(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-12-26
(54)【発明の名称】ＢＣＭＡおよびＣＤ３に対する抗体を用いる処置方法
(51)【国際特許分類】
A61K 39/395 20060101AFI20221219BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20221219BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20221219BHJP
A61K 31/573 20060101ALI20221219BHJP
C07K 16/46 20060101ALI20221219BHJP
C12N 15/13 20060101ALI20221219BHJP
【ＦＩ】
A61K39/395 T
A61P35/00
A61K45/00
A61K31/573
C07K16/46 ZNA
C12N15/13
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022525788
(86)(22)【出願日】2020-11-04
(85)【翻訳文提出日】2022-06-22
(86)【国際出願番号】 US2020058939
(87)【国際公開番号】W WO2021092056
(87)【国際公開日】2021-05-14
(31)【優先権主張番号】20179573.9
(32)【優先日】2020-06-11
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(31)【優先権主張番号】19207293.2
(32)【優先日】2019-11-05
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】391015708
【氏名又は名称】ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー
【氏名又は名称原語表記】ＢＲＩＳＴＯＬ－ＭＹＥＲＳ ＳＱＵＩＢＢ ＣＯＭＰＡＮＹ
(74)【代理人】
【識別番号】100145403
【弁理士】
【氏名又は名称】山尾 憲人
(74)【代理人】
【識別番号】100122301
【弁理士】
【氏名又は名称】冨田 憲史
(74)【代理人】
【識別番号】100157956
【弁理士】
【氏名又は名称】稲井 史生
(74)【代理人】
【識別番号】100170520
【弁理士】
【氏名又は名称】笹倉 真奈美
(72)【発明者】
【氏名】バージェス，マイケル
(72)【発明者】
【氏名】ヒージ，クリステン
(72)【発明者】
【氏名】ダッタ，カウシク
(72)【発明者】
【氏名】ボス，アイザック
(72)【発明者】
【氏名】ヴー，ミン ディエム
【テーマコード（参考）】
4C084
4C085
4C086
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C084AA19
4C084ZA072
4C084ZB212
4C084ZB261
4C084ZB262
4C084ZB352
4C084ZC412
4C084ZC751
4C085AA14
4C085BB11
4C085BB41
4C085EE01
4C085GG02
4C086AA01
4C086AA02
4C086DA10
4C086MA02
4C086MA04
4C086NA06
4C086ZB26
4C086ZC75
4H045AA11
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA10
4H045BA40
4H045CA42
4H045DA76
4H045EA28
4H045FA74
(57)【要約】
本発明は、ＣＤ３およびＢＣＭＡに結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を用いた用量漸増投与レジメンを用いる、ＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）を有する患者を処置する方法に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
患者においてＢＣＭＡ発現に関連する障害の処置に用いるための、ＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する多重特異性抗体であって、ここで、該処置が、（ｉ）多重特異性抗体の１回以上の開始用量が患者に投与される、開始期；および
（ｉｉ）多重特異性抗体の最初の維持用量が患者に投与され、要すれば、その後、多特異性抗体の少なくとも１回の追加維持用量が投与される、維持期
を含み、ここで、各維持用量は１回以上の開始用量よりも多い、
投与レジメンにおける多重特異性抗体の投与を含む、多重特異性抗体。
【請求項2】
多重特異性抗体が二重特異性抗体であり、要すれば、ここで、二重特異性抗体が、抗ＢＣＭＡ抗体の２つのＦａｂフラグメント、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、および１つのＦｃ部分を含む３価の二重特異性抗体であり、かつＢＣＭＡ Ｆａｂ－Ｆｃ－ＣＤ３ Ｆａｂ－ＢＣＭＡ Ｆａｂのフォーマットである、請求項１に記載の多重特異性抗体。
【請求項3】
抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントが、ａ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｂ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１３のＶＬ領域、
ｃ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域、
ｄ）配列番号３８のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｅ）配列番号３９のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｆ）配列番号４０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、または
ｇ）配列番号９のＶＨ領域および配列番号１１のＶＬ領域
からなる群より選択されるＶＨおよびＶＬを含む、請求項１または２に記載の多重特異性抗体。
【請求項4】
抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントが、配列番号７のＶＨ領域および配列番号８のＶＬ領域を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項5】
二重特異性抗体が、配列番号４８、配列番号５５、配列番号５６および配列番号５７（ｘ２）の重鎖ポリペプチドおよび軽鎖ポリペプチドを含む、請求項２に記載の多重特異性抗体。
【請求項6】
開始期が単回の固定用量を含み、要すれば、ここで、単回の固定用量が約１．５ｍｇ～４．５ｍｇ、例えば約３ｍｇである、請求項１から５のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項7】
最初の維持用量が、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量である、請求項１～６のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項8】
開始期が単回の固定用量を含み、要すれば、ここで、単回の固定用量が約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ、例えば約６ｍｇである、請求項１から５のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項9】
最初の維持用量が、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量である、請求項１から６および８のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項10】
少なくとも単回の追加の維持用量が、最初の維持用量と同じである、請求項１から９のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項11】
少なくとも単回の追加の維持用量が、最初の維持用量よりも多い、請求項１から９のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項12】
少なくとも単回の追加の維持用量が、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量である、請求項１から７のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項13】
患者が多重特異性抗体の投与に関連する有害事象を発症したか、または発症のリスクを有しており、ここで、処置がさらに以下：ａ）ステロイド、例えばコルチコステロイド；
ｂ）ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－６、ＩＬ－６受容体（ＩＬ－６Ｒ）、ＩＦＮγ、ＩＦＮＧＲ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ／ＣＤ２５、ＭＣＰ－１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ΜΙΡΙβ、ＣＣＲ５、ＴＮＦα、ＴＮＦＲ１、ＩＬ－１およびＩＬ－１Ｒα／ＩＬ－１βから選択されたサイトカイン受容体またはサイトカインのアンタゴニスト、ここで、該アンタゴニストが、抗体または抗原結合フラグメント、低分子、タンパク質またはペプチドおよび核酸から選択される、アンタゴニスト；
ｃ）制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）集団を減少させる分子、例えばシクロホスファミド；
ｄ）解熱剤、鎮痛剤および／または抗生物質；ならびに／あるいは
ｅ）発作予防薬、例えばレベチラセタム、
を投与することを含む、請求項１から１２のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項14】
ＢＣＭＡ発現に関連する障害が、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌である、請求項１から１１のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項15】
多重特異性抗体が静脈内に投与される、請求項１から１２のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本出願は、２０１９年１１月５日出願の欧州特許出願第１９２０７２９３．２号および２０２０年６月１１日出願の欧州特許出願第２０１７９５７３．９号に基づく優先権の利益を主張し、それぞれの内容は、引用によりその全体が本明細書中に包含される。
【0002】
電子的に提出された配列表の引用
本出願は、２０２０年１１月４日に作成され、サイズが６８，１４６バイトの“１４２４７－６０８－２２８＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ．ＴＸＴ”と称されたテキストファイルで提出された配列表を引用により本明細書中に包含させる。
本出願は、２０２０年１１月４日に作成され、サイズが６８，１４６バイトの“１４２４７－６０８－２２８＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ．ＴＸＴ”と称されたテキストファイルで提出された配列表を引用により本明細書中に包含させる。
【0003】
発明の分野
本発明は、ＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）の処置に用いるためのＢＣＭＡおよびＣＤ３に対する抗体に関する。
本発明は、ＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）の処置に用いるためのＢＣＭＡおよびＣＤ３に対する抗体に関する。
【背景技術】
【0004】
背景
ＢＣＭＡおよびＣＤ３に対する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は知られており、顕著な治療効果を示している。しかしながら、これらの抗体は、副作用、特にサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を伴い得る。したがって、有利な利益－リスクプロファイルを達成する投与レジメンが必要とされている。
ＢＣＭＡおよびＣＤ３に対する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は知られており、顕著な治療効果を示している。しかしながら、これらの抗体は、副作用、特にサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を伴い得る。したがって、有利な利益－リスクプロファイルを達成する投与レジメンが必要とされている。
【発明の概要】
【0005】
概要
本発明は、ＣＤ３およびＢＣＭＡに結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を用いた用量漸増投与レジメンを用いて、ＢＣＭＡ発現と関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）を有する患者を処置する方法に関する。この投与レジメンは、サイトカイン放出の減少により毒性を著しく低減する。
本発明は、ＣＤ３およびＢＣＭＡに結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を用いた用量漸増投与レジメンを用いて、ＢＣＭＡ発現と関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）を有する患者を処置する方法に関する。この投与レジメンは、サイトカイン放出の減少により毒性を著しく低減する。
【0006】
したがって、一面において、本発明は、患者（例えば、ヒト）におけるＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）を処置する方法を提供し、ここで、この処置は、ＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を、以下：
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１回以上の開始用量が患者に投与される、開始期；および
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量が患者に投与され、要すれば、その後、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の少なくとも１回の追加の維持用量が投与される、維持期、
を含み、ここで、各維持用量は１回以上の開始用量よりも多い、
投与レジメンで投与することを含む。
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１回以上の開始用量が患者に投与される、開始期；および
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量が患者に投与され、要すれば、その後、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の少なくとも１回の追加の維持用量が投与される、維持期、
を含み、ここで、各維持用量は１回以上の開始用量よりも多い、
投与レジメンで投与することを含む。
【0007】
別の面において、本発明は、患者（例えば、ヒト）におけるＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）の処置に用いるためのＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を提供し、ここで、処置は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を、以下：
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１回以上の開始用量が患者に投与される、開始期；および
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量が患者に投与され、要すれば、その後、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の少なくとも１回の追加の維持用量が投与される、維持期
を含み、ここで、各維持用量は１回以上の開始用量よりも多い、
投与レジメンで投与することを含む。
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１回以上の開始用量が患者に投与される、開始期；および
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量が患者に投与され、要すれば、その後、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の少なくとも１回の追加の維持用量が投与される、維持期
を含み、ここで、各維持用量は１回以上の開始用量よりも多い、
投与レジメンで投与することを含む。
【0008】
ある態様において、１回以上の開始用量は、約１．５ｍｇ～４．５ｍｇ；約２ｍｇ～４ｍｇ；約２．５ｍｇ～３．５ｍｇ、例えば、約３ｍｇの固定用量を含む。好ましい態様において、１回以上の開始用量は、約１．５ｍｇ～４．５ｍｇ；約２ｍｇ～４ｍｇ；約２．５ｍｇ～３．５ｍｇ、例えば約３ｍｇの単回の固定用量を含む。
【0009】
ある態様において、最初の維持用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～６ｍｇ；約５．５ｍｇ～６．５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量で投与され得る。
【0010】
ある態様において、少なくとも１回の追加の維持用量は、最初の維持用量と同量である。ある態様において、維持用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～６ｍｇ；約５．５ｍｇ～６．５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量で投与され得る。したがって、ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約３ｍｇの（例えば、単回の）固定用量であり、各維持用量は、約６ｍｇの固定用量である。
【0011】
ある態様において、少なくとも１回の追加の維持用量は、最初の維持用量よりも多い。ある態様において、最初の維持用量は、約４．５ｍｇ～約７．５ｍｇ；約５ｍｇ～約６ｍｇ；約５．５ｍｇ～約６．５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量で投与されてよく、少なくとも１回の追加の維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～約１０．５ｍg、例えば約１０ｍｇの固定用量である。したがって、ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約３ｍｇの（例えば、単回の）固定用量であり、最初の維持用量は、約６ｍｇの固定用量であり、少なくとも１回の追加の維持用量は、約１０ｍｇの固定用量である。
【0012】
ある態様において、１回以上の開始用量は、約４．５ｍｇ～約７．５ｍｇ；約５ｍｇ～約７ｍｇ；約６．５ｍｇ～約７．５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量を含む。ある態様において、１回以上の開始用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～７ｍｇ；約５．５ｍｇ～６．５ｍｇ、例えば約６ｍｇの単回の固定用量を含む。
【0013】
ある態様において、最初の維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与され得る。
【0014】
ある態様において、少なくとも１回の追加の維持用量は、最初の維持用量と同量である。ある態様において、維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与され得る。したがって、ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約６ｍｇの固定用量であり、各維持用量は、約１０ｍｇの固定用量である。
【0015】
ある態様において、少なくとも１回の追加の維持用量は、最初の維持用量よりも多い。したがって、ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は約６ｍｇの固定用量であり、最初の維持用量は約１０ｍｇの固定用量であり、少なくとも１回の追加の維持用量は約１０ｍｇより多い固定用量である。
【0016】
ある態様において、患者が、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与に関連する有害事象を発症した、または発症するリスクがあり、ここで、処置は、以下：
ａ）ステロイド、例えばコルチコステロイド；
ｂ）ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－６、ＩＬ－６受容体（ＩＬ－６Ｒ）、ＩＦＮγ、ＩＦＮＧＲ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ／ＣＤ２５、ＭＣＰ－１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ΜΙΡΙβ、ＣＣＲ５、ＴＮＦα、ＴＮＦＲ１、ＩＬ－１、およびＩＬ－１Ｒα／ＩＬ－ｌβの中から選択されるサイトカイン受容体のアンタゴニスト、またはサイトカインであって、ここで、アンタゴニストが、抗体または抗原結合フラグメント、低分子、タンパク質またはペプチド、および核酸から選択される；
ｃ）制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）集団を減少させる分子、例えばシクロホスファミド；
ｄ）解熱剤、鎮痛剤および／または抗生物質；ならびに／あるいは
ｅ）発作予防薬、例えばレベチラセタム
を投与することをさらに含む。
ａ）ステロイド、例えばコルチコステロイド；
ｂ）ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－６、ＩＬ－６受容体（ＩＬ－６Ｒ）、ＩＦＮγ、ＩＦＮＧＲ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ／ＣＤ２５、ＭＣＰ－１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ΜΙΡΙβ、ＣＣＲ５、ＴＮＦα、ＴＮＦＲ１、ＩＬ－１、およびＩＬ－１Ｒα／ＩＬ－ｌβの中から選択されるサイトカイン受容体のアンタゴニスト、またはサイトカインであって、ここで、アンタゴニストが、抗体または抗原結合フラグメント、低分子、タンパク質またはペプチド、および核酸から選択される；
ｃ）制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）集団を減少させる分子、例えばシクロホスファミド；
ｄ）解熱剤、鎮痛剤および／または抗生物質；ならびに／あるいは
ｅ）発作予防薬、例えばレベチラセタム
を投与することをさらに含む。
【0017】
ある態様において、コルチコステロイドは、デキサメタゾンまたはメチルプレドニゾロンである。ある態様において、アンタゴニストは、トシリズマブおよび／またはシルトキシマブである。
【0018】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、静脈内投与または皮下投与される。好ましい態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、静脈内投与される。
【0019】
ある態様において、ＢＣＭＡ発現に関連する障害は、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌である。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、単剤療法として患者に投与される。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、１回以上の追加の治療剤との併用療法として患者に投与される。ある態様において、１回以上の追加の治療剤は、サリドマイドおよびその免疫療法誘導体、抗ＣＤ３８抗体、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）、抗ＢＣＭＡ抗体薬剤結合体および抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞療法からなる群より選択される。
【0020】
特定の態様において、“対象”または“患者”は、ヒトである。
【0021】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号１７のＣＤＲ３Ｈ領域および配列番号２０のＣＤＲ３Ｌ領域と、以下：
ａ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２３のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２４のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｂ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２５のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２６のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｃ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｄ）配列番号２９のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３０のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｅ）配列番号３４のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３５のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｆ）配列番号３６のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３７のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、ならびに配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、ならびに
ｇ）配列番号１５のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号１６のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号１８のＣＤＲ１Ｌ領域、ならびに配列番号１９のＣＤＲ２Ｌ領域
の群から選択されるＣＤＲ１Ｈ、ＣＤＲ２Ｈ、ＣＤＲ１ＬおよびＣＤＲ２Ｌ領域の組み合わせを含む、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。
ａ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２３のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２４のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｂ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２５のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２６のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｃ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｄ）配列番号２９のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３０のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｅ）配列番号３４のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３５のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｆ）配列番号３６のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３７のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、ならびに配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、ならびに
ｇ）配列番号１５のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号１６のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号１８のＣＤＲ１Ｌ領域、ならびに配列番号１９のＣＤＲ２Ｌ領域
の群から選択されるＣＤＲ１Ｈ、ＣＤＲ２Ｈ、ＣＤＲ１ＬおよびＣＤＲ２Ｌ領域の組み合わせを含む、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。
【0022】
ある態様において、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントは、以下：
ａ）配列番号１０のＶＨ領域及び配列番号１２のＶＬ領域
ｂ）配列番号１０のＶＨ領域と配列番号１３のＶＬ領域
ｃ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域
ｄ）配列番号３８のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域
ｅ）配列番号３９のＶＨ領域と配列番号１２のＶＬ領域、
ｆ）配列番号４０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、または
ｇ）配列番号９のＶＨ領域および配列番号１１のＶＬ領域
からなる群より選択されるＶＨおよびＶＬを含む。
ａ）配列番号１０のＶＨ領域及び配列番号１２のＶＬ領域
ｂ）配列番号１０のＶＨ領域と配列番号１３のＶＬ領域
ｃ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域
ｄ）配列番号３８のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域
ｅ）配列番号３９のＶＨ領域と配列番号１２のＶＬ領域、
ｆ）配列番号４０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、または
ｇ）配列番号９のＶＨ領域および配列番号１１のＶＬ領域
からなる群より選択されるＶＨおよびＶＬを含む。
【0023】
特に好ましい態様において、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域を含む。
【0024】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号１、２および３の重鎖ＣＤＲをそれぞれ重鎖ＣＤＲ１Ｈ、ＣＤＲ２ＨおよびＣＤＲ３Ｈとして含む可変ドメインＶＨ、ならびに配列番号４、５および６の軽鎖ＣＤＲをそれぞれ軽鎖ＣＤＲ１Ｌ、ＣＤＲ２ＬおよびＣＤＲ３Ｌとして含む可変ドメインＶＬを含む抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。ある態様において、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号７のＶＨ領域および配列番号８のＶＬ領域を含む。
【0025】
特に好ましい態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域を含む抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント、ならびに配列番号７のＶＨ領域および配列番号８のＶＬ領域を含む抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。
【0026】
ある態様において、多特異性抗体は、二重特異性抗体である。ある態様において、二重特異性抗体は二価である（１＋１形式）。ある態様において、二価の二重特異性抗体は、フォーマット：ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ（すなわち、Ｆｃが存在しない場合）を有する。あるいは、二価の二重特異性抗体は、形式：Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ；Ｆｃ－ＢＣＭＡＦａｂ－ＣＤ３Ｆａｂ；または、ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ（すなわち、Ｆｃが存在する場合）を有していてもよい。好ましい態様において、二価の二重特異性抗体は、ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂの形式を有する。ある態様において、二重特異性抗体は、３価である（２＋１フォーマット）。ある態様において、３価の二重特異性抗体は、フォーマット：ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ；または、ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ（すなわち、Ｆｃが存在しない場合）を有する。あるいは、３価の二重特異性抗体は、フォーマット：ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ； ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ； またはＣＤ３ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ（すなわち、Ｆｃが存在するとき）を有していてもよい。好ましい態様において、３価の二重特異性抗体は、ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂの形式を有する。
【0027】
ある態様において、抗ＣＤ３ Ｆａｂは、軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖である。
【0028】
ある態様において、抗ＢＣＭＡ ＦａｂフラグメントのＣＨ１ドメインは、アミノ酸修飾Ｋ１４７Ｅ／ＤおよびＫ２１３Ｅ／Ｄ（ＥＵ番号付けに従って番号付け）、ならびにアミノ酸修飾Ｅ１２３Ｋ／Ｒ／ＨおよびＱ１２４Ｋ／Ｒ／Ｈ（Kabatによる番号付け）を有するＣＬドメインを含む対応する免疫グロブリン軽鎖を含む。
【0029】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、Ｆｃをさらに含む。ある態様において、Ｆｃは、ＩｇＧ１ Ｆｃである。ある態様において、（例えば、ＩｇＧ１）Ｆｃは、第１の定常ドメインＣＨ２およびＣＨ３を含む第１のＦｃ鎖と、第２の定常ドメインＣＨ２およびＣＨ３を含む第２のＦｃ鎖とを含み、ここで、
