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青山学院大学 (神奈川県相模原市中央区淵野辺)

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特表2023-500703ｐＨ応答性ブロックコポリマー組成物、ミセル、及び使用の方法

書誌要約請求の範囲詳細な説明課題実施例実施するための形態図面の説明

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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-01-10

(54)【発明の名称】ｐＨ応答性ブロックコポリマー組成物、ミセル、及び使用の方法

(51)【国際特許分類】

A61K 47/60 20170101AFI20221227BHJP

A61K 45/00 20060101ALI20221227BHJP

A61K 38/20 20060101ALI20221227BHJP

A61K 39/395 20060101ALI20221227BHJP

A61P 37/02 20060101ALI20221227BHJP

A61P 43/00 20060101ALI20221227BHJP

A61K 31/537 20060101ALI20221227BHJP

A61P 1/02 20060101ALI20221227BHJP

A61P 1/04 20060101ALI20221227BHJP

A61P 1/18 20060101ALI20221227BHJP

A61P 11/00 20060101ALI20221227BHJP

A61P 11/02 20060101ALI20221227BHJP

A61P 11/04 20060101ALI20221227BHJP

A61P 13/08 20060101ALI20221227BHJP

A61P 13/10 20060101ALI20221227BHJP

A61P 13/12 20060101ALI20221227BHJP

A61P 15/00 20060101ALI20221227BHJP

A61P 13/02 20060101ALI20221227BHJP

A61P 17/00 20060101ALI20221227BHJP

A61P 35/00 20060101ALI20221227BHJP

A61K 9/48 20060101ALI20221227BHJP

C08F 293/00 20060101ALI20221227BHJP

C08F 20/34 20060101ALI20221227BHJP

C08G 81/02 20060101ALI20221227BHJP

A61K 47/34 20170101ALI20221227BHJP

【ＦＩ】

A61K47/60

A61K45/00

A61K38/20

A61K39/395 D

A61P37/02

A61P43/00 105

A61P43/00 111

A61K31/537

A61P1/02

A61P1/04

A61P1/18

A61P11/00

A61P11/02

A61P11/04

A61P13/08

A61P13/10

A61P13/12

A61P15/00

A61P13/02

A61P17/00

A61P35/00

A61K9/48

C08F293/00

C08F20/34

C08G81/02

A61K47/34

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022526022

(86)(22)【出願日】2020-11-03

(85)【翻訳文提出日】2022-07-01

(86)【国際出願番号】 US2020058752

(87)【国際公開番号】W WO2021091924

(87)【国際公開日】2021-05-14

(31)【優先権主張番号】62/930,530

(32)【優先日】2019-11-04

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522176078

【氏名又は名称】オンコナノ・メディスン・インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110001173

【氏名又は名称】弁理士法人川口國際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ジャオ，ティアン

(72)【発明者】

【氏名】ディン，シンリャン

(72)【発明者】

【氏名】ミラー，ジェイソン

(72)【発明者】

【氏名】キャンベル，アシュリー

(72)【発明者】

【氏名】バラドワジ，ガウラブ

(72)【発明者】

【氏名】グタウスキー，スティーブン

(72)【発明者】

【氏名】ロビンソン，ドルー

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C085

4C086

4J026

4J031

4J100

【Ｆターム（参考）】

4C076AA53

4C076CC01

4C076CC07

4C076CC10

4C076CC15

4C076CC16

4C076CC17

4C076CC18

4C076CC27

4C076EE10

4C076EE59

4C076FF34

4C084AA02

4C084AA03

4C084AA17

4C084BA44

4C084DA12

4C084DA14

4C084MA05

4C084MA37

4C084NA10

4C084ZA021

4C084ZA341

4C084ZA591

4C084ZA661

4C084ZA671

4C084ZA811

4C084ZA891

4C084ZB021

4C084ZB211

4C084ZB261

4C085AA13

4C085EE01

4C085EE05

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086CB25

4C086MA01

4C086MA02

4C086MA04

4C086MA05

4C086MA37

4C086NA10

4C086ZA02

4C086ZA34

4C086ZA59

4C086ZA66

4C086ZA67

4C086ZA81

4C086ZA89

4C086ZB26

4C086ZC41

4J026HA11

4J026HA29

4J026HB11

4J026HB29

4J026HB45

4J026HB48

4J026HC11

4J026HC29

4J026HC45

4J026HD11

4J026HE01

4J026HE04

4J031AA20

4J031AA53

4J031AB01

4J031AC03

4J031AD01

4J031AF03

4J100AL08P

4J100AL08Q

4J100AL08R

4J100AM54R

4J100BA02R

4J100BA29Q

4J100BA31P

4J100BA34R

4J100BA38R

4J100BA51R

4J100BC65P

4J100BC69R

4J100CA04

4J100CA05

4J100FA03

(57)【要約】

本明細書に記載されているのは、ブロックコポリマー及びがんの治療に有用な治療剤を含む治療的なｐＨ応答性組成物である。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【化1】

【請求項2】

Ｒ^１及びＲ^２が、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキルである、請求項１に記載のブロックコポリマー。

【請求項3】

Ｒ^１及びＲ^２が、各々独立して、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３又は－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である、請求項１又は２に記載のブロックコポリマー。

【請求項4】

Ｒ^１及びＲ^２が、各々－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である、請求項１～３のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項5】

Ｒ^１及びＲ^２が、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する、請求項１に記載のブロックコポリマー。

【請求項6】

Ｒ^１及びＲ^２が一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_３ＣＨ_２－又は－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である、請求項１又は５に記載のブロックコポリマー。

【請求項7】

ｘ_１が、５０～２００、６０～１６０又は９０～１４０の整数である、請求項１～６のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項8】

ｘ_１が、９０～１４０である、請求項７に記載のブロックコポリマー。

【請求項9】

ｙ_１が、１～６、１～５、１～４又は１～３の整数である、請求項１～８のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項10】

ｙ_１が０である、請求項１～８のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項11】

ｚ_１が、１～９、１～８、１～７、１～６、１～５、１～４又は１～３の整数である、請求項１～１０のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項12】

ｚ_１が０である、請求項１～１０のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項13】

ｎ_１が、６０～１５０又は１００～１４０の整数である、請求項１～１２のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項14】

ｎ_１が、１００～１４０である、請求項１～１２のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項15】

Ｘ^１がハロゲンである、請求項１～１４のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項16】

Ｘ^１が－Ｂｒである、請求項１５に記載のブロックコポリマー。

【請求項17】

各Ｒ^３が、独立して、アシル又はＩＣＧである、請求項１～１６のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項18】

各Ｒ^３が、独立して水素である、請求項１～１６のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項19】

Ｌ^１が、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている、請求項１～１８のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項20】

Ｌ^１が、任意選択的に置換されているＰＥＧリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている、請求項１～１８のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項21】

Ｌ^１が、以下である、請求項１～１８のいずれか一項に記載のブロックコポリマー：

【化2】

（式中、ｍ_１は、２～２００である。）。

【請求項22】

式（Ｉ）のブロックコポリマーが、式（Ｉ－ａ）の構造、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物を有する、請求項１に記載のブロックコポリマー：

【化3】

（式中：
ｍ_１は、１０～２００の整数であり；
Ａは、結合、又はマレイミド残基で任意選択的に置換されている－Ｃ（Ｏ）－である。）。

【請求項23】

治療剤が、サイトカイン若しくはその断片、操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である、請求項１～２２のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項24】

サイトカインが、ＩＬ－２、ＩＬ－１２若しくはＩＬ－１５又はその断片である、請求項２３に記載のブロックコポリマー。

【請求項25】

サイトカインが、ＩＬ－２又はその断片である、請求項２３に記載のブロックコポリマー。

【請求項26】

操作された抗体断片が、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーである、請求項２３に記載のブロックコポリマー。

【請求項27】

小分子が、メイタンシン又はその誘導体である、請求項２３に記載のブロックコポリマー。

【請求項28】

式（ＩＩ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【化4】

【請求項29】

Ｒ^５及びＲ^６が、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキルである、請求項２８に記載のブロックコポリマー。

【請求項30】

Ｒ^５及びＲ^６が、各々独立して、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３又は－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である、請求項２８又は２９に記載のブロックコポリマー。

【請求項31】

Ｒ^５及びＲ^６が、各々、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である、請求項２８～３０のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項32】

Ｒ^５及びＲ^６が、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する、請求項２８に記載のブロックコポリマー。

【請求項33】

Ｒ^５及びＲ^６が一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_３ＣＨ_２－又は－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である、請求項２８又は３２に記載のブロックコポリマー。

【請求項34】

ｘ_２が、５０～２００、６０～１６０又は９０～１４０の整数である、請求項２８～３３のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項35】

ｘ_２が、９０～１４０である、請求項３４に記載のブロックコポリマー。

【請求項36】

ｙ_２が、１～９、１～８、１～７、１～６、１～５、１～４又は１～３の整数である、請求項２８～３５のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項37】

ｙ_２が０である、請求項２８～３６のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項38】

ｎ_２が、６０～１５０又は１００～１４０の整数である、請求項２８～３７のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項39】

ｎ_２が、１００～１４０である、請求項３８に記載のブロックコポリマー。

【請求項40】

Ｘ^２がハロゲンである、請求項２８～３９のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項41】

Ｘ^２が－Ｂｒである、請求項４０に記載のブロックコポリマー。

【請求項42】

各Ｒ^７が、独立して、アシル又はＩＣＧである、請求項２８～４１のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項43】

各Ｒ^７が、独立して水素である、請求項２８～４１のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項44】

Ｚ^１が－Ｏ－である、請求項２８～４３のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項45】

Ｚ^１が－ＮＨ－である、請求項２８～４３のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項46】

Ｚ^２が、－Ｏ－又は－ＮＨ－である、請求項２８～４５のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項47】

Ｚ^２が、任意選択的に置換されているトリアゾール残基である、請求項２８～４６のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項48】

Ｌ^２が、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている、請求項２８～４７のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項49】

Ｌ^２が、任意選択的に置換されているＰＥＧリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている、請求項２８～４８のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項50】

Ｌ^２が、

【化5】

（式中、ｍ_２は、２～２００である。）
である、請求項２８～４８のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項51】

式（ＩＩ）のブロックコポリマーが、式（ＩＩ－ａ）の構造、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物を有する、請求項２８に記載のブロックコポリマー：

【化6】

（式中：
ｍ_２は、２～２００であり；
Ａは、結合、又はマレイミド残基で任意選択的に置換されている－Ｃ（Ｏ）－である。）。

【請求項52】

治療剤が、サイトカイン若しくはその断片、操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である、請求項２８～５１のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項53】

サイトカインが、ＩＬ－２、ＩＬ－１２若しくはＩＬ－１５又はその断片である、請求項５２に記載のブロックコポリマー。

【請求項54】

サイトカインが、ＩＬ－２又はその断片である、請求項５２に記載のブロックコポリマー。

【請求項55】

操作された抗体断片が、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーである、請求項５２に記載のブロックコポリマー。

【請求項56】

小分子が、メイタンシン又はその誘導体である、請求項５２に記載のブロックコポリマー。

【請求項57】

ミセルの形態である、請求項１～５６のいずれか一項に記載のブロックコポリマー。

【請求項58】

以下を含むミセル：
（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【化7】

（式中：
ｎ_３は、１０～２００の整数であり；
ｘ_３は、４０～３００の整数であり；
ｙ_３は、０～６の整数であり；
ｚ_３は、０～１０の整数であり；
Ｘ^３は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
各Ｒ^１０は、独立して、水素又はＩＣＧであり；
Ｒ^８及びＲ^９は、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。）；並びに
（ｉｉ）ブロックコポリマーによってカプセル化された治療剤。

【請求項59】

Ｒ^８及びＲ^９が、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキルである、請求項５８に記載のミセル。

【請求項60】

Ｒ^８及びＲ^９が、各々独立して、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３又は－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である、請求項５８又は５９に記載のミセル。

【請求項61】

Ｒ^８及びＲ^９が、各々、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である、請求項５８～６０のいずれか一項に記載のミセル。

【請求項62】

Ｒ^８及びＲ^８が、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する、請求項５８に記載のミセル。

【請求項63】

Ｒ^８及びＲ^９が一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_３ＣＨ_２－又は－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である、請求項５８又は６２に記載のミセル。

【請求項64】

ｘ_３が、５０～２００、６０～１６０又は９０～１４０の整数である、請求項５８～６３のいずれか一項に記載のミセル。

【請求項65】

ｘ_３が、９０～１４０である、請求項６４に記載のミセル。

【請求項66】

ｙ_３が、１～６、１～５、１～４又は１～３の整数である、請求項５８～６５のいずれか一項に記載のミセル。

【請求項67】

ｙ_３が０である、請求項５８～６５のいずれか一項に記載のミセル。

【請求項68】

ｚ_３が、１～９、１～８、１～７、１～６、１～５、１～４又は１～３の整数である、請求項５８～６６のいずれか一項に記載のミセル。

【請求項69】

ｚ_３が０である、請求項５８～６６のいずれか一項に記載のミセル。

【請求項70】

ｎ_３が、６０～１５０又は１００～１４０の整数である、請求項５８～６９のいずれか一項に記載のミセル。

【請求項71】

ｎ_３が、１００～１４０である、請求項６６に記載のミセル。

【請求項72】

Ｘ^３がハロゲンである、請求項５８～７１のいずれか一項に記載のミセル。

【請求項73】

Ｘ^３が－Ｂｒである、請求項７２に記載のミセル。

【請求項74】

治療剤が、サイトカイン若しくはその断片、操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である、請求項５８～７３のいずれか一項に記載のミセル。

【請求項75】

治療剤が、サイトカイン又はその断片である、請求項７４に記載のミセル。

【請求項76】

サイトカインが、ＩＬ－２、ＩＬ－１２若しくはＩＬ－１５又はその断片である、請求項７５に記載のミセル。

【請求項77】

サイトカインが、ＩＬ－２又はその断片である、請求項７５に記載のミセル。

【請求項78】

操作された抗体断片が、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー又はその断片である、請求項７４に記載のミセル。

【請求項79】

小分子が、メイタンシン又はその誘導体である、請求項７４に記載のミセル。

【請求項80】

以下を含むミセル：
（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【化8】

（式中：
ｎ_３は、１０～２００の整数であり；
ｘ_３は、４０～３００の整数であり；
ｙ_３は、０～６の整数であり；
ｚ_３は、０～１０の整数であり；
Ｘ^３は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^８及びＲ^９は、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成し；
各Ｒ^１０は、独立して、水素又はＩＣＧである。）；並びに
（ｉｉ）請求項１～２７のいずれか一項に記載のブロックコポリマー；又は請求項２８～５６のいずれかに記載のブロックコポリマー。

【請求項81】

以下を含むミセル：
（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【化9】

（式中：
ｎ_３は、１０～２００の整数であり；
ｘ_３は、４０～３００の整数であり；
ｙ_３は、０～６の整数であり；
ｚ_３は、０～１０の整数であり；
Ｘ^３は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
各Ｒ^１０は、独立して、水素又はＩＣＧであり；
Ｒ^８及びＲ^９は、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。）；
（ｉｉ）請求項１～２７のいずれか一項に記載のブロックコポリマー；並びに
（ｉｉｉ）請求項２８～５６のいずれかに記載のブロックコポリマー。

【請求項82】

式（ＩＩＩ）のブロックコポリマーと、請求項１～２７のいずれか一項又は請求項２８～５６のいずれか一項に記載のブロックコポリマーとの比が、１：９９～９９：１であるか、又はその中のいずれかの比である、請求項８０又は８１に記載のミセル。

【請求項83】

ｐＨ遷移点及び任意選択的に発光スペクトルを有する、請求項５８～７８のいずれか一項に記載のｐＨ応答組成物。

【請求項84】

ｐＨ遷移点及び任意選択的に発光スペクトルを有する、請求項７９～８２のいずれか一項に記載のｐＨ応答組成物。

【請求項85】

ｐＨ遷移点が、４～８、６～７．５、又は４．５～５．５の間である、請求項８３又は８４に記載のｐＨ応答性組成物。

【請求項86】

０．２５又は０．１５未満のｐＨ単位のｐＨ応答を有する、請求項８３又は８４に記載のｐＨ応答性組成物。

【請求項87】

発光スペクトルが、７００～９００ｎｍの間である、請求項８３～８４に記載のｐＨ応答性組成物。

【請求項88】

請求項５８～７８のいずれか一項に記載のミセルの治療有効量を患者に投与することを含む、がんの治療を必要とする患者におけるがんを治療するための方法。

【請求項89】

がんが固形腫瘍である、請求項８８に記載の方法。

【請求項90】

がんが、乳がん、子宮頸がん、頭頸部扁平細胞癌（ＮＨＳＣＣ）、腹膜転移、肺がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、膀胱がん、腎臓がん、尿道がん、食道がん、結腸直腸がん、脳がん又は皮膚がんである、請求項８８又は８９に記載の方法。

【請求項91】

式（Ｉ－ｂ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【化10】

（式中：
ｎ_１は、１０～２００の整数であり；
ｘ_１は、４０～３００の整数であり；
ｙ_１は、０～６の整数であり；
ｚ_１は、０～１０の整数であり；
Ｘ^１は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^１及びＲ^２は、各々独立して、置換若しくは非置換のＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^１及びＲ^２は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成し；
各Ｒ^３は、独立して、水素、アシル又はＩＣＧであり；
Ｌ^３は、結合、Ｃ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカー又はＰＥＧリンカーであり；
Ｂは、マレイミド、

