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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-11-16
(54)【発明の名称】治療用コンジュゲート
(51)【国際特許分類】
A61K 31/5377 20060101AFI20221109BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20221109BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20221109BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20221109BHJP
A61P 37/06 20060101ALI20221109BHJP
【ＦＩ】
A61K31/5377
A61P43/00 111
A61P35/00
A61P25/00
A61P37/06
A61P43/00 105
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022516684
(86)(22)【出願日】2020-09-18
(85)【翻訳文提出日】2022-05-12
(86)【国際出願番号】 US2020051491
(87)【国際公開番号】W WO2021055747
(87)【国際公開日】2021-03-25
(31)【優先権主張番号】62/902,554
(32)【優先日】2019-09-19
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/078,055
(32)【優先日】2020-09-14
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＲＩＴＯＮ
(71)【出願人】
【識別番号】522101634
【氏名又は名称】トータス メディスンズ インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100079108
【弁理士】
【氏名又は名称】稲葉 良幸
(74)【代理人】
【識別番号】100109346
【弁理士】
【氏名又は名称】大貫 敏史
(74)【代理人】
【識別番号】100117189
【弁理士】
【氏名又は名称】江口 昭彦
(74)【代理人】
【識別番号】100134120
【弁理士】
【氏名又は名称】内藤 和彦
(72)【発明者】
【氏名】ダワン，ニール ソニン
(72)【発明者】
【氏名】ブレア，ジェームズ アベレラ
(72)【発明者】
【氏名】ペルニ，ロバート ビー．
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086CB05
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA05
4C086NA14
4C086ZA01
4C086ZB08
4C086ZB21
4C086ZB26
4C086ZC20
(57)【要約】
本開示は概して、生物学的標的に共有結合する治療用コンジュゲートに関する。組成物を、それを必要とする対象に投与する方法も本明細書に提供される。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
キナーゼまたはシュードキナーゼと共有結合を形成する治療用コンジュゲート。
【請求項2】
前記キナーゼがＰＩ３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）である、請求項１に記載の治療用コンジュゲート。
【請求項3】
前記治療用コンジュゲートが、（ＦＣＢ）ａ－（Ｌ）ｂ－（ＣＬＭ）ｃの構造を有し、
ａおよびｃが独立して、１～５の整数であり、
ｂが０～５の整数であり、
前記ＦＣＢ部分が、ＰＩ３Ｋ阻害剤またはその断片、類似体もしくは誘導体を含む、請求項１または請求項２に記載の治療用コンジュゲート。
【請求項4】
前記ＦＣＢが、【化1】
【請求項5】
前記治療用コンジュゲートが、化合物１－１０１～化合物１－１７２からなる群から選択される構造を含む、請求項４に記載の治療用コンジュゲート。
【請求項6】
構造【化2】
【化3】
【化4】
【化5】
【請求項7】
化合物１－１０１、１－１０２、１－１０３、１－１０４、１－１０５、１－１０６、１－１０７、１－１０８、１－１０９、１－１１０、１－１１１、１－１１２、１－１１３、１－１１４、１－１１５、１－１１６、１－１１７、１－１１８、１－１１９、１－１２０、１－１２１、１－１２２、１－１２３、１－１２４、１－１２５、１－１２６、１－１２７、１－１２８、１－１２９、１－１３０、１－１３７、１－１３８、１－１４５、１－１４６、１－１５３、１－１５４、１－１６１、１－１６２、１－１６９、１－１７０、１－１７１および１－１７２からなる群から選択される請求項６に記載の治療用コンジュゲート。
【請求項8】
構造【化6】
【化7】
【化8】
【化9】
【請求項9】
化合物１－１３１、１－１３２、１－１３３、１－１３４、１－１３５、１－１３６、１－１３９、１－１４０、１－１４１、１－１４２、１－１４３、１－１４４、１－１４７、１－１４８、１－１４９、１－１５０、１－１５１、１－１５２、１－１５５、１－１５６、１－１５７、１－１５８、１－１５９、１－１６０、１－１６３、１－１６４、１－１６５、１－１６６、１－１６７および１－１６８からなる群から選択される請求項８に記載の治療用コンジュゲート。
【請求項10】
化合物１－１０１～化合物１－１７２から選択される構造またはその薬学的に許容される塩を含む、治療用コンジュゲート。
【請求項11】
化合物１－１～化合物１－１１から選択される構造またはその薬学的に許容される塩を含む、治療用コンジュゲート。
【請求項12】
請求項１～１１のいずれか一項に記載の治療用コンジュゲートおよび少なくとも一種類の薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項13】
請求項１～１１のいずれか一項に記載の治療用コンジュゲートを投与することを含む、キナーゼまたはシュードキナーゼの活性を調節する方法。
【請求項14】
前記キナーゼまたはシュードキナーゼの活性が阻害される、請求項１３に記載の方法。
【請求項15】
前記キナーゼがＰＩ３Ｋである、請求項１３に記載の方法。
【請求項16】
請求項１２に記載の医薬組成物を治療有効量投与することを含む、治療を必要とする対象を治療する方法。
【請求項17】
前記対象が、癌、神経変性疾患、自己免疫障害および老化からなる群から選択された治療状態を有する、請求項１６に記載の方法。
【請求項18】
前記対象が癌を有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項19】
前記対象が、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子において突然変異を有する癌を有する、請求項１８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年９月１９日に出願されたＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣ ＣＯＮＪＵＧＡＴＥＳという題名の米国仮特許出願第６２／９０２，５５４号およびＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣ ＣＯＮＪＵＧＡＴＥＳという題名の２０２０年９月１４日に出願された米国仮特許出願第６３／０７８，０５５号の優先権を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０１９年９月１９日に出願されたＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣ ＣＯＮＪＵＧＡＴＥＳという題名の米国仮特許出願第６２／９０２，５５４号およびＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣ ＣＯＮＪＵＧＡＴＥＳという題名の２０２０年９月１４日に出願された米国仮特許出願第６３／０７８，０５５号の優先権を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
本開示は概して、生物学的標的に共有結合する治療用コンジュゲートに関する。
【背景技術】
【0003】
共有結合性阻害剤は、古典的阻害剤と同じ方法で受容体に結合するが、解離する代わりに、共有結合性阻害剤は、受容体に対する共有結合の永久的な化学結合を形成する。共有結合性阻害剤のいくつかの例として、ペニシリン、アスピリン、クロピドグレル、肺癌を治療するために使用されているＥＧＦＲキナーゼ阻害剤アファチニブおよびＢ細胞悪性腫瘍を治療するために使用されるブルトン型チロシンキナーゼ阻害剤イブルチニブが挙げられる。さらに、腫瘍学の分野では、共有結合性阻害剤は、薬剤耐性腫瘍に対して有効であり、概して、腫瘍成長を阻害する能力がより強く示されている。
【0004】
近年、共有結合性阻害剤の使用は、古典的な可逆的阻害剤と比較して、高い潜在能および作用持続時間をもたらすため、共有結合性阻害剤は大手製薬会社の注目を集めている。作用持続時間の延長は、より低い投与頻度で済み、すなわち、患者は、より少ない錠剤を、より少ない頻度で摂取すればよい。
【0005】
生物学的標的に共有結合することができる治療用コンジュゲートを設計し、治療用コンジュゲートのハイスループットスクリーニング方法を開発する必要性がある。
【発明の概要】
【0006】
いくつかの実施形態では、本開示は、キナーゼまたはシュードキナーゼと共有結合を形成し得る治療用コンジュゲートを提供する。キナーゼは、ＰＩ３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）であってもよい。治療用コンジュゲートは、（ＦＣＢ）ａ－（Ｌ）ｂ－（ＣＬＭ）ｃの構造を有していてもよく、ａおよびｃは独立して、１～５の整数であり、ｂは０～５の整数であり、ＦＣＢ部分はＰＩ３Ｋ阻害剤またはその断片、類似体もしくは誘導体を含む。一部の実施形態では、ＦＣＢは、
を含んでいてもよい。治療用コンジュゲートは、化合物１－１０１～化合物１－１７２からなる群から選択された構造を含んでいてもよい。
【化1】
【0007】
いくつかの実施形態において、治療用コンジュゲートは、
の構造またはその薬学的に許容される塩を有していてもよく、Ｌは
からなる群から選択され、いずれかの端がＣＬＭに接続することができ、Ｒ１は
からなる群から選択され、ＣＬＭは
からなる群から選択される。治療用コンジュゲートは、化合物１－１０１、１－１０２、１－１０３、１－１０４、１－１０５、１－１０６、１－１０７、１－１０８、１－１０９、１－１１０、１－１１１、１－１１２、１－１１３、１－１１４、１－１１５、１－１１６、１－１１７、１－１１８、１－１１９、１－１２０、１－１２１、１－１２２、１－１２３、１－１２４、１－１２５、１－１２６、１－１２７、１－１２８、１－１２９、１－１３０、１－１３７、１－１３８、１－１４５、１－１４６、１－１５３、１－１５４、１－１６１、１－１６２、１－１６９、１－１７０、１－１７１および１－１７２からなる群から選択されてもよい。
【化2】
の構造またはその薬学的に許容される塩を有していてもよく、Ｌは
【化3】
【化4】
【化5】
【0008】
いくつかの実施形態において、治療用コンジュゲートは
の構造またはその薬学的に許容される塩を有していてもよく、Ｌは
であり、Ｒ２は
からなる群から選択され、ＣＬＭは
からなる群から選択される。治療用コンジュゲートは、化合物１－１３１、１－１３２、１－１３３、１－１３４、１－１３５、１－１３６、１－１３９、１－１４０、１－１４１、１－１４２、１－１４３、１－１４４、１－１４７、１－１４８、１－１４９、１－１５０、１－１５１、１－１５２、１－１５５、１－１５６、１－１５７、１－１５８、１－１５９、１－１６０、１－１６３、１－１６４、１－１６５、１－１６６、１－１６７および１－１６８からなる群から選択されてもよい。
【化6】
【化7】
【化8】
【化9】
【0009】
いくつかの実施形態において、治療用コンジュゲートは、化合物１－１０１～化合物１－１７２から選択された構造またはその薬学的に許容される塩を含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、治療用コンジュゲートは、化合物１－１～化合物１－１１から選択された構造またはその薬学的に許容される塩を含んでいてもよい。
【0010】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される治療用コンジュゲートおよび少なくとも一つの薬学的に許容される賦形剤を含みうる医薬組成物を提供する。
【0011】
いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に開示される治療用コンジュゲートを投与することを含む、キナーゼまたはシュードキナーゼの活性を調節する方法を提供する。いくつかの実施形態では、キナーゼまたはシュードキナーゼの活性を阻害することができる。いくつかの実施形態では、キナーゼはＰＩ３－Ｋであってもよい。
【0012】
一部の実施形態では、本開示は、治療を必要とする対象を治療する方法を提供し、方法は、治療有効量の本明細書に記載の医薬組成物を投与することを含む。対象は、癌、神経変性疾患、自己免疫障害および老化からなる群から選択された治療状態を有していてもよい。一部の実施形態では、対象は癌を有してもよい。一部の実施形態では、対象は、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子に突然変異を有する癌を有していてもよい。
【発明を実施するための形態】
【0013】
Ｉ．組成物
発明者らはとりわけＡｎｃｈｏｒｅｄ Ｒｅｌａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｖａｌｅｎｔ Ｓｙｓｔｅｍを発見し、これ以降ＡＲＣＳと呼び、ＡＲＣＳはＦｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ Ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ Ｂｉｎｄｅｒ、これ以降ＦＣＢと呼び、Ｃｏｖａｌｅｎｔ Ｌｉｎｋｉｎｇ Ｍｏｄａｌｉｔｙ、これ以降ＣＬＭと呼ぶ、を含み、ＣＬＭは治療用モダリティに直接的または間接的に結合しており、任意選択的で、ＦＣＢとＣＬＭとの間に位置付けられるリンカーを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、結合によってＦＣＢに直接的に共有結合的に結合されている。一部の実施形態では、ＣＬＭは、リンカーによってＦＣＢに間接的に共有結合的に結合されている。
発明者らはとりわけＡｎｃｈｏｒｅｄ Ｒｅｌａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｖａｌｅｎｔ Ｓｙｓｔｅｍを発見し、これ以降ＡＲＣＳと呼び、ＡＲＣＳはＦｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ Ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ Ｂｉｎｄｅｒ、これ以降ＦＣＢと呼び、Ｃｏｖａｌｅｎｔ Ｌｉｎｋｉｎｇ Ｍｏｄａｌｉｔｙ、これ以降ＣＬＭと呼ぶ、を含み、ＣＬＭは治療用モダリティに直接的または間接的に結合しており、任意選択的で、ＦＣＢとＣＬＭとの間に位置付けられるリンカーを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、結合によってＦＣＢに直接的に共有結合的に結合されている。一部の実施形態では、ＣＬＭは、リンカーによってＦＣＢに間接的に共有結合的に結合されている。
【0014】
本明細書で使用される場合、「ＡＲＣＳ」という用語は、ＦＣＢおよびＣＬＭを結合またはリンカーによって連結することによって形成される任意の治療用コンジュゲートを指す。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ペプチドまたはタンパク質などの一つ以上の標的との共有結合を形成することができる。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、生物学的標的との共有結合を形成することができる。共有結合は、当該技術分野で任意の公知の方法を用いて検出することができる。非限定的な例として、アジド小分子のタンパク質への共有結合は、重いＰＥＧ含有アルキンを小分子に結合させるクリックケミストリーを使用することによって検出することができる。共有結合的に標識されたタンパク質は、ＰＥＧ標識され、より高い分子量を有しているため、ゲルシフトによって検出される（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１８、５７：５７６９－５７７４）。別の非限定的な例では、質量分析を使用して、共有結合的に標識された精製タンパク質を検出することができる（Ｎａｔｕｒｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２００７、３：２２９－２３８）。さらに別の非限定的な例では、細胞定量的質量分析に基づくプロテオミクス方法を使用して、共有結合を分析することができる（Ｃｅｌｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２０１７、２４：１３８８－１４００．ｅ７）。さらに別の非限定的な例では、Ｘ線結晶構造解析を使用して、共有結合形成を確認する（Ｎａｔｕｒｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２００７：３：２２９－２３８；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０２０、６３：５２－６５）。さらに別の非限定的な例では、細胞内、共有結合的に標識されたおよび親和性に富んだ試料の質量分析を使用して、共有結合修飾の部位を明らかにすることができる（Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．２０１６、１２：８７６－８８４）。
【0015】
一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、生物学的標的と共有結合を生物学的標的の約５％～１００％の割合まで形成することができる。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または１００％から生物学的標的と共有結合を形成することができる。いくつかの実施形態では、共有結合は、０～５０℃の温度で、４８時間以内に、１０ｍＭの治療用量で、水溶液中に形成される。
【0016】
いかなる理論に縛られることを望まないが、ＡＲＣＳはまず、ＦＣＢを介して生物学的標的（標的タンパク質など）と非共有結合を形成し、次いでＣＬＭを介して生物学的標的と共有結合を形成することができる。一部の実施形態では、ＡＲＣＳの有効性は、ＦＣＢ単独の有効性よりも優れている。一部の実施形態では、ＣＬＭは、ＦＣＢの有効性に実質的に干渉しない。一部の実施形態では、ＦＣＢは、ＣＬＭの共有結合に実質的に干渉しない。一部の実施形態では、ＡＲＣＳの毒性は、ＦＣＢ単独の毒性よりも少ない。
【0017】
本明細書で使用される場合、「毒性」という用語は、細胞、生体組織または細胞環境に有害または有毒である物質または組成物の能力を指す。低毒性は、細胞、生体組織または細胞環境に有害または有毒である物質または組成物の弱毒した能力を指す。こうした弱毒または低毒性は、標準尺度、治療に対して、または治療の非存在に対して相対的であってもよい。
【0018】
本明細書で使用される場合、「ＦＣＢ」という用語は、既知の薬剤、診断化合物、薬剤候補および機能的断片および／または前述のいずれかの組み合わせであり得る治療モダリティを指す。ＦＣＢは遊離酸および遊離塩基形態、光学異性体および互変異性体、薬剤の放射性同位体および薬学的に許容される塩、そのプロドラッグまたは断片を含むアイソトープを含む。ＦＣＢは、小分子、タンパク質、ペプチド、脂質、炭水化物、糖、核酸またはそれらの組み合わせであってもよい。一部の実施形態では、ＦＣＢは、ＤＮＡまたはＲＮＡを含むがこれに限定されない核酸である。ＦＣＢは、限定されないが、抗癌剤、抗神経変性剤、自己免疫薬および抗老化剤などの治療剤であってもよい。ＦＣＢは、非共有結合的に生物学的標的に結合していてもよい。一部の実施形態では、ＦＣＢは薬剤の機能的断片であってもよい。本明細書で使用される場合、「機能的断片」という用語は、薬剤の望ましい効果を誘発することができる薬剤またはその誘導体もしくは類似体の一部を指す。一部の実施形態では、ＦＣＢはアルキン官能基を含んでいてもよい。一部の実施形態では、ＦＣＢはアルキン官能基を含んでいなくてもよい。
【0019】
本明細書で使用される場合、「ペプチド」、「ポリペプチド」、「タンパク質」はアミド結合によって連結されているアミノ酸モノマーから構成されるポリマーを指す。アミノ酸はＤまたはＬ光学異性体であってもよい。ペプチドは、一方のα－炭素カルボキシル基および別のアミノ酸のアミノ基と縮合またはカップリング反応することによって形成されていてもよい。ペプチドは非線形的分岐ペプチドまたは環状ペプチドであってもよい。さらに、ペプチドは、アミノおよび／またはカルボキシ末端を含む多岐の官能基または保護基で任意選択的に修飾または保護されていてもよい。
【0020】
ペプチドのアミノ酸残基は以下のように略される。フェニルアラニンは、ＰｈｅまたはＦであり、ロイシンはＬｅｕまたはＬであり、イソロイシンはＩｌｅまたはＩであり、メチオニンは、ＭｅｔまたはＭであり、バリンは、ＶａｌまたはＶであり、セリンはＳｅｒまたはＳであり、プロリンはＰｒｏまたはＰであり、トレオニンはＴｈｒまたはＴであり、アラニンはＡｌａまたはａであり、チロシンはＴｙｒまたはＹであり、ヒスチジンはＨｉｓまたはＨであり、グルタミンはＧｌｎまたはＱであり、アスパラギンはＡｓｎまたはＮであり、リジンはＬｙｓまたはＫであり、アスパラギン酸はＡｓｐまたはＤであり、グルタミン酸はＧｌｕまたはＥであり、システインはＣｙｓまたはＣであり、トリプトファンはＴｒｐまたはＷであり、アルギニンはＡｒｇまたはＲであり、グリシンはＧｌｙまたはＧである。
【0021】
本明細書で使用される場合、「ＣＬＭ」という用語は、生物学的標的との共有結合を形成することができる任意の共有結合モダリティを指す。ＣＬＭは、結合またはリンカーによってＦＣＢに連結されていてもよい。ＣＬＭは、生物学的標的と共有結合を形成することができる一つ以上の化学的部分を含んでいてもよい。化学的部分は、親電子基または求核基であってもよい。
【0022】
ＣＬＭは、約１，０００Ｄａ未満、約９００Ｄａ未満、約８００Ｄａ未満、約７００Ｄａ未満、約６００Ｄａ未満または約５００Ｄａ未満の分子量を有する小分子であってもよい。一部の事例では、ＣＬＭは、約５Ｄａ～約１，０００Ｄａ、約１０Ｄａ～約９００Ｄａ、一部の実施形態では約２０Ｄａ～約７００Ｄａ、一部の実施形態では２０Ｄａ～約５００Ｄａ、約５０Ｄａ～約４００Ｄａ、一部の実施形態では約１００Ｄａ～約３００Ｄａおよび一部の実施形態では約１５０Ｄａ～約３００Ｄａの分子量を有していてもよい。ＣＬＭの分子量は、ＣＬＭの式中の各原子の原子量の総和に各原子の数を掛けたものとして計算することができる。また、質量分析、ＮＭＲ、クロマトグラフィー、光散乱、粘度および／または当技術分野で公知の任意の他の方法によって測定することができる。分子量の単位は、ｇ／ｍｏｌ、ダルトン（Ｄａ）または原子質量単位（ａｍｕ）であってもよく、１ｇ／ｍｏｌ＝１Ｄａ＝１ａｍｕであることが知られている。
【0023】
本明細書において使用される場合、「生物学的標的」という用語は、ＦＣＢが非共有結合的に結合して治療効果を産生する任意の標的を指す。ＣＬＭは、共有結合的に生物学的標的に結合している。一部の実施形態では、生物学的標的はタンパク質である。生物学的標的の非限定的な例として、以下に限定されないが、ホスホイノシチド３－キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）およびシュードキナーゼなどのキナーゼが挙げられる。
【0024】
一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、ＰＩ３キナーゼと共有結合を形成することができる。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、約５％～１００％のＰＩ３キナーゼからのＰＩ３キナーゼと共有結合を形成することができる。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または１００％のＰＩ３キナーゼからのＰＩ３キナーゼと共有結合を形成することができる。
【0025】
ＡＲＣＳは、任意選択的にリンカーによって少なくとも一つのＣＬＭに結合されている少なくとも一つのＦＣＢを含む。いくつかの実施形態では、ＡＲＣＳは、単一のＦＣＢと単一のＣＬＭとの間の治療用コンジュゲートであってもよく、例えば、構造Ｘ－Ｌ－Ｙを有し、ＸはＣＬＭであり、Ｌは任意選択のリンカーであり、ＹはＦＣＢである。いくつかの実施形態では、ＡＲＣＳは、単一の治療モダリティと単一の共有結合モダリティとの間の治療用コンジュゲートであってもよい。一部の実施形態では、Ｘは共有結合モダリティであり、Ｌは任意選択のリンカーであり、Ｙは治療モダリティである。
【0026】
一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、一つ以上のＦＣＢ、一つ以上のリンカー、一つ以上のＣＬＭまたはそれらの任意の組み合わせを含有する。ＡＲＣＳは、任意の数のＦＣＢ、リンカーおよびＣＬＭを有することができる。ＡＲＣＳは、限定されないが、Ｘ－Ｌ－Ｙ－Ｌ－Ｘ、（Ｘ－Ｌ－Ｙ）ｎ、Ｙ－Ｌ－Ｘ－Ｌ－Ｙ、Ｘ－（Ｌ－Ｙ）ｎ、（Ｘ－Ｌ）ｎ－Ｙ、（Ｘ）ｎ－Ｌ－ＹまたはＸ－Ｌ－（Ｙ）ｎの構造を有することができ、Ｌは任意選択のリンカーであり、ＹはＦＣＢであり、ｎは２～１００、２～５０、２～２０、例えば、２～５の整数である。Ｘ、ＬおよびＹの各発生は、同一であっても異なっていてもよく、例えば、ＡＲＣＳは、一つ以上の種類のＦＣＢ、一つ以上の種類のリンカーおよび／または一つ以上の種類のＣＬＭを含むことができる。
【0027】
一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、単一のＦＣＢに結合されている一つ以上の種類のＣＬＭを含有していてもよい。例えば、ＡＲＣＳは、同一または異なるリンカーを介してそれぞれ結合されている複数のＣＬＭを有する一つのＦＣＢを含んでいてもよい。ＡＲＣＳは、構造Ｘ－Ｌ－Ｙ－Ｌ－Ｘを有していてもよく、各Ｘは、同一であっても異なっていてもよいＣＬＭであり、各Ｌは、同一であっても異なっていてもよいリンカーであり、ＹはＦＣＢである。
【0028】
一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、単一のＦＣＢに結合されている一つ以上のＣＬＭを含有していてもよい。例えば、ＡＲＣＳは、同一または異なるリンカーを介してそれぞれ結合されている複数のＦＣＢを有する一つのＣＬＭを含んでいてもよい。ＡＲＣＳは、構造Ｙ－Ｌ－Ｘ－Ｌ－Ｙを有していてもよく、ＸはＣＬＭであり、各Ｌは同一であっても異なっていてもよいリンカーであり、Ｙは同一であっても異なっていてもよいＦＣＢである。
【0029】
