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特表2022-554277エンドセリンレセプターアンタゴニストを使用する眼疾患の処置
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-12-28
(54)【発明の名称】エンドセリンレセプターアンタゴニストを使用する眼疾患の処置
(51)【国際特許分類】
A61K 31/422 20060101AFI20221221BHJP
A61P 27/06 20060101ALI20221221BHJP
A61P 27/02 20060101ALI20221221BHJP
A61K 31/4025 20060101ALI20221221BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20221221BHJP
【ＦＩ】
A61K31/422
A61P27/06
A61P27/02
A61K31/4025
A61K45/00
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022525291
(86)(22)【出願日】2020-10-30
(85)【翻訳文提出日】2022-06-24
(86)【国際出願番号】 US2020058411
(87)【国際公開番号】W WO2021087399
(87)【国際公開日】2021-05-06
(31)【優先権主張番号】63/068,215
(32)【優先日】2020-08-20
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/928,092
(32)【優先日】2019-10-30
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522170076
【氏名又は名称】パフューズ セラピューティクス， インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(74)【代理人】
【識別番号】100181674
【弁理士】
【氏名又は名称】飯田 貴敏
(74)【代理人】
【識別番号】100181641
【弁理士】
【氏名又は名称】石川 大輔
(74)【代理人】
【識別番号】230113332
【弁護士】
【氏名又は名称】山本 健策
(72)【発明者】
【氏名】ギュルカン， セヴギ
(72)【発明者】
【氏名】フロイド， デイビッド
【テーマコード（参考）】
4C084
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C084AA19
4C084MA16
4C084MA58
4C084MA66
4C084NA05
4C084NA10
4C084ZA211
4C084ZA212
4C084ZA331
4C084ZA332
4C084ZC751
4C084ZC752
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC07
4C086BC69
4C086GA09
4C086MA02
4C086MA04
4C086MA16
4C086MA58
4C086MA66
4C086NA05
4C086NA10
4C086ZA33
(57)【要約】
本開示は、ヒト視覚系に、そして結果として、クオリティー・オブ・ライフに大きく影響を及ぼすある特定の眼の疾患が、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６を使用して処置され得るという発見に関する。エドネンタンまたはＡ－１８２０８６は、単独で、または例えば、眼内圧（ＩＯＰ）降下剤、神経保護剤、抗ＶＥＧＦ剤、もしくは全てと組み合わせて使用され得る。エドネンタンまたはＡ－１８２０８６を、単独で、またはさらなる薬剤と組み合わせて使用することによって、ある特定の疾患において網膜への灌流の増大が提供され、網膜細胞への損傷が低減される。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
眼疾患を処置する方法であって、前記方法は、被験体の視覚組織と、治療上有効な量のエドネンタンもしくはＡ－１８２０８６のいずれか、またはこれらの薬学的に受容可能な塩、またはこれらの結晶形態もしくは非晶質形態を含む組成物とを接触させる工程、
を包含し、ここで前記眼疾患は、緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）からなる群より選択される、方法。
【請求項2】
前記処置の治療有効性は、視力または視野における改善の程度を評価することによって決定される、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記眼疾患は、緑内障である、請求項１に記載の方法。
【請求項4】
前記処置の治療有効性は、眼内圧の降下、または視神経損傷の割合の低減を、視神経損傷を軽減または防止するために十分な量で検出することによって決定される、請求項３に記載の方法。
【請求項5】
前記処置の治療有効性は、視神経乳頭血流の改善によって決定される、請求項３に記載の方法。
【請求項6】
前記眼疾患は、ＤＲ、ＲＶＯ、ＮＡＩＯＮ、ＡＩＯＮ、またはＲＯＰである、請求項１に記載の方法。
【請求項7】
前記処置の治療有効性は、糖尿病によって誘導される網膜神経変性の減少によって決定される、請求項６に記載の方法。
【請求項8】
前記処置の治療有効性は、組織または網膜灌流の改善によって示される、請求項６に記載の方法。
【請求項9】
前記処置の治療有効性は、組織もしくは網膜灌流の改善、炎症の低減、またはこれらの組み合わせを測定することによって決定される、請求項１に記載の方法。
【請求項10】
前記組成物は、治療上有効な量の、眼内圧（ＩＯＰ）降下剤もしくは神経保護剤、またはこれらの薬学的に受容可能な塩をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項11】
前記組成物は、治療上有効な量の眼内圧（ＩＯＰ）降下剤またはその薬学的に受容可能な塩をさらに含み、ここで前記ＩＯＰ降下剤は、プロスタグランジン（例えば、ラタノプロストまたはトラボプロスト）、β遮断薬（例えば、チモロールまたはベタキソロール）、αアドレナリン作動薬（例えば、ブリモニジン、アプラクロニジン）、炭酸脱水酵素インヒビター（例えば、ドルゾラミドまたはブリンゾラミド）、Ｒｈｏキナーゼインヒビター（例えば、ネタルスジル）および縮瞳薬またはコリン作動性薬剤（例えば、ピロカルピン）からなる群より選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項12】
前記組成物は、治療上有効な量の神経保護剤またはその薬学的に受容可能な塩をさらに含み、ここで前記神経保護剤は、抗アポトーシス薬剤（例えば、カスパーゼ－２インヒビター）および神経栄養因子（例えば、毛様体神経栄養因子）からなる群より選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項13】
前記組成物は、エドネンタンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項14】
前記眼疾患は、緑内障である、請求項１３に記載の方法。
【請求項15】
前記処置の治療有効性は、眼内圧の降下、または視神経損傷の割合の低減を、視神経損傷を軽減または防止するために十分な量で検出することによって決定される、請求項１４に記載の方法。
【請求項16】
前記組成物は、Ａ－１８２０８６を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項17】
前記眼疾患は、緑内障である、請求項１６に記載の方法。
【請求項18】
前記処置の治療有効性は、眼内圧の降下、もしくは視神経損傷の割合の低減、またはこれらの組み合わせを、視神経損傷を軽減または防止するために十分な量で検出することによって決定される、請求項１７に記載の方法。
【請求項19】
前記組成物は、１μｇ～４ｍｇの間の投与量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項20】
前記組成物は、１０μｇ～１００μｇの間の投与量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項21】
前記接触させる工程は、前記組成物を、眼またはその一部の表面に局所的に投与する工程を包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項22】
前記接触させる工程は、眼またはその構成要素に組成物を注射する工程を包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項23】
前記組成物は、１種またはこれより多くの保存剤、保存助剤、粘性または潤滑調節剤、張度調節剤、可溶化剤、緩衝物質、界面活性剤、安定化剤、またはこれらの組み合わせを含む眼用調製物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項24】
前記接触させる工程は、標的化薬物送達システムを介して組成物を投与する工程を包含し、ここで前記標的化薬物送達システムは、ＡｐｉｄＣＯＲ、ＢｉｏＳｅｉｚｅｒ－ＰｒｏＤｅｘ、Ｖｉｔｒａｓｅｒｔ、Ｒｅｔｉｓｅｒｔ、Ｉｌｕｖｉｅｎ、Ｉ－Ｖａｔｉｏｎ、Ｎａｎｏｐｏｒｏｕｓ Ｓｉｌｉｃｏｎ、Ｏｚｕｒｄｅｘ／Ｎｏｖａｄｕｒ、ＯｃｕＬｉｅｆ、Ｐｏｒｔ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰＤＳ）、ＰＥＡ Ｉｍｐｌａｎｔ、ＰＥＧ－ＰＬＡ Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ、ＰＲＩＮＴ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｑ－Ｓｐｈｅｒａ、ＳＫＳ Ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ、Ｖｅｒｉｓｏｍｅ、Ｃａｐｓｕｌｅ Ｒｉｎｇ Ｄｅｖｉｃｅ、ＭｉｃｒｏＰｕｍｐ、Ｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅ Ｉｎｊｅｃｔｏｒ、Ｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅ／Ｎｅｅｄｌｅ－ｌｅｓｓ Ｉｎｊｅｃｔｏｒｓ、ＥｙｅＣＥＴ、Ｇｅｍｉｎｉ Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ Ｃａｐｓｕｌｅ、ＩＶＭＥＤ、Ｃｉｌｉａｒｙ Ｓｕｌｃｕｓ Ｒｉｎｇ、Ｅｐｉｓｃｌｅｒａｌ Ｅｘｏｐｌａｎｔ、Ｅｙｅ－Ｄ Ｉｍｐｌａｎｔ、およびＮａｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓからなる群より選択される、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願
本出願は、２０１９年１０月３０日および２０２０年８月２０日にそれぞれ出願された米国仮特許出願第６２／９２８，０９２号および同第６３／０６８，２１５号（これらの全内容は、全ての目的のために本明細書に参考として援用される）の優先権を主張する。
本出願は、２０１９年１０月３０日および２０２０年８月２０日にそれぞれ出願された米国仮特許出願第６２／９２８，０９２号および同第６３／０６８，２１５号（これらの全内容は、全ての目的のために本明細書に参考として援用される）の優先権を主張する。
【0002】
分野
本開示は、医療の分野および眼疾患の処置に関する。より具体的には、本開示は、緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ｎｏｎ－ａｒｔｅｒｉｔｉｃ ａｎｔｅｒｉｏｒ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｏｐｔｉｃ ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ａｒｔｅｒｉｔｉｃ ａｎｔｅｒｉｏｒ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｏｐｔｉｃ ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）の処置または改善におけるエドネンタンおよびＡ－１８２０８６エンドセリンレセプターアンタゴニストの使用に関する。
本開示は、医療の分野および眼疾患の処置に関する。より具体的には、本開示は、緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ｎｏｎ－ａｒｔｅｒｉｔｉｃ ａｎｔｅｒｉｏｒ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｏｐｔｉｃ ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ａｒｔｅｒｉｔｉｃ ａｎｔｅｒｉｏｒ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｏｐｔｉｃ ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）の処置または改善におけるエドネンタンおよびＡ－１８２０８６エンドセリンレセプターアンタゴニストの使用に関する。
【背景技術】
【0003】
背景
眼の疾患は、ヒトのクオリティー・オブ・ライフに対して非常に大きな影響を有するが、有効な処置は非常に分かりにくいままである。米国では、一千億ドル超という年間の経済的負担が、視力喪失、眼疾患、および視覚障害から生じると概算される。消耗性の眼疾患の例としては、緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）が挙げられる。
眼の疾患は、ヒトのクオリティー・オブ・ライフに対して非常に大きな影響を有するが、有効な処置は非常に分かりにくいままである。米国では、一千億ドル超という年間の経済的負担が、視力喪失、眼疾患、および視覚障害から生じると概算される。消耗性の眼疾患の例としては、緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）が挙げられる。
【0004】
緑内障は、視野欠損および視神経乳頭陥凹によって特徴づけられる眼の障害である。異常に高い眼内圧は、眼に有害であることが一般に公知であり、緑内障患者において、これはおそらく、網膜の変性を引き起こす最も重要な物理的変化であるという明確な徴候がある。最終的には、処置されなければ、時間を経て徐々に視力が失われる。しかし、緑内障の病態生理学的機序は、なお未知である。
【0005】
緑内障には３つの基本的なタイプが存在する：原発性、続発性、および先天性。原発性緑内障は、最も一般的なタイプであり、開放隅角緑内障および閉塞隅角緑内障に分けられ得る。原発性開放隅角緑内障（「ＰＯＡＧ」）は、米国で観察される緑内障の最も頻度の高いタイプである。ＰＯＡＧは通常、慣用的な眼の検査中にその初期段階で検出される。原発性閉塞隅角緑内障は、急性緑内障ともいわれ、通常は、突発的な発症を有し、眼の疼痛および霧視によって特徴づけられる。続発性緑内障は、種々の他の状態（例えば、傷害、炎症、一般的な血管疾患、および糖尿病）の合併症として起こる。先天性緑内障は、眼の排液機序における発生上の欠損に起因する。
