▶ ヤンセン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッドの特許一覧 ▶ カトリック ユニヴェルシテット ルーヴェンの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-01-20
(54)【発明の名称】デング病の治療及び予防
(51)【国際特許分類】
A61K 31/404 20060101AFI20230113BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20230113BHJP
【ＦＩ】
A61K31/404
A61P31/14
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022528008
(86)(22)【出願日】2020-11-13
(85)【翻訳文提出日】2022-06-20
(86)【国際出願番号】 EP2020082102
(87)【国際公開番号】W WO2021094563
(87)【国際公開日】2021-05-20
(31)【優先権主張番号】19209593.3
(32)【優先日】2019-11-15
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(31)【優先権主張番号】19213851.9
(32)【優先日】2019-12-05
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(31)【優先権主張番号】20171172.8
(32)【優先日】2020-04-23
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】514010601
【氏名又は名称】ヤンセン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド
(71)【出願人】
【識別番号】512320560
【氏名又は名称】カトリック ユニヴェルシテット ルーヴェン
(74)【代理人】
【識別番号】100092783
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 浩
(74)【代理人】
【識別番号】100095360
【弁理士】
【氏名又は名称】片山 英二
(74)【代理人】
【識別番号】100093676
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 純子
(74)【代理人】
【識別番号】100120134
【弁理士】
【氏名又は名称】大森 規雄
(74)【代理人】
【識別番号】100149010
【弁理士】
【氏名又は名称】星川 亮
(72)【発明者】
【氏名】ゲタルス，オリヴィア，ガブリエラ，エム
(72)【発明者】
【氏名】ケステルイン，バート，ルドルフ，ロマニー
(72)【発明者】
【氏名】ストープス，バート，ヘンリ，テレジア
(72)【発明者】
【氏名】ボンファンティ，ジャン－フランソワ
(72)【発明者】
【氏名】ヨンカース，ティム，ヒューゴ，マリア
(72)【発明者】
【氏名】ファン ローク，マルニクス
(72)【発明者】
【氏名】カプテイン，スザンヌ
(72)【発明者】
【氏名】ネイツ，ヨハン
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC13
4C086MA01
4C086MA04
4C086MA16
4C086MA52
4C086MA65
4C086MA66
4C086NA14
4C086ZB33
(57)【要約】
本発明は、デングウイルスに感染した個体におけるデング病の治療、又はデングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデング病の予防のための薬剤の製造における、置換インドール誘導体及び置換インドリン誘導体の使用に関する。本発明は更に、デングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデングの治療又は予防のための方法を提供する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
デングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデング病の予防における、又はデングウイルスに感染した個体におけるデング病の治療のための使用のための式Ｉの化合物であって、前記化合物が、少なくとも１２時間の時間間隔で断続的に投与される薬剤に含まれ、式Ｉが、【化1】
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＦであり、Ｒ３がＨ又はＣＨ３である、
Ｒ１がＨ、ＣＨ３、又はＦであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＣＨ３である、
Ｒ１がＣＨ３であり、Ｒ２がＦであり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＣＦ３又はＯＣＦ３であり、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＯＣＦ３であり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＯＣＦ３であり、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＣＨ３である、の群から選択される、化合物。
【請求項2】
前記薬剤が、２４時間毎に少なくとも１回、好ましくは１週間毎に少なくとも１回、より好ましくは２週間毎に少なくとも１回、より好ましくは１ヶ月毎に少なくとも１回、最も好ましくは６ヶ月毎に少なくとも１回投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項3】
前記薬剤の初回投与が、デングウイルスによる感染の少なくとも５分前かつデングウイルスによる感染の最大１０日後に行われる、請求項１又は２に記載の使用のための化合物。
【請求項4】
前記薬剤が、有効量の式Ｉの化合物を含み、前記有効量が、血液中のデングウイルス負荷が１５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下、好ましくは１０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下、より好ましくは７ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下、更により好ましくは５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下、最も好ましくは３ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下、更に最も好ましくは２ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下のレベルに保持されるように選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項5】
前記化合物の前記有効量が、０．０５ｍｇ／ｋｇ～５００ｍｇ／ｋｇ体重である、請求項４に記載の使用のための化合物。
【請求項6】
前記薬剤が、経口、皮下、筋肉内、又は静脈内投与される、請求項１～５のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項7】
デングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデングの予防のための、又はデングウイルスに感染した個体におけるデング病の治療のための方法であって、前記方法が、前記個体に、式Ｉの化合物を含む薬剤を投与する工程を含み、前記薬剤が、少なくとも１２時間の時間間隔で断続的に投与され、前記式Ｉが、【化2】
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＦであり、Ｒ３がＨ又はＣＨ３である、
Ｒ１がＨ、ＣＨ３、又はＦであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＣＨ３である、
Ｒ１がＣＨ３であり、Ｒ２がＦであり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＣＦ３又はＯＣＦ３であり、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＯＣＦ３であり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＯＣＦ３であり、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＣＨ３である、の群から選択される、方法。
【請求項8】
前記薬剤の初回投与が、デングウイルスによる感染の少なくとも５分前かつデングウイルスによる感染の最大１０日後に行われる、請求項７に記載の方法。
【請求項9】
前記薬剤が、２４時間毎に少なくとも１回、好ましくは１週間毎に少なくとも１回、より好ましくは２週間毎に少なくとも１回、より好ましくは１ヶ月毎に少なくとも１回、最も好ましくは６ヶ月毎に少なくとも１回投与される、請求項７又は８に記載の方法。
【請求項10】
前記薬剤が、有効量の式Ｉの化合物を含み、前記有効量が、血液中のデングウイルス負荷が１５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下、好ましくは１０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下、より好ましくは７ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下、更により好ましくは５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下、最も好ましくは３ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下、更に最も好ましくは２ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ以下のレベルに保持されるように選択される、請求項７～９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項11】
前記化合物の前記有効量が、０．０５ｍｇ／ｋｇ～５００ｍｇ／ｋｇ体重である、請求項７～１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項12】
前記薬剤が、経口、皮下、筋肉内、又は静脈内投与される、請求項７～１１のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、デングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデング病の治療又は予防のための薬剤の製造における、置換インドール誘導体及び置換インドリン誘導体の使用に関する。本発明は更に、デングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデング病の治療又は予防のための方法を提供する。
【0002】
発明の背景
デングは、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ科のＦｌａｖｉｖｉｒｕｓ属に属する、４つの抗原的に異なるＤＥＮＶ血清型（ＤＥＮＶ－１、－２、－３、及び－４）のいずれかによって引き起こされる。ＤＥＮＶは、Ａｅｄｅｓ属、主にＡｅｄｅｓ ａｅｇｙｐｔｉ種、及び比較的程度は低いがＡｅｄｅｓ ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓの感染した雌の蚊の刺咬を通して伝播されるヒト病原体である（Ｃａｒｒｉｎｇｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４）。デングは、１２５を超える国において流行性であり、また、プエルトリコの米国（United States、ＵＳ）領土、及びバージン諸島においても再び流行性になっている（ＣＤＣ，２０１９）。世界人工の約半分は現在、ＤＥＮＶに感染するリスクがある（Ｂｈａｔｔ ｅｔ ａｌ．，２０１３；Ｂｒａｄｙ ｅｔ ａｌ．，２０１２；ＷＨＯ，２０１９）。世界保健機関（World Health Organization、ＷＨＯ）によると、デングは、２０１９年の世界的な健康に対する脅威の上位１０に入っている（ＷＨＯ，２０１９）。
デングは、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ科のＦｌａｖｉｖｉｒｕｓ属に属する、４つの抗原的に異なるＤＥＮＶ血清型（ＤＥＮＶ－１、－２、－３、及び－４）のいずれかによって引き起こされる。ＤＥＮＶは、Ａｅｄｅｓ属、主にＡｅｄｅｓ ａｅｇｙｐｔｉ種、及び比較的程度は低いがＡｅｄｅｓ ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓの感染した雌の蚊の刺咬を通して伝播されるヒト病原体である（Ｃａｒｒｉｎｇｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４）。デングは、１２５を超える国において流行性であり、また、プエルトリコの米国（United States、ＵＳ）領土、及びバージン諸島においても再び流行性になっている（ＣＤＣ，２０１９）。世界人工の約半分は現在、ＤＥＮＶに感染するリスクがある（Ｂｈａｔｔ ｅｔ ａｌ．，２０１３；Ｂｒａｄｙ ｅｔ ａｌ．，２０１２；ＷＨＯ，２０１９）。世界保健機関（World Health Organization、ＷＨＯ）によると、デングは、２０１９年の世界的な健康に対する脅威の上位１０に入っている（ＷＨＯ，２０１９）。
【0003】
デング症例の実際の数は、過小報告されている。世界的に毎年３億９０００万のＤＥＮＶ感染があると推定され、そのうちの９６００万は、臨床的に発現する（疾患のいずれの重症度で）（Ｂｈａｔｔ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。平均して、毎年約５００，０００のデング症例が、重度かつ生命を脅かす疾患により入院を必要とし、最大２５，０００人の患者が、デングにより死亡する。
