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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-01-05
(54)【発明の名称】ウルソール酸カリウム塩の固体分散体
(51)【国際特許分類】
A61K 31/19 20060101AFI20221223BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20221223BHJP
A61P 25/16 20060101ALI20221223BHJP
A61P 25/02 20060101ALI20221223BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20221223BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20221223BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20221223BHJP
A61P 9/00 20060101ALI20221223BHJP
A61P 21/00 20060101ALI20221223BHJP
A61P 21/04 20060101ALI20221223BHJP
A61K 9/20 20060101ALI20221223BHJP
A61K 47/38 20060101ALI20221223BHJP
A61K 47/02 20060101ALI20221223BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20221223BHJP
A61K 47/36 20060101ALI20221223BHJP
A61K 47/12 20060101ALI20221223BHJP
A61K 47/44 20170101ALI20221223BHJP
A61K 47/24 20060101ALI20221223BHJP
A61K 9/14 20060101ALI20221223BHJP
A23L 33/10 20160101ALN20221223BHJP
【ＦＩ】
A61K31/19
A61P25/28
A61P25/16
A61P25/02
A61P13/12
A61P1/16
A61P3/10
A61P9/00
A61P21/00
A61P21/04
A61K9/20
A61K47/38
A61K47/02
A61K47/26
A61K47/36
A61K47/12
A61K47/44
A61K47/24
A61K9/14
A23L33/10
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022525758
(86)(22)【出願日】2020-10-30
(85)【翻訳文提出日】2022-06-29
(86)【国際出願番号】 EP2020080548
(87)【国際公開番号】W WO2021089433
(87)【国際公開日】2021-05-14
(31)【優先権主張番号】102019000020492
(32)【優先日】2019-11-06
(33)【優先権主張国・地域又は機関】IT
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】397068654
【氏名又は名称】インデナ・ソチエタ・ペル・アチオニ
(74)【代理人】
【識別番号】110001508
【氏名又は名称】弁理士法人 津国
(72)【発明者】
【氏名】アッレグリーニ，ピエトロ
(72)【発明者】
【氏名】チチェリ，ダニエレ
(72)【発明者】
【氏名】メナ，ロレンソ
【テーマコード（参考）】
4B018
4C076
4C206
【Ｆターム（参考）】
4B018MD04
4B018MD05
4B018MD08
4B018MD09
4B018MD10
4B018MD30
4B018MD32
4B018MD35
4B018MD36
4B018MD45
4B018MD46
4B018ME06
4B018ME14
4B018MF02
4B018MF06
4C076AA29
4C076AA36
4C076BB01
4C076CC01
4C076CC09
4C076CC16
4C076CC17
4C076DD25A
4C076DD26A
4C076DD28A
4C076DD29A
4C076DD38A
4C076DD41A
4C076DD63
4C076DD68A
4C076EE23A
4C076EE31A
4C076EE32A
4C076EE38A
4C076EE53
4C076FF04
4C076GG05
4C206AA01
4C206AA02
4C206CB13
4C206KA12
4C206MA02
4C206MA05
4C206MA54
4C206MA72
4C206NA11
