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特表2023-506403遺伝性血管性浮腫の治療または予防のための抗第ＸＩＩ因子抗体の使用
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-02-16
(54)【発明の名称】遺伝性血管性浮腫の治療または予防のための抗第ＸＩＩ因子抗体の使用
(51)【国際特許分類】
A61K 39/395 20060101AFI20230209BHJP
A61P 9/00 20060101ALI20230209BHJP
C07K 16/36 20060101ALI20230209BHJP
C12N 15/13 20060101ALI20230209BHJP
【ＦＩ】
A61K39/395 N
A61P9/00
C07K16/36 ZNA
C12N15/13
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022533078
(86)(22)【出願日】2020-12-03
(85)【翻訳文提出日】2022-07-08
(86)【国際出願番号】 AU2020051321
(87)【国際公開番号】W WO2021108862
(87)【国際公開日】2021-06-10
(31)【優先権主張番号】62/943,117
(32)【優先日】2019-12-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/093,975
(32)【優先日】2020-10-20
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】521541826
【氏名又は名称】シーエスエル・イノベーション・プロプライエタリー・リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100127926
【弁理士】
【氏名又は名称】結田 純次
(74)【代理人】
【識別番号】100140132
【弁理士】
【氏名又は名称】竹林 則幸
(72)【発明者】
【氏名】インゴ・プラークスト
(72)【発明者】
【氏名】ディプティ・パワスカー
(72)【発明者】
【氏名】テレサ・ユラセック
(72)【発明者】
【氏名】イン・ヂァン
【テーマコード（参考）】
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C085AA13
4C085BB31
4C085CC23
4C085DD61
4C085EE01
4C085GG04
4H045AA11
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA10
4H045CA40
4H045DA76
4H045EA23
4H045FA74
(57)【要約】
本発明は、対象に皮下投与される、対象の遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）を治療または予防する方法における使用のための抗ＦＸＩＩ抗体に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
（ｉ）配列番号１に記載の配列を含むＣＤＲＨ１；配列番号２に記載の配列を含むＣＤＲＨ２；および配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲＨ３を含むＶＨ；ならびに（ｉｉ）配列番号４に記載の配列を含むＣＤＲＬ１；配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲＬ２；および配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲＬ３を含むＶＬを含み、
対象に皮下投与される、
対象の遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）を治療または予防する方法における使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項2】
配列番号７に記載の配列を含むＶＨおよび配列番号８に記載の配列を含むＶＬを含む、請求項１に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項3】
ＩｇＧ、好ましくはＩｇＧ４抗体である、請求項１または２に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項4】
ＥＵ番号付けシステムによるヒンジ領域の２２８位のプロリンへの変異を含む、請求項３に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項5】
配列番号９に記載の重鎖配列および配列番号１０に記載の軽鎖配列を含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項6】
重鎖が、配列番号９の最後のアミノ酸に連結された追加のリジンを含む、請求項５に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項7】
抗体の２回の後続の投与の間に、少なくとも５μｇ／ｍｌの抗体濃度を維持する量で投与される、請求項１～６のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項8】
７０ｍｇ～７００ｍｇの投与量で、１～３ヶ月ごとに１回、好ましくは１～２ヶ月ごとに１回投与される、請求項１～７のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項9】
１５０ｍｇ～２５０ｍｇ、好ましくは１７０ｍｇ～２２０ｍｇ、より好ましくは２００ｍｇの投与量で投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項10】
５０ｍｇ～１５０ｍｇ、好ましくは７０ｍｇ～１３０ｍｇ、より好ましくは１００ｍｇの投与量で投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項11】
１～２ヶ月ごとに、好ましくは１ヶ月に１回投与される、請求項１～１０のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項12】
患者が、ＨＡＥを有するか、またはＨＡＥを有する疑いがあるか、またはＨＡＥのリスクがあるヒト患者である、請求項１～１１のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項13】
方法が、負荷用量の抗ＦＸＩＩ抗体の投与を含む、請求項１～１２のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項14】
負荷用量の投与が、３０ｍｇ～４００ｍｇの間、好ましくは１００～３００ｍｇの間、より好ましくは２００ｍｇの投与量での抗ＦＸＩＩ抗体の静脈内投与である、請求項１３に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項15】
負荷用量の投与が、７０ｍｇ～７００ｍｇの間、好ましくは２００～５００ｍｇの間、より好ましくは４００ｍｇの投与量での抗ＦＸＩＩ抗体の皮下投与である、請求項１３に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項16】
対象に皮下投与されるのみである、請求項１～１３および１５のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項17】
ＦＸＩＩ抗体の投与が、ＨＡＥ発作のリスクを、好ましくは８５％を超えて、より好ましくは９０％を超えて、さらにより好ましくは、９５％を超えてまたは９８％を超えて低減させる、請求項１～１６のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【請求項18】
抗体の２回の後続の投与の間に、ＦＸＩＩ媒介カリクレイン活性の６０％、５０％、４０％、または３０％未満を阻害するのに十分な量で投与される、請求項１～１７のいずれか１項に記載の使用のための抗ＦＸＩＩ抗体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、抗体は対象に皮下投与される、対象の遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）を治療または予防する方法で使用するための抗ＦＸＩＩ抗体に関する。
【背景技術】
【0002】
第ＸＩＩ因子（ハーゲマン因子、ＦＸＩＩ）は、分子量約８０ｋＤａの血清糖タンパク質である。負に帯電した表面への曝露による自己活性化に加えて、第ＸＩＩ因子は、タンパク質分解切断によってカリクレイン（ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ）によりさらに活性化され、アルファ第ＸＩＩａ因子を形成し、次に、例えばトリプシンによってベータ第ＸＩＩａ因子（ＦＸＩＩａ－β）にさらに変換される。アルファ第ＸＩＩａ因子は、接触結合ドメインを含む約５０ｋＤａのＮ末端重鎖、および触媒中心を含む約２８ｋＤａのＣ末端軽鎖で構成される。重鎖および軽鎖はジスルフィド結合で接続されている。ＦＸＩＩａ－βは約３０ｋＤａのＦＸＩＩの活性型であり、完全な軽鎖、およびジスルフィド結合によって連結された重鎖の２０００Ｄａ断片からなる。
【0003】
遺伝性血管性浮腫は、１型ＨＡＥ、２型ＨＡＥ、および正常Ｃ１－エステラーゼ阻害剤（ｎＣ１－ＩＮＨ）を伴うＨＡＥを含む、３つの疾患タイプに分類される、まれな遺伝性傷害である［非特許文献１；非特許文献２］。１型ＨＡＥおよび２型ＨＡＥは、ＳＥＲＰＩＮＧ１遺伝子の変異によって引き起こされ、Ｃ１－エステラーゼ阻害剤（Ｃ１－ＩＮＨ）血漿濃度の定量的減少（１型）および正常な血漿濃度に存在する機能不全Ｃ１－ＩＮＨ（２型）によって特徴づけられる［非特許文献３；非特許文献４］。一緒に、１型ＨＡＥおよび２型ＨＡＥはＣ１－ＩＮＨ欠損症（Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥ）を伴うＨＡＥとしてグループ化される。Ｃ１－エステラーゼ阻害剤は、血漿接触系によるＢＫの生成を調節するセリンプロテアーゼ阻害剤であり、ＦＸＩＩおよびカリクレインを含む多くの血漿接触系プロテアーゼの主要な阻害剤である［非特許文献５］。第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）駆動血漿接触系の病理学的活性化による過剰なＢＫ形成は、ＨＡＥの急性エピソードにおける一貫した所見である［非特許文献６］（図１を参照）。
【0004】
正常Ｃ１－ＩＮＨ（ｎＣ１－ＩＮＨ）を伴うＨＡＥは、Ｃ１－ＩＮＨ欠損症ではなく、ＦＸＩＩ遺伝子の塩基対のミスセンス変異、欠失、または挿入［非特許文献４］、プラスミノーゲン遺伝子のミスセンス変異［非特許文献７］、［非特許文献８］に関連するか、または未知の遺伝的欠陥によって引き起こされた［非特許文献４］遺伝性疾患である。
【0005】
臨床的には、ＨＡＥを有する患者に起きるＨＡＥ発作は、皮膚の局所的な腫れ（すなわち、四肢の浮腫、顔面の浮腫、生殖器の浮腫）、腹痛、および時には生命を脅かす喉頭浮腫の発作により特徴づけられる［非特許文献９］。Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの推定有病率は一般に１：５００００と報告されているが、ｎＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥの有病率は不明である［非特許文献１０；非特許文献１１］。
【0006】
ＨＡＥの現在の治療選択肢は、発作の急性期治療と予防に細分することができる。ＨＡＥの急性期および予防的治療は、カリクレイン－キニン経路のさまざまなタンパク質を標的とすることによりＢＫ産生を阻害することに基づいている。急性ＨＡＥ発作の事象に選択される治療法は、Ｃ１－ＩＮＨ濃縮物の急速静脈内（ＩＶ）投与である［非特許文献９；非特許文献１２；非特許文献１３］。最近、カリクレイン阻害剤およびＢＫ受容体拮抗薬を含む化合物が、急性ＨＡＥ発作の治療に利用できる薬剤の範囲に追加された［非特許文献１４；非特許文献１０］。
【0007】
急性ＨＡＥ発作を静脈内投与により治療するために現在承認されているＣ１－ＩＮＨ濃縮物は、血漿由来のＢｅｒｉｎｅｒｔ（登録商標）および組換えＲｕｃｏｎｅｓｔ（登録商標）である。あるいは、カリクレイン阻害剤であるＫａｌｂｉｔｏｒ（登録商標）（ｉｃａｔｉｂａｎｔ）、またはブラジキニン（ｂｒａｄｙｋｉｎｉｎ）Ｂ２受容体拮抗薬であるＦｉｒａｚｙｒ（登録商標）（ｅｃａｌｌａｎｔｉｄｅ）を、急性ＨＡＥ発作の場合に皮下投与することができる。ＨＡＥの予防的治療の治療選択肢は、血漿由来のＣｉｎｒｙｚｅ（登録商標）（ＩＶ）ＨＡＥＧＡＲＤＡ／Ｂｅｒｉｎｅｒｔ ２０００／３０００（ＳＣ）に限定されている。ごく最近、カリクレイン抗体製品Ｔａｋｈｚｙｒｏ（登録商標）（ラナデルマブ（ｌａｎａｄｅｌｕｍａｂ）、ＳＣ）が予防の代替選択肢として承認された。
【0008】
急性ＨＡＥ発作およびＨＡＥの予防的治療のための既存の治療選択肢にもかかわらず、特に予防の分野では、まだ満たされていない医学的必要性の領域がある。現在の予防的治療の限界は、好ましくない副作用プロファイル（アンドロゲンの減弱）、効果の欠如（抗線溶薬）、または投与頻度（ＩＶまたはＳＣ Ｃ１－ＩＮＨ）である。さらに、血漿由来のＣ１－ＩＮＨ製品は、時折、供給の問題が起きる可能性があり、そのために、代替治療選択肢が依然として必要である。
【0009】
特許文献１および特許文献２は、さまざまな抗ＦＸＩＩ抗体、およびＨＡＥを含むがそれに限定されないさまざまな疾患の治療におけるそれらの使用を開示している。ＨＡＥに関しては、インビボ実験データ、患者の安全性データ、または臨床試験に関するデータは提供されていない。
【0010】
特許文献３は、本発明の文脈で使用される抗体を含むがこれらに限定されない、さらなる抗ＦＸＩＩ抗体を開示している。特許文献３においては、ＨＡＥは言及されていない。
【0011】
最後に、抗第ＸＩＩ因子ｍＡｂがＨＡＥの治療または予防に有効であるか否かは不明のままであった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0012】
【特許文献1】国際公開第２０１３／０１４０９２号
【特許文献2】国際公開第２０１７／０１５４３１号
【特許文献3】国際公開第２０１７／１７３４９４号
【非特許文献】
【0013】
【非特許文献1】Ｒｏｓｅｎら、１９６５、Ｓｃｉｅｎｃｅ １４８；３６７２：９５７～８頁
【非特許文献2】Ｂｏｒｋら、２０００、Ｌａｎｃｅｔ、３５６；９２２５：２１３～７頁
【非特許文献3】Ｚｕｒａｗら、２０１０、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ、３６３；６：５１３～２２頁
【非特許文献4】Ｃｉｃａｒｄｉら、２０１４、Ａｌｌｅｒｇｙ、６９；５：６０２～１６頁
【非特許文献5】Ｄａｖｉｓら、２０１０、Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ、１０４；５：８８６～９３頁
【非特許文献6】Ｂｊｏｅｒｋｑｖｉｓｔら、２０１３、Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ、１１０；３：３９９～４０７頁
【非特許文献7】Ｂｏｒｋら、２０１８、Ａｌｌｅｒｇｙ、７３；２：４４２～５０頁
【非特許文献8】Ｄｅｗａｌｄ、２０１８、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ、４９８；１：１９３～８頁
【非特許文献9】Ｂｏｒｋ、２００８、Ｅｘｐ Ｒｅｖ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ、４；１：１３～２０頁
【非特許文献10】Ｃｉｃａｒｄｉら、２０１０、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ、３６３；６：５２３～３１頁
【非特許文献11】Ｎａｓｒら、２０１６、Ｅｘｐ Ｒｅｖ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ、１２；１：１９～３１頁
【非特許文献12】Ｇｏｍｐｅｌｓら、２００５、Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ、１３９；３：３７９～９４頁
【非特許文献13】Ｌｏｎｇｈｕｒｓｔ、２００５、Ｉｎｔ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐｒａｃｔｉｃｅ、５９；５：５９４～９頁
【非特許文献14】Ｃｉｃａｒｄｉら、２０１０、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ、３６３；６：５３２～４１頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0014】
全体として、新たな治療法は予防的臨床転帰の改善を提供しているものの、ＨＡＥの予防的管理、特に新規の薬理学的経路を標的とするさらなるモダリティが必要である。
【課題を解決するための手段】
【0015】
本発明は、
（ｉ）配列番号１に記載の配列を含むＣＤＲＨ１；配列番号２に記載の配列を含むＣＤＲＨ２；および配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲＨ３を含むＶＨ；ならびに
（ｉｉ）配列番号４に記載の配列を含むＣＤＲＬ１；配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲＬ２；および配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲＬ３を含むＶＬを含み、
対象に皮下投与される、
対象の遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）を治療または予防する方法における使用のための抗ＦＸＩＩ抗体に関する。
（ｉ）配列番号１に記載の配列を含むＣＤＲＨ１；配列番号２に記載の配列を含むＣＤＲＨ２；および配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲＨ３を含むＶＨ；ならびに
（ｉｉ）配列番号４に記載の配列を含むＣＤＲＬ１；配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲＬ２；および配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲＬ３を含むＶＬを含み、
