特表 2022-553058 低タンパク質濃度のタンパク質損失を最小限に抑えるための組成物及び方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-12-21

(54)【発明の名称】低タンパク質濃度のタンパク質損失を最小限に抑えるための組成物及び方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20221214BHJP

   A61K 47/60 20170101ALI20221214BHJP

   A61K 47/10 20060101ALI20221214BHJP

   A61K 47/02 20060101ALI20221214BHJP

   A61K 47/18 20060101ALI20221214BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20221214BHJP

   A61K 47/36 20060101ALI20221214BHJP

   A61K 47/12 20060101ALI20221214BHJP

   A61K 9/10 20060101ALI20221214BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20221214BHJP

   A61J 1/10 20060101ALI20221214BHJP

   C07K 16/28 20060101ALN20221214BHJP

   C07K 16/46 20060101ALN20221214BHJP

   C12N 15/13 20060101ALN20221214BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 Z

A61K47/60

A61K47/10

A61K47/02

A61K47/18

A61K47/26

A61K47/36

A61K47/12

A61K9/10

A61P35/00

A61J1/10 331A

A61J1/10 331B

C07K16/28 ZNA

C07K16/46

C12N15/13

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022523597

(86)(22)【出願日】2020-10-23

(85)【翻訳文提出日】2022-06-15

(86)【国際出願番号】 US2020057065

(87)【国際公開番号】W WO2021081326

(87)【国際公開日】2021-04-29

(31)【優先権主張番号】62/926,089

(32)【優先日】2019-10-25

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】500203709

【氏名又は名称】アムジェン インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(72)【発明者】

【氏名】ジュー， チェン

(72)【発明者】

【氏名】グリーン， ダニエル ジェラード

(72)【発明者】

【氏名】ハオ， チー

(72)【発明者】

【氏名】カナプラム， シェカール

(72)【発明者】

【氏名】トゥルーハイト， マイケル ジョン

【テーマコード（参考）】

4C047

4C076

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C047AA11

4C047AA21

4C047BB11

4C047BB12

4C047BB22

4C047CC04

4C076AA16

4C076BB13

4C076CC27

4C076DD09F

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4C076DD41Z

4C076DD51

4C076DD51Z

4C076DD67

4C076EE23F

4C076FF70

4C085AA13

4C085AA40

4C085BB41

4C085BB50

4C085CC32

4C085DD51

4C085EE01

4C085EE05

4C085GG02

4H045AA10

4H045AA11

4H045AA30

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA20

(57)【要約】

本発明は、低タンパク質濃度の（例えば、固体表面への吸着による）タンパク質損失を最小限に抑えるための組成物及び方法に関する。本明細書で開示される発明は、概して、タンパク質を含む組成物、特に低タンパク質濃度の治療用タンパク質を含む医薬組成物の分野に関する。本明細書で開示される発明はまた、組成物をそれを必要とする対象に投与する方法に関する。本明細書に開示される発明は、界面活性剤がその臨界ミセル濃度よりも低い濃度で使用される場合、界面活性剤は液体組成物中で低濃度のタンパク質を安定化し、固体表面への吸着によるタンパク質損失を効果的に防止できるという驚くべき発見に基づく。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

約０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度の二重特異性抗体コンストラクトと、界面活性剤の臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）の少なくとも約０．２５倍の濃度の前記界面活性剤と、を含む水性組成物であって、前記二重特異性抗体コンストラクトが、標的細胞表面抗原に結合する第１の結合ドメイン、Ｔ細胞の表面上のヒトＣＤ３に結合する第２の結合ドメイン、及び任意選択的にアミノからカルボキシルの順にヒンジ－ＣＨ２ドメイン－ＣＨ３ドメイン－リンカー－ヒンジ－ＣＨ２ドメイン－ＣＨ３ドメインを含む第３のドメインを含み、前記第２の結合ドメインが、配列番号２０１の配列を有するポリペプチドを含む、組成物。

【請求項2】

前記二重特異性抗体コンストラクトが、約０．００１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記二重特異性抗体コンストラクトが、約０．０１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、又は０．１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、又は０．１μｇ／ｍＬ～約１０μｇ／ｍＬ、又は１μｇ／ｍＬ～約１０μｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項4】

前記界面活性剤が、ポリソルベート、ポロキサマー、又はトリトンＸ－１００である、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項5】

前記界面活性剤が、ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、ポリソルベート４０、ポリソルベート２０、又はトリトンＸ－１００である、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項6】

前記界面活性剤が、ポロキサマー１８８、又はポロキサマー４０７である、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項7】

前記界面活性剤が、前記界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約２０倍、又はＣＭＣの約０．２５倍～約１０倍の濃度で存在する、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項8】

前記組成物が、塩、アミノ酸、糖類若しくは糖類誘導体、又はこれらの組み合わせを更に含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項9】

前記組成物が、緩衝剤又は防腐剤を更に含む、請求項８に記載の組成物。

【請求項10】

前記組成物のｐＨが、約３．５～約７．５である、請求項８又は９に記載の組成物。

【請求項11】

前記組成物のｐＨが、約４．２～約７．０である、請求項１０に記載の組成物。

【請求項12】

前記塩が、ＮａＣｌである、請求項８～１１のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項13】

前記糖類又は糖類誘導体が、単糖類、二糖類、環状多糖類、又は糖アルコールである、請求項８～１２のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項14】

前記糖類が、スクロース、トレハロース、マンニトール、又はソルビトールである、請求項８～１３のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項15】

前記アミノ酸が、リジンである、請求項８～１４のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項16】

前記緩衝剤が、酢酸緩衝剤、グルタミン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、コハク酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、フマル酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、又はリン酸緩衝剤である、請求項９～１５のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項17】

前記二重特異性抗体コンストラクトの前記第１及び第２の結合ドメインの各々が、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む、請求項１～１６のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項18】

前記二重特異性抗体コンストラクトが、単鎖抗体コンストラクトである、請求項１～１７のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項19】

前記二重特異性抗体コンストラクトが、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２４、配列番号２５、配列番号４７、配列番号４８、配列番号６６、配列番号６７、配列番号７６、配列番号７８、配列番号８７、配列番号８８、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７６、配列番号１７８、及び配列番号１９２から選択されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む、請求項１～１８のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項20】

前記組成物が、医薬組成物である、請求項１～１９のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項21】

前記組成物が、プラスチック容器に収容されている、請求項１～２０のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項22】

前記容器が、ポリオレフィン、ＰＶＣ、ＥＶＡ、又はポリウレタンを含む材料から作製される、請求項２１に記載の組成物。

【請求項23】

前記容器が、ＰＶＣを含む材料から作製され、ここで、前記ＰＶＣが、ＤＥＨＰ又はＴＯＴＭを実質的に含まない、請求項２２に記載の組成物。

【請求項24】

前記容器が、ＩＶバッグ又はＩＶチューブである、請求項２１～２３のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項25】

容器内に収容されている水性医薬組成物を含む医薬製剤であって、前記水性医薬組成物が：
ａ）０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度の二重特異性抗体コンストラクトと、
ｂ）界面活性剤のＣＭＣの少なくとも約０．２５倍の濃度の前記界面活性剤と、
を含み、前記界面活性剤が、少なくとも２０のＨＬＢ値を有する、医薬製剤。

【請求項26】

前記水性医薬組成物が、約０．００１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬの濃度の前記二重特異性抗体コンストラクトを含む、請求項２５に記載の医薬製剤。

【請求項27】

前記水性医薬組成物が、前記界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約２０倍、又はＣＭＣの約０．２５倍～約１０倍の濃度の前記界面活性剤を含む、請求項２５又は２６に記載の医薬製剤。

【請求項28】

前記水性医薬組成物が、塩、緩衝剤、アミノ酸、糖類若しくは糖類誘導体、又はこれらの組み合わせを更に含む、請求項２５～２７のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項29】

前記水性医薬組成物が、約４．２～約７．０のｐＨを有する、請求項２５～２８のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項30】

前記容器が、ポリオレフィン、ＰＶＣ、ＥＶＡ、又はポリウレタンを含む材料から作製される、請求項２５～２９のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項31】

前記二重特異性抗体コンストラクトが、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２４、配列番号２５、配列番号４７、配列番号４８、配列番号６６、配列番号６７、配列番号７６、配列番号７８、配列番号８７、配列番号８８、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７６、配列番号１７８、及び配列番号１９２から選択されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む、請求項２５～３０のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項32】

二重特異性抗体コンストラクトを患者に投与する方法であって：
ａ）容器中で水性医薬組成物を調製することであって、前記水性医薬組成物が、約０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度の前記二重特異性抗体コンストラクトと、界面活性剤のＣＭＣの少なくとも約０．２５倍の濃度の前記界面活性剤と、を含むことと、
ｂ）前記水性医薬組成物を前記患者に投与することと、を含み、
前記二重特異性抗体コンストラクトが、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２４、配列番号２５、配列番号４７、配列番号４８、配列番号６６、配列番号６７、配列番号７６、配列番号７８、配列番号８７、配列番号８８、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７６、配列番号１７８、及び配列番号１９２から選択されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む、方法。

【請求項33】

前記水性医薬組成物が、約０．００１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬの濃度の前記二重特異性抗体コンストラクトを含む、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

前記水性医薬組成物が、前記界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約２０倍、又はＣＭＣの約０．２５倍～約１０倍の濃度の前記界面活性剤を含む、請求項３２又は３３に記載の方法。

【請求項35】

前記界面活性剤が、ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、ポリソルベート４０、ポリソルベート２０、ポロキサマー１８８、ポロキサマー４０７、又はトリトンＸ－１００である、請求項３２～３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項36】