ａ）第１のＣＨ３ドメインは、修飾Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖ、またはそれらの保存的置換（ＥＵ番号付けによる番号付け）を含み；そして
ｂ）第２のＣＨ３ドメインは、修飾Ｔ３６６Ｗ、またはその保存的置換（ＥＵ番号付けによる番号付け）を含む。
ａ）第１のＣＨ３ドメインは、修飾Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖ、またはそれらの保存的置換（ＥＵ番号付けによる番号付け）を含み；そして
ｂ）第２のＣＨ３ドメインは、修飾Ｔ３６６Ｗ、またはその保存的置換（ＥＵ番号付けによる番号付け）を含む。
【0030】
ある態様において、（例えば、ＩｇＧ１）Ｆｃは、以下：
ａ）修飾Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５ＡおよびＰ３２９Ｇ（ＥＵ番号付けによる番号付け）、および／または
ｂ）修飾Ｄ３５６ＥおよびＬ３５８Ｍ（ＥＵ番号付けによる番号付け）
を含む。
ａ）修飾Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５ＡおよびＰ３２９Ｇ（ＥＵ番号付けによる番号付け）、および／または
ｂ）修飾Ｄ３５６ＥおよびＬ３５８Ｍ（ＥＵ番号付けによる番号付け）
を含む。
【0031】
さらなる実施形態では、本発明による二重特異性抗体は、以下の配列番号：
ｉ． ８３Ａ１０－ＴＣＢｃｖ：４５、４６、４７（ｘ２）、４８（図２Ａ）
ｉｉ． ２１－ＴＣＢｃｖ：４８、４９、５０、５１（ｘ２）（図２Ａ）
ｉｉｉ． ２２－ＴＣＢｃｖ：４８、５２、５３、５４（ｘ２）（図２Ａ）
ｉｖ． ４２－ＴＣＢｃｖ：４８、５５、５６、５７（ｘ２）（図２Ａ）
を含む。
ｉ． ８３Ａ１０－ＴＣＢｃｖ：４５、４６、４７（ｘ２）、４８（図２Ａ）
ｉｉ． ２１－ＴＣＢｃｖ：４８、４９、５０、５１（ｘ２）（図２Ａ）
ｉｉｉ． ２２－ＴＣＢｃｖ：４８、５２、５３、５４（ｘ２）（図２Ａ）
ｉｖ． ４２－ＴＣＢｃｖ：４８、５５、５６、５７（ｘ２）（図２Ａ）
を含む。
【0032】
好ましい態様において、本発明の二重特異性抗体は、４２－ＴＣＢｃｖである。
【0033】
本発明の面および態様は、添付の特許請求の範囲に記載されている。本発明のこれらおよび他の面ならびに態様は、本明細書にも記載されている。
【図面の簡単な説明】
【0034】
本発明は、次に、添付の図面を参照してより詳細に説明され得る。
【図1】図１は、本発明で用いるための二重特異性二価抗体の異なるフォーマットを示しており、これは、Ｆａｂ ＢＣＭＡ－Ｆｃ－Ｆａｂ ＣＤ３のフォーマットでＣＤ３およびＢＣＭＡに結合するＦａｂフラグメントを含む。ＣＤ３ Ｆａｂは、軽鎖のミスペアリングおよび副産物を減らすために、ＶＨ－ＶＬクロスオーバーを含んでいてもよい。ＣＬ－ＣＨ１にアミノ酸置換“ＲＫ／ＥＥ”を導入することにより、製造時に軽鎖のミスペア／副産物を低減し得る。ＣＤ３ ＦａｂおよびＢＣＭＡ Ｆａｂは、フレキシブルリンカーで互いに連結されていてもよい。
【図2】図２は、本発明で用いるための二重特異性三価抗体の異なるフォーマットを示しており、これは、以下のフォーマットでＣＤ３およびＢＣＭＡに結合するＦａｂフラグメントを含む：Ｆａｂ ＢＣＭＡ－Ｆｃ－Ｆａｂ ＣＤ３－Ｆａｂ ＢＣＭＡ（Ａ，Ｂ）；Ｆａｂ ＢＣＭＡ－Ｆｃ－Ｆａｂ ＢＣＭＡ－Ｆａｂ ＣＤ３（Ｃ，Ｄ）。ＣＤ３ Ｆａｂは、軽鎖のミスペアリングおよび副産物を減らすために、ＶＨ－ＶＬクロスオーバーを含んでいてもよい。ＣＬ－ＣＨ１にアミノ酸置換“ＲＫ／ＥＥ”を導入して、製造時の軽鎖のミスペアリング／副産物を低減することができる。ＣＤ３ ＦａｂおよびＢＣＭＡ Ｆａｂは、フレキシブルリンカーで互いに連結されていてもよい。
【図3】図３は、本発明で用いるための二重特異性三価抗体の異なるフォーマットを示しており、これは、以下のフォーマットでＣＤ３およびＢＣＭＡに結合するＦａｂフラグメントを含む：Ｆｃ－Ｆａｂ ＣＤ３－Ｆａｂ ＢＣＭＡ（Ａ，Ｂ）；Ｆｃ－Ｆａｂ ＢＣＭＡ－Ｆａｂ ＣＤ３（Ｃ，Ｄ）。ＣＤ３ Ｆａｂは、軽鎖のミスペアリングおよび副産物を減らすために、ＶＨ－ＶＬクロスオーバーを含んでいてもよい。ＣＬ－ＣＨ１にアミノ酸置換“ＲＫ／ＥＥ”を導入して、製造時の軽鎖のミスペアリング／副産物を低減することができる。ＣＤ３ ＦａｂおよびＢＣＭＡ Ｆａｂは、フレキシブルリンカーで互いに連結されていてもよい。
【図6】図６は、実施例３に記載されたＣＣ－９３２６９誘発サイトカイン分泌に対するデキサメサゾンの効果を示す。サイトカイン（ｐｇ／ｍＬ）は、トリプリケートサンプルの平均値±標準偏差としてグラフ化されている。Ｈ９２９、ＭＭ１Ｓ、ＫＭＳ１およびＳＫＭＭ２は、ＢＣＭＡ発現骨髄腫細胞株である。Ｄｅｘ＝デキサメサゾン。
【図7】図７は、実施例３に記載のＢＣＭＡ発現骨髄腫細胞株（Ｈ９２９、ＭＭ．１Ｓ、ＫＭＳ１２－ＰＥおよびＳＫＭＭ２）のＣＣ－９３２６９誘導細胞溶解に対するデキサメサゾンの効果を示す。生腫瘍細胞の割合は、トリプリケートサンプルの平均値±標準偏差としてグラフ化されている。Ｄｅｘ＝デキサメサゾン。
【図8】図８は、実施例３に記載のＣＣ－９３２６９誘導Ｔ細胞増殖および活性化に対するデキサメサゾンの効果を示す。増殖は、Ｔ細胞のみの培養と比較して、腫瘍細胞株との共培養後にＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔの希釈を示すＣＤ４＋／ＣＤ８＋ Ｔ細胞の割合として測定される。ＣＤ４＋およびＣＤ８＋ Ｔ細胞上の活性化マーカーＣＤ２５、ＣＤ６９およびＨＬＡ－ＤＲの発現は、Ｔ細胞のみの培養と比較して、腫瘍細胞株との共培養後、活性化マーカーを発現するＣＤ４＋／ＣＤ８＋ Ｔ細胞の割合として測定される。増殖および活性化マーカーの発現の両方を、トリプリケートサンプルの平均値±標準偏差としてグラフ化されている。ＳＫＭＭ２は、ＢＣＭＡ発現骨髄腫細胞株である。Ｄｅｘ＝デキサメサゾン。
【発明を実施するための形態】
【0035】
詳細な説明
本明細書で用いる冠詞“ａ”および“ａｎ”は、冠詞の文法的対象の１つまたは２つ以上（例えば、少なくとも１つ）を意味し得る。
本明細書で用いる冠詞“ａ”および“ａｎ”は、冠詞の文法的対象の１つまたは２つ以上（例えば、少なくとも１つ）を意味し得る。
【0036】
“約”は、一般的に、測定の性質または精度を与えられた測定量に対する許容可能な誤差の程度を意味し得る。例示的な誤差の程度は、所定の値または値の範囲の２０パーセント（％）以内、一般的には、１０％以内、より一般的には、５％以内である。
【0037】
本明細書において１以上の特徴を“含む”として記載される態様は、そのような特徴“からなる”および／またはそのような特徴“から本質的になる”対応する態様の開示とも見なされ得る。
【0038】
濃度、量、体積、百分率および他の数値は、本明細書において範囲形式で示されてもよい。このような範囲形式は、単に便宜上および簡潔さのために用いられ、範囲の限定として明示的に記載された数値だけでなく、各数値およびサブ範囲が明示的に記載されているのと同様にその範囲内に包含される全ての個々の数値またはサブ範囲も含むようにフレキシブルに解釈されるべきであるとも理解される。
【0039】
治療方法
本発明は、部分的には、ＣＤ３およびＢＣＭＡに結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を用いた用量漸増投与レジメンを用いて、ＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢ細胞性癌）を有する患者を処置する方法に基づくものである。本方法は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）などの望ましくない処置効果を低減または抑制し、それによって、より好ましい利益－リスクプロファイルを達成しながら患者を処置することが期待される。特定の態様において、“対象”または“患者”は、ヒトである。
本発明は、部分的には、ＣＤ３およびＢＣＭＡに結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を用いた用量漸増投与レジメンを用いて、ＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢ細胞性癌）を有する患者を処置する方法に基づくものである。本方法は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）などの望ましくない処置効果を低減または抑制し、それによって、より好ましい利益－リスクプロファイルを達成しながら患者を処置することが期待される。特定の態様において、“対象”または“患者”は、ヒトである。
【0040】
本明細書で用いる“ＢＣＭＡ発現に関連する障害”は、増強されたＢＣＭＡ発現と相関する形質細胞障害またはＢ細胞障害である。形質細胞障害には、ＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌、形質細胞腫、形質細胞白血病、多発性骨髄腫、マクログロブリン血症、アミロイドーシス、ワルデンストームマクログロブリン血症、孤立性骨形質細胞腫、髄外形質細胞腫、骨硬化性骨髄腫（ＰＯＥＭＳ症候群）および重鎖疾患、ならびに臨床的に不明瞭な単クローン性免疫グロブリン血症／くすぶり型多発性骨髄腫が含まれる。
【0041】
ある態様において、Ｂ細胞障害は、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌である。多発性骨髄腫は、骨髄コンパートメント内の異常形質細胞の単クローン性の拡大および蓄積により特徴付けられる形質細胞悪性腫瘍である。また、多発性骨髄腫また、同じＩｇＧ遺伝子再配列および体細胞超変異を伴う循環型クローン性形質細胞も伴う。多発性骨髄腫は、意義不詳の単クローン性ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）と呼ばれる無症状の前癌状態であって、骨髄形質細胞の低レベルおよび単クローン性タンパク質により特徴付けられる状態から生じる。多発性骨髄腫細胞は、低速で増殖する。多発性骨髄腫は、複数の構造的染色体変化（例えば、不均衡型転座）の進行性の発生に起因する。多発性骨髄腫は、悪性形質細胞と骨髄微小環境（例えば、正常な骨髄間質細胞）との交互的な相互作用を伴う。活動性多発性骨髄腫の臨床徴候としては、単クローン性抗体スパイク、形質細胞の過密な骨髄、溶解性骨病変、および破骨細胞の過剰刺激に起因する骨破壊が挙げられる（Dimopulos & Terpos, Ann Oncol 2010; 21 suppl 7: vii143-150）。
【0042】
本明細書で用いる用語“処置する”、“処置”などは、所望の薬理学的および／または生理学的効果を得ることを意味する。好ましくは、効果は治療的であり、すなわち、効果は、疾患および／または疾患に起因する有害な症状を部分的または完全に治癒させるものである。あるいは、薬理学的および／または生理学的効果は、予防的であってもよく、すなわち、その効果は、疾患またはその症状を完全にまたは部分的に予防するものである。
【0043】
したがって、一面において、本発明は、患者（例えば、ヒト）におけるＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）を処置する方法を提供し、ここで、この処置は、以下：
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１回以上の開始用量が患者に投与される開始期；および
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量が患者に投与され、要すれば、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の少なくとも１回の追加維持用量がそれに続いて投与される、維持期
を含み、ここで、各維持用量は１回以上の開始用量よりも多い、
投与レジメンでのＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与を含む。
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１回以上の開始用量が患者に投与される開始期；および
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量が患者に投与され、要すれば、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の少なくとも１回の追加維持用量がそれに続いて投与される、維持期
を含み、ここで、各維持用量は１回以上の開始用量よりも多い、
投与レジメンでのＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与を含む。
【0044】
別の面において、本発明は、患者（例えば、ヒト）におけるＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）の処置に用いるためのＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を提供し、ここで、処置は、以下を含む投与レジメンにおける多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与を含む：
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１回以上の開始用量が患者に投与される、開始期；および
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量が患者に投与され、要すれば、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の少なくとも１回の追加維持用量がそれに続いて投与される、維持期
を含み、ここで、各維持用量は１回以上の開始用量よりも多い。
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１回以上の開始用量が患者に投与される、開始期；および
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量が患者に投与され、要すれば、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の少なくとも１回の追加維持用量がそれに続いて投与される、維持期
を含み、ここで、各維持用量は１回以上の開始用量よりも多い。
【0045】
多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量の投与は、サイトカイン放出の減少により毒性を顕著に低減する。
【0046】
ある態様において、開始期は、単回の固定用量を含む。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約１．５ｍｇ～４．５ｍｇ；約２ｍｇ～４ｍｇ；約２．５ｍｇ～３．５ｍｇ、例えば、約３ｍｇの単回の固定用量である。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～６ｍｇ；約５.５ｍｇ～６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの単回の固定用量である。
【0047】
他の態様において、開始期は、同じ濃度の２回以上の開始用量を含む。開始用量が同じ濃度の２回以上の用量として投与される態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約１．５ｍｇ～４．５ｍｇ、約２ｍｇ～４ｍｇ、約２．５ｍｇ～３．５ｍｇ、例えば約３ｍｇの固定用量で投与され得る。あるいは、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約１．５ｍｇ～４．５ｍｇ、約２ｍｇ～４ｍｇ、約２．５ｍｇ～３．５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量で投与され得る。
【0048】
患者が、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量（例えば、最初の開始用量）の投与後に有害事象（例えば、ＣＲＳまたは感染症）を発症した場合、後続の開始用量（例えば、第２の開始用量）は、有害事象を誘発した開始用量から最大１２週間後に患者に投与され得る。ある態様において、後続の開始用量は、有害事象を誘発した開始用量から最大１０週間後、最大８週間後、最大６週間後、最大４週間後、最大２週間後、例えば最大１週間後に投与され得る。ある態様において、後続の開始用量は、有害事象を誘発した開始用量と同じ濃度またはそれより低濃度であってよい。
【0049】
患者が、開始期の最後の開始用量の投与後に有害事象（例えば、ＣＲＳまたは感染症）を発症した場合、開始期は、有害事象を誘発した開始用量から最大１２週間後に患者に投与される追加の開始用量を含んでもよい。ある態様において、追加の開始用量は、有害事象を誘発した開始用量から最大１０週間後、最大８週間後、最大６週間後、最大４週間後、最大２週間後、例えば最大１週間後に投与されてもよい。ある態様において、追加の開始用量は、有害事象を誘発した開始用量と同じ濃度またはそれより低濃度であってよい。
【0050】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～６ｍｇ；約５.５ｍｇ～６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量で投与され得る。したがって、ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約３ｍｇの（例えば、１回の）固定用量であり、かつ多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、約６ｍｇの固定用量である。
【0051】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与され得る。したがって、ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約６ｍｇの（例えば、１回の）固定用量であり、かつ多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、約１０ｍｇの固定用量である。
【0052】
ある態様において、維持期は、同じ濃度または漸増濃度の２回以上の維持用量を含む。
【0053】
ある態様において、維持期は、約４．５ｍｇ～約２５ｍｇ、好ましくは約４．５ｍｇ～約１１．５ｍｇの２回以上の維持用量を含む。ある態様において、維持期は、約４．５ｍｇ～約７．５ｍｇ；約５ｍｇ～約６ｍｇ；約５.５ｍｇ～約６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの２回以上の維持用量を含む。ある態様において、維持期は、約８．５ｍｇ～約１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～約１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～約１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの２回以上の維持用量を含む。ある態様において、維持期は、約６ｍｇ～約１１．５ｍｇ、約６.５ｍｇ～約１１ｍｇ、約７ｍｇ～約１０．５ｍｇ、例えば約７．５ｍｇ～約１０ｍｇ、例えば約１０ｍｇの２回以上の維持用量を含む。ある態様において、維持期は、約１８．５ｍｇ～２１．５ｍｇ；約１９ｍｇ～２１ｍｇ；約１９．５ｍｇ～２０．５ｍｇ、例えば約２０ｍｇの２回以上の維持用量を含む。
【0054】
維持用量が同じ濃度の２回以上の用量として投与される態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～６ｍｇ；約５.５ｍｇ～６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量で投与され得る。したがって、ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約３ｍｇの（例えば、単回の）固定用量であり、かつ多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量は、約６ｍｇの固定用量である。
【0055】
維持用量が同じ濃度の２回以上の用量として投与される態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与され得る。したがって、ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約６ｍｇの（例えば、単回の）固定用量であり、かつ多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量は、約１０ｍｇの固定用量である。
【0056】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量は、漸増濃度（すなわち、増加用量）の２回以上の用量として投与される。この場合、最大用量に達するまで、後続の用量を特定の増分で、または可変増分で増加させることができ、その時点で投与を停止してもよいし、最大用量で継続投与してもよい。したがって、維持用量が漸増濃度で投与される態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、開始用量より大きく、多重特異性抗体のその後の（例えば、第２、第３、第４または第５の）維持用量は、最初の維持用量より大きい。例えば、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、開始用量よりも大きく、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の維持用量（複数可）は、最初の維持用量と同じであり、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第３（および要すれば後続の）維持用量（複数可）は、第２の維持用量より大きい。
【0057】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～６ｍｇ；約５.５ｍｇ～６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量で投与されてもよく、後続の（例えば、第２、第３、第４または第５の）維持用量の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与されてもよい。
【0058】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与されてよく、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体のその後の（例えば、第２、第３、第４または第５の）維持用量は、最初の維持用量より多い固定用量で投与されてよい。
【0059】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の維持用量は、最初の維持用量よりも大きい。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、約４．５ｍｇ～約７．５ｍｇ；約５ｍｇ～約６ｍｇ；約５.５ｍｇ～約６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量で投与されてもよく、かつ多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与されてもよい。したがって、ある態様において、開始用量は、約３ｍｇの（例えば、単回の）固定用量であり、最初の維持用量は、約６ｍｇの固定用量であり、かつ第２の維持用量は、約１０ｍｇの固定用量である。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体のその後の（例えば、第３、第４または第５の）維持用量は、第２の維持用量と同じ用量またはそれ以上であってもよい。
【0060】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与されてよく、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の維持用量は、最初の維持用量より大きい固定用量で投与されてもよい。したがって、ある態様において、開始用量は、約６ｍｇの（例えば、１回の）固定用量であり、最初の維持用量は、約１０ｍｇの固定用量であり、かつ第２の維持用量は、最初の維持用量よりも大きい固定用量である。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体のその後の（例えば、第３、第４または第５の）維持用量は、第２の維持用量と同じ用量またはそれ以上であってもよい。
【0061】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量は、２つの濃度：最初の濃度および最大用量濃度、として投与される。ある態様において、最初の維持用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～７ｍｇ；約５.５ｍｇ～６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量で投与されてもよく、多重特異性抗体のその後の（例えば、第２の）維持用量は、最大用量濃度で投与されてもよい。ある態様において、最大用量濃度は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量である。したがって、ある態様において、開始用量は約３ｍｇの（例えば、単回の）固定用量であり、最初の維持用量は約６ｍｇの固定用量であり、その後の（例えば、第２の）維持用量は最大用量であり、これは約１０ｍｇの固定用量である。最大維持用量が皮下投与されるとき、最大用量濃度は、約１８．５ｍｇ～２１．５ｍｇ；約１９ｍｇ～２１ｍｇ；約１９．５ｍｇ～２０．５ｍｇ、例えば約２０ｍｇの固定用量であってもよい。
【0062】
ある態様において、最初の維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与されてもよく、多重特異性（例えば二重特異性）抗体のその後の（例えば、第２の）維持用量は、最大用量濃度で投与されでもよい。したがって、ある態様において、開始用量は、約６ｍｇの（例えば、単回の）固定用量であり、最初の維持用量は、約１０ｍｇの固定用量であり、その後の（例えば、第２の）維持用量は、最初の維持用量よりも大きい最大用量である。
【0063】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、開始用量から１－２１日後、例えば、１日後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後、７日後、８日後、９日後、１０日後、１１日後、１２日後、１３日後または１４日後に、患者に投与される。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、開始用量から２日後に、患者に投与されてもよい。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、開始用量から３日後に患者に投与されてもよい。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、開始用量から７日後に患者に投与されてもよい。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、開始用量から１４日後に患者に投与されてもよい。
【0064】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の維持用量は、最初の維持用量から、１－２１日後、例えば、２日後、４日後、７日後または１４日後に、患者に投与される。したがって、開始用量から２日後に最初の維持用量を投与する態様において、最初の維持用量から２日後に第２の維持用量を投与してもよく、要すれば、第２の維持用量の３日後に第３の維持用量を投与してもよい。
【0065】
最初の維持用量が開始用量から３日後に投与される態様において、第２の維持用量は、最初の維持用量から４日後に投与されてもよい。最初の維持用量が開始用量から７日後に投与される態様において、第２の（および要すれば後続の）維持用量は、最初の維持用量から７日後に投与されてもよい。最初の維持用量が開始用量から１４日後に投与される態様において、第２の（および要すれば後続の）維持用量は、最初の維持用量から１４日後に投与されてもよい。
【0066】
本発明の何れかの面のある態様において、患者が、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量（例えば、最初、第２、第３またはその後の維持用量）の投与後に有害事象（例えば、ＣＲＳまたは感染症）を発症した場合、次の維持用量は、有害事象を誘発した維持用量から最大１２週間後に患者に投与されてもよい。ある態様において、該次の維持開始用量は、有害事象を誘発した開始用量から最大１０週間後、最大８週間後、最大６週間後、最大４週間後、最大２週間後、例えば最大１週間後に投与されてもよい。ある態様において、該次の維持用量は、有害事象を誘発した維持用量と同じ濃度またはそれより低濃度であってよい。
【0067】
本発明の何れかの面のある態様において、第３および後続の維持用量は、約１週間に１回またはそれ以上の投与間隔で投与される。本明細書で用いる“投与間隔”は、患者に投与される複数の用量の間に経過する時間を意味する。多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量（例えば、第３およびその後の維持用量）の投与後に有害事象（例えば、ＣＲＳまたは感染症）が生じた場合、投与間隔は、次の維持用量が患者に投与される日にリセットされ得る。
【0068】
本発明の何れかの面のある態様において、第３および後続の維持用量の投与間隔は、約１週間に１回であってもよい。本明細書で用いる“週１回の投与間隔”は、５－９日毎、６－９日毎、７－９日毎、５－８日毎、５－７日毎、６－８日毎、６－７日毎、７－８日毎、好ましくは７日毎を含む。ある態様において、第３および後続の維持用量の投与間隔は、２週間に１回程度であってもよい。本明細書で用いる“２週間に１回の投与間隔”は、１２－１６日毎、１３－１６日毎、１４－１６日毎、１２－１５日毎、１２－１４日毎、１３－１５日毎、１３－１４日毎、１４－１５日毎、好ましくは１４日毎を含む。ある態様において、第３および後続の維持用量の投与間隔は、３週間に１回程度であってもよい。本明細書で用いる“３週間に１回の投与間隔”は、１９－２３日毎、２０－２３日毎、２１－２３日毎、１９－２２日毎、１９－２１日毎、２０－２２日毎、２０－２１日毎、２１－２２日毎、好ましくは２１日毎を含む。ある態様において、第３および後続の維持用量の投与間隔は、４週間に１回程度であってもよい。本明細書で用いる“４週間に１回の投与間隔”は、２６－３０日毎、２７－３０日毎、２８－３０日毎、２６－２９日毎、２６－２８日毎、２７－２９日毎、２７－２８日毎、２８－２９毎、好ましくは２８日毎を含む。ある態様において、第３および後続の維持用量の投与間隔は、月１回程度であってもよい。
【0069】
本発明の何れかの面のある態様において、第３および後続の維持用量のための投与間隔は、１週間に１回の投与間隔、２週間に１回の投与間隔、３週間に１回の投与間隔、および４週間に１回の投与間隔のうちの１以上の組み合わせであってよい。ある態様において、第３および後続の維持用量の投与間隔は、１週間に１回の投与間隔、２週間に１回の投与間隔、および４週間に１回の投与間隔の組合せであってもよい。
【0070】
本発明の何れかの面のある態様において、第３および後続の維持用量は、１週間に１回の投与間隔（例えば、７日毎）、次に２週間に１回の投与間隔（例えば、１４日毎）、次に３週間に１回の投与間隔（例えば、２１日毎）、次に４週間に１回の投与間隔（例えば、２８日毎）で投与される。ある態様において、第３および後続の維持用量は、１週間に１回の投与間隔（例えば、７日毎）、次に２週間に１回の投与間隔（例えば、１４日毎）、次に４週間に１回の投与間隔（例えば、２８日毎）に投与される。
【0071】
本発明の何れかの面のある態様において、処置は、２８日の少なくとも１つの処置サイクルを含む。本明細書で用いる“処置サイクル”は２８日である。有害事象（例えば、ＣＲＳまたは感染症）の結果として、開始用量が最初の処置サイクルの２８日目を超えて投与されるとき、最初の処置サイクルは、開始用量が患者に投与された日に再開されてもよい。有害事象（例えば、ＣＲＳまたは感染症）の結果として現在の処置サイクルの２８日目を超えて維持用量が投与されるとき、次の処置サイクルは、維持用量が患者に投与された日に開始されてもよい。ある態様において、処置は、開始用量が１日目に固定用量として患者に投与され、その後、維持用量が３週間連続して１週間の投与間隔で（例えば、７日毎に）（例えば、８日目、１５日目および２２日目に）投与される、第１の処置サイクルを含む。維持用量は、その後の処置サイクルにおいて、１週間に１回またはそれ以上の投与間隔で投与され続けてもよい。
【0072】
本発明の何れかの面のある態様において、処置は第２の処置サイクルを含み、ここで、維持用量は１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される。さらなる態様において、患者は、１－５処置サイクル間、１－３処置サイクル間、１－２処置サイクル間、２－３処置サイクル間のさらなる処置サイクル、好ましくは（第１の処置サイクルに加えて）２つのさらなる処置サイクルにおいて、１週間に１回の投与間隔を維持する。ある態様において、処置は、第２および第３の処置サイクルを含み、ここで、維持用量は、１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される。
【0073】
本発明の何れかの面のある態様において、維持用量は、１週間に１回の処置サイクル（複数可）の完了後、処置サイクルの２週間に１回の投与間隔（例えば、１日目および１５日目）で投与されてもよい。さらなる態様において、患者は、１－５サイクル間、１－３サイクル間、１－２サイクル間、２－３サイクル間の２週間に１回の処置サイクル、好ましくは３週間に１回の処置サイクルの間、２週間に１回の投与間隔を維持する。ある態様において、処置は、第４、第５および第６の処置サイクルを含み、ここで、維持用量は、２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与される。
【0074】
本発明の何れかの面のある態様において、維持用量は、２週間に１回の処置サイクル（複数可）の完了後、その後の処置サイクル（例えば、後続のサイクルは、（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）の順であり、ここで、維持用量は、サイクル（ａ）の１日目および２２日目、サイクル（ｂ）の１５日目、ならびにサイクル（ｃ）の８日目に投与される）で３週間の投与間隔で投与され得る。さらなる態様において、患者は、１回、２回または３回の処置サイクルについて、３週間の投与間隔を維持する。
【0075】
本発明の何れかの面のある態様において、維持用量は、２週間に１回の処置サイクル（複数可）の完了後の後続の処置サイクルにおいて（例えば、１日目に）４週間の投与間隔で投与されてもよい。別の態様において、維持用量は、３週間の処置サイクル（複数可）の完了後、後続の処置サイクルにおいて４週間の投与間隔で（例えば、１日目に）投与されてもよい。さらなる態様において、患者は、少なくとも１サイクルの間、４週間の投与間隔を維持する。患者の中には、生涯にわたって処置を受け続ける者もいる。
【0076】
ある態様において、処置は以下を含む：
（ｉ）開始用量が１日目に投与され、維持用量が８日目、１５日目および２２日目に投与される、最初の処置サイクル；
（ｉｉ）維持用量が１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される、第２および第３の処置サイクル；
（ｉｉｉ）維持用量が２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与される、第４から第６の処置サイクル；ならびに
