特表 2022-553640 眼障害を処置する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-12-26

(54)【発明の名称】眼障害を処置する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 47/68 20170101AFI20221219BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20221219BHJP

   A61K 47/56 20170101ALI20221219BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20221219BHJP

   C07K 16/22 20060101ALN20221219BHJP

【ＦＩ】

A61K47/68

A61P27/02

A61K47/56

A61K39/395 N

C07K16/22 ZNA

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022521198

(86)(22)【出願日】2020-10-09

(85)【翻訳文提出日】2022-06-06

(86)【国際出願番号】 US2020055074

(87)【国際公開番号】W WO2021072265

(87)【国際公開日】2021-04-15

(31)【優先権主張番号】62/913,567

(32)【優先日】2019-10-10

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/935,434

(32)【優先日】2019-11-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/971,738

(32)【優先日】2020-02-07

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】512159960

【氏名又は名称】コディアック サイエンシーズ インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】Ｋｏｄｉａｋ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｉｎｃ．

(74)【代理人】

【識別番号】110002860

【氏名又は名称】弁理士法人秀和特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】エールリッヒ，ジェイソン

(72)【発明者】

【氏名】ヴェラスケス－マルティン，パブロ

(72)【発明者】

【氏名】ナオール，ジョエル

(72)【発明者】

【氏名】ペルロス，ディー．ヴィクター

(72)【発明者】

【氏名】リャン，ホン

【テーマコード（参考）】

4C076

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA12

4C076AA95

4C076BB24

4C076EE59

4C085AA14

4C085AA23

4C085BB11

4C085CC23

4C085DD11

4C085DD59

4C085EE01

4C085GG01

4H045AA11

4H045AA30

4H045BA50

4H045BA56

4H045BA57

4H045CA40

4H045DA75

4H045DA76

4H045EA20

(57)【要約】

抗ＶＥＧＦ抗体および／またはコンジュゲートを、眼障害を有する対象に投与することにより眼障害を処置する方法が本明細書において提供される。本開示の抗ＶＥＧＦ抗体は、対象に投与された場合の抗体の半減期／有効性／特性を拡大させるポリマー部分を含む抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートであってもよい。本開示の方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の用量を、眼障害の処置を必要とする対象（例えば、ヒトまたは他の哺乳動物患者）に投与することを含み、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートは、眼障害を処置するために、標準的な抗ＶＥＧＦ治療よりも低い頻度で投与されてもよい。
【選択図】図４２

【特許請求の範囲】

【請求項1】

眼障害を処置する方法であって、
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与すること；および
前記負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すこと
を含み、
それにより、前記対象が、前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも１２週間保持する、
方法。

【請求項2】

前記眼障害が、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、および糖尿病網膜症（ＤＲ）のうちの少なくとも１つである、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記眼障害がＤＭＥまたはＲＶＯのいずれかである、請求項１～２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項4】

網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）を処置する方法であって、
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを、ＲＶＯを有する対象に第１の負荷用量において投与すること；および
前記負荷用量を１回繰り返すこと
を含み；
それにより、前記対象が、前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも８週間保持する、
方法。

【請求項5】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の前記治療結果が、最終負荷用量後に少なくとも１４週間続く、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項6】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の前記治療結果が、最終負荷用量後に少なくとも２０週間続く、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項7】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートのさらなる投与が、前記対象に最終負荷用量の４週以内に提供されない、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートのさらなる投与が、前記対象に最終負荷用量の１０週以内に提供されない、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートのさらなる投与が、前記対象に最終負荷用量の１４週以内に提供されない、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項10】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートのさらなる投与が、前記対象に最終負荷用量の２０週以内に提供されない、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項11】

前記負荷用量が、各負荷用量の間に約１か月を伴って投与される、請求項１～１０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項12】

前記負荷用量が、各負荷用量の間に約１～２か月を伴って投与される、請求項１～１０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項13】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を前記対象に前記最終負荷用量後に投与することをさらに含む、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項14】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの任意の後続用量が、１２週毎に１回以下の頻度で投与される、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの任意の後続用量が、２０週毎に１回以下の頻度で投与される、請求項１３または１４に記載の方法。

【請求項16】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの前記１回または複数回の後続用量が、平均で２４週毎に１回以下の頻度で投与される、請求項１３～１５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの第１の後続用量を前記最終負荷用量後の第１の期間において投与すること；および
第２の後続用量を前記第１の後続用量後の第２の期間において投与することであって、前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートが前記第１の後続用量および前記第２の後続用量の間に投与されない、前記投与すること
を含み、
前記第１の期間が前記第２の期間よりも短い、
請求項１２～１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

前記第１の期間が８週またはより長い、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

前記第２の時間間隔が前記第１の期間よりも少なくとも４週長い、請求項１７または１８に記載の方法。

【請求項20】

負荷用量当たり約１．２５ｍｇの抗体が、前記対象に前記抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲートの形態で投与される、請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項21】

負荷用量当たり約５ｍｇの抗体が、前記対象に前記抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲートの形態で投与される、請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項22】

前記負荷用量に後続する用量が、直近の負荷用量の少なくとも２０週後まで投与されない、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項23】

前記負荷用量に後続する用量が、直近の負荷用量の少なくとも２４週後まで投与されない、請求項２２に記載の方法。

【請求項24】

前記治療結果が、処置前のレベルと比較した、視力の改善、網膜厚の低減、少なくとも１つの目における灌流の改善、糖尿病網膜症重症度スコア（ＤＲＳＳ）の改善、または前記眼障害の疾患活動性の低減のうちの１つまたは複数を含む、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項25】

目の灌流を改善する方法であって、
ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を同定すること；および
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの少なくとも２回の負荷用量を前記対象に投与すること；
前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回のさらなる用量を前記対象に、
前記対象が少なくとも１つの目における灌流の改善を示すまで提供すること
を含む、方法。

【請求項26】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの前記負荷用量の各々が少なくとも１．２５ｍｇの抗体タンパク質を含む、請求項２５に記載の方法。

【請求項27】

前記負荷用量に後続する用量が、直近の負荷用量の少なくとも２０週後まで投与されない、請求項２５または２６に記載の方法。

【請求項28】

目の灌流を改善する方法であって、
非増殖性ＤＲを有する対象を同定すること；および
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの初期用量を前記対象に投与して、少なくとも１つの目における灌流の改善を提供すること
を含む、方法。

【請求項29】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回のさらなる用量を前記対象に前記初期用量後に提供することをさらに含む、請求項２８に記載の方法。

【請求項30】

用量が、前記初期用量の少なくとも２０週後まで投与されない、請求項２９に記載の方法。

【請求項31】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの負荷用量が前記対象に投与されない、請求項２８～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの各用量が少なくとも１．２５ｍｇの抗体タンパク質を含む、請求項２８～３１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項33】

前記灌流の改善が、前記少なくとも１つの目における無灌流の進行の速度における低減を少なくとも含む、請求項２５～３２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項34】

前記灌流の改善が、処置前に対して無灌流の面積における少なくとも１０％の低減を含む、請求項２５～３２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項35】

ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を処置する方法であって、
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１～３回の負荷用量を、ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象に投与すること；
３回より多くの負荷用量を前記対象に投与しないこと；
前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用を前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの直近の負荷用量または直近の後続適用の１２週以後の時点において提供することであって、前記負荷用量が前記対象に月毎を基準にして投与される、前記提供すること
を含む、方法。

【請求項36】

前記対象が増殖性ＤＲを有し、かつ前記方法が、前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの３回の負荷用量を前記対象に投与することを含む、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

非増殖性ＤＲを有する対象を処置する方法であって、
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１または２回の負荷用量を、非増殖性ＤＲを有する対象に投与すること；
２回より多くの負荷用量を前記対象に投与しないこと；および
前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与を直近の負荷用量の１２週以後の時点に
おいて提供することであって、前記負荷用量が前記対象に月毎を基準にして投与される、前記提供すること
を含む、方法。

【請求項38】

ＲＶＯを有する対象を処置する方法であって、
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１または２回の負荷用量を、ＲＶＯを有する対象に投与すること；
２回より多くの負荷用量を前記対象に投与しないこと；
前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与を直近の負荷用量の８週以後の時点において提供することであって、前記負荷用量が前記対象に月毎を基準にして投与される、前記提供すること
を含む、方法。

【請求項39】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの各負荷用量が少なくとも１．２５ｍｇの抗体タンパク質を含む、請求項３５～３８または４５～７７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項40】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートが、硝子体内注射を介して投与される、請求項１～３９または４５～７７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項41】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートが５ｍｇの量で投与される、請求項１～３７または４５～７７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項42】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートが、ポリマーに結合した抗ＶＥＧＦ－Ａ免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を含む抗体コンジュゲートを含み、前記ポリマーがＭＰＣモノマーを含み、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体重鎖の配列が配列番号１であり、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体軽鎖の配列が配列番号２であり、かつ前記抗体が配列番号１中のＣ４４９において前記ポリマーに結合している、請求項１～３８または４５～７７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項43】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートが、軽鎖および重鎖を含む抗体コンジュゲートを含み、前記抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体重鎖が、ＣＤＲ_Ｈ１：ＧＹＤＦＴＨＹＧＭＮ（配列番号９）、ＣＤＲ_Ｈ２：ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＡＤＦＫＲ（配列番号１０）、およびＣＤＲ_Ｈ３：ＹＰＹＹＹＧＴＳＨＷＹＦＤＶ（配列番号１１）を含み、かつ前記抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体軽鎖が、ＣＤＲ_Ｌ１：ＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮ（配列番号１２）、ＣＤＲ_Ｌ２：ＦＴＳＳＬＨＳ（配列番号１３）、およびＣＤＲ_Ｌ３：ＱＱＹＳＴＶＰＷＴ（配列番号１４）を含む、請求項１～４２または４５～７７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項44】

前記抗体コンジュゲートが、以下の構造：

【化1】

を有し、式中、
前記抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各重鎖は文字Ｈにより表され、かつ前記抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各軽鎖は文字Ｌにより表され；
前記ポリマーは、Ｃ４４３（ＥＵナンバリング）のスルフヒドリルを通じて前記抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体に結合しており、前記結合は前記重鎖の１つに描写されており；
ＰＣは、

【化2】

であり、曲線は前記ポリマーの残部への結合点を指し示し、Ｘは、ａ）－ＯＲ（式中、Ｒは、－Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピルである）、ｂ）－Ｈ、ｃ）－Ｂｒ、－Ｃｌ、もしくは－Ｉを含む、任意のハロゲン、ｄ）－ＳＣＮ、またはｅ）－ＮＣＳであり；かつ
ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９は同じまたは異なり、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９の和は２５００プラス
またはマイナス１５％である、
請求項４２または４３に記載の方法。

【請求項45】

ＲＶＯを処置する方法であって、
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを、ＲＶＯの処置を必要とする対象に１～３回の負荷用量において投与すること
を含み；かつ
それにより、前記対象が、ＲＶＯに対する前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも８週間、および／または少なくとも８週の１回もしくは複数回のその後の投薬間隔の間に保持する、
方法。

【請求項46】

前記対象が、１０週毎に１回よりも高い頻度で前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを用いて再処置されない、請求項４５に記載の方法。

【請求項47】

前記対象が、１２週毎に１回よりも高い頻度で前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを用いて再処置されない、請求項４５に記載の方法。

【請求項48】

眼障害の疾患修飾の方法であって、
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを、眼障害を有する対象に第１の負荷用量において投与すること
を含み、それにより、前記眼障害が、前記対象にとって有益な方式で修飾される、
方法。

【請求項49】

眼障害を処置する方法であって、
ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を同定すること；および
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１～６回の負荷用量を前記対象に投与すること；
前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの第１の再処置用量を前記対象に直近の負荷用量から第１の時間量後に提供すること；および
前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの第２の再処置用量を前記対象に、前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの前記第１の再処置用量から第２の時間量後に提供することであって、前記第２の時間量が前記第１の時間量に等しいまたはより大きい、前記提供すること
を含む、方法。

【請求項50】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１～３回の負荷用量を前記対象に投与することを含む、請求項４９に記載の方法。

【請求項51】

前記第２の時間量が、前記第１の時間量よりも少なくとも１週大きい、請求項４９または５０に記載の方法。

【請求項52】

前記第２の時間量が、前記第１の時間量よりも少なくとも２週大きい、請求項４９または５０に記載の方法。

【請求項53】

前記第２の時間量が、前記第１の時間量よりも少なくとも４週大きい、請求項４９または５０に記載の方法。

【請求項54】

眼障害を処置する方法であって、
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与することであって、前記眼障害が糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）である、前記投与すること；および
前記負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すこと
を含み、それにより、前記対象が、前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも８週間保持する、
方法。

【請求項55】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を前記対象に前記最終負荷用量後に投与することをさらに含む、請求項５４に記載の方法。

【請求項56】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの前記１回または複数回の後続用量をＱ８Ｗまたはより長い間隔の投薬スケジュールにおいて投与することを含む、請求項５５に記載の方法。

【請求項57】

前記投薬スケジュールがＱ８Ｗ～Ｑ２４Ｗである、請求項５６に記載の方法。

【請求項58】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量が、前記対象に前記第１の負荷用量後の少なくとも約１年以内に投与されない、請求項５５に記載の方法。

【請求項59】

眼障害を処置する方法であって、
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与することであって、前記眼障害が滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）である、前記投与すること；および
前記負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すこと
を含み、それにより、前記対象が、前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも１２週間保持する、
方法。

【請求項60】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を前記対象に前記最終負荷用量後にＱ１２Ｗまたはより長い間隔の投薬スケジュールにおいて投与することをさらに含む、請求項５９に記載の方法。

【請求項61】

前記投薬スケジュールがＱ２４Ｗまたはより長い間隔である、請求項６０に記載の方法。

【請求項62】

前記投薬スケジュールがＱ１２Ｗ～Ｑ２０Ｗである、請求項６０に記載の方法。

【請求項63】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回より多くの後続用量が、前記対象に前記第１の負荷用量の約１年以内に投与されない、請求項５９～６１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項64】

眼障害を処置する方法であって、
抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与することであって、前記眼障害が網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）である、前記投与すること；および
前記負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すこと
を含み、それにより、前記対象が、前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも８週間保持する、
方法。

【請求項65】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を前記対象に前記最終負荷用量後に投与することをさらに含む、請求項６４に記載の方法。

【請求項66】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの前記１回または複数回の後続用量をＱ８Ｗまたはより長い間隔の投薬スケジュールにおいて投与することを含む、請求項６５に記載の方法。

【請求項67】

眼障害を処置する方法であって、眼障害の処置を必要とする対象に治療有効量の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートをＱ１２Ｗまたはより長い間隔の投薬スケジュールにおいて投与することであって、前記眼障害が糖尿病網膜症（ＤＲ）であり、前記投与により前記眼障害が処置される、前記投与すること
を含む、方法。

【請求項68】

前記投薬スケジュールがＱ１２Ｗ～Ｑ２４Ｗである、請求項６７に記載の方法。

【請求項69】

前記対象に前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの２回以下の負荷用量を投与することをさらに含む、請求項６７または６８に記載の方法。

【請求項70】

任意の２回の連続する負荷用量の間の時間が約８週である、請求項６９に記載の方法。

【請求項71】

眼障害を処置する方法であって、眼障害の処置を必要とする対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの複数回の用量のうちの前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの第１の用量を投薬スケジュールにおいて投与することであって、前記投薬スケジュールが、
前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１～３回の負荷用量を含む負荷投薬スケジュールであって、前記第１の用量が負荷用量である、前記負荷投薬スケジュール；続いて
最終負荷用量後の前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を含む維持投薬スケジュールであって、Ｑ８Ｗまたはより長い間隔の予め決定された投薬スケジュールを含む、前記維持投薬スケジュール
を含む、前記投与することを含む、
方法。

【請求項72】

前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を前記対象において前記第１の用量後の１つまたは複数の時点において評価すること；および
前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量を前記対象に、前記予め決定された投薬スケジュールにより指定されるその後の時点において、前記治療結果が前記対象により保持されていない場合に、投与し、前記治療結果が前記対象により保持されている場合には、前記後続用量を投与するまでの時間間隔を延長すること
をさらに含む、請求項７１に記載の方法。

【請求項73】

前記眼障害がｗＡＭＤであり、かつ前記予め決定された投薬スケジュールがＱ１２Ｗまたはより長い間隔である、請求項７１または７２に記載の方法。

【請求項74】

前記予め決定された投薬スケジュールがＱ２４Ｗまたはより長い間隔である、請求項７３に記載の方法。

【請求項75】

前記眼障害が、ＤＭＥ、ＤＲ、またはＲＶＯである、請求項７１または７２に記載の方法。

【請求項76】

眼障害を処置する方法であって、
眼障害の処置を必要とする対象を同定することであって、前記眼障害が推定眼ヒストプラズマ症候群である、前記同定すること；および
前記対象の硝子体内に治療有効量の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを投与し、それによ
り前記眼障害を処置すること
を含む、方法。

【請求項77】

前記治療有効量が約１ｍｇ～約５ｍｇの前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを含む、請求項７６に記載の方法。

【請求項78】

前記対象が、前記抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の前記治療結果を前記最終負荷用量後に少なくとも２４週間保持する、請求項１～２４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項79】

前記眼障害がｗＡＭＤである、請求項７８に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年１０月１０日に出願された米国仮出願第６２／９１３５６７号；２０１９年１１月１４日に出願された同第６２／９３５４３４号；および２０２０年２月７日に出願された同第６２／９７１７３８号に対する優先権を主張し、これらの仮出願の各々は参照により全体が本明細書に組み込まれる。

【0002】

配列表
本出願は、電子フォーマットの配列表と共に提出される。配列表は、２０２０年１０月９日に作成された２０，６０９バイトのサイズのＳＥＱＬＩＳＴ＿ＫＤＩＡＫ１０２ＷＯ．ｔｘｔという名称のファイルとして提供される。配列表の電子フォーマット中の情報は参照により全体が本明細書に組み込まれる。

【0003】

分野
本開示は、抗体およびそのコンジュゲート、ならびに前記抗体、そのコンジュゲート、および他のタンパク質コンジュゲートを使用および製造する方法に関する。

【背景技術】

【0004】

背景
血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）は、血管内皮細胞の増殖を刺激し、血管透過性を誘導する。これらの生物学的活性は、正常および病的の両方の状態において、血管新生における中心的役割をＶＥＧＦに与える。ＶＥＧＦの不適切な過剰発現は、網膜血管疾患、例えば糖尿病網膜症（ＤＲ）、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）、および網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）において鍵となる役割を果たしている。追加的に、網膜ＶＥＧＦ発現の増加が、網膜虚血性疾患を有する患者において実証されている。不適切なＶＥＧＦ活性の阻害はこれらの疾患の処置に対する「抗血管新生」アプローチであり、これらの網膜血管疾患を有する患者における視力の保存および改善の有効な方法となっている。

【0005】

硝子体内抗血管新生治療は現在、ＤＭＥ、ｗＡＭＤ、およびＲＶＯに起因する黄斑浮腫に対する主要な処置である。しかしながら、治療用ＶＥＧＦ－Ａ阻害剤、例えば硝子体内アフリベルセプトおよび硝子体内ラニビズマブを用いるこれらの眼障害の標準的な処置は、眼障害に依存して、月毎または８週毎（初期の月毎の負荷用量の後）の投薬を伴う。そのため、現実世界のアウトカムは、評価および処置のための網膜専門医への月毎の来診に関係する負担のため、期待に達していない。より少ないかつ／またはより低い頻度の硝子体内注射で治療結果を達成するための医学的必要性が存在する。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【特許文献1】米国特許第５，５３０，１０１号明細書

【特許文献2】米国特許第５，５８５，０８９号明細書

【特許文献3】米国特許第５，２２５，５３９号明細書

【特許文献4】米国特許第６，４０７，２１３号明細書

【特許文献5】米国特許第５，８５９，２０５号明細書

【特許文献6】米国特許第６，８８１，５５７号明細書

【特許文献7】米国特許第４，６３４，６６４号明細書

【特許文献8】米国特許第４，６３４，６６６号明細書

【特許文献9】国際公開第９３／１２２２７号

【特許文献10】米国特許第５，８７７，３９７号明細書

【特許文献11】米国特許第５，８７４，２９９号明細書

【特許文献12】米国特許第５，８１４，３１８号明細書

【特許文献13】米国特許第５，７８９，６５０号明細書

【特許文献14】米国特許第５，７７０，４２９号明細書

【特許文献15】米国特許第５，６６１，０１６号明細書

【特許文献16】米国特許第５，６３３，４２５号明細書

【特許文献17】米国特許第５，６２５，１２６号明細書

【特許文献18】米国特許第５，５６９，８２５号明細書

【特許文献19】米国特許第５，５４５，８０６号明細書

【特許文献20】国際公開第９１／１０７４１号

【特許文献21】国際公開第９１／１７２７１号

【特許文献22】国際公開第９２／０１０４７号

【特許文献23】米国特許第５，８７７，２１８号明細書

【特許文献24】米国特許第５，８７１，９０７号明細書

【特許文献25】米国特許第５，８５８，６５７号明細書

【特許文献26】米国特許第５，８３７，２４２号明細書

【特許文献27】米国特許第５，７３３，７４３号明細書

【特許文献28】米国特許第５，５６５，３３２号明細書

【特許文献29】国際公開第２０１３／０５９１３７号

【特許文献30】米国特許出願公開第２０１７／０１９０７６６号明細書

【特許文献31】国際公開第２００４／０２０４０５号

【特許文献32】国際公開第２００８／１５５１３４号

【特許文献33】国際公開第２０１３／０９３８０９号

【特許文献34】米国特許第７，５２１，５４１号明細書

【特許文献35】国際公開第２００８／０２０８２７号

【特許文献36】米国特許第８，００８，４５３号明細書

【特許文献37】米国特許第８，４５５，６２２号明細書

【特許文献38】米国特許出願公開第２０１２／０２１３７０５号明細書

【特許文献39】米国特許出願第２０１５／０１５８９５２号明細書

【特許文献40】国際公開第２００９／０５２２４９号

【特許文献41】米国特許第７，８９３，１７３号明細書

【特許文献42】米国特許第４，８９２，５３８号明細書

【特許文献43】米国特許第５，２８３，１８７号明細書

【特許文献44】国際公開第９３／２５６７３号

【特許文献45】米国特許第５，６８１，７４６号明細書

【特許文献46】国際公開第２０１７１１７４６４号

【非特許文献】

【0007】

【非特許文献1】Ｈｏｕｓｔｏｎ ＪＳ．１９９１．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌ．２０３：４６－９６

【非特許文献2】Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｐａｕｌ，Ｗ．，ｅｄ．，２ｎｄ ｅｄ．Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．，１９８９），Ｃｈ．７

【非特許文献3】Ｓｏｎｇｓｉｖｉｌａｉ Ｓ，Ｌａｃｈｍａｎｎ ＰＣ．１９９０．Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ：ａ ｔｏｏｌ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７９：３１５－３２１

【非特許文献4】Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ＳＡ， Ｃｏｌｅ ＭＳ， Ｔｓｏ ＪＹ． １９９２．Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｂｙ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｌｅｕｃｉｎｅ ｚｉｐｐｅｒｓ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７－１５５３

【非特許文献5】Ｋａｂａｔ ＥＡ， ｅｔ ａｌ．１９８７

【非特許文献6】Ｋａｂａｔ ＥＡ， ｅｔ ａｌ．１９９１．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）

【非特許文献7】Ｃｈｏｔｈｉａ Ｃ，Ｌｅｓｋ ＡＭ．１９８７．Ｃａｎｏｎｉｃａｌ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ Ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ １９６：９０１－９１７

【非特許文献8】Ｃｈｏｔｈｉａ Ｃ，ｅｔ ａｌ．１９８９．Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ Ｒｅｇｉｏｎｓ．Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７－８８３

【非特許文献9】Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ， ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６６，Ｇｌｅｎｎ Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅｄ．（１９９６）

【非特許文献10】Ｊｕｎｇｈａｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５０：１４９５，１９９０

【非特許文献11】Ｄｅ Ｐａｓｃａｌｉｓ Ｒ，Ｉｗａｈａｓｈｉ Ｍ，Ｔａｍｕｒａ Ｍ，ｅｔ ａｌ．２００２．Ｇｒａｆｔｉｎｇ “Ａｂｂｒｅｖｉａｔｅｄ” Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ－Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ Ｒｅｇｉｏｎｓ Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ－Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ Ｒｅｓｉｄｕｅｓ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ Ｌｉｇａｎｄ Ｃｏｎｔａｃｔ ｔｏ Ｅｎｇｉｎｅｅｒ ａ Ｌｅｓｓ Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：３０７６－３０８４

【非特許文献12】Ｖａｊｄｏｓ ＦＦ，Ａｄａｍｓ ＣＷ，Ｂｒｅｅｃｅ ＴＮ，Ｐｒｅｓｔａ ＬＧ，ｄｅ Ｖｏｓ ＡＭ，Ｓｉｄｈｕ，ＳＳ．２００２．Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｍａｐｓ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉｇｅｎ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ ｏｆ ａｎ ａｎｔｉ－ＥｒｂＢ２ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｓｈｏｔｇｕｎ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．３２０：４１５－４２８

【非特許文献13】Ｉｗａｈａｓｈｉ Ｍ，Ｍｉｌｅｎｉｃ ＤＥ，Ｐａｄｌａｎ ＥＡ，ｅｔ ａｌ．１９９９．ＣＤＲ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎｓ ｏｆ ａ ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ （ＣＣ４９）：Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ ｏｆ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ ＣＤＲｓ ｔｏ ａｎｔｉｇｅｎ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ．Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．３６：１０７９－１０９１

【非特許文献14】Ｔａｍｕｒａ Ｍ，Ｍｉｌｅｎｉｃ ＤＥ，Ｉｗａｈａｓｈｉ Ｍ，ｅｔ ａｌ．２０００．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｏｆ ａｎ ａｎｔｉｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｎｔｉｂｏｄｙ：Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎｓ （ＳＤＲｓ） ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｍｉｎｉｍａｌｌｙ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｖａｒｉａｎｔ ｂｙ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｏｆ ＳＤＲｓ ｏｎｌｙ． Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：１４３２－１４４１

【非特許文献15】Ｐａｄｌａｎ ＥＡ．１９９１．Ａ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｆｏｒ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｖａｒｉａｂｌｅ ｄｏｍａｉｎｓ ｗｈｉｌｅ ｐｒｅｓｅｒｖｉｎｇ ｔｈｅｉｒ ｌｉｇａｎｄ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９－９８

【非特許文献16】Ｏｓｔｂｅｒｇ Ｌ，Ｐｕｒｓｃｈ Ｅ． １９８３．Ｈｕｍａｎ ｘ （ｍｏｕｓｅ ｘ ｈｕｍａｎ） ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ｓｔａｂｌｙ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｈｕｍａｎ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ ２：３６１－３６７

【非特許文献17】Ｎａｔｕｒｅ １４８， １５４７－１５５３ （１９９４）

【非特許文献18】Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １４，８２６ （１９９６）

【非特許文献19】Ｇｒｅｅｎｅ ｅｔ ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ Ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，” ３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９９

【非特許文献20】ＣｏｖａｎｃｅＳｔｕｄｙ ８３７６３２１、Ｐａｒｋ ２０１６Ｆｅｒｒａｒａ ｅｔ ａｌ， （２００３） Ｎａｔ． Ｍｅｄ． ９：６６９－６７６

【非特許文献21】Ｆｅｒｒａｒａ ｅｔ ａｌ， （２００３） Ｎａｔ． Ｍｅｄ． ９：６６９－６７６

【非特許文献22】Ｆｅｒｒａｒａ Ｎ， Ｈｉｌｌａｎ ＫＪ， Ｇｅｒｂｅｒ ＨＰ， Ｎｏｖｏｔｎｙ Ｗ． ２００４． Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ， ａｎ ａｎｔｉ－ＶＥＧＦ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｉｎｇ ｃａｎｃｅｒ． Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ． ３（５）：３９１－４００

【非特許文献23】Ｃａｐｏｎ ＤＪ，Ｃｈａｍｏｗ ＳＭ，Ｍｏｒｄｅｎｔｉ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ ＣＤ４ ｉｍｍｕｎｏａｄｈｅｓｉｏｎｓ ｆｏｒ ＡＩＤＳ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｎａｔｕｒｅ．１９８９．３３７：５２５－３１

【非特許文献24】Ｙｅｈ Ｐ，Ｌａｎｄａｉｓ Ｄ，Ｌｅｍａｉｔｒｅ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｙｅａｓｔ－ｓｅｃｒｅｔｅｄ ａｌｂｕｍｉｎ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｔｈｅｒａｐｙ：ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ａ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ－ＣＤ４ ｇｅｎｅｔｉｃ ｃｏｎｊｕｇａｔｅ． Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．１９９２．８９：１９０４－０８

【非特許文献25】Ｆａｒｅｓ ＦＡ， Ｓｕｇａｎｕｍａ Ｎ． Ｎｉｓｈｉｍｏｒｉ Ｋ， ｅｔ ａｌ． Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ａ ｌｏｎｇ－ａｃｔｉｎｇ ｆｏｌｌｉｔｒｏｐｉｎ ａｇｏｎｉｓｔ ｂｙ ｆｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ ｂｅｔａ ｓｕｂｕｎｉｔ ｔｏ ｔｈｅ ｆｏｌｌｉｔｒｏｐｉｎ ｂｅｔａ ｓｕｂｕｎｉｔ． Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ． １９９２． ８９：４３０４－０８

【非特許文献26】Ｓｃｈｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒ Ｖ， Ｗａｎｇ ＣＷ， Ｇｅｅｔｈｉｎｇ ＮＣ， ｅｔ ａｌ． Ａ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ｅｘｔｅｎｄｓ ｔｈｅ ｉｎ ｖｉｖｏ ｈａｌｆ－ｌｉｆｅ ｏｆ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ａ ｔｕｎａｂｌｅ ｍａｎｎｅｒ． Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ２００９． ２７：１１８６－９０

【非特許文献27】ＭＣｐｈｅｒｓｏｎ ＤＴ， Ｍｏｒｒｏｗ Ｃ， Ｍｉｎｅｈａｎ ＤＳ， ｅｔ ａｌ． Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｅｌａｓｔｏｍｅｒｉｃ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ， Ｇ（ＶＰＧＶＧ１９－ＶＰＧＶ， ｆｒｏｍ Ｅｓｃｈｅｒｉａｃｈｉａ ｃｏｌｉ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｐｒｏｇ． １９９２． ８：３４７－５２

【非特許文献28】Ｓｃｈｌａｐｓｃｈｙ Ｍ， Ｔｈｅｏｂａｌｄ Ｉ， Ｍａｃｋ Ｈ， ｅｔ ａｌ． Ｆｕｓｉｏｎ ｏｆ ａ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｆｒａｇｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｈｏｍｏ－ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｐｏｌｙｍｅｒ： ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ ｐｌａｓｍａ ｈａｌｆ－ｌｉｆｅ． Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ Ｓｅｌ． ２００７． ２０：２７３－８４

【非特許文献29】Ｈｕａｎｇ Ｙ－Ｓ， Ｗｅｎ Ｘ－Ｆ， Ｚａｒｏ ＪＬ， ｅｔ ａｌ． Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｆｏｒｍ ｏｆ ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ－ｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ－ｆａｃｔｏｒ ｂｙ ｆｕｓｉｏｎ ｗｉｔｈ ｇｅｌａｔｉｎ－ｌｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｏｌｙｍｅｒ． Ｅｕｒ Ｊ． Ｐｈａｒｍ Ｂｉｏｐｈａｒｍ． ２０１０． ７２：４３５－４１

【非特許文献30】Ｔｏｎｋｉｎｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ， １４（１）： ５４－６５ （１９９６）

【非特許文献31】Ｗｕ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ ．，２６２： ４４２９－４４３２ （１９８７）

【非特許文献32】Ｗａｇｎｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ， ８７： ３４１０－３４１４（１９９０）

【非特許文献33】Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２５６： ８０８－８１３ （１９９２）

【非特許文献34】Ｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ， Ｊａｆｆｅ， Ａｓｈｔｏｎ， ａｎｄ Ｐｅａｒｓｏｎ， ｅｄｉｔｏｒｓ， Ｔａｙｌｏｒ ＆ Ｆｒａｎｃｉｓ （Ｍａｒｃｈ ２００６）

【非特許文献35】Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ， ２４７－３０１ （Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｌｅｅ ｅｄ．， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｎ．Ｙ．， １９９１）

【非特許文献36】Ｊｏｎｅｓ， １９９３ Ａｄｖ． Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ． １０： ２９－９０

【非特許文献37】Ｒａｅｔｚ ＣＲ， Ｕｌｅｖｉｔｃｈ ＲＪ， Ｗｒｉｇｈｔ ＳＤ， Ｓｉｂｌｅｙ ＣＨ， Ｄｉｎｇ Ａ， Ｎａｔｈａｎ ＣＦ． １９９１． Ｇｒａｍ－ｎｅｇａｔｉｖｅ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ： ａｎ ｅｘｔｒａｏｒｄｉｎａｒｙ ｌｉｐｉｄ ｗｉｔｈ ｐｒｏｆｏｕｎｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ ｓｉｇｎａｌ ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ． ＦＡＳＥＢ Ｊ． ５（１２）：２６５２－２６６０

【非特許文献38】Ｐｅｔｓｃｈ Ｄ， Ａｎｓｐａｃｈ Ｆ． ２０００． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｒｅｍｏｖａｌ ｆｒｏｍ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ． Ｊ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ７６： ９７－１１９

【非特許文献39】Ｏｇｉｋｕｂｏ Ｙ， Ｏｇｉｋｕｂｏ Ｙ， Ｎｏｒｉｍａｔｓｕ Ｍ， Ｎｏｄａ Ｋ， Ｔａｋａｈａｓｈｉ Ｊ， Ｉｎｏｔｓｕｍｅ Ｍ， Ｔｓｕｃｈｉｙａ Ｍ， Ｔａｍｕｒａ Ｙ． ２００４． Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｔｅｓｔ ｆｏｒ ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｒｃｉｎｅ ｖａｃｃｉｎｅｓ． Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ ３２：８８－９３

【非特許文献40】Ｆｉｓｋｅ ＪＭ， Ｒｏｓｓ Ａ， ＶａｎＤｅｒＭｅｉｄ ＲＫ， ＭｃＭｉｃｈａｅｌ ＪＣ， Ａｒｕｍｕｇｈａｍ． ２００１． Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｉｎ Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ ＵｓｐＡ２ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ． Ｊ Ｃｈｒｏｍ Ｂ． ７５３：２６９－２７８

【非特許文献41】Ｄａｎｅｓｈｉａｍ Ｍ， Ｇｕｅｎｔｈｅｒ Ａ， Ｗｅｎｄｅｌ Ａ， Ｈａｒｔｕｎｇ Ｔ， Ｖｏｎ Ａｕｌｏｃｋ Ｓ． ２００６． Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｐｙｒｏｇｅｎ ｔｅｓｔ ｆｏｒ ｔｏｘｉｃ ｏｒ ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ｄｒｕｇｓ． Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄ ３１３：１６９－１７５

【非特許文献42】Ｈｉｒａｙａｍａ Ｃ， Ｓａｋａｔａ Ｍ． ２００２． Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｒｅｍｏｖａｌ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｆｒｏｍ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ｂｙ ｐｏｌｙｍｅｒ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ． Ｊ Ｃｈｒｏｍ Ｂ ７８１：４１９－４３２

【非特許文献43】Ｂｅｒｔｈｏｌｄ Ｗ， Ｗａｌｔｅｒ Ｊ． １９９４． Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ： Ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ ｆｏｒ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ． Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ ２２：１３５－１５０； Ｐｅｔｓｃｈ Ｄ， Ａｎｓｐａｃｈ ＦＢ． ２０００． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｒｅｍｏｖａｌ ｆｒｏｍ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ． Ｊ Ｂｉｏｔｅｃｈ ７６：９７－１１９

【非特許文献44】Ｒｙｃｒｏｆｔ ＢＷ． １９４５． Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｄｅｅｐ ｉｎｔｒａ－ｏｃｕｌａｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ． Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２９ （２）： ５７－８７

【非特許文献45】Ｃｈｒｉｓｔｙ ＮＥ， Ｓｏｍｍｅｒ Ａ． １９７９． Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ ｏｆ ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｅｎｄｏｐｈｔｈａｌｍｉｔｉｓ． Ａｎｎ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ １１ （８）： １２６１－１２６５

【非特許文献46】Ｍａｒｔｉｃｏｒｅｎａ Ｊ， Ｒｏｍａｎｏ Ｖ， Ｇｏｍｅｚ－Ｕｌｌａ Ｆ． ２０１２ “Ｓｔｅｒｉｌｅ Ｅｎｄｏｐｈｔｈａｌｍｉｔｉｓ ａｆｔｅｒ Ｉｎｔｒａｖｉｔｒｅａｌ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ” Ｍｅｄ Ｉｎｆｌａｍ． ９２８１２３

【非特許文献47】Ｈｏｆｆｍａｎ Ｓ， ｅｔ ａｌ． ２００５． Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ｐｙｒｏｇｅｎ ｔｅｓｔｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｏｉｄ ｃｅｌｌｓ Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ２９８：１６１－１７３； Ｄｉｎｇ ＪＬ， Ｈｏ ＢＡ． ２００１． Ｎｅｗ ｅｒａ ｉｎ ｐｙｒｏｇｅｎ ｔｅｓｔｉｎｇ． Ｂｉｏｔｅｃｈ． １９：２７７－２８１

【非特許文献48】Ｏｎｇ ＫＧ， Ｌｅｌａｎ ＪＭ， Ｚｅｎｇ ＫＦ， Ｂａｒｒｅｔｔ Ｇ， Ａｏｕｒｏｂ Ｍ， Ｇｒｉｍｅｓ ＣＡ． ２００６． Ａ ｒａｐｉｄ ｈｉｇｈｌｙ－ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ． Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓ ａｎｄ Ｂｉｏｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ ２１：２２７０－２２７４

【非特許文献49】Ｈａｉｓｈｉｍａ Ｙ， Ｈａｓｅｇａｗａ Ｃ， Ｙａｇａｍｉ Ｔ， Ｔｓｕｃｈｉｙａ Ｔ， Ｍａｔｓｕｄａ Ｒ， Ｈａｙａｓｈｉ Ｙ． ２００３． Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｙ ｉｎ ｋｉｎｅｔｉｃ－ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ａｓｓａｙ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ． Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｂｉｏｍｅｄ Ａｎａｌｙｓｉｓ． ３２：４９５－５０３

【非特許文献50】Ｇａｕｄｒｅａｌｔ ｅｔ ａｌ （２００７） ＩＯＶＳ ４６（２） ７２６

【非特許文献51】Ｇａｕｄｒｅａｌｔ ｅｔ ａｌ （２００７） Ｒｅｔｉｎａ ２７（９） １２６０

【非特許文献52】Ｂａｋｒｉ ｅｔ ａｌ （２００７） Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ １１４（１２） ２１７９

【非特許文献53】Ｙｅｕｎｇ ｅｔ ａｌ ２０１０ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ

【非特許文献54】Ｄｏ ＤＶ，Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ２０１９；Ｐａｔｅｌ ｅｔ ａｌ．，ＡＲＶＯ ２０１９．

【発明の概要】

【0008】

要旨
抗ＶＥＧＦ抗体または抗ＶＥＧＦタンパク質を、眼障害を有する対象に投与することにより眼障害を処置する方法が本明細書において提供される。本開示の抗ＶＥＧＦ抗体は、対象に投与された場合に抗体またはタンパク質の半減期（例えば、眼内半減期など）を延長させるポリマー部分を含む抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートであってもよい。本開示の方法は、対象において抗ＶＥＧＦ治療の治療効果を達成するために従来の抗ＶＥＧＦ治療よりも少ない抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの用量（例えば、より低い頻度の投与）を含む眼障害に対する処置の過程を提供し得る。

【0009】

眼障害を処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与すること；および負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すことを含み；それにより、対象が、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも１２週間保持する、方法が本明細書において提供される。任意選択的に、眼障害は、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、および糖尿病網膜症（ＤＲ）のうちの少なくとも１つである。一部の実施形態において、眼障害はＤＭＥまたはＲＶＯのいずれかである。

【0010】

網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）を処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、ＲＶＯを有する対象に第１の負荷用量において投与すること；および負荷用量を１回繰り返すことを含み；それにより、対象が、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも８週間保持する、方法もまた本明細書において提供される。

【0011】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療の治療結果は、最終負荷用量後に少なくとも１２週間、少なくとも１４週間、例えば少なくとも１６週間続く。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果は、最終負荷用量後に少なくとも２０週間続く。

【0012】

任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）のさらなる投与は、対象に最終負荷用量の４週以内に提供されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１のさらなる投与は、対象に最終負荷用量の１０週以内、１２週以内、または１６週以内に提供されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１のさらなる投与は、対象に最終負荷用量の１４週以内に提供されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１のさらなる投与は、対象に最終負荷用量の２０週以内に提供されない。

【0013】

任意選択的に、負荷用量は、各負荷用量の間に１か月を伴って投与される。一部の実施形態において、負荷用量は、各負荷用量の間に約１～２か月を伴って投与される。一部の実施形態において、負荷用量は、各負荷用量の間に約２か月を伴って投与される。

【0014】

任意選択的に、本開示の方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の１回または複数回の後続用量を対象に最終負荷用量後に投与することを含む。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の任意の後続用量は、１２週毎に１回以下の頻度で投与される。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の任意の後続用量は、２０週毎に１回以下の頻度で投与される。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量は、平均で２４週毎に１回以下の頻度で投与される。任意選択的に、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の第１の後続用量を最終負荷用量後の第１の期間において投与すること；および第２の後続用量を第１の後続用量後の第２の期間において投与することを含み、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１は、第１の後続用量および第２の後続用量の間に投与されず、第１の期間は第２の期間よりも短い。一部の実施形態において、第１の期間は８週またはより長い。一部の実施形態において、第２の時間間隔は第１の期間よりも少なくとも４週長い。

【0015】

任意選択的に、負荷用量当たり約１．２５ｍｇの抗体が対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の形態で投与される。一部の実施形態において、負荷用量当たり約５ｍｇの抗体が対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の形態で投与される。

【0016】

一部の実施形態において、負荷用量に後続する用量は、直近の負荷用量の少なくとも２０週後まで投与されない。

【0017】

任意選択的に、治療結果は、処置前のレベルと比較した、視力の改善、網膜厚の低減、少なくとも１つの目（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１が投与された少なくとも１つの目）における灌流の改善、糖尿病網膜症重症度スコア（ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｓｃｏｒｅ；ＤＲＳＳ）の改善、または眼障害の疾患活動性の低減のうちの１つまたは複数を含む。

【0018】

目の灌流を改善する方法であって、ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を同定すること；および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の少なくとも２回の負荷用量を対象に投与すること；対象が少なくとも１つの目における灌流の改善を示すまで、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１回または複数回のさらなる用量を対象に提供することを含む、方法もまた本明細書において提供される。任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量の各々は、少なくとも１．２５ｍｇの抗体タンパク質を含む。任意選択的に、負荷用量に後続する用量は、直近の負荷用量の少なくとも２０週後まで投与されない。一部の実施形態において、負荷用量に後続する用量は、直近の負荷用量の少なくとも２４週後まで投与されない。

【0019】

本開示はまた、目の灌流を改善する方法であって、非増殖性ＤＲを有する対象を同定すること；および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の初期用量を対象に投与して、少なくとも１つの目における灌流の改善を提供することを含む、方法を提供する。任意選択的に、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の１回または複数回のさらなる用量を対象に初期用量後に提供することを含む。一部の実施形態において、用量は、初期用量の少なくとも２０週後まで投与されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量は、対象に投与されない。任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の各用量は、少なくとも１．２５ｍｇの抗体タンパク質を含む。任意選択的に、灌流の改善は少なくとも、少なくとも１つの目における進行性の無灌流の率における低減を含む。一部の実施形態において、灌流の改善は、処置前に対して少なくとも１０％の無灌流の面積における低減を含む。

【0020】

ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１～３回の負荷用量をＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象に投与すること；３回より多くの負荷用量を対象に投与しないこと；抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の後続適用を抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の直近の負荷用量または直近の後続適用の１２週以後の時点において提供することを含み、負荷用量が対象に月毎を基準にして投与される、方法もまた本明細書において提供される。任意選択的に、対象は増殖性ＤＲを有し、かつ方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の３回の負荷用量を対象に投与することを含む。

【0021】

非増殖性ＤＲを有する対象を処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１または２回の負荷用量を、非増殖性ＤＲを有する対象に投与すること；２回より多くの負荷用量を対象に投与しないこと；および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の後続投与を直近の負荷用量の１２週以後の時点において提供することを含み、負荷用量が対象に月毎を基準にして投与される、方法もまた提供される。

【0022】

本開示はまた、ＲＶＯを有する対象を処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１または２回の負荷用量を、ＲＶＯを有する対象に投与すること；２回より多くの負荷用量を対象に投与しないこと；抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の後続投与を直近の負荷用量の８週以後の時点において提供することを含み、負荷用量が対象に月毎を基準にして投与される、方法を提供する。

【0023】

任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量の各々は、少なくとも１．２５ｍｇの抗体タンパク質を含む。

【0024】

任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１は、硝子体内注射を介して投与される。任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１は、５ｍｇの量で投与される。

【0025】

任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１は、ポリマーに結合した抗ＶＥＧＦ－Ａ免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を含む抗体コンジュゲートを含み、ポリマーはＭＰＣモノマーを含み、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体重鎖の配列は配列番号１であり、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体軽鎖の配列は配列番号２であり、かつ抗体は配列番号１中のＣ４４９においてポリマーに結合している。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１は、軽鎖および重鎖を含む抗体コンジュゲートを含み、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体重鎖は、ＣＤＲ_Ｈ１：ＧＹＤＦＴＨＹＧＭＮ（配列番号９）、ＣＤＲ_Ｈ２：ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＡＤＦＫＲ（配列番号１０）、およびＣＤＲ_Ｈ３：ＹＰＹＹＹＧＴＳＨＷＹＦＤＶ（配列番号１１）を含み、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体軽鎖は、ＣＤＲ_Ｌ１：ＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮ（配列番号１２）、ＣＤＲ_Ｌ２：ＦＴＳＳＬＨＳ（配列番号１３）、およびＣＤＲ_Ｌ３：ＱＱＹＳＴＶＰＷＴ（配列番号１４）を含む。一部の実施形態において、抗体コンジュゲートは、以下の構造：

【0026】

【化1】

【0027】

を有し、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各重鎖は文字Ｈにより表され、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各軽鎖は文字Ｌにより表され；ポリマーは、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体にＣ４４３（ＥＵナンバリング）のスルフヒドリルを通じて結合しており、該結合は重鎖の１つに描写されており；ＰＣは、

【0028】

【化2】

【0029】

であり、曲線はポリマーの残部への結合点を指し示し、Ｘは、ａ）－ＯＲ（式中、Ｒは、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、もしくはイソプロピルである）、ｂ）－Ｈ、ｃ）－Ｂｒ、－Ｃｌ、もしくは－Ｉを含む任意のハロゲン、ｄ）－ＳＣＮ、またはｅ）－ＮＣＳであり；かつｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９は同じまたは異なり、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９の和は２５００プラスまたはマイナス１５％である。

【0030】

ＲＶＯを処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、ＲＶＯの処置を必要とする対象に１～３回の負荷用量において投与することを含み；それにより、対象が、ＲＶＯに対する抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも８週間および／または少なくとも８週の１回もしくは複数回のその後の投薬間隔の間に保持する、方法もまた本明細書において提供される。任意選択的に、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１を用いて１０週毎に１回よりも高い頻度で再処置されない。任意選択的に、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１を用いて１２週毎に１回よりも高い頻度で再処置されない。

【0031】

本開示はまた、眼障害の疾患修飾の方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、眼障害を有する対象に第１の負荷用量において投与することを含み、それにより、眼障害が、対象にとって有益な方式で修飾される、方法を提供する。

【0032】

眼障害を処置する方法であって、ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を同定すること；および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１～６回の負荷用量を対象に投与すること；抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの第１の再処置用量を対象に直近の負荷用量から第１の時間量後に提供すること；および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の第２の再処置用量を対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の第１の再処置用量から第２の時間量後に提供することであって、第２の時間量が第１の時間量に等しいまたはより大きい、提供することを含む、方法もまた本明細書において提供される。任意選択的に、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１～３回の負荷用量を対象に投与することを含む。任意選択的に、第２の時間量は、第１の時間量よりも少なくとも１週大きい。一部の実施形態において、第２の時間量は、第１の時間量よりも少なくとも２週大きい。一部の実施形態において、第２の時間量は、第１の時間量よりも少なくとも４週大きい。

【0033】

眼障害を処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与することであって、眼障害が糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）である、投与すること；および負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すことを含み、それにより、対象が、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート治療（ｔｈｅｒｐａｙ）の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも８週間保持する、方法もまた本明細書において提供される。任意選択的に、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を対象に最終負荷用量後に投与することをさらに含む。一部の実施形態において、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量をＱ８Ｗまたはより長い間隔の投薬スケジュールにおいて投与することを含む。一部の実施形態において、投薬スケジュールはＱ８Ｗ～Ｑ２４Ｗである。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量は、対象に第１の負荷用量後の少なくとも約１年以内に投与されない。

【0034】

眼障害を処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与することであって、眼障害が滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）である、投与すること；および負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すことを含み、それにより、対象が、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも１２週間保持する、方法もまた本明細書において提供される。任意選択的に、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を対象に最終負荷用量後にＱ１２Ｗまたはより長い間隔の投薬スケジュールにおいて投与することをさらに含む。任意選択的に、投薬スケジュールはＱ１２Ｗ～Ｑ２０Ｗである。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回より多くの後続用量は、対象に第１の負荷用量の約１年以内に投与されない。

【0035】

眼障害を処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与することであって、眼障害が網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）である、投与すること；および負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すことを含み、それにより、対象が、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療、またはまたは（ｏｒ ｏｒ）抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも８週間保持する、方法もまた本明細書において提供される。一部の実施形態において、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を対象に最終負荷用量後に投与することをさらに含む。任意選択的に、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量をＱ８Ｗまたはより長い間隔の投薬スケジュールにおいて投与することを含む。

【0036】

眼障害を処置する方法であって、眼障害の処置を必要とする対象に治療有効量の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）をＱ１２Ｗまたはより長い間隔の投薬スケジュールにおいて投与することであって、眼障害が糖尿病網膜症（ＤＲ）であり、投与により眼障害が処置される、投与することを含む、方法が本明細書において提供される。一部の実施形態において、投薬スケジュールはＱ１２Ｗ～Ｑ２４Ｗである。一部の実施形態において、方法は、対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの２回以下の負荷用量を投与することをさらに含む。任意選択的に、任意の２回の連続する負荷用量の間の時間は約８週である。

