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特表2023-503403リルピビリンを含む組成物及び腫瘍又は癌を治療するためのその使用
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-01-30
(54)【発明の名称】リルピビリンを含む組成物及び腫瘍又は癌を治療するためのその使用
(51)【国際特許分類】
A61K 31/505 20060101AFI20230123BHJP
A61P 1/02 20060101ALI20230123BHJP
A61P 1/04 20060101ALI20230123BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20230123BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20230123BHJP
A61P 11/02 20060101ALI20230123BHJP
A61P 11/04 20060101ALI20230123BHJP
A61P 13/08 20060101ALI20230123BHJP
A61P 13/10 20060101ALI20230123BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20230123BHJP
A61P 15/00 20060101ALI20230123BHJP
A61P 17/00 20060101ALI20230123BHJP
A61P 19/08 20060101ALI20230123BHJP
A61P 21/00 20060101ALI20230123BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20230123BHJP
A61P 27/02 20060101ALI20230123BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20230123BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20230123BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20230123BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20230123BHJP
A61K 39/00 20060101ALI20230123BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20230123BHJP
A61K 31/704 20060101ALI20230123BHJP
A61K 31/675 20060101ALI20230123BHJP
A61K 33/24 20190101ALI20230123BHJP
A61K 31/7048 20060101ALI20230123BHJP
A61K 31/475 20060101ALI20230123BHJP
A61K 31/282 20060101ALI20230123BHJP
【ＦＩ】
A61K31/505
A61P1/02
A61P1/04
A61P1/16
A61P11/00
A61P11/02
A61P11/04
A61P13/08
A61P13/10
A61P13/12
A61P15/00
A61P17/00
A61P19/08
A61P21/00
A61P25/00
A61P27/02
A61P35/00
A61P35/02
A61P43/00 105
A61K45/00
A61K39/00 H
A61K39/395 D
A61K31/704
A61K31/675
A61K33/24
A61K31/7048
A61K31/475
A61K31/282
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022527833
(86)(22)【出願日】2020-11-27
(85)【翻訳文提出日】2022-05-11
(86)【国際出願番号】 CN2020132422
(87)【国際公開番号】W WO2021104487
(87)【国際公開日】2021-06-03
(31)【優先権主張番号】62/941,891
(32)【優先日】2019-11-29
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/072,281
(32)【優先日】2020-08-31
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522185461
【氏名又は名称】シピオ ライフ サイエンシズ リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＳＣＩＰＩＯ ＬＩＦＥ ＳＣＩＥＮＣＥＳ ＬＩＭＩＴＥＤ
(74)【代理人】
【識別番号】100163991
【弁理士】
【氏名又は名称】加藤 慎司
(72)【発明者】
【氏名】リー，ワイ イップ トマス
(72)【発明者】
【氏名】プーン，チュン シン ダニエル
(72)【発明者】
【氏名】ライ，カー ルン
(72)【発明者】
【氏名】フアン，ジャンツイ
(72)【発明者】
【氏名】リー，ホー イン
【テーマコード（参考）】
4C084
4C085
4C086
4C206
【Ｆターム（参考）】
4C084AA19
4C084MA13
4C084MA17
4C084MA22
4C084MA23
4C084MA24
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4C084MA35
4C084MA37
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4C084MA43
4C084MA52
4C084MA55
4C084MA56
4C084MA60
4C084MA63
4C084MA66
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4C084ZB212
4C084ZB262
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4C084ZC202
4C084ZC212
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4C085AA13
4C085EE03
4C086AA01
4C086AA02
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4C086EA11
4C086HA12
4C086HA24
4C086HA26
4C086HA28
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4C086MA04
4C086MA13
4C086MA17
4C086MA22
4C086MA23
4C086MA24
4C086MA31
4C086MA32
4C086MA35
4C086MA37
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4C206MA76
4C206MA80
4C206MA83
4C206MA86
4C206NA05
4C206ZB26
4C206ZC41
(57)【要約】
本発明は、癌性腫瘍の増殖を抑止及び／又は治療するため、及び／又は、腫瘍開始細胞からの癌の発症を遅延させるための組成物及び／又はその使用を提供する。組成物は、有効量の式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物、
【化１】
【化２】
又は、その薬学的に許容される塩を含んでいる。組成物は、単独で、又は、１つ若しくは複数の化学療法剤、生物学的薬剤、及び／又は抗癌剤と組み合わせて投与される。使用は、本発明の組成物を、化学療法剤、生物学的薬剤、若しくは他の癌治療剤と共に、又はそれらを伴わずに、それを必要とする対象に、静脈内、非経口、経鼻、局所的若しくは部分的、経口、又は、リポソーム、インプラント、若しくは血管標的化ナノ懸濁液送達を介して投与することを含み得る。
【選択図】なし
【化１】
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物の、それを必要とする対象における癌性腫瘍の増殖を抑止及び／又は治療するための、及び／又は、腫瘍開始細胞からの癌の発症を遅らせるための組成物の調製における使用であって、【化1】
【化2】
【請求項2】
前記癌性腫瘍又は癌は、肥満細胞腫若しくは肥満細胞腫瘍、卵巣癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肝癌、黒色腫、網膜芽細胞腫、乳癌、大腸癌、白血病、リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）若しくは急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、組織球性肉腫、脳腫瘍、星細胞腫、膠芽腫、神経腫、神経芽腫、結腸癌、子宮頸癌、肉腫、前立腺腫瘍、膀胱腫瘍、細網内皮系組織の腫瘍、ウィルムス腫瘍、卵巣癌、骨癌、骨肉腫、腎癌、頭頸部癌、口腔癌、喉頭癌、又は口腔咽頭癌を含んでいる、請求項１に記載の使用。【請求項3】
前記癌性腫瘍又は癌は、神経芽細胞腫を含んでいる、請求項２に記載の使用。【請求項4】
前記対象は、成人、少年、子供、又は幼児を含むヒトである、請求項１に記載の使用。【請求項5】
前記組成物中の前記化合物の前記有効量は、１日あたり約０．１ｍｇから１０００ｍｇである、請求項１に記載の使用。【請求項6】
前記組成物中の前記化合物の前記有効量は、１日あたり１ｍｇから２５ｍｇである、請求項５に記載の使用。【請求項7】
前記組成物は、前記対象に少なくとも１日１回投与される、請求項５に記載の使用。【請求項8】
前記組成物は、前記式（Ｉ）の前記化合物を含み、前記式（Ｉ）の前記化合物は、１つ又は複数の化学療法剤、１つ又は複数の生物学的薬剤、及び／又は、１つ又は複数の抗癌剤と組み合わせて前記対象に投与される、請求項１に記載の使用。【請求項9】
前記１つ又は複数の化学療法剤は、１つ又は複数のアルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、有糸分裂阻害剤、ステロイド、及び／又はそれらの任意の混合物を含んでおり；前記１つ又は複数の生物学的薬剤は、１つ又は複数のワクチン、サイトカイン、抗体、及び／又はそれらの任意の混合物を含んでいる、請求項８に記載の使用。
【請求項10】
前記アルキル化剤は、シクロホスファミド、メルファラン、テモゾロミド、カルボプラチン、シスプラチン、及び／又はオキサリプラチンから選択される１つ又は複数のアルキル化剤である、請求項９に記載の使用。【請求項11】
前記代謝拮抗剤は、５－フルオロウラシル、６－メルカプトプリン、シタラビン、ゲムシタビン、及び／又はメトトレキサートから選択される１つ又は複数の代謝拮抗剤である、請求項９に記載の使用。【請求項12】
前記抗腫瘍抗生物質は、アクチノマイシン－Ｄ、ブレオマイシン、ダウノルビシン、及び／又はドキソルビシンから選択される１つ又は複数の抗腫瘍抗生物質である、請求項９に記載の使用。【請求項13】
前記トポイソメラーゼ阻害剤は、エトポシド、イリノテカン、テニポシド、及び／又はトポテカンから選択される１つ又は複数のトポイソメラーゼ阻害剤である、請求項９に記載の使用。【請求項14】