（ｉｖ）維持用量が、４週間の投与間隔（例えば、１日目）で投与される、第７および後続のサイクル。
（ｉ）開始用量が１日目に投与され、維持用量が８日目、１５日目および２２日目に投与される、最初の処置サイクル；
（ｉｉ）維持用量が１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される、第２および第３の処置サイクル；
（ｉｉｉ）維持用量が２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与される、第４から第６の処置サイクル；ならびに
（ｉｖ）維持用量が、４週間の投与間隔（例えば、１日目）で投与される、第７および後続のサイクル。
【0077】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表１に示されるレジメンに従って患者に投与され得る。
【0078】
【表1】
【0079】
別の態様において、処置は最初の処置サイクルを含み、ここで、開始用量は１日目に固定用量として患者に投与され、最初の維持用量は開始用量の３日後（例えば、４日目）に投与され、第２の維持用量は最初の維持用量の４日後（例えば、８日目）に投与され、第３および第４の維持用量は１週間間隔で（例えば、１５日目および２２日目に）投与される。維持用量は、その後の処置サイクルにおいて、毎週またはそれ以上の投与間隔で投与され続けてもよい。
【0080】
本発明の何れかの面のある態様において、処置は第２の処置サイクルを含み、ここで、維持用量は毎週の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される。さらなる態様において、患者は、１－５サイクル間、１－３サイクル間、１－２サイクル間、２－３サイクルの間のさらなる処置サイクル、好ましくは（第１の処置サイクルに加えて）２つのさらなる処置サイクルの間、毎週の投与間隔を維持する。ある態様において、処置は、第２および第３の処置サイクルを含み、ここで、維持用量は、毎週の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される。
【0081】
本発明の何れかの面のある態様において、維持用量は、毎週の処置サイクル（複数可）の完了後、処置サイクルの２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与されてもよい。さらなる態様において、患者は、１－５、１－３、１－２、２－３サイクルの毎週の処置サイクルの間、２週間に１回の投与間隔で投与され、好ましくは３サイクルの２週間に１回の処置サイクルを維持する。ある態様において、処置は、第４、第５および第６の処置サイクルを含み、ここで、維持用量は、２週間に１回の投与間隔（例えば、１日目および１５日目）で投与される。
【0082】
本発明の何れかの面のある態様において、維持用量は、２週間に１回の処置サイクル（複数可）の完了後、その後の処置サイクルにおいて４週間の投与間隔で（例えば、１日目に）投与され得る。さらなる態様において、患者は、少なくとも１つのサイクルの間、４週間の投与間隔を維持する。患者の中には、生涯にわたって処置を受け続ける者もいる。
【0083】
ある態様において、処置は以下を含む：
（ｉ）開始用量が１日目に投与され、維持用量が４日目、８日目、１５日目および２２日目に投与される、最初の処置サイクル；
（ｉｉ）維持用量が１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される、第２および第３の処置サイクル；
（ｉｉｉ）維持用量が２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与される、第４から第６の処置サイクル；ならびに
（ｉｖ）維持用量が、４週間の投与間隔（例えば、１日目）で投与される、第７および後続のサイクル。
（ｉ）開始用量が１日目に投与され、維持用量が４日目、８日目、１５日目および２２日目に投与される、最初の処置サイクル；
（ｉｉ）維持用量が１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される、第２および第３の処置サイクル；
（ｉｉｉ）維持用量が２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与される、第４から第６の処置サイクル；ならびに
（ｉｖ）維持用量が、４週間の投与間隔（例えば、１日目）で投与される、第７および後続のサイクル。
【0084】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表２に示されるレジメンに従って患者に投与され得る。
【0085】
【表2】
【0086】
別の態様において、処置は、最初の処置サイクルを含み、ここで、開始用量は１日目に固定用量として患者に投与され、最初の維持用量は開始用量の２日後（例えば、３日目）に投与され、第２の維持用量は最初の維持用量の２日後（例えば、５日目）に投与され、第３の維持用量は最初の維持用量の３日後（例えば、８日目）に投与され、そして第４および第５の維持用量は１週間間隔で（例えば、１５日目および２２日目）投与される。維持用量は、その後の処置サイクルにおいて、１週間に１回またはそれ以上の投与間隔で投与され続けてもよい。
【0087】
本発明の何れかの面のある態様において、処置は第２の処置サイクルを含み、ここで、維持用量は１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される。さらなる態様において、患者は、１－５、１－３、１－２、２－３の間のさらなる処置サイクル、好ましくは（最初の処置サイクルに加えて）２つのさらなる処置サイクルにおいて、１週間に１回の投与間隔を維持する。ある態様において、処置は、第２および第３の処置サイクルを含み、ここで、維持用量は、１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される。
【0088】
本発明の何れかの面のある態様において、維持用量は、１週間に１回の処置サイクル（複数可）の完了後、処置サイクルの２週間に１回の投与間隔（例えば、１日目および１５日目）で投与されてもよい。さらなる態様において、患者は、１－５、１－３、１－２、２－３サイクルの１週間に１回の処置サイクル、好ましくは３サイクルの２週間に１回の処置サイクルの間、２週間に１回の投与間隔を維持する。ある態様において、処置は、第４、第５および第６の処置サイクルを含み、ここで、維持用量は、２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与される。
【0089】
本発明の何れかの面のある態様において、維持用量は、２週間に１回の処置サイクル（複数可）の完了後、その後の処置サイクルにおいて（例えば、１日目に）４週間の投与間隔で投与され得る。さらなる態様において、患者は、少なくとも１サイクルの間、４週間の投与間隔を維持する。患者の中には、生涯にわたって処置を受け続ける者もいる。
【0090】
ある態様において、処置は以下を含む：
（ｉ）開始用量が１日目に投与され、維持用量が３日目、５日目、８日目、１５日目および２２日目に投与される、最初の処置サイクル；
（ｉｉ）維持用量が１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される、第２および第３の処置サイクル；
（ｉｉｉ）維持用量が２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与される、第４から第６の処置サイクル；ならびに
（ｉｖ）維持用量が、４週間の投与間隔（例えば、１日目）で投与される、第７および後続のサイクル。
（ｉ）開始用量が１日目に投与され、維持用量が３日目、５日目、８日目、１５日目および２２日目に投与される、最初の処置サイクル；
（ｉｉ）維持用量が１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される、第２および第３の処置サイクル；
（ｉｉｉ）維持用量が２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与される、第４から第６の処置サイクル；ならびに
（ｉｖ）維持用量が、４週間の投与間隔（例えば、１日目）で投与される、第７および後続のサイクル。
【0091】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表３に示されるレジメンに従って患者に投与され得る。
【0092】
【表3】
【0093】
表１、表２または表３に示されるレジメンのある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量は、同じ濃度の２つ以上の用量として投与される。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約１．５ｍｇ～４．５ｍｇ；約２ｍｇ～４ｍｇ；約２．５ｍｇ～３．５ｍｇ、例えば約３ｍｇの固定用量である。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初およびその後の維持用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～７ｍｇ；約５.５ｍｇ～６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量である。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約３ｍｇの（例えば、単回の）固定用量であり、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量およびその後の維持用量は、約６ｍｇの固定用量である。
【0094】
表１、表２または表３に示されるレジメンのある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量は、同じ濃度の２つ以上の用量として投与される。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～６ｍｇ；約５.５ｍｇ～６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量である。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初およびその後の維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量である。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約６ｍｇの固定用量であり、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量およびその後の維持用量は、約１０ｍｇの固定用量である。
【0095】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表４に示されるレジメンに従って患者に投与され得る。
【0096】
【表4】
【0097】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表５に示されるレジメンに従って患者に投与され得る。
【0098】
【表5】
【0099】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表６に示されるレジメンに従って患者に投与され得る。
【0100】
【表6】
【0101】
表１、表２または表３に示されるレジメンのある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量は、漸増濃度の２以上の用量として投与される。
【0102】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約１．５ｍｇ～４．５ｍｇ；約２ｍｇ～４ｍｇ；約２．５ｍｇ～３．５ｍｇ、例えば約３ｍｇの固定用量である。ある態様において、最初の維持用量は、約４．５ｍｇ～約７．５ｍｇ；約５ｍｇ～約７ｍｇ；約５.５ｍｇ～約６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量で投与されてもよく、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の（および要すればその後の）維持用量（複数可）は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与され得る。したがって、ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約３ｍｇの（例えば、１回の）固定用量であり、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、約６ｍｇの固定用量であり、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の（および要すればその後の）維持用量（複数可）は、約１０ｍｇの固定用量である。
【0103】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約４．５ｍｇ～７．５ｍｇ；約５ｍｇ～７ｍｇ；約５.５ｍｇ～６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量である。ある態様において、最初の維持用量は、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量で投与されてよく、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の（および要すればその後の）維持用量（複数可）は、最初の維持用量よりも多い固定用量で投与されてもよい。したがって、ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量は、約６ｍｇの固定用量であり、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量は、約１０ｍｇの固定用量であり、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の（および要すればその後の）維持用量（複数可）は、最初の維持用量よりも多い。
【0104】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表７に示されるレジメンに従って患者に投与され得る。
【0105】
【表7】
【0106】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表８に示されるレジメンに従って患者に投与され得る。
【0107】
【表8】
【0108】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表９に示されるレジメンに従って患者に投与され得る。
【0109】
【表9】
【0110】
本発明の何れかの面のある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、静脈内または皮下に投与される。この点に関して、データ（図示せず）は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）の皮下投与が静脈内投与と同等のバイオアベイラビリティを有することを示唆している。
【0111】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量および最初の維持用量は静脈内投与されてよく、多重特異性（例えば、二重特異性）のその後の（例えば、第２、第３、第４または第５の）維持用量は皮下投与されてもよい。
【0112】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表１～９に示されるレジメンのいずれかに従って患者に投与されてよく、ここで多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の開始用量および最初の維持用量は、静脈内投与されてもよく、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体のその後の（例えば、第２、第３、第４または第５の）維持用量は皮下投与されてもよい。
【0113】
いある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、表１～９に示されるレジメンのいずれかに従って患者に投与されてよく、ここで、サイクル１～２は静脈内に投与されてよく、サイクル３＋は皮下に投与されてもよい。
【0114】
多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）の用量が皮下投与されるとき、最大用量濃度は、約１８．５ｍｇ～２１．５ｍｇ；約１９ｍｇ～２１ｍｇ；約１９．５ｍｇ～２０．５ｍｇ、例えば約２０ｍｇの固定用量であってよい。
【0115】
本発明の何れかの面の好ましい態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、静脈内投与される。
【0116】
多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の高用量投与
別の面において、本発明は、患者（例えば、ヒト）におけるＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）を処置する方法であって、ここで、該処置は、ＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量を患者に投与し、次いで要すれば多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１以上の追加の維持用量を投与することを含む、処置方法を提供する。
別の面において、本発明は、患者（例えば、ヒト）におけるＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）を処置する方法であって、ここで、該処置は、ＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量を患者に投与し、次いで要すれば多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１以上の追加の維持用量を投与することを含む、処置方法を提供する。
【0117】
別の面において、本発明は、患者（例えば、ヒト）におけるＢＣＭＡ発現に関連する障害（例えば、多発性骨髄腫などのＢＣＭＡ発現Ｂ細胞癌）の処置に用いるためのＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を提供し、ここで、該処置は、患者への多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量の投与、および要すればそれに続く多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１以上の追加の維持用量（複数回）を含む、ＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を提供する。
【0118】
ある態様において、最初の維持用量は、約４．５ｍｇ～約１１．５ｍｇの濃度（本明細書中、“多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の高用量”と呼ぶ）を有し得る。ある態様において、最初の維持用量は、６ｍｇ以上、６.５ｍｇ以上、７ｍｇ以上、例えば７．５ｍｇ以上の固定用量である。ある態様において、最初の維持用量は、約６ｍｇ～約１１．５ｍｇ、約６.５ｍｇ～約１１ｍｇ、約７ｍｇ～約１０．５ｍｇ、例えば約７．５ｍｇ～約１０ｍｇの固定用量である。ある態様において、最初の維持用量は、約８．５ｍｇ～約１１．５ｍｇ；約９ｍｇ～約１１ｍｇ；約９．５ｍｇ～約１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇの固定用量である。別の態様において、最初の維持用量は、約４．５ｍｇ～約７．５ｍｇ；約５ｍｇ～約６ｍｇ；約５.５ｍｇ～約６.５ｍｇ、例えば約６ｍｇの固定用量である。
【0119】
ある態様において、最初の維持用量の投与後に、グレード＞３のＣＲＳ事象は発生せず、好ましくはグレード＞２のＣＲＳ事象は発生せず、好ましくはグレード＞１のＣＲＳ事象は発生せず、好ましくはグレード１またはそれ以上のＣＲＳ事象は発生せず、要すれば、最初の維持用量はデキサメタゾンの予防的投与なしで投与される。
【0120】
処置が、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１以上の追加の維持用量（複数可）、すなわち少なくとも第２の維持用量を含む態様において、第２の維持用量は、最初の維持用量から１－２１日後、例えば１日後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後、７日後、８日後、９日後、１０日後、１１日後、１２日後、１３日後、１４日後、１５日後、１６日後、１７日後、１８日後、１９日後、２０日後または２１日後に患者に投与されてもよい。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の維持用量は、最初の維持用量の７日後に、患者に投与される。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第２の維持用量は、最初の維持用量の１４日後に患者に投与される。ある態様において、第２の維持用量の投与後に、グレード＞３のＣＲＳ事象は発生せず、好ましくは、グレード＞２のＣＲＳ事象は発生せず、好ましくは、グレード＞１のＣＲＳ事象は発生せず、好ましくはグレード１またはそれ以上のＣＲＳ事象は発生せず、好ましくはＣＲＳ事象は発生せず、要すれば、第２の維持用量はデキサメタゾンの予防的投与なしで投与される。
【0121】
処置は、第２の維持用量の１－２１日後、例えば１日後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後、７日後、８日後、９日後、１０日後、１１日後、１２日後、１３日後、１４日後、１５日後、１６日後、１７日後、１８日後、１９日後、２０日後または２１日後に、患者に投与される多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第３の維持用量を含み得る。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第３の維持用量は、第２の維持用量の７日後に患者に投与される。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の第３の維持用量は、第２の維持用量の１４日後に患者に投与される。ある態様において、第３の維持用量の投与後に、グレード＞３のＣＲＳ事象は発生せず、好ましくはグレード＞２のＣＲＳ事象は発生せず、好ましくはグレード＞１のＣＲＳ事象は発生せず、好ましくはグレード１またはそれ以上のＣＲＳ事象は発生せず、要すれば、第３の維持用量はデキサメタゾンの予防的投与なしに投与される。
【0122】
ある態様において、処置は、さらなる維持用量、例えば第４、第５、第６の維持用量を投与することを含む。処置が第４の維持用量を含むある態様において、この処置は最初の処置サイクルを含み、要すれば、ここで、最初の維持用量は１日目に固定用量として患者に投与され、その後、追加の維持用量が３週間連続して（例えば、８日目、１５日目および２２日目に）１週間に１回の投与間隔で（例えば、７日毎に）投与される。
【0123】
ある態様において、処置は、その後の処置サイクル、例えば、第２、第３、第４、第５、第６、第７の処置サイクルを含む。処置が後続の処置サイクルを含むある態様において、維持用量は、後続の処置サイクルにおいて１週間に１回またはそれ以上の投与間隔で投与され続ける。
【0124】
ある態様において、処置は、以下を含む：
（ｉ）最初の維持用量が１日目に投与され、追加の維持用量が８日目、１５日目および２２日目に投与される、最初の処置サイクル；
（ｉｉ）維持用量が１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される、第２および第３の処置サイクル；
（ｉｉｉ）維持用量が２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与される、第４および第５の処置サイクル；ならびに、
（ｉｖ）維持用量が４週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目に）投与される、第７およびそれ以降のサイクル。
（ｉ）最初の維持用量が１日目に投与され、追加の維持用量が８日目、１５日目および２２日目に投与される、最初の処置サイクル；
（ｉｉ）維持用量が１週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目、８日目、１５日目および２２日目に）投与される、第２および第３の処置サイクル；
（ｉｉｉ）維持用量が２週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目および１５日目に）投与される、第４および第５の処置サイクル；ならびに、
（ｉｖ）維持用量が４週間に１回の投与間隔で（例えば、１日目に）投与される、第７およびそれ以降のサイクル。
【0125】
したがって、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体（例えば、“４２－ＴＣＢｃｖ”）は、“開始用量”の代わりに最初の維持用量が投与される、表１に記載のレジメンに従って患者に投与され得ることが理解される。
【0126】
ある態様において、１回以上の追加の維持用量（複数可）は、最初の維持用量と同じ濃度の固定用量である。維持用量（例えば、最初の、第２の、第３のまたは第４の維持用量）の投与後に患者が有害事象（例えば、ＣＲＳ）を発症した場合、その後の維持用量（例えば、第２、第３、第４または第５の維持用量）は、有害事象（例えば、ＣＲＳ）を誘発した維持用量より低濃度であってよい。
【0127】
有害事象
本発明の何れかの面のある態様において、患者は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与に関連する有害事象を発症するか、または発症するリスクがある。有害事象は、サイトカインにより引き起こされる毒性（例えば、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ））、注入に伴う反応（infusion related reaction, ＩＲＲ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、神経毒性、重症腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、好中球減少症、血小板減少症、肝酵素上昇、細菌感染、ウイルス感染、および／または中枢神経系（ＣＮＳ）毒性であり得る。特定の態様において、有害事象はＣＲＳである。
本発明の何れかの面のある態様において、患者は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与に関連する有害事象を発症するか、または発症するリスクがある。有害事象は、サイトカインにより引き起こされる毒性（例えば、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ））、注入に伴う反応（infusion related reaction, ＩＲＲ）、マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、神経毒性、重症腫瘍崩壊症候群（ＴＬＳ）、好中球減少症、血小板減少症、肝酵素上昇、細菌感染、ウイルス感染、および／または中枢神経系（ＣＮＳ）毒性であり得る。特定の態様において、有害事象はＣＲＳである。
【0128】
患者が多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与に関連する有害事象を発症した場合、または発症するリスクがある場合、本発明の何れかの面による処置は、有害事象の発症または発症のリスクを処置、予防、遅延、軽減または低減することができる薬剤の投与をさらに含む。薬剤は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体による処置の開始前に（例えば、有害事象の発症リスクを防止または低減するための予防として）、または多重特異性（例えば、二重特異性）抗体による治療中に（例えば、有害事象の発症に応答して）患者に投与され得る。ある態様において、薬剤は、ステロイド、例えばコルチコステロイドを含む。本明細書で用いる“コルチコステロイド”は、コレステロールから誘導することができ、水素化シクロペンタノペルヒドロフェナントレン環系によって特徴付けられる何れかの天然または合成ステロイドホルモンを意味する。天然コルチコステロイドは、一般に副腎皮質によって産生される。合成コルチコステロイド、ハロゲン化されている場合がある。活性に必要な官能基としては、Δ４の二重結合、Ｃ３ケトン、およびＣ２０ケトンが挙げられる。コルチコステロイドは、グルココルチコイドおよび／またはミネラルコルチコイド活性を有していてもよい。例示的なコルチコステロイドとしては、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロン、ベタメタゾン、ブデソニドおよびデキサメタゾンが挙げられる。ある態様において、薬剤はデキサメタゾンである。
【0129】
ある態様において、薬剤は、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－６、ＩＬ－６受容体（ＩＬ－６Ｒ）、ＩＦＮγ、ＩＦＮＧＲ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ／ＣＤ２５、ＭＣＰ－１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ΜΙΡΙβ、ＣＣＲ５、ＴＮＦａｌｐｈａ、ＴＮＦＲ１、ＩＬ－１（例えば、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－１ＲＡ）およびＩＬ－１受容体（ＩＬ－１Ｒ）から選択されるサイトカイン受容体またはサイトカインのアンタゴニストを含み、ここで、アンタゴニストは、抗体または抗原結合フラグメント、低分子、タンパク質またはペプチド、および核酸から選択される。アンタゴニストは、抗ＩＬ－６抗体および／または抗ＩＬ６Ｒ抗体であってもよい。例えば、アンタゴニストは、トシリズマブ、シルトキシマブ、クラザキズマブ、サリルマブ、オロキズマブ、エルシリモマブ、ＡＬＤ５１８／ＢＭＳ－９４５４２９、シルクマブ（ＣＮＴＯ１３６）、ＣＰＳＩ－２６３４、ＡＲＧＸ－１０９、レンジルマブ、ＦＥ３０１およびＦＭ１０１から選択されてもよい。ある態様において、アンタゴニストは、トシリズマブおよび／またはシルトキシマブである。あるいは、アンタゴニストは、抗ＩＬ－１アンタゴニストおよび／または抗ＩＬ－１Ｒアンタゴニスト、例えばアナキンラであってもよい。
【0130】
ある態様において、薬剤は、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）集団を減少させる分子を含む。Ｔｒｅｇ細胞の数を減少させる（例えば、枯渇させる）薬剤は当技術分野で知られており、例えば、ＣＤ２５枯渇、シクロホスファミド投与、抗ＣＴＬＡ４抗体およびグルココルチコイド誘導ＴＮＬＲファミリー関連遺伝子（ＧＩＴＲ）機能を調節することが含まれる。ＧＩＴＲは、活性化Ｔ細胞上で上方制御されるＴＮＬＲスーパーファミリーのメンバーであり、免疫系を強化する。ある態様において、処置は、シクロホスファミドの投与を含む。
【0131】
ある態様において、有害事象の発生または発生のリスクを処置、予防、遅延、低減または減弱することができる薬剤は、有害事象の予防的処置として、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体による処置の開始前に患者に１以上の用量で投与される。
【0132】
ある態様において、有害事象の発生または発生のリスクを処置、予防、遅延、低減または減弱することができる薬剤は、有害事象の予防的処置として、１以上の用量の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体と併用して患者に投与される。薬剤は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体と１以上の用量を連続的に（前および／または後に）、ならびに／または同時に投与されてもよい。
【0133】
ある態様において、有害事象の発生または発生のリスクを処置、予防、遅延、低減または減弱することができる薬剤は、有害事象の予防的処置として、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の用量と併用して患者に投与される。薬剤は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体と１以上の用量を連続的に（前および／または後に）、ならびに／または同時に投与されてもよい。
【0134】
ある態様において、有害事象の発生または発生のリスクを処置、予防、遅延、低減または減弱することができる薬剤は、有害事象の予防的処置として、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の各増量と組み合わせて、患者に投与される。薬剤は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体と１以上の用量を連続的に（前および／または後に）、ならびに／または同時に投与されてもよい。
【0135】
治療が、患者への多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量および１以上の追加の維持用量の投与を含むある態様において、維持用量は、以下を含む投与レジメンで投与される：
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量、および要すれば、１以上の追加の維持用量を、予防的処置と組み合わせて患者に投与する、開始期、次いで
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１以上の維持用量が患者に投与される、維持期
ここで、予防的処置は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量と連続して（前および／または後に）、および／または同時に、１以上の用量として患者に薬剤を投与することを含み、薬剤は、サイトカイン駆動性毒性（例えば、ＣＲＳ）の発症または発症リスクを処置、予防、遅延、低減または減弱することができる。
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初の維持用量、および要すれば、１以上の追加の維持用量を、予防的処置と組み合わせて患者に投与する、開始期、次いで
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の１以上の維持用量が患者に投与される、維持期
ここで、予防的処置は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量と連続して（前および／または後に）、および／または同時に、１以上の用量として患者に薬剤を投与することを含み、薬剤は、サイトカイン駆動性毒性（例えば、ＣＲＳ）の発症または発症リスクを処置、予防、遅延、低減または減弱することができる。
【0136】
多重特異性（例えば、二重特異性）抗体を開始期の予防的処置と組み合わせて投与すると、サイトカイン放出の減弱により毒性が著しく低減される。したがって、開始期の維持用量は、本明細書に記載の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の高用量、例えば、約８．５ｍｇ～１１．５ｍｇ、約９ｍｇ～１１ｍｇ、約９．５ｍｇ～１０．５ｍｇ、例えば約１０ｍｇを含み得ることが理解される。
