▶ スージョウ アーイェ ファーマシューティカル カンパニー リミテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-01-25
(54)【発明の名称】スルホニル尿素環置換単環式β－ラクタム系抗生物質
(51)【国際特許分類】
C07D 417/14 20060101AFI20230118BHJP
A61K 31/433 20060101ALI20230118BHJP
A61K 31/541 20060101ALI20230118BHJP
A61P 31/04 20060101ALI20230118BHJP
【ＦＩ】
C07D417/14 CSP
A61K31/433
A61K31/541
A61P31/04
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022529868
(86)(22)【出願日】2020-11-20
(85)【翻訳文提出日】2022-06-03
(86)【国際出願番号】 CN2020130568
(87)【国際公開番号】W WO2021098840
(87)【国際公開日】2021-05-27
(31)【優先権主張番号】201911159356.9
(32)【優先日】2019-11-22
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522201462
【氏名又は名称】スージョウ アーイェ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100166729
【弁理士】
【氏名又は名称】武田 幸子
(72)【発明者】
【氏名】ルオ ウェイ
(72)【発明者】
【氏名】ファン ジーガン
(72)【発明者】
【氏名】ディン チャールズ ズィー．
(72)【発明者】
【氏名】リー ジアン
(72)【発明者】
【氏名】チェン シューフイ
【テーマコード（参考）】
4C063
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C063AA03
4C063BB03
4C063CC67
4C063DD02
4C063EE01
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086BC85
4C086BC87
4C086GA07
4C086GA10
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZB35
(57)【要約】
スルホニル尿素環置換単環式β－ラクタム系抗生物質であって、具体的には、式（Ｉ）で示される化合物、その薬学的に許容される塩又はその立体異性体、及び細菌感染症に関連する疾患を治療する薬物の製造における使用に関する。
【化１】
【選択図】なし
【化１】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）で示される化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩であって、【化1】
Ｌ１は、－ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２－、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２－、及び－ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２－から選択され、
Ｌ２は、単結合及び－ＣＨ２－から選択され、
Ｒ１は、Ｈ、ＣＮ、Ｃ１～３アルキルから選択され、前記Ｃ１～３アルキルは任意選択的に１、２及び３個のＲａによって置換され、
Ｒ２及びＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６アルコキシ（ａｌｋｏｘｙ）、－ＣＨ２－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、及び－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキルから選択され、前記Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６アルコキシ、－ＣＨ２－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、及び－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキルは、任意選択的に１、２及び３個のＲｂによって置換され、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＨＦ２、及びＣＨ２Ｆから選択され、
Ｒａ及びＲｂは、それぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＨ２Ｆ、及びＮＨ２から選択される、前記式（Ｉ）で示される化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項2】
Ｒ１は、Ｈ、ＣＮ、及びＣＨ３から選択される、請求項１に記載の化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項3】
Ｒ２及びＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、Ｃ１～３アルコキシ、【化2】
【化3】
【化4】
【化5】
【化6】
【化7】
【請求項4】
Ｒ２及びＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＣＨ３、【化8】
【化9】
【化10】
【化11】
【請求項5】
構造単位【化12】
【化13】
【化14】
【化15】
【請求項6】
構造単位【化16】
【化17】
【請求項7】
化合物は、【化18】
【化19】
ここで、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は請求項１～６のいずれか１項と同義である、請求項１～６のいずれか１項に記載の化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項8】
化合物は、【化20】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は請求項７と同義である、請求項７に記載の化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項9】
以下から選択される、下記式で示される化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩。【化21】
【請求項10】
以下から選択される、請求項９に記載の化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩。【化22】
【請求項11】
細菌感染症に関連する疾患を治療する薬物の製造における請求項１～１０のいずれか１項に記載の化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩の使用。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本願は、出願日が２０１９年１１月２２日のＣＮ２０１９１１１５９３５６．９の優先権を主張している。
【0002】
本発明は、新規なスルホニル尿素環置換単環式β－ラクタム系抗生物質に関し、具体的には、式（Ｉ）で示される化合物、その薬学的に許容される塩又はその立体異性体、及び細菌感染症に関連する疾患の治療における使用を開示する。
【背景技術】
【0003】
１９２８年にイギリスの科学者フレミングが最初にペニシリンを発見して以来、β－ラクタム系抗生物質は数え切れない命を救って、人々の日常生活の中でもますます重要な役割を果たしている。薬剤耐性遺伝子及び超広スペクトルβ－ラクタマーゼ（ＥＳＢＬｓ）、セリン型カルバペネマーゼ（ＫＰＣｓ）などの抗生物質加水分解酵素が相次いで出現するに伴い、既存の抗生物質の機能はますます不十分になっている。特にメタロ－β－ラクタマーゼ（ＭＢＬｓ）が媒介する深刻な多剤耐性により、ペニシリン類、セファロスポリン類、カルバペネム類などの従来の抗生物質はこれらの耐性菌による感染に対応できなくなっており、人類の健康と安全にもますます深刻な脇威をもたらしている。アズトレオナムに代表される単環式βヒトラクタム環系抗生物質は、メタロ－β－ラクタマーゼ（ＭＢＬｓ）に対して安定的であり、極めて優位性を有する化学薬剤シリーズである。
【0004】
市販薬であるアズトレオナムは、浸透性が悪く、排出作用が強く、静菌スペクトルが狭いという欠点があり、これらの臨床的な問題を克服するために、シデロホアを通じて透過性を増強する策略が導入され、例えばＢａｓｉｌｅａ（ＷＯ２００７０６５２８８）、Ｎａｅｊａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（ＷＯ２００２０２２６１３）は対応するシリーズ分子を報告しており、最近、Ｎｏｖａｒｔｉｓ（ＷＯ２０１５１４８３７９）により、アズトレオナム分子上の置換基を修飾することにより薬剤耐性を克服する研究が報告されており、化合物の一般式は以下のとおりであり、ここで、基Ｈｅｔはヘテロ芳香環又は１～２個のヘテロ原子で置換されたヘテロ環である。
【化1】
【0005】
薬剤耐性が深刻化することに鑑み、新規な単環式β－ラクタム系抗生物質を開発し、現在の薬剤耐性の課題を解決することは急務となっており、本発明のスルホニル尿素環置換単環式β－ラクタム系分子は将来性が期待できる。
【発明の概要】
【0006】
本発明は、式（Ｉ）で示される化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩を提供し、
ここで、
Ｌ１は、－ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２－、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２－、及び－ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２－から選択され、
Ｌ２は、単結合及び－ＣＨ２－から選択され、
Ｒ１は、Ｈ、ＣＮ、Ｃ１～３アルキルから選択され、前記Ｃ１～３アルキルは、任意選択的に１、２及び３個のＲａによって置換され、
Ｒ２及びＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６アルコキシ（ａｌｋｏｘｙ）、－ＣＨ２－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、及び－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキルから選択され、前記Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６アルコキシ、－ＣＨ２－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、及び－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキルは、任意選択的に１、２及び３個のＲｂによって置換され、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＨＦ２、及びＣＨ２Ｆから選択され、
Ｒａ及びＲｂは、それぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＨ２Ｆ、及びＮＨ２から選択される。
【化2】
Ｌ１は、－ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２－、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２－、及び－ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２－から選択され、
Ｌ２は、単結合及び－ＣＨ２－から選択され、
Ｒ１は、Ｈ、ＣＮ、Ｃ１～３アルキルから選択され、前記Ｃ１～３アルキルは、任意選択的に１、２及び３個のＲａによって置換され、
Ｒ２及びＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６アルコキシ（ａｌｋｏｘｙ）、－ＣＨ２－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、及び－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキルから選択され、前記Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６アルコキシ、－ＣＨ２－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ１～３アルキル、－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、及び－ＣＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ１～３アルキルは、任意選択的に１、２及び３個のＲｂによって置換され、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＨＦ２、及びＣＨ２Ｆから選択され、
Ｒａ及びＲｂは、それぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯＨ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＨ２Ｆ、及びＮＨ２から選択される。
【0007】
本発明のいくつかの態様では、上記のＲ１は、Ｈ、ＣＮ、及びＣＨ３から選択され、残りの変数は本発明で定義したとおりである。
【0008】
本発明のいくつかの態様では、上記のＲ２及びＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１～３アルキル、Ｃ１～３アルコキシ、
、
及び
から選択され、前記Ｃ１～３アルキル、Ｃ１～３アルコキシ、
、
及び
は、任意選択的に１、２及び３個のＲｂによって置換され、残りの変数は本発明で定義したとおりである。
【化3】
【化4】
【化5】
【化6】
【化7】
【化8】
【0009】
本発明のいくつかの態様では、上記のＲ２及びＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＣＨ３、
、
、
、及び
から選択され、残りの変数は本発明で定義したとおりである。
【化9】
【化10】
【化11】
【化12】
【0010】
本発明のいくつかの態様では、上記の構造単位
は、
及び
から選択され、残りの変数は本発明で定義したとおりである。
【化13】
【化14】
【化15】
【化16】
【0011】
本発明のいくつかの態様では、上記の構造単位
は、
から選択され、残りの変数は本発明で定義したとおりである。
【化17】
【化18】
【0012】
本発明のいくつかの態様では、上記の化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩において、化合物は、
及び
から選択され、
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は本発明で定義したとおりである。
【化19】
【化20】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は本発明で定義したとおりである。
【0013】
本発明のいくつかの態様では、上記の化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩において、化合物は、
から選択され、
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は本発明で定義したとおりである。
【化21】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は本発明で定義したとおりである。
【0014】
本発明はまた、以下からから選択される以下の式で示される化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【化22】
【0015】
本発明のいくつかの態様では、上記の化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩は、以下から選択される。
【化23】
【0016】
本発明は、また、細菌感染症に関連する疾患を治療する薬物の製造における上記の化合物、その異性体又はその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
本発明の別のいくつかの態様は上記の各変数を任意に組み合わせたものである。
本発明の別のいくつかの態様は上記の各変数を任意に組み合わせたものである。
【0017】
技術的効果
本発明の化合物は、特にβ－ラクタマーゼを産生する各種の細菌に対して、高い抗菌活性を有し、水溶性に優れ、細菌感染症に関連する疾患を治療する薬物の製造に使用することができる。
本発明の化合物は、特にβ－ラクタマーゼを産生する各種の細菌に対して、高い抗菌活性を有し、水溶性に優れ、細菌感染症に関連する疾患を治療する薬物の製造に使用することができる。
【0018】
定義及び説明
特に断らない限り、本明細書で使用される以下の用語及び語句は、以下の意味を有することを意図している。特定の用語や語句は、特に定義されていない限り、不確実又は不明瞭であるとみなされるべきではなく、一般的な意味で理解されるべきである。本明細書では、商品名が記載された場合、対応する商品又はその活性成分を指すことを意図している。
特に断らない限り、本明細書で使用される以下の用語及び語句は、以下の意味を有することを意図している。特定の用語や語句は、特に定義されていない限り、不確実又は不明瞭であるとみなされるべきではなく、一般的な意味で理解されるべきである。本明細書では、商品名が記載された場合、対応する商品又はその活性成分を指すことを意図している。
【0019】