対象に皮下投与される、
対象の遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）を治療または予防する方法における使用のための抗ＦＸＩＩ抗体に関する。
【0016】
好ましい実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、配列番号７に記載の配列を含むＶＨおよび配列番号８に記載の配列を含むＶＬを含む。
【0017】
好ましい実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、ＩｇＧ、好ましくはＩｇＧ４抗体である。
【0018】
好ましい実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、配列番号９に記載の重鎖配列および配列番号１０に記載の軽鎖配列を含む。
【0019】
好ましい実施形態では、重鎖は、配列番号９の最後のアミノ酸に連結された追加のリジンを含む。
【0020】
好ましい実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、抗体の２回の後続の投与の間に、少なくとも５μｇ／ｍＬの抗体の濃度を維持する量で投与される。
【0021】
好ましい実施形態では、抗体は、７０ｍｇから７００ｍｇの投与量で、１から３ヶ月ごとに１回、好ましくは１～２ヶ月ごとに１回投与される。
【0022】
好ましい実施形態では、抗体は、１５０ｍｇから２５０ｍｇ、好ましくは１７０ｍｇから２２０ｍｇ、より好ましくは２００ｍｇの投与量で投与される。
【0023】
好ましい実施形態では、抗体は、５０ｍｇから１５０ｍｇ、好ましくは７０ｍｇから１３０ｍｇ、より好ましくは１００ｍｇの投与量で投与される。
【0024】
好ましい実施形態では、抗体は、１～２ヶ月ごと、好ましくは１ヶ月ごとに１回投与される。
【0025】
好ましい実施形態では、対象は、ＨＡＥを有するか、またはＨＡＥを有する疑いがあるか、またはＨＡＥのリスクがあるヒト患者である。
【0026】
好ましい実施形態では、本方法は、負荷用量の抗ＦＸＩＩ抗体の投与を含む。
【0027】
好ましい実施形態では、負荷用量の投与は、３０ｍｇと４００ｍｇの間、好ましくは１００と３００ｍｇの間、より好ましくは約２００ｍｇの投与量での抗ＦＸＩＩ抗体の静脈内投与である。
【0028】
好ましい実施形態では、負荷用量の投与は、７０ｍｇと７００ｍｇの間、好ましくは２００と５００ｍｇの間、より好ましくは約４００ｍｇの投与量での抗ＦＸＩＩ抗体の皮下投与である。
【0029】
好ましい実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、対象に皮下投与されるのみである。
【0030】
好ましい実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体の投与は、ＨＡＥ発作のリスクを、好ましくは８５％を超えて、より好ましくは９０％を超えて、さらにより好ましくは９５％を超えてまたは９８％を超えて低減する。
【発明を実施するための形態】
【0031】
本発明によれば、「抗ＦＸＩＩ抗体」は、ＦＸＩＩの活性化形態、すなわちＦＸＩＩａ－ベータ（ベータ第ＸＩＩａ因子）に結合して阻害するが、ＦＸＩＩおよびＦＸＩＩａ（アルファ第ＸＩＩａ因子）にも結合する。
【0032】
最も広い意味での「抗体」は、抗原上のエピトープを特異的に認識する免疫グロブリン可変領域を含むポリペプチドである。「抗体」という用語はまた、ＦＸＩＩａおよびＦＸＩＩに結合する能力を維持する抗体断片を含む。好ましい抗原結合断片は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、単鎖抗体、単鎖Ｆｖ断片、ジスルフィド安定化Ｆｖタンパク質、または単鎖Ｆｖ断片の二量体である。本発明に含まれる抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体、マウス化抗体または二重特異性抗体である。これらの断片および抗体を産生するための方法は、当技術分野で周知である（例えば、Ｈａｒｌｏｗ＆Ｌａｎｅ：Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、１９８８を参照）。
【0033】
抗体は通常、各々のＮ末端に可変領域（ＶＨおよびＶＬ領域）を有する、２つの同一の重鎖および２つの同一の軽鎖で構成される。通常、ＶＨおよびＶＬ領域が結合し、抗原結合部位を形成する。しかしながら、１つの可変領域のみが存在し、抗原に結合する単一ドメイン抗体もまた、記述されている。
【0034】
典型的には、抗体には、ジスルフィド結合で接続された、２つの重鎖および２つの軽鎖が含まれる。抗体には５つの主要なアイソタイプ（ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、ＩｇＤ）があり、そのいくつかは基本的な抗体構造の多量体として発生する。アイソタイプは、重鎖の定常領域によって決定される。軽鎖には、ラムダおよびカッパの２種類がある。
【0035】
本明細書で使用される「抗体」という用語は、インタクトな抗体（全長抗体、または重鎖および軽鎖の可変ドメインおよび定常ドメインの両方を含む抗体としても知られる）、ならびに抗原結合を保持するその変異体および部分を含む。これには、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、単鎖Ｆｖ断片、またはジスルフィド安定化Ｆｖ断片のような抗体の断片が含まれる。したがって、本明細書で使用される場合の「抗体またはその抗原結合断片」という用語は、単なる予防的なものであり、「抗体」という用語のみが抗体およびその抗原結合断片を網羅することをすでに意図している。
【0036】
「全長抗体」、「インタクトな抗体」または「全抗体」という用語は、抗体の抗原結合断片とは反対に、実質的にインタクトな形態の抗体を指すために交換可能に使用される。特に、全抗体には、Ｆｃ領域を含む重鎖および軽鎖を持つ抗体が含まれる。定常ドメインは、野生型配列定常ドメイン（例えば、ヒト野生型配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列変異体であってもよい。
【0037】
各重鎖および軽鎖は、可変領域および定常領域からなる。可変領域には、フレームワーク残基および超可変領域が含まれ、超可変領域は、相補性決定領域またはＣＤＲとも呼ばれる。
【0038】
本明細書で使用される場合、「可変領域」は、抗原に特異的に結合することができ、相補性決定領域（ＣＤＲ）のアミノ酸配列；すなわち、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびにフレームワーク領域（ＦＲ）を含む、本明細書で定義される抗体の軽鎖および／または重鎖の部分を指す。例示的な可変領域には、３つのＣＤＲと共に３つまたは４つのＦＲ（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３および場合によりＦＲ４）が含まれる。
【0039】
本明細書で使用される場合、「相補性決定領域」（ＣＤＲ；すなわち、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３と同義）という用語は、その存在が抗原結合に必要である抗体可変ドメインのアミノ酸残基を指す。各々の可変ドメインは、典型的には、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３として識別される３つのＣＤＲ領域を有する。フレームワーク残基およびＣＤＲの範囲は、Ｋａｂａｔに従って決定される；Ｋａｂａｔデータベースはオンラインで入手できる（Ｋａｂａｔ ＥＡ、Ｗｕ ＴＴ、Ｐｅｒｒｙ ＨＭ、Ｇｏｔｔｅｓｍａｎ ＫＳ、Ｆｏｅｌｌｅｒ Ｃ（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、米国保健福祉省、ＮＩＨ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ）。ＣＤＲ領域は、エピトープへの結合に重要であり、したがって抗体の特異性を決定する。
【0040】
「フレームワーク領域」（ＦＲ）は、ＣＤＲ残基以外の可変ドメイン残基である。
【0041】
「モノクローナル抗体」は、Ｂリンパ球の単一クローンによって、または単一抗体を発現するように操作された細胞株によって産生される抗体である。
【0042】
「キメラ抗体」は、ある種の可変領域が異なる種の定常領域に移植された抗体である。「ヒト化」抗体は、異なる種、例えばマウスモノクローナル抗体からのＣＤＲ領域がヒト抗体のフレームワークに移植されている抗体である。同様に、「マウス化」抗体は、異なる種、例えばヒトモノクローナル抗体からのＣＤＲ領域がマウス抗体のフレームワークに移植されている抗体である。ヒト抗体は、完全にヒトに由来する抗体、すなわち、ヒトのフレームワークにおけるヒトＣＤＲ、およびヒトへの投与に適した任意の定常領域である。
【0043】
「生殖系列」抗体は、フレームワーク残基に変化を導入した体細胞変異を、ゲノムに存在する元の配列に戻した抗体である。
【0044】
「抗原結合断片」は、抗体が結合する抗原のエピトープに特異的に結合する能力を保持した抗体の任意の断片を指す。これらには、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、または単鎖Ｆｖ断片が含まれるが、これらに限定されない。
【0045】
「結合親和性」は、その抗原に対する抗体の親和性を指す。それは、例えば、表面プラズモン共鳴に基づく技術（ＢｉａＣｏｒｅ（登録商標））など、さまざまな手法で測定できる。
【0046】
「エピトープ」は抗原決定基であり、抗体が抗原上で接触する残基または特定の化学構造によって定義される。
【0047】
「配列同一性」は、アミノ酸配列の類似性に関連している。２つの配列の可能な限り最良のアラインメントを準備して、配列同一性を同一の残基のパーセンテージによって決定する。配列のアラインメントには、例えば、ＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ（Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ（１９７０）４８、４４３頁）、ＳｍｉｔｈおよびＷａｔｅｒｍａｎ（Ａｄｖ Ａｐｐｌ Ｍａｔｈ（１９８１）２、４８２頁）、Ｐｅａｒｓｏｎ ａｎｄ Ｌｉｐｍａｎ（Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ（１９８８）８５，２４４４頁）などの標準的な方法が利用可能である。例えば、デフォルトパラメータを備えたＧＡＰまたはＢＥＳＴＦＩＴ、またはそれらの後継を使用してアライメントを作成できる、例えば、ＧＣＧスイートのソフトウェア（Ｄｅｖｅｒｅｕｘら（１９８４）、Ｎｕｃｌ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ １２、３８７頁）のような、適切なソフトウェアが市販されている。もともとはＡｌｔｓｃｈｕｌら（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（１９９０）２１５、４０３頁）によって記述され、ＥＢＩ、ＮＣＢＩのようなさまざまなソースから入手可能なギャップのあるアラインメント（Ｂｌａｓｔ ２）を含むようにさらに改良されたＢｌａｓｔアルゴリズムもまた、アラインメントを生成し、２つの配列間の％同一性を計算する。
【0048】
「特異的結合」は、実質的に単一の抗原のみへの結合を指す。
【0049】
「ＦＸＩＩ／ＦＸＩＩａ」は、第ＸＩＩ因子および活性化第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩａ）のいずれかまたは両方を指す。したがって、「ＦＸＩＩ／ＦＸＩＩａ阻害剤」は、ＦＸＩＩおよびＦＸＩＩａのいずれかまたは両方の阻害剤を含む。さらに、抗ＦＸＩＩ／ＦＸＩＩａ抗体には、ＦＸＩＩおよびＦＸＩＩａのいずれかまたは両方に結合して阻害する抗体が含まれる。
【0050】
「治療する」または「治療」とは、ＨＡＥに関連する任意の症状の軽減、特には、ＨＡＥ発作の重症度および／または頻度の軽減を意味する。
【0051】
「予防する」または「予防」とは、疾患の悪化を含む、ＨＡＥに関連する任意の症状の予防を意味する。
【0052】
添付の実施例でより詳細に説明されるように、本発明者らは、驚くべきことに、本発明の文脈で使用される抗ＦＸＩＩ抗体が遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）患者における発作の数を減らすのに非常に活性であることを初めて示すことができた。実際、本発明の文脈で使用される抗体は、皮下投与された場合であっても、そのようなＨＡＥ発作をほぼ完全に防ぐことができる。本発明の抗ＦＸＩＩ抗体を経時的に繰り返し投与し、それにより血中の抗体濃度を維持することにより、ＨＡＥ発作の数の著しい減少がもたらされる。したがって、本発明の文脈で使用される抗体は、ＨＡＥの予防または治療のための有用な薬剤を提示する。
【0053】
したがって、一態様では、本発明は、
（ｉ）配列番号１に記載の配列を含むＣＤＲＨ１；配列番号２に記載の配列を含むＣＤＲＨ２；および配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲＨ３を含むＶＨ；ならびに
（ｉｉ）配列番号４に記載の配列を含むＣＤＲＬ１；配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲＬ２；および配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲＬ３を含むＶＬ；
を含み、
対象に皮下投与される、
対象におけるＨＡＥを治療または予防する方法において使用するための抗ＦＸＩＩ抗体に関する。
（ｉ）配列番号１に記載の配列を含むＣＤＲＨ１；配列番号２に記載の配列を含むＣＤＲＨ２；および配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲＨ３を含むＶＨ；ならびに
（ｉｉ）配列番号４に記載の配列を含むＣＤＲＬ１；配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲＬ２；および配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲＬ３を含むＶＬ；
を含み、
対象に皮下投与される、
対象におけるＨＡＥを治療または予防する方法において使用するための抗ＦＸＩＩ抗体に関する。
【0054】
ＣＤＲ配列は、図１０にも示される。
【0055】
好ましくは、本発明の文脈で使用される抗体は、１０－７Ｍより良好な、より好ましくは３×１０－８Ｍより良好な、より好ましくは１０－８Ｍより良好な、さらに好ましくは３×１０－９Ｍより、最も好ましくは１０－９Ｍ、あるいは５×１０－１０Ｍより良好なＫＤでヒト第ＸＩＩａ因子－βに結合する。
【0056】
抗体またはその抗原結合断片は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはＩｇＡおよびそれらの任意のサブタイプを含む任意のアイソタイプであってもよい。好ましくは、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、ヒトＩｇＧまたはその変異体、好ましくはヒトＩｇＧ４またはその変異体である。抗体のタイプを切り替える方法は、当技術分野で周知である。ＶＨまたはＶＬ領域をコードする核酸分子は、単離され、免疫グロブリン分子の異なるクラスの定常領域から、それぞれ異なるｃＨまたはｃＬをコードする核酸配列に作動可能に連結される。
【0057】
本開示は、抗体の定常領域を含む、本明細書に記載のタンパク質および／または抗体を包含する。これには、Ｆｃに融合した抗体の抗原結合断片が含まれる。
【0058】
本開示のタンパク質を産生するのに有用な定常領域の配列は、いくつかの異なる供給源から得てもよい。いくつかの例では、タンパク質の定常領域またはその一部は、ヒト抗体に由来する。定常領域またはその一部は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＥを含む任意の抗体クラス、ならびにＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４を含む任意の抗体アイソタイプに由来してもよい。
【0059】
一実施形態では、定常領域は、ヒトアイソタイプＩｇＧ４または安定化ＩｇＧ４定常領域である。
【0060】
一実施形態では、定常領域のＦｃ領域は、例えば、天然または野生型のヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ３ Ｆｃ領域と比較して、エフェクター機能を誘導する能力が低下している。一実施形態では、エフェクター機能は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および／または抗体依存性細胞媒介性食作用（ＡＤＣＰ）および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）である。タンパク質を含むＦｃ領域のエフェクター機能のレベルを評価するための方法は、当技術分野で周知である。
【0061】
一実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ４ Ｆｃ領域（すなわち、ＩｇＧ４定常領域から）、例えば、ヒトＩｇＧ４ Ｆｃ領域である。適切なＩｇＧ４ Ｆｃ領域の配列は、当業者には明らかであり、および／または公的に利用可能なデータベースで利用可能（例えば、国立バイオテクノロジー情報センターから利用可能）である。
【0062】
一実施形態では、定常領域は、安定化されたＩｇＧ４定常領域である。「安定化されたＩｇＧ４定常領域」という用語は、Ｆａｂアーム交換またはＦａｂアーム交換を受ける傾向または半抗体の形成もしくは半抗体を形成する傾向を低減するように改変されたＩｇＧ４定常領域を意味すると理解される。「Ｆａｂアーム交換」とは、ＩｇＧ４重鎖および付着した軽鎖（半分子）が別のＩｇＧ４分子からの重鎖－軽鎖ペアと交換される、ヒトＩｇＧ４のタンパク質修飾のタイプを指す。したがって、ＩｇＧ４分子は、２つの異なる抗原を認識する２つの異なるＦａｂアームを取得することもある（その結果、二重特異性分子を生じる）。Ｆａｂアーム交換はインビボで自然発生するし、精製血液細胞または還元型グルタチオンのような還元剤によってインビトロで誘導される。「半抗体」は、ＩｇＧ４抗体が解離して、単一の重鎖および単一の軽鎖を各々含む２つの分子を形成する場合に形成される。