【0137】
好ましい態様において、予防的処置は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の維持用量の前に、少なくとも１用量の薬剤（例えば、ＣＲＳ薬剤）を投与することを含む。ある態様において、予防的処置は、維持用量の前に薬剤（例えば、ＣＲＳ剤）の１以上の用量（例えば、２用量）を投与し、維持用量の後に薬剤（例えば、ＣＲＳ剤）の１以上の用量を投与することを含む。
【0138】
本発明の何れかの面のある態様において、予防的処置は、有害事象（例えば、ＣＲＳ）の発症または発症リスクを予防、遅延、低減または減弱するのに十分な量の薬剤（例えば、ＣＲＳ剤）の投与を含む。
【0139】
本発明の何れかの面のある態様において、予防的処置は、デキサメタゾンなどのコルチコステロイドを投与することを含む。ある態様において、デキサメタゾンは、約１０－２０ｍｇの用量で、好ましくは静脈内に投与される。デキサメタゾンがサイトカイン駆動毒性(cytokine-driven toxicity)（例えば、ＣＲＳ）の予防的処置として投与される態様において、好ましくは、デキサメタゾンは、本発明の多重特異性（例えば二重特異性）抗体によって誘導されるサイトカイン（例えば、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－２および／またはＴＮＦ－α）の分泌を減弱するのに充分な量で投与される。
【0140】
本発明の何れかの面のある態様において、予防的処置は、サイトカイン受容体またはサイトカインのアンタゴニスト、例えば、ＩＬ－６、ＩＬ－６受容体（ＩＬ－６Ｒ）、ＩＬ－１（例えば、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－１ＲＡ）および／またはＩＬ－１受容体（ＩＬ－１Ｒ）のアンタゴニストの投与を含み、ここで、アンタゴニストは、抗体または抗原結合フラグメント、低分子、タンパク質またはペプチドおよび核酸から選択される。
【0141】
本発明の何れかの面のある態様において、予防的処置は、抗ＩＬ－６アンタゴニスト抗体および／または抗ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト抗体、例えばトシリズマブを含む。ある態様において、トシリズマブは、約８ｍｇ／ｋｇの１以上の用量として患者に投与され、好ましくは静脈内に投与される。好ましい態様において、トシリズマブは、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体より少なくとも３０分前に投与される。トシリズマブがサイトカイン放出症候群（例えば、ＣＲＳ）の予防的処置として投与される態様において、好ましくは、トシリズマブは、本発明の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体によって誘導されるＩＬ－６受容体シグナル伝達を減弱させるのに十分な量で投与される。
【0142】
特定の態様において、開始期は、予防的処置と組み合わせて患者に投与される多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初のおよび第２の維持用量をそれぞれ含み、ここで、予防的処置は、維持用量の少なくとも３０分前に投与されるトシリズマブの単回投与を含み、要すれば、第２の維持用量が、最初の維持用量の７日後に患者に投与される。
【0143】
本発明の何れかの面のある態様において、予防的処置は、抗ＩＬ－１アンタゴニストおよび／または抗ＩＬ－１Ｒアンタゴニスト、例えばアナキンラを含む。ある態様において、アナキンラは、サイトカイン放出症候群（例えば、ＣＲＳ）の予防的処置として、好ましくは、本発明の多重特異性（例えば二重特異性）抗体によって誘導されるＩＬ－１受容体シグナル伝達を減弱するために十分な量で投与される。アナキンラは、約１００ｍｇ（例えば、１００ｍｇ±２０％）の用量で、好ましくは皮下投与され得る。ある態様において、アナキンラは、約１００ｍｇの用量で、好ましくは皮下投与で患者に投与される。ある態様において、予防的処置は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の前に投与される少なくとも１用量のアナキンラ、および多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の後に投与される少なくとも１用量のアナキンラを含む。
【0144】
アナキンラは、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の約１６時間前から約２時間前の間に１回以上の固定用量として患者に投与されてもよく、要すれば多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の約２０時間後から約２２時間後の間に１回の固定用量として患者に投与されてもよい。本発明の何れかの面のある態様において、アナキンラは、以下のように投与される：
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の約１６時間前から約８時間前の間の１回の固定用量；および／または
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の約４時間前から約２時間前の間の１回の固定用量、
ここで、要すれば、アナキンラの追加の固定用量が、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の約２０時間後から約２２時間後の間に投与されてもよい。
（ｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の約１６時間前から約８時間前の間の１回の固定用量；および／または
（ｉｉ）多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の約４時間前から約２時間前の間の１回の固定用量、
ここで、要すれば、アナキンラの追加の固定用量が、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の約２０時間後から約２２時間後の間に投与されてもよい。
【0145】
特定の態様において、開始期は、予防的処置と組み合わせて患者に投与される、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の最初のおよび第２の維持用量をそれぞれ含み、ここで、
（ｉ）最初の維持用量は、以下と組み合わせて投与される：維持用量の約１６時間前から約８時間前までの間のアナキンラの最初の用量；維持用量の約４時間前から約２時間前までの間のアナキンラの第２の用量；および、維持用量の約２０時間後から約２２時間後までの間のアナキンラの第３の用量；ならびに、
（ｉｉ）第２の維持用量は、以下と組み合わせて投与される：維持用量の約４時間前から約２時間前の間のアナキンラの第４の用量；および、維持用量の約２０時間後から約２２時間後の間のアナキンラの第５の用量、
要すれば、第２の維持用量は、最初の維持用量の７日後に患者に投与される。
（ｉ）最初の維持用量は、以下と組み合わせて投与される：維持用量の約１６時間前から約８時間前までの間のアナキンラの最初の用量；維持用量の約４時間前から約２時間前までの間のアナキンラの第２の用量；および、維持用量の約２０時間後から約２２時間後までの間のアナキンラの第３の用量；ならびに、
（ｉｉ）第２の維持用量は、以下と組み合わせて投与される：維持用量の約４時間前から約２時間前の間のアナキンラの第４の用量；および、維持用量の約２０時間後から約２２時間後の間のアナキンラの第５の用量、
要すれば、第２の維持用量は、最初の維持用量の７日後に患者に投与される。
【0146】
本発明の何れかの面のある態様において、予防的処置は、トシリズマブ（例えば、約８ｍｇ／ｋｇ、好ましくは静脈内投与）と共にデキサメタゾン（例えば、約１０－２０ｍｇ、好ましくは静脈内投与）を投与することを含む。ある態様において、予防的処置は、アナキンラ（例えば、約１００ｍｇ、好ましくは皮下投与）と共にデキサメタゾン（例えば、約１０－２０ｍｇ、好ましくは静脈内投与）の投与を含む。
【0147】
本発明の何れかの面のある態様において、予防的処置は、解熱剤、鎮痛剤、抗ウイルス剤および／または抗生物質の投与を含む、対症療法剤の投与（symptomatic support）を含む。ある態様において、対症療法剤の投与は、抗ウイルス剤（例えば、アシクロビル、オセルタミビル、ザナミビルおよび／または同等物）および／または抗生物質（例えば、トリメトプリム・スルファメトキサゾール、レボフロキサシンおよび／または同等物）の投与を含む。ある態様において、予防的処置は、発作予防薬（例えば、レベチラセタム）の投与を含む。対症療法剤投与および／または発作予防薬は、有害事象の発生または発生のリスクを処置、予防、遅延、低減または減弱させることができる薬剤に加えて投与されてもよい。
【0148】
本発明の何れかの面のある態様において、有害事象の発生またはそのリスクを処置、予防、遅延、低減または減弱させることができる薬剤は、患者が多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与に関連する有害事象を発症した場合に、患者に投与される。ある態様において、処置は、治療量、または有害事象（例えば、ＣＲＳ）またはその症状を部分的または完全に緩和もしくは改善するのに十分な量の薬剤を投与することを含む。
【0149】
患者が、本発明の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与後に有害事象（例えば、ＣＲＳ）を発症した場合、処置は、抗ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト抗体、例えば、トシリズマブの投与をさらに含んでもよい。ある態様において、トシリズマブは、約８ｍｇ／ｋｇの単回用量として患者に投与され、好ましくは静脈内投与される。ある態様において、、処置は、ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト抗体、例えば、トシリズマブの１以上の追加用量を患者に投与することをさらに含んでもよい。ある態様において、トシリズマブは、約８ｍｇ／ｋｇの１回以上の追加用量で患者に投与され、好ましくは静脈内投与される。
【0150】
ある態様において、患者が本発明の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与後に有害事象（例えば、ＣＲＳ）を発症した場合、処置は、抗ＩＬ－１アンタゴニストおよび／または抗ＩＬ－１Ｒアンタゴニスト、例えば、アナキンラの投与をさらに含んでもよい。ある態様において、アナキンラは、約１００ｍｇの１以上の固定用量として患者に投与され、好ましくは皮下投与される。ある態様において、アナキンラは、１日２回、好ましくは約１００ｍｇの固定用量で、好ましくは皮下投与として、患者に投与される。
【0151】
ある態様において、有害事象（例えば、ＣＲＳ）が発生した場合、処置は、ＩＬ－６アンタゴニスト抗体、例えば、シルトキシマブの投与をさらに含んでもよい。ある態様において、シルツキシマブは、約１１ｍｇ／ｋｇの単回用量として患者に投与され、好ましくは静脈内投与される。
【0152】
ある態様において、有害事象（例えば、ＣＲＳ）が発生した場合、処置は、メチルプレドニゾロンまたはデキサメタゾンなどのコルチコステロイドを患者に投与することをさらに含んでもよい。ある態様において、デキサメタゾンは、約１０－２０ｍｇの用量で、好ましくは静脈内投与される。ある態様において、メチルプレドニゾロンは、１日当たり約１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、例えば、１日当たり約２ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【0153】
ある態様において、追加の処置は、ＣＲＳのステージに基づき得る。ＣＲＳのグレード付けおよび処置のために、共通のＣＴＣＡＥ ＣＲＳグレード付けスケールの修正版が確立されており、表１０に詳述されている。
【0154】
【表10】
【0155】
例えば、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与後に患者がグレード２のＣＲＳを有する態様において、処置は、抗ＩＬ－６アンタゴニスト抗体および／または抗ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト抗体、例えば、トシリズマブの最初の用量の投与を含む第一選択治療（first line treatment）の投与をさらに含んでもよい。ある態様において、トシリズマブは、約８ｍｇ／ｋｇの単回投与として患者に静脈内投与される。
【0156】
多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与後に患者がグレード２のＣＲＳを有する別の態様において、処置は、１以上の固定用量（複数可）の抗ＩＬ－１アンタゴニストおよび／または抗ＩＬ－１Ｒアンタゴニスト、例えば、アナキンラの投与を含む第一選択治療の投与をさらに含んでもよい。アナキンラは、約１００ｍｇ（例えば、１００ｍｇ±２０％）の用量で、好ましくは皮下投与され得る。ある態様において、アナキンラは、約１００ｍｇの１以上の固定用量（複数可）として患者に投与され、好ましくは皮下投与される。ある態様において、アナキンラは、１日２回、好ましくは約１００ｍｇの固定用量で、好ましくは皮下投与として患者に投与される。
【0157】
患者が、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与後にグレード２のＣＲＳの急速な発症を生じるか、またはグレード３以上のＣＳＲ発症を生じる場合、処置は、以下を含む第一選択治療の投与をさらに含み得る：
（ｉ）抗ＩＬ－６アンタゴニスト抗体および／または抗ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト抗体、例えば、トシリズマブ；ならびに
（ｉｉ）コルチコステロイド、例えば、デキサメタゾンまたはメチルプレドニゾロン。
（ｉ）抗ＩＬ－６アンタゴニスト抗体および／または抗ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト抗体、例えば、トシリズマブ；ならびに
（ｉｉ）コルチコステロイド、例えば、デキサメタゾンまたはメチルプレドニゾロン。
【0158】
ある態様において、トシリズマブは、約８ｍｇ／ｋｇの用量で患者に静脈内投与される。
【0159】
あるいは、患者が、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の投与後にグレード２のＣＲＳの急速な発症を生じるかまたはグレード３以上のＣＲＳの発症を生じる場合、処置は、以下を含む第一選択治療の投与をさらに含み得る：
（ｉ）抗ＩＬ－１アンタゴニストおよび／または抗ＩＬ－１Ｒアンタゴニスト、例えばアナキンラ；ならびに
（ｉｉ）コルチコステロイド、例えば、デキサメタゾンまたはメチルプレドニゾロン。
（ｉ）抗ＩＬ－１アンタゴニストおよび／または抗ＩＬ－１Ｒアンタゴニスト、例えばアナキンラ；ならびに
（ｉｉ）コルチコステロイド、例えば、デキサメタゾンまたはメチルプレドニゾロン。
【0160】
ある態様において、アナキンラは、約１００ｍｇの１以上の固定用量（複数可）として患者に投与され、好ましくは皮下投与される。ある態様において、アナキンラは、１日２回、好ましくは約１００ｍｇの固定用量として患者に投与され、好ましくは皮下投与される。
【0161】
コルチコステロイドは、（ｉ）抗ＩＬ－６アンタゴニスト抗体および／または抗ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト抗体、例えばトシリズマブ、又は（ｉｉ）抗ＩＬ－１アンタゴニストおよび／または抗ＩＬ－１Ｒアンタゴニスト、例えばアナキンラと連続的（前後に）または同時に投与され得る。ある態様において、コルチコステロイドは、デキサメタゾンである。ある態様において、デキサメタゾンは、約１０－２０ｍｇの用量で、好ましくは静脈内投与される。ある態様において、コルチコステロイドは、メチルプレドニゾロンである。ある態様において、メチルプレドニゾロンは、１日当たり約１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、例えば１日当たり約２ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【0162】
ある態様において、第一選択治療は、解熱剤、鎮痛剤および／または抗生物質の投与を含む、ＣＲＳに対する対症療法剤の投与を含む。ある態様において、第一選択治療は、発作予防薬（例えば、レベチラセタム）の投与を含む。対症療法剤および／または発作予防薬は、有害事象の発生または発生のリスクを処置、予防、遅延、低減または減弱させることができる薬剤に加えて投与されてもよい。
【0163】
本発明の何れかの面のある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の用量（例えば、開始用量または維持用量）の投与後に患者がＣＲＳを発症した場合、本明細書に記載の毒性がグレード≦１に達したとき、次の用量（例えば、次の開始用量または次の維持用量）が患者に投与されてもよい。患者がＣＲＳを発症する別の態様において、毒性がベースラインレベルに達したとき、次の用量を患者に投与してもよい。
【0164】
第一選択治療に反応してＣＲＳが解決しないかまたは悪化する場合、処置は、以下を含む第二選択治療の投与を更に含んでもよい：
（ｉ）抗ＩＬ－６アンタゴニスト抗体および／または抗ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト抗体、例えば、トシリズマブの１回以上（例えば、１回、２回、３回、４回または５回またはそれ以上）の追加の用量；および
（ｉｉ）１回以上（例えば、１回、２回、３回、４回、または５回またはそれ以上）のコルチコステロイド、例えば、デキサメタゾンまたはメチルプレドニゾロンの追加の用量。
（ｉ）抗ＩＬ－６アンタゴニスト抗体および／または抗ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト抗体、例えば、トシリズマブの１回以上（例えば、１回、２回、３回、４回または５回またはそれ以上）の追加の用量；および
（ｉｉ）１回以上（例えば、１回、２回、３回、４回、または５回またはそれ以上）のコルチコステロイド、例えば、デキサメタゾンまたはメチルプレドニゾロンの追加の用量。
【0165】
ある態様において、１以上の追加用量のトシリズマブは、約８ｍｇ／ｋｇの用量で患者に静脈内投与される。コルチコステロイドは、抗ＩＬ－６アンタゴニスト抗体および／または抗ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト抗体、例えば、トシリズマブと連続して（前後に）または同時に投与され得る。ある態様において、コルチコステロイドはデキサメサゾンである。ある態様において、デキサメサゾンは、約１０－２０ｍｇの用量で、好ましくは静脈内投与される。ある態様において、コルチコステロイドはメチルプレドニゾロンである。ある態様において、メチルプレドニゾロンは、１日当たり約１ｍｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇの用量で、例えば１日当たり約２ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【0166】
第二選択治療に対してＣＲＳが消失しないまたは悪化する場合、処置は、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－６、ＩＬ－６受容体（ＩＬ－６Ｒ）、ＩＦＮ、ＩＦＮＧＲ、ＩＬ－２、ＩＬ－２Ｒ／ＣＤ２５、ＭＣＰ－１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ΜΙΡΙβ、ＣＣＲ５、ＴＮＦα、ＴＮＦＲ１、ＩＬ－１（例えば、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－１ＲＡ）、およびＩＬ－１受容体（ＩＬ－１Ｒ）から選択されるサイトカイン受容体またはサイトカインのアンタゴニストの投与を含む第三選択治療の投与をさらに含んでもよく、ここで、アンタゴニストは、抗体または抗原結合フラグメント、低分子、タンパク質またはペプチドおよび核酸から選択される。アンタゴニストは、抗ＩＬ－６抗体および／または抗ＩＬ－６Ｒ抗体であってもよい。例えば、アンタゴニストは、トシリズマブ、シルトキシマブ、クラザキズマブ、サリルマブ、オロキズマブ、エルシリモマブ、ＡＬＤ５１８／ＢＭＳ－９４５４２９、シルクマブ（ＣＮＴＯ１３６）、ＣＰＳＩ－２６３４、ＡＲＧＸ－１０９、レンジルマブ、ＦＥ３０１およびＦＭ１０１から選択されてもよい。ある態様において、第三選択治療は、シルツキシマブの投与を含む。ある態様において、シルツキシマブは、約１１ｍｇ／ｋｇの単回投与として患者に投与され、好ましくは静脈内投与される。あるいは、アンタゴニストは、抗ＩＬ－１アンタゴニストおよび／または抗ＩＬ－１Ｒアンタゴニスト、例えばアナキンラであってもよい。
【0167】
ＣＲＳが第三選択治療に応答して消失しないかまたは悪化する場合、処置は、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）集団を減少させる分子の投与を含む第四選択治療の投与をさらに含んでもよい。Ｔｒｅｇ細胞の数を減少させる（例えば、枯渇させる）分子は当技術分野で知られており、例えば、ＣＤ２５枯渇、シクロホスファミド投与、抗ＣＴＬＡ４抗体およびグルココルチコイド誘導ＴＮＬＲファミリー関連遺伝子（ＧＩＴＲ）機能調節を含む。ＧＩＴＲは、活性化Ｔ細胞上で上方制御されるＴＮＬＲスーパーファミリーのメンバーであり、免疫系を強化する。ある態様において、第四選択治療は、シクロホスファミドの投与を含む。
【0168】
ある態様において、有害事象（例えば、好中球減少、感染症）が発生した場合、処置は、解熱剤、鎮痛剤、抗ウイルス剤および／または抗生物質の投与を含む対症療法をさらに含んでいてもよい。ある態様において、発作予防薬（例えば、レベチラセタム）が患者に投与され得る。患者が好中球減少症（例えば、少なくともグレード３の好中球減少症）を発症した場合、処置は、抗生物質（例えば、レボフロキサシンまたは同等物）の投与をさらに含み得る。患者がウイルス感染症（例えば、インフルエンザ）を発症した場合、処置は、オセルタミビル、ザナミビルおよび／または等価物（equivalents）の投与をさらに含んでもよい。
【0169】
本発明の何れかの面のある態様において、患者が、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体の用量（例えば、開始用量または維持用量）の投与後にウイルス感染（例えば、インフルエンザＡ／Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）を発症した場合、次の用量（例えば、次の開始用量または次の維持用量）は、感染の症状が消失したときに患者に投与されてもよい。患者がウイルス感染を発症する別の態様において、次の投与は、ウイルス感染に対するネガティブ試験、例えばＰＣＲウイルスパネルが陰性であった後、および／またはウイルス感染に対するポジティブ試験、例えばＰＣＲウイルスパネルが陽性であった後、少なくとも１４日後に実施されてもよい。ウイルスパネル（例えば、ＰＣＲウイルスパネル）は、インフルエンザＡ/Ｂ、呼吸器多核体ウイルス（ＲＳウイルス）、パラインフルエンザウイルス、メタニューモウイルス、アデノウイルスおよび／またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を検査することができる。
【0170】
多重特異性抗体
本発明の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、ＢＣＭＡおよびＣＤ３に特異的に結合する。用語“ＢＣＭＡおよびＣＤ３に対する抗体”、“抗ＢＣＭＡ抗ＣＤ３抗体”または“ＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する抗体”は、抗体が治療薬として有用であるように十分な親和性でＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合できる多特異的抗体（例えば、二重特異的抗体）を意味する。これは、ＢＣＭＡに結合する第１の抗体または抗原結合フラグメント、およびＣＤ３に結合する第２の抗体または抗原結合フラグメントを含む分子を作製することにより達成される。このような多重特異性抗体は、三重特異性抗体または二重特異性抗体であってもよい。好ましい態様において、多重特異性抗体は、二重特異性抗体である。
本発明の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、ＢＣＭＡおよびＣＤ３に特異的に結合する。用語“ＢＣＭＡおよびＣＤ３に対する抗体”、“抗ＢＣＭＡ抗ＣＤ３抗体”または“ＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合する抗体”は、抗体が治療薬として有用であるように十分な親和性でＢＣＭＡおよびＣＤ３に結合できる多特異的抗体（例えば、二重特異的抗体）を意味する。これは、ＢＣＭＡに結合する第１の抗体または抗原結合フラグメント、およびＣＤ３に結合する第２の抗体または抗原結合フラグメントを含む分子を作製することにより達成される。このような多重特異性抗体は、三重特異性抗体または二重特異性抗体であってもよい。好ましい態様において、多重特異性抗体は、二重特異性抗体である。
【0171】
本明細書で用いる用語“ＢＣＭＡ”は、分化形質細胞で優先的に発現される腫瘍壊死受容体スーパーファミリーのメンバーである、ＢＣＭＡ；ＴＲ１７＿ＨＵＭＡＮ、ＴＮＦＲＳＦ１７（UniProt Q02223）としても知られているヒトＢ細胞成熟抗原に関連する。ＢＣＭＡの細胞外ドメインは、ＵｎｉＰｒｏｔによれば、アミノ酸１～５４（または５～５１）からなる。本明細書で用いる用語“ＢＣＭＡに対する抗体”、“抗ＢＣＭＡ抗体”または“ＢＣＭＡに結合する抗体”は、ＢＣＭＡの細胞外ドメインに特異的に結合する抗体に関する。
【0172】
用語“ＢＣＭＡに特異的に結合する”とは、抗体がＢＣＭＡを標的とする治療薬として有用であるように、定義された標的に十分な親和性で結合することが可能な抗体を意味する。ある態様において、ＢＣＭＡに特異的に結合する抗体は、他の抗原に結合しないか、または生理学的効果をもたらすのに十分な親和性で他の抗原に結合しない。
【0173】
ある態様において、無関係の非ＢＣＭＡタンパク質に対する抗ＢＣＭＡ抗体の結合の程度は、例えば、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）、例えばBiacore(登録商標）、酵素結合免疫吸着（ＥＬＩＳＡ）またはフローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）によって測定したＢＣＭＡに対する抗体の結合よりも約１０倍、好ましく１００倍以上少ない。一態様において、ＢＣＭＡに結合する抗体は、１０－８Ｍ以下、好ましくは１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、より好ましくは１０－９Ｍ～１０－１３Ｍの解離定数（Ｋｄ）を有する。
【0174】
一態様において、抗ＢＣＭＡ抗体は、異なる種、好ましくはヒトおよびカニクイザル由来のＢＣＭＡ間で保存されているＢＣＭＡのエピトープに結合し、さらに好ましくはマウスおよびラットのＢＣＭＡにも結合する。
【0175】
好ましくは、抗ＢＣＭＡ抗体は、ヒトＢＣＭＡおよび非ヒト哺乳動物由来のＢＣＭＡ、好ましくはカニクイザル、マウスおよび／またはラット由来のＢＣＭＡからなる一群のＢＣＭＡに特異的に結合する。抗ＢＣＭＡ抗体は、プレート結合ＢＣＭＡを用いて、ヒトＢＣＭＡとの結合をＥＬＩＳＡ法により分析する。このアッセイでは、プレート結合ＢＣＭＡの量は好ましくは１．５μｇ／ｍＬであり、抗ＢＣＭＡ抗体の濃度は０．１ｐＭから２００ｎＭの範囲で用いられる。
【0176】
用語“ＣＤ３”は、ヒトＣＤ３タンパク質多量体サブユニット複合体を意味する。ＣＤ３タンパク質多量体サブユニット複合体は、６つの特徴的なポリペプチド鎖で構成されている。したがって、この用語は、ＣＤ３γ鎖（SwissProt P09693）、ＣＤ３δ鎖（SwissProt P04234）、２つのＣＤ３ε鎖（SwissProt P07766）、および１つのＣＤ３ζ鎖ホモダイマー（SwissProt 20963）を含み、Ｔ細胞受容体α鎖およびβ鎖と関連付けられる。この用語は、“完全長”の未処理のＣＤ３、ならびに細胞（Ｔ細胞を含む）によって天然に発現されるか、あるいはそれらのポリペプチドをコードする遺伝子またはｃＤＮＡをトランスフェクトした細胞上で発現され得る何れかのＣＤ３変異体、アイソフォームおよび種ホモログを包含する。
【0177】
用語“ＣＤ３に特異的に結合する”とは、抗体がＣＤ３を標的とする治療薬として有用であるように、定義された標的に十分な親和性で結合することが可能な抗体を意味する。ある態様において、ＣＤ３に特異的に結合する抗体は、他の抗原に結合しないか、または生理学的効果をもたらすのに十分な親和性で他の抗原に結合しない。
【0178】
本発明の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、ＣＤ３への結合についてＳＰＲ、例えば、Biacore(登録商標）によって分析することができる。ある態様において、二重特異性抗体は、表面プラズモン共鳴アッセイ、好ましくは２５℃にてBiacore 8Kを用いて測定された、約１０－７Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）、約１０－８Ｍ以下のＫＤ、約１０－９Ｍ以下のＫＤ、約１０－１０Ｍ以下のＫＤ、約１０－１１Ｍ以下のＫＤ、または約１０－１２Ｍ以下のＫＤでヒトＣＤ３と結合する。好ましい態様において、二重特異性抗体は、約１０－８Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）でヒトＣＤ３に結合する。
【0179】
本明細書における用語“抗体”とは、所望の抗原結合活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）および抗体フラグメントを含むがこれらに限定されない、様々な抗体構造を包含する。
【0180】
“重鎖”は、重鎖可変領域（本明細書では“ＶＨ”と略記）および重鎖定常領域（本明細書では“ＣＨ”と略記）を含む。重鎖定常領域は、重鎖定常ドメインＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３（抗体クラスＩｇＡ、ＩｇＤおよびＩｇＧ）ならびに要すれば重鎖定常ドメインＣＨ４（抗体クラスＩｇＥおよびＩｇＭ）を含んでいてよい。
【0181】
“軽鎖”は、軽鎖可変ドメイン（本明細書では“ＶＬ”と略記）および軽鎖定常ドメイン（本明細書では“ＣＬ”と略記）を含む。可変領域ＶＨおよびＶＬは、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変領域と、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる保存性の高い領域にさらに細分化され得る。各ＶＨおよびＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって、以下の順序で並んだ３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成されている：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。重鎖および軽鎖の“定常ドメイン”は、抗体と標的の結合には直接関与しないが、様々なエフェクター機能を発揮する。
【0182】
抗体とその標的抗原またはエピトープとの結合は、相補性決定領域（ＣＤＲ）によって媒介される。ＣＤＲは、抗体重鎖および軽鎖の可変領域内に位置する配列可変性の高い領域であり、抗原結合部位を形成している。ＣＤＲは抗原特異性を決定する主要な要素である。一般的に、抗体重鎖および軽鎖はそれぞれ、非連続的に配置された３つのＣＤＲを含む。抗体重鎖および軽鎖のＣＤＲ３領域は、本発明による抗体の結合特異性／親和性において特に重要な役割を果たし、したがって、本発明のさらなる態様を提供する。
【0183】
本明細書で用いる用語“抗原結合フラグメント”は、１個、２個または３個の軽鎖ＣＤＲ、および／または１個、２個または３個の重鎖ＣＤＲを含む抗原結合ポリペプチドの何れかの天然または人工的に構築された構成を包含し、このポリペプチドは抗原に結合することが可能である。したがって、この用語は、無傷（intact）の抗体が結合する抗原に結合する無傷の抗体の一部を含む、無傷の抗体以外の分子を意味する。抗体フラグメントの例としては、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ'）2；二重特異性抗体（ダイアボディ）；直鎖抗体；単鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）；および、抗体フラグメントから形成される多特異性抗体などがあるが、それらに限定されない。
【0184】
用語“Ｆａｂフラグメント”および“Ｆａｂ”は、本明細書において互換的に用いられ、単一の軽鎖（すなわち、定常ドメインＣＬおよびＶＬ）および単一の重鎖（すなわち、定常ドメインＣＨ１およびＶＨ）を含む。Ｆａｂフラグメントの重鎖は、別の重鎖とジスルフィド結合を形成することができない。
【0185】
“Ｆａｂ’フラグメント”は、単一の軽鎖および単一の重鎖を含むが、ＣＨ１およびＶＨに加えて、ＣＨ１ドメインとＣＨ２ドメインの間の重鎖の領域で、鎖間ジスルフィド結合の形成に必要な領域を含んでいる。したがって、２つのＦａｂ’フラグメントは、ジスルフィド結合の形成を介して会合し、Ｆ（ａｂ’）２分子を形成することができる。
【0186】
“Ｆ（ａｂ’）２フラグメント”は、２本の軽鎖および２本の重鎖を含む。各鎖は、２本の重鎖の間の鎖間ジスルフィド結合の形成に必要な定常領域の一部を含む。
【0187】
“Ｆｖフラグメント”は、重鎖および軽鎖の可変領域のみを含む。定常領域は含まれない。
【0188】
“単一ドメイン抗体”とは、単一の抗体ドメイン単位（例えば、ＶＨまたはＶＬ）を含む抗体フラグメントのことである。
【0189】
“単鎖Ｆｖ”（“ｓｃＦｖ”）は、抗体のＶＨドメインおよびＶＬドメインを含む抗体フラグメントであり、互いに連結して一本の鎖を形成している。ｓｃＦｖのＶＨドメインおよびＶＬドメインの連結には、一般的にポリペプチドリンカーが用いられる。
【0190】
“タンデムｓｃＦｖ”は、TandAb(登録商標）としても知られ、２つのｓｃＦｖを柔軟なペプチドリンカーでタンデム方向に共有結合して形成される一本鎖のＦｖ分子である。
【0191】
“二重特異性Ｔ細胞誘導（BiTE(登録商標））は、一本鎖ペプチド鎖上に２つの単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）からなる融合タンパク質である。一方のｓｃＦｖはＣＤ３受容体を介してＴ細胞に結合し、もう一方のｓｃＦｖは腫瘍細胞抗原に結合する。
【0192】
“ダイアボディ”とは、同じポリペプチド鎖上の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）が、短すぎて同じ鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするペプチドリンカーで連結された小さな二価および二重特異性抗体フラグメントである（Kipriyanov、Int. J. Cancer 77 (1998), 763-772)。これにより、別の鎖の相補的なドメインとの対合が強制され、２つの機能的な抗原結合部位を有する二量体分子の集合が促進される。
【0193】