前記水性医薬組成物が、塩、緩衝剤、アミノ酸、糖類、及び防腐剤から選択される１つ以上を更に含む、請求項３２～３５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項37】

前記水性医薬組成物が、約４．２～約７．０のｐＨを有する、請求項３２～３６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項38】

前記容器が、ポリオレフィン、ＰＶＣ、ＥＶＡ、又はポリウレタンを含む材料から作製される、請求項３２～３７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項39】

前記界面活性剤が、ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、ポリソルベート４０、又はポリソルベート２０であって、前記容器が、ＤＥＨＰ又はＴＯＴＭを実質的に含まないＰＶＣを含む材料から作製される、請求項３２～３８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項40】

前記水性医薬組成物が、前記二重特異性抗体コンストラクトを含む第１の組成物を好適な水溶液で希釈することによって調製される、請求項３２～３９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項41】

前記第１の組成物が、前記二重特異性抗体コンストラクトを含む液体組成物である、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記第１の組成物が、前記二重特異性抗体コンストラクトを含む凍結乾燥組成物から再構成された液体組成物である、請求項４０に記載の方法。

【請求項43】

前記好適な溶液が、前記界面活性剤のＣＭＣの少なくとも約０．２５倍の濃度の前記界面活性剤を含む、請求項４１～４２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項44】

前記水性医薬組成物が、前記好適な水溶液を前記容器中に添加し、続いて適切な量の前記第１の組成物を前記容器中に添加することによって調製される、請求項４０～４３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項45】

前記患者が、癌患者である、請求項３２～４４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項46】

前記投与が、ＩＶ投与である、請求項３２～４５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項47】

前記界面活性剤が、ポロキサマー１８８、又はポロキサマー４０７である、請求項２５～３１のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項48】

前記二重特異性抗体コンストラクトが、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２５、配列番号４８、配列番号６７、配列番号７８、配列番号８８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７８、又は配列番号１９２のアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む、請求項１９に記載の組成物、請求項３１に記載の医薬製剤、又は請求項３２に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本願は、２０１９年１０月２５日に出願された米国仮特許出願第６２／９２６，０８９号の利益を主張するものであり、これは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

ＡＳＣＩＩテキストファイルに記録された配列表の提出
ＡＳＣＩＩテキストファイルに関する次の提出物の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる：コンピュータ可読形式（ＣＲＦ）のシーケンスリスト（ファイル名：Ａ－２４２９－ＷＯ－ＰＣＴ＿ＳＴ２５、データ作成日：２０２０年１０月２３日 サイズ：４５１，６０８バイト）。

【0003】

本明細書で開示される発明は、概して、タンパク質を含む組成物、特に低タンパク質濃度の治療用タンパク質を含む医薬組成物の分野に関する。本明細書で開示される発明はまた、組成物をそれを必要とする対象に投与する方法に関する。

【背景技術】

【0004】

治療用タンパク質は、患者を治療するための重要な種類の治療法である。タンパク質分子は界面活性であり、固体表面への潜在的な吸着を受ける。医薬組成物中の治療用タンパク質は、タンパク質が接触する固体表面（例えば、医薬組成物を収容している容器の表面）に吸着される可能性があり、これは、貯蔵及び使用中にタンパク質の損失をもたらす可能性がある。一般に、これらの組成物中の治療用タンパク質の濃度は高く（例えば、１ｍｇ／ｍＬ以上）、その結果、固体表面へのタンパク質の吸着は、患者への投与に利用できる薬物の不十分な量をもたらさない。しかしながら、組成物中のタンパク質の濃度が低い（例えば、患者に投与する前に組成物を希釈する場合など、０．１ｍｇ／ｍＬ未満である）場合、タンパク質損失のリスクがより顕著になる可能性があり、これは潜在的に患者への投与に利用できる薬物の不十分な量につながる可能性がある。

【0005】

界面活性剤は、一般に、治療用タンパク質を含む医薬組成物において、例えば、タンパク質凝集を防止し、タンパク質を安定化するために使用される。タンパク質が医薬組成物中に低濃度（例えば、０．１ｍｇ／ｍＬ以下）で存在する場合、界面活性剤を使用して表面吸着によるタンパク質の損失を効果的に防止できるかどうかは不明である。

【0006】

特に組成物が低タンパク質濃度のタンパク質を含む場合、固体表面への吸着によるタンパク質損失を最小限に抑えるタンパク質組成物及び方法が必要である。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0007】

低タンパク質濃度のタンパク質を含む組成物、並びに組成物をそれを必要とする対象に投与する方法が、本明細書で開示される。本明細書で開示される組成物及び方法は、固体表面へのタンパク質吸着によるタンパク質損失を最小化又は排除し、患者への治療用タンパク質の正確な投与を確実にするという利点を有する。

【0008】

特定の実施形態では、タンパク質と、界面活性剤と、を含む水性組成物であって、タンパク質が、約０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度で組成物中に存在し、界面活性剤が、界面活性剤の臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）の少なくとも約０．２５倍の濃度で組成物中に存在する、水性組成物が、本明細書で開示される。

【0009】

特定の実施形態では、タンパク質は、標的細胞表面抗原に結合する第１の結合ドメイン、Ｔ細胞の表面上のヒトＣＤ３に結合する第２の結合ドメイン、及び任意選択的にアミノからカルボキシルの順にヒンジ－ＣＨ２ドメイン－ＣＨ３ドメイン－リンカー－ヒンジ－ＣＨ２ドメイン－ＣＨ３ドメインを含む第３のドメインを含む二重特異性抗体コンストラクトである。特定の実施形態では、第２の結合ドメインは、配列番号２０１の配列を有するポリペプチドを含む。特定の実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、約０．００１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、又は０．１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、又は０．１μｇ／ｍＬ～約１０μｇ／ｍＬ、又は１μｇ／ｍＬ～約１０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0010】

特定の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート、ポロキサマー、又はトリトンＸ－１００である。特定の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、ポリソルベート４０、ポリソルベート２０、又はトリトンＸ－１００である。特定の実施形態では、界面活性剤は、ポロキサマー１８８、又はポロキサマー４０７である。特定の実施形態では、界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約２０倍、又はＣＭＣの約０．２５倍～約１０倍の濃度で存在する。

【0011】

特定の実施形態では、組成物は、塩、アミノ酸、糖類若しくは糖類誘導体、又はこれらの組み合わせを更に含む。特定の実施形態では、塩は、ＮａＣｌである。特定の実施形態では、糖類又は糖類誘導体は、単糖類、二糖類、環状多糖類、又は糖アルコールである。特定の実施形態では、糖類は、スクロース、トレハロース、マンニトール、又はソルビトールである。特定の実施形態では、アミノ酸は、リジンである。

【0012】

特定の実施形態では、組成物のｐＨは、約３．５～約７．５である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは、約４．２～約７．０である。

【0013】

特定の実施形態では、組成物は、緩衝剤又は防腐剤を更に含む。特定の実施形態では、緩衝剤は、酢酸緩衝剤、グルタミン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、コハク酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、フマル酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、又はリン酸緩衝剤である。

【0014】

特定の実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第１及び第２の結合ドメインの各々は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む。特定の実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、単鎖抗体コンストラクトである。特定の実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２４、配列番号２５、配列番号４７、配列番号４８、配列番号６６、配列番号６７、配列番号７６、配列番号７８、配列番号８７、配列番号８８、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７６、配列番号１７８、及び配列番号１９２から選択されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。特定の実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２５、配列番号４８、配列番号６７、配列番号７８、配列番号８８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７８、又は配列番号１９２のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む。

【0015】

特定の実施形態では、組成物は、ＩＶバッグ又はＩＶチューブなどのプラスチック容器に収容されている。特定の実施形態では、容器は、ポリオレフィン、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、エチレン酢酸ビニル（ＥＶＡ）、又はポリウレタンを含む材料から作製される。特定の実施形態では、容器は、ＰＶＣを含む材料から作製され、ここで、ＰＶＣは、ジ－２－エチルヘキシルフタレート（ＤＥＨＰ）又はトリ－２－エチルヘキシルトリメリテート（ＴＯＴＭ）を実質的に含まない。

【0016】

特定の実施形態では、容器内に収容されている水性医薬組成物を含む医薬製剤であって、水性医薬組成物が：約０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度の二重特異性抗体コンストラクトと、界面活性剤のＣＭＣの少なくとも約０．２５倍の濃度の界面活性剤と、を含み、界面活性剤が、少なくとも２０のＨＬＢ値を有する、医薬製剤が本明細書で開示される。特定の実施形態では、界面活性剤は、ポロキサマー１８８、又はポロキサマー４０７である。特定の実施形態では、水性医薬組成物は、約０．００１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬの濃度の二重特異性抗体コンストラクトを含む。特定の実施形態では、水性医薬組成物は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約２０倍、又はＣＭＣの約０．２５倍～約１０倍の濃度の界面活性剤を含む。

【0017】

特定の実施形態では、水性医薬組成物は、塩、緩衝剤、アミノ酸、糖類若しくは糖類誘導体、又はこれらの組み合わせを更に含む。特定の実施形態では、水性医薬組成物は、約４．２～約７．０のｐＨを有する。

【0018】

特定の実施形態では、容器は、ポリオレフィン、ＰＶＣ、ＥＶＡ、又はポリウレタン（例えば、ポリエステル及びポリエーテル）を含む材料から作製される。

【0019】

特定の実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２４、配列番号２５、配列番号４７、配列番号４８、配列番号６６、配列番号６７、配列番号７６、配列番号７８、配列番号８７、配列番号８８、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７６、配列番号１７８、及び配列番号１９２から選択されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。特定の実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２５、配列番号４８、配列番号６７、配列番号７８、配列番号８８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７８、又は配列番号１９２のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む。