【0063】
一実施形態では、安定化されたＩｇＧ４定常領域は、Ｋａｂａｔのシステムによるヒンジ領域の２４１位にプロリンを含む（Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ ＤＣ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、１９８７年および／または１９９１年）。この位置は、ＥＵ番号付けシステムによるヒンジ領域の２２８位に対応する（Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ ＤＣ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、２００１年およびＥｄｅｌｍａｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ ＵＳＡ、６３、７８～８５頁、１９６９年）。ヒトＩｇＧ４では、この残基は一般的にセリンである。セリンをプロリンに置換した後、ＩｇＧ４ヒンジ領域は配列ＣＰＰＣを含む。この点に関して、当業者は、「ヒンジ領域」が、抗体の２つのＦａｂアームに易動性を与えるＦｃ領域およびＦａｂ領域を連結する抗体重鎖定常領域のプロリンに富む部分であることを認識するであろう。ヒンジ領域には、重鎖間ジスルフィド結合に関与するシステイン残基が含まれている。これは一般に、Ｋａｂａｔの番号付けシステムにより、ヒトＩｇＧ１のＧｌｕ２２６からＰｒｏ２４３への延伸として定義される。他のＩｇＧアイソタイプのヒンジ領域は、重鎖間ジスルフィド（Ｓ－Ｓ）結合を形成する最初および最後のシステイン残基を同じ位置に配置することによってＩｇＧ１配列と整列させることができる（例えば、国際公開第２０１０／０８０５３８号を参照）。
【0064】
安定化ＩｇＧ４抗体の追加の実施形態は、ヒトＩｇＧ４の重鎖定常領域（ＥＵ番号付けシステムによる）の４０９位のアルギニンがリジン、スレオニン、メチオニン、またはロイシンで置換されている抗体である（例えば、国際公開第２００６／０３３３８６号に記載されているように）。定常領域のＦｃ領域は、（ＥＵ番号付けシステムによる）４０５に対応する位置に、アラニン、バリン、グリシン、イソロイシンおよびロイシンからなる群から選択される残基を追加的または代替的に含んでもよい。場合により、ヒンジ領域は、（上記のように）２４１位（すなわち、ＣＰＰＣ配列）にプロリンを含む。
【0065】
別の実施形態では、Ｆｃ領域は、エフェクター機能が低下するように改変された領域、すなわち「非免疫刺激性Ｆｃ領域」である。例えば、Ｆｃ領域は、２６８、３０９、３３０、および３３１からなる群から選択される１つまたはそれ以上の位置での置換を含むＩｇＧ１ Ｆｃ領域である。別の実施形態では、Ｆｃ領域は、１つもしくはそれ以上の以下の変更Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５ＡならびにＧ２３６の欠失ならびに／または１つもしくはそれ以上の以下の変更Ａ３２７Ｇ、Ａ３３０ＳおよびＰ３３１Ｓを含むＩｇＧ１ Ｆｃ領域である（Ａｒｍｏｕｒら、Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９：２６１３～２６２４頁、１９９９年；Ｓｈｉｅｌｄｓら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７６（９）：６５９１～６０４頁、２００１年）。非免疫刺激性Ｆｃ領域の追加の例は、例えば、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７７：１１２９～１１３８頁、２００６年；および／またはＨｅｚａｒｅｈ Ｊ Ｖｉｒｏｌ；７５：１２１６１～１２１６８頁、２００１年に記載されている。
【0066】
別の実施形態では、Ｆｃ領域は、例えば、ＩｇＧ４抗体からの少なくとも１つのＣＨ２ドメインおよびＩｇＧ１抗体からの少なくとも１つのＣＨ３ドメインを含むキメラＦｃ領域であり、ここで、Ｆｃ領域は、２４０、２６２、２６４、２６６、２９７、２９９、３０７、３０９、３２３、３９９、４０９および４２７（ＥＵ番号付け）からなる群から選択される１つまたはそれ以上のアミノ酸位置での置換を含む（例えば、国際公開第２０１０／０８５６８２号に記載されるように）。例示的な置換には、２４０Ｆ、２６２Ｌ、２６４Ｔ、２６６Ｆ、２９７Ｑ、２９９Ａ、２９９Ｋ、３０７Ｐ、３０９Ｋ、３０９Ｍ、３０９Ｐ、３２３Ｆ、３９９Ｓ、および４２７Ｆが含まれる。
【0067】
本開示はまた、抗体への追加の改変を企図する。
【0068】
例えば、抗体は、タンパク質の半減期を増加させる１つまたはそれ以上のアミノ酸置換を含む。例えば、抗体は、新生児Ｆｃ領域（ＦｃＲｎ）に対するＦｃ領域の親和性を増加させる１つまたはそれ以上のアミノ酸置換を含むＦｃ領域を含む。例えば、Ｆｃ領域は、エンドソームにおけるＦｃ／ＦｃＲｎ結合を促進するために、より低いｐＨ、例えば、約ｐＨ６．０でＦｃＲｎについての親和性が増加している。一例では、Ｆｃ領域は、約ｐＨ７．４での親和性と比較して、約ｐＨ６でのＦｃＲｎに対する親和性が増加しているが、これは、細胞のリサイクル後の血液へのＦｃ（したがってＦｃ領域を含む分子）の再放出を促進する。これらのアミノ酸置換は、血液からのクリアランスを低減することにより、タンパク質の半減期を延長するのに役立つ。
【0069】
例示的なアミノ酸置換には、ＥＵ番号付けシステムによる、Ｔ２５０Ｑおよび／またはＭ４２８ＬまたはＴ２５２Ａ、Ｔ２５４ＳおよびＴ２６６ＦまたはＭ２５２Ｙ、Ｓ２５４ＴおよびＴ２５６ＥまたはＨ４３３ＫおよびＮ４３４Ｆが含まれる。追加または代替のアミノ酸置換は、例えば、米国特許出願公開第２００７／０１３５６２０号または米国特許第７０８３７８４号に記載されている。
【0070】
より好ましくは、本発明の抗体は、より低いｐＨ、例えば、ｐＨ６でのヒト新生児Ｆｃ受容体ＦｃＲｎへの結合を増強するように操作されたヒトＩｇＧ１またはヒトＩｇＧ４であり、これにより、ヒト血清中の抗体の半減期が増加する。ＦｃＲｎ結合を最適化するための最適なＦｃ変異体をスクリーニングする方法が記載されている（例えば、Ｚａｌｅｖｓｋｙら（２０１０）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ ２８、１５７～１５９頁）。
【0071】
好ましい実施形態では、本発明の文脈で使用される抗体は、上記で定義された生殖系列抗体である。
【0072】
本発明の他の好ましい抗体またはその抗原結合断片は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはＩｇＡおよびそれらの任意のサブタイプのような哺乳動物アイソタイプの定常領域のような哺乳動物免疫グロブリン定常領域を含む。好ましくは、抗体は、マウスＩｇＧ、ブタＩｇＧ、ウシＩｇＧ、ウマＩｇＧ、ネコＩｇＧ、イヌＩｇＧおよび霊長類ＩｇＧまたはそれらの変異体を含む哺乳動物ＩｇＧである。これらの抗体は、本発明のヒト可変領域が選択された種の免疫グロブリンの定常領域と組み合わされたキメラ抗体であってもよい。あるいは、抗体またはその抗原結合断片は、本明細書に記載のヒトＣＤＲ領域を、選択された種の免疫グロブリンからのフレームワーク残基に移植することによって産生される。
【0073】
好ましくは、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、それらの成熟形態、すなわち、シグナルペプチドを含まない形態である；しかしながら、シグナルペプチドを含む抗体またはその抗原結合断片もまた、本発明に含まれる。
【0074】
さらに好ましい実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、配列番号７に記載の配列を含むＶＨおよび配列番号８に記載の配列を含むＶＬを含む。好ましくは、抗ＦＸＩＩ抗体は、生殖系列抗体である。
【0075】
さらに好ましい実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、配列番号９に記載の重鎖配列および配列番号１０に記載の軽鎖配列を含む。これらの配列は、上に定義された生殖系列抗体であるＣＳＬ３１２抗体の全長の重鎖および軽鎖を表している。これらの重鎖および軽鎖の定常領域が上に開示された修飾を含むことが、本発明に特に含まれる。
【0076】
この特に好ましい抗体のアミノ酸配列もまた、図１０に示される。
【0077】
製造方法に依存して、しばしば、重鎖の末端リジンが抗体の少なくともいくつかのアームから切断されることが当技術分野で知られている。したがって、本発明は、抗体の重鎖配列が配列番号９に示されるような末端リジンを含まないこと、および抗体の重鎖配列が配列番号９の最後のアミノ酸に連結された追加のリジンを含むことの両方を含み、ならびに切断されていない、部分的に切断された、および完全に切断された種を含む抗体の集団を含む。
【0078】
本明細書における抗体のいずれの議論も、製造および／または保存中に産生される抗体の任意の変異体を含むと理解されるであろう。例えば、製造または保存中に、抗体を脱アミド化することができ（例えば、アスパラギンまたはグルタミン残基で）、および／またはグリコシル化を変化させ、および／またはグルタミン残基をピログルタミンに変換させ、および／またはＮ末端もしくはＣ－末端残基を除去または「クリップ」し、および／またはシグナル配列の一部または全てを不完全に処理し、その結果、抗体の末端に留まる。特定のアミノ酸配列を含む組成物は、記載またはコード化された配列および／またはその記載またはコード化された配列の変異体の異種混合物であり得ることが理解される。
【0079】
本発明の文脈で使用される抗体は、当技術分野で周知の任意の方法によって産生される。例えば、抗体は、抗体をコードする核酸を適切な細胞、例えば、ＣＨＯ、ＨＥＫ２９３、ＭＤＣＫ、ＣＯＳ、ＨｅＬａのような哺乳動物細胞株、またはＮＳ０のような骨髄腫細胞株に導入することによって産生される。別の適切な細胞株は、ＳＦ９細胞、ＳＦ２１細胞、またはＨｉｇｈＦｉｖｅ（商標）細胞のようなバキュロウイルスと共に使用するための昆虫細胞株である。さらに別の細胞は、サッカロミセス、例えばＳ．セレビシエ、またはピキア・ピストリスのような酵母細胞である。大腸菌のような細菌宿主細胞も可能である。それぞれの宿主細胞にＤＮＡを導入するための方法は、当技術分野で周知である。例えば、宿主細胞が哺乳動物細胞株である場合、リポフェクションまたはエレクトロポレーションのような技術を使用してもよい。
【0080】
抗体を産生する方法には、抗体を発現するための適切な条件下で、本発明の細胞株または酵母細胞のような宿主細胞を培養することが含まれてもよい。その後、抗体を精製してもよい。抗体は宿主細胞により分泌され、その後、培養上清から容易に精製することができる。抗体を精製するための技術は当技術分野で周知であり、硫酸アンモニウム沈殿、サイズ排除クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィーのような技術が含まれる。
【0081】
大腸菌で発現させる場合、抗体またはその抗原結合断片は封入体で産生される。封入体を単離し、発現タンパク質をリフォールディングする方法は、当技術分野で周知である。
【0082】
したがって、本発明はまた、対象における遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）を治療または予防する方法における使用のための抗ＦＸＩＩ抗体に関し、ここで、抗体は対象に皮下投与され、抗ＦＸＩＩ抗体が、上記の抗ＦＸＩＩ抗体をコードする核酸、好ましくは配列番号１１および１２に記載の核酸を細胞に導入することにより得られ、抗ＦＸＩＩ抗体が細胞内で産生され、続いて精製される。
【0083】
配列番号１１および１２による核酸は、配列番号９および１０によるポリペプチドをコードする。
【0084】
本発明によれば、抗体は、対象に皮下投与される。皮下投与用の抗体を製剤化するための方法は、当技術分野で周知であり、抗体を含む医薬組成物の調製を含む。
【0085】
例えば、皮下投与のための医薬組成物の調製のために、抗体は、１つまたはそれ以上の医薬として許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合することができる。例えば、滅菌水または生理食塩水を使用してもよい。ｐＨ緩衝液、粘度低下剤、または安定剤のような他の物質も含まれてもよい。
【0086】
多種多様な医薬として許容される賦形剤および担体が当技術分野で周知である。そのような医薬担体および賦形剤、ならびに適切な製剤は、さまざまな刊行物に十分に記載されている（例えば、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ」、Ｆｒｏｋｊａｅｒら、Ｔａｙｌｏｒ＆Ｆｒａｎｃｉｓ（２０００）または「Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ」、第３版、Ｋｉｂｂｅら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ（２０００）Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）”Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ”、第２０版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ、＆Ｗｉｌｋｉｎｓ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９９）Ｈ．Ｃ．Ａｎｓｅｌら、第７版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ、＆Ｗｉｌｋｉｎｓ；およびＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２０００）Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅら、第３版、Ａｍｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃ）。特に、本発明の抗体を含む医薬組成物は、凍結乾燥または安定な可溶形態で製剤化される。ポリペプチドは、当技術分野で知られているさまざまな手順によって、凍結乾燥してもよい。凍結乾燥製剤は、使用前に、注射用滅菌水または滅菌生理食塩水のような１つまたはそれ以上の医薬として許容される希釈剤を添加することによって再構成される。
【0087】
皮下投与の場合、抗体を含む医薬組成物は、当技術分野で周知の投与量および技術によって投与することができる。投与の量およびタイミングは、所望の目的を達成するために、治療する医師または獣医によって決定され、治療される対象の血液への安全で治療的に有効な用量の送達を確実にするべきである。
【0088】
一実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、２回の引き続く抗体の投与の間に、血中の抗体の濃度を少なくとも約３、５、７または１０μｇ／ｍＬ、好ましくは約５μｇ／ｍＬに維持する量で投与される。
【0089】
実施例から、特に図５から理解できるように、７５ｍｇ、２００ｍｇ、または６００ｍｇの抗ＦＸＩＩ抗体の投与は、１回の治療サイクル、すなわち、抗体の２回の投与の間の期間で少なくとも約３μｇ／ｍＬの抗体の血中濃度をもたらす。特に定常状態のような血中の抗体濃度がこのように低い場合でも、ＨＡＥ発作の回数の顕著な減少が観察される。また、図５からもわかるように、７５ｍｇまたは２００ｍｇ投与後の血中の抗ＦＸＩＩ抗体の濃度のピークは、約２０μｇ／ｍＬより高い必要はない。
【0090】
その結果、本発明の実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、約２０μｇ／ｍＬの血中の抗体の最大濃度を達成する量で投与される。
【0091】
さらなる実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、その活性化形態のものを含むＦＸＩＩの活性を健康な対象で観察されるレベルまで低下させる量で投与される。したがって、抗ＦＸＩＩ抗体は、その活性化形態のものを含むＦＸＩＩの活性を正常化する量で投与される。
【0092】
さらなる態様では、本発明はまた、対象における遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）を治療または予防する方法における使用のための抗ＦＸＩＩ抗体に関し、ここで、抗体は対象に皮下投与され、抗ＦＸＩＩ抗体は、その活性化形態のものを含むＦＸＩＩの活性を健康な対象で観察されるレベルまで低下させる量で投与される。
【0093】
本発明によれば、定常状態での投薬サイクルの終わりでのＦＸＩＩ媒介カリクレイン活性の適度な阻害は、効果的な結果を促進する。その結果、さらなる実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体は、抗体の２回の引き続く投与の間にＦＸＩＩ媒介カリクレイン活性の約６０％未満、約５０％未満、約４０％未満、または約３０％未満、阻害するのに十分な量で投与される。
【0094】
抗ＦＸＩＩ抗体は、約７０ｍｇから７００ｍｇ、約７５ｍｇから１５０ｍｇ、約１５０ｍｇから２５０ｍｇ、約３００ｍｇから３５０ｍｇ、約３５０ｍｇから７００ｍｇ、約１７０ｍｇから２２０ｍｇの投与量で、好ましくは約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約２００ｍｇ、約３００ｍｇ、約３４０ｍｇまたは約６００ｍｇの投与量で、好ましくは約１００ｍｇまたは約２００ｍｇの投与量で投与してもよい。
【0095】
抗ＦＸＩＩ抗体は、１～３ヶ月ごとに１回、１～２ヶ月ごとに１回、毎月１回投与してもよい。また、それは、２、３、４、５、６、７、または８週間ごとに１回投与してもよい。
【0096】