“ＤＡＲＰｉｎ”は、二重特異性アンキリンリピート分子である。ＤＡＲＰｉｎは、ヒトゲノムに存在する天然アンキリンタンパク質に由来し、最も豊富な種類の結合タンパク質の１つである。ＤＡＲＰｉｎライブラリモジュールは、２２９個のアンキリンリピートタンパク質の配列によって定義され、最初の設計には２２９個のアンキリンリピートが、その後の改良にはさらに２２００個のアンキリンリピートが補充されている。このモジュールは、ＤＡＲＰｉｎライブラリーの構成要素として機能する。ライブラリモジュールは、ヒトゲノム配列に類似している。ＤＡＲＰｉｎは４－６個のモジュールで構成されている。各モジュールは約３．５ｋＤａであるため、平均的なＤＡＲＰｉｎのサイズは１６－２１ｋＤａである。結合剤の選択はリボソームディスプレイによって行われるが、これは完全に無細胞であり、He M. and Taussig MJ., Biochem Soc Trans. 2007, Nov;35(Pt 5):962-5 に記載されている。
【0194】
ＣＤＲの配列は、当技術分野で公知の何れかの番号システム、例えば、Kabatシステム（Kabat, E. A., et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991); Chothiaシステム（Chothia &, Lesk, “Canonical Structures for the Hypervariable Regions of Immunoglobulins,” J. Mol. Biol. 196, 901-917 (1987))；またはIMGTシステム（Lefranc et al.、“IMGT Unique Numbering for Immunoglobulin and Cell Receptor Variable Domains and Ig superfamily V-like domains”、Dev．Comp. Immunol. 27, 55-77 (2003)) を参照して特定することができる。
【0195】
【表11】
【0196】
本発明で議論される重鎖定常領域アミノ酸位置について、番号付けは、Edelman, G.M., et al, Proc. Natl.Acad. Sci. USA 63 (1969) 78-85に最初に記載されたＥＵ番号付けに従っている。EdelmanのＥＵ番号付けはまた、Kabatら（1991）（上掲）にも記載されている。したがって、重鎖の文脈における用語“KabatによるＥＵインデックス”、“ＥＵインデックス”、“KabatのＥＵインデックス”または“ＥＵ番号付け”とは、Kabatら（1991）に規定されているEdelmanらのヒトｌｇＧ１ ＥＵ抗体に基づく残基番号付けシステムを意味する。軽鎖定常領域アミノ酸配列に用いられる番号付けシステムは、同様にKabatら（上掲）に記載されている。したがって、本明細書で用いる“Kabatによって番号付けされた”とは、Kabatら（上掲）の文献に記載された番号付けを意味する。
【0197】
本発明の抗体およびその抗原結合フラグメントは、組換え手段により何れかの種に由来していてもよい。例えば、抗体または抗原結合フラグメントは、マウス、ラット、ヤギ、ウマ、ウシ、ニワトリ、ウサギ、ラクダ、ロバ、ヒトまたはそれらのキメラバージョンであってもよい。ヒトへの投与に用いるために、非ヒト由来の抗体または抗原結合フラグメントは、ヒト患者への投与時に抗原性が低くなるように遺伝的または構造的に改変されていてもよい。
【0198】
とりわけ組換えヒト抗体またはヒト化抗体としての、ヒト抗体またはヒト化抗体が特に好ましい。
【0199】
用語“ヒト化抗体”は、フレームワークまたは“相補性決定領域”（ＣＤＲ）が、親免疫グロブリンのものと比較して異なる特異性を有する免疫グロブリンのＣＤＲを含むよう改変された抗体を意味する。例えば、マウスＣＤＲをヒト抗体のフレームワーク領域に移植して、“ヒト化抗体”を調製することができる。例えば、Riechmann, L., et al., Nature 332 (1988) 323-327；および、Neuberger, M.S., et al., Nature 314 (1985) 268-270を参照のこと。ある態様において、“ヒト化抗体”は、本発明による抗体の特性、特にＣｌｑ結合および／またはＦｃ受容体（ＦｃＲ）結合に関する特性を生成するために、定常領域が元の抗体のものから追加的に修飾または変更されているものである。
【0200】
用語“ヒト抗体”とは、ヒトまたはヒト細胞によって産生された抗体、あるいはヒト抗体レパートリーまたは他のヒト抗体コーディング配列を利用する非ヒト起源に由来する抗体のものに対応するアミノ酸配列を有するものである。このヒト抗体の定義では、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体は特に除外されている。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリーなど、当技術分野で知られる様々な技術を用いて作製することができる。
【0201】
用語“キメラ抗体”とは、１つの供給源または種由来の可変領域、すなわち結合領域と、異なる供給源または種由来の定常領域の少なくとも一部とを含む抗体を意味し、通常は組換えＤＮＡ技術により産生される。マウス可変領域およびヒト定常領域を含むキメラ抗体が好ましい。本発明に包含される“キメラ抗体”の他の好ましい態様は、本発明による抗体の特性、特にＣｌｑ結合および／またはＦｃ受容体（ＦｃＲ）結合に関して生成するために、定常領域が元の抗体のものから修飾または変更されたものである。かかるキメラ抗体は、“クラススイッチ抗体”とも呼ばれる。キメラ抗体は、免疫グロブリン可変領域をコードするＤＮＡセグメントおよび免疫グロブリン定常領域をコードするＤＮＡセグメントを含む免疫グロブリン遺伝子が発現した産物である。従来の組換えＤＮＡおよび遺伝子導入技術を含むキメラ抗体の製造方法は、当技術分野でよく知られている。例えば、Morrison, S.L., et al., Proc. Natl.Acad. Sci. USA 81 (1984) 6851-6855；米国特許第５，２０２，２３８号および同第５，２０４，２４４号を参照のこと。
【0202】
用語“Ｆｃ領域”および“Ｆｃ”は、本明細書において互換的に用いられ、２つのＦｃ鎖によって形成される天然免疫グロブリンの部分を意味する。各“Ｆｃ鎖”は、定常ドメインおよび定常ドメインＣＨ３を含む。各Ｆｃ鎖はまた、ヒンジ領域を含んでいてもよい。天然Ｆｃ領域は、ホモ二量体である。ある態様において、Ｆｃ領域は、Ｆｃヘテロ二量体化を実施するための修飾を含んでもよい。
【0203】
用語“Ｆｃ部分”は、Ｆｃ領域に対応する、本発明の抗体またはその抗原結合フラグメントの部分を意味する。
【0204】
重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭに分類され、それぞれアイソタイプによって指定された特徴的なエフェクター機能を有する５つの主要なクラスがある。例えば、ＩｇＧは、ＩｇＧｌ、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４と呼ばれる４つのサブクラスに分けられる。Ｉｇ分子は、複数の細胞受容体クラスと相互作用する。例えば、ＩｇＧ分子は、ＩｇＧクラスの抗体に特異的な３つのクラスのＦｃγ受容体、すなわちＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩおよびＦｃγＲＩＩＩと相互作用する。ＩｇＧとＦｃγＲ受容体の結合に重要な配列は、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインに存在することが報告されている。
【0205】
本発明の抗体またはその抗原結合フラグメントは、何れかのアイソタイプ、すなわちＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭ、ならびに４鎖の免疫グロブリン（Ｉｇ）構造の合成多量体であってよい。好ましい態様において、抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＩｇＧアイソタイプである。抗体または抗原結合フラグメントは、何れかのＩｇＧサブクラス、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４アイソタイプであり得る。好ましい態様において、抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＩｇＧ１アイソタイプである。
【0206】
ある態様において、抗体は、ＩｇＧアイソタイプである重鎖定常領域を含む。ある態様において、抗体は、ＩｇＧアイソタイプである重鎖定常領域の一部を含む。ある態様において、ＩｇＧ定常領域またはその一部は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４定常領域である。好ましくは、ＩｇＧ定常領域またはその一部は、ＩｇＧ１定常領域である。
【0207】
本発明の抗体またはその抗原結合フラグメントは、ラムダ軽鎖またはカッパ軽鎖を含んでいてもよい。
【0208】
好ましい態様において、抗体またはその抗原結合フラグメントは、κ軽鎖である軽鎖を含む。ある態様において、抗体または抗原結合フラグメントは、κ定常領域である軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む軽鎖を含む。
【0209】
ある態様において、抗体は、κ可変領域である軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含む。好ましくは、カッパ軽鎖は、カッパＶＬであるＶＬおよびカッパＣＬであるＣＬを含む。
【0210】
あるいは、抗体またはその抗原結合フラグメントは、λ軽鎖である軽鎖を含んでいてもよい。ある態様において、抗体または抗原結合フラグメントは、λ定常領域である軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む軽鎖を含む。ある態様において、抗体は、λ可変領域である軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含む。
【0211】
設計された抗体およびその抗原結合フラグメントとしては、ＶＨおよび／またはＶＬ内のフレームワーク残基に修飾がなされたものが含まれる。このような修飾は、例えば、抗体の免疫原性を低下させるため、および／または抗体の生産および精製を改善するために、抗体の特性を改善し得る。
【0212】
本明細書に記載の抗体およびその抗原結合フラグメントは、当技術分野で公知の従来の技術、例えば、アミノ酸欠失（複数可）、挿入（複数可）、置換（複数可）、付加（複数可）および／または組換えおよび／または当技術分野で公知の他の修飾（複数可）を、単独または組み合わせて用いることによって、さらに修飾することができる。免疫グロブリン鎖のアミノ酸配列の基礎となるＤＮＡ配列にそのような改変を導入する方法は、当業者によく知られている。
【0213】
本発明の抗体およびその抗原結合性フラグメントは、共有結合が抗体のエピトープへの結合を妨げないように、またはそうでなければ抗体の生物学的活性を損なわないように（例えば、抗体への何れかのタイプの分子の共有結合により）修飾された誘導体も含む。適切な誘導体の例としては、フコシル化抗体、グリコシル化抗体、アセチル化抗体、ＰＥＧ化抗体、リン酸化抗体、アミド化抗体などがあるが、これらに限定されない。
【0214】
本発明の抗体のアミノ酸配列におけるマイナーな変異は、アミノ酸配列（複数可）の変異が、本明細書の何れかで定義される本発明の抗体またはその抗原結合フラグメントに対して少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、最も好ましくは少なくとも９９％の配列同一性を維持するという条件で、本発明に包含されることが企図される。
【0215】
本発明の抗体は、保存位置または非保存位置のいずれかにおいて、ある種からのアミノ酸残基が別の種における対応する残基と置換されているバリアントを含んでもよい。一態様において、非保存位置のアミノ酸残基は、保存的残基または非保存的残基で置換される。特に、保存的アミノ酸置換が企図される。
【0216】
“保存的アミノ酸置換”とは、アミノ酸残基が、類似の側鎖を有するアミノ酸残基で置換されるものである。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは当技術分野で定義されており、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニンまたはヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸またはグルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、またはシステイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニンまたはトリプトファン）、ベータ分岐側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族性側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファンまたはヒスチジン）が挙げられる。従って、ポリペプチド中のアミノ酸が同じ側鎖ファミリーからの別のアミノ酸に置換されている場合、そのアミノ酸置換は保存的であると考えられる。本発明の抗体において保存的に修飾されたバリアントを含むことは、バリアントの他の形態、例えば多型バリアント、種間ホモログ、およびアレルを除外するものではない。
【0217】
“非保存的アミノ酸置換”には、（ｉ）電気的に陽性側鎖を有する残基（例えば、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＬｙｓ）が電気的に陰性残基（例えば、ＧｌｕまたはＡｓｐ）に置換される、またはそれによるもの、（ｉｉ）親水性残基（例えば、ＳｅｒまたはＴｈｒ）が疎水性残基（例えば、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ＰｈｅまたはＶａｌ）、（ｉｉｉ）システインまたはプロリンが他の残基と置換される、または他の残基によって置換される、あるいは（ｉｖ）嵩高い疎水性または芳香族側鎖（例えば、Ｖａｌ、Ｈｉｓ、ＩｌｅまたはＴｒｐ）を有する残基が、小さい側鎖（例えばＡｌａまたはＳｅｒ）または側鎖なし（例えばＧｌｙ）を有するものと、あるいはそれらによって置換される。
【0218】
抗体フォーマット
多重特異性、例えば二重特異性抗体のためのフォーマットは、当技術分野において知られている。例えば、二重特異性抗体のフォーマットは、Kontermann RE, mAbs 4:2 1-16 (2012); Holliger P., Hudson PJ, Nature Biotech.23 (2005) 1126- 1136, Chan AC, Carter PJ Nature Reviews Immunology 10, 301-316 (2010) およびCuesta AM et al., Trends Biotech 28 (2011) 355-362 に記載されている。
多重特異性、例えば二重特異性抗体のためのフォーマットは、当技術分野において知られている。例えば、二重特異性抗体のフォーマットは、Kontermann RE, mAbs 4:2 1-16 (2012); Holliger P., Hudson PJ, Nature Biotech.23 (2005) 1126- 1136, Chan AC, Carter PJ Nature Reviews Immunology 10, 301-316 (2010) およびCuesta AM et al., Trends Biotech 28 (2011) 355-362 に記載されている。
【0219】
本発明の多重特異性、例えば二重特異性抗体は、何れかのフォーマットを有することができる。多重特異性および二重特異性抗体フォーマットには、例えば、多価単鎖抗体、ダイアボディおよびトリアボディ、ならびに、さらなる抗原結合ドメイン（例えば、単鎖Ｆｖ、タンデムｓｃＦｖ、ＶＨドメインおよび／またはＶＬドメイン、Ｆａｂ、または（Ｆａｂ）２、）が１以上のペプチドリンカーを介して連結されている完全長抗体の一定ドメイン構造を有する抗体、ならびにＤＡＲＰｉｎｓ等の抗体模倣体が含まれる。ある態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、二重特異性Ｔ細胞エンジャー（BITE(登録商標））などのｓｃＦｖのフォーマットを有する。ある態様において、本発明の抗体は、ＢＣＭＡに結合する第１のドメイン、Ｔ細胞抗原（例えば、ＣＤ３）に結合する第２のドメイン、およびそれぞれがヒンジ、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインを含む２つのポリペプチドモノマーを含む第３のドメインを含む単鎖抗体であり、ここで２つのポリペプチドモノマーはペプチドリンカー（例えば（ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－リンカー－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３）を介して互いに融合される。
【0220】
抗体の“価数（valency）”は、結合ドメインの数を示す。そのため、用語“２価”、“３価”および“多価”とは、それぞれ、２つの結合ドメイン、３つの結合ドメイン、および複数の結合ドメインの存在を示す。本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、各標的抗原に結合することができる複数の結合ドメインを有していてもよい（すなわち、抗体は３価または多価である）。好ましい態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、各標的抗原の同じエピトープに結合することができる２以上の結合ドメインを有する。ある態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、各標的抗原の異なるエピトープに結合することができる２以上の結合ドメインを有する。
【0221】
本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、二価、三価または四価であってよい。好ましい態様において、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は３価であり、好ましくは、３価の抗体はＢＣＭＡに対して２価である。したがって、二重特異性抗体は、３価であってもよく、ここで、３価の抗体は、ＢＣＭＡに対して２価である。
【0222】
多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、単一の種からの全長であってもよいか、またはキメラ化もしくはヒト化されていてもよい。３以上の抗原結合ドメインを有する抗体では、タンパク質が２つの異なる抗原に対する結合ドメインを有する限り、いくつかの結合ドメインは同一であってもよい。
【0223】
本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、二重特異性ヘテロ二量体フォーマットを有し得る。ある態様において、二重特異性抗体は、２つの異なる重鎖および２つの異なる軽鎖を含む。他の態様において、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、２つの同一の軽鎖および２つの異なる重鎖を含む。ある態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体において、重鎖と軽鎖の２つの対（ＨＣ／ＬＣ）のうちの１つがＣＤ３に特異的に結合し、他の１つがＢＣＭＡに特異的に結合する。
【0224】
本発明の二重特異性抗体が二価である態様において、それらは、１つの抗ＢＣＭＡ抗体および１つの抗ＣＤ３抗体を含んでいてよい（本明細書において“１＋１”フォーマットと称される）。
【0225】
ＢＣＭＡ抗体およびＣＤ３抗体がＦａｂである態様において、１＋１フォーマットの二価の二重特異性抗体は、フォーマット：ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ（すなわち、Ｆｃが存在しないとき）、を有していてもよい。あるいは、二重特異性抗体は、フォーマット：Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ；Ｆｃ－ＢＣＭＡＦａｂ－ＣＤ３Ｆａｂ；または、ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ（すなわち、Ｆｃが存在するとき）を有していてもよい。好ましい態様において、二価の二重特異性抗体は、ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂのフォーマットを有する。
【0226】
“ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ”は、ＣＤ３ Ｆａｂが、そのＮ末端を介してＢＣＭＡ ＦａｂのＣ末端に結合していることを意味する。
“Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ”とは、ＢＣＭＡ ＦａｂがそのＣ末端を介してＦｃのＮ末端と結合し、ＣＤ３ ＦａｂがそのＣ末端を介してＢＣＭＡ ＦａｂのＮ末端と結合していることを意味する。
“Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ”とは、ＣＤ３ ＦａｂがそのＣ末端を介してＦｃのＮ末端に結合し、ＢＣＭＡ ＦａｂがそのＣ末端を介してＣＤ３ ＦａｂのＮ末端に結合していることを意味する。
“ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ”は、ＢＣＭＡおよびＣＤ３ Ｆａｂ断片が、それらのＣ末端を介してＦｃのＮ末端に結合していることを意味する。
“Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ”とは、ＢＣＭＡ ＦａｂがそのＣ末端を介してＦｃのＮ末端と結合し、ＣＤ３ ＦａｂがそのＣ末端を介してＢＣＭＡ ＦａｂのＮ末端と結合していることを意味する。
“Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ”とは、ＣＤ３ ＦａｂがそのＣ末端を介してＦｃのＮ末端に結合し、ＢＣＭＡ ＦａｂがそのＣ末端を介してＣＤ３ ＦａｂのＮ末端に結合していることを意味する。
“ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ”は、ＢＣＭＡおよびＣＤ３ Ｆａｂ断片が、それらのＣ末端を介してＦｃのＮ末端に結合していることを意味する。
【0227】
本発明の二重特異性抗体が３価である態様において、それらは２つの抗ＢＣＭＡ抗体および１つの抗ＣＤ３抗体を含み得る（本明細書中、“２＋１”フォーマットと称される）。
【0228】
ＢＣＭＡ抗体およびＣＤ３抗体がＦａｂである態様において、２＋１フォーマットの３価の二重特異性抗体は、フォーマット：ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ；または、ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ （すなわち、Ｆｃが存在しないとき）を有していてもよい。あるいは、二重特異性抗体は、以下のフォーマット：ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ； ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ；または、ＣＤ３ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ（すなわち、Ｆｃが存在するとき）を有していてもよい。好ましい態様において、３価の二重特異性抗体は、ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂのフォーマットを有する。
【0229】
“ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ”は、ＣＤ３ ＦａｂがそのＣ末端を介して第１のＢＣＭＡ ＦａｂのＮ末端に結合し、第１のＢＣＭＡ ＦａｂがそのＣ末端を介して第２のＢＣＭＡ ＦａｂのＮ末端に結合していることを意味する。
“ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ”は、第１のＢＣＭＡ ＦａｂがそのＣ末端を介してＣＤ３ ＦａｂのＮ末端と結合し、ＣＤ３ ＦａｂがそのＣ末端を介して第２のＢＣＭＡ ＦａｂのＮ末端と結合していることを意味する。
“ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ”とは、第１のＢＣＭＡ ＦａｂおよびＣＤ３ ＦａｂがそれらのＣ末端を介してＦｃのＮ末端に結合し、第２のＢＣＭＡ ＦａｂがそれらのＣ末端を介してＣＤ３ ＦａｂのＮ末端に結合していることを意味する。
“ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ”とは、第１のＢＣＭＡ Ｆａｂおよび第２のＢＣＭＡ ＦａｂがそれらのＣ末端を介してＦｃのＮ末端に結合し、ＣＤ３ ＦａｂがそのＣ末端を介して第２のＢＣＭＡ ＦａｂのＮ末端に結合していることを意味する。
“ＣＤ３ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ”とは、ＣＤ３ Ｆａｂおよび第１のＢＣＭＡ Ｆａｂが、それらのＣ末端を介してＦｃのＮ末端に結合し、第２のＢＣＭＡ Ｆａｂが、それらのＣ末端を介して第１のＢＣＭＡ ＦａｂのＮ末端に結合していることを意味する。
“ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ”は、第１のＢＣＭＡ ＦａｂがそのＣ末端を介してＣＤ３ ＦａｂのＮ末端と結合し、ＣＤ３ ＦａｂがそのＣ末端を介して第２のＢＣＭＡ ＦａｂのＮ末端と結合していることを意味する。
“ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ”とは、第１のＢＣＭＡ ＦａｂおよびＣＤ３ ＦａｂがそれらのＣ末端を介してＦｃのＮ末端に結合し、第２のＢＣＭＡ ＦａｂがそれらのＣ末端を介してＣＤ３ ＦａｂのＮ末端に結合していることを意味する。
“ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ”とは、第１のＢＣＭＡ Ｆａｂおよび第２のＢＣＭＡ ＦａｂがそれらのＣ末端を介してＦｃのＮ末端に結合し、ＣＤ３ ＦａｂがそのＣ末端を介して第２のＢＣＭＡ ＦａｂのＮ末端に結合していることを意味する。
“ＣＤ３ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ”とは、ＣＤ３ Ｆａｂおよび第１のＢＣＭＡ Ｆａｂが、それらのＣ末端を介してＦｃのＮ末端に結合し、第２のＢＣＭＡ Ｆａｂが、それらのＣ末端を介して第１のＢＣＭＡ ＦａｂのＮ末端に結合していることを意味する。
【0230】
ある態様において、本発明の二重特異性抗体は、ＢＣＭＡに特異的に結合する１以下のＢＣＭＡ Ｆａｂを含み、ＣＤ３に特異的に結合する１以下のＣＤ３ Ｆａｂおよび１以下のＦｃ部分を含む。
【0231】
ある態様において、二重特異性抗体は、ＣＤ３に特異的に結合する１以下のＣＤ３ Ｆａｂ、ＢＣＭＡに特異的に結合する２以下のＢＣＭＡ Ｆａｂ、および１以下のＦｃ部分を含む。ある態様において、１以下のＣＤ３ Ｆａｂおよび１以下のＢＣＭＡ ＦａｂがＦｃ部分に連結され、Ｆａｂ（複数可）のＦｃ部分のヒンジ領域へのＣ末端結合を介して連結が実施される。ある態様において、第２のＢＣＭＡ Ｆａｂは、そのＣ末端を介してＣＤ３ ＦａｂのＮ末端またはＦｃ部分のヒンジ領域のいずれかに連結され、したがって、二重特異性抗体のＦｃ部分とＣＤ３ Ｆａｂとの間に存在する。
【0232】
２つのＢＣＭＡ Ｆａｂを含む態様において、ＢＣＭＡ Ｆａｂは、好ましくは、同じ抗体に由来し、ＣＤＲ配列、可変ドメイン配列ＶＨおよびＶＬ、ならびに／または定常ドメイン配列ＣＨ１およびＣＬにおいて、好ましくは同一である。好ましくは、２つのＢＣＭＡ Ｆａｂのアミノ酸配列は、同一である。
【0233】
本発明の二重特異性抗体はまた、Ｆａｂの代わりにｓｃＦｖを含んでいてもよい。したがって、ある態様において、二重特異性抗体は、各Ｆａｂが対応するｓｃＦｖで置換されている、上記のフォーマットのうちのいずれか１つを有する。
【0234】
本発明の二重特異性抗体の構成要素、例えばＦａｂフラグメントは、当技術分野の状態に従って適切なリンカーの使用によって化学的に連結されていてもよい。好ましい態様において、（Ｇｌｙ４－Ｓｅｒ１）２リンカーが用いられる（Desplancq DK et al., Protein Eng. 1994 Aug;7(8):1027-33およびMack M. et al., PNAS July 18, 1995 vol.92 no.15 7021-7025）。本明細書で用いる“化学的に連結された”（または“連結された”）とは、成分が共有結合によって連結されていることを意味する。リンカーがペプチドリンカーであるため、このような共有結合は、通常、生化学的な組換え手段によって行われる。例えば、結合は、それぞれのＦａｂフラグメントのＶＬおよび／またはＶＨドメイン、リンカー、および抗体がＦｃを含んでいる場合にはＦｃ部分鎖をコードする核酸を用いて行うことができる。
【0235】
リンカーが用いられる場合、このリンカーは、第１のドメインおよび第２のドメインの各々が、互いに独立して、それらの異なる結合特異性を保持できることを保証するのに十分な長さおよび配列であってよい。
【0236】
抗体配列
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号１７のＣＤＲ３Ｈ領域ならびに配列番号２０のＣＤＲ３Ｌ領域ならびに以下の群より選択されるＣＤＲ１Ｈ、ＣＤＲ２Ｈ、ＣＤＲ１ＬおよびＣＤＲ２Ｌ領域の組合せを含む抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む：
ａ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２３のＣＤＲ１Ｌ領域、ならびに配列番号２４のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｂ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２５のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２６のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｃ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｄ）配列番号２９のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３０のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｅ）配列番号３４のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３５のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｆ）配列番号３６のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３７のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、ならびに配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、ならびに
ｇ）配列番号１５のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号１６のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号１８のＣＤＲ１Ｌ領域、ならびに配列番号１９のＣＤＲ２Ｌ領域。
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号１７のＣＤＲ３Ｈ領域ならびに配列番号２０のＣＤＲ３Ｌ領域ならびに以下の群より選択されるＣＤＲ１Ｈ、ＣＤＲ２Ｈ、ＣＤＲ１ＬおよびＣＤＲ２Ｌ領域の組合せを含む抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む：
ａ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２３のＣＤＲ１Ｌ領域、ならびに配列番号２４のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｂ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２５のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２６のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｃ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｄ）配列番号２９のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３０のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｅ）配列番号３４のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３５のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｆ）配列番号３６のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３７のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、ならびに配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、ならびに
ｇ）配列番号１５のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号１６のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号１８のＣＤＲ１Ｌ領域、ならびに配列番号１９のＣＤＲ２Ｌ領域。
【0237】
好ましい態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域、配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域および配列番号１７のＣＤＲ３Ｈ領域を含むＶＨ領域と、配列番号２０のＣＤＲ３Ｌ領域および以下の群より選択されるＣＤＲ１ＬおよびＣＤＲ２Ｌ領域の組合せを含む、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む：
ｉ）配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域および配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域。
ｉｉ）配列番号２３のＣＤＲ１Ｌ領域および配列番号２４のＣＤＲ２Ｌ領域；または
ｉｉｉ）配列番号２５のＣＤＲ１Ｌ領域および配列番号２６のＣＤＲ２Ｌ領域。
ｉ）配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域および配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域。
ｉｉ）配列番号２３のＣＤＲ１Ｌ領域および配列番号２４のＣＤＲ２Ｌ領域；または
ｉｉｉ）配列番号２５のＣＤＲ１Ｌ領域および配列番号２６のＣＤＲ２Ｌ領域。
【0238】
