特表 2023-502469 血液成分を調製するプロセスおよびバイオメディカルデバイス

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-01-24

(54)【発明の名称】血液成分を調製するプロセスおよびバイオメディカルデバイス

(51)【国際特許分類】

   A61M 1/02 20060101AFI20230117BHJP

   A61K 35/18 20150101ALI20230117BHJP

   A61K 35/19 20150101ALI20230117BHJP

   A61P 7/00 20060101ALI20230117BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230117BHJP

【ＦＩ】

A61M1/02 121

A61M1/02 100

A61M1/02 180

A61K35/18 A

A61K35/19 A

A61P7/00

A61P43/00 105

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022529529

(86)(22)【出願日】2020-11-18

(85)【翻訳文提出日】2022-06-29

(86)【国際出願番号】 IB2020060853

(87)【国際公開番号】W WO2021099953

(87)【国際公開日】2021-05-27

(31)【優先権主張番号】102019000021426

(32)【優先日】2019-11-18

(33)【優先権主張国・地域又は機関】IT

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522196973

【氏名又は名称】メディタリア・インドゥストリアーレ・ソチエタ・ア・レスポンサビリタ・リミタータ

【氏名又は名称原語表記】Ｍｅｄｉｔａｌｉａ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｅ Ｓ．Ｒ．Ｌ．

(71)【出願人】

【識別番号】522196984

【氏名又は名称】フォンダツィオーネ・ポリクリニコ・ウニヴェルシターリオ・アゴスティーノ・ジェメッリ・イエッレチチエッセ

【氏名又は名称原語表記】Ｆｏｎｄａｚｉｏｎｅ Ｐｏｌｉｃｌｉｎｉｃｏ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｒｉｏ Ａｇｏｓｔｉｎｏ Ｇｅｍｅｌｌｉ ＩＲＣＣＳ

(71)【出願人】

【識別番号】522196995

【氏名又は名称】ウニヴェルシタ・カットーリカ・デル・サクロ・クオーレ

【氏名又は名称原語表記】Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａ Ｃａｔｔｏｌｉｃａ ｄｅｌ Ｓａｃｒｏ Ｃｕｏｒｅ

(71)【出願人】

【識別番号】508306026

【氏名又は名称】フォンダツィオーネ イエッレチチェッセ カ’グランダ－オスペダーレ マッジョーレ ポリクリニコ

【氏名又は名称原語表記】Ｆｏｎｄａｚｉｏｎｅ ＩＲＣＣＳ Ｃａ Ｇｒａｎｄａ－Ｏｓｐｅｄａｌｅ Ｍａｇｇｉｏｒｅ Ｐｏｌｉｃｌｉｎｉｃｏ

【住所又は居所原語表記】Ｖｉａ Ｆｒａｎｃｅｓｃｏ Ｓｆｏｒｚａ，２８，Ｉ－２０１２２ Ｍｉｌａｎｏ（ＩＴ）

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100189555

【弁理士】

【氏名又は名称】徳山 英浩

(74)【代理人】

【識別番号】100125922

【弁理士】

【氏名又は名称】三宅 章子

(72)【発明者】

【氏名】レブッラ，パオロ

(72)【発明者】

【氏名】マッツァーロ，ジョヴァンニ

(72)【発明者】

【氏名】ビアンキ，マリア

(72)【発明者】

【氏名】テオフィリ，ルチャーナ

【テーマコード（参考）】

4C077

4C087

【Ｆターム（参考）】

4C077AA12

4C077BB02

4C077BB04

4C077CC04

4C077DD13

4C077DD22

4C077NN02

4C077NN03

4C087AA04

4C087BB36

4C087BB38

4C087DA17

4C087DA21

4C087NA20

4C087ZA51

4C087ZB21

(57)【要約】

血液から血液成分を調製するプロセスは、バイオメディカルデバイス（１６）を用い、分離した血液サンプル（１）に、２５０ｒｐｍの速度で１０分間の第１の遠心分離を行うステップと、２０００ｒｐｍの速度で１５分間の第２の遠心分離を行うステップとを含む。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