【0006】
糖尿病網膜症（ＤＲ）は、糖尿病の最も一般的な合併症であり、先進国の生産年齢集団における視力の低下および失明の原因第１位である。ＤＲの発生率は、糖尿病の進展の時間とともに増大する。従って、１型糖尿病を有する患者のうちの９０％および２型糖尿病を有する患者のうちの６０％は、糖尿病の進展の２０年後にある程度のＤＲを有する。西側諸国におけるＤＲの有病率は、非常に似通っており、およそ３０％であり、その症例のうちの１０％では、ＤＲは、視力に重篤に脅威を与える進行した段階にある。
【0007】
ＤＲは、血中グルコースレベルの変化が、網膜血管の変化を引きおこす場合に起こる。いくらかの場合には、これらの血管は腫脹し（ｓｗｅｌｌ ｕｐ）（黄斑浮腫）、眼の後部へと液体を漏出させる。他の場合には、異常な血管が網膜の表面上で増殖する。処置されなければ、ＤＲは、徐々により重篤になって「背景網膜症（ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ）」から進行して、視力に重篤に影響を及ぼし得、失明をもたらし得る。
【0008】
網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）は、網膜の血管障害であり、全世界で視力喪失の最も一般的な原因のうちの１つである。具体的には、それは、糖尿病網膜症後の網膜血管疾患に由来する失明の最も一般的な原因第２位である。ＲＶＯはしばしば、根底にある健康上の問題（例えば、高血圧症、高コレステロールレベル、糖尿病、および他の健康上の問題）の結果である。網膜静脈閉塞症には２つのタイプがある： 網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）は、主要な網膜静脈の閉塞であり、網膜静脈分枝閉塞症（ＢＲＶＯ）は、より小さな分岐静脈のうちの１つの閉塞である。
【0009】
現在では、網膜静脈の閉塞を除去する（ｕｎｂｌｏｃｋ）方法は存在せず、許容される処置は、網膜静脈閉塞症に関連する健康上の問題に対処することに指向される。視力は、網膜静脈閉塞症に罹ってしまった眼でも戻る場合もある。約１／３はある程度の改善を有し、約１／３は同じままであり、約１／３は徐々に改善するが、最終的な転帰を決定するには、１年またはより長くかかり得る。いくらかの場合には、閉塞した血管は、網膜における液体蓄積をもたらす。他の場合には、虚血の発生が、新たな血管の形成を引きおこす。ＲＶＯは現在、抗血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）薬物の硝子体内注射で処置されている。
【0010】
前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）は、視神経の前部（後毛様体動脈循環によって主に供給される領域）への虚血性損傷から生じる。前部虚血性視神経症は、２つのタイプに分けられる： 血管炎（特に、巨細胞動脈炎）に続発する動脈性ＡＩＯＮ（ＡＡＩＯＮ）および非炎症性小血管疾患に続発する非動脈性ＡＩＯＮ（ＮＡＩＯＮ）。ＮＡＩＯＮは、全ＡＩＯＮのうちの９５％を構成し、５０歳を超える人々における急性視神経症の最も一般的な原因であり、１００，０００人あたりおよそ２～１０人の間の個体に影響を及ぼす（米国で１年間あたりおよそ１５００～６０００の新たな症例）。現在では、ＮＡＩＯＮの一般に許容される処置または二次的防止は存在しないが、いくらかの患者では、ステロイドが旧来から使用されている。
【0011】
未熟児網膜症（ＲＯＰ）は、早産に起因して起こり得る。網膜における異常な漏出血管増殖（新生血管形成）は、早産に関する他の処置に対して続発して生じ、しばしば新生児の失明をもたらし得る。妊娠中に、血管は、母親の妊娠１６週目に、発育中の子供の網膜の中心から増殖し、次いで、外側に分枝して、妊娠８ヶ月目に網膜の縁部に到達する。早産の子供では、正常な網膜血管増殖が不完全であり、従って、より容易に破裂し得る。
【0012】
エドネンタンは、高度に選択的でありかつ非常に強力なエンドセリンＡレセプターアンタゴニストである。エドネンタンは、最初の臨床候補であるＢＭＳ－１９３８８４（これは、うっ血性心不全（ＣＨＦ）の処置のために開発されていた）の中止後に、第二世代アナログとして開発された。エドネンタンは、２００２年４月までフェーズＩ治験中であったが、その開発は中止された。
【0013】
Ａ－１８２０８６は、４倍のＥＴＡ／ＥＴＢ選択性を有する強力な二重ＥＴＡ／ＥＴＢレセプターアンタゴニストである。Ａ－１８２０８６は、今日まで臨床現場では研究されてこなかった。
【0014】
緑内障、ＤＲ、ＲＶＯ、ＮＡＩＯＮ、ＡＩＯＮ、およびＲＯＰの発生率をより効果的に低減する、これらを処置するまたはそうでなければ改善する必要性が未だにある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0015】
要旨
本発明は、緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）から選択される眼疾患を処置するためにエンドセリンレセプターアンタゴニストを使用する方法を提供する。
本発明は、緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）から選択される眼疾患を処置するためにエンドセリンレセプターアンタゴニストを使用する方法を提供する。
【0016】
上記方法は、被験体における視覚組織（ｏｐｔｉｃａｌ ｔｉｓｓｕｅ）と、治療上有効な量のエドネンタンもしくはＡ－１８２０８６、またはその薬学的に受容可能な塩を含む組成物とを接触させる工程を包含し、ここで上記エンドセリンレセプターアンタゴニストは、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６である。このようなアンタゴニスト真たはその薬学的に受容可能な塩は、結晶形態または非晶質形態にあり得る。これらの各々は、薬理学的に受容可能な使用のためのものであり得る。
【0017】
いくつかの実施形態において、接触させる工程は、眼またはその一部の表面に局所用組成物を投与する工程を包含する。他の実施形態において、接触させる工程は、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６を眼へと、全体にまたはその特定の領域に注射する工程を包含する。
【0018】
さらに他の実施形態において、接触させる工程は、眼インプラント（ｅｙｅ ｉｍｐｌａｎｔ）、例えば、ポート送達システム（ｐｏｒｔ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｓｙｓｔｅｍ）を介して、組成物を投与する工程を包含する。眼インプラント技術の例としては、ＡｐｉｄＣＯＲ、ＢｉｏＳｅｉｚｅｒ－ＰｒｏＤｅｘ、Ｖｉｔｒａｓｅｒｔ、Ｒｅｔｉｓｅｒｔ、Ｉｌｕｖｉｅｎ、Ｉ－Ｖａｔｉｏｎ、Ｎａｎｏｐｏｒｏｕｓ Ｓｉｌｉｃｏｎ、Ｏｚｕｒｄｅｘ／Ｎｏｖａｄｕｒ、ＯｃｕＬｉｅｆ、Ｐｏｒｔ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰＤＳ）、ＰＥＡ Ｉｍｐｌａｎｔ、ＰＥＧ－ＰＬＡ Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ、ＰＲＩＮＴ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｑ－Ｓｐｈｅｒａ、ＳＫＳ Ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ、Ｖｅｒｉｓｏｍｅ、Ｃａｐｓｕｌｅ Ｒｉｎｇ Ｄｅｖｉｃｅ、ＭｉｃｒｏＰｕｍｐ、Ｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅ Ｉｎｊｅｃｔｏｒ、Ｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅ／Ｎｅｅｄｌｅ－ｌｅｓｓ Ｉｎｊｅｃｔｏｒｓ、ＥｙｅＣＥＴ、Ｇｅｍｉｎｉ Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ Ｃａｐｓｕｌｅ、ＩＶＭＥＤ、Ｃｉｌｉａｒｙ Ｓｕｌｃｕｓ Ｒｉｎｇ、Ｅｐｉｓｃｌｅｒａｌ Ｅｘｏｐｌａｎｔ、Ｅｙｅ－Ｄ Ｉｍｐｌａｎｔ、およびＮａｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓが挙げられるが、これらに限定されない。
【0019】
いくつかの実施形態において、本開示の方法において使用され得る眼インプラント技術は、ＡｐｉｄＣＯＲ、ＢｉｏＳｅｉｚｅｒ－ＰｒｏＤｅｘ、Ｖｉｔｒａｓｅｒｔ、Ｒｅｔｉｓｅｒｔ、Ｉｌｕｖｉｅｎ、Ｉ－Ｖａｔｉｏｎ、Ｎａｎｏｐｏｒｏｕｓ Ｓｉｌｉｃｏｎ、Ｏｚｕｒｄｅｘ／Ｎｏｖａｄｕｒ、ＯｃｕＬｉｅｆ、Ｐｏｒｔ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰＤＳ）、ＰＥＡ Ｉｍｐｌａｎｔ、ＰＥＧ－ＰＬＡ Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ、ＰＲＩＮＴ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｑ－Ｓｐｈｅｒａ、ＳＫＳ Ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ、Ｖｅｒｉｓｏｍｅ、Ｃａｐｓｕｌｅ Ｒｉｎｇ Ｄｅｖｉｃｅ、ＭｉｃｒｏＰｕｍｐ、Ｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅ Ｉｎｊｅｃｔｏｒ、Ｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅ／Ｎｅｅｄｌｅ－ｌｅｓｓ Ｉｎｊｅｃｔｏｒｓ、ＥｙｅＣＥＴ、Ｇｅｍｉｎｉ Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ Ｃａｐｓｕｌｅ、およびＩＶＭＥＤから選択される。好ましくは、上記眼インプラント技術は、ＡｐｉｄＣＯＲ、ＢｉｏＳｅｉｚｅｒ－ＰｒｏＤｅｘ、Ｖｉｔｒａｓｅｒｔ、Ｒｅｔｉｓｅｒｔ、Ｉｌｕｖｉｅｎ、Ｉ－Ｖａｔｉｏｎ、Ｎａｎｏｐｏｒｏｕｓ Ｓｉｌｉｃｏｎ、Ｏｚｕｒｄｅｘ／Ｎｏｖａｄｕｒ、ＯｃｕＬｉｅｆ、Ｐｏｒｔ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰＤＳ）、ＰＥＡ Ｉｍｐｌａｎｔ、ＰＥＧ－ＰＬＡ Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ、ＰＲＩＮＴ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｑ－Ｓｐｈｅｒａ、ＳＫＳ Ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ、Ｖｅｒｉｓｏｍｅ、Ｃａｐｓｕｌｅ Ｒｉｎｇ Ｄｅｖｉｃｅ、またはＭｉｃｒｏＰｕｍｐである。
【0020】
いくつかの実施形態において、上記眼疾患は、緑内障である。いくつかの実施形態において緑内障を処置することにおける治療有効性は、眼内圧の降下、または視神経損傷／網膜神経線維層菲薄化の速度の低減を、視神経損傷を軽減または防止するために十分な量で検出することによって決定される。さらなる実施形態において、上記処置の治療有効性は、視神経乳頭血流の改善によって決定される。他の実施形態において、緑内障を処置することの治療有効性は、網膜、視神経乳頭または組織灌流の改善を測定することによって決定される。
【0021】
緑内障の処置に関するいくつかの実施形態において、そのレジメンは、治療上有効な量の眼内圧（ＩＯＰ）降下剤もしくは神経保護剤、または前述のうちのいずれかの薬学的に受容可能な塩の追加をさらに包含する。いくつかの実施形態において、上記ＩＯＰ降下剤は、プロスタグランジン（例えば、ラタノプロストまたはトラボプロスト）、β遮断薬（例えば、チモロールまたはベタキソロール）、αアドレナリン作動薬（例えば、ブリモニジン、アプラクロニジン）、炭酸脱水酵素インヒビター（例えば、ドルゾラミドまたはブリンゾラミド）、Ｒｈｏキナーゼインヒビター（例えば、ネタルスジル）および縮瞳薬またはコリン作動性薬剤（例えば、ピロカルピン）からなる群より選択される。いくつかの実施形態において、上記神経保護剤は、抗アポトーシス薬剤（例えば、カスパーゼ－２インヒビター）および神経栄養因子（例えば、毛様体神経栄養因子）からなる群より選択される。
【0022】
いくつかの実施形態において、上記眼疾患は、糖尿病網膜症（ＤＲ）である。さらなる実施形態において、ＤＲを処置することの治療有効性は、網膜新生血管形成、糖尿病網膜症重篤度スコアおよび糖尿病によって誘導される神経変性の減少によって決定される。他の実施形態において、ＤＲを処置することの治療有効性は、網膜または脈絡膜灌流の改善を測定することによって決定される。
【0023】
いくつかの実施形態において、上記疾患は、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）である。さらなる実施形態において、ＲＶＯを処置することの治療有効性は、組織灌流の改善、炎症の低減、または前述の組み合わせを測定することによって決定される。
【0024】
いくつかの実施形態において、上記疾患は、ＮＡＩＯＮである。さらなる実施形態において、ＮＡＩＯＮを処置することの治療有効性は、組織灌流の改善、炎症の低減、または前述の組み合わせを測定することによって決定される。
【0025】
いくつかの実施形態において、上記疾患は、ＡＩＯＮである。さらなる実施形態において、ＡＩＯＮを処置することの治療有効性は、組織灌流の改善、炎症の低減、または前述の組み合わせを測定することによって決定される。
【0026】
いくつかの実施形態において、上記眼疾患は、未熟児網膜症（ＲＯＰ）である。さらなる実施形態において、ＲＯＰを処置することの治療有効性は、網膜灌流の改善および異常な新生血管形成の低減を測定することによって決定される。
【0027】
いくつかの実施形態において、上記エンドセリンレセプターアンタゴニストまたはその薬学的に受容可能な塩は、エドネンタンである。他の実施形態において、上記エンドセリンレセプターアンタゴニストまたはその薬学的に受容可能な塩は、Ａ－１８２０８６である。いずれにしても、上記アンタゴニストまたはその薬学的に受容可能な塩は、結晶形態または非晶質形態にあり得る。その各々は、薬理学的に受容可能な使用のためのものであり得る。
【0028】
いくつかの実施形態において、上記エンドセリンレセプターアンタゴニストは、約１μｇ～約４ｍｇの間（例えば、約１μｇ～約１０μｇの間、約１０μｇ～約１００μｇの間、約１００μｇ～約５００μｇの間、および約５００μｇ～約４ｍｇの間）の投与量で投与される。いくつかの実施形態において、上記エンドセリンレセプターアンタゴニストは、約０．１μｇ～約１０μｇの投与量で投与される。いくつかの実施形態において、上記エンドセリンレセプターアンタゴニストは、約１μｇ～約１０μｇの投与量で投与される。さらなる実施形態において、上記エンドセリンレセプターアンタゴニストは、約１０μｇ～約１００μｇの投与量で投与される。