4C206ZA02
4C206ZA16
4C206ZA20
4C206ZA36
4C206ZA75
4C206ZA81
4C206ZA94
4C206ZC35
(57)【要約】
本発明は、アルカリ金属とのウルソール酸の塩及びリン脂質を含む固体分散体、並びにこれらを含む経口投与製剤に関する。本発明はまた、固体分散体の調製方法、並びに肝保護、抗酸化、抗炎症、抗ウイルス及び細胞毒性活性が望まれる、様々な病的状態の予防及び／又は治療のための固体分散体及び製剤の使用に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
アルカリ金属とのウルソール酸の塩及びリン脂質を含む固体分散体であって、ウルソール酸塩：リン脂質の重量比が０．５：１～２：１の範囲である、固体分散体。
【請求項2】
ウルソール酸の塩が、ナトリウム又はカリウム塩である、請求項１記載の固体分散体。
【請求項3】
ウルソール酸の塩が、カリウム塩である、請求項２記載の固体分散体。
【請求項4】
以下：－セルロース、セルロースエーテル、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、マンニトール、マルトデキストリン、イソマルト及びこれらの組合せ；
－シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム及びこれらの組合せ；
－ショ糖エステル、ポリソルベート、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、Ｄ－α－トコフェリル－ポリエチレングリコールコハク酸塩及びこれらの組合せ
から選択される１種以上の賦形剤を更に含む、請求項１～３のいずれか一項記載の固体分散体。
【請求項5】
１種以上の賦形剤とウルソール酸の塩との重量比が、０．５：１～２：１の範囲である、請求項４記載の固体分散体。
【請求項6】
以下：アルカリ金属とのウルソール酸の塩；
リン脂質；
セルロース又はセルロースエーテル又はこれらの組合せ；及び
シリカ
から本質的になる、請求項４又は５記載の固体分散体。
【請求項7】
アルカリ金属とのウルソール酸の塩；リン脂質；セルロース又はセルロースエーテル又はこれらの組合せ；及びシリカからなる、請求項６記載の固体分散体。
【請求項8】
カリウムとのウルソール酸の塩、リン脂質、セルロース及びシリカを含む、請求項４～７のいずれか一項記載の固体分散体。
【請求項9】
リン脂質が、ダイズ、ヒマワリ、卵又は任意の他の植物源若しくは動物源から得られ、そしてホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン及びこれらの混合物を含む（ここで、アシル基は、同一であっても異なっていてもよく、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸又はリノレン酸から誘導され得る）、１種以上のレシチンから選択される物質である、請求項１～８のいずれか一項記載の固体分散体。
【請求項10】
リン脂質が、ダイズレシチン又はヒマワリレシチンである、請求項９記載の固体分散体。
【請求項11】
１０μm～３００μmの範囲の粒径を有する、請求項１～１０のいずれか一項記載の固体分散体。
【請求項12】
請求項１～３のいずれか一項記載の固体分散体の調製方法であって、以下の工程：ａ－１）アルコールにウルソール酸塩及びリン脂質を懸濁して、懸濁液を提供すること；
ｂ－１）工程ａ－１）で得られた懸濁液を、５分～５時間、好ましくは１～３時間の間、加熱還流すること；
ｃ－１）溶媒を除去して固体分散体を提供すること
を含む、方法。
【請求項13】
請求項４～１０のいずれか一項記載の固体分散体の調製方法であって、以下の工程：ａ－２）アルコールに、上記比のウルソール酸塩及びリン脂質並びに賦形剤を懸濁して、懸濁液を提供すること；
ｂ－２）工程ａ－２）で得られた懸濁液を、５分～５時間、好ましくは１～３時間の間、加熱還流すること；
ｃ－２）アルコールを除去して固体を得、場合により更なる賦形剤を添加し、粉砕して、固体分散体を提供すること
を含む、方法。
【請求項14】
医薬又は栄養補助食品等級の更なる成分と混合した、請求項１～１１のいずれか一項記載の固体分散体を含む、経口投与製剤。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【0001】
式（１）：
【0002】
【化1】