いくつかの実施形態では、ＡＲＣＳは、治療用コンジュゲートであり、治療用コンジュゲートは、
ａ．治療モダリティを含み、この治療モダリティは、既知の薬剤、診断化合物、薬剤候補および機能的断片および／または前記のいずれかの組み合わせのうちの一つ以上からなる群から選択され、
ｂ．共有結合モダリティを含み、この共有結合モダリティは、一つ以上の化学部分を含み、その一つ以上が生物学的標的との共有結合を形成することができ、この共有結合モダリティは、この治療モダリティに直接的または間接的に結合されており、および
ｃ．任意選択的に、治療モダリティと共有結合モダリティとの間に位置付けられるリンカーと、を含む。
ａ．治療モダリティを含み、この治療モダリティは、既知の薬剤、診断化合物、薬剤候補および機能的断片および／または前記のいずれかの組み合わせのうちの一つ以上からなる群から選択され、
ｂ．共有結合モダリティを含み、この共有結合モダリティは、一つ以上の化学部分を含み、その一つ以上が生物学的標的との共有結合を形成することができ、この共有結合モダリティは、この治療モダリティに直接的または間接的に結合されており、および
ｃ．任意選択的に、治療モダリティと共有結合モダリティとの間に位置付けられるリンカーと、を含む。
【0030】
いくつかの実施形態では、治療用コンジュゲートは、以下からなる群から選択された式を含み、
ａ）Ｘ－Ｌ－Ｙ、
ｂ）Ｘ－Ｌ－Ｙ－Ｌ－Ｘ、
ｃ）（Ｘ－Ｌ－Ｙ）ｎ、
ｄ）Ｙ－Ｌ－Ｘ－Ｌ－Ｙ、
ｅ）Ｘ－（Ｌ－Ｙ）ｎ、
ｆ）（Ｘ－Ｌ）ｎ－Ｙ、
ｇ）（Ｘ）ｎ－Ｌ－Ｙおよび
ｈ）Ｘ－Ｌ－（Ｙ）ｎ；
Ｘは共有結合モダリティであり、Ｌは任意選択のリンカーであり、Ｙは治療モダリティであり、ｎは２と１００の間の整数である。
ａ）Ｘ－Ｌ－Ｙ、
ｂ）Ｘ－Ｌ－Ｙ－Ｌ－Ｘ、
ｃ）（Ｘ－Ｌ－Ｙ）ｎ、
ｄ）Ｙ－Ｌ－Ｘ－Ｌ－Ｙ、
ｅ）Ｘ－（Ｌ－Ｙ）ｎ、
ｆ）（Ｘ－Ｌ）ｎ－Ｙ、
ｇ）（Ｘ）ｎ－Ｌ－Ｙおよび
ｈ）Ｘ－Ｌ－（Ｙ）ｎ；
Ｘは共有結合モダリティであり、Ｌは任意選択のリンカーであり、Ｙは治療モダリティであり、ｎは２と１００の間の整数である。
【0031】
本開示の目的は、ＡＲＣＳおよびその組成物ならびにＡＲＣＳおよびＡＲＣＳのライブラリを合成する方法を設計することである。
【0032】
また、本開示の目的は、生物学的標的への共有結合の候補を識別するために、ＡＲＣＳのライブラリをスクリーニングする方法を提供することである。
【0033】
本開示のさらなる目的は、ＡＲＣＳおよびその組成物をそれを必要とする対象に投与する方法を提供することである。
【0034】
Ａ．ＦＣＢ
本開示のＡＲＣＳは、少なくとも一つのＦＣＢを含有する。本開示のＡＲＣＳは、同一であっても異なっていてもよい一つ以上のＦＣＢを含有してもよい。ＦＣＢは、任意の生物学的プロセスに影響を与え、疾患状態の予防、診断、緩和、治療または治癒に使用される治療モダリティであることができる。ＦＣＢは、治療剤、予防剤、診断剤または栄養剤であることができる。ＦＣＢまたはＡＲＣＳの有効性は、その意図された目的に対するＦＣＢまたはＡＲＣＳの有効性、すなわち、所与のＦＣＢまたはＡＲＣＳが所望される薬理学的効果を引き起こす能力を指す。本明細書で使用される場合、「薬理活性」という用語は、生物学的プロセスを調節または改変して、表現型の変化、例えば、細胞死、細胞増殖の減少などをもたらす活性を意味する。
本開示のＡＲＣＳは、少なくとも一つのＦＣＢを含有する。本開示のＡＲＣＳは、同一であっても異なっていてもよい一つ以上のＦＣＢを含有してもよい。ＦＣＢは、任意の生物学的プロセスに影響を与え、疾患状態の予防、診断、緩和、治療または治癒に使用される治療モダリティであることができる。ＦＣＢは、治療剤、予防剤、診断剤または栄養剤であることができる。ＦＣＢまたはＡＲＣＳの有効性は、その意図された目的に対するＦＣＢまたはＡＲＣＳの有効性、すなわち、所与のＦＣＢまたはＡＲＣＳが所望される薬理学的効果を引き起こす能力を指す。本明細書で使用される場合、「薬理活性」という用語は、生物学的プロセスを調節または改変して、表現型の変化、例えば、細胞死、細胞増殖の減少などをもたらす活性を意味する。
【0035】
一部の実施形態では、ＦＣＢはＰＩ３キナーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＦＣＢは、ピロロ［２，１－Ｆ［１，２，４］トリアジン化合物である。一部の実施形態では、ＦＣＢは、米国特許第９，７２４，３５２Ｂ２号に記載され、その内容の全体が参照により本明細書に組み込まれる、式のいずれか一つを有するＰＩ３キナーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＦＣＢは、米国特許第９，７２４，３５２Ｂ２号の表１に示される化合物のいずれかである。一部の実施形態では、ＦＣＢは、
の構造を含む。
【化10】
【0036】
いくつかの実施形態では、ＦＣＢは、構造
を有する化合物であり、Ｒ１は、
からなる群から選択される。
【化11】
【化12】
【0037】
いくつかの実施形態では、ＦＣＢは、構造
を有する化合物であり、Ｒ２は、
からなる群から選択される。
【化13】
【化14】
【0038】
一般に、ＦＣＢの有効性は、生物学的標的に非共有結合することによって達成される。非共有結合は、標的に対するある程度の特異性および／または親和性によって達成される。特異性および親和性の両方は概して望ましいが、特定の場合には、より高い特異性がより低い親和性を補い、より高い親和性がより低い特異性を補うことができる。親和性および特異性の要件は、限定されないが、標的の絶対濃度、標的の相対濃度（例えば、癌対正常細胞における）、潜在能および毒性、投与経路および／または標的細胞への拡散または輸送を含む様々な要因に応じて変化する。分子または細胞レベルにおいて、ＦＣＢの効果（ＡＲＣＳまたは単独で）は、限定されないが、標的の活性の促進または阻害、標的の標識化および／または標的細胞の変化（例えば、細胞死）を含み得る。
【0039】
いくつかの実施形態において、ＦＣＢは、小分子、タンパク質、ペプチド、脂質、炭水化物、糖、核酸またはそれらの組み合わせであってもよい。いくつかの実施形態において、ＦＣＢは、限定されないが、抗癌剤、抗神経変性剤、自己免疫薬および抗老化剤などの治療剤であってもよい。様々な治療剤が当該技術分野で周知であり、本明細書に記載される組成物に使用されてもよい。
【0040】
一部の実施形態では、ＦＣＢは小分子である。一部の実施形態では、ＦＣＢは、タンパク質、ペプチドまたは核酸であってもよい。一部の実施形態では、ＦＣＢは脂質であってもよい。一部の実施形態では、ＦＣＢは炭水化物または糖であってもよい。一部の実施形態では、ＦＣＢはアルキン基を有する。一部の実施形態では、ＦＣＢはアルキン官能基を有していなくてもよい。
【0041】
一部の実施形態では、ＦＣＢは薬剤の機能的断片であってもよい。本明細書で使用される場合、「機能的断片」あるいは「薬剤のコア」という用語は、薬剤の望ましい効果を誘発することができる薬剤またはその誘導体もしくは類似体の一部を指す。
【0042】
いくつかの実施形態において、ＦＣＢは、非共有結合的に生物学的標的に結合していてもよい。いくつかの実施形態では、ＦＣＢは、＜１０００μｍ、９００μｍ、８００μｍ、７００μｍ、６００μｍまたは５００μｍのＩＣ５０で生物学的標的に結合していてもよい。
【0043】
一部の実施形態では、ＦＣＢは抗癌剤である。一部の実施形態では、ＦＣＢは抗神経変性薬である。一部の実施形態では、ＦＣＢは自己免疫性薬剤である。一部の実施形態では、ＦＣＢは抗老化剤である。
【0044】
特定の実施形態において、ＡＲＣＳのＦＣＢは、ＡＲＣＳの構成要素のモル重量パーセントの和が１００％になるように、約１％～約１０％または約１０％～約２０％または約２０％～約３０％または約３０％～約４０％または約４０％～約５０％または約５０％～約６０％または約６０％～約７０％または約７０％～約８０％または約８０％～約９０％または約９０％～約９９％の所定のモル重量パーセントを含む。ＡＲＣＳのＦＣＢの量は、ＣＬＭに対する割合で表されていてもよい。例えば、本教示は、約１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９または１：１０のＣＬＭに対するＦＣＢの比を提供する。
【0045】
Ｂ．ＣＬＭ
本開示のＡＲＣＳは、一つ以上のＣＬＭを含有する。ＣＬＭは、生物学的標的と共有結合を形成することができる任意の共有結合モダリティであることができる。ＣＬＭは、一つ以上の化学的部分、生物学的標的と共有結合を形成することができる一つ以上の化学的部分を含んでいてもよい。特定の実施形態では、ＣＬＭは内部リンカーまたはスペーサーを含んでいてもよい。内部リンカーまたはスペーサーは、ＣＬＭの二つの部分を組み合わせてもよく、またはＣＬＭに結合することができる。
本開示のＡＲＣＳは、一つ以上のＣＬＭを含有する。ＣＬＭは、生物学的標的と共有結合を形成することができる任意の共有結合モダリティであることができる。ＣＬＭは、一つ以上の化学的部分、生物学的標的と共有結合を形成することができる一つ以上の化学的部分を含んでいてもよい。特定の実施形態では、ＣＬＭは内部リンカーまたはスペーサーを含んでいてもよい。内部リンカーまたはスペーサーは、ＣＬＭの二つの部分を組み合わせてもよく、またはＣＬＭに結合することができる。
【0046】
一部の実施形態では、ＣＬＭは小分子である。一部の実施形態では、ＣＬＭは、約１０００ダルトン未満の分子量（例えば、約９００、８００、７５０、７００、６５０、６００、５５０、５００、４５０、４００、３５０、３００、２５０、２００、１５０、１００未満など）を有する。
【0047】
特定の実施形態において、ＡＲＣＳのＣＬＭは、ＡＲＣＳの構成要素のモル重量パーセントの和が１００％になるように、約１％～約１０％または約１０％～約２０％または約２０％～約３０％または約３０％～約４０％または約４０％～約５０％または約５０％～約６０％または約６０％～約７０％または約７０％～約８０％または約８０％～約９０％または約９０％～約９９％の所定のモル重量パーセントを含む。ＡＲＣＳのＣＬＭの量は、ＦＣＢに対する割合で表されていてもよい。例えば、本教示は、約１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９または１：１０のＣＬＭに対するＦＣＢの比を提供する。
【0048】
一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換アルキンを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換アクリルアミドを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換ビニルスルホンアミドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換ビニルスルホンを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換フマルアミドを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換アクリル酸を含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換イソチオシアン酸を含む。いくつかの実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換スルホニルフロリドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換フルオロ硫酸塩を含む。いくつかの実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換ホルミルフェニルボロン酸を含む。いくつかの実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換ボロン酸を含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは少なくとも一つの活性化エステルを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換チオエステルを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは少なくとも一つのスルホニル基を含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは少なくとも一つのニトロ基を含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換エポキシドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換ホルミルフェニルボロン酸を含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換ハロゲン化アリールを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換アルデヒドを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換トリアジンを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換シアノ－アクリルアミドを含む。一部の実施形態では、ＣＬＭは、少なくとも一つの置換または非置換クロロアセトアミドを含む。
【0049】
例示的なＣＬＭとしては、これらに限定されないが、以下が挙げられ、
Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは各出現において独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、Ａ、Ｂ、ＣおよびＤについての任意の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基である。
【化15-1】
【化15-2】
【化15-3】
【化15-4】
【化15-5】
Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは各出現において独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、Ａ、Ｂ、ＣおよびＤについての任意の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基である。
【0050】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５およびＡ６は各出現において独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、およびＡ６の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、１～２個の置換基であり、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３またはその断片、誘導体または類似体からなる群から選択される。
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、およびＡ６の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、１～２個の置換基であり、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３またはその断片、誘導体または類似体からなる群から選択される。
【0051】
一部の実施形態では、ＣＬＭは
からなる群から選択される。
【化16】
【0052】
Ｃ．リンカー
本開示のＡＲＣＳは、ＦＣＢおよびＣＬＭを接続する一つ以上の任意選択のリンカーを含有する。リンカー、Ｌは、ＦＣＢの有効性およびＣＬＭの結合が著しく影響を受けない限り、ＦＣＢおよびＣＬＭ上のどこにでも結合することができる。いくつかの実施形態では、ＣＬＭは、任意の内部リンカーを含む。
本開示のＡＲＣＳは、ＦＣＢおよびＣＬＭを接続する一つ以上の任意選択のリンカーを含有する。リンカー、Ｌは、ＦＣＢの有効性およびＣＬＭの結合が著しく影響を受けない限り、ＦＣＢおよびＣＬＭ上のどこにでも結合することができる。いくつかの実施形態では、ＣＬＭは、任意の内部リンカーを含む。
【0053】
いくつかの実施形態では、リンカー（ＣＬＭの内部リンカーを含む）は、小分子である。一部の実施形態では、前記リンカー（ＣＬＭの内部リンカーを含む）が選択され、限定されるものではないが、置換および非置換Ｃ１－Ｃ３０アルキル、置換および非置換Ｃ２－Ｃ３０アルケニル、置換および非置換Ｃ２－Ｃ３０アルキニル、置換および非置換Ｃ３－Ｃ３０シクロアルキル、置換および非置換Ｃ１－Ｃ３０ヘテロシクロアルキル、置換および非置換Ｃ３－Ｃ３０シクロアルケニル、置換および非置換Ｃ１－Ｃ３０ヘテロシクロアルケニル、置換および非置換アリールならびに置換および非置換ヘテロアリールを含む。
【0054】
一部の実施形態では、リンカー（ＣＬＭの内部リンカーを含む）は、Ｃ１－Ｃ１０直鎖アルキル、Ｃ１－Ｃ１０直鎖Ｏ－アルキル、Ｃ１－Ｃ１０直鎖置換アルキル、Ｃ１－Ｃ１０直鎖置換Ｏ－アルキル、Ｃ４－Ｃ１３分岐鎖アルキル、Ｃ４－Ｃ１３分岐鎖Ｏ－アルキル、Ｃ２－Ｃ１２直鎖アルケニル、Ｃ２－Ｃ１２直鎖Ｏ－アルケニル、Ｃ３－Ｃ１２直鎖置換アルケニル、Ｃ３－Ｃ１２直鎖置換Ｏ－アルケニル、ポリエチレングリコール、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ（ラクチド－ｃｏ－グリコリド）、ポリカルプロラクトン、ポリシアノアクリレート、ケトン、アリール、ヘテロ環、コハク酸エステル、アミノ酸、芳香族基、エーテル、クラウンエーテル、尿素、チオ尿素、アミド、プリン、ピリミジン、ビピリジン、クロスリンカーとして作用するインドール誘導体、キレート剤、アルデヒド、ケトン、ビスアミン、ビスアルコール、ヘテロ環構造、アジリン、ジスルフィド、チオエーテル、ヒドラゾンおよびその組み合わせであってもよい。例えば、リンカーは、Ｃ３直鎖アルキルまたはケトンであってもよい。リンカーのアルキル鎖は、一つ以上の置換基またはヘテロ原子で置換されてもよい。いくつかの実施形態では、リンカーは、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＮＲ、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ－、－Ｓ－、－Ｓ－Ｓ－から選択された一つ以上の原子または基を含有する。リンカーは、コハク酸、グルタミン酸またはジグリコール酸のジカルボン酸塩誘導体から選択されてもよい。
【0055】
一部の実施形態では、リンカーのアルキル鎖は、任意選択的に、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＮＲ、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ－、－Ｓ－、－Ｓ－Ｓ－から選択された一つ以上の原子または基によって中断されてもよい。リンカーは、コハク酸、グルタミン酸またはジグリコール酸のジカルボン酸塩誘導体から選択されてもよい。
【0056】
いくつかの実施形態では、リンカーは切断不能であってもよい。いくつかの実施形態では、リンカーは切断可能であってもよい。いくつかの実施形態では、リンカーは酵素によって切断されてもよい。
【0057】
リンカーの非限定的な例として、
が挙げられ、
Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、Ｄ５およびＤ６は、各出現において独立して、Ｎ、Ｃ、Ｏ、またはＳからなる群から選択され、Ｄ１－６がＮである場合、対応する位置は三価であり、Ｄ１－６がＯまたはＳである場合、対応する位置は二価であり、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ４、Ｂ５およびＢ６は、各出現において不在である、または独立してＨ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＣＨ３、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１～３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリール、および任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールから選択され、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３およびＢ４の任意選択の置換基は、独立してハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１～３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３、またはその任意の断片もしくは類似体からなる群から選択された１～２個の置換基である。
【化17】
【化18】
【0058】
いくつかの実施形態では、リンカーは、
からなる群から選択され、いずれかの端はＣＬＭに接続することができる。いくつかの実施形態では、
からなる群から選択されたリンカーは、
からなる群から選択されたＣＬＭに接続されている。
【化19】
【化20】
【化21】
【0059】
Ｄ．ＡＲＣＳ
本開示のＡＲＣＳは、可逆的阻害剤と比較した場合、潜在能の増加および作用持続時間の延長など、多くの利点を有する薬剤のクラスを表す。本開示は、キナーゼまたはシュードキナーゼと共有結合を形成する治療用コンジュゲートを提供する。いくつかの実施形態では、キナーゼは、ＰＩ３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）である。治療用コンジュゲートは、
（ＦＣＢ）ａ－（Ｌ）ｂ－（ＣＬＭ）ｃの構造を有していてもよく、
ａおよびｃは独立して、１～５の整数であり、
ｂは０～５の整数であり、
ＦＣＢ部分はＰＩ３Ｋ阻害剤またはその断片、類似体もしくは誘導体を含む。
本開示のＡＲＣＳは、可逆的阻害剤と比較した場合、潜在能の増加および作用持続時間の延長など、多くの利点を有する薬剤のクラスを表す。本開示は、キナーゼまたはシュードキナーゼと共有結合を形成する治療用コンジュゲートを提供する。いくつかの実施形態では、キナーゼは、ＰＩ３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）である。治療用コンジュゲートは、
（ＦＣＢ）ａ－（Ｌ）ｂ－（ＣＬＭ）ｃの構造を有していてもよく、
ａおよびｃは独立して、１～５の整数であり、
ｂは０～５の整数であり、
ＦＣＢ部分はＰＩ３Ｋ阻害剤またはその断片、類似体もしくは誘導体を含む。
【0060】
ＦＣＢ部分、Ｌ（リンカー）部分およびＣＬＭ部分については、上のセクションで説明している。一つの非限定的な例では、ＦＣＢは、
を含む。
【化22】
【0061】
いくつかの実施形態では、ＦＣＢは、構造
を有する化合物であり、Ｒ１は、
からなる群から選択される。
【化23】
【化24】
【0062】
いくつかの実施形態では、ＦＣＢは、構造
を有する化合物であり、Ｒ２は、
からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、リンカーは、
からなる群から選択され、いずれかの端はＣＬＭに接続することができる。一部の実施形態では、ＣＬＭは、
からなる群から選択される。
【化25】
【化26】
【化27】
【化28】
【0063】
いくつかの実施形態では、ＡＲＣＳは、広範な一般構造化合物１－１～化合物１－５、
またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択され、Ｒ１は各出現において独立して、
からなる群から選択され、Ｒ１は、Ｘ、Ｌまたは二つの端のいずれかにおける薬剤の機能的断片に結合することができる。例えば、
において、Ｒ１は、ＲｅおよびＲｇに隣接するいずれかの端からＬに、ＲｆおよびＲｈに隣接する端からの薬剤の機能的断片に結合することができ、またはＲ１は、化合物１－１において、ＲｆおよびＲｈに隣接するいずれかの端からＬに、ＲｅおよびＲｇに隣接する端からの薬剤の機能的断片に結合することができる。
【化29】
【化30】
【化31】
【0064】
一部の実施形態では、Ｒ１は、各出現において独立して、非置換または置換された－（ａｌｋ）ａ－Ｓ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｏ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）６５５ａ－ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｏ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｓ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｓ（Ｏ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｓ（Ｏ）２－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＯＣ（Ｏ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＯＣ（Ｓ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｓ）Ｏ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｏ）ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｓ）ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｓ（Ｏ）２ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｏ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｓ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＳ（Ｏ）２－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｏ）Ｏ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｓ）Ｏ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＯＣ（Ｏ）ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＯＣ（Ｓ）ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｏ）ＮＲＢ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｓ）ＮＲＢ－（ａｌｋ）ｂ－および－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＳ（Ｏ）２ＮＲＢ－（ａｌｋ）ｂ－からなる群から選択され、
ａおよびｂは独立して、０、１、２、３および４からなる基から選択され、