【0004】
一次ＤＥＮＶ感染の間、個体の７５％は、無症候性である。臨床症状を示す個体は、主に急性、自己限定性の発熱性疾患を発症する。最初の臨床症状は、ＤＥＮＶ感染したウイルス血症の蚊による刺咬の３～８日後に生じる。感染の治癒は、通常、強固な先天性及び適応性の免疫応答により、４～７日以内に生じる（Ｗｈｉｔｅｈｏｒｎ ａｎｄ Ｓｉｍｍｏｎｓ．，２０１１）。ＤＥＮＶ感染の割合が少ないほど、デング出血熱及びデングショック症候群などの重度のデング転帰をもたらす。二次ＤＥＮＶ感染、又は特に毒性ウイルス株による感染症は、重度のデングのリスク増加に関連すると考えられている（Ｍｕｒｒａｙ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。
【0005】
古典的デング熱の間、突然の発熱は、広範囲の潜在的な症状、すなわち、筋痛、関節痛、頭痛、及び発疹を伴い、眼窩後痛及び下背部痛は、原型的な症状である。嘔吐、悪心、及び食欲不振も一般的である（ＷＨＯ，２００９）。この発熱段階の間、重度及び非重度のデング症例を区別することができない。重大な段階は、毛細血管漏出及び出血の傾向の増加によって特徴付けられ、典型的には、散在性点状出血、血尿、及び消化管出血により明らかになる（Ｗｈｉｔｅｈｏｒｎ ａｎｄ Ｓｉｍｍｏｎｓ，２０１１；Ｍｕｒｒａｙ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。早期診断及び適切な管理がない場合、一部の患者は、失血又は血漿漏出によるショックを経験し、これは、患者の状態の突然の悪化をもたらす可能性がある（Ｇｕｂｌｅｒ，１９９８）。
【0006】
現在、利用可能なデング特異的治療はないため、臨床治療は、本質的に主として支持的である。
【0007】
２０１５年１２月に、ＤＥＮＶに対する最初のワクチンが、メキシコで許可された。キメラ黄熱－ＤＥＮＶ四価デングワクチン（chimeric yellow fever-DENV tetravalent dengue vaccine、ＣＹＤ－ＴＤＶ；Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標））は、Ｓａｎｏｆｉ Ｐａｓｔｅｕｒによって開発された四価弱毒化生ワクチンである。２０１６年１１月までに、ワクチンは、ブラジル、メキシコ、エルサルバドル、コスタリカ、及びフィリピンを含む１８か国において使用が承認されている。近年、ワクチンは、検査で確認された以前のデング感染を有し、流行地域で生活している９～１６歳の人々における、すべてのＤＥＮＶ血清型（ＤＥＮＶ－１、ＤＥＮＶ－２、ＤＥＮＶ－３、及びＤＥＮＶ－４）によって引き起こされるデング病の予防のために、米国でも承認された。しかしながら、ワクチンの広範な使用は、多数の要因が更なる検討を必要とするため、予防接種のＷＨＯ研究グループによって予測されていない（ＷＨＯ，２０１７）。専門家の戦略的諮問委員会は、国々に、デング流行性が高い地理的背景（全国又は地方）においてのみ、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）の導入を考慮することを推奨した。
【0008】
近年、予防的使用のために開発された薬物が、デングを予防するための潜在的な代替物として徐々に更なる注目を集めている（Ｗｈｉｔｅｈｏｒｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４）。予防は、デング流行地域への旅行者（例えば、救援者、観光旅行者、ビジネス及び軍事旅行者）、並びに流行地域で生活している影響を受けやすい集団にとって有益であり得る。ウイルス血症を予防することによって、及び／又はウイルス負荷を低減することによって、デング関連の罹患率及び死亡率は、著しく低減され得るか、又は更には防止され得る（Ｗｈｉｔｅｈｏｒｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４）。加えて、有効かつ安全なデング抗ウイルス化合物は更に、治療薬としてのその用途もあり得る。
【0009】
国際公開第２０１７／１６７９５１号及び同第２０１６／１８０６９６号は、デングウイルス感染の予防及び治療のための化合物を開示している。しかしながら、動物において、より具体的にはヒトにおいて、デング病（デングとも呼ばれる）の治療又は予防を可能にする薬剤に対して、満たされていない高い医学的必要性がある。
【0010】
本発明は、デングウイルスに感染した個体におけるデング病の治療、又はデングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデング病の予防のための薬剤の製造における、置換インドール誘導体及び置換インドリン誘導体の使用に関する。本発明は更に、デングウイルスに感染した個体におけるデング病の治療、又はデングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデング病の予防のための方法を提供する。
【0011】
発明の概要
第１の態様では、本発明は、デングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデングの予防のための薬剤の製造における、置換インドール誘導体及び／又は置換インドリン誘導体の使用を提供する。薬剤は、好ましくは、少なくとも６時間、好ましくは少なくとも１２時間、好ましくは少なくとも２０時間、より好ましくは少なくとも２４時間、より好ましくは少なくとも３６時間、より好ましくは少なくとも４８時間、より好ましくは少なくとも７２時間の時間間隔で断続的に投与される。置換インドール誘導体及び／又は置換インドリン誘導体は、本明細書に記載されるとおりである。本発明は更に、デングウイルスに感染した個体におけるデング病の治療のための薬剤の製造における、置換インドール誘導体及び／又は置換インドリン誘導体の使用を提供する。
第１の態様では、本発明は、デングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデングの予防のための薬剤の製造における、置換インドール誘導体及び／又は置換インドリン誘導体の使用を提供する。薬剤は、好ましくは、少なくとも６時間、好ましくは少なくとも１２時間、好ましくは少なくとも２０時間、より好ましくは少なくとも２４時間、より好ましくは少なくとも３６時間、より好ましくは少なくとも４８時間、より好ましくは少なくとも７２時間の時間間隔で断続的に投与される。置換インドール誘導体及び／又は置換インドリン誘導体は、本明細書に記載されるとおりである。本発明は更に、デングウイルスに感染した個体におけるデング病の治療のための薬剤の製造における、置換インドール誘導体及び／又は置換インドリン誘導体の使用を提供する。
【0012】
第２の態様では、本発明は、デングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデングの予防のための方法を提供する。当該方法は、リスクがある個体に、置換インドール誘導体及び／又は置換インドリン誘導体を含む薬剤を投与することを含み、薬剤は、少なくとも６時間、好ましくは少なくとも１２時間、好ましくは少なくとも２０時間、より好ましくは少なくとも２４時間、より好ましくは少なくとも３６時間、より好ましくは少なくとも４８時間、より好ましくは少なくとも７２時間の時間間隔で断続的に投与される。置換インドール誘導体及び／又は置換インドリン誘導体は、以下に記載されるとおりである。本発明は更に、デングウイルスに感染した個体におけるデングの治療のための方法を提供する。
【0013】
本発明は、デング病の予防的処置又は曝露前予防とも呼ばれる、予防のための化合物の使用を提供する。予防の背後にある概念は、化合物が存在し、ウイルス感染前及び／又はウイルス血症がそのピーク（ピークウイルス負荷）に達する時点の前に、十分なレベルの全身曝露を示すことである。本発明は、デングウイルス複製のかなりの阻害をもたらし、それによって、デングに感染するリスクを最小限に抑え、更には排除する。これは、救援者、観光旅行者、ビジネス及び軍事旅行者、並びに訪問する友人及び家族など、流行地域で生活している集団及びデング流行地域への旅行者を含むがこれらに限定されない、複数の集団にとって有益である。
【図面の簡単な説明】
【0014】
【図1】インビボウイルス血症ＡＧ１２９マウス実験の概略図であり、化合物（ａ）は、１０６プラーク形成単位（plaque forming unit、ＰＦＵ）のＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａの高いウイルス投入量又は接種量に対する有効性について試験される。図面の底部の矢印は、化合物（ａ）／ビヒクルの投与を示す。０日目、化合物（ａ）の初回投与の１時間後、マウスを１０６ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａで腹腔内（intraperitoneal、ｉ．ｐ．）感染させた。
【図2】感染後（post infection、ｐ．ｉ．）３日目の、ビヒクル及び２’－Ｃ－メチルシチジン（2'-C-Methylcytidine、２’ＣＭＣ）１日２回で処置されたマウスと比較した、経口で（per os、ｐ．ｏ．）１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）、０．１、０．３、１、３、１０、及び３０ｍｇ／ｋｇ／用量における化合物（ａ）で１日２回処置されたＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ感染マウス（１０６ＰＦＵ）の血清中の平均ｌｏｇ１０ウイルス負荷（コピー／ｍＬ）。点線：定量下限（Lower limit of quantification、ＬＬＯＱ）（３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ）。図面の下部に示される塗りつぶされた横方向に長い長方形：負の値：すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。有意な平均ウイルス負荷低減（ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ）をアステリスクによって示す（＊ｐ＜０．０５及び＊＊ｐ＜０．００１）。処置群毎の推定平均ｌｏｇ１０ウイルス負荷（コピー／ｍＬ）値を、９５％信頼区間の上限と合わせたグラフ表示を示す。
【図3】インビボウイルス血症マウス実験の概略図であり、化合物（ａ）（ｑ．ｄ．）は、ＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａの高いウイルス投入量又は接種量（１０６ＰＦＵ）に対する有効性について試験される。図面の底部の矢印は、１日１回の化合物（ａ）／ビヒクルの経口投与を示す。０日目、化合物（ａ）の初回投与の１時間後、マウスを１０６ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａで腹腔内感染させた。
【図4】感染後３日目の、ビヒクル１日１回及び２’ＣＭＣ １日２回で処置されたマウスと比較した、経口で０．３、３、及び３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回における化合物（ａ）で１日１回処置されたＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ感染マウス（１０６ＰＦＵ）の血清中の平均ｌｏｇ１０ウイルス負荷（コピー／ｍＬ）。標準偏差を図面中のエラーバーとして示す。点線：定量下限（ＬＬＯＱ）＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。図面の下部に示される塗りつぶされた横方向に長い長方形：負の値：すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図5】インビボウイルス血症マウス実験の概略図であり、１日２回の化合物（ａ）は、ＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａの低いウイルス投入量又は接種量（１０２ＰＦＵ）に対する有効性について試験される。上向きの矢印：化合物（ａ）／ビヒクルの１日２回の投与。下向きの矢印：ウイルスＲＮＡ負荷を測定するための血液試料の採取。０日目、化合物（ａ）の初回投与の１時間後、マウスを１０２ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａで腹腔内感染させた。
【図6】ビヒクル処置されたマウスと比較した、１日２回０．１、１、及び１０ｍｇ／ｋｇ／用量における化合物（ａ）で処置された、１１日間にわたるＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ感染マウス（１０２ＰＦＵ）の血清中のｌｏｇ１０ウイルス負荷中央値（コピー／ｍＬ）。ｘ軸の下の矢印は、化合物（ａ）の１日２回の投与を示す。定量下限（ＬＬＯＱ）＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図7】インビボウイルス血症マウス実験の概略図であり、１日１回の化合物（ａ）は、ＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａの低いウイルス投入量又は接種量（１０２ＰＦＵ）に対する有効性について試験される。上向きの矢印：化合物（ａ）／ビヒクルの１日１回の投与。下向きの矢印：ウイルスＲＮＡ負荷を測定するための血液試料の採取。０日目、化合物（ａ）の初回投与の１時間後、マウスを１０２ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａで腹腔内感染させた。