血液から血液成分を調製するプロセスであって、第２バッグ（１１）および第３バッグ（１３）に接続された第１バッグ（２）を備えるバイオメディカルデバイス（１６）を用い、
前記プロセスは、
ａ）前記第１バッグ（２）内に収容された、分離された(isolated)血液サンプル（１）に、２５０ｒｐｍの速度で１０分間の第１の遠心分離を行い、赤血球（３）からなる沈殿物と多血小板血漿（４）からなる上清とを得るステップ、
ｂ）前記ステップａ）から得られた前記多血小板血漿（４）を、前記第１バッグ（２）から前記第２バッグ（１１）に移送するステップ、
ｃ）前記第２バッグ（１１）および前記第３バッグ（１３）に接続された前記第１バッグ（２）に、２０００ｒｐｍの速度で１５分間の第２の遠心分離を行い、前記第１バッグ（２）の上部にある少血小板血漿（５）からなる上清および前記第１バッグ（２）の下部にある赤血球濃縮物（６）と、前記第２バッグ（１１）の上部にある少血小板血漿（５）からなる上清および前記第２バッグ（１１）の下部にある血小板パッド（１２）とを得るステップ、
ｄ）前記第１バッグ（２）から前記少血小板血漿（５）を前記第２バッグ（１１）または前記第３バッグ（１３）へ移送するステップ、
ｅ）前記第１バッグ（２）を、前記第２バッグ（１１）および前記第３バッグ（１３）から分離し、前記第１バッグ（２）を保存バッグ（７）に流体接続するステップ、
ｆ）前記血小板パッド（１２）を希釈するような量の少血小板血漿（５）を差し引いて、前記第２バッグ（１１）から前記少血小板血漿（５）を前記第３バッグ（１３）に移送し、これにより、マイクロリットル当たりの血小板が８０万個から１２０万個の間である血小板濃度を有する再懸濁血小板濃縮物（１５）を形成するステップ、
ｇ）前記赤血球濃縮物（６）を、ある量の添加溶液（８）を加えて希釈し、６０％超のヘマトクリット値を有する濃縮赤血球懸濁液を得るステップ、および
ｈ）前記濃縮赤血球懸濁液に含まれる白血球を、白血球除去フィルタ（１４）で濾過することにより除去し、これにより、濾過された濃縮赤血球懸濁液（９）を得て、前記濾過された濃縮赤血球懸濁液（９）を前記保存バッグ（７）に収集して保存するステップ
を含む、プロセス。

【請求項2】

前記赤血球を保存するための前記添加溶液（８）が、ナトリウム―アデニン―グルコース―マンニトール（ＳＡＧＭ）、または生理溶液（physiological solution）からなる、請求項１に記載のプロセス。

【請求項3】

前記ステップｇ）の前には、前記添加溶液（８）は、前記第１バッグ（２）に取り外し可能に流体接続可能な溶液バッグ（１０）に収容されている、請求項１または２に記載のプロセス。

【請求項4】

前記ステップｇ）は、前記溶液バッグ（１０）の支流カニューレ（１８）を副カニューレ（１９）に流体接続することによって実施され、前記副カニューレ（１９）は、無菌接続によって前記第１バッグ（２）を前記保存バッグ（７）に流体接続する主カニューレ（１７）から分岐している、請求項３に記載のプロセス。

【請求項5】

前記ステップａ）の前に、選択ステップａ１）が含まれ、前記選択ステップａ１）では、以下のパラメータ
ＴＮＣ（総核球数）＜１．５×１０^９、
抗凝固剤を含まない体積＞５０ｍｌ、
抗凝固剤を使用したユニットの血小板数＞１５０，０００／マイクロリットル、
血液ユニット採取から４８時間以内に前記プロセスを開始すること、
オプションとして、現地の法規制を遵守していること、
に従って血液ユニットが選択される、請求項１から４のいずれか１つに記載のプロセス。

【請求項6】

前記選択ステップａ１）に続いて、前記ステップａ）の前に、記録ステップａ）が含まれ、前記記録ステップａ２）では、前記ステップａ）に供される前記血液ユニットの搬入日時、および前記ステップａ）の開始日時の記録が実施される、請求項５に記載のプロセス。

【請求項7】

前記記録ステップａ２）に続いて、前記ステップａ）の前に、分析ステップａ３）が含まれ、前記分析ステップａ３）では、前記血液ユニットの正味重量が決定され、前記血液ユニットの血球計算が実施され、
前記ステップａ３）に続いて、移送ステップａ４）が含まれ、前記移送ステップａ４）では、前記血液ユニットの血液が無菌接続によって前記第１バッグ（２）内に移送される、請求項６に記載のプロセス。

【請求項8】

前記ステップｂ）において、前記多血小板血漿（４）は、手動血漿抽出器によって、前記第１バッグ（２）から抽出されて前記第２バッグ（１１）に移送される、請求項１から７のいずれか１つに記載のプロセス。

【請求項9】

前記少血小板血漿（５）は、手動血漿抽出器によって、前記第２バッグ（１１）から抽出されて前記第３バッグ（１３）に移送され、引き続いて、サイフォンラッキングによって、前記第２バッグ（１１）から前記第３バッグ（１３）に移送される、請求項１から８のいずれか１つに記載のプロセス。

【請求項10】

前記少血小板血漿（５）の前記第２バッグ（１１）から前記第３バッグ（１３）への移送の後、前記第２バッグ（１１）に収容されている前記血小板パッド（１２）の正味重量が算出される、請求項１から９のいずれか１つに記載のプロセス。