本発明によれば、抗ＦＸＩＩ抗体は、７０ｍｇから７００ｍｇを１～３ヶ月ごとに１回、７０ｍｇから７００ｍｇを１～２ヶ月ごとに１回、７０ｍｇから７００ｍｇを２ヶ月ごとに１回、７０ｍｇから７００ｍｇを６週間ごとに１回、７０ｍｇから７００ｍｇを毎月１回、７５ｍｇから１５０ｍｇを１～３ヶ月ごとに１回、７５ｍｇから１５０ｍｇを１～２ヶ月ごとに１回、７５ｍｇから１５０ｍｇを２ヶ月ごとに１回、７５ｍｇから１５０ｍｇを６週間ごとに１回、７５ｍｇから１５０ｍｇを毎月１回、１５０ｍｇから２５０ｍｇを１～２ヶ月ごとに１回、１５０ｍｇから２５０ｍｇを２ヶ月ごとに１回、１５０ｍｇから２５０ｍｇを６週間ごとに１回、１５０ｍｇから２５０ｍｇを毎月１回、１７０ｍｇから２２０ｍｇを１～２ヶ月ごとに１回、１７０ｍｇから２２０ｍｇを２ヶ月ごとに１回、１７０ｍｇから２２０ｍｇを６週間に１回、１７０ｍｇから２２０ｍｇを毎月１回、７５ｍｇを１～２ヶ月ごとに１回、７５ｍｇを２ヶ月ごとに１回、７５ｍｇを６週間ごとに１回、７５ｍｇを毎月１回、１００ｍｇを１～２ヶ月ごとに１回、１００ｍｇを２ヶ月ごとに１回、１００ｍｇを６週間ごとに１回、１００ｍｇを毎月１回、２００ｍｇを１～２ヶ月ごとに１回、２００ｍｇを２ヶ月ごとに１回、２００ｍｇを６週間ごとに１回、２００ｍｇを毎月１回の投与量で投与してもよい。
【0097】
好ましい実施形態では、抗体は、約１５０ｍｇから２５０ｍｇ、好ましくは約１７０ｍｇから２２０ｍｇ、より好ましくは約２００ｍｇの投与量で、１～３ヶ月ごとに１回、好ましくは１～２ヶ月ごとに１回、好ましくは毎月１回投与される。
【0098】
代替の好ましい実施形態では、抗体は、約５０ｍｇから１５０ｍｇ、好ましくは約７０ｍｇから１３０ｍｇ、より好ましくは約１００ｍｇの投与量で、１～３ヶ月ごとに１回、好ましくは１～２ヶ月ごとに１回、好ましくは毎月１回投与される。
【0099】
別の代替の好ましい実施形態では、抗体は、約３００ｍｇから３５０ｍｇ、好ましくは約３００ｍｇまたは３４０ｍｇの投与量で、１～３ヶ月ごとに１回、好ましくは２ヶ月ごとに１回投与される。
【0100】
好ましい実施形態によれば、対象は、ヒト対象、好ましくは、ＨＡＥを有するか、またはＨＡＥを有する疑いがあるか、またはＨＡＥのリスクがあるヒト患者である。
【0101】
本発明によれば、抗ＦＸＩＩ抗体は、ＨＡＥを治療または予防する方法の間に、対象に皮下投与される。好ましくは、これには、抗ＦＸＩＩ抗体が対象に皮下投与されるのみであることが含まれる。あるいは、本方法は、静脈内、動脈内、皮内、腹腔内、経口、経粘膜、硬膜外、または髄腔内投与のような別の投与、好ましくは静脈内投与もまた含むことが含まれる。
【0102】
一実施形態では、本方法は、負荷用量の抗ＦＸＩＩ抗体の投与を含む。この負荷用量は、次の投与と同じ投与量であってもよいし、またはより高いまたはより低い投与量であってもよい。さらに、前記負荷用量は、皮下投与されるか、または上記のように、好ましくは静脈内投与される。負荷用量は、次の投与の開始と同時、またはその直前（すなわち、約１週間以内）に投与してもよい。負荷用量の皮下投与の場合、そのような負荷用量は、好ましくは、後続の最初の投与量と同じ量であり、同時に与えられる。これにより、その後の投与量と比較して２倍の最初の投薬が行われる。負荷用量の静脈内投与の場合、初期投与量は通常、後続の投与量よりも低くなり、例えば、後続の投与量の約２５％、５０％または７５％である。好ましくは、負荷用量は、後続の投与量の直前に与えられる。
【0103】
好ましい実施形態では、負荷用量の投与は、約３０ｍｇから４００ｍｇの間、好ましくは１００から３００ｍｇの間、より好ましくは２００ｍｇの投与量での抗ＦＸＩＩ抗体の静脈内投与である。例えば、約７５ｍｇのその後の皮下投与の場合、負荷用量は、約３０ｍｇから６０ｍｇの間であってもよく、後続の１００ｍｇの皮下投与の場合、負荷用量は、約４０ｍｇから７０ｍｇの間であってもよく、後続の２００ｍｇの皮下投与の場合、負荷用量は約８０ｍｇから１３０ｍｇの間であってもよく、後続の約６００ｍｇの皮下投与の場合、負荷用量は約２４０ｍｇから７００ｍｇの間であってもよい。
【0104】
さらに好ましい実施形態では、負荷用量の投与は、約７０ｍｇから７００ｍｇの間、好ましくは２００から５００ｍｇの間、より好ましくは４００ｍｇの投与量での抗ＦＸＩＩ抗体の皮下投与である。例えば、約７５ｍｇの後続の皮下投与の場合、同時での負荷用量は、約７５ｍｇであってもよく（すなわち、最初の投与において、１５０ｍｇの総用量が皮下投与される）。約１００ｍｇの後続の皮下投与の場合、同時での負荷用量は約１００ｍｇであってもよく、約２００ｍｇの後続の皮下投与の場合、同時での負荷用量は約２００ｍｇであってもよく、約６００ｍｇの後続の皮下投与の場合、同時での負荷用量は約６００ｍｇであってもよい。
【0105】
本発明の文脈において、および実施例に示されるように、本発明者らは、本発明の文脈において使用される抗体の投与によって、ＨＡＥ発作の数を顕著に低減させることができることを実証することができた。
【0106】
その結果、本発明の好ましい実施形態では、抗ＦＸＩＩ抗体の投与は、ＨＡＥ発作のリスクを、好ましくは８５％を超えて、好ましくは９０％を超えて、さらにより好ましくは９５％を超えてまたは９８％を超えて、低減させる。好ましくは、前記低減は、治療されていない対象と比較して適用される。
【0107】
さらなる態様では、本発明はまた、対象における遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）を治療または予防する方法に関し、前記方法は、配列番号１に記載の配列を含むＣＤＲＨ１；配列番号２に記載の配列を含むＣＤＲＨ２；および配列番号３に記載の配列を含むＣＤＲＨ３を含むＶＨ；ならびに（ｉｉ）配列番号４に記載の配列を含むＣＤＲＬ１；配列番号５に記載の配列を含むＣＤＲＬ２；配列番号６に記載の配列を含むＣＤＲＬ３を含むＶＬを含む、この対象に対する抗ＦＸＩＩ抗体への皮下投与を含む。抗ＦＸＩＩ抗体は、好ましくは、治療活性量で対象に投与される。
【0108】
本発明の他の態様に関して上に開示された全ての実施形態は、本発明の本態様にも適用される。
【0109】
本発明は、以下の図および実施例の助けを借りてさらに説明されるが、これらは本発明を説明するためのものであって、限定するためのものではない。
【図面の簡単な説明】
【0110】
【図1】ＦＸＩＩ、カリクレインおよびブラジキニンを含む接触システム、ならびに抗ＦＸＩＩ抗体の作用機序を説明する図である。
【図2】実施例１で行われた第１相試験の投薬および用量漸増スキームを説明する図である。
【図3-1】健康な対象に抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２を静脈内（ＩＶ）または皮下（ＳＣ）投与した後のＣＳＬ３１２の血中濃度を示す図である。
【図4】実施例２で行われた第２相試験の研究設計を説明する図である。
【図5】定常状態（ＰＫ集団）の例として、６３日目から９１日目の間の、それぞれ７５ｍｇ（ドット）、２００ｍｇ（三角）、または６００ｍｇ（四角）の濃度で抗体を投与した後の治療期間１におけるＣＳＬ３１２抗体の血漿濃度（ｎｇ／ｍＬ）の平均（ＳＤ）ＰＫプロファイルを示す図である。注：ＰＫ＝薬物動態。ＰＫ集団は、少なくとも１つの測定可能な濃度のＣＳＬ３１２が報告された全ての対象からなる。ｘ軸は、１日目での最初のＣＳＬ３１２投与からの経過時間を日数で示す。
【図6】定常状態（％ベースライン）（ＰＤ母集団）の例として、６３日目から９１日目の間の、それぞれ０ｍｇ（プラセボ、リング）、７５ｍｇ（ドット）、２００ｍｇ（三角）、または６００ｍｇ（四角）の濃度でＣＳＬ３１２抗体を投与した後の治療期間１におけるＦＸＩＩ媒介カリクレイン活性の平均（ＳＤ）ＰＤプロファイルを示す図である。注：ＰＤ＝薬力学。ＰＤ集団は、少なくとも１回のＰＤ測定が報告された全ての対象からなる。ｘ軸は、来診１日目に対応する、時間０での最初のＣＳＬ３１２投与からの時間を示す。
【図7】ＦＸＩＩ媒介カリクレイン活性と血中のＣＳＬ３１２濃度との間の時間に依存しない関係を示す図である。
【図8】ＣＳＬ３１２抗体をそれぞれ０ｍｇ（プラセボ）、７５ｍｇ、２００ｍｇ、または６００ｍｇの濃度で投与した後の平均発作率を示す図である。
【図9】想定される第３相試験の投与レジメンおよびそれぞれの予測される発作率を示す図である。
【図10】ＣＳＬ３１２の重鎖および軽鎖のアミノ酸配列を示す図である。それぞれのＣＤＲ配列には下線が引かれている。重鎖のＣ末端リジンはアスタリスクでマークされているが、これは、それがコードされているものの、翻訳後に部分的または完全に除去され得ることを示している。
【図11】実施例３の第３相試験の研究設計を説明する図である。
【0111】
配列表への鍵
配列番号１は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２のＣＤＲ１可変ドメインからのアミノ酸配列である。
配列番号１は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２のＣＤＲ１可変ドメインからのアミノ酸配列である。
【0112】
配列番号２は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２のＣＤＲ２可変ドメインからのアミノ酸配列である。
【0113】
配列番号３は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２のＣＤＲ３可変ドメインからのアミノ酸配列である。
【0114】
配列番号４は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２のＣＤＲ１可変ドメインからのアミノ酸配列である。
【0115】
配列番号５は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２のＣＤＲ２可変ドメインからのアミノ酸配列である。
【0116】
配列番号６は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２のＣＤＲ３可変ドメインからのアミノ酸配列である。
【0117】
配列番号７は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２の重領域可変ドメインからのアミノ酸配列である。
【0118】
配列番号８は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２の軽領域可変ドメインからのアミノ酸配列である。
【0119】
配列番号９は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２の重鎖可変ドメインからのアミノ酸配列である。
【0120】
配列番号１０は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２の軽鎖可変ドメインからのアミノ酸配列である。
【0121】
配列番号１１は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２の重鎖をコードする核酸配列である。
【0122】
配列番号１２は、抗ＦＸＩＩ抗体ＣＳＬ３１２の重鎖をコードする核酸配列である。
【実施例】
【0123】
健康な対象における単回ＩＶ注入またはＳＣ注射後のＣＳＬ３１２の漸増用量の安全性、忍容性、およびＰＫを調査するために、単一施設、無作為化、二重盲検、プラセボ－対照、単一漸増用量、第１相試験が行われた。ＣＳＬ３１２の重鎖および軽鎖を図１０に提供する。
【0124】
研究設計
ＣＳＬ３１２は、完全ヒトＩｇＧ４／ラムダ組換えモノクローナル抗体であり、活性化ＦＸＩＩ（ＦＸＩＩａおよびβＦＸＩＩａ）の触媒ドメインに特異的に結合し、その触媒活性を強力に阻害する。ＣＳＬ３１２は、インビトロでブラジキニン（ＢＫ）産生を阻害し、インビボではＢＫ媒介浮腫モデルにおいて浮腫の形成を抑制する。ＣＳＬ３１２は、炎症性メディエーターの発現を抑制する。
ＣＳＬ３１２は、完全ヒトＩｇＧ４／ラムダ組換えモノクローナル抗体であり、活性化ＦＸＩＩ（ＦＸＩＩａおよびβＦＸＩＩａ）の触媒ドメインに特異的に結合し、その触媒活性を強力に阻害する。ＣＳＬ３１２は、インビトロでブラジキニン（ＢＫ）産生を阻害し、インビボではＢＫ媒介浮腫モデルにおいて浮腫の形成を抑制する。ＣＳＬ３１２は、炎症性メディエーターの発現を抑制する。
【0125】
合計４８人の対象が８つのコホートのうちの１つ（５つのＩＶコホートおよび３つのＳＣコホート）に無作為化された（図１）。各コホートは６人の対象（４人の活性および２人のプラセボ）で構成されていた。５つのＩＶコホートの各々の対象に、０．１、０．３、１、３もしくは１０ｍｇ／ｋｇ、またはプラセボ（製剤緩衝液）の単回ＣＳＬ３１２ ＩＶ用量を投与した。３つのＳＣコホートの各々の対象に、１、３もしくは１０ｍｇ／ｋｇ、またはプラセボ（製剤緩衝液）の単回ＣＳＬ３１２ ＳＣ注射を投与した。（図２：投薬および用量漸増スキーム）
【0126】
センチネル投薬は、各ＩＶコホートおよび最初のＳＣコホートに実行された。最初の２人の登録された対象（センチネル対象）は無作為化され、ＣＳＬ３１２（１対象）またはプラセボ（１対象）のいずれかを受け、４８時間モニターされた。次に、治験責任医師および医療モニターは、４８時間のモニタリング期間からの安全性データを評価した。安全性の問題が特定されなかった後、追加の４人の対象が無作為化され、ＣＳＬ３１２またはプラセボ（３：１の比率）のいずれかが投与された；これらの４人の対象の投薬は、２番目のセンチネル対象の投薬の最低４８時間後に開始された。
【0127】
安全性の分析および結果：
全てのＡＥの要約は、治療に起因するＡＥ（ＴＥＡＥ）のみに限定された。同じＴＥＡＥ（好ましい用語に関して）を２回以上経験した対象は、対象数においてその事象に対して１回だけカウントされたが、同じ事象の全ての発生は事象数でカウントされた。
全てのＡＥの要約は、治療に起因するＡＥ（ＴＥＡＥ）のみに限定された。同じＴＥＡＥ（好ましい用語に関して）を２回以上経験した対象は、対象数においてその事象に対して１回だけカウントされたが、同じ事象の全ての発生は事象数でカウントされた。
【0128】
血液学、生化学、および凝固のデータは、実際の値およびベースラインからの変化と共にスケジュールされた各来診時に要約された。ＣＳＬ３１２を投与された全ての対象について、時点ごとの抗薬物抗体（ＡＤＡ）の発生頻度を要約した。観察値ならびに１２誘導心電図パラメータおよびバイタルサイン評価のベースラインからの変化について、説明的な要約が提供された。
【0129】
全体として、４３／４８対象の対象（８９．６％）が少なくとも１つのＴＥＡＥを経験した。プラセボ（５０事象で１３／１６対象［８１．３％］）よりも多くの対象がＣＳＬ３１２（１０６事象で３０／３２対象［９３．８％］）でＴＥＡＥを経験した。ＣＳＬ３１２またはプラセボによる治療後に報告されたＴＥＡＥの大部分は、重症度グレード１であった（ＣＳＬ３１２では１００／１０６事象［９４．３％］、およびプラセボでは４５／５０事象［９０．０％］）。全てのＴＥＡＥの３分の１未満が、ＣＳＬ３１２またはプラセボに関連していると評価された（ＣＳＬ３１２では３１／１０６事象［２９．２％］、およびプラセボでは１４／５０事象［２８．０％］）。プラセボを投与された３人の対象で進行中の３つのＴＥＡＥを除いて、全てのＴＥＡＥは回復または消失という転帰であった。
【0130】
ＴＥＡＥの頻度または重症度に用量依存的な傾向は見られなかった。死亡、重篤なＡＥ、または中止につながるＡＥは報告されなかった。
【0131】
注入／注射部位反応は、プラセボを投与された対象（５／１６対象［３１．３％］、９事象）よりもＣＳＬ３１２を投与された対象（１８／３２対象［５６．３％］、２１事象）の割合が高いことが報告されたが、これは主にＳＣコホートで報告された事象に起因している。全体として、ＩＶコホートでは、注入部位反応のある対象の割合は、ＣＳＬ３１２およびプラセボと同様であった（両方の治療で３０．０％）。ＳＣコホートでは、ＳＣプラセボを投与された対象の３３．３％と比較して、ＳＣ ＣＳＬ３１２を投与された全ての対象が、少なくとも１回の注射部位反応を経験した。全ての注入／注射部位反応はグレード１であり、回復または消失という転帰であった。
【0132】
血栓塞栓性事象、出血、またはアナフィラキシー事象はなかった。
【0133】
血液学、生化学、尿検査、凝固、または補体活性の結果に臨床的に関連する傾向はなかった。個々の対象において異常な検査値が観察されたが、安全性の懸念は特定されなかった。
【0134】
ベースラインまたは研究中の任意の時点で、抗ＣＳＬ３１２抗体陽性であると試験された対象はいなかった。
【0135】
心電図またはバイタルサイン評価について、臨床的に関連する傾向は報告されていなかった。
【0136】
薬物動態分析および結果：
ＰＫパラメータおよびＣＳＬ３１２血漿濃度は、積極的治療によって記述的に要約された。全てのＰＫパラメータは、実際のサンプリング時間を使用して計算された。濃度－時間データの要約統計には、分析母集団内の対象の数、実際の観測の数、および観測の総数に対する定量限界（ＢＬＱ）値を下回るパーセンテージが含まれていた。
ＰＫパラメータおよびＣＳＬ３１２血漿濃度は、積極的治療によって記述的に要約された。全てのＰＫパラメータは、実際のサンプリング時間を使用して計算された。濃度－時間データの要約統計には、分析母集団内の対象の数、実際の観測の数、および観測の総数に対する定量限界（ＢＬＱ）値を下回るパーセンテージが含まれていた。
【0137】
用量比例は、ＰＫパラメータＣｍａｘ、ＡＵＣ０－ｉｎｆおよびＡＵＣ０－ｔについてＩＶ用量およびＳＣ用量について別々に評価した。探索的な用量比例は、パワーモデルで分析された。９０％信頼区間（ＣＩ）が、ＩＶ注入の場合は０．８５～１．１５、またはＳＣ注射の場合は０．７～１．３の事前定義された臨界区間内にあるならば、ＰＫパラメータと用量の間の線形比例が明らかにされたことになる。
【0138】
ＣＳＬ３１２のＩＶ注入を受けた対象のＰＫパラメータＡＵＣ０－ｉｎｆおよび時間０から投与後の最後の定量可能な時点までのＡＵＣ（ＡＵＣ０－ｌａｓｔ）を、ＣＳＬ３１２のＳＣ注射を受けた対象のＡＵＣ０－ｉｎｆおよびＡＵＣ０－ｌａｓｔと比較した。分散分析モデルを使用して、ＩＶおよびＳＣの同じ用量（すなわち、１ｍｇ／ｋｇ ＩＶおよび１ｍｇ／ｋｇ ＳＣなど）間、ならびにプールされたＩＶおよびプールされたＳＣの用量間で比較を行った。
【0139】
ＣＳＬ３１２の単回ＩＶ注入後、血漿濃度は、およそ４時間でピークに達した０．１ｍｇ／ｋｇの用量を除いて、一般に注入の終わり（１時間）でピークに達した。平均ｔ１／２は、ＩＶ投与にわたって約１４日から２０日の範囲であった（図３Ａを参照されたい）。
【0140】
１、３、または１０ｍｇ／ｋｇ ＣＳＬ３１２の単回ＳＣ注射後、血漿濃度はそれぞれ、およそ７日（１６８時間）、５日（１２０時間）、および７日（１６８時間）でピークに達した。平均ｔ１／２は、ＳＣ投与にわたって、およそ１８日から２０日の範囲であった（図３Ｂを参照されたい）。
【0141】
ＣＳＬ３１２の単回投与では、０．１、０．３、１、３、１０ｍｇ／ｋｇの用量でのＩＶ注入または１、３、１０ｍｇ／ｋｇの用量でのＳＣ注射として投与した場合、ＣＳＬ３１２のＣｍａｘおよびＡＵＣにおいて用量依存的な増加を示した。