ａｌｋは、独立してＣ１－５アルキレン、Ｃ１－５アルケニレンおよびＣ１－５アルキニレンから成る群から選択され、各々が、Ｈ、ハロゲン、－ＯＨ、ＮＨ２、ＣＦ３、Ｃ１－５アルキル、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、－Ｏ－Ｃ１－５アルキル、－Ｓ－Ｃ１－５アルキル、－ＮＨ－Ｃ１－５アルキルおよび－Ｎ（Ｃ１～５アルキル）２、から成る群から、独立して、選択さた１～３個の置換基と任意に置き換えられ、Ｃ１～５アルキル基は、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、Ｃ１－４アルキル、ＣＦ３、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリルおよびメチルピラゾリルからなる群から選択された１～３個の置換基と、独自に、任意に置き換えられ、；
ＲＡおよびＲＢは各出現において独立して、水素、Ｃ１－３アルキル、Ｃ３－６シクロアルキル、５～１０員のヘテロ環、アリールおよび５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、アルキル、シクロアルキル、ヘテロ環、アリールおよびヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ１－３アルキル、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨ－Ｃ１－３アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）２、ＣＦ３、Ｃ１－６アルキル、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリルおよびメチルピラゾリルからなる群から選択された１～３個の置換基と、それぞれ、独自に、任意に置き換えられ、
各出現におけるＲ３は独立して、以下から成る群から選択され：
；
各出現におけるＲａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、ＲｇおよびＲｈは、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、
Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、ＲｇおよびＲｈの任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
ａおよびｂは独立して、０、１、２、３および４からなる基から選択され、
ａｌｋは、独立してＣ１－５アルキレン、Ｃ１－５アルケニレンおよびＣ１－５アルキニレンから成る群から選択され、各々が、Ｈ、ハロゲン、－ＯＨ、ＮＨ２、ＣＦ３、Ｃ１－５アルキル、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、－Ｏ－Ｃ１－５アルキル、－Ｓ－Ｃ１－５アルキル、－ＮＨ－Ｃ１－５アルキルおよび－Ｎ（Ｃ１～５アルキル）２、から成る群から、独立して、選択さた１～３個の置換基と任意に置き換えられ、Ｃ１～５アルキル基は、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、Ｃ１－４アルキル、ＣＦ３、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリルおよびメチルピラゾリルからなる群から選択された１～３個の置換基と、独自に、任意に置き換えられ、；
ＲＡおよびＲＢは各出現において独立して、水素、Ｃ１－３アルキル、Ｃ３－６シクロアルキル、５～１０員のヘテロ環、アリールおよび５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、アルキル、シクロアルキル、ヘテロ環、アリールおよびヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ１－３アルキル、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨ－Ｃ１－３アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）２、ＣＦ３、Ｃ１－６アルキル、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリルおよびメチルピラゾリルからなる群から選択された１～３個の置換基と、それぞれ、独自に、任意に置き換えられ、
各出現におけるＲ３は独立して、以下から成る群から選択され：
【化32】
各出現におけるＲａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、ＲｇおよびＲｈは、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、
Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、ＲｇおよびＲｈの任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
【0065】
いくつかの実施形態において、各出現においてＲ３は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、
Ｒ３の任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から、独立して選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
Ｒ３の任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から、独立して選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
【0066】
各出現におけるＲ４は独立して、以下から成る群から選択され：
【化33】
【0067】
いくつかの実施形態において、各出現においてＲ４は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、
Ｒ４の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
Ｒ４の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
【0068】
各出現においてＲ５は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、
Ｒ５の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
Ｒ５の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
【0069】
各出現においてＲ６は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、
Ｒ６の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
Ｒ６の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
【0070】
各出現におけるＬは独立して、以下から成る群から選択され：
、
Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、Ｄ５およびＤ６は、各出現において独立して、Ｎ、Ｃ、Ｏ、またはＳからなる群から選択され、但しＤ１－６がＮである場合、対応する位置は三価であり、Ｄ１－６がＯまたはＳである場合、対応する位置は二価である。リンカーは、ＣＬＭまたは薬剤の機能的断片のいずれかに、二つの末端のいずれかに結合することができる。例えば、
において、Ｌは、窒素に隣接する端から、または他方の端からのいずれかでＣＬＭに結合することができる。
【化34】
Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、Ｄ５およびＤ６は、各出現において独立して、Ｎ、Ｃ、Ｏ、またはＳからなる群から選択され、但しＤ１－６がＮである場合、対応する位置は三価であり、Ｄ１－６がＯまたはＳである場合、対応する位置は二価である。リンカーは、ＣＬＭまたは薬剤の機能的断片のいずれかに、二つの末端のいずれかに結合することができる。例えば、
【化35】
【0071】
各出現においてＢ１、Ｂ２、Ｂ３およびＢ４は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、
Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３およびのＢ４の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３およびのＢ４の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
【0072】
一部の実施形態では、Ｌは、各出現において独立して、非置換または置換された－（ａｌｋ）ａ－Ｓ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｏ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｏ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｓ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｓ（Ｏ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｓ（Ｏ）２－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＯＣ（Ｏ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＯＣ（Ｓ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｓ）Ｏ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｏ）ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｃ（Ｓ）ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－Ｓ（Ｏ）２ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｏ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｓ）－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＳ（Ｏ）２－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｏ）Ｏ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｓ）Ｏ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＯＣ（Ｏ）ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＯＣ（Ｓ）ＮＲＡ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｏ）ＮＲＢ－（ａｌｋ）ｂ－、－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＣ（Ｓ）ＮＲＢ－（ａｌｋ）ｂ－および－（ａｌｋ）ａ－ＮＲＡＳ（Ｏ）２ＮＲＢ－（ａｌｋ）ｂ－からなる群から選択され、
ａおよびｂは独立して、０、１、２、３および４からなる基から選択され、
ａｌｋは、独立して、Ｃ１－５アルキレン、Ｃ１－５アルケニレンおよびＣ１－５アルキニレンからなる群から選択され、各々が、独立して、Ｈ、ハロゲン、－ＯＨ、ＮＨ２、ＣＦ３、Ｃ１－５アルキル、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、－Ｏ－Ｃ１－５アルキル、－Ｓ－Ｃ１－５アルキル、－ＮＨ－Ｃ１－５アルキル、および－Ｎ（Ｃ１～５アルキル）２、からなる群から選択された１～３個の置換基で任意選択的に置換され、Ｃ１～５アルキル基は独立して、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、Ｃ１－４アルキル、ＣＦ３、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリルおよびメチルピラゾリルからなる群から選択された１～３個の置換基で任意選択的に置換される。
ａおよびｂは独立して、０、１、２、３および４からなる基から選択され、
ａｌｋは、独立して、Ｃ１－５アルキレン、Ｃ１－５アルケニレンおよびＣ１－５アルキニレンからなる群から選択され、各々が、独立して、Ｈ、ハロゲン、－ＯＨ、ＮＨ２、ＣＦ３、Ｃ１－５アルキル、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、－Ｏ－Ｃ１－５アルキル、－Ｓ－Ｃ１－５アルキル、－ＮＨ－Ｃ１－５アルキル、および－Ｎ（Ｃ１～５アルキル）２、からなる群から選択された１～３個の置換基で任意選択的に置換され、Ｃ１～５アルキル基は独立して、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、Ｃ１－４アルキル、ＣＦ３、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリルおよびメチルピラゾリルからなる群から選択された１～３個の置換基で任意選択的に置換される。
【0073】
ＲＣおよびＲＤは各出現において独立して、水素、Ｃ１－３アルキル、Ｃ３－６シクロアルキル、５～１０員のヘテロ環、アリールおよび５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、アルキル、シクロアルキル、ヘテロ環、アリールおよびヘテロアリールはそれぞれ独立して、ハロゲン、Ｃ１－３アルキル、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨ－Ｃ１－３アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）２、ＣＦ３、Ｃ１－６アルキル、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリルおよびメチルピラゾリルからなる群から選択された１～３個の置換基で任意選択的に置換される。
【0074】
各発生におけるＸは、独立して、以下からなる群から選択される：
【化36-1】
【化36-2】
【化36-3】
【化36-4】
【化36-5】
【0075】
Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは、各出現において、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、
Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤに対する任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤに対する任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基であり、
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
【0076】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、およびＡ６は各出現において独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＣＨ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＣＨ２（ＮＨ２）、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、Ｎ（Ｃ１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ１－６アルキル、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルイミダゾリル、メチルピラゾリル、任意選択的に置換されたＣ１－６アルキル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルケニル、任意選択的に置換されたＣ２－６アルキニル、任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキル、任意選択的に置換された５～１０員のヘテロ環、任意選択的に置換されたアリールおよび任意選択的に置換された５～１０員のヘテロアリールからなる群から選択され、
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５およびＡ６の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基である。
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５およびＡ６の任意選択の置換基は、独立して、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨ、－Ｓ－ＣＨ３、任意選択的に置換されたＣ１－３アルキルおよび任意選択的に置換されたＣ３－６シクロアルキルからなる群から選択された１～３個の置換基である。
Ｃ１－３アルキルおよびＣ３－６シクロアルキルの任意選択の置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＨ３、ＣＦ３、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨ２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＳＨおよび－Ｓ－ＣＨ３からなる群から、独立して選択された１～２個の置換基である。
【0077】
本開示は、様々な置換基のすべての組み合わせを使用することを企図している。したがって、化合物１－１から化合物１－５の構造式内に含まれる上述の置換基の任意の組み合わせを使用することができる。
【0078】
いくつかの実施形態では、ＡＲＣＳは、狭義の一般構造の化合物１－６から化合物１－１１、
またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
【化37】
【0079】
いくつかの実施形態において、ＡＲＣＳは、
の構造またはその薬学的に許容される塩を有していてもよく、Ｌは、
からなる群から選択されたリンカーであり、いずれかの端はＣＬＭに接続することができ、Ｒ１は
からなる群から選択され、ＣＬＭは、
からなる群から選択される。式１－５０に包含される化合物は、以下に限定されないが、表１における化合物１－１０１、１－１０２、１－１０３、１－１０４、１－１０５、１－１０６、１－１０７、１－１０８、１－１０９、１－１１０、１－１１１、１－１１２、１－１１３、１－１１４、１－１１５、１－１１６、１－１１７、１－１１８、１－１１９、１－１２０、１－１２１、１－１２２、１－１２３、１－１２４、１－１２５、１－１２６、１－１２７、１－１２８、１－１２９、１－１３０、１－１３７、１－１３８、１－１４５、１－１４６、１－１５３、１－１５４、１－１６１、１－１６２、１－１６９、１－１７０、１－１７１および１－１７２を含む。
【化38】
【化39】
【化40】
【化41】
【0080】
いくつかの実施形態において、ＡＲＣＳは、
の構造またはその薬学的に許容される塩を有していてもよく、Ｌのリンカーは
であり、Ｒ２は、
からなる群から選択され、ＣＬＭは
からなる群から選択される。式１－５１によって包含される化合物は、以下に限定されないが、表１における化合物１－１３１、１－１３２、１－１３３、１－１３４、１－１３５、１－１３６、１－１３９、１－１４０、１－１４１、１－１４２、１－１４３、１－１４４、１－１４７、１－１４８、１－１４９、１－１５０、１－１５１、１－１５２、１－１５５、１－１５６、１－１５７、１－１５８、１－１５９、１－１６０、１－１６３、１－１６４、１－１６５、１－１６６、１－１６７および１－１６８を含む。
【化42】
【化43】
【化44】
【化45】
【0081】
例示的なＡＲＣＳは、化合物１－１０１～化合物１－１７２からなる群から選択された任意の化合物を含む。
表１ ＡＲＣＳ化合物の非限定的な例
またはその薬学的に許容される塩。
表１ ＡＲＣＳ化合物の非限定的な例
【化46-1】
【化46-2】
【化46-3】
【化46-4】
【化46-5】
【化46-6】
【化46-7】
【化46-8】
【化46-9】
【化46-10】
【化46-11】
【0082】
Ｅ．医薬組成物
本開示のＡＲＣＳは、所望の結果を生成することができる任意の便利な手段を使用して、対象に投与されてもよい。したがって、本開示のＡＲＣＳは、治療投与のための様々な製剤に組み込むことができる。より詳細には、本開示のＡＲＣＳは、適切な薬学的に許容される担体または希釈剤との組み合わせによって医薬組成物に製剤化されてもよく、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、溶液、座薬、注射、吸入剤およびエアロゾルなどの固体、半固体、液体、またはガス状の形態で製剤化されてもよい。
本開示のＡＲＣＳは、所望の結果を生成することができる任意の便利な手段を使用して、対象に投与されてもよい。したがって、本開示のＡＲＣＳは、治療投与のための様々な製剤に組み込むことができる。より詳細には、本開示のＡＲＣＳは、適切な薬学的に許容される担体または希釈剤との組み合わせによって医薬組成物に製剤化されてもよく、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、溶液、座薬、注射、吸入剤およびエアロゾルなどの固体、半固体、液体、またはガス状の形態で製剤化されてもよい。
【0083】
本明細書で使用される場合、「医薬組成物」という用語は、本明細書に記載のＡＲＣＳおよび少なくとも一つの薬学的に許容可能な担体、例えば、製薬業界で一般的に使用される任意の担体を含む組成物を指す。「薬学的に許容される」という用語は、本明細書では、妥当な利益／リスク比に見合った、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応またはその他の問題または合併症なしに、ヒトおよび動物の組織に接触して使用するのに適した、健全な医学的判断の範囲内にある化合物、材料、組成物および／または剤形を指すように用いられる。
【0084】
医薬組成物の投与は、経口、口腔、直腸、非経口、腹腔内、皮内、経皮、気管内など、様々な方法で達成することができる。医薬剤形では、医薬組成物は、単独でまたは他の薬学的に活性な化合物と組み合わせて投与されてもよい。
【0085】
医薬組成物中のＡＲＣＳの量は、重量、モルまたは体積に基づいてもよい。一部の実施形態において、医薬組成物は、少なくとも０．０００１％のＡＲＣＳを含む。一部の実施形態において、医薬組成物は、少なくとも０．１％のＡＲＣＳを含む。一部の実施形態において、医薬組成物は、少なくとも０．５％のＡＲＣＳを含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、ＡＲＣＳの化合物の少なくとも１％を含む。一部の実施形態において、医薬組成物は、少なくとも２％のＡＲＣＳを含む。一部の実施形態において、医薬組成物は、少なくとも３％のＡＲＣＳを含む。一部の実施形態において、医薬組成物は、少なくとも４％のＡＲＣＳを含む。一部の実施形態において、医薬組成物は、少なくとも５％のＡＲＣＳを含む。一部の実施形態において、医薬組成物は、少なくとも１０％のＡＲＣＳを含む。一部の実施形態において、医薬組成物は、ＡＲＣＳの０．０５％～９０％を含む。一部の実施形態において、医薬組成物は、ＡＲＣＳの０．１％～８５％を含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、０．５％～８０％のＡＲＣＳを含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、１％～７５％のＡＲＣＳを含有する。一部の実施形態において、医薬組成物は、２％～７０％のＡＲＣＳを含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、ＡＲＣＳの３％～６５％を含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、ＡＲＣＳの４％～６０％を含む。一部の実施形態において、医薬組成物は、５％～５０％のＡＲＣＳを含む。
【0086】
また、特定のＡＲＣＳは、治療のために遊離形態または適切な場合、その薬学的に許容される誘導体として存在することができることも理解されるであろう。本開示によると、薬学的に許容される誘導体として、限定されないが、薬学的に許容される塩、エステル、このようなエステルの塩またはＡＲＣＳのプロドラッグもしくはその他の付加物もしくは誘導体が含まれ、ＡＲＣＳは、必要のある患者への投与時に、本明細書に記載されるように化合物またはその代謝物もしくは残渣を、直接的または間接的に提供することができる組成物に含まれる。
【0087】
上述したように、本開示の医薬組成物は、薬学的に許容される賦形剤を含んでもよく、賦形剤は本明細書で使用される場合、所望される特定の剤形に好適な、任意のおよび全ての溶媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散剤または懸濁液助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、保存剤、抗酸化剤、固体結合剤、潤滑剤等を含む。
【0088】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」という用語は、液体もしくは固体充填剤、希釈剤、賦形剤、製造支援（例えば、潤滑剤、タルクマグネシウム、カルシウムもしくはステアリン酸亜鉛またはステアリン酸）または一つの臓器もしくは身体の一部から、別の臓器もしくは一部に対象化合物を運ぶもしくは輸送することに関与する溶媒封入材料などの、薬学的に許容される材料、組成物またはビヒクルを意味する。各担体は、製剤の他の成分と互換性があり、患者に有害ではないという意味で、「許容可能」でなければならない。薬学的に許容される担体として役立ち得る材料のいくつかの例として、（１）ラクトース、グルコースおよびショ糖などの糖、（２）トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンなどのデンプン、（３）セルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、エチルセルロース、微結晶性セルロースおよび酢酸セルロースなどのその誘導体、（４）粉末化されたトラガカンス、（５）モルト、（６）ゼラチン、（７）ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムおよびタルクなどの潤滑剤、（８）ココアバターおよび座薬ワックスなどの賦形剤、（９）ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびダイズ油などの油、（１０）プロピレングリコールなどのグリコール、（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール、（１２）オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル、（１３）寒天、（１４）水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤、（１５）アルギニン酸、（１６）パイロジェンフリー水（１７）等張生理食塩水、（１８）リンゲル溶液（１９）エチルアルコール、（２０）ｐＨ緩衝溶液、（２１）ポリエステル、ポリカーボネートおよび／またはポリ無水物、（２２）ポリペプチドおよびアミノ酸などのバルク化剤（２３）血清アルブミン、ＨＤＬおよびＬＤＬなどの血清成分、（２４）エタノールなどのＣ２－Ｃ１２アルコール、および（２５）医薬品製剤に使用される他の非毒性の適合性物質が挙げられる。湿潤剤、着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤、芳香剤、保存剤および抗酸化剤も、製剤中に存在し得る。本明細書では、「賦形剤」、「担体」、「薬学的に許容可能な担体」などの用語が交換可能に使用される。