【請求項11】

前記ステップｄ）に続いて、前記赤血球濃縮物（６）を収容している前記第１バッグ（２）が密封され、前記赤血球濃縮物（６）を収容している前記第１バッグ（２）の正味重量が決定され、前記第１バッグ（２）に収容された前記赤血球濃縮物（６）の血球計算が実施され、前記赤血球濃縮物（６）を収容している前記第１バッグ（２）が冷却されて２℃から６℃の間の温度で保存される、請求項１から１０のいずれか１つに記載のプロセス。

【請求項12】

マイクロリットル当たりの血小板が所定の濃度である前記再懸濁血小板濃縮物（１５）を形成するように適合された前記少血小板血漿（５）の前記量は、出発血液ユニット中の血小板の総数に、前記ステップｂ）で分離した前記多血小板血漿（４）中に回収した血小板の平均割合（average percentage）を乗じることによって計算される、請求項１から１１のいずれか１つに記載のプロセス。

【請求項13】

前記再懸濁血小板濃縮物（１５）の形成に続いて、前記第２バッグ（１１）に収容された前記再懸濁血小板濃縮物（１５）に対する血球計算と、前記第３バッグ（１３）に収容された前記少血小板血漿（５）に対する血球計算とが実施され、
その後、前記再懸濁血小板濃縮物（１５）を収容している前記第２バッグ（１１）および前記少血小板血漿（５）を収容している前記第３バッグ（１３）が冷却されて－２５℃未満の温度で保存される、請求項１から１２のいずれか１つに記載のプロセス。

【請求項14】

前記添加溶液（８）は、前記保存バッグ（７）に向かって導かれる前記赤血球濃縮物（６）の流れと反対方向に前記添加溶液（８）の流れを導くことにより、前記赤血球濃縮物（６）に添加される、請求項１から１３のいずれか１つに記載のプロセス。

【請求項15】

血液成分を調製するためのバイオメディカルデバイス（１６）であって、
第１バッグ（２）であって、前記第１バッグ（２）は、第２バッグ（１１）および第３バッグ（１３）に接続されており、前記第２バッグ（１１）は、血漿（４）および血小板パッド（１２）および再懸濁血小板濃縮物（１５）を収容するように適合され、前記第３バッグ（１３）は、少血小板血漿（５）を収容するように適合されている、第１バッグ（２）と、
主カニューレ（１７）によって前記第１バッグ（２）に流体接続された保存バッグ（７）と、
支流カニューレ（１８）を有する溶液バッグ（１０）であって、前記溶液バッグ（１０）は、前記主カニューレ（１７）から分離され、前記溶液バッグ（１０）は、前記主カニューレ（１７）から分岐した副カニューレ（１９）に、前記支流カニューレ（１８）の前記副カニューレ（１９）への無菌接続によって、流体接続可能である、溶液バッグ（１０）と、を備え、
前記第１バッグ（２）が、血液サンプル（１）および赤血球濃縮物（６）を収容するように適合されており、
前記溶液バッグ（１０）が、赤血球を保存するための添加溶液（８）を収容するように適合されており、
前記保存バッグ（７）が、濾過された濃縮赤血球懸濁液（９）を収容するように適合されている、バイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項16】

前記第２バッグ（１１）と前記第３バッグ（１３）とを流体接続するサイフォンを備える、請求項１５に記載のバイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項17】

前記第２バッグ（１１）は、前記第２バッグ（１１）の上部領域で前記第２バッグ（１１）に接続される接続チューブ（２０）を有する、請求項１５または１６に記載のバイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項18】

前記第２バッグ（１１）は、前記第２バッグ（１１）の前記上部領域に設けられたブラインドチューブ（２１）を有し、前記接続チューブ（２０）は、前記ブラインドチューブ（２１）上に「Ｙ」継手を用いて挿入されている、請求項１７に記載のバイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項19】

前記支流カニューレ（１８）は、前記添加溶液（８）の流れを、前記第１バッグ（２）から前記保存バッグ（７）に向かって導かれる前記赤血球濃縮物（６）の流れと反対方向に導くことによって、前記添加溶液（８）を前記主カニューレ（１７）に注入するように構成されている、請求項１５から１８のいずれか１つに記載のバイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項20】

前記主カニューレ（１７）内に配置された白血球除去フィルタ（１４）を備え、前記白血球除去フィルタ（１４）は、前記保存バッグ（７）に向かって導かれる前記濃縮赤血球懸濁液を濾過するように適合されている、請求項１５から１９のいずれか１つに記載のバイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項21】

前記白血球除去フィルタ（１４）は、前記第１バッグ（２）から前記保存バッグ（７）への前記濃縮赤血球懸濁液の流れを基準にして、前記主カニューレ（１７）と前記副カニューレ（１９）との交差部の上流に設けられている、請求項２０に記載のバイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項22】

前記白血球除去フィルタ（１４）は、前記第１バッグ（２）から前記保存バッグ（７）への前記赤血球濃縮物（６）の流れを基準にして、前記副カニューレ（１９）と前記支流カニューレ（１８）との交差部の下流に設けられている、請求項２０に記載のバイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項23】