【0142】
プールされたＳＣ用量に対するプールされたＩＶ用量の全体的な比較により、用量正規化されたＡＵＣ０－ｉｎｆのバイオアベイラビリティは４９．７％と推定された。
【0143】
結論として、ＣＳＬ３１２は、健康な男性対象に１０ｍｇ／ｋｇまでの単回ＩＶ注入または単回皮下注射として投与された場合、安全で良い忍容性であった。ＣＳＬ３１２は、単回ＩＶ注入またはＳＣ注射として投与された場合、ＳＣ注射後の絶対バイオアベイラビリティが約５０％、ｔ１／２が約１８日である線形ＰＫを示した。
【実施例】
【0144】
Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥ対象の遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）発作を予防する予防法として、ＣＳＬ３１２の臨床効能、薬物動態、薬力学、安全性を調査するために、多施設、無作為化、プラセボ－対照、並行群、第２相試験が行われた。
【0145】
研究設計
ＣＳＬ３１２の複数の皮下用量は、以下の用量でＨＡＥ患者に投与された：７５ｍｇ ２００ｍｇ、または６００ｍｇ。本研究は、スクリーニング期間（≦４週間）、慣らし期間（≦８週間）、治療期間１（～１３週間）、治療期間２（～４４週間）、およびフォローアップ期間（～１４週間）からなる。慣らし期間および無作為化治療期間１を含む主な研究設計の概要を図４に提示する。
ＣＳＬ３１２の複数の皮下用量は、以下の用量でＨＡＥ患者に投与された：７５ｍｇ ２００ｍｇ、または６００ｍｇ。本研究は、スクリーニング期間（≦４週間）、慣らし期間（≦８週間）、治療期間１（～１３週間）、治療期間２（～４４週間）、およびフォローアップ期間（～１４週間）からなる。慣らし期間および無作為化治療期間１を含む主な研究設計の概要を図４に提示する。
【0146】
スクリーニング後、適格な対象は、基礎疾患の状態を確認し、治療期間１への参加の適格性を評価するために、少なくとも４週間から最大８週間続く初期の慣らし期間に入った。Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象は、慣らし期間中の連続する４週間以内に≧２回のＨＡＥ発作を経験したことを含む、事前に指定された基準を満たしたときに、慣らし期間の参加を中止し、治療期間１を開始した。
【0147】
盲検化された治療期間１に参加する資格のあるＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥの合計３２人の対象が、盲検化された方法で以下の治療レジメンの１つによる治療に無作為に割り当てられた：
・ ４０ｍｇ ＣＳＬ３１２の静脈内（ＩＶ）単回負荷用量に続いて、約１週間後に７５ｍｇ ＣＳＬ３１２を皮下［ＳＣ］、４週間ごと［ｑ４ｗｋ］で１２週間（９患者）；
・ １００ｍｇ ＣＳＬ３１２ ＩＶの単回負荷用量に続いて、約１週間後に２００ｍｇ ＣＳＬ３１２ ＳＣ ｑ４ｗｋを１２週間（８患者）；
・ ３００ｍｇ ＣＳＬ３１２ ＩＶの単回負荷用量に続いて、約１週間後に６００ｍｇ ＣＳＬ３１２ ＳＣ ｑ４ｗｋを１２週間（７患者）；
・ プラセボＩＶの単回負荷用量に続いて、約１週間後のプラセボＳＣ ｑ４ｗｋで１２週間（８患者）。
・ ４０ｍｇ ＣＳＬ３１２の静脈内（ＩＶ）単回負荷用量に続いて、約１週間後に７５ｍｇ ＣＳＬ３１２を皮下［ＳＣ］、４週間ごと［ｑ４ｗｋ］で１２週間（９患者）；
・ １００ｍｇ ＣＳＬ３１２ ＩＶの単回負荷用量に続いて、約１週間後に２００ｍｇ ＣＳＬ３１２ ＳＣ ｑ４ｗｋを１２週間（８患者）；
・ ３００ｍｇ ＣＳＬ３１２ ＩＶの単回負荷用量に続いて、約１週間後に６００ｍｇ ＣＳＬ３１２ ＳＣ ｑ４ｗｋを１２週間（７患者）；
・ プラセボＩＶの単回負荷用量に続いて、約１週間後のプラセボＳＣ ｑ４ｗｋで１２週間（８患者）。
【0148】
３２人の患者の全員が治療期間１を完了し、治療期間２での治療を開始した。医師は、電子日記（ｅＤｉａｒｙ）で対象によって報告されたデータに基づいて、ＨＡＥ発作の発生を評価および文書化した。安全性、ＰＫ／ＰＤパラメータ、およびオンデマンドＨＡＥ薬の使用も評価された。
【0149】
１３週間の治療期間１を完了した対象は、治療期間２に参加する資格があった。オープンラベルの治療期間２に引き続き参加した対象は、割り当てられたとおり、ＣＳＬ３１２（２００ｍｇまたは６００ｍｇ）ｑ４ｗｋ ＳＣを投与された。医師は、ｅＤｉａｒｙにおいて、対象によって報告されたデータに基づいて、ＨＡＥ発作の発生を評価および文書化し続けた。安全性およびＰＫパラメータも引き続き評価された。治療期間２は、全ての対象に対してオープンラベルで行われた。
【0150】
参加を中止したものを含む全ての対象は、治療期間中の各対象の最後の来診の約１４週間後にフォローアップ来診に参加した。
【0151】
用量選択
第２相の用量選択は、健康なボランティアへの投与後の第１相の単一漸増用量試験で得られた安全性、ＰＫおよびＰＤデータに基づいた（実施例１）。用量選択に使用された主要なＰＤ評価項目は、ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性であった。ＣＳＬ３１２の阻害能力は、カリクレイン－キニンシステムのバイオマーカーを使用して研究された。カリクレイン活性は、ＣＳＬ３１２がＨＡＥの病態生理にどのように寄与するかを知らせる。血漿サンプルはエクスビボで活性化され、ＨＡＥ発作を模倣し、カリクレイン－キニン経路のＦＸＩＩ媒介増幅をもたらした。ＦＸＩＩａはプレカリクレインを切断してカリクレインを生成するが、その活性は発色性ペプチド基質を使用して測定できる。ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性を特定の％標的阻害に一貫して阻害することで、ＨＡＥ発作からの保護が期待できるという仮説が立てられた。ＨＡＥ発作を予防するための正確な％標的ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン阻害は不明であった。ＰＫ／ＰＤモデルは、健康なボランティアへの投与後の第１相単回漸増用量試験におけるＣＳＬ３１２血漿濃度およびＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性との間の関係を定量化するために開発された。モデル化された関係は、ＣＳＬ３１２の濃度の増加と共に、ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性の阻害の増加を示した。ＣＳＬ３１２の血漿中濃度とＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性との間の関係から、曲線の全スペクトルに沿った情報を提供するために、選択された％標的阻害レベルには≧３０、≧５０、および≧９０％が含まれ、本研究における用量の評価を堅牢にさせた。最終的なＰＫ／ＰＤモデルを使用したシミュレーションでは、４週間ごとに７５ｍｇ、２００ｍｇ、および６００ｍｇの固定用量を投与すると、患者の少なくとも７５％が、それぞれ、≧３０、≧５０、および≧９０％のＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性の％標的阻害に達した。
第２相の用量選択は、健康なボランティアへの投与後の第１相の単一漸増用量試験で得られた安全性、ＰＫおよびＰＤデータに基づいた（実施例１）。用量選択に使用された主要なＰＤ評価項目は、ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性であった。ＣＳＬ３１２の阻害能力は、カリクレイン－キニンシステムのバイオマーカーを使用して研究された。カリクレイン活性は、ＣＳＬ３１２がＨＡＥの病態生理にどのように寄与するかを知らせる。血漿サンプルはエクスビボで活性化され、ＨＡＥ発作を模倣し、カリクレイン－キニン経路のＦＸＩＩ媒介増幅をもたらした。ＦＸＩＩａはプレカリクレインを切断してカリクレインを生成するが、その活性は発色性ペプチド基質を使用して測定できる。ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性を特定の％標的阻害に一貫して阻害することで、ＨＡＥ発作からの保護が期待できるという仮説が立てられた。ＨＡＥ発作を予防するための正確な％標的ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン阻害は不明であった。ＰＫ／ＰＤモデルは、健康なボランティアへの投与後の第１相単回漸増用量試験におけるＣＳＬ３１２血漿濃度およびＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性との間の関係を定量化するために開発された。モデル化された関係は、ＣＳＬ３１２の濃度の増加と共に、ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性の阻害の増加を示した。ＣＳＬ３１２の血漿中濃度とＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性との間の関係から、曲線の全スペクトルに沿った情報を提供するために、選択された％標的阻害レベルには≧３０、≧５０、および≧９０％が含まれ、本研究における用量の評価を堅牢にさせた。最終的なＰＫ／ＰＤモデルを使用したシミュレーションでは、４週間ごとに７５ｍｇ、２００ｍｇ、および６００ｍｇの固定用量を投与すると、患者の少なくとも７５％が、それぞれ、≧３０、≧５０、および≧９０％のＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性の％標的阻害に達した。
【0152】
研究集団
慣らし期間に入るには、対象は次の包含基準を全て満たす必要がある：
１． 書面によるインフォームドコンセントを提出した。
２． 男性または女性。
３． 書面によるインフォームドコンセントを提出した時点で１８歳以上６５歳以下。
４． 以下の基準に基づくＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥの臨床診断：
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥ（１型）の場合：
－ ＨＡＥと一致する文書化された病歴（蕁麻疹を伴わない皮下または粘膜の非掻痒性腫脹エピソード）。
－ 対象の医療記録に記載された、参照範囲の下限の５０％未満のＣ１－ＩＮＨ抗原濃度または機能活性。
－ 対象の医療記録に記載された、参照範囲の下限を下回るＣ４抗原濃度。
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥ（２型）の場合：
－ ＨＡＥと一致する文書化された病歴（蕁麻疹を伴わない皮下または粘膜の非掻痒性腫脹エピソード）。
－ 対象の医療記録に記載された、参照範囲の下限の５０％未満のＣ１－ＩＮＨ機能活性。
－ 対象の医療記録に記載された、参照範囲の下限を下回るＣ４抗原濃度。５． Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象の場合：対象の医療記録に記載された、スクリーニング前の３ヶ月の間の連続した２ヶ月間に４回以上のＨＡＥ発作。注：スクリーニング前の３ヶ月の間に予防的ＨＡＥ療法を受けている対象の場合、予防的治療を開始する前の３ヶ月の間の連続する２ヶ月間に４回以上のＨＡＥ発作が記録されている可能性がある。
６． ＨＡＥ発作のオンデマンド治療を支援なしで適切に管理できると医師により評価された後、慣らし期間の初日に、ＨＡＥ発作に対する日常的な予防のために、Ｃ１－ＩＮＨ製品、アンドロゲン、または抗線溶薬の使用を中止することを望むこと。
７． 医師が、対象が研究の性質、範囲、および起こり得る結果を理解していると確信した。
慣らし期間に入るには、対象は次の包含基準を全て満たす必要がある：
１． 書面によるインフォームドコンセントを提出した。
２． 男性または女性。
３． 書面によるインフォームドコンセントを提出した時点で１８歳以上６５歳以下。
４． 以下の基準に基づくＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥの臨床診断：
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥ（１型）の場合：
－ ＨＡＥと一致する文書化された病歴（蕁麻疹を伴わない皮下または粘膜の非掻痒性腫脹エピソード）。
－ 対象の医療記録に記載された、参照範囲の下限の５０％未満のＣ１－ＩＮＨ抗原濃度または機能活性。
－ 対象の医療記録に記載された、参照範囲の下限を下回るＣ４抗原濃度。
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥ（２型）の場合：
－ ＨＡＥと一致する文書化された病歴（蕁麻疹を伴わない皮下または粘膜の非掻痒性腫脹エピソード）。
－ 対象の医療記録に記載された、参照範囲の下限の５０％未満のＣ１－ＩＮＨ機能活性。
－ 対象の医療記録に記載された、参照範囲の下限を下回るＣ４抗原濃度。５． Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象の場合：対象の医療記録に記載された、スクリーニング前の３ヶ月の間の連続した２ヶ月間に４回以上のＨＡＥ発作。注：スクリーニング前の３ヶ月の間に予防的ＨＡＥ療法を受けている対象の場合、予防的治療を開始する前の３ヶ月の間の連続する２ヶ月間に４回以上のＨＡＥ発作が記録されている可能性がある。
６． ＨＡＥ発作のオンデマンド治療を支援なしで適切に管理できると医師により評価された後、慣らし期間の初日に、ＨＡＥ発作に対する日常的な予防のために、Ｃ１－ＩＮＨ製品、アンドロゲン、または抗線溶薬の使用を中止することを望むこと。
７． 医師が、対象が研究の性質、範囲、および起こり得る結果を理解していると確信した。
【0153】
以下の除外基準のいずれかを満たす場合、対象は慣らし期間に入ってはならない：
１． 臨床的に重大な動脈または静脈血栓症の病歴、または現在の臨床的に重大な血栓形成促進リスク（中心静脈アクセス装置の存在を含む）。
２． 凝固障害による制御不能な異常出血事象の病歴、または現在の臨床的に重大な凝固障害または臨床的に重大な出血事象のリスク。
３． 固有の臨床的に重大な血栓性事象または出血のリスクがあった試験中の事前計画された手術。
４． スクリーニング時の既知の不治の悪性腫瘍。
５． Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの臨床診断を受けた対象については、ＨＡＥの管理のためのＣ１－ＩＮＨ療法に対する応答不良の臨床的に重要な病歴。
６． スクリーニング前の３ヶ月以内に、任意のホルモン避妊レジメンまたはホルモン補充療法（すなわち、エストロゲン／プロゲステロン含有製品）の服用または用量変更を開始したＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥの女性対象。
７． スクリーニング前の３０日間、または以前の介入研究中に投与された治験薬の最終用量の５半減期以内のいずれか長い方の期間中に、別の介入臨床研究に参加したこと。
８． モノクローナル抗体、Ｆｃドメインを持つ組換えタンパク質、リボ核酸（ＲＮＡ）サイレンシング、または遺伝子導入技術での以前の治療。
９． スクリーニング時、研究中に許可されていない任意の他の治療を受ける。
１０． 治療期間１または治療期間２中、およびフォローアップ期間中の任意の時点で、非常に効果的な避妊法を使用していないか、もしくは使用する意思がない、または性的に禁欲していない、あるいは外科的不妊ではない、妊娠可能性のある男性または女性の対象。
１１． 研究中の時点で、妊娠する、または子供の父親になる意図があること。
１２． 妊娠中または授乳中の母親。
１３． 治験薬または治験薬の添加剤に対する既知であるか、または疑われる過敏症。
１４． 研究施設の従業員、または医師またはその部下の配偶者／パートナーまたは親族。
１５． 医師の意見で、対象を研究への参加に不適とするその他の問題。
１． 臨床的に重大な動脈または静脈血栓症の病歴、または現在の臨床的に重大な血栓形成促進リスク（中心静脈アクセス装置の存在を含む）。
２． 凝固障害による制御不能な異常出血事象の病歴、または現在の臨床的に重大な凝固障害または臨床的に重大な出血事象のリスク。
３． 固有の臨床的に重大な血栓性事象または出血のリスクがあった試験中の事前計画された手術。
４． スクリーニング時の既知の不治の悪性腫瘍。
５． Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの臨床診断を受けた対象については、ＨＡＥの管理のためのＣ１－ＩＮＨ療法に対する応答不良の臨床的に重要な病歴。
６． スクリーニング前の３ヶ月以内に、任意のホルモン避妊レジメンまたはホルモン補充療法（すなわち、エストロゲン／プロゲステロン含有製品）の服用または用量変更を開始したＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥの女性対象。
７． スクリーニング前の３０日間、または以前の介入研究中に投与された治験薬の最終用量の５半減期以内のいずれか長い方の期間中に、別の介入臨床研究に参加したこと。
８． モノクローナル抗体、Ｆｃドメインを持つ組換えタンパク質、リボ核酸（ＲＮＡ）サイレンシング、または遺伝子導入技術での以前の治療。
９． スクリーニング時、研究中に許可されていない任意の他の治療を受ける。
１０． 治療期間１または治療期間２中、およびフォローアップ期間中の任意の時点で、非常に効果的な避妊法を使用していないか、もしくは使用する意思がない、または性的に禁欲していない、あるいは外科的不妊ではない、妊娠可能性のある男性または女性の対象。
１１． 研究中の時点で、妊娠する、または子供の父親になる意図があること。
１２． 妊娠中または授乳中の母親。
１３． 治験薬または治験薬の添加剤に対する既知であるか、または疑われる過敏症。
１４． 研究施設の従業員、または医師またはその部下の配偶者／パートナーまたは親族。
１５． 医師の意見で、対象を研究への参加に不適とするその他の問題。
【0154】
対象が以下の基準を満たした場合、慣らし期間の終了、および治療期間１の開始に：
１． 対象は慣らし期間に少なくとも４週間（２８日間）参加した。
２． Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象については、中央検査室試験による診断の確認：
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥ（１型）の対象の場合：