【図8】ビヒクル処置されたマウスと比較した、０．１、０．６、及び３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回の化合物（ａ）で処置された、１１日間にわたるＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ感染マウス（１０２ＰＦＵ）の血清中のｌｏｇ１０ウイルス負荷中央値（コピー／ｍＬ）。ｘ軸の下の矢印は、化合物（ａ）の１日１回の投与を示す。定量下限（ＬＬＯＱ）＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図9】ビヒクル処置されたマウスと比較した、０．１、０．３、及び１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回の化合物（ａ）で処置された、１１日間にわたるＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ感染マウス（１０２ＰＦＵ）の血清中のｌｏｇ１０ウイルス負荷中央値（コピー／ｍＬ）。ｘ軸の下の矢印は、化合物（ａ）の１日１回の投与を示す。定量下限（ＬＬＯＱ）＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図10】ビヒクル処置されたマウスと比較した、１、３、及び１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回の化合物（ａ）で処置された、１１日間にわたるＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ感染マウス（１０２ＰＦＵ）の血清中のｌｏｇ１０ウイルス負荷中央値（コピー／ｍＬ）。ｘ軸の下の矢印は、化合物（ａ）の１日１回の投与を示す。定量下限（ＬＬＯＱ）＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図11】インビボ非ヒト霊長類（Non-Human Primate、ＮＨＰ）実験の概略図であり、アカゲザルを１０２ＴＣＩＤ５０のＤＥＮＶ－２／１６６８１のウイルス接種量で感染させた。水平の矢印は、－１日目からの、及び１０日目を含む、化合物（ａ）／ビヒクルの１日１回の投与を示す。濃い灰色の下向き矢印：ウイルスＲＮＡ負荷を測定するための血液試料の採取。
【図12A-1】ビヒクル処置されたアカゲザル（０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回）と比較した、０．０１、０．０２４、０．０９、０．１８、０．９３、及び３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回の化合物（ａ）で１２日間処置された、ＤＥＮＶ－２／１６６８１感染アカゲザル（１０２ＴＣＩＤ５０のＤＥＮＶ－２／１６６８１で感染）の血清中のｌｏｇ１０ウイルスＲＮＡ（ＧＣＥ／ｍＬ）。化合物（ａ）の経口投与を、ＤＥＮＶ－２での感染の１日前に開始し、接種の１０日後まで毎日投与し続けた。灰色の破線は、アッセイの定量下限（ＬＬＯＱ）（１２８６ＲＮＡゲノムコピー当量（ＧＣＥ／ｍＬ）を表す。すべての負の値を、３５のＣｔ値に対応する４２ＧＣＥ／ｍＬの値に補完した。
【図12A-2】ビヒクル処置されたアカゲザル（０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回）と比較した、０．０１、０．０２４、０．０９、０．１８、０．９３、及び３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回の化合物（ａ）で１２日間処置された、ＤＥＮＶ－２／１６６８１感染アカゲザル（１０２ＴＣＩＤ５０のＤＥＮＶ－２／１６６８１で感染）の血清中のｌｏｇ１０ウイルスＲＮＡ（ＧＣＥ／ｍＬ）。化合物（ａ）の経口投与を、ＤＥＮＶ－２での感染の１日前に開始し、接種の１０日後まで毎日投与し続けた。灰色の破線は、アッセイの定量下限（ＬＬＯＱ）（１２８６ＲＮＡゲノムコピー当量（ＧＣＥ／ｍＬ）を表す。すべての負の値を、３５のＣｔ値に対応する４２ＧＣＥ／ｍＬの値に補完した。
【図12B-1】ビヒクル処置されたアカゲザル（０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回）と比較した、０．０１、０．０２４、０．０９、０．１８、０．９３、及び３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回の化合物（ａ）で１２日間処置された、ＤＥＮＶ－２／１６６８１感染アカゲザル（１０２ＴＣＩＤ５０のＤＥＮＶ－２／１６６８１で感染）の血清中のｌｏｇ１０ウイルスＲＮＡ（ＧＣＥ／ｍＬ）。化合物（ａ）の経口投与を、ＤＥＮＶ－２での感染の１日前に開始し、接種の１０日後まで毎日投与し続けた。灰色の破線は、アッセイの定量下限（ＬＬＯＱ）（１２８６ＲＮＡゲノムコピー当量（ＧＣＥ／ｍＬ）を表す。すべての負の値を、３５のＣｔ値に対応する４２ＧＣＥ／ｍＬの値に補完した。
【図12B-2】ビヒクル処置されたアカゲザル（０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回）と比較した、０．０１、０．０２４、０．０９、０．１８、０．９３、及び３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回の化合物（ａ）で１２日間処置された、ＤＥＮＶ－２／１６６８１感染アカゲザル（１０２ＴＣＩＤ５０のＤＥＮＶ－２／１６６８１で感染）の血清中のｌｏｇ１０ウイルスＲＮＡ（ＧＣＥ／ｍＬ）。化合物（ａ）の経口投与を、ＤＥＮＶ－２での感染の１日前に開始し、接種の１０日後まで毎日投与し続けた。灰色の破線は、アッセイの定量下限（ＬＬＯＱ）（１２８６ＲＮＡゲノムコピー当量（ＧＣＥ／ｍＬ）を表す。すべての負の値を、３５のＣｔ値に対応する４２ＧＣＥ／ｍＬの値に補完した。
【図13】インビボ非ヒト霊長類（ＮＨＰ）実験の概略図であり、アカゲザルを０．５ｍＬのＤＥＮＶ－１／４５ＡＺ５（１．２×１０５ＰＦＵ／ｍＬの力価）で０日目に感染させた。水平の矢印は、－３日目からの、及び１０日目を含む、化合物（ａ）／ビヒクルの１日１回の投与を示す。濃い灰色の下向き矢印：ウイルスＲＮＡ負荷を測定するための血液試料の採取。
【図14-1】６ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回の化合物（ａ）で１４日間処置された、ＤＥＮＶ－１／４５ＡＺ５感染アカゲザル（１０４．７ＰＦＵ）の血清中のｌｏｇ１０ウイルスＲＮＡ（ＧＣＥ／ｍＬ）（Ｙ）と、ビヒクル処置されたアカゲザル（０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回）（Ｘ）との比較であり、化合物（ａ）（６ｍｇ／ｋｇ）の経口投与を、ＤＥＮＶ－１での感染の３日前に開始し、感染の１０日後まで毎日投与し続けた。アッセイ定量限界（ＬＯＱ）は、１００ゲノムコピー／反応である。
【図14-2】６ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回の化合物（ａ）で１４日間処置された、ＤＥＮＶ－１／４５ＡＺ５感染アカゲザル（１０４．７ＰＦＵ）の血清中のｌｏｇ１０ウイルスＲＮＡ（ＧＣＥ／ｍＬ）（Ｙ）と、ビヒクル処置されたアカゲザル（０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回）（Ｘ）との比較であり、化合物（ａ）（６ｍｇ／ｋｇ）の経口投与を、ＤＥＮＶ－１での感染の３日前に開始し、感染の１０日後まで毎日投与し続けた。アッセイ定量限界（ＬＯＱ）は、１００ゲノムコピー／反応である。
【図15-1】予防的設定における、ウイルス血症及び疾患発症に対する化合物（ｂ）のインビボ有効性。Ｘ：ウイルス血症及び生存研究の概略図。Ｙ：感染後３日目のウイルス血症に対する化合物（ｂ）の阻害効果、及びＺ：ビヒクル処置されたマウス（黒色の点）と比較した、３０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、又は１ｍｇ／ｋｇの化合物（ｂ）で１日２回処置されたマウスにおけるウイルス誘発性疾患。データは、１群当たりｎ＝８（ウイルス血症）又はｎ＝１０（生存）を用いた２つの独立して実施された研究からコンパイルされている。統計分析を、クラスカル・ウォリス検定（ウイルス血症）又はログランク検定（生存）を使用して実施した。ビヒクル処置されたマウスと比較して、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１。ＬＬＯＱ、定量下限＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図15-2】予防的設定における、ウイルス血症及び疾患発症に対する化合物（ｂ）のインビボ有効性。Ｘ：ウイルス血症及び生存研究の概略図。Ｙ：感染後３日目のウイルス血症に対する化合物（ｂ）の阻害効果、及びＺ：ビヒクル処置されたマウス（黒色の点）と比較した、３０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、又は１ｍｇ／ｋｇの化合物（ｂ）で１日２回処置されたマウスにおけるウイルス誘発性疾患。データは、１群当たりｎ＝８（ウイルス血症）又はｎ＝１０（生存）を用いた２つの独立して実施された研究からコンパイルされている。統計分析を、クラスカル・ウォリス検定（ウイルス血症）又はログランク検定（生存）を使用して実施した。ビヒクル処置されたマウスと比較して、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１。ＬＬＯＱ、定量下限＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図15-3】予防的設定における、ウイルス血症及び疾患発症に対する化合物（ｂ）のインビボ有効性。Ｘ：ウイルス血症及び生存研究の概略図。Ｙ：感染後３日目のウイルス血症に対する化合物（ｂ）の阻害効果、及びＺ：ビヒクル処置されたマウス（黒色の点）と比較した、３０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、又は１ｍｇ／ｋｇの化合物（ｂ）で１日２回処置されたマウスにおけるウイルス誘発性疾患。データは、１群当たりｎ＝８（ウイルス血症）又はｎ＝１０（生存）を用いた２つの独立して実施された研究からコンパイルされている。統計分析を、クラスカル・ウォリス検定（ウイルス血症）又はログランク検定（生存）を使用して実施した。ビヒクル処置されたマウスと比較して、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１。ＬＬＯＱ、定量下限＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図16-1】予防的設定における、ＤＥＮＶ複製の動態に対する化合物（ｂ）のインビボ有効性。Ｙ：インビボ動態研究の概略図。各処置群を、１日置きの採血のために、２つのサブグループ（各々ｎ＝８）に分けた。Ｚ：ビヒクル処置されたマウス（黒色の点、ｎ＝１６）、３０ｍｇ／ｋｇ（白色の点、ｎ＝８）、１０ｍｇ／ｋｇ（薄い灰色の点、ｎ＝８）、３ｍｇ／ｋｇ（薄い灰色の点、ｎ＝１６）、１ｍｇ／ｋｇ（薄い灰色の点、ｎ＝８）、又は０．３ｍｇ／ｋｇ（薄い灰色の点、ｎ＝８）の化合物（ｂ）で１日２回処置されたマウスにおける、感染後の様々な日数のウイルス血症に対する化合物（ｂ）の阻害効果。データは、２つの独立して実施された研究からコンパイルされている。ＬＬＯＱ、定量下限＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図16-2】予防的設定における、ＤＥＮＶ複製の動態に対する化合物（ｂ）のインビボ有効性。Ｙ：インビボ動態研究の概略図。各処置群を、１日置きの採血のために、２つのサブグループ（各々ｎ＝８）に分けた。Ｚ：ビヒクル処置されたマウス（黒色の点、ｎ＝１６）、３０ｍｇ／ｋｇ（白色の点、ｎ＝８）、１０ｍｇ／ｋｇ（薄い灰色の点、ｎ＝８）、３ｍｇ／ｋｇ（薄い灰色の点、ｎ＝１６）、１ｍｇ／ｋｇ（薄い灰色の点、ｎ＝８）、又は０．３ｍｇ／ｋｇ（薄い灰色の点、ｎ＝８）の化合物（ｂ）で１日２回処置されたマウスにおける、感染後の様々な日数のウイルス血症に対する化合物（ｂ）の阻害効果。データは、２つの独立して実施された研究からコンパイルされている。ＬＬＯＱ、定量下限＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図17-1】曝露後予防（Post-Exposure Prophylaxis、ＰＥＰ）及び治療設定における、ＤＥＮＶ複製の動態に対する化合物（ｂ）のインビボ有効性。Ｙ：ＤＥＮＶ攻撃後１～５日目に治療を開始したインビボ動態研究の概略図（群３～７）。対照群では、感染日に治療を開始した（群１～２）。各処置群（各々ｎ＝８）を、１日置きの採血のために、２つのサブグループ（各々ｎ＝４）に分けた。Ｚ：３０ｍｇ／ｋｇで１日２回、６日間連続して処置されたマウスにおける、様々な時点でのウイルス血症に対する化合物（ｂ）の阻害効果。遅延処置群（群３～８）では、化合物（ｂ）による処置を１日目（群３）、２日目（群４）、３日目（群５）、４日目（群６）、５日目（群７）、又は６日目（群８）に開始した。対照として、マウスの２つの群は、感染日に処置を受けた：群１（ビヒクル、黒色に塗りつぶされた点／バー）、及び群２（化合物（ｂ）、白色の塗りつぶされていない点／バー）。ＬＬＯＱ、定量下限＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【図17-2】曝露後予防（Post-Exposure Prophylaxis、ＰＥＰ）及び治療設定における、ＤＥＮＶ複製の動態に対する化合物（ｂ）のインビボ有効性。Ｙ：ＤＥＮＶ攻撃後１～５日目に治療を開始したインビボ動態研究の概略図（群３～７）。対照群では、感染日に治療を開始した（群１～２）。各処置群（各々ｎ＝８）を、１日置きの採血のために、２つのサブグループ（各々ｎ＝４）に分けた。Ｚ：３０ｍｇ／ｋｇで１日２回、６日間連続して処置されたマウスにおける、様々な時点でのウイルス血症に対する化合物（ｂ）の阻害効果。遅延処置群（群３～８）では、化合物（ｂ）による処置を１日目（群３）、２日目（群４）、３日目（群５）、４日目（群６）、５日目（群７）、又は６日目（群８）に開始した。対照として、マウスの２つの群は、感染日に処置を受けた：群１（ビヒクル、黒色に塗りつぶされた点／バー）、及び群２（化合物（ｂ）、白色の塗りつぶされていない点／バー）。ＬＬＯＱ、定量下限＝３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ。すべての負の値を、４０のＣｔ値に対応する２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの値に補完した。
【0015】
発明の詳細な記述