前記有糸分裂阻害剤は、ドセタキセル、エストラムスチン、パクリタキセル、及び／又はビンブラスチンから選択される１つ又は複数の有糸分裂阻害剤である、請求項９に記載の使用。【請求項15】
前記ステロイドは、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、及び／又はデキサメタゾンから選択される１つ又は複数のステロイドである、請求項９に記載の使用。【請求項16】
前記抗体は、Ｈｕ３Ｆ８、ｈｕ１４．１８Ｋ３２２Ａ、Ｈｕ１４．１８－ＩＬ－２、ジヌツキシマブ、又はそれらの任意の組み合わせから選択される、請求項９に記載の使用。【請求項17】
癌性腫瘍の増殖を抑止及び／又は治療するための、及び／又は、腫瘍開始細胞からの癌の発症を遅延させるための組成物であって、前記組成物は、有効量の式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物：
【化3】
【化4】
前記組成物は、以下のＡ及びＢのうちの１つ又は複数を更に含んでいる、組成物。
Ａ：アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、有糸分裂阻害剤、又はステロイドから選択される１つ又は複数の化学療法剤；
Ｂ：ワクチン、サイトカイン、又は抗体から選択される１つ又は複数の生物学的薬剤。
【請求項18】
前記アルキル化剤は、シクロホスファミド、メルファラン、テモゾロミド、カルボプラチン、シスプラチン、及び／又はオキサリプラチンから選択される１つ又は複数のアルキル化剤である、請求項１７に記載の組成物。【請求項19】
前記代謝拮抗剤は、５－フルオロウラシル、６－メルカプトプリン、シタラビン、ゲムシタビン、及び／又はメトトレキサートから選択される１つ又は複数の代謝拮抗剤である、請求項１７に記載の組成物。【請求項20】
前記抗腫瘍抗生物質は、アクチノマイシン－Ｄ、ブレオマイシン、ダウノルビシン、及び／又はドキソルビシンから選択される１つ又は複数の抗腫瘍抗生物質である、請求項１７に記載の組成物。【請求項21】
前記トポイソメラーゼ阻害剤は、エトポシド、イリノテカン、テニポシド、及び／又はトポテカンから選択される１つ又は複数のトポイソメラーゼ阻害剤である、請求項１７に記載の組成物。【請求項22】
前記有糸分裂阻害剤は、ドセタキセル、エストラムスチン、パクリタキセル、及び／又はビンブラスチンから選択される１つ又は複数の有糸分裂阻害剤である、請求項１７に記載の組成物。【請求項23】
前記ステロイドは、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、及び／又はデキサメタゾンから選択される１つ又は複数のステロイドである、請求項１７に記載の組成物。【請求項24】
前記抗体は、Ｈｕ３Ｆ８、ｈｕ１４．１８Ｋ３２２Ａ、Ｈｕ１４．１８－ＩＬ－２、ジヌツキシマブ、又はそれらの任意の組み合わせから選択される、請求項１７に記載の組成物。【請求項25】
前記組成物は、以下の１つ又は複数の投与形態中へと配合される、請求項１７に記載の組成物：非経口製剤、水溶液、リポソーム、注射用溶液、注射用懸濁液、静脈内溶液、静脈内懸濁液／ナノ懸濁液、錠剤、丸剤、トローチ剤、カプセル剤、カプレット、パッチ、スプレー、吸入剤、粉末、凍結乾燥粉末、パッチ、ゲル、ゲルタブ、懸濁液、ナノ懸濁液、微粒子、ナノ粒子、ナノリポソーム、マイクロゲル、ペレット、坐剤、経口懸濁液、経口崩壊錠、経口分散錠、経口崩壊性フィルム、マイクロエマルジョン、ナノエマルジョン、自己乳化ドラッグデリバリーシステム、及び／又はそれらの任意の組み合わせ。【請求項26】
それを必要とする対象における癌性腫瘍を治療するため、及び／又は、腫瘍開始細胞からの癌の進行を遅らせるために必要な１つ又は複数の化学療法剤の頻度又は量を低減するための組成物の調製における、式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物の使用であって、【化5】
【化6】
前記１つ又は複数の化学療法剤は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、有糸分裂阻害剤、ステロイド、及び／又はそれらの任意の混合物から選択され、
投与される前記１つ又は複数の化学療法剤の頻度又は量は、有効量の前記式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物を含んだ組成物を投与しない場合における前記対象に対する前記化学療法剤の標準プロトコルによる使用と比較して最大で約７５％から９０％低い、使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願への相互参照：
この出願は、（１）２０１９年１１月２９日に出願された米国仮特許出願番号第６２／９４１，８９１号、及び、（２）２０２０年８月３１日に出願された米国仮特許出願番号第６３／０７２，２８１からの優先権を主張し、その開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
この出願は、（１）２０１９年１１月２９日に出願された米国仮特許出願番号第６２／９４１，８９１号、及び、（２）２０２０年８月３１日に出願された米国仮特許出願番号第６３／０７２，２８１からの優先権を主張し、その開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0002】
本発明は、癌治療及び前癌状態の治療のためのリルピビリン（ｒｉｌｐｉｖｉｒｉｎｅ）を含んだ組成物に関する。特に、この組成物は、それを必要とする対象に、単独で、又は、１つ若しくは複数の化学療法剤、生物学的薬剤、及び／又は抗癌剤を含む１つ若しくは複数の治療剤と組み合わせて投与される。
【背景技術】
【0003】
癌は複雑な疾患であり、通常は１つの細胞又は細胞群における遺伝子の特異的な変化によって引き起こされ、正常な細胞機能の破壊をもたらす。正常細胞と癌細胞との間には少なくとも６つの大きな違いがある。（Ａ）増殖：正常な細胞は、十分な数の細胞が存在すると増殖を停止する。しかしながら、癌細胞は増殖を止めず、正常な細胞よりも速く分裂する；このような制御されない細胞増殖が腫瘍の形成に繋がり得る。（Ｂ）細胞修復及び細胞死：正常な細胞は、損傷を受けたり老化したりすると、修復されるか又はプログラム細胞死を経験する（アポトーシス）。対照的に、癌細胞は、修復されないか、又は、アポトーシスを起こさない。（Ｃ）転移：正常な細胞は、身体のあるべき場所に留まっている；しかしながら、癌細胞は、血流やリンパ系を介して移動し、他の組織や臓器に侵入する。（Ｄ）外観：正常な細胞は、規則的で整然とした外観を示す；対照的に、癌細胞は変形しており、様々な形や大きさの細胞が無秩序に集まっているように見える。（Ｅ）成熟：正常細胞は、通常は成熟細胞に分化し、自然に機能化する；しかしながら、癌細胞は急速に成長して分裂し、未分化の状態を維持する。（Ｆ）ゲノムの安定性：正常な細胞は、標準的なＤＮＡ及び染色体数を有している；しかしながら、癌細胞の染色体には異常な数の染色体が含まれていることが多く、癌細胞のＤＮＡに突然変異が蓄積するにつれて異常が増加することがある。
【0004】
癌治療には様々なアプローチがある。多くの種類の癌に対して、化学療法は、最も一般的でコンベンショナルな治療法の１つである。一般的に、この治療法は、癌細胞を破壊したり、癌細胞の増殖／分裂や他の部位への転移を阻止したりするために、細胞傷害性薬剤を投与することを含んでいる。１００以上の化学療法剤が癌治療に使用されている。癌治療中に使用される薬には、以下のような幾つかのクラスがある：（ａ）細胞周期の全ての段階でＤＮＡを損傷することによって細胞の再生を妨げるアルキル化剤；（ｂ）ＤＮＡ及びＲＮＡの通常の構成要素を置換することによってＤＮＡ及びＲＮＡの複製を妨げる抗代謝産物（ａｎｔｉ－ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ）；（ｃ）ＤＮＡ複製のための酵素を阻害する抗生物質；（ｄ）複製及び転写中にＤＮＡ鎖をほどく酵素、即ちトポイソメラーゼＩ又はトポイソメラーゼＩＩを阻害するトポイソメラーゼ阻害剤；（ｅ）有糸分裂及び細胞分裂を阻害する有糸分裂阻害剤（ｍｉｔｏｔｉｃ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ）；（ｆ）他の薬によって引き起こされる副作用を和らげるために使用されるコルチコステロイド。
【0005】
化学療法剤は、癌細胞及び正常細胞の両方を含む細胞の成長を阻害する；これらの正常な細胞には、骨髄の新しい血液細胞、体内の口腔、胃、皮膚、毛髪、又は生殖器の上皮細胞が含まれる。これは化学療法の主な制限又は欠点である：即ち、それは、体内の正常な細胞と異常な細胞とを区別することができない。したがって、患者は、化学療法治療中及び治療後に深刻な副作用を経験することがしばしばある。
【0006】
非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩ）の抗増殖効果は、様々な研究の対象となっている。例えば、ネビラピン（ｎｅｖｉｒａｐｉｎｅ）及びエファビレンツ（ｅｆａｖｉｒｅｎｚ）などの特定の逆転写酵素阻害剤は、動物実験において、Ａ－３７５メラノーマ及びＰＣ３前立腺癌細胞株の腫瘍形成性増殖に拮抗することが示されている（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２４：３９２３－３９３１，２００５）。ダピビリン（ｄａｐｉｖｉｒｉｎｅ）は、Ｕ８７神経膠芽腫細胞の腫瘍増殖を阻害することが示されている（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ９（１）：１１７－１２８，２０１８）。ｉｎ ｖｉｔｒｏでのエファビレンツ及びリルピビリン（ＨＩＶ感染症の治療のためにＦＤＡによって承認された第２世代ＮＮＲＴＩ）は、膵臓癌細胞に対して高い毒性の可能性を有することが見出されている（ＰｌｏＳ ＯＮＥ １０（６）：ｅ０１３０２７７，２０１５）。しかしながら、特に忍容性が高く重篤な副作用が少ない新しい癌治療法を開発するニーズは依然として存在している。より具体的には、他の抗癌治療と組み合わせて安全に、効果的に、及び／又は相乗的に機能する更なる薬剤の必要性、並びに、追加の化学療法剤なしで安全且つ効果的であり得る癌治療の必要性が依然として存在している。
【発明の概要】
【0007】
本発明は、以下の説明の何れかによって範囲が限定されるべきではない。以下の例又は実施形態は、例示のみを目的として提示されている。
【0008】
「癌」という用語は、乳房、気道、脳、神経組織、生殖器、消化管、尿路、眼、肝臓、皮膚、頭頸部、甲状腺、副甲状腺、及びそれらの遠隔転移の癌などの固形腫瘍だけでなく、リンパ腫、肉腫、及び白血病を含むがこれらに限定されない血液癌も指す。
【0009】
乳癌には、浸潤性乳管癌、浸潤性小葉癌、非浸潤性乳管癌、及び非浸潤性小葉癌が含まれるが、これらに限定されない。
【0010】
気道癌には、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌、並びに、気管支腺腫及び胸膜肺芽腫が含まれるが、これらに限定されない。
【0011】
脳腫瘍には、脳幹及び視床下部グリオーマ、小脳及び大脳星細胞腫、膠芽腫、髄芽腫、上衣腫、並びに神経外胚葉及び松果体腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。
【0012】
眼の癌には、眼内黒色腫及び網膜芽細胞腫が含まれるが、これらに限定されない。
【0013】
肝癌には、肝細胞癌（線維層板変異体を伴う又は伴わない肝細胞癌）、胆管癌（肝内胆管癌）、及び混合型肝細胞胆管癌が含まれるが、これらに限定されない。