【0037】

眼障害を処置する方法であって、眼障害の処置を必要とする対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の複数回の用量のうちの第１の用量を投薬スケジュールにおいて投与することであって、投薬スケジュールが、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの１～３回の負荷用量を含む負荷投薬スケジュールであって、第１の用量が負荷用量である、負荷投薬スケジュ
ール；続いて最終負荷用量後の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を含む維持投薬スケジュールであって、Ｑ８Ｗまたはより長い間隔の予め決定された投薬スケジュールを含む、維持投薬スケジュールを含む、投与することを含む、方法もまた提供される。任意選択的に、方法は、対象における抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を第１の用量後の１つまたは複数の時点において評価すること；および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量を対象に、予め決定された投薬スケジュールにより指定されるその後の時点において、治療結果が対象により保持されていない場合に、投与し、治療結果が対象により保持されている場合には、後続用量を投与するまでの時間間隔を延長することをさらに含む。一部の実施形態において、眼障害はｗＡＭＤであり、かつ予め決定された投薬スケジュールはＱ１２Ｗまたはより長い間隔である。一部の実施形態において、眼障害は、ＤＭＥ、ＤＲ、またはＲＶＯである。

【0038】

眼障害を処置する方法であって、眼障害の処置を必要とする対象を同定することであって、眼障害が推定眼ヒストプラズマ症候群である、同定すること；および対象の硝子体内に治療有効量の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を投与し、それにより眼障害を処置することを含む、方法もまた本明細書において提供される。任意選択的に、治療有効量は約１ｍｇ～約５ｍｇの抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを含む。

【図面の簡単な説明】

【0039】

【図1】図１は、インビボでのＫＳＩ－３０１の延長された半減期を示すグラフである。

【図2】図２は、ＫＳＩ－３０１のインビボ網膜バイオアベイラビリティを示すグラフである。

【図3】図３は、静脈内に投与されたＫＳＩ－３０１の急速な全身クリアランスを示すグラフである。

【図4】図４は、本開示の一部の実施形態による、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）を有する患者におけるＫＳＩ－３０１の単回硝子体内投与の治療効果を示すグラフである。

【図5】図５は、本開示の一部の実施形態による、加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、および網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）におけるＫＳＩ－３０１硝子体内投与スケジュールを表す図解である。

【図6】図６は、本開示の一部の実施形態による、滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図7】図７は、本開示の一部の実施形態による、ｗＡＭＤについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフのセットである。４％（１／２５）は３か月の前に再処置され；５％（１／２０）は３か月時に再処置され；９０％（１９／２１）は直近の負荷用量後に３か月よりも長く過ぎており；８０％（１１／１４）は第１の再処置までに４か月またはより長きに達している。

【図8】図８は、本開示の一部の実施形態による、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図9】図９は、本開示の一部の実施形態による、ＤＭＥについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフのセットである。

【図10】図１０は、本開示の一部の実施形態による、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図11】図１１は、本開示の一部の実施形態による、ＲＶＯについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフである。

【図12】図１２は、本開示の一部の実施形態による、ｗＡＭＤ（左列）、ＤＭＥ（中央列）、およびＲＶＯ（右列）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後の網膜の健康状態における持続された改善を示す画像の集合である。

【図13】図１３は、本開示の一部の実施形態によるＫＳＩ－３０１の構造の図解であり、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各重鎖は文字Ｈにより表され、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各軽鎖は文字Ｌにより表され；ポリマーは、ＥＵナンバリングにしたがってＣ４４３におけるスルフヒドリルを通じて抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体に結合しており、該結合は上記の重鎖の１つにおいて描写されており；ＰＣは、

【化3】

であり、曲線はポリマーの残部への結合点を指し示し；かつｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９は同じまたは異なり、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９の和は２５００プラスまたはマイナス１５％である。

【図14】図１４は、本開示の一部の実施形態による、ＫＳＩ－３０１の重鎖および軽鎖のアミノ酸配列を描写する。

【図15】図１５は、様々な抗体のアミノ酸配列のセットである。

【図16】図１６は、標準化された写真読み取り尺度で測定された、異なるレベルの糖尿病網膜症重症度を有する患者の割合を示すグラフである。

【図17A】図１７Ａは、滲出型ＡＭＤにおけるＫＳＩ－３０１の有効性および脈絡膜血管新生に対する直接的な効果を示す。滲出型ＡＭＤにおけるＫＳＩ－３０１の有効性、ならびにメジアンＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおけるベースラインから週までの変化を示す。

【図17B】図１７Ｂは、滲出型ＡＭＤにおけるＫＳＩ－３０１の有効性および脈絡膜血管新生に対する直接的な効果を示す。

【図18A】図１８Ａは、３回の負荷用量後の疾患修飾を伴うＤＭＥ患者における結果を示し、著しいＤＲＳＳの改善および再灌流が疾患修飾を表す。

【図18B】図１８Ｂは、３回の負荷用量後の疾患修飾を伴うＤＭＥ患者における結果を示し、著しいＤＲＳＳの改善および再灌流が疾患修飾を表す。

【図18C】図１８Ｃは、３回の負荷用量後の疾患修飾を伴うＤＭＥ患者における結果を示し、著しいＤＲＳＳの改善および再灌流が疾患修飾を表す。

【図18D】図１８Ｄは、３回の負荷用量後の疾患修飾を伴うＤＭＥ患者における結果を示し、著しいＤＲＳＳの改善および再灌流が疾患修飾を表す。

【図19】図１９は、疾患修飾の可能性を表す、３回の負荷用量後に追加の用量を少なくとも５か月間要求しなかったＲＶＯ患者の結果を示す。

【図20】図２０は、疾患が再発し、患者が再処置を受けるまでに８週続く３回の負荷用量の効果を示した患者のＯＣＴ画像のセットを示す。

【図21A】図２１Ａは、単回用量生物活性研究からの結果を描写する。

【図21B】図２１Ｂは、単回用量生物活性研究からの結果を描写する。

【図21C】図２１Ｃは、単回用量生物活性研究からの結果を描写する。

【図22】図２２は、本開示の一部の実施形態による、ｗＡＭＤについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフのセットである。

【図23】図２３は、本開示の一部の実施形態による、滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図24】図２４は、本開示の一部の実施形態による、滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）を有するが高度な色素上皮剥離を有しない患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図25】図２５は、本開示の一部の実施形態による、滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図26】図２６は、本開示の一部の実施形態による、滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）を有するが高度な色素上皮剥離を有しない患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図27】図２７は、本開示の一部の実施形態による、ＤＭＥについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフのセットである。

【図28】図２８は、本開示の一部の実施形態による、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図29】図２９は、本開示の一部の実施形態による、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図30】図３０は、本開示の一部の実施形態による、ＲＶＯについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフである。

【図31】図３１は、本開示の一部の実施形態による、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図32】図３２は、本開示の一部の実施形態による、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図33】図３３は、本開示の一部の実施形態による、加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、および網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）における抗体結合性構築物Ａ硝子体内投与スケジュールを表す図解である。

【図34】図３４は、本開示の一部の実施形態による、ｗＡＭＤについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフのセットである。

【図35】図３５は、本開示の一部の実施形態による、ｗＡＭＤを有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図36】図３６は、本開示の一部の実施形態による、ＤＭＥについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフのセットである。

【図37】図３７は、本開示の一部の実施形態による、ＤＭＥを有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図38】図３８は、本開示の一部の実施形態による、ＲＶＯについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフのセットである。

【図39】図３９は、本開示の一部の実施形態による、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）を有する患者へのＫＳＩ－３０１の負荷用量の硝子体内投与後のＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図40】図４０は、本開示の一部の実施形態による、処置ナイーブｗＡＭＤ患者におけるＫＳＩ－３０１処置のフェーズ２研究設計および標準治療の処置との比較を表す図解である。

【図41A】図４１Ａは、本開示の一部の実施形態による、フェーズ１ｂ研究からであるがフェーズ２再処置基準を適用した患者からのデータに基づく、処置の仮説的なスケジュールを示すグラフである。

【図41B】図４１Ｂは、本開示の一部の実施形態による、フェーズ１ｂ研究からであるがフェーズ２再処置基準を適用した患者からのデータに基づく、Ｑ２０Ｗ投薬での残存の確率を示すグラフである。

【図42】図４２は、本開示の方法の実施形態を描写するフローチャートである。

【図43】図４３は、本開示の一部の実施形態による、加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、および網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）におけるＫＳＩ－３０１硝子体内投与スケジュールを表す図解である。

【図44】図４４は、本開示の一部の実施形態による、滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）を有する患者に投与されたＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図45A】図４５Ａは、本開示の一部の実施形態による、ｗＡＭＤについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフのセットである。

【図45B】図４５Ｂは、図４５Ａに示されるｗＡＭＤ患者におけるＫＳＩ－３０１の投与間隔を要約する表である。

【図46】図４６は、本開示の一部の実施形態による、ＫＳＩ－３０１で処置されたｗＡＭＤ患者のＯＣＴ画像の集合である。

【図47】図４７は、本開示の一部の実施形態による、標準治療の処置に対するｗＡＭＤにおけるＫＳＩ－３０１のベンチマーキングを示すグラフである。

【図48】図４８は、本開示の一部の実施形態による、標準治療の処置に対するｗＡＭＤにおけるＫＳＩ－３０１のベンチマーキングを示すグラフである。

【図49】図４９は、本開示の一部の実施形態による、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）を有する患者に投与されたＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図50A】図５０Ａは、本開示の一部の実施形態による、ＤＭＥについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフのセットである。

【図50B】図５０Ｂは、図５０Ａに示されるＤＭＥ患者におけるＫＳＩ－３０１の投与間隔を要約する表である。

【図51】図５１は、本開示の実施形態による、ＫＳＩ－３０１で処置されたＤＭＥ患者のＯＣＴ画像の集合である。

【図52】図５２は、本開示の一部の実施形態による、ＫＳＩ－３０１で処置されたＤＭＥ患者のＯＣＴ画像の集合である。

【図53】図５３は、本開示の一部の実施形態による、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）を有する患者に投与されたＫＳＩ－３０１の持続された治療効果を示すグラフのセットである。

【図54A】図５４Ａは、本開示の一部の実施形態による、ＲＶＯについて処置される個々の患者に与えられるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与のスケジュールを示すグラフのセットである。

【図54B】図５４Ｂは、図５４Ａに示されるＲＶＯ患者におけるＫＳＩ－３０１の投与間隔を要約する表である。

【図55】図５５は、本開示の一部の実施形態による、標準治療の処置に対するＲＶＯにおけるＫＳＩ－３０１のベンチマーキングを示すグラフである。

【図56】図５６は、本開示の一部の実施形態による、ＫＳＩ－３０１で処置されたＣＲＶＯ患者のＯＣＴ画像の集合である。

【図57】図５７は、本開示の一部の実施形態による、加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）における抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート硝子体内投与スケジュールを表す図解である。

【図58】図５８は、本開示の一部の実施形態による、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）における抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート硝子体内投与スケジュールを表す図解である。

【図59】図５９は、本開示の一部の実施形態による、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）における抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート硝子体内投与スケジュールを表す図解である。

【発明を実施するための形態】

【0040】

好ましい実施形態の詳細な説明
眼障害を有する対象に抗ＶＥＧＦ抗体を投与することにより眼障害を処置する方法が本明細書において提供される。本開示の抗ＶＥＧＦ抗体は、対象に投与された場合の抗体の半減期を延長させるポリマー部分を含む抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）であってもよい。抗体コンジュゲートは、ポリマー部分を有しない抗体と比較して投与後により長期間にわたり治療有効性を保持し得る。そのため、本開示の方法は、対象において抗ＶＥＧＦ治療の治療効果を達成するために従来の抗ＶＥＧＦ抗体治療よりも少ない用量（例えば、より低い頻度の投与）の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを含む眼障害に対する処置の過程を提供し得る。本発明の方法は、特に眼障害処置が治療剤の硝子体内投与を伴う場合に、処置過程へのより良好な患者のコンプライアンスを促し得る。

【0041】

定義
「新生血管障害」は、血管新生の変更、脱調節または未調節により特徴付けられる障害または疾患状態である。新生血管障害の例としては、新生物性形質転換（例えば、がん）ならびに糖尿病網膜症および加齢黄斑変性症を含めて目の新生血管障害が挙げられる。

【0042】

「目の新生血管」障害は、患者の目における血管新生の変更、脱調節または未調節により特徴付けられる障害である。そのような障害としては、視神経乳頭血管新生、虹彩血管新生、網膜血管新生、脈絡膜血管新生、角膜血管新生、硝子体血管新生、緑内障、パンヌス、翼状片、黄斑浮腫、糖尿病網膜症、糖尿病黄斑浮腫、血管網膜症、網膜変性症、ぶどう膜炎、網膜の炎症性疾患、および増殖性硝子体網膜症が挙げられる。

【0043】

抗体という用語は、インタクトな抗体およびその結合性断片を含む。結合性断片は、インタクトな抗体が結合する抗原に結合するインタクトな抗体の部分を含むインタクトな抗体以外の分子を指す。結合性断片の例としては、Ｆｖ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；ダイアボディ；直鎖状抗体；単鎖抗体分子（例えばｓｃＦｖ）；および抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられる。ｓｃＦｖ抗体は、非特許文献１において記載されている。追加的に、抗体断片は、ＶＨドメインの特徴を有する、すなわち、ＶＬドメインと共に集合することができる、またはＶＬドメインの特徴を有する、すなわち、ＶＨドメインと共に機能的な抗原結合性部位に集合することにより全長抗体の抗原結合特性を提供することができる、単鎖ポリペプチドを含む。

【0044】

抗体のその標的抗原への特異的結合は、少なくとも１０^６、１０^７、１０^８、１０^９、または１０^１０Ｍ^－１の親和性を意味する。特異的結合は、少なくとも１つの無関連の標的に対して起こる非特異的結合に対して検出可能により強く、区別可能である。特異的結合は、特定の官能基または特定の空間的フィット（例えば、錠および鍵型）の間の結合の形成の結果であり得る一方、非特異的結合は通常、ファンデルワールス力の結果である。特異的結合は、しかしながら、抗体または融合タンパク質がただ１つの標的に結合することを必ずしも含意しない。

【0045】

基本的な抗体構造単位はサブユニットの四量体である。各四量体は、ポリペプチド鎖の２つの同一のペアを含み、各ペアは、１つの「軽」鎖（約２５ｋＤａ）および１つの「重」鎖（約５０～７０ｋＤａ）を有する。各鎖のアミノ末端部分は、抗原認識の主な原因となる約１００～１１０またはより多くのアミノ酸の可変領域を含む。この可変領域は最初に、切断可能なシグナルペプチドに連結されて発現される。シグナルペプチドを有しない可変領域は成熟可変領域と称されることがある。そのため、例えば、軽鎖成熟可変領域は、軽鎖シグナルペプチドを有しない軽鎖可変領域を意味する。しかしながら、可変領域への言及は、シグナル配列が必然的に存在することを意味せず、実際に、抗体または融合タンパク質が発現および分泌されると、シグナル配列は切断される。重鎖および軽鎖可変領域のペアは抗体の結合性領域を定義する。軽鎖および重鎖のカルボキシ末端部分は軽鎖および重鎖定常領域をそれぞれ定義する。重鎖定常領域は主にエフェクター機能の原因となる。ＩｇＧ抗体において、重鎖定常領域は、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、およびＣＨ３領域に分けられる。ＣＨ１領域は、ジスルフィドおよび非共有結合により軽鎖定常領域に結合する。ヒンジ領域は、抗体の結合性領域およびエフェクター領域の間の柔軟性を提供し、そしてまた四量体サブユニット中の２つの重鎖定常領域の間の分子間ジスルフィド結合のための部位を提供する。ＣＨ２およびＣＨ３領域は、エフェクター機能およびＦｃＲ結合の主要な部位である。

【0046】

軽鎖は、カッパまたはラムダのいずれかとして分類される。重鎖は、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、またはイプシロンとして分類され、抗体のアイソタイプをそれぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよびＩｇＥとして定義する。軽鎖および重鎖内で、可変および定常領域は約１２またはより多くのアミノ酸の「Ｊ」セグメントにより接合され、重鎖は約１０またはより多くのアミノ酸の「Ｄ」セグメントも含む。（一般に、非特許文献２を参照）（参照により全体が全ての目的のために組み込まれる）。

【0047】

各軽／重鎖ペアの成熟可変領域は、抗体結合性部位を形成する。そのため、インタクトな抗体は２つの結合性部位を有し、すなわち、二価である。天然抗体において、結合性部位は同じである。しかしながら、２つの結合性部位が異なる二重特異性抗体を作製することができる（例えば、非特許文献３；非特許文献４を参照）。可変領域は全て、相対的に保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）が、相補性決定領域またはＣＤＲとも呼ばれる３つの超可変領域により接合されている同じ全体構造を呈する。各ペアの２つの鎖からのＣＤＲはフレームワーク領域によりアライメントされて、特異的なエピトープへの結合が可能になる。Ｎ末端からＣ末端へと、両方の軽鎖および重鎖は、ドメインＦＲｌ、ＣＤＲｌ、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３およびＦＲ４を含む。簡便性のために、可変重鎖ＣＤＲは、ＣＤＲ_Ｈ１、ＣＤＲ_Ｈ２およびＣＤＲ_Ｈ３と称されることがあり、可変軽鎖ＣＤＲは、ＣＤＲ_Ｌ１、ＣＤＲ_Ｌ２およびＣＤＲ_Ｌ３と称されることがある。各ドメインへのアミノ酸の割当ては、非特許文献５および非特許文献６または非特許文献７；非特許文献８の定義に従う。Ｋａｂａｔはまた、広く使用されているナンバリング規則（Ｋａｂａｔナンバリング）を提供しており、該規則において、異なる重鎖可変領域の間または異なる軽鎖可変領域の間の対応する残基は同じ数を割り当てられる。Ｋａｂａｔナンバリングを抗体定常領域のために使用することができるが、ＥＵナンバリングがより一般的に使用され、本出願においても同様である。本明細書に開示される例示的な抗体のために特有の配列が提供されるが、タンパク質鎖の発現後に軽鎖および／または重鎖のアミノまたはカルボキシ末端における１～数個のアミノ酸、特には重鎖Ｃ末端リジン残基が、分子の部分または全体において欠失または誘導体化され得ることが理解される。

【0048】

「エピトープ」という用語は、抗体または細胞外トラップセグメントが結合する抗原上の部位を指す。タンパク質上のエピトープは、連続するアミノ酸から、または１つもしくは複数のタンパク質の三次フォールディングにより並置される不連続のアミノ酸から形成
され得る。連続するアミノ酸から形成されるエピトープ（リニアエピトープとしても公知）は、典型的には、変性溶媒への曝露で保持される一方、三次フォールディングにより形成されるエピトープ（コンホメーショナルエピトープとしても公知）は、典型的には、変性溶媒での処理で喪失される。エピトープは、典型的には、独特の空間的配座において少なくとも３個、より通常は、少なくとも５個または８～１０個のアミノ酸を含む。エピトープの空間的配座を決定する方法としては、例えば、ｘ線結晶学および２次元核磁気共鳴が挙げられる。例えば、非特許文献９を参照。

【0049】

同じまたはオーバーラップするエピトープを認識する抗体は、標的抗原への別の抗体の結合と競合する１つの抗体の能力を示す単純なイムノアッセイにおいて同定することができる。抗体のエピトープはまた、その抗原に結合した抗体（またはＦａｂ断片）のＸ線結晶学により接触残基を同定することにより定義することができる。

【0050】

代替的に、２つの抗体は、１つの抗体の結合を低減させまたは排除する抗原中の全てのアミノ酸突然変異が他の抗体の結合を低減させまたは排除する場合に、同じエピトープを有する。２つの抗体は、１つの抗体の結合を低減させまたは排除する一部のアミノ酸突然変異が他の抗体の結合を低減させまたは排除する場合に、オーバーラップするエピトープを有する。

【0051】

抗体間の競合は、試験下の抗体が共通の抗原への参照抗体の特異的結合を阻害するアッセイにより決定される（例えば、非特許文献１０を参照）。試験抗体は、過剰な試験抗体（例えば、少なくとも２×、５×、１０×、２０×またはｌ００×）が参照抗体の結合を少なくとも５０％阻害する場合に、参照抗体と競合する。一部の実施形態において、試験抗体は、競合結合アッセイにおける測定で、参照抗体の結合を７５％、９０％、または９９％阻害する。競合アッセイにより同定される抗体（競合性抗体）としては、参照抗体と同じエピトープに結合する抗体、および立体障害が起こるために参照抗体により結合されるエピトープの十分に近位にある隣接するエピトープに結合する抗体が挙げられる。

【0052】

「患者」という用語は、予防的処置または治療的処置のいずれかを与えられるヒトおよび他の哺乳動物対象を含む。

【0053】

アミノ酸置換を保存的または非保存的として分類する目的のために、アミノ酸は以下のようにグループ分けされる：グループＩ（疎水性側鎖）：ｍｅｔ、ａｌａ、ｖａｌ、ｌｅｕ、ｉｌｅ；グループＩＩ（中性親水性側鎖）：ｃｙｓ、ｓｅｒ、ｔｈｒ；グループＩＩＩ（酸性側鎖）：ａｓｐ、ｇｌｕ；グループＩＶ（塩基性側鎖）：ａｓｎ、ｇｉｎ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、ａｒｇ；グループＶ（鎖配向に影響を及ぼす残基）：ｇｌｙ、ｐｒｏ；およびグループＶＩ（芳香族側鎖）：ｔｒｐ、ｔｙｒ、ｐｈｅ。保存的置換は、同じクラス内のアミノ酸の間の置換を伴う。非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーの、別のクラスのメンバーとの交換を構成する。

【0054】

配列同一性パーセンテージは、可変領域についてＫａｂａｔナンバリング規則によりまたは定常領域についてＥＵナンバリングにより最大にアライメントされた抗体配列を用いて決定される。アライメント後に、対象抗体領域（例えば、重鎖または軽鎖の成熟可変領域全体）が参照抗体の同じ領域と比較されている場合、対象および参照抗体領域の間の配列同一性パーセンテージは、ギャップをカウントせずに、対象および参照抗体領域の両方において同じアミノ酸により占有された位置の数を、２つの領域のアライメントされた位置の総数で割り、１００を掛けてパーセンテージに変換したものである。他の配列の配列同一性は、アルゴリズム、例えばＷｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｐａｃｋａｇｅ Ｒｅｌｅａｓｅ ７．０、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ
Ｇｒｏｕｐ、５７５ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｒ．、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ中のＢＥＳＴＦ
ＩＴ、ＦＡＳＴＡ、およびＴＦＡＳＴＡを使用し、デフォルトのギャップパラメーターを使用して配列をアライメントすることにより、または検査、および最良のアライメント（すなわち、比較ウィンドウにかけて配列類似性の最も高いパーセンテージを結果としてもたらす）により、決定することができる。配列同一性のパーセンテージは、比較のウィンドウにかけて２つの最適にアライメントされた配列を比較し、両方の配列において同一の残基が起こる位置の数を決定してマッチした位置の数を得、マッチした位置の数を比較のウィンドウ中の位置の総数（すなわち、ウィンドウサイズ）で割り、結果に１００を掛けて配列同一性のパーセンテージを得ることにより算出される。

【0055】

１つまたは複数の記載される要素を「含む」組成物または方法は、特に記載されない他の要素を含んでもよい。例えば、抗体を含む組成物は、抗体を単独でまたは他の成分と組み合わせて含有してもよい。

【0056】

「抗体依存性細胞傷害性」、またはＡＤＣＣという用語は、抗体でコーティングされた標的細胞（すなわち、抗体に結合した細胞）の、溶解活性を有する免疫細胞（エフェクター細胞とも称される）との相互作用に依存する、細胞死を誘導するための機序である。そのようなエフェクター細胞としては、ナチュラルキラー細胞、単球／マクロファージおよび好中球が挙げられる。ＡＤＣＣは、細胞に結合した抗体のＦｃ領域と、免疫エフェクター細胞、例えば好中球、マクロファージおよびナチュラルキラー細胞上のＦｃｙ受容体、特にはＦｃγＲＩおよびＦｃγＲＩＩＩとの間の相互作用により誘発される。標的細胞は、媒介性エフェクター細胞の種類に依存して、ファゴサイトーシスまたは溶解により排除される。抗体でコーティングされた標的細胞の死が、エフェクター細胞活性の結果として起こる。

【0057】

オプソニン化という用語は、「抗体依存性細胞ファゴサイトーシス」、またはＡＤＣＰとしても公知であり、抗体でコーティングされた細胞が、全体的または部分的のいずれかで、免疫グロブリンＦｃ領域に結合する貪食免疫細胞（例えば、マクロファージ、好中球および樹状細胞）への内部移行を受けるプロセスを指す。

【0058】

「補体依存性細胞傷害性」またはＣＤＣという用語は、標的に結合した抗体のＦｃエフェクタードメインが一連の酵素反応を活性化させ、結果的に標的細胞膜中のホールの形成をもたらす、細胞死を誘導するための機序を指す。典型的には、抗原－抗体複合体、例えば抗体でコーティングされた標的細胞上の抗原－抗体複合体は、補体成分Ｃｌｑに結合してそれを活性化させ、次いでそれは補体カスケードを活性化させて標的細胞の死に繋がる。補体の活性化はまた、白血球上の補体受容体（例えば、ＣＲ３）に結合することによりＡＤＣＣを促す標的細胞表面上の補体成分の沈着を結果としてもたらし得る。

【0059】

ヒト化抗体は、遺伝子操作された抗体であって、非ヒト「ドナー」抗体からのＣＤＲがヒト「アクセプター」抗体配列にグラフトされたものである（例えば、Ｑｕｅｅｎの特許文献１および特許文献２；Ｗｉｎｔｅｒ，特許文献３、Ｃａｒｔｅｒ，特許文献４、Ａｄａｉｒ，特許文献５、特許文献６、Ｆｏｏｔｅ，特許文献６を参照）。アクセプター抗体配列は、例えば、成熟ヒト抗体配列、そのような配列の複合物、ヒト抗体配列のコンセンサス配列、または生殖系列領域配列であることができる。そのため、ヒト化抗体は、全体的にまたは実質的にドナー抗体からの一部のまたは全てのＣＤＲならびに全体的にまたは実質的にヒト抗体配列からの可変領域フレームワーク配列および存在する場合には定常領域を有する抗体である。同様に、ヒト化重鎖は、全体的にまたは実質的にドナー抗体重鎖からの少なくとも１つ、２つ、通常は３つ全てのＣＤＲ、ならびに実質的にヒト重鎖可変領域フレームワークおよび定常領域配列からの重鎖可変領域フレームワーク配列および存在する場合には重鎖定常領域を有する。同様に、ヒト化軽鎖は、全体的にまたは実質的にドナー抗体軽鎖からの少なくとも１つ、２つ、通常は３つ全てのＣＤＲ、ならびに実質的
にヒト軽鎖可変領域フレームワークおよび定常領域配列からの軽鎖可変領域フレームワーク配列および存在する場合には軽鎖定常領域を有する。ナノボディおよびｄＡｂ以外では、ヒト化抗体はヒト化重鎖およびヒト化軽鎖を含む。ヒト化抗体中のＣＤＲは、対応する残基（Ｋａｂａｔにより定義される）の少なくとも８５％、９０％、９５％または１００％が各々のＣＤＲの間で同一である場合に、実質的に非ヒト抗体中の対応するＣＤＲからのものである。抗体鎖の可変領域フレームワーク配列または抗体鎖の定常領域は、Ｋａｂａｔにより定義される対応する残基の少なくとも８５、９０、９５または１００％が同一である場合に、実質的にそれぞれヒト可変領域フレームワーク配列またはヒト定常領域からのものである。

【0060】

ヒト化抗体は多くの場合にマウス抗体からの６つ全てのＣＤＲ（Ｋａｂａｔにより定義され得る）を組み込んでいるが、それらはまた、全てではないＣＤＲ（例えば、マウス抗体からの少なくとも３、４、または５つのＣＤＲ）と共に作製することができる（例えば、非特許文献１１；非特許文献１２；非特許文献１３；非特許文献１４）。

【0061】

キメラ抗体は、非ヒト抗体（例えば、マウス）の軽鎖および重鎖の成熟可変領域がヒト軽鎖および重鎖定常領域と組み合わせられた抗体である。そのような抗体は、マウス抗体の結合特異性を実質的にまたは全体的に保持し、約３分の２のヒト配列である。

【0062】

ベニア抗体（ｖｅｎｅｅｒｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ）は、非ヒト抗体のＣＤＲの一部、通常は全て、ならびに非ヒト可変領域フレームワーク残基の一部を保持するが、ＢまたはＴ細胞エピトープに寄与し得る他の可変領域フレームワーク残基、例えば露出される残基（非特許文献１５）を、ヒト抗体配列の対応する位置からの残基で置き換えた、ヒト化抗体の種類である。結果は、ＣＤＲが全体的にまたは実質的に非ヒト抗体からのものであり、かつ非ヒト抗体の可変領域フレームワークが置換によってよりヒト様とされた抗体である。ヒト抗体は、ヒトから単離することができ、または他にヒト免疫グロブリン遺伝子の発現の結果としてもたらされ得る（例えば、トランスジェニックマウス、インビトロまたはファージディスプレイによる）。ヒト抗体を製造する方法としては、非特許文献１６；Ｏｓｔｂｅｒｇ，；特許文献７およびＥｎｇｌｅｍａｎ ｅｔ ａｌ．，特許文献８のトリオーマ法、ヒト免疫グロブリン遺伝子を含むトランスジェニックマウスの使用（例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，特許文献９；特許文献１０、特許文献１１、特許文献１２、特許文献１３、特許文献１４、特許文献１５、特許文献１６、特許文献１７、特許文献１８、特許文献１９、非特許文献１７、非特許文献１８、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉ，特許文献２０を参照）ならびにファージディスプレイ法（例えば、Ｄｏｗｅｒ ｅｔ ａｌ．，特許文献２１およびＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，特許文献２２、特許文献２３、特許文献２４、特許文献２５、特許文献２６、特許文献２７および特許文献２８を参照）が挙げられる。

【0063】

「ポリマー」は、連結されて一緒になった一連のモノマー基を指す。ポリマーは、単一のモノマー（ホモポリマー）または異なるモノマー（ヘテロポリマー）の複数の単位から構成される。高ＭＷポリマーは、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド、メタクリルアミド、スチレン、ビニル－ピリジン、ビニル－ピロリドンおよびビニルエステル、例えば酢酸ビニルが挙げられるがこれらに限定されないモノマーから調製される。追加のモノマーが高ＭＷポリマーにおいて有用である。２つの異なるモノマーが使用される場合、２つのモノマーは「コモノマー」と呼ばれ、これは異なるモノマーが共重合されて単一のポリマーを形成することを意味する。ポリマーは直鎖状または分枝状であることができる。ポリマーが分枝状である場合、各ポリマー鎖は「ポリマーアーム」と称される。開始剤部分に連結されたポリマーアームの末端は近位末端であり、ポリマーアームの成長鎖末端は遠位末端である。ポリマーアームの伸長鎖末端において、ポリマーアーム末端基は、ラジカルスカベンジャー、または別の基であることができる。

【0064】

「開始剤」は、モノマーまたはコモノマーを使用して重合を開始させることができる化合物を指す。重合は、従来のフリーラジカル重合または制御／「リビング」ラジカル重合、例えば原子移動ラジカル重合（Ａｔｏｍ Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｒａｄｉｃａｌ Ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ；ＡＴＲＰ）、可逆的付加開裂連鎖移動（Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ａｄｄｉｔｉｏｎ Ｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ＲＡＦＴ）重合またはニトロキシド媒介重合（ＮＭＰ）であることができる。重合は、「擬」制御重合（“ｐｓｅｕｄｏ” ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ）、例えば縮退的移動（ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ）であることができる。開始剤がＡＴＲＰのために好適な場合、それは、ホモリティックに切断されて、ラジカル重合を開始させることができるラジカルである開始剤断片、Ｉを形成することができる不安定な結合、および成長するポリマー鎖のラジカルと反応して重合を可逆的に停止させるラジカルスカベンジャー、Ｉ’を含有する。ラジカルスカベンジャーＩ’は典型的にはハロゲンであるが、有機部分、例えばニトリルであることもできる。一部の実施形態において、開始剤は、ＡＴＲＰを介する重合用の部位としてより多くの２－ブロモイソブチレート基のうちの１つを含有する。

【0065】

「化学的リンカー」は、２つの基を一緒になるように連結させる化学的部分、例えば半減期延長部分およびタンパク質を指す。リンカーは切断可能なものまたは切断不可能なものであることができる。切断可能なリンカーは、特には、加水分解可能、酵素切断可能、ｐＨ感受性、光解離性、またはジスルフィドリンカーであることができる。他のリンカーとしては、ホモ二官能性およびヘテロ二官能性リンカーが挙げられる。「連結基」は、生物活性剤への１つまたは複数の結合からなる共有連結を形成することができる官能基である。非限定的な例としては、特許文献２９（参照により組み込まれる）のＴａｂｌｅ １に示されるものが挙げられる。

【0066】

「反応基」という用語は、別の化学基と反応して共有結合を形成することができる、すなわち好適な反応条件下で共有結合的に反応性の基を指し、一般に別の物質のための結合点となる。反応基は、部分、例えばマレイミドまたはスクシンイミジルエステルであり、異なる部分上の官能基と化学的に反応して共有連結を形成することができる。反応基としては、一般に、求核剤、求電子剤および光活性化可能基が挙げられる。

【0067】

「ＰＣ」としても表される「ホスホリルコリン」は、以下：

【0068】

【化4】

【0069】

を指し、＊は結合点を表す。ホスホリルコリンは、双性イオン基であり、その塩（例えば分子内塩）、ならびにプロトン化および脱プロトン化形態を含む。

【0070】

「ホスホリルコリン含有ポリマー」は、ホスホリルコリンを含有するポリマーである。
「双性イオン含有ポリマー」は、双性イオンを含有するポリマーを指す。

【0071】

ポリ（アクリロイルオキシエチルホスホリルコリン）含有ポリマーは、２－（アクリロイルオキシ）エチル－２－（トリメチルアンモニウム）エチルホスフェート（以下の実施例６において示されるＨＥＡ－ＰＣ）をモノマーとして含有するポリマーを指す。

【0072】

ポリ（メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン）含有ポリマーは、２－（メタクリロイルオキシ）エチル－２－（トリメチルアンモニウム）エチルホスフェート（ＨＥＭＡ－ＰＣまたはＭＰＣ）をモノマーとして含有するポリマーを指す（以下を参照）：

【0073】

【化5】

【0074】

本明細書において使用される場合、「ＭＰＣ」および「ＨＥＭＡ－ＰＣ」は交換可能である。

【0075】

ポリマーの文脈における「分子量」は、数平均分子量、または重量平均分子量またはピーク分子量のいずれかとして表すことができる。他に指し示されなければ、本明細書における分子量への全ての言及はピーク分子量を指す。これらの分子量決定、数平均（Ｍｎ）、重量平均（Ｍｗ）およびピーク（Ｍｐ）は、サイズ排除クロマトグラフィーまたは他の液体クロマトグラフィー技術を使用して測定することができる。分子量値を測定する他の方法もまた使用することができ、それは例えば、数平均分子量を決定するための末端基分析もしくは束一的特性（例えば、凝固点降下、沸点上昇、もしくは浸透圧）の測定の使用、または重量平均分子量を決定するための光散乱技術、超遠心分離もしくは粘度測定の使用である。一部の実施形態において、分子量はＳＥＣ－ＭＡＬＳ（サイズ排除クロマトグラフィー－多角光散乱）により測定される。一部の実施形態において、ポリマー試薬は典型的には多分散（すなわち、ポリマーの数平均分子量および重量平均分子量は等しくない）であり、例えば、ＳＥＣ－ＭＡＬＳ測定に由来するＰＤＩ値による判断で、例えば、約１．５未満の低い多分散性値を有することができる。一部の実施形態において、多分散性（ＰＤＩ）は、約１．４～約１．２の範囲内である。一部の実施形態において、ＰＤＩは、約１．１５、１．１０、１．０５、または１．０３よりも低い。

【0076】

「ａ」または「ａｎ」実体という語句は、その実体の１つまたは複数を指し、例えば、化合物（ａ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）は、１つもしくは複数の化合物または少なくとも１つの化合物を指す。そのため、「ａ」（または「ａｎ」）、「１つまたは複数の」、および「少なくとも１つの」という用語は、本明細書において交換可能に使用され得る。

【0077】

「約」は、異なる機器、試料、および試料調製の間で得られる測定値において見られ得るばらつきを意味する。

【0078】

「保護された」、「保護された形態」、「保護基」（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）および「保護基」（ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｇｒｏｕｐ）は、ある特定の反応条件下で分子中の特定の化学的に反応性の官能基の反応を予防または遮断する基（すなわち、保護基）の存在を指す。保護基は、保護されている化学的に反応性の基の種類の他に、用いられる反応条件および存在する場合には分子中の追加の反応基または保護基の存在に依存して変動する。好適な保護基としては、非特許文献１９において見出されるようなものが挙げられる。

【0079】

「アルキル」は、指し示される炭素原子の数を有する、直鎖状または分枝状の、飽和した、脂肪族ラジカルを指す。例えば、Ｃ_１～Ｃ_６アルキルとしては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシルなどが挙げられるがこれらに限定されない。他のアルキル基としては、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルなどが挙げられるがこれらに限定されない。アルキルは、任意の数、例えば１～２個、１～３個、１～４個、１～５個、１～６個、１～７個、１～８個、１～９個、１～１０個、２～３個、２～４個、２～５個、２～６個、３～４個、３～５個、３～６個、４～５個、４～６および５～６個の炭素を含むことができる。アルキル基は典型的には一価であるが、二価であることができ、これは例えば、アルキル基が２つの部分を一緒になるように連結する場合である。

【0080】

有機ラジカルまたは化合物との繋がりで上記および下記において言及される「低級」（ｌｏｗｅｒ）という用語は、７つを含めて７つまでのまたは４つを含めて４つまでのおよび（非分枝状として）１または２つの炭素原子を有する分枝状または非分枝状であり得る化合物またはラジカルをそれぞれ定義する。

【0081】

「アルキレン」は、少なくとも２つの他の基を連結する、上記に定義されるようなアルキル基、すなわち、二価炭化水素ラジカルを指す。アルキレンに連結される２つの部分は、アルキレンの同じ原子または異なる原子に連結され得る。例えば、直鎖アルキレンは、－（ＣＨ_２）_ｎの二価ラジカルであることができ、ｎは、１、２、３、４、５または６である。アルキレン基としては、メチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレン、ブチレン、イソブチレン、ｓｅｃ－ブチレン、ペンチレンおよびヘキシレンが挙げられるがこれらに限定されない。

【0082】

アルキルおよびヘテロアルキルラジカル（アルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニル、およびヘテロシクロアルケニルと多くの場合に称される基を含む）の置換基は、０～（２ｍ’＋１）（ｍ’は、そのようなラジカル中の炭素原子の総数である）の範囲内の数の、以下から選択される様々な基であることができる：－ＯＲ’、＝Ｏ、＝ＮＲ’、＝Ｎ－ＯＲ’、－ＮＲ’Ｒ’’、－ＳＲ’、－ハロゲン、－ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、－Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＣＯ_２Ｒ’、－ＣＯＮＲ’Ｒ’’、－ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＮＲ’－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）_２Ｒ’、－ＮＨ－Ｃ（ＮＨ_２）＝ＮＨ、－ＮＲ’Ｃ（ＮＨ_２）＝ＮＨ、－ＮＨ－Ｃ（ＮＨ_２）＝ＮＲ’、－Ｓ（Ｏ）Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ’Ｒ’’、－ＣＮおよび－ＮＯ_２。Ｒ’、Ｒ’’およびＲ’’’は、各々独立して、水素、非置換（Ｃ_１～Ｃ_８）のアルキルおよびヘテロアルキル、非置換のアリール、１～３個のハロゲンで置換されたアリール、非置換のアルキル、アルコキシもしくはチオアルコキシ基、またはアリール－（Ｃ_１～Ｃ_４）アルキル基を指す。Ｒ’およびＲ’’が同じ窒素原子に結合している場合、それらは、窒素原子と組み合わさって、５、６、または７員環を形成することができる。例えば、－ＮＲ’Ｒ’’は、１－ピロリジニルおよび４－モルホリニルを含むことが意味される。「アルキル」という用語は、ハロアルキル（例えば、－ＣＦ_３および－ＣＨ_２ＣＦ_３）ならびにアシル（例えば、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、－Ｃ（Ｏ）ＣＦ_３、および－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＯＣＨ_３など）などの基を含む。一部の実施形態において、置換されたアルキルおよびヘテロアルキル基は１～４個の置換基を有する。一部の実施形態において、置換されたアルキル（ａｋｙｌ）およびヘテロアルキル基は、１、２または３個の置換基を有する。例外は、ペルハロアルキル基（例えば、ペンタフルオロエチルなど）である。

【0083】

アルキルおよびヘテロアルキルラジカル（アルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニル、およびヘテロシクロアルケニルと多くの場合に称される基を含む）の置換基は、０～（２ｍ’＋１）（ｍ’は、そのようなラジカル中の炭素原子の総数である）の範囲内の数の、－ＯＲ’、＝Ｏ、＝ＮＲ’、＝Ｎ－ＯＲ’、－ＮＲ’Ｒ’’、－ＳＲ’、－ハロゲン、－ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、－Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＣＯ_２Ｒ’、－ＣＯＮＲ’Ｒ’’、－ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＮＲ’－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）_２Ｒ’、－ＮＲ－Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’）＝ＮＲ’’’’、－ＮＲ－Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、－Ｓ（Ｏ）Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲＳＯ_２Ｒ’、－ＣＮおよび－ＮＯ_２から選択される様々な基のうちの１つまたは複数であることができるがこれらに限定されない。Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’およびＲ’’’’は、各々独立して、水素、置換または非置換のヘテロアルキル、置換または非置換のアリール、例えば、１～３個のハロゲンで置換されたアリール、置換または非置換のアルキル、アルコキシもしくはチオアルコキシ基、またはアリールアルキル基を指す。化合物が、例えば、１つより多くのＲ基を含む場合、Ｒ基の各々は独立して選択され、１つより多くのＲ’、Ｒ’’、Ｒ’’’およびＲ’’’’基が存在する場合にこれらの基の各々についても同様である。Ｒ’およびＲ’’が同じ窒素原子に結合している場合、それらは、窒素原子と組み合わさって、５、６、または７員環を形成することができる。例えば、－ＮＲ’Ｒ’’は、１－ピロリジニルおよび４－モルホリニルを含むがこれらに限定されないことが意味される。置換基の上記の議論から、「アルキル」という用語は、水素基以外の基に結合した炭素原子を含む基、例えばハロアルキル（例えば、－ＣＦ_３および－ＣＨ_２ＣＦ_３）ならびにアシル（例えば、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、－Ｃ（Ｏ）ＣＦ_３、および－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＯＣＨ_３など）を含むことが意味されることを当業者は理解する。

【0084】

「アルコキシ」は、アルコキシ基を結合点に接続するか、またはアルコキシ基の２つの炭素に連結された酸素原子を有するアルキル基を指す。アルコキシ基としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソ－プロポキシ、ブトキシ、２－ブトキシ、イソ－ブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシ、ペントキシ、ヘキソキシなどが挙げられる。アルコキシ基は、本明細書に記載の様々な置換基でさらに置換され得る。例えば、アルコキシ基は、ハロゲンで置換されて「ハロ－アルコキシ」基を形成することができる。

【0085】

「カルボキシアルキル」は、カルボキシ基で置換されたアルキル基（本明細書において定義される）を意味する。「カルボキシシクロアルキル」という用語は、カルボキシ基で置換されたシクロアルキル基（本明細書において定義される）を意味する。アルコシキアルキルという用語は、アルコキシ基で置換されたアルキル基（本明細書において定義される）を意味する。本明細書において用いられる「カルボキシ」という用語は、カルボン酸およびそれらのエステルを指す。

【0086】

「ハロアルキル」は、水素原子の一部または全てがハロゲン原子で置換された、上記に定義されるようなアルキルを指す。ハロゲン（ハロ）はクロロまたはフルオロを表すが、ブロモまたはヨードであってもよい。例えば、ハロアルキルとしては、トリフルオロメチル、フルオロメチル、１，２，３，４，５－ペンタフルオロ－フェニルなどが挙げられる。「パーフルオロ」という用語は、全ての利用可能な水素がフッ素で置き換えられた化合物またはラジカルを定義する。例えば、パーフルオロフェニルは１，２，３，４，５－ペンタフルオロフェニルを指し、パーフルオロメチルは１，１，１－トリフルオロメチルを指し、パーフルオロメトキシは１，１，１－トリフルオロメトキシを指す。

【0087】

「フルオロ置換されたアルキル」は、１つ、一部、または全ての水素原子がフッ素に置き換えられたアルキル基を指す。

【0088】

「サイトカイン」は、免疫および炎症応答において細胞－細胞コミュニケーションに参加し得るタンパク質シグナル伝達分子の群のメンバーである。サイトカインは、典型的には、約８～３５ｋＤａの質量を有する、小さい、水溶性の糖タンパク質である。

【0089】

「シクロアルキル」は、約３～１２個、３～１０個、または３～７個の環内炭素原子を含有する環式炭化水素基を指す。シクロアルキル基としては、縮合、架橋およびスピロ環構造が挙げられる。

【0090】

「環内（の）」は、環式環構造の部分を構成する原子または原子の群を指す。

【0091】

「環外（の）」は、結合しているが環式環構造を定義しない原子または原子の群を指す。

【0092】

「環式アルキルエーテル」は、３もしくは４個の環内炭素原子および１個の環内酸素もしくは硫黄原子を有する４もしくは５員環式アルキル基（例えば、オキセタン、チエタン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン）；または１もしくは２個の環内酸素もしくは硫黄原子を有する６～７員環式アルキル基（例えば、テトラヒドロピラン、１，３－ジオキサン、１，４－ジオキサン、テトラヒドロチオピラン、１，３－ジチアン、１，４－ジチアン、１，４－オキサチアン）を指す。

【0093】

「アルケニル」は、少なくとも１つの二重結合を有する、２～６個の炭素原子の直鎖または分枝状炭化水素を指す。アルケニル基の例としては、ビニル、プロペニル、イソプロペニル、１－ブテニル、２－ブテニル、イソブテニル、ブタジエニル、１－ペンテニル、２－ペンテニル、イソペンテニル、１，３－ペンタジエニル、１，４－ペンタジエニル、１－ヘキセニル、２－ヘキセニル、３－ヘキセニル、１，３－ヘキサジエニル、１，４－ヘキサジエニル、１，５－ヘキサジエニル、２，４－ヘキサジエニル、または１，３，５－ヘキサトリエニルが挙げられるがこれらに限定されない。アルケニル基はまた、２～３、２～４、２～５、３～４、３～５、３～６、４～５、４～６および５～６個の炭素を有することができる。アルケニル基は典型的には一価であるが、二価であることができ、これは例えば、アルケニル基が２つの部分を一緒になるように連結する場合である。

【0094】

「アルケニレン」は、少なくとも２つの他の基を連結する、上記に定義されるようなアルケニル基、すなわち、二価炭化水素ラジカルを指す。アルケニレンに連結される２つの部分は、アルケニレンの同じ原子または異なる原子に連結され得る。アルケニレン基としては、エテニレン、プロペニレン、イソプロペニレン、ブテニレン、イソブテニレン、ｓｅｃ－ブテニレン、ペンテニレンおよびヘキセニレンが挙げられるがこれらに限定されない。

【0095】

「アルキニル」は、少なくとも１つの三重結合を有する、２～６個の炭素原子の直鎖または分枝状炭化水素を指す。アルキニル基の例としては、アセチレニル、プロピニル、１－ブチニル、２－ブチニル、イソブチニル、ｓｅｃ－ブチニル、ブタジイニル、１－ペンチニル、２－ペンチニル、イソペンチニル、１，３－ペンタジイニル、１，４－ペンタジイニル、１－ヘキシニル、２－ヘキシニル、３－ヘキシニル、１，３－ヘキサジイニル、１，４－ヘキサジイニル、１，５－ヘキサジイニル、２，４－ヘキサジイニル、または１，３，５－ヘキサトリイニルが挙げられるがこれらに限定されない。アルキニル基はまた、２～３、２～４、２～５、３～４、３～５、３～６、４～５、４～６および５～６個の炭素を有することができる。アルキニル基は典型的には一価であるが、二価であることができ、これは例えば、アルキニル基が２つの部分を一緒になるように連結する場合である。

【0096】

「アルキニレン」は、少なくとも２つの他の基を連結する、上記に定義されるようなアルキニル基、すなわち、二価炭化水素ラジカルを指す。アルキニレンに連結される２つの部分は、アルキニレンの同じ原子または異なる原子に連結され得る。アルキニレン基としては、エチニレン、プロピニレン、ブチニレン、ｓｅｃ－ブチニレン、ペンチニレンおよびヘキシニレンが挙げられるがこれらに限定されない。

【0097】

「シクロアルキル」は、３～１２個の環原子、または指し示される数の原子を含有する、飽和または部分的に不飽和の、単環式、縮合二環式または架橋多環式環アセンブリーを指す。単環式環としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロオクチルが挙げられる。二環式および多環式環としては、例えば、ノルボルナン、デカヒドロナフタレンおよびアダマンタンが挙げられる。例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルとしては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロオクチル、およびノルボルナンが挙げられる。

【0098】

「シクロアルキレン」は、少なくとも２つの他の基を連結する、上記に定義されるようなシクロアルキル基、すなわち、二価炭化水素ラジカルを指す。シクロアルキレンに連結される２つの部分は、シクロアルキレンの同じ原子または異なる原子に連結され得る。シクロアルキレン基としては、シクロプロピレン、シクロブチレン、シクロペンチレン、シクロヘキシレン、およびシクロオクチレンが挙げられるがこれらに限定されない。

【0099】

「ヘテロシクロアルキル」は、３個の環員～約２０個の環員ならびに１～約５個のヘテロ原子、例えばＮ、ＯおよびＳを有する環系を指す。追加のヘテロ原子もまた有用であり得、これにはＢ、Ａｌ、ＳｉおよびＰが含まれるがこれらに限定されない。ヘテロ原子はまた、酸化されたものであることができ、これは例えば－Ｓ（Ｏ）－および－Ｓ（Ｏ）_２－であるがこれらに限定されない。例えば、複素環としては、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、モルホリノ、ピロリジニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、インドリニル、キヌクリジニルおよび１，４－ジオキサ－８－アザ－スピロ［４．５］デカ－８－イルが挙げられるがこれらに限定されない。