本発明は、デング病の予防的処置とも呼ばれる予防を提供する。本明細書で使用される場合、予防的及び予防という用語は、曝露後予防（ＰＥＰ）及び曝露前予防（Pre-Exposure Prophylaxis、ＰｒＥＰ）を指す。曝露後予防としても知られるＰＥＰは、デングウイルスへの曝露後、好ましくはピークウイルス負荷に達する前に開始される処置を指す。ＰｒＥＰは、デングウイルスへの曝露前に開始される処置を指す。本発明は更に、デング病の治療に関する。治療は、デングウイルスへの曝露後に開始され、好ましくはピークウイルス負荷に達した後及び／又は症状の発現後に開始される処置を指すために、本明細書で使用される。
本発明は、デング病の予防的処置とも呼ばれる予防を提供する。本明細書で使用される場合、予防的及び予防という用語は、曝露後予防（ＰＥＰ）及び曝露前予防（Pre-Exposure Prophylaxis、ＰｒＥＰ）を指す。曝露後予防としても知られるＰＥＰは、デングウイルスへの曝露後、好ましくはピークウイルス負荷に達する前に開始される処置を指す。ＰｒＥＰは、デングウイルスへの曝露前に開始される処置を指す。本発明は更に、デング病の治療に関する。治療は、デングウイルスへの曝露後に開始され、好ましくはピークウイルス負荷に達した後及び／又は症状の発現後に開始される処置を指すために、本明細書で使用される。
【0016】
第１の態様では、本発明は、デングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデング感染又はデング病の予防のための薬剤の製造における、式Ｉ又は式ＩＩの化合物の使用を提供し、薬剤は、少なくとも６時間、好ましくは少なくとも１２時間、好ましくは少なくとも２０時間、好ましくは少なくとも２４時間の時間間隔で断続的に投与され、式Ｉの化合物は、
【0017】
【化1】
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＦであり、Ｒ３がＨ又はＣＨ３である、
Ｒ１がＨ、ＣＨ３、又はＦであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＣＨ３である、
Ｒ１がＣＨ３であり、Ｒ２がＦであり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＣＦ３又はＯＣＦ３であり、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＯＣＦ３であり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＯＣＦ３であり、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＣＨ３である、の群から選択され、
式ＩＩの化合物は、
【0018】
【化2】
Ｒ１はクロロであり、Ｒ２は水素であり、Ｒ３はトリフルオロメチルであり、Ｒ４は水素であるか、又は
Ｒ１はクロロであり、Ｒ２は水素であり、Ｒ３はトリフルオロメトキシであり、Ｒ４は水素であるか、又は
Ｒ１はクロロであり、Ｒ２は水素であり、Ｒ３はトリフルオロメチルであり、Ｒ４はメトキシであるか、又は
Ｒ１はクロロであり、Ｒ２はメトキシであり、Ｒ３はトリフルオロメチルであり、Ｒ４は水素であるか、又は
Ｒ１はクロロであり、Ｒ２はメトキシであり、Ｒ３はトリフルオロメチルであり、Ｒ４はメトキシであるか、又は
Ｒ１はクロロであり、Ｒ２はメトキシであり、Ｒ３はトリフルオロメトキシであり、Ｒ４は水素であるか、又は
Ｒ１はクロロであり、Ｒ２はフルオロであり、Ｒ３はトリフルオロメチルであり、Ｒ４は水素であるか、又は
Ｒ１はクロロであり、Ｒ２はフルオロであり、Ｒ３はトリフルオロメトキシであり、Ｒ４は水素であるか、又は
Ｒ１はクロロであり、Ｒ２はフルオロであり、Ｒ３はトリフルオロメチルであり、Ｒ４はメトキシであるか、又は
Ｒ１はクロロであり、Ｒ２は水素であり、Ｒ３はトリフルオロメトキシであり、Ｒ４はメトキシである。
【0019】
本発明はまた、デングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデング病の予防における、又はデングウイルスに感染した個体におけるデング病の治療のための使用のための式Ｉの化合物を提供し、化合物は、少なくとも６時間、好ましくは少なくとも１２時間、好ましくは少なくとも２０時間、好ましくは少なくとも２４時間、好ましくは少なくとも３６時間、好ましくは少なくとも４８時間、好ましくは少なくとも７２時間の時間間隔で断続的に投与され、式Ｉは、
【0020】
【化3】
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＦであり、Ｒ３がＨ又はＣＨ３である、
Ｒ１がＨ、ＣＨ３、又はＦであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＣＨ３である、
Ｒ１がＣＨ３であり、Ｒ２がＦであり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＣＦ３又はＯＣＦ３であり、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＯＣＦ３であり、Ｒ２がＯＣＨ３であり、Ｒ３がＨである、
Ｒ１がＯＣＦ３であり、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＣＨ３である、の群から選択される。
【0021】
式Ｉ又は式ＩＩの化合物のすべての立体異性体（その１つ又は２つ以上の混合物を含む）が、本発明の範囲内に含まれる。
【0022】
式Ｉ又は式ＩＩの化合物の無水形態が、本発明の範囲内に含まれる。
【0023】
式Ｉ又は式ＩＩの化合物のすべての非晶質形態が、本発明の範囲内に含まれる。
【0024】
好ましくは、式Ｉの化合物、又はその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、若しくは多形は、以下の群から選択される。
【0025】
【化4】
【0026】
好ましくは、式ＩＩの化合物、又はその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物、若しくは多形は、以下の群から選択される。
【0027】
【化5】
【0028】
式Ｉ及びＩＩの化合物の薬学的に許容される塩は、その酸付加塩及び塩基塩を含む。好適な酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。好適な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。式Ｉ及びＩＩの化合物は、非溶媒和形態及び溶媒和形態で使用され得る。「溶媒和物」という用語は、式Ｉ及びＩＩの化合物、及び１つ又は２つ以上の薬学的に許容される溶媒分子、例えば、エタノールを含む分子複合体を説明するために、本明細書で使用される。
【0029】
本発明に従った式Ｉの化合物は、国際公開第２０１６／１８０６９６号に開示されるように、当該技術分野で記載される方法に従って合成され得る。本発明に従った式ＩＩの化合物は、国際公開第２０１７／１６７９５１号に開示されるように、当該技術分野で記載される方法に従って調製され得る。
【0030】
好ましい実施形態では、式Ｉの化合物は、
【0031】
【化6】
【0032】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、化合物（ａ）の（Ｓ）－エナンチオマーである。好ましくは、化合物（ａ）は、無水形態である。好ましくは、化合物（ａ）は、非晶質形態である。好ましくは、化合物（ａ）又はその薬学的に許容される塩形態は、非晶質形態又は溶解状態である。好ましくは、化合物（ａ）は、非晶質形態又は溶解状態である。好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、非晶質形態の（Ｓ）－エナンチオマーである。好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、無水形態の（Ｓ）－エナンチオマーである。好ましくは、化合物（ａ）は、非晶質形態の（Ｓ）－エナンチオマーである。好ましくは、化合物（ａ）は、無水形態の（Ｓ）－エナンチオマーである。
【0033】
化合物は、結晶性又は非晶質の生成物として投与され得る。それらは、単独で、又は本発明の１つ若しくは２つ以上の他の化合物と組み合わせて、又は１つ若しくは２つ以上の他の薬物と組み合わせて投与され得る。一般に、それらは、１つ又は２つ以上の薬学的に許容される賦形剤と併せて、製剤として投与される。「賦形剤」という用語は、本発明の化合物以外の任意の成分を説明するために、本明細書で使用される。賦形剤の選択は、特定の投与方法、溶解度及び安定性に対する賦形剤の効果、並びに剤形の性質などの要因に大きく依存する。
【0034】
「多形」という用語は、式Ｉ及びＩＩの化合物が、２つ以上の形態又は結晶構造で存在する能力を指す。
【0035】
好ましくは、薬剤は、６時間毎に少なくとも１回、８時間毎に少なくとも１回、１２時間毎に少なくとも１回、２０時間毎に少なくとも１回、２４時間毎に少なくとも１回、３６時間毎に少なくとも１回、４８時間毎に少なくとも１回、７２時間毎に少なくとも１回、１週間毎に少なくとも１回、２週間毎に少なくとも１回、３週間毎に少なくとも１回、１ヶ月毎に少なくとも１回、６週間毎に少なくとも１回、２ヶ月毎に少なくとも１回、３ヶ月毎に少なくとも１回、４ヶ月毎に少なくとも１回、５ヶ月毎に少なくとも１回、６ヶ月毎に少なくとも１回、又は１年に少なくとも１回投与される。「月」及び「４週間」という用語は、本明細書では同等物として使用される。
【0036】
薬剤は、デングウイルスに感染するリスクがある個体に投与され得る。当該個体は、デング流行地域で生活しているか、又はそこに旅行している。薬剤はまた、デングウイルスに既に感染しているが、血液中のピークウイルス負荷がまだ達成されていない個体に投与され得る。好ましくは、デングウイルスに感染するリスクがある個体について、薬剤の初回投与は、感染の少なくとも５分、少なくとも３０分、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、少なくとも６時間、少なくとも７時間、少なくとも８時間、少なくとも９時間、少なくとも１０時間、少なくとも１１時間、少なくとも１２時間、少なくとも２４時間、少なくとも３６時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月前（したがって、例えば、旅行者に関しては流行地域に入る前、又は流行地域で生活している個体に関してはデング流行期の前）に行われる。薬剤の初回投与はまた、デングウイルスに感染した最大１５日、最大１４日、最大１３日、最大１２日、最大１１日、最大１０日、最大８日、最大６日、最大５日、最大４日、最大７２時間、最大４８時間、最大３６時間、最大２４時間、又は最大１２時間後に行われ得る。
【0037】
薬剤は、有効量の式Ｉ又は式ＩＩの化合物を含む。当該有効量は、血液中のデングウイルス負荷が、最大０コピー／ｍＬ、最大０．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大２ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大２．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大３ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大３．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大４ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大４．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大５．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大６．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大７ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大７．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大８．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大９ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大９．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１０．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１１ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１１．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１２ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１２．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１３ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１３．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１４ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのレベルで長期間保持されるように選択される。
【0038】