ここで使われている「薬学的に許容される」という用語は、過剰な毒性、刺激性、アナフィラキシー、又はその他の問題や合併症なしに、信頼性のある医学的判断の範囲内でヒト及び動物の組織と接触して使用するのに適しており、合理的な利益／リスク比に見合った化合物、材料、組成物、及び／又は剤形に対するものである。
【0020】
「薬学的に許容される塩」という用語は、本発明で発見された特定の置換基を有する化合物と、比較的毒性のない酸又は塩基とから製造された本発明の化合物の塩を意味する。本発明の化合物が比較的酸性の官能基を含有する場合、塩基付加塩は、純粋な溶液中又は適切な不活性溶媒中で、そのような化合物に十分な量の塩基を接触させることによって得ることができる。薬学的に許容される塩基付加塩としては、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミン、若しくはマグネシウム塩又は類似の塩が含まれる。本発明の化合物が比較的塩基性の官能基を含有する場合、酸付加塩は、純粋な溶液中又は適切な不活性溶媒中で、そのような化合物に十分な量の酸を接触させることによって得ることができる。薬学的に許容される酸付加塩の例としては、例えば、塩酸（ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｃ ａｃｉｄ）、臭化水素酸（ｈｙｄｒｏｂｒｏｍｉｃ ａｃｉｄ）、硝酸（ｎｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ）、炭酸（ｃａｒｂｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、重炭酸（ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｃａｒｂｏｎａｔｅ）イオン、リン酸（ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ）、リン酸一水素（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）イオン、リン酸二水素（ｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、硫酸（ｓｕｌｆｕｒｉｃ ａｃｉｄ）、硫酸水素（ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｓｕｌｆａｔｅ）イオン、ヨウ化水素酸（ｈｙｄｒｏｉｏｄｉｃ ａｃｉｄ）、亜リン酸（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ ａｃｉｄ）などの無機酸の塩；酢酸（ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ）、プロピオン酸（ｐｒｏｐｉｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、イソ酪酸（ｉｓｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ）、マレイン酸（ｍａｌｅｉｃ ａｃｉｄ）、マロン酸（ｍａｌｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、安息香酸（ｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ）、コハク酸（ｓｕｃｃｉｎｉｃ ａｃｉｄ）、スベリン酸（ｓｕｂｅｒｉｃ ａｃｉｄ）、フマル酸（ｆｕｍａｒｉｃ ａｃｉｄ）、乳酸（ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ）、マンデル酸（ｍａｎｄｅｌｉｃ ａｃｉｄ）、フタル酸（ｐｈｔｈａｌｉｃ ａｃｉｄ）、ベンゼンスルホン酸（ｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、ｐ－トルエンスルホン酸（ｐ －Ｔｏｌｕｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、クエン酸（ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ）、酒石酸（ｔａｒｔａｒｉｃ ａｃｉｄ）、及びメタンスルホン酸（ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ）などの類似の酸の有機酸の塩；アミノ酸（ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ）（例えばアルギニン（ａｒｇｉｎｉｎｅ））の塩；グルクロン酸（ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ）などの有機酸の塩が含まれる。本発明の特定の化合物のいくつかは、塩基性及び酸性の官能基を含有し、それによって、任意の塩基又は酸付加塩に変換することができる。
【0021】
本発明の薬学的に許容される塩は、従来の化学的方法により、酸基又は塩基を含有する親化合物から合成することができる。一般に、このような塩は、水、有機溶媒、又は両者の混合物中で、これらの化合物を遊離酸又は塩基の形で化学量論的に適当な塩基又は酸と反応させることによって製造される。
【0022】
本発明の化合物は、特定の幾何異性体又は立体異性体の形態を有していてもよい。本発明は、シス異性体及びトランス異性体、（－）－及び（＋）－エナンチオマー、（Ｒ）－及び（Ｓ）－エナンチオマー、ジアステレオマー、（Ｄ）－異性体、（Ｌ）－異性体、並びにそれらのラセミ混合物、並びに、エナンチオマー又はジアステレオマーリッチな混合物のような他の混合物を含む全てのこのような化合物を想定しており、これらのすべての混合物は本発明の範囲内に属する。アルキルなどの置換基には、さらに不斉炭素原子が存在していてもよい。これらすべての異性体及びそれらの混合物は、本発明の範囲内に含まれる。
【0023】
特に断らない限り、「エナンチオマー」又は「旋光異性体」という用語は、互いに鏡像関係にある立体異性体を意味する。
【0024】
特に断らない限り、「シス／トランス異性体」又は「幾何異性体」という用語は、二重結合又は環を形成する炭素原子の単結合が自由に回転できないことから生じる。
【0025】
特に断らない限り、「ジアステレオマー」という用語とは、分子が２つ以上のキラル中心を有し、分子間が非鏡像の関係にある立体異性体を意味する。
【0026】
特に断らない限り、「（Ｄ）」又は「（＋）」は右旋性、「（Ｌ）」又は「（－）」は左旋性、「（ＤＬ）」又は「（±）」はラセミを意味する。
【0027】
特に断らない限り、くさび形実線キー（
）及びくさび形破線キー（
）は、立体中心の絶対配置を表し、直線形実線キー（
）及び直線形破線キー（
）は、立体中心の相対配置を表し、波線（
）はくさび形実線キー（
）又はくさび形破線キー（
）を表し、又は波線（
）は直線形実線キー（
）又は直線形破線キー（
）を表す。
【化24】
【化25】
【化26】
【化27】
【化28】
【化29】
【化30】
【化31】
【化32】
【化33】
【0028】
特に断らない限り、化合物に二重結合構造、例えば炭素炭素二重結合、炭素窒素二重結合及び窒素窒素二重結合が存在し、且つ二重結合上の各原子に２つの異なる置換基が連結されている場合（窒素原子を含む二重結合では、窒素原子上の一対の孤立電子がこれに連結された１つの置換基とみなされる）、該化合物の二重結合上の原子とその置換基とが波線
で連結されれば、該化合物の（Ｚ）型異性体、（Ｅ）型異性体又は２種の異性体の混合物を表す。例えば下記式（Ａ）は、該化合物が式（Ａ－１）又は式（Ａ－２）の単一異性体の形態で存在するか、又は式（Ａ－１）と式（Ａ－２）の２種の異性体の混合物の形態で存在することを示し、下記式（Ｂ）は、該化合物が式（Ｂ－１）又は式（Ｂ－２）の単一異性体の形態で存在するか、又は式（Ｂ－１）と式（Ｂ－２）の２種の異性体の混合物の形態で存在することを示す。下記式（Ｃ）は、該化合物が式（Ｃ－１）又は式（Ｃ－２）の単一異性体の形態で存在するか、又は式（Ｃ－１）と式（Ｃ－２）の２種の異性体の混合物の形態で存在することを示す。
【化34】
【化35】
【0029】
本発明の化合物は、特定のものを有してもよい。特に断らない限り、「互変異性体」又は「互変異性体の形態」という用語は、室温において、異なる官能基異性体が動的平衡にあり、かつ相互に迅速に転化することができることを意味する。互変異性体が可能であれば（溶液中）、互変異性体の化学平衡が達成される。例えば、プロトン互変異性体（ｐｒｏｔｏｎ ｔａｕｔｏｍｅｒ）（プロトトロピー互変異性体（ｐｒｏｔｏｔｒｏ ｐｉｃｔａｕｔｏｍｅｒ）とも呼ばれる）は、ケト－エノール異性化やイミン－エナミン異性化などのプロトン移動による相互変換を含む。価数結合異性体（ｖａｌｅｎｃｅ ｔａｕｔｏｍｅｒ）には、結合している電子の再結合による相互変換が含まれる。このうち、ケト－エノールの互変異性化の具体例は、ペンタン－２，４－ジオンと４－ヒドロキシペンタ－３－エン－２－オンの２つの互変異性体間の互変である。
【0030】
特に断らない限り、「異性体リッチ」、「異性体が濃縮される」、「エナンチオマーリッチ」、「エナンチオマーが濃縮される」又はという用語は、１種の異性体又はエナンチオマーの含有量が１００％未満、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、９９．５％以上、９９．６％以上、９９．７％以上、９９．８％以上、又は９９．９％以上であることを意味する。
【0031】
特に断らない限り、「異性体過剰」又は「エナンチオマー過剰」という用語は、２つの異性体又は２つのエナンチオマーの相対百分率の差を意味する。例えば、一方の異性体又はエナンチオマーの含有量を９０％、他方の異性体又はエナンチオマーの含有量を１０％とすると、異性体又はエナンチオマーの過剰量（ｅｅ値）は８０％となる。
【0032】
光学活性な（Ｒ）－異性体及び（Ｓ）－異性体、ならびにＤ及びＬ異性体は、キラル合成又はキラル試薬又は他の従来技術によって製造することができる。本発明の化合物の１種のエナンチオマーを得ることが望まれる場合、不斉合成により、又はキラル助剤を有する誘導作用により製造することができ、その際、得られるジアステレオマー混合物を分離し、補助基を開裂させて純粋な所望のエナンチオマーを提供する。あるいは、分子内に塩基性官能基（例えば、アミノ）又は酸性官能基（例えば、カルボキシル）を含有する場合、適切な光学活性酸又は塩基とジアステレオマーの塩を形成し、次いで、当分野で公知の従来の方法によりジアステレオマー分割を行い、次いで回収して純粋なエナンチオマーを得る。さらに、エナンチオマーとジアステレオマーの分離は、キラル固定相を使用するクロマトグラフィーを用いて、必要に応じて化学的誘導法（例えば、アミンからカルバミン酸塩を生成する）と組み合わせて行うことが一般的である。本発明の化合物は、該化合物を構成する１つ以上の原子上に非自然比の原子同位体を含んでいてもよい。例えば、トリチウム（３Ｈ）、ヨウ素－１２５（１２５Ｉ）又はＣ－１４（１４Ｃ）などの放射性同位体で化合物を標識してもよい。また例えば、重水素を水素に置換して重水素化薬物を形成してもよく、重水素と炭素の結合は普通の水素と炭素の結合よりも強く、重水素化していない薬物と比べ、重水素化薬物は毒副作用を低下させ、薬物の安定性を増加させ、治療効果を増強し、薬物の生物半減期を延長するなどの優位性がある。本発明の化合物のすべての同位体組成の変換は、放射能の有無にかかわらず、本発明の範囲内に含まれる。「任意選択的」又は「任意選択的に」とは、後述するイベント又は状況が発生する可能性があるが、必ずしも発生するわけではないことを意味し、この記載は前記イベント又は状況が発生した場合及び前記イベント又は状況が発生しない場合を含む。
【0033】
「置換される」という用語は、特定の原子上の任意の１つ以上の水素原子が置換基によって置換されることを意味し、特定の原子の価数が正常であり、置換された化合物が安定である限り、重水素及び水素の変異体を含み得る。置換基が酸素（即ち＝Ｏ）である場合、２つの水素原子が置換されていることを意味する。芳香族基では酸素置換は起こらない。「置換されてもよい」という用語は置換されても、置換されなくてもよいことを意味し、特に規定がない限り、置換基の種類及び数は、化学的に達成可能な限り任意である。
【0034】
いずれかの変数（例えばＲ）が化合物の組成又は構造中に複数回出現する場合、その定義はそれぞれ独立である。したがって、例えば、１つの基が０～２つのＲで置換されている場合、前記基は任意選択的に多くとも２つのＲで置換され、それぞれの場合のＲには独立した選択肢がある。さらに、置換基及び／又はその変異体の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物を生成する場合にのみ許容される。
【0035】
連結基の数が０である場合、例えば－（ＣＲＲ）０－は、その連結基が単結合であることを示す。
【0036】
１つの変数が単結合から選択された場合、それにより連結される２つの基が直接連結されることを示し、例えば、Ａ－Ｌ－ＺにおいてＬが単結合を表す場合、その構造が実質的にＡ－Ｚであることを示す。
【0037】
置換基が空である場合、その置換基が存在しないことを示し、例えば、Ａ－ＸにおいてＸが空である場合、その構造が実際にはＡであることを示す。列挙された置換基の中に、どの原子を介して被置換基に連結しているかが示されていない場合、そのような置換基は、そのいずれかの原子を介して結合していてもよく、例えば、ピリジル（ｐｙｒｉｄｙｌ）は置換基としてピリジン（ｐｙｒｉｄｉｎｅ）環上の任意の炭素原子を介して被置換基に連結されてもよい。
【0038】
列挙された連接基が連接方向を特定していない場合、その連接方向は任意であり、例えば、
において、連接基Ｌが－Ｍ－Ｗ－であり、この場合、－Ｍ－Ｗ－は、左から右への読み取り順と同じ方向に環Ａと環Ｂを連接して
を構成してもよいし、左から右への読み取り順と逆方向に環Ａと環Ｂを連接して
を構成してもよい。前記連結基、置換基及び／又はその変異体の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物を生成する場合にのみ許容される。
【化36】
【化37】
【化38】
【0039】
特に規定がない限り、ある基が連結可能な部位を１つ以上有する場合、その基の任意の１つ以上の部位と他の基とが化学結合により連結されていてもよい。前記部位と他の基とが連結している化学結合は、直線形実線キー（
）、直線形破線キー（
）、又は波線（
）で表すことができる。例えば－ＯＣＨ３の直線形実線キーは、その基中の酸素原子を介して他の基と連結していることを表し、
での直線形破線キーは、その基の窒素原子の両端を介して他の基と連結していることを表し、
の波線は、このフェニルの１位と２位の炭素原子を介して他の基と連結していることを表す。
【化39】
【化40】
【化41】
【化42】
【化43】
【0040】
特に規定がない限り、「Ｃ１～６アルキル」という用語は、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を表す。前記Ｃ１～６アルキルは、Ｃ１～５、Ｃ１～４、Ｃ１～３、Ｃ１～２、Ｃ２～６、Ｃ２～４、Ｃ６、及びＣ５アルキルなどを含み、これは、１価（例えばメチル）、２価（例えばメチレン）又は多価（例えばメチン）であってもよい。Ｃ１～６アルキルの例としては、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（ｎ－プロピル及びイソプロピルを含む）、ブチル（ｎ－ブチル、イソブチル、ｓ－ブチル及びｔ－ブチルを含む）、ペンチル（ｎ－ペンチル、イソペンチル及びネオペンチルを含む）、ヘキシルなどが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【0041】
特に規定がない限り、「Ｃ１～３アルキル」という用語は、炭素数１～３の直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を表す。前記Ｃ１～３アルキルはＣ１～２、及びＣ２～３アルキルなどを含み、これは、１価（例えばメチル）、２価（例えばメチレン）又は多価（例えばメチン）であってもよい。Ｃ１～３アルキルの例としては、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（ｎ－プロピル及びイソプロピルを含む）などが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【0042】
特に規定がない限り、「Ｃ１～６アルコキシ」という用語は、１つの酸素原子を介して分子の残りの部分に連結されているような炭素数１～６のアルキルを表す。前記Ｃ１～６アルコキシは、Ｃ１～４、Ｃ１～３、Ｃ１～２、Ｃ２～６、Ｃ２～４、Ｃ６、Ｃ５、Ｃ４、及びＣ３アルコキシなどを含む。Ｃ１～６アルコキシの例としては、メトキシ（ｍｅｔｈｏｘｙ）、エトキシ（ｅｔｈｏｘｙ）、プロポキシ（ｂｕｔｏｘｙ）（ｎ－プロポキシ（ｐｒｏｐｏｘｙ）及びイソプロポキシを含む）、ブトキシ（ｂｕｔｏｘｙ）（ｎ－ブトキシ、イソブトキシ、ｓ－ブトキシ、及びｔ－ブトキシを含む）、ペンチルオキシ（ｐｅｎｔｙｌｏｘｙ）（ｎ－ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ及びネオペンチルオキシを含む）、ヘキシルオキシなどが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【0043】
特に規定がない限り、「Ｃ１～３アルコキシ」という用語は、１つの酸素原子を介して分子の残りの部分に連結されているような炭素数１～３のアルキルを表す。前記Ｃ１～３アルコキシはＣ１～２、Ｃ２～３、Ｃ３、及びＣ２アルコキシなどを含む。Ｃ１～３アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ（ｎ－プロポキシ及びイソプロポキシを含む）などが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【0044】
本発明の化合物は、当業者によく知られている従来の方法により構造を確認することができ、また、本発明が化合物の絶対配置に係わっている場合、その絶対配置を当業者の従来の技術的手段により確認することができる。例えば単結晶Ｘ線回折法（ＳＸＲＤ）では、成長させた単結晶をＢｒｕｋｅｒ Ｄ８ ｖｅｎｔｕｒｅ回折計で回折強度データを収集し、光源はＣｕＫα放射、走査方式：φ／ω走査でデータを収集した後、さらに直接法（Ｓｈｅｌｘｓ９７）を用いて結晶構造を解析すれば、絶対配置を確証することができる。
