特表 2023-503195 シイタケ由来ビタミンＤの製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-01-26

(54)【発明の名称】シイタケ由来ビタミンＤの製造方法

(51)【国際特許分類】

   A23L 19/00 20160101AFI20230119BHJP

   A23L 33/155 20160101ALI20230119BHJP

   A23L 5/00 20160101ALI20230119BHJP

【ＦＩ】

A23L19/00 101

A23L19/00 A

A23L33/155

A23L5/00 K

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022548051

(86)(22)【出願日】2020-12-21

(85)【翻訳文提出日】2022-08-10

(86)【国際出願番号】 KR2020018776

(87)【国際公開番号】W WO2021157856

(87)【国際公開日】2021-08-12

(31)【優先権主張番号】10-2020-0014531

(32)【優先日】2020-02-06

(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522312838

【氏名又は名称】キム、ジョン オク

【氏名又は名称原語表記】ＫＩＭ，Ｊｅｏｎｇ Ｏｋ

【住所又は居所原語表記】１０５ｄｏｎｇ １６０２ｈｏ，４５，Ｇａｎｇｎａｍ－ｒｏ Ｊｉｎｊｕ－ｓｉ Ｇｙｅｏｎｇｓａｎｇｎａｍ－ｄｏ ５２７２８，Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ

(71)【出願人】

【識別番号】522418244

【氏名又は名称】エイチケイ バイオテック カンパニー リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100130111

【弁理士】

【氏名又は名称】新保 斉

(72)【発明者】

【氏名】キム、ジョン オク

(72)【発明者】

【氏名】ハ、ヨン レ

【テーマコード（参考）】

4B016

4B018

4B035

【Ｆターム（参考）】

4B016LC07

4B016LE02

4B016LG14

4B016LP01

4B016LP03

4B016LP05

4B016LP13

4B018LB03

4B018LE02

4B018MD23

4B018MD83

4B018ME14

4B018MF04

4B018MF07

4B018MF09

4B018MF14

4B035LC06

4B035LE01

4B035LG16

4B035LG39

4B035LP01

4B035LP16

4B035LP59

(57)【要約】

ビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法に関し、（１）シイタケを常温以下の温度で予備熟成する第１段階、（２）前記予備熟成したシイタケを常温の温度で本熟成する第２段階、（３）前記本熟成したシイタケを破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）する第３段階、（４）前記破片化したシイタケにＵＶ－Ｂを照射する第４段階、（５）前記ＵＶ－Ｂを照射したシイタケ片を熱処理する第５段階、及び（６）前記熱処理したシイタケ片を粉砕する第６段階、を含むビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法に関するものである。本発明の方法によってシイタケを製造した場合、既存の方法より６０倍以上のビタミンＤ２含量を増加させ、有機溶媒を全く使用せずに細菌数が低く安全性が確保された完成品の製造が可能であるという利点がある。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

（１）シイタケを常温以下の低温で予備熟成する第１段階、（２）前記予備熟成したシイタケを常温の温度で本熟成する第２段階、（３）前記本熟成したシイタケを破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）する第３段階、（４）前記破片化したシイタケにＵＶ－Ｂを照射する第４段階、（５）前記ＵＶ－Ｂを照射したシイタケ片を熱処理する第５段階、及び（６）前記熱処理したシイタケ片を粉砕する第６段階、を含むビタミンＤ２含量が増大した
ことを特徴とするシイタケの製造方法。

【請求項2】

前記予備熟成は１～８日である
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項3】

前記本熟成は１～８日である
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項4】

前記破片化したシイタケは、横、縦及び高さの長さがそれぞれ０．５～２０ｍｍ以下である
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項5】

前記破片化したシイタケの水分含量が７０～９５重量％である
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項6】

前記ＵＶ－Ｂを照射することは、ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板に前記シイタケ試料を載せた状態で、８０～１００％の相対湿度で、１，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強さで、３０分～１８０分間照射しながら、１５分に１回～３回一定の時間間隔で前記シイタケを裏返す
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項7】

前記熱処理することは、４０～８０℃で１２～４８時間の間処理する
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項8】