を有する、ウルソール酸（３β－ヒドロキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸）は、天然に存在する五環式トリテルペン酸であり、多くの植物に広く存在し、また日常生活で使用される多くの果物及びハーブ、例えば、ほんの数例を挙げると、リンゴ、ビルベリー、クランベリー、バジル、ローズマリー、オレガノ及びタイムにも存在する。果物の皮、特にリンゴの皮も、大量のウルソール酸を含有し得る。ウルソール酸は、肝保護、抗酸化、抗炎症、抗ウイルス及び細胞毒性活性などの多くの生物学的効果に恵まれており、かつその毒性の低さに起因して、栄養補助食品市場の有望な候補である。ただし、ウルソール酸は水性媒体に難溶性であるため、経口投与ではほとんど生物学的に利用可能でなく；更に、ウルソール酸は膜透過性が低い。このような理由から、ウルソール酸は、バイオ医薬品分類システム（ＢＣＳ）によりクラスIV分子として分類される。Amidon ら（Pharm Res. 1995 Mar;12(3):413-20）により開発されたＢＣＳは、胃腸液への薬物の溶解及び胃腸膜の透過性が、薬物吸収の速度及び程度を制御する基本的なパラメーターであるという知見に基づく。ＢＣＳによると、分子は、その溶解性及び透過性の特性に応じて、次の４つのカテゴリーに分類できる：高溶解性－高透過性（クラスＩ）；低溶解性－高透過性（クラスII）；高溶解性－低透過性（クラスIII）；及び低溶解性－低透過性（クラスIV）。４つの異なるクラスに属する活性成分のバイオアベイラビリティを改善するために、多くの製剤化戦略が開発されてきた。理論的には、クラスIV分子のバイオアベイラビリティを改善するための理想的なアプローチは、必要な物理化学的特性を得るためにその構造を修飾することであろう。しかし、より生物学的に利用可能なウルソール酸誘導体を発見することは、困難で、時間と費用がかかるだけでなく、そのような誘導体を栄養補助食品の分野で使用することはできないだろう。
【0003】
バイオアベイラビリティを改善するための高分子ナノ粒子システムの使用は、達成できても、医薬品だけに適し、栄養補助食品市場向けの製品には適さないだろう（Current medicinal chemistry 2017, 24, 1-10）。
【0004】
この不利な点はまた、Zhouら（Drug Development and Industrial Pharmacy 2009 35 3 305）によって報告されたウルソール酸のナノ粒子などの、公知技術に存在する他の製剤化のアプローチにも付随する；ウルソール酸、大豆リン脂質及びポロキサマー１８８を含有し、注射により投与可能な前記調製物は、経口投与可能な製剤が好ましい、栄養補助食品分野での使用は困難である。
【0005】
Wu W.ら（Journal of Solution Chemistry 27(6):521-531, 1998）によれば、熱力学的溶解度は結晶サイズにも依存するため、ナノ結晶の使用により、粗ウルソール酸と比較して２．５６倍の溶解度の増大が可能になった（J. Pi, et al. Current drug delivery (2016), 13(8), 1358-1366）。ただし、ナノ結晶は流動性が低いため、製剤化が困難である。
【0006】
それに対して、中国特許出願第101095684号に開示されている、ウルソール酸とレシチンのリン脂質複合体は、カプセル、錠剤などの経口剤型に製剤化することができる；ただし、レシチンとの複合体形成はバイオアベイラビリティの向上につながるが、酸対リン脂質の比は１：４以上である。この比は、複合体中の活性物質の量が少ないことを意味し、高用量の医薬品又は栄養補助食品製剤を調製するか、又は反復投与する必要が生じる。
【0007】
したがって、ウルソール酸の溶解度を高めるための単純で産業的に持続可能な方法の必要性が依然として感じられる。
【0008】
［発明の説明］
本出願人は、今般、アルカリ金属、例えば、カリウムとのウルソール酸の塩がリン脂質に分散して固体分散体を形成することができること、及びそのような分散体［固体分散体ＳＤ］が遊離ウルソール酸塩、遊離ウルソール酸と比較して、またリン脂質とのウルソール酸の固体分散体（ただしアルカリ金属を欠いている）と比較して、胃液にはるかに溶解しやすいことを発見した。理論上、アルカリ金属とのウルソール酸塩のような親水性又は両親媒性分子の溶解度は、リン脂質マトリックスに分散されても恩恵が得られないため、これは非常に驚くべきことである。
本出願人は、今般、アルカリ金属、例えば、カリウムとのウルソール酸の塩がリン脂質に分散して固体分散体を形成することができること、及びそのような分散体［固体分散体ＳＤ］が遊離ウルソール酸塩、遊離ウルソール酸と比較して、またリン脂質とのウルソール酸の固体分散体（ただしアルカリ金属を欠いている）と比較して、胃液にはるかに溶解しやすいことを発見した。理論上、アルカリ金属とのウルソール酸塩のような親水性又は両親媒性分子の溶解度は、リン脂質マトリックスに分散されても恩恵が得られないため、これは非常に驚くべきことである。
【0009】
したがって、１つの態様において、本発明は、固体分散体［固体分散体ＳＤ］であって、
ａ）アルカリ金属、例えば、ナトリウム及びカリウム、更に好ましくはカリウムとのウルソール酸の塩、並びに
ｂ）リン脂質
を含む固体分散体に関する。