－ Ｃ１－ＩＮＨ抗原濃度または機能的活性＜参照範囲の下限の５０％。
－ 参照範囲の下限を下回るＣ４抗原濃度。
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥ（２型）の対象の場合：
－ Ｃ１－ＩＮＨ機能活性＜参照範囲の下限の５０％。
－ 参照範囲の下限を下回るＣ４抗原濃度。
３． Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象の場合：慣らし期間中の連続する４週間の期間内に２回以上のＨＡＥ発作が発生したこと。
４． スクリーニング中に行われた血液学、化学、または尿検査の評価の結果について、臨床的に重大であると医師によって評価された臨床的異常がなかったこと。注：アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼおよび／またはアラニンアミノトランスフェラーゼの正常上限の２倍以上の対象は、この検査結果の説明があり、結果が臨床的に重大ではない場合には、参加適格とする場合がある。
１． 対象は慣らし期間に少なくとも４週間（２８日間）参加した。
２． Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象については、中央検査室試験による診断の確認：
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥ（１型）の対象の場合：
－ Ｃ１－ＩＮＨ抗原濃度または機能的活性＜参照範囲の下限の５０％。
－ 参照範囲の下限を下回るＣ４抗原濃度。
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥ（２型）の対象の場合：
－ Ｃ１－ＩＮＨ機能活性＜参照範囲の下限の５０％。
－ 参照範囲の下限を下回るＣ４抗原濃度。
３． Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象の場合：慣らし期間中の連続する４週間の期間内に２回以上のＨＡＥ発作が発生したこと。
４． スクリーニング中に行われた血液学、化学、または尿検査の評価の結果について、臨床的に重大であると医師によって評価された臨床的異常がなかったこと。注：アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼおよび／またはアラニンアミノトランスフェラーゼの正常上限の２倍以上の対象は、この検査結果の説明があり、結果が臨床的に重大ではない場合には、参加適格とする場合がある。
【0155】
研究目的
本研究の主要目的は、Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象のＨＡＥ発作の予防におけるＣＳＬ３１２の効能を評価することである。主要評価項目は、治療期間１の間にＣＳＬ３１２またはプラセボｑ４ｗｋで治療されたＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象におけるＨＡＥ発作の時間正規化数（１ヶ月あたり）である。
本研究の主要目的は、Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象のＨＡＥ発作の予防におけるＣＳＬ３１２の効能を評価することである。主要評価項目は、治療期間１の間にＣＳＬ３１２またはプラセボｑ４ｗｋで治療されたＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象におけるＨＡＥ発作の時間正規化数（１ヶ月あたり）である。
【0156】
研究の副次的目的は：
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象におけるＣＳＬ３１２の効能をさらに評価すること。
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象におけるＣＳＬ３１２のＰＫを評価すること。
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象におけるＣＳＬ３１２の安全性および忍容性を評価することである。
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象におけるＣＳＬ３１２の効能をさらに評価すること。
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象におけるＣＳＬ３１２のＰＫを評価すること。
・ Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象におけるＣＳＬ３１２の安全性および忍容性を評価することである。
【0157】
安全性：
ＣＳＬ３１２は安全であり、全ての用量で忍容性が良好であった。用量依存的な安全性への懸念はなかった。ＣＳＬ３１２の任意の用量での治療中に、少なくとも１回のＡＥを経験した対象のパーセンテージは、プラセボと同様であった。全てのＡＥは重篤ではなく、軽度または中程度の強度として評価された。Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象は、ＳＡＥ（重篤な有害事象）、特に関心のあるＡＥ（アナフィラキシー、血栓塞栓性事象または出血事象）、またはＣＳＬ３１２による盲検治療中に中止につながるＡＥを経験しなかった。死亡は報告されていない。
ＣＳＬ３１２は安全であり、全ての用量で忍容性が良好であった。用量依存的な安全性への懸念はなかった。ＣＳＬ３１２の任意の用量での治療中に、少なくとも１回のＡＥを経験した対象のパーセンテージは、プラセボと同様であった。全てのＡＥは重篤ではなく、軽度または中程度の強度として評価された。Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象は、ＳＡＥ（重篤な有害事象）、特に関心のあるＡＥ（アナフィラキシー、血栓塞栓性事象または出血事象）、またはＣＳＬ３１２による盲検治療中に中止につながるＡＥを経験しなかった。死亡は報告されていない。
【0158】
薬物動態、薬力学および効能：
３２人の無作為化された患者全員（平均年齢４０歳［範囲２０～６５］；５６％女性；９１％白人；９４％ＨＡＥタイプ１）が治療期間１を完了した。４週間ごとのＣＳＬ３１２ ＳＣでの治療は、プラセボと比較したＨＡＥ発作率の減少において統計的有意性を達成した。本研究はまた、副次的評価項目に対するＨＡＥ発作の予防において臨床的に意味のある結果を実証した。
３２人の無作為化された患者全員（平均年齢４０歳［範囲２０～６５］；５６％女性；９１％白人；９４％ＨＡＥタイプ１）が治療期間１を完了した。４週間ごとのＣＳＬ３１２ ＳＣでの治療は、プラセボと比較したＨＡＥ発作率の減少において統計的有意性を達成した。本研究はまた、副次的評価項目に対するＨＡＥ発作の予防において臨床的に意味のある結果を実証した。
【0159】
負荷用量および３回のＳＣ投与後、６３日目の後のＣＳＬ３１２の血漿濃度は、３種の用量全てについて３回目のＳＣ注射の約３～７日後にピークに達した。定常状態ならびにＣＳＬ３１２の平均血漿レベルの用量依存的増加に関するこれらのデータを図５に示す（上から下へのプロットのグラフは、下から上へと列挙されたレジメンに対応する）。
【0160】
表１は、治療期間１（来診６３日目）におけるＣＳＬ３１２の最後のＳＣ投与後の血漿ＰＫパラメータの要約を表している。治療期間１（来診６３日目）でのＣＳＬ３１２の最後のＳＣ投与後、平均Ｃｍａｘは１０．６～５６．４μｇ／ｍＬの範囲であった。２．７倍と８倍の用量の増加、それぞれ、７５ｍｇと２００ｍｇの間、および７５ｍｇと６００ｍｇの間のＣＳＬ３１２のＳＣ用量で、平均Ｃｍａｘはおよそ１．５倍および５倍に増加した。平均ＡＵＣ０－ｔａｕは４５０７～２６，５１４ｈ＊μｇ／ｍＬの範囲であった。２．７倍と８倍の用量の増加、それぞれ７５ｍｇと２００ｍｇの間および７５ｍｇと６００ｍｇの間のＣＳＬ３１２のＳＣ用量で、平均ＡＵＣ０－ｔａｕはおよそ１．６倍および６倍に増加した。平均Ｔ１／２は、用量にわたっておよそ１６日から１８日の範囲であった。全体として、治療期間１（来診６３日目）でのＣＳＬ３１２の最後のＳＣ投与後、ＣＳＬ３１２ ＣｍａｘおよびＡＵＣは用量依存的に増加した。
【0161】
【表1】
【0162】
図６は、治療による定常状態、すなわち６３日目の後のＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性のベースラインプロファイルの平均（ＳＤ）パーセントを表す。１００％カリクレイン活性は、このプロットのベースライン（治療前のカリクレイン活性）であり、すなわち、プロットされた全ての値は各ＨＡＥ対象のベースラインに対する値である。この図は、ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性の用量依存的な阻害を実証している（上から下へのプロットのグラフは、上から下へと列挙されたレジメンに対応する）。
【0163】
一般に、ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性の用量依存的な阻害は、ＣＳＬ３１２の投与後に観察された。平均ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性は、プラセボと比較して、いくつかのサンプリングポイントで７５ｍｇ治療群において高かった。これは、結果のばらつきが大きいことが原因である可能性がある。ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性のほぼ完全な阻害が、６００ｍｇ用量のＳＣ投与後のＣＳＬ３１２のピーク濃度で観察された。
【0164】
図７は、健康およびＨＡＥ対象からのデータに基づく、シミュレートおよび観察された曝露（血中のＣＳＬ３１２濃度）－応答（ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性）関係を表す。５０μｇ／ｍＬを超えるＣＳＬ３１２血漿濃度では、ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性が完全に阻害される。
【0165】
【0166】
第２相試験の主要効能評価項目は、時間正規化ＨＡＥ発作数であった。ＣＳＬ３１２ ７５ｍｇ、２００ｍｇ、または６００ｍｇでの治療は、プラセボと比較した場合、時間正規化ＨＡＥ発作数に臨床的に関連性のある減少をもたらした（表２）。平均（ＳＤ）時間正規化ＨＡＥ発作数は、プラセボ群で４．２４（１．８０１）、ＣＳＬ３１２ ２００ｍｇ治療群で０．０５（０．１２７）、６００ｍｇ ＣＳＬ３１２治療群で０．４０（０．５１４）であった。時間正規化ＨＡＥ発作数の平均減少は、プラセボと比較して、ＣＳＬ３１２ ２００ｍｇで９８．９４％、ＣＳＬ３１２ ６００ｍｇで９０．５０％であった。７５ｍｇ ＣＳＬ３１２での治療も評価されたが、ＣＳＬ３１２ ７５ｍｇとプラセボの間の正式な統計的比較は行われなかった。しかしながら、要約統計量はこの用量での治療後の効能を実証している。平均（ＳＤ）時間正規化ＨＡＥ発作数は０．４８（１．０５７）であった。時間正規化ＨＡＥ発作数の平均減少は、プラセボと比較して、ＣＳＬ３１２ ７５ｍｇで８８．６８％であった。
【0167】
副次的評価項目は、応答者対象、ＨＡＥ発作のない対象、ＨＡＥ発作、オンデマンドＨＡＥ薬で治療されたＨＡＥ発作、および血漿中のＣＳＬ３１２ ＰＫであった（Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、Ｔ１／２、ＡＵＣ、表１を参照されたい）。
【0168】
【表2】
【0169】
ＣＳＬ３１２を用いて時間正規化ＨＡＥ発作数（すなわち、応答者）が５０％以上、７０％以上、または９０％以上減少した対象の慣らし期間に対するパーセンテージの分析を行った（表３）。応答者のパーセンテージは、プラセボによる治療と比較して、ＣＳＬ３１２による治療中の方が高かった。
・ ＨＡＥ発作が５０％以上減少した応答者の数とパーセンテージは、プラセボの対象で０例、７５ｍｇで９／９（１００．０％）、２００ｍｇで８／８（１００．０％）、６００ｍｇで６／７（８５．７％）であった。
・ ＨＡＥ発作が７０％以上減少した応答者の数とパーセンテージは、プラセボの対象で０例、７５ｍｇで８／９（８８．９％）、２００ｍｇで８／８（１００．０％）、６００ｍｇで６／７（８５．７％）であった。
・ ＨＡＥ発作が９０％以上減少した応答者の数とパーセンテージは、プラセボの対象で０例、７５ｍｇで８／９（８８．９％）、２００ｍｇで８／８（１００．０％）、６００ｍｇで４／７（５７．１％）であった。
・ ＨＡＥ発作が５０％以上減少した応答者の数とパーセンテージは、プラセボの対象で０例、７５ｍｇで９／９（１００．０％）、２００ｍｇで８／８（１００．０％）、６００ｍｇで６／７（８５．７％）であった。
・ ＨＡＥ発作が７０％以上減少した応答者の数とパーセンテージは、プラセボの対象で０例、７５ｍｇで８／９（８８．９％）、２００ｍｇで８／８（１００．０％）、６００ｍｇで６／７（８５．７％）であった。
・ ＨＡＥ発作が９０％以上減少した応答者の数とパーセンテージは、プラセボの対象で０例、７５ｍｇで８／９（８８．９％）、２００ｍｇで８／８（１００．０％）、６００ｍｇで４／７（５７．１％）であった。
【0170】
慣らし期間に対してＣＳＬ３１２による時間正規化ＨＡＥ発作数が３０％以上減少した応答者のパーセンテージの分析も行われたが、トップラインの結果の一部ではなかったため、ここでは示していないことに留意されたい。この応答者分析の結果は、上記の結果と一致していた。
【0171】
【表3】
【0172】
プラセボと比較した、ＣＳＬ３１２による治療中の時間正規化ＨＡＥ発作数の平均減少率は、７５ｍｇで８８．６８％、２００ｍｇで９８．９４％、６００ｍｇで９０．５０％であった。対照的に、慣らし期間と比較した場合（グループ比較内）のプラセボによる治療中の時間正規化ＨＡＥ発作数に実質的な減少はなかった。時間正規化ＨＡＥ発作数の平均減少は、慣らし期間に対してプラセボで９．７６％であった。
【0173】
任意の用量のＣＳＬ３１２での治療に無作為化された２４人の対象のうち、１５人の対象は効能評価期間中にＨＡＥ発作がなかった。これら１５人のＨＡＥ発作のない対象のうち、５／９人の対象（５５．６％［９５％ＣＩ：２６．６７、８１．１２］）で７５ｍｇのＣＳＬ３１２を用いてＨＡＥ発作がなく、７／８人の対象（８７．５％［９５％ＣＩ：５２．９１、９７．７６］）でＣＳＬ３１２ ２００ｍｇを用いてＨＡＥ発作がなく、３／７人の対象（４２．９％［９５％ＣＩ：１５．８２、７４．９５］）でＣＳＬ３１２ ６００ｍｇを用いてＨＡＥ発作がなかった。効能評価期間中、プラセボで治療された対象でＨＡＥ発作がなかった者はいなかった。
【0174】
ＣＳＬ３１２で治療され、治療期間１の間にＨＡＥ発作がなかった対象は、最初の発作まで、７５ｍｇ（４人の対象）では１．７～５．１週の間、６００ｍｇ（４人の対象）では１．３～９．９週の間、ＨＡＥ発作のない期間があった。２００ｍｇでＨＡＥ発作がなかった唯一の対象は、２．３週間のＨＡＥ発作のない期間と共に２回のＨＡＥ発作があった。
【0175】
結論として、盲検治療ＣＳＬ３１２は、Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの患者に単回ＩＶ注入の後、最大６００ｍｇまでの４週間ごと、３回のＳＣ注射を投与した場合、安全で、忍容性が良好であった。
【0176】
研究に参加したＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥの対象は、プラセボ、または７５ｍｇ、２００ｍｇ、もしくは６００ｍｇのＣＳＬ３１２ ＳＣ ｑ４ｗｋによる盲検治療に無作為化された。結果は、この研究集団において、ＣＳＬ３１２がＨＡＥ発作の予防に安全で、効果的であることを実証している。
【0177】
７５ｍｇ、２００ｍｇ、または６００ｍｇのＣＳＬ３１２ ＳＣ ｑ４ｗｋによる治療は、プラセボと比較した場合、時間正規化ＨＡＥ発作数の臨床的に関連性のある減少をもたらした。任意の用量のＣＳＬ３１２による治療に無作為化された２４人の対象のうち、１５人の対象は効能評価期間中にＨＡＥ発作がなく、７５ｍｇのＣＳＬ３１２で治療された５／９（５５．６％）の対象、２００ｍｇのＣＳＬ３１２で治療された７／８（８７．５％）の対象および６００ｍｇのＣＳＬ３１２で治療された３／７（４２．９％）の対象を含んでいた。同じ評価期間中、プラセボで治療された対象で、ＨＡＥ発作がなかった者はいなかった。
【0178】
結果は、ＣＳＬ３１２が治療期間１のＳＣ投与後に、～１７日のＴ１／２を有する用量依存的なＰＫを示すことを実証している。治療期間１でＣＳＬ３１２をＳＣ投与した後、ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性の濃度依存性阻害が観察された。
【0179】
ＨＡＥ発作を予防する最先端の方法（カリクレインまたは特定のブラジキニン受容体２遮断の正常または完全な最大阻害へのＣ１－ＩＮＨタンパク質レベルの上昇に基づく）と比較して、ＨＡＥ患者における部分的なＦＸＩＩａ活性阻害によるカリクレイン活性を正常化することによってＨＡＥ発作を予防するこの新しい方法が非常に効率的であることが実証された。
【0180】
第３相の予備研究設計
ＨＡＥ患者は、突発性な腫脹から明らかなように、健康な対象よりも接触活性に対して脆弱である。ＨＡＥ発作を予防するための予防としてのＣＳＬ３１２の臨床的効能、薬物動態、および安全性を評価して、ＣＳＬ３１２の効能を評価および確認するためのフォローアップ研究にどの投与レジメンを使用するかを決定した。図９は、一部にＳＣ負荷用量が含まれる、月単位の異なるＳＣ用量でＣＳＬ３１２を投与するための予測ＨＡＥ発作率の仮想シナリオを表している（図９Ａは、選択した用量レジメン対プラセボの治療効果を表す；図９Ｂは選択した投与レジメンの発作率の違いを強調した；各期間の左から右へのプロットのバーは、列挙されているレジメンの上から下に対応する）。６ヶ月の治療期間について、選択された月単位用量での効能に有意な差はない。
ＨＡＥ患者は、突発性な腫脹から明らかなように、健康な対象よりも接触活性に対して脆弱である。ＨＡＥ発作を予防するための予防としてのＣＳＬ３１２の臨床的効能、薬物動態、および安全性を評価して、ＣＳＬ３１２の効能を評価および確認するためのフォローアップ研究にどの投与レジメンを使用するかを決定した。図９は、一部にＳＣ負荷用量が含まれる、月単位の異なるＳＣ用量でＣＳＬ３１２を投与するための予測ＨＡＥ発作率の仮想シナリオを表している（図９Ａは、選択した用量レジメン対プラセボの治療効果を表す；図９Ｂは選択した投与レジメンの発作率の違いを強調した；各期間の左から右へのプロットのバーは、列挙されているレジメンの上から下に対応する）。６ヶ月の治療期間について、選択された月単位用量での効能に有意な差はない。