前記方法で製造したシイタケは、３６０μｇ（１４，４００ＩＵ）／ｇ以上のビタミンＤ２を生産する
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項9】

前記方法で製造したシイタケは、細菌数がｇあたり１０００以下であり、大腸菌が陰性である
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項10】

前記方法で製造したシイタケは、ベータグルカン、ポリフェノール、銅（Ｃｕ）、亜鉛（Ｚｎ）、セレン（Ｓｅ）、エルゴステロール、エリタデニン（ｅｒｉｔａｄｅｎｉｎｅ）、硫黄化合物、抗炎症物質、免疫増強物質、抗癌物質、抗ウイルス物質、抗バクテリア物質、抗カビ物質、血糖調節物質を含有する
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明はビタミンＤ含量が増大したシイタケの製造方法に関する。より詳細には、予備熟成及び本熟成段階を経たシイタケを破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した後、ＵＶ－Ｂを照射して熱処理することを特徴とするビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法に関する。

【背景技術】

【0002】

ビタミン（ｖｉｔａｍｉｎ）Ｄは、小腸でのカルシウムとリン酸の吸収促進、カルシウム機能の維持、骨粗鬆症の予防、ホルモンとしての役割遂行、アルツハイマー等のさまざまな疾病の予防及び治療に役立つ重要な役割をする栄養素である。現在まで発見されたビタミンＤの種類はＤ２からＤ７までであり、これらのうちＤ２とＤ３が生物学的に活性が高い。

【0003】

このようなビタミンＤの一日の勧奨量は、１５歳以下の子供と５０歳以上の女性の場合１０μｇ（４００ＩＵ）、５０歳以下の成人の場合５μｇ（２００ＩＵ）であるが、最近は室内生活の増加、粒子状物質等によるマスク着用及び紫外線遮断剤の使用により紫外線にさらされる時間が制限されるので、皮膚でのビタミンＤ生合成が妨げられている。特に、ビタミンＤの欠乏は、成長期の子供ではくる病が発生し、更年期の女性や老人では骨軟化症（ｏｓｔｅｏｍａｌａｃｉａ）が発生し、低カルシウム症、甲状腺機能不全症や骨の喪失をもたらし得る。

【0004】

食餌によって摂取できるビタミンＤは、きのこ類や魚、肉類及び牛乳等に微量含有されており、特にきのこは、ビタミンＤ２の前駆体であるエルゴステロール（ｅｒｇｏｓｔｅｒｏｌ）を多く含んでいて、エルゴステロールから合成されたビタミンＤ２を健康機能食品として摂取すると、これは肝臓と腎臓を経て活性ビタミンＤ２である１，２５－ｈｙｄｒｏｘｙｖｉｔａｍｉｎ Ｄ２に転換されてビタミンＤ２としての多様な生理機能をする。

【0005】

市場に流通している大部分のビタミンＤ３は、羊毛から得たコレステロール（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）から化学的に合成したビタミンＤ３である。すなわち、羊毛のＬａｎｏｌｉｎを有機溶媒で抽出及び精製→Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ分離及び精製→７－ｄｅｈｙｄｒｏｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌの化学的合成→ＵＶ照射過程を経てビタミンＤ３を合成するので、最終のビタミンＤ３製品に有機溶媒、ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ、不純物等が残留する可能性が高い。また、市場で流通している「酵母ビタミンＤ３」があるが、これは実際に酵母由来のビタミンでなく、酵母に羊毛のｌａｎｏｌｉｎから合成された合成ビタミンＤ３を混合して製造したものである。

【0006】

マッシュルームから生産されるビタミンＤは、子実体の組織が脆く、水分含量が高くて初期細菌数が１０００／ｇ以上と多いので、完成品の製造時に規格に不適合となるという問題点がある。また食餌によって供給できる食品の種類が少ないだけでなく、食品に含有されているビタミンＤの含量が非常に低く食品を介した摂取は非常に制限的であるため、ビタミンＤが強化された食品の開発が切実に要求されている。