【0029】
さらなる実施形態において、上記エンドセリンレセプターアンタゴニストは、約１００μｇ～約５００μｇの間、および約５００μｇ～約４ｍｇの間の投与量で投与される。
【0030】
本発明の技術のさらなる特徴および利点は、以下の説明に示され、その説明から部分的に明らかであるか、または本発明の技術の実施によって学習され得る。本発明の技術の利点は、書面による説明の中で特に指摘される構造およびその実施形態によって実現されかつ獲得される。
【0031】
本開示の１またはこれより多くの実施形態の詳細は、以下の説明の中で示される。本開示の他の特徴、目的および利点は、以下の図面、説明および特許請求の範囲から明らかである。
【図面の簡単な説明】
【0032】
【0033】
【0034】
【0035】
【0036】
【図5-1】図５Ａは、ビヒクル単独（コントロール群）またはエドネンタンの局所投与後の眼内圧（ＩＯＰ）が上昇したラット（コントロールについてはｎ＝４匹のラット／群、エドネンタンについてはｎ＝６匹のラット／群）の網膜周辺部における網膜神経節細胞（ＲＧＣ）数の比較を示す。図５Ｂは、ビヒクル単独（コントロール群）またはエドネンタンの局所投与後の眼内圧（ＩＯＰ）上昇ラット（コントロールについてはｎ＝４匹のラット／群、エドネンタンについてはｎ＝５匹のラット／群）におけるパターン網膜電図（ｐａｔｔｅｒｎ ｅｌｅｃｔｒｏｒｅｔｉｎｏｇｒａｍ）（ＰＥＲＧ）変化の比較を示す。図５Ａおよび図５Ｂは、エドネンタンでの処置後のＲＧＣ喪失の防止およびＲＧＣ機能の維持を明らかにする。
【0037】
【0038】
【図6-1】図６Ａは、ビヒクル単独（コントロール群）またはＡ－１８２０８６の局所投与後の眼内圧（ＩＯＰ）が上昇したラット（コントロールについてはｎ＝４匹のラット／群、Ａ－１８２０８６についてはｎ＝６匹のラット／群）の網膜周辺部における網膜神経節細胞（ＲＧＣ）数の比較を示す。図６Ｂは、ビヒクル単独（コントロール群）またはＡ－１８２０８６の局所投与後の眼内圧（ＩＯＰ）が上昇したラット（（コントロールについてはｎ＝４匹のラット／群、Ａ－１８２０８６についてはｎ＝５匹のラット／群）におけるパターン網膜電図（ＰＥＲＧ）変化の比較を示す。図６Ａおよび図６Ｂは、Ａ－１８２０８６での処置後のＲＧＣ喪失の防止およびＲＧＣ機能の維持を明らかにする。
【0039】
【0040】
【図7-1】図７Ａ～７Ｌは、レーザー誘導性緑内障モデルにおける視神経乳頭（ＯＮＨ）血流の指数として、全体の平均ブレ率（ｇｌｏｂａｌ ａｖｅｒａｇｅ ｍｅａｎ ｂｌｕｒ ｒａｔｅ）（ＭＢＲ）またはベースラインからの経時的なＭＢＲ変化において、３匹の非ヒト霊長類の実験的緑内障の眼および対側の健常な眼（コントロール）の比較に関するレーザースペックルフローグラフ（ＬＳＦＧ）を示す。図７Ｍは、３匹の非ヒト霊長類からの集合結果を示す。図７Ｎは、種々の選択された時点での、上記非ヒト霊長類のうちの１匹のＬＳＦＧスキャンを示す。
【図7-2】同上。
【図7-3】同上。
【図7-4】同上。
【図7-5】同上。
【図7-6】同上。
【図7-7】同上。
【図7-8】同上。
【図7-9】同上。
【図7-10】同上。
【図7-11】同上。
【図7-12】同上。
【図7-13】同上。
【図7-14】同上。
【図7-15】同上。
【0041】
【0042】
【図9-1】図９Ａ、図９Ｂ、図９Ｃおよび図９Ｄは、硝子体内送達したエドネンタンの、ウサギの血漿、網膜、虹彩－毛様体（ＩＣＢ）、網膜色素上皮（ＲＰＥ）／脈絡膜、硝子体液または眼房水における薬物動態プロフィールを示す（図９Ａ、図９Ｂ、図９Ｃおよび図９Ｄ）－エドネンタンに関するより長いｔ１／２を明らかにする。
【図9-2】同上。
【図9-3】同上。
【図9-4】同上。
【0043】
【発明を実施するための形態】
【0044】
詳細な説明
本発明は、エドネンタンおよびＡ－１８２０８６が、眼疾患（緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）が挙げられるが、これらに限定されない）を防止する、処置する、または別の方法で改善するために使用され得るという発見から生じる。本発明は、以下にさらに記載される。
本発明は、エドネンタンおよびＡ－１８２０８６が、眼疾患（緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）が挙げられるが、これらに限定されない）を防止する、処置する、または別の方法で改善するために使用され得るという発見から生じる。本発明は、以下にさらに記載される。
【0045】
エンドセリンレセプターアンタゴニスト
本発明の方法は、眼の組織と（局所的または眼内での）治療上有効な量のエドネンタンおよびＡ－１８２０８６、またはこれらの薬学的に受容可能な塩との接触または投与を包含する。上記アンタゴニストは、以下で記載されるように、具体的にはエドネンタンおよびＡ－１８２０８６である。
本発明の方法は、眼の組織と（局所的または眼内での）治療上有効な量のエドネンタンおよびＡ－１８２０８６、またはこれらの薬学的に受容可能な塩との接触または投与を包含する。上記アンタゴニストは、以下で記載されるように、具体的にはエドネンタンおよびＡ－１８２０８６である。
【0046】
エドネンタンを調製する方法は、当業者に周知である。適切な方法は、例えば、米国特許第６，０４３，２６５号に開示される。エドネンタンは、Ｎ－［［２’－［［（４，５－ジメチル－３－イソオキサゾリル）アミノ］スルホニル］－４－（２－オキサゾリル）［１，１’－ビフェニル］－２－イル］メチル］－Ｎ，３，３－トリメチルブタンアミドという化学名（分子量５３６．６ｇ／ｍｏｌ）および以下の構造：
を有する。
【化1】
【0047】
Ａ－１８２０８６を調製する方法は、当業者に周知である。適切な方法は、例えば、米国特許第６，１６２，９２７号に開示される。Ａ－１８２０８６は、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）－４－（２Ｈ－１，３－ベンゾジオキソール－５－イル）－２－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－１－［２－（Ｎ－プロピルペンタン－１－スルホンアミド）エチル］ピロリジン－３－カルボン酸という化学名（分子量５７８．７ｇ／ｍｏｌ）および以下の構造：
を有する。
【化2】
【0048】
眼疾患
本開示の方法は、緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）から選択される眼疾患（これらは以下に記載される）の処置および改善において、上記のエドネンタンおよびＡ－１８２０８６の使用を包含する。
本開示の方法は、緑内障、糖尿病網膜症（ＤＲ）、網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）、非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）、動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、および未熟児網膜症（ＲＯＰ）から選択される眼疾患（これらは以下に記載される）の処置および改善において、上記のエドネンタンおよびＡ－１８２０８６の使用を包含する。
【0049】
緑内障
本明細書で記載されるエドネンタンまたはＡ－１８２０８６を使用する緑内障の処置において、「治療上有効な量」とは、標準ケアによって達成され得るもの（眼内圧（ＩＯＰ）の降下）を超える、網膜血流（ＲＢＦ）の改善を評価することによって決定され得る。緑内障兆候に関して、健常ウサギ眼モデルにおける血流の改善は、ヒトにおける薬力学的応答（ＰＤ）の予測因子として使用され得る。ウサギは、ウサギおよびヒトの眼の解剖学的および機能的類似性に起因して、ヒトの眼疾患を目標とする化合物に関して眼のＰＫ／ＰＤ関係を評価するために一般に使用される。以前は、ＥＴ－１をウサギの眼に硝子体内投与することで、顕著な血管収縮および視神経損傷を誘導することが示された（Ｓａｓａｏｋａ Ｍ．ら， Ｅｘｐ Ｅｙｅ Ｒｅｓ ２００６； Ｓｕｇｉｙａｍａ Ｔ．ら， Ａｒｃｈ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２００９）。このモデルにおける有効性は、ある特定の濃度での硝子体内ＥＴ－１投与によって誘導される灌流障害の逆転に対する基準にされる。例えば、上記有効性は、ヒトの緑内障患者の血漿および眼房水において観察されるレベルに等しい濃度で達成され得る（Ｌｉ Ｓ．ら， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ ２０１６）。
本明細書で記載されるエドネンタンまたはＡ－１８２０８６を使用する緑内障の処置において、「治療上有効な量」とは、標準ケアによって達成され得るもの（眼内圧（ＩＯＰ）の降下）を超える、網膜血流（ＲＢＦ）の改善を評価することによって決定され得る。緑内障兆候に関して、健常ウサギ眼モデルにおける血流の改善は、ヒトにおける薬力学的応答（ＰＤ）の予測因子として使用され得る。ウサギは、ウサギおよびヒトの眼の解剖学的および機能的類似性に起因して、ヒトの眼疾患を目標とする化合物に関して眼のＰＫ／ＰＤ関係を評価するために一般に使用される。以前は、ＥＴ－１をウサギの眼に硝子体内投与することで、顕著な血管収縮および視神経損傷を誘導することが示された（Ｓａｓａｏｋａ Ｍ．ら， Ｅｘｐ Ｅｙｅ Ｒｅｓ ２００６； Ｓｕｇｉｙａｍａ Ｔ．ら， Ａｒｃｈ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２００９）。このモデルにおける有効性は、ある特定の濃度での硝子体内ＥＴ－１投与によって誘導される灌流障害の逆転に対する基準にされる。例えば、上記有効性は、ヒトの緑内障患者の血漿および眼房水において観察されるレベルに等しい濃度で達成され得る（Ｌｉ Ｓ．ら， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ ２０１６）。
【0050】
関連する動物の緑内障モデルの他の例は、ＩＯＰ上昇のＭｏｒｒｉｓｏｎのラットモデルおよびレーザー誘導性非ヒト霊長類（ＮＨＰ）緑内障モデルである。Ｍｏｒｒｉｓｏｎのラットモデルにおける緑内障は、強膜上静脈を介する高張性食塩水投与を経てＩＯＰの持続性の上昇によって誘導される。上記レーザー誘導性ＮＨＰ緑内障モデルでは、ＩＯＰの持続性の上昇の後に、視神経乳頭血流は低減することが示された（Ｗａｎｇ Ｌ．ら， Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ ２０１２）。さらに、視神経乳頭血流の低減は、視神経における長期の構造的変化と相関することが示されている（Ｃｕｌｌ Ｇ．ら， Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ ２０１３）。
【0051】
上記の緑内障モデルにおける有効性は、ＩＯＰの降下、ベースラインからの視神経乳頭もしくは網膜血流の改善、フラットマウント上での構造的神経変性変化（例えば、光干渉断層撮影法（ＯＣＴ）または網膜神経節細胞数によって測定される網膜神経線維層の厚さ）の進行の防止または緩慢化、ならびにエドネンタンまたはＡ－１８２０８６での処置後の網膜電図（ＥＲＧ）またはコントラスト感度のような機能的変化として定義される。
【0052】
網膜血流に対するエドネンタンまたはＡ－１８２０８６の効果が、ポアズイユの法則における血管半径（ｒ）によって評価され得ると考えられる。エンドセリンアンタゴニストによる（ｒ）の増大は、ＩＯＰ降下を経て灌流圧の増大によって達成され得るものより顕著な血流の増大を誘導する：
血流＝（灌流圧×πｒ４）／（８ηｌ）
ここで
ｌ： 血管の長さ
ｒ： 血管の半径
η： 血液の粘性
灌流圧： 平均動脈圧－ＩＯＰ
さらに、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６は、網膜／視神経乳頭組織灌流における改善とは独立した機序を通じて、ＩＯＰを降下させ得るおよび／またはＲＧＣ死滅を防止し得る。よって、ある特定の特異的エンドセリンレセプターアンタゴニストを使用することによって、上記のパラメーターのうちの１つ（ｒ）またはより多くの（ＩＯＰ）が、ＲＢＦを改善するように変化させられ得、よって、緑内障を処置することにおける治療有効性を達成する。
血流＝（灌流圧×πｒ４）／（８ηｌ）
ここで
ｌ： 血管の長さ
ｒ： 血管の半径
η： 血液の粘性
灌流圧： 平均動脈圧－ＩＯＰ
さらに、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６は、網膜／視神経乳頭組織灌流における改善とは独立した機序を通じて、ＩＯＰを降下させ得るおよび／またはＲＧＣ死滅を防止し得る。よって、ある特定の特異的エンドセリンレセプターアンタゴニストを使用することによって、上記のパラメーターのうちの１つ（ｒ）またはより多くの（ＩＯＰ）が、ＲＢＦを改善するように変化させられ得、よって、緑内障を処置することにおける治療有効性を達成する。
【0053】
いくつかの実施形態において、上記緑内障患者は、彼らが診断され次第、処置が開始される。いくつかの実施形態において、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６は、３～１２ヶ月ごと（例えば、３～６ヶ月ごとまたは４～６ヶ月ごと）の頻度で硝子体内、局所、脈絡膜上、またはインプラント送達プラットフォームを使用して眼の後ろ側に局所投与される。
【0054】
糖尿病網膜症（ＤＲ）
糖尿病は、微小血管障害性（網膜症、ニューロパチーおよび糖尿病性腎症）および大血管障害性（ｍａｃｒｏａｎｇｉｏｐａｔｈｉｃ）（心血管疾患）として分類される重篤な後期合併症を引きおこし得る。糖尿病網膜症は、網膜の小血管およびニューロンに対する損傷の結果である。糖尿病網膜症をもたらす最も早い変化としては、網膜血流の低減と関連した網膜動脈の狭窄；網膜内層のニューロンの機能障害、続いて、後のステージでは、視覚機能の微妙な変化と関連する網膜外層の機能の変化；血液中の多くの物質（毒素および免疫細胞が挙げられる）から網膜を防御する血液網膜関門の機能障害が挙げられ、網膜神経網（ｒｅｔｉｎａｌ ｎｅｕｒｏｐｉｌｅ）への血液成分の漏出をもたらす。後に、網膜血管の基底膜は肥厚化し、毛細管は変性して細胞、特にペリサイトおよび血管平滑筋細胞を失う。これは、血流の喪失および進行性の虚血、ならびに毛細管壁からはみ出したバルーン様構造（これは、炎症性細胞を動員する）として現れる顕微鏡的動脈瘤をもたらし；そして網膜のニューロンおよびグリア細胞の進行した機能障害および変性をもたらす。
糖尿病は、微小血管障害性（網膜症、ニューロパチーおよび糖尿病性腎症）および大血管障害性（ｍａｃｒｏａｎｇｉｏｐａｔｈｉｃ）（心血管疾患）として分類される重篤な後期合併症を引きおこし得る。糖尿病網膜症は、網膜の小血管およびニューロンに対する損傷の結果である。糖尿病網膜症をもたらす最も早い変化としては、網膜血流の低減と関連した網膜動脈の狭窄；網膜内層のニューロンの機能障害、続いて、後のステージでは、視覚機能の微妙な変化と関連する網膜外層の機能の変化；血液中の多くの物質（毒素および免疫細胞が挙げられる）から網膜を防御する血液網膜関門の機能障害が挙げられ、網膜神経網（ｒｅｔｉｎａｌ ｎｅｕｒｏｐｉｌｅ）への血液成分の漏出をもたらす。後に、網膜血管の基底膜は肥厚化し、毛細管は変性して細胞、特にペリサイトおよび血管平滑筋細胞を失う。これは、血流の喪失および進行性の虚血、ならびに毛細管壁からはみ出したバルーン様構造（これは、炎症性細胞を動員する）として現れる顕微鏡的動脈瘤をもたらし；そして網膜のニューロンおよびグリア細胞の進行した機能障害および変性をもたらす。