【0100】

「ヘテロシクロアルキレン」は、少なくとも２つの他の基を連結する、上記に定義され
るようなヘテロシクロアルキル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌａｌｋｙｌ）基を指す。ヘテロシクロアルキレンに連結される２つの部分は、ヘテロシクロアルキレンの同じ原子または異なる原子に連結され得る。

【0101】

「アリール」は、６～１６個の環炭素原子を含有する、単環式または縮合二環式、三環式もしくはより多環式の、芳香環アセンブリーを指す。例えば、アリールは、フェニル、ベンジルまたはナフチルであってもよい。「アリーレン」は、アリール基に由来する二価ラジカルを意味する。アリール基は、アルキル、アルコキシ、アリール、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、アミノ－アルキル、トリフルオロメチル、アルキレンジオキシおよびオキシ－Ｃ_２～Ｃ_３－アルキレン（これらの全ては、例えば上記に定義されるように、さらに置換されていてもよい）；または１－もしくは２－ナフチル；または１－もしくは２－フェナントレニルから選択される１、２または３個のラジカルにより一、二または三置換されたものであることができる。アルキレンジオキシは、フェニルの２個の隣接する炭素原子に結合した二価置換基、例えばメチレンジオキシまたはエチレンジオキシである。オキシ－Ｃ_２～Ｃ_３－アルキレンもまた、フェニルの２個の隣接する炭素原子に結合した二価置換基、例えばオキシエチレンまたはオキシプロピレンである。オキシ－Ｃ_２～Ｃ_３－アルキレン－フェニルの例は２，３－ジヒドロベンゾフラン－５－イルである。

【0102】

一部の実施形態において、アリールは、ナフチル、フェニルまたはアルコキシ、フェニル、ハロゲン、アルキルもしくはトリフルオロメチルにより一もしくは二置換されたフェニル、特にフェニルまたはアルコキシ、ハロゲンもしくはトリフルオロメチルにより一もしくは二置換されたフェニル、特にはフェニルである。

【0103】

Ｒとしての置換されたフェニル基の例は、例えば、４－クロロフェン－１－イル、３，４－ジクロロフェン－１－イル、４－メトキシフェン－１－イル、４－メチルフェン－１－イル、４－アミノメチルフェン－１－イル、４－メトキシエチルアミノメチルフェン－１－イル、４－ヒドロキシエチルアミノメチルフェン－１－イル、４－ヒドロキシエチル－（メチル）－アミノメチルフェン－１－イル、３－アミノメチルフェン－１－イル、４－Ｎ－アセチルアミノメチルフェン－１－イル、４－アミノフェン－１－イル、３－アミノフェン－１－イル、２－アミノフェン－１－イル、４－フェニル－フェン－１－イル、４－（イミダゾール－１－イル）－フェニル、４－（イミダゾール－１－イルメチル）－フェン－１－イル、４－（モルホリン－１－イル）－フェン－１－イル、４－（モルホリン－１－イルメチル）－フェン－１－イル、４－（２－メトキシエチルアミノメチル）－フェン－１－イルおよび４－（ピロリジン－１－イルメチル）－フェン－１－イル、４－（チオフェニル）－フェン－１－イル、４－（３－チオフェニル）－フェン－１－イル、４－（４－メチルピペラジン－１－イル）－フェン－１－イル、および４－（ピペリジニル）－フェニルおよび４－（ピリジニル）－フェニルであり、これらは複素環式環中で置換されていてもよい。

【0104】

「アリーレン」は、少なくとも２つの他の基を連結する、上記に定義されるようなアリール基を指す。アリーレンに連結される２つの部分は、アリーレンの異なる原子に連結されている。アリーレン基としてはフェニレンが挙げられるがこれに限定されない。

【0105】

「アリーレン－オキシ」は、アリーレンに連結された部分のうちの１つが酸素原子を通じて連結されている、上記に定義されるようなアリーレン基を指す。アリーレン－オキシ基としてはフェニレン－オキシが挙げられるがこれに限定されない。

【0106】

同様に、アリールおよびヘテロアリール基の置換基は変動的であり、０から芳香環系上の開放原子価の総数までの範囲内の数の、－ハロゲン、－ＯＲ’、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、－ＮＲ’Ｒ’’、－ＳＲ’、－Ｒ’、－ＣＮ、－ＮＯ_２、－ＣＯ_２Ｒ’、－ＣＯＮＲ’Ｒ’
’、－Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）_２Ｒ’、－ＮＲ’－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、－ＮＨ－Ｃ（ＮＨ_２）＝ＮＨ、－ＮＲ’Ｃ（ＮＨ_２）＝ＮＨ、－ＮＨ－Ｃ（ＮＨ_２）＝ＮＲ’、－Ｓ（Ｏ）Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ’Ｒ’’、－Ｎ_３、－ＣＨ（Ｐｈ）_２、パーフルオロ（Ｃ_１～Ｃ_４）アルコキシ、およびパーフルオロ（Ｃ_１～Ｃ_４）アルキルから選択され；Ｒ’、Ｒ’’およびＲ’’’は、水素、（Ｃ_１～Ｃ_８）アルキルおよびヘテロアルキル、非置換のアリールおよびヘテロアリール、（非置換のアリール）－（Ｃ_１～Ｃ_４）アルキル、および（非置換のアリール）オキシ－（Ｃ_１～Ｃ_４）アルキルから独立して選択される。

【0107】

アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基のうちの２つは、式－Ｔ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｑ－Ｕ－の置換基で置き換えられてもよく、ＴおよびＵは、独立して、－ＮＨ－、－Ｏ－、－ＣＨ_２－または単結合であり、ｑは０～２の整数である。代替的に、アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基のうちの２つは、式－Ａ－（ＣＨ_２）_ｒ－Ｂ－の置換基で置き換えられてもよく、ＡおよびＢは、独立して、－ＣＨ_２－、－Ｏ－、－ＮＨ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）_２－、－Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ’－または単結合であり、ｒは１～３の整数である。そのように形成された新たな環の単結合のうちの１つは、二重結合で置き換えられてもよい。代替的に、アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基のうちの２つは、式－（ＣＨ_２）_ｓ－Ｘ－（ＣＨ_２）_ｔ－の置換基で置き換えられてもよく、ｓおよびｔは独立して０～３の整数であり、Ｘは、－Ｏ－、－ＮＲ’－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）_２－、または－Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ’－である。－ＮＲ’－および－Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ’－中の置換基Ｒ’は、水素または非置換の（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルから選択される。

【0108】

「ヘテロアリール」は、５～１６個の環原子を含有する単環式または縮合二環式もしくは三環式芳香環アセンブリーであって、環原子のうちの１～４個が、それぞれＮ、ＯまたはＳであるヘテロ原子であるものを指す。例えば、ヘテロアリールとしては、ピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、フラニル、ピロリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チエニル、または例えばアルキル、ニトロもしくはハロゲンにより置換された、特に一もしくは二置換された、任意の他のラジカルが挙げられる。ピリジルは、２－、３－または４－ピリジル、有利には２－または３－ピリジルを表す。チエニルは２－または３－チエニルを表す。一部の実施形態において、キノリニルは、２－、３－または４－キノリニルを表す。一部の実施形態において、イソキノリニルは、１－、３－または４－イソキノリニルを表す。一部の実施形態において、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニルは、３－ベンゾピラニルまたは３－ベンゾチオピラニルをそれぞれ表すことができる。一部の実施形態において、チアゾリルは２－または４－チアゾリルを表すことができる。一部の実施形態において、トリアゾリルは、１－、２－または５－（１，２，４－トリアゾリル）であることができる。一部の実施形態において、テトラゾリルは５－テトラゾリルであることができる。

【0109】

一部の実施形態において、ヘテロアリールは、ピリジル、インドリル、キノリニル、ピロリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チエニル、フラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾフラニル、イソキノリニル、ベンゾチエニル、オキサゾリル、インダゾリル、または置換された、特に一もしくは二置換された、ラジカルのいずれかである。

【0110】

「ヘテロアルキル」という用語は、１～３個のヘテロ原子、例えばＮ、ＯおよびＳを有するアルキル基を指す。追加のヘテロ原子もまた有用であり得、これにはＢ、Ａｌ、ＳｉおよびＰが含まれるがこれらに限定されない。ヘテロ原子はまた、酸化されたものである
ことができ、これは例えば－Ｓ（Ｏ）－および－Ｓ（Ｏ）_２－であるがこれらに限定されない。例えば、ヘテロアルキルとしては、エーテル、チオエーテル、アルキル－アミンおよびアルキル－チオールを挙げることができる。

【0111】

「ヘテロアルキレン」という用語は、少なくとも２つの他の基を連結する、上記に定義されるようなヘテロアルキル基を指す。ヘテロアルキレンに連結される２つの部分は、ヘテロアルキレンの同じ原子または異なる原子に連結され得る。

【0112】

「求電子剤」は、求電子中心、すなわち、求核剤と反応することができる電子求引性の中心を有する、イオンまたは、イオン性であり得る、原子もしくは原子の集合を指す。求電子剤（または求電子試薬）は、その反応パートナー（求核剤）からの両方の結合性電子を受容することによりその反応パートナーへの結合を形成する試薬である。

【0113】

「求核剤」は、求核中心、すなわち、求電子中心に求引されるまたは求電子剤と反応することができる中心を有する、イオンまたは、イオン性であり得る、原子もしくは原子の集合を指す。求核剤（または求核試薬）は、両方の結合性電子を供与することによりその反応パートナー（求電子剤）への結合を形成する試薬である。「求核基」は、反応基と反応した後の求核剤を指す。非限定的な例としては、アミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、およびハロアルコキシなどが挙げられる。

【0114】

「マレイミド」は、構造：

【0115】

【化6】

【0116】

を有するピロール－２，５－ジオン－１－イル基であって、スルフヒドリル（例えば、チオアルキル）との反応で、構造：

【0117】

【化7】

【0118】

（式中、「・」は、マレイミド基のための結合点を指し示し、

【0119】

【化8】

【0120】

は、元々のスルフヒドリル含有基の残余への硫黄原子チオールの結合点を指し示す）を有する－Ｓ－マレイミド基を形成するものを指す。

【0121】

本開示の目的のために、タンパク質およびポリペプチド中に見出される「天然に存在するアミノ酸」は、Ｌ－アラニン、Ｌ－アルギニン、Ｌ－アスパラギン、Ｌ－アスパラギン酸、Ｌ－システイン、Ｌ－グルタミン、Ｌ－グルタミン酸、Ｌ－グリシン、Ｌ－ヒスチジン、Ｌ－イソロイシン、Ｌ－ロイシン、Ｌ－リジン、Ｌ－メチオニン、Ｌ－フェニルアラニン、Ｌ－プロリン、Ｌ－セリン、Ｌ－スレオニン、Ｌ－トリプトファン、Ｌ－チロシン、およびまたは（ａｎｄ ｏｒ）Ｌ－バリンである。タンパク質中に見出される「天然に存在しないアミノ酸」は、天然に存在するアミノ酸として記載されるもの以外の任意のアミノ酸である。天然に存在しないアミノ酸としては、非限定的に、天然に存在するアミノ酸のＤ異性体、ならびに天然に存在するアミノ酸のＤおよびＬ異性体の混合物が挙げられる。他のアミノ酸、例えばＮ－アルファ－メチルアミノ酸（例えばサルコシン）、４－ヒドロキシプロリン、デスモシン、イソデスモシン、５－ヒドロキシリジン、イプシロン－Ｎ－メチルリジン、３－メチルヒスチジンは、天然に存在するタンパク質中に見出されるが、それらは、一般に、ｍＲＮＡのリボソーム翻訳以外の手段により導入されるので、本開示の目的のためにタンパク質中に見出される天然に存在しないアミノ酸であると考えられる。

【0122】

ポリマーの幾何形状、構成（ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ）または全体構造に関する「直鎖状」は、単一のポリマーアームを有するポリマーを指す。

【0123】

ポリマーの幾何形状、構成または全体構造に関する「分枝状」は、開始剤内に含有されるコア構造から伸長した２つまたはより多くのポリマー「アーム」を有するポリマーを指す。開始剤は、原子移動ラジカル重合（ＡＴＲＰ）反応において用いられてもよい。分枝状ポリマーは、２個のポリマー鎖（アーム）、３個のポリマーアーム、４個のポリマーアーム、５個のポリマーアーム、６個のポリマーアーム、７個のポリマーアーム、８個のポリマーアーム、９個のポリマーアームまたはより多くを有してもよい。各ポリマーアームはポリマー開始部位から伸長する。各ポリマー開始部位は、モノマーの付加によるポリマー鎖の成長のための部位となることができる。限定ではなく例えば、ＡＴＲＰを使用して、開始剤上のポリマー開始の部位は、典型的には、遷移金属化合物、例えばハロゲン化第一銅により触媒される可逆的なレドックスプロセスを受ける有機ハロゲン化物である。一部の実施形態において、ハロゲン化物は臭素である。

【0124】

「薬学的に許容される賦形剤」は、組成物中に含めることができ、かつ患者に対して著しい有害な毒物学的効果を引き起こさず、かつ特にはヒトにおける、治療的使用のためにＦＤＡにより承認されているまたは承認可能な、賦形剤を指す。薬学的に許容される賦形剤の非限定的な例としては、水、ＮａＣｌ、生理食塩水溶液、乳酸リンゲル液、通常スクロース、および通常グルコースなどが挙げられる。

【0125】

治療用タンパク質は有効なレジームにおいて投与され、これは、障害の開始を遅延させ、その重症度を低減させ、そのさらなる悪化を阻害し、かつ／またはその少なくとも１つの徴候もしくは症状を寛解させる投薬量、投与の経路および投与の頻度を意味する。患者が障害を既に患っている場合、レジームは治療有効レジームと称され得る。患者が、一般集団と比べて障害のリスクが上昇しているが、症状を未だに経験していない場合、レジームは予防有効レジームと称され得る。一部の事例において、治療的または予防的有効性は、歴史的な対照または同じ患者における過去の経験と比べて個々の患者において観察され得る。他の事例において、治療的または予防的有効性は、処置されていない患者の対照集団と比べた処置された患者の集団における前臨床または臨床試験において実証され得る。

【0126】

物質の「生物学的半減期」は、物質の半分が、物質の導入後に組織または生物から除去されるために要求される時間を指定する薬物動態パラメーターである。

【0127】

「ＯＧ１７８６」は、ポリマー合成のために使用される９アーム開始剤であり、トリフルオロ酢酸（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｒａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ）とのＯＧ１７８６の塩形態が描写される。ＯＧ１７８６は、他の塩として使用されてもよく、または遊離塩基として使用されてもよい。

【0128】

「ＯＧ１８０１」は、おおよそ（＋／－１５％）７５０ｋＤａのポリマー（ＭｎまたはＭｐのいずれかによる）であり、モノマーＨＥＭＡ－ＰＣを使用するＡＴＲＰ合成用の開始剤としてＯＧ１７８６を使用して製造される。

【0129】

「ＯＧ１８０２」は、マレイミド官能性を付加したＯＧ１８０１であり、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９の各々は整数（正）（０～約３０００）であり、ポリマーの総分子量は（Ｍｗ）７５０，０００±１５％ダルトンである。

【0130】

「ＢＣＶＡ」は最良矯正視力（Ｂｅｓｔ Ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ Ｖｉｓｕａｌ Ａｃｕｉｔｙ）を表す。

【0131】

「ＯＣＴ－Ａ」はＯＣＴアンギオグラフィー（ＯＣＴ－Ａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ）を表す。

【0132】

「ＳＤ－ＯＣＴ」はスペクトル領域光干渉断層撮影法（Ｓｐｅｃｔｒａｌ Ｄｏｍａｉｎ Ｏｐｔｉｃａｌ Ｃｏｈｅｒｅｎｃｅ Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）を表す。

【0133】

多角光散乱（ｍｕｌｔｉ－ａｎｇｌｅ ｌｉｇｈｔ ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ；ＭＡＬＳ）は、レーザー光が分子に衝突し、光の振動電場がその中で振動双極子を誘導する、高分子を分析する技術である。この振動双極子は光を再放射し、ＭＡＬＳ検出器、例えばＷｙａｔｔ ｍｉｎｉＤａｗｎ ＴＲＥＯＳを使用して測定することができる。放射される光の強度は、高分子中で誘導される双極子の振幅に依存し、そしてそれは高分子の分極率に比例し、誘導される双極子がより大きいほど、散乱される光の強度はより大きい。したがって、そのような高分子の溶液から散乱を分析するために、周囲の媒体（例えば、溶媒）に対するそれらの分極率を知るべきである。これは、分子濃度変化、Δｃに伴う溶液の屈折率ｎの変化、Δｎの測定から、Ｗｙａｔｔ Ｏｐｔｉｌａｂ Ｔ－ｒＥＸ示差屈折計を使用してｄｎ／ｄｃ（＝Δｎ／Δｃ）値を測定することにより決定されてもよい。ＭＡＬＳ決定が用いる２つのモル重量パラメーターは数平均分子量（Ｍｎ）および重量平均分子量（Ｍｗ）であり、多分散指数（ＰＤＩ）はＭｗをＭｎで割ったものに等しい。ＳＥＣはまた、ＳＥＣにおける最も高いピークの分子量として定義されるピーク分子量Ｍｐの別の平均分子量決定を可能とする。

【0134】

ＰＤＩは、ポリマー、および多分散バイオポリマー（例えば、ＯＧ１８０２）への別々のタンパク質（例えばＯＧ１９５０）のコンジュゲーションに由来するバイオコンジュゲートの分子量分布の広がりの度合として使用される。タンパク質試料について、その多分散性は１．０に近く、これは、溶液中のあらゆるタンパク質分子は、ほぼ同じ長さおよびモル質量を有することが期待される翻訳の産物であるという事実に起因する。対照的に、様々な長さのポリマー鎖が重合プロセスの間に合成されるバイオポリマーの多分散的性質に起因して、分子量の狭い分布のためにその品質属性の１つとして試料のＰＤＩを決定することは非常に重要である。

【0135】

サイズ排除クロマトグラフィー（ｓｉｚｅ ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ＳＥＣ）は、溶液中の分子がサイズにより分離されるクロマトグラフィー技術である。典型的には、水性溶液は、様々な細孔径の樹脂が充填されたカラムを通じて試料を輸送するようにアプライされる。樹脂は、カラムを通過する時にアナライトに対して不活性であることが期待され、アナライトは、それらの独特のサイズおよび選択されたカラムの細孔径の特徴に基づいて互いに分離する。

【0136】

ＳＥＣをＭＡＬＳと連結したものまたはＳＥＣ／ＭＡＬＳは、ＳＥＣ軟正標準のセットに依拠する場合とは対照的に、モル質量およびサイズ（二乗平均平方根半径）の正確な分布を提供する。この種類の構成は、伝統的なカラム軟正方法を上回る多くの利点を有する。光散乱および濃度は各溶出画分について測定されるので、モル質量およびサイズは、溶出位置とは独立して決定され得る。これは特には、非球形高分子を有する種、例えばバイオポリマー（ＯＧ１８０２）またはバイオコンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）に該当し、そのような種は、典型的には、カラム軟正標準のセットにより記載され得る方式で溶出しない。

【0137】

一部の実施形態において、ＳＥＣ／ＭＡＬＳ分析は、Ａｌｌｉａｎｃｅ ２６９５溶媒送達モジュールおよびＳｈｏｄｅｘ ＳＥＣ－ＨＰＬＣカラム（７．８×３００ｍｍ）を備えたＷａｔｅｒｓ ２９９６ Ｐｈｏｔｏｄｉｏｌｅ Ａｒｒａｙ Ｄｅｔｅｃｔｏｒを有するＷａｔｅｒｓ ＨＰＬＣシステムを含む。これは、Ｗｙａｔｔ ｍｉｎｉＤａｗｎ ＴＲＥＯＳおよびＷｙａｔｔ Ｏｐｔｉｌａｂ Ｔ－ｒＥＸ示差屈折計とオンラインで接続される。ＷａｔｅｒｓのＥｍｐｏｗｅｒソフトウェアを使用してＷａｔｅｒｓ ＨＰＬＣシステムを制御することができ、ＷｙａｔｔのＡＳＴＲＡ Ｖ ６．１．７．１６ソフトウェアを使用して、Ｗｙａｔｔ ｍｉｎｉＤａｗｎ ＴＲＥＯＳからＭＡＬＳデータ、Ｔ－ｒＥＸ検出器からｄｎ／ｄｃデータ、およびＷａｔｅｒｓ ２９９６ Ｐｈｏｔｏｄｉｏｌｅ Ａｒｒａｙ ｄｅｔｅｃｔｏｒからＡ２８０吸光度シグナルを使用して質量リカバリーデータを得ることができる。ＳＥＣは、１×ＰＢＳ ｐＨ７．４における１ｍｌ／分の試料注入において実行することができ、ＭＡＬＳおよびＲＩシグナルは、絶対
モル質量（Ｍｐ、Ｍｗ、Ｍｎ）および多分散指数（ＰＤＩ）の決定のためにＡＳＴＲＡソフトウェアにより分析することができる。追加的に、算出はまた、ポリマーおよびタンパク質のインプットｄｎ／ｄｃ値をそれぞれ０．１４２および０．１８３として伴う。ＫＳＩ－３０１ ｄｎ／ｄｃ値について、ｄｎ／ｄｃは、約０．１４８であるポリマーおよびタンパク質の加重ＭＷに基づいて、以下の式：
コンジュゲートｄｎ／ｄｃ＝０．１４２×［ＭＷポリマー／（ＭＷポリマー＋ＭＷタンパク質）］＋０．１８３×［ＭＷタンパク質／（ＭＷポリマー＋ＭＷタンパク質）］

【0138】

（式中、ＯＧ１８０２のＭＷポリマーは８００ｋＤａであり、ＯＧ１９５０のＭＷタンパク質は１４６ｋＤａである）を使用して算出される。

【0139】

「ＫＳＩ－３０１」は、分枝状高分子量ホスホリルコリンベースバイオポリマーに共有結合的にコンジュゲート化された、組換えの、哺乳動物細胞発現全長ヒト化抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体のバイオコンジュゲートである。一部の実施形態において、ＫＳＩ－３０１は、防腐剤フリーの無菌の水性溶液として単回使用ガラスバイアル中に５０ｍｇ／ｍＬ（抗体質量に基づく）の濃度で供給される。図１４は、ＫＳＩ－３０１の抗体部分のアミノ酸配列を示す。ＫＳＩ－３０１は、延長された眼内半減期を有する抗血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）バイオ医薬品である。ＫＳＩ－３０１は、２つの中間体：（１）ＯＧ１９５０抗体中間体、組換え全長ヒト化抗ｈｕＶＥＧＦ Ａモノクローナル抗体、および（２）ＯＧ１８０２バイオポリマー中間体、ホスホリルコリンバイオポリマーのバイオコンジュゲートである。ＯＧ１８０２、不活性バイオポリマーの付加は、生物学的製剤のサイズを増加させ、それにより、現在承認されている抗ｈｕＶＥＧＦ－Ａ治療のものを超えてＫＳＩ－３０１の眼内薬物動態（ＰＫ）を延長させる。ＫＳＩ－３０１での非臨床研究は、それは高い親和性でｈｕＶＥＧＦ－Ａに適切に結合し、ｈｕＶＥＧＦ受容体１および２（ｈｕＶＥＧＦＲ）へのｈｕＶＥＧＦ－Ａの結合は阻害されることを指し示す。これは次いで、ｈｕＶＥＧＦ－Ａ媒介性の機能を妨げる。

【0140】

薬物動態研究がウサギにおいて実行されたが、これは、ＫＳＩ－３０１は、延長された眼内半減期を有し、眼組織を良好に透過し、かつ網膜および脈絡膜に分布されることを実証する。ウサギにおいて、ＫＳＩ－３０１は約１１日の眼内半減期を有し、これは、それぞれ４～５日および３～４日であるアフリベルセプトおよびラニビズマブについて測定された、報告されたウサギ半減期（非特許文献２０）よりも著しく長い。ＫＳＩ－３０１の眼内および全身安全性を試験するカニクイザルにおける一連の非臨床ＧＬＰ反復用量（４週の投薬間隔）毒物学研究がそれぞれ２６週（７回の硝子体内用量）および１０週（３回の静脈内用量）を通じて実行された。ＫＳＩ－３０１は、眼内および全身研究におけるそれぞれ５ｍｇ／目（硝子体内）および５ｍｇ／ｋｇ（静脈内）の試験された最大用量まで忍容性良好であったことを結果は示す。以上を合わせて、非臨床ＰＫおよび毒物学研究から推定されるデータは、ＫＳＩ－３０１はヒト対象において安全かつ有効に投薬され得ることを指し示す。一部の実施形態において、投与の経路は硝子体内注射を介するものである。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）は、負荷用量完了後に３～４か月毎に、またはよりいっそう低い頻度で、投与され得る。

【0141】

一部の実施形態において、本明細書において提供される方法のいずれか１つまたは複数において投与される分子は、特許文献３０（参照により全体が本明細書に組み込まれる）において開示される分子のいずれか１つである。

【0142】

処置方法
一般的に、本開示の方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１、もしくは本明細書において提供されるような、ホスホリルコリンポリマーにコンジュゲート化された図１４における実施形態、もしくは図１３において描写される構築物）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１回または複数回の用量を、眼障害の処置を必要とする対象（例えば、ヒトまたは他の哺乳動物患者）に投与し、それにより、眼障害を処置することを含む。抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートは、対象に投与された場合に、抗ＶＥＧＦ治療と共に以前に使用されていたよりも長い投薬間の間隔を有する投薬スケジュールを可能とする長期持続性の治療効果を提供し得る。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート治療の治療結果は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの１回または複数回の用量（例えば、負荷用量および／または維持用量）の投与により一旦達成されると、その後にいかなる追加の用量も要求することなく対象により保持される、例えば、対象の残りの人生にわたり保持される。

【0143】

図４２を参照すると、本開示の方法の実施形態が記載される。方法４２００は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）を、眼障害（例えば、ｗＡＭＤ、ＤＭＥ、またはＲＶＯ）の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与すること４２１０を含むことができる。次に、負荷用量を少なくとも１回繰り返すこと４２２０ができる（例えば、１回、２回、３回などで繰り返される）。負荷用量の投与後に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療の治療結果は、最終負荷用量後に少なくとも８週、例えば、少なくとも１２週、少なくとも１６週、少なくとも２０週、少なくとも２４週またはより長い間、対象により保持され得る。一部の実施形態において、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の１回または複数回の後続用量（例えば、維持用量）を対象に、最終負荷用量を投与した少なくとも８週、例えば、少なくとも１２週、少なくとも１６週、少なくとも２０週、少なくとも２４週後に投与すること４２３０を含む。一部の実施形態において、方法は、本明細書に開示される方法のいずれかにしたがって、（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの代わりに）抗ＶＥＧＦタンパク質、例えば、アフリベルセプト、コンジュゲートを、眼障害の処置を必要とする対象に投与することを含む。

【0144】

一部の実施形態において、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の第１の負荷用量を、眼障害の処置を必要とする対象（例えば、ヒトまたは他の哺乳動物患者）に投与すること、およびその後に少なくともさらに１回であるが２回以下の負荷用量を投与して、延長された時間的期間にわたり続く抗ＶＥＧＦ治療の治療結果（例えば、視力の改善、疾患進行の緩慢化、症状の低減、網膜の健康状態の改善など）を達成することを含む。一部の実施形態において、患者は、最終負荷用量を受けると延長された時間的期間にわたり眼障害の再処置を要求しないことがあり得る。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート））の投与は、眼障害（例えば、非増殖性糖尿病網膜症）を有する対象を処置するために、いかなる負荷用量もなしに抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を提供し得る。

【0145】

本明細書において使用される場合、「抗ＶＥＧＦ抗体」または「抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート」が言及される場合は常に、抗ＶＥＧＦタンパク質、例えば抗ＶＥＧＦ融合タンパク質、例えば、アフリベルセプトもまた想定される。そのため、本明細書に開示される場合、「抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート」が言及される場合は常に、本明細書に開示されるようなホスホリルコリン含有バイオポリマー（例えば、ＯＧ１８０２）に共有結合した抗ＶＥＧＦタンパク質、例えば、アフリベルセプトもまた想定される。本明細書に開示される様々な実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療に対する任意の言及はまた、抗ＶＥＧＦタンパク質、例えば、アフリベルセプト、コンジュゲート治療を想定する。本明細書に開示される、眼障害を処置する方法の様々な実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートに対する任意の言及はまた、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲートを想定する。

【0146】

「負荷用量」は、本開示を考慮して当業者に理解されるようなその通常および慣習的な意味を有する。負荷用量は、剤の治療効果が対象において観察される前、または剤の治療効果の所望のレベルが対象において達成される前のいずれかで、対象に投与される治療剤の量を指すことができる。負荷用量は、典型的には、治療を伴う処置の過程の始めに投与される。一部の実施形態において、負荷用量は、治療結果の維持のための後の用量と比較してより頻繁にまたはより短い間隔で投与される。対象が１回または複数回の負荷用量を与えられる期間は、負荷期（ｌｏａｄｉｎｇ ｐｈａｓｅ）と称されることがある。一部の実施形態において、対象は、負荷期の間に疾患進行または状態についてモニターされない（例えば、視力、網膜厚などについて評価されない）。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療（例えば、ＫＳＩ－３０１治療）の（本明細書に開示されるような）治療結果は、負荷期の間に所望のまたは閾値のレベルに達していない。負荷用量は、例えば負荷期の間に、対象に投与される一連の負荷用量のうちの１つであってもよい。「最終負荷用量」は、対象に投与された一連の負荷用量中の最後の負荷用量であって、その時点および／またはその後の時点において剤の治療効果の所望のレベルが達成されるものを指すことができる。そのため、対象が１回の負荷用量を与えられる場合、最終負荷用量は第１の負荷用量である。対象が２回の負荷用量を与えられる場合、最終負荷用量は第２の負荷用量である。同様に、対象が３回の負荷用量を与えられる場合、最終負荷用量は第３の負荷用量である、などである。負荷期の後に対象に投与される治療剤の用量は、維持用量または再処置用量と称されることがある。「維持用量」および「再処置用量」は本明細書において交換可能に使用される。本明細書において提供される一部の実施形態において、負荷用量は、その後の再処置または維持用量を頻繁に必要としない、または何ら必要としないために十分なものであることができる。一部の実施形態において、一連の負荷用量は、対象に投与される一連の維持（または再処置）用量よりも高い頻度で対象に投与される。一部の実施形態において、与えられる負荷用量は、維持（または再処置）用量を要求することなく、疾患活動性を対象において制御下に保つために十分なものであってもよい。

【0147】

一部の実施形態において、本明細書に開示される方法により達成される抗ＶＥＧＦ治療の治療結果は、予め決定された投薬スケジュール中のスケジュールされた時点において維持用量を要求しないように十分に保持される。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約２か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えばＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約３か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約４か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約５か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約６か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約７か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約８か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約９か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約１０か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約１２か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約１４か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約１６か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。一部の実施形態において、対象は、直近の負荷用量または直近の維持用量を与えられた約１８か月またはより長い期間の後までに、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量、例えば、維持用量を要求しない少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくはより高い可能性、または先行する値のうちのいずれか２つの間のパーセンテージを有する。

【0148】

直近の用量（例えば、最終負荷用量、または直近に起こった任意の投薬）を与えられた後に、対象は、抗体コンジュゲートの後続用量（例えば、維持用量）を与えられることなく持続された時間的期間にわたり抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を保持してもよい。抗ＶＥＧＦ治療の治療結果は、第１の負荷用量の前またはその時点と比較した最終負荷用量の時点またはその付近の時点における視力または網膜の健康状態（例えば、網膜厚、網膜灌流の程度など）の１つまたは複数における改善を含んでもよい。抗ＶＥＧＦ治療の任意の好適な治療結果が本開示の方法にしたがって使用され得る。治療結果を決定するための好適な度合は、例えば、視力、網膜厚、少なくとも１つの目における灌流、糖尿病網膜症重症度スコア（ＤＲＳＳ）、眼障害の疾患活動性、またはこれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態において、ｗＡＭＤ、ＤＭＥ、ＲＶＯ、またはＤＲ疾患活動性は、網膜内流体の増加、網膜下流体の増加、新たな網膜内出血、新たな滲出物のうちの１つまたは複数を含む。

【0149】

一部の実施形態において、治療結果は、視力における改善、または少なくとも緩慢化された低下を含む。視力は、任意の好適な方法を使用してモニターされてもよい。一部の実施形態において、視力は、例えば、ＥＴＤＲＳ文字またはスネレンチャートなどを使用して、最良矯正視力（ＢＣＶＡ）により測定される。一部の実施形態において、治療結果は、処置前と比較して、３文字もしくはより多く、例えば、４文字もしくはより多く、５文字もしくはより多く、６文字もしくはより多く、７文字もしくはより多く、８文字もしくはより多く、９文字もしくはより多く、１０文字もしくはより多く、１２文字もしくはより多く、１５文字もしくはより多く、１８文字もしくはより多く、２０文字もしくはより多く、２２文字もしくはより多く、例えば２５文字もしくはより多くの、ＥＴＤＲＳ文字により測定される、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の数によるＢＣＶＡにおける改善を含んでもよい。一部の実施形態において、治療結果は、処置前に対して、少なくとも１０％、例えば、少なくとも１５％、少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％、例えば約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の任意のパーセンテージのＢＣＶＡの劣化の速度における低減を含んでもよい。

【0150】

一部の実施形態において、治療結果は、網膜厚（例えば、中心サブフィールド厚）における低減、または少なくとも緩慢化された増加を含む。網膜厚は、光干渉断層撮影法（ＯＣＴ）が挙げられるがこれに限定されない任意の好適な方法を使用して測定されてもよい。一部の実施形態において、治療結果は、処置前と比較して、約２５μｍまたはより大きい、例えば、約５０μｍもしくはより大きい、約７５μｍもしくはより大きい、約１００μｍもしくはより大きい、約１２５μｍもしくはより大きい、約１５０μｍもしくはより大きい、約１７５μｍもしくはより大きい、約２００μｍもしくはより大きい、約２２５μｍもしくはより大きい、約２５０μｍもしくはより大きい、約２７５μｍもしくはより大きい、約３００μｍもしくはより大きい、約３２５μｍもしくはより大きい、約３５０μｍもしくはより大きい、約３７５μｍもしくはより大きい、約４００μｍもしくはより大きい網膜厚における低減、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の低減を含んでもよい。一部の実施形態において、治療結果は、処置前に対して、少なくとも１０％、例えば、少なくとも１５％、少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％、例えば約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の任意のパーセンテージの網膜厚における増加の速度における低減を含んでもよい。

【0151】

一部の実施形態において、治療結果は、網膜の灌流の改善、または少なくとも無灌流の拡大の速度における低減を含む。灌流は、任意の好適な方法を使用してモニターされてもよい。好適な方法は、非限定的に、ＯＣＴアンギオグラフィー（ＯＣＴ－Ａ）、フルオレセイン血管造影図または超広視野フルオレセイン血管造影図を含む。灌流、または無灌流の程度は、任意の好適な度合を使用して測定されてもよい。一部の実施形態において、無灌流面積または毛細血管無灌流の面積が測定される。一部の実施形態において、虚血指数が、無灌流面積を総網膜面積で割ることにより算出される。一部の実施形態において、血管造影図上の網膜四半分における網膜無灌流の存在または非存在が測定される。一部の実施形態において、治療結果は、処置前に対して、少なくとも１０％、例えば、少なくとも１５％、少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％、例えば約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の任意のパーセンテージの無灌流の面積における低減を含んでもよい。一部の実施形態において、治療結果は、処置前に対して、少なくとも１０％、例えば、少なくとも１５％、少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％、例えば約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の任意のパーセンテージの無灌流進行の速度における低減を含んでもよい。

【0152】

一部の実施形態において、治療結果は、糖尿病網膜症重症度スコア（ＤＲＳＳ）の改善、または悪化の予防を含む。一部の実施形態において、治療結果は、処置前と比較して、２ステップもしくはより大きい、または３ステップもしくはより大きいＤＲＳＳの改善を含んでもよい。一部の実施形態において、治療結果は、処置前と比較して、２ステップもしくはより大きい、または３ステップもしくはより大きいＤＲＳＳの悪化の予防を含んでもよい。

【0153】

視力または網膜の健康状態（例えば、網膜厚、無灌流の程度など）のレベルが、改善されたレベルと比較して予め決定された量より大きく悪化しない場合に、治療結果は保持される。一部の実施形態において、視力または網膜の健康状態のレベルが、直近の用量（例えば、最終負荷用量）後に、視力または網膜の健康状態の処置前レベルに向けて３０％またはより高い％、例えば、５０％またはより高い％、７５％またはより高い％、９０％またはより高い％、例えば１００％またはより高い％復帰しない場合に、治療結果は保持される。一部の実施形態において、視力または網膜の健康状態の変化の速度が、直近の用量（例えば、最終負荷用量）後に、視力または網膜の健康状態の変化の速度の処置前レベル
に向けて３０％またはより高い％、例えば、５０％またはより高い％、７５％またはより高い％、９０％またはより高い％、例えば１００％またはより高い％復帰しない場合に、治療結果は保持される。

【0154】

一部の実施形態において、治療結果は、視力における改善を含む。一部の実施形態において、ＢＣＶＡが、（例えば、３回の月毎の負荷用量後の１２週目において）最終負荷用量の時点におけるＢＣＶＡスコアから３文字もしくはより多く、４文字もしくはより多く、５文字もしくはより多く、６文字もしくはより多く、７文字もしくはより多く、８文字もしくはより多く、９文字もしくはより多く、または１０文字もしくはより多く低下しない場合に、治療結果は保持され得る。一部の実施形態において、ＢＣＶＡが、直近の評価（例えば、４週前）において測定されたＢＣＶＡスコアから３文字もしくはより多く、４文字もしくはより多く、５文字もしくはより多く、６文字もしくはより多く、７文字もしくはより多く、８文字もしくはより多く、９文字もしくはより多く、または１０文字もしくはより多く低下しない場合に、治療結果は保持され得る。一部の実施形態において、ＢＣＶＡが、対象の最良の測定されたＢＣＶＡスコア、または２つの最良の測定されたＢＣＶＡスコアの平均から３文字もしくはより多く、４文字もしくはより多く、５文字もしくはより多く、６文字もしくはより多く、７文字もしくはより多く、８文字もしくはより多く、９文字もしくはより多く、または１０文字もしくはより多く低下しない場合に、治療結果は保持され得る。

【0155】

一部の実施形態において、治療結果は、網膜厚（例えば、中心サブフィールド厚）における低減を含む。一部の実施形態において、網膜厚（例えば、中心サブフィールド厚）が、（例えば、３回の月毎の負荷用量後の１２週目において）直近の用量（例えば、最終負荷用量）の時点における網膜厚から２５μｍもしくはより大きく、５０μｍもしくはより大きく、７５μｍもしくはより大きく、１００μｍもしくはより大きく、１２５μｍもしくはより大きく、または１５０μｍもしくはより大きく増加しない場合に、治療結果は保持され得る。一部の実施形態において、網膜厚（例えば、中心サブフィールド厚）が、直近の評価（例えば、４週前）において測定された網膜厚から２５μｍもしくはより大きく、５０μｍもしくはより大きく、７５μｍもしくはより大きく、１００μｍもしくはより大きく、１２５μｍもしくはより大きく、または１５０μｍもしくはより大きく増加しない場合に、治療結果は保持され得る。一部の実施形態において、保持された治療結果は、対象の最も低い測定された網膜厚と比較して１５０μｍ、１２５μｍ、１００μｍ、７５μｍ、５０μｍ、４０μｍ、または３０μｍよりも大きいものではない網膜厚を含む。

【0156】

一部の実施形態において、治療結果は、網膜の灌流の改善を含む。ＤＲ、ＤＭＥ、およびＲＶＯを有する患者において、網膜は、無灌流、または血流の非存在の領域を有し得る。一部の実施形態において、無灌流は血管造影図上で可視化される。一部の実施形態において、本開示の方法による、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、投与、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）投与の治療結果は、網膜の無灌流の逆行（ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）、または再灌流を含む。一部の実施形態において、無灌流の面積が、直近の用量（例えば、最終負荷用量）の時点における無灌流の面積と比べて１０％またはより高い％、例えば、１５％もしくはより高い％、２５％もしくはより高い％、５０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、または約１００％低減される場合に、治療結果は保持され得る。一部の実施形態において、無灌流の面積が、直近の用量（例えば、最終負荷用量）の時点における無灌流の面積と比べて１０％またはより高い％、例えば、１５％もしくはより高い％、２５％もしくはより高い％、５０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、または約１００％増加されない場合に、治療結果は保持され得る。一部の実施形態において、無灌流の面積が、直近の評価（例えば、４週前）において測定された無灌流の面積と比べて１０％またはより高い％、例えば、１５％もしくはより高い％、２５％もしくはより高い％、５０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、または約１００％増加されない場合に、治療結果は保持され得る。一部の実施形態において、無灌流の面積が、対象において測定された無灌流の最小の面積と比べて１０％またはより高い％、例えば、１５％もしくはより高い％、２５％もしくはより高い％、５０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、または約１００％増加されない場合に、治療結果は保持され得る。

【0157】

本開示の方法によれば、直近の用量（例えば、最終負荷用量）後の抗ＶＥＧＦ治療の治療結果は、直近の用量（例えば、最終負荷用量）が投与された後に少なくとも８週またはより長く、例えば、少なくとも１０週またはより長く、少なくとも１２週またはより長く、少なくとも１４週またはより長く、少なくとも１６週またはより長く、少なくとも２０週またはより長く、少なくとも２４週またはより長く、少なくとも２８週またはより長く、少なくとも３２週またはより長く、少なくとも３６週またはより長く、少なくとも４０週またはより長く、少なくとも４４週またはより長く、少なくとも４８週またはより長く、例えば少なくとも５２週またはより長く保持され得る。一部の実施形態において、治療結果は、最終負荷用量が投与された後に８週～１年、例えば、８週～４０週、８週～３２週、例えば１２週～２８週の期間にわたり保持され得る。これは、例えば、ＲＶＯ、ＤＭＥ、ＤＲ、および／またはｗＡＭＤを含めて、本明細書において提供される眼障害のいずれか１つまたは複数についてのものであり得る。

【0158】

一部の実施形態において、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１、２、または３回の負荷用量を対象に投与すること、および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、（または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート））の１回または複数回の後続用量（例えば、維持用量）を最終負荷用量後に投与することを含む。後続用量は、対象に８週毎に１回以下の頻度、例えば、１０週毎、１２週毎、１４週毎、１６週毎、１８週毎、２０週毎、２４週毎、２８週毎、３２週毎、４０週毎、例えば５２週毎に投与されてもよい。抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量を投与するかどうかは、任意の好都合な理由に基づいて決定されてもよい。一部の実施形態において、後続用量は、予め決定されたスケジュール（例えば、対象が負荷用量のうちの１つまたは複数のいずれかを投与される前に決定されたスケジュール）に基づいて投与されてもよい。一部の実施形態において、後続用量は、眼障害の重症度、眼障害に対する他の治療への対象の先行する応答、もしくはその欠如、または対象と関連付けられる任意の他の臨床的に関連する因子に基づいて予め決定されたスケジュールに基づいて投与されてもよい。一部の実施形態において、後続用量は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートでの処置の過程の間に対象に対して実行される目の健康状態および／または機能についての１つまたは複数の評価試験のアウトカムに基づいて投与されてもよい。一部の実施形態において、後続用量は、４週またはより多くの週毎、例えば、６週またはより多くの週毎、８週またはより多くの週毎、１０週またはより多くの週毎、１２週またはより多くの週毎、１６週またはより多くの週毎、２０週またはより多くの週毎、２４週またはより多くの週毎、２８週またはより多くの週毎、３２週またはより多くの週毎、３６週またはより多くの週毎、例えば４０週またはより多くの週毎に対象に対して実行される１つまたは複数の評価試験のアウトカムに基づいて投与されてもよい。一部の実施形態において、１つまたは複数の評価試験が、予め決定された閾値よりも大きい抗ＶＥＧＦ治療の治療結果の減少を指し示す場合に、後続用量は投与されてもよい。

【0159】

本明細書において使用される場合、「Ｑ４Ｗ」および「Ｑ８Ｗ」などは、投薬スケジュールを指し、当業者にとっての通常のおよび慣習的な意味を有する。数は、その後の文字により指定される時間の単位の数を指し示し得る。「Ｗ」は週の単位を指し示し、「Ｍ」は月の間隔を指定する。そのため、Ｑ４Ｗは４週の投薬間隔を指し、これは１か月の投薬間隔も含む；Ｑ８Ｗは８週の投薬間隔を指し、これは２か月の投薬間隔も含む；などである。本明細書において使用される場合、投薬スケジュールの指定は、他に指し示されなければ、２回を超える多数の用量を必ずしも含意しない。一部の実施形態において、投薬スケジュールは、維持用量のための投薬スケジュール（直近の負荷用量、および第１の維持用量の間の間隔を含む）を指す。「より長い」または「より短い」投薬スケジュール（例えば、「Ｑ１２Ｗまたはより長い間隔」）への言及は、指定されるよりも長い用量間の時間間隔（例えば、１２週またはより長い投薬間隔）を指す。

【0160】

一部の実施形態において、処置の最初の１年中に対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、１０回もしくはそれ未満、９回もしくはそれ未満、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。一部の実施形態において、処置の最初の２年中に対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、１０回もしくはそれ未満、９回もしくはそれ未満、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。一部の実施形態において、処置の最初の３年中に対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、１０回もしくはそれ未満、９回もしくはそれ未満、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。

【0161】

一部の実施形態において、処置のための１年の期間中に対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。一部の実施形態において、処置のための２年の期間中に対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。一部の実施形態において、処置のための３年の期間中に対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。

【0162】

一部の実施形態において、処置の最初の１年中にｗＡＭＤを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。一部の実施形態において、処置の最初の２年中にｗＡＭＤを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持
用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。一部の実施形態において、処置の最初の３年中にｗＡＭＤを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。

【0163】

一部の実施形態において、処置のための１年の期間中にｗＡＭＤを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。一部の実施形態において、処置のための２年の期間中にｗＡＭＤを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。一部の実施形態において、処置のための３年の期間中にｗＡＭＤを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。

【0164】

一部の実施形態において、処置の最初の１年中にＤＭＥを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。一部の実施形態において、処置の最初の２年中にＤＭＥを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。一部の実施形態において、処置の最初の３年中にＤＭＥを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。

【0165】

一部の実施形態において、処置の間の１年の期間中にＤＭＥを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。一部の実施形態において、処置の間の２年の期間中にＤＭＥを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。一部の実施形態において、処置の間の３年の期間中にＤＭＥを有する対象に投与される抗Ｖ
ＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。

【0166】

一部の実施形態において、処置の最初の１年中にＲＶＯを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。一部の実施形態において、処置の最初の２年中にＲＶＯを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。一部の実施形態において、処置の最初の３年中にＲＶＯを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の注射（負荷および維持用量を含む）の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、８回もしくはそれ未満、７回もしくはそれ未満、６回もしくはそれ未満、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、または１回である。

【0167】

一部の実施形態において、処置の間の１年の期間中にＤＭＥを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。一部の実施形態において、処置の間の２年の期間中にＤＭＥを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。一部の実施形態において、処置の間の３年の期間中にＤＭＥを有する対象に投与される抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の維持用量の総数は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持するために、５回もしくはそれ未満、４回もしくはそれ未満、３回もしくはそれ未満、２回もしくはそれ未満、１回もしくはそれ未満、または０回である。

【0168】

一部の実施形態において、第１の後続用量は直近の負荷用量後の第１の時点において投与され、かつ第２の後続用量は第１の後続用量後の第２の時間的期間において投与され、他の用量は、直近の負荷用量および第１の後続用量の間にも、第１の後続用量および第２の後続用量の間にも投与されない。第１および第２の後続用量の間の第２の時間的期間は、直近の負荷用量および第１の後続用量の間の第１の時間的期間と同じまたは異なるものであってもよい。一部の実施形態において、第１の期間は、８週またはより長い、例えば、１０週またはより長い、１２週またはより長い、１４週またはより長い、１６週またはより長い、１８週またはより長い、２０週またはより長い、２４週またはより長い、２８週またはより長い、３２週またはより長い、３６週またはより長い、４０週またはより長い、少なくとも４４週またはより長い、少なくとも４８週またはより長い、例えば５２週またはより長い。一部の実施形態において、第２の時間的期間は、０週またはより長く、例えば、４週またはより長く、６週またはより長く、８週またはより長く、１０週またはより長く、１２週またはより長く、１６週またはより長く、２０週またはより長く、例えば２４週またはより長く第１の時間的期間よりも長い。第２の後続用量を投与するためのタイミングは、対象の目の健康状態および／または機能についての１つまたは複数の評価のアウトカムに依存してもよい。

【0169】

任意の好適な量の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）が、対象に後続用量（例えば、維持用量）において投与されてもよい。一部の実施形態において、後続用量は、約１ｍｇまたはより多く、例えば、約１．２５ｍｇまたはより多く、約１．５ｍｇまたはより多く、約１．７５ｍｇまたはより多く、約２ｍｇまたはより多く、約２．５ｍｇまたはより多く、約３ｍｇまたはより多く、約３．５ｍｇまたはより多く、約４ｍｇまたはより多く、約４．５ｍｇまたはより多く（ｏｆ ｍｏｒｅ）、例えば約５ｍｇまたはより多く（抗ＶＥＧＦ抗体部分の重量による）の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを含む。一部の実施形態において、後続用量は、約１ｍｇ～約１０ｍｇ、例えば、約１ｍｇ～約７．５ｍｇ、約１．２５ｍｇ～約５ｍｇ、例えば約２ｍｇ～約５ｍｇ（抗ＶＥＧＦ抗体部分の重量による）の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを含む。

【0170】

抗ＶＥＧＦ治療の治療結果は、直近の用量（例えば、最終負荷用量）後に持続された時間的期間にわたり保持されるので、治療効果が続いている間に、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の用量を与えられる必要がないことがあり得る。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）のさらなる投与は、直近の用量（例えば、最終負荷用量）後の４週またはより長い期間内、例えば、６週またはより長い期間内、８週またはより長い期間内、１０週またはより長い期間内、１２週またはより長い期間内、１４週またはより長い期間内、１６週またはより長い期間内、２０週またはより長い期間内、２４週またはより長い期間内、２８週またはより長い期間内、３２週またはより長い期間内、３６週またはより長い期間内、４０週またはより長い期間内、４４週またはより長い期間内、４８週またはより長い期間内、例えば５２週またはより長い期間内に対象に対して為されない。