【0014】
皮膚癌には、扁平上皮癌、カポジ肉腫、悪性黒色腫、メルケル細胞皮膚癌、及び非黒色腫皮膚癌が含まれるが、これらに限定されない。
【0015】
頭頸部癌には、喉頭癌／下咽頭癌／上咽頭癌／中咽頭癌、並びに口唇癌及び口腔癌が含まれるが、これらに限定されない。
【0016】
リンパ腫には、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ホジキン病、及び中枢神経系のリンパ腫が含まれるが、これらに限定されない。
【0017】
肉腫には、軟部組織肉腫、線維肉腫、骨肉腫、悪性線維性組織球腫、リンパ肉腫、及び横紋筋肉腫が含まれるが、これらに限定されない。
【0018】
白血病には、急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、及び有毛細胞白血病が含まれるが、これらに限定されない。
【0019】
神経組織関連腫瘍には、神経芽細胞腫、神経節芽細胞腫、神経節細胞腫、神経鞘腫、又は神経線維肉腫が含まれるが、これらに限定されない。
【0020】
男性の生殖器腫瘍には、前立腺癌及び精巣癌が含まれるが、これらに限定されない。
【0021】
女性の生殖器腫瘍には、子宮内膜癌、子宮頸癌、卵巣癌、膣癌、外陰癌、及び子宮肉腫が含まれるが、これらに限定されない。
【0022】
消化管腫瘍には、肛門、結腸、結腸直腸、食道、胆嚢、胃、膵臓、直腸、小腸、及び唾液腺の癌が含まれるが、これらに限定されない。
【0023】
尿路腫瘍には、膀胱癌、陰茎癌、腎臓癌、腎盂癌、尿管癌、及び尿道癌が含まれるが、これらに限定されない。
【0024】
本明細書で使用される「前癌状態」は、癌化するリスクが高い異常細胞に関する。
【0025】
上記の疾患は、ヒトにおいて十分に特徴付けられており、本発明の１つ又は複数の治療剤を投与することによって治療することができる。
【0026】
薬学的に許容される賦形剤は、賦形剤に起因する副作用が活性成分の有益な作用を活性化しないように、活性成分の有効な活性と両立する濃度で患者に比較的毒性がなく無害である任意の賦形剤である。
【0027】
本発明の一態様は、癌性腫瘍の増殖を阻害又は抑止し、及び／又は癌性腫瘍を治療し、及び／又は腫瘍開始細胞からの癌の発症を遅延させるための組成物を提供する。この組成物は、以下を含んでいる：
有効量の式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物：
又はその薬学的に許容される塩であって、前記組成物は、それを必要とする対象に単独で、又は以下の化学療法剤、生物学的薬剤、及び／又は抗癌剤（以下、「治療剤」と交換可能に使用する）の１つ又は複数と組み合わせて投与される。
有効量の式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物：
【化1】
【化2】
【0028】
一態様では、１つ又は複数の化学療法剤は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、キナーゼ阻害剤、有糸分裂阻害剤、ステロイド、及び／又はそれらの任意の混合物であり得る。
【0029】
１つ又は複数の生物学的薬剤は、限定されるものではないが、ワクチン、サイトカイン、抗体、タンパク質及びペプチド薬、及び／又はそれらの任意の混合物を含み得る。リルピビリンによる治療は、放射線療法、Ｔ細胞療法などの他の癌治療と併用することもできる。
【0030】
一実施形態において、本発明の組成物は、限定されるものではないが、アスパラギナーゼ、ブレオマイシン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、コラパーゼ、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エピルビシン、エトポシド、５－フルオロウラシル、ヘキサメチルメラミン、ヒドロキシ尿素、イホスファミド、イリノテカン、ロイコボリン、ロムスチン、メクロレタミン、６－メルカプトプリン、メスナ、メトトレキサート、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プロカルバジン、ラロキシフェン、ストレプトゾシン、タモキシフェン、チオグアニン、トポテカン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、及びビンデシンを含む抗癌剤と組み合わせることができる。
【0031】
一実施形態において、本発明の組成物は、アミノグルテチミド、Ｌ－アスパラギナーゼ、アザチオプリン、５－アザシチジンクラドリビン、ブスルファン、ジエチルスチルベストロール、２’，２’－ジフルオロデオキシシチジン、ドセタキセル、エリスロヒドロキシノニルアデニン、エチニルエストラジオール、５－フルオロデオキシウリジン、５－フルオロデオキシウリジン、リン酸フルダラビン、フルダラビン、フルオキシステロン、フルタミド、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、イダルビシン、インターフェロン、メドロキシプロゲステロン酢酸メゲストロール、メルファラン、ミトタン、パクリタキセル、ペントスタチン、Ｎ－ホスホノアセチル－Ｌ－アスパラギン酸塩（ＰＡＬＡ）、プリカマイシン、セムスチン、テニポシド、テストステロンプロピオネート、チオテパ、トリメチルメラミン、ウリジン、ビノレルビン、キサリプラチン、ゲムシタビン、カペシタビン、エポチロン及びその天然又は合成誘導体、テモゾロミド、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ）、トラベデクチン、並びにキネシンスピンドル蛋白Ｅｇ５の阻害剤を含むがこれに限定されない他の細胞毒性薬剤と組み合わせることができる。
【0032】
本発明の組成物は、限定されるものではないが、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）、並びに、ＥＧＦＲファミリー及びそれらの関連リガンドを標的とするシグナル伝達阻害剤を含む抗癌剤と組み合わせることができる。シグナル伝達阻害剤には、限定されるものではないが、ハーセプチン（トラスツズマブ）、アービタックス（セツキシマブ）、ペルツズマブ、ＺＤ－１８３９／イレッサ、ＯＳＩ－７７４／タルセバ、ＣＩ－１０３３、ＧＷ－２０１６、ＣＰ－７２４、７１４、ＨＫＩ－２７２、及びＥＫＢ－５６９が含まれる。
【0033】
一実施形態では、本発明の組成物は、ＰＤ－３２５９０１及びＡＲＲＹ－１４２８８６を含むがこれらに限定されないＲａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ形質導入経路の阻害剤と組み合わせることができる。
【0034】
一実施形態では、本発明の組成物は、ラパチニブ、パロキセチン、ルカパリブ、ドキセピン、レボブノロール、ダリフェナシン、リスペリドン、フロバトリプタン、ロチゴチン、ロチゴチン、カルテオロール、イプラトロピウム、テストステロン、ダナゾール、及びそれらの誘導体を含むがこれらに限定されない、Ｒｈｏ関連プロテインキナーゼ２（ＲＯＣＫ ２）のタンパク質部位を標的とする阻害剤と組み合わせることができる。
【0035】
一実施形態では、本発明の組成物は、ジプラシドン、メチルテストステロン、エキセメスタン、パノビノスタット、ドラセトロン、レトロゾール、ラパチニブ、レンバチニブ、ロサルタン、アキシチニブ、フラボキサート、イルベサルタン、ニンテダニブ、ジブカイン、イロペリドン、エルロチニブ、パリペリドン、アルプラゾラム、ハルシオン、レゴラフェニブ、及びそれらの誘導体を含むがこれらに限定されない、オーロラＡのタンパク質部位を標的とする阻害剤と組み合わせることができる。
【0036】
一実施形態では、本発明の組成物は、ニカルジピン、アルフェンタニル、シロスタゾール、アルフゾシン、ポマリスト、ベムラフェニブ、ロサルタン、サルメテロール、ネビボロール、ポドフィロックス、ミダゾラム、及びそれらの誘導体を含むがこれらに限定されない、ブロモドメイン含有タンパク質４（ＢＲＤ４）のタンパク質部位を標的とする阻害剤と組み合わせることができる。
【0037】
一実施形態では、本発明の組成物は、限定されるものではないが、ボルテゾミブ及びＣＣＩ－７７９を含むプロテアソーム阻害剤及びｍＴＯＲ阻害剤と組み合わせることができる。
【0038】
一実施形態では、本発明の組成物は、限定されるものではないが、免疫療法（ワクチン、サイトカイン、幾つか抗体など）、遺伝子療法、及び幾つかの標的療法を含む生物学的療法と組み合わせることができる。
【0039】
一実施形態では、本発明の組成物は、ＩＬ－２又はインターフェロン（ＩＦＮ）を含むが、これらに限定されないサイトカインと組み合わせることができ、任意選択的に、インターフェロンは、α－ＩＦＮ又はγ－ＩＦＮであり；任意選択的に、ＩＬ－２は組換えＩＬ－２である。
【0040】
一実施形態では、本発明の組成物は、限定されるものではないが、Ｈｕ３Ｆ８、ｈｕ１４．１８Ｋ３２２Ａ、Ｈｕ１４．１８－ＩＬ－２、及びジヌツキシマブ（Ｑａｒｚｉｂａ）を含むＧＤ２タンパク質に対するモノクローナル抗体と組み合わせることができる。
【0041】
実施形態において、リルピビリンの好ましい投与量は、約０．１ｍｇから１０００ｍｇ、より好ましくは１ｍｇから２５ｍｇである。例えば、それは、１日あたり、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、又は２５ｍｇの投与量で対象に投与され得る。
【0042】
本発明の別の態様は式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物の、それを必要とする対象における、癌性腫瘍の増殖を抑止し、及び／又は癌性腫瘍を治療し、及び／又は腫瘍開始細胞からの癌の発症を遅らせるための組成物の調製における使用が提供される：
ここで、前記組成物は、それを必要とする対象に対して、有効量の前記化合物又はその薬学的に許容される塩を含んでいる。
【化3】
【化4】
【0043】
一実施形態では、組成物は、単独で、又は、１つ若しくは複数の化学療法剤、生物学的薬剤、及び／又は抗癌剤と組み合わせて、それを必要とする対象に投与することができる。
【0044】
一実施形態では、１つ又は複数の化学療法剤が、１つ又は複数のアルキル化剤、抗代謝物、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、有糸分裂阻害剤、ステロイド、及び／又はそれらの任意の混合物を含み；１つ又は複数の生物学的薬剤が、１つ又は複数のワクチン、サイトカイン、抗体、タンパク質及びペプチド薬物、及び／又はそれらの任意の混合物を含んでいるような使用が企図される；
【0045】
一実施形態では、上記使用のための１つ又は複数のアルキル化剤は、シクロホスファミド、メルファラン、テモゾロミド、カルボプラチン、シスプラチン、及び／又はオキサリプラチンから選択される１つ又は複数である。
【0046】
一実施形態では、１つ又は複数の代謝拮抗剤は、５－フルオロウラシル、６－メルカプトプリン、シタラビン、ゲムシタビン、及び／又はメトトレキサートから選択される１つ又は複数である。
【0047】
一実施形態では、１つ又は複数の抗腫瘍抗生物質は、アクチノマイシン－Ｄ、ブレオマイシン、ダウノルビシン、及び／又はドキソルビシンから選択される１つ又は複数である。
【0048】
一実施形態では、１つ又は複数のトポイソメラーゼ阻害剤は、エトポシド、イリノテカン、テニポシド、及び／又はトポテカンから選択される１つ又は複数である。
【0049】