【0045】
本発明に使用される溶媒は、市販品として入手可能である。
【0046】
本発明では、下記の略語が使用されている。
ａｑ：水
ＨＯＢＴ：１－ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＢＴＵ：Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチル－Ｏ－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）ウロニウムヘキサフルオロホスファート
ＨＡＴＵ：Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩
ＥＤＣＩ：Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩
ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド
ｅｑ：当量、等量
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＰＥ：石油エーテル
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
ＭｅＯＨ：メタノール
ＣＢｚ：アミン保護基であるベンジルオキシカルボニル
ＢＯＣ：アミン保護基であるｔ－ブトキシカルボニル
ＨＯＡｃ：酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
Ｂｏｃ２Ｏ：二炭酸ジ－ｔ－ブチル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン
ＴＢＡＦ：テトラブチルアンモニウムフルオリド
ｉＰｒＯＨ：２－プロパノール。
ａｑ：水
ＨＯＢＴ：１－ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＢＴＵ：Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチル－Ｏ－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）ウロニウムヘキサフルオロホスファート
ＨＡＴＵ：Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩
ＥＤＣＩ：Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩
ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド
ｅｑ：当量、等量
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＰＥ：石油エーテル
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
ＭｅＯＨ：メタノール
ＣＢｚ：アミン保護基であるベンジルオキシカルボニル
ＢＯＣ：アミン保護基であるｔ－ブトキシカルボニル
ＨＯＡｃ：酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
Ｂｏｃ２Ｏ：二炭酸ジ－ｔ－ブチル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン
ＴＢＡＦ：テトラブチルアンモニウムフルオリド
ｉＰｒＯＨ：２－プロパノール。
【0047】
化合物は当該分野の通常の命名原則に基づいて、又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）ソフトウェアを使用して命名し、市販の化合物はサプライヤーの目録に記載の名称を採用する。
【発明を実施するための形態】
【0048】
以下、実施例にて本発明を詳細に説明するが、本発明を何ら不適に限定するものではない。本発明の化合物は、当業者に公知の複数の合成方法によって製造することができ、以下に記載の具体的な実施形態、他の化学合成方法と組み合わせた実施形態、並びに当業者に公知の同等の置換形態を含み、好ましい実施形態は本発明の実施例を含むが、これらに限定されるものではない。当業者にとっては、本発明の主旨や範囲を逸脱することなく本発明の具体的な実施形態について各種の変化や改良を加えることが明らかなことである。
【0049】
一般的な合成経路
反応手順１
ＰＧ１は一般的なアミン保護基、例えばトリチル、ｔ－ブトキシカルボニルなどであり、ＰＧ２は一般的なカルボキシル保護基、例えばジベンジル、ｔ－ブチルなどである。他の変数は全て本発明で定義したとおりであり、式（Ｉ）の化合物は、反応中間体ＳＭ－１を用いて３つのステップを経て製造してもよく、具体的には、ステップ１は、通常、０～２０℃のような低い温度で、縮合剤例えばＨＯＢＴ、ＥＤＣＩ、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵ、ＤＣＣ及び適切な塩基の作用で行われる酸－アミン縮合反応であり、ステップ２は、通常、溶媒ＤＭＦ中で、基質ＳＭ－２とスルホン化試薬例えばＤＭＦ・ＳＯ３とをピリジン・ＳＯ３の作用により低温で反応させるようなスルホン化反応であり、好ましい温度範囲は０～１０℃であり、ステップ３は、通常、酸の作用で行われる脱保護反応であり、よく使用されている酸には、トリフルオロ酢酸、ギ酸などがあり、溶媒はジクロロメタンであり、アニソールは保護基の除去に有利であり、好ましい反応温度範囲は－１０～１０℃とする。
反応手順１
【化44】
【0050】
中間体の製造
中間体の合成経路１
中間体Ａ－６の合成は文献（Ｏｒｇ．Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．２０１８，２２，２１２）を参照すればよく、ラセミ体Ａ－５を化学分割して単一キラル化合物Ａ－６を得た。
中間体の合成経路１
【化45】
【0051】
中間体の合成経路２
ステップ１：化合物Ｂ－２の製造
Ａ－６（３．８ｇ、１０．４０ｍｍｏｌ、１当量）及びトリエチルアミン（２．１０ｇ、２０．８０ｍｍｏｌ、２．８９ｍＬ、２当量）をジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に溶解し、ベンジルクロロスルホニルカルバメート（２．６０ｇ、１０．４０ｍｍｏｌ、１当量）のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液を０℃で滴下し、混合物を１０～２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を水（４０ｍＬ）で洗浄して５分間撹拌した。ジクロロメタン（３０ｍＬ）で抽出した。併せた有機相を食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、有機相を真空濃縮させ、化合物Ｂ－２（６．０ｇ）を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５７９．２（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物Ｂ－３の製造
化合物Ｂ－２（６ｇ、１０．３７ｍｍｏｌ、１当量）をＭｅＣＮ（６０ｍＬ）に溶解し、Ｎ２保護下、１０～２０℃で溶液に１，２－ジブロモエタン（３．９０ｇ、２０．７４ｍｍｏｌ、１．５６ｍＬ、２当量）及びＫ３ＰＯ４（４．４０ｇ、２０．７４ｍｍｏｌ、２当量）を一括して加えた。混合物を６０℃で１４時間撹拌し、１，２－ジブロモメタン（１．９５ｇ、１０．３７ｍｍｏｌ、７８２．３２μＬ、１当量）を補充し、混合物を９０℃で８時間撹拌した。混合物をろ過し、減圧濃縮させ、残留物を得た。シリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝４：１～２：１、次に、ジクロロメタン／ＰＥ＝５０：１～２０：１）により残留物を精製した。化合物Ｂ－３を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４７７（Ｍ＋２３）；３９９（Ｍ－５６＋１）。
ステップ３：化合物Ｂ－４の製造
化合物Ｂ－３（３．４ｇ、５．６２ｍｍｏｌ、１当量）をＨ２Ｏ（４５ｍＬ）及びＭｅＣＮ（９０ｍＬ）に溶解し、２５℃、窒素ガス保護下、リン酸水素二カリウム（３．９２ｇ、２２．４９ｍｍｏｌ、４当量）及び過硫酸カリウム（６．８４ｇ、２５．３０ｍｍｏｌ、４．５当量）を一括して加えた。混合物を１００℃で０．５時間撹拌した。反応混合物に重炭酸ナトリウム水溶液５０ｍＬを加えて、酢酸エチル（１００ｍＬ溶液）で抽出した。併せた有機相を食塩水洗浄、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル（Ｖ／Ｖ、以下同様）＝４：１～１：３）により残留物を精製した、化合物Ｂ－４を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９９．１（Ｍ－５６＋１）。
ステップ４：化合物Ｂ－５の製造
化合物Ｂ－４（１．６ｇ、３．５２ｍｍｏｌ、１当量）及びＰｄ／Ｃ（３２０ｍｇ、１０％純度）をＥｔＯＨ（３０ｍＬ）に溶解し、２５℃、Ｈ２（１５ｐｓｉ）下、２時間撹拌した。ろ過し、ろ液を真空濃縮させた。Ｂ－５を得て、次の反応に直接用いた。
ステップ５：化合物Ｂ－６の製造
化合物Ｂ－５をジクロロメタン（５ｍＬ）溶液に溶解し、窒素ガス保護下、０℃でＴＦＡ（８．４７ｇ、７４．２８ｍｍｏｌ、５．５０ｍＬ、２１．６３当量）を一括して加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮させ、化合物Ｂ－６のトリフルオロ酢酸塩を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４２．９（Ｍ＋２３）。
【化46】
Ａ－６（３．８ｇ、１０．４０ｍｍｏｌ、１当量）及びトリエチルアミン（２．１０ｇ、２０．８０ｍｍｏｌ、２．８９ｍＬ、２当量）をジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に溶解し、ベンジルクロロスルホニルカルバメート（２．６０ｇ、１０．４０ｍｍｏｌ、１当量）のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液を０℃で滴下し、混合物を１０～２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を水（４０ｍＬ）で洗浄して５分間撹拌した。ジクロロメタン（３０ｍＬ）で抽出した。併せた有機相を食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、有機相を真空濃縮させ、化合物Ｂ－２（６．０ｇ）を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５７９．２（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物Ｂ－３の製造
化合物Ｂ－２（６ｇ、１０．３７ｍｍｏｌ、１当量）をＭｅＣＮ（６０ｍＬ）に溶解し、Ｎ２保護下、１０～２０℃で溶液に１，２－ジブロモエタン（３．９０ｇ、２０．７４ｍｍｏｌ、１．５６ｍＬ、２当量）及びＫ３ＰＯ４（４．４０ｇ、２０．７４ｍｍｏｌ、２当量）を一括して加えた。混合物を６０℃で１４時間撹拌し、１，２－ジブロモメタン（１．９５ｇ、１０．３７ｍｍｏｌ、７８２．３２μＬ、１当量）を補充し、混合物を９０℃で８時間撹拌した。混合物をろ過し、減圧濃縮させ、残留物を得た。シリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝４：１～２：１、次に、ジクロロメタン／ＰＥ＝５０：１～２０：１）により残留物を精製した。化合物Ｂ－３を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４７７（Ｍ＋２３）；３９９（Ｍ－５６＋１）。
ステップ３：化合物Ｂ－４の製造
化合物Ｂ－３（３．４ｇ、５．６２ｍｍｏｌ、１当量）をＨ２Ｏ（４５ｍＬ）及びＭｅＣＮ（９０ｍＬ）に溶解し、２５℃、窒素ガス保護下、リン酸水素二カリウム（３．９２ｇ、２２．４９ｍｍｏｌ、４当量）及び過硫酸カリウム（６．８４ｇ、２５．３０ｍｍｏｌ、４．５当量）を一括して加えた。混合物を１００℃で０．５時間撹拌した。反応混合物に重炭酸ナトリウム水溶液５０ｍＬを加えて、酢酸エチル（１００ｍＬ溶液）で抽出した。併せた有機相を食塩水洗浄、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル（Ｖ／Ｖ、以下同様）＝４：１～１：３）により残留物を精製した、化合物Ｂ－４を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９９．１（Ｍ－５６＋１）。
ステップ４：化合物Ｂ－５の製造
化合物Ｂ－４（１．６ｇ、３．５２ｍｍｏｌ、１当量）及びＰｄ／Ｃ（３２０ｍｇ、１０％純度）をＥｔＯＨ（３０ｍＬ）に溶解し、２５℃、Ｈ２（１５ｐｓｉ）下、２時間撹拌した。ろ過し、ろ液を真空濃縮させた。Ｂ－５を得て、次の反応に直接用いた。
ステップ５：化合物Ｂ－６の製造
化合物Ｂ－５をジクロロメタン（５ｍＬ）溶液に溶解し、窒素ガス保護下、０℃でＴＦＡ（８．４７ｇ、７４．２８ｍｍｏｌ、５．５０ｍＬ、２１．６３当量）を一括して加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮させ、化合物Ｂ－６のトリフルオロ酢酸塩を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４２．９（Ｍ＋２３）。
【0052】
中間体の合成経路３
ステップ１：化合物Ｃ－２の製造
化合物Ａ－６（５００ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ、１当量）をアセトニトリル（２０ｍＬ）に溶解し、２５～３０℃、窒素ガス保護下、２－ブロモエタノール（３４１．９７ｍｇ、２．７４ｍｍｏｌ、１９４．３０μＬ、２当量）及びＫ３ＰＯ４（５８０．８８ｍｇ、２．７４ｍｍｏｌ、２当量）を一括して加えた。混合物を９０℃で１２時間持続して撹拌し、混合物をろ過し、ろ液を食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、混合物をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）で抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝３：１～０：１）により残留物を精製した。化合物Ｃ－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１０．２（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物Ｃ－１の製造
化合物Ａ－６（４１０．０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ、１当量）を１，２－ジクロロエタン（２０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、窒素ガス保護下、３０℃で２－［ｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシアセトアルデヒド（２９３．３６ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、３２０．６２μＬ、１．５当量）を加え、ＡｃＯＨ（６７．３８ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ、６４．１７μＬ、１当量）で混合物をｐＨ＝５に調整し、３０分間撹拌し、次に、０～１０℃に冷却してＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（８３２．２８ｍｇ、３．９３ｍｍｏｌ、３．５当量）を加え、さらに混合物を１８時間撹拌した。溶液に飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）を加え、ＤＣＭ（１０ｍＬ）で抽出した。併せた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０：１～０：１）により濃縮液を精製し、化合物Ｃ－１を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５２４．５（Ｍ＋１）。
ステップ３：化合物Ｃ－２の製造
０℃で、窒素ガス保護下、化合物Ｃ－１（７４０ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリドのテトラヒドロフラン溶液（１Ｍ、２．８３ｍＬ、２当量）を加え、次に、１時間撹拌した。混合物に飽和食塩水２０ｍＬを加え、有機相を分離し、ＥＡ（２０ｍＬ、３）で抽出し、収集した有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝５：１～０：１）により濃縮液を精製し、化合物Ｃ－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１０．３（Ｍ＋１）。
ステップ４：化合物Ｂ－３の製造
化合物Ｃ－２（３８０ｍｇ、９２８．０２μｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ溶液（１０ｍｌ）にＮ－（トリエチルアミノスルホニル）ベンジルカルバメート（Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２００４，１０，５５８１－５６０６合成参照））（２５７５．３ｍｇ、２．７８ｍｍｏｌ、３当量）を２５℃で加え、次に、窒素ガス下、７５℃で４時間撹拌した。混合物に水１０ｍＬを加え、ＥＡ（２０ｍＬ混合）で抽出し、有機相を食塩水２０ｍＬで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝５：１～０：１）により濃縮液を精製し、化合物Ｂ－３を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ＝７．３５－７．２８（ｍ，３Ｈ），７．２７－７．２０（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｓ，５Ｈ），６．３８－６．３３（ｍ，１Ｈ），５．２３（ｓ，１Ｈ），５．１４－５．００（ｍ，２Ｈ），３．７１（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，５Ｈ），３．３８－３．２９（ｍ，２Ｈ），３．１８－２．９９（ｍ，２Ｈ），１．４８（ｓ，２０Ｈ），１．３７－１．２９（ｍ，９Ｈ），１．２８－１．０５（ｍ，４Ｈ），０．９６－０．６９（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６０５．４（Ｍ＋１）。
