特表 2022-552841 ポリマー薬物送達コンジュゲートならびにそれを作製および使用する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-12-20

(54)【発明の名称】ポリマー薬物送達コンジュゲートならびにそれを作製および使用する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 47/58 20170101AFI20221213BHJP

   A61K 38/16 20060101ALI20221213BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20221213BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20221213BHJP

   A61K 38/10 20060101ALI20221213BHJP

   C07K 7/00 20060101ALI20221213BHJP

   C07K 14/00 20060101ALI20221213BHJP

   A61K 31/451 20060101ALN20221213BHJP

   A61K 31/5375 20060101ALN20221213BHJP

   A61K 31/37 20060101ALN20221213BHJP

   A61K 31/357 20060101ALN20221213BHJP

   A61K 31/453 20060101ALN20221213BHJP

   A61K 31/44 20060101ALN20221213BHJP

   A61K 31/137 20060101ALN20221213BHJP

   A61K 31/704 20060101ALN20221213BHJP

   C12N 15/11 20060101ALN20221213BHJP

【ＦＩ】

A61K47/58

A61K38/16

A61P35/00

A61K39/395 T

A61K38/10

C07K7/00 ZNA

C07K14/00

A61K31/451

A61K31/5375

A61K31/37

A61K31/357

A61K31/453

A61K31/44

A61K31/137

A61K31/704

C12N15/11 Z

【審査請求】未請求

【予備審査請求】有

(21)【出願番号】P 2022522891

(86)(22)【出願日】2020-10-16

(85)【翻訳文提出日】2022-06-14

(86)【国際出願番号】 US2020055940

(87)【国際公開番号】W WO2021076865

(87)【国際公開日】2021-04-22

(31)【優先権主張番号】62/916,821

(32)【優先日】2019-10-18

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】504260058

【氏名又は名称】ザ ユニバーシティ オブ ユタ リサーチ ファウンデイション

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】ヤン， ジユアン

(72)【発明者】

【氏名】リー， リアン

(72)【発明者】

【氏名】ピーターソン， シー． マシュー

(72)【発明者】

【氏名】コペチェク， ジンドリッチ

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C085

4C086

4C206

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA95

4C076CC41

4C076EE59

4C084AA02

4C084AA03

4C084BA01

4C084BA09

4C084BA18

4C084BA19

4C084BA23

4C084BA42

4C084MA52

4C084MA55

4C084NA14

4C084ZB261

4C084ZB262

4C085AA14

4C085AA21

4C085AA24

4C085BB11

4C085EE01

4C086AA01

4C086AA02

4C086BA17

4C086BC17

4C086BC21

4C086BC73

4C086EA10

4C086GA02

4C086GA07

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA13

4C086ZB26

4C206AA01

4C206AA02

4C206FA11

4C206KA01

4C206MA01

4C206MA04

4C206NA13

4C206ZB26

4H045AA10

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA15

4H045BA16

4H045BA18

4H045BA72

4H045EA28

4H045FA33

4H045FA51

4H045FA52

4H045GA22

(57)【要約】

抗がん剤を被験体に有効に送達するための生分解性薬物送達コンジュゲートおよび抗がんコンジュゲートが本明細書に記載される。コンジュゲートは、２つのポリマーセグメントに共有結合により接続した単一の第１の切断可能なペプチドリンカーを含み、少なくとも１つのＰＤ－Ｌ１阻害剤が、各ポリマーセグメントに共有結合している（本明細書において、「ＰＤ－Ｌ１阻害剤ポリマーコンジュゲート」と称される）。がんを処置または予防するために、抗がん剤と組み合わせたＰＤ－Ｌ１阻害剤ポリマーコンジュゲートの使用も本明細書に記載される。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含む薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルであって、少なくとも１つのＰＤ－Ｌ１阻害剤が、各ポリマーセグメントに共有結合している、薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステル。

【請求項2】

各ポリマーセグメントが、２つまたはそれより多いエチレン性不飽和モノマーの重合生成物を含む、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項3】

各ポリマーセグメントが、式Ｉ：

【化22】

の第１のモノマーであって、式中、Ｒ^１は水素またはメチルであり；
ＸはＯまたはＮＲ^２であり、Ｒ^２は水素またはアルキル基であり；
ｎは１～１０である、第１のモノマーと、
Ｎ－置換メタクリルアミド、Ｎ，Ｎ－二置換アクリルアミド、メタクリル酸もしくはアクリル酸の親水性エステル、Ｎ－ビニルピロリドン、Ｎ－アクリロイルモルホリン、スルホエチルメタクリレート、アクリル酸、メタクリル酸、またはこれらの任意の組合せを含む第２のモノマーとの間の重合生成物を含む、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項4】

Ｒ^１がメチルであり、ＸがＮＨであり、ｎが１～５である、請求項３に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項5】

Ｒ^１がメチルであり、ＸがＮＨであり、ｎが３である、請求項３に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項6】

前記第２のモノマーが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、Ｎ－［３－（Ｎ’－ジカルボキシメチル）アミノプロピル］メタクリルアミド（ＤＡＭＡ）、Ｎ－メタクリロイルグリシルフェニルアラニルロイシルグリシン－アミノマロン酸（ＭＡ－ＧＦＬＧ－ｄｉＣＯＯＨ）、Ｎ－（３－アミノプロピル）メタクリルアミド、Ｎ－（１，３－ジヒドロキシプロパン－２－イル）メタクリルアミドまたはこれらの任意の組合せを含む、請求項３に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項7】

前記第２のモノマーが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）である、請求項３に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項8】

各ポリマーセグメントが、
第１のモノマーであって、オレフィン基と前記第１のモノマーに結合したＰＤ－Ｌ１阻害剤を有する、第１のモノマーおよび
Ｎ－置換メタクリルアミド、Ｎ，Ｎ－二置換アクリルアミド、メタクリル酸もしくはアクリル酸の親水性エステル、Ｎ－ビニルピロリドン、Ｎ－アクリロイルモルホリン、スルホエチルメタクリレート、アクリル酸、メタクリル酸、またはこれらの任意の組合せを含む第２のモノマーとの間の重合生成物を含む、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項9】

前記第２のモノマーが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、Ｎ－［３－（Ｎ’－ジカルボキシメチル）アミノプロピル］メタクリルアミド（ＤＡＭＡ）、Ｎ－メタクリロイルグリシルフェニルアラニルロイシルグリシン－アミノマロン酸（ＭＡ－ＧＦＬＧ－ｄｉＣＯＯＨ）、Ｎ－（３－アミノプロピル）メタクリルアミド、Ｎ－（１，３－ジヒドロキシプロパン－２－イル）メタクリルアミドまたはこれらの任意の組合せを含む、請求項８に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項10】

前記第２のモノマーが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）である、請求項８に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項11】

前記第１の切断可能なリンカーが、酵素、ｐＨの変化、またはこれらの組合せによって切断される、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項12】

前記第１の切断可能なペプチドリンカーが、酵素によって切断される、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項13】

前記第１の切断可能なペプチドリンカーが、リソソーム酵素によって切断される、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項14】

前記第１の切断可能なペプチドリンカーが、アミノ酸配列－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ｎｌｅ－（配列番号１）；－Ｃｉｔ－Ｐｈｅ－（配列番号２）；－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－（配列番号３）；－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－（配列番号４）；－Ａｒｇ－Ａｒｇ－（配列番号５）；Ｖａｌ－Ｃｉｔ（配列番号６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号７）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ（配列番号８）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号９）；Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１０）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ（配列番号１１）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１２）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１３）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ（配列番号１４）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１５）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｙｒ－Ａｌａ（配列番号１６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号１７）；Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ（配列番号１８）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号１９）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２０）；Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２１）；およびＧｌｎ－Ｓｅｒ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ（配列番号２２）を有するペプチドである、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項15】

前記第１の切断可能なリンカーが、式ＩＩ：
－（ＡＡ_１）－Ｋ－（ＡＡ_２）－ ＩＩ
を有し、式中、ＡＡ_１およびＡＡ_２は、最大６個のアミノ酸を含む同じかまたは異なるアミノ酸配列であり、Ｋは、リジン、オルニチン、またはジアミンである、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項16】

前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、ペプチド、Ｄ－ペプチド、非ペプチド小分子、または抗体である、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項17】

前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アミノ酸配列－^ＤＡｓｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＳｅｒ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｈｒ－^ＤＡｓｐ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＰｈｅ－、－^ＤＬｙｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｌａ－^ＤＨｉｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＴｈｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｓｎ－^ＤＬｅｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＬｅｕ－^ＤＰｒｏ－、－^ＤＭｅｔ－^ＤＡｒｇ－_ＤＡｓｎ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＴｙｒ－^ＤＰｒｏ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｙｒ－^ＤＴｙｒ－、またはこれらの組合せを有するＤ－ペプチドである、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項18】

前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、

【化23】

【化24】

またはこれらの組合せを含む非ペプチド小分子である、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項19】

前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、またはこれらの組合せである、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項20】

前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アミノ酸配列－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｔｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｐｒｏ－Ｌｙｓ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ａｓｎ－（配列番号２５）を有するペプチドである、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項21】

各ＰＤ－Ｌ１阻害剤が同じ分子である、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項22】

各ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、架橋剤によって各ポリマーセグメントに共有結合している、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項23】

各ポリマーセグメントが、式ＩＩＩ：

【化25】

のユニットを１つまたは複数有し、式中、Ｒ^２は水素またはメチルであり；
ｎは１～１０であり；
ＣＬは架橋剤であり；
ＹはＰＤ－Ｌ１阻害剤である、
請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項24】

各ポリマーセグメントが、式ＩＶ：

【化26】

のユニットを１つまたは複数有し、式中、Ｒ^２は水素またはメチルであり；
ｎは１～１０であり；
ＹはＰＤ－Ｌ１阻害剤である、
請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項25】

各ポリマーセグメントが、式ＩＩＩ

【化27】

のユニットを１つまたは複数有し、式中、Ｒ^２は水素またはメチルであり；
ｎは、独立して、１～１０であり；
ＹはＰＤ－Ｌ１阻害剤である、
請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項26】

図２のＭＰＰＡとして特定される、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項27】

約６０ｋＤａ～約９０ｋＤａの平均Ｍ_ｎを有する、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項28】

約７０ｋＤａ～約１００ｋＤａの平均Ｍ_ｗを有する、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項29】

約１．０～約２の平均Ｍ_ｗ／Ｍ_ｎを有する、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項30】

約１０～約１５の価数を有する、請求項１に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステル。

【請求項31】

請求項１から３１のいずれかに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルおよび薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。

【請求項32】

被験体におけるがんを処置または予防するための方法であって、請求項１から３１のいずれかに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルおよび抗がん剤を、前記被験体に投与することを含む、方法。

【請求項33】

前記がんが、膵臓がん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、卵巣がん（ｏｖａｒｙ ｃａｎｃｅｒ）、上咽頭がん、乳がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、結腸がん、胃腺癌、頭部がん、頸部がん、脳がん、口腔がん、咽頭がん、甲状腺がん、食道がん、胆嚢がん、肝臓がん、直腸がん、腎臓がん、子宮がん、膀胱がん、精巣がん、リンパ腫、骨髄腫、黒色腫、白血病、または非特定の固形腫瘍である、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

前記被験体における腫瘍を低減する、請求項３２に記載の方法。

【請求項35】

前記薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、前記抗がん剤の投与前に、前記被験体に投与される、請求項３２に記載の方法。

【請求項36】

前記薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、前記抗がん剤の投与後に、前記被験体に投与される、請求項３２に記載の方法。

【請求項37】

前記薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、前記抗がん剤の投与と同時に、前記被験体に投与される、請求項３２に記載の方法。

【請求項38】

前記抗がん剤が、エピルビシン、パクリタキセル、ドキソルビシン、ゲムシタビン、シスプラチン、メトトレキサート、５－フルオロウラシル、ベツリン酸、アムホテリシンＢ、ジアゼパム、ナイスタチン、プロポフォール、テストステロン、エストロゲン、プレドニゾロン、プレドニゾン、２，３－メルカプトプロパノール、プロゲステロン、ドセタキセル、メイタンシノイド、ＰＤ－１阻害剤、プロテインキナーゼ阻害剤、Ｐ－糖タンパク質阻害剤、オートファジー阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤、アロマターゼ阻害剤、モノクローナル抗体、光増感剤、放射線増感剤、インターロイキン、抗アンドロゲン薬、またはこれらの任意の組合せを含む、請求項３２に記載の方法。

【請求項39】

前記抗がん剤が、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含む抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルを含み、抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合している、請求項３２に記載の方法。

【請求項40】

各ポリマーセグメントが、２つまたはそれより多いエチレン性不飽和モノマーの重合生成物を含む、請求項３９に記載の方法。

【請求項41】

各ポリマーセグメントが、式ＩＶ：

【化28】

の第１のモノマーであって、式中、Ｒ^２は水素またはメチルであり；
ＸはＯまたはＮＲ^３であり、Ｒ^３は水素またはアルキル基であり；
Ｌ^１は第２の切断可能なリンカーであり；
Ｚは抗がん剤である、第１のモノマーと、
Ｎ－置換メタクリルアミド、Ｎ，Ｎ－二置換アクリルアミド、メタクリル酸もしくはアクリル酸の親水性エステル、Ｎ－ビニルピロリドン、Ｎ－アクリロイルモルホリン、スルホエチルメタクリレート、アクリル酸、メタクリル酸、またはこれらの任意の組合せを含む第２のモノマーとの間の重合生成物を含む、請求項３９に記載の方法。

【請求項42】

前記第２のモノマーが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、Ｎ－［３－（Ｎ’－ジカルボキシメチル）アミノプロピル］メタクリルアミド（ＤＡＭＡ）、Ｎ－メタクリロイルグリシルフェニルアラニルロイシルグリシン－アミノマロン酸（ＭＡ－ＧＦＬＧ－ｄｉＣＯＯＨ）、Ｎ－（３－アミノプロピル）メタクリルアミド、Ｎ－（１，３－ジヒドロキシプロパン－２－イル）メタクリルアミドまたはこれらの任意の組合せを含む、請求項４１に記載の方法。

【請求項43】

前記第１の切断可能なペプチドリンカーおよび前記第２の切断可能なペプチドリンカーが、独立して、アミノ酸配列－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ｎｌｅ－（配列番号１）；－Ｃｉｔ－Ｐｈｅ－（配列番号２）；－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－（配列番号３）；－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－（配列番号４）；－Ａｒｇ－Ａｒｇ－（配列番号５）；Ｖａｌ－Ｃｉｔ（配列番号６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号７）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ（配列番号８）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号９）；Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１０）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ａｌａ；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ（配列番号１１）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｌａ；Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１２）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１３）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ（配列番号１４）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１５）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｙｒ－Ａｌａ（配列番号１６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号１７）；Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ（配列番号１８）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号１９）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２０）；Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２１）；およびＧｌｎ－Ｓｅｒ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ（配列番号２２）を有するペプチドである、請求項３９に記載の方法。

【請求項44】

前記第１の切断可能なペプチドリンカーが、式ＩＩＩ：
－（ＡＡ_１）－Ｋ－（ＡＡ_２）－ （ＩＩＩ）
を有し、式中、ＡＡ_１およびＡＡ_２は、最大６個のアミノ酸を含む同じかまたは異なるアミノ酸配列であり、Ｋは、リジン、オルニチン、またはジアミンである、請求項３９に記載の方法。

【請求項45】

前記抗がん薬が、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、プラチネート、ドキソルビシン、ゲルダナマイシン、エピルビシン、または９－アミノカンプトテシンである、請求項３９に記載の方法。

【請求項46】

各ポリマーセグメントに共有結合した各抗がん剤が同じ抗がん剤である、請求項３９に記載の方法。

【請求項47】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルが、式Ｖ：
Ｐ^１－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐ^２ Ｖ
に示されるように、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含み、
前記抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合しており、
各ポリマーセグメントが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）と式ＶＩ：

【化29】

のモノマーであって、式中、Ｚは抗がん剤である、モノマーとの重合生成物を含む、
請求項３９に記載の方法。

【請求項48】

前記抗がん薬が、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、プラチネート、ドキソルビシン、ゲルダナマイシン、エピルビシン、または９－アミノカンプトテシンである、請求項４１に記載の方法。

【請求項49】

前記抗がん薬がエピルビシンである、請求項４１に記載の方法。

【請求項50】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルがＫＴ－１である、請求項３９に記載の方法。

【請求項51】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約６０ｋＤａ～約９０ｋＤａの平均Ｍ_ｎを有する、請求項３９に記載の方法。

【請求項52】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約９０ｋＤａ～約１２０ｋＤａの平均Ｍ_ｗを有する、請求項３９に記載の方法。

【請求項53】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約１．０～約２の平均Ｍ_ｗ／Ｍ_ｎを有する、請求項３９に記載の方法。

【請求項54】

被験体におけるがんを処置するための方法であって、ＰＤ－Ｌ１阻害剤と、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含む抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルとを、前記被験体に投与することを含み、抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合している、方法。

【請求項55】

被験体におけるがんを予防するための方法であって、ＰＤ－Ｌ１阻害剤と、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含む抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルとを、前記被験体に投与することを含み、抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合している、方法。

【請求項56】

被験体における腫瘍を低減するための方法であって、ＰＤ－Ｌ１阻害剤と、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含む抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルとを、前記被験体に投与することを含み、抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合している、方法。

【請求項57】

前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、ペプチド、Ｄ－ペプチド、非ペプチド小分子、または抗体である、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項58】

前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アミノ酸配列－^ＤＡｓｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＳｅｒ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｈｒ－^ＤＡｓｐ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＰｈｅ－、－^ＤＬｙｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｌａ－^ＤＨｉｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＴｈｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｓｎ－^ＤＬｅｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＬｅｕ－^ＤＰｒｏ－、－^ＤＭｅｔ－^ＤＡｒｇ－_ＤＡｓｎ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＴｙｒ－^ＤＰｒｏ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｙｒ－^ＤＴｙｒ－、またはこれらの組合せを有するＤ－ペプチドである、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項59】

前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、

【化30】

【化31】

【化32】

またはこれらの組合せを含む非ペプチド小分子である、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項60】

前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、またはこれらの組合せである、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項61】

前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アミノ酸配列－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｔｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｐｒｏ－Ｌｙｓ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ａｓｎ－（配列番号２５）を有するペプチドである、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項62】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤の投与前に、前記被験体に投与される、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項63】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤の投与後に、前記被験体に投与される、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項64】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤の投与と同時に、前記被験体に投与される、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項65】

各ポリマーセグメントが、２つまたはそれより多いエチレン性不飽和モノマーの重合生成物を含む、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項66】

各ポリマーセグメントが、式ＩＶ：

【化33】

の第１のモノマーであって、式中、Ｒ^１は水素またはメチルであり；
ＸはＯまたはＮＲ^２であり、Ｒ^２は水素またはアルキル基であり；
Ｌ^１は第２の切断可能なリンカーであり；
Ｚは抗がん剤である、第１のモノマーと、
Ｎ－置換メタクリルアミド、Ｎ，Ｎ－二置換アクリルアミド、メタクリル酸もしくはアクリル酸の親水性エステル、Ｎ－ビニルピロリドン、Ｎ－アクリロイルモルホリン、スルホエチルメタクリレート、アクリル酸、メタクリル酸、またはこれらの任意の組合せを含む第２のモノマーとの間の重合生成物を含む、請求項６５に記載の方法。

【請求項67】

前記第２のモノマーが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、Ｎ－［３－（Ｎ’－ジカルボキシメチル）アミノプロピル］メタクリルアミド（ＤＡＭＡ）、Ｎ－メタクリロイルグリシルフェニルアラニルロイシルグリシン－アミノマロン酸（ＭＡ－ＧＦＬＧ－ｄｉＣＯＯＨ）、Ｎ－（３－アミノプロピル）メタクリルアミド、Ｎ－（１，３－ジヒドロキシプロパン－２－イル）メタクリルアミドまたはこれらの任意の組合せを含む、請求項６６に記載の方法。

【請求項68】

前記第１の切断可能なペプチドリンカーと前記第２の切断可能なペプチドリンカーとが、独立して、アミノ酸配列－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ｎｌｅ－（配列番号１）；－Ｃｉｔ－Ｐｈｅ－（配列番号２）；－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－（配列番号３）；－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－（配列番号４）；－Ａｒｇ－Ａｒｇ－（配列番号５）；Ｖａｌ－Ｃｉｔ（配列番号６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号７）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ（配列番号８）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号９）；Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１０）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ａｌａ；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ（配列番号１１）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｌａ；Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１２）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１３）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ（配列番号１４）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１５）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｙｒ－Ａｌａ（配列番号１６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号１７）；Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ（配列番号１８）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号１９）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２０）；Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２１）；およびＧｌｎ－Ｓｅｒ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ（配列番号２２）を有するペプチドである、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項69】

前記第１の切断可能なペプチドリンカーが、式ＩＩＩ：
－（ＡＡ_１）－Ｋ－（ＡＡ_２）－ ＩＩＩ
を有し、式中、ＡＡ_１およびＡＡ_２は、最大６個のアミノ酸を含む同じかまたは異なるアミノ酸配列であり、Ｋは、リジン、オルニチン、またはジアミンである、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項70】

前記抗がん薬が、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、プラチネート、ドキソルビシン、ゲルダナマイシン、エピルビシン、または９－アミノカンプトテシンである、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項71】

各ポリマーセグメントに共有結合した各抗がん剤が同じ抗がん剤である、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項72】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルが、式Ｉ：
Ｐ^１－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐ^２ Ｖ
に示されるように、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含み、
前記抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合しており、
各ポリマーセグメントが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）と式ＶＩ：

【化34】

のモノマーであって、式中、Ｚは抗がん剤である、モノマーとの重合生成物を含む、
請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項73】

前記抗がん薬が、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、プラチネート、ドキソルビシン、ゲルダナマイシン、エピルビシン、または９－アミノカンプトテシンである、請求項７２に記載の方法。

【請求項74】

前記抗がん薬がエピルビシンである、請求項７２に記載の方法。

【請求項75】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルが、ＫＴ－１である、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項76】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約６０ｋＤａ～約９０ｋＤａの平均Ｍ_ｎを有する、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項77】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約９０ｋＤａ～約１２０ｋＤａの平均Ｍ_ｗを有する、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項78】

前記抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約１．０から約２の平均Ｍ_ｗ／Ｍ_ｎを有する、請求項５４から５６のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年１０月１８日に出願された米国仮出願第６２／９１６，８２１号に関する優先権を主張する。かかる出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0002】

承認
本発明は、国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ）によって授与された助成金ＣＡ１５６９３３の下、政府の支援によりなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。

【0003】

配列表に対する相互参照
本明細書に記載の遺伝的構成要素は、配列識別子番号（配列番号）によって参照される。配列番号は、配列識別子＜４００＞１、＜４００＞２などに数値上対応する。コンピューター可読形式（ＣＲＦ）で書かれた配列表は、参照によりその全体が組み込まれる。

【背景技術】

【0004】

背景
エピルビシンは、乳がん、卵巣がん、胃がん、肺がん、およびリンパ腫を含む様々ながんを処置するために使用されるアントラサイクリン薬物である。エピルビシンは、トポイソメラーゼＩＩによるＤＮＡ切断を誘発するだけでなく、挿入剤としても作用する。エピルビシンは、類似薬物と比較して少ない副作用しか示さないが、注射の数時間後にはほとんど検出不能となる程度まで、腫瘍から迅速に排除されることが多い。毒性の低い他の抗がん剤は類似の限界を示す。