【0171】

本開示の方法は、治療結果を維持するために、標準治療の処置における注射の回数と比較して直近の負荷用量後により少ない回数の（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えばＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の）注射を投与することを含むことができる。一部の実施形態において、直近の負荷用量後に投与される（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの）注射の平均回数は、１６週にかけて、約１もしくはそれ未満、約０．９もしくはそれ未満、約０．８もしくはそれ未満、約０．７もしくはそれ未満、約０．５もしくはそれ未満、約０．４５もしくはそれ未満、約０．４もしくはそれ未満、約０．３５もしくはそれ未満、約０．３もしくはそれ未満、約０．２５もしくはそれ未満、約０．２もしくはそれ未満、約０．１８もしくはそれ未満、約０．１７もしくはそれ未満、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の数である。一部の実施形態において、直近の負荷用量後に投与される（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの）注射の平均回数は、１２週にかけて、約１もしくはそれ未満、約０．９もしくはそれ未満、約０．８もしくはそれ未満、約０．７もしくはそれ未満、約０．５もしくはそれ未満、約０．４５もしくはそれ未満、約０．４もしくはそれ未満、約０．３５もしくはそれ未満、約０．３もしくはそれ未満、約０．２５もしくはそれ未満、約０．２もしくはそれ未満、約０．１８もしくはそれ未満、約０．１７もしくはそれ未満、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の数である。一部の実施形態において、直近の負荷用量後に投与される（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）注射の平均回数は、８週にかけて、約１もしくはそれ未満、約０．９もしくはそれ未満、約０．８もしくはそれ未満、約０．７もしくはそれ未満、約０．５もしくはそれ未満、約０．４５もしくはそれ未満、約０．４もしくはそれ未満、約０．３５もしくはそれ未満、約０．３もしくはそれ未満、約０．２５もしくはそれ未満、約０．２もしくはそれ未満、約０．１８もしくはそれ未満、約０．１７もしくはそれ未満、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の数である。

【0172】

一部の実施形態において、対象はＤＭＥを有し、かつ直近の負荷用量後に投与される（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）注射の平均回数は、１６週にかけて、約１．７５もしくはそれ未満、約１．５もしくはそれ未満、約１．２５もしくはそれ未満、約１もしくはそれ未満、約０．９もしくはそれ未満、約０．８もしくはそれ未満、約０．７もしくはそれ未満、約０．５もしくはそれ未満、約０．４５もしくはそれ未満、約０．４もしくはそれ未満、約０．３５もしくはそれ未満、約０．３もしくはそれ未満、約０．２５もしくはそれ未満、約０．２もしくはそれ未満、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の数である。一部の実施形態において、対象はＤＭＥを有し、かつ直近の負荷用量後に投与される（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）注射の平均回数は、１２週にかけて、約１．７５もしくはそれ未満、約１．５もしくはそれ未満、約１．２５もしくはそれ未満、約１もしくはそれ未満、約０．９もしくはそれ未満、約０．８もしくはそれ未満、約０．７もしくはそれ未満、約０．５もしくはそれ未満、約０．４５もしくはそれ未満、約０．４もしくはそれ未満、約０．３５もしくはそれ未満、約０．３もしくはそれ未満、約０．２５もしくはそれ未満、約０．２もしくはそれ未満、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の数である。一部の実施形態において、対象はＤＭＥを有し、かつ直近の負荷用量後に投与される（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）注射の平均回数は、８週にかけて、約１．７５もしくはそれ未満、約１．５もしくはそれ未満、約１．２５もしくはそれ未満、約１もしくはそれ未満、約０．９もしくはそれ未満、約０．８もしくはそれ未満、約０．７もしくはそれ未満、約０．５もしくはそれ未満、約０．４５もしくはそれ未満、約０．４もしくはそれ未満、約０．３５もしくはそれ未満、約０．３もしくはそれ未満、約０．２５もしくはそれ未満、約０．２もしくはそれ未満、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の数である。

【0173】

一部の実施形態において、対象はＲＶＯを有し、かつ直近の負荷用量後に投与される（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）注射の平均回数は、１６週にかけて、約２．７５もしくはそれ未満、約２．５もしくはそれ未満、約２．２５もしくはそれ未満、約２もしくはそれ未満、約１．７５もしくはそれ未満、約１．５もしくはそれ未満、約１．２５もしくはそれ未満、約１もしくはそれ未満、約０．９もしくはそれ未満、約０．８もしくはそれ未満、約０．７もしくはそれ未満、約０．５もしくはそれ未満、約０．４５もしくはそれ未満、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の数である。一部の実施形態において、対象はＲＶＯを有し、かつ直近の負荷用量後に投与される（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）注射の平均回数は、１２週にかけて、約２．７５もしくはそれ未満、約２．５もしくはそれ未満、約２．２５もしくはそれ未満、約２もしくはそれ未満、約１．７５もしくはそれ未満、約１．５もしくはそれ未満、約１．２５もしくはそれ未満、約１もしくはそれ未満、約０．９もしくはそれ未満、約０．８もしくはそれ未満、約０．７もしくはそれ未満、約０．５もしくはそれ未満、約０．４５もしくはそれ未満、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の数である。一部の実施形態において、対象はＲＶＯを有し、かつ直近の負荷用量後に投与される（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）注射の平均回数は、８週にかけて、約２．７５もしくはそれ未満、約２．５もしくはそれ未満、約２．２５もしくはそれ未満、約２もしくはそれ未満、約１．７５もしくはそれ未満、約１．５もしくはそれ未満、約１．２５もしくはそれ未満、約１もしくはそれ未満、約０．９もしくはそれ未満、約０．８もしくはそれ未満、約０．７もしくはそれ未満、約０．５もしくはそれ未満、約０．４５もしくはそれ未満、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の数である。

【0174】

一部の実施形態において、本発明の方法により処置される眼障害は、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）（例えば、中心網膜静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）および分枝中心網膜静脈閉塞症（ｂｒａｎｃｈｅｄ ｃｅｎｔｒａｌ ｒｅｔｉｎａｌ ｖｅｉｎ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ；ＢＲＶＯ））、糖尿病網膜症（ＤＲ）（例えば、非増殖性ＤＲおよび増殖性ＤＲ）ならびに推定眼ヒストプラズマ症候群のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態において、本開示の方法により処置される対象は滲出型ＡＭＤを有する。一部の実施形態において、対象は、高度な色素上皮剥離（ＰＥＤ）を有しない滲出型ＡＭＤを有する。一部の実施形態において、対象は、対象の目におけるベースライン中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）が５００ミクロンまたはより大きい場合に、高度なＰＥＤを有する。

【0175】

一部の実施形態において、眼障害を有する対象は、本開示の方法による処置を受ける前に、約２００ミクロンもしくはより大きい、約２５０ミクロンもしくはより大きい、約２７５ミクロンもしくはより大きい、約３００ミクロンもしくはより大きい、約３２５ミクロンもしくはより大きい、約３５０ミクロンもしくはより大きい、約３７５ミクロンもしくはより大きい、約４００ミクロンもしくはより大きい、約４２５ミクロンもしくはより大きい、約４５０ミクロンもしくはより大きい、約４７５ミクロンもしくはより大きい、約５００ミクロンもしくはより大きい、約５２５ミクロンもしくはより大きい、約５５０ミクロンもしくはより大きい、約５７５ミクロンもしくはより大きい、約６００ミクロンもしくはより大きい、約６２５ミクロンもしくはより大きい、約６５０ミクロンもしくはより大きい、約６７５ミクロンもしくはより大きい、約７００ミクロンもしくはより大きい、約７２５ミクロンもしくはより大きい、約７５０ミクロンもしくはより大きい、約７７５ミクロンもしくはより大きい、約８００ミクロンもしくはより大きい、約８２５ミクロンもしくはより大きい、約８５０ミクロンもしくはより大きい、約８７５ミクロンもしくはより大きい、約９００ミクロンもしくはより大きい、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の距離のＣＳＴを有する。ＣＳＴは、例えば、光干渉断層撮影法（ＯＣＴ）により測定することができる。

【0176】

一部の実施形態において、眼障害を有する対象は、本開示の方法による処置を受ける前に、約８０もしくはそれ未満、約７５もしくはそれ未満、約７０もしくはそれ未満、約６８もしくはそれ未満、約６６もしくはそれ未満、約６４もしくはそれ未満、約６２もしくはそれ未満、約６０もしくはそれ未満、約５８もしくはそれ未満、約５６もしくはそれ未満、約５４もしくはそれ未満、約５２もしくはそれ未満、約５０もしくはそれ未満、約４８もしくはそれ未満、約４６もしくはそれ未満、約４４もしくはそれ未満、約４２もしくはそれ未満、約４０もしくはそれ未満、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内の値の、ＥＴＤＲＳ文字におけるＢＣＶＡを有する。

【0177】

一部の実施形態において、本開示の方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）（または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート））の第１の負荷用量を、ｗＡＭＤまたはＤＭＥの処置を必要とする対象（例えば、ヒトまたは他の哺乳動物患者）に投与すること、およびその後に少なくともさらに１回であるが２回以下の負荷用量を投与して抗ＶＥＧＦ治療の治療結果（例えば、視力の改善、症状の低減など）を達成することを含み、治療結果は、最終負荷用量が投与された後に少なくとも１２週間保持される。一部の実施形態において、治療結果は、最終負荷用量が投与された後に少なくとも１４週、例えば、少なくとも１６週、少なくとも２０週、少なくとも２４週、少なくとも２８週、少なくとも３２週、少なくとも３６週、少なくとも４０週、少なくとも４４週、少なくとも４８週、例えば少なくとも５２週にわたり保持される。

【0178】

一部の実施形態において、眼障害はｗＡＭＤであり、かつ方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の後続用量を最終負荷用量の約２４か月後に投与することを含む。一部の実施形態において、眼障害は、高度な色素上皮剥離（ＰＥＤ）を有しない滲出型ＡＭＤである。一部の実施形態において、対象は、対象の目におけるベースライン中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）が５００ミクロンまたはより大きい場合に、高度なＰＥＤを有する。

【0179】

一部の実施形態において、本発明の方法により処置される対象はＲＶＯを有する。一部の実施形態において、本開示の方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の第１の負荷用量を、ＲＶＯの処置を必要とする対象（例えば、ヒト患者）に投与すること、およびその後にさらに１回の負荷用量を投与して抗ＶＥＧＦ治療の治療結果（例えば、視力の改善、症状の低減など）を達成することを含み、治療結果は、最終負荷用量が投与された後に少なくとも８週間保持される。一部の実施形態において、治療結果は、最終負荷用量が投与された後に少なくとも１０週、例えば、少なくとも１２週、少なくとも１４週、少なくとも１６週、少なくとも２０週、少なくとも２４週、少なくとも２８週、少なくとも３２週、少なくとも３６週、少なくとも４０週、例えば少なくとも５２週にわたり保持される。一部の実施形態において、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の１回または複数回の後続用量（例えば、維持用量）を最終負荷用量後に投与することをさらに含む。後続用量は、対象に８週毎に１回以下の頻度、例えば、１０週毎、１２週毎、１４週毎、１６週毎、１８週毎、２０週毎、２４週毎、２８週毎、３２週毎、３６週毎、４０週毎、４４週毎、４８週毎、例えば５２週毎に投与されてもよい。

【0180】

眼障害を有する対象を処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１～３回の負荷用量であるが３回以下の負荷用量を対象に投与すること、および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの後続適用を、直近の負荷用量が投与された１４週以後に提供することを含む、方法もまた本明細書において提供される。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの後続適用は、直近の負荷用量が投与された１６週以後、例えば、１８週以後、２０週以後、２４週以後、２８週以後、３２週以後、３６週以後、例えば４０週以後に提供される。一部の実施形態において、処置される眼障害はＤＭＥである。

【0181】

眼障害について対象を処置する方法であって、眼障害の処置を必要とする対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の月毎の負荷用量を１、２または３か月にかけて投与すること、および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を、最終負荷用量後に８週以上毎に投与することを含む、方法もまた提供される。一部の実施形態において、眼障害は、ＡＭＤ（例えば、ｗＡＭＤ）、ＤＭＥ、ＲＶＯまたはＤＲである。一部の実施形態において、眼障害はＲＶＯである。一部の実施形態において、眼障害は、ｗＡＭＤ、ＤＭＥまたはＤＲであり、かつ抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの後続用量は、最終負荷用量後に１２週以上毎、例えば、１６週毎、２０週毎、２４週毎、２８週毎、３２週毎、３６週毎、４０週毎、例えば５２週毎に投与される。一部の実施形態において、眼障害はｗＡＭＤであり、かつ抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの後続用量は、１２週以上毎に投与される。一部の実施形態において、眼障害は、高度な色素上皮剥離（ＰＥＤ）を有しない滲出型ＡＭＤである。一部の実施形態において、対象は、対象の目におけるベースライン中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）が５００ミクロンまたはより大きい場合に、高度なＰＥＤを有する。

【0182】

一部の実施形態において、本開示の方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の少なくとも１回かつ３回までの負荷用量を、眼障害の処置を必要とする対象に投与し、それにより抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を達成すること、対象の目の健康状態を最終負荷用量後に評価して、抗ＶＥＧＦ治療の治療結果が保持されているかどうかを決定すること、および最終負荷用量後に少なくとも８週間、抗ＶＥＧＦ治療がもはや保持されていないと決定されるまで、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートのいかなる後続用量も投与しないことを含む。一部の実施形態において、眼障害は、ＡＭＤ（例えば、ｗＡＭＤ）、ＤＭＥまたはＲＶＯである。一部の実施形態において、眼障害はＲＶＯである。一部の実施形態において、眼障害はｗＡＭＤまたはＤＭＥであり、かつ抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの後続用量は、最終負荷用量の少なくとも１２週後に投与される。一部の実施形態において、眼障害はｗＡＭＤであり、かつ方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の後続用量を最終負荷用量の約２４か月後に投与することを含む。一部の実施形態において、眼障害は、高度な色素上皮剥離（ＰＥＤ）を有しない滲出型ＡＭＤである。一部の実施形態において、対象は、対象の目におけるベースライン中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）が５００ミクロンまたはより大きい場合に、高度なＰＥＤを有する。

【0183】

一部の実施形態において、本開示の方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の少なくとも１回かつ３回までの負荷用量を、眼障害の処置を必要とする対象に投与して、抗ＶＥＧＦ治療の治療結果（例えば、視力の改善、症状の低減など）を達成すること、および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を最終負荷用量後に８週以上毎に投与することを含み、抗ＶＥＧＦ治療の治療結果は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を最終負荷用量後に４週毎に投与する場合と同様に有効に保持される。一部の実施形態において、眼障害は、ＡＭＤ（例えば、ｗＡＭＤ）、ＤＭＥまたはＲＶＯである。一部の実施形態において、眼障害はＲＶＯである。一部の実施形態において、眼障害はｗＡＭＤまたはＤＭＥであり、かつ抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量は、最終負荷用量後に１２週以上毎に投与され、抗ＶＥＧＦ治療の治療結果は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を最終負荷用量後に４週毎に投与する場合と同様に有効に保持される。一部の実施形態において、眼障害はｗＡＭＤであり、かつ方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の後続用量を最終負荷用量の約２４か月後に投与することを含む。一部の実施形態において、眼障害は、高度な色素上皮剥離（ＰＥＤ）を有しない滲出型ＡＭＤである。一部の実施形態において、対象は、対象の目におけるベースライン中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）が５００ミクロンまたはより大きい場合に、高度なＰＥＤを有する。

【0184】

一部の実施形態によれば、本開示の方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の少なくとも１回かつ３回までの負荷用量を、眼障害の処置を必要とする対象に投与して、抗ＶＥＧＦ治療の治療結果（例えば、視力の改善、症状の低減など）を達成すること、および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を最終負荷用量後に１２週以上毎に投与することを含み、抗ＶＥＧＦ治療の治療結果が、眼障害に対する標準治療の処置での治療結果と同様に有効に保持され、標準治療の処置が、標準治療の治療剤の３回の月毎の負荷用量を投与すること、および標準治療の治療剤の１回または複数回の後続用量を標準治療の治療剤の最終負荷用量後に８週毎、または４週毎に投与することを含む。一部の実施形態において、眼障害はｗＡＭＤである。一部の実施形態において、眼障害は、高度な色素上皮剥離（ＰＥＤ）を有しない滲出型ＡＭＤである。一部の実施形態において、対象は、対象の目におけるベースライン中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）が５００ミクロンまたはより大きい場合に、高度なＰＥＤを有する。一部の実施形態において、標準治療の治療剤はアフリベルセプトである。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量は、１６週以上毎、例えば、２０週以上毎、２４週以上毎、２８週以上毎、例えば３２週以上毎に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの最終負荷用量後に投与される。

【0185】

ＤＭＥを患う対象における目の再灌流の方法であって、ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を同定すること、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の少なくとも２回の負荷用量を対象に投与すること、および対象が少なくとも１つの目における再灌流を示すまで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの１回または複数回のさらなる用量を対象に提供することを含む、方法もまた本明細書において提供される。目の再灌流は、任意の好適な度合を使用してモニターされてもよい。一部の実施形態において、目の再灌流は、処置前の状態と比較した、例えば、網膜組織における、血管数における増加により決定される。目の再灌流は、任意の好適な方法を使用してモニターされてもよく、該方法としては、ＯＣＴアンギオグラフィー（ＯＣＴ－Ａ）、フルオレセイン血管造影図または超広視野フルオレセイン血管造影図が挙げられるがこれらに限定されない。一部の実施形態において、方法は、処置前の無灌流の面積に対して少なくとも１０％、例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％、例えば約１００％の無灌流の面積における低減により測定されるような目の灌流の改善を提供する。一部の実施形態において、方法は、処置前の無灌流の面積に対して１０％～１００％、例えば、１０％～７５％、１０％～５０％、例えば１０％～３０％の無灌流の面積における低減により測定されるような目の再灌流を提供する。一部の実施形態において、灌流の改善は、処置前のレベルに対して対象における視力の少なくとも１０％の回復、例えば、少なくとも２０％の回復、少なくとも３０％の回復、少なくとも５０％の回復、少なくとも７５％の回復、少なくとも９０％の回復、例えば約１００％の回復を提供する。一部の実施形態において、灌流の改善は、処置前のレベルに対して対象における視力の１０％～１００％の回復、例えば、１０％～９０％の回復、１０％～７５％の回復、１０％～５０％の回復、例えば１０％～３０％の回復を提供する。

【0186】

負荷用量は、所望の治療結果を達成するために任意の好適な時間間隔で対象に投与されてもよい。一部の実施形態において、負荷用量は、各負荷用量の間に３週またはより長く、例えば、４週またはより長く、１か月またはより長く、５週またはより長く、６週またはより長く、８週またはより長く、１２週またはより長く、例えば１６週またはより長くを伴って投与される。２回よりも多くの負荷用量がある場合、各負荷用量の間の期間は、同じであってもよく、または異なってもよい。一部の実施形態において、負荷用量の一部は同じ間隔で投与されてもよく、かつ一部の他の負荷用量は異なる間隔で投与されてもよい。

【0187】

抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの任意の好適な量が、対象にある負荷用量において投与されてもよい。一部の実施形態において、負荷用量は、約１ｍｇまたはより多く、例えば、約１．２５ｍｇまたはより多く、約１．５
ｍｇまたはより多く、約１．７５ｍｇまたはより多く、約２ｍｇまたはより多く、約２．５ｍｇまたはより多く、約３ｍｇまたはより多く、約３．５ｍｇまたはより多く、約４ｍｇまたはより多く、約４．５ｍｇまたはより多く（ｏｆ ｍｏｒｅ）、例えば約５ｍｇまたはより多く（抗ＶＥＧＦ抗体部分の重量による）の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを含む。一部の実施形態において、負荷用量は、約１ｍｇ～約１０ｍｇ、例えば、約１ｍｇ～約７．５ｍｇ、約１．２５ｍｇ～約５ｍｇ、例えば約２ｍｇ～約５ｍｇ（抗ＶＥＧＦ抗体部分の重量による）の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを含む。

【0188】

抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、眼障害の処置を必要とする対象に投与することにより眼障害を処置する方法であって、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの単回用量が、抗ＶＥＧＦ治療の治療効果を得るために十分なものである、方法もまた本明細書において提供される。一部の実施形態において、継続する治療効果は、いかなる負荷用量も投与することなく（例えば、処置スケジュール中に月毎の負荷用量を用いる負荷期を有することなく）、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの単回用量により得られる。一部の実施形態において、眼障害は非増殖性ＤＲである。一部の実施形態において、ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質は、非増殖性ＤＲを有する患者に、対象の少なくとも１つの目における灌流を改善するために投与される。

【0189】

抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの任意の好適な量が、対象にある用量において投与されてもよい。一部の実施形態において、用量は、１ｍｇまたはより多く、例えば、１．２５ｍｇまたはより多く、１．５ｍｇまたはより多く、１．７５ｍｇまたはより多く、２ｍｇまたはより多く、２．５ｍｇまたはより多く、３ｍｇまたはより多く、３．５ｍｇまたはより多く、４ｍｇまたはより多く、４．５ｍｇまたはより多く、例えば５ｍｇまたはより多く（抗ＶＥＧＦ抗体部分の重量による）の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを含む。一部の実施形態において、用量は、１ｍｇ～１０ｍｇ、例えば、１ｍｇ～７．５ｍｇ、１．２５ｍｇ～５ｍｇ、例えば２ｍｇ～５ｍｇ（抗ＶＥＧＦ抗体部分の重量による）の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを含む。

【0190】

一部の実施形態において、本開示の方法は、眼内炎症（例えば、眼瞼炎、感染性結膜炎、角膜炎、強膜炎、眼内炎）のリスクが低減される、眼障害に対する抗ＶＥＧＦ治療を提供する。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の硝子体内投与は、例えば、眼障害に対する標準治療の処置と比較した、眼内炎症のリスクの低減と関連付けられる。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の硝子体内投与は眼内炎症を引き起こさない。

【0191】

一部の実施形態において、ｗＡＭＤの再処置は、以下のうちの１つまたは複数を伴う：

【0192】

－ １２週目と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う≧７５μｍのＣＳＴにおける増加、または

【0193】

－ ｗＡＭＤ活動性の悪化に起因する、１日目と比較した、＞５文字のＢＣＶＡにおける減少、または

【0194】

－ ｗＡＭＤ活動性の悪化に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと比較した、≧１０文字
のＢＣＶＡにおける減少。

【0195】

一部の実施形態において、ｗＡＭＤの再処置は、以下のうちの１つまたは複数を伴う：

【0196】

－ １２週目と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う≧５０μｍのＣＳＴにおける増加、または

【0197】

－ ｗＡＭＤ活動性の悪化に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと比較した、＞１０文字のＢＣＶＡにおける減少、または

【0198】

－ １２週目と比較した、≧７５ミクロンの増加、または

【0199】

－ 新たな黄斑出血。

【0200】

一部の実施形態において、ＤＭＥおよびＲＶＯの再処置は、以下のうちの１つまたは複数を伴う：

【0201】

－ １２週目もしくは以前の来診と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う≧７５μｍのＣＳＴにおける増加、または

【0202】

－ ＤＭＥ／ＲＶＯ疾患活動性の悪化に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと比較した、≧１０文字のＢＣＶＡにおける減少。

【0203】

一部の実施形態において、０、１、２、３、４、５、または６回以下の再処置事象が対象のために１年の持続期間、例えば１、２、３または４年の持続期間にかけて要求される。

【0204】

一部の実施形態において、再処置は、上記の基準のうちの１つまたは複数が起こる場合に行われる。一部の実施形態において、再処置は、対象のための直近の負荷用量または処置に後続する処置である。負荷用量は、初期治療効果を得るために所望のレベルまで患者または対象における薬物の量を至らせるように最初に提供される用量である。対照的に、再処置用量、または維持用量は、以前の用量（直近の負荷用量もしくは再処置／維持用量）の有効性が解消された後に、または予め決定された間隔で、対象に対する薬物の治療効果を戻すために提供される用量である。

【0205】

一部の実施形態において、方法は、以下の再処置基準のうちの少なくとも１つが満たされる場合に、抗体またはそのコンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の硝子体内注射を用いて再処置を施すことを伴う。一部の実施形態において、基準は、疾患の再発の徴候および／または疾患の再発に起因する視力低下に関する。一部の実施形態において、対象はｗＡＭＤを有し、かつ基準は、以下のうちの１つまたは複数である：１２週目と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う≧７５μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；ｗＡＭＤ疾患活動性の悪化（例えば網膜内流体の増加、網膜下流体の増加、新たな網膜内出血、新たな網膜下出血）に起因する、１日目と比較した、≧１０文字のＢＣＶＡにおける減少；および／またはｗＡＭＤ疾患活動性に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと比較した、≧１０文字のＢＣＶＡにおける減少。一部の実施形態において、対象はＤＭＥまたはＲＶＯを有し、かつ基準は以下のうちの１つまたは複数である：１２週目もしくは以前の来診（来診間に４週の間隔）と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う≧７５μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；および／またはＤＭＥ／ＲＶＯ疾患活動性の悪化（例えば網膜内流体の増加、網膜下流体の増加、新たな網膜内出血、新たな滲出物）に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと
比較した、≧１０文字のＢＣＶＡにおける減少。

【0206】

一部の実施形態において、方法は、以下の再処置基準のうちの少なくとも１つが満たされる場合に、抗体またはそのコンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の硝子体内注射を用いて再処置を施すことを伴う。一部の実施形態において、基準は、疾患の再発の徴候および／または疾患の再発に起因する視力低下に関する。一部の実施形態において、対象はｗＡＭＤを有し、かつ基準は以下のうちの１つまたは複数である：１２週目と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う≧５０μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；ｗＡＭＤ疾患活動性の悪化（例えば網膜内流体の増加、網膜下流体の増加、新たな網膜内出血、新たな網膜下出血）に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと比較した、≧１０文字のＢＣＶＡにおける減少；≧７５μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；および／または新たな黄斑出血。

【0207】

一部の実施形態において、再処置用量は、対象に直近の負荷用量後に少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２またはより多くの週にわたり与えられない。一部の実施形態において、１回の負荷用量が投与され、かつ再処置用量は、対象に負荷用量後に少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２またはより多くの週にわたり与えられない。一部の実施形態において、２回の負荷用量が対象に与えられ、かつ再処置用量は、直近の負荷用量後に少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２またはより多くの週にわたり与えられない。一部の実施形態において、３回の負荷用量が対象に与えられ、かつ再処置用量は、直近の負荷用量後に少なくとも少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２またはより多くの週にわたり与えられない。一部の実施形態において、１～２回の負荷用量が対象に与えられ、かつ再処置用量は、直近の負荷用量後に少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２またはより多くの週にわたり与えられない。一部の実施形態において、１～３回の負荷用量が対象に与えられ、かつ１、２、３、または４回の再処置用量が、直近の負荷用量後に少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２またはより多くの週にわたり与えられる。一部の実施形態において、２、３、４、または５回以下の負荷用量が対象に投与される。一部の実施形態において、４回目の負荷用量は対象に提供されない。一部の実施形態において、上記の処置アプローチは、１回目、２回目または３回目の負荷用量後に達成されるレベルまたはその近くまで対象の視力が改善されたままとなることを可能とする。一部の実施形態において、上記の処置アプローチは、対象の再処置を要求しない点まで対象の視力が改善されたままとなることを可能とする。

【0208】

一部の実施形態において、本開示の方法は、長い投薬間隔を提供し、かつ抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）治療、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）治療の治療結果を依然として持続させることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の少なくとも７５％は、Ｑ４Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の少なくとも９０％は、Ｑ４Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％は、Ｑ４Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の約４０～約９５％、例えば、約４５～約９０％、約５０～約８５％、約５５～約８５％、約６０～約８５％、約６５～約８５％、例えば約７０～約８０％は、Ｑ４Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の少なくとも７５％は、Ｑ５Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％は、Ｑ５Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の約４０～約９５％、例えば、約４５～約９０％、約５０～約８５％、約５５～約８５％、約６０～約８５％、約６５～約８５％、例えば約７０～約８０％は、Ｑ５Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の少なくとも５５％は、Ｑ６Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の少なくとも７０％は、Ｑ６Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の少なくとも７５％は、Ｑ６Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、または少なくとも８０％は、Ｑ６Ｍの投薬間隔であることができる。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者の約３０～約８５％、例えば、約３０～約８０％、約３５～約７５％、約４０～約７０％、約４５～約６５％、約５０～約６５％、例えば約５０～約６０％は、Ｑ６Ｍの投薬間隔であることができる。

【0209】

一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する患者）は、Ｑ５Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する少なくとも７５％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する患者）は、Ｑ５Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、または少なくとも８０％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する患者）は、Ｑ５Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する約４０～約９５％、例えば、約４５～約９０％、約５０～約８５％、約５５～約８５％、約６０～約８５％、約６５～約８５％、例えば約７０～約８０％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する患者）は、Ｑ６Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する少なくとも５５％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する患者）は、Ｑ６Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する少なくとも７０％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する患者）は、Ｑ６Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する少なくとも８０％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する患者）は、Ｑ６Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置される患者（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する患者）は、Ｑ６Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する約３０～約８５％、例えば、約３０～約８０％、約３５～約７５％、約４０～約７０％、約４５～約６５％、約５０～約６５％、例えば約５０～約６０％の可能性を有する。

【0210】

一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置されるＲＶＯを有する患者は、Ｑ４Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する少なくとも７５％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置されるＲＶＯを有する患者は、Ｑ５Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する少なくとも８０％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置されるＲＶＯを有する患者は、Ｑ５Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する少なくとも９０％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置されるＲＶＯを有する患者は、Ｑ４Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％または少なくとも９００％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の方法にしたがって処置されるＲＶＯを有する患者は、Ｑ４Ｍの投薬間隔で抗ＶＥＧＦ治療の治療結果を維持する約４０～約９５％、例えば、約４５～約９５％、約５０～約９５％、約５５～約９５％、約６０～約９５％、約６５～約９５％、例えば約７０～約９０％の可能性を有する。

【0211】

一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって１、２、３、４、５、または６回の負荷用量（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量）を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）の５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージは、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２８週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない。一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって３回の負荷用量（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量）を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）の５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージは、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２８週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない。

【0212】

一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）１、２、３、４、５、または６回の負荷用量を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）は、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２８週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージの可能性を有する（および代替的に、少なくとも０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５，８、８．５、９、９．５、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０年またはより長きにわたり、ＫＳＩ－３０１（または代替的に、抗ＶＥＧＦタンパク質治療剤、例えばアフリベルセプトバイオコンジュゲート）の別の注射のその後の必要性なしに過ごすことができる）。一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）３回の負荷用量を投与されたｗＡＭＤを有する対象は、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２８週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない約７０％またはより高い％の可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）３回の負荷用量を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）は、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２８週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージの可能性を有する。

【0213】

一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって１、２、３、４、５、または６回の負荷用量（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量）を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）の５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージは、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２４週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない。一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって３回の負荷用量（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量）を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）の５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージは、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２４週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない。

【0214】

一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）１、２、３、４、５、または６回の負荷用量を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）は、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２４週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージの可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって（例えば、ＫＳＩ－３０１の）３回の負荷用量を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）は、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２４週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージの可能性を有する。

【0215】

一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって１、２、３、４、５、または６回の負荷用量（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量）を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）の５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージは、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２０週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない。一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって３回の負荷用量（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量）を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）の５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージは、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２０週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない。

【0216】

一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）１、２、３、４、５、または６回の負荷用量を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）は、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２０週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくは
より高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージの可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）３回の負荷用量を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）は、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約２０週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージの可能性を有する。

【0217】

一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって１、２、３、４、５、または６回の負荷用量（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量）を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）の５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージは、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約１６週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない。一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって３回の負荷用量（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷用量）を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）の５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージは、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約１６週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない。

【0218】

一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって（抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の）１、２、３、４、５、または６回の負荷用量を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）は、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約１６週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージの可能性を有する。一部の実施形態において、本開示の一部の方法にしたがって（例えば、ＫＳＩ－３０１の）３回の負荷用量を投与された対象（例えば、眼障害、以下に限定されないが例えばｗＡＭＤ、ＲＶＯまたはＤＭＥを有する対象）は、直近の負荷用量後、または直近の再処置用量後に少なくとも約１６週間、（例えば、１つまたは複数の再処置基準を満たす疾患活動性に起因する）再処置用量を与えられない５０％もしくはより高い％、５５％もしくはより高い％、６０％もしくはより高い％、６５％もしくはより高い％、７０％もしくはより高い％、７５％もしくはより高い％、８０％もしくはより高い％、８５％もしくはより高い％、９０％もしくはより高い％、９５％もしくはより高い％、もしくは約１００％、または先行する値の任意の２つにより定義される範囲内のパーセンテージの可能性を有する。

【0219】

本明細書において提供される眼障害（例えば、ｗＡＭＤ、ＲＶＯおよび／またはＤＭＥ）のいずれかについての一部の実施形態において、２または３回の負荷用量は、障害の永久的な解消を提供し、その結果、さらなる再処置または維持用量は要求されない。本明細書において提供される眼障害（例えば、ｗＡＭＤ、ＲＶＯおよび／またはＤＭＥ）のいずれかについての一部の実施形態において、２または３回の負荷用量は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０年またはより長きにわたり障害の有効な抑制を提供し、その結果、維持用量のさらなる再処置はその期間の間に要求されない。

【0220】

一部の実施形態において、上記の投薬スケジュールのいずれかは、任意の眼障害からである。一部の実施形態において、それは、ＲＶＯ、ＡＭＤ、ｗＡＭＤ、および／もしくはＤＭＥ、ならびに／または本明細書において提供される他の障害のいずれかの処置および／または予防のためである。

【0221】

一部の実施形態において、ｗＡＭＤ患者は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の使用を介して３～６か月の持久性を達成する。

【0222】

一部の実施形態において、ＤＭＥ患者は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の使用を介して３回の負荷用量のみで３～５＋か月の持久性を達成する。一部の実施形態において、ＤＭＥ患者は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の使用を介して３回の負荷用量のみで３～６＋か月の持久性を達成する。

【0223】

一部の実施形態において、ＲＶＯ患者は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の使用を介して３回の負荷用量のみで２～４＋か月の持久性を達成する。一部の実施形態において、ＲＶＯ患者は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の使用を介して３回の負荷用量のみで２～５＋か月の持久性を達成する。

【0224】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の使用を介する３回の負荷用量でのＰＤＲにおける持続された改善。

【0225】

一部の実施形態において、ＤＭＥおよびＲＶＯにおける負荷用量の回数の低減が、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の使用を介して達成される。一部の実施形態において、滲出型ＡＭＤのための投薬スケジュールは、３～５か月毎（但し、一部のｗＡＭＤ患者は８週毎の投薬から利益を受け得る）。一部の実施形態において、ＤＭＥのための投薬スケジュールは３～６か月毎である。一部の実施形態において、ＲＶＯのための投薬スケジュールは８週またはより長い期間毎（例えば、６か月毎）である。一部の実施形態において、糖尿病網膜症（糖尿病黄斑浮腫を伴わない）のための投薬スケジュールは３か月またはより長い期間毎（例えば、４か月毎もしくは６か
月毎）である。一部の実施形態において、投薬スケジュールは、糖尿病網膜症（非増殖性（ｎｏｎ－ｐｒｏｉｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ）糖尿病網膜症および増殖性糖尿病網膜症を処置するために適用され得る。

【0226】

一部の実施形態において、負荷用量後に１回より多くの再処置を与えられたＲＶＯ患者、第２の再処置までの時間は、第１の再処置までの時間よりも長い。これもまた、驚くべきおよび予想外である。

【0227】

一部の実施形態において、対象に投与される抗体の量は、１～５ｍｇ、例えば、１．２５（２５マイクロリットル）、２．５（５０マイクロリットル）または５ｍｇ（１００マイクロリットル）である。

【0228】

一部の実施形態において、２回の負荷用量のみが適用され、次に８週毎に再処置用量が適用される（例えば、ＲＶＯのため）。ＲＶＯの場合において、２回の負荷用量のみまたは３回の負荷用量の使用であっても月毎と同様の良好なアウトカムを有することは驚くべきおよび予想外である（Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標）、Ｅｙｌｅａ（登録商標）、およびＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）の全ては、一次的な結果のために月毎の投薬を必要とすることをデータは示す）。一部の実施形態において、ＤＭＥについて抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を使用して、３回の負荷用量で良好な結果を得ることが可能である一方、他の抗体システムは４または５回の月毎の負荷用量を要求する。

【0229】

一部の実施形態において、非増殖性ＤＲについて、任意の負荷用量を回避することができ、または処置を得るために単回の負荷用量のみを含むことができる。

【0230】

一部の実施形態において、非増殖性または増殖性糖尿病網膜症を有する患者において糖尿病網膜症の重症度を減少させることができる。ＤＭＥと同じ処置レジメン（３回の負荷用量および次にｑ１２ｗもしくはより低い頻度）、または「負荷用量なしもしくは２回の負荷用量、次に３、４、もしくは６か月毎」）を使用してこれを達成することができる。一部の実施形態において、アウトカムは、１）網膜の標準的なカラー写真における糖尿病網膜症重症度状態の２つもしくはより多くのステップにおける改善または２）写真を使用してＤＲＳＳの２つもしくはより多くのステップの悪化の予防があることを測定する。一部の実施形態において、再処置は、８週毎に１回よりも低い頻度で為される。

【0231】

一部の実施形態において、投薬スケジュールは、１～２回の負荷用量、またはただ１回だけの負荷用量を用いて非増殖性ＤＲに応用され得る。再処置は、その１２または１６または２４週以後に行うことができる。

【0232】

一部の実施形態において、増殖性ＤＲについて、３回の月毎の負荷用量が適用され、続いて１２週またはより長い期間毎とすることができる。

【0233】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートを投与する方法であって、患者が負荷期（例えば、ｑ４週の２回の負荷用量）、次に８週時の再処置を与えられ、第２の再処置までの時間が第１の再処置までの時間よりも長い（例えば、１６＋週）、方法が提供される。一部の実施形態において、これは「疾患修飾」を反映する。

【0234】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマー
コンジュゲート）は、虚血性領域の「再灌流」のために糖尿病を有する対象に投与することができ、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の用量（または抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の負荷期、例えば、４週毎に３回、そのため０日目、４週目、８週目の３回の負荷用量）、次に必要に応じて再処置が与えられる。

【0235】

一部の実施形態において、眼障害の疾患修飾の方法が提供される。方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、眼障害を有する対象に第１の負荷用量において投与することを含み、それにより、眼障害が、対象にとって有益な方式で修飾される。

【0236】

一部の実施形態において、眼障害を処置する方法が提供される。方法は、ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を同定すること；抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１～６回の負荷用量を対象に投与すること；抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の第１の再処置用量を対象に直近の負荷用量から第１の時間量後に提供すること；および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の第２の再処置用量を対象に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の第１の再処置用量から第２の時間量後に提供することを含み、第２の時間量は第１の時間量よりも大きい。一部の実施形態において、第２の時間量は、第１の時間量よりも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００％またはより高い％だけ大きい。一部の実施形態において、第２の時間量は、第１の時間量よりも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６またはより多くの週だけ長い。一部の実施形態において、負荷用量は、対象に投与される、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の３回の用量を含む。

【0237】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を用いてＤＭＥまたは増殖性糖尿病網膜症または非増殖性糖尿病網膜症を処置する方法であって、（虚血性組織の）再灌流を結果としてもたらし、したがって基礎疾患の改善となる、方法において応用することができる。灌流および再灌流という用語は本明細書において交換可能に使用される。

【0238】

一部の実施形態において、負荷注射および第１の再処置注射後に、各その後の再処置注射は、第１の再処置注射よりも低い頻度で為される。すなわち、再処置注射の間の時間量を増加させ、本発明の方法の特性を与えることができる。特に、時間量は、各その後の再処置注射について１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０またはより多くの週だけ増加させることができる。一部の実施形態において、時間量は、各再処置の間に１、２、３、４、５、６、７、８、９０、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、１００、５００、１０００、５０００、１０，０００パーセントまたはより高いパーセントだけ増加される。

【0239】

一部の実施形態において、眼障害を処置する方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与することであって、眼障害が糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）である、投与すること；および負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すことを含むことができ、それにより、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）、治療の治療結果を、最終負荷用量後に少なくとも８週間保持する。一部の実施形態において、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）治療の治療結果を、最終負荷用量後に少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４４、４８、５２、５６、または６０またはより多くの週にわたり保持する。一部の実施形態において、負荷用量は、２回、または３回投与される。一部の実施形態において、負荷用量は、月毎または２か月毎に投与される。

【0240】

一部の実施形態において、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１回または複数回の後続用量を対象に最終負荷用量後に投与することをさらに含む。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量は、Ｑ８Ｗ、Ｑ１２Ｗ、Ｑ１６Ｗ、Ｑ２０Ｗ、またはＱ２４Ｗ、またはより長い間隔の投薬スケジュールで投与される。一部の実施形態において、投薬スケジュールはＱ８Ｗ～Ｑ２４Ｗである。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量は、対象に第１の負荷用量後の少なくとも約１年、約２年、または約３年以内に投与されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回よりも多くの後続用量は、対象に第１の負荷用量後の少なくとも約１年、約２年、または約３年以内に投与されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの２回よりも多くの後続用量は、対象に第１の負荷用量後の少なくとも約１年、約２年、または約３年以内に投与されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの３回よりも多くの後続用量は、対象に第１の負荷用量後の少なくとも約１年、約２年、または約３年以内に投与されない。

【0241】

一部の実施形態において、眼障害を処置する方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与することであって、眼障害が滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）である、投与すること；および負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すことを含み、それにより、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも１２週間保持する。一部の実施形態において、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療の治療結果を、最終負荷用量後に少なくとも１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４４、４８、５２、５６、または６０またはより多くの週にわたり保持する。一部の実施形態において、負荷用量は、２回、または３回投与される。一部の実施形態において、負荷用量は、月毎または２か月毎に投与される。

【0242】

一部の実施形態において、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１回または複数回の後続用量を対象に最終負荷用量後に投与
することをさらに含む。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの後続用量は、Ｑ２Ｗ、Ｑ４Ｗ、Ｑ８Ｗ、Ｑ１２Ｗ、Ｑ１６Ｗ、Ｑ２０Ｗ、またはＱ２４Ｗ、またはより長い間隔の投薬スケジュールで投与される。一部の実施形態において、投薬スケジュールはＱ１２Ｗ～Ｑ２０Ｗである。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの１、２、３、もしくは４回よりも多くの後続用量、または後続用量は、対象に第１の負荷用量の約１年以内に投与されない。一部の実施形態において、投薬スケジュールはＱ１２Ｗ～Ｑ２０Ｗである。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの１、２、３、もしくは４回よりも多くの後続用量、または後続用量は、対象に第１の負荷用量の約２年以内に投与されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの１、２、３、もしくは４回よりも多くの後続用量、または後続用量は、対象に第１の負荷用量の約３年以内に投与されない。

【0243】

一部の実施形態において、眼障害を処置する方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を、眼障害の処置を必要とする対象に第１の負荷用量において投与することであって、眼障害が網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、例えば、ＣＲＶＯまたはＢＲＶＯである、投与すること；および負荷用量を少なくとも１回かつ２回以下で繰り返すことを含み、それにより、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）治療の治療結果を、最終負荷用量後に少なくとも８週間保持する。一部の実施形態において、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）治療の治療結果を、最終負荷用量後に少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４４、４８、５２、５６、または６０またはより多くの週にわたり保持する。一部の実施形態において、負荷用量は、２回、または３回投与される。一部の実施形態において、負荷用量は、月毎または２か月毎に投与される。

【0244】

一部の実施形態において、方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の１回または複数回の後続用量を対象に最終負荷用量後に投与することをさらに含む。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量は、Ｑ８Ｗ、Ｑ１２Ｗ、Ｑ１６Ｗ、Ｑ２０Ｗ、またはＱ２４Ｗ、またはより長い間隔の投薬スケジュールで投与される。一部の実施形態において、投薬スケジュールは、Ｑ８Ｗまたはより長い間隔である。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続用量は、対象に第１の負荷用量後の少なくとも約１年、約２年、または約３年以内に投与されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回よりも多くの後続用量は、対象に第１の負荷用量後の少なくとも約１年、約２年、または約３年以内に投与されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの２回よりも多くの後続用量は、対象に第１の負荷用量後の少なくとも約１年、約２年、または約３年以内に投与されない。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの３回よりも多くの後続用量は、対象に第１の負荷用量後の少なくとも約１年、約２年、または約３年以内に投与されない。

【0245】

一部の実施形態において、眼障害を処置する方法は、眼障害の処置を必要とする対象に治療有効量の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート
）を投与し、眼障害が糖尿病網膜症（ＤＲ）であり、該投与により眼障害を処置することを含む。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートは、Ｑ１２Ｗ、Ｑ１６Ｗ、Ｑ２０Ｗ、またはＱ２４Ｗ、またはより長い間隔の投薬スケジュールにしたがって投与される。一部の実施形態において、投薬スケジュールはＱ１２Ｗ～Ｑ２４Ｗである。一部の実施形態において、方法は、対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの少なくとも１回の負荷用量であるが２回以下の負荷用量を投与することをさらに含む。一部の実施形態において、任意の２回の連続する負荷用量の間の時間は約４または８週（月毎に１回または２か月毎に１回）である。

【0246】

一部の実施形態において、眼障害を処置する方法は、眼障害の処置を必要とする対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）の複数回の用量のうちの第１の用量を投薬スケジュールにおいて投与することであって、投薬スケジュールが、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１～３回の負荷用量を含む負荷投薬スケジュールであって、第１の用量が負荷用量である、負荷投薬スケジュール；続いて最終負荷用量後の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの１回または複数回の後続用量を含む維持投薬スケジュールであって、Ｑ８Ｗまたはより長い間隔の予め決定された投薬スケジュールを含む、維持投薬スケジュールを含む、投与することを含む。一部の実施形態において、予め決定された投薬スケジュールは、Ｑ８Ｗ、Ｑ１２Ｗ、Ｑ１６Ｗ、Ｑ２０Ｗ、またはＱ２４Ｗ、またはより長い間隔である。一部の実施形態において、眼障害はｗＡＭＤであり、かつ予め決定された投薬スケジュールは、Ｑ１２Ｗまたはより長い間隔、例えば、Ｑ１６Ｗ、Ｑ２０Ｗ、もしくはＱ２４Ｗ、もしくはより長い間隔である。一部の実施形態において、眼障害は、ＤＭＥ、ＤＲ、またはＲＶＯである。

【0247】

一部の実施形態において、方法は、個別化された投薬スケジュールを含む。個別化された投薬スケジュールを用いる眼障害を処置する方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）治療の治療結果を、対象において第１の用量（例えば、負荷用量または維持用量）後の１つまたは複数の時点において評価すること；および抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの後続用量を対象に、予め決定された投薬スケジュールにより指定されるその後の時点において、治療結果が対象により保持されていない場合に、投与し、治療結果が対象により保持されている場合には、後続用量を投与するまでの時間間隔を延長することを含むことができる。一部の実施形態において、対象の目の健康状態、例えば網膜の健康状態は、直近の用量、例えば、直近の負荷用量、または直近の維持用量後に、４、８、もしくは１２週、または上記の値により定義される範囲内の任意の時点のフォローアップ来院において評価（ｅｖａｌｕａｔｅｄまたはａｓｓｅｓｓｅｄ）されてもよい。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート治療の治療結果は、本明細書において開示されるような任意の好適なオプション（例えば、視力、網膜厚など）により評価されてもよい。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート治療の治療結果が、本明細書に開示されるように保持される場合、後続用量、例えば、維持用量は必要とされず、実際の投薬スケジュールは、予め決定された投薬スケジュールから逸脱してもよい。一部の実施形態において、次の後続用量、例えば、維持用量は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート治療の治療結果が保持される限り、延期される。一部の実施形態において、例えば、実際の投薬スケジュールは、直近の負荷用量または直近の維持用量後の８週時に、対象の処置された目が抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を保持する場合に、予め決定されたＱ８Ｗ投薬スケジュールから逸脱してもよく、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートは、スケジュールされた時点において投与されない。一部の実施形態において、次の維持用量は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果が保持される限り、無期限に延期されてもよい。

【0248】

一部の実施形態において、眼障害を処置する方法は、眼障害の処置を必要とする対象を同定することであって、眼障害が推定眼ヒストプラズマ症候群である、同定すること；および対象の硝子体内に治療有効量の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を投与し、それにより眼障害を処置することを含む。一部の実施形態において、治療有効量は、約１ｍｇ～約５ｍｇ、約１．２５ｍｇ～約５ｍｇ、または約２．５ｍｇ～約５ｍｇ（抗ＶＥＧＦ抗体部分の重量による）の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートを含む。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートまたは抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲートの１回よりも多くの注射は、眼障害を処置するために要求されない。

【0249】

一部の実施形態において、眼障害の処置を必要とする対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の３回以下の負荷用量を投与することは、少なくとも２４週またはより長く続く治療結果を提供する。一部の実施形態において、眼障害の処置を必要とする対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の２回以下の用量を投与することは、少なくとも２４週またはより長く続く治療結果を提供する。一部の実施形態において、眼障害の処置を必要とする対象に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の１回以下の用量を投与することは、少なくとも２４週またはより長く治療結果を提供する。一部の実施形態において、最終負荷用量後に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの追加用量（例えば、維持用量）は、対象に少なくとも２４週間投与されない（すなわち、それはその時間的期間のために有効であり、その結果、追加の維持または再処置用量はその時間の間に要求されない）。一部の実施形態において、１回の負荷用量を投与した後に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの追加用量（例えば、維持用量）は、対象に少なくとも２４週間投与されない。一部の実施形態において、２回の負荷用量を投与した後に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの追加用量（例えば、維持用量）は、対象に少なくとも２４週間投与されない。一部の実施形態において、３回の負荷用量を投与した後に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの追加用量（例えば、維持用量）は、対象に少なくとも２４週間投与されない。一部の実施形態において、負荷用量間の間隔は約１か月～約２か月である。一部の実施形態において、負荷用量間の間隔は約１か月または約２か月である。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）は、対象にＱ２４Ｗまたはより長い間隔の投薬スケジュール（例えば、維持投薬スケジュール）で投与される。一部の実施形態において、眼障害はｗＡＭＤである。一部の実施形態において、眼障害はＲＶＯである。一部の実施形態において、眼障害はＤＭＥである。一部の実施形態において、眼障害はＤＲである。