【0055】
ＤＲにおいて観察される虚血およびオキシダント傷害（ｏｘｉｄａｎｔ ｉｎｊｕｒｙ）は、血流を損ない、本発明者らが発見した組織虚血は、エドネンタンおよびＡ－１８２０８６によって逆転され得る。ＤＲ兆候に関しては、網膜灌流の改善は、低酸素症を低減し、血管増殖性変化、新生血管形成および／または黄斑浮腫合併症を遅らせるという結果的な利益とともに、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）アップレギュレーションを抑制することが理解される。
【0056】
ＤＲにおいて観察される虚血性網膜症変化の代理モデルとして、未熟児網膜症（ＲＯＰ）の前臨床マウスモデルが使用され得る。上記マウスにおける酸素誘導性網膜症は、ＲＯＰおよび他の血管病理（ＤＲが挙げられる）の網膜新生血管形成に関する病因および治療介入を試験するために適切な、再現性がありかつ定量可能な増殖性網膜新生血管形成モデルである。上記モデルは、以前に記載されるように、１週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスを７５％酸素に５日間、次いで、室内気へと曝すことによって誘導される（Ｓｍｉｔｈ ＬＥＨら， Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ １９９４）。ＲＯＰのこの前臨床モデルにおける有効性は、網膜低酸素症および新生血管形成を試験することによって評価され得る。ＤＲにおける現在の標準ケアは、疾患の進行した血管合併症に対処するのみの抗ＶＥＧＦ治療を含む。いくつかの実施形態において、ＤＲを有する患者は、上記疾患の非増殖性の段階の間にこの処置が着手される。いくつかの実施形態において、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６のいずれかが、３～１２ヶ月ごと（例えば、３～６ヶ月ごとまたは４～６ヶ月ごと）の頻度で、硝子体内、局所、脈絡膜上、またはインプラント送達プラットフォームを使用して眼の後ろ側に局所投与される。
【0057】
網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）
網膜の血管障害である網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）は現在、黄斑浮腫を引きおこす増殖因子を阻害するための抗ＶＥＧＦ薬物および浮腫をもたらす炎症性の構成要素と戦うためのコルチコステロイドの硝子体内注射で処置される。組織灌流を改善し、全身の免疫抑制の不要な影響および／またはステロイドの局所的有害効果を回避しながら炎症を低減することによって、ＲＶＯを処置するためにエドネンタンおよびＡ－１８２０８６治療を使用することは、非常に望ましい。
網膜の血管障害である網膜静脈閉塞症（ＲＶＯ）は現在、黄斑浮腫を引きおこす増殖因子を阻害するための抗ＶＥＧＦ薬物および浮腫をもたらす炎症性の構成要素と戦うためのコルチコステロイドの硝子体内注射で処置される。組織灌流を改善し、全身の免疫抑制の不要な影響および／またはステロイドの局所的有害効果を回避しながら炎症を低減することによって、ＲＶＯを処置するためにエドネンタンおよびＡ－１８２０８６治療を使用することは、非常に望ましい。
【0058】
ＲＶＯは現在、硝子体内ステロイドおよび抗ＶＥＧＦ剤で処置されている。既存の血管の灌流を改善することは、黄斑浮腫の程度ならびにＶＥＧＦアップレギュレーションおよびＲＶＯとして症状発現する下流の不適応の変化を低減する。有効性を試験するために、虚血性網膜症の前臨床マウスモデルが使用され得る。上記マウスにおける酸素誘導性網膜症は、多くの虚血性網膜症（ＲＶＯが挙げられる）における網膜新生血管形成に関する病因および治療介入を試験するために適切な、再現性がありかつ定量可能な増殖性網膜新生血管形成モデルである。上記モデルは、以前に記載されるように、１週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスを７５％酸素に５日間、次いで、室内気へと曝すことによって誘導される（Ｓｍｉｔｈ ＬＥＨら， Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ １９９４）。虚血性網膜症のこの前臨床モデルにおける有効性は、網膜低酸素症および新生血管形成を試験することによって評価され得る。本明細書で記載される「治療上有効な量の」エドネンタンまたはＡ－１８２０８６は、組織灌流を改善し、局所的ステロイドの不必要な効果を回避しながら、ＥＴ－１によって媒介される炎症を低減することによる、現在の標準ケアに対する追加であり得る。ＲＶＯの処置のいくつかの実施形態において、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６は、硝子体内、局所、脈絡膜上、またはインプラント送達プラットフォームを使用して眼の後ろ側に局所投与される。投与頻度は、患者の疾患経過および治療への応答に基づいて変動する。
【0059】
非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）
非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）において、視神経の前部に供給する小血管への血流の妨害が存在する。ＮＡＩＯＮにおける視力喪失は、疼痛がなく、急速であり、通常は恒久的である。ＮＡＩＯＮのリスク因子としては、アテローム性動脈硬化症（これは、視神経に供給する血管を通る血流を損なうので）および「絞扼された（ｔｉｇｈｔ）」視神経を含む。「リスクのある乳頭（ｄｉｓｃ ａｔ ｒｉｓｋ）」ともいわれる、小さな眼杯を有するかまたは眼杯のない視神経は、眼に入る場合に、強膜を通過する「絞扼された」経路になる。強膜を通過するこの絞扼された経路は、視神経に供給する小血管にさらなる圧力を課すと考えられる。アテローム性動脈硬化症は、これらの小血管の外径の増大を（および内径の減少を）引きおこすことから、血管が広がる余地がない。なぜならそれらは、「絞扼された」視神経によって拘束されるからである。このプロセスは最終的に、視神経への適切な血流の喪失をもたらし、虚血性視神経症が後に起こる。ＮＡＩＯＮを処置しようとする試みは、視神経に対する機械的圧力およびその支持する血管系を解放するために、放射状神経切開術（ｒａｄｉａｌ ｎｅｕｒｏｔｏｍｙ）を含んだ。この手順は、眼内手術のリスクの全てを有し、実施するのは困難である。穿孔される領域は、周囲の構造と同様に極めて繊細である。これらの構造に付帯する損傷は、希なことではない。
非動脈炎性前部虚血性視神経症（ＮＡＩＯＮ）において、視神経の前部に供給する小血管への血流の妨害が存在する。ＮＡＩＯＮにおける視力喪失は、疼痛がなく、急速であり、通常は恒久的である。ＮＡＩＯＮのリスク因子としては、アテローム性動脈硬化症（これは、視神経に供給する血管を通る血流を損なうので）および「絞扼された（ｔｉｇｈｔ）」視神経を含む。「リスクのある乳頭（ｄｉｓｃ ａｔ ｒｉｓｋ）」ともいわれる、小さな眼杯を有するかまたは眼杯のない視神経は、眼に入る場合に、強膜を通過する「絞扼された」経路になる。強膜を通過するこの絞扼された経路は、視神経に供給する小血管にさらなる圧力を課すと考えられる。アテローム性動脈硬化症は、これらの小血管の外径の増大を（および内径の減少を）引きおこすことから、血管が広がる余地がない。なぜならそれらは、「絞扼された」視神経によって拘束されるからである。このプロセスは最終的に、視神経への適切な血流の喪失をもたらし、虚血性視神経症が後に起こる。ＮＡＩＯＮを処置しようとする試みは、視神経に対する機械的圧力およびその支持する血管系を解放するために、放射状神経切開術（ｒａｄｉａｌ ｎｅｕｒｏｔｏｍｙ）を含んだ。この手順は、眼内手術のリスクの全てを有し、実施するのは困難である。穿孔される領域は、周囲の構造と同様に極めて繊細である。これらの構造に付帯する損傷は、希なことではない。
【0060】
ＮＡＩＯＮに関しては、エンドセリン拮抗作用とともに有効性を試験する関連のある前臨床モデルは存在しない。さらに、非動脈性前部虚血性視神経症に関して承認された治療は存在しない。ＮＡＩＯＮの処置に関しては、「治療上有効な」量のエンドセリンアンタゴニストは、視神経の灌流を増大させることによって、視力および／または視野の臨床上意味のある改善を引きおこすものである。この前臨床エンドポイントの予測因子として、レーザーフローメーターまたは光干渉断層撮影－Ａ（ＯＣＴ－Ａ）によって評価される視神経乳頭灌流の改善、および（ＯＣＴ）によって決定される網膜神経線維層（ＲＮＦＬ）厚の解剖学的変化が、使用される。いくつかの実施形態において、薬物治療は、患者の疾患経過および治療への応答に基づいて、必要とされる場合に４～６週間ごとの頻度で硝子体内、局所、脈絡膜上、またはインプラント送達プラットフォームを使用して眼の後ろ側に局所投与される。例えば、上記薬物治療は、患者の疾患経過および治療への応答に基づいて、必要とされる場合に５週間ごとの頻度で、懸濁物の硝子体内注射を使用して眼の後ろ側に局所投与される。
【0061】
動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）
動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）は、５０歳を超える高齢患者において主に起こり、その後各１０年間で発生率が増大する急性の、しばしば有痛性の視神経症であり、視覚の恒久的な喪失を引きおこし得る。虚血は、神経線維の構造的密集と関連して、視神経の頭部で起こり、灌流を損ない、視神経乳頭浮腫をもたらす。白色人種がより高い割合で罹患することを証拠が示していることから、上記疾患には遺伝的構成要素があると考えられるが、多くの異なる人種および民族においても報告されている。
動脈炎性前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）は、５０歳を超える高齢患者において主に起こり、その後各１０年間で発生率が増大する急性の、しばしば有痛性の視神経症であり、視覚の恒久的な喪失を引きおこし得る。虚血は、神経線維の構造的密集と関連して、視神経の頭部で起こり、灌流を損ない、視神経乳頭浮腫をもたらす。白色人種がより高い割合で罹患することを証拠が示していることから、上記疾患には遺伝的構成要素があると考えられるが、多くの異なる人種および民族においても報告されている。
【0062】
症状発現は、視力の低下（代表的には、重篤： 患者のうちの６０％超において＜２０／２００）、視野欠損（水平半盲が最も一般的である）または両方が付随する片側の視覚喪失の急激な発生を含む。ＡＩＯＮに関しては、エンドセリン拮抗作用とともに有効性を試験する関連のある前臨床モデルは存在しない。さらに、非動脈性前部虚血性視神経症に関して承認された治療は存在しない；しかし、ステロイドは、大部分の患者において旧来から使用されている。処置がなければ、ＧＣＡ患者のうちの５４～９５％において（１６）、代表的には、４ヶ月以内に（１０）、視覚喪失が起こる。コルチコステロイド治療を用いると、このような減退の率は、概算１３％へと低減される（１６）。処置を受けた罹患した眼の視力回復は、１５～３４％ 改善率で不十分であり、これは、静脈内治療でより高い。視力の増悪は、治療にもかかわらず、９～１７％において報告されている。両眼の視力喪失は起こり得る；しかし、大部分の症例は、それが、ある患者が、最初の眼の視力喪失に気づかない場合に頻繁であることが示されている。この両側が関わっている発生率は、コルチコステロイド治療をどの程度積極的に利用するかと同様に、タイミングに大きく関わる。しかし、処置されないまま放置されれば、両側の視力喪失は、症例のうちの５０％までで、視神経虚血、網膜虚血もしくは脈絡膜虚血のいずれかから急速に進行し得る。ＡＩＯＮの処置に関しては、エンドセリンアンタゴニストの「治療上有効な」量とは、視神経および網膜の灌流を改善することによって、ステロイドによって達成される視力の付加的な改善を引きおこすものである。視力および／または視野における改善の予測因子として、レーザーフローメーターまたはＯＣＴ－Ａによって評価される視神経乳頭灌流の改善、および光干渉断層撮影（ＯＣＴ）によって決定される網膜神経線維層（ＲＮＦＬ）厚の解剖学的変化が、使用される。いくつかの実施形態において、薬物治療は、患者の疾患経過および治療への応答に基づいて、必要とされる場合に４～６週間ごとの頻度で硝子体内、局所、脈絡膜上、またはインプラント送達プラットフォームを使用して眼の後ろ側に局所投与される。例えば、上記薬物治療は、患者の疾患経過および治療への応答に基づいて、必要とされる場合に５週間ごとの頻度で懸濁物の硝子体内注射を使用して眼の後ろ側に局所投与される。
【0063】
未熟児網膜症（ＲＯＰ）
未熟児網膜症（ＲＯＰ）は、早産児に影響を及ぼす網膜血管増殖性疾患である。ＲＯＰは、全世界で失明および視覚障害の主要な防止可能な原因であり続けている。周産期ケアの改善、中等度早産児（ｍｏｄｅｒａｔｅｌｙ ｐｒｅｔｅｒｍ ｉｎｆａｎｔ）の生存の改善、および酸素送達およびモニタリングに関する資源の制限に伴って、発展途上国では、より成熟した早産児が、重篤なＲＯＰを発生している。
未熟児網膜症（ＲＯＰ）は、早産児に影響を及ぼす網膜血管増殖性疾患である。ＲＯＰは、全世界で失明および視覚障害の主要な防止可能な原因であり続けている。周産期ケアの改善、中等度早産児（ｍｏｄｅｒａｔｅｌｙ ｐｒｅｔｅｒｍ ｉｎｆａｎｔ）の生存の改善、および酸素送達およびモニタリングに関する資源の制限に伴って、発展途上国では、より成熟した早産児が、重篤なＲＯＰを発生している。
【0064】
ＲＯＰの病態生理は、２つの段階によって特徴づけられる。第Ｉ段階のＲＯＰは、ＶＥＧＦおよびインスリン様増殖因子－１（ＩＧＦ－１）の顕著な減少に続発する出生直後に始まる血管閉塞（ｖａｓｏ－ｏｂｌｉｔｅｒａｔｉｏｎ）に起因する。第ＩＩ段階は、およそ３３週間の月経後年齢（ｐｏｓｔｍｅｎｓｔｒｕａｌ ａｇｅ）（ＰＭＡ）に始まる。この段階の間に、ＶＥＧＦレベルは、特に、網膜代謝の増大に伴う網膜低酸素症および酸素の要求が存在する場合に増大し、異常な血管増殖をもたらす。進行したステージのＲＯＰに関しては、無血管網膜のレーザーアブレーション、ＲＯＰ早期処置（ＥＴＲＯＰ）プロトコール、抗ＶＥＧＦ抗体（例えば、ベバシズマブ）の硝子体内注射および硝子体切除術は、中心視力を保護し、網膜剥離を防止するために使用される。長期の合併症（例えば、屈折異常（ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ ｅｒｒｏｒ）、ＲＯＰの再発および網膜剥離のリスク）は、思春期およびその後も眼科医による継続した追跡を必要とする。