【化47】
化合物Ａ－６（５００ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ、１当量）をアセトニトリル（２０ｍＬ）に溶解し、２５～３０℃、窒素ガス保護下、２－ブロモエタノール（３４１．９７ｍｇ、２．７４ｍｍｏｌ、１９４．３０μＬ、２当量）及びＫ３ＰＯ４（５８０．８８ｍｇ、２．７４ｍｍｏｌ、２当量）を一括して加えた。混合物を９０℃で１２時間持続して撹拌し、混合物をろ過し、ろ液を食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、混合物をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）で抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝３：１～０：１）により残留物を精製した。化合物Ｃ－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１０．２（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物Ｃ－１の製造
化合物Ａ－６（４１０．０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ、１当量）を１，２－ジクロロエタン（２０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、窒素ガス保護下、３０℃で２－［ｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシアセトアルデヒド（２９３．３６ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、３２０．６２μＬ、１．５当量）を加え、ＡｃＯＨ（６７．３８ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ、６４．１７μＬ、１当量）で混合物をｐＨ＝５に調整し、３０分間撹拌し、次に、０～１０℃に冷却してＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（８３２．２８ｍｇ、３．９３ｍｍｏｌ、３．５当量）を加え、さらに混合物を１８時間撹拌した。溶液に飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）を加え、ＤＣＭ（１０ｍＬ）で抽出した。併せた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０：１～０：１）により濃縮液を精製し、化合物Ｃ－１を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５２４．５（Ｍ＋１）。
ステップ３：化合物Ｃ－２の製造
０℃で、窒素ガス保護下、化合物Ｃ－１（７４０ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリドのテトラヒドロフラン溶液（１Ｍ、２．８３ｍＬ、２当量）を加え、次に、１時間撹拌した。混合物に飽和食塩水２０ｍＬを加え、有機相を分離し、ＥＡ（２０ｍＬ、３）で抽出し、収集した有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝５：１～０：１）により濃縮液を精製し、化合物Ｃ－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１０．３（Ｍ＋１）。
ステップ４：化合物Ｂ－３の製造
化合物Ｃ－２（３８０ｍｇ、９２８．０２μｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ溶液（１０ｍｌ）にＮ－（トリエチルアミノスルホニル）ベンジルカルバメート（Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２００４，１０，５５８１－５６０６合成参照））（２５７５．３ｍｇ、２．７８ｍｍｏｌ、３当量）を２５℃で加え、次に、窒素ガス下、７５℃で４時間撹拌した。混合物に水１０ｍＬを加え、ＥＡ（２０ｍＬ混合）で抽出し、有機相を食塩水２０ｍＬで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝５：１～０：１）により濃縮液を精製し、化合物Ｂ－３を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ＝７．３５－７．２８（ｍ，３Ｈ），７．２７－７．２０（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｓ，５Ｈ），６．３８－６．３３（ｍ，１Ｈ），５．２３（ｓ，１Ｈ），５．１４－５．００（ｍ，２Ｈ），３．７１（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，５Ｈ），３．３８－３．２９（ｍ，２Ｈ），３．１８－２．９９（ｍ，２Ｈ），１．４８（ｓ，２０Ｈ），１．３７－１．２９（ｍ，９Ｈ），１．２８－１．０５（ｍ，４Ｈ），０．９６－０．６９（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６０５．４（Ｍ＋１）。
【0053】
中間体の合成経路４
ステップ１：化合物Ｄ－２の製造
窒素ガス保護下、０～１０℃で、ジフェニルケトンヒドラゾン（１０ｇ、５０．９６ｍｍｏｌ、１当量）とジクロロメタン（１００ｍＬ）の混合物にＭｇＳＯ４（４．６０ｇ、３８．２２ｍｍｏｌ、０．７５当量）及び二酸化マンガン（１５．５０ｇ、１７８．３５ｍｍｏｌ、３．５当量）を一括して加えた。反応混合物を０～３０℃で１時間撹拌した。混合物をろ過し、０～１０℃、窒素ガス保護下、ろ液をＤ－１（４．９４ｇ、４８．４２ｍｍｏｌ、０．９５当量）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）混合物に加えた。混合物を０～３０℃で２時間撹拌した。混合物を真空濃縮させた。ＰＥ（１５０ｍＬ）から再結晶させ、化合物Ｄ－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．２０－７．３０（ｍ，１０Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），１．２７－１．３６（ｍ，２Ｈ），１．０９－１．２２（ｍ，２Ｈ）。
ステップ２：化合物Ｄ－３の製造
Ｏ－ジフェニルホスフィニルヒドロキシルアミン（５２１．５０ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ、１．２当量）及び化合物Ｄ－２（０．５ｇ、１．８６ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ（１０ｍＬ）混合物に、０～１０℃、窒素ガス保護下、ｔ－ＢｕＯＮａ（２１４．９１ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。反応混合物を０～１０℃で１２０分間撹拌した。反応液を５％食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、１５分間撹拌した。不溶分をろ別し、ろ過ケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ）で洗浄し、ろ液を酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出した。併せた有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ併せた）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。化合物Ｄ－３のＥｔＯＡｃ／ＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液を得て、次の反応に直接用いた。
ステップ３：化合物Ｄ－４の製造
化合物Ｄ－３のＥｔＯＡｃ／ＴＨＦ溶液（理論収量５２８ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ、１当量、６０ｍＬ）に、窒素ガス保護下、１５～２５℃で２－オキサ－２－［２－（トリフェニルアミノ）チアゾール－４－イル］酢酸（６１７．９４ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ、０．８当量）を一括して加えた。混合物を１５～２５℃で撹拌しながら８時間反応させた。反応混合物を４５℃で減圧濃縮させ、化合物Ｄ－４を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６８０．２（Ｍ＋１）。
【化48】
窒素ガス保護下、０～１０℃で、ジフェニルケトンヒドラゾン（１０ｇ、５０．９６ｍｍｏｌ、１当量）とジクロロメタン（１００ｍＬ）の混合物にＭｇＳＯ４（４．６０ｇ、３８．２２ｍｍｏｌ、０．７５当量）及び二酸化マンガン（１５．５０ｇ、１７８．３５ｍｍｏｌ、３．５当量）を一括して加えた。反応混合物を０～３０℃で１時間撹拌した。混合物をろ過し、０～１０℃、窒素ガス保護下、ろ液をＤ－１（４．９４ｇ、４８．４２ｍｍｏｌ、０．９５当量）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）混合物に加えた。混合物を０～３０℃で２時間撹拌した。混合物を真空濃縮させた。ＰＥ（１５０ｍＬ）から再結晶させ、化合物Ｄ－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．２０－７．３０（ｍ，１０Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），１．２７－１．３６（ｍ，２Ｈ），１．０９－１．２２（ｍ，２Ｈ）。
ステップ２：化合物Ｄ－３の製造
Ｏ－ジフェニルホスフィニルヒドロキシルアミン（５２１．５０ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ、１．２当量）及び化合物Ｄ－２（０．５ｇ、１．８６ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ（１０ｍＬ）混合物に、０～１０℃、窒素ガス保護下、ｔ－ＢｕＯＮａ（２１４．９１ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。反応混合物を０～１０℃で１２０分間撹拌した。反応液を５％食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、１５分間撹拌した。不溶分をろ別し、ろ過ケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ）で洗浄し、ろ液を酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出した。併せた有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ併せた）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。化合物Ｄ－３のＥｔＯＡｃ／ＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液を得て、次の反応に直接用いた。
ステップ３：化合物Ｄ－４の製造
化合物Ｄ－３のＥｔＯＡｃ／ＴＨＦ溶液（理論収量５２８ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ、１当量、６０ｍＬ）に、窒素ガス保護下、１５～２５℃で２－オキサ－２－［２－（トリフェニルアミノ）チアゾール－４－イル］酢酸（６１７．９４ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ、０．８当量）を一括して加えた。混合物を１５～２５℃で撹拌しながら８時間反応させた。反応混合物を４５℃で減圧濃縮させ、化合物Ｄ－４を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６８０．２（Ｍ＋１）。
【0054】
実施例１
化合物１の合成
ステップ１：化合物１－２の製造
１５℃で、化合物Ｂ－６のトリフルオロ酢酸塩（１．１ｇ、３．２９ｍｍｏｌ、１当量）、化合物Ｄ－４（２．０１ｇ、２．９６ｍｍｏｌ、０．９当量）及びＤＭＦ（２０ｍＬ）の混合溶液に、ＨＡＴＵ（１．６３ｇ、４．２８ｍｍｏｌ、１．３当量）及びＴＥＡ（９９８．９７ｍｇ、９．８７ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３当量）を加え、次に、反応混合物を１５℃、窒素ガス保護下、８時間撹拌した。反応液に水（５０ｍＬ）を加え、水相を酢酸エチル（１００ｍＬ酢酸）で抽出した。併せた有機相をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝４：１～１：３）により粗製品を精製し、化合物１－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８８２．２（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物１－３の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物１－２（１．３ｇ、１．４７ｍｍｏｌ、１当量）とＤＭＦ（１５ｍＬ）の混合溶液に、ＤＭＦ・ＳＯ３錯体（１．３５ｇ、８．８４ｍｍｏｌ、６当量）を一括して加えた。溶液を１５℃で１時間撹拌した。溶液に水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。併せた有機相を水及び食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、化合物１－３を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９６２．７（Ｍ＋１）。
ステップ３：化合物１の製造
化合物１－３（４００．００ｍｇ、４１５．７７μｍｏｌ、１当量）をジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解し、窒素ガス保護下、０℃で、該反応混合物にアニソール（８９．９２ｍｇ、８３１．５３μｍｏｌ、９０．３７μＬ、２当量）及びＴＦＡ（３．０８ｇ、２７．０１ｍｍｏｌ、２．００ｍＬ、６４．９７ｅｑ）を加えた。反応混合物を２５℃で１時間撹拌した。化合物にメチルｔ－ブチルエーテル（１００ｍＬ）を加えて固体を析出させ、ろ過し、ろ過ケーキを収集した。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２００×４０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率：１％～２７％、１０ｍｉｎ）によりろ過ケーキを精製し、粗製品として化合物１を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ＝６．９６（ｓ，１Ｈ），５．３９－５．１０（ｍ，１Ｈ），４．２８－４．０５（ｍ，２Ｈ），３．５６－３．４２（ｍ，１Ｈ），３．３６－３．２９（ｍ，２Ｈ），３．２７－３．０３（ｍ，３Ｈ），１．４０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５５３．９（Ｍ＋１）；４７３．９（Ｍ－８０＋１）。
化合物１の合成
【化49】
１５℃で、化合物Ｂ－６のトリフルオロ酢酸塩（１．１ｇ、３．２９ｍｍｏｌ、１当量）、化合物Ｄ－４（２．０１ｇ、２．９６ｍｍｏｌ、０．９当量）及びＤＭＦ（２０ｍＬ）の混合溶液に、ＨＡＴＵ（１．６３ｇ、４．２８ｍｍｏｌ、１．３当量）及びＴＥＡ（９９８．９７ｍｇ、９．８７ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３当量）を加え、次に、反応混合物を１５℃、窒素ガス保護下、８時間撹拌した。反応液に水（５０ｍＬ）を加え、水相を酢酸エチル（１００ｍＬ酢酸）で抽出した。併せた有機相をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝４：１～１：３）により粗製品を精製し、化合物１－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８８２．２（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物１－３の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物１－２（１．３ｇ、１．４７ｍｍｏｌ、１当量）とＤＭＦ（１５ｍＬ）の混合溶液に、ＤＭＦ・ＳＯ３錯体（１．３５ｇ、８．８４ｍｍｏｌ、６当量）を一括して加えた。溶液を１５℃で１時間撹拌した。溶液に水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。併せた有機相を水及び食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、化合物１－３を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９６２．７（Ｍ＋１）。
ステップ３：化合物１の製造