【0181】
約２０μｇ／ｍＬ未満のＣＳＬ３１２血漿濃度は、部分的なカリクレイン活性阻害と関連しており、臨床的に意味のある予防効果を明らかにし、それにより、低用量仮説を支持した。したがって、ＣＳＬ３１２の薬物レベルを約５または１０μｇ／ｍＬを超えて継続的に維持することにより、ＨＡＥ患者のカリクレインの過剰活性化を予防し、したがって、ＨＡＥ発作を予防する。
【実施例】
【0182】
研究の概要
これは、Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥタイプ１またはタイプ２の対象におけるＨＡＥ発作を予防するための予防策として、皮下投与されたＣＳＬ３１２の臨床的効能および安全性を調査するための、多施設二重盲検、無作為化、プラセボ対照、並行群間第３相試験である。
これは、Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥタイプ１またはタイプ２の対象におけるＨＡＥ発作を予防するための予防策として、皮下投与されたＣＳＬ３１２の臨床的効能および安全性を調査するための、多施設二重盲検、無作為化、プラセボ対照、並行群間第３相試験である。
【0183】
潜在的なリスク
ＣＳＬ３１２の開発プログラムでは、以下のリスクは観察されていないものの、薬剤クラスおよび／または作用機序に基づく潜在的なリスクである。
ＣＳＬ３１２の開発プログラムでは、以下のリスクは観察されていないものの、薬剤クラスおよび／または作用機序に基づく潜在的なリスクである。
【0184】
血栓塞栓症事象および出血：ＦＸＩＩａをＣＳＬ３１２で遮断することにより、止血の変化、不安定な血餅形成、または血餅分解の障害による出血または血栓塞栓症事象（ＴＥＥ）の潜在的なリスクが生じる可能性がある。さらに、ＣＳＬ３１２の薬理作用により、ａＰＴＴの延長が用量依存的に観察されることが予期される。第１相試験の健康なボランティアおよび進行中の第２相試験のＨＡＥ患者におけるＣＳＬ３１２の臨床経験は、プロトロンビン時間または異常出血のいずれにも影響を示さなかった。これは、ＦＸＩＩの先天性欠損症の患者は、ａＰＴＴが長引くにもかかわらず、出血表現型を示さないという観察結果と一致している。さらに、マウスおよびウサギでの非臨床研究では、ＦＸＩＩａの阻害後の止血に障害を示さなかった。研究中、対象は出血または血栓症の兆候について注意深く監視される。
【0185】
重度の過敏症／アナフィラキシー型反応：ＣＳＬ３１２のようなモノクローナル抗体を含む治療用タンパク質の投与は、過敏症およびアナフィラキシー反応のリスクと潜在的に関連しており、その一部は深刻で生命を脅かす可能性がある。ＣＳＬ３１２を研究施設で投与する場合は、適切な予防措置を取り、潜在的な重度の過敏症およびアナフィラキシー反応を注意深く監視する。ＣＳＬ３１２の投与は、少なくとも最初の２～３回の用量で、アナフィラキシーを含む重度の過敏性副作用の治療のための緊急設備および薬剤への即時アクセスを伴う医療監督下の現場で行われる。
【0186】
免疫原性（抗薬物抗体）：全てのタンパク質治療薬は潜在的に免疫原性である。ＣＳＬ３１２はタンパク質であるため、中和および非中和の抗薬物抗体の発生を引き起こす可能性がある。対象は、研究を通じて、免疫原性の発生について監視される。
【0187】
第１相試験（実施例１）および第２相試験（実施例２）のＴＰ１の両方で、重篤な有害事象（ＳＡＥ）は報告されなかった。さらに、第２相試験では、特に注目すべき有害事象（ＡＥＳＩ）は報告されなかった。いずれの研究においても、用量依存の安全性の懸念はなかった。
【0188】
ＣＯＶＩＤ－１９患者におけるＣＳＬ３１２の潜在的な利益、第１相試験および進行中の第２相試験からの好ましい安全性データを考えると、関連する利益リスク評価は許容できると見なされる。
【0189】
研究の主要目的および評価項目
本研究の主要目的は、ＨＡＥの対象のＨＡＥ発作を予防する予防法としてのＣＳＬ３１２のＳＣ投与の効能を評価することである。１日目から１８２日目までの治療中の時間正規化ＨＡＥ発作数が主要評価項目である。これは、１日目から１８２日目（６ヶ月）までの期間中にＣＳＬ３１２（活性群）またはプラセボ（プラセボ群）のいずれかで月に１回治療された対象における時間正規化ＨＡＥ発作数（月間および年間）によって評価される。
本研究の主要目的は、ＨＡＥの対象のＨＡＥ発作を予防する予防法としてのＣＳＬ３１２のＳＣ投与の効能を評価することである。１日目から１８２日目までの治療中の時間正規化ＨＡＥ発作数が主要評価項目である。これは、１日目から１８２日目（６ヶ月）までの期間中にＣＳＬ３１２（活性群）またはプラセボ（プラセボ群）のいずれかで月に１回治療された対象における時間正規化ＨＡＥ発作数（月間および年間）によって評価される。
【0190】
研究の副次的目的と評価項目
研究の副次的目的は：
１． ＨＡＥの予防的治療におけるＳＣ ＣＳＬ３１２の臨床的効能を特徴づけること
２． ＨＡＥの予防的治療におけるＳＣ ＣＳＬ３１２の安全性を評価することである。
研究の副次的目的は：
１． ＨＡＥの予防的治療におけるＳＣ ＣＳＬ３１２の臨床的効能を特徴づけること
２． ＨＡＥの予防的治療におけるＳＣ ＣＳＬ３１２の安全性を評価することである。
【0191】
【表4】
【0192】
診査目的および評価項目
本研究の診査目的は、ＨＡＥの対象におけるＣＳＬ３１２の使用に関連する効能、薬物動態（ＰＫ）／薬力学（ＰＤ）、および生活の質（ＱｏＬ）をさらに評価することである。
本研究の診査目的は、ＨＡＥの対象におけるＣＳＬ３１２の使用に関連する効能、薬物動態（ＰＫ）／薬力学（ＰＤ）、および生活の質（ＱｏＬ）をさらに評価することである。
【0193】
診査評価項目には、以下のものが含まれる：
１． １日目以降および１５日目以降の最初の発作までの時間。
２． スケジュールされた時点でのＣＳＬ３１２濃度。
３． スケジュールされた時点でのＦＸＩＩ濃度およびＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性。
４． 対象は結果測定値を報告した：
・ 血管性浮腫の生活の質（ＡＥ－ＱｏＬ）
・ ＥｕｒｏＱｏＬグループ ５次元 ５レベル（ＥＱ－５Ｄ－５Ｌ）
・ 仕事の生産性および活動の障害：一般的な健康（ＷＰＡＩ：ＧＨ）。
５． 医師による治療への応答の包括的評価（ＩＧＡＲＴ）。
１． １日目以降および１５日目以降の最初の発作までの時間。
２． スケジュールされた時点でのＣＳＬ３１２濃度。
３． スケジュールされた時点でのＦＸＩＩ濃度およびＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性。
４． 対象は結果測定値を報告した：
・ 血管性浮腫の生活の質（ＡＥ－ＱｏＬ）
・ ＥｕｒｏＱｏＬグループ ５次元 ５レベル（ＥＱ－５Ｄ－５Ｌ）
・ 仕事の生産性および活動の障害：一般的な健康（ＷＰＡＩ：ＧＨ）。
５． 医師による治療への応答の包括的評価（ＩＧＡＲＴ）。
【0194】
研究設計
これは、１型および２型Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの若年者（１２～１７歳を含む）および成人の対象のＨＡＥ発作を予防するための予防策として、月に１回投与されるＳＣ ＣＳＬ３１２の単回投与の効能と安全性を調査するための、多施設、二重盲検、無作為化、プラセボ対照、並行群、第３相試験である。図１１に示されるように、本研究は、スクリーニング期間（最大１ヶ月）、疾患活動性の確認および対象のベースラインＨＡＥ発作率の決定のための慣らし期間（最大２ヶ月）、２００ｍｇ ＣＳＬ３１２用量の安全性と効能の確認のための１治療期間（６ヶ月）、ならびに２ヶ月のフォローアップ期間（すなわち、治験薬の最後の治験薬投与後の３ヶ月）またはオープンラベルの第３ｂ相試験への参加のいずれかからなる。
これは、１型および２型Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥの若年者（１２～１７歳を含む）および成人の対象のＨＡＥ発作を予防するための予防策として、月に１回投与されるＳＣ ＣＳＬ３１２の単回投与の効能と安全性を調査するための、多施設、二重盲検、無作為化、プラセボ対照、並行群、第３相試験である。図１１に示されるように、本研究は、スクリーニング期間（最大１ヶ月）、疾患活動性の確認および対象のベースラインＨＡＥ発作率の決定のための慣らし期間（最大２ヶ月）、２００ｍｇ ＣＳＬ３１２用量の安全性と効能の確認のための１治療期間（６ヶ月）、ならびに２ヶ月のフォローアップ期間（すなわち、治験薬の最後の治験薬投与後の３ヶ月）またはオープンラベルの第３ｂ相試験への参加のいずれかからなる。
【0195】
スクリーニング：インフォームドコンセントに続いて、対象は研究への登録の適格性を決定するために最大１ヶ月のスクリーニング期間を受ける。全ての包含基準を満たし、除外基準のいずれも満たさないスクリーニングされた対象は、慣らし期間に入る。
【0196】
慣らし期間：スクリーニング後、適格な対象は、少なくとも１ヶ月から最大２ヶ月続く慣らし期間に入り、基礎疾患の状態を確認し、治療期間への参加の適格性を評価する。慣らし期間の初日は、スクリーニングと同日に生じてもよい。
【0197】
対象は、慣らし期間の少なくとも１ヶ月を完了する必要がある。さらに、対象は、治療期間に入る適格性のために、慣らし期間中に少なくとも２回のＨＡＥ発作を経験しなければならない。慣らし期間の必要な最初の月の間に少なくとも２回の発作を経験した対象は、治療期間に入ることができる。慣らし期間の最初の月にＨＡＥ発作を経験しなかった対象は、さらなる１ヶ月まで慣らし期間に留まり、その間、治療期間および無作為化に入る資格のためには少なくとも２回の発作を経験する必要がある。
【0198】
対象は、慣らし期間中のＨＡＥ発作を防ぐためにルーチン的な予防法を使用することは認められてはいない；ただし、その薬が以前に有効であることが示されている場合、対象はオンデマンドＨＡＥ療法を使用してＨＡＥ発作を治療することができる。
【0199】
慣らし期間中に最小ＨＡＥ発作率を満たさないか、またはスクリーニング評価のために不適格であると決定された対象は、慣らし失敗と見なし、研究への参加のため再スクリーニングされてはならない。
【0200】
治療期間：適格基準を満たす対象は、慣らし期間の後に治療期間に入る。
【0201】
適格な対象は、ＣＳＬ３１２活性群またはプラセボ群のいずれかに３：２で無作為化される。治療期間は６ヶ月である。無作為化には年齢（１７歳以下、１７歳を超える）が考慮され、成人の場合、慣らし期間中に観察されたベースラインの発作率（１発作から３発作未満／月、および３発作以上／月）が考慮される。
【0202】
フォローアップ期間／オープンラベル第３ｂ相試験エントリー：
現在の第３相試験を無事に完了した対象は、オープンラベル第３ｂ相試験（ＯＬＥ）に繰り越しする選択肢がある。ＯＬＥ研究に参加しないことを選択した対象は、フォローアップ来診を完了する必要がある（２４２日目、これは、治験薬の最後の投与からおよそ３ヶ月後である）。ＯＬＥ研究への参加を選択した対象については、１８２日目に集められた評価がＯＬＥ研究の１日目に適用可能な評価を満たすために使用される。
現在の第３相試験を無事に完了した対象は、オープンラベル第３ｂ相試験（ＯＬＥ）に繰り越しする選択肢がある。ＯＬＥ研究に参加しないことを選択した対象は、フォローアップ来診を完了する必要がある（２４２日目、これは、治験薬の最後の投与からおよそ３ヶ月後である）。ＯＬＥ研究への参加を選択した対象については、１８２日目に集められた評価がＯＬＥ研究の１日目に適用可能な評価を満たすために使用される。
【0203】
用量および投薬レジメン
本研究の治験薬は２００ｍｇのＣＳＬ３１２およびプラセボである。
本研究の治験薬は２００ｍｇのＣＳＬ３１２およびプラセボである。
【0204】
活性群に無作為化された対象は、６ヶ月の間、月に１回ＣＳＬ３１２ ＳＣを受ける。ＣＳＬ３１２の最初の用量は、研究施設での２回の別々の注射と同じ日に皮下投与される４００ｍｇの負荷用量である（すなわち、１ヶ月目）。その後のＣＳＬ３１２の用量は、２００ｍｇを月に１回、連続する５ヶ月間（すなわち、２ヶ月目から６ヶ月目）ＳＣ投与する。
【0205】
プラセボ群に無作為化された対象は、６ヶ月の間、月に１回、一致した量のプラセボを受ける。プラセボ群におけるプラセボの最初の用量は、２回の別々の注射としてＳＣ投与された一致した容量のプラセボである（すなわち、１ヶ月目）。その後、対象は、連続５ヶ月間、月に１回（すなわち、２ヶ月から６ヶ月）、一致した容量のプラセボＳＣを受ける。
【0206】
提案された２００ｍｇの用量は、第２相試験のＴＰ１（実施例２）、ＣＳＬ３１２ ＰＫ、ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性の阻害、および曝露応答（Ｅ－Ｒ）モデリングで観察された効能および安全性に基づいて選択された。
【0207】
２８日ごとに１回（±３日）投与された２００ｍｇの用量は、さまざまな効能評価項目にわたって非常に効果的であり、良好な安全性プロファイルであった。さらに、２００ｍｇの用量は、ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性の約５０％阻害をもたらした。
【0208】
第３相の用量選択を支援するために、Ｅ－Ｒモデルを使用して、異なる投与レジメンの後に予期される広範囲のＣＳＬ３１２濃度にわたるＨＡＥ発作率をシミュレートした。Ｅ－Ｒモデルに基づくと、ベースラインの発作率で５０、７５、および９０％の相対的発作リスクの低減を達成するための推定１日平均濃度は、それぞれ１．４、３．３、および７．８μｇ／ｍＬであった。月に１回のレジメンで２００ｍｇのＳＣ投与した後の定常状態での最小１日平均ＣＳＬ３１２濃度の予測中央値は、７３％の患者のベースライン発作率の９０％相対発作リスク低下に相当する。
【0209】
さらに、Ｅ－Ｒモデルは、ＣＳＬ３１２濃度の累積効果が、１ヶ月あたりのＨＡＥ発作の予想数の減少で証明されることを示した。月に１回の２００ｍｇ ＳＣのレジメンは、プラセボと比較して平均発作率をおよそ９１％減少させると予測されている。用量を、２００ｍｇを超えて増やしても、ＨＡＥ発作のさらなる大幅な減少をもたらすとは予測されていない。
【0210】
最後に、毎月投与される２００ｍｇのＳＣ用量での曝露は、第３相試験の大多数の対象でａＰＴＴ延長を引き起こすとは予想されていない。
【0211】
用量を選択する際に考慮される全ての要因に基づいて、月に１回投与される２００ｍｇのＣＳＬ３１２ ＳＣは、Ｃ１－ＩＮＨ ＨＡＥタイプ１およびタイプ２の対象において臨床的に意味のある治療効果および最適なベネフィット／リスク比を達成すると予想される。
【0212】
適格基準
研究集団は、以下のセクションで説明する包含基準および除外基準に基づいて選択される。各対象は、本研究の全ての包含基準を満たし、除外基準を満たさないようにする必要がある。対象が研究に含まれる前に、対象の適格性は、医師の研究チームの適切な医学的資格のあるメンバーによってレビューされ、文書化されるべきである。
研究集団は、以下のセクションで説明する包含基準および除外基準に基づいて選択される。各対象は、本研究の全ての包含基準を満たし、除外基準を満たさないようにする必要がある。対象が研究に含まれる前に、対象の適格性は、医師の研究チームの適切な医学的資格のあるメンバーによってレビューされ、文書化されるべきである。
【0213】
包含基準
研究に登録して無作為化するために、対象は以下の包含基準を全て満たす必要がある：
１． 書面によるインフォームドコンセントを提供することができ、全てのプロトコル要件を遵守する意思と能力がある者、および／または書面によるインフォームドコンセント／同意を適宜提供することができる対象の親もしくは法的に許容される代理人。
２． 男性または女性。
３． 書面によるインフォームドコンセントを提供する時点で１２歳以上または未成年者のための同意。
４． 臨床的に確認されたＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥと診断された者：
ａ． ＨＡＥ（蕁麻疹を伴わない皮下または粘膜の非掻痒性腫脹エピソード）と一致する文書化された病歴、ならびに
ｂ． Ｃ１－ＩＮＨ抗原および／または対象の医療記録に文書化されている正常の５０％以下の機能的活性、ならびに
ｃ． 対象の医療記録に文書化されている参照範囲の下限を下回るＣ４抗原濃度。
５． 対象の医療記録に文書化されている、スクリーニング前の３ヶ月間に３回以上のＨＡＥ発作の経験。
研究に登録して無作為化するために、対象は以下の包含基準を全て満たす必要がある：
１． 書面によるインフォームドコンセントを提供することができ、全てのプロトコル要件を遵守する意思と能力がある者、および／または書面によるインフォームドコンセント／同意を適宜提供することができる対象の親もしくは法的に許容される代理人。
２． 男性または女性。
３． 書面によるインフォームドコンセントを提供する時点で１２歳以上または未成年者のための同意。
４． 臨床的に確認されたＣ１－ＩＮＨ ＨＡＥと診断された者：
ａ． ＨＡＥ（蕁麻疹を伴わない皮下または粘膜の非掻痒性腫脹エピソード）と一致する文書化された病歴、ならびに
ｂ． Ｃ１－ＩＮＨ抗原および／または対象の医療記録に文書化されている正常の５０％以下の機能的活性、ならびに
ｃ． 対象の医療記録に文書化されている参照範囲の下限を下回るＣ４抗原濃度。
５． 対象の医療記録に文書化されている、スクリーニング前の３ヶ月間に３回以上のＨＡＥ発作の経験。
【0214】
注：スクリーニング前の３ヶ月間に予防的ＨＡＥ療法を受けている対象については、予防的治療を開始する前に３ヶ月以上連続して３回以上のＨＡＥ発作が文書化されている場合がある。
【0215】
除外基準
以下の除外基準のいずれかを満たす場合、対象は研究に登録してはならない：
１． 特発性または後天性血管性浮腫、蕁麻疹またはＨＡＥタイプ３に関連する再発性血管性浮腫のような、別の形態の血管性浮腫の同時診断。
２． 臨床研究中に事前に計画された主要な手術または医療手当。
３． 成人の対象について：慣らし期間の２週間前以内に、ＨＡＥ発作を日常的に予防するために、Ｃ１－ＩＮＨ製品、アンドロゲン、抗線溶薬、またはその他の小分子薬を使用すること。
４． １２～１７歳の若年者の対象について：スクリーニング前のＨＡＥに対する長期予防療法の使用。
５． 慣らし期間の３ヶ月前以内に、ラナデルマブ（Ｔａｋｈｚｙｒｏ（登録商標））のようなモノクローナル抗体を使用すること。
