーズパレット（またはビーズ）が取り除かれたときに流体の残量の排出を防止または低減する１以上の物理バリアを含んでいてもよい。例えば、図６を参照すると、マイクロアクチュエータ６０は、液滴が配置されるギャップに部分的に延びる（それによってギャップを狭くする）物理バリア６５を含んでもよい。図示されるように、磁石６９が物理バリア６５の左に移動するとき、物理バリア６５は、ビーズパレット６１が物理バリア６５の左に移動することを可能にするが、ビーズパレット６１と共に出る流体の残量を遮断または減少させる役割を果たすことができる。その結果、より多くの量の流体が液滴本体６６ａに保持され得る。
【0042】
いくつかの場合では、より速い液滴からのビーズの分離（あるいは、より速い液滴へのビーズの導入）が最適であることもある。このような場合、ビーズを移動させるだけでなく、液滴本体を移動させて、ビーズを液滴から（または液滴に）分離（または導入）する時間を短縮することが有利となる場合がある。これを達成するための例示的な技術は、図７Ａ～９Ｄに関して以下に説明される。
【0043】
図７Ａ～７Ｄは、スポット磁界を移動させて１以上のビーズ７１ａを第１方向に移動させ、エレクトロウェッティングを用いて液滴本体７６ａを第２方向に移動させるマイクロアクチュエータ７０の一例を示す。図７Ａに示されるように、ビーズ７１ａを含む液滴７６は、複数の作動電極７４を有するマイクロアクチュエータ７０の表面に配置されてもよい。図７Ｂに示すように、磁石７９をマイクロアクチュエータ７０の基板に向かって移動させて、ビーズ７１ａをビーズパレット７１に集めてもよい。図７Ｃに示されるように、磁石７９を第１方向（ここでは図の左方向）に移動させて、ビーズパレット７１を第１方向に移動させるようにしてもよい。同時または略同時に、作動電極７４は、他の箇所に記載されているエレクトロウェッティングの原理を用いて液滴本体７６ａを第２方向（ここでは図の右方向）に移動させるように作動されてもよい。図７Ｄは、分離されたビーズパレット７１および液滴本体７６ａをもたらす、最終的な分離を示す。
【0044】
図８Ａ～８Ｄは、スポット磁場を移動させて１以上のビーズ８１ａを第１方向に移動させ、親水性表面８５を用いて液滴本体８６ａを第２方向に移動させるマイクロアクチュエータ８０の一例を示す。図８Ａに示されるように、ビーズ８１ａを含む液滴８６は、マイクロアクチュエータ８０の表面に配置されていてもよい。図８Ａに示されるように、磁石８９をマイクロアクチュエータ８０の基板に向かって持ってきて、ビーズ８１ａをビーズパレット８１に集めてよい。また、図８Ｂに示すように、液滴８６の少なくとも一部を親水性表面８５（例えば、親水性パッチ）に接触させるようにしてもよい。例えば、作動電極８４の作動によるエレクトロウェッティングは、液滴８６の一部が親水性表面８５に接触するまで、液滴８６を親水性表面８５に向かって移動させるために使用されてもよい。図８Ｃに示されるように、磁石８９を第１方向に移動させて、ビーズパレット８１を第１方向に移動させてもよい。また、図８Ｃに示すように、同時または略同時に、親水性表面８５の親水性が、液滴本体８６ａを第２方向へ移動させてもよい。このステップまたはこのステップの直前において、作動電極８４は、液滴本体８６ａが作動電極８４の近くの基板部分にもはや引き寄せられないように任意にオフされてもよい（例えば、作動電極８４がオンでなければ、この部分は再び疎水性になり得る）。図８Ｄは、分離されたビーズパレット８１および液滴本体８６ａをもたらす、最終的な分離を示す。
【0045】