【0020】

本明細書ではまた、二重特異性抗体コンストラクトを患者に投与する方法であって：容器中で水性医薬組成物を調製することであって、水性医薬組成物が、約０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度の二重特異性抗体コンストラクトと、界面活性剤のＣＭＣの少なくとも約０．２５倍の濃度の界面活性剤と、を含むことと、水性医薬組成物を患者に投与することと、を含み、二重特異性抗体コンストラクトが、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２４、配列番号２５、配列番号４７、配列番号４８、配列番号６６、配列番号６７、配列番号７６、配列番号７８、配列番号８７、配列番号８８、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７６、配列番号１７８、及び配列番号１９２から選択されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む、方法が開示される。特定の実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２５、配列番号４８、配列番号６７、配列番号７８、配列番号８８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７８、又は配列番号１９２のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む。特定の実施形態では、水性医薬組成物は、約０．００１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬの濃度の二重特異性抗体コンストラクトを含む。

【0021】

特定の実施形態では、水性医薬組成物は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約２０倍、又はＣＭＣの約０．２５倍～約１０倍の濃度の界面活性剤を含む。特定の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、ポリソルベート４０、ポリソルベート２０、ポロキサマー１８８、ポロキサマー４０７、又はトリトンＸ－１００である。

【0022】

特定の実施形態では、水性医薬組成物は、塩、緩衝剤、アミノ酸、糖類又は糖類誘導体、及び防腐剤から選択される１つ以上を更に含む。特定の実施形態では、水性医薬組成物は、約４．２～約７．０のｐＨを有する。

【0023】

特定の実施形態では、容器は、ポリオレフィン、ＰＶＣ、ＥＶＡ、ポリウレタンを含む材料から作製される。特定の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、ポリソルベート４０、又はポリソルベート２０であって、容器は、ＤＥＨＰ又はＴＯＴＭを実質的に含まないＰＶＣを含む材料から作製される。

【0024】

特定の実施形態では、水性医薬組成物は、二重特異性抗体コンストラクトを含む第１の組成物を好適な水溶液で希釈することによって調製される。特定の実施形態では、第１の組成物は、二重特異性抗体コンストラクトを含む液体組成物である。特定の実施形態では、第１の組成物は、二重特異性抗体コンストラクトを含む凍結乾燥組成物から再構成された液体組成物である。特定の実施形態では、好適な溶液は、界面活性剤のＣＭＣの少なくとも約０．２５倍の濃度の界面活性剤を含む。特定の実施形態では、水性医薬組成物は、好適な水溶液を容器中に添加し、続いて適切な量の第１の組成物を容器中に添加することによって調製される。

【0025】

特定の実施形態では、患者は、癌患者である。特定の実施形態では、投与は、ＩＶ投与である。

【図面の簡単な説明】

【0026】

【図1】図１は、固体表面に結合しているタンパク質を測定するためのアッセイの図解を示す。

【図2】図２は、界面活性剤の非存在下での固体表面に結合しているタンパク質を示す。

【図3】図３は、様々な界面活性剤の様々な添加が、タンパク質の固体表面への結合を防止することを示す。

【図4】図４は、タンパク質を添加する前に界面活性剤を固体表面に添加することが、タンパク質の表面への結合を効率的に防止することを示す。

【図5】図５は、ＤＥＨＰ含有ＰＶＣからのジ－２－エチルヘキシルフタレート（ＤＥＨＰ）の浸出に対する、同じ濃度での様々な界面活性剤の影響を示す。

【図6】図６は、ＤＥＨＰ含有ＰＶＣからのＤＥＨＰの浸出に対する、ＣＭＣの同じ倍率での様々な界面活性剤の影響を示す。

【発明を実施するための形態】

【0027】

本明細書に開示される発明は、界面活性剤がその臨界ミセル濃度よりも低い濃度で使用される場合、界面活性剤は液体組成物中で低濃度のタンパク質を安定化し、固体表面への吸着によるタンパク質損失を効果的に防止できるという驚くべき発見に基づく。

【0028】

いくつかの実施形態では、タンパク質と、界面活性剤と、を含む水性組成物であって、タンパク質が、約０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度で組成物中に存在し、界面活性剤が、界面活性剤の臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）の少なくとも約０．２５倍の濃度で組成物中に存在する、水性組成物が、本明細書で開示される。

【0029】

組成物で使用され得る界面活性剤は、典型的には、医薬組成物で使用される任意の界面活性剤であり得る。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、非イオン性界面活性剤である。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、又はポリソルベート８５などのポリソルベートである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート２０であり、他の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０である。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポロキサマー１２４ ポロキサマー１８８、ポロキサマー２３７、ポロキサマー３３８、及びポロキサマー４０７などのポロキサマーである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、トリトンＸ－１００である。様々な界面活性剤が市販されている（例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ６８、及びＰｌｕｒｏｎｉｃＦ１２７など）。

【0030】

界面活性剤は、その界面活性剤の臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）の少なくとも約０．２５倍（０．２５ｘ）の濃度で組成物中に存在し得る。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約２０倍の濃度で組成物中に存在する。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約１５倍、又は約０．２５倍～約１０倍、又は約０．２５倍～約８倍、又は約０．２５倍～約６倍、又は約０．２５倍～約４倍、又は約０．２５倍～約２倍、又は約０．２５倍～約１倍の濃度で組成物中に存在する。

【0031】

いくつかの実施形態では、界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約０．５倍～約２０倍の濃度で組成物中に存在する。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約０．５倍～約１５倍、又は約０．５倍～約１０倍、又は約０．５倍～約８倍、又は約０．５倍～約６倍、又は約０．５倍～約４倍、又は約０．５倍～約２倍、又は約０．５倍～約１倍の濃度で組成物中に存在する。

【0032】

いくつかの実施形態では、界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍、約０．５倍、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１２倍、約１４倍、約１６倍、約１８倍、又は約２０倍の濃度で組成物中に存在する。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約１．２５倍、約２．５倍、約３．５倍、約４．５倍、約５．５倍、約６．５倍、約７．５倍、約８．５倍、又は約９．５倍の濃度で組成物中に存在する。

【0033】

本明細書で使用する場合、用語「約」は、特定の値又は範囲を変更するために使用する場合、所与の値又は範囲において２０パーセント以内、例えば記載された値又は範囲の１０パーセント以内、５パーセント以内、４パーセント以内、３パーセント以内、２パーセント以内又は１パーセント以内を含む変動があり得ることを意味すると理解される。

【0034】

臨界ミセル濃度は、それを超えるとミセルが形成される界面活性剤の濃度を指し、それは界面活性剤の特性である。界面活性剤のＣＭＣ値は、蛍光光度法、表面張力、導電率測定、及び動的光散乱などの当該技術分野で周知の実験方法によって測定することができる。例えば、Ｎｏｒｍａｎ Ｓｃｈｏｌｚ，Ｔｈｏｍａｓ Ｂｅｈｎｋｅ，Ｕｔｅ ＲｅｓｃｈＧｅｎｇｅｒ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ２８：４６５－４７６（２０１８）及びＯｅｎｄｅｒ Ｔｏｐｅｌ，Ｂｕｒｃｉｎ Ａｃａｒ Ｃａｋｉｒ，Ｌｅｙｌａ Ｂｕｄａｍａ，Ｎｕｍａｎ Ｈｏｄａ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｌｉｑｕｉｄｓ １７７；４０－４３（２０１３）を参照されたい。界面活性剤のＣＭＣ値は、Ａｔｔｅｎｔｉｏｎ（登録商標）Ｓｉｇｍａ７００又は７０１などの装置を使用して自動的に測定することもできる。

【0035】

いくつかの実施形態では、界面活性剤の各々のＣＭＣ値は、以下の表１に列挙されている。

【0036】

【表1】

【0037】

＊表に列挙されているＣＭＣ値については、例えば、ｌｅ Ｍａｉｒｅ Ｍ，Ｃｈａｍｐｅｉｌ Ｐ，Ｍｏｌｌｅｒ ＪＶ．２０００．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｎｄ ｌｉｐｉｄｓ ｗｉｔｈ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ．Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １５０８：８６－１１１；Ｓｕｋｓｉｒｉｗｏｒａｐｏｎｇ Ｊ，Ｒｕｎｇｖｉｍｏｌｓｉｎ Ｔ，Ａ－ｇｏｍｏｌ Ａ，Ｊｕｎｙａｐｒａｓｅｒｔ ＶＢ，Ｃｈａｎｔａｓａｒｔ Ｄ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ ｄｉａｚｅｐａｍ－ｌｏａｄｅｄ ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ ｍｉｃｅｌｌｅｓ．２０１４．ＡＡＰＳ ＰｈａｒｍＳｃｉＴｅｃｈ．１５（１）：５２－６４；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍ／ｃｏｎｔｅｎｔ／ｄａｍ／ｓｉｇｍａ－ａｌｄｒｉｃｈ／ｄｏｃｓ／Ｓｉｇｍａ／Ｐｒｏｄｕｃｔ＿Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ＿Ｓｈｅｅｔ／１／ｔ８５３２ｐｉｓ．ｐｄｆを参照されたい。

【0038】

タンパク質は、約０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度で組成物中に存在し得る。いくつかの実施形態では、タンパク質は、約０．００１μｇ／ｍＬ～約９０μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約８０μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約７０μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約６０μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約４０μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約３０μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約２０μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約１０μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約５μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約１μｇ／ｍＬ、又は約０．００１μｇ／ｍＬ～約０．０１μｇ／ｍＬの濃度で組成物中に存在する。