ａ）アルカリ金属、例えば、ナトリウム及びカリウム、更に好ましくはカリウムとのウルソール酸の塩、並びに
ｂ）リン脂質
を含む固体分散体に関する。
【0010】
好ましい態様によれば、固体分散体ＳＤは、レオロジー特性を改変するのに適した１種以上の医薬又は栄養補助食品賦形剤［賦形剤（Ｅ）］を含み、このため経口の医薬又は栄養補助食品製剤［製剤（Ｆ）］の製造が可能になる。
【0011】
賦形剤（Ｅ）の例は、以下：
－セルロース、好ましくは、微結晶性セルロース、セルロースエーテル、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、マンニトール、マルトデキストリン、イソマルト及びこれらの組合せなどの、可溶性及び不溶性希釈剤；
－シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム及びこれらの組合せなどの、滑沢剤及び／又は流動促進剤；
－ショ糖エステル、ポリソルベート、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、Ｄ－α－トコフェリル－ポリエチレングリコールコハク酸塩（ビタミンＥ ＴＰＧＳ）及びこれらの組合せなどの、界面活性剤
を包含するが、これらに限定されない。
－セルロース、好ましくは、微結晶性セルロース、セルロースエーテル、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、マンニトール、マルトデキストリン、イソマルト及びこれらの組合せなどの、可溶性及び不溶性希釈剤；
－シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム及びこれらの組合せなどの、滑沢剤及び／又は流動促進剤；
－ショ糖エステル、ポリソルベート、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、Ｄ－α－トコフェリル－ポリエチレングリコールコハク酸塩（ビタミンＥ ＴＰＧＳ）及びこれらの組合せなどの、界面活性剤
を包含するが、これらに限定されない。
【0012】
上記の及び更なる賦形剤は、例えば、Remington: “The Science and Practice of Pharmacy”, 22nd edition, Pharmaceutical Press, 2013に開示されている（その開示は、引用例としてその全体が本明細書に取り込まれる）。
【0013】
例示的な実施態様において、固体分散体ＳＤは、以下から本質的になる：
ａ）アルカリ金属、好ましくはナトリウム及びカリウム、更に好ましくはカリウムとのウルソール酸の塩；
ｂ）リン脂質；
ｃ）セルロース又はセルロースエーテル又はこれらの組合せ；及び
ｄ）シリカ。
ａ）アルカリ金属、好ましくはナトリウム及びカリウム、更に好ましくはカリウムとのウルソール酸の塩；
ｂ）リン脂質；
ｃ）セルロース又はセルロースエーテル又はこれらの組合せ；及び
ｄ）シリカ。
【0014】
記載された成分から「本質的になる」本明細書の実施態様において、そのような固体分散体ＳＤは、記載された成分、並びに請求項に係る固体分散体ＳＤの基本的及び新規の特徴に実質的に影響を及ぼさない成分を含有する。請求項に係る固体分散体の基本的及び新規の特徴に実質的に影響を及ぼさない成分は、遊離ウルソール酸塩、遊離ウルソール酸と比較して、またリン脂質とのウルソール酸の固体分散体（ただしアルカリ金属を欠いている）と比較して、胃液への固体分散体ＳＤの溶解度を損なわない成分である。請求項に係る固体分散体ＳＤの基本的及び新規の特徴に実質的に影響を及ぼさず、よって記載された成分から本質的になる固体分散体ＳＤに含まれ得る成分の例は、セルロース、好ましくは微結晶性セルロース、セルロースエーテル、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、マンニトール、マルトデキストリン、イソマルト及びこれらの組合せなどの、可溶性及び不溶性希釈剤；シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム及びこれらの組合せなどの、滑沢剤及び／又は流動促進剤；ショ糖エステル、ポリソルベート、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、Ｄ－α－トコフェリル－ポリエチレングリコールコハク酸塩（ビタミンＥ ＴＰＧＳ）及びこれらの組合せなどの、界面活性剤などの種々の賦形剤を包含する。
【0015】
好ましい実施態様において、固体分散体ＳＤは、以下からなる：
ｅ）アルカリ金属、好ましくはナトリウム及びカリウム、更に好ましくはカリウムとのウルソール酸の塩；
ｆ）リン脂質；
ｇ）セルロース又はセルロースエーテル又はこれらの組合せ；
ｈ）シリカ。
ｅ）アルカリ金属、好ましくはナトリウム及びカリウム、更に好ましくはカリウムとのウルソール酸の塩；