図９Ａ～９Ｄは、スポット磁場を移動させて１以上のビーズ９１ａを第１方向に移動させ、圧力差を用いて液滴本体８６ａを第２方向に移動させるマイクロアクチュエータ９０の一例を示す図である。図９Ａに示されるように、マイクロアクチュエータ９０は、第１基板９２と、第１基板９２からの距離が変化する２つの部分９８ａおよび９８ｂを有する第２基板とを含んでもよい。図示された例では、部分９８ａは、部分９８ｂよりも第１基板９２に近い。その結果、部分９８ａに沿ったマイクロアクチュエータ９０の基板間のギャップ容量は、部分９８ｂに沿った対応するギャップ容量よりも小さい。この容量差が、２つの部分に沿ったギャップ内に圧力差を作り出す。例えば、ボイルの法則Ｐ１Ｖ１＝Ｐ２Ｖ２により、部分９８ａに対して部分９８ｂに沿って増加した容量は、部分９８ａに対して部分９８ｂに沿って減少した圧力（他のすべてが同じ）に変換されなければならないことが保証される。この圧力差は、第２方向（例えば、図の右側）に毛細管押圧力を作り出す。図９Ａに示されるように、液滴９６を（例えば、作動電極９４を用いたエレクトロウェッティングを使用して）部分９８ａおよび部分９８ｂの間の接合部の近くに持って来てもよい。図９Ｂに示されるように、磁石９６をマイクロアクチュエータ９０の第１基板に向かって持って来て、ビーズ９１ａをビーズパレット９１に集めてもよい。図９Ｃに示されるように、磁石９９を第１方向に移動させて、ビーズパレット９１を第１方向に移動させてもよい。また、図９Ｃに示されるように、同時または略同時に、部分９８ａおよび９８ｂに沿ったギャップ間の圧力差により、液滴本体９６ａを第２方向に移動させてもよい（例えば、図９Ｃでは、液滴本体９６ａの左側が液滴本体９６ａの右側より高い圧力を経験し、液滴本体９６ａを右側に進ませてもよい）。このステップまたはこのステップの直前において、作動電極９４は、液滴本体９６ａが作動電極９４の近くの基板部分にもはや引き寄せられないように任意にオフされてもよい（例えば、作動電極９４がオンでなければ、この部分は再び疎水性になり得る）。図９Ｄは、分離されたビーズパレット９１および液滴本体９６ａをもたらす、最終的な分離を示す。いくつかの実施形態において、圧力差は、アクティブ正圧またはアクティブ負圧を（例えば、真空源を介して）加えることにより作り出されてもよい。
【0046】
図７Ａ～９Ｄは、単一の可動磁石の使用を示しているが、本開示は、図５Ａ～５Ｃに示すように、複数の非可動磁石の使用を想定している。さらに、図７Ａ～９Ｄは、第１方向（例えば、左）が第２方向（例えば、右）の正反対であることを示しているが、本開示は、第１方向が第２方向と異なるが正反対ではない状態（例えば、第１方向が第２方向と直交する方向、または、鋭角もしくは鈍角を成す方向である場合）を想定している。
【0047】
図１０は、マイクロ流体アクチュエータ上の液滴本体から１以上のビーズを磁気的に分離するための例示的方法１００を示す。この方法は、ステップ１０２で開始されてもよい。ステップ１０２では、スポット磁場が、マイクロアクチュエータの第１面の第１位置に配置された液滴に印加されてもよい。液滴は、１以上の磁気応答性ビーズおよび流体を含む。ステップ１０４において、スポット磁場は、磁気応答性ビーズを液滴の本体から分離するように移動してもよい。特定の実施形態は、適切な場合、図１０の方法の１以上のステップを繰り返してもよい。本開示は、図１０の方法の特定のステップが特定の順序で発生するものとして説明し、図示しているが、本開示は、図１０の方法の任意の好適なステップが任意の好適な順序で発生することを想定している。さらに、本開示は、図１０の方法の特定のステップを含む、マイクロ流体アクチュエータ上の液滴本体から１以上のビーズを磁気的に分離するための例示的な方法を説明し、図示しているが、本開示は、適切な場合には図１０の方法のステップの全て若しくは一部を含む、または、全てを含まない任意の適したステップを含む、マイクロ流体アクチュエータ上の液滴本体から１以上のビーズを磁気的に分離する任意の適した方法を想定している。さらに、本開示は、図１０の方法の特定のステップを実行する特定の構成要素、装置、または、システムを説明し、図示しているが、本開示は、図１０の方法の任意の適切なステップを実行する任意の適切な構成要素、装置、または、システムの任意の適切な組み合わせを想定している。
【0048】