【0089】
本明細書の組成物の調製のための有用な医薬担体は、固体、液体またはガスであり得る。適切な医薬担体およびその製剤は、Ｅ．Ｗ．ＭａｒｔｉｎによるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓに記載されている。こうした組成物は、いずれにしても、レシピエントへの適切な投与のための適切な剤形を調製するために、適切な担体と共に有効量のＡＲＣＳを含有する。
【0090】
経口投与のための液体剤形としては、以下に限定されないが、医薬的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルが挙げられる。ＡＲＣＳに加えて、液体剤形は、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に綿実油、ピーナッツ油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルおよびそれらの混合物などの当該技術分野で一般的に使用される不活希釈剤を含むことができる。不活希釈剤に加えて、経口組成物は、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、甘味剤、香味剤および芳香剤などのアジュバントも含み得る。
【0091】
経口投与のための固体剤形には、カプセル、錠剤、丸剤、粉末および顆粒が含まれる。このような固体剤形において、ＡＲＣＳは、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなどの少なくとも一つの不活性、薬学的に許容される賦形剤または担体および／またはａ）デンプン、ラクトース、ショ糖、グルコース、マンニトール、ケイ酸などの充填剤または延長剤、ｂ）結合剤、例えば、例えば カルボキシメチルセルロース、アルギン酸、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、ショ糖およびアカシア、ｃ）グリセロールなどの保水剤、ｄ）寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤、ｅ）パラフィンなどの溶液遅延剤、ｆ）第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤、ｇ）湿潤剤、例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアリン酸、ｈ）カオリンおよびベントナイト粘土などの吸収剤ならびにｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなどの潤滑剤、ならびにこれらの混合物を含む。カプセル、錠剤および丸剤の場合、剤形はまた、緩衝剤を含み得る。
【0092】
類似の種類の固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、軟質および硬質充填ゼラチンカプセルに充填剤として使用することができる。錠剤、糖剤、カプセル、丸剤および顆粒の固形剤形は、腸溶性コーティングなどのコーティングおよびシェルならびに医薬製剤技術で周知の他のコーティングを用いて調製することができる。これらの固体剤形は、任意選択的に不透明化剤を含有してもよく、また活性成分のみを放出する、または優先的に、腸管の特定の部分において、任意選択的に、遅延様式で放出する組成物であってもよい。使用され得る包埋組成物の例には、高分子物質およびワックスが含まれる。類似の種類の固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、軟質および硬質充填ゼラチンカプセルに充填剤として使用することができる。
【0093】
ＡＲＣＳはまた、上述のように、一つ以上の賦形剤を有するマイクロカプセル形態であってもよい。錠剤、糖剤、カプセル、丸剤および顆粒の固形剤形は、腸溶性コーティング、放出制御コーティングなどのコーティングおよびシェルならびに医薬製剤技術で周知の他のコーティングを用いて調製することができる。こうした固体剤形では、ＡＲＣＳは、ショ糖、ラクトースおよびデンプンなどの少なくとも一つの不活性希釈剤と混合され得る。こうした剤形はまた、通常の慣行のように、不活性希釈剤以外の追加の物質、例えば、打錠潤滑剤およびステアリン酸マグネシウムおよび微結晶セルロースを含み得る。カプセル、錠剤および丸剤の場合、剤形はまた、緩衝剤を含み得る。これらの固体剤形は、任意選択的に不透明化剤を含有してもよく、また活性成分のみを放出する、または優先的に、腸管の特定の部分において、任意選択的に、遅延様式で放出する組成物であってもよい。使用され得る包埋組成物の例には、高分子物質およびワックスが含まれる。
【0094】
非経口投与に適した製剤は、都合よく、好ましくはレシピエントの血液と等張性の薬剤の滅菌水性調製物を含む。適切な賦形剤溶液には、リン酸緩衝生理食塩水、生理食塩水、水、乳酸リンゲル液またはデキストロース（水中５％）が含まれる。こうした製剤は、薬剤を水と混合して溶液または懸濁液を生成することによって便利に調製することができ、滅菌容器に充填され、細菌汚染に対して密封される。滅菌材料は、最終滅菌の必要性を回避するために、無菌製造条件下で使用されることが好ましい。かかる製剤は、一つ以上の追加の成分を任意選択的に含有することができ、ヒドロキシ安息香酸メチル、クロロクレゾール、メタクゾール、フェノールおよび塩化ベンザルコニウムなどの保存剤が含まれうる。かかる物質は、製剤が多用量容器に提示される場合に特別な価値がある。
【0095】
緩衝液も含有されて、製剤に適切なｐＨ値を提供することができる。適切な緩衝材料としては、リン酸ナトリウムおよび酢酸ナトリウムが挙げられる。塩化ナトリウムまたはグリセリンを使用して、血液を用いて製剤を等張性にすることができる。
【0096】
所望により、製剤は、窒素などの不活性雰囲気下で容器に充填することができ、単位用量または複数回用量形態、例えば、密封されたアンプルで簡便に提示することができる。
【0097】
当業者は、本開示の方法に従って対象に投与される本開示の組成物の様々な構成要素の量が、上述の要因に依存することを認識する。
【0098】
注射用調製物は、例えば、滅菌注射用水性または油性懸濁液を、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して、公知技術に従って製剤化することができる。滅菌された注射用調製物はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌された注射用溶液、懸濁液またはエマルジョンであってもよく、例えば１，３－ブタンジオール中の溶液としてなどである。使用され得る許容されるビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌された固定油は、溶媒または懸濁媒体として従来的に用いられる。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む、任意の無刺激の固定油を用いることができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製に使用される。
【0099】
錠剤の非限定的な例は、１０ｍｇ～１００ｍｇの範囲の量の有効成分、７０ｍｇ～９５ｍｇの粉末状のラクトース、１０ｍｇ～３５ｇの白色トウモロコシデンプン、１ｍｇ～８ｍｇのポリビニルピロリドン、１ｍｇ～１０ｍｇのナトリウム（Ｎａ）カルボキシメチルデンプン（ＣＭＳ）、１ｍｇ～５ｍｇのステアリン酸マグネシウムを含み、錠剤重量は２００ｍｇ～３０００ｍｇの範囲である。
【0100】
本開示の錠剤の例は、以下の通りである。
成分 ｍｇ／錠剤
有効成分 １００
粉末ラクトース ９５
白色トウモロコシデンプン ３５
ポリビニルピロリドン ８
ナトリウムカルボキシメチルデンプン １０
ステアリン酸マグネシウム ２
錠剤重量 ２５０
成分 ｍｇ／錠剤
有効成分 １００
粉末ラクトース ９５
白色トウモロコシデンプン ３５
ポリビニルピロリドン ８
ナトリウムカルボキシメチルデンプン １０
ステアリン酸マグネシウム ２
錠剤重量 ２５０
【0101】
カプセルの非限定的な例は、１０ｍｇ～１００ｍｇの範囲の量の有効成分、５０ｍｇ～７５ｍｇの結晶性ラクトース、１０ｍｇ～３５ｇの微結晶セルロース、１ｍｇ～８ｍｇのタルクおよび１ｍｇ～５ｍｇのステアリン酸マグネシウムを含み、カプセル充填重量は１００ｍｇ～３０００ｍｇの範囲である。
【0102】
本開示のカプセルの例は、以下の通りである。
成分 ｍｇ／カプセル
有効成分 ５０
結晶性ラクトース ６０
微結晶セルロース ３４
タルク ５
ステアリン酸 マグネシウム１
カプセル充填重量 １５０
成分 ｍｇ／カプセル
有効成分 ５０
結晶性ラクトース ６０
微結晶セルロース ３４
タルク ５
ステアリン酸 マグネシウム１
カプセル充填重量 １５０
【0103】
上のカプセルでは、活性成分は適切な粒子サイズを有する。結晶性ラクトースおよび微結晶性セルロースは、互いに均質に混合され、ふるい分けされ、その後、タルクおよびステアリン酸マグネシウムが混合される。最終混合物を、適切なサイズの硬質ゼラチンカプセルに充填する。
【0104】
注射の非限定的な例は、０．０５ｍｇ～５ｍｇの範囲の量の有効成分、１０．０μＬ～２０．０μＬの１Ｎ ＨＣｌ、０．１ｍｇ～１ｍｇの酢酸、１ｍｇ～１０ｍｇの塩化ナトリウム、１ｍｇ～１０ｍｇのフェノール、ｐＨを４～５に調整するために十分な量の１Ｎ ＮａＯＨおよび十分な量の水を含む。
【0105】
本開示の注射液の例は、以下の通りである。
成分 ｍｇ／溶液
活性物質 １．０ｍｇ
１ Ｎ ＨＣｌ ２０．０μｌ
酢酸 ０．５ｍｇ
ＮａＣｌ ８．０ｍｇ
フェノール １０．０ｍｇ
１Ｎ ＮａＯＨ ｑ．ｓ．ａｄ ｐＨ５
Ｈ２Ｏ ｑ．ｓ．ａｄ １ｍＬ
成分 ｍｇ／溶液
活性物質 １．０ｍｇ
１ Ｎ ＨＣｌ ２０．０μｌ
酢酸 ０．５ｍｇ
ＮａＣｌ ８．０ｍｇ
フェノール １０．０ｍｇ
１Ｎ ＮａＯＨ ｑ．ｓ．ａｄ ｐＨ５
Ｈ２Ｏ ｑ．ｓ．ａｄ １ｍＬ
【0106】
注射可能な製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通した濾過によって、または使用前に滅菌水または他の滅菌注射可能な媒体中に溶解または分散され得る滅菌固体組成物の形態の滅菌剤を組み込むことによって、滅菌することができる。
【0107】
ＡＲＣＳの効果を延長するために、多くの場合、皮下注射または筋肉内注射からのＡＲＣＳの吸収を遅くすることが望ましい。これは、低水溶性の液体懸濁液または非結晶性材料の使用によって達成され得る。次いで、ＡＲＣＳの吸収速度は、その溶解速度に依存し、次に、結晶サイズおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口的に投与されるＡＲＣＳ形態の遅延吸収は、油ビヒクルにＡＲＣＳを溶解または懸濁することによって達成される。注射用デポ形態は、ポリラクチド－ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中にＡＲＣＳのマイクロカプセルマトリックスを形成することによって作製される。ポリマーに対するＡＲＣＳの比および使用される特定のポリマーの性質に応じて、ＡＲＣＳ放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、（ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポ注射用製剤はまた、身体組織と互換性のあるリポソームまたはマイクロエマルジョンにＡＲＣＳを封入することによっても調製される。
【0108】
直腸投与または膣投与のための組成物は、好ましくは、ＡＲＣＳを、またはココアバター、ポリエチレングリコールなどの適切な非刺激性賦形剤または担体、または周囲温度で固体であるが、体温で液体であり、したがって直腸または膣腔で溶融し、活性化合物を放出する坐薬ワックスと混合することによって調製することができる坐薬である。
【0109】
典型的な座薬製剤は、ＡＲＣＳまたはその薬学的に許容される塩を含み、この方法で投与された場合、例えば、ポリマーグリコール、ゼラチン、ココアバターまたは他の低融点の植物性ワックスまたは脂肪などの結合剤および／または潤滑剤と共に活性である。典型的な経皮製剤として、従来の水性または非水性ビヒクル、例えば、クリーム、軟膏、ローションまたはペーストが挙げられ、または薬用プラスチック、パッチもしくは膜の形態である。
【0110】
吸入のための典型的な組成物は、例えばジクロロジフルオロメタンまたはトリクロロフルオロメタンなどの従来の噴霧剤を使用してエアロゾルの形態で投与することができる、溶液、懸濁液またはエマルションの形態である。
【0111】
投与経路に応じて、当業者は、それに応じて、ヒト対象などの対象に本明細書に開示される小分子の有効用量を決定し、調整することができる。
【0112】
毒性および治療有効性は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％の致死量）およびＥＤ５０（集団の５０％の治療有効量）を決定するための、細胞培養または実験動物における標準的な医薬品手順によって決定することができる。毒性と治療効果との間の用量比は、治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０の比として表され得る。大きな治療指数を呈する組成物が好ましい。
【0113】
本明細書に提供される医薬組成物の記述は、主にヒトへの投与に適した医薬組成物を対象とするが、当業者であれば、このような組成物は、概して、例えば非ヒト動物、例えば非ヒト哺乳動物などの任意の他の動物への投与に適していることを理解する。医薬組成物の投与が企図される対象としては、限定されないが、ウシ、ウマ、ニワトリおよびブタなどの農業動物、ネコ、イヌなどの飼育動物またはマウス、ラット、ウサギ、イヌおよび非ヒト霊長類などの研究動物を含む、非ヒト哺乳動物が挙げられる。
【0114】
ＩＩ．ＡＲＣＳの使用方法
本明細書に記載されるＡＲＣＳまたは本明細書に記載されるＡＲＣＳを含有する組成物は、そのＦＣＢで治療され得る任意の治療疾患または、癌、神経変性疾患、自己免疫疾患または適宜に老化などであるがこれらに限定されない、ＡＲＣＳの生物学的標的に関連する任意の治療疾患を治療するために投与され得る。製剤は、脳および中枢神経系、目、耳、肺、骨、心臓、腎臓、肝臓、脾臓、乳房、卵巣、結腸、膵臓、筋肉、消化管、口、皮膚などの様々な身体部分に送達され、こうした身体部分に関連する疾患を治療することができる。製剤は、注射、経口または局所的に、典型的には、粘膜表面（肺、鼻腔、口腔、頬側、舌下、膣、直腸）または眼（眼内または経眼）に投与され得る。
本明細書に記載されるＡＲＣＳまたは本明細書に記載されるＡＲＣＳを含有する組成物は、そのＦＣＢで治療され得る任意の治療疾患または、癌、神経変性疾患、自己免疫疾患または適宜に老化などであるがこれらに限定されない、ＡＲＣＳの生物学的標的に関連する任意の治療疾患を治療するために投与され得る。製剤は、脳および中枢神経系、目、耳、肺、骨、心臓、腎臓、肝臓、脾臓、乳房、卵巣、結腸、膵臓、筋肉、消化管、口、皮膚などの様々な身体部分に送達され、こうした身体部分に関連する疾患を治療することができる。製剤は、注射、経口または局所的に、典型的には、粘膜表面（肺、鼻腔、口腔、頬側、舌下、膣、直腸）または眼（眼内または経眼）に投与され得る。
【0115】
本開示の態様では、ＡＲＣＳは生物学的標的に結合する。いくつかの実施形態では、生物学的標的は、以下に限定されないが、ホスホイノシチド３－キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）およびシュードキナーゼなどのキナーゼを含む。
【0116】
一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、生物学的標的との共有結合を形成することができる。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、生物学的標的の約５％～１００％から生物学的標的と共有結合を形成することができる。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、生物学的標的の約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または１００％から、生物学的標的と共有結合を形成することができる。
【0117】
一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、ＰＩ３キナーゼと共有結合を形成することができる。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、約５％～１００％のＰＩ３キナーゼからＰＩ３キナーゼと共有結合を形成することができる。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、ＰＩ３キナーゼの約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または１００％からＰＩ３キナーゼと共有結合を形成することができる。
【0118】
タンパク質キナーゼおよびシュードキナーゼ
タンパク質キナーゼおよびシュードキナーゼは、正常状態および疾患状態における幅広い生物学的プロセスのためのシグナル伝達経路を調節する（Ｂｒｏｇｎａｒｄ，Ｊ．ら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｇｅｎｅｔ．Ｄｅｖ．２０１１、２１、ｐｐ４－１１；Ｃｏｈｅｎ，Ｐ．ら、Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．２００２、４、Ｅ１２７－１３０）。実際、ほとんどの真核生物のプロセスは、キナーゼおよび／またはシュードキナーゼによって制御される。「シュードキナーゼ」という用語は、ＶＡＩＫモチーフ中のリジンまたはＤＦＧモチーフ中のアスパラギン酸を含む、触媒的に関連する残基を欠いているキナーゼドメインを有するタンパク質を指す。シュードキナーゼの例としては、ＨＥＲ３、ＳＴＲＡＤ、ＩＬＫ、ＫＳＲ１およびＫＳＲ２が挙げられる。一部のシュードキナーゼはホスホリル基の伝達が不可能であるが、他のシュードキナーゼは触媒的に関連した残基を欠くにもかかわらずホスホリル基の伝達能力を有する。
タンパク質キナーゼおよびシュードキナーゼは、正常状態および疾患状態における幅広い生物学的プロセスのためのシグナル伝達経路を調節する（Ｂｒｏｇｎａｒｄ，Ｊ．ら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｇｅｎｅｔ．Ｄｅｖ．２０１１、２１、ｐｐ４－１１；Ｃｏｈｅｎ，Ｐ．ら、Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．２００２、４、Ｅ１２７－１３０）。実際、ほとんどの真核生物のプロセスは、キナーゼおよび／またはシュードキナーゼによって制御される。「シュードキナーゼ」という用語は、ＶＡＩＫモチーフ中のリジンまたはＤＦＧモチーフ中のアスパラギン酸を含む、触媒的に関連する残基を欠いているキナーゼドメインを有するタンパク質を指す。シュードキナーゼの例としては、ＨＥＲ３、ＳＴＲＡＤ、ＩＬＫ、ＫＳＲ１およびＫＳＲ２が挙げられる。一部のシュードキナーゼはホスホリル基の伝達が不可能であるが、他のシュードキナーゼは触媒的に関連した残基を欠くにもかかわらずホスホリル基の伝達能力を有する。
【0119】
キナーゼおよびシュードキナーゼは、結合、リン酸化などの共有結合的修飾、立体構造制御、細胞局在化および／または他のプロセスを介して、タンパク質パートナーを阻害および／または活性化することによって機能し得る。タンパク質キナーゼおよびシュードキナーゼは、癌、アルツハイマー病、老化、糖尿病、心血管疾患、ＣＮＳ関連疾患、免疫学的疾患、アレルギー、高血圧およびパーキンソン病を含むがこれに限定されない、幅広い疾患を促進および／または拮抗することができる。タンパク質キナーゼおよびシュードキナーゼもまた、癌およびパーキンソン病を含むがこれに限定されない複数の疾患において、一般的に変異される。
【0120】
キナーゼおよびシュードキナーゼを標的とする分子は、抗癌剤として作用し得る。残念なことに、一般的な阻害剤は、標的上の短い共鳴時間に起因して、限定的な効力しか示さないことが多い。したがって、以前のキナーゼ阻害剤と比較して、標的における共鳴時間が改善され、および同時に改善された潜在能および有効性を有するキナーゼ阻害剤を発見する必要がある。
【0121】
いくつかの実施形態では、本開示のＡＲＣＳは、キナーゼおよびシュードキナーゼを標的にしてもよく、これによってキナーゼおよびシュードキナーゼを阻害する。ＡＲＣＳのＦＣＢは、キナーゼおよびシュードキナーゼの阻害剤であってもよい。ＡＲＣＳのＣＬＭは、キナーゼおよびシュードキナーゼに共有結合してもよい。
【0122】
一部の実施形態では、本開示は、疾患を治療する方法を提供し、治療有効量の本開示のＡＲＣＳまたはＡＲＣＳを含む組成物またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含み、患者は、癌、アルツハイマー病、老化、糖尿病、心臓血管疾患、ＣＮＳ関連疾患、免疫学的疾患、アレルギー、高血圧、またはパーキンソン病などの標的キナーゼまたはシュードキナーゼの調節の変化によって部分的または全体的に引き起こされる疾患を有している。一部の実施形態では、疾患は、ＰＩ３Ｋに関連するか、またはＰＩ３Ｋが変異している。一部の実施形態では、対象は、ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子に突然変異を有する癌を有する。
【0123】
投与
本開示は、本明細書に記載されるＡＲＣＳを含む組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。本明細書に記載されるＡＲＣＳを含む組成物は、疾患、障害および／または状態を予防または治療もしくは撮像するために有効な任意の量および任意の投与経路を使用して、対象に投与されてもよい。必要とされる正確な量は、対象の種、年齢および全身状態、疾患の重症度、特定の組成物、その投与様式、その活性様式などに応じて、対象によって異なる。
本開示は、本明細書に記載されるＡＲＣＳを含む組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。本明細書に記載されるＡＲＣＳを含む組成物は、疾患、障害および／または状態を予防または治療もしくは撮像するために有効な任意の量および任意の投与経路を使用して、対象に投与されてもよい。必要とされる正確な量は、対象の種、年齢および全身状態、疾患の重症度、特定の組成物、その投与様式、その活性様式などに応じて、対象によって異なる。
【0124】
本開示による組成物は、典型的には、投与の容易さおよび用量の均一性のために、単位剤形で製剤化される。しかしながら、本開示の組成物の毎日の総使用量は、健全な医学的判断の範囲内で担当医によって決定され得ることが理解される。任意の特定の患者について、特定の治療有効量、予防的有効量または適切な撮像用量レベルは、治療される障害および障害の重症度、用いられる特定の化合物の活性、用いられる特定の組成物、患者の年齢、体重、全般的健康、性別および食事、使用される特定の化合物の投与時間、投与経路および排出速度、治療期間、使用される特定の化合物と組み合わせて、または偶発的に使用される薬剤、医学分野でよく知られているような要因を含む、様々な要因に依存する。
【0125】
一部の実施形態では、本開示による組成物は、１日つき、対象の体重の約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ～約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約０．５ｍｇ／ｋｇ～約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ～約０．１ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇ～約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇ～約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ～約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇまたは約１ｍｇ／ｋｇ～約２５ｍｇ／ｋｇを送達されるのに十分な用量レベルで、１日に１回以上投与されて、望ましい治療的、診断的、予防的または撮像効果を得ることができる。所望の用量は、１日３回、１日２回、１日１回、１日おき、３日おき、毎週、２週間ごと、３週間ごとまたは４週間ごとに送達することができる。一部の実施形態では、所望の用量は、複数の投与（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４またはそれ以上の投与）を使用して送達されてもよい。複数の投与が採用される場合、本明細書に記載されるものなどの分割投与レジメンを使用してもよい。
【0126】
本明細書で使用される場合、「分割用量」は、単一単位用量または１日総用量を、例えば、単一単位用量の２回以上の投与など、２回以上の用量に分割することである。本明細書で使用される場合、「単一単位用量」は、１回／１回／単一経路／単一接点、すなわち、単回投与事象で投与される任意の治療剤の用量である。本明細書で使用される場合、「１日総用量」は、２４時間で投与または処方される量である。１日総用量は、単回単位用量として投与されてもよい。
【0127】
ＩＩＩ．キットおよび装置
本開示は、本開示の方法を便利におよび／または効果的に実施するための様々なキットを提供する。典型的には、キットは、十分な量および／または数の構成要素を含み、ユーザーは対象の複数の治療を行い、および／または複数の実験を行うことができる。
本開示は、本開示の方法を便利におよび／または効果的に実施するための様々なキットを提供する。典型的には、キットは、十分な量および／または数の構成要素を含み、ユーザーは対象の複数の治療を行い、および／または複数の実験を行うことができる。
【0128】
一実施形態では、本開示は、インビトロまたはインビボで腫瘍細胞の成長を阻害するためのキットを提供し、このキットは、本開示のＡＲＣＳまたは本開示のＡＲＣＳの組み合わせを任意選択的に任意の他の活性薬剤と組み合わせて含んでいる。
【0129】