【0007】

一方、きのこにＵＶ－Ｂを照射して、きのこに含有されたエルゴステロールをビタミンＤ２に合成する方法に関して、特許文献１ないし３が提示されている（特許文献１－３：大韓民国登録特許第１０－０６３７８３３号、第１０－１５８８１０５号、第１０－１１７１４６５号）。しかし、特許文献１ないし３の場合、きのこにＵＶ－Ｂを照射してビタミンＤ２を増大させた利点はあるが、結果的にビタミンＤ２の含量がヒラタケで２４０μｇ／ｇ未満で、シイタケでは６．９３μｇ／ｇと非常に低い方であり、照射時間が長く製造費用が上昇する等の商品性及び経済性が低い問題がある。

【0008】

そこで本発明者らは、従来行われてきたきのこに紫外線を照射する条件だけでなく、ビタミンＤの含量に影響を及ぼし得る前処理条件を研究し、ビタミンＤの含量差を分析してビタミンＤの含量が顕著に増大したきのこを製造する最適の条件を確立することにより本発明を完成した。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0009】

【特許文献1】大韓民国登録特許第１０－０６３７８３３号

【特許文献2】大韓民国登録特許第１０－１５８８１０５号

【特許文献3】大韓民国登録特許第１０－１１７１４６５号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

本発明は、ビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法、及びそれによるビタミンＤ２含量が増大したシイタケを提供することを目的とする。

【0011】

より詳細には、（１）シイタケを常温以下の温度で予備熟成する第１段階、（２）前記予備熟成したシイタケを常温の温度で本熟成する第２段階、（３）前記本熟成したシイタケを破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）する第３段階、（４）前記破片化したシイタケにＵＶ－Ｂを照射する第４段階、（５）前記ＵＶ－Ｂを照射したシイタケ片を熱処理する第５段階、及び（６）前記熱処理したシイタケ片を粉砕する第６段階、を含むビタミンＤ２含量が増大したシイタケを提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0012】

上記のような課題を解決するために、本発明は、ビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法を提供する。（１）シイタケを常温以下の温度で予備熟成する第１段階、（２）前記予備熟成したシイタケを常温の温度で本熟成する第２段階、（３）前記本熟成したシイタケを破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）する第３段階、（４）前記破片化したシイタケにＵＶ－Ｂを照射する第４段階、（５）前記ＵＶ－Ｂを照射したシイタケ片を熱処理する第５段階、及び（６）前記熱処理したシイタケ片を粉砕する第６段階、を含むビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法を提供する。

【0013】

さらに、本発明の前記予備熟成は１～８日であることを特徴とすることができる。
さらに、本発明の前記本熟成は１～８日であることを特徴とすることができる。
さらに、本発明の前記破片化したシイタケは、横、縦及び高さの長さがそれぞれ０．５～２０ｍｍ以下であることを特徴とすることができる。
さらに、本発明の前記破片化したシイタケの水分含量が７０～９５重量％であることを特徴とすることができる。

【0014】

さらに、本発明の前記ＵＶ－Ｂを照射することは、ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板に前記シイタケ試料を載せた状態で、８０～１００％の相対湿度で、１，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強さで、３０分～１８０分間照射しながら、１５分に１回～３回一定の時間間隔で前記シイタケを裏返してやることを特徴とすることができる。
さらに、本発明の前記熱処理することは、４０～８０℃で１２～４８時間の間処理することを特徴とすることができる。
さらに、本発明の前記方法で製造したシイタケは、３６０μｇ（１４，４００ＩＵ）／ｇ以上のビタミンＤ２を生産することを特徴とすることができる。
さらに、本発明の前記方法で製造したシイタケは、細菌数がｇあたり１０００以下であり、大腸菌が陰性であることを特徴とすることができる。

【0015】

さらに、本発明の前記方法で製造したシイタケは、ベータ-グルカン、ポリフェノール、銅（Ｃｕ）、亜鉛（Ｚｎ）、セレン（Ｓｅ）、エルゴステロール、エリタデニン（ｅｒｉｔａｄｅｎｉｎｅ）、硫黄化合物、抗炎症物質、免疫増強物質、抗癌物質、抗ウイルス物質、抗バクテリア物質、抗カビ物質、血糖調節物質を含有することを特徴とすることができる。