ｆ）リン脂質；
ｇ）セルロース又はセルロースエーテル又はこれらの組合せ；
ｈ）シリカ。
【0016】
更になお好ましくは、分散体ＳＤは、ウルソール酸カリウム塩、リン脂質、セルロース及びシリカからなる。
【0017】
本説明において、「ウルソール酸塩」という表現は、アルカリ金属とのウルソール酸の塩を意味することが意図され、そして上に特定される好ましい塩及び更に好ましい塩を含むことが意図される。
【0018】
一般に、用語が本明細書においてその最も広い範囲で使用される場合、特に断りのない限り、各々のより狭い範囲（好ましい定義）が含まれる。
【0019】
「リン脂質」という用語は、ダイズ、ヒマワリ、卵又は任意の他の植物源若しくは動物源から得られ、そしてホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン及びこれらの混合物を含む（ここで、アシル基は、同一であっても異なっていてもよく、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸又はリノレン酸から誘導することができる）、１種以上のレシチンから選択される物質を指す。好ましい実施態様によれば、リン脂質はダイズレシチンである。別の好ましい態様によれば、リン脂質はヒマワリレシチンである。
【0020】
本明細書に使用されるとき「固体分散体ＳＤ」又は「ＳＤ」又は「固体分散体」という用語は、その製剤が、溶媒法によって調製された固体状態の不活性担体（リン脂質）中に、アルカリ金属とのウルソール酸の塩を含有することを示す。ＳＤは、微結晶性セルロース又はセルロースエーテル又はこれらの組合せの表面上に堆積される。
【0021】
本明細書に記載の固体分散体は、適切には固体状態が懸濁又は分散された任意の水相を含有せず、そして具体的にはリポソーム、水中油型エマルション及び他の水性分散液を除外する。
【0022】
固体分散体ＳＤは、適切には重量比が０．２：１～３：１（０．３：１～３：１、０．４：１～２：１、好ましくは０．５：１～２：１、又は０．５：１～１：１、又は１：１を含む）であるウルソール酸塩及びリン脂質を含む。固体成分の相互量を示す比は、特に断りのない限り、重量比として表される。範囲が示されている場合、範囲の端が含まれる。例示的な実施態様において、固体分散体ＳＤ中のウルソール酸塩の量は、重量パーセントで１６％～７５％ w/w（２２％～７５％、２８％～６６％、好ましくは３３％～６６％、又は３３％～５０％、又は５０％を含む）である。
【0023】
固体分散体ＳＤは、以下を含むプロセス［プロセス（Ｐ１）］により調製することができる：
ａ－１）アルコール、好ましくはＣ１－Ｃ３脂肪族アルコール、更に好ましくはエタノール中で、ウルソール酸塩とリン脂質とを混合して、懸濁液を提供すること；
ｂ－１）工程ａ－１）で得られた懸濁液を、５分～５時間、好ましくは１～３時間の間、加熱還流すること；
ｃ－１）溶媒を除去して固体分散体ＳＤを提供すること。
ａ－１）アルコール、好ましくはＣ１－Ｃ３脂肪族アルコール、更に好ましくはエタノール中で、ウルソール酸塩とリン脂質とを混合して、懸濁液を提供すること；
ｂ－１）工程ａ－１）で得られた懸濁液を、５分～５時間、好ましくは１～３時間の間、加熱還流すること；
ｃ－１）溶媒を除去して固体分散体ＳＤを提供すること。
【0024】
工程ａ－１）において、ウルソール酸塩及びリン脂質は、０．２：１～３：１、好ましくは０．５：１～２：１の重量比で混合される。アルコールは、ウルソール酸塩の量に対して１０～２０容量の量で使用される。選択されたウルソール酸塩は、場合により、選択されたアルコールにウルソール酸を懸濁し、金属水酸化物を添加することにより、その場で調製することができる。特に、ウルソール酸カリウム塩は、エタノールにウルソール酸を懸濁した後、水酸化カリウムを添加することにより調製される。
【0025】
工程ｂ－１）において、加熱は、選択されたアルコールの還流温度で行われる。
【0026】
工程ｃ－１）において、アルコールの大部分は通常、減圧下での蒸発によって除去されて、固体残渣が得られるが、これは残留アルコールを含むＳＤであり、次に残渣を真空下で３０℃～７０℃の温度で、好ましくは６０℃で加熱することによって、アルコールの完全な除去が行われる。完全な除去とは、ＧＣ（ガスクロマトグラフィー）分析で検出されるアルコールの量がＩＣＨの限度（即ち、エタノールでは５０００ppm）よりも少ないことを意味する。
【0027】
次に、得られた粉末（乾燥ＳＤ）を粉砕して、典型的には１０μm～３００μmの範囲の所望の粒径を得る。
【0028】
１種以上の賦形剤（Ｅ）を更に含む固体分散体ＳＤは、選択された賦形剤を工程ｃ－１）の終わりに得られた分散体に乾式混合し、次いで所望の粒径に粉砕することによるか、あるいはプロセス［プロセス（Ｐ２）］であって、上記の工程ａ－１）の間に１種以上の賦形剤（Ｅ）を添加し、そして場合により工程ｃ－１）の終わりにも添加することを含むプロセスによるかのいずれかによって調製することができる。