ＲＯＰは、早産に続発する網膜血管の発達不全に起因する重篤な虚血によって誘導される。従って、本発明の一局面として、本発明者らは、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６での既存の血管の灌流の改善が、虚血の程度およびＶＥＧＦアップレギュレーション、およびＲＯＰとして症状発現する下流の不適応の変化を低減すると考える。有効性を試験するために、ＲＯＰの前臨床マウスモデルが使用され得る。上記マウスにおける酸素誘導性網膜症は、ＲＯＰにおける網膜新生血管形成に関する病因および治療介入を試験するために適切な、再現性がありかつ定量可能な増殖性網膜新生血管形成モデルである。上記モデルは、以前に記載されるように、１週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスを７５％酸素に５日間、次いで、室内気へと曝すことによって誘導される（Ｓｍｉｔｈ ＬＥＨら， Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ １９９４）。ＲＯＰのこの前臨床モデルにおける有効性は、網膜低酸素症および新生血管形成を試験することによって評価され得る。エドネンタンまたはＡ－１８２０８６の「治療上有効な量」は、本明細書で記載されるように、組織灌流を改善し、ＶＥＧＦによって誘導される病的な新生血管形成を低減することによる、現在の標準ケアに対する追加である。いくつかの実施形態において、上記薬物治療は、患者の疾患経過および治療への応答に基づいて、必要な場合に４～６週間ごとの頻度で、硝子体内、局所、脈絡膜上、またはインプラント送達プラットフォームを使用して眼の後ろ側に局所投与される。例えば、上記薬物治療は、患者の疾患経過および治療への応答に基づいて、必要な場合に５週間ごとの頻度で、硝子体内注射を使用して眼の後ろ側に局所投与される。
ＲＯＰは、早産に続発する網膜血管の発達不全に起因する重篤な虚血によって誘導される。従って、本発明の一局面として、本発明者らは、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６での既存の血管の灌流の改善が、虚血の程度およびＶＥＧＦアップレギュレーション、およびＲＯＰとして症状発現する下流の不適応の変化を低減すると考える。有効性を試験するために、ＲＯＰの前臨床マウスモデルが使用され得る。上記マウスにおける酸素誘導性網膜症は、ＲＯＰにおける網膜新生血管形成に関する病因および治療介入を試験するために適切な、再現性がありかつ定量可能な増殖性網膜新生血管形成モデルである。上記モデルは、以前に記載されるように、１週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスを７５％酸素に５日間、次いで、室内気へと曝すことによって誘導される（Ｓｍｉｔｈ ＬＥＨら， Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ １９９４）。ＲＯＰのこの前臨床モデルにおける有効性は、網膜低酸素症および新生血管形成を試験することによって評価され得る。エドネンタンまたはＡ－１８２０８６の「治療上有効な量」は、本明細書で記載されるように、組織灌流を改善し、ＶＥＧＦによって誘導される病的な新生血管形成を低減することによる、現在の標準ケアに対する追加である。いくつかの実施形態において、上記薬物治療は、患者の疾患経過および治療への応答に基づいて、必要な場合に４～６週間ごとの頻度で、硝子体内、局所、脈絡膜上、またはインプラント送達プラットフォームを使用して眼の後ろ側に局所投与される。例えば、上記薬物治療は、患者の疾患経過および治療への応答に基づいて、必要な場合に５週間ごとの頻度で、硝子体内注射を使用して眼の後ろ側に局所投与される。
【0065】
薬学的組成物
本明細書で記載されるいくつかの実施形態は、治療上有効な量の、エドネンタンおよびＡ－１８２０８６（本明細書で記載される）のうちの一方、またはその薬学的に受容可能な塩、および薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、賦形剤またはこれらの組み合わせを含み得る薬学的組成物に関する。このようなアンタゴニストまたはその薬学的に受容可能な塩は、結晶形態または非晶質形態にあり得る。これらの各々は、薬理学的に受容可能な使用のためのものであり得る。
本明細書で記載されるいくつかの実施形態は、治療上有効な量の、エドネンタンおよびＡ－１８２０８６（本明細書で記載される）のうちの一方、またはその薬学的に受容可能な塩、および薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、賦形剤またはこれらの組み合わせを含み得る薬学的組成物に関する。このようなアンタゴニストまたはその薬学的に受容可能な塩は、結晶形態または非晶質形態にあり得る。これらの各々は、薬理学的に受容可能な使用のためのものであり得る。
【0066】
用語「薬学的組成物」とは、本明細書で開示される一方または両方の化合物と、他の化学的構成要素（例えば、希釈剤またはキャリア）との混合物に言及する。上記薬学的組成物は、生物への上記化合物の投与を容易にする。薬学的組成物は一般に、特定の意図した投与経路に合わせて作られる。
【0067】
いくつかの薬学的組成物は、薬学的に受容可能な塩を調製することを要する。薬学的に受容可能な塩としては、本発明の化合物に存在する酸性のまたは塩基性の基の塩が挙げられる。薬学的に受容可能な酸付加塩としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩（ｇｅｎｔｉｓｉｎａｔｅ）、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩（ｇｌｕｃａｒｏｎａｔｅ）、サッカリン酸塩（ｓａｃｃｈａｒａｔｅ）、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩およびパモ酸塩（すなわち、１，１’－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエート））。本発明のある特定の化合物は、種々のアミノ酸と薬学的に受容可能な塩を形成し得る。適切な塩基塩としては、アルミニウム塩、カルシウム塩、リチウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩、およびジエタノールアミン塩が挙げられるが、これらに限定されない。薬学的に受容可能な塩に対する総説に関しては、Ｂｅｒｇｅら， ６６ Ｊ． ＰＨＡＲＭ． ＳＣＩ， １－１９ （１９７７）を参照のこと。
【0068】
用語「薬学的に受容可能な」は、その意図した使用にとって安全かつ有効であるキャリア、希釈剤、賦形剤、塩または組成物を定義し、所望の生物学的および薬理学的活性を有する。
【0069】
本明細書で使用される場合、「キャリア（ｃａｒｒｉｅｒ）」とは、細胞または組織への化合物の組み込みを促進する化合物をいう。例えば、限定なしに、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、被験体の細胞または組織への多くの有機化合物の取り込みを促進する一般に利用されるキャリアである。
【0070】
本明細書で使用される場合、「希釈剤」とは、薬理学的活性を欠くが、薬学的に必要であるかまたは所望され得る、薬学的組成物中の成分をいう。例えば、希釈剤は、製造および／または投与のためには質量が小さすぎる強力な薬物のかさを増大させるために使用され得る。それはまた、注射、摂取または吸入によって投与されるべき薬物の溶解のための液体でもあり得る。当該分野の希釈剤の一般的形態は、緩衝化水性溶液（例えば、ヒト血液の組成を模倣するリン酸緩衝化食塩水が挙げられるが、これらに限定されない）である。
【0071】
本明細書で使用される場合、「賦形剤」とは、限定なしに、かさ、粘稠性、安定性、結合能力、潤滑、崩壊能力などを組成物に提供するために薬学的組成物に添加される不活性物質をいう。「希釈剤」は、賦形剤の１タイプである。
【0072】
本明細書で記載される薬学的組成物は、それ自体が、またはそれらが他の活性成分（併用療法にあるように）と、またはキャリア、希釈剤、賦形剤もしくはこれらの組み合わせと混合される薬学的組成物において、ヒト患者に投与され得る。適切な製剤は、選択される投与経路に依存する。本明細書で記載される化合物の製剤化および投与のための技術は、当業者に公知である。
【0073】
本明細書で開示される薬学的組成物は、例えば、従来の混合、溶解、造粒、研和（ｌｅｖｉｇａｔｉｎｇ）、乳化、被包化または捕捉プロセスによって、それ自体公知の様式で製造され得る。例えば、Ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ， ｉｎ： Ｆｏｏｄ Ｐｏｗｄｅｒｓ， ２００５， １９９－２９９を参照のこと。さらに、活性成分は、その意図した目的を達成するために有効な量で含まれる。本明細書で開示される薬学的組み合わせにおいて使用される化合物は、薬学的に受容可能な塩として提供され得る。
【0074】
本発明の化合物または薬学的組成物を、局所的眼用製剤として、または眼の組織へと直接、上記化合物もしくは薬学的組成物の注射を介して、しばしば、デポーまたは徐放性製剤においていずれかで、局所的な様式で投与することは、好ましい。局所投与の様式は、製剤の硝子体内、脈絡膜上、眼球周囲、もしくは結膜下注射、またはインプラント技術もしくは局所適用の使用であり得る。例えば、上記化合物は、所望の薬理学的効果を持続させる化合物をゆっくりと放出するリポソーム調製物において投与される。あるいは、ポリビニルアルコールナノ粒子は、局所もしくは眼内適用のための徐放性製剤もしくは長期放出製剤を提供するために、周知の方法によって調製され得る。
【0075】
さらに、標的化薬物送達システムにおいて上記化合物が投与され得る。標的化薬物送達システムの例としては、ＡｐｉｄＣＯＲ、ＢｉｏＳｅｉｚｅｒ－ＰｒｏＤｅｘ、Ｖｉｔｒａｓｅｒｔ、Ｒｅｔｉｓｅｒｔ、Ｉｌｕｖｉｅｎ、Ｉ－Ｖａｔｉｏｎ、Ｎａｎｏｐｏｒｏｕｓ Ｓｉｌｉｃｏｎ、Ｏｚｕｒｄｅｘ／Ｎｏｖａｄｕｒ、ＯｃｕＬｉｅｆ、Ｐｏｒｔ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰＤＳ）、ＰＥＡ Ｉｍｐｌａｎｔ、ＰＥＧ－ＰＬＡ Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ、ＰＲＩＮＴ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｑ－Ｓｐｈｅｒａ、ＳＫＳ Ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ、Ｖｅｒｉｓｏｍｅ、Ｃａｐｓｕｌｅ Ｒｉｎｇ Ｄｅｖｉｃｅ、ＭｉｃｒｏＰｕｍｐ、Ｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅ Ｉｎｊｅｃｔｏｒ、Ｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅ／Ｎｅｅｄｌｅ－ｌｅｓｓ Ｉｎｊｅｃｔｏｒｓ、ＥｙｅＣＥＴ、Ｇｅｍｉｎｉ Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ Ｃａｐｓｕｌｅ、ＩＶＭＥＤ、Ｃｉｌｉａｒｙ Ｓｕｌｃｕｓ Ｒｉｎｇ、Ｅｐｉｓｃｌｅｒａｌ Ｅｘｏｐｌａｎｔ、Ｅｙｅ－Ｄ Ｉｍｐｌａｎｔ、およびＮａｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓが挙げられるが、これらに限定されない。
【0076】
いくつかの実施形態において、本開示の方法において使用され得る標的化薬物送達システムは、ＡｐｉｄＣＯＲ、ＢｉｏＳｅｉｚｅｒ－ＰｒｏＤｅｘ、Ｖｉｔｒａｓｅｒｔ、Ｒｅｔｉｓｅｒｔ、Ｉｌｕｖｉｅｎ、Ｉ－Ｖａｔｉｏｎ、Ｎａｎｏｐｏｒｏｕｓ Ｓｉｌｉｃｏｎ、Ｏｚｕｒｄｅｘ／Ｎｏｖａｄｕｒ、ＯｃｕＬｉｅｆ、Ｐｏｒｔ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰＤＳ）、ＰＥＡ Ｉｍｐｌａｎｔ、ＰＥＧ－ＰＬＡ Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ、ＰＲＩＮＴ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｑ－Ｓｐｈｅｒａ、ＳＫＳ Ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ、Ｖｅｒｉｓｏｍｅ、Ｃａｐｓｕｌｅ Ｒｉｎｇ Ｄｅｖｉｃｅ、ＭｉｃｒｏＰｕｍｐ、Ｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅ Ｉｎｊｅｃｔｏｒ、Ｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅ／Ｎｅｅｄｌｅ－ｌｅｓｓ Ｉｎｊｅｃｔｏｒｓ、ＥｙｅＣＥＴ、Ｇｅｍｉｎｉ Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ Ｃａｐｓｕｌｅ、およびＩＶＭＥＤから選択される。好ましくは、上記標的化薬物送達システムは、ＡｐｉｄＣＯＲ、ＢｉｏＳｅｉｚｅｒ－ＰｒｏＤｅｘ、Ｖｉｔｒａｓｅｒｔ、Ｒｅｔｉｓｅｒｔ、Ｉｌｕｖｉｅｎ、Ｉ－Ｖａｔｉｏｎ、Ｎａｎｏｐｏｒｏｕｓ Ｓｉｌｉｃｏｎ、Ｏｚｕｒｄｅｘ／Ｎｏｖａｄｕｒ、ＯｃｕＬｉｅｆ、Ｐｏｒｔ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰＤＳ）、ＰＥＡ Ｉｍｐｌａｎｔ、ＰＥＧ－ＰＬＡ Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ、ＰＲＩＮＴ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｑ－Ｓｐｈｅｒａ、ＳＫＳ Ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ、Ｖｅｒｉｓｏｍｅ、Ｃａｐｓｕｌｅ Ｒｉｎｇ Ｄｅｖｉｃｅ、またはＭｉｃｒｏＰｕｍｐである。
【0077】
いくつかの実施形態において、上記薬学的組成物は、本明細書で記載される１種もしくはこれより多くのエンドセリンレセプターアンタゴニスト、またはその薬学的に受容可能な塩の治療上有効な量を含む眼用調製物である。本明細書で使用される場合、「眼用調製物（ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）」とは、眼の外側表面（局所）に滴下される、内側に（眼内）もしくは眼に隣接して（眼球周囲）投与される、または眼用デバイスとともに使用されるように設計された特化された投与形態をいう。いくつかの実施形態において、上記眼用調製物は、液剤、懸濁物、または軟膏剤の形態にある。他の実施形態において、上記眼用調製物は、局所、または好ましくは、硝子体内注射、もしくはインプラントのための、ゲル、ゲル形成溶液、眼用挿入物、マイクロ／ナノ粒子調製物の形態にある。
【0078】