【0039】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、約０．０１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約８０μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約７０μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約６０μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約４０μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約３０μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約２０μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約１０μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約５μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約１μｇ／ｍＬ、又は約０．０１μｇ／ｍＬ～約０．１μｇ／ｍＬ、又は約０．１μｇ／ｍＬ～約１μｇ／ｍＬ、又は約０．１μｇ／ｍＬ～約５１μｇ／ｍＬの濃度で組成物中に存在する。

【0040】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、約０．００１μｇ／ｍＬ、約０．００５μｇ／ｍＬ、約０．０１μｇ／ｍＬ、約０．０５μｇ／ｍＬ、約０．１μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ、約４μｇ／ｍＬ、約８μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ、約１５μｇ／ｍＬ、約２０μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ、約３０μｇ／ｍＬ、約３５μｇ／ｍＬ、約４０μｇ／ｍＬ、約４５μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ、約５５μｇ／ｍＬ、約６０μｇ／ｍＬ、約６５μｇ／ｍＬ、約７０μｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ、約８０μｇ／ｍＬ、約８５μｇ／ｍＬ、約９０μｇ／ｍＬ、約９５μｇ／ｍＬ、又は約１００μｇ／ｍｌの濃度で組成物中に存在する。

【0041】

本明細書に開示される組成物では、タンパク質の濃度又は濃度範囲のいずれかを、界面活性剤の濃度又は濃度範囲のいずれかと組み合わせることができる。

【0042】

任意のタンパク質は、組成物中のタンパク質であり得る。いくつかの実施形態では、組成物中のタンパク質は、抗原結合タンパク質又は融合タンパク質などの治療用タンパク質である。

【0043】

本明細書で使用する場合、「抗原結合タンパク質」という用語は、１つ以上の標的抗原に特異的に結合するタンパク質を指す。抗原結合タンパク質としては、抗体（例えば、モノクローナル抗体）が挙げられるがこれに限定されない。抗原結合タンパク質は、典型的には、抗原に特異的に結合する抗原結合断片を含み、且つ任意選択的に、抗原結合断片が、抗原結合タンパク質の抗原への結合を促進するコンフォメーションをとることを可能にする骨格又はフレームワーク部分を含むタンパク質である。「抗原結合断片」とは、完全長の重鎖及び／又は軽鎖に存在するアミノ酸の少なくとも一部を欠くが、それでもなお抗原に特異的に結合することができる、抗体の一部を指す。抗原結合断片としては、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、ナノボディー（例えば、ラクダ重鎖抗体のＶＨドメイン；ＶＨＨ断片、Ｃｏｒｔｅｚ－Ｒｅｔａｍｏｚｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｖｏｌ．６４：２８５３－５７，２００４を参照）、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、Ｆｄ断片、及び相補性決定領域（ＣＤＲ）断片が挙げられるが、これらに限定されず、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、又はラクダなどの任意の哺乳動物供給源に由来し得る。抗原結合断片は、標的抗原との結合についてインタクトな抗体と競合する場合があり、断片は、インタクトな抗体の改変（例えば、酵素的又は化学的切断）によって作製され得るか、又は当該技術分野で公知の組換えＤＮＡ技術若しくはペプチド合成を使用して新たに合成され得る。

【0044】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、二重特異性の抗原結合タンパク質である。本明細書で使用する場合、用語「二重特異性」は、２つの異なる抗原又は標的又はエピトープに特異的に結合することができる抗原結合タンパク質を指す。本明細書で使用する場合、「エピトープ」は、抗体又はその断片などの抗原結合タンパク質によって特異的に結合され得る任意の決定基を指す。いくつかの実施形態では、二重特異性抗原結合タンパク質は、ある抗原又は標的に特異的に結合する第１のドメインと、別の抗原又は標的に特異的に結合する第２のドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗原結合タンパク質の第１のドメインは、標的細胞表面抗原に特異的に結合し、二重特異性抗原結合タンパク質の第２の結合ドメインは、ヒトＣＤ３、Ｔ細胞上のＴ細胞受容体複合体のサブユニットに特異的に結合する。いくつかの好ましい実施形態では、二重特異性抗原結合タンパク質は、例えば、国際公開第２００８１１９５６７号パンフレット、及び国際公開第２０１７１３４１４０号パンフレットで記載されているとおりの二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ（登録商標））抗体コンストラクトである。

【0045】

本明細書で使用する場合、用語「抗体コンストラクト」は、その構造及び／又は機能が、抗体、例えば全長又は完全免疫グロブリン分子の構造及び／若しくは機能に基づき、且つ／又は抗体若しくはその断片の可変重鎖（ＶＨ）及び／又は可変軽鎖（ＶＬ）ドメインから抽出される分子を指す。したがって、抗体コンストラクトは、その特異的な標的又は抗原に結合することができる。抗体コンストラクトとしては、抗体の修飾断片、例えばｓｃＦｖ、ジ－ｓｃＦｖ又はバイ（ｓ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－Ｆｃ、ｓｃＦｖ－ジッパー、ｓｃＦａｂ、Ｆａｂ_２、Ｆａｂ_３、ダイアボディー、１本鎖ダイアボディー、タンデムダイアボディー（Ｔａｎｄａｂ’ｓ）、タンデムジ－ｓｃＦｖ、タンデムトリ－ｓｃＦｖ、「マルチボディー」、例えばトリアボディー又はテトラボディー及び単一ドメイン抗体、例えばナノボディー又は、他のＶ領域若しくはドメインに非依存的に抗原若しくはエピトープに特異的に結合するＶＨＨ、ＶＨ若しくはＶＬであり得る１つのみの可変ドメインを含む単一可変ドメイン抗体も挙げられる。

【0046】

いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、第１の結合ドメインと、第２の結合ドメインと、を含み、第１の結合ドメインは第１の細胞表面抗原に特異的に結合し、第２の結合ドメインはヒトＣＤ３に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第１及び第２のドメインは、「二重特異性１本鎖抗体コンストラクト」、より好ましくは二重特異性「１本鎖Ｆｖ」（ｓｃＦｖ）である。ｓｃＦｖでは、抗体のＶＬ及びＶＨは、例えば、合成リンカーによって、ＶＬ及びＶＨ領域が対になって一価分子を形成する単一のタンパク質鎖として結合される；例えばＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３を参照されたい）。リンカーは、約１０個～約２５個のアミノ酸、好ましくは約１５個～２０個のアミノ酸の短いペプチドであり得る。リンカーは通常、柔軟性のためにグリシン、並びに溶解性のためにセリン又はスレオニンに富み、ＶＨのＮ末端をＶＬのＣ末端に連結するか又はその逆のいずれかであり得る。このｓｃＦｖは、定常領域の除去及びリンカーの導入にもかかわらず、元の免疫グロブリンの特異性を保持する。ＶＨ及びＶＬ領域は、ＶＨ－ＶＬ又はＶＬ－ＶＨの順に配置される。ＶＨ領域がリンカー配列のＮ末端に配置され、且つＶＬ領域がリンカー配列のＣ末端に配置されることが好ましい。特定の実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第１及び第２のドメインは、これらの形式のいずれかの（ｓｃＦｖ）_２、ｓｃＦｖ－単一ドメインｍＡｂ、ダイアボディー又はオリゴマーから選択される形式である。

【0047】

いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、第３のドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第３のドメインは、１本鎖Ｆｃ（ｓｃＦｃ）ドメインである。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｃドメインは、ｓｃＦｃ半減期延長（ＨＬＥ）ドメインである。いくつかの好ましい実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第３のドメインは、アミノからカルボキシルの順に：ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－リンカー－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３があるＨＬＥドメインである。

【0048】

いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第１の結合ドメインは、第１の細胞表面抗原に結合する。いくつかの実施形態では、第１の細胞表面抗原は、ＣＤ７０である。ＣＤ７０（ＣＤ２７Ｌ又はＴＮＦＳＦ７としても知られる）は、正常な発現が活性化Ｔ及びＢ細胞、成熟樹状細胞及び胸腺髄質上皮細胞のサブセットに制限されるＩＩ型膜内在性タンパク質である。

【0049】

いくつかの実施形態では、第１の細胞表面抗原は腫瘍抗原である。本明細書中で使用する場合、「腫瘍抗原」という用語は、腫瘍細胞上に提示されるそれらの抗原を指すものと理解される。これらの抗原は、細胞外部分とともに細胞表面上に提示され得、多くの場合、分子の膜貫通部分及び細胞質部分を併せ持つ。これらの抗原は、場合により腫瘍細胞によってのみ提示され得、正常細胞によって提示され得ない。腫瘍抗原は、腫瘍細胞上に限って発現され得るか、又は正常細胞と比較して腫瘍特異的突然変異を示し得る。この場合、それらは、腫瘍特異抗原と呼ばれる。より一般的な抗原は、腫瘍細胞及び正常細胞によって提示される抗原であり、それらは、腫瘍関連抗原と呼ばれる。これらの腫瘍関連抗原は、正常細胞と比較して過剰発現され得るか、又は正常組織と比較して、腫瘍組織のよりコンパクトさに欠ける構造ゆえに、腫瘍細胞において抗体結合のために接近可能である。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＣＤ１９、ＣＤ３３、上皮増殖因子受容体変異体ｉｉｉ（ＥＧＦＲｖＩＩＩ）、メソテリン（ＭＳＬＮ）、カドヘリン１９（ＣＤＨ１９）、ＦＭＳ様チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ３）、デルタ様リガンド３（ＤＬＬ３）、胎盤カドヘリン（ＣＤＨ３）、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、ヒトムチン１７（ＭＵＣ１７）、及びクローディン－１８アイソフォーム２（ＣＬＤＮ１８．２）から選択される腫瘍抗原に結合する。いくつかの実施形態では、腫瘍抗原はヒト腫瘍抗原である。