当該有効量は、血液中のデングウイルス負荷が、最大０コピー／ｍＬ、最大０．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大２ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大２．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大３ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大３．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大４ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大４．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大５．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大６．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大７ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大７．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大８．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大９ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大９．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１０．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１１ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１１．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１２ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１２．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１３ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１３．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１４ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大１５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのレベルで保持されるように選択される。
【0039】
好ましくは、式Ｉ又は式ＩＩの化合物の有効量は、血液中のデングウイルス負荷が、最大２ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大２．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大３ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大３．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大４ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大４．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大５．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大６．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大７ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大７．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大８．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大９ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのレベルで長期間保持されるように選択される。
【0040】
好ましくは、式Ｉ又は式ＩＩの化合物の有効量は、血液中のデングウイルス負荷が、最大２ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大２．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大３ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大３．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大４ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大４．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大５．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大６．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大７ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大７．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大８．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ、最大９ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのレベルで保持されるように選択される。
【0041】
長期間は、少なくとも６時間、少なくとも１２時間、少なくとも２４時間、少なくとも３６時間、少なくとも４８時間、少なくとも７２時間、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、又は少なくとも４週間の期間を指す。当該長期間は、最大１年、最大６ヶ月、最大５ヶ月、最大４ヶ月、最大３ヶ月、又は最大２ヶ月の期間を指す。
【0042】
好ましくは、薬剤は、経口、皮下、筋肉内、又は静脈内投与される。
【0043】
薬剤は、異なる投与目的で、様々な薬学的形態に製剤化され得る。薬剤は、有効量の上記の任意の化合物又はその混合物を、有効成分として、任意選択で付加塩形態で含む。当該活性成分は、薬学的に許容される担体と密接に混合して組み合わされ得、この担体は、投与に望ましい調製物の形態に応じて多種多様な形態をとり得る。薬剤は、例えば、経口、局所、直腸、又は当業者に既知の任意の他の投与経路に好適な単一剤形であり得る。例えば、経口剤形として薬剤を調製する際に、例えば、懸濁液、シロップ、エリキシル剤、エマルジョン、及び溶液などの経口液体調製物の場合、水、グリコール、油、アルコール；又は粉末、ピル、カプセル、及び錠剤の場合、デンプン、糖、カオリン、希釈剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などの固形担体など、通常の薬学的媒体のいずれかが用いられ得る。薬剤はまた、使用直前に液体形態に変換され得る固体形態の調製物であり得る。
【0044】
投与を容易にし、投与量を均一にするために、上記の薬剤を単位剤形として製剤化することが特に有利である。本明細書で使用される場合、単位剤形は、単一の投与量として好適な物理的に分離した単位を指し、各単位は、必要な薬理学的担体と併せて、所望の治療効果をもたらすように計算された所定量の活性成分を含有する。そのような単位剤形の例は、錠剤（割線入り錠剤又はコーティング錠剤を含む）、カプセル、ピル、粉末パケット、ウエハー、坐剤、注射用溶液又は懸濁液など、及びそれらの複数分割量である。
【0045】
薬剤（例えば、単一錠剤又は剤形）に含まれる式Ｉ又は式ＩＩの化合物の有効量は、０．０５ｍｇ／ｋｇ～５００ｍｇ／ｋｇ体重、０．１ｍｇ／ｋｇ～４００ｍｇ／ｋｇ体重、０．５ｍｇ／ｋｇ～３００ｍｇ／ｋｇ体重、１ｍｇ／ｋｇ～２００ｍｇ／ｋｇ体重、１．５～１８０ｍｇ／ｋｇ体重、３ｍｇ／ｋｇ～１５０ｍｇ／ｋｇ体重、５ｍｇ／ｋｇ～１２０ｍｇ／ｋｇ体重、６ｍｇ／ｋｇ～１１０ｍｇ／ｋｇ体重、１０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ体重、１５ｍｇ／ｋｇ～９０ｍｇ／ｋｇ体重、２０ｍｇ／ｋｇ～８０ｍｇ／ｋｇ体重、２５ｍｇ／ｋｇ～７０ｍｇ／ｋｇ体重、３０ｍｇ／ｋｇ～６０ｍｇ／ｋｇ体重、３５ｍｇ／ｋｇ～５５ｍｇ／ｋｇ体重、４０ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ体重、４２～４５ｍｇ／ｋｇ体重、又は約４３ｍｇ／ｋｇ体重である。
【0046】
式Ｉ又は式ＩＩの化合物の有効１日量は、０．１～２４００ｍｇ、０．２～２０００ｍｇ、０．３ｍｇ～１６００ｍｇ、０．５ｍｇ～１５００ｍｇ、１ｍｇ～１４００ｍｇ、２ｍｇ～１３００ｍｇ、３ｍｇ～１２００ｍｇ、４ｍｇ～１１００ｍｇ、５ｍｇ～１０００ｍｇ、６ｍｇ～９５０ｍｇ、７ｍｇ～９００ｍｇ、８ｍｇ～８５０ｍｇ、９ｍｇ～８００ｍｇ、１０ｍｇ～７５０ｍｇ、１１ｍｇ～７００ｍｇ、１２ｍｇ～６５０ｍｇ、１３ｍｇ～６００ｍｇ、１４ｍｇ～５５０ｍｇ、１５ｍｇ～５００ｍｇ、１６ｍｇ～４５０ｍｇ、１７ｍｇ～４００ｍｇ、１８ｍｇ～３５０ｍｇ、１９ｍｇ～３００ｍｇ、２０ｍｇ～２５０ｍｇ、２１ｍｇ～２００ｍｇ、２２ｍｇ～１５０ｍｇ、２３ｍｇ～１００ｍｇ、２４ｍｇ～９５ｍｇ、２５ｍｇ～９０ｍｇ、２６ｍｇ～８５ｍｇ、２７ｍｇ～８０ｍｇ、２８ｍｇ～７５ｍｇ、２９ｍｇ～７０ｍｇ、３０ｍｇ～６５ｍｇ、３１ｍｇ～６０ｍｇ、３２ｍｇ～５５ｍｇ、３３ｍｇ～５０ｍｇ、３４ｍｇ～４５ｍｇ、３５ｍｇ～４０ｍｇ、３６ｍｇ～３８ｍｇである。有効１日量は、本明細書において、１日当たり又は２４時間当たり投与される式Ｉ又は式ＩＩの化合物の量を指す。
【0047】
化合物の有効１日量は、予防処置期間中に変化しないままであり得る。当該有効１日用量又は量はまた、指示された予防処置期間中に減少及び／又は増加し得るように可変であり得る。当該有効１日量は、変化しない又は異なる濃度（又は有効量）の本発明の化合物を含む薬剤の投与によって達成され得る。
【0048】
本明細書に記載される式Ｉ又はＩＩの化合物はまた、デング病の治療のための薬剤の製造で使用され得る。薬剤は、好ましくは１日当たり１、２、３、又は４回投与される。
【0049】
上記のすべての先の実施形態は、式Ｉ又はＩＩの化合物を含む薬剤にも適用可能であり、デング感染の治療に使用される。当該実施形態は、以下を含む。
－薬剤に含まれる式Ｉ又は式ＩＩの化合物の有効量は、血液中のデングウイルス負荷が上記のように保持されるように選択される、
－薬剤投与及び製剤、
－薬剤（例えば、単一錠剤又は剤形）に含まれる式Ｉ又は式ＩＩの化合物の有効量、並びに
－式Ｉ又は式ＩＩの化合物の有効１日量。
－薬剤に含まれる式Ｉ又は式ＩＩの化合物の有効量は、血液中のデングウイルス負荷が上記のように保持されるように選択される、
－薬剤投与及び製剤、
－薬剤（例えば、単一錠剤又は剤形）に含まれる式Ｉ又は式ＩＩの化合物の有効量、並びに
－式Ｉ又は式ＩＩの化合物の有効１日量。
【0050】
化合物の有効１日量は、処置期間中に変化しないままであり得る。当該有効１日用量又は量はまた、指示された処置期間中に減少及び／又は増加し得るように可変であり得る。当該有効１日量は、変化しない又は異なる濃度の本発明の化合物を含む薬剤の投与によって達成され得る。
【0051】
第２の態様では、本発明は、デングウイルスに感染した個体におけるデング病の治療、又はデングウイルスに感染するリスクがある個体におけるデング病の予防のための方法を提供し、当該方法は、当該個体に、式Ｉ又は式ＩＩの化合物を含む薬剤を投与する工程を含み、薬剤は、少なくとも６時間、好ましくは少なくとも１２時間、好ましくは少なくとも２０時間、より好ましくは少なくとも２４時間、より好ましくは少なくとも３６時間、より好ましくは少なくとも４８時間、より好ましくは７２時間の時間間隔で断続的に投与され、式Ｉ又は式ＩＩの化合物は、本発明の第１の態様で上述されたとおりである。
【0052】
本方法の好ましい実施形態では、薬剤は、薬剤の投与タイミングを含む本発明の第１の態様において上記で指定されたように投与される。本方法の好ましい実施形態では、薬剤は、有効量の式Ｉ又は式ＩＩの化合物を含み、当該有効量は、本発明の第１の態様において上記で指定されたように選択され、指定されたような値を有する。
【実施例】
【0053】
１．曝露前予防として１日２回の化合物（ａ）を使用した、高ウイルス投入量１０６ＰＦＵ）のＤＥＮＶ－２に対する、ＡＧ１２９マウスのウイルス血症モデルにおけるインビボ有効性研究。
ＡＧ１２９マウスモデルは、インビボでＤＥＮＶに対する化合物の抗ウイルス効果を研究するための十分に確立されたモデルである（Ｚｏｍｐｉ ａｎｄ Ｈａｒｒｉｓ，２０１２）。これらの１２９／Ｓｖマウスは、ＩＦＮ－α／β及びＩＦＮ－γ受容体の両方を欠損しており、ＤＥＮＶによる静脈内（intravenous、ｉ．ｖ．）又は皮下（subcutaneous、ｓ．ｃ．）感染時に末梢ウイルス複製を可能にする（Ｊｏｈｎｓｏｎ ａｎｄ Ｒｏｅｈｒｉｇ，１９９９）。セルゴシビル（α－グルコシダーゼ阻害剤）Ｗａｔｈａｎｅｂｅ ｅｔ ａｌ，２０１２及びＲａｔｈｏｒｅ ｅｔ ａｌ．，２０１１）、並びにＮＩＴＤ－００８（アデノシンヌクレオシド阻害剤、Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００９）を含むいくつかの前臨床候補が、このモデルで評価されている。
ＡＧ１２９マウスモデルは、インビボでＤＥＮＶに対する化合物の抗ウイルス効果を研究するための十分に確立されたモデルである（Ｚｏｍｐｉ ａｎｄ Ｈａｒｒｉｓ，２０１２）。これらの１２９／Ｓｖマウスは、ＩＦＮ－α／β及びＩＦＮ－γ受容体の両方を欠損しており、ＤＥＮＶによる静脈内（intravenous、ｉ．ｖ．）又は皮下（subcutaneous、ｓ．ｃ．）感染時に末梢ウイルス複製を可能にする（Ｊｏｈｎｓｏｎ ａｎｄ Ｒｏｅｈｒｉｇ，１９９９）。セルゴシビル（α－グルコシダーゼ阻害剤）Ｗａｔｈａｎｅｂｅ ｅｔ ａｌ，２０１２及びＲａｔｈｏｒｅ ｅｔ ａｌ．，２０１１）、並びにＮＩＴＤ－００８（アデノシンヌクレオシド阻害剤、Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００９）を含むいくつかの前臨床候補が、このモデルで評価されている。
【0054】