【化11】

である。）。

【請求項92】

【化12】

（式中、ｍ_１は、２～２００である。）
である、請求項９１に記載のブロックコポリマー；又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物。

【請求項93】

式（ＩＩ－ｂ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【化13】

（式中：
ｎ_２は、２～２００の整数であり；
ｘ_２は、４０～３００の整数であり；
ｙ_２は、０～６の整数であり；
Ｘ^２は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^５及びＲ^６は、各々独立して、置換若しくは非置換のＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^５及びＲ^６は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成し；
各Ｒ^７は、独立して、水素、アシル又はＩＣＧであり；
Ｚ^１は、－ＮＨ－又は－Ｏ－であり；
Ｚ^２は、－ＮＨ－、－Ｏ－、又は置換トリアゾールであり；
Ｌ^４は、結合、Ｃ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカー又はＰＥＧリンカーであり；
Ｂは、マレイミド、

【化14】

である。）。

【請求項94】

【化15】

（式中、ｍ_２は、２～２００である。）
である、請求項９３に記載のブロックコポリマー；又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、２０１９年１１月４日に出願された米国仮出願第６２／９３０，５３０号の利益を主張するものであり、その出願は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0002】

多機能ナノ粒子は、バイオセンサー、診断用ナノプローブ及び標的化薬物送達系など広範囲の用途において注目を集めている。これらの努力は、様々な生理学系における薬剤送達の正確な時空間的制御を介する診断及び治療における副作用の低減とともに生物学的な特異性を改善する必要性によって大幅に推進されてきた。この目標を達成するため、刺激応答性ナノプラットフォームを開発することに努力が、向けられてきた。送達効率に照準を定めるために利用されている環境刺激としては、ｐＨ、温度、酵素発現、レドックス反応及び光誘発が挙げられる。これらの活性化シグナルの中で、ｐＨトリガーは、２つの型のｐＨ差異：（ａ）病的組織（例えば腫瘍）対正常組織、及び（ｂ）酸性細胞内区画に基づく最も広範に研究された刺激の１つである。

【0003】

例えば、腫瘍細胞外微小環境（ｐＨ約６．５）の通常でない酸性度により、いくつかのｐＨ応答性ナノ系は、腫瘍画像化の感受性又は治療の効力を増加させることが報告されている。しかしながら、酸性環境において加水分解によって薬物を放出するポリマーミセル組成物について、薬物の放出に数日かかることがある。その時間期間において、身体がミセルを排泄又は分解することがある。

【0004】

酸性エンド－／リソソーム区画を標的化するため、ｐＨ切断可能リンカーを有するナノベクターが、ペイロード生物学的利用能を改善するために調査されている。さらに、ｐＨ誘発電荷変換を有するいくつかのスマートナノベクターが、薬効性を増加させるように設計されている。エンドサイトーシス系は、内部移行されたカーゴの選別、加工及び劣化において特有の役割を有する一連の区画から構成されている。ｐＨ感受性ナノ粒子による異なるエンドサイトーシス区画の選択的な標的化は、短いナノ粒子残留時間（＜分）及びこれらの区画における小さいｐＨ差異（例えば、早期のエンドソームとリソソームとの間の＜１ｐＨ単位）により、特に困難である。

【0005】

免疫療法は、がん治療にとって強力な戦略となってきている。インターロイキン－２（ＩＬ－２）などの免疫モジュレーターは、抗腫瘍性免疫応答を誘発し得るが、それらの臨床的な適用は、重篤な用量制限毒性（例えば、広域スペクトルの毒性／副作用、例えば血管漏出症候群）を引き出すことがある好ましくない薬物動態学的特性によって制限されている。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

必要とされているものは、治療用途のための改善されたｐＨ応答性ミセル組成物、特に、増加された薬物ペイロード、延長された血液循環時間、標的部位での薬物の急速な送達、及び特定の狭いｐＨ範囲内の応答性（例えば、腫瘍又は特定の小器官の標的化のため）を有する組成物である。

【課題を解決するための手段】

【0007】

（発明の要旨）
本明細書に記載されているブロックコポリマーは、原発性及び転移性腫瘍組織（リンパ節を含める）の治療に有用な治療剤である。本明細書において表されているブロックコポリマー及びミセル組成物は、がん性組織と正常組織との間のこのユビキタスなｐＨ差異を利用し、細胞によって取り込まれた後に高感受性及び特異的応答を提供し、したがって、腫瘍組織への治療的ペイロードの配置を可能にする。

【0008】

一態様において、本明細書において提供されているのは、式（Ｉ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である：

【0009】

【化1】

（式中：
ｎ_１は、１０～２００の整数であり；
ｘ_１は、４０～３００の整数であり；
ｙ_１は、０～６の整数であり；
ｚ_１は、０～１０の整数であり；
Ｘ^１は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^１及びＲ^２は、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^１及びＲ^２は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成し；
各Ｒ^３は、独立して、水素、アシル又はＩＣＧであり；
Ｌ^１は、結合若しくは－Ｃ（Ｏ）－、又は任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカー若しくはＰＥＧリンカーであり；
Ｙは、治療剤である。）。
一部の実施形態において、各Ｒ^１及びＲ^２は、独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキルである。一部の実施形態において、各Ｒ^１及びＲ^２は、独立して、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３又は－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。一部の実施形態において、各Ｒ^１及びＲ^２は、独立して、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。一部の実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。一部の実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２は一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_３ＣＨ_２－又は－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である。一部の実施形態において、ｘ_１は、５０～２００、６０～１６０又は９０～１４０の整数である。一部の実施形態において、ｘ_１は、９０～１４０である。一部の実施形態において、ｙ_１は０である。一部の実施形態において、ｚ_１は、１～９、１～８、１～７、１～６、１～５、１～４又は１～３の整数である。一部の実施形態において、ｚ_１は０である。一部の実施形態において、ｎ_１は、６０～１５０又は１００～１４０の整数である。一部の実施形態において、ｎ_１は、１００～１４０である。一部の実施形態において、Ｘ^１は、ハロゲンである。一部の実施形態において、Ｘ^１は、臭化物である。一部の実施形態において、各Ｒ^３は、独立して、アシル又はＩＣＧである。一部の実施形態において、Ｌ^１は、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている。一部の実施形態において、治療剤は、サイトカイン若しくはその断片、操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２、ＩＬ－１２若しくはＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、操作された抗体断片は、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシン又はその誘導体である。

【0010】

本明細書において提供されている一部の実施形態において、式（Ｉ）のブロックコポリマーは、式（Ｉ－ａ）の構造、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物を有する：

【0011】

【化2】

（式中：
ｍ_１は、１０～２００の整数であり；
Ａは、結合、又はマレイミド残基で任意選択的に置換されている、－Ｃ（Ｏ）－である。）。
別の態様において、本明細書において提供されているのは、式（Ｉ－ｂ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である：

【0012】

【化3】

【0013】

【化4】

である。）。
別の態様において、本明細書において提供されているのは、式（ＩＩ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である：

【0014】

【化5】

（式中：
ｎ_２は、２～２００の整数であり；
ｘ_２は、４０～３００の整数であり；
ｙ_２は、０～６の整数であり；
Ｘ^２は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^５及びＲ^６は、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^５及びＲ^６は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成し；
各Ｒ^７は、独立して、水素、アシル又はＩＣＧであり；
Ｚ^１は、－ＮＨ－又は－Ｏ－であり；
Ｚ^２は、－ＮＨ－、－Ｏ－、又は置換トリアゾールであり；
Ｌ^２は、結合、又は－Ｃ（Ｏ）－、又は任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカー若しくはＰＥＧリンカーであり；
Ｙは、治療剤である。）。
一部の実施形態において、各Ｒ^５及びＲ^６は、独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキルである。一部の実施形態において、各Ｒ^５及びＲ^６は、独立して、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３又は－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。一部の実施形態において、各Ｒ^５及びＲ^６は、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。一部の実施形態において、Ｒ^５及びＲ^６は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。一部の実施形態において、Ｒ^５及びＲ^６は、一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_３ＣＨ_２－又は－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である。一部の実施形態において、ｘ_２は、５０～２００、６０～１６０又は９０～１４０の整数である。一部の実施形態において、ｘ_２は、９０～１４０である。一部の実施形態において、ｙ_２は、１～９、１～８、１～７、１～６、１～５、１～４又は１～３の整数である。一部の実施形態において、ｙ_２は０である。一部の実施形態において、ｎ_２は、６０～１５０又は１００～１４０の整数である。一部の実施形態において、ｎ_２は、１００～１４０である。一部の実施形態において、Ｘ^２はハロゲンである。一部の実施形態において、Ｘ^２は－Ｂｒである。一部の実施形態において、Ｚ^１は、－Ｏ－又は－ＮＨ－である。一部の実施形態において、Ｚ^２は、－Ｏ－又は－ＮＨ－である。一部の実施形態において、Ｚ^２は、任意選択的に置換されているトリアゾール残基である。一部の実施形態において、Ｌ^２は、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている。一部の実施形態において、Ｌ^２は、任意選択的に置換されているＰＥＧリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている。一部の実施形態において、治療剤は、サイトカイン若しくはその断片、操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２、ＩＬ－１２若しくはＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、操作された抗体断片は、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシン又はその誘導体である。

【0015】

一部の実施形態において、式（ＩＩ）のブロックコポリマーは、式（ＩＩ－ａ）の構造、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物を有する：

【0016】

【化6】

（式中：
ｍ_２は、２～２００であり；
Ａは、結合、又はマレイミド残基で任意選択的に置換されている－Ｃ（Ｏ）－である。）。
別の態様において、本明細書において提供されているのは、式（ＩＩ－ｂ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である：

【0017】

【化7】

【0018】

【化8】

である。）。
別の態様において、本明細書において提供されているのは、以下を含むミセルである：
（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【0019】

【化9】

【0020】

別の態様において、本明細書において提供されているのは、以下を含むミセルである：
（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【0021】

【化10】

（式中：
ｎ_３は、１０～２００の整数であり；
ｘ_３は、４０～３００の整数であり；
ｙ_３は、０～６の整数であり；
ｚ_３は、０～１０の整数であり；
Ｘ^３は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
各Ｒ^１０は、独立して、水素又はＩＣＧであり；
Ｒ^８及びＲ^９は、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。）
（ｉｉ）式（Ｉ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【0022】

【化11】

【0023】

【化12】

（式中：
ｎ_２は、２～２００の整数であり；
ｘ_２は、４０～３００の整数であり；
ｙ_２は、０～６の整数であり；
Ｘ^２は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^５及びＲ^６は、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^５及びＲ^６は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成し；
各Ｒ^７は、独立して、水素、アシル又はＩＣＧであり；
Ｚ^１は、－ＮＨ－又は－Ｏ－であり；
Ｚ^２は、－ＮＨ－、－Ｏ－、又は置換トリアゾール残基であり；
Ｌ^２は、結合若しくは－Ｃ（Ｏ）－、又は任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカー若しくはＰＥＧリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている；
Ｙは、治療剤である。）。
一部の実施形態において、各Ｒ^８及びＲ^９は、独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキルである。一部の実施形態において、各Ｒ^８及びＲ^９は、独立して、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３又は－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。一部の実施形態において、各Ｒ^８及びＲ^９は、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。一部の実施形態において、Ｒ^８及びＲ^９は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。一部の実施形態において、Ｒ^８及びＲ^９は一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_３ＣＨ_２－又は－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である。一部の実施形態において、ｘ_３は、５０～２００、６０～１６０又は９０～１４０の整数である。一部の実施形態において、ｘ_３は、９０～１４０である。一部の実施形態において、ｙ_３は、１～６、１～５、１～４又は１～３の整数である。一部の実施形態において、ｙ_３は０である。一部の実施形態において、ｚ_３は、１～９、１～８、１～７、１～６、１～５、１～４又は１～３の整数である。一部の実施形態において、ｚ_３は０である。一部の実施形態において、ｎ_３は、６０～１５０又は１００～１４０の整数である。一部の実施形態において、治療剤は、サイトカイン若しくはその断片、操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である。一部の実施形態において、サイトカイン又はその断片は、ＩＬ－１２又はその断片である。一部の実施形態において、操作された抗体断片は、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシン又はその誘導体である。

【0024】

本明細書に存在する一部の実施形態において、ミセルは、以下を含む：（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー；及び（ｉｉ）式（Ｉ）のブロックコポリマー。本明細書に存在する一部の実施形態において、ミセルは、以下を含む：（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー；及び（ｉｉ）式（ＩＩ）のブロックコポリマー。本明細書に存在する一部の実施形態において、ミセルは、以下を含む：（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー；（ｉｉ）式（Ｉ）のブロックコポリマー；及び（ｉｉｉ）式（ＩＩ）のブロックコポリマー。本明細書に存在する一部の実施形態において、ミセルは、約１：９９～約９９：１の（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー対（ｉｉ）式（Ｉ）又は（ＩＩ）のブロックコポリマーを含む。

【0025】

別の態様において、そこに提供されるのは、ブロックコポリマーを含むｐＨ応答性組成物又はそこに記載されているミセル組成物であり、ここで、組成物は、ｐＨ遷移点及び任意選択的に発光スペクトルを有する。一部の実施形態において、ｐＨ遷移点は、４～８、６～７．５、又は４．５～５．５の間である。一部の実施形態において、ｐＨ応答性組成物は、０．２５又は０．１５未満のｐＨ単位のｐＨ応答を有する。一部の実施形態において、発光スペクトルは、７００～９００ｎｍの間である。

【0026】

別の態様は、本明細書に記載されている通りの化学療法剤を含むｐＨ感受性ミセル組成物の有効量を個体に投与することを含む、がんの治療を必要とする個体におけるがんを治療するための方法である。一部の実施形態において、がんは、固形腫瘍を含む。一部の実施形態において、腫瘍はがんの腫瘍であり、ここで、がんは、乳房、頸部、卵巣、膵臓、前立腺、腹膜転移、結腸直腸、膀胱、腎臓、食道、頭頸部（ＨＮＳＳＣ）、肺、脳又は皮膚（黒色腫及び肉腫を含める）のがんである。

【0027】

本明細書に記載されているブロックコポリマー、ミセル組成物及び方法の他の目的、特色及び利点は、以下の詳細な記載から明らかになる。しかしながら、詳細な記載及び具体例は、特定の実施形態を示している一方で、例示を経て与えられているだけであると理解されるべきであり、というのは、当開示の趣旨及び範疇内の様々な変化及び修飾は、この詳細な記載から当業者に明らかになるからである。

【0028】

参考文献の援用
本明細書において記述されている全ての公報、特許及び特許出願は、各個々の公報、特許又は特許出願が、参照により組み込まれていると具体的に及び個々に示されているのと同じ程度に、参照により本明細書に組み込まれる。

【0029】

本開示の様々な態様は、添付の請求項において詳細に説明されている。本開示の特色及び利点のより良好な理解は、本開示の原理が用いられる例示的な実施形態を説明する以下の詳細な記載、及び下記の添付の図面への言及によって得られる。

【図面の簡単な説明】

【0030】

【図1】ペイロード（例えばＩＬ－２）のカプセル化及びｐＨ依存性放出を可能にする超ｐＨ感受性ナノ粒子プラットフォームの模式を示す図である。ｐＨ＞ｐＨ_ｔである場合、ブロックコポリマーはナノ粒子として存在し；一旦ｐＨ＜ｐＨ_ｔとなると、ナノ粒子はユニマーに分解し、それによって、カプセル化されたペイロードを放出する。

【図2】ｐＨ依存性ＩＬ－２放出特性を示す図である。（左）：酸性緩衝液トリガーＩＬ－２ペイロード放出の定量的測定。（右）：ＤＬＳによって試験された酸性緩衝液条件下のナノ粒子のサイズ変化。

【図3】ＰＥＧ_１１３－ｂ－ＰＤＢＡ_{９０－１６０}ミセルがＩＬ－２を充填することができることを示す図である。ＳＥＣに続きＩＬ－２のドットブロットが、ＩＬ－２の充填を確認した。

【図4-1】ｐＨ感受性ミセルを使用する二重特異性抗体のカプセル化を示す図である。４Ａは、二重特異性抗体カプセル化後のＳＥＣクロマトグラフ及びミセルカプセル化二重特異性抗体のＤＬＳによるサイズ分布（３つのレプリケート）を示す図である。最小二重特異性抗体は、非カプセル化フリーフォーマットとして存在する。

【図4-2】ｐＨ感受性ミセルを使用する二重特異性抗体のカプセル化を示す図である。４Ｂは、二重特異性抗体充填の定量分析並びにウエスタンブロット及びＤＬＳによる製剤のサイズを示す。

【図5】ＧＳＵ細胞へのナノ粒子カプセル化抗体のｐＨ依存性結合を示す図である。ナノ粒子カプセル化二重特異性抗体は、中性ｐＨで抗体の標的を担持する細胞に対して低い結合親和性を示した。一旦酸性化されると、二重特異性抗体は、ミセルから放出される。放出された二重特異性抗体の結合は、元のフォーマットと比較して、細胞の標的に対して等しい親和性を示す。

【図6】体内分布プロファイルから、同所性頭頸部腫瘍を担持するマウスにおける遊離Ｆａｂと比較して、有意な腫瘍蓄積増加及び薬物動態変化を示す、ｐＨ感受性ナノ粒子非共有結合カプセル化Ｆａｂ製剤（化合物１）を示す図である。代表的なインビボ（Ａ、１時間、３時間、２４時間）及びエクスビボ（Ｂ、２４時間）の主要な臓器体内分布が示されている。インビボ腫瘍（Ｃ）及びエクスビボ臓器（Ｄ）蛍光の定量化を行った。スチューデントｔ検定による統計的分析（^＊＊ｐ＜０．０１）、Ｎ＝３。Ｆａｂは、画像化目的のために近赤外フルオロフォアで標識化されている。