【0005】

Ｔ細胞は、様々ながんおよび他の疾患を認識し、身体がそれらと闘う手助けをすることができる。急速に変異する腫瘍細胞は、プログラム死リガンド１、すなわちＰＤ－Ｌ１の発現を上方調節する。ＰＤ－Ｌ１は、受容体、すなわち活性化Ｔ細胞および免疫系の他の細胞に見られるプログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ－１）に結合し、免疫系のさらなる活性化をもたらす細胞シグナルを遮断する。よって、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１相互作用を破壊することは、がん治療に関する有望な標的である。しかし、ある特定の腫瘍は、Ｔ細胞浸潤を欠き、よって免疫治療にほとんど応答しない。さらに、細胞内に内部移行したＰＤ－Ｌ１は、細胞表面にリサイクルされることが多く、そこでＴ細胞活性化を抑制し続けることができる。

【0006】

ポリマー薬物送達コンジュゲートは、腎臓における糸球体濾過および他の手段による薬物の迅速なクリアランスなどの問題に対処するための益々一般的な戦略となっている。高分子量ポリマーコンジュゲートは、長期間循環し、血管透過性滞留性亢進（enhanced permeability and retention）（ＥＰＲ）効果により腫瘍組織に効率的に蓄積する傾向がある。しかし、非分解性であるポリマー構成成分は、様々な器官に蓄積し、生体適合性を損なう可能性がある。

【0007】

腫瘍部位に蓄積し、有効な化学療法に十分な期間そこに存続する生分解性薬物送達および／または抗がんコンジュゲートを開発することが望まれる。この薬物送達および／または抗がんコンジュゲートが、がんを処置または予防するための方法の一部として被験体に投与され、かつそのコンジュゲートが、様々な組織または器官に長期間蓄積するのを防止するためにいくつかの生分解性エレメントを含有したならば、さらに望ましい。本方法は、理想的には、冷たい腫瘍（ｃｏｌｄ ｔｕｍｏｒ）を免疫治療に感受性とし、さらに、ＰＤ－Ｌ１の凝集、細胞取込み、および標的化リソソーム分解をもたらし、よって、腫瘍再発に対する耐久性免疫をもたらすことになる。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0008】

概要
抗がん剤を被験体に効果的に送達するための生分解性薬物送達コンジュゲートおよび抗がんコンジュゲートが本明細書に記載される。コンジュゲートは、２つのポリマーセグメントに共有結合により接続した単一の第１の切断可能なペプチドリンカーを含み、少なくとも１つのＰＤ－Ｌ１阻害剤が、各ポリマーセグメントに共有結合している（本明細書において、「ＰＤ－Ｌ１阻害剤ポリマーコンジュゲート」と称される）。がんを処置または予防するために、抗がん剤と組み合わせたＰＤ－Ｌ１阻害剤ポリマーコンジュゲートの使用も本明細書に記載される。

【0009】

本発明に対する利点は、その一部は後に続く記載に示され、一部はその記載から自明となり、または以下に記載の態様の実践によって学習され得る。以下に記載の利点は、特に添付の特許請求の範囲において指摘される要素および組合せによって実現および達成されることになる。前述の一般的記載と以下の詳細な説明との両方が、例示的および説明的であるに過ぎず、限定的でないことが理解されるべきである。

【0010】

本明細書に組み込まれ、本明細書の一部を構成する添付の図面は、以下に記載のいくつかの態様を例証する。

【図面の簡単な説明】

【0011】

【図1】図１は、ポリマーによって増強される免疫原性化学療法とＰＤ－Ｌ１分解との組合せの略図を示す。主鎖分解性ＨＰＭＡコポリマーは、免疫原性薬物の腫瘍標的化を促進し、その直接的抗腫瘍活性を増強し、免疫原性細胞死（ＩＣＤ）の誘導を促進して、抗腫瘍免疫を「ヒートアップさせる」。一方、コポリマーもまた、ＰＤ－Ｌ１の表面架橋を媒介し、そのリサイクリングをリソソーム分解に偏らせ、持続的抑制を示す。この二面的アプローチは、腫瘍において眠っているＴ細胞を動員および蘇生させ、Ｔ細胞応答を耐久的に促進する。

【0012】

【図2】図２は、コンジュゲートの合成および特徴付けを示す。（Ａ）２つのジチオベンゾエート基に挟まれた２つの酵素分解性オリゴペプチド配列（ＧＦＬＧ）から構成される連鎖移動剤（ＣＴＡ－ＧＦＬＧＫＧＬＦＧ－ＣＴＡ）の化学的構造。（Ｂ）第２世代の主鎖分解性ＨＰＭＡコポリマー－エピルビシン（アントラサイクリン）コンジュゲート：ＫＴ－１の合成スキームおよび特徴付け。（Ｃ）ＰＤ－Ｌ１に対する多価ＨＰＭＡコポリマー－ペプチドアンタゴニスト（ＭＰＰＡ）の合成スキームおよび特徴付け。

【0013】

【図3】図３は、ＫＴ－１に媒介される腫瘍蓄積およびＩＣＤ誘導を示す。（Ａ）静脈内注射の２、２４、７２、１２０、および１９６時間後に、Ｃｙ５（左）およびＣｙ５標識ＫＴ－１（右）で処置した４Ｔ１腫瘍担持ＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝３）のリアルタイム蛍光イメージング。蛍光強度を同じスケールに正規化した。黒丸は腫瘍を示す。（Ｂ）マウスを、注射の１、４、７日後に、遊離ＥＰＩまたはＫＴ－１（１０ｍｇ／ｋｇ ＥＰＩ当量）のいずれかで処置した後のｉｎ ｖｉｖｏでのＥＰＩの腫瘍細胞取込み。データは、１群あたり個々に解析されたｎ＝５匹のマウスを表す。（Ｃ）ｉｎ ｖｉｔｒｏでの４Ｔ１細胞表面におけるＫＴ－１に増強されたＣＲＴ曝露の共焦点イメージング。青：細胞核；緑：ＥＰＩ；赤：ＣＲＴ。ｉｎ ｖｉｖｏでの、（Ｄ）細胞表面におけるＣＲＴ上方調節、（Ｅ）腫瘍内ＨＭＧＢ_１放出、（Ｆ）ＤＣ成熟、（Ｇ）ＴＤＬＮにおけるＣＤ８６＋ＣＤ１１^＋ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６ｃ＋細胞の出現頻度および（Ｈ）４Ｔ１腫瘍担持マウスに対して食塩水、ＥＰＩおよびＫＴ－１での２回用量の処置（７日目および１４日目に）後の腫瘍におけるＣＤ８＋ Ｔ細胞の浸潤。データをボックスプロットとして表す（ひげ、５～９５パーセンタイル）。２つの独立した実験からの代表的実験から、食塩水およびＥＰＩ処置に関してはｎ＝４、およびＫＴ－１処置に関してはｎ＝６。スチューデントｔ検定による^＊Ｐ＜０．０５。

【0014】

【図4】図４は、ＫＴ－１処置後の４Ｔ１細胞におけるカルレティキュリン誘導のｉｎ ｖｉｔｒｏフローサイトメトリー解析を示す。２×１０^５個の４Ｔ１マウス乳がん細胞を２４ウェルプレート中に播種した。２４時間のインキュベーション後に、細胞培養培地を除去し、細胞を、薬物を含まないＨＰＭＡポリマー（ｐＨＰＭＡ主鎖０．３ｍｇ／ｍＬ）、ＥＰＩ（４０μＭ）、または２Ｐ－ＥＰＩ（４０μＭ ＥＰＩ当量）で２４時間処置した。処置後に、細胞を脱離させ、冷ＰＢＳで洗浄し、カルレティキュリン（ＣＲＴ）ポリクローナル抗体（１：１００）と３７℃で１時間さらにインキュベートした。次いで、細胞を１％ＢＳＡ緩衝液で２回洗浄し、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７で標識したヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）高度交差吸着済み二次抗体（１：２００）で４℃で３０分間染色した。その後、細胞を冷ＰＢＳで洗浄し、フローサイトメトリー解析のためにＰＢＳ中に再懸濁させた。実験は三連で行った。

【0015】

【図5】図５は、ＫＴ_－１が、ＣＤ８＋ Ｔ細胞に依存した様式で、ｉｎ ｖｉｖｏでの転帰を改善させることを示す。食塩水、ＥＰＩおよびＫＴ_－１による処置後の経時的な（Ａ）個々の腫瘍成長曲線および（Ｂ）動物生存率。ＣＤ８枯渇抗体とＫＴ_－１とによる同時処置後の（Ｃ）個々の腫瘍成長曲線および（Ｄ）動物生存率。（Ａ）に示したＥＰＩとＫＴ－１による化学療法後の腫瘍細胞内での（Ｅ）ＣＤ８＋ ＣＴＬの腫瘍動員、（Ｆ）Ｆｏｘｐ３＋ Ｔｒｅｇ、（Ｇ）Ｔｒｅｇに対するＣＤ８＋ ＣＴＬの比、および（Ｈ）ＰＤ－Ｌ１発現。α－ＰＤ－Ｌ１と組み合わせた食塩水、ＥＰＩ、およびＫＴ－１処置後の（Ｉ）個々の腫瘍成長曲線および（Ｊ）動物生存率。ＣＲ、完全腫瘍退縮。矢印は、処置レジメンを示す。２つの独立した実験からの代表的実験から、ｎ＝５～１０。^＊Ｐ＜０．０５、ｎ．ｓ、有意ではない、チューキーの多重比較検定を用いる一元ＡＮＯＶＡ。

【0016】

【図6】図６は、（Ａ）食塩水、ＥＰＩ、またはＫＴ－１による処置、（Ｂ）食塩水、またはＫＴ－１とα－ＣＤ８抗体による処置、および（Ｃ）α－ＰＤ－Ｌ_１、ＥＰＩ→α－ＰＤ－Ｌ１、またはＫＴ－１→α－ＰＤ－Ｌ１による処置の後の経時的なｉｎ ｖｉｖｏ処置レジメンおよび平均腫瘍成長曲線を示す。０日目に、８週齢の雌のＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝５～１０）の胸部パッドに４Ｔ１細胞を接種し、矢印で示すように処置した。

【0017】

【図7】図７は、ＭＰＰＡによる表面ＰＤ－Ｌ１の架橋によって、ＰＤ－Ｌ１をリソソーム分解させることを示す。（Ａ）ＭＰＰＡ架橋によりＰＤ－Ｌ１リサイクリングを阻害する略図。（Ｂ）３７℃で３時間処置した後の、α－ＰＤ－Ｌ_１－Ｃｙ５またはＣｙ３標識ＭＰＰＡ（Ｐ－（ＰＰＡ）１４－Ｃｙ３）とのリソソーム共局在。青：核；赤：Ｃｙ３／Ｃｙ５；緑：リソソーム。（Ｃ）Ｅ－６４によるリソソーム加水分解阻害を用いた、またはそれを用いない場合の全細胞ＰＤ－Ｌ１発現。４Ｔ１細胞を、Ｅ－６４システインプロテアーゼ阻害剤の非存在下（－）または存在下（＋）で、α－ＰＤ－Ｌ１、ＰＰＡ、またはＭＰＰＡで３時間処置した。その後、細胞を、ＰＤ－Ｌ１定量の前に、さらに２４時間細胞培養培地中でさらにインキュベートした。（Ｄ）表面ＰＤ－Ｌ１の時間に依存する回復。４Ｔ１細胞表面を、飽和濃度のα－ＰＤ－Ｌ１、ＰＰＡ、またはＭＰＰＡで、４℃で２時間予めコーティングし、未結合のものを除去した後、３７℃でさらにインキュベートした。図示した時点（０、１、３、６時間）で、表面のアクセス可能なＰＤ－Ｌ１受容体をフルオロフォアで標識した抗ＰＤ－Ｌ１抗体で染色し、フローサイトメトリーによって測定した。（Ｅ）ｉｎ ｖｉｖｏ腫瘍ＰＤ－Ｌ１発現、ならびに（Ｆ）（Ｅ）の矢印で示したＫＴ－１とＭＰＰＡの併用処置後のＣＤ３＋ＣＤ８＋ ＣＴＬおよびＣＤ４＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇの代表的なフローサイトメトリー解析プロット。２つの独立した実験からの代表的実験から、（Ｃ）および（Ｄ）ではｎ＝３、（Ｅ）および（Ｆ）ではｎ＝５。

【0018】

【図8】図８は、ＰＤ－Ｌ１へのＰＰＡの特異性およびＨＰＭＡポリマーへのそのコンジュゲーションを示す。（Ａ）免疫逃避からがん免疫治療までの、ＰＰＡに媒介されるＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用。（Ｂ）４Ｔ１細胞におけるＰＤ－Ｌ１に対するＰＰＡの特異性。陰性対照：Ｃｙ５標識した抗ＣＤ２０ ｍＡｂリツキシマブ（ＲＴＸ）の４Ｔ１細胞との４℃で１時間のインキュベーション；陽性対照：Ｃｙ５標識した抗ＰＤ－Ｌ１抗体の４Ｔ１細胞との４℃で１時間のインキュベーション；ＰＰＡ：０．２ｍＭのＰＰＡによる１時間の前処置と、Ｃｙ５標識した抗ＰＤ－Ｌ１抗体との４℃で１時間のコインキュベーション。ＰＰＡによる前処置は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体の細胞表面結合を有意に阻害し、細胞表面におけるＰＤ－Ｌ１受容体に対するその特異性が検証された。（Ｃ）異なるＰＰＡ価数を有するＣｙ３標識したＨＰＭＡコポリマー－ＰＰＡコンジュゲートの合成スキームおよび特徴付け。

【0019】

【図9】図９は、ＫＴ－１とＭＰＰＡとの組合せが、治癒した動物の長期抗腫瘍抗原特異的記憶をもたらすことを示す。（Ａ）示した処置に関する処置スケジュール。４Ｔ１腫瘍担持ＢＡＬＢ／ｃマウスにおける異なる処置後の経時的な（Ｂ）個々の腫瘍体積、（Ｃ）体重変化、および（Ｄ）生存率（ｎ＝５～１０）。（Ｅ）（Ｄ）のナイーブ対照マウスまたはＫＴ－１→ＭＰＰＡ処置ＣＲマウスの皮下に４Ｔ１またはＣＴ２６細胞を再負荷した後の個々の腫瘍体積測定（ｎ＝５）。（Ｆ）４Ｔ１細胞またはＣＴ２６細胞に対する（Ｄ）のＫＴ－１→ＭＰＰＡ処置ＣＲマウス由来のＰＢＭＣ中の腫瘍細胞反応性Ｔ細胞（ＩＦＮ－γ＋ＣＤ８＋）のパーセンテージの代表的散布図（ｎ＝５）。（Ｇ）最初のＫＴ－１→ＭＰＰＡ処置後の４Ｔ１細胞のｉ．ｖ．注射による再負荷後のマウスの生存曲線（ｎ＝５）。（Ｈ）４Ｔ１細胞ｉ．ｖ．再負荷後の脾臓におけるＣＤ４４＋ＣＤ６２Ｌ－メモリーエフェクターＣＤ８＋ Ｔ細胞（ｎ＝５）。（Ｉ）ＫＴ－１とＭＰＰＡ併用処置とによる腫瘍免疫状態での「熱の増大（ｔｕｒｎｉｎｇ ｕｐ）」の略図。

【0020】

【図10】図１０は、４Ｔ１細胞表面におけるＰ－（ＰＰＡ）_ｘ（ｘ＝０、１．４、４．３、１４）の価数依存性結合親和性を示す。異なる価数を有するＰ－（ＰＰＡ）_ｘの４Ｔ１細胞上のＰＤ－Ｌ１に対する結合親和性を比較するために、Ｐ－（ＰＰＡ）_ｘ－Ｃｙ３（ｘ＝０、１．４、４．３、１４）を４Ｔ１細胞と４℃で２時間インキュベートした。次いで、細胞を冷ＰＢＳで洗浄し、Ｃｙ３強度をフローサイトメトリーによって測定した。結果は、価数が増加するにつれて、Ｐ－（ＰＰＡ）_ｘの表面結合親和性が増大したことを示した。実験は三連で行った。エラーバーは平均±ｓ．ｅ．ｍを示す。

【0021】

【図11】図１１は、表面に結合したＰ－（ＰＰＡ）_ｘ－Ｃｙ３の内部移行（％）を示す。４Ｔ１細胞表面を飽和濃度のＰ－（ＰＰＡ）_ｘ－Ｃｙ３（ｘ＝０、１．４、４．３、１４）で４℃で予めコーティングし、コンジュゲートを３７℃で内部移行させた。次いで、受容体に結合したコンジュゲートと一緒に表面ＰＤ－Ｌ１をプロテイナーゼ－Ｋ消化（０．４ｍｇ／ｍＬ、２０分、３７℃）によって除去し、フローサイトメトリーを使用して内部移行したコンジュゲートを測定した。実験は三連で行った。エラーバーは平均±ｓ．ｅ．ｍを示す。

【0022】

【図12】図１２は、食塩水、ＫＴ－１、ＫＴ－１→α－ＰＤ－Ｌ１、ＫＴ－１→ＰＰＡ、およびＫＴ－１→ＭＰＰＡで処置したＢＡＬＢ／ｃマウスの４Ｔ１腫瘍におけるＣＤ８＋ ＣＴＬ、Ｆｏｘｐ３＋ Ｔｒｅｇ、およびＴｒｅｇに対するＣＤ８＋ ＣＴＬの比の定量を示す。２つの独立した実験からの代表的実験から、ｎ＝５。チューキーの多重比較検定を用いる一元ＡＮＯＶＡから、^＊Ｐ＜０．０５。エラーバーは平均±ｓ．ｅ．ｍを示し、ボックスプロットは、ひげ、５～９５パーセンタイルを表す。

【0023】

【図13】図１３は、４Ｔ１細胞またはＣＴ２６細胞に対するナイーブＢＡＬＢ／ｃマウス由来のＰＢＭＣ中の腫瘍細胞反応性Ｔ細胞（ＩＦＮ－γ＋ＣＤ８＋）のパーセンテージの代表的散布図を示す。２つの群（ｎ＝５）の間の差は、スチューデントｔ検定による有意性を全く示さなかった。

【0024】

【図14】図１４は、４Ｔ１腫瘍を移植され、最初のＫＴ－１→ＭＰＰＡ処置後に完全に治癒したＢＡＬＢ／ｃマウスに５×１０^５個の４Ｔ１細胞をｉ．ｖ．注射によって再負荷した後の肺転移を示す。対照群として、ナイーブＢＡＬＢ／ｃマウスは同じ数の４Ｔ１細胞を受けた。ｎ＝５、エラーバーは平均±ｓ．ｅ．ｍを示す。

【0025】

【図15】図１５は、皮下ＣＴ２６および転移性ＬＬＣ－１腫瘍モデルにおけるＫＴ－１とＭＰＰＡとの組合せの抗腫瘍効果および抗転移効果を示す。（Ａ）示した処置後のＣＴ２６結腸腫瘍成長曲線（ｎ＝５）。０日目に、ＢＡＬＢ／ｃマウスの皮下に２×１０^６個のＣＴ２６細胞を接種した。７、１４、および２１日目に、腫瘍担持マウスをＫＴ－１で処置した。１５、および２２日目に、マウスを、抗ＰＤ－Ｌ１療法、α－ＰＤ－Ｌ１抗体またはＭＰＰＡコンジュゲートで処置した。ＣＤ８枯渇抗体を、ＣＤ８＋ Ｔ細胞除去に供したマウスに、ＫＴ－１と同時に与えた。矢印は、ＫＴ－１とＭＰＰＡとの組合せに関する処置レジメンを示す。（Ｂ）ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＣＴ２６細胞の表面におけるＫＴ－１に増強されたＣＲＴ曝露の共焦点イメージ。青：細胞核；緑；ＥＰＩ；赤：ＣＲＴ。ＣＴ２６腫瘍担持マウスに対する食塩水およびＫＴ－１による２回用量の処置（７日目および１４日目）後の、ｉｎ ｖｉｖｏでの（Ｃ）細胞表面でのＣＲＴ上方調節、および（Ｄ）Ｔｒｅｇに対するＣＤ８＋ ＣＴＬの比。（Ｅ）ＫＴ－１による２回用量の処置（７日目および１４日目）と、その後のα－ＰＤ－Ｌ１またはＭＰＰＡによる１回用量（１５日目）による処置後の、ｉｎ ｖｉｖｏでのＣＴ２６腫瘍におけるＰＤ－Ｌ１発現（１７日目）。（Ｆ）時間に依存する表面ＰＤ－Ｌ１の回復。ＫＴ－１による２回用量の処置（７日目および１４日目）後の腫瘍担持マウスからＣＴ２６腫瘍細胞を単離した。次いで、細胞表面を飽和濃度のα－ＰＤ－Ｌ１またはＭＰＰＡで４℃で２時間予めコーティングした。その後、細胞を洗浄し、新しい培養培地を用いて３７℃でインキュベートした。選択した時点（０、１、３、６時間）で、表面のアクセス可能なＰＤ－Ｌ１受容体を、フルオロフォアで標識した抗ＰＤ－Ｌ１抗体で染色し、フローサイトメトリーによって測定した。（Ｇ）（Ａ）のナイーブ対照マウス（ｎ＝５）またはＫＴ－１→ＭＰＰＡ処置ＣＲマウス（ｎ＝３）の皮下にＣＴ２６細胞を再負荷した後の、個々の腫瘍体積測定。（Ｈ）ナイーブマウスの原発性ＣＴ２６腫瘍および治癒したマウスの続発性ＣＴ２６腫瘍におけるＣＤ３＋ＣＤ８＋ ＣＴＬ、ＣＤ３＋ＣＤ４＋ Ｆｏｘｐ３＋ Ｔｒｅｇ、ＰＤ－Ｌ１の発現を含む免疫状態。（Ｉ）示した処置後のマウスの生存率（ｎ＝５）。０日目に、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの静脈内に、２×１０^５個のＬＬＣ－１ Ｌｅｗｉｓ肺癌細胞を接種した。次いで、マウスを（Ａ）に記載したように処置した。（Ｊ）ＬＬＣ－１細胞に対する、２５日目の（Ｉ）のマウス由来のＰＢＭＣ中の腫瘍細胞反応性Ｔ細胞（ＩＦＮ－γ＋ＣＤ８＋）のパーセンテージの倍数増加（ｆｏｌｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ）。（Ｋ）２５日目の（Ｉ）のマウス由来の脾臓におけるＣＤ４４＋ＣＤ６２Ｌ－メモリーエフェクターＣＤ８＋ Ｔ細胞。（Ｌ）肺重量および肺葉切片のヘマトキシリン－エオシン組織学解析として示した、２５日目の（Ｉ）のマウス由来の肺における腫瘍負荷。^＊Ｐ＜０．０５、ｎ．ｓ、有意ではない、チューキーの多重比較検定を用いる一元ＡＮＯＶＡ。エラーバーは平均±ｓ．ｅ．ｍを示す；ボックスプロットはひげ、５～９５パーセンタイルを表す。