図１１は、マイクロ流体アクチュエータ上の液滴本体に１以上のビーズを磁気的に導入するための例示的方法１１０を示す。この方法は、ステップ１１２で開始されてもよい。ステップ１１２では、スポット磁場が、マイクロアクチュエータの第１面の第２位置で１以上の磁気応答性ビーズに印加されてもよい。ステップ１１４では、スポット磁場を移動させて、磁気応答性ビーズを第１位置に配置された液滴に導入してもよい。ステップ１１４において、液滴は流体を含む。特定の実施形態は、適切な場合、図１１の方法の１以上のステップを繰り返してもよい。本開示は、図１１の方法の特定のステップを特定の順序で発生するものとして説明し、図示しているが、本開示は、図１１の方法の任意の好適なステップが任意の好適な順序で発生することを想定している。さらに、本開示は、図１１の方法の特定のステップを含む、マイクロ流体アクチュエータ上の液滴本体に１以上のビーズを磁気的に導入するための例示的方法を説明し、図示しているが、本開示は、適切な場合には図１１の方法のステップの全て若しくは一部を含む、または、全てを含まない任意の適したステップを含む、マイクロ流体アクチュエータ上の液滴本体に１以上のビーズを磁気的に導入する任意の適した方法を想定している。さらに、本開示は、図１１の方法の特定のステップを実行する特定の構成要素、装置、または、システムを説明し、図示しているが、本開示は、図１１の方法の任意の適切なステップを実行する任意の適切な構成要素、装置、または、システムの任意の適切な組み合わせを想定している。
【0049】
ここに記載されたプロセスは、特定の順序で実行される、特定の数のステップに関して記載されているが、明示的に示されていない、および／または、記載されていない追加のステップが含まれ得ることが想定される。さらに、記載された実施形態の範囲から逸脱することなく、示され記載されたステップよりも少ないステップが含まれてもよいことが想定される（すなわち、記載されたステップの１または複数が任意であってもよい）。さらに、ここに記載されたステップは、記載された順序とは異なる順序で実行されてもよいことが想定される。
【0050】
ここに記載された例および実施形態は説明のためのものであり、それを踏まえた様々な修正または変更が、当業者に示唆され、本願の精神および範囲並びに添付の請求項の範囲に含まれるものと理解される。ここで引用したすべての刊行物、特許、および、特許出願は、すべての目的のためにその全体が参照により組み込まれる。
【0051】
上記の説明は、例示であって、制限的なものではないことを理解されたい。多くの実施形態は、上記の説明を検討することにより、当業者には明らかになるであろう。したがって、本発明の範囲は、上記の説明を参照して決定されるべきではなく、代わりに、添付の請求項を、その完全な均等物の範囲と共に参照して決定されるべきである。
【0052】
前述の開示は、本開示の例示的な態様を示しているが、添付の請求項によって定義される本開示の範囲から逸脱することなく、本明細書において様々な変更および修正が行われ得ることに留意されたい。ここに記載された本開示の態様に従った方法クレームの機能、ステップ、および／または、動作は、任意の特定の順序で実行される必要はない。さらに、本開示の要素は単数形で記載または請求され得るが、単数形への限定が明示されない限り、複数形が想定される。
【0053】
ここのすべてのフローチャートについて、多くのステップが、達成される機能に影響を与えることなく、組み合わされ、並行して実行され、または、異なるシーケンスで実行され得ることが理解されるであろう。
【図1A】
【図1B】
【図2A】
【図2B】
【図3A】
【図3B】
【図3C】
【図4A】
【図4B】
【図4C】
【図4D】
【図4E】
【図5A】
【図5B】
【図5C】
【図6】
【図7A】
【図7B】
【図7C】
【図7D】
【図8A】
【図8B】
【図8C】
【図8D】
【図9A】
【図9B】
【図9C】
【図9D】
【図10】
【図11】
【国際調査報告】