化合物１－３（４００．００ｍｇ、４１５．７７μｍｏｌ、１当量）をジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解し、窒素ガス保護下、０℃で、該反応混合物にアニソール（８９．９２ｍｇ、８３１．５３μｍｏｌ、９０．３７μＬ、２当量）及びＴＦＡ（３．０８ｇ、２７．０１ｍｍｏｌ、２．００ｍＬ、６４．９７ｅｑ）を加えた。反応混合物を２５℃で１時間撹拌した。化合物にメチルｔ－ブチルエーテル（１００ｍＬ）を加えて固体を析出させ、ろ過し、ろ過ケーキを収集した。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２００×４０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率：１％～２７％、１０ｍｉｎ）によりろ過ケーキを精製し、粗製品として化合物１を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ＝６．９６（ｓ，１Ｈ），５．３９－５．１０（ｍ，１Ｈ），４．２８－４．０５（ｍ，２Ｈ），３．５６－３．４２（ｍ，１Ｈ），３．３６－３．２９（ｍ，２Ｈ），３．２７－３．０３（ｍ，３Ｈ），１．４０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５５３．９（Ｍ＋１）；４７３．９（Ｍ－８０＋１）。
【0055】
実施例２
化合物２の合成
化合物１の製造過程を参照して、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０ｍｍ×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率％：１％～２５％、１０ｍｉｎ）により処理し、化合物２を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ＝６．９０－６．８４（ｍ，１Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），４．２２－４．１２（ｍ，１Ｈ），３．５９（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝３．２，１４．１Ｈｚ，２Ｈ），３．３１－３．０５（ｍ，６Ｈ），１．３７（ｂｒ ｓ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５６７．５（Ｍ＋１）。
化合物２の合成
【化50】
【0056】
実施例３
化合物３の合成
ステップ１：化合物３－２の製造
化合物Ａ－６（５．７ｇ、１５．６０ｍｍｏｌ、１当量）、ｔ－ブチル－ジメチル－［［（（２Ｒ）－エチレンオキシド－２－イル］メトキシ］シラン（３．２３ｇ、１７．１６ｍｍｏｌ、１．１当量）及びジイソプロピルエチルアミン（２．３２ｇ、１７．９４ｍｍｏｌ、３．１２ｍＬ、１．１５当量）を１５℃、窒素ガス保護下、エタノール（６０ｍＬ）に溶解し、次に、混合物を９０℃で１８時間撹拌した。溶液を真空濃縮させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー精製（石油エーテル／酢酸エチル＝４／１～０／１）に通した。化合物３－２を得た。
ステップ２：化合物３－３の製造
化合物３－２（４．０２ｇ、７．２６ｍｍｏｌ、１当量）、トリエチルアミン（１．４７ｇ、１４．５２ｍｍｏｌ、２．０２ｍＬ、２当量）をジクロロメタン（４０ｍｌ）に溶解し、０℃に降温して、窒素ガス保護下、ベンジルクロロスルホニルカルバメート（１．８１ｇ、７．２６ｍｍｏｌ、１当量）のジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液を滴下し、次に、混合物を０～１５℃で２時間撹拌した。溶液に水（５０ｍＬ）を加えてクエンチングし、ジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、粗品３－３を得た。
ステップ３：化合物３－４の製造
化合物３－３（６．３０ｇ、８．２１ｍｍｏｌ、１ｅｑ）、トリエチルアミン（１．２５ｇ、１２．３２ｍｍｏｌ、１．７１ｍＬ、１．５当量）をジクロロメタン（７０ｍｌ）に溶解し、０℃に降温して、窒素ガス保護下、メタンスルホニルクロリド（１．１３ｇ、９．８６ｍｍｏｌ、７６２．９２μＬ、１．２当量）を滴下し、溶液を０℃で２時間撹拌した。溶液を水（１００ｍＬ）でクエンチングし、ジクロロメタン（１００ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、粗品３－４を得た。
ステップ４：化合物３－５の製造
化合物３－４（１３．４０ｇ、１５．８６ｍｍｏｌ、１当量）、リン酸カリウム（４．３８ｇ、２０．６１ｍｍｏｌ、１．３当量）を１５℃でアセトニトリル（１５０ｍＬ）に混合し、次に、反応液を８０℃で２時間撹拌した。ろ液を真空濃縮させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー精製（石油エーテル／酢酸エチル＝５／１～３／１）に通して、化合物３－５を得た。
ステップ５：化合物３－６の製造
２５℃、窒素ガス保護下、化合物３－５（５．００ｇ、６．６８ｍｍｏｌ、１当量）、リン酸二水素カリウム（４．６５ｇ、２６．７０ｍｍｏｌ、４当量）、過硫酸カリウム（８．１２ｇ、３０．０４ｍｍｏｌ、６．０２ｍＬ、４．５当量）を混合して、アセトニトリル（２４０ｍＬ）及び水（１２０ｍＬ）に溶解し、次に、溶液を１００℃に加熱して４０分間撹拌した。溶液を冷却し、ろ過し、ろ液を真空濃縮させ、次に、水（５０ｍＬ）を加えて、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、併せた有機相を食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー精製（石油エーテル／酢酸エチル＝４／１～２／１）に通した。化合物３－６を得た。
ステップ６：化合物３－７の製造
化合物３－６（２．３０ｇ、３．８４ｍｍｏｌ、１当量）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解し、２５℃、窒素ガス保護下、反応液にトリエチルアミン三フッ化水素塩（３．７２ｇ、２３．０５ｍｍｏｌ、３．７６ｍＬ、６当量）を加え、次に、溶液を２５℃で１５時間撹拌した。溶液に水（３０ｍＬ）を加えて希釈し、ジクロロメタン（３０ｍＬ×３）で抽出し、併せた有機相を食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー精製（石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～０／１）に通した。化合物３－７を得た。
ステップ７：化合物３－８の製造
窒素ガス保護下、０℃で、化合物３－７（７００ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ、１当量）、トリエチルアミン（１９０．０５ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ、２６１．４２μＬ、１．３当量）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、塩化アセチル（１３６．０９ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ、１２３．７２μＬ、１．２当量）を滴下し、溶液を２５℃にゆっくりと昇温して、４時間撹拌した。溶液に水（１０ｍＬ）を加えてクエンチングし、ジクロロメタン（２０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー精製（石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～０／１）に通した。化合物３－８を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ＝７．４６－７．３４（ｍ，５Ｈ），６．５３－６．４６（ｍ，１Ｈ），５．４０－５．３１（ｍ，２Ｈ），５．０６－５．０５（ｍ，１Ｈ），５．１０－５．００（ｍ，１Ｈ），４．５７－４．４７（ｍ，１Ｈ），４．４１－４．３４（ｍ，１Ｈ），４．２８－４．２１（ｍ，１Ｈ），４．１２－４．０６（ｍ，１Ｈ），４．１８－４．０６（ｍ，３Ｈ）， ３．６４－３．５５（ｍ，１Ｈ），３．５２－３．４３（ｍ，１Ｈ），３．３９－３．３３（ｍ，１Ｈ），３．２６－３．１８（ｍ，１Ｈ），２．１２－２．０９（ｍ，３Ｈ），１．５０－１．４２（ｍ，９Ｈ）。
ステップ８：化合物３－９の製造
２０℃、窒素ガス保護下、化合物３－８（４３０ｍｇ、８１６．６２μｍｏｌ、１当量）のエタノール（１０ｍＬ）溶液にパラジウム炭素（１３０ｍｇ、１８９．５６μｍｏｌ、純度１０％）を加え、窒素ガス置換を行い、次に、該溶液を２０℃、水素圧（１５Ｐｓｉ）で２時間撹拌した。溶液をろ過し、テトラヒドロフランで洗浄し、ろ液を真空濃縮させた。精製せずに化合物３－９を得た。
ステップ９：化合物３－１０の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物３－９（２８０ｍｇ、７１３．５１μｍｏｌ、１当量）をジクロロメタン（１ｍＬ）に溶解し、溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ、１８．９３当量）を添加した。反応液を２５℃に昇温して、２時間反応させた。該反応溶液を真空濃縮させた。３－１０のトリフルオロ酢酸塩粗品を得た。
ステップ１０：化合物３－１１の製造
２５℃、窒素ガス保護下、化合物３－１０のトリフルオロ酢酸塩（２９０ｍｇ、７１３．７０μｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、該反応溶液に化合物Ｄ－４（４８５．１６ｍｇ、７１３．７０μｍｏｌ、１当量）、ＨＡＴＵ（３５２．７８ｍｇ、９２７．８１μｍｏｌ、１．３当量）及びトリエチルアミン（２１６．６６ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ、２９８．０２μＬ、３当量）を添加した。溶液を４時間撹拌した後、溶液に水１０ｍＬを加え、水相を酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。粗製品をシリカゲルクロマトグラフィー精製（ＰＥ／ＥＡ＝３／１～１／３）に通し、化合物３－１１を得た。ＬＣＭＳ：９５４．３（Ｍ＋１）。
ステップ１１：化合物３－１２の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物３－１１（１００ｍｇ、１０４．８１μｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解し、該反応液にＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド三酸化硫黄錯体（９６．３２ｍｇ、６２８．８８μｍｏｌ、６当量）を加えた。２５℃で２時間反応させた。反応溶液に水（５ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、併せた有機相を食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、粗品３－１２を得た。ＬＣＭＳ：１０３４．３（Ｍ＋１）。
ステップ１２：化合物３の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物３－１２（６０ｍｇ、５８．０２μｍｏｌ、１当量）をジクロロメタン（０．８ｍＬ）に溶解し、アニソール（６２．７４ｍｇ、５８０．１９μｍｏｌ、６３．０６μＬ、１０当量）及びＴＦＡ（１．２３ｇ、１０．８０ｍｍｏｌ、０．８ｍＬ、１８６．２３当量）を加え、次に、反応液を２５℃、窒素ガス保護下、１時間撹拌した。溶液をｎ－ヘプタン（５ｍＬ×２）で洗浄し、上澄みを捨てて、次に、冷却したＭＴＢＥ（２０ｍＬ）をスラリー化し、ろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（５ｍＬ）で洗浄し、ろ過ケーキを逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率：１０％～３０％、１０ｍｉｎ）により精製し、化合物３を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝６．８１（ｓ，１Ｈ），５．２５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），４．１８－４．１０（ｍ，１Ｈ），３．９６－３．８８（ｍ，２Ｈ），３．７６－３．６６（ｍ，１Ｈ），３．６３－３．４６（ｍ，２Ｈ），３．０５（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝８．３，１３．６Ｈｚ，１Ｈ），２．９５－２．６９（ｍ，２Ｈ），２．０１－１．９６（ｍ，３Ｈ），１．４２－１．２８（ｍ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６２６（Ｍ＋１）；５４６（Ｍ－８０＋１）。
化合物３の合成
【化51】
化合物Ａ－６（５．７ｇ、１５．６０ｍｍｏｌ、１当量）、ｔ－ブチル－ジメチル－［［（（２Ｒ）－エチレンオキシド－２－イル］メトキシ］シラン（３．２３ｇ、１７．１６ｍｍｏｌ、１．１当量）及びジイソプロピルエチルアミン（２．３２ｇ、１７．９４ｍｍｏｌ、３．１２ｍＬ、１．１５当量）を１５℃、窒素ガス保護下、エタノール（６０ｍＬ）に溶解し、次に、混合物を９０℃で１８時間撹拌した。溶液を真空濃縮させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー精製（石油エーテル／酢酸エチル＝４／１～０／１）に通した。化合物３－２を得た。
ステップ２：化合物３－３の製造
化合物３－２（４．０２ｇ、７．２６ｍｍｏｌ、１当量）、トリエチルアミン（１．４７ｇ、１４．５２ｍｍｏｌ、２．０２ｍＬ、２当量）をジクロロメタン（４０ｍｌ）に溶解し、０℃に降温して、窒素ガス保護下、ベンジルクロロスルホニルカルバメート（１．８１ｇ、７．２６ｍｍｏｌ、１当量）のジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液を滴下し、次に、混合物を０～１５℃で２時間撹拌した。溶液に水（５０ｍＬ）を加えてクエンチングし、ジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、粗品３－３を得た。
ステップ３：化合物３－４の製造
化合物３－３（６．３０ｇ、８．２１ｍｍｏｌ、１ｅｑ）、トリエチルアミン（１．２５ｇ、１２．３２ｍｍｏｌ、１．７１ｍＬ、１．５当量）をジクロロメタン（７０ｍｌ）に溶解し、０℃に降温して、窒素ガス保護下、メタンスルホニルクロリド（１．１３ｇ、９．８６ｍｍｏｌ、７６２．９２μＬ、１．２当量）を滴下し、溶液を０℃で２時間撹拌した。溶液を水（１００ｍＬ）でクエンチングし、ジクロロメタン（１００ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、粗品３－４を得た。
ステップ４：化合物３－５の製造
化合物３－４（１３．４０ｇ、１５．８６ｍｍｏｌ、１当量）、リン酸カリウム（４．３８ｇ、２０．６１ｍｍｏｌ、１．３当量）を１５℃でアセトニトリル（１５０ｍＬ）に混合し、次に、反応液を８０℃で２時間撹拌した。ろ液を真空濃縮させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー精製（石油エーテル／酢酸エチル＝５／１～３／１）に通して、化合物３－５を得た。
ステップ５：化合物３－６の製造
２５℃、窒素ガス保護下、化合物３－５（５．００ｇ、６．６８ｍｍｏｌ、１当量）、リン酸二水素カリウム（４．６５ｇ、２６．７０ｍｍｏｌ、４当量）、過硫酸カリウム（８．１２ｇ、３０．０４ｍｍｏｌ、６．０２ｍＬ、４．５当量）を混合して、アセトニトリル（２４０ｍＬ）及び水（１２０ｍＬ）に溶解し、次に、溶液を１００℃に加熱して４０分間撹拌した。溶液を冷却し、ろ過し、ろ液を真空濃縮させ、次に、水（５０ｍＬ）を加えて、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、併せた有機相を食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー精製（石油エーテル／酢酸エチル＝４／１～２／１）に通した。化合物３－６を得た。
ステップ６：化合物３－７の製造
化合物３－６（２．３０ｇ、３．８４ｍｍｏｌ、１当量）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解し、２５℃、窒素ガス保護下、反応液にトリエチルアミン三フッ化水素塩（３．７２ｇ、２３．０５ｍｍｏｌ、３．７６ｍＬ、６当量）を加え、次に、溶液を２５℃で１５時間撹拌した。溶液に水（３０ｍＬ）を加えて希釈し、ジクロロメタン（３０ｍＬ×３）で抽出し、併せた有機相を食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー精製（石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～０／１）に通した。化合物３－７を得た。
ステップ７：化合物３－８の製造
窒素ガス保護下、０℃で、化合物３－７（７００ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ、１当量）、トリエチルアミン（１９０．０５ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ、２６１．４２μＬ、１．３当量）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、塩化アセチル（１３６．０９ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ、１２３．７２μＬ、１．２当量）を滴下し、溶液を２５℃にゆっくりと昇温して、４時間撹拌した。溶液に水（１０ｍＬ）を加えてクエンチングし、ジクロロメタン（２０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー精製（石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～０／１）に通した。化合物３－８を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ＝７．４６－７．３４（ｍ，５Ｈ），６．５３－６．４６（ｍ，１Ｈ），５．４０－５．３１（ｍ，２Ｈ），５．０６－５．０５（ｍ，１Ｈ），５．１０－５．００（ｍ，１Ｈ），４．５７－４．４７（ｍ，１Ｈ），４．４１－４．３４（ｍ，１Ｈ），４．２８－４．２１（ｍ，１Ｈ），４．１２－４．０６（ｍ，１Ｈ），４．１８－４．０６（ｍ，３Ｈ）， ３．６４－３．５５（ｍ，１Ｈ），３．５２－３．４３（ｍ，１Ｈ），３．３９－３．３３（ｍ，１Ｈ），３．２６－３．１８（ｍ，１Ｈ），２．１２－２．０９（ｍ，３Ｈ），１．５０－１．４２（ｍ，９Ｈ）。