前記主カニューレ（１７）から第１の副カニューレ（１９’）および第２の副カニューレ（１９’’）が分岐し、前記白血球除去フィルタ（１４）は、前記主カニューレ（１７）と前記第１の副カニューレ（１９’）との交差部と、前記主カニューレ（１７）および前記第２の副カニューレ（１９’’）の交差部との間にある請求項２０に記載のバイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項24】

前記第１バッグ（２）、前記第２バッグ（１１）および前記第３バッグ（１３）は、持続時間１５分間の２０００ｒｐｍの遠心分離に耐えられる柔軟な材料で作られている、請求項１５から２３までのいずれか１つに記載のバイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項25】

前記第１バッグ（２）は、１５０ｍｌの内容積を有し、
前記第２バッグ（１１）は、６０ｍｌの内容積を有し、
前記第３バッグ（１３）は、６０ｍｌの内容積を有し、
前記溶液バッグ（１０）は、５０ｍｌの内容積を有し、
前記保存バッグ（７）は、１５０ｍｌの内容積を有する、請求項１５から２４のいずれか１つに記載のバイオメディカルデバイス（１６）。

【請求項26】

請求項１５から２５のいずれか１つに記載のバイオメディカルデバイス（１６）と、
少なくとも１つの遠心分離機と、
少なくとも１つの血漿抽出器と、を備える、血液成分を調製するシステム。

【請求項27】

前記少なくとも１つの遠心分離機は、保護用の管状フレキシブルケーシングと固形プラスチック製の複数の円筒形アダプタとを備える、請求項２６に記載のシステム。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、血液成分を調製するプロセス、ならびに、生物学的生産物、特に血液成分の製造、保存およびトレーサビリティのためのバイオメディカルデバイスに関する。

【0002】

近年の輸血療法技術は、成人ドナーから採取した血液の使用に基づいている。成人ドナーから採取した血液を、マルチプラスチックバッグ（multiple plastic bags）のシステムに採取し、遠心分離にかけることによって、主要な血液成分、すなわち以下の成分を分離する。
―急性および慢性貧血の治療に使用される赤血球濃縮物（red blood cell concentrates）。
―出血の予防と治療に使用される血小板濃縮物（platelet concentrates）。
―凝固因子欠乏症の患者に使用される少血小板血漿（platelet-poor plasma）。

【0003】

先行技術では、赤血球濃縮物および血小板濃縮物は、輸血された患者に反応や重い副作用を引き起こす可能性のある白血球を除去するために濾過される。

【0004】

血液成分を濃縮した形態で調製することにより、患者に不足している血液成分のみを比較的少量ずつ投与することができる。血液成分を濃縮して調製することは、ドナーから採取した血液の使用を最適化するとともに、患者の心血管系に過度の負担をかけるリスクを回避する。

【0005】

成人ドナーの血液を用いた治療法の確立と並行して、健康な新生児から出生時に採取され、地域社会に提供（寄付）された胎盤血を、重症血液疾患の患者への造血幹細胞移植の目的で使用する治療法も開発されている。

【0006】

胎盤献血の９０％超は、安全に移植を行うために十分な数の造血幹細胞が含まれておらず、手順に沿って病院の廃棄物として処理される。

【0007】

献血された胎盤血の治療的使用のための研究プロジェクト、血液成分の調製方法およびプロトコルは、造血細胞移植に代わる治療法として、造血細胞移植に適さないユニットの使用に基づいて開発されてきた。

【0008】

特に、胎盤血の赤血球、血小板ゲル、血漿点眼液の調製と、皮膚病変を治療するための血小板ゲルの治療投与を容易にするシステムが開発されてきた。

【0009】

このタイプのシステムは、例えば、特許出願ＩＴ１０２０１５００００２０４３０およびＩＴ１０２０１５００００２０４１５に開示されている。

【0010】

ＵＳ２０１６３５４２８０Ａ１は、血液成分を調製するためのマルチバッグシステムおよび方法を開示している。

【0011】

ＵＳ４５９６６５７Ａは、濾過手段が一体化されたマルチバッグシステムを開示している。

【0012】

ＵＳ２００９３１７３０５Ａ１は、血液を個別容量に分離するためのバッグシステムを開示している。

【0013】

ＵＳ２０１５３２８３９２は、血液サンプルから白血球を除去するためのシステム及び方法を開示している。

【0014】

胎盤血から血液成分を調製するための先行技術の方法には、いくつかの重要な限界がある。

【0015】

まず、赤血球から多血小板血漿（platelet-rich plasma）を分離するために用いられる低速遠心分離方法では、輸血用の赤血球の保存に必要な十分な量の適切な添加溶液に再懸濁させた後の赤血球は、高いヘマトクリット値（＞６０％）を有することができない。６０％超のヘマトクリット値を維持することは、輸血用の赤血球の標準的な要件である。