【図7】疎水性／アミンブロックにおける共有結合性タンパク質－ポリマー製剤の調製のためのスキームを示す図である。

【図8】ｐＨ感受性ナノ粒子及びＩＬ－２非共有結合性製剤（化合物２）が、体内分布プロファイルから、同所性頭頸部腫瘍を担持するマウスにおける遊離ＩＬ－２と比較して、有意な腫瘍蓄積増加及び薬物動態変化を示すことを示す図である。代表的なインビボ（Ａ、１時間、３時間、２４時間）及びエクスビボ（Ｂ、２４時間）の主要な臓器体内分布が示されている。インビボ腫瘍（Ｃ）及びエクスビボ臓器（Ｄ）蛍光の定量化を行った。スチューデントｔ検定による統計的分析（^＊＊ｐ＜０．０１）、Ｎ＝３。ＩＬ－２は、画像化目的のために近赤外フルオロフォアで標識化されている。

【図9】Ｆａｂ製剤に共有結合的にコンジュゲートされたｐＨ感受性ナノ粒子（化合物３）が、体内分布プロファイルから、同所性頭頸部腫瘍を担持するマウスにおける遊離Ｆａｂ抗体と比較して、有意な腫瘍蓄積増加及び薬物動態変化を示すことを示す図である。代表的なインビボ（Ａ、１時間、３時間、２４時間）及びエクスビボ（Ｂ、２４時間）の主要な臓器体内分布が示されている。インビボ腫瘍（Ｃ）及びエクスビボ臓器（Ｄ）蛍光の定量化を行った。スチューデントｔ検定による統計的分析（^＊＊ｐ＜０．０１）、Ｎ＝３。Ｆａｂは、画像化目的のために近赤外フルオロフォアで標識化されている。

【図10】ＰＥＧ_１１３－ＰＤＢＡ_{９０－１６０}－ＡＭＡ－ＯＰＳＳポリマーへのｒｈＩＬ－２のコンジュゲーションのための代表的なスキームを示す図である。

【図11】ブロックコポリマー－ＩＬ－２共有結合性コンジュゲートの精製及び特徴付けを示す図である。（上）：ＰＥＧ_１１３－ｂ－（ＰＤＢＡ_{９０－１６０}－ｒ－ＯＰＳＳ_４－ＩＬ－２共有結合性コンジュゲート精製のＦＰＬＣクロマトグラムを示す。（下）：ＦＰＬＣ画分のウエスタンブロットが、電気泳動移動度の変化によるＩＬ－２のコンジュゲーションを確認することを示す。

【図12-1】ｐＨ感受性ポリマー－ＩＬ－２共有結合性製剤のインビトロ生物活性を示す図である。（Ａ）は、ＳＡＴ（ＰＥＧ_４）化学を介してコンジュゲートされたＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳ－ＩＬ－２を示す。（Ｂ）は、トラウト試薬化学を介してコンジュゲートされたＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳ－ＩＬ－２を示す。（Ｃ）は、ＳＡＴ（ＰＥＧ_４）化学を介してコンジュゲートされたＰＥＧ－ＰＤＢＡ－Ｍａｌ－ＩＬ－２を示す。（Ｄ）は、トラウト試薬化学を介してコンジュゲートされたＰＥＧ－ＰＤＢＡ－Ｍａｌ－ＩＬ－２を示す。使用された親化合物は、ＰＥＧ_１１３－ｂ－－（ＰＤＢＡ_１２０－ｒ－ＯＰＳＳ_４）又はＰＥＧ_１１３－ｂ（ＰＤＢＡ_１２０－ｒ－Ｍａｌ_１）であった。

【図12-2】ｐＨ感受性ポリマー－ＩＬ－２共有結合性製剤のインビトロ生物活性を示す図である。（Ａ）は、ＳＡＴ（ＰＥＧ_４）化学を介してコンジュゲートされたＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳ－ＩＬ－２を示す。（Ｂ）は、トラウト試薬化学を介してコンジュゲートされたＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳ－ＩＬ－２を示す。（Ｃ）は、ＳＡＴ（ＰＥＧ_４）化学を介してコンジュゲートされたＰＥＧ－ＰＤＢＡ－Ｍａｌ－ＩＬ－２を示す。（Ｄ）は、トラウト試薬化学を介してコンジュゲートされたＰＥＧ－ＰＤＢＡ－Ｍａｌ－ＩＬ－２を示す。使用された親化合物は、ＰＥＧ_１１３－ｂ－－（ＰＤＢＡ_１２０－ｒ－ＯＰＳＳ_４）又はＰＥＧ_１１３－ｂ（ＰＤＢＡ_１２０－ｒ－Ｍａｌ_１）であった。

【図13】ＰＥＧ末端上の共有結合性タンパク質－ブロックコポリマーコンジュゲートの調製のための代表的なスキームを示す図である。

【図14】ブロックコポリマー－小分子（メルタンシン）コンジュゲートのための代表的な合成スキームを示す図である。

【図15A】ブロックコポリマー－小分子（メルタンシン）コンジュゲート（化合物４）の特徴付けを示す図である。１５Ａは、ＰＤＢＡ－ＡＭＡポリマー、（ＰＥＧ_１１３－ＰＤＢＡ_{９０－１６０}－ＡＭＡ４）の出発材料についての^１ＨＮＭＲスペクトルを示す。

【図15B】ブロックコポリマー－小分子（メルタンシン）コンジュゲート（化合物４）の特徴付けを示す図である。１５Ｂは、ＰＤＢＡ－ＡＭＡ－ＳＭＣＣ－ＤＭ１コンジュゲートの^１ＨＮＭＲスペクトルを示す。３．３ｐｐｍでのｏ－メトキシピークの積分を使用して、ＤＭ１薬物からの単一のプロトン積分ピークを有する薬物充填を決定し、ブロックコポリマー鎖当たり約３．５ＤＭ１分子の充填を算出した。

【図15C】ブロックコポリマー－小分子（メルタンシン）コンジュゲート（化合物４）の特徴付けを示す図である。１５Ｃは、ＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＡＭＡ－ＳＭＣＣ－ＤＭ１修飾ポリマーのＨＰＬＣ分析を示す。

【図16】ＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳ－ＤＭ１合成のための代表的な合成スキームを示す図である。

【図17】ＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳ－ＤＭ１（化合物５）の特徴付けを示す図である。１７Ａは、ＤＭ１コンジュゲートを使用するＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳの出発材料についての^１ＨＮＭＲスペクトルを示す。１７Ｂは、ＤＭ１コンジュゲーション後のＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳポリマー材料の^１ＨＮＭＲスペクトルを示す。積分は、薬物へのポリマーの８０％充填を示す。

【図17C】ＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳ－ＤＭ１（化合物５）の特徴付けを示す図である。１７Ｃは、化合物５修飾ポリマーのＨＰＬＣ分析を示す。

【図18】ＰＥＧ－ＰＤＢＡ－Ｍａｌ－ＤＭ１のための代表的な合成スキームを示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0031】

本開示の詳細な記載
本明細書において提供されているのは、治療剤にコンジュゲートされているブロックコポリマーである。他の実施形態において、本明細書において提供されるのは、治療剤を含むミセル組成物である。

【0032】

Ｉ．ブロックコポリマー
一態様において、本明細書において提供されているのは、式（Ｉ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である：

【0033】

【化13】

【0034】

一部の実施形態において、各Ｒ^１及びＲ^２は、独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキルである。一部の実施形態において、アルキルは、直鎖又は分枝アルキルである。一部の実施形態において、アルキルは直鎖アルキルである。一部の実施形態において、各Ｒ^１及びＲ^２は、独立して、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３又は－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。一部の実施形態において、各Ｒ^１及びＲ^２は、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。

【0035】

一部の実施形態において、各Ｒ^１及びＲ^２は、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_３～Ｃ_１０シクロアルキル又はアリールである。一部の実施形態において、各Ｒ^１及びＲ^２は、独立して、任意選択的に置換されているシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル又はシクロヘプチルである。一部の実施形態において、各Ｒ^１及びＲ^２は、独立して、任意選択的に置換されているフェニルである。

【0036】

一部の実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。一部の実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２は一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_３ＣＨ_２－又は－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である。一部の実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２は一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である。

【0037】

一部の実施形態において、各Ｒ^３は、独立して、アシル又はＩＣＧである。一部の実施形態において、各Ｒ^３は、独立して、アシルである。一部の実施形態において、各Ｒ^３は、独立して、ＩＣＧである。一部の実施形態において、各Ｒ^３は、独立して、水素である。

【0038】

一部の実施形態において、Ｌ^１は、ブロックコポリマーに及び治療剤に結合できる任意選択的に置換されている二官能性リンカーである。一部の実施形態において、Ｌ^１は、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている。一部の実施形態において、Ｌ^１は、任意選択的に置換されているＰＥＧリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている。

【0039】

一部の実施形態において、Ｌ^１は、

【0040】

【化14】

（式中、ｍ_１は、２～２０の整数又はその中の任意の整数である。）
である。

【0041】

一部の実施形態において、式（Ｉ）のブロックコポリマーは、式（Ｉ－ａ）の構造、又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物を有する：

【0042】

【化15】

（式中：
ｍ_１は、２～２００の整数であり；
Ａは、結合、又はマレイミド残基で任意選択的に置換されている－Ｃ（Ｏ）－である。）。
一部の実施形態において、ｍ_１は、２～２０の整数又はその中の任意の整数である。一部の実施形態において、ｍ_１は、２～５、６～９、１０～１４若しくは１５～２０の整数、又はその中の任意の整数である。

【0043】

一部の実施形態において、Ａは結合である。一部の実施形態において、Ａは、マレイミド残基で任意選択的に置換されている－Ｃ（Ｏ）－である。

【0044】

一部の実施形態において、式（Ｉ）のブロックコポリマーは、式（Ｉ－ｃ）の構造、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物を有する：

【0045】

【化16】

【0046】

式（Ｉ）、（Ｉ－ａ）及び（Ｉ－ｃ）のブロックコポリマーの一部の実施形態において、治療剤は、サイトカイン若しくはその断片、操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２、ＩＬ－１２若しくはＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－１２又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、Ｆａｂ又はその断片である。一部の実施形態において、操作された抗体断片は、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシン又はその誘導体である。

【0047】

別の態様において、本明細書において提供されているのは、式（ＩＩ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である：

【0048】

【化17】

【0049】

一部の実施形態において、各Ｒ^５及びＲ^６は、独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキルである。一部の実施形態において、アルキルは、直鎖又は分枝アルキルである。一部の実施形態において、アルキルは直鎖アルキルである。一部の実施形態において、各Ｒ^５及びＲ^６は、独立して、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３又は－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。一部の実施形態において、各Ｒ^５及びＲ^６は、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。

【0050】

一部の実施形態において、各Ｒ^５及びＲ^６は、独立して、任意選択的に置換されているＣ_３～Ｃ_１０シクロアルキル又はアリールである。一部の実施形態において、各Ｒ^５及びＲ^６は、独立して、任意選択的に置換されているシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル又はシクロヘプチルである。一部の実施形態において、各Ｒ^５及びＲ^６は、独立して、任意選択的に置換されているフェニルである。

【0051】

一部の実施形態において、Ｒ^５及びＲ^６は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。一部の実施形態において、Ｒ^５及びＲ^６は一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_３ＣＨ_２－又は－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である。

【0052】

一部の実施形態において、各Ｒ^７は、独立して、アシル又はＩＣＧである。一部の実施形態において、各Ｒ^７は、独立して、アシルである。一部の実施形態において、各Ｒ^７は、独立して、ＩＣＧである。一部の実施形態において、各Ｒ^７は、独立して、水素である。

【0053】

一部の実施形態において、Ｚ^１は－Ｏ－である。一部の実施形態において、Ｚ^１は－ＮＨ－である。

【0054】

一部の実施形態において、Ｚ^２は、－ＮＨ－又は－Ｏ－である。一部の実施形態において、Ｚ^２は－Ｏ－である。一部の実施形態において、Ｚ^２は－ＮＨ－である。一部の実施形態において、Ｚ^２は置換トリアゾールである。

【0055】

一部の実施形態において、Ｌ^２は、ブロックコポリマーに及び治療剤に結合できる任意選択的に置換されている二官能性リンカーである。一部の実施形態において、Ｌ^２は、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている。一部の実施形態において、Ｌ^２は、任意選択的に置換されているＰＥＧリンカーであって、マレイミド残基で任意選択的に置換されている。一部の実施形態において、Ｌ^２は、

【0056】

【化18】

（式中、ｍ_２は、２～２００である。）
である。

【0057】

一部の実施形態において、式（ＩＩ）のブロックコポリマーは、式（ＩＩ－ａ）の構造、又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物を有する：

【0058】

【化19】

（式中：
ｍ_２は、２～２００であり；
Ａは、結合、又はマレイミド残基で任意選択的に置換されている－Ｃ（Ｏ）－である。）。
一部の実施形態において、ｍ_２は、２～２０の整数である。一部の実施形態において、ｍ_２は、２～５、６～９、１０～１４若しくは１５～２０の整数、又はその中の任意の整数である。

【0059】

一部の実施形態において、Ａは結合である。一部の実施形態において、Ａは、マレイミド残基で任意選択的に置換されている－Ｃ（Ｏ）－である。

【0060】

一部の実施形態において、式（ＩＩ）のブロックコポリマーは、式（ＩＩ－ｃ）の構造、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物を有する：

【0061】

【化20】

【0062】

一部の実施形態において、式（ＩＩ）のブロックコポリマーは、式（ＩＩ－ａ２）の構造、又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物を有する：

【0063】

【化21】

（式中：
Ｚ^１は、－Ｏ－である。）。
式（ＩＩ）、（ＩＩ－ａ）、（ＩＩ－ａ２）又は（ＩＩ－ｃ）のブロックコポリマーの一部の実施形態において、治療剤は、サイトカイン若しくはその断片、操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２、ＩＬ－１２若しくはＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、Ｆａｂ又はその断片である。一部の実施形態において、操作された抗体断片は、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシン又はその誘導体である。

【0064】

別の実施形態において、本明細書において提供されているのは、式（Ｉ－ｂ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である：

【0065】

【化22】

【0066】

【化23】

である。）。
式（Ｉ－ｂ）のブロックコポリマーの一部の実施形態において、Ｌ^３は、Ｃ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカー又はＰＥＧリンカーである。一部の実施形態において、Ｌ^３は、２～２００のＰＥＧ単位又はその中の任意の整数を含むＰＥＧリンカーである。一部の実施形態において、Ｌ^３は結合である。

【0067】

式（Ｉ－ｂ）のブロックコポリマーの一部の実施形態において、Ｂは、マレイミドである。一部の実施形態において、Ｂは、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド又はカルボニルジイミダゾールである。

【0068】

一部の実施形態において、式（Ｉ－ｂ）の構造を有するブロックコポリマーは：

【0069】

【化24】

（式中、ｍ_１は、２～２００である。）
又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である。

【0070】

別の実施形態において、本明細書において提供されているのは、式（ＩＩ－ｂ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である：

【0071】

【化25】

（式中：
ｎ_２は、２～２００の整数であり；
ｘ_２は、４０～３００の整数であり；
ｙ_２は、０～６の整数であり；
Ｘ^２は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
Ｒ^５及びＲ^６は、各々独立して、置換若しくは非置換のＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^５及びＲ^６は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、置換又は非置換の５～７員環を形成し；
各Ｒ^７は、独立して、水素、アシル又はＩＣＧであり；
Ｚ^１は、－ＮＨ－又は－Ｏ－であり；
Ｚ^２は、－ＮＨ－、－Ｏ－、又は置換トリアゾールであり；
Ｌ^４は、結合、Ｃ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカー又はＰＥＧリンカーであり；
Ｂは、マレイミド、

【0072】

【化26】

である。）。
一部の実施形態において、式（ＩＩ－ｂ）のブロックコポリマーは、式（ＩＩ－ｂ２）の構造、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物を有する：

【0073】

【化27】

（式中：
Ｚ^１は、－Ｏ－であり；他の可変物は、式（ＩＩ－ｂ）の実施形態において定義されている。）。
式（ＩＩ－ｂ）又は（ＩＩ－ｂ２）のブロックコポリマーの一部の実施形態において、Ｌ^４は、Ｃ_１～Ｃ_１０アルキレンリンカー又はＰＥＧリンカーである。一部の実施形態において、Ｌ^４は、２～２００のＰＥＧ単位を含むＰＥＧリンカーである。一部の実施形態において、Ｌ^４は結合である。

【0074】

式（ＩＩ－ｂ）又は（ＩＩ－ｂ２）のブロックコポリマーの一部の実施形態において、Ｂはマレイミドである。一部の実施形態において、Ｂは、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド又はカルボニルジイミダゾールである。

【0075】

一部の実施形態において、ブロックコポリマーは：

【0076】

【化28】

又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である。

【0077】

一部の実施形態において、ブロックコポリマーは：

【0078】

【化29】

（式中、ｍ_１は、２～２００である。）
又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物である。

【0079】

一部の実施形態において、ブロックコポリマーは、ジブロックコポリマーである。一部の実施形態において、ブロックコポリマーは、親水性ポリマーセグメント及び疎水性ポリマーセグメントを含む。一部の実施形態において、親水性ポリマーセグメントは、ポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）を含む。一部の実施形態において、親水性ポリマーセグメントは、サイズが約２ｋＤａ～約１０ｋＤａである。一部の実施形態において、親水性ポリマーセグメントは、サイズが約２ｋＤａ～約５ｋＤａである。一部の実施形態において、親水性ポリマーセグメントは、サイズが約３ｋＤａ～約８ｋＤａである。一部の実施形態において、親水性ポリマーセグメントは、サイズが約４ｋＤａ～約６ｋＤａである。一部の実施形態において、親水性ポリマーセグメントは、サイズが約５ｋＤａである。