ステップ８：化合物３－９の製造
２０℃、窒素ガス保護下、化合物３－８（４３０ｍｇ、８１６．６２μｍｏｌ、１当量）のエタノール（１０ｍＬ）溶液にパラジウム炭素（１３０ｍｇ、１８９．５６μｍｏｌ、純度１０％）を加え、窒素ガス置換を行い、次に、該溶液を２０℃、水素圧（１５Ｐｓｉ）で２時間撹拌した。溶液をろ過し、テトラヒドロフランで洗浄し、ろ液を真空濃縮させた。精製せずに化合物３－９を得た。
ステップ９：化合物３－１０の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物３－９（２８０ｍｇ、７１３．５１μｍｏｌ、１当量）をジクロロメタン（１ｍＬ）に溶解し、溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ、１８．９３当量）を添加した。反応液を２５℃に昇温して、２時間反応させた。該反応溶液を真空濃縮させた。３－１０のトリフルオロ酢酸塩粗品を得た。
ステップ１０：化合物３－１１の製造
２５℃、窒素ガス保護下、化合物３－１０のトリフルオロ酢酸塩（２９０ｍｇ、７１３．７０μｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、該反応溶液に化合物Ｄ－４（４８５．１６ｍｇ、７１３．７０μｍｏｌ、１当量）、ＨＡＴＵ（３５２．７８ｍｇ、９２７．８１μｍｏｌ、１．３当量）及びトリエチルアミン（２１６．６６ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ、２９８．０２μＬ、３当量）を添加した。溶液を４時間撹拌した後、溶液に水１０ｍＬを加え、水相を酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。粗製品をシリカゲルクロマトグラフィー精製（ＰＥ／ＥＡ＝３／１～１／３）に通し、化合物３－１１を得た。ＬＣＭＳ：９５４．３（Ｍ＋１）。
ステップ１１：化合物３－１２の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物３－１１（１００ｍｇ、１０４．８１μｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解し、該反応液にＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド三酸化硫黄錯体（９６．３２ｍｇ、６２８．８８μｍｏｌ、６当量）を加えた。２５℃で２時間反応させた。反応溶液に水（５ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、併せた有機相を食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、粗品３－１２を得た。ＬＣＭＳ：１０３４．３（Ｍ＋１）。
ステップ１２：化合物３の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物３－１２（６０ｍｇ、５８．０２μｍｏｌ、１当量）をジクロロメタン（０．８ｍＬ）に溶解し、アニソール（６２．７４ｍｇ、５８０．１９μｍｏｌ、６３．０６μＬ、１０当量）及びＴＦＡ（１．２３ｇ、１０．８０ｍｍｏｌ、０．８ｍＬ、１８６．２３当量）を加え、次に、反応液を２５℃、窒素ガス保護下、１時間撹拌した。溶液をｎ－ヘプタン（５ｍＬ×２）で洗浄し、上澄みを捨てて、次に、冷却したＭＴＢＥ（２０ｍＬ）をスラリー化し、ろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（５ｍＬ）で洗浄し、ろ過ケーキを逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率：１０％～３０％、１０ｍｉｎ）により精製し、化合物３を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝６．８１（ｓ，１Ｈ），５．２５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），４．１８－４．１０（ｍ，１Ｈ），３．９６－３．８８（ｍ，２Ｈ），３．７６－３．６６（ｍ，１Ｈ），３．６３－３．４６（ｍ，２Ｈ），３．０５（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝８．３，１３．６Ｈｚ，１Ｈ），２．９５－２．６９（ｍ，２Ｈ），２．０１－１．９６（ｍ，３Ｈ），１．４２－１．２８（ｍ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６２６（Ｍ＋１）；５４６（Ｍ－８０＋１）。
【0057】
実施例４
化合物４の合成
ステップ１：化合物４－２の製造
化合物Ａ－６（５ｇ、１３．６８ｍｍｏｌ、１当量）、（Ｓ）－２－（エチレンオキシド－２－イルメチル）イソインドリン－１，３－ジオン（１．９５ｇ、９．５８ｍｍｏｌ、０．７当量）、過塩素酸リチウム（４．３７ｇ、４１．０５ｍｍｏｌ、１．８０ｍＬ、３当量）及びアセトニトリル（３０ｍＬ）を混合し、反応液を６０℃で３．５時間撹拌した。溶液を水１００ｍｌでクエンチングし、次に、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、併せた有機層を水（１００ｍＬ×２）及び食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー法（ＰＥ／ＥＡ／ＤＣＭ＝５／１／１～ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により精製した。残留物をＤＣＭ：ＥＡ＝１：１（８０ｍＬ）にて１６時間スラリー化し、白色固体を形成し、ろ過して固体を収集し、ＥＡ（１０ｍＬ×２）で洗浄した。ろ過ケーキを収集して化合物４－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５６９．３（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物４－３の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－２（２．８ｇ、４．９２ｍｍｏｌ、１当量）及びトリエチルアミン（９９６．５６ｍｇ、９．８５ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、２当量）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、ベンジルクロロスルホニルカルバメート（１．８４ｇ、７．３９ｍｍｏｌ、１．５当量）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を滴下して、１時間撹拌した。水５０ｍＬで反応をクエンチングし、次に、ＤＣＭ（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機層を水（１００ｍＬ×２）及び食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、粗品４－３を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７２６．２（Ｍ－５５）。
ステップ３：化合物４－４の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－３（４．７８ｇ、６．１１ｍｍｏｌ、１当量）及びトリエチルアミン（８０４．２６ｍｇ、７．９５ｍｍｏｌ、１．１１ｍＬ、１．３当量）のＤＣＭ（４０ｍＬ）溶液にメタンスルホニルクロリド（７００．３５ｍｇ、６．１１ｍｍｏｌ、４７３．２１μＬ、１当量）を滴下し、滴下終了後、反応液を１時間撹拌した。水（５０ｍＬ）で反応をクエンチングし、次に、ＤＣＭ（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機層を水（１００ｍＬ×２）及び食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、化合物４－４を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８０４．２（Ｍ－５５）。
ステップ４：化合物４－５の製造
化合物４－４（５．３２ｇ、６．１９ｍｍｏｌ、１当量）、リン酸カリウム（１．７１ｇ、８．０４ｍｍｏｌ、１．３当量）及びアセトニトリル（８０ｍＬ）を混合し、混合物を、窒素ガス保護下、６０℃で１６時間撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を真空濃縮させ、化合物４－５を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０８．２（Ｍ－５５）。
ステップ５：化合物４－６の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－５（２．９４ｇ、３．８５ｍｍｏｌ、１当量）をアセトニトリル（１００ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）に溶解し、該反応溶液に硝酸セリウムアンモニウム（４．２２ｇ、７．７０ｍｍｏｌ、３．８４ｍＬ、２当量）の水（２０ｍＬ）溶液を１滴ずつ滴下し、次に、０～２５℃で５時間撹拌した。反応溶液に水１００ｍＬを加え、次に、ＥＡ（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機層を水（１００ｍＬ×２）及び食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を真空濃縮させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝５／１～１／１、２０％ＤＣＭ）により精製し、化合物４－６を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５５８．２（Ｍ－５５）。
ステップ６：化合物４－７の製造
化合物４－６（１．４２ｇ、２．３１ｍｍｏｌ、１当量）及びＰｄ／Ｃ（１５０ｍｇ、１０％純度）をエタノール（４０ｍＬ）と混合し、２０～３０℃、水素ガス（１５ｐｓｉ）下、１５時間撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を真空濃縮させ、化合物４－７を得た。
ステップ７：化合物４－８の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－７（１．２ｇ、２．５０ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ（１６ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（１２．３２ｇ、１０８．０５ｍｍｏｌ、８ｍＬ、４３．１７当量）を加え、０℃で１時間撹拌した。該溶液を真空濃縮させ、４－８のトリフルオロ酢酸塩粗品を得た。
ステップ８：化合物４－９の製造
化合物４－８のトリフルオロ酢酸塩（１．３ｇ、２．６３ｍｍｏｌ、１当量）、化合物Ｄ－４（１．７９ｇ、２．６３ｍｍｏｌ、１当量）及びＤＭＦ（１５ｍＬ）の混合溶液に、ＨＡＴＵ（１．３０ｇ、３．４２ｍｍｏｌ、１．３当量）及びジイソプロピルエチルアミン（１．０２ｇ、７．８９ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３当量）を加え、次に、２０～３０℃で１時間撹拌した。溶液を水１００ｍＬに注入し、ＤＣＭ（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機層を水（１００ｍＬ）及び食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー法（ＤＣＭ／ＥＡ＝１／０～１／２）により精製し、化合物４－９を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０４１．４（Ｍ＋１）。
ステップ９：化合物４－１０の製造
化合物４－９（１．２２ｇ、１．０４ｍｍｏｌ、１当量）、ヒドラジン水和物（２６５．１３ｍｇ、５．１９ｍｍｏｌ、２５７．４０μＬ、９８％純度、５当量）をエタノール（３０ｍＬ）と混合し、混合溶液を３０℃で４時間撹拌した。溶液を水２５０ｍＬに注入し、ＤＣＭ（１５０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を食塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。濃縮液をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー法（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝５０／１～２０／１）により精製し、４－１０を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９１１．４（Ｍ＋１）。
ステップ１０：化合物４－１１の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－１０（１４５ｍｇ、１５９．１６μｍｏｌ、１当量）及びトリエチルアミン（４０．２６ｍｇ、３９７．８９μｍｏｌ、５５．３８μＬ、２．５当量）とＤＣＭ（５ｍＬ）の混合溶液に、Ｂｏｃ２Ｏ（４５．１６ｍｇ、２０６．９０μｍｏｌ、４７．５３μＬ、１．３当量）のＤＣＭ（０．５ｍＬ）溶液を加えて、１時間撹拌した。Ｂｏｃ２Ｏ１０ｍｇを加えて２５～３０℃で１時間撹拌した。溶液をＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、次に、食塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー法精製（ＰＥ／ＥＡ＝２／１～０／１）に通し、化合物４－１１を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０１１．５（Ｍ＋１）。
ステップ１１：化合物４－１２の製造
２５℃で、化合物４－１１（１３０ｍｇ、１２８．５６μｍｏｌ、１当量）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド三酸化硫黄錯体（５９．０７ｍｇ、３８５．６９μｍｏｌ、３当量）を加えた。反応液を２５℃で１時間反応させた。溶液に水１０ｍＬを加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。化合物４－１２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０９１．４（Ｍ＋Ｈ）。
ステップ１２：化合物４の製造
０℃で、化合物４－１２（１５０ｍｇ、１３７．４６μｍｏｌ、１当量）、アニソール（２９．７３ｍｇ、２７４．９２μｍｏｌ、２９．８８μＬ、２当量）のＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ、９８．２６当量）を加えた。次に、混合物を２５℃で１時間撹拌した。０℃に降温して、混合物にｎ－ヘプタン（６ｍＬ×３）を添加し、上澄みを捨てて、次に、冷却したＭＴＢＥ（４ｍＬ）をスラリー化し、次に、Ｎ２保護下、溶液をろ過した。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ Ｔ３ １５０ｍｍ×３０ｍｍ×５μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率：５％～３５％、１０ｍｉｎ）により粗製品を精製し、化合物４のトリフルオロ酢酸塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ＝６．８６（ｓ，１Ｈ），５．２７－５．１９（ｍ，１Ｈ），４．２３－４．１６（ｍ，１Ｈ），３．７３－３．５９（ｍ，２Ｈ），３．４０－３．３３（ｍ，１Ｈ），３．２０－３．０６（ｍ，２Ｈ），３．０３－２．８２（ｍ，３Ｈ），１．３６（ｂｒ ｓ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５８３．０（Ｍ＋１）。
化合物４の合成
【化52】
化合物Ａ－６（５ｇ、１３．６８ｍｍｏｌ、１当量）、（Ｓ）－２－（エチレンオキシド－２－イルメチル）イソインドリン－１，３－ジオン（１．９５ｇ、９．５８ｍｍｏｌ、０．７当量）、過塩素酸リチウム（４．３７ｇ、４１．０５ｍｍｏｌ、１．８０ｍＬ、３当量）及びアセトニトリル（３０ｍＬ）を混合し、反応液を６０℃で３．５時間撹拌した。溶液を水１００ｍｌでクエンチングし、次に、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、併せた有機層を水（１００ｍＬ×２）及び食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー法（ＰＥ／ＥＡ／ＤＣＭ＝５／１／１～ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により精製した。残留物をＤＣＭ：ＥＡ＝１：１（８０ｍＬ）にて１６時間スラリー化し、白色固体を形成し、ろ過して固体を収集し、ＥＡ（１０ｍＬ×２）で洗浄した。ろ過ケーキを収集して化合物４－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５６９．３（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物４－３の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－２（２．８ｇ、４．９２ｍｍｏｌ、１当量）及びトリエチルアミン（９９６．５６ｍｇ、９．８５ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、２当量）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、ベンジルクロロスルホニルカルバメート（１．８４ｇ、７．３９ｍｍｏｌ、１．５当量）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を滴下して、１時間撹拌した。水５０ｍＬで反応をクエンチングし、次に、ＤＣＭ（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機層を水（１００ｍＬ×２）及び食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、粗品４－３を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７２６．２（Ｍ－５５）。