キットは、製剤組成物を形成するためのパッケージングおよび／または説明書、ならびに／または送達剤をさらに含んでいてもよい。送達剤は、生理食塩水、緩衝溶液または本明細書に開示される任意の送達剤を含んでもよい。各成分の量は、一貫した、再現性のあるより高濃度の生理食塩水または単純な緩衝液製剤を可能にするように変化させてもよい。構成要素はまた、ある期間にわたっておよび／または様々な条件下で、緩衝液中のＡＲＣＳの安定性を増加させるために変化させてもよい。
【0130】
本開示は、本開示のＡＲＣＳを組み込むことができる装置を提供する。これらの装置は、ヒト患者などの、それを必要とする対象に直ちに送達することができる安定した製剤に含まれる。一部の実施形態では、対象は癌を有する。
【0131】
装置の非限定的な例として、ポンプ、カテーテル、針、経皮パッチ、加圧臭覚送達装置、イオン泳動装置、多層マイクロ流体装置が挙げられる。装置は、単一、複数または分割投与レジメンに従って、本開示のコンジュゲートおよび／または粒子を送達するために用いられてもよい。装置は、生体組織、皮内、皮下または筋肉内に本開示のコンジュゲートおよび／または粒子を送達するために用いられてもよい。
【0132】
Ａ．アッセイ
生物学的標的へのＡＲＣＳの共有結合は、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、ゲルアッセイ、抗体アレイ、ウェスタンブロット、親和性ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＳＰＯＴ、免疫化学（例えば、ＩＨＣ）、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）、フローサイトメトリー、免疫細胞学、表面プラズモン共鳴分析、動態排除アッセイ、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣＭＳ）、タンデム質量分析（ＭＳ／ＭＳ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、ＢＣＡアッセイ、免疫電気泳動、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、タンパク質免疫沈降および／またはＰＣＲを含む。
生物学的標的へのＡＲＣＳの共有結合は、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、ゲルアッセイ、抗体アレイ、ウェスタンブロット、親和性ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＳＰＯＴ、免疫化学（例えば、ＩＨＣ）、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）、フローサイトメトリー、免疫細胞学、表面プラズモン共鳴分析、動態排除アッセイ、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣＭＳ）、タンデム質量分析（ＭＳ／ＭＳ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、ＢＣＡアッセイ、免疫電気泳動、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、タンパク質免疫沈降および／またはＰＣＲを含む。
【0133】
本明細書で使用される場合、「アッセイ」という用語は、報告された結果に関連する一連の活動を指し、これには、細胞播種、試験材料の調製、感染、溶解、分析および結果の計算が含まれ得るが、これらに限定されない。
【0134】
いくつかの実施形態では、基材上のアッセイ表面は、滅菌されており、生物学的産物の大規模（例えば、産業規模）製造の間、培養条件を表す条件下で細胞を培養するのに適している。いくつかの実施形態では、基材の外部は、アッセイ表面に対応する位置に、ウェル、くぼみ、境界などを含む。一部の実施形態では、ウェル、くぼみ、境界または類似のものは、アッセイ表面上に、例えば細胞培養培地などの流体を保持する。
【0135】
いくつかの実施形態では、基材は、マイクロアレイプレート、バイオチップなどを含み、培養細胞による生物学的産物の産生に関する、一連の試験剤、条件および／またはそれらの組み合わせのハイスループット、自動試験を可能にする。例えば、基材は、ｍカラムおよびｎ列のアッセイ表面（例えば、ウェル内に存在する）を有する２次元マイクロアレイプレートまたはバイオチップを含んでもよく、（例えば、２４ウェル、９６ウェルまたは３８４ウェルのマイクロアレイプレート上で）試験剤および／または条件のｍ×ｎの組み合わせの試験を可能にする。マイクロアレイ基材は、薬剤および／または条件の試験と並行して、すべての必要なポジティブおよびネガティブコントロールを実施することができるように設計されることが好ましい。
【0136】
Ｂ．スクリーニング方法
一般的に、生物学的標的との共有結合を形成する治療用コンジュゲートの合成は、複数の合成および精製工程を伴う。こうした合成および精製工程を使用する場合、スクリーニング目的のために治療用コンジュゲートのライブラリを生成することまたは構造－活性関係（ＳＡＲ）を開発することは困難な場合がある。有機合成の方法を使用して治療用コンジュゲートのライブラリを自動的に生成する方法およびシステムに対するニーズが依然として存在する。治療用コンジュゲート薬剤リードを発見するためには、タンパク質受容体に対する治療用コンジュゲートのライブラリをスクリーニングし、細胞環境で受容体に特異的に結合する分子を識別しなければならず、結合は共有結合的であり不可逆的である。治療用コンジュゲートが細胞内の特定の標的に共有結合するかどうかを特定することは、証明するのが困難である。
一般的に、生物学的標的との共有結合を形成する治療用コンジュゲートの合成は、複数の合成および精製工程を伴う。こうした合成および精製工程を使用する場合、スクリーニング目的のために治療用コンジュゲートのライブラリを生成することまたは構造－活性関係（ＳＡＲ）を開発することは困難な場合がある。有機合成の方法を使用して治療用コンジュゲートのライブラリを自動的に生成する方法およびシステムに対するニーズが依然として存在する。治療用コンジュゲート薬剤リードを発見するためには、タンパク質受容体に対する治療用コンジュゲートのライブラリをスクリーニングし、細胞環境で受容体に特異的に結合する分子を識別しなければならず、結合は共有結合的であり不可逆的である。治療用コンジュゲートが細胞内の特定の標的に共有結合するかどうかを特定することは、証明するのが困難である。
【0137】
生物学的標的へのそれらの共有結合のための治療用コンジュゲートをスクリーニングするための当技術分野の現在の方法は、タンデム質量分析アプローチを含む。タンデムＭＳまたはＭＳ／ＭＳは、選択されたイオンをフラグメントイオンに分解する方法である。試料がイオン化されてイオンの混合物を生成すると、特定の質量対電荷比（ｍ／ｚ）の前駆体イオンが選択され（ＭＳ１）、次いでフラグメント化（ＭＳ２）されて、検出用の生成物イオンが生成される。選択されたイオンの化学構造についての情報を、断片から決定することができる。
【0138】
しかしながら、質量分析法に関連する課題がある。質量分析法は、薬物様分子スクリーニングではなく、主に断片スクリーニングに限定される。治療用コンジュゲートの質量分析解析は、いくつかの断片を特定することが困難であるため、未解決の分析をもたらすことになる。このアプローチは、処理時間が長い複数ステップのプロセスを伴い、手動による分析を伴う。ＭＳ／ＭＳは、複合体、より大きい分子をデフラグメントし、各ペプチドによって手動で組み合わせることが必要であるため、得られたデータを解釈することが難しい。質量分析法を使用する別の欠点は、検出が存在量よりもイオン化に比例し、この手法をわずかに定量的にすることである。
【0139】
したがって、治療用コンジュゲートの合成およびスクリーニングに関連する課題がある。第一に、システインアミノ酸および非システインアミノ酸の両方にアクセスすることができる標的共有結合性阻害剤を生成することは困難である。偽陽性共有結合性阻害剤を実際の陽性と区別することも困難である。
【0140】
前述の問題に対処するために、発明者らは、コンビナトリアル合成アプローチを、信頼性のあるスクリーニングアプローチと組み合わせて、潜在的な治療用コンジュゲートを識別した。本開示は、治療用コンジュゲートを合成するためのハイスループット複合アプローチを提供し、共有結合を迅速に追跡し、作用持続時間について大型ライブラリを分析し、細胞内の共有結合的標的結合を直接的に定量する。
【0141】
ＭＳ／ＭＳ法を用いることにより、ナノモル感度を有する数十の分子と比較して、ピコモル感度で１日あたり数千の分子をスクリーニングすることができる。本開示は、任意の薬剤分子に適合し、断片に限定されず、９５～９９％の再現性で定量的結果をもたらす。
【0142】
いくつかの実施形態では、ＡＲＣＳのライブラリをスクリーニングする方法は、
組成物中にＡＲＣＳのライブラリを生成することと、
ライブラリを標的細胞に接触させることと、
標的細胞を溶解して可溶化物を生成することと、
可溶化物を標識することと、および
標的細胞上の生物学的標的へのＡＲＣＳの共有結合を検出することを含む。
組成物中にＡＲＣＳのライブラリを生成することと、
ライブラリを標的細胞に接触させることと、
標的細胞を溶解して可溶化物を生成することと、
可溶化物を標識することと、および
標的細胞上の生物学的標的へのＡＲＣＳの共有結合を検出することを含む。
【0143】
標的細胞として本明細書に提供される方法において有用なヒト細胞株の例として、限定されるものではないが、２９３Ｔ（胚性腎臓）、７８６－０（腎性）、Ａ４９８（腎）、Ａ５４９（肺胞基底上皮）、ＡＣＨＮ（腎性）、ＢＴ－５４９（乳房）、ＢｘＰＣ－３（膵臓）、ＣＡＫＩ－１（腎性）、Ｃａｐａｎ－１（膵臓）、ＣＣＲＦ－ＣＥＭ（白血病）、ＣＯＬＯ２０５（結腸）、ＤＬＤ－１（結腸）、ＤＭＳ１１４（小細胞肺）、ＤＵ１４５（前立腺）、ＥＫＶＸ（非小細胞肺）、ＨＣＣ－２９９８（結腸）、ＨＣＴ－１５（結腸）、ＨＣＴ－１１６（結腸）、ＨＴ２９（結腸）、ＨＴ－１０８０（線維肉腫）、ＨＥＫ２９３（胚性腎臓）、ＨｅＬａ（子宮頸癌）、ＨｅｐＧ２（肝細胞癌）、ＨＬ－６０（ＴＢ）（白血病）、ＨＯＰ－６２（非小細胞肺）、ＨＯＰ－９２（非小細胞肺）、ＨＳ ５７８Ｔ（乳房）、ＨＴ－２９（結腸腺がん）、ＩＧＲ－ＯＶ１（卵巣）、ＩＭＲ３２（神経芽腫）、Ｊｕｒｋａｔ（Ｔリンパ球）、Ｋ－５６２（白血病）、ＫＭ１２（結腸）、ＫＭ２０Ｌ２（結腸）、ＬＡＮ５（神経芽腫）、ＬＮＣａｐ．ＦＧＣ（白人前立腺腺がん）、ＬＯＸ ＩＭＶＩ（黒色腫）、ＬＸＦＬ５２９（非小細胞肺）、Ｍ１４（黒色腫）、Ｍ１９－ＭＥＬ（黒色腫）、ＭＡＬＭＥ－３Ｍ（黒色腫）、ＭＣＦｌＯＡ（乳腺上皮）、ＭＣＦ７（乳腺）、ＭＤＡ－ＭＢ－４５３（乳腺上皮）、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８（乳房）、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１（乳房）、ＭＤＡ－Ｎ（乳房）、ＭＯＬＴ－４（白血病）、ＮＣＩ／ＡＤＲ－ＲＥＳ（卵巣）、ＮＣＩ－Ｈ２２６（非小細胞肺）、ＮＣＩ－Ｈ２３（非小細胞肺）、ＮＣＩ－Ｈ３２２Ｍ（非小細胞肺）、ＮＣＩ－Ｈ４６０（非小細胞肺）、ＮＣＩ－Ｈ５２２（非小細胞肺）、ＯＶＣＡＲ－３（卵巣）、ＯＶＣＡＲ－４（卵巣）、ＯＶＣＡＲ－５（卵巣）、ＯＶＣＡＲ－８（卵巣）、Ｐ３８８（白血病）、Ｐ３８８／ＡＤＲ（白血病）、ＰＣ－３（前立腺）、ＰＥＲＣ６（登録商標）（Ｅ１形質転換胚性網膜）、ＲＰＭＩ－７９５１（黒色腫）、ＲＰＭＩ－８２２６（白血病）、ＲＸＦ ３９３（腎性）、ＲＸＦ－６３１（腎性）、Ｓａｏｓ－２（骨）、ＳＦ－２６８（ＣＮＳ）、ＳＦ－２９５（ＣＮＳ）、ＳＦ－５３９（ＣＮＳ）、ＳＨＰ－７７（小細胞肺）、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ（神経芽細胞腫）、ＳＫ－ＢＲ３（乳房）、ＳＫ－ＭＥＬ－２（黒色腫）、ＳＫ－ＭＥＬ－５（黒色腫）、ＳＫ－ＭＥＬ－２８（黒色腫）、ＳＫ－ＯＶ－３（卵巣）、ＳＮ１２Ｋ１（腎性）、ＳＮ１２Ｃ（腎性）、ＳＮＢ－１９（ＣＮＳ）、ＳＮＢ－７５（ＣＮＳ）ＳＮＢ－７８（ＣＮＳ）、ＳＲ（白血病）、ＳＷ－６２０（コロン）、Ｔ－４７Ｄ（乳房）、ＴＨＰ－１（単球由来マクロファージ）、ＴＫ－１０（腎性）、Ｕ８７（膠芽腫）、Ｕ２９３（腎臓）、Ｕ２５１（ＣＮＳ）、ＵＡＣＣ－２５７（黒色腫）、ＵＡＣＣ－６２（黒色腫）、ＵＯ－３１（腎）、Ｗ１３８（肺）およびＸＦ４９８（ＣＮＳ）が挙げられる。
【0144】
本明細書に提供される方法に有用な齧歯類細胞株の例として、限定されるものではないが、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞（例えば、ＢＨＫ２１細胞、ＢＨＫ ＴＫ－細胞）、マウスＳｅｒｔｏｌｉ（ＴＭ４）細胞、バッファローラット肝臓（ＢＲＬ ３Ａ）細胞、マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ）細胞、ラット肝腫（ＨＴＣ）細胞、マウス骨髄腫（ＮＳ０）細胞、マウスハイブリドーマ（Ｓｐ２／０）細胞、マウス胸腺腫（ＥＬ４）細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞およびＣＨＯ細胞誘導体、マウス胚性（ＮＩＨ／３Ｔ３、３Ｔ３Ｌｌ）細胞、ラット心筋（Ｈ９ｃ２）細胞、マウス筋芽細胞（Ｃ２Ｃ１２）細胞およびマウス腎臓（ｍｉＭＣＤ－３）細胞が挙げられる。
【0145】
本明細書に提供される方法に有用な非ヒト霊長類細胞株の例として、以下に限定されないが、サル腎臓（ＣＶＩ－７６）細胞、アフリカグリーンサル腎臓（ＶＥＲＯ－７６）細胞、グリーンサル線維芽細胞（Ｃｏｓ－１）細胞およびＳＶ４０（Ｃｏｓ－７）により形質転換されたサル腎臓（ＣＶＩ）細胞が挙げられる。追加の哺乳類細胞株は、当業者に既知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎカタログ（ＡＴＣＣ（登録商標）、ママサス、バージニア州）でカタログ化されている。
【0146】
一部の実施形態では、細胞は、化学的および／または機械的溶解を使用して溶解される。いくつかの実施形態では、化学溶解は、プロテアーゼ阻害剤、リン酸緩衝生理食塩水、およびＴｒｉｔｏｎ Ｘ１００を含む溶解緩衝液を含む。一部の実施形態では、細胞は、溶解緩衝液を－８０℃で約３０分～約７２時間添加した後に凍結させることができる。あるいは、細胞可溶化物は、２～８℃の範囲内または室温で保存することができる。いくつかの実施形態では、細胞は遠心分離され、細胞可溶化物が収集される。いくつかの実施形態では、３，７５０ＲＰＭで、室温で１０分間、遠心分離器中で細胞を回転させることによって実施される。
【0147】
本明細書に記載される方法は、限定されるものではないが、細胞プレート、例えば、２４ウェルプレート、４８ウェルプレート、９６ウェルプレートまたは３８４ウェルプレート、個々の細胞培養プレートまたはフラスコ、例えば、Ｔフラスコまたは振とうフラスコを含む、広範な細胞アッセイフォーマットのいずれかを利用することによって実施することができる。
【0148】
ＡＲＣＳの共有結合は、限定されるものではないが、ゲルアッセイ、ＮａｎｏＢＲＥＴアッセイ、ウェスタンブロット、ＥＬＩＳＡまたはマイクロアレイなどのアッセイによって検出することができる。例えば、ゲルアッセイは、マイクロ流体または毛細管技術を含んで、タンパク質をサイズ別に分離することができる。
【0149】
いくつかの実施形態では、共有結合は、ゲルアッセイによって検出される。「ゲルアッセイ」は、細胞または細胞可溶化物が、まず、１ピコモル－１ミリモルの用量で、２分～１２０時間の長さで、一般的な細胞培養技術を含むが、これらに限定されない当業者に公知の技術を使用して、ＡＲＣＳで最初に処理されるアッセイとして定義される。次いで、細胞を、限定されないが、超音波処理または緩衝液溶解を含む当業者に公知の技術を使用して溶解する。細胞の非精製可溶化物としても記載される、得られた可溶化物は、さらに調製されて、遠心分離を含むがこれに限定されない当業者に公知の技術を使用して、精製された可溶化物を生成することができる。精製または未精製の可溶化物は、対象の分子に共有結合しているタンパク質を含有する可能性が高い。「カップリング試薬」および標識分子を、精製または未精製の可溶化物に添加し、反応混合物中のＡＲＣＳを、銅を含まないまたは銅駆動のクリック化学反応を介して標識分子で共有結合的に標識する。次いで、標識分子に結合している化合物が添加され、これにより、化学量論の信頼性の高い分離および信頼性の高い共有結合性薬物追跡が可能となる。次いで、試料を、当業者に周知のウェスタンブロット法を介して実行する。その後、共有結合の量は、未処置のバンドと比較した薬物処置されたバンドのシフトに基づいて追跡することができる。バンドは、デンシトメトリーを使用して定量することができ、バンドの相対存在量を使用して、共有結合標識の定量的量を決定することができる。
【0150】
概して、高分子量のタンパク質／質量のＡＲＣＳへの共有結合が、ゲル中の標的－ＡＲＣＳ－高分子量のタンパク質質量複合体のシフトにつながる。高分子量タンパク質または任意の種類の分子に結合されたアジド結合分子が、ＡＲＣＳ上でアルキンに直接的に連結されている場合、シフトは依然として起こり、ＡＲＣＳの標的への共有結合を検出することが可能になる。
【0151】
いくつかの実施形態では、共有結合は、ゲルのみのシフトアッセイによって検出される。「ゲルのみのシフトアッセイ」は、タンパク質が（トランスフェクションまたは感染を介して）任意の細胞型に発現され、タグ付けドメインに連結されるアッセイとして定義される。このタグ付けドメインは、蛍光タンパク質またはリンカータンパク質を含む。蛍光タンパク質には、ＧＦＰ、ＲＦＰなどが含まれる。このリンカータンパク質には、ＨＡＬＯ、ＳＮＡＰ－、ＣＬＩＰ－、ＡＣＰ－およびＭＣＰ－タグが含まれる。トランスフェクションまたは感染の後、細胞は次に、本開示の治療用コンジュゲートで処理され、治療用コンジュゲートは、潜在的に共有結合することができるアルキンを含有する。その後、細胞は溶解する。リンカータンパク質を用いたタンパク質の発現の場合、次いで、蛍光染料を対象タンパク質に共有結合するために「カップリング試薬」が加えられる。次いで、可溶化液をゲル上で実行し、ゲル内蛍光を介して標的タンパク質を、ウェスタンブロット転写を必要とせずに可視化することができる。共有結合の量は、未処理のバンドと比較した薬剤処理されたバンドのシフトに基づいて追跡することができる。バンドは、デンシトメトリーを使用して定量することができ、バンドの相対存在量を使用して、共有結合標識の定量的量を決定することができる。
【0152】
タグ付けドメインは、標的の標識化を可能にする任意のドメインとすることができる。いくつかの実施形態では、タグ付けドメインは、標識を含む。この標識は、抗体によって認識されるエピトープまたは検出可能な光もしくは放射性標識などのドメイン自体に含まれていてもよい。いくつかの実施形態では、標識は、蛍光マーカー、例えば、ＦＩＴＣ、フィコビリタンパク質、例えば、Ｒ－もしくはＢ－フィコエリスリン、アロフィコシアニン、ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ染料、Ｃｙ３、Ｃｙ５、Ｃｙ７、発光マーカー、１２５Ｉもしくは３２Ｐなどの放射性標識、西洋ワサビペルオキシダーゼもしくはアルカリホスファターゼなどの酵素またはアルカリホスファターゼ、例えば、アルカリシュリンプホスファターゼからなる群から選択される。
【0153】
一部の実施形態では、本明細書で使用される場合「蛍光タンパク質」は、限定されるものではないが、オワンクラゲ緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、赤色蛍光タンパク質（ＲＦＰ）、ＧＦＰの構造バリアント（すなわち、循環置換、単量体型）、ＧＦＰのフォールディングバリアント（すなわち、より可溶性の型、スーパーフォルダー型）、ＧＦＰのスペクトルバリアント（すなわち、ＹＦＰ、ＣＦＰ）およびＧＦＰ様蛍光タンパク質（すなわちＤｓｋｅｄ）である。「ＧＦＰ様蛍光タンパク質」という用語は、１１ベータ鎖のＧＦＰのバレル構造ならびにその構造、折り畳みおよびスペクトルバリアントを共有するＡｎｔｈｏ Ｚｏａ蛍光タンパク質のメンバーを指すために使用される。「ＧＦＰ様非蛍光タンパク質」および「ＧＦＰ様発色タンパク質」（または単に「発色タンパク質」または「色素タンパク質」）は、１１ベータ鎖のＧＦＰのバレル構造ならびにその構造、折り畳みおよびスペクトルバリアントを共有する、花虫綱およびヒドロ虫綱の発色タンパク質を指すために使用される。
【0154】
いくつかの実施形態では、共有結合は、ウェスタンブロットベースシフトアッセイによって検出される。「ウェスタンブロットベースシフトアッセイ」は、試料が当業者に周知のウェスタンブロット法を介して実行されるアッセイとして定義される。その後、共有結合タンパク質が非共有結合バンドと比較してシフトするため、標的のシフトに基づいて共有結合の量を追跡することができる。バンドは、デンシトメトリーを使用して定量することができ、バンドの相対存在量を使用して、共有結合標識の定量的量を決定することができる。
【0155】
いくつかの実施形態では、共有結合は、ＥＬＩＳＡアッセイによって検出される。いくつかの実施形態では、共有結合は、ＥＬＩＳＡアッセイ１によって検出される。「ＥＬＩＳＡアッセイ１」は、ビオチン標識薬剤を含有する可溶化液が、単量体もしくは四量体ストレプトアビジンまたはストレプトアビジンバリアントもしくはビオチンに結合する分子とのハイブリダイゼーションを介して、固体支持体上に固定されているアッセイとして定義される。薬剤を固定した後、検出抗体を加えて、対象の薬剤標的を検出する。検出抗体は、酵素に共有結合されてもよく、または酵素または蛍光標識に連結された二次抗体によってそれ自体が検出されてもよい。生体共役反応を通して。各工程の間で、プレートは溶液で洗浄されて、非特異的に結合されている任意のタンパク質または抗体を除去する。最終洗浄工程の後、プレートは、酵素基質を添加して可視シグナルを生成することによって開発され、対象の標的への共有薬剤結合の量を示す。共有結合の量は、シグナルの量に基づいて追跡することができる。
【0156】
いくつかの実施形態では、共有結合は、ＥＬＩＳＡアッセイ２によって検出される。「ＥＬＩＳＡアッセイ２」は、対象の標的を結合する抗体とのハイブリダイゼーションを介して固体支持体上に固定化されるアッセイとして定義される。対象の標的を固定した後、検出抗体、単量体／四量体ストレプトアビジンまたはストレプトアビジンバリアントを添加して、対象の標的に結合されている薬剤を検出する。検出抗体、単量体／四量体ストレプトアビジンまたはストレプトアビジンバリアントは、酵素または蛍光標識に共有結合されていてもよく、または生体共役反応によって酵素または蛍光標識に連結された二次抗体によってそれ自体が検出されてもよい。各工程の間で、プレートは溶液で洗浄されて、非特異的に結合されている任意のタンパク質または抗体を除去する。最終洗浄工程の後、プレートは、酵素基質を添加して可視シグナルを生成することによって開発され、または蛍光シグナルを直接的に測定し、対象の標的への共有薬剤結合の量を示す。共有結合の量は、シグナルの量に基づいて追跡することができる。
【0157】
いくつかの実施形態では、共有結合は、抗体アレイによって検出される。「抗体アレイ」は、個々の抗体または複数の抗体が固体支持体に結合されて、その抗体に結合する対象のタンパク質および対象のタンパク質に結合している分子の検出を可能にするシステムとして定義される。抗体マイクロアレイは、特定の抗体が各ドットまたはウェルにハイブリダイズされた一連の個々のドットまたはウェルからなる（米国特許第２０１２０２３１９６３Ａ１号に記載されており、その内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。結合した精製または未精製の可溶化液を「抗体マイクロアレイ」に添加して、異なるタンパク質の分離、抗体結合パートナーへの特異的タンパク質の局在化または追加のタンパク質の洗浄を可能にする。標識された対象の分子は、各マイクロアレイドットまたはウェルで検出されて、ビオチン標識分子の存在を検出して標識レベルを明らかにすることによって、特定のタンパク質または複数のタンパク質への対象分子の共有結合の量を調べる。各ドットでの標識レベルは、特定の抗体にハイブリダイズした特定のタンパク質の共有結合標識の量を示す。分子上のビオチン標識は、蛍光、発光、ＦＲＥＴまたはＢＲＥＴアッセイなどの当業者に公知の技術を含むがこれに限定されない、標識に結合する蛍光分子または発光酵素の添加を介して検出することができる。この読み出しは、限定されるものではないが、蛍光または発光検出スキームを含む、当業者に公知のアプローチを使用して検出することができる。
【0158】
いくつかの実施形態では、可溶化液は、ビオチンで標識されて、ビオチン化化合物を生成する。いくつかの実施形態では、ストレプトアビジンは、ビオチン化化合物に結合するように添加される。一部の実施形態では、ストレプトアビジンは単量体である。いくつかの実施形態では、ビオチン化化合物は、クリックケミストリーによって生成される。いくつかの実施形態では、化合物は、ＡＲＣＳを用いた処理、細胞の単離および細胞溶解の後、クリックケミストリーで標識される。いくつかの実施形態では、クリックケミストリー試薬は、ピコリルアジドを含む。
【0159】
本明細書で使用される場合、「クリックケミストリー」という用語は、ヒュスゲン環化付加反応またはアジドと末端アルキンとの間の２，３－二極性環化付加反応を指し、１，２，４－トリアゾールを形成する。本明細書で使用される場合、「環化付加反応」という用語は、二つ以上のπ電子系（例えば、同じ分子の不飽和分子または不飽和部分）が結合して、結合多重性の正味の減少がある環状生成物を形成する化学反応を指す。環化付加反応では、π電子を使用して新しいシグマ結合が形成される。π電子の生成物は、「付加体」または「環化付加物」と呼ばれる。［３＋２］環化付加反応およびディールス・アルダー反応を含むがこれらに限定されない異なる種類の環化付加反応は当技術分野で公知である。［３＋２］環化付加反応は、２，３－二極性環化付加反応とも呼ばれ、１，３－二極と親双極子との間で生じ、一般的に５員のヘテロ環の構築に使用される。「［３＋２］環化付加反応」という用語は、アジド、シクロオクチン誘導体とジフルオロシクロオクチンとの間で「銅抜き」［３＋２］環化付加反応も含み、Ｂｅｒｔｏｚｚｉら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００４，１２６：１５０４６－１５０４７に記載されている。ヒュスゲン環化付加反応を促進するために使用することができる任意の試薬を、クリックケミストリー試薬として使用することができる。いくつかの実施形態では、クリックケミストリー試薬は、ピリジルアジドを含む。いくつかの実施形態では、クリック化学試薬は、ピリジルアジドを含む。限定されないが、ピリジルアジドの任意の異性体を使用してもよい。
【0160】
一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、一つ以上の放射性物質または検出可能な薬剤と会合、または結合していてもよい。これらの薬剤として、様々な有機小分子、無機化合物、ナノ粒子、酵素または酵素基質、蛍光材料、発光材料（例えば、ルミノール）、生物発光材料（例えば、ルシフェラーゼ、ルシフェリンおよびエクオリン）、化学発光材料、放射性物質（例えば、１８Ｆ、６７Ｇａ、８１ｍＫｒ、８２Ｒｂ、１１１Ｉｎ、１２３Ｉ、１３３Ｘｅ、２０１Ｔｌ、１２５Ｉ、３５Ｓ、１４Ｃ、３Ｈまたは９９ｍＴｃ（例えば、ペルテクネチン酸（テクネチン酸（ＶＩＩ）、ＴｃＯ４