一実施形態では、１つ又は複数の有糸分裂阻害剤は、ドセタキセル、エストラムスチン、パクリタキセル、及び／又はビンブラスチンから選択される１つ又は複数である。
【0050】
一実施形態では、１つ又は複数のステロイドは、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、及び／又はデキサメタゾンから選択される１つ又は複数である。
【0051】
一実施形態では、１つ又は複数の抗体は、Ｈｕ３Ｆ８、ｈｕ１４．１８Ｋ３２２Ａ、Ｈｕ１４．１８－ＩＬ－２、ジヌツキシマブ、又はそれらの任意の組み合わせから選択される。
【0052】
例示的な実施形態において、組成物中の式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物及び／又はその薬学的に許容される塩は、対象において神経芽細胞腫に成長又は発達することができる腫瘍開始細胞を標的とする。
【0053】
本明細書で使用される場合、例えば「癌の抑止」または「癌の増殖の抑止」のように、治療の文脈における「抑止する」又は「抑止」という用語は、癌の減少を指している。抑止は、症状の１００％の除去を必要としない。
【0054】
１つの実施形態において、前記組成物は、以下の処方形態の１つ又は複数へと配合される：非経口製剤、水溶液、リポソーム、注射液、懸濁液若しくはエマルジョン、静脈内溶液、錠剤、丸剤、トローチ剤、カプセル剤、カプレット、パッチ剤、スプレー剤、吸入剤、粉末剤、凍結乾燥粉末剤、吸入剤、パッチ剤、ゲル剤、ゲルタブ剤、ナノ懸濁液、ナノ粒子、ナノリポソーム剤、マイクロゲル剤、ペレット剤、坐剤、経口懸濁液、経口崩壊錠、分散性錠剤、経口崩壊性フィルム、マイクロエマルジョン剤、ナノエマルジョン剤、自己乳化ドラッグデリバリーシステム、及び／又はそれらの任意の組み合わせ。
【0055】
実施形態では、前記癌性腫瘍又は癌は、肥満細胞腫若しくは肥満細胞腫瘍、卵巣癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肝癌、黒色腫、網膜芽細胞腫、乳癌、大腸癌、白血病、リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）若しくは急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、組織球性肉腫、脳腫瘍、星細胞腫、膠芽腫、神経芽腫、結腸癌、子宮頸癌、肉腫、前立腺腫瘍、膀胱腫瘍、細網内皮系組織の腫瘍、ウィルムス腫瘍、卵巣癌、骨癌、骨肉腫、腎癌、頭頸部癌、口腔癌、喉頭癌、又は口腔咽頭癌を含んでいる。
【0056】
好ましい実施形態では、前記癌性腫瘍又は癌は、神経芽細胞腫を含んでいる。例示的な実施形態では、癌性腫瘍又は癌は、対象の神経芽細胞腫開始細胞から発生する。言い換えれば、本組成物中の式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物及び／又はその薬学的に許容される塩は、対象において神経芽細胞腫に発達することができる腫瘍開始細胞の増殖を標的化及び阻害するためのものである。
【0057】
実施形態では、前記対象は、成人、少年、子供及び／又は乳児を含むヒトである。例示的な実施形態では、対象は、神経芽細胞腫を有する、神経芽細胞腫と診断された、神経芽細胞腫を有するリスクが認識されている、又は神経芽細胞腫治療の必要性が認識されているものであり得る。実施形態において、対象は、本明細書で企図される他の癌の１つを有する若しくは診断されたもの、又は、本明細書で企図される他の癌の１つを有するという認識されたリスクを有しているか、若しくは、癌治療の認識された必要性を有している。
【0058】
実施形態において、組成物は、静脈内、非経口的、筋肉内、皮下、鼻腔内、肺内、局所的（ｔｏｐｉｃａｌｌｙ）若しくは部分的（ｌｏｃａｌｌｙ）、経口的、口腔内、舌下、膣内、直腸内、点眼、注射、眼への移植、外科的移植、又は、リポソーム、インプラント、若しくは血管標的化ナノ懸濁液送達を介して、前記対象に投与される。
【0059】
実施形態において、組成物中の前記化合物の有効量は、１日あたり約０．１ｍｇから１０００ｍｇであり、より好ましくは、組成物中の前記化合物の有効量は、１日あたり０．１ｍｇから２５ｍｇである。例えば、組成物中の化合物は、１日あたり１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４又は２５ｍｇの有効量で対象に投与される。
【0060】
実施形態において、組成物は、少なくとも１日１回、例えば、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回などで投与される。
【0061】
本明細書に記載の各薬剤の候補は、本発明の任意の態様において、本組成物に適用可能であるか、又は、本組成物と組み合わせることができると理解されるべきである。
【0062】
別の実施形態は、それを必要とする対象における癌性腫瘍を治療するために必要な１つ又は複数の化学療法剤の頻度又は量を減少させるための、及び／又は、腫瘍開始細胞からの癌の進行を遅延させるための組成物の調製における式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物の使用に関する：
ここで、前記組成物は、有効量の前記化合物又はその薬学的に許容される塩を含み、１つ又は複数の化学療法剤と組み合わせて、それを必要とする前記対象に投与され、
前記１つ又は複数の化学療法剤は、アルキル化剤、抗代謝物、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、有糸分裂阻害剤、ステロイド及び／又はそれらの任意の混合物から選択され；
ここで、投与される前記化学療法剤の頻度又は量は、有効量の式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物を含む組成物を投与せずに前記対象中で前記化学療法剤を使用する標準プロトコルよりも最大で約７５から９０％少ない。
【化5】
【化6】
前記１つ又は複数の化学療法剤は、アルキル化剤、抗代謝物、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、有糸分裂阻害剤、ステロイド及び／又はそれらの任意の混合物から選択され；
ここで、投与される前記化学療法剤の頻度又は量は、有効量の式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物を含む組成物を投与せずに前記対象中で前記化学療法剤を使用する標準プロトコルよりも最大で約７５から９０％少ない。
【図面の簡単な説明】
【0063】
本発明の実施形態は、以下により、図面を参照して詳細に説明される。
【0064】
図１Ａ、図１Ｂ、及び図１Ｃは、リルピビリン単独処理下における神経芽細胞腫細胞ＩＭＲ－３２の阻害を示している。図１Ａは、対照群であって、薬物処理なしで２４時間インキュベートしたＩＭＲ－３２細胞を示しており；図１Ｂは、リルピビリン（５μＭ）で２４時間処理したＩＭＲ－３２細胞を示しており、図１Ｃは、種々の濃度のリルピビリンで処理した（７２時間）ＩＭＲ－３２の細胞生存率のパーセンテージを示している。
【0065】
図２は、ＩＭＲ－３２細胞株に対するドキソルビシン（ＤＯＸ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）の組み合わせ処理のアイソボログラム分析を示している。
【0066】
図３は、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ細胞株に対するドキソルビシン（ＤＯＸ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）の組み合わせ処理のアイソボログラム分析を示している。
【0067】
図４は、ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）細胞株に対するドキソルビシン（ＤＯＸ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）の組み合わせ処理のアイソボログラム分析を示している。
【0068】
図５は、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株に対するドキソルビシン（ＤＯＸ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）の組み合わせ処理のアイソボログラム分析を示している。
【0069】
図６は、ＩＭＲ－３２細胞株に対する４－ヒドロペルオキシシクロホスファミド（ＣＰＡ－ＯＯＨ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）の組み合わせ処理のアイソボログラム分析を示している。
【0070】
図７は、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株に対する４－ヒドロペルオキシシクロホスファミド（ＣＰＡ－ＯＯＨ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）の組み合わせ処理のアイソボログラム分析を示している。
【0071】
図８は、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ細胞株に対する４－ヒドロペルオキシシクロホスファミド（ＣＰＡ－ＯＯＨ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）の組み合わせ処理のアイソボログラム分析を示している。
【0072】
図９は、ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）細胞株に対する４－ヒドロペルオキシシクロホスファミド（ＣＰＡ－ＯＯＨ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）の組み合わせ処理のアイソボログラム分析を示している。
【0073】
図１０は、ＩＭＲ－３２細胞株に対する併用治療シスプラチン（ＣＤＤＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0074】
図１１は、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株に対する併用治療シスプラチン（ＣＤＤＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0075】
図１２は、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ細胞株に対する併用治療シスプラチン（ＣＤＤＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0076】
図１３は、ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）細胞株に対する併用治療シスプラチン（ＣＤＤＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0077】
図１４は、ＳＨ－ＳＹ ５ Ｙ細胞株に対する併用治療エトポシド（ＥＴＯＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0078】
図１５は、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ細胞株に対する併用治療エトポシド（ＥＴＯＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0079】