【0016】

しかしながら、胎盤血の遠心分離は、バッグの上部区画に形成される血漿画分に血小板を浮遊（懸濁）させるために、低速で行われる必要がある。

【0017】

実際、胎盤血を高速遠心分離すると、血漿中に含まれる血小板の崩壊が生じ得る。これにより、その後の多血小板血漿からの血小板濃縮物の調製ができなくなり得る。

【0018】

先行技術のさらなる問題は、胎盤血からの赤血球を輸血目的で使用するには、白血球を除去するように適合されたメディカルデバイスが必要であるということである。成人ドナーの血液から白血球除去赤血球（白血球を減少させた赤血球）を調製するために通常使用される現在の濾過システムは、胎盤血からの赤血球の白血球除去に適合していない。胎盤血中の赤血球の量（体積）がはるかに少なく（約１／５）、成人ドナーの血液からの赤血球の白血球除去に使用されるフィルタに大きなデッドスペースが生じて、濾過終了時にフィルタ内に閉じ込められた新生児赤血球が大きな損失となり得るからである。

【0019】

従って、本発明の目的は、先行技術で明確になった問題の少なくともいくつかを回避するような、血液成分（赤血球、血小板濃縮物および少血小板血漿）を調製するプロセス、ならびに、生物学的生産物、特に血液成分の製造、保存、およびトレーサビリティのためのバイオメディカルデバイスを提供することである。

【0020】

本発明のある特定の目的は、高いヘマトクリット値（＞６０％）を有し、したがって輸血用途、特に早産新生児（premature newborns）に対する輸血用途に適した濃縮赤血球懸濁液（すなわち、赤血球を保存するために必要な適切な添加溶液中に懸濁（浮遊）させた赤血球濃縮物）を調製するプロセスを提供することである。

【0021】

本発明のさらなる特定の目的は、血液成分を調製するための、より効率的かつ迅速なプロセスを提供することである。

【0022】

本発明のさらなる目的は、血液成分の製造、保存、およびトレーサビリティのための改良されたバイオメディカルデバイスを提供することである。

【0023】

これらおよび他の目的は、添付の特許請求の範囲に記載されたプロセスおよびデバイスによって達成される。

【0024】

本発明のさらなる特徴および利点は、添付図面を参照して非限定的な例として以下に与えられる、いくつかの好ましい実施形態の説明からより明らかとなるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0025】

【図1】図１は、本発明のある実施形態に係る、血液成分を調製するためのバイオメディカルデバイスを示す。

【図2】図２は、本発明のある実施形態に係る、赤血球を濾過するためのバイオメディカルデバイスの詳細を示す。

【図3】図３は、本発明のさらなる実施形態に係る、赤血球を濾過するためのバイオメディカルデバイスを示す。

【図4】図４は、本発明のさらなる実施形態に係る、赤血球を濾過するためのバイオメディカルデバイスを示す。

【図5】図５は、本発明のさらなる実施形態に係る、血液成分を調製するためのバイオメディカルデバイスを示す。

【発明を実施するための形態】

【0026】

血液成分を調製するプロセス
本発明の一態様によれば、血液、特に臍帯血または胎盤血から血液成分を調製するプロセスは、第２バッグ１１および第３バッグ１３に接続された第１バッグ２を備えるバイオメディカルデバイス１６を用い、以下のステップを含む。

【0027】

上記プロセスは、第１バッグ２内に収容された、分離された(isolated)血液サンプル（１）に、２５０ｒｐｍの速度で１０分間の第１の遠心分離を行い、赤血球３からなる沈殿物と多血小板血漿（血小板を多く含む血漿）４からなる上清とを得るステップａ）を含む。

【0028】

上記プロセスは、その後、ステップａ）から得られた多血小板血漿４が、第１バッグ２から第２バッグ１１に移送されるステップｂ）を含む。

【0029】

上記プロセスは、その後、第２バッグ１１および第３バッグ１３に接続された第１バッグ２に、２０００ｒｐｍの速度で１５分間の第２の遠心分離を行い、第１バッグ２の上部にある少血小板血漿５からなる上清および第１バッグ２の下部にある赤血球濃縮物６と、第２バッグ１１の上部にある少血小板血漿（血小板の少ない血漿）５からなる上清および第２バッグ１１の下部にある血小板パッド１２とを得るステップｃ）を含む。

【0030】

有利には、ステップｃ）から得られる赤血球濃縮物６のヘマトクリット値は、８０％超である。

【0031】

さらなる利点として、第１バッグ２の遠心分離と第２バッグ１１の遠心分離とが、同じ遠心分離機の内部で同時に行われるので、本プロセスの効率が向上する。

【0032】

上記プロセスは、その後、少血小板血漿５が第１バッグ２から第２バッグ１１または第３バッグ１３へ移送されるステップｄ）を含む。

【0033】

上記プロセスは、その後、第１バッグ２が、第２バッグ１１および第３バッグ１３から分離され、第１バッグ２が保存バッグ７（図２、図３、図４）に流体接続されるステップｅ）を含む。