【0050】

いくつかの好ましい実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、第１のドメイン、第２のドメイン、及び任意選択的に第３のドメインを含み、第１のドメインはＣＤ７０に結合し、第２のドメインはヒトＣＤ３に結合し、第３のドメイン（存在する場合）は、アミノからカルボキシルの順に：ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－リンカー－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３があるＨＬＥドメインである。他の好ましい実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、第１のドメイン、第２のドメイン、及び任意選択的に第３のドメインを含み、第１のドメインは、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＭＳＬＮ、ＣＤＨ１９、ＦＬＴ３、ＤＬＬ３、ＣＤＨ３、ＢＣＭＡ、ＰＳＭＡ、ＭＵＣ１７、及びＣ：ＤＮ１８．２から選択される腫瘍抗原に結合し、第２のドメインは、ヒトＣＤ３に結合し、第３のドメイン（存在する場合）は、アミノからカルボキシルの順に：ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－リンカー－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３があるＨＬＥドメインである。好ましい実施形態では、第１及び第２のドメインは、ペプチドリンカーを介して共に連結されており、且つペプチドリンカーを介して第３のドメイン（存在する場合）に連結されている。好ましいペプチドリンカーは、本明細書中上記に記載され、アミノ酸配列Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ、即ちＧｌｙ４Ｓｅｒ又はそのポリマー、即ち（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｘ［式中、ｘは、１以上の整数（例えば２、３、４、５、６又は７）である］を特徴とする。好ましい実施形態のいくつかでは、第２の結合ドメインは、配列番号２０１のアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0051】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＣＤ３３に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号１～１５のいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0052】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＥＧＦＲｖＩＩＩに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号１６～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0053】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＭＳＬＮに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号２７～３８及び１６５のいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0054】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＣＤＨ１９に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号３９～５６のいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0055】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＤＬＬ３に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号６８～７８のアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0056】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＣＤ１９に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号７９～８８のいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0057】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＦＬＴ３に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号５７～６７のいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0058】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＣＤＨ３に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号８９～９９のいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0059】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＢＣＭＡに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号１００～１１０のいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0060】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＰＳＭＡに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号１１１～１５５、１６６及び１６７のいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0061】

いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、ＣＤ７０に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の結合ドメインは、配列番号１５６～１６４のいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0062】

いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第２の結合ドメインは、Ｔ細胞の表面上のヒトＣＤ３のイプシロンに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第２のドメインは、ヒトＣＤ３ε鎖の細胞外エピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ヒトＣＤ３に特異的に結合する二重特異性抗体コンストラクトの第２のドメインは、配列番号１９３の配列のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ１と、配列番号１９４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ２と、配列番号１９５の配列のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｌ３と、を含むＶＬ領域と、配列番号１９６の配列のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ１と、配列番号１９７の配列のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ２と、配列番号１９８の配列のアミノ酸配列を有するＣＤＲ－Ｈ３と、を含むＶＨ領域と、を含む。

【0063】

いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第２のドメインは、配列番号１９９のアミノ酸配列を有するＶＨ及び配列番号２００のアミノ酸配列を有するＶＬを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトの第２のドメインは、配列番号２０１のアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。

【0064】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤ７０ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、ＣＤ７０に特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ７０に特異的に結合し、配列番号１５６～１６１で示されるようなＣＤＲを含み、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号１６２のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号１６３のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＣＤ７０ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１６４のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0065】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＢＣＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、ＢＣＭＡに特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＢＣＭＡに特異的に結合し、配列番号１００～１０５で示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、ＢＣＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号１０６のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号１０７のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＢＣＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１０８のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＢＣＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１０９のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。別の実施形態では、ＢＣＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１１０のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0066】

いくつかの実施形態では、二重特異性抗体はＣＤ３３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、ＣＤ３３に特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ３３に特異的に結合し、配列番号３～５及び８～１０で示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、ＣＤ３３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号１若しくは２のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号６若しくは７のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。別の実施形態では、ＣＤ３３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１１若しくは１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。別の実施形態では、ＢＣＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１３若しくは１５のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0067】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＥＧＦＲｖＩＩＩｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、ＥＧＦＲｖＩＩＩに特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＥＧＦＲｖＩＩＩに特異的に結合し、配列番号１６～２１で示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、ＥＧＦＲｖＩＩＩｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号２３のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＥＧＦＲｖＩＩＩｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号２４若しくは２５のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＥＧＦＲｖＩＩＩｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号２４若しくは２６のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0068】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＭＳＬＮｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、ＭＳＬＮに特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＭＳＬＮに特異的に結合し、配列番号２７～３２で示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、ＭＳＬＮｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＭＳＬＮｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号３５～３８のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＭＳＬＮｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１６５のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0069】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤＨ１９ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、ＣＤＨ１９に特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＣＤＨ１９に特異的に結合し、配列番号３９～４４で示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、ＣＤＨ１９ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号４５若しくは５２のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号４６若しくは５２のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＣＤＨ１９ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号４７、４８～５０、及び５３～５６のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＣＤＨ１９ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0070】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＤＬＬ３ｘＣＤ３二重特異性抗体であり、これは、ＤＬＬ３に特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＤＬＬ３に特異的に結合し、配列番号６８～７３で示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、ＤＬＬ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号７４のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号７５のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＤＬＬ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号７６～７８のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＤＬＬ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号７８のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0071】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＦＬＴ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、ＦＬＴ３に特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＦＬＴ３に特異的に結合し、配列番号５７～６２で示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、ＦＬＴ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号６３のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号６４のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＦＴＬ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号６５～６７のいずれかのアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＦＴＬ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号６７のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0072】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤＨ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、ＣＤＨ３に特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＣＤＨ３に特異的に結合し、配列番号８９～９４で示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、ＣＤＨ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号９５のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号９６のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＣＤＨ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号９７～９９のいずれかのアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＣＤＨ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号９９のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0073】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＰＳＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、ＰＳＭＡに特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＰＳＭＡに特異的に結合し、配列番号１１１～１１６のいずれかで示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、第１のドメインは、ＰＳＭＡに結合し、配列番号１２６～１３１及び１４１～１４６のいずれかで示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、ＰＳＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号１１７、１３２、若しくは１４７のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号１１８、１３３、若しくは１４８のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＰＳＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１１９～１２５、１３４～１４０、及び１４９～１５５のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＰＳＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１２１、１２２、１２４、１２５、１３６、１３７、１３９、１４０、１５１、１５２、１５４、及び１５５のいずれかのアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＰＳＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１６６若しくは１６７のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0074】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、Ｃｌｄｎ１８．２ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、Ｃｌｄｎ１８．２に特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、Ｃｌｄｎ１８．２に特異的に結合し、配列番号１６８～１７３で示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、Ｃｌｄｎ１８．２ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号１７４のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号１７５のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、Ｃｌｄｎ１８．２ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１７６若しくは１７８のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、Ｃｌｄｎ１８．２ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１７８のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0075】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＭＵＣ１７ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトであり、これは、ＭＵＣ１７に特異的に結合する第１のドメイン及びＣＤ３に特異的に結合する第２のドメインを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、ＨＬＥドメイン（第３のドメイン）を更に含む。一実施形態では、第１のドメインは、ＭＵＣ１７に特異的に結合し、配列番号１８４～１８９で示されるようなＣＤＲを有し、第２のドメインは、ＣＤ３に特異的に結合し、配列番号１９３～１９８で示されるようなＣＤＲを有する。一実施形態では、ＭＵＣ１７ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨは、配列番号１９０のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含み、ＶＬは、配列番号１９１のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。一実施形態では、ＭＵＣ１７ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１９２のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0076】

特定の実施形態では、二重特異性抗体コンストラクトは、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２５、配列番号４８、配列番号６７、配列番号７８、配列番号８８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７８、若しくは配列番号１９２のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなるポリペプチドを含む。

【0077】

本明細書中で開示される二重特異性抗体は、当該技術分野で公知の方法により調製され得る。例えば、二重特異性抗体は、国際公開第２００８／１１９６５７号パンフレット及び国際公開第２０１７／１３４１４０号パンフレットで開示される方法により調製され得る。

【0078】

組成物で使用され得る更なる賦形剤
いくつかの実施形態では、組成物は、医薬組成物に好適な１つ以上の賦形剤を更に含む。いくつかの実施形態では、組成物は、塩、緩衝剤、糖類若しくは糖類誘導体、アミノ酸、若しくは防腐剤、又は前述のものの２つ以上の組み合わせを更に含む。いくつかの実施形態では、組成物は、塩、糖類又は糖類誘導体、アミノ酸、及び任意選択的に防腐剤を更に含む。いくつかの実施形態では、組成物は、塩、緩衝剤、糖類又は糖類誘導体、及びアミノ酸を更に含む。いくつかの実施形態では、組成物は、塩、緩衝剤、糖類又は糖類誘導体、アミノ酸、及び防腐剤を更に含む。

【0079】

組成物で使用され得る例示的な塩としては、医薬組成物での使用に好適な塩（例えば、ＮａＣｌ）が挙げられる。組成物で使用され得る例示的な緩衝剤としては、酢酸緩衝剤、グルタミン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、コハク酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、フマル酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、及びリン酸緩衝剤が挙げられる。例示的な糖類又は糖類誘導体としては、単糖類、二糖類、環状多糖類、及び糖アルコール、例えば糖（例えば、スクロース及びトレハロース）及び糖アルコール（例えば、マンニトール及びソルビトール）などが挙げられる。例示的なアミノ酸としては、リジン、ヒスチジン、アルギニン、グリシン、メチオニン、及びアラニンが挙げられる。例示的な防腐剤としては、ベンゾエート（例えば、ベンジルアルコール及び安息香酸ナトリウム）及びソルビン酸塩（例えば、ソルビン酸カリウム）が挙げられる。