【発明を実施するための形態】

【0026】

詳細な説明
本発明の化合物、組成物、物品、デバイス、および／または方法が開示および記載される前に、以下に記載した態様は、当然のことながら変化し得るため、特定の化合物、合成方法、または使用に限定されないことが理解されるべきである。本明細書において使用される専門用語は、特定の態様を説明することを目的とするに過ぎず、限定的であることを意図するものではないことも理解されるべきである。

【0027】

本明細書および以下の特許請求の範囲において、以下の意味を有することが定義されるいくつかの用語に対して言及される。

【0028】

本明細書および添付の特許請求の範囲において使用される場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、文脈が別段に明確に示していなければ、複数の指示対象を含むことに留意されたい。よって、例えば、「抗がん剤」への言及は、２つまたはそれより多いそのような抗がん剤の混合物などを含む。

【0029】

「必要に応じた」または「必要に応じて」は、次に記載された事象または状況が起こり得るかまたは起こり得ないこと、およびこの記載が、事象または状況が起こる事例とそれが起こらない事例を含むことを意味する。例えば、語句「第２のモノマーを必要に応じて含む」は、第２のモノマーが存在しても存在しなくてもよいことを意味する。

【0030】

範囲は、本明細書において、「約」１つの特定値から、および／または「約」別の特定値までとして表現されてもよい。このような範囲が表現される場合、別の態様は、１つの特定値から、および／または他の特定値までを含む。同様に、値が、先行詞「約」の使用によって近似値として表現される場合、特定値が別の態様を形成することが理解されるであろう。範囲のそれぞれの終点が、他方の終点との関係においても、他方の終点から独立しても両方とも有意であることがさらに理解されるであろう。

【0031】

「混合する（ａｄｍｉｘｉｎｇ）」または「混合（ａｄｍｉｘｔｕｒｅ）」は、化学反応も物理的相互作用も存在しない、２つまたはそれより多い構成成分を合わせた組合せを指す。用語「混合する（ａｄｍｉｘｉｎｇ）」および「混合（ａｄｍｉｘｔｕｒｅ）」は、混合して組成物を生成する際の本明細書に記載の構成成分のいずれかの間の化学反応または物理的相互作用も含み得る。構成成分は、単独で、水中で、別の溶媒中で、または溶媒の組合せ中で混合されてもよい。

【0032】

本明細書および結論としての特許請求の範囲において使用される場合、化学種の残基は、その部分がその化学種から実際に得られるかどうかにかかわらず、特定の反応スキームにおいて得られた化学種の生成物またはその後の製剤もしくは化学生成物である部分を指す。例えば、少なくとも１つの－ＮＨ_２基を含有するアミノ酸は、式Ｈ－Ｙ－ＯＨ（式中、Ｙはアミノ酸分子の残りの部分（すなわち、残基、－ＨＮ－ＣＨＲ－ＣＯ－）である）で表すことができる。

【0033】

用語「アルキル基」は、本明細書で使用される場合、１～２４個の炭素原子の分岐または非分岐の飽和炭化水素基、例えばメチル、エチル、ｎプロピル、イソプロピル、ｎブチル、イソブチル、ｔブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、デシル、テトラデシル、ヘキサデシル、エイコシル、テトラコシルなどである。「低級アルキル」基は、１～６個の炭素原子を含有するアルキル基である。

【0034】

用語「処置する」は、本明細書で使用される場合、対照（例えば、被験体への食塩水の投与）と比較した場合に、既存の状態の症状を維持または低減することとして定義される。例えば、本明細書に記載の組成物を使用してがんを処置することができる。

【0035】

用語「予防する」は、本明細書で使用される場合、対照（例えば、被験体への食塩水の投与）と比較した場合に、疾患または障害の１つまたは複数の症状の発生の可能性を排除または低減することとして定義される。例えば、本明細書に記載の組成物および方法を使用して、腫瘍細胞の再成長を予防するか、または腫瘍細胞の再成長速度を低減させることができる。他の態様では、本明細書に記載の組成物および方法は、がんの再発または腫瘍成長を低減または予防することができる。

【0036】

本明細書において定義される用語「被験体」は、がんの処置および／または予防を必要とする任意の生物である。一態様では、被験体は、ヒト、飼育動物（例えば、イヌ、ネコ、ウマ）、家畜（例えば、ウシ、ブタ）、および野生動物を含むがこれらに限定されない哺乳動物である。

【0037】

「多分散指数」は、本明細書で使用される場合、ポリマーの分子量分布の広さを評価する手段である。一態様では、多分散指数は、Ｍ_ｗ／Ｍ_ｎと定義され、Ｍ_ｗは重量平均分子量（すなわち、分子量平均への寄与を決定する際に鎖の分子量を考慮に入れる値であり、より長い鎖はＭ_ｗに比較的多く寄与する）であり、Ｍ_ｎは数平均分子量（すなわち、試料中のすべてのポリマー鎖の統計的平均分子量）である。

【0038】

本明細書で使用される場合、「熱い（ｈｏｔ）」腫瘍は、炎症の徴候を示す腫瘍である。一態様では、熱い腫瘍は細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）によって浸潤されており、よって、免疫系はがんを認識する。一態様では、熱い腫瘍は免疫治療によく応答する。

【0039】

本明細書で使用される場合、「冷たい」腫瘍はＴ細胞によって浸潤されていない。さらなる態様では、冷たい腫瘍に関して、身体の免疫系は適切に作用しておらず、免疫治療薬は有効である可能性は低い。一態様では、冷たい腫瘍は、調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）に囲まれている。別の態様では、本明細書に開示されるコンジュゲートおよび方法は、Ｔｒｅｇに対するＣＴＬの比を増加させ、冷たい腫瘍を免疫治療に対して応答性にすることができる。

【0040】

本出願を通して使用されるＲ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｋ、ＣＬ、Ｌ^１、Ｘ、Ｙ、Ｚ、ＡＡ_１、ＡＡ_２、Ｐ^１、およびＰ^２などの変数は、逆の内容が記述されていなければ以前に定義されたものと同じ変数である。

【0041】

本明細書を通して、文脈が別段に指示していなければ、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」もしくは「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変形は、記述された要素、整数、ステップ、または要素、整数もしくはステップの群を含むことを意味するが、任意の他の要素、整数、ステップ、または要素、整数、もしくはステップの群を排除することを意味するものではないことが理解されるであろう。

【0042】

本明細書で使用される場合、複数の項目、構造的要素、組成的要素、および／または材料は、便宜上共通のリストに表されてもよい。しかし、これらのリストは、そのリストの各メンバーが、別々の固有のメンバーとして個々に特定されているかのように解釈されるべきである。よって、任意のこのようなリストのいずれの個々メンバーも、逆の内容が示されていなければ、共通の群に提示されていることのみに基づいて、同じリストのいずれかの他のメンバーの事実上の等価物として解釈されるべきでない。

【0043】

濃度、量、および他の数値データは、範囲形式で本明細書において表現または提示されてもよい。このような範囲形式は、単に便宜上および簡潔さのために使用されているので、範囲の限界として明示的に記載された数値だけでなく、各数値および下位範囲が明示的に記載されているかのように、この範囲内に包含されるすべての個々の数値または下位範囲を含むように柔軟に解釈されるべきであることが理解されるべきである。例として、「約１」～「約５」の数値範囲は、約１～約５の明示的に記載された値だけでなく、個々の値および示された範囲内の下位範囲も含むものと解釈されるべきである。よって、２、３、および４などの個々の数値、１～３、２～４、３～５、約１～約３、１～約３、約１～３などのような下位範囲、ならびに１、２、３、４、および５は、個々にこの数値範囲に含まれる。同じ原理を、最小値または最大値のような唯一の数値を記載する範囲に適用する。この範囲は、終点を含む（例えば、「約１～３」の範囲が記載される場合、この範囲は終点１および３ならびにその間の値の両方を含む）ものと解釈されるべきである。さらに、このような解釈は、記載されている文字の幅または範囲にかかわらず適用されるべきである。

【0044】

本開示の組成物および方法に使用することができるか、それと併せて使用することができるか、それの調製において使用することができるか、またはその生成物である材料および構成成分が開示される。これらの材料と他の材料が本明細書において開示され、これらの材料の組合せ、サブセット、相互作用、群などが開示される場合、これらの化合物のそれぞれの様々な個別的および集合的な組合せおよび順列への具体的な言及を明示的に開示することができないが、それぞれが本明細書で具体的に企図および記載されていると理解される。例えば、抗がん剤が開示および議論され、いくつかの異なる適合性の切断可能なペプチドリンカーが議論される場合、逆の内容が具体的に示されていなければ、可能である抗がん剤および切断可能なペプチドリンカーのありとあらゆる組合せおよび順列が具体的に企図される。例えば、分子Ａ、Ｂ、およびＣのクラスが、分子Ｄ、Ｅ、およびＦのクラスと同様に開示される場合、組合せ分子の一例であるＡ－Ｄが開示され、次いで、それぞれが個別に記載されていないとしても、それぞれは個別的および集合的に企図される。よって、この例において、Ａ、Ｂ、およびＣ；Ｄ、Ｅ、およびＦ；および例示的組合せＡ－Ｄの開示から、組合せＡ－Ｅ、Ａ－Ｆ、Ｂ－Ｄ、Ｂ－Ｅ、Ｂ－Ｆ、Ｃ－Ｄ、Ｃ－Ｅ、およびＣ－Ｆのそれぞれが具体的に企図され、開示されているとみなされるべきである。同様に、これらの任意のサブセットまたは組合せも具体的に企図され、開示される。よって、例えば、Ａ、Ｂ、およびＣ；Ｄ、Ｅ、およびＦ；および例示的組合せＡ－Ｄの開示から、Ａ－Ｅ、Ｂ－Ｆ、およびＣ－Ｅのサブグループが、具体的に企図され、開示されているとみなされるべきである。この概念は、以下に限定されないが、本開示の組成物を作製および使用する方法におけるステップを含む本開示のすべての態様に適用される。よって、実施され得る種々の追加のステップが存在する場合、これらの追加のステップのそれぞれが、本開示の方法のいずれかの特定の実施形態または実施形態の組合せにより実施され得ること、およびこのような組合せのそれぞれが、具体的に企図され、開示されているとみなされるべきであることが理解される。

【0045】

本明細書および結論としての特許請求の範囲において、組成物または物品における特定の要素または構成成分の重量部への言及は、要素または構成成分と、重量部が表現される組成物または物品におけるいずれかの他の要素または構成成分との間の重量関係を示す。よって、２重量部の構成成分Ｘおよび５重量部の構成成分Ｙを含有する化合物において、ＸおよびＹは、２：５の重量比で存在し、追加の構成成分が化合物中に含有されるかどうかに関係なく、このような比で存在する。

【0046】

構成成分の重量パーセントは、逆の内容が具体的に記述されていなければ、構成成分が含まれる製剤または組成物の総重量に対するものである。

【0047】

Ｉ．ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲート
一態様では、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合により接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を有し、少なくとも１つのＰＤ－Ｌ１阻害剤が各ポリマーセグメントに共有結合している、薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルが本明細書に開示される。ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲート中に存在する各構成成分は、以下に詳細に記載される。

【0048】

ポリマーセグメント
ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートは２つのポリマーセグメントを含む。ポリマーセグメントは、それらが被験体にとって毒性でないように設計される。ある特定の態様では、ポリマーセグメントは生分解性である。他の態様では、ポリマーセグメントは親水性である。一態様では、各ポリマーセグメントは同じポリマーである。他の態様では、各ポリマーセグメントは互いに異なる。

【0049】

一態様では、本明細書に開示されている各ポリマーセグメント（すなわち、Ｐ^１およびＰ^２）は、２つまたはそれより多いエチレン性不飽和モノマーの重合生成物であるか、またはそれを含んでもよい。

【0050】

一態様では、一方または両方のポリマーセグメントは、式Ｉの第１のモノマー：

【化1】

（式中、Ｒ^１は水素またはメチルであり；ＸはＯまたはＮＲ^２であり、Ｒ^２は水素またはアルキル基であり；ｎは、１～１０、または１、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０であり、任意の値は範囲の下の終点と上の終点（例えば１～８、１～５など）であってもよい）と；
Ｎ－置換メタクリルアミド、Ｎ，Ｎ－二置換アクリルアミド、メタクリル酸もしくはアクリル酸の親水性エステル、Ｎ－ビニルピロリドン、Ｎ－アクリロイルモルホリン、スルホエチルメタクリレート、アクリル酸、メタクリル酸、またはこれらの任意の組合せを含む第２のモノマー
との間の重合生成物であるか、またはそれを含む。

【0051】

別の態様では、一方または両方のポリマーセグメントが、式Ｉのモノマー（式中、Ｒ^１はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎは１～５である）との重合生成物であるか、またはそれを含む、薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルが本明細書に開示される。別の態様では、ｎは、１、２、３、４、もしくは５、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲である。一態様では、ｎは３である。

【0052】

また別の態様では、第２のモノマーは、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、Ｎ－［３－（Ｎ’－ジカルボキシメチル）アミノプロピル］メタクリルアミド（ＤＡＭＡ）、Ｎ－メタクリロイルグリシルフェニルアラニルロイシルグリシン－アミノマロン酸（ＭＡ－ＧＦＬＧ－ｄｉＣＯＯＨ）、Ｎ－（３－アミノプロピル）メタクリルアミド、Ｎ－（１，３－ジヒドロキシプロパン－２－イル）メタクリルアミドまたはこれらの任意の組合せから選択される。一態様では、第２のモノマーは、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）である。

【0053】

別の態様では、両方のポリマーセグメントは、式Ｉのモノマー（式中、Ｒ^１はメチルであり、ＸはＮＨであり、ｎは３である）とＮ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）との重合生成物であり、両方のポリマーセグメントは同じポリマーである。ポリマーセグメントを生成するための方法が以下に提供される。

【0054】

ペプチドリンカー
一態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーは、酵素の使用、周囲媒体のｐＨの変化、またはこれらの組合せを含むがこれらに限定されない、当技術分野で公知の任意の手段によって切断することができる。一態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーが酵素によって切断される場合、酵素は、例えば、カテプシン、カルボキシペプチダーゼ、アスパラギニルエンドペプチダーゼ、またはこれらの組合せなどのリソソーム酵素であってもよい。

【0055】

一態様では、コンジュゲート中に存在する第１の切断可能なリンカーは、１つまたは複数のアミノ酸残基から構成される。第１の切断可能なリンカーは、本明細書において、主鎖の切断可能なリンカーとも称され、リンカーはポリマー主鎖中に存在する。例えば、第１の切断可能なリンカーは、２～１３個のアミノ酸残基を有するペプチドであってもよい。アミノ酸またはアミノ酸の配列を変更することによって、第１の切断可能なリンカーを、それが特定の条件下で切断されるように設計することが可能である。第１の切断可能なリンカーは、血流中でかなり安定であるが、酵素と接触すると分解することが望ましい。

【0056】

第１の切断可能なリンカーは、酵素によって切断され得る。一態様では、リンカーは、リソソーム酵素によって切断される。リソソーム酵素は、ペプチド結合を加水分解する能力を有するいくつかのプロテイナーゼ（例えば、カテプシンＢ、Ｌ、ＤまたはＫ）を含む。切断可能なリンカーのリソソーム加水分解の速度は、リンカー中に存在するアミノ酸残基の数と性質の両方に依存する。これは、立体的要因と構造的要因の両方を反映する。

【0057】

別の態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーは、以下のアミノ酸配列のいずれかを有してもよい：－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ｎｌｅ－（配列番号１）；－Ｃｉｔ－Ｐｈｅ－（配列番号２）；－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－（配列番号３）；－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－（配列番号４）；－Ａｒｇ－Ａｒｇ－（配列番号５）；Ｖａｌ－Ｃｉｔ（配列番号６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号７）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ（配列番号８）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号９）；Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１０）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ（配列番号１１）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１２）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１３）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ（配列番号１４）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１５）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｙｒ－Ａｌａ（配列番号１６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号１７）；Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ（配列番号１８）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号１９）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２０）；Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２１）；およびＧｌｎ－Ｓｅｒ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ（配列番号２２）、ここで、Ｎｌｅはノルロイシンであり、Ｃｉｔはシトルリンであり、列挙された他のアミノ酸は、それらの標準的な三文字コードによって参照される。

【0058】

別の態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーは、式ＩＩ：
－（ＡＡ_１）－Ｋ－（ＡＡ_２）－ ＩＩ
（式中、ＡＡ_１およびＡＡ_２は、最大６個のアミノ酸を含む同じかまたは異なるアミノ酸配列であり、Ｋは、リジン、オルニチン、またはジアミンである）を有する。

【0059】

他の態様では、第１の切断可能なリンカーは、加水分解によって切断され得る基である。例えば、リンカーは、ｐＨの変化によって（例えば、カルボキシアルキルマレイン酸リンカーまたはアスコルビン酸リンカー）、またはこれらの組合せによって切断され得る。

【0060】

ＰＤ－Ｌ１阻害剤
ＰＤ－Ｌ１（プログラム死－リガンド１）は、がんを含むがこれらに限定されない疾患状態の間に免疫系の獲得部分を抑制する役割を担うと推測されるヒトにおける膜貫通タンパク質である。ＰＤ－Ｌ_１が阻害性チェックポイント分子ＰＤ－１に結合すると、最終結果は、リンパ節における抗原特異的Ｔ細胞の増殖の低減および調節性Ｔ細胞におけるアポトーシスの低減である。ＰＤ－Ｌ１の上方調節により、がんが免疫系を回避することが可能になる可能性があり、よってＰＤ－Ｌ１の作用を抑制することは、がんを処置および／または予防するのに有用である。

【0061】

一態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ペプチド、Ｄ－ペプチド、非ペプチド小分子、抗体、またはこれらの組合せであり得る。一部の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤はＰＤ－Ｌ１に結合し、そうでなければＰＤ－１または細胞表面受容体と相互作用するＰＤ－Ｌ１のアクセス部位を遮断することができる。

【0062】

一態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤がＤ－ペプチドである場合、これは、以下の配列のうちの１つまたは複数を含んでもよい：－^ＤＡｓｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＳｅｒ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｈｒ－^ＤＡｓｐ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＰｈｅ－；－^ＤＬｙｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｌａ－^ＤＨｉｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＴｈｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｓｎ－^ＤＬｅｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＬｅｕ－^ＤＰｒｏ－；－^ＤＭｅｔ－^ＤＡｒｇ－_ＤＡｓｎ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＴｙｒ－^ＤＰｒｏ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｙｒ－^ＤＴｙｒ－、またはこれらの任意の組合せ。

【0063】

代替の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、非ペプチド小分子である場合、以下の構造：

【化2】

【化3】

のうちの１つもしくは複数、またはこれらの組合せ
によって表される化合物を含んでもよい。

【0064】

また別の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が抗体である場合、これは、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、またはこれらの任意の組合せから選択されてもよい。

【0065】

さらに別の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤がペプチドである場合、これは、アミノ酸配列－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｔｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｐｒｏ－Ｌｙｓ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ａｓｎ－（配列番号２５）を有するかまたはこれを組み込んでもよい。また別の態様では、アミノ酸配列は追加のシステイン残基を組み込むことができ、よって、ジスルフィド結合を作製するためのチオール基を表す（すなわち、－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｔｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｐｒｏ－Ｌｙｓ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ａｓｎ－Ｃｙｓ－（配列番号２６））。

【0066】

一態様では、薬物送達コンジュゲート中の各ＰＤ－Ｌ１阻害剤は同じ分子である。代替の態様では、薬物送達コンジュゲート中の各ＰＤ－Ｌ１阻害剤は異なる分子であってもよい。

【0067】

架橋剤
ある特定の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、１つまたは複数の架橋剤によって薬物送達コンジュゲートのポリマーセグメントに共有結合している。

【0068】

一態様では、リンカーは、ヘテロ官能性架橋剤またはホモ官能性架橋剤を含む。この態様では、ヘテロ官能性架橋剤は、共有結合が可能な少なくとも２つの異なる官能基を有するリンカーを含み得る。例えば、ヘテロ官能性リンカーは、リンカーの一方の末端に位置するチオール基とリンカーの反対側の末端のカルボキシル基とを有し得る。この例では、リンカーは以下のように例示され得る：ＨＳ－リンカー－ＣＯＯＨ。別の態様では、ホモ官能性架橋剤は、共有結合が可能な少なくとも２つの同一の官能基を有するリンカーを含む。例えば、ホモ官能性リンカーは２つのチオール基を有することができ、そのうちの一方はリンカーの一方の末端に位置し、他方はリンカーの反対側の末端に位置する。この例では、リンカーは以下のように例示され得る：ＨＳ－リンカー－ＳＨ。例えば、リンカーは、求核剤と反応することが可能な少なくとも１つの基を有する。この態様では、求核剤は、マイケル付加によってリンカーに共有結合してもよい。この例では、リンカーは、カルボニル基とのコンジュゲーションにおけるオレフィン基を有する。別の態様では、ペプチド配列とリンカーとは、カルボキシル基と反応する第一級アミンによって共有結合することができる。さらなる例では、リンカーは、チオール基と反応することができる官能基を有する。

【0069】

一部の態様では、リンカーは、スルホスクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（スルホ－ＳＭＣＣ）およびその誘導体、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＭＢＳ）およびその誘導体、３－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）およびその誘導体、スルホスクシンイミジル６－（３’－［２－ピリジルジチオ］－プロピオンアミド）ヘキサノエート（スルホ－ＬＣ－ＳＰＤＰ）およびその誘導体、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）およびその誘導体、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステルおよびその誘導体、Ｎ－スクシンイミジル（４－ヨードアセチル）アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ）、マレイミドブチリルオキシ－スクシンイミドエステル（ＧＭＢＳ）およびその誘導体、Ｎ－（ε－マレイミドカプロイルオキシ）－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＥＭＣＳ）およびその誘導体、スクシンイミジル－６－（（ヨードアセチル）アミノ）ヘキサノエート（ＳＩＡＸ）およびその誘導体、スクシンイミジル－４－（ｐ－マレイミドフェニル）ブチレート（ＳＭＰＢ）およびその誘導体、スクシンイミジル－４－（（（ヨードアセチル）アミノ）メチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（ＳＩＡＣ）およびその誘導体、ｐ－ニトロフェニルヨードアセテート（ＮＰＩＡ）およびその誘導体、またはこれらの任意の組合せを含む。

【0070】

一部の態様では、リンカーは、以下に限定されないが、ヘテロ官能性水溶性架橋剤を含み、ヘテロ官能性架橋剤は、スルホスクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（スルホ－ＳＭＣＣ）およびその誘導体、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＭＢＳ）およびその誘導体、３－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）およびその誘導体、スルホスクシンイミジル６－（３’－［２－ピリジルジチオ］－プロピオンアミド）ヘキサノエート（スルホ－ＬＣ－ＳＰＤＰ）およびその誘導体、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）およびその誘導体（アミンとチオール反応性末端官能基とを含有するヘテロ二官能性ＰＥＧ誘導体を含むがこれらに限定されない）、アクリレート－ＰＥＧ－ＮＨＳ、アクリレート－ポリマー－ＮＨＳ、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステルおよびその誘導体、Ｎ－スクシンイミジル（４－ヨードアセチル）アミノベンゾエート（スルホ－ＳＩＡＢ）を含むＮ－スクシンイミジル（４－ヨードアセチル）アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ）およびその誘導体、マレイミドブチリルオキシ－スクシンイミドエステル（ＧＭＢＳ）およびその誘導体（Ｎ－マレイミドブチリルオキシ－スルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＧＭＢＳ）を含むがこれらに限定されない）、Ｎ－（ε－マレイミドカプロイルオキシ）－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＥＭＣＳ）およびその誘導体（Ｎ－（ε－マレイミドカプロイルオキシ）スルホスクシンイミドエステル（スルホ－ＥＭＣＳ）を含むがこれらに限定されない）、スクシンイミジル－６－（（ヨードアセチル）アミノ）ヘキサノエート（ＳＩＡＸ）およびその誘導体、スクシンイミジル－４－（ｐ－マレイミドフェニル）ブチレート（ＳＭＰＢ）およびその誘導体、スクシンイミジル－４－（（（ヨードアセチル）アミノ）メチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（ＳＩＡＣ）およびその誘導体、ｐ－ニトロフェニルヨードアセテート（ＮＰＩＡ）およびその誘導体、またはこれらの任意の組合せである。