【0080】

一部の実施形態において、各ｎ_１、ｎ_２及びｎ_３は、独立して、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、２５～３０、３０～３５、３５～４０、４０～４５、４５～５０、５０～５５、５５～６０、６０～６５、６５～７０、７０～７５、７５～８０、８０～８５、８５～９０、９０～９５、９５～９９、１００～１０９、１１０～１１９、１２０～１２９、１３０～１３９、１４０～１４９、１５０～１５９、１６０～１６９、１７０～１７９、１８０～１８９、１９０～１９９の整数又はその中で誘導可能な任意の範囲である。一部の実施形態において、各ｎ_１、ｎ_２及びｎ_３は、独立して、６０～１５０、１００～１４０又は１１０～１２０の整数である。一部の実施形態において、各ｎ_１、ｎ_２及びｎ_３は、独立して、１００～１４０である。

【0081】

一部の実施形態において、ブロックコポリマーは、疎水性ポリマーセグメントを含む。一部の実施形態において、疎水性ポリマーセグメントは、第３級アミンを含む。一部の実施形態において、疎水性ポリマーセグメントは、以下から選択される：

【0082】

【化30】

（式中、ｘは、合計で約４０～３００である。）。

【0083】

一部の実施形態において、疎水性セグメントは、ジブチルアミンを含む。一部の実施形態において、疎水性セグメントは、

【0084】

【化31】

を含む。

【0085】

一部の実施形態において、各ｘ_１、ｘ_２及びｘ_３は、独立して、整数１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、２５～３０、３０～３５、３５～４０、４０～４５、４５～５０、５０～５５、５５～６０、６０～６５、６５～７０、７０～７５、７５～８０、８０～８５、８５～９０、９０～９５、９５～９９、１００～１０９、１１０～１１９、１２０～１２９、１３０～１３９、１４０～１４９、１５０～１５９、１６０～１６９、１７０～１７９、１８０～１８９、１９０～１９９又はその中で誘導可能な任意の範囲である。一部の実施形態において、各ｘ_１、ｘ_２及びｘ_３は、独立して、５０～２００、６０～１６０又は９０～１４０の整数である。一部の実施形態において、各ｘ_１、ｘ_２及びｘ_３は、独立して、９０～１４０である。

【0086】

一部の実施形態において、各ｙ_１、ｙ_２及びｙ_３は、独立して、１～６、１～５、１～４若しくは１～３の整数、又はその中で誘導可能な任意の範囲である。一部の実施形態において、各ｙ_１、ｙ_２及びｙ_３は、独立して、１、２、３、４、５又は６である。一部の実施形態において、各Ｙ_１、ｙ_２及びｙ_３は、独立して、０である。

【0087】

一部の実施形態において、各ｚ_１及びｚ_２は、独立して、１～９、１～８、１～７、１～６、１～５、１～４若しくは１～３の整数、又はその中で誘導可能な任意の範囲である。一部の実施形態において、各ｚ_１及びｚ_２は、独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０である。一部の実施形態において、各ｚ_１及びｚ_２は、独立して、０である。

【0088】

「ｒ」という用語は、異なるブロックコポリマー単位／セグメント（例えば、ｘ_１、ｙ_１及びｚ_１によって表される）の間の接続を示す。一部の実施形態において、各ｒは、独立して、該単位／セグメントの炭素原子を接続する結合、又はｎが１～１０であるアルキル基－（ＣＨ_２）_ｎ－である。一部の実施形態において、コポリマーブロックセグメント／単位（例えば、ｘ_１、ｙ_１及びｚ_１によって表される）は、任意の順序、配列又は立体配置で生じ得る。一部の実施形態において、コポリマーブロック単位は、式（Ｉ）、（Ｉ－ａ）、（Ｉ－ｂ）、（Ｉ－ｃ）、（ＩＩ）、（ＩＩ－ａ）、（ＩＩ－ａ２）、（ＩＩ－ｂ）、（ＩＩ－ｂ２）、（ＩＩ－ｃ）、（ＩＩＩ－ｃ）及び（ＩＩＩ）に記載されている通りに順次に生じる。

【0089】

一部の実施形態において、各ｍ_１及びｍ_２は、独立して、２～２００の整数である。一部の実施形態において、各ｍ_１及びｍ_２は、独立して、２～２０の整数である。

【0090】

一部の実施形態において、各Ｘ^１、Ｘ^２及びＸ^３は、末端基である。一部の実施形態において、末端キャッピング基は、原子移動ラジカル重合（ＡＴＲＰ）反応の生成物である。例えば、末端キャッピング基は、原子移動ラジカル重合（ＡＴＲＰ）が使用される場合、－Ｂｒなどのハロゲンであり得る。一部の実施形態において、各Ｘ^１、Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、Ｂｒである。一部の実施形態において、各Ｘ^１、Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、－ＯＨである。一部の実施形態において、各Ｘ^１、Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、酸である。一部の実施形態において、各Ｘ^１、Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、－Ｃ（Ｏ）ＯＨである。一部の実施形態において、各Ｘ^１、Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、Ｈである。該端部基は、任意選択的に、適切な部分との重合に続いてさらに修飾されていてよい。

【0091】

一部の実施形態において、リンカーＬ^１及びＬ^２は、ブロックコポリマー及び治療剤と反応する基を有する二官能性リンカーである。一部の実施形態において、リンカーは、マレイミド－ＰＥＧ－ＮＨＳ、ＮＨＳ－カーボネート（Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドカーボネート）、ＳＰＤＢ（Ｎ－スクシンイミジル－４－（２－ピリジルジチオ）ブタノエート）、又はＣＤＩ（カルボニルジイミダゾール）において使用される構成成分である。

【0092】

一部の実施形態において、リンカーは、治療剤にコンジュゲートされている。一部の実施形態において、リンカーは、治療剤に共有結合的にコンジュゲートされている。当技術分野において公知の方法は、治療剤を、例えば、疎水性ポリマーセグメントにコンジュゲートするために使用することができる。

【0093】

治療剤
一部の実施形態において、治療剤は、サイトカイン若しくはその断片、操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である。

【0094】

一部の実施形態において、治療剤は、サイトカイン又はその断片である。サイトカインは、細胞シグナリングにおいて重要である広い及び緩いカテゴリーの小さいタンパク質である。サイトカインはペプチドであり、細胞の脂質二重層を横切って細胞質に進入することができない。サイトカインは、免疫モジュレート剤として自己分泌、傍分泌及び内分泌シグナル伝達に関与することが示された。インターロイキン－２（ＩＬ－２）は、免疫系におけるサイトカインシグナル伝達分子の型、インターロイキンである。それは、免疫を担う白血球細胞の活性を調節する１５．５～１６ｋＤａのタンパク質である。インターロイキン－１５（ＩＬ－１５）は、インターロイキン－２との構造上の相似点を有するサイトカインである。ＩＬ－２のように、ＩＬ－１５は、ＩＬ－２／ＩＬ－１５受容体ベータ鎖及び共通ガンマ鎖で構成された複合体に結合し、それを介してシグナル伝達する。ＩＬ－１５は、ウイルスによる感染に続いて単核貪食細胞によって分泌される。インターロイキン－２１は、ウイルス感染された細胞又はがん性細胞を破壊するナチュラルキラー細胞及び細胞毒性Ｔ細胞を含めて、免疫系の細胞に対して強力な調節効果を有するサイトカインである。インターロイキン１２（ＩＬ－１２）は、抗原刺激に応答して樹状細胞、マクロファージ、好中球、及びヒトＢ－リンパ芽球様細胞（ＮＣ－３７）によって天然に産生されるインターロイキンである。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２、ＩＬ－２１、ＩＬ－１２若しくはＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２若しくはＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、治療剤は、Ｆａｂ又はその断片である。

【0095】

インターフェロン（ＩＦＮ）は、病原体を根絶するのを助ける免疫系の保護的防御をトリガーする細胞間のコミュニケーションのために使用される分子である、サイトカインとして公知のタンパク質のクラスに属するシグナル伝達タンパク質のグループである。一部の実施形態において、サイトカインは、インターフェロンα、インターフェロンβ若しくはインターフェロンγ又はその断片である。

【0096】

コロニー刺激因子２としても公知の顆粒球マクロファージコロニー刺激因子は、サイトカインとして機能する、マクロファージ、Ｔ細胞、肥満細胞、ナチュラルキラー細胞、内皮細胞及び線維芽細胞によって分泌されるモノマー性糖タンパク質である。一部の実施形態において、サイトカインは、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子ＧＭ－ＣＳＦである。

【0097】

一部の実施形態において、治療剤は、操作された抗体断片である。一部の実施形態において、操作された抗体断片は、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーである。二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）は、抗がん薬としての使用について調査されている人工的な二重特異性モノクローナル抗体のクラスである。それらは、がん細胞に対して、宿主の免疫系、より具体的にはＴ細胞の細胞毒性活性を指向する。一部の実施形態において、治療剤は、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）又はその断片である。

【0098】

一部の実施形態において、治療剤は小分子である。一部の実施形態において、治療剤は、９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシン、パクリタキセル、ドキソルビシン、テモゾロマイド、スニチニブ、ダカルバジン、ゲムシタビン、メルファラン、フェンレチニド若しくはその誘導体、又はＥＧＦＲ－ＴＫＩ（チロシンキナーゼ阻害剤）である。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシン、テモゾロマイド、スニチニブ、ダカルバジン、ゲムシタビン、メルファラン、フェンレチニド若しくはその誘導体、又はＥＧＦＲ－ＴＫＩ（チロシンキナーゼ阻害剤）である。一部の実施形態において、小分子は、ドキソルビシン又はパクリタキセルでない。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシン又はその誘導体である。マイタンシン又はメイタンシンは、細胞毒性剤である。それは、リゾキシン結合部位でチューブリンに結合することによって微小管のアセンブリを阻害する。それは、アンサマイシン型のマクロライドであり、マイテヌス（Ｍａｙｔｅｎｕｓ）属の植物から単離することができる。誘導体は、メイタンシノイドとして公知である。メイタンシン及びそれの類似体（メイタンシノイドＤＭ１及びＤＭ４）は、有糸分裂で細胞の増殖を阻害する強力な微小管標的化化合物である。それは、リゾキシン結合部位でチューブリンに結合することによって、微小管のアセンブリを阻害する。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシノイドＤＭ１（メルタンシン）若しくはその誘導体；又はメイタンシノイドＤＭ４若しくはその誘導体である。一部の実施形態において、メイタンシンは、以下の構造のいずれかを有する：

【0099】

【化32】

【0100】

ある特定の実施形態において、ブロックコポリマーは、アミンを介してブロックコポリマーにコンジュゲートされている蛍光染料を含む。一部の実施形態において、蛍光染料は、ブロックコポリマー上のアミンを介してブロックコポリマーの疎水性ブロックにコンジュゲートされている。一部の実施形態において、蛍光染料は、シアニン染料又はその誘導体である。一部の実施形態において、蛍光染料は、インドシアニングリーン（ＩＣＧ）又はその誘導体である。インドシアニングリーン（ＩＣＧ）は、医療診断において使用される。一部の実施形態において、ＩＣＧ誘導体の構造は、以下である：

【0101】

【化33】

【0102】

一態様において、本明細書に記載されている化合物は、薬学的に許容される塩の形態である。同様に、同じ型の活性を有するこれらの化合物の活性代謝物は、本開示の範疇に含まれる。加えて、本明細書に記載されている化合物は、非溶媒和形態、並びに薬学的に許容される溶媒、例えば、水、エタノールなどを用いる溶媒和形態で存在することができる。本明細書において表されている化合物の溶媒和形態は、その上、本明細書において開示されていると考えられる。

【0103】

ＩＩ．ミセル及び組成物
本明細書に記載されている１つ以上のブロックコポリマーは、ｐＨ感受性ミセル組成物を形成するために使用することができる。一部の実施形態において、組成物は、単一型のミセルを含む。一部の実施形態において、２つ以上の異なる型のミセルは、混合ミセル組成物を形成するために組み合わせることができる。一部の実施形態において、ミセルは、治療剤に共有結合的にコンジュゲートされているブロックコポリマーを含む。一部の実施形態において、ミセルは、治療剤を非共有結合的にカプセル化する１つ以上のブロックコポリマーを含む。

【0104】

一部の実施形態において、式（Ｉ）、（Ｉ－ａ）、（Ｉ－ｂ）若しくは（Ｉ－ｃ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物は、ミセルの形態である。一部の実施形態において、式（Ｉ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物は、ミセルの形態である。一部の実施形態において、式（Ｉ－ｃ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物は、ミセルの形態である。

【0105】

一部の実施形態において、式（ＩＩ）、（ＩＩ－ａ）、（ＩＩ－ｂ）若しくは（ＩＩ－ｃ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物は、ミセルの形態である。一部の実施形態において、式（ＩＩ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物は、ミセルの形態である。一部の実施形態において、式（ＩＩ－ｃ）のブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物は、ミセルの形態である。

【0106】

別の態様において、本明細書において表されているのは、以下を含むミセルである：
（ｉ）式（ＩＩＩ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【0107】

【化34】

【0108】

一部の実施形態において、カプセル化は、非共有結合性カプセル化であり、ここで、治療剤は、物理的にミセル内にある。一部の実施形態において、治療剤は、非共有結合的にカプセル化される。

【0109】

該治療剤は、当技術分野において公知の方法を使用してミセルに組み込むことができる。一部の実施形態において、治療剤は、サイトカイン若しくはその断片、操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２、ＩＬ－２１、ＩＬ－１２若しくはＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２若しくはＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－１５又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、インターフェロンα、インターフェロンβ若しくはインターフェロンγ又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、Ｆａｂ又はその断片である。一部の実施形態において、操作された抗体断片は、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）又はその断片である。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシン、パクリタキセル、ドキソルビシン、テモゾロマイド、スニチニブ、ダカルバジン、ゲムシタビン、メルファラン、フェンレチニド若しくはその誘導体、又はＥＧＦＲ－ＴＫＩ（チロシンキナーゼ阻害剤）である。一部の実施形態において、小分子は、メイタンシン又はその誘導体である。

【0110】

一部の実施形態において、ｙ_３及びｚ_３が両方とも０である場合、式（ＩＩＩ）のブロックコポリマーは、パクリタキセル又はドキソルビシンを非共有結合的にカプセル化しない。

【0111】

該ミセルの一部の実施形態において、式（ＩＩＩ）のブロックコポリマーは、式（ＩＩＩ－ｃ）の構造、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物を有する：

【0112】

【化35】

【0113】

一部の実施形態において、ミセルは、（ｉ）式（ＩＩＩ－ｃ）のブロックコポリマー及び（ｉｉ）ブロックコポリマーによって非共有結合的にカプセル化された治療剤を含む。一部の実施形態において、治療剤は、サイトカイン若しくはその断片、又は操作された抗体断片、又は９００ダルトン未満の分子量を有する小分子である。一部の実施形態において、治療剤は、サイトカイン又はその断片である。一部の実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－２又はその断片である。一部の実施形態において、操作された抗体断片は、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）又はその断片である。

【0114】

【0115】

【化36】

（式中：
ｎ_３は、１０～２００の整数であり；
ｘ_３は、４０～３００の整数であり；
ｙ_３は、０～６の整数であり；
ｚ_３は、０～１０の整数であり；
Ｘ^３は、ハロゲン、－ＯＨ又は－Ｃ（Ｏ）ＯＨであり；
各Ｒ^１０は、独立して、水素又はＩＣＧであり；
Ｒ^８及びＲ^９は、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。）；並びに
（ｉｉ）式（Ｉ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【0116】

【化37】

【0117】

【化38】

【0118】

【化39】

（式中：
ｎ_３は、１０～２００の整数であり；
ｘ_３は、４０～３００の整数であり；
ｙ_３は、０～６の整数であり；
ｚ_３は、０～１０の整数であり；
Ｘ^３は、ハロゲン、－ＯＨ又はＣ（Ｏ）ＯＨであり；
各Ｒ^１０は、独立して、水素又はＩＣＧであり；
Ｒ^８及びＲ^９は、各々独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_１０シクロアルキル若しくはアリールであるか；
又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。）；並びに
（ｉｉ）式（Ｉ）の構造を有するブロックコポリマー、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは水和物：

【0119】

【化40】

【0120】

【化41】

【0121】

式（ＩＩＩ）又は（ＩＩＩ－ｃ）の一部の実施形態において、各Ｒ^８及びＲ^９は、独立して、任意選択的に置換されているＣ_１～Ｃ_６アルキルである。一部の実施形態において、アルキルは、直鎖又は分枝アルキルである。一部の実施形態において、アルキルは直鎖アルキルである。一部の実施形態において、各Ｒ^８及びＲ^９は、独立して、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３又は－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。一部の実施形態において、各Ｒ^８及びＲ^９は、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３である。一部の実施形態において、各Ｒ^８及びＲ^９は、独立して、任意選択的に置換されているＣ_３～Ｃ_１０シクロアルキル又はアリールである。一部の実施形態において、各Ｒ^８及びＲ^９は、独立して、任意選択的に置換されているシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル又はシクロヘプチルである。一部の実施形態において、各Ｒ^８及びＲ^９は、独立して、任意選択的に置換されているフェニルである。