【0080】

組成物のｐＨは、約３．５～７．５の範囲であり得る。いくつかの実施形態では、組成物は、約４．０～約７．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、組成物は、約４．２～約７．０、又は約５．０～約７．０、又は約５．５～約７．０、又は約６．０～約７．０、又は約６．５～約７．０、又は約４．２～約６．５、又は約４．２～約６．０、又は約４．２～約５．５、又は約４．２～約５．０、又は約５．０～約６．０、又は約５．０～約６．５、又は約５．０～約６．０、又は約５．０～約５．５、又は約５．５～約６．０、又は約５．５～約６．５、又は約５．５～約６．０、又は約６．０～約６．５のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは、約３．５、約４．０、約４．５、約５．０、約５．５、約６．０、約６．５、約７．０、又は約７．５である。

【0081】

組成物のｐＨは、上記で列挙された１つ以上の緩衝剤を使用することによって達成され得る。いくつかの実施形態では、組成物は、酢酸緩衝剤、グルタミン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、コハク酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、フマル酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、又はリン酸緩衝剤から選択される緩衝剤を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、上記の緩衝剤のリストから選択される２つの緩衝剤の組み合わせ、例えば、グルタミン酸緩衝剤及びクエン酸緩衝剤を含む。

【0082】

いくつかの実施形態では、組成物は、更なる緩衝剤を実質的に含まない。本明細書で使用する場合、語句「更なる緩衝剤を実質的に含まない」は、組成物が、組成物のｐＨを調整及び／又は維持する目的でそこに添加される緩衝剤を含まない。例えば、生理食塩水（０．９％ＮａＣｌ溶液）は更なる緩衝剤を含まず、ｐＨは約５．５を有する。生理食塩水のｐＨは、水に溶解した大気中のＣＯ_２によって部分的に達成及び維持されると考えられている。例えば、Ｒｅｄｄｉ，Ｂ．ＡＪ Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．１０：７４７－７５０（２０１３）を参照されたい。そのような組成物は、組成物の緩衝能力に寄与しない残留緩衝剤を含み得る。

【0083】

いくつかの実施形態では、組成物は、上記で開示される濃度のいずれかのタンパク質と、上記で開示される濃度のいずれかの界面活性剤と、を含み、塩（例えば、ＮａＣｌ）、糖（例えば、スクロース）、アミノ酸（例えば、リジン）、及び任意選択的に防腐剤（例えば、ベンジルアルコール）を更に含む。いくつかの実施形態では、組成物は、上記で開示される濃度のいずれかのタンパク質と、上記で開示される濃度のいずれかの界面活性剤と、を含み、塩（例えば、ＮａＣｌ）、糖（例えば、スクロース）、アミノ酸（例えば、リジン）、緩衝剤（例えば、グルタミン酸緩衝剤及び／又はクエン酸緩衝剤）、及び任意選択的に防腐剤（例えば、ベンジルアルコール）を更に含む。組成物のｐＨは、上記で開示されるｐＨ値のいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは、約５．５である。

【0084】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示される組成物は、医薬組成物である。本明細書で使用する場合、「医薬組成物」という用語は、それを必要とする患者（例えばヒト）への注射及び／又は投与に好適なタンパク質（例えば、二重特異性抗体コンストラクト）を含む処方物を指すものと理解される。より詳しくは、医薬組成物は実質的に無菌であり、レシピエントに対して過度な毒性又は感染性を有する如何なる物質も含有しない。

【0085】

組成物のための容器
いくつかの実施形態では、本明細書で開示される組成物は、プラスチック容器に収容されている。本明細書で使用され得る容器としては、無毒且つ物理的一体性を維持する材料で作製された容器など、医薬品の使用に好適なものが挙げられる。いくつかの実施形態では、容器は、静脈内（ＩＶ）投与用コンポーネントである。本明細書で使用する場合、「ＩＶ投与用コンポーネント」は、ＩＶ投与中に組成物と接触し得るシステムの容器又は一部を指すと理解される。いくつかの実施形態では、容器は、ＩＶバッグ又はＩＶチューブである。

【0086】

容器の製造に使用され得る材料としては、ガラス及びプラスチックなどの医薬品容器の製造に典型的に使用される材料が挙げられる。

【0087】

いくつかの実施形態では、容器は、プラスチック容器である。いくつかの実施形態では、容器は、ポリオレフィン（例えば、ポリプロピレン（ＰＰ）及びポリエチレン（ＰＥ））、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、エチレン酢酸ビニル（ＥＶＡ）、又はポリウレタン（例えば、ポリエステル及びポリエーテル）を含む材料から作製される。いくつかの実施形態では、容器は、ＰＶＣを含む材料から作製される。いくつかの実施形態では、ＰＶＣは、ジ－２－エチルヘキシルフタレート（ＤＥＨＰ）又はトリ－２－エチルヘキシルトリメリテート（ＴＯＴＭ）を実質的に含まない。本明細書で使用する場合、用語「～を実質的に含まない」は、ＤＥＨＰ又はＴＯＴＭが使用及び／又は検出されないＰＶＣを指すと理解される。ＤＥＨＰ及びＴＯＴＭは可塑剤であり、ＰＶＣを柔らかくするために使用できるため、様々な形状に作ることができる。いくつかの実施形態では、容器は、ＰＶＣを含まない材料から作製される。いくつかの実施形態では、容器は、ポリオレフィン、ＥＶＡ、又はポリウレタン（例えば、ポリエステル及びポリエーテル）を含む材料から作製される。いくつかの実施形態では、容器は、ＰＰ及び／又はＰＥを含む材料から作製される。

【0088】

特定の条件下では、特定の種類のＰＶＣプラスチックに含まれるＤＥＨＰ又はＴＯＴＭは、特定の界面活性剤（例えば、ポリソルベート、実施例３を参照されたい）の特定の濃度の存在下で、プラスチックから浸出する可能性がある。任意の特定の理論に制限されることを望むものではないが、親油性の界面活性剤が多いほど、界面活性剤の存在下でＤＥＨＰ又はＴＯＴＭが浸出しやすくなると考えられている。界面活性剤の親水性親油性比（ＨＬＢ）は、それが親水性又は親油性である程度の尺度であり、当該技術分野で公知の方法によって計算することができる。例えば、Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ｗｉｌｌｉａｍ Ｃ．Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＨＬＢ Ｖａｌｕｅｓ ｏｆ Ｎｏｎ－Ｉｏｎｉｃ Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ，５（４）：２４９－５６（１９５４）を参照されたい。ＨＬＢ値は、界面活性剤の特性を予測するために使用することができ、例えば、ＨＬＢ＞１０は、界面活性剤がより水溶性（脂質不溶性）であることを示し、ＨＬＢ＜１０は、界面活性剤がより脂溶性（水不溶性）であることを示す。本明細書に開示される組成物で使用することができる例示的な界面活性剤のＨＬＢ値としては、１７（ポリソルベート２０）、１５（ポリソルベート８０）（ｈｔｔｐｓ：／／ｐｈａｒｍｌａｂｓ．ｕｎｃ．ｅｄｕ／ｌａｂｓ／ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ／ｈｌｂ．ｈｔｍ）、及び２９（ポロキサマー１８８）（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｒｕｍａｐｅｌ．ｃｏｍ．ａｒ／ｃｏｓｍｅｔｉｃａ＿ｍｉｓｃｅｌａｎｅｏｓ／ｆｉｃｈａ＿ｔｅｃｎｉｃａ／Ｐｌｕｒａｃａｒｅ％２０Ｌ－％２０Ｆ％２０Ｇｒａｄｅｓ．ｐｄｆ）が挙げられる。容器がＤＥＨＰ又はＴＯＴＭを含むＰＶＣプラスチックから作製される実施形態では、組成物中の界面活性剤は、好ましくは少なくとも２０のＨＬＢ値（例えば、ポロキサマー、実施例３を参照）、より好ましくは２０～３０のＨＬＢ値を有する。

【0089】

上記の材料から作製されたＩＶコンポーネント（例えば、ＩＶ投与に使用されるＩＶバッグ及びチューブ）などの容器は市販されている。例えば、様々な好適な容器は、Ｂａｘｔｅｒ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ及びＢ．Ｂｒａｕｎ ＭｅｄｉｃａｌＩｎｃなどの製造者から入手することができる。

【0090】

医薬製剤
また、本明細書では、上記で開示される水性組成物を含む医薬製剤が開示される。本明細書で使用する場合、「医薬製剤」は、患者（例えば、ヒト）に投与する前に、好適な医薬容器に本明細書に開示される水性組成物を含む製剤を指すと理解される。いくつかの実施形態では、容器に水性医薬組成物を含む医薬製剤であって、水性医薬組成物が：ａ）約０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度のタンパク質と、ｂ）界面活性剤のＣＭＣの少なくとも約０．２５倍の濃度の界面活性剤と、を含み、タンパク質がブリナツモマブではない、医薬製剤が本明細書で開示される。

【0091】

いくつかの実施形態では、組成物中に含まれる界面活性剤は、ポリソルベートである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、及びポリソルベート８５から選択されるポリソルベートである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート２０、又はポリソルベート８０である。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポロキサマーである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポロキサマー１８８、又はポロキサマー４０７である。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、トリトンＸ－１００である。

【0092】

いくつかの実施形態では、容器に水性医薬組成物を含む医薬製剤であって、水性医薬組成物が：ａ）約０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度の二重特異性抗体コンストラクトと、ｂ）界面活性剤のＣＭＣの少なくとも約０．２５倍の濃度の界面活性剤と、を含み、界面活性剤がポロキサマーではない、医薬製剤が本明細書で開示される。いくつかの実施形態では、ポロキサマーは、ポロキサマー１８８、又はポロキサマー４０７である。