【0071】

一態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、そのポリマーセグメント中に、式ＩＩＩ：

【化4】

（式中、Ｒ^２は水素またはメチルであり；ｎは１～１０であり；ＣＬは架橋剤であり；ＹはＰＤ－Ｌ１阻害剤である）のユニットを１つまたは複数含む。

【0072】

別の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、そのポリマーセグメント中に、式ＩＶ：

【化5】

（式中、Ｒ^２は水素またはメチルであり；ｎは１～１０であり；ＹはＰＤ－Ｌ１阻害剤である）のユニットを１つまたは複数含む。さらに、この態様では、薬物送達コンジュゲートはＭＰＰＡであってもよい（図２）。

【0073】

塩またはエステル
一態様では、本明細書に記載のＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートは、薬学的に許容される塩またはエステルであってもよい。ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートは、塩またはエステルに容易に変換することができる１つまたは複数の塩基性または酸性部位を含み得る。さらなる態様では、薬学的に許容される塩は、例えば、ナトリウム、リチウムなどのアルカリ金属塩；例えば、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属塩；例えば、銀、アルミニウム、アンモニウムもしくは置換アンモニウム塩などの別の金属もしくは多原子の塩；または例えば、アミノ酸塩（例えば、リジン塩、アルギニン塩など）などの有機塩であってもよい。代替の態様では、塩は、塩酸塩、硫酸塩、酢酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、塩化物、マレイン酸塩、クエン酸塩、メシル酸塩、硝酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、または別の一般的塩であってもよい。さらなる態様では、塩は無水であってもよく、または例えば、アルコレートもしくは水和物などの薬学的に許容される溶媒和物の形態であってもよい。一部の態様では、結晶水和塩または結晶性無水塩が使用されてもよい。

【0074】

別の態様では、好適な薬学的に許容されるエステルとしては、以下に限定されないが、メチルエステルおよびエチルエステルを含む低級アルキルエステルが挙げられる。

【0075】

上記態様のいずれかにおいて、塩またはエステルは、ｐＫ_ａ、親油性、吸湿性、流動性、賦形剤との適合性、化学的安定性、融点、溶解度、解離速度、風味、剤形および／または投与経路（すなわち、経口、非経口、局所など）などを含むがこれらに限定されない薬物送達コンジュゲートの特性を改善または調整するために、当業者によって選択され得る。

【0076】

特性
本明細書に記載のＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートの構造的特徴は、特定の構造的特性および化学的特性を付与するために必要に応じて改変され得る。例えば、コンジュゲートの分子量は改変されてもよい。一態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、約６０ｋＤａ～約９０ｋＤａ、または約７０ｋＤａ～約８０ｋＤａ、または約６０ｋＤａ、約６５ｋＤａ、約７０ｋＤａ、約７５ｋＤａ、約８０ｋＤａ、約８５ｋＤａ、もしくは約９０ｋＤａ、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲の平均Ｍ_ｎを有する。

【0077】

別の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、約７０ｋＤａ～約１００ｋＤａ、または約８５ｋＤａ～約９５ｋＤａ、または約７０ｋＤａ、約７５ｋＤａ、約８０ｋＤａ、約８５ｋＤａ、約９０ｋＤａ、約９５ｋＤａ、もしくは約１００ｋＤａ、または前述の値のいずれかの組合せ、または前記値のいずれかを包含する範囲の平均Ｍ_ｗを有する。

【0078】

さらに別の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、約１．０～約２、または約１～約１．５、または約１、約１．２５、約１．５、約１．７５、もしくは約２、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲の平均多分散指数（すなわち、Ｍ_ｗ／Ｍ_ｎ）を有する。

【0079】

ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲート中に存在するＰＤ－Ｌ１阻害剤モチーフの数も変化し得る。本明細書において言及される「多価」化合物は、ＰＤ－Ｌ１結合モチーフの複数のコピーを有するＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートである。よって、「価数」は、本明細書で使用される場合、送達コンジュゲート当たりのＰＤ－Ｌ１結合モチーフの平均数を指す。一態様では、本明細書に開示されている薬物送達コンジュゲートおよび／またはそれらの塩もしくはエステルは、約１０～約１５、または約１０、１０．５、１１、１１．５、１２、１２．５、１３、１３．５、１４、１４．５、もしくは約１５、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲の価数を有する。一態様では、価数は約１２．６である。一部の態様では、価数は、ＰＰＡ／ポリマーの価数であり、「ＰＰＡ」は、ＰＤ－Ｌ１ペプチドアンタゴニストを指す。

【0080】

ＩＩ．医薬組成物
一態様では、本明細書に記載のＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートおよび／またはそれらの薬学的に許容される塩もしくはエステルならびに薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物が本明細書に開示される。

【0081】

本明細書に記載のＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートを、少なくとも１種の薬学的に許容される担体と組み合わせて、医薬組成物を生成することができる。医薬組成物は、当技術分野で公知の技法を使用して調製することができる。一態様では、医薬組成物は、立体複合体（ｓｔｅｒｅｏｃｏｍｐｌｅｘ）を薬学的に許容される担体と混合することによって調製される。

【0082】

薬学的に許容される担体は、当業者に公知である。これらのほとんどは、典型的には、ヒトおよび／または他の哺乳動物に投与するための標準的な担体であり、滅菌水、食塩水、および生理学的ｐＨの緩衝溶液などの溶液を含む。

【0083】

薬学的送達を意図した分子は、医薬組成物に配合されてもよい。医薬組成物は、本明細書に記載の立体複合体に加えて、担体、増粘剤、希釈剤、緩衝液、防腐剤、界面活性剤などを含んでもよい。医薬組成物は、抗微生物剤、抗炎症剤、麻酔薬などの１種または複数の追加の有効成分を含んでもよい。

【0084】

医薬組成物は、局所的処置が望まれるか全身的処置が望まれるか、および処置される領域に応じて、いくつかの手法で投与することができる。投与は、非経口的、経口的、皮下、病変内、腹腔内、静脈内、または筋肉内にであってもよい。

【0085】

投与用の調製物は、無菌の水性または非水性溶液、懸濁物、およびエマルションを含む。非水性担体の例としては、食塩水および緩衝媒体を含む、アルコール／水溶液、エマルション、または懸濁物が挙げられる。非経口ビヒクルとしては、本開示の組成物および方法の付帯的使用に必要であれば、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸リンゲル、または固定油が挙げられる。静脈内ビヒクルとしては、本開示の組成物および方法の付帯的使用に必要であれば、流体および栄養分補充物質、電解質補充物質（例えば、リンゲルデキストロースに基づくものなど）などが挙げられる。例えば、抗微生物薬、抗酸化剤、キレート剤、不活性ガスなどの、防腐剤および他の添加剤も存在してよい。

【0086】

一態様では、本明細書に記載の薬物送達コンジュゲートおよび薬学的に許容される担体または賦形剤を含有する医薬組成物が本明細書において提供される。

【0087】

ＩＩＩ．がんを処置または予防するための方法
一態様では、被験体におけるがんを処置または予防するための方法であって、ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルを被験体に投与することを含む、方法が本明細書に開示される。さらなる態様では、本方法は、１種または複数の追加の抗がん剤をＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルと組み合わせて、被験体に送達することも含む。別の態様では、本方法は、被験体における腫瘍のサイズを低減するのに有用である。

【0088】

本明細書で使用される場合、「抗がん剤」は、被験体の体内のがん細胞を死滅させるため、被験体におけるがんの成長を遅延させるため、被験体においてがんが広がらないようにするため、または外科的に除去された腫瘍の再発を予防するために使用される化合物である。抗がん剤は、以下に限定されないが、ＤＮＡをアルキル化すること（ＤＮＡ複製酵素による螺旋化および認識を妨害することができる）、ＤＮＡの生成を妨害すること、がん細胞におけるタンパク質産生を妨害すること、がん細胞の分裂を妨げること、またはホルモンに依存するがんの成長を遅延させることによるものを含む種々の方法によって作用することができる。

【0089】

一態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、追加の抗がん剤の投与前、投与後、または投与と同時に、被験体に投与することができる。

【0090】

一態様では、抗がん剤は、ＰＤ－１阻害剤である。ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－Ｌ_１のプログラム細胞死タンパク質（ＰＤ－１）との会合を阻害する免疫チェックポイント阻害剤である。このタンパク質－リガンド相互作用は、ある特定のタイプのがんにおける免疫系の抑制に関与する。さらなる態様では、ＰＤ－１阻害剤は、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ＡＭＰ－２２４、ＡＭＰ－５１４、またはＰＤＲ００１であってもよい。一態様では、進行性黒色腫、非小細胞肺がん、腎細胞癌、膀胱がん、ホジキンリンパ腫、および他のがんが、ＰＤ－１阻害剤によって処置され得る。

【0091】

一態様では、抗がん剤は、モノクローナル抗体である。モノクローナル抗体治療では、モノクローナル抗体は、標的細胞および／またはタンパク質に単一特異的に結合し、被験体の免疫系を刺激してこれらの細胞を攻撃する。一部の態様では、モノクローナル抗体治療は、放射線治療と併せて使用される。一態様では、本明細書に開示される組成物はモノクローナル抗体を含む。モノクローナル抗体は、マウスのもの（接尾辞が－ｏｍａｂ）、キメラのもの（接尾辞が－ｘｉｍａｂ）、ヒト化されたもの（接尾辞が－ｚｕｍａｂ）、またはヒトのもの（接尾辞が－ｕｍａｂ）であり得る。一態様では、モノクローナル抗体は、ラムシルマブ、３Ｆ８、８Ｈ９、アバゴボマブ（Ａｂａｇｏｖｏｍａｂ）、アビツズマブ（Ａｂｉｔｕｚｕｍａｂ）、アダリムマブ（Ａｄａｌｉｍｕｍａｂ）、アフツズマブ（Ａｆｕｔｕｚｕｍａｂ）、アラシズマブペゴル（Ａｌａｃｉｚｕｍａｂ ｐｅｇｏｌ）、アマツキシマブ（Ａｍａｔｕｘｉｍａｂ）、アナツモマブマフェナトックス（Ａｎａｔｕｍｏｍａｂ ｍａｆｅｎａｔｏｘ）、アンデカリキシマブ（Ａｎｄｅｃａｌｉｘｉｍａｂ）、アネツマブラブタンシン（Ａｎｅｔｕｍａｂ ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、アポリズマブ（Ａｐｏｌｉｚｕｍａｂ）、アルシツモマブ（Ａｒｃｉｔｕｍｏｍａｂ）、アスクリンバクマブ（Ａｓｃｒｉｎｖａｃｕｍａｂ）、アテゾリズマブ（Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ）、アベルマブ（Ａｖｅｌｕｍａｂ）、アジンツキシズマブベドチン（Ａｚｉｎｔｕｘｉｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、バビツキシマブ（Ｂａｖｉｔｕｘｉｍａｂ）、ＢＣＤ－１００、ベランタマブマフォドチン（Ｂｅｌａｎｔａｍａｂ ｍａｆｏｄｏｔｉｎ）、ベリムマブ（Ｂｅｌｉｍｕｍａｂ）、ベマリツズマブ（Ｂｅｍａｒｉｔｕｚｕｍａｂ）、ベシレソマブ（Ｂｅｓｉｌｅｓｏｍａｂ）、ベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、ビバツズマブメルタンシン（Ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、ブレンツキシマブベドチン（Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ブロンチクツズマブ（Ｂｒｏｎｔｉｃｔｕｚｕｍａｂ）、カビラリズマブ（Ｃａｂｉｒａｌｉｚｕｍａｂ）、カミダンルマブテシリン（Ｃａｍｉｄａｎｌｕｍａｂ ｔｅｓｉｒｉｎｅ）、カムレリズマブ（Ｃａｍｒｅｌｉｚｕｍａｂ）、カンツズマブメルタンシン（Ｃａｎｔｕｚｕｍａｂ ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、カンツズマブラブタンシン（Ｃａｎｔｕｚｕｍａｂ ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、カロツキシマブ（Ｃａｒｏｔｕｘｉｍａｂ）、カツマキソマブ（Ｃａｎｔｕｍａｘｏｍａｂ）、ｃＢＲ９６－ドキソルビシンイムノコンジュゲート、セミプリマブ（Ｃｅｍｉｐｌｉｍａｂ）、セルグツズマブアムナロイキン（Ｃｅｒｇｕｔｕｚｕｍａｂ ａｍｕｎａｌｅｕｋｉｎ）、セトレリマブ（Ｃｅｔｒｅｌｉｍａｂ）、セツキシマブ（Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）、シビサタマブ（Ｃｉｂｉｓａｔａｍａｂ）、シタツズマブボガトックス（ｃｉｔａｔｕｚｕｍａｂ ｂｏｇａｔｏｘ）、シクスツムマブ（Ｃｉｘｕｔｕｍｕｍａｂ）、クリバツズマブテトラキセタン（Ｃｌｉｖａｔｕｚｕｍａｂ ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、コドリツズマブ（Ｃｏｄｒｉｔｕｚｕｍａｂ）、コフェツズマブペリドチン（Ｃｏｆｅｔｕｚｕｍａｂ ｐｅｌｉｄｏｔｉｎ）、コルツキシマブラブタンシン（Ｃｏｌｔｕｘｉｍａｂ ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、コナツムマブ（Ｃｏｎａｔｕｍｕｍａｂ）、クサツズマブ（Ｃｕｓａｔｕｚｕｍａｂ）、ダセツズマブ（Ｄａｃｅｔｕｚｕｍａｂ）、ダロツズマブ（Ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）、ダラツムマブ（Ｄａｒａｔｕｍｕｍａｂ）、デムシズマブ（Ｄｅｍｃｉｚｕｍａｂ）、デニンツズマブマホドチン（Ｄｅｎｉｎｔｕｚｕｍａｂ ｍａｆｏｄｏｔｉｎ）、デパツキシツマブマホドチン（Ｄｅｐａｔｕｘｉｚｕｍａｂ ｍａｆｏｄｏｔｉｎ）、デルロツキシマブビオチン（Ｄｅｒｌｏｔｕｘｉｍａｂ ｂｉｏｔｉｎ）、デツモマブ（Ｄｅｔｕｍｏｍａｂ）、ジヌツキシマブ（Ｄｉｎｕｔｕｘｉｍａｂ）、ドロジツマブ（Ｄｒｏｚｉｔｕｍａｂ）、ＤＳ－８２０１、デュリゴツズマブ（Ｄｕｌｉｇｏｔｕｚｕｍａｂ）、デュルバルマブ（Ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ）、デュシギツマブ（Ｄｕｓｉｔｇｉｔｕｍａｂ）、デュボルツキシツマブ（Ｄｕｖｏｒｔｕｘｉｚｕｍａｂ）、エクロメキシマブ（Ｅｃｒｏｍｅｘｉｍａｂ）、エドレコロマブ（Ｅｄｒｅｃｏｌｏｍａｂ）、エルゲムツマブ（Ｅｌｇｅｍｔｕｍａｂ）、エロツズマブ（Ｅｌｏｔｕｚｕｍａｂ）、エマクツズマブ（Ｅｍａｃｔｕｚｕｍａｂ）、エミベツズマブ（Ｅｍｉｂｅｔｕｚｕｍａｂ）、エナポトマブベドチン（Ｅｎａｐｏｔｏｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、エナバツズマブ（Ｅｎａｖａｔｕｚｕｍａｂ）、エンフォルツマブベドチン（Ｅｎｆｏｒｔｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、エノブリツズマブ（Ｅｎｏｂｌｉｔｕｚｕｍａｂ）、エンシツキシマブ（Ｅｎｓｉｔｕｘｉｍａｂ）、エプラツズマブ（Ｅｐｒａｔｕｚｕｍａｂ）、エルツマキソマブ（Ｅｒｔｕｍａｘｏｍａｂ）、エタラシズマブ（Ｅｔａｒａｃｉｚｕｍａｂ）、ファリシマブ（Ｆａｒｉｃｉｍａｂ）、ファルレツズマブ（Ｆａｒｌｅｔｕｚｕｍａｂ）、ＦＢＴＡ０５、フィクラツズマブ（Ｆｉｃｌａｔｕｚｕｍａｂ）、フィギツムマブ（Ｆｉｇｉｔｕｍｕｍａｂ）、フランボツマブ（Ｆｌａｎｖｏｔｕｍａｂ）、フロテツズマブ（Ｆｌｏｔｅｔｕｚｕｍａｂ）、フツキシマブ（Ｆｕｔｕｘｉｍａｂ）、ガリキシマブ（Ｇａｌｉｘｉｍａｂ）、ガンコタマブ（Ｇａｎｃｏｔａｍａｂ）、ガニツマブ（Ｇａｎｉｔｕｍａｂ）、ガチポツズマブ（Ｇａｔｉｐｏｔｏｚｕｍａｂ）、ゲムツズマブオゾガマイシン（Ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ）、ギレンツキシマブ（Ｇｉｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ）、グレムバツムマブベドチン（Ｇｌｅｍｂａｔｕｍｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ＩＢＩ３０８、イブリツモマブチウキセタン（Ｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂ ｔｉｕｘｅｔａｎ）、イクルクマブ（Ｉｃｒｕｃｕｍａｂ）、イラダツズマブベドチン（Ｉｌａｄａｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ＩＭＡＢ３６２、イマルマブ（Ｉｍａｌｕｍａｂ）、イムガツズマブ（Ｉｍｇａｔｕｚｕｍａｂ）、インダツキシマブラブタンシン（Ｉｎｄａｔｕｘｉｍａｂ ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、インデュサツマブベドチン（Ｉｎｄｕｓａｔｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、イネビリズマブ（Ｉｎｅｂｉｌｉｚｕｍａｂ）、インテツムマブ（Ｉｎｔｅｔｕｍｕｍａｂ）、イピリムマブ（Ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ）、イラツムマブ（Ｉｒａｔｕｍｕｍａｂ）、イサツキシマブ（Ｉｓａｔｕｘｉｍａｂ）、イスチラツマブ（Ｉｓｔｉｒａｔｕｍａｂ）、ラベツズマブ（Ｌａｂｅｔｕｚｕｍａｂ）、ラクノツズマブ（Ｌａｃｎｏｔｕｚｕｍａｂ）、ラディラツズマブベドチン（Ｌａｄｉｒａｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、レンジルマブ（Ｌｅｎｚｉｌｕｍａｂ）、レキサツムマブ（Ｌｅｘａｔｕｍｕｍａｂ）、リファスツズマブベドチン（Ｌｉｆａｓｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ロンカスツキシマブテシリン（Ｌｏｎｃａｓｔｕｘｉｍａｂ ｔｅｓｉｒｉｎｅ）、ロサツキシズマブベドチン（Ｌｏｓａｔｕｘｉｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、リロトマブサテトラキセタン（Ｌｉｌｏｔｏｍａｂ ｓａｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、リンツズマブ（Ｌｉｎｔｕｚｕｍａｂ）、リリルマブ（Ｌｉｒｉｌｕｍａｂ）、ロルボツズマブメルタンシン（Ｌｏｒｖｏｔｕｚｕｍａｂ ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、ルカツムマブ（Ｌｕｃａｔｕｍｕｍａｂ）、ルミリキシマブ（Ｌｕｍｉｌｉｘｉｍａｂ）、ルムレツズマブ（Ｌｕｍｒｅｔｕｚｕｍａｂ）、ＭＡＢｐ１、マパツムマブ（Ｍａｐａｔｕｍｕｍａｂ）、マルジェツキシマブ（Ｍａｒｇｅｔｕｘｉｍａｂ）、マツズマブ（Ｍａｔｕｚｕｍａ）、ミラツズマブ（Ｍｉｌａｔｕｚｕｍａｂ）、ミルベツキシマブソラブタンシン（Ｍｉｒｖｅｔｕｘｉｍａｂ ｓｏｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、ミツモマブ（Ｍｉｔｕｍｏｍａｂ）、モドツキシマブ（Ｍｏｄｏｔｕｘｉｍａｂ）、モガムリズマブ（Ｍｏｇａｍｕｌｉｚｕｍａｂ）、モナリズマブ（Ｍｏｎａｌｉｚｕｍａｂ）、モスネツズマブ（Ｍｏｓｕｎｅｔｕｚｕｍａｂ）、モキセツモマブパスドトックス（Ｍｏｘｅｔｕｍｏｍａｂ ｐａｓｕｄｏｔｏｘ）、ナコロマブタフェナトックス（Ｎａｃｏｌｏｍａｂ ｔａｆｅｎａｔｏｘ）、ナプツモマブエスタフェナトクス（Ｎａｐｔｕｍｏｍａｂ ｅｓｔａｆｅｎａｔｏｘ）、ナルナツマブ（Ｎａｒｎａｔｕｍａｂ）、ナビシキシズマブ（Ｎａｖｉｃｉｘｉｚｕｍａｂ）、ナキシタマブ（Ｎａｘｉｔａｍａｂ）、ネシツムマブ（Ｎｅｃｉｔｕｍｕｍａｂ）、ネスバクマブ（Ｎｅｓｖａｃｕｍａｂ）、ニモツズマブ（Ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ）、ニボルマブ（Ｎｉｖｏｌｕｍａｂ）、ノフェツモマブメルペンタン（Ｎｏｆｅｔｕｍｏｍａｂ ｍｅｒｐｅｎｔａｎ）、オビヌツズマブ（Ｏｂｉｎｕｔｕｚｕｍａｂ）、オカラツズマブ（Ｏｃａｒａｔｕｚｕｍａｂ）、オファツムマブ（Ｏｆａｔｕｍｕｍａｂ）、オララツマブ（Ｏｌａｒａｔｕｍａｂ）、オレクルマブ（Ｏｌｅｃｌｕｍａｂ）、オナルツズマブ（Ｏｎａｒｔｕｚｕｍａｂ）、オンツキシズマブ（Ｏｎｔｕｘｉｚｕｍａｂ）、オポルツズマブモナトクス（Ｏｐｏｒｔｕｚｕｍａｂ ｍｏｎａｔｏｘ）、オレゴボマブ（Ｏｒｅｇｏｖｏｍａｂ）、オトレルツズマブ（Ｏｔｌｅｒｔｕｚｕｍａｂ）、パムレブルマブ（Ｐａｍｒｅｖｌｕｍａｂ）、パニツムマブ（Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ）、パンコマブ（Ｐａｎｋｏｍａｂ）、パルサツズマブ（Ｐａｒｓａｔｕｚｕｍａｂ）、パソツキシズマブ（Ｐａｓｏｔｕｘｉｚｕｍａｂ）、パトリツマブ（Ｐａｔｒｉｔｕｍａｂ）、ＰＤＲ００１、ペムブロリズマブ（Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ）、ペムツモマブ（Ｐｅｍｔｕｍｏｍａｂ）、ペルツズマブ（Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ）、ピジリズマブ（Ｐｉｄｉｌｉｚｕｍａｂ）、ピナツズマブベドチン（Ｐｉｎａｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ポラツズマブベドチン（Ｐｏｌａｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、プリツムマブ（Ｐｒｉｔｕｍｕｍａｂ）、ラコツモマブ（Ｒａｃｏｔｕｍｏｍａｂ）、ラドレツマブ（Ｒａｄｒｅｔｕｍａｂ）、ラムシルマブ（Ｒａｍｕｃｉｒｕｍａｂ）、リロツムマブ（Ｒｉｌｏｔｕｍｕｍａｂ）、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉａｍａｂ）、ロバツムマブ（Ｒｏｂａｔｕｍｕｍａｂ）、ロスマンツズマブ（Ｒｏｓｍａｎｔｕｚｕｍａｂ）、ロバルピツズマブテシリン（Ｒｏｖａｌｐｉｔｕｚｕｍａｂ ｔｅｓｉｒｉｎｅ）、サシツズマブゴビテカン（Ｓａｃｉｔｕｚｕｍａｂ ｇｏｖｉｔｅｃａｎ）、サマリズマブ（Ｓａｍａｌｉｚｕｍａｂ）、サムロタマブベドチン（Ｓａｍｒｏｔａｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、セリバンツマブ（Ｓｅｒｉｂａｎｔｕｍａｂ）、シブロツズマブ（Ｓｉｂｒｏｔｕｚｕｍａｂ）、ＳＧＮ－ＣＤ１９Ａ、シルツキシマブ（Ｓｉｌｔｕｘｉｍａｂ）、シルトラツマブベドチン（Ｓｉｒｔｒａｔｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ソフィツズマブベドチン（Ｓｏｆｉｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ソリトマブ（Ｓｏｌｉｔｏｍａｂ）、スパルタリズマブ（Ｓｐａｒｔａｌｉｚｕｍａｂ）、タバルマブ（Ｔａｂａｌｕｍａｂ）、タカツズマブテトラキセタン（Ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、タピツムマブパプトクス（Ｔａｐｉｔｕｍｕｍａｂ ｐａｐｔｏｘ）、タレクスツマブ（Ｔａｒｅｘｔｕｍａｂ）、タボリマブ（Ｔａｖｏｌｉｍａｂ）、テリソツズマブベドチン（Ｔｅｌｉｓｏｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、テナツモマブ（Ｔｅｎａｔｕｍｏｍａｂ）、テポチジマブ（Ｔｅｐｏｔｉｄｉｍａｂ）、テツロマブ（Ｔｅｔｕｌｏｍａｂ）、ＴＧＮ１４１２、チガツズマブ（Ｔｉｇａｔｕｚｕｍａｂ）、チミグツズマブ（Ｔｉｍｉｇｕｔｕｚｕｍａｂ）、チラゴツマブ（Ｔｉｒａｇｏｔｕｍａｂ）、チスレリズマブ（Ｔｉｓｌｅｚｌｉｚｕｍａｂ）、チソツマブベドチン（Ｔｉｓｏｔｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ＴＮＸ－６５０、トムズツキシマブ（Ｔｏｍｕｚｕｔｕｘｉｍａｂ）、トベツマブ（Ｔｏｖｅｔｕｍａｂ）、トラスツズマブ（Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）、トラスツズマブエムタンシン（Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ ｅｍｔａｎｓｉｎｅ
）、ＴＲＢＳ０７、トレメリムマブ（Ｔｒｅｍｅｌｉｍｕｍａｂ）、ツコツズマブセルモロイキン（Ｔｕｃｏｔｕｚｕｍａｂ ｃｅｌｍｏｌｅｕｋｉｎ）、ウブリツキシマブ（Ｕｂｌｉｔｕｘｉｍａｂ）、ウロクプルマブ（Ｕｌｏｃｕｐｌｕｍａｂ）、ウレルマブ（ＵＲｅｌｕｍａｂ）、ウトミルマブ（Ｕｔｏｍｉｌｕｍａｂ）、バダスツキシマブタリリン（Ｖａｄａｓｔｕｘｉｍａｂ ｔａｌｉｒｉｎｅ）、バンドルツズマブベドチン（Ｖａｎｄｏｒｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、バンチクツマブ（Ｖａｎｔｉｃｔｕｍａｂ）、バヌシズマブ（Ｖａｎｕｃｉｚｕｍａｂ）、バリサクマブ（Ｖａｒｉｓａｃｕｍａｂ）、バルリルマブ（Ｖａｒｌｉｌｕｍａｂ）、ベルツズマブ（Ｖｅｌｔｕｚｕｍａｂ）、ベセンクマブ（Ｖｅｓｅｎｃｕｍａｂ）、ボロシキシマブ（Ｖｏｌｏｃｉｘｉｍａｂ）、ボンレロリズマブ（Ｖｏｎｌｅｒｏｌｉｚｕｍａｂ）、ボルセツズマブマフォドチン（Ｖｏｒｓｅｔｕｚｕｍａｂ ｍａｆｏｄｏｔｉｎ）、ボツムマブ（Ｖｏｔｕｍｕｍａｂ）、ＸＭＡＢ－５５７４、ザルツムマブ（Ｚａｌｕｔｕｍｕｍａｂ）、ザツキシマブ（Ｚａｔｕｘｉｍａｂ）、ゼノクツズマブ（Ｚｅｎｏｃｕｔｕｚｕｍａｂ）、ゾルベツキシマブ（Ｚｏｌｂｅｔｕｘｉｍａｂ）、またはトシツモマブである。別の態様では、モノクローナル抗体を使用して、進行性悪性疾患および非ホジキンリンパ腫などのリンパ腫ならびに神経芽腫、肉腫、転移性脳がん、卵巣がん、前立腺がん、トリプルネガティブ乳がんを含む乳がん、リンパ腫、非小細胞肺癌、胃がん、胃食道接合部腺癌、血液がん、黒色腫、扁平上皮癌、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、膵臓がん、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、肝細胞癌、結腸直腸がん、血管肉腫、頭頚部がん、卵巣がん、固形腫瘍、多発性骨髄腫、神経膠芽腫、精巣がん、Ｂ細胞悪性疾患、尿路上皮がん（urotnelial cancer）、慢性リンパ球性白血病、副腎皮質癌、急性骨髄性白血病、腎明細胞癌、慢性骨髄単球性白血病、若年性骨髄単球性白血病、小細胞肺癌、ヘアリー細胞白血病、腎細胞癌、上咽頭がん、神経膠腫、慢性リンパ性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、および他のがんを処置することができる。