図１６は、ＩＭＲ－３２細胞株に対する併用治療エトポシド（ＥＴＯＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0080】
図１７は、ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）細胞株に対する併用治療エトポシド（ＥＴＯＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0081】
図１８は、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株に対する併用治療ビンクリスチン（Ｖｉｎ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0082】
図１９は、ＩＭＲ－３２細胞株に対する併用治療ビンクリスチン（Ｖｉｎ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0083】
図２０は、ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）細胞株に対する併用治療ビンクリスチン（Ｖｉｎ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0084】
図２１は、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ細胞株に対する併用治療ビンクリスチン（Ｖｉｎ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0085】
図２２は、ＩＭＲ－３２細胞株に対する併用治療カルボプラチン（ＣＢＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0086】
図２３は、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株に対する併用治療カルボプラチン（ＣＢＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0087】
図２４は、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ細胞株に対する併用治療カルボプラチン（ＣＢＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0088】
図２５は、ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）細胞株に対する併用治療カルボプラチン（ＣＢＰ）及びリルピビリン（ＲＰＶ）のアイソボログラム分析を示している。
【0089】
図２６は、異なる濃度のリルピビリンを適用した後の神経芽細胞腫細胞株ＳＫ－Ｎ－ＳＨ、ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）及びＳＨ－ＳＹ５Ｙにおける切断されたＰＡＲＰ及びｐ－Ｈ２Ａ．Ｘの発現を示している。
【0090】
図２７は、異なる濃度のリルピビリン、ビンクリスチン及びリルピビリン＋ビンクリスチンを適用した後の、神経芽細胞腫細胞株ＩＭＲ－３２における切断されたＰＡＲＰ、ｐ－Ｈ２Ａ．Ｘ及びＢＲＣＡ１の発現を示している。
【0091】
図２８は、動物モデルにおける、シスプラチン並びにシスプラチン及びリルピビリンの投与後の神経芽細胞腫の体積変化を示している。
【0092】
図２９は、動物モデルにおける、カルボプラチン並びにカルボプラチン及びリルピビリンの投与後の神経芽細胞腫の体積変化を示している。
【0093】
図３０は、動物モデルにおける、ビンクリスチン並びにビンクリスチン及びリルピビリンの投与後の神経芽細胞腫の体積変化を示している。
【0094】
図３１は、動物モデルにおける、ビンクリスチン単独、並びに、異なる濃度のリルピビリン（それぞれ６０ｍｇ及び１６０ｍｇ）及びビンクリスチンを投与した後の神経芽細胞腫の体積変化を示している。
【0095】
図３２は、動物モデルにおいてリルピビリンのみを投与した後の神経芽細胞腫の体積変化を示している。
【発明を実施するための形態】
【0096】
本発明は、他の癌療法からの重篤な副作用を最小限に抑えながら癌を治療するための、リルピビリン、その塩基形態若しくはその塩の単独又は他の癌療法との組み合わせによる使用に関する。癌の発生の予防、並びに、悪性細胞及び／又は悪性腫瘍の発生及び転移に関連する症状の実質的な減少又は排除が企図される。前癌状態の治療も本明細書で企図されている。
【0097】
以下に示す式Ｉ又はＩＩの化合物を本発明で使用することができる：
【化7】
【化8】
【0098】
式ＩＩの化合物は、一般に、リルピビリンの「塩基」形態と呼ばれる。式ＩＩの化合物の薬学的に許容される塩、例えば、リン酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、及びそれらの硫酸塩を含むが、これらに限定されない塩も使用され得る。形態は、結晶性又はアモルファスであり得る。
【0099】
本発明において、式（Ｉ）、（ＩＩ）のリルピビリン、又はその塩は、様々な癌を治療するために、単独で使用されるか、又は、様々な抗癌剤、生物学的薬剤、若しくは他の治療と組み合わされる。化学療法レジメン又は化学療法剤へのリルピビリンの添加は、腫瘍サイズを減少させるために必要な化学療法剤の量の実質的な減少を可能にし、それによって、これらの化学療法剤の有害な副作用を大幅に減少させる。幾つかの側面において、化学療法剤又は生物学的薬剤の減少量は、標準治療レジメンの量及び／又は頻度の最大７５～９０％であり得る。
【0100】
一側面において、本発明は、必要とする対象における癌性腫瘍の増殖を抑止し、及び／又は癌性腫瘍を治療し、及び／又は腫瘍開始細胞からの癌の開始を遅らせるための組成物の調製における式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物の使用を含んでいる：
ここで、上記組成物は、有効量の上記化合物を含んでいる。
【化9】
【化10】
【0101】
或いは、式（ＩＩ）の化合物の薬学的に許容される塩を使用することもできる。式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物は、単独で、又は、１つ若しくは複数の化学療法剤、生物学的薬剤、及び／又は抗癌剤と組み合わせて投与される。「組み合わせて」とは、式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の組成物を、化学療法剤、生物学的薬剤及び／又は抗癌剤の１つ又は複数と、別々に、又は、シンクロさせて、クロノドージングで、同時注入若しくは別々の注入によって、同時に投与することができ、化学療法剤、生物学的薬剤及び／又は抗癌剤の１つを他の１つの前又は後に投与することができることを意味している。
【0102】
組成物は、静脈内、非経口、鼻腔内、局所的若しくは部分的に、経口的に、又は、リポソーム、インプラントによって、若しくは対象への血管標的化ナノ懸濁液送達を介して投与され得る。
【0103】
理論に束縛されるものではないが、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物は、ＤＮＡ複製を妨害することによって癌細胞複製を妨害し得ると考えられる。したがって、リルピビリンは、ＤＮＡ損傷を増加させ、ＤＮＡ修復メカニズムを低下させ、ＭＹＣＮを分解し、及び／又は血管新生を阻害する可能性がある。更に、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物は、キナーゼ阻害によって生存シグナルをシャットダウンする可能性がある。或いは、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物は、ｐ糖タンパク質及びＢＣＲＰなどの排出トランスポータを妨害することにより、化学療法薬の標的腫瘍細胞による取り込みを増加させる可能性がある。
【0104】
化学療法剤は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、有糸分裂阻害剤、ステロイド、及び／又はそれらの任意の混合物のうちの１つ又は複数であり得る。
【0105】
アルキル化剤は、シクロホスファミド、メルファラン、テモゾロミド、カルボプラチン、シスプラチン、及び／又はオキサリプラチンのうちの１つ又は複数であり得る。代謝拮抗剤は、５－フルオロウラシル、６－メルカプトプリン、シタラビン、ゲムシタビン、及び／又はメトトレキサートのうちの１つ又は複数であり得る。抗腫瘍抗生物質は、アクチノマイシン－Ｄ、ブレオマイシン、ダウノルビシン、及び／又はドキソルビシンのうちの１つ又は複数であり得る。トポイソメラーゼ阻害剤は、エトポシド、イリノテカン、テニポシド、及び／又はのうちの１つ又は複数であり得る。有糸分裂阻害剤は、ドセタキセル、エストラムスチン、パクリタキセル、及び／又はビンブラスチンのうちの１つ又は複数であり得る。ステロイドは、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、及び／又はデキサメタゾンのうちの１つ又は複数であり得る。
【0106】
本発明の組成物又は化合物の使用は、様々な癌を治療するために使用され得る。一態様では、癌性腫瘍又は癌は、肥満細胞腫若しくは肥満細胞腫、卵巣癌、膵臓癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肝癌、黒色腫、網膜芽細胞腫、乳房腫瘍、結腸直腸癌、白血病、リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）若しくは急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、組織球性肉腫、脳腫瘍、星状細胞腫、膠芽腫、神経腫、神経芽腫、結腸癌、子宮頸癌、肉腫、前立腺腫瘍、膀胱腫瘍、細網内皮細胞組織の腫瘍、ウィルム腫瘍、卵巣癌、骨癌、骨肉腫、腎癌、若しくは頭頸部癌、口腔癌、喉頭癌、又は口腔咽頭癌であり得る。
【0107】
本発明の組成物又は化合物の使用は、成人、少年、子供及び幼児を含むヒトに適用することが意図されている。
【0108】
組成物中の化合物の有効量は、１日あたり約０．１ｍｇから１０００ｍｇである。当業者によって理解されるように、投薬は、癌のタイプ、癌の病期、投与の方法又は経路、及び同時投与される化学療法剤又は生物学的薬剤の量及びタイプに基づいて変化し得る。別の態様では、化合物量の範囲は、１日あたり０．１ｍｇから２５ｍｇである。例えば、組成物中の化合物は、１日あたり、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、又は２５ｍｇの有効量で対象に処方され得る。
【0109】
投与期間は、実施されている他の治療並びに癌の種類及び病期に応じて、１日１回以上、１週間に数回、又は、１週間若しくは複数週間に１回であり得る。
【0110】
生物学的薬剤は、ワクチン、サイトカイン、抗体、タンパク質及びペプチド薬物、及び／又はそれらの任意の混合物のうちの１つ又は複数であり得る。抗体は、Ｈｕ３Ｆ８、ｈｕ１４．１８Ｋ３２２Ａ、Ｈｕ１４．１８－ＩＬ－２、ジヌツキシマブ、又はそれらの任意の組み合わせのうちの１つ又は複数であり得る。一態様では、２つ以上の化学療法剤、生物学的薬剤、及び／又は他の抗癌剤が、対象への投与のために、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の上記化合物と共に処方される。