【発明の効果】

【0016】

上記のような本発明は、ビタミンＤ２含量が増大したシイタケを提供して、既存の方法より１０倍～６０倍以上ビタミンＤ２含量が顕著に増加し、有機溶媒を全く使用せずに細菌数が低く、安全性が確保された完成品の製造が可能であるという長所がある。

【図面の簡単な説明】

【0017】

【図1】本発明のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造工程を時系列で簡略に示した図である。

【図2】本発明のシイタケから生産されたビタミンＤ２のＨＰＬＣの結果を示した図である（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ １２００ ｓｅｒｉｅｓ；ビタミンＤ２、２３分）。

【図3】本発明のシイタケから生産されたビタミンＤ２と標準品のビタミンＤ２の比較ＵＶ ｓｐｅｃｔｒｕｍの結果を示した図である（標準品のビタミンＤとシイタケ由来ビタミンのＤ ｓｐｅｃｔｒｕｍ比較）。

【発明を実施するための形態】

【0018】

本発明は多様な変更を加えることができ、さまざまな実施例を持ち得るところ、特定の実施例を図面に例示し詳細な説明で詳細に説明することにする。しかし、これは本発明を特定の実施形態について限定しようとするものではなく、本発明の思想及び技術範囲に含まれるすべての変更、均等物ないし代替物を含む。

【0019】

第１、第２等のように序数を含む用語は、多様な構成要素を説明するのに使用され得るが、該当構成要素はこのような用語によって限定されない。これらの用語は、一つの構成要素を他の構成要素から区別する目的でのみ使用される。

【0020】

以下の説明において、当業者に周知著名な技術についてはその詳細な説明を省略することができる。また、本発明を説明するにおいて、関連した公知機能または構成に対する具体的な説明が本発明の要旨を不要に不明瞭にし得ると判断される場合には、その詳細な説明を省略することができる。また、本明細書で使用される用語（ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ）は、本発明の好ましい実施例を適切に表現するために使用された用語であって、これは使用者、運用者の意図または本発明が属する分野の慣例等によって変わり得る。

【0021】

したがって、本用語についての定義は、本明細書全般にわたった内容を土台としてなされるべきものである。明細書全体で、ある部分がある構成要素を「含む」というとき、これは特に反対の記載がない限り他の構成要素を除外するものではなく、他の構成要素をさらに含み得ることを意味する。

【0022】

以下、添付された図面を参照して本発明に係る好ましい一実施例を詳細に説明する。
ただし、下記の実施例及び製造例は本発明を例示するものに過ぎず、本発明の内容が下記の実施例及び製造例によって限定されるものではない。

【0023】

＜実施例＞
材料および方法
以下の実施例で使用された材料および方法は下記のとおりである。
１．試料のシイタケ子実体
試料のシイタケ子実体は、韓国慶州南道晋州市金谷面で栽培した中等級製品を使用した。

【0024】

２．予冷及び熟成貯蔵庫
温度が調節（０～３０℃）できる貯蔵庫で貯蔵した。

【0025】

３．ＵＶ照射箱
密閉されたステンレススチールチャンバは、上部にＵＶ電球（２８０～３６０ｎｍ：１５Ｗ）が３つ装着されており、ＵＶ電灯から１０～２０ｃｍ離れた所に（距離調整可能）試料を入れることができるステンレススチール板が装着されている。

【0026】

４．試料乾燥機
温度が調節（常温～１００℃）できる乾燥機を使用した。

【0027】

５．ビタミンＤ２の分析
ビタミンＤ２の分析のための試料は、食品医薬品安全処のビタミンＤ２標準調製方法で調製し、調製した試料のビタミンＤ２の分析は、食品医薬品安全処の標準ＨＰＬＣのｓｙｓｔｅｍ及び方法で分析した。分析値に対する統計は、Ｔｕｋｅｙ’ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｔｅｓｔで検証した。同一処理内で互いに異なる英語の小文字を有する平均値は、ｐ＜０．０５で有意性があることを意味する。

【0028】

＜実施例１＞
予備熟成の温度及び期間による破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した試料のビタミンＤ２含量

【0029】

シイタケ子実体は、収穫直後に温度が調節できる貯蔵庫で多様な温度（０、５、１５、３０℃）と多様な熟成期間（０、１、４、８日）の組み合わせで予備熟成した。予備熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５重量％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）して、おがくず（横×縦×高さ３ｍｍ以下）のような状態に試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で３０分間照射しながら、１５分に一回裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0030】