【0029】
したがって、プロセス（Ｐ２）は次の工程を含む：
ａ－２）アルコール、好ましくはＣ１－Ｃ３脂肪族アルコール、更に好ましくはエタノール中でウルソール酸塩、リン脂質及び賦形剤（Ｅ）を混合して、懸濁液を提供すること；
ｂ－２）工程ａ－２）で得られた懸濁液を、５分～５時間、好ましくは１～３時間の間、加熱還流すること；
ｃ－２）溶媒を除去して固体を得、場合により更なる賦形剤（Ｅ）を添加し、粉砕して、固体分散体ＳＤを提供すること。
ａ－２）アルコール、好ましくはＣ１－Ｃ３脂肪族アルコール、更に好ましくはエタノール中でウルソール酸塩、リン脂質及び賦形剤（Ｅ）を混合して、懸濁液を提供すること；
ｂ－２）工程ａ－２）で得られた懸濁液を、５分～５時間、好ましくは１～３時間の間、加熱還流すること；
ｃ－２）溶媒を除去して固体を得、場合により更なる賦形剤（Ｅ）を添加し、粉砕して、固体分散体ＳＤを提供すること。
【0030】
工程ａ－２）において、ウルソール酸塩及びリン脂質は、０．２：１～３：１、好ましくは０．５：１～２：１の重量比で混合される。溶媒は、ウルソール酸の量に対して１０～３０容量の量で使用される。プロセス（Ｐ１）と同様に、プロセス（Ｐ２）においても、選択されたウルソール酸塩は、場合により、選択されたアルコールにウルソール酸を懸濁し、金属水酸化物を添加することにより、その場で調製することができる。特に、ウルソール酸カリウム塩は、エタノールにウルソール酸を懸濁した後、水酸化カリウムを添加することにより調製される。
【0031】
工程ａ－２）において、賦形剤（Ｅ）は、ウルソール酸塩に対して０．１：１～１：２、好ましくは０．５：１の重量比で使用される。
【0032】
工程ｂ－２）において、加熱は、選択されたアルコールの還流温度で行われる。
【0033】
工程ｃ－２）において、アルコールの大部分は通常、減圧下での蒸発によって除去されて、固体残渣が得られ、これを真空下で３０℃～７０℃の温度での、好ましくは６０℃での加熱に供することによって、残留アルコールを完全に除去する。次に得られた固体残渣を更なる賦形剤（Ｅ）と混合して、典型的には１０μm～３００μmの範囲にある、所望の粒径を有する固体分散体ＳＤを提供することができる。工程ｃ－２）の後に添加される任意の賦形剤（Ｅ）は、完全な溶媒除去後に得られる固体残渣に対して０．０１：１～０．１：１の量で使用される。よって、ウルソール酸塩に対する賦形剤（Ｅ）の全体的な重量比は、０．５：１～２：１の範囲であり得る。
【0034】
ウルソール酸のアルカリ金属塩、リン脂質、微結晶性セルロース及びシリカからなる好ましい固体分散体ＳＤを調製するためのプロセス（Ｐ２）において、微結晶性セルロースは工程ａ－２）で添加されるが、シリカは粉砕前の工程ｃ－２）の最後に添加される。
【0035】
上で予想されたとおり、本出願人によって実施された実験は、本発明の固体分散体ＳＤが、遊離ウルソール酸塩、遊離ウルソール酸に対して、またリン脂質を含むが、アルカリ金属を欠いているウルソール酸の固体分散体と比較して、人工胃液にはるかに溶解しやすいことを証明した。実際、胃腸条件のシミュレーションは、製品の生体内挙動を適切に予測するために、及び摂食状態と絶食状態の両方で適切な性能を持つ医薬品を特定するのに必要なヒトでの試験の規模と数を減らすために不可欠である（Klein, S.; AAPS Journal 2010, 12, 3, 397-406）。本出願人は、３つの異なるｐＨ値（ｐＨ １．６、６．５及び５．０）の３つの異なる人工胃液を使用して、胃の絶食状態、腸の絶食状態及び腸の摂食状態をシミュレーションして、以下を観察した：
－ｐＨ １．６での固体分散体ＳＤの溶解度は、０．５～０．３mg/mlであり、対応するリン脂質中のウルソール酸の固体分散体の溶解度よりも約６～１３倍高かった；
－ｐＨ ６．５での固体分散体ＳＤの溶解度は、１．１～１．２mg/mlであり、対応するリン脂質中のウルソール酸の固体分散体の溶解度よりも約２．５～２．８倍高かった；
－ｐＨ ５．０での固体分散体ＳＤの溶解度は、０．８～１．１mg/mlであり、対応するリン脂質中のウルソール酸の固体分散体の溶解度よりも２～２．５倍高かった。
－ｐＨ １．６での固体分散体ＳＤの溶解度は、０．５～０．３mg/mlであり、対応するリン脂質中のウルソール酸の固体分散体の溶解度よりも約６～１３倍高かった；
－ｐＨ ６．５での固体分散体ＳＤの溶解度は、１．１～１．２mg/mlであり、対応するリン脂質中のウルソール酸の固体分散体の溶解度よりも約２．５～２．８倍高かった；
－ｐＨ ５．０での固体分散体ＳＤの溶解度は、０．８～１．１mg/mlであり、対応するリン脂質中のウルソール酸の固体分散体の溶解度よりも２～２．５倍高かった。
【0036】