【0111】
式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物は、以下の処方形態の１つ又は複数に成形することができる：非経口製剤、水溶液、リポソーム、注射用溶液、注射用懸濁液、注射用エマルジョン、静脈内溶液、静脈内懸濁液／ナノ懸濁液、錠剤、丸剤、トローチ剤、カプセル剤、カプレット、パッチ、スプレー、吸入剤、粉末、凍結乾燥粉末、パッチ、ゲル、ゲルタブ、懸濁液、ナノ懸濁液、微粒子、ナノ粒子、ナノリポソーム、マイクロゲル、ペレット、坐剤、経口懸濁液、経口崩壊錠、経口分散錠剤、経口崩壊性フィルム、マイクロエマルジョン、ナノエマルジョン、及び自己乳化ドラッグデリバリーシステム、及び／又はそれらの任意の組み合わせ。
【0112】
まず、リルピビリン（ＲＰＶ）と他の潜在的化学療法剤との間の薬物－薬物相互作用を評価するために、アイソボグラム及び併用指数分析を行った。アイソボログラム分析は、特定の効果レベルで２つの薬剤間の相互作用を評価するものである。リルピビリンと他の化学療法剤の間の薬物－薬物相互作用、ＣＨＰ－１００，ＣＨＰ－１２６，ＣＨＰ－１３４Ｂ，ＣＨＰ－２１２，ＣＨＰ－２３４，ＣＨＰ－３８２，ＣＨＰ－４０４（Ｓｃｈｌｅｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９７６），ＧＩ－ＣＡ－Ｎ（Ｄｏｎｔｉ ｅｔ ａｌ．，１９８８），ＧＩ－ＬＩ－Ｎ（Ｃｏｒｎａｇｌｉａ ｅｔ ａｌ．，１９９２），ＧＩ－ＭＥ－Ｎ（Ｐｏｎｚｏｎｉ ｅｔ ａｌ．，１９８８），ＧＯＴＯ（Ｓｅｋｉｇｕｉｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，１９７９），ＩＧＲ－Ｎ－８３５（Ｂｅｔｔａｎ ｅｔ ａｌ．，１９８９），ＩＭＲ－３２（Ｔｕｍｉｌｏｃｗｉｃｚ ｅｔ ａｌ．，１９７０），ＬＡ－Ｎ－１，ＬＡ－Ｎ－５（Ｓｅｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９７７），ＭＨＨ－ＮＢ１１（Ｐｉｅｔｓｃｈ ｅｔ ａｌ．，１９８８），ＮＢ－６９（Ｇｉｌｂｅｒｔ ｅｔ ａｌ．，１９８２），ＮＢ１－Ｇ（Ｃａｒａｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，１９８７），ＮＢＬ－Ｗ（Ｆｏｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，１９９１），ＮＧＰ，ＮＧＰ－２，ＮＬＦ，ＮＭＢ（Ｂｒｏｄｅｕｒ ｅｔ ａｌ．，１９７７），ＲＮ－ＧＡ（Ｓｃａｒｐａ ｅｔ ａｌ．，１９８９）， ＳＫ－Ｎ－ＡＳ，ＳＫ－Ｎ－ＤＺ，ＳＫ－Ｎ－ＦＩ，ＳＫ－Ｎ－ＬＥ，ＳＫ－ＰＮ－ＬＯ，ＳＫ－ＰＮ－ＬＩ，ＳＫ－ＰＮ－ＤＷ， ＶＡ－Ｎ－ＢＲ（Ｈｅｌｓｏｎ ａｎｄ Ｈｅｌｓｏｎ，１９８５），ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）（Ｂｉｅｄｌｅｒ ａｎｄ Ｓｐｅｎｇｌｅｒ，１９７６），ＳＫ－Ｎ－ＳＨ（Ｂｉｅｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８３），ＳＭＳ－ＫＡＮ，ＳＭＳ－ＫＡＮＲ，ＳＭＳ－ＫＣＮ，ＳＭＳ－ＫＣＮＲ（Ｒｅｙｎｏｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，１９８６），ＴＣ－３２，ＴＣ－１０６，Ｎ１０００，Ｎ１００８，Ｎ１０１６，Ａ４５７３（Ｗｈａｎｇ－Ｐｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，１９８６），ＬＡＰ－３５（Ｂａｇｎａｒａ ｅｔ ａｌ．，１９９０），ＮＵＢ－２０（Ｙｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９０），ＳＫ－Ｎ－ＭＣ（Ｂｉｅｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８３），及びＴＣ－２６８（Ｃａｖａｚｚａｎａ ｅｔ ａｌ，１９８８）などの神経芽細胞腫細胞株に対して分析した。これらの全てが参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0113】
神経芽細胞腫細胞株
【0114】
ＩＭＲ－３２細胞株は１３か月齢の白人男性の腹部腫瘤から樹立されたヒト神経芽細胞腫細胞株であり（Ｔｕｍｉｌｏｃｗｉｃｚ ｅｔ ａｌ．，１９７０； Ｒｏｓｔｏｍｉｌｙ ＲＣ，ｅｔ ａｌ．，１９９７； Ｍａｅｓｔｒｉｎｉ Ｅ，ｅｔ ａｌ．１９９６）、神経関連疾患のモデルとして広く使用されている。ＩＭＲ－３２細胞株に加えて、更に３つの神経芽細胞腫細胞株（ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ、及びＳＨ－ＳＹ５Ｙ）の増殖も、リルピビリン処理下で成功裏に阻害された。
【0115】
アイソボログラム分析
【0116】
本発明では、ＩＭＲ－３２細胞株及び他の神経芽細胞腫細胞株の活性を阻害するのに必要なＩＣ５０濃度を、リルピビリン及び他の化学療法剤について測定した。これらは、２つの点（ＩＣ５０，リルピビリン，０）と（０、ＩＣ５０、化学療法剤）を形成する、ｘ軸とｙ軸の２座標プロット上に表示されている。これらの２つの点を結ぶ線は、これら２つの薬剤の相加性を示している。更に、同じ阻害作用を示す化学療法剤と組み合わせた場合のリルピビリンの濃度又は比を、同じプロットにおいて、点（Ｃリルピビリン，５０，Ｃ化学療法剤，５０）として示している。この点が線より下、線上、線より上にあるとき、それぞれ、相乗作用、相加作用、拮抗作用を示している。
【0117】
コンビネーションインデックス（ＣＩ）分析
【0118】
コンビネーションインデックスは、所定の効果レベルでの薬物間相互作用の定量的測定を提供する。組み合わせ指数（ＣＩ）は、次の式で計算される。
ここで、「ＩＣ５０（Ａ）ペア」は、薬剤Ｂと組み合わせて使用した場合の薬剤ＡのＩＣ５０を示し、「ＩＣ５０（Ｂ）ペア」は、薬剤Ａと組み合わせて使用した場合の薬剤ＢのＩＣ５０を示し 、「ＩＣ５０（Ａ）」は、単独で使用される場合の薬物ＡのＩＣ５０を指し、「ＩＣ５０（Ｂ）」は、単独で使用される場合の薬物ＢのＩＣ５０を指している。
【数1】
【0119】
ＣＩが１未満、１に等しい、及び１より大きい場合は、それぞれ、相乗効果、相加効果、及び拮抗効果を示している。
【0120】
異種移植マウスモデル
この研究では、ＢｉｏＬａｓｃｏ Ｔａｉｗａｎ（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｌｉｃｅｎｓｅｅ下）から入手した４～５週齢の雌のＢＡＬＢ／ｃヌードマウスを使用した。動物は個別に換気されたケージ（ＩＶＣ、３６ミニアイソレーターシステム）に収容された。４匹の動物への割り当てはｃｍ単位で２７ｘ２０ｘ１４であった。全ての動物は、温度（２０～２４℃）と湿度（３０％～７０％）を制御し、１２時間の明暗サイクルで衛生的な環境に維持された。標準的な実験用食餌［ＭＦＧ（オリエンタル酵母工業株式会社、日本）］とオートクレーブ処理された水道水への自由なアクセスが認容された。飼育、実験、動物の処分を含むこの作業の全ての側面は、本出願人のＡＡＡＬＡＣ認定の実験動物施設における「実験動物の管理と使用のためのガイド：第８版」（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｉｅｓ Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，２０１１年）に従って実施された。更に、動物のケアと使用に関するプロトコルは、ＩＡＣＵＣのＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（台湾）で審査され、承認された。
この研究では、ＢｉｏＬａｓｃｏ Ｔａｉｗａｎ（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｌｉｃｅｎｓｅｅ下）から入手した４～５週齢の雌のＢＡＬＢ／ｃヌードマウスを使用した。動物は個別に換気されたケージ（ＩＶＣ、３６ミニアイソレーターシステム）に収容された。４匹の動物への割り当てはｃｍ単位で２７ｘ２０ｘ１４であった。全ての動物は、温度（２０～２４℃）と湿度（３０％～７０％）を制御し、１２時間の明暗サイクルで衛生的な環境に維持された。標準的な実験用食餌［ＭＦＧ（オリエンタル酵母工業株式会社、日本）］とオートクレーブ処理された水道水への自由なアクセスが認容された。飼育、実験、動物の処分を含むこの作業の全ての側面は、本出願人のＡＡＡＬＡＣ認定の実験動物施設における「実験動物の管理と使用のためのガイド：第８版」（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｉｅｓ Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，２０１１年）に従って実施された。更に、動物のケアと使用に関するプロトコルは、ＩＡＣＵＣのＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（台湾）で審査され、承認された。
【0121】
ＩＭＲ－３２腫瘍細胞株をＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－１２７、神経芽腫）から購入し、台湾のＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｓｅｒｖｉｃｅｓで培養した。細胞は、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、及び１ｍＭ ＮＥＡＡを含むＭＥＭ培地中、３７℃、５％ＣＯ２インキュベータ中で培養した。先のセクションで説明したように、雌のＢＡＬＢ／ｃヌードマウスを使用した。生存ＩＭＲ－３２細胞（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－１２７）を雌ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの右脇腹に皮下（ＳＣ）移植した（０．２ｍＬ／マウスで１：１マトリゲル／完全培地混合物に１×１０７細胞）。腫瘍細胞移植後４１日目（群平均腫瘍容積範囲１２８ｍｍ３～１３０ｍｍ３）に、全動物を各々が８匹を含む１６の試験群に無作為に割り付け、用量投与を開始した（Ｄａｙ １と表記）。全ての実験は、施設の動物管理及び使用委員会によって承認されたプロトコル及び条件を使用して実施された。腫瘍の体積、体重、死亡率、及び明白な毒性の兆候を監視し、週に２回２８日間記録した。
【0122】
細胞培養及び薬物治療