【0250】

抗体コンジュゲート
抗ＶＥＧＦ抗体（抗ＶＥＧＦタンパク質、例えば、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｃｅｐｔ）を含む）およびそのコンジュゲートが本明細書において提供される。一部の実施形態において、抗体自体が、他の抗ＶＥＧＦ剤とは異なり、他の抗ＶＥＧＦ剤を上回る優位な結果を提供する。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートは、他の抗体、および／または他の抗体コンジュゲートの活性の期待を上回る驚くべき優位性を示す。

【0251】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートはＫＳＩ－３０１であり、ＫＳＩ－３０１は抗体コンジュゲートであり、
（１）抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体；および
（２）ホスホリルコリン含有ポリマー
を含み、ポリマーは、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の可変領域の外側のシステインにおいて抗ＶＥ
ＧＦ－Ａ抗体に共有結合しており、かつ前記システインは、配列中の同じ位置に存在する非システインアミノ酸を置き換えており、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は軽鎖および重鎖を含み、前記重鎖はＦｃ領域を含み、前記システインは重鎖のＦｃ領域中にあり、重鎖の配列は配列番号１を含み、かつ軽鎖の配列は配列番号２を含み、抗体コンジュゲートは、以下の構造：

【0252】

【化9】

【0253】

を有し、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各重鎖は文字Ｈにより表され、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各軽鎖は文字Ｌにより表され；
ポリマーは、ＥＵナンバリングにしたがってＣ４４３におけるスルフヒドリルを通じて抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体に結合しており、該結合は上記の重鎖の１つにおいて描写されており；
ＰＣは、

【0254】

【化10】

【0255】

であり、曲線はポリマーの残部への結合点を指し示し；かつ
ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９は同じまたは異なり、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９の和は２５００プラスまたはマイナス１５％である。

【0256】

歴史的に、タンパク質への分子のコンジュゲート化は、多くの場合に、その意図される標的へのタンパク質の結合相互作用における減少を結果としてもたらした。本開示の一部の実施形態において、活性部位の外側の位置へのコンジュゲート化の場合、予測されたかもしれないものと同じレベルの減少は必ずしも観察されない。本明細書において提供される証拠は、予測されたかもしれないものと反対の効果を示す。一部の実施形態において、理論により限定されることは意図せずに、コンジュゲートは抗体単独に対して優位であり得る。例えば、リガンドおよびその特異的な受容体の相互作用は、多くの場合に、受容体上の親水性アミノ酸とのリガンド上の親水性アミノ酸の相互作用により導かれるようなリガンドおよび受容体の立体特異的な相互作用を通じて駆動され、水分子はそれらの相互作用において前面および中心にある。同時に、この親水性の立体特異性は、疎水性－疎水性アミノ酸により一般に媒介／作出され得る非特異的な疎水性相互作用を脱強調および／または抑制することによりさらに増強される。

【0257】

一部の実施形態において、ＶＥＧＦリガンド（「ＶＥＧＦＬ」）およびＶＥＧＦ受容体（「ＶＥＧＦＲ」）の間の相互作用の少なくとも９０％を遮断することができる抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートが提供される。例えば、それは、ＶＥＧＦＲおよびＶＥＧＦＬの間の相互作用の少なくとも９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、または有効に全てを遮断することができる。一部の実施形態において、留意される遮断は、飽和濃度において起こる。一部の実施形態において、ＶＥＧＦリガンドおよびＶＥＧＦ受容体の間の相互作用の少なくとも９５％を遮断する抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートが提供される。遮断のそのような優位性の例は、Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標）（ラニビズマブ）またはＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）またはさらには抗体ＯＧ１９５０（非コンジュゲート化）よりも高い程度まで遮断する抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲート（本明細書において提供される抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１）の能力である。実際に、抗体へのポリマーの付加（抗体コンジュゲートを形成する）は、抗体の結合／活性に何らかの有害な影響力を有するまたは何らの有害な影響力も有しないことを予測することはできたが、この方式で抗体の遮断能力を実際に向上させることは予想外であったという点で、この結果は予想外であった。

【0258】

一部の実施形態において、抗体またはそのコンジュゲートは、ＶＥＧＦＲおよびＶＥＧＦＬの間の活性および／または相互作用の少なくとも７０、８０、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、または１００％を阻害する。一部の実施形態において、ＩＣ５０値は、０．１、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、４０、５０、１００ｎＭであるか、または先行する値の任意の１つもしくは複数よりも低いものであることができる。一部の実施形態において、ＫＤは、２×１０＾－１３、１×１０＾－１３、１×１０＾－１２、１×１０＾－１１、１×１０＾－１０Ｍであるか、または先行する値のいずれか１つよりも低いものであることができる。一部の実施形態において、ＩＣ５０値は、１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１，０００、１，１００、１，２００、１，３００であるか、または先行する値のいずれか１つよりも低いものであることができる。

【0259】

一部の実施形態において、ＶＥＧＦリガンドおよびＶＥＧＦ受容体の間の相互作用の少なくとも９０％を遮断する抗ＶＥＧＦ抗体が提供される。例えば、それは、ＶＥＧＦＲおよびＶＥＧＦＬの間の相互作用の少なくとも９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、または有効に全てを遮断することができる。遮断のそのような優位性の例としては、Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標）（ラニビズマブ）またはＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）よりも高い程度まで遮断するＯＧ１９５０（および本明細書において提供される抗体）の能力である。

【0260】

一部の実施形態において、他の抗体、例えばＬｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標）（ラニビズマブ）またはＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）は、本明細書に記載の方法の１つまたは複数により、本明細書に記載されるようなポリマーの１つまたは複数にコンジュゲート化させることができる。一部の実施形態において、任意の抗体、またはその断片は、本明細書に記載の方法の１つまたは複数により、本明細書に記載されるようなポリマーの１つまたは複数にコンジュゲート化させることができる。

【0261】

一部の実施形態において、抗体は、配列番号１を含む重鎖アミノ酸可変領域および配列番号２を含む軽鎖アミノ酸可変領域を含む。一部の実施形態において、抗体は、本明細書において提供されるポリマーの１つまたは複数にコンジュゲート化される。一部の実施形態において、コンジュゲート化される抗体は、配列番号１および／または２に対して少なくとも９０％同一である。一部の実施形態において、抗体は、配列番号１および配列番号２内の６つのＣＤＲの他に、Ｌ４４３Ｃ（ＥＵナンバリング、または配列番号１中の４４９Ｃ）の点突然変異を含有する。一部の実施形態において、コンジュゲート化される抗体は、配列番号１および／または２に対して少なくとも９０％同一であり、かつ以下の突然変異：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＧ２３７Ａ（ＥＵナンバリング）、ならびに以下の突然変異：Ｑ３４７Ｃ（ＥＵナンバリング）またはＬ４４３Ｃ（ＥＵナンバリング）のうちの少なくとも１つを含む。

【0262】

一部の実施形態において、ＶＥＧＦ－Ａに結合する抗体が提供される。抗体は、配列番号１中のＣＤＲ_Ｈ１であるＣＤＲ_Ｈ１、配列番号１中のＣＤＲ_Ｈ２であるＣＤＲ_Ｈ２、配列番号１中のＣＤＲ_Ｈ３であるＣＤＲ_Ｈ３、配列番号２中のＣＤＲ_Ｌ１であるＣＤＲ_Ｌ１、配列番号２中のＣＤＲ_Ｌ２であるＣＤＲ_Ｌ２、配列番号２中のＣＤＲ_Ｌ３であるＣＤＲ_Ｌ３、以下の突然変異：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＧ２３７Ａ（ＥＵナンバリング）のうちの少なくとも１つ、ならびに以下の突然変異：Ｑ３４７Ｃ（ＥＵナンバリング）またはＬ４４３Ｃ（ＥＵナンバリング）のうちの少なくとも１つを含む。

【0263】

当業者に認識されるように、本明細書に照らして、本明細書において提供される任意の抗体は、本明細書において提供される任意のポリマーにコンジュゲート化することができ、かつ／または本明細書において提供される任意の抗体は、ポリマーへの部位特異的なコンジュゲーションを可能とするようにシステインを付加され得る。

【0264】

「ＶＥＧＦ」または「血管内皮増殖因子」は、血管新生または血管新生プロセスに影響するヒト血管内皮増殖因子である。特に、ＶＥＧＦという用語は、（ｉ）ＶＥＧＦ受容体
、例えばＶＥＧＦＲ－１（Ｆｌｔ－１）、ＶＥＧＦＲ－２（ＫＤＲ／Ｆｌｋ－１）、またはＶＥＧＦＲ－３（ＦＬＴ－４）に結合し；（ｉｉ）ＶＥＧＦ受容体と関連付けられるチロシンキナーゼ活性を活性化させ；かつ（ｉｉｉ）それにより血管新生または血管新生プロセスに影響する、増殖因子のクラスの任意のメンバーを意味する。

【0265】

ＶＥＧＦの因子ファミリーは、５つの関連する糖タンパク質：ＶＥＧＦ－Ａ（ＶＰＥとしても公知）、－Ｂ、－Ｃ、－ＤおよびＰＧＦ（胎盤増殖因子）から構成される。これらのうち、ＶＥＧＦ－Ａは最もよく研究されており、抗血管新生治療の標的である。非特許文献２１。ＶＥＧＦ－Ａは、選択的スプライシングおよびタンパク質加水分解の両方により生成される多数の異なるアイソタイプ：ＶＥＧＦ－Ａ_２０６、ＶＥＧＦ－Ａ_１８９、ＶＥＧＦ－Ａ_１６５、およびＶＥＧＦ－Ａ_１２１として存在する。アイソフォームは、ヘパリンおよびニューロピリンと呼ばれる非シグナル伝達結合性タンパク質に結合する能力において異なる。アイソフォームは全て、二量体として生物学的に活性である。

【0266】

ＶＥＧＦの様々な効果は、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）へのＶＥＧＦ、例えば、ＶＥＧＦ－Ａ（Ｐ１５６９２）、－Ｂ（Ｐ４９７６６）、－Ｃ（Ｐ４９７６７）および－Ｄ（Ｑ４３９１５）の結合により媒介される。ＶＥＧＦファミリー受容体はクラスＶ ＲＴＫに属し、各々は細胞外ドメイン（ＥＣＤ）中に７つのＩｇ様ドメインを有する。ヒトにおいて、ＶＥＧＦは、３種類のＲＴＫ：ＶＥＧＦＲ－１（Ｆｌｔ－１）（Ｐ１７９４８）、ＶＥＧＦＲ－２（ＫＤＲ、Ｆｌｋ－１）（Ｐ９３５９６８）およびＶＥＧＦＲ－３（Ｆｌｔ－４）（Ｐ３５９１６）に結合する。文脈から他に明らかでなければ、ＶＥＧＦへの言及は、天然アイソフォームもしくは天然バリアントまたは天然形態に対して少なくとも９０、９５、９８もしくは９９％もしくは１００％の配列同一性を有する誘導されたバリアントのいずれかの、ＶＥＧＦ－Ａ、－Ｂ、－Ｃ、－Ｄ、およびＰＧＦのいずれかを意味する。一部の実施形態において、そのようなＶＥＧＦはヒトＶＥＧＦである。同様に、ＶＥＧＦＲへの言及は、任意の天然アイソフォームもしくは天然バリアント、または天然配列に対して少なくとも９０、９５、９８もしくは９９％もしくは１００％の配列同一性を有する誘導されたバリアントを含めて、ＶＥＧＲ－１、Ｒ－２またはＲ－３のいずれかを意味する。

【0267】

ＶＥＧＦアンタゴニスト治療は、ある特定のがんおよび滲出型ＡＭＤの処置のために承認されている。ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）は、ヒトＶＥＧＦ、特にはＶＥＧＦ－Ａの全てのアイソフォームおよびＶＥＧＦ－Ａの生物学的に活性のタンパク質分解断片に結合してそれを中和するヒト化マウスモノクローナル抗体である。例えば、非特許文献２２を参照。ベバシズマブは、ある特定のがんの処置のために承認されている。ベバシズマブの重鎖および軽鎖のタンパク質配列（ＤｒｕｇＢａｎｋ ＤＢ００１１２）は配列番号３（重）および配列番号４（軽）に記載される。

【0268】

ベバシズマブ可変軽鎖ＣＤＲは、ＣＤＲ_Ｌ１：ＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮ（配列番号１２）、ＣＤＲ_Ｌ２：ＦＴＳＳＬＨＳ（配列番号１３）およびＣＤＲ_Ｌ３：ＱＱＹＳＴＶＰＷＴ（配列番号１４）である。ベバシズマブ可変重鎖ＣＤＲは、ＣＤＲ_Ｈ１：ＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮ、ＣＤＲ_Ｈ２：ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＡＤＦＫＲ（配列番号１０）、およびＣＤＲ_Ｈ３：ＹＰＨＹＹＧＳＳＨＷＹＦＤＶである。ＣＤＲＨ１が複合Ｋａｂａｔ／Ｃｈｏｔｈｉａ定義を使用することを除いてＣＤＲはＫａｂａｔにより定義される。一部の実施形態において、システインをベバシズマブ配列に付加することができ、抗体（および／またはベバシズマブの６つのＣＤＲを含むバリアント）を、本明細書において提供されるポリマーのいずれか１つまたは複数にコンジュゲート化させることができる。

【0269】

ベバシズマブと同じマウスモノクローナル抗体に由来する別の抗ＶＥＧＦ分子が滲出型ＡＭＤに対する処置として承認されている：ラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標
）（ラニビズマブ）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）。ラニビズマブは抗体断片またはＦａｂである。ラニビズマブは、ベバシズマブの可変重鎖および軽鎖の親和性成熟により製造された。（Ｎｏｖａｒｔｉｓにより報告された）ラニビズマブの重鎖および軽鎖の配列は、それぞれ配列番号５および６において記載される。一部の実施形態において、システインをラニビズマブ配列に付加することができ、抗体（および／またはラニビズマブの６つのＣＤＲを含むバリアント）を、本明細書において提供されるポリマーのいずれか１つまたは複数にコンジュゲート化させることができる。

【0270】

ラニビズマブＣＤＲは、改良が親和性成熟後に加えられたことを除いてベバシズマブと同じである。ラニビズマブ可変軽鎖ＣＤＲは、ＣＤＲ_Ｌ１：ＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮ（配列番号１２）、ＣＤＲ_Ｌ２：ＦＴＳＳＬＨＳ（配列番号１３）およびＣＤＲ_Ｌ３：ＱＱＹＳＴＶＰＷＴ（配列番号１４）である。ラニビズマブ可変重鎖ＣＤＲは、ＣＤＲ_Ｈ１：ＧＹＤＦＴＨＹＧＭＮ（配列番号９）、ＣＤＲ_Ｈ２：ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＡＤＦＫＲ（配列番号１０）、およびＣＤＲ_Ｈ３：ＹＰＹＹＹＧＴＳＨＷＹＦＤＶ（配列番号１１）である。

【0271】

一部の実施形態において、抗体の可変領域の外側のシステインにおいてホスホリルコリン含有ポリマーに結合した抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体を有し、システインが組換えＤＮＡ技術を介して付加されている、抗体コンジュゲートが提示される。一部の実施形態において、ポリマーは、単一のシステインに結合している。一部の実施形態において、「組換えＤＮＡ技術により付加される」は、システイン残基が、公知もしくは既存の抗体中またはコンセンサス抗体配列中の同じ位置に存在する非システインアミノ酸を置き換えることを意味する。そのため、例えば、抗体がＩｇＧ１であり、かつ重鎖がＥＵ位置４４３にロイシンを有する場合、ロイシンは、組換えＤＮＡ技術を介してシステインで置き換えられる（Ｌ４４３Ｃ、ＥＵナンバリング、または配列番号１中の４４９Ｃ）。対応して、ＥＵ位置３４７におけるネイティブなＩｇＧ１配列はＱ（グルタミン）であり、Ｑは、組換えＤＮＡ技術を介してシステインで置き換えられてＱ３４７Ｃをもたらす。

【0272】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は、軽鎖および重鎖を含み、重鎖はＦｃ領域を有する。一部の実施形態において、システインはＦｃ領域中にあり、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）である。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ重鎖は、ＣＤＲ_Ｈ１：ＧＹＤＦＴＨＹＧＭＮ（配列番号９）、ＣＤＲ_Ｈ２：ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＡＤＦＫＲ（配列番号１０）、およびＣＤＲ_Ｈ３：ＹＰＹＹＹＧＴＳＨＷＹＦＤＶ（配列番号１１）を有し、かつ位置２２１（配列番号３における通りの連続的なカウントを介する）はＴであり、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ軽鎖は、ＣＤＲ_Ｌ１：ＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮ（配列番号１２）、ＣＤＲ_Ｌ２：ＦＴＳＳＬＨＳ（配列番号１３）、およびＣＤＲ_Ｌ３：ＱＱＹＳＴＶＰＷＴ（配列番号１４）を有し、かつＫａｂａｔ位置４はＬである。

【0273】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ重鎖アイソタイプはＩｇＧ１である。一部の実施形態において、ＩｇＧ１定常ドメインは、エフェクター機能をモジュレートするためにＩｇＧ１定常ドメイン（例えば配列番号３の定常領域）と比べて１つまたは複数の突然変異を有する。一部の実施形態において、エフェクター機能突然変異は、以下：（ＥＵナンバリング）Ｅ２３３Ｘ、Ｌ２３４Ｘ、Ｌ２３５Ｘ、Ｇ２３６Ｘ、Ｇ２３７Ｘ、Ａ３２７Ｘ、Ａ３３０Ｘ、およびＰ３３１Ｘ（Ｘは任意の天然または非天然アミノ酸である）のうちの１つまたは複数である。一部の実施形態において、突然変異は、（ＥＵナンバリング）Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ａ３２７Ｇ、Ａ３３０Ｓ、およびＰ３３１Ｓからなる群から選択される。一部の実施形態において、抗体コンジュゲートは、以下の突然変異（ＥＵナンバリング）：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＧ２３７Ａを有する。

【0274】

一部の実施形態において、システイン残基は抗ＶＥＧＦ－Ａ重鎖中にあり、かつＱ３４７Ｃ（ＥＵナンバリング）またはＬ４４３Ｃ（ＥＵナンバリング）である。一部の実施形態において、システイン残基はＬ４４３Ｃ（ＥＵナンバリング、または配列番号１中の４４９Ｃ）である。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ重鎖の配列は配列番号１であり、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ軽鎖の配列は配列番号２である。

【0275】

一部の実施形態において、ホスホリルコリン含有ポリマーは、以下：

【0276】

【化11】

【0277】

に記載されるような２－（メタクリロイルオキシエチル）－２’－（トリメチルアンモニウム）エチルホスフェート（ＭＰＣ）モノマーを含む。

【0278】

その結果、ポリマーは、以下の繰返し単位：

【0279】

【化12】

【0280】

（式中、ｎは１～３０００の整数であり、かつ波線はポリマー中のモノマー単位の間の結合点を指し示す）を含む。

【0281】

一部の実施形態において、ポリマーは、３つもしくはより多くのアームを有し、または３つもしくはより多くのポリマー開始部位を含む開始剤を用いて合成される。一部の実施形態において、ポリマーは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１もしくは１２個のアームを有し、または２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、もしくは１２個のポリマー開始部位を含む開始剤を用いて合成される。より好ましくは、ポリマーは、３、６、もしくは９個のアームを有し、または３、６、もしくは９個のポリマー開始部位を含む開始剤を用いて合成される。一部の実施形態において、ポリマーは９個のアームを有し、または９個のポリマー開始部位を含む開始剤を用いて合成される。

【0282】

一部の実施形態において、付加されるポリマーは約３００，０００～約１，７５０，０００Ｄａの分子量（ＳＥＣ－ＭＡＬｓ）を有する。一部の実施形態において、ポリマーは約５００，０００～約１，０００，０００Ｄａの分子量を有する。一部の実施形態において、ポリマーは約６００，０００～約９００，０００Ｄａの分子量を有する。一部の実施形態において、ポリマーは約７５０，０００～約８５０，０００Ｄａの分子量を有する。一部の実施形態において、ポリマーは約８００，０００～約８５０，０００Ｄａの分子量を有する。一部の実施形態において、ポリマーは約７５０，０００～約８００，０００Ｄａの分子量を有する。

【0283】

一部の実施形態において、本明細書に記載の任意の抗体は、さらにポリマーにコンジュゲート化してバイオコンジュゲートを形成させることができる。バイオコンジュゲートの分子量（合計、ＳＥＣ－ＭＡＬｓ）は、約３５０，０００～２，０００，０００ダルトン、例えば、約４５０，０００～１，９００，０００ダルトン、約５５０，０００～１，８００，０００ダルトン、約６５０，０００～１，７００，０００ダルトン、約７５０，０００～１，６００，０００ダルトン、約８５０，０００～１，５００，０００ダルトン、約９００，０００～１，４００，０００ダルトン、約９５０，０００～１，３００，０００ダルトン、約９００，０００～１，０００，０００ダルトン、約１，０００，０００～１，３００，０００ダルトン、約８５０，０００～１，３００，０００ダルトン、約８５０，０００～１，０００，０００ダルトン、および約１，０００，０００～１，２００，０００ダルトンであることができる。

【0284】

一部の実施形態において、抗体コンジュゲートは精製される。一部の実施形態において、ポリマーは、抗体コンジュゲートの態様であり、多分散であり、すなわちポリマーＰＤＩは１．０ではない。一部の実施形態において、ＰＤＩは１．５よりも低い。一部の実施形態において、ＰＤＩは１．４よりも低い。一部の実施形態において、ＰＤＩは１．３よりも低い。一部の実施形態において、ＰＤＩは１．２よりも低い。一部の実施形態において、ＰＤＩは１．１よりも低い。

【0285】

一部の実施形態において、抗体コンジュゲートは、ポリマーに結合した抗ＶＥＧＦ－Ａ免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を有し、ポリマーはＭＰＣモノマーを含み、抗ＶＥＧＦ－Ａ重鎖の配列は配列番号１であり、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ軽鎖の配列は配列番号２であり、かつ抗体は、ポリマーに配列番号１中のＣ４４９においてのみ結合している。一部の実施形態において、ポリマーは９個のアームを有し、かつ約６００，０００～約１，０００，０００Ｄａの分子量を有する。

【0286】

一部の実施形態において、抗体コンジュゲートは、ポリマーに結合した抗ＶＥＧＦ－Ａ免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を有し、ポリマーはＭＰＣモノマーを含み、抗ＶＥＧＦ－Ａ重鎖の配列は配列番号１であり、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ軽鎖の配列は配列番号２であり、かつ抗体は、ポリマーにＣ４４３（ＥＵナンバリング、または配列番号１中の４４９Ｃ）においてのみ結合している。一部の実施形態において、ポリマーは９個のアームを有し、かつ約６００，０００～約１，０００，０００Ｄａの分子量を有する。

【0287】

一部の実施形態において、抗体コンジュゲートは、以下の構造：

【0288】

【化13】

【0289】

を有し、式中、
抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各重鎖は文字Ｈにより表され、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各軽鎖は文字Ｌにより表され；
ポリマーは、配列番号１のＣ４４９のスルフヒドリルを通じて抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体に結合しており、該結合は、重鎖の１つにおいて描写されており；ＰＣは、

【0290】

【化14】

【0291】

であり、曲線はポリマーの残部への結合点を指し示し；Ｘは、ａ）－ＯＲ（式中、Ｒは、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、もしくはイソプロピルである）、ｂ）－Ｈ、ｃ）－Ｂｒ、－Ｃｌ、もしくは－Ｉを含む、任意のハロゲン、ｄ）－ＳＣＮ、またはｅ）－ＮＣＳであり；かつｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９は同じまたは異なり、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９の和は２５００プラスまたはマイナス１０％である。一部の実施形態において、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９は同じまたは異なり、０～３０００の整数である。一部の実施形態において、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９は同じまたは異なり、０～５００の整数である。一部の実施形態において、Ｘは－ＯＲ（Ｒは、糖、アミノアルキル、以下の残基：飽和Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル、不飽和Ｃ_２～Ｃ_２４アルケニルまたはＣ_２～Ｃ_２４アルキニル、アシル、アシルオキシ、アルキルオキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルコキシ、シクロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアシル、アミノ、アミノカルボニル、アミノカルボニルオキシ（ａｍｉｎｏｃａｒｂｏｙｌｏｘｙ）、ニトロ、アジド、フェニル、ヒドロキシ、アルキルチオ、アリールチオ、オキシスルホニル、カルボキシ、シアノ、およびポリハロゲン化アルキルを含むハロゲン化アルキルの一置換、多置換または非置換バリアント）、－－ＣＯ－－Ｏ－－Ｒ_７、カルボニル－－ＣＣＯ－－Ｒ_７、－－ＣＯ－－ＮＲ_８Ｒ_９、－－（ＣＨ_２）_ｎ－－ＣＯＯＲ_７、－－ＣＯ－－（ＣＨ）_ｎ－－ＣＯＯＲ_７、－－（ＣＨ_２）_ｎ－－ＮＲ_８Ｒ_９、エステル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル（ｎは１～６の整数であり、各Ｒ_７、Ｒ_８およびＲ_９は、水素原子、ハロゲン原子、以下の残基：飽和Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル、不飽和Ｃ_２～Ｃ_２４アルケニルまたはＣ_２～Ｃ_２４アルキニル、アシル、アシルオキシ、アルキルオキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルコキシ、シクロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアシル、アミノ、アミノカルボニル、アミノカルボニルオキシ、ニトロ、アジド、フェニル、ヒドロキシ、アルキルチオ、アリールチオ、オキシスルホニル、カルボキシ、シアノ、およびポリハロゲン化アルキルを含むハロゲン化アルキルの一置換、多置換または非置換バリアントからなる群から別々に選択される）、５員環、および６員環である。

【0292】

一部の実施形態において、抗体コンジュゲートは、以下の構造：

【0293】

【化15】

【0294】

を有し、式中、
抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各重鎖は文字Ｈにより表され、かつ抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の各軽鎖は文字Ｌにより表され；
ポリマーは、Ｃ４４３（ＥＵナンバリング、または配列番号１中の４４９Ｃ）のスルフヒドリルを通じて抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体（ａｎｔｂｉｏｄｙ）に結合しており、該結合は重鎖の１つにおいて描写されており；ＰＣは、

【0295】

【化16】

【0296】

であり、曲線はポリマーの残部への結合点を指し示し；Ｘは、ａ）－ＯＲ（式中、Ｒは、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、もしくはイソプロピルである）、ｂ）－Ｈ、ｃ）Ｂｒ、－Ｃｌ、もしくは－Ｉを含む、任意のハロゲン、ｄ）－ＳＣＮ、またはｅ）－ＮＣＳであり；かつｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９は同じまたは異なり、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９の和は２５００プラスまたはマイナス１０％である。一部の実施形態において、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９は同じまたは異なり、０～３０００の整数である。一部の実施形態において、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ６、ｎ７、ｎ８およびｎ９は同じまたは異なり、０～５００の整数である。一部の実施形態において、Ｘは、－ＯＲ（Ｒは、糖、アミノアルキル、以下の残基：飽和Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル、不飽和Ｃ_２～Ｃ_２４アルケニルまたはＣ_２～Ｃ_２４アルキニル、アシル、アシルオキシ、アルキルオキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルコキシ、シクロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアシル、アミノ、アミノカルボニル、アミノカルボニルオキシ、ニトロ、アジド、フェニル、ヒドロキシ、アルキルチオ、アリールチオ、オキシスルホニル、カルボキシ、シアノ、およびポリハロゲン化アルキルを含むハロゲン化アルキルの一置換、多置換または非置換バリアントである）、－－ＣＯ－－Ｏ－－Ｒ_７、カルボニル－－ＣＣＯ－－Ｒ_７、－－ＣＯ－－ＮＲ_８Ｒ_９、－－（ＣＨ_２）_ｎ－－ＣＯＯＲ_７、－－ＣＯ－－（ＣＨ）_ｎ－－ＣＯＯＲ_７、－－（ＣＨ_２）_ｎ－－ＮＲ_８Ｒ_９、エステル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル（ｎは１～６の整数であり、各Ｒ_７、Ｒ_８およびＲ_９は、水素原子、ハロゲン原子、以下の残基：飽和Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル、不飽和Ｃ_２～Ｃ_２４アルケニルまたはＣ_２～Ｃ_２４アルキニル、アシル、アシルオキシ、アルキルオキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルコキシ、シクロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアシル、アミノ、アミノカルボニル、アミノカルボニルオキシ、ニトロ、アジド、フェニル、ヒドロキシ、アルキルチオ、アリールチオ、オキシスルホニル、カルボキシ、シアノ、およびポリハロゲン化アルキルを含むハロゲン化アルキルの一置換、多置換または非置換バリアントからなる群から別々に選択される）、５員環、および６員環である。一部の実施形態において、この構築物はＫＳＩ－３０１と呼称される。

【0297】

一部の実施形態において、抗体コンジュゲートは液体製剤中に存在する。一部の実施形態において、抗体コンジュゲートは、薬学的に許容される担体と合わせられている。

【0298】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体が提示される。抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体重鎖は、少なくとも以下のＣＤＲ配列：ＣＤＲ_Ｈ１：ＧＹＤＦＴＨＹＧＭＮ（配列番号９）、ＣＤＲ_Ｈ２：ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＡＤＦＫＲ（配列番号１０）、およびＣＤＲ_Ｈ３：ＹＰＹＹＹＧＴＳＨＷＹＦＤＶ（配列番号１１）を有する。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ重鎖は、それらのＣＤＲを有し、かつ追加的に位置２２１（配列番号３における通りの連続的なカウントを介する）におけるスレオニン（Ｔ）を有する。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ軽鎖は、少なくとも以下のＣＤＲ：ＣＤＲ_Ｌ１：ＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮ（配列番号１２）、ＣＤＲ_Ｌ２：ＦＴＳＳＬＨＳ（配列番号１３）およびＣＤＲ_Ｌ３：ＱＱＹＳＴＶＰＷＴ（配列番号１４）を有する。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は、それらのＣＤＲを有し、かつ追加的にＫａｂａｔ位置４におけるロイシン（Ｌ）を有する。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体重鎖のアイソタイプは、ＩｇＧ１であり、かつＣＨ_１、ヒンジ、ＣＨ_２およびＣＨ_３ドメインを有する。一部の実施形態において、軽鎖アイソタイプはカッパである。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）構築物は、これらのＣＤＲのうちの１つまたは複数を有する。

【0299】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体のＩｇＧ１ドメインは、エフェクター機能、例えばＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、およびＣＤＣをモジュレートするための１つまたは複数
の突然変異を有する。一部の実施形態において、ＩｇＧ１突然変異はエフェクター機能を低減させる。一部の実施形態において、エフェクター機能突然変異のために使用するアミノ酸としては、（ＥＵナンバリング）Ｅ２３３Ｘ、Ｌ２３４Ｘ、Ｌ２３５Ｘ、Ｇ２３６Ｘ、Ｇ２３７Ｘ、Ｇ２３６Ｘ、Ｄ２７０Ｘ、Ｋ３２２Ｘ、Ａ３２７Ｘ、Ｐ３２９Ｘ、Ａ３３０Ｘ、Ａ３３０Ｘ、Ｐ３３１Ｘ、およびＰ３３１Ｘが挙げられ、Ｘは任意の天然または非天然アミノ酸である。一部の実施形態において、突然変異は、以下：Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ａ３２７Ｇ、Ａ３３０ＳおよびＰ３３１Ｓ（ＥＵナンバリング）のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ重鎖は、以下の突然変異（ＥＵナンバリング）：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５ＡおよびＧ２３７Ａを有する。一部の実施形態において、天然ヒトＩｇＧ１配列と比べたエフェクター機能突然変異の数は１０個以下である。一部の実施形態において、天然ヒトＩｇＧ１配列と比べたエフェクター機能突然変異の数は、５、４、３、２または１個以下である。一部の実施形態において、抗体は、減少されたＦｃガンマ結合および／または補体Ｃ１ｑ結合を有し、その結果、エフェクター機能を結果としてもたらす抗体の能力は減少されている。これは、眼科適応症／障害のために特に有利であり得る。

【0300】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は、以下のアミノ酸突然変異：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ（ＥＵナンバリング）、およびＬ４４３Ｃ（ＥＵナンバリング、または配列番号１中の４４９Ｃ）のうちの１つまたは複数を含む。

【0301】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は、ヒト免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ１）、またはその部分である。

【0302】

一部の実施形態において、ＶＥＧＦ－Ａ抗体は、免疫媒介性エフェクター機能を低減させる１つまたは複数の突然変異を含む重鎖定常ドメインを含む。

【0303】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体が提供される。抗ＶＥＧＦ抗体は、配列ＧＹＤＦＴＨＹＧＭＮ（配列番号９）を含むＣＤＲ_Ｈ１、配列ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＡＤＦＫＲ（配列番号１０）を含むＣＤＲ_Ｈ２、配列ＹＰＹＹＹＧＴＳＨＷＹＦＤＶ（配列番号１１）を含むＣＤＲ_Ｈ３、配列ＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮ（配列番号１２）を含むＣＤＲ_Ｌ１、配列ＦＴＳＳＬＨＳ（配列番号１３）を含むＣＤＲ_Ｌ２、および配列ＱＱＹＳＴＶＰＷＴ（配列番号１４）を含むＣＤＲ_Ｌ３を含む重鎖を含む。

【0304】

代替的に、ＩｇＧドメインは、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３もしくはＩｇＧ４、または定常領域がこれらのアイソタイプのうちの１つより多く（例えば、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４からのＣＨ１領域、ＩｇＧ１からのヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３領域）から形成された複合物であることができる。そのようなドメインは、ＩｇＧ１について言及されたＥＵ位置のうちの１つまたは複数においてエフェクター機能を低減させかつ／またはモジュレートするための突然変異を含有することができる。ヒトＩｇＧ２およびＩｇＧ４は、ヒトＩｇＧ１およびＩｇＧ３と比べて低減されたエフェクター機能を有する。

【0305】

抗ＶＥＧＦ－Ａ重鎖は、組換えＤＮＡ技術により突然変異として付加されたシステイン残基を有し、該残基は、半減期延長部分をコンジュゲート化するために使用され得る。一部の実施形態において、突然変異は、（ＥＵナンバリング）Ｑ３４７Ｃ（ＥＵナンバリング）および／またはＬ４４３Ｃ（ＥＵナンバリング、もしくは配列番号１中の４４９Ｃ）である。一部の実施形態において、突然変異はＬ４４３Ｃ（ＥＵナンバリング、または配列番号１中の４４９Ｃ）である。一部の実施形態において、抗体対ポリマーの化学量論は１：１であり、換言すれば、コンジュゲートは、１分子のポリマーにコンジュゲート化された１分子の抗体を有する。

【0306】

抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体の半減期は、「半減期延長部分」または「半減期延長基」の取付けにより延長させることができる。半減期延長部分としては、問題とする生物学的薬物とインフレームで発現され得る（または状況に依存して化学的にコンジュゲート化され得る）ペプチドおよびタンパク質、ならびに１つまたは複数のアミノ酸側鎖または末端官能基、例えば－ＳＨ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＨ２、または１つもしくは複数のＮ－および／もしくはＯ－グリカン構造に取付けまたはコンジュゲート化され得る様々なポリマーが挙げられる。半減期延長部分は、一般に、生物学的薬物のインビボ循環半減期を増加させるように作用する。

【0307】

ペプチド／タンパク質半減期延長部分の例としては、Ｆｃ融合物（非特許文献２３）、ヒト血清アルブミン（ＨＡＳ）融合物（非特許文献２４）、カルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）融合物（非特許文献２５）、不正確反復ペプチド配列（ＸＴＥＮ）融合物の遺伝子融合（非特許文献２６）、エラスチン様ペプチド（ＥＬＰ化）（非特許文献２７）、ヒトトランスフェリン融合物（Ｐｒｉｏｒ ＣＰ， Ｌａｉ Ｃ－Ｈ， Ｓａｄｅｈｇｈｉ Ｈ ｅｔ ａｌ． Ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ ｆｕｓｉｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎｓ． 特許 特許文献３１）、プロリン－アラニン－セリン（ＰＡＳ化）（Ｓｋｅｒｒａ Ａ， Ｔｈｅｏｂａｌｄ Ｉ， Ｓｃｈｌａｐｓｋｙ Ｍ． Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｈａｖｉｎｇ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ａｎｄ／ｏｒ ｖｉｔｒｏ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ． 特許 特許文献３２）、ホモ－アミノ酸ポリマー（ＨＡＰ化）（非特許文献２８）およびゼラチン様タンパク質（ＧＬＫ）融合物（非特許文献２９）が挙げられる。

【0308】

ポリマー半減期延長部分の例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、分枝状ＰＥＧ、ＰｏｌｙＰＥＧ（登録商標）（Ｗａｒｗｉｃｋ Ｅｆｆｅｃｔ Ｐｏｌｙｍｅｒｓ；Ｃｏｖｅｎｔｒｙ、ＵＫ）、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、デンプン、ヒドロキシエチルデンプン（ｈｙｄｒｏｘｙｌｅｔｈｙｌ ｓｔａｒｃｈ；ＨＥＳ）、ヒドロキシアルキルデンプン（ＨＡＳ）、炭水化物、多糖、プルラン（ｐｕｌｌｕｌａｎｅ）、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、デキストラン、カルボキシメチル－デキストラン、ポリアルキレン酸化物（ＰＡＯ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリオキサゾリン、ポリアクリロイルモルホリン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリエチレン－コ－マレイン酸無水物（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ－ｃｏ－ｍａｌｅｉｃ ａｃｉｄ ａｎｙｈｙｄｒｉｄｅ）、ポリスチレン－コ－マレイン酸無水物、ポリ（１－ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルマール）（ｐｏｌｙ（１－ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｅｔｈｙｌｅｎｅ ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｌ）；ＰＨＦ）、双性イオンポリマー、ホスホリルコリン含有ポリマーおよびＭＰＣを含むポリマー、ポリ（Ｇｌｙ_ｘ－Ｓｅｒ_ｙ）、ヒアルロン酸（ＨＡ）、ヘパロサンポリマー（ＨＥＰ）、フレキシマー（Ｆｌｅｘｉｍｅｒｓ）、デキストラン、ならびにポリシアル酸（ＰＳＡ）が挙げられる。

【0309】

１つの実施形態において、半減期延長部分は、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステルを使用してタンパク質の遊離アミノ基を介して抗体にコンジュゲート化させることができる。アミン基にコンジュゲーションを標的化する試薬は、リジンのε－アミン基、Ｎ末端アミノ酸のα－アミン基、およびヒスチジンのδ－アミン基に無作為に反応することができる。

【0310】

しかしながら、本明細書に開示される抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は、ポリマーコンジュゲーションのために利用可能な多くのアミン基を有する。遊離アミノ基へのポリマーのコンジュゲーションは、そのため、ＶＥＧＦに結合する抗体タンパク質の能力に負に影響する可能性がある。

【0311】

一部の実施形態において、半減期延長部分は、非限定的に、マレイミド化学を含めて、任意の適切なチオール反応化学、または以前の酸化後の抗体の炭水化物部分へのポリマーヒドラジドもしくはポリマーアミンのカップリングを使用して１つまたは複数の遊離ＳＨ基に連結される。一部の実施形態において、マレイミドカップリングが使用される。一部の実施形態において、カップリングは、天然に存在するまたは遺伝子操作を介して導入されたシステインにおいて行われる。

【0312】

一部の実施形態において、ポリマーは、部位特異的突然変異誘発により抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体に導入されたシステイン残基に共有結合的に取り付けられる。一部の実施形態において、システイン残基が抗体のＦｃ部分において用いられる。一部の実施形態において、システイン残基をＦｃ領域に導入するための部位は、特許文献３３、特許文献３４、特許文献３５、特許文献３６、特許文献３７および特許文献３８（参照により全ての目的のために本明細書に組み込まれる）において提供される。一部の実施形態において、システイン突然変異は、ＥＵナンバリングによるヒトＩｇＧ重鎖を参照するＱ３４７Ｃ（ＥＵナンバリング）およびＬ４４３Ｃである。

【0313】

一部の実施形態において、抗体および半減期延長剤として役立つ高ＭＷポリマーのコンジュゲートが提供される。一部の実施形態において、コンジュゲートは、双性イオンポリマーに連結された抗体を含み、ポリマーは１つまたは複数のモノマー単位から形成され、かつ少なくとも１つのモノマー単位は双性イオン基を有するものが提供される。一部の実施形態において、双性イオン基はホスホリルコリンである。

【0314】

一部の実施形態において、モノマー単位のうちの１つはＨＥＭＡ－ＰＣである。一部の実施形態において、ポリマーは、ＨＥＭＡ－ＰＣである単一のモノマーから合成される。

【0315】

一部の実施形態において、一部の抗体コンジュゲートは、モノマーがＨＥＭＡ－ＰＣである２、３、またはより多くのポリマーアームを有する。一部の実施形態において、コンジュゲートは、モノマーがＨＥＭＡ－ＰＣである２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２個のポリマーアームを有する。一部の実施形態において、コンジュゲートは、３、６または９個のアームを有する。一部の実施形態において、コンジュゲートは９個のアームを有する。

【0316】

一部の実施形態において、ポリマー－抗体コンジュゲートは、１００，０００～１，５００，０００Ｄａの分子量を有するポリマー部分を有する。一部の実施形態において、コンジュゲートは、５００，０００～１，０００，０００Ｄａの分子量を有するポリマー部分を有する。一部の実施形態において、コンジュゲートは、６００，０００～８００，０００Ｄａの分子量を有するポリマー部分を有する。一部の実施形態において、コンジュゲートは、６００，０００～８５０，０００Ｄａの分子量を有するポリマー部分を有し、かつ９個のアームを有する。分子量がポリマーにコンジュゲート化された抗体について与えられる場合、分子量は、それと会合した任意の炭水化物部分を含めて、タンパク質の分子量、およびポリマーの分子量の合計である。

【0317】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は、約１００ｋＤａ～１６５０ｋＤａのＭｗにより測定される分子量を有するＨＥＭＡ－ＰＣポリマーを有するものが提供される。一部の実施形態において、Ｍｗにより測定されるポリマーの分子量は約５００ｋＤａ～１０００ｋＤａである。一部の実施形態において、Ｍｗにより測定されるポリマーの分子量は約６００ｋＤａ～約９００ｋＤａである。一部の実施形態において、Ｍｗにより測定されるポリマー分子量は７５０ｋＤａプラスまたはマイナス１５％である。

【0318】

一部の実施形態において、ポリマーは、１つまたは複数のポリマー開始部位を有するＡＴＲＰのために好適な開始剤から作られる。一部の実施形態において、ポリマー開始部位は２－ブロモイソブチレート部位を有する。一部の実施形態において、開始剤は、３つまたはより多くのポリマー開始部位を有する。一部の実施形態において、開始剤は、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２個のポリマー開始部位を有する。一部の実施形態において、開始剤は、３、６または９個のポリマー開始部位を有する。一部の実施形態において、開始剤は９個のポリマー開始部位を有する。一部の実施形態において、開始剤はＯＧ１７８６である。

【0319】

抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は、（ｉ）遺伝子操作による組換えＤＮＡの製造、（ｉｉ）非限定的に例えば、トランスフェクション、エレクトロポレーションまたは微量注射により、原核または真核細胞に組換えＤＮＡを導入すること、（ｉｉｉ）形質転換細胞を培養すること、（ｉｖ）例えば構成的にまたは誘導で、抗体を発現させること、および（ｖ）例えば培養培地からまたは形質転換細胞を採取することにより、抗体を単離すること、それにより（ｖｉ）精製された抗体を得ることを含む組換え発現により製造することができる。

【0320】

抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は、薬理学的に許容される抗体分子の製造により特徴付けられる好適な原核または真核宿主システムにおける発現により製造することができる。真核細胞の例は、哺乳動物細胞、例えばＣＨＯ、ＣＯＳ、ＨＥＫ ２９３、ＢＨＫ、ＳＫ－Ｈｉｐ、およびＨｅｐＧ２である。他の好適な発現システムは、原核性（例えば、ｐＥＴ／ＢＬ２１発現システムを伴う大腸菌（Ｅ． ｃｏｌｉ））、酵母（サッカロミセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）および／またはピキア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）システム）、ならびに昆虫細胞である。

【0321】

多様なベクターを、本明細書に開示される抗体の調製のために使用することができ、それは真核および原核発現ベクターから選択される。原核発現用のベクターの例としては、プラスミド、非限定的に例えばｐｒｅｓｅｔ、ｐｅｔ、およびｐａｄが挙げられ、原核発現ベクターにおいて使用されるプロモーターは、非限定的に、ｌａｃ、ｔｒｃ、ｔｒｐ、ｒｅｃＡ、またはａｒａＢＡＤのうちの１つまたは複数を含む。真核発現用のベクターの例としては、（ｉ）酵母における発現のためのベクター、非限定的に例えば、プロモーター、非限定的に例えば、ＡＯＸ１、ＧＡＰ、ＧＡＬ１、またはＡＵＧ１を使用する、ｐＡＯ、ｐＰＩＣ、ｐＹＥＳ、またはｐＭＥＴ；（ｉｉ）昆虫細胞における発現のためのベクター、非限定的に例えば、プロモーター、非限定的に例えばＰＨ、ｐ１０、ＭＴ、Ａｃ５、ＯｐＩＥ２、ｇｐ６４、またはｐｏｌｈを使用する、ｐＭＴ、ｐＡｃ５、ｐＩＢ、ｐＭＩＢ、またはｐＢＡＣ、ならびに（ｉｉｉ）哺乳動物細胞における発現のためのベクター、非限定的に例えば、プロモーター、非限定的に例えばＣＭＶ、ＳＶ４０、ＥＦ－１、ＵｂＣ、ＲＳＶ、ＡＤＶ、ＢＰＶ、およびベータ－アクチンを使用する、ｐＳＶＬ、ｐＣＭＶ、ｐＲｃ／ＲＳＶ、ｐｃＤＮＡ３、またはｐＢＰＶ、および、１つの態様において、ウイルスシステム、非限定的に例えばワクシニアウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、またはレトロウイルスに由来するベクターが挙げられる。

【0322】

タンパク質をポリマーにコンジュゲート化する方法
一部の実施形態において、治療用タンパク質－半減期延長部分コンジュゲートを調製する方法であって、組換えＤＮＡ技術を介して付加されたシステイン残基を有する治療用タンパク質を、マレイミド、ビニルスルホン、オルトピリジル－ジスルフィド、およびヨードアセトアミドからなる群から選択されるスルフヒドリル特異的反応基を有する半減期延長部分にコンジュゲート化して、治療用タンパク質－半減期延長部分コンジュゲートを提供するステップを有する、方法が提示される。

【0323】

一部の実施形態において、ＯＧ１９５０から抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、
ＫＳＩ－３０１を調製する方法が提供される。方法は、５０×モル過剰のＴＣＥＰ還元剤を用いてＯＧ１９５０タンパク質を還元させることを含む。還元後に、抗体（ａｎｔｉｏｂｏｄｙ）は酸化されて、キャップ除去されたＯＧ１９５０抗体が製造され、ＯＧ１９５０抗体において、抗体中に天然に存在する軽鎖および重鎖の間およびそれらの内部のジスルフィド結合が形成されるが、重鎖位置Ｌ４４３Ｃ（ＥＵナンバリング、または配列番号１中の４４９Ｃ）上の操作されたシステインはキャップ除去されたままとなる。ＯＧ１９５０は次に、賦形剤を加えることおよび５～１０×モル過剰のマレイミドバイオポリマーを加えることによりコンジュゲート化される。バイオポリマーは、共有結合性のチオエーテル（ｔｈｉｏｌｅｔｈｅｒ）連結を通じてＯＧ１９５０抗体に連結する。コンジュゲーション後に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１は精製され、非コンジュゲート化抗体およびポリマーの両方は除去される。

【0324】

上記のタンパク質および方法は変更することもできる。そのため、一部の実施形態において、コンジュゲート化されたタンパク質（抗体または抗ＶＥＧＦ抗体である必要はない）を調製する方法が提供される。方法は、溶液中でタンパク質中の１つまたは複数のシステインを還元させて、キャップ除去されたタンパク質を形成させることを含む。１つまたは複数のシステインを還元させた後に、キャップ除去されたタンパク質を再酸化して、還元されたタンパク質中の少なくとも１つのジスルフィド連結を回復させると共に、タンパク質中の操作されたシステイン残基が遊離チオール形態に留まって、溶液中で再酸化されたキャップ除去されたタンパク質を形成することを確実にする。少なくとも１つの賦形剤が次に溶液に加えられる。賦形剤は、ポリマー誘導性のタンパク質沈殿を低減させる。賦形剤が加えられた後に、ポリマーが溶液に加えられ、これは操作されたシステイン残基において再酸化されたキャップ除去されたタンパク質にコンジュゲート化されて、コンジュゲート化されたタンパク質が形成される。

【0325】

一部の実施形態において、モル過剰の還元剤は、機能する任意の量に変更することができる。一部の実施形態において１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０×モル過剰の還元剤（全ての実施形態においてＴＣＥＰである必要はない）を用いることができる。一部の実施形態において、任意の抗体（治療用またはその他）を用いることができる。一部の実施形態において、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５×モル過剰なマレイミドバイオポリマーを用いることができる。一部の実施形態において、ポリマーに対して過剰なキャップ除去されたタンパク質が存在する。一部の実施形態において、還元されたタンパク質の量はポリマーの量よりも少ない。一部の実施形態において、還元されたタンパク質の量は、ポリマーの量の９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１０％、５％、４％、３％、２％、１％である。一部の実施形態において、ポリマーの１０～１５倍の量がタンパク質として使用される。一部の実施形態において、還元された抗体の量はポリマーの量よりも多い。一部の実施形態において、ポリマーの量は、還元された抗体の量よりも多い。

【0326】

一部の実施形態において、精製ステップは任意選択的である。

【0327】

一部の実施形態において、抗体コンジュゲートを製造する方法は、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体をホスホリルコリン含有ポリマーにコンジュゲート化することを含む。一部の実施形態において、方法は、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体をホスホリルコリン含有ポリマーにコンジュゲート化するステップを含む。抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は、組換えＤＮＡ技術を介して付加されたアミノ残基（ａｍｉｎｏ ｒｅｓｉｄｕｅ）を含む。一部の実施形態において、付加されるアミノ酸残基はシステイン残基である。一部の実施形態において、システイン残基は、抗体の可変領域の外側に付加される。システイン残基は、抗体の重鎖または軽鎖のいずれかに付加され得る。