【表1】

【0031】

その結果、表１に示すように、３０℃で１日間予備熟成させた試料がビタミンＤ２含量が最も高かった。しかし組織が脆くなり過ぎて破片化が難しく、乾燥時に固まり現象が起き、若干の腐敗現象が起きてカビと細菌数が高くて、試料として使用するには不適合であった。

【0032】

＜実施例２＞
本熟成の温度及び期間による破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した試料のビタミンＤ２含量

【0033】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させた試料を、さらに温度（０、５、１５、３０℃）と期間（０、２、５、８日）の組み合わせで本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５重量％水分含量の子実体を選定した。本熟成したシイタケ子実体を破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）して、おがくず（横×縦×高さ３ｍｍ以下）のような状態に試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で３０分間照射しながら、１５分に一回裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0034】

【表2】

【0035】

その結果、表２に示すように、１５℃で２日間本熟成させた試料がビタミンＤ２含量が最も高いが、最も適した貯蔵期間は２～５日であった。

【0036】

＜実施例３＞
破片化（Ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した試料のＵＶ照射量によるビタミンＤ２含量

【0037】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５重量％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）して、おがくず（横×縦×高さ３ｍｍ以下）のような状態に試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板(電球から１５ｃｍ離れた位置)に試料を０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き、ＵＶ量（０、５００、１，０００、２，０００、３，０００、４，０００、５０００μＷ／ｃｍ^２）を相対湿度９０～１００％で３０分間照射しながら、１５分に一回裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0038】

【表3】

【0039】

その結果、表３に示すように、３，０００μＷ／ｃｍ^２で３０分間ＵＶ照射した試料がビタミンＤ２含量が最も高いが、２，０００～４，０００μＷ／ｃｍ^２ではビタミンＤ２生産には差がなかった。

【0040】

＜実施例４＞
破片化（Ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した試料のＵＶ照射時間及び裏返しによるビタミンＤ２含量

【0041】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）して、おがくず（横×縦×高さ３ｍｍ以下）のような状態に試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で一定時間（１０、３０、６０、１２０分）照射しながら、一定回数（０、１、２、３）で裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0042】

【表4】

【0043】

その結果、表４に示すように、ＵＶ２５００～３０００μＷ／ｃｍ^２で３０分間に一回裏返した試料がビタミンＤ２含量が最も高かったが、２回裏返した試料でも類似のビタミンＤ２含量を得た。そして６０分照射した試料の場合は２回裏返した試料でも類似のビタミンＤ２含量を得た。

【0044】

＜実施例５＞
破片化（Ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した試料のＵＶ照射後の乾燥温度及び時間によるビタミンＤ２含量

【0045】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）して、おがくず（横×縦×高さ３ｍｍ以下）のような状態に試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で３０分照射しながら、１５分に一回裏返した。ＵＶが照射された試料を一定の温度（０、２０、４０、６０、８０、１００℃）で２４時間熱処理し、また６０℃で一定の時間（０、６、１２、２４、４８時間）熱処理した後、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0046】

【表5】

【0047】

その結果、表５に示すように、６０～８０℃で２４時間熱処理した試料がビタミンＤ２含量が最も高かった。また６０℃では１２時間～４８時間処理するものがビタミンＤ２含量が高かった。

【0048】

＜実施例６＞
破片化（Ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した試料量とＵＶ照射時間によるビタミンＤ２含量

【0049】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）して、おがくず（横×縦×高さ３ｍｍ以下）のような状態に試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を多様な厚さ（０．５～１．０、１～２、２～３、３～５ｃｍ）で敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で多様な時間（０、３０、６０、９０、１８０分）照射しながら、１５分に一回裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0050】

【表6】

【0051】

その結果、表６に示すように、試料を０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き３０～６０分間ＵＶで照射された試料がビタミンＤ２含量が最も高かった。１～２ｃｍの厚さで敷き６０分ＵＶ照射した試料も、０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き３０～６０分間ＵＶ照射された試料とビタミンＤ２含量には差がなかった。