いくつかの実施形態において、上記眼用調製物は、保存剤を含む。適切な保存剤の例としては、カチオン性湿潤剤（例えば、塩化ベンザルコニウム）、有機性水銀（例えば、フェニル水銀硝酸塩、フェニル水銀酢酸塩）、有機酸もしくはそれらのエステル（例えば、ソルビン酸、ｐ－ヒドロキシ安息香酸のエステル（例えば、ヒドロキシ安息香酸メチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル）、およびアルコール代替物（例えば、クロロブタノール、フェニルエタノール）が挙げられるが、これらに限定されない。保存剤は、約０．００２％ ｗ／ｖ～約０．５％ ｗ／ｖ（例えば、０．０１～０．２５％ ｗ／ｖ）の範囲の量で上記眼用調製物に存在し得る。上記眼用調製物は、保存助剤（ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ ａｉｄ）をさらに含み得る。適切な保存助剤の例としては、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【0079】
いくつかの実施形態において、上記眼用調製物は、粘性または潤滑を付与する、活性成分を分解に対して安定化させる、活性成分もしくは不活性成分の溶解度を増大させる、張度を調節する、または溶媒として作用するために、１もしくはこれより多くのさらなる賦形剤または作用物質を含む。賦形剤または粘性もしくは潤滑を付与するための作用物質の例としては、ヒプロメロース、カルボマー９７４Ｐ、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ポリビニルアルコール、ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、Ｃａｒｂｏｐｏｌ ９４０、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポロキサマー、キシログルカン、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、ゲランガム、酢酸フタル酸セルロース、およびキサンタンガムが挙げられる。賦形剤、または安定化剤としての作用物質の例としては、亜硫酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、および硫酸ナトリウム／硫酸（これらは、抗酸化剤として作用し得る）が挙げられる。賦形剤、または可溶化剤としての作用物質の例としては、ポビドン（ｐｒｏｖｉｄｏｎｅ）、クレアチニン、ヒマシ油、およびシクロデキストリン（例えば、γ－シクロデキストリン）が挙げられるが、これらに限定されない。賦形剤、または張度を調節するための作用物質の例としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム二水和物（ｃａｌｃｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｄｅｈｙｄｒａｔｅ）、塩化マグネシウム六水和物、糖（例えば、スクロース、マルトース、デキストロースなど）、グリセリン、プロピレングリコール、マンニトール、アスコルビン酸、およびアセチルシステインが挙げられるが、これらに限定されない。
【0080】
いくつかの実施形態において、上記眼用調製物は、ｐＨを調節するための１またはこれより多くの緩衝物質を含む。ｐＨを調節するための緩衝物質の例としては、クエン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、ホウ酸、七水和物（ｈｅｐａｔａｈｙｄｒａｔｅ）、酢酸ナトリウム三水和物、クエン酸ナトリウム二水和物、ヒスチジン、およびリン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ）が挙げられるが、これらに限定されない。得られる組成物は、５．０～８．５（例えば、５．０～６．０、５．２～５．８、６．０～８．０、６．６～７．８、６．２～８．２、および６．２～７．５）のｐＨ値を有し得る。
【0081】
いくつかの実施形態において、上記眼用調製物は、１種またはこれより多くの界面活性剤を含む。界面活性剤の例としては、オレイン酸のソルビタンエーテルエステル（例えば、ポリソルベートまたはＴｗｅｅｎ（登録商標） ２０および８０）およびチロキサポールが挙げられる。
【0082】
ヒトの眼に１度に注射され得る容積は、硝子体内経路を経ておよそ５０～９０μＬ、網膜下経路を経て４５０μＬまで、脈絡膜上経路を介して２００μＬまで、および局所経路（例えば、点眼剤としての局所投与）を介して約４０～５０μＬである。これらの経路において使用される針は、代表的には、２７～３０Ｇのサイズである。その用量は、この容積、効力、目標有効性および各適応症に関する薬物動態プロフィールと適合するように製剤化され得る濃度に依存する。一般に、眼への注射は、片眼あたり１ヶ月に１回より多い頻度では投与されない。局所投与（例えば、点眼剤）に関しては、大部分の場合に、眼への投与頻度は、１日に１回より多くも２回より多くも超えない。
【0083】
いくつかの実施形態において、上記硝子体内製剤は、約１μｇ～約１ｍｇの範囲のエンドセリンレセプターアンタゴニストの用量を含む。第１の例示的な製剤は、約１μｇ～約１ｍｇの上記のエンドセリンレセプターアンタゴニスト、約１０ｍＭ ヒスチジンＨＣｌ、約１０％ α，α－トレハロース二水和物、および約０．０１％ ポリソルベート２０を含む。第２の例示的な製剤は、約１μｇ～約１ｍｇのエンドセリンレセプターアンタゴニスト、約１０ｍＭ リン酸ナトリウム、約４０ｍＭ 塩化ナトリウム、約０．０３％ ポリソルベート２０、および約５％ スクロースを含む。
【0084】
いくつかの実施形態において、上記硝子体内製剤は、約１０μｇ～約１００μｇの範囲のエンドセリンレセプターアンタゴニストの用量を含む。第１の例示的な製剤は、約１０μｇ～約１００μｇの上記のエンドセリンレセプターアンタゴニスト、約１０ｍＭ ヒスチジンＨＣｌ、約１０％ α，α－トレハロース二水和物、および約０．０１％ ポリソルベート２０を含む。第２の例示的な製剤は、約１０μｇ～約１００μｇのエンドセリンレセプターアンタゴニスト、約１０ｍＭ リン酸ナトリウム、約４０ｍＭ 塩化ナトリウム、約０．０３％ ポリソルベート２０、および約５％ スクロースを含む。
【0085】
さらなる実施形態において、上記硝子体内製剤は、約５００μｇ～約４ｍｇの範囲のエンドセリンレセプターアンタゴニストの用量を含む。第１の例示的な製剤は、約５００μｇ～約１ｍｇの上記のエンドセリンレセプターアンタゴニスト、約０．０１４％ リン酸カリウム一塩基性、０．０８％ リン酸ナトリウム二塩基性、０．７％ 塩化ナトリウム、０．０２％ ポリソルベート、および０．５％ カルボキシメチルセルロースナトリウムを含む。第２の例示的な製剤は、約５００μｇ～約１ｍｇの上記のエンドセリンレセプターアンタゴニスト、約０．０４％ リン酸ナトリウム一塩基性一水和物、約０．３％ リン酸ナトリウム二塩基性七水和物、０．６３％ 塩化ナトリウム、および約１％～約２．３％ ヒアルロン酸ナトリウムを含む。
【0086】
さらなる精緻化なしに、当業者は、上記の説明に基づいて、その完全な範囲にまで本発明を利用し得ると考えられる。従って、以下の具体例、すなわち、実施例１～８は、例証に過ぎず、如何様にしても本開示の残りの限定ではないと解釈されるべきである。
【実施例】
【0087】
実施例１： 化合物の物理化学的および生化学的特徴付け
以下の表１に提供されるのは、上記のエドネンタンおよびＡ－１８２０８６に関する物理化学的および生化学的データである。表１に示されるように、ｐＨ２では、Ａ－１８２０８６は、エドネンタンのものより優れた溶解度を有する。他方で、ｐＨ７では、エドネンタンは、Ａ－１８２０８６のものより優れた溶解度を有する。
表１． 化合物の物理化学的および生化学的特徴付け
ａ データは、非晶質形態のものである。
ｂ 表面電荷分布（主にＯおよびＮ）を考慮して適切に計算した。およそ９０またはこれ未満のＰＳＡを有する化合物は、血液脳関門を横断すると推測される。
以下の表１に提供されるのは、上記のエドネンタンおよびＡ－１８２０８６に関する物理化学的および生化学的データである。表１に示されるように、ｐＨ２では、Ａ－１８２０８６は、エドネンタンのものより優れた溶解度を有する。他方で、ｐＨ７では、エドネンタンは、Ａ－１８２０８６のものより優れた溶解度を有する。
表１． 化合物の物理化学的および生化学的特徴付け
【表1】
ｂ 表面電荷分布（主にＯおよびＮ）を考慮して適切に計算した。およそ９０またはこれ未満のＰＳＡを有する化合物は、血液脳関門を横断すると推測される。
【0088】
上記の表において、物理化学的データ（例えば、溶解度）を、当該分野で公知の標準的プロトコールに従って得た（例えば、Ｒｅｉｓら， Ｍｉｎｉ Ｒｅｖ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．， ２０１０， １０（１１）：１０７１－６； Ａｖｄｅｅｆら， Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｔｏｘｉｃｏｌ．， ２００５， １（２）：３２５－４２； Ｂｈａｒａｔｅら， Ｃｏｍｂ Ｃｈｅｍ Ｈｉｇｈ Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ Ｓｃｒｅｅｎ．， ２０１６， １９（６）：４６１－９；およびＪａｉｎら， Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｂｉｏｍｅｄ Ａｎａｌ．， ２０１３， ８６：１１－３５を参照のこと）；生化学的データ（すなわち、ＥＴＡ／ＥＴＢの効力）を、当該分野で公知のプロトコールに従って得た（例えば、Ｋｉｒｋｂｙら， Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， ２００８， １５３（６）：１１０５－１９；およびＭａｇｕｉｒｅら， Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， ２０１４， １７１（２４）：５５５５－７２を参照のこと）。
【0089】
実施例２： ウサギにおける硝子体内使用のためのエドネンタンの製剤化
適切な量のエドネンタンを、ニートのＰＥＧ４００中に溶解し、続いて、１５％ ＣＤ（ＨＰ－β－シクロデキストリン）溶液を添加する。ＰＥＧ４００の最終濃度は、２０％であると測定される。目標濃度は、エドネンタンの量に基づいて、５ｍｇ／ｍｌおよび０．５ｍｇ／ｍｌである。その得られた溶液を、０．２５ミクロンフィルターを使用して濾過する。
適切な量のエドネンタンを、ニートのＰＥＧ４００中に溶解し、続いて、１５％ ＣＤ（ＨＰ－β－シクロデキストリン）溶液を添加する。ＰＥＧ４００の最終濃度は、２０％であると測定される。目標濃度は、エドネンタンの量に基づいて、５ｍｇ／ｍｌおよび０．５ｍｇ／ｍｌである。その得られた溶液を、０．２５ミクロンフィルターを使用して濾過する。
【0090】
実施例３： ウサギモデルにおけるエドネンタンおよびＥＴ－１の効果
成体雄性Ｄｕｔｃｈ－ｂｅｌｔｅｄウサギに、０．５μｇのＥＴ－１の２０μｌ 硝子体内注射（ＩＶＴ）を与え、続いて、１０～１００μｇ エドネンタンの２０μｌ 硝子体内注射を、ＥＴ－１投与の３０分後に与えた。ＩＯＰ、光干渉断層撮影－血管造影検査（ＯＣＴ－Ａ）、およびフルオレセイン血管造影図（ＦＡ）を、ＥＴ－１およびエドネンタン投与後の所定の時点（３０分、４５分、６０分、および７５分）で行って、ＥＴ－１±エドネンタンによって誘導された網膜血流変化を評価した。図１に示されるように、ＥＴ－１投与は、４５分以内に網膜血管床において明らかな血管収縮を効果的に誘導した。図２は、ＥＴ－１の効果が、次いで、９０分以内（エドネンタン投与の６０分後）の１０μｇのエドネンタン投与で逆転されたことを示す。
成体雄性Ｄｕｔｃｈ－ｂｅｌｔｅｄウサギに、０．５μｇのＥＴ－１の２０μｌ 硝子体内注射（ＩＶＴ）を与え、続いて、１０～１００μｇ エドネンタンの２０μｌ 硝子体内注射を、ＥＴ－１投与の３０分後に与えた。ＩＯＰ、光干渉断層撮影－血管造影検査（ＯＣＴ－Ａ）、およびフルオレセイン血管造影図（ＦＡ）を、ＥＴ－１およびエドネンタン投与後の所定の時点（３０分、４５分、６０分、および７５分）で行って、ＥＴ－１±エドネンタンによって誘導された網膜血流変化を評価した。図１に示されるように、ＥＴ－１投与は、４５分以内に網膜血管床において明らかな血管収縮を効果的に誘導した。図２は、ＥＴ－１の効果が、次いで、９０分以内（エドネンタン投与の６０分後）の１０μｇのエドネンタン投与で逆転されたことを示す。
【0091】
実施例４： エドネンタンを含む長期放出製剤の調製
濃縮エドネンタン分散物を、エドネンタンと、水、ビタミンＥ－ＴＰＧＳおよびγ－シクロデキストリンとを合わせることによって作製する。これらの成分を混合して、エドネンタンを分散させ、次いで、オートクレーブにかける。ヒアルロン酸ナトリウムを、無菌粉末として購入し得るか、または希薄溶液を濾過によって滅菌し、続いて、凍結乾燥して、無菌粉末を獲得し得る。その無菌ヒアルロン酸ナトリウムを水に溶解して、水性濃縮物にする。その濃縮したエドネンタン分散物を混合し、スラリーとしてヒアルロン酸ナトリウム濃縮物に添加する。水を、十分量で（十分な程度に、この場合、均質な混合物、分散物、ゲルまたは懸濁物を調製するために必要とされる十分な程度に）添加し、その混合物を、均質になるまで混合する。これらの組成物の例を、以下の表２に提供する：
表２． エドネンタンを含む長期放出製剤の組成物
濃縮エドネンタン分散物を、エドネンタンと、水、ビタミンＥ－ＴＰＧＳおよびγ－シクロデキストリンとを合わせることによって作製する。これらの成分を混合して、エドネンタンを分散させ、次いで、オートクレーブにかける。ヒアルロン酸ナトリウムを、無菌粉末として購入し得るか、または希薄溶液を濾過によって滅菌し、続いて、凍結乾燥して、無菌粉末を獲得し得る。その無菌ヒアルロン酸ナトリウムを水に溶解して、水性濃縮物にする。その濃縮したエドネンタン分散物を混合し、スラリーとしてヒアルロン酸ナトリウム濃縮物に添加する。水を、十分量で（十分な程度に、この場合、均質な混合物、分散物、ゲルまたは懸濁物を調製するために必要とされる十分な程度に）添加し、その混合物を、均質になるまで混合する。これらの組成物の例を、以下の表２に提供する：
表２． エドネンタンを含む長期放出製剤の組成物
【表2】
【0092】
これらの例示的組成物は、ヒトの眼への硝子体内注射の際に、ゼラチン状のプラグまたは薬物デポーを形成するように、十分な濃度の高分子量（すなわち、ポリマー）ヒアルロン酸ナトリウムを含む。好ましくは、使用されるヒアルロン酸塩の平均分子量は、２００万未満であり、より好ましくは、使用されるヒアルロン酸塩の平均分子量は、約１３０万～１６０万の間である。上記エドネンタン粒子は、実際には、ヒアルロン酸塩のこの粘性プラグ内に捕捉または保持され、その結果、望ましくないプルミング（ｐｌｕｍｉｎｇ）は、上記製剤の硝子体内注射の際に起こらない。従って、薬物粒子が都合悪くも網膜組織上に直接沈殿するというリスクは、例えば、水のような粘性を有する組成物（例えば、Ｋｅｎａｌｏｇ（登録商標）４０）を使用することと比較すると、実質的に低減される。ヒアルロン酸ナトリウム溶液は、劇的なずり減粘を受けることから、これらの製剤は、２５ゲージ、２７ゲージまたはさらには３０ゲージ針を介して容易に注射される。
【0093】
実施例５： 局所エドネンタン製剤の調製