【0328】

一部の実施形態において、ポリマーは、ホスホリルコリン含有ポリマーを含むまたはからなる。一部の実施形態において、ホスホリルコリン含有ポリマーは、マレイミド、ビニルスルホン、オルトピリジル－ジスルフィド、およびヨードアセトアミドからなる群から選択されるスルフヒドリル特異的反応基を含む。一部の実施形態において、ホスホリルコリン含有ポリマー上のスルフヒドリル特異的反応基は、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体上のシステイン残基と反応して抗体コンジュゲートを生成する。

【0329】

一部の実施形態において、コンジュゲート化されるタンパク質は、抗体、抗体タンパク質融合物、またはその結合性断片であることができる。一部の実施形態において、タンパク質は抗体ではなく、酵素、リガンド、受容体、もしくは他のタンパク質またはその突然変異体もしくはバリアントである。一部の実施形態において、ネイティブなタンパク質は、少なくとも１つのジスルフィド結合および少なくとも１つの非ネイティブのシステインを含有する。

【0330】

一部の実施形態において、賦形剤は酸または塩基であることができる。一部の実施形態において、賦形剤は、界面活性剤、糖、または荷電性アミノ酸である。一部の実施形態において、賦形剤は、ポリマーへのコンジュゲーションの間に溶液中にタンパク質を保つことを補助する。一部の実施形態において、賦形剤は、タンパク質を含有する溶液へのポリマーの添加の前に、タンパク質を含有する溶液に加えられる。

【0331】

一部の実施形態において、反応は、約ｐＨ５～約ｐＨ９の水性条件下で行われる。一部の実施形態において、反応は、６．０～８．５、６．５～８．０または７．０～７．５で行われる。

【0332】

一部の実施形態において、ポリマーは、２～３７℃でタンパク質にコンジュゲート化される。一部の実施形態において、コンジュゲーションは、０～４０℃、５～３５℃、１０～３０℃、および１５～２５℃で行われる。

【0333】

一部の実施形態において、本明細書に記載のコンジュゲート化されたタンパク質は、精製のため（コンジュゲート化されたものを非コンジュゲート化のものから取り出すため）にイオン交換媒体または疎水性相互作用クロマトグラフィーまたはアフィニティークロマトグラフィー媒体に接触させることができる。一部の実施形態において、イオン交換媒体、疎水性相互作用クロマトグラフィー、および／またはアフィニティークロマトグラフィー媒体は、コンジュゲート化されたタンパク質を遊離ポリマーから、および再酸化されたキャップ除去されたタンパク質から分離する。

【0334】

一部の実施形態において、本明細書に記載され、図１８に概要が述べられる方法は、溶解系の促進および／または維持が可能な賦形剤を伴う。一部の実施形態において、方法は、溶液が、相互作用が意図される２つの成分の溶解度を維持することを可能とする。これは、タンパク質およびポリマー、そして目標コンジュゲートの溶解度を含むことができる。一部の実施形態において、賦形剤アプローチなしでの問題は、タンパク質は可溶性であるが、バイオポリマーが加えられた場合に、溶液（例えば、タンパク質）の溶解度が低下し、タンパク質が衝突／沈殿して溶液の外に出るということであり得る。当然、タンパク質が衝突して外に出る場合、それはバイオポリマーと効率的にコンジュゲート化するために利用可能でない。そのため、バイオポリマーの存在下でタンパク質の溶解度を維持することで２つが連結してタンパク質コンジュゲート（または図１８に描写されるように、抗体コンジュゲート）を形成できるように賦形剤を用いることができる。これはまた、コンジュゲートの溶解度が維持されることを可能とする。

【0335】

一部の実施形態において、本明細書に開示されるポリマーは、以下：双性イオン、ホス
ホリルコリン、またはポリマー分岐点の中心をマレイミド官能基にブリッジするＰＥＧリンカーのうちの１つまたは複数を含むことができる。一部の実施形態において、本明細書において提供される任意のポリマーは、本明細書において提供される方法を介してタンパク質に付加することができる。

【0336】

一部の実施形態において、本明細書において提供される任意のタンパク質は、本明細書において提供される方法のうちの１つまたは複数を介して本明細書において提供されるポリマーのいずれかにコンジュゲート化することができる。

【0337】

一部の実施形態において、本明細書において提供される方法は、タンパク質および／または抗体コンジュゲートを製造および精製するためのより大きいスケールの処理を可能とする。一部の実施形態において、用いられる体積は、少なくとも１リットル、例えば１、１０、１００、１，０００、５，０００、１０，０００、リットルまたはより大きい。一部の実施形態において、製造および／または精製される抗体コンジュゲートの量は、０．１、１、１０、１００、１０００、またはより多くのグラムであることができる。

【0338】

一部の実施形態において、治療用タンパク質は、組換えＤＮＡ技術を介して付加されたシステイン残基を有する本明細書に記載の抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体のいずれかであってもよい。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体重鎖は、以下のＣＤＲ：ＣＤＲ_Ｈ１：ＧＹＤＦＴＨＹＧＭＮ（配列番号９）、ＣＤＲ_Ｈ２：ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＡＤＦＫＲ（配列番号１０）、およびＣＤＲ_Ｈ３：ＹＰＹＹＹＧＴＳＨＷＹＦＤＶ（配列番号１１）を有する。重鎖はまた、位置２２１（配列番号３における通りの連続的なカウントを介する）におけるスレオニン（Ｔ）を有することができる。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ軽鎖は、以下のＣＤＲ：ＣＤＲ_Ｌ１：ＳＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮ（配列番号１２）、ＣＤＲ_Ｌ２：ＦＴＳＳＬＨＳ（配列番号１３）、およびＣＤＲ_Ｌ３：ＱＱＹＳＴＶＰＷＴ（配列番号１４）を有する。抗ＶＥＧＦ－Ａ軽鎖はまた、Ｋａｂａｔ位置４におけるロイシン（Ｌ）を有することができる。

【0339】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体はＩｇＧ１である。一部の実施形態において、重鎖は、エフェクター機能をモジュレートするための１つまたは複数の突然変異を有する。一部の実施形態において、突然変異は、以下のアミノ酸位置（ＥＵナンバリング）：Ｅ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｇ２３６、Ｇ２３７、Ａ３２７、Ａ３３０、およびＰ３３１のうちの１つまたは複数に対するものである。一部の実施形態において、突然変異は、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ａ３２７Ｇ、Ａ３３０ＳおよびＰ３３１Ｓ（ＥＵナンバリング）からなる群から選択される。一部の実施形態において、突然変異は、（ＥＵナンバリング）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５ＡおよびＧ２３７Ａである。

【0340】

一部の実施形態において、組換えＤＮＡ技術を介して治療用タンパク質に付加されたシステイン残基は、Ｃｙｓ－Ｃｙｓジスルフィド結合対合に関与するべきではない。これに関して、治療用タンパク質は二量体であってもよい。そのため、例えば、インタクトな抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体は２つの軽鎖および２つの重鎖を有する。Ｃｙｓ残基が例えば重鎖に導入される場合、インタクトな抗体は、同一の位置において２つのそのような導入されたシステインを有し、これらのシステイン残基が鎖内ジスルフィド結合を形成する可能性が存在する。導入されたシステイン残基がＣｙｓ－Ｃｙｓジスルフィド結合を形成するまたはその傾向を有する場合、その導入されたＣｙｓ残基はコンジュゲーションのために有用ではない。鎖内ジスルフィド対合を生じさせる重鎖および軽鎖中の位置を回避する方法は当該技術分野において公知である。例えば、特許文献３９を参照。

【0341】

一部の実施形態において、組換えＤＮＡ技術を介して導入されたシステイン残基は、（
ＥＵナンバリング）Ｑ３４７ＣおよびＬ４４３Ｃからなる群から選択される。一部の実施形態において、システイン残基はＬ４４３Ｃ（ＥＵナンバリング、または配列番号１中の４４９Ｃ）である。一部の実施形態において、重鎖抗体（ｔｈｅ ｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎ ｔｈｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ）は配列番号１に記載のアミノ酸配列を有し、かつ軽鎖は配列番号２のアミノ酸配列を有する。

【0342】

一部の実施形態において、スルフヒドリル（ｓｕｌｆｈｙｄｒａｌ）特異的反応基はマレイミドである。

【0343】

一部の実施形態において、半減期延長部分は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、分枝状ＰＥＧ、ＰｏｌｙＰＥＧ（登録商標）（Ｗａｒｗｉｃｋ Ｅｆｆｅｃｔ Ｐｏｌｙｍｅｒｓ；Ｃｏｖｅｎｔｒｙ、ＵＫ）、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、デンプン、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、ヒドロキシアルキルデンプン（ＨＡＳ）、炭水化物、多糖、プルラン、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、デキストラン、カルボキシメチル－デキストラン、ポリアルキレン酸化物（ＰＡＯ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリオキサゾリン、ポリアクリロイルモルホリン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、ポリビニルピロリドン、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリエチレン－コ－マレイン酸無水物、ポリスチレン－コ－マレイン酸無水物、ポリ（１－ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルマール）（ＰＨＦ）、双性イオンポリマー、ホスホリルコリン含有ポリマーおよび２－メタクリロイルオキシ－２’－エチルトリメチルアンモニウムホスフェート（ＭＰＣ）を含むポリマーからなる群から選択される。

【0344】

一部の実施形態において、半減期延長部分は双性イオンポリマーである。一部の実施形態において、双性イオンは、ホスホリルコリン、すなわちホスホリルコリン含有ポリマーである。一部の実施形態において、ポリマーはＭＰＣ単位から構成される。

【0345】

一部の実施形態において、ＭＰＣポリマーは、３個またはより多くのアームを有する。一部の実施形態において、ＭＰＣポリマーは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２個のアームを有する。一部の実施形態において、ＭＰＣポリマーは、３、６、または９個のアームを有する。一部の実施形態において、ＭＰＣポリマーは９個のアームを有する。一部の実施形態において、ポリマーは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、またはより多くのポリマー開始部位を含む開始剤を用いて合成される。

【0346】

一部の実施形態において、ＭＰＣポリマーは約３００，０００～１，７５０，０００Ｄａの分子量を有する。一部の実施形態において、ＭＰＣポリマーは約５００，０００～１，０００，０００Ｄａまたは約６００，０００～９００，０００Ｄａの分子量を有する。

【0347】

一部の実施形態において、治療用タンパク質－半減期延長部分コンジュゲートを調製する方法は、治療用タンパク質をチオール還元剤と、還元されたシステインスルフヒドリル基を生成する条件下で接触させる追加のステップを有する。上記で議論されたように、組換えＤＮＡ技術を介して付加されたシステイン残基は対合していない、すなわち、Ｃｙｓ－Ｃｙｓ鎖内ジスルフィド結合に関与しない、またはそのような結合に実質的に関与しないことが好ましい。しかしながら、そのようなＣｙｓ－Ｃｙｓジスルフィド結合に関与せず、かつコンジュゲーションのために遊離であるＣｙｓ残基は、培養培地中の遊離のシステインと反応してジスルフィド付加体を形成することが公知である。例えば、特許文献４０を参照。そのように誘導体化されたシステインはコンジュゲーションのために利用可能ではない。新たに付加されたシステインをジスルフィド付加体から遊離させるために、精製後のタンパク質は、還元剤、例えば、ジチオトレイトールで処理される。しかしながら、還元剤でのそのような処理は、その多くが鎖間および鎖内Ｃｙｓ－Ｃｙｓジスルフィド結合に関与するネイティブなシステインを含めて、治療用タンパク質中のシステイン残基の全てを還元させる。ネイティブなＣｙｓ－Ｃｙｓジスルフィドは、タンパク質の安定性および活性に対して一般に決定的なものであり、再形成されるべきである。一部の実施形態において、全てのネイティブな（例えば、鎖間および鎖内）Ｃｙｓ－Ｃｙｓジスルフィドが再形成される。

【0348】

ネイティブな鎖間および鎖内ジスルフィド残基を再形成させるために、システインジスルフィド付加体を除去するための還元後に、治療用タンパク質は、規定される時間的期間、例えば、終夜、酸化条件および／または酸化剤に曝露される。一部の実施形態において、終夜の周囲空気曝露を使用して、ネイティブなジスルフィド結合の再形成を達成することができる。一部の実施形態において、ネイティブなジスルフィドを回復させるために酸化剤が用いられる。一部の実施形態において、酸化剤（ｏｘｉｄｉｎｇ ａｇｅｎｔ）は、水性（ａｃｑｕｅｏｕｓ）ＣｕＳＯ４およびデヒドロアスコルビン酸（ＤＨＡＡ）からなる群から選択される。一部の実施形態において、酸化剤はＤＨＡＡである。一部の実施形態において、使用されるＤＨＡＡの範囲は５～３０当量の範囲内である。一部の実施形態において、範囲は１０～２０当量である。一部の実施形態において、範囲は１５当量である。

【0349】

一部の実施形態において、チオール還元剤は、トリス［２－カルボキシエチル（ｃａｒｂｏｘｙｅｈｔｙｌ）］ホスフィンヒドロクロリド（ＴＣＥＰ）、ジチオトレイトール（ＤＴＴ）、ジチオエリトリトール（ＤＴＥ）、水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ_４）、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＣＮＢＨ_３）、β－メルカプトエタノール（ＢＭＥ）、塩酸システインおよびシステインからなる群から選択される。一部の実施形態において、チオール還元剤はＴＣＥＰである。

【0350】

一部の実施形態において、チオール還元剤濃度は、治療用タンパク質濃度と比べて１～１００倍モル過剰である。一部の実施形態において、チオール還元剤濃度は、治療用タンパク質濃度と比べて２０～５０倍モル過剰である。一部の実施形態において、チオール還元剤は、治療用タンパク質とのインキュベーション後に治療用タンパク質の酸化前に除去される。

【0351】

一部の実施形態において、治療用タンパク質を半減期延長部分にコンジュゲート化する方法は、コンジュゲーション後に治療用タンパク質コンジュゲートを精製するさらなるステップを有する。一部の実施形態において、治療用タンパク質コンジュゲートは、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、およびアフィニティークロマトグラフィーまたはこれらの組合せからなる群から選択される技術を使用して精製される。

【0352】

一部の実施形態において、治療用タンパク質コンジュゲートは、非コンジュゲート化治療用タンパク質と比べて少なくとも２０％の生物学的活性を保持する。一部の実施形態において、治療用タンパク質コンジュゲートは、非コンジュゲート化治療用タンパク質と比べて少なくとも５０％の生物学的活性を保持する。一部の実施形態において、治療用タンパク質コンジュゲートは、ネイティブな治療用タンパク質と比べて少なくとも９０％の生物学的活性を保持する。

【0353】

一部の実施形態において、治療用タンパク質コンジュゲートは、非コンジュゲート化治療用タンパク質と比べて増加された半減期を有する。一部の実施形態において、治療用タンパク質コンジュゲートは、非コンジュゲート化治療用タンパク質と比べて半減期における少なくとも１．５倍の増加を有する。一部の実施形態において、治療用タンパク質コン
ジュゲートは、非コンジュゲート化治療用タンパク質と比べて半減期における少なくとも５倍の増加を有する。

【0354】

一部の実施形態において、治療用タンパク質を半減期延長部分にコンジュゲート化する方法の双性イオンポリマーは、双性イオン（ｚｗｉｔｔｅｒｉｏｎｃ）基を有するラジカル重合可能なモノマーであり、かつ方法は、重合媒体中の遊離のラジカル重合可能な双性イオンモノマーを重合させてポリマーを提供するさらなるステップを有し、媒体は、ラジカル重合可能な双性イオンモノマー；遷移金属触媒Ｍ_ｔ（^ｑ－１）^＋（式中、Ｍ_ｔは遷移金属であり、ｑは金属のより高い酸化状態であり、ｑ－１は金属のより低い酸化状態であり、金属触媒は、Ｍｔ（^ｑ－１）^＋Ｘ’（_ｑ－１）（式中、Ｘ’は対イオンもしくは基である）の形態の塩として供給され、または遷移金属触媒は、そのより高い酸化状態Ｍ_ｔ ^ｑ＋Ｘ’_ｑにある不活性の金属塩を、遷移金属を酸化された不活性の状態から還元された活性の状態に還元することができる還元剤と共に提供することによりインサイチューで供給される）；配位子；および開始剤を含む。

【0355】

ＡＴＲＰ遷移金属触媒として機能するために、遷移金属は、１つの電子により分離される少なくとも２つの容易にアクセス可能な酸化状態、より高い酸化状態およびより低い酸化状態を有するべきである。ＡＴＲＰにおいて、可逆的なレドックス反応は、より高い酸化状態およびより低い酸化状態の間の遷移金属触媒サイクリングを結果としてもたらすと同時に、ポリマー鎖は成長鎖末端および休止（ｄｏｒｍａｎｔ）鎖末端の間でサイクルする。例えば、特許文献４１を参照。

【0356】

一部の実施形態において、ラジカル重合可能な双性イオンモノマーは、

【0357】

【化17】

【0358】

（式中、Ｒ１はＨまたはＣ_１～６アルキルであり、ＺＷは双性イオンであり、ｎは１～６の整数である）からなる群から選択される。

【0359】

一部の実施形態において、ラジカル重合可能なモノマーは、

【0360】

【化18】

【0361】

（式中、Ｒ１はＨまたはＣ_１～６アルキルであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は同じまたは異なり、ＨまたはＣ_１～４アルキルであり、ＸおよびＹは同じまたは異なり、１～６の整数である）である。一部の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はそれぞれメチルであり、ＸおよびＹはそれぞれ２である。

【0362】

一部の実施形態において、ラジカル重合可能なモノマーは、

【0363】

【化19】

【0364】

（式中、Ｒ１はＨまたはＣ_１～６アルキルであり、Ｒ２およびＲ３は同じまたは異なり、ＨまたはＣ_１～４アルキルであり、Ｒ４はＰＯ_４－、ＳＯ_３－またはＣＯ_２－であり、ＸおよびＹは同じまたは異なり、１～６の整数である）である。一部の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はメチルであり、Ｒ４はＰＯ_４－であり、ＸおよびＹはそれぞれ２である。

【0365】

一部の実施形態において、モノマーは、

【0366】

【化20】

【0367】

（式中、Ｒ１はＨまたはＣ_１～６アルキルであり、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は同じまたは異なり、ＨまたはＣ_１～４アルキルであり、Ｒ５は、ＰＯ_４－、ＳＯ_３－またはＣＯ_２－であり、ＸおよびＹは同じまたは異なり、１～６の整数である）である。一部の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４はメチルであり、Ｒ５はＰＯ_４－であり、ＸおよびＹは２である。

【0368】

一部の実施形態において、遷移金属Ｍｔは、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｒｕ、Ｃｒ、Ｍｏ、Ｗ、Ｍｎ、Ｒｈ、Ｒｅ、Ｃｏ、Ｖ、Ｚｎ、Ａｕ、およびＡｇからなる群から選択される。一部の実施形態において、金属触媒は、形態Ｍｔ（^ｑ－１）^＋Ｘ’（_ｑ－１）の塩として供給される。Ｍ_ｔ（^ｑ－１）^＋は、Ｃｕ^１＋、Ｆｅ^２＋、Ｒｕ^２＋、Ｃｒ^２＋、Ｍｏ^２＋、Ｗ^２＋、Ｍｎ^３＋、Ｒｈ^３＋、Ｒｅ^２＋、Ｃｏ^＋、Ｖ^２＋、Ｚｎ^＋、Ａｕ^＋、およびＡｇ^＋からなる群から選択され、かつＸ’は、ハロゲン、Ｃ_１～６アルコキシ、（ＳＯ_４）_１／_２、（ＰＯ_４）_１／_３、（Ｒ７ＰＯ_４）_１／_２、（Ｒ７_２ＰＯ_４）、トリフレート、ヘキサフルオロホスフェート（ｈｅｘａｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、メタンスルホネート、アリールスルホネート、ＣＮおよびＲ７ＣＯ_２からなる群から選択され、Ｒ７は、Ｈ、またはハロゲンで１～５回置換されていてもよい直鎖状もしくは分枝状Ｃ_１～６アルキル基である。一部の実施形態において、Ｍ_ｔ（^ｑ－１）^＋はＣｕ^１＋であり、かつＸ’はＢｒである。

【0369】

一部の実施形態において、Ｍ_ｔ（^ｑ－１）^＋はインサイチューで供給される。一部の実施形態において、Ｍ_ｔ ^ｑ＋Ｘ_ｑはＣｕＢｒ_２である。一部の実施形態において、還元剤は無機化合物である。一部の実施形態において、還元剤は、低い酸化レベルの硫黄化合物、亜硫酸水素ナトリウム、金属イオンを含む無機塩、金属、ヒドラジン水和物およびそのような化合物の誘導体からなる群から選択される。一部の実施形態において、還元剤は金属である。一部の実施形態において、還元剤はＣｕ^０である。

【0370】

一部の実施形態において、還元剤は有機化合物である。一部の実施形態において、有機化合物は、アルキルチオール、メルカプトエタノール、または容易にエノール化され得るカルボニル化合物、アスコルビン酸、アセチルアセトネート、カンファースルホン酸（ｃａｍｐｈｏｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、ヒドロキシアセトン、還元糖、単糖、グルコ
ース、アルデヒド、およびそのような有機化合物の誘導体からなる群から選択される。

【0371】

一部の実施形態において、配位子は、２，２’－ビピリジン、４，４’－ジ－５－ノニル－２，２’－ビピリジン、４，４－ジノニル－２，２’－ジピリジル、４，４’，４’’－トリス（５－ノニル）－２，２’：６’，２’’－テルピリジン、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，Ｎ’’－ペンタメチルジエチレントリアミン、１，１，４，７，１０，１０－ヘキサメチルトリエチレンテトラミン、トリス（２－ジメチルアミノエチル）アミン、Ｎ，Ｎ－ビス（２－ピリジルメチル）オクタデシルアミン、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラ［（２－ピリジル（ｐｙｒｉｄａｌ））メチル］エチレンジアミン、トリス［（２－ピリジル）メチル］アミン、トリス（２－アミノエチル）アミン、トリス（２－ビス（３－ブトキシ－３－オキソプロピル）アミノエチル）アミン、トリス（２－ビス（３－（２－エチルヘキシルオキシ（ｅｔｈｙｌｈｅｘｏｘｙ））－３－オキソプロピル）アミノエチル）アミンおよびトリス（２－ビス（３－ドデコキシ－３－オキソプロピル）アミノエチル）アミンからなる群から選択される。一部の実施形態において、配位子は２，２’－ビピリジンである。

【0372】

一部の実施形態において、開始剤は、構造：

【0373】

【化21】

【0374】

（式中、Ｒ１は求核性反応基であり、Ｒ２はリンカーを含み、かつＲ３は、構造

【0375】

【化22】

【0376】

（式中、Ｒ４およびＲ５は、同じまたは異なり、アルキル、置換されたアルキル、アルキレン、アルコキシ、カルボキシアルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、環式アルキルエーテル、アルケニル、アルケニレン、アルキニル、アルキニレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキレン、アリール、アリーレン、アリーレン－オキシ、ヘテロアリール、アミノ、アミドまたはこれらの任意の組合せからなる群から選択され；Ｚは、ハロゲン、－ＯＲ（式中、Ｒは、－Ｈ、メチル、エチル、プロピル、もしくはイソプロピルである）、－ＳＣＮまたは－ＮＣＳである）を有するポリマー合成開始剤部分を含み；かつｓは１～２０の整数である）を有する。

【0377】

一部の実施形態において、ＺはＢｒであり、かつＲ４およびＲ５はそれぞれメチルである。一部の実施形態において、Ｒ１は、－ＮＨ_２、－ＯＨ、および－ＳＨからなる群から
選択される。

【0378】

一部の実施形態において、Ｒ２は、アルキル、置換されたアルキル、アルキレン、アルコキシ、カルボキシアルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、環式アルキルエーテル、アルケニル、アルケニレン、アルキニル、アルキニレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキレン、アリール、アリーレン、アリーレン－オキシ、ヘテロアリール、アミノ、アミドまたはこれらの任意の組合せである。一部の実施形態において、Ｒ２は、

【0379】

【化23】

【0380】

（式中、ＸおよびＹは同じまたは異なり、１～２０の整数である）である。一部の実施形態において、ＸおよびＹはそれぞれ４である。

【0381】

一部の実施形態において、Ｒ３は、

【0382】

【化24】

【0383】

（式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は同じまたは異なり、

【0384】

【化25】

【0385】

（式中、Ｚは、－ＯＲ（式中、Ｒは、－Ｈ、メチル、エチル、プロピル、またはイソプロピルである）、－ＳＣＮ、－ＮＣＳ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒまたは－Ｉである）からなる群から選択される。一部の実施形態において、Ｚは－Ｂｒであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８はそれぞれ、

【0386】

【化26】

【0387】

である。

【0388】

一部の実施形態において、開始剤は、構造：

【0389】

【化27】

【0390】

（式中、ＡおよびＢは同じまたは異なり、２～１２の整数であり、Ｚは任意のハロゲン化物、例えばＢｒである）を有する。一部の実施形態において、ＡおよびＢはそれぞれ４
である。

【0391】

一部の実施形態において、方法は、ポリマーをマレイミド試薬と反応させて、末端マレイミドを有するポリマーを提供するステップをさらに有する。一部の実施形態において、マレイミド化合物は、

【0392】

【化28】

【0393】

である。

【0394】

処置方法
一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体（およびそのコンジュゲート）、ならびに抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）からなる群から選択される治療用タンパク質を投与するステップを有する眼疾患の処置または予防方法が提示される。一部の実施形態において、本明細書において提供される抗体または抗体コンジュゲートまたはタンパク質コンジュゲートの任意の１つまたは複数を眼疾患の処置および／または予防として使用することができる。方法は、対象に本明細書において提供される抗体または抗体コンジュゲートの任意の１つまたは複数を投与することを含む。

【0395】

一部の実施形態において、眼疾患の処置または予防方法が提供される。方法は、有効用量の本明細書に記載の抗体および／または抗体コンジュゲートおよび／またはタンパク質コンジュゲートのいずれかをそれを必要とする対象に投与することを含む。一部の実施形態において、疾患は加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）または糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）であることができる。一部の実施形態において、疾患は滲出型ＡＭＤであることができる。一部の実施形態において、眼障害は、高度な色素上皮剥離（ＰＥＤ）を有しない滲出型ＡＭＤである。一部の実施形態において、対象は、対象の目におけるベースライン中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）が５００ミクロンまたはより大きい場合に、高度なＰＥＤを有する。

【0396】

一部の実施形態において、眼疾患は、糖尿病網膜症、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、病的近視、フォンヒッペル－リンドウ病、目のヒストプラズマ症、中心網膜静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、分枝中心網膜静脈閉塞症（ＢＲＶＯ）、角膜血管新生、網膜血管新生、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、結膜下出血、および高血圧性網膜症からなる群の１つまたは複数から選択される。一部の実施形態において、眼疾患は糖尿病網膜症である。

【0397】

一部の実施形態において、抗体または抗体コンジュゲートまたはタンパク質コンジュゲートは、月に１回以下の頻度で投与される。一部の実施形態において、抗体またはそのコンジュゲートは、月に２回または週毎に投与される。一部の実施形態において、抗体またはそのコンジュゲートは、２か月毎に１回、３か月毎に１回、４か月毎に１回、５か月毎に１回、６か月毎に１回、７か月毎に１回、８か月毎に１回、９か月毎に１回、１０か月毎に１回、１１か月毎に１回、または１２か月毎に１回投与される。

【0398】

一部の実施形態において、本明細書において提供される組成物の１つまたは複数は、滲出（増殖）型の加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）の処置のための抗ＶＥＧＦ剤の硝子体内注射の使用からの高い処置負担の帰結における低減を可能とすることができる。滲出型ＡＭＤを有する患者の現実世界のアウトカムは、フェーズ３臨床研究、例えばＬｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標）（ラニビズマブ）を用いたＭＡＲＩＮＡおよびＡＮＣＨＯＲ研究ならびにＥｙｌｅａ（登録商標）（アフリベルセプト）を用いたＶＩＥＷ １およびＶＩＥＷ ２研究において実証された臨床アウトカムに後れを取る。より低い頻度、およびしたがって患者にとってより忍容性のプロファイルで投与できるようなより長い眼滞留時間を有する抗ＶＥＧＦ治療剤は、より多くの患者のためにフェーズ３臨床アウトカムにより近い現実世界のアウトカムをもたらすことができる。

【0399】

一部の実施形態において、抗体コンジュゲートおよび抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体、ならびに抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート（例えば、アフリベルセプトバイオポリマーコンジュゲート）を含めて、本明細書に記載の化合物は、基礎または非増殖性糖尿病網膜症を有するがほとんどまたは全く視覚障害を有しない患者を処置するために使用される。一部の実施形態において、そのような患者は、月に１回よりも少なく硝子体内注射を介して投薬される。一部の実施形態において、そのような患者は、年に６回投薬される。一部の実施形態において、そのような患者（ｐａｔｅｉｎｔｓ）は年に４回以下で投薬される。一部の実施形態において、患者は年に３回以下で投薬される。一部の実施形態において、患者は年に２回以下で投薬される。一部の実施形態において、患者は年に１回以下で投薬される。一部の実施形態において、対象は、抗体または抗体コンジュゲートまたはタンパク質コンジュゲートを硝子体内注射を介して与えられる。

【0400】

本明細書に記載の治療用タンパク質（例えば、抗体および抗体コンジュゲートの両方）は、患者におけるインビボでのそのようなポリペプチドの発現、すなわち、遺伝子治療により用いられ得る。

【0401】

核酸（任意選択的にベクター中に含有される）を患者の細胞に入れる２つの主要なアプローチ：インビボおよびエクスビボがある。インビボ送達のために核酸は、通常は治療用タンパク質が要求される、すなわち、治療用タンパク質の生物学的活性が必要とされる部位において、患者に直接的に注射される。エクスビボ処置のために、患者の細胞が取り出され、核酸がこれらの単離された細胞に導入され、改変された細胞は、直接的にまたは、例えば、患者に移植される多孔性膜内に被包されて、患者に投与される（例えば、特許文献４２および特許文献４３を参照）。生存細胞に核酸を導入するために利用可能な様々な技術がある。技術は、核酸が培養細胞にインビトロで移入されるのか、それとも意図される宿主の細胞にインビボで移入されるのかに依存して変動する。インビトロでの哺乳動物細胞への核酸の移入のために好適な技術としては、リポソーム、エレクトロポレーション、微量注射、形質導入、細胞融合、ＤＥＡＥ－デキストラン、リン酸カルシウム沈殿法などの使用が挙げられる。形質導入は、細胞受容体との複製欠陥性組換えウイルス（レトロウイルスを含む）粒子の会合、続いて粒子により含有された核酸の細胞への導入を伴う。遺伝子のエクスビボ送達のための一般的に使用されるベクターはレトロウイルスである。

【0402】

一部の実施形態において、インビボ核酸移入技術としては、ウイルスまたは非ウイルスベクター（例えばアデノウイルス、レンチウイルス、単純ヘルペスＩウイルス、またはアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ））を用いるトランスフェクションおよび脂質ベースのシステム（遺伝子の脂質媒介性移入のための有用な脂質は、例えば、ＤＯＴＭＡ、ＤＯＰＥ、およびＤＣ－Ｃｈｏｌである；例えば、非特許文献３０を参照）が挙げられる。一部の実施形態において、遺伝子治療における使用のためのベクターはウイルスであり、ウイルスは
、アデノウイルス、ＡＡＶ、レンチウイルス、またはレトロウイルスを含む。ウイルスベクター、例えばレトロウイルスベクターは、少なくとも１つの転写プロモーター／エンハンサーもしくは遺伝子座定義エレメント、または他の手段、例えば選択的スプライシング、核ＲＮＡ輸送、もしくはメッセンジャーの翻訳後修飾により遺伝子発現を制御する他のエレメントを含む。追加的に、ウイルスベクター、例えばレトロウイルスベクターは、治療用タンパク質をコードする遺伝子の存在下で転写された場合にそれに作動可能に連結され、翻訳開始配列として作用する核酸分子を含む。そのようなベクター構築物はまた、パッケージングシグナル、長鎖末端反復（ＬＴＲ）またはその部分、ならびに使用されるウイルスに対して適切な正および負鎖プライマー結合性部位（これらがウイルスベクター中に既に存在しない場合）を含む。追加的に、そのようなベクターは、典型的には、それが置かれる宿主細胞からのプロポリペプチドの分泌のためのシグナル配列を含む。一部の実施形態において、この目的のためのシグナル配列は哺乳動物シグナル配列である。一部の実施形態において、シグナルは、治療用タンパク質のネイティブなシグナル配列である。任意選択的に、ベクター構築物はまた、ポリアデニル化を指令するシグナルの他に、１つまたは複数の制限部位および翻訳終結配列を含んでもよい。例として、そのようなベクターは、典型的には、５’ＬＴＲ、ｔＲＮＡ結合性部位、パッケージングシグナル、第２鎖ＤＮＡ合成の起点、および３’ＬＴＲまたはこれらの部分を含む。非ウイルス性の他のベクター、例えば陽イオン性脂質、ポリリジン、およびデンドリマーを使用することができる。

【0403】

一部の状況において、標的細胞を標的化する剤、例えば細胞表面膜タンパク質または標的細胞に特異的な抗体、標的細胞上の受容体のリガンドなどと共に核酸供給源を提供することが望ましい。リポソームが用いられる場合、エンドサイトーシスと関連付けられる細胞表面膜タンパク質に結合するタンパク質が標的化のためおよび／または取込みを促すために使用されてもよく、これは例えば、特定の細胞種に対してトロピズムを有するカプシドタンパク質またはその断片、サイクリングにおいて内部移行を起こすタンパク質に対する抗体、および細胞内局在性を標的化し、細胞内半減期を増強するタンパク質である。受容体媒介性エンドサイトーシスの技術は、例えば、非特許文献３１；および非特許文献３２により記載される。現在公知の遺伝子マーキングおよび遺伝子治療プロトコールの総説について、非特許文献３３を参照。特許文献４４およびそれにおいて参照される参考文献も参照。

【0404】

好適な遺伝子治療ならびにレトロウイルス粒子および構造タンパク質を製造する方法は、例えば、特許文献４５に見出され得る。

【0405】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ－Ａ抗体からなる群から選択される治療用タンパク質をコードする核酸分子が投与される、哺乳動物における眼疾患の処置または予防方法が提示される。

【0406】

一部の実施形態において、重鎖は配列番号１に記載のものであり、かつ軽鎖は配列番号２に記載のものである。一部の実施形態において、核酸分子は、エクスビボ遺伝子治療を介して投与される。

【0407】

本開示の方法における使用のために好適な抗体コンジュゲートを調製する方法は、例えば、特許文献４６（参照により全体が本明細書に組み込まれる）において見出される。

【0408】

医薬組成物
治療用タンパク質は、薬学的に許容される賦形剤と共に医薬組成物に組み込むことができる。経口投与のために適合された医薬組成物は、別々の単位、例えばカプセルとして、溶液、シロップまたは懸濁液として（水性もしくは非水性液；または食用フォームもしく
はホイップとして；またはエマルションとして）提供されてもよい。錠剤または硬質ゼラチンカプセルのための好適な賦形剤としては、ラクトース、トウモロコシデンプンまたはその誘導体、ステアリン酸またはその塩が挙げられる。軟質ゼラチンカプセルとの使用のための好適な賦形剤としては、例えば植物油、ワックス、脂肪、半固体、または液体ポリオールなどが挙げられる。溶液およびシロップの調製のために、使用され得る賦形剤としては、例えば水、ポリオールおよび糖が挙げられる。懸濁液の調製のために、油（例えば植物油）を使用して水中油または油中水懸濁液を提供することができる。

【0409】

医薬組成物は経鼻投与のために適合させることができ、その場合、賦形剤は固体であり、例えば２０～５００ミクロンの範囲内の粒子サイズを有する粗い粉末を含み、これは嗅ぎタバコが摂取される方式で、すなわち、鼻の近くに保持された粉末の容器からの鼻通過を通じた急速な吸入により、投与される。経鼻スプレーとしてまたは点鼻薬としての投与のための、賦形剤が液体である好適な組成物としては、活性成分の水性または油性溶液が挙げられる。吸入による投与のために適合された医薬組成物としては、様々な種類の計量された用量の加圧エアロゾル、ネブライザーまたは空気吸入器の手段により生成され得る微粒子ダストまたはミストが挙げられる。

【0410】

非経口投与のために適合された医薬組成物としては、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤および製剤を意図されるレシピエントの血液と実質的に等張とする溶質を含有してもよい水性および非水性無菌注射溶液；ならびに懸濁化剤および増稠剤を含んでもよい水性および非水性無菌懸濁液が挙げられる。注射可能な溶液のために使用され得る賦形剤としては、例えば、水、アルコール、ポリオール、グリセリンおよび植物油が挙げられる。組成物は、単位用量または複数用量容器、例えば密封されたアンプルおよびバイアル中で提供されてもよく、使用の直前に無菌の液体担体（ｌｉｑｕｉｄ ｃａｒｒｉｅｄ）、例えば注射用の水の添加のみを要求するフリーズドライ（凍結乾燥）状態で貯蔵されてもよい。即席注射溶液および懸濁液が無菌粉末、顆粒および錠剤から調製されてもよい。医薬組成物は実質的に等張であることができ、これは約２５０～４００ｍＯｓｍ／ｋｇ水の重量オスモル濃度を含意する。

【0411】

医薬組成物は、保存剤、可溶化剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、臭気剤、塩（物質自体が薬学的に許容される塩の形態で提供されてもよい）、緩衝剤、コーティング剤または抗酸化剤を含有してもよい。それらはまた、物質に加えて治療活性剤を含有してもよい。医薬組成物は、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて用いられてもよい。そのような賦形剤としては、食塩水、緩衝食塩水（例えばリン酸緩衝食塩水）、デキストロース、リポソーム、水、グリセロール、エタノールおよびこれらの組合せを挙げることができるがこれらに限定されない。

【0412】

抗体およびそれらを含有する医薬組成物は、患者の疾患の処置または予防のための有効なレジームにおいて投与されてもよく、該レジームとしては、例えば、経口、硝子体内、静脈内、皮下、筋肉内、骨内、鼻腔内、外用、腹腔内、および病巣内投与による投与が挙げられる。非経口注入は、特には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与または経路を含む。治療においてまたは予防として、活性剤は、注射可能な組成物、例えば無菌水性分散体として個体に投与されてもよい。一部の実施形態において、剤は等張または実質的に等張である。

【0413】

哺乳動物、特にはヒトへの投与のために、活性剤の投薬量は０．０１ｍｇ／ｋｇ体重、典型的には１ｍｇ／ｋｇ程度であることが予測される。医師は、個体のために最も好適な実際の投薬量を決定することができ、これは、個体の年齢、体重、性別および応答、処置されている疾患または障害、ならびに処置されている個体の年齢および条件を含む要因に依存する。上記の投薬量は平均的な症例の例示である。当然、より高いまたはより低い投
薬量にメリットがある事例が存在し得る。一部の実施形態において、投薬量は、０．５～２０ｍｇ／目、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、または１９ｍｇであることができる。

【0414】

この投薬量は、適切な頻度（例えば、週毎、隔週毎、月毎、２か月毎に１回、年に４回、年に２回、年毎）で繰り返されてもよい。副作用が発生する場合、投薬の量および／または頻度は、通常の臨床プラクティスにしたがって低減され得る。１つの実施形態において、医薬組成物は１～３０日毎に１回投与されてもよい。１つの実施形態において、医薬組成物は３０日毎に２回投与されてもよい。１つの実施形態において、医薬組成物は週に１回投与されてもよい。

【0415】

抗体および医薬組成物は、単独でまたは他の化合物、例えば治療用化合物もしくは分子、例えば抗炎症性薬物、鎮痛剤もしくは抗生物質と組み合わせて用いることができる。他の化合物とのそのような投与は、同時、別々または逐次的であってもよい。成分は、適宜に使用説明書を含んでもよいキットの形態で調製されてもよい。

【0416】

本明細書に開示される抗体および医薬組成物は、疾患、特には本明細書に記載の眼疾患または状態の処置または予防のために使用することができる。

【0417】

抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、または抗ＶＥＧＦタンパク質コンジュゲート、およびそれらを含有する医薬組成物は、眼、眼内、および／もしくは硝子体内注射、ならびに／または強膜近傍注射、ならびに／または網膜下注射ならびに／またはテノン嚢下注射、ならびに／または上脈絡膜（ｓｕｐｅｒｃｈｏｒｏｉｄａｌ）注射ならびに／または点眼剤および／もしくは軟膏の形態での結膜下および／もしくは外用投与のために製剤化されてもよく、それらにより投与されてもよい。そのような抗体および組成物は、様々な方法により、例えば、硝子体への化合物の遅い放出を可能とするデバイスおよび／またはデポーとして硝子体内に、送達することができ、これには、参考文献、例えば非特許文献３４に記載のものが含まれる。一例において、デバイスは、ミニポンプおよび／またはマトリックスおよび／または受動拡散システムおよび／または長期化された時間的期間にわたり化合物を放出する被包された細胞の形態であってもよい（非特許文献３４）。

【0418】

眼、眼内または硝子体内投与用の製剤は、当該技術分野において公知の方法によりおよび成分を使用して調製することができる。効率的な処置のための主な要求は目の適切な透過である。薬物が外用で送達され得る目の前方の疾患とは異なり、網膜疾患はより部位特異的なアプローチを要求する。点眼剤および軟膏は目の背後にほとんど透過せず、血液眼関門は、全身投与された薬物の眼組織への透過を妨げる。よって、網膜疾患、例えばＡＭＤおよびＣＮＶを処置するための薬物送達のために選択される方法は通常、直接的な硝子体内注射である。硝子体内注射は、通常、患者の状態、ならびに送達される薬物の特性および半減期に依存する間隔で繰り返される。

【0419】

治療用抗体および関連するコンジュゲートは、一般に、無菌アクセスポートを有する容器、例えば、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針により貫通可能なストッパーを有するバイアル中に置かれる。そのような組成物はまた、事前充填シリンジの形態で供給されてもよい。

【0420】

「安定な」製剤は、タンパク質または製剤中で他の半減期延長部分のポリマーにコンジュゲート化されたタンパク質が貯蔵時にその物理的安定性および／または化学的安定性および／または生物学的活性を本質的に保持する製剤である。「安定な」により、凝集および／または脱アミドを含めて、不安定性の徴候をほとんどまたは全く呈しない製剤もまた意味される。例えば、提供される製剤は、５～８℃の温度で指し示されるように貯蔵された場合に、少なくとも２年間安定なままであってもよい。本開示の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートのための好適な製剤は、例えば、特許文献４６（参照により全体が本明細書に組み込まれる）において記載されている。

【0421】

タンパク質の安定性を測定するための様々な分析技術が当該技術分野において利用可能であり、例えば、非特許文献３５および非特許文献３６において総説されている。安定性は、選択された温度において選択された期間にわたり測定することができる。一部の実施形態において、製剤の貯蔵は、少なくとも６か月、１２か月、１２～１８か月、または２もしくはより多くの年にわたり安定である。

【0422】

タンパク質、例えば抗体またはその断片は、色および／もしくは清澄度の視覚的検査において、またはＵＶ光散乱もしくはサイズ排除クロマトグラフィーによる測定で、凝集、沈殿、脱アミドおよび／または変性の徴候を示さない場合に、薬学的製剤中で「その物理的安定性を保持する」。

【0423】

タンパク質は、所与の時点における化学的安定性が、タンパク質がその生物学的活性を依然として保持すると考えられるようなものである場合に、薬学的製剤中で「その化学的安定性を保持する」。化学的安定性は、化学的に変更された形態のタンパク質を検出および定量化することにより評価することができる。化学的な変更はサイズの改変（例えば、クリッピング）を伴ってもよく、これは、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、ＳＤＳ－ＰＡＧＥおよび／またはマトリックス支援レーザー脱離イオン化／飛行時間質量分析（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ ＭＳ）を使用して評価することができる。他の種類の化学的な変更としては電荷の変更（例えば、脱アミドの結果として起こる）が挙げられ、これは、例えば、イオン交換クロマトグラフィーにより評価することができる。抗体は、例えば、抗原結合アッセイにおける決定で所与の時点における抗体の生物学的活性が、薬学的製剤が調製された時点に呈された生物学的活性の約１０％以内（アッセイの誤差以内）である場合に、薬学的製剤中で「その生物学的活性を保持する」。

【0424】

タンパク質－ポリマーコンジュゲートは「その化学的安定性を保持し」、タンパク質およびポリマーの間の化学結合はインタクトに維持される、例えば、それは加水分解も他の破壊もされない。コンジュゲートのタンパク質部分は、上記のようにその化学的安定性を保持する。

【0425】

「等張（の）」により、関心対象の製剤が、ヒト血液または硝子体内注射について硝子体と本質的に同じ浸透圧を有することが意味される。等張製剤は一般に約２５０～４００ｍＯｓｍの浸透圧を有する。等張性は、例えば、蒸気圧または氷結型浸透圧計を使用して測定することができる。

【0426】

本明細書において使用される場合、「緩衝剤」は、その酸－塩基共役成分の作用によりｐＨにおける変化に抵抗する緩衝化溶液を指す。一部の実施形態において、緩衝剤は、約３．０～約８．０、例えば約４．５～８、または約ｐＨ６～約７．５、または約６．０～約７．０、または約６．５～７．０、または約ｐＨ７．０～約７．５、または約７．１～約７．４のｐＨを有する。上記の範囲の間にある任意の点のｐＨもまた想定される。

【0427】

一部の実施形態において、「ＰＢＳ」リン酸緩衝食塩水、トリスベースの緩衝剤およびヒスチジンベースの緩衝剤が使用される。

【0428】

一部の実施形態において、ＰＢＳ緩衝剤は、適切なｐＨを提供するように調整された少なくともＮａ_２ＨＰＯ_４、ＫＨ_２ＰＯ_４およびＮａＣｌから構成される。一部の実施形態において、緩衝剤は、安定貯蔵溶液を提供するように他の薬学的賦形剤、例えばＫＣｌお
よび他の塩、界面活性剤ならびに／または防腐剤を含有してもよい。

【0429】

「防腐剤」は、製剤中の細菌の作用を本質的に低減させて、例えばマルチユースの製剤の製造を促す、製剤中に含めることができる化合物である。潜在的な防腐剤の例としては、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム（アルキル基が長鎖化合物であるアルキルベンジルジメチルアンモニウムクロリドの混合物）、および塩化ベンゼトニウムが挙げられる。他の種類の防腐剤としては、芳香族アルコール、例えばフェノール、ブチルおよびベンジルアルコール、アルキルパラベン、例えばメチルまたはプロピルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３－ペンタノール、ならびにｍ－クレゾールが挙げられる。

【0430】

一部の実施形態において、製剤は、ヒトでの使用または動物試験のために安全であるために、十分に低いレベルのエンドトキシンを有するべきである。「エンドトキシン」は、グラム陰性細菌の細胞膜に由来するリポ多糖（ＬＰＳ）である。エンドトキシンは、疎水性脂質部分（リピドＡ）に共有結合的に連結された親水性多糖部分から構成される。非特許文献３７。リピドＡは、エンドトキシンの生物学的活性、すなわち、その毒性のほとんどの原因となる。エンドトキシンは、細菌細胞の死の他に、増殖および分裂の間に大量に放出される。それらは高度に熱安定的であり、通常の滅菌条件下で破壊されない。熱またはｐＨを用いる極端な処理、例えば、１８０～２５０℃および０．１Ｍを上回る酸または塩基が使用されなければならない（非特許文献３８）。そのような条件は、当然ながら、生物学的薬物に対して高度に有害である。

【0431】

バイオテクノロジーおよび医薬品産業において、製造プロセスの間および最終製造物の両方においてエンドトキシンが見出され得る。細菌は、水、食塩水および緩衝剤を含めて、栄養分に乏しい培地中で増殖することができるので、注意しなければエンドトキシンが蔓延する。動物またはヒトへのエンドトキシンの注射は、エンドトキシンショック、組織傷害およびさらには死を含めて、多様な病態生理学的効果を引き起こす。非特許文献３９。

【0432】

発熱性反応およびショックは、低濃度（１ｎｇ／ｍＬ）のエンドトキシンの静脈内注射で哺乳動物において誘導される（非特許文献４０）。医薬および生物製剤製造物の静脈内適用のためのエンドトキシンの最大レベルは、全ての薬局方により５エンドトキシン単位（ＥＵ）／ｋｇ体重／時間に設定されている（非特許文献４１）。ＥＵはエンドトキシンの生物学的活性の測定値である。例えば、１００ｐｇの標準的なエンドトキシンＥＣ－５および大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）Ｏ１１１：Ｂ４からの１２０ｐｇのエンドトキシンは１ＥＵの活性を有する（非特許文献４２）。この閾値レベルを満たすことは常に生物学的研究および医薬品産業において課題となっている（非特許文献４３）。

【0433】

硝子体内注射を介して送達される薬物中のエンドトキシンの存在は特に懸念される。薬物（ペニシリン）の硝子体内注射はＲｙｃｒｏｆｔにより１９４５年に初めて行われた。非特許文献４４。硝子体は、高いレベルの薬物が導入され、相対的に長い時間的期間にわたり維持され得るチャンバーである。硝子体内注射を介して達成され得る薬物の濃度は、外用投与または全身投与（例えば静脈内）により生成され得るものをはるかに上回る。

【0434】

硝子体内注射から生じる可能性がある最も危険な合併症の１つは眼内炎である。眼内炎は２つのクラス：感染性および無菌性に入る。感染性眼内炎は、一般に、細菌、真菌または寄生生物により引き起こされる（ｃａｕｓｅ）。感染性眼内炎の症状としては、重篤な疼痛、視力の喪失、ならびに結膜および裏打ちする上強膜の潮紅が挙げられる。感染性眼内炎は緊急の診断および処置を要求する。可能な処置としては、抗生物質の硝子体内注射および一部の場合には毛様体扁平部硝子体切除術が挙げられる。盲目および有痛性の目を
除去するために眼球除去が要求されることがある。例えば、非特許文献４５を参照。

【0435】

無菌性眼内炎は対照的に感染性因子を伴わず、硝子体内抗生物質および／または網膜硝子体手術の必要性なしに解消する硝子体腔の急性眼内炎症として定義することができる。硝子体の微生物学的試験が行われている場合、それは、無菌性眼内炎の診断の維持が証明される陰性培養物である必要がある。非特許文献４６。