【0092】

一態様では、抗がん剤は、光増感剤である。光増感剤を光と分子酸素とを併せて使用して、細胞死を誘引する。一態様では、本明細書に開示される組成物は光増感剤を含む。理論に拘束されることを望むものではないが、まず、光増感剤は、その光増感剤が処置される組織において臨界濃度に達するまで、光の非存在下で投与される。その後、光増感剤は、付近の健康な組織への損傷を最小限にしながら、光増感剤を活性化するのに十分なレベルの光に曝露することによって活性化される。さらなる態様では、頭頚部、肺、膀胱、および皮膚（カポジ肉腫および皮膚の非黒色腫皮膚がんを含む）の悪性がん、転移性乳がん、消化管のがん、ならびに膀胱がんは、光増感剤に特に感受性であり得る。一態様では、光増感剤は、ポルフィリン、塩素、または色素であってもよい。別の態様では、光増感剤は、５－アミノレブリン酸（Ｌｅｖｕｌａｎ）、シリコンフタロシアニンＰｃ ４、ナフタロシアニン、メタロ－ナフタロシアニン、スズ（ＩＶ）プルプリン、銅オクタエチルベンゾクロリン、亜鉛（ＩＩ）プルプリン、ｍ－テトラヒドロキシフェニルクロリン、モノ－Ｌ－アスパルチルクロリンｅ６、Ａｌｌｕｍｅｒａ、Ｐｈｏｔｏｆｒｉｎ、Ｖｉｓｕｄｙｎｅ（Ｖｅｒｔｅｐｏｒｆｉｎ）、Ｆｏｓｃａｎ、Ｍｅｔｖｉｘ、Ｈｅｘｖｉｘ、Ｃｙｓｖｉｅｗ、Ｌａｓｅｒｐｈｙｒｉｎ、Ａｎｔｒｉｎ、Ｐｈｏｔｏｃｈｌｏｒ、Ｐｈｏｔｏｓｅｎｓ、Ｐｈｏｔｒｅｘ、Ｐｕｒｌｙｔｉｎ、Ｌｕｔｅｘ、Ｌｕｍａｃａｎ、Ｃｅｖｉｒａ、Ｖｉｓｏｎａｃ、ＢＦ－２００ ＡＬＡ、Ａｍｐｈｉｎｅｚ、アザジピロメテン、亜鉛フタロシアニン、または別の光増感剤である。

【0093】

一態様では、抗がん剤は、プロテインキナーゼ阻害剤である。プロテインキナーゼ阻害剤は、１種または複数のプロテインキナーゼの作用を遮断する。プロテインキナーゼは、ある特定のタイプのがんにおいて過剰発現される場合がある。一部の態様では、本明細書に開示される組成物は、１種または複数のプロテインキナーゼ阻害剤を含む。さらなる態様では、プロテインキナーゼ阻害剤は、アファチニブ（afatanib）、アキシチニブ、ボスチニブ、セツキシマブ、コビメチニブ、クリゾチニブ、カボザニチニブ、ダサチニブ、エヌトレクチニブ、エルロチニブ、フォスタマチニブ、ゲフィチニブ、イブルチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、レンバチニブ、ムブリチニブ、ニロチニブ、パゾパニブ、ペガプタニブ、ルキソリチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、ＳＵ６６５６、バンデタニブ、ベムラフェニブ、または別のプロテインキナーゼ阻害剤であってもよい。一部の態様では、プロテインキナーゼ阻害剤は、非小細胞肺がん、腎細胞癌、慢性骨髄性白血病（chronic myolegenous leukemia）、進行性黒色腫、転移性甲状腺髄様がん、神経芽腫（neruoblastoma）、結腸直腸がん、乳がん、甲状腺がん、腎がん、骨髄線維症、腎細胞癌、または消化管間質腫瘍に対して特に有用である。

【0094】

一態様では、抗がん剤は、ｐ－糖タンパク質阻害剤であってもよい。ｐ－糖タンパク質は、無差別な薬物排出ポンプであり、腫瘍部位において薬物のバイオアベイラビリティーを低下させ得る。理論に拘束されることを望むものではないが、ｐ－糖タンパク質阻害剤は、抗がん剤の細胞内蓄積を増強することができる。一態様では、このことは、ｐ－糖タンパク質輸送体に結合し、抗がん剤の膜貫通輸送を阻害することによって遂行され得る。膜貫通輸送体の阻害によって、抗がん剤の細胞内濃度の増加がもたらされる場合があり、最終的にその細胞傷害を増強し得る。さらなる態様では、ｐ－糖タンパク質阻害剤は、ベラパミル、シクロスポリン、タモキシフェン、カルモジュリンアンタゴニスト、デクスベラパミル、デクスニグルジピン、バルスポダール（ｖａｌｓｐｏｄａｒ）（ＰＳＣ ８３３）、ビリコダル（ｂｉｒｉｃｏｄａｒ）（ＶＸ－７１０）、タリキダル（ｔａｒｉｑｕｉｄａｒ）（ＸＲ９５７６）、ゾスキダル（ｚｏｓｕｑｕｉｄａｒ）（ＬＹ３３５９７９）、ラニキダル（ｌａｎｉｑｕｉｄａｒ）（Ｒ１０１９３３）、エラクリダル（ｅｌａｃｒｉｄａｒ）（ＧＦ１２０９１８）、チムコダル（ｔｉｍｃｏｄａｒ）（ＶＸ－８５３）、タキシフォリン、ナリンゲニン、ジオスミン、ケルセチン、ジルチアゼム、ベプリジル、ニカルジピン、ニフェジピン、フェロジピン、イスラジピン、トリフルオペラジン、クロペンチキソール、トリフルオプロマジン、フルペンチキソール、エモパミル、ガロパミル、Ｒｏ１１－２９３３、アミオダロン、クラリスロマイシン、コルヒチン、エリスロマイシン、ランソプラゾール、オメプラゾール、別のプロトンポンプインヒビター、パロキセチン、セルトラリン、キニジン、またはこれらの任意の組合せである。一態様では、ｐ－糖タンパク質阻害剤は、薬物耐性がんを処置するのに特に有効であり、併用療法の一部として含まれる。

【0095】

一態様では、抗がん剤は、オートファジー阻害剤である。オートファジーは、本明細書で使用される場合、リソソームに依存する細胞内分解のメカニズムである。オートファジーは、いくつかのプロテインキナーゼを含む複数のタンパク質に関与する。オートファジー阻害剤は、オートファジーの早期段階（すなわち、コアオートファジー機構の初期ステップに関与する経路）を標的とすることができるか、または後期段階（すなわち、リソソームの機能）を標的とすることができる。一態様では、本明細書に開示される組成物は、１種または複数のオートファジー阻害剤を含む。さらなる態様では、オートファジー阻害剤は、３－メチルアデニン、ウォルトマニン、ＬＹ２９４００２、ＰＴ２１０、ＧＳＫ－２１２６５４８、ｓｐａｕｔｉｎ－１、ＳＡＲ４０５、化合物３１、ＶＰＳ３４－ＩＮ１、ＰＩＫ－ＩＩＩ、化合物６、ＭＲＴ６８９２１、ＳＢＩ－０２０６９６５、ペプスタチンＡ、Ｅ６４ｄ、バフィロマイシンＡ１、クロミプラミン、ルカントン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、Ｌｙｓ０５、ＡＲＮ５１８７、化合物３０、または別のオートファジー阻害剤であり得る。さらなる態様では、オートファジー阻害剤は、非小細胞肺がん、慢性骨髄性白血病、転移性前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、転移性結腸直腸がん、乳がん、脳転移、再発した難治性多発性骨髄腫、神経膠芽腫多形、および他のがんを処置するのに有用であり得る。

【0096】

一態様では、抗がん剤は、放射線増感剤である。放射線増感剤は、腫瘍細胞を放射線治療に対してより感受性にする。一態様では、本明細書に開示される組成物は、１種または複数の放射線増感剤を含む。一態様では、放射線増感剤は、フルオロピリミジン、ゲムシタビン、シスプラチンなどのプラチナアナログ、ＮＢＴＸＲ３、Ｎｉｍｏｒａｌ、トランスクロセチン酸ナトリウム（ｔｒａｎｓ ｓｏｄｉｕｍ ｃｒｏｃｅｔｉｎａｔｅ）、ＮＶＸ－１０８、ミソニダゾール、メトロニダゾール、チラパザミン、または別の放射線増感剤である。理論に拘束されることを望むものではないが、放射線増感剤は、腫瘍細胞、特に放射線治療によって引き起こされたＤＮＡ損傷を有するものにおける細胞周期チェックポイントの調節を妨害する。いくつかの放射線増感剤は、ＤＮＡ鎖を架橋させ、放射線治療によって引き起こされるＤＮＡ損傷を悪化させ得る。一態様では、放射線増感剤は、四肢および胴体の壁の軟組織肉腫、肝細胞癌、前立腺がん、口腔の扁平上皮がん、頭頚部の扁平上皮癌、および神経膠芽腫に対して特に有用であり得る。

【0097】

一態様では、抗がん剤は、ＰＡＲＰ阻害剤である。ＰＡＲＰ阻害剤は、酵素であるポリＡＤＰリボースポリメラーゼに対して作用する。一態様では、本明細書に開示される組成物は、１種または複数のＰＡＲＰ阻害剤を含む。理論に拘束されることを望むものではないが、ＰＡＲＰ阻害剤は、ＰＡＲＰ活性を遮断し、ＤＮＡ損傷の修復を妨げ、また、ＰＡＲＰタンパク質をＤＮＡ損傷部位に局在化させることもでき、これがＤＮＡ複製を遮断し、よって細胞傷害性である。一態様では、ＰＡＲＰ阻害剤は、再発プラチナ感受性卵巣がん、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ２、またはＰＡＬＢ２変異を有する腫瘍、ＰＴＥＮ欠損腫瘍（例えば、ある特定の前立腺がん）、低酸素で急成長する腫瘍、卵巣上皮がん、卵管がん、原発性腹膜がん、扁平上皮細胞肺がん、血液悪性疾患、進行性または再発性の固形腫瘍、非小細胞肺がん、トリプルネガティブ乳がん、結腸直腸がん、転移性乳がんおよび卵巣がん、ならびに転移性黒色腫に対して有効である。一態様では、ＰＡＲＰ阻害剤は、ＭＫ－４８２７（ニラパリブとしても公知）、ルカパリブ、イニパリブ、タラゾパリブ、オラパリブ、ベリパリブ、ＣＥＰ ９７２２、Ｅ７０１６、ＢＧＢ２－２９０、３－アミノベンズアミド、または別のＰＡＲＰ阻害剤である。

【0098】

一態様では、抗がん剤は、インターロイキンである。インターロイキンは、典型的には白血球によって発現されるサイトカイン、またはシグナル分子である。一部の態様では、外部で合成されたインターロイキンは、がん処置として使用することができる。一態様では、本明細書に開示される組成物は、１種または複数のインターロイキンを含む。さらなる態様では、インターロイキンは、ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）（ＩＬ－２およびアルデスロイキンとしても公知）または別のインターロイキンであってもよい。理論に拘束されることを望むものではないが、インターロイキンは、キラーＴ細胞および他の免疫細胞の増殖を助長する助けとなり、それによって、被験体の免疫系の機能を増強することができる（それが腫瘍細胞の出現に関係するため）。別の態様では、インターロイキンは、腎臓がんおよび黒色腫に対して有効であり得る。

【0099】

一態様では、抗がん剤は、ｍＴＯＲ阻害剤である。ｍＴＯＲ阻害剤は、ラパマイシンの機構的標的を阻害する薬物である。ｍＴＯＲは、セリン／トレオニン特異的プロテインキナーゼであり、代謝、成長、および細胞増殖の調節にとって重要である。一態様では、本明細書に開示される組成物は、１種または複数のｍＴＯＲ阻害剤を含む。さらなる態様では、ｍＴＯＲ阻害剤は、ラパマイシン、シロリムス、テムシロリムス、エベロリムス、リダフォロリムス、デフォロリムス、ダクトリシブ、サパニセルチブ、ＡＺＤ８０５５、ＡＺＤ２０１４、または別のｍＴＯＲ阻害剤であってもよい。理論に拘束されることを望むものではないが、ｍＴＯＲ阻害剤は、Ｔ細胞の増殖、そして腫瘍血管新生に関連するプロセスを含む、様々なサイトカインによって誘導される増殖性の応答に対して作用する。一態様では、ある特定のｍＴＯＲ阻害剤は、特定の遺伝子決定基または変異を有する腫瘍に対して主に有効であり得る。ｍＴＯＲ阻害剤は、腎細胞癌、上衣下巨細胞星状細胞腫、膵臓起源の進行性神経内分泌腫瘍、進行性乳がんに対して特に有用であり得る。別の態様では、ｍＴＯＲ阻害剤は、疾患の安定化に対する単剤治療として、または多くのがん型に対する併用療法の一部として使用することができる。

【0100】

一態様では、抗がん剤は、アロマターゼ阻害剤である。アロマターゼ阻害剤は、特に閉経後の女性、高リスクの女性、およびホルモン感受性腫瘍を有する女性における乳がんおよび卵巣がんの処置および予防において有用である。一態様では、本明細書に開示される組成物は、１種または複数のアロマターゼ阻害剤を含む。理論に拘束されることを望むものではないが、アロマターゼ阻害剤は、アンドロステンジオンおよびテストステロンを含む様々な前駆体の変換を遮断する。一態様では、アロマターゼ阻害剤は、アロマターゼ酵素との永続的な結合を形成することによって作用することができる、不可逆的ステロイド阻害剤である。別の態様では、アロマターゼ阻害剤は、アロマターゼ酵素に対する基質と可逆的に競合する、非ステロイド阻害剤である。また別の態様では、アロマターゼ阻害剤の具体的作用機序は知られていない場合もある。一態様では、アロマターゼ阻害剤は、アミノグルテチミド、テストラクトン、アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、フォルメスタン、ファドロゾール、１，４，６－アンドロスタトリエン－３，１７－ジオン、４－アンドロステン，３，６，１７－トリオン、または別のアロマターゼ阻害剤であってもよい。

【0101】

一態様では、抗がん剤は、抗アンドロゲン薬である。抗アンドロゲン薬、すなわちアンドロゲン合成阻害剤は、アンドロゲンホルモンの生合成を妨げる。一態様では、本明細書に開示される組成物は、１種または複数の抗アンドロゲン薬を含む。理論に拘束されることを望むものではないが、抗アンドロゲン薬は、以下に限定されないが、コレステロールのステロイドホルモン前駆体への変換を阻害すること、またはプレグナンステロイドのアンドロゲンへの変換を阻害することを含むアンドロゲン合成経路における種々の異なるステップで作用することができる。一態様では、抗アンドロゲン薬は、アミノグルテチミド（アロマターゼ阻害剤としても作用する）、ケトコナゾール、酢酸アビラテロン、セビテロネル、または別の抗アンドロゲン薬であってもよい。

【0102】

これらの態様のいずれかにおいて、追加の抗がん剤は、エピルビシン、パクリタキセル、ドキソルビシン、ゲムシタビン、シスプラチン、メトトレキサート、５－フルオロウラシル、ベツリン酸、アムホテリシンＢ、ジアゼパム、ナイスタチン、プロポフォール、テストステロン、エストロゲン、プレドニゾロン、プレドニゾン、２，３－メルカプトプロパノール、プロゲステロン、ドセタキセル、メイタンシノイド、ＰＤ－１阻害剤、プロテインキナーゼ阻害剤、Ｐ－糖タンパク質阻害剤、オートファジー阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤、アロマターゼ阻害剤、モノクローナル抗体、光増感剤、放射線増感剤、インターロイキン、抗アンドロゲン薬、またはこれらの任意の組合せであってもよい。

【0103】

一態様では、被験体におけるがんを処置するための方法であって、以下に記載されているＰＤ－Ｌ１阻害剤と、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルとを、被験体に投与することを含む、方法が本明細書に開示される。この態様では、ＰＤ－Ｌ_１阻害剤は遊離分子であり、本明細書に記載されているＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートではない。さらなる態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ペプチド、Ｄ－ペプチド、非ペプチド小分子、または抗体であってもよい。一態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、ＰＤ－Ｌ１阻害剤の投与前、またはＰＤ－Ｌ１阻害剤の投与後、またはＰＤ－Ｌ１阻害剤と同時に投与される。

【0104】

一態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤がＤ－ペプチドである場合、これは以下の配列のうちの１つまたは複数を含んでもよい：－^ＤＡｓｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＳｅｒ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｈｒ－^ＤＡｓｐ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＰｈｅ－；－^ＤＬｙｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｌａ－^ＤＨｉｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＴｈｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｓｎ－^ＤＬｅｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＬｅｕ－^ＤＰｒｏ－；－^ＤＭｅｔ－^ＤＡｒｇ－_ＤＡｓｎ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＴｙｒ－^ＤＰｒｏ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｙｒ－^ＤＴｙｒ－、またはこれらの任意の組合せ。