【0052】

＜実施例７＞
破片化（Ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した試料の水分含量によるビタミンＤ２含量

【0053】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、水分含量（４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５％）の子実体を試料として製造した。選定されたシイタケ子実体を破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）して、おがくず（横×縦×高さ３ｍｍ以下）のような状態に試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で３０分間照射しながら、１５分に一回裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0054】

【表7】

【0055】

その結果、表７に示すように、水分含量が９０％の試料がビタミンＤ２含量が最も高かったが、水分含量が８０～９５％の試料ではビタミンＤ２含量に差がなかった。

【0056】

＜実施例８＞
チャンバ（Ｃｈａｍｂｅｒ）内の相対湿度による破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した試料のビタミンＤ２含量

【0057】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）して、おがくず（横×縦×高さ３ｍｍ以下）のような状態に試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２強度で多様な相対湿度（４０、６０、８０、９０、１００％）で３０分間照射しながら、１５分に一回裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0058】

【表8】

【0059】

その結果、表８に示すように、チャンバ（Ｃｈａｍｂｅｒ）内の相対湿度が９０％の試料がビタミンＤ２含量が最も高かったが、相対湿度が９０～１００％の場合にはビタミンＤ２含量に差がなかった。

【0060】

＜実施例９＞
試料の形態及び大きさによるビタミンＤ２含量

【0061】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を多様な大きさ（０．５～３、３～５、５～１０、１０～２０ｍｍ）にスライス（Ｓｌｉｃｉｎｇ）、または、多様な大きさ（０．５～３、３～５、５～１０、１０～２０ｍｍ）に破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）して試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を３００ｇ入れ、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で３０分間照射しながら、１５分に一回裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0062】

【表9】

【0063】

その結果、表９に示すように、試料を破片化やスライスしない試料では非常に低いビタミンＤ２が生成された。しかし０．５～３ｍｍ以下に破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した試料でビタミンＤ２含量が最も高く、３～５ｍｍ以下に破片化した試料と差がなかった。またスライスした場合、０．５～３ｍｍ以下にスライスした試料でビタミンＤ２含量が最も高かったが、その含量は破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）した試料より相対的に低かった。

【0064】

＜実施例１０＞
本熟成期間によるスライス（Ｓｌｉｃｉｎｇ）した試料のビタミンＤ２含量

【0065】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で多様な期間（０、１、２、５、８日）の間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を３ｍｍ程度にスライス（Ｓｌｉｃｉｎｇ）した試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で３０分間照射しながら、１５分に一回裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0066】

【表10】

その結果、表１０に示すように、２～５日間本熟成した試料がビタミンＤ２含量が最も高かった。

【0067】

＜実施例１１＞
スライス（Ｓｌｉｃｉｎｇ）した試料のＵＶ照射時間及び裏返しによるビタミンＤ２含量

【0068】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間の間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を３ｍｍ程度にスライス（Ｓｌｉｃｉｎｇ）した試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を一つずつ敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で多様な時間（０．５、１．０、５．０時間）照射しながら、多様な間隔で裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0069】

【表11】

その結果、表１１に示すように、１時間ＵＶ照射し、１～２回裏返した試料がビタミンＤ２含量が最も高かった。

【0070】

＜実施例１２＞
スライス（Ｓｌｉｃｉｎｇ）した試料の厚さとＵＶ照射時間によるビタミンＤ２含量

【0071】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間の間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を多様な大きさ（０．５～３、３～５、５～１０、１０～２０ｍｍ）にスライス（Ｓｌｉｃｉｎｇ）して試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に多様な厚さを有した試料を一つずつ敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で多様な時間（０、３０、６０、１８０分）照射しながら、３０分ごとに裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0072】

【表12】

【0073】

その結果、表１２に示すように、スライス（Ｓｌｉｃｉｎｇ）の厚さが０．５～３ｍｍの試料を６０～１８０分間ＵＶ照射した試料がビタミンＤ２含量が最も高かった。そして３～５ｍｍの試料の場合、６０分照射した試料でビタミンＤ２含量が最も高く、この含量は０．５～３ｍｍの試料を６０～１８０分間ＵＶ照射した試料と差がなかった。