局所エドネンタン製剤を、公知の方法（例えば、ＷＯ ２０１６１５６６３９ Ａ１）に従って調製し得る。より具体的には、２０ｇのＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標） ＲＨ４０を、磁性式撹拌によって７５ｍＬの脱イオン水に溶解し、これを、完全に溶解するまで撹拌させておく。次いで、１．５ｇのトロメタモールを、その得られる溶液に添加し、１５分間撹拌し、完全な溶解を達成する。０．５ｇのエドネンタンを添加し、１５分間撹拌させ、完全な溶解を確実にする。次いで、２ｇのグリシンおよび１ｇのホウ酸を添加し、完全に溶解されるまで撹拌させる。その得られた溶液を、１００ｍＬ 脱イオン水に十分量で添加する。その最終溶液を濾紙で濾過すると、ｐＨ８．０６を有する無色透明溶液が得られる。容積５ｍＬを有する点眼用滴瓶の点眼剤中に上記溶液を充填する。
局所エドネンタン製剤を、公知の方法（例えば、ＷＯ ２０１６１５６６３９ Ａ１）に従って調製し得る。より具体的には、２０ｇのＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標） ＲＨ４０を、磁性式撹拌によって７５ｍＬの脱イオン水に溶解し、これを、完全に溶解するまで撹拌させておく。次いで、１．５ｇのトロメタモールを、その得られる溶液に添加し、１５分間撹拌し、完全な溶解を達成する。０．５ｇのエドネンタンを添加し、１５分間撹拌させ、完全な溶解を確実にする。次いで、２ｇのグリシンおよび１ｇのホウ酸を添加し、完全に溶解されるまで撹拌させる。その得られた溶液を、１００ｍＬ 脱イオン水に十分量で添加する。その最終溶液を濾紙で濾過すると、ｐＨ８．０６を有する無色透明溶液が得られる。容積５ｍＬを有する点眼用滴瓶の点眼剤中に上記溶液を充填する。
【0094】
実施例６： エドネンタンを含む局所眼用液剤ナノ粒子
ナノ粒子を、溶媒エバポレーション技術によって調製した。６０ｍＬの酢酸エチル中１２０ｍｇの５０：５０ ＰＬＧＡの溶液を、調製した。この溶液に、５０ｍｌの水と１２ｍｇのエドネンタンおよび０．５ｍｇのポリビニルアルコールの水性溶液を、激しく撹拌しながら組み込んだ。その得られた混合物を、連続撹拌下および２時間の真空下で放置した。次いで、その得られた調製物を超遠心分離し、水で３回洗浄して、その媒体からナノ粒子を取り出した。そのようにして得たナノ粒子を、真空オーブン中で乾燥させ、評価後に、５ｍｇ／１ｍＬのエドネンタンの濃度に対して十分な等張性の水性溶液中に分散させた。
ナノ粒子を、溶媒エバポレーション技術によって調製した。６０ｍＬの酢酸エチル中１２０ｍｇの５０：５０ ＰＬＧＡの溶液を、調製した。この溶液に、５０ｍｌの水と１２ｍｇのエドネンタンおよび０．５ｍｇのポリビニルアルコールの水性溶液を、激しく撹拌しながら組み込んだ。その得られた混合物を、連続撹拌下および２時間の真空下で放置した。次いで、その得られた調製物を超遠心分離し、水で３回洗浄して、その媒体からナノ粒子を取り出した。そのようにして得たナノ粒子を、真空オーブン中で乾燥させ、評価後に、５ｍｇ／１ｍＬのエドネンタンの濃度に対して十分な等張性の水性溶液中に分散させた。
【0095】
実施例７： 緑内障前臨床試験
健常ウサギモデルは、エドネンタンおよび／もしくはＡ－１８２０８６またはこれらの薬学的に受容可能な塩の薬力学的効果を（インビボで）評価するために使用される。これらの試験を、選択したエンドセリンアンタゴニストの種々の用量で行う。さらなる動物試験を、エンドセリンアンタゴニストと現在の標準ケアとを組み合わせることによって行う。緑内障のＭｏｒｒｉｓｏｎのラットモデル、急性に上昇したＩＯＰ上昇のラットモデルおよび非ヒト霊長類のレーザー誘導性緑内障モデルを使用して、標準ケアありおよびなしの選択したエンドセリンアンタゴニストの種々の用量に伴う視神経乳頭血流および網膜神経節細胞喪失の割合を評価する。
健常ウサギモデルは、エドネンタンおよび／もしくはＡ－１８２０８６またはこれらの薬学的に受容可能な塩の薬力学的効果を（インビボで）評価するために使用される。これらの試験を、選択したエンドセリンアンタゴニストの種々の用量で行う。さらなる動物試験を、エンドセリンアンタゴニストと現在の標準ケアとを組み合わせることによって行う。緑内障のＭｏｒｒｉｓｏｎのラットモデル、急性に上昇したＩＯＰ上昇のラットモデルおよび非ヒト霊長類のレーザー誘導性緑内障モデルを使用して、標準ケアありおよびなしの選択したエンドセリンアンタゴニストの種々の用量に伴う視神経乳頭血流および網膜神経節細胞喪失の割合を評価する。
【0096】
健常ウサギモデルの血流の改善は、局所投与したＥＴ－１による灌流障害の誘導後に、種々の用量で、示されたエンドセリンレセプターアンタゴニストに関して測定される。非ヒト霊長類緑内障モデルにおける視神経乳頭血流および網膜神経線維層（ＲＮＦＬ）厚の変化は、種々の用量で、示されたエンドセリンレセプターアンタゴニストに関して測定される。その結果は、ＲＧＣ生存、網膜および視神経乳頭血流の改善、ならびに選択したエンドセリンレセプターアンタゴニストの使用に起因するＲＮＦＬ菲薄化の緩徐化を示す。ヒトに関する投与レジメンは、健常ウサギおよび非ヒト霊長類の緑内障モデルの結果から推測される。
【0097】
ウサギにおける網膜血流変化を評価するための薬力学的試験
ウサギにおいて硝子体内投与したエンドセリン－１（ＥＴ－１）、続いて、アンタゴニストであるエドネンタンの投与後の網膜血流の効果を評価するために、ウサギ（Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓ ｃｕｎｉｃｕｌｕｓ）の左眼に、ＥＴ－１の２０μＬ 硝子体内注射を、続いて、２種（または３種）の異なる用量（例えば、０．１μｇ、０．５μｇ、２．５μｇ）のエドネンタンの２０μＬ 硝子体内注射を与えた。パルスオキシメーター、眼圧測定、光干渉断層撮影－血管造影検査（ＯＣＴＡ）、フルオレセイン血管造影検査（ＦＡ）および網膜漏出スコア付けを、評価のために行った。ウサギにおける用量応答を、図８Ａおよび図８Ｂに示す。
ウサギにおいて硝子体内投与したエンドセリン－１（ＥＴ－１）、続いて、アンタゴニストであるエドネンタンの投与後の網膜血流の効果を評価するために、ウサギ（Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓ ｃｕｎｉｃｕｌｕｓ）の左眼に、ＥＴ－１の２０μＬ 硝子体内注射を、続いて、２種（または３種）の異なる用量（例えば、０．１μｇ、０．５μｇ、２．５μｇ）のエドネンタンの２０μＬ 硝子体内注射を与えた。パルスオキシメーター、眼圧測定、光干渉断層撮影－血管造影検査（ＯＣＴＡ）、フルオレセイン血管造影検査（ＦＡ）および網膜漏出スコア付けを、評価のために行った。ウサギにおける用量応答を、図８Ａおよび図８Ｂに示す。
【0098】
ウサギにおいて硝子体内送達したエドネンタンの薬物動態および耐容性分析
ウサギにおける硝子体内投与後のエドネンタンの薬物動態および安全性特性を決定するために、ウサギ（Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓ ｃｕｎｉｃｕｌｕｓ）に、両側の硝子体内注射（２０μＬ 注射容積／眼）を与えた。その注射後に、動物をケタミン／キシラジンカクテルで鎮静化し、次いで、その動物を、ペントバルビタールナトリウム（Ｅｕｔｈａｓｏｌ）の過剰投与で安楽死させた。薬物動態分析のために指定された動物を、種々の時点（例えば、１２時間、１６時間、２４時間、３６時間および４８時間）で安楽死させた。少なくとも１．０ｍＬの全血を、耳介縁部（ｍａｒｇｉｎａｌ ｅａｒ）の静脈または心臓穿刺（終末採血のみ）から、血漿収集のためにＫ２ＥＤＴＡチューブへと採血し、分析のために処理した。
ウサギにおける硝子体内投与後のエドネンタンの薬物動態および安全性特性を決定するために、ウサギ（Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓ ｃｕｎｉｃｕｌｕｓ）に、両側の硝子体内注射（２０μＬ 注射容積／眼）を与えた。その注射後に、動物をケタミン／キシラジンカクテルで鎮静化し、次いで、その動物を、ペントバルビタールナトリウム（Ｅｕｔｈａｓｏｌ）の過剰投与で安楽死させた。薬物動態分析のために指定された動物を、種々の時点（例えば、１２時間、１６時間、２４時間、３６時間および４８時間）で安楽死させた。少なくとも１．０ｍＬの全血を、耳介縁部（ｍａｒｇｉｎａｌ ｅａｒ）の静脈または心臓穿刺（終末採血のみ）から、血漿収集のためにＫ２ＥＤＴＡチューブへと採血し、分析のために処理した。
【0099】
安楽死直後に、眼を摘出した。両眼の眼房水を、シリンジを介して取り出し、分析用に急速凍結した。眼を凍結したときに解剖して、種々の眼の組織を単離し、隣接組織への薬物拡散を最小限にした。左眼および右眼の組織を、分析のために別個のバイアルの中に集めた。集めた組織のリストは、血漿および眼房水、虹彩／毛様体（ＩＣＢ）、網膜、硝子体液およびＲＰＥ／脈絡膜を含む。ウサギにおいて硝子体内送達したエドネンタンの薬物動態特性を、図９Ａ、図９Ｂ、図９Ｃおよび図９Ｄに示す。
【0100】
ウサギにおいて局所投与したエドネンタンの薬物動態分析
ウサギにおける局所投与後のエドネンタンの薬物動態特性を決定するために、ウサギ（Ｄｕｔｃｈ－ｂｅｌｔｅｄウサギ）の両眼に、点眼剤（１００μｇのエドネンタン、３５μＬ用量容積／眼）を与えた。その投与後に、動物（Ｎ＝２）を、種々の時点（例えば、１０分（投与直後（ｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙ ａｆｔｅｒ ｐｏｔ－ｄｏｓｅ））、２時間および７時間）で安楽死させ、分析のために組織を集めた。集めた組織のリストは、血漿、網膜、硝子体液および眼球結膜を含む。ウサギにおいて局所送達したエドネンタンの薬物動態特性を図１０に示す。これは、エドネンタンが、１回の局所適用後の全ての時点で試験した全ての組織において検出されたことを示す。
ウサギにおける局所投与後のエドネンタンの薬物動態特性を決定するために、ウサギ（Ｄｕｔｃｈ－ｂｅｌｔｅｄウサギ）の両眼に、点眼剤（１００μｇのエドネンタン、３５μＬ用量容積／眼）を与えた。その投与後に、動物（Ｎ＝２）を、種々の時点（例えば、１０分（投与直後（ｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙ ａｆｔｅｒ ｐｏｔ－ｄｏｓｅ））、２時間および７時間）で安楽死させ、分析のために組織を集めた。集めた組織のリストは、血漿、網膜、硝子体液および眼球結膜を含む。ウサギにおいて局所送達したエドネンタンの薬物動態特性を図１０に示す。これは、エドネンタンが、１回の局所適用後の全ての時点で試験した全ての組織において検出されたことを示す。
【0101】
緑内障のＭｏｒｒｉｓｏｎのラットモデルにおける有効性試験
成体雄性および雌性の繁殖を終えたＢｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラット（およそ８～１１ヶ月の年齢群）を、Ｅｎｖｉｇｏ（Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ， ＩＮ）から得た。ベースラインＩＯＰ測定およびパターン網膜電図（ＰＥＲＧ）振幅を、ＩＯＰの上昇のための手術前に集めた（ＩＯＰおよびＰＥＲＧ振幅が、予測される値の範囲にあったことを担保するため）。ＩＯＰをラットの片眼（左眼）で上昇させた一方で、その対応する右眼を、対側のコントロールとして供した。ラットにおいてＩＯＰを上昇させるＭｏｒｒｉｓｏｎ法を、５０μＬの高張性食塩水を強膜上静脈を経て注射することによって行って、線維柱網を硬化させた。ＩＯＰを、実験の継続期間全体の間に１週間に２回測定した。手術の７～１０日後に、ＩＯＰ上昇が、ラットの手術した眼において観察された。２連続日にわたってＩＯＰの上昇を検出した後、点眼剤の局所投与（ＩＯＰが上昇した眼において２０μＬ（１００μｇ）／用量の試験化合物）を開始し、１週間に５日間、合計４週間にわたって行った。処置の４週間目に、ＰＥＲＧ分析を行い、ラットを、ペントバルビタール（Ｆａｔａｌ－Ｐｌｕｓ）の過剰投与によって屠殺した。眼房水をラットの眼から集め、凍結し、分析のために送付した。網膜のフラットマウントを準備し、ＲＧＣマーカー、Ｂｒｎ３ａ抗体で免疫染色し、生存しているＲＧＣを、２つの偏心（ｅｃｃｅｎｔｒｉｃｉｔｙ）（中心および周辺部）で計数した。
成体雄性および雌性の繁殖を終えたＢｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラット（およそ８～１１ヶ月の年齢群）を、Ｅｎｖｉｇｏ（Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ， ＩＮ）から得た。ベースラインＩＯＰ測定およびパターン網膜電図（ＰＥＲＧ）振幅を、ＩＯＰの上昇のための手術前に集めた（ＩＯＰおよびＰＥＲＧ振幅が、予測される値の範囲にあったことを担保するため）。ＩＯＰをラットの片眼（左眼）で上昇させた一方で、その対応する右眼を、対側のコントロールとして供した。ラットにおいてＩＯＰを上昇させるＭｏｒｒｉｓｏｎ法を、５０μＬの高張性食塩水を強膜上静脈を経て注射することによって行って、線維柱網を硬化させた。ＩＯＰを、実験の継続期間全体の間に１週間に２回測定した。手術の７～１０日後に、ＩＯＰ上昇が、ラットの手術した眼において観察された。２連続日にわたってＩＯＰの上昇を検出した後、点眼剤の局所投与（ＩＯＰが上昇した眼において２０μＬ（１００μｇ）／用量の試験化合物）を開始し、１週間に５日間、合計４週間にわたって行った。処置の４週間目に、ＰＥＲＧ分析を行い、ラットを、ペントバルビタール（Ｆａｔａｌ－Ｐｌｕｓ）の過剰投与によって屠殺した。眼房水をラットの眼から集め、凍結し、分析のために送付した。網膜のフラットマウントを準備し、ＲＧＣマーカー、Ｂｒｎ３ａ抗体で免疫染色し、生存しているＲＧＣを、２つの偏心（ｅｃｃｅｎｔｒｉｃｉｔｙ）（中心および周辺部）で計数した。
【0102】
この試験のために、Ｍｏｒｒｉｓｏｎのモデルを使用して、Ｍｏｒｒｉｓｏｎら（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ＪＣ， Ｍｏｏｒｅ ＣＧ， Ｄｅｐｐｍｅｉｅｒ ＬＭ， Ｇｏｌｄ ＢＧ， Ｍｅｓｈｕｌ ＣＫ， Ｊｏｈｎｓｏｎ ＥＣ． Ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｏｐｔｉｃ ｎｅｒｖｅ ｄａｍａｇｅ． Ｅｘｐ Ｅｙｅ Ｒｅｓ． １９９７；６４（１）：８５－９６）によって以前に記載されたように、成体の繁殖を終えた雄性Ｂｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラットにおいて眼内圧亢進（ｏｃｕｌａｒ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ）を誘導した。
【0103】
免疫染色した網膜フラットマウントを得て、網膜神経節細胞（ＲＧＣ）数を測定した。免疫染色した網膜フラットマウントを得るために、その動物を、処置後に安楽死させ、次いで、それらの眼を摘出した。その眼杯を、４℃において４％ パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）中で一晩固定し、網膜フラットマウントを、画像を集めるために準備した。網膜神経節細胞（ＲＧＣ）計数を、免疫染色した網膜フラットマウントの画像を使用して行った。その画像を、ＩｍａｇｅＪ（生物学研究のために設計されたフォトエディター（Ｒａｓｂａｎｄ， １９９７－２０１８））にアップロードし、その標識した網膜神経節細胞を、２つの偏心（中心および周辺部）において手動で計数した。図５Ａは、ビヒクルとエドネンタンとの間の周辺部網膜におけるＲＧＣ数の比較を示し、図６Ａは、ビヒクルとＡ－１８２０８６との間の比較を示す。