【0093】

いくつかの実施形態では、界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約２０倍の濃度で組成物中に存在する。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約１０倍の濃度で組成物中に存在する。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、上記で開示される濃度範囲のいずれかの範囲内の濃度で組成物中に存在する。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、上記で開示される濃度のいずれかの濃度で組成物中に存在する。界面活性剤のＣＭＣ値は、上記で開示される方法により決定することができる。いくつかの実施形態では、特定の一般的に使用される界面活性剤のＣＭＣ値を、表１に列記する。

【0094】

いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、約０．００１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬの濃度のタンパク質を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、上記で開示される範囲のいずれかの範囲内の濃度のタンパク質（例えば、二重特異性抗体コンストラクト）を含む。いくつかの実施形態では、タンパク質（例えば、二重特異性抗体コンストラクト）は、上記で開示される濃度のいずれかで組成物中に存在する。上記で開示されるタンパク質の濃度又は濃度範囲のいずれかを、上記で開示される界面活性剤の濃度又は濃度範囲のいずれかと組み合わせることができる。

【0095】

上記に開示されるとおり、タンパク質は、抗原結合タンパク質又は融合タンパク質などの治療用タンパク質であり得る。いくつかの実施形態では、タンパク質は、二重特異性抗原結合タンパク質である。いくつかの実施形態では、タンパク質は、上記で開示される二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤ７０ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＢＣＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤ３３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＥＧＦＲｖＩＩＩｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＭＳＬＮｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤＨ１９ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＤＬＬ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＦＬＴ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤＨ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＰＳＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、Ｃｌｄｎ１８．２ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＭＵＣ１７ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。これらの二重特異性抗体コンストラクトの各々は、上記で開示されている。特定の実施形態では、タンパク質は、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２５、配列番号４８、配列番号６７、配列番号７８、配列番号８８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７８、若しくは配列番号１９２のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなる。

【0096】

組成物のｐＨは、上記で開示されるｐＨ範囲のいずれかの範囲内であり得る。いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは、上記で開示される任意のｐＨであり得る。

【0097】

いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、医薬組成物での使用に好適な１つ以上の賦形剤を更に含む。いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、塩、緩衝剤、アミノ酸、糖類若しくは糖類誘導体、防腐剤、又はこれらの組み合わせを更に含む。いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、塩、アミノ酸、糖類若しくは糖類誘導体、防腐剤、又はこれらの組み合わせを更に含む。組成物で使用され得る例示的な塩、緩衝剤、アミノ酸、糖類又はその誘導体、及び防腐剤は、上記で開示されている。

【0098】

いくつかの実施形態では、容器は、プラスチック容器である。いくつかの実施形態では、容器は、ポリオレフィン（例えば、ＰＰ及びＰＥ）、ＰＶＣ、ＥＶＡ、又はポリウレタン（例えば、ポリエステル及びポリエーテル）を含む材料から作製される。いくつかの実施形態では、容器は、ＰＶＣを含む材料から作製される。いくつかの実施形態では、ＰＶＣは、ＤＥＨＰ又はＴＯＴＭを実質的に含まない。いくつかの実施形態では、容器は、ＰＶＣを含まない材料から作製される。

【0099】

いくつかの実施形態では、組成物中に含まれる界面活性剤は、ポロキサマーであり、容器は、ポリオレフィン、ＰＶＣ、ＥＶＡ、又はポリウレタン（例えば、ポリエステル及びポリエーテル）を含む材料から作製することができる。いくつかの実施形態では、組成物中に含まれる界面活性剤は、ポリソルベート又はトリトンＸ－１００であり、容器は、ポリオレフィン、ＤＥＨＰ若しくはＴＯＴＭを実質的に含まないＰＶＣ、ＥＶＡ、又はポリウレタン（例えば、ポリエステル及びポリエーテル）を含む材料から作製することができる。

【0100】

いくつかの実施形態では、容器は、静脈内（ＩＶ）投与用コンポーネントである。いくつかの実施形態では、容器は、ＩＶバッグ又はＩＶチューブである。

【0101】

いくつかの実施形態では、医薬製剤は、容器に水性医薬組成物を含み、水性医薬組成物が、二重特異性抗体コンストラクト（例えば、本明細書で開示される二重特異性抗体コンストラクトのいずれか）と、界面活性剤（例えば、本明細書で開示される界面活性剤のいずれか）と、を含み、塩（例えば、ＮａＣｌ）、アミノ酸（例えば、リジン）、糖類又は糖類誘導体（例えば、スクロース又はマンニトール）、任意選択的に防腐剤（例えば、ベンジルアルコール）を更に含み、容器が、ポリオレフィン、ＰＶＣ、ＥＶＡ、又はポリウレタン（例えば、ポリエステル及びポリエーテル）を含む材料から作製される。いくつかの実施形態では、医薬製剤は、容器に水性医薬組成物を含み、水性医薬組成物が、二重特異性抗体コンストラクト（例えば、本明細書で開示される二重特異性抗体コンストラクトのいずれか）と、界面活性剤（例えば、本明細書で開示される界面活性剤のいずれか）と、を含み、塩（例えば、ＮａＣｌ）、緩衝剤（例えば、グルタミン酸緩衝剤及び／又はクエン酸緩衝剤）、アミノ酸（例えば、リジン）、糖類又は糖類誘導体（例えば、スクロース又はマンニトール）、任意選択的に防腐剤（例えば、ベンジルアルコール）を更に含み、容器が、ポリオレフィン、ＰＶＣ、ＥＶＡ、又はポリウレタン（例えば、ポリエステル及びポリエーテル）を含む材料から作製される。二重特異性抗体コンストラクトの濃度は、タンパク質について上記に開示された濃度のいずれかであり得る。界面活性剤の濃度は、上記で開示される濃度のいずれかであり得る。組成物のｐＨは、約３．５～約７．０の範囲である。いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは、約５．５である。いくつかの実施形態では、容器は、ＩＶバッグである。

【0102】

組成物を投与する方法
また、本明細書で開示される組成物を患者に投与する方法が本明細書で開示される。いくつかの実施形態では、タンパク質を患者に投与する方法であって、方法が、ａ）容器中で水性医薬組成物を調製することであって、水性医薬組成物が、約０．００１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬの濃度のタンパク質（例えば、本明細書で開示される二重特異性抗体コンストラクト）と、界面活性剤のＣＭＣの少なくとも約０．２５倍の濃度の界面活性剤と、を含むことと、ｂ）水性医薬組成物を患者に投与することと、を含み、タンパク質がブリナツモマブではない、方法が本明細書で開示される。

【0103】

いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、タンパク質（例えば、二重特異性抗体コンストラクト）を含む第１の組成物を好適な水溶液で希釈することによって調製される。いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、好適な溶液を容器中に添加し、続いて適切な量の第１の組成物を容器中に添加し、それによりタンパク質を含む第１の組成物を希釈することによって調製される。

【0104】

いくつかの実施形態では、第１の組成物は、タンパク質を含む液体組成物である。いくつかの実施形態では、第１の組成物は、タンパク質を含む凍結乾燥組成物から再構成された液体組成物である。いくつかの実施形態では、第１の組成物は、滅菌水を使用して、タンパク質を含む凍結乾燥組成物から再構成された液体組成物である。

【0105】

いくつかの実施形態では、第１の組成物を希釈するために使用される好適な水溶液は、界面活性剤のＣＭＣの少なくとも約０．２５倍の濃度の界面活性剤を含む。いくつかの実施形態では、第１の組成物を希釈するために使用される好適な水溶液は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約２０倍、又は約０．２５倍～約１０倍の濃度の界面活性剤を含む。いくつかの実施形態では、第１の組成物を希釈するために使用される好適な水溶液は、界面活性剤のＣＭＣの０．２５倍、約０．５倍、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１５倍、又は約２０倍の濃度の界面活性剤を含む。いくつかの実施形態では、第１の組成物を希釈するために使用される好適な水溶液は、ＮａＣｌを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の組成物を希釈するために使用される好適な水溶液は、約３．５～約７．０、又は約４．０～約６．５のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、第１の組成物を希釈するために使用される好適な水溶液は、約５．５のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、方法は、調製ステップの前に、第１の組成物を希釈するために使用される好適な水溶液で容器をすすぐことを更に含む。

【0106】

いくつかの実施形態では、水性医薬組成物中の界面活性剤は、ポリソルベートである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、及びポリソルベート８５から選択されるポリソルベートである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート２０、又はポリソルベート８０である。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポロキサマーである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポロキサマー１８８、又はポロキサマー４０７である。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、トリトンＸ－１００である。

【0107】

いくつかの実施形態では、水性医薬組成物中の界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約２０倍の濃度で組成物中に存在する。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、界面活性剤のＣＭＣの約０．２５倍～約１０倍の濃度で水性医薬組成物中に存在する。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、上記で開示される濃度範囲のいずれかの範囲内の濃度で水性医薬組成物中に存在する。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、上記で開示される濃度のいずれかの濃度で水性医薬組成物中に存在する。界面活性剤のＣＭＣ値は、上記で開示される方法により決定することができる。いくつかの実施形態では、特定の一般的に使用される界面活性剤のＣＭＣ値を、表１に列記する。

【0108】

いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、約０．００１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬの濃度のタンパク質を含む。いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、上記で開示される範囲のいずれかの範囲内の濃度のタンパク質を含む。いくつかの実施形態では、タンパク質は、上記で開示される濃度のいずれかで組成物中に存在する。