人工胃腸液への高い溶解度から鑑みて、固体分散体ＳＤは、経口投与製剤［製剤（Ｆ）］を調製するために有利に使用することができる。よって、固体分散体ＳＤ及び医薬品又は栄養補助食品等級の更なる成分を含む製剤（Ｆ）は、本発明の更なる態様である。製剤（Ｆ）の例は、チュアブル錠、カプセル剤、ゼラチン軟カプセル剤、ゼラチン硬カプセル剤、トローチ剤、チュアブルトローチ剤、ヘルスバー（health bars）、菓子、動物飼料、シリアル、シリアルコーティング、及びこれらの組合せを包含するが、これらに限定されない。製剤（Ｆ）は、当技術分野で公知の方法及び成分を用いて調製することができ、そしてそれらは、当業者が特定のニーズに応じてケースバイケースで選択することができよう。そのような成分の非限定的な例は、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、コーティング剤、着色剤、吸収促進剤、可溶化剤、安定剤、香味甘味料、防腐剤、保存料、抗酸化剤などを包含するが、これらに限定されない。
【0037】
本発明の固体分散体ＳＤ及び製剤（Ｆ）は、アルツハイマー病、パーキンソン病、運動ニューロン疾患、急性腎障害、腎疾患、非アルコール性脂肪肝疾患、２型糖尿病、心血管疾患、筋ジストロフィー、神経筋障害、サルコペニア及び筋萎縮障害の予防及び／又は治療に使用することができる。
【0038】
本発明は、以下の実験の項において非限定的な様式で更に詳細に開示される。
【0039】
実験の項
材料
ウルソール酸はSigma Aldrichから市販されている。
微結晶性セルロース（Avicel（登録商標））はDuPontから入手できる。
シリカ（Syloid（登録商標））はGraceから入手できる。
人工胃液ＦａＳＳＧＦ ｐＨ１．６、ＦａＳＳＩＦ ｐＨ６．５及びＦａＳＳＩＦ ｐＨ５．５は、BioRelevantから市販されている。
ウルソール酸カリウムは、標準的な手順によってウルソール酸から調製された。
方法
固体分散体の分析及び人工胃腸液への溶解度の測定は、以下に報告する機器及び条件を用いたＨＰＬＣによって実施された。
カラム
固定相：Symmetry C18。
サイズ：ｌ＝２５０mm；Ｉ．Ｄ．＝４．６mm、粒径５μm。
製造業者：Waters ; P/N: WAT054275。
移動相
溶媒Ａ：水中のギ酸０．０１％（Ｖ／Ｖ）
溶媒Ｂ：アセトニトリル中のギ酸０．０１％（Ｖ／Ｖ）
溶媒Ｃ：メタノール
線形勾配
材料
ウルソール酸はSigma Aldrichから市販されている。
微結晶性セルロース（Avicel（登録商標））はDuPontから入手できる。
シリカ（Syloid（登録商標））はGraceから入手できる。
人工胃液ＦａＳＳＧＦ ｐＨ１．６、ＦａＳＳＩＦ ｐＨ６．５及びＦａＳＳＩＦ ｐＨ５．５は、BioRelevantから市販されている。
ウルソール酸カリウムは、標準的な手順によってウルソール酸から調製された。
方法
固体分散体の分析及び人工胃腸液への溶解度の測定は、以下に報告する機器及び条件を用いたＨＰＬＣによって実施された。
カラム
固定相：Symmetry C18。
サイズ：ｌ＝２５０mm；Ｉ．Ｄ．＝４．６mm、粒径５μm。
製造業者：Waters ; P/N: WAT054275。
移動相
溶媒Ａ：水中のギ酸０．０１％（Ｖ／Ｖ）
溶媒Ｂ：アセトニトリル中のギ酸０．０１％（Ｖ／Ｖ）
溶媒Ｃ：メタノール
線形勾配
【0040】
【表1】
【0041】
分析条件
流量：１．０ml/分
検出：２０５nm
注入容量：１０μl
カラム温度：１５℃
オートサンプラー温度：２０℃
ランタイム：３２分
流量：１．０ml/分
検出：２０５nm
注入容量：１０μl
カラム温度：１５℃
オートサンプラー温度：２０℃
ランタイム：３２分
【0042】
調製実施例
【実施例】
【0043】
（本発明例）－リン脂質中のウルソール酸カリウム塩の固体分散体（ウルソール酸カリウム塩のその場での調製）
ウルソール酸（２．５ｇ、純度９０％、４．９２mmol）をエタノール（３０ml）に懸濁し、得られた懸濁液に最初にエタノール中の４％ ｗ／ｗ水酸化カリウム溶液（１．１６当量）を加え、次にヒマワリレシチン（５ｇ）を加え、１５分間加熱還流した。溶媒を減圧下で蒸発乾固して固体残渣を得、これを真空下で６０℃で乾燥させ、次いで粉砕した。乾燥固体７．５ｇが得られた。
ウルソール酸（２．５ｇ、純度９０％、４．９２mmol）をエタノール（３０ml）に懸濁し、得られた懸濁液に最初にエタノール中の４％ ｗ／ｗ水酸化カリウム溶液（１．１６当量）を加え、次にヒマワリレシチン（５ｇ）を加え、１５分間加熱還流した。溶媒を減圧下で蒸発乾固して固体残渣を得、これを真空下で６０℃で乾燥させ、次いで粉砕した。乾燥固体７．５ｇが得られた。
【実施例】
【0044】
（本発明例）－リン脂質、微結晶性セルロース及びシリカ中のウルソール酸カリウム塩の固体分散体（ウルソール酸カリウム塩のその場での調製）