【0122】

式（ＩＩＩ）又は（ＩＩＩ－ｃ）の一部の実施形態において、Ｒ^８及びＲ^８は、それらが結合している対応する窒素と一緒になって、任意選択的に置換されている５～７員環を形成する。一部の実施形態において、Ｒ^８及びＲ^９は一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_３ＣＨ_２－又は－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である。一部の実施形態において、Ｒ^８及びＲ^９は一緒になって、－ＣＨ_２（ＣＨ_２）_４ＣＨ_２－である。

【0123】

一部の実施形態において、ミセルは、様々なユニマーからのブロックコポリマー構成成分の１つ以上の異なる型を含む。一部の実施形態において、ミセルは、（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー及び（ｉｉ）式（Ｉ）又は式（ＩＩ）のブロックコポリマーを含む。一部の実施形態において、ミセルは、構成成分（ｉ）と（ｉｉ）との比が１：９９～９９：１であるか；又はこの中のいずれかの比である。一部の実施形態において、ミセルは、構成成分（ｉ）と（ｉｉ）との比が１：９９、１０：９０、２０：８０、３０：７０、４０：５０又は５０：５０の比である。一部の実施形態において、ミセルは、構成成分（ｉ）と（ｉｉ）との比が１：１の比である。

【0124】

一部の実施形態において、ミセルは、１：９９の式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー対式（Ｉ）のブロックコポリマーを含む。一部の実施形態において、ミセルは、９９：１の式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー対式（Ｉ）のブロックコポリマーを含む。一部の実施形態において、ミセルは、１：９９の式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー対式（ＩＩ）のブロックコポリマーを含む。一部の実施形態において、ミセルは、９９：１の式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー対式（ＩＩ）のブロックコポリマーを含む。

【0125】

一部の実施形態において、ミセルは、（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー；（ｉｉ）式（Ｉ）のブロックコポリマー；及び（ｉｉｉ）式（ＩＩ）のブロックコポリマーを含む。一部の実施形態において、ミセルは、均等部の構成成分（ｉ）、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）を含む。一部の実施形態において、ミセルは、不均等部の構成成分（ｉ）、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）を含む。

【0126】

一部の実施形態において、各異なる型のブロックコポリマーは、異なる治療剤にコンジュゲートされている。一部の実施形態において、各異なる型のブロックコポリマーは、同じ治療剤にコンジュゲートされている。

【0127】

別の態様において、本明細書において表されているのは、以下を含むミセルである：（ｉ）式（ＩＩＩ）のブロックコポリマー；（ｉｉ）式（Ｉ）のブロックコポリマー及び／又は式（ＩＩ）のブロックコポリマー；並びに（ｉｉｉ）ブロックコポリマーによってカプセル化された治療剤。一部の実施形態において、治療剤は、ミセル内に非共有結合的にカプセル化されている。

【0128】

がん治療におけるミセルの使用は、ミセルのサイズにより部分的に、抗腫瘍効力を増強するとともに健常組織に対する毒性を低減することができる。ある特定の化学療法剤などの小分子が正常及び腫瘍組織の両方に進入することができる一方で、非標的化ミセルナノ粒子は、優先的に、漏出性腫瘍脈管構造を横切ることができる。ミセルのサイズは、典型的に、ナノメートルスケールである（すなわち、直径が約１ｎｍ～１μｍの間）。一部の実施形態において、ミセルは、約１０～約２００ｎｍのサイズを有する。一部の実施形態において、ミセルは、約２０～約１００ｎｍのサイズを有する。一部の実施形態において、ミセルは、約３０～約５０ｎｍのサイズを有する。一部の実施形態において、ミセルは、約１μｍ未満の直径を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約１００ｎｍ未満の直径を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約５０ｎｍ未満の直径を有する。

【0129】

ｐＨ応答性組成物
別の態様において、本明細書において表されているのは、ｐＨ応答性組成物である。本明細書において開示されているｐＨ応答性組成物は、ブロックコポリマー及び治療剤を含む１つ以上のｐＨ応答性ミセル及び／又はナノ粒子を含む。各ブロックコポリマーは、親水性ポリマーセグメント及び疎水性ポリマーセグメントを含み、ここで、疎水性ポリマーセグメントは、ｐＨ感受性にするイオン化可能なアミン基を含む。このｐＨ感受性は、薬物／治療薬－コンジュゲート治療薬として適当な組成物を提供するために利用される。

【0130】

該ミセルは、特定の細胞又は微小環境を標的化するために生理学範囲内で異なるｐＨ遷移値を有することができる。一部の実施形態において、ミセルは、約５～約８、又はその中の任意の値のｐＨ遷移値を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約５～約６のｐＨ遷移値を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約６～約７のｐＨ遷移値を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約７～約８のｐＨ遷移値を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約６．３～約６．９のｐＨ遷移値を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約５．０～約６．２のｐＨ遷移値を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約５．９～約６．２のｐＨ遷移値を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約５．０～約５．５のｐＨ遷移値を有する。一部の実施形態において、ｐＨ遷移点は、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４又は５．５である。一部の実施形態において、ｐＨ遷移点は、約４．８である。一部の実施形態において、ｐＨ遷移点は、約４．９である。一部の実施形態において、ｐＨ遷移点は、約５．０である。一部の実施形態において、ｐＨ遷移点は、約５．１である。一部の実施形態において、ｐＨ遷移点は、約５．２である。一部の実施形態において、ｐＨ遷移点は、約５．３である。一部の実施形態において、ｐＨ遷移点は、約５．４である。一部の実施形態において、ｐＨ遷移点は、約５．５である。

【0131】

本開示のｐＨ感受性ミセル組成物は、有利には、ｐＨ応答が非常に広い（すなわち、２ｐＨ単位）他のｐＨ感受性組成物と対照的に、狭いｐＨ遷移範囲を有することができる。一部の実施形態において、ミセルは、約１未満のｐＨ単位のｐＨ遷移範囲を有する。各種実施形態において、ミセルは、約０．９未満、約０．８未満、約０．７未満、約０．６未満、約０．５未満、約０．４未満、約０．３未満、約０．２未満、約０．１未満のｐＨ単位のｐＨ遷移範囲を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約０．５未満のｐＨ単位のｐＨ遷移範囲を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約０．２５未満のｐＨ単位のｐＨ遷移範囲を有する。狭いｐＨ遷移範囲は、有利には、より鋭いｐＨ応答を提供し、ここで、ミセルは、特定の位置でカーゴを放出するために開くことができる（例えば、腫瘍又は特定の小器官の内側）。

【0132】

一部の実施形態において、ｐＨ応答性組成物は、発光スペクトルを有する。一部の実施形態において、発光スペクトルは、６００～８００ｎｍである。一部の実施形態において、発光スペクトルは、７００～８００ｎｍである。

【0133】

ＩＩＩ．使用の方法
がん細胞がグルコースを優先的に取り込み、それを乳酸又は他の酸に変換するワールブルク効果として公知の好気性解糖が、全ての固体がんにおいて生じる。乳酸又は他の酸は、モノカルボキシレート輸送体又は他の輸送体により細胞外空間に優先的に蓄積する。細胞外空間の結果として得られた酸性化は、さらなる腫瘍侵襲及び転移のために細胞外マトリックスのリモデリングを促進する。

【0134】

本明細書において提供されている一部の実施形態は、生理的ｐＨ（７．３５～７．４５）でミセルを形成する化合物を記載している。一部の実施形態において、本明細書に記載されている化合物は、治療剤に共有結合的に又は非共有結合的にコンジュゲートされている。一部の実施形態において、ミセルは、２×１０^７ダルトンよりも大きい分子量を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約２．７×１０^７ダルトンの分子量を有する。一部の実施形態において、治療剤は、生理的ｐＨ（７．３５～７．４５）でミセルコア内に捕捉される（例えば、血液循環中）。一部の実施形態において、ミセルが酸性環境（例えば、腫瘍組織）に遭遇する場合、ミセルは、約３．７×１０^４ダルトンの平均分子量を有するジブロックコポリマーユニマーなどの個々の化合物に解離し、治療剤の放出を可能にする。一部の実施形態において、ミセルは、ｐＨ遷移点より低いｐＨ（例えば、腫瘍微小環境の酸性状態）で解離する。

【0135】

一部の実施形態において、治療剤は、ミセルの内部に組み込むことができる。特定のｐＨ条件（例えば、腫瘍及びエンドサイトーシス区画中にみられる酸性ｐＨ）は、急速なプロトン化及びユニマーへのミセルの解離に至り、それによって、治療剤（例えば、薬物）を放出することができる。一部の実施形態において、ミセルは、生理学的ｐＨ（ｐＨ７．４）で安定な薬物カプセル化を提供するが、酸性環境において薬物を迅速に放出することができる。

【0136】

一部の例において、本明細書に記載されているｐＨ感受性ミセル組成物は、狭いｐＨ遷移範囲を有する。一部の実施形態において、本明細書に記載されているミセルは、１未満のｐＨ単位のｐＨ遷移範囲（ΔｐＨ_{１０～９０％}）を有する。各種実施形態において、ミセルは、約０．９未満、約０．８未満、約０．７、未満約０．６未満、約０．５未満、約０．４未満、約０．３未満、約０．２未満、約０．１未満のｐＨ単位のｐＨ遷移範囲を有する。一部の実施形態において、ミセルは、約０．５未満のｐＨ単位のｐＨ遷移範囲を有する。一部の実施形態において、ｐＨ遷移範囲は、０．２５未満のｐＨ単位である。一部の実施形態において、ｐＨ遷移範囲は、０．１５未満のｐＨ単位である。この鋭い遷移点は、ミセルが腫瘍微小環境の酸ｐＨで解離するのを可能にする。

【0137】

本明細書に記載されているミセルは、薬物送達剤として使用することができる。薬物を含むミセルは、例えばがん、又は薬物が局在化ｐＨ差異（例えば、生理学的ｐＨ（７．４）と異なるｐＨ）により適切な位置に送達され得る他の疾患を治療するために使用することができる。一部の実施形態において、治療される障害は、がんである。一部の実施形態において、がんは、固形腫瘍を含む。一部の実施形態において、腫瘍は、原発腫瘍の遷移からの続発性腫瘍である。一部の実施形態において、薬物送達は、リンパ節に又は腹膜若しくは胸膜表面に対するものであり得る。

【0138】

一部の実施形態におけるのは、本明細書において開示されているブロックコポリマー、ミセル又は組成物のいずれかの治療有効量を対象に投与することを含む、がんの治療を必要とする対象においてがんを治療する方法である。

【0139】

一部の実施形態において、がんは、癌、肉腫、リンパ腫、白血病、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫又は精上皮腫である。

【0140】

一部の実施形態において、腫瘍は、がんである。一部の実施形態において、がんは、乳がん、頭頸部扁平細胞癌（ＮＨＳＣＣ）、肺がん、子宮頸がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、膀胱がん、尿道がん、腎臓がん、食道がん、結腸直腸がん、腹膜転移、脳又は皮膚（黒色腫及び肉腫を含める）である。一部の実施形態において、がんは、乳がん、頭頸部扁平細胞癌（ＮＨＳＣＣ）、食道がん、腎がん又は結腸直腸がんである。一部の実施形態において、がんは、乳がんである。一部の実施形態において、がんは、頭頸部扁平細胞癌（ＮＨＳＣＣ）である。一部の実施形態において、がんは、食道がんである。一部の実施形態において、がんは、結腸直腸がんである。

【0141】

一部の実施形態において、がんは固形腫瘍である。

【0142】

一部の実施形態において、腫瘍は、約５％、約１０％、約１５％、約２５％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％又は約９０％低減される。一部の実施形態において、腫瘍は、約５０％低減される。一部の実施形態において、腫瘍は、約６０％低減される。一部の実施形態において、腫瘍は、約７０％低減される。一部の実施形態において、腫瘍は、約７５％低減される。一部の実施形態において、腫瘍は、約８０％低減される。一部の実施形態において、腫瘍は、約８５％低減される。一部の実施形態において、腫瘍は、約９０％低減される。一部の実施形態において、腫瘍は、約９５％低減される。一部の実施形態において、腫瘍は、約９９％低減される。

【0143】

一部の実施形態において、がんは、固形腫瘍ではない。

【0144】

投薬の方法及び治療レジメン
本開示の医薬組成物は、投与の意図される方法又は経路と適合性のあるように製剤化することができ；例証的な投与経路は、本明細書において説明されている。一部の実施形態において、本明細書において開示されている医薬組成物は、経口、静脈内（ＩＶ）、筋肉内、皮下、皮内注射又は腫瘍内注射による投薬又は投与のための形態である。一部の実施形態において、医薬組成物は、経口、筋肉内、皮下又は静脈内投与のために製剤化される。一部の実施形態において、医薬組成物は、静脈内投与のために製剤化される。一部の実施形態において、医薬組成物は、静脈内（ＩＶ）投与のための水溶液又は懸濁液として製剤化される。一部の実施形態において、医薬組成物は、単一用量として投与するために製剤化される。一部の実施形態において、本明細書において開示されている医薬組成物は、ＩＶによってボーラスとして投与するために製剤化される。一部の実施形態において、本明細書において開示されている医薬組成物は、腫瘍中への注射として投与するために製剤化される。

【0145】

一部の実施形態において、本明細書において開示されている化合物を含有する組成物は、予防的治療及び／又は治療的治療のために投与される。ある特定の治療用途において、組成物は、疾患又は状態をすでに患う患者に、疾患又は状態の症状の少なくとも１つを治癒する又は少なくとも部分的に停止するのに十分な量で投与される。この使用に有効な量は、疾患又は状態の重症度及び過程、前の治療、患者の健康状態、体重及び薬物への応答、並びに治療する医師の判断次第である。治療有効量は、任意選択的に、以下に限定されないが用量漸増臨床試験を含めた方法によって決定される。

【0146】

典型的な投与量は、１用量当たり約０．００１ｍｇ～約１００ｍｇ／ｋｇを範囲とする。一部の実施形態において、用量範囲は、約０．０１ｍｇ～約５０ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態において、用量のさらなる範囲は、１用量当たり約０．０５ｍｇ～約１０ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態において、用量は、約５０ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態において、用量は、約１００ｍｇ／ｋｇである。正確な投与量は、投与の頻度及びモード、治療される対象の性別、年齢、体重及び全般的な健康、治療される状態の性質及び重症度及び治療される任意の付随疾患、並びに当業者に明らかな他の因子に依存する。

【0147】

ある特定の実施形態において、投与されている組成物の用量は、一時的に低減する又は時間のある特定の長さの間一時的に中止する（すなわち、「休薬日」）ことができる。

【0148】

一部の実施形態において、方法は、組成物を１回投与することを含む。一部の実施形態において、方法は、組成物を２回以上投与することを含む。一部の実施形態において、組成物は、１日当たり１回投与される。

【0149】

一部の実施形態において、対象は、哺乳動物である。一部の実施形態において、対象はヒトである。

【0150】

組合せ治療
別の態様において、本明細書において開示されている組成物は、１つ以上の追加の治療とともに投与される。一部の実施形態において、方法は、第２の抗がん治療をさらに含む。一部の実施形態において、第２の抗がん治療は、外科手術、化学療法、放射線治療、遺伝子治療又は免疫療法である。一部の実施形態において、第２の抗がん治療は、免疫療法である。一部の実施形態において、免疫療法は、チェックポイント治療である。一部の実施形態において、第２の抗がん治療は、放射線治療である。一部の実施形態において、第２の治療は、外科手術である。

【0151】

定義
以下の記載において、様々な実施形態の徹底的な理解を提供するために、ある特定の具体的な詳細が説明される。しかしながら、当業者は、本発明がこれらの詳細なく実践することができることを理解されよう。他の例において、周知の構造は、実施形態の不必要に不明瞭な記載を回避するために、示されていない又は詳細に記載されていない。文脈が別段に必要としない限り、以下に続く本明細書及び請求項の全体にわたって、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という単語及びその変動、例えば、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、オープンな包含的な意味で、すなわち、「以下に限定されないが、を含めて」として解釈されるべきである。さらに、本明細書において提供されている見出しは、便宜上のためであり、請求項に係る発明の範囲又は意味を解釈するものでない。

【0152】

本明細書及び添付の請求項において使用されている場合、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、内容が別段に明らかに指示していない限り、複数の参照対象を含む。「又は」という用語は、内容が別段に明らかに指示していない限り、「及び／又は」を含めたそれの意味で一般に用いられることも注記されるべきである。