６． 全身吸収を伴うエストロゲン含有薬の使用（例えば、経口避妊薬またはホルモン補充療法）、慣らし期間前の４週間以内のアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、または現在、研究期間に許可されていない治療を受けていること。
７． スクリーニング前の３０日間または以前の介入研究中に投与された治験薬の最終用量の５半減期のいずれか長い方の期間中、別の介入臨床研究に参加していること。
８． モノクローナル抗体療法に対する既知または疑われる過敏症、または治験薬または治験薬の任意の賦形剤に対する過敏症。
９． 医師またはＣＳＬの判断において、対照の安全性またはコンプライアンスを損なう、研究の成功を妨げる、例えば、凝固障害、血栓性障害、重大な病気もしくは主要な併存疾患による臨床的に重大な出血など、結果の解釈を妨げる、またはその他の方法で対象を研究への参加に適さないものにする可能性がある条件を対象が有していること。
１０． 別の介入臨床研究で以前に投与されたＣＳＬ３１２。
１１． 研究中のいずれの時点における妊娠、または子供の父親になる意図。
１２． 妊娠の可能性のある女性、または研究中および治験薬の最後の投与を受けてから３０日間、妊娠を避けるために許容される避妊法を使用していないか、または使用する意思のない、出生力があり性的に活発な男性対象。
以下の除外基準のいずれかを満たす場合、対象は研究に登録してはならない：
１． 特発性または後天性血管性浮腫、蕁麻疹またはＨＡＥタイプ３に関連する再発性血管性浮腫のような、別の形態の血管性浮腫の同時診断。
２． 臨床研究中に事前に計画された主要な手術または医療手当。
３． 成人の対象について：慣らし期間の２週間前以内に、ＨＡＥ発作を日常的に予防するために、Ｃ１－ＩＮＨ製品、アンドロゲン、抗線溶薬、またはその他の小分子薬を使用すること。
４． １２～１７歳の若年者の対象について：スクリーニング前のＨＡＥに対する長期予防療法の使用。
５． 慣らし期間の３ヶ月前以内に、ラナデルマブ（Ｔａｋｈｚｙｒｏ（登録商標））のようなモノクローナル抗体を使用すること。
６． 全身吸収を伴うエストロゲン含有薬の使用（例えば、経口避妊薬またはホルモン補充療法）、慣らし期間前の４週間以内のアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、または現在、研究期間に許可されていない治療を受けていること。
７． スクリーニング前の３０日間または以前の介入研究中に投与された治験薬の最終用量の５半減期のいずれか長い方の期間中、別の介入臨床研究に参加していること。
８． モノクローナル抗体療法に対する既知または疑われる過敏症、または治験薬または治験薬の任意の賦形剤に対する過敏症。
９． 医師またはＣＳＬの判断において、対照の安全性またはコンプライアンスを損なう、研究の成功を妨げる、例えば、凝固障害、血栓性障害、重大な病気もしくは主要な併存疾患による臨床的に重大な出血など、結果の解釈を妨げる、またはその他の方法で対象を研究への参加に適さないものにする可能性がある条件を対象が有していること。
１０． 別の介入臨床研究で以前に投与されたＣＳＬ３１２。
１１． 研究中のいずれの時点における妊娠、または子供の父親になる意図。
１２． 妊娠の可能性のある女性、または研究中および治験薬の最後の投与を受けてから３０日間、妊娠を避けるために許容される避妊法を使用していないか、または使用する意思のない、出生力があり性的に活発な男性対象。
【0216】
注：以下を除いて、全ての女性対象は出産の可能性があると想定される：
－ ６０歳を超える対象。
－ ４５～６０歳（包括的）で、１年以上無月経であり、卵胞刺激ホルモンレベルが３０ＩＵ／Ｌを超えるという証拠が文書化されている対象。無作為化の前に卵胞刺激ホルモン値が利用できない場合は、尿妊娠検査が必要である。
－ インフォームドコンセントを提供する前に少なくとも３ヶ月間、外科的不妊である対象。
－ ６０歳を超える対象。
－ ４５～６０歳（包括的）で、１年以上無月経であり、卵胞刺激ホルモンレベルが３０ＩＵ／Ｌを超えるという証拠が文書化されている対象。無作為化の前に卵胞刺激ホルモン値が利用できない場合は、尿妊娠検査が必要である。
－ インフォームドコンセントを提供する前に少なくとも３ヶ月間、外科的不妊である対象。
【0217】
注：インフォームドコンセントを提供する前に少なくとも３ヶ月間、外科的不妊である対象を除いて、全ての男性対象は出生力があると見なされる
１３． 妊娠中、授乳中、または授乳を辞める意志がないこと。
１４． 研究の計画および／または実施に関与すること。
１３． 妊娠中、授乳中、または授乳を辞める意志がないこと。
１４． 研究の計画および／または実施に関与すること。
【0218】
治療期間にエントリーする基準
対象は、以下の全ての基準を満たしている場合、慣らし期間を終了して治療期間に入る資格がある：
１． 少なくとも１ヶ月の間、慣らし期間に参加した。
２． 慣らし期間中に月に少なくとも平均１回のＨＡＥ発作を経験した（例えば、合計で少なくとも２回のＨＡＥ発作を経験した）。
３． 血液学、化学、または尿検査の評価の結果において、医師によって臨床的に重大と評価された検査臨床異常がないこと。
４． Ｃ１－ＩＮＨの機能的活性および抗原、およびＣ４抗原の濃度レベルが、無作為化の前に検証されていること。
対象は、以下の全ての基準を満たしている場合、慣らし期間を終了して治療期間に入る資格がある：
１． 少なくとも１ヶ月の間、慣らし期間に参加した。
２． 慣らし期間中に月に少なくとも平均１回のＨＡＥ発作を経験した（例えば、合計で少なくとも２回のＨＡＥ発作を経験した）。
３． 血液学、化学、または尿検査の評価の結果において、医師によって臨床的に重大と評価された検査臨床異常がないこと。
４． Ｃ１－ＩＮＨの機能的活性および抗原、およびＣ４抗原の濃度レベルが、無作為化の前に検証されていること。
【0219】
注：アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼおよび／またはアラニンアミノトランスフェラーゼの正常上限の２倍以上の対象は、この検査結果の説明があり、結果が臨床的に有意ではない場合、参加適格性がある可能性がある。
【0220】
研究評価
全ての評価の時間枠の詳細を表５に示す。
全ての評価の時間枠の詳細を表５に示す。
【0221】
【表5】
【0222】
人口統計および安全性評価
本研究の間、対象の人口統計および安全性評価（一部の検査室評価を含む）が行われる。
本研究の間、対象の人口統計および安全性評価（一部の検査室評価を含む）が行われる。
【0223】
薬物動態学的および薬力学的評価
血漿サンプルは、ＣＳＬ３１２濃度（薬物動態評価）およびＦＸＩＩ濃度ならびにＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性（薬力学評価）の評価のために研究中に収集される。
血漿サンプルは、ＣＳＬ３１２濃度（薬物動態評価）およびＦＸＩＩ濃度ならびにＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性（薬力学評価）の評価のために研究中に収集される。
【0224】
効能評価
医師または被指名人によって確認された遺伝性血管性浮腫発作は、効能分析に使用され、電子症例報告書（ｅＣＲＦ）に記録される。対象によって報告された全てのＨＡＥ症状は、対象ごとのリストに表示される。医師は、対象により報告された症状をレビューする。医師は、症状がＨＡＥ発作を表しているかどうかを確認し、ＨＡＥ発作でない場合は、症状をＡＥとしてｅＣＲＦに記録する。前駆症状自体またはオンデマンド薬の使用だけでは発作と見なされるべきではない。
医師または被指名人によって確認された遺伝性血管性浮腫発作は、効能分析に使用され、電子症例報告書（ｅＣＲＦ）に記録される。対象によって報告された全てのＨＡＥ症状は、対象ごとのリストに表示される。医師は、対象により報告された症状をレビューする。医師は、症状がＨＡＥ発作を表しているかどうかを確認し、ＨＡＥ発作でない場合は、症状をＡＥとしてｅＣＲＦに記録する。前駆症状自体またはオンデマンド薬の使用だけでは発作と見なされるべきではない。
【0225】
慣らし期間中の各研究来診および電話連絡で、医師または被指名人は対象の電子日記（ｅＤｉａｒｙ）エントリーをレビューする。医師は、入手可能な全ての医療情報を考慮し、ＨＡＥ発作の確認の助けのために明確な質問をしてもよい。
【0226】
以下の情報は、対象のｅＤｉａｒｙに文書化される：
・ ＨＡＥ症状の発症日時
・ ＨＡＥ症状が解消した（すなわち、対象が発作の症状をもはや経験しなくなった）日時
・ ＨＡＥ症状の場所
・ 症状が対象の日常生活に干渉していることの確認
・ オンデマンド薬がＨＡＥ症状を治療することに使用された場合：
－ 薬の名前
－ 投与日時
・ ＨＡＥ症状に対して受けた医療援助の確認
・ ＨＡＥ症状の発症日時
・ ＨＡＥ症状が解消した（すなわち、対象が発作の症状をもはや経験しなくなった）日時
・ ＨＡＥ症状の場所
・ 症状が対象の日常生活に干渉していることの確認
・ オンデマンド薬がＨＡＥ症状を治療することに使用された場合：
－ 薬の名前
－ 投与日時
・ ＨＡＥ症状に対して受けた医療援助の確認
【0227】
医師は、症状に関連する対象について追加の詳細を確認する：
・ ＨＡＥ症状の場所
・ 症状の開始／終了日時
・ 使用したオンデマンド薬の用量
・ 使用したオンデマンド薬の投与経路
・ 自己投与のオンデマンド薬？（はい／いいえ）
・ 研究施設、自宅、または緊急治療室でのオンデマンド薬の投与
・ 入院または救急部門の来診を含む、ＨＡＥの症状の間に医療専門家によって提供される医療支援または介入の種類
・ 発作の重症度（日常生活への干渉の程度、ならびにオンデマンド薬および／または医療支援の使用が必要であったか否かに基づいた）
・ ＨＡＥ症状の場所
・ 症状の開始／終了日時
・ 使用したオンデマンド薬の用量
・ 使用したオンデマンド薬の投与経路
・ 自己投与のオンデマンド薬？（はい／いいえ）
・ 研究施設、自宅、または緊急治療室でのオンデマンド薬の投与
・ 入院または救急部門の来診を含む、ＨＡＥの症状の間に医療専門家によって提供される医療支援または介入の種類
・ 発作の重症度（日常生活への干渉の程度、ならびにオンデマンド薬および／または医療支援の使用が必要であったか否かに基づいた）
【0228】
効能分析
主要評価項目「１日目から１８２日目までの治療中の１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数」は、対象ごとに以下のように計算される：
［ＨＡＥ発作数／対象治療日の長さ］＊３０．４３７５
ここで、対象治療の長さは以下のように計算される：
［研究来診１８２日目の日付または研究中止の日付［いずれか最初のもの］－研究来診１日目＋１］。
主要評価項目「１日目から１８２日目までの治療中の１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数」は、対象ごとに以下のように計算される：
［ＨＡＥ発作数／対象治療日の長さ］＊３０．４３７５
ここで、対象治療の長さは以下のように計算される：
［研究来診１８２日目の日付または研究中止の日付［いずれか最初のもの］－研究来診１日目＋１］。
【0229】
ＣＳＬ３１２とプラセボとの間の主要な効能評価項目の違いを試験するために、活性群の６ヶ月間および６ヶ月のプラセボアーム期間における時間正規化ＨＡＥ発作数の比較が、両側ウィルコクソン検定（アルファ＝５％）を使用して実行される。
【0230】
ＨＡＥ発作の１ヶ月あたりおよび１年あたりの時間正規化数は、活性群の６ヶ月間および６ヶ月のプラセボアーム期間について、治療ごとに対応する９５％信頼区間（ＣＩ）で中央値および平均値により記述的に要約される。
【0231】
感度分析としては、ポアソン回帰モデルを使用して、活性群の６ヶ月およびプラセボ群の６ヶ月の時間正規化ＨＡＥ発作数を比較する。共変数としての慣らし期間の時間正規化ＨＡＥ発作数および年齢ならびにオフセット変数としての対象の治療の長さの対数が含まれる。モデルは過分散を考慮する。
【0232】
時間正規化ＨＡＥ発作数のパーセンテージの減少の副次的効能評価項目は、対象内で次のように計算される：
１００＊［１－（治療中の１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数／慣らし中の１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数）］
活性群の全６ヶ月間について、および６ヶ月のプラセボ群期間について、治療群間の個々のパーセンテージの減少を使用した両側ウィルコクソン検定によって試験される。
１００＊［１－（治療中の１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数／慣らし中の１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数）］
活性群の全６ヶ月間について、および６ヶ月のプラセボ群期間について、治療群間の個々のパーセンテージの減少を使用した両側ウィルコクソン検定によって試験される。
【0233】
応答者および非応答者の数とパーセンテージは、対応する９５％のＣＩと共に表示される。ＨＡＥ発作のパーセンテージの減少が５０％以上の場合、対象は応答者として分類される。さらに、７０％以上および９０％以上のパーセンテージの減少を持つ対象の数およびパーセンテージは、対応する９５％ＣＩが表示される。
【0234】
１００％のパーセンテージの減少の対象、すなわち、ＨＡＥ発作を経験しておらず、発作がない対象の数とパーセンテージは、６ヶ月の活性群期間および６ヶ月のプラセボ群期間について対応する９５％のＣＩと共に表示されて要約され、治療間の違いを評価するためにフィッシャー試験が実行される。
【0235】
活性群の６ヶ月間の時間正規化ＨＡＥ発作数のパーセンテージの減少もまた：
１００＊［１－（活性群の６ヶ月間の１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数の中央値／６ヶ月のプラセボ群期間中の１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数の中央値）］
のような、プラセボ群（対象間）の６ヶ月と比較したパーセンテージの減少として計算され、治療群間の個々のパーセンテージの減少を使用して、両側ウィルコクソン検定を介して探索的に試験される。
１００＊［１－（活性群の６ヶ月間の１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数の中央値／６ヶ月のプラセボ群期間中の１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数の中央値）］
のような、プラセボ群（対象間）の６ヶ月と比較したパーセンテージの減少として計算され、治療群間の個々のパーセンテージの減少を使用して、両側ウィルコクソン検定を介して探索的に試験される。
【0236】
オンデマンド治療を必要とする１ヶ月あたりの時間正規化ＨＡＥ発作数の副次的効能評価項目は、次のように計算される：
１００＊［１－（治療中にオンデマンド治療を必要とするＨＡＥ発作の数／対象の治療日数）］＊３０．４３７５
１００＊［１－（治療中にオンデマンド治療を必要とするＨＡＥ発作の数／対象の治療日数）］＊３０．４３７５
【0237】
オンデマンド治療を必要とするＨＡＥ発作は、オンデマンド治療の投与の日がＨＡＥ発作の開始日（を含む）と終了日（を含む）の間にある発作として定義される。活性群の６ヶ月および６ヶ月のプラセボ群期間の違いは、両側ウィルコクソン検定を介して探索的に試験される。
【0238】
時間正規化された中程度および／または重度のＨＡＥ発作の数を分析するために、中程度または重度に分類された全てのＨＡＥ発作を使用してアナログ計算が行われる。
【0239】
安全性分析
試験薬の最初の投与後に発生した開始日時の有害事象は、治療に起因する有害事象（ＴＥＡＥ）と見なされる。開始日時ではないか部分的である有害事象もまた、ＡＥが最初の投与日時より前に開始したことを部分的なデータが明確に示していない限り、ワーストケースの原則に従ってＴＥＡＥと見なされる。フォローアップ来診までに発生した治療に起因するＡＥは要約される。ＴＥＡＥのみが分析に含まれるが、全てのＡＥが列挙される。
試験薬の最初の投与後に発生した開始日時の有害事象は、治療に起因する有害事象（ＴＥＡＥ）と見なされる。開始日時ではないか部分的である有害事象もまた、ＡＥが最初の投与日時より前に開始したことを部分的なデータが明確に示していない限り、ワーストケースの原則に従ってＴＥＡＥと見なされる。フォローアップ来診までに発生した治療に起因するＡＥは要約される。ＴＥＡＥのみが分析に含まれるが、全てのＡＥが列挙される。
【0240】
薬物動態分析
ＰＫ分析は、ＰＫ母集団を使用して実行される。ＣＳＬ３１２の血漿中濃度は、個々の対象ごとに列挙され、名目上の時点ごとに要約される。個々の平均ＣＳＬ３１２血漿濃度対時間が、線形および片対数スケールでプロットされる。血漿ＣＳＬ３１２濃度は、記述統計：平均、ＳＤ、変動のパーセント係数、中央値、最小、最大、および連続変数の第１および第３四分位数、幾何平均、およびそれぞれの９０％ＣＩで要約される。
ＰＫ分析は、ＰＫ母集団を使用して実行される。ＣＳＬ３１２の血漿中濃度は、個々の対象ごとに列挙され、名目上の時点ごとに要約される。個々の平均ＣＳＬ３１２血漿濃度対時間が、線形および片対数スケールでプロットされる。血漿ＣＳＬ３１２濃度は、記述統計：平均、ＳＤ、変動のパーセント係数、中央値、最小、最大、および連続変数の第１および第３四分位数、幾何平均、およびそれぞれの９０％ＣＩで要約される。
【0241】
薬力学的分析
薬力学的データは、ＰＤ母集団を使用して要約される。ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性およびＦＸＩＩ濃度は、上記のようにＣＳＬ３１２の薬力学について評価される。ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性およびＦＸＩＩ濃度は、個々の対象ごとに列挙され、名目上の時点および治療ごとに要約される。
薬力学的データは、ＰＤ母集団を使用して要約される。ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性およびＦＸＩＩ濃度は、上記のようにＣＳＬ３１２の薬力学について評価される。ＦＸＩＩａ媒介カリクレイン活性およびＦＸＩＩ濃度は、個々の対象ごとに列挙され、名目上の時点および治療ごとに要約される。
【図1】
【図2】
【図3-1】
【図3-2】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【配列表】
【国際調査報告】