【0074】

＜実施例１３＞
最適条件で生産したビタミンＤ２含量

【0075】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間の間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５％水分含量の子実体を選定した。選定されたシイタケ子実体を破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）して、おがくず（横×縦×高さ３ｍｍ以下）のような状態に試料を調製した。ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板（電球から１５ｃｍ離れた位置）に試料を０．５～１．０ｃｍの厚さで敷き、ＵＶを２，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強度で相対湿度９０～１００％で３０分照射しながら、１５分に一回裏返した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0076】

【表13】

その結果、表１３に示すように、最適の条件で生産したビタミンＤ２含量は３６０．８±２０．４μｇ／ｇと測定された。

【0077】

＜実施例１４＞
本特許方法と既存特許（大韓民国登録特許第１０－０６３７８３３号）によるビタミンＤ２含量の比較

【0078】

シイタケ子実体は、収穫直後に５℃の貯蔵庫で１日間予備熟成させ、さらに温度１５℃で３日間の間本熟成した。本熟成したシイタケ子実体を水で洗浄し、子実体表面の水を除去し、８０～９５％水分含量の子実体を選定した。ＵＶが照射された試料を６０℃で２４時間熱処理し、粉砕してビタミンＤ２分析試料として使用してビタミンＤ２含量を測定した。

【0079】

既存特許（特許文献１：大韓民国登録特許第１０－０６３７８３３号）の方法は、照射部位はスライスされたシイタケの内側のひだ層（５ｍｍ）にＵＶ－Ｂを７５ＫＪ／ｍ^２で３５℃で、相対湿度８０％で照射した。

【0080】

【表14】

【0081】

その結果、表１４に示すように、本発明の最適条件で生産したビタミンＤ２含量は３６０．８±２０．４μｇ／ｇである一方、既存特許（特許文献１：大韓民国登録特許第１０－０６３７８３３号）で報告されたビタミンＤ２含量は６．９３μｇ／ｇで、本発明による場合、既存特許に比べ６０倍以上ビタミンＤ２含量を顕著に増大させることができるものと示された。また、既存特許に記載された方法と類似にシイタケをスライス（５ｍｍ）した後ＵＶを照射した結果、ビタミンＤ２含量は３５．３±３．５μｇ／ｇで、本発明はこれと対比して１０倍以上ビタミンＤ２含量を顕著に増大させることができる優れた効果がある。

【図1】

【図2】

【図3】

【手続補正書】

【提出日】2022-11-11

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

（１）シイタケを５℃～１５℃の温度範囲で貯蔵して、予備熟成する第１段階;（２）前記予備熟成したシイタケを５℃～３０℃の温度範囲で貯蔵して、本熟成する第２段階;（３）前記本熟成したシイタケを破片化（ｃｈｏｐｐｉｎｇ）する第３段階;（４）前記破片化したシイタケをＵＶ－Ｂで照射する第４段階;（５）前記ＵＶ－Ｂを照射したシイタケ片を熱処理する第５段階;及び（６）前記熱処理したシイタケ片を粉砕する第６段階;を含み、前記破片化したシイタケは、横、縦及び高さの長さがそれぞれ０．５～２０ｍｍで、前記熱処理は、４０～８０℃で１２～４８時間の間処理する
ことを特徴とするビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項2】

前記予備熟成する第１段階は、５℃～１５℃の温度範囲で１日～８日の間貯蔵する
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項3】

前記本熟成する第２段階は、５℃～３０℃の温度範囲で２日～８日の間貯蔵する
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項4】

前記破片化したシイタケの水分含量が７０～９５重量％である
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項5】

前記ＵＶ－Ｂを照射することは、ＵＶ電球が装着されたステンレススチールチャンバのステンレススチール板に前記シイタケを載せた状態で、１，０００～３，０００μＷ／ｃｍ^２の強さで、３０分～１８０分間照射しながら、１５分に１回～３回一定の時間間隔で前記シイタケを裏返す
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【請求項6】

前記方法で製造したシイタケは、３６０μｇ（１４，４００ＩＵ）／ｇ以上のビタミンＤ２を生産する
請求項１に記載のビタミンＤ２含量が増大したシイタケの製造方法。

【国際調査報告】