ステップ３：化合物４－４の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－３（４．７８ｇ、６．１１ｍｍｏｌ、１当量）及びトリエチルアミン（８０４．２６ｍｇ、７．９５ｍｍｏｌ、１．１１ｍＬ、１．３当量）のＤＣＭ（４０ｍＬ）溶液にメタンスルホニルクロリド（７００．３５ｍｇ、６．１１ｍｍｏｌ、４７３．２１μＬ、１当量）を滴下し、滴下終了後、反応液を１時間撹拌した。水（５０ｍＬ）で反応をクエンチングし、次に、ＤＣＭ（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機層を水（１００ｍＬ×２）及び食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、化合物４－４を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８０４．２（Ｍ－５５）。
ステップ４：化合物４－５の製造
化合物４－４（５．３２ｇ、６．１９ｍｍｏｌ、１当量）、リン酸カリウム（１．７１ｇ、８．０４ｍｍｏｌ、１．３当量）及びアセトニトリル（８０ｍＬ）を混合し、混合物を、窒素ガス保護下、６０℃で１６時間撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を真空濃縮させ、化合物４－５を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０８．２（Ｍ－５５）。
ステップ５：化合物４－６の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－５（２．９４ｇ、３．８５ｍｍｏｌ、１当量）をアセトニトリル（１００ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）に溶解し、該反応溶液に硝酸セリウムアンモニウム（４．２２ｇ、７．７０ｍｍｏｌ、３．８４ｍＬ、２当量）の水（２０ｍＬ）溶液を１滴ずつ滴下し、次に、０～２５℃で５時間撹拌した。反応溶液に水１００ｍＬを加え、次に、ＥＡ（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機層を水（１００ｍＬ×２）及び食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を真空濃縮させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝５／１～１／１、２０％ＤＣＭ）により精製し、化合物４－６を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５５８．２（Ｍ－５５）。
ステップ６：化合物４－７の製造
化合物４－６（１．４２ｇ、２．３１ｍｍｏｌ、１当量）及びＰｄ／Ｃ（１５０ｍｇ、１０％純度）をエタノール（４０ｍＬ）と混合し、２０～３０℃、水素ガス（１５ｐｓｉ）下、１５時間撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を真空濃縮させ、化合物４－７を得た。
ステップ７：化合物４－８の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－７（１．２ｇ、２．５０ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ（１６ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（１２．３２ｇ、１０８．０５ｍｍｏｌ、８ｍＬ、４３．１７当量）を加え、０℃で１時間撹拌した。該溶液を真空濃縮させ、４－８のトリフルオロ酢酸塩粗品を得た。
ステップ８：化合物４－９の製造
化合物４－８のトリフルオロ酢酸塩（１．３ｇ、２．６３ｍｍｏｌ、１当量）、化合物Ｄ－４（１．７９ｇ、２．６３ｍｍｏｌ、１当量）及びＤＭＦ（１５ｍＬ）の混合溶液に、ＨＡＴＵ（１．３０ｇ、３．４２ｍｍｏｌ、１．３当量）及びジイソプロピルエチルアミン（１．０２ｇ、７．８９ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３当量）を加え、次に、２０～３０℃で１時間撹拌した。溶液を水１００ｍＬに注入し、ＤＣＭ（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機層を水（１００ｍＬ）及び食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー法（ＤＣＭ／ＥＡ＝１／０～１／２）により精製し、化合物４－９を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０４１．４（Ｍ＋１）。
ステップ９：化合物４－１０の製造
化合物４－９（１．２２ｇ、１．０４ｍｍｏｌ、１当量）、ヒドラジン水和物（２６５．１３ｍｇ、５．１９ｍｍｏｌ、２５７．４０μＬ、９８％純度、５当量）をエタノール（３０ｍＬ）と混合し、混合溶液を３０℃で４時間撹拌した。溶液を水２５０ｍＬに注入し、ＤＣＭ（１５０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を食塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。濃縮液をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー法（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝５０／１～２０／１）により精製し、４－１０を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９１１．４（Ｍ＋１）。
ステップ１０：化合物４－１１の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－１０（１４５ｍｇ、１５９．１６μｍｏｌ、１当量）及びトリエチルアミン（４０．２６ｍｇ、３９７．８９μｍｏｌ、５５．３８μＬ、２．５当量）とＤＣＭ（５ｍＬ）の混合溶液に、Ｂｏｃ２Ｏ（４５．１６ｍｇ、２０６．９０μｍｏｌ、４７．５３μＬ、１．３当量）のＤＣＭ（０．５ｍＬ）溶液を加えて、１時間撹拌した。Ｂｏｃ２Ｏ１０ｍｇを加えて２５～３０℃で１時間撹拌した。溶液をＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、次に、食塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー法精製（ＰＥ／ＥＡ＝２／１～０／１）に通し、化合物４－１１を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０１１．５（Ｍ＋１）。
ステップ１１：化合物４－１２の製造
２５℃で、化合物４－１１（１３０ｍｇ、１２８．５６μｍｏｌ、１当量）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド三酸化硫黄錯体（５９．０７ｍｇ、３８５．６９μｍｏｌ、３当量）を加えた。反応液を２５℃で１時間反応させた。溶液に水１０ｍＬを加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。化合物４－１２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１０９１．４（Ｍ＋Ｈ）。
ステップ１２：化合物４の製造
０℃で、化合物４－１２（１５０ｍｇ、１３７．４６μｍｏｌ、１当量）、アニソール（２９．７３ｍｇ、２７４．９２μｍｏｌ、２９．８８μＬ、２当量）のＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ、９８．２６当量）を加えた。次に、混合物を２５℃で１時間撹拌した。０℃に降温して、混合物にｎ－ヘプタン（６ｍＬ×３）を添加し、上澄みを捨てて、次に、冷却したＭＴＢＥ（４ｍＬ）をスラリー化し、次に、Ｎ２保護下、溶液をろ過した。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ Ｔ３ １５０ｍｍ×３０ｍｍ×５μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率：５％～３５％、１０ｍｉｎ）により粗製品を精製し、化合物４のトリフルオロ酢酸塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ＝６．８６（ｓ，１Ｈ），５．２７－５．１９（ｍ，１Ｈ），４．２３－４．１６（ｍ，１Ｈ），３．７３－３．５９（ｍ，２Ｈ），３．４０－３．３３（ｍ，１Ｈ），３．２０－３．０６（ｍ，２Ｈ），３．０３－２．８２（ｍ，３Ｈ），１．３６（ｂｒ ｓ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５８３．０（Ｍ＋１）。
【0058】
実施例５
化合物５の合成
ステップ１：化合物５－２の製造
化合物４－１０（８７ｍｇ、９５．４９μｍｏｌ、１当量）、（Ｅ）－ｔ－ブチル（（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）（１Ｈ－ピラゾール－１－イル）メチレン）カーバメート（３５．５６ｍｇ、１１４．５９μｍｏｌ、１．２当量）を２０～２５℃でアセトニトリル（５ｍＬ）と混合し、該混合物にトリエチルアミン（２４．１６ｍｇ、２３８．７３μｍｏｌ、３３．２３μＬ、２．５当量）を滴下し、次に、硫酸マグネシウム（５３．２２ｍｇ、４４２．１４μｍｏｌ、４．６３当量）を加えて、２０～２５℃で２０時間撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を減圧濃縮させ、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により残留物を精製し、粗製品化合物５－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１１５３．５（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物５－３の製造
２５℃、窒素ガス保護下、化合物５－２（８５ｍｇ、７３．７０μｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、該溶液にＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド三酸化硫黄錯体（３３．８６ｍｇ、２２１．１０μｍｏｌ、３当量）を加え、次に、２５℃で１時間撹拌した。反応溶液に水１０ｍＬを加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、粗品５－３を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１２３４．７（Ｍ＋１）。
ステップ３：化合物５の製造
０℃で、化合物５－３（９３ｍｇ、７５．４０μｍｏｌ、１当量）、アニソール（１６．３１ｍｇ、１５０．８０μｍｏｌ、１６．３９μＬ、２当量）のＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ、１７９．１２当量）を加えた。次に、混合物を２５℃で１時間撹拌した。０℃に降温して、混合物にｎ－ヘプタン（６ｍＬ×３）を添加し、上澄みを捨てて、０℃で冷却したＭＴＢＥ（４ｍＬ）でスラリー化し、次に、窒素ガス保護下、ろ過した。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率：１２％～３０％、１０ｍｉｎ）により粗製品を精製し、化合物５を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６２５．０（Ｍ＋１）。
化合物５の合成
【化53】
化合物４－１０（８７ｍｇ、９５．４９μｍｏｌ、１当量）、（Ｅ）－ｔ－ブチル（（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）（１Ｈ－ピラゾール－１－イル）メチレン）カーバメート（３５．５６ｍｇ、１１４．５９μｍｏｌ、１．２当量）を２０～２５℃でアセトニトリル（５ｍＬ）と混合し、該混合物にトリエチルアミン（２４．１６ｍｇ、２３８．７３μｍｏｌ、３３．２３μＬ、２．５当量）を滴下し、次に、硫酸マグネシウム（５３．２２ｍｇ、４４２．１４μｍｏｌ、４．６３当量）を加えて、２０～２５℃で２０時間撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を減圧濃縮させ、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により残留物を精製し、粗製品化合物５－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１１５３．５（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物５－３の製造
２５℃、窒素ガス保護下、化合物５－２（８５ｍｇ、７３．７０μｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、該溶液にＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド三酸化硫黄錯体（３３．８６ｍｇ、２２１．１０μｍｏｌ、３当量）を加え、次に、２５℃で１時間撹拌した。反応溶液に水１０ｍＬを加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、粗品５－３を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１２３４．７（Ｍ＋１）。
ステップ３：化合物５の製造
０℃で、化合物５－３（９３ｍｇ、７５．４０μｍｏｌ、１当量）、アニソール（１６．３１ｍｇ、１５０．８０μｍｏｌ、１６．３９μＬ、２当量）のＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ、１７９．１２当量）を加えた。次に、混合物を２５℃で１時間撹拌した。０℃に降温して、混合物にｎ－ヘプタン（６ｍＬ×３）を添加し、上澄みを捨てて、０℃で冷却したＭＴＢＥ（４ｍＬ）でスラリー化し、次に、窒素ガス保護下、ろ過した。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率：１２％～３０％、１０ｍｉｎ）により粗製品を精製し、化合物５を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６２５．０（Ｍ＋１）。
【0059】
実施例６
化合物６の合成
ステップ１：化合物６－２の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－１０（１６０ｍｇ、１７５．６２μｍｏｌ、１当量）、トリエチルアミン（４４．４３ｍｇ、４３９．０５μｍｏｌ、６１．１１μＬ、２．５当量）及びＤＣＭ（５ｍＬ）の混合溶液に、無水酢酸（１７．９３ｍｇ、１７５．６２μｍｏｌ、１６．４５μＬ、１当量）のジクロロメタン（０．５ｍＬ）溶液を滴下し、この温度で１時間撹拌した。溶液を食塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝２／１～０／１～ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により精製し、粗製品６－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９５３．５（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物６－３の製造
２５℃、窒素ガス保護下、化合物６－２（２１０ｍｇ、２２０．３４μｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、該溶液にＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド三酸化硫黄錯体（１０１．２４ｍｇ、６６１．０１μｍｏｌ、３当量）を加えた。この温度で１時間撹拌した。溶液に水（１０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、化合物６－３を得た。ＬＣＭＳ：１０３３．６（Ｍ＋１）。
ステップ３：化合物６の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物６－３（１９０ｍｇ、１８３．９０μｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ（０．８ｍＬ）溶液を撹拌しながら、アニソール（９９．４３ｍｇ、９１９．５１μｍｏｌ、９９．９３μＬ、５当量）及びトリフルオロ酢酸（２０．９７ｍｇ、１８３．９０μｍｏｌ、１３．６２μＬ、１当量）を加え、次に、この反応液を２５℃で１時間撹拌した。０℃に降温して、混合物にｎ－ヘプタン（５ｍＬ×２）を添加し、上澄みを捨てて、０℃で冷却したＭＴＢＥ（１０ｍＬ）を用いてスラリー化し、ろ過し、ＭＴＢＥでろ過ケーキを洗浄した。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ Ｔ３ １５０×３０ｍｍ×５μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率：５％～３５％、１０ｍｉｎ）により粗製品を精製し、化合物６を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ＝６．８９（ｓ，１Ｈ），５．２４（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２０－４．１２（ｍ，１Ｈ），３．６０（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），３．５３－３．３６（ｍ，２Ｈ），３．１５－２．９９（ｍ，３Ｈ），２．９１（ｄｄ，Ｊ＝７．０，９．５Ｈｚ，１Ｈ），１．８７－１．７３（ｍ，３Ｈ），１．３８（ｂｒ ｓ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：６２５（Ｍ＋１）；５４５（Ｍ－８０＋１）。