特に好ましい態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域、配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域および配列番号１７のＣＤＲ３Ｈ領域を含むＶＨ領域、ならびに配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域および配列番号２０のＣＤＲ３Ｌ領域を含むＶＬ領域を含む抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。
【0239】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、以下からなる群より選択されるＶＨおよびＶＬを含む抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む：
ａ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｂ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１３のＶＬ領域、
ｃ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域、
ｄ）配列番号３８のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｅ）配列番号３９のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｆ）配列番号４０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、または
ｇ）配列番号９のＶＨ領域および配列番号１１のＶＬ領域。
ａ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｂ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１３のＶＬ領域、
ｃ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域、
ｄ）配列番号３８のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｅ）配列番号３９のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｆ）配列番号４０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、または
ｇ）配列番号９のＶＨ領域および配列番号１１のＶＬ領域。
【0240】
特に好ましい態様において、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域を含む。
【0241】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。
【0242】
抗ＣＤ３抗体の例としては、ＯＫＴ３、ＴＲ６６、ＡＰＡ １／１、ＳＰ３４、ＣＨ２５２７、ＷＴ３１、７Ｄ６、ＵＣＨＴ－１、Ｌｅｕ－４、ＢＣ－３、Ｈ２Ｃ、ＨｕＭ２９１（ビシリズマブ）、Ｈｕ２９１（ＰＤＬ）、ＣｈＡｇｌｙＣＤ３（オテリックスマブ）、ｈＯＫＴ３γ１（アラ－アラ）（テプリズマブ）およびＮＩ－０４０１（フォラルマブ）が挙げられる。
【0243】
最初に作製された抗ＣＤ３抗体は、ＣＤ３εドメインに結合するマウス抗体であるＯＫＴ３（muromonab-CD3）であった。その後の抗ＣＤ３抗体には、ヒト化抗体またはヒト抗体、および人工抗体、例えば修飾Ｆｃ領域を含む抗体が含まれる。
【0244】
抗ＣＤ３抗体は、単一のポリペプチド鎖上のエピトープ、例えばＡＰＡ １/１またはＳＰ３４（Yang SJ, The Journal of Immunology (1986) 137; 1097-1100）、またはＣＤ３の２以上のサブユニット、例えばＷＴ３１、７Ｄ６、ＵＣＨＴ－１（ＷＯ２００００４１４７４参照）およびＬｅｕ－４に位置する立体構造エピトープを認識し得る。ＢＣ－３（Anasetti et al., Transplantation 54：844（1992））およびＨ２Ｃ（ＷＯ２００８１１９５６７Ａ２）を含むいくつかの抗ＣＤ３抗体を用いて臨床治験が実施されている。臨床開発中の抗ＣＤ３抗体としては、ＨｕＭ２９１（visilizumab）（Norman et al., Transplantation. 2000 Dec 27;70(12):1707-12.)、Ｈｕ２９１（PDL）、ＣｈＡｇｌｙＣＤ３（Otelixizumab）（H Waldmann）、ｈＯＫＴ３γ１（Ala-Ala）（Teplizumab）（J Bluestone and Johnson and Johnson）および（NI-0401）ホラルマブ(Foralumab)が挙げられる。
【0245】
何れかの抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントは、本発明の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体における使用に適し得る。例えば、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、ＯＫＴ３、ＴＲ６６、ＡＰＡ１／１、ＳＰ３４、ＣＨ２５２７、ＷＴ３１、７Ｄ６、ＵＣＨＴ－１、Ｌｅｕ－４、ＢＣ－３、Ｈ２Ｃ、ＨｕＭ２９１（ビシリズマブ）、Ｈｕ２９１（ＰＤＬ）、ＣｈＡｇｌｙＣＤ３（オテリックスマブ）、ｈＯＫＴ３γ１（Ala-Ala）（テプリズマブ）およびＮＩ－０４０１（フォラルマブ）から選択される抗ＣＤ３抗体を含み得る。ある態様において、本発明の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、ヒト化ＳＰ３４抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。
【0246】
いくつかの好ましい態様において、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントは、ＳＰ３４に由来してもよく、抗体ＳＰ３４と同様の配列およびエピトープ結合に関して同じ特性を有していてもよい。
【0247】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号１、２および３の重鎖ＣＤＲをそれぞれ重鎖ＣＤＲ１Ｈ、ＣＤＲ２ＨおよびＣＤＲ３Ｈとして含む可変ドメインＶＨと、配列番号４、５および６の軽鎖ＣＤＲをそれぞれ軽鎖ＣＤＲ１Ｌ、ＣＤＲ２ＬおよびＣＤＲ３Ｌとして含む可変ドメインＶＬとを含む抗ＣＤ３抗体、またはその抗原結合フラグメントを含む。ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号７（ＶＨ）および配列番号８（ＶＬ）の可変ドメインを含む、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。
【0248】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号１７のＣＤＲ３Ｈ領域および配列番号２０のＣＤＲ３Ｌ領域、ならびに以下の群から選択されるＣＤＲ１Ｈ、ＣＤＲ２Ｈ、ＣＤＲ１ＬおよびＣＤＲ２L領域の組合せを含む抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む：
ａ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２３のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２４のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｂ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２５のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２６のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｃ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｄ）配列番号２９のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３０のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｅ）配列番号３４のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３５のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｆ）配列番号３６のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３７のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、ならびに
ｇ）配列番号１５のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号１６のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号１８のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号１９のＣＤＲ２Ｌ領域、ならびに
配列番号１のＣＤＲ１Ｈ領域、配列番号２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３のＣＤＲ３Ｈ領域、配列番号４のＣＤＲ１Ｌ領域、配列番号５のＣＤＲ２Ｌ領域および配列番号６のＣＤＲ３Ｌ領域を含む、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントである。
ａ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２３のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２４のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｂ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２５のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２６のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｃ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｄ）配列番号２９のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３０のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｅ）配列番号３４のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３５のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、
ｆ）配列番号３６のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３７のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、ならびに
ｇ）配列番号１５のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号１６のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号１８のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号１９のＣＤＲ２Ｌ領域、ならびに
配列番号１のＣＤＲ１Ｈ領域、配列番号２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３のＣＤＲ３Ｈ領域、配列番号４のＣＤＲ１Ｌ領域、配列番号５のＣＤＲ２Ｌ領域および配列番号６のＣＤＲ３Ｌ領域を含む、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントである。
【0249】
特に好ましい態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、
配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域、配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域および配列番号１７のＣＤＲ３Ｈ領域を含むＶＨ領域、ならびに配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域および配列番号２０のＣＤＲ３Ｌ領域を含むＶＬ領域、
を含む抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント；および
配列番号１のＣＤＲ１Ｈ領域、配列番号２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３のＣＤＲ３Ｈ領域、配列番号４のＣＤＲ１Ｌ領域、配列番号５のＣＤＲ２Ｌ領域および配列番号６のＣＤＲ３Ｌ領域を含む、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント
を含む。
配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域、配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域および配列番号１７のＣＤＲ３Ｈ領域を含むＶＨ領域、ならびに配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域および配列番号２０のＣＤＲ３Ｌ領域を含むＶＬ領域、
を含む抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント；および
配列番号１のＣＤＲ１Ｈ領域、配列番号２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３のＣＤＲ３Ｈ領域、配列番号４のＣＤＲ１Ｌ領域、配列番号５のＣＤＲ２Ｌ領域および配列番号６のＣＤＲ３Ｌ領域を含む、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント
を含む。
【0250】
ある態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、以下からなる群より選択されるＶＨおよびＶＬを含む抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む：
ａ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｂ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１３のＶＬ領域、
ｃ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域、
ｄ）配列番号３８のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｅ）配列番号３９のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｆ）配列番号４０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、ならびに
配列番号７のＶＨ領域および配列番号８のＶＬ領域を含む、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント。
ａ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｂ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１３のＶＬ領域、
ｃ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域、
ｄ）配列番号３８のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｅ）配列番号３９のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、
ｆ）配列番号４０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域、ならびに
配列番号７のＶＨ領域および配列番号８のＶＬ領域を含む、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント。
【0251】
特に好ましい態様において、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域を含む抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント、ならびに配列番号７のＶＨ領域および配列番号８のＶＬ領域を含む抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。
【0252】
Ｆｃ
本発明の多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体は、Ｆｃを有していてもよいか、またはＦｃを有していなくてもよい。好ましい態様において、本発明の多特異性抗体は、Ｆｃ、好ましくはヒトＦｃを含む。
本発明の多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体は、Ｆｃを有していてもよいか、またはＦｃを有していなくてもよい。好ましい態様において、本発明の多特異性抗体は、Ｆｃ、好ましくはヒトＦｃを含む。
【0253】
特定の態様において、Ｆｃは、バリアントＦｃ、例えば、親Ｆｃ配列（例えば、バリアントを生成するためにその後修飾される未修飾Ｆｃポリペプチド）に対して（例えば、アミノ酸置換、欠失および／または挿入によって）修飾されたＦｃ配列であり、望ましい構造的特徴および／または生物活性を提供する。
【0254】
したがって、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、血清半減期、補体固定、Ｆｃ受容体結合、および／または抗原依存性細胞傷害性などの抗体の１以上の機能特性を変更するために、一般的には１以上の修飾を含むＦｃを含んでいてもよい。Ｆｃは、本発明の抗体における抗ＢＣＭＡフラグメントおよび／または抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントに連結されていてもよい。
【0255】
Ｆｃの存在は、抗体の消失半減期を延長させるという利点を有する。本発明の抗体、例えば二重特異性抗体は、マウスまたはカニクイザル、好ましくはカニクイザルにおいて、１２時間より長い、好ましくは３日以上の消失半減期を有していてもよい。ある態様において、本発明の抗体、例えば二重特異性抗体は、約１～１２日の消失半減期を有し、これにより、少なくとも１回または２回／週の投与が可能になる。
【0256】
エフェクター機能の低下
好ましくは、本発明の二重特異性抗体は、ＦｃＲおよびＣ１ｑ結合を回避し、ＡＤＣＣ／ＣＤＣを最小化するための修飾を含む、（例えば、ＩｇＧ１サブクラスの）Ｆｃ領域を含む。これは、二重特異性抗体が、エフェクター細胞、例えばＴ細胞のリダイレクション／活性化の強力な機構によって純粋にその腫瘍細胞殺傷能に介在するという利点を提供する。したがって、補体系に対する効果およびＦｃＲを発現するエフェクター細胞に対する効果などの追加の作用機構は回避され、点滴関連反応などの副作用のリスクを減少させる。
好ましくは、本発明の二重特異性抗体は、ＦｃＲおよびＣ１ｑ結合を回避し、ＡＤＣＣ／ＣＤＣを最小化するための修飾を含む、（例えば、ＩｇＧ１サブクラスの）Ｆｃ領域を含む。これは、二重特異性抗体が、エフェクター細胞、例えばＴ細胞のリダイレクション／活性化の強力な機構によって純粋にその腫瘍細胞殺傷能に介在するという利点を提供する。したがって、補体系に対する効果およびＦｃＲを発現するエフェクター細胞に対する効果などの追加の作用機構は回避され、点滴関連反応などの副作用のリスクを減少させる。
【0257】
好ましい態様において、本発明の抗体、例えば二重特異性抗体は、ＩｇＧ、特にＩｇＧ１、修飾Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５ＡおよびＰ３２９Ｇ（ＥＵ番号付けによる番号付け）を含むＦｃ領域を含む。
【0258】
ヘテロ二量体化
本発明の多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体は、ヘテロ多量体抗体であってもよい。そのようなヘテロ多量体抗体は、抗体の正しいアセンブリを促進するために、抗体鎖間の相互作用に関与する領域における修飾を含んでいてもよい。
本発明の多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体は、ヘテロ多量体抗体であってもよい。そのようなヘテロ多量体抗体は、抗体の正しいアセンブリを促進するために、抗体鎖間の相互作用に関与する領域における修飾を含んでいてもよい。
【0259】
例えば、本発明の二重特異性抗体は、Ｆｃヘテロ二量化を実施するためにＣＨ２およびＣＨ３ドメインに１以上の修飾（複数可）を有するＦｃを含み得る。代替的にまたは追加的に、本発明の二重特異性抗体は、Ｆａｂフラグメントの重鎖と軽鎖の間の優先的な対合を促進するために、ＣＨ１およびＣＬ領域における改変を含んでいてもよい。
【0260】
ヘテロ二量体化を促進するための戦略は数多く存在する。これらの戦略は、両鎖が互いに適合し、故にヘテロ二量体を形成することができるが、各鎖がそれ自体と二量化することができないように、２つの抗体鎖の各々に非対称の相補的修飾を導入することを含むことができる。このような修飾は、挿入、欠失、保存的および非保存的置換ならびに転位を包含し得る。
【0261】
ヘテロ二量体化は、第一抗体鎖と第二抗体鎖との間に好ましい静電的相互作用を生じさせるために、荷電残基を導入することによって促進され得る。例えば、１つまたは複数の正に帯電したアミノ酸を第１の抗体鎖に導入し、１つまたは複数の負に帯電したアミノ酸を第２の抗体鎖の対応する位置に導入することができる。
【0262】
代替的にまたは追加的に、ヘテロ二量体化は、接触する残基の間に立体障害を導入することによって促進されてもよい。例えば、嵩高い側鎖を有する1つまたは複数の残基を第１の抗体鎖に導入し、大きい側鎖を収容することができる１つまたは複数の残基を第２の抗体鎖に導入することができる。
【0263】
代替的にまたは追加的に、ヘテロ二量体形成がホモ二量体形成よりもエントロピー的およびエンタルピー的に有利になるように、鎖間の界面にある親水性残基および疎水性残基に１つまたは複数の修飾（複数可）を導入することによって、ヘテロ二量体化を促進することができる。
【0264】
ヘテロ二量体化を促進するためのさらなる戦略は、各鎖が対応する再配置を含む鎖とのみ適合性を保つように、抗体鎖の一部を再配置することである。例えば、CrossMAb技術は、正しい鎖の結合を可能にするために抗体ドメインの交差をベースにしている。CrossMAbには、主に３つのフォーマットがある：（ｉ）ＶＨおよびＶＬが交換され、ＣＨ１およびＣＬが交換される、ＣｒｏｓｓＭＡｂＦａｂ、（ｉｉ）ＶＨおよびＶＬが交換されるＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬ、（ｉｉｉ）ＣＨ１およびＣＬが交換されるＣｒｏｓｓＭＡｂＣＨ１－ＣＬ（Klein et al, 2016. MABS, 8(6):1010-1020）。
【0265】
ある態様において、本発明の二重特異性抗体は、ＶＨおよびＶＬの交換を含んでいてもよい。ある態様において、本発明の抗体、例えば二重特異性抗体は、ＣＨ１およびＣＬの交換を含んでいてもよい。ある態様において、本発明の抗体、例えば二重特異性抗体は、ＶＨおよびＶＬの交換、ならびにＣＨ１およびＣＬの交換を含んでいてもよい。
【0266】
好ましい態様において、本発明の抗体、例えば二重特異性抗体は、ＶＨおよびＶＬの交換を含む。
【0267】
ヘテロ二量体化を促進する他のアプローチには、鎖交換工学ドメイン（ＳＥＥＤ）の使用を含む（Davis et al., 2010．Protein Eng Des Sel, 23（4）；195-202）。
【0268】
抗体の安定性への影響を最小限に抑えながら、集合の効率を最大化するために、上記の戦略の組合せが用いられ得る。
【0269】
Ｆｃヘテロ二量体化
ある態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、ヘテロ二量体Ｆｃを有していてもよく、例えばそれらは、抗ＢＣＭＡ抗体に由来する１つの重鎖および抗ＣＤ３抗体に由来する１つの重鎖を含んでいてもよい。
ある態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、ヘテロ二量体Ｆｃを有していてもよく、例えばそれらは、抗ＢＣＭＡ抗体に由来する１つの重鎖および抗ＣＤ３抗体に由来する１つの重鎖を含んでいてもよい。
【0270】
本発明の抗体、例えば二重特異性抗体は、第１のＣＨ２および／またはＣＨ３ドメインと第２のＣＨ２および／またはＣＨ３ドメインとの会合を促進する１以上の修飾（複数可）を含むヘテロ二量体Ｆｃを含んでいてもよい。好ましい態様において、１以上の修飾（複数可）は、例えば、ＣＨ３ドメインに非対称修飾をもたらすことによって、第１のＣＨ３ドメインと第２のＣＨ３ドメインとの会合が促進される。１以上の修飾（複数可）は、アミノ酸の挿入、欠失、保存的および非保存的置換および転位、ならびにそれらの組み合わせから選択される修飾を含んでいてよい。
【0271】
一般的には、第１のＣＨ３ドメインおよび第２のＣＨ３ドメインは、各ＣＨ３ドメイン（またはそれを含む重鎖）がもはやそれ自身とホモ二量化できず、相補的に操作された他のＣＨ３ドメインとヘテロ二量化せざるを得ないように（第１および第２のＣＨ３ドメインがヘテロ二量化し、２つの第１または第２のＣＨ３ドメイン間のホモ二量化がないように）相補的に操作される。
【0272】
本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、“ノブ－イン－ホール（knob-into-holes）”修飾（複数可）を有するＦｃを含んでいてよく、例えばＷＯ９６/０２７０１１, Ridgway, J.B., et al, Protein Eng. 9 (1996) 617-621、Merchant, A.M. et al., Nat. Biotechnol. 16 (1998) 677-68、およびＷＯ９８/０５０４３１にいくつかの例とともに詳細に記載されている。
【0273】
この方法では、２つのＣＨ３ドメインの相互作用面を変化させ、これら２つのＣＨ３ドメインを含む両Ｆｃ鎖のヘテロダイマー化を増加させる。（２つのＦｃ鎖の）２つのＣＨ３ドメインのうちの１つは“ノブ”であってよく、他方は“ホール”であり得る。
【0274】
したがって、本発明の二重特異性抗体は、２つのＣＨ３ドメインを含んでいてもよく、第１のＦｃ鎖の第１のＣＨ３ドメインおよび第２のＦｃ鎖の第２のＣＨ３ドメインはそれぞれ、抗体ＣＨ３ドメイン間の元の界面を含む界面で合い、ここで、該界面は、抗体の形成を促進するために変更される。
【0275】
ある態様において、
（ｉ）他方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの元の界面と合う一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの元の界面内で、アミノ酸残基がより大きな側鎖を有するアミノ酸残基に置き換えられ、それによって一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの界面に突起が生じ、他方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの界面にある空間内に配置可能になるように、一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインが改変され、；かつ
ｉｉ）一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの元の界面に合う他方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの元の界面内で、アミノ酸残基をより小さい側鎖を有するアミノ酸残基に置換し、それによって、一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの界面内の突起が配置可能である空間を他方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの界面内に生成させ、一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインが変更され、その際、一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインが配置可能となる。
（ｉ）他方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの元の界面と合う一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの元の界面内で、アミノ酸残基がより大きな側鎖を有するアミノ酸残基に置き換えられ、それによって一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの界面に突起が生じ、他方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの界面にある空間内に配置可能になるように、一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインが改変され、；かつ
ｉｉ）一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの元の界面に合う他方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの元の界面内で、アミノ酸残基をより小さい側鎖を有するアミノ酸残基に置換し、それによって、一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの界面内の突起が配置可能である空間を他方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインの界面内に生成させ、一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインが変更され、その際、一方のＦｃ鎖のＣＨ３ドメインが配置可能となる。
【0276】
好ましくは、より大きな側鎖体積を有する該アミノ酸残基は、アルギニン（Ｒ）、フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）からなる群より選択される。
【0277】
ある態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、位置Ｔ３６６、Ｌ３６８およびＹ４０７、例えばＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖ（ＥＵ番号付けによる番号付け）において修飾（複数可）を含む第１のＣＨ３ドメインを含む。
【0278】
ある態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、位置Ｔ３６６における修飾（「ノブ修飾」）、例えばＴ３６６Ｗ（ＥＵ番号付けによる番号付け）を含む第２のＣＨ３ドメインを含む。
【0279】
特に好ましい態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、修飾Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖ、またはその保存的置換を含む第１のＣＨ３ドメイン、ならびに修飾Ｔ３６６Ｗ、またはその保存的置換（ＥＵ番号付けによる番号付け）を含む第２のＣＨ３ドメインを含む。
【0280】
一態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、表１２に記載の改変を含む第１のＣＨ３ドメインと、表１２に記載の改変を含む第２のＣＨ３ドメインとを含む。
【表12】
【0281】
ヘテロ二量体化を行うためのＣＨ３修飾の他の技術は、本発明の代替物として企図され、例えばＷＯ９６／２７０１１、ＷＯ９８／０５０４３１、ＥＰ１８７０４５９、ＷＯ２００７／１１０２０５、ＷＯ２００７／１４７９０１、ＷＯ２００９／０８９００４、ＷＯ２０１０／１２９３０４、ＷＯ２０１１／９０７５４、ＷＯ２０１１／１４３５４５、ＷＯ２０１２／０５８７６８、ＷＯ２０１３／１５７９５４、ＷＯ２０１３／１５７９５３及びＷＯ２０１３／０９６２９１に記載されている。
【0282】
ある態様において、本発明による二重特異性抗体はＩｇＧ２アイソタイプであり、ＷＯ２０１０／１２９３０４に記載のヘテロ二量化アプローチを用いることができる。
【0283】
他のＦｃ修飾
ある態様において、本発明の二重特異性抗体は、両ＣＨ３ドメインが、両ＣＨ３ドメイン間のジスルフィド橋が形成され得るように、各ＣＨ３ドメインの対応する位置にアミノ酸としてシステイン（Ｃ）を導入することによって改変されたＦｃを含んでいてもよい。システインは、一方のＣＨ３ドメインでは３４９位に、他方のＣＨ３ドメインでは３５４位に導入されてもよい（ＥＵ番号付けによる番号付け）。
ある態様において、本発明の二重特異性抗体は、両ＣＨ３ドメインが、両ＣＨ３ドメイン間のジスルフィド橋が形成され得るように、各ＣＨ３ドメインの対応する位置にアミノ酸としてシステイン（Ｃ）を導入することによって改変されたＦｃを含んでいてもよい。システインは、一方のＣＨ３ドメインでは３４９位に、他方のＣＨ３ドメインでは３５４位に導入されてもよい（ＥＵ番号付けによる番号付け）。
【0284】
好ましくは、３５４位に導入されたシステインは第１のＣＨ３ドメインにあり、３４９位に導入されたシステインは第２のＣＨ３ドメインにある（ＥＵ番号付けによる番号付け）。
【0285】
Ｆｃは、Ｄ３５６Ｅ、Ｌ３５８Ｍ、Ｎ３８４Ｓ、Ｋ３９２Ｎ、Ｖ３９７ＭおよびＶ４２２Ｉ（ＥＵ番号付けにしたがって番号付け）などの修飾を含んでいてもよい。好ましくは、両ＣＨ３ドメインは、Ｄ３５６ＥおよびＬ３５８Ｍ（ＥＵ番号付けによる番号付け）を含む。
【0286】
軽鎖および重鎖のヘテロ二量化
本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体において、免疫グロブリン重鎖および軽鎖の１以上は、重鎖および軽鎖が共発現または共生産されるとき、特定の重鎖と特定の軽鎖との優先的な対合を促進することができる１以上の修飾（複数可）、例えばアミノ酸修飾を含んでいてもよい。かかる修飾は、ＢＣＭＡへの結合のような生物学的特性を変えることなく、かなり改善された生産／精製を提供することができる。特に、アミノ酸置換のような１以上の修飾（複数可）を導入することにより、生産における軽鎖のミスペアおよび副産物の形成を著しく低減することができ、したがって、収量が増加し、精製が容易になる。
本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体において、免疫グロブリン重鎖および軽鎖の１以上は、重鎖および軽鎖が共発現または共生産されるとき、特定の重鎖と特定の軽鎖との優先的な対合を促進することができる１以上の修飾（複数可）、例えばアミノ酸修飾を含んでいてもよい。かかる修飾は、ＢＣＭＡへの結合のような生物学的特性を変えることなく、かなり改善された生産／精製を提供することができる。特に、アミノ酸置換のような１以上の修飾（複数可）を導入することにより、生産における軽鎖のミスペアおよび副産物の形成を著しく低減することができ、したがって、収量が増加し、精製が容易になる。
【0287】