ＩＭＲ－３２，ＳＫ－Ｎ－ＳＨ，ＳＨ－ＳＹ５Ｙ及びＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）腫瘍細胞株をＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ，マナサス，ヴァージニア州）から購入した。ＩＭＲ－３２及びＳＫ－Ｎ－ＳＨは、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１００ Ｕ／ｍＬペニシリン、及び１００Ｕ／ｍＬストレプトマイシンを含有するＥＭＥＭ培地中で、３７℃、５％ ＣＯ２インキュベータ中で培養した。ＳＨ－ＳＹ５Ｙ及びＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）は、１０％ＦＢＳ，１００Ｕ／ｍＬペニシリン、及び１００Ｕ／ｍＬストレプトマイシンを含むＥＭＥＭ／Ｆ－１２中で、３７℃、５％ ＣＯ２インキュベータ中で培養した。細胞を、培養培地中の１ウェル当たり３×１０３の細胞密度で９６ウェルマイクロプレートにプレーティングした。２４時間後、細胞を様々な濃度のリルピビリン及び化学療法剤で処理した。細胞を７２時間インキュベートし、３－（４，５－ジメチル－－２－チアゾリル）－２、５－ジフェニル－２ Ｈ－テトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）比色アッセイ（シグマ・アルドリッチ社、ミズーリ州セントルイス）により細胞増殖を測定した。ＭＴＴアッセイは３回行った。各ウェルの吸光度を、分光光度計（ｕＱｕａｎｔ ＳｐｅｃｔｒｏＭＡＸ Ｇｅｍｉｎｉ Ｄｕａｌ－ｓｃａｎｎｉｎｇ ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ ｓｐｅｃｔｒｏ，Ｂｉｏ－ｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｉｎｃ．）を用いて５５０ｎｍで測定した。増殖阻害は、対照のそれに対する処理された細胞の平均吸光度の比として表した。
ＩＭＲ－３２，ＳＫ－Ｎ－ＳＨ，ＳＨ－ＳＹ５Ｙ及びＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）腫瘍細胞株をＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ，マナサス，ヴァージニア州）から購入した。ＩＭＲ－３２及びＳＫ－Ｎ－ＳＨは、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１００ Ｕ／ｍＬペニシリン、及び１００Ｕ／ｍＬストレプトマイシンを含有するＥＭＥＭ培地中で、３７℃、５％ ＣＯ２インキュベータ中で培養した。ＳＨ－ＳＹ５Ｙ及びＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）は、１０％ＦＢＳ，１００Ｕ／ｍＬペニシリン、及び１００Ｕ／ｍＬストレプトマイシンを含むＥＭＥＭ／Ｆ－１２中で、３７℃、５％ ＣＯ２インキュベータ中で培養した。細胞を、培養培地中の１ウェル当たり３×１０３の細胞密度で９６ウェルマイクロプレートにプレーティングした。２４時間後、細胞を様々な濃度のリルピビリン及び化学療法剤で処理した。細胞を７２時間インキュベートし、３－（４，５－ジメチル－－２－チアゾリル）－２、５－ジフェニル－２ Ｈ－テトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）比色アッセイ（シグマ・アルドリッチ社、ミズーリ州セントルイス）により細胞増殖を測定した。ＭＴＴアッセイは３回行った。各ウェルの吸光度を、分光光度計（ｕＱｕａｎｔ ＳｐｅｃｔｒｏＭＡＸ Ｇｅｍｉｎｉ Ｄｕａｌ－ｓｃａｎｎｉｎｇ ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ ｓｐｅｃｔｒｏ，Ｂｉｏ－ｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｉｎｃ．）を用いて５５０ｎｍで測定した。増殖阻害は、対照のそれに対する処理された細胞の平均吸光度の比として表した。
【0123】
腫瘍体積評価
腫瘍体積（ｍｍ３）は、扁長楕円体の式に従って、次のように推定した：
長さｘ（幅）２ｘ０．５
腫瘍増殖阻害（Ｔ／Ｃ）は、次の式で計算した：
％Ｔ／Ｃ＝（Ｔｎ／Ｃｎ）ｘ１００％
Ｃｎ：対照群のｎ日目に測定された腫瘍体積
Ｔｎ：治療群のｎ日目に測定された腫瘍体積
腫瘍増殖阻害率（ＴＧＩ）についても、次の式で計算した：
％ＴＧＩ＝（１－（Ｔｎ／Ｃｎ））×１００％
双方向ＡＮＯＶＡとそれに続くＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ試験を用いて、研究におけるネガティブ対照群と比較して、抗腫瘍活性における統計的有意差を確認した（＊ｐ＜０．０５）。
腫瘍体積（ｍｍ３）は、扁長楕円体の式に従って、次のように推定した：
長さｘ（幅）２ｘ０．５
腫瘍増殖阻害（Ｔ／Ｃ）は、次の式で計算した：
％Ｔ／Ｃ＝（Ｔｎ／Ｃｎ）ｘ１００％
Ｃｎ：対照群のｎ日目に測定された腫瘍体積
Ｔｎ：治療群のｎ日目に測定された腫瘍体積
腫瘍増殖阻害率（ＴＧＩ）についても、次の式で計算した：
％ＴＧＩ＝（１－（Ｔｎ／Ｃｎ））×１００％
双方向ＡＮＯＶＡとそれに続くＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ試験を用いて、研究におけるネガティブ対照群と比較して、抗腫瘍活性における統計的有意差を確認した（＊ｐ＜０．０５）。
【0124】
高リスク神経芽細胞腫患者の治療の標準レジメンの１つであるＲａｐｉｄ ＣＯＪＥＣ（シスプラチン［Ｃ］、ビンクリスチン［Ｏ］、カルボプラチン［Ｊ］、エトポシド［Ｅ］、及びシクロホスファミド［Ｃ］）に対するリルピビリンの影響を明らかにするために、ｉｎ ｖｉｖｏ研究を行った。リルピビリンをｒａｐｉｄ ＣＯＪＥＣ由来の各々と組み合わせて、異種移植マウスモデルにおける神経芽細胞腫の治療における潜在的利益を評価した。以下の実施例４に見られるように、リルピビリンは、シスプラチン、カルボプラチン、及びビンクリスチンの治療効果を増強することが決定された。これらの化学療法剤の治療効果を増強することによって、神経芽細胞腫の治療中の細胞傷害性化学療法剤の投与頻度又は薬物濃度を、特には標準治療プロトコルの量の最大７５～９０％まで減少させることができる。更に、リルピビリンは化学療法薬（シクロホスファミド及びエトポシド）の治療効果を弱めることはなく、神経芽細胞腫の標準的な治療レジメンで使用できることが示された。
【0125】
Ｉｎ ｖｉｔｒｏ分析
【0126】
実施例１（複数の神経芽細胞腫細胞株に対するリルピビリン単独のｉｎ ｖｉｔｒｏデータ）
【0127】
神経芽細胞腫細胞株の阻害に対するリルピビリンの効力を決定するために、ＩＭＲ－３２、ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ、及びＳＨ－ＳＹ５Ｙなどの神経芽細胞腫細胞株において、ＩＣ５０を測定した（表１）。更に、神経芽細胞腫細胞株ＩＭＲ－３２の増殖は、２４時間のリルピビリン処理下で有意に阻害された（図１Ａ、図１Ｂ）。種々の濃度のリルピビリンで処理したＩＭＲ－３２の細胞生存率を図１Ｃに示す。
【0128】
【表1】
【0129】
実施例２（ドキソルビシン多発性神経芽細胞腫細胞株と組み合わせたリルピビリンのｉｎ ｖｉｔｒｏデータ）
【0130】
ドキソルビシン（ＤＯＸ）は、乳癌、膀胱癌、カポジ肉腫、リンパ腫及び急性リンパ性白血病を含む癌治療の化学療法剤である。アイソボログラム分析は、ＩＭＲ－３２及びＳＫ－Ｎ－ＳＨ細胞株に対して異なる比率におけるリルピビリンとＤＯＸとの相乗効果を示している（図２及び図３）。コンビネーションインデックス分析は、ＣＩが１未満であるという相乗効果も示している（表２及び表３）。ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）及びＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株については、アイソボログラム解析（図４及び図５）において相加効果が認められ、ＣＩはほぼ１に近い値であった（表４及び表５）。
【0131】
【表2】
【0132】
【表3】
【0133】
【表4】
【0134】
【表5】
【0135】
実施例３（複数の神経芽細胞腫細胞株に対するペルホスファミドと組み合わせたリルピビリンのｉｎ ｖｉｔｒｏデータ）
【0136】
シクロホスファミド類似体である４－ヒドロペルオキシシクロホスファミド（又はペルホスファミド）は、急性骨髄性白血病などの血液癌治療のための実験薬である。アイソボログラム分析は、ＩＭＲ－３２（図６），ＳＨ－ＳＹ５Ｙ（図７）、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ（図８）、及びＳＫ－Ｎ－ＢＥ２細胞株（図９）に対して異なる比率の４－ヒドロペルオキシシクロホスファミド及びリルピビリンによる相加的及び軽度の拮抗作用を示している。コンビネーションインデックス分析はまた、ＣＩが０．９から１．１の間である相加的及びＣＩが１．１以上である拮抗作用を示している（表６から表９）。
【0137】
【表6】
【0138】
【表7】
【0139】
【表8】
【0140】
【表9】
【0141】
実施例４（複数の神経芽細胞腫細胞株に対するシスプラチンと組み合わせたリルピビリンのｉｎ ｖｉｔｒｏデータ）
【0142】
シスプラチン（ＣＤＤＰ）は、精巣癌、卵巣癌、頚部癌、胸癌、膀胱癌、頭頚部癌、食道癌、肺癌、中皮腫、脳腫瘍、及び神経芽腫などの癌治療のための化学療法剤である。アイソボログラム分析は、ＩＭＲ－３２（図１０）、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ（図１１）、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ（図１２）、及びＳＫ－Ｎ－ＢＥ２細胞株（図１３）に対する異なる比率によるリルピビリンとＣＤＤＰとの相加的及び軽度の拮抗作用を示している。コンビネーションインデックス分析はまた、ＣＩが０．９と１．１の間である相加効果及びＣＩが１．１以上である拮抗効果を示している（表１０から表１３）。
【0143】
【表10】
【0144】
【表11】
【0145】
【表12】
【0146】
【表13】
【0147】
実施例５（複数の神経芽細胞腫細胞株に対するエトポシドと組み合わせたリルピビリンのｉｎ ｖｉｔｒｏデータ）。エトポシド（ＥＴＯＰ）は、精巣癌、肺癌、リンパ腫、白血病、神経芽細胞腫、及び卵巣癌などの癌治療に使用される化学療法薬である。アイソボログラム分析は、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ及びＳＫ－Ｎ－ＳＨ細胞株に対するリルピビリン及びＥＴＯＰの異なる比率による相乗効果を示し（図１４及び図１５）、コンビネーションインデックス分析もＣＩが１未満である相乗効果を示した（表１４及び表１５）。また、ＩＭＲ－３２細胞株及びＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）細胞株については、アイソボログラム解析（図１６及び図１７）において相加効果が認められ、ＣＩは概ね１に近い値を示した（表１６及び表１７）。
【0148】
【表14】
【0149】
【表15】
【0150】
【表16】
【0151】
【表17】
【0152】
実施例６（多発性神経芽細胞腫細胞株に対するビンクリスチンと組み合わせたリルピビリンのｉｎ ｖｉｔｒｏデータ）
【0153】
ビンクリスチン（Ｖｉｎ）は、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、ホジキン病、神経芽細胞腫、及び小細胞肺癌などの癌治療に使用される化学療法薬である。アイソボログラム分析は、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株（図１８）に対して異なる比のリルピビリンとＶｉｎとの相乗効果を示し、コンビネーションインデックス分析もＣＩが１未満である相乗効果を示した（表１８）。また、ＩＭＲ－３２細胞株及びＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）細胞株については、アイソボログラム解析（図１９及び図２０）において相加効果が認められ、ＣＩは概ね１に近い値を示した（表１９及び表２０）。更に、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ細胞株では、アイソボグラム解析（図２１）での併用割合の違いにより複数の影響が認められ、ＣＩは０．５～１．５であった（表２１）。