－））および造影剤（例えば、金（例えば、金ナノ粒子）、ガドリニウム（例えば、キレート化Ｇｄ）、酸化鉄（例えば、超常磁性酸化鉄（ＳＰＩＯ）、単結晶酸化鉄ナノ粒子（ＭＩＯＮ）、超々常磁性酸化鉄（ＵＳＰＩＯ）、マンガンキレート（例えば、Ｍｎ－ＤＰＰＰ）、硫酸バリウム、ヨウ素化造影剤（イオヘキソール）、マイクロバブルまたはペルフルオロカーボン）が挙げられる。こうした光学的に検出可能な標識としては、例えば、４－アセトアミド－４’－イソチオシアナトスチルベン－２，２’ジスルホン酸、アクリジンおよび誘導体（例えば、アクリジンおよびアクリジンイソチオシアネート）、５－（２’－アミノエチル）アミノナフタレン－１－スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）、４－アミノ－Ｎ－［３－ビニルスルホニル）フェニル］ナフタルイミド－３，５ ジスルホナート、Ｎ－（４－アニリノ－Ｌ－ナフチル）マレイミド、アントラニルアミド、ＢＯＤＩＰＹ、ブリリアントイエロー、クマリンおよび誘導体（例えば、クマリン、７－アミノ－４－メチルクマリン（ＡＭＣ、クマリン１２０）および７－アミノ－４－トリフルオロメチルクマリン（クマリン１５１））、シアニン染料、シアノシン、４’，６－ジアミニジノ－２－フェニルインドール（ＤＡＰＩ）、５’５’ ’－ジブロモピロガロール－スルホナフタレイン（ブロモピロガロールレッド）、７－ジエチルアミノ－３－（４’－イソチオシアナトフェニル）－４－メチルクマリン、ジエチレントリアミンペンタ酢酸塩、４，４’－ジイソチオシアナトジヒドロ－スチルベン－２，２’－ジスルホン酸、４，４’－ジイソチオシアナトスチルベン－２，２’－ジスルホン酸、５－［ジメチルアミノ］－ナフタレン－１－スルホニルクロリド（ＤＮＳ、ダニルクロリド）、４－ジメチルアミノフェニルアゾフェニル－４’－イソチオシアネート（ＤＡＢＩＴＣ）、エオシンおよび誘導体（例えば、エオシンおよびエオシンイソチオシアネート）、エリスロシンおよび誘導体（例えば、エリスロシンＢおよびエリスロシンイソチオシアネート）、エチジウム、フルオレセインおよび誘導体（例えば、５－カルボキシフルオレセイン（ＦＡＭ）、５－（４，６－ジクロロトリアジン－２－イル）アミノフルオレセイン（ＤＴＡＦ）、２’，７’－ジメトキシ－４’５’－ジクロロ－６－カルボキシフルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、キスローダミン－５－（および－６）－イソチオシアン酸塩（ＱＦＩＴＣまたはＸＲＩＴＣ）およびフルオレスカミン）、２－［２－［３－［［１，３－ジヒドロ－１，１－ジメチル－３－（３－スルホプロピル）－２ーベンゾ［ｅ］インドール－２－イリデン］エチリデン］－２－［４－（エトキシカルボニル）－１－ピペラジニル］－１－シクロペンテン－１－イル］エテニル］－１，１－ジメチル－３－（３－スルホルプロピル）－１ーベンゾ［ｅ］インドリウム水酸化物、分子内塩、Ｎ，Ｎ－ジエチルエタンアミン（１：１）（ＩＲ１４４）有する化合物、５－クロロ－２－［２－［３－［（５－クロロ－３－エチル－２（３Ｈ）－ベンゾチアゾール－イリデン）エチリデン］－２－（ジフェニルアミノ）－１－シクロペンテン－１－イル］エテニル］－３－エチルベンゾチアゾリウムペルクロラート（ＩＲ１４０）、マラカイトグリーンイソチオシアネート、４－メチルウンベリフェロンオルトクレゾールフタレイン、ニトロチロシン、パラロサニリン、フェノールレッド、Ｂ－フィコエリスリン、オフタジアルデヒド、ピレンおよび誘導体（例えば、ピレン、ピレンブチレートおよびスクシンイミジル１－ピレン）、酪酸量子ドット、Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｒｅｄ４（ＣＩＢＡＣＲＯＮＴＭ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｒｅｄ ３Ｂ－Ａ）、ローダミンおよび誘導体（例えば、６－カルボキシ－Ｘ－ローダミン（ＲＯＸ）、６－カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）、リサミンローダミンＢスルホニルクロリドローダミン（Ｒｈｏｄ）、ローダミンＢ、ローダミン１２３、ローダミンＸイソチオシアネート、スルホローダミンＢ、スルホローダミン１０１、スルホローダミンの塩化スルホニル誘導体１０１（テキサスレッド）、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’テトラメチル－６－カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）テトラメチルローダミンおよびテトラメチルローダミンイソシアネート（ＴＲＩＴＣ））、リボフラビン、ロゾール酸、テルビウムキレート誘導体、シアニン－３（Ｃｙ３）、シアニン－５（Ｃｙ５）、シアニン－５．５（Ｃｙ５．５）、シアニン－７（Ｃｙ７）、ＩＲＤ ７００、ＩＲＤ ８００、Ａｌｅｘａ ６４７、Ｌａ Ｊｏｌｔａ Ｂｌｕｅ、フタロシアニン、およびナフタロールシアニンが挙げられる。
【0161】
いくつかの実施形態では、検出可能な薬剤は、活性化時に検出可能になる非検出可能前駆体（例えば、蛍光テトラジン－フルオロフォア構築物（例えば、テトラジン－ＢＯＤＩＰＹ ＦＬ、テトラジン－オレゴングリーン４８８またはテトラジン－ＢＯＤＩＰＹ ＴＭＲ－Ｘ））または酵素活性化性蛍光発生剤（例えば、ＰＲＯＳＥＮＳＥ（登録商標）（Ｖｉｓ Ｍｅｄｉｃａｌ社）））であってもよい。
【0162】
ＩＶ．定義
本明細書で使用される場合、「ＡＲＣＳ」という用語は、ＦＣＢおよびＣＬＭを結合またはリンカーによって連結することによって形成される任意の治療用コンジュゲートを指す。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ペプチドまたはタンパク質などの一つ以上の標的との共有結合を形成することができる。いくつかの実施形態では、共有結合は、０～５０℃の温度で、４８時間以内に、１０ｍＭの治療用量で、水溶液中に形成される。
本明細書で使用される場合、「ＡＲＣＳ」という用語は、ＦＣＢおよびＣＬＭを結合またはリンカーによって連結することによって形成される任意の治療用コンジュゲートを指す。一部の実施形態では、ＡＲＣＳは、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ペプチドまたはタンパク質などの一つ以上の標的との共有結合を形成することができる。いくつかの実施形態では、共有結合は、０～５０℃の温度で、４８時間以内に、１０ｍＭの治療用量で、水溶液中に形成される。
【0163】
本明細書で使用される場合、「ＦＣＢ」という用語は、既知の薬剤、診断化合物、薬剤候補および機能的断片および／または前述のいずれかの組み合わせであり得る治療モダリティを指す。ＦＣＢは、遊離酸および遊離塩基形態、光学異性体および互変異性体、薬剤の放射性同位体および薬学的に許容される塩、そのプロドラッグまたは断片を含むアイソトープを含む。ＦＣＢは、小分子、タンパク質、ペプチド、脂質、炭水化物、糖、核酸またはそれらの組み合わせであってもよい。一部の実施形態では、ＦＣＢは、ＤＮＡまたはＲＮＡを含むがこれに限定されない核酸である。ＦＣＢは、限定されないが、抗癌剤、抗神経変性剤、自己免疫薬および抗老化剤などの治療剤であってもよい。ＦＣＢは、非共有結合的に生物学的標的に結合していてもよい。一部の実施形態では、ＦＣＢは薬剤の機能的断片であってもよい。本明細書で使用される場合、「機能的断片」という用語は、薬剤の望ましい効果を誘発することができる薬剤またはその誘導体もしくは類似体の一部を指す。一部の実施形態では、ＦＣＢはアルキン官能基を含んでいてもよい。一部の実施形態では、ＦＣＢはアルキン官能基を含んでいなくてもよい。
【0164】
本明細書で使用される場合、「ＣＬＭ」という用語は、生物学的標的との共有結合を形成することができる任意の共有結合モダリティを指す。ＣＬＭは、結合またはリンカーによってＦＣＢに連結されていてもよい。ＣＬＭは、生物学的標的と共有結合を形成することができる一つ以上の化学的部分を含んでいてもよい。化学的部分は、親電子基または求核基であってもよい。
【0165】
本明細書において使用される場合、「リンカー」という用語は、化合物の二つの部分を接続する有機部分を指す。リンカーは、外部リンカーまたは内部リンカーであってもよい。外部リンカーは、ＦＣＢ部分とＣＬＭ部分を接続することができる。内部リンカーを使用して、ＣＬＭ部分を結合することができる。特定の実施形態では、ＣＬＭは内部リンカーまたはスペーサーを含んでいてもよい。内部リンカーまたはスペーサーは、ＣＬＭの二つの部分を組み合わせてもよく、またはＣＬＭに結合することができる。外部または内部リンカーは、結合、置換および非置換Ｃ１～Ｃ３０アルキル、置換および非置換Ｃ２～Ｃ３０アルケニル、置換および非置換Ｃ２～Ｃ３０アルキニル、置換および非置換Ｃ３～Ｃ３０シクロアルキル、置換および非置換Ｃ１～Ｃ３０ヘテロシクロアルキル、置換および非置換Ｃ３－Ｃ３０シクロアルケニル、置換および非置換Ｃ１－Ｃ３０ヘテロシクロアルケニル、置換および非置換アリールならびに置換および非置換ヘテロアリールからなる群から選択することができる。リンカーは、切断可能であっても非切断可能であってもよい。
【0166】
本明細書において使用される場合、「生物学的標的」という用語は、ＦＣＢが非共有結合的に結合して治療効果を産生する任意の標的を指す。ＣＬＭは、共有結合的に生物学的標的に結合している。一部の実施形態では、生物学的標的はタンパク質である。
【0167】
本明細書で使用される場合、「毒性」という用語は、細胞、生体組織または細胞環境に有害または有毒である物質または組成物の能力を指す。低毒性は、細胞、生体組織または細胞環境に有害または有毒である物質または組成物の弱毒した能力を指す。こうした弱毒または低毒性は、標準尺度、治療に対して、または治療の非存在に対して相対的であってもよい。
【0168】
本明細書で使用される場合、「化合物」という用語は、図示した構造の全ての立体異性体、幾何異性体、互変異性体および同位体を含むことを意味する。いくつかの実施形態では、化合物は、ＡＲＣＳと交換可能に使用される。したがって、本明細書で使用される場合、ＡＲＣＳは、図示した構造の全ての立体異性体、幾何異性体、互変異性体および同位体を含むことも意味する。本明細書で使用される場合、ＦＣＢおよびＣＬＭは、図示した構造の全ての立体異性体、幾何異性体、互変異性体および同位体を含むことも意味する。
【0169】
本明細書に記載される化合物は、非対称であってもよい（例えば、一つ以上の立体中心を有する）。エナンチオマーおよびジアステレオマーなどのすべての立体異性体は、別段の示唆がない限り意図される。非対称に置換された炭素原子を含む本開示の化合物は、光学的に活性またはラセミ形態で単離することができる。ラセミ混合物の解像度または立体選択的合成など、光学的に活性な出発材料から光学的に活性な形態を調製する方法は、当技術分野で公知である。オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合などの多くの幾何異性体も、本明細書に記載される化合物中に存在することができ、こうした安定異性体のすべては本開示で意図されている。本開示の化合物のシスおよびトランス幾何異性体が記載され、異性体の混合物として、または分離された異性体形態として単離されてもよい。
【0170】
本開示の化合物はまた、互変異性体を含む。互変異性体は、隣接する二重結合との単結合のスワップおよびプロトンの同時移動から生じる。互変異性体は、同じ経験的式および総電荷を有する異性体プロトン化状態である、プロトトロピーの互変異性体を含む。プロトトロピーの互変異性体の例として、ケトン－エノール対、アミド－イミジン酸対、ラクタム－ラクチム対、アミド－イミジン酸対、エナミン－イミン対および、プロトンが、１Ｈ－および３Ｈ－イミダゾール、１Ｈ－、２Ｈ－および４Ｈ－１，２，４－トリアゾール１Ｈ、および１Ｈ－、２Ｈ－および４Ｈ－１，２，４－トリアゾール、１Ｈ－および２Ｈ－イソインドールならびに１Ｈ－および２Ｈ－ピラゾールが挙げられる。互変異性体は、平衡状態であってもよく、または適切な置換によって一つの形態に立体的にロックされていてもよい。
【0171】
本開示の化合物はまた、中間化合物または最終化合物に発生する原子のすべての同位体を含む。「同位体」は、原子番号が同じであるが、核内に異なる数の中性子から生じる異なる質量番号を有する原子を指す。例えば、水素の同位体は、トリチウムおよび重水素を含む。
【0172】
本開示の化合物および塩は、溶媒または水分子と組み合わせて調製され、日常的な方法によって溶媒和物および水和物を形成することができる。
【0173】
本明細書で使用される場合、「対象」または「患者」という用語は、例えば、実験的、治療的、診断的および／または予防的目的のために、粒子が投与されうる任意の生物体を指す。典型的な対象として、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ、イヌ、ネコ、ハムスター、ラマ、非ヒト霊長類、およびヒトなどの哺乳類）が挙げられる。
【0174】
本明細書で使用される場合、「治療する」または「予防する」という用語は、疾患、障害および／または状態に罹患しやすいと思われるが、疾患、障害または状態を有していると診断されてはいない動物において、疾患、障害または状態が発症することを予防すること、疾患、障害または状態を阻害すること、例えば、その進行を阻害すること、疾患、障害または状態を軽減すること、例えば、疾患、障害および／または状態の退縮を引き起こすことを含むことができる。疾患、障害または状態を治療することは、たとえ根底にある病態生理が影響を受けていなくても、特定の疾患、障害または状態のうちの少なくとも一つの症状を改善すること、例えば、鎮痛剤が疼痛の原因を治療することはなくとも、鎮痛剤の投与によって対象の疼痛を治療することを含むことができる。
【0175】
本明細書で使用される場合、「標的」は、ＡＲＣＳ、ＦＣＢおよび／またはＣＬＭが結合する部位を意味する。標的は、インビボまたはインビトロのいずれかであってもよい。特定の実施形態では、標的は、白血病または腫瘍（例えば、脳、肺（小細胞および非小細胞）、卵巣、前立腺、乳房および結腸ならびに他の癌および肉腫の腫瘍）に見られる癌細胞であってもよい。標的は、一種の組織、例えば、神経組織、腸組織、膵組織、肝臓、腎臓、前立腺、卵巣、肺、骨髄または乳房組織であってもよい。
【0176】
治療用コンジュゲートの標的として機能し得る「標的細胞」は、概して動物細胞、例えば哺乳類細胞である。本発明の方法は、細胞が動物組織の一部を形成する、またはさもなくば動物組織に存在する生細胞の細胞機能を、インビトロ、すなわち、細胞培養、またはインビボにおいて改変するために使用することができる。したがって、標的細胞として、例えば、血液、リンパ組織、口腔粘膜や咽頭粘膜などの消化管を覆う細胞、小腸の毛様体を形成する細胞、大腸を覆っている細胞、動物の呼吸器系（鼻腔／肺）を覆う細胞（対象の吸入によって接触し得る）、皮膚／表皮細胞、膣および直腸の細胞、胎盤の細胞およびいわゆる血液／脳関門を含む内臓の細胞を挙げることができる。
【0177】
「治療効果」という用語は、当技術分野で認識され、動物、特に哺乳動物、より詳細にはヒトにおいて、薬理活性物質によって引き起こされる局所的または全身的効果を指す。したがって、この用語は、疾患の診断、治癒、軽減、治療または予防においてまたは動物もしくはヒトにおける望ましい身体的もしくは精神的発達および状態の強化に使用することが意図される任意の物質を意味する。
【0178】
「調節」という用語は、当技術分野で認識され、応答の上方調節（すなわち、活性化または刺激）、下方調節（すなわち、阻害または抑制）またはそれら二つの組み合わせまたは別々のことを指す。
【0179】
本明細書で使用される場合、「経腸投与」は、消化管（経腸）または非侵襲的な局所経路以外の任意の方法による投与を意味する。例えば、非経口投与として、静脈内、皮内、腹腔内、胸膜内、気管内、骨内、脳内、髄腔内、筋肉内、皮下、結膜下、注射および注入による患者への投与を挙げることができる。
【0180】
本明細書で使用される場合、「局所投与」は、皮膚、開口部または粘膜への非侵襲的投与を意味する。局所投与は、局所的に投与することができ、すなわち、全身曝露することなく、適用領域に局所的効果を提供することができる。局所製剤は、個体の血流への吸着を介して全身的効果を提供することができる。局所投与として、皮膚および経皮投与、バッカル投与、鼻腔内投与、膣内投与、膀胱内投与、眼投与および直腸投与を挙げることができるが、これらに限定されない。
【0181】
本明細書で使用される場合、「経腸投与」は、消化管を介した吸収を介した投与を意味する。経腸投与として、経口および舌下投与、胃投与または直腸投与を挙げることができる。
【0182】
本明細書で使用される場合、「肺投与」は、吸入または気管内投与による肺への投与を意味する。本明細書で使用される場合、「吸入」という用語は、肺胞への空気の吸入を指す。空気の摂取量は、口または鼻を通して発生し得る。
【0183】
本明細書で互換的に使用される場合、「十分な」および「有効な」という用語は、一つ以上の所望の結果を達成するために必要な量（例えば、質量、体積、用量、濃度および／または期間）を指す。「治療有効量」は、少なくとも一つの症状特定の状態または障害を測定可能な改善または予防をもたらし、平均余命の測定可能な増加をもたらし、または概して患者のＱＯＬを改善するのに必要とされる少なくとも最小の濃度である。したがって、治療有効量は、特定の生物活性分子および治療される特定の状態または障害に依存する。抗体などの多くの活性剤の治療有効量は、当技術分野で公知である。例えば、特定の障害を治療するために、本明細書に記載の化合物および組成物の治療有効量は、医師などの当業者の技術範囲内である技術によって決定することができる。
【0184】
「プロドラッグ」という用語は、インビトロおよび／またはインビボで生物学的に活性な形態に変換される核酸またはタンパク質を含む薬剤を指す。一部の状況では、親化合物よりも投与しやすい場合があるため、プロドラッグが有用である場合がある。例えば、プロドラッグは、経口投与によって生物学的に利用可能な場合があり、一方で親化合物はそうではない。プロドラッグは、親薬物と比較して、医薬組成物において完全された可溶性も有する場合がある。プロドラッグは、酵素的プロセスおよび代謝加水分解を含む様々な機構によって親薬物に変換されてもよい。Ｈａｒｐｅｒ，Ｎ．Ｊ．（１９６２）Ｄｒｕｇ Ｌａｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ Ｊｕｃｋｅｒ、ｄ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、４：２２１－２９４；Ｍｏｌｏｚｏｗｉｃｈら（１９７７）Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｔｏ Ｐｒｏｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ｉｎ Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ ｅｄ．Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ ａｎｄ Ａｎａｌｏｇｓ， ＡＰｈＡ；Ａｃａｄ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．；Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ、ｅｄ．（１９７７）Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ、Ｔｈｅｏｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ、ＡＰｈＡ；Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、ｅｄ．（１９８５）Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、Ｗａｎｇら（１９９９）Ｐｒｏｄｒｕｇ ａｐｐｒｏａｃｈｓ ｔｏ ｔｈｅ ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ｏｆ ｐｅｐｔｉｄｅ ｄｒｕｇ、Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ．５（４）：２６５－２８７；Ｐａｕｌｅｔｔｉら（１９９７）Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｉｎ ｐｅｐｔｉｄｅ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ： Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｐｒｏｄｒｕｇ Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．２７：２３５－２５６；Ｍｉｚｅｎら（１９９８）。Ｔｈｅ Ｕｓｅ ｏｆ Ｅｓｔｅｒｓ ａｓ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ ｆｏｒ Ｏｒａｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ β－Ｌａｃｔａｍ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ、Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１１：３４５－３６５；Ｇａｉｇｎａｕｌｔら（１９９６）Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ ａｎｄ Ｂｉｏｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ Ｉ．Ｃａｒｒｉｅｒ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ、Ｐｒａｃｔ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．６７１－６９６；Ｍ．Ａｓｇｈａｒｎｅｊａｄ（２０００）。Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ Ｏｒａｌ Ｄｒｕｇ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ Ｖｉａ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ、ｉｎ Ｇ．Ｌ．Ａｍｉｄｏｎ，Ｐ．Ｉ．Ｌｅｅ ａｎｄ Ｅ．Ｍ．Ｔｏｐｐ、Ｅｄｓ．、Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍａｒｃｅｌｌ Ｄｅｋｋｅｒ、ｐ．１８５－２１８；Ｂａｌａｎｔら（１９９０）Ｐｒｏｄｒｕｇｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｄｒｕｇ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｖｉａ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒｏｕｔｅｓ ｏｆ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．、１５（２）：１４３－５３；Ｂａｌｉｍａｎｅ ａｎｄ Ｓｉｎｋｏ（１９９９）。Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｏｒａｌ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ａｎａｌｏｇｓ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．、３９（１－３）：１８３－２０９；Ｂｒｏｗｎｅ（１９９７）。Ｆｏｓｐｈｅｎｙｔｏｉｎ（Ｃｅｒｅｂｙｘ）、Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０（１）：１－１２；Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（１９７９）。Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｒｕｇｓ－－ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｒｕｇｓ、Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．Ｃｈｅｍｉ．８６（１）：１－３９；Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、ｅｄ．（１９８５）Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、Ｆｌｅｉｓｈｅｒら（１９９６）Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｏｒａｌ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ：ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ ｏｖｅｒｃｏｍｅ ｂｙ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｐｒｏｄｒｕｇｓ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．１９（２）：１１５－１３０；Ｆｌｅｉｓｈｅｒら（１９８５）Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｐｒｏｄｒｕｇｓ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｇｒａｍｓ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｇｒａｍｓ ｇａｓｔｒｏｕｎｉｃ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｂｙ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｅｎｚｙｍｅ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．１１２：３６０－８１；Ｆａｒｑｕｈａｒ Ｄら（１９８３）Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，７２（３）：３２４－３２５；Ｈａｎ，Ｈ．Ｋ．ら（２０００）Ｔａｒｇｅｔｅｄ ｐｒｏｄｒｕｇ ｄｅｓｉｇｎ ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ、ＡＡＰＳ ＰｈａｒｍＳｃｉ．，２（１）：Ｅ６；Ｓａｄｚｕｋａ Ｙ．（２０００）Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｐｒｏｄｒｕｇ ｌｉｐｏｓｏｍｅ ａｎｄ ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｔｏ ａｃｔｉｖｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ、Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．、１（１）：３１－４８；．Ｍ．Ｌａｍｂｅｒｔ（２０００）Ｒａｔｉｏｎａｌｅ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｌｉｐｉｄｓ ａｓ ｐｒｏｄｒｕｇ ｃａｒｒｉｅｒｓ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１１ Ｓｕｐｐｌ．２：Ｓ１５－２７；Ｗａｎｇら（１９９９）Ｐｒｏｄｒｕｇ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｐｅｐｔｉｄｅ ｄｒｕｇｓ．Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，５（４）：２６５－８７。