アミノ酸置換は、軽鎖のミスペアを減少させ、例えばBence-Jonesタイプの副産物を減少させる、（例えばＣＨ１／ＣＬ界面における）反対の電荷を有する荷電アミノ酸の置換であってもよい。
【0288】
好ましい態様において、軽鎖および重鎖のヘテロ二量体化を補助する１以上の修飾（複数可）は、ＣＤＲの外側の軽鎖および重鎖におけるアミノ酸修飾である。
【0289】
１以上の修飾（複数可）は、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントに存在してもよい。あるいは、１以上の修飾（複数可）は、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントに存在してもよい。好ましい態様において、１以上の修飾（複数可）は、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントに存在する。
【0290】
ある態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、アミノ酸修飾Ｋ１４７Ｅ／ＤおよびＫ２１３Ｅ／Ｄ（ＥＵ番号付けによる番号付け）を有するＣＨ１ドメインを含む免疫グロブリン重鎖、およびアミノ酸修飾Ｅ１２３Ｋ／Ｒ／ＨおよびＱ１２４Ｋ／Ｒ／Ｈ（Ｋａｂａｔによる番号付け）を有するＣＬドメインを含む対応する免疫グロブリン軽鎖を含む。好ましくは、ＣＨ１ドメインは、アミノ酸修飾Ｋ１４７ＥおよびＫ２１３Ｅ（ＥＵ番号付けによる番号付け）またはその保存的置換を含み、かつ対応するＣＬドメインは、アミノ酸修飾Ｅ１２３ＲおよびＱ１２４Ｋまたはその保存的置換（Ｋａｂａｔによる番号付け）を含む。このような多特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、高収率で製造することができ、容易に精製することができる。
【0291】
一態様において、表１３に記載されたアミノ酸修飾は、ＢＣＭＡ抗体中またはＣＤ３抗体中に存在し得る。
【0292】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は二価であり、１つの抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントおよび１つの抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントを含み（“１＋１”フォーマット）、ここで
（ａ）ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＢＣＭＡ Ｆａｂ）は、表１３に記載のアミノ酸修飾を有するＣＨ１ドメインおよび表１３に記載のアミノ酸修飾を有する対応するＣＬドメインを含むか；あるいは
（ｂ）ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＣＤ３ Ｆａｂ）は、表１３に記載のアミノ酸修飾を有するＣＨ１ドメインおよび表１３に記載のアミノ酸修飾を有する対応するＣＬドメインを含む。
（ａ）ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＢＣＭＡ Ｆａｂ）は、表１３に記載のアミノ酸修飾を有するＣＨ１ドメインおよび表１３に記載のアミノ酸修飾を有する対応するＣＬドメインを含むか；あるいは
（ｂ）ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＣＤ３ Ｆａｂ）は、表１３に記載のアミノ酸修飾を有するＣＨ１ドメインおよび表１３に記載のアミノ酸修飾を有する対応するＣＬドメインを含む。
【0293】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は３価であり、２つの抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントおよび１つの抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントを含み（“２＋１”フォーマット）、ここで、
（ａ）一方または両方のＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＢＣＭＡ Ｆａｂ）は、表１３に記載のアミノ酸修飾を有するＣＨ１ドメインおよび表１３に記載のアミノ酸修飾を有する対応するＣＬドメインを含むか；あるいは
（ｂ）ＣＤ３抗体（例えば、ＣＤ３ Ｆａｂ）は、表１３に記載のアミノ酸修飾を有するＣＨ１ドメインおよび表１３に記載のアミノ酸修飾を有する対応するＣＬドメインを含む。
（ａ）一方または両方のＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＢＣＭＡ Ｆａｂ）は、表１３に記載のアミノ酸修飾を有するＣＨ１ドメインおよび表１３に記載のアミノ酸修飾を有する対応するＣＬドメインを含むか；あるいは
（ｂ）ＣＤ３抗体（例えば、ＣＤ３ Ｆａｂ）は、表１３に記載のアミノ酸修飾を有するＣＨ１ドメインおよび表１３に記載のアミノ酸修飾を有する対応するＣＬドメインを含む。
【0294】
特に、各ＢＣＭＡ抗体（例えば、ＢＣＭＡ Ｆａｂ）は、表１３に記載のアミノ酸修飾を有するＣＨ１ドメイン、および表１３に記載のアミノ酸修飾を有する対応するＣＬドメインを含み得る。
【0295】
【表13】
【0296】
好ましい態様において、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、表１３に記載の改変を表１２に記載の改変と組み合わせて含む。したがって、一態様において、本発明の二重特異性抗体は二価であり、以下：
（ａ）１つの抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントおよび１つの抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント（“１＋１”フォーマット）であり、ここで、（ｉ）ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＢＣＭＡ Ｆａｂ）は、アミノ酸修飾Ｋ１４７ＥおよびＫ２１３Ｅを含むＣＨ１ドメイン、ならびにアミノ酸修飾Ｅ１２３ＲおよびＱ１２４Ｋ（すなわち、表１３に記載の改変）を含む対応するＣＬドメインを含むか、または（ｉｉ）ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＣＤ３ Ｆａｂ）は、アミノ酸改変Ｋ１４７ＥおよびＫ２１３Ｅを含むＣＨ１ドメイン、ならびにアミノ酸改変Ｅ１２３ＲおよびＱ１２４Ｋ（すなわち、表１３に記載の改変）を含む対応するＣＬドメインを含み；ならびに、
（ｂ）修飾Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖを含む第１のＣＨ３ドメイン、ならびに修飾Ｔ３６６Ｗを含む第２のＣＨ３ドメイン（すなわち、表１２に記載の修飾）、
を含む。
（ａ）１つの抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメントおよび１つの抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント（“１＋１”フォーマット）であり、ここで、（ｉ）ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＢＣＭＡ Ｆａｂ）は、アミノ酸修飾Ｋ１４７ＥおよびＫ２１３Ｅを含むＣＨ１ドメイン、ならびにアミノ酸修飾Ｅ１２３ＲおよびＱ１２４Ｋ（すなわち、表１３に記載の改変）を含む対応するＣＬドメインを含むか、または（ｉｉ）ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＣＤ３ Ｆａｂ）は、アミノ酸改変Ｋ１４７ＥおよびＫ２１３Ｅを含むＣＨ１ドメイン、ならびにアミノ酸改変Ｅ１２３ＲおよびＱ１２４Ｋ（すなわち、表１３に記載の改変）を含む対応するＣＬドメインを含み；ならびに、
（ｂ）修飾Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖを含む第１のＣＨ３ドメイン、ならびに修飾Ｔ３６６Ｗを含む第２のＣＨ３ドメイン（すなわち、表１２に記載の修飾）、
を含む。
【0297】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は三価であり、以下：
（ａ）２つの抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント、および１つの抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント（“２＋１”フォーマット）、ここで、（ｉ）一方または両方のＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＢＣＭＡ Ｆａｂ）は、アミノ酸修飾Ｋ１４７ＥおよびＫ２１３Ｅを含むＣＨ１ドメイン、ならびにアミノ酸修飾Ｅ１２３ＲおよびＱ１２４Ｋを含む対応するＣＬドメイン（すなわち、表１３に記載の改変）を含むか、または（ｉｉ）ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＣＤ３ Ｆａｂ）は、アミノ酸改変Ｋ１４７ＥおよびＫ２１３Ｅを含むＣＨ１ドメイン、およびアミノ酸改変Ｅ１２３ＲおよびＱ１２４Ｋ（すなわち、表１３に記載の改変）を含む対応するＣＬドメインを含む；および
（ｂ）修飾Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖを含む第１のＣＨ３ドメイン、ならびに修飾Ｔ３６６Ｗを含む第２のＣＨ３ドメイン（すなわち、表１２に記載された修飾）、
を含む。
（ａ）２つの抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント、および１つの抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント（“２＋１”フォーマット）、ここで、（ｉ）一方または両方のＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＢＣＭＡ Ｆａｂ）は、アミノ酸修飾Ｋ１４７ＥおよびＫ２１３Ｅを含むＣＨ１ドメイン、ならびにアミノ酸修飾Ｅ１２３ＲおよびＱ１２４Ｋを含む対応するＣＬドメイン（すなわち、表１３に記載の改変）を含むか、または（ｉｉ）ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメント（例えば、ＣＤ３ Ｆａｂ）は、アミノ酸改変Ｋ１４７ＥおよびＫ２１３Ｅを含むＣＨ１ドメイン、およびアミノ酸改変Ｅ１２３ＲおよびＱ１２４Ｋ（すなわち、表１３に記載の改変）を含む対応するＣＬドメインを含む；および
（ｂ）修飾Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖを含む第１のＣＨ３ドメイン、ならびに修飾Ｔ３６６Ｗを含む第２のＣＨ３ドメイン（すなわち、表１２に記載された修飾）、
を含む。
【0298】
特に、各ＢＣＭＡ抗体（例えば、ＢＣＭＡ Ｆａｂ）は、表１３に記載されるアミノ酸修飾を有するＣＨ１ドメインおよび表１３に記載のアミノ酸修飾を有する対応するＣＬドメインを含んでいてもよい。好ましい態様において、第１のＦｃ鎖は、ＦｃのＮ末端で第１の抗ＢＣＭＡ抗体のＣ末端に結合し、かつ第２のＦｃ鎖は、ＦｃのＮ末端で抗ＣＤ３抗体のＣ末端に結合している。
【0299】
本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、さらに、ＶＬ領域の４９位のアミノ酸置換がチロシン（Ｙ）、グルタミン酸（Ｅ）、セリン（Ｓ）およびヒスチジン（Ｈ）の群から選択されるアミノ酸置換を含み、および／またはＶＬ領域の７４位がスレオニン（Ｔ）もしくはアラニン（Ａ）であるアミノ酸置換を含んでいてもよい。
【0300】
クロスＭＡｂ（ＣｒｏｓｓＭＡｂ）
本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、ＣｒｏｓｓＭＡｂ技術を含んでいてもよい。ＣｒｏｓｓＭＡｂ技術は、正しい鎖の結合を可能にするために抗体ドメインの交差に基づくものである。これは、多重特異性抗体の形成を促進するために用いられる。ＣｒｏｓｓＭＡｂには３つの主なフォーマットがあり、それらは以下の通りである：（ｉ）ＶＨおよびＶＬ、ＣＨ１およびＣＬを交換したＣｒｏｓｓＭＡｂＦａｂ、（ｉｉ）ＶＨおよびＶＬを交換したＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬ、および(iii）ＣＨ１およびＣＬを交換したＣｒｏｓｓＭＡｂＣＨ１－ＣＬ（Clain et al.2016. mabs, 8(6):1010-1020）。
本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、ＣｒｏｓｓＭＡｂ技術を含んでいてもよい。ＣｒｏｓｓＭＡｂ技術は、正しい鎖の結合を可能にするために抗体ドメインの交差に基づくものである。これは、多重特異性抗体の形成を促進するために用いられる。ＣｒｏｓｓＭＡｂには３つの主なフォーマットがあり、それらは以下の通りである：（ｉ）ＶＨおよびＶＬ、ＣＨ１およびＣＬを交換したＣｒｏｓｓＭＡｂＦａｂ、（ｉｉ）ＶＨおよびＶＬを交換したＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬ、および(iii）ＣＨ１およびＣＬを交換したＣｒｏｓｓＭＡｂＣＨ１－ＣＬ（Clain et al.2016. mabs, 8(6):1010-1020）。
【0301】
ＣｒｏｓｓＭＡｂ技術は、当該技術分野において知られている。可変ドメインＶＬおよびＶＨ、または定常ドメインＣＬおよびＣＨ１が互いに交換された二重特異性抗体は、ＷＯ２００９０８０２５１およびＷＯ２００９０８０２５２に記載されている。
【0302】
本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体内の抗体または抗原結合フラグメントの１以上において、可変ドメインＶＬおよびＶＨ、または定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置換されていてもよい。ある態様において、本発明の抗体、例えば二重特異性抗体は、ＶＨおよびＶＬの交換、ならびにＣＨ１およびＣＬの交換を含んでいてもよい。したがって、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、クロスオーバー軽鎖およびクロスオーバー重鎖を含んでいてもよい。本明細書で用いる“クロスオーバー軽鎖”は、ＶＨ－ＣＬ、ＶＬ－ＣＨ１またはＶＨ－ＣＨ１を含み得る軽鎖である。本明細書で用いる“クロスオーバー重鎖”は、ＶＬ－ＣＨ１、ＶＨ－ＣＬまたはＶＬ－ＣＬを含み得る重鎖である。
【0303】
ある態様において、本発明の抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合フラグメント、および抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントを含む多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体が提供され、ここで、該多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体は、以下：
（ａ）ＣＤ３に特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖；ならびに
（ｂ）ＢＣＭＡに特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖
を含み、ここで、（ｉ）抗ＢＣＭＡ抗体；および／または（ｉｉ）抗ＣＤ３抗体において、可変ドメインＶＬおよびＶＨならびに／または定常ドメインＣＬおよびＣＨ１が互いに置換されている。
（ａ）ＣＤ３に特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖；ならびに
（ｂ）ＢＣＭＡに特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖
を含み、ここで、（ｉ）抗ＢＣＭＡ抗体；および／または（ｉｉ）抗ＣＤ３抗体において、可変ドメインＶＬおよびＶＨならびに／または定常ドメインＣＬおよびＣＨ１が互いに置換されている。
【0304】
ある態様において、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントの可変ドメインＶＬおよびＶＨ、または定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置換されている。より好ましくは、抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントの可変ドメインＶＬおよびＶＨは、互いに置換されている。
【0305】
１＋１フォーマットの二重特異性抗体がフォーマット：ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ（すなわち、Ｆｃが存在しないとき）；Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ；Ｆｃ－ ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ；または、ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂを有する態様において、二重特異性抗体は、例えば、ＣｒｏｓｓＭＡｂＦａｂ、ＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬまたはＣｒｏｓｓＭＡｂＣＨ１－ＣＬ等のＣｒｏｓｓＭＡｂフォーマットを含んでいてもよい。ＢＣＭＡ Ｆａｂは、ＣｒｏｓｓＭＡｂフォーマット、例えばＣｒｏｓｓＭＡｂＦａｂ、ＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬまたはＣｒｏｓｓＭＡｂＣＨ１－ＣＬを有していてもよい。あるいは、ＣＤ３ Ｆａｂは、ＣｒｏｓｓＭＡｂフォーマット、例えば、ＣｒｏｓｓＭＡｂＦａｂ、ＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬまたはＣｒｏｓｓＭＡｂＣＨ１－ＣＬを有していてもよい。好ましい態様において、二重特異性抗体のＣＤ３ Ｆａｂは、ＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬフォーマットを含む。
【0306】
２＋１フォーマットを有する本発明の二重特異性抗体は、ＣｒｏｓｓＭＡｂ技術を含むことがとりわけ好ましい。従って、２＋１フォーマットの３価の二重特異性抗体がフォーマット：ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ； ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ（すなわち、Ｆｃが存在しないとき）；ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ； ＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂ；または、ＣＤ３ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂを有する態様において、二重特異性抗体は、例えば、ＣｒｏｓｓＭＡｂＦａｂ、ＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬまたはＣｒｏｓｓＭＡｂＣＨ１－ＣＬ等のＣｒｏｓｓＭＡｂフォーマットを含んでいてもよい。ＢＣＭＡ Ｆａｂは、ＣｒｏｓｓＭＡｂフォーマット、例えばＣｒｏｓｓＭＡｂＦａｂ、ＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬまたはＣｒｏｓｓＭＡｂＣＨ１－ＣＬを有していてもよい。あるいは、ＣＤ３ Ｆａｂは、ＣｒｏｓｓＭＡｂフォーマット、例えば、ＣｒｏｓｓＭＡｂＦａｂ、ＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬまたはＣｒｏｓｓＭＡｂＣＨ１－ＣＬを有していてもよい。好ましい態様において、二重特異性抗体のＣＤ３ Ｆａｂは、ＣｒｏｓｓＭＡｂＶＨ－ＶＬフォーマットを含む。
【0307】
ある態様において、１＋１フォーマットを有する本発明の二重特異性抗体は、ＣｒｏｓｓＭＡｂ技術を含まない、すなわち、抗ＢＣＭＡ抗体も抗ＣＤ３抗体もいずれも、可変ドメインＶＬおよびＶＨまたは定常ドメインＣＬおよびＣＨ１が互いに置換されたものでない。
【0308】
例示的態様
例示的な態様を図１から３に記載している。
例示的な態様を図１から３に記載している。
【0309】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の１つのＦａｂフラグメントおよびフォーマットＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂの１つのＦｃ部分を含む二価の二重特異性抗体である。抗ＢＣＭＡ Ｆａｂフラグメントは、表１３に示すアミノ酸修飾を含む。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖である。この態様は、図１Ａに示されている。
【0310】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の１つのＦａｂフラグメントおよびフォーマットＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂの１つのＦｃ部分を含む二価の二重特異性抗体である。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、（ａ）軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖であり、そして（ｂ）表１３に記載のアミノ酸修飾を含む。この態様は、図１Ｂに示されている。
【0311】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の２つのＦａｂフラグメント、およびフォーマットＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂによる１つのＦｃ部分を含む３価の二重特異性抗体である。各抗ＢＣＭＡ Ｆａｂフラグメントは、表１３に示されるアミノ酸修飾を含む。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖である。この態様は、図２Ａに示されている。
【0312】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の２つのＦａｂフラグメントおよびフォーマットＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂによる１つのＦｃ部分を含む３価の二重特異性抗体である。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、（ａ）軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖であり、そして（ｂ）表１３に記載のアミノ酸修飾を含む。この態様は、図２Ｂに示されている。
【0313】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の２つのＦａｂフラグメント、およびフォーマットＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂによる１つのＦｃ部分を含む３価の二重特異性抗体である。各抗ＢＣＭＡ Ｆａｂフラグメントは、表１３に示されるアミノ酸修飾を含む。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖である。この態様は、図２Ｃに示されている。
【0314】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の２つのＦａｂフラグメント、およびフォーマットＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂによる１つのＦｃ部分を含む３価の二重特異性抗体である。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、（ａ）軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖であり、そして（ｂ）表１３に記載のアミノ酸修飾を含む。この態様は、図２Ｄに示されている。
【0315】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の１つのＦａｂフラグメント、およびフォーマットＦｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂによる１つのＦｃ部分を含む二価の二重特異性抗体である。抗ＢＣＭＡ Ｆａｂフラグメントは、表１３に示すアミノ酸修飾を含む。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖である。この態様は図３Ａに示されている。
【0316】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の１つのＦａｂフラグメント及びフォーマットＦｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂによる１つのＦｃ部分を含む二価の二重特異性抗体である。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、（ａ）軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖であり、そして（ｂ）表１３に記載のアミノ酸修飾を含む。この態様は、図３Ｂに示されている。
【0317】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の１つのＦａｂフラグメント、およびフォーマットＦｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂによる１つのＦｃ部分を含む二価の二重特異性抗体である。抗ＢＣＭＡ Ｆａｂフラグメントは、表１３に示すアミノ酸修飾を含む。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖である。この態様は、図３Ｃに示されている。
【0318】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の１つのＦａｂフラグメント、およびフォーマットＦｃ － ＢＣＭＡ Ｆａｂ － ＣＤ３ Ｆａｂによる１つのＦｃ部分を含む二価の二重特異性抗体である。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、（ａ）軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖であり、そして（ｂ）表１３に記載のアミノ酸修飾を含む。この態様は、図３Ｄに示されている。
【0319】
一態様において、図２に例示された抗体は、さらに、表１２に規定された改変を含む。
【0320】
一態様において、本発明の二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の１つのＦａｂフラグメント、抗ＢＣＭＡ抗体の２つのＦａｂフラグメントおよびフォーマットＢＣＭＡ Ｆａｂ － Ｆｃ － ＣＤ３ Ｆａｂ － ＢＣＭＡ Ｆａｂによる１つのＦｃ部分を含む３価の二重特異性抗体である。抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、軽鎖および重鎖を含み、ここで、軽鎖は、可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＬを含むクロスオーバー軽鎖であり、重鎖は、可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＨ１を含むクロスオーバー重鎖である。各抗ＢＣＭＡ Ｆａｂフラグメントは、軽鎖および重鎖を含み、ここで、重鎖は、アミノ酸修飾Ｋ１４７ＥおよびＫ２１３Ｅ（ＥＵ番号付けによる番号付け）を含むＣＨ１ドメインを含み、軽鎖は、アミノ酸修飾Ｅ１２３ＲおよびＱ１２４Ｋ（Ｋａｂａｔによる番号付け）（すなわち表１３に記載の修飾）を含む、対応するＣＬドメインを含む。Ｆｃ部分は、第１のＦｃ鎖および第２のＦｃ鎖を含み、ここで、第１のＦｃ鎖は、第１の定常ドメインＣＨ２および第１の定常ドメインＣＨ３を含み、第２のＦｃ鎖は、第２の定常ドメインＣＨ２および第２の定常ドメインＣＨ３を含む。第１のＦｃ鎖は、ＦｃのＮ末端が第１の抗ＢＣＭＡ ＦａｂのＣ末端と結合し、第２のＦｃ鎖は、ＦｃのＮ末端が抗ＣＤ３ ＦａｂのＣ末端と結合している。第１のＣＨ３ドメインは、修飾Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖ（“ホール修飾（hole modifications）”）を含み、第２のＣＨ３ドメインは、修飾Ｔ３６６Ｗ（“ノブ修飾（knob modification）”）（ＥＵ番号付けによる番号付け）を含む（すなわち、表１２に記載された修飾である）。さらに、両方のＦｃ鎖は、修飾Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５ＡおよびＰ３２９Ｇ、ならびに要すればＤ３５６ＥおよびＬ３５８Ｍ（ＥＵ番号付けに従って番号付け）をさらに含む。要すれば、第１のＣＨ３ドメインは、アミノ酸修飾Ｓ３５４Ｃをさらに含み、第２のＣＨ３ドメインは、両方のＣＨ３ドメイン間のジスルフィド橋が形成されるように、アミノ酸修飾Ｙ３４９Ｃ（ＥＵ番号付けに従って番号付け）をさらに含んでいてよい。
【0321】
ある態様において、抗ＢＣＭＡ Ｆａｂフラグメントは、配列番号１７のＣＤＲ３Ｈ領域および配列番号２０のＣＤＲ３Ｌ領域、ならびに以下：
ａ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２３のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２４のＣＤＲ２Ｌ領域；
ｂ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２５のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２６のＣＤＲ２Ｌ領域；
ｃ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域；
ｄ）配列番号２９のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３０のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域；
ｅ）配列番号３４のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３５のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域；
ｆ）配列番号３６のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３７のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、ならびに
ｇ）配列番号１５のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号１６のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号１８のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号１９のＣＤＲ２Ｌ領域
の群から選択されるＣＤＲ１Ｈ、ＣＤＲ２Ｈ、ＣＤＲ１ＬおよびＣＤＲ２Ｌ領域の組合せを含み、そして抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、配列番号１のＣＤＲ１Ｈ領域、配列番号２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３のＣＤＲ３Ｈ領域、配列番号４のＣＤＲ１Ｌ領域、配列番号５のＣＤＲ２Ｌ領域および配列番号６のＣＤＲ３Ｌ領域を含む。
ａ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２３のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２４のＣＤＲ２Ｌ領域；
ｂ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２５のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２６のＣＤＲ２Ｌ領域；
ｃ）配列番号２１のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号２２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号２７のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号２８のＣＤＲ２Ｌ領域；
ｄ）配列番号２９のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３０のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域；
ｅ）配列番号３４のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３５のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域；
ｆ）配列番号３６のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号３７のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３１のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号３２のＣＤＲ２Ｌ領域、ならびに
ｇ）配列番号１５のＣＤＲ１Ｈ領域および配列番号１６のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号１８のＣＤＲ１Ｌ領域、および配列番号１９のＣＤＲ２Ｌ領域
の群から選択されるＣＤＲ１Ｈ、ＣＤＲ２Ｈ、ＣＤＲ１ＬおよびＣＤＲ２Ｌ領域の組合せを含み、そして抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、配列番号１のＣＤＲ１Ｈ領域、配列番号２のＣＤＲ２Ｈ領域、配列番号３のＣＤＲ３Ｈ領域、配列番号４のＣＤＲ１Ｌ領域、配列番号５のＣＤＲ２Ｌ領域および配列番号６のＣＤＲ３Ｌ領域を含む。
【0322】
ある態様において、抗ＢＣＭＡ Ｆａｂフラグメントは、以下：
ａ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域；
ｂ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１３のＶＬ領域；
ｃ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域；
ｄ）配列番号３８のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域；
ｅ）配列番号３９のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域；
ｆ）配列番号４０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域；または
ｇ）配列番号９のＶＨ領域および配列番号１１のＶＬ領域
からなる群より選択されるＶＨおよびＶＬを含み、そして抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、配列番号７のＶＨ領域および配列番号８のＶＬ領域を含む。