本発明の化合物（ａ）を、ＡＧ１２９マウスのウイルス血症モデルで試験した。化合物（ａ）の合成は、国際公開第２０１６／１８０６９６号の実施例９に記載されている。
【0055】
【化7】
【0056】
年齢及び性別が適合した（６～１０週齢）ＡＧ１２９マウスを使用して、血清中のウイルスＲＮＡレベルに対する化合物（ａ）の抗ウイルス効果を評価した。動物を、１０６プラーク形成単位（ＰＦＵ）のＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株の高ウイルス投入量で腹腔内（ｉ．ｐ．）感染させた。動物を、感染の１時間前の初回投与を用いた強制経口投与によって化合物（ａ）を投与することによって処置した。１２時間毎に１回（１日２回又はｂ．ｉ．ｄ．）の化合物（ａ）の投与で、３日間連続して処置を継続した。感染後（ｐ．ｉ．）３日目に、マウスを屠殺し、血液を採取し、ウイルス負荷決定のために－８０℃で保存した（図１）。
【0057】
マウスを、以下の処置レジメンを表すいくつかの群（ｎ＝８／群）に分けた。
（ｉ）ビヒクル８０％／２０％ ＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ、
（ｉｉ）皮下（ｓ．ｃ．）投与される１日２回の参照化合物（２’ＣＭＣ）：５０ｍｇ／ｋｇ／用量、
（ｉｉｉ）化合物（ａ）：３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｉｖ）化合物（ａ）：１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｖ）化合物（ａ）：３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｖｉ）化合物（ａ）：１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｖｉｉ）化合物（ａ）：０．３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回、及び
（ｖｉｉｉ）化合物（ａ）：０．１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｉ）ビヒクル８０％／２０％ ＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ、
（ｉｉ）皮下（ｓ．ｃ．）投与される１日２回の参照化合物（２’ＣＭＣ）：５０ｍｇ／ｋｇ／用量、
（ｉｉｉ）化合物（ａ）：３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｉｖ）化合物（ａ）：１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｖ）化合物（ａ）：３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｖｉ）化合物（ａ）：１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｖｉｉ）化合物（ａ）：０．３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回、及び
（ｖｉｉｉ）化合物（ａ）：０．１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
【0058】
血清からの全ＲＮＡを、ＮｕｃｌｅｏＳｐｉｎ ＲＮＡウイルスキットを製造元のプロトコル（Ｍａｃｈｅｒｅｙ－Ｎａｇｅｌ、Ｄｕｒｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）に従って使用して抽出した。ウイルスＲＮＡ負荷を、一段階ＴａｑＭａｎ ＲＴ－ｑＰＣＲ（Ｅｕｒｏｇｅｎｔｅｃ、Ｓｅｒａｉｎｇ，Ｂｅｌｇｉｕｍからのマスターミックス）によって決定した。
【0059】
化合物（ａ）による処置後の３つの実験にわたる平均ウイルスＲＮＡレベルを推定するために、統計分析を実施している。３つの実験からの結果を一緒にプールした。二元配置ＡＮＯＶＡモデルを使用して、平均ウイルスＲＮＡレベルを推定した。
【0060】
平均ウイルス負荷の用量依存的な低減を、血清中の０．１、０．３、１、３、１０、及び３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回の化合物（ａ）の用量範囲について推定した（図２）。０．１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回を除くすべての用量は、ビヒクル処置群と比較して、血清中の有意なウイルス負荷低減をもたらした（ｐ＜０．００１）。３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回における血清中、４．４ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのウイルス負荷低減が観察され、最低用量の化合物（ａ）（０．１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回）において、０．４７ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのウイルス負荷低減が依然として達成された。
【0061】
２．曝露前予防として１日１回の化合物（ａ）を使用した、高ウイルス投入量１０６ＰＦＵ）のＤＥＮＶ－２に対する、ＡＧ１２９マウスのウイルス血症モデルにおけるインビボ有効性研究。
１日２回の投与量研究と同様の設定で、インビボ有効性を、高ウイルス接種量及び化合物（ａ）の１日１回の投与を用いたＤＥＮＶ－２に対して、ＡＧ１２９標準ウイルス血症モデルにおいて研究した。動物を、２００μＬの体積の１０６ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株で腹腔内感染させた。動物を、感染の１時間前の初回投与を用いた強制経口投与によって化合物（ａ）を投与することによって処置した。２４時間毎に１回（１日１回又はｑ．ｄ．）の化合物（ａ）の投与で、３日間連続して処置を継続した。感染後（ｐ．ｉ．）３日目に、マウスを安楽死させ、血液を採取した（図３）。ウイルスＲＮＡ負荷を、実施例１に概説されるように決定した。
１日２回の投与量研究と同様の設定で、インビボ有効性を、高ウイルス接種量及び化合物（ａ）の１日１回の投与を用いたＤＥＮＶ－２に対して、ＡＧ１２９標準ウイルス血症モデルにおいて研究した。動物を、２００μＬの体積の１０６ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株で腹腔内感染させた。動物を、感染の１時間前の初回投与を用いた強制経口投与によって化合物（ａ）を投与することによって処置した。２４時間毎に１回（１日１回又はｑ．ｄ．）の化合物（ａ）の投与で、３日間連続して処置を継続した。感染後（ｐ．ｉ．）３日目に、マウスを安楽死させ、血液を採取した（図３）。ウイルスＲＮＡ負荷を、実施例１に概説されるように決定した。
【0062】
マウスを、以下の処置レジメンを表す５つの群（ｎ＝８／群）に分けた。
（ｉ）ビヒクル８０％／２０％ ＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ、
（ｉｉ）参照化合物（２’ＣＭＣ、５０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回、皮下）、
（ｉｉｉ）化合物（ａ）：０．３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回
（ｉｖ）化合物（ａ）：３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回
（ｖ）化合物（ａ）：３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回
（ｉ）ビヒクル８０％／２０％ ＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ、
（ｉｉ）参照化合物（２’ＣＭＣ、５０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回、皮下）、
（ｉｉｉ）化合物（ａ）：０．３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回
（ｉｖ）化合物（ａ）：３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回
（ｖ）化合物（ａ）：３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回
【0063】
血清中、感染後３日目に、ウイルス負荷中央値の用量依存的な低減が観察された。０．３、３、及び３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ａ）の用量範囲に関して、それぞれ、０．７、３．１、及び４．５ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのウイルス負荷中央値の低減が、ビヒクル処置されたマウスと対比して（versus、ｖｓ．）観察された（図４）。
【0064】
３．曝露前予防として１日２回の化合物（ａ）を使用した、低ウイルス投入量１０２ＰＦＵ）のＤＥＮＶ－２に対する、ＡＧ１２９マウスのウイルス血症モデルにおけるインビボ有効性研究。
この実験では、高ウイルス投入量を用いた標準的なウイルス血症実験（１０６ＰＦＵ）と比較して、より低いウイルス投入量を使用した（１０２ＰＦＵ）。１０２ＰＦＵは、マウスモデルにおけるデング感染につながる最低ウイルス負荷であるため選択された。より低いウイルス投入量を使用してもなお、マウスの１００％の感染をもたらすが、ピークウイルス負荷は、１～２日延期され、これは、自然なヒト感染をより密接に模倣する（Ｃｌａｐｈａｍ ｅｔ ａｌ．，２０１４及びＳｉｍ ｅｔ ａｌ．，２０１５）。マウスを６日連続して処置した。
この実験では、高ウイルス投入量を用いた標準的なウイルス血症実験（１０６ＰＦＵ）と比較して、より低いウイルス投入量を使用した（１０２ＰＦＵ）。１０２ＰＦＵは、マウスモデルにおけるデング感染につながる最低ウイルス負荷であるため選択された。より低いウイルス投入量を使用してもなお、マウスの１００％の感染をもたらすが、ピークウイルス負荷は、１～２日延期され、これは、自然なヒト感染をより密接に模倣する（Ｃｌａｐｈａｍ ｅｔ ａｌ．，２０１４及びＳｉｍ ｅｔ ａｌ．，２０１５）。マウスを６日連続して処置した。
【0065】
動物を１０２ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株で腹腔内感染させ、強制経口投与による化合物（ａ）で１日２回、６日間連続して処置した（図５）。
【0066】
マウスを、以下の処置レジメンを表す４つの処置群（ｎ＝１６／群）に分けた。
（ｉ）ビヒクル８０％／２０％ ＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ、
（ｉｉ）化合物（ａ）：１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回、経口
（ｉｉｉ）化合物（ａ）：１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回、経口
（ｉｖ）化合物（ａ）：０．１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回、経口
（ｉ）ビヒクル８０％／２０％ ＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ、
（ｉｉ）化合物（ａ）：１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回、経口
（ｉｉｉ）化合物（ａ）：１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回、経口
（ｉｖ）化合物（ａ）：０．１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回、経口
【0067】
毎日、血液試料を採取して、経時的なウイルス負荷を追跡した。ウイルスＲＮＡ負荷検出のための採血を、マウスの２つの交互のサブグループで実施した。各サブグループは、処置群（ｉ）～（ｉｖ）の各々からのマウスの半分（ｎ／２＝８）を含んでいた。感染後１、３、５、及び８日目に第１のサブグループから、並びに感染後２、４、６、及び１１日目に第２のサブグループから、血液を採取した。感染後８日目に、第１のサブグループのマウスを屠殺した一方で、第２のサブグループのマウスを感染後１１日目に屠殺した。常に、化合物の次の投与直前に採血を実施した。
【0068】
ビヒクル処置されたマウスが、感染後４日目～５日目にピークウイルス負荷に達した一方で、０．１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回の化合物（ａ）で処置されたマウスについては、ピークは、約１日遅延した。５日目に、０．１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回の化合物（ａ）の用量は、ビヒクルと比較して、ウイルス負荷を０．５０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ低減した。２つのより高い用量（１０及び１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回の化合物（ａ））は、すべての日数にわたって、マウスにおけるウイルス負荷を検出不可能なレベルまで低減した（図６）。
【0069】
４．曝露前予防として１日１回の化合物（ａ）を使用した、低ウイルス投入量１０２ＰＦＵ）のＤＥＮＶ－２に対する、ＡＧ１２９マウスのウイルス血症モデルにおけるインビボ有効性研究。
年齢及び性別が適合した（６～１０週齢）ＡＧ１２９マウスを使用して、血清中のウイルスＲＮＡレベルに対する化合物（ａ）の活性を評価した。動物を、２００μＬの体積の１０２ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株で腹腔内感染させた。動物を、感染の１時間前の初回投与を用いた強制経口投与によって化合物（ａ）を投与することによって処置した。２４時間毎に１回（１日１回又はｑ．ｄ．）の化合物（ａ）の投与で、６日間連続して処置を継続した（図７）。