【0185】
「薬学的に許容される」という用語は、本明細書で使用する場合、米国食品医薬品局などの機関のガイドラインに従って、妥当な利益／リスク比に見合った、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応またはその他の問題または合併症なしに、ヒトおよび動物の組織に接触して使用するのに適した、健全な医学的判断の範囲内にある化合物、材料、組成物および／または剤形を指す。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」は、インビボでの組成物の送達を促進する医薬製剤の全成分を指す。薬学的に許容される担体として、希釈剤、保存剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、膨潤剤、充填剤、安定剤およびそれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【0186】
本明細書で使用される場合、「分子量」という用語は、概して、材料の質量または平均質量を指す。ポリマーまたはオリゴマーの場合、分子量は、バルクポリマーの相対平均鎖長または相対鎖質量を指すことができる。実際には、ポリマーおよびオリゴマーの分子量は、ゲル透過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）または毛細管粘度測定を含む様々な方法で推定または特徴化することができる。ＧＰＣ分子量は、数平均分子量（Ｍｎ）とは対照的に、重量平均分子量（Ｍｗ）として報告される。毛細管粘度測定は、特定の濃度、温度および溶媒条件のセットを使用して、希釈ポリマー溶液から決定された固有粘度としての分子量の推定値を提供する。
【0187】
本明細書で使用される場合、「小分子」という用語は概して、２０００ｇ／ｍｏｌ未満、１５００ｇ／ｍｏｌ未満、１０００ｇ／ｍｏｌ未満、８００ｇ／ｍｏｌ未満または５００ｇ／ｍｏｌ未満の分子量である有機分子を指す。小分子は、非ポリマーおよび／または非オリゴマーである。
【0188】
「アルキル」という用語は、直鎖アルキル基、分岐鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基およびシクロアルキル置換アルキル基を含む、飽和脂肪族基のラジカルを指す。
【0189】
一部の実施形態では、直鎖または分岐鎖アルキルは、その骨格に３０以下の炭素原子（例えば、直鎖はＣ１－Ｃ３０、分岐鎖はＣ３－Ｃ３０）、２０以下、１２以下または７以下の炭素原子を有する。同様に、一部の実施形態では、シクロアルキルは、環構造に３～１０個の炭素原子を有し、例えば、環構造に５、６または７個の炭素を有する。本明細書、実施例および特許請求の範囲全体で使用される「アルキル」という用語（または低級アルキル）は、「非置換アルキル」と「置換アルキル」の両方を含むことが意図され、後者は、炭化水素骨格の一つ以上の炭素において水素を置換する一つ以上の置換基を有するアルキル部分を指す。かかる置換基として、限定されるものではないが、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミルまたはアシルなど）、チオカルボニル（チオエステル、チオアセテートまたはチオホルメートなど）、アルコキシル、ホスホリル、リン酸、ホスホン酸、ホスフィン酸、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、硫酸、スルホン酸、スルファモイル、スルホンアミドスルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分が挙げられる。
【0190】
炭素の数が別途指定されない限り、本明細書で使用される場合、「低級アルキル」は、上記で定義されるが、その骨格構造に１～１０個の炭素または１～６個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。同様に、「低級アルケニル」および「低級アルキニル」は、類似の鎖長を有する。本出願全体を通して、好ましいアルキル基は、低級アルキルである。いくつかの実施形態では、本明細書でアルキルとして指定される置換基は、低級アルキルである。
【0191】
炭化水素鎖上で置換された部分は、適切な場合、それ自体が置換され得ることが当業者には理解される。例えば、置換アルキルの置換基として、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、チオール、アミノ、アジド、イミノ、アミド、ホスホリル（ホスホネート及びホスフィナートを含む）、スルホニル（硫酸塩、スルホンアミド、スルファモイルおよびスルホン酸塩を含む）およびシリル基ならびにエーテル、アルキルチオ、カルボニル（ケトン、アルデヒドおよびカルボキシレートおよびエステルを含む）、－ＣＦ３、－ＣＮなどを含むことができる。シクロアルキルは、同様に置換することができる。
【0192】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキル」という用語は、少なくとも一つのヘテロ原子を含有する直鎖または分岐鎖または環状炭素含有ラジカルまたはそれらの組み合わせを指す。適切なヘテロ原子として、限定されるものではないが、Ｏ、Ｎ、Ｓｉ、Ｐ、Ｓｅ、ＢおよびＳが挙げられ、リン原子および硫黄原子は任意選択的に酸化され、窒素ヘテロ原子は任意選択的に四級化される。ヘテロアルキルは、アルキル基に対して上記で定義されるように置換することができる。
【0193】
「アルキルチオ」という用語は、上記で定義されるように、それに結合されている硫黄ラジカルを有するアルキル基を指す。一部の実施形態では、「アルキルチオ」部分は、－Ｓ－アルキル、－Ｓ－アルケニルおよび－Ｓ－アルキニルのうちの一つによって表される。代表的なアルキルチオ基として、メチルチオおよびエチルチオが挙げられる。「アルキルチオ」という用語はまた、シクロアルキル基、アルケン基およびシクロアルケン基ならびにアルキン基を包含する。「アリールチオ」は、アリール基またはヘテロアリール基を指す。アルキルチオ基は、アルキル基に対して上記で定義されるように置換することができる。
【0194】
「アルケニル」および「アルキニル」という用語は、上述のアルキルに対して長さおよび可能な置換において類似しているが、それぞれ少なくとも一つの二重結合または三重結合を含有する不飽和脂肪族基を指す。
【0195】
本明細書で使用される場合、「アルコキシル」または「アルコキシ」という用語は、上記に定義されるアルキル基を指し、それに結合している酸素ラジカルを有する。代表的なアルコキシル基として、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシおよびｔｅｒｔ－ブトキシが挙げられる。「エーテル」は、酸素によって共有結合された二つの炭化水素である。したがって、アルキルをエーテルにするアルキルの置換基は、アルコキシルである、またはアルコキシルに類似し、例えば、－Ｏ－アルキル、－Ｏ－アルケニルおよび－Ｏ－アルキニルのうちの一つによって表すことができる。アロキシ（ａｒｏｘｙ）は、－Ｏ－アリールまたはＯ－ヘテロアリールによって表されてもよく、アリールおよびヘテロアリールは以下に定義されるとおりである。アルコキシ基およびアロキシ基は、アルキルについて上述したように置換することができる。
【0196】
「アミン」および「アミノ」という用語は、当技術分野で認識され、非置換と置換アミンの両方を指し、例えば、一般式：
によって表すことができる部分であり、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ’１０は、それぞれ独立して、水素、アルキル、アルケニル、－（ＣＨ２）ｍ－Ｒ８またはＲ９およびＲ１０は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、環構造に４～８個の原子を有するヘテロ環を完成する。Ｒ８は、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環またはポリ環を表し、ｍは、ゼロまたは１～８の範囲の整数である。一部の実施形態では、Ｒ９またはＲ１０のうちの一つのみ、カルボニルであることができ、例えば、Ｒ９、Ｒ１０および窒素を一緒になってイミドを形成しない。さらに他の実施形態では、「アミン」という用語は、アミドを包含せず、例えば、Ｒ９およびＲ１０のうちの一つはカルボニルを表す。追加の実施形態において、Ｒ９およびＲ１０（及び任意選択的にＲ’１０）はそれぞれ独立して、水素、アルキルまたはシクロアルキル、アルケニルまたはシクロアルケニルまたはアルキニルを表す。したがって、本明細書で使用される場合、「アルキルアミン」という用語は、上記で定義されるように、それに結合している置換された（アルキルについて上述した）または非置換アルキルを有するアミン基であり、すなわち、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも一つはアルキル基であることを意味する。
【化47】
【0197】
「アミド」という用語は、アミノ置換カルボニルとして当技術分野で認識され、一般式：
によって表すことができる部分を含み、Ｒ９およびＲ１０は上記に定義されるとおりである。
【化48】
【0198】
本明細書で使用される場合、「アリール」は、Ｃ５－Ｃ１０員の芳香族、ヘテロ環式、融合芳香族、融合ヘテロ環式、二芳香族または二ヘテロ環系を指す。広義に定義される「アリール」は、本明細書で使用される場合、例えば、ベンゼン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、トリアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジンおよびピリミジンなどの、０～４個のヘテロ原子を含み得る、５員、６員、７員、８員、９員および１０員の単環式芳香族基を含む。環構造中にヘテロ原子を有するアリール基はまた、「アリールヘテロ環」または「ヘテロ芳香族」と呼んでもよい。芳香族環は、限定されるものではないが、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ（または四級化アミノ）、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホン酸、ホスフィナート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロ環、芳香族環またはヘテロ芳香族部分、－ＣＦ３、－ＣＮ；およびそれらの組み合わせを含む。
【0199】
「アリール」という用語はまた、二つ以上の環状環を有する大環状系であり、二つ以上の炭素が二つの隣接する環（すなわち、融合環）に対して共通であり、環の少なくとも一つは芳香族であり、例えば、他の環状環または環は、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリールおよび／またはヘテロ環であることができる。ヘテロ環の例として、限定されるものではないが、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾキサゾリル、ベンゾキサゾリニル、ベンズチアゾリル、ベンズトリアゾリル、ベンズテトラゾリル、ベンジソキサゾリル、ベンジソチアゾリル、ベンズイミダゾリニル、カルバゾリル、４ａＨカルバゾリル、カルボリニル、クロマニル、クロメニル、シンノリニル、デカヒドロキノリニル、２Ｈ，６Ｈ－１，５，２－ジチアジニル、ジヒドロフロ［２，３ｂ］テトラヒドロフラン、フラニル，フラザニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、１Ｈ－インダゾリル、インドレニル、インドリニル、インドリジニル、インドリル、３Ｈ－インドリル、イサチノイル、イソベンゾフラニル、イソクロマニル、イソインダゾリル、イソインドニル、イソインドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、メチレンジオキシフェニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オクタヒドロイソキノリニル、オキサジアゾリル、１，２，３－オキサジアゾリル、１，２，４－オキサジアゾリル、１，２，５－オキサジアゾリル、１，３，４－オキサジアゾリル、オキサゾリジニル、オキサゾリル、オキシドリル、ピリミジニル、フェナントリジニル、フェナントロニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサチニル、フェノキサジニル、フタラジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリドニル、４－ピペリドニル、ピペロニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドオキサゾール、ピリドイミダゾール、ピリドチアゾール、ピリジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリニル、２Ｈ－ピロリル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、４Ｈ－キノリジニル、キノキサリニル、キヌシジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾリル、６Ｈ－１，２，５－チアジアジニル、１，２，３－チアジアゾリル、１，２，４－チアジアゾリル、１，２，５－チアジアゾリル、１，３，４－チアジアゾリル、チアントレニル、チアゾリル、チエニル、チエノチアゾリル、チエノオキサゾリル、チエノイミダゾリル、チオフェニルおよびキサンテニルが挙げられる。一つ以上の環は、上記で定義されるように、「アリール」に置換することができる。
【0200】
本明細書で使用される場合、「アラルキル」という用語は、アリール基（例えば、芳香族基または複素芳香族基）で置換されたアルキル基を指す。
【0201】
本明細書で使用される場合、「炭素環」という用語は、環の各原子が炭素である芳香族環または非芳香族環を指す。
【0202】
「ヘテロ環」または「ヘテロ環式」は、本明細書で使用される場合、３～１０個の環原子、好ましくは５～６個の環原子を含有する単環式または二環式環の環炭素または窒素を介して結合される環状ラジカルを指し、非ペルオキシド酸素、硫黄およびＮ（Ｙ）からなる群から選択される１～４個のヘテロ原子から構成され、Ｙが存在しない、またはＨ、Ｏ、（Ｃ１－Ｃ１０）アルキル、フェニルまたはベンジルであり、任意選択的に１～３個の二重結合を含有し、一つ以上の置換基で任意選択的に置換されている。ヘテロ環式環の例として、限定されるものではないが、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾキサゾリル、ベンゾキサゾリニル、ベンズチアゾリル、ベンズトリアゾリル、ベンズテトラゾリル、ベンズソキサゾリル、ベンズソチアゾリル、ベンズイミダゾリニル、カルバゾリル、４ａＨカルバゾリル、カルボリニル、クロマニル、クロメニル、シンノリニル、デカヒドロキノリニル、２Ｈ，６Ｈ－１，５，２－ジチアジニル、ジヒドロフロ［２，３ｂ］テトラヒドロフラン、フラニル、フラザニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、１Ｈ－インダゾリル、インドレニル、インドリニル、インドリジニル、インドリル、３Ｈ－インドリル、イサチノイル、イソベンゾフラニル、イソクロマニル、イソインダゾリル、イソインドニル、イソインドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、メチレンジオキシフェニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オクタヒドロイソキノリニル、オキサジアゾリル、１，２，３－オキサジアゾリル、１，２，４－オキサジアゾリル、１，２，５－オキサジアゾリル、１，３，４－オキサジアゾリル、オキサゾリジニル、オキサゾリル、オキシドリル、ピリミジニル、フェナントリジニル、フェナントロニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサチニル、フェノキサジニル、フタラジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリドニル、４－ピペリドニル、ピペロニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドオキサゾール、ピリドイミダゾール、ピリドチアゾール、ピリジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリニル、２Ｈ－ピロリル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、４Ｈ－キノリジニル、キノキサリニル、キヌシジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾリル、６Ｈ－１，２，５－チアジアジニル、１，２，３－チアジアゾリル、１，２，４－チアジアゾリル、１，２，５－チアジアゾリル、１，３，４－チアジアゾリル、チアントレニル、チアゾリル、チエニル、チエノチアゾリル、チエノオキサゾリル、チエノイミダゾリル、チオフェニルおよびキサンテニルが挙げられる。芳香族環基は、上記で定義されるように、例えば、ハロゲン、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホン酸、ホスフィナート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロ環、芳香族環またはヘテロ芳香族部分、－ＣＦ３および－ＣＮについて、一つ以上の位置において、一つ以上の置換基で任意選択的に置換されていてもよい。
【0203】
「カルボニル」という用語は、当技術分野で認識され、一般式：
によって表され得るような部分を含み、Ｘは、結合である、または酸素もしくは硫黄を表し、Ｒ１１は、水素、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニルまたはアルキニルを表し、Ｒ’１１は、水素、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニルまたはアニルを表す。Ｘが酸素であり、Ｒ１１またはＲ’１１が水素ではない場合、式は「エステル」を表す。Ｘが酸素であり、Ｒ１１が上記に定義されるとおりである場合、部分は本明細書ではカルボキシル基と呼称され、特にＲ１１が水素である場合、式は「カルボン酸」を表す。Ｘが酸素であり、Ｒ’１１が水素である場合、式は「ギ酸」を表す。概して、上記式の酸素原子が硫黄で置換される場合、式は「チオカルボニル」基を表す。Ｘが硫黄であり、Ｒ１１またはＲ’１１が水素ではない場合、式は「チオエステル」を表す。Ｘが硫黄であり、Ｒ１１が水素である場合、式は「チオカルボン酸」を表す。Ｘが硫黄であり、Ｒ’１１が水素である場合、式は「チオギ酸」を表す。一方、Ｘが結合であり、Ｒ１１が水素ではない場合、上の式は「ケトン」基を表す。Ｘが結合であり、Ｒ１１が水素である場合、上記の式は、「アルデヒド」基を表す。
【化49】
【0204】
本明細書で使用される場合、「モノエステル」という用語は、ジカルボン酸の類似体を指し、カルボン酸の一方がエステルとして官能化され、他方のカルボン酸が遊離カルボン酸またはカルボン酸の塩である。モノエステルの例としては、以下に限定されないが、コハク酸、グルタミン酸、アジピン酸、亜硫酸、セバシン酸、アゼレイン酸、シュウ酸およびマレイン酸のモノエステルが挙げられる。
【0205】
本明細書で使用される場合、「ヘテロ原子」という用語は、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味する。ヘテロ原子の例としては、ホウ素、窒素、酸素、リン、硫黄およびセレンが挙げられる。他のヘテロ原子は、シリコンおよびヒ素が含まれる。
【0206】
本明細書で使用される場合、「ニトロ」という用語は、－ＮＯ２を意味する。「ハロゲン」という用語は、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒまたは－Ｉを示し、「スルフヒドリル」という用語は－ＳＨを意味し、「ヒドロキシル」という用語は－ＯＨを意味し、「スルホニル」という用語は－ＳＯ２－を意味する。
【0207】
本明細書で使用される場合、「置換された」という用語は、本明細書に記載される化合物のすべての許容される置換基を指す。もっとも広い意味で、許容される置換基として、有機化合物の非環式および環状、分岐および非分岐、炭素環式およびヘテロ環式、芳香族および非芳香族置換基が挙げられる。例示的な置換基として、限定されるものではないが、ハロゲン、ヒドロキシル基または任意の数の炭素原子、好ましくは１～１４個の炭素原子を含有する任意の他の有機族が含まれ、任意選択的に、線形、分岐または環状構造フォーマットにおける酸素、硫黄、または窒素属などの一つ以上のヘテロ原子を含む。代表的な置換基として、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ３－Ｃ２０環状、置換Ｃ３－Ｃ２０環状、ヘテロ環式、置換ヘテロ環式、アミノ酸、ペプチドおよびポリペプチド基を含む。
【0208】
窒素などのヘテロ原子は、ヘテロ原子の原子価を満たす本明細書に記載の有機化合物の水素置換基および／または任意の許容される置換基を有していてもよい。当然のことながら、「置換」または「置換された」は、こうした置換が、置換された原子および置換基の許容される原子価に従っていること、置換が、安定した化合物、すなわち、再構成、環化または除去などにより、自発的に形質転換を経ない化合物をもたらすことを暗黙の条件で含む。
【0209】
広い態様において、許容される置換基として、有機化合物の非環式および環状、分岐および非分岐、炭素環式およびヘテロ環式、芳香族および非芳香族置換基が挙げられる。例示的な置換基には、例えば、本明細書に記載されるものが含まれる。許容される置換基は、適切な有機化合物に対して一つ以上の同一または異なる置換基であってもよい。窒素などのヘテロ原子は、ヘテロ原子の原子価を満たす本明細書に記載の有機化合物の水素置換基および／または任意の許容される置換基を有していてもよい。
【0210】
様々な実施形態において、置換基は、アルコキシ、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド、アミノ、アリール、アリールアルキル、カルバミン酸、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロゲン、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシル、ケトン、ニトロ、リン酸塩、スルフィド、スルフィニル、スルホニル、スルホン酸、スルホンアミドおよびチオケトンから選択され、それぞれ一つ以上の適切な置換基で任意選択的に置換される。一部の実施形態では、置換は、アルコキシ、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド、アミノ、アリール、アリールアルキル、カルバミン酸、カルボキシ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ケトン、リン酸、スルフィド、スルフィニル、スルホニル、スルホン酸、スルホンアミドおよびチオケトンから選択され、アルコキシ、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド、アミノ、アリール、アリールアルキル、カルバミン酸、カルボキシ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ケトン、リン酸、スルフィド、スルフィニル、スルホニル、スルホン酸、スルホンアミドおよびチオケトンは、一つ以上の適切な置換基でさらに置換されていてもよい。
【0211】
置換基の例としては、限定されるものではないが、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、ニトロ，スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホン酸、ホスフィナート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、チオケトン、エステル、ヘテロシクリル、－ＣＮ、アリール、アリールオキシ、ペルハロアルコキシ、アラルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアラルコキシ、アジド、アルキルチオ、オキソ、アシルアルキル、カルボキシエステル、カルボキサミド、アシルオキシ、アミノアルキル、アルキルアミノアリール、アルキルアリール、アルキルアミノアルキル、アルコキシアリール、アリールアミノ、アラルキルアミノ、アルキルスルホニル、カルボキサミドアルキルアリール、カルボキサミドアリール、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、アルキルアミノアルキルカルボキシ、アミノカルボキサミドアルキル、シアノ、アルコキシアルキル、ペルハロアルキル、アリールアルキルオキシアルキル等が挙げられる。いくつかの実施形態では、置換基は、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシルおよびニトロから選択される。
【0212】
「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」という用語は、概してアミノ酸残基のポリマーを指す。本明細書で使用される場合、この用語はまた、一つ以上のアミノ酸が、対応する天然由来のアミノ酸の化学類似体または修飾誘導体であるアミノ酸ポリマーにも適用される。本明細書で一般的に使用される「タンパク質」という用語は、ペプチド結合によって互いに連結されたアミノ酸のポリマーを指し、その鎖長が三次構造および／または四次構造を作製するのに十分であるポリペプチドを形成する。「タンパク質」という用語は、定義により小さなペプチドを除外し、小さなペプチドは、タンパク質とみなされるために必要な高次構造を欠く。
【0213】
タンパク質、ポリペプチドまたは核酸の「機能的断片」は、その配列が全長タンパク質、ポリペプチド、または核酸と同一ではなく、全長タンパク質、ポリペプチドまたは核酸として少なくとも一つの機能を保持するタンパク質、ポリペプチドまたは核酸である。機能的断片は、対応する天然分子より多い、少ないまたは同じ数の残基を有することができ、および／または一つ以上のアミノ酸またはヌクレオチドの置換を含有してもよい。核酸の機能（例えば、コード機能、別の核酸にハイブリダイズする能力）を決定する方法は、当技術分野で周知である。同様に、タンパク質機能を決定する方法は周知である。例えば、ポリペプチドのＤＮＡ結合機能は、例えば、フィルター結合、電気泳動移動度シフトまたは免疫沈降アッセイによって決定することができる。ＤＮＡ切断は、ゲル電気泳動によりアッセイすることができる。タンパク質が別のタンパク質と相互作用する能力は、例えば、共免疫沈降、二ハイブリッドアッセイまたは相補によって、例えば、遺伝子または生化学的に決定することができる。例えば、Ｆｉｅｌｄｓら（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４０：２４５－２４６、米国特許第５，５８５，２４５号およびＰＣＴ ＷＯ９８／４４３５０号を参照されたい。