ａ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域；
ｂ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１３のＶＬ領域；
ｃ）配列番号１０のＶＨ領域および配列番号１４のＶＬ領域；
ｄ）配列番号３８のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域；
ｅ）配列番号３９のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域；
ｆ）配列番号４０のＶＨ領域および配列番号１２のＶＬ領域；または
ｇ）配列番号９のＶＨ領域および配列番号１１のＶＬ領域
からなる群より選択されるＶＨおよびＶＬを含み、そして抗ＣＤ３ Ｆａｂフラグメントは、配列番号７のＶＨ領域および配列番号８のＶＬ領域を含む。
【0323】
ある態様において、本発明の二重特異性抗体は、以下の配列番号を含む（以下の表１４Ａおよび１５Ｂに記載されている）：
８３Ａ１０－ＴＣＢｃｖ：４５、４６、４７（ｘ２）、４８（図２Ａ）
２１－ＴＣＢｃｖ：４８、４９、５０、５１（ｘ２）（図２Ａ）
２２－ＴＣＢｃｖ：４８、５２、５３、５４（ｘ２）（図２Ａ）
４２－ＴＣＢｃｖ：４８、５５、５６、５７（ｘ２）（図２Ａ）。
８３Ａ１０－ＴＣＢｃｖ：４５、４６、４７（ｘ２）、４８（図２Ａ）
２１－ＴＣＢｃｖ：４８、４９、５０、５１（ｘ２）（図２Ａ）
２２－ＴＣＢｃｖ：４８、５２、５３、５４（ｘ２）（図２Ａ）
４２－ＴＣＢｃｖ：４８、５５、５６、５７（ｘ２）（図２Ａ）。
【0324】
本明細書で用いる用語“８３Ａ１０－ＴＣＢｃｖ”は、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７（２ｘ）、および配列番号４８のその重鎖および軽鎖の組合せによって規定され、図２Ａに示され、かつＥＰ１４１７９７０５に記載されるように、ＢＣＭＡおよびＣＤ３に特異的に結合する二特異性抗体を意味する。
【0325】
本明細書で用いる用語“２１－ＴＣＢｃｖ、２２－ＴＣＢｃｖ、４２－ＴＣＢｃｖ”は、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１（２ｘ）のその重鎖および軽鎖の組合せによって規定されるＭａｂ２１、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５３および配列番号５４（２ｘ）のその重鎖および軽鎖の組合せによって規定されるＭａｂ ２２、ならびに、配列番号４８、配列番号５５、配列番号５６および配列番号５７（２ｘ）のその重鎖および軽鎖の組合せによって規定されるＭａｂ４２、のそれぞれの二重特異性抗体を意味し、図２Ａに示され、かつＷＯ２０１７／０２１４５０に記載されている。
【0326】
好ましい態様において、二重特異性抗体は、４２－ＴＣＢｃｖである。
【0327】
医薬組成物
本発明の多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体は、医薬組成物として患者に投与することができる。したがって、本発明はまた、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
本発明の多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体は、医薬組成物として患者に投与することができる。したがって、本発明はまた、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【0328】
本明細書で用いる用語“薬学的に許容される”とは、連邦政府または州政府の規制機関によって承認されるか、または動物、より具体的にはヒトでの使用について米国薬局方、欧州薬局方または他の一般に認められた薬局方に記載されていることを意味する。
【0329】
適切な賦形剤の例としては、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなどの１以上、およびそれらの何れかの組み合わせが挙げられる。多くの場合、組成物中に糖類、多価アルコール、または塩化ナトリウムなどの等張剤を含むことが好ましい。特に、適切な賦形剤の関連する例としては、（１）約１ｍｇ／ｍＬ～２５ｍｇ／ｍＬのヒト血清アルブミンを含むかまたは含まないダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水、ｐＨ約７．４、（２）０．９％生理食塩水（０．９ｗ／ｖ塩化ナトリウム（ＮａＣｌ））、および（３）５％（ｗ／ｖ）デキストロースが挙げられ、また、トリプタミングなどの抗酸化剤およびＴｗｅｅｎ２０(登録商標)などの安定化剤も含んでいてもよい。
【0330】
当業者であれば、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体と共に用いるための賦形剤（複数可）の適当な選択が、医薬組成物の所望の特性によって変わることを理解し得る。
【0331】
単剤療法および併用療法
ある態様において、処置は、単剤療法として患者への本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体の投与を含む。
ある態様において、処置は、単剤療法として患者への本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体の投与を含む。
【0332】
ある態様において、処置は、併用療法として患者への本発明の多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体の投与を含み、ここで、併用療法は、本発明の多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体および１以上の追加の治療薬の投与を含む。用語“併用療法”は、独りの患者への選択された治療薬の投与を包含することを意味し、治療薬が同じもしくは異なる投与経路によって、または同じもしくは異なる時間に投与される処置を含むことを意図している。
【0333】
ある態様において、１以上の追加の治療薬は、サリドマイドおよびその免疫療法誘導体、抗ＣＤ３８抗体、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）、抗ＢＣＭＡ抗体薬剤結合体および抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞療法からなる群より選択される。
【0334】
本明細書で用いる用語“抗ＣＤ３８抗体”は、ヒトＣＤ３８に特異的に結合する抗体に関する。本発明の態様において、抗ＣＤ３８抗体は、ダラツムマブ（ＵＳ２０１５０２４６１２３）である。本発明の態様において、抗ＣＤ３８抗体は、イサツキシマブ（ＳＡＲ６５０９８４、ＵＳ８８７８９９）である。本発明の態様において、抗ＣＤ３８抗体は、ＭＯＲ２０２（ＷＯ２０１２０４１８００）である。本発明の態様において、抗ＣＤ３８抗体は、Ａｂ７９（ＵＳ８３６２２１１）である。本発明の態様において、抗ＣＤ３８抗体は、Ａｂ１９（ＵＳ８３６２２１１）である。このような抗ＣＤ３８抗体の投与量は、当技術分野の状況に応じて行われ、それぞれの処方情報に記載される。例えば、ダラツムマブの投与量は、通常１６ｍｇ／ｋｇである（www.ema.europa.eu）。
【0335】
本明細書で用いる用語“サリドマイド化合物”または“サリドマイドおよび免疫治療誘導体”は、２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－イソインドール－１，３－ジオンおよびその免疫治療誘導体に関する。本発明の態様において、サリドマイド化合物は、サリドマイド（ＣＡＳ登録番号５０－３５－１）、レナリドマイド（ＣＡＳ登録番号１９１７３２－７２－６）、ポマリドミド（ＣＡＳ登録番号１９７１－１９－８）、ＣＣ１２２（ＣＡＳ登録番号１３９８０５３－４５－６）およびＣＣ－２２０（ＣＡＳ登録番号１３２３４０３－３３－３）およびそれぞれの塩（好ましくはＨＣｌ塩１：１）からなる群より選択されるが、それらに限定されない。ＣＣ－１２２の化学式は、２，６－ピペリジンジオン，３－（５－アミノ－２－メチル－４－オキソ－３（４Ｈ－キナゾリニル），塩酸塩（１：１）であり、ＣＣ－２２０のそれは２，６－ピペリジンジオン，３－［１，３－ジヒドロ－４－［（４－モルホリニルメチル）フェニル］メトキシ］－１－オキソ－２Ｈ－イソインドール－２－イル），（３Ｓ）－，塩酸塩（１：１）である。ＣＣ－２２０の調製方法は、例えば、ＵＳ２０１１０１９６１５０に記載されており、その全体が引用により本明細書中に包含される。
【0336】
サリドマイド化合物の投与量は、当技術分野の状態に従って行われ、それぞれの処方例に記載される。例えば、レブリミド（登録商標）（レナリドマイド）の投与量は、通常、１日１回２５ｍｇを２８日サイクルの繰り返しの１～２１日目に経口投与し（www.revlimid.com）、多発性骨髄腫の治療のためのＰＯＭＡＬＹＳＴ(登録商標）（ポマリドマイド）の投与量は、通常１日４ｍｇを２８日サイクルの繰り返しの１～２１日目に経口投与する（www.celgene.com）。一態様において、３－（５－アミノ－２－メチル－４－オキソ－４Ｈ－キナゾリン－３－イル）－ピペリジン－２，６－ジオンが、１日当たり約５～約５０ｍｇの量で投与される。
【0337】
一態様において、ＣＣ－１２２およびＣＣ－２２０は、１日当たり約５～約２５ｍｇの量で投与される。別の態様において、ＣＣ－１２２およびＣＣ－２２０は、１日当たり約５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇまたは５０ｍｇの量で投与される。別の態様において、１日当たり１０ｍｇまたは２５ｍｇのｍｇのＣＣ－１２２およびＣＣ－２２０が投与される。一態様において、ＣＣ－１２２およびＣＣ－２２０は、１日２回投与される。
【0338】
本明細書で用いる用語“抗ＰＤ－１抗体”は、ヒトＰＤ－１に特異的に結合する抗体に関するものである。そのような抗体は、例えば、ＷＯ２０１５０２６６３４（ＭＫ－３４７５、ペムブロリズマブ）、ＵＳ７５２１０５１、ＵＳ８００８４４９およびＵＳ８３５４５０９に記載されている。ペムブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ(登録商標）、ＭＫ－３４７５）はまた、ＷＯ２００９／１１４３３５、Poole, R.M. Drugs (2014) 74: 1973; Seiwert, T.,et al., J. Clin. Oncol. 32,5s (suppl;abstr 6011)に記載されている。本発明の態様において、ＰＤ－１抗体は、ＭＫ－３４７５（WHO Drug Information，Vol. 27, No. 2, pages 161-162 (2013)）であり、ＷＯ２０１５０２６６３４の図６に示される重鎖および軽鎖アミノ酸配列を含むペムブロリズマブのアミノ酸配列はＷＯ２００８１５６７１２（軽鎖ＣＤＲ 配列番号１５，１６および１７ならびに重鎖ＣＤＲ 配列番号１８，１９および２０）に記載されている。本発明の態様において、ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ（ＢＭＳ－９３６５５８，MDX 1106; WHO Drug Information, Vol.27, No.1, pages 68-69 (2013), ）, ＷＯ２００６/１２１、ＷＯ２０１５０２６６３４に示されるアミノ酸配列）である。本発明の態様において、ＰＤ－１抗体は；ピジリズマブ（ＣＴ－０１１、ｈＢＡＴまたはｈＢＡＴ－１としても知られている；アミノ酸配列はＷＯ２００３／０９９１９６；ＷＯ２００９／１０１６１１、Fried I. et al.; Neuro Oncol (2014) 16 (suppl 5): v111-v112.)である。本発明の態様において、ＰＤ－１抗体は、ＭＥＤＩ－０６８０（ＡＭＰ－５１４、ＷＯ２０１０／０２７４２３、ＷＯ２０１０／０２７８２７、ＷＯ２０１０／０２７８２８、Hamid O. et al.; J Clin Oncol 33, 2015 (suppl; abstr TPS3087)）である。本発明の態様において、ＰＤ－１抗体は、ＰＤＲ００１（Naing A. et al.; J Clin Oncol 34, 2016 (suppl; abstr 3060)）である。本発明の態様において、ＰＤ－１抗体はＲＥＧＮ２８１０（Papadopoulos KPet al.;J Clin Oncol 34, 2016 (suppl; abstr 3024)）である。本発明の態様において、ＰＤ－１抗体は、ラムロリズマブ（ＷＯ２００８／１５６７１２）である。本発明の態様において、ＰＤ－１抗体は、ＷＯ２００８／１５６７１２に記載されているｈ４０９Ａｌ ｌ、ｈ４０９Ａ１６またはｈ４０９Ａ１７である。このような抗ＰＤ－１抗体の投与量は、当業者の技術水準に従って行われ、それぞれの処方例に記載される。例えば、キイトルーダ(登録商標)は、通常、２ｍｇ／ｋｇ体重の濃度で３週間ごとに投与される（http://ec.europa.eu/health/documents）。
【0339】
本明細書で用いる用語“抗ＰＤ－Ｌ１抗体”は、ヒトＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する抗体に関する。そのような抗体は、例えば、ＷＯ２０１５０２６６３４、ＷＯ２０１３／０１９９０６、Ｗ０２０１０／０７７６３４およびＵＳ８３８３７９６に記載されている。本発明の態様において、ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＷＯ２０１０／０７７６３４、McDermott DF. Et al., JCO March 10, 2016 vol.34 no.8 833-842）である。本発明の態様において、ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＭＤＸ－１１０５（ＢＭＳ－９３６５５９、ＷＯ２００７／００５８７４、Patrick A. Ott PAら、DOI: 10.1158/1078-0432, Clinical Cancer Research-13-0143) である。本発明の態様において、ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＭＥＤＩ４７３６（ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ、ＷＯ２０１６／０４０２３８ Gilbert J. et al., Journal for ImmunoTherapy of Cancer 20153(Suppl 2):P152）である。本発明の態様において、ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＭＳＢ００１０７１ ８Ｃ (avelumab, Disis ML. et al., Journal of Clinical Oncology, Vol 33, No 15_suppl (May 20 Supplement), 2015：5509)である。本発明の態様において、ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＷＯ２０１６００７２３５に記載の配列番号１６のＶＨ配列および配列番号１７のＶＬ配列を含む抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。かかる抗ＰＤ－Ｌ１抗体の投与量は、当技術分野の状況に応じて行われ、それぞれの処方例に記載される。例えば、アテゾリズマブは、通常、１２００ｍｇの濃度で３週間ごとに６０分かけて点滴静注される（www.accessdata.fda.gov）。
【0340】
本明細書で用いる用語“ガンマセクレターゼ”は、ガンマセクレターゼ切断配列を有する基質に結合し、ガンマセクレターゼ切断部位で、基質切断産物を生成するためにガンマセクレターゼ切断配列の切断を触媒することを含むガンマセクレターゼ活性を示す何れかのタンパク質またはタンパク質複合体を意味する。一態様において、γセクレターゼは、以下のサブユニット：プレセニリン、ニカストリン、γセクレターゼサブユニットＡＰＨ－１、およびγセクレターゼサブユニットＰＥＮ－２のうちの１以上を含めタンパク質複合体である。
【0341】
本明細書で用いる用語“γセクレターゼ阻害剤”または“ＧＳＩ”は、γセクレターゼの発現および／または機能を阻害または低減することができる何れかの分子を意味する。特定の態様において、ＧＳＩは、γセクレターゼのサブユニット（例えば、プレセニリン、ニカストリン、ＡＰＨ－１またはＰＥＮ－２）の発現および／または機能を低下させる。塩、共結晶、結晶形、プロドラッグなどの“γセクレターゼ阻害剤”の何れかの形態が、この用語内に含まれる。ある態様において、ＧＳＩは、抗体または抗原結合フラグメント、低分子、タンパク質またはペプチド、および核酸から選択される。
【0342】
上記の態様は、例示的な例として理解されるべきである。さらなる態様が想定される。何れか１つの態様に関連して記載された何れかの特徴は、単独で、または記載された他の特徴と組み合わせて使用されてもよく、また、態様の他の何れか１以上の特徴、または態様の他の何れかの組み合わせと組み合わせて使用されてもよいことが理解される。さらに、上記に記載されていない等価物および変更も、添付の特許請求の範囲に定義される本発明の範囲から逸脱することなく採用することができる。
【0343】
本明細書中、本明細書に記載される抗体および方法の他の例および変形は、当業者には明らかであり得る。他の例および変形は、添付の特許請求の範囲に規定されるように、本発明の範囲内である。
【0344】
本明細書で引用された全ての文献は、引用された文献に示された全てのデータ、表、図およびテキストを含め、それぞれ本明細書に引用により完全に包含される。
【0345】
【表14】
【表15】
【表16】
【表17】
【表18】
【表19】
【表20】
【表21】
【表22】
【0346】
【表23】
【0347】
【表24】
【0348】
【表25】
【実施例】
【0349】
実施例
実施例１：再発性／難治性多発性骨髄腫（ＲＲＭＭ）を対象としたＣＣ－９３２６９の臨床治験：コホート１～７
本治験には、３種以上の前ＢＣＭＡ指向型療法を受けたことがないＲＲＭＭ患者１９名が参加した。前療法には、自家幹細胞移植、同種幹細胞移植、レナリドミド、ポマリドミド、ボルテゾミブ、カーフィルゾミブ、ダラツムマブ（ＤＡＲＡ）などが含まれた。すべての患者は、最後の治療戦略に対して不応性のＭＭを有した。
実施例１：再発性／難治性多発性骨髄腫（ＲＲＭＭ）を対象としたＣＣ－９３２６９の臨床治験：コホート１～７
本治験には、３種以上の前ＢＣＭＡ指向型療法を受けたことがないＲＲＭＭ患者１９名が参加した。前療法には、自家幹細胞移植、同種幹細胞移植、レナリドミド、ポマリドミド、ボルテゾミブ、カーフィルゾミブ、ダラツムマブ（ＤＡＲＡ）などが含まれた。すべての患者は、最後の治療戦略に対して不応性のＭＭを有した。
【0350】
ＢＣＭＡに２価およびＣＤ３に１価で結合する二重特異性抗体であるＣＣ－９３２６９（４２－ＴＣＢｃｖ）を、２８日間サイクルで、１～３サイクルでは、１、８、１５、２２日目に、４～６サイクルでは、１、１５日目に、そして７サイクル以降では１日目に、２時間で静脈内投与いた。１４名の患者は、０．１５ｍｇ（コホート１、ｎ＝１）、０．５ｍｇ（コホート２、ｎ＝１）、１．５ｍｇ（コホート３、ｎ＝１）、３ｍｇ（コホート４、ｎ＝４）、６ｍｇ（コホート５、ｎ＝３）または１０ｍｇ（コホート６、ｎ＝４）の固定用量がそれぞれの間隔で投与された。５名の患者には、１サイクル目１日目に６ｍｇの投与を開始し、１サイクル目８日目以降に１０ｍｇの投与を行った（コホート７、ｎ＝５）。
【0351】
有効性：
応答は、国際骨髄腫ワーキンググループ（ＩＭＷＧ）統一応答基準（Rajkumar, 2011a; Kumar, 2016）を用いて、２サイクル１日目から始まるサイクルごとおよび処置終了時に評価した。微小残存病変（ＭＲＤ）を、ＥｕｒｏＦｌｏｗ評価および評価可能な場合はＮＧＳ（次世代シーケンシング）により評価した。ＭＲＤ陰性は、有核細胞１０５個中に腫瘍細胞１個未満という最小感度が達成された場合のみ報告された。
応答は、国際骨髄腫ワーキンググループ（ＩＭＷＧ）統一応答基準（Rajkumar, 2011a; Kumar, 2016）を用いて、２サイクル１日目から始まるサイクルごとおよび処置終了時に評価した。微小残存病変（ＭＲＤ）を、ＥｕｒｏＦｌｏｗ評価および評価可能な場合はＮＧＳ（次世代シーケンシング）により評価した。ＭＲＤ陰性は、有核細胞１０５個中に腫瘍細胞１個未満という最小感度が達成された場合のみ報告された。
【0352】
ＣＣ－９３２６９を６ｍｇ以上投与した１２名の患者のうち（コホート５～７）、１０名の患者が部分奏効（ＰＲ）以上（全奏効率；８３．３％）を達成し、このうち７名の患者が最良部分奏効（ＶＧＰＲ）以上を達成し、４名の患者が（sCR）が厳格な完全奏効（ＳＣＲ）を達成た；９名の患者（７５．０％）がＭＲＤ陰性であった（表１６）。奏効までの期間中央値は４．２週間（範囲４．０－１３．１）であった。これらのデータから、ＣＣ－９３２６９の６ｍｇ以上の用量が臨床的に有効であることが示唆された。
【0353】
また、コホート４の４名の患者では、３ｍｇの連続投与で奏効が認められなかったことから（表１６）、この用量では臨床活性が不十分であることが示唆された。
【0354】
６ｍｇ以上の用量における薬物動態学的（ＰＫ）データでは、ＣＣ－９３２６９の複数回投与後に曝露が大きく増加することが示され、初回投与後にＢＣＭＡ陽性骨髄腫細胞の標的介在性薬物体内動態（ＴＭＤＤ）およびクリアランスが顕著になることが示唆された。この現象は３ｍｇ投与では観察されなかった。これらのデータは、３ｍｇの投与が大多数の対象にとって標的を飽和させることなく、余裕安全度（margin of safety）を追加することを示唆するものである。
【0355】
【表26】
【0356】
安全性：
ＣＲＳ予防のため、初回投与時にはデキサメタゾン（最大２０ｍｇ静脈内投与またはその相当量）を投与し、６ｍｇ以上の投与時には増量して実施した。コホート１～４では、前投薬としてデキサメタゾンは用いなかった。
ＣＲＳ予防のため、初回投与時にはデキサメタゾン（最大２０ｍｇ静脈内投与またはその相当量）を投与し、６ｍｇ以上の投与時には増量して実施した。コホート１～４では、前投薬としてデキサメタゾンは用いなかった。
【0357】
患者はＣＲＳに関連する臨床症状および徴候をモニターし（Lee, 2014）、ＣＲＳ事象を共通のＣＴＣＡＥ ＣＲＳグレード分けスケール（Lee, 2015）に従ってグレード付けし、処置した。
【0358】
３ｍｇ以下のＣＣ－９３２６９の連続投与は、この用量でＣＲＳ予防薬が投与されていないにもかかわらず、良好な忍容性が確認された。最大グレード１のサイトカイン放出症候群は、３ｍｇ以下のＣＣ－９３２６９の固定用量で観察された（図４）。
【0359】
６ｍｇのＣＣ－９３２６９を連続投与したコホート６では、最大グレード２のＣＲＳが観察され、すべてのＣＲＳ事象がサイクル１で発生した。ＣＣ－９３２６９の初回投与として６ｍｇ、サイクル１の８日目に１０ｍｇを投与された患者（コホート７）１名がＣＲＳを発症し、治験中に死亡した。この患者では、グレード３のＣＲＳが第１サイクル１日目の６ｍｇの初回投与後に認められ、グレード５のＣＲＳが第１サイクル８日目の１０ｍｇの２回目の投与後に認められた（図４）。この患者は登録時に広範な髄外疾患があり、同時に感染症（Clostridium difficile）が記録され、死亡時に感染症の疑いがあることが指摘された。
【0360】
２７件のＣＲＳ事象のうち、８件（２９．６％）はデキサメタゾンで、１０件（３７．０％）はトシリズマブで対処した。
【0361】
実施例２：再発性／難治性多発性骨髄腫（ＲＲＭＭ）を対象としたＣＣ－９３２６９の臨床治験：コホート８～９
コホート８および９では、臨床活性および全体的な安全性プロファイルのバランスをとること、特に第１サイクルにおける重症サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）のリスクを最小限に抑えることを目的に、新たな投与レジメンが採用された。
コホート８および９では、臨床活性および全体的な安全性プロファイルのバランスをとること、特に第１サイクルにおける重症サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）のリスクを最小限に抑えることを目的に、新たな投与レジメンが採用された。
【0362】
ＣＣ－９３２６９は、１～３サイクル目は１日目、８日目、１５日目および２２日目に、４～６サイクル目は １日目および１５日目に、７サイクル目以降は１日目に、すべて２８日サイクルで２時間かけて静脈内投与された。患者には、第１サイクル１日目に３ｍｇから投与を開始し、第１サイクル８日目以降に６ｍｇを投与した。
【0363】
コホート８（ｎ＝６）およびコホート９（ｎ＝５）では、骨髄形質細胞の割合および／または髄外病変の存在に基づき、ベースラインの多発性骨髄腫の腫瘍負荷が異なる（コホート８には骨髄形質細胞（切除または吸引）５０％以下かつ髄外病変５個以下の対象、コホート９には骨髄形質細胞５０％以上または髄外病変５個超の対象が含まれる）。コホート１～７でグレード３以上のＣＲＳを経験した唯一の患者が登録時に広範な髄外病変を有していたという根拠に基づいて、腫瘍負荷が低い患者（コホート８）および高い患者（コホート９）が登録され、忍容性の違いを評価することができた。
【0364】
安全性
コホート８および９では、すべての患者が、初回投与前、２回目投与前、増量時、および第１～６サイクル中に発生した２週間以上の投与中断後に、ＣＲＳの予防薬としてデキサメタゾン（最大２０ｍｇ静脈内投与または同等量）を投与された。患者は、実施例１のコホート１～７と同様の方法でＣＲＳをモニターし、グレード付けし、処置した。
コホート８および９では、すべての患者が、初回投与前、２回目投与前、増量時、および第１～６サイクル中に発生した２週間以上の投与中断後に、ＣＲＳの予防薬としてデキサメタゾン（最大２０ｍｇ静脈内投与または同等量）を投与された。患者は、実施例１のコホート１～７と同様の方法でＣＲＳをモニターし、グレード付けし、処置した。
【0365】
３／６ｍｇの用量レジメンを受けた１１名の患者のうち、６名（５４．５％）のみがＣＲＳを経験しなかったのに対し、６ｍｇ、６／１０ｍｇまたは１０ｍｇの用量を受けた１２名の対象のうち１２名がＣＲＳを経験した（１００％）（実施例１のコホート５～７）。ＣＲＳ事象の頻度の減少に加え、コホート８および９におけるＣＲＳの重症度は、コホート５から７と比較して一般的に減少していた。コホート８および９で報告された全てのＣＲＳ事象の重症度はグレード１（８例中６例［７５％］）またはグレード２（８例中２例［２５％］）であり、グレード３以上のＣＲＳ事象は報告されなかった。グレード２以上の事象は、６ｍｇ、６／１０ｍｇまたは１０ｍｇの投与を受けた１２名中６名（５０％）と比較して、３／６ｍｇの投与を受けた１１名中２名（１８．２％）にのみ報告された（図４）。コホート８および９のすべてのＣＲＳ事象は、トシリズマブおよび／またはデキサメタゾンを含む標準治療で解決された。
【0366】
多発性骨髄腫の腫瘍負荷、すなわち骨髄形質細胞の割合または髄外病変の数が多い対象（コホート９）では、腫瘍負荷が低い対象（コホート８）と比較して、ＣＲＳの頻度または重症度に増加は観察されなかった。
【0367】
実施例１および２の全コホート１～９において、ＣＲＳの初発までの期間の中央値は１日、最大値３日であった。ＣＲＳ事象の大部分はＣ１Ｄ１の初回投与で発生し（７３．３％）、Ｃ１Ｄ８の２回目の投与でより少なく（２３．３％）、その後の投与ではほとんど発生せず（２．７％、グレード２以下の事象に限られる）、このことは投与の継続によりＣＲＳリスクが低下することを示唆した（図５）。
【0368】
実施例１および２の全コホート１～９において、ＣＲＳ事象の期間中央値は２日（範囲１～７日、３日以上続いたのは３６例中４例のみ）であった。
【0369】
有効性
実施例１のコホート１～７と同様の方法で奏効を評価した。コホート８および９（開始用量３ｍｇからさらに６ｍｇ以上の維持用量を投与）の対象は、実施例１のコホート１～４の対象（３ｍｇ以下の維持用量を投与）と比較して、改善された奏効を示した。
実施例１のコホート１～７と同様の方法で奏効を評価した。コホート８および９（開始用量３ｍｇからさらに６ｍｇ以上の維持用量を投与）の対象は、実施例１のコホート１～４の対象（３ｍｇ以下の維持用量を投与）と比較して、改善された奏効を示した。
【0370】
６ｍｇまでで処置された患者（３／６ｍｇおよび６ｍｇ）の全奏効率は、１０ｍｇまでで処置された患者（６／１０ｍｇおよび１０ｍｇ）より低かった。６ｍｇまで投与された患者（コホート５、８および９）のうち、合計５件の奏効が報告されており、予備的な全奏効率は３５．７％であった。また、維持量１０ｍｇで処置された９例（コホート６および７）では、合計８例の奏効が報告され、予備的な全奏効率は８８．９％であった（表１７）。
【0371】
これらのデータから、３／６ｍｇから開始する投与スケジュールはＣＲＳを減少させる可能性があるが、１０ｍｇの高い維持用量は有効性を改善する可能性があり、３／６／１０ｍｇレジメンを支持することが示唆された。
【0372】
【表27】
【0373】
実施例３：ＣＣ－９３２６９を介したサイトカイン放出、Ｔ細胞活性化、Ｔ細胞増殖およびＭＭ細胞株のリダイレクション溶解に対するデキサメタゾンの効果
ＡＴＣＣ（Manassa、VA）から購入した４つのＢＣＭＡ発現腫瘍細胞株（多発性骨髄腫細胞株：ＢＣＭＡ高Ｈ９２９（カタログ番号ＣＲＬ－９０６８）、ＢＣＭＡ ｍｉｄ－ＳＫＭＭ２および－ＭＭ．１Ｓ（カタログ番号ＡＣＣ－４３０）ならびにＢＣＭＡ ｌｏｗ－ＫＭＳ１２－ＰＥ（カタログ番号ＡＣＣ－６０６））を、１：１のＥ：Ｔ比、すなわちＴ細胞 １：ＭＭ細胞 １で、３名の独立した健康ドナー由来のＴ細胞（Bloodworks Northwest、Seattle、WA）と共培養した。共培養は、臨床的に適切な用量のデキサメタゾン（ＤＥＸ：０．００１４μＭ －１μＭ）、または対照のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、および様々な濃度（６.４－５００ｎｇ／ｍＬ；０．０３３－２．６ｎＭ）のＣＣ－９３２６９で７２時間共に処理した。
ＡＴＣＣ（Manassa、VA）から購入した４つのＢＣＭＡ発現腫瘍細胞株（多発性骨髄腫細胞株：ＢＣＭＡ高Ｈ９２９（カタログ番号ＣＲＬ－９０６８）、ＢＣＭＡ ｍｉｄ－ＳＫＭＭ２および－ＭＭ．１Ｓ（カタログ番号ＡＣＣ－４３０）ならびにＢＣＭＡ ｌｏｗ－ＫＭＳ１２－ＰＥ（カタログ番号ＡＣＣ－６０６））を、１：１のＥ：Ｔ比、すなわちＴ細胞 １：ＭＭ細胞 １で、３名の独立した健康ドナー由来のＴ細胞（Bloodworks Northwest、Seattle、WA）と共培養した。共培養は、臨床的に適切な用量のデキサメタゾン（ＤＥＸ：０．００１４μＭ －１μＭ）、または対照のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、および様々な濃度（６.４－５００ｎｇ／ｍＬ；０．０３３－２．６ｎＭ）のＣＣ－９３２６９で７２時間共に処理した。
【0374】
デキサメタゾンは、Milliplex ヒト サイトカイン／ケモカイン磁気ビーズマルチプレックスアッセイ（Millipore Sigma, Temecula, MA）を用いて、製造者の推奨に従って測定したところ、ＣＣ－９３２６９が仲介するＩＬ－２の放出（４８．３～７４．１％）、ＧＭ－ＣＳＦ（４７．５～６７．８％）およびＴＮＦ－α（４６．３～６１．８％）を低下させることを確認した。低下率は、１μＭ ＤＥＸの共処理をＤＭＳＯ対照と比較して、試験したＣＣ－９３２６９の最高濃度で決定した。サイトカインレベルは、ＦｏｒｅＣｙｔソフトウェア（Intellicyt）を用いて、２．２９から７５００ｐｇ／ｍＬの範囲の標準曲線に従って計算した。ＣＣ－９３２６９誘発サイトカイン分泌に対するデキサメタゾンの効果は、ＤＭＳＯ対照および試験したＣＣ－９３２６９の最高濃度と比較して、１μＭデキサメタゾンの阻害パーセントを、以下の式に従って計算することによって決定された：阻害パーセント＝１００×（［サイトカイン濃度、ＤＭＳＯ対照］－［サイトカイン分泌、１μＭデキサメタゾン］）／［サイトカイン濃度、ＤＭＳＯ対照］。
【0375】
図６は、１名の健康なドナー由来のドナーＴ細胞との共培養からのサイトカイン分泌を示す；独立した３名の健康なドナーすべてからの結果を、表１８にまとめた。
【0376】
【表28】
【0377】
デキサメタゾンは、ＣＣ－９３２６９によって誘発されたＣＤ４およびＣＤ８ Ｔ細胞の活性化、増殖およびＢＣＭＡ＋腫瘍細胞株（例えば、多発性骨髄腫細胞株）のリダイレクト溶解に最小限の影響を及ぼした。
【0378】
図７は、１名の健康なドナー由来のドナーＴ細胞との共培養後に、ＣＣ－９３２６９によって誘発されたＢＣＭＡ＋腫瘍細胞株のリダイレクト溶解を示す；３名の独立した健康なドナーすべてからの結果を、表１９にまとめている。９６ウェル丸底プレートおよび終容量１００μＬにおいて、１×１０４個のCellTrace Violet標識Ｔ細胞を、１×１０４個のCellTrace CFSE標識標的細胞と共に、異なる濃度のデキサメタゾン（７点用量反応）と組み合わせた、異なる濃度のＣＣ－９３２６９の存在下で、播種した。共培養物を、３７℃、５％ ＣＯ２でインキュベートした。インキュベーションの７２時間後、培養上清を採取し、－８０℃にて保存した。製造元の指示に従い、細胞をLive/Dead Fixable Aqua Dead Cell Stainで、ＲＴにて３０分間標識した。その後、細胞を以下の細胞表面マーカーに対する抗体で染色した：ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ６９、ＣＤ２５、ＨＬＡ－ＤＲおよびＣＤ１５４に対する抗体で、終容量５０μＬのフロー染色バッファー中で染色した。細胞表面分子の染色後、細胞を１５０μＬのフロー染色バッファーで１回洗浄し、５０μＬのＢＤ Ｃｙｔｏｆｉｘ固定バッファーに再懸濁し、ＲＴにて３０分間インキュベートした。細胞を１５０μＬのフロー染色バッファーで洗浄し、終容量５０μＬのフロー染色バッファーに再懸濁させ、IQUE Screener plus装置（Intellicyt，Albuquerque，NM）で分析した。１００％の生存率は、ＣＣ－９３２６９またはデキサメタゾンを添加しない場合の生腫瘍細胞の絶対細胞数によって決定された；生細胞の絶対細胞数が０であれば、腫瘍細胞の１００％死滅と定義した。ＩＣ５０は、特定の曝露時間後にベースラインと最大値の中間の反応を阻害するＣＣ－９３２６９の濃度を示す。ＩＣ５０値は、GraphPad Prism（バージョン5.0）ソフトウェアを用いて、非線形回帰分析、シグモイド用量反応を用いて算出した。
【0379】
【表29】
【0380】
図８は、１名の健康なドナー由来のドナーＴ細胞との共培養後のＣＣ－９３２６９誘発Ｔ細胞活性化および増殖を示す図である。ＣＣ－９３２６９の増加量に応答して増殖するＣＤ４＋およびＣＤ８＋ Ｔ細胞は、Ｔ細胞のみの培養と比較して、健康なドナーＴ細胞の腫瘍細胞株との共培養後にCellTrace Violetの希釈を示したＣＤ４＋およびＣＤ８＋ Ｔ細胞の割合のトリプリケートサンプルの平均±標準偏差（ＳＤ）としてグラフにした。増加量のＣＣ－９３２６９に反応して活性化マーカーＣＤ６９、ＣＤ２５、ＨＬＡ－ＤＲおよびＣＤ１５４を発現するＣＤ４＋およびＣＤ８＋ Ｔ細胞の割合は、Ｔ細胞のみの培養と比較して、健康なドナーＴ-細胞と腫瘍細胞株との共培養後の活性化マーカーを発現するＣＤ４＋およびＣＤ８＋ Ｔ細胞の割合のトリプリケートサンプルの平均±ＳＤとしてグラフにした。増殖データおよび活性化マーカーの発現の両方を、ＦｏｒＣｙｔソフトウェア（Intellicyt）を用いて解析した。
【0381】
デキサメタゾンの併用処置は、ＣＣ－９３２６９を介した細胞傷害活性に対する抑制効果はほとんどなかったが、サイトカイン分泌を強く抑制し、サイトカイン放出症候群の臨床管理に有益である可能性を示唆する。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6-1】
【図6-2】
【図7】
【図8-1】
【図8-2】
【配列表】
【国際調査報告】