【0436】

エンドトキシンが夾雑した生物学的薬物の硝子体内注射は無菌性眼内炎を結果としてもたらし得ることが観察されている。非特許文献４６。ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））は、膠芽腫および転移性結腸直腸がん、進行性非扁平非小細胞肺がんならびに転移性腎臓がんの処置のために食品医薬品局により承認されている。ベバシズマブはまた、滲出型ＡＭＤの処置として適応外で広く使用される。ベバシズマブは１００ｍｇ／４ｍｌとして製造者から得られる。この溶液は硝子体内注射のために直接的に使用することはできず、薬剤師により調合されるべきである。無菌性眼内炎のクラスターが観察されており、調合薬剤師によるエンドトキシンによるベバシズマブの意図しない夾雑により引き起こされる（ｃａｕｓｅ）と考えられている。

【0437】

エンドトキシンの硝子体内注射の直接的な臨床結果を考慮すれば、硝子体内投薬を介して患者に与えられ得るエンドトキシンの総量は高度に限定的である。一部の実施形態において、抗体または抗体コンジュゲートを有する溶液であって、５．０ＥＵ／ｍｌを超えないエンドトキシンレベルを有するものが提供される。一部の実施形態において、エンドトキシンレベルは１．０ＥＵ／ｍｌを超えない。一部の実施形態において、エンドトキシンレベルは０．５ＥＵ／ｍｌを超えない。一部の実施形態において、エンドトキシンレベルは０．２ＥＵ／ｍｌを超えない。一部の実施形態において、エンドトキシンレベルは、２、１、０．５、０．２、０．１、０．０９、０．０８、０．０７、０．０６、０．０５、０．０４、０．０３、０．０２または０．０１ＥＵ／ｍｌを超えない。

【0438】

エンドトキシンの存在についての２つの一般的に使用されるＦＤＡ承認済みの試験は、ウサギパイロジェン試験およびカブトガニ溶解液（Ｌｉｍｕｌｕｓ Ａｍｏｅｂｏｄｙｔｅ Ｌｙｓａｔｅ；ＬＡＬ）アッセイである（非特許文献４７）。ウサギパイロジェン試験は１９２０年代に開発され、試験溶液を注射されたウサギにおける温度上昇をモニターすることを伴う。しかしながら、ウサギパイロジェン試験の使用は、費用および長い所要時間に起因して年月と共に大きく減少している。はるかにより一般的なものはＬＡＬ試験である。ＬＡＬはカブトガニの血液に由来し、エンドトキシンへの曝露で凝固する。

【0439】

最も単純なＬＡＬアッセイの１つはＬＡＬゲル凝固アッセイである。本質的に、ＬＡＬ凝固アッセイは、問題とする試料の段階希釈液と組み合わせられる。ゲルの形成は試料中のエンドトキシンの量に比例する。段階希釈液が試料から調製され、各希釈液がＬＡＬゲルを形成する能力についてアッセイされる。何らかの点において陰性反応が含有される。元々の試料中のエンドトキシンの量が希釈アッセイから概算され得る。

【0440】

他のＬＡＬ試験もまた開発されており、これには比濁法ＬＡＬアッセイ（非特許文献４８）および色素産生ＬＡＬアッセイ（非特許文献４９）が含まれる。比濁法および色素産生アッセイは、単純なゲル凝固希釈アッセイよりもはるかに高感度かつ定量的である。

【0441】

一部の実施形態において、本明細書に開示される抗体を有する組成物中のエンドトキシンの量を低減させる方法が提供される。方法は、組成物を、抗体に結合するアフィニティークロマトグラフィー樹脂と接触させるステップ；抗体をアフィニティークロマトグラフィー樹脂から溶出させて、アンタゴニストを有するアフィニティークロマトグラフィー溶出液を形成させるステップ；アフィニティークロマトグラフィー溶出液を、抗体に結合するイオン交換樹脂と接触させるステップ；および抗体をイオン交換樹脂から溶出させるステップを有し、イオン交換樹脂から溶出される抗体はエンドトキシンを実質的に含まない。

【0442】

エンドトキシンの量を低減させる上記の方法、または本明細書に記載される他の方法もしくはプロセスは、上記のステップに記載の順序で行うことができ、またはそれは任意選択的に、ステップの順序を変更することにより、もしくはステップのうちの１つもしくは複数を繰り返すことによっても行うことができる。１つの実施形態において、組成物中のエンドトキシンの量を低減させる方法は、記載されたステップの順序で行われる。一部の実施形態において、アフィニティークロマトグラフィー樹脂接触、洗浄および溶出ステップは、アフィニティークロマトグラフィー溶出液をイオン交換樹脂と接触させる前に同じ順序で１回より多く繰り返される。方法はまた、例えば、０．１ミクロン、０．２２ミクロン、または０．４４ミクロンフィルターを使用する、濾過ステップを含むことができ、これは、各樹脂結合ステップ後に除去された溶出液のいずれか１つまたは複数に対して行うことができる。

【0443】

ある特定の事例において、組成物をアフィニティークロマトグラフィー樹脂と接触させるステップ、洗浄するステップおよび抗体をアフィニティークロマトグラフィー樹脂から溶出させるステップは、第１の溶出液をイオン交換樹脂と接触させる前に１回より多く繰り返すことができる。１つの実施形態において、アフィニティークロマトグラフィー樹脂は、組換えプロテインＡ［０２９７］（「ｒＰｒｏｔｅｉｎＡ」）樹脂を含む。好適な組換えプロテインＡ樹脂の１つの例はｒＰｒｏｔｅｉｎＡ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標） ＦＦ樹脂（Ａｍｅｒｓｈａｍ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．）である。別の実施形態において、好適なアフィニティークロマトグラフィー樹脂はプロテインＧクロマトグラフィー樹脂を含む。他の実施形態において、好適なアフィニティークロマトグラフィー樹脂は、混合されたプロテインＡ／プロテインＧ樹脂を含む。他の実施形態において、好適なアフィニティークロマトグラフィー樹脂は、４－メルカプトエチルピリジンリガンドを含む疎水性電荷誘導樹脂、例えばＭＥＰ ＨｙｐｅｒＣｅｌ樹脂（ＢｉｏＳｅｐｒａ、Ｃｅｒｇｙ、Ｓａｉｎｔ Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅ、Ｆｒａｎｃｅ）を含む。

【0444】

一部の実施形態において、イオン交換樹脂は陰イオン交換樹脂を含む。当業者に公知であるように、イオン交換体は、マトリックスの他に取り付けられる荷電性基に関して様々な材料に基づいてもよい。例えば、以下のマトリックスが使用されてもよく、これらにおいて記載される材料は何らかの程度で架橋されていてもよい：ＭａｃｒｏＣａｐ Ｑ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）、アガロースベースのもの（例えばＳｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標） ＣＬ－６Ｂ、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標） Ｆａｓｔ ＦｌｏｗおよびＳｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）
Ｈｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ）、セルロースベースのもの（例えばＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｃｅｌ（登録商標））、デキストランベースのもの（例えばＳｅｐｈａｄｅｘ（登録商標））、シリカベースのものならびに合成ポリマーベースのもの。陰イオン交換樹脂のために、マトリックスに共有結合的に取り付けられる荷電性基は、例えば、ジエチルアミノエチル、第四級アミノエチル、および／または第四級アンモニウムであってもよい。一部の実施形態において、陰イオン交換樹脂は第四級アミン基を含む。抗Ｍ－ＣＳＦ抗体に結合するための第四級アミン基を有する例示的な陰イオン交換樹脂はＱ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）樹脂（Ａｍｅｒｓｈａｍ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．）である。

【0445】

他の態様において、エンドトキシンレベルが、組成物を上述の陰イオン交換クロマトグラフィーステップに供した後に所望されるよりも高い場合、組成物は代替的に陽イオン交換樹脂に供されてもよい。一部の実施形態において、組成物中の任意のエンドトキシンは
、問題とするタンパク質とは差次的なイオン交換樹脂への結合を有して、エンドトキシンからのタンパク質の精製を可能とするべきである。これに関して、エンドトキシンは負に荷電しており、一般に陰イオン交換樹脂に結合する。タンパク質およびエンドトキシンの両方が陰イオン交換樹脂に結合する場合、他方からの一方の精製は、塩勾配を使用して２つを異なる画分に溶出させることにより実現され得る。特定の樹脂へのタンパク質の相対的な結合はまた、タンパク質のｐＩと比べて緩衝剤のｐＨを変化させることによりもたらされ得る。一部の実施形態において、陽イオン交換クロマトグラフィーは、用いられる唯一のイオン交換クロマトグラフィーである。

【0446】

一部の実施形態において、エンドトキシンレベルが陰イオン交換樹脂後に高すぎる場合、組成物は第２のイオン交換ステップにさらに供されてもよく、これは例えば、組成物を陽イオン交換樹脂と接触させ、続いて洗浄ステップ、次にイオン交換樹脂からの溶出を行うことにより為される。一部の実施形態において、陽イオン交換樹脂は結合のためのスルホン酸基を含む。例示的な陽イオン交換樹脂は、ＳＰ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）樹脂ＦＦ（Ａｍｅｒｓｈａｍ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．）Ｐｏｒｏｓ ＸＳ（ＣＥＸ）（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）である。

【0447】

一部の実施形態において、指定されるレベルのエンドトキシンを有する抗体タンパク質の溶液が製造された後に、タンパク質の最終製剤化の前に多数のステップが為される。一部の実施形態において、半減期延長部分がタンパク質にコンジュゲート化される。コンジュゲートは次に、患者に注射される最終薬物製剤に製剤化される。一部の実施形態において、コンジュゲートは、陽イオン交換樹脂であり得るイオン交換樹脂において再び精製される。他の実施形態において、タンパク質が製剤化される。全ての場合に、タンパク質試料へのまたはタンパク質－ポリマーコンジュゲートへのエンドトキシン夾雑物の導入を予防するために通常の実験室手順が用いられるべきである。

【実施例】

【0448】

実施例１：ＫＳＩ－３０１の網膜半減期、網膜バイオアベイラビリティおよび全身クリアランス
硝子体内に投与されたＫＳＩ－３０１は、ウサギモデルの網膜および脈絡膜／網膜色素上皮（ＲＰＥ）において延長された半減期を示した（図１）。アフリベルセプトおよびラニビズマブについて報告された結果とのＫＳＩ－３０１のデータの比較は、ＫＳＩ－３０１は、他の抗ＶＥＧＦ治療剤と比較して優位な持久性を呈することを指し示した。データはウサギモデルからのものである。ラニビズマブのデータ：非特許文献５０、非特許文献５１、非特許文献５２；アフリベルセプトのデータ：ＥＶＥＲ Ｃｏｎｇｒｅｓｓ Ｐｏｒｔｏｒｏｚ Ｓｌｏｖｅｎｉａ （２００８） Ｓｔｒｕｂｌｅ （Ｃｏｖａｎｃｅ） Ｋｏｅｈｌｅｒ－Ｓｔｅｃ （Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）。アフリベルセプトのデータは、２，０００μｇの用量の投与を反映するように算術的に調整し（５００μｇのウサギインビボ投薬に基づく）；ＫＳＩ－３０１のデータは、５，０００μｇの用量の投与を反映するように算術的に調整した（７２５μｇのウサギインビボ投薬に基づく）。エラーバーは平均の標準誤差を反映する。

【0449】

硝子体内に投与されたＫＳＩ－３０１は優れた網膜バイオアベイラビリティを示した（図２）。アフリベルセプトについて報告された結果とのＫＳＩ－３０１のデータの比較は、ＫＳＩ－３０１のより良好なバイオアベイラビリティを指し示した。図２からのデータはｃｏｖａｎｃｅウサギＡＤＭＥ（吸収、分布、代謝、排除）モデルからのものである。アフリベルセプトのデータ（２００８）：ＥＶＥＲ Ｃｏｎｇｒｅｓｓ Ｐｏｒｔｏｒｏｚ Ｓｌｏｖｅｎｉａ Ｓｔｒｕｂｌｅ （Ｃｏｖａｎｃｅ）， Ｋｏｅｈｌｅｒ－Ｓｔｅｃ （Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）。エラーバーは平均の標準誤差を反映する。

【0450】

静脈内に投与されたＫＳＩ－３０１は急速な全身クリアランスを示した（図３）。ベバシズマブについての報告された結果とのＫＳＩ－３０１のデータの比較は、ＫＳＩ－３０１のより速い全身クリアランスを指し示した。ベバシズマブのデータは非特許文献５３からのものであった。

【0451】

実施例２：糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）を有する対象におけるＫＳＩ－３０１の硝子体内投与の用量漸増研究
研究設計
用量漸増研究を実行して、目および全身安全性を評価し、ＫＳＩ－３０１の最大耐用量（ＭＴＤ）を確立した。３つの用量、１．２５ｍｇ、２．５ｍｇ、および５ｍｇ（タンパク質の重量による）のうちの１つを各対象に単回の注射として与えた。３人の対象を各用量レベルに登録した。対象を以下の時点；２日目、１週目、２週目、４週目、８週目、および１２週目における最終フォローアップにおいて計１２週間追跡した。

【0452】

研究開始時に、最初の３人の対象を第１投薬コホート（１．２５ｍｇのＫＳＩ－３０１）に登録し、ＫＳＩ－３０１の単回の硝子体内用量を用いて処置した。次の対象の注射を承認する前に各対象についての安全性審査のための十分な時間を可能とするために対象間に少なくとも２４時間の待ち時間を用いて対象を逐次的に評価した。

【0453】

先行する用量レベルの３人目の対象がＫＳＩ－３０１の用量後の１週の安全性期間を完了したら、用量群を漸増様式において登録した。対象の登録および用量漸増は、安全性情報および用量制限毒性（ＤＬＴ）の存在の審査に基づいた。

【0454】

９人の登録された対象のうちの８人は以前に処置されていたが、複数の以前の抗ＶＥＧＦ処置にもかかわらず限られたまたは無応答であり、重篤な疾患（前年においてＢＣＶＡメジアン３、０～７の範囲）を有していた。

【0455】

結果
ＫＳＩ－３０１の単回の注射は、急速な、１２週まで持続可能な高規模の応答を結果としてもたらした（図４）。眼内炎症および薬物関連有害事象は観察されなかった。図４：糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）を有する対象の硝子体内に投与された１．２５ｍｇ、２．５ｍｇ、または５ｍｇ（タンパク質の重量による）のＫＳＩ－３０１の適用。ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴをＫＳＩ－３０１の硝子体内注射後に測定した。ベースラインから１２週目までのメジアン変化、３つの用量群の間でプール（ｎ＝計９患者、用量群当たり３患者）。非特許文献５４。

【0456】

そのほとんどが他の抗ＶＥＧＦ剤（ベバシズマブ、アフリベルセプト、および／またはラニビズマブ）を用いてＤＭＥについて以前に処置されていた患者における単回の注射としてのＫＳＩ－３０１の有効性を結果は示す。ＫＳＩ－３０１は、硝子体内に投与された場合に、１２週を通じて安定な様式で視力および網膜厚（ＯＣＴでの測定）における改善を提供することを結果は指し示す。実験では、重篤な疾患を有する糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）患者（ｎ＝９）を調べた。一部の患者は以前に処置されていたが（８／９）、複数の以前の抗ＶＥＧＦ処置にもかかわらず限られたまたは無応答であり、重篤な疾患（前年においてメジアン３、０～７の範囲）を有していた。ＫＳＩ－３０１の単回の注射は、急速な、１２週まで持続可能な高規模の応答を結果としてもたらすことを結果は実証した。眼内炎症および薬物関連有害事象は観察されなかった。

【0457】

糖尿病黄斑浮腫を有する対象の硝子体内に投与された１．２５ｍｇ、２．５ｍｇ、または５ｍｇ（タンパク質の重量による）のＫＳＩ－３０１の適用から結果を得た。そのほと
んどが他の抗ＶＥＧＦ剤（ベバシズマブ、アフリベルセプト、および／またはラニビズマブ）を用いてＤＭＥについて以前に処置されていた患者における単回の注射としてのＫＳＩ－３０１の有効性を結果は示す。ＫＳＩ－３０１は、ここで行われたように、単回用量において投与された場合に、予想外の治療効果を有し、視力および網膜厚（ＯＣＴでの測定）が１２週を通じて安定な様式で改善したことを結果は指し示す。

【0458】

実施例３：滲出型加齢黄斑変性症（ｗＡＭＤ）を有する対象におけるＫＳＩ－３０１の複数回の硝子体内投与を調べるためのオープンラベル多施設探査的研究
他に指し示されなければ、実施例３、４および５において以下の研究設計および方法に従った。一般に、抗ＶＥＧＦ処置ナイーブであり、かつｗＡＭＤ、ＤＭＥ、またはＲＶＯのいずれかを有する患者を無作為に割り当てて、２．５ｍｇまたは５ｍｇ（抗体の重量による）のＫＳＩ－３０１の３回の月毎の負荷用量を与え、その後に月毎またはより高い頻度で追跡し、疾患活動性に起因する再処置が要求されると医師が決定した場合、または患者が任意の再処置基準を満たした場合のいずれかにおいて再処置を行った。

【0459】

全体的な研究設計

【0460】

この研究において、抗ＶＥＧＦ処置ナイーブであり、かつｗＡＭＤ、ＤＭＥ、またはＲＶＯのいずれかを有する患者を無作為に割り当てて、２．５ｍｇまたは５ｍｇ（抗体の重量による）のＫＳＩ－３０１の３回の月毎の負荷用量を与え、その後に月毎またはより高い頻度で追跡し、疾患活動性に起因して再処置が要求されると医師が決定した場合、または患者が再処置基準のいずれかを満たした場合のいずれかにおいて再処置を行った。これらの基準は、疾患の再発の徴候および／または疾患の再発に起因する視力低下に関するものであった。

【0461】

ＫＳＩ－３０１の２つの用量レベル、２．５ｍｇ（５０μＬ）および５ｍｇ（１００μＬ）（タンパク質の重量による）を複数用量研究において評価した。各対象にＫＳＩ－３０１の３回の初期硝子体内注射を、１日目に１回目、４週目に２回目、８週目に３回目で与えた（図５）。全てのコホートを１：３で２．５ｍｇまたは５ｍｇの用量に無作為化した。

【0462】

図５：ＫＳＩ－３０１の硝子体内投与の複数用量安全性、有効性および持久性を評価するための無作為化されたオープンラベル研究の研究設計。

【0463】

対象を４週毎に評価し、対象は、特有の再処置基準が満たされる場合に、１６週目に開始して研究薬物の追加投与を与えることがあった。滲出型ＡＭＤコホートの場合を除いて、評価来診において義務的な注射はなかったが、滲出型ＡＭＤコホートの場合、直近の注射から２４週が経っている場合に来診時に義務的な硝子体内注射を与えた。

【0464】

予め決定された包含および除外基準に基づいて適格対象を選択した。対象は、処置されるべき眼障害に関して処置ナイーブであり、調査される状態以外の網膜疾患の歴史を有しなかった。

【0465】

ＫＳＩ－３０１を、約１２．５ｍＭのリン酸ナトリウムおよび０．０２５％のポリソルベート２０中に水性溶液として５０ｍｇ／ｍＬ（抗体質量に基づく）において製剤化し、単回使用の２．０ｍＬのバイアルに充填した。

【0466】

研究の間に、ＫＳＩ－３０１の複数用量曝露は忍容性良好であり、眼内炎症は観察されなかった。１１３人の対象に投薬を行い、計３０８の用量を与えた（１日目に１０４の用量、４週目に９６の用量、８週目に８４の用量）。以下が観察された：

【0467】

・研究眼において眼内炎症も眼ＳＡＥもこれまで報告されなかった；

【0468】

・薬物関連有害事象（ＡＥ）も薬物関連の深刻な有害事象（ＳＡＥ）もこれまで報告されなかった；

【0469】

・ほとんどのＡＥは軽度と評価され、硝子体内抗ＶＥＧＦのプロファイルと合致した；

【0470】

・薬物関連ではない目以外の８つのＳＡＥが４人の対象において報告された：

【0471】

・１人の９２歳のＲＶＯ対象は既存の状態に関する入院を伴い、これは死を結果としてもたらした。

【0472】

・１人の６６歳のＲＶＯ対象はめまいに関する入院を伴った。

【0473】

・１人の４３歳のＤＭＥ対象は既存の状態に関する入院を伴った。

【0474】

・１人の５６歳のＤＭＥ対象は既存の状態に関する入院を伴った。

【0475】

ｗＡＭＤコホート
ｗＡＭＤコホートに含まれる患者は、≧５０歳であり；中心窩を伴う処置ナイーブ滲出型加齢黄斑変性症を有し；病変面積＜３０ｍｍ^２（１２乳頭面積）の任意の病変型を有し；スクリーニング時におよび１日目に確認された研究眼における≦７８および≧２３（約２０／２５～約２０／３２０のスネレンに相当）のＢＣＶＡ ＥＴＤＲＳ文字スコアを有し；主にｗＡＭＤの結果であると決定された研究眼の視力における減少を有した。

【0476】

研究集団の平均的特徴を表１に示す。

【0477】

【表1】

【0478】

試験の評価
ＫＳＩ－３０１の３回の初期硝子体内注射後に以下の評価を４週毎に行った：早期処置糖尿病網膜症研究（ＥＴＤＲＳ）視力試験による最良矯正視力（ＢＣＶＡ）；スペクトル領域光干渉断層撮影法（ＳＤ－ＯＣＴ）；ＯＣＴアンギオグラフィー（ＯＣＴ－Ａ）。

【0479】

再処置基準（非負荷用量）
以下の再処置基準のうちの少なくとも１つが満たされた場合にＫＳＩ－３０１の硝子体内注射での再処置を行った。これらの基準は、疾患の再発の徴候および／または疾患の再発に起因する視力低下に関する。

【0480】

・１２週目と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う、≧７５μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；

【0481】

・ｗＡＭＤ疾患活動性の悪化（例えば網膜内流体の増加、網膜下流体の増加、新たな網膜内出血、新たな網膜下出血）に起因する、１日目と比較した、＞５文字のＢＣＶＡにおける減少；

【0482】

・ｗＡＭＤ疾患活動性の悪化（例えば網膜内流体の増加、網膜下流体の増加、新たな網膜内出血、新たな網膜下出血）に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと比較した、≧１０文字のＢＣＶＡにおける減少；または

【0483】

・先行する注射から２４週／６か月が経過した。

【0484】

結果
１日目に投与された第１の負荷用量後の患者においてＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善が観察された（図６；図１２、左列）。ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴ値の改善は標準治療の抗ＶＥＧＦ治療と同等であった。ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも８週間継続した（図６）。ＣＳＴにおける低減は、代表的な患者において再処置なしで７か月間持続した（図１２、左列）。

【0485】

図６：滲出型ＡＭＤを有する患者の最良矯正視力（ＢＣＶＡ）および網膜厚（ＯＣＴ）における初期改善。ｗＡＭＤコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝２５。データカットオフ日までに１６週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。

【0486】

図１２：ｗＡＭＤコホートからの患者における治療の持久性。ＫＳＩ－３０１での処置の１日目（１行目）、１週目（２行目）、３か月目（３行目）、および７か月目（４行目）における個々の網膜のＯＣＴスキャン。左列：ｗＡＭＤ患者；中央列：ＤＭＥ患者；右列：ＲＶＯ患者。

【0487】

結果は、これまでのｗＡＭＤコホートからの患者における治療の持久性を示す（図７）。１人の患者のみが２０週目（または直近の負荷用量から約３か月）の前に再処置されており、１人の患者が直近の負荷用量から３か月時に再処置されており、１１／１４（８０％）が第１の再処置までに４か月またはより長きに達していたので、ＫＳＩ－３０１は、現行の剤と比べて予想外の治療効果を提供し、より良好な結果を提供し得ることをデータは指し示す。ｗＡＭＤにおける３～５か月の標的投薬間隔が可能であることをこれは指し示す。

【0488】

要約すると、２５人の患者のうちの１人のみ（４％）が３か月の前に再処置された（図
７）。２０人の患者のうちの１人のみ（５％）が３か月時に再処置された。患者の８６％（１８／２１）は、直近の負荷用量後に再処置なしで３か月またはより長きに達し、患者の８０％（１１／１４）は、直近の負荷用量後に再処置なしで４か月またはより長きに達した。ｗＡＭＤにおける標的投薬間隔は３～５か月であり得ることをこれは指し示す。

【0489】

図７：ｗＡＭＤコホートにおけるＫＳＩ－３０１の処置持久性。データカットオフ日までに第１の再処置機会（１２週目の来診）に達した無作為化された患者を含む。各バーは個々の患者を表す。再処置は（◆）により指し示される。全ての描写される患者は、指し示される直近の評価時点を超えて追跡された（右の矢印により指し示される）。結果は以下のように要約され得る：

【0490】

・１８．５％が再処置を受けた（５／２７）。２０週目に達した患者の中で、９５％（２０／２１）は、直近の負荷用量後に１２週よりも長きにわたり再処置を受けていない。

【0491】

・８１．５％は再処置を要求しなかった（２２／２７）

【0492】

・２０週目に達した患者の中で、９５％（２０／２１）は、第３の負荷用量後に少なくとも１２週にわたり再処置を受けていない。

【0493】

・負荷期後６か月までの再処置がＫＳＩ－３０１ ５ｍｇ用量において達成された。

【0494】

実施例４：糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）を有する対象におけるＫＳＩ－３０１の複数回の硝子体内投与を調べるためのオープンラベル多施設探査的研究
全体的な研究設計および試験評価は実施例３に記載される通りであった。

【0495】

ＤＭＥコホート
ＤＭＥコホートに含まれる患者は、処置ナイーブ糖尿病黄斑浮腫；スクリーニング時におよび１日目に確認された研究眼における≦７８および≧２３（約２０／２５～約２０／３２０のスネレンに相当）のＢＣＶＡ ＥＴＤＲＳ文字スコア；ＳＤ－ＯＣＴ（ハイデルベルグスペクトラリスまたは同等物）における≧３００ミクロンの中心サブフィールド厚（ＣＳＴ）；ならびに主にＤＭＥの結果であると決定された研究眼の視力における減少を有した。

【0496】

研究集団の平均的特徴を上記の表１に示す。

【0497】

再処置基準（非負荷用量）
以下の再処置基準のうちの少なくとも１つが満たされた場合にＫＳＩ－３０１の硝子体内注射での再処置を行った。これらの基準は、疾患の再発の徴候および／または疾患の再発に起因する視力低下に関する。

【0498】

１２週目または以前の来診（来診間に４週の間隔）と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う、≧７５μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；または

【0499】

ＤＭＥ／ＲＶＯ疾患活動性の悪化（例えば網膜内流体の増加、網膜下流体の増加、新たな網膜内出血、新たな滲出物）に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと比較した、≧１０文字のＢＣＶＡにおける減少。

【0500】

結果
１日目に投与された第１の負荷用量後の患者においてＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴに
おける改善が観察された（図８；図１２、中央列）。ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも８週間継続した（図８）。ＣＳＴにおける低減は、代表的な患者において再処置なしで７か月間持続した（図１２、中央列）。

【0501】

データは、ＤＭＥを有する患者における３回の月毎の用量後のＫＳＩ－３０１の効果を実証する（図８）。現行の製造物は月毎の治療または５回の月毎の負荷用量のいずれかを要求する一方、ＫＳＩ－３０１は３回の負荷用量のみの後に高いレベルの改善を提供したので、データは予想外である。

【0502】

図８：ＤＭＥコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝１２。データカットオフ日までに１６週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。

【0503】

直近の負荷用量後３か月の前に再処置を要求した患者はおらず、第４または第５の月毎の負荷用量を要求した患者はいなかった（図９）。患者の１８％（２／１１）は３か月時に再処置された。２０週目に達した患者の中で、８１．８％（９／１１）は、第３の負荷用量後に１２週間を上回って再処置を要求しなかった。一部の患者は、再処置なしで４、５、または６か月に達した。

【0504】

データは、ＤＭＥを有する患者における３回の負荷用量のみの後の３＋か月の投薬間隔の可能性を指し示す（図９）。さらには、いずれのＤＭＥ患者も３か月の前に未だに再処置されていないので、データは予想外である。追加的に、８０％よりも多くは、直近の負荷用量後に再処置が必要となる前に３か月よりも長く過ぎている。従来の治療を用いた場合、９～１０ほど多くの注射が治療の最初の１２か月のうちに投与されるので、これは予想外である。

【0505】

図９：ＤＭＥコホートにおけるＫＳＩ－３０１の処置持久性。データカットオフ日までに第１の再処置機会（１２週目の来診）に達した無作為化された患者を含む。各バーは個々の患者を表す。再処置は（◆）により指し示される。全ての描写される患者は、指し示される直近の評価時点を超えて追跡された（右の矢印により指し示される）。結果は以下のように要約され得る：

【0506】

・１１．８％は再処置を受けた（２／１７）。

【0507】

・２０週目に達した患者の中で、８０％（８／１０）は、直近の負荷用量後に１２週よりも長きにわたり再処置を受けていない。

【0508】

・８８．２％は再処置を受けていない（１５／１７）。

【0509】

・２０週目に達した患者の中で、８１．８％（９／１１）は、３回の負荷用量のみの後に１２週よりも長きにわたり再処置を受けていない。

【0510】

・いずれの患者も第４または第５の月毎の負荷用量を要求しなかった。

【0511】

図１５は糖尿病網膜症重症度の結果（ＤＲＳＳ）を描写する。図は、独立した専門読み取り施設による、標準化された写真読み取り尺度で測定された、異なるレベルの糖尿病網膜症重症度を有する患者の割合を示す。ＤＲは、異なるレベルの重症度、例えば、軽度、中等度、そして重篤な非増殖性糖尿病網膜症、または軽度～高リスク増殖性ＤＲとして記
載することができる。この場合、患者の大部分はベースラインにおいてレベル４７の疾患（中等度のＮＰＤＲ）を有した。１２週（３回の負荷用量および次に１か月）後に、患者の２７％は、重症度スケールにおいて＞＝２ステップのＤＲ重症度における改善を有し、１３％は１ステップの改善を有し、６０％は同じレベルのＤＲ重症度を維持した。（ＤＲ重症度は、抗ＶＥＧＦ治療の適用後に改善することが公知であるが、他の剤を用いた場合、ピーク効果に達するために１～２年を要し、抗ＶＥＧＦ治療が中止された場合に、効果は多くの患者において喪失され、疾患は再び悪化する）。画像は、１２週目において疾患修飾を有し、非増殖性（レベル５３）まで改善（標準的なグレーディング尺度において２ステップ）した増殖性（レベル６５）疾患を有する患者を示す。追加用量が与えられることなく、その患者のために利用可能な最大のフォローアップ時間である追加の１４週にわたりＤＲ重症度に対する効果が維持された。

【0512】

一部の実施形態において、非増殖性ＤＲを有する患者は、負荷用量なしまたは潜在的にわずか数回の負荷用量（例えば、１回の用量、２回の用量、または３回の開始用量）と共に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）を使用して処置され、次に非増殖性ＤＲの処置のために３～６か月毎に再処置され得る。

【0513】

実施例４．５
非増殖性ＤＲを有する患者が同定される。患者は、負荷用量なしで処置されるが、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の単回の注射を用いて３～６か月毎に処置され、非増殖性ＤＲが処置される。代替的に、患者は、最初に１、２、または３回の負荷用量を用いて処置される。

【0514】

実施例５：網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）を有する対象におけるＫＳＩ－３０１の複数回の硝子体内投与を調べるためのオープンラベル多施設探査的研究
全体的な研究設計および試験評価は、実施例３に記載される通りであった。

【0515】

ＲＶＯコホート
ＲＶＯコホートに含まれる患者は、黄斑浮腫および二次的な視覚障害を伴う処置ナイーブ網膜静脈閉塞症；スクリーニング時におよび１日目に確認された研究眼における≦７８および≧２３（約２０／２５～約２０／３２０のスネレンに相当）のＢＣＶＡ ＥＴＤＲＳ文字スコア；ＳＤ－ＯＣＴ（ハイデルベルグスペクトラリスまたは同等物）における≧３００ミクロンの中心サブフィールド厚（ＣＳＴ）；分枝網膜静脈閉塞症（ＢＲＶＯ）または中心網膜静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）；ならびに主にＲＶＯに二次的な黄斑浮腫の結果であると研究者により決定された研究眼の視力における減少を有した。

【0516】

研究集団の平均的特徴を表１に示す。

【0517】

再処置基準
以下の再処置基準のうちの少なくとも１つが満たされた場合にＫＳＩ－３０１の硝子体内注射での再処置を行った。これらの基準は、疾患の再発の徴候および／または疾患の再発に起因する視力低下に関する。

【0518】

・１２週目または以前の来診（来診間に４週の間隔）と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う、≧７５μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；または

【0519】

・ＤＭＥ／ＲＶＯ疾患活動性の悪化（例えば網膜内流体の増加、網膜下流体の増加、新たな網膜内出血、新たな滲出物）に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと比較した、≧１０文字のＢＣＶＡにおける減少。

【0520】

結果
１日目に投与された第１の負荷用量後の患者においてＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善が観察された（図１０；図１２、右列）。ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも８週間継続した（図１０）。ＣＳＴにおける低減は、代表的な患者において再処置なしで７か月間持続した（図１２、右列）。

【0521】

データは、ＲＶＯを有する患者における３回の月毎の用量後のＫＳＩ－３０１の効果を実証する（図１０）。視力における継続した改善が８週から１６週までで観察されるので、データは予想外である。ＲＶＯにおけるラニビズマブ、アフリベルセプト、およびベバシズマブの研究において、月毎の治療から月毎よりも低い頻度の治療への切換えは、視力およびＯＣＴ ＣＳＴの悪化を結果としてもたらす。

【0522】

図１０：ＲＶＯコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝１４。データカットオフ日までに１６週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。

【0523】

ＲＶＯコホートにおける患者の７５％（１８／２４）は再処置を要求しなかった（図１１）。患者の８％（２／２４）は１か月時に第１の再処置を受け；患者の２３％（３／１３）は２か月時に第１の再処置を受け；患者の１１％（１／９）は３か月時に第１の再処置を受けた。２０週目に達した患者の中で、５６％（５／９）は、第３の負荷用量後に１２週間を超えて再処置を要求しなかった。５ｍｇコホートの１００％（１８／１８）の患者は第４または第５の月毎の負荷用量を要求せず、要求する場合には、直近の負荷用量の９週後またはより後に再処置を受けた。５ｍｇにおける８人の患者のうちの２人のみが２か月時に第１の再処置を受け、両者は次の処置の前により長い時間を有した。そのため、１回より多くの再処置を受けた患者の中で、第１および第２の再処置の間の時間は、直近の負荷用量および第１の再処置の間の時間と比較して延長された。

【0524】

５ｍｇ用量群において、ＲＶＯ患者は８週またはより後に第１の再処置を受けていることをデータは示す（図１１）。従来の治療はＲＶＯを処置するために月毎の投薬を要求するので、この結果は予想外である。さらに、１回より多くの再処置を受けた患者の中で、第１および第２の再処置の間の時間は延長され、典型的にはＲＶＯを有する患者は特定のパターン、または定期的な間隔において疾患の再発を有するので、これもまた予想外であった。最後に、半数を上回る患者（５／９）は、直近の負荷用量から３か月よりも長くを過ごし、ＲＶＯの高い眼内ＶＥＧＦ負荷を考慮すれば、これもまた予想外であった。

【0525】

図１１：ＲＶＯコホートにおけるＫＳＩ－３０１の処置持久性。データカットオフ日までに第１の再処置機会（１２週目の来診）に達した無作為化された患者を含む。各バーは個々の患者を表す。再処置は（◆）により指し示される。指し示される直近の評価時点を超えて追跡された患者は右の矢印により指し示される。中止は左の矢印により指し示される。図１１に示されるさらなる結果は以下のように要約され得る：

【0526】

・２５％は再処置を受けた（６／２４）。

【0527】

・２０週目に達した患者の中で、５６％（５／９）は、直近の負荷用量後に１２週よりも長きにわたり再処置を受けていない。

【0528】

・７５％は再処置を受けていない（１８／２４）。

【0529】

・２０週目に達した患者の中で、５６％（５／９）は、３回の負荷用量のみの後に１２週よりも長きにわたり再処置を受けていない。

【0530】

・ＫＳＩ－３０１ ５ｍｇコホートの１８／１８人の患者は４回目の月毎の負荷用量を要求しなかった。

【0531】

実施例６
眼障害の処置（予防的またはその他）を必要とする対象が最初に同定される。次に１～５ｍｇの抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の抗体が対象に第１の負荷用量において投与され、任意選択的に第２の負荷用量および任意選択的に第３の負荷用量が投与される（互いに約１か月以内）。直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ治療の治療的な利益を少なくとも１２週間保持する。これは、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、および／または代替的に糖尿病網膜症（ＤＲ）に適用され得る。

【0532】

実施例６．５
眼障害の処置（予防的またはその他）を必要とする対象が最初に同定される。次に１～５ｍｇの抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の抗体が対象に第１の負荷用量において投与され、任意選択的に第２の負荷用量および任意選択的に第３の負荷用量が投与される（互いに約１か月以内）。直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも１６週間保持する。代替的に、直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも２０週間保持する。代替的に、直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも２４週間保持する。代替的に、直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも３０週間保持する。代替的に、直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも３６週間保持する。代替的に、直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも４２週間保持する。代替的に、直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも４８週間保持する。代替的に、直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも５４週間保持する。代替的に、直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも６０週間保持する。これは、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、および／または代替的に糖尿病網膜症（ＤＲ）に適用され得る。

【0533】

実施例７
本実施例は、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）を処置する方法を提供する。方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）を、ＲＶＯを有する対象に第１の負荷用量において投与することを含む。次に負荷用量を１回または代替的に２回繰り返すことができる。これは、対象が抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも８週間保持することを結果としてもたらす。代替的に、これは、対象が抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも１２週間保持することを結果としてもたらす。代替的に、これは、対象が抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１、治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも２０週間保持することを結果としてもたらす。

【0534】

実施例７．５
本実施例は、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）を処置する方法を提供する。方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）を、ＲＶＯを有する対象に第１の負荷
用量において投与することを含む。次に負荷用量を１回または代替的に２回繰り返すことができる。これは、対象が抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも２４週間保持することを結果としてもたらす。代替的に、これは、対象が抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも３０週間保持することを結果としてもたらす。代替的に、これは、対象が抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも３６週間保持することを結果としてもたらす。代替的に、これは、対象が抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも４２週間保持することを結果としてもたらす。代替的に、これは、対象が抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも４８週間保持することを結果としてもたらす。代替的に、これは、対象が抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも５４週間保持することを結果としてもたらす。代替的に、これは、対象が抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも６０週間保持することを結果としてもたらす。

【0535】

実施例８
本実施例は、目の灌流を改善する方法であって、ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を同定することを含む、方法を提供する。次に抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の少なくとも２回の負荷用量を対象に１．２５～５ｍｇにおいて、各注射間に１か月で投与する。２回よりも多くの注射を投与しない。次に、対象が少なくとも１つの目における灌流の改善を示すまで、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の１回または複数回のさらなる用量（再処置）を対象に提供する。

【0536】

実施例９
本実施例は、目の灌流を改善する方法を提供する。方法は、非増殖性ＤＲを有する対象を同定することおよび抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の初期用量を対象に投与（１～５ｍｇの抗体）して、少なくとも１つの目における灌流の改善を提供することを伴う。灌流が対象の処置された目において達成されるまで用量は繰り返される。

【0537】

実施例１０
本実施例は、ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を処置する方法を提供する。方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の１～３回の負荷用量（月毎に１回を基準にして１～５ｍｇの抗体）を、ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象に投与することを含む。３回より多くの負荷用量を対象に投与しない。要求される場合には、要求される程度まで、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用（再処置）を直近の負荷用量の１２週以後の時点において提供する。

【0538】

実施例１０．５
本実施例は、ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象を処置する方法を提供する。方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の１～３回の負荷用量（月毎に１回を基準にして１～５ｍｇの抗体）を、ＤＭＥ、ＤＲまたはＲＶＯを有する対象に投与することを含む。３回より多くの負荷用量を対象に投与しない。要求される場合には、要求される程度まで、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用（再処置）を直近の負荷用量の１６週以後の時点において提供する。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用（再処置）を直近の負荷用量の２０週以後の時点において提供する。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用（再処置）を直近の負荷用量の２４週以後の時点において提供する。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用（再処置）を直近の負荷用量の３０週以後の時点において提供する。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用（再処置）を直近の負荷用量の３６週以後の時点において提供する。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用（再処置）を直近の負荷用量の４２週以後の時点において提供する。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用（再処置）を直近の負荷用量の４８週以後の時点において提供する。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用（再処置）を直近の負荷用量の５４週以後の時点において提供する。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続適用（再処置）を直近の負荷用量の６０週以後の時点において提供する。

【0539】

実施例１１
本実施例は、非増殖性ＤＲを有する対象を処置する方法を提供する。治療を必要とする患者を同定し、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の１回または２回の負荷用量（１～５ｍｇ、月に１回）を、非増殖性ＤＲを有する対象に投与する。２回より多くの負荷用量を対象に投与しない。任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の後続投与（再処置）を直近の負荷用量の１２週以後の時点において提供することができる。

【0540】

実施例１１．５
本実施例は、非増殖性ＤＲを有する対象を処置する方法を提供する。治療を必要とする患者を同定し、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の１回または２回の負荷用量（１～５ｍｇ、月に１回）を、非増殖性ＤＲを有する対象に投与する。２回より多くの負荷用量を対象に投与しない。任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の１６週以後の時点において提供することができる。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の２０週以後の時点において提供することができる。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の２４週以後の時点において提供することができる。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の３０週以後の時点において提供することができる。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の３６週以後の時点において提供することができる。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の４２週以後の時点において提供することができる。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の４８週以後の時点において提供することができる。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の５４週以後の時点において提供することができる。代替的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の６０週以後の時点において提供することができる。

【0541】

実施例１２
本実施例は、ＲＶＯを有する対象を処置する方法を提供する。方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の１回または２回の負荷用量（１～５ｍｇ、月毎に１回）を、ＲＶＯを有する対象に投与することを含む。追加の負荷用量は３対象に投与されない。次に、任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の８週以後の時点において提供する。代替的に、再処置は１２週以後に行われる。代替的に、再処置は１６週以後に行われる。代替的に、再処置は２０週以後に行われる。代替的に、再処置は２４週以後に行われる。

【0542】

実施例１２．５
本実施例は、ＲＶＯを有する対象を処置する方法を提供する。方法は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の１回または２回の負荷用量（１～５ｍｇ、月毎に１回）を、ＲＶＯを有する対象に投与することを含む。追加の負荷用量は３対象に投与されない。次に、任意選択的に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの後続投与（再処置）を直近の負荷用量の３０週以後の時点において提供する。代替的に、再処置は３６週以後に行われる。代替的に、再処置は４２週以後に行われる。代替的に、再処置は４８週以後に行われる。代替的に、再処置は５４週以後に行われる。代替的に、再処置は６０週以後に行われる。

【0543】

実施例１３
本実施例は、ＲＶＯを処置する方法を提供する。抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）（１～５ｍｇ、月に１回）を、ＲＶＯの処置を必要とする対象に１～３回の負荷用量において投与する。対象は、それにより、ＲＶＯに対する抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも８週間保持する。対象は、治療的な利益の、ほとんどまたは全てではないにしても少なくとも１つをこの時間的期間にかけて保持し、その結果、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの直近の適用後に少なくとも１４週間、別の再処置からの利益を実質的に受けない。

【0544】

実施例１３．５
本実施例は、ＲＶＯを処置する方法を提供する。抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）（１～５ｍｇ、月に１回）を、ＲＶＯの処置を必要とする対象に１～３回の負荷用量において投与する。対象は、それにより、ＲＶＯに対する抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療結果を最終負荷用量後に少なくとも１２週間保持する。対象は、治療的な利益の、ほとんどまたは全てではないにしても少なくとも１つをこの時間的期間にかけて保持し、その結果、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲートの直近の適用後に少なくとも１８週間、別の再処置からの利益を実質的に受けない。代替的に、対象は、治療的な利益の、ほとんどまたは全てではないにしても少なくとも１つをこの時間的期間にかけて保持し、その結果、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲートの直近の適用後に少なくとも２４週間、別の再処置からの利益を実質的に受けない。代替的に、対象は、治療的な利益の、ほとんどまたは全てではないにしても少なくとも１つをこの時間的期間にかけて保持し、その結果、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲートの直近の適用後に少なくとも３０週間、別の再処置からの利益を実質的に受けない。代替的に、対象は、治療的な利益の、ほとんどまたは全てではないにしても少なくとも１つをこの時間的期間にかけて保持し、その結果、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲートの直近の適用後に少なくとも３６週間、別の再処置からの利益を実質的に受けない。代替的に、対象は、治療的な利益の、ほとんどまたは全てではないにしても少なくとも１つをこの時間的期間にかけて保持し、その結果、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲートの直近の適用後に少なくとも４２週間、別の再処置からの利益を実質的に受けない。代替的に、対象は、治療的な利益の、ほとんどまたは全てではないにしても少なくとも１つをこの時間的期間にかけて保持し、その結果、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲートの直近の適用後に少なくとも４８週間、別の再処置からの利益を実質的に受けない。代替的に、対象は、治療的な利益の、ほとんどまたは全てではないにしても少なくとも１つをこの時間的期間にかけて保持し、その結果、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲートの直近の適用後に少なくとも５４週間、別の再処置からの利益を実質的に受けない。代替的に、対象は、治療的な利益の、ほとんどまたは全てではないにしても少なくとも１つをこの時間的期間にかけて保持し、その結果、対象は、抗ＶＥＧＦ抗体バイオコンジュゲートの直近の適用後に少なくとも６０週間、別の再処置からの利益を実質的に受けない。

【0545】

実施例１４
眼障害の処置（予防的またはその他）を必要とする対象が最初に同定される。次に１～５ｍｇの抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の抗体が対象に第１の負荷用量において投与され、任意選択的に第２の負荷用量および任意選択的に第３の負荷用量が投与される（互いに約１か月以内）。直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも１２週間保持する。これは、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、およ
び／または代替的に糖尿病網膜症（ＤＲ）に適用され得る。任意の再処置適用後に、対象は、投与される各再処置についてますます少ない処置を必要とするので、任意のその後の再処置事象の間の持続期間は増加する。

【0546】

実施例１４．５
眼障害の処置（予防的またはその他）を必要とする対象が最初に同定される。次に１～５ｍｇの抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート（例えば、ＫＳＩ－３０１）の抗体が対象に第１の負荷用量において投与され、任意選択的に第２の負荷用量および任意選択的に第３の負荷用量が投与される（互いに約１か月以内）。直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも１８週間保持する。代替的に直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも２４週間保持する。代替的に直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも３０週間保持する。代替的に直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも３６週間保持する。代替的に直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも４２週間保持する。代替的に直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも４８週間保持する。代替的に直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも５４週間保持する。代替的に直近の負荷用量後に、対象は抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート治療の治療的な利益を少なくとも６０週間保持する。

【0547】

これは、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、滲出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、および／または代替的に糖尿病網膜症（ＤＲ）に適用され得る。任意の再処置適用後に、対象は、投与される各再処置についてますます少ない処置を必要とするので、任意のその後の再処置事象の間の持続期間は増加する。

【0548】

実施例１５
本実施例は、繰返しの投与を通じたＫＳＩ－３０１の使用について観察された安全性および特徴を要約する。１１３の対象にフェーズ１ａおよび１ｂにかけて投薬が為された。３０８の合計用量が投与された。以下が安全性に関して観察された：
・研究眼における眼内炎症も眼ＳＡＥもこれまで報告されていない。
・薬物関連ＡＥも薬物関連ＳＡＥもこれまで報告されていない。
・ほとんどのＡＥは軽度と評価されており、これは硝子体内抗ＶＥＧＦのプロファイルと合致する。
・薬物関連ではない目以外の８つのＳＡＥが４人の対象において報告された：
－ １人の９２歳のＲＶＯ対象は既存の状態に関する入院を伴い、これは死を結果としてもたらした。
－ １人の６６歳のＲＶＯ対象はめまいに関する入院を伴った。
－ １人の４３歳のＤＭＥ対象は既存の状態に関する入院を伴った。
－ １人の５６歳のＤＭＥ対象は既存の状態に関する入院を伴った。

【0549】

上記の実施例は、抗体バイオポリマーコンジュゲート（ＡＢＣ）構築物は、長い持久性の硝子体内医薬のための新たな設計プラットフォームであることを実証する。ＫＳＩ－３０１は、重要な開発結果を達成しており、これには以下が含まれる：

【0550】

優れた安全性：３００＋の用量後に眼内炎症の症例なし。

【0551】

強い有効性：３つの主要な表現型的に変動的な網膜疾患の中には滲出型ＡＭＤ、ＤＭＥ／ＤＲ＆ＲＶＯがある。

【0552】

顕著な生物学的持久性：処置された目の大部分は、３回の負荷用量後に再処置なしで４か月またはそれを超えて持続した。以下の可能性が実証されることが予期される：

【0553】

・ｗＡＭＤにおいて３～５＋か月の間隔

【0554】

・ＤＭＥにおいて３～５＋か月の間隔

【0555】

・ＲＶＯにおいて２～３＋か月の間隔

【0556】

実施例１６
図１７Ａおよび図１７Ｂは、ベースライン、４週目および８週目における５ｍｇ ＫＳＩ－３０１の３回の負荷用量で処置された滲出型ＡＭＤ患者のＯＣＴおよびＯＣＴアンギオグラフィーを描写する。ＯＣＴ画像における流体の減少に加えて、パネルの中心におけるスポット低減と共に表されるように、流れおよびサイズの両方において脈絡膜新生血管膜に対する直接的な効果がある。脈絡膜新生血管膜は、滲出型ＡＭＤのコアとなる特徴であり、この膜において直接的な効果を有することは、疾患修飾の徴候であると考えられる。

【0557】

実施例１７
図１８Ａ～１８Ｄは、３回の負荷用量後の疾患修飾を伴うＤＭＥの例を示し、疾患修飾を表す著しいＤＲＳＳの改善および再灌流を伴う。図１８Ａは、３回の負荷用量のみでＤＭＥにおいて迅速かつ長期持続性の効果を得ることができる（再処置は少なくとも５か月間要求されない）ことを明らかにする時間経過を示す。図１８Ｂは、ＫＳＩ－３０１の３回の負荷用量のみの有効性が増殖性糖尿病網膜症において存在することを実証する。示されるように、ＫＳＩ－３０１の３回の負荷用量後に１４週持続した、迅速かつ実質的な（２つの急な）改善があった。ＰＤＲからＮＰＤＲへの転換に加えて、対象はまた末梢血管再灌流の徴候を示した（図１８Ｃおよび図１８Ｄ）。