【0105】

代替の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が非ペプチド小分子である場合、これは、以下の構造：

【化6】

【化7】

のうちの１つもしくは複数、またはこれらの組合せによって表される化合物を含んでもよい。

【0106】

また別の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が抗体である場合、それは、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、またはそれらの組合せから選択されてもよい。

【0107】

さらに別の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤がペプチドである場合、それは、アミノ酸配列－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｔｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｐｒｏ－Ｌｙｓ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ａｓｎ－（配列番号２５）を有するか、またはこれを組み込んでもよい。また別の態様では、アミノ酸配列は、追加のシステイン残基を組み込むことができ、よって、ジスルフィド結合を作り出すためのチオール基を提示する（すなわち、－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｔｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｐｒｏ－Ｌｙｓ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ａｓｎ－Ｃｙｓ－（配列番号２６））。

【0108】

抗がんコンジュゲート
一部の態様では、抗がん剤は、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルであるか、またはこれを含み、抗がんコンジュゲートは、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含み、抗がん薬は、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合されている。

【0109】

一態様では、抗がんコンジュゲートの各ポリマーセグメントは、２つまたはそれより多いエチレン性不飽和モノマーの重合生成物であるか、またはそれを含む。抗がんコンジュゲートのポリマーセグメントは、ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートにおけるものと同じであっても異なっていてもよい。

【0110】

一態様では、抗がんコンジュゲートのポリマーセグメントは、式ＩＶの第１のモノマー：

【化8】

（式中、Ｒ^２は水素またはメチルであり；ＸはＯまたはＮＲ^３であり、Ｒ^３は水素またはアルキル基であり；Ｌ^１は第２の切断可能なリンカーであり；Ｚは抗がん剤である）と；
Ｎ－置換メタクリルアミド、Ｎ，Ｎ－二置換アクリルアミド、メタクリル酸もしくはアクリル酸の親水性エステル、Ｎ－ビニルピロリドン、Ｎ－アクリロイルモルホリン、スルホエチルメタクリレート、アクリル酸、メタクリル酸、またはこれらの任意の組合せを含む第２のモノマーとの間の重合生成物を含む。

【0111】

また別の態様では、第２のモノマーは、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、Ｎ－［３－（Ｎ’－ジカルボキシメチル）アミノプロピル］メタクリルアミド（ＤＡＭＡ）、Ｎ－メタクリロイルグリシルフェニルアラニルロイシルグリシン－アミノマロン酸（ＭＡ－ＧＦＬＧ－ｄｉＣＯＯＨ）、Ｎ－（３－アミノプロピル）メタクリルアミド、Ｎ－（１，３－ジヒドロキシプロパン－２－イル）メタクリルアミドまたはこれらの任意の組合せであってもよい。

【0112】

この態様では、抗がん剤は、第２のリンカーＬ^１によって不飽和モノマーに連結している。第２の切断可能なリンカーは、本明細書において、側鎖リンカーとも称され、このリンカーは、ポリマー主鎖の一部ではないが主鎖に対するペンダントである。第２の切断可能なリンカーは、コンジュゲートのポリマー主鎖において、第１の切断可能なリンカーのものと同じペプチドであっても異なるペプチドであってもよい。抗がんコンジュゲートの第１の切断可能なペプチドリンカーは、ＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートにおける第１の切断可能なペプチドリンカーと同じであっても異なっていてもよい。

【0113】

これらの態様のいずれかにおいて、第１の切断可能なペプチドリンカーおよび第２の切断可能なペプチドリンカーは、以下から独立して選択され得る：－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ｎｌｅ－（配列番号１）；－Ｃｉｔ－Ｐｈｅ－（配列番号２）；－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－（配列番号３）；－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－（配列番号４）；－Ａｒｇ－Ａｒｇ－（配列番号５）；Ｖａｌ－Ｃｉｔ（配列番号６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号７）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ（配列番号８）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号９）；Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１０）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ（配列番号１１）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１２）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１３）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ（配列番号１４）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１５）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｙｒ－Ａｌａ（配列番号１６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号１７）；Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ（配列番号１８）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号１９）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２０）；Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２１）；およびＧｌｎ－Ｓｅｒ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ（配列番号２２）、ここで、Ｎｌｅはノルロイシンであり、Ｃｉｔはシトルリンであり、他のアミノ酸は、それらの標準的な三文字コードによって表される。一部の態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーは、式ＩＩＩ：
－（ＡＡ_１）－Ｋ－（ＡＡ_２）－ （ＩＩＩ）
（式中、ＡＡ_１およびＡＡ_２は、最大６個のアミノ酸を含む同じかまたは異なるアミノ酸配列であり、Ｋは、リジン、オルニチン、またはジアミンである）を有する。

【0114】

ある特定の態様では、抗がんコンジュゲートは、コンジュゲートの細胞への特異性を改善するために、それに共有結合した１つまたは複数の標的化基を有する。例えば、標的化基は、水溶性ポリマーセグメント、第１の切断可能なリンカー、またはこれらの組合せに共有結合されていてもよい。標的化基は、スペーサーを用いないアミドまたはエステル結合のいずれかによって、ポリマー主鎖に直接的に連結されていてもよく、アミノ酸またはペプチドスペーサーを介して連結されていてもよい。標的化基は、標的細胞上の特異的受容体によってアクセス可能であるべきであり、これは、大部分は、ポリマー薬物分子の幾何学の関数である。

【0115】

一態様では、標的化基は、メタクリルアミド、メタクリル酸またはＮ－メタクリロイル化（Ｎ－ｍｅｔｈａｃｒｙｌｏｙｌａｔｅｄ）アミノ酸もしくはペプチドに結合されている。例えば、上記式ＩＶを参照して、Ｚは、抗がん剤の代わりに標的化基であってもよく、抗がん剤を含有する式ＩＶを有する他のモノマーと重合されてもよい。

【0116】

標的化基として、細胞表面抗原または受容体に相補的な構造を使用することができる。一態様では、標的化基は、抗体、抗体断片、糖類、またはエピトープ結合ペプチド、またはアプタマーである。例えば、標的化基は、アミド結合によって結合した単糖、二糖、オリゴ糖またはメタクリロイル化糖のユニット、抗体、例えばＩｇＧ（ラット免疫グロブリン）もしくは抗体断片、またはトランスフェリンもしくはメラノサイト刺激ホルモン（ＭＳＨ）などのタンパク質、またはペプチドであってもよい。別の態様では、標的化基は、ガラクトサミン、フコシルアミン、ラクトース；葉酸誘導体；ホルモン、例えばＭＳＨ、セクレチン；オピエート；モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体である。一態様では、標的化基は、ＣＤ４７（卵巣癌細胞の大多数において発現される）に対して特異的なＯＶ－ＴＬ１６抗体または前立腺特異的膜抗原（ＰＭＳＡ）に対する抗体由来のＦａｂ’である。

【0117】

一部の態様では、本明細書に開示される抗がんコンジュゲートにおいて、抗がん薬は、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、プラチネート（ｐｌａｔｉｎａｔｅ）、ドキソルビシン、ゲルダナマイシン、エピルビシン、または９－アミノカンプトテシンであってもよい。一態様では、抗がん薬はエピルビシンである。一態様では、各ポリマーセグメントに結合した各抗がん剤は、同じであっても異なっていてもよい。

【0118】

一態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、式Ｖ：
Ｐ^１－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐ^２ Ｖ
で示されるように、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合によって接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含み、
ここで、抗がん薬は、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合しており、各ポリマーセグメントは、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）と式ＶＩのモノマー：

【化9】

の重合生成物を含む。

【0119】

さらなる態様では、２つのポリマーセグメント間の式Ｖのセグメントは、配列番号２４を有する。別の態様では、式ＶＩのＬ^１部分は配列番号２３を有する。別の態様では、式ＶＩのＺは、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、プラチネート、ドキソルビシン、ゲルダナマイシン、エピルビシン、または９－アミノカンプトテシンである。一態様では、抗がんコンジュゲートは、ＫＴ－１である（図２）。

【0120】

一態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、約６０ｋＤａ～約９０ｋＤａ、または約７０ｋＤａ～約８０ｋＤａ、または約６０ｋＤａ、約６５ｋＤａ、約７０ｋＤａ、約７５ｋＤａ、約８０ｋＤａ、約８５ｋＤａ、もしくは約９０ｋＤａ、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲の平均Ｍ_ｎを有する。

【0121】

別の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、約９０ｋＤａ～約１２０ｋＤａ、または約８５～約９５ｋＤａ、または約１００～約１１０ｋＤａ、または約９０ｋＤａ、約９５ｋＤａ、約１００ｋＤａ、約１０５ｋＤａ、約１１０ｋＤａ、約１１５ｋＤａ、もしくは約１２０ｋＤａ、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲の平均Ｍ_ｗを有する。

【0122】

また別の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルは、約１．０～約２、または約１～約１．５、または約１、約１．２５、約１．５、約１．７５、もしくは約２、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲の平均多分散指数（Ｍ_ｗ／Ｍ_ｎ）を有する。

【0123】

本開示の方法を使用してがんを処置および／または予防すること
別の態様では、がんは、膵臓がん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、卵巣がん（ｏｖａｒｙ ｃａｎｃｅｒ）、上咽頭がん、乳がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、結腸がん、胃腺癌、頭部がん、頸部がん、脳がん、口腔がん、咽頭がん、甲状腺がん、食道がん、胆嚢がん、肝臓がん、直腸がん、腎臓がん、子宮がん、膀胱がん、精巣がん、リンパ腫、骨髄腫、黒色腫、白血病、または不特定の固形腫瘍である。

【0124】

一態様では、本明細書に開示されるＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートおよび使用される場合、抗がんコンジュゲートは、遊離薬物と比較して延長された体循環半減期を有する。一態様では、本明細書に開示されるコンジュゲートの体循環半減期は、約２４～約４８時間であってもよく、あるいは約２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、もしくは約４８時間、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲であってもよい。一態様では、本明細書に開示されるコンジュゲートの体循環半減期は、約３３．２時間である。別の態様では、本明細書に開示される抗がんおよび／または薬物－送達コンジュゲートは、腫瘍部位に蓄積し得る。一態様では、コンジュゲートは、注射の約２０～約２８時間後、または注射の約２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、もしくは約２８時間後、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲に濃度がピークに達する。一態様では、コンジュゲートは、注射の約２４時間後に腫瘍部位の濃度がピークに達する。別の態様では、抗がんおよび／または薬物－送達コンジュゲートは、約１５０～約２５０時間、または約１５０、１７５、２００、２２５、もしくは約２５０時間、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲の期間、腫瘍部位で持続する。一態様では、コンジュゲートは、注射後約１９６時間、腫瘍部位で持続する。

【0125】

別の態様では、本明細書に開示されるＰＤ－Ｌ_１阻害剤コンジュゲートおよび使用される場合、抗がんコンジュゲートは、免疫原性細胞死（ＩＣＤ）において有効であり得る。理論に拘束されることを望むものではないが、免疫原性により瀕死の腫瘍細胞の表面に曝露されたカルレティキュリン（ＣＲＴ）が樹状細胞（ＣＤ）にシグナルを送り、抗原提示細胞（ＡＰＣ）によりファゴサイトーシスを促進する一方で、放出された高移動度群ボックス１（ＨＭＢＧ１）は、Ｔ細胞に対する抗原提示を刺激する。一態様では、本明細書に開示される抗がんおよびＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートは、ＣＲＴの有意な上方調節を誘発することができる。さらなる態様では、本明細書に開示されるＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートは、遊離薬物単独よりも多くのＴ細胞を動員することができる。またさらなる態様では、本明細書に開示されるＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートは、以下に限定されないが、腫瘍へのＴ細胞浸潤に有利に働くことを含む様々な手段によって、Ｔ細胞に依存する方式で腫瘍進行を阻害することができる。一部の態様では、ＰＤ－Ｌ１は、本明細書に開示される抗がんコンジュゲートで処置された腫瘍中で濃縮され、ＰＤ－Ｌ１阻害剤と抗がんコンジュゲートを使用する併用療法は、いずれかの化合物単独での処置よりもより有効である。さらなる態様では、抗がん剤を腫瘍に効率的に送達することによって、例えば、本明細書に開示される抗がんコンジュゲートを使用することによって、そうでなければＰＤ－Ｌ１阻害剤に対して非応答性である腫瘍細胞が、ＰＤ－Ｌ１遮断に対して感受性となり得る。

【0126】

一部の態様では、がんの有効な処置は、細胞表面のＰＤ－Ｌ１に結合することだけでなく、細胞内のＰＤ－Ｌ１を排除することにも関与する。さらなる態様では、図８Ａに示される配列（すなわち、配列番号２５）を有するＰＤ－Ｌ_１阻害剤ペプチド（ＰＤ－Ｌ_１ペプチドアンタゴニスト、ＰＰＡと略される）は、以下に記載の方法によって合成される薬物送達コンジュゲートにカップリングされ得る。一態様では、薬物送達コンジュゲートは、異なる価数で合成され得る。一態様では、価数は、約１～約１５であってもよく、または約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、もしくは約１５、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲であってもよい。一態様では、価数は約１２．６である。別の態様では、価数は、反応物の濃度を変更することによって所望の数または範囲に調整することができ、異なる価数を有するコンジュゲートは、異なる適用または異なる腫瘍タイプに好まれる場合がある。

【0127】

上記態様のいずれかにおいて、本明細書に開示されるコンジュゲートによる処置の結果として、ＰＤ－Ｌ１架橋によって駆動される特異的結合および内部移行の増強に際し、ＰＤ－Ｌ１は、標的化分解のためにリソソームによって取り込まれ、よって、ＰＤ－Ｌ１の細胞表面へのリサイクリングを妨げることができる（図１）。

【0128】

一態様では、本明細書に開示されるコンジュゲートによる腫瘍の逐次的処置は、単剤または非コンジュゲート剤による腫瘍の処置よりもより有効であり得る。一態様では、例えば、ＫＴ－１などの抗がんコンジュゲートで処置された腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１遮断治療に対してより感受性となる。さらに、この態様では、ＫＴ－１による処置後に、続いて例えば、ＰＰＡまたはＭＰＰＡなどのＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートにより腫瘍を処置することにより、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）の腫瘍浸潤が劇的に増加し、調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）に対するＣＴＬのより高い比がもたらされ得る。一部の態様では、ＫＴ－１とＭＰＰＡとの併用治療によって、腫瘍の最大１００％が低減または根絶され得る。別の態様では、本明細書に開示される抗がんおよびＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートによる治療は、既存のがんの転移を予防することができる。また別の態様では、本明細書に開示される抗がんおよびＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートによる治療は、腫瘍再発に対する耐久性免疫を確立することができる。

【0129】

本明細書に記載のコンジュゲートは、水溶性かつ生分解性である。コンジュゲートは、循環中に安定であり、長期滞留時間を有し、より良い標的化特性を有する。さらに、これらは、リンカーの切断（例えば、酵素的、加水分解的など）後に身体から排除され得る。本明細書に記載されているコンジュゲートの合成は多用途であり、循環時間および分解の速度／部位などのテーラーメイド特性を有する多種多様なポリマー構造の調製を可能にする。さらに、コンジュゲートは以下のさらなる利点を有する：（１）不安定な薬物を劣化から保護すること；（２）コンジュゲート薬物の非特異的毒性の低下；（３）標的化による標的化された部位における薬物の能動的蓄積の増加および／またはＥＰＲ効果による腫瘍部位における薬物の受動的蓄積の増加；ならびに（４）異なる（補完的な）特性を有する２つまたはそれより多い薬物を同じ標的部位に送達し、協同および／または相乗効果によって薬物の有効性を増強する能力。これらは、本明細書に記載のコンジュゲートが、抗がん剤および／または他の薬物の被験体への送達において有効である理由のほんの一部である。

【0130】

ＩＶ．薬物－送達コンジュゲートおよび抗がんコンジュゲートを合成するための方法
一態様では、本明細書に記載されているＰＤ－Ｌ１阻害剤コンジュゲートを合成するための方法が本明細書に開示される。さらなる態様では、狭い多分散性を有するコンジュゲートは、図２Ｃに示されるワンステップ可逆的付加－開裂連鎖移動（ＲＡＦＴ）重合を使用して合成することができる。一態様では、例えば、ＨＰＭＡおよびＡＰＭＡなどの好適なモノマーなどは、連鎖移動剤で終了する好適な切断可能なペプチドリンカーを含む水性酸性溶液中で、高温で開始剤により還流され得る。一態様では、ペプチドＧＦＬＧＫＧＬＦＧ（すなわち、配列番号２４）は、リンカーであり得る。一態様では、高温は、約５０～約９０℃であるか、あるいは約５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、もしくは約９０℃、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲である。一態様では、高温は約７０℃である。さらなる態様では、酸性水溶液中での還流後に、第２の開始剤を混合物に添加することができ、高温で、例えばメタノールなどの溶媒中で還流を継続させることができる。一態様では、高温は、約３５～約７５℃であるか、あるいは約３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、もしくは約７５℃、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲である。一態様では、高温は約５５℃である。

【0131】

上記態様のいずれかにおいて、ポリマー出発材料および連鎖移動剤によって終了するリンカーの還流後に、リンカーによって接続した少なくとも２つのポリマーセグメントを含有する種が形成され、ポリマーユニットの少なくとも一部は遊離アミノ基（図２Ｃの種２Ｐ－ＮＨ_２を参照されたい）を有する。一態様では、２Ｐ－ＮＨ_２は、例えばマレイミド残基を含有する前駆体などの切断可能なリンカー前駆体を含むＤＭＦ中で、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）または別の好適な塩基により、室温で還流される。さらなる態様では、この反応が完了した際に、２Ｐ－ＮＨ_２中のアミノ基が、マレイミド残基で終了する切断可能なリンカーに変換されている（図２Ｃの種２Ｐ－ｍａｌを参照されたい）。次いで、２Ｐ－ｍａｌをチオール終端ペプチドまたは他のチオール含有ＰＤ－Ｌ１阻害剤または他のチオールで改変された抗がん剤と反応させ、それによって、ＰＤ－Ｌ１阻害剤または抗がん剤を、例えばＭＰＰＡなどの分子を形成する２Ｐ－ｍａｌに連結することができる。

【0132】

別の態様では、異なる切断可能なリンカーの戦略を用いて、例えばＫＴ－１および関連する抗がんコンジュゲートなどの化合物を合成することができる（図２Ｂ）。一態様では、短いペプチドリンカーをペンダントアミノ糖部分に接続させることによって改変されたエピルビシン（図２Ｂの種ＭＡ－ＧＦＬＧ－ＥＰＩを参照されたい）は、ＨＰＭＡの存在下で、例えば、連鎖移動剤で終了する好適な切断可能なペプチドリンカーを含むメタノールなどの溶媒中で、高温で、開始剤と反応させることができる。一態様では、ペプチドＧＦＬＧＫＧＬＦＧ（すなわち、配列番号２４）はリンカーであり得る。一態様では、高温は、約２５～約５５℃であるか、あるいは約２５、３０、３５、４０、４５、５０、もしくは約５５℃、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲である。一態様では、高温は約４０℃である。さらなる態様では、酸性水溶液中での還流後に、第２の開始剤を混合物に添加することができ、高温で、例えばメタノールなどの溶媒中で還流を継続させることができる。一態様では、高温は、約３５～約７５℃であるか、あるいは約３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、もしくは約７５℃、または前述の値のいずれかの組合せ、または前述の値のいずれかを包含する範囲である。一態様では、高温は約５５℃である。

【0133】

別の態様では、例えばＨＰＭＡおよびそのモノマーに共有結合したＰＤ－Ｌ１阻害剤を有するモノマーなどの好適なモノマーを、連鎖移動剤で終了する好適な切断可能なペプチドリンカーを含む水性酸性溶液中で、高温で、開始剤と還流させ、薬物送達コンジュゲートを生成することができる。このアプローチを使用する非限定的な手順を実施例において提供する。

【0134】

上記態様のいずれかにおいて、連鎖移動剤に挟まれたペプチドは、図２Ａに示される種であってもよく、または関連する種であってもよい。

【0135】

態様
第１の態様では、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含む薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルであって、少なくとも１つのＰＤ－Ｌ１阻害剤が、各ポリマーセグメントに共有結合している、薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0136】

第２の態様では、各ポリマーセグメントが、２つまたはそれより多いエチレン性不飽和モノマーの重合生成物を含む、第１の態様に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0137】

第３の態様では、各ポリマーセグメントが、オレフィン基および第１のモノマーに結合したＰＤ－Ｌ１阻害剤を有する第１のモノマーと、Ｎ－置換メタクリルアミド、Ｎ，Ｎ－二置換アクリルアミド、メタクリル酸もしくはアクリル酸の親水性エステル、Ｎ－ビニルピロリドン、Ｎ－アクリロイルモルホリン、スルホエチルメタクリレート、アクリル酸、メタクリル酸、またはこれらの任意の組合せを含む第２のモノマーとの間の重合生成物を含む、第１または第２の態様に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、本明細書に開示される。

【0138】

第４の態様では、Ｒ^１がメチルであり、ＸがＮＨであり、ｎが１～５である、第３の態様に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0139】

第５の態様では、Ｒ^１がメチルであり、ＸがＮＨであり、ｎが３である、第３の態様に記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0140】

第６の態様では、第２のモノマーが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、Ｎ－［３－（Ｎ’－ジカルボキシメチル）アミノプロピル］メタクリルアミド（ＤＡＭＡ）、Ｎ－メタクリロイルグリシルフェニルアラニルロイシルグリシン－アミノマロン酸（ＭＡ－ＧＦＬＧ－ｄｉＣＯＯＨ）、Ｎ－（３－アミノプロピル）メタクリルアミド、Ｎ－（１，３－ジヒドロキシプロパン－２－イル）メタクリルアミドまたはこれらの任意の組合せを含む、第３から第５の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0141】

第７の態様では、第２のモノマーが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）である、第３から第５の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0142】

第８の態様では、第１の切断可能なリンカーが、酵素、ｐＨの変化、またはこれらの組合せによって切断される、第１から第７の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0143】

第９の態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーが酵素によって切断される、第１から第７の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0144】

第１０の態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーが、リソソーム酵素によって切断される、第１から第７の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0145】

第１１の態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーが、アミノ酸配列－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ｎｌｅ－（配列番号１）；－Ｃｉｔ－Ｐｈｅ－（配列番号２）；－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－（配列番号３）；－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－（配列番号４）；－Ａｒｇ－Ａｒｇ－（配列番号５）；Ｖａｌ－Ｃｉｔ（配列番号６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号７）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ（配列番号８）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号９）；Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１０）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ（配列番号１１）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１２）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１３）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ（配列番号１４）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１５）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｙｒ－Ａｌａ（配列番号１６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号１７）；Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ（配列番号１８）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号１９）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２０）；Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２１）；およびＧｌｎ－Ｓｅｒ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ（配列番号２２）を有するペプチドである、第１から第９の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0146】

第１２の態様では、第１のリンカーが、式ＩＩ
－（ＡＡ_１）－Ｋ－（ＡＡ_２）－ ＩＩ
（式中、ＡＡ_１およびＡＡ_２は、最大６個のアミノ酸を含む同じかまたは異なるアミノ酸配列であり、Ｋは、リジン、オルニチン、またはジアミンである）を有する、第１から第１１の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0147】