【0154】
【表18】
【0155】
【表19】
【0156】
【表20】
【0157】
【表21】
【0158】
実施例７（複数の神経芽細胞腫細胞株に対するカルボプラチンと組み合わせたリルピビリンのｉｎ ｖｉｔｒｏデータ）カルボプラチン（ＣＢＰ）は、卵巣癌、肺癌、頭頸部癌、脳癌、及び神経芽腫などの癌治療に用いられる化学療法剤である。アイソボログラム分析は、ＩＭＲ－３２細胞株（図２２）に対して、リルピビリンとＶｉｎとの異なる組み合わせによる軽度の相乗効果を示し、コンビネーションインデックス解析もＣＩが１未満である相乗効果を示した（表２２）。ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞株及びＳＫ－Ｎ－ＳＨ細胞株では、アイソボログラム解析（図２３及び図２４）で相加効果を示し、ＣＩはほぼ１に近い値を示した（表２３及び表２４）。また、ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）細胞株では、アイソボログラム解析（図２５）で拮抗作用を示し、ＣＩは１．３以上である（表２５）。
【0159】
【表22】
【0160】
【表23】
【0161】
【表24】
【0162】
【表25】
【0163】
実施例８（他の癌細胞株に対するリルピビリン単独のｉｎ ｖｉｔｒｏデータ）
【0164】
神経芽細胞腫細胞株に加えて、他の癌細胞株においてもリルピビリン単独の効力が示されている（表２６）。
【0165】
【表26】
【0166】
図２６を参照すると、ＳＫ－Ｎ－ＳＨ、ＳＫ－Ｎ－ＢＥ（２）及びＳＨ－ＳＹ５Ｙ神経芽細胞腫細胞株に適用したリルピビリンの濃度を増加させる（０．１２、０．３７、１．１１、３．３及び１０μＭ）ことによって、切断されたポリ（ＡＤＰ－リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）及びリン酸－ヒストンＨ２Ａ．Ｘ（ｐ－Ｈ２Ａ．Ｘ）の発現が徐々に増加し、リルピビリン単独でＤＮＡ損傷を引き起こし、神経芽細胞腫又は他の癌細胞の細胞アポトーシスにつながることが示唆された。更に、単剤治療と比較して、化学療法薬ビンクリスチンとリルピビリンとの併用は、切断されたＰＡＲＰとＰ－Ｈ２Ａ．Ｘの発現増加を示し、神経芽細胞腫細胞株ＩＭＲ－３２におけるＤＮＡ損傷及び細胞アポトーシスの増強を示唆し、腫瘍抑制遺伝子ＢＲＣＡ１もアップレギュレートされた（図２７）。
【0167】
Ｉｎ ｖｉｖｏ分析
【0168】
本発明では、神経芽細胞腫の異種移植マウスモデルにおける治療効果を評価するために、リルピビリンを単独で、又は、シスプラチン、カルボプラチン、及びビンクリスチンなどの化学療法薬と組み合わせて使用した。ｉｎ ｖｉｖｏ試験の詳細については、上記の異種移植マウスモデルのセクションを参照のこと。
【0169】
実施例９（マウスモデルにおけるシスプラチンを伴うリルピビリンのｉｎ ｖｉｖｏデータ）
【0170】
図２８に示すように、シスプラチン７ｍｇ／ｋｇを１日目に腹腔内投与し、リルピビリン４００ｍｇ／ｋｇを１日１回２１日間連続経口投与する併用療法の腫瘍体積は、シスプラチン７ｍｇ／ｋｇを週１回３週間に腹腔内投与する単独療法群と比較して、、特に１１日目において、統計学的に有意に小さく（アンペアドスチューデントのｔ検定，ｐ＜０．０５）、腫瘍増殖抑制効果は約８８％以上であった。約９４％の最大％ＴＧＩ値は２８日目にみられる。
【0171】
実施例１０（マウスモデルにおけるリルピビリン及びカルボプラチンのｉｎ ｖｉｖｏデータ）
【0172】
また、図２９に示すように、１日目に８０ｍｇ／ｋｇのカルボプラチンを腹腔内投与し、毎日４００ｍｇ／ｋｇのリルピビリンを経口投与する併用療法（ＱＤ×１１）による腫瘍体積は、８ｍｇ／ｋｇのカルボプラチンを週１回３週間腹腔内投与する単独療法群と比較して、特に８日目と１１日目において、統計学的に有意に小さく（アンペアドスチューデントのｔ検定，ｐ＜０．０５）、腫瘍増殖抑制率は約７７％及び約８４％超であった。約９４％の最大％ＴＧＩ値は２８日目にみられる。
【0173】
実施例１１（マウスモデルにおけるリルピビリン及びビンクリスチンのｉｎ ｖｉｖｏデータ）
【0174】
また、図３０に示すように、１日目に１ｍｇ／ｋｇのビンクリスチンを腹腔内投与し、毎日４００ｍｇ／ｋｇのリルピビリンを経口投与する併用療法（ＱＤ×１１）による腫瘍体積は、ビンクリスチン１ｍｇ／ｋｇを週１回３週間、腹腔内投与する単独療法群と比較して、特に８日目と１１日目において、統計学的に有意に小さく（アンペアドｔ検定，ｐ＜０．０５）、腫瘍増殖抑制効果は約８６％以上であった。約９３％の最大％ＴＧＩ値は２８日目にみられる。
【0175】
なお、併用療法群の化学療法剤（実施例９～１１）は第１日目のみに適用し、単独療法群は第１、８、１５日目に適用したことは、注目に値する。このことは、リルピビリンの投与が細胞毒性化学療法薬の用量頻度又は量を低下させ、化学療法薬により生じる副作用を改善する可能性があることを示している。投与回数は、月３回から月１回、週２回から週１回へと概ね減少した。
【0176】
別の実施形態では、カルボプラチン又はビンクリスチンのリルピビリンとの併用療法の腹腔内注射は、１１日目以降に全ての薬物治療が中止され、腫瘍体積は単剤療法群と統計学的に差がなく、リルピビリンの長期阻害作用が示唆された。
【0177】
高リスク神経芽細胞腫患者の治療の標準レジメンの１つであるｒａｐｉｄ ＣＯＪＥＣに対するリルピビリンの影響を解明するために、上記のｉｎ ｖｉｖｏ併用試験を実施した。リルピビリンをｒａｐｉｄ ＣＯＪＥＣ（シスプラチン、カルボプラチン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、及びエトポシドを含む）で各化学療法薬と併用し、その潜在的利益を異種移植マウスモデルで評価した。
【0178】
このｉｎ ｖｉｖｏ研究のデータによると、リルピビリンは、神経芽細胞腫異種移植モデルに対するシスプラチン、カルボプラチン、及びビンクリスチンの有効性を増強した。一般的に言えば、併用療法は、カルボプラチン及びビンクリスチンでは８日目と１１日目に、シスプラチンでは１１日目に、単独療法群と比較して、腫瘍体積に統計的に有意な減少をもたらした（アンペアドスチューデントのｔ検定，ｐ＜０．０５）。併用療法群の化学療法薬が１日目のみに投与されたことは注目に値する。一方、単剤療法群では、化学療法薬は１日目、８日目、１５日目に投与された。このことは、リルピビリンが細胞毒性化学療法薬の投与頻度を減らす可能性があることを示している可能性がある。
【0179】
加えて、リルピビリン＋シスプラチン群は、１１～１５日目にシスプラチン単独群と比較して同様の腫瘍サイズ（アンペアドスチューデントのｔ検定，ｐ＞０．０５）を達成し、２５日目まで差がないことが観察された。カルボプラチン及びビンクリスチンの併用群では、１１日目に治療を中止したが、腫瘍サイズは化学療法単独群と統計的に異ならなかった。
【0180】
一方、リルピビリンは、異種移植モデルにおいて、シクロホスファミド及びエトポシドの治療効果に干渉したり、それを弱めたりしないことも観察された。シクロホスファミド単独とシクロホスファミド＋リルピビリン及びエトポシド単独とエトポシド＋リルピビリンとをそれぞれ比較した２８日間のｉｎ ｖｉｖｏ試験では、単独療法と併用療法との間に腫瘍サイズに有意差は認められなかった。
【0181】
このｉｎ ｖｉｖｏ研究に基づいて、リルピビリンは、シスプラチン、カルボプラチン、及びビンクリスチンの治療効果を増強し、神経芽細胞腫の治療中の細胞毒性化学療法薬の投与頻度を潜在的に減少させることが見出された。一方、リルピビリンは、シクロホスファミド及びエトポシドの治療効果を弱めなかった。したがって、神経芽細胞腫に対する標準的な化学療法にリルピビリンを組み込むことにより、優越性と改善が観察される可能性がある。
【0182】
実施例１２（マウスモデルにおけるリルピビリン単独のｉｎ ｖｉｖｏデータ）
図３２に示すように、ヴィークル（０．５％ ＨＰＭＣ）を経口投与により２１日間連続して１日１回投与した陰性対照群と比較して、リルピビリン４００ｍｇ／ｋｇを１日１回２１日間連続で経口投与した群において、腫瘍増殖が有意に抑制され（アンペアドスチューデントのｔ検定，ｐ＜０．０５）、神経芽腫に対するリルピビリン単独の抗腫瘍活性が示唆された。投与の過程で、リルピビリンは忍容性が高く、体重減少を伴うことがなく、明白な毒性は観察されなかった。
図３２に示すように、ヴィークル（０．５％ ＨＰＭＣ）を経口投与により２１日間連続して１日１回投与した陰性対照群と比較して、リルピビリン４００ｍｇ／ｋｇを１日１回２１日間連続で経口投与した群において、腫瘍増殖が有意に抑制され（アンペアドスチューデントのｔ検定，ｐ＜０．０５）、神経芽腫に対するリルピビリン単独の抗腫瘍活性が示唆された。投与の過程で、リルピビリンは忍容性が高く、体重減少を伴うことがなく、明白な毒性は観察されなかった。
【0183】
本明細書における「一実施形態」「ある実施形態」「例示的な実施形態」などへの言及は、記載された実施形態が特定の構成、構造、又は特徴を含むことができるが、全ての実施形態が特定の構成、構造、又は特徴を必ずしも含むとは限らないことを示している。また、そのような句は、必ずしも同じ実施形態を指すとは限らない。更に、特定の構成、構造、又は特徴が実施形態に関連して記載される場合、明示的に記載されているか否かにかかわらず、他の実施形態に関連してそのような構成、構造、または特徴に影響を及ぼすことは、当業者の知識の範囲内である。
【0184】
本明細書に記載されている製造方法では、時間的又は操作的シーケンスが明示的に記載されている場合を除き、工程は、本発明の原理から逸脱することなく任意の順序で実施することができる。最初の工程が実施され、次いで幾つかの他の工程がその後に実施される旨のクレームにおける記載は、第１の工程が他の工程の何れかの前に実施されるが、他の工程は、他の工程内で更に記載されない限り、任意の適切な順序で実施することができることを意味するものとする。例えば、「工程Ａ、工程Ｂ、工程Ｃ、工程Ｄ、及び工程Ｅ」を記載するクレーム要素は、工程Ａが最初に実施され、工程Ｅが最後に実施され、工程Ｂ、Ｃ及びＤが工程Ａと工程Ｅの間の任意の順序で実施され、その順序が依然としてクレームされたプロセスの文言の範囲内にあることを意味すると解釈される。特定の工程又は工程のサブセットを繰り返すこともできる。更に、特定の工程は、明示的なクレーム文言がそれらが別々に実施されることを記載しない限り、同時に実施することができる。
【0185】
本明細書で使用される選択された用語の定義は、本発明の詳細な説明の中に見出されるかもしれない。そして、その定義は、全体を通して適用され得る。他に定義されない限り、本明細書で使用される他のすべての技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解されるのと同じ意味を有する。
【0186】
これらの教示を考慮すると、添付の特許請求の範囲に記載されているように、本発明の精神又は範囲から逸脱することなく、代替実施形態を実施することができることが当業者には理解されるだろう。本発明は、上記の明細書及び添付の図面と関連して見たときに、全てのそのような実施形態及び変形を含む、以下の請求項によってのみ限定されるべきである。
【図1A】
【図1B】
【図1C】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【図30】
【図31】
【図32】
【国際調査報告】