化合物６の合成
【化54】
０℃、窒素ガス保護下、化合物４－１０（１６０ｍｇ、１７５．６２μｍｏｌ、１当量）、トリエチルアミン（４４．４３ｍｇ、４３９．０５μｍｏｌ、６１．１１μＬ、２．５当量）及びＤＣＭ（５ｍＬ）の混合溶液に、無水酢酸（１７．９３ｍｇ、１７５．６２μｍｏｌ、１６．４５μＬ、１当量）のジクロロメタン（０．５ｍＬ）溶液を滴下し、この温度で１時間撹拌した。溶液を食塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させた。シリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝２／１～０／１～ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により精製し、粗製品６－２を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９５３．５（Ｍ＋１）。
ステップ２：化合物６－３の製造
２５℃、窒素ガス保護下、化合物６－２（２１０ｍｇ、２２０．３４μｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、該溶液にＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド三酸化硫黄錯体（１０１．２４ｍｇ、６６１．０１μｍｏｌ、３当量）を加えた。この温度で１時間撹拌した。溶液に水（１０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。併せた有機相を食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、真空濃縮させ、化合物６－３を得た。ＬＣＭＳ：１０３３．６（Ｍ＋１）。
ステップ３：化合物６の製造
０℃、窒素ガス保護下、化合物６－３（１９０ｍｇ、１８３．９０μｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ（０．８ｍＬ）溶液を撹拌しながら、アニソール（９９．４３ｍｇ、９１９．５１μｍｏｌ、９９．９３μＬ、５当量）及びトリフルオロ酢酸（２０．９７ｍｇ、１８３．９０μｍｏｌ、１３．６２μＬ、１当量）を加え、次に、この反応液を２５℃で１時間撹拌した。０℃に降温して、混合物にｎ－ヘプタン（５ｍＬ×２）を添加し、上澄みを捨てて、０℃で冷却したＭＴＢＥ（１０ｍＬ）を用いてスラリー化し、ろ過し、ＭＴＢＥでろ過ケーキを洗浄した。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ Ｔ３ １５０×３０ｍｍ×５μｍ；移動相：［移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）；移動相Ｂ：アセトニトリル］；移動相Ｂの百分率：５％～３５％、１０ｍｉｎ）により粗製品を精製し、化合物６を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ＝６．８９（ｓ，１Ｈ），５．２４（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２０－４．１２（ｍ，１Ｈ），３．６０（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），３．５３－３．３６（ｍ，２Ｈ），３．１５－２．９９（ｍ，３Ｈ），２．９１（ｄｄ，Ｊ＝７．０，９．５Ｈｚ，１Ｈ），１．８７－１．７３（ｍ，３Ｈ），１．３８（ｂｒ ｓ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：６２５（Ｍ＋１）；５４５（Ｍ－８０＋１）。
【0060】
実験例１：化合物の静菌作用（ＭＩＣ）検出
クレブシエラ・ニューモニエＡＴＣＣ ＢＡＡ－２０５（ＴＥＭ－１／ＳＨＶ－１／ＳＨＶ－１２）、ＡＴＣＣ ＢＡＡ－１７０５（ＫＰＣ－２）、ＡＴＣＣ ＢＡＡ－２４７０（ＮＤＭ－１）３株、エンテロバクター・クロアカＡＴＣＣ ＢＡＡ－１１４３（ＡｍｐＣ）、大腸菌ＡＴＣＣ ＢＡＡ－２５２３（ＯＸＡ－４８）、ＡＴＣＣ ２５９２２ ２株について、臨床検査標準協会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｓｔａｎｄａｒｄ、ＣＬＳＩ）の要件に従って、微量液体希釈法により、各化合物の最小静菌濃度（Ｍｉｎｉｍｕｍ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ、ＭＩＣ）を測定した。丸底９６ウェルプレート（Ｃａｔａｌｏｇ＃３７８８、Ｃｏｒｎｉｎｇ）に２倍連続希釈化合物（最終濃度範囲０．１２５μｇ／ｍＬ－１２８μｇ／ｍＬ）を加え、一晩放置して、ミューラー・ヒントン寒天培地Ｍｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ ＩＩ Ａｇａｒ（ＭＨＡ、Ｃａｔ．Ｎｏ．２１１４３８、ＢＤ ＢＢＬ ＴＭ）プレートから新鮮な細菌単一クローンを選択して、滅菌生理食塩水に懸濁させ、濃度を１×１０８ＣＦＵ／ｍＬに調整し、次に、カチオンで調整されたミューラー・ヒントン培地Ｃａｔｉｏｎ－Ａｄｊｕｓｔｅｄ Ｍｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ ＩＩ Ｂｒｏｔｈ（ＭＨＢ、Ｃａｔａｌｏｇ＃２１２３３２、ＢＤ ＢＢＬＴＭ）を用いて５×１０５ＣＦＵ／ｍＬに希釈し、薬物を容れた丸底９６ウェルプレートに１００μＬを加えた。プレートを逆様にして３７℃で２０～２４ｈ培養した後、ＭＩＣ値を読み取り、細菌成長を阻害する最低薬物濃度をＭＩＣとした。結果を表１に示す。コロニー形成ユニット（ＣＦＵ、Ｃｏｌｏｎｙ－Ｆｏｒｍｉｎｇ Ｕｎｉｔｓ）とは、単位体積あたりの細菌コロニー総数である。
結論：本発明の化合物は複数種類の菌に対して良好な阻害効果を有する。
クレブシエラ・ニューモニエＡＴＣＣ ＢＡＡ－２０５（ＴＥＭ－１／ＳＨＶ－１／ＳＨＶ－１２）、ＡＴＣＣ ＢＡＡ－１７０５（ＫＰＣ－２）、ＡＴＣＣ ＢＡＡ－２４７０（ＮＤＭ－１）３株、エンテロバクター・クロアカＡＴＣＣ ＢＡＡ－１１４３（ＡｍｐＣ）、大腸菌ＡＴＣＣ ＢＡＡ－２５２３（ＯＸＡ－４８）、ＡＴＣＣ ２５９２２ ２株について、臨床検査標準協会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｓｔａｎｄａｒｄ、ＣＬＳＩ）の要件に従って、微量液体希釈法により、各化合物の最小静菌濃度（Ｍｉｎｉｍｕｍ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ、ＭＩＣ）を測定した。丸底９６ウェルプレート（Ｃａｔａｌｏｇ＃３７８８、Ｃｏｒｎｉｎｇ）に２倍連続希釈化合物（最終濃度範囲０．１２５μｇ／ｍＬ－１２８μｇ／ｍＬ）を加え、一晩放置して、ミューラー・ヒントン寒天培地Ｍｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ ＩＩ Ａｇａｒ（ＭＨＡ、Ｃａｔ．Ｎｏ．２１１４３８、ＢＤ ＢＢＬ ＴＭ）プレートから新鮮な細菌単一クローンを選択して、滅菌生理食塩水に懸濁させ、濃度を１×１０８ＣＦＵ／ｍＬに調整し、次に、カチオンで調整されたミューラー・ヒントン培地Ｃａｔｉｏｎ－Ａｄｊｕｓｔｅｄ Ｍｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ ＩＩ Ｂｒｏｔｈ（ＭＨＢ、Ｃａｔａｌｏｇ＃２１２３３２、ＢＤ ＢＢＬＴＭ）を用いて５×１０５ＣＦＵ／ｍＬに希釈し、薬物を容れた丸底９６ウェルプレートに１００μＬを加えた。プレートを逆様にして３７℃で２０～２４ｈ培養した後、ＭＩＣ値を読み取り、細菌成長を阻害する最低薬物濃度をＭＩＣとした。結果を表１に示す。コロニー形成ユニット（ＣＦＵ、Ｃｏｌｏｎｙ－Ｆｏｒｍｉｎｇ Ｕｎｉｔｓ）とは、単位体積あたりの細菌コロニー総数である。
【表1】
【0061】
実験例２：臨床分離菌に対する化合物の静菌作用（ＭＩＣ）の検出
寒天二倍希釈法によって、化合物とβ－ラクタマーゼ（ＭＢＬｓ）阻害剤との併用による、カルバペネム系薬剤耐性を有する臨床分離した腸内細菌科細菌に対する最小静菌濃度（ＭＩＣ）を測定し、ＭＢＬｓ産菌株に対する被検化合物の活性を確認した。抗生物質及び酵素阻害剤をそれぞれ秤量して、滅菌超純水又はジメチルスルホキシドで溶解して母液を調製し、ＭＨＡ培地を調製し、ｐＨ値を７．２～７．４に調整し、１２１℃で１５ｍｉｎ滅菌し、５５℃の水浴鍋に入れて保温し、二倍希釈法によって母液を被検濃度に希釈し、直接菌懸濁液法によって接種液を製造し、製造した菌液を１ｍＬ吸い取って接種チューブに入れ、位置決め針及び接種針をセットした。細菌多点接種装置を起動させて接種した。菌液が寒天で吸収されると、平皿を逆様にして３７℃のインキュベータに入れて１６～２０ｈ培養し、結果を観察した。３回のテストの平均値を取る。化合物単独及び併用の場合のテスト結果を以下の表２、表３に示されたようである。
結論：本発明の化合物単独及びβ－ラクタマーゼ（ＭＢＬｓ）阻害剤と併用する場合の抗菌活性はＬＹＳ－２２８及び市販薬物であるメロペネム、アズトレオナムよりも明らかに優れる。
寒天二倍希釈法によって、化合物とβ－ラクタマーゼ（ＭＢＬｓ）阻害剤との併用による、カルバペネム系薬剤耐性を有する臨床分離した腸内細菌科細菌に対する最小静菌濃度（ＭＩＣ）を測定し、ＭＢＬｓ産菌株に対する被検化合物の活性を確認した。抗生物質及び酵素阻害剤をそれぞれ秤量して、滅菌超純水又はジメチルスルホキシドで溶解して母液を調製し、ＭＨＡ培地を調製し、ｐＨ値を７．２～７．４に調整し、１２１℃で１５ｍｉｎ滅菌し、５５℃の水浴鍋に入れて保温し、二倍希釈法によって母液を被検濃度に希釈し、直接菌懸濁液法によって接種液を製造し、製造した菌液を１ｍＬ吸い取って接種チューブに入れ、位置決め針及び接種針をセットした。細菌多点接種装置を起動させて接種した。菌液が寒天で吸収されると、平皿を逆様にして３７℃のインキュベータに入れて１６～２０ｈ培養し、結果を観察した。３回のテストの平均値を取る。化合物単独及び併用の場合のテスト結果を以下の表２、表３に示されたようである。
結論：本発明の化合物単独及びβ－ラクタマーゼ（ＭＢＬｓ）阻害剤と併用する場合の抗菌活性はＬＹＳ－２２８及び市販薬物であるメロペネム、アズトレオナムよりも明らかに優れる。
【表2】
【表3】
【0062】
実験例３：マウスのインビボ薬効の実験評価（マウス大腿筋モデル）
ＣＤ－１メスマウス９匹を、１ケージあたり３匹で、３つのケージに入れて、免疫阻害剤であるシクロホスファミド（１５０ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内注射した。
２４時間後、３ケージにあるマウスに免疫阻害剤であるシクロホスファミド（１００ｍｇ／ｋｇ）、ＭＨＡプレート蘇生菌株Ｅ．ｃｏｌｉ ＡＴＣＣ－２５９２２を再度腹腔内注射した。蘇生させたコロニーを選択して生理食塩水に溶解し、濃度１．３６Ｅ＋０７ＣＦＵ／ｍＬのＥ．ｃｏｌｉ ＡＴＣＣ－２５９２２菌液を製造し、マウス大腿筋肉に感染させた。実験マウスの大腿筋肉への菌液注射量を１００μＬ／匹、即ち、接種量を１．３６Ｅ＋０６ＣＦＵ／匹とした。２ｈ感染後、対照群マウスから大腿筋肉組織を取って生理食塩水１０ｍＬに入れ、大腿筋肉組織をホモジネートし、連続希釈してスポッティング（ｓｐｏｔｔｉｎｇ）を行った。
マウスへの投与は具体的には以下のとおりである。
（１）２ｈ感染後：第１ケージにあるマウスを２ｈ感染させるところを終点とし、大腿筋肉組織を生理食塩水１０ｍＬに入れて、大腿筋肉組織をホモジネートし、連続希釈してスポッティングし、マウス１匹あたり２回繰り返し、マウスの大腿筋肉組織の菌担持量をカウントした。第３ケージにあるマウスのそれぞれに１００ｍｇ／ｋｇの化合物１を皮下注射した。
（２）４、６、８ｈ感染後：第３ケージにあるマウスのそれぞれに１００ｍｇ／ｋｇ化合物１を皮下注射した。第２～３ケージにあるマウスを１０ｈ感染させるところを終点とし、大腿筋肉組織を生理食塩水１０ｍＬに入れて、大腿筋肉組織をホモジネートし、連続希釈してスポッティングし、マウス１匹あたり２回繰り返した。マウス大腿筋肉組織の菌担持量をカウントし、実験結果をまとめて、表４に示す。
結論：本発明の化合物は、明らかな感染阻害作用を有する。
ＣＤ－１メスマウス９匹を、１ケージあたり３匹で、３つのケージに入れて、免疫阻害剤であるシクロホスファミド（１５０ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内注射した。
２４時間後、３ケージにあるマウスに免疫阻害剤であるシクロホスファミド（１００ｍｇ／ｋｇ）、ＭＨＡプレート蘇生菌株Ｅ．ｃｏｌｉ ＡＴＣＣ－２５９２２を再度腹腔内注射した。蘇生させたコロニーを選択して生理食塩水に溶解し、濃度１．３６Ｅ＋０７ＣＦＵ／ｍＬのＥ．ｃｏｌｉ ＡＴＣＣ－２５９２２菌液を製造し、マウス大腿筋肉に感染させた。実験マウスの大腿筋肉への菌液注射量を１００μＬ／匹、即ち、接種量を１．３６Ｅ＋０６ＣＦＵ／匹とした。２ｈ感染後、対照群マウスから大腿筋肉組織を取って生理食塩水１０ｍＬに入れ、大腿筋肉組織をホモジネートし、連続希釈してスポッティング（ｓｐｏｔｔｉｎｇ）を行った。
マウスへの投与は具体的には以下のとおりである。
（１）２ｈ感染後：第１ケージにあるマウスを２ｈ感染させるところを終点とし、大腿筋肉組織を生理食塩水１０ｍＬに入れて、大腿筋肉組織をホモジネートし、連続希釈してスポッティングし、マウス１匹あたり２回繰り返し、マウスの大腿筋肉組織の菌担持量をカウントした。第３ケージにあるマウスのそれぞれに１００ｍｇ／ｋｇの化合物１を皮下注射した。
（２）４、６、８ｈ感染後：第３ケージにあるマウスのそれぞれに１００ｍｇ／ｋｇ化合物１を皮下注射した。第２～３ケージにあるマウスを１０ｈ感染させるところを終点とし、大腿筋肉組織を生理食塩水１０ｍＬに入れて、大腿筋肉組織をホモジネートし、連続希釈してスポッティングし、マウス１匹あたり２回繰り返した。マウス大腿筋肉組織の菌担持量をカウントし、実験結果をまとめて、表４に示す。
【表4】
【0063】
実験例４：マウス大腿筋肉感染モデルの薬効実験の評価
ＣＤ－１メスマウス１５匹を、１ケージあたり３匹で、５ケージに入れ、感染当日を０日目とした。
Ｄａｙ－４に免疫阻害剤であるシクロホスファミド１５０ｍｇ／ｋｇを腹腔内注射し、１日目に免疫阻害剤であるシクロホスファミド１００ｍｇ／ｋｇを再度腹腔内注射して、免疫不全マウスを作成した。
１日目にＭＨＡプレートで菌株Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ＡＴＣＣ－ＢＡＡ ２４７０蘇生をさせた。蘇生させたコロニーを選択して、無菌生理食塩水に溶解し、濃度９．５Ｅ＋０７ＣＦＵ／ｍＬの菌液を製造して、マウスの大腿筋肉を感染させた。感染開始時間を０ｈとし、１匹あたり、０ｈに大腿筋肉に菌液１００μＬを注射し、即ち、接種量を９．５Ｅ＋０６ＣＦＵ／ｍｏｕｓｅとした。２ｈ感染後、実験スキームに従って投与した。具体的な実験スキームは以下のとおりである（表５参照）。
（１）２ｈ感染後：第１ケージにあるマウスを殺し、大腿筋肉組織を無菌生理食塩水１０ｍＬに入れて、ホモジナイザーにより組織をホモジネートし、ホモジネート液を連続希釈してスポッティングし、マウス１匹あたり、２回繰り返した。
（２）２ｈ感染後：第２～３ケージについて、マウス体重１０ｍＬ／ｋｇの体積でそれぞれ治療を施した。第２ケージにあるマウスについて、２ｈごとに溶媒を皮下投与し、２４ｈを終点とした。第３ケージにあるマウスについて、２ｈごとに２００ｍｇ／ｋｇの化合物４を腹腔内注射し、２４ｈを終点とした。終点になると、大腿筋肉組織を摘出し、無菌生理食塩水１０ｍＬに入れて、ホモジナイザーにより組織をホモジネートし、ホモジネート液を連続希釈してスポッティングし、マウス１匹あたり、２回繰り返した。マウスの大腿筋肉組織の菌担持量をカウントし、実験結果を表６に示す。
結論：本発明の化合物は明らかな感染阻害作用を有する。
ＣＤ－１メスマウス１５匹を、１ケージあたり３匹で、５ケージに入れ、感染当日を０日目とした。
Ｄａｙ－４に免疫阻害剤であるシクロホスファミド１５０ｍｇ／ｋｇを腹腔内注射し、１日目に免疫阻害剤であるシクロホスファミド１００ｍｇ／ｋｇを再度腹腔内注射して、免疫不全マウスを作成した。
１日目にＭＨＡプレートで菌株Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ＡＴＣＣ－ＢＡＡ ２４７０蘇生をさせた。蘇生させたコロニーを選択して、無菌生理食塩水に溶解し、濃度９．５Ｅ＋０７ＣＦＵ／ｍＬの菌液を製造して、マウスの大腿筋肉を感染させた。感染開始時間を０ｈとし、１匹あたり、０ｈに大腿筋肉に菌液１００μＬを注射し、即ち、接種量を９．５Ｅ＋０６ＣＦＵ／ｍｏｕｓｅとした。２ｈ感染後、実験スキームに従って投与した。具体的な実験スキームは以下のとおりである（表５参照）。
（１）２ｈ感染後：第１ケージにあるマウスを殺し、大腿筋肉組織を無菌生理食塩水１０ｍＬに入れて、ホモジナイザーにより組織をホモジネートし、ホモジネート液を連続希釈してスポッティングし、マウス１匹あたり、２回繰り返した。
（２）２ｈ感染後：第２～３ケージについて、マウス体重１０ｍＬ／ｋｇの体積でそれぞれ治療を施した。第２ケージにあるマウスについて、２ｈごとに溶媒を皮下投与し、２４ｈを終点とした。第３ケージにあるマウスについて、２ｈごとに２００ｍｇ／ｋｇの化合物４を腹腔内注射し、２４ｈを終点とした。終点になると、大腿筋肉組織を摘出し、無菌生理食塩水１０ｍＬに入れて、ホモジナイザーにより組織をホモジネートし、ホモジネート液を連続希釈してスポッティングし、マウス１匹あたり、２回繰り返した。マウスの大腿筋肉組織の菌担持量をカウントし、実験結果を表６に示す。
【表5】
【表6】
【国際調査報告】