ウルソール酸（２．５ｇ、純度９０％、４．９２mmol）をエタノール（３０ml）に懸濁し、得られた懸濁液に最初にエタノール中の４％ ｗ／ｗ水酸化カリウム溶液（１．１６当量）を加え、次にヒマワリレシチン（３．７５ｇ）及び微結晶性セルロース（１．２５ｇ）を加えた。懸濁液を１５分間加熱還流し、次に溶媒を減圧下で蒸発乾固して固体残渣を得、これを真空下で６０℃で乾燥させ、次いでシリカ（７５mg）の存在下で粉砕した。収量：標題生成物７．５ｇ。
ウルソール酸（２．５ｇ、純度９０％、４．９２mmol）をエタノール（３０ml）に懸濁し、得られた懸濁液に最初にエタノール中の４％ ｗ／ｗ水酸化カリウム溶液（１．１６当量）を加え、次にヒマワリレシチン（３．７５ｇ）及び微結晶性セルロース（１．２５ｇ）を加えた。懸濁液を１５分間加熱還流し、次に溶媒を減圧下で蒸発乾固して固体残渣を得、これを真空下で６０℃で乾燥させ、次いでシリカ（７５mg）の存在下で粉砕した。収量：標題生成物７．５ｇ。
【実施例】
【0045】
（本発明例）－リン脂質、微結晶性セルロース及びシリカ中のウルソール酸カリウム塩の固体分散体
ウルソール酸カリウム塩（６．５ｇ、含有率７７％）、ヒマワリレシチン（７．５ｇ）及び微結晶性セルロース（２．５ｇ）をエタノールに懸濁して、１５分間加熱還流した。溶媒を減圧下で蒸発乾固して固体残渣を得、これを真空下で６０℃で乾燥させ、次にシリカ（０．１６ｇ）の存在下で粉砕した。標題生成物１５ｇを得た。
ウルソール酸カリウム塩（６．５ｇ、含有率７７％）、ヒマワリレシチン（７．５ｇ）及び微結晶性セルロース（２．５ｇ）をエタノールに懸濁して、１５分間加熱還流した。溶媒を減圧下で蒸発乾固して固体残渣を得、これを真空下で６０℃で乾燥させ、次にシリカ（０．１６ｇ）の存在下で粉砕した。標題生成物１５ｇを得た。
【実施例】
【0046】
（比較例）－リン脂質とのウルソール酸の固体分散体（アルカリ金属を欠いている）
ウルソール酸（０．５ｇ、含有率９４％）及びヒマワリレシチン（１．０ｇ）をエタノールに懸濁して、６０分間加熱還流した。溶媒を減圧下で蒸発乾固して固体残渣を得、これを真空下で６０℃で乾燥させ、次に粉砕した。標題生成物１．５ｇを得た。
ウルソール酸（０．５ｇ、含有率９４％）及びヒマワリレシチン（１．０ｇ）をエタノールに懸濁して、６０分間加熱還流した。溶媒を減圧下で蒸発乾固して固体残渣を得、これを真空下で６０℃で乾燥させ、次に粉砕した。標題生成物１．５ｇを得た。
【0047】
溶解試験
試験１－リン脂質とのウルソール酸カリウム塩の固体分散体の溶解
実施例１のリン脂質とのウルソール酸カリウム塩の固体分散体（３００mg）を、選択した人工胃腸液（２０mL）に懸濁して、２５℃で２時間撹拌した。撹拌を停止し、溶解していない固体からデカントした。上清を親水性０．２μm ＰＴＦＡフィルターで濾過し、ウルソール酸の含量を分析した。
試験１－リン脂質とのウルソール酸カリウム塩の固体分散体の溶解
実施例１のリン脂質とのウルソール酸カリウム塩の固体分散体（３００mg）を、選択した人工胃腸液（２０mL）に懸濁して、２５℃で２時間撹拌した。撹拌を停止し、溶解していない固体からデカントした。上清を親水性０．２μm ＰＴＦＡフィルターで濾過し、ウルソール酸の含量を分析した。
【0048】
試験５－微結晶性セルロース及びシリカと配合されたウルソール酸カリウム塩の固体分散体の溶解
実施例１の分散体の代わりに実施例３の微結晶性セルロース及びシリカと配合されたリン脂質とのウルソール酸カリウム塩の固体分散体３００mgを用いて、試験１と同じ手順に従った。
実施例１の分散体の代わりに実施例３の微結晶性セルロース及びシリカと配合されたリン脂質とのウルソール酸カリウム塩の固体分散体３００mgを用いて、試験１と同じ手順に従った。
【0049】
試験２（比較例）－ウルソール酸の溶解
実施例１の分散体の代わりにウルソール酸１００mgを用いて、試験１と同じ手順に従った。
実施例１の分散体の代わりにウルソール酸１００mgを用いて、試験１と同じ手順に従った。
【0050】
試験３（比較例）－ウルソール酸カリウム塩の溶解
実施例１の分散体の代わりにウルソール酸カリウム塩１００mgを用いて、試験１と同じ手順に従った。
実施例１の分散体の代わりにウルソール酸カリウム塩１００mgを用いて、試験１と同じ手順に従った。
【0051】
試験４（比較例）－リン脂質とのウルソール酸の固体分散体の溶解
実施例１の分散体の代わりにリン脂質とのウルソール酸の固体分散体３００mgを用いて、試験１と同じ手順に従った。
実施例１の分散体の代わりにリン脂質とのウルソール酸の固体分散体３００mgを用いて、試験１と同じ手順に従った。
【0052】
試験結果は、以下の表１に報告される。示されているとおり、アルカリ金属とのウルソール酸の塩及びリン脂質を使用して調製された固体分散体ＳＤは、アルカリ金属単独、更にはアルカリ金属を欠いた固体分散体ＳＤと比較して、ウルソール酸の最高の溶解を提供した。
【0053】
【表2】
【国際調査報告】