年齢及び性別が適合した（６～１０週齢）ＡＧ１２９マウスを使用して、血清中のウイルスＲＮＡレベルに対する化合物（ａ）の活性を評価した。動物を、２００μＬの体積の１０２ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株で腹腔内感染させた。動物を、感染の１時間前の初回投与を用いた強制経口投与によって化合物（ａ）を投与することによって処置した。２４時間毎に１回（１日１回又はｑ．ｄ．）の化合物（ａ）の投与で、６日間連続して処置を継続した（図７）。
【0070】
３つの独立した実験を実施した。３つの実験の各々において、ビヒクルに加えて３つの異なる用量の化合物（ａ）を試験した。マウスを、以下の処置レジメンを表す４つの処置群（ｎ＝１６／群）に分けた。
（ｉ）ビヒクル、
（ｉｉ）実験１：０．１、０．６、及び３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回において１日１回経口投与される化合物（ａ）（図８の結果）
（ｉｉｉ）実験２：０．１、０．３、及び１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回において１日１回経口投与される化合物（ａ）（図９の結果）
（ｉｖ）実験３：１、３、及び１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回において１日１回経口投与される化合物（ａ）（図１０の結果）
（ｉ）ビヒクル、
（ｉｉ）実験１：０．１、０．６、及び３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回において１日１回経口投与される化合物（ａ）（図８の結果）
（ｉｉｉ）実験２：０．１、０．３、及び１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回において１日１回経口投与される化合物（ａ）（図９の結果）
（ｉｖ）実験３：１、３、及び１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回において１日１回経口投与される化合物（ａ）（図１０の結果）
【0071】
交互のサブグループを使用して、毎日の採血を可能にした。ウイルスＲＮＡ負荷検出のための血液を、２つの交互のサブグループのマウスから採取した。各サブグループは、処置群（ｉ）～（ｉｖ）の各々からのマウスの半分（ｎ／２＝８）を含んでいた。感染後１、３、５、及び８日目に第１のサブグループから、並びに感染後２、４、６、及び１１日目に第２のサブグループから、血液を採取した。常に、化合物の次の投与直前に採血を実施した。感染後８日目に、各処置群のマウスの半分（ｎ＝８／群）を屠殺した。各処置群の残りのマウス（ｎ＝８／群）を感染後１１日目に屠殺した（図７）。
【0072】
３つの実験にわたって、ビヒクル処置されたマウスは、一般に感染後５日目～６日目にピークウイルス負荷に達し、ウイルス負荷中央値は、実験１、２、及び３において、それぞれ、４．３、７．１、及び６．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬであった（それぞれ図８、図９、及び図１０）。７つの用量のうち５つ、すなわち０．６、１、３、１０、及び３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回の化合物（ａ）は、１１日すべてにわたるマウスにおける血清ウイルス負荷中央値を検出不可能なレベルまで低減し（ＬＯＤ＝２．５９ｌｏｇ１０コピーｍＬ）、１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回において、１つのウイルスのリバウンドが８日目にあった（３．７８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのウイルス負荷中央値）。０．３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回において、ビヒクル処置されたマウスと比較して、５日目に１．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのウイルス負荷低減が達成されたが、１１日目までのウイルス負荷の更なる低下を観察することはできなかった。最低用量の０．１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回において、経時的なウイルス負荷は、ビヒクル処置されたウイルス負荷曲線と同等であった。
【0073】
５．ＤＥＮＶ－２／１６６８１に対する、非ヒト霊長類モデル（ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）における化合物（ａ）、１日１回による曝露前予防。
化合物（ａ）を、ＤＥＮＶ－２／１６６８１に対して非ヒト霊長類（ＮＨＰ）モデルで試験した。実験の設定を、曝露前予防（ＰｒｅＰ）研究として設計した。化合物（ａ）の経口投与は、実験感染の１日前（－１日目）に開始し、感染後１０日まで毎日の投与を継続した。０日目に、動物を、０．１ｍＬの総体積の１００ＴＣＩＤ５０のＤＥＮＶ－２／１６６８１ウイルスを用いた皮内接種によって感染させた（図１１）。
化合物（ａ）を、ＤＥＮＶ－２／１６６８１に対して非ヒト霊長類（ＮＨＰ）モデルで試験した。実験の設定を、曝露前予防（ＰｒｅＰ）研究として設計した。化合物（ａ）の経口投与は、実験感染の１日前（－１日目）に開始し、感染後１０日まで毎日の投与を継続した。０日目に、動物を、０．１ｍＬの総体積の１００ＴＣＩＤ５０のＤＥＮＶ－２／１６６８１ウイルスを用いた皮内接種によって感染させた（図１１）。
【0074】
アカゲザルを、以下の処置レジメンを表す７つの群に分けた。
（ｉ）ビヒクル１００％ ＰＥＧ４００（ｎ＝５）
（ｉｉ）群１：０．０１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝３）、
（ｉｉｉ）群２：０．１８ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝３）、
（ｉｖ）群３：３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝３）、
（ｖ）群４：０．０２４ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝４）、
（ｖｉ）群５：０．０９ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝４）、
（ｖｉｉ）群６：０．９３ｍｇ ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝４）。
（ｉ）ビヒクル１００％ ＰＥＧ４００（ｎ＝５）
（ｉｉ）群１：０．０１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝３）、
（ｉｉｉ）群２：０．１８ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝３）、
（ｉｖ）群３：３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝３）、
（ｖ）群４：０．０２４ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝４）、
（ｖｉ）群５：０．０９ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝４）、
（ｖｉｉ）群６：０．９３ｍｇ ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝４）。
【0075】
予防的設定における化合物（ａ）の抗ウイルス活性が、ＤＥＮＶ－２／１６６８１感染アカゲザル（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）において評価されている。血液試料を、０日目から１１日目まで、並びに１４日目及び２８日目に毎日採取した。ＤＥＮＶ ＲＮＡを、Ｓａｎｔｉａｇｏ ｅｔ ａｌ．（２０１３）によって記載されるように、リアルタイムｑＰＣＲを使用して測定した。感染前１日目から感染後１０日目まで、１日１回投与された０．０１、０．０２４、０．０９、０．１８、０．９３、及び３ｍｇ／ｋｇの化合物（ａ）用量からの結果を、図１２Ａ及び図１２Ｂに示す。
【0076】
２つの最高用量（０．９３及び３ｍｇ／ｋｇ用量）について、研究期間全体を通して、すなわち投与後２８日目まで、ＤＥＮＶ ＲＮＡは、検出可能ではなかった。ＤＥＮＶ ＲＮＡ及びピークＲＮＡの開始遅延が、０．０９及び０．１８ｍｇ／ｋｇ投与群の一部の動物で観察された（図１２Ｂ）。各個々の動物についてのデータを示す（各線は、１つの動物からのデータを表す）。１２８６ＧＣＥ／ｍＬにおける水平の破線は、アッセイの定量下限（ＬＬＯＱ）を表す（図１２Ａ及び図１２Ｂ）。
【0077】
ベイズ的非線形用量応答統計モデルに基づいて、ビヒクルと比較したピークウイルス負荷低減を各投与群について推定した。ビヒクルと比較したピークＤＥＮＶ ＲＮＡ中央値の統計的に有意な低減は、０．０１及び０．０２４ｍｇ／ｋｇの２つの最低用量について観察されなかった。ビヒクル対照と比較した、０．７８、１．９１、４．７３、及び６．７６ｌｏｇ１０ゲノムコピー当量（ＧＣＥ）／ミリリットル（ＧＣＥ／ｍＬ）の血漿のＤＥＮＶピークＲＮＡレベルの用量依存的な中央値の低減を、それぞれ、０．０９、０．１８、０．９３、及び３ｍｇ／ｋｇの用量で推定した（表１）。
【0078】
【表1】
【0079】
６．非ヒト霊長類（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）におけるＤＥＮＶ １／４５ＡＺ５に対する化合物（ａ）の抗ウイルス活性。
予防的設定における化合物（ａ）ＤＥＮＶの抗ウイルス活性を、株ＤＥＮＶ １／４５ＡＺ５に感染したアカゲザル（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）において評価した。化合物（ａ）（６ｍｇ／ｋｇ）の経口投与を、ＤＥＮＶでの感染の３日前（－３日目）に開始し、感染の１０日後まで毎日投与し続けた。０日目に、動物に、０．５ｍＬのＤＥＮＶ １／４５ＡＺ５（１．２×１０５プラーク形成単位［ＰＦＵ／ｍＬ］）を皮内接種した。動物を感染後２８日まで追跡した（図１３Ｘ）。
予防的設定における化合物（ａ）ＤＥＮＶの抗ウイルス活性を、株ＤＥＮＶ １／４５ＡＺ５に感染したアカゲザル（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）において評価した。化合物（ａ）（６ｍｇ／ｋｇ）の経口投与を、ＤＥＮＶでの感染の３日前（－３日目）に開始し、感染の１０日後まで毎日投与し続けた。０日目に、動物に、０．５ｍＬのＤＥＮＶ １／４５ＡＺ５（１．２×１０５プラーク形成単位［ＰＦＵ／ｍＬ］）を皮内接種した。動物を感染後２８日まで追跡した（図１３Ｘ）。
【0080】
アカゲザルを、以下の処置レジメンを表す２つの群に分けた。
（ｉ）ビヒクル１００％ ＰＥＧ４００（ｎ＝６）
（ｉｉ）群１：６ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝６）
（ｉ）ビヒクル１００％ ＰＥＧ４００（ｎ＝６）
（ｉｉ）群１：６ｍｇ／ｋｇ／用量、１日１回（ｎ＝６）
【0081】
ビヒクル対照群のすべての動物は、ウイルス攻撃の４日後に開始して１４日目まで検出可能なＤＥＮＶ ＲＮＡを有し、ピークＲＮＡは、８．１５×１０３～５．８８×１０５ゲノム当量／ｍＬの範囲である（図１４Ｘを参照されたい）。個々の動物のウイルスＲＮＡは、一般に、攻撃後９～１０日目にピークに達し、１４日目に依然としてＤＥＮＶ－ＲＮＡ陽性であったプラセボ群の１匹の動物（ＡＩＤ１４Ｕ０１８）を除いて、ウイルスＲＮＡは、１１日目に最後に検出された。化合物（ａ）で処置された動物において、ＤＥＮＶ ＲＮＡは、全研究期間中に検出不可能なままであった（図１４Ｙを参照されたい）。
【0082】
７．曝露前予防として１日２回の化合物（ｂ）を使用した、高ウイルス投入量１０６ＰＦＵ）のＤＥＮＶ－２に対する、ＡＧ１２９マウスのウイルス血症モデルにおけるインビボ有効性研究。
本発明の化合物（ｂ）を、ＡＧ１２９マウスのウイルス血症モデルで試験した。化合物（ｂ）の合成は、国際公開第２０１７／１６７９５１号の実施例４に記載されている。
本発明の化合物（ｂ）を、ＡＧ１２９マウスのウイルス血症モデルで試験した。化合物（ｂ）の合成は、国際公開第２０１７／１６７９５１号の実施例４に記載されている。
【0083】
【化8】
【0084】
年齢及び性別が適合した（６～９週齢）ＡＧ１２９マウスを使用して、マウスの血清中のウイルスＲＮＡレベルに対する化合物（ｂ）の活性、及びマウスのウイルス誘発性疾患又は死亡率を評価した。
【0085】
ウイルス血症研究のために、動物を１×１０６プラーク形成単位（ＰＦＵ）のＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株で腹腔内（ｉ．ｐ．）感染させた。動物（ｎ＝８／群）を、感染の１時間前の初回投与を用いた強制経口投与によって化合物（ｂ）を投与することによって処置した。１２時間毎に１回（１日２回又はｂ．ｉ．ｄ．）の化合物（ｂ）の投与で、３日間連続して処置を継続した。感染後３日目に、マウスを屠殺し、血液を採取し、ウイルス負荷決定のために－８０℃で保存した（図１５Ｘ）。血清からの全ＲＮＡを、ＮｕｃｌｅｏＳｐｉｎ ＲＮＡウイルスキットを製造元のプロトコル（Ｍａｃｈｅｒｅｙ－Ｎａｇｅｌ、Ｄｕｒｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）に従って使用して抽出した。ウイルスＲＮＡ負荷を、上記のようにＲＴ－ｑＰＣＲによって決定した。
【0086】
致死的なＤＥＮＶ攻撃研究（又は生存研究）において、抗体依存性増強（antibody-dependent-enhancement、ＡＤＥ）誘発性デング病を、ＤＥＮＶ－２ Ｒｅｇａ実験室株での攻撃（１×１０６ＰＦＵ、腹腔内）の１日前に、抗フラビウイルス群抗原抗体、クローンＤ１－４Ｇ２－４－１５（「４Ｇ２」；Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）をＡＧ１２９マウス（ｎ＝１０／群）に腹腔内注射することによって模倣する。動物を、感染の１時間前の初回投与を用いた強制経口投与によって化合物（ｂ）を投与することによって処置した。１２時間毎に１回（１日２回又はｂ．ｉ．ｄ．）の化合物（ｂ）の投与で、５日間連続して処置を継続した。（図１５Ｘ）。