【0034】

上記プロセスは、その後、血小板パッド１２を希釈するような量の少血小板血漿５を差し引いて、少血小板血漿５が第２バッグ１１から第３バッグ１３に移送され、これにより、１マイクロリットル当たりの血小板が好ましくは８０万個から１２０万個の間である血小板濃度を有する再懸濁（re-suspended）血小板濃縮物１５を形成するステップｆ）を含む。

【0035】

有利には、元の血液サンプル１から製造することができる少血小板血漿５の量が増加するので、本プロセスの効率が増加する。特に、第１バッグ２が１５０ｍｌの内容積を有し、第２バッグ１１が６０ｍｌの内容積を有し、第３バッグ１３が６０ｍｌの内容積を有する場合、このプロセスによって、約１０ｃｃの少血小板血漿５を追加的に得ることができる

【0036】

上記プロセスは、その後、赤血球濃縮物６が、ある量の添加溶液８の添加によって希釈され、６０％超のヘマトクリット値を有する濃縮赤血球懸濁液を得るステップｇ）を含む。

【0037】

上記プロセスは、その後、濃縮赤血球懸濁液に含まれる白血球が、白血球除去フィルタ１４（図２、図３、図４）を用いた濾過によって除去され、濾過された濃縮赤血球懸濁液９を得る、および、濾過された濃縮赤血球懸濁液９が保存バッグ７に収集され、保存されるステップｈ）を含む。

【0038】

有利には、このように構成された血液成分を調製するためのプロセスは、高いヘマトクリット値（＞６０％）を有する、したがって輸血用途、特に早産新生児に対する輸血用途に適した、濾過された濃縮赤血球懸濁液を調製することができる。

【0039】

さらなる利点として、上記に記載の血液成分を調製するプロセスは、効率的かつ迅速である。

【0040】

さらなる利点として、本発明の方法（手順）は、システムのバッグにかけられる遠心加速度の大きさ（「ｒｐｍ」で表される）を特定する。先行技術から知られている方法は、バッグにかけられる加速度（ＵＳ２０１６３５４２８０、ＵＳ４５９６６５７、ＵＳ２００９３１７３０５）又は遠心分離時間（ＵＳ４５９６６５７、ＵＳ２００９３１７３０５）について何も表示していない。

【0041】

一実施形態によれば、赤血球を保存するための添加溶液８は、ナトリウム―アデニン―グルコース―マンニトール（ＳＡＧＭ）からなる。

【0042】

有利には、ＳＡＧＭによって、赤血球濃縮物６の適切な再懸濁と、輸血用途のための濾過された濃縮赤血球懸濁液９の高い保存性とが確保される。

【0043】

あるいは、添加溶液８は、生理溶液からなる。

【0044】

一実施形態によれば、赤血球を保存するための添加溶液８は、予め、第１バッグ２に取り外し可能に流体接続可能な溶液バッグ１０に収容されている。

【0045】

一実施形態によれば、ステップｇ）は、溶液バッグ１０の支流カニューレ１８を副カニューレ１９に流体接続することによって行われる。副カニューレ１９は、無菌接続によって第１バッグ２を保存バッグ７に流体接続する主カニューレ１７から分岐している。

【0046】

一実施形態によれば、上述したステップａ）が行われる前に、上記プロセスは、選択ステップａ１）を含む。選択ステップａ１）では、以下のパラメータに従って血液ユニット、特に胎盤血（臍帯血とも呼ばれる）が選択される。
―ＴＮＣ（総核球数）＜１．５×１０^９
―抗凝固剤を含まない体積（Volume without anticoagulant）＞５０ｍｌ
―抗凝固剤を含むユニットの血小板数＞１５００００／マイクロリットル
―血液ユニットの採取（collection）から４８時間以内にプロセスを開始すること。
―オプションとして、現地の法規制を遵守していること。

【0047】

一実施形態によれば、選択ステップａ１）に続いて、ステップａ）が行われる前に、上記プロセスは、記録ステップａ）を含む。記録ステップａ２）では、ステップａ）に供される血液ユニットの搬入日時、およびステップａ）の開始日時の記録が行われる。

【0048】

一実施形態によれば、記録ステップａ２）の後、ステップａ）の前に、上記プロセスは、分析ステップａ３）を含む。分析ステップａ３）では、血液ユニットの正味重量が決定され、血液ユニットに含まれる血液のパラメータを完全に調べる血液ユニットの全血球計算が実施される。

【0049】

ステップａ３）に続いて、ステップａ）の前に、上記プロセスは、移送ステップａ４）を含む。移送ステップａ４）では、血液ユニットの血液が無菌接続によって第１バッグ２内に移送される。

【0050】

一実施形態によれば、ステップｂ）において、多血小板血漿４は、血漿抽出器によって、第１バッグ２から抽出され、第２バッグ１１に移送される。本発明の一態様では、この抽出器は手動式であってもよく、代わりに、自動抽出器が使用されてもよい。