第１３の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、ペプチド、Ｄ－ペプチド、非ペプチド小分子、または抗体である、第１から第１２の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0148】

第１４の態様では、ＰＤ－Ｌ_１阻害剤が、アミノ酸配列－^ＤＡｓｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＳｅｒ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｈｒ－^ＤＡｓｐ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＰｈｅ－、－^ＤＬｙｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｌａ－^ＤＨｉｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＴｈｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｓｎ－^ＤＬｅｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＬｅｕ－^ＤＰｒｏ－、－^ＤＭｅｔ－^ＤＡｒｇ－_ＤＡｓｎ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＴｙｒ－^ＤＰｒｏ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｙｒ－^ＤＴｙｒ－、またはこれらの組合せを有するＤ－ペプチドである、第１から第１２の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0149】

第１５の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、

【化10】

【化11】

【化12】

またはこれらの組合せを含む非ペプチド小分子である、第１から第１２の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0150】

第１６の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、またはこれらの組合せである、第１から第１２の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0151】

第１７の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アミノ酸配列－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｔｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｐｒｏ－Ｌｙｓ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ａｓｎ－（配列番号２５）を有するペプチドである、第１から第１２の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0152】

第１８の態様では、各ＰＤ－Ｌ１阻害剤が同じ分子である、第１から第１７の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0153】

第１９の態様では、各ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、架橋剤によって各ポリマーセグメントに共有結合している、第１から第１８の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0154】

第２０の態様では、各ポリマーセグメントが、式ＩＩＩａまたはＩＩＩｂ

【化13】

（式中、Ｒ^２は水素またはメチルであり；各ｎは１～１０であり；ＣＬは架橋剤であり；ＹはＰＤ－Ｌ１阻害剤である）のユニットを１つまたは複数有する、第１から第１９の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0155】

第２１の態様では、各ポリマーセグメントが、式ＩＶ

【化14】

（式中、Ｒ^２は水素またはメチルであり；ｎは１～１０であり；ＹはＰＤ－Ｌ１阻害剤である）のユニットを１つまたは複数有する、第１から第２０の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0156】

第２２の態様では、図２のＭＰＰＡとして特定される、第１から第２１の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0157】

第２３の態様では、約６０ｋＤａ～約９０ｋＤａの平均Ｍ_ｎを有する、第１から第２３の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0158】

第２４の態様では、約７０ｋＤａ～約１００ｋＤａの平均Ｍ_ｗを有する、第１から第２３の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0159】

第２５の態様では、約１．０～約２の平均Ｍ_ｗ／Ｍ_ｎを有する、第１から第２３の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0160】

第２６の態様では、約１０～約１５の価数を有する、第１から第２３の態様のいずれか１つに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが本明細書に開示される。

【0161】

第２７の態様では、第１から第２６の態様のいずれかに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルおよび薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が本明細書に開示される。

【0162】

第２８の態様では、被験体におけるがんを処置するための方法であって、第１から第２６の態様のいずれかに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルおよび抗がん剤を被験体に投与することを含む、方法が本明細書に開示される。

【0163】

第２９の態様では、被験体におけるがんを予防するための方法であって、第１から第２６の態様のいずれかに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルおよび抗がん剤を被験体に投与することを含む、方法が本明細書に開示される。

【0164】

第３０の態様では、がんが、膵臓がん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、卵巣がん（ｏｖａｒｙ ｃａｎｃｅｒ）、上咽頭がん、乳がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、結腸がん、胃腺癌、頭部がん、頸部がん、脳がん、口腔がん、咽頭がん、甲状腺がん、食道がん、胆嚢がん、肝臓がん、直腸がん、腎臓がん、子宮がん、膀胱がん、精巣がん、リンパ腫、骨髄腫、黒色腫、白血病、または非特定の固形腫瘍である、第２８または第２９の態様に記載の方法が本明細書に開示される。

【0165】

第３１の態様では、被験体における腫瘍を低減するための方法であって、第１から第２６の態様のいずれかに記載の薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルおよび抗がん剤を被験体に投与することを含む、方法が本明細書に開示される。

【0166】

第３２の態様では、薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、抗がん剤の投与前に、被験体に投与される、第２８から第３１の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0167】

第３３の態様では、薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、抗がん剤の投与後に、被験体に投与される、第２８から第３１の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0168】

第３４の態様では、薬物送達コンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、抗がん剤の投与と同時に、被験体に投与される、第２８から第３１の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0169】

第３５の態様では、抗がん剤が、エピルビシン、パクリタキセル、ドキソルビシン、ゲムシタビン、シスプラチン、メトトレキサート、５－フルオロウラシル、ベツリン酸、アムホテリシンＢ、ジアゼパム、ナイスタチン、プロポフォール、テストステロン、エストロゲン、プレドニゾロン、プレドニゾン、２，３－メルカプトプロパノール、プロゲステロン、ドセタキセル、メイタンシノイド、ＰＤ－１阻害剤、プロテインキナーゼ阻害剤、Ｐ－糖タンパク質阻害剤、オートファジー阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤、アロマターゼ阻害剤、モノクローナル抗体、光増感剤、放射線増感剤、インターロイキン、抗アンドロゲン薬、またはこれらの任意の組合せを含む、第２８から第３４の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0170】

第３６の態様では、抗がん剤が、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含む抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルを含み、抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合している、第２８から第３４の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0171】

第３７の態様では、各ポリマーセグメントが、２つまたはそれより多いエチレン性不飽和モノマーの重合生成物を含む、第３６の態様に記載の方法が本明細書に開示される。

【0172】

第３８の態様では、各ポリマーセグメントが、式ＩＶの第１のモノマー

【化15】

（式中、Ｒ^２は水素またはメチルであり；ＸはＯまたはＮＲ^３であり、Ｒ^３は水素またはアルキル基であり；Ｌ^１は第２の切断可能なリンカーであり；Ｚは抗がん剤である）と、Ｎ－置換メタクリルアミド、Ｎ，Ｎ－二置換アクリルアミド、メタクリル酸もしくはアクリル酸の親水性エステル、Ｎ－ビニルピロリドン、Ｎ－アクリロイルモルホリン、スルホエチルメタクリレート、アクリル酸、メタクリル酸、またはこれらの任意の組合せを含む第２のモノマーとの間の重合生成物を含む、第３６の態様に記載の方法が本明細書に開示される。

【0173】

第３９の態様では、第２のモノマーが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、Ｎ－［３－（Ｎ’－ジカルボキシメチル）アミノプロピル］メタクリルアミド（ＤＡＭＡ）、Ｎ－メタクリロイルグリシルフェニルアラニルロイシルグリシン－アミノマロン酸（ＭＡ－ＧＦＬＧ－ｄｉＣＯＯＨ）、Ｎ－（３－アミノプロピル）メタクリルアミド、Ｎ－（１，３－ジヒドロキシプロパン－２－イル）メタクリルアミドまたはこれらの任意の組合せを含む、第３８の態様に記載の方法が本明細書に開示される。

【0174】

第４０の態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーおよび第２の切断可能なペプチドリンカーが、独立して、アミノ酸配列－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ｎｌｅ－（配列番号１）；－Ｃｉｔ－Ｐｈｅ－（配列番号２）；－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－（配列番号３）；－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－（配列番号４）；－Ａｒｇ－Ａｒｇ－（配列番号５）；Ｖａｌ－Ｃｉｔ（配列番号６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号７）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ（配列番号８）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号９）；Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１０）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ａｌａ；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ（配列番号１１）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｌａ；Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１２）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１３）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ（配列番号１４）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１５）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｙｒ－Ａｌａ（配列番号１６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号１７）；Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ（配列番号１８）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号１９）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２０）；Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２１）；およびＧｌｎ－Ｓｅｒ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ（配列番号２２）を有するペプチドである、第３６から第３９の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0175】

第４１の態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーが、式ＩＩＩ
－（ＡＡ_１）－Ｋ－（ＡＡ_２）－ （ＩＩＩ）
（式中、ＡＡ_１およびＡＡ_２は、最大６個のアミノ酸を含む同じかまたは異なるアミノ酸配列であり、Ｋは、リジン、オルニチン、またはジアミンである）を有する、第３６から第３９の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0176】

第４２の態様では、抗がん薬が、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、プラチネート、ドキソルビシン、ゲルダナマイシン、エピルビシン、または９－アミノカンプトテシンである、第３６から第４１の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0177】

第４３の態様では、各ポリマーセグメントに共有結合した各抗がん剤が同じ抗がん剤である、第３６から第４２の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0178】

第４４の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルが、式Ｖ：
Ｐ^１－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐ^２ Ｖ
に示されるように、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含み、
抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合しており、各ポリマーセグメントが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）と式ＶＩ（式中、Ｚは抗がん剤である）のモノマー：

【化16】

との重合生成物を含む、第３６から第４３の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0179】

第４５の態様では、抗がん薬が、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、プラチネート、ドキソルビシン、ゲルダナマイシン、エピルビシン、または９－アミノカンプトテシンである、第４４の態様に記載の方法が本明細書に開示される。

【0180】

第４６の態様では、抗がん薬がエピルビシンである、第４４の態様に記載の方法が本明細書に開示される。

【0181】

第４７の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルが、ＫＴ－１である、第３６から第４６の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0182】

第４８の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約６０ｋＤａ～約９０ｋＤａの平均Ｍ_ｎを有する、第３６から第４７の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0183】

第４９の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約９０ｋＤａ～約１２０ｋＤａの平均Ｍ_ｗを有する、第３６から第４７の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0184】

第５０の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約１．０～約２の平均Ｍ_ｗ／Ｍ_ｎを有する、第３６から第４７の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0185】

第５１の態様では、被験体におけるがんを処置するための方法であって、ＰＤ－１阻害剤と、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含む抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルとを、被験体に投与することを含み、抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合している、方法が本明細書に開示される。

【0186】

第５２の態様では、被験体におけるがんを予防するための方法であって、ＰＤ－Ｌ１阻害剤と、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含む抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルとを、被験体に投与することを含み、抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合している、方法が本明細書に開示される。

【0187】

第５３の態様では、被験体における腫瘍を低減するための方法であって、ＰＤ－Ｌ１阻害剤と、単一の第１の切断可能なペプチドリンカーによって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含む抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルとを、被験体に投与することを含み、抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合している、方法が本明細書に開示される。

【0188】

第５４の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、ペプチド、Ｄ－ペプチド、非ペプチド小分子、または抗体である、第５１から第５３の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0189】

第５５の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アミノ酸配列－^ＤＡｓｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＳｅｒ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｈｒ－^ＤＡｓｐ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｎ－^ＤＴｙｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＰｈｅ－、－^ＤＬｙｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｌａ－^ＤＨｉｓ－^ＤＨｉｓ－^ＤＴｈｒ－^ＤＨｉｓ－^ＤＡｓｎ－^ＤＬｅｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＬｅｕ－^ＤＰｒｏ－、－^ＤＭｅｔ－^ＤＡｒｇ－_ＤＡｓｎ－^ＤＡｒｇ－^ＤＧｌｕ－^ＤＡｒｇ－^ＤＴｙｒ－^ＤＰｒｏ－^ＤＬｙｓ－^ＤＰｒｏ－^ＤＴｙｒ－^ＤＴｙｒ－、またはこれらの組合せを有するＤ－ペプチドである、第５１から第５３の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0190】

第５６の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、

【化17】

【化18】

またはこれらの組合せを含む非ペプチド小分子である、第５１から第５３の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0191】

第５７の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、またはこれらの組合せである、第５１から第５３の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0192】

第５８の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、アミノ酸配列－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｔｙｒ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｐｒｏ－Ｌｙｓ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ａｓｎ－（配列番号２５）を有するペプチドである、第５１から第５３の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0193】

第５９の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、ＰＤ－Ｌ１阻害剤の投与前に、被験体に投与される、第５１から第５３の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0194】

第６０の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、ＰＤ－Ｌ_１阻害剤の投与後に、被験体に投与される、第５１から第５３の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0195】

第６１の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、ＰＤ－Ｌ１阻害剤の投与と同時に、被験体に投与される、第５１から第５３の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0196】

第６２の態様では、各ポリマーセグメントが、２つまたはそれより多いエチレン性不飽和モノマーの重合生成物を含む、第５１から第６１の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0197】

第６３の態様では、各ポリマーセグメントが、式ＩＶの第１のモノマー

【化19】

（式中、Ｒ^１は水素またはメチルであり；ＸはＯまたはＮＲ^２であり、Ｒ^２は水素またはアルキル基であり；Ｌ^１は第２の切断可能なリンカーであり；Ｚは抗がん剤である）と、Ｎ－置換メタクリルアミド、Ｎ，Ｎ－二置換アクリルアミド、メタクリル酸もしくはアクリル酸の親水性エステル、Ｎ－ビニルピロリドン、Ｎ－アクリロイルモルホリン、スルホエチルメタクリレート、アクリル酸、メタクリル酸、またはこれらの任意の組合せを含む第２のモノマーとの間の重合生成物を含む、第６２の態様に記載の方法が本明細書に開示される。

【0198】

第６４の態様では、第２のモノマーが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、Ｎ－［３－（Ｎ’－ジカルボキシメチル）アミノプロピル］メタクリルアミド（ＤＡＭＡ）、Ｎ－メタクリロイルグリシルフェニルアラニルロイシルグリシン－アミノマロン酸（ＭＡ－ＧＦＬＧ－ｄｉＣＯＯＨ）、Ｎ－（３－アミノプロピル）メタクリルアミド、Ｎ－（１，３－ジヒドロキシプロパン－２－イル）メタクリルアミドまたはこれらの任意の組合せを含む、第６３の態様に記載の方法が本明細書に開示される。

【0199】

第６５の態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーおよび第２の切断可能なペプチドリンカーが、独立して、アミノ酸配列－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ｎｌｅ－（配列番号１）；－Ｃｉｔ－Ｐｈｅ－（配列番号２）；－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－（配列番号３）；－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－（配列番号４）；－Ａｒｇ－Ａｒｇ－（配列番号５）；Ｖａｌ－Ｃｉｔ（配列番号６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号７）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ（配列番号８）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号９）；Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１０）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ａｌａ；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ（配列番号１１）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ａｌａ；Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａ（配列番号１２）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１３）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ（配列番号１４）；Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号１５）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｙｒ－Ａｌａ（配列番号１６）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号１７）；Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ（配列番号１８）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ（配列番号１９）；Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２０）；Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ（配列番号２１）；およびＧｌｎ－Ｓｅｒ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ（配列番号２２）を有するペプチドである、第５１から第６４の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0200】

第６６の態様では、第１の切断可能なペプチドリンカーが、式ＩＩＩ
－（ＡＡ_１）－Ｋ－（ＡＡ_２）－ ＩＩＩ
（式中、ＡＡ_１およびＡＡ_２は、最大６個のアミノ酸を含む同じかまたは異なるアミノ酸配列であり、Ｋは、リジン、オルニチン、またはジアミンである）を有する、第５１から第６４の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0201】

第６７の態様では、抗がん薬が、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、プラチネート、ドキソルビシン、ゲルダナマイシン、エピルビシン、または９－アミノカンプトテシンである、第５１から第６６の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0202】

第６８の態様では、各ポリマーセグメントに共有結合した各抗がん剤が同じ抗がん剤である、第５１から第６６の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0203】

第６９の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルが、式Ｉに示される単一の第１の切断可能なペプチドリンカー、
Ｐ^１－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｐ^２ Ｖ
によって互いに共有結合的に接続された２つのポリマーセグメントＰ^１およびＰ^２を含み、
抗がん薬が、第２の切断可能なペプチドリンカーによって各ポリマーセグメントに共有結合しており、各ポリマーセグメントが、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）と式ＶＩ（式中、Ｚは抗がん剤である）のモノマー：

【化20】

との重合生成物を含む、第５１から第６６の態様のいずれか１つに記載の方法。

【0204】

第７０の態様では、抗がん薬が、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、プラチネート、ドキソルビシン、ゲルダナマイシン、エピルビシン、または９－アミノカンプトテシンである、第６９の態様に記載の方法が本明細書に開示される。

【0205】

第７１の態様では、抗がん薬がエピルビシンである、第６９の態様に記載の方法が本明細書に開示される。

【0206】

第７２の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容されるその塩もしくはエステルが、ＫＴ－１である、第５１から第６６の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0207】

第７３の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約６０ｋＤａ～約９０ｋＤａの平均Ｍ_ｎを有する、第５１から第７２の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0208】

第７４の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約９０ｋＤａ～約１２０ｋＤａの平均Ｍ_ｗを有する、第５１から第７２の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【0209】

第７５の態様では、抗がんコンジュゲートまたは薬学的に許容される塩もしくはエステルが、約１．０～約２の平均Ｍ_ｗ／Ｍ_ｎを有する、第５１から第７２の態様のいずれかに記載の方法が本明細書に開示される。

【実施例】

【0210】

以下の実施例は、本明細書において記載および特許請求される化合物、組成物、および方法が、どのように作り出され、評価されるかの完全な開示および説明を、当業者に提供するために示され、ならびに単に例示的であることが意図され、本発明者らが自らの発明とみなすものの範囲を限定することを意図しない。数（例えば、量、温度など）に関して正確性を確保するための努力がなされているが、いくらかの誤差および逸脱は考慮されるべきである。別段に示されていなければ、部は重量部であり、温度は℃におけるものであるかまたは周囲温度であり、圧力は大気圧であるかまたはそれに近い。反応条件、例えば、構成成分の濃度、所望の溶媒、溶媒混合物、温度、圧力、ならびに他の反応範囲および条件の多数の変動および組合せを使用して、記載されたプロセスから得られる生成物の純度および収量を最適化することができる。このようなプロセスおよび条件を最適化するために、合理的かつ日常的な実験のみが必要とされるであろう。

【0211】

（実施例１：ＭＰＰＡの合成および特徴付け）
ＰＤ－Ｌ１ペプチドアンタゴニストであるＰＰＡの複数のコピーをグラフトさせた主鎖－分解性ＨＰＭＡコポリマーである、ＭＰＰＡを、図２に示されるチオール－エン反応によって調製した。簡単に述べると、Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ戦略およびＰＳ３ペプチド合成機での固相合成方法を使用して、ＰＰＡ（ＮＹＳＫＰＴＤＲＱＹＨＦ）を合成した。配列にＮ末端システイン残基を付加して、次のバイオコンジュゲーションのためのチオール残基でタグ付けしたペプチド（ＰＰＡ－Ｃｙｓ）を得た。ペプチド構造をＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ質量分析によって検証し（ＰＰＡ－Ｃｙｓ；計算値１６５９．７Ｄａ、実測値１６５９．７Ｄａ）、ペプチドの純度を分析的ＲＰ－ＨＰＬＣを用いて検証した。ペンダントアミノ基（２Ｐ－ＮＨ_２）を含有するＨＰＭＡコポリマー前駆体を、二官能連鎖移動剤ＣＴＡ－ＧＦＬＧＫＧＬＦＧＣＴＡを使用して、ＨＰＭＡのＮ－（３－アミノプロピル）メタクリルアミド（ＡＰＭＡ）とのＲＡＦＴ共重合によって調製した。ジチオベンゾエートポリマーの末端基を、５５℃でメタノール中の過剰量のＶ－６５を使用して、ラジカル誘導された末端修飾によって除去した。アセトン中への沈殿および濾過の後に、白い粉末を得て、その後、水に対する透析（ＭＷＣＯ ６，０００～８，０００）を１６時間かけて行い、凍結乾燥させた。次いで、マレイミド官能化ポリマー前駆体（２Ｐ－ｍａｌ）を、ジメチルホルムアミド中、第三級アミン（ＤＩＰＥＡ）の存在下で、室温で２時間の、２Ｐ－ＮＨ_２の、ヘテロ二官能性試薬であるスクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（ＳＭＣＣ）との反応（［ＮＨ_２］：［ＳＭＣＣ］：［ＤＩＰＥＡ］＝１：１．５：３のモル比）によって得た。前駆体のマレイミド含量は、改変エルマンアッセイによって測定した場合、鎖当たり２２分子のマレイミド基であった。ＰＰＡコンジュゲーションは、ＰＰＡ－Ｃｙｓを、ＰＰＡ－Ｃｙｓのマレイミドに対するモル比１：１で、２Ｐ－ｍａｌに結合させることによって達成し、多価ポリマー－ペプチドアンタゴニストであるＭＰＰＡを生成した。反応は、１０ｍＭのＰＢＳ（ｐＨ６．５）中で実施し、室温で３時間撹拌し続けた。終了時に、未反応のＰＰＡ－Ｃｙｓを、限外濾過（３０，０００Ｄａのカットオフ）によって除去し、ＤＩ水で４回洗浄し、凍結乾燥させた。コンジュゲートの平均分子量および多分散性は、移動相として３０％のアセトニトリルを含有する酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．５）を含むＳｕｐｅｒｏｓｅ ６ ＨＲ１０／３０カラムを使用して、ＵＶ検出器（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、ｍｉｎｉＤＡＷＮ ＴＲＥＯＳおよびＯｐｔｉｌａｂｒＥＸ（屈折率、ＲＩ）検出器（Ｗｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を備えたＡＫＴＡ ＦＰＬＣシステムで、ＳＥＣによって決定した。ＭＰＰＡ中のＰＰＡの含量を、ビシンコニン酸（ＢＣＡ）タンパク質アッセイ（Ｐｉｅｒｃｅ）を使用して決定した。

【0212】

（実施例２：ＫＴ－１は薬物送達を増強し、免疫原性細胞死を誘発する）
狭い多分散性を有する分解性ジブロックＨＰＭＡコポリマー－ＥＰＩコンジュゲートであるＫＴ－１を、ワンステップ可逆的付加－開裂連鎖移動（ＲＡＦＴ）重合によって合成し、図２ＢおよびYang et al., J. Controlled Release, 218 (2015) 36-44において提供された技法において特徴付けた。ＫＴ－１は、腫瘍中で長期間保持される。図３Ａに示されるように、ＥＰＩと類似する分子量および疎水性を有するモデル蛍光トレーサーである、シアニン５（Ｃｙ５）は、腫瘍から迅速に排除され、注射の２時間後にはほとんど検出されなかった。対照的に、ＫＴ－１－Ｃｙ５は、腫瘍部位に大いに蓄積し、２４時間でピークに達し、少なくとも１９６時間持続した。結果として、ＫＴ－１は、ｉｎ ｖｉｖｏにおける腫瘍細胞のＥＰＩ取込みを大幅に増強した（図３Ｂ）。

【0213】

ＫＴ－１の腫瘍標的化送達が示されたため、カルレティキュリン（ＣＲＴ）発現と高移動度群ボックス１（ＨＭＧＢ１）放出が関与するＩＣＤの誘導へのＫＴ－１の影響を調査した。免疫原性により瀕死の腫瘍細胞の表面に曝露されたＣＲＴは、樹状細胞（ＤＣ）に「イートミー（ｅａｔ ｍｅ）」シグナルを送り、抗原提示細胞（ＡＰＣ）によるファゴサイトーシスを促進する一方で、放出されたＨＭＧＢ１は、「危険」シグナルとして機能し、Ｔ細胞への最適な抗原提示を刺激する。ＫＴ－１は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで、表面ＣＲＴの有意な上方調節を誘発し（図３Ｃ）、これは、ＥＰＩの細胞内送達によっては誘導されたが、ポリマー主鎖によっては誘導されなかった（図４）。図３Ｄ～Ｅでは、非免疫原性４Ｔ１腫瘍を担持するＢＡＬＢ／ｃマウスに、食塩水、ＥＰＩまたはＫＴ－１による２回の静脈内用量（腫瘍移植後７日目および１４日目に）の処置（１回目のＥＰＩ等価用量は１０ｍｇ／ｋｇ、その後の２回目の用量は５ｍｇ／ｋｇ）を与えた。１５日目の解析によって、ＫＴ_－１処置が、遊離ＥＰＩと比較した場合、４Ｔ１細胞におけるＣＲＴ発現（図３Ｄ）とＨＭＧＢ１の腫瘍内放出（図３Ｅ）を増強したことが明らかとなり、このことは、ｉｎ ｖｉｖｏでのＫＴ－１のより多くの腫瘍蓄積に対応する。