【0104】
パターンＥＲＧ（ＰＥＲＧ）を使用して、ＲＧＣ機能を評価した。そのパターンｅｒｇの記録を得るために、ＵＴＡＳ Ｖｉｓｕａｌ Ｅｌｅｃｔｒｏｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｓｙｓｔｅｍ（ＬＫＣ， Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇｈ， ＭＤ， ＵＳＡ）を、Ｐｏｒｃｉａｔｔｉら（Ｐｏｒｃｉａｔｔｉ Ｖ， Ｓａｌｅｈ Ｍ， Ｎａｇａｒａｊｕ Ｍ． Ｔｈｅ ｐａｔｔｅｒｎ ｅｌｅｃｔｒｏｒｅｔｉｎｏｇｒａｍ ａｓ ａ ｔｏｏｌ ｔｏ ｍｏｎｉｔｏｒ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ ｒｅｔｉｎａｌ ｇａｎｇｌｉｏｎ ｃｅｌｌ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ＤＢＡ／２Ｊ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｇｌａｕｃｏｍａ． Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ． ２００７；４８（２）：７４５－７５１）によって記載される方法に従って使用した。簡潔には、ＰＥＲＧシグナルを、角膜表面の下側部分に配置したＤＴＬ－ｐｌｕｓ電極から獲得し、ＰＥＲＧ波を、ＥＭＷＩＮソフトウェア（ＬＫＣ）を使用して分析した。主要な正（Ｐ１）および負（Ｎ２）の波の振幅間の差異を計算して、ＰＥＲＧ振幅を解読（ｄｅｃｉｐｅｒ）した。図５Ｂは、ビヒクルとエドネンタンとの間のＩＯＰ媒介性ＰＥＲＧ変化を示し、図６Ｂは、ビヒクルとＡ－１８２０８６との間の変化を示す。
【0105】
ＲＧＣ数およびＰＥＲＧ変化は、図５Ａ、図５Ｂ、図６Ａおよび図６Ｂに示されるように、エドネンタンおよびＡ－１８２０８６の両方が、緑内障のｍｏｒｒｉｓｏｎのラットモデルにおいてＲＧＣ喪失を防止し、ＲＧＣ機能を維持したことを明らかにする。
【0106】
ラットにおいて局所的にまたは経口的に送達したエドネンタンまたはＡ－１８２０８６の薬物動態分析
ラットにおける局所投与後に、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６の薬物動態特性を決定するために、ラット（Ｂｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラット）に、点眼剤（１００μｇのエドネンタン、２０μＬ用量容積／眼；または１００μｇのＡ－１８２０８６、２０μＬ用量容積／眼）を与えた。ラットにおける経口投与後のエドネンタンまたはＡ－１８２０８６の薬物動態特性を決定するために、ラット（Ｂｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラット）に、１０ｍｇ／ｋｇもしくは５０ｍｇ／ｋｇのエドネンタンの経口投与、または１．７ｍｇ／ｋｇもしくは１７ｍｇ／ｋｇのＡ－１８２０８６の経口投与を与えた。投与後に、動物（Ｎ＝２）を、種々の時点（例えば、４時間および８時間）で安楽死させ、組織を分析のために集めた。集めた組織のリストは、血漿、網膜／網膜色素上皮（ＲＰＥ）／脈絡膜、硝子体液および眼房水を含む。ラットにおいて局所投与または経口投与したエドネンタンの薬物動態特性を、図５Ｃに示す。ラットにおいて局所投与または経口投与したＡ－１８２０８６の薬物動態特性を、図６Ｃに示す。図５Ｃおよび図６Ｃは、エドネンタンおよびＡ－１８２０８６の両方が、網膜／ＲＰＥ／脈絡膜、眼房水および硝子体液において局所投与の４時間後および８時間後で検出されることを示す。これらのデータはまた、エドネンタンが、エドネンタンの経口投与後に１７ｍｇ／ｋｇで眼房水において、ならびに１．７および１７ｍｇ／ｋｇで網膜／ＲＰＥ／脈絡膜および硝子体液において検出可能であり、Ａ－１８２０８６が、Ａ－１８２０８６の経口投与後に５０ｍｇ／ｋｇで網膜／ＲＰＥ／脈絡膜において検出可能であることを明らかにした。
ラットにおける局所投与後に、エドネンタンまたはＡ－１８２０８６の薬物動態特性を決定するために、ラット（Ｂｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラット）に、点眼剤（１００μｇのエドネンタン、２０μＬ用量容積／眼；または１００μｇのＡ－１８２０８６、２０μＬ用量容積／眼）を与えた。ラットにおける経口投与後のエドネンタンまたはＡ－１８２０８６の薬物動態特性を決定するために、ラット（Ｂｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラット）に、１０ｍｇ／ｋｇもしくは５０ｍｇ／ｋｇのエドネンタンの経口投与、または１．７ｍｇ／ｋｇもしくは１７ｍｇ／ｋｇのＡ－１８２０８６の経口投与を与えた。投与後に、動物（Ｎ＝２）を、種々の時点（例えば、４時間および８時間）で安楽死させ、組織を分析のために集めた。集めた組織のリストは、血漿、網膜／網膜色素上皮（ＲＰＥ）／脈絡膜、硝子体液および眼房水を含む。ラットにおいて局所投与または経口投与したエドネンタンの薬物動態特性を、図５Ｃに示す。ラットにおいて局所投与または経口投与したＡ－１８２０８６の薬物動態特性を、図６Ｃに示す。図５Ｃおよび図６Ｃは、エドネンタンおよびＡ－１８２０８６の両方が、網膜／ＲＰＥ／脈絡膜、眼房水および硝子体液において局所投与の４時間後および８時間後で検出されることを示す。これらのデータはまた、エドネンタンが、エドネンタンの経口投与後に１７ｍｇ／ｋｇで眼房水において、ならびに１．７および１７ｍｇ／ｋｇで網膜／ＲＰＥ／脈絡膜および硝子体液において検出可能であり、Ａ－１８２０８６が、Ａ－１８２０８６の経口投与後に５０ｍｇ／ｋｇで網膜／ＲＰＥ／脈絡膜において検出可能であることを明らかにした。
【0107】
酸素誘導性虚血性網膜症を有するマウスにおける試験
関連するマウスモデルを、図４に示されるように、種々の時点で、酸素誘導性虚血性網膜症（ＯＩＲ）を有するマウスにおいて網膜低酸素領域を得るために使用した。エドネンタンによるマウス酸素誘導性虚血性網膜症（ＯＩＲ）モデルの網膜低酸素症の改善が、明らかにされる。簡潔には、Ｐ１７において、ＯＩＲを有するマウス（ｎ＝６０）に、ＥＴ－１アンタゴニストの注射（１μＬの２μｇ／μＬ エドネンタン製剤、単一用量）を片眼に与え、ＰＢＳを他眼に与えた。注射後２４時間、４８時間、および９６時間で、マウス（各時点に対してｎ＝１０）を安楽死させ、網膜を解剖し、ＧＳＡレクチンおよびｈｙｐｏｘｙｐｒｏｂｅで染色した。ＮＶの領域、網膜低酸素症の領域、および網膜非灌流の領域を、各網膜に対して決定した。
関連するマウスモデルを、図４に示されるように、種々の時点で、酸素誘導性虚血性網膜症（ＯＩＲ）を有するマウスにおいて網膜低酸素領域を得るために使用した。エドネンタンによるマウス酸素誘導性虚血性網膜症（ＯＩＲ）モデルの網膜低酸素症の改善が、明らかにされる。簡潔には、Ｐ１７において、ＯＩＲを有するマウス（ｎ＝６０）に、ＥＴ－１アンタゴニストの注射（１μＬの２μｇ／μＬ エドネンタン製剤、単一用量）を片眼に与え、ＰＢＳを他眼に与えた。注射後２４時間、４８時間、および９６時間で、マウス（各時点に対してｎ＝１０）を安楽死させ、網膜を解剖し、ＧＳＡレクチンおよびｈｙｐｏｘｙｐｒｏｂｅで染色した。ＮＶの領域、網膜低酸素症の領域、および網膜非灌流の領域を、各網膜に対して決定した。
【0108】
実施例８： レーザー誘導性非ヒト霊長類試験－薬力学的試験
非ヒト霊長類（アカゲザル、Ｍａｃａｃａ Ｍｕｌａｔｔａ）を、この試験のために得た。各動物の片眼に、線維柱網の反復レーザー光凝固による眼内圧（ＩＯＰ）の上昇の誘導を行った。画像化セッションを反復して、視神経乳頭（ＯＮＨ）および網膜構造の変化をモニターした。
非ヒト霊長類（アカゲザル、Ｍａｃａｃａ Ｍｕｌａｔｔａ）を、この試験のために得た。各動物の片眼に、線維柱網の反復レーザー光凝固による眼内圧（ＩＯＰ）の上昇の誘導を行った。画像化セッションを反復して、視神経乳頭（ＯＮＨ）および網膜構造の変化をモニターした。
【0109】
ＩＶＴ投与後の視神経乳頭血流に対するエドネンタンの効果
レーザー誘導性緑内障モデルにおけるＯＮＨ血流の指数として、全体の平均ブレ率（ＭＢＲ）およびベースラインからの経時的なＭＢＲ変化において３匹の非ヒト霊長類の実験的緑内障の眼および対側の健常な眼（コントロール）を比較する試験を行った。より具体的には、ビヒクルコントロール、０．０２ｍｇ／ｍＬのエドネンタン、０．２ｍｇ／ｍＬのエドネンタン、または２．０ｍｇ／ｍＬのエドネンタンを、３匹の非ヒト霊長類（アカゲザル、Ｍａｃａｃａ Ｍｕｌａｔｔａ）の各々の緑内障の眼に硝子体内投与した（５０μＬ）。次いで、ＯＮＨ血流を、図７Ａ～７Ｌに示されるように、レーザースペックルフローグラフィー（ＬＳＦＧ）を使用して６時間かけて測定した。これらのグラフは、ビヒクル単独（図７Ａ、図７Ｅ、および図７Ｉ）、０．０２ｍｇ／ｍＬのエドネンタン（図７Ｂ、図７Ｆ、および図７Ｊ）、０．２ｍｇ／ｍＬのエドネンタン（図７Ｃ、図７Ｇ、および図７Ｋ）または２．０ｍｇ／ｍＬのエドネンタン（図７Ｄ、図７Ｈ、および図７Ｌ）のＩＶＴ投与後の３匹の非ヒト霊長類におけるＯＮＨ血流を示す。図７Ａ～７Ｌは、エドネンタンでの処置後に用量依存性様式において、ＯＮＨ血流の改善を明らかにする。３匹の非ヒト霊長類の集合結果を、図７Ｍに示す。これは、エドネンタンが、コントロールの眼と比較して、実験的緑内障の眼において網膜動脈、静脈、および毛細管の拡張から生じるＯＮＨ血流の用量関連増大を明らかに示すことを示す。
レーザー誘導性緑内障モデルにおけるＯＮＨ血流の指数として、全体の平均ブレ率（ＭＢＲ）およびベースラインからの経時的なＭＢＲ変化において３匹の非ヒト霊長類の実験的緑内障の眼および対側の健常な眼（コントロール）を比較する試験を行った。より具体的には、ビヒクルコントロール、０．０２ｍｇ／ｍＬのエドネンタン、０．２ｍｇ／ｍＬのエドネンタン、または２．０ｍｇ／ｍＬのエドネンタンを、３匹の非ヒト霊長類（アカゲザル、Ｍａｃａｃａ Ｍｕｌａｔｔａ）の各々の緑内障の眼に硝子体内投与した（５０μＬ）。次いで、ＯＮＨ血流を、図７Ａ～７Ｌに示されるように、レーザースペックルフローグラフィー（ＬＳＦＧ）を使用して６時間かけて測定した。これらのグラフは、ビヒクル単独（図７Ａ、図７Ｅ、および図７Ｉ）、０．０２ｍｇ／ｍＬのエドネンタン（図７Ｂ、図７Ｆ、および図７Ｊ）、０．２ｍｇ／ｍＬのエドネンタン（図７Ｃ、図７Ｇ、および図７Ｋ）または２．０ｍｇ／ｍＬのエドネンタン（図７Ｄ、図７Ｈ、および図７Ｌ）のＩＶＴ投与後の３匹の非ヒト霊長類におけるＯＮＨ血流を示す。図７Ａ～７Ｌは、エドネンタンでの処置後に用量依存性様式において、ＯＮＨ血流の改善を明らかにする。３匹の非ヒト霊長類の集合結果を、図７Ｍに示す。これは、エドネンタンが、コントロールの眼と比較して、実験的緑内障の眼において網膜動脈、静脈、および毛細管の拡張から生じるＯＮＨ血流の用量関連増大を明らかに示すことを示す。
【0110】
上記の３匹の非ヒト霊長類のうちの１匹において、ＬＳＦＧスキャンを、エドネンタンを２．０ｍｇ／ｍＬで投与した場合に種々の選択した時点で行った。結果を図７Ｎに示す。
【0111】
局所投与後の眼内圧に対するエドネンタンの効果
単一用量の０．５％ チモロールまたは単一用量の２ｍｇ／ｍＬ エドネンタンを、右眼（ＯＤ）にレーザー誘導性緑内障を有する３匹の非ヒト霊長類に、無作為の順序での１週間洗い流しを伴って局所投与した。
単一用量の０．５％ チモロールまたは単一用量の２ｍｇ／ｍＬ エドネンタンを、右眼（ＯＤ）にレーザー誘導性緑内障を有する３匹の非ヒト霊長類に、無作為の順序での１週間洗い流しを伴って局所投与した。
【0112】
試験結果：
コントロール１： 各眼における単一用量の５０μＬの局所的チモロール ０．５％は、投与前から投与後（１２０分間）へと約２０％のＩＯＰ降下を示した。
コントロール１： 各眼における単一用量の５０μＬの局所的チモロール ０．５％は、投与前から投与後（１２０分間）へと約２０％のＩＯＰ降下を示した。
【0113】
コントロール２： 各眼における単一用量の５０μＬの局所チモロール ０．５％は、投与前から投与後（１２０分間）へと約３０％のＩＯＰ降下を示した。
【0114】
非ヒト霊長類１： 実験的緑内障の眼における５０μＬのエドネンタン点眼剤（２ｍｇ／ｍＬ）は、投与前から投与後（１２０分間）へと約６０％のＩＯＰ降下を示し、対側の健常な眼においては、投与前から投与後（１２０分間）へと約１０％のＩＯＰ降下を示した。
【0115】
非ヒト霊長類２： 実験的緑内障の眼における５０μＬのエドネンタン点眼剤（２ｍｇ／ｍＬ）は、投与前から投与後（１５分間）へと約５０％の、および投与前から投与後（１２０分間）へと約３０％のＩＯＰ降下を示した。対側の健常な眼における５０μＬのエドネンタン点眼剤（２ｍｇ／ｍＬ）は、投与前から投与後（１５分間）へと約２０％の、および投与前から投与後（１２０分間）へと約０％のＩＯＰ降下を示した。
【0116】
非ヒト霊長類３： 実験的緑内障の眼における５０μＬのエドネンタン点眼剤（２ｍｇ／ｍＬ）は、投与前から投与後（１５分間）へと約４０％の、および投与前から投与後（１２０分間）へと約４０％のＩＯＰ降下を示した。対側の健常な眼における５０μＬのエドネンタン点眼剤（２ｍｇ／ｍＬ）は、投与前から投与後（１５分間）へと約１０％の、および投与前から投与後（１２０分間）へと約４０％のＩＯＰ降下を示した。
【0117】
他の実施形態
本明細書で開示される特徴は全て、任意の組み合わせにおいて組み合わされ得る。本明細書で開示される各特徴は、同じ、等価な、または類似の目的を果たす代替の特徴によって置換され得る。従って、別段明示的に述べられなければ、開示される各特徴は、包括的な一連の等価なまたは類似の特徴の例に過ぎない。
本明細書で開示される特徴は全て、任意の組み合わせにおいて組み合わされ得る。本明細書で開示される各特徴は、同じ、等価な、または類似の目的を果たす代替の特徴によって置換され得る。従って、別段明示的に述べられなければ、開示される各特徴は、包括的な一連の等価なまたは類似の特徴の例に過ぎない。
【0118】
さらに、上記の説明から、当業者は、本発明の必須の特徴を容易に確認し得、その趣旨および範囲から逸脱することなく、本発明の種々の変更および改変を行って、種々の使用法および条件に適合させ得る。従って、他の実施形態はまた、特許請求の範囲内にある。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5-1】
【図5-2】
【図6-1】
【図6-2】
【図7-1】
【図7-2】
【図7-3】
【図7-4】
【図7-5】
【図7-6】
【図7-7】
【図7-8】
【図7-9】
【図7-10】
【図7-11】
【図7-12】
【図7-13】
【図7-14】
【図7-15】
【図8】
【図9-1】
【図9-2】
【図9-3】
【図9-4】
【図10】
【国際調査報告】