【0051】

一実施形態によれば、少血小板血漿５は、手動血漿抽出器によって、第２バッグ１１から抽出され、第３バッグ１３に移送され、引き続いて、サイフォンラッキングによって、第２バッグ１１から第３バッグ１３に移送される。「サイフォンラッキング」は、サイフォンの動作原理を利用して実施される流体の移送を意味する。

【0052】

有利には、サイフォンラッキングによって引き続いて行われる移送は、第２バッグ１１から全ての少血小板血漿を実質的に除去し、これにより、第２バッグ１１には血小板パッド１２のみが残るようになる。

【0053】

少血小板血漿をサイフォンで吸い上げる方法は、本発明の方法で導入された主な革新点の1つである。実際、先行技術から知られている他の方法は、少血小板血漿をサイフォンで吸い上げることを記載又は示唆していない。

【0054】

実際、少血小板血漿５の抽出を手動の血漿抽出器によってのみ行うと、第２バッグ１１の厚さのために、少血小板血漿５の完全な抽出は得られない。

【0055】

少血小板血漿５の第２バッグ１１から第３バッグ１３への移送の後、第２バッグ１１に収容されている血小板パッド１２の正味重量が算出される。

【0056】

ステップｄ）の後、赤血球濃縮物６を収容している第１バッグ２が密封され、その正味重量（したがって、赤血球濃縮物６のみの重量）が決定される。第１バッグ２に収容された赤血球濃縮物６の血球計算が実施される。このバッグ２は冷却されて２℃から６℃の間の温度で保存される。

【0057】

一実施形態によれば、マイクロリットル当たりの血小板が所定の濃度である再懸濁血小板濃縮物１５を形成するように適合された少血小板血漿５の量は、出発血液ユニット中の血小板の総数（１０億単位）に、ステップｂ）で分離された多血小板血漿４中に回収された血小板の平均割合（本方法の検証プロトコル（the procedure validation protocol）中に決定される）を乗じることによって計算される。

【0058】

例えば、出発血液ユニット中の血小板の総数が１５０億であり、回収された血小板の平均割合が５０％である場合、マイクロリットル当たり約１００万の血小板濃度を有する再懸濁血小板濃縮物１５の最終量（最終的な体積）は、７．５ｍｌに等しい。

【0059】

従って、例えば、再懸濁血小板濃縮物の最終量が７．５ｍｌ（従って約７．５ｇの重量を有する）であり、第２バッグ１１に収容された血小板パッド１２の先に計算された正味重量が３ｇであるとすれば、第２バッグ１１に移送すべき少血小板血漿５の重量は、４．５ｇである。

【0060】

有利には、この計算方法は迅速であり、高い精度を有している。

【0061】

好ましくは、再懸濁血小板濃縮物１５の形成後、第２バッグ１１に収容された再懸濁血小板濃縮物１５に対する全血球計算と、第３バッグ１３に収容された少血小板血漿５に対する血球計算とが行われる。

【0062】

その後、再懸濁血小板濃縮物１５を収容している第２バッグ１１および少血小板血漿５を収容している第３バッグ１３は冷却されて、－２５℃未満の温度で保存される。

【0063】

好ましい一実施形態によれば、添加溶液８は、保存バッグ７に向かって導かれる赤血球濃縮物６の流れと反対方向に添加溶液８の流れを導くことにより、赤血球濃縮物６に添加される。

【0064】

一実施形態によれば、赤血球濃縮物６の第１バッグ２から保存バッグ７への移送中に、赤血球濃縮物６は、白血球除去フィルタ１４によって濾過される。

【0065】

有利には、白血球除去フィルタ１４による赤血球濃縮物６の濾過は、添加溶液８の添加後に実施されるので、非常に高いヘマトクリットを有する赤血球の濾過中に生じ得る溶血のリスクを回避することができる。

【0066】

血液成分を調整するためのバイオメディカルデバイス
本発明のさらなる態様によると、バイオメディカルデバイス１６は、第２バッグ１１および第３バッグ１３に接続された第１バッグ２を備える。

【0067】

バイオメディカルデバイス１６は、さらに、主カニューレ１７によって第１バッグ２に流体接続された保存バッグ７を備える。

【0068】

バイオメディカルデバイス１６は、さらに、支流カニューレ１８を有する溶液バッグ１０を備える。溶液バッグ１０は、主カニューレ１７から分離されている。溶液バッグ１０は、主カニューレ１７から分岐した副カニューレ１９に、支流カニューレ１８の副カニューレ１９への無菌接続によって、流体接続可能である。

【0069】

第１バッグ２は、血液サンプル１および赤血球濃縮物６を収容するように適合されている。

【0070】

溶液バッグ１０は、赤血球を保存するための添加溶液８を収容するように適合されている。

【0071】

保存バッグ７は、濾過された濃縮赤血球懸濁液９を収容するように適合されている。

【0072】

有利には、このように構成されたメディカルデバイス１６によって、高いヘマトクリット値（＞６０％）を有し、したがって輸血用途、特に早産新生児への輸血用途に適した、濾過された濃縮赤血球懸濁液９を確実に調製することができる。