【0153】

下記の用語は、本明細書で使用される場合、別段に表示されていない限り以下の意味を有する：
「オキソ」は、＝Ｏ置換基を指す。

【0154】

「チオキソ」は、＝Ｓ置換基を指す。

【0155】

「アルキル」は、１～２０個の炭素原子を有するとともに単結合によって分子の残りに結合している直鎖又は分岐の炭化水素鎖基を指す。最大１０個までの炭素原子を含むアルキルは、Ｃ_１～Ｃ_１０アルキルと称され、同様に、例えば、最大６個までの炭素原子を含むアルキルは、Ｃ_１～Ｃ_６アルキルである。他の数の炭素原子を含むアルキル（及び本明細書において定義されている他の部分）は、同様に表される。アルキル基としては、以下に限定されないが、Ｃ_１～Ｃ_１０アルキル、Ｃ_１～Ｃ_９アルキル、Ｃ_１～Ｃ_８アルキル、Ｃ_１～Ｃ_７アルキル、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_１～Ｃ_５アルキル、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、Ｃ_１～Ｃ_３アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２アルキル、Ｃ_２～Ｃ_８アルキル、Ｃ_３～Ｃ_８アルキル及びＣ_４～Ｃ_８アルキルが挙げられる。代表的なアルキル基としては、以下に限定されないが、メチル、エチル、ｎ－プロピル、１－メチルエチル（ｉ－プロピル）、ｎ－ブチル、ｉ－ブチル、ｓ－ブチル、ｎ－ペンチル、１，１－ジメチルエチル（ｔ－ブチル）、３－メチルヘキシル、２－メチルヘキシル、１－エチル－プロピルなどが挙げられる。一部の実施形態において、アルキルは、メチル、エチル、ｓ－ブチル又は１－エチル－プロピルである。本明細書において具体的に別段に明記されていない限り、アルキル基は、下に記載されている通り任意選択的に置換されていてよい。「アルキレン」又は「アルキレン鎖」は、分子の残りをラジカル基に連結する直鎖又は分岐の二価の炭化水素鎖を指す。一部の実施形態において、アルキレンは、飽和されている。一部の実施形態において、アルキレンは、－ＣＨ_２－、－ＣＨ_２ＣＨ_２－又は－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－である。一部の実施形態において、アルキレンは、－ＣＨ_２－である。一部の実施形態において、アルキレンは、－ＣＨ_２ＣＨ_２－である。一部の実施形態において、アルキレンは、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－である。

【0156】

「アルコキシ」は、Ｒが定義されている通りのアルキル基である式－ＯＲの基を指す。本明細書において具体的に別段に明記されていない限り、アルコキシ基は、下に記載されている通り任意選択的に置換されていてよい。代表的なアルコキシ基としては、以下に限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシが挙げられる。一部の実施形態において、アルコキシはメトキシである。一部の実施形態において、アルコキシはエトキシである。

【0157】

「ヘテロアルキレン」は、アルキルの１個以上の炭素原子がＯ、Ｎ又はＳ原子と置き換えられる上に記載されている通りのアルキル基を指す。「ヘテロアルキレン」又は「ヘテロアルキレン鎖」は、分子の残りをラジカル基に連結する直鎖又は分岐の二価のヘテロアルキル鎖を指す。本明細書において具体的に別段に明記されていない限り、ヘテロアルキル基又はヘテロアルキレン基は、下に記載されている通り任意選択的に置換されていてよい。代表的なヘテロアルキル基としては、以下に限定されないが、－ＯＣＨ_２ＯＭｅ、－ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＭｅ又は－ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２が挙げられる。代表的なヘテロアルキレン基としては、以下に限定されないが－ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ－、－ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ－又は－ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ－が挙げられる。

【0158】

「アルキルアミノ」は、各Ｒが独立して、上記で定義されている通りのアルキル基である式－ＮＨＲ又は－ＮＲＲの基を指す。本明細書において具体的に別段に明記されていない限り、アルキルアミノ基は、下に記載されている通り任意選択的に置換されていてよい。

【0159】

「芳香族」という用語は、ｎが整数である４ｎ＋２π電子を含有する非局在化π電子系を有する平面環を指す。芳香族は、任意選択的に置換されていてよい。「芳香族」という用語は、アリール基（例えば、フェニル、ナフタレニル）及びヘテロアリール基（例えば、ピリジニル、キノリニル）の両方を含む。

【0160】

「アリール」は、環を形成する原子の各々が炭素原子である芳香族環を指す。アリール基は、任意選択的に置換されていてよい。アリール基の例としては、以下に限定されないが、フェニル及びナフタレニルが挙げられる。一部の実施形態において、アリールはフェニルである。構造に依存して、アリール基は、モノラジカル又はジラジカル（すなわち、アリーレン基）であり得る。本明細書において具体的に別段に明記されていない限り、「アリール」という用語又は接頭辞「ａｒ－」（例えば、「アラルキル」における）は、任意選択的に置換されているアリール基を含むと意味される。

【0161】

「カルボキシ」は、－ＣＯ_２Ｈを指す。一部の実施形態において、カルボキシ部分は、カルボン酸部分と同様の物理的及び／又は化学的な特性を呈する官能基又は部分を指す「カルボン酸生物学的等価体」と置き換えることができる。カルボン酸生物学的等価体は、カルボン酸基のものと同様の生物学的特性を有する。カルボン酸部分を有する化合物は、カルボン酸生物学的等価体と交換されたカルボン酸部分を有し、カルボン酸含有化合物と比較した場合に同様の物理的及び／又は生物学的特性を有することができる。例えば、一実施形態において、カルボン酸生物学的等価体は、生理学的ｐＨでカルボン酸基とおおよそ同じ程度にイオン化する。カルボン酸の生物学的等価体の例としては、限定されないが、以下が挙げられる：

【0162】

【化42】

など。

【0163】

「シクロアルキル」は、環を形成する原子の各々（すなわち、骨格原子）が炭素原子である、単環式又は多環式の非芳香族基を指す。シクロアルキルは、飽和又は部分不飽和されていてよい。シクロアルキルは、芳香族環と縮合されていてよい（この場合、シクロアルキルは、非芳香族環炭素原子を介して結合されている）。シクロアルキル基は、３～１０個の環原子を有する基を含む。一部の実施形態において、シクロアルキルは、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキルである。一部の実施形態において、シクロアルキルは、３～６員シクロアルキルである。代表的なシクロアルキルとしては、以下に限定されないが、３～１０個の炭素原子、３～８個の炭素原子、３～６個の炭素原子、又は３～５個の炭素原子を有するシクロアルキルが挙げられる。単環式シクロアルキル基としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルが挙げられる。一部の実施形態において、単環式シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル又はシクロヘキシルである。多環式基としては、例えば、アダマンチル、ノルボルニル、デカリニル、及び３，４－ジヒドロナフタレン－１（２Ｈ）－オンが挙げられる。本明細書において具体的に別段に明記されていない限り、シクロアルキル基は、任意選択的に置換されていてよい。

【0164】

「縮合されている」は、存在する環構造に縮合されている、本明細書に記載されている任意の環構造を指す。縮合環がヘテロシクリル環又はヘテロアリール環である場合、縮合ヘテロシクリル環又は縮合ヘテロアリール環の一部となる存在する環構造上の任意の炭素原子は、窒素原子と置き換えることができる。

【0165】

「ハロ」又は「ハロゲン」は、ブロモ、クロロ、フルオロ又はヨードを指す。

【0166】

「ハロアルキル」は、上記で定義されている通りの１個以上のハロ基によって置換されている上記で定義されている通りのアルキル基、例えば、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、フルオロメチル、トリクロロメチル、２，２，２－トリフルオロエチル、１，２－ジフルオロエチル、３－ブロモ－２－フルオロプロピル、１，２－ジブロモエチルなどを指す。本明細書において具体的に別段に明記されていない限り、ハロアルキル基は、任意選択的に置換されていてよい。

【0167】

「ハロアルコキシ」は、上記で定義されている通りの１個以上のハロ基によって置換されている上記で定義されている通りのアルコキシ基、例えば、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、フルオロメトキシ、トリクロロメトキシ、２，２，２－トリフルオロエトキシ、１，２－ジフルオロエトキシ、３－ブロモ－２－フルオロプロポキシ、１，２－ジブロモエトキシなどを指す。本明細書において具体的に別段に明記されていない限り、ハロアルコキシ基は、任意選択的に置換されていてよい。

【0168】

「ヘテロシクロアルキル」又は「ヘテロシクリル」又は「複素環式環」は、２～１３個の炭素原子並びに窒素、酸素及び硫黄からなる群から選択される１～６個のヘテロ原子を含む安定な３～１４員非芳香族環基を指す。一部の実施形態において、ヘテロシクロアルキルは、Ｃ_２～Ｃ_７ヘテロシクロアルキルである。一部の実施形態において、ヘテロシクロアルキルは、Ｃ_２～Ｃ_６ヘテロシクロアルキルである。一部の実施形態において、ヘテロシクロアルキルは、Ｃ_２～Ｃ_５ヘテロシクロアルキルである。一部の実施形態において、ヘテロシクロアルキルは、３～８員ヘテロシクロアルキルである。一部の実施形態において、ヘテロシクロアルキルは、３～７員ヘテロシクロアルキルである。一部の実施形態において、ヘテロシクロアルキルは、３～６員ヘテロシクロアルキルである。一部の実施形態において、ヘテロシクロアルキルは、３～５員ヘテロシクロアルキルである。本明細書において具体的に別段に明記されていない限り、ヘテロシクロアルキル基は、縮合環系（アリール又はヘテロアリール環と縮合されている場合、ヘテロシクロアルキルは非芳香族環原子を介して結合されている）又は架橋環系を挙げることができる単環式又は二環式環系であってよい。ヘテロシクリル基における窒素、炭素又は硫黄原子は、任意選択的に酸化することができる。窒素原子は、任意選択的に四級化することができる。ヘテロシクロアルキル基は、部分的又は完全に飽和されている。こうしたヘテロシクロアルキル基の例としては、以下に限定されないが、ジオキソラニル、チエニル［１，３］ジチアニル、デカヒドロイソキノリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリジニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、オクタヒドロインドリル、オクタヒドロイソインドリル、２－オキソピペラジニル、２－オキソピペリジニル、２－オキソピロリジニル、オキサゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、４－ピペリドニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、キヌクリジニル、チアゾリジニル、テトラヒドロフリル、トリチアニル、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニル、チアモルホリニル、１－オキソ－チオモルホリニル、１，１－ジオキソ－チオモルホリニルが挙げられる。ヘテロシクロアルキルという用語は、以下に限定されないが単糖類、二糖類及びオリゴ糖類を含めて、炭水化物の全ての環形態も含む。別段に注記されていない限り、ヘテロシクロアルキルは、環中に２～１０個の炭素を有する。一部の実施形態において、ヘテロシクロアルキルは、環中に２～８個の炭素を有する。一部の実施形態において、ヘテロシクロアルキルは、環中に２～８個の炭素、及び１個又は２個のＮ原子を有する。ヘテロシクロアルキルにおける炭素原子の数について言及する場合、ヘテロシクロアルキルにおける炭素原子の数は、ヘテロシクロアルキル（すなわち、ヘテロシクロアルキル環の骨格原子）を構成する原子の合計数（ヘテロ原子を含める）と同じではないと理解される。本明細書において具体的に別段に明記されていない限り、ヘテロシクロアルキル基は、任意選択的に置換されていてよい。

【0169】

「ヘテロアリール」は、窒素、酸素及び硫黄から選択される１個以上の環ヘテロ原子を含むアリール基を指す。ヘテロアリールは、単環式又は二環式である。一部の実施形態において、ヘテロアリールは、５員又は６員のヘテロアリールである。一部の実施形態において、ヘテロアリールは、５員ヘテロアリールである。一部の実施形態において、ヘテロアリールは、６員ヘテロアリールである。単環式ヘテロアリールの例示的な例としては、ピリジニル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、ピリダジニル、トリアジニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フラザニル、インドリジン、インドール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インダゾール、ベンズイミダゾール、プリン、キノリジン、キノリン、イソキノリン、シンノリン、フタラジン、キナゾリン、キノキサリン、１，８－ナフチリジン及びプテリジンが挙げられる。単環式ヘテロアリールの例示的な例としては、ピリジニル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、ピリダジニル、トリアジニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル及びフラザニルが挙げられる。二環式ヘテロアリールの例示的な例としては、インドリジン、インドール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インダゾール、ベンズイミダゾール、プリン、キノリジン、キノリン、イソキノリン、シンノリン、フタラジン、キナゾリン、キノキサリン、１，８－ナフチリジン及びプテリジンが挙げられる。一部の実施形態において、ヘテロアリールは、ピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、チアゾリル、チエニル、チアジアゾリル又はフリルである。一部の実施形態において、ヘテロアリールは、環中に０～４個のＮ原子を含有する。一部の実施形態において、ヘテロアリールは、環中に１～４個のＮ原子を含有する。一部の実施形態において、ヘテロアリールは、環中に０～４個のＮ原子、０～１個のＯ原子、及び０～１個のＳ原子を含有する。一部の実施形態において、ヘテロアリールは、環中に１～４個のＮ原子、０～１個のＯ原子、及び０～１個のＳ原子を含有する。

【0170】

「任意選択的に置換されている」又は「置換されている」という用語は、参照されている基が、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、－ＯＨ、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルチオ、アリールチオ、アルキルスルホキシド、アリールスルホキシド、アルキルスルホン、アリールスルホン、－ＣＮ、アルキン、Ｃ_１～Ｃ_６アルキルアルキン、ハロゲン、アシル、アシルオキシ、－ＣＯ_２Ｈ、－ＣＯ_２アルキル、ニトロ並びに一置換及び二置換アミノ基（例えば、－ＮＨ_２、－ＮＨＲ、－Ｎ（Ｒ）_２）を含めたアミノ、並びにその保護誘導体から個々に及び独立して選択される１個以上の追加の基で置換されていてよいことを意味する。一部の実施形態において、任意選択の置換基は、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、シクロアルキル、ハロゲン、－ＣＮ、－ＮＨ_２、－ＮＨ（ＣＨ_３）、－Ｎ（ＣＨ_３）_２、－ＯＨ、－ＣＯ_２Ｈ及び－ＣＯ_２アルキルから独立して選択される。一部の実施形態において、任意選択の置換基は、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＦ_３、－ＯＣＨ_３及び－ＯＣＦ_３から独立して選択される。一部の実施形態において、任意選択の置換基は、フルオロ、クロロ、－ＣＨ_３、－ＣＦ_３、－ＯＣＨ_３及び－ＯＣＦ_３から独立して選択される。一部の実施形態において、置換されている基は、先行する基の１個又は２個で置換されている。一部の実施形態において、脂肪族炭素原子上の任意選択の置換基（芳香族炭素原子を除外する、非環式又は環式の飽和又は不飽和の炭素原子）は、オキソ（＝Ｏ）を含む。

【0171】

「マレイミド残基」は、マレイミド基と例えばタンパク質のチオール硫黄原子との反応に起因する化合物構造を指す。

【0172】

「互変異性体」は、分子の１個の原子から同じ分子の別の原子へのプロトンシフトを指す。本明細書において表されている化合物は、互変異性体として存在することができる。互変異性体は、単結合及び隣接する二重結合の切り換えを伴う水素原子の移動によって相互変換可能である化合物である。互変異性化が可能である結合配置において、互変異性体の化学平衡が存在する。本明細書において開示されている化合物の全ての互変異性体形態が企図される。互変異性体の正確な比は、温度、溶媒及びｐＨを含めて、いくつかの因子に依存する。互変異性の相互変換の一部の例としては、以下が挙げられる：

【0173】

【化43】

【0174】

「同時投与」という用語などは、本明細書で使用される場合、単一患者への選択された治療剤の投与を包含することが意味され、薬剤が同一若しくは異なる投与経路によって又は同一若しくは異なる時間で投与される治療レジメンを含むことが意図される。

【0175】

「有効量」又は「治療有効量」という用語は、本明細書で使用される場合、治療されている疾患又は状態の症状の１つ以上をある程度緩和する、投与される薬剤又は化合物の十分な量を指す。結果は、疾患の兆候、症状若しくは原因の低減及び／若しくは軽減、又は生物系の任意の他の所望の変更であり得る。例えば、治療的使用のための「有効量」は、疾患症状の臨床的に著しい減少を提供するのに必要とされる、本明細書において開示されている通りの化合物を含む組成物の量である。任意の個々の場合における適切な「有効」量は、用量漸増研究などの技法を使用して決定することができる。

【0176】

別段に明記されていない限り、この出願において使用される以下の用語は、下記に与えられている定義を有する。「含めて（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語、並びに「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」及び「含まれる（ｉｎｃｌｕｄｅｄ）」などの他の形態の使用は、限定するものでない。本明細書において使用されているセクション見出しは、組織化の目的だけのためであり、記載されている対象物を限定していると解釈されるべきでない。

【0177】

「薬学的に許容される」は、本明細書で使用される場合、ブロックコポリマーの生物学的活性又は特性を抑制しないとともに相対的に非毒性である担体又は希釈液などの材料に参照し、すなわち、材料は、望ましくない生物学的影響を引き起こすこと又はそれが含有される組成物の構成成分のいずれかと有害な方式で相互作用することなく、個体に投与される。

【0178】

「薬学的に許容される塩」という用語は、適当なアニオンとの組合せにおける治療的に活性な薬剤のカチオン形態、又は代替実施形態において、適当なカチオンとの組合せにおける治療的に活性な薬剤のアニオン形態からなる治療的に活性な薬剤の形態を指す。ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ、ＳｅｌｅｃｔｉｏｎａｎｄＵｓｅ。国際純正応用化学連合、Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ２００２。Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ、Ｌ．Ｄ．Ｂｉｇｈｌｅｙ、Ｄ．Ｃ．Ｍｏｎｋｈｏｕｓｅ、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１９７７、６６、１～１９。Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ及びＣ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ、ｅｄｉｔｏｒｓ、ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ、ＳｅｌｅｃｔｉｏｎａｎｄＵｓｅ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ／Ｚｕｒｉｃｈ：Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ／ＶＨＣＡ、２００２。医薬塩は、典型的に、胃及び腸液中で非イオン種よりも可溶性及び急速に可溶性であり、そのため、固体剤形において有用である。さらに、それらの可溶度がしばしばｐＨの関数であるので、消化管の１つの又は別の部分における選択的な溶解が可能であり、これは遅延及び徐放の挙動の一態様として操作することができる。その上、塩形成分子が中性形態と平衡状態であり得るので、生物学的膜を介する通過は調整することができる。