【0558】

そのため、本明細書において提供される方式でのＫＳＩ－３０１の使用は、迅速かつ長期化された結果および再灌流を達成するために使用することができる。

【0559】

実施例１８
図１９は、ＲＶＯ患者における結果を示し、これは３回の負荷用量後に、追加用量は少なくとも５か月間要求されず、疾患修飾と考えられるものを表した。そのため、本明細書において提供される方式でのＫＳＩ－３０１の使用は、疾患修飾を達成するために使用することができる。

【0560】

実施例１９
図２０は、疾患が再発し、患者が再処置を受けるまでに８週続く３回の負荷用量の効果を示す患者のＯＣＴ画像のセットを示す。その第４の用量の効果は、患者が再処置を要求するまで１６週続き、８週から１６週へと再処置間隔を有効に倍加させており、これは疾患修飾の徴候であり得る。そのため、追加の有効性が再処置プロセスを通じても達成されており、その後の要求される再処置の間のより多くの時間を可能とすることをこれは実証する。

【0561】

実施例２０
図２１Ａ～２１ＣはＫＳＩ－３０１の単回の注射の結果を示す。フェーズ１単回用量研究 － 要約：
・迅速な高規模かつ持続可能な処置応答が、試験された全ての用量レベルにおいて見られた。
・単回用量の１２週後に、＋９のＥＴＤＲＳチャート文字のベースラインからのメジアンＢＣＶＡ改善および－１２１ミクロン（ＯＣＴ ＣＳＴ）の網膜浮腫におけるメジアン改善が観察された。
・１２週における各患者の直近の来診を通じて用量制限毒性も、薬物関連有害事象も、眼内炎症も観察されなかった。

【0562】

図２１Ａは、ベースラインから１２週目までのメジアン変化のグラフを示す。それは、ＫＳＩ－３０１投与についての、持続可能な迅速な、高い応答を実証する。症例研究１の結果が図２１Ｂに示され、これは、以前の最適以下の応答を有する対象における慢性黄斑浮腫に対するＫＳＩ－３０１投与の有効性を実証する。図２１Ｃは症例研究２からの結果を示し、これは、慢性浮腫および大規模な中心窩脂質滲出物を有する対象における１２週を通じた網膜下流体の解消を示す。

【0563】

これらの結果は、単回の注射後に、以前に処置されて失敗した患者において、ＫＳＩ－３０１の単回の注射が長く続く利益を有する２つの症例を提供する。症例２において、効果はＫＳＩ－３０１注射後に遅く現れ、経時的に増加しており、疾患修飾の形態を実証する。

【0564】

実施例２１
実施例３に記載の研究に登録された患者のフォローアップ評価を行った。結果は、３～５またはより多くの月に及ぶｗＡＭＤコホートからの患者におけるＫＳＩ－３０１処置の持久性を示す（図２２）。患者の８３％（２０／２４）は、第１の再処置の前に４か月またはより長きに達した。患者の８５％（２２／２６）は、直近の負荷用量後に３か月よりも長きにわたり再処置を受けなかった。６％（２／３１）は直近の負荷用量後３か月の前に再処置され、８％（２／２５）は直近の負荷用量後３か月時に再処置された。ｗＡＭＤにおける標的投薬間隔は負荷用量後に３～５またはより多くの月であり得ることをこれらの結果は指し示す。

【0565】

図２２：ｗＡＭＤコホートにおけるＫＳＩ－３０１の処置持久性。データカットオフ日までに第１の再処置機会（１２週目の来診）に達した無作為化された患者を含む。各バーは個々の患者を表す。再処置は（◆）により指し示される。指し示される直近の評価時点を超えて追跡された患者（右の矢印により指し示される）。１人の中止された患者は左の矢印により指し示される。

【0566】

ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善は、２０週目、直近の負荷用量の１２週後において患者において継続して観察された（図２３）。ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴ値の改善は標準治療の抗ＶＥＧＦ治療と同等であった。ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも１２週間継続した（図２３）。ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善は、１２週目に達した患者のより大きいコホートにおいて観察された（図２５）。

【0567】

図２３：滲出型ＡＭＤを有する患者における最良矯正視力（ＢＣＶＡ）および網膜厚（ＯＣＴ）における改善。ｗＡＭＤコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝２５。データカットオフ日までに２０週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0568】

図２５：ＫＳＩ－３０１で処置された滲出型ＡＭＤ患者におけるＢＣＶＡおよびＯＣＴにおける改善。Ｎ＝３１。データカットオフ日までに１２週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；Ｏ
ＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0569】

高度な色素上皮剥離（ＰＥＤ）を有しないｗＡＭＤコホートからの患者のサブセットのＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善を分析した。これらの患者もまたＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴ値における持続された改善を示し、ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも１２週間継続した（図２４）。ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善は、１２週目に達した高度なＰＥＤを有しないｗＡＭＤ患者のより大きいコホートにおいて観察された（図２６）。

【0570】

図２４：高度なＰＥＤを有しない滲出型ＡＭＤ患者における最良矯正視力（ＢＣＶＡ）および網膜厚（ＯＣＴ）における改善。ｗＡＭＤコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝２３。高度なＰＥＤは、≧５００ミクロンのベースラインＣＳＴを有するＰＥＤの存在として定義される。データカットオフ日までに２０週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0571】

図２６：ＫＳＩ－３０１で処置された、高度なＰＥＤを有する滲出型ＡＭＤ患者におけるＢＣＶＡおよびＯＣＴにおける改善。Ｎ＝２９。高度なＰＥＤは、≧５００ミクロンのベースラインＣＳＴを有するＰＥＤの存在として定義される。データカットオフ日までに１２週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0572】

実施例２２
実施例４に記載の研究に登録された患者のフォローアップ評価を行った。結果は、４か月より長きに及んだＤＭＥコホートからの患者におけるＫＳＩ－３０１処置の持久性を示す（図２７）。患者の７２％（８／１１）は、再処置なしで４か月またはより長きに達した。８１％（１３／１６）は、直近の負荷用量後に３か月より長く再処置を要求しなかった。１人の患者は３か月の前に再処置され、患者の１３％（２／１５）は３か月時に再処置された。ＤＭＥにおける標的投薬間隔は負荷用量後に３またはより多くの月であり得ることをこれらの結果は指し示す。

【0573】

図２７：ＤＭＥコホートにおけるＫＳＩ－３０１の処置持久性。データカットオフ日までに第１の再処置機会（１２週目の来診）に達した無作為化された患者を含む。各バーは個々の患者を表す。再処置は（◆）により指し示される。全ての描写される患者は、指し示される直近の評価時点を超えて追跡された（右の矢印により指し示される）。

【0574】

ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善が２０週目、直近の負荷用量後１２週目にＤＭＥ患者において観察された（図２８）。ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも１２週間継続した。ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善は、１２週目に達したＤＭＥ患者のより大きいコホートにおいて観察された（図２９）。

【0575】

図２８：ＤＭＥコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝１５。データカットオフ日までに２０週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0576】

図２９：ＤＭＥコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝１９。データカットオフ日までに１２週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0577】

実施例２３
実施例５に記載の研究に登録された患者のフォローアップ評価を行った。結果は、３か月より長きに及んだＲＶＯコホートからの患者におけるＫＳＩ－３０１処置の持久性を示す（図３０）。３人の患者のみが１回より多くの再処置を受け、それらの３人の患者において、各再処置は再処置までの最初の間隔よりも長い間隔で行われた。患者の５０％（９／１８）は、再処置なしで３か月またはより長きに達した。患者の６％（２／３２）、３０％（７／２３）および１４％（２／１４）はそれぞれ１、２および３か月時に第１の再処置を受けた。ＲＶＯにおける標的投薬間隔は２～３か月またはより長いものであり得ることをこれらの結果は指し示す。

【0578】

図３０：ＲＶＯコホートにおけるＫＳＩ－３０１の処置持久性。データカットオフ日までに第１の再処置機会（１２週目の来診）に達した無作為化された患者を含む。各バーは個々の患者を表す。再処置は（◆）により指し示される。指し示される直近の評価時点を超えて追跡された患者は右の矢印により指し示される。中止は左の矢印により指し示される。

【0579】

ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善が２０週目、直近の負荷用量後１２週目にＲＶＯ患者において観察された（図３１）。ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも１２週間継続した（図３１）。ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善は、１２週目に達したＲＶＯ患者のより大きいコホートにおいて観察された（図３２）。

【0580】

図３１：ＲＶＯコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝１５。データカットオフ日までに２０週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0581】

図３２：ＲＶＯコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝３２。データカットオフ日までに１２週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0582】

実施例２４
実施例２２～２３に記載の研究の間に、ＫＳＩ－３０１の複数用量曝露は忍容性良好であり、眼内炎症は観察されなかった。１１６の対象が投薬を受け、３３８の合計用量が与えられた（１日目に１０７の用量、４週目に１０３の用量、８週目に９６の用量）。以下が観察された：

【0583】

・研究眼において眼内炎症も眼ＳＡＥもこれまで報告されなかった；

【0584】

・薬物関連有害事象（ＡＥ）も薬物関連の深刻な有害事象（ＳＡＥ）もこれまで報告されなかった；

【0585】

・ほとんどのＡＥは軽度と評価され、硝子体内抗ＶＥＧＦのプロファイルと合致した；

【0586】

・薬物関連ではない目以外の１２のＳＡＥが７人の対象において報告された：

【0587】

・１人の９２歳のＲＶＯ対象は既存の状態に関する入院を伴い、これは死を結果としてもたらした；

【0588】

・１人の６６歳のＲＶＯ対象はめまいに関する入院を伴った；

【0589】

・１人の４３歳のＲＶＯ対象は、オートバイ事故に関する脚の骨折を伴った；

【0590】

・１人の８５歳のＲＶＯ対象は既存の状態に関する入院を伴った。

【0591】

実施例２４
実施例３～５、１５～２３に記載の研究を、図３３に示されるように７２週までさらに延長した。

【0592】

図３３：ＫＳＩ－３０１の硝子体内投与の複数用量安全性、有効性および持久性を評価するための無作為化されたオープンラベル研究の更新された研究設計。

【0593】

研究集団の更新された平均的特徴を表２に示す。

【0594】

【表2】

【0595】

実施例２１に記載の研究に登録された患者のさらなるフォローアップ評価を行った。結果は、３～６またはより多くの月に及んだｗＡＭＤコホートからの患者におけるＫＳＩ－３０１処置の持久性を示す（図３４）。患者の５５％（１６／２９）において、第１の再
処置は直近の負荷用量の６か月後に行われ、これはｗＡＭＤコホートのための研究設計における義務的な再処置であった。患者の７２％（２１／２９）は、直近の負荷用量後に５か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。患者の８４％（２７／３２）は、直近の負荷用量後に４か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。患者の８６％（３０／３５）は、直近の負荷用量後に３か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。１４％（５／３５）は、直近の負荷用量の３か月後またはそれよりも前に再処置された。ｗＡＭＤにおける標的投薬間隔は直近の負荷用量後に３～６またはより多くの月であり得ることをこれらの結果は指し示す。

【0596】

図３４：ｗＡＭＤコホートにおけるＫＳＩ－３０１の処置持久性。データカットオフ日までに第１の再処置機会（１２週目の来診）に達した無作為化された患者を含む。各バーは個々の患者を表す。再処置は（◆）により指し示される。指し示される直近の評価時点を超えて追跡された患者は右の矢印により指し示される。１人の中止された患者は左の矢印により指し示される。

【0597】

ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴの改善は、２４週目、直近の負荷用量後１６週目に患者において維持された（図３５）。このコホートのベースライン（処置前）ＢＣＶＡは６４．１ ＥＴＤＲＳ文字であった。２４週目のＢＣＶＡにおける平均改善は＋５．９文字であった（２０／４０のスネレンＶＡに対応する）。ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴ値の改善は、標準治療の抗ＶＥＧＦ治療において報告された改善（６０．８文字のベースライン、約６文字の増加；または６１．５のベースライン、約５．２文字の増加、２０週目）と同等であった。ＯＣＴ ＣＳＴにおける平均改善は２４週目において－５８ミクロンであった。ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも１６週間継続した（図３５）。

【0598】

最終負荷用量後１６週にかけて、患者は再処置のためにＫＳＩ－３０１の平均で０．１６回の注射を受けた。（図３５）。これは、各々の標識によれば、同じ期間にかけて１．０回の注射の平均回数を要求する標準治療の処置、アフリベルセプトまたはブロルシズマブと比較される。

【0599】

図３５：滲出型ＡＭＤを有する患者における最良矯正視力（ＢＣＶＡ）および網膜厚（ＯＣＴ）における改善。ｗＡＭＤコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝３１。データカットオフ日までに２４週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0600】

実施例２５
実施例２２に記載の研究に登録された患者のさらなるフォローアップ評価を行った。ＤＭＥコホート集団の特徴は、表２に記載される通りであった。結果は、６か月より長きに及んだＤＭＥコホートからの患者におけるＫＳＩ－３０１処置の持久性を示す（図３６）。患者の６９％（９／１３）は、再処置なしで６か月またはより長きに達した。７３％（１１／１５）は、直近の負荷用量後に５か月より長く再処置を要求しなかった。８０％（１６／２０）は、直近の負荷用量後に４か月より長く再処置を要求しなかった。８３％（２０／２４）は、直近の負荷用量後に３か月より長く再処置を要求しなかった。患者の１７％（４／２４）は最初の３か月の間に再処置された。ＤＭＥにおける標的投薬間隔は直近の負荷用量後に３～６またはより多くの月であり得ることをこれらの結果は指し示す。

【0601】

図３６：ＤＭＥコホートにおけるＫＳＩ－３０１の処置持久性。データカットオフ日までに第１の再処置機会（１２週目の来診）に達した無作為化された患者を含む。各バーは個々の患者を表す。再処置は（◆）により指し示される。全ての描写される患者は、指し
示される直近の評価時点を超えて追跡された（右の矢印により指し示される）。

【0602】

ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善が２４週目、直近の負荷用量後１６週目にＤＭＥ患者において観察された（図３７）。２４週目におけるＢＣＶＡにおける平均改善は＋６．８文字であった（約２０／３２^＋２のスネレンＶＡに対応する）。ＯＣＴ ＣＳＴにおける平均改善は２４週目において－１３３ミクロンであった。ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも１６週間継続した。

【0603】

負荷用量後１６週にかけて患者は平均で０．２１回のＫＳＩ－３０１の注射を受けた。（図３７）。これは、標識によれば（アフリベルセプト）、または中枢的な研究設計に基づいて（ブロルシズマブ）、同じ期間にかけて２．０回の注射の平均回数を要求する標準治療の処置、アフリベルセプトまたはブロルシズマブと比較される。

【0604】

図３７：ＤＭＥコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝１９。データカットオフ日までに２４週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0605】

実施例２６
実施例２３に記載の研究に登録された患者のフォローアップ評価を行った。ＲＶＯコホート集団の特徴は、表２に記載される通りであった。結果は、４か月より長きに及んだＲＶＯコホートからの患者におけるＫＳＩ－３０１処置の持久性を示す（図３８）。患者の５３％（１６／３０）は、再処置なしで４か月またはより長きに達した。患者の５５％（１７／３１）は、再処置なしで３か月またはより長きに達した。患者の３４％（１１／３２）は直近の負荷用量後に最初の２か月の間に再処置を受け、４５％（１４／３１）は直近の負荷用量後に最初の３か月の間に再処置を受けた。ＲＶＯにおける標的投薬間隔は２～４か月またはより長いものであり得ることをこれらの結果は指し示す。

【0606】

図３８：ＲＶＯコホートにおけるＫＳＩ－３０１の処置持久性。データカットオフ日までに第１の再処置機会（１２週目の来診）に達した無作為化された患者を含む。各バーは個々の患者を表す。再処置は（◆）により指し示される。指し示される直近の評価時点を超えて追跡された患者は右の矢印により指し示される。中止は左の矢印により指し示される。

【0607】

ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴにおける改善は、２４週目、直近の負荷用量後１６週目にＲＶＯ患者において継続して観察された（図３９）。２４週目におけるＢＣＶＡにおける平均改善は＋２２．２文字であった（２０／３２のスネレンＶＡに対応する）。ＯＣＴ
ＣＳＴにおける平均改善は２４週目において－３５０ミクロンであった。ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも１６週間継続した（図３９）。

【0608】

最終負荷用量後１６週にかけて患者は再処置のために平均で０．４６回のＫＳＩ－３０１の注射を受けた。（図３９）。これは、標識によれば（アフリベルセプト）、または中枢的な研究設計に基づいて（ブロルシズマブ）、同じ期間にかけて３．０回の注射の平均回数を要求する標準治療の処置、アフリベルセプトまたはブロルシズマブと比較される。

【0609】

図３９：ＲＶＯコホートについてのＢＣＶＡおよびＣＳＴ評価。Ｎ＝３０。データカットオフ日までに２４週目の来診に達した無作為化された患者を含む；２．５および５ｍｇの用量をプールした。ＢＣＶＡ＝最良矯正視力；ＯＣＴ＝光干渉断層撮影法；ＣＳＴ＝中
心サブフィールド厚。エラーバーは平均の標準誤差を表す。

【0610】

実施例２７
実施例３～５、および１５～２６に記載の研究の間に、ＫＳＩ－３０１の複数用量曝露は忍容性良好であり、眼内炎症は観察されなかった。１３０の対象が投薬を受け、４２０の合計用量が与えられた（１日目に１２１の用量、４週目に１１２の用量、８週目に１０５の用量）。以下が認められた：

【0611】

・研究眼において眼内炎症も眼ＳＡＥもこれまで報告されなかった；

【0612】

・薬物関連有害事象（ＡＥ）も薬物関連の深刻な有害事象（ＳＡＥ）もこれまで報告されなかった；

【0613】

・ほとんどのＡＥは軽度と評価され、硝子体内抗ＶＥＧＦのプロファイルと合致した；

【0614】

・薬物関連ではない目以外の１６のＳＡＥが１０人の対象において報告された：

【0615】

・１人の９２歳のＲＶＯ対象は既存の状態に関する入院を伴い、これは死を結果としてもたらした；

【0616】

・６人（それぞれ４３、５６、６２、６６、７０および７２歳）のＤＭＥ対象は既存の状態に関する入院を伴った；

【0617】

・１人の６６歳のＲＶＯ対象はめまいに関する入院を伴った；

【0618】

・１人の４３歳のＲＶＯ対象は、オートバイ事故に関する脚の骨折を伴った；

【0619】

・１人の８５歳のＲＶＯ対象は既存の状態に関する入院を伴った。

【0620】

実施例２８：ｗＡＭＤにおけるＫＳＩ－３０１および標準治療の処置のフェーズ２無作為化研究
約５５０人の処置ナイーブｗＡＭＤ患者が、ＫＳＩ－３０１での処置を標準治療の治療剤（アフリベルセプト）での処置と比較する無作為化研究に参加する。標準治療の処置は、４週の間隔で投与される治療剤の３回の負荷用量（２ｍｇ／投与）、続いて初期処置の１６週後に開始される４週毎の維持用量またはシャム注射の交互投与を含む（図４０）。そのため、標準治療の治療剤は患者に８週毎に投与される。

【0621】

ＫＳＩ－３０１は、別の患者コホートに４週の間隔の３回の負荷用量で投与される（５ｍｇ／投与）。最終負荷用量（８週目）後に、患者は、初期処置の１６週後に開始される４週毎の少なくともシャム注射を受ける（図４０）。ＫＳＩ－３０１処置患者の１つのコホートは、直近の負荷用量（８週目）後に１２週毎（Ｑ１２Ｗ）に疾患活動性について評価される。ＫＳＩ－３０１処置患者の別のコホートは、直近の負荷用量（８週目）後に１６週毎（Ｑ１６Ｗ）に疾患活動性について評価される。評価された疾患活動性が予め指定された再処置基準を満たす場合、患者はＫＳＩ－３０１で再処置される。ＫＳＩ－３０１処置患者の第３のコホートは、直近の負荷用量（８週目）後に２０週毎（Ｑ２０Ｗ）にＫＳＩ－３０１を投与される。全ての患者は、直近の負荷用量（８週目）の２０週後にＫＳＩ－３０１を投与される。

【0622】

図４０：処置ナイーブｗＡＭＤ患者の処置においてアフリベルセプトに対してＫＳＩ－３０１を評価するための無作為化研究用の研究設計。ＫＳＩ－３０１は２０週毎のような
低い頻度で投薬される。

【0623】

再処置基準（非負荷用量）
ＫＳＩ－３０１の硝子体内注射での再処置は、以下の再処置基準のうちの少なくとも１つが満たされる場合に行われる。これらの基準は、疾患の再発の徴候および／または疾患の再発に起因する視力低下に関する。

【0624】

－ １２週目と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う≧５０μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；

【0625】

－ ｗＡＭＤ疾患活動性の悪化（例えば網膜内流体の増加、網膜下流体の増加、新たな網膜内出血、新たな網膜下出血）に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと比較した、≧１０文字のＢＣＶＡにおける減少；

【0626】

－ ≧７５μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；

【0627】

－ 新たな黄斑出血。

【0628】

実施例３、１５、２１および２４に記載されるような、フェーズ１ｂ研究におけるＫＳＩ－３０１で処置されたｗＡＭＤ患者の評価の間に観察された疾患活動性を使用して、フェーズ２臨床試験において指定される、より厳格な再処置基準の下での、各患者のための再処置の仮説的なスケジュールを構築した（図４１Ａ）。３２人の総患者のうち、２４人の患者（または７５％）は、再処置のいかなるより早期の必要性もなしに再処置の５か月のキャップ（ｃａｐ）に達することになる（図４１Ａおよび図４１Ｂ）。患者の１２．５％のみが、１２週において第１の再処置を要求し、別の１２．５％は、１６週において第１の再処置を要求することになる（図４１Ａおよび図４１Ｂ）。

【0629】

図４１Ａおよび図４１Ｂ：フェーズ２臨床試験における仮説的な再処置基準の下でのｗＡＭＤコホートにおけるＫＳＩ－３０１の処置持久性（図４１）、およびＱ２０Ｗ投薬において残存する患者の仮説的な確率（図４１Ｂ）。データカットオフ日まで２８週目の前または２８週目に再処置基準を満たしている無作為化された患者を含む。各バーは個々の患者を表す。

【0630】

実施例２９
実施例３～５、１５～２４に記載の研究を７６～１４８週目（１９～３６か月）にさらに延長した（図４３）。図４３は、ＫＳＩ－３０１の硝子体内投与の複数用量安全性、有効性および持久性を評価するための無作為化されたオープンラベル研究の更新された研究設計を示す。研究のｗＡＭＤ、ＤＭＥおよびＲＶＯアームの患者の数はそれぞれ５１、３５および３５であった。

【0631】

実施例３０
この実施例は、実施例２１および２４に記載のｗＡＭＤについてのＫＳＩ－３０１の臨床研究のさらなるフォローアップ評価を示す。平均ＢＣＶＡおよびＯＣＴ ＣＳＴの改善が、４４週目、直近の負荷用量後３６週目に患者において維持されることを結果は示した（図４４）。抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも３６週間継続した。患者の５８％は３２週目に第１の再処置用量を受け（Ｑ６Ｍの投薬）、これは、直近の負荷用量から再処置されていない任意の患者についての義務的な再処置用量であった。さらに、患者は、１２～４０週目の間に平均で１．３２回の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの注射を受け、その４４％は義務的なＱ６Ｍ用量であった。対照的に、同じ期間にかけての従来の処置（アフリベルセ
プト）についての標識にしたがった注射の平均回数は４である。

【0632】

図４５Ａはフォローアップ評価の個々の内訳を示す。ｗＡＭＤコホートからの患者における抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート処置の持久性は３～６またはより多くの月に及んだ。図４５Ｂは、図４５Ａに示される結果を要約する。患者の７２％において、患者は、直近の負荷用量の後の何らかの時期に少なくとも１つの６か月の処置間隔（Ｑ６Ｍ － 処置用量間の間隔についての義務的なキャップ）を達成した（図４５Ｂ）。患者の４９％（２０／４１）は、直近の負荷用量後に６か月にわたり再処置を受けなかった。患者の６６％（２７／４１）は、直近の負荷用量後に５か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。患者の８２％（４０／４９）は、直近の負荷用量後に４か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。患者の９２％（４５／４９）は、直近の負荷用量後に３か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。８％（４／４９）のみが、直近の負荷用量の２か月後またはそれよりも前に再処置された。ｗＡＭＤにおける抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの標的投薬間隔は、直近の負荷用量後に３～６またはより多くの月であり得ることをこれらの結果は指し示す。

【0633】

そのため、ｗＡＭＤ患者の半分近くは、第１の再処置まで６か月の時間であり、＞６０％のｗＡＭＤ患者は、フォローアップの間に６か月の間隔を少なくとも１回達成した。これらの結果はＫＳＩ－３０１単独の半減期に基づけば予想外であった。

【0634】

図４６は、１年を通じて６か月の投薬でＫＳＩ－３０１を用いて処置された、上記のフェーズ１ｂ研究におけるｗＡＭＤ患者の症例を示す。指し示される時点においてＯＣＴ画像を撮影した。ＢＣＶＡもまた評価した（週の標識の下のＥＴＤＲＳ文字値における変化により指し示される）。ＯＣＴおよびＢＣＶＡの改善が、直近の負荷用量の１か月後（１２週目）もの早期に観察され、直近の負荷用量後に少なくとも６か月（３２週目）にわたり持続された。６か月時（３２週目）に、義務的な再処置用量が投与された。再処置の６か月（５６週目）後に、患者はＯＣＴおよびＢＣＶＡの改善を維持した。合計で、患者は処置の最初の１年中に４回の硝子体内注射を受けた。

【0635】

一部の実施形態において、ｗＡＭＤ患者は、硝子体内に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１を、約３か月、約４か月、約５か月、もしくは約６か月の投薬間隔、または上記の値のうちの任意の２つの間の任意の時間間隔で、患者が直近の負荷用量を投与された後の任意の期間において投与される。一部の実施形態において、ｗＡＭＤ患者は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を、直近の負荷用量の少なくとも約３か月後、少なくとも約４か月後、少なくとも約５か月後、もしくは少なくとも約６か月後もしくはより後まで、または上記の値のうちの任意の２つの間の任意の時点まで、投与されない。一部の実施形態において、ｗＡＭＤ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約６か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない約４０％、約５０％、約５５％、約６０％、もしくは約６５％またはより高い可能性を有する。一部の実施形態において、ｗＡＭＤ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約５か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、もしくは約７０％またはより高い可能性を有する。一部の実施形態において、ｗＡＭＤ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約４か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない約５０％、約６０％、約７０％、もしくは約８０％またはより高い可能性を有する。一部の実施形態において、ｗＡＭＤ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約３か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない約６０％、約７０％、約８０％、もしくは約９０％またはより高い可能性を有する。一部の実施形態において、対象は、負荷用量を含めて、ｗＡＭＤに対する処置の最初の１年中に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの８回またはより少ない、７回またはより少ない、６回またはより少ない、５回またはより少ない、４回またはより少ない硝子体内注射を受ける。一部の実施形態において、対象は、ｗＡＭＤの処置のために１年当たりで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの４回またはより少ない、３回またはより少ない、２回またはより少ない、または１回の維持用量を受ける。

【0636】

実施例３１
この実施例は、処置ナイーブｗＡＭＤについてのアフリベルセプト（Ｅｙｌｅａ（登録商標））長間隔ＲＣＴデータ（図４７）およびｗＡＭＤについてのＥｙｌｅａ（登録商標）現実世界データ（図４８）と比較したＫＳＩ－３０１持久性のベンチマーキングを示す。上記のＫＳＩ－３０１フェーズ１ｂ研究における処置ナイーブｗＡＭＤ患者の間の処置間隔の分布が、ラニビズマブおよびアフリベルセプト、２つの従来の抗ＶＥＧＦ処置の組合せについてのｔｒｅａｔ－ａｎｄ－ｅｘｔｅｎｄ無作為化臨床試験におけるものと比較されたことを図４７は示す。従来の抗ＶＥＧＦ処置を受けた患者のほぼ５０％は４週の処置間隔を有し、処置間隔は患者の約１５％について１２週（３か月）の最大間隔に延長された。対照的に、ＫＳＩ－３０１で処置された患者の約５０％は、研究の下で許容された最大間隔である２４週（６か月）の処置間隔を有した。ＫＳＩ－３０１処置を受けた患者の８０％より多くは、１６週またはより長い処置間隔を有し、従来の抗ＶＥＧＦ処置により達成された最大処置間隔を超えた。

【0637】

図４８は、上記のフェーズ１ｂ研究におけるＫＳＩ－３０１で処置された患者についての平均処置間隔およびアフリベルセプト（Ｅｙｌｅａ（登録商標））ｔｒｅａｔ－ａｎｄ－ｅｘｔｅｎｄについての現実世界データからの平均処置間隔の比較を示す。アフリベルセプトで処置された患者は、８週の平均処置間隔、および９．６週の平均最大処置間隔を有した。対照的に、ＫＳＩ－３０１での患者は、１９．３週の平均の第１の間隔（直近の負荷用量後の第１の再処置までの平均間隔）、および２０．６週の平均最大間隔を有した。これらの結果は、ｗＡＭＤを処置するための従来の抗ＶＥＧＦ処置と比較した抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの治療効果の優位な持続期間を実証する。

【0638】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１を用いてｗＡＭＤを処置するための平均最大間隔は、従来の抗ＶＥＧＦ処置の平均最大間隔よりも少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約１００％、少なくとも約１１０％、少なくとも約１２０％、少なくとも約１３０％、少なくとも約１４０％、少なくとも約１５０％、少なくとも約１７０％または少なくとも約２００％長い。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートは、ｗＡＭＤを処置するための従来の抗ＶＥＧＦ処置の投与の頻度の、最高でも約８０％、最高でも約７０％、最高でも約６０％、最高でも約５０％、最高でも約４０％、最高でも約３０％、最高でも約２０％、最高でも約１０％またはより低い頻度でｗＡＭＤ患者に投与される。

【0639】

実施例３２
この実施例は、実施例２２および２５に記載のＤＭＥに対するＫＳＩ－３０１の臨床研究のさらなるフォローアップ評価を示す。ＫＳＩ－３０１の治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも３６週間継続したことを図４９は示す。患者は、１２～４０週目の間に平均で０．６１回の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの注射を受け、患者の６７％は再処置注射を要求しなかった。対照的に、同じ期間にかけての従来の処置（アフリベルセプト）についての標識にしたがった注射の平均回数は５である。

【0640】

図５０Ａはフォローアップ評価の個々の内訳を示す。ＤＭＥコホートからの患者におけるＫＳＩ－３０１処置の持久性は３～６またはより多くの月まで及んだ。図５０Ｂは、図
５０Ａに示される結果を要約する。患者の４５％（１５／３３）は、負荷用量後に再処置用量をこれまで（直近の負荷用量から６か月より長く）要求していない。患者の７９％において、患者は、直近の負荷用量後の何らかの時点において６か月またはより長い少なくとも１つの処置間隔を達成した。患者の６７％（２２／３３）において再処置までの時間は、直近の負荷用量後に６か月またはより長かった。患者の７０％（２３／３３）は、直近の負荷用量後に５か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。患者の７６％（２５／３３）は、直近の負荷用量後に４か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。患者の９７％（３２／３３）は、直近の負荷用量後に３か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。患者の３％（１／３３）のみが、直近の負荷用量の２か月後に再処置された。いずれの患者も、直近の負荷用量後に２か月の前に再処置されなかった。

【0641】

ＤＭＥにおける抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の標的投薬間隔は直近の負荷用量後に３～６またはより多くの月であり得ることをこれらの結果は指し示す。

【0642】

要約すると、ＤＭＥ患者の２／３は、３回の負荷用量後に６か月より長く追加の処置を要求しなかった。これらの結果は、市販の抗ＶＥＧＦ処置でのＤＭＥにおける高い処置必要性（例えば、ＤＲＣＲ．ｎｅｔ処置アルゴリズムに基づく第１年における注射のメジアン回数は９～１０である）に基づいては予測されなかったであろう。

【0643】

図５１は、負荷期後に処置なしでＫＳＩ－３０１を用いて処置された、上記のフェーズ１ｂ研究におけるＤＭＥ患者の症例を示す。指し示される時点においてＯＣＴ画像を撮影した。ＢＣＶＡもまた評価した（週の標識の下のＥＴＤＲＳ文字値における変化により指し示される）。ＯＣＴおよびＢＣＶＡの改善が、直近の負荷用量の１か月後（１２週目）もの早期に観察され、直近の負荷用量後に少なくとも１２か月（５６週目）にわたり持続された。再処置用量は直近の負荷用量後に１２か月を超えて要求されなかった。合計で、患者は処置の最初の１年中に３回の硝子体内注射を受けた。

【0644】

一部の実施形態において、ＤＭＥ患者は、硝子体内に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１を、約３か月、約４か月、約５か月、約６か月、約７か月、約８か月、約９か月、または約１０か月、約１１か月、約１２か月、約１３か月、もしくは約１４か月もしくはより長い投薬間隔、または上記の値のうちの任意の２つの間の任意の時間間隔で、患者が直近の負荷用量を投与された後の任意の期間において投与される。一部の実施形態において、ＤＭＥ患者は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を、直近の負荷用量の少なくとも約３か月後、少なくとも約４か月後、少なくとも約５か月後、少なくとも約６か月後、少なくとも約７か月後、少なくとも約８か月後、少なくとも約９か月後、少なくとも約１０か月後、少なくとも約１１か月後、少なくとも約１２か月後、少なくとも約１３か月後、もしくは少なくとも約１４か月後もしくはより後まで、または上記の値のうちの任意の２つの間の任意の時点まで、投与されない。一部の実施形態において、ＤＭＥ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約７か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、もしくは約５０％またはより高い可能性を有する。一部の実施形態において、ＤＭＥ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約６か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、または少なくとも約６５％の可能性を有する。一部の実施形態において、ＤＭＥ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約５か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、または少なくとも約７０％の可能性を有する。一部の実施形態において、ＤＭＥ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約４か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約７５％の可能性を有する。一部の実施形態において、ＤＭＥ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約３か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％の可能性を有する。一部の実施形態において、対象は、負荷用量を含めて、ＤＭＥに対する処置の最初の１年中に、８回またはより少ない、７回またはより少ない、６回またはより少ない、５回またはより少ない、４回またはより少ない、または３回またはより少ない抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの硝子体内注射を受ける。一部の実施形態において、対象は、ＤＭＥの処置のために１年当たりで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの４回もしくはより少ない、３回もしくはより少ない、２回もしくはより少ない、または１回もしくはより少ない維持用量を受ける、または維持用量を受けない。

【0645】

実施例３３
この実施例は、ＤＭＥにおけるＥｙｌｅａ（登録商標）と比較したＫＳＩ－３０１持久性のベンチマーキングを示す。図５２は、上記のフェーズ１ｂ研究におけるＫＳＩ－３０１（右）、または従来の抗ＶＥＧＦ処置、Ｅｙｌｅａ（登録商標）（アフリベルセプト）（左）で処置されたＤＭＥを有する患者について１年の間隔中に要求された注射の平均回数を示す。従来の抗ＶＥＧＦ処置での患者は、処置の最初の１年中に平均で６回の月毎の負荷用量、および３．２回の維持用量、合計で９．２回の注射を要求した。対照的に、ＫＳＩ－３０１で処置された患者は、処置の最初の１年中に平均で３回の月毎の負荷用量、および１回の維持用量、合計で４回の注射のみを要求した。そのため、ＫＳＩ－３０１は、従来の抗ＶＥＧＦ処置と比較して半分の回数の負荷および維持用量でのＤＭＥの処置を可能とした。これらの結果は、ＤＭＥを処置するための従来の抗ＶＥＧＦ処置と比較した抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの治療効果の優位な持続期間を実証する。

【0646】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１でのＤＭＥの処置のために要求される負荷用量（例えば、月毎の負荷用量）の回数は、従来の抗ＶＥＧＦ処置での処置のために要求される負荷用量の回数の最高でも約７５％、最高でも約７０％、最高でも約６５％、最高でも約６０％、最高でも約５５％、最高でも約５０％、最高でも約４５％、または最高でも約４０％である。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートでのＤＭＥの処置のために要求される維持用量の回数は、従来の抗ＶＥＧＦ処置での処置のために要求される維持用量の回数の最高でも約７５％、最高でも約７０％、最高でも約６５％、最高でも約６０％、最高でも約５５％、最高でも約５０％、最高でも約４５％、または最高でも約４０％である。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートでのＤＭＥの処置のために要求される１年当たりの用量の総数は、従来の抗ＶＥＧＦ処置での処置について１年当たりに要求される用量の総数の最高でも約７５％、最高でも約７０％、最高でも約６５％、最高でも約６０％、最高でも約５５％、最高でも約５０％、最高でも約４５％、または最高でも約４０％である。

【0647】

実施例３４
この実施例は、実施例２３および２６に記載のＲＶＯに対するＫＳＩ－３０１の臨床研究のさらなるフォローアップ評価を示す。抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの治療効果は負荷期の間に持続され、８週目に投与された最終負荷用量後に少なくとも３６週間継続したことを図５３は示す。患者は、１２～４０週目の間に平均で１．３３回の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの注射を受け、患者の３６％のみが１回より多くの再処置用量を要求した。対照的に、同じ期間にかけての従来の処置（アフリベルセプト）についての標識にしたがった注射の平均回数は８である。

【0648】

図５４Ａはフォローアップ評価の個々の内訳を示す。ＲＶＯコホートからの患者におけ
るＫＳＩ－３０１処置の持久性は、３回の月毎の負荷用量後に２～４またはより多くの月まで及んだ。図５４Ｂは、図５４Ａに示される結果を要約する。患者の８１％は、直近の負荷用量後の何らかの時点において４か月またはより長い少なくとも１つの処置間隔を達成した。患者の５６％（１８／３２）において再処置までの時間は、直近の負荷用量後に４か月またはより長かった。患者の６６％（２１／３２）は、直近の負荷用量後に３か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。患者の９４％（３１／３３）は、直近の負荷用量後に２か月またはより長きにわたり再処置を受けなかった。患者の６％（２／３４）のみが、直近の負荷用量の１か月後に再処置された。

【0649】

ＲＶＯにおける抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１の標的投薬間隔は、直近の負荷用量後に２～４か月またはより長くであり得ることをこれらの結果は指し示す。

【0650】

図５６は、ＫＳＩ－３０１で処置された、上記のフェーズ１ｂ研究におけるＣＲＶＯ患者の症例を示す。指し示される時点においてＯＣＴ画像を撮影し、厚さの測定値は、左の週の標識の下に指し示される。ＢＣＶＡもまた評価した（右のＥＴＤＲＳ文字値における変化により指し示される）。処置前のＯＣＴ測定は、患者は最も重篤なＣＲＶＯを有することを指し示した。ＯＣＴおよびＢＣＶＡの改善が第１の負荷用量の１週後もの早期に観察され、次の月毎の負荷用量までの翌３週にかけて継続して改善された。ＯＣＴは継続して改善され、ＢＣＶＡは第２の負荷用量の１か月後に維持された。抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの２回の負荷用量のみで最も重篤なＣＲＶＯ症例を制御することが可能であり得ることをこれらの結果は指し示した。

【0651】

一部の実施形態において、ＲＶＯ（例えば、ＢＲＶＯ、ＣＲＶＯ）患者は、硝子体内に有効量の抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１を、約２か月、約３か月、約４か月、約５か月、約６か月、約７か月、約８か月、約９か月、約１０か月、約１１か月、約１２か月、約１３か月、約１４か月、もしくは約１５か月もしくはより長い投薬間隔、または上記の値のうちの任意の２つの間の任意の時間間隔で、直近の負荷用量後の任意の期間において、投与される。一部の実施形態において、ＲＶＯ患者は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を、直近の負荷用量の少なくとも約２か月後、少なくとも約３か月後、少なくとも約４か月後、少なくとも約５か月後、少なくとも約６か月後、少なくとも約７か月後、少なくとも約８か月後、少なくとも約９か月後、少なくとも約１０か月後、少なくとも約１１か月後、少なくとも約１２か月後、少なくとも約１３か月後、少なくとも約１４か月後、もしくは少なくとも約１５か月後もしくはより後まで、または上記の値のうちの任意の２つの間の任意の時点まで、投与されない。一部の実施形態において、ＲＶＯ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約４か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、もしくは約７０％またはより高い可能性を有する。一部の実施形態において、ＲＶＯ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約３か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない約５０％もしくはより高い、約５５％もしくはより高い、約６０％もしくはより高い、約６５％もしくはより高い、または約７０％もしくはより高い可能性を有する。一部の実施形態において、ＲＶＯ患者は、直近の負荷用量または直近の維持用量の約２か月後またはより後まで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの維持用量を要求しない約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、約９０％、もしくは約９５％またはより高い可能性を有する。一部の実施形態において、対象は、負荷用量を含めて、ＲＶＯに対する処置の最初の１年中に、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの８回またはより少ない、７回またはより少ない、６回またはより少ない、５回またはより少ない、４回またはより少ない硝子体内注射を受ける。一部の実施形態において、対象は、ＲＶＯの処置のために１年当たりで抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの５回もしくはより少ない、４回もしくはより少ない、３回もしくはより少ない、２回もしくはより少ない、または１回の維持用量を受ける。一部の実施形態において、ＲＶＯ患者（例えば、ＣＲＶＯ患者）は、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの２または３回の負荷用量を受ける。

【0652】

実施例３５
この実施例は、ＲＶＯにおけるＥｙｌｅａ（登録商標）と比較したＫＳＩ－３０１持久性のベンチマーキングを示す。図５５は、上記のフェーズ１ｂ研究におけるＫＳＩ－３０１（右）、または従来の抗ＶＥＧＦ処置であるＥｙｌｅａ（登録商標）（アフリベルセプト）（左）で処置されたＲＶＯを有する患者についての１年の間隔中に要求された注射の平均回数を示す。従来の抗ＶＥＧＦ処置での患者は、処置の最初の１年中に平均で６回の月毎の負荷用量、および２．６回の維持用量、合計で８．６回の注射を要求した。対照的に、ＫＳＩ－３０１で処置された患者は、処置の最初の１年中に平均で３回の月毎の負荷用量、および１．７回の維持用量、合計で４．７回の注射のみを要求した。そのため、ＫＳＩ－３０１は、従来の抗ＶＥＧＦ処置と比較して半分の回数の負荷用量、および約２／３の回数の維持用量でのＲＶＯの処置を可能とした。これらの結果は、ＲＶＯを処置するための従来の抗ＶＥＧＦ処置と比較した抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートの治療効果の優位な持続期間を実証する。

【0653】

一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲート、例えば、ＫＳＩ－３０１でのＲＶＯの処置のために要求される負荷用量（例えば、月毎の負荷用量）の回数は、従来の抗ＶＥＧＦ処置での処置のために要求される負荷用量の回数の最高でも約７５％、最高でも約７０％、最高でも約６５％、最高でも約６０％、最高でも約５５％、最高でも約５０％、最高でも約４５％、または最高でも約４０％である。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートでのＲＶＯの処置のために要求される維持用量の回数は、従来の抗ＶＥＧＦ処置での処置のために要求される維持用量の回数の最高でも約８０％、最高でも約７５％、最高でも約７０％、最高でも約６５％、または最高でも約６０％である。一部の実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体コンジュゲートでのＲＶＯの処置のために要求される１年当たりの用量の総数は、従来の抗ＶＥＧＦ処置での処置について１年当たりに要求される用量の総数の最高でも約８０％、最高でも約７５％、最高でも約７０％、最高でも約６５％、最高でも約６０％、最高でも約５５％、または最高でも約５０％である。

【0654】

実施例３６
この実施例は、（負荷用量後に）２０週毎に１回程度の低い頻度で投薬されるＫＳＩ－３０１でのフェーズ２ｂ／３ ｗＡＭＤ研究を提供する。図５７は、研究設計の構成図を示す。研究のＫＳＩ－３０１処置アームの患者は、任意のフォローアップ評価において疾患活動性評価基準（下記）が満たされるまで、Ｑ１２Ｗ、Ｑ１６ＷまたはＱ２０Ｗの投薬スケジュールとされ、該基準が満たされた時点において患者は維持用量を投与される。

【0655】

疾患活動性評価基準（非負荷用量）
これらの基準は、疾患の再発の徴候および／または疾患の再発に起因する視力低下に関する。
－ １２週目と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う≧５０μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；
－ ｗＡＭＤ活動性の悪化（例えば網膜内流体の増加、網膜下流体の増加、新たな網膜内出血、新たな網膜下出血）に起因する、最良の以前のＢＣＶＡと比較した、≧１０文字のＢＣＶＡにおける減少；
－ １２週目と比較した、≧７５μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；
－ 新たな黄斑出血。

【0656】

実施例３７
この実施例は、（負荷用量後に）２４週毎に１回程度の低い頻度で投薬されるＫＳＩ－３０１でのフェーズ３ ＤＭＥ研究を提供する。図５８は研究設計の構成図を示す。研究のＫＳＩ－３０１処置アームの患者は、任意のフォローアップ評価において疾患活動性評価基準（下記）が満たされるまで、Ｑ８Ｗ、Ｑ１２Ｗ、Ｑ１６Ｗ、Ｑ２０Ｗ、Ｑ２４Ｗの投薬スケジュールとされ、該基準が満たされた時点において患者は維持用量を投与される。

【0657】

疾患活動性評価基準（非負荷用量）
これらの基準は、疾患の再発の徴候および／または疾患の再発に起因する視力低下に関する。
－ ＤＭＥ疾患活動性の悪化に起因する、２つの最良の先行するＢＣＶＡ評価の平均と比較した、≧５文字のＢＣＶＡにおける減少を伴う、最も低い先行する測定値と比較した、≧５０μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；
－ ＤＭＥ疾患活動性の悪化に起因する、最も低い先行する測定値と比較した、≧７５μｍのＯＣＴ ＣＳＴにおける増加；
－ 新たなまたは悪化した増殖性ＤＲ（ＰＤＲ）。

【0658】

実施例３８
この実施例は、（負荷用量後に）８週に１回投薬されるＫＳＩ－３０１でのフェーズ３
ＲＶＯ研究を提供する。図５８は研究設計の構成図を示す。研究のＫＳＩ－３０１処置アームの患者は、２回の月毎の負荷用量、続いて２回の８週毎の投薬、次に投薬を個別化するための疾患活動性評価を伴う８週毎の投薬を受ける。疾患活動性評価基準（下記）が任意のフォローアップ評価において満たされた場合、患者は維持用量を投与される。

【0659】

疾患活動性評価基準（非負荷用量）
これらの基準は、疾患の再発の徴候および／または疾患の再発に起因する視力低下に関する。
－ ＲＶＯ疾患活動性の悪化に起因する、最も低い先行する測定値と比較した、≧７５μｍのＯＣＴ中心サブフィールド網膜厚（ＣＳＴ）における増加；
－ ＲＶＯ疾患活動性の悪化に起因する、最も低い先行する測定値と比較した、≧７５μｍのＯＣＴ ＣＳＴにおける増加。

【0660】

実施例３９
この実施例は、（負荷用量後に）６か月毎に１回程度の低い頻度で投薬されるＫＳＩ－３０１での非増殖性糖尿病網膜症（ＮＰＤＲ）についての臨床研究を示す。研究のＫＳＩ－３０１処置アームの患者は、８週離して２回の負荷用量を受ける。次に患者は４または６か月毎に維持用量を受ける。エンドポイントは、灌流だけでなく、＞＝２または３ステップの改善および２または３ステップの悪化を伴う患者のＥＴＤＲＳ ＤＲＳＳ（糖尿病網膜症重症度スコア）％を使用する。

【0661】

実施例４０
実施例３～５、１５～２６、および２９～３５に記載の研究の間に、ＫＳＩ－３０１の複数用量曝露は忍容性良好であり、眼内炎症は観察されなかった。１３０の対象が投薬を受け、５４６の合計用量が与えられた。１２１の対象は、フェーズ１ｂにおける負荷期を完了し、８１人は、１２週目またはそれ以後に少なくとも１回の追加の再処置を受けた。以下が認められた：
－ ほとんどの有害事象（ＡＥ）は軽度と評価され、従来の硝子体内抗ＶＥＧＦ処置のプロファイルと合致する；
－ これまで、非薬物関連の、２９の深刻な有害事象（ＳＡＥ）が１６の対象において報告された；
－ 研究眼における１つの眼ＳＡＥ（薬物関連ではない、全身性流体過負荷に二次的なＤＭＥの悪化）；
－ 眼内炎症の２つのみのＡＥ、両方とも１＋の硝子体細胞が認められ、完全に解消された：
・注射当たりを基準にして０．３７％（２／５４６の注射）、患者当たりを基準にして１．５％（２／１３０人の患者）の率
・いずれの患者においても血管炎も網膜炎もなし。

【0662】

上記または下記において参照される全ての特許出願、ウェブサイト、他の刊行物、およびアクセッション番号などは、各個々の項目が参照により組み込まれることを特におよび個々に指し示された場合と同じ程度まで全ての目的のために全体が参照により組み込まれる。配列の異なるバージョンが異なる時点においてアクセッション番号と関連付けられる場合、本出願の有効出願日におけるアクセッション番号と関連付けられるバージョンが意味される。有効出願日は、実際の出願日または該当する場合にはアクセッション番号に言及する優先権出願の出願日のうちの最先のものを意味する。同様に、刊行物またはウェブサイトなどの異なるバージョンが異なる時点において刊行されている場合、他に指し示されなければ、本出願の有効出願日における最も最近に刊行されたバージョンが意味される。本明細書に開示される任意の特徴、ステップ、要素、実施形態、または態様は、他に特に指し示されなければ、任意の他のものと組み合わせて使用され得る。一部の実施形態は、明確性および理解の目的のためにイラストレーションおよび例によりある程度詳細に記載されているが、ある特定の変更および修飾が添付の請求項の範囲内で実施され得ることは明らかである。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17A】

【図17B】

【図18A】

【図18B】

【図18C】

【図18D】

【図19】

【図20】

【図21A】

【図21B】

【図21C】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【図29】

【図30】

【図31】

【図32】

【図33】

【図34】

【図35】

【図36】

【図37】

【図38】

【図39】

【図40】

【図41A】

【図41B】

【図42】

【図43】

【図44】

【図45A】

【図45B】

【図46】

【図47】

【図48】

【図49】

【図50A】

【図50B】

【図51】

【図52】

【図53】

【図54A】

【図54B】

【図55】

【図56】

【図57】

【図58】

【図59】

【配列表】

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【国際調査報告】