【0214】
「薬学的に許容される対イオン」という用語は、薬学的に許容されるアニオンまたはカチオンを指す。様々な実施形態において、薬学的に許容される対イオンは、薬学的に許容されるイオンである。例えば薬学的に許容される対イオンは、クエン酸塩、リンゴ酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸、リン酸塩、イソニコチン酸、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩、サッカラート、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩およびパモ酸塩（すなわち、１，１’－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエート）から選択される。一部の実施形態では、薬学的に許容される対イオンは、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、二硫酸塩、リン酸塩、酸リン酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩および乳酸塩から選択される。特定の実施形態では、薬学的に許容される対イオンは、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、二硫酸塩およびリン酸塩から選択される。
【0215】
「薬学的に許容される塩」という用語は、本発明の組成物で使用される化合物に存在し得る酸性基または塩基性基の塩を指す。塩基性の性質である本発明の組成物に含まれる化合物は、様々な無機酸および有機酸で多種多様な塩を形成することができる。こうした塩基性化合物の薬学的に許容される酸付加塩を調製するために使用することができる酸は、非毒性の酸付加塩を形成する酸であり、すなわち、薬理学的に許容されるアニオンを含有する塩であり、以下に限定されないが、硫酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、二硫酸塩、リン酸塩、酸リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチジン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩、サッカラート、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩およびパモ酸塩（すなわち、１，１’－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエート）塩を含む。アミノ部分を含む本発明の組成物に含まれる化合物は、上述の酸に加えて、様々なアミノ酸を有する薬学的に許容される塩を形成することができる。酸性の性質である本発明の組成物に含まれる化合物は、様々な薬理学的に許容されるカチオンで塩基性塩を形成することができる。こうした塩の例としては、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、特にカルシウム、マグネシウム、ナトリウム、リチウム、亜鉛、カリウムおよび鉄塩が挙げられる。
【0216】
本明細書に記載の化合物が酸付加塩として取得される場合、遊離塩基は、酸塩の溶液を塩基性化することによって取得することができる。逆に、生成物が遊離塩基である場合、付加塩、特に薬学的に許容される付加塩は、塩基化合物から酸付加塩を調製する従来的な手順に従って、遊離塩基を適切な有機溶媒に溶解し、溶液を酸で処理することによって作製することができる。当業者は、非毒性の薬学的に許容される付加塩を調製するために使用することができる様々な合成方法論を認識している。
【0217】
薬学的に許容される塩は、１－ヒドロキシ－２－ナフト酸、２，２－ジクロロ酢酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、２－オキソグルタミン酸、４－アセトアミド安息香酸、４－アミノサリチル酸、酢酸、アジピン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンフル酸、カンフル－１０－スルホン酸、カプリン酸（デカン酸）、カプロ酸（ヘキサン酸）、カプリル酸（オクタン酸）、炭酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン－１，２－ジスルホン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、グリセロホスホリン酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、イソブチル酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液、ナフタレン－１，５－ジスルホン酸、ナフタレン－２－スルホン酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモイン酸、パントテニック、リン酸、プロプリオン酸、ピログルタミン酸、サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、チオシアニン酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸およびウンデシレン酸に生じることができる。
【0218】
本明細書で使用される場合、「アッセイ」という用語は、報告された結果に関連する一連の活動を指し、これには、細胞播種、試験材料の調製、感染、溶解、分析および結果の計算が含まれ得るが、これらに限定されない。
【0219】
本明細書で使用される場合、「検出可能な応答」という用語は、観察または計測手段のいずれかによって直接的または間接的に検出可能なシグナルの発生または変化を指す。典型的には、検出可能な応答は、シグナルの発生であり、フルオロフォアは本質的に蛍光であり、金属イオンまたは生物学的化合物に結合するとシグナルの変化を生じさせない。あるいは、検出可能な応答は、波長分布パターンもしくは吸光度もしくは蛍光の強度の変化または光散乱、蛍光寿命、蛍光偏光または上記のパラメータの組み合わせの変化が生じる光学応答である。他の検出可能な応答として、例えば、化学発光、リン光、放射性同位元素からの放射、磁気引力および電子密度が挙げられる。
【0220】
当然のことながら、以下の実施例は、本開示を例示するが、限定するものではない。様々な他の実施例および前述の説明および例の修正は、本開示の趣旨および範囲から逸脱することなく、本開示の読んだ後に当業者に明らかであり、そのような例または修正のすべては、添付の特許請求の範囲に含まれることが意図される。本明細書に参照されるすべての刊行物および特許は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【0221】
実施例１：ＡＲＣＳの一般的な合成
本開示のＡＲＣＳは、一般的な化学合成原理および技術を使用して、当業者によって合成することができる。合理的なアプローチでは、ＡＲＣＳは、その個々の構成要素、すなわち治療モダリティ、任意のリンカーおよび共有結合モダリティから構築される。構成要素は、当技術分野で知られているように、官能基を介して互いに共有結合されてもよく、こうした官能基は、構成要素上に存在してもよく、または一つ以上のステップを使用して構成要素上に導入されてもよい。構成要素を一緒に共有結合してＡＲＣＳを生成するのに使用することができる官能基として、ヒドロキシ基、スルフヒドリル基またはアミノ基が挙げられるが、これらに限定されない。共有結合を提供するために改変される異なる構成要素の特定の部分は、例えば、共有結合モダリティについて、その構成要素に所望の結合活性に実質的に悪影響を及ぼさないように選択され、共有結合活性に影響を与えない領域は、十分な量の所望の活性が保持されるように、改変される。必要および／または所望される場合、構成要素上の特定の部分は、当技術分野で公知のブロッキング基を使用して保護されてもよく、例えば、Ｇｒｅｅｎ ＆ Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ）（１９９１）を参照されたい。
本開示のＡＲＣＳは、一般的な化学合成原理および技術を使用して、当業者によって合成することができる。合理的なアプローチでは、ＡＲＣＳは、その個々の構成要素、すなわち治療モダリティ、任意のリンカーおよび共有結合モダリティから構築される。構成要素は、当技術分野で知られているように、官能基を介して互いに共有結合されてもよく、こうした官能基は、構成要素上に存在してもよく、または一つ以上のステップを使用して構成要素上に導入されてもよい。構成要素を一緒に共有結合してＡＲＣＳを生成するのに使用することができる官能基として、ヒドロキシ基、スルフヒドリル基またはアミノ基が挙げられるが、これらに限定されない。共有結合を提供するために改変される異なる構成要素の特定の部分は、例えば、共有結合モダリティについて、その構成要素に所望の結合活性に実質的に悪影響を及ぼさないように選択され、共有結合活性に影響を与えない領域は、十分な量の所望の活性が保持されるように、改変される。必要および／または所望される場合、構成要素上の特定の部分は、当技術分野で公知のブロッキング基を使用して保護されてもよく、例えば、Ｇｒｅｅｎ ＆ Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ）（１９９１）を参照されたい。
【0222】
あるいは、ＡＲＣＳは、周知のコンビナトリアル法を使用して作製されて、ＡＲＣＳの大きなライブラリを作製することができ、その後、所望の薬物動態プロファイルを有する標的と共有結合を形成する分子の特定のためにスクリーニングされてもよい。
【0223】
実施例２：化合物１－１～化合物１－１７２の一般合成
本開示の化合物１－１～化合物１－１７２は、一般的な化学合成原理および技術を使用して、当業者によって合成することができる。化学は、米国特許第９，７２４，３５２号Ｂ２の実施例１に記載されているとおりであり、その内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本開示の化合物１－１～化合物１－１７２は、一般的な化学合成原理および技術を使用して、当業者によって合成することができる。化学は、米国特許第９，７２４，３５２号Ｂ２の実施例１に記載されているとおりであり、その内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0224】
化合物１－１～化合物１－１７２の多くの前駆体である化合物１－ＩＶは、スキーム１に示すように調製することができる。米国特許第９，７２４，３５２号に記載されるように、出発のピロール（１－Ｉ）をアルデヒド（１－ＩＩ）と反応させて中間体（１－ＩＩＩ）を形成することができる。モルホリノ化合物１－ＩＶは、化合物（１～ＩＩＩ）をオキシ塩化リンで還元してＣｌ脱離基を提供することによって形成され、次にモルホリンの添加によって置換することができる。１－ＩＶ中のＲ６’がニトロ基である場合、Ｈ２雰囲気下でＣ／Ｐｄと反応することによって、対応するＮＨ２基に還元することができる。次いで、アミンを、適切なエステル（例えば、炭酸ジメチル）または活性化エステル（例えば、メチルクロロホルメート）とさらに反応させて、化合物のメチルカルバメートを形成する、またはイソシアネート（例えば、イソシアネートメチル）と反応させて、ウレア化合物１－Ｖを得ることができる。
スキーム１
スキーム１
【化50】
【0225】
ピペラジニル化合物（例えば、化合物１－１１および化合物１－１２）に到達するために、化合物１－ＩＶのメチルエステル部分を改変し、その後、Ｒ６’を最終Ｒ６基に変換することが有利な場合がある。上述のように、１－ＩＶのＲ６’がニトロ基である場合、Ｈ２雰囲気下で、対応するＮＨ２基に対してＰｄ／Ｃによって還元させることができる。スキーム２に示されるように、１－ＩＶのメチルエステルを加水分解し（例えば、ＥｔＯＨ中の２Ｍの水性ＮａＯＨ）、得られた酸を、塩基（例えば、Ｋ２ＣＯ３）の存在下でｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボン酸（１－ＢＯＣ－ピペラジン）と反応させて、ＢＯＣ－ピペラジニル化合物を得ることができる。次いで、ピペラジニル添加後に残留するカルボニル部分（例えば、ボラン－ジメチルスルフィド）を還元して、保護されたピペラジニル化合物１－ＶＩを得ることができる。次いで、化合物１－ＶＩのアミン基を、適切なエステル（例えば、炭酸ジメチル）または活性化エステル（例えば、メチルクロロホルメート）とさらに反応させて、化合物１－Ｖのメチルカルバメートを形成する、またはイソシアネート（例えば、メチルイソシアナート）と反応させて、ウレア化合物１－ＶＩＩＡ（例えば、化合物１－１０５および化合物１－１０６のグループを参照されたい）を得ることができる。化合物１－ＶＩのアミン基は、それが最終的な所望の基である場合、保護することもできる（図示せず）（化合物１－１２１を参照）。所望のＸ基が加えられた後、アミノ保護基を除去して、最終生成物を得ることができる。例えば、Ｎ－ＢＯＣ－ピペラジンの代わりにＮ－アセチル－ピペラジンを使用して、化合物１－ＶＩ中にＮ－アセチル保護基を得ることができる。次いで、化合物１－ＶＩのアミノ基は、Ｎ－アセチルよりも安定であるＮ－ＢＯＣ基で保護することができる。次いで、化合物１－ＶＩをＸ基で修飾し、Ｎ－ＢＯＣを除去して、最終アミノ基を残すことができる。
スキーム２
スキーム２
【化51】
【0226】
追加の出発化合物１－ＩＩＩＡ－Ｃ（化合物１－１０１～化合物１－１７２の化合物を参照）を、スキーム３に示すように調製することができる。次いで、これらの出発化合物を、本明細書に記載されるように改変することができる。
スキーム３
スキーム３
【化52】
【0227】
本開示のＸ基（例えば、化合物１－１０１～化合物１－１７２の化合物を参照）は、スキーム４に示されるように結合することができる。化合物１－ＶＩＩ（または上述のアセチル）のＢＯＣ保護基は、酸加水分解（例えば、メタノール中のＨＣｌ）を介して除去されて、化合物１－ＶＩＩＩを得ることができる。次いで、塩基（例えば、Ｋ２ＣＯ３またはジメチルアミノピリジン）の存在下で、化合物１－ＶＩＩＩのピペラジニル基を適切なエステル（例えば、１－ＩＸおよび１－ＩＸＡについては、ＣＨ２＝ＣＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ３またはその酸もしくは活性化酸を使用することができる）と反応させて、最終化合物１－ＩＸ（化合物１－１０１）または化合物１－ＩＸＡ（化合物１－１０５）を得ることができる。Ｘ基が、アミド形成条件下で反応し得る部分を含有する場合、保護されているＸ’基（例えば、保護されている末端アミン）を使用してもよく、その後、脱保護され、修飾されて、所望の最終化合物に到達することができる（例えば、末端アミンは脱保護され、次いで適切なエステルまたは酸と反応して、Ｘに対して最終アミドを形成することができる）。
スキーム４
スキーム４
【化53】
【0228】
実施例３：化合物１－１０２の合成
化合物１－１０１～化合物１－１７２の化合物の多くに対する中間体である化合物１－ＸＸＩＩおよび化合物１－ＸＸＶをスキーム５に示すように調製することができる。前駆体化合物１－ＸＸＸＩＩおよび化合物１－１０２は、スキーム６に示されるように合成することができる。残っている化合物は、同様の方法で合成することができる。
スキーム５
スキーム６
化合物１－１０１～化合物１－１７２の化合物の多くに対する中間体である化合物１－ＸＸＩＩおよび化合物１－ＸＸＶをスキーム５に示すように調製することができる。前駆体化合物１－ＸＸＸＩＩおよび化合物１－１０２は、スキーム６に示されるように合成することができる。残っている化合物は、同様の方法で合成することができる。
スキーム５
【化54-1】
【化54-2】
【0229】
実施例４：ＡＲＣＳのスクリーニングの一般的方法
本開示のＡＲＣＳは、一般的な化学合成原理および技術を使用して、当業者によって合成することができる。あるいは、既知のコンビナトリアル法を使用してＡＲＣＳを作製して、ＡＲＣＳの大きなライブラリを作製することができる。本開示のＡＲＣＳはまた、実施例１～３に示されるように合成することができる。次いで、標的細胞の生物学的標的に共有結合するＡＲＣＳを、ゲルアッセイ、ウェスタンブロット、ＥＬＩＳＡ、抗体アレイまたはＮａｎｏＢＲＥＴアッセイによりスクリーニングすることができる。
本開示のＡＲＣＳは、一般的な化学合成原理および技術を使用して、当業者によって合成することができる。あるいは、既知のコンビナトリアル法を使用してＡＲＣＳを作製して、ＡＲＣＳの大きなライブラリを作製することができる。本開示のＡＲＣＳはまた、実施例１～３に示されるように合成することができる。次いで、標的細胞の生物学的標的に共有結合するＡＲＣＳを、ゲルアッセイ、ウェスタンブロット、ＥＬＩＳＡ、抗体アレイまたはＮａｎｏＢＲＥＴアッセイによりスクリーニングすることができる。
【0230】
実施例５：ＡＲＣＳのＮａｎｏＢＲＥＴスクリーニングのためのトランスフェクションプロトコルおよび読み取り
ヒト胚性腎臓２９３－Ｈ（ＨＥＫ ２９３、Ｇｉｂｃｏ ２９３－Ｈ、＃１１６３１０１７）細胞株は、水飽和インキュベーターにおいて、３７℃および５％のＣＯ２で、１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ、Ｇｉｂｃｏ、＃１００８２１４７）および１×ペニシリン－ストレプトマイシン（１００×溶液、Ｇｉｂｃｏ、＃１５１４０１４８）を補充したダルベッコ変法イーグル培地、高グルコース、ピルビン酸（ＤＭＥＭ、Ｇｉｂｃｏ、＃１１９９５０６５）に、維持されている。細胞は、０．０５％または０．２５％のトリプシン－ＥＤＴＡ溶液（トリプシン－ＥＤＴＡ、フェノールレッド、Ｇｉｂｃｏ、＃２５２０００５６（０．２５％）または＃２５３０００５４）を使用してトリプシン化される。１０％のウシ胎児血清（Ｏｐｔｉ－ＭＥＭ Ｉ還元血清培地、フェノールレッドなし、Ｇｉｂｃｏ、＃１１０５８０２１）を補充したＯｐｔｉ－ＭＥＭ培地を、ＮａｎｏＢＲＥＴ読み取り実験のために、細胞を一晩培養するために使用する。
ヒト胚性腎臓２９３－Ｈ（ＨＥＫ ２９３、Ｇｉｂｃｏ ２９３－Ｈ、＃１１６３１０１７）細胞株は、水飽和インキュベーターにおいて、３７℃および５％のＣＯ２で、１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ、Ｇｉｂｃｏ、＃１００８２１４７）および１×ペニシリン－ストレプトマイシン（１００×溶液、Ｇｉｂｃｏ、＃１５１４０１４８）を補充したダルベッコ変法イーグル培地、高グルコース、ピルビン酸（ＤＭＥＭ、Ｇｉｂｃｏ、＃１１９９５０６５）に、維持されている。細胞は、０．０５％または０．２５％のトリプシン－ＥＤＴＡ溶液（トリプシン－ＥＤＴＡ、フェノールレッド、Ｇｉｂｃｏ、＃２５２０００５６（０．２５％）または＃２５３０００５４）を使用してトリプシン化される。１０％のウシ胎児血清（Ｏｐｔｉ－ＭＥＭ Ｉ還元血清培地、フェノールレッドなし、Ｇｉｂｃｏ、＃１１０５８０２１）を補充したＯｐｔｉ－ＭＥＭ培地を、ＮａｎｏＢＲＥＴ読み取り実験のために、細胞を一晩培養するために使用する。
【0231】
ＨＥＫ２９３細胞は、アッセイ前に適切に培養される。細胞フラスコからの培地は、吸引を介して除去され、ＰＢＳで１回洗浄され、次いで吸引され、トリプシン化され、細胞をフラスコから解離させる。トリプシンは、成長培地を使用して中和され、細胞は、２００×ｇで５分間遠心分離を介してペレット化される。培地を吸引し、１０％のＦＢＳで補充されたＯｐｔｉ－ＭＥＭ Ｉを使用して、細胞を単一の細胞懸濁液に再懸濁する。細胞密度は、滅菌された円錐管中の１０％のＦＢＳで補充されたＯｐｔｉ－ＭＥＭ Ｉにおいて、２×１０５／ｍＬに調整される。細胞をトランスフェクトし、翌日に、ＮａｎｏＢＲＥＴアッセイ用の９６ウェルプレートに直接アリコートし、したがって、細胞をＯｐｔｉ－ＭＥＭ中で一晩培養する。細胞はまた、大量にトランスフェクトされ、９６ウェルプレートに分注されて、細胞をプレートに一晩接着させ、それによって洗浄試験を可能にする。
【0232】
脂質：ＤＮＡ複合体は以下のように調製される：
【0233】
ＤＮＡの１０μｇ／ｍＬの溶液を、血清を含まないＯｐｔｉ－ＭＥＭにおいて調製する。この溶液は、以下の比の生物学的標的に融合されたＮａｎｏＬｕｃをコードしている担体ＤＮＡとＤＮＡを含有する。連続希釈ステップは、ＮａｎｏＬｕｃ融合ＤＮＡを正確に希釈するために保証されてもよい。順番に、以下の試薬を滅菌ポリスチレン試験管に添加した：フェノールレッドを含まない１ｍＬのＯｐｔｉ－ＭＥＭ；９．０μｇ／ｍＬの担体ＤＮＡ；１．０μｇ／ｍＬのＮａｎｏＬｕｃ融合ＤＮＡ（一部の標的については、量が少ない）。試薬を完全に混合する。
【0234】
３０μＬのＦｕＧＥＮＥ ＨＤを、各ｍＬのＤＮＡ混合物に添加して、脂質：ＤＮＡ複合体を形成する。ＦｕＧＥＮＥ ＨＤがチューブのプラスチック側に触れないように注意し、チューブ内の液体にピペットで直接的に分注する。上下にピペッティングすることによって５～１０回混合し、室温で２０分間インキュベートして、複合体を形成する。脂質：ＤＮＡ複合体の１部（例えば、１ｍＬ）を、２×１０５／ｍＬで懸濁液中のＨＥＫ２９３細胞の２０部（例えば、２０ｍＬ）と混合し、滅菌円錐管で上下に５回、ピペッティングによって穏やかに混合する。より大きなまたはより小さいバルクトランスフェクションは、この比を使用して、それに応じてスケーリングされる。１００μＬの細胞＋脂質：ＤＮＡ複合体を、滅菌された組織培養処理済みの９６ウェルプレート（２０，０００細胞／ウェル）に分注し、少なくとも１６時間インキュベートして発現させる。細胞を３７℃＋５％のＣＯ２インキュベーターで１６時間超インキュベートする。連続希釈された阻害剤または試験化合物を、１００％ＤＭＳＯ中、１００×最終濃度で調製する。連続希釈された阻害剤ストックは、ＰＣＲプレートに調製される。１００回連続希釈された阻害剤／試験化合物のウェル当たり１μＬを、一晩一過性にトランスフェクトされた９６ウェルプレートの細胞に添加し、プレートを手で軽くたたくことによって混合する。プレートを３７℃＋５％のＣＯ２インキュベーターで一晩インキュベートする。基質混合の１Ｘ溶液（５００Ｘストック）およびトレーサーの適切な濃度を、Ｏｐｔｉ－Ｍｅｍに調製する。その都度２００μＬのＰＢＳを加えることによって、ｐＨ７．４のＰＢＳにおける９６ウェルプレート５Ｘにプレートワッシャーを設定することによって、細胞を洗浄する。細胞を３７℃で２時間インキュベートする。１００μＬの１Ｘ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ－Ｔｒａｃｅｒ溶液を添加し、９６ウェルプレートを穏やかに軽くたたいて混合する。プレートリーダー上のプレートを、次の６時間、毎時読み取る。いくつかのＡＲＣＳの結合アッセイを以下に示す。化合物１－ＸＸＸＩＩは、約５％～２０％のＰＩ３キナーゼと共有結合を形成した。化合物１－１０１、１－１０２、１－１１３、１－１１４、１－１１９、１－１２０、１－１２５および１－１２６からなる群から選択されたＡＲＣＳは、約８０％～１００％のＰＩ３キナーゼと共有結合を形成した。化合物１－１７１および１－１７２は、約５０％～８０％のＰＩ３キナーゼと共有結合を形成した。ＰＩ３キナーゼの活性は、化合物１－ＸＸＸＩＩによって約５％～２０％阻害される。ＰＩ３キナーゼの活性は、化合物１－１０１、１－１０２、１－１１３、１－１１４、１－１１９、１－１２０、１－１２５および１－１２６からなる群から選択されたＡＲＣＳによって、約８０％～１００％阻害される。ＰＩ３キナーゼの活性は、化合物１－１７１および１－１７２によって約５０％～８０％阻害される。
【表1】
【0235】
等価物および範囲
当業者は、本明細書に記載される開示に従って、通常の実験のみを使用して、特定の実施形態に対する多くの等価物を認識する、または確認することができる。本開示の範囲は、上記の説明に限定されることを意図しておらず、添付の特許請求の範囲に記載されるとおりである。
当業者は、本明細書に記載される開示に従って、通常の実験のみを使用して、特定の実施形態に対する多くの等価物を認識する、または確認することができる。本開示の範囲は、上記の説明に限定されることを意図しておらず、添付の特許請求の範囲に記載されるとおりである。
【0236】
特許請求の範囲において、相反する指示がない限り、または文脈から別の形で明らかでない限り、「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」などの冠詞は、一つ以上を意味する場合がある。グループの一つ以上のメンバーの間に「または」を含む請求項または説明は、グループメンバーの一つ、一つ以上またはすべてが、その文脈から反対に示唆されない限り、または別の方法で明らかでない限り、所与の製品または方法に存在する、またはそれに使用されている、または他の方法で関連がある場合、満たされるとみなされる。本開示は、正確にグループの一つのメンバーが、所与の製品または方法に存在する、またはそれらに使用される、またはそうでなければ関連する実施形態を含む。本開示は、一つ以上またはグループのメンバー全体が、所与の製品または方法に存在する、またはそれらに使用される、またはそうでなければ関連する実施形態を含む。
【0237】
また、「含む」という用語は、オープンであり、許可するが、追加の要素またはステップを含める必要はないことに留意されたい。「含む」という用語が本明細書で使用される場合、「からなる」という用語も包含され、開示される。
【0238】
範囲が与えられる場合、終点が含まれる。さらに、当業者の文脈および理解から別段の示唆または別の方法で明らかでない限り、範囲として表される値は、文脈が別の意味を明確に示さない限り、本開示の異なる実施形態で記載される範囲内の任意の特定の値または範囲を、範囲の下限の単位の１０分の１まで仮定することができる。
【0239】
さらに、当然のことながら、先行技術に属する本開示の任意の特定の実施形態は、特許請求の範囲の任意の一つ以上から明示的に除外されうる。こうした実施形態は、当業者に公知であるとみなされるため、除外が本明細書に明示的に記載されていない場合でも除外されうる。本開示の組成物の任意の特定の実施形態（例えば、任意の抗生物質、治療剤または活性成分、任意の製造方法、任意の使用方法など）は、任意の理由のために、先行技術の存在に関連するか否かにかかわらず、任意の一つ以上の特許請求の範囲から除外することができる。
【0240】
使用された用語は、限定というよりは説明の言葉であり、そのより広い態様における本開示の真の範囲および精神から逸脱することなく、添付の特許請求の範囲の範囲内で変更がなされ得ることが理解されるべきである。
【0241】
本開示は、いくつかの記載される実施形態に関して何らかの長さおよび何らかの特殊性で記載されてきたが、そのような詳細または実施形態または任意の特定の実施形態に限定されることは意図されていないが、先行技術の観点からそのような特許請求の範囲の最も広範な解釈を提供するように、従って、本開示の意図された範囲を効果的に包含するように、添付の特許請求の範囲を参照して解釈されるべきである。
【国際調査報告】