【0179】

一部の実施形態において、薬学的に許容される塩は、ブロックコポリマーを酸と反応させることによって得られる。一部の実施形態において、本明細書において開示されているブロックコポリマー（すなわち、遊離塩基形態）は、塩基性であり、有機酸又は無機酸と反応される。無機酸としては、以下に限定されないが、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸及びメタリン酸が挙げられる。有機酸／としては、以下に限定されないが、１－ヒドロキシ－２－ナフトエ酸；２，２－ジクロロ酢酸；２－ヒドロキシエタンスルホン酸；２－オキソグルタル酸；４－アセトアミド安息香酸；４－アミノサリチル酸；酢酸；アジピン酸；アスコルビン酸（Ｌ）；アスパラギン酸（Ｌ）；ベンゼンスルホン酸；安息香酸；ショウノウ酸（＋）；カンファー－１０－スルホン酸（＋）；カプリン酸（デカン酸）；カプロン酸（ヘキサン酸）；カプリル酸（オクタン酸）；炭酸；ケイ皮酸；クエン酸；シクラミン酸；ドデシル硫酸；エタン－１，２－ジスルホン酸；エタンスルホン酸；ギ酸；フマル酸；ガラクタル酸；ゲンチジン酸；グルコヘプタン酸（Ｄ）；グルコン酸（Ｄ）；グルクロン酸（Ｄ）；グルタミン酸；グルタル酸；グリセロリン酸；グリコール酸；馬尿酸；イソ酪酸；乳酸（ＤＬ）；ラクトビオン酸；ラウリン酸；マレイン酸；リンゴ酸（－Ｌ）；マロン酸；マンデル酸（ＤＬ）；メタンスルホン酸；ナフタレン－１，５－ジスルホン酸；ナフタレン－２－スルホン酸；ニコチン酸；オレイン酸；シュウ酸；パルミチン酸；パモ酸；リン酸；プロピオン酸；ピログルタミン酸（－Ｌ）；サリチル酸；セバシン酸；ステアリン酸；コハク酸；硫酸；酒石酸（＋Ｌ）；チオシアン酸；トルエンスルホン酸（ｐ）；及びウンデシレン酸が挙げられる。

【0180】

一部の実施形態において、本明細書において開示されているブロックコポリマーは、塩化物塩、サルフェート塩、臭化物塩、メシレート塩、マレエート塩、シトレート塩又はホスフェート塩として調製される。

【0181】

一部の実施形態において、薬学的に許容される塩は、本明細書において開示されているブロックコポリマーを塩基と反応させることによって得られる。一部の実施形態において、本明細書において開示されているブロックコポリマーは、酸性であり、塩基と反応される。こうした状況において、本明細書において開示されているブロックコポリマーの酸性プロトンは、金属イオン、例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム又はアルミニウムイオンによって置き換えられる。一部の場合において、本明細書に記載されているブロックコポリマーは、以下に限定されないが、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、メグルミン、Ｎ－メチルグルカミン、ジシクロヘキシルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミンなどの有機塩基と配位する。他の場合において、本明細書に記載されているブロックコポリマーは、アミノ酸、例えば、以下に限定されないが、アルギニン、リジンなどと塩を形成する。酸性プロトンを含むブロックコポリマーと塩を形成するために使用される許容可能な無機塩基としては、以下に限定されないが、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化リチウムなどが挙げられる。一部の実施形態において、本明細書において提供されているブロックコポリマーは、ナトリウム塩、カルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、メラミン塩、Ｎ－メチルグルカミン塩又はアンモニウム塩として調製される。

【0182】

薬学的に許容される塩への言及は、溶媒付加形態を含むと理解されるべきである。一部の実施形態において、溶媒和物は、溶媒の化学量論量又は非化学量論量のいずれかを含有し、薬学的に許容される溶媒、例えば、水、エタノールなどとの結晶化のプロセス中に形成される。水和物は、溶媒が水である場合に形成される、又はアルコラートは、溶媒がアルコールである場合に形成される。本明細書に記載されている化合物の溶媒和物は、好都合には、本明細書に記載されているプロセス中に調製又は形成される。加えて、本明細書において提供されている化合物は、任意選択的に、非溶媒和並びに溶媒和の形態で存在する。

【0183】

本明細書に記載されている方法及び製剤は、Ｎ－オキシド（適切な場合）、又は式（Ｉ）、（Ｉ－ａ）、（Ｉ－ｂ）、（Ｉ－ｂ２）、（Ｉ－ｃ）、（ＩＩ）、（ＩＩ－ａ）、（ＩＩ－ｂ）、（ＩＩ－ｂ２）、（ＩＩＩ）若しくは（ＩＩＩ－ｃ）のいずれかの構造を有するブロックコポリマーの薬学的に許容される塩、並びに同じ型の活性を有するこれらの化合物の活性代謝物の使用を含む。

【0184】

別の実施形態において、本明細書に記載されている化合物は、同位体的に（例えば、放射性同位体で）、又は以下に限定されないが、発色団若しくは蛍光性部分、生物発光標識、若しくは化学発光標識の使用を含めて、別の他の手段によって標識化される。

【0185】

本明細書に記載されている化合物は、１個以上の原子が、自然界に通常見出される原子質量又は質量数と異なる原子質量又は質量数を有する原子によって置き換えられるという事実を別にすれば、本明細書において表されている様々な式及び構造に列挙されているものと同一である同位体標識化化合物を含む。本化合物に組み込むことができる同位体の例としては、例えば、^２Ｈ、^３Ｈ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１８Ｏ、^１７Ｏ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、^３６Ｃｌ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、^３２Ｐ及び^３３Ｐなど、水素、炭素、窒素、酸素、硫黄、フッ素塩素、ヨウ素、リンの同位体が挙げられる。一態様において、本明細書に記載されている同位体標識化化合物、例えば、^３Ｈ及び^１４Ｃなどの放射性同位元素が組み込まれているものは、薬物及び／又は基質組織分布アッセイにおいて有用である。一態様において、重水素などの同位体での置換は、例えば、インビボ半減期の増加又は投与量要求の低減など、より大きな代謝安定性に起因するある特定の治療的利点を与える。

【0186】

本明細書で使用される場合、「ｐＨ応答性系」、「ｐＨ応答性組成物」、「ミセル」、「ｐＨ応答性ミセル」、「ｐＨ感受性ミセル」、「ｐＨ活性化可能ミセル」及び「ｐＨ活性化可能ミセル（ｐＨＡＭ）ナノ粒子」は、ｐＨ（例えば、ある特定のｐＨの上又は下）に依存して解離する、１種以上の化合物を含むミセルを示すために本明細書において相互交換可能に使用される。非限定的な例として、ある特定のｐＨで、式（ＩＩ）のブロックコポリマーは、実質的にミセル形態である。ｐＨが変化（例えば、減少）すると、ミセルは解離し始め、ｐＨがさらに変化（例えば、さらに減少）すると、式（ＩＩ）のブロックコポリマーは、実質的に解離（非ミセル）形態で存在する。

【0187】

本明細書で使用される場合、「ｐＨ遷移範囲」は、ミセルが解離するｐＨ範囲を示す。

【0188】

本明細書で使用される場合、「ｐＨ遷移値」（ｐＨ）は、ミセルの半分が解離されるｐＨを示す。

【0189】

「ナノプローブ」は、画像化標識化部分を含むｐＨ感受性ミセルを示すために本明細書で使用される。一部の実施形態において、標識化部分は、蛍光染料である。一部の実施形態において、蛍光染料は、インドシアニングリーン染料である。

【0190】

「投与する（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒ）」、「投与すること（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）」、「投与（ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」などという用語は、本明細書で使用される場合、生物学的作用の所望の部位への化合物又は組成物の送達を可能にするために使用することができる方法を指す。これらの方法としては、以下に限定されないが、経口経路、十二指腸内経路、非経口注射（静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、血管内又は注入を含める）、局所及び直腸投与が挙げられる。当業者は、本明細書に記載されている化合物及び方法で用いることができる投与技法に精通している。一部の実施形態において、本明細書に記載されている化合物及び組成物は、経口的に投与される。一部の実施形態において、本明細書に記載されている組成物は、静脈内に投与される。

【0191】

「同時投与」などという用語は、本明細書で使用される場合、単一患者への選択された治療剤の投与を包含すると意味され、薬剤が同一若しくは異なる投与経路によって又は同一若しくは異なる時間に投与される治療レジメンを含むと意図される。

【0192】

「有効量」又は「治療有効量」という用語は、本明細書で使用される場合、治療されている疾患又は状態の症状の１つ以上をある程度緩和する、投与される薬剤又は化合物の十分な量を指す。結果としては、疾患の兆候、症状若しくは原因の低減及び／若しくは軽減、又は生物系の任意の他の所望の変更が挙げられる。例えば、治療的使用についての「有効量」は、疾患症状の臨床的に著しい減少を提供するのに必要とされる本明細書において開示されている通りの化合物を含む組成物の量である。任意の個々の場合における適切な「有効」量は、任意選択的に、用量漸増研究などの技法を使用して決定される。

【0193】

「増強する」又は「増強すること」という用語は、本明細書で使用される場合、効力又は持続期間のいずれかにおいて所望の効果を増加又は延長することを意味する。したがって、治療剤の効果を増強することに関して、「増強すること」という用語は、効力又は持続期間のいずれかにおいて、系に対する他の治療剤の効果を増加又は延長する能力を指す。「増強有効量」は、本明細書で使用される場合、所望の系において別の治療剤の効果を増強するのに適切な量を指す。

【0194】

「対象」又は「患者」という用語は、哺乳動物を包含する。哺乳動物の例としては、以下に限定されないが、哺乳動物クラスの任意のメンバー：ヒト、非ヒト霊長類、例えば、チンパンジー、及び他の類人猿及びモンキー種；農場動物、例えば、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ；家畜、例えば、ウサギ、イヌ及びネコ；げっ歯類、例えば、ラット、マウス及びモルモットなどを含めた実験室動物が挙げられる。一態様において、哺乳動物は、ヒトである。

【0195】

「治療する(ｔｒｅａｔ)」、「治療すること(ｔｒｅａｔｉｎｇ)」又は「治療(ｔｒｅａｔｍｅｎｔ)」という用語は、本明細書で使用される場合、疾患若しくは状態の少なくとも１つの症状を軽減すること、弱めること若しくは寛解させること、追加の症状を防止すること、疾患若しくは状態を阻害すること、例えば、疾患若しくは状態の発症を抑止すること、疾患若しくは状態を緩和すること、疾患若しくは状態の後退を引き起こすこと、疾患若しくは状態によって引き起こされる状態を緩和すること、又は予防的に及び／若しくは治療的のいずれかで疾患若しくは状態の症状を阻止することを含む。

【0196】

請求項における「又は」という用語の使用は、開示が代替物のみ及び「及び／又は」を指す定義を支持しても、代替物のみを指すことが明白に示されていない限り又は代替物が相互排他的でない限り「及び／又は」を意味するために使用される。この願書の全体にわたって、「約」という用語は、値を決定するために用いられている装置又は方法についての誤差の標準偏差を値が含むことを示すために使用される。長年にわたる特許法に従って、「ａ」及び「ａｎ」という単語は、請求項又は明細書において「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という単語と併せて使用される場合、具体的に注記されていない限り１つ以上を示す。

【実施例】

【0197】

［実施例１］ブロックコポリマーの合成
一般的合成方法
本明細書に記載されているブロックコポリマー及びミセルは、標準合成技術を使用して、又は当技術分野において公知の方法を使用して合成される。

【0198】

別段に表示されていない限り、質量分析、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、タンパク質化学、生化学、組換えＤＮＡ技術及び薬理学の従来の方法が用いられる。ブロックコポリマーは、例えば、Ｍａｒｃｈ’ｓＡｄｖａｎｃｅｄＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ、第６版、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ、Ｉｎｃ．に記載されているものなど標準的な有機化学技法を使用して調製される

【0199】

本明細書において使用されている一部の略語は、以下の通りである：
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＡＰ：４－ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＤＭＦ－ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドジメチルアセタール
ＥＤＣＩ：１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
ＦＰＬＣ高速タンパク質液体クロマトグラフィー
ＩＣＧ－ＯＳｕ：インドシアニングリーンスクシンアミドエステル
ＭｅＯＨ：メタノール
ＰＭＤＥＴＡ：Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ”，Ｎ”－ペンタメチルジエチレントリアミン
ＣＤＩカルボニルジイミダゾール
ＮＨＳ－カーボネートＮ－ヒドロキシスクシンイミドカーボネート
ＳＰＤＢＮ－スクシンイミジル－４－（２－ピリジルジチオ）ブタノエート
ＴＥＡ：トリエチルアミン
Ｈｒ時間
ＩＳＲ試料再分析の発生
ＩＶ静脈内
ｋｇキログラム
ｍｇミリグラム
ｍＬミリリットル
μｇマイクログラム
ＮＣ算出されず
ＮＲ報告されず

【0200】

適当なＰＥＧポリマーは、（例えば、ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈから）購入することができる、又は当技術分野において公知の方法に従って合成することができる。一部の実施形態において、親水性ポリマーは、ブロックコポリマーを形成するために疎水性モノマーの重合のための開始剤として使用することができる。例えば、ＭＰＣポリマー（例えば、狭く分布されたＭＰＣポリマー）は、市販で利用可能な小分子開始剤、例えば、エチル２－ブロモ－２－メチルプロパノエート（ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ）との原子移動ラジカル重合（ＡＴＲＰ）によって調製することができる。これらの結果として得られたＭＰＣポリマーは、ブロックポリマーを形成するために他のモノマーとさらに共重合するための巨大分子ＡＴＲＰ開始剤として使用することができ、ブロックポリマーは、原子移動ラジカル重合（ＡＴＲＰ）又は可逆的付加－断片化連鎖移動（ＲＡＦＴ）方法を使用して合成することができる。

【0201】

一部の実施形態において、適当なブロックコポリマー及びミセルは、標準合成技術を使用して、又は参照によりそれら全体で本明細書に組み込まれる特許公報番号ＷＯ２０１２０３９７４１及びＷＯ２０１５１８８１５７に記載されている方法との組合せにおいて当技術分野で公知の方法を使用して合成することができる。

【0202】

［実施例２］ミセル形成
一般的方法
メタノールは、ガラス丸底フラスコ中でブロックコポリマーに添加され、超音波処理浴を利用して溶解させる。溶解後、結果として得られた溶液は、撹拌子を含有するＨＤＰＥ瓶に定量的に移され、氷浴を用いて０℃に冷却される。水は、ぜん動ポンプを使用してＨＤＰＥ瓶中でメタノールポリマー溶液に、撹拌しながら滴下により添加される。ポリマー溶液を含有するＨＤＰＥ瓶は、氷浴中で維持され、ミセルの形成をもたらす。メタノールは、１００ｋのＰｅｌｌｉｃｏｎ（登録商標）２ＭｉｎｉＵｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎＭｏｄｕｌｅを介して５サイクルのタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）を使用してミセル溶液から除去される。

【0203】

単純混合することによって調製されるＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＩＬ－２製剤
水中のポリマーミセル溶液を注射用水（ＷＦＩ）で希釈した。リン酸緩衝液中１０％（ｗ／ｗ）のＩＬ－２（ポリマーの％）を添加することで、ピペット混合することによって１ｍｇ／ｍＬのミセル及び０．１ｍｇ／ｍＬのＩＬ－２の溶液を作製した。溶液を室温で１０分間インキュベートした。次いで、試料を高速度で微量遠心機中にて周囲温度で遠心分離した（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ、２１，１３０×ｇ、１０分）。溶液を膜限外濾過（Ａｍｉｃｏｎ、０．５ｍＬ、ＭＷＣＯ１００ｋＤａ）によって精製することで、非カプセル化ＩＬ－２を全て除去した。次いで、０．５ｍＬの製剤をＡｍｉｃｏｎ超遠心分離装置に添加し、５，０００ｒｃｆで２～３分間遠心分離した。透過物を捨て、ミセル－ＩＬ－２製剤を含有した残余分を注射用水中にて０．５ｍＬに希釈した。このプロセスを１０回反復した。製剤中のＩＬ－２濃度を標準曲線に対するウエスタンブロット又はドットブロットによって決定した。

【0204】

ＦＰＬＣによるＰＤＢＡ－ＩＬ－２製剤の精製
方法（例えば、単純混合すること、酸－塩基滴定など）の１つによるＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＩＬ－２非共有結合性製剤又はコンジュゲート。Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００Ｉｎｃｒｅａｓｅ１０／３００ＧＬカラム（ＧＥ）が備えられているＡｋｔａＰｕｒｅ２５Ｍ（ＧＥ）システムを使用するＦＰＬＣによって、粗製ＰＤＢＡ－ＩＬ－２製剤を精製した。平衡化を０．７５ｍＬ／分で１×ＰＢＳ中にて行った。適切化サイズ化された試料ループ又はスーパーループを使用して、試料注射を行った。複数の波長（例えば、２１４ｎｍ、２８０ｎｍ、７００ｎｍ）で吸光度をモニタリングしながら、均一溶媒溶出を１×ＰＢＳ中にて０．５ｍＬ／分の流量で行った。画分（０．５ｍＬ）を１．５ｍＬチューブ中に回収した。クロマトグラムによって示された通りの製剤及び遊離タンパク質を含有する画分をＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ウエスタンブロット又はドットブロットによって分析した。製剤中にＩＬ－２を含有する画分をプールした。