【0087】
マウスを、以下の処置レジメンを表すいくつかの群（ウイルス血症研究のためにｎ＝８／群、及び生存研究のためにｎ＝１０／群）に分けた。
（ｉ）ビヒクル、８０％／２０％ ＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ
（ｉｉ）化合物（ｂ）：３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｉｉｉ）化合物（ｂ）：１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｉｖ）化合物（ｂ）：３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｖ）化合物（ｂ）：１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｉ）ビヒクル、８０％／２０％ ＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ
（ｉｉ）化合物（ｂ）：３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｉｉｉ）化合物（ｂ）：１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｉｖ）化合物（ｂ）：３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
（ｖ）化合物（ｂ）：１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回
【0088】
ウイルス血症研究において、１、３、１０、及び３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回の化合物（ｂ）の試験された用量レジメンについて、血清中の平均ウイルス負荷の用量依存的な低減が観察された。４つすべての用量は、ビヒクル処置群と比較して、有意なウイルス負荷低減をもたらした（ｐ＜０．０５）。３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回で処置された動物の血清中、３．８ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのウイルス負荷低減が観察された。最低用量（１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回）において、０．７０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのウイルス負荷低減が依然として達成された（図１５Ｙ）。
【0089】
次に、化合物（ｂ）の影響を、感染日に開始してちょうど５日間連続して投与した場合（経口、１日２回）のウイルス誘発性疾患及び死亡率に対して評価した（生存研究）。動物を２５日の最大期間監視した。１匹を除くすべて（２０匹のうち１９匹）のビヒクル処置されたマウスを安楽死させる必要があった。３０ｍｇ／ｋｇの用量において、マウスの９０％がウイルス攻撃を生き延び、１０、３、及び１ｍｇ／ｋｇの用量において、生存率は、それぞれ８０％、８５％、及び７５％であった（図１５Ｚ）。
【0090】
８．曝露前予防として１日２回の化合物（ｂ）を使用した、低ウイルス投入量１０２ＰＦＵ）のＤＥＮＶ－２に対する、ＡＧ１２９マウスのウイルス血症モデルにおけるインビボ有効性研究。
年齢及び性別が適合した（６～１０週齢）ＡＧ１２９マウスを使用して、血清中のウイルスＲＮＡレベルに対する化合物（ｂ）の活性を評価した。動物を、２００μＬの体積の１０２ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株で腹腔内感染させた。動物を、感染の１時間前の初回投与を用いた強制経口投与によって化合物（ｂ）を投与することによって処置した。１２時間毎に１回（１日２回又はｂ．ｉ．ｄ．）の化合物（ｂ）の投与で、６日間連続して処置を継続した（図１６Ｙ）。
年齢及び性別が適合した（６～１０週齢）ＡＧ１２９マウスを使用して、血清中のウイルスＲＮＡレベルに対する化合物（ｂ）の活性を評価した。動物を、２００μＬの体積の１０２ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株で腹腔内感染させた。動物を、感染の１時間前の初回投与を用いた強制経口投与によって化合物（ｂ）を投与することによって処置した。１２時間毎に１回（１日２回又はｂ．ｉ．ｄ．）の化合物（ｂ）の投与で、６日間連続して処置を継続した（図１６Ｙ）。
【0091】
ビヒクルに加えて、５つの異なる用量の化合物（ｂ）を試験した。マウスを、以下の処置レジメンを表す６つの処置群（ｎ＝１６／群）に分けた。
（ｉ）ビヒクル、
（ｉｉ）０．３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回において１日２回経口投与される化合物（ｂ）、
（ｉｉｉ）１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回において１日２回経口投与される化合物（ｂ）、
（ｉｖ）３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回において１日２回経口投与される化合物（ｂ）、
（ｖ）１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回において１日２回経口投与される化合物（ｂ）、
（ｖｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回において１日２回経口投与される化合物（ｂ）
（ｉ）ビヒクル、
（ｉｉ）０．３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回において１日２回経口投与される化合物（ｂ）、
（ｉｉｉ）１ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回において１日２回経口投与される化合物（ｂ）、
（ｉｖ）３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回において１日２回経口投与される化合物（ｂ）、
（ｖ）１０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回において１日２回経口投与される化合物（ｂ）、
（ｖｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回において１日２回経口投与される化合物（ｂ）
【0092】
交互のサブグループを使用して、毎日の採血を可能にした。ウイルスＲＮＡ負荷検出のための血液を、２つの交互のサブグループのマウスから採取した。各サブグループは、処置群（ｉ）～（ｖｉ）の各々からのマウスの半分（ｎ／２＝８）を含んでいた。感染後１、３、５、及び８日目に第１のサブグループから、並びに感染後２、４、６、及び１１日目に第２のサブグループから、血液を採取した。常に、化合物の次の投与直前に採血を実施した。感染後８日目に、各処置群のマウスの半分（ｎ＝８／群）を屠殺した。各処置群の残りのマウス（ｎ＝８／群）を感染後１１日目に屠殺した（図１６Ｙ）。
【0093】
３０、１０、又は３ｍｇ／ｋｇ／用量、１日２回のいずれかの用量の化合物（ｂ）は、ウイルスＲＮＡレベルを検出不可能なレベルまで低減した（図１６Ｚ）。１及び０．３ｍｇ／ｋｇほど低い用量においてさえ、ピークウイルス血症におけるウイルスＲＮＡレベルは、それぞれ１．８ｌｏｇ１０及び０．８ｌｏｇ１０低減した（図１６Ｚ）。
【0094】
９．ＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａに対するインビボＡＧ１２９マウスモデルにおけるＰｒＥＰ、曝露後予防（ＰＥＰ）、及び化合物（ｂ）による処置。
年齢及び性別が適合した（６～９週齢）ＡＧ１２９マウスを使用して、マウスの血清中のウイルスＲＮＡレベルに対する化合物（ｂ）の活性を評価した。動物を１×１０２ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株で腹腔内（ｉ．ｐ．）感染させ、強制経口投与によって投与された化合物（ｂ）で５日間連続して処置した。化合物（ｂ）を１２時間毎に（１日２回又はｂ．ｉ．ｄ．）投与した。
年齢及び性別が適合した（６～９週齢）ＡＧ１２９マウスを使用して、マウスの血清中のウイルスＲＮＡレベルに対する化合物（ｂ）の活性を評価した。動物を１×１０２ＰＦＵのＤＥＮＶ－２／Ｒｅｇａ実験室株で腹腔内（ｉ．ｐ．）感染させ、強制経口投与によって投与された化合物（ｂ）で５日間連続して処置した。化合物（ｂ）を１２時間毎に（１日２回又はｂ．ｉ．ｄ．）投与した。
【0095】
マウスを、以下の処置レジメンを表す６つの処置群（ｎ＝８／群）に分けた。
（ｉ）ビヒクル８０％／２０％ ＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ（群１）、
（ｉｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の１時間前に初回投与（群２）、
（ｉｉｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の１日後に初回投与（群３）、
（ｉｖ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の２日後に初回投与（群４）、
（ｖ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の３日後に初回投与（群５）、
（ｖｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の４日後に初回投与（群６）、
（ｖｉｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の５日後に初回投与（群７）、
（ｖｉｉｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の６日後に初回投与（群８）。
（ｉ）ビヒクル８０％／２０％ ＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ（群１）、
（ｉｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の１時間前に初回投与（群２）、
（ｉｉｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の１日後に初回投与（群３）、
（ｉｖ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の２日後に初回投与（群４）、
（ｖ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の３日後に初回投与（群５）、
（ｖｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の４日後に初回投与（群６）、
（ｖｉｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の５日後に初回投与（群７）、
（ｖｉｉｉ）３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回：感染の６日後に初回投与（群８）。
【0096】
ウイルスＲＮＡ負荷検出のための血液を、２つの交互のサブグループのマウスから採取した。各サブグループは、処置群（ｉ）～（ｖｉｉｉ）の各々からのマウスの半分（ｎ／２＝４）を含んでいた。感染後２、４、６、８、及び１２日目に第１のサブグループから、並びに感染後３、５、７、９、及び１４日目に第２のサブグループから、血液を採取した。感染後１２日目に、各処置群のマウスの半分（ｎ＝４／群）を屠殺した。各処置群の残りのマウス（ｎ＝４／群）を感染後１４日目に屠殺した（図１７Ｙ）。
【0097】
ビヒクル処置されたマウスは、感染後７日目に７．０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬのピークウイルス負荷に達した。群２、群３、及び群４に属するマウスの血清中のウイルスＲＮＡは、群４の２つの測定値（感染後９日目（３．０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ）及び１４日目（４．７ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ）にウイルスのリバウンドが観察された）を除いて、検出不可能なレベル（２．６ｌｏｇ１０コピー／ｍＬの負の値の補完された値未満）まで低減した（図１５Ｚ）。処置を感染後３日目に開始し、感染後９日目に停止した群５において、検出不可能なウイルス負荷が感染後９日目まで観察されたが、ウイルスＲＮＡは、感染後１２日目に検出された（５．０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ）（図１７Ｚ）。
【0098】
群６及び群７において、ピークウイルス負荷は、それぞれ１．１及び０．７ｌｏｇ１０コピー／ｍＬで、依然として低減した。ビヒクル処置されたマウスと比較して、検出不可能なウイルス負荷は、両方の処置群について早く達成された（図１７Ｚ）。
【0099】
この実験は更に、追加の処置群、すなわち、動物を３０ｍｇ／ｋｇ／用量の化合物（ｂ）、１日２回で処置した群８を含む。化合物（ｂ）の初回投与は、感染の６日後に行われた。この群では、ピークウイルス負荷は、ビヒクル処置群と同様であったが、検出不可能なウイルス負荷は、ビヒクル処置されたマウスについてよりも早く達成された（図１７Ｚ）。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12A-1】
【図12A-2】
【図12B-1】
【図12B-2】
【図13】
【図14-1】
【図14-2】
【図15-1】
【図15-2】
【図15-3】
【図16-1】
【図16-2】
【図17-1】
【図17-2】
【国際調査報告】