【0109】

上記に開示されるとおり、タンパク質は、抗原結合タンパク質、ｍＡｂ又は融合タンパク質などの治療用タンパク質であり得る。いくつかの実施形態では、タンパク質は、二重特異性抗原結合タンパク質である。いくつかの実施形態では、タンパク質は、上記で開示される二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤ７０ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＢＣＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤ３３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＥＧＦＲｖＩＩＩｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＭＳＬＮｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤＨ１９ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＤＬＬ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＦＬＴ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＣＤＨ３ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＰＳＭＡｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、Ｃｌｄｎ１８．２ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。いくつかの実施形態では、タンパク質は、ＭＵＣ１７ｘＣＤ３二重特異性抗体コンストラクトである。これらの二重特異性抗体コンストラクトの各々は、上記で開示されている。特定の実施形態では、タンパク質は、配列番号１３、配列番号１５、配列番号２５、配列番号４８、配列番号６７、配列番号７８、配列番号８８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１６５、配列番号１６６、配列番号１６７、配列番号１７８、若しくは配列番号１９２のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、又はそれからなる。

【0110】

組成物のｐＨは、上記で開示されるｐＨ範囲のいずれかの範囲内であり得る。いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは、上記で開示される任意のｐＨであり得る。

【0111】

いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、医薬組成物での使用に好適な１つ以上の賦形剤を更に含む。いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、塩、緩衝剤、アミノ酸、糖類若しくは糖類誘導体、任意選択的には防腐剤、又は前述のものの２つ以上の組み合わせを更に含む。いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、塩、アミノ酸、糖類若しくは糖類誘導体、任意選択的には防腐剤、又は前述のものの２つ以上の組み合わせを更に含む。組成物で使用され得る例示的な塩、緩衝剤、アミノ酸、糖類又はその誘導体、及び防腐剤は、上記で開示されている。

【0112】

いくつかの実施形態では、容器は、プラスチック容器又はコンポーネントである。いくつかの実施形態では、容器は、ポリオレフィン（例えば、ＰＰ及びＰＥ）、ＰＶＣ、ＥＶＡ、又はポリウレタン（例えば、ポリエステル及びポリエーテル）を含む材料から作製される。いくつかの実施形態では、容器は、ＰＶＣを含む材料から作製される。いくつかの実施形態では、ＰＶＣは、ＤＥＨＰ又はＴＯＴＭを実質的に含まない。いくつかの実施形態では、容器は、ＰＶＣを含まない材料から作製される。いくつかの実施形態では、容器は、ＩＶバッグ又はＩＶチューブである。

【0113】

いくつかの実施形態では、水性医薬組成物は、ＩＶ投与により患者に投与される。いくつかの実施形態では、患者は、癌患者である。いくつかの実施形態では、患者はヒトである。

【0114】

タンパク質の固体表面への結合に接近するための方法
また、本明細書では、タンパク質の固体表面への結合に接近するための方法が開示される。いくつかの実施形態では、タンパク質の固体表面への結合に接近する方法であって：ａ）タンパク質を含む水溶液を固体表面とインキュベートすることであって、タンパク質がフルオロフォアで標識されていることと、ｂ）固体表面から水溶液を除去し、表面をすすぐことと、ｃ）共焦点顕微鏡を使用して固体表面を画像化することと、を含む方法が本明細書で開示される。

【0115】

【表2】

【0116】

【表3】

【0117】

【表4】

【0118】

【表5】

【0119】

【表6】

【0120】

【表7】

【0121】

【表8】

【0122】

【表9】

【0123】

【表10】

【0124】

【表11】

【0125】

【表12】

【0126】

【表13】

【0127】

【表14】

【0128】

【表15】

【0129】

【表16】

【0130】

【表17】

【0131】

【表18】

【0132】

【表19】

【0133】

【表20】

【0134】

【表21】

【0135】

【表22】

【0136】

【表23】

【0137】

【表24】

【0138】

【表25】

【0139】

【表26】

【0140】

【表27】

【0141】

【表28】

【0142】

【表29】

【0143】

【表30】

【0144】

【表31】

【0145】

【表32】

【0146】

【表33】

【0147】

【表34】

【0148】

【表35】

【0149】

【表36】

【0150】

【表37】

【0151】

【表38】

【0152】

【表39】

【0153】

【表40】

【0154】

【表41】

【0155】

【表42】

【0156】

【表43】

【0157】

【表44】

【0158】

【表45】

【0159】

本発明は、以下の実施例を参照することにより、より詳細に理解されるであろう。しかし、実施例は、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。

【実施例】

【0160】

実施例１．タンパク質の固体表面への結合を測定する方法
二重特異性抗体コンストラクトは、内部から供給された。これらをフルオロフォアで標識し、標識手順の後に精製した。

【0161】

各測定チャンバは、プラスチックカバースリップを備えている。タンパク質の固体表面への結合を測定するために、底部にプラスチックカバースリップを備えた測定チャンバを、最初にフルオロフォアタンパク質（例えば、フルオロフォア標識抗体コンストラクト）を含む溶液とともにインキュベートした。次いで、サンプル溶液を吸引し、カバースリップからすすぎ、後で共焦点顕微鏡で画像化するために緩衝液で満たした。共焦点顕微鏡で測定した蛍光強度は、二重特異性抗体コンストラクトがカバースリップに結合していることを示している。図１は、実験装置の配置図を示す。

【0162】

図２は、界面活性剤の非存在下で、固体表面（カバースリップなど）に別々に結合する２つのフルオロフォア標識抗体コンストラクトの滴定を示す。結合したフルオロフォア標識抗体コンストラクトの蛍光強度は、表面の共焦点ｘｙスキャンによって測定した。

【0163】

実施例２．タンパク質の表面への結合を防ぐ界面活性剤による固体表面の処理
いくつかの界面活性剤をそれぞれのＣＭＣの異なる倍率で使用して、二重特異性抗体コンストラクトが固体表面に結合するのを防ぐ際の各界面活性剤の有効性を決定した。この研究では、界面活性剤を含む溶液を最初に表面とインキュベートし、次にフルオロフォア標識抗体コンストラクトを添加してインキュベートした。その後、溶液を吸引し、表面をすすぎ、共焦点顕微鏡で画像化するための緩衝液で満たした。結果を図３に示す。図において、最初のグループの棒は、界面活性剤なしで表面に結合する二重特異性抗体である。これらはベンチマークとして機能し、以下の全てのデータグループがそれらと比較された。２番目から最後のグループまでは、異なるＣＭＣの異なる倍率の異なる界面活性剤で前処理された表面に結合したタンパク質の相対的なパーセンテージである。挿入は、グラフの下部領域の拡大である。ＰＳ８０、ＰＳ２０、Ｐ１８８、Ｐ４０７、及びトリトンＸ－１００を調査した。

【0164】

界面活性剤及び抗体を表面に添加する順序を試験した。二重特異性抗体１及び２については、２つの順序が試験された：最初のものでは、表面に抗体を添加する前に、界面活性剤含有溶液を表面に添加し；もう一方ではその逆であった。結果を図４に示した（左が抗体１、右が抗体２である）。双方の図について、最初のグループの棒は、界面活性剤なしで表面に結合する二重特異性抗体である。これらはベンチマークとして機能し、以下の全てのデータグループがそれらと比較された。２番目から最後のグループまでは、そのＣＭＣの異なる倍率のＰＳ８０で前処理された表面に結合した抗体の相対的なパーセンテージである。界面活性剤は、タンパク質が表面に結合するのを効果的に防いだ。

【0165】

実施例３．プラスチックＩＶコンポーネントで使用される特定の界面活性剤と可塑剤の非互換性
生理食塩水希釈剤を事前に充填したＢａｘｔｅｒ Ｖｉａｆｌｅｘ ＰＶＣ－ＤＥＨＰ ＩＶバッグを研究に使用した。界面活性剤は、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）、ポロキサマー１８８（Ｐ１８８）、ポロキサマー４０７（Ｐ４０７）、及びトリトンＸ－１００を、研究で使用した。異なる量の異なる界面活性剤をバッグとともに２５℃で２４時間又は４８時間インキュベートした。次いで、バッグをサンプリングし、逆相超高圧液体クロマトグラフィー（ＲＰ－ＵＨＰＬＣ）で分析し、ＵＶ検出器で検出した。移動相Ａ及びＢは、ＤＩ水中の０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）及びアセトニトリル中の０．１％ＴＦＡである。勾配を、以下の表３に列挙する。流速は、０．６ｍＬ／分である。定量化のために、ＤＥＨＰの標準曲線を同じ条件下で作成した。

【0166】

【表46】

【0167】

ＰＳ８０、ＰＳ２０、及びＰ１８８は、ＰＶＣ－ＤＥＨＰ ＩＶバッグ内の生理食塩水中０．３ｗｔ％で、２５℃の２４時間及び４８時間で比較した。結果を図５に示す。ＰＳ８０及びＰＳ２０は、ＰＶＣ－ＤＥＨＰ ＩＶバッグからのＤＥＨＰの大幅な浸出を引き起こしたが、Ｐ１８８は浸出を引き起こさなかった（図５）。生理食塩水単独を対照として使用した。

【0168】

ＰＳ８０、ＰＳ２０、Ｐ１８８、Ｐ４０７、及びトリトンＸ－１００を、ＰＶＣ－ＤＥＨＰ ＩＶバッグ内の生理食塩水中で２５℃で２４時間インキュベートすることにより、それぞれのＣＭＣの異なる倍率で比較した。浸出したＤＥＨＰの量は、図６でＣＭＣの倍率の関数としてプロットした。明らかに、ポリソルベートは一定量のＤＥＨＰを抽出するが、ポロキサマーは抽出しない。また、浸出したＤＥＨＰの量は、使用される界面活性剤の量と相関関係がある。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【配列表】

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【国際調査報告】