【0073】

さらに、第２バッグ１１は、多血小板血漿４、少血小板血漿５および血小板パッド１２、および再懸濁血小板濃縮物１５を収容するように適合されている。

【0074】

さらに、第３バッグ１３は、少血小板血漿５を収容するように適合されている。

【0075】

一実施形態によると、バイオメディカルデバイス１６は、第２バッグ１１と第３バッグ１３とを流体接続するサイフォンをさらに備える。

【0076】

一実施形態によると、第２バッグ１１は、第２バッグ１１の上部領域で第２バッグ１１に接続された接続チューブ２０を有する。

【0077】

好ましい一実施形態によると、第２バッグ１１は、第２バッグ１１の上部領域に設けられたブラインドチューブ２１を有し、接続チューブ２０は、ブラインドチューブ２１上に「Ｙ」継手を用いて挿入されている（図５）。

【0078】

一実施形態によると、支流カニューレ１８は、添加溶液８の流れを、第１バッグ２から保存バッグ７に向かって導かれる（directed）赤血球濃縮物６の流れと反対方向に導くことによって、添加溶液８を主カニューレ１７に注入するように構成されている。

【0079】

一実施形態によると、バイオメディカルデバイス１６は、主カニューレ１７内に配置された白血球除去フィルタ１４を備える。

【0080】

白血球除去フィルタ１４は、保存バッグ７に向かって導かれる濃縮赤血球懸濁液を濾過するように適合されている。

【0081】

ある有利な実施形態によると、白血球除去フィルタ１４は、第１バッグ２から保存バッグ７への赤血球濃縮物６の流れを基準にして、主カニューレ１７と副カニューレ１９との交差部の上流に設けられている。

【0082】

代替的な一実施形態によると、白血球除去フィルタ１４は、第１バッグ２から保存バッグ７への赤血球濃縮物６の流れを基準にして、副カニューレ１９と支流カニューレ１８との交差部の下流に設けられている（図３）。この実施形態によると、白血球除去フィルタ１４のデッドスペースに残存する赤血球を回収するために、濾過方法（濾過工程）の最後に白血球除去フィルタ１４の灌流を行うことができる。

【0083】

さらなる代替的な一実施形態によると、主カニューレ１７から第１の副カニューレ１９’および第２の副カニューレ１９’’が分岐し、白血球除去フィルタ１４は、主カニューレ１７と第１の副カニューレ１９’との交差部と、主カニューレ１７および第２の副カニューレ１９’’の交差部との間にある（図４）。この実施形態によると、濾過する前に、白血球除去フィルタ１４の上方の位置に設けられた第１の副カニューレ１９’を用いてフィルタの洗浄処理を実施し、白血球除去フィルタ１４と当該デバイスに含まれない収集バッグとの無菌接続後に白血球除去フィルタ１４の下方の位置に設けられた第２の副カニューレ１９’’から洗浄液を回収することが可能である。

【0084】

図２、図３及び図４で説明した実施形態によると、オペレータは、例えば溶出によって白血球除去フィルタ１４に捕捉された白血球画分を回収するなど、異なるニーズ、オプション及び動作仕様に対応した、異なる濾過方法を行うことができる。

【0085】

有利には、これらの異なる添加溶液の接続方式によって、本発明の上記システムは、非常に汎用性が高く、より多くの赤血球を回収するために、白血球除去フィルタ１４を下からも上からも濡らす（wetted）ことができ、所望により最終的に洗い流す(rinsing)ことができる。

【0086】

一実施形態によると、第１バッグ２、第２バッグ１１および第３バッグ１３は、持続時間１５分間の２０００ｒｐｍの遠心分離に耐えられる柔軟な材料で作られている。

【0087】

一実施形態によると、第１バッグ２は、１５０ｍｌの内容積を有し、第２バッグ１１は、６０ｍｌの内容積を有し、第３バッグ１３は、６０ｍｌの内容積を有し、溶液バッグ１０は、５０ｍｌの内容積を有し、保存バッグ７は、１５０ｍｌの内容積を有する。

【0088】

本発明のさらなる一態様によると、血液成分を調製するシステムは、上記に記載したバイオメディカルデバイス１６と、少なくとも１つの遠心分離機と、少なくとも１つの手動血漿抽出器と、を備える。

【0089】

一実施形態によると、遠心分離は、各遠心分離の前に、その内部にバッグ２、１１および１３のシステムが挿入される、保護用の管状フレキシブルケーシングおよび固形プラスチック製の複数の円筒形アダプタを使用して行われる。

【0090】

当然のことながら、当業者は、以下に述べる請求の範囲から逸脱することなく、本発明に修正または適合を加えることができるであろう。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【国際調査報告】