【0214】

腫瘍内の変化に加えて、１５日目に腫瘍流入領域リンパ節（ＴＤＬＮ）を解析すると、ＫＴ－１は、ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６ｃ＋細胞の分化をＣＤ１１ｃ＋ＣＤ８６＋炎症性ＤＣ様表現型へと歪め（図３Ｆ）、その結果、腫瘍細胞抗原を捕捉および提示するのに特に効率的なＡＰＣのサブセットであるＣＤ１１ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６ｃ＋ＣＤ８６＋の有意により高い出現頻度をもたらした（図３Ｇ）。このことは、腫瘍においてＩＣＤに関連するシグナルを効率的に誘発した結果であり得る。比較すると、ＥＰＩはより多くのＬｙ６ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋細胞を誘引したが、ＣＤ１１ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６ｃ＋ ＤＣのサブセットを生成することはできなかった。その代わりに、ＥＰＩは、腫瘍抗原提示があまり効率的ではない顆粒球（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６ｃ－）の集団を増加させた。結果として、ＫＴ_－１は、遊離ＥＰＩよりも大いにより高い出現頻度のＣＤ８＋ Ｔ細胞を腫瘍床へと動員した（図３Ｈ）。

【0215】

（実施例３：ＫＴ－１は、ＣＤ８＋ Ｔ細胞依存性腫瘍阻害および腫瘍ＰＤ－Ｌ_１発現における適応性増加を誘発する）
ＢＡＬＢ／ｃマウスに、４Ｔ１細胞を接種し、食塩水、ＥＰＩおよびＫＴ－１（１回目のＥＰＩ等価用量は１０ｍｇ／ｋｇ、その後の２回の用量は５ｍｇ／ｋｇ）による３回の週に１回の処置を与えた。図５Ａ～Ｂおよび６に示されるように、食塩水処置したマウスのすべてが、爆発的な腫瘍成長を経験し、急速に死亡した。この用量のＥＰＩは、腫瘍の制御と生存の延長に限定的な効果を有した。注意すべきことは、ＫＴ－１処置は、腫瘍成長を有意に抑制し、動物の生存率を改善したことであった。

【0216】

腫瘍制御が、直接的な薬物作用にのみ依存するのか、またはＣＤ８＋細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）も必要とするのかどうかを明らかにするために、４Ｔ１腫瘍を担持するマウスを、ＫＴ－１処置の間ＣＤ８枯渇抗体を使用してＣＤ８＋ Ｔ細胞除去に供した。結果は、ＣＤ８＋ Ｔ細胞の同時枯渇は、ＫＴ－１に媒介される腫瘍退縮を顕著に弱め（図５Ｃおよび６Ｂ）、マウスの生存を損なった（図５Ｄ）ことを示し、ＫＴ－１が、ＣＤ８＋ Ｔ細胞に依存する様式によって腫瘍進行を阻害することを示唆した。

【0217】

想定した通り、上記処置のエンドポイントにおいて、ＫＴ－１処置は、ＣＤ８＋ ＣＴＬの腫瘍中への浸潤を促進した（図５Ｅ）。しかし、有効な抗腫瘍免疫応答を妨げるＴｒｅｇは、すべての処置群の中で変化がなかった（図５Ｆ）。ＫＴ－１は、全体的なＴｒｅｇに対するＣＤ８＋ ＣＴＬの比を促進するが（図５Ｇ）、依然として、マウスにおける腫瘍を完全に根絶することができなかった（図５Ａ）。化学療法後の他の報告と相関して、ＥＰＩで処置した腫瘍とＫＴ－１で処置した腫瘍の両方でＰＤ－Ｌ_１発現が適応的に富化したが（図５Ｈ）、これは、ＣＤ８＋ Ｔ細胞の浸潤に続く負のフィードバック機構によるものであろう。腫瘍微小環境において影響を受けないＴｒｅｇの存在を伴う腫瘍のＰＤ－Ｌ１の増加は、残りのがん細胞によって用いられる複数の免疫抑制機構を化学療法に対して反映し、ＰＤ－Ｌ１遮断とのさらなる組合せの必要性を強調し得る。

【0218】

ＰＤ－Ｌ１遮断と組み合わせたＫＴ－１の治療可能性を評価するために、ＢＡＬＢ／ｃマウスを図５Ｉに示されるように処置した。マウスは、α－ＰＤ－Ｌ１単剤療法には応答しなかったが、これは主に、４Ｔ１腫瘍におけるＰＤ－Ｌ１発現とＴ細胞関与の欠如によるものであった。α－ＰＤ－Ｌ１と組み合わせた遊離ＥＰＩ（ＥＰＩ→α－ＰＤ－Ｌ１）は、ほんのわずかだけ腫瘍成長を遅らせた。全く対照的に、ＫＴ－１→α－ＰＤ－Ｌ１治療は、顕著な腫瘍退縮をもたらし、マウスの８０％において確立した腫瘍を排除し、劇的な１００％の動物生存を達成した（図５Ｊおよび６Ｃ）。これらの結果は、ＥＰＩを腫瘍に効率的に送達することによって、ＫＴ－１が、非応答性の腫瘍を、免疫原性かつＰＤ－Ｌ１遮断に対して感受性にすることができたことを示唆する。

【0219】

（実施例４：ＭＰＰＡは、ＰＤ－Ｌ１をリソソーム分解に標的化する）
表面ＰＤ－Ｌ１が、α－ＰＤ－Ｌ_１結合の後に迅速にリサイクルされ、回復され得ることを示す新たに出現した証拠を考慮すると、細胞表面のＰＤ－Ｌ１に結合するだけでなく、細胞内でそれを排除することも不可避である。ＰＤ－Ｌ１をリサイクリング経路からリソソーム分解へと向けなおすために、分子スイッチとして受容体架橋の作用に関与した、ＰＤ－Ｌ１に対する多価ポリマー－ペプチドアナロジスト（analogist）（図７Ａ）。

【0220】

図８Ａに示されるアミノ酸配列を有するＰＤ－Ｌ１ペプチドアンタゴニスト（ＰＰＡ）は、高親和性でＰＤ－Ｌ１に結合することが報告され、図８Ｂでさらに確認された。多量体ＰＤ－Ｌ１架橋を達成するために、ＰＰＡをＨＰＭＡコポリマーにグラフトさせ、多価ポリマー－ＰＰＡコンジュゲートを生成した。合成スキームとコンジュゲートの特徴付けの概説を図８Ｃに提示する。反応構成成分の比率を変更することによって、次の評価のために異なる価数を有するコンジュゲートのパネルを調製した。Ｃｙ３標識した主鎖を有する３つのコンジュゲートを調製した：Ｐ－（ＰＰＡ）_１４－Ｃｙ３、Ｐ－（ＰＰＡ）_４．３－Ｃｙ３、Ｐ－（ＰＰＡ）_１．３－Ｃｙ３（添え字は価数を示す）。さらに、受容体枯渇研究のための未標識ＭＰＰＡを、分解性主鎖を用いて調製した。１２．６の価数を有するＭＰＰＡの特徴付けを図２Ｃに提示する。

【0221】

図１０は、価数が増加するに従い、Ｐ－（ＰＰＡ）_ｘの表面結合親和性が増加したことを示す。受容体の架橋がエンドサイトーシスを誘発することを示した研究と一致して、多価のＰ－（ＰＰＡ）_１４－Ｃｙ３およびＰ－（ＰＰＡ）_４．３－Ｃｙ３は、価数の低いＰ－（ＰＰＡ）_１．３－Ｃｙ３とポリマー前駆体Ｐ－Ｃｙ３と比較した場合、加速された内部移行率を有した（図１１）。特異的結合とＰＤ－Ｌ１架橋によって駆動された内部移行の増強に関して、本発明者らは、リソソーム内への実質的なＭＰＰＡの内部移行も実証したが（図７Ｂ）、一方、α－ＰＤ－Ｌ１とのリソソームでの共局在は、部分的かつ限定的であった。図７Ｃでは、ＭＰＰＡは、細胞結合の２４時間後に、α－ＰＤ－Ｌ１よりも高い程度までＰＤ－Ｌ１を枯渇させたが、一方、リソソームにおける酵素分解を部分的に妨げる不可逆的かつ高度に選択的なシステインプロテアーゼ阻害剤であるＥ－６４の存在は、ＭＰＰＡに誘発されるＰＤ－Ｌ_１枯渇を緩和させた。ＭＰＰＡによるＰＤ－Ｌ１のリソソーム分解の増強の裏付けとして、本発明者らは、図７Ｄにおけるリサイクリングアッセイを使用して、ＭＰＰＡ処置が、α－ＰＤ－Ｌ１およびＰＰＡと比較した場合、表面ＰＤ－Ｌ_１の回復を顕著に遅延させ、損なわせることを見出し、このことは、ＭＰＰＡ架橋の後に内部移行したＰＤ－Ｌ１の量の増加が、細胞表面にリサイクリングされず、代わりに、分解のためにリソソームへとルート変更されたことを示した。まとめると、これらの知見は、標準的な抗ＰＤ－Ｌ１抗体によって与えられる一過的な遮断よりもむしろ、ＰＤ－Ｌ１の排除の延長をもたらす有効な治療戦略として、ポリマーに促進される表面ＰＤ－Ｌ１の架橋を確立した。

【0222】

ｉｎ ｖｉｖｏでのＰＤ－Ｌ_１枯渇を検証するために、４Ｔ１腫瘍担持マウスを、１５日目にα－ＰＤ－Ｌ１、ＰＰＡ、またはＭＰＰＡで処置し、その後、７日目と１４日目に２用量のＫＴ－１処置を与えた（図７Ｅ）。腫瘍のＰＤ－Ｌ１発現と腫瘍浸潤リンパ球とについて、ＰＤ－Ｌ１遮断の２日後に研究した。以前の知見と一致して、腫瘍ＰＤ－Ｌ１は、ＫＴ－１化学療法に応答して適応的に濃縮される。逐次的なＰＤ－Ｌ１遮断治療である、α－ＰＤ－Ｌ１およびＰＰＡは、ＰＤ－Ｌ１発現を下方調節した。ＰＤ－Ｌ１発現のさらなる低減はＭＰＰＡによって達成され、ＭＰＰＡは、受容体架橋によってＰＤ－Ｌ１の排除を延長させた（図７Ｅ）。さらに、ＫＴ－１は、ＣＴＬ浸潤を優位に増加させたが、追加のα－ＰＤ－Ｌ１、ＰＰＡ、またはＭＰＰＡは、ＣＴＬの腫瘍浸潤をさらには増強させなかった。対照的に、Ｔｒｅｇの存在は、ＫＴ－１による処置後に影響を受けないままであったが、腫瘍中のＴｒｅｇ集団を作製または維持することが知られているＰＤ－Ｌ１のα－ＰＤ－Ｌ１およびＰＰＡに媒介される遮断は、Ｔｒｅｇを枯渇させた（図７Ｆ）。さらに、同時に起こるＣＤ８＋ Ｔ細胞の増加とＴｒｅｇの最大の低下とともに、ＫＴ－１とＭＰＰＡとの組合せは、他の処置よりも劇的に高いＴｒｅｇに対するＣＴＬの比をもたらした（図１２）。

【0223】

（実施例５：ＫＴ－１とＭＰＰＡの組合せは、治癒動物の長期抗腫瘍抗原－特異的記憶をもたらす）
ｉｎ ｖｉｖｏでの治療効果を検証するために、４Ｔ１腫瘍を担持する同系のＢＡＬＢ／ｃマウスを、図９Ａに示されるように処置した。ＰＰＡは、食塩水と比較した場合、ほとんど腫瘍成長を遅らせなかった。ＭＰＰＡは、おそらく、受動的腫瘍標的化およびＰＤ－Ｌ１架橋のポリマーに媒介される効果によって、ＰＰＡよりもわずかに優れた治療有効性を示した。しかし、免疫抑制腫瘍微小環境は、エンドポイント時に腫瘍進行を制御することができなかった。対照的に、併用療法であるＫＴ－１→ＰＰＡおよびＫＴ－１→ＭＰＰＡは、腫瘍の著しい退縮をもたらした。とりわけ、ＫＴ－１→ＭＰＰＡは、すべての群の中で、最も高い抗腫瘍効率を発揮し、腫瘍の１００％を完全に根絶した（図９Ｂおよび１３）。さらに、いずれの群も体重の有意な減少を経験せず、最小限の毒性を示唆した（図９Ｃ）。

【0224】

免疫記憶の確立が存在するかどうかを試験するために、ＫＴ－１→ＭＰＰＡ治療から、４Ｔ１腫瘍の完全な腫瘍退縮（ＣＲ）および１００％の生存（図９Ｄ）を経験したマウスに、４Ｔ１細胞または無関係のマウスの結腸がん細胞ＣＴ２６のいずれかを皮下に再負荷した。図９Ｅに示されるように、ＣＲマウスは、４Ｔ１に抵抗性であったが、ＣＴ２６に対しては抵抗性ではなく、一方、４Ｔ１腫瘍とＣＴ２６腫瘍の両方が、ナイーブマウスにおいて急速に成長した。さらに、ＣＲマウスから単離した末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の生きた４Ｔ１細胞との同時培養は、ＣＴ２６細胞との同時培養と比較した場合、腫瘍細胞反応性Ｔ細胞（ＩＦＮ－γ＋ＣＤ８＋）の出現頻度を有意に拡大させ（図９Ｆ）、一方、ナイーブマウス由来のＰＢＭＣは、この４Ｔ１特異的応答を生じることができなかった（図１４）。

【0225】

並行して、最初のＫＴ－１→ＭＰＰＡ処置後に治癒したＣＲマウスに、併用療法のエンドポイントである５０日目に、尾静脈から４Ｔ１細胞を投与することによって再負荷した。実証されたように（図９Ｇおよび１５）、すべての再負荷マウスは、さらに６０日間の終わりまで生存し、肺転移がなかった。対照的に、ナイーブ被験体群由来のマウスの８０％は、４０日目の前に死亡し、かなりの肺転移腫瘍結節を有した。一方、ＫＴ－１→ＭＰＰＡは、無処置対照よりも、脾臓中のＣＤ４４＋ＣＤ６２Ｌ－メモリーエフェクターＣＤ８＋ Ｔ細胞のより高い出現頻度をもたらし（図９Ｈ）、これにより、腫瘍再発に対する持続的免疫の確立が明らかとなった。

【0226】

（実施例６：結腸がんモデルにおけるＫＴ－１および併用療法）
ＢＡＬＢ／ｃマウスと同系のマウス結腸癌モデルのＣＴ２６腫瘍細胞では、α－ＰＤ－Ｌ１またはＭＰＰＡによる単剤療法が、腫瘍成長を阻害するのにわずかな効果を発揮しただけであった。ＫＴ－１処置の間、腫瘍進行は有効に制限されたが、残りの腫瘍はＫＴ－１化学療法を中断した後、発達し続けた。対照的に、α－ＰＤ－Ｌ１またはＭＰＰＡと組み合わせたＫＴ－１は、処置の終了後でも、腫瘍成長の持続的抑制をもたらした。さらに、ＫＴ－１→ＭＰＰＡは、抗腫瘍効率をさらに改善し、ＫＴ－１→α－ＰＤ－Ｌ１（２０％の完全腫瘍退縮）よりも優れており、動物の６０％で確立した腫瘍を完全に退縮させた（図１５Ａ）。さらに、ＣＤ８枯渇抗体との同時投与は、ＫＴ－１→ＭＰＰＡの有効性を大いに損ない（図１５Ａ）、併用療法の効果におけるＣＤ８＋ Ｔ細胞応答の重要な関与を実証した。これは、概してＫＴ－１のモジュレーションに起因するものであり、これは、予測された通り、ＩＣＤの特徴のうちの１つである、表面ＣＲＴのかなりの曝露を誘導し（図１５Ｂ、Ｃ）、結果として、免疫抑制Ｔｒｅｇに対するＣＤ８＋ ＣＴＬの比の実質的増加を刺激し（図１５Ｄ）、よって、抗腫瘍免疫を改善した。しかし、ＫＴ－１処置から生存した残りの腫瘍細胞は、表面ＰＤ－Ｌ１発現を適応的に増加させることによって、ＣＤ８＋ Ｔ細胞応答の誘発を中和させた（図１５Ｅ）。とりわけ、このようなジレンマは、α－ＰＤ－Ｌ１またはＭＰＰＡによる逐次的処置によって克服されるであろう。さらに、ＫＴ－１治療の後、ＭＰＰＡは、α－ＰＤ－Ｌ１よりもより顕著なＰＤ－Ｌ１発現の低下をもたらし（図１５Ｅ）、これは、ＭＰＰＡが、受容体架橋の結果として、α－ＰＤ－Ｌ１（図１５Ｆ）よりも、表面ＰＤ－Ｌ１回復の抑制に対して持続的効果を発揮したためである。

【0227】

ＫＴ－１→ＭＰＰＡ治療による原発性ＣＴ２６腫瘍が治癒したマウスに、同じタイプのがん細胞を再負荷した。治癒したマウスにおける続発性腫瘍の成長は、ナイーブマウスにおける原発性腫瘍と比較した場合、有意に阻害され（図１５Ｇ）、長期抗腫瘍免疫記憶を示した。腫瘍再発に対するこのような保護もまた、浸潤したＣＤ８＋ Ｔ細胞の大いに増加した集団および免疫抑制Ｔｒｅｇのわずかに減少した集団を有する続発性腫瘍における再形成された免疫微小環境をもたらした（図１５Ｈ）。興味深いことに、治癒したマウスの続発性腫瘍は、２．５倍多いＰＤ－Ｌ１発現の上方調節をもたらし（図１５Ｆ）、これは、完全腫瘍退縮の失敗の理由の１つであろうが、特に腫瘍がＣＤ８＋ Ｔ細胞によって実質的に浸潤された場合に、抗ＰＤ－Ｌ１免疫治療に対する感受性が増加したことも意味するであろう。

【0228】

（実施例７：非小細胞肺がんモデルにおけるＫＴ－１および併用療法）
ＬＣＣ－１癌肺転移腫瘍モデルでは、Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、α－ＰＤ－Ｌ１（メジアン生存 ２４日）またはＭＰＰＡ（メジアン生存 ２８日）の免疫治療に応答しなかったが、その免疫原性が「冷たい」腫瘍状態のために、食塩水で処置した対照（メジアン生存 ２２日）と類似する動物の生存を有した。ＫＴ－１単独（メジアン生存 ３６日）はマウスの生存を延長させたが、限定された程度までであった。ＫＴ－１→α－ＰＤ－Ｌ１（メジアン生存 ５４日）は動物の生存をさらに延長させたが、最善の治療転帰は、ＫＴ－１→ＭＰＰＡによって達成され、マウスメジアン生存における７４日までの有意な改善を有した（図１５Ｉ）。同様に、ＣＤ８枯渇は、ＫＴ－１→ＭＰＰＡによってなされた改善を無効にし（図１５Ｉ）、ＫＴ－１→ＭＰＰＡの効果がＣＤ８＋ Ｔ細胞に依存することを実証した。実際に、ＫＴ－１、ＫＴ－１→α－ＰＤ－Ｌ１、またはＫＴ－１→ＭＰＰＡによる処置を受けたマウスは、ＰＢＭＣのＣＴ２６腫瘍細胞に対する反応性ＩＦＮ－γ＋ＣＤ８＋ Ｔ細胞（図１５Ｊ）および脾臓においてサイトカイン様ＩＦＮ－γを産生することによって、即時保護を誘発することができるＣＤ８＋ＣＤ６２Ｌ－ＣＤ４４＋エフェクターメモリーＴ細胞（図１５Ｋ）を有意に拡大させた。一方、食塩水、α－ＰＤ－Ｌ１、またはＭＰＰＡによる処置はいずれも、基礎レベルを超えてＩＦＮ－γ＋ＣＤ８＋またはＣＤ８＋ＣＤ６２Ｌ－ＣＤ４４＋ Ｔ細胞の数を増加させなかった。これらの結果によって、ＩＣＤを誘導するコンジュゲートＫＴ－１は、広い抗腫瘍免疫応答および抗腫瘍免疫記憶の誘発に主な効果を有することが確認された。さらに、ＭＰＰＡと組み合わせたＫＴ－１は、他のいずれの処置よりも、腫瘍負荷を低減する、およびＬＬＣ－１細胞の肺転移を抑制するのにより効率的であり（図１５Ｌ）、ＭＰＰＡに媒介されるＰＤ－Ｌ１架橋によって、ＫＴ－１によって誘導される促進された抗腫瘍免疫が補完されたことを意味した。

【0229】

（実施例８：ＭＰＰＡ合成の代替ルート）
ペプチドＰＤ－Ｌ１アンタゴニストの重合性誘導体をＨＰＭＡと共重合させ、多価ポリマーペプチドアンタゴニストを生成することができる。例えば、ペプチドアンタゴニストＴＰＰ－１（ＳＧＱＹＡＳＹＨＣＷＣＷＲＤＰＧＲＳＧＧＳＫ）をＮ－メタクリロイルグリシルグリシン（ＭＡ－ＧＧ）で延長させて、Ｎ－メタクリロイルＧＧ－ＳＧＱＹＡＳＹＨＣＷＣＷＲＤＰＧＲＳＧＧＳＫ（ＭＡ－ＧＧ－ＴＰＰ－１）を生成することができる。Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ戦略と固相合成方法とを使用して、ＭＡ－ＧＧ－ＴＰＰ－１を合成した。重合性ペプチド構造をＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ質量分析（ＭＡ－ＧＧ－ＴＰＰ－１：計算値２６６９．１３Ｄａ、実測値２６７０．１３Ｄａ）によって検証し、純度を分析的ＲＰ－ＨＰＬＣで検証した。ＭＡ－ＧＧ－ＴＰＰ－１の構造を以下に提供する。

【化21】

【0230】

実施例１において提供した技法を使用して、ＭＡ－ＧＧ－ＴＰＰ－１をＨＰＭＡおよびＣＴＡ－ＧＦＬＧＫＧＬＦＧＣＴＡと重合させて、ＭＰＰＡを生成することができる。

【0231】

この出願全体を通して、様々な刊行物が参照される。これらの刊行物の開示はそれらの全体が、これにより参照により本出願に組み込まれ、本明細書に記載の化合物、組成物、および方法をより十分に説明する。

【0232】

本明細書に記載の化合物、組成物、および方法に対して様々な修正および変更がなされ得る。本明細書に記載の化合物、組成物、および方法の他の態様は、本明細書を考慮して、ならびに本明細書に開示される化合物、組成物、および方法の実践から明らかとなるであろう。本明細書および実施例は例示とみなされることが意図される。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【配列表】

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【国際調査報告】