【0205】

ＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＩＬ－２製剤二重エマルジョン溶媒蒸発（ＤＥＳＥ）
ジクロロメタン（ＤＣＭ）中の１．０ｍｇ／ｍＬのポリマー溶液及びリン酸緩衝液中の１．０ｍｇ／ｍＬのＩＬ－２を氷水浴中にて５分間冷やした。ＩＬ－２溶液を氷水浴中にて超音波処理条件下で１０％（ｗ／ｗ、ＩＬ－２／ポリマー）総量で滴下によりポリマー溶液に添加することで、第１のエマルジョン溶液を形成した。第１のエマルジョンを冷水中にて超音波処理条件下で、冷やしたＰＶＡ／ＴＨＬ溶液に滴下により添加することで、第２のエマルジョン溶液を形成した。第２のエマルジョン溶液を終夜室温で撹拌した。溶液を膜限外濾過（Ａｍｉｃｏｎ、０．５ｍＬ、ＭＷＣＯ１００ｋＤａ）によって精製することで、非カプセル化ＩＬ－２を除去した。次いで、０．５ｍＬの製剤をＡｍｉｃｏｎ超遠心分離装置に添加し、５，０００ｒｃｆで２～３分間遠心分離した。透過物を捨て、ミセル－ＩＬ－２製剤を含有した残余分を注射用水中にて０．５ｍＬに希釈した。このプロセスを１０回反復した。製剤中のＩＬ－２濃度を標準曲線に対するウエスタンブロット又はドットブロットによって決定した。

【0206】

酸－塩基滴定によるＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＩＬ－２製剤
ｐＨ４．４７のリン酸緩衝液中のポリマー溶液に、リン酸緩衝液中の１０％（ｗ／ｗ）ＩＬ－２を添加し、室温でボルテックスした。１ＭＮａＯＨ溶液を超音波処理条件下で溶液に添加した。溶液をＷＦＩにより最終濃度１．０ｍｇ／ｍＬのポリマー及び０．１ｍｇ／ｍＬのＩＬ－２で希釈した。溶液を膜限外濾過（Ａｍｉｃｏｎ、０．５ｍＬ、ＭＷＣＯ１００ｋＤａ）によって精製することで、非カプセル化ＩＬ－２を除去した。次に、０．５ｍＬの製剤をＡｍｉｃｏｎ超遠心分離装置に添加し、５，０００ｒｃｆで２～３分間遠心分離した。透過物を捨て、ミセル－ＩＬ－２製剤を含有した残余分を注射用水中にて０．５ｍＬに希釈した。このプロセスを１０回反復した。製剤中のＩＬ－２濃度を標準曲線に対するウエスタンブロット又はドットブロットによって決定した。

【0207】

ドットブロットによる製剤中のＩＬ－２及びミセルの定量化
製剤のＩＬ－２含有量及びミセル含有量をドットブロットによって決定した。Ｄｏｔ－Ｂｌｏｔ器具に０．２μｍのニトロセルロース膜を組み入れた。各ウェルを真空下にて２００μＬの１×ＰＢＳで洗浄し、続いて、１００μＬのＰＢＳで再水和した。試料及び標準物（１０～１００μＬ）を添加し、膜に真空を適用した。膜をＰＢＳで２×洗浄した。

【0208】

ＩＬ－２免疫ブロッティングを、プローブすることによって、及び２％ＢＳＡが補充されたＰＢＳ－Ｔ（ＰＢＳとともに０．０５％ツイーン－２０）でブロックし、抗ＩＬ－２ウサギモノクローナル抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、２Ｈ２０Ｌ７、ＰＢＳ－Ｔ中１：１０００希釈、１時間）でプローブし、ＰＢＳ－Ｔで４回洗浄し、続いて、ＩＲＤｙｅ（登録商標）６８０ＲＤ（ＬＩ－ＣＯＲ、ＰＢＳ－Ｔ中１：５０００希釈）で標識化されたロバ－抗ウサギＩｇＧでプローブすることによって行った。ＣｈｅｍｉＤｏｃＭＰ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を使用することによって検出を行い、ＩｍａｇｅＬａｂ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を使用するデンシトメトリー分析によって画像を定量化した。標準曲線にフィットさせることによって、ＩＬ－２含有量を決定した。

【0209】

ポリマー標準曲線に対してポリ－エチレングリコールについて免疫ブロッティングすることによって、ポリマー含有量を決定した。免疫ブロッティングを、２％ＢＳＡが補充されたＰＢＳで膜をブロックし、ＴＨＥ（商標）抗－ＰＥＧＩＧＭｍＡｂ（Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ、ＰＢＳ中１：１０００希釈）でプローブし、ＰＢＳで４回洗浄し、ＩＲＤｙｅ（登録商標）６８０ＲＤ（ＬＩ－ＣＯＲ、ＰＢＳ中１：５０００希釈）で標識化されたヤギ抗マウスＩｇＭ（μ鎖特異的）でプローブすることによって行った。ＣｈｅｍｉＤｏｃＭＰ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を使用することによって検出を行い、ＩｍａｇｅＬａｂ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を使用するデンシトメトリー分析によって画像を定量化した。ＰＥＧ－ＰＤＢＡ標準曲線にフィットさせることによって、ポリマー含有量を決定した。

【0210】

［実施例３］ＩＬ－２及びＦａｂに共有結合的にコンジュゲートされているブロックコポリマー
アミンブロックにおけるＩＬ－２へのＰＥＧ－ＰＤＢＡコンジュゲーション
ｐＨ７．５のＰＢＳ緩衝液中の５００ｕｌの１ｍｇ／ｍｌｒｈＩＬ－２溶液（ＧｅｎｓｃｒｉｐｔＺ００３６８－１）に、１３．５ｕｌのＳＡＴ（ＰＥＧ）_４（Ｔｈｅｒｍｏ、ＤＭＳＯ中２５ｍＭ）を添加した。３０分後、反応物を１Ｍトリス－ＨＣｌによってクエンチし、溶液を室温で１５分間撹拌した。溶液を２ｍＬ脱塩用カラム（ＴｈｅｒｍｏＺｅｂａ、７ｋＤａＭＷＣＯ）に移し、続いて、１００μＬの１×ＰＢＳをカラムの上部に添加することで、中間体を精製した。溶液を回収するため、１６７μＬの脱アセチル化溶液（０．５Ｍヒドロキシルアミン、１×ＰＢＳ中２５ｍＭＥＤＴＡ）を添加し、反応溶液を室温で２時間の間保持した。次いで、溶液を２ｍｌ脱塩用カラムに、続いて、１００μＬの１×ＰＢＳ緩衝液をカラムの上部に移すことで、次のステップにおけるポリマーコンジュゲーションのタンパク質前駆体を精製した。

【0211】

溶液に、５．６ｍｇのＰＥＧ－ＰＤＢＡ_１００－ＡＭＡ_４－ＯＰＳＳポリマーを添加し、続いて、５ｍＬのｐＨ４．５のＰＢＳ緩衝液を添加した。混合物を超音波処理することで、清澄な溶液を作製した。ポリマー溶液（１ｍＬ）を１．３５ｍＬのｐＨ４．５緩衝溶液及び１．３５ｍＬの１×ＰＢＳ溶液で希釈した。次いで、修飾されたｒｈＩＬ－２溶液を添加した。反応物を室温で終夜保持した。次いで、溶液を５ｍＬ脱塩用カラムに移すことで、コンジュゲートを精製した。コンジュゲートを０．４ｍｇ／ｍＬに濃縮した（ＡＰＩとしてｒｈＩＬ－２に基づく）。移動相としてｐＨ４．５の酢酸ナトリウム緩衝液を使用するＦＰＬＣによって、コンジュゲートを精製し、ＩＬ－２含有量をウエスタンブロットによって決定した。ＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＩＬ－２コンジュゲートのミセル化を、ＰＥＧ－ＰＤＢＡでブレンドし、酸－塩基滴定によってミセルを形成することによって行った。

【0212】

［実施例４］小分子メルタンシンに共有結合的にコンジュゲートされているブロックコポリマー
ＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳ
メルタンシン（ＤＭ１）（１３．３５ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ、４．１当量）を、２．５ｍｌの無水ＴＨＦ／ＤＭＦ（４／１ｖ：ｖ）中のＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＯＰＳＳ（１５０ｍｇ、０．００４４１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に添加した。（使用された親化合物は、ＰＥＧ_１１３－ｂ－（ＰＤＢＡ_１２０－ｒ－ＯＰＳＳ_４）であった）。反応混合物を３７℃で２０時間の間撹拌した。粗反応混合物を３０ｍｌにメタノール／水溶液（１：１）で希釈することによって、精製を行った。溶液をＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ遠心膜装置（１０ｋＭＷＣＯ）に移した。溶液を遠心分離する（２，５００ｒｐｍ、４０～６０分）ことによって約１ｍＬに濃縮し、プロセスを５～７時間反復した。各サイクルからの上澄みをＨＰＬＣによって分析することで、非コンジュゲートＤＭ１の完全な除去をモニタリング及び確認した。一旦精製すると、ポリマー－ＤＭ１コンジュゲートをバイアルにピペットで取り、溶媒ＭｅＯＨ／水を窒素流下で除去し、続いて、凍結乾燥した。最終生成物を^１ＨＮＭＲによって特徴付けることで、薬物充填を決定した。

【0213】

ＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＡＭＡ－ＤＭ１
ＮＨＳ－エステルコンジュゲートメルタンシン（ＳＭＣＣ－ＤＭ１）（１３．７９ｍｇ、０．０１２８ｍｍｏｌ、３．０当量）を、３ｍｌの無水ＭｅＯＨ中のＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＡＭＡ（１５０ｍｇ、０．００４２８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に添加した。反応混合物を３７℃で２０時間の間撹拌した。粗反応混合物への水（３ｍＬ）の添加によって精製を行い、続いて、１５ｍｌにメタノール／水溶液（１：１）で希釈した。溶液をＡｍｉｃｏｎＵｌｔｒａ遠心膜装置（１０ｋＭＷＣＯ）に移した。溶液を遠心分離する（２，５００ｒｐｍ、４０～６０分）ことによって約１ｍＬに濃縮し、プロセスを５～７時間反復した。各サイクルからの上澄みをＨＰＬＣによって分析することで、非コンジュゲートＤＭ１の完全な除去をモニタリング及び確認した。一旦精製すると、ポリマー－ＤＭ１コンジュゲートをピペットでバイアルに取り、溶媒ＭｅＯＨ／水を窒素流下で除去し、続いて、凍結乾燥した。最終生成物をＲＰ－ＨＰＬＣ及び^１ＨＮＭＲによって特徴付けた。^１ＮＭＲを使用して、ＤＭ１からのアリールＣ－Ｈ（δ６．７５ｐｐｍ、１Ｈ）及びビニルＣ－Ｈ（δ４．７ｐｐｍ、１Ｈ）とｏ－メトキシシングレット（δ３．４ｐｐｍ、３Ｈ）の積分を比較することによって薬物充填を決定した。

【0214】

［実施例５］インビボ腫瘍マウスモデルについての一般的手順
およそ６～８週齢の雌性ＮＯＤｓｃｉｄマウス（ＳｔｒａｉｎＮＯＤ．ＣＢ１７－Ｐｒｋｄｃ^{ｓｃｉｄ／Ｊ}）に、顎下三角中にて５０μＬの１×ＰＢＳ中の１．５×１０^６のＨＮ５腫瘍細胞を播種し、腫瘍が約１週間成長するのを可能にした。ＰＥＧ－ＰＤＢＡ－ＩＬ－２又はＰＥＧ－ＰＤＢＡ－Ｆａｂ製剤を、ＩＲＤｙｅ（登録商標）８００ＣＷ（ＬｉＣＯＲ）で蛍光標識化されたｒｈＩＬ－２で調製し、プレートリーダーを使用する８００ＣＷ蛍光（λ_Ｅｘ７６０ｎｍ、λ_Ｅｍ７８０ｎｍ）によって、投薬を正規化した。非カプセル化蛍光標識化タンパク質を対照として使用した。ミセル－ＩＬ－２製剤又はタンパク質を、尾静脈注射を介して投与した。イソフルランを使用して動物に麻酔をかけ、試験物品投与後１時間、３時間、及び２４時間に白色光及び８００ｎｍチャネルでＰｅａｒｌＴｒｉｌｏｇｙ（ＬＩ－ＣＯＲ）を使用して、インビボ小動物画像化を行った。最終のインビボ画像化時点後、動物をＣＯ_２窒息及び頸椎脱臼によって屠殺し、主要な臓器のエクスビボ画像化を行った。ＩｍａｇｅＳｔｕｄｉｏソフトウェア（ＬＩ－ＣＯＲ）を使用するＲＯＩ分析によって、蛍光を定量化した。

【0215】

［実施例６］インビトロＩＬ－２生物活性アッセイのための一般的手順
解凍及び使用ＩＬ－２Ｂｉｏａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用してマニュアルに従って、製剤中のＩＬ－２生物活性を測定した。ＩＬ－２をカプセル化している又はＩＬ－２にコンジュゲートされているミセルを、用量－応答アッセイにおいて酸放出状態又はカプセル化状態のいずれかで評価した。２０μＬの製剤を２０μＬのプールヒト血清、続いて、４０μＬの酸性の酢酸ナトリウム緩衝液（０．１Ｍ酢酸ナトリウム、０．９％生理食塩水、ｐＨ約４．５）と混合し、１５分間室温でインキュベートすることによって、酸放出を行い、引き続いて、４０μＬの２０×ＰＢＳを添加した。カプセル化試料について、酸性の酢酸緩衝液を中性の酢酸緩衝液（０．１Ｍ酢酸ナトリウム、０．９％生理食塩水、ｐＨ７～７．６）と置き換え、同様のプロセスを使用して混合した。放出製剤又はカプセル化製剤の３倍系列希釈を、アッセイ緩衝液（９０％ＲＰＭＩ１６４０／１０％ウシ胎児血清）中で調製した。製剤希釈物（２５μＬ）を、白色の不透明な９６ウェルマイクロプレート又は半ウェルマイクロプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）中に前播種されたＩＬ－２バイオアッセイ細胞を含有するウェルに、製造者推奨に従って添加した。アッセイ緩衝液単独及び処置なし細胞を陰性対照として使用し、他方、ＩＬ－２単独を陽性対照として使用した。プレートを覆い、加湿インキュベーター（３７℃、５％のＣＯ_２）において６時間の間インキュベートした。インキュベーション後、７５μＬのＢｉｏ－Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、１０分間インキュベートし、プレートリーダー（ＴｅｃａｎＭ２００Ｐｒｏ）を使用して生物発光を読んだ。データをＰｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ）からプロットし、ＥＤ５０を非線形フィットによって算出した。

【0216】

［実施例７］製剤のＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析のための一般的手順
ミセル－ＩＬ－２製剤をＳＤＳ－ＰＡＧＥによって評価することで、ミセル中へのＩＬ－２充填及びＩＬ－２統合性を確認した。レーン当たり充填された１００～２００ｎｇのタンパク質を標的化するように、試料を調製した。ＦＰＬＣによるＩＬ－２充填製剤精製の特徴付けのため、充填試料は、全く精製することない粗製の製剤を構成し、スピンされた充填試料は、凝集体及び大きい粒子を排除するための高速遠心分離による精製後に製剤を構成し、ミセルプールは、ミセルを含有する画分を組み合わせることによって調製され、遊離ＩＬ－２試料は、非カプセル化タンパク質を含有する画分を含有する。製剤試料を還元要件に依存してβ－メルカプトエタノールの有無において４×Ｌａｅｍｍｌｉ緩衝液（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）中に希釈し、６５℃で５分間変性させた。試料を５０Ｖで３０分間スタックし、続いて、１００Ｖで９０分間分離させることによって、ＡｎｙｋＤ（商標）又は４～２０％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ勾配Ｍｉｎｉ－Ｐｒｏｔｅａｎゲル（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）に充填した。ＩＬ－２の検出をＳｉｍｐｌｙＢｌｕｅＳｔａｉｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によって行った。ＩＬ－２をその上、抗ＩＬ－２Ａｂクローン（ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ＣｌｏｎｅＤ７Ａ５、１：４０００希釈）、続いて、ＨＲＰ－コンジュゲート抗ウサギ二次（ＬＩ－ＣＯＲ、１：２０００希釈）を用いてプローブすることによって０．２μｍニトロセルロース膜に移した後にウエスタンブロットによって決定し、ＥＣＬ試薬（Ｐｉｅｒｃｅ）によって検出し、化学ルミネッセンスをＣｈｅｍｉＤｏｃＭＰイメージャ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）で捕捉した。ＩｍａｇｅＬａｂ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を使用して、画像処理及びデンシトメトリー分析を行った。必要とされる場合、ＩＬ－２の定量化をＩＬ－２標準曲線にフィットさせることによって行った。

【0217】

［実施例８］治療の方法
がん（例えば、固形腫瘍がん）を患うヒト対象は、注射によって、例えば静脈内注射によって（例えば、ミセルの形態で）本明細書において開示されている通りのブロックコポリマーによってカプセル化された治療剤の治療有効量を、又は１ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、例えば、１０ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの範囲で、投与される。

【0218】

本発明の好ましい実施形態が示され、本明細書に記載されているが、こうした実施形態が単に一例として提供されることは、当業者に明白である。多数の変動、変化及び置換が、ここで、本発明から逸脱することなく当業者に想起されよう。本明細書に記載されている本発明の実施形態に対する様々な代替が、本発明を実践する際に用いられ得ると理解されるべきである。以下の請求項が本発明の範疇を定義すること、並びにこれらの請求項の範疇内の方法及び構造並びにそれらの等価物がそれによって